Оценка реактогенности, безопасности, иммуногенности и профилактической эффективности отечественной расщепленной гриппозной вакцины Грифор

Оценка реактогенности, безопасности, иммуногенности и профилактической эффективности отечественной расщепленной гриппозной вакцины Грифор

И.В. Фельдблюм, А.В. Полушкина, К.А. Павроз, Н.Н. Воробьева, Н.В. Исаева, М.Г. Меньшикова, С.Д. Новгородова, Т.К. Рысинская, О.Н. Сумливая,

В.В. Николенко

ПО «ПГМА им. акад. Е.А. Вагнера Росздрава», г. Пермь

Резюме

В статье представлены результаты проспективного рандомизированного клинического наблюдения за взрослыми в возрасте от 18 до 65 лет, иммунизированными новой отечественной расщепленной гриппозной вакциной Грифор, с целью оценки ее реактогенности, безопасности, иммуногенности и профилактической эффективности. Вакцина характеризуется высоким профилем безопасности (отсутствовали клинические проявления аллергических заболеваний, изменения лабораторных показателей крови и мочи), достаточной иммуногенностью (индукция антител на защитном уровне ко всем трем компонентам вакцины) и высокой профилактической эффективностью (коэффициент защищенности - почти 100%).

Ключевые слова: вакцина гриппозная Грифор, реактоген-ность, безопасность, иммуногенность, профилактическая эффективность

Введение

В настоящее время вакцинопрофилактика является наиболее эффективным методом борьбы с гриппом, сочетающим в себе высокую специфичность, профилактическую эффективность и экономичность [4]. Имеется большое количество данных, свидетельствующих о том, что гриппозные вакцины, приготовленные из актуальных вакцинных штаммов вируса гриппа и примененные в соответ-ствущее время, способны защитить от заболевания гриппом около 80% здоровых детей и взрослых [3 - 5].

В России спектр используемых для специфической профилактики медицинских иммунобиологических препаратов достаточно широк и включает как инактивированные, так и живые вакцины. Живые гриппозные вакцины воспроизводят в организме ослабленную естественную инфекцию, стимулируют секреторную, гуморальную и клеточную системы иммунитета, экономичны по стоимости. Инактивированные гриппозные вакцины формируют преимущественно гуморальный иммунитет и имеют меньшее число противопоказаний, что делает возможным их применение не только среди практически здоровых людей, но и среди лиц стар-

Study of Reactogenicity, Safety, Immunogenicity and Preventive Efficiency of Russian Split Influensa Vaccine Grifor

I.V. Feldblyum, A.V. Polushkina, K.A. Pavroz, N.N. Vorob'eva,

N.V. Isaeva, M.G. Menshikova, S.D. Novgorodova, T.K. Rysinskaya, O.N. Sumlivaya, V.V. Nikolenko

E.A. Vagner the State Medical Academy of Perm (rector@psma.ru) Abstract

Reactogenicity, safety, immunogenicity and preventive efficiency of new Russian split influensa vaccine Grifor were assessed. Five hundred and four volunteers aged 18 - 65years consented to participate in the trial. Analysis of obtained results showed that there was evidence of safety and low reactogenicity of the vaccine as well as of its high immunogenic characteristics.

Key words: influenza vaccine Grifor, reactogenicity, safety, immu-nogenicity, prophylactic efficacy

ше 65 лет, а также страдающих различными хроническими заболеваниями.

В последние годы для профилактики гриппа в большинстве стран мира применяют три типа инактивированных гриппозных вакцин: вирионные (корпускулярные, или цельновирионные), расщепленные, или дезинтегрированные (сплит-вакцины) и субъединичные.

Цельновирионные вакцины содержат цельные инактивированные вирионы вируса гриппа. Поскольку они имеют липиды вирусной оболочки, вакцинация может сопровождаться поствакцинальны-ми реакциями и осложнениями. По этой причине использование цельновирионных вакцин ограничено, особенно у детей.

Сплит-вакцины получают путем расщепления вируса, они содержат все внутренние и поверхностные антигены, необходимые для адекватной выработки иммунитета, при отсутствии реактоген-ных липидов. В связи с этим расщепленные вакцины нашли широкое применение, в том числе у детей начиная с шестимесячного возраста [3]. Кроме того, в отличие от субъединичных, сплит-вакцины индуцируют выработку эндогенного интерферона, что позволяет повысить неспецифическую противо-

epid 3 (52).indd 63

7/1/10 3:24:56 PM

вирусную резистентность организма. Это немаловажно для снижения общей заболеваемости ОРВИ в период эпидемического подъема.

Субъединичные вакцины включают в себя только гемагглютинин и нейраминидазу. Они, как и расщепленные вакцины, редко вызывают послеприви-вочные реакции, так как не содержат реактогенных липидов. Вместе с тем отсутствие внутренних антигенов не позволяет им индуцировать образование антител, способных к перекрестной нейтрализации «неблизкородственных» штаммов диких вирусов. Это отчасти объясняет более низкую профилактическую эффективность субъединичных вакцин по сравнению с расщепленными, в составе которых внутренние антигены присутствуют [5].

Инактивированные гриппозные вакцины изготавливают компании многих стран Европы, Азии, Америки и Австралии. В 2006 году в России на основе нанотехнологий была сконструирована новая расщепленная вакцина - Грифор. Важным отличием ее от зарубежных аналогов является то, что содержащиеся в составе препарата поверхностные и внутренние антигены собраны в виде виросом. Этого удалось достичь благодаря применению высокоэффективного современного детергента р-октилгликозида [1]. Вакцина прошла доклинические и I фазу клинических испытаний и была рекомендована для проведения полевых рандомизированных клинических исследований по оценке ее профилактической эффективности [2].

Цель настоящего исследования - изучение безопасности, реактогенности, иммуногенности и профилактической эффективности новой отечественной гриппозной расщепленной вакцины Грифор при иммунизации ею взрослых от 18 до 65 лет.

Материалы и методы

Оценку реактогенности, иммуногенности, безопасности и профилактической эффективности проводили в условиях контролируемого полевого рандомизированного исследования в соответствии с программой, утвержденной Комитетом по этике при Федеральном органе контроля качества лекарственных средств. Дизайн исследования разрабатывался в строгом соответствии с правилами GCP и с соблюдением рекомендаций Хельсинкской декларации.

В простом слепом, сравнительном, проспективном, рандомизированном исследовании приняли участие 1008 здоровых добровольцев в возрасте от 18 до 63 лет. В основную группу вошли 504 человека, вакцинированных препаратом Грифор, в контрольную - также 504 человека, не привитых против гриппа.

Критерии включения в исследование: возраст от 18 лет и старше на момент вакцинации, способность понимать задачи и ход исследования и подписанное добровольное информированное согласие на участие и ведение дневника. Для участниц исследования были дополнительные условия:

применение эффективных методов контрацепции начиная за 30 дней до и в течение двух месяцев после проведенной вакцинации и отрицательные результаты теста на беременность.

Критерии исключения из исследования: наличие в анамнезе аллергических заболеваний или реакций, способных обостриться под воздействием любого из компонентов изучаемой вакцины, онкологические заболевания, ВГВ, ВГС, ВИЧ-инфекция, наличие острых заболеваний на момент включения в исследование, выраженные врожденные дефекты или серьезные хронические заболевания в анамнезе, применение препаратов крови и иммунотропных лекарственных средств, нарушение графика исследования, отказ от участия в исследовании, участие в другом клиническом испытании.

Программа исследования включала следующие этапы:

• отбор пациентов с заполнением информированного согласия на включение их в исследование;

• вакцинация против гриппа (однократно, внутримышечно в дельтовидную мышцу, в дозе 35 мкг);

• активное наблюдение за привитыми в поствак-цинальном периоде с целью оценки безопасности, реактогенности, иммуногенности и профилактической эффективности препарата.

Безопасность вакцины оценивалась на основании общеклинических и биохимических исследований крови, общего анализа мочи и определения в сыворотке крови ^Е. Сыворотки крови привитых исследовали до вакцинации и спустя 21, 90 и 180 дней. Определение содержания проводили методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием коммерческих тест-систем. За нормальный уровень сывороточных ^Е согласно инструкции был принят уровень не более 130 МЕ/мл.

Реактогенность вакцины оценивали по выявлению общих и местных поствакцинальных реакций, степени их выраженности и длительности проявления (через 30 минут после введения и при активном наблюдении в течение 21 дня). Общие реакции оценивались по степени повышения температуры и выраженности проявлений интоксикации (кратковременные недомогание, головная боль, нарушение сна, аппетита). К слабой реакции относили субфебрильную температуру - до

37,5 оС, при отсутствии симптомов интоксикации; к средней - от 37,6 до 38,5 оС, с умеренно выраженной интоксикацией; к сильной - выше 38,6 оС с выраженными симптомами интоксикации.

Оценка выраженности местной реакции проводилась по величине инфильтрата и степени гиперемии. Слабой реакцией считали гиперемию на участке диаметром до 5 см или инфильтрат в месте инъекции до 2,5 см в диаметре; средней -гиперемию диаметром более 5 см или инфильтрат

— 64

ер1с1 3 (52).тсИ 64 Ф 7/1/10 3:24:56 РМ

от 2,6 до 5 и сильной - инфильтрат более 5 см, а также гиперемию 8 см и более.

Иммуногенность вакцины оценивали по уровню сероконверсии и серопротекции путем определения в сыворотке крови до иммунизации и через месяц после введения вакцины антител к трем типам вируса гриппа: А(Н^1)/Соломоновы 0строва/03/06, А(H3N2)/Висконсин/67/05 и В/Малайзия/2504/04. Уровень антител в сыворотке крови определяли в РТГА с куриными эритроцитами (на базе ГУ «НИИ гриппа» РАМН).

Профилактическую эффективность оценивали путем сопоставления заболеваемости гриппом и ОРВИ в группе наблюдения и контрольной на основании активного клинического и лабораторного анализа в эпидемический сезон 2008 года (с 25 февраля по 14 апреля). Лабораторное подтверждение диагноза «грипп» осуществлялось по результатам четырехкратного нарастания титра антител в динамике с интервалом две-три недели.

Статистическую обработку результатов выполняли с использованием методов параметрической статистики. Достоверность различия определяли по критерию Стьюдента при Р < 0,05.

Результаты и обсуждение

Оценка реактогенности вакцины Грифор позволила установить следующее: в группе наблюдения общее число случаев поствакцинальных реакций составило 20 (3,97%), включая 4 (0,79%) случая слабых местных реакций, 14 (2,88%) - слабых общих и 2 (0,4%) - слабых комбинированных (сочетание слабовыраженных местных и общих реакций) (табл. 1). Местные реакции проявлялись только развитием гиперемии размером 30 - 40 мм в месте введения вакцины, продолжительностью два - четыре дня. Общие реакции были слабой степени выраженности, в виде субфебрильной температуры и незначительной слабости длительностью один-два дня.

Таким образом, при активном наблюдении за добровольцами в поствакцинальном периоде не было выявлено местных и общих реакций средней и тяжелой степени, а также поствакцинальных

осложнений, что свидетельствует о низкой реактогенности вакцины.

У 15 человек (2,98%) с 8-го по 21-й день после иммунизации имели место повышение температуры тела от 37,2 до 38,6 оС, головная боль и боль в горле, насморк, кашель, озноб, незначительные миалгии и артралгии. Экспертный анализ, включающий результаты клинико-лабораторных исследований, позволил расценить эти явления как присоединение интеркуррентных заболеваний (ОРЗ, обострение хронического тонзиллита).

Оценка иммуногенности вакцины показала, что новая гриппозная вакцина Грифор обеспечивает выработку антител в защитных титрах к трем вакцинным штаммам. Уровень серопротекции к вирусу гриппа А(Н^1)/Соломоновы 0строва/03/06 выявлен у 98% привитых; к вирусу гриппа А(H3N2)/Висконсин/67/05 и вирусу гриппа В/Малайзия/2504/04 - у 77 и 70% привитых соответственно.

Анализ частоты диагностических приростов антител продемонстрировал высокие иммуноген-ные свойства вакцины. Сероконверсия к вирусу гриппа А(Н^1) была выявлена у 60% привитых, к В-вирусному компоненту и вирусу гриппа А(H3N2) - у 46 и 53% соответственно.

Рассмотрение результатов общего анализа крови в группе привитых не выявило статистически достоверных различий показателей, которые в динамике наблюдения соответствовали нормативным значениям. Так, количество эритроцитов до вакцинации было 4,7 ± 0,0 х 1012/л, а на 21-й, 90-й, 180-й дни наблюдения - 4,6 ± 0,1, 4,7 ± 0,1 и

5,0 ± 0,1 х 1012/л соответственно. Показатель лейкоцитов до вакцинации составлял 7,7 ± 0,2 х 109/л, а на 21-й, 90-й дни наблюдения - 7,0 ± 0,2, 7,8 ± 0,2 х 109/л. К 180-му дню отмечалась тенденция к увеличению количества лейкоцитов до 9,5 ± 2,0 х 109/л (Р > 0,05). В лейкограмме относительный показатель эозинофилов до вакцинации был 2,4 ± 0,5%, на 21-й, 90-й, 180-й дни - 1,5 ± 0,2, 2,8 ± 0,2 и 2,5 ± 0,1% соответственно, лимфоцитов - 32,0 ± 0,8, 33,7 ± 0,8, 36,3 ± 0,8, 32,8 ± 0,9%, моноцитов - до вакцинации 6,3 ± 0,2%, в процессе

Таблица 1.

Местные, общие и комбинированные реакции, зарегистрированные у привитых вакциной Грифор в первые три недели (0 - 21-й день) после иммунизации

Привитые вакциной Грифор Общее число поствакцинальных реакций Местные реакции Общие реакции Комбинированные

I II III I II III I II III

504 абс. % абс. % абс. % абс. % абс. % абс. % абс. % абс. % абс. % абс. %

20 3,97 ± 4,4 4 9 ,0 г-— 0± - - - - 14 ± 2, 7 - - - - 2 0,40 ± 1,4 - - - -

I - слабые, II - средние, III - тяжелые

65 —

ер1С 3 (52).1пСС 65 Ф 7/1/10 3:24:56 РМ

Таблица 2.

Динамика сывороточных IgE до и после иммунизации

Сроки обследования Число обследованных Показатели

До вакцинации 107 50,14 і 4,08

21-й день 107 50,24 і 3,84

90-й день 107 57,14 і 4,0

180-й день 107 88,34 і 9,88

Таблица 3.

Заболеваемость гриппом и ОРВИ среди привитых вакциной Грифор и непривитых в эпидсезон 2008 года

Группа наблюдения ОРВИ + грипп ОРВИ Грипп

всего лабораторный клинический

абс. на 1000 чел. абс. на 1000 чел. абс. на 1000 чел. абс. на 1000 чел. абс. на 1000 чел.

Привитые вакциной Грифор 31 61,5 і 10,7 31 61,5 і 10,7 0 - 0 - 0 -

Непривитые 43 85,3 і 12,4 32 63,5 і 10,9 11 21,8 і 6,5 5 9,9 і 4,4 6 1,9 і 1,8

наблюдения - 4,6 ± 0,2, 7,0 ± 0,2 и 5,7 ± 1,2% соответственно. В общем анализе мочи не выявлено отклонений от физиологической нормы.

При исследовании биохимического анализа крови также не обнаружено статистически достоверных отличий исходных данных от результатов, полученных в процессе наблюдения после вакцинации. Не выявлено нарушений пигментного обмена (общий билирубин до вакцинации составлял

11.2 ± 2,0 мкмоль/л при норме 5 - 21,0 мкмоль/л, в соответствующие дни наблюдения - 11,1 ± 0,5,

10.2 ± 0,6, 13,5 ± 1,5 мкм/л). Ферментативная активность печени оставалась без патологических изменений (АЛТ до вакцинации - 22,7 ±

1,5 (норма - от 0 до 34,0 Ед./л), на 21-й, 90-й, 180-й дни - 18,9 ± 2,0, 23,5 ± 0,8, 27,4 ± 0,8 Ед./л соответственно; АСТ - 24,2 ± 0,8 (норма - от 0 до 31,0), 23,6 ± 1,0, 21,8 ± 1,1, 25,1 ± 0,8 Ед./л). Показатели очищения крови оставались в пределах нормы (креатинин до вакцинации был 72,4 ± 1,7 мкмоль/л (норма - 58,0 -

96,0 мкмоль/л), на 21-й, 90-й, 180-й дни - 75,8 ± 1,7, 58,7 ± 1,6, 62,4 ± 1,77 мкмоль/л соответственно; исходные данные мочевины - 4,4 ± 0,1 (норма - 2,8 - 7,2 моль/л), в динамике наблюдения - 4,1 ± 0,1, 4,9 ± 0,1, 4,4 ± 0,1 моль/л).

Как известно, латентная сенсибилизация, одно из проявлений которой - повышение сывороточных IgE, может протекать без клинических проявлений аллергических заболеваний. Под воздействием некоторых факторов (респираторных вирусов, иммунизации противовирусными препаратами) возможен переход латентной формы сенсибилизации в клинически выраженную. В таблице 2 представлены параметры уровней сывороточных IgE у обследованных до

и после вакцинации. Полученные результаты показали отсутствие изменений концентраций ^Е (Р > 0,05) в течение всего периода наблюдения, что свидетельствует о высоком профиле безопасности вакцины.

Оценка профилактической эффективности препарата Грифор позволила установить его высокую эпидемиологическую эффективность. В период сезонного подъема заболеваемости гриппом и ОРВИ в группе привитых на основании клиникоанамнестических данных было зарегистрировано 26 случаев ОРВИ и пять случаев гриппа. Однако при серологическом исследовании нарастания специфических противогриппозных антител не выявлено, что позволило снять диагноз гриппа. В группе сравнения по результатам активного наблюдения было зарегистрировано 32 случая ОРВИ и 11 случаев гриппа (табл. 3). Охват серологическим обследованием этой группы - 51,7%. По результатам серологических исследований диагноз гриппа был подтвержден в пяти случаях, у шести человек этот диагноз поставлен на основании клинических данных. Коэффициент защищенности - 100%.

Выводы

Таким образом, новая отечественная расщепленная гриппозная вакцина Грифор характеризуется высоким профилем безопасности, достаточной иммуногенностью и высокой профилактической эффективностью.

Незначительное количество слабовыраженных побочных реакций после вакцинации подтвердило ее хорошую переносимость. Вакцинация препаратом Грифор не сопровождалась развитием необычных явлений в поствакцинальном периоде, а возникшие слабовыраженные общие и местные ре-

66

epid 3 (52).indd 66 Ф 7/1/10 3:24:56 PM

акции были кратковременными (два - четыре дня) и не вызывали ухудшения состояния здоровья привитых.

Случаев заболевания гриппом среди привитых вакциной Грифор в эпидемический сезон 2007 -2008 годов выявлено не было.

Литература

1. Бурцева Е.И., Слепушкин А.Н., Беляев А.Л. и др. Выбор оптимальных схем в тактике вакцинации против гриппа пожилых людей// Журн. микробиол. 1998. № 4. С. 40 - 45.

2. Гендон Ю.З. Стратегия борьбы с гриппом с помощью вакцин // Вакцинация. Новости вакцинопрофилактики. Информ. бюл. 1999. № 5. С. 3.

3. Зверев В.В., Киселев О.И., Коровкин С.А. и др. Клинические исследования новой инактивированной гриппозной вакцины Грифор // Журн. микробиол. 2009. № 2. С. 35 - 40.

Все вышеизложенное позволяет рекомендовать вакцину Грифор для использования в рамках реализации Национального календаря профилактических прививок. Ш

4. Мельников С.Я., Зверев В.В., Коровкин С.А. и др. Оценка реакто-генности, безопасности и иммуногенности виросомальной расщепленной инактивированной гриппозной вакцины «Грифор» в I фазе клинического исследования // Журн. микробиол. 2009. № 1. С. 26 - 31.

5. Семененко Т.А., Селькова Е.П., Гендон Ю.З. Грипп, эпидемиология и вакцинопрофилактика: Сб. матер. к краев. науч.-практ. конф. - Хабаровск: Изд-во ИПКСЗ, 2004. С. 35 - 50.

6. Bruijin I.A., Nauta J., Cramer W.C.M. et al. Clinical experience with inactivated, virosomal influenza vaccine // Vaccine. 2005. 23S1, S1/39 -S1/49.

ИНФОРМАЦИЯ ВОЗ

Европейская неделя иммунизации (ЕНИ). Итоги

ЕНИ 2010 года оказалась наиболее успешной за весь период ежегодного проведения подобных кампаний начиная с 2005 года.

В 47 странах было проведено множество мероприятий, направленных на повышение общественной осведомленности по вопросам иммунизации и на поддержание высокого охвата населения профилактическими прививками. В центре внимания кампании была элиминация кори и краснухи как вклад в достижение цели, поставленной более десяти лет назад, - полностью искоренить эти инфекции в Европейском регионе ВОЗ.

В проведении ЕНИ впервые участвовали такие страны, как Андорра, Дания, Исландия, Люксембург Нидерланды, Норвегия, Финляндия и Эстония.

Мероприятия и события в рамках ЕНИ носили различный характер - в зависимости от конкретных потребностей и основных проблем той или иной страны. Среди них можно отметить такие нерешенные вопросы, как дефицит вакцин в некоторых регионах, риск завоза инфекций, снижение охвата иммунизацией вследствие нежелания родителей делать прививки своим детям.

Большое внимание было уделено выездным мероприятиям по иммунизации. В результате в Казахстане было вакцинировано около 170 тыс. человек против краснухи; в Боснии и Герцеговине мобильные бригады вакцинации посетили места проживания цыганского населения; в Узбекистане была проведена вакцинация против полиомиелита; в бывшей югославской Республике Македония прививали в полевых условиях цыганских детей и сельское население.

В странах проводились учебные курсы и семинары по вопросам вакцинации для работников здравоохранения, родителей и учащихся, в ряде стран государственные органы выпустили пресс-релизы и провели пресс-конференции и семинары для средств массовой информации, чтобы подчеркнуть важность сохраняющегося высокого охвата вакцинацией и достоверной отчетности по применению вакцин.

Некоторые страны, в частности Исландия, Люксембург и Финляндия, впервые принимавшие участие

в Неделе иммунизации, разработали информационные материалы и распространили их в лечебнопрофилактических учреждениях и через Интернет. Другие - в том числе Азербайджан, Бельгия, Болгария, Грузии, Венгрия, Италия, Польша, Украина и Чешская Республика - организовали лекции, встречи, обсуждения за круглым столом, выставки и конференции по широкому кругу проблем, касающихся иммунизации, в которых приняло участие большое количество людей.

В ходе ЕНИ-2010 ВОЗ использовала новые медийные технологии для того, чтобы помочь заинтересованным партнерам обмениваться опытом и дать возможность продемонстрировать примеры успешной практической деятельности в области иммунизации.

ЕНИ началась с виртуальной конференции, организованной ЕРБ ВОЗ совместно со Всемирным банком. Транслировались обращения директора ЕРБ ВОЗ, регионального директора ЮНИСЕФ по Центральной и Восточной Европе и Содружеству Независимых Государств, и.о. директора Европейского центра профилактики и контроля заболеваний. За обращениями последовала видеоконференция, связавшая десять стран в обсуждении практических путей обеспечения охвата иммунизацией.

Новый веб-сайт кампании ЕНИ дает возможность заинтересованным сторонам легко и наглядно демонстрировать свой опыт и материалы, что способствует формированию атмосферы единого общерегионального дела.

После успешного завершения ЕНИ-2010 ЕРБ ВОЗ приступило к проведению оценки реализованной инициативы. Результаты оценки будут использованы при формировании пятилетней стратегии, которая предусмотрит более тесное сотрудничество в области иммунизации с другими регионами ВОЗ. Конечная цель - сформировать глобальную инициативу по иммунизации.

В планах по будущим европейским кампаниям предусматривается применение новых и в неполной мере используемых вакцин, по мере того как они внедряются в растущем числе стран по всему Региону.

Ф

67 —

epid 3 (52).indd 6/ Ф 7/1/10 3:24:5/ PM