Вакцин против бруцеллеза: прошлое, настоящее и будущее

был удовлетворительным (К = 0,73), то можно рекомендовать применение ПЦР в качестве дополнительного метода диагностики бруцеллеза при абортах коров.

БИБЛИОГРАФИЯ

1. Alton G.G., Jones L.M., Angus R.D.,Verger J.М. Techniques for the brucellosis laboratory. INRA, Paris, 1988, 190.

2. Baily G.G., Krahn J.B., Drasar B.S., Soker N.G. Detection of Brucella melite-nsis and Brucella abortusby DNA amplification. J Trap Med Hyg, 1992, 95, 271—275.

3. Canant J.C.Jr. Diagnosis of the cause of bovine abortion. Mod Vet Prac, 1985, 66, 107—109.

4. Carter G.R.. Chengappa M.M. Essentials of veterinary bacteriology and mycology. 4th Edn, Lea & Febiger, Philadelphia. 1991. 284.

5. Cetinkaya В., OngorH., Muz A. et al. Detection of Brucella species DNA in the stomach content of aborted sheep foetuses by PCR. Vet Rec, 1999,144, 239—240.

6. Dennis S.M. Infectious bovine abortion: a practioner's approach to diagnosis. Vet Med Small Anim Clin. 1980, 75, 459-^166.

7. Dieffenbach C.W., Dragon E.A., DvekslerG.S. Setting up a PCR laboratory. In : PCR primer: a laboratory manual. Cold Spring Harbor Lab Press, NY, 1995.

8. Fekete A., Bantle J.A., Hailing S.M. Detection of Brucellaby polymerase chain reaction in bovine fetal and maternal tissues. J Vet Invest, 1992, 4, 79—83.

9. Gallien P., Dom C„ Alban G. et al. Detection of Brucella species in organs of

naturally infected cattle by polymerase chain reaction. Vet Rec, 1998,142, 512—514.

10. Genovez M.E., Scarcelli E„ Rojas S. et al. Isolamentos bacterianos de fetos abortados bovinos examinados no Instituto Biolygico de Sro Paulo, no pemodo de 1985 a 1992. Braz J Vet Res Anim Sei, 1993. 30, 107—112.

11. Holt J.G., Krieg N.R., Sneath P.H. et al. Bergey's manual of determinative bacteriology. 9th Edn, Williams & Wilkins, Baltimore, 1994.

12. Landis J.R., Koch G.G. The measure of observer agreement for categorical data. Biometrics, 1977, 33, 159—174.

13. Sambrook J., Fritsch E.F., ManiatisT. Molecular cloning: a laboratory manual. 2nd Edn., Cold Spring Harbor Lab Press, NY, 1989, 957.

SUMMARY

A. Cortez, E. Scarcelli, R.M. Soares, M.B. Heinemann, S.M. Sakamoto, M.E. Genovez, F. Ferreira, L.J. Richtze-nhain. Detection of Brucella DNA from aborted bovine foetuses by polymerase chain reaction. Aust Vet J, 2001, 79, 7, 500—501.

Considering that negative results in bacte-riological culture are no guarantee the absence of Brucella infection and that the estimated concordance between PCR and microbiological culture techniques was good, PCR may be an additional tool for the direct diagnosis of brucellosis from aborted bovine foetuses.

уцк619:616.98:615.371 Вакцины ПрОТив бруцеллеза: прошлое, настоящее и будущее

М.П. Альбертян, А.И. Федоров, М.И. Искандаров, Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии им. Я.Р. Коваленко

Ключевые слова: бруцеллез, вакцины, профилактика

Сокращения: Бр — бруцеллы; ВПБ — вакцина(ы) против бруцеллеза; КРС — крупный рогатый скот

Введение

За 100 с лишним лет, прошедших с открытия Бр, установили, что с вызываемой ими болезнью можно бороться двумя путями: созданием у восприимчивых животных с помощью вакцин иммунитета и посредством разрыва эпизоотической цепи инфекции за счет ликвидации источника заражения, который выявляют при проведении диагностических исследований. Выбраковку серопозитивных к Бр животных использовали для ликвидации инфекции в ряде развитых стран Европы и Америки. Такой метод борьбы с бруцеллезом эффективен только при высокой культуре животноводства. В регионах со слабым зоотехническим учетом поголовья общественного сектора, особенно на отгонных пастбищах, при интенсивной миграции животных между стадами практически невозможно наладить систему выявления инфицированных Бр животных. Часто уже через 2...3 дня после взятия крови для лабораторных исследований не удается найти животных, признанных серопозитивными. В этих условиях основным средством борьбы с бруцеллезом становится вакцинация.

Заражение животных 25...30 инфицирующими дозами Бр легко прорывает иммунитет, создаваемый даже самыми имму-ногенными вакцинами. Инфицированное животное при аборте и родах вместе с плодными водами выделяет в окружающую среду миллионы Бр, способных прорвать поствакцинальный иммунитет. Поэтому можно говорить лишь об относительном иммунитете животных, подвергшихся вакцинации.

Роль специфических антител в защите животных от Бр не ясна. Титр специфических агглютинирующих и комплемент-

связывающих антител при бруцеллезе не коррелирует с устойчивостью животных к заражению. Однако появление сывороточных агглютининов после вакцинации затрудняет дифференциацию больных и привитых животных.

Типы вакцин

Наибольшее распространение для иммунизации животных против бруцеллеза получили живые аттенуированные и инактивированные вакцины. Помимо цельноклеточных ВПБ разрабатываются препараты на основе антигенов, выделенных из Бр, рекомбинантные и ДНК-вакцины. Чтобы оценить преимущества и недостатки различных типов ВПБ, попытаемся представить себе идеальную вакцину против этой опасной болезни. Она должна:

• обеспечивать защиту, по меньшей мере, 70% привитых животных;

• быть безопасной в эпизоотическом и эпидемиологическом аспектах (отсутствие реверсии вакцинного штамма в исходные формы, обладающие повышенной вирулентностью, утрата способности вызывать аборт, передаваться другим животным и персистировать в организме привитых животных);

• не индуцировать образования агглютинирующих антител, что позволяет отличать привитых и инфицированных животных;

• не вызывать сенсибилизацию при ревакцинациях;

• не давать побочные эффекты (аборт, воспаление в месте введения и т.д.);

• быть технологичной для массового производства.

Живые ВПБ

Первые варианты живых ВПБ появились в1897 г. Их готовили из вирулентных штаммов Бр. 20-летний опыт применения таких препаратов в ряде стран (Германии, Великобритании, Голландии, Дании, США и Франции) показал, что они способствуют распространению инфекции [301.

Изучение свойств возбудителя выявило связь между его вирулентностью и иммуногенностью, а также морфологией. S-форма оказалась иммуногеннее R-формы, но в отличие от последней проявляла агглютиногенность. Свойства штаммов Бр в промежуточной (RS) форме определяются соотношением в них микробных клеток, находящихся в R- и S- формах. За обозримый исторический период было разработано большое количество живых аттенуированных вакцин из упомянутых морфологических форм Бр.

Многие вакцины из S-формы Бр (штаммов 68, 519, 70, 150 В. abortus, 89/23 В. melitensis и 61 В. suis) по ряду причин (нестабильности свойств и т.д.) применяли непродолжительное время.

В 1953 г. С. Элберг и В. Фауне аттенуировали S-штамм В. melitensis Rev-1. По остаточной вирулентности и иммуно-генности он превосходил известные в то время вакцинные штаммы Бр. Приготовленная из него вакцина нашла наибольшее применение для мелкого рогатого скота, хотя в ряде стран ею прививали КРС, а в Казахстане и Туркмении — верблюдов. У овец антительный иммунный ответ после первичной иммунизации Rev-1 сохраняется 6... 12 мес, а после ревакцинации — до 2 лет. Привитые этой ВПБ овцы сохраняют устойчивость к заражению в течение 1... 1,5 лет [32). В России в настоящее время ею пользуются редко. В медицине она не нашла применения, т.к. штамм Rev-1 патогенен для человека [3].

Совершенно по-другому сложилась судьба ВПБ из S-штамма 19 В. abortus, выделенного Дж. Бакком из молока абортировавшей коровы в 1924 г. Он имеет стабильные свойства, умеренную вирулентность и относительно высокую иммуногенность. ВПБ из него прививают все виды сельскохозяйственных животных. После ревакцинации этим препаратом специфические антитела сохраняются у КРС до 1...4 лет [29]. В последнее время животных стали иммунизировать (особенно при ревакцинации) пониженными дозами препарата, что позволило снизить длительность персистенции сывороточных агглютининов без ущерба для напряженности иммунитета [11, 31]. Через 1...2 года после двукратной иммунизации 25...43 % овец реагируют на аллерген [22]. У привитых животных серологический ответ сохраняется 3...4 года и зависит от кратности введения вакцины [6[. П.А. Вершилова, отбирая варианты штамма 19, получила штамм 19-В А с пониженной вирулентностью, нашедший применение в медицине. У привитых им людей антительный ответ сохраняется длительное время. Местные и общие поствакцинальные реакции при первичной иммунизации незначительны, чаще возникают у лиц, переболевших бруцеллезом. Однако у многократно прививавшихся данным препаратом людей возникают клинические, гематологические и иммунные сдвиги, напоминающие латентные и хронические формы бруцеллеза [2].

S-штамм 104-М В. abortus, выделенный Х.С. Котляровой из патологического материала, обладает большими иммуногенностью, остаточной вирулентностью и реактогенпостью, чем штамм 19 В. abortus [2]. Вследствие отсутствия аборто-генных свойств им можно прививать животных па любом сроке беременности |24|. Телки и овцы, однократно привитые такой вакциной, остаются невосприимчивыми к инфекции в течение года. Высокий титр антител регистрируют в первые 2...4 нед после вакцинации, а к 3 мес серопозитивны-ми остаются лишь отдельные особи. Эту ВПБ не удалось применить для иммунизации людей из-за высокой реакто-генности и остаточной вирулентности [2].

ВПБ из штаммов Бр в S-форме имеют выраженные антигенные свойства и стимулируют продолжительный иммунитет (8...24 мес). Однако их иммуногенность пропорциональна остаточной вирулентности и приживаемости, а многократное применение приводит к развитию патологических процессов. Кроме того, живые ВПБ из S-штаммов Бр, как

правило, обладают высокими агглютиногенной и сенсибилизирующей активностями, а также реактогенностью. Это затрудняет ревакцинацию и мешает дифференциации привитых и инфицированных животных. Поэтому перспективным направлением стала разработка ВПБ из неагглютино-генных R-штаммов и слабоагглютиногенных SR и RS-штам-мов. В лабораторных и производственных условиях испытывали большое количество вакцин из таких штаммов В. abortus (21, 7/26, 16, 16/4, 4004/1, В-1, В-8, 82, 75/79) и В. melitensis (56, К-24, Невский-12). Из слабоагглютиногенных вакцинных штаммов В. abortus в настоящее время широко применяют SR-штамм 82, выделенный K.M. Салмаковым в 1960 г. По иммуногенным свойствам препарат уступает ВПБ из штамма 19. Кроме того, сообщали о длительном (до 1 года) сохранении аллергических реакций на введение этой ВПБ, нестабильности свойств вакцинного штамма, а также его абортогенности для стельных коров [12, 17]. У большинства телят специфические антитела исчезают уже через 3...6 мес после иммунизации, но отдельные животные остаются серопозитивными в течение ряда лет [17].

За рубежом широко применяют американскую живую вакцину из неагглютиногенного штамма В. abortus RB-51, имеющего стабильные биологические и иммуногенные свойства.

Инактивированные ВПБ

В 1902 г. Б. Бэнг впервые использовал убитую культуру Бр для вакцинации животных. В нашей стране опыты по иммунизации людей и животных убитыми культурами начали проводить в первой половине XX в. Исследователи пытались найти оптимальный способ инактивации культур Бр, применяя с этой целью нагревание, обработку формалином, квасцами, хинозолом, кристалл-виолетом, фтористым натрием, иодом, карболовой кислотой и эфиром. Наиболее широкую известность получили полужидкая формалинизированная вакцина С.И. Муромцева и А.Н. Тронина [15], убитая фор-мол-квасцовая вакцина В.А.Николаева [16] и кристалл-виолет вакцина П.И. Жованника [9]. Они вызывали резко выраженную общую и местную реакции, а также длительную персистенцию в крови агглютининов, но длительность поствакцинального иммунитет не превышала 2...6 мес [1 ].

Во Франции широко применяли масляные адъювант-вакцины. Первым этот тип ВПБ предложил А.Д. Мак Эвен. Ему удалось посредством 20 пассажей трансформировать S-штамм Бр в R-форму. Полученный штамм 45/20 обладал высокими протективными свойствами, но легко реверсировал в исходную S-форму. Поэтому он не нашел применения в качестве живой вакцины [36], но был использован для приготовления инактивированных адъювант-вакцин (Дюфавак, Duphavac Phillips Duphar и др.). Фирма Рон Мерье изготавливает из него вакцину Abortox, предназначенную для иммунизации КРС. После ревакцинации она создает такой же иммунитет, как живая вакцина из штамма 19 [28J. Животных, привитых этим препаратом, не рекомендуют исследовать аллергическим тестом в течение 18 мес. Упомянутые адъю-вант-вакцины вызывают сильные местные и общие реакции: отек в месте введения, абсцессы, хромоту, угнетение и повышение температуры 110]. Они нашли широкое применение в зонах с небольшим распространением бруцеллеза, где с их помощью удавалось не только улучшить эпизоотическую ситуацию, но и ликвидировать заболевание.

Г. Ренокс предложил инактивированную вакцину из S-штамма 53 Н-38 В. melitensis. В качестве адъюванта в нее включали смесь парафинового масла с арлацелем А и майо-лином 2214. Результаты сравнительной оценки эффективности этого препарата и живой ВПБ из штамма 19 В. abortus противоречивы [10, 35]. После введения ВПБ из штамма 53 Н-38 высокий титр специфических антител сохраняется в течение двух лет, что делает невозможным проведение диаг-

ностических мероприятий. Эту ВПБ отличают не только высокая агглютиногенность, но и бурные местные реакции, сохраняющиеся до трех месяцев, а также повышенная сенсибилизирующая активность (у 4 % животных регистрируют аллергические реакции через 3 года после иммунизации) [34]. Такие свойства препарата сдерживают его применение — им пользуются только в регионах с широким распространением бруцеллеза.

В нашей стране разработаны 2 масляные адъювант-вакци-ны: из R-штамма KB 17/100 против бруцеллеза КРС и препарат ЭВАК против инфекционного эпидидимита баранов. Их преимущества и недостатки аналогичны зарубежным аналогам.

Французские ученые предложили оригинальный способ получения неагтлютиногенной адъювант-вакцины. Он основан па устранении агглютиногенной активности у инактиви-рованного высокоиммуногенного штамма Бр инкубацией с антисывороткой, имеющей активность не ниже 8000 МЕ/мл. Препарат предназначался для иммунизации телок, коз и овец [33]. Он не вызывал сенсибилизацию у привитых животных. Однако в регионах с острым течением инфекции эта ВПБ, несмотря на свои преимущества, не обеспечивала надежной защиты животных.

ВПБ, полученная конъюгацией убитых клеток штамма 19 В. abortus с эритроцитарным гемоглобином, имела выраженную протективную активность, сопоставимую с действием живых ВПБ [5|. Однако, используя этот метод, авторам не удалось избежать побочных явлений, свойственных живым вакцинам.

Таким образом, убитые ВПБ наряду со стабильностью свойств и безопасностью применения обладают такими недостатками, как агглютиногенность, сильная реактогенность и низкая иммуногенность. Компенсация последней повышением вводимой дозы препарата сопряжена с усилением двух других упомянутых негативных последствий вакцинации. Использование с той же целью масляных адъювантов повышает аллергенность и реактогенность убитых ВПБ.

Альтернативные типы ВПБ

Недостатки цельноклеточных ВПБ служат стимулом для разработки препаратов из антигенов Бр.

В Институте эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи разработана ВПБ из очищенного полисахаридного антигена Бр. Препарат прошел клинические испытания на людях [4], но не нашел широкого применения, т.к. в ряде случаев проявлял недостаточную иммуногенность, а также вызывал аллергические реакции и появление специфических антител, выявляемых диагностическими тестами.

Иммунопотенциированную вакцину на основе гликопро-теидного антигена Бр и иммуностимулятора применяли в течение ряда лет для иммунизации КРС. Она отличалась от предшествующих ВПБ тем, что не вызывала сенсибилизацию, была неагтлютиногенной и ареактогенной. К недостаткам препарата можно отнести недостаточную иммуногенность и необходимость двукратной вакцинации [8, 23].

Под руководством Р.В.Петрова разрабатывается принципиально иной подход к конструированию антиген-полимерных вакцинных препаратов, заключающийся в конъюгации необходимой антигенной детерминанты с полимерным иммуностимулирующим носителем. Основа создания таких вакцин при бруцеллезе была заложена работами, показывающими, что фрагменты природных антигенов могут защищать организм от последующего внедрения возбудителя [19]. При получении антиген-полимериой вакцины важным является выбор специфического протективного антигена, поскольку антигенный состав Бр очень велик и не все антигены имеют одинаковое значение в формировании иммунитета [7, 13]. Многие авторы рекомендуют использовать наиболее общие протективные антигены Бр [14, 18]. В Институте иммунологии МЗ РФ получены искусственные иммунизирующие комплек-

сы антигенов Бр с полимерным носителем полиоксидонием [ 19, 20]. Вакцина предназначена для профилактики бруцеллеза у людей. Испытания препарата дали обнадеживающие результаты, показав его безвредность, ареактогенность, неагглю-тиногенность. Кроме того, он не вызывает патологических изменений и сенсибилизацию организма. Входящий в его состав полимерный носитель обеспечивает высокий иммунный ответ организма на антиген Бр, сравнимый с протективным эффектом, индуцируемым живыми вакцинами [21].

В настоящее время в основном за рубежом развивается новое перспективное направление по созданию ДНК-ВПБ и рекомбинантных ВПБ. Уже выделен ряд генов, ответственных за синтез протективных антигенов. На их основе получены противобруцеллезные ДНК-вакцины, вызывающие защиту организма от экспериментального заражения Бр [27]. Препараты на основе рекомбинантного протеина гОшр31 наружной мембраны Бр индуцируют у мышей протективный иммунный ответ против В. оу1з и В. те1пеп818. Рекомбинант-ный протеин Юшр31 в неполном адъюванте Фрейнда стимулирует специфическую цитотоксическую активность Т-лим-фоцитов, лизирующих т \'Цп> макрофаги, инфицированные Бр [25, 26]. Данное направление в конструировании бруцеллезных вакцин находится на стадии развития, и результаты еще далеки от практического применения.

Выводы

Подводя итог анализу ВПБ, можно отметить, что:

• живые ВПБ из Б-штаммов Бр высокоиммуногенны, но вызывают сенсибилизацию и длительное сохранение специфических антител, что затрудняет дифференциацию иммунизированных и инфицированных животных;

• живые ВПБ из Я-, 8К- и КН-ппаммои неагглютиноген-ны или слабо агглютиногенны, но недостаточно иммуноген-ны, склонны к реверсии вирулентности, проявляют выраженную сенсибилизирующую активность;

• убитые ВПБ из Б-штаммов Бр реактогенны (из-за входящих в их состав адъювантов и высокой концентрации микробных клеток), проявляют сенсибилизирующую активность, а у привитых ими животных длительно сохраняются специфические антитела;

• убитые ВПБ из Я-штаммов Бр обладают стабильными свойствами, не имеют выраженной агглютиногенности, но проявляют высокие реактогенность и сенсибилизирующую активность;

• нецельноклеточные ВПБ не вызывают сенсибилизации, привитых ими животных легко отличить от инфицированных. Варианты ВПБ без иммуностимулирующего компонента слабо иммуногенны, а при использовании масляных адъювантов проявляют высокую реактогенность. Кроме того, их производство пока еще нетехнологично и.дорого, но это направление сейчас наиболее перспективно.

Заключение

Проблема профилактики бруцеллеза в медицинской и ветеринарной практике окончательно не решена. Хотя вакцинация является основной мерой борьбы с бруцеллезом, но существующие ВПБ в полной мере не позволяют его искоренить, а только ограничивают инцидентность. Поэтому по-прежнему актуальна разработка ВПБ, более эффективных по сравнению с существующими.

БИБЛИОГРАФИЯ

1. Вершилова П.А. Активная иммунизация против бруцеллеза//ЖМЭИ, 1950, 6, 3—9.

2. Вершилова П.А. Сравнительное определение вирулентности вакцинных штаммов В. abortus 19-ВА и 104-М предложенных для иммунизации людей// ЖМЭИ, 1959, 11, 41—44.

3. Вершилова П.А., Чернышова М.И., Князева Э.Н. Патогенез и иммунология бруцеллеза.—М.:Медгиз, 1974, 242—244.

4. Вершилова П.А., Драновская Е.А., Капинская Г.А. и др. Определение оптимальной прививочной дозы бруцеллезной химической вакцины//ЖМЭИ, 1976, 3, 21—26.

5. Голубинский Е.П., Пинигин А.Ф., Миринов С.П. и др. Некоторые аспекты конструирования конъюгированных противобруцеллезных вакцин. Тезисы докладов Всесоюзной научной конф. специалистов противочумных учреждений «Современные аспекты профилактики зоонозных инфекций».—Иркутск, 1984, 2, 91—93.

6. Глотов Г.Н. Эффективность иммунизации овец против бруцеллеза вакциной из штамма В. abortus 19. Автореф. дисс. канд. вет. наук. 1968, 6—15.

7. Григорьева Г.И., Игнатов П.Е. Факторы латогенности как протективные антигены при конструировании вакцин//Сельскохозяйственная биология, 1987, 12. 100—104.

8. Григорьева Г.И., Игнатов П.Е., Федоров А.И. и др. Изучение иммуноген-ных свойств бруцеллезной искусственной вакцины в условиях эксперимента. Тезисы докладов на Всесоюзной конференции «Актуальные вопросы профилактики бруцеллеза и организации медицинской помощи больным-..—Новосибирск, 24-25.10.1989, 193—195.

9. Жованник П.Н. Сравнительное исследование различных способов профилактической вакцинации против бруцеллеза. Научные труды Украинского ИЭВ, 1948, 16, 160—172.

10. Касьянова Л.Ф. Результаты сравнительного изучения реактогенных и иммуногенных свойств адъювант-вакцин из штаммов В. abortus 45/20 и В. melitensis 53-Н-38 на морских свинках и телках. Сборник научных трудов ВГНКИ вет. препаратов. Методы и средства диагностики, профилактики и лечения инфекционных болезней животных, 1985, 67—71.

11. Ким В.И.. Шумилов К.В.. Галлиев А.Р. и др. Результаты изучения уменьшенной дозы вакцины из штамма В. abortus 19 при иммунизации крупного рогатого скота. Инфекционные болезни животных и вопросы природной очаговости, 1989, 11, 67—71.

12. Косилов И.А., Димов C.K., Падалица А.Г. Противоэпизоотическая эффективность вакцины из штамма 82 в общем комплексе противобруцеллезных мероприятий. Эпизоотология, диагностика и меры борьбы с инфекционными болезнями. Сб. науч. трудов.—Новосибирск,1986, 37—43.

13. Ляшенко В.А., Воробьев А.А. Молекулярные основы иммуногенности антигенов,—М:Медицина, 1982. 229—233.

14. Мертвецов Н.П., Беклемишев А.Б., Савич И М. Современные подходы к конструированию молекулярных вакцин.—Новосибирск, Наука, 1987, 42— 46, 95—100.

15. Муромцев С.Н. Материалы по испытанию полужидкой формолвакцины против бруцеллеза//Ветеринария, 1944. 2—3, 8—10.

16. Николаев В.А. Итоги трехлетних полевых опытов применения убитых вакцин против бруцеллеза//Ветеринария, 1944. 10, 13.

17. Новицкий А.А., Тягунина Е.А. Иммунитет у морских свинок, привитых разными сериями вакцины из штамма 82 и различными антигенными популяциями одной серии этой вакцины. Сб. научных трудов Сибирского отделения ВАСХНИЛ, Новосибирск, 1984, 21—26.

18. Петров Р.В., Хаитов P.M. Искусственные антигены и вакцины.М: Медицина, 1988, 238—255.

19. Петров Р.В., Хаитов P.M., Атауллаханов Р.И. Иммуногенетика и искусственные антигены.—М: Медицина, 1983, 210—229.

20. Петров Р.В., Хаитов P.M., Игнатов П.Е. и др. Изучение иммуноген-ной активности искусственных бруцеллезных антигенов//ЖМЭИ, 1988, 3, 39—43.

21. Петров Р.В., Хаитов P.M., Некрасов А.В. и др. Разработка технологии получения и доклиническое изучение антиген-полимерной бруцеллезной вакцины//Аллергия, астма и клиническая иммунология, 2001, 1, 12—15.

22. Усманова Ф.И., Иванов Н.П. Аллергическая реактивность и иммунитет у овец после многократных прививок вакциной из штамма В. abortus 19. В сборнике «Иммунитет с-х животных», 1973, 73—75.

23. Филиппов Н.В. Управление эпизоотическим процессом бруцеллеза крупного рогатого скота в условиях повышенного риска. Автореферат дисс —С.Пб, 1998, 28—30.

24. Шумилов K.B., Альбертян М П., Клочков А.А. и соавт. Биологические свойства вакцинного штамма В. abortus 104-М. Труды ВИЭВ, 1983, 57, 42—47.

25. Baloglu S„ Boyle S.M., Vemulapalli R. et.al. Immune responses of mice to vaccinia virus recombinants expressing either Listeria monocytogenes partial listeriolysin or Brucella abortus ribosomal L7/L12 protein. Vet Microb. 2005, 109, 1—2, 11—7.

26. Cassataro J., Estein S.M., Pasquevich K.A. et. al. Vaccination with the recombinant Brucella outer membrane protein 31 or a derived 27-amino-acid synthetic peptide elicits a CD4+ T helper 1 response that protects against Brucella melitensis infection. Inf Immun, 2005, 73, 12, 8079—8088.

27. Commander N.. Thirlwall R., Miguel S. et al. DNA vaccines based upon bmei1249 and bmei1584 protect mice against challenge with B. melitensis 16M Brucellosis. 58 th Brucellosis Res Conf, Merida, Yucatan, Mexico, 1519.10.2005, 102.

28. Croft B.C. Brucellosis of cattle. Agriculture. 1972, 79, 2, 77—81.

29. Herr S„ Lasley A. Profiles of serological reactions following adult cow inoculation with standart dose B. abortus strain 19 vaccine. J S Afr Vet Assoc, 1985, 56, 2, 93—96.

30. Kitselman C. A study of Bang abortion live germ vaccine in a beef herd. Cornell Vet, 1933, 23, 309—311.

31. Odeon A., Campero C., Moreira A. et al. Revaccination with a reduced dose of Brucella abortus strain 19 vaccine of breeding cows in the Pampas region of Argentina. Rev Sci et Tech OIE, 1987. 6, 4, 1063—1071.

32. Pappous C., Hontou A. Serological control of sheep vaccined with Rew-1 brucella-vaccine. Bull Hellen Vet. Med. Soc., 1988, 39, 2, 126—130.

33. PiletC., Bonneau M., Balette L. Resultats obtenus a I aide du vaccine PB contre la brucellose. Les Cahiers de Med Vet, 1970, 39, 3, 159—177.

34. Plommet M. Progrès recents en immunisation contre I infection a Brucella abortus. Immunisation ches les bovis. Prev Vet Med, 1984. 2, 1—4, 205—214.

35. Plommet M., Renoux G., Philippon A. et al. Brucellose bovine experimentale. Ann Rech Vet, 1970, 1, 2, 189—231.

36. Waghella S., Philpott M. Serological respons of cattle in Kenya vaccinated with a killed B. abortus strain 45/20 adjuvant vaccine. Vet Res, 1976, 99, 25/26, 505—507.

SUMMARY

M.P. Albertian, A.I. Fedorov, M.I. Iskandarov. Vaccines against brucellosis : past, present and future.

Infections of B. abortus, B. melitensis & B. suis remains a significant animal & human health threat in many areas of the world. The problem of brucellosis farm animals remains unresolved despite decades of regulatory efforts worldwide. Although vaccination is probably the most economic control measure, administration of currently available vaccines alone is not sufficient for elimination of brucellosis in any host species.

НАША СПРАВКА

Живые вакцины против бруцеллеза из R-штаммов

Редактируя статью М.П. Альбертяна и соавт., которая, безусловно, является одним из наиболее полных обзоров по вакцинопрофилактике бруцеллеза, когда-либо публиковавшихся в отечественных периодических изданиях, мы заинтересовались вопросом применения живых вакцин из R-штаммов. В выводах к статье авторы пишут о том, что R-, SR- и RS-штаммы Бр недостаточно иммуногенны, склонны к реверсии вирулентности, проявляют выраженную сенсибилизирующую активность. Как исключение они упоминают американскую живую вакцину из неагглютиногенного штамма В. abortus RB51, имеющего стабильные биологические и иммуногенные свойства. Поскольку этим информация о данной вакцине ограничивается, то мы решили, что читателям будет интересно больше узнать об этом препарате.

RB51 является спонтанным R-мутантом, полученным американскими бактериологами в результате многократных пересевов штамма В. abortus 2308 на питательной среде с ри-фамиицином и пенициллином. При селекции штамма RB51 пользовались кристалл виолетовым и акрифлавиновым тестами [5]. Полисахарид не входит в состав его липополисаха-рида О, но в небольшом количестве находится в цитозоле бактериальных клеток.

В опытах на мышах установили, что новый штамм не так длительно гтерсистирует в селезенке, как известный вакцинный штамм 19, даже если его инокулировали животным в 100 раз более высокой дозе, чем последний. При пероральной вакцинации в очень высоких дозах и после подкожного введения в дозе 5 х 10'колониеобразующих единиц вакцина создавала протективный имумнитет у большей части привитого КРС и не вызывала аборта у стельных коров и овцематок, а также нарушения репродуктивных качеств у быков. При других методах введения вакцины (в т.ч. внутривенном) в той же дозе