ТЕРМОЧУВСТВИТЕЛЬНЫЕ СОСТАВЫ В ВИДЕ НАНОЧАСТИЦ И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ

1. Липосомный препарат, содержащий суспензию липосом, содержащих гелевый липидный бислой и активный агент, заключенный внутри липосом, где указанный липидный бислой содержит:
(i) один или более фосфолипид, выбранный из группы, состоящей из фосфатидилхолинов, фосфатидилглицеринов, фосфатидилинозитолов и фосфатидилэтаноламинов;
(ii) один или более фосфолипид, дериватизированный гидрофильным полимером; и
(iii) один или более лизолипид, выбранный из группы, состоящей из моноацилфосфатидилхолинов, моноацилфосфатидилглицеринов, моноацилфосфатидилинозитолов и моноацилфосфатидилэтаноламинов;
при этом активный агент выбран из группы, состоящей из доксорубицина, блеомицина, дакарбазина, даунорубицина, дактиномицина, флударабина, гемцитабина, идарубицина, метотрексата, митомицина, митоксантрона, винбластина, винорелбина и винкристина, и
при этом компоненты липидного бислоя представлены в мольном отношении примерно 80-90:2-8:2-18; и при этом липосомы в суспензии имеют размер от примерно 50 до примерно 150 нм.
2. Липосомный препарат по п. 1, отличающийся тем, что активный агент представляет собой доксорубицин, относительная концентрация примеси А после 6 месяцев хранения при температуре, менее чем или равной 8°C, составляет менее 0,5%, и примесь А образует пик с относительным временем удержания примерно 1,4 при анализе методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на колонке С18 с обращенной фазой при элюировании с градиентом смесью уксусная кислота/метанол.
3. Липосомный препарат по п. 2, отличающийся тем, что относительная концентрация примеси А после 6 месяцев хранения при температуре, менее чем или равной 8°C, составляет менее 0,2%.
4. Липосомный препарат по п. 2, отличающийся тем, что относительная концентрация примеси А после примерно 1 года хранения при температуре, менее чем или равной 8°C, составляет менее примерно 0,5%.
5. Липосомный препарат по п. 2, отличающийся тем, что относительная концентрация примеси А после примерно 2 лет хранения при температуре, менее чем или равной 8°C, составляет менее примерно 0,75%.
6. Липосомный препарат по п. 2, отличающийся тем, что относительная концентрация 8-дезацетил-8-карбоксидаунорубицина после 6 месяцев хранения при температуре, менее чем или равной 8°C, составляет менее примерно 0,5%.
7. Липосомный препарат по п. 2, отличающийся тем, что относительная концентрация 8-дезацетил-8-карбоксидаунорубицина после примерно 1 года хранения при температуре, менее чем или равной 8°C, составляет менее примерно 0,5%.
8. Липосомный препарат по п. 2, отличающийся тем, что относительная концентрация 8-дезацетил-8-карбоксидаунорубицина после примерно 2 лет хранения при температуре, менее чем или равной 8°C, составляет менее примерно 1,6%.
9. Липосомный препарат по п. 2, отличающийся тем, что концентрация доксорубицина после примерно шести месяцев хранения при температуре, менее чем или равной примерно 8°C, составляет больше, чем 99% от начальной концентрации доксорубицина, что определяется при помощи ВЭЖХ на колонке С18 с обращенной фазой при элюировании с градиентом смесью уксусная кислота/метанол.
10. Липосомный препарат по п. 2, отличающийся тем, что концентрация доксорубицина после примерно одного года хранения при температуре, менее чем или равной примерно 8°C, составляет более 97% от начальной концентрации доксорубицина, что определяется при помощи ВЭЖХ на колонке С18 с обращенной фазой при элюировании с градиентом смесью уксусная кислота/метанол.
11. Липосомный препарат по п. 2, отличающийся тем, что концентрация доксорубицина после примерно двух лет хранения при температуре, менее чем или равной примерно 8°C, составляет больше, чем 95% от начальной концентрации доксорубицина, что определяется при помощи ВЭЖХ на колонке С18 с обращенной фазой при элюировании с градиентом смесью уксусная кислота/метанол.
12. Липосомный препарат по п. 2, отличающийся тем, что общее содержание продуктов разложения после примерно шести месяцев хранения при температуре, менее чем или равной примерно 8°C, составляет менее 1%.
13. Липосомный препарат по п. 2, отличающийся тем, что общее содержание продуктов разложения после примерно одного года хранения при температуре, менее чем или равной примерно 8°C, составляет менее 1%.
14. Липосомный препарат по п. 2, отличающийся тем, что общее содержание продуктов разложения после примерно двух лет хранения при температуре, менее чем или равной примерно 8°C, составляет менее 2,5%.
15. Липосомный препарат по п. 2, отличающийся тем, что один или более фосфолипид представляет собой дипальмитоилфосфатидилхолин (ДПФХ), дистеароилфосфатидилглицерин (ДСФГ) или комбинацию указанных соединений; лизолипид представляет собой монопальмитоилфосфатидилхолин (МПФХ), монолаурилфосфатидилхолин (МЛФХ), мономиристоилфосфатидилхолин (ММФХ), моностеароилфосфатидилхолин (МСФХ) или смесь указанных соединений; и один или более фосфолипид, дериватизированный гидрофильным полимером, представляет собой пегилированный липид.
16. Липосомный препарат по п. 2, отличающийся тем, что один или более фосфолипид представляет собой дипальмитоилфосфатидилхолин, один или более фосфолипид, дериватизированный гидрофильным полимером, представляет собой 1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин-N-[поли(этиленгликоль) 2000], и один или более лизолипид представляет собой моностеароилфосфатидилхолин.
17. Липосомный препарат по п. 2, отличающийся тем, что липосомы дополнительно содержат визуализирующий агент или диагностический агент.
18. Липосомный препарат по п. 17, отличающийся тем, что визуализирующий агент или диагностический агент заключен в липосоме.
19. Липосомный препарат по п. 18, отличающийся тем, что визуализирующий агент или диагностический агент представляет собой рентгеноконтрастный агент, контрастный агент для магнитно-резонансной визуализации, агент для ультразвуковой визуализации, флуоресцентный агент или радиоактивный агент.
20. Способ загрузки активного агента в липосомы, чувствительные к температуре, включающий:
(a) получение суспензии липосом, содержащих гелевый липидный бислой и концентрацию ионов аммония внутри липосом больше, чем вне липосом, где указанный липидный бислой содержит:
(i) один или более фосфолипид, выбранный из группы, состоящей из фосфатидилхолинов, фосфатидилглицеринов, фосфатидилинозитолов и фосфатидилэтаноламинов;
(ii) один или более фосфолипид, дериватизированный гидрофильным полимером; и
(iii) один или более лизолипид, выбранный из группы, состоящей из моноацилфосфатидилхолинов, моноацилфосфатидилглицеринов, моноацилфосфатидилинозитолов и моноацилфосфатидилэтаноламинов;
при этом компоненты липидного бислоя представлены в мольном отношении примерно 80-90:2-8:2-18; и
при этом указанное получение включает уменьшение размера липосом в суспензии до среднего размера частиц от примерно 50 до примерно 150 нм;
(b) добавление раствора активного агента к суспензии липосом, при этом активный агент заключается в липосомы,
где активный агент выбран из группы, состоящей из доксорубицина, блеомицина, дакарбазина, даунорубицина, дактиномицина, флударабина, гемцитабина, идарубицина, метотрексата, митомицина, митоксантрона, винбластина, винорелбина и винкристина.
21. Способ по п. 20, отличающийся тем, что активный агент представляет собой доксорубицин.
22. Способ по п. 21, отличающийся тем, что по меньшей мере 95% доксорубицина, содержащегося в растворе, заключается в липосомы.
23. Способ по п. 21, отличающийся тем, что концентрация доксорубицина, заключенного в липосомы, составляет примерно 50 мМ.
24. Способ по п. 21, отличающийся тем, что концентрация доксорубицина, заключенного в липосомы, составляет примерно 75 мМ.
25. Способ по п. 21, отличающийся тем, что указанный способ включает получение липосом в присутствии соли аммония.
26. Способ по п. 25, отличающийся тем, что соль аммония обеспечена в виде раствора сульфата аммония.
27. Способ по п. 26, отличающийся тем, что концентрация сульфата аммония составляет от примерно 100 мМ до примерно 300 мМ.
28. Способ по п. 26, дополнительно включающий замену ионов аммония, находящихся вне липосом, на раствор моносахарида или дисахарида.
29. Способ по п. 28, отличающийся тем, что концентрация раствора моносахарида или дисахарида составляет примерно 5-15%.
30. Способ по п. 29, отличающийся тем, что ионы аммония, находящиеся вне липосом, заменяют раствором моносахарида.
31. Способ по п. 30, отличающийся тем, что раствор моносахарида представляет собой раствор лактозы.
32. Способ по п. 21, дополнительно включающий добавление гистидинового буфера после стадии (b).
33. Способ по п. 32, отличающийся тем, что концентрация гистидинового буфера составляет от примерно 5 мМ до примерно 15 мМ.
14
20
34. Способ по п. 21, отличающийся тем, что один или более фосфолипид содержит две одинаковые или различные C-C ацильные группы.
35. Способ по п. 34, отличающийся тем, что один или более фосфолипид представляет собой дипальмитоилфосфатидилхолин (ДПФХ), дистеароилфосфатидилглицерин (ДСФГ) или комбинацию указанных соединений.
36. Способ по п. 21, отличающийся тем, что лизолипид представляет собой монопальмитоилфосфатидилхолин (МПФХ), монолаурилфосфатидилхолин (МЛФХ), мономиристоилфосфатидилхолин (ММФХ), моностеароилфосфатидилхолин (МСФХ) или смесь указанных соединений.
37. Способ по п. 21, отличающийся тем, что один или более фосфолипид, дериватизированный гидрофильным полимером, представляет собой пегилированный липид.
38. Способ по п. 37, отличающийся тем, что пегилированный липид представляет собой 1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин-N-[поли(этиленгликоль) 2000].
39. Способ по п. 21, отличающийся тем, что один или более фосфолипид представляет собой дипальмитоилфосфатидилхолин, один или более фосфолипид, дериватизированный гидрофильным полимером, представляет собой 1,2-дистеароил-sn-глицеро-3-фосфоэтаноламин-N-[поли(этиленгликоль) 2000], и один или более лизолипид представляет собой моностеароилфосфатидилхолин.
40. Липосомный препарат, полученный при помощи способа по п. 21.