Эффекты и механизмы гемопоэзстимулирующего действия иммобилизированных олигонуклеотидов при цитостатической миелосупресии

лирования гена RARp2 в цирДНК плазмы и цирДНК, связанных с клеточной поверхностью, значимо выше у больных НМРЛ, чем в норме (3589 коп/мл и 1068 коп/мл - в цирДНК плазмы, 7620 коп/мл и 1083 коп/мл - в связанных цирДНК, р=0,003 и р=0,001 соответственно). После удаления опухоли на этапе оперативного лечения больных НМРЛ в 93 % случаев обнаружено существенное снижение уровня метилирования гена RARp2 в цирДНК плазмы и цирДНК, связанных с клеточной поверхностью, по сравнению с его уровнем до лечения (439 ± 52 коп/ мл и 547 ± 62 коп/мл соответственно, р<0,001), до уровня показателя практически здоровых лиц, не имеющих онкологических заболеваний.

Выводы. Повышенный уровень метилирования гена RARp2 во фракциях цирДНК крови

обусловлен присутствием в организме опухолевой ткани. Снижение уровня до нормального является результатом успешной резекции опухоли у большинства пациентов, что свидетельствует о потенциальной возможности использования этого показателя для оценки эффективности проводимой комбинированной терапии. Определение уровня метилирования гена RARp2 в цирДНК крови у больных НМРЛ через 1 мес после операции и затем каждые 3 мес в процессе наблюдения позволит определить значимость выявленных количественных изменений для мониторинга течения заболевания.

Работа поддержана грантом РФФИ (№ 09-04-01334-а), ФЦП «Научные и научно-

педагогические кадры инновационной России», Госконтракт №П256.

ЭФФЕКТЫ и механизмы гемопоэзстимулирующего действия иммобилизированных олигонуклеотидов ПРИ ЦИТОСТАТИЧЕСКОЙ МИЕЛОСУПРЕСИИ

А.М. ПОПОНИНА, Т.В. АНДРЕЕВА, Е.С. ХМЕЛЕВСКАЯ

НИИ фармакологии СО РАМН, г. Томск

Актуальность. Перспективным лекарственным средством, оказывающим стимулирующее влияние на различные ростки кроветворения при отсутствии токсического воздействия, являются препараты олигонуклеотидов. Однако низкая доставка олигонуклеотидов в клетку, быстрая деградация нуклеазами в лизосомах во многом ограничивают их клиническое применение. Возможным решением данной проблемы является использование транспортных систем, способствующих проникновению нуклеотидного материала через гистогематические барьеры и клеточные мембраны. Пегилированные нуклеиновые кислоты более активно захватываются клетками, чем неиммобилизированные молекулы, при этом полимер повышает растворимость и время по-лувыведения нуклеотидного материала.

Целью исследования являлось изучение гемопоэзстимулирующей активности препарата иммобилизированных олигонуклеотидов на моделях цитостатических миелосупрессий.

Материал и методы. Эксперименты выполнены на 520 мышах линии CBA/CaLac. Ци-

тостатическую миелосупрессию моделировали однократным внутрибрюшинным введением алкилирующего агента циклофосфана в дозе 200 мг/кг или фторпиримидинового антиметаболита 5-фторурацила в дозе 83 мг/кг. На следующий день после введения цитостатика в течение 7 дней мышам перорально вводили препарат иммобилизированных олигонуклеотидов (имОН) в дозах 50, 100, 150, 200 и 250 мг/кг (ООО «Саентифик фьючер менеджмент», г. Новосибирск). На 2-13-е сут после цитостатического воздействия стандартными гематологическими и культуральными методами определяли показатели периферической крови и костного мозга. Математическую обработку результатов производили с применением стандартных методов вариационной статистики.

Результаты. Скрининговые эксперименты позволили установить, что в условиях цитоста-тической миелосупрессии, вызванной введением циклофосфана, препарат имОН вызывал увеличение общего количества лейкоцитов в периферической крови во всех исследуемых до-

зах. Наиболее выраженный и длительный эффект наблюдался при использовании имОН в дозе 200 мг/кг. Обнаруженная высокая активность имОН в отношении лейкоцитов периферической крови предопределила изучение действия препарата на костномозговое кроветворение. Так, имОН повышали содержание незрелых нейтрофиль-ных гранулоцитов в костном мозге на 8-е сут на 47,2 %, а их зрелых форм на 4-е сут - на 15,3 %, способствовали накоплению эритрокариоцитов на 2, 4-е сут исследования. В противоположность этому, содержание лимфоидных клеток в опыте снижалось. Эффективное использование гемостимуляторов в клинической практике невозможно без понимания механизма их действия. В наших исследованиях курсовое применение имОН на фоне развития миелосупрессии стимулировало формирование КОЕ-ГМ и КОЕ-Э. Одновременно отмечалось увеличение индекса

созревания эритроидных и гранулоцитарно-макрофагальных предшественников. Кроме того, в ходе эксперимента было выявлено, что имОН снижали уровень эритропоэтической активности в супернатантах неприлипающих миелокариоци-тов на 3-и сут после цитостатического воздействия и не влияли на продукцию КСА клетками кроветворного микроокружения.

Выводы На модели цитостатической миелосупрессии, вызванной введением циклофосфана и 5-фторурацила, было показано, что при цитостатических воздействиях имОН ускоряют процессы регенерации костномозгового эритро-и гранулоцитопоэза. В периферической крови наблюдается увеличение количества нейтро-фильных гранулоцитов. Механизм действия имОН связан с увеличением функциональной активности эритроидных и гранулоцитарно-макрофагальных предшественников.

ТРАНСТОРАКАЛЬНАЯ БИОПСИЯ В ДИАГНОСТИКЕ объемных образований легких

Ю.А. РАГУЛИН, В.С. УСАЧЕВ

ФГБУ «Медицинский радиологический научный центр» Минздравсоцразвития РФ, г. Обнинск

Актуальность. Внедрение высокотехнологичных аппаратных методик расширило возможности методов визуализации в диагностике патологии легких. Тем не менее морфологическая верификация остается основой формирования онкологического диагноза. В настоящее время для адекватной диагностики и определения плана лечения необходимо достаточное количество материала для определения гистологического подтипа опухоли и проведения молекулярногенетических исследований.

Цель исследования - определение диагностической ценности трансторакальной биопсии образований легких под контролем компьютерной томографии.

Материал и методы. В клинике МРНЦ с 2005 по 2010 г. трансторакальная пункционная биопсия под контролем КТ выполнена 93 больным, возраст от 25 до 86 лет (в среднем 60 лет). В 4 случаях проведение пункции не удалось и морфологический материал не был получен (у 3 по причине развившегося пневмоторакса, не

позволившего локализовать иглу в опухоли, у 1 в связи с плотной консистенцией опухоли и ее малым размером). 31 больному выполнена тонкоигольная аспирационная биопсия (диаметр иглы 20G), 58 больным - трепанационная биопсия иглой, представляющей собой троакар, внутри которого проводится стилет с расщепленным концом, позволяющий захватить кусочек ткани, достаточный для гистологического исследования (диаметр 14G, длина 100 мм). Также данная техника выполнения пункции позволяет получать материал для цитологического исследования в виде отпечатков опухолевой ткани или смывов иглы.

Результаты. Размер пунктируемых образований составил от 10^10 мм до 80^95 мм (в среднем - 36,6x45,4 мм). Субплеврально расположенные образования были у 24 (25,8%) больных, на расстоянии 1-3 см от грудной стенки - 53 (57 %), на расстоянии более 4 см -16 (17,2 %). Диагноз злокачественной опухоли легкого был поставлен у 65 больных на осно-