Сохранность клеточной популяции в дерме. Необходимые условия формирования нормотрофического рубца кожи

ЛИТЕРАТУРА

1. Барскова В.Г., Елисеев М.С., Денисов И.С. и др. Частота метаболического синдрома и сопутствующих заболеваний у больных подагрой. Данные многоцентрового исследования // Научно-практическая ревматология. - 2012. - №6. - С.15-18.

2. Диагностика и лечение артериальной гипертонии. Рекомендации Российского медицинского общества по артериальной гипертонии и Всероссийского научного общества кардиологов // Кардиоваскулярная терапия и профилактика.

- 2011. - Т. 10. №6. Прил. 2. - С.1-64.

3. Ильина А.Е., Барскова В.Г., Насонов Е.Л. Бессимптомная гиперурикемия - польза или вред? // Русский медицинский журнал. - 2008. - Т. 16. №24. - С.1619-1621.

4. Кушнаренко Н.Н., Говорин А.В. Показатели кардиоге-модинамики у мужчин первичной подагрой с синдромом инсулинорезистентности // Вестник ВолГМУ - 2012. - №1.

- С.54-56.

5. Кушнаренко Н.Н., Щербакова О.А., Говорин А.В. Структурно-функциональные изменения левого желудочка у мужчин с первичной подагрой // Забайкальский медицинский вестник. - 2011. - №1. - С.66-70.

6. Рогоза А.Н., Ощепкова Е.В., Цагареишвили Е.В., Гориева Ш.Б. Современные неинвазивные методы измерения артериального давления для диагностики артериальной гипертонии и оценки эффективности антигипертензивной терапии: Пособие для врачей. - М.: Медика, 2007. - С.21-27.

7. Рыбакова М.К., Алехин М.Н., Митьков В.В. Практическое руководство по ультразвуковой диагностике. Эхокардиография. - М.: Видар, 2008. - С.112-116.

8. Braiser A.R., Resinos A., EledrisiM.S. Vascular inflammation and the renin-angiotensin system // Arterioscler Thromb Vasc Biol. - 2002. - Vol. 22. - P.1257-1266.

9. McEniery C.M., Spratt M., Munnery M., et al. An analysis of prospective risk factors for aortic stiffness in men: 20-year followup from the Caerphilly prospective study // Hypertension.

- 2010. - Vol. 56. - P.36-43.

10. Patel R.S., Al Mheid I., Morris A.A., et al. Oxidative stress is associated with impaired arterial elasticity // Atherosclerosis. -2011. - Vol. 218. - P.90-95.

11. Schumacher H.R.Jr. Crystal-induced arthritis: an overview // Am J Med. - 1996. - Vol. 100. - P.46-52.

12. Wallace KL. Increasing prevalence of gout and hyperuricemia over 10 years among older adult in a managed care population // J Rheumatol. - 2004. - Vol. 31. - P.1582-1587.

REFERENCES

1. Barskova V.G., Eliseyev M.S., Denisov I.S., et al. The rate of metabolic syndrome and comorbidities in patients with gout: data of a multicenter trial // Nauchno-prakticheskaja revmatologia. -2012. - №6. - C.15-18.

2. Diagnosis and treatment ofhypertension. Recommendations of Russian Medical Society of hypertension and the All-Russian Scientific Society of Cardiology // Kardiovaskularnaja Terapia I Profilaktika. - 2011. - Vol. 10. №6. Suppl. 2. - P.1-64.

3. Ilyina A.E., Barskova V.G., Nasonov E.L. Asymptomatic hyperuricemia - benefit or harm? // Russkij Meditsinskij Zurnal.

- 2008. - Vol. 16. №24. - P.1619-1621.

4. Kushnarenko N.N., Govorin A.V. Indicators cardiohemodynamics primary gout in men with insulin resistance syndrome // Vestnik Volgogradskogo Meditsinskogo Universiteta.

- 2012. - №1. - P.54-56.

5. Kushnarenko N.N., Shcherbakovа O.A., Govorin A.V. Structural and functional changes in the left ventricle in men with primary gout // Zabaikalskii Medicinskij Vestnik. - 2011. - №1. -P.66-70.

6. Rogoza A.N., Oshchepkova E.V., Tsagareishvili E.V, Gorieva Sh.B. Current non-invasive measurement of blood pressure for hypertension and diagnostic evaluation of antihypertensive therapy. Manual for physicians. - Moscow: Medica, 2007. - P.21-27.

7. Rybakovа M.K., Alekhine M.N., Mitkov V.V. A practical guide to ultrasound. Echocardiography. - Moscow: Vidar, 2008.

- P.112-116.

8. Braiser A.R., Resinos A., Eledrisi M.S. Vascular inflammation and the renin-angiotensin system // Arterioscler Thromb Vasc Biol. - 2002. - Vol. 22. - P.1257-1266.

9. McEniery C.M., Spratt M., Munnery M., et al. An analysis of prospective risk factors for aortic stiffness in men: 20-year followup from the Caerphilly prospective study // Hypertension.

- 2010. - Vol. 56. - P.36-43.

10. Patel R.S., Al Mheid I., Morris A.A., et al. Oxidative stress is associated with impaired arterial elasticity // Atherosclerosis. -2011. - Vol. 218. - P.90-95.

11. Schumacher H.R.Jr. Crystal-induced arthritis: an overview // Am J Med. - 1996. - Vol. 100. - P.46-52.

12. Wallace К.L. Increasing prevalence of gout and hyperuricemia over 10 years among older adult in a managed care population // J Rheumatol. - 2004. - Vol. 31. - P.1582-1587.

Информация об авторах:

Кушнаренко Наталья Николаевна - заведующая кафедрой внутренних болезней педиатрического и стоматологического факультетов, д.м.н.; Губанова Марина Валерьевна - врач отделения функциональной диагностики, аспирант кафедры внутренних болезней педиатрического и стоматологического факультетов. 672001, г. Чита, ул. Горбунова д. 11,

тел. (3022) 243310, e-mail: mgubanova@inbox.ru.

Information About of the Authors:

Kushnarenko Natalia N. - head of the department of Internal Diseases pediatric and dental faculties Chita State Medical Academy, PhD, MD; Gubanova Marina V. - doctor in the department of functional diagnostics Hospital within the Russian Railroad Network,

graduate student.

© КЕНСОВСКАЯ И.М., ИЗАТУЛИН В.Г., ЛЕБЕДИНСКИЙ В.Ю. - 2014 УДК: 611.77-003.96

СОХРАННОСТЬ КЛЕТОЧНОЙ ПОПУЛЯЦИИ В ДЕРМЕ. НЕОБХОДИМЫЕ УСЛОВИЯ ФОРМИРОВАНИЯ НОРМОТРОФИЧЕСКОГО РУБЦА КОЖИ

Инна Михайловна Кенсовская1, Владимир Григорьевич Изатулин1, Владислав Юрьевич Лебединский2 ('Иркутский государственный медицинский университет, ректор - д.м.н., проф. И.В. Малов, кафедра гистологии, цитологии эмбриологии, зав. - д.б.н., проф. Л.С. Васильева; 2Национальный исследовательский Иркутский государственный технический университет, и.о. ректора - д.ф.-м. н., проф. А.Д. Афанасьев, центры медико-биологических проблем и здоровьесберегающих технологий, научный руководитель -

д.м.н., проф. В.Ю. Лебединский)

Резюме. Представлены результаты экспериментального исследования влияния гормона пролактин на морфогенез рубца кожи. Показано, что на морфологические характеристики рубца кожи, его биомеханические и косметические свойства большое влияние оказывает сохранность клеток соединительной ткани и сосудов в парараневой зоне.

Ключевые слова: пролактин, рубец кожи, морфогенез, коррекция.

SECURITY OF CELL POPULATION IN DERMIS. ESSENTIAL CONDITIONS FOR THE FORMATION OF NORMOTROPHICSCAR TISSUE.

I.M. Kensovskaya1, V.G. Izatulin1, V.Y. Lebedinsky2

Summary. The results of experimental studies of the effect of the hormone prolactin in the morphogenesis of scar tissue. It is shown that in the morphological characteristics of the scar tissue, its biomechanical and cosmetic properties is greatly influenced by the preservation of connective tissue cells and blood vessels in pararanic zone. Key words: prolactin, scar tissue, morphogenesis, correction.

Участие клеток соединительной ткани в восстановительных процессах изучено достаточно подробно на различных моделях воспалительных процессов и при заживлении ран [4,6,7,9,11].

Особое место в изучении этой важной медико-социальной проблемы занимают вопросы поиска методов и препаратов для успешного их заживления. Исследователи пришли к заключению, что характеристики сформированного рубца кожи изменить практически невозможно [3].

Проведенные экспериментальные исследования показали, что на качество рубцовой ткани большое влияние оказывает выраженность и характер посттравматической воспалительной реакции, Следовательно, её ограничение в значительной мере предопределяет характеристики и исход репаративного процесса [5].

Большую роль в этом играют клетки соединительной ткани парараневой зоны, которые обладают исходной информацией о структуре интактной дермы, в области которой нанесена рана. Они в процессе формирования грануляционной ткани и ремоделирования рубца будут играть ведущую роль. Исследователи отмечают, что чем выше сохранность этих клеток, тем больше характеристики рубца приближаются к структуре интактной кожи.

Цель исследования: изучить возможность использования пролактина для повышения сохранности популяции клеток дермы и сосудов парараневой зоны с целью коррекции и улучшения характеристик формирующегося рубца кожи.

Материалы и методы

Работа выполнена на 220 беспородных крысах-самцах массой 170±15,2 г, содержащихся на строгой диете в условиях вивария. Условия содержания и обращения с экспериментальными животными соответствовали «Правилам проведения работ с использованием экспериментальных животных», утвержденных приказом Минздрава СССР от 12.08. 1977 г. №755. Животные, согласно цели исследования были разделены на 3 группы.

Первая группа - 70 крыс, которым внутримышечно вводили физиологический раствор.

Вторая группа - 70 крыс, на которых изучали ре-зорбтивное действие пролактина. вызываемое внутримышечным введением гормона на сохранность клеток в парараневой зоне и на цито- и гистогенез формирующегося рубца кожи.

Третья группа - 70 крыс. На животных этой группы изучали местное влияние гормона на эти же процессы, как и во 2 группе.

Исходное состояние кожи исследовано на 10 интакт-ных животных.

Экспериментальным животным, в состоянии наркоза, в межлопаточной области производили электрокоагулятором через трафарет нанесение субдермальной кожной раны диаметром 6 мм.

Гиперпролактнемию вызывали в течение первых 7 суток посредством внутримышечного введения (25 ед/ кг масса) пролактина (2 группа) и путем местного его применения в виде аппликаций индиферентного геля с 5% содержанием пролактина на область экспериментальных ран (3 группа).

Согласно периода полувыведения препарата из организма и продолжительности его фармакологического действия, гель наносили на раневую поверхность два раза в сутки также на протяжении первых 7 суток после нанесения травмы.

Визуально и макроскопически проявления воспалительно-репаративного процесса (характер заживления и формирование рубцов кожи) оценивали по выраженности воспаления, скорости формирования грануляционной ткани, характеру и срокам эпители-зации раневой поверхности, степени васкуляризации рубца и его качеству (нормотрофический, гипотрофи-ческий, гипертрофический).

Забор материала осуществляли через 2, 6, 12 ч и на 1, 2, 3, 5, 7, 10, 15, 30, 60 и 180 сутки.

Для изучения морфологии раны и рубца кожи применяли окраски: гематоксилин-эозином, азур 11-эозином, пикрофуксином по методу Ван-Гизон и пикрофуксином по методу М.К. Васильцова (1971) для оценки состояния клеток, межклеточного вещества соединительной ткани и для определения содержания коллагена [1,2].

При оценке динамики воспалительно-репаративного процесса учитывали продолжительность фаз; состояние микроциркуляторного русла, скорость миграции лейкоцитов (по их концентрации в различных зонах очага воспаления); характер и динамичность изменения клеточных элементов в ране (нейтрофилов, мононукле-аров, макрофагов и фибробластов); пролиферативную активность фибробластов; интенсивность коллагеноо-бразования; развитие сосудов в грануляционной ткани; сроки формирования коллагеновых волокон, образование их пучков; сроки образования демаркационного вала, скорость и сроки удаления детрита из раны; степень зрелости грануляционной ткани, относительные объемы в рубце кожи клеточных элементов, сосудов и волокон, скорость эпителизации раневого дефекта.

Биомеханические свойства рубца (прочность, эластичность и упругость) определяли по методике О.С. Мишарева с соавт. [8].

Статистическую обработку данных проводили с помощью программы <^а^йса 6.1». Анализ значимости различий между группами осуществляли с использованием теста Манна-Уитни в соответствии с рекомендациями О.Ю Реброва. За критический уровень значимости была принята величина р=0,05 [10].

Результаты и обсуждение

Материалы исследования показали, что нанесение раны сопровождается массовой альтерацией клеточных элементов и других тканевых структур, обусловленных прямым действием травмы и «локальным» стрессом. Этот процесс занимает первые часы после нанесения раны. Установлено, что посттравматическая альтерация имеет различную степень выраженности в исследуемых группах.

При анализе полученных результатов установлено, что количество лейкоцитов к 2 часам раневого воспаления во 2 и 3 группах в 1,2 раза выше, чем в контрольной группе (р<0,05), К 6 часам процесса лейкоцитов больше во 2 группе в 1, 26 раза (р <0,05), макрофагов - в 1,12 раза. а фибробластов - в 1,22 раза (0< 0,05), чем в контроле. При местном использовании пролактина сохран-

ность макрофагов в парараневой зоне в 1,34 раза выше (р<0,05), чем в контроле, а фибробластов - в 1,52 раз (р <0,05). Помимо клеточных элементов во 2 экспериментальной группе отмечается большая сохранность и сосудистого русла.

В ранний посттравматический период создаются условия не только для клеток соединительной ткани, но и для сосудов. Кроме того, клетки имеют более высокую функциональную активность. Лейкоциты и макрофаги в более ранние сроки, чем в контроле, формируют демаркационный вал, который отграничивает зону поражения от здоровых тканей. Он значительно уже, но имеет более плотное расположение клеток. Эти изменения обеспечивают более активное начало репаративных процессов. Так при локальном использовании препарата, количество фибробластов уже на 3 сутки раневого процесса превышает уровень в контроле в 1,45 раза (р<0,01). Стимулируется не только миграция, пролиферация и дифференцировка фибробластов, но и их синтетическая активность. Так содержание коллагена на 30 сутки раневого процесса во 2 и 3 группах значительно выше по сравнению с контрольной (первой) группой.

Темпы созревания рубца значительно выше при местном применении препарата. К окончанию эксперимента (180 сутки) в структуре рубца контрольной серии отмечается 74,3% волокон, 17,4% клеток и 8,3% сосудов (табл. 1).

Таблица 1

Относительный объем волокон в рубцовой ткани, в %

группы 15 сут. 30 сут. 60 сут. 180 сут.

Ме

1 51,8

2 58,1

3 # 64,2

Примечание: здесь и далее: в первой и последующих таблицах: * - статистически значимые различия (р 0,05) с предыдущим сроком, # - статистически значимые различия с первой группой, - статистически значимые различия между показателями 2 3 группами.

При внутримышечном введении препарата: волокон - 76,9%, клеток - 15,2%, сосудов - 7,9% (табл. 2).

Таблица 2

Относительный объем сосудов в рубцовой ткани, в %

группа 15 сут. 30 сут. 60 сут. 180 сут.

Ме

1 21,4

2 18,5

3 # 16,1

При местном применении препарата относительный объем волокон в рубце составляет 78,7%, сосудов - 6,7%, а клеток - 14,6% (табл. 3). Итак, полученные данные говорят в пользу того, что при местном применении гормона формируется более зрелый рубец кожи с низким содержанием клеток и кровеносных сосудов.

Таблица 3

Относительный объем клеток в рубцовой ткани, в %

группы 15 сут. 30 сут. 60 сут. 180 сут.

Ме

1 26,8

2 23,4

3 # 19,7

Синхронно с процессом формирования грануляционной ткани происходит эпителизация формирующегося рубца. Оптимизация репаративных процессов, особенно при локальном использовании препарата, незамедлительно сказывается на биомеханических характеристиках сформированного рубца. Его прочность при локальном использовании препарата возрастает в 1,74 раза (р<0,01), а упругость - в 1,46 раза (р<0,01) по сравнению с контролем. Улучшаются и косметические свойства рубца кожи, он становится более эластичным и менее васкуляризованным.

На основании проведенного исследования можно заключить, что местное использование гормона за счет ускоренной его кумуляции в области раны, в ранний посттравматический период обеспечивает повышение сохранности и резистентности клеток соединительной ткани резистентности клеток, тканевых структур и снижает ишемические явления в зоне поражения. По сравнению с контролем в 1,52 раза (6 ч) больше количество сохранившихся фибробластов; формируется наиболее узкий лейкоцитарный вал (1 сутки) с наибольшей плотностью расположения в нем клеток; «демакационный» вал - в 1,4 раза тоньше, а максимальное количество макрофагов отмечается на 2-3 суток раньше.

К 180 суткам при местном применения пролактина формируется норматрофический тип рубца (100% случаев), при резорбтивном действии - он формируется в 70% наблюдений, а в контрольной группе - только в 60% случаев.

Наряду с этим сформированный рубец кожи в условиях локальной гиперпролактинемии имеет более высокие биомеханические свойства (прочность и эластичность) и эстетические характеристики.

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Прозрачность исследования. Исследование не имело спонсорской поддержки. Исследователи несут полную ответственность за предоставление окончательной версии рукописи в печать.

Декларация о финансовых и иных взаимодействиях. Все авторы принимали участие в разработке концепции и дизайна исследования и в написании рукописи. Окончательная версия рукописи была одобрена всеми авторами. Авторы не получали гонорар за исследование.

ЛИТЕРАТУРА

1. Васильцов М.К. Метод полуколичественного определения содержания коллагена в гистологических препаратах // Материалы научно-практической конференции. - Иркутск, 1971. - С.69-70.

2. Васильцов М.К., Изатулин В.Г., Лебединский В.Ю. и др. Воспаление кожи (оценка, прогнозирование исходов) // Морфология. - 1996. — Т. 109. №2. - С.40.

3. Зорина А.И., Зорин В.Л., Черкасов В.Р. Дермальные

фибробласты: разнообразие фенотипов, физиологических функций, возможности терапевтического применения // Косметика и медицина. - 2011. - №2. - С.12-24.

4. Изатулин В.Г. Заживление ран в условиях экспериментальной экзогенной гиперпролактинемии // Бюллетень Восточно-Сибирского научного центра СО РАМН. - 1999. -№3. - С.51-54.

5. Кенсовская И.М., Изатулин В.Г., Лебединский В.Ю.

Обоснование применения препарата лактин для коррекции морфогенеза рубцов кожи и его характеристик // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). - 2014. - №4. - С.44-48.

6. Кузин М.И., Костючено Б.М. Раны и раневая инфекция. - М.: Медицина, 1981. - 688 с.

7. Лебединский В.Ю., Буланкина И.А. Морфология и биомеханика очага воспаления различного генеза. - Иркутск: Мегапринт, 2008. - 237 с.

8. Мишарев О.С., Абаев Ю.К., Прокопчук Н.Р. Изучение

биомеханики заживления инфицированной раны в эксперименте // Клиническая хирургия. - 1985. - №1. - С.48-49.

9. Озерская О.С. Рубцы кожи и их дерматокосметологиче-ская коррекция. - СПб.: Искусство России, 2007. - 224 с.

10. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ БТАШТГСА. - М.: Медиа-сфера, 2002. - 312 с.

11. Чернух А.М. Воспаление: очерки патологии и экспериментальной терапии. - М.: Медицина, 1979. - 446 с.

REFERENCES

1. Vasiltsov M.K. The method of semi-quantitative determination of collagen in histological preparations // Proceedings of the conference. - Irkutsk, 1971. - P.69-70.

2. Vasiltsov M.K., Izatulin V.G., Lebedinsky V.Y., et al. Inflammation of the skin

3. Zorina A.I., Zorin V.L., Cherkasov V.R. Dermal fibroblasts: a variety of phenotypes, physiological functions, possible therapeutic use // Kosmetika I meditsina. - 2011. - №2. - P.12-24.

4. Izatulin V.G. Wound healing in experimental exogenous hyperprolactinemia // Bulleten Vostochno-Sibirskogo Nauchnogo Tsentra SO RAMN. - 1999. - №3. - P.51-54.

5. Kensovskaya I.M., Isatulin V.G., Lebedinskii V.U. The basis for use of lactin to correct morphogenesis of skin scars and its characteristics // Sibirskij Medicinskij Zurnal

6. Kuzin M.I., Kostyucheno B.M. Wounds and wound infection. - Moscow: Meditsina, 1981. - 688 p.

7. Lebedinsky V.Y., Bulankina I.A. Morphology and biomechanics of the source of inflammation of various origins. -Irkutsk, 2008. - 237 p.

8. Misharev O.S., Abaev J.K., Prokopchuk N.R. The study of biomechanics of healing infected wounds in the experiment // Klinicheskaia khirurgia. - 1985. - №1. - P.48-49.

9. Ozerskaya O.S. Scarring of the skin and dermatology correction. - St. Petersburg: Isskustvo Rossii, 2007. - 224 p.

10. Rebrova O.Yu. Statistical analysis of medical data. Application software package STATISTICA. - Moscow: Media sphera, 2002. - 312 p.

11. Chernukh A.M. Inflammation: Essays Pathology and Experimental Therapeutics. - Moscow: Medicine, 1979. - 446 p.

Информация об авторах:

Кенсовская Инна Михайловна - аспирант кафедры гистологии, цитологии, эмбриологии; Изатулин Владимир Григорьевич -профессор кафедры гистологии, цитологии и эмбриологии, д.м.н., 664003, г. Иркутск, ул. Красного Восстания, 1, e-mail: iza.vladimir@rambler.ru; Лебединский Владислав Юрьевич - д.м.н., профессор, научный руководитель центров медико-биологических проблем и здоровьесберегающих технологий.

Information About the Authors:

Kensovskaya Inna - aspirant of Histolodgy, Citolodgy and Embryolodgy; Izatulin Vladimir G. - Department of Histolodgy, Citology and Embryology, PhD, MD, Professor, 664003 Russia, Irkutsk, Krasnogo Vosstania st.,1, e-mail: iza.vladimir @rambler.ru; Lebedinsky Vladislav Y. - MD, PhD, professor, research of the Center for Biomedical Problems and health-technology.

© КОЛЕСНИКОВ С.И., МАКАРОВА Н.Г. - 2014 УДК: 591.149

НАРУШЕНИЯ ТИРЕОИДНОГО СТАТУСА, ПРОЦЕССОВ ЛИПОПЕРОКСИДАЦИИ И СТРУКТУРЫ ГЕПАТОЦИТОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ГИПОТИРЕОЗЕ

Сергей Иванович Колесников1, Надежда Георгиевна Макарова2

Резюме. В работе с использованием 42 экспериментальных животных установлено, что под влиянием мерказо-лила формируется стойкое (не менее 28 дней) гипотиреоидное состояние, которое сопровождается увеличением массы тела и печени, снижением продукции тиреоидных гормонов, активацией процессов липопероксидации, а также изменением структуры гепатоцитов. Печень, сохраняя увеличенную массу (за счет тканевых отеков), активно восстанавливается, несмотря на продолжающийся некроз клеток, который является следствием токсического действия мерказолила и торможения метаболических процессов.

Ключевые слова: печень, экспериментальный гипотиреоз, липопероксидация, мерказолил.

DISTURBANCES OF THYROID STATUS, PROCESSES PAUL AND THE CELLULAR COMPOSITION OF THE LIVER

WITH THE EXPERIMENTAL HYPOTHYREOSIS

S.I. KolesnikovN.G. Makarova2 ^Research Center of Family Health Problems And Human Reproduction, Irkutsk;

2Irkutsk State Medical University, Russia)

Summary. In this paper, using 42 experimental animals revealed that under the influence of thiamazole formed resistant (not less than 28 days) hypothyroid state, which is accompanied by an increase in body weight and liver, decreased production of thyroid hormones, activation of lipid peroxidation, as well as changes in the structure of hepatocytes. Liver increased while maintaining the mass (by tissue edema) recovering active, in spite of continued cell death that is a consequence of toxic effects and deceleration thiamazole metabolic processes.

Key words: hepatocytes, hypothyreosis, lipoperoxidation, thiamazole.