АНАЛИЗЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИТЕЛ, СПЕЦИФИЧНЫХ К ТЕРАПЕВТИЧЕСКИМ АНТИТЕЛАМ ПРОТИВ IGE, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ПРИ АНАФИЛАКСИИ

1. Способ определения антитела изотипа IgE против лекарственного средства, связывающегося с терапевтическим антителом против IgE в образце, включающий этапы:
(a) приведения образца, который может содержать антитело против лекарственного средства, в контакт с мутантным терапевтическим антителом, содержащим по меньшей мере одну мутацию аминокислоты терапевтического антитела против IgE, где относительная аффинность связывания мутантного терапевтического антитела с IgE человека составляет приблизительно 10% или менее от относительной аффинности связывания терапевтического антитела против IgE с указанным IgE человека; и
(b) определения связывания антитела против лекарственного средства с мутантным терапевтическим антителом.
2. Способ по п.1, где относительная аффинность связывания мутантного терапевтического антитела с IgE человека составляет приблизительно 5% или менее от относительной аффинности связывания терапевтического антитела против IgE с IgE человека.
3. Способ по п.1, где относительная аффинность связывания мутантного терапевтического антитела с IgE человека составляет приблизительно 2,5% или менее от относительной аффинности связывания терапевтического антитела против IgE с IgE человека.
4. Способ по п.1, где относительная аффинность связывания мутантного терапевтического антитела с IgE человека составляет приблизительно 1% или менее от относительной аффинности связывания терапевтического антитела против IgE с IgE человека.
5. Способ по п.1, где относительную аффинность связывания измеряют сравнением связывания с IgE человека в анализе ELISA.
6. Способ определения антитела изотипа IgE против лекарственного средства, связывающегося с терапевтическим антителом против IgE, в образце, включающий этапы:
(a) приведения образца, который может содержать антитело против лекарственного средства, в контакт с мутантным терапевтическим антителом, содержащим по меньшей мере одну мутацию аминокислоты терапевтического антитела против IgE, где активность мутантного терапевтического антитела по отношению к IgE человека составляет приблизительно 10% или менее от активности терапевтического антитела против IgE по отношению к указанному IgE человека; и
(b) определения связывания антитела против лекарственного средства с мутантным терапевтическим антителом.
7. Способ по п.1 или 6, где мутантное терапевтическое антитело содержит одну, две, три, четыре, пять или шесть мутаций аминокислот в последовательностях CDR тяжелой и/или легкой цепи терапевтического антитела против IgE.
8. Способ по п.1 или 6, где терапевтическое антитело против IgE является омализумабом, и мутантное терапевтическое антитело содержит одну, две или три мутации аминокислот в первой CDR легкой цепи.
9. Способ по п.8, где мутантное терапевтическое антитело содержит аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:2 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:1, где в легкой цепи заменяют аминокислоту Asp в положениях 30, 32 и 34.
10. Способ по п.9, где мутантное терапевтическое антитело содержит аминокислотную последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:2 и аминокислотную последовательность легкой цепи SEQ ID NO:1 с заменами аминокислот Asp на Ala в положениях 30, 32 и 34.
11. Способ по п.1 или 6, где мутантное терапевтическое антитело фиксируют на поверхности.
12. Способ по п.11, где мутантное терапевтическое антитело напрямую иммобилизируют на поверхности.
13. Способ по п.11, где мутантное терапевтическое антитело метят и фиксируют на поверхности средством фиксации, которое специфически связывается с меткой, где средство фиксации иммобилизируют на поверхности.
14. Способ по п.13, где метка является биотином, и средство фиксации является стрептавидином.
15. Способ по п.13, где метка является дигоксигенином, и средство фиксации является антителом против дигоксигенина.
16. Способ по п.1 или 6, где образец приводят в контакт с мутантным терапевтическим антителом, которое фиксируют на поверхности.
17. Способ по п.1 или 6, где образец приводят в контакт с мутантным терапевтическим антителом до фиксации мутантного терапевтического антитела на поверхности.
18. Способ по п.1 или 6, где связывание антител против лекарственного средства с мутантным терапевтическим антителом определяют средством детекции.
19. Способ по п.18, где средство детекции является полипептидом FcεRIα, связывающимся с Fc-областью IgE человека.
20. Способ по п.19, где полипептид FcεRIα содержит внеклеточный домен субъединицы FcεRIα.
21. Способ по п. 20, где полипептид FcεRIα содержит внеклеточный домен субъединицы FcεRIα, слитый с константной областью IgG.
22. Способ по п.19, где метят полипептид FcεRIα.
23. Способ по п.22, где метка на полипептиде FcεRIα выбрана из группы, состоящей из биотина, дигоксигенина, рутения, радиоактивной метки, фотолюминесцентной метки, хемилюминесцентной метки, флуоресцентной метки, электрохемилюминесцентной метки и ферментной метки.
24. Способ по п.22, где метку на полипептиде FcεRIα определяют вторым средством детекции, которое специфически связывается с меткой на полипептиде FcεRIα.
25. Способ по любому из пп.1-6, где терапевтическое антитело против IgE является омализумабом.
26. Способ по любому из пп.1-6, где образец включает сыворотку или плазму человека.
27. Способ по п.26, где сыворотка или плазма содержит терапевтическое антитело.
28. Способ по п.26, где сыворотка или плазма не содержит терапевтическое антитело.
29. Способ по любому из пп.1-6, дополнительно включающий этап сравнения связывания антител против лекарственного средства с мутантным терапевтическим антителом, определяемым на этапе b), с референсным значением.
30. Способ по п.29, где референсное значение является определяемым связыванием между мутантным терапевтическим антителом и контрольным антителом.
31. Способ по п.30, где контрольное антитело является антителом положительного контроля, связывающимся и с терапевтическим антителом против IgE, и с мутантным терапевтическим антителом со схожей аффинностью.
32. Способ по п.31, где антитело положительного контроля содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:7, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:8.
33. Набор для определения в образце антитела изотипа IgE против лекарственного средства, связывающегося с терапевтическим антителом против IgE, содержащий:
(a) мутантное терапевтическое антитело, содержащее по меньшей мере одну мутацию аминокислоты терапевтического антитела против IgE, где относительная аффинность связывания мутантного терапевтического антитела с IgE человека составляет приблизительно 10% или менее от относительной аффинности связывания терапевтического антитела против IgE с IgE человека; и
(b) средство детекции, связывающееся с Fc-областью IgE человека.
34. Набор по п.33, где средство детекции является полипептидом FcεRIα, содержащим внеклеточный домен субъединицы FcεRIα.
35. Набор по п.34, где полипептид FcεRIα содержит внеклеточный домен субъединицы FcεRIα, слитый с константной областью IgG.
36. Набор по любому из пп.33-35, дополнительно содержащий антитело положительного контроля, связывающееся и с терапевтическим антителом против IgE, и с мутантным терапевтическим антителом со схожей аффинностью.
37. Набор по п.36, где антитело положительного контроля содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:7, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:8.
38. Набор для определения антитела изотипа IgE против лекарственного средства, связывающегося с терапевтическим антителом против IgE, в образце, содержащий:
(a) мутантное терапевтическое антитело, содержащее по меньшей мере одну мутацию аминокислоты терапевтического антитела против IgE, где активность мутантного терапевтического антитела по отношению к IgE человека составляет приблизительно 10% или менее от активности терапевтического антитела против IgE по отношению к IgE человека; и
(b) средство детекции, связывающееся с Fc-областью IgE человека.
39. Набор по п.38, где средство детекции является полипептидом FcεRIα, содержащим внеклеточный домен субъединицы FcεRIα.
40. Набор по п.39, где полипептид FcεRIα содержит внеклеточный домен субъединицы FcεRIα, слитый с константной областью IgG.
41. Набор по любому из пп.38-40, дополнительно содержащий антитело положительного контроля, связывающееся и с терапевтическим антителом против IgE, и с мутантным терапевтическим антителом со схожей аффинностью.
42. Набор по п.41, где антитело положительного контроля содержит вариабельную область тяжелой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:7, и вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:8.
43. Способ определения антитела изотипа IgE против лекарственного средства, связывающегося с терапевтическим антителом против IgE, в образце, включающий этапы:
(a) приведения образца, который может содержать антитело против лекарственного средства, в контакт с (i) мутантным терапевтическим антителом и (ii) полипептидом FcεRIα, связывающимся с Fc-областью IgE человека, где мутантное терапевтическое антитело содержит по меньшей мере одну мутацию аминокислоты терапевтического антитела против IgE, и относительная аффинность связывания мутантного терапевтического антитела с IgE человека составляет приблизительно 10% или менее от относительной аффинности связывания терапевтического антитела против IgE с указанным IgE человека;
(b) фиксации мутантного терапевтического антитела на поверхности; и
(c) определения связывания антитела против лекарственного средства с мутантным терапевтическим антителом.
44. Способ по п.43, где избыточное количество полипептида FcεRIα приводят в контакт с образцом на этапе (a).
45. Способ по п.44, где по меньшей мере приблизительно 10-кратный избыток полипептида FcεRIα приводят в контакт с образцом на этапе (a).
46. Способ по любому из пп.43-45, где полипептид FcεRIα содержит внеклеточный домен субъединицы FcεRIα.
47. Способ по любому из пп.43-45, где мутантное терапевтическое антитело метят и фиксируют на поверхности средством фиксации, специфически связывающимся с меткой.
48. Способ по п.47, где метка является биотином, и поверхность покрывают стрептавидином.
49. Способ по любому из пп.43-45, где связывание антитела против лекарственного средства с мутантным терапевтическим антителом определяют меченым антителом против IgE человека.
50. Способ по любому из пп.43-45, где метят полипептид FcεRIα и связывание антитела против лекарственного средства с мутантным терапевтическим антителом определяют средством детекции, специфически связывающимся с меткой на полипептиде FcεRIα.
51. Набор для определения антитела изотипа IgE против лекарственного средства, связывающегося с терапевтическим антителом против IgE, в образце, содержащий:
(a) мутантное терапевтическое антитело, содержащее по меньшей мере одну мутацию аминокислоты из терапевтического антитела против IgE, где относительная аффинность связывания мутантного терапевтического антитела с IgE человека составляет приблизительно 10% или менее от относительной аффинности связывания терапевтического антитела против IgE с IgE человека; и
(b) полипептид FcεRIα, связывающийся с Fc-областью IgE человека.
52. Набор по п.51, дополнительно содержащий антитело против IgE человека.
53. Набор по п.52, где метят антитело против IgE человека.
54. Набор по любому из пп.51-53, где метят полипептид FcεRIα.
55. Набор по п.54, дополнительно содержащий средство детекции, специфически связывающееся с меткой на полипептиде FcεRIα.
56. Способ определения антитела изотипа IgE против лекарственного средства, связывающегося с терапевтическим антителом против IgE в образце, включающий этапы:
(a) преинкубации образца, который может содержать антитело против лекарственного средства, с избыточным количеством полипептида FcεRIα, связывающегося с Fc-областью IgE человека;
(b) инкубации преинкубированного образца из этапа (a) с терапевтическим антителом против IgE или мутантным терапевтическим антителом, содержащим по меньшей мере одну мутацию аминокислоты терапевтического антитела против IgE, и относительная аффинность связывания мутантного терапевтического антитела с IgE человека снижена по сравнению с относительной аффинностью связывания терапевтического антитела против IgE с указанным IgE человека; и
(c) определения связывания антитела против лекарственного средства с терапевтическим антителом против IgE или мутантным терапевтическим антителом.
57. Способ по п.56, где мутантное терапевтическое антитело содержит по меньшей мере одну мутацию аминокислоты терапевтического антитела против IgE, и относительная аффинность связывания мутантного терапевтического антитела с IgE человека составляет приблизительно 10% или менее от относительной аффинности связывания терапевтического антитела против IgE с указанным IgE человека.
58. Способ по п.56, где по меньшей мере приблизительно 10-кратный избыток полипептида FcεRIα преинкубируют с образцом на этапе (a).
59. Способ по любому из пп.56-58, где терапевтическое антитело против IgE или мутантное терапевтическое антитело фиксируют на поверхности до или после инкубации с образцом на этапе (b).
60. Способ по любому из пп.56-58, где терапевтическое антитело против IgE или мутантное терапевтическое антитело напрямую иммобилизируют на поверхности до инкубации с образцом на этапе (b).
61. Способ по любому из пп.56-58, где терапевтическое антитело против IgE или мутантное терапевтическое антитело метят и фиксируют на поверхности иммобилизированным средством фиксации, специфически связывающимся с меткой.
62. Способ по п.61, где терапевтическое антитело против IgE или мутантное терапевтическое антитело метят биотином и фиксируют на покрытой стрептавидином поверхности.
63. Способ по любому из пп.56-58, где связывание антитела против лекарственного средства с терапевтическим антителом против IgE или мутантным терапевтическим антителом определяют конъюгированным с HRP антителом против IgE человека.
64. Способ по любому из пп.56-58, где метят полипептид FcεRIα и определяют связывание антитела против лекарственного средства с терапевтическим антителом против IgE или мутантным терапевтическим антителом посредством определения метки.
65. Способ по п.64, где полипептид FcεRIα метят дигоксигенином, и связывание антитела против лекарственного средства с терапевтическим антителом против IgE или мутантным терапевтическим антителом определяют конъюгированным с HRP антителом против дигоксигенина.
66. Способ по п.64, где полипептид FcεRIα метят рутением, и связывание антитела против лекарственного средства с терапевтическим антителом против IgE или мутантным терапевтическим антителом определяют электрохемилюминесценцией.
67. Набор для определения антитела изотипа IgE против лекарственного средства, связывающегося с терапевтическим антителом против IgE, в образце, содержащий:
(a) терапевтическое антитело против IgE или его мутантное терапевтическое антитело, где мутантное терапевтическое антитело содержит по меньшей мере одну мутацию аминокислоты терапевтического антитела против IgE, где относительная аффинность связывания мутантного терапевтического антитела с IgE человека снижена по сравнению с относительной аффинностью связывания терапевтического антитела против IgE с IgE человека; и
(b) полипептид FcεRIα, связывающийся с Fc-областью IgE человека.
68. Набор по п.67, дополнительно содержащий антитело против IgE человека.
69. Набор по п.68, где метят антитело против IgE человека.
70. Набор по любому из пп.67-69, где метят полипептид FcεRIα.
71. Набор по п.70, дополнительно содержащий средство детекции, специфически связывающееся с меткой на полипептиде FcεRIα.
72. Способ идентификации пациента, имеющего риск анафилактической реакции на терапевтическое антитело против IgE, включающий этапы:
(a) приведения образца от пациента в контакт с мутантным терапевтическим антителом, содержащим по меньшей мере одну мутацию аминокислоты терапевтического антитела против IgE, где относительная аффинность связывания мутантного терапевтического антитела с IgE человека составляет приблизительно 10% или менее от относительной аффинности связывания терапевтического антитела против IgE с указанным IgE человека; и
(b) определения связывания антитела изотипа IgE против лекарственного средства с мутантным терапевтическим антителом, где наличие и/или уровень антитела против лекарственного средства свидетельствует о том, что пациент обладает риском анафилактической реакции на терапевтическое антитело против IgE.
73. Способ идентификации пациента, имеющего риск анафилактической реакции на терапевтическое антитело против IgE, включающий этапы:
(a) приведения образца от пациента в контакт с мутантным терапевтическим антителом, содержащим по меньшей мере одну мутацию аминокислоты терапевтического антитела против IgE, где активность мутантного терапевтического антитела по отношению к IgE человека составляет приблизительно 10% или менее от активности терапевтического антитела против IgE по отношению к указанному IgE человека; и
(b) определения связывания антитела изотипа IgE против лекарственного средства с мутантным терапевтическим антителом, где наличие и/или уровень антитела против лекарственного средства в образце свидетельствует о том, что пациент обладает риском анафилактической реакции на терапевтическое антитело против IgE.
74. Способ идентификации пациента, имеющего риск анафилактической реакции на терапевтическое антитело против IgE, включающий этапы:
(a) приведения образца от пациента в контакт с (i) мутантным терапевтическим антителом и (ii) полипептидом FcεRIα, связывающимся с Fc-областью IgE человека, где мутантное терапевтическое антитело содержит по меньшей мере одну мутацию аминокислоты терапевтического антитела против IgE, и относительная аффинность связывания мутантного терапевтического антитела с IgE человека составляет приблизительно 10% или менее от относительной аффинности связывания терапевтического антитела против IgE с указанным IgE человека;
(b) фиксации мутантного терапевтического антитела на поверхности; и
(c) определения связывания антитела изотипа IgE против лекарственного средства с мутантным терапевтическим антителом, где наличие и/или уровень антитела против лекарственного средства в образце свидетельствует о том, что пациент обладает риском анафилактической реакции на терапевтическое антитело против IgE.
75. Способ идентификации пациента, имеющего риск анафилактической реакции на терапевтическое антитело против IgE, включающий этапы:
(a) преинкубации образца от пациента с избыточным количеством полипептида FcεRIα, связывающегося с Fc-областью IgE человека;
(b) инкубации преинкубированного образца из этапа (a) с терапевтическим антителом против IgE или мутантным терапевтическим антителом, содержащим по меньшей мере одну мутацию аминокислоты терапевтического антитела против IgE, и относительная аффинность связывания мутантного терапевтического антитела с IgE человека снижена по сравнению с относительной аффинностью связывания терапевтического антитела против IgE с указанным IgE человека; и
(c) определения связывания антитела изотипа IgE против лекарственного средства с терапевтическим антителом против IgE или мутантным терапевтическим антителом, где наличие и/или уровень антитела против лекарственного средства в образце свидетельствует о том, что пациент обладает риском анафилактической реакции на терапевтическое антитело против IgE.
76. Способ лечения пациента, имеющего IgE-опосредованное нарушение, включающий этапы:
(a) определения уровня антитела изотипа IgE против лекарственного средства к терапевтическому антителу против IgE в образце от пациента;
(b) введения пациенту эффективного количества терапевтического антитела против IgE для лечения IgE-опосредованного нарушения, если уровень антитела против лекарственного средства в образце не свидетельствует о том, что пациент обладает риском анафилактической реакции на терапевтическое антитело против IgE.
77. Способ по п.76, где уровень антитела против лекарственного средства в образце определяют способом, включающим этапы:
(a) приведения образца от пациента в контакт с мутантным терапевтическим антителом, содержащим по меньшей мере одну мутацию аминокислоты терапевтического антитела против IgE, где относительная аффинность связывания мутантного терапевтического антитела с IgE человека составляет приблизительно 10% или менее от относительной аффинности связывания терапевтического антитела против IgE с указанным IgE человека; и
(b) определения связывания антитела изотипа IgE против лекарственного средства с мутантным терапевтическим антителом.
78. Способ по п.76, где уровень антитела против лекарственного средства в образце определяют способом, включающим этапы:
(a) приведения образца от пациента в контакт с мутантным терапевтическим антителом, содержащим по меньшей мере одну мутацию аминокислоты терапевтического антитела против IgE, где активность мутантного терапевтического антитела по отношению к IgE человека составляет приблизительно 10% или менее от активности терапевтического антитела против IgE по отношению к указанному IgE человека; и
(b) определения связывания антитела изотипа IgE против лекарственного средства с мутантным терапевтическим антителом.
79. Способ по п.76, где уровень антитела против лекарственного средства в образце определяют способом, включающим этапы:
(a) приведения образца от пациента в контакт с (i) мутантным терапевтическим антителом и (ii) полипептидом FcεRIα, связывающимся с Fc-областью IgE человека, где мутантное терапевтическое антитело содержит по меньшей мере одну мутацию аминокислоты терапевтического антитела против IgE, и относительная аффинность связывания мутантного терапевтического антитела с IgE человека составляет приблизительно 10% или менее от относительной аффинности связывания терапевтического антитела против IgE с указанным IgE человека;
(b) фиксации мутантного терапевтического антитела на поверхности; и
(c) определения связывания антитела изотипа IgE против лекарственного средства с мутантным терапевтическим антителом.
80. Способ по п.76, где уровень антитела против лекарственного средства в образце определяют способом, включающим этапы:
(a) преинкубации образца от пациента с избыточным количеством полипептида FcεRIα, связывающегося с Fc-областью IgE человека;
(b) инкубации преинкубированного образца из этапа (a) с терапевтическим антителом против IgE или мутантным терапевтическим антителом, содержащим по меньшей мере одну мутацию аминокислоты терапевтического антитела против IgE, и относительная аффинность связывания мутантного терапевтического антитела с IgE человека снижена по сравнению с относительной аффинностью связывания терапевтического антитела против IgE с указанным IgE человека; и
(c) определения связывания антитела изотипа IgE против лекарственного средства с терапевтическим антителом против IgE или мутантным терапевтическим антителом.