РЕАГЕНТЫ И СПОСОБЫ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КЛЕТОК II ТИПА ПРИ PNH

1. Способ прогнозирования риска развития тромбоза у пациента, где способ включает:
определение процентного соотношения лейкоцитов типа II PNH в общем количестве лейкоцитов того же гистологического типа в биологическом образце пациента; и
прогнозирование того, имеется ли у пациента повышенный риск развития тромбоза, где у пациента имеется повышенный риск развития тромбоза, если процентное соотношение лейкоцитов типа II PNH является большим или равным 1,2%.
2. Способ по п.1, где лейкоциты представляют собой (i) гранулоциты или (ii) моноциты.
3. Способ по п.1, где биологический образец представляет собой образец цельной крови.
4. Способ по п.1, где количество популяции лейкоцитов типа II PNH, представленное значением между 1,2-65,3%, включая 1,2% и 65,3%, показывает, что у пациента имеется повышенный риск развития тромбоза.
5. Способ по п.1, где количество популяции лейкоцитов типа II PNH, которое представлено значением большим или равным a) 5%, b) 10%, с) 20% или d) 50%, показывает, что у пациента имеется повышенный риск развития тромбоза.
6. Способ по п.1, дополнительно включающий мониторинг пациента на развитие у него по меньшей мере одного симптома тромбоза, если у пациента имеется повышенный риск развития тромбоза.
7. Способ по п.1, дополнительно включающий выбор противотромботической терапии для пациента, если у пациента имеется повышенный риск развития тромбоза.
8. Способ по п.7, где противотромботическая терапия представляет собой антикоагулянт или тромболитик.
9. Способ по п.8, где антикоагулянт представляет собой кумадин, гепарин или их производные.
10. Способ по п.8, где тромболитик представляет собой тканевой активатор плазминогена, стрептокиназу или активатор плазминогена урокиназного типа.
11. Способ по п.1, дополнительно включающий введение пациенту противотромботической терапии, если у пациента имеется повышенный риск развития тромбоза.
12. Способ выбора терапии для пациента, где способ включает: выбор как одной, так и как противотромботической терапии, так и противотромбоцитопенической терапии для пациента, у которого определили наличие популяции лейкоцитов типа II PNH в количестве большем чем 1,2% или равном 1,2%.
13. Способ лечения пациента, где способ включает введение нуждающемуся в этом пациенту как одной, так и как противотромботической терапии, так и противотромбоцитопенической терапии для пациента, у которого определили наличие популяции лейкоцитов типа II PNH в количестве большем чем 1,2% или равном 1,2%.
14. Способ по п.12 или 13, где противотромботическая терапия представляет собой антикоагулянт или тромболитик.
15. Способ по п.12 или 13, где противотромбоцитопеническая терапия представляет собой переливание тромбоцитов.
16. Способ по п.12 или 13, где нелитическую вариантную форму белка аэролизина применяют для определения процентного соотношения лейкоцитов типа II PNH.
17. Способ идентификации лейкоцитов типа II PNH, где способ включает:
взаимодействие множества лейкоцитов с реагентом, который связывается с: (i) GPI или (ii) «заякоренным» GPI белком; и
идентификацию одного или нескольких лейкоцитов как лейкоцитов типа II PNH, основанную на количестве реагента, связанного с клетками, где промежуточное количество связывания реагента с лейкоцитом, по сравнению с количеством связывания реагента с лейкоцитом типа III PNH и количеством связывания реагента с лейкоцитом типа I показывает, что лейкоцит представляет собой лейкоцит типа II PNH.
18. Способ определения различий между популяциями лейкоцитов, где способ включает:
Взаимодействие множества лейкоцитов с реагентом, который связывается с: (i) GPI или (ii) «заякоренным» GPI белком; и
определение различий по меньшей мере в части лейкоцитов от других лейкоцитов множества, основанное на количестве реагента, связанного с клетками, где лейкоциты типа II PNH, если присутствуют, значимо отличаются от лейкоцитов типа I PNH и лейкоцитов типа III PNH того же гистологического типа для обеспечения процентного соотношения лейкоцитов типа II PNH в общем количестве лейкоцитов того же гистологического типа в подлежащем определению множестве лейкоцитов.
19. Способ по п.17 или 18, дополнительно включающий определение процентного соотношения лейкоцитов типа II PNH в общем количестве лейкоцитов того же гистологического типа во множестве лейкоцитов.
20. Способ определения процентного соотношения лейкоцитов типа II PNH, где способ включает:
предоставление множества лейкоцитов, взаимодействующих с реагентом, который связывает: (i) GPI или (ii) «заякоренный» GPI белок;
определение различий по меньшей мере в части лейкоцитов от других лейкоцитов множества, основанное на количестве реагента, связанного с клетками, где лейкоциты типа II PNH, если присутствуют, значимо отличаются от лейкоцитов типа I и типа III PNH того же гистологического типа для обеспечения процентного соотношения лейкоцитов типа II PNH в общем количестве лейкоцитов того же гистологического типа в подлежащем определению множестве; и
определение процентного соотношения лейкоцитов типа II PNH.
21. Способ по п.20, дополнительно включающий определение процентного соотношения лейкоцитов типа III PNH.
22. Способ по любому из пп.18 или 20, где определение различий включает проточную цитометрию.
23. Способ по любому из пп.17, 18 или 20, где множество лейкоцитов получают от пациента, у которого есть, предполагают наличие или существует риск развития PNH.
24. Способ по любому из пп.17, 18 или 20, где реагент связывается с молекулой GPI человека.
25. Способ по п.24, где реагент включает белок аэролизин.
26. Способ по п.24 или 25, где реагент включает вариантную форму белка аэролизина, которая является нелитической или по существу нелитической по сравнению с формой белка дикого типа.
27. Способ по п.24 или 25, где реагент включает аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:2 или 7, где треонин в положении 253 замещен цистеином и аланин в положении 300 замещен на цистеин.
28. Способ по п.24, где реагент представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент.
29. Способ по любому из пп.17, 18 или 20, где реагент связывается с «заякоренным» GPI белком.
30. Способ по п.29, где «заякоренный» GPI белок выбран из группы, состоящей из щелочной фосфатазы, 5' нуклеотидазы ацетилхолинэстеразы, дипептидазы, LFA-3, NCAM, PH-20, CD55, CD59, Thy-1, Qa-2, CD14, CD33, CD16 (Fcγ рецептор III), раково-эмбриональный антиген (CEA), CD24, CD66b, CD87, CD48 и CD52.
31. Способ по п.29, где реагент представляет собой антитело или его антигенсвязывающий фрагмент.
32. Способ по любому из пп.17, 18 или 20, где множество лейкоцитов взаимодействуют с реагентом, который связывается с GPI и реагентом, который связывается с белком, сцепленным с GPI.