ЦИКЛОГЕКСИЛАММОНИЕВАЯ СОЛЬ 2-[3-МЕТИЛ-7-(1,1-ДИОКСОТИЕТАНИЛ-3)-1-ЭТИЛКСАНТИНИЛ-8-ТИО]УКСУСНОЙ КИСЛОТЫ, ПРОЯВЛЯЮЩАЯ АНТИТРОМБОЭМБОЛИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ
CYCLOHEXYL AMMONIUM SALT OF 2-[3-METHYL-7-(1,1-DIOXOTIETHANYL-3)-1-ETHYL XANTHENYL-8-TIO]ACETIC ACID, WHICH SHOWS ANTITHROMBOEMBOLIC ACTION

Изобретение относится к медицине, а именно к фармацевтической химии и фармакологии, и может быть использовано для создания новых лекарственных средств профилактики тромбоэмболических состояний.
Прототипом и препаратом сравнения является пентоксифиллин (3,7-диметил-1-(5-оксогексил)ксантин), который длительно и успешно применяется в практической медицине и имеет доказанную эффективность в качестве средства профилактики и лечения тромбоэмболических заболеваний и осложнений (Hsu, C.Y. Pentoxifylline in acute nonhemorrhagic stroke. A randomized, placebo-controlled double-blind trial / C.Y.Hsu, J.W.Norris, E.L.Hogan, P.Bladin, H.B.Dinsdale, F.M.Yatsu, M.P.Earnest, P.Scheinberg, L.R.Caplan, H.R.Karp // Stroke. - 1988. - Vol.19. - №6. - P.716-722. De Sanctis, M.T.Treatment of retinal vein thrombosis with pentoxifylline: a controlled, randomized trial / M.T. De Sanctis, M.R.Cesarone, G.Belcaro, L.Incandela e.a. // Angiology. - 2002. - №53. - P.72-73).
Задачей изобретения является расширение арсенала биологически активных веществ, проявляющих антитромбоэмболическое действие.
Технический результат - получение вещества, проявляющего антитромбоэмболическое действие.
Сущность изобретения: циклогексиламмониевая соль 2-[3-метил-7-(1,1-диоксотиетанил-3)-1-этилксантинил-8-тио]уксусной кислоты (Ia) формулы
проявляющая антитромбоэмболическое действие.
Заявляемое соединение синтезировали следующим образом.
Соединение Ia синтезируют из 8-бром-3-метил-7-(1,1-диоксотиетанил-3)-1-этилксантина (Тиетанильная защита в синтезе 1-алкил-8-бром-3-метил-3,7-дигидро-1H-пурин-2,6-дионов / Ф.А.Халиуллин, Ю.В.Шабалина, P.M.Шарафутдинов // ЖОрХ. - 2010. - Т. 46, №5. - С.698-701) в 2 стадии. При кипячении 8-бром-3-метил-7-(1,1-диоксотиетанил-3)-1-этилксантина с 2-кратным мольным избытком тиогликолевой кислоты в водной среде в присутствии гидроксида калия образуется 2-[3-метил-7-(1,1-диоксотиетанил-3)-1-этилксантинил-8-тио]уксусная кислота, взаимодействие которой с циклогексиламином в среде ацетона приводит к циклогексиламмониевой соли [3-метил-7-(1,1-диоксотиетанил-3)-1-этилксантинил-8-тио]уксусной кислоты.
Пример 1. Синтез соединения Ia.
пл
К раствору 0,84 г (15 ммоль) гидроксида калия в 50 мл воды добавляют 0,92 г (10 ммоль) тиогликолевой кислоты и 1,89 г (5 ммоль) 8-бром-3-метил-7-(1,1-диоксотиетанил-3)-1-этилксантина, кипятят в течение 1 часа. Охлаждают, нейтрализуют 3,7% раствором хлористоводородной кислоты до рН 2. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают водой, сушат. Получают 1,52 г (78%) 2-[3-метил-7-(1,1-диоксотиетанил-3)-1-этилксантинил-8-тио]уксусной кислоты. Т 201-203°С (из воды).
Элементный анализ.
13
16
4
6
2
Найдено, %: С 40,2 Н 4,2 N 14,4 - CHNOS
Вычислено, %: С 40,4 Н 4,1 N 14,6
-1
2
ИК спектр (таблетки с KBr), ν, см: 1133,6; 1312,0 (SO вал.), 1650,6; 1658,5; 1666,3; 1671,6; 1693,6; 1699,1 (С=С вал., C=N вал., С=O вал.), 2380-3030 (acc. O-Н вал.).
1
3
3
3
2
2
2
2
Спектр ЯМР Н (CDCl), δ, м.д.: 1,26 (3Н, т, J 7,0 Гц, СН), 3,55 (3Н, с, 3-СН), 4,06-4,18 (4Н, м, SCH и 1-СН), 4,35-4,44 (2Н, м, S(CH)), 5,17-5,28 (2Н, м, S(CH)), 5,53-5,66 (1Н, м, 7-СН).
пл
К раствору 1,94 г (5 ммоль) 2-[3-метил-7-(1,1-диоксотиетанил-3)-1-этилксантинил-8-тио]уксусной кислоты в 80 мл ацетона добавляют 0,64 г (6,5 ммоль) циклогексиламина. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают ацетоном, сушат. Получают 2,18 г (89%) соединения Ia. Т 223-225°С (из диоксана).
Элементный анализ.
19
29
5
6
2
Найдено, %: С 46,8 Н 6,0 N 14,4 - CHNOS
Вычислено, %: С 46,7 Н 6,2 N 14,6
-1
+
2
3
ИК спектр (таблетки с KBr), ν, см: 1135,5; 1320,1 (SO вал.), 1661,5; 1698,6 (С-С вал., C=N вал., СО вал.), 2400-3150 (NH вал.).
1
6
3
2
3
2
3
2
2
2
2
Спектр ЯМР H (DMSO-d), δ, м.д.: 1,09-1,31 (9Н, м, СН и (СН)), 1,51-1,91 (4Н, м, 2СН), 2,82-2,93 (1Н, м, NCH), 3,42 (3Н, с, 3-СН), 3,79 (2Н, с, SCH), 3,94 (2Н, к, J 6,9 Гц, 1-СН), 4,50-4,61 (2Н, м, S(CH)), 5,00-5,11 (2Н, м, S(CH)), 5,52-5,65 (1Н, м, 7-СН). Заявляемое соединение представляет собой белое кристаллическое вещество, растворимое в воде, при нагревании в этаноле и диметилсульфоксиде.
Острая токсичность.
50
Определение острой токсичности проводили по методу Deichman и Le Blanc (Саноцкий И.В. Методы определения токсичности и опасности химических веществ. - М.: Медицина, 1989. - 150 с.). Для этого крысам внутрибрюшинно вводили исследуемые соединения в нарастающих дозировках с шагом в 100 мг/кг. Наблюдение за лабораторными животными проводились в течение 2 недель после инъекции. За ЛД принималась наименьшая доза, вызвавшая летальный исход.
Пример 2. Острая токсичность
50
При изучении ЛД заявляемого соединения установлено, что его токсичность существенно меньше (в 2,4 раза) токсичности препарата сравнения: по классификации К.К.Сидорова при внутрибрюшинном введении он относится к IV классу опасности (малотоксичные) (таблица 1).
Антитромбоэмболическое действие соединения Ia.
2
Антитромбоэмболическое действие соединения Ia определяли на модели тромбоэмболии легочной артерии по методу DiMinno G. и Silver M.J. (DiMinno, G.S. Mouse antithrombotic assay: a simple method for the evaluation of antithrombotic agents in vivo. Potentiation of antithrombotic activity by ethyl alcohol / G.S.DiMinno // J. Pharmacol. Exp. Ther. - 1983. - V. 225. - P.57-60). В хвостовую вену мышей вводили смесь растворов коллагена и адреналина (0,5 мг/кг и 0,06 мг/кг соответственно). В качестве критерия эффективности исследуемых соединений отмечали количество выживших животных по сравнению с контрольной группой. За 1 час до моделирования тромбоэмболии внутрибрюшинно вводили исследуемые соединения в эквимолярных дозах: 70 мг/кг соединения Ia и 40 мг/кг пентоксифиллина. Контрольной группе мышей вводился физиологический раствор в аналогичных объемах. Статистическая обработка данных проводилась с помощью теста χ.
Пример 3. Антитромбоэмболическое действие соединения Ia.
При изучении коллаген-адреналинового тромбоза соединение Ia и пентоксифиллин в разной степени уменьшали гибель животных.
При введении раствора, содержащего 0,5 мг коллагена и 0,06 мг адреналина из расчета на килограмм массы тела, в хвостовую вену животным контрольной группы, в течение уже первого часа после введения индукторов тромбоза наблюдали гибель животных. В первый час после инъекции гибель составляла 60% мышей, в первые 3 суток падеж составил 100%.
Пентоксифиллин уменьшал гибель мышей при моделировании тромбоэмболии легочной артерии по сравнению с контролем. Выживаемость составила 58,3%. Основной падеж пришелся на первые сутки после введения индукторов тромбоза. В экспериментальной группе у животных, получивших соединение Ia, гибель значимо меньше в сравнении с контролем и препаратом сравнения. Выживаемость составила 75,1%, основной падеж пришелся в первые сутки эксперимента (таблица 2).
Выживаемость животных в группе, получавших соединение Ia, значимо превышала таковую в контрольной группе и в 1,3 раза в группе у животных, получавших пентоксифиллин.
Таким образом, заявляемое соединение Ia оказывает выраженное антитромбоэмболическое действие, превышающее действие пентоксифиллина, и выгодно отличается более низкой токсичностью.
Таблица 1
Параметры токсичности препарата сравнения и заявляемого соединения
Соединение
ЛД<sub>50</sub>, мг/кг
Пентоксифиллин
250
Соединение Ia
>600
Таблица 2
Показатели выживаемости при моделировании тромбоэмболии легочных артерий, n=12
Соединение
Контроль
Пентоксифиллин
Соединение Ia
Р<sub>2</sub>
Выживаемость, %
0,0
58,3*
75,1*
<0,05
Примечание: * - уровень статистической значимости различий признаков контрольной и опытной групп (P<sub>1</sub><0,01); P<sub>2</sub> - уровень статистической значимости различий признаков групп  получавших пентоксифиллин и заявляемое соединение Ia