КОМБИНАЦИЯ ТЕРМОСТАБИЛЬНЫХ БИОКАТАЛИЗАТОРОВ ДЛЯ СИНТЕЗА НУКЛЕОЗИДОВ

1. Рекомбинантный экспрессионный вектор, включающий последовательность, кодирующую фосфорилазу пуриновых нуклеозидов (ПНФаза, ЕС 2.4.2.1) одну, или совместно с последовательностью, кодирующей уридинфосфорилазу (УФаза, ЕС 2.4.2.3); при этом каждая из последовательностей функционально связана с одной или более регуляторной последовательностью, которая контролирует продукцию указанной фосфорилазы в подходящем хозяине; при этом указанные последовательности происходят из архей класса Thermoprotei и характеризуются тем, что указанная ПНФаза происходит из Sulfolobus solfataricus (SEQ ID NO 7.), а указанная УФаза происходит из Aeropyrum pernix (SEQ ID NO. 8), а указанный хозяин представляет собой Escherichia coli.
2. Рекомбинантный экспрессионный вектор по п.1, отличающийся тем, что указанная клетка-хозяин представляет собой бактериальный штамм BL21 Е.coli.
3. Клетка-хозяин Е.coli, которая содержит рекомбинантный экспрессионный вектор по п.1.
4. Лизат, полученный посредством лизирования клетки-хозяина по п.3.
5. Способ трансгликозилирования между нуклеиновым основанием, которое связано с сахаром, представляющим собой рибозу или дезоксирибозу, через бета-гликозидную связь и нуклеиновым основанием или модифицированным нуклеиновым основанием в присутствии фосфат-ионов, отличающийся тем, что указанный способ включает применение уридинфосфорилазы (УФазы) из Aeropyrum pernix (SEQ ID NO 7.), одной, или совместно с фосфорилазой пуриновых нуклеозидов (ПНФазы) из Sulfolobus solfataricus (SEQ ID NO 8), причем указанные фосфорилазы продуцируются с применением рекомбинантного экспрессионного вектора по п.1 или 2.
6. Способ трансгликозилирования по п.5, по которому УФаза из Aeropyrum pernix и ПНФаза из Sulfolobus solfataricus обеспечиваются клеткой-хозяином по любому из пп.2-4.
7. Способ трансгликозилирования по п.5, по которому получаемые продукты представляют собой активные фармацевтические ингредиенты (АФИ) или их промежуточные соединения.
8. Способ трансгликозилирования по любому из пп.5-7, по которому указанное нуклеиновое основание, которое связано с сахаром, представляющим собой рибозу или дезоксирибозу, через бета-гликозидную связь, выбран из природных или модифицированных нуклеозидов, содержащих D-рибозу или 2'-дезоксирибозу; нуклеозидов, содержащих остаток рибозы, модифицированный по 2', 3' и/или 5' положению, и нуклеозидов, в которых сахар представляет собой бета-D-арабинозу, альфа-L-ксилозу, 3'-дезоксирибозу, 3',5'-дидезоксирибозу, 2',3'-дидезоксирибозу, 5'-дезоксирибозу, 2',5'-дидезоксирибозу, 2'-амино-2'-дезоксирибозу, 3'-амино-3'-дезоксирибозу или 2'-фтор-2'-дезоксирибозу.
9. Способ трансгликозилирования по любому из пп.5-7, по которому указанное нуклеиновое основание или модифицированное нуклеиновое основание выбрано из природного или замещенного пиримидинового и пуринового основания, пуринового основания, замещенного по одному или более из положений 1, 2, 6; пиримидинового основания, замещенного по одному или более из положений 3, 5, и пурина, 2-азапурина, 8-азапурина, 1-деазапурина (имидазопиридина), 3-деазапурина, 7-деазапурина, 2,6-диаминопурина, 5-фторурацила, 5-трифторметилурацила, транс-зеатина, 2-хлор-6-метиламинопурина, 6-диметиламинопурина, 6-меркаптопурина.
10. Способ трансгликозилирования по любому из пп.5-7, отличающийся тем, что указанный способ осуществляют при температуре от 60° до 100°С.
11. Способ трансгликозилирования по любому из пп.5-7, отличающийся тем, что указанный способ осуществляют в водной среде или в системе апротонного полярного сорастворителя.
12. Способ трансгликозилирования по п.11, по которому указанная система апротонного полярного сорастворителя выбрана из диметилсульфоксида, тетрагидрофурана, 2-метилтетрагидрофурана и диметилформамида.
13. Способ трансгликозилирования по любому из пп.5-7, отличающийся тем, что нуклеозид-донор сахара выбран из уридина и 2'-дезоксиуридина, и акцепторное основание выбрано из 2,6-диаминопурина, 5-фторурацила, 5-трифторметилурацила, транс-зеатина, 2-хлор-6-метиламинопурина, 6-диметиламинопурина и 6-меркаптопурина.