Дизрегуляция апоптоза гепатоцитов при различных поражениях печени, возможности фитокоррекции

материалы и методы

Эксперименты проведены на крысах линии Вистар разных полов массой 160—180 г. Модель геми-ческой гипоксии воспроизводили путем однократного внутрибрюшинного введения животным водного раствора натрия нитрита в дозе 210 мг/кг [3]. Животным опытной группы внутрижелудочно вводили испытуемое средство в объемах 5,0 и 10,0 мл/кг профилактически в течение 3 дней, а затем однократно за 1 ч до тестирования. Животные контрольной группы получали эквиобъемное количество дистиллированной воды. В качестве препарата сравнения использовали экстракт элеутерококка в объеме 5,0 мл/ кг. Устойчивость животных к действию тканевой гипоксии определяли по времени жизни от момента введения натрия нитрита до прекращения дыхания. Полученные данные приведены в таблице 1.

Таблица 1

Влияние многокомпонентного растительного средства на продолжительность жизни крыс

при гемической гипоксии

Группы животных Объем, мл/кг Продолжительность жизни, мин.

Контрольная(Н20) - 28,6 ± 1,55

Опытная 1 (Жудлэн 1) 5,0 35,8 ± 2,06*

Опытная 2 (Жудлэн 1) 10,0 28,0 ± 2,14

Опытная 3 (Элеутерококк) 5,0 36,2 ± 1,37*

Как следует из приведенной таблицы, профилактическое введение растительного средства «Жуд-лэн 1» в объеме 5,0 мл/кг сопровождалось повышением устойчивости животных к гемической гипоксии в среднем на 25 %, тогда как увеличение дозы средства до 10,0 мл/кг не оказывало влияния на продолжительность жизни животных. При этом антигипоксическое действие испытуемого средства в объеме 5,0 мл/кг было аналогичным таковому у препарата сравнения — элеутерококка.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют, что многокомпонентное растительное средство «Жудлэн 1» в объеме 5,0 мл/кг оказывает достаточно выраженное антигипоксическое действие, которое является характерным для многих адаптогенных растительных препаратов [4].

литература

1. Дильман В.М. Четыре модели медицины / В.М. Дильман. — Л., 1987. — 288 с.

2. Здоровье населения России и деятельность учреждений здравоохранения (Статистический справочник). — М.: Медицина, 2006.

3. Костюченков Ю.Ф. Влияние фармакологических средств на развитие гемической гипоксии / Ю.Ф. Костюченков, Н.Ф. Фаращук // Фармакол. и токсикол. — 1982. — № 1. — С. 76 — 79.

4. Перекисное окисление и стресс / Барабой В.А. [и др.]. — СПб., 1992. — 142 с.

С.Ч. Гончикова, И.П. Убеева

дизрегуляция апоптоза гепатоцитов при различных поражениях печени, возможности фитокоррекции

Бурятский государственный университет

В настоящее время отмечается неуклонный рост заболеваемости вирусными гепатитами, повышение частоты их осложнений. Патология печени является не только медицинской, но и актуальной социально-экономической проблемой, которой уделено значительное внимание в Национальном проекте «Здоровье».

Наибольший интерес исследователей в последние годы проявляется в отношении апоптоза, выявляемого при вирусных гепатитах В и С, поражениях печени другой природы, механизм развития которого остается до конца невыясненным. Предполагается решающая роль иммуноопосредованных реакций, которые осуществляются с участием про- и противоапоптотических цитокинов.

В этих условиях представляется перспективным использование лекарственных средств растительного происхождения, обладающих иммуномодулирующей активностью и способностью влиять на иммуноо-посредованные механизмы регуляции апоптоза.

С позиций апоптоза можно объяснить развитие многих заболеваний человека, поскольку подавление его ведет к патологическим изменениям органов и тканей. Интересные данные были получены в работе, в которой культура крысиных гепатоцитов подвергалась воздействию активированных ИЛ-2 ЫК-клеток и экспериментальных ингибиторов каспаз. Подавление активности каспаз предотвращало апоптоз

гепатоцитов, но при этом усиливалась их гибель посредством некроза, что указывает на определенный баланс между этими путями элиминации клеток, осуществляемыми иммунной системой. Предполагают следующие механизмы, с помощью которых вирусы гепатитов В и С активируют апоптоз:

прямой;

опосредованный цитотоксическими лимфоцитами:

• перфорин-гранзимовый;

• FAS-опосредованный;

• цитокинопосредованный.

Обнаружено, что HBx-белок вируса гепатита В индуцирует апоптоз чувствительных клеток. Кроме того, прямым агентом, инициирующим Fas-опосредованную гибель гепатоцитов, является HBs-белок.

В то же время, обнаружено, что некоторые кодируемые вирусами белки обладают антиапоптозной активностью, которая осуществляется подавлением функции проапоптогенного белка р53, инактивацией каспаз, а также усиленной экспрессией мощного ингибитора апоптоза bcl-2. Интересно, что в норме bcl-2 обнаружен в печени только в эпителии желчных протоков, постоянно контактирующих с желчью, но не в гепатоцитах. У больных хроническим гепатитом С выявлено повышение экспрессии Fas рецептора в 3 — 5 раз по сравнению с исходным уровнем, усиление Fas-опосредованного апоптоза гепатоцитов, при этом экспрессия Fas-лиганда возрастала параллельно прогрессированию заболевания. У пациентов с хроническими гепатитами В и С было обнаружено значительное количество клеток печени в состоянии апоптоза и выявлена прямая корреляция уровня апоптоза гепатоцитов с уровнем экспрессии Fas-L клетками лимфогистиоцитарного инфильтрата. У пациентов с алкогольным поражением печени наблюдается высокая экспрессия мРНК Fas-иганда в гепатоцитах.

Влияние иммунных механизмов на процессы в печени отражают результаты исследования D.R. Nelson: выявлены активированные CD4+ и CD8+ Т-лимфоциты в портальных трактах и внутри долек, экспрессия молекул HLA I и II класса и молекул адгезии на поверхности гепатоцитов и клеток желчных протоков.

О связи экспрессии Fas и последующего апоптоза с действием вируса гепатита С свидетельствует и то, что после успешного лечения а-интерфероном количество Fas-положительных клеток резко уменьшается и коррелирует как со снижением активности трансаминаз, так и с уменьшением выраженности портальной и лобулярной лимфоидной инфильтрации ткани печени.

Одними из основных регуляторов апоптоза выступают цитокины, продуцируемые клетками иммунной системы. Их условно разделяют на провоспалительные (интерлейкины 1, 6, 8, ФНО а, трансформирующий фактор роста pi и др.) и противовоспалительные (интерлейкин 10). При алкогольном поражении печени отмечено повышение активности ФНО а наряду с увеличением рецепторов к нему на поверхности гепатоцитов.

Уровень ФНО а повышен у пациентов с хроническим гепатитом С. Рядом авторов была установлена прямая корреляция между выраженностью воспалительной инфильтрации, внутриклеточной дегенерацией и мостовидными некрозами с одной стороны, и высокими показателями цитокинов крови (интерлейкинов 1, 6, ФНО а) с другой стороны.

В то же время у больных острым алкогольным гепатитом отмечено снижение уровней противовоспалительных цитокинов, интерлейкина 10 в первую очередь.

Так, в работе О.Б. Жуковой и соавт. показано ингибирующее влияние вируса гепатита С на лимфоциты периферической крови (отмечено достоверное снижение уровней апоптоза Т-хелперов по сравнению с здоровыми лицами). У больных хроническим гепатитом В выявлены более высокие уровни количества лимфоцитов и Т-хелперных клеток, подвергшихся апоптозу, по сравнению с соответствующими показателями у здоровых лиц и у больных хроническим гепатитом С. С этими данными входят в противоречие результаты исследований: при остром циклическом течении вирусного гепатита В наблюдается резкое повышение уровня апоптоза лимфоцитов периферической крови в разгаре, быстрое снижение в периоде ранней реконвалесценции данной инфекции. Для хронического течения вирусных гепатитов В и С характерен монотонно высокий уровень апоптоза лимфоцитов периферической крови, более высокие урони данного параметра регистрировались при обнаружении маркеров репликации.

Таким образом, на основании вышесказанного следует отметить наличие в разной степени выраженной апоптотической реакции гепатоцитов при поражениях печени различной природы. При этом существенную роль играет модуляция апоптоза цитокинами провоспалительного и противовоспалительного характера действия. Дизрегуляция процессов активации и ингибирования запрограммированного суицида клеток, дисбаланс цитокинового статуса способствуют дальнейшему углублению патологических изменений в ткани печени. Осознание роли апоптоза в повреждении тканей печени способствует поиску новых подходов терапии данной патологии, связанных с воздействием на иммунные механизмы регуляции гибели клеток, а также направленно применять растительные иммуномодулирующие препараты с известным механизмом действия с целью коррекции нарушений иммуноопосредованного апоптоза.

Результаты многочисленных исследований свидетельствуют о способности многих растительных препаратов оказывать влияние на состояние различных факторов иммунной системы, в том числе играющих ключевую роль в регуляции апоптоза при различных нарушениях.

Отличительной способностью лекарственных средств растительного происхождения является их поливалентность, что обусловлено сложностью химического состава растительной клетки. К настоящему времени установлен характер влияния на иммунные процессы ряда биологически активных веществ, которые содержатся в растениях.

Имеются сообщения о наличии иммуностимулирующих свойств у растительных полифенолов. Кверцетин устраняет иммунодепрессивный эффект антибиотиков и гистаминоблокаторов.

Ряд авторов рассматривают флавоноиды как перспективные противоопухолевые средства. Их действие связывают как с прямым цитотоксическим эффектом на клетки опухоли, так и модификацией биологического ответа — стимуляцией активности лимфоцитов.

Иммуностимулирующим действием обладают такие растительные полисахариды, как фенил-гамма-пироны, гетерополисахариды, сапонины типа бета-амирина и глициризиновая кислота.

Полисахариды обладают противовоспалительными и иммуномодулирующими свойствами, влияют на процессы физиологической и репаративной регенерации. Было также обнаружено стимулирующее влияние полисахаридов эхинацеи пурпурной и узколистной на макрофагальную систему, функциональное состояние лимфоцитов (особенно Т-лимфоцитов), на выработку интерферона.

В последние годы пристальное внимание исследователей привлекают каротиноиды, относящиеся к подгруппе тетратерпенов.

Таким образом, лекарственные растения, содержащие природный комплекс полифенольных соединений, полисахаридов, эфирных масел, сапонинов, витаминов макро- и микроэлементов, обладающие иммуномодулирующим действием, находят свое применение в качестве средств коррекции иммунологических нарушений. Необходимо дальнейшее комплексное изучение факторов регуляции апоптоза как в ткани печени, так и системных проявлений дизрегуляции, так и системных, исследование механизмов эффективности различных, в том числе растительных, препаратов с целью коррекции нарушений баланса клеточной пролиферации и гибели.

Ц.Д. Дашиев, П.М. Киселев, А.И. Товаршинов

современные методы дезинфекции высокого уровня гибких эндоскопов

Бурятский государственный университет

Важнейшая задача современной медицины — профилактика внутрибольничных инфекций. По данным ВОЗ, не менее 5 % больных, посетивших лечебные учреждения, подвергаются внутрибольничному заражению. Актуальность проблемы эффективного обеззараживания гибких эндоскопов, используемых для диагностических и лечебных манипуляций, обусловлена, прежде всего, необходимостью защиты пациента и медперсонала от инфицирования такими опасными заболеваниями как СПИД, гепатит, туберкулез, которые резко возросли в последние годы. Вместе с тем, именно при обеззараживании фи-броэндоскопов актуален вопрос их сохранности, поскольку это оборудование имеет сложное, тонкое устройство с использованием различных, в том числе лабильных материалов, стоимость же эндоскопического оборудования, как известно, очень высока.

В настоящее время появился выбор дезинфектантов высокого уровня, которые обладают вирули-цидными, бактерицидными, спороцидными и фунгицидными свойствами.

В отделении эндоскопии ОКБ на ст. Улан-Удэ используются следующие дезинфектанты:

1) Экобак фирмы ОАО НПО «Новодез», Россия. В качестве активного действующего вещества содержит 20 % комплекс четвертичных аммонийных соединений.

2) Деконекс 55 Эндо фирмы «Борер Хеми АГ» Швейцария. В качестве активного действующего вещества содержит 20 % глутаровый альдегид.

Следуя «Положением о государственном санитарно-эпидемиологическом нормировании», утвержденным Постановлением Правительства Российской Федерации от 24 июля 2000 г. № 554, а также рекомендациям фирмы производителя OLIMPUS и РЕЫТАХ, в отделении эндоскопии разработана своя методика дезинфекции эндоскопической аппаратуры и инструментария к ней. Хочется отметить, что для работы используются гибкие эндоскопы 20 — 30 — 40 серий. Оснащение отдела также включает: ручные моющие машины, ртутно-кварцевые облучатели. Каждый кабинет оборудован приточно-вытяжной и естественной вентиляцией.

Эндоскопы проходят цикл дезинфекции в моечной машине, предварительно пройдя этап очистки, т.к. вышеперечисленные дезинфектанты фиксируют загрязнения органической природы.