ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА ПРОТИВ ЛИГАНДА CD40
CD40 LIGAND THERAPEUTIC ANTIBODIES

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
[0001] Данная заявка PCT заявляет приоритет по предварительной заявке США № 62/510471, поданной 24 мая 2017 г., описание которой в полном объеме включено в данный документ посредством ссылки.
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
[0002] Данная заявка посредством ссылки в полном объеме включает перечень последовательностей под названием «224823-431206_ST25.txt», созданный 23 мая 2018 г. в 2:40 пополудни, который имеет размер 100 Кб и подан в электронном виде вместе с данным документом.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
[0003] Антитела к CD40L, композиции, содержащие указанные антитела, и способ их применения для лечения связанных с CD40L заболеваний или нарушений.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
in vitro
[0004] Взаимодействие CD40 с его лигандом CD40L играет важную роль в регуляции иммунных ответов. Связывание CD40L с CD40 запускает активацию пути CD40, который активирует костимуляторные молекулы, такие как CD80 и CD86. Было показано, что блокирование взаимодействия между CD40 и CD40L моноклональными антителами приводит к защите от аутоиммунности и отторжения трансплантата в различных доклинических моделях. Недавно в мышиной модели амиотрофического латерального склероза было показано, что антитело, направленное на CD40L, замедляет появление заболевания и продлевает время жизни после начала заболевания. (Патент США № 8435514, включенный в данный документ посредством ссылки). В ранних клинических исследования гуманизированное анти-CD40L антитело hu5c8 демонстрировало эффективность у пациентов с волчанкой и у пациентов с иммунной тромбоцитопенической пурпурой. Однако из-за случаев тромбоэмболии у пациентов, которых лечили hu5c8, дополнительные исследования приостановили. Дополнительные и доклинические исследования на животных позволили установить, что взаимодействие Fc с Fc-рецептором FcγRIIa вызывало активацию тромбоцитов и агрегацию, что приводило к случаям тромбоэмболии. Кроме того, сообщалось, что связывание Fc с комплементом может снижать или предотвращать индукцию иммунной толерантности. Были предприняты различные подходы для снижения или устранения взаимодействия Fc-области иммуноглобулина с FcγRIIa и/или снижения или устранения взаимодействия с комплементом, включая внесение точечной(ых) мутации(й) в Fc-область для создания анти-CD40L антител с отсутствием Fc-эффекторной функции. В других подходах используют фрагменты антител с отсутствующей Fc-областью или антител, которые содержат некоторое количество аминокислотных замен в Fc-области. Хотя анти-CD40L антитело hu5c8 демонстрировало эффективность у пациентов-людей, на рынке отсутствуют анти-CD40L антитела.
Соответственно, существует необходимость в улучшенных анти-CD40L антителах для введения людям, которые являются эффективными и не вызывают активацию или агрегацию тромбоцитов или не связываются с комплементом, и при этом являются стабильными и связываются с CD40L.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0005] Новые полипептиды антител и их антигенсвязывающие фрагменты по данному изобретению обеспечивают такие усовершенствованные анти-CD40L антитела. В следующем разделе всего лишь обобщены определенные аспекты данного описания, и подразумевается, что он не является ограничительным по сути. Эти аспекты и другие аспекты и варианты реализации в более полном объеме описаны ниже. Все ссылки, цитируемые в тексте данной заявки, в полном объеме включены в данный документ посредством ссылки. В случае наличия противоречия между прописанной информацией по данной заявке и литературой, включенной посредством ссылки, приоритет имеет прописанная информация по данной заявке.
[0006] В данном изобретении предложены выделенные, сконструированные, не встречающиеся в природе антитела и их антигенсвязывающие фрагменты, которые связывают человеческий CD40L и блокируют связывание CD40 с CD40L. Антитело и его антигенсвязывающий фрагмент сконструированы так, чтобы характеризоваться необходимыми активностью и связыванием. В некоторых вариантах реализации антитело и его антигенсвязывающий фрагмент сконструированы так, чтобы характеризоваться сниженной Fc-эффекторной функцией по сравнению с некоторыми предыдущими анти-CD40L антителами. Описанные в данной заявке антитела и их антигенсвязывающие фрагменты применимы в лечении заболеваний, при которых наблюдается активация CD40L, включая нейродегенеративные или нейромышечные заболевания или нарушения, воспалительные или иммунные заболевания или нарушения и аутоиммунные заболевания.
H
L
[0007] В одном аспекте в данном изобретении предложены выделенные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые специфически связываются с CD40L, которые содержат: (a) вариабельную область тяжелой цепи (V), содержащую; i) домен CDRH1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10, 11, 12, 13 или 14; iii) домен CDRH3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (V), содержащую: i) домен CDRL1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16 или 17; ii) домен CDRL2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18 или 19; и iii) домен CDRL3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20.
H
L
[0008] В некоторых вариантах реализации вышеописанного аспекта в данном изобретении предложены выделенные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые специфически связываются с CD40L, которые содержат: (a) вариабельную область тяжелой цепи (V), содержащую; i) домен CDRH1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 10, 11, 12, 13 или 14; iii) домен CDRH3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (V), содержащую: i) домен CDRL1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 16 или 17; ii) домен CDRL2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 18 или 19; и iii) домен CDRL3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20.
H
L
[0009] В данном изобретении также предложены выделенные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые специфически связываются с CD40L, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (V), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, 2, 3 или 4; и (b) вариабельную область легкой цепи (V), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5, 6, 7 или 8.
[0010] В некоторых вариантах реализации выделенное антитело или его антигенсвязывающий фрагмент в соответствии с изобретением содержат Fc-область, а Fc-область сконструирована со сниженной или устраненной одной или более Fc-эффекторной функцией. В некоторых вариантах реализации выделенные антитела имеют изотип IgG1, а константная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21. В других вариантах реализации антитело содержит константную область тяжелой цепи, при этом константная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 22. В других вариантах реализации антитело содержит константную область тяжелой цепи, при этом константная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 23. В другом варианте реализации антитело содержит константную область тяжелой цепи, при этом константная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 24.
[0011] В другом аспекте данного изобретения предложены способы лечения субъекта, имеющего CD40L-ассоциированное заболевание или нарушение, включающие введение субъекту терапевтически эффективного количества антитела или антигенсвязывающего фрагмента в соответствии с данным изобретением. В другом аспекте данного изобретения предложены способы подавления иммунного ответа у субъекта, включающие введение субъекту терапевтически эффективного количества антитела или антигенсвязывающего фрагмента в соответствии с данным изобретением.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
[0012] На Фиг. 1A представлена гистограмма, иллюстрирующая ранжированную эффективность 16 клонов антитела в сравнении с анти-CD40L антителом 5c8. Ранжированная эффективность равна IC50 клона/IC50 5c8×100.
[0013] На Фиг. 1B представлена гистограмма, иллюстрирующая ранжированную эффективность 16 клонов антитела в сравнении с анти-CD40L антителом AT-1501. Ранжированная эффективность равна IC50 клона/IC50 AT-1501×100.
[0014] На Фиг. 2A-2G и 2I-2Q проиллюстрированы кривые связывания антител из каждого из клонов с кривой связывания для 5c8. На Фиг. 2H проиллюстрированы кривые связывания AT-1501 и 5c8.
[0015] На Фиг. 3A-3G и 3I-3Q проиллюстрированы кривые связывания антител из каждого из клонов с кривой связывания для AT-1501. На Фиг. 3H проиллюстрированы кривые связывания AT-1501 и 5c8.
[0016] На Фиг. 4A и 4B представлены графики, каждый из которых иллюстрирует связывание восьми клонов антител, 5c8, AT-1501 и абатасепта с FcγRI. Единственным антителом, характеризующимся существенным связыванием, является антитело 5c8.
[0017] На Фиг. 5A и 5B представлены графики, каждый из которых иллюстрирует связывание восьми клонов антител, 5c8, AT-1501 и абатасепта с FcγRIIa. Единственным антителом, характеризующимся существенным связыванием, является антитело 5c8.
[0018] На Фиг. 6A и 6B представлены графики, каждый из которых иллюстрирует связывание восьми клонов антител, 5c8, AT-1501 и абатасепта с FcγRIIIa. Ни одно из антител не демонстрировало существенное связывание с FcγRIIIa. На Фиг. 6C и 6D представлены графики, каждый из которых иллюстрирует связывание восьми клонов антител, 5c8, AT-1501 и абатасепта с FcγRIIIb. Ни одно из антител не демонстрировало существенное связывание с FcγRIIIb.
[0019] На Фиг. 7A и 7B представлены графики, каждый из которых иллюстрирует связывание восьми клонов антител, 5c8, AT-1501 и абатасепта с C1q. Единственным антителом, характеризующимся существенным связыванием с C1q, было антитело 5c8.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0020] Определения
[0021] Для удобства ниже приведены значения определенных терминов и выражений, употребляемых в тексте заявки, примерах и прилагаемой формуле изобретения.
[0022] Такие термины как «содержит», «состоящий», «содержащий» и т. п. имеют значение, приписываемое в патентном законе Соединенных Штатов; эти термины являются включительными и неограничивающими и не исключают дополнительные, не перечисленные элементы или этапы способов. Такие термины как «состоящий преимущественно из» и «состоит преимущественно из» имеют значение, приписываемое им в патентном законе Соединенных Штатов; эти термины допускают включение дополнительных ингредиентов или этапов, которые не оказывают материальное влияние на основные и новые характеристики заявляемого изобретения. Термины «состоит из» и «состоящий из» имеют значение, приписываемое им в патентном законе Соединенных Штатов; эти термины являются ограничивающими.
[0023] ТМБ является аббревиатурой 3,3′,5,5′-тетраметилбензидина.
[0024] В контексте данного документа «домен CDR» означает определяющую комплементарность область антитела с фланкирующими последовательностями или без них.
[0025] Иллюстративно описанное в данном документе изобретение можно должным образом реализовывать на практике в отсутствие любых элемента или элементов, ограничения или ограничений, которые явным образом не раскрыты в данном документе.
[0026] «Эффекторные функции» относятся к тем видам биологической активности, которые обусловлены Fc-областью антитела и которые варьируются в зависимости от изотипа антитела. Примеры эффекторных функций антитела включают: связывание C1q и комплементзависимую цитотоксичность (КЗЦ); связывание Fc-рецепторов; антителозависимую клеточноопосредованную цитотоксичность (АЗКЦ); фагоцитоз; понижающую регуляцию рецепторов клеточной поверхности (например, B-клеточных рецепторов); и активацию B-клеток. Одной из эффекторных функций является способность Fc- или константной области антитела связывать белки, включая, но не ограничиваясь этим, Fc-рецептор (FcR) (например, рецептор высокоаффинной Fc-области IgG Ia (FCγRIa) (CD64) (SEQ ID NO: 34), акцептор низкоаффинной Fc-области иммуноглобулина гамма IIa (FCγRIIa) (CD32) (SEQ ID NO: 35), рецептор низкоаффинной Fc-области иммуноглобулина гамма IIIa (FCγRIIIA) (CD16a) (SEQ ID NO: 36), рецептор низкоаффинной Fc-области иммуноглобулина гамма IIIb (FCγRIIIb) (CD16b)) (SEQ ID NO: 37). В вариантах реализации данного изобретения, в которых антитела и их антигенсвязывающие фрагменты имеют Fc-домен, Fc-домен сконструирован так, чтобы снижать или устранять одну или более Fc-эффекторную функцию. В предпочтительном варианте реализации Fc-домен сконструирован так, чтобы снижать или устранять активацию тромбоцитов и/или агрегацию тромбоцитов и связанный с ними риск тромбоэмболии.
[0027] В контексте данного документа формы единственного числа включают отсылки на множественное число, если из контекста четко не следует иное. Употребление «или» или «и» означает «и/или», если не указано иное. Кроме того, употребление термина «включающий», а также других форм, таких как «включать», «включает» и «включенный», не является ограничивающим.
[0028] Употребление союза «или» используется взаимозаменяемо с «по меньшей мере один из». Например: если композиция содержит A или B, способ должен включать по меньшей мере один элемент из A и B, но также может включать как A, так и B. Аналогично, композиция, содержащая «A, B, C или D», должна содержать по меньшей мере один элемент из группы A, B, C и D, но также может содержать все или любую комбинацию A, B, C и D.
[0029] Термин «около» указывает, что приведенное числовое значение допускает некоторую небольшую неточность (с некоторым приближением к точности в значении; приблизительно или достаточно близко к значению; вблизи). Если неточность, привносимая термином «около», не определена каким-либо образом в данной области техники этим обычным значением, тогда в контексте данного документа «около» включает вариации до ± 10% от приведенного значения. Если не указано иное, в контексте данного документа все числа, выражающие количества ингредиентов, свойства, такие как молекулярная масса, условия реакций и т. д., следует понимать как модифицируемые термином «около».
[0030] CD40L также известен как CD154, gp39, T-BAM, антиген 5c8 или TNF-родственный белок активации (TRAP).
[0031] Термины «лечить», «лечение» и т. п. включают терапевтическое лечение и профилактическое лечение. Терапевтическое лечение представляет собой лечение субъекта, у которого наблюдаются признаки или симптомы заболевания, патологического состояния или нарушения, подлежащего лечению. Профилактическое лечение относится к лечению субъекта, который предрасположен к заболеванию, патологическому состоянию или нарушению, но который не проявляет очевидных признаков заболевания, патологического состояния или нарушения. Таким образом, результатом лечения может быть приостановка, частичное или полное снятие симптомов или уменьшение признаков или симптомов болезни, и, в частности, без ограничения, продление времени жизни и излечение.
[0032] «Эффективное количество» агента, например, фармацевтической готовой формы, относится к количеству, эффективному в необходимых дозировках и в течение необходимого периода времени для достижения желаемого терапевтического или профилактического результата.
[0033] «Аффинность» относится к силе общих нековалентных взаимодействий между одним связывающим сайтом молекулы (например, антитела) и ее партнером по связыванию (например, антигеном). Если не указано иное, в контексте данного документа «аффинность связывания» относится к характерной аффинности связывания, которая отображает 1:1 взаимодействие между представителями пары связывания (например, антителом и антигеном). Аффинность молекулы X к ее партнеру Y в общем случае можно представить равновесной константой диссоциации (KД), соотношением kдисс./kасс. между антителом и его антигеном. KД и аффинность обратно пропорциональны. Значение KД относится к концентрации антитела (количеству антитела, необходимому для конкретного эксперимента) и, таким образом, чем ниже значение KД (ниже концентрация), тем выше аффинность антитела. Аффинность можно измерять стандартными способами, известными в данной области техники, включая описанные в данном документе. Конкретные иллюстративные и типовые варианты реализации для измерения аффинности связывания могут включать измерение методом радиоиммуноанализа (РИА), поверхностного плазмонного резонанса (ППР) на инструменте BIAcore (GE Healthcare Europe GmbH, Glattbrugg, Switzerland) путем захвата антитела на сопряженном с протеином-A сенсорном чипе CM5 высокой чистоты (GE Healthcare Europe GmbH, Glattbrugg, Switzerland; BR-1000-14) с применением полипептида лиганда человеческого CD40 в качестве аналита. Другие методы могут включать радиоиммуноанализ и анализ кинетического исключения. Анализ кинетического исключения представляет собой многоцелевую платформу для иммуноанализа, которая позволяет измерять равновесные константы диссоциации, а также константы скорости ассоциации и диссоциации для взаимодействия антиген/антитело.
[0034] Текст данной заявки ссылается на процент идентичности между полипептидными или аминокислотными последовательностями. Процент идентичности между двумя последовательностями является функцией числа идентичных позиций, общих для последовательностей, с учетом числа гэпов и длины каждого гэпа, которые необходимо внести для оптимального выравнивания двух последовательностей. Идентичность можно определять как «локальную идентичность» или «глобальную идентичность». Локальная идентичность относится к степени родства последовательностей между полипептидами, определяемой совпадениями между двумя цепями таких последовательностей. Глобальная идентичность относится к степени родства последовательностей полипептида по сравнению с полной длиной референсного полипептида. Если не указано иное, в контексте данного документа, идентичность означает глобальную идентичность. В целях данного изобретения и формулы изобретения процентные значения для глобальной идентичности рассчитаны с помощью алгоритма Нидлмана и Вунша (Needleman and Wunsch ((1970) J. Mol. Biol. 48:444-453)) с применением весовой матрицы Blossum 62 со штрафом за гэп 12, штрафом за продление гэпа 4 и штрафом за гэп со сдвигом рамки 5. Существует много общедоступного программного обеспечения, в котором используется алгоритм Нидлмана и Вунша, например, программа GAP в пакете программного обеспечения GCG.
[0035] Специалисту в данной области техники понятно, что при практической реализации изобретения можно использовать исходные материалы, биологические и химические материалы, биологические и химические реагенты, способы синтеза, способы очистки, аналитические способы, оценочные способы и биологические способы, отличные от тех, которые приведены в качестве примера, не прибегая к необязательным экспериментам. Подразумевается, что в изобретение включены все известные в данной области техники функциональные эквиваленты любых таких материалов и способов.
[0036] Аминокислотные замены обозначают по системе, в которой определяются исходная аминокислота, позиция аминокислоты в конкретной последовательности и замещающая аминокислота, например, C11S указывает на то, что цистеин в позиции 11 полипептидной последовательности замещен серином.
[0037] Гуманизированные антитела представляют собой антитела, вырабатываемые у отличных от человека видов, чьи белковые последовательности были модифицированы так, чтобы повысить их сходство с вариантами антител, естественным образом вырабатываемыми у людей. Процесс «гуманизации» обычно применяют к моноклональным антителам, разработанным для введения людям (например, антителам, разработанным в качестве противораковых лекарственных препаратов).
[0038] На сегодняшний день общепринято гуманизировать нечеловеческое антитело путем вставки релевантных CDR из антител, полученных в организме отличного от человека животного, в «остов» человеческого антитела. «Прямое» создание гуманизированного антитела можно осуществлять путем вставки соответствующих кодирующих CDR сегментов (ответственных за необходимые свойства связывания) в «остов» человеческого антитела. Это можно обеспечить методами рекомбинантных ДНК, используя соответствующий вектор и экспрессию в клетках млекопитающих. Это означает, что после разработки антитела, имеющего необходимые свойства, у мышей (или других отличных от человека животных) ДНК, кодирующую это антитело, можно выделять, клонировать в вектор и сиквенировать. Затем можно определить последовательность ДНК, соответствующую CDR антитела. После того, как точная последовательность необходимых CDR известна, можно разрабатывать стратегию для вставки должным образом этих последовательностей в конструкцию, содержащую ДНК для варианта антитела человека. CDR также можно варьировать, например, чтобы повысить специфичность, перед вставкой в остов.
[0039] Термин «человеческое» антитело относится к антителу, которое имеет аминокислотную последовательность, соответствующую таковой антитела, вырабатываемого человеком, и/или созданную с помощью любой технологии получения человеческих антител. Определение человеческого антитела явным образом исключает гуманизированное антитело, содержащее нечеловеческие антигенсвязывающие остатки.
[0040] «Антигенсвязывающий фрагмент антитела» относится к молекуле, отличной от интактного антитела, которая содержит часть интактного антитела, которая связывается с антигеном, с которым связывается интактное антитело. Примеры фрагментов антител включают, но не ограничиваются этим Fv, Fab, Fab', Fd-фрагменты, dAb-фрагменты, Fab'-SH, F(ab')2; диатела; триатела; линейные антитела; одноцепочечные молекулы антител (например, scFv); и мультиспецифические антитела, образуемые из фрагментов антител, минимальные единицы распознавания, состоящие из аминокислотных остатков, которые имитируют гипервариабельную область антитела (например, выделенную определяющую комплементарность область (CDR), такую как пептид CDR3). Антигенсвязывающий фрагмент, описанный в данной заявке, связывается с антигеном CD40L.
[0041] Антигенсвязывающий фрагмент антитела, как правило, содержит по меньшей мере один вариабельный домен. Вариабельный домен может иметь любой размер или аминокислотный состав и в общем случае содержит по меньшей мере одну CDR, которая является смежной или находится в одной рамке считывания с одной или более каркасными последовательностями. В антигенсвязывающих фрагментах, содержащих домен VH, связанный с доменом VL, домены VH и VL могут располагаться относительно друг друга в любом подходящем упорядочении. Например, вариабельная область может быть димерной и содержать димеры VH-VH, VH-VL или VL-VL. В альтернативном варианте антигенсвязывающий фрагмент антитела может содержать мономерный домен VH или VL.
[0042] Выделенное антитело включает биспецифические антитела, в которых каждое плечо антитела или антигенсвязывающий фрагмент связывается с отличной мишенью или отличным эпитопом.
[0043] Термины «полноразмерное антитело», «интактное антитело» и «цельное антитело» взаимозаменяемо употребляются в данном документе и относятся к антителу, имеющему структуру, по существу сходную со структурой нативного антитела, или имеющему тяжелые цепи, которые содержат Fc-область.
[0044] «5c8» относится к мышиному античеловеческому антителу, которое связывает CD40L и вырабатывается гибридомой, доступной от ATCC под номером доступа HB10916, и описано в патенте США № 5474771. «hu5c8» относится к германизированной версии 5c8, последовательность которой описана в Karpusas, et al., Structure vol. 9, pp 321-329, (2001).
[0045] Термины «субъект», «индивид» и «пациент» взаимозаменяемо употребляются в данном документе и относятся к субъекту-, индивиду- или пациенту-человеку.
[0046] Согласно данному документу все композиционные процентные значения приведены по массе общей композиции, если не указано иное. В контексте данного документа подразумевается, что слово «включать» и его варианты являются неограничивающими так, что перечисление элементов в перечне не подразумевает исключение других подобных элементов, которые также можно применять в материалах, композициях, устройствах и способах данной технологии. Аналогично, подразумевается, что термины «может» и «может включать» и их варианты являются неограничивающими так, что упоминание, что вариант реализации может или может включать определенные элементы или признаки, не исключает другие варианты реализации данной технологии, которые не включают эти элементы или признаки.
[0047] Термин «выделенный белок» или «выделенный полипептид» (например, выделенное антитело или выделенный антигенсвязывающий фрагмент) представляет белок или полипептид, который за счет своего происхождения или источника получения не связан с ассоциированными природным образом компонентами, которые связаны с ним в его нативном состоянии; по существу не содержит других белков от того же вида; экспрессируется клеткой от отличного вида; или не встречается в природе. Таким образом, полипептид, который химически синтезирован или синтезирован в клеточной системе, отличной от клетки, из которой он происходит в природе, будет «выделенным» из компонентов, ассоциированных с ним природным образом. Белок также можно по существу освободить от компонентов, ассоциированных с ним природным образом, путем выделения, используя методики очистки белков, хорошо известные в данной области техники.
[0048] В контексте данного документа термин «вариант» определен как модифицированная или измененная форма последовательности дикого типа, например, в которой одна или более аминокислот могут быть замещены другими аминокислотами или не аминокислотами, которые не оказывают сильное влияние на функцию. В некоторых вариантах реализации вариант может содержать измененную боковую цепь в случае по меньшей мере одного аминокислотного остатка.
[0049] В контексте данного документа термин «антиген» определен как соединение, которое может стимулировать выработку антител и специфическим образом взаимодействует с ними, и/или соединение, которое вызывает ответ иммунной системы. Например, это белок клеточной поверхности или специфическая линейная или нелинейная его часть. В данном документе этот термин может быть сокращен до «Ag».
[0050] Термин «специфически связывает» и т. п. означает, что антитело или его антигенсвязывающий фрагмент образует комплекс с антигеном, который является относительно стабильным в физиологических условиях. Специфическое связывание может характеризоваться равновесной константой диссоциации (KД), составляющей около 3000 нМ или менее (т. е. меньшая KД означает более сильное связывание), около 2000 нМ или менее, около 1000 нМ или менее; около 500 нМ или менее; около 300 нМ или менее; около 200 нМ или менее; около 100 нМ или менее; около 50 нМ или менее; около 1 нМ или менее; или около 0,5 нМ.
[0051] Специфическое связывание в отношении конкретного антигена или эпитопа может демонстрировать, например, антитело, имеющее KД в отношении антигена или эпитопа, составляющую по меньшей мере около 1×10-4 М, по меньшей мере около 1×10-5 М, по меньшей мере около 1×10-6 М, по меньшей мере около 1×10-7 М, по меньшей мере около 1×10-8 М, по меньшей мере около 1×10-9 М, в альтернативном варианте по меньшей мере около 1×10-10 М, по меньшей мере около 1×10-11 М, по меньшей мере около 1×10-12 М или более, где KД относится к равновесной константе диссоциации конкретного взаимодействия антитело-антиген. Как правило, антитело, которое специфически связывает антиген, имеет KД, которая в 20, 50, 100, 500, 1000, 5000, 10000 или более раз больше для контрольной молекулы по сравнению с антигеном или эпитопом. Также специфическое связывание в отношении конкретного антигена или эпитопа может демонстрировать, например, антитело, имеющее Kасс. в отношении антигена или эпитопа, по меньшей мере в 20, 50, 100, 500, 1000, 5000, 10000 или более раз большую для эпитопа по сравнению с контролем, где Kасс. относится к скорости ассоциации конкретного взаимодействия антитело-антиген.
[0052] Термин «нейтрализующее антитело» включает антитело, которое способно ингибировать и/или нейтрализовать биологическую активность CD40L, например, анти-CD40L антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые ингибируют или предотвращают, или снижают связывание CD40L с CD40, и, таким образом, ингибировать или снижать путь передачи сигнала, активируемый CD40L, и/или ингибировать или снижать связывание CD40L с CD40.
выше
[0053] Термины «антагонистическое антитело» или «антитело-антагонист» в равной мере употребляются в данном документе и включают антитело, которое способно ингибировать и/или нейтрализовать активность биологической передачи сигнала CD40L, как описано для нейтрализующего антитела .
[0054] Термины и выражения, употребляемые в данном документе, используются в терминах описания, но не ограничения, а употребление таких терминов и выражений не подразумевает исключение любых эквивалентов проиллюстрированных и описанных признаков или их частей, но считается, что возможны различные модификации в рамках объема заявляемого изобретения. Таким образом, следует понимать, что хотя аспекты данного изобретения были явным образом описаны посредством различных вариантов реализации, которые могут включать предпочтительные варианты реализации, типовые варианты реализации и необязательные признаки, специалисты в данной области техники могут прибегнуть к модификациям и вариациям описанной в данном документе концепции. Считается, что такие модификации и вариации входят в объем вариантов реализации изобретения, описанный и определяемый прилагаемой формулой изобретения.
Фармацевтические композиции и способы введения
[0055]
[0056] Фармацевтические композиции для применения в соответствии со способами данного изобретения можно готовить традиционным образом, используя один или более физиологически приемлемых носителей. Фармацевтически приемлемые носители частично определяются конкретной вводимой композицией, а также конкретным способом, применяемым для введения композиции. Соответственно, существует широкий ряд подходящих готовых форм соединений, применимых в способах данного изобретения (смотрите, например, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th ed., Gennaro et al. Eds., Lippincott Williams and Wilkins, 2000).
[0057] Готовые формы, подходящие для парентерального введения, включают водные и неводные изотонические стерильные растворы для инъекций, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостатические агенты и растворенные вещества, которые придают готовой форме изотоничность с кровью предполагаемого реципиента, а также водные и неводные стерильные суспензии, которые могут содержать суспендирующие агенты, солюбилизаторы, загустители, стабилизаторы и консерванты. Типовые наполнители для инъекций или инфузий могут включать маннит, кислоты лимонной моногидрат, двухосновного фосфата натрия дигидрат, одноосновного фосфата натрия дигидрат, полисорбат 80, хлорид натрия, цитрат натрия и воду.
[0058] В соответствии с данным изобретением соединения можно вводить любыми подходящими средствами, которые могут варьироваться в зависимости от типа подлежащего лечению нарушения и от природы самого соединения. Например, в случае антител и их антигенсвязывающих фрагментов по данному изобретению пути введения предпочтительно включают парентеральные, например, внутримышечный, внутривенный, внутриартериальный, внутрибрюшинный, интрацереброспинальный, интраспинальный, эпидуральный, подкожный или с помощью систем с замедленным высвобождением или имплантатов. Предпочтительно парентеральное дозирование осуществляют посредством инъекции, наиболее предпочтительно внутривенной, внутримышечной или подкожной инъекции.
[0059] В некоторых вариантах реализации анти-CD40L антитела или их антигенсвязывающие фрагменты по данному изобретению готовят для и могут лиофилизировать для хранения, и восстанавливают в подходящем наполнителе перед применением в соответствии с известными в данной области техники методиками лиофилизации и восстановления.
[0060] В одной типовой фармацевтической композиции, содержащей анти-CD40L антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, композиция приготовлена в виде стерильного, не содержащего консервантов раствора анти-CD40L антитела или его антигенсвязывающего фрагмента для внутривенного или подкожного введения. Готовая форма может быть предоставлена в виде одноразового предварительно наполненного шприца-ручки, в виде одноразового, например, содержащего около 1 мл, предварительно наполненного шприца или в виде одноразового системно используемого флакона. Предпочтительно фармацевтическая композиция, содержащая анти-CD40L антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, является прозрачной и бесцветной с pH от около 5,0 до около 6,9, предпочтительно pH от около 5,0 до около 6,5 и даже более предпочтительно pH в диапазоне от около 5,0 до около 6,0. В различных вариантах реализации готовые формы, содержащие фармацевтические композиции, могут содержать от около 500 мг до около 1 мг, или от около 400 мг до около 10 мг, или от около 300 мг до около 30 мг, или от около 200 мг до около 50 мг анти-CD40L антитела или его антигенсвязывающего фрагмента на мл раствора при восстановлении и введении субъекту.
[0061] Выбор схемы введения для терапевтического средства зависит от нескольких факторов, включая сывороточную или тканевую скорость циркуляции соединения, уровень симптомов, иммуногенность соединения и доступность целевых клеток в биологической среде, общее состояние здоровья пациента, анамнез пациента и т. п. Предпочтительно схема введения позволяет максимизировать количество терапевтического средства, доставляемое в организм пациента, в соответствии с приемлемым уровнем побочных явлений. Соответственно, количество доставляемого биологического препарата частично зависит от конкретного соединения и тяжести подлежащего лечению патологического состояния. Следует понимать, что определение соответствующих дозированных форм, величины доз и путей введения находится в компетенции специалиста в области фармацевтики и медицины.
Дозы
[0062]
[0063] Фармацевтические готовые формы по данному изобретению могут содержать от около 0,001 до около 200 мг/кг анти-CD40L антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, например, внутривенную инъекцию от около 0,001 мг/кг до около 100 мг/кг, или от около 0,001 мг/кг до около 50 мг/кг, или от около 0,001 мг/кг до около 10 мг/кг анти-CD40L антитела или его антигенсвязывающего фрагмента можно осуществлять в виде болюсной инъекции, а оставшуюся дозу антитела можно вводить путем внутривенной инъекции. Можно вводить предопределенную дозу анти-CD40L антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, например, в течение периода, составляющего от часа до двух часов или до пяти часов.
[0064] В дополнительном варианте реализации часть дозы вводят путем подкожной инъекции и/или инфузии в форме болюса, а остаток - путем инфузии готовой формы антитела. В случае некоторых типовых доз готовую форму антитела можно вводить подкожно в диапазоне доз от около 0,001 до около 200 мг/кг, например, от около 0,001 мг/кг до около 100 мг/кг, или от около 0,001 мг/кг до около 50 мг/кг, или от около 0,001 мг/кг до около 10 мг/кг подкожной инъекции анти-CD40L антитела или его антигенсвязывающего фрагмента. В некоторых вариантах реализации дозу можно вводить в виде болюса, а оставшуюся дозу антител можно вводить путем подкожной или внутривенной инъекции. Можно вводить предопределенную дозу анти-CD40L антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, например, в течение периода, составляющего час, или периода, составляющего два часа, или периода, составляющего три часа, или периода, составляющего четыре часа, или периода, составляющего пять часов или больше.
Комбинированная терапия
[0065]
[0066] Описанные в данном документе антитела или их антигенсвязывающие фрагменты можно вводить одни (монотерапия) или в комбинации, т. е. вместе с другими агентами. Например, в одном варианте реализации комбинированная терапия может включать применение одного или более дополнительных терапевтических агентов. В другом варианте реализации комбинированная терапия включает соответствующее стандарту лечение, которое может включать или нет применение дополнительных терапевтических агентов (состоит преимущественно из антитела или его антигенсвязывающего фрагмента).
[0067] Дополнительное или комбинированное введение (совместное введение) включает одновременное введение любого из антител или их антигенсвязывающих фрагментов, описанных в данном документе, и одного или более агентов в такой же или отличной дозированной форме, или отдельное введение полипептида и одного или более агентов (например, последовательное введение). Такое одновременное или последовательное введение предпочтительно приводит к одновременному присутствию как полипептида, так и одного или более агентов в организме получающих лечение пациентов.
Наборы и готовые изделия
[0068]
[0069] Дополнительно предложены наборы, содержащие антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, описанные в данном документе, и инструкции по применению. Наборы, как правило, содержат запакованную комбинацию реагентов в предопределенных количествах с инструкциями и этикеткой с указанием предусмотренного применения содержимого набора. Термины этикетка или инструкция включают любой письменный или записанный материал, предоставляемый на наборе или вместе с ним, или который каким-либо иным образом прилагается к набору в любой момент во время его производства, перевозки, продажи или применения. Они могут иметь форму, предписанную государственным органом, регулирующим производство, продажу фармацевтических препаратов или биологических продуктов, с информацией, отображающей одобрение органом производства, применения или продажи для введения людям или для ветеринарного применения. Этикетка или инструкция также могут включать рекламные проспекты и брошюры, упаковочные материалы, а также аудио- или видеоинструкции.
Варианты реализации
[0070]
[0071] Все варианты реализации выделенных антител или их антигенсвязывающих фрагментов связываются с CD40L и ингибируют или блокируют связывание CD40L с CD40. В контексте данного документа выражения «блокировать связывание CD40L и CD40» и «блокировать взаимодействие между CD40L и CD40» употребляются взаимозаменяемо. Ингибирование или блокирование связывания может быть прямым или непрямым. В общем случае антитело или его антигенсвязывающий фрагмент создают физические препятствия связыванию CD40L с CD40 посредством прямой специфической конкуренции с CD40 за один сайт связывания на CD40L или посредством стерического несоответствия вследствие связывания антитела или его антигенсвязывающего фрагмента вблизи CD40-связывающего сайта CD40L. В других случаях эффект является непрямым, например, антитело или его антигенсвязывающий фрагмент вызывают аллостерическое изменение в конформации CD40L, которое ингибирует или устраняет его связывание с CD40.
[0072] Один вариант реализации представляет собой выделенное антитело, которое связывается с CD40L и содержит легкую цепь и тяжелую цепь, при этом легкая цепь содержит вариабельную область легкой цепи, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, или по меньшей мере 91%, или по меньшей мере 92%, или по меньшей мере 93%, или по меньшей мере 94%, или по меньшей мере 95%, или по меньшей мере 96% или по меньшей мере 97%, или по меньшей мере 98%, или по меньшей мере 99% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7 или SEQ ID NO: 8, а тяжелая цепь содержит вариабельную область тяжелой цепи, при этом вариабельная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, имеющую по меньшей мере 90%, или по меньшей мере 91%, или по меньшей мере 92%, или по меньшей мере 93%, или по меньшей мере 94%, или по меньшей мере 95%, или по меньшей мере 96% или по меньшей мере 97%, или по меньшей мере 98%, или по меньшей мере 99% идентичности последовательности с SEQ ID NO:1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 4.
[0073] В одном варианте реализации в данном изобретении предложены выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с CD40L, содержащие: a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10, 11, 12, 13 или 14; iii) домен CDRH3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16 или 17; ii) домен CDRL2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18 или 19; iii) домен CDRL3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20.
[0074] В аспекте A в данном изобретении предложены выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, которые специфически связываются с CD40L, содержащие: a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 10, 11, 12, 13 или 14; iii) домен CDRH3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 16 или 17; ii) домен CDRL2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 18 или 19; iii) домен CDRL3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20.
[0075] Один вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10; iii) домен CDRH3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16; ii) домен CDRL2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18; iii) домен CDRL3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20. Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 10; iii) домен CDRH3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 16; ii) домен CDRL2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 18; iii) домен CDRL3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20.
[0076] Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10; iii) домен CDRH3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17; ii) домен CDRL2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18; iii) домен CDRL3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20. Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 10; iii) домен CDRH3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 17; ii) домен CDRL2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 18; iii) домен CDRL3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20.
[0077] Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10; iii) домен CDRH3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16; ii) домен CDRL2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19; iii) домен CDRL3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20. Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 10; iii) домен CDRH3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 16; ii) домен CDRL2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 19; iii) домен CDRL3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20.
[0078] Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 10; iii) домен CDRH3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17; ii) домен CDRL2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19; iii) домен CDRL3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20. Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 10; iii) домен CDRH3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 17; ii) домен CDRL2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 19; iii) домен CDRL3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20.
[0079] Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 11; iii) домен CDRH3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16; ii) домен CDRL2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18; iii) домен CDRL3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20. Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 11; iii) домен CDRH3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 16; ii) домен CDRL2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 18; iii) домен CDRL3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20.
[0080] Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 11; iii) домен CDRH3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17; ii) домен CDRL2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18; iii) домен CDRL3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20. Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 11; iii) домен CDRH3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 17; ii) домен CDRL2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 18; iii) домен CDRL3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20.
[0081] Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 11; iii) домен CDRH3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16; ii) домен CDRL2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19; iii) домен CDRL3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20. Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 11; iii) домен CDRH3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 16; ii) домен CDRL2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 19; iii) домен CDRL3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20.
[0082] Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 11; iii) домен CDRH3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17; ii) домен CDRL2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19; iii) домен CDRL3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20. Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 11; iii) домен CDRH3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 17; ii) домен CDRL2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 19; iii) домен CDRL3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20.
[0083] Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 12; iii) домен CDRH3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16; ii) домен CDRL2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18; iii) домен CDRL3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20. Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 12; iii) домен CDRH3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 16; ii) домен CDRL2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 18; iii) домен CDRL3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20.
[0084] Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 12; iii) домен CDRH3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17; ii) домен CDRL2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18; iii) домен CDRL3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20. Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 12; iii) домен CDRH3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 17; ii) домен CDRL2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 18; iii) домен CDRL3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20.
[0085] Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 12; iii) домен CDRH3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16; ii) домен CDRL2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19; iii) домен CDRL3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20. Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 12; iii) домен CDRH3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 16; ii) домен CDRL2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 19; iii) домен CDRL3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20.
[0086] Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 12; iii) домен CDRH3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17; ii) домен CDRL2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19; iii) домен CDRL3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20. Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 12; iii) домен CDRH3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 17; ii) домен CDRL2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 19; iii) домен CDRL3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20.
[0087] Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13; iii) домен CDRH3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16; ii) домен CDRL2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18; iii) домен CDRL3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20. Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 13; iii) домен CDRH3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 16; ii) домен CDRL2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 18; iii) домен CDRL3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20.
[0088] Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13; iii) домен CDRH3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17; ii) домен CDRL2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18; iii) домен CDRL3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20. Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 13; iii) домен CDRH3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 17; ii) домен CDRL2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 18; iii) домен CDRL3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20.
[0089] Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 13; iii) домен CDRH3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17; ii) домен CDRL2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19; iii) домен CDRL3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20. Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 13; iii) домен CDRH3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 17; ii) домен CDRL2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 19; iii) домен CDRL3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20.
[0090] Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14; iii) домен CDRH3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 16; ii) домен CDRL2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18; iii) домен CDRL3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20. Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 14; iii) домен CDRH3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 16; ii) домен CDRL2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 18; iii) домен CDRL3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20.
[0091] Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14; iii) домен CDRH3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17; ii) домен CDRL2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 18; iii) домен CDRL3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20. Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 14; iii) домен CDRH3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 17; ii) домен CDRL2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 18; iii) домен CDRL3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20.
[0092] Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 14; iii) домен CDRH3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 17; ii) домен CDRL2, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 19; iii) домен CDRL3, содержащий последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 20. Другой вариант реализации аспекта A представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую: i) домен CDRH1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 9; ii) домен CDRH2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 14; iii) домен CDRH3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 15; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую: i) домен CDRL1, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 17; ii) домен CDRL2, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 19; iii) домен CDRL3, состоящий из последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 20.
[0093] В аспекте B в данном изобретении предложены выделенные антитела или их антигенсвязывающие фрагменты, которые специфически связываются с CD40L, содержащие: (a) вариабельную область тяжелой цепи (VH), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, 2, 3 или 4; и (b) вариабельную область легкой цепи (VL), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5, 6, 7 или 8.
[0094] Вариант реализации аспекта B представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи (VL), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5.
[0095] Другой вариант реализации аспекта B представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи (VL), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6.
[0096] Другой вариант реализации аспекта B представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи (VL), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7.
[0097] Другой вариант реализации аспекта B представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи (VL), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8.
[0098] Другой вариант реализации аспекта B представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи (VL), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5.
[0099] Другой вариант реализации аспекта B представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи (VL), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6.
[00100] Другой вариант реализации аспекта B представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи (VL), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7.
[00101] Другой вариант реализации аспекта B представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1, и вариабельную область легкой цепи (VL), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8.
[00102] Другой вариант реализации аспекта B представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, и вариабельную область легкой цепи (VL), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5.
[00103] Другой вариант реализации аспекта B представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, и вариабельную область легкой цепи (VL), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6.
[00104] Другой вариант реализации аспекта B представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, и вариабельную область легкой цепи (VL), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7.
[00105] Другой вариант реализации аспекта B представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 3, и вариабельную область легкой цепи (VL), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8.
[00106] Другой вариант реализации аспекта B представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 4, и вариабельную область легкой цепи (VL), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 5.
[00107] Другой вариант реализации аспекта B представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 4, и вариабельную область легкой цепи (VL), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 6.
[00108] Другой вариант реализации аспекта B представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 4, и вариабельную область легкой цепи (VL), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 7.
[00109] Другой вариант реализации аспекта B представляет собой выделенные антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, содержащие вариабельную область тяжелой цепи (VH), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 4, и вариабельную область легкой цепи (VL), имеющую аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 8.
[00110] В аспекте C предложены выделенные антитела по любому из вариантов реализации, описанных в данной заявке, при этом антитела содержат Fc-область, а Fc-область сконструирована со сниженной или устраненной одной или более Fc-эффекторной функцией.
[00111] В одном варианте реализации аспекта C Fc-область сконструирована так, что Fc-область характеризуется сниженным или устраненным связыванием с Fc-рецептором (FcR) или сниженным или устраненным связыванием с C1q. В конкретном варианте реализации аспекта C FcR представляет собой FCγRIa (CD64), FCγRIIa (CD32), FCγRIIIa (CD16a) или FCγRIIIb (CD16b). В другом варианте реализации аспекта C FcR представляет собой FcγRIIa.
[00112] Вариант реализации аспекта C представляет собой выделенное антитело в соответствии с любым из вариантов реализации данного изобретения, при этом антитело имеет изотип IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4 или любую их комбинированную или гибридную версию. Другой вариант реализации аспекта C представляет собой выделенное антитело в соответствии с любым из вариантов реализации данного изобретения, при этом антитело имеет изотип IgG1, а константная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 21. (P238S и N297G) Как показано в эксперименте 3, ни один из клонов антител, предложенных в данном изобретении, которые были сконструированы с Fc SEQ ID NO: 21, не связывался с FCγRIa, FCγRIIa, FCγRIIIa или FCγRIIIb. Как показано в эксперименте 4, ни один из клонов антител, предложенных в данном изобретении, которые были сконструированы с Fc SEQ ID NO: 21, не связывался с C1q.
[00113] Было показано, что мутация Fc остова IgG в позиции 297 (N297A) устраняет гликозилирование IgG и связывание Fc-гамма-рецептора. Было показано, что мутация Fc остова IgG в позиции 265 (D265A) устраняет связывание Fc-гамма-рецептора. Соответственно, были созданы варианты реализации данного изобретения, которые содержали эти мутации в Fc-области. Один вариант реализации аспекта C представляет собой выделенное антитело в соответствии с любым из вариантов реализации данного изобретения, которое содержит константную область тяжелой цепи, а константная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 22. (D265A и N297A).
[00114] В публикации заявки на патент Соединенных Штатов номер 2014/0294834 описана мутация константной области тяжелой цепи. Таким образом, другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело в соответствии с любым из вариантов реализации, имеющих Fc-область, которые описаны в данной заявке, содержащее константную область тяжелой цепи, а константная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 23. (T299K - MM131).
[00115] Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело в соответствии с любым из вариантов реализации, имеющих Fc-область, которые описаны в данной заявке, содержащее константную область тяжелой цепи, а константная область тяжелой цепи содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 24. (N299K).
[00116] В конкретном варианте реализации выделенное антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи, соединенную с константной областью тяжелой цепи. В одном варианте реализации вариабельная область тяжелой цепи VH1 соединена непосредственно с константной областью тяжелой цепи, содержащей P238S и N297G, а тяжелая цепь выделенного антитела состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 42. В другом варианте реализации вариабельная область тяжелой цепи VH2 соединена непосредственно с константной областью тяжелой цепи, содержащей P238S и N297G, а тяжелая цепь выделенного антитела состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 43. В другом варианте реализации вариабельная область тяжелой цепи VH3 соединена непосредственно с константной областью тяжелой цепи, содержащей P238S и N297G, а тяжелая цепь выделенного антитела состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 44. В другом варианте реализации вариабельная область тяжелой цепи VH4 соединена непосредственно с константной областью тяжелой цепи, содержащей P238S и N297G, а тяжелая цепь выделенного антитела состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 45.
[00117] В одном варианте реализации вариабельная область тяжелой цепи VH1 соединена непосредственно с константной областью тяжелой цепи, содержащей D265A/N297A, а тяжелая цепь выделенного антитела состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 46. В другом варианте реализации вариабельная область тяжелой цепи VH2 соединена непосредственно с константной областью тяжелой цепи, содержащей D265A/N297A, а тяжелая цепь выделенного антитела состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 47. В другом варианте реализации вариабельная область тяжелой цепи VH3 соединена непосредственно с константной областью тяжелой цепи, содержащей 265A/N297A, а тяжелая цепь выделенного антитела состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 48. В другом варианте реализации вариабельная область тяжелой цепи V4 соединена непосредственно с константной областью тяжелой цепи, содержащей 265A/N297A, а тяжелая цепь выделенного антитела состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 49.
[00118] В другом варианте реализации вариабельная область тяжелой цепи VH1 соединена непосредственно с константной областью тяжелой цепи, имеющей гибридный изотип IgG1/IgG4, а тяжелая цепь выделенного антитела состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 50. В другом варианте реализации вариабельная область тяжелой цепи VH2 соединена непосредственно с константной областью тяжелой цепи, имеющей гибридный изотип IgG1/IgG4, а тяжелая цепь выделенного антитела состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 51. В другом варианте реализации вариабельная область тяжелой цепи VH3 соединена непосредственно с константной областью тяжелой цепи, имеющей гибридный изотип IgG1/IgG4, а тяжелая цепь выделенного антитела состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 51. В другом варианте реализации вариабельная область тяжелой цепи VH4 соединена непосредственно с константной областью тяжелой цепи, имеющей гибридный изотип IgG1/IgG4, а тяжелая цепь выделенного антитела состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 53.
[00119] В другом варианте реализации вариабельная область тяжелой цепи VH1 соединена непосредственно с константной областью тяжелой цепи, имеющей изотип IgG4, а тяжелая цепь выделенного антитела состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 54. В другом варианте реализации вариабельная область тяжелой цепи VH2 соединена непосредственно с константной областью тяжелой цепи, имеющей изотип IgG4, а тяжелая цепь выделенного антитела состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 55. В другом варианте реализации вариабельная область тяжелой цепи VH3 соединена непосредственно с константной областью тяжелой цепи, имеющей изотип IgG4, а тяжелая цепь выделенного антитела состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 56. В другом варианте реализации вариабельная область тяжелой цепи VH4 соединена непосредственно с константной областью тяжелой цепи, имеющей изотип IgG4, а тяжелая цепь выделенного антитела состоит из аминокислотной последовательности, приведенной в SEQ ID NO: 57.
[00120] Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело в соответствии с любым из вариантов реализации, имеющих вариабельную область легкой цепи и константную область легкой цепи, при этом константная область легкой цепи содержит последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 25. Другой вариант реализации представляет собой вариабельную область легкой цепи 1 с константной областью легкой цепи, при этом аминокислотная последовательность приведена в SEQ ID NO: 38. Другой вариант реализации представляет собой вариабельную область легкой цепи 2 с константной областью легкой цепи, при этом аминокислотная последовательность приведена в SEQ ID NO: 39. Другой вариант реализации представляет собой вариабельную область легкой цепи 3 с константной областью легкой цепи, при этом аминокислотная последовательность приведена в SEQ ID NO: 40. Другой вариант реализации представляет собой вариабельную область легкой цепи 4 с константной областью легкой цепи, при этом аминокислотная последовательность приведена в SEQ ID NO: 41.
[00121] Другой вариант реализации представляет собой способ лечения субъекта, имеющего CD40L-ассоциированное заболевание или нарушение, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, описанных в данной заявке.
[00122] Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 42, и последовательностью легкой цепи, приведенной в SEQ ID NO: 38. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 43, и последовательностью легкой цепи, приведенной в SEQ ID NO: 38. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 44, и последовательностью легкой цепи, приведенной в SEQ ID NO: 38. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 45, и последовательностью легкой цепи, приведенной в SEQ ID NO: 38. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 42, и последовательностью легкой цепи, приведенной в SEQ ID NO:39. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 43, и последовательностью легкой цепи, приведенной в SEQ ID NO: 39. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 44, и последовательностью легкой цепи, приведенной в SEQ ID NO: 39. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 45, и последовательностью легкой цепи, приведенной в SEQ ID NO: 39. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 42, и последовательностью легкой цепи, приведенной в SEQ ID NO: 40. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 43, и последовательностью легкой цепи, приведенной в SEQ ID NO: 40. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 44, и последовательностью легкой цепи, приведенной в SEQ ID NO: 40. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 45, и последовательностью легкой цепи, приведенной в SEQ ID NO: 40. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 42, и последовательностью легкой цепи, приведенной в SEQ ID NO: 41. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 43, и последовательностью легкой цепи, приведенной в SEQ ID NO: 41. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 44, и последовательностью легкой цепи, приведенной в SEQ ID NO: 41. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 45, и последовательностью легкой цепи, приведенной в SEQ ID NO: 41.
[00123] Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 46, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 38. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 47, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 38. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 48, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 38. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 49, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 38. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 46, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO:39. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 47, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 39. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 48, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 39. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 49, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 39. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 46, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 40. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 47, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 40. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 48, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 40. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 49, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 40. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 46, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 41. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 47, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 41. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 48, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 41. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 49, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 41.
[00124] Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 50, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 38. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 51, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 38. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 52, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 38. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 53, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 38. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 50, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO:39. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 51, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 39. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 52, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 39. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 53, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 39. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 50, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 40. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 51, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 40. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 52, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 40. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 53, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 40. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 50, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 41. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 51, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 41. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 52, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 41. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 53, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 41.
[00125] Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 54, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 38. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 55, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 38. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 56, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 38. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 57, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 38. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 54, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO:39. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 55, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 39. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 56, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 39. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 57, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 39. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 54, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 40. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 55, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 40. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 56, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 40. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 57, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 40. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 54, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 41. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 55, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 41. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 56, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 41. Другой вариант реализации представляет собой выделенное антитело, имеющее тяжелую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 57, и легкую цепь с аминокислотной последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 41.
[00126] Другой вариант реализации представляет собой способ лечения субъекта, имеющего нейродегенеративное или нейромышечное заболевание или нарушение; воспалительное или иммунное заболевание или нарушение; или аутоиммунное заболевание, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, описанных в данной заявке.
[00127] Другой вариант реализации представляет собой способ лечения субъекта, имеющего аутоиммунное заболевание, выбранное из группы, состоящей из системной красной волчанки, диабета 1 типа, миастении гравис, псориаза, болезни Аддисона, болезни Крона, увеита, множественного склероза, гемолитической анемии, воспалительного заболевания кишечника, иммунной тромбоцитопенической пурпуры, болезни Грейвcа и ревматоидного артрита, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, описанных в данной заявке.
[00128] Другой вариант реализации представляет собой способ лечения субъекта, имеющего нейродегенеративное нарушение или нейромышечное нарушение, выбранное из группы, состоящей из болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, амиотрофического латерального склероза, мультифокальной двигательной нейропатии, первичного латерального склероза, спинальной мышечной атрофии, болезни Кеннеди и спиноцеребеллярной атаксии, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, описанных в данной заявке.
[00129] Другой вариант реализации представляет собой способ лечения субъекта, имеющего амиотрофический латеральный склероз, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, описанных в данной заявке.
[00130] Другой вариант реализации представляет собой способ ингибирования иммунного ответа у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, описанных в данной заявке.
[00131] Другой вариант реализации представляет собой способ ингибирования иммунного ответа у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества антитела или его антигенсвязывающего фрагмента, при этом иммунный ответ представляет собой болезнь «трансплантат против хозяина» или отторжение органного трансплантата.
[00132] Другой вариант реализации представляет собой способ в соответствии с любыми способами по данному изобретению, в котором антитело или фрагмент антитела вводят в комбинации с другим терапевтическим агентом. Один вариант реализации представляет собой способ в соответствии с любыми способами по данному изобретению, в котором антитело или фрагмент антитела вводят в комбинации с соединением, которое блокирует взаимодействие между CD28 и CD86 или между CD28 и CD80.
[00133] Другой вариант реализации представляет собой способ в соответствии с любыми способами по данному изобретению, в котором антитело или фрагмент антитела вводят в комбинации с соединением, которое блокирует взаимодействие между CD28 и CD86 или между CD28 и CD80 и представляет собой слитый белок CTLA4-Ig.
[00134] Другой вариант реализации представляет собой способ в соответствии с любыми способами по данному изобретению, в котором антитело или фрагмент антитела вводят в комбинации с соединением, которое блокирует взаимодействие между CD28 и CD86 или между CD28 и CD80 и представляет собой абатасепт, белатацепт или галиксимаб.
ПРИМЕРЫ
Пример 1 Анализ связывания CD40L
[00135]
2
4
[00136] Чтобы сравнить связывание CD40L антител из всех 16 клонов в сравнении с 5c8 или AT-1501, проводили анализ связывания, используя 2 клона и анализируя 5c8 и AT-1501 на том же 96-луночном аналитическом планшете. Трехсоставной сандвич-анализ ИФА использовали для определения уровня связывания антител по данному изобретению в сравнении с референсными антителами 5c8-19 и AT1501. 96-луночные полистироловые планшеты покрывали рекомбинантным человеческим CD40L (BioLegend, кат. # 591706), используя 2 мкг/мл в ФСБ, а 50 мкл/лунку добавляли в 96-луночные планшеты Costar площадью ½ с высокой степенью связывания (Corning 3690) и инкубировали в течение ночи при 4°C. Планшеты блокировали (1X) ФСБ/1,0% БСА (140 мкл/лунку) в течение 1 часа при комнатной температуре, чтобы предотвратить фоновое связывание. Добавляли кривые связывания 5C8 или AT1501 (от 2 мкг/мл из серийных 2-кратных разведений) (50 мкл/лунку) и инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре. Планшеты промывали и инкубировали с HRP-(Fab2) ослиным античеловеческим IgG (Fc-специфическим) (Jackson Immuno. 709-036-098) в разведении 1:10 000 (50 мкл/лунку) в течение 1 часа при комнатной температуре. Планшеты промывали и добавляли ТМБ-субстрат (Surmodics BioFX TMBW-1000-01) (50 мкл/лунку). Проявление цвета останавливали через 5 минут при комнатной с помощью 25 мкл 2NHSO. Планшеты считывали на планшет-ридере Molecular Devices SpectraMax M5, используя программу SoftMax Pro 6.2.2 для определения поглощения на 450 нм.
[00137] Относительную эффективность связывания CD40L рассчитывали следующим образом: [IC50 (клона) / IC50 (5c8 или AT-1501) X 100%]. Ранжированная эффективность 16 клонов в сравнении с 5c8 проиллюстрирована на Фиг. 1A, а ранжированная эффективность в сравнении с AT-1501 проиллюстрирована на Фиг. 1B. Полученные в результате кривые связывания проиллюстрированы на Фиг. 2A-2Q (сравнение 16 клонов и 5c8, на Фиг. 2H проиллюстрировано сравнение между AT-1501 и 5c8) и Фиг. 3A-3Q (сравнение 16 клонов и AT-1501, на Фиг. 3H проиллюстрировано сравнение между AT-1501 и 5c8). Значения IC50, LCL, UCL и относительной эффективности для каждого клона приведены в Таблице 2 (сравнение с 5c8) и Таблице 3 (сравнение с AT-1501).
Таблица 2
<b>Фиг. № </b>
<b>Клон</b>
<b>IC50</b>
<b>LCL</b>
<b>UCL </b>
<b>Отн. эффект.</b>
2A
16-3
0,022
0,017
0,026
46
5c8
0,047
0,040
0,054
2B
8-3
0,036
0,028
0,043
51
5c8
0,070
0,062
0,078
12-4
0,020
0,013
0,027
47
5c8
0,042
0,038
0,046
2D
8-4
0,036
0,030
0,041
51
5c8
0,070
0,062
0,078
2E
13-2
0,020
0,013
0,027
48
5c8
0,041
0,038
0,045
4-4
0,037
0,029
0,045
51
5c8
0,072
0,064
0,081
2G
17-1
0,028
0,023
0,033
63
5c8
0,044
0,036
0,053
2H
AT-1501
0,049
0,043
0,056
95
5c8
0,052
0,046
0,058
2I
5-3
0,055
0,047
0,063
76
5c8
0,072
0,064
0,081
2J
6-6
0,065
0,059
0,070
106
5c8
0,061
0,054
0,068
2K
18-2
0,041
0,036
0,046
92
5c8
0,044
0,036
0,053
2L
10-4
0,075
0,065
0,086
113
5c8
0,067
0,058
0,076
2M
10-1
0,079
0,070
0,089
119
5c8
0,067
0,058
0,076
2N
7-5
0,102
0,094
0,111
168
5c8
0,061
0,054
0,068
2O
15,4
0,063
0,056
0,069
133
5c8
0,047
0,040
0,054
2P
11-5
0,092
0,071
0,112
177
5c8
0,052
0,046
0,058
2Q
15-1
0,081
0,073
0,089
163
5c8
0,050
0,046
0,053
Таблица 3
<b>Фиг. № </b>
<b>Клон</b>
<b>IC50</b>
<b>LCL</b>
<b>UCL </b>
<b>Отн. Эффект.</b>
3A
12-4
0,020
0,013
0,027
45
AT-1501
0,044
0,039
0,049
3B
8-3
0,036
0,028
0,043
59
AT-1501
0,060
0,053
0,068
13-2
0,020
0,013
0,027
45
AT-1501
0,044
0,038
0,049
3D
8-4
0,036
0,030
0,041
59
AT-1501
0,060
0,053
0,068
3E
16-3
0,022
0,017
0,026
48
AT-1501
0,045
0,039
0,051
4-4
0,037
0,029
0,045
60
AT-1501
0,062
0,054
0,070
3G
17-1
0,028
0,023
0,033
66
AT-1501
0,042
0,035
0,050
3H
5c8
0,052
0,046
0,058
105
AT-1501
0,049
0,043
0,056
3I
5-3
0,055
0,047
0,063
89
AT-1501
0,062
0,054
0,070
3J
10-4
0,075
0,065
0,086
115
AT-1501
0,066
0,056
0,076
3K
18-2
0,041
0,036
0,046
96
AT-1501
0,042
0,035
0,050
3L
10-1
0,079
0,070
0,089
121
AT-1501
0,066
0,056
0,076
3M
6-6
0,065
0,059
0,070
132
AT-1501
0,049
0,047
0,051
3N
11-5
0,092
0,071
0,112
174
AT-1501
0,053
0,050
0,056
3O
15-4
0,063
0,056
0,069
139
AT-1501
0,045
0,039
0,051
3P
7-5
0,102
0,094
0,111
210
AT-1501
0,049
0,047
0,051
3Q
15-1
0,081
0,073
0,089
159
AT-1501
0,051
0,046
0,055
Пример 2 Активность связывания с человеческими FcγRI, FcγRIIa, FcγRIIIa и FcγRIIIb
[00138]
[00139] 16 VH/VL-клонов антител конструировали с Fc IgG1, содержащей две мутации, P238S и N297G (SEQ ID NO: 21). Эти клоны антител анализировали в отношении Fc-эффекторной функции в отношении связывания с человеческими FcγRI, FcγRIIa и FcγRIIIa.
2
2
4
[00140] Анти-CD40L антитела (абатасепт был включен в качестве отрицательного контроля) разводили до 2 мкг/мл в (1X) ФСБ, а 50 мкл/лунку добавляли в 96-луночные планшеты Costar площадью ½ с высокой степенью связывания (Corning 3690) для инкубации в течение ночи при 4°C. Планшеты блокировали (1X) ФСБ/1,0% БСА (140 мкл/лунку) в течение 1 часа при комнатной температуре, чтобы предотвратить фоновое связывание. Добавляли кривые связывания рекомбинантных человеческих FcγRI, IIa, IIIa и IIIb (от 5 мкг/мл из серийных 2-кратных разведений) (50 мкл/лунку) и инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре. Планшеты промывали и инкубировали с мышиным античеловеческим CD16 (анти-FcRIII); CD32 (анти-FcRIIa) или CD64 (анти-FcRI) (eBioSciences/Invitrogen 14-0168-82; 16-0329-81; 14-0649-82) при 2 мкг/мл (50 мкл/лунку) в течение 1 часа при комнатной температуре. Планшеты промывали и инкубировали с HRP-(Fab) козьим антимышиным IgG (Fc-специфическим) (Jackson Immuno. 116-036-071) в разведении 1:10 000 (50 мкл/лунку) в течение 1 часа при комнатной температуре. Планшеты промывали и добавляли ТМБ-субстрат (Surmodics BioFX TMBW-1000-01) (50 мкл/лунку). Проявление цвета останавливали через 5 мин при комнатной с помощью (25 мкл/лунку) 2NHSO. Планшеты считывали на планшет-ридере Molecular Devices SpectraMax M5, используя программу SoftMax Pro 6.2.2 для определения поглощения на 450 нм.
[00141] Как можно видеть на фигурах, клоны, описанные в этой заявке, были отрицательными в отношении связывания с тремя Fc-рецепторами, тогда как 5c8 связывалось с FcγRI, FcγRIIa, но не с FcγRIIIa или FcγRIIIb. На каждой из Фиг. 4A и 4B проиллюстрировано связывание с FcγRIa для восьми клонов антител по сравнению с кривыми связывания 5c8, AT-1501 и абатасепта. На каждой из Фиг. 5A и 5B проиллюстрировано связывание с FcγRIIa для восьми клонов антител по сравнению с кривыми связывания 5c8, AT-1501 и абатасепта. На каждой из Фиг. 6A и 6B проиллюстрировано связывание с FcγRIIIa для восьми клонов антител по сравнению с кривыми связывания 5c8, AT-1501 и абатасепта. На каждой из Фиг. 6C и 6D проиллюстрировано связывание с FcγRIIIb для восьми клонов антител по сравнению с кривыми связывания 5c8, AT-1501 и абатасепта. (На Фиг. 4A, 5A, 6A и 6A приведены результаты по клонам антител 4-4, 5-3, 6-6, 7-5, 8-3, 8-4, 10-1 и 10-4, на Фиг. 4B, 5B, 6C и 6D приведены результаты по клонам антител 11-5, 12-4, 13-2, 15-1, 15-4, 16-3, 17-1 и 18-2).
Пример 4 Активность связывания с C1q
[00142]
2
4
[00143] Анти-CD40L антитела (абатасепт был включен в качестве отрицательного контроля) разводили до 2 мкг/мл в (1X) ФСБ, а 50 мкл/лунку добавляли в 96-луночные планшеты Costar площадью ½ с высокой степенью связывания (Corning 3690) для инкубации в течение ночи при 4°C. Планшеты блокировали (1X) ФСБ/1,0% БСА (140 мкл/лунку) в течение 1 часа при комнатной температуре, чтобы предотвратить фоновое связывание. Добавляли кривые связывания природного человеческого белка C1q (Abcam ab96363) от 10 мкг/мл из серийных 2-кратных разведений (50 мкл/лунку) в течение 1 часа при комнатной температуре. Планшеты промывали и добавляли HRP-овечий античеловеческий C1q (Abcam ab46191) в разведении 1:400 (50 мкл/лунку) и инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре. Планшеты промывали и добавляли ТМБ-субстрат (Surmodics BioFX TMBW-1000-01) (50 мкл/лунку). Проявление цвета останавливали через 5 мин при комнатной с помощью (25 мкл/лунку) 2NHSO. Планшеты считывали на планшет-ридере Molecular Devices SpectraMax M5, используя программу SoftMax Pro 6.2.2 для определения поглощения на 450 нм.
[00144] Как можно видеть на фигурах, антитела из всех шестнадцати клонов антител, описанных в этой заявке, были отрицательными в отношении связывания с C1q, тогда как 5c8 демонстрировал существенное связывание. На каждой из Фиг. 7A и 7B проиллюстрировано связывание с C1q для восьми клонов антител по сравнению с кривыми связывания 5c8, AT-1501 и абатасепта. На Фиг. 7A приведены результаты по клонам антител 4-4, 5-3, 6-6, 7-5, 8-3, 8-4, 10-1 и 10-4, а на Фиг. 7B приведены результаты по клонам антител 11-5, 12-4, 13-2, 15-1, 15-4, 16-3, 17-1 и 18-2.
--->
ПЕРЕЧЕНЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110>  ALS Therapy Development Institute
<120>  ТЕРАПЕВТИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА ПРОТИВ ЛИГАНДА CD40
<130>  224823-431206
<150>  62/510,471
<151>  2017-05-24
<160>  57
<170>  PatentIn версия 3.5
<210>  1
<211>  118
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  1
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1               5                   10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20                  25                  30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35                  40                  45
Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50                  55                  60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Val Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85                  90                  95
Ala Arg Ser Asp Gly Arg Asn Asp Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210>  2
<211>  118
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  2
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1               5                   10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Ser Tyr
20                  25                  30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35                  40                  45
Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Ala Glu Lys Phe
50                  55                  60
Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Val Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85                  90                  95
Thr Arg Ser Asp Gly Arg Asn Asp Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210>  3
<211>  118
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  3
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1               5                   10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Ser Tyr
20                  25                  30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35                  40                  45
Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Ala Glu Lys Phe
50                  55                  60
Lys Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85                  90                  95
Thr Arg Ser Asp Gly Arg Asn Asp Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210>  4
<211>  118
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  4
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1               5                   10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Ser Tyr
20                  25                  30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35                  40                  45
Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Phe Ala Glu Lys Phe
50                  55                  60
Lys Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85                  90                  95
Thr Arg Ser Asp Gly Arg Asn Asp Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser
115
<210>  5
<211>  111
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  5
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Arg Val Ser Ser Ser
20                  25                  30
Thr Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
35                  40                  45
Arg Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala
50                  55                  60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65                  70                  75                  80
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Ser Trp
85                  90                  95
Glu Ile Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100                 105                 110
<210>  6
<211>  111
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  6
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Asp Glu Arg Val Ser Ser Ser
20                  25                  30
Thr Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
35                  40                  45
Arg Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala
50                  55                  60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65                  70                  75                  80
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Ser Trp
85                  90                  95
Glu Ile Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100                 105                 110
<210>  7
<211>  111
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  7
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Arg Val Ser Ser Ser
20                  25                  30
Thr Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
35                  40                  45
Arg Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Asn Arg Glu Thr Gly Ile Pro Ala
50                  55                  60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65                  70                  75                  80
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Ser Trp
85                  90                  95
Glu Ile Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100                 105                 110
<210>  8
<211>  111
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  8
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Asp Glu Arg Val Ser Ser Ser
20                  25                  30
Thr Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
35                  40                  45
Arg Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Asn Arg Glu Thr Gly Ile Pro Ala
50                  55                  60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65                  70                  75                  80
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Ser Trp
85                  90                  95
Glu Ile Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys
100                 105                 110
<210>  9
<211>  5
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  9
Ser Tyr Tyr Met Tyr
1               5
<210>  10
<211>  17
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  10
Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe Gln
1               5                   10                  15
Gly
<210>  11
<211>  19
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  11
Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Ala Glu Lys Phe Lys
1               5                   10                  15
Gly Arg Val
<210>  12
<211>  19
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  12
Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Ala Glu Lys Phe Lys
1               5                   10                  15
Gly Arg Ala
<210>  13
<211>  17
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  13
Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Phe Ala Glu Lys Phe Lys
1               5                   10                  15
Gly
<210>  14
<211>  17
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  14
Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Ala Glu Lys Phe Lys
1               5                   10                  15
Gly
<210>  15
<211>  9
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  15
Ser Asp Gly Arg Asn Asp Met Asp Ser
1               5
<210>  16
<211>  15
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  16
Arg Ala Ser Gln Arg Val Ser Ser Ser Thr Tyr Ser Tyr Met His
1               5                   10                  15
<210>  17
<211>  15
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  17
Arg Ala Asp Glu Arg Val Ser Ser Ser Thr Tyr Ser Tyr Met His
1               5                   10                  15
<210>  18
<211>  7
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  18
Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr
1               5
<210>  19
<211>  7
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  19
Tyr Ala Ser Asn Arg Glu Thr
1               5
<210>  20
<211>  9
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  20
Gln His Ser Trp Glu Ile Pro Pro Thr
1               5
<210>  21
<211>  232
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  21
Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1               5                   10                  15
Pro Glu Leu Leu Gly Gly Ser Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro
20                  25                  30
Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val
35                  40                  45
Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val
50                  55                  60
Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln
65                  70                  75                  80
Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln
85                  90                  95
Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala
100                 105                 110
Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro
115                 120                 125
Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr
130                 135                 140
Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser
145                 150                 155                 160
Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr
165                 170                 175
Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr
180                 185                 190
Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe
195                 200                 205
Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys
210                 215                 220
Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225                 230
<210>  22
<211>  329
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  22
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1               5                   10                  15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20                  25                  30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35                  40                  45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50                  55                  60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65                  70                  75                  80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85                  90                  95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys
100                 105                 110
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115                 120                 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130                 135                 140
Val Val Val Ala Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp
145                 150                 155                 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165                 170                 175
Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180                 185                 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195                 200                 205
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210                 215                 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu
225                 230                 235                 240
Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr
245                 250                 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260                 265                 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275                 280                 285
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290                 295                 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305                 310                 315                 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
325
<210>  23
<211>  329
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  23
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1               5                   10                  15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20                  25                  30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35                  40                  45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50                  55                  60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65                  70                  75                  80
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85                  90                  95
Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Ser Cys
100                 105                 110
Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro
115                 120                 125
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys
130                 135                 140
Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp
145                 150                 155                 160
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu
165                 170                 175
Glu Gln Phe Asn Ser Lys Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu
180                 185                 190
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn
195                 200                 205
Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly
210                 215                 220
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu
225                 230                 235                 240
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys Ala Val Lys Gly Phe Tyr
245                 250                 255
Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn
260                 265                 270
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe
275                 280                 285
Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn
290                 295                 300
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr
305                 310                 315                 320
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
325
<210>  24
<211>  326
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  24
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1               5                   10                  15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20                  25                  30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35                  40                  45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50                  55                  60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65                  70                  75                  80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85                  90                  95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro
100                 105                 110
Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys
115                 120                 125
Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val
130                 135                 140
Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp
145                 150                 155                 160
Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe
165                 170                 175
Asn Ser Lys Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp
180                 185                 190
Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu
195                 200                 205
Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg
210                 215                 220
Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys
225                 230                 235                 240
Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp
245                 250                 255
Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys
260                 265                 270
Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser
275                 280                 285
Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser
290                 295                 300
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser
305                 310                 315                 320
Leu Ser Leu Ser Leu Gly
325
<210>  25
<211>  107
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  25
Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu
1               5                   10                  15
Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe
20                  25                  30
Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln
35                  40                  45
Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser
50                  55                  60
Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu
65                  70                  75                  80
Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser
85                  90                  95
Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
100                 105
<210>  26
<211>  354
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  26
gaggtgcagc tggtgcagtc cggcgccgag gtgaagaagc ccggcgcctc cgtgaaggtg       60
tcctgcaagg cctccggcta caccttcacc tcctactaca tgtactgggt gaggcaggcc      120
cccggccagg gcctggagtg gatgggcgag atcaacccct ccaacggcga caccaactac      180
gcacagaagt tccagggtag ggtcaccatg accgtggaca cgtccacctc caccgtctac      240
atggagctgt cctccctgag gtccgaggac accgccgtgt actactgcgc caggtccgac      300
ggcaggaacg acatggactc ctggggccag ggcaccctgg tgaccgtgtc ctcc            354
<210>  27
<211>  354
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  27
gaggtgcagc tggtgcagtc cggcgccgag gtgaagaagc ccggcgcctc cgtgaaggtg       60
tcctgcaagg cctccggcta catcttcacc tcctactaca tgtactgggt gaggcaggcc      120
cccggccagg gcctggagtg gatgggcgag atcaacccct ccaacggcga caccaactac      180
gcagagaagt tcaagggtag ggtcaccatg accgtggaca cgtccacctc caccgtctac      240
atggagctgt cctccctgag gtccgaggac accgccgtgt actactgcac caggtccgac      300
ggcaggaacg acatggactc ctggggccag ggcaccctgg tgaccgtgtc ctcc            354
<210>  28
<211>  354
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  28
gaggtgcagc tggtgcagtc cggcgccgag gtgaagaagc ccggcgcctc cgtgaaggtg       60
tcctgcaagg cctccggcta catcttcacc tcctactaca tgtactgggt gaggcaggcc      120
cccggccagg gcctggagtg gatcggcgag atcaacccct ccaacggcga caccaactac      180
gcagagaagt tcaagggtag ggccaccctg accgtggaca cgtccacctc caccgtctac      240
atggagctgt cctccctgag gtccgaggac accgccgtgt actactgcac caggtccgac      300
ggcaggaacg acatggactc ctggggccag ggcaccctgg tgaccgtgtc ctcc            354
<210>  29
<211>  354
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  29
caggtgcagc tggtgcagtc cggcgccgag gtgaagaagc ccggcgcctc cgtgaaggtg       60
tcctgcaagg cctccggcta catcttcacc tcctactaca tgtactgggt gaggcaggcc      120
cccggccagg gcctggagtg gatcggcgag atcaacccct ccaacggcga caccaacttc      180
gcagagaagt tcaagggtag ggccaccctg accgtggaca cgtccacctc caccgtctac      240
atggagctgt cctccctgag gtccgaggac accgccgtgt actactgcac caggtccgac      300
ggcaggaacg acatggactc ctggggccag ggcaccctgg tgaccgtgtc ctcc            354
<210>  30
<211>  333
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  30
gagatcgtgc tgacccagtc acctgccacc ctgtccctgt cacctggaga gagagccacc       60
ctctcctgca gagcctccca gagggtgtcc tcctccacct actcctacat gcactggtac      120
cagcagaagc ctggacaggc acctaggctg ctgatctacg acgcctccaa cagggcgacc      180
ggtataccag ccaggttctc aggctcaggc tcaggcaccg acttcaccct gaccatctcc      240
tccctggagc cagaggactt cgccgtctac tactgccagc actcctggga gatcccacct      300
accttcggac aaggcaccaa gctggaaatc aaa                                   333
<210>  31
<211>  333
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  31
gagatcgtgc tgacccagtc acctgccacc ctgtccctgt cacctggaga gagagccacc       60
ctctcctgca gagccgatga gagggtgtcc tcctccacct actcctacat gcactggtac      120
cagcagaagc ctggacaggc acctaggctg ctgatctacg acgcctccaa cagggcgacc      180
ggtataccag ccaggttctc aggctcaggc tcaggcaccg acttcaccct gaccatctcc      240
tccctggagc cagaggactt cgccgtctac tactgccagc actcctggga gatcccacct      300
accttcggac aaggcaccaa gctggaaatc aaa                                   333
<210>  32
<211>  333
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  32
gagatcgtgc tgacccagtc acctgccacc ctgtccctgt cacctggaga gagagccacc       60
ctctcctgca gagcctccca gagggtgtcc tcctccacct actcctacat gcactggtac      120
cagcagaagc ctggacaggc acctaggctg ctgatcaagt acgcctccaa cagggagacc      180
ggtataccag ccaggttctc aggctcaggc tcaggcaccg acttcaccct gaccatctcc      240
tccctggagc cagaggactt cgccgtctac tactgccagc actcctggga gatcccacct      300
accttcggac aaggcaccaa gctggaaatc aaa                                   333
<210>  33
<211>  333
<212>  ДНК
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  33
gagatcgtgc tgacccagtc acctgccacc ctgtccctgt cacctggaga gagagccacc       60
ctctcctgca gagccgatga gagggtgtcc tcctccacct actcctacat gcactggtac      120
cagcagaagc ctggacaggc acctaggctg ctgatcaagt acgcctccaa cagggagacc      180
ggtataccag ccaggttctc aggctcaggc tcaggcaccg acttcaccct gaccatctcc      240
tccctggagc cagaggactt cgccgtctac tactgccagc actcctggga gatcccacct      300
accttcggac aaggcaccaa gctggaaatc aaa                                   333
<210>  34
<211>  374
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  34
Met Trp Phe Leu Thr Thr Leu Leu Leu Trp Val Pro Val Asp Gly Gln
1               5                   10                  15
Val Asp Thr Thr Lys Ala Val Ile Thr Leu Gln Pro Pro Trp Val Ser
20                  25                  30
Val Phe Gln Glu Glu Thr Val Thr Leu His Cys Glu Val Leu His Leu
35                  40                  45
Pro Gly Ser Ser Ser Thr Gln Trp Phe Leu Asn Gly Thr Ala Thr Gln
50                  55                  60
Thr Ser Thr Pro Ser Tyr Arg Ile Thr Ser Ala Ser Val Asn Asp Ser
65                  70                  75                  80
Gly Glu Tyr Arg Cys Gln Arg Gly Leu Ser Gly Arg Ser Asp Pro Ile
85                  90                  95
Gln Leu Glu Ile His Arg Gly Trp Leu Leu Leu Gln Val Ser Ser Arg
100                 105                 110
Val Phe Thr Glu Gly Glu Pro Leu Ala Leu Arg Cys His Ala Trp Lys
115                 120                 125
Asp Lys Leu Val Tyr Asn Val Leu Tyr Tyr Arg Asn Gly Lys Ala Phe
130                 135                 140
Lys Phe Phe His Trp Asn Ser Asn Leu Thr Ile Leu Lys Thr Asn Ile
145                 150                 155                 160
Ser His Asn Gly Thr Tyr His Cys Ser Gly Met Gly Lys His Arg Tyr
165                 170                 175
Thr Ser Ala Gly Ile Ser Val Thr Val Lys Glu Leu Phe Pro Ala Pro
180                 185                 190
Val Leu Asn Ala Ser Val Thr Ser Pro Leu Leu Glu Gly Asn Leu Val
195                 200                 205
Thr Leu Ser Cys Glu Thr Lys Leu Leu Leu Gln Arg Pro Gly Leu Gln
210                 215                 220
Leu Tyr Phe Ser Phe Tyr Met Gly Ser Lys Thr Leu Arg Gly Arg Asn
225                 230                 235                 240
Thr Ser Ser Glu Tyr Gln Ile Leu Thr Ala Arg Arg Glu Asp Ser Gly
245                 250                 255
Leu Tyr Trp Cys Glu Ala Ala Thr Glu Asp Gly Asn Val Leu Lys Arg
260                 265                 270
Ser Pro Glu Leu Glu Leu Gln Val Leu Gly Leu Gln Leu Pro Thr Pro
275                 280                 285
Val Trp Phe His Val Leu Phe Tyr Leu Ala Val Gly Ile Met Phe Leu
290                 295                 300
Val Asn Thr Val Leu Trp Val Thr Ile Arg Lys Glu Leu Lys Arg Lys
305                 310                 315                 320
Lys Lys Trp Asp Leu Glu Ile Ser Leu Asp Ser Gly His Glu Lys Lys
325                 330                 335
Val Ile Ser Ser Leu Gln Glu Asp Arg His Leu Glu Glu Glu Leu Lys
340                 345                 350
Cys Gln Glu Gln Lys Glu Glu Gln Leu Gln Glu Gly Val His Arg Lys
355                 360                 365
Glu Pro Gln Gly Ala Thr
370
<210>  35
<211>  316
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  35
Met Thr Met Glu Thr Gln Met Ser Gln Asn Val Cys Pro Arg Asn Leu
1               5                   10                  15
Trp Leu Leu Gln Pro Leu Thr Val Leu Leu Leu Leu Ala Ser Ala Asp
20                  25                  30
Ser Gln Ala Ala Pro Pro Lys Ala Val Leu Lys Leu Glu Pro Pro Trp
35                  40                  45
Ile Asn Val Leu Gln Glu Asp Ser Val Thr Leu Thr Cys Gln Gly Ala
50                  55                  60
Arg Ser Pro Glu Ser Asp Ser Ile Gln Trp Phe His Asn Gly Asn Leu
65                  70                  75                  80
Ile Pro Thr His Thr Gln Pro Ser Tyr Arg Phe Lys Ala Asn Asn Asn
85                  90                  95
Asp Ser Gly Glu Tyr Thr Cys Gln Thr Gly Gln Thr Ser Leu Ser Asp
100                 105                 110
Pro Val His Leu Thr Val Leu Ser Glu Trp Leu Val Leu Gln Thr Pro
115                 120                 125
His Leu Glu Phe Gln Glu Gly Glu Thr Ile Met Leu Arg Cys His Ser
130                 135                 140
Trp Lys Asp Lys Pro Leu Val Lys Val Thr Phe Phe Gln Asn Gly Lys
145                 150                 155                 160
Ser Gln Lys Phe Ser His Leu Asp Pro Thr Phe Ser Ile Pro Gln Ala
165                 170                 175
Asn His Ser His Ser Gly Asp Tyr His Cys Thr Gly Asn Ile Gly Tyr
180                 185                 190
Thr Leu Phe Ser Ser Lys Pro Val Thr Ile Thr Val Gln Val Pro Ser
195                 200                 205
Met Gly Ser Ser Ser Pro Met Gly Val Ile Val Ala Val Val Ile Ala
210                 215                 220
Thr Ala Val Ala Ala Ile Val Ala Ala Val Val Ala Leu Ile Tyr Cys
225                 230                 235                 240
Arg Lys Lys Arg Ile Ser Ala Asn Ser Thr Asp Pro Val Lys Ala Ala
245                 250                 255
Gln Phe Glu Pro Pro Gly Arg Gln Met Ile Ala Ile Arg Lys Arg Gln
260                 265                 270
Leu Glu Glu Thr Asn Asn Asp Tyr Glu Thr Ala Asp Gly Gly Tyr Met
275                 280                 285
Thr Leu Asn Pro Arg Ala Pro Thr Asp Asp Asp Lys Asn Ile Tyr Leu
290                 295                 300
Thr Leu Pro Pro Asn Asp His Val Asn Ser Asn Asn
305                 310                 315
<210>  36
<211>  290
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  36
Met Gly Gly Gly Ala Gly Glu Arg Leu Phe Thr Ser Ser Cys Leu Val
1               5                   10                  15
Gly Leu Val Pro Leu Gly Leu Arg Ile Ser Leu Val Thr Cys Pro Leu
20                  25                  30
Gln Cys Gly Ile Met Trp Gln Leu Leu Leu Pro Thr Ala Leu Leu Leu
35                  40                  45
Leu Val Ser Ala Gly Met Arg Thr Glu Asp Leu Pro Lys Ala Val Val
50                  55                  60
Phe Leu Glu Pro Gln Trp Tyr Arg Val Leu Glu Lys Asp Ser Val Thr
65                  70                  75                  80
Leu Lys Cys Gln Gly Ala Tyr Ser Pro Glu Asp Asn Ser Thr Gln Trp
85                  90                  95
Phe His Asn Glu Ser Leu Ile Ser Ser Gln Ala Ser Ser Tyr Phe Ile
100                 105                 110
Asp Ala Ala Thr Val Asp Asp Ser Gly Glu Tyr Arg Cys Gln Thr Asn
115                 120                 125
Leu Ser Thr Leu Ser Asp Pro Val Gln Leu Glu Val His Ile Gly Trp
130                 135                 140
Leu Leu Leu Gln Ala Pro Arg Trp Val Phe Lys Glu Glu Asp Pro Ile
145                 150                 155                 160
His Leu Arg Cys His Ser Trp Lys Asn Thr Ala Leu His Lys Val Thr
165                 170                 175
Tyr Leu Gln Asn Gly Lys Gly Arg Lys Tyr Phe His His Asn Ser Asp
180                 185                 190
Phe Tyr Ile Pro Lys Ala Thr Leu Lys Asp Ser Gly Ser Tyr Phe Cys
195                 200                 205
Arg Gly Leu Val Gly Ser Lys Asn Val Ser Ser Glu Thr Val Asn Ile
210                 215                 220
Thr Ile Thr Gln Gly Leu Ala Val Ser Thr Ile Ser Ser Phe Phe Pro
225                 230                 235                 240
Pro Gly Tyr Gln Val Ser Phe Cys Leu Val Met Val Leu Leu Phe Ala
245                 250                 255
Val Asp Thr Gly Leu Tyr Phe Ser Val Lys Thr Asn Ile Arg Ser Ser
260                 265                 270
Thr Arg Asp Trp Lys Asp His Lys Phe Lys Trp Arg Lys Asp Pro Gln
275                 280                 285
Asp Lys
290
<210>  37
<211>  233
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  37
Met Trp Gln Leu Leu Leu Pro Thr Ala Leu Leu Leu Leu Val Ser Ala
1               5                   10                  15
Gly Met Arg Thr Glu Asp Leu Pro Lys Ala Val Val Phe Leu Glu Pro
20                  25                  30
Gln Trp Tyr Ser Val Leu Glu Lys Asp Ser Val Thr Leu Lys Cys Gln
35                  40                  45
Gly Ala Tyr Ser Pro Glu Asp Asn Ser Thr Gln Trp Phe His Asn Glu
50                  55                  60
Ser Leu Ile Ser Ser Gln Ala Ser Ser Tyr Phe Ile Asp Ala Ala Thr
65                  70                  75                  80
Val Asn Asp Ser Gly Glu Tyr Arg Cys Gln Thr Asn Leu Ser Thr Leu
85                  90                  95
Ser Asp Pro Val Gln Leu Glu Val His Ile Gly Trp Leu Leu Leu Gln
100                 105                 110
Ala Pro Arg Trp Val Phe Lys Glu Glu Asp Pro Ile His Leu Arg Cys
115                 120                 125
His Ser Trp Lys Asn Thr Ala Leu His Lys Val Thr Tyr Leu Gln Asn
130                 135                 140
Gly Lys Asp Arg Lys Tyr Phe His His Asn Ser Asp Phe His Ile Pro
145                 150                 155                 160
Lys Ala Thr Leu Lys Asp Ser Gly Ser Tyr Phe Cys Arg Gly Leu Val
165                 170                 175
Gly Ser Lys Asn Val Ser Ser Glu Thr Val Asn Ile Thr Ile Thr Gln
180                 185                 190
Gly Leu Ala Val Ser Thr Ile Ser Ser Phe Ser Pro Pro Gly Tyr Gln
195                 200                 205
Val Ser Phe Cys Leu Val Met Val Leu Leu Phe Ala Val Asp Thr Gly
210                 215                 220
Leu Tyr Phe Ser Val Lys Thr Asn Ile
225                 230
<210>  38
<211>  218
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  38
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Arg Val Ser Ser Ser
20                  25                  30
Thr Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
35                  40                  45
Arg Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala
50                  55                  60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65                  70                  75                  80
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Ser Trp
85                  90                  95
Glu Ile Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
100                 105                 110
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
115                 120                 125
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr
130                 135                 140
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser
145                 150                 155                 160
Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
165                 170                 175
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys
180                 185                 190
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro
195                 200                 205
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210                 215
<210>  39
<211>  218
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  39
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Asp Glu Arg Val Ser Ser Ser
20                  25                  30
Thr Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
35                  40                  45
Arg Leu Leu Ile Tyr Asp Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly Ile Pro Ala
50                  55                  60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65                  70                  75                  80
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Ser Trp
85                  90                  95
Glu Ile Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
100                 105                 110
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
115                 120                 125
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr
130                 135                 140
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser
145                 150                 155                 160
Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
165                 170                 175
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys
180                 185                 190
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro
195                 200                 205
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210                 215
<210>  40
<211>  218
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  40
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gln Arg Val Ser Ser Ser
20                  25                  30
Thr Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
35                  40                  45
Arg Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Asn Arg Glu Thr Gly Ile Pro Ala
50                  55                  60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65                  70                  75                  80
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Ser Trp
85                  90                  95
Glu Ile Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
100                 105                 110
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
115                 120                 125
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr
130                 135                 140
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser
145                 150                 155                 160
Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
165                 170                 175
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys
180                 185                 190
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro
195                 200                 205
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210                 215
<210>  41
<211>  218
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  41
Glu Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly
1               5                   10                  15
Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Asp Glu Arg Val Ser Ser Ser
20                  25                  30
Thr Tyr Ser Tyr Met His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro
35                  40                  45
Arg Leu Leu Ile Lys Tyr Ala Ser Asn Arg Glu Thr Gly Ile Pro Ala
50                  55                  60
Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser
65                  70                  75                  80
Ser Leu Glu Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gln His Ser Trp
85                  90                  95
Glu Ile Pro Pro Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys Arg
100                 105                 110
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln
115                 120                 125
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr
130                 135                 140
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser
145                 150                 155                 160
Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr
165                 170                 175
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys
180                 185                 190
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro
195                 200                 205
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys
210                 215
<210>  42
<211>  232
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  42
Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1               5                   10                  15
Pro Glu Leu Leu Gly Gly Ser Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro
20                  25                  30
Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val
35                  40                  45
Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val
50                  55                  60
Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln
65                  70                  75                  80
Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln
85                  90                  95
Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala
100                 105                 110
Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro
115                 120                 125
Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr
130                 135                 140
Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser
145                 150                 155                 160
Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr
165                 170                 175
Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr
180                 185                 190
Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe
195                 200                 205
Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys
210                 215                 220
Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225                 230
<210>  43
<211>  232
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  43
Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1               5                   10                  15
Pro Glu Leu Leu Gly Gly Ser Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro
20                  25                  30
Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val
35                  40                  45
Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val
50                  55                  60
Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln
65                  70                  75                  80
Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln
85                  90                  95
Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala
100                 105                 110
Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro
115                 120                 125
Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr
130                 135                 140
Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser
145                 150                 155                 160
Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr
165                 170                 175
Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr
180                 185                 190
Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe
195                 200                 205
Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys
210                 215                 220
Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225                 230
<210>  44
<211>  232
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  44
Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1               5                   10                  15
Pro Glu Leu Leu Gly Gly Ser Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro
20                  25                  30
Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val
35                  40                  45
Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val
50                  55                  60
Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln
65                  70                  75                  80
Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln
85                  90                  95
Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala
100                 105                 110
Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro
115                 120                 125
Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr
130                 135                 140
Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser
145                 150                 155                 160
Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr
165                 170                 175
Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr
180                 185                 190
Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe
195                 200                 205
Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys
210                 215                 220
Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225                 230
<210>  45
<211>  232
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  45
Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala
1               5                   10                  15
Pro Glu Leu Leu Gly Gly Ser Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro
20                  25                  30
Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val
35                  40                  45
Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val
50                  55                  60
Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln
65                  70                  75                  80
Tyr Gly Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln
85                  90                  95
Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala
100                 105                 110
Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro
115                 120                 125
Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr
130                 135                 140
Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser
145                 150                 155                 160
Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr
165                 170                 175
Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr
180                 185                 190
Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe
195                 200                 205
Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys
210                 215                 220
Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
225                 230
<210>  46
<211>  447
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  46
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1               5                   10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20                  25                  30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35                  40                  45
Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50                  55                  60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Val Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85                  90                  95
Ala Arg Ser Asp Gly Arg Asn Asp Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
115                 120                 125
Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly
130                 135                 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145                 150                 155                 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
165                 170                 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
180                 185                 190
Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser
195                 200                 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr
210                 215                 220
His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser
225                 230                 235                 240
Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
245                 250                 255
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ala Val Ser His Glu Asp Pro
260                 265                 270
Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
275                 280                 285
Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val
290                 295                 300
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
305                 310                 315                 320
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr
325                 330                 335
Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu
340                 345                 350
Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys
355                 360                 365
Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
370                 375                 380
Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp
385                 390                 395                 400
Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser
405                 410                 415
Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
420                 425                 430
Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435                 440                 445
<210>  47
<211>  447
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  47
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1               5                   10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Ser Tyr
20                  25                  30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35                  40                  45
Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Ala Glu Lys Phe
50                  55                  60
Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Val Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85                  90                  95
Thr Arg Ser Asp Gly Arg Asn Asp Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
115                 120                 125
Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly
130                 135                 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145                 150                 155                 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
165                 170                 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
180                 185                 190
Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser
195                 200                 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr
210                 215                 220
His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser
225                 230                 235                 240
Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
245                 250                 255
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ala Val Ser His Glu Asp Pro
260                 265                 270
Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
275                 280                 285
Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val
290                 295                 300
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
305                 310                 315                 320
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr
325                 330                 335
Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu
340                 345                 350
Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys
355                 360                 365
Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
370                 375                 380
Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp
385                 390                 395                 400
Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser
405                 410                 415
Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
420                 425                 430
Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435                 440                 445
<210>  48
<211>  447
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  48
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1               5                   10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Ser Tyr
20                  25                  30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35                  40                  45
Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Ala Glu Lys Phe
50                  55                  60
Lys Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85                  90                  95
Thr Arg Ser Asp Gly Arg Asn Asp Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
115                 120                 125
Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly
130                 135                 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145                 150                 155                 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
165                 170                 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
180                 185                 190
Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser
195                 200                 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr
210                 215                 220
His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser
225                 230                 235                 240
Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
245                 250                 255
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ala Val Ser His Glu Asp Pro
260                 265                 270
Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
275                 280                 285
Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val
290                 295                 300
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
305                 310                 315                 320
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr
325                 330                 335
Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu
340                 345                 350
Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys
355                 360                 365
Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
370                 375                 380
Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp
385                 390                 395                 400
Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser
405                 410                 415
Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
420                 425                 430
Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435                 440                 445
<210>  49
<211>  447
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  49
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1               5                   10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Ser Tyr
20                  25                  30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35                  40                  45
Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Phe Ala Glu Lys Phe
50                  55                  60
Lys Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85                  90                  95
Thr Arg Ser Asp Gly Arg Asn Asp Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
115                 120                 125
Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly
130                 135                 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145                 150                 155                 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
165                 170                 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
180                 185                 190
Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser
195                 200                 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr
210                 215                 220
His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser
225                 230                 235                 240
Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
245                 250                 255
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Ala Val Ser His Glu Asp Pro
260                 265                 270
Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
275                 280                 285
Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Ala Ser Thr Tyr Arg Val Val
290                 295                 300
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
305                 310                 315                 320
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr
325                 330                 335
Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu
340                 345                 350
Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys
355                 360                 365
Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
370                 375                 380
Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp
385                 390                 395                 400
Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser
405                 410                 415
Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
420                 425                 430
Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435                 440                 445
<210>  50
<211>  447
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  50
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1               5                   10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20                  25                  30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35                  40                  45
Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50                  55                  60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Val Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85                  90                  95
Ala Arg Ser Asp Gly Arg Asn Asp Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
115                 120                 125
Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly
130                 135                 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145                 150                 155                 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
165                 170                 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
180                 185                 190
Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser
195                 200                 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr
210                 215                 220
His Thr Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser
225                 230                 235                 240
Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
245                 250                 255
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro
260                 265                 270
Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
275                 280                 285
Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Lys Tyr Arg Val Val
290                 295                 300
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
305                 310                 315                 320
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr
325                 330                 335
Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu
340                 345                 350
Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys
355                 360                 365
Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
370                 375                 380
Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp
385                 390                 395                 400
Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser
405                 410                 415
Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
420                 425                 430
Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435                 440                 445
<210>  51
<211>  447
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  51
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1               5                   10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Ser Tyr
20                  25                  30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35                  40                  45
Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Ala Glu Lys Phe
50                  55                  60
Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Val Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85                  90                  95
Thr Arg Ser Asp Gly Arg Asn Asp Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
115                 120                 125
Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly
130                 135                 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145                 150                 155                 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
165                 170                 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
180                 185                 190
Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser
195                 200                 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr
210                 215                 220
His Thr Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser
225                 230                 235                 240
Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
245                 250                 255
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro
260                 265                 270
Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
275                 280                 285
Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Lys Tyr Arg Val Val
290                 295                 300
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
305                 310                 315                 320
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr
325                 330                 335
Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu
340                 345                 350
Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys
355                 360                 365
Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
370                 375                 380
Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp
385                 390                 395                 400
Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser
405                 410                 415
Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
420                 425                 430
Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435                 440                 445
<210>  52
<211>  447
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  52
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1               5                   10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Ser Tyr
20                  25                  30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35                  40                  45
Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Ala Glu Lys Phe
50                  55                  60
Lys Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85                  90                  95
Thr Arg Ser Asp Gly Arg Asn Asp Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
115                 120                 125
Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly
130                 135                 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145                 150                 155                 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
165                 170                 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
180                 185                 190
Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser
195                 200                 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr
210                 215                 220
His Thr Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser
225                 230                 235                 240
Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
245                 250                 255
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro
260                 265                 270
Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
275                 280                 285
Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Lys Tyr Arg Val Val
290                 295                 300
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
305                 310                 315                 320
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr
325                 330                 335
Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu
340                 345                 350
Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys
355                 360                 365
Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
370                 375                 380
Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp
385                 390                 395                 400
Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser
405                 410                 415
Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
420                 425                 430
Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435                 440                 445
<210>  53
<211>  447
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  53
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1               5                   10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Ser Tyr
20                  25                  30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35                  40                  45
Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Phe Ala Glu Lys Phe
50                  55                  60
Lys Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85                  90                  95
Thr Arg Ser Asp Gly Arg Asn Asp Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
115                 120                 125
Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly
130                 135                 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145                 150                 155                 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
165                 170                 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
180                 185                 190
Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser
195                 200                 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr
210                 215                 220
His Thr Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser
225                 230                 235                 240
Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg
245                 250                 255
Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro
260                 265                 270
Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala
275                 280                 285
Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Lys Tyr Arg Val Val
290                 295                 300
Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
305                 310                 315                 320
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr
325                 330                 335
Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu
340                 345                 350
Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Ser Cys
355                 360                 365
Ala Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser
370                 375                 380
Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp
385                 390                 395                 400
Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Val Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser
405                 410                 415
Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala
420                 425                 430
Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly
435                 440                 445
<210>  54
<211>  444
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  54
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1               5                   10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Ser Tyr
20                  25                  30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35                  40                  45
Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Ala Gln Lys Phe
50                  55                  60
Gln Gly Arg Val Thr Met Thr Val Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85                  90                  95
Ala Arg Ser Asp Gly Arg Asn Asp Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
115                 120                 125
Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly
130                 135                 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145                 150                 155                 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
165                 170                 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
180                 185                 190
Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser
195                 200                 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys
210                 215                 220
Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu
225                 230                 235                 240
Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu
245                 250                 255
Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln
260                 265                 270
Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys
275                 280                 285
Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Lys Tyr Arg Val Val Ser Val Leu
290                 295                 300
Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys
305                 310                 315                 320
Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys
325                 330                 335
Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser
340                 345                 350
Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys
355                 360                 365
Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln
370                 375                 380
Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly
385                 390                 395                 400
Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln
405                 410                 415
Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn
420                 425                 430
His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435                 440
<210>  55
<211>  444
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  55
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1               5                   10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Ser Tyr
20                  25                  30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35                  40                  45
Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Ala Glu Lys Phe
50                  55                  60
Lys Gly Arg Val Thr Met Thr Val Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85                  90                  95
Thr Arg Ser Asp Gly Arg Asn Asp Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
115                 120                 125
Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly
130                 135                 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145                 150                 155                 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
165                 170                 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
180                 185                 190
Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser
195                 200                 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys
210                 215                 220
Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu
225                 230                 235                 240
Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu
245                 250                 255
Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln
260                 265                 270
Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys
275                 280                 285
Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Lys Tyr Arg Val Val Ser Val Leu
290                 295                 300
Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys
305                 310                 315                 320
Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys
325                 330                 335
Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser
340                 345                 350
Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys
355                 360                 365
Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln
370                 375                 380
Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly
385                 390                 395                 400
Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln
405                 410                 415
Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn
420                 425                 430
His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435                 440
<210>  56
<211>  444
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  56
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1               5                   10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Ser Tyr
20                  25                  30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35                  40                  45
Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Tyr Ala Glu Lys Phe
50                  55                  60
Lys Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85                  90                  95
Thr Arg Ser Asp Gly Arg Asn Asp Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
115                 120                 125
Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly
130                 135                 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145                 150                 155                 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
165                 170                 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
180                 185                 190
Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser
195                 200                 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys
210                 215                 220
Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu
225                 230                 235                 240
Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu
245                 250                 255
Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln
260                 265                 270
Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys
275                 280                 285
Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Lys Tyr Arg Val Val Ser Val Leu
290                 295                 300
Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys
305                 310                 315                 320
Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys
325                 330                 335
Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser
340                 345                 350
Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys
355                 360                 365
Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln
370                 375                 380
Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly
385                 390                 395                 400
Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln
405                 410                 415
Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn
420                 425                 430
His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435                 440
<210>  57
<211>  444
<212>  Белок
<213>  Искусственная последовательность
<220>
<223>  Синтетическая
<400>  57
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ala
1               5                   10                  15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ile Phe Thr Ser Tyr
20                  25                  30
Tyr Met Tyr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Ile
35                  40                  45
Gly Glu Ile Asn Pro Ser Asn Gly Asp Thr Asn Phe Ala Glu Lys Phe
50                  55                  60
Lys Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Thr Ser Thr Ser Thr Val Tyr
65                  70                  75                  80
Met Glu Leu Ser Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85                  90                  95
Thr Arg Ser Asp Gly Arg Asn Asp Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr
100                 105                 110
Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro
115                 120                 125
Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly
130                 135                 140
Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn
145                 150                 155                 160
Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln
165                 170                 175
Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser
180                 185                 190
Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser
195                 200                 205
Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys
210                 215                 220
Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu
225                 230                 235                 240
Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu
245                 250                 255
Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln
260                 265                 270
Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys
275                 280                 285
Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Lys Tyr Arg Val Val Ser Val Leu
290                 295                 300
Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys
305                 310                 315                 320
Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys
325                 330                 335
Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser
340                 345                 350
Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys
355                 360                 365
Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln
370                 375                 380
Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly
385                 390                 395                 400
Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln
405                 410                 415
Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn
420                 425                 430
His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly
435                 440
<---