АНТИТЕЛА К ИНТЕГРИНУ АЛЬФА-2 И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Гуманизированное антитело к интегрину α2, содержащее вариабельную область тяжелой цепи, вариабельную область легкой цепи, константную область легкой цепи человека и вариантную константную область тяжелой цепи IgG1 человека, при этом вариантная константная область тяжелой цепи IgG1 человека включает по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно константной области тяжелой цепи IgG1 человека исходного гуманизированного антитела к интегрину α2 и при этом данное антитело проявляет измененную эффекторную функцию по сравнению с исходным гуманизированным антителом к интегрину α2.
2. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.1, где вариантная константная область тяжелой цепи IgG1 человека является изотипическим вариантом, содержащим CH1 из IgG1 человека, шарнирный участок из IgG1 человека и Fc-область из IgG3 человека.
3. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.1, где вариантная константная область тяжелой цепи IgG1 человека является изотипическим вариантом, содержащим CH1 из IgG3 человека, шарнирный участок из IgG1 человека и Fc-область из IgG3 человека.
4. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.1, где вариантная константная область тяжелой цепи IgG1 человека содержит вариантную Fc-область IgG1 человека, которая содержит по меньшей мере одну аминокислотную модификацию относительно Fc-области IgG человека исходного гуманизированного антитела к интегрину α2.
5. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.4, где аминокислотная модификация содержит аминокислотную замену в аминокислотном положении, выбранном из группы, состоящей из 269, 298 и 324, где аминокислотное положение каждого члена группы указано с использованием системы нумерации, изложенной в Kabat.
6. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.4, где аминокислотная модификация содержит аминокислотную замену, выбранную из группы, состоящей из E269D, S298A и S324N, где аминокислотное положение каждого члена группы указано с использованием системы нумерации, изложенной в Kabat.
7. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.4, где аминокислотная модификация содержит комбинацию аминокислотных замен в аминокислотном положении, выбранном из группы, состоящей из 269/298, 269/324, 298/324 и 269/298/324, где аминокислотное положение каждого члена группы указано с использованием системы нумерации, изложенной в Kabat.
8. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.4, где аминокислотная модификация содержит комбинацию аминокислотных замен, выбранных из группы, состоящей из E269D/S298A, E269D/S324N, S298A/S324N и E269D/S298A/S324N, где аминокислотное положение каждого члена группы указано с использованием системы нумерации, изложенной в Kabat.
9. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.1, где указанная эффекторная функция является комплементзависимой цитотоксичностью (CDC) и/или антителозависимой клеточно-опосредованной цитотоксичностью (ADCC).
10. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.1, где гуманизированное антитело к интегрину α2 проявляет улучшенную комплементзависимую цитотоксичность (CDC) по сравнению с исходным гуманизированным антителом к интегрину α2.
11. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.10, где гуманизированное антитело к интегрину α2 проявляет антителозависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность (ADCC), эквивалентную исходному гуманизированному антителу к интегрину α2.
12. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.4, где аминокислотная модификация является аминокислотной заменой, выбранной из группы, состоящей из S324N, S298A/S324N и E269D/S298A/S324N, при этом антитело проявляет улучшенную комплементзависимую цитотоксичность (CDC) по сравнению с исходным гуманизированным антителом к интегрину α2.
13. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.12, где гуманизированное антитело к интегрину α2 проявляет антителозависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность (ADCC), эквивалентную исходному гуманизированному антителу к интегрину α2.
14. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.4, где аминокислотная модификация является аминокислотной заменой, выбранной из группы, состоящей из E269D, S298A, S298A/S324N и E269D/S298A/S324N, где антитело проявляет улучшенную антителозависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность (ADCC) по сравнению с исходным гуманизированным антителом к интегрину α2.
15. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.4, где аминокислотная модификация является аминокислотной заменой S298A/S324N или E269D/S298A/S324N, при этом антитело проявляет улучшенную комплементзависимую цитотоксичность (CDC) и улучшенную антителозависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность (ADCC) по сравнению с исходным гуманизированным антителом к интегрину α2.
16. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.2, где гуманизированное антитело к интегрину α2 содержит вариантную константную область тяжелой цепи IgG1 человека, содержащую SEQ ID NO: 35.
17. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.3, где гуманизированное антитело к интегрину α2 содержит вариантную константную область тяжелой цепи IgG1 человека, содержащую SEQ ID NO: 36.
18. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.4, где гуманизированное антитело к интегрину α2 содержит вариантную Fc-область IgG1 человека, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 37-43.
19. Гуманизированное антитело по любому из пп.1-18, где вариабельная область тяжелой цепи содержит HCDR1, содержащий аминокислотную последовательность GFSLTNYGIH (SEQ ID NO: 1), HCDR2, содержащий аминокислотную последовательность VIWARGFTNYNSALMS (SEQ ID NO: 2), и HCDR3, содержащий аминокислотную последовательность ANDGVYYAMDY (SEQ ID NO: 3).
20. Гуманизированное антитело по любому из пп.1-18, где вариабельная область легкой цепи содержит LCDR1, содержащий аминокислотную последовательность SAQSSVNYIH (SEQ ID NO:4), LCDR2, содержащий аминокислотную последовательность DTSKLAS (SEQ ID NO: 5), и LCDR3, содержащий аминокислотную последовательность QQWTTNPLT (SEQ ID NO: 6).
21. Гуманизированное антитело по любому из пп.1-18, где вариабельная область тяжелой цепи содержит HCDR1, содержащий аминокислотную последовательность GFSLTNYGIH (SEQ ID NO: 1), HCDR2, содержащий аминокислотную последовательность VIWARGFTNYNSALMS (SEQ ID NO: 2), и HCDR3, содержащий аминокислотную последовательность ANDGVYYAMDY (SEQ ID NO: 3); и/или
где вариабельная область легкой цепи содержит LCDR1, содержащий аминокислотную последовательность SAQSSVNYIH (SEQ ID NO: 4), LCDR2, содержащий аминокислотную последовательность DTSKLAS (SEQ ID NO: 5), и LCDR3, содержащий аминокислотную последовательность QQWTTNPLT (SEQ ID NO: 6).
22. Гуманизированное антитело по п.1, где вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7.
23. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.22, где вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7, в которой (a) в положении 71 находится Lys, (b) в положении 73 находится Asn, (c) в положении 78 находится Val или (d) любая комбинация (a)-(c).
24. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.1, где вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 8-19.
25. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.1, где вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 17.
.
26. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по любому из пп.22-25, где вариабельная область тяжелой цепи дополнительно содержит FW4-область, содержащую аминокислотную последовательность WGQGTLVTVSS (SEQ ID NO: 20)
27. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.1, где вариабельная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21.
28. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.27, где вариабельная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 21, в которой (a) в положении 2 находится Phe, (b) в положении 45 находится Lys, (c) в положении 48 находится Tyr или (d) любая комбинация (a)-(c).
29. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.1, где вариабельная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 22-33.
30. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.1, где вариабельная область легкой цепи содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30.
31. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по любому из пп.27-30, где вариабельная область легкой цепи дополнительно содержит FW4-область, содержащую аминокислотную последовательность FGQGTKVEIK (SEQ ID NO: 34).
32. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.1, где антитело содержит тяжелую цепь, содержащую SEQ ID NO: 47, и легкую цепь, содержащую SEQ ID NO: 56.
33. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.1, где антитело содержит тяжелую цепь, содержащую SEQ ID NO: 48, и легкую цепь, содержащую SEQ ID NO: 56.
34. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.1, где антитело содержит тяжелую цепь, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 49-55, и легкую цепь, содержащую SEQ ID NO: 56.
35. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая гуманизированное антитело к интегрину α2β1 по любому из пп.1-34.
36. Вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п.35.
37. Клетка-хозяин, содержащая нуклеиновую кислоту по п.35 или вектор по п.36.
38. Композиция, содержащая гуманизированное антитело к интегрину α2 по любому из пп.1-34 и фармацевтически приемлемый носитель.
39. Способ лечения нарушения, связанного с интегрином α2β1, у субъекта, при этом способ включает введение субъекту терапевтически эффективного количества антитела к интегрину α2 по любому из пп.1-34 или композиции по п.38.
40. Способ по п.39, где нарушение, связанное с интегрином α2β1, выбирается из воспалительного заболевания, аутоиммунного заболевания и заболевания, характеризующегося аномальным или повышенным ангиогенезом.
41. Способ по п.39, где нарушение, связанное с интегрином α2β1, выбирается из воспалительного заболевания кишечника, болезни Крона, неспецифического язвенного колита, реакции на трансплантат, неврита зрительного нерва, травмы спинного мозга, ревматоидного артрита, системной красной волчанки (СКВ), сахарного диабета, рассеянного склероза, синдрома Рейно, экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита, синдрома Шегрена, склеродермии, юношеского сахарного диабета, диабетической ретинопатии, возрастной дегенерации желтого пятна, сердечно-сосудистого заболевания, псориаза, рака, а также инфекций, которые индуцируют воспалительную реакцию.
42. Способ по п.39, где нарушение, связанное с интегрином α2β1, выбирается из рассеянного склероза, ревматоидного артрита, неврита зрительного нерва и травмы спинного мозга.
43. Способ по п.39, где нарушение, связанное с интегрином α2β1, является видом рака, выбранным из группы, состоящей из плоскоклеточного рака, рака легкого, включающего мелкоклеточный рак легкого, немелкоклеточный рак легкого, аденокарциному легкого и плоскоклеточный рак легкого, рака брюшины, гепатоцеллюлярного рака, желудочного рака или рака желудка, включающего рак желудочно-кишечного тракта, рака поджелудочной железы, глиобластомы, рака шейки матки, рака яичников, рака печени, рака мочевого пузыря, гепатомы, рака молочной железы, рака ободочной кишки, колоректального рака, карциномы эндометрия или матки, карциномы слюнной железы, рака почки или почечного рака, рака печени, рака предстательной железы, рака вульвы, рака щитовидной железы, карциномы печени и различных видов рака головы и шеи, а также B-клеточной лимфомы, включающей неходжкинскую лимфому (НХЛ) низкой степени злокачественности/фолликулярную, мелкоклеточную лимфоцитарную (МЛ) НХЛ, НХЛ средней степени злокачественности/фолликулярную, диффузную НХЛ средней степени злокачественности, иммунобластную НХЛ высокой степени злокачественности, лимфобластную НХЛ высокой степени злокачественности, мелкоклеточную с нерасщепленным ядром НХЛ высокой степени злокачественности, массивное поражение при НХЛ; лимфому из клеток зоны мантии, СПИД-ассоциированную лимфому; макроглобулинемию Вальденстрема, хронический лимфолейкоз (ХЛЛ), острый лимфобластный лейкоз (ОЛЛ), гистиолимфоцитоз Бернарда, хронический миелобластный лейкоз и посттрансплантационное лимфопролиферативное нарушение (ПТЛН), а также аномальной сосудистой пролиферации, связанной с факоматозами, отека, а именно связанного с опухолями головного мозга, синдрома Мейса, меланомы, мезотелиомы, множественной миеломы, фибросаркомы, остеосаркомы и эпидермоидной карциномы.
44. Способ по п.39, где нарушение, связанное с интегрином α2β1, является видом рака, выбранным из группы, состоящей из немелкоклеточного рака легкого, рака поджелудочной железы, глиобластомы, рака шейки матки, рака яичников, рака печени, рака молочной железы, рака ободочной кишки, колоректального рака, рака почки, рака предстательной железы, метастатического рака предстательной железы, мезотелиомы, фибросаркомы, остеосаркомы и эпидермоидной карциномы, метастатического колоректального рака, метастатического рака предстательной железы и метастатического рака молочной железы.
45. Способ по п.39, где нарушение, связанное с интегрином α2β1, является видом рака, выбранным из группы, состоящей из рака поджелудочной железы, рака молочной железы, рака ободочной кишки, колоректального рака, немелкоклеточного рака легкого, фибросаркомы, метастатического колоректального рака, рака предстательной железы, метастатического рака предстательной железы и метастатического рака молочной железы.
46. Способ по п.39, где способ не связан с (a) активацией тромбоцитов, (b) агрегацией тромбоцитов, (c) снижением количества циркулирующих тромбоцитов, (d) осложнениями с кровотечениями или (e) любой комбинацией (a) до (d).
47. Способ ингибирования связывания лейкоцитов с коллагеном, включающий введение субъекту некоторого количества антитела к интегрину α2β1 по любому из пп.1-34 или композиции по п.38, эффективного для ингибирования связывания лейкоцитов с коллагеном.
48. Применение гуманизированного антитела к интегрину α2 по любому из пп.1-34 или композиции по п.38 в качестве лекарственного средства.
49. Применение гуманизированного антитела к интегрину α2 по любому из пп.1-34 или композиции по п.38 для лечения нарушения, связанного с интегрином α2β1.
50. Гуманизированное антитело к интегрину α2 по п.1 для применения в способе лечения нарушения, связанного с интегрином α2β1.
51. Применение гуманизированного антитела к интегрину α2 по любому из пп.1-34 или композиции по п.38 для получения лекарственного средства для лечения нарушения, связанного с интегрином α2β1.
52. Набор, содержащий гуманизированное антитело к интегрину α2 по любому из пп.1-34 или композицию по п.38 и инструкции для лечения нарушения, связанного с интегрином α2β1.
53. Антитело, содержащее вариантную Fc-область IgG человека, содержащую аминокислотную замену S324N, замещающую серин в аминокислотном положении 324 у исходного антитела на аспарагин, при этом антитело проявляет улучшенную комплементзависимую цитотоксичность (CDC) и улучшенную антителозависимую клеточно-опосредованную цитотоксичность (ADCC) по сравнению с исходным антителом.
54. Антитело по п.53, где антитело дополнительно содержит аминокислотную замену E269D, замещающую глутамат в аминокислотном положении 269 у исходного антитела на аспартат, и замену S298A, замещающую серин в аминокислотном положении 298 у исходного антитела на аланин.
55. Антитело по п.53 или 54, где антитело выбирают из группы, состоящей из химерного антитела, гуманизированного антитела и полностью человеческого антитела.
56. Антитело по п.53 или 54, где антитело является гуманизированным антителом к интегрину α2.