БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКАЯ ОПТИМИЗАЦИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ

1. Генетически модифицированная бактерия, где экспрессия гена, кодирующего 20-бета-гидроксистероид-дегидрогеназу (20β-HSDH), снижена или подавлена по сравнению с соответствующей немодифицированной бактерией, где соответствующая немодифицированная бактерия обладает активностью Δ1-дегидрогеназы и 20-β-дегидрогеназы.
2. Генетически модифицированная бактерия по п. 1, где ген, кодирующий 20β-HSDH, инактивирован или удален.
3. Генетически модифицированная бактерия по п. 1 или 2, где ген, кодирующий 20β-HSDH, мутирован.
4. Генетически модифицированная бактерия по любому из пп. 1-3, где ген, кодирующий 20β-HSDH, укорочен.
5. Генетически модифицированная бактерия по любому из пп. 1-4, где бактерия принадлежит к семейству Nocardioidaceae.
6. Генетически модифицированная бактерия по любому из пп. 1-5, которая обладает активностью Δ1-дегидрогеназы, но имеет пониженную активность 20-β-дегидрогеназы или лишена ее по сравнению с немодифицированной бактерией.
7. Способ получения генетически модифицированной бактерии по любому из пп. 1-6, включающий:
а) предоставление бактерии, которая обладает активностью Δ1-дегидрогеназы и активностью 20-β-дегидрогеназы; и
b) инактивацию или делецию гена, кодирующего 20β-HSDH.
8. Способ получения 1,2-дегидрированного стероида, включающий:
а) предоставление стероида, который не является 1,2-дегидрированным;
b) контактирование указанного стероида, который не является 1,2-дегидрированным, с бактерией по любому из пп. 1-6 или ее экстрактом в условиях, достаточных для получения 1,2-дегидрированного стероида.
9. Способ по п. 8, где стероид, который не является 1,2-дегидрированным, представляет собой кортикостероид.
10. Способ по п. 8 или 9, где указанный стероид, который не является 1,2-дегидрированным, представляет собой гидрокортизон, и указанный способ предназначен для получения преднизолона.
11. Способ по любому из пп. 8-10, где указанный способ дополнительно включает выделение и очистку указанного 1,2-дегидрированного стероида.
12. Способ по п. 11, который не включает стадию удаления 20-β-дегидрированного стероида.
13. Способ по любому из пп. 8-12, который дополнительно содержит включение 1,2-дегидрированного стероида в состав фармацевтической композиции.
14. Способ по любому из пп. 8-13, где указанный экстракт обладает активностью Δ1-дегидрогеназы.
15. Способ по любому из пп. 8-13, где указанный экстракт получают с помощью клеточного лизиса бактерии по одному из пп. 1-6 и необязательно фракционирования продукта клеточного лизиса для концентрирования Δ1-дегидрогеназной активности или для облегчения очистки от Δ1-дегидрогеназной активности.