Вирусное инфицирование слизистых оболочек желудка и двенадцатиперстной кишки у пациентов

Вирусное инфицирование слизистых оболочек желудка и двенадцатиперстной кишки у пациентов с хроническим гастродуоденитом

Зубрицкий М.Г.1, Ермак С.Ю.1, Ляликов С.А.1, Кривецкий Д.С.2

Тродненский государственный медицинский университет, Беларусь 2Гродненская областная детская клиническая больница, Беларусь

Zubritsky M.G.1, Yarmak S.U.1, Lialikau S.A.1, Krivesky D.S.2

Grodno State Medical University, Belarus 2Grodno Regional Children's Clinical Hospital, Belarus

Viral infection of gastric and duodenal mucosa of patients with chronic gastroduodenitis

Резюме. Приведены результаты обследования 64 детей в возрасте ют 9 до 17 лет и 50 взрослых в возрасте ют 26 до 71 года с верифицированным хроническим гастродуоденитом. Для выявления антигенов вирусов простого герпеса 1-го и 2-го типов, вируса Эпштейна-Барр, цитомегаловируса и вируса папилломы человека проводилось иммуногистохимическое исследование биоптатов слизистой оболочки желудка и 12-перстной кишки. Инфицированность Н. pylori определяли цитологическим методом. У 56,3% детей и у 64% взрослых в слизистых оболочках желудка и 12-перстной кишки выявлены вирусные антигены. Полученные данные указывают на значимость вирусной инфекции в этиологии хронических гастродуодентов у лиц разного возраста. Показано влияние вирусов на степень выраженности основных морфологических изменений в слизистых оболочках у детей и взрослых.

Ключевые слова: хронический гастродуоденит, вирусы простого герпеса, воспаление, иммуногистохимия.

Медицинские новости. - 2014. - №2. - С. 77-80. Summary. The article presents the results of a survey of 64 children aged 9 to 17 years and 50 adults aged 26 to 71 years with verified chronic gastroduodenitis. For identification of simple herpes virus antigens of 1 and 2 types, Ebstein-Barr virus, cytomegalovirus and human papilloma virus the immunohistochemical study of biopsy specimens of the gastric and duodenum mucosa was performed. Viral antigens are revealed in the mucous membranes of the stomach and duodenum in 56,3% of children and in 64% of adults. The obtained data indicate the importance of the viral infection in an etiology of chronic gastritis in individuals of all ages. It shows the effect of viruses on the severity of major morphological changes in the mucous membranes in children and adults.

Keywords: chronic gastroduodenitis, simple herpes viruses, inflammation, immunohistochemistry. Meditsinskie novosti. - 2014. - N2. - P. 77-80.

Хронические воспалительные заболевания желудочно-кишечного тракта - наиболее частой встречаемая патология во все возрастные периоды [1].

Инфекция Helicobacter pylori (Н. pylori) считается одним из основных факторов, приводящих к развитию хронических воспалительных заболеваний верхних отделов пищеварительного тракта [7]. Инфицирование слизистых оболочек H. Pylori способствует развитию хронического активного гастрита, длительное течение которого, согласно «каскаду P. Correa», приводит к атрофии слизистой оболочки с последующей метаплазией и диспла-зией желудочного эпителия, что в итоге способствует развитию рака желудка [3]. Таким образом, наличие атрофии и метаплазии слизистых рассматривается как предраковое состояние и в соответствии с рекомендациями Маастрихт IV требует обязательной эрадикации Н. pylori [10].

В последние годы широко обсуждается вопрос о роли вирусов семейства

НегреэшсСае: вируса простого герпеса (ВПГ) 1-го и 2-го типов, вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ), цитомегаловируса (ЦМВ), вирусов герпеса 6, 7, 8-го типов в развитии хронических воспалительных заболеваний желудка и 12-перстной кишки у лиц разного возраста [2, 4-6].

Особое внимание уделяется ВЭБ и его участию в процессе канцерогенеза. Примерно в 10% случаев злокачественных опухолей желудка выявляются элементы генома ВЭБ [9, 11]. Данный факт позволил ввести в терминологию онкологов и гастроэнтерологов понятие ВЭБ-позитивных опухолей. Однако, принимая во внимание тот факт, что практически 90% населения планеты инфицировано ВЭБ [8], механизм возникновения и прогноз ассоциированных с этим вирусом заболеваний требует дальнейшего изучения.

Вирусы простого герпеса обладают тропизмом к тканям эктодермального происхождения, к которым относятся слизистые оболочки желудочно-кишечного тракта, кожа и нервная система. Высокая

распространенность и контагиозность вирусных инфекций, способность к пожизненной персистенции в организме и возможность к реактивации инфекционного процесса, а также полиморфизм клинических проявлений создают серьезные проблемы в борьбе с данной патологией. В связи с этим актуально дальнейшее изучение инфицированности вирусами слизистых оболочек желудочно-кишечного тракта и их вклада в процесс развития и поддержания хронического воспаления.

Цель исследования - выявить частоту встречаемости вирусов простого герпеса 1, 2, 4, 5-го типов, вируса папилломы человека и Н. pylori в слизистой желудка и 12-перстной кишки у лиц разного возраста с хроническим гастро-дуоденитом, а также оценить влияние выявленных инфекций на характер морфологических изменений в слизистых оболочках.

Материалы и методы

Нами изучен биопсийный материал, полученный в ходе фиброгастродуоде-

носкопии у 114 пациентов с морфологически верифицированным хроническим гастродуоденитом.

В процессе эндоскопического исследования проводили прицельную биопсию слизистой оболочки антрального отдела, тела желудка и 12-перстной кишки. Для морфологического исследования парафиновые срезы окрашивали гематоксилином и эозином. Согласно критериям модифицированной Сиднейской системы, основные морфологические параметры оценивали полуколичественным способом по стандартной визуально-аналоговой шкале как слабые, умеренные, выраженные.

Стрептавидин-биотиновым методом в парафиновых срезах биоптатов с помощью поликлональных кроличьих антител выявляли антигены ВПГ-1, ВПГ-2, с использованием моноклональных мышиных антител (Dako, Дания) - антигены ВЭБ, ЦМВ и вируса папилломы человека (ВПЧ). Продукты иммуногистохимической реакции определяли по наличию светло- и темно-коричневых гранул в ядрах и цитоплазме клеток. Степень экспрессии антигенов вирусов оценивали полуколичественно: слабая, умеренная и выраженная. Н. pylori диагностировали гистологически с использованием окраски полученного материала по Романовскому-Гимзе.

Все обследуемые были разделены на две группы. Первую группу составили 64 ребенка (44 девочки и 20 мальчиков) в возрасте от 9 до 17 лет, медиана (Ме) -13 лет, нижняя квартиль (Q25) - 11 лет, верхняя квартиль (Q75) - 15 лет. Вторая группа включала 50 взрослых (25 женщин и 25 мужчин) в возрасте от 26 лет до 71 года, Ме - 41,5 лет, Q25 - 35 лет, Q75 - 64 года.

Полученные данные обработаны статистически при помощи программы Statistica 6.0. Соответствие распределения каждой анализируемой переменной Гаусовскому (нормальному) распределению оценивали c помощью теста Шапиро-Уилка. При сравнении долей (процентов) использовался метод Фишера (Fisher exact test). Связи между измеряемыми переменными оценивали методом ранговой корреляции Спирмена (R). Для визуализации результатов содержательного анализа использовался кластерный анализ (построение дендрограммы). Нулевая гипотеза (о нормальности распределения, отсутствии различий между переменными, отсутствии связи между переменными) отвергалась на уровне значимости а=0,05 (p<0,05) для каж-

дого из использованных тестов. Результаты статистического анализа представлены в формате Ме (Q25-Q75).

Результаты и обсуждение

Длительность основного заболевания варьировала у взрослых пациентов от 2 до 38 лет и составляла 8 (5-18) лет, у детей: от 1 месяца до 10 лет, 2 (1-4) года.

У 36 (56,3%) детей в слизистых исследуемых отделов были обнаружены вирусные антигены. ВПГ-1 был диагностирован у 27 (42,2%) пациентов, ВПГ-2 - у 22 (34,4%), ВПЧ - у 15 (23,4%) обследованных (рис. 1). Антигены ВЭБ и ЦМВ встречались достоверно реже (в 18,7 и 4,7% случаев соответственно), чем антигены ВПГ-1 и ВПГ-2 (во всех случаях сравнений р<0,05).

У взрослых пациентов инфицирование вирусами установлено в 32 (64%) случаях. Из них ВПГ-1 был выявлен у 24 (48%) обследованных, ВПГ-2 - у 22 (42%), ВЭБ - у 20 (40%), ВПЧ - у 17 (34%) пациентов. Антигены ЦМВ обнаружены у 5 (10%) обследованных, что достоверно реже, чем частота выявления ВПГ-1, ВПГ-2, ВПЧ и ВЭБ (р<0,05 во всех случаях сравнений). В слизистых оболочках пациентов первой группы ВЭБ встречался реже, чем у пациентов второй группы (р=0,01). Инфицирование Н. pylori установлено у 33 (51,6%) детей и у 27 (54%) взрослых.

Анализ сочетания изучаемых инфекций. H.pylori в качестве единственного инфекционного агента встречался у 14 (21,8%) детей и у 4 (8%) взрослых (р=0,04). Микст-инфицирование слизистой желудка и 12-перстной кишки бактериальной инфекцией и вирусами обнаружено у 19 (29,7%) пациентов 1-й группы и у 23 (46%) обследованных 2-й группы. В качестве моноинфекции вирусы встречались у 17 (26,6%) детей и у 9 (18,0%) взрослых. У 14 (21,8%) детей и у 14 (28,0%) взрослых в слизистых желудка и 12-перстной кишки не было обнаружено анализируемых инфекционных агентов.

Сочетанное бактериально-вирусное инфицирование слизистых оболочек у взрослых встречалось достоверно чаще, чем инфицирование только вирусами либо Н. pylori (р<0,05). У детей отсутствовали статистически значимые различия в частоте выявления анализируемых вариантов инфицирования слизистых (р>0,05).

Обращает на себя внимание высокая частота сочетания герпетических инфекций в слизистых оболочках у обследуемых обеих возрастных групп. Антигены только одного из определяемых вирусов обнаружены у 10 (15,6%) детей и у 6 (12%) взрослых, два и более - у 26 (40,6%) детей и 26 (52%) взрослых пациентов (р<0,01 и р<0,001 соответственно). Причем сочетание двух вирусных агентов в биоптатах слизистых встречалось у 14 (21,8%) детей и 9 (18%) взрослых, трех - у 7 (10,9%) детей и 6 (12%) взрослых, четырех - у 5 детей и 10 взрослых пациентов (7,8% и 20% соответственно, р=0,06). Одновременное присутствие в слизистых оболочках антигенов всех пяти анализируемых вирусов диагностировано у 1 (2%) пациента из второй группы.

Наиболее часто в слизистых оболочках пациентов 1-й группы ВПГ-1 сочетался с ВПГ-2 (18 детей; 28,1%), с ВПЧ (11 детей; 17,2%) и ВЭБ (9 детей; 14%). ВПГ-2 с высокой частотой встречался в ассоциации с ВПЧ (11 детей, 17,2%) и более редко - с ВЭБ (7 детей; 10,9%). Сочетание антигенов ВЭБ и ВПЧ в слизистых установлено у 6 (9,4%) обследованных детей.

У пациентов 2-й группы в слизистых оболочках исследуемых отделов ВПГ-1 сочетался с ВПГ-2 (16 пациентов; 32%), с ВЭБ (15 пациентов; 30%), ВПЧ (13 пациентов; 26%) и более редко - с ЦМВ (5 человек, 10%). ВПГ-2 с высокой частотой встречался в ассоциации с ВЭБ (14 пациентов, 28%) и ВПЧ (12 пациентов, 24%). Антигены ВЭБ и ВПЧ одновременно присутствовали в слизистых у 13 (26%) пациентов.

У взрослых пациентов Н. pylori достоверно чаще встречался в ассоциации с ВПГ-1, ВПГ-2, ВПЧ и ВЭБ, чем в сочетании с ЦМВ (р<0,05 во всех случаях сравнений). У детей статистически значимых

Таблица 1 | Связь (коэффициенты корреляции Спирмена) между степенью инфицированности слизистой желудка, 12-перстной кишки (ДПК) и выраженностью морфологических изменений у детей

Признак Отдел ВПГ-1 ВПГ-2 ВЭБ ЦМВ ВПЧ H. pylori

Выраженность тело 0,26* 0,12 0,14 -0,05 -0,07 0,11

антрум 0,43** 0,18 0,14 -0,06 0,09 0,14

ДПК 0,04 0,05 0,06 -0,10 0,06 0,01

Активность тело 0,10 -0,01 0,03 0,12 -0,02 0,02

антрум 0,25* 0,17 0,04 -0,17 0,05 0,15

ДПК 0,06 0,02 0,02 -0,02 0,00 0,04

П р и м е ч а н и е : * - р<0,05, ** - р<0,001

Таблица 2 Связь (коэффициенты корреляции Спирмена) между степенью инфицированности слизистой желудка, 12-перстной кишки (ДПК) и выраженностью морфологических изменений у взрослых

Морфология Отдел ВПГ-1 ВПГ-2 ВЭБ ЦМВ ВПЧ H.pylori

Активность воспаления тело 0,58*** 0,26 0,14 0,01 0,12 0,22

антрум 0,43** 0,38** 0,37** 0,23 0,39** 0,22

ДПК 0,54*** 0,52*** 0,23 0,04 0,10 0,01

Выраженность воспаления тело 0,31* 0,14 0,02 -0,00 0,19 0,05

антрум 0,21 0,16 0,26 -0,00 0,13 -0,10

ДПК 0,21 0,15 0,30* 0,10 0,01 0,10

Метаплазия слизистой тело 0,47*** 0,23 0,13 0,17 0,09 0,08

антрум 0,44** 0,31* 0,20 0,15 0,14 0,26

ДПК 0,21 0,22 0,31* -0,11 0,07 0,20

Атрофия слизистой тело 0,17 0,05 -0,01 0,13 -0,03 -0,05

антрум 0,34* 0,16 0,18 0,04 0,11 0,11

ДПК - - - - - -

Гиперплазия слизистой тело 0,27 0,16 0,14 0,27 0,25 0,02

антрум 0,48*** 0,31* 0,36** 0,19 0,38** 0,07

ДПК 0,40** 0,31* 0,36** 0,05 0,13 0,03

Дисплазия слизистой тело 0,46*** 0,30* 0,27 0,15 -0,01 -0,00

антрум 0,43** 0,37** 0,22 0,29* 0,25 0,19

ДПК 0,72*** 0,37** 0,21 0,14 0,21 0,28*

Пролиферация сосудов тело 0,63*** 0,19 0,11 0,10 -0,07 0,14

антрум 0,55*** 0,19 0,14 0,12 -0,00 0,11

ДПК 0,66*** 0,37** 0,28* 0,14 0,19 0,33*

П р и м е ч а н и е : * - р<0, изучаемого признака.

05,

р<0,01,

р<0,001, «-» - отсутствие в слизистых

различий в частоте обнаружения Н. pylori и определяемых вирусов не выявлено (р>0,05).

В анализируемых группах не было установлено достоверных различий между характеристиками вирусно-бак-териальной инфицированности тела, антрального отдела желудка, 12-перст-ной кишки (р>0,05 во всех случаях сравнений).

У детей наличие изучаемых вирусных антигенов в слизистых не было связано с возрастом и длительностью течения хронического гастродуоденита (р>0,05). А у взрослых пациентов установлена достоверно положительная связь между данными показателями и инфицированием тела желудка ВПЧ (с возрастом R=0,32, р<0,05; с длительностью заболевания R=0,36, р<0,05). У пациентов

2-й группы обсеменение Н. pylori достоверно высоко коррелировало с возрастом (R=0,44; p=0,001) и длительностью течения хронического гастродуоденита (R=0,37; p=0,007), в отличие от представителей 1-й группы, у которых данные связи были статистически незначимыми (р>0,05). Полученные данные могут косвенно свидетельствовать о «первичности» инфицирования слизистых вирусами ВПГ-1, ВПГ-2, ВЭБ и ЦМВ. Присутствие последних в слизистых оболочках может являться непосредственной причиной заболевания, а также создавать благоприятную «почву» для обсеменения Н. pylori.

Анализ влияния определяемых инфекций на морфологию слизистых оболочек в исследуемых отделах. У детей выявлены достоверно положительные корреляционные связи между интенсивностью экспрессии антигенов ВПГ-1 и степенью выраженности воспалительного процесса в теле и антральном отделе желудка и активностью - в антральном отделе (табл. 1).

Наличие антигенов ВПГ-2, ВЭБ, ЦМВ, ВПЧ и обсеменение Н. pylori не были статистически значимо связаны со степенью лимфоци-тарной и нейтрофильной инфильтрации слизистых в исследуемых отделах (р>0,05).

В группе взрослых пациентов с выраженностью морфологических изменений, обнаруженных при гистологическом исследовании слизистой желудка и 12-перстной кишки, достоверно положительно коррелировали показатели ин-фицированности биопсийного материала ВПГ-1, ВПГ-2 и ВЭБ (табл. 2). ВПЧ был ассоциирован только с активностью воспаления и гиперплазией слизистой антраль-ного отдела желудка, ЦМВ - с наличием дисплазии в антруме. Обсемененность Н. pylori была достоверно связана только с пролиферацией сосудов и дисплазией 12-перстной кишки.

Дендрограмма, построенная в ходе кластерного анализа, хорошо иллюстрирует полученные корреляционные связи (рис. 2). Выделилось два кластера, связанных между собой за уровнем значимости. Первый кластер образован ВПГ-1, ВПГ-2, ВЭБ и анализируемыми морфологическими признаками в слизистых, второй кластер состоял из показателей инфицированности ВПЧ и Н. pylori. ЦМВ не вошел ни в один из кластеров. Показатель инфицирован-ности ВПГ-1 наиболее тесно связан с дисплазией, пролиферационной активностью и выраженностью метаплазии в слизистых.

Рисунок 2

Характеристика связей между инфицированностью слизистых оболочек и морфологическими изменениями у взрослых

П р и м е ч а н и е : при r=0,3, р<0,05.

Таким образом, присутствие в слизистых оболочках ВПГ-1 оказывает существенное влияние на выраженность морфологических изменений во всех возрастных группах. С увеличением возраста пациентов и продолжительности течения хронического гастродуоденита спектр вирусов, приводящих к морфологическим изменениям в слизистых оболочках, расширяется. Вероятно, длительная персистенция вирусной инфекции в слизистых желудочно-кишечного тракта способствует развитию в них структурных нарушений. Обнаружение при гистологическом исследовании выраженных гиперпластических пролиферативных и диспластических изменений на фоне высокой активности воспаления может служить показанием для иммуногисто-химического исследования слизистых

на предмет вероятного инфицирования вирусами.

Выводы:

1. У 56,3% обследованных детей и 64% взрослых в слизистых оболочках желудка и 12-перстной кишки обнаружены вирусные антигены. Наиболее часто выявляемые вирусы в слизистых пациентов с хроническим гастродуоденитом -ВПГ-1, ВПГ-2, ВЭБ и ВПЧ. У 40,6% детей и 52% взрослых в биоптатах слизистых оболочек верхних отделов желудочно-кишечного тракта установлено одновременное инфицирование несколькими вирусами.

2. Вирус простого герпеса 1-го типа оказывает влияние на степень выраженности и активность хронического воспаления в слизистых оболочках желудка у детей и взрослых. У взрослых

пациентов ВПГ-1 и ВПГ-2 усиливают выраженность проявлений метаплазии, гиперплазии, дисплазии и пролиферации сосудов, ВЭБ и ВПЧ поддерживают активность воспаления и гиперплазию в слизистых, ЦМВ ассоциирован с дис-пластическими изменениями в слизистых оболочках желудка.

3. Обсемененность Н. pylori не оказывала статистически значимого влияния на выраженность и активность воспалительного процесса у пациентов в сравниваемых группах, но была статистически значимо связана с про-лиферативными и диспластическими изменениями в слизистых оболочках у взрослых.

Л И Т Е Р А Т У Р А

1. Гастроэнтерология. Болезни детей / псд общ. ред. Л.Б.Лазебника, П.Л.Щербакова. - М.: МК, 2011. - С.11-14.

2. Жукова А.Е. // Вопр. диагностики в педиатрии. -2012. - Т.4, №1. - С.36-40.

3. Король С.М., Колупаева А.Е. / Болезни желудка и 12-перстной кишки у детей и подростков (диагностика и лечение). - Мн.: БелМАПО, 2005. - 20 с.

4. ЛевитР.М. // Вопр. детской диетологии. - 2013. -Т.11, №1. - С.63-65.

5. Нелюбин В.Н. // Аллергология и иммунология. -2010. - Т.11, N 2. - С.98-102.

6. Чупрынова М.Ю. // Врач-аспирант. - 2011. - Т.46, №3. - С.32-37.

7. Щербаков П.Л. Болезни органов пищеварения у детей при хеликобактериозе / М.: Мед. информ. агентство, 2011. - С.10-17.

8. Cohen Л // N. Engl. J. Med. - 2000. - N343. - Р.481-492.

9. GulleyM.L, Tang W. // J. Mol. Diagn. - 2008. - N10. -Р.279-292.

10. MalfertheinerP., MegraudF// Gut. - 2012. - N61. -Р.646-464.

11. UozakiH, Fukayama M. // Int. J. Clin. Exp. Pathol. -2008. - N1. - Р.198-216.

Поступила 10.05.2013 г.

Вниманию авторов и рекламодателей

Многие интересные, новаторские идеи и технологии не доходят до конечного пользователя. Причин этому много. Для многократного увеличения читаемости и цитируемости предлагаем активнее пользоваться нашими дополнительными услугами: одновременно с опубликованием в журнале «Медицинские новости» Вы можете заказать размещение Ваших статей на нашем сайте www.mednovosti.by, имеющем посещаемость 280-320 тыс. кликов в месяц из 112 стран мира. Также на сайте можно активировать и ранее опубликованные в журнале статьи в разделе «Медицинские новости. Архив», начиная с 2007 г. Это будет способствовать увеличению читаемости Ваших статей в десятки раз и цитируемости - не менее чем в 4,5 раза.

Подробности на сайте www.mednovosti.by в разделе «О сайте».

Справки по телефону в Минске: (+375 17) 226-03-95