4-[2-(гидроксиметил)-фениламино]-6',6'-диметил-1'-(2-фторфенил)-3-(4-хлорбензоил)-6',7'-дигидро-5Н-спиро[фуран-2,3'-индол]-2',4',5(1'H,5'H)-трион в качестве средства, обладающего противомикробной активностью
4-[2-(HYDROXYMETHYL)-PHENYLAMINO] -6',6'-DIMETHYL-1'-(2-FLUOROPHENYL)-3-(4-CHLOROBENZOYL)-6 ',7'-DIHYDRO-5H-SPIRO[FURAN -2,3'-INDOLE]-2 ', 4',5(1'H,5'H)-TRIONE AS ANTIMICROBIAL AGENT

Изобретение относится к области органической химии, а именно к структуре индивидуального соединения класса спиро[фуран-2,3'-индол]ов, обладающего противомикробной активностью, которое может быть использовано в качестве исходного продукта для синтеза новых гетероциклических систем и в фармакологии.
Известны структурные аналоги заявленного соединения - 3-бензоил-1'-(4-бромфенил)-4-[2-(гидроксиметил)фениламино]-6',6'-диметил-6',7'-дигидро-5H-спиро[фуран-2,3'-индол]-2',4',5(1'H,5'H)-трион и 1'-бензил-4-[2-(гидроксиметил)фениламино]-6',6'-диметил-3-(4-хлорбензоил)-6',7'-дигидро-5H-спиро[фуран-2,3'-индол]-2',4',5(1'H,5'H)-трион, получаемые из 3-ароилпирроло[1,2-а][4,1]бензоксазепин-1,2,4-трионов (Maslivets A.A., Maslivets A.N. //Russian Journal of Organic Chemistry. - 2015. - V. 51. - №. 8. - PP. 1194-1195.). Синтез структурных аналогов осуществляется по следующей схеме:
6
4
6
4
Ar=Ph, R=4-ВrСН; Аr=4-СlСН, R=Вn.
Задачей изобретения является поиск в ряду производных спиро[фуран-2,3'-индол]ов веществ с выраженным антибактериальным действием, расширение арсенала средств воздействия на живой организм.
Поставленная задача достигается синтезированием 4-[2-(гидроксиметил)-фениламино]-6',6'-диметил-1'-(2-фторфенил)-3-(4-хлорбензоил)-6',7'-дигидро-5H-спиро[фуран-2,3'-индол]-2',4',5(1'H,5'H)-триона формулы:
который проявляет высокую противомикробную активность.
Заявляемое соединение синтезируют взаимодействием 3-(4-хлорбензоил)-пирроло[1,2-с][4,1]бензоксазепин-1,2,4-триона с 3-((2-фторфенил)амино)-5,5-диметилциклогекс-2-ен-1-оном в кипящем безводном хлороформе в течение 30 мин по следующей схеме:
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. 4-[2-(гидроксиметил)-фениламино]-6',6'-диметил-1'-(2-фторфенил)-3-(4-хлорбензоил)-6',7'-дигидро-5H-спиро[фуран-2,3'-индол]-2',4',5(1'H,5'H)-трион.
33
26
2
6
Раствор 1.0 ммоль соединения 1 и 1.0 ммоль енамина 2 в 10 мл безводного хлороформа кипятили 30 мин (до исчезновения ярко-красной окраски исходного соединения 1), охлаждали, образовавшийся осадок отфильтровывали. Выход 55%, т.пл. 135-136°С. Соединение 3 CHClFNO.
Найдено, %: -
Вычислено, %: С 65.95; Н 4.36; Сl 5.90; F 3.16; N 4.66.
Соединение 3 - желтое высокоплавкое кристаллическое вещество, легкорастворимое в ДМСО и ДМФА, растворимое в ацетоне, толуоле, хлороформе, этаноле, этилацетате, умеренно растворимое в ацетонитриле, нерастворимое в алканах и воде. Устойчиво при хранении в обычных условиях.
-1
-1
-1
-1
4'
-1
-1
В ИК спектре соединения 3, снятого в виде пасты в вазелиновом масле, присутствуют полосы валентных колебаний групп NH при 3468 см и ОН при 3377 см, лактонной карбонильной группы при 1776 см, лактамной карбонильной группы при 1758 см, карбонильных групп (С=O, С(Аr)=O) при 1655 см и 1631 см.
6
3
3
2
2
2
Ar
7'
5'
Спектр ЯМР 1Н, δ, м.д., ДМСО-d: 0.71 s (3Н, СН), 1.03 s (3Н, СН), 2.01 d, 2.36 d (J=16.1 Hz, 2Н, СН), 2.27 d, 2.76 d (J=18.4 Hz, 2H, CH), 4.22 d, 4.49 d (J=13.4 Hz, 2H, СHОН), 5.26 s (1H, OH), 6.77-7.69 m (12H, СН), 8.75 s (1H, NH).
Пример 2. Фармакологическое исследование 4-[2-(гидроксиметил)-фениламино]-6',6'-диметил-1'-(2-фторфенил)-3-(4-хлорбензоил)-6',7'-дигидро-5H-спиро[фуран-2,3'-индол]-2',4',5(1'H,5'H)-трион 3 на наличие противомикробной активности.
Противомикробные свойства химических веществ изучали на 2-х коллекционных условно-патогенных штаммах микроорганизмов: Staphylococcus aureus (штамм 906) и Candida albicans, 1353.
5
Для исследования противомикробного действия использовали общепринтый метод двукратных серийных разведений в жидкой питательной среде микрометодом [Хабриев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М.: И-во Медицина, 2005. - 832 с.]. Готовили исходные разведения микроорганизмов в физиологическом растворе из суточной агаровой культуры по оптическому стандарту мутности (ОСО) на 5 ME с использованием денситометра. После ряда разведений конечная концентрация клеток в опыте составляла 2.5×10 клеток/мл. В лунках стерильного 96 луночного плоскодонного микропланшета готовили два параллельных ряда двукратных серийных разведений химических соединений в бульоне РПБ, Сабуро. В каждой лунке содержалось 150 мкл определенной концентрации испытуемого вещества и 150 мкл инокулята культуры. В последних рядах содержалась питательная среда и культура в равных объемах (контроль). Максимально испытанная концентрация соответствовала 1000.0 мкг/мл, минимальная - 1.0 мкг/мл. Факт ингибирования (торможения роста) микробных клеток в разведениях препаратов отмечали после 20-ти часового термостатирования при 37°С с последующим высевом на твердую питательную среду. Окончательные результаты фиксировали через 7 суток после высева на скошенный агар. Противомикробную активность оценивали по минимально действующей концентрации.
Результаты оценивали с помощью программного обеспечения Gen 5 спектрофотометра для микропланшет Epoch. Последняя лунка ряда с задержкой роста и показателями ОП равной оптической плотности контрольной лунки соответствует минимальной подавляющей концентрацией соединения.
Проведенные исследования показали (см. таблицу), что соединение 3 проявляет выраженное ингибирующее действие в концентрации 15,6 мкг/мл в отношении S. aureus, в отношении дрожжевых грибков С.albicans показало фунгистатическое действие в концентрации 500,0 мкг/мл.
Заявляемый ранее неописанный в литературе 4-[2-(гидроксиметил)-фениламино]-6',6'-диметил-1'-(2-фторфенил)-3-(4-хлорбензоил)-6',7'-дигидро-5H-спиро[фуран-2,3'-индол]-2',4',5(1'H,5'H)-трион может найти применение в фармакологии в качестве потенциального лекарственного средства с противомикробными свойствами.