T-КЛЕТКИ С ПОВЫШЕННОЙ УСТОЙЧИВОСТЬЮ К ИММУНОСУПРЕССИИ

1. Способ получения популяции модифицированных T-клеток, включающий:
модификацию популяции T-клеток, полученных от индивидуума-донора, для экспрессии цАМФ-фосфодиэстеразы (ФДЭ) или ее фрагмента.
2. Способ по п. 1, где цАМФ-фосфодиэстераза (ФДЭ) или фрагмент ингибируют передачу сигнала цАМФ.
3. Способ по п. 1 или 2, где цАМФ-ФДЭ выбрана из группы, состоящей из ФДЭ4 и ФДЭ7.
4. Способ по любому из пп. 1-3, где T-клетки модифицированы для экспрессии N-концевого фрагмента цАМФ-ФДЭ.
5. Способ по п. 4, где T-клетки модифицированы для экспрессии N-концевого фрагмента ФДЭ 7A.
6. Способ по п. 5, где N-концевой фрагмент содержит остатки с 1 до 57 из SEQ ID NO: 4.
7. Способ по п. 6, где N-концевой фрагмент содержит SEQ ID NO: 4.
8. Способ по любому из предшествующих пунктов, где T-клетки модифицированы путем введения нуклеиновой кислоты, кодирующей цАМФ-ФДЭ или фрагмент, в T-клетки.
9. Способ по п. 8, где нуклеиновая кислота, кодирующая цАМФ-ФДЭ или фрагмент, находится в составе экспрессирующего вектора.
10. Способ по п. 9, где экспрессирующий вектор представляет собой лентивирусный вектор.
11. Способ по любому из пп. 1-10, где T-клетки экспрессируют антигенный рецептор, который специфически связывается со злокачественными клетками от индивидуума-донора.
12. Способ по п. 11, где антигенный рецептор представляет собой T-клеточный рецептор (TCR).
13. Способ по любому из пп. 1-12, где способ включает дополнительную модификацию популяции T-клеток для экспрессии антигенного рецептора, который специфически связывается со злокачественными клетками.
14. Способ по п. 13, где T-клетки дополнительно модифицированы путем введения нуклеиновой кислоты, кодирующей антигенный рецептор, в T-клетки.
15. Способ по п. 14, где нуклеиновая кислота, кодирующая антигенный рецептор, находится в составе экспрессирующего вектора.
16. Способ по п. 15, где экспрессирующий вектор представляет собой лентивирусный вектор.
17. Способ по любому из пп. 13-16, где антигенный рецептор представляет собой гетерологичный TCR.
18. Способ по п. 17, где гетерологичный TCR представляет собой TCR с улучшенной активностью.
19. Способ по любому из пп. 12 и 17, 18, где TCR специфически связывается с MHC, презентирующей пептидный фрагмент опухолевого антигена, который экспрессируется злокачественными клетками.
20.Способ по любому из пп. 11 и 13-16, где антигенный рецептор представляет собой химерный антигенный рецептор (CAR).
21. Способ по п. 20, где CAR специфически связывается с опухолевым антигеном, который экспрессируется злокачественными клетками.
22. Способ по п. 19 или 20, где опухолевый антиген представляет собой NY-ESO-1 или MAGE-A10.
23. Способ по любому из пп. 11-22, где нуклеиновая кислота, кодирующая антигенный рецептор, и нуклеиновая кислота, кодирующая ФДЭ или ее фрагмент, находятся в составе одного экспрессирующего вектора.
24. Способ по любому из пп. 11-23, где T-клетки экспрессируют слитый белок, который расщепляется для получения антигенного рецептора и цАМФ-фосфодиэстеразы (ФДЭ) или ее фрагмента.
25. Способ по п. 24, где слитый белок содержит аминокислотную последовательность из SEQ ID NO: 6 или SEQ ID NO: 8 или ее вариант.
26. Способ по п. 25, где слитый белок кодируется нуклеиновой кислотой, содержащей нуклеотидную последовательность из SEQ ID NO: 5 или SEQ ID NO: 7 или ее вариант.
27. Способ по любому из предшествующих пунктов, включающий наращивание популяции модифицированных T-клеток.
28. Способ по любому из предшествующих пунктов, включающий хранение популяции модифицированных T-клеток.
29. Способ по любому из предшествующих пунктов, включающий формулирование популяции модифицированных T-клеток с фармацевтически приемлемым эксципиентом.
30. Способ по любому из предшествующих пунктов, включающий введение популяции модифицированных T-клеток индивидууму-реципиенту.
31. Способ по п. 30, где индивидуум-реципиент имеет раковое заболевание.
32. Способ по п. 31, где раковое заболевание характеризуется наличием одной или нескольких злокачественных клеток, которые связываются с указанным антигенным рецептором.
33. Способ по любому из пп. 30-32, где индивидуум-донор и индивидуум-реципиент являются одним и тем же лицом.
34. Способ по любому из пп. 30-33, где индивидуум-донор и индивидуум-реципиент являются различными лицами.
35. Способ по любому из пп. 30-34, включающий:
обеспечение образца злокачественных клеток, полученных от индивидуума-реципиента, и
выявление антигенного рецептора, который связывается со злокачественными клетками в полученном образце,
где популяция T-клеток модифицирована для экспрессии выявленного антигенного рецептора.
36. Популяция модифицированных T-клеток, которые экспрессируют антигенный рецептор, который специфически связывается со злокачественными клетками и цАМФ-фосфодиэстеразу (ФДЭ) или ее фрагмент, где указанные клетки содержат гетерологичную нуклеиновую кислоту, кодирующую цАМФ-фосфодиэстеразу (ФДЭ).
37. Популяция модифицированных T-клеток по п. 36, полученная способом по любому из пп. 1-35.
38. Фармацевтическая композиция, включающая популяцию модифицированных T-клеток по п. 36 или 37 и фармацевтически приемлемый эксципиент.
39. Популяция модифицированных T-клеток по п. 36 или 37 для применения в способе лечения организма человека или животного.
40. Популяция модифицированных T-клеток по п. 36 или 37 для применения в способе лечения злокачественной опухоли у индивидуума.
41. Применение популяции модифицированных T-клеток по п. 36 или 37 в производстве лекарственного средства для лечения злокачественной опухоли у индивидуума.
42. Способ лечения злокачественной опухоли, включающей введение индивидууму со злокачественной опухолью популяции модифицированных T-клеток по п. 36 или 37.
43. Популяция для применения по п. 40, применения по п. 41 или способ по п. 42, где злокачественная опухоль характеризуется наличием одной или нескольких злокачественных клеток, которые связываются с указанным антигенным рецептором.
44. Выделенная нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, которая кодирует антигенный рецептор, который специфически связывается со злокачественными клетками, и нуклеотидную последовательность, которая кодирует цАМФ-фосфодиэстеразу (ФДЭ) или еу фрагмент.
45. Вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п. 44.
46. Вектор по п. 45, который представляет собой лентивирусный вектор.
47. Вирусная частица, содержащая вектор по п. 45 или 46.
48. Способ получения вирусной частицы, включающий:
трансдукцию клеток млекопитающих вирусным вектором по п. 46 и одним или несколькими вирусными векторами для оболочки и упаковки и
культивирование трансдуцированных клеток в среде для культивирования, таким образом, что клетки производят лентивирусные частицы, которые высвобождаются в среду.