КОНТЕЙНЕР ДЛЯ ИНКУБАЦИИ И ОТМЫВКИ БИОЧИПА

Полезная модель относится к области медицины, но также может быть использована в ветеринарии и биологии.
Известно устройство для инкубации и отмывки биочипа, используемое при выполнении исследований клеточных суспензий (см. А.В.Шишкин, И.И.Шмырев, С.А.Кузнецова, Н.Г.Овчинина, А.А.Бутылин, Ф.И.Атауллаханов, А.И.Воробьев «Иммунологические биочипы для параллельного определения поверхностных антигенов и морфологического исследования клеток», Биологические мембраны, 2008, том 25, №4, с277-284), взятое в качестве прототипа и представляющее собой чашку Петри или иную емкость, на дне которой закреплен биочип.
Недостатками известного устройства являются продолжительное время проведения анализа, обусловленное невозможностью ускоренного осаждения клеток на поверхность биочипа путем центрифугирования, а также необходимость выполнения точных манипуляций при закреплении (наклеивании) биочипа и его извлечении, повышающих риск повреждения поверхности биочипа и искажения результатов анализа.
Задачей заявленной полезной модели является сокращение длительности выполнения анализа.
Поставленная задача решается за счет того, что согласно полезной модели, в контейнере для инкубации и отмывки биочипа содержащем корпус в котором размещен биочип, корпус снабжен приспособлением для крепления в центрифуге, а также съемной вставкой с отверстием, сечение которого соответствует форме и размерам биочипа.
Корпус выполнен разъемным
Корпус снабжен съемной крышкой
Корпус снабжен платформой на которой располагается биочип.
Дно корпуса является прозрачным.
Соединение биочипа со съемной вставкой выполнено герметичным.
Приспособление для крепления в центрифуге выполнено съемным.
Устройство снабжено балансировочным приспособлением, включающим дополнительный съемный груз и приспособление для его крепления
Использование заявленной полезной модели снижает длительность выполнения анализа. Это достигается за счет ускоренного осаждения клеток на поверхность биочипа путем центрифугирования. За счет более удобного крепления биочипа в корпусе снижается риск повреждения биочипа при его закреплении в устройстве и извлечении из него. Наличие съемной вставки, внутреннее сечение которой соответствует форме и размерам биочипа позволяет снизить расход клеточной суспензии и использовать для анализа меньшее количество биологического материала. Для работы с биочипами, имеющими разную форму и размеры могут использоваться разные вставки отверстия которых имеет необходимые для этого форму и размеры. За счет использования съемной крышки исключается разбрызгивание жидкости. Выполнение съемным приспособления, предназначенного для крепления устройства в центрифуге, делает эксплуатацию устройства более удобной. Для крепления устройства в разных моделях центрифуг могут быть использованы крепежные приспособления разной формы и размеров. Наличие балансировочного устройства, включающего дополнительный груз и приспособление для его размещения, облегчает процесс уравновешивания ротора центрифуги при размещении в ней нескольких устройств.
Полезная модель поясняется чертежом, на котором
на фиг.1 представлен общий вид устройства (в разрезе).
на фиг.2 представлен биочип (вид сверху)
Контейнер для инкубации и отмывки биочипа (фиг.1) состоит из корпуса, который выполнен разъемным и имеет основную секцию 1, верхнюю секцию 2 и нижнюю прижимающую секцию 3. Дно корпуса образовано платформой 4, имеющей выступ 5, на котором располагается биочип 6. Платформа 4 выполнена из прозрачного материала. В корпусе размещена съемная вставка 7, представляющая собой цилиндр со сквозным отверстием 8, форма и размеры сечения которого соответствуют форме и размерам биочипа 6 и выступа 5. Съемная вставка 7 размещена в корпусе таким образом, что выступ 5 платформы 4 с размещенным на нем биочипом 6, входит в отверстие 8. Герметизацию соединения съемной вставки 7 и платформы 4 обеспечивает эластичная прокладка 9. Герметизацию контакта краев биочипа 6 и съемной вставки 7 обеспечивает прокладка 10. На верхней секции 2 устройства крепится муфта 11 и гайка 12, обеспечивающие крепление устройства в роторе 13 центрифуги. К нижней прижимающей секции 3 корпуса с помощью резьбового соединения крепится короб 14, снабженный завинчивающейся пробкой 15 и самогерметизирующимся отверстием 16, заполненным резиной. В коробе 14 располагается груз 17, необходимый для уравновешивания ротора центрифуги при использовании нескольких устройств. Помимо функции балансировочного приспособления короб 14 способен выполнять функцию адаптера в случае крепления устройства не непосредственно на роторе центрифуги, а в центрифужном стакане. На верхней секции 2 устройства крепится съемная пробка 18. Биочип 6 (фиг.2) представляет собой твердую подложку 19, на которой в строго определенных участках (пятнах) 20 иммобилизованы антитела, специфичные к поверхностным антигенам клеток. Пятна 20 отделены друг от друга фоновыми участками 21, не содержащими иммобилизованных антител.
Устройство работает следующим образом.
Контейнер с закрепленным в нем биочипом заполняют клеточной суспензией и помещают на центрифужные весы. Доводят вес контейнера до нужной величины. В том случае, если вес заполненного суспензией контейнера меньше необходимого, а уравновешивание за счет добавления дополнительного объема суспензии является нежелательным, необходимый дополнительный груз помещают в короб 14. Твердый или сыпучий груз помещают в короб 14 через отверстие, которое закрывают завинчивающейся съемной пробкой 15. В качестве груза 17 также может быть использована жидкость, которую вводят в короб 14 с помощью шприца через самогерметизирующееся отверстие 16. Короб 14 привинчивают к секции 3 корпуса контейнера. Контейнер закрепляют в центрифуге. При этом крепление контейнера осуществляют непосредственно на роторе 13 с помощью гайки 12 и муфты 11. Если конструкция ротора центрифуги не позволяет осуществить такое крепление контейнера, его закрепляют в центрифужном стакане. В этом случае короб 14 выполняет функцию адаптера. При необходимости контейнер закрывают съемной крышкой 18, исключающей разбрызгивание жидкости. Осуществляют центрифугирование устройства в течение необходимого времени. При этом клетки оседают на поверхность биочипа. Клетки, имеющие на своей поверхности соответствующие антигены оказываются связанными в участках 20 с иммобилизованными антителами. После завершения центрифугирования снимают крышку 18 и короб 14. Из корпуса контейнера сливают надосадочную жидкость и отмывают биочип от не связавшихся с антителами клеток. Для этого наливают в корпус контейнера отмывочный раствор и сразу же сливают его. Данную манипуляцию проводят несколько раз. Отмывка также может быть выполнена с использованием шейкера. Если подложка 19 биочипа 6 является прозрачной, качество контроля отмывки оценивают с помощью микроскопии, при этом используют инвертированный микроскоп с длиннофокусными объективами. Критерием качества отмывки является отсутствие клеток в области фоновых участков 21. Если это необходимо, после завершения отмывки осуществляют фиксацию и окрашивание связанных с биочипом 6 клеток, для чего в заданной последовательности в контейнер наливают соответствующие жидкости и осуществляют инкубацию с ними в течение необходимого времени. Затем контейнер разбирают и извлекают биочип 6, который подвергают дальнейшим исследованиям.