МАРКЕРНЫЕ ГЕНЫ ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В ИДЕНТИФИКАЦИИ ФЕНОТИПИЧЕСКОЙ СТАБИЛЬНОСТИ ХОНДРОЦИТОВ И В СКРИНИНГЕ ФАКТОРОВ, ВЛИЯЮЩИХ НА ПРОДУЦИРОВАНИЕ ХРЯЩА

1. In vitro-способ определения способности популяции клеток продуцировать стабильный гиалиновый хрящ in vivo, способ, который включает определение экспрессии указанной популяцией ряда маркерных генов, включающих по меньшей мере три маркерных гена, включающих FRZB (Frizzled-Подобный Белок 1), ALK1 (Рецептор Активина А, Типу II-Подобная Киназа) и один или более маркеров, выбранных из группы, состоящей из PEDF (Фактор, Выделенный из Пигментного Эпителия), COL11 (Коллаген, Тип XI A1), COL2 (Коллаген, Тип II, Альфа 1), FGFR3 (Рецептор Фактора Роста Фибробластов), OPN (Остеопонтин), BMP-2 (Костный Морфогенетический Белок 1) и RASF-PLA (Фосфолипаза А2, Группа IIA).
2. Способ по п.1, с помощью которого популяция клеток контактирует с соединением или условием.
3. Способ по п.1, включающий стадии:
контактирования популяции клеток с соединением или условием, и
определения уровня экспрессии указанной популяцией клеток ряда маркерных генов, включающих по меньшей мере три маркерных гена, включающих FRZB, ALK1 и один или более маркерных генов, выбранных из группы, состоящей из PEDF, COL11, COL2, FGFR3, OPN, BMP-2 и RASF-PLA.
4. Способ по п.3, дополнительно включающий стадии:
определения уровня экспрессии указанной популяцией клеток указанного ряда маркерных генов, включающих по меньшей мере три маркерных гена, перед указанной стадией контактирования и
определения того, способно ли соединение или условие влиять на экспрессию одного или более маркерных генов из указанного ряда маркерных генов, включающих по меньшей мере три маркерных гена, после указанной стадии контактирования.
5. Способ по п.1, где ряд маркеров, включающих по меньшей мере три маркера, представляет собой ряд маркерных генов, включающих по меньшей мере 4, 5 или 6 маркерных генов, включающих FRZB, ALK1 и включающих соответственно 2, 3 и 4 маркерных гена, выбранных из группы, состоящей из PEDF, COL11, COL2 и FGFR3.
6. Способ по п.1, где ряд маркерных генов, включающих по меньшей мере три маркерных гена, представляет собой ряд, включающий по меньшей мере шесть маркерных генов, включающих FRZB, ALK1, PEDF, COL11, COL2 и FGFR3.
7. Способ по п.3, который дополнительно включает определение способности соединения влиять на способность популяции клеток продуцировать стабильный гиалиновый хрящ in vivo, определение основано на влиянии присутствующего соединения на экспрессию ряда маркерных генов, включающих по меньшей мере три маркерных гена.
8. Способ по п.7, где соединение, способное к повышению экспрессии одного или более позитивных маркерных генов, выбранных из группы, состоящей из FRZB, COL11, COL2, FGFR3, OPN, BMP-2 и RASF-PLA, идентифицируют как позитивно влияющее на образование хряща, и соединения, способные повышать экспрессию или PEDF и/или ALK-1, идентифицируют как негативно влияющие на образование хряща.
9. Способ по п.8, где способность соединения или условия влиять на образование хряща определяют на основе кумулятивного влияния соединения или условия на экспрессию позитивных маркерных генов, выбранных из группы, состоящей из FRZB, COL11, COL2, FGFR3, OPN, BMP-2, RASF-PLA, и негативных маркерных генов PEDF и/или ALK-1.
10. Способ по любому из пп.1-9, где популяцию клеток получают из сустава.
11. Способ по любому из пп.1-9, где популяцию клеток получают от здорового донора.
12. Способ по любому из пп.1-9, где популяцию клеток получают от индивидуума с остеохондральным дефектом.
13. Способ по любому из пп.1-9, где уровень экспрессии маркеров из ряда маркеров определяют с помощью количественного метода.
14. Применение ряда маркеров для идентификации соединения, которое способно влиять на способность клеток продуцировать образование хряща in vitro, отличающееся тем, что маркеры включают ряд по меньшей мере из трех маркерных генов, включающих FRZB, ALK1 и один или более маркеров, выбранных из группы, состоящей из PEDF, COL11, COL2, FGFR3, OPN, BMP-2 и RASF-PLA.
15. Применение по п.14, где ряд маркеров включает по меньшей мере шесть маркеров, включающих FRZB, ALK1, PEDF, COL11, COL2 и FGFR3.
16. Набор реагентов, включающий зонды для детекции экспрессии ряда генов в клетках, образующих хрящ, где ряд генов включает ряд по меньшей мере из трех маркерных генов, выбранных из группы, состоящей из FRZB, ALK1, PEDF, COL11, COL2 и FGFR3.
17. Набор реагентов по п.16, где ряд маркерных генов, включающих по меньшей мере три маркерных гена, включает FRZB, ALK1, PEDF, COL11, COL2 и FGFR3.
18. Набор реагентов по п.16, где зонды для детекции по меньшей мере одного из маркерных генов, выбирают из группы, состоящей из олигонуклеотидов, которые гибридизуются с мРНК, ряда ПЦР-праймеров и антител.
19. Набор реагентов по п.18, где зонды являются меченными.
20. Устройство для детекции экспрессии ряда генов в клетках, образующих хрящ, причем указанное устройство включает одно или более из следующих:
средство для детекции экспрессии маркерных генов,
и зонды для ряда маркерных генов, включающих по меньшей мере три маркерных гена, включающих FRZB, ALK1 и один или более маркеров, выбранных из группы, состоящей из PEDF, COL11, COL2, FGFR3, OPN, BMP-2 и RASF-PLA.