Физиолого-биохимическая регуляция взаимодействия растений рода Amaranthus L. и диазотрофов

УЧЕНЫЕ ЗАПИСКИ КАЗАНСКОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО УНИВЕРСИТЕТА Том 147, кн. 1 Естественные науки 2005

УДК 631.811+631.461.5

ФИЗИОЛОГО-БИОХИМИЧЕСКАЯ РЕГУЛЯЦИЯ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ РАСТЕНИЙ РОДА ЛМЛЯЛтИШ Ь.

И ДИАЗОТРОФОВ

И.А. Чернов, И.А. Дегтярева

Аннотация

В статье представлены результаты исследования эколого-физиологической регуляции взаимодействия в агроценозе растений рода ЛтагапЛш' Ь. и диазотрофов. Изучены пути интенсификации азотфиксации в корневой зоне этих растений.

Введение

Внедрение в практику сельского хозяйства интенсивных, высокоурожайных видов и сортов растений требует оптимального удовлетворения их основных физиологических потребностей, в том числе создания в прикорневой зоне высоких концентраций легкодоступных соединений азота. Однако увеличение выпуска и применения азотных удобрений связано с решением сложных проблем, наиболее важными из которых являются энергетическая и экологическая.

Важнейший резерв повышения продуктивности сельскохозяйственных растений - использование ризосферных азотфиксирующих бактерий, функции которых при растительно-микробных взаимодействиях многообразны: это фиксация молекулярного азота, улучшение питания растений за счет повышения коэффициента использования минерального азота, синтеза биологически активных веществ, повышение устойчивости растений к действию патогенов и абиотическим стрессам [1].

В настоящее время наметились два основных подхода к усилению азот-фиксации в агроэкосистемах: активизация деятельности спонтанной популяции диазотрофных микроорганизмов в ризосфере и ризоплане, а также инокуляция растений эффективными штаммами азотфиксаторов [2]. Первый путь заключается в оптимизации факторов среды и подборе видов, линий, сортов растений, наиболее способных к активной азотфиксации. Второй путь предусматривает использование высокоэффективных в отношении азотфиксации микроорганизмов. Не менее перспективным направлением являются подбор и использование специально для этого создаваемых искусственных ассоциаций микроорганизмов, обладающих суммарным положительным эффектом и экологической поливалентностью.

Проблема поиска эффективных азотфиксаторов при всей ее сложности чрезвычайно актуальна. Прикорневая зона растений является наиболее благоприятной средой для размножения диазотрофов, а растения рода Лтагап1Нш Ь, обеспечивающие их активное развитие, могут служить «поставщиками» пер-

спективных штаммов или ассоциаций азотфиксирующих бактерий для целого ряда сельскохозяйственных культур [3-5].

В настоящей работе представлены результаты исследования эколого-физио-логической регуляции взаимодействия в агроценозе растений рода Amaranthus L. и диазотрофных бактерий и поиск путей усиления азотфиксации в корневой зоне этих растений, обладающих способностью к интенсивному биосинтезу и накоплению высоколизинового, легкоусваивающегося белка.

Материалы и методы исследований

В экспериментальной работе были использованы 45 образцов растений рода Amaranthus L. из коллекции Ботанического сада Казанского государственного университета. Полевой опыт для исследования нитрогеназной актвности корневой зоны различных видообразцов амаранта был заложен на дерновоподзолистой почве в 45 вариантах в 3-х кратной повторности. Почва имела следующую агрохимическую характеристику: рН - 6 .65; гумус - 1.8%; N щелочно-гидролизуемый - 264.0 мг/кг; Р2О5 - 146.6 мг/кг; К2О - 92.6 мг/кг. Растения выращивали на делянках площадью 10.5 м .

Почвенные пробы для агрохимических и микробиологических анализов отбирали по общепринятой методике в течение всего вегетационного сезона. Ризосферную микрофлору определяли в различные фазы онтогенеза: вегетативную, бутонизации, цветения, плодоношения. Контролем служила почва без растений.

В соответствии с поставленной задачей было проведено выделение азот-фиксирующих и других ризосферных микроорганизмов [6, 7], определение потенциальной активности азотфиксации ризосферной почвы и нитрогеназной активности у ризосферных диазотрофов ацетиленовым методом [8], определение витаминов группы В и индолил-3-уксусной кислоты у диазотрофов [9, с. 139-146].

Результаты

Исследование динамики численности ризосферных гетеротрофов амаранта показало, что обильное размножение этих микроорганизмов происходит на ранних стадиях развития растений. Так, уже в вегетативной фазе их количество составляет 8.0-12.0 млн/г почвы. Некоторое уменьшение численности гетеро-трофов и микромицетов в фазе бутонизации вызывается тем, что в данный период происходит сокращение количества эксудатов за счет усиления оттока пластических веществ к формирующимся репродуктивным органам. Максимальная численность этих микроорганизмов отмечена в фазе цветения (36.5-

47.5 млн/г почвы).

В корневой зоне A. cruentus обнаружены микромицеты из родов Trichoderma, Penicillium, Aspergillus, Rhizopus, Mucor, Chaetomium, Mortierella, а также фитопатогенные микромицеты из родов Alternaria и Fusarium. Для дерново-подзолистой почвы характерна следующая особенность: количество микромицетов в ризосфере растений остается практически на одном уровне в онтогенезе и при этом меньше, чем в контроле (почва без растений). Следует

отметить преобладание в грибном сообществе ризосферы окученных и неоку-ченных растений микромицетов рода Trichoderma (Tr. lignorum и Tr. harzianum). Это позитивный факт, так как представители рода Trichoderma обладают ростстимулирующим действием на растения, улучшают обмен, ускоряют прорастание семян, увеличивают валовый выход урожая и улучшают качество продукции [10].

Деятельность микроорганизмов в почве тесно связана с процессом аэрации, активизация которого зависит от различных агротехнических мероприятий, повышающих активность диазотрофов. Рыхление междурядий и окучивание растений способствуют увеличению численности гетеротрофных и, самое главное, азотфиксирующих микроорганизмов.

В серии полевых опытов у растений с площадью питания 70x20 см осуществлена оценка коллекции видообразцов амаранта по способности фиксировать азот в ассоциации с микроорганизмами. Для скрининга было взято 45 образцов, относящихся к 16 видам рода Amaranthus L.: A. cruentus (2 видообразца), A. cruentus, A. caudatus (3), A. caudatus (2), A. hypochondriacus (7), A. Mantegazzianus (2), A. paniculatus (5), A. hybridus (5), A. viridis, A. guitensis, A. mangostanos, A. crispus, A. dubius, A. albus, A. spinosus, A. aureus и A. retroflexus - по 1 видообразцу, A. sp. - 10 видообразцов.

В корневой зоне изучаемых видообразцов амаранта наблюдается широкий спектр изменчивости нитрогеназной активности (в мкг ^/кг-ч) - в вегетативной фазе от 20.2 до 130.4, в фазе бутонизации от 39.3 до 278.0, в фазе цветения от 91.1 до 742.1, в фазе плодоношения от 77.7 до 637.8, тогда как активность азотфиксации в образцах почвы без растений крайне низка (7.7-32.9). Для большинства образцов амаранта характерна общая тенденция: в вегетативной фазе наблюдается минимальная нитрогеназная активность, она возрастает в период бутонизации, достигает максимальной величины в фазе цветения и незначительно снижается в фазе плодоношения. Исключение составляют 4 видо-образца: A. hypochondriacus v. «Azteca», A. hypochondriacus v. «Nepal»,

A. hypochondriacus v. «Mercado» и A. paniculatus - 1, у которых максимальная активность азотфиксации отмечается в фазе бутонизации.

Таким образом, максимальная активность ацетиленредукции корневой зоны большинства исследованных видообразцов амаранта приурочена к фазе цветения, что дает основание для сравнения ризосферных комплексов различных видов растений в этот период.

Прослеживается вариабельность ризосферной азотфиксации в одних и тех же экологических условиях у растений рода Amaranthus L., однозначно свидетельствующая о более широких ее пределах на уровне образцов разной видовой принадлежности. Полученные данные свидетельствуют о том, что величины азотфиксирующей активности исследованных образцов больше различаются во время цветения и плодоношения.

Среди изученных образцов выделяются 2 модальных класса - с нитроге-назной активностью в фазе цветения 200-750 (23 образца) и 82-200 мкг ^/кг-ч (22 образца). В первый модальный класс входят A. crispus, A. aureus, A. dubius, по 2 видообразца A. cruentus, A. caudatus, A. cruentus-A. caudatus, A. Mantegazzianus, 3 видообразца A. hybridus и A. hypochondriacus, 4 видообраз-

ца A. paniculatus, а также A. sp. (К 432) и A. sp. (К 40). Эти образцы после более глубокого изучения по признаку nis могут быть рекомендованы как исходный материал для селекции на улучшение азотфиксирующей способности.

У 19 образцов из второго модального класса нитрогеназная активность изменяется в интервале 100-200 мкг ^/кг-ч. И лишь у 3 образцов (A. hybridus v. «Negro», A. paniculatus - 1 и A. retroflexus) активность ацетиленредукции составляет 82.8-91.1 мкг ^/кг-ч. Видообразцы амаранта с очень низкой (до 100) и очень высокой (свыше 500 мкг ^/кг-ч) активностью в фазе цветения встречаются редко. Анализ распределения видообразцов амаранта по показателю ацетиленредукции показывает, что у 51% из 45 изученных наблюдается высокая активность азотфиксации, у 49% этот показатель значительно ниже. Диапазон разброса величин нитрогеназной активности объясняется, видимо, генетической неоднородностью видообразцов. В почве без растений азотфиксирую-щая активность значительно ниже (7.7-32.9 мкг ^/кг-ч).

Растения рода Amaranthus L. обладают высоким потенциалом нитрогеназ-ной активности в прикорневой зоне. Учитывая экологическую пластичность, для дальнейших исследований отобрано 5 видообразцов амаранта: A. cruentus L. - 1, A. caudatus L. - 1, A. hypochondriacus v. «Azteca»,

A. Mantegazzianus Passerini и A. paniculatus L. - 3.

В динамике численности ризосферных диазотрофов амаранта выявлены определенные закономерности. Обильное размножение этих микроорганизмов происходит на ранних стадиях развития растения. Так, уже в вегетативной фазе количество этих микроорганизмов составляет в ризосфере амаранта 0.9-1.5 млн./г почвы в зависимости от видообразца. Максимальная численность азот-фиксаторов отмечена во время цветения растений. Вне зависимости от сроков отбора, корневая зона характеризуется более высокой численностью диазо-трофных микроорганизмов по сравнению с почвой, не занятой растительностью.

Установлены азотфиксаторы, занимающие ведущее положение в функционировании микробного сообщества. Величина R/S составляет для суммарного количества диазотрофов на среде Доберейнер 3.0-108.3, для азотобактера 0.730.3, а для азоспирилл - 0.6-26.0 в зависимости от стадии онтогенеза. Количество азотобактера и азоспирилл в ризосферной зоне исследуемых образцов амаранта на протяжении всего вегетационного периода остается высоким и составляет от общей численности диазотрофов в зависимости от фазы развития 20-35% для азотобактера и 15-32% для азоспирилл.

У выделенных штаммов диазотрофов определена азотфиксирующая активность. Все исследуемые штаммы характеризуются различной степенью активности нитрогеназы (10.1-189.6 нМ ^/мл-ч). Наибольшей активностью азот-фиксации обладают штаммы Azotobacter chroococcum Ш25, В35, Ц2 и Ц5 (189.6; 168.1; 164.6 и 142.9 нМ ^/мл-ч, соответственно), а также Azospirillum spp. А1 и А22 (122.0 и 120.0 нМ ^/мл-ч, соответственно), выделенные в полевых опытах из ризосферной зоны A. cruentus, A. caudatus и A. paniculatus.

Таким образом, диазотрофные микроорганизмы являются активной частью биоценоза растений рода Amaranthus L. У видообразцов A. cruentus, А. caudatus

и A. Mantegazzianus отмечены наибольшие численность и активность этих микроорганизмов.

При изучении способности штаммов азотфиксаторов продуцировать физиологически активные вещества - витамины группы В и индолил-3-уксусную кислоту - на 2, 4, 7 сутки установлено, что наибольшая способность продуцировать эти соединения наступает для всех исследуемых штаммов на 4 сутки.

Как показывают результаты исследований (табл. 1), оба штамма азотобактера способны синтезировать и выделять в среду витамины группы В: биотин (В7), пиридоксин (В6), тиамин (В1) и пантотеновую кислоту (В3).

Однако способность к синтезу витаминов у изучаемых штаммов отличается в несколько раз. Для Azospirillum spp. способность к синтезу биотина не установлена.

К более активным продуцентам пиридоксина среди чистых культур относятся Az. chroococcum Ш25, тиамина - Az. chroococcum В35. Биотин синтезируется всеми штаммами азотобактера примерно на одном уровне (0.07-0.09 мг/л). Смешанные культуры азотфиксаторов продуцируют витамины (за исключением биотина) в большем количестве, чем чистые культуры.

При исследовании способности азотобактера и азоспирилл образовывать индолил-3-уксусную кислоту (гетероауксин) показано, что азотфиксирующие микроорганизмы и их комплексы продуцируют ИУК, максимальное накопление которой также происходит на 4 сутки (32.5-75.4 мг/л).

Сравнительная характеристика исследуемых культур показывает, что наиболее активными продуцентами индолил-3-уксусной кислоты являются штамм Az. chroococcum Ш25 (68.0 мг/л), а также комплекс штаммов азотобактера и комплекс штаммов азотобактера и азоспирилл (67.7-75.4 мг/л, соответственно).

Заключение

Проведенные исследования показывают, что растения амаранта влияют не только на активность ризосферных микроорганизмов, но и на их количественный и качественный состав. Выявлен ризосферный эффект для диазотрофов, гетеротрофных бактерий и микромицетов в корневой зоне амаранта и отмечено достоверное увеличение исследуемых групп микроорганизмов по сравнению с контрольной почвой.

Коэффициент продуктивности у амаранта изменяется в процессе онтогенеза растений, достигая максимальных значений в фазе цветения (11.5-14.0). Торможение ростовых процессов, а иногда и некоторое уменьшение массы корневой системы происходят в те периоды онтогенеза, когда снижается интенсивность фотосинтеза. Учет роли корневой системы в снабжении питательными веществами растения имеет важное значение для обоснования рационального размещения растений в агрофитоценозе, оптимальная конструкция которого дает возможность максимально использовать энергию и ресурсы на формирование урожая.

В ризосфере растений рода Amaranthus L. численность азотфиксаторов высока, и это сопоставимо с данными исследователей для других небобовых культур [11]. Наблюдаемое нами активное развитие корневых диазотрофов

Табл.1

Сравнительная характеристика нитрогеназной активности, концентрации витаминов группы В и гетероауксина у чистых культур и ассоциаций ризосферных диазотрофов амаранта

Вид микроорганизмов Шифр штамма Нитроге-назная активность, нМ ^/мл-ч Концентрация витаминов, мг/л

биотин пиридоксин тиамин пантотен. к-та

скгоососсит В35 168.1+5.2 0.08+0.005 0.59+0.005 1.90+0.14 0.15+0.01 65.0+2.1

А2о1оЬас1ег скгоососсит 11125 189.6+4.6 0.09+0.003 1.50+0.11 0.90+0.05 0.25+0.02 68.0+2.2

АгозртПит ярр. А1 122.0+2.3 - 0.55+0.04 0.50+0.04 0.12+0.01 22.5+1.5

АгозртПит ьрр. А22 120.0+4.0 - 0.70+0.05 0.50+0.03 0.15+0.01 19.3+1.1

Комплекс штаммов ВЗ 5+11125 307.0+11.2 0.09+0.003 1.65+0.12 1.95+0.15 2.25+0.2 67.7+1.9

Комплекс штаммов АгозртПит А1+А22 211.0+5.5 0 1.1+0.09 0.9+0.06 0.2+0.01 32.5+0.7

Комплекс штаммов и АгозртПит В35+11125+ А1+А22 385.5+10.8 0.09+0.004 1.9+0.017 2.15+0.19 2.4+0.21 75.4+2.6

136_И.А. ЧЕРНОВ, И.А. ДЕГТЯРЕВА

можно объяснить трофическими связями, обменом витаминами, разного рода стимуляторами.

При этом в почве под амарантом преобладают микроорганизмы из родов Azotobacter и Azospirillum. Количество этих бактерий в корневой зоне исследуемых образцов амаранта на протяжении всего вегетационного периода остается высоким и составляет от общей численности диазотрофов в зависимости от стадии онтогенеза 20-35% для азотобактера и 15-32% для азоспирилл. Естественным объяснением повышенного содержания микроорганизмов в почве под амарантом является выделение корнями этого растения в окружающую среду различных амино- и карбоновых кислот (феномен эккрисодинамии), которые являются источником питания и энергии для почвенных микроорганизмов.

Растения с С4-типом фотосинтеза (амарант, кукуруза, сорго и другие), обладая мощным фотосинтетическим аппаратом, обеспечивают более активное развитие ризосферных азотфиксаторов, чем растения с С3-типом [12, 13]. Наибольшая численность диазотрофных микроорганизмов наблюдается в фазы бутонизации и цветения растений, что согласуется с данными литературы [14].

Полученные данные свидетельствуют о том, что в корневой зоне амаранта создаются благоприятные условия для микроорганизмов, определяющих плодородие почвы. В зависимости от стадии онтогенеза амарантовые в значительной мере определяют состав ризосферных азотфиксаторов.

Чистые культуры диазотрофов в наших экспериментах проявляют более низкую (в 1.9-3.2 раза) азотфиксирующую активность по сравнению с комплексом штаммов, что подтверждают данные многих авторов [15-17].

Бактерии родов Azotobacter и Azospirillum обладают не только высокой нитрогеназной активностью, но и способностью выделять витамины группы В (биотин, тиамин, пиридоксин, пантотеновая кислота), гетероауксины (ИУК). Способность к синтезу витаминов у изучаемых штаммов различна - 0.021.9 мг/л (табл. 1). Следует отметить разницу в количестве продуцируемых витаминов, которая у отдельных штаммов отличается в несколько раз.

Масштабы синтеза ИУК изучаемых диазотрофов на 2, 4 и 7 сутки (19.375.4 мг/л) сопоставимы с таковыми для артробактера [18], азотобактера [19]. Действие микроорганизмов на растения двоякое: прямое (как азотфиксаторов и продуцентов биологически активных веществ) и косвенное (путем усиления общей активности микрофлоры ризосферы). Таким образом, влияние азотфик-сирующих бактерий на растения носит полифункциональный характер, и все они могут быть использованы для бактеризации не только амаранта, но и других сельскохозяйственных культур. В исследуемой системе макроорганизм -микроорганизм не только растения оказывают влияние на микроорганизмы, но и сами микроорганизмы влияют на растения.

Процесс азотфиксации протекает неодинаково по фазам развития растений, так как подвержен влиянию комплекса различных факторов, вследствие чего нитрогеназная способность почв сильно колеблется в течение вегетационного периода [20]. Поэтому оценку ассоциативной азотфиксирующей продуктивности агробиоценоза необходимо проводить в полевых условиях по фазам вегетации. Проведенные нами исследования показывают, что по интенсивности

ассоциативной азотфиксации изученные видообразцы амаранта различаются в

0.26-3.13 раз в зависимости от стадии онтогенеза. В почве без растений нитро-геназная активность значительно ниже. Это подтверждают имеющиеся в литературе данные о том, что присутствие растений является одним из факторов увеличения активности несимбиотической азотфиксации в почве [21].

Количественная оценка видообразцов амаранта позволяет обнаружить не только меж-, но и внутривидовые различия. Это помогает выявить образцы амаранта, перспективные с точки зрения направленного отбора линий с повышенной активностью диазотрофов, обитающих в ассоциации с его корневой системой. Достаточно широкий диапазон варьирования нитрогеназной активности свидетельствует, что азотфиксацию у растений рода Amaranthus Ь. можно увеличить путем простого отбора лучших особей в процессе семеноводства.

Принимая во внимание недостаточную изученность механизмов взаимодействия растений с С4-типом фотосинтеза (Amaranthus Ь.) и ассоциативных азотфиксирующих микроорганизмов (представители родов Azotobacter, Azospirillum), впервые проведено исследование взаимного влияния в образуемой ими агроэкосистеме. Установлено, что в создании фитомассы с высоким содержанием полноценного белка (семена 15-18%, стебель 8-12%, листья 3050%) огромная роль принадлежит положительной связи между фотосинтетиче-ским усвоением углерода по аспартатному варианту С4-пути у амаранта и фиксации азота клетками диазотрофов [22, с. 26-29].

Результаты экспериментов, проведенных на дерново-подзолистой почве, свидетельствуют о том, что эксудация ассимилятов клетками корневой системы растений рода Amaranthus Ь. стимулирует жизнедеятельность клеток азот-фикаторов, в свою очередь, увеличивающих образование веществ, ускоряющих рост растений и накопление фитомассы, и, в итоге, к значительному повышению продуктивности. Значительная часть этих фотоассимилятов легко выводится по флоэме в клетки корня с другими компонентами эксудата, а далее в ризосферу, где становится доступной для клеток диазотрофов.

Активная фотосинтетическая деятельность растений амаранта вызывает активизацию сообщества ризосферных азотфиксаторов, обеспечивая их комплексом веществ, необходимых для оптимального осуществления процессов их жизнедеятельности. В свою очередь, стимуляция диазотрофов усиливает поток минерального азота из почвы в клетки корня и далее к листьям, где и осуществляется исключительно интенсивный биосинтез белка, являющийся первопричиной быстрого роста амаранта и его высокой продуктивности. Таким образом, диазотрофы, стимулируемые эксудатами амаранта, способствуют эффективной ассимиляции азота амарантом до уровня, соответствующего его генетически детерминированному уровню усвоения углерода.

Координация двух важнейших процессов метаболизма растений и лежит в основе тех продукционных процессов, которые ведут к быстрому образованию большого количества фитомассы, обладающей исключительно ценными свойствами, благодаря которым амарант нашел широкое признание как пищевое, кормовое и лекарственное растение. Кроме того, расширение практического использования ассоциативной азотфиксации в растениеводстве делает возмож-

ным масштабное получение экологически безопасной сельскохозяйственной продукции.

Результаты проведенных исследований позволяют дать достаточно точную оценку тому, в какой степени положительное взаимодействие растений рода Amaranthus L. и клеток азотфиксаторов зависит от влияния экологических факторов и регулируется агротехническими средствами.

Таким образом, представлен анализ возможных путей взаимосвязи углеродного и азотного метаболизма в растениях амаранта при участии клеток ассоциативных азотфиксаторов и ее зависимости от экологических факторов. Показана возможность регуляции ризосферных диазотрофов при возделывании амаранта и использования наиболее активных штаммов азотобактера и азоспирилл. Отмечен экологический аспект практического использования ассоциативной азотфиксации в растениеводстве, расширение масштабов которой позволит существенно снизить отрицательное влияние использования высоких доз минеральных азотных удобрений на почву, воду, растения и человека.

Summary

I.A. Tchernov, I.A. Degtereva. Hysiolog-biochemical regulation of interaction between the plants of genius Amaranthus and dyazotrophs.

The results of studies of ecology-physiological regulation of interaction between the plants of genius Amaranthus and dyazotrophs were shown in this article. It was researched the way of intensification of nitrogen-fixation in root system of this plant.

Литература

1. Тихонович И.А. Значение биологической фиксации азота для современной биологии и практики сельскохозяйственного производства // Аграрная наука. - 1993. -№ 3. - С. 29-31.

2. Патыка В.Ф. Микроорганизмы и биологическое земледелие // Микробиологический журнал. - 1993. - Т. 55, № 3. - С. 95-102.

3. Oziganova G., Degtereva I., Tchernov I. Utilizacion de la microflora fijadora de nitrogeno asociada, para el incremento del rendimiento de los Amarantos // Amarantos. Novedades e Informaciones (Argentina). - 1993. - No 13. - P. 2-3.

4. Чернов И.А., Ожиганова Г. У., Дегтярева И.А. Феномен ассоциативной азотфиксации у растений рода Amaranthus L. // Тез. докл. I Всеукраинск. науч.-практ. конф. по проблемам выращивания, переработки и возделывания амаранта на кормовые, пищевые и другие цели. - Винница, 1995. - С. 36.

5. Дегтярева И.А., Чернов И.А., Яппаров А.Х. Разработка биологических методов повышения урожайности овощных и зеленных культур в условиях защищенного грунта // Состояние и проблемы научного обеспечения овощеводства защищенного грунта: Материалы межд. науч. конф. - М., 2003. - С. 33 35.

6. Калининская Т.А., Редькина Т.В., Белов Ю.М. и др. Применение ацетиленового метода для количественного учета разных групп азотфиксаторов методом предельных разведений // Микробиология. - 1981. - Т. 50, Вып. 5. - С. 924-927.

7. Федорова Л.С., Позднякова Л.И., Каневская С.В. Выделение азоспирилл из культурных и дикорастущих злаков Саратовской области // Микробиология. - 1985. -Т. 54, Вып. 4. - С. 684-685.

8. Гарусов А.В., Алимова Ф.К., Захарова Н.Г. Газохроматографический метод анализа в биомониторинге почвы. Метод. пособие. - Казань: Изд-во Казан. ун-та, 1998. - 28 с.

9. Колешко О.И. Экология микроорганизмов почвы. Лаб. практикум. - Минск: Высш. шк., 1981. - 175 с.

10. Алимова Ф.К., Мако Гулам А., Захарова Н.Г., Дегтярева И.А. Опыт применения триходермина в Республике Татарстан на основе местных видов микромицетов рода Trichoderma // Нива Татарстана. - 2000. - № 2. - С. 22.

11. Берестецкий О.А., Васюк Л.Ф., Элисашвили Т.А., Плющ А.В. Азотфиксирующая активность и эффективность спирилл, обитающих на корнях растений // Микробиология. - 1985. - Т. 54, Вып. 6. - С. 1002-1007.

12. Tran V. V., Berge O., Heulin T. New method for isolation of Azospirillum associated with the rhizosphere of rice // 6-th Int. Symp. Microb. Ecol. (ISME-6), Barcelom, 1992. -P. 109.

13. Pacovsky R.S. Diazotroph establishment and maintenance in the Sorghum-Giomus-Azospirillum association // Can. J. Microbiol. - 1989. - V. 35, No 11. - P. 977-981.

14. Degtereva 1А., Tchernov 1А., Mikheev P.V. The role of edaphic factors and associative nitrogen fixation in improving efficieney of non-legumes cultures // Enviromental Radioecology and Applied Ecology. - 2001. - V. 7, No 4. - P. 9-17.

15. Глаголева О.Б., Умаров М.М., Злотников А.К. Нитрогеназная активность ризосфер-ных диазотрофных бактерий в чистых и смешанных культурах // Микробиология. -1994. - Т. 63, № 2. - С. 221-227.

16. Злотников А.К., Глаголева О.Б., Умаров М.М. Взаимосвязь нитрогеназной активности, устойчивости и относительного содержания компонентов смешанных культур диазотрофных бактерий // Микробиология. - 1997. - Т. 66, № 6. - С. 807-812.

17. Дегтярева И.А. Нитрогеназная активность и физиологически активные вещества диазотрофов амаранта // Ферменты микроорганизмов. Материалы XII юбилейной конф. - Казань, 2001. - С. 137-138.

18. Белимов А.А. Эффективность инокуляции ячменя смешанными культурами диазотрофов // Автореф. дис. ... канд. биол. наук. - Ленинград, 1990. - 19 с.

19. Zimmer W., Roeben K., Bothe H. An alternative explanation for plant growth promotion by bacteria of the genus Azospirillum // Planta. - 1989. - V. 176, No 3. - P. 333-342.

20. Косинова Л.Ю., Родынюк И.С. Влияние минерального азота на несимбиотическую и ассоциативную азотфиксацию в выщелоченном черноземе // Микробоценозы почв при антропогенном воздействии. - Новосибирск: Наука, 1985. - С. 103-111.

21. Умаров М.М., Куракова Н.Г., Садыков Б.Ф. Азотфиксация в ассоциациях микроорганизмов с растениями // Минеральный и биологический азот в земледелии СССР. - М.: Наука, 1985. - С. 205-213.

22. Чернов И. А. Амарант - физиолого-биохимические основы интродукции. - Казань: Изд-во Казан. ун-та, 1992. - 89 с.

Поступила в редакцию

11.05.05

Чернов Игорь Анатольевич - доктор биологических наук, профессор, главный научный сотрудник Ботанического сада Казанского государственного университета.

Дегтярева Ирина Александровна - кандидат биологических наук, старший научный сотрудник, зав. лабораторией агроэкологии и микробиологии ГУ «Татарский НИИ агрохимии и почвоведения РАСХН».

E-mail: niiaxp@rambler.ru