Иммуногистохимическое исследование митохондриального белка теплового шока 70 (mtHSP70) в мышечной ткани при различных формах миопатии у детей

Раздел 4 Разное

центом выявленных патологических изменений среднего уха у недоношенных детей 1 года жизни, осмотр недоношенных детей должен осуществляться врачом оториноларингологом в 3 мес, 6 мес и в 1 год жизни с обязательным проведением тимпаноме-трии на частоте зондирующего тона 1 кГц.

ОСОБЕННОСТИ ПОКАЗАТЕЛЕЙ УЛЬТРАЗВУКОВОГО ИССЛЕДОВАНИЯ ОРГАНОВ БРЮШНОЙ ПОЛОСТИ И ПОЧЕК У ДЕТЕЙ С ДИСПЛАЗИЕЙ СОЕДИНИТЕЛЬНОЙ ТКАНИ, ПРОЖИВАЮЩИХ НА УРБАНИЗИРОВАННЫХ И СЕЛЬСКИХ ТЕРРИТОРИЯХ

Суменко В.В., Лебедькова С.Е., Боев В.М., Баедилова М.Т., Рощупкин А.Н., Трусова О.Ю.

ГБОУ ВПО «Оренбургский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Оренбург

Введение. Установлено, что вклад антропогенных факторов в формирование отклонений здоровья колеблется от 10,0 до 56,9%. Серьезные эколого-гиги-енические проблемы характерны для Оренбургской области. Показано, что величина комплексной антропогенной нагрузки среды обитания на детское население, проживающего на урбанизированных и сельских территориях, формируется вследствие высокого уровня загрязнения атмосферного воздуха, накопления поллютантов в почве и в воздухе, которая на урбанизированной территории в 4,9 раза выше, чем на сельских.

Цель исследования — установить частоту встречаемости дисплазии органов брюшной полости у детей и подростков первой и второй группы здоровья, проживающих на урбанизированных и сельских территориях.

Материалы и методы. Проведено популяционное исследование 10% репрезентативной выборки детей 6-16 лет, сформированы две группы детей: проживающих на урбанизированных (608) и сельских территориях (464). Всем детям был проведён врачебный осмотр, ультразвуковое исследование печени, желчного пузыря, почек по стандартной методике, а также почек в положение пациента стоя для выявления повышенной подвижности.

Результаты. У детей и подростков, проживающих на урбанизированных территориях по сравнению с сельскими детьми достоверно чаще регистрировались дис-плазии гепатобилиарной системы — 24,73% (р<0,001): деформация желчного пузыря — 18,04% (на сельских

- 5,98%) (р<0,001), расширение печеночных вен — 20,76% (на сельских — 5,32%) (р<0,01), малая аномалия воротной или печеночных вен — 1,15% (0%). Диспластические изменения мочевой системы были у 19,3% детей и подростков, проживающих на урбанизированных территориях (р<0,001), при этом повышенная подвижность почек — у 16,75% (на сельских

- 3,55%) (р<0,001), пиелоэктазия — у 3,68% детей. Диспазии внутренних органов, как правило, сочета-

лись с внешними диспластическими признаками, распространённость которых также была выше у детей и подростков, проживающих на урбанизированных территориях 34,21%, в то время как на сельских — 20,1% (p<0,01). Что вероятно связано с влиянием поллютан-тов на ферментативные системы синтеза коллагена. Заключение. Проведенные исследования показали высокую распространенность дисплазии внутренних органов у детей, проживающих на урбанизированных терраториях по сравнению с сельскими.

ИММУНОГИСТОХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ МИТОХОНДРИАЛЬНОГО БЕЛКА ТЕПЛОВОГО ШОКА 70 (MTHSP70) В МЫШЕЧНОЙ ТКАНИ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ФОРМАХ МИОПАТИИ У ДЕТЕЙ.

Сухоруков В.С., Баранич Т.И., Виноградова Т.В., Клейменова Н.В., Шаталов П.А., Брыдун А.В., Глинкина В.В..

НИКИ педиатрии ГБОУ ВПО РНИМУ

им. Н.И.Пирогова Минздрава России, г. Москва

Введение.Белки теплового шока — это семейство белков, функция которых различна, но их экспрессия активируется при попадании клетки или организма в условия стресса. Представитель данного семейства — mtHSP70 — является компонентом митохондрии и играет важную роль в регуляции митохондриальной функций, контролируя транспорт белка через ми-тохондриальную мембрану. Учитывая значительные морфо-функциональные изменения митохондрий при различных формах миопатии у детей, представляется актуальным исследовать этот белок в мышечной ткани при соответствующих миопатиях. Цель.Провести сравнительное исследование иммуно-гистохимического распределения маркера mtHSP70 в поперечнополосатых мышечных волокнах у больных различными формами повреждения митохондрий при миопатиях у детей.

Материалы и методы. Было проведено исследование парафиновых срезов мышечной ткани, полученных от больных с первичным митохондриальным поражением (митохондриальными миопатиями) и вторичным (мышечными дистрофиями и с врожденными структурными миопатиями).

Применялся метод флюоресцентной иммуногисто-химии. Использовались первичные моноклональные антитела мыши к mtHSP70 и вторичные антитела Alexa Fluor 555 goat anti-mouse IgG. Оценка полученных препаратов осуществлялась при помощи системы визуализации для анализа флюоресценции и проходящего света EVOS.

Результаты. Наибольшая степень выраженности флюоресценции маркера была характерна для первичного митохондриального поражения (митохондриальной миопатии). Экспрессия белка при структурных мио-патиях и мышечных дистрофиях была менее выражена. При всех изученных миопатиях, указанный маркер практически не определялся в аномальных митохон-

РОССИЙСКИЙ ВЕСТНИКПЕРИНАТОЛОГИИ И ПЕДИАТРИИ, 4, 2015

ИННОВАЦИОННЫЕ ТЕХНОЛОГИИ В ПЕДИАТРИИ И ДЕТСКОЙ ХИРУРГИИ

дриальных скоплениях, характерных для адаптационных реакций мышечной ткани, однако был обнаружен в единичных митохондриях, расположенных под сарколеммой и между миофибриллами. Заключение. Полученные результаты свидетельствуют об активации mtHSP70 при различных формах мито-хондриальных поражений. Так, активация mtHSP70 при митохондриальной миопатии наиболее значительна ввиду выраженного окислительного стресса, как результата аномального митохондриального метаболизма, характерного для данного заболевания. Обращает на себя внимание преимущественная локализация данного белка в одиночных митохондриях, в отличие от митохондрий, расположенных в аномальных скоплениях, что может свидетельствовать о разной реакции двух популяций митохондрий (связанной и не связанной с адаптивной пролиферацией) на патологические условия.

РИНОЦИТОГРАММА ЧАСТО БОЛЕЮЩИХ ДЕТЕЙ ДОШКОЛЬНОГО ВОЗРАСТА

Тимофеева Е.С. Романцова Е.Б., Бабцева А.Ф., Зиновьев С.В., Уфимцева В.И.

ГБОУ ВПО Амурская ГМА, Минздрава России, г. Благовещенск

Одним из методов в диагностике заболеваний человека является способ исследования продуктов кристаллизации биологических жидкостей (симптом арбори-зации) человеческого организма на цитологических препаратах.

Цель работы — исследование на цитологических препаратах ультраструктуры продуктов кристаллизации безсолевых (гипотонических) смывов носовой полости у часто болеющих детей.

Материал и методы исследования. Мазки клеток назального секрета фиксировали в парах формалина. методу нативной кристаллографии с помощью растровой электронной микроскопии нами исследовался сухой остаток капель жидкости назального секрета, нанесенный на фольгу. Просмотр готового объекта осуществляли на сканирующем электронном микроскопе S-3400 Hitachi (Япония).

Результаты. Из нижнего носового хода с помощью ватной палочки извлекали носовой секрет. В целях потенцирования носового секрета ватную палочку смачивали дистиллированной водой. Затем ватной палочкой назальный секрет наносили на предметное стекло, на подложку из алюминиевой фольги. После высыхания жидкости, сухой остаток изучался под световым микроскопом . Мазки клеток назального секрета фиксировали в парах формалина в течение 20 минут, окрашивали по Романовскому-Гимза в течение 30 минут.

Назальный секрет исследовали назальный секрет у 167 детей в возрасте 5-6 лет. В назальном секрете у 37 из 167 пациентов обнаружили эозинофильные лейкоциты в количестве от 0,2% до 30% от всех клеток, что составляет 22% детей от числа обследованных. У

10% детей выявлены вирусные включения в клетках цилиндрического эпителия. У 10% детей отмечалась выраженная кристаллизация мазков назального секрета. В препаратах обнаруживаются крупные кристаллы в виде листа папоротника (древовидные), они обладают массивными стеблями, ширина кристаллов-10,656±2,1 мкм. От стебля отходят ветви, которые расходятся под углом 90°, длина ветви — 18,646±2,8 мкм. Отмечается незначительное количество кристаллов типичных для натрия хлорида, которые имеют кубическую форму. Свободные кристаллы эндогенного натрия хлорида селективно оседают на поверхности клеток и микроорганизмов. При растровой электронной микроскопии выявлены комплексы кристаллов круглой, овальной, гантелеобразной формой, которые расценены как ионы кальция. В назальном секрете обнаруживаются крупные скопления микроорганизмов Заключение. Цитологическое исследование позволяет обнаружить нарушение носового дыхания, гиперсекрецию назального секрета с формированием каль-цинатов у часто болеющих детей. Информативность микроскопического исследования мазков назального секрета повышается при фиксации в парах вормалина в сравнении с фиксацией в метаноле и смеси Никифорова.

ОСТЕОПОРОЗ У ДЕТЕЙ С ПРОГРЕССИРУЮЩЕЙ МЫШЕЧНОЙ ДИСТРОФИЕЙ (ПМД) ДЮШЕННА, ВОЗМОЖНОСТИ ДИАГНОСТИКИ И ТЕРАПИИ

Тозлиян Е.В., Сухорукое В.С.

"Научно-исследовательский клинический институт педиатрии" ГБОУ ВПО РНИМУ им. Н.И.Пирогова, г. Москва

Актуальность: ПМД Дюшенна — тяжелое наследственное нервно-мышечное заболевание. У большинства больных с ПМД Дюшенна выражена костная патология, наиболее типичными в ранних стадиях заболевания являются сколиоз, поясничный лордоз, деформации грудной клетки, остеопения. Прогрес-сирование миодистрофического процесса, а также прием глюкокортикостероидов (используются при этом заболевании с целью снижения степени про-грессирования патологического процесса) усугубляют костно-суставные нарушения, приводя к выраженному остеопорозу. Систематизация уникальных случаев сочетаний болезни с различными патологическими состояниями имеет исключительно важное значение для изучения клинического полиморфизма и возможной генетической гетерогенности заболевания, поиска наиболее эффективных симптоматических средств терапии с целью улучшения качества жизни больных с этим тяжелым заболеванием.

Цель: исследовать показатели фосфорно-кальциевого обмена, степень остеопороза у детей с ПМД Дюшенна, оценить влияние комплексной терапии метаболитами витамина Д, препаратами кальция и фосфора на показатели фосфорно-кальциевого обмена, минеральной плотности кости (МПК) и маркеров костного

РОССИЙСКИЙ ВЕСТНИКПЕРИНАТОЛОГИИ И ПЕДИАТРИИ, 4, 2015