Анализ частых мутаций в гене CFTR в Узбекистане

2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue

Иммунологические проблемы в педиатрии Immunological problems in pediatrics

и повышен CD95+ (Р < 0,01). Число CD16+, CD20+ и CD23+ в периферической крови повышено (Р < 0,05). Концентрация IgG и IgА снижена (Р < 0,05), а ^М и ^Е — повышена (Р < 0,5). Уровень С3 компонента комплемента выше контрольных значений (Р < 0,01), а уровень лактоферина выше значений контрольной группы (Р < 0,01) при ОБ и ниже у детей с ХОБ (Р < 0,05). При ОБ и ХОБ уровень Ш-1р, Ш-6, Ш-8 был выше значений контрольной группы, а уровень ниже (Р < 0,01). У детей с хроническим бронхитом на фоне паразитарной инвазии снижен уровень Т-лимфоцитов и субпопуляций (CD4+ и CD8+). На фоне сниженного содержания Т-лимфоцитов и его субпопуляций уровень киллерной активности, содержание В-лимфоцитов, CD23+ клеток и лимфоцитов с маркером апаптоза (CD95+) достоверно снижены (Р < 0,01). При этом наблюдалось сниженное содержание лимфоцитов с маркером ранней активации (CD25+) (Р < 0,05). Уровень IgG в 1,5 раза, а уровень IgA — в 1,4 раза был ниже контрольных значений (Р < 0,01). Концентрация ^М была в пределах контрольных значений, наблюдалась гиперпродукция общего ^Е (Р < 0,001). Повышенный уровень С3 компонента комплемента и лактофер-рина характерно для паразитарной инвазии. У детей с ХБ на фоне паразитарной инвазии уровень изученных цитокинов достоверно повышен, как провоспалительных (ГЬ-1р, ГЬ-6, Ш-8) так и противовоспалительного — Ш-4, (Р < 0,05-0,01). При этом наблюдается повышенный уровень ШЫу.

Астматический бронхит — инфекционно-аллергиче-ское заболевание нижних дыхательных путей, характеризующееся гиперсекрецией слизистой, отеком стенок, спазмом крупных и средний бронхов. При астматическом бронхите, в отличие от бронхиальной астмы, обычно не возникает приступов выраженного удушья. Тем не менее, в пульмонологии астматический бронхит расценивается как состояние предастмы.

Астматический бронхит имеет полиэтиологическую природу. При этом непосредственными аллергенами могут выступать как неинфекционные агенты, так и инфекционные факторы (вирусные, грибковые, бактериальные, паразитарные).

В состоянии иммунной системы детей с асматическим бронхитом наблюдаются изменения, сопровождающиеся снижением общего пула CD3+, CD4+ и CD8+ (Р < 0,010,05). Киллерная активность (CD16+) и лимфоциты ранней активации (CD25+) достоверно снижены (Р < 0,01). Наблюдается повышение уровней CD20+-, CD23+ и CD95+ лимфоцитов (Р < 0,01-0,05). При изучении гуморального звена были выявлены нарушения в синтезе иммуноглобулинов, которые выражались сниженным уровнем IgG и гиперпродукцией IgA, ^Е (Р < 0,01-0,05). Выявлен сниженный синтез СЗ-компонента комплемента и лактоферрина (Р < 0,05). Наблюдалась гиперсекреция всех изученных цитокинов.

Таким образом, механизм формирования воспаления при бронхитах напрямую связан с дисбалансом и изменением функциональной активности параметров иммунной системы. Слизистые респираторного тракта постоянно подвергаются воздействию разнообразных чужеродных веществ, аллергенов и микроорганизмов. Барьерная функция слизистых, заключающаяся в предотвращении фиксации и проникновения патогенных микроорганизмов во внутреннюю среду организма, осуществляется комплексом защитных механизмов: барьерной механической функцией слизистых, рецепторами врожденного и адаптивного иммунитета

В целом снижение иммунокомпетентности при брон-холегочных заболеваниях, связанных с сочетанным действием патогенов обусловлено следующими основными механизмами:

— перераспределением иммунокомпетентных клеток с опустошением зон, обеспечивающих наиболее благоприятные условия для развития оптимального иммунного ответа (например селезенка, лимфотические узлы);

— активацией различных органных систем (генов, ре-цепторного аппарата клеток, сигнальных путей), сопровождающихся изменением функциональной активности иммунокомпетентных клеток;

— усилением запрограммированной гибели клеток (апоптоз) под действием различных факторов.

АНАЛИЗ ЧАСТЫХ МУТАЦИЙ В ГЕНЕ СПВ В УЗБЕКИСТАНЕ

Файзуллаева Н.Я., Хегай Т.Р.

Республиканский научный центр иммунологии Министерства здравоохранения РУз, Ташкент, Узбекистан

Муковисцидоз (МВ, СБ) — аутосомно-рецессивное заболевание, обусловленное мутациями в гене CFTR, му-ковисцидозного трансмембранного регулятора проводимости. Ген CFTR расположен на длинном плече хромосомы 7 в области q31, имеет протяженность около 250 т.п.н. и включает 27 экзонов. К настоящему времени выявлено более 1800 мутаций и около 250 полиморфизмов в гене CFTR. Распределение и частота CFTR-мутаций значительно различаются в разных странах и этнических группах. Наиболее распространенной из CFTR-мутаций, приводящих к МВ, у европейцев является мутация F508del.

Цель. Анализ распределения частот наиболее распространенных мутаций в гене CFTR в Узбекистане.

Молекулярно-генетический анализ проведен у 58 больных МВ детей из неродственных семей в возрасте от 1,5 месяцев до 16 лет. Контрольную группу составили 60 здоровых детей. Генотипирование мутаций (CFTR dele2,3(21kb), СБТК_Б508ас1, CFTR_G542X, W1282X, CFTR_N1303K, CFTR_2143delT, CFTR_2184insA, CFTR_3849+10kbC > ^ осуществлялось методом RT-PCR с использованием реагентов «НПО ДНК-Технология» и «Синтол» (г.Москва, РФ), анализ кривых плавления и по «конечной точке», качественный анализ. Материал для исследования: Периферическая кровь. Выделение ДНК из лейкоцитов венозной крови человека проводилось модифицированным спиртово-солевым методом.

Статистический анализ данных проводили при помощи программы R и Statgraphics Р1ш 5,0. Были изучены 8 наиболее частых мутаций гена CFTR ассоциированных с муковисцидозом. Анализ генетической ассоциации гена CFTR на модели «случай—контроль» показал, что среди детей с муковисцидозом наиболее частой и достоверной была мутация CFTR_F508del, с показателем OR = 13,73 при р = 0,001. Другой рисковой мутацией была установлена CFTR_N1303K: OR = 14,18 при р = 0,01. Остальные шесть мутаций выявлены не были ни в одном случае. Таким образом, показана достоверная роль 2-х мутаций гена CFTR в развитии муковисцидоза.