Результаты клинического изучения вакцины против краснухи культуральной живой производства ФГУП «НПО «Микроген» МЗиСР РФ

Результаты клинического изучения вакцины против краснухи культуральной живой производства ФГУП «НПО «Микроген» МЗиСР РФ

А.Н. Миронов1, А.А. Цаан1 (a.a.tsaan@microgen.ru), И.В. Фельдблюм2, Д.С. Бушменков1, А.А. Романова1, Е.С. Сидоренко1

1 ФГУП «НПО «Микроген» МЗиСР РФ, Москва

2 ГОУ ВПО «Пермская государственная медицинская академия им. акад. Е.А. Вагнера» Росздрава

Резюме

Специалистами Московского подразделения по производству бактерийных препаратов ФГУП «НПО «Микроген» МЗиСР РФ разработан первый отечественный препарат для профилактики краснухи - вакцина против краснухи культуральная живая на основе вакцинного штамма НА-27/3. После доказательства безопасности вакцины на экспериментальных животных были инициированы клинические исследования препарата в соответствии с Национальным календарем профилактических прививок на добровольцах трех возрастных групп. Клинические исследования провели в два этапа: на первом - изучили реактогенность, безопасность и иммуногенность производственного штамма и вакцины против краснухи. После доказательства безопасности и иммуногенности препаратов приступили ко второму этапу исследования на детском контингенте добровольцев - детях в возрасте 12 - 24 месяцев и 6 лет.

Результаты исследований показали низкую реактогенность, безопасность и высокие иммуногенные свойства этой вакцины, давая основания для ее регистрации на территории Российской Федерации.

Ключевые слова: вакцина против краснухи, клинические исследования, реактогенность, безопасность, иммуноген-ность

Results of a Clinical Study a Live Culture Vaccine against Rubella Maded in the Federal State Scientific-Industrial Company for Immunobiological Medicines of the Ministry of Health of the Russian Federation

A.N. Mironov1, A.A. Tsaan1 (a.a.tsaan@microgen.ru), I.V. Feldblyum2 D.S. Bushmenkov1, A.A. Romanova1, E.S. Sidorenko1

1 The Federal State Scientific-Industrial Company for Immunobiological Medicines of the Ministry of Health of the Russian Federation MICROGEN, Moscow

2 E.A. Wagner's State Medical Academy of Perm Abstract

MICROGEN specialists developed the first domestic product for the rubella prevention - live rubella vaccine with strain RA 27/3. After proving the safety of the vaccine in experimental animals, were initiated clinical trials of the drug in compliance with the National calendar of preventive vaccination volunteers of three age groups. Clinical studies conducted in two phases: the first - to study reac-togenicity, safety and immunogenicity of the production strain and rubella vaccine. After proving reactogenicity, safety and immunogenicity of the preparations have begun for the second phase of research on children's contingent of volunteers - children aged 12 - 24 months and 6 years.

Results of clinical studies have shown low reactogenicity, safety and high immunogenic properties of native rubella vaccine. The results obtained give reason for the registration of the vaccine in the Russian Federation.

Key words: rubella vaccine, clinical studies, reactogenicity, safety, immunogenicity

Введение

Эпидемиологическая и социальная значимость краснухи в России в современных условиях обусловлена повсеместным распространением инфекции и высоким тератогенным действием вируса, его способностью формировать врожденные дефекты развития, которые завершаются смертельным исходом или инвалидностью [5, 7].

Изучение иммунной прослойки населения к вирусу краснухи показало, что 20% женщин репродуктивного возраста не имеют защитного уровня антител к краснухе и должны быть привиты [14].

Особую опасность краснуха представляет в период беременности - из-за риска внутриутробного

инфицирования плода. Вирус краснухи выделяется во внешнюю среду за неделю до появления сыпи и в течение недели после высыпания. Заражение происходит воздушно-капельным путем (у беременных - трансплацентарно) [11, 12].

Наиболее опасна краснуха в первые три месяца беременности, и особенно высокая частота поражений бывает в первые четыре недели (60,9% случаев синдрома врожденной краснухи (СВК), во второй месяц - 26,4% и в третий -7,9%) [3].

Наибольшую социальную значимость имеет СВК, частота которого среди детей с врожденной патологией может достигать 15 - 35% [10, 13].

Показано, что СВК обуславливает 27 - 35% всей внутриутробной патологии [7].

В нашей стране краснуха всегда была социально значимой инфекцией - из-за ее повсеместного распространения и высокого уровня заболеваемости населения.

В России до конца 90-х годов краснуха оставалась неуправляемой инфекцией [1].

Вакцинация против краснухи была введена в Национальный календарь профилактических прививок в 1997 году. В программе вакцинопро-филактики краснухи была предусмотрена ежегодная первичная иммунизация детей обоего пола 12 - 15 месяцев, ревакцинация - в 6 лет [8].

Ввиду отсутствия отечественного препарата для профилактики этого заболевания мы были вынуждены закупать импортные вакцины. Однако по причине нехватки закупаемой за рубежом вакцины охват прививками был недостаточным для формирования иммунной прослойки среди населения. С 1997 по 2000 год охват вакцинацией против краснухи детей в возрасте 24 месяцев составлял всего 12,7% [9].

Так, в 2006 году сразу в нескольких районах Белгородской области заболевание краснухой приобрело характер эпидемии - к концу августа число заболевших приблизилось к 12 тыс. человек [2].

Согласно данным официальной статистики, в 2008 году в целом по стране было впервые достигнуто эпидемиологическое благополучие по краснухе: показатель заболеваемости за 2008 год составил 6,77 на 100 тыс. населения, что в 3,2 раза меньше, чем в 2007 году. В 2009 году сохранилась наметившаяся тенденция снижения заболеваемости: показатель составил 1,13 на 100 тыс. населения, что в 5,9 раза ниже, чем в 2008 году [4].

В настоящее время Минздравсоцразвития продолжает закупать импортные препараты для профилактики этого заболевания.

Снижение уровня заболеваемости краснухой населения России было достигнуто благодаря усилению эпидемиологического надзора за этой инфекцией и более широкому охвату вакцинацией групп населения, включенных в Национальный календарь профилактических прививок.

Наиболее эффективным средством защиты от приобретенной и врожденной краснухи признается иммунизация населения живыми аттенуиро-ванными вакцинами [6].

Специалистами Московского подразделения по производству бактерийных препаратов НПО «Микроген» была разработана вакцина культу-ральная живая на основе штамма RA-27/3 вируса краснухи. Она прошла в полном объеме доклиническое изучение на лабораторных животных. Результаты доказали безопасность и высокие иммуногенные свойства препарата.

Дальнейшим этапом на пути регистрации вакцины стали ее клинические испытания на добровольцах.

Материалы и методы

Испытания проводилось на базе двух исследовательских центров - ВПО «Пермская государственная медицинская академия им. акад. Е.А. Вагнера» Росздрава и ВПО «Смоленская гос-медакадемия» Росздрава. Их клинические базы входят в перечень учреждений, имеющих разрешение Росздравнадзора на проведение клинических исследований.

В испытаниях участвовали 280 добровольцев трех возрастных групп: женщины 18 - 25 лет (40 женщин) и дети 6 лет (80 детей) и 12 - 24 месяцев (160 детей). Возрастные группы добровольцев были определены в соответствии с Национальным календарем профилактических прививок.

Каждого добровольца обследовали для выяснения, соответствует ли он критериям включения или исключения из испытания.

Критериями включения в исследование были возраст, состояние здоровья и письменное информированное согласие на участие в исследовании, подписанное добровольцем или родителем добровольца.

Основные критерии исключения: аллергическая реакция на аминогликозиды, первичный иммунодефицит, иммуносупрессивная терапия, острые инфекционные и неинфекционные заболевания, обострение хронических заболеваний, наличие в анамнезе онкологических заболеваний или положительной реакции на ВИЧ-инфекцию, гепатиты В и С, применение препаратов иммуноглобулина или переливание крови в течение последних трех месяцев до начала исследования, использование препаратов крови менее чем за три месяца до начала исследования, аллергическая реакция на предшествующее введение вакцины против краснухи, беременность или период лактации, одновременное участие в другом клиническом исследовании (в настоящий момент или в последние три месяца).

Работа проводилась в два этапа. На первом -изучили реактогенность, безопасность и имму-ногенность производственного штамма вируса краснухи и полученной из него вакцины. При этом 20 девушкам вводили производственный штамм и 20 девушек были иммунизированы вакциной. Период наблюдения за добровольцами первого этапа составил 42 дня.

После доказательства безопасности, низкой реактогенности и высоких иммуногенных свойств вакцины и производственного штамма приступили ко второму этапу исследования - на детском контингенте добровольцев.

В группе детей 6 лет изучали реактогенность и безопасность вакцины. Полученное подтверждение ее безопасности позволило приступить к исследованию на детском контингенте в возрасте 12 - 24 месяцев.

В данной возрастной группе провели сравнительное изучение реактогенности, безопасности

и иммуногенных свойств этой вакцины. В качестве препарата сравнения использовали вакцину против краснухи, произведенную из хорватской субстанции. Препарат сравнения зарегистрирован и используется для профилактики краснухи на территории России с 2003 года.

Все добровольцы младшей возрастной группы были рандомизированы в две группы (по 80 добровольцев в каждой группе) на основании случайных чисел, сгенерированных с помощью компьютерной программы. После присвоения добровольцу номера вскрывался конверт с его номером. Внутри конверта находились информация с номером группы, в которую вошел доброволец, и название препарата, которым его вакцинировали. Данные по каждому добровольцу заносились в индивидуальную регистрационную карту.

Таким образом было сформировано две группы по 80 детей в каждой:

• группе 1 вводилась новая отечественная вакцина против краснухи;

• группу 2 вакцинировали вакциной против краснухи, произведенной из хорватской субстанции.

К исследованию приступили только после подписания родителями детей письменного информированного согласия. Родителям добровольцев были разъяснены цели, задачи, схема исследования, а также вся интересующая их информация.

Все препараты, используемые в клиническом исследовании, вводились добровольцам однократно подкожно в область плеча в дозе 0,5 мл (аттенуированный штамм RA 27/3 вируса краснухи, содержащий не менее 1000 ТЦД50 (тканевых цитопатических доз)).

Период наблюдения за детскими группами составил 28 суток.

Изучение реактогенности и переносимости препаратов провели путем наблюдения за возможным появлением местных (боль в месте инъекции, гиперемия, инфильтрат) и общих реакций (температура, гиперемия зева, артралгия, головная боль, увеличение лимфатических узлов, сыпь на коже). После вакцинации все испытуемые находились под наблюдением врача-исследователя в течение двух часов, в последующем они посещали клинику ежедневно в течение шести дней для регистрации возможных реакций на вве-

дение препаратов. На шестой день им выдали дневники самонаблюдения для самостоятельной регистрации изменений в состоянии здоровья. Врач-исследователь ежедневно связывался по телефону с добровольцем или его родителем для выявления и регистрации любых нежелательных явлений с 8-го по 14-й день и на 21-й день после вакцинации.

В целях определения безопасности вакцины изучали динамику изменения показателей гематологического и биохимического анализа крови и общего анализа мочи. Кроме этого, определяли содержание неспецифических иммуноглобулинов в крови добровольцев (^А, -Е, -М). Иммуногенные свойства препаратов оценивали путем определения уровня и фактора серокон-версии в сыворотках до вакцинации и на 28-е сутки после введения препаратов. При этом сыворотки, полученные до и после вакцинации, исследовали одновременно в ИФА с использованием зарегистрированной в РФ тест-системы «ИФА-Краснуха-^» производства ЗАО «ЭКОлаб» (Москва).

Забор крови и мочи производили до вакцинации и на 28-е сутки после нее.

Клинические исследования проводили на основании разрешения Росздравнадзора и положительных заключений регулирующих органов: ГИСК им. Л.А. Тарасевича, Научного центра экспертизы средств медицинского применения и Национального этического комитета.

Все манипуляции, предусмотренные в исследовании, проводили в строгом соответствии с принципами международных правил клинических исследований, а также требованиями федерального законодательства.

Результаты и обсуждение

В течение двух часов после введения препаратов ни у одного добровольца побочных реакций не отмечено. Зарегистрированные за весь период наблюдения местные и общие реакции представлены в таблице 1.

Данные, представленные в таблице, свидетельствуют о низкой реактогенности изученных препаратов. В группе девушек, иммунизированных вакциной, отмечали одну общую реакцию в виде артралгии на 13-е сутки после вакцинации, что

Таблица 1.

Результаты изучения реактогенности препаратов

Группа реакции Производственный штамм Вакцина

Девушки 18 - 25 лет Местные реакции - -

Общие реакции - 1 (артралгия на 13-е сутки) - 5%

Дети 6 лет Местные реакции - 1 (гиперемия в месте инъекции в первые сутки) - 1,25%

Общие реакции - -

Таблица 2.

Иммуногенность препаратов

Препарат сгт* Фактор сероконверсии Уровень сероконверсии

до вакцинации после вакцинации

Девушки 18 - 25 лет Производственный штамм 4,2 45,7 10,8 100

Вакцинный 9,8 46,3 4,7 100

Дети 12 - 24 месяцев Российская вакцина 0,3 49,2 164 81,3

Хорватская вакцина 0,2 34,9 174,5 80

* СГТ - среднегеометрическое титров антител в группе.

составляет 5% от общего числа девушек, привитых вакциной. В группе детей 6 лет отмечалась одна местная реакция в виде гиперемии в месте инъекции - 1,25% от всего количества добровольцев в этой возрастной группе. В сравнительном исследовании вакцины у девушек не отмечали ни одной местной реакции. Данные, полученные при изучении реактогенности препаратов, значительно ниже максимально допустимых значений для краснушных вакцин, которые освещены в литературе и представлены разработчиком вакцинного штамма [1].

Анализ дневников самонаблюдения и индивидуальных регистрационных карт добровольцев показал, что нежелательных явлений за период наблюдения не было.

Самочувствие привитых после вакцинации не ухудшилось, что говорит о хорошей переносимости вакцины.

Результаты биохимического и гематологического анализов крови, а также общего анализа мочи показали отсутствие значимых колебаний - все показатели находились в пределах нормы. Анализ динамики неспецифических сывороточных иммуноглобулинов добровольцев свидетельствует об отсутствии негативного влияния вакцины на иммунную систему организма человека. На 28-е сутки после введения препаратов показатели IgA, IgE, IgG, IgM находились в пределах нормальных величин. Повышенные значения IgE у некоторых детей в возрасте 12 - 24 месяцев отмечались в сыворотках, взятых до вакцинации. Все эти дети имели предрасположенность к аллергическим заболеваниям в анамнезе, что не было критерием исключения из исследования. Аллергизирующего воздействия вакцины не отмечено.

Результаты, полученные при изучении имму-ногенных свойств производственного штамма и вакцины против краснухи, показали выраженную иммуногенность препаратов.

На первом этапе клинического исследования отмечали 100%-ную сероконверсию как в группе привитых производственным штаммом, так и в группе, где вводили изучаемую вакцину. Кратность прироста антител составила соответственно 10,8 и 4,7.

Данные, полученные при изучении иммуно-генности вакцины на детях 12 - 24 месяцев, показали, что на 28-е сутки после вакцинации уровень сероконверсии в группе вакцинированных отечественной вакциной достиг 81,3%, в группе добровольцев, которых привили вакциной хорватского производства, - 80%. Отмечался выраженный прирост антител к вирусу краснухи в обеих группах привитых. Кратность прироста величины антител к вирусу в первой группе добровольцев составила 164, во второй - 174,5, что свидетельствует о выраженных иммуноген-ных свойствах препаратов.

Таким образом, по иммуногенности изученная вакцина незначительно отличается от препарата сравнения, высокие иммуногенные свойства которого неоднократно подтверждались как в клинических исследованиях, так и в рамках реализации Национального календаря профилактических прививок.

Заключение

Результаты, полученные в рамках клинических исследований, доказали безопасность и высокие иммуногенные свойства нового отечественного препарата для профилактики краснухи. Вакцина против краснухи производства НПО «Микроген» разработана на основе штамма вируса краснухи RA 27/3, который на протяжении 40 лет применяется во всем мире (кроме Китая и Японии) для производства про-тивокраснушных вакцин и зарекомендовал себя как безопасный и высокоиммуногенный штамм.

Регистрация и применение на территории РФ отечественной вакцины для профилактики краснухи позволят усилить противоэпидемические мероприятия и закрепить достигнутые успехи в борьбе с этой инфекцией.

Литература

1. Бектемиров Т.А. Мировой опыт иммунопрофилактики краснухи // Вакцинация. 2004. № 6 (36). С. 3, 4.

2. Жихарева Н.С. Современные принципы вакцинации против краснухи в России // Лечащий врач. 2006. № 9. С. 45 - 47.

3. Зверев В.В., Десятскова Р.Г. Врожденная краснуха // Вакцинация. 2004. № 6.

4. Инфекционная заболеваемость в России (1913 - 2009 гг.) / Информационный сборник статистических и аналитических материалов ФГУЗ «Федеральный центр гигиены и эпидемиологии» Роспо-требнадзора. - М., 2010. С. 19.

5. Лаврентьева И.Н., Семериков В.В., Жебрун А.Б. и др. Краснуха в России: изменчивость возбудителя в период вакцинопрофилакти-ки инфекции // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2008. № 3. С. 26 - 31.

6. Медуницын Н.В. Вакцинология. - М.: Триада-Х, 1998.

7. Нисевич Л.Л., Бахмут Е.В., Талалаев А.Г. и др. Врожденная краснуха и ее роль в развитии внутриутробной патологии / Краснуха.

Синдром врожденной краснухи. Информ. сборник. - М.-СПб., 1997. С. 31 - 39.

8. Приказ МЗ РФ № 375 от 18.12.1997 г.

9. Селезнева Т.С., Заргарьянц А.И., Яковлева И.В., Белевская А.А. Современная ситуация по заболеваемости краснухой на территории Российской Федерации // Эпидемиология и Вакцинопрофилактика. 2009. № 5. С. 9 - 19.

10. Семериков В.В., Попов В.Ф., Седельникова Т.А. и др. Краснуха в России: выявление врожденной краснухи, стратегия и тактика вакцинации // Микробиология. 1998. № 1. С. 46 - 49.

11. Ющук Н.Д., Венгеров Ю.Я. Лекции по инфекционным болезням. Т. 1. - М.: ВУНМЦ, 1999.

12. Ющук Н.Д., Венгеров Ю.Я. Медицинская вирусология. Ч. 2 / Под ред. А.М. Королюка, В.Б. Сбойчакова. - СПб., 2002.

13. Ясинский А.А., Михеева И.В., Лыткина И.Н., Жукова Г.А. Проблемы профилактики краснухи в России // Детские инфекции. 2004. № 2. С. 11 - 13.

14. Demirdal T., Demirturk N., Toprak O. et al. Seroprevalence of rubella among turkish women and children in Afyonkarahisar, Turkey // Turk. J. Pediatr. 2009, Nov. - Dec.

информация роспотребнадзорд

об оптимизации противоэпидемической работы и утверждении формы акта эпидемиологического расследования очага инфекционной (паразитарной) болезни с установлением причинно-следственной связи

Постановление № 133 от 21.10.2010 года

Я, Главный государственный санитарный врач Российской Федерации Г.Г. Онищенко, проанализировав организацию противоэпидемической работы, отмечаю, что в 2009 - 2010 годах в Российской Федерации определилась тенденция по увеличению общего числа эпидемических очагов. В течение 2000 - 2008 годов регистрировалось от 600 до 1200 вспышек инфекционных и паразитарных болезней от пяти случаев, с числом пострадавших в среднем около 13 тыс. человек. В 2009 году было зарегистрировано 1684 эпидемических очага с вовлечением более 43 тыс. человек. По оперативным данным, за девять месяцев 2010 года число зарегистрированных эпидемических очагов и количество пострадавших в них людей превысили среднемноголетние показатели более чем в два раза.

Рост числа очагов обусловлен в первую очередь неблагополучной эпидемиологической обстановкой, связанной с острыми кишечными инфекциями в Российской Федерации, сложившейся в 2010 году.

Превышение среднемноголетних уровней заболеваемости населения острыми кишечными инфекциями явилось следствием активной циркуляции вирусов - возбудителей гастроэнтеритов. В условиях аномально жаркого лета уменьшение дебита водоисточников, нарушение правил хранения и обработки пищевых продуктов привели к обострению эпидемической ситуации. Только за летний период острые кишечные инфекции стали причиной 70% всех зарегистрированных очагов инфекционных болезней.

В связи с жаркой засушливой погодой осложнилась ситуация по болезням, общим для человека и животных. За летний период в стране зарегистрировано 22 случая сибирской язвы среди людей, с начала года отмечается рост бруцеллеза на 18,5%, очаги которого наблюдаются в Южном и Северо-Кавказском федеральных округах.

руководитель Г.Г. онищенко