БИОАКТИВНЫЕ ПЕПТИДЫ FUS-1 И КОМПЛЕКСЫ ПОЛИПЕПТИДОВ С НАНОЧАСТИЦАМИ

1. Комплекс полипептида с наночастицей, включающий:
a) биоактивный полипептид в связи с
b) наночастицей,
где биоактивный полипептид модифицирован добавлением химической части, которая облегчает клеточный захват полипептида.
2. Комплекс полипептида с наночастицей по п.1, где полипептид представляет собой пептид.
3. Комплекс полипептида с наночастицей по п.2, где аминокислотная последовательность пептида происходит от аминокислотной последовательности продукта гена-супрессора опухолей.
4. Комплекс полипептида с наночастицей по п.3, где ген-супрессор опухолей представляет собой ген, представленный в таблице 4, проапоптозный ген или цитотоксический ген.
5. Комплекс полипептида с наночастицей по п.1, где биоактивный пептид представляет собой пептид FUS-1, пептид гомеобоксного гена Antennapedia (Antp), пептид Tat ВИЧ, пептид VP22 вируса герпеса, модельный амфипатический пептид, пептид транспортана, пептид антигена SV 40 T или пептид протегрина I.
6. Комплекс полипептида с наночастицей по п.5, где биоактивный пептид представляет собой пептид FUS-1.
7. Комплекс полипептида с наночастицей по п.5, где пептид FUS-1 включает SEQ ID NO:1.
8. Комплекс полипептида с наночастицей по п.5, где пептид FUS-1 представляет собой SEQ ID NO:1.
9. Комплекс полипептида с наночастицей по п.5, где биоактивный пептид включает KLALKLALKALKAALKLA (SEQ ID NO:2), RQIKIWFQNRRMKWKK (SEQ ID NO:3), GWTLNSAGYLLGKINLKALAALAKKIL (SEQ ID NO:4), MGLGLHLLVLAAALQGAWSQPKKKRKV (SEQ ID NO:5), GALFLGWLGAAGSTMGAWSQPKKKRKV (SEQ ID NO:6), GRKKRRQRRRPPQ (SEQ ID NO:7), RGGRLSYSRRRFSTSTGR (SEQ ID NO:8) или RRLSYSRRRF (SEQ ID NO:9).
10. Комплекс полипептида с наночастицей по п.9, где биоактивный пептид включает KLALKLALKALKAALKLA (SEQ ID NO:2).
11. Комплекс полипептида с наночастицей по п.3, где пептид включает функциональный домен аминокислотной последовательности продукта гена-супрессора опухолей.
12. Комплекс полипептида с наночастицей по п.3, где пептид включает предсказанный функциональный домен аминокислотной последовательности продукта гена-супрессора опухолей.
13. Комплекс полипептида с наночастицей по п.12, где предсказанный функциональный домен идентифицируют с помощью компьютерного анализа последовательностей в отношении аминокислотной последовательности продукта гена-супрессора опухолей.
14. Комплекс полипептида с наночастицей по п.1, где полипептид является белком.
15. Комплекс полипептида с наночастицей по п.13, где аминокислотная последовательность белка происходит от аминокислотной последовательности продукта гена-супрессора опухолей.
16. Комплекс полипептида с наночастицей по п.14, где ген-супрессор опухолей представляет собой ген, представленный в таблице 4.
17. Комплекс полипептида с наночастицей по п.16, где ген-супрессор опухолей представляет собой FUS-1.
18. Комплекс полипептида с наночастицей по п.1, где наночастица представляет собой наночастицу на основе липидов, суперпарамагнитную наночастицу, нанооболочку, полупроводниковый нанокристалл, квантовую точку, наночастицу на основе полимера, наночастицу на основе кремния, наночастицу на основе кремнезема, наночастицу на основе металла, фуллерен или нанотрубку.
19. Комплекс полипептида с наночастицей по п.18, где наночастица представляет собой наночастицу на основе липидов.
20. Комплекс полипептида с наночастицей по п.18, где наночастица на основе липидов представляет собой липосому, нейтральную липосому, липосому DOPC или везикулу DOTAP:холестерин.
21. Комплекс полипептида с наночастицей по п.20, где липосома представляет собой липосому DOPC.
22. Комплекс полипептида с наночастицей по п.18, где наночастица представляет собой суперпарамагнитную наночастицу.
23. Комплекс полипептида с наночастицей по п.18, где наночастица представляет собой суперпарамагнитную наночастицу, и комплекс полипептида с наночастицей находится в липосоме или везикуле DOTAP:холестерин.
24. Комплекс полипептида с наночастицей по п.23, где липосома представляет собой липосому DOPC.
25. Комплекс полипептида с наночастицей по п.1, где химическая часть представляет собой жирную кислоту.
4
18
26. Комплекс полипептида с наночастицей по п.25, где жирная кислота представляет собой C-C жирную кислоту.
27. Комплекс полипептида с наночастицей по п.25, где жирная кислота представляет собой стеарат или миристат.
28. Комплекс полипептида с наночастицей по п.1, где химическая часть представляет собой проникающий в клетку пептид.
29. Комплекс полипептида с наночастицей по п.28, где проникающий в клетку пептид происходит от Tat ВИЧ, VP22 вируса герпеса или продукта гомеобоксного гена Drosophila Antennapedia.
30. Комплекс полипептида с наночастицей по п.1, дополнительно включающий второй биоактивный полипептид в связи с наночастицей.
31. Комплекс полипептида с наночастицей по п.30, где первый и второй биоактивные полипептиды представляют собой биоактивные пептиды, каждый включающий аминокислотную последовательность, происходящую от различных продуктов генов-супрессоров опухолей.
32. Комплекс полипептида с наночастицей по п.1, дополнительно включающий нацеливающую часть, которая направляет комплекс полипептида с наночастицей к ткани или клетке.
33. Комплекс полипептида с наночастицей, включающий:
a) биоактивный полипептид в связи с
b) наночастицей,
где биоактивный полипептид модифицирован добавлением стеаратной части, и наночастица представляет собой везикулу DOTAP:холестерин, липосому DOPC или суперпарамагнитную частицу.
34. Выделенный пептид, включающий:
a) аминокислотную последовательность KLRRVHKNLIPQGIVKLDHPR (SEQ ID NO:1) или
b) ее биологически активный вариант.
35. Пептид по п.34, где пептид составляет от 10 до 100 аминокислотных остатков в длину.
36. Пептид по п.35, где пептид составляет от 10 до 75 аминокислотных остатков в длину.
37. Пептид по п.36, где пептид составляет от 10 до 50 аминокислотных остатков в длину.
38. Пептид по п.37, где пептид составляет от 10 до 25 аминокислотных остатков в длину.
39. Пептид по п.38, где пептид составляет 10 аминокислотных остатков в длину.
40. Пептид по п.34, где пептид модифицирован добавлением химической части, которая облегчает клеточный захват пептида.
41. Пептид по п.40, где химическая часть представляет собой жирную кислоту.
4
18
42. Пептид по п.41, где химическая жирная кислота представляет собой C-C жирную кислоту.
43. Пептид по п.42, где жирная кислота представляет собой стеарат или миристат.
44. Пептид по п.40, где химическая часть представляет собой проникающий в клетку пептид.
45. Пептид по п.44, где проникающий в клетку пептид происходит от Tat ВИЧ, VP22 вируса герпеса или продукта гомеобоксного гена Drosophila Antennapedia.
46. Комплекс полипептида с наночастицей, включающий:
a) биоактивный пептид по любому из пп.34-45;
b) наночастицу.
47. Комплекс полипептида с наночастицей по п.46, где наночастица представляет собой наночастицу на основе липидов, суперпарамагнитную наночастицу, нанооболочку, полупроводниковый нанокристалл, квантовую точку, наночастицу на основе полимера, наночастицу на основе кремния, наночастицу на основе кремнезема, наночастицу на основе металла, фуллерен или нанотрубку.
48. Комплекс полипептида с наночастицей по п.47, где наночастица представляет собой наночастицу на основе липидов.
49. Комплекс полипептида с наночастицей по п.48, где наночастица на основе липидов представляет собой липосому или везикулу DOTAP:холестерин.
50. Комплекс полипептида с наночастицей по п.47, где наночастица представляет собой суперпарамагнитную наночастицу.
51. Комплекс полипептида с наночастицей по п.47, где наночастица представляет собой суперпарамагнитную наночастицу, и комплекс полипептида с наночастицей находится в липосоме или везикуле DOTAP:холестерин.
52. Комплекс полипептида с наночастицей, включающий:
a) пептид с аминокислотной последовательностью KLRRVHKNLIPQGIVKLDHPR (SEQ ID NO:1) в связи с
b) наночастицей,
где пептид модифицирован добавлением стеаратной части, и наночастица представляет собой липосому, везикулу DOTAP:холестерин, липосому DOPC или суперпарамагнитную наночастицу.
53. Способ лечения заболевания, включающий введение субъекту фармацевтической композиции, включающей любой из пептидов или комплексов полипептидов с наночастицами по любому из пп.1-52, в фармацевтически приемлемом разбавителе.
54. Способ по п.53, где заболевание представляет собой рак.
55. Способ по п.53, дополнительно включающий введение химиотерапевтического агента субъекту.
56. Способ по п.55, где химиотерапевтический агент представляет собой иматиниб.
57. Способ по п.54, где рак представляет собой рак легких.
58. Способ по п.57, где рак легких представляет собой NSCLC.
59. Способ по п.53, дополнительно включающий облучение субъекта.
60. Способ по п.53, дополнительно включающий введение второго биоактивного полипептида субъекту.
61. Способ доставки полипептида в клетку, включающий:
a) получение любого из комплексов полипептида с наночастицей по любому из пп.1-33 и 46-52; и
b) контактирование клетки с комплексом полипептида с наночастицей в условиях, достаточных для обеспечения захвата биоактивного полипептида клеткой.
62. Способ лечения опухоли у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества любого из пептидов или комплексов полипептида с наночастицей по пп.1-52, где полипептид комплекса с наночастицей основан на аминокислотной последовательности продукта гена-супрессора опухолей.
63. Способ по п.62, где указанное введение представляет собой внутрибрюшинное введение.
64. Способ по п.62, где опухоль представляет собой опухоль желудочно-кишечного тракта.
65. Способ получения комплекса полипептида с наночастицей, включающий:
a) идентификацию одного или нескольких функциональных доменов в последовательности биоактивного полипептида;
b) получение пептида, включающего, по меньшей мере, один из функциональных доменов;
c) выбор пептида, обладающего желаемой биологической активностью; и
d) получение комплекса полипептида с наночастицей путем связывания пептида с наночастицей.
66. Способ по п.65, где указанная идентификация включает применение компьютерного структурного анализа.
67. Способ по п.66, где компьютерный структурный анализ приводит к идентификации предполагаемого сайта взаимодействия с протеинкиназой, предполагаемого сайта миристоилирования, мотива домена PDZ класса II или мотива белка, заякоривающего киназу A (AKAP).
68. Способ по п.65, дополнительно включающий модификацию пептида путем добавления химической части, которая облегчает клеточный захват пептида.
69. Способ по п.65, где функциональный домен представляет собой предсказанный функциональный домен аминокислотной последовательности гена-супрессора опухолей.
70. Способ ингибирования протеинтирозинкиназы, включающий контактирование киназы с любым из пептидов по любому из пп.34-45.
71. Способ по п.70, где киназа представляет собой EGFR, PDGFR, cKit, cAbl или Erk.
72. Способ индукции апоптоза в опухолевой клетке, включающий контактирование опухолевой клетки с любым из пептидов по любому из пп.34-45.
73. Способ индукции апоптоза в опухолевой клетке, включающий контактирование опухолевой клетки с любым из комплексов полипептида с наночастицей по любому из пп.46-51.
74. Композиция для магнитно-резонансной визуализации, включающая любой из комплексов полипептида с наночастицей по любому из пп.1-32 и 46-51, где наночастица представляет собой суперпарамагнитную наночастицу.