Фунгицидная активность штаммов бактерии Bacillus subtilis по отношению к токсигенным и плесневым грибам

Ветеринария

ФУНГИЦИДНАЯ АКТИВНОСТЬ ШТАММОВ БАКТЕРИИ BACILLUS SUBTILIS ПО ОТНОШЕНИЮ К ТОКСИГЕННЫМ И ПЛЕСНЕВЫМ ГРИБАМ

А. Д. ЖИРКОВ, аспирант,

С. С. ТАТАРИНОВА, кандидат ветеринарных наук, старший научный сотрудник,

Н. П. ТАРАБУКИНА, доктор ветеринарных наук, профессор,

М. П. НЕУСТРОЕВ, 677018 г Якутск, доктор ветеринарных наук, профессор, ул. Бестужева-Марлинского, д. 23/1; Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства e-mail: agronii@mail.ru

Положительная рецензия представлена Н. И Прокопьевой, доктором ветеринарных наук, профессором Якутской государственной сельскохозяйственной академии.

Корма растительного происхождения, контамини-рованные токсигенными и плесневыми грибами (ми-кромицетами), представляют реальную опасность для здоровья сельскохозяйственных животных и человека. При загрязнении кормов микромицетами существует возможность накопления микотоксинов, вторичных метаболитов плесневых грибов, кроме того, угнетается полезная микрофлора самих растений. По-

этому вопросы детоксикации кормов от микотоксинов и их продуцентов остаются актуальными [1, 2, 4].

Цель и методика исследований.

Целью данной работы явилось изучение фунгицидной активности штаммов бактерий Bacillus subtilis ТНП-3 и ТНП-5 к токсигенным и плесневым грибам родов Aspergillus, Mucor, Candida, Fusarium.

Таблица 1

Результаты изучения фунгицидных свойств бактерий Bacillus subtilis ТНП-3 и ТНП-5

Срок наблюдения (дни) Штамм бактерий Тест-культура

Aspergillus niqer Fusarium semitectum Mucor ramosissmus Candida albicans

На 2-й день Bаc. subtiUs ТНП-3 + Рост Bac.sub Рост Bac.sub + Рост Bac.sub + Рост Bac.sub

Bac. subtШs ТНП-5 + Рост Bac.sub. Рост Bac.sub. Рост Bac.sub. + Рост Bac.sub

контроль ++ ++ ++ ++

На 3-й день Bac. subtiUs ТНП-3 + Рост Bac.sub Рост Bac.sub Рост Bac.sub + Рост Bac.sub

Bac. subtШs ТНП-5 + Рост Bac.sub Рост Bac.sub Рост Bac.sub + Рост Bac.sub

контроль +++ +++ +++ +++

На 4-й день Bac. subtiUs ТНП-3 + Рост Bac.sub Рост Bac.sub Рост Bac.sub + Рост Bac.sub

Bac. subtШs ТНП-5 + Рост Bac.sub Рост Bac.sub Рост Вас^иЬ + Рост Bac.sub

контроль +++ +++ +++ +++

На 6-й день Bac. subtШs ТНП-3 + Рост Bac.sub Рост Bac.sub Рост Bac.sub + Рост Bac.sub

Bac. subШs ТНП-5 ++ Рост Bac.sub Рост Bac.sub Рост Bac.sub + Рост Bac.sub

контроль +++ +++ +++ +++

На 8-й день Bac. subtШs ТНП-3 + Рост Bac.sub Рост Bac.sub Рост Bac.sub + Рост Bac.sub

Bac. subШs ТНП-5 +++ Рост Bac.sub Рост Bac.sub Рост Bac.sub + Рост Bac.sub

контроль

На 10-й день Bac. subtШs ТНП-3 + Рост Bac.sub Рост Bac.sub Рост Bac.sub + Рост Bac.sub

Bac. subШs ТНП-5 +++ Рост Bac.sub Рост Bac.sub Рост Bac.sub + Рост Bac.sub

контроль

Примечание: «-» — отсутствие роста; «+» — рост вокруг инокулята 1 мм; «++» — рост вокруг инокулята 2 мм; «+++» — рост вокруг инокулята 6мм; «++++» — разрастание колонии.

Ветеринария

Объектом исследования служили штаммы бактерий Bacillus subtilis ТНП-3 и ТНП-5, выделенные из мерзлотных почв, паспортизированные и депонированные в коллекции микроорганизмов, используемых в животноводстве и ветеринарии в ВГНКИ [3].

В качестве тест-культур использованы 5-7-суточные культуры микроскопических грибов: Aspergillus niger, Mucor ramosissimus, Candida albicans, Fusarium semitectum выращенных на средах Чапека. Токсиген-ные и плесневые грибы родов Aspergillus, Mucor, Candida, Fusarium выделены из фекалий лошадей разновозрастных групп табунного содержания.

Фунгицидную активность штаммов бактерий Bacillus subtilis изучали методом диффузии в агар в чашках Петри. Для этого использовали культуральную жидкость (КЖ) штаммов бактерий Bacillus subtilis ТНП-3 и ТНП-5, которые получали в результате фильтрации и центрифугирования 5-суточных культур, выращенных на мясо-пептонном агаре. КЖ вносили на расплавленную и охлажденную до 40 °С агазированную среду. На поверхности застывшего агара микологической иглой (загнутым углом) осторожно берется (инокулят) кусочек мицелия грибов и помещается на середину поверхности приготовленной среды в чашках Петри. Посевы помещают в термостат, завернутыми в стерильную бумагу, и культивируют при температуре 25 °С. Учитывается результат, полученный в течение 10 дней. Периодически ведется наблюдение за ростом тест-культур.

Для контроля использовали среды без КЖ штаммов бактерий Bacillus subtilis ТНП-3 и ТНП-5.

Результаты исследований.

Испытуемые штаммы бактерий Bacillus subtilis ТНП-3 и ТНП-5 обладают широким спектром фунгицидного действия по отношению к токсигенным и плесневым грибам (табл. 1).

На 10-й день наблюдений в опытных чашках отмечен сплошной рост штаммов бактерий Bacillus subtilis, виден чуть заметный рост грибов Aspergillus niqer, Candida albicans вокруг инокулята (от 1 до 6 мм). Рост грибов Mucor ramosissimus, Fusarium semitectum не зарегистрирован с 3-го дня наблюдений. Зона лизиса между ростом штаммов бактерий Bacillus subtilis и грибов отсутствует.

Результаты проведенных опытов позволяют отметить, что штаммы бактерий Bac. subtilis ТНП-3 и ТНП-5, несомненно, обладают выраженным фунгицидным действием в отношении плесневых грибов родов Aspergillus,Mucor, Candida, Fusarium. Следует отметить, что наиболее выраженной антифунгальной активностью обладает штамм бактерий Bac. subtilis ТНП-3.

Выводы. Рекомендации.

Изучение фунгицидной активности штаммов бактерий Bac. subtilis «ТНП-3» и Bac. subtilis «ТНП-5» по отношению к токсигенным и плесневым грибам родов Aspergillus, Mucor, Candida, Fusarium показывает перспективность их использования для профилактики микотоксикозов в табунном коневодстве.

Литература

1. Антипов В. А., Васильев В. Ф., Кутищева Т. Г. Микотоксикозы — важная проблема животноводства // Ветеринария. 2007. № 11. С. 7-9.

2. Неустроев М. П., Тарабукина Н. П., Былгаева А. А. Профилактика микотоксикозов сельскохозяйственных животных в условиях Якутии : методические рекомендации РАСХН, Сиб. отд-ние. ГНУ Якут. НИИСХ. Якутск, 2004. 16 с.

3. Неустроев М. П., Тарабукина Н. П., Парникова С. И., Федорова М. П., Трофимов И. И., Никитин А. Е. Новый препарат «Сахабактисубтил». Проблемы стабилизации и развития сельского хозяйства Казахстана, Сибири и Монголии : материалы Ш-й междунар. науч.- практ. конф. (Алматы, 18-19 июля 2000 г.) СО РАСХН. Новосибирск, 2000.

4. Чулков А., Тремасов М., Иванов А. Ветеринария сельскохозяйственных животных // О профилактике микотоксикозов животных. 2009. № 9. С. 11-14.