ПОЛИЕНОВЫЕ АНТИБИОТИКИ, КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ УКАЗАННЫЕ АНТИБИОТИКИ, СПОСОБ И МИКРООРГАНИЗМЫ, ПРИМЕНЯЕМЫЕ ДЛЯ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

1. Полиеновое макролидное производное, имеющее формулу (I):
1
3
в которой R1 обозначает С-Салкил;
3
2
R2 обозначает функциональную группу, выбранную из СН- или CONH-(метил или первичный амид),
его изомеры, соли, пролекарства или сольваты.
2. Соединение по п.1, имеющее формулу (I-1)
2
в которой R обозначает NH; и
1
3
R1 обозначает C-Салкил,
его изомеры, соли, пролекарства или сольваты.
3. Соединение по п.2, отличающееся тем, что оно выбрано из амидированных соединений, имеющих формулу I, которые идентифицированы как римоцидин В (I-1а) и СЕ-108В (I-1b):
4. Соединение по п.1, имеющее формулу (III):
1
1
3
в которой R обозначает С-Салкил, его изомеры, соли, пролекарства или сольваты.
5. Соединение по п.4, отличающееся тем, что оно выбрано из амидированных соединений, имеющих формулу III, которые идентифицированы как римоцидин С (IIIa) и СЕ-108С (IIIb):
6. Биоцидная композиция, отличающаяся тем, что содержит соединение формулы (I) по п.1 в сочетании с инертным наполнителем.
7. Биоцидная композиция по п.6, отличающаяся тем, что соединение формулы (I) выбрано из соединений формулы (I-1) по п.2.
8. Биоцидная композиция по п.7, отличающаяся тем, что соединение формулы (I-1) выбрано из римоцидина В (I-1а), СЕ-108В (I-1b) и их смесей.
9. Биоцидная композиция по п.6, отличающаяся тем, что соединение формулы (I) выбрано из соединений формулы (III) по п.4.
10. Биоцидная композиция по п.9, отличающаяся тем, что соединение формулы (III) выбрано из римоцидина С (IIIa), CE-108C (IIIb) и их смесей.
11. Фармацевтическая композиция, отличающаяся тем, что содержит соединение формулы (I) по п.1 необязательно в сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами.
12. Фармацевтическая композиция по п.11, отличающаяся тем, что соединение формулы (I) выбрано из соединений формулы (I-1) по п.2.
13. Фармацевтическая композиция по п.12, отличающаяся тем, что соединение формулы (I-1) выбрано из римоцидина В (I-1а), СЕ-108В (I-1b) и их смесей.
14. Фармацевтическая композиция по п.11, отличающаяся тем, что соединение формулы (I) выбрано из соединений формулы (III) по п.2.
15. Фармацевтическая композиция по п.12, отличающаяся тем, что соединение формулы (III) выбрано из римоцидина С (IIIa), СЕ-108С (IIIb) и их смесей.
16. Фармацевтическая композиция по одному из пп.11-15, которая дополнительно содержит один или несколько терапевтических агентов.
17. Применение соединения формулы (I) по п.1 для приготовления лекарственного средства, предназначенного для предупреждения и/или лечения инфекции у человека или животного, вызываемой патогенными организмами, клеточные мембраны которых содержат эргостерин, или которые, хотя и не содержат его, но являются чувствительными к полиеновым макролидам.
18. Применение по п.17, отличающееся тем, что соединение формулы (I) выбирают из соединений формулы (I-1) по п.2.
19. Применение по п.18, отличающееся тем, что соединение формулы (I-1) выбирают из римоцидина В (I-1а), СЕ-108В (I-1b) и их смесей.
20. Применение по п.17, отличающееся тем, что соединение формулы (I) выбирают из соединений формулы (III) по п.4.
21. Применение по п.20, отличающееся тем, что соединение формулы (III) выбирают из римоцидина С (IIIa), СЕ-108С (IIIb) и их смесей.
22. Противогрибковая композиция, отличающаяся тем, что она содержит соединение формулы (I) по п.1 необязательно в сочетании с одним или несколькими инертными наполнителями.
23. Противогрибковая композиция по п.22, отличающаяся тем, что соединение формулы (I) выбрано из соединений формулы (I-1) по п.2.
24. Противогрибковая композиция по п.23, отличающаяся тем, что соединение формулы (I-1) выбрано из римоцидина В (I-1а), СЕ-108В (I-1b) и их смесей.
25. Противогрибковая композиция по п.22, отличающаяся тем, что соединение формулы (I) выбрано из соединений формулы (III) по п.4.
26. Противогрибковая композиция по п.25, отличающаяся тем, что соединение формулы (III) выбрано из римоцидина С (IIIa), CE-108C (IIIb) и их смесей.
27. Композиция по одному из пп.22-26, которая дополнительно содержит один или несколько противогрибковых агентов.
28. Способ борьбы с вызываемой фитопатогенными грибами инфекцией растения, который заключается в том, что растение или окружающую его среду обрабатывают противогрибковой композицией по одному из пп.22-27.
29. Способ борьбы с вызываемой фитопатогенными грибами инфекцией плода, который заключается в том, что плод обрабатывают противогрибковой композицией по одному из пп.22-27.
30. Способ борьбы с инфекцией, вызываемой грибом, который обладает способностью развиваться в приготовленных пищевых продуктах, заключающийся в том, что приготовленный пищевой продукт обрабатывают противогрибковой композицией по одному из пп.22-27.
31. Способ получения соединения формулы (I-1) по п.2, отличающийся тем, что культивируют микроорганизм, выбранный из Streptomyces diastaticus var. 108/743B, Streptomyces diastaticus var. 108/784, Streptomyces diastaticus var. 108::PM1-500/743B и их комбинаций, в условиях, обеспечивающих продуцирование соединения формулы (I-1), и при необходимости выделяют и очищают указанное соединение.
32. Способ по п.31, отличающийся тем, что предназначенное для получения соединения формулы (I-1) выбирают из римоцидина В (I-1а), СЕ-108В (I-1b) и их смесей.
33. Способ по пп.31 и 32, отличающийся тем, что одновременно с полиеновым макролидом формулы (I-1), предпочтительно представляющим собой римоцидин В (I-1a), CE-108B (I-1b) или их смеси, получают исходный полиен, представляющий собой римоцидин (IIa), СЕ-108 (IIb) или их смеси.
34. Способ получения соединения формулы (III) по п.4, отличающийся тем, что осуществляют следующие стадии:
культивируют микроорганизм Streptomyces diastaticus var. 108::РМ1-768/743В в условиях, обеспечивающих продуцирование соединений формулы (III),
получают сбраживаемую культуру, и, при необходимости,
выделяют и очищают указанные соединения формулы (III).
35. Способ по п.34, отличающийся тем, что соединение формулы (III) относится к группе, включающей следующие соединения: римоцидин С (IIIa), СЕ-108С (IIIb) и их смеси.
36. Рекомбинантный микроорганизм, необходимый для осуществления способа по пп.31-33, отличающийся тем, что он выбран из Streptomyces diastaticus var. 108/743B, Streptomyces diastaticus var. 108/784 (DSM 17187) и Streptomyces diastaticus var. 108::PM1-500/743B.
37. Рекомбинантный микроорганизм, необходимый для осуществления способа по пп.34 и 35, отличающийся тем, что он обладает способностью продуцировать соединение формулы (III) по п.4, и тем, что в нем нарушена экспрессия только гена rimG или гомологичного гена.
38. Микроорганизм по п.37, отличающийся тем, что он представляет собой микроорганизм Streptomyces diastaticus var. 108::PM1-768/743B (депонированный под регистрационным номером DSM 17482) и является продуцентом метилированных полиенов общей формулы (III), представляющих собой римоцидин С, СЕ-108С и их смеси.
39. Микроорганизм по п.38, отличающийся тем, что он представляет собой микроорганизм, функционально эквивалентный микроорганизму Streptomyces diastaticus var. 108::PM1-768/743B (депонированному под регистрационным номером DSM 17482).
40. Культура микроорганизма, отличающаяся тем, что микроорганизм выбран из Streptomyces diastaticus var. 108/743B, Streptomyces diastaticus var. 108/784, Streptomyces diastaticus var. 108::PM1-500/743B, Streptomyces diastaticus var. 108:::PM1-768B/743B и их комбинаций.
41. Применение микроорганизма по пп.36-39 или культуры микроорганизма по п.40 для получения соединение формулы (I) по п.1.
42. Применение микроорганизма по п.41, отличающееся тем, что соединение формулы (I-1) и соединение формулы (III) выбирают из римоцидина В (I-1а) или СЕ-108В (I-1b) и из римоцидина С (IIIa) или СЕ-108С (IIIb) соответственно или из смесей указанных соединений.
43. Сбраживаемая культура микроорганизма по пп.36-39, отличающаяся тем, что она содержит соединение формулы (I).
44. Сбраживаемая культура по п.43, отличающаяся тем, что микроорганизм относится к группе, включающей следующие микроорганизмы: Streptomyces diastaticus var. 108/743B, Streptomyces diastaticus var. 108/784, Streptomyces diastaticus var. 108::PM1-500/743B и их комбинации, и тем, что она содержит соединение формулы (I-1) по п.2, относящееся к группе, которая включает следующие соединения: римоцидин В (I-1a), CE-108B (I-1b) и их смеси.
45. Сбраживаемая культура по п.43, отличающаяся тем, что микроорганизм представляет собой Streptomyces diastaticus var. 108:::PM1-768В/743В, и тем, что она содержит соединение формулы (III) по п.4, относящееся к группе, которая включает следующие соединения: римоцидин С (IIIa), СЕ-108С (IIIb) и их смеси.
46. Способ создания рекомбинантного микроорганизма-продуцента полиеновых макролидов, содержащих амидную группу по п.36, отличающийся тем, что в микроорганизмы-продуценты полиеновых макролидов, имеющих свободные карбоксильные группы, встраивают экспрессионный вектор или в микроорганизмы-продуценты полиеновых макролидов, имеющих свободные карбоксильные группы, встраивают комбинацию векторов, которая включает, с одной стороны,
(I) вектор, содержащий биосинтетический кластер полиена или его фрагмент, и, с другой стороны,
(II) вектор, полученный из SCP2*, который содержит ген ermE, или вектор, который содержит сайт инициации репликации, отличный от сайта инициации репликации SCP2*, ген ermE и фрагмент вектора SCP2*.
47. Способ создания микроорганизма по пп.37-39, отличающийся тем, что в образовавшемся штамме нарушают только экспрессию гена rimG, и тем, что осуществляют следующие стадии:
а) создают путем нарушения или делеции гена rimG микроорганизма S. diastaticus var. 108 с мутацией в гене rimG, или его эквиваленты, который(е) не обладает(ют) способностью продуцировать полиены, и
б) после этого трансформируют его(их) с помощью вектора, предпочтительно плазмиды, которая обладает способностью компенсировать нарушение гена rimA в хромосоме указанного мутанта.
48. Способ создания микроорганизма по п.46, отличающийся тем, что созданный штамм представляет собой штамм S. diastaticus var. 108::PM1-768/743В.
49. Способ создания микроорганизма по п.37, отличающийся тем, что в созданном штамме нарушена только экспрессия гомологичного гена rimG и тем, что осуществляют следующие стадии:
а) создают путем нарушения или делеции указанного гена исходного микроорганизма с мутацией в гомологичном гене, который не обладает способностью продуцировать полиены, и
б) после этого его трансформируют с помощью вектора, предпочтительно плазмиды, которая обладает способностью компенсировать нарушение этого гена в хромосоме указанного мутанта.
50. Способ создания микроорганизма по п.49, отличающийся тем, что ген, гомологичный гену rimG, представляет собой ген, обладающий активностью цитохром Р450-монооксигеназы, который относится к группе генов, включающих гены pimG, amphN, nysN, canC.
51. Способ создания микроорганизма по пп.46 и 50, отличающийся тем, что исходный микроорганизм относится к актиномицетам (Actinomycete).
52. Способ создания микроорганизма по п.51, отличающийся тем, что относящийся к актиномицетам микроорганизм представляет собой Streptomyces sp.
53. Способ создания микроорганизма по п.52, отличающийся тем, что микроорганизм Streptomyces sp. относится к следующей группе: Streptomyces noursei, Streptomyces albidus, Streptomyces rimosus, Streptomyces diastaticus var. 108, Streptomyces nodosus, Streptomyces natalensis, Streptomyces chattanoogensis и Streptomyces. griseus.
54. Рекомбинантный микроорганизм, который можно создавать с помощью способа по одному из пп.46-53.
55. Экспрессионный вектор по п.46, отличающийся тем, что он выбран из группы, включающей:
а) вектор, полученный из вектора SCP2*, или его фрагмент, который содержит сайт инициации репликации SCP2* и ген ermE, обусловливающий устойчивость к эритромицину;
б) вектор, который содержит (I) сайт инициации репликации вектора SCP2*; (II) ген ermE и (III) фрагмент вектора SCP2*;
в) вектор, который содержит (I) сайт инициации репликации, (II) ген ermE и (III) фрагмент вектора SCP2*, в котором указанный сайт инициации репликации отличен от сайта инициации репликации SCP2*;
г) вектор, в котором отсутствует сайт инициации репликации и который содержит ген ermE и фрагмент вектора SCP2*;
д) вектор, полученный из вектора SCP2*, который содержит (I) сайт инициации репликации, (II) ген ermE и (III) полный биосинтетический кластер полиена или фрагмент указанного кластера;
е) вектор, полученный из вектора SCP2*, который содержит (I) сайт инициации репликации, идентичный сайту инициации репликации вектора SCP2, или отличный от него, (II) ген ermE, (III) фрагмент вектора SCP2* и (IV) полный биосинтетический кластер полнена или фрагмент указанного кластера;
ж) вектор, в котором отсутствует сайт инициации репликации и который содержит ген ermE и полный биосинтетический кластер полиена или фрагмент указанного кластера; и
з) вектор, в котором отсутствует сайт инициации репликации и который содержит (I) ген ermE, (II) фрагмент вектора SCP2* и (III) полный биосинтетический кластер полиена или фрагмент указанного кластера.
56. Экспрессионный вектор по п.55, отличающийся тем, что он получен из вектора SCP2* и несет ген, обусловливающий устойчивость к эритромицину (ermE).
57. Экспрессионный вектор по п.56, отличающийся тем, что он представляет собой плазмиду pSM784.
58. Экспрессионный вектор по п.55, отличающийся тем, что он содержит сайт инициации репликации SCP2*, ген, обусловливающий устойчивость к эритромицину (ermE), и фрагмент вектора SCP2*.
59. Экспрессионный вектор по п.54, отличающийся тем, что он содержит сайт инициации репликации, отличный от сайта инициации репликации SCP2*, ген, обуславливающий устойчивость к эритромицину (ermE), и фрагмент вектора SCP2*.
60. Экспрессионный вектор по п.55, отличающийся тем, что он представляет собой производное SCP2*, которое содержит ген ermE и полный биосинтетический кластер полиена или фрагмент указанного кластера, находящийся под контролем промотора.
61. Экспрессионный вектор по одному из пп.57-59, отличающийся тем, что он дополнительно содержит полный кластер rim или фрагмент указанного кластера.
62. Экспрессионный вектор по п.61, отличающийся тем, что он представляет собой плазмиду pSM743B.
63. Ферментативный способ, предназначенный для получения амидированных полиенов из полиенов, которые имеют свободные карбоксилированные группы в макролактоновом кольце, отличающийся тем, что используют бесклеточные экстракты штаммов-продуцентов амидированных полиенов, и тем, что осуществляют следующие стадии:
а) приготавливают смесь, включающую субстрат, который представляет собой полиен, имеющий свободные карбоксилированные группы, или смесь нескольких таких полиенов, очищенных или неочищенных, и белковый экстракт, полученный из штамма-продуцента или штаммов-продуцентов амидированных полиенов,
++
б) осуществляют реакцию в смеси, указанной в а), в условиях, обеспечивающих присутствие АТФ/Mg и глутамина или других доноров амидных групп, и
в) очищают амидированные полиены.
64. Ферментативный способ по п.63, отличающийся тем, что предназначенный для получения полиен представляет собой СЕ-108В (I-1b), римоцидин В (I-1а) или их смеси, указанный в а) полиен, служащий в качестве субстрата, представляет собой очищенный или неочищенный СЕ-108 (IIb), римоцидин (IIa) или их смеси, и в котором экстракт, указанный в а) получают из следующих штаммов: S. diastaticus var. 108/784 и S. diastaticus var. 108/743B.
65. Ферментативный способ по п.63, отличающийся тем, что предназначенный для получения амидированный полиен представляет собой АВ-400 (IVb), указанный в а) полиен, служащий в качестве субстрата, представляет собой очищенный или неочищенный пимарицин (IVa), и в котором экстракт, указанный в а) получают из следующих штаммов: S. diastaticus var. 108/784 и S. diastaticus var. 108/743B.
66. Ферментативный способ по п.63, отличающийся тем, что предназначенный для получения амидированный полиен представляет собой АВ-400 (IVb), указанный в а) полиен, служащий в качестве субстрата, представляет собой очищенный или неочищенный пимарицин (IVa), и в котором экстракт, указанный в а) получают из штамма Streptomyces sp. RGU5.3.
67. Бесклеточный экстракт, необходимый для осуществления ферментативного способа по пп.63-66, основанного на применении продуцентов амидированных полиенов, отличающийся тем, что в нем используется активность амидотрансферазы, обладающей способностью превращать in vitro карбоксилированные полиены в их соответствующие амиды, и то, что он получен из штаммов-продуцентов амидированных полиенов.
68. Бесклеточный экстракт по п.67, отличающийся тем, что он получен из следующих микроорганизмов: S. diastaticus var. 108/743B, S. diastaticus var. 108/784 (DSM 17187) и/или Streptomyces sp. RGU5.3
69. Метилированные полиеновые производные, отличающиеся тем, что они относятся к группе, включающей следующие соединения: метилированный амфотерицин В, метилированный нистатин, метилированный пимарицин и метилированный кандицидин.
70. Применение метилированных полиенов по п.69 для получения биоцидных и фармакологических композиций.
71. Способ получения полиенового макролида, отличающийся тем, что осуществляют культивирование рекомбинантного микроорганизма по п.54 в условиях, обеспечивающих продуцирование указанного соединения, и при необходимости выделяют и очищают указанное соединение.
72. Способ по п.71, отличающийся тем, что полиеновый макролид выбирают из полиенового макролида, имеющего свободную карбоксильную группу, полиенового макролида, имеющего свободную амидную группу, и их смесей.
73. Способ по п.72, отличающийся тем, что полиеновый макролид, имеющий свободную карбоксильную группу, выбирают из амфотерицина В, нистатина, римоцидина, пимарицина, кандицидина и их смесей.
74. Способ по п.72, отличающийся тем, что полиеновый макролид, имеющий амидную группу, выбирают из соединения АВ-400 (IVb) и соединения формулы (I) по п.1.
75. Способ по п.74, отличающийся тем, что соединение формулы (I) выбирают из римоцидина В (I-1a), CE-108B (I-1b) и их смесей.
76. Способ по п.72, отличающийся тем, что полиеновый макролид выбирают из пимарицина (IVa), АВ-400 (IVb), римоцидина (IIa), римоцидина В (I-1a), CE-108 (IIb), CE-108B (I-1b) и их смесей.
77. Фармацевтическая композиция, отличающаяся тем, что она содержит соединение АВ-400 (IVb) необязательно в сочетании с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами.
78. Применение соединения АВ-400 (IVb) для получения лекарственного средства, предназначенного для предупреждения и/или лечения инфекции у человека или животного, вызываемой патогенными организмами, клеточные мембраны которых содержат эргостерин.
79. Применение по п.78, отличающееся тем, что патогенные для человека или животного организмы, клеточные мембраны которых содержат эргостерин, выбирают из паразитов и грибов.
80. Применение по пп.78 и 79 в медицине для лечения системной инфекции у человека или животного, вызываемой патогенными организмами, клеточные мембраны которых содержат эргостерин.