ПРОИЗВОДНОЕ СУЛЬФОНАМИДА И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ В МЕДИЦИНЕ
SULFONAMIDE DERIVATIVE AND MEDICINAL USE THEREOF

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
[0001]
Настоящее изобретение относится к производному сульфонамида или его фармацевтически приемлемой соли и к фармацевтической композиции, содержащей такое соединение в качестве активного ингредиента. В частности, настоящее изобретение относится к соединению, которое применяют в качестве терапевтического или профилактического лекарственного препарата при воспалительном заболевании, при котором в патологические процессы вовлечена α4-интегрин-зависимая адгезия.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[0002]
Известны перорально доступные соединения, обладающие ингибирующим действием в отношении α4-интегрина, которые применяют в качестве терапевтического или профилактического лекарственного препарата при воспалительном заболевании, при котором в патологические процессы вовлечена α4-интегрин-зависимая адгезия. Например, в патентной публикации 1 раскрыто производное фенилаланина, представленное общей формулой (1), или его фармацевтически приемлемая соль, и его типичное соединение имеет следующую химическую структуру:
[0003]
Кроме того, в патентной публикации 1 приведены результаты ингибирующего действия в отношении молекулы адгезии сосудистого эндотелия VCAM (анализ связывания VCAM-1/α4β1 и анализ связывания VCAM-1/α4β7).
12
13
Кроме того, в патентной публикации 2 также раскрыто производное фенилаланина, представленное ниже общей формулой (1) и имеющее R(R)N-X1-группу на конце, или его фармацевтически приемлемая соль.
Показано, что это соединение обладает высокой ингибирующей активностью в отношении VCAM-1/α4β1 интегрина в присутствии сыворотки по сравнению с соединением в примере 1 патентной публикации 1. Кроме того, в патентных публикациях 3 и 4 также раскрыты соединения, обладающие ингибирующей активностью в отношении α4-интегрина.
Перечень цитируемой литературы
Патентные публикации
[0004]
Патентная публикация 1: WO 02/016329 A1
Патентная публикация 2: WO 05/061466 A1
Патентная публикация 3: WO 03/070709 A1
Патентная публикация 4: WO 01/042225 A1
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0005]
Задачей настоящего изобретения является получение нового соединения, имеющего неизвестную до настоящего времени химическую структурную формулу и обладающего высоким ингибирующим действием в отношении α4-интегрина.
В частности, задачей настоящего изобретения является получение нового соединения, обладающего ингибирующим действием в отношении α4-интегрина с высокой селективностью, то есть с низким ингибирующим действием в отношении α4β1, и высоким ингибирующим действием в отношении α4β7.
Задачей настоящего изобретения является получение перорально доступного соединения, обладающего сильным ингибирующим действием в отношении α4 интегрина.
Задачей настоящего изобретения является получение фармацевтической композиции, содержащей такое описанное выше новое соединение и фармацевтически приемлемый носитель.
Задачей настоящего изобретения является получение лекарственного средства, содержащего такое описанное выше новое соединение.
Задачей настоящего изобретения является получение терапевтического средства или профилактического средства для воспалительного заболевания, при котором в патологические процессы вовлечена α4β7-интегрин-зависимая адгезия.
Задачей настоящего изобретения является получение ингибитора α4-интегрина.
[0006]
Настоящее изобретение было создано на основе полученных экспериментальных данных, позволяющих сделать вывод о том, что производное сульфонамида, имеющее конкретную химическую структуру и содержащее на конце сульфонамидную группу, имеющую в качестве заместителя гетерокольцевую группу, содержащую гетероатом в качестве кольцевого атома, или фенильную группу, или его фармацевтически приемлемая соль обладают высокой ингибирующей активностью в отношении α4-интегрина, и применение такого соединения может решить описанные выше задачи.
А именно, настоящее изобретение включает следующие аспекты [1]-[17].
[1] Производное сульфонамида, представленное ниже общей формулой (1), или его фармацевтически приемлемая соль:
где
А представляет собой группу, представленную общей формулой (2-1), (2-2), (2-3) или (2-4) ниже:
[0007]
где
Arm представляет собой циклическую алкильную группу или ароматическое кольцо, содержащее 0, 1, 2, 3 или 4 гетероатома, выбранных из атомов кислорода, атомов серы и атомов азота,
1
11
21
51
52
R, R, R, R и R каждый независимо представляет собой любой из следующих фрагментов: атом водорода, атом галогена, гидроксильная группа, низшая алкильная группа, низшая алкенильная группа, низшая алкинильная группа, низшая алкоксильная группа, низшая алкилтиогруппа, гидрокси-низшая алкильная группа, гидрокси-низшая алкенильная группа, гидрокси-низшая алкоксильная группа, галоген-низшая алкильная группа, галоген-низшая алкоксильная группа, галоген-низшая алкилтиогруппа, галоген-низшая алкенильная группа, нитрогруппа, цианогруппа, аминогруппа, низшая алкиламиногруппа, низшая алкиламино-низшая алкильная группа, карбоксильная группа, низшая алкилоксикарбонильная группа, карбамоильная группа, низшая алканоильная группа, ароильная группа, низшая алкилсульфонильная группа, сульфамоильная группа и аммонийная группа,
12
13
14
R, R и R каждый независимо представляет собой любой из следующих фрагментов: атом водорода, атом галогена, гидроксильная группа, низшая алкильная группа, низшая алкенильная группа, низшая алкинильная группа, низшая алкоксильная группа, низшая алкилтиогруппа, гидрокси-низшая алкильная группа, гидрокси-низшая алкенильная группа, гидрокси-низшая алкоксильная группа, галоген-низшая алкильная группа, галоген-низшая алкоксильная группа, галоген-низшая алкилтиогруппа, галоген-низшая алкенильная группа, нитрогруппа, цианогруппа, аминогруппа, низшая алкиламиногруппа, низшая алкокси-низшая алкиленовая группа, низшая алкилтио-низшая алкиленовая группа, низшая алкиламино-низшая алкиленовая группа, низшая алкиламино-низшая алкильная группа, карбоксильная группа, низшая алкилоксикарбонильная группа, карбамоильная группа, низшая алканоильная группа, ароильная группа, низшая алкилсульфонильная группа, сульфамоильная группа и аммонийная группа, и
2
3
22
23
24
25
53
R, R, R, R, R, R, и R каждый независимо представляет собой любой из следующих фрагментов: атом водорода, атом галогена, гидроксильная группа, низшая алкильная группа, низшая алкенильная группа, низшая алкинильная группа, низшая алкоксильная группа, низшая алкилтиогруппа, гидрокси-низшая алкильная группа, гидрокси-низшая алкенильная группа, гидрокси-низшая алкоксильная группа, галоген-низшая алкильная группа, галоген-низшая алкоксильная группа, галоген-низшая алкилтиогруппа, галоген-низшая алкенильная группа, нитрогруппа, цианогруппа, аминогруппа, низшая алкиламиногруппа, низшая алкиламино-низшая алкильная группа, карбоксильная группа, низшая алкилоксикарбонильная группа, карбамоильная группа, низшая алканоильная группа, ароильная группа, низшая алкилсульфонильная группа, сульфамоильная группа и аммонийная группа,
B представляет собой любой из следующих фрагментов: алкоксильная группа, имеющая от 1 до 10 углеродных атомов, гидроксильная группа или гидроксиаминогруппа, при этом эти группы необязательно замещены с помощью заместителя, выбранного из группы, состоящей из арильной группы, гидроксильной группы, алкильной группы, имеющей от 1 до 10 углеродных атомов, низшей алкоксильной группы, низшей алкиламиногруппы, атома галогена и гетероциклической группы,
[0008]
41
R представляет собой атом водорода или низшую алкильную группу,
31
32
33
34
a, b, c и d независимо представляют собой C-R, C-R, C-R или C-R, соответственно, где один или два из a, b, c и d могут представлять собой атом азота,
31
32
33
34
31
32
33
34
R, R, R и R каждый независимо представляет собой любой из следующих фрагментов: атом водорода, атом галогена, низшая алкильная группа, низшая алкоксильная группа и нитрогруппа, где любой из R, R, R и R представляет собой атом галогена или низшую алкильную группу,
35
36
37
38
e, f, g и h независимо представляют собой C-R, C-R, C-R или C-R, соответственно, где один или два из e, f, g и h могут представлять собой атом азота,
35
36
37
38
R, R, R и R каждый независимо представляет собой любой из следующих фрагментов: атом водорода, атом галогена, низшая алкильная группа, низшая алкоксильная группа и нитрогруппа,
D представляет собой фенильную группу или гетероциклическую группу, необязательно имеющую заместитель, выбранный из группы, состоящей из следующих заместителей: атом галогена, гидроксильная группа, низшая алкильная группа, низшая алкенильная группа, низшая алкинильная группа, низшая алкоксильная группа, низшая алкилтиогруппа, гидрокси-низшая алкильная группа, гидрокси-низшая алкенильная группа, гидрокси-низшая алкоксильная группа, галоген-низшая алкильная группа, галоген-низшая алкоксильная группа, галоген-низшая алкилтиогруппа, галоген-низшая алкенильная группа, нитрогруппа, цианогруппа, аминогруппа, карбоксильная группа, низшая алкилоксикарбонильная группа, карбамоильная группа, низшая алканоильная группа, ароильная группа, низшая алкилсульфонильная группа, сульфамоильная группа, низшая алкокси-низшая алкиленовая группа, низшая алкилтио-низшая алкиленовая группа, низшая алкиламино-низшая алкиленовая группа и аммонийная группа,
[0009]
когда A представляет собой группу, представленную общей формулой (2-1), (2-2) или (2-3), E представляет собой 5- или 6-членную гетероциклическую группу, замещенную с помощью заместителя, выбранного из группы, состоящей из 3-8-членной насыщенной кольцевой группы, содержащей атом азота, присоединенной через углеродный атом, 3-8-членной насыщенной или ненасыщенной кольцевой группы, содержащей гетероатом, выбранный из атома кислорода и атома серы, низшей алкокси-низшей алкиленовой группы, низшей алкилтио-низшей алкиленовой группы, низшей алкиламино-низшей алкиленовой группы, низшей алкиламиногруппы и низшей алкениламиногруппы; или 5- или 6-членную циклическую кетоновую группу, содержащую от 1 до 4 атомов азота в качестве кольцевых атомов, при этом циклическая кетоновая группа замещена с помощью низшей алкильной группы или низшей алкенильной группы, и
когда A представляет собой группу, представленную общей формулой (2-4), E представляет собой фенильную группу или 5- или 6-членную гетероциклическую группу, необязательно имеющую заместитель, выбранный из группы, состоящей из следующих фрагментов: атом галогена, гидроксильная группа, низшая алкильная группа, низшая алкенильная группа, низшая алкинильная группа, низшая алкоксильная группа, низшая алкилтиогруппа, гидрокси-низшая алкильная группа, гидрокси-низшая алкенильная группа, гидрокси-низшая алкоксильная группа, галоген-низшая алкильная группа, галоген-низшая алкоксильная группа, галоген-низшая алкилтиогруппа, галоген-низшая алкенильная группа, нитрогруппа, цианогруппа, аминогруппа, 4-6-членная циклическая аминогруппа, карбоксильная группа, низшая алкилоксикарбонильная группа, карбамоильная группа, низшая алканоильная группа, ароильная группа, низшая алкилсульфонильная группа, сульфамоильная группа и аммонийная группа; аминокарбонильную группу, необязательно имеющую заместитель, выбранный из группы, состоящей из следующих фрагментов: гидроксильная группа, низшая алкильная группа, низшая алкенильная группа, низшая алкинильная группа, низшая алкоксильная группа, гидрокси-низшая алкильная группа, гидрокси-низшая алкенильная группа, гидрокси-низшая алкоксильная группа, галоген-низшая алкильная группа, галоген-низшая алкоксильная группа, галоген-низшая алкенильная группа, аминогруппа, низшая алкиламиногруппа, арильная группа, гетероциклическая группа, гетероциклическая низшая алкильная группа, низшая алкилсульфонильная группа и сульфамоильная группа; атом водорода; атом галогена; гидроксильную группу; низшую алкильную группу; низшую алкенильную группу; низшую алкинильную группу; низшую алкоксильную группу; низшую алкилтиогруппу; гидрокси-низшую алкильную группу; гидрокси-низшую алкенильную группу; гидрокси-низшую алкоксильную группу; галоген-низшую алкильную группу; галоген-низшую алкоксильную группу; галоген-низшую алкилтиогруппу; галоген-низшую алкенильную группу; нитрогруппу; цианогруппу; аминогруппу; карбоксильную группу; дигидроксиборильную группу; низшую алкилкарбонильную группу; низшую алкилоксикарбонильную группу; карбамоильную группу; низшую алканоильную группу; ароильную группу; низшую алкилсульфонильную группу; сульфамоильную группу; аммонийную группу; низшую алкиламиноалкиленовую группу; 5- или 6-членную гетероциклическую группу, замещенную с помощью заместителя, выбранного из группы, состоящей из следующих фрагментов: 3-8-членная насыщенная кольцевая группа, содержащая атом азота, присоединенная через углеродный атом, 3-8-членная насыщенная или ненасыщенная кольцевая группа, содержащая гетероатом, выбранный из атома кислорода и атома серы, низшая алкокси-низшая алкиленовая группа, низшая алкилтио-низшая алкиленовая группа, низшая алкиламино-низшая алкиленовая группа, низшая алкиламиногруппа и низшая алкениламиногруппа; или 5- или 6-членную циклическую кетоновую группу, содержащую от 1 до 4 атомов азота в качестве кольцевых атомов, при этом циклическая кетоновая группа замещена с помощью низшей алкильной группы или низшей алкенильной группы, где низшая алкилкарбонильная группа и низшая алкилоксикарбонильная группа могут образовывать конденсированное кольцо путем образования связи с фенильной группой в D,
при условии, что производное сульфонамида исключает производные сульфонамида, выбранные из группы, состоящей из соединений (a)-(h), приведенных ниже:
[0010]
(a) (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-ил-пиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[4-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)фенил]пропановая кислота
(b) циклогексил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетрагидро-пиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[4-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)фенил]-пропионат
(c) (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-ил-пиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]-пропановая кислота
[0011]
(d) циклогексил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетрагидро-пиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]-пропаноат
(e) (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[4-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)фенил]пропановая кислота
(f) циклогексил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метокси-метил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[4-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)фенил]пропаноат
(g) (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропановая кислота
и
(h) циклогексил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метокси-метил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]-пропаноат.
[0012]
[2] Производное сульфонамида или его фармацевтически приемлемая соль по пункту [1], где D представляет собой фенильную группу, необязательно имеющую заместитель, выбранный из группы, состоящей из низшей алкильной группы, атома галогена, гидроксильной группы и низшей алкоксильной группы.
[3] Производное сульфонамида или его фармацевтически приемлемая соль по пункту [1], где D представляет собой 6-членную ароматическую гетероциклическую группу, необязательно имеющую заместитель, выбранный из группы, состоящей из низшей алкильной группы, атома галогена и низшей алкоксильной группы и имеющей атом азота в качестве кольцевого атома.
[4] Производное сульфонамида или его фармацевтически приемлемая соль по пункту [3], где гетероциклическая группа D представляет собой пиридильную группу или пиррольную группу, необязательно имеющую заместитель, выбранный из группы, состоящей из низшей алкильной группы, атома галогена и низшей алкоксильной группы.
[5] Производное сульфонамида или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пунктов [1]-[4], где 5- или 6-членную гетероциклическую группу E выбирают из группы, состоящей из пиридильной группы, пиридазильной группы, пиримидильной группы, пиразинильной группы, пирролильной группы, триазолильной группы и тетразольной группы, и циклическая кетоновая группа E представляет собой 5- или 6-членную циклическую кетоновую группу, содержащую 2 или 3 атома азота в качестве кольцевых атомов.
[6] Производное сульфонамида или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пунктов [1]-[4], где A представляет собой группу, представленную общей формулой (2-4), и E представляет собой 5- или 6-членную ароматическую гетероциклическую группу, содержащую 1, 2, 3 или 4 гетероатома, выбранных из атомов кислорода, атомов серы или атомов азота, и необязательно имеющую заместитель, выбранный из группы, состоящей из низшей алкильной группы, низшей алкоксильной группы, низшей алкокси-низшей алкиленовой группы и атома галогена.
[0013]
[7] Производное фенилаланина или его фармацевтически приемлемая соль по пункту [6], где ароматическую гетероциклическую группу выбирают из группы, состоящей из пиридильной группы, пиридазильной группы, пиримидильной группы, пиразинильной группы, пирролильной группы, фуранильной группы, тиофенильной группы, тиазолильной группы, оксазолильной группы, триазолильной группы и тетразольной группы.
[8] Производное сульфонамида или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пунктов [1]-[4], где A представляет собой группу, представленную общей формулой (2-4), и E представляет собой аминокарбонильную группу, необязательно замещенную с помощью низшей алкильной группы, гетероциклической группы или гетероциклической низшей алкильной группы или низшей алкиламиноалкиленовой группы.
[9] Производное сульфонамида или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пунктов [1]-[4] и [5], где гетероциклическая группа E представляет собой пиридильную группу, пиримидильную группу, триазолильную группу и тетразольную группу, необязательно имеющую заместитель, выбранный из группы, состоящей из 3-8-членной насыщенной или ненасыщенной кольцевой группы, содержащей гетероатом, выбранный из атома кислорода и атома серы, низшую алкокси-низшую алкиленовую группу или низшую алкиламино-низшую алкиленовую группу.
11
12
13
[10] Производное сульфонамида или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пунктов [1]-[5] и [9], где A представляет собой группу, представленную общей формулой (2-2), и R, R и R выбирают из группы, состоящей из низшей алкильной группы, низшей алкоксильной группы, низшей алкокси-низшей алкиленовой группы, низшей алкиламино-низшей алкиленовой группы и атома галогена.
[0014]
[11] Производное сульфонамида или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пунктов [1]-[10], где B представляет собой низшую алкоксильную группу, необязательно замещенную с помощью заместителя, выбранного из группы, состоящей из низшей алкильной группы, низшей алкоксильной группы, низшей алкиламиногруппы, атома галогена и гетероциклической группы; или гидроксильную группу.
[12] Производное сульфонамида или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пунктов [1]-[6], [8], [9], [10] и [11], где низшая алкильная группа представляет собой линейную, разветвленную или циклическую алкильную группу.
1
11
21
51
52
[13] Производное сульфонамида или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пунктов [1]-[12], где R, R, R, R и R представляют собой низшие алкильные группы.
[14] Производное сульфонамида или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пунктов [1]-[13], где Arm выбирают из группы, состоящей из фенильной группы, пиридильной группы, пиримидильной группы и имидазолильной группы.
[15] Производное сульфонамида или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пунктов [1]-[4], где
A представляет собой группу, представленную общей формулой (2-2), и
E представляет собой 5- или 6-членную гетероциклическую группу, содержащую от 1 до 4 атомов азота, при этом 5- или 6-членная гетероциклическая группа замещена с помощью заместителя, выбранного из группы, состоящей из низшей алкильной группы, низшей алкокси-низшей алкиленовой группы, и 5- или 6-членная гетероциклическая группа содержит атом кислорода; или циклическую кетоновую группу, содержащую от 1 до 4 атомов азота, при этом циклическая кетоновая группа замещена с помощью низшей алкильной группы или низшей алкенильной группы.
[16] Производное сульфонамида или его фармацевтически приемлемая соль по пункту [15], где
B необязательно замещен с помощью заместителя, выбранного из группы, состоящей из алкильной группы, имеющей от 1 до 10 углеродных атомов, низшей алкоксильной группы и гетероциклической группы, содержащей от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из атомов кислорода и атомов азота, и
Arm представляет собой пиридильную группу.
[17] Производное сульфонамида или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пунктов [1]-[4], где
A представляет собой группу, представленную общей формулой (2-4),
E представляет собой 5- или 6-членную гетероциклическую группу, содержащую атом кислорода, или 5- или 6-членную гетероциклическую группу, содержащую от 1 до 4 атомов азота, и
E необязательно имеет заместитель, выбранный из низшей алкильной группы, низшей алкокси-низшей алкиленовой группы и 5- или 6-членной гетероциклической группы, содержащей атом кислорода.
[18] Фармацевтическая композиция, содержащая производное сульфонамида или его фармацевтически приемлемую соль по любому из пунктов [1]-[17].
[19] Терапевтическое средство или профилактическое средство для воспалительного заболевания, при котором в патологические процессы вовлечена α4β7-интегрин-зависимая адгезия, где средство содержит в качестве активного ингредиента производное сульфонамида или его фармацевтически приемлемую соль по любому из пунктов [1]-[17].
[20] Ингибитор α4β7-интегрина, содержащий в качестве активного ингредиента производное сульфонамида или его фармацевтически приемлемую соль по любому из пунктов [1]-[17].
ОПИСАНИЕ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ
[0015]
Используемый в данном описании термин "низший", когда речь идет о низшей алкильной группе или других подобных группах, обозначает группу, имеющую от 1 до 6 углеродных атомов, предпочтительно, группу, имеющую от 1 до 4 углеродных атомов. Алкильная группа, алкенильная группа и алкинильная группа, служащая в качестве составной части алкильной группы, алкенильной группы, алкинильной группы, алкоксильной группы, алкилтиогруппы, алканоильной группы, алкиламиногруппы или других подобных групп, могут быть линейными или разветвленными. В качестве варианта, они могут быть циклическими. Примеры алкильной группы включают метильную группу, этильную группу, пропильную группу, изопропильную группу, бутильную группу, вторбутильную группу, трет-бутильную группу, пентильную группу, 2-пентильную группу, 3-пентильную группу, гексильную группу, циклопропильную группу, циклобутильную группу, циклопентильную группу, циклогексильную группу, циклопропилметильную группу и циклопропилэтильную группу, предпочтительно, имеющие от 1 до 6 углеродных атомов, более предпочтительно, имеющие от 1 до 4 углеродных атомов. Примеры алкенильной группы включают винильную группу, пропенильную группу, бутенильную группу и пентенильную группу, предпочтительно имеющие от 2 до 6 углеродных атомов, более предпочтительно, имеющие от 2 до 4 углеродных атомов. Примеры алкинильной группы включают этинильную группу, пропинильную группу и бутинильную группу, предпочтительно, имеющие от 2 до 6 углеродных атомов, более предпочтительно, имеющие от 2 до 4 углеродных атомов.
Примеры алкоксильной группы включают метоксильную группу, этоксильную группу, пропилоксильную группу и изопропилоксильную группу, предпочтительно, имеющие от 1 до 6 углеродных атомов, более предпочтительно, имеющие от 1 до 4 углеродных атомов. Примеры гетероатома включают азот, кислород и серу. Примеры атома галогена включают фтор, хлор, бром и йод. Примеры галогеналкильной группы включают хлорметильную группу, трихлорметильную группу, трифторметильную группу, трифторэтильную группу и пентафторметильную группу. Примеры галогеналкоксильной группы включают трихлорметоксильную группу и трифторметоксильную группу. Примеры гидроксиалкильной группы включают гидроксиметильную группу и гидроксиэтильную группу.
[0016]
В данном описании, арильная группа обозначает замещенную или незамещенную арильную группу, и ее примеры включают фенильную группу, 1-нафтильную группу и 2-нафтильную группу, среди которых фенильная группа и замещенная фенильная группа являются предпочтительными, где в качестве заместителя атом галогена, алкоксильная группа, алкильная группа, гидроксильная группа, галогеналкильная группа и галогеналкоксильная группа являются особенно предпочтительными. Гетероциклическая группа обозначает 4-7-членную гетерокольцевую группу, которая состоит из от одного до трех колец и которая состоит из углерода и азота, кислорода, серы или других подобных атомов, и конкретные примеры которой включают пиридильную группу, дигидропиранильную группу, тетрагидропиранильную группу, пиридазильную группу, пиримидильную группу, пиразильную группу, пирролильную группу, фурильную группу, тиенильную группу, тиазолильную группу, триазолильную группу, изоксазолильную группу, изотиазолильную группу, оксазолильную группу, индолильную группу, хинолильную группу, изохинолильную группу, бензоимидазолильную группу, пиразолильную группу, имидазолильную группу, тиадиазолильную группу, пирролидильную группу, пиперидильную группу, пиперазильную группу, морфолильную группу, оксетанильное кольцо, изоиндолильную группу, бензофурильную группу, изобензофурильную группу, бензотиенильную группу, бензопиразолильную группу, бензоимидазолильную группу, бензоксазолильную группу и бензотиазолильную группу, среди которых пиридильная группа, пиразильная группа, пиримидильная группа, фурильная группа и тиенильная группа являются предпочтительными.
[0017]
В общей формуле (1) настоящего изобретения, предпочтительно, чтобы (i) D представлял собой фенильную группу, необязательно имеющую заместитель, выбранный из группы, состоящей из низшей алкильной группы, атома галогена, гидроксильной группы и низшей алкоксильной группы, или (ii) D представлял собой 6-членную ароматическую гетероциклическую группу, необязательно имеющую заместитель, выбранный из группы, состоящей из низшей алкильной группы, атома галогена и низшей алкоксильной группы, и имеющую атом азота в качестве кольцевого атома. Особенно предпочтительно, чтобы гетероциклическая группа D представляла собой пиридильную группу.
Кроме того, в общей формуле (1) настоящего изобретения, B представляет собой любую алкоксильную группу, имеющую от 1 до 10 углеродных атомов, гидроксильную группу или гидроксиаминогруппу, и эти группы необязательно замещены с помощью заместителя, выбранного из группы, состоящей из арильной группы, гидроксильной группы, алкильной группы, имеющей от 1 до 10 углеродных атомов, низшей алкоксильной группы, низшей алкиламиногруппы, атома галогена и гетероциклической группы, среди которых низшая алкоксильная группа, необязательно замещенная с помощью заместителя, выбранного из группы, состоящей из низшей алкильной группы, низшей алкоксильной группы, низшей алкиламиногруппы, атома галогена и гетероциклической группы или гидроксильной группы, является предпочтительной. Гетероциклическая группа, когда B представляет собой любую алкоксильную группу, замещенную с помощью гетероциклической группы и имеющую от 1 до 10 углеродных атомов, гидроксильную группу или гидроксиаминогруппу, является предпочтительно насыщенной кольцевой группой, содержащей гетероатом, выбранный из атома азота, атома кислорода и атома серы, и ее конкретные примеры включают морфолильную группу, пиперазильную группу, тетрагидропиранильную группу и оксетанильную группу, среди которых тетрагидропиранильная группа является предпочтительной.
[0018]
Кроме того, в общей формуле (1) настоящего изобретения, когда A представляет собой группу, представленную общей формулой (2-1), (2-2) или (2-3), предпочтительно, чтобы E представлял собой 5- или 6-членную гетероциклическую группу, замещенную с помощью заместителя, выбранного из группы, состоящей из 3-8-членной насыщенной кольцевой группы, содержащей атом азота, присоединенной через углеродный атом, 3-8-членной насыщенной или ненасыщенной группы, содержащей гетероатом, выбранный из атома кислорода и атома серы, низшей алкоксиалкиленовой группы, низшей алкилтиоалкиленовой группы, низшей алкиламиноалкиленовой группы, низшей алкиламиногруппы и низшей алкениламиногруппы (предпочтительно, 5- или 6-членной циклическую аминогруппу, содержащую от 1 до 4 атомов азота, имеющую описанный выше заместитель); или 5- или 6-членную циклическую кетоновую группу, содержащую от 1 до 4 атомов азота в качестве кольцевых атомов, при этом циклическая кетоновая группа замещена с помощью низшей алкильной группы или низшей алкенильной группы, в комбинации с описанными выше (i) или (ii).
Предпочтительно, чтобы 5- или 6-членную гетероциклическую группу E выбирали из группы, состоящей из пиридильной группы, пиридазильной группы, пиримидильной группы, пиразильной группы, пирролильной группы, триазолильной группы и тетразольной группы, и чтобы циклическая кетоновая группа представляла собой 5- или 6-членную циклическую кетоновую группу, содержащую 2 или 3 атома азота в качестве кольцевых атомов.
Кроме того, предпочтительно, чтобы низшая алкиленовая группа низшей алкокси-низшей алкиленовой группы, низшей алкилтио-низшей алкиленовой группы или низшей алкиламино-низшей алкиленовой группы имела от 1 до 6 углеродных атомов, более предпочтительно, имела от 1 до 3 углеродных атомов, и предпочтительно, чтобы низшая алкильная группа имела от 1 до 3 углеродных атомов.
Кроме того, предпочтительно, чтобы 3-8-членная насыщенная или ненасыщенная кольцевая группа, содержащая гетероатом, выбранный из атома кислорода и атома серы, представляла собой 5- или 6-членную насыщенную или ненасыщенную кольцевую группу, содержащую один гетероатом, выбранный из атома кислорода и атома серы, и, в частности, предпочтительными являются тетрагидропиран, тетрагидрофуран, оксетан, фуран, тиофен или другие подобные группы.
Предпочтительно, чтобы 3-8-членная насыщенная кольцевая группа, содержащая атом азота, представляла собой 5- или 6-членную насыщенную кольцевую группу, содержащую один атом азота, и, в частности, предпочтительными являются пирролидин, пиперидин или другие подобные группы.
Кроме того, предпочтительно, чтобы циклическая кетоновая группа представляла собой, в частности, пиримидиноновую группу, и, предпочтительно, чтобы низшая алкильная группа или низшая алкенильная группа были связаны с атомами азота, входящими в циклическую кетоновую группу.
[0019]
Когда A представляет собой группу, представленную общей формулой (2-4), предпочтительно, чтобы E представлял собой фенильную группу или 5- или 6-членную гетероциклическую группу, необязательно имеющую заместитель, выбранный из группы, состоящей из следующих фрагментов: атом галогена, гидроксильная группа, низшая алкильная группа, низшая алкенильная группа, низшая алкинильная группа, низшая алкоксильная группа, низшая алкилтиогруппа, гидрокси-низшая алкильная группа, гидрокси-низшая алкенильная группа, гидрокси-низшая алкоксильная группа, галоген-низшая алкильная группа, галоген-низшая алкоксильная группа, галоген-низшая алкилтиогруппа, галоген-низшая алкенильная группа, нитрогруппа, цианогруппа, аминогруппа, карбоксильная группа, низшая алкилоксикарбонильная группа, карбамоильная группа, низшая алканоильная группа, ароильная группа, низшая алкилсульфонильная группа, сульфамоильная группа, и аммонийная группа; представлял собой аминокарбонильную группу, необязательно имеющую заместитель, выбранный из группы, состоящей из следующих фрагментов: гидроксильная группа, низшая алкильная группа, низшая алкенильная группа, низшая алкинильная группа, низшая алкоксильная группа, гидрокси-низшая алкильная группа, гидрокси-низшая алкенильная группа, гидрокси-низшая алкоксильная группа, галоген-низшая алкильная группа, галоген-низшая алкоксильная группа, галоген-низшая алкенильная группа, аминогруппа, низшая алкиламиногруппа, арильная группа, гетероциклическая группа, низшая алкилсульфонильная группа и сульфамоильная группа; представлял собой атом водорода; атом галогена; гидроксильную группу; низшую алкильную группу; низшую алкенильную группу; низшую алкинильную группу; низшую алкоксильную группу; низшую алкилтиогруппу; гидрокси-низшую алкильную группу; гидрокси-низшую алкенильную группу; гидрокси-низшую алкоксильную группу; галоген-низшую алкильную группу; галоген-низшую алкоксильную группу; галоген-низшую алкилтиогруппу; галоген-низшую алкенильную группу; нитрогруппу; цианогруппу; аминогруппу; карбоксильную группу; дигидроксиборильную группу; низшую алкилоксикарбонильную группу; карбамоильную группу; низшую алканоильную группу; ароильную группу; низшую алкилсульфонильную группу; сульфамоильную группу; аммонийную группу; низшую алкиламиноалкиленовую группу или 5- или 6-членную гетероциклическую группу, замещенную с помощью заместителя, выбранного из группы, состоящей из 3-8-членной насыщенной кольцевой группы, содержащей атом азота, присоединенный через углеродный атом, 3-8-членной насыщенной или ненасыщенной кольцевой группы, содержащей гетероатом, выбранный из атома кислорода и атома серы, низшей алкоксиалкиленовой группы, низшей алкилтиоалкиленовой группы, низшей алкиламиноалкиленовой группы, низшей алкиламиногруппы и низшей алкениламиногруппы (предпочтительно, 5- или 6-членной циклической аминогруппы, содержащей от 1 до 4 атомов азота, имеющей описанный выше заместитель); или 5- или 6-членную циклическую кетоновую группу, содержащую от 1 до 4 атомов азота, в качестве кольцевых атомов, при этом циклическая кетоновая группа замещена с помощью низшей алкильной группы или низшей алкенильной группы.
Следует отметить, что предпочтительные примеры E являются аналогичными примерам, описанным для случая, когда A представляет собой группу, представленную общей формулой (2-1), (2-2) или (2-3).
[0020]
Кроме того, когда A представляет собой группу, представленную общей формулой (2-4), предпочтительно, чтобы E представлял собой 5- или 6-членную ароматическую гетероциклическую группу, содержащую 1, 2, 3 или 4 гетероатома, выбранных из атомов кислорода, атомов серы или атомов азота, и необязательно имеющую заместитель, выбранный из группы, состоящей из низшей алкильной группы, низшей алкоксильной группы и атома галогена в комбинации с описанным выше (i) или (ii). Предпочтительно, чтобы ароматическую гетероциклическую группу выбирали из группы, состоящей из пиридильной группы, пиридазильной группы, пиримидильной группы, пиразинильной группы, пирролильной группы, фуранильной группы, тиофенильной группы, тиазолильной группы, оксазолильной группы, триазолильной группы и тетразольной группы.
Когда A представляет собой группу, представленную общей формулой (2-4), предпочтительно, чтобы E представлял собой аминокарбонильную группу, необязательно замещенную с помощью низшей алкильной или гетероциклической или гетероциклической низшей алкильной группы; или низшую алкиламиноалкиленовую группу в комбинации с описанными выше (i) или (ii). Кроме того, предпочтительно, чтобы E также представлял собой пиридильную группу, пиримидильную группу, триазолильную группу или пирролильную группу, необязательно имеющую низшую алкильную группу или 4-6-членную циклическую аминогруппу; или аминокарбонильную группу, необязательно замещенную с помощью низшей алкильной или гетероциклической низшей алкильной группы. Примеры 4-6-членной циклической аминогруппы включают азетидинильную группу, а примеры гетероциклической низшей алкильной группы включают тетрапиран-низшую алкильную группу.
Кроме того, когда E представляет собой низшую алкилкарбонильную группу или низшую алкилоксикарбонильную группу, примеры конденсированного кольца, образованного такой группой, связанной с фенильной группой D, включают 1-оксоинданильную группу и 3-оксо-1H-изобензофуранильную группу.
[0021]
1
11
21
51
52
Кроме того, в общей формуле (1) настоящего изобретения или в любом из описанных выше предпочтительных аспектов, предпочтительно, чтобы R, R, R, R и R представляли собой низшие алкильные группы.
Кроме того, в общей формуле (1) настоящего изобретения или в любом из описанных выше предпочтительных аспектов, предпочтительно, чтобы Arm выбирали из группы, состоящей из фенильной группы, пиридильной группы, пиримидильной группы и имидазолильной группы.
31
32
33
34
Кроме того, в общей формуле (1) настоящего изобретения или в любом из описанных выше предпочтительных аспектов, предпочтительно, чтобы один из R, R, R и R представлял собой атом галогена, при этом другие представляли собой атомы водорода, два из них представляли собой атомы галогена, при этом другие представляли собой атомы водорода, или четыре из них представляли собой атомы галогена.
Кроме того, в общей формуле (1) настоящего изобретения или в любом из описанных выше предпочтительных аспектов, предпочтительно, чтобы g представлял собой атом углерода или азота, и e представлял собой атом углерода или азота.
[0022]
В настоящем изобретении, соединения, представленные следующими формулами, или их фармацевтически приемлемые соли являются особенно предпочтительными. Кроме того, пролекарства этих соединений или их фармацевтически приемлемые соли также являются предпочтительными.
(2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]пропионовая кислота
Циклогексил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]пропаноат
[0023]
Изопропил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат
1-Этилпропил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат
[0024]
(4,4-Диметилциклогексил) (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат
Циклопентил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат
[0025]
Циклогептил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат
2,2-Диметилпропил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метокси-метил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]-пропаноат
[0026]
Циклобутилметил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метокси-метил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]-пропаноат
(2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-(2-фурилсульфониламино)бензоил]-амино]-3-[4-(1,3,4-триметил-2,6-диоксо-пиримидин-5-ил)фенил]-пропановая кислота
[0027]
(2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[4-[2-(изопропоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[4-(1,3,4-триметил-2,6-диоксопиримидин-5-ил)фенил]пропановая кислота
[0028]
Кроме того, когда A представляет собой группу, представленную общей формулой (2-2), предпочтительно, чтобы E представлял собой 5- или 6-членную гетероциклическую группу, содержащую от 1 до 4 атомов азота, при этом 5- или 6-членная гетероциклическая группа замещена с помощью заместителя, выбранного из низшей алкильной группы, низшей алкокси-низшей алкиленовой группы, и 5- или 6-членная гетероциклическая группа содержит атом кислорода; или циклическую кетоновую группу, содержащую от 1 до 4 атомов азота, при этом циклическая кетоновая группа замещена с помощью низшей алкильной группы или низшей алкенильной группы.
Кроме того, предпочтительно, чтобы E представлял собой пиримидильную группу, замещенную с помощью низшей алкокси-низшей алкиленовой группы или тетрагидропиранильной группы; или пиримидинoновую группу, замещенную с помощью низшей алкенильной группы.
Кроме того, предпочтительно, чтобы B представлял собой алкоксильную группу, имеющую от 1 до 10 углеродных атомов, гидроксильную группу или гидроксиаминогруппу, где B необязательно замещен с помощью заместителя, выбранного из группы, состоящей из алкильной группы, имеющей от 1 до 10 углеродных атомов, низшей алкоксильной группы и гетероциклической группы, содержащей от 1 до 4 гетероатомов, выбранных из атомов кислорода и атомов азота.
Кроме того, предпочтительно, чтобы Arm представлял собой пиридильную группу.
[0029]
Кроме того, когда A представляет собой группу, представленную общей формулой (2-4), предпочтительно, чтобы E представлял собой 5- или 6-членную гетероциклическую группу, содержащую атом кислорода, или 5- или 6-членную гетероциклическую группу, содержащую от 1 до 4 атомов азота, где E необязательно имеет заместитель, выбранный из группы, состоящей из низшей алкильной группы, низшей алкокси-низшей алкиленовой группы и 5- или 6-членной гетероциклической группы, содержащей атом кислорода.
Кроме того, предпочтительно, чтобы E представлял собой тетрагидропиранильную группу или пиримидильную группу, где E необязательно имеет заместитель, выбранный из группы, состоящей из низшей алкильной группы и тетрагидропиранильной группы.
Кроме того, предпочтительно, чтобы B представлял собой низшую алкоксильную группу или гидроксильную группу.
51
52
53
Кроме того, предпочтительно, чтобы R, R и R каждый представлял собой низшую алкильную группу.
[0030]
Кроме того, в настоящем изобретении, соединения, представленные следующими формулами, или их фармацевтически приемлемые соли являются особенно предпочтительными. Кроме того, пролекарства этих соединений или их фармацевтически приемлемые соли являются особенно предпочтительными.
[0031]
Когда соединение настоящего изобретения, представленное общей формулой (1), может принимать форму соли, его соль может являться фармацевтически приемлемой, и ее примеры для кислотной группы, такой как карбоксильная группа в формуле, могут включать аммонийные соли, соли со щелочными металлами, такими как натрий и калий, соли с щелочно-земельными металлами, такими как кальций и магний, соли алюминия, соли цинка, соли с органическими аминами, такими как триэтиламин, этаноламин, морфолин, пиперидин и дициклогексиламин, и соли с аминокислотами, обладающими основными свойствами, такими как аргинин и лизин. Примеры солей для группы с основными свойствами, когда такая группа присутствует в формуле, могут включать соли с неорганическими кислотами, такими как хлористоводородная кислота, серная кислота и фосфорная кислота, соли с органическими карбоновыми кислотами, такими как уксусная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, винная кислота и янтарная кислота, и соли с органическими сульфоновыми кислотами, такими как метансульфоновая кислота и п-толуолсульфоновая кислота. Что касается метода получения солей, то соли могут быть получены путем смешения соединения общей формулы (1) с требуемой кислотой или основанием при соответствующем количественном соотношении в растворителе или диспергирующей среде, или путем катионного обмена или анионного обмена из других форм солей.
Соединение настоящего изобретения может содержать сольват соединения, представленного общей формулой (1), такой как гидраты или аддукты со спиртом.
[0032]
Соединение настоящего изобретения включает варианты осуществления пролекарств соединения, представленного общей формулой (1). Пролекарство соединения настоящего изобретения обозначает соединение, превращаемое в соединение, представленное общей формулой (1), в результате взаимодействия с ферментом, кислотой желудочного сока или другими подобными веществами при физиологических условиях in vivo, то есть, соединение, трансформируемое в соединение, представленное общей формулой (1), в результате воздействия ферментативного окисления, восстановления, гидролиза или других подобных процессов, или соединение, трансформируемое в соединение, представленное общей формулой (1) в результате протекания реакции гидролиза в среде кислоты желудочного сока или других подобных процессов. Пролекарство соединения, представленного общей формулой (1), иллюстрируется соединениями в примерах, но ими не ограничивается, и примеры его использования включают, когда соединение, представленное общей формулой (1), имеет аминогруппу, соединения, получаемые ацилированием, алкилированием или фосфорилированием амино (например, соединения, получаемые эйкозаноилированием, аланилированием, пентиламинокарбонилированием, (5-метил-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил)метоксикарбонилированием, тетрагидро-фуранилированием, пирролидилметилированием, пивалоилокси-метилированием или трет-бутилированием аминогруппы соединения, представленного общей формулой (1)); когда соединение, представленное общей формулой (1), имеет гидроксильную группу, соединения, получаемые ацилированием, алкилированием, фосфорилированием или борированием гидроксильной группы (например, соединения, получаемые ацетилированием, польмитоилированием, пропаноилированием, пивалоилированием, сукцинилированием, фумарилированием, аланилированием или диметиламинометил-карбонилированием гидроксильной группы соединения, представленного общей формулой (1)); и когда соединение, представленное общей формулой (1), имеет карбоксильную группу, соединения, получаемые этерификацией или амидированием карбоксильной группы (например, соединения, получаемые этерификацией с образованием этилового эфира, получаемые этерификацией с образованием фенилового эфира, получаемые этерификацией с образованием изопропилового эфира, получаемые этерификацией с образованием изобутилового эфира, получаемые этерификацией с образованием циклопентилового эфира, получаемые этерификацией с образованием циклогексилового эфира, получаемые этерификацией с образованием циклогептилового эфира, получаемые этерификацией с образованием циклобутилметилового эфира, получаемые этерификацией с образованием циклогексилметилового эфира, получаемые этерификацией с образованием н-гексилового эфира, получаемые этерификацией с образованием вторбутилового эфира, получаемые этерификацией с образованием трет-бутилового эфира, получаемые этерификацией с образованием (4-тетрагидропиранил)метилового эфира, получаемые этерификацией с образованием 4-тетрагидропиранилового эфира, получаемые этерификацией с образованием карбоксиметилового эфира, получаемые этерификацией с образованием диметиламинометилового эфира, получаемые этерификацией с образованием пивалоилоксиметилового эфира, получаемые этерификацией с образованием этоксикарбонилоксиэтилового эфира, получаемые этерификацией с образованием фталидилового эфира, получаемые этерификацией с образованием (5-метил-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил)метилового эфира, получаемые этерификацией с образованием циклогексилоксикарбонилэтилового эфира или получаемых метиламидированием карбоксильной группы соединения, представленного общей формулой (1)). Эти соединения могут быть получены из соединения, представленного общей формулой (1), известными способами.
Кроме того, пролекарство соединения (1) может представлять собой соединение, трансформируемое в соединение (1) в физиологических условиях, описанное в публикации "IYAKUHIN no KAIHATSU (Development of Pharmaceuticals)", Vol. 7, Design of Molecules, p. 163 to 198, published by HIROKAWA SHOTEN in 1990.
[0033]
2
3
13
14
15
17
18
31
32
35
18
36
3
14
Настоящее изобретение включает все изотопы соединения, представленного формулой (1). Изотоп соединения настоящего изобретения имеет, по меньшей мере, один атом, замещенный с помощью атома, имеющего такой же атомный номер (число протонов), но отличающееся массовое число (сумму числа протонов и нейтронов). Примеры изотопа, содержащегося в соединении настоящего изобретения, включают атом водорода, атом углерода, атом азота, атом кислорода, атом фосфора, атом серы, атом фтора и атом хлора, который соответственно содержит H, H, C, C, N, O, O, P, P, S, F, Cl, или другие подобные изотопы. В частности, нестабильные радиоактивные изотопы, которые излучают радиацию с испусканием нейтронов, такие как H и C, применяют для исследования распределения фармацевтических препаратов или соединений в тканях организма. Стабильные изотопы могут безопасно использоваться, так как они не распадаются, их содержание практически не изменяется и они нерадиоактивны. Изотоп соединения настоящего изобретения может быть получен с помощью традиционных способов путем замены реагента, используемого для синтеза, на реагент, содержащей соответствующий изотоп.
[0034]
Соединение настоящего изобретения, представленное общей формулой (1), может быть получено, например, путем реакции дегидратации промежуточного соединения, представленного общей формулой (M-I) и имеющего аминогруппу на конце, и промежуточного соединения, представленного общей формулой (M-II) и имеющего карбоксильную группу на конце.
Из этих промежуточных соединений, промежуточное соединение, представленное общей формулой (M-II) и имеющее карбоксильную группу на конце, может быть получено, например, следующим способом.
[0035]
Типичный способ получения промежуточного соединения, представленного общей формулой (M-II) и имеющего карбоксильную группу на конце, которое является соединением настоящего изобретения, показан ниже. В следующем далее описании, символы в формулах являются такими же, как и в формуле (I), если не указано иное.
(1) В общей формуле (M-II), промежуточное соединение (S6), имеющее карбоксильную группу на конце, в котором D представляет собой фенильную группу или пиридильную группу, необязательно имеющую заместитель, выбранный из группы, состоящей из низшей алкильной группы и атома галогена, и E представляет собой 5- или 6-членную ароматическую гетероциклическую группу, содержащую 1, 2, 3 или 4 гетероатома, выбранных из атомов кислорода, атомов серы или атомов азота, и необязательно имеющую заместитель, может быть синтезировано, например, с помощью способов, описанных ниже (способов получения A, B, C и D).
[0036]
<Способ получения A>
[0037]
51
D' в формуле представляет собой описанный выше заместитель, представленный как D, или заместитель, который может быть легко превращен в D путем проведения такой реакции, как удаление защиты, и E' в формуле представляет собой описанный выше заместитель, представленный как E, или заместитель, который может быть легко дериватизирован в E путем проведения такой реакции, как удаление защиты. Кроме того, R представляет собой обычный заместитель для эфира, такой как низшая алкильная группа.
Производное сульфонамида (S3) может быть синтезировано путем взаимодействия производного сульфонилхлорида (S1) (X в формуле представляет собой атом галогена, такой как хлор, бром и йод, или уходящую группу, такую как трифторметансульфонилоксильная группа) с производным амина (S2) в растворителе, не оказывающем негативного воздействия на протекание настоящей реакции, таком как метиленхлорид, в присутствии основания, такого как пиридин. Полученное производное сульфонамида (S3) может быть дериватизировано в соответствующее производное сульфонамида (S5) путем проведения реакции сочетания Сузуки с производным бороновой кислоты (S4). Затем, может быть получено целевое промежуточное соединение (S6), имеющее карбоксильную группу на конце, путем проведения щелочного гидролиза полученного производного сульфонамида (S5), используя основание, такое как гидроксид натрия, или проведения реакции удаления защиты, такой как кислотный гидролиз, например, используя хлористоводородную кислоту или трифторуксусную кислоту, в растворителе, не оказывающем негативного воздействия на протекание настоящей реакции, таком как тетрагидрофуран, метанол и этанол.
[0038]
Реакция сочетания Сузуки является хорошо известной, и ее проводят путем реакции производного бороновой кислоты или производного эфира бороновой кислоты с галогенпроизводным, трифторметансульфонатом или метансульфонатом, в растворителе, не оказывающем негативного воздействия на протекание настоящей реакции, таком как 1,4-диоксан, тетрагидрофуран, толуол, диметилсульфоксид и 1,2-диметоксиэтан, в присутствии или отсутствии сорастворителя, такого как вода, используя катализатор на основе переходного металла, такой как тетракис(трифенилфосфин)палладий(0), [1,1'-бис(дифенилфосфино)-ферроцен]дихлорпалладий(II), и трис(дибензилиденацетон)-дипалладий(0), или используя катализатор на основе переходного металла, такой как ацетат палладия(II), и лиганд, такой как трифенилфосфин, в присутствии основания, такого как карбонат калия, карбонат натрия, фосфат калия, метоксид натрия и гидроксид натрия.
[0039]
<Способ получения B>
[0040]
51
D' в формуле представляет собой описанный выше заместитель, представленный как D, или заместитель, который может быть легко превращен в D путем проведения такой реакции, как удаление защиты, и E' в формуле представляет собой описанный выше заместитель, представленный как E, или заместитель, который может быть легко дериватизирован в E путем проведения такой реакции, как удаление защиты. Кроме того, R представляет собой обычный заместитель эфира, такой как низшая алкильная группа.
Соответствующее производное бороновой кислоты (S7) может быть синтезировано путем проведения реакции сочетания производного сульфонамида (S3), которое является промежуточным соединением, описанным в разделе <Способ получения A>, с производным борана, такого как бис(пинаколато)диборан, в растворителе, не оказывающем негативного воздействия на протекание настоящей реакции, таком как N,N-диметилформамид, в присутствии основания, такого как ацетат калия, используя катализатор на основе металла, такой как [1,1'-бис-(дифенил-фосфино)ферроцен]дихлорпалладий(II), с получением соответствующего производного эфира бороновой кислоты, и затем обработки полученного производного эфира бороновой кислоты, например, путем добавления периодата натрия, ацетата аммония и воды, в растворителе, не оказывающем негативного воздействия на протекание настоящей реакции, таком как ацетон, с удалением эфира бороновой кислоты. Полученное производное бороновой кислоты (S7) может быть дериватизировано в соответствующее производное сульфонамида (S5) путем проведения реакции сочетания Сузуки (описанной выше) с галогенпроизводным (S8) (X в формуле представляет собой атом галогена, такой как хлор, бром и йод, или уходящую группу, такую как трифторметансульфонилоксильная группа). Целевое промежуточное соединение (S6), имеющее карбоксильную группу на конце, может быть получено путем проведения реакции удаления защиты с производного сульфонамида (S5) гидролизом или другими подобными способами, используя способ, описанный в разделе <Способ получения A>.
[0041]
<Способ получения C>
[0042]
51
D' в формуле представляет собой описанный выше заместитель, представленный как D, или заместитель, который может быть легко превращен в D путем проведения такой реакции, как удаление защиты, и E' в формуле представляет собой описанный выше заместитель, представленный как E, или заместитель, который может быть легко дериватизирован в E путем проведения такой реакции, как удаление защиты. Кроме того, R представляет собой обычный заместитель эфира, такой как низшая алкильная группа.
Производное сульфонамида (S3), которое представляет собой промежуточное соединение, описанное в разделе <Способ получения A> (X в формуле представляет собой атом галогена, такой как хлор, бром и йод, или уходящую группу, такую как трифторметансульфонил-оксильная группа), может быть дериватизировано в соответствующее производное сульфонамида (S5) путем проведения реакции сочетания с ароматическим гетероциклом (S9) в растворителе, не оказывающем негативного воздействия на протекание настоящей реакции, таком как N-метилпирролидон, в присутствии лиганда, который обычно используют в органических синтезах, такого как транс-N,N'-диметилциклогексан-1,2-диамин, и основания, такого как фосфат калия, используя катализатор на основе металла, такой как йодид меди(I). Затем, может быть получено целевое промежуточное соединение (S6), имеющее карбоксильную группу на конце, путем проведения реакции удаления защиты с полученного производного сульфонамида (S5) гидролизом или другими подобными способами, используя способ, описанный в разделе <Способ получения A>.
[0043]
<Способ получения D>
[0044]
51
D' в формуле представляет собой описанный выше заместитель, представленный как D, или заместитель, который может быть легко превращен в D путем проведения такой реакции, как удаление защиты, и E' в формуле представляет собой описанный выше заместитель, представленный как E, или заместитель, который может быть легко дериватизирован в E путем проведения такой реакции, как удаление защиты. Кроме того, R представляет собой обычный заместитель для эфира, такой как низшая алкильная группа.
Производное сульфонамида (S10) (X в формуле представляет собой атом галогена, такой как хлор, бром и йод, или уходящую группу, такую как трифторметансульфонилоксильная группа) может быть дериватизировано в соответствующее производное сульфонамида (S5) путем проведения реакции сочетания с галогенпроизводным (S11) в растворителе, не оказывающем негативного воздействия на протекание настоящей реакции, таком как 1,4-диоксан, в присутствии катализатора на основе металла, такого как трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0), лиганда, обычно используемого в органических синтезах, такого как XantPHOS, и основания, такого как карбонат цезия. Затем, может быть получено целевое промежуточное соединение (S6), имеющее карбоксильную группу на конце, путем проведения реакции удаления защиты с полученного производного сульфонамида (S5), такой как гидролиз, например, способом, описанным в разделе <Способ получения A>.
[0045]
Промежуточное соединение, имеющее карбоксильную группу на конце, в котором D представляет собой фенильную группу или пиридильную группу, необязательно имеющую заместитель, выбранный из группы, состоящей из низшей алкильной группы и атома галогена, и E представляет собой аминокарбонильную группу, необязательно замещенную с помощью низшего алкила, гетероцикл или низший алкил, замещенный с помощью гетероцикла, в общей формуле (M-II) может быть синтезировано, используя способ, описанный ниже (способ получения E).
<Способ получения E>
[0046]
51
61
71
D' в формуле представляет собой описанный выше заместитель, представленный как D, или заместитель, который может быть легко превращен в D путем проведения такой реакции, как удаление защиты. Кроме того, R представляет собой обычный заместитель для эфира, такой как низшая алкильная группа. Кроме того, R и R представляют собой обычные заместители на амине, такие как низшая алкильная группа, гетероциклическая группа или низшая алкильная группа, замещенная с помощью гетероцикла.
Соответствующее производное карбоновой кислоты (S13) может быть синтезировано путем реакции производного сульфонилхлорида (S12), имеющего карбоновую кислоту или заместитель, который может быть легко превращен в карбоновую кислоту, с производным амина (S2) в растворителе, не оказывающем негативного воздействия на протекание настоящей реакции, таком как метиленхлорид, в присутствии основания, такого как пиридин. Соответствующее производное амида (S15) может быть синтезировано путем амидирования полученного производного карбоновой кислоты (S13) с помощью производного амина (S14).
Затем, может быть получено промежуточное соединение (S16), имеющее карбоксильную группу на конце, путем проведения реакции удаления защиты с полученного производного амина (S15), такой как гидролиз, используя способ, описанный в разделе <Способ получения A>.
[0047]
Реакция амидирования является хорошо известной, и ее примеры включают (1) способ с использованием конденсирующего реагента и (2) способ с использованием галогенангидрида.
(1) Способ с использованием конденсирующего реагента осуществляют путем проведения реакции карбоновой кислоты с амином или его солью в растворителе, не оказывающем негативного воздействия на протекание настоящей реакции, таком как дихлорметан, тетрагидрофуран, 1,4-диоксан, N,N-диметилформамид или ацетонитрил, в присутствии или отсутствии основания, такого как пиридин, триэтиламин или N-этилдиизопропиламин, в присутствии или отсутствии реагента, способствующего конденсации, такого как 1-гидроксибензотриазол (HOBt), 1-гидрокси-7-азабензотриазол (HOAt) или N-гидроксисукцинимид (HOSu), используя конденсирующий реагент, такой как 1-этил-3-(3'-диметиламинопропил)карбодиимид (WSC), 1,3-дициклогексил-карбодиимид (DCC) или O-(бензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетра-метилурония гексафторфосфат (HATU).
[0048]
(2) Способ с использованием галогенангидрида осуществляют путем проведения реакции карбоновой кислоты с тионилхлоридом, оксалилхлоридом, тионилбромидом или другими подобными реагентами, в растворителе, не оказывающем негативного воздействия на протекание настоящей реакции, таком как дихлорметан, или в отсутствии растворителя, в присутствии или отсутствии катализатора, такого как N,N-диметилформамид, с получением галогенангидрида, и проведения реакции галогенангидрида с амином или его солью в растворителе, не оказывающем негативного воздействия на протекание настоящей реакции, таком как дихлорметан или тетрагидрофуран, в присутствии основания, такого как пиридин, триэтиламин или N-этилдиизопропиламин.
На каждой стадии, синтез может быть проведен, используя обычно применяемые условия реакции, которые должны быть соответствующим образом выбраны в зависимости от типа или других подобных характеристик исходных веществ. Соединение настоящего изобретения, полученное описанными выше способами, может быть очищено с помощью методик, которые обычно используются в органических синтезах, таких как экстракция, дистилляция, кристаллизация и колоночная хроматография.
[0049]
Промежуточное соединение, представленное общей формулой (M-I) и имеющее аминогруппу на конце, которое является соединением настоящего изобретения, может быть синтезировано, например, используя способ, раскрытый в патентной публикации 1, или способы получения (способы получения F и G), описанные ниже. В следующем далее описании, символы в формулах являются такими же, как и в формуле (I), если не указано иное.
[0050]
<Способ получения F>
[0051]
81
В формуле, R представляет собой обычный заместитель амина, который может быть удален путем проведения реакции, такой как реакция удаления защиты, такой как трет-бутоксикарбонильная группа и бензилоксикарбонильная группа, и Y в формуле представляет собой атом галогена, такой как хлор, бром и йод, или уходящую группу, такую как трифторметансульфонилоксильная группа. Y' в формуле представляет собой заместитель, который может быть легко дериватизирован в Y путем проведения такой реакции, как трифторметансульфонилирование.
Соответствующее производное аминокислоты (S18) может быть синтезировано путем проведения реакции производного аминокислоты (S17), например, с N-фенил бис(трифторметансульфонамидом), в растворителе, не оказывающем негативного воздействия на протекание настоящей реакции, таком как тетрагидрофуран, в присутствии основания, такого как диизопропилэтиламин. Соответствующее производное бороновой кислоты (S19) может быть синтезировано путем проведения реакции сочетания полученного производного аминокислоты (S18) с производным бороновой кислоты, такой как бис(2,2,3,3-тетраметил-2,3-бутандионат)дибор, в растворителе, не оказывающем негативного воздействия на протекание настоящей реакции, таком как 1,4-диоксан, в присутствии основания, такого как ацетат калия, используя катализатор на основе металла, такой как [1,1'-бис(дифенил-фосфино)ферроцен]дихлорпалладий(II), с получением соответствующего производного эфира бороновой кислоты, и затем проведения обработки полученного производного эфира бороновой кислоты, например, путем добавления периодата натрия, ацетата аммония и воды, в растворителе, не оказывающем негативного воздействия на протекание настоящей реакции, таком как ацетон, с целью гидролиза эфира бороновой кислоты. Производное аминокислоты (S21) может быть получено путем проведения реакции сочетания полученного производного бороновой кислоты (S19) с соединением (S20) в растворителе, не оказывающем негативного воздействия на протекание настоящей реакции, таком как метиленхлорид, в присутствии основания, такого как триэтиламин, используя катализатор на основе металла, такой как ацетат меди(II), или путем проведения реакции его сочетания в растворителе, не оказывающем негативного воздействия на протекание настоящей реакции, таком как 1,4-диоксан, в присутствии основания, такого как карбонат натрия, используя катализатор на основе металла, такой как [1,1'-бис(дифенилpфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(II). Целевое промежуточное соединение (S22), имеющее аминогруппу на конце, может быть получено путем проведения кислотного гидролиза полученного производного аминокислоты (S21), например, используя хлористоводородную кислоту или трифторуксусную кислоту, или путем удаления защиты с помощью реакции гидрирования или другой подобной реакции в присутствии водорода, используя катализатор, такой как палладий на угле.
[0052]
<Способ получения G>
81
В формуле, R представляет собой обычный заместитель амина, который может быть удален путем проведения реакции, такой как реакция удаления защиты, такой как трет-бутоксикарбонильная группа и бензилоксикарбонильная группа, и X' и X'' в формуле каждый независимо представляет собой атом галогена, такой как хлор, бром и йод, или уходящую группу, такую как трифторметансульфонилоксильная группа.
Соответствующее галогенпроизводное (S24) может быть синтезировано из производного амина (S23) с помощью способа, раскрытого, например, в патентной публикации 1, или из его субстрата, раскрытого в патентной публикации 1, путем проведения реакции образования уреидо с трифосгеном или другим подобным реагентом в растворителе, не оказывающем негативного воздействия на протекание настоящей реакции, таком как метиленхлорид, затем проведения реакции циклизации с карбонатом калия и метиловым эфиром п-толуолсульфоновой кислоты, метилйодидом или другими подобными реагентами в растворителе, не оказывающем негативного воздействия на протекание настоящей реакции, таком как N,N-диметилформамид, и затем путем проведения N-метилирования. Производное аминокислоты (S25) может быть дериватизировано в соответствующее производное аминокислоты (S21) путем проведения реакции сочетания с галогенпроизводным (S24) в растворителе, не оказывающем негативного воздействия на протекание настоящей реакции, таком как N,N-диметилформамид, в присутствии металла, такого как цинк, используя катализатор на основе металла, такой как бис(трифенилфосфин)палладия(II) дихлорид. Целевое промежуточное соединение (S22), имеющее аминогруппу на конце, может быть получено путем проведения реакции кислотного гидролиза полученного производного аминокислоты (S21), например, используя хлористоводородную кислоту или трифторуксусную кислоту, или путем удаления защиты с помощью реакции гидрирования или другой подобной реакции в присутствии водорода, используя катализатор, такой как палладий на угле.
Соединение, в котором A имеет группу, представленную общей формулой (2-4), также может быть получено описанным выше способом или способом, раскрытым в патентной публикации 4.
[0053]
Соединение, представленное общей формулой (1), или его соль вводят в чистом виде или в виде различных фармацевтических композиций. Примеры лекарственных форм фармацевтических композиций включают таблетки, порошки, пилюли, гранулы, капсулы, суппозитории, растворы, драже, депо-препараты или сиропы, и фармацевтические композиции могут быть приготовлены традиционными способами, используя обычные вспомогательные вещества.
Например, таблетка может быть получена путем смешения производного фенилаланина, которое является активным ингредиентом настоящего изобретения, с известными вспомогательными веществами, например, инертными разбавителями, такими как лактоза, карбонат кальция или фосфат кальция, связующими, такими как гуммиарабик, кукурузный крахмал или желатин, разрыхлители, такие как альгиновая кислота, кукурузный крахмал или прежелатинизированный крахмал, подсластители, такие как сахароза, лактоза или сахарин, вкусовые добавки, такие как мята перечная, масло гаультерии (Akamono) или аромат вишни, увлажняющие средства, такие как стеарат магния, тальк или карбоксиметилцеллюлоза, вспомогательные вещества для мягких желатиновых капсул и суппозиториев, такие как жиры, воски, полутвердые и жидкие полиолы, природные масла или гидрогенизированные масла, или вспомогательные вещества для растворов, такие как вода, спирт, глицерин, полиол, сахароза, инвертный сахар, глюкоза или растительные масла.
Ингибитор, содержащий соединение, представленное общей формулой (1), или его соль, в качестве активного ингредиента, может быть использован в качестве терапевтического средства или профилактического средства для любого из воспалительных заболеваний, при котором в патологические процессы вовлечена α4-интегрин-зависимая адгезия, при ревматоидном артрите, воспалительном заболевании кишечника, системной эритематозной волчанке, множественном склерозе, синдроме Шегрена, астме, псориазе, аллергии, диабете, заболевании сердечно-сосудистой системы, артериосклерозе, рестенозе, росте опухоли, метастазировании опухоли и отторжении трансплантата.
Дозу, используемую для решения описанной выше задачи, определяют в зависимости от требуемого терапевтического эффекта, способа введения, периода лечения, возраста, массы тела или других подобных факторов, и суточная доза для взрослого человека при пероральном или парентеральном введении может составлять обычно от 1 мкг до 5 г в случае перорального введения, и от 0,01 мкг до 1 г в случае парентерального введения.
ПРИМЕРЫ
[0054]
Далее настоящее изобретение будет описано более подробно с помощью следующих примеров. Примерами являются предпочтительные варианты осуществления настоящего изобретения, но эти примеры не являются ограничениями для настоящего изобретения.
Пример 1: Синтез M-1
(Стадия 1) Метил 3-[(5-бром-2-пиридил)карбамоиламино]-пиридин-4-карбоксилат
Метил 3-аминопиридин-4-карбоксилат (31,8 г, 209 ммоль) растворяли в метиленхлориде (1,1 л), добавляли раствор (50 мл) трифосгена (20,7 г, 69,8 ммоль) в метиленхлориде, и полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 3 часов. К реакционной смеси добавляли раствор (50 мл) 5-бромпиридин-2-амина (30,0 г, 174 ммоль) в метиленхлориде, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Осажденное твердое вещество фильтровали, промывали метиленхлоридом, и затем сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (30 г, 49%).
1
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 11,02 (с, 1H), 10,36 (с, 1H), 9,44 (с, 1H), 8,39 (с, 2H), 7,98 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,74-7,73 (м, 1H), 7,48 (д, J=8,0 Гц, 1H), 3,92 (с, 3H).
[0055]
(Стадия 2) 3-(5-Бром-2-пиридил)-1-метил-пиридо[3,4-d]-пиримидин-2,4-дион
Метил 3-[(5-бром-2-пиридил)карбамоиламино]пиридин-4-карбоксилат <смотрите (стадию 1)> (30 г, 85,7 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (600 мл), добавляли водный раствор (80 мл) карбоната калия (23,7 г, 171 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. К полученному раствору добавляли дополнительное количество карбоната калия (23,7 г, 171 ммоль) и метиловый эфир п-толуол-сульфоновой кислоты (31,9 г, 171 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 90 минут. Реакционную жидкость охлаждали до 0°C, и затем разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (100 мл × 4). Экстракты объединяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, и затем растворитель удаляли при пониженном давлении. Полученный остаток перемешивали в петролейном эфире в течение 20 минут, и полученное твердое вещество фильтровали и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (9,8 г, 34%).
1
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 9,00 (с, 1H), 8,77 (м, 1H), 8,58 (д, J=4,8 Гц, 1H), 8,32-8,29 (м, 1H), 7,91 (д, J=4,8 Гц, 1H), 7,52 (д, J=8,4 Гц, 1H), 3,61 (с, 3H).
[0056]
(Стадия 3) Циклогексил (2S)-3-бензилокси-2-(трет-бутокси-карбониламино)пропаноат
(2S)-3-Бензилокси-2-(трет-бутоксикарбониламино)пропионовую кислоту (300 г, 1,02 моль) растворяли в N,N-диметилформамиде (2,0 л), EDCL (189 г, 1.22 ммоль), добавляли циклогексанол (210 г, 2,10 моль) и N,N-диметил-4-аминопиридин (12,4 г, 102 ммоль), и полученную смесь перемешивали в присутствии газообразного азота при комнатной температуре в течение 90 минут. Реакционный раствор разбавляли водой (5,0 л) и затем экстрагировали этилацетатом (1,0 л × 2). Экстракты объединяли и промывали водой (1,0 л), 1 N хлористоводородной кислотой (900 мл), насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия (1,0 л) и насыщенным раствором хлорида натрия (900 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, и затем растворитель удаляли при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (360 г, 94%).
1
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 7,35-7,25 (м, 5H), 7,06 (д, J=8,4 Гц, 1H), 4,73-4,69 (м, 1H), 4,51-4,39 (м, 2H), 4,26-4,21 (м, 1H), 3,73-3,64 (м, 2H), 1,47-1,10 (м, 19H).
[0057]
(Стадия 4) Циклогексил (2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-гидроксипропаноат
Циклогексил (2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-гидрокси-пропаноат (360 г, 954 ммоль) <смотрите (стадию 3)> растворяли в этаноле (1,6 л), добавляли гидроксид палладия 20% на угле (40 г), и полученную смесь перемешивали в присутствии газообразного водорода (0,35 МПа) при 70°C в течение 3 дней. Реакционный раствор фильтровали, и полученный фильтрат концентрировали и затем сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (250 г, 91%).
1
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 6,80 (д, J=8,0 Гц, 1H), 4,82 (с, 1H), 4,72-4,67 (м, 1H), 4,37 (с, 1H), 4,01-3,99 (м, 1H), 3,46-3,38 (м, 1H), 1,48-1,35 (м, 19H).
[0058]
(Стадия 5) Циклогексил (2R)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-йодпропаноат
Трифенилфосфин (275 г, 1,05 моль) и имидазол (75,0 г, 1,05 моль) растворяли в метиленхлориде (3,0 л), полученный раствор охлаждали до 0°C, затем добавляли йод (270 г, 1,05 моль), и полученную смесь перемешивали в присутствии газообразного азота при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционный раствор охлаждали до 0°C, затем медленно добавляли по каплям раствор (500 мл) циклогексил (2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-гидроксипропаноата <смотрите (стадию 4)> (250 г, 871 ммоль) в метиленхлориде в течение 1 часа, и реакционную жидкость перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную жидкость фильтровали, полученный остаток промывали смесью гексан/диэтиловый эфир (1:1), и полученный фильтрат очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=1:1-1:2) с получением указанного в заголовке соединения (200 г, 58%).
1
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 7,24 (д, J=8,0 Гц, 1H), 4,75-4,69 (м, 1H), 4,21-4,16 (м, 1H), 3,51-3,47 (м, 1H), 3,36-3,33 (м, 1H), 1,75-1,10 (м, 19H).
[0059]
(Стадия 6) Циклогексил (2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]-пропаноат
3
2
2
Цинк (9,50 г, 146 ммоль) нагревали при 210°C в течение 10 минут, охлаждали до 70°C, затем опять нагревали до 210°C, и перемешивали в течение 10 минут. Полученное вещество охлаждали до комнатной температуры, затем добавляли N,N-диметилформамид (20 мл) и раствор (5,0 мл) дибромметана (2,10 г, 11,2 ммоль) в N,N-диметилформамиде, и полученную смесь перемешивали при 90°C в течение 30 минут. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем добавляли триметилсилилхлорид (243 мг, 2,25 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. К реакционной жидкости добавляли раствор (15 мл) циклогексил (2R)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-йодпропаноата <смотрите (стадию 5)> (8,90 г, 22,5 ммоль) в N,N-диметилформамиде, и полученную смесь перемешивали при 35°C в течение 90 минут. Это цинкпроизводное добавляли к суспензии 3-(5-бром-2-пиридил)-1-метилпиридо[3,4-d]пиримидин-2,4-диона <смотрите (стадию 2)> (2,50 г, 7,49 ммоль) и Pd(PPh)Cl (788 мг, 1,12 ммоль) в N,N-диметилформамиде (20 мл), и полученную смесь перемешивали в присутствии газообразного азота при 80°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем реакционный раствор фильтровали, полученный фильтрат разбавляли водой (150 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл × 3). Экстракты объединяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, и затем растворитель удаляли при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=1:1-1:2) с получением указанного в заголовке соединения (1,88 г, 48%).
1
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 8,99 (с, 1H), 8,56 (д, J=4,8 Гц, 1H), 8,46-8,45 (м, 1H), 7,92-7,89 (м, 2H), 7,43-7,40 (м, 2H), 4,69-4,67 (м, 1H), 4,26-4,21 (м, 1H), 3,60 (с, 3H), 3,13-2,96 (м, 2H), 1,76-1,20 (м, 19H).
[0060]
(Стадия 7) Циклогексил 3-[6-(1-метил-2,4-диоксо-1,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-3(2H)-ил)пиридин-3-ил]-L-аланинат (M-1)
Циклогексил (2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]-пропаноат <смотрите (стадию 6)> (7,50 г, 14,3 ммоль) растворяли в этилацетате (20 мл), добавляли смесь 4 N хлористоводородноййй кислоты/этилацетата (25 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Растворитель удаляли при пониженном давлении, затем добавляли этилацетат (30 мл), и полученную смесь перемешивали в течение 5 минут. Полученное белое твердое вещество фильтровали и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (5,77 г, 87%) в форме гидрохлорида.
1
+
3
H ЯМР (400 МГц, CDOD): δ 9,29 (с, 1H), 8,75 (д, J=6,0 Гц, 1H), 8,61 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,58 (д, J=5,6 Гц, 1H), 8,11 (дд, J=8,0, 2,4 Гц, 1H), 7,61 (д, J=8,0 Гц, 1H), 4,87-4,83 (м, 1H), 4,47 (т, J=7,6 Гц, 1H), 3,73 (с, 3H), 3,40-3,38 (м, 2H), 1,87-1,29 (м, 10H); MS (ESI) m/z 424 (M+H)
[0061]
Пример 2: Синтез M-2
(Стадия 1) 5-Йод-6-метил-1H-пиримидин-2,4-дион
Диацетат йодбензола (38,0 г, 119 ммоль) растворяли в дихлорметане (100 мл), добавляли йод (5,00 г, 19,8 ммоль), и полученную смесь перемешивали в течение 30 минут. К реакционной смеси добавляли 6-метил-1H-пиримидин-2,4-дион (5,01 г, 39,7 ммоль), и полученную смесь перемешивали. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении и затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=1:1-1:3) с получением указанного в заголовке соединения (3,50 г, 35%).
1
6
H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц): δ 11,3 (с, 2H), 2,27 (с, 3H).
[0062]
(Стадия 2) 5-Йод-1,3,6-триметил-1H-пиримидин-2,4-дион
5-Йод-6-метил-1H-пиримидин-2,4-дион (3,50 г, 13,9 ммоль) <смотрите (стадию 1)> и карбонат калия (5,70 г, 41,7 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (50 мл), добавляли йодметан (5,02 г, 34,7 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Реакционную жидкость разбавляли водой и затем экстрагировали этилацетатом (50 мл × 3). Органические слои объединяли, затем промывали насыщенным солевым раствором и сушили над сульфатом магния. Растворитель удаляли при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (3,15 г, 81%).
1
6
H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц): δ 3,41 (с, 3H), 3,22 (с, 3H), 2,61 (с, 3H)
[0063]
(Стадия 3) Метил N-(трет-бутоксикарбонил)-O-[(трифторметил)-сульфонил]-L-тирозинат
Метил N-(трет-бутоксикарбонил)-L-тирозинат (60,0 г, 203 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране, добавляли N-фенилбис-(трифторметансульфонамид) (79,8 г, 224 ммоль) и диизоапропилэтиламин (90,0 г, 714 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении, затем полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=3:1) с получением указанного в заголовке соединения (74,0 г, 85%).
1
+
3
H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ 7,25-7,19 (м, 4H), 5,08-5,06(м, 1H), 4,61-4,59 (м, 1H), 3,71 (3H, с), 3,19-3,15 (м, 1H), 3,06-3,01(м, 1H), 1,41 (с, 9H); MS (ESI) m/z 328 (M+H)
[0064]
(Стадия 4) Метил N-(трет-бутоксикарбонил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-L-фенилаланинат
Метил N-(трет-бутоксикарбонил)-O-[(трифторметил)сульфонил]-L-тирозинат <смотрите (стадию 3)> (74,0 г, 173 ммоль) и бис(пинаколато)диборан (66,0 г, 260 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (1,0 л). К раствору добавляли [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(II) (13,6 г, 18,6 ммоль) и ацетат калия (60,0 г, 612 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 95°C в течение 12 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем реакционный раствор фильтровали через целит, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=4:1) с получением указанного в заголовке соединения (45,0 г, 65%).
1
+
3
H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ 7,73 (д, J=8 Гц, 2H), 7,12 (д, J=8 Гц, 2H), 4,59-4,57 (м, 1H), 3,70 (3H, s), 3,11-3,06 (м, 2H), 1,41 (с, 9H), 1,13 (с, 12H); MS (ESI) m/z 306 (M+H)
[0065]
(Стадия 5) [4-[(2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-метокси-3-оксопропил]фенил]бороновая кислота
Метил N-(трет-бутоксикарбонил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-L-фенилаланинат <смотрите (стадию 4)> (67,0 г, 165 ммоль) растворяли в ацетоне (700 мл), добавляли периодат натрия (71,0 г, 330 ммоль), ацетат аммония (25,0 г, 330 ммоль) и воду (300 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 55 часов. Реакционный раствор фильтровали через целит, затем фильтрат концентрировали при пониженном давлении, добавляли этилацетат, промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия и сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и осажденное твердое вещество промывали смешанным растворителем петролейный эфир:этилацетат (1:10) и затем сушили с получением указанного в заголовке соединения (29,0 г, 55%).
1
+
3
H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ: 7,71-7,56 (м, 2H), 7,25-7,16 (м, 2H), 4,39-4,37 (м, 1H), 3,71 (с, 3H), 3,14-3,10 (м, 1H), 2,96-2,90 (м, 1H), 1,40 (с, 9H); MS (ESI) m/z 224 (M+H)
[0066]
(Стадия 6) Метил (2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-[4-(1,3,4-триметил-2,6-диоксопиримидин-5-ил)фенил]пропаноат
2
5-Йод-1,3,6-триметил-1H-пиримидин-2,4-дион <смотрите (стадию 2)> (0,52 г, 1,8 ммоль), [4-[(2S)-2-(трет-бутокси-карбониламино)-3-метокси-3-оксопропил]фенил]бороновую кислоту <смотрите (стадию 5)> (0,50 г, 1,5 ммоль), карбонат натрия (0,49 г, 4,65 ммоль) и Pd(dppf)Cl (57 мг, 0,078 ммоль) растворяли в диоксане (100 мл) и воде (3,0 мл), и полученную смесь перемешивали в присутствии газообразного азота при 100°C в течение 3 часов. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении, и затем полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=3:1-1:1) с получением указанного в заголовке соединения (0,35 г, 51%).
1
+
3
H ЯМР (CDCl, 300 МГц): δ 7,20-7,13 (м, 4H), 5,04-5,02 (м, 1H), 4,63-4,60 (м, 1H), 3,74 (с, 3H), 3,51 (с, 3H), 3,41 (с, 3H), 3,14-3,07 (м, 2H), 2,05 (с, 3H), 1,35 (с, 9H); MS (ESI) m/z 432 (M+H)
[0067]
(Стадия 7) Метил (2S)-2-амино-3-[4-(1,3,4-триметил-2,6-диоксопиримидин-5-ил)фенил]пропаноат (M-2)
Метил (2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-[4-(1,3,4-триметил-2,6-диоксопиримидин-5-ил)фенил]пропаноат <смотрите стадию 6> (1,30 г, 2,80 ммоль) растворяли в дихлорметане (10 мл), реакционный раствор охлаждали до 0°C, затем добавляли 3 N хлористоводородную кислоту/дихлорметан (10,0 мл, 30,0 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении, затем добавляли дихлорметан (10,0 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Осажденное твердое вещество фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (0,84 г, 82%) в виде белого твердого вещества.
1
+
3
H ЯМР (CDOD, 400 МГц): δ 7,35 (д, J=10,0 Гц, 2H), 7,24 (т, J=11,2 Гц, 2H), 4,39 (дд, J=11,2, 7,6 Гц, 1H), 3,88 (с, 3H), 3,53 (с, 3H), 3,36 (с, 3H), 3,34-3,15 (м, 2H), 2,21 (с, 3H); MS (ESI) m/z 332 (M+H)
[0068]
Пример 3: Синтез M-3
(Стадия 1) 5-(Метиламинометил)-2-нитробензойная кислота
5-Метил-2-нитробензойную кислоту (50,0 г, 276 ммоль) и 5-диметилгидантоин (36,6 г, 128 ммоль) суспендировали в хлорбензоле (100 мл), и суспензию нагревали при 40°C в присутствии газообразного аргона. Добавляли азобис(2-метилпропионитрил) (1,26 г, 7,69 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 80°C в течение 1 часа. Реакционную жидкость охлаждали до 40°C, затем опять добавляли 5-диметилгидантоин (18,3 г, 64,1 ммоль) и азобис(2-метилпропионитрил) (1,26 г, 7,69 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 80°C в течение 2 часов. Реакционную жидкость охлаждали до 10°C, и затем полученную смесь перемешивали в течение 12 часов. Выпавшие кристаллы твердого вещества отфильтровывали, полученный фильтрат добавляли по каплям к раствору 40% метиламин/метанол (260 мл, 2,56 моль), который предварительно охлаждали до 10°C в течение 80 минут, и полученную смесь перемешивали при 25°C. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, затем добавляли 2-пропанол (100 мл), полученную смесь перемешивали при 50°C в течение 1 часа и затем охлаждали до 9°C, и осажденное твердое вещество отфильтровывали, промывали 2-пропанолом (100 мл) и сушили с получением указанного в заголовке соединения (42,2 г, 52%) в виде белого твердого вещества.
1
+
2
H ЯМР (400 МГц, DO): δ 8,03 (д, J=8,44 Гц, 1H), 7,55 (дд, J=8,44 Гц, 1,92 Гц, 1H), 7,49 (т, 1H), 4,25 (с, 2H), 2,70 (с, 3H); MS (ESI) m/z 210,8 (M+H)
[0069]
(Стадия 2) 5-[[Формил(метил)амино]метил]-2-нитробензойная кислота
5-(Метиламинометил)-2-нитробензойную кислоту <смотрите (стадию 1)> (5,58 г) и формиат натрия (0,65 г, 9,52 ммоль) растворяли в муравьиной кислоте (4,00 мл) и уксусном ангидриде (2,70 мл, 14,3 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную жидкость разбавляли водой (32 мл), осаждали кристаллы, и получали суспензию. Суспензию перемешивали при 9°C в течение 12 часов, и осажденное твердое вещество отфильтровывали и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (3,95 г, 87%) в виде белого твердого вещества.
1
+
6
H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 8,32 (с, 1H), 8,19 (с, 1H), 8,01 (д, J=8,24 Гц, 1H), 7,98 (д, J=8,24 Гц, 1H), 7,73 (д, 1H, J=1,88 Гц), 7,66 (д, J=1,92 Гц, 1H), 7,65 (дд, J=8,24 Гц, 1,72 Гц, 1H), 7,58 (дд, J=8,24 Гц, 1,92 Гц, 1H), 4,62 (с, 2H), 4,57 (с, 2H), 2,89 (с, 3H), 2,65 (с, 3H); MS (ESI) m/z 239 (M+H)
[0070]
(Стадия 3) 2-Амино-5-[[формил(метил)амино]метил]бензойная кислота
5-[[Формил(метил)амино]метил]-2-нитробензойную кислоту <смотрите (стадию 2)> (6,96 г, 25,19 ммоль) суспендировали в метаноле (48,0 мл), и добавляли 6 N водный раствор гидроксида натрия (3,5 мл) и растворяли. Добавляли 5% Pd/C (1,03 г, 0,250 ммоль), и полученную смесь перемешивали в присутствии газообразного водорода при 40°C в течение 5 часов. Реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры и фильтровали, и растворитель удаляли при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли воду (48 мл) и 2 N водный раствор хлористоводородной кислоты (11,0 мл), осажденное твердое вещество отфильтровывали, промывали водой (24,0 мл) и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (4,84 г, 92,3%) в виде белого твердого вещества.
1
+
6
2
a
2
b
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 8,49 (уш.с, 2H), 8,25 (с, PhCCHNMeCHO), 8,08 (с, PhCCHNMeCHO), 7,60 и 7,59 (с, 1H), 7,12 (м, 1H), 6,74 (м, 1H), 4,27 (с, 2H), 2,77 и 2,58 (с, 3H); MS (ESI) m/z 231 (M+H)
[0071]
(Стадия 4) Метил (2S)-2-[трет-бутоксикарбониламино]-3-[4-[6-[[формил(метил)амино]метил]-1-метил-2,4-диоксохиназолин-3-ил]-фенил]пропаноат
Карбодиимидазол (16,4 г, 101 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (50 мл), добавляли метил (2S)-3-(4-аминофенил)-2-(трет-бутоксикарбониламино)пропаноат (25,0 г, 84,9 ммоль) и 2-амино-5-[[формил(метил)амино]метил]бензойную кислоту <смотрите (стадию 3)> (17,6 г, 84,5 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 65°C. Реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры, затем опять добавляли карбодиимидазол (16,4 г, 101 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 65°C. После завершения реакции, реакционную жидкость разбавляли водой (2,000 мл) и экстрагировали метиленхлоридом (500 мл, 100 мл). Экстракты объединяли, промывали насыщенным солевым раствором и сушили. Полученное вещество использовали на (стадии 5).
[0072]
(Стадия 5) Метил (2S)-2-амино-3-[4-[6-[[формил(метил)-амино]метил]-1-метил-2,4-диоксохиназолин-3-ил]фенил]пропаноат (M-3)
Соединение, полученное на (стадии 4), растворяли в N,N-диметилформамиде (150 мл), добавляли карбонат калия (21,7 г) и метил п-толуолсульфонат (17,8 мл), и полученную смесь перемешивали при 40°C в течение 4 часов. Добавляли уксусную кислоту (9,0 мл), затем реакционную жидкость разбавляли водой (1500 мл) и экстрагировали метиленхлоридом (1000 мл), и растворитель удаляли при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (метиленхлорид:метанол=9:1). Полученное соединение растворяли в изопропиловом спирте (150 мл), добавляли 4 N хлористоводородную кислоту/диоксан (150 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Осажденное твердое вещество фильтровали, промывали изопропиловым спиртом (100 мл) и сушили с получением гидрохлорида указанного в заголовке соединения (28,0 г).
1
+
6
2
a
2
b
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 8,70 (с, 3H), 8,35 (с, PhCCHNMeCHO), 8,16 (с, PhCCHNMeCHO), 7,93 (дд, J=15,8, 2,1 Гц, 1H), 7,77-7,66 (м, 1H), 7,53 (дд, J=11,7, 8,6 Гц, 1H), 7,38-7,33 (м, 2H), 7,30-7,25 (м, 2H), 4,55 и 4,53 (с, 2H), 4,36 (дд, J=7,3, 6,0 Гц, 1H), 3,70 (с, 3H), 3,54 и 3,53 (с, 3H), 3,33 (с, 3H), 3,25 (дд, J=14,1, 5,9 Гц, 1H), 3,16 (дд, J=14,1, 7,3 Гц, 1H); MS (ESI) m/z 425,48 (M+H)
[0073]
Пример 4: Синтез M-4
(Стадия 1) 2-Хлор-5-нитропиридин-4-карбоновая кислота
2-Хлор-4-метил-5-нитропиридин (20,5 г, 119 ммоль) растворяли в концентрированной серной кислоте (200 мл), полученный раствор охлаждали до 0°C, затем добавляли оксид хрома(VI) (40,0 г, 400 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 часа и затем при комнатной температуре в течение 12 часов. Реакционную жидкость разбавляли водой (2000 мл), и осажденное твердое вещество фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (18,0 г, 75%).
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDOD): δ 10,8 (уш.с, 1H), 9,13 (с, 1H), 7,70 (с, 1H).
[0074]
(Стадия 2) Метил 2-хлор-5-нитропиридин-4-карбоксилат
2-Хлор-5-нитропиридин-4-карбоновую кислоту <смотрите (стадию 1)> (20,2 г, 100 ммоль) растворяли в этилацетате (100 мл), полученный раствор охлаждали до 0°C, затем добавляли раствор диазометан/диэтиловый эфир, и полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 часа. Реакционную жидкость концентрировали, затем полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=6:1-2:1) с получением указанного в заголовке соединения (20,0 г, 92%).
[0075]
(Стадия 3) Метил 2-метокси-5-нитропиридин-4-карбоксилат
Метил 2-хлор-5-нитропиридин-4-карбоксилат <смотрите (стадию 2)> (10,8 г, 50,0 ммоль) растворяли в метаноле (100 мл), добавляли метоксид натрия (8,10 г, 150 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 65°C в течение 4 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, и затем полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=8:1-4:1) с получением указанного в заголовке соединения (8,0 г, 75%).
[0076]
(Стадия 4) Метил 5-амино-2-метоксипиридин-4-карбоксилат
Метил 2-метокси-5-нитропиридин-4-карбоксилат <смотрите (стадию 3)> (8,0 г, 37 ммоль) растворяли в метаноле (100 мл), добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония (50 мл) и железо (10,6 г, 175 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 65°C в течение 2 часов. Реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры, затем доводили величину pH до значения > 7,0 водным раствором гидрокарбоната натрия, и реакционный раствор фильтровали и экстрагировали этилацетатом (100 мл × 3). Экстракты объединяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, и затем растворитель удаляли при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=4:1-1:1) с получением указанного в заголовке соединения (5,80 г, 84%).
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 7,80 (с, 1H), 7,15 (с, 1H), 5,10 (с, 2H), 3,90 (с, 3H), 3,84 (с, 3H).
[0077]
(Стадия 5) 3-(6-Бром-3-пиридил)-6-метокси-1-метилпиридо-[3,4-d]пиримидин-2,4-дион
Проводили две стадии, аналогичные стадиям примера 1 (стадия 1), (стадия 2), для метил 5-амино-2-метоксипиридин-4-карбоксилата <смотрите (стадию 4)> (21,0 г, 115 ммоль) и 6-бром-пиридин-3-амина (19,9 г, 115 ммоль) с получением указанного в заголовке соединения (12,9 г, 31%).
1
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 8,58 (с, 1H), 8,40 (с, 1H), 7,87-7,78 (м, 2H), 7,30 (с, 1H), 3,93 (с, 3H), 3,57 (с, 3H).
[0078]
(Стадия 6) Метил (2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-[5-(6-метокси-1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]пропаноат
Использовали способ, аналогичный способу примера 1 (стадия 6), для 3-(6-бром-3-пиридил)-6-метокси-1-метилпиридо[3,4-d]-пиримидин-2,4-диона <смотрите (стадию 5)> (12,5 г, 34,6 ммоль) с получением указанного в заголовке соединения (10,0 г, 60%).
1
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 8,57 (с, 1H), 8,45 (с, 1H), 7,43 (д, J=17,2 Гц, 1H), 7,34 (д, J=8 Гц, 1H), 7,29 (с, 1H), 4,55-4,49 (м, 1H), 3,93 (с, 3H), 3,62 (с, 3H), 3,56 (с, 3H), 3,33-3,07 (м, 2H), 1,37 (с, 9H).
[0079]
(Стадия 7) Метил (2S)-2-амино-3-[5-(6-метокси-1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]пропаноат (M-4)
Использовали способ, аналогичный способу примера (стадия 7), для метил (2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-[5-(6-метокси-1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]-пропаноата <смотрите (стадию 6)> (10,0 г, 20.0 ммоль) с получением гидрохлорида указанного в заголовке соединения. К полученному гидрохлориду добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия (100 мл), затем полученную смесь экстрагировали этилацетатом (100 мл × 2), экстракты объединяли, полученную смесь промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, и затем растворитель удаляли при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (4,20 г, 53%).
1
+
3
H ЯМР (400 МГц, CDOD): δ 8,49 (с, 1H), 8,46 (д, J=2,0 Гц, 1H), 7,75 (дд, J=8,4, 2,4 Гц, 1H), 7,49 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,41 (с, 1H), 4,02-3,98 (м, 4H), 3,73 (с, 3H), 3,67 (с, 3H), 3,33-3,30 (м, 1H), 3,22-3,16 (м, 1H); MS (ESI) m/z 386 (M+H)
[0080]
Пример 5: Синтез M-5
(Стадия 1) Метил N-(трет-бутоксикарбонил)-4-(3-метил-2,6-диоксо-3,6-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-L-фенилаланинат
Пиримидин-2,4(1H,3H)дион (30,0 г, 268 ммоль), 1,1,1,3,3,3-гексаметилдисилазан (550 мл) и триметилхлорсилан (55 мл) перемешивали при 130°C в течение 5 часов. Реакционный раствор охлаждали до 60°C, затем добавляли метилйодид (200 мл), и полученную смесь перемешивали при 60°C в течение 30 часов. Реакционный раствор охлаждали до 0°C, медленно добавляли уксусную кислоту (500 мл), и растворитель удаляли при пониженном давлении. К остатку добавляли 2-пропанол (1600 мл), полученную смесь интенсивно перемешивали, и затем полученное твердое вещество фильтровали и промывали водой (500 мл) с получением белого твердого вещества (22 г, 67%). [4-[(2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-метокси-3-оксопропил]фенил]-бороновую кислоту <смотрите пример 2 (стадия 5)> (49,0 г, 152 ммоль) растворяли в метиленхлориде (500 мл), затем добавляли полученное белое твердое вещество (22,0 г, 175 ммоль), ацетат меди(II) (18,0 г, 98,9 ммоль) и триэтиламин (40 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 60 часов. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении, и затем полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=1:1) с получением указанного в заголовке соединения (6,0 г, 10%) в виде белых кристаллов.
1
+
3
H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ 7,20-7,15 (м, 3H), 7,08 (д, J=8,0 Гц, 2H), 5,76 (д, J=8,0 Гц, 1H), 4,55-4,51 (м, 1H), 3,60 (с, 3H), 3,35 (с, 3H), 3,06 (д, J=4,0 Гц, 1H), 1,36 (с, 9H); MS (ESI) m/z 421 (M+H)
[0081]
(Стадия 2) Метил 4-(3-метил-2,6-диоксо-3,6-дигидро-пиримидин-1(2H)-ил)-L-фенилаланинат (M-5)
Метил N-(трет-бутоксикарбонил)-4-(3-метил-2,6-диоксо-3,6-дигидропиримидин-1(2H)-ил)-L-фенилаланинат <смотрите (стадию 1)> (6,00 г, 15,0 ммоль) растворяли в растворе 3 N хлористоводородной кислоты/этилацетата (100 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Растворитель удаляли при пониженном давлении, затем добавляли этилацетат (50 мл), и полученную смесь дополнительно перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 часа. Суспензию фильтровали, и полученное твердое вещество сушили с получением указанного в заголовке соединения (4,0 г, 80%) в виде белого твердого вещества.
1
+
3
H ЯМР (CDOD, 500 МГц): δ 7,72 (д, J=8 Гц, 1H), 7,45 (д, J=8 Гц, 2H), 7,29 (д, J=8 Гц, 2H), 5,85 (д, J=8 Гц, 1H), 4,44-4,41 (м, 1H), 3,91 (с, 3H), 3,49-3,45 (м, 4H), 3,23-3,17 (м, 1H); MS (ESI) m/z 304 (M+H)
[0082]
Пример 6: Синтез M-6
(Стадия 1) Метил 4-аминопиримидин-5-карбоксилат
4-Аминопиримидин-5-карбоновую кислоту (10,0 г, 71,9 ммоль) растворяли в метаноле (100 мл), реакционный раствор охлаждали до 0°C, затем медленно добавляли по каплям концентрированную серную кислоту (25 мл), и полученную смесь перемешивали при 85°C в течение 12 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, затем полученный раствор разбавляли водой и добавляли гидрокарбонат натрия (10,0 г). Полученную смесь экстрагировали этилацетатом (80 мл × 4), экстракты объединяли, промывали насыщенным солевым раствором и сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении, полученный остаток перемешивали в смешанном растворителе (петролейный эфир:этилацетат=8:1), и осажденное твердое вещество фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (9,90 г, 90%).
1
+
6
H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 8,72 (с, 1H), 8,53 (с, 1H), 8,04 (с, 1H), 7,62 (с, 1H), 3,83 (с, 3H); MS (ESI) m/z 154 (M+H)
[0083]
(Стадия 2) 3-(6-Бром-3-пиридил)-1-метилпиримидо[4,5-d]-пиримидин-2,4-дион
Проводили две стадии, аналогичные стадиям примера 1 (стадия 1), (стадия 2), (метилйодид использовали вместо метилового эфира п-толуолсульфоновой кислоты) для метил 4-аминопиримидин-5-карбоксилата <смотрите (стадию 1)> (4,50 г, 29,4 ммоль) и 6-бромпиридин-3-амина (4,20 г, 24,7 ммоль) с получением указанного в заголовке соединения (3,10 г, 38%).
1
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 9,30 (с, 1H), 9,23 (с, 1H), 8,40 (с, 1H), 7,89 (д, J=11,2 Гц, 1H), 7,81-7,77 (м, 1H), 3,57 (с, 3H).
[0084]
(Стадия 3) Метил (2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиримидо[4,5-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]-пропаноат
Использовали способ, аналогичный способу примера 1 (стадия 6) для 3-(6-бром-3-пиридил)-1-метилпиримидо[4,5-d]пиримидин-2,4-диона <смотрите (стадию 2)> (1,50 г, 4,50 ммоль) с получением указанного в заголовке соединения (1,33 г, 65%).
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 9,29 (с, 1H), 9,20 (с, 1H), 8,44 (с, 1H), 7,73-7,70 (м, 1H), 7,44 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,38 (д, J=7,6 Гц, 1H), 4,55-4,50 (м, 1H), 3,62 (с, 3H), 3,56 (с, 3H), 3,22-3,06 (м, 2H), 1,36 (с, 9H); MS (ESI) m/z 457 (M+H)
[0085]
(Стадия 4) Метил (2S)-2-амино-3-[5-(1-метил-2,4-диоксо-пиримидо[4,5-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]пропаноат (M-6)
Использовали способ, аналогичный способу примера 1 (стадия 7) для метил (2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиримидо[4,5-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]пропаноата <смотрите (стадию 3)> (1,30 г, 2,85 ммоль) с получением гидрохлорида указанного в заголовке соединения (1,10 г, 98%).
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 9,36 (с, 1H), 9,33 (с, 1H), 8,70 (д, J=2,4 Гц, 1H), 8,09 (дд, J=8,4, 2,4 Гц, 1H), 7,78 (д, J=8,4 Гц, 1H), 4,70 (т, J=6,4 Гц, 1H), 3,86 (с, 3H), 3,76 (с, 3H), 3,68-3,65 (м, 2H); MS (ESI) m/z 357 (M+H)
[0086]
Пример 7: Синтез M-7
(Стадия 1) Метил (2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-[4-[2,4-диоксо-6-(трифторметил)-1H-пиримидин-3-ил]фенил]пропаноат
6-(Трифторметил)-1H-пиримидин-2,4-дион (1,00 г, 5,60 ммоль) и [4-[(2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-метокси-3-оксопропил]-фенил]бороновую кислоту <смотрите пример 2 (стадия 5)> (2,00 г, 6,20 ммоль) растворяли в метиленхлориде (10 мл), добавляли ацетат меди(II) (3,01 г, 15,1 ммоль) и триэтиламин (2,40 г, 2,40 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Реакционную жидкость фильтровали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=5:1-1:1) с получением указанного в заголовке соединения (750 мг, 29%) в виде желтых кристаллов.
1
3
H ЯМР (CDOD, 400 МГц): δ 7,26 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,22 (д, J=8, 0 Гц, 2H), 6,27 (с, 1H), 4,45-4,41 (м, 1H), 3,73 (с, 3H), 3,21-3,16 (м, 1H), 3,07-3,02 (м, 1H), 1,43 (с, 9H)
[0087]
(Стадия 2) Метил (2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-[4-[3-метил-2,6-диоксо-4-(трифторметил)пиримидин-1-ил]фенил]пропаноат
Метил (2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-[4-[2,4-диоксо-6-(трифторметил)-1H-пиримидин-3-ил]фенил]пропаноат <смотрите (стадию 1)> (700 мг, 1,53 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (15 мл), добавляли карбонат калия (400 мг, 2,90 ммоль) и метилйодид (6,60 г, 46,0 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 90 минут. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, разбавляли водой (20 мл) и затем экстрагировали этилацетатом. Экстракты объединяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, и растворитель удаляли при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (700 мг, 97%) в виде твердого желтого вещества.
1
3
H ЯМР (CDOD, 400 МГц): δ 7,37 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,21 (д, J=8, 0 Гц, 2H), 6,42 (с, 1H), 4,45-4,42 (м, 1H), 3,73 (с, 3H), 3,34 (с, 3H), 3,21-3,16 (м, 1H), 3,07-3,02 (м, 1H), 1,43 (с, 9H)
[0088]
(Стадия 3) Метил (2S)-2-амино-3-[4-[3-метил-2,6-диоксо-4-(трифторметил)пиримидин-1-ил]фенил]пропаноат (M-7)
Метил (2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-[4-[3-метил-2,6-диоксо-4-(трифторметил)пиримидин-1-ил]фенил]пропаноат <смотрите (стадию 2)> (604 мг, 1,28 ммоль) растворяли в смеси 6 N хлористоводородная кислота/этилацетат (10,0 мл), и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, к полученному остатку добавляли этилацетат (30,0 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Осажденное твердое вещество фильтровали и сушили с получением гидрохлорида указанного в заголовке соединения (470 мг, 90%) в виде белого твердого вещества.
1
+
3
H ЯМР (CDOD, 400 МГц): δ 7,34 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,20 (д, J=8,4 Гц, 2H), 6,34 (с, 1H), 4,33-4,29 (м, 1H), 3,78 (с, 3H), 3,43 (с, 3H), 3,36-3,31 (м, 1H), 3,13-3,07 (м, 1H); MS (ESI) m/z 372 (M+H)
[0089]
Пример 8: Синтез M-8
(Стадия 1) Метил N-(трет-бутоксикарбонил)-4-(2,4-диоксо-1,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-3(2H)-ил)-L-фенилаланинат
Метил 3-аминоизоникотинат (10,0 г, 65,0 ммоль) растворяли в метиленхлориде (100 мл), добавляли диизопропилэтиламин (17,0 г, 130 ммоль) и трифосген (6,40 г, 22,0 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 3 часов. Добавляли к раствору метил 4-амино-N-(трет-бутоксикарбонил)-L-фенилаланинат (19,0 г, 65,0 ммоль), и затем полученную смесь перемешивали в течение 12 часов при медленном повышении температуры от 0°C до комнатной температуры. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении, затем добавляли этилацетат, и полученный раствор промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия и сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и полученный продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир/этилацетат=1:1). Полученное соединение растворяли в N,N-диметилформамиде (200 мл), добавляли водный раствор карбоната калия (1,20 г, 8,70 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении, затем добавляли этилацетат, и полученный раствор промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия и сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и затем полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=1:1) с получением указанного в заголовке соединения (12,0 г, 43% за две стадии).
1
3
3
H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ 10,07 (1H, s), 8,54 (д, J=5,2 Гц, 1H), 8,14 (с, 1H), 7,92 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,35 (д, J=7,6 Гц, 2H), 7,23 (д, J=8,0 Гц, 2H), 6,12-6,10 (м, 1H), 4,73-4,69 (м, 1H), 3,71 (с, 3H), 3,22-3,21 (м, 2H), 1,44 (с, 9H)
[0090]
(Стадия 2) Метил N-(трет-бутоксикарбонил)-4-(1-метил-2,4-диоксо-1,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-3(2H)-ил)-L-фенил-аланинат
Метил N-(трет-бутоксикарбонил)-4-(2,4-диоксо-1,4-дигидро-пиридо[3,4-d]пиримидин-3(2H)-ил)-L-фенилаланинат <смотрите (стадию 1)> (8,00 г, 18,5 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (100 мл), добавляли карбонат калия (5,10 г, 37,0 ммоль) и метилйодид (1,9 мл, 37 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Суспензию фильтровали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении и затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=1:1) с получением указанного в заголовке соединения (3,5 г, 43%).
1
+
3
3
H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ 8,81 (1H, s), 8,60 (д, J=4,8 Гц, 1H), 8,03 (д, J=5,6 Гц, 1H), 7,30 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,19 (д, J=8,4 Гц, 2H), 5,05-5,03 (м, 1H), 4,65-4,63 (м, 1H), 3,73 (с, 3H), 3,71 (с, 3H), 3,18-3,16 (м, 2H), 1,44 (с, 9H); MS (ESI) m/z 355 (M+H-Boc)
[0091]
(Стадия 3) Метил 4-(1-метил-2,4-диоксо-1,4-дигидропиридо-[3,4-d]пиримидин-3(2H)-ил)-L-фенилаланинат (M-8)
Метил N-(трет-бутоксикарбонил)-4-(1-метил-2,4-диоксо-1,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-3(2H)-ил)-L-фенилаланинат (3,5 г, 7,7 ммоль) растворяли в растворе 4 N хлористоводородной кислоты/этилацетате (40 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную жидкость фильтровали, затем полученное твердое вещество сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (3,0 г, 94%).
1
+
3
H ЯМР (CDOD, 400 МГц): δ 9,28 (с, 1H), 8,76 (д, J=0,8 Гц, 1H), 8,56 (д, J=1,6 Гц, 1H), 7,51 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,41 (д, J=8,4 Гц, 2H), 4,48-4,44 (м, 1H), 3,90 (с, 3H), 3,76 (с, 3H), 3,49-3,44 (m 1H), 3,30-3,24 (м, 1H); MS (ESI) m/z 355 (M+H)
[0092]
Пример 9: Синтез M-9
(Стадия 1) 6-Бромпиридин-3-амин
2-Бром-5-нитропиридин (202 г, 1,0 моль) растворяли в метаноле (2,0 л), добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония (2,0 л), полученную смесь перемешивали при 50°C, затем медленно добавляли железо (224 г, 4,0 моль), и полученную смесь перемешивали при 50°C в течение 6 часов. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и затем фильтровали и промывали этилацетатом. Фильтрат разбавляли водой и затем экстрагировали этилацетатом (1,0 л × 6). Экстракты объединяли, промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия (2,0 л) и насыщенным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, и затем растворитель удаляли при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=1:1) с получением указанного в заголовке соединения (126 г, 73%).
1
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 7,69 (д, J=2,8 Гц, 1H), 7,19 (д, J=8,4 Гц, 1H), 6,90 (дд, J=8,4 Гц, 2,8 Гц, 1H), 5,50 (с, 2H)
[0093]
(Стадия 2) 3-(6-Бром-3-пиридил)-1-метилпиридо[3,4-d]-пиримидин-2,4-дион
Использовали способ, аналогичный способу примера 1 (стадия 1), (стадия 2), для 6-бромпиридин-3-амин <смотрите (стадию 1)> (67,7 г, 394 ммоль) с получением указанного в заголовке соединения (32,5 г, 24,8% за две стадии).
1
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 9,00 (с, 1H), 8,59 (д, J=8,8 Гц, 1H), 8,41 (д, J=4,8 Гц, 1H), 7,92 (д, J=4,8 Гц, 1H), 7,86 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,80 (дд, J =8,4 Гц, 2,0 Гц, 1H), 3,62 (с, 3H)
[0094]
(Стадия 3) Циклогексил (2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]-пропаноат
Использовали способ, аналогичный способу примера 1 (стадия 6), для 3-(6-бром-3-пиридил)-1-метилпиридо[3,4-d]пиримидин-2,4-диона <смотрите (стадию 2)> (23,0 г, 69,2 ммоль) с получением указанного в заголовке соединения (21,7 г, 60%).
1
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 8,99 (с, 1H), 8,56 (д, J=4,8 Гц, 1H), 8,46 (д, J=1,6 Гц, 1H), 7,91 (д, J=5,2 Гц, 1H), 7,72 (дд, J=8,0, 2,4 Гц, 1H), 7,42 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,31 (д, J=8,0 Гц, 1H), 4,67-4,65 (м, 1H), 4,48-4,47 (м, 1H), 3,61 (с, 3H), 3,17-3,13 (м, 2H), 1,71-1,25 (м, 19H)
[0095]
(Стадия 4) Циклогексил 3-[5-(1-метил-2,4-диоксо-1,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-3(2H)-ил)пиридин-2-ил]-L-аланинат (M-9)
Использовали способ, аналогичный способу примера 1 (стадия 7), для циклогексил (2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]-пропаноата <смотрите (стадию 3)> (35,0 г, 66,9 ммоль) с получением указанного в заголовке соединения (27,9 г, 91%) в форме гидрохлорида.
1
+
3
H ЯМР (400 МГц, CDOD): δ 9,16 (с, 1H), 8,65 (д, J=5,6 Гц, 1H), 8,52 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,44 (д, J=5,6 Гц, 1H), 7,89 (дд, J=8,4, 2,4 Гц, 1H), 7,61 (д, J=8,4Гц, 1H); 4,80 (м, 1H), 4,54 (т, J=6,0 Гц, 1H), 3,65 (с, 3H), 3,46-3,59 (м, 2H), 1,70-1,20 (м, 10H); MS (ESI) m/z 424 (M+H)
[0096]
Пример 10: Синтез M-10
(Стадия 1) Трет-бутил 4-(5-бромпиримидин-2-ил)-3,6-дигидро-2H-пиридин-1-карбоксилат
3
4
5-Бром-2-йодпиримидин (210 мг, 0,74 ммоль) и трет-бутил 4-(5-бромпиримидин-2-ил)-3,6-дигидро-2H-пиридин-1-карбоксилат (275 мг, 0,890 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (50 мл) и воде (10 мл), добавляли карбонат калия (255 мг, 1,85 ммоль) и Pd(PPh) (805 мг, 1,10 ммоль), и полученную смесь перемешивали в присутствии газообразного азота при 100°C в течение 4 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=5:1-1:1) с получением указанного в заголовке соединения (78 мг, 31%).
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8,72 (с, 2H), 7,23-7,20 (м, 1H), 4,19-4,17 (м, 2H), 3,66-3,62 (м, 2H), 2,72-2,66 (м, 2H), 8,72 (с, 9H)
[0097]
(Стадия 2) 4-Бром-2,5-дифторбензойная кислота
1,4-Дибром-2,5-дифторбензол (51,2 г, 188 ммоль) растворяли в 1,2-диэтоксиэтане (400 мл) и медленно добавляли по каплям раствор 2,5 M н-бутиллитий/гексан (76,0 мл, 190 ммоль) при -78°C в присутствии газообразного азота. Реакционный раствор перемешивали при -78°C в течение 30 минут, затем добавляли сухой лед, и полученную смесь дополнительно перемешивали в течение 30 минут. Температуру постепенно повышали до комнатной температуры, и затем к реакционной жидкости добавляли воду (200 мл). Реакционную жидкость разбавляли этилацетатом, полученный раствор промывали 10% водным раствором карбоната натрия (200 мл × 2), затем полученные водные слои объединяли, добавляли 1 N хлористоводородную кислоту для корректировки значения pH в кислую область, и осажденное желтое твердое вещество фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (30,0 г, 67%).
1
+
6
H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц): δ 7,90-7,87 (м, 1H), 7,79-7,75 (м, 1H); MS (ESI) m/z 191 (M+H-44)
[0098]
(Стадия 3) Метил 4-бром-2,5-дифторбензоат
4-Бром-2,5-дифторбензойную кислоту <смотрите (стадию 2)> (30,0 г, 127 ммоль) растворяли в этилацетате (500 мл), реакционный раствор охлаждали до 0°C, затем добавляли раствор диазометан/эфир. Реакционную жидкость перемешивали при 0°C в течение 1 часа, и растворитель удаляли при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=6:1-2:1) с получением указанного в заголовке соединения (25,0 г, 78%).
1
6
H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц): δ 7,93-7,89 (м, 1H), 7,80-7,77 (м, 1H), 3,86 (с, 3H)
[0099]
(Стадия 4) Метил 4-амино-2,5-дифторбензоат
Метил 4-бром-2,5-дифторбензоат <смотрите (стадию 3)> (25,0 г, 99,6 ммоль) и BINAP (1,86 г, 3,00 ммоль) растворяли в толуоле (500 мл). К раствору добавляли ацетат палладия(II) (672 мг, 3,00 ммоль), карбонат цезия (52,0 г, 160 ммоль) и имин бензофенона (25,3 г, 140 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 110°C в течение 12 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и затем фильтровали через целит и промывали этилацетатом. Полученный фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученное соединение растворяли в воде (30 мл) и тетрагидрофуране (80 мл), добавляли концентрированную хлористоводородную кислоту (30 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Осажденное твердое вещество фильтровали с получением белого твердого вещества. Фильтрат также концентрировали при пониженном давлении до тех пор, пока не выпадало в осадок белое твердое вещество, полученное твердое вещество фильтровали, белые твердые вещества объединяли, и полученный продукт сушили с получением указанного в заголовке соединения (9,8 г, 53% за две стадии).
1
+
3
H ЯМР (CDOD, 400 МГц): δ 7,53-7,49 (м, 1H), 6,60-6,56 (м, 1H), 3,85 (с, 3H); MS (ESI) m/z 188 (M+H)
[0100]
(Стадия 5) Метил 4-[(4-бромфенил)сульфониламино]-2,5-дифторбензоат
Метил 4-амино-2,5-дифторбензоат <смотрите (стадию 4)> (24,4 г, 130 ммоль) растворяли в метиленхлориде (1,0 л), добавляли 4-бромбензолсульфонилхлорид (50,0 г, 196 ммоль) и пиридин (100 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, затем к полученному остатку добавляли 6 N хлористоводородную кислоту для доведения до pH=1,0. Полученное желтое твердое вещество фильтровали, промывали водой и метиленхлоридом и сушили с получением указанного в заголовке соединения (36,5 г, 69%) в виде твердого желтого вещества.
+
MS (ESI) m/z 406 (M+H)
(Стадия 6) [4-[(2,5-Дифтор-4-метоксикарбонил-фенил)-сульфамоил]фенил]бороновая кислота
Метил 4-[(4-бромфенил)сульфониламино]-2,5-дифторбензоат <смотрите (стадию 5)> (40,5 г, 100 ммоль) и бис(пинаколато)диборан (35,5 г, 140 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (800 мл). К раствору добавляли [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлорпалладий(II) (2,20 г, 3,00 ммоль) и ацетат калия (29,4 г, 300 ммоль), и полученную смесь перемешивали в присутствии газообразного азота при 90°C в течение 12 часов. Реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры, и затем разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (600 мл × 3). Экстракты объединяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, и затем растворитель удаляли при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=4:1-2:1) с получением метил 2,5-дифтор-4-[[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]сульфониламино]бензоата (40,0 г, 88%).
1
+
3
H ЯМР (CDOD, 400 МГц): δ 7,89 (с, 4H), 7,62-7,58 (м, 1H), 7,44-7,40 (м, 1H), 3,87 (с, 3H), 1,36 (с, 12H); MS (ESI) m/z 454 (M+H)
[0101]
Полученный метил 2,5-дифтор-4-[[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]сульфониламино]бензоат (59,0 г, 130 ммоль) растворяли в ацетоне (450 мл), добавляли периодат натрия (83,6 г, 390 ммоль), ацетат аммония (30,0 г, 390 ммоль) и воду (150 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 72 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении и затем разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (500 мл × 3). Экстракты объединяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, и затем растворитель удаляли при пониженном давлении. Полученный остаток промывали смешанным растворителем (петролейный эфир:этилацетат=1:10) и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (43,0 г, 89%).
1
+
6
H ЯМР: (400 МГц, DMSO-d): δ 11,05 (с, 1H), 8,37 (с, 2H), 7,94 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,81 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,65-7,61 (м, 1H), 7,27-7,23 (м, 1H), 3,80 (с, 3H); MS (ESI) m/z 372 (M+H)
[0102]
(Стадия 7) Трет-бутил 4-[5-[4-[(2,5-дифтор-4-метокси-карбонил-фенил)сульфамоил]фенил]пиримидин-2-ил]-3,6-дигидро-2H-пиридин-1-карбоксилат
2
Трет-бутил 4-(5-бромпиримидин-2-ил)-3,6-дигидро-2H-пиридин-1-карбоксилат <смотрите (стадию 1)> (100 мг, 0,290 ммоль), [4-[(2,5-дифтор-4-метоксикарбонил-фенил)сульфамоил]фенил]бороновую кислоту <смотрите (стадию 6)> (131 мг, 0,350 ммоль), карбонат натрия (93,8 мг, 0,885 ммоль) и Pd(dppf)Cl (11,0 мг, 0,030 ммоль) растворяли в диоксане (10,0 мл) и воде (0,50 мл), и полученную смесь перемешивали в присутствии газообразного азота при 100°C в течение 8 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, и затем полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=3:1-1:1) с получением указанного в заголовке соединения (50,0 мг, 29%).
+
MS (ESI) m/z 587 (M+H)
[0103]
(Стадия 8) Трет-бутил 4-[5-[4-[(2,5-дифтор-4-метокси-карбонилфенил)сульфамоил]фенил]пиримидин-2-ил]пиперидин-1-карбоксилат
Трет-бутил 4-[5-[4-[(2,5-дифтор-4-метоксикарбонилфенил)-сульфамоил]фенил]пиримидин-2-ил]-3,6-дигидро-2H-пиридин-1-карбоксилат <смотрите (стадию 7)> (120 мг, 0,20 ммоль) и 10% Pd/C (влажный, 50 мг) суспендировали в метаноле (10 мл), и полученную смесь перемешивали в присутствии газообразного водорода (0,35 МПа) при 50°C в течение 24 часов. Реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры и затем фильтровали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (31,0 мг, 27%).
+
MS (ESI) m/z 589 (M+H)
[0104]
(Стадия 9) 4-[[4-[2-(1-трет-бутоксикарбонил-4-пиперидил)-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]-2,5-дифторбензойная кислота (M-10)
Трет-бутил 4-[5-[4-[(2,5-дифтор-4-метоксикарбонилфенил)-сульфамоил]фенил]пиримидин-2-ил]пиперидин-1-карбоксилат <смотрите (стадию 8)> (60 мг, 0,10 ммоль) растворяли в метаноле (10 мл), добавляли 2 N водный раствор гидроксида лития (3,0 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ, и добавляли 4 N хлористоводородную кислоту для доведения до pH=5,0. Осажденное твердое вещество фильтровали, промывали смешанным растворителем метиленхлорид:метанол (10:1) и сушили с получением указанного в заголовке соединения (45 мг, 78%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (CDOD, 400 МГц): δ 8,93 (с, 2H), 7,94-7,91 (м, 2H), 7,80 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,50-7,45 (м, 1H), 7,36-7,32 (м, 1H), 4,10-4,07 (м, 2H), 3,05-2,99 (м, 1H), 2,90-2,81 (м, 2H), 1,91-1,89 (м, 2H), 1,76-1,69 (м, 2H), 1,43 (с, 9H); MS (ESI) m/z 573 (M-1)
[0105]
Пример 11: Синтез M-11
(Стадия 1) 5-Бром-2-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)пиримидин
2
5-Бром-2-йодпиримидин (5,87 г, 20,7 ммоль), 2-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборан (4,35 г, 20,7 ммоль), карбонат калия (5,70 г, 41,4 ммоль) и Pd(dppf)Cl (805 мг, 1,10 ммоль) суспендировали в N,N-диметилформамиде (50 мл) и воде (10 мл), и полученную смесь перемешивали в атмосфере газообразного азота при 100°C в течение 4 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=5:1-1:1) с получением указанного в заголовке соединения (1,44 г, 29%).
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,72 (с, 2H), 7,25 (с, 1H), 4,42-3,38 (м, 2H), 3,94-3,91 (м, 2H), 2,68-2,66 (м, 2H)
(Стадия 2) Метил 4-[[4-[2-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]-2,5-дифторбензоат
2
5-Бром-2-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)пиримидин <смотрите (стадию 1)> (1,44 г, 6,00 ммоль), [4-[(2,5-дифтор-4-метокси-карбонилфенил)сульфамоил]фенил]бороновую кислоту (смотрите пример 10 (стадия 6)> (2,20 г, 6,00 ммоль), карбонат натрия (1,27 г, 12,0 ммоль), и Pd(dppf)Cl (220 мг, 0,3 ммоль) суспендировали в диоксане (20 мл) и воде (5,0 мл), и полученную смесь перемешивали при 100°C в течение 8 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=3:1-1:1) с получением указанного в заголовке соединения (1,20 г, 41%).
+
MS (ESI) m/z 488 (M+H)
[0106]
(Стадия 3) Метил 2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-ил-пиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]бензоат
Метил 4-[[4-[2-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)пиримидин-5-ил]-фенил]сульфониламино]-2,5-дифторбензоат <смотрите (стадию 2)> (1,20 г, 2,46 ммоль) растворяли в метаноле (10 мл), добавляли Pd/C (10%, 500 мг), и полученную смесь перемешивали в атмосфере водорода (0,35 МПа) при 50°C в течение 24 часов. Реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры и затем фильтровали, и растворитель удаляли при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (843 мг, 70%).
+
MS (ESI) m/z 490 (M+H)
[0107]
(Стадия 4) 2,5-Дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-ил-пиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]бензойная кислота (M-11)
Метил 2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]бензоат <смотрите (стадию 3)> (600 мг, 1,22 ммоль) растворяли в метаноле (10 мл), добавляли 2 N водный раствор гидроксида лития (3,0 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ, добавляли 4 N хлористоводородную кислоту для доведения pH до 4-5, и осажденное белое твердое вещество отфильтровывали, сушили и промывали смесью дихлорметан:метанол=10:1 с получением указанного в заголовке соединения (512 мг, 88%) в виде белого твердого вещества.
1
+
3
H ЯМР (CDOD, 400 МГц): δ 9,07 (с, 2H), 8,06 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,93 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,63-7,59 (м, 1H), 7,50-7,45 (м, 1H), 4,10-4,07 (м, 2H), 3,66-3,59 (м, 2H), 3,25-3,19 (м, 1H), 2,04-1,94 (м, 4H); MS (ESI) m/z 476 (M+H)
[0108]
Пример 12: Синтез M-12
(Стадия 1) Хлорметилбензоат
Параформальдегид (4,5 г) и хлорид цинка (каталитическое количество) смешивали при 0°C. Добавляли по каплям бензоилхлорид (20 г, 0,14 моль) в течение 1 часа. Температуру реакционной жидкости повышали до комнатной температуры, и затем реакционную жидкость перемешивали при 55°C в течение 10 часов. Реакционную жидкость охлаждали и затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=30:1-10:1) с получением указанного в заголовке соединения (9,7 г, 40%).
1
3
H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ 8,09-8,07 (м, 2H), 7,63-7,60 (м, 1H), 7,49-7,44 (м, 2H), 5,96 (с, 2H)
[0109]
(Стадия 2) Йодметил бензоат
Хлорметил бензоат <смотрите (стадию 1)> (10,0 г, 58,8 ммоль) растворяли в ацетонитриле (70,0 мл), добавляли йодид натрия (17,6 г, 117 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов. Ацетонитрил отгоняли при пониженном давлении и добавляли диэтиловый эфир. Осажденное твердое вещество отфильтровывали, промывали диэтиловым эфиром, и сушили при пониженном давлении, и затем очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=30:1-10:1) с получением указанного в заголовке соединения (14,5 г, 94%).
1
3
H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ 8,06-8,04 (м, 2H), 7,64-7,62 (м, 1H), 7,49-7,44 (м, 2H), 6,17 (с, 2H)
[0110]
(Стадия 3) (5-Бромпиримидин-2-ил)метилбензоат
3
2
2
Цинк (21,6 г, 332 ммоль) нагревали при 210°C в течение 10 минут, затем охлаждали до 70°C, опять нагревали до 210°C, перемешивали в течение 10 минут и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли N,N-диметилформамид (100 мл) и раствор дибромметан (7,72 г, 41,2 ммоль)/N,N-диметилформамид (20 мл), и полученную смесь перемешивали при 90°C в течение 30 минут. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, добавляли хлортриметилсилан (900 мг, 8,30 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. Добавляли по каплям раствор йодметил бензоат <смотрите (стадию 2)> (14,5 г, 55,3 ммоль)/N,N-диметилформамид (60 мл) при 35°C, и полученную смесь перемешивали в течение 90 минут. 5-Бром-2-йодпиримидин (7,90 г, 28,0 ммоль) и Pd(PPh)Cl (3,0 г, 4,1 ммоль) суспендировали в N,N-диметилформамиде (80 мл), добавляли с помощью шприца реагент цинка, полученный на приведенной выше стадии, и полученную смесь перемешивали в атмосфере азота при 80°C в течение 2 часов. Реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры и фильтровали, и затем фильтрат разбавляли водой (600 мл) и экстрагировали этилацетатом (200 мл × 3). Экстракты объединяли, промывали насыщенным солевым раствором и сушили над сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и затем полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=6:1-2:1) с получением указанного в заголовке соединения (7,38 г, 90%).
1
3
H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ 8,79 (с, 2H), 8,15-8,13 (м, 2H), 7,63-7,57 (м, 1H), 7,47-7,45 (м, 2H), 5,63 (с, 2H)
[0111]
(Стадия 4) (5-Бромпиримидин-2-ил)метанол
(5-Бромпиримидин-2-ил)метилбензоат <смотрите (стадию 3)> (7,30 г, 25,0 ммоль) растворяли в метаноле (15 мл), добавляли раствор 1 N метоксид натрия/метанол (50,0 мл, 0,500 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре. Растворитель отгоняли после того, как была удалена защита, и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан:метанол=30:1-15:1) с получением указанного в заголовке соединения (3,58 г, 76%).
1
3
H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ 8,80 (с, 2H), 4,82 (д, J=4,0 Гц, 2H), 3,39 (с, 1H)
[0112]
(Стадия 5) 5-Бром-2-(метоксиметил)пиримидин
(5-Бромпиримидин-2-ил)метанол <смотрите (стадию 4)> (3,72 г, 19,8 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл), полученный раствор охлаждали до 0°C, затем добавляли гидрид натрия (60% в масле, 1,19 г, 29,7 ммоль) и метилйодид (4,20 г, 29,7 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле с получением указанного в заголовке соединения (2,40 г, 60%).
[0113]
(Стадия 6) Метил 2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоат
2
5-Бром-2-(метоксиметил)пиримидин <смотрите (стадию 5)> (2,30 г, 11,3 ммоль), [4-[(2,5-дифтор-4-метоксикарбонил-фенил)сульфамоил]фенил]бороновую кислоту <смотрите пример 10 (стадия 6)> (4,20 г, 11,3 ммоль), карбонат натрия (2,40 г, 22,6 ммоль) и Pd(dppf)Cl (415 мг, 0,57 ммоль) суспендировали в диоксане (50 мл) и воде (10 мл), и полученную смесь перемешивали при 100°C в течение 8 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=2:1-1:4) с получением указанного в заголовке соединения (2,95 г, 58%).
+
MS (ESI) m/z 450 (M+H)
[0114]
(Стадия 7) 2,5-Дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензойная кислота (M-12)
Метил 2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]-фенил]сульфониламино]бензоат <смотрите (стадию 5)> (700 мг, 1,56 ммоль) растворяли в метаноле (10 мл), добавляли 2 N водный раствор гидроксида лития (3,0 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ, и затем добавляли 4 N хлористоводородную кислоту для доведения pH до 4-5. Осажденное белое твердое вещество фильтровали, сушили и промывали смешанным растворителем (метиленхлорид:метанол=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (617 мг, 91%) в виде белого твердого вещества.
1
+
3
H ЯМР (CDOD, 400 МГц): δ 9,06 (с, 2H), 8,01 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,90 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,56-7,52 (м, 1H), 7,43-7,39 (м, 1H), 4,68 (с, 2H), 3,47 (с, 3H); MS (ESI) m/z 436 (M+H)
[0115]
Пример 13: Синтез M-13
(Стадия 1) 4-Метокси-2-бутиновая кислота
3-Метоксипропин (1,00 г, 14,3 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (100 мл), полученный раствор охлаждали до -78°C и затем добавляли по каплям раствор 2,5 M н-бутиллитий/гексан (24,4 мл, 61,0 ммоль). Полученную смесь перемешивали при -78°C, затем к реакционной жидкости добавляли сухой лед, и температуру реакционной жидкости постепенно повышали до комнатной температуры. Реакционную жидкость разбавляли водой, и затем добавляли 4 N хлористоводородную кислоту для доведения pH до 5,0. Полученную жидкость экстрагировали метиленхлоридом (50 мл × 3), органические слои объединяли и сушили над сульфатом натрия, и растворитель удаляли при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (1,50 г, 92%) в виде желтого масла.
1
3
H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ 8,97 (с, 1H), 4,27 (с, 2H), 3,44 (с, 3H)
[0116]
(Стадия 2) Метил 2,5-дифтор-4-[(4-йодфенил)сульфониламино]-бензоат
Использовали способ, аналогичный способу примера 10 (стадия 5) для метил 4-амино-2,5-дифторбензоата <смотрите пример 10 (стадия 4)> (6,50 г, 34,8 ммоль) и 4-йодбензолсульфонилхлорида (21,0 г, 69,5 ммоль) с получением указанного в заголовке соединения (14,0 г, 89%) в виде твердого желтого вещества.
MS (ESI) m/z 452 (M-1)
[0117]
(Стадия 3) Метил 2,5-дифтор-4-[[4-[4-(метоксиметил)триазол-1-ил]фенил]сульфониламино]бензоат
4-Метокси-2-бутиновую кислоту <смотрите (стадию 1)> (502 мг, 4,40 ммоль) и метил 2,5-дифтор-4-[(4-йодфенил)-сульфониламино]бензоат <смотрите (стадию 2)> (2,00 г, 4,40 ммоль) растворяли в диметилсульфоксиде (25,0 мл) и воде (3,0 мл), последовательно добавляли L-пролин (102 мг, 0,880 ммоль), пентагидрат сульфата меди(II) (110 мг, 0,440 ммоль), аскорбат натрия (175 мг, 0,880 ммоль), азид натрия (345 мг, 5,30 ммоль) и карбонат калия (731 мг, 5,30 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 65°C в течение 12 часов. К реакционной жидкости добавляли этилацетат (50 мл), аммиачную воду (50 мл) и воду (100 мл), затем полученную смесь экстрагировали этилацетатом (60 мл × 10), органические слои объединяли и промывали насыщенным солевым раствором (300 мл), сушили над сульфатом натрия, и растворитель удаляли при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (510 мг, 26%).
1
3
H ЯМР (CDOD, 400 МГц): δ 8,48 (с, 1H), 7,98 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,86 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,30-7,26 (м, 1H), 6,94-6,88 (м, 1H), 4,50 (с, 2H), 3,68 (с, 3H), 3,31 (с, 3H)
[0118]
(Стадия 4) 2,5-Дифтор-4-[[4-[4-(метоксиметил)триазол-1-ил]-фенил]сульфониламино]бензойная кислота (M-13)
Метил 2,5-дифтор-4-[[4-[4-(метоксиметил)триазол-1-ил]-фенил]сульфониламино]бензоат <смотрите (стадию 3)> (500 мг, 1,14 ммоль) растворяли в метаноле (10 мл), добавляли 2 N водный раствор гидроксида лития (5,0 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ, и затем добавляли 4 N хлористоводородную кислоту для доведения рН до 5,0. Осажденное твердое вещество фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (450 мг, 93%) в виде твердого желтого вещества.
1
+
3
H ЯМР (CDOD, 400 МГц): δ 8,66 (с, 1H), 8,14-8,08 (м, 4H), 7,56-7,47 (м, 2H), 4,64 (с, 2H), 3,44 (с, 3H); MS (ESI) m/z 425 (M+H)
[0119]
Пример 14: Синтез M-14
(Стадия 1) 2-Аллилокси-5-бромпиримидин
5-Бром-2-хлорпиримидин (30,0 г, 0,150 моль) растворяли в тетрагидрофуране (300 мл), добавляли трет-бутоксид калия (20,1 г, 0,180 моль) и аллиловый спирт (19,9 г, 0,170 моль), и полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 часов. Реакционную жидкость разбавляли водой и экстрагировали диэтиловым эфиром (300 мл × 3). Экстракты объединяли и промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, и растворитель удаляли при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (23,3 г, 70%).
1
3
H ЯМР (CDCl, 300 МГц): δ 8,53 (с, 2H), 6,11-6,02 (м, 1H), 5,45-5,39 (м, 1H), 5,30-5,26 (м, 1H), 4,89-4,87 (м, 2H)
[0120]
(Стадия 2) Метил 4-[[4-(1-аллил-2-оксопиримидин-5-ил)-фенил]сульфониламино]-2,5-дифторбензоат
2
2-Аллилокси-5-бромпиримидин <смотрите (стадию 1)> (7,12 г, 3,30 ммоль), [4-[(2,5-дифтор-4-метоксикарбонилфенил)-сульфамоил]фенил]бороновую кислоту <смотрите пример 10 (стадия 6)> (8,19 г, 22,1 ммоль), карбонат натрия (7,03 г, 66,1 ммоль), и Pd(dppf)Cl (2,40 г, 3,30 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (200 мл) и воде (20 мл), и полученную смесь перемешивали в присутствии газообразного азота при 100°C в течение 2 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, и затем полученный остаток очищали методом ВЭЖХ (ацетонитрил в воде) с получением указанного в заголовке соединения (3,56 г, 35%).
+
MS (ESI) m/z 462 (M+H)
[0121]
(Стадия 3) 4-[[4-(1-Аллил-2-оксопиримидин-5-ил)фенил]-сульфониламино]-2,5-дифторбензойная кислота
Метил 4-[[4-(1-аллил-2-оксопиримидин-5-ил)фенил]сульфонил-амино]-2,5-дифторбензоат <смотрите (стадию 2)> (3,51 г, 7,60 ммоль) растворяли в метаноле (30 мл), добавляли 2 N водный раствор гидроксида лития (10,0 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ, и затем добавляли 4 N хлористоводородную кислоту для доведения рН до 5,0. Осажденное твердое вещество фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (2,72 г, 80%) в виде твердого желтого вещества.
1
+
6
H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц): δ 13,42-13,40 (уш., 1H), 11,13-11,05 (уш., 1H), 9,04 (д, J=3,3 Гц, 1H), 8,72 (д, J=3,3 Гц, 1H), 7,93-7,85 (м, 4H), 7,67-7,57 (м, 1H), 6,07-5,95 (м, 1H), 5,25-5,18(м, 2H), 4,58-4,51(м, 2H); MS (ESI) m/z 448 (M+H)
[0122]
Пример 15: Синтез M-15
(Стадия 1) 5-Бром-2-этоксиметил)пиримидин
(5-Бромпиримидин-2-ил)метанол <смотрите пример 12 (стадия 4)> (3,72 г, 19,8 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (10,0 мл), реакционный раствор охлаждали до 0°C, затем последовательно добавляли гидрид натрия (60% масс. в минеральном масле, 1,19 г, 29,7 ммоль) и этанйодид (4,63 ммоль, 29,7 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир) с получением указанного в заголовке соединения (2,58 г, 60%).
[0123]
(Стадия 2) Метил 4-[[4-[2-(этоксиметил)пиримидин-5-ил]-фенил]сульфониламино]-2,5-дифторбензоат
2
5-Бром-2-(этоксиметил)пиримидин <смотрите (стадию 1)> (2,45 г, 11,3 ммоль), [4-[(2,5-дифтор-4-метоксикарбонил-фенил)-сульфамоил]фенил]бороновую кислоту <смотрите пример 10 (стадия 6)> (4,20 г, 11,3 ммоль), карбонат натрия (2,40 г, 22,6 ммоль) и Pd(dppf)Cl (415 мг, 0,57 ммоль) растворяли в диоксане (50,0 мл) и воде (10.0 мл), и полученную смесь перемешивали в присутствии азота при 100°C в течение 8 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, и затем полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=2:1-1:4) с получением указанного в заголовке соединения (2,94 г, 56%).
+
MS (ESI) m/z 464 (M+H)
[0124]
(Стадия 3) 4-[[4-[2-(Этоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]-сульфониламино]-2,5-дифторбензойная кислота (M-15)
Метил 4-[[4-[2-(этоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфонил-амино]-2,5-дифторбензоат <смотрите (стадию 2)> (800 мг, 1,72 ммоль) растворяли в метаноле (10 мл), добавляли 2 N водный раствор гидроксида лития (3,0 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ, и затем добавляли 4 N хлористоводородную кислоту для доведения рН до 5,0. Осажденное твердое вещество фильтровали, промывали смешанным раствором метиленхлорид:метанол (10:1) и сушили с получением указанного в заголовке соединения (698 мг, 90%) в виде белого твердого вещества.
1
+
6
H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц): δ 13,35 (уш., 1H), 11,19 (уш., 1H), 9,25 (д, J=7,6 Гц, 2H), 8,16-7,96 (м, 4H), 7,63-7,56 (м, 1H), 7,31-7,27 (м, 1H), 4,67 (с, 2H), 3,63-3,48 (м, 2H), 1,23-1,15 (м, 3H); MS (ESI) m/z 450 (M+H)
[0125]
Пример 16: Синтез M-16
(Стадия 1) 4-нитро-2-тетрагидропиран-4-илпиридин
3
2
2
Цинк (19,2 г, 293 ммоль) нагревали при 210°C в течение 10 минут, охлаждали до 70°C, затем опять нагревали до 210°C, и полученную смесь перемешивали в течение 10 минут. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем добавляли раствор N,N-диметилформамида (100 мл) и дибромметана (6,87 г, 33,6 ммоль) в N,N-диметилформамиде (10,0 мл), и полученную смесь перемешивали при 90°C в течение 30 минут. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем добавляли триметилсилилхлорид (800 мг, 7,30 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. К реакционной жидкости добавляли раствор 4-йодтетрагидропирана (10,4 г, 49,2 ммоль) в N,N-диметилформамиде (60,0 мл), и полученную смесь перемешивали при 35°C в течение 90 минут. Это производное цинка добавляли к суспензии 2-бром-4-нитропиридина (5,00 г, 24,6 ммоль) и Pd(PPh)Cl (2,60 г, 3,70 ммоль) в N,N-диметилформамиде (80,0 мл), и полученную смесь перемешивали в присутствии газообразного азота при 90°C в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем реакционный раствор фильтровали, и полученный фильтрат разбавляли водой (600 мл) и экстрагировали этилацетатом (200 мл × 3). Экстракты объединяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, и затем растворитель удаляли при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=10:1-5:1) с получением указанного в заголовке соединения (900 мг, 17%).
1
3
H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ 8,85 (д, J=5,6 Гц, 1H), 7,90-7,86 (м, 2H), 4,15-4,11 (м, 2H), 3,61-3,54 (м, 2H), 3,16-3,10 (м, 1H), 2,00-1,91 (м, 4H)
[0126]
(Стадия 2) 2-Тетрагидропиран-4-илпиридин-4-амин
4-нитро-2-тетрагидропиран-4-ил-пиридин <смотрите (стадию 1)> (900 мг, 4,30 ммоль) и 10% Pd/C (влажный, 100 мг) суспендировали в метаноле (5,0 мл), и полученную смесь перемешивали в присутствии водорода при комнатной температуре в течение 24 часов. Реакционную жидкость фильтровали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (700 мг, 91%).
1
3
H ЯМР (CDOD, 300 МГц): δ 7,89 (д, J=5,7 Гц, 1H), 6,49-6,41 (м, 2H), 4,07-4,01 (м, 2H), 3,59-3,50 (м, 2H), 2,80-2,71 (м, 1H), 1,84-1,76 (м, 4H)
[0127]
(Стадия 3) 4-Бром-2-тетрагидропиран-4-илпиридин
2-Тетрагидропиран-4-илпиридин-4-амин <смотрите (стадию 2)> (700 мг, 3,90 ммоль) растворяли в бромоформе (30 мл), добавляли амилнитрит (20 мл), и полученную смесь перемешивали в присутствии газообразного азота при 85°C в течение 4 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=10:1-5:1) с получением указанного в заголовке соединения (350 мг, 37%).
1
3
H ЯМР (CDCl, 300 МГц): δ 8,37 (д, 1H, J=5,4 Гц), 7,36-7,27 (м, 2H), 4,13-4,07 (м, 2H), 3,59-3,50 (м, 2H), 2,97-2,92 (м, 1H), 1,92-1,84 (м, 4H)
[0128]
(Стадия 4) 2-Бензилсульфанил-5-бромпиридин
5-Бром-2-хлорпиридин (80,0 г, 645 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (600 мл), добавляли в течение 20 минут гидрид натрия (60% масс. в минеральном масле, 45,0 г, 1,13 моль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. К реакционной жидкости добавляли бензилтиол (123 г, 640 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную жидкость разбавляли водой, экстрагировали диэтиловым эфиром, экстракты объединяли и промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным раствором хлорида натрия. Полученный остаток сушили над сульфатом магния, и растворитель удаляли при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (148 г, 82%).
[0129]
(Стадия 5) 5-Бромпиридин-2-сульфонилхлорид
2-Бензилсульфанил-5-бромпиридин <смотрите (стадию 4)> (250 г, 0,89 моль) суспендировали в уксусной кислоте (2250 мл) и воде (750 мл), добавляли NCS (340 г, 2,60 моль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную жидкость разбавляли водой и экстрагировали метиленхлоридом. Экстракты объединяли, промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и насыщенным раствором хлорида натрия и сушили над сульфатом магния. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=30:1) с получением указанного в заголовке соединения (60,4 г, 26%).
[0130]
(Стадия 6) Метил 4-[(5-бром-2-пиридил)сульфониламино]-2,5-дифторбензоат
Метил 4-амино-2,5-дифторбензоат <смотрите пример 10 (стадия 4)> (14,1 г, 75,0 ммоль) и 5-бромпиридин-2-сульфонилхлорид <смотрите (стадию 5)> (29,0 г, 113 ммоль) растворяли в метиленхлориде (250 мл), добавляли пиридин (23 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, добавляли 6 N хлористоводородную кислоту для доведения рН до 1,0, и осажденное желтое твердое вещество фильтровали. Полученное твердое вещество промывали водой и сушили с получением указанного в заголовке соединения (21,4 г, 70%) в виде твердого желтого вещества.
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 11,30 (с, 1H), 8,91 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,40 (дд, J=8,4, 2,4 Гц, 1H), 8,00 (д, J=8,4 Гц, 1H), 7,69-7,65 (м, 1H), 7,45-7,39 (м, 1H), 3,83 (с, 3H); MS (ESI) m/z 407, 409 (M+H)
[0131]
(Стадия 7) [6-[(2,5-Дифтор-4-метоксикарбонил-фенил)-сульфамоил]-3-пиридил]бороновая кислота
Проводили две стадии, аналогичные стадиям в примере 10 (стадия 6) для метил 4-[(5-бром-2-пиридил)сульфониламино]-2,5-дифторбензоата <смотрите (стадию 6)> (41 г, 0,10 моль) с получением указанного в заголовке соединения (30 г, 81%) в виде черного масла.
MS (ESI) m/z 371 (M-1)
[0132]
(Стадия 8) Метил 2,5-дифтор-4-[[5-(2-тетрагидропиран-4-ил-4-пиридил)-2-пиридил]сульфониламино]бензоат
2
4-Бром-2-тетрагидропиран-4-ил-пиридин <смотрите (стадию 3)> (350 мг, 1,45 ммоль), [6-[(2,5-дифтор-4-метоксикарбонил-фенил)сульфамоил]-3-пиридил]бороновую кислоту <смотрите (стадию 7)> (647 мг, 1,74 ммоль), карбонат натрия (462 мг, 4,83 ммоль) и Pd(dppf)Cl (106 мг, 0,14 ммоль) растворяли в диоксане (10,0 мл) и воде (2,0 мл), и полученный раствор перемешивали в присутствии азота при 105°C в течение 2 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, и затем полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=10:1-1:1) с получением указанного в заголовке соединения (210 мг, 29%).
[0133]
(Стадия 9) 2,5-Дифтор-4-[[5-(2-тетрагидропиран-4-ил-4-пиридил)-2-пиридил]сульфониламино]бензойная кислота (M-16)
Метил 2,5-дифтор-4-[[5-(2-тетрагидропиран-4-ил-4-пиридил)-2-пиридил]сульфониламино]бензоат <смотрите (стадию 8)> (210 мг, 0,43 ммоль) растворяли в метаноле (5,0 мл), добавляли 2 N водный раствор гидроксида лития (3,0 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ, и затем добавляли 4 N хлористоводородную кислоту для доведения рН до 5,0. Осажденное твердое вещество фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (140 мг, 69%) в виде белого твердого вещества.
1
+
6
H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц): δ 13,32 (уш.с, 1H), 11,27 (уш.с, 1H), 9,18 (с, 1H), 8,65 (д, J=3,6 Гц, 1H), 8,53 (дд, J=6,0, 1,2 Гц, 1H), 8,15 (д, J=6,0 Гц, 1H), 7,77 (с, 1H), 7,69 (д, J=3,6 Гц, 1H), 7,61 (дд, J=8,1, 5,1 Гц, 1H), 7,45 (дд, J=9,3, 5,1 Гц, 1H), 3,98-3,96 (м, 2H), 3,49-3,43 (м, 2H), 3,04-2,99 (м, 1H), 1,87-1,78 (м, 4H); MS (ESI) m/z 476 (M+H)
[0134]
Пример 17: Синтез M-17
(Стадия 1) (5-Бромпиримидин-2-ил)метилметансульфонат
(5-Бромпиримидин-2-ил)метанол <смотрите пример 12 (стадия 4)> (3,72 г, 19,7 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (10 мл), добавляли триэтиламин (3,0 г, 30 ммоль), мезилхлорид (3,38 г, 29,6 ммоль) при 0°C, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, и затем полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (4,54 г, 86%).
1
3
H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ 8,83 (с, 2H), 5,39 (с, 2H), 3,20 (с, 3H)
[0135]
(Стадия 2) N-[(5-Бромпиримидин-2-ил)метил]пропан-2-амин
(5-Бромпиримидин-2-ил)метилметансульфонат <смотрите (стадию 1)> (200 мг, 0,750 ммоль) растворяли в этаноле (10 мл), добавляли изопропиламин (88,5 мг, 1,50 ммоль) и триэтиламин (151 мг, 1,50 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 80°C в течение 1 часа. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, и затем полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=3:1-1:1) с получением указанного в заголовке соединения (144 мг, 84%).
1
3
H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ 8,77 (с, 2H), 4,08 (с, 2H), 2,89-2,83(м, 1H), 1,12 (д, J=6,4 Гц, 6H)
[0136]
(Стадия 3) Метил 2,5-дифтор-4-[[4-[2-[(изопропиламино)-метил]пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоат
2
N-[(5-Бромпиримидин-2-ил)метил]пропан-2-амин <смотрите (стадию 2)> (0,260 г, 1,13 ммоль), [4-[(2,5-дифтор-4-метокси-карбонилфенил)сульфамоил]фенил]бороновую кислоту <смотрите пример 10 (стадия 6)> (0,420 г, 1,13 ммоль), карбонат натрия (0,24 г, 2,2 ммоль) и Pd(dppf)Cl (41,5 мг, 0,057 ммоль) растворяли в диоксане (5,0 мл) и воде (1,0 мл), и полученную смесь перемешивали в присутствии газообразного азота при 100°C в течение 8 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, и затем полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=2:1-1:4) с получением указанного в заголовке соединения (0,32 г, 59%).
+
MS (ESI) m/z 477 (M+H)
[0137]
(Стадия 4) 2,5-Дифтор-4-[[4-[2-[(изопропиламино)метил]-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензойная кислота (M-17)
Метил 2,5-дифтор-4-[[4-[2-[(изопропиламино)метил]пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоат <смотрите (стадию 3)> (476 мг, 1,00 ммоль) растворяли в метаноле (10 мл), добавляли 2 N водный раствор гидроксида лития (3,0 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ, и затем добавляли 4 N хлористоводородную кислоту для доведения рН до 5,0. Осажденное твердое вещество фильтровали, промывали смешанным раствором метиленхлорид:метанол (10:1), и сушили с получением указанного в заголовке соединения (406 мг, 88%) в виде белого твердого вещества.
1
+
3
H ЯМР (CDOD, 400 МГц): δ 9,06 (с, 2H), 7,88 (д, J=8,8 Гц, 2H), 7,80 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,63-7,56 (м, 2H), 4,44 (с, 2H), 3,48-3,45 (м, 1H), 1,33 (д, J=6,4 Гц, 6H); MS (ESI) m/z 463 (M+H)
[0138]
Пример 18: Синтез M-18
(Стадия 1) 5-Бром-2-винилпиримидин
3
4
5-Бром-2-йодпиримидин (28,4 г, 0,100 моль) и Pd(PPh) (1,73 г, 1,50 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (350 мл), добавляли 1,5 M раствор винилмагния бромид/тетрагидрофуран (75,0 мл, 0,110 моль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционную жидкость разбавляли водой (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (200 мл × 3). Экстракты объединяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, и затем растворитель удаляли при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения.
+
MS (ESI) m/z 185, 187 (M+H)
[0139]
(Стадия 2) 2-(5-Бромпиримидин-2-ил)-N,N-диметилэтанамин
5-Бром-2-винилпиримидин <смотрите (стадию 1)> растворяли в метаноле (50 мл), добавляли диметиламин (40% водный раствор, 19,0 мл, 0,250 моль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 90 минут. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, и затем полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (метиленхлорид:метанол=100:1-10:1) с получением указанного в заголовке соединения (6,90 г, 30%, две стадии).
1
3
H ЯМР (CDOD, 300 МГц): δ 8,82 (с, 2H), 3,33-3,32 (м, 2H), 2,88-2,83 (м, 2H), 2,30 (с, 6H)
[0140]
(Стадия 3) Метил 4-[[4-[2-(2-диметиламиноэтил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]-2,5-дифторбензоат
2
2-(5-Бромпиримидин-2-ил)-N,N-диметилэтанамин <смотрите (стадию 2)> (5,20 г, 22,6 ммоль), метил 2,5-дифтор-4-[[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]сульфонил-амино]бензоат <смотрите пример 10 (стадия 6)> (10,2 г, 22,6 ммоль), карбонат натрия (3,60 г, 33,9 ммоль) и Pd(dppf)Cl (830 мг, 1,14 ммоль) растворяли в диоксане (60 мл) и воде (20 мл), и полученную смесь перемешивали в присутствии азота при 100°C в течение 8 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, и затем полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (метиленхлорид:метанол=100:1-10:1) с получением указанного в заголовке соединения (5,90 г, 55%).
+
MS (ESI) m/z 477 (M+H)
[0141]
(Стадия 4) 4-[[4-[2-(2-Диметиламиноэтил)пиримидин-5-ил]-фенил]сульфониламино]-2,5-дифторбензойная кислота (M-18)
Метил 4-[[4-[2-(2-диметиламиноэтил)пиримидин-5-ил]фенил]-сульфониламино]-2,5-дифторбензоат <смотрите (стадию 3)> (5,90 г, 12,4 ммоль) растворяли в метаноле (10 мл), добавляли 2 N водный раствор гидроксида лития (30 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ, и затем добавляли 4 N хлористоводородную кислоту для доведения рН до 5,0. Осажденное твердое вещество фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (4,6 г, 81%) в виде белого твердого вещества.
1
+
6
H ЯМР (DMSO-d, 300 МГц): δ 9,11 (с, 2H), 7,86 (с, 4H), 7,30-7,23 (м, 1H), 6,99-6,92 (м, 1H), 3,55-3,51 (м, 2H), 3,38-3,34 (м, 2H), 2,81 (с, 6H); MS (ESI) m/z 463 (M+H)
[0142]
Пример 19: Синтез M-19
(Стадия 1) 5-Бром-2-(изопропоксиметил)пиримидин
Изопропанол (10 мл) добавляли к гидриду натрия (60% масс. в минеральном масле, 225 мг, 5,60 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 60°C в течение 30 минут. Реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры, затем добавляли раствор (5-бром-пиримидин-2-ил)метилметансульфоната <смотрите пример 17 (стадия 1)> (1,0 г, 3,7 ммоль) в изопропаноле (15 мл), и полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 3 часов. Реакционную жидкость разбавляли водой (50 мл), экстрагировали диэтиловым эфиром (50 мл × 3), экстракты объединяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, затем растворитель удаляли при пониженном давлении, и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=10:1) с получением указанного в заголовке соединения (657 мг, 76%).
1
3
H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ 8,80 (с, 2H), 4,71 (с, 2H), 3,82-3,79 (м, 1H), 1,28-1,27 (д, J=6,0 Гц, 6H)
[0143]
(Стадия 2) Метил 2,5-дифтор-4-[[4-[2-(изопропоксиметил)-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоат
2
5-Бром-2-(изопропоксиметил)пиримидин <смотрите (стадию 1)> (508 мг, 2,20 ммоль), [4-[(2,5-дифтор-4-метоксикарбонил-фенил)сульфамоил]фенил]бороновую кислоту <смотрите пример 10 (стадия 6)> (820 мг, 2,20 ммоль), карбонат натрия (700 мг, 6,60 ммоль) и Pd(dppf)Cl (48 мг, 0,066 ммоль) растворяли в диоксане (20 мл) и воде (7,0 мл), и полученную смесь перемешивали в присутствии азота при 105°C в течение 12 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, затем полученный остаток промывали диэтиловым эфиром (20 мл) и сушили с получением указанного в заголовке соединения (1,50 г).
+
MS (ESI) m/z 478 (M+H)
[0144]
(Стадия 3) 2,5-Дифтор-4-[[4-[2-(изопропоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензойная кислота (M-19)
Метил 2,5-дифтор-4-[[4-[2-(изопропоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоат <смотрите (стадию 2)> (1,50 г) растворяли в метаноле (10 мл), добавляли 2 N водный раствор гидроксида лития (6,0 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ, и затем добавляли 4 N хлористоводородную кислоту для доведения рН до 4,0. Осажденное твердое вещество отфильтровывали, промывали ацетонитрилом и сушили с получением указанного в заголовке соединения (763 мг, 75% за две стадии) в виде твердого желтого вещества.
1
+
6
H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц): δ 13,41 (уш., 1H), 11,15 (уш., 1H), 9,19 (с, 2H), 8,07-7,97 (м, 4H), 7,62 (дд, J=10,8, 6,4 Гц, 1H), 7,31 (дд, J=12,0, 6,4 Гц, 1H), 4,66 (с, 2H), 3,81-3,75 (м, 1H), 1,24 (д, J=6,0 Гц, 6H); MS (ESI) m/z 464 (M+H)
[0145]
Пример 20: Синтез M-20
(Стадия 1) 2-(Азетидин-1-ил)-5-бромпиримидин
5-Бром-2-хлорпиримидин (29,9 г, 0,150 моль) растворяли в N,N-диметилформамиде (300 мл), добавляли азетидин (11,4 г, 0,200 моль) и карбонат калия (42,5 г, 0,310 моль), и полученную смесь перемешивали при 50°C в течение 12 часов. Реакционную жидкость разбавляли водой, экстрагировали диэтиловым эфиром (300 мл × 3), экстракты объединяли, промывали насыщенным солевым раствором и сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (30 г, 93%).
1
3
H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ 8,26 (с, 2H), 4,12 (т, J=7,4 Гц, 4H), 2,40-2,33 (м, 2H)
[0146]
(Стадия 2) Метил 4-[[4-[2-(азетидин-1-ил)пиримидин-5-ил]-фенил]сульфониламино]-2,5-дифторбензоат
Использовали способ, аналогичный способу примера 10 (стадия 7) для 2-(азетидин-1-ил)-5-бромпиримидина <смотрите (стадию 1)> (10,7 г, 50,4 ммоль) с получением указанного в заголовке соединения (15,0 г, 64%).
+
MS (ESI) m/z 461 (M+H)
[0147]
(Стадия 3) 4-[[4-[2-(Азетидин-1-ил)пиримидин-5-ил]фенил]-сульфониламино]-2,5-дифторбензойная кислота (M-20)
Метил 4-[[4-[2-(азетидин-1-ил)пиримидин-5-ил]фенил]-сульфониламино]-2,5-дифторбензоат <смотрите (стадию 2)> (15,0 г, 32,6 ммоль) растворяли в метаноле (180 мл), добавляли 2 N водный раствор гидроксида лития (60 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Завершение реакции контролировали методом ТСХ, и затем добавляли 4 N хлористоводородную кислоту для доведения рН до 4,0. Осажденное твердое вещество фильтровали, промывали смешанным растворителем (метиленхлорид:метанол=10:1) и сушили с получением указанного в заголовке соединения (10,0 г, 69%) в виде белого твердого вещества.
1
+
6
H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц): δ 13,43-13,40 (уш., 1H), 11,13-11,05 (уш., 1H), 8,78 (д, J=10,0 Гц, 2H), 7,98-7,88 (м, 4H), 7,62 (дд, J=10,4, 6,8 Гц, 1H), 7,29 (дд, J=12,0, 6,4 Гц, 1H), 4,12 (т, J=7,2 Гц, 4H), 2,52-2,32 (м, 2H); MS (ESI) m/z 447 (M+H)
[0148]
Пример 21: Синтез M-21
(Стадия 1) Метил 2,5-дифтор-4-[[5-(4-метилтриазол-1-ил)-2-пиридил]сульфониламино]бензоат
2-Бутиновую кислоту (3,70 г, 44,0 ммоль) и метил 2,5-дифтор-4-[(5-йод-2-пиридил)сульфониламино]бензоат <синтезированный способом, аналогичным способу примера 16 (стадия 6)> (20,0 г, 44,0 ммоль), растворяли в диметилсульфоксиде (250 мл) и воде (30 мл), последовательно добавляли L-пролин (1,00 г, 8,80 ммоль), пентагидрат сульфата меди(II) (1,10 г, 4,40 ммоль), аскорбат натрия (1,70 г, 8,80 ммоль), азид натрия (4,29 г, 66,0 ммоль) и карбонат калия (7,30 г, 53,0 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 65°C в течение 12 часов. К реакционной жидкости добавляли этилацетат (500 мл), аммонийную воду (500 мл) и воду (1000 мл), затем реакционную жидкость экстрагировали этилацетатом (600 мл × 15), органические слои объединяли и промывали насыщенным солевым раствором (3000 мл), сушили над сульфатом натрия, и растворитель удаляли при пониженном давлении. Полученный остаток очищали методом ВЭЖХ с получением указанного в заголовке соединения (4,70 г, 26%).
1
3
H ЯМР (CDOD, 300 МГц): δ 9,11 (с, 1H), 8,43-8,42 (м, 2H), 8,22-8,19 (м, 1H), 7,43-7,30 (м, 2H), 3,83 (с, 3H), 2,43 (с, 3H)
[0149]
(Стадия 2) 2,5-Дифтор-4-[[5-(4-метилтриазол-1-ил)-2-пиридил]сульфониламино]бензойная кислота (M-21)
Метил 2,5-дифтор-4-[[5-(4-метилтриазол-1-ил)-2-пиридил]-сульфониламино]бензоат <смотрите (стадию 1)> (4,50 г, 11,0 ммоль) растворяли в метаноле (60 мл), добавляли 2 N водный раствор гидроксида лития (15 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Завершение реакции контролировали методом ТСХ, и затем добавляли 4 N хлористоводородную кислоту для доведения рН до 4,0. Осажденное твердое вещество отфильтровывали, промывали насыщенным солевым раствором, и сушили с получением указанного в заголовке соединения (3,90 г, 90%) в виде белого твердого вещества.
1
+
3
H ЯМР (CDOD, 400 МГц): δ 9,22 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,58-8,47 (д, J=9,2, 2,8 Гц, 1H), 8,47 (с, 1H), 8,29 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,66-7,58 (м, 2H), 2,44 (с, 3H); MS (ESI) m/z 396 (M+H)
[0150]
Пример 22: Синтез M-22
(Стадия 1) Фуран-2-сульфонилхлорид
Фуран (3,67 г, 53,9 ммоль) растворяли в диэтиловом эфире (50 мл), реакционный раствор охлаждали до 0°C, затем медленно добавляли по каплям раствор трет-бутиллитий/гексан (1,3 моль/л, 50 мл), и полученную смесь перемешивали в течение 15 минут. К реакционной жидкости добавляли диоксид серы, и полученную смесь дополнительно перемешивали в течение 15 минут. Затем добавляли N-хлорсукцинимид (8,65 г, 64,8 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную жидкость разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (100 мл × 2), затем экстракты объединяли, промывали насыщенным солевым раствором и сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и затем остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=10:1-5:1) с получением указанного в заголовке соединения (3,2 г, 36%) в виде желтого масла.
[0151]
(Стадия 2) Метил 2,5-дифтор-4-[(2-фурилсульфонил)-амино]бензоат
Метил 4-амино-2,5-дифторбензоат (1,40 г, 7,48 ммоль) <смотрите пример 10 (стадия 4)> растворяли в метиленхлориде (60 мл), добавляли фуран-2-сульфонилхлорид <смотрите (стадию 1)> (3,00 г, 18,0 ммоль) и пиридин (10 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Реакционную жидкость разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Экстракты объединяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, растворитель удаляли при пониженном давлении, и затем полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=10:1-5:1) с получением указанного в заголовке соединения (800 мг, 34%) в виде серого твердого вещества.
1
+
6
H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц): δ 8,02 (с, 1H), 7,71-6,66 (м, 1H), 7,32-7,25 (м, 2H), 6,70-6,66 (м, 1H), 3,82 (с, 3H); MS (ESI) m/z 318 (M+H)
[0152]
(Стадия 3) 2,5-Дифтор-4-[(2-фурилсульфонил)амино]бензойная кислота (M-22)
Метил 2,5-дифтор-4-[(2-фурилсульфонил)амино]бензоат <смотрите (стадию 2)> (800 мг, 2,52 ммоль) растворяли в метаноле (10 мл), добавляли 6 N водный раствор гидроксида натрия (10,0 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Завершение реакции контролировали методом ТСХ, и затем добавляли 4 N хлористоводородную кислоту для доведения рН до 4,0. Осажденное твердое вещество фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (600 мг, 79%).
1
+
3
H ЯМР (CDOD, 400 МГц): δ 7,74 (дд, J=2,4, 1,6 Гц, 1H), 7,61 (дд, J=14,4, 8,4 Гц, 1H), 7,38 (дд, J=15,6, 8,4 Гц, 1H), 7,18 (дд, J=4,8, 1,6 Гц, 1H), 6,58 (дд, J=4,8, 2,4 Гц, 1H); MS (ESI) m/z 304 (M+H)
[0153]
Пример 23: Синтез M-23
(Стадия 1) Метил 4-амино-2,3,5,6-тетрафторбензоат
4-Амино-2,3,5,6-тетрафторбензойная кислоту (10,0 г, 47,8 ммоль) растворяли в метаноле (80 мл), реакционный раствор охлаждали до 0°C, затем добавляли по каплям тионилхлорид (15 мл), и полученную смесь перемешивали при 65°C в течение 12 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, и затем полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=5:1-2:1) с получением указанного в заголовке соединения (9,28 г, 87%).
1
3
H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ 4,38 (уш.с, 2H), 3,92 (с, 3H).
[0154]
(Стадия 2) Метил 4-[(4-бромфенил)сульфониламино]-2,3,5,6-тетрафторбензоат
Метил 4-амино-2,3,5,6-тетрафторбензоат <смотрите (стадию 1)> (4,60 г, 20,6 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (50 мл), добавляли гидрид натрия (60% в масле, 1,64 г, 41,0 ммоль), и полученную смесь перемешивали в присутствии газообразного азота при комнатной температуре в течение 30 минут. К реакционной жидкости добавляли 4-бромбензолсульфонилхлорид (5,70 г, 22,3 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 60°C в течение 2 часов. К реакционной жидкости добавляли насыщенный водный раствор гидрокарбоната натрия, и полученную смесь экстрагировали этилацетатом (50 мл × 3). Экстракты объединяли, промывали насыщенным солевым раствором и сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=5:1-1:1) с получением указанного в заголовке соединения (6,29 г, 69%).
1
3
H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ 7,75 (д, J=7,8 Гц, 2H), 7,50 (д, J=7,8 Гц, 2H), 3,90 (с, 3H)
[0155]
(Стадия 3) Метил 4-[[4-(2-этилпиримидин-5-ил)фенил]-сульфониламино]-2,3,5,6-тетрафторбензоат
2
Метил 4-[(4-бромфенил)сульфониламино]-2,3,5,6-тетрафтор-бензоат <смотрите (стадию 2)> (587 мг, 1,33 ммоль) и 2-этил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пиримидин (311 мг, 1,33 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (25 мл) и воде (4,0 мл), добавляли карбонат натрия (421 мг, 3,98 ммоль) и Pd(dppf)Cl (194 мг, 0,266 ммоль), и полученную смесь перемешивали в присутствии газообразного азота при 100°C в течение 4 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, и затем полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=5:1-1:1) с получением указанного в заголовке соединения (541 мг, 87%).
1
3
H ЯМР (CDCl, 400 МГц): δ 8,91 (с, 2H), 8,03 (д, J=7,8 Гц, 2H), 7,73 (д, J=7,8 Гц, 2H), 3,98 (с, 3H), 3,08 (кв, J=8,0 Гц, 2H), 1,42 (т, J=8,0 Гц, 3H)
[0156]
(Стадия 4) 4-[[4-(2-Этилпиримидин-5-ил)фенил]сульфонил-амино]-2,3,5,6-тетрафторбензойная кислота (M-23)
Метил 4-[[4-(2-этилпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]-2,3,5,6-тетрафторбензоат <смотрите (стадию 3)> (541 мг, 1,15 ммоль) растворяли в метаноле (5,0 мл), добавляли 2 N водный раствор гидроксида лития (1,0 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Завершение реакции контролировали методом ТСХ, и затем добавляли 4 N хлористоводородную кислоту для доведения рН до 4,0. Осажденное твердое вещество фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (260 мг, 49%) в виде белого твердого вещества.
1
+
6
H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц): δ 9,31 (с, 2H), 8,11 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,92 (д, J=8,0 Гц, 2H), 3,04 (кв, J=8,0 Гц, 2H), 1,38 (т, J=8,0 Гц, 3H); MS (ESI) m/z 456 (M+H)
[0157]
Пример 24: Синтез M-24
(Стадия 1) Метил 4-[(4-бром-2-метилфенил)сульфониламино]-2-фторбензоат
Метил 4-амино-2-фторбензоат (2,00 г, 12,0 ммоль) и 4-бром-2-метилбензолсульфонилхлорид (4,70 г, 17,0 ммоль) растворяли в метиленхлориде (50 мл), добавляли пиридин (10 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении, затем полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=4:1) с получением указанного в заголовке соединения (3,28 г, 69%).
+
MS (ESI) m/z 402, 404 (M+H)
[0158]
(Стадия 2) Метил 2-фтор-4-[[2-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]сульфониламино]бензоат
Метил 4-[(4-бром-2-метил-фенил)сульфониламино]-2-фтор-бензоат <смотрите (стадию 1)> (2,30 г, 5,70 ммоль) и бис(пинаколато)диборан (1,70 г, 6,90 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (30 мл), добавляли [1,1'-бис(дифенилфосфино)-ферроцен]дихлорпалладий(II) (22 мг, 0,030 ммоль) и ацетат калия (1,70 г, 17,0 ммоль), и полученную смесь перемешивали в присутствии газообразного азота при 85°C в течение 12 часов. Реакционную жидкость охлаждали до комнатной температуры и затем фильтровали, и фильтрат экстрагировали метиленхлоридом (30 мл × 4). Экстракты объединяли и концентрировали при пониженном давлении, полученный остаток разбавляли водой, осажденное твердое вещество отфильтровывали, промывали смешанным растворителем (петролейный эфир:метиленхлорид=5:2), и сушили с получением указанного в заголовке соединения (1,90 г, 74%) в виде коричневого твердого вещества.
1
6
H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц): δ 8,00 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,95 (с, 1H), 7,92 (с, 1H), 7,76 (т, J=8,8 Гц, 1H), 7,68-7,68 (м, 1H), 6,97 (дд, J=8,8, 2,0 Гц, 1H), 6,90 (дд, J=8,8, 2,0 Гц, 1H), 3,79 (с, 3H), 2,60 (с, 3H), 1,28 (с, 12H)
[0159]
(Стадия 3) [4-[(3-Фтор-4-метоксикарбонилфенил)сульфамоил]-3-метил-фенил]бороновая кислота
Метил 2-фтор-4-[[2-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенил]сульфониламино]бензоат <смотрите (стадию 2)> (1,50 г, 3,30 ммоль) растворяли в ацетоне (15 мл), добавляли периодат натрия (1,40 г, 6,60 ммоль), ацетат аммония (500 мг, 6,60 ммоль) и воду (6,0 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 48 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, затем разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (500 мл × 3). Экстракты объединяли, промывали насыщенным солевым раствором и сушили над безводным сульфатом натрия, и затем растворитель удаляли при пониженном давлении. Полученный остаток промывали смешанным растворителем (петролейный эфир:этилацетат=1:10) и сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (1,00 г, 82%).
1
6
H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц): δ 8,70 (д, J=4,4 Гц, 1H), 7,76 (т, J=8,4 Гц, 1H), 7,65-7,57 (м, 2H), 6,93-6,87 (м, 2H), 3,80 (с, 3H), 2,64 (с, 3H)
[0160]
(Стадия 4) Метил 2-фтор-4-[[2-метил-4-(2-пиридил)фенил]-сульфониламино]бензоат
2
[4-[(3-Фтор-4-метоксикарбонилфенил)сульфамоил]-3-метил-фенил]бороновую кислоту <смотрите (стадию 3)> (800 мг, 2,18 ммоль) и 2-бромпиридин (680 мг, 4,35 ммоль) растворяли в диоксане (20 мл) и воде (5,0 мл), добавляли карбонат натрия (530 мг, 5,00 ммоль) и Pd(dppf)Cl (162 мг, 0,200 ммоль), и полученную смесь перемешивали в присутствии азота при 110°C в течение 4 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, и затем полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (н-гексан:этилацетат=10:1-1:1) с получением указанного в заголовке соединения (530 мг, 61%).
1
3
H ЯМР (CDOD, 400 МГц): δ 8,70 (д, J=8,0 Гц, 1H), 8,12-8,03 (м, 3H), 8,00 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,96-7,90 (м, 2H), 7,76 (т, J=8,4 Гц, 1H), 7,44-7,41(м, 1H), 7,02-6,91 (м, 2H), 3,76 (с, 3H), 2,69 (с, 3H)
[0161]
(Стадия 5) 2-Фтор-4-[[2-метил-4-(2-пиридил)фенил]сульфонил-амино]бензойная кислота (M-24)
Метил 2-фтор-4-[[2-метил-4-(2-пиридил)фенил]сульфонил-амино]бензоат <смотрите (стадию 4)> (630 мг, 1,57 ммоль) растворяли в метаноле (10 мл), добавляли 6 N водный раствор гидроксида натрия (5,0 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Завершение реакции контролировали методом ТСХ, и затем добавляли 4 N хлористоводородную кислоту для доведения рН до 4,0. Осажденное твердое вещество фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения (560 мг, 92%) в виде белого твердого вещества.
1
3
H ЯМР (CDOD, 400 МГц): δ 8,67 (д, J=4,8 Гц, 1H), 8,18 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,99-7,96 (м, 4H), 7,81 (т, J=8,4 Гц, 1H), 7,47-7,45 (м, 1H), 6,99-6,94 (м, 2H), 2,77 (с, 3H); MS (ESI) m/z 385 (M-1)
[0162]
Пример 25: Синтез M-25
(Стадия 1) 4-({[3,5-Дифтор-4-(метоксикарбонил)фенил]амино}-сульфонил)бензойная кислота
4-(Хлорсульфонил)бензойную кислоту (25,0 г, 113 ммоль) и метил 4-амино-2,6-дифторбензоат (19,0 г, 101 ммоль) растворяли в метиленхлориде (500 мл), добавляли пиридин (25,0 мл, 285 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении, полученный остаток разбавляли водой, добавляли 6 N водный раствор хлористоводородной кислоты для доведения рН до 1,0, и осажденное твердое вещество фильтровали и промывали водой. Полученное твердое вещество опять суспендировали в воде, промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия и затем экстрагировали этилацетатом (100 мл × 2). Добавляли 6 N водный раствор хлористоводородной кислоты для доведения рН полученного водного слоя до 6,0, и добавляли этилацетат (100 мл × 2) для проведения экстракции. Экстракты объединяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, и затем растворитель удаляли с получением указанного в заголовке соединения (15,0 г, 36%).
1
+
H ЯМР (d-DMSO, 400 МГц): δ 11,50 (с, 1H), 8,14 (д, J=8,4 Гц, 2H), 8,01 (д, J=8,4 Гц, 2H), 6,67 (д, J=10,4 Гц, 2H), 3,87 (с, 3H); MS (ESI) m/z 372 (M+H)
[0163]
(Стадия 2) 4-[({4-[(Циклопропиламино)карбонил]фенил}-сульфонил)амино]-2,6-дифторбензойная кислота (M-25)
4-({[3,5-Дифтор-4-(метоксикарбонил)фенил]амино}сульфонил)-бензойную кислоту <смотрите (стадию 1)> (1,5 г, 4,0 ммоль) растворяли в тионилхлориде (40 мл), и полученную смесь перемешивали при 75°C в течение 4 часов. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в метиленхлориде (30 мл), добавляли циклопропиламин (680 мг, 12,0 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат=2:1-1:1). Часть полученного соединения (740 мг, 1,8 ммоль) растворяли в метаноле (15 мл), добавляли 3 N водный раствор гидроксида натрия (5,0 мл), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Добавляли 6 N водный раствор хлористоводородной кислоты для доведения рН до 4,0, и осажденное твердое вещество фильтровали и затем сушили при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (670 мг, 51% за две стадии) в виде белого твердого вещества.
1
+
H ЯМР (d-DMSO, 400 МГц): δ 7,79-7,72 (м, 4H), 6,62 (д, J=10 Гц, 2H), 2,67-2,65 (м, 1H), 0,63-0,59 (м, 2H), 0,45-0,43 (м, 2H); MS (ESI) m/z 397 (M+H)
[0164]
Следующие соединения (примеры 26-47) синтезировали, используя способы, аналогичные способу в примере 28 (стадия 1), (стадия 2), применяемого для синтеза промежуточных соединений, обозначаемых как M-1 - M-25, и аналогичных соединений.
Пример 26: Синтез A-1
(Стадия 1) (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[4-[2-(4-пиперидил)-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]-пропановая кислота (A-1)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,99 (с, 1H), 9,16 (с, 2H), 9,00 (с, 1H), 8,75 (дд, J=7,8, 3,8 Гц, 1H), 8,57 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,47 (д, J=2,5 Гц, 1H), 8,07-7,94 (м, 4H), 7,90 (д, J=5,0 Гц, 1H), 7,75 (дд, J=8,2, 2,5 Гц, 1H), 7,47 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,38 (дд, J=10,3, 6,4 Гц, 1H), 7,29 (дд, J=11,4, 6,3 Гц, 1H), 4,89 (тд, J=8,2, 4,9 Гц, 1H), 3,61 (с, 3H), 3,42-2,99 (м, 8H), 2,20-2,12 (м, 2H), 2,05-1,92 (м, 2H); MS (ESI) m/z 798,26 (M+H)
[0165]
Пример 27: Синтез A-2 и B-2
(Стадия 1) (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]-пропионовая кислота (A-2)
2
3
Метил 3-[5-(1-метил-2,4-диоксо-1,4-дигидропиридо[3,4-d]-пиримидин-3(2H)-ил)пиридин-2-ил]-L-аланинат (метиловый эфир соединения M-9) <синтезированный способом, аналогичным способу примера 9> (67,0 мг, 0,190 ммоль) и 2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]-бензойную кислоту (M-11) <смотрите пример 11 (стадия 4)> (75,0 мг, 0,160 ммоль) суспендировали в метиленхлориде (2,0 мл), добавляли HATU (91,0 мг, 0,240 ммоль) и диизопропилэтиламине (0,167 мл, 0,960 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, затем добавляли 4 N раствор хлористоводородной кислоты/диоксана (3,0 мл) и воду (1,0 мл), и полученную смесь перемешивали при 60°C в течение 2 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении и затем очищали методом ВЭЖХ с обращенной фазой (система HO/CHCN, содержащая 0,1% TFA) с получением TFA-соли указанного в заголовке соединения (30,7 мг, 21%).
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,13 (с, 2H), 9,00 (с, 1H), 8,73 (дд, J=7,9, 3,8 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,46 (д, J=2,4 Гц, 1H), 8,05-7,99 (м, 2H), 7,98-7,93 (м, 2H), 7,90 (д, J=4,9 Гц, 1H), 7,73 (дд, J=8,2, 2,5 Гц, 1H), 7,45 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,38 (дд, J=10,4, 6,4 Гц, 1H), 7,28 (дд, J=11,4, 6,3 Гц, 1H), 4,88 (тд, J=8,2, 5,0 Гц, 1H), 3,95 (ддд, J=11,3, 4,4, 2,1 Гц, 2H), 3,61 (с, 3H), 3,48 (тд, J=11,6, 2,5 Гц, 2H), 3,42-3,23 (м, 2H), 3,13 (тт, J=11,2, 4,2 Гц, 1H), 1,97-1,75 (м, 4H); MS (ESI) m/z 799,51 (M+H)
[0166]
(Стадия 2) Циклогексил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетра-гидропиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]пропаноат (B-2)
2
3
Циклогексил 3-[5-(1-метил-2,4-диоксо-1,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-3(2H)-ил)пиридин-2-ил]-L-аланинат (M-9) <смотрите пример 9 (стадия 4)> (107 мг, 0,250 ммоль) и 2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]-бензойную кислоту (M-11) <смотрите пример 11 (стадия 4)> (100 мг, 0,210 ммоль) суспендировали в метиленхлориде (3,0 мл), добавляли HATU (120 мг, 0,320 ммоль) и диизопропилэтиламине (0,219 мл, 1,26 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении и затем очищали методом ВЭЖХ с обращенной фазой (система HO/CHCN, содержащая 0,1% TFA) с получением TFA-соли указанного в заголовке соединения (48,7 мг, 21%).
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,99 (с, 1H), 9,14 (с, 2H), 9,00 (с, 1H), 8,85 (дд, J=7,6, 3,4 Гц, 1H), 8,57 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,45 (д, J=2,4 Гц, 1H), 8,05-8,00 (м, 2H), 7,99-7,94 (м, 2H), 7,90 (д, J=4,9 Гц, 1H), 7,73 (дд, J=8,2, 2,5 Гц, 1H), 7,46 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,38 (дд, J=10,3, 6,3 Гц, 1H), 7,29 (дд, J=11,3, 6,3 Гц, 1H), 4,91 (тд, J=7,6, 5,9 Гц, 1H), 4,68 (тт, J=8,2, 3,7 Гц, 1H), 4,01-3,90 (м, 2H), 3,61 (с, 3H), 3,38-3,25 (м, 2H), 3,19-3,07 (м, 1H), 1,97-1,77 (м, 4H), 1,75-1,52 (м, 4H), 1,50-1,17 (м, 7H); MS (ESI) m/z 881,56 (M+H)
[0167]
Пример 28: Синтез A-3 и B-3
(Стадия 1) (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]-пропановая кислота (A-3)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,99 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 9,00 (с, 1H), 8,73 (дд, J=7,8, 3,8 Гц, 1H), 8,57 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,46 (д, J=2,4 Гц, 1H), 8,07-8,02 (м, 2H), 7,99-7,95 (м, 2H), 7,90 (д, J=4,9 Гц, 1H), 7,73 (дд, J=8,2, 2,5 Гц, 1H), 7,46 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,38 (дд, J=10,4, 6,4 Гц, 1H), 7,28 (дд, J=11,3, 6,2 Гц, 1H), 4,93-4,84 (м, 1H), 4,63 (с, 2H), 3,61 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,38-3,23 (м, 2H); MS (ESI) m/z 759,46 (M+H)
[0168]
(Стадия 2) Циклогексил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]пропаноат (B-3)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,00 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 9,00 (с, 1H), 8,85 (дд, J=7,6, 3,4 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,45 (д, J=2,4 Гц, 1H), 8,08-8,02 (м, 2H), 8,01-7,95 (м, 2H), 7,90 (д, J=4,9 Гц, 1H), 7,73 (дд, J=8,2, 2,5 Гц, 1H), 7,46 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,38 (дд, J=10,3, 6,3 Гц, 1H), 7,29 (дд, J=11,3, 6,3 Гц, 1H), 4,97-4,87 (м, 1H), 4,63 (с, 3H), 3,61 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,38-3,25 (м, 2H), 1,77-1,51 (м, 4H), 1,46-1,18 (м, 6H); MS (ESI) m/z 841,55 (M+H)
[0169]
Пример 29: Синтез A-4 и B-4
(Стадия 1) (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[4-[4-(метоксиметил)-триазол-1-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]пропановая кислота (A-4)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,97 (с, 1H), 9,00 (д, J=0,8 Гц, 1H), 8,93 (с, 1H), 8,74 (дд, J=7,9, 3,7 Гц, 1H), 8,58 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,49-8,47 (м, 1H), 8,20-8,11 (м, 2H), 8,05-8,00 (м, 2H), 7,90 (дд, J=4,9, 0,7 Гц, 1H), 7,76 (дд, J=8,2, 2,0 Гц, 1H), 7,48 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,37 (дд, J=10,3, 6,4 Гц, 1H), 7,27 (дд, J=11,2, 6,2 Гц, 1H), 4,94-4,85 (м, 1H), 4,54 (с, 2H), 3,61 (с, 3H), 3,43-3,23 (м, 5H); MS (ESI) m/z 748,46 (M+H)
[0170]
(Стадия 2) Циклогексил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[4-(метоксиметил)триазол-1-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]пропаноат (B-4)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,00 (с, 1H), 8,93 (с, 1H), 8,86 (дд, J=7,7, 3,3 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,46 (д, J=2,4 Гц, 1H), 8,21-8,12 (м, 2H), 8,07-7,99 (м, 2H), 7,90 (д, J=4,9 Гц, 1H), 7,74 (дд, J=8,2, 2,5 Гц, 1H), 7,47 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,37 (дд, J=10,3, 6,3 Гц, 1H), 7,28 (дд, J=11,1, 6,2 Гц, 1H), 4,97-4,87 (м, 1H), 4,74-4,63 (м, 1H), 4,55 (с, 2H), 3,61 (с, 3H), 3,38-3,28 (м, 5H), 1,79-1,52 (м, 4H), 1,50-1,08 (м, 6H); MS (ESI) m/z 830,63 (M+H)
[0171]
Пример 30: Синтез A-5 и B-5
(Стадия 1) (2S)-2-[[4-[[4-(1-Аллил-2-оксопиримидин-5-ил)-фенил]сульфониламино]-2,5-дифтор-бензоил]амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]пропановая кислота (A-5)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,91-10,88 (м, 1H), 9,05 (д, J=3,3 Гц, 1H), 9,00 (д, J=0,7 Гц, 1H), 8,78-8,72 (м, 2H), 8,58 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,51-8,47 (м, 1H), 7,93-7,84 (м, 5H), 7,79-7,74 (м, 1H), 7,49 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,37 (дд, J=10,3, 6,4 Гц, 1H), 7,26 (дд, J=11,4, 6,3 Гц, 1H), 6,07-5,95 (м, 1H), 5,27-5,19 (м, 2H), 4,93-4,86 (м, 1H), 4,58-4,53 (м, 2H), 3,62 (с, 3H), 3,42-3,26 (м, 2H); MS (ESI) m/z 771,58 (M+H)
[0172]
(Стадия 2) Циклогексил (2S)-2-[[4-[[4-(1-аллил-2-оксо-пиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]-2,5-дифторбензоил]амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]-пропаноат (B-5)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,90 (с, 1H), 9,04 (д, J=3,4 Гц, 1H), 9,00 (с, 1H), 8,85 (дд, J=7,6, 3,4 Гц, 1H), 8,72 (д, J=3,4 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,45 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,94-7,83 (м, 5H), 7,73 (дд, J=8,2, 2,5 Гц, 1H), 7,46 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,37 (дд, J=10,3, 6,3 Гц, 1H), 7,26 (дд, J=11,3, 6,3 Гц, 1H), 6,07-5,94 (м, 1H), 5,27-5,17 (м, 2H), 4,96-4,87 (м, 1H), 4,73-4,63 (м, 1H), 4,57-4,50 (м, 2H), 3,61 (с, 3H), 3,33-3,28 (м, 2H), 1,76-1,52 (м, 4H), 1,46-1,17 (м, 6H); MS (ESI) m/z 853,63 (M+H)
[0173]
Пример 31: Синтез A-6 и B-6
(Стадия 1) (2S)-2-[[4-[[4-[2-(Этоксиметил)пиримидин-5-ил]-фенил]сульфониламино]-2,5-дифторбензоил]амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]пропановая кислота (A-6)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,99 (с, 1H), 9,17 (с, 2H), 9,00 (с, 1H), 8,74 (дд, J=7,9, 3,8 Гц, 1H), 8,58 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,48 (дд, J=2,6, 1,1 Гц, 1H), 8,08-8,02 (м, 2H), 8,00-7,95 (м, 2H), 7,90 (дд, J=5,0, 0,7 Гц, 1H), 7,76 (ддд, J=9,0, 3,3, 1,9 Гц, 1H), 7,48 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,38 (дд, J=10,4, 6,4 Гц, 1H), 7,29 (дд, J=11,3, 6,2 Гц, 1H), 4,89 (тд, J=8,2, 4,9 Гц, 1H), 4,66 (с, 2H), 3,66-3,55 (м, 5H), 3,43-3,25 (м, 2H), 1,17 (т, J=7,0 Гц, 3H); MS (ESI) m/z 773,58 (M+H)
[0174]
(Стадия 2) Циклогексил (2S)-2-[[4-[[4-[2-(этоксиметил)-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]-2,5-дифторбензоил]амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]-пропаноат (B-6)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,00 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 9,00 (с, 1H), 8,86 (дд, J=7,6, 3,4 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,46 (д, J=2,4 Гц, 1H), 8,09-8,02 (м, 2H), 8,00-7,96 (м, 2H), 7,91 (дд, J=5,0, 0,7 Гц, 1H), 7,79-7,71 (м, 1H), 7,47 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,38 (дд, J=10,3, 6,3 Гц, 1H), 7,29 (дд, J=11,3, 6,3 Гц, 1H), 4,98-4,87 (м, 1H), 4,66 (с, 3H), 3,65-3,57 (м, 5H), 3,39-3,24 (м, 2H), 1,80-1,52 (м, 4H), 1,50-1,21 (м, 6H), 1,17 (т, J=7,0 Гц, 3H); MS (ESI) m/z 855,67 (M+H)
[0175]
Пример 32: Синтез A-7 и B-7
(Стадия 1) (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[4-[2-[(изопропиламино)-метил]пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]-пропановая кислота (A-7)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,03 (с, 1H), 9,32 (с, 2H), 9,14 (с, 2H), 9,00 (с, 1H), 8,75 (дд, J=7,8, 4,0 Гц, 1H), 8,58 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,46 (д, J=2,5 Гц, 1H), 8,13-8,08 (м, 2H), 8,02-7,99 (м, 2H), 7,90 (д, J=5,0 Гц, 1H), 7,73 (дд, J=8,2, 2,5 Гц, 1H), 7,45 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,39 (дд, J=10,3, 6,4 Гц, 1H), 7,31 (дд, J=11,4, 6,3 Гц, 1H), 4,89 (тд, J=8,1, 5,1 Гц, 1H), 4,54 (т, J=6,2 Гц, 2H), 3,61 (с, 3H), 3,47 (дкв, J=11,6, 5,8, 5,4 Гц, 1H), 3,40-3,24 (м, 2H), 1,32 (д, J=6,5 Гц, 6H); MS (ESI) m/z 786,74 (M+H)
[0176]
(Стадия 2) Циклогексил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-[(изо-пропиламино)метил]пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]пропаноат (B-7)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,04 (с, 1H), 9,32 (с, 2H), 9,12 (д, J=6,9 Гц, 2H), 9,00 (д, J=0,7 Гц, 1H), 8,87 (дд, J=7,6, 3,5 Гц, 1H), 8,58 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,45 (дд, J=2,4, 0,7 Гц, 1H), 8,14-8,07 (м, 2H), 8,03-7,99 (м, 2H), 7,91 (дд, J=5,0, 0,7 Гц, 1H), 7,73 (дд, J=8,2, 2,5 Гц, 1H), 7,49-7,44 (м, 1H), 7,40 (дд, J=10,3, 6,4 Гц, 1H), 7,32 (дд, J=11,3, 6,3 Гц, 1H), 4,96-4,88 (м, 1H), 4,72-4,63 (м, 1H), 4,57-4,51 (м, 2H), 3,61 (с, 3H), 3,53-3,42 (м, 1H), 3,38-3,24 (м, 2H), 1,75-1,52 (м, 4H), 1,46-1,21 (м, 12H); MS (ESI) m/z 868,71 (M+H)
[0177]
Пример 33: Синтез A-8 и B-8
(Стадия 1) (2S)-2-[[4-[[4-[2-(2-Диметиламиноэтил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]-2,5-дифтор-бензоил]амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]-пропановая кислота (A-8)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,00 (с, 1H), 9,44 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 9,00 (с, 1H), 8,74 (дд, J=7,8, 3,9 Гц, 1H), 8,58 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,45 (дд, J=2,4, 0,7 Гц, 1H), 8,07-8,02 (м, 2H), 8,00-7,95 (м, 2H), 7,90 (дд, J=4,9, 0,8 Гц, 1H), 7,72 (дд, J=8,2, 2,5 Гц, 1H), 7,45 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,39 (дд, J=10,4, 6,4 Гц, 1H), 7,29 (дд, J=11,4, 6,3 Гц, 1H), 4,92-4,86 (м, 1H), 3,61 (с, 5H), 3,40 (дд, J=8,2, 6,9 Гц, 2H), 3,38-3,24 (м, 2H), 2,88 (д, J=4,4 Гц, 6H); MS (ESI) m/z 786,75 (M+H)
[0178]
(Стадия 2) Циклогексил (2S)-2-[[4-[[4-[2-(2-диметиламино-этил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]-2,5-дифторбензоил]-амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]пропаноат (B-8)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,01 (с, 1H), 9,31 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 9,00 (с, 1H), 8,87 (дд, J=7,6, 3,4 Гц, 1H), 8,58 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,47 (д, J=2,4 Гц, 1H), 8,08-8,02 (м, 2H), 8,01-7,96 (м, 2H), 7,91 (дд, J=5,0, 0,8 Гц, 1H), 7,76 (дд, J=8,2, 2,5 Гц, 1H), 7,48 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,39 (дд, J=10,3, 6,4 Гц, 1H), 7,30 (дд, J=11,3, 6,3 Гц, 1H), 4,98-4,86 (м, 1H), 4,73-4,64 (м, 1H), 3,65-3,57 (м, 5H), 3,47-3,25 (м, 4H), 2,88 (д, J=4,9 Гц, 6H), 1,76-1,52 (м, 4H), 1,48-1,16 (м, 6H); MS (ESI) m/z 868,71 (M+H)
[0179]
Пример 34: Синтез A-9 и B-9
(Стадия 1) (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[5-(2-тетрагидропиран-4-ил-4-пиридил)-2-пиридил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]-пропановая кислота (A-9)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,15 (с, 1H), 9,25 (д, J=2,2 Гц, 1H), 9,00 (с, 1H), 8,75 (дд, J=7,2, 3,9 Гц, 2H), 8,63-8,55 (м, 2H), 8,48 (д, J=2,4 Гц, 1H), 8,18 (д, J=8,3 Гц, 1H), 8,07-7,87 (м, 3H), 7,78-7,74 (м, 1H), 7,52-7,37 (м, 3H), 4,95-4,86 (м, 1H), 4,02-3,95 (м, 2H), 3,61 (с, 3H), 3,51-3,42 (м, 2H), 3,42-3,26 (м, 2H), 3,17-3,08 (м, 1H), 1,95-1,80 (м, 4H); MS (ESI) m/z 799,70 (M+H)
[0180]
(Стадия 2) Циклогексил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[5-(2-тетра-гидропиран-4-ил-4-пиридил)-2-пиридил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]пропаноат (B-9)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,15 (с, 1H), 9,24 (дд, J=2,4, 0,8 Гц, 1H), 9,00 (с, 1H), 8,87 (дд, J=7,6, 3,5 Гц, 1H), 8,74 (д, J=5,4 Гц, 1H), 8,63-8,55 (м, 2H), 8,47 (дд, J=2,4, 0,7 Гц, 1H), 8,17 (дд, J=8,3, 0,8 Гц, 1H), 7,97 (с, 1H), 7,89 (ддд, J=7,1, 5,2, 1,2 Гц, 2H), 7,75 (дд, J=8,2, 2,5 Гц, 1H), 7,51-7,37 (м, 3H), 4,93 (тд, J=7,6, 5,9 Гц, 1H), 4,68 (тд, J=8,2, 3,9 Гц, 1H), 3,98 (ддд, J=11,4, 4,2, 2,0 Гц, 2H), 3,61 (с, 3H), 3,46 (тд, J=11,4, 2,8 Гц, 2H), 3,40-3,26 (м, 2H), 3,16-3,05 (м, 1H), 1,97-1,78 (м, 4H), 1,76-1,53 (м, 4H), 1,33 (дддт, J=34,0, 24,1, 17,5, 9,8 Гц, 6H); MS (ESI) m/z 881,71 (M+H)
[0181]
Пример 35: Синтез A-10 и B-10
(Стадия 1) (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[4-[2-(изопропоксиметил)-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]-пропановая кислота (A-10)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,00 (с, 1H), 9,17 (с, 2H), 9,00 (д, J=0,8 Гц, 1H), 8,74 (дд, J=7,8, 3,8 Гц, 1H), 8,58 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,49 (дд, J=2,4, 0,7 Гц, 1H), 8,07-8,03 (м, 2H), 8,00-7,96 (м, 2H), 7,91 (дд, J=4,9, 0,7 Гц, 1H), 7,78 (дд, J=8,2, 2,5 Гц, 1H), 7,49 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,39 (дд, J=10,4, 6,4 Гц, 1H), 7,29 (дд, J=11,4, 6,3 Гц, 1H), 4,90 (тд, J=8,3, 4,9 Гц, 1H), 4,65 (с, 2H), 3,83-3,72 (м, 1H), 3,61 (с, 3H), 3,43-3,25 (м, 2H), 1,16 (д, J=6,1 Гц, 6H); MS (ESI) m/z 787,62 (M+H)
[0182]
(Стадия 2) Циклогексил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(изопропоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]пропаноат (B-10)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,00 (с, 1H), 9,17 (с, 2H), 9,00 (с, 1H), 8,86 (дд, J=7,6, 3,4 Гц, 1H), 8,57 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,47 (дд, J=2,5, 0,7 Гц, 1H), 8,08-8,02 (м, 2H), 8,01-7,94 (м, 2H), 7,91 (дд, J=5,0, 0,8 Гц, 1H), 7,75 (дд, J=8,2, 2,5 Гц, 1H), 7,47 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,38 (дд, J=10,3, 6,3 Гц, 1H), 7,29 (дд, J=11,3, 6,3 Гц, 1H), 4,97-4,88 (м, 1H), 4,72-4,62 (м, 3H), 3,77 (гепт, J=6,1 Гц, 1H), 3,61 (с, 3H), 3,39-3,25 (м, 2H), 1,76-1,53 (м, 4H), 1,48-1,19 (м, 6H), 1,16 (д, J=6,1 Гц, 6H); MS (ESI) m/z 869,67 (M+H)
[0183]
Пример 36: Синтез A-11
(Стадия 1) (2S)-2-[[4-[[4-[2-(Азетидин-1-ил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]-2,5-дифторбензоил]амино]-3-[4-(1,3,4-триметил-2,6-диоксо-пиримидин-5-ил)фенил]пропановая кислота (A-11)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,86 (с, 1H), 8,75 (с, 2H), 8,52 (дд, J=8,0, 2,7 Гц, 1H), 7,87 (с, 4H), 7,30-7,20 (м, 4H), 7,10-7,05 (м, 2H), 4,60 (ддд, J=9,9, 7,9, 4,7 Гц, 1H), 4,14-4,06 (м, 4H), 3,38 (с, 3H), 3,20 (с, 4H), 3,00 (дд, J=13,9, 9,9 Гц, 1H), 2,40-2,29 (м, 2H), 2,04 (с, 3H); MS (ESI) m/z 746,66 (M+H)
[0184]
Пример 37: Синтез A-12
(Стадия 1) (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[5-(4-метилтриазол-1-ил)-2-пиридил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[4-(1,3,4-триметил-2,6-диоксо-пиримидин-5-ил)фенил]пропановая кислота (A-12)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,10 (с, 1H), 9,28 (дд, J=2,5, 0,7 Гц, 1H), 8,75 (д, J=0,9 Гц, 1H), 8,59 (дд, J=8,6, 2,5 Гц, 1H), 8,55 (дд, J=8,0, 2,6 Гц, 1H), 8,22 (дд, J=8,6, 0,7 Гц, 1H), 7,36 (дд, J=11,1, 6,3 Гц, 1H), 7,31-7,23 (м, 3H), 7,11-7,05 (м, 2H), 4,62 (ддд, J=9,9, 7,9, 4,7 Гц, 1H), 3,39 (с, 3H), 3,20 (с, 4H), 3,01 (дд, J=13,9, 9,8 Гц, 1H), 2,36 (д, J=0,9 Гц, 3H), 2,06 (с, 3H); MS (ESI) m/z 695,56 (M+H)
[0185]
Пример 38: Синтез A-13
(Стадия 1) (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-(2-фурилсульфониламино)-бензоил]амино]-3-[4-(1,3,4-триметил-2,6-диоксо-пиримидин-5-ил)-фенил]пропановая кислота (A-13)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,10 (с, 1H), 8,61 (дд, J=8,0, 2,4 Гц, 1H), 8,02 (дд, J=1,8, 0,9 Гц, 1H), 7,31-7,25 (м, 3H), 7,24-7,16 (м, 2H), 7,11-7,07 (м, 2H), 6,68 (дд, J=3,6, 1,8 Гц, 1H), 4,62 (ддд, J=9,9, 7,9, 4,7 Гц, 1H), 3,40 (с, 3H), 3,21 (с, 4H), 3,02 (дд, J=13,9, 9,9 Гц, 1H), 2,07 (с, 3H); MS (ESI) m/z 603,49 (M+H)
[0186]
Пример 39: Синтез A-14
(Стадия 1) (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[4-[1-метил-6-(метиламинометил)-2,4-диоксо-хиназолин-3-ил]фенил]-пропановая кислота (A-14)
+
MS (ESI) m/z 800,99 (M+H)
[0187]
Пример 40: Синтез A-15
(Стадия 1) (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[4-[2-(изопропоксиметил)-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[4-(1,3,4-триметил-2,6-диоксо-пиримидин-5-ил)фенил]пропановая кислота (A-15)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,96 (с, 1H), 9,17 (с, 2H), 8,54 (дд, J=7,9, 2,6 Гц, 1H), 8,07-8,03 (м, 2H), 7,98-7,94 (м, 2H), 7,30-7,22 (м, 4H), 7,09-7,05 (м, 2H), 4,68-4,57 (м, 3H), 3,78 (гепт, J=6,1 Гц, 1H), 3,38 (с, 3H), 3,20 (с, 4H), 3,00 (дд, J=13,9, 9,9 Гц, 1H), 2,05 (с, 3H), 1,16 (д, J=6,1 Гц, 6H); MS (ESI) m/z763,58 (M+H)
[0188]
Пример 41: Синтез A-16
(Стадия 1) (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[4-[2-(изопропоксиметил)-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[5-(6-метокси-1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]пропановая кислота (A-16)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,16 (с, 2H), 8,73 (дд, J=7,9, 3,8 Гц, 1H), 8,56 (д, J=0,8 Гц, 1H), 8,46 (дд, J=2,4, 0,7 Гц, 1H), 8,06-8,01 (м, 2H), 7,99-7,95 (м, 2H), 7,73 (дд, J=8,2, 2,5 Гц, 1H), 7,45 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,38 (дд, J=10,4, 6,4 Гц, 1H), 7,32-7,25 (м, 2H), 4,88 (тд, J=8,2, 5,0 Гц, 1H), 4,65 (с, 2H), 3,93 (с, 3H), 3,76 (дкв, J=12,1, 6,1 Гц, 1H), 3,55 (с, 3H), 3,40-3,24 (м, 2H), 1,15 (д, J=6,1 Гц, 6H); MS (ESI) m/z 817,59 (M+H)
[0189]
Пример 42: Синтез A-17
(Стадия 1) (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[4-[2-(изопропоксиметил)-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[4-(3-метил-2,6-диоксо-пиримидин-1-ил)фенил]пропановая кислота (A-17)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,96 (с, 1H), 9,17 (с, 2H), 8,59 (дд, J=7,8, 2,6 Гц, 1H), 8,07-8,02 (м, 2H), 7,99-7,95 (м, 2H), 7,74 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,35-7,23 (м, 4H), 7,12-7,06 (м, 2H), 5,73 (дд, J=7,9, 2,2 Гц, 1H), 4,66 (с, 2H), 4,63-4,55 (м, 1H), 3,83-3,72 (м, 1H), 3,29 (с, 3H), 3,19 (дд, J=14,1, 4,6 Гц, 1H), 3,04 (дд, J=14,1, 9,8 Гц, 1H), 1,16 (д, J=6,1 Гц, 6H); MS (ESI) m/z 735,50 (M+H)
[0190]
Пример 43: Синтез A-18
(Стадия 1) (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[4-[2-(изопропоксиметил)-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксо-пиримидо[4,5-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]-пропановая кислота (A-18)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,99 (с, 1H), 9,28 (с, 1H), 9,19 (с, 1H), 9,16 (с, 2H), 8,73 (дд, J=7,9, 3,7 Гц, 1H), 8,46 (д, J=2,5 Гц, 1H), 8,07-8,02 (м, 2H), 7,99-7,95 (м, 2H), 7,73 (дд, J=8,2, 2,5 Гц, 1H), 7,47 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,37 (дд, J=10,4, 6,4 Гц, 1H), 7,28 (дд, J=11,4, 6,3 Гц, 1H), 4,93-4,85 (м, 1H), 4,65 (с, 2H), 3,77 (гепт, J=6,1 Гц, 1H), 3,55 (с, 3H), 3,41-3,23 (м, 2H), 1,15 (д, J=6,1 Гц, 6H); MS (ESI) m/z 788,63 (M+H)
[0191]
Пример 44: Синтез A-19
(Стадия 1) (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[4-[2-(изопропоксиметил)-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[4-[3-метил-2,6-диоксо-4-(трифторметил)пиримидин-1-ил]фенил]пропановая кислота (A-19)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,96 (с, 1H), 9,17 (с, 2H), 8,59 (дд, J=7,9, 2,5 Гц, 1H), 8,07-8,02 (м, 2H), 7,99-7,94 (м, 2H), 7,37-7,32 (м, 2H), 7,32-7,23 (м, 2H), 7,18-7,12 (м, 2H), 6,48 (с, 1H), 4,68-4,56 (м, 3H), 3,78 (гепт, J=6,1 Гц, 1H), 3,38-3,35 (м, 3H), 3,21 (дд, J=14,0, 4,6 Гц, 1H), 3,04 (дд, J=14,1, 9,9 Гц, 1H), 1,16 (д, J=6,1 Гц, 6H); MS (ESI) m/z 803,62 (M+H)
[0192]
Пример 45: Синтез A-20
(Стадия 1) (2S)-2-[[4-[[4-(2-Этилпиримидин-5-ил)фенил]-сульфониламино]-2,3,5,6-тетрафтор-бензоил]амино]-3-[4-(1,3,4-триметил-2,6-диоксопиримидин-5-ил)фенил]пропановая кислота (A-20)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,83 (с, 1H), 9,33 (д, J=8,1 Гц, 1H), 9,14 (с, 2H), 8,08-8,02 (м, 2H), 7,93-7,87 (м, 2H), 7,27 (д, J=7,8 Гц, 2H), 7,11-7,06 (м, 2H), 4,73-4,65 (м, 1H), 3,38 (с, 3H), 3,25-3,18 (м, 4H), 3,00-2,91 (м, 3H), 2,06 (с, 3H), 1,32 (т, J=7,6 Гц, 3H); MS (ESI) m/z 755,50 (M+H)
[0193]
Пример 46: Синтез A-21
(Стадия 1) (2S)-2-[[2-Фтор-4-[[2-метил-4-(2-пиридил)фенил]-сульфониламино]бензоил]амино]-3-[4-(1,3,4-триметил-2,6-диоксо-пиримидин-5-ил)фенил]пропановая кислота (A-21)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,12 (с, 1H), 8,72-8,68 (м, 1H), 8,28 (дд, J=7,9, 3,1 Гц, 1H), 8,12-8,03 (м, 4H), 7,95 (тд, J=7,8, 1,8 Гц, 1H), 7,47-7,36 (м, 2H), 7,26-7,21 (м, 2H), 7,07-7,02 (м, 2H), 6,96 (дд, J=8,5, 2,1 Гц, 1H), 6,89 (дд, J=12,4, 2,1 Гц, 1H), 4,62-4,53 (м, 1H), 3,38 (с, 3H), 3,22-3,12 (м, 4H), 2,98 (дд, J=13,9, 9,8 Гц, 1H), 2,68 (с, 3H), 2,04 (с, 3H); MS (ESI) m/z 686,62 (M+H)
[0194]
Пример 47: Синтез A-22
(Стадия 1) (2S)-2-[[4-[[4-(циклопропилкарбамоил))фенил]-сульфониламино]-2,6-дифтор-бензоил]амино]-3-[4-(1,3,4-триметил-2,6-диоксопиримидин-5-ил)фенил]пропановая кислота (A-22)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,13 (с, 1H), 8,97 (д, J=8,0 Гц, 1H), 8,63 (д, J=4,3 Гц, 1H), 7,97-7,89 (м, 4H), 7,27-7,23 (м, 2H), 7,09-7,04 (м, 2H), 6,76 (д, J=9,0 Гц, 2H), 4,57 (ддд, J=10,1, 8,0, 4,6 Гц, 1H), 3,41 (с, 3H), 3,21 (с, 3H), 3,14 (дд, J=14,0, 4,6 Гц, 1H), 2,97-2,79 (м, 2H), 2,08 (с, 3H), 0,72-0,66 (м, 2H), 0,58-0,52 (м, 2H); MS (ESI) m/z 696,58 (M+H)
Следующие соединения (примеры 48-79) синтезировали способами, аналогичными способам примера 51 (стадии 1), (стадии 2) и примера 52 (стадии 1), применяемых для синтеза промежуточных соединений, обозначаемых как M-1 - M-25, и аналогичных им соединений.
[0195]
Пример 48: Синтез C-1
(Стадия 1) Тетрагидропиран-4-ил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]-бензоил]амино]-3-[4-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)фенил]пропаноат (C-1)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,14 (с, 2H), 8,97 (с, 1H), 8,81 (дд, J=7,3, 1,9 Гц, 1H), 8,54 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,07-8,01 (м, 2H), 8,01-7,94 (м, 2H), 7,88 (д, J=5,0 Гц, 1H), 7,40-7,25 (м, 4H), 7,24-7,19 (м, 2H), 4,94-4,84 (м, 1H), 4,68-4,61 (м, 1H), 4,00-3,91 (м, 2H), 3,79-3,66 (м, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,53-3,44 (м, 4H), 3,22-3,07 (м, 3H), 1,95-1,71 (м, 6H), 1,57-1,39 (м, 2H); MS (ESI) m/z 882,68 (M+H)
[0196]
Пример 49: Синтез C-2
(Стадия 1) Тетрагидропиран-4-илметил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-бензоил]амино]-3-[4-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)фенил]пропаноат (C-2)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,01-10,91 (м, 1H), 9,14 (с, 2H), 8,97 (с, 1H), 8,80 (дд, J=7,5, 2,0 Гц, 1H), 8,55 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,07-7,94 (м, 4H), 7,88 (д, J=5,0 Гц, 1H), 7,39-7,34 (м, 2H), 7,34-7,25 (м, 2H), 7,24-7,16 (м, 2H), 4,74-4,57 (м, 1H), 4,00-3,89 (м, 4H), 3,83-3,75 (м, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,54-3,39 (м, 2H), 3,33-3,05 (м, 5H), 2,01-1,72 (м, 5H), 1,56-1,44 (м, 2H), 1,30-1,10 (м, 2H); MS (ESI) m/z 896,68 (M+H)
[0197]
Пример 50: Синтез C-3
(Стадия 1) Тетрагидропиран-4-ил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]-бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-3)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,14 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,88 (дд, J=7,6, 1,7 Гц, 1H), 8,56 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,47 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,05-8,01 (м, 2H), 7,99-7,95 (м, 2H), 7,93 (дд, J=8,2, 2,4 Гц, 1H), 7,89 (д, J=4,9 Гц, 1H), 7,41 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,29 (ддд, J=10,8, 6,3, 3,9 Гц, 2H), 4,97-4,84 (м, 1H), 4,76-4,66 (м, 1H), 3,99-3,90 (м, 2H), 3,79-3,66 (м, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,54-3,42 (м, 4H), 3,26 (дд, J=14,1, 5,8 Гц, 1H), 3,19-3,07 (м, 2H), 1,96-1,72 (м, 6H), 1,58-1,39 (м, 2H); MS (ESI) m/z 883,72 (M+H)
[0198]
Пример 51: Синтез A-23
(Стадия 1) Циклогексил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат
2
3
Циклогексил 3-[6-(1-метил-2,4-диоксо-1,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-3(2H)-ил)пиридин-3-ил]-L-аланинат (M-1) <смотрите пример 1> (127 мг, 0,280 ммоль) и 2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензойную кислоту (M-11) <смотрите пример 11> (100 мг, 0,230 ммоль) суспендировали в метиленхлориде (4,0 мл), добавляли HATU (131 мг, 0,350 ммоль) и диизопропилэтиламин (0,160 мл, 0,920 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении и затем очищали методом ВЭЖХ с обращенной фазой (система HO/CHCN, содержащая 0,1% TFA) с получением TFA-соли указанного в заголовке соединения (130 мг, 53%) в виде белого твердого вещества.
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 10,97 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,84 (дд, J=7,7, 1,7 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,49-8,43 (м, 1H), 8,10-8,01 (м, 2H), 8,01-7,95 (м, 2H), 7,95-7,85 (м, 2H), 7,40 (дд, J=8,0, 0,8 Гц, 1H), 7,33-7,23 (м, 2H), 4,76-4,64 (м, 2H), 4,63 (с, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,24 (дд, J=14,1, 5,6 Гц, 1H), 3,12 (дд, J=14,1, 9,7 Гц, 1H), 1,78-1,58 (м, 4H), 1,50-1,19 (м, 6H); MS(ESI) m/z 841,59(M+H)
[0199]
(Стадия 2) (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]-пропановая кислота
2
3
4 N раствор хлористоводородной кислоты/диоксана (3,0 мл) и воду (2,0 мл) добавляли к циклогексил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноату <смотрите (стадию 1)> (70,0 мг, 65,0 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 60°C в течение 4 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении и затем очищали методом ВЭЖХ с обращенной фазой (система HO/CHCN, содержащая 0,1% TFA) с получением TFA-соли указанного в заголовке соединения (42,3 мг, 66%) в виде белого твердого вещества.
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 10,96 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,69 (дд, J=8,1, 2,2 Гц, 1H), 8,56 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,46 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,09-8,01 (м, 2H), 8,01-7,93 (м, 2H), 7,93-7,85 (м, 2H), 7,40 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,34-7,23 (м, 2H), 4,74-4,64 (м, 1H), 4,62 (с, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,29 (дд, J=14,0, 4,6 Гц, 1H), 3,09 (дд, J=14,1, 10,2 Гц, 1H); MS(ESI) m/z 759,5(M+H)
[0200]
Пример 52: Синтез C-4
(Стадия 1) Тетрагидропиран-4-ил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-4)
2
3
4 N раствор хлористоводородной кислоты/диоксана (3,0 мл) и тетрагидро-4-пиранол (1,0 мл) добавляли к (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]-бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноату <смотрите (стадию 2)> (100 мг, 101 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 60°C в течение 12 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении и затем очищали методом ВЭЖХ с обращенной фазой (система HO/CHCN, содержащая 0,1% TFA) с получением TFA-соли указанного в заголовке соединения (39,6 мг, 37%) в виде белого твердого вещества.
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,91-8,86 (м, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,47 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,07-8,03 (м, 2H), 8,00-7,96 (м, 2H), 7,93 (дд, J=8,2, 2,4 Гц, 1H), 7,89 (д, J=4,9 Гц, 1H), 7,41 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,33-7,24 (м, 2H), 4,96-4,86 (м, 1H), 4,76-4,67 (м, 1H), 4,63 (с, 2H), 3,80-3,67 (м, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,49-3,44 (м, 2H), 3,40 (с, 3H), 3,26 (дд, J=14,1, 5,8 Гц, 1H), 3,14 (дд, 1H), 1,88-1,72 (м, 2H), 1,59-1,40 (м, 2H); MS (ESI) m/z 843,59 (M+H)
[0201]
Пример 53: Синтез C-5
(Стадия 1) Тетрагидропиран-4-илметил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]-бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-5)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,87 (дд, J=7,7, 1,6 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,47 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,09-8,02 (м, 2H), 8,00-7,96 (м, 2H), 7,94-7,86 (м, 2H), 7,40 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,32-7,24 (м, 2H), 4,79-4,70 (м, 1H), 4,63 (с, 2H), 3,99-3,89 (м, 2H), 3,84-3,76 (м, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,30-3,20 (м, 3H), 3,13 (дд, J=14,1, 9,9 Гц, 1H), 1,89-1,74 (м, 1H), 1,56-1,47 (м, 2H), 1,29-1,12 (м, 2H); MS (ESI) m/z 857,75 (M+H)
[0202]
Пример 54: Синтез C-6
(Стадия 1) Циклогексилметил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-6)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,87-8,83 (м, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,48-8,46 (м, 1H), 8,08-8,02 (м, 2H), 8,00-7,95 (м, 2H), 7,93-7,87 (м, 2H), 7,42-7,38 (м, 1H), 7,31-7,23 (м, 2H), 4,79-4,71 (м, 1H), 4,63 (с, 2H), 3,96-3,84 (м, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,28 (дд, J=14,1, 5,0 Гц, 1H), 3,22-3,06 (м, 1H), 1,68-1,54 (м, 5H), 1,22-0,87 (м, 6H); MS (ESI) m/z 855,67 (M+H)
[0203]
Пример 55: Синтез C-7
(Стадия 1) Изопропил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-7)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,19 (с, 2H), 8,99 (д, J=0,8 Гц, 1H), 8,83 (дд, J=7,7, 1,8 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,46 (дд, J=2,5, 0,8 Гц, 1H), 8,08-8,04 (м, 2H), 8,01-7,96 (м, 2H), 7,95-7,87 (м, 2H), 7,40 (дд, J=8,1, 0,7 Гц, 1H), 7,34-7,22 (м, 2H), 4,91 (гепт, J=6,3 Гц, 1H), 4,72-4,59 (м, 3H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,28-3,06 (м, 2H), 1,16 (дд, J=18,9, 6,2 Гц, 6H); MS (ESI) m/z 801,63 (M+H)
[0204]
Пример 56: Синтез C-8
(Стадия 1) 2-Этилбутил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-8)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,84 (дд, J=8,0, 1,8 Гц, 1H), 8,57 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,47 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,08-8,03 (м, 2H), 8,00-7,96 (м, 2H), 7,93-7,87 (м, 2H), 7,42-7,38 (м, 1H), 7,31-7,22 (м, 2H), 4,79-4,71 (м, 1H), 4,63 (с, 2H), 4,01 (д, J=5,6 Гц, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,28 (дд, J=14,2, 4,9 Гц, 1H), 3,12 (дд, J=14,1, 10,3 Гц, 1H), 1,46 (гепт, J=6,2 Гц, 1H), 1,32-1,23 (м, 4H), 0,81 (т, J=7,4 Гц, 6H); MS (ESI) m/z 843,71 (M+H)
[0205]
Пример 57: C-9
(Стадия 1) 2-Адамантил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-9)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,19 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,86 (дд, J=7,8, 1,7 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,48 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,07-8,03 (м, 2H), 7,99-7,96 (м, 2H), 7,93 (дд, J=8,2, 2,4 Гц, 1H), 7,88 (д, J=4,9 Гц, 1H), 7,40 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,31-7,23 (м, 2H), 4,86 (д, J=3,2 Гц, 1H), 4,82-4,72 (м, 1H), 4,63 (с, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,30 (дд, J=14,1, 5,1 Гц, 1H), 3,14 (дд, J=14,1, 10,2 Гц, 1H), 1,99-1,40 (м, 14H); MS (ESI) m/z 893,72 (M+H)
[0206]
Пример 58: C-10
(Стадия 1) (1-Метил-4-пиперидил) (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-10)
+
MS (ESI) m/z 856,67 (M+H)
[0207]
Пример 59: Синтез C-11
(Стадия 1) 1-Этилпропил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-11)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,97 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,85 (дд, J=8,0, 1,6 Гц, 1H), 8,56 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,48 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,07-8,04 (м, 2H), 8,00-7,96 (м, 2H), 7,93 (дд, J=8,2, 2,4 Гц, 1H), 7,88 (д, J=4,9 Гц, 1H), 7,40 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,31-7,21 (м, 2H), 4,78-4,66 (м, 2H), 4,63 (с, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,27 (дд, J=14,1, 5,3 Гц, 1H), 3,13 (дд, J=14,1, 10,2 Гц, 1H), 1,62-1,41 (м, 4H), 0,86-0,76 (м, 6H); MS (ESI) m/z 829,63 (M+H)
[0208]
Пример 60: Синтез C-12
(Стадия 1) (4,4-Диметилциклогексил) (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]-бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-12)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,83 (дд, J=7,6, 1,8 Гц, 1H), 8,57 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,46 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,08-8,02 (м, 2H), 8,00-7,96 (м, 2H), 7,94-7,87 (м, 2H), 7,40 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,32-7,25 (м, 2H), 4,74-4,66 (м, 2H), 4,63 (с, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,25 (дд, J=14,1, 5,4 Гц, 1H), 3,13 (дд, J=14,1, 9,8 Гц, 1H), 1,73-1,11 (м, 8H), 0,85 (д, J=15,3 Гц, 6H); MS (ESI) m/z 869,71 (M+H)
[0209]
Пример 61: Синтез C-13
(Стадия 1) 1-Пропилбутил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-13)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,97 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,84 (дд, J=7,8, 1,6 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,48 (дд, J=2,3, 0,8 Гц, 1H), 8,07-8,03 (м, 2H), 8,00-7,96 (м, 2H), 7,93 (дд, J=8,2, 2,4 Гц, 1H), 7,88 (дд, J=4,9, 0,7 Гц, 1H), 7,40 (дд, J=8,1, 0,7 Гц, 1H), 7,25 (ддд, J=17,9, 10,5, 6,2 Гц, 2H), 4,86 (п, J=6,3 Гц, 1H), 4,77-4,68 (м, 1H), 4,63 (с, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,27 (дд, J=14,2, 5,0 Гц, 1H), 3,11 (дд, J=14,1, 10,4 Гц, 1H), 1,52-1,42 (м, 4H), 1,35-1,17 (м, 4H), 0,87-0,81 (м, 6H); MS (ESI) m/z 857,71 (M+H)
[0210]
Пример 62: Синтез C-14
(Стадия 1) (4,4-Дифторциклогексил) (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]-бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-14)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,99 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,90 (дд, J=7,5, 1,6 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,47 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,08-8,03 (м, 2H), 8,00-7,96 (м, 2H), 7,93 (дд, J=8,1, 2,4 Гц, 1H), 7,89 (дд, J=5,0, 0,7 Гц, 1H), 7,43-7,39 (м, 1H), 7,32-7,25 (м, 2H), 4,96-4,88 (м, 1H), 4,77-4,69 (м, 1H), 4,63 (с, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,27 (дд, J=14,1, 5,6 Гц, 1H), 3,14 (дд, J=14,1, 9,7 Гц, 1H), 2,05-1,63 (м, 8H); MS (ESI) m/z 877,72 (M+H)
[0211]
Пример 63: Синтез C-15
(Стадия 1) Этил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метокси-метил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]-пропаноат (C-15)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,19 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,86 (дд, J=7,8, 1,7 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,47 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,08-8,03 (м, 2H), 8,00-7,96 (м, 2H), 7,94-7,87 (м, 2H), 7,42-7,39 (м, 1H), 7,33-7,25 (м, 2H), 4,75-4,68 (м, 1H), 4,63 (с, 2H), 4,11 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,25 (дд, J=14,0, 5,6 Гц, 1H), 3,13 (дд, J=14,0, 9,7 Гц, 1H), 1,16 (т, J=7,1 Гц, 3H); MS (ESI) m/z 787,63 (M+H)
[0212]
Пример 64: Синтез C-16
(Стадия 1) Циклопентил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-16)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,19 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,83 (дд, J=7,7, 1,7 Гц, 1H), 8,57 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,46 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,08-8,03 (м, 2H), 8,01-7,95 (м, 2H), 7,93-7,87 (м, 2H), 7,40 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,32-7,24 (м, 2H), 5,14-5,07 (м, 1H), 4,72-4,59 (м, 3H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,24 (дд, J=14,1, 5,5 Гц, 1H), 3,11 (дд, J=14,2, 9,7 Гц, 1H), 1,86-1,46 (м, 8H); MS (ESI) m/z 827,71 (M+H)
[0213]
Пример 65: Синтез C-17
(Стадия 1) Гексил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метокси-метил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]-пропаноат (C-17)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,84 (дд, J=8,0, 1,8 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,46 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,08-8,03 (м, 2H), 8,00-7,95 (м, 2H), 7,93-7,86 (м, 2H), 7,40 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,31-7,24 (м, 2H), 4,76-4,69 (м, 1H), 4,63 (с, 2H), 4,09-4,02 (м, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,27 (дд, J=14,1, 5,2 Гц, 1H), 3,12 (дд, J=14,1, 10,1 Гц, 1H), 1,58-1,48 (м, 2H), 1,32-1,18 (м, 6H), 0,83-0,77 (м, 3H); MS (ESI) m/z 843,71 (M+H)
[0214]
Пример 66: Синтез C-18
(Стадия 1) Циклогептил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-18)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,83 (дд, J=7,5, 1,7 Гц, 1H), 8,57 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,46 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,08-8,03 (м, 2H), 8,00-7,96 (м, 2H), 7,93-7,87 (м, 2H), 7,40 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,28 (дд, J=10,6, 6,2 Гц, 2H), 4,91-4,82 (м, 1H), 4,72-4,64 (м, 1H), 4,63 (с, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,24 (дд, J=14,1, 5,5 Гц, 1H), 3,11 (дд, J=14,0, 9,7 Гц, 1H), 1,89-1,30 (м, 12H); MS (ESI) m/z 855,71 (M+H)
[0215]
Пример 67: Синтез C-19
(Стадия 1) Метил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метокси-метил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]-пропаноат (C-19)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 11,00 (с, 1H), 9,19 (с, 2H), 8,98 (с, 1H), 8,86 (дд, J=8,1, 2,0 Гц, 1H), 8,56 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,49 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,09-8,03 (м, 2H), 8,02-7,98 (м, 2H), 7,93 (дд, J=8,2, 2,4 Гц, 1H), 7,90-7,87 (м, 1H), 7,43 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,31 (тд, J=10,8, 10,4, 6,3 Гц, 2H), 4,82-4,75 (м, 1H), 4,63 (с, 2H), 3,68 (с, 3H), 3,60 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,30 (дд, J=14,0, 5,1 Гц, 1H), 3,15 (дд, J=14,1, 10,1 Гц, 1H); MS (ESI) m/z 773,62 (M+H)
[0216]
Пример 68: Синтез C-20
(Стадия 1) 2,2-Диметилпропил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-20)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,98 (с, 1H), 8,86 (дд, J=7,9, 1,7 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,47 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,07-8,03 (м, 2H), 7,99-7,96 (м, 2H), 7,92 (дд, J=8,2, 2,4 Гц, 1H), 7,88 (д, J=5,0 Гц, 1H), 7,40 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,30-7,23 (м, 2H), 4,83-4,76 (м, 1H), 4,62 (с, 2H), 3,79 (д, J=1,6 Гц, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,31 (дд, J=14,2, 5,0 Гц, 1H), 3,14 (дд, J=14,1, 10,4 Гц, 1H), 0,88 (с, 9H); MS (ESI) m/z 829,67 (M+H)
[0217]
Пример 69: Синтез C-21
(Стадия 1) Циклопентилметил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-21)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,99 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,85 (дд, J=7,9, 1,8 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,47 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,08-8,04 (м, 2H), 8,00-7,96 (м, 2H), 7,94-7,87 (м, 2H), 7,43-7,39 (м, 1H), 7,31-7,24 (м, 2H), 4,78-4,70 (м, 1H), 4,63 (с, 2H), 3,97 (д, J=6,9 Гц, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,32-3,23 (м, 1H), 3,13 (дд, J=14,1, 10,1 Гц, 1H), 2,13 (гепт, J=7,4 Гц, 1H), 1,72-1,40 (м, 6H), 1,25-1,15 (м, 2H); MS (ESI) m/z 841,67 (M+H)
[0218]
Пример 70: Синтез C-22
(Стадия 1) 1-Адамантилметил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-22)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,19 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,84 (дд, J=8,0, 1,8 Гц, 1H), 8,57 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,48 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,08-8,03 (м, 2H), 7,99-7,95 (м, 2H), 7,94-7,86 (м, 2H), 7,43-7,37 (м, 1H), 7,32-7,22 (м, 2H), 4,83-4,74 (м, 1H), 4,63 (с, 2H), 3,67 (д, J=1,8 Гц, 3H), 3,59 (с, 3H), 3,39 (с, 3H), 3,31 (дд, J=14,1, 4,7 Гц, 1H), 3,14 (дд, J=14,1, 10,5 Гц, 1H), 2,00-1,40 (м, 14H); MS (ESI) m/z 907,76 (M+H)
[0219]
Пример 71: Синтез C-23
(Стадия 1) Циклобутилметил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-23)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,99 (д, J=0,7 Гц, 1H), 8,86 (дд, J=7,7, 1,7 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,47 (дд, J=2,4, 0,8 Гц, 1H), 8,09-8,04 (м, 2H), 8,00-7,95 (м, 2H), 7,94-7,87 (м, 2H), 7,40 (дд, J=8,0, 0,8 Гц, 1H), 7,31-7,25 (м, 2H), 4,79-4,70 (м, 1H), 4,63 (с, 2H), 4,05 (д, J=6,5 Гц, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,27 (дд, J=14,1, 5,2 Гц, 1H), 3,13 (дд, J=14,1, 10,0 Гц, 1H), 2,61-2,52 (м, 1H), 2,00-1,91 (м, 2H), 1,87-1,66 (м, 4H); MS (ESI) m/z 827,71 (M+H)
[0220]
Пример 72: Синтез C-24
(Стадия 1) 2-Циклогексилэтил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-24)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,99 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,84 (дд, J=7,8, 1,9 Гц, 1H), 8,57 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,47 (дд, J=2,4, 0,8 Гц, 1H), 8,09-8,03 (м, 2H), 8,01-7,95 (м, 2H), 7,93-7,86 (м, 2H), 7,40 (дд, J=7,9, 0,8 Гц, 1H), 7,34-7,24 (м, 2H), 4,76-4,68 (м, 1H), 4,63 (с, 2H), 4,14-4,08 (м, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,31-3,22 (м, 1H), 3,13 (дд, J=14,1, 10,1 Гц, 1H), 1,74-0,74 (м, 13H); MS (ESI) m/z 869,75 (M+H)
[0221]
Пример 73: Синтез C-25
(Стадия 1) (1-Изобутил-3-метилбутил) (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]-бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-25)
+
MS (ESI) m/z 885,80 (M+H)
[0222]
Пример 74: Синтез C-26
(Стадия 1) 4,4,4-Трифторбутил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-26)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,89 (дд, J=7,5, 1,7 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,48-8,46 (м, 1H), 8,07-8,03 (м, 2H), 7,99-7,96 (м, 2H), 7,92 (дд, J=8,1, 2,4 Гц, 1H), 7,88 (дд, J=4,9, 0,8 Гц, 1H), 7,41 (дд, J=8,0, 0,7 Гц, 1H), 7,31-7,24 (м, 2H), 4,78-4,70 (м, 1H), 4,63 (с, 2H), 4,21-4,06 (м, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,29 (дд, J=14,1, 5,1 Гц, 1H), 3,13 (дд, J=14,1, 10,1 Гц, 1H), 2,39-2,23 (м, 2H), 1,84-1,74 (м, 2H); MS (ESI) m/z 869,63 (M+H)
[0223]
Пример 75: Синтез C-27
(Стадия 1) Циклобутил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-27)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,19 (с, 2H), 8,99 (д, J=0,8 Гц, 1H), 8,85 (дд, J=7,7, 1,7 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,47 (дд, J=2,3, 0,8 Гц, 1H), 8,08-8,02 (м, 2H), 8,01-7,96 (м, 2H), 7,94-7,87 (м, 2H), 7,41 (дд, J=8,1, 0,7 Гц, 1H), 7,33-7,25 (м, 2H), 4,98-4,87 (м, 1H), 4,74-4,67 (м, 1H), 4,63 (с, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,25 (дд, J=14,2, 5,7 Гц, 1H), 3,12 (дд, J=14,0, 9,7 Гц, 1H), 2,31-2,19 (м, 2H), 2,06-1,87 (м, 2H), 1,79-1,68 (м, 1H), 1,65-1,50 (м, 1H); MS (ESI) m/z 813,67 (M+H)
[0224]
Пример 76: Синтез C-28
(Стадия 1) 2,2-Дифторэтил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-28)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,99 (с, 1H), 9,16 (с, 2H), 9,00 (с, 1H), 8,75 (дд, J=7,8, 3,8 Гц, 1H), 8,57 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,47 (д, J=2,5 Гц, 1H), 8,07-7,94 (м, 4H), 7,90 (д, J=5,0 Гц, 1H), 7,75 (дд, J=8,2, 2,5 Гц, 1H), 7,47 (д, J=8,3 Гц, 1H), 7,38 (дд, J=10,3, 6,4 Гц, 1H), 7,29 (дд, J=11,4, 6,3 Гц, 1H), 4,89 (тд, J=8,2, 4,9 Гц, 1H), 3,61 (с, 3H), 3,42-2,99 (м, 8H), 2,20-2,12 (м, 2H), 2,05-1,92 (м, 2H); MS (ESI) m/z 823,63 (M+H)
[0225]
Пример 77: Синтез C-29
(Стадия 1) 3-Циклогексилпропил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-29)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,99 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,84 (дд, J=7,8, 1,8 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,46 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,09-8,02 (м, 2H), 8,01-7,95 (м, 2H), 7,94-7,86 (м, 2H), 7,40 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,32-7,24 (м, 2H), 4,76-4,67 (м, 1H), 4,63 (с, 2H), 4,08-4,01 (м, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,31-3,21 (м, 1H), 3,17-3,07 (м, 1H), 1,68-1,49 (м, 7H), 1,22-0,97 (м, 6H), 0,85-0,70 (м, 2H); MS (ESI) m/z 883,76 (M+H)
[0226]
Пример 78: Синтез C-30
(Стадия 1) Изопентил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метокси-метил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]-пропаноат (C-30)
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,98 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,99 (д, J=0,7 Гц, 1H), 8,86-8,83 (м, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,47-8,45 (м, 1H), 8,07-8,04 (м, 2H), 8,00-7,96 (м, 2H), 7,93-7,86 (м, 2H), 7,40 (дд, J=8,1, 0,7 Гц, 1H), 7,31-7,23 (м, 2H), 4,76-4,68 (м, 1H), 4,63 (с, 2H), 4,10 (т, J=6,7 Гц, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,26 (дд, J=14,0, 5,2 Гц, 1H), 3,12 (дд, J=14,1, 10,0 Гц, 1H), 1,71-1,56 (м, 1H), 1,45 (кв, J=6,8 Гц, 2H), 0,85 (д, J=6,6 Гц, 6H); MS (ESI) m/z 829,71 (M+H)
[0227]
Пример 79: Синтез C-31
(Стадия 1) 2-Циклопентилэтил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-31)
+
MS (ESI) m/z 855,99 (M+H)
[0228]
Кроме того, с помощью следующих способов были синтезированы промежуточные соединения M-26 - M-30, соединения A-24 - A-30 и соединения C-32 - C-46.
[0229]
Пример 80: Синтез 4-[[4-(4-этилтриазол-1-ил)фенил]-сульфониламино]-2,5-дифторбензойная кислота (M-26)
(Стадия 1) Метил 4-[[4-(4-этилтриазол-1-ил)фенил]сульфонил-амино]-2,5-дифторбензоат
4
2
L-пролин (1,6 г, 20 моль%, 14 ммоль), CuSO⋅5HO (1,7 г, 10 моль%, 6,8 ммоль), аскорбат натрия (2,7 г, 20 моль%, 14 ммоль), азид натрия (6,50 г, 100 ммоль), карбонат калия (11,4 г, 82,6 ммоль), метил 2-пентиноат (6,76 г, 69 ммоль), метил 2,5-дифтор-4-[(4-йодфенил)сульфониламино]бензоат, полученный в примере 13 (стадия 2) (31,2 г, 69 ммоль), DMSO (225 мл) и воду (25 мл) последовательно добавляли в колбу емкостью 1 л. Полученную смесь осторожно перемешивали при 65°C в течение ночи и добавляли смесь концентрированной аммонийной воды (500 мл), воды (1,0 л) и этилацетата (400 мл). Водную фазу экстрагировали этилацетатом (600 мл × 10), органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором (3,0 л), сушили над сульфатом натрия и фильтровали, и растворитель отгоняли при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (14,2 г, 49%).
1
3
H ЯМР (CDOD, 400 МГц): δ 8,37 (с, 1H), 8,13-8,06 (м, 2H), 8,10-7,96 (м, 2H), 7,45-7,04 (м, 2H), 3,27 (с, 3H), 1,72-1,64 (м, 2H), 1,04-1,02 (м, 3H).
[0230]
(Стадия 2) 4-[[4-(4-Этилтриазол-1-ил)фенил]сульфониламино]-2,5-дифторбензойная кислота (M-26)
Соединение, полученное на стадии 1 (14,1 г, 33,4 ммоль), растворяли в метаноле (60 мл), добавляли 2 N водный раствор гидроксида лития (30 мл), затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут, затем контролировали завершение реакции, и добавляли 4 N хлористоводородную кислоту для доведения рН до 4-5. Осажденное белое твердое вещество фильтровали, и полученное твердое вещество сушили с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества.
1
+
6
H ЯМР (DMSO-d, 400 МГц): δ 13,41 (уш.с, 1H), 11,10 (уш.с, 1H), 8,70 (с, 1H), 8,13 (д, J=8,8 Гц, 2H), 8,04 (д, J=8,8 Гц, 2H), 7,63-7,59 (м, 1H), 7,30-7,25 (м, 1H), 2,73 (кв, J=7,2 Гц, 2H), 1,26 (т, J=7,2 Гц, 3H); MS (ESI) m/z 409 (M+H).
[0231]
Пример 81: Синтез 2,5-Дифтор-4-[(4-тетрагидропиран-4-ил-фенил)сульфониламино]бензойная кислота (M-27)
(Стадия 1) Метил 4-{[4-(3,6-дигидро-2H-пиран-4-ил)фенил]-сульфониламино}-2,5-дифторбензоат
Метил 2,5-дифтор-4-[(4-йодфенил)сульфониламино]бензоат, полученный на стадии 2 примера 13 (0,2 г, 0,44 ммоль), растворяли в N,N'-диметилформамиде (5 мл) и воде (1 мл), добавляли пинаколовый эфир 3,6-дигидро-2H-пиран-4-бороновой кислоты (0,11 г, 0,53 ммоль), [1,1'-бис(дифенилфосфино)-ферроцен]дихлорпалладий(II) (18 мг, 0,022 ммоль) и ацетат калия (0,15 г, 1,1 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 100°C в течение 4 часов. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через целит, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан/этилацетат).
+
MS (ESI) m/z 410 (M+H).
[0232]
(Стадия 2) 2,5-Дифтор-4-[(4-тетрагидропиран-4-илфенил)-сульфониламино]бензойная кислота (M-27)
2
3
Соединение, полученное на стадии 1, растворяли в метаноле (20 мл), добавляли каталитическое количество 10% палладия на угле, и полученную смесь перемешивали в присутствии газообразного водорода при комнатной температуре в течение ночи. Реакционный раствор фильтровали, и фильтрат концентрировали. К полученному остатку добавляли 2 N раствор гидроксида натрия (4 мл) и метанол, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную жидкость нейтрализовывали 2 N хлористоводородной кислотой, очищали методом ВЭЖХ с обращенной фазой (система HO/CHCN, содержащая 0,1% TFA) и лиофилизировали с получением указанного в заголовке соединения.
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ 10,97 (с, 1H), 7,84-7,77 (м, 2H), 7,60 (дд, J=10,7, 6,6 Гц, 1H), 7,53-7,47 (м, 2H), 7,24 (дд, J=11,8, 6,4 Гц, 1H), 3,98-3,88 (м, 2H), 3,46-3,38 (м, 2H), 2,93-2,80 (м, 1H), 1,77-1,54 (м, 4H); MS (ESI) m/z 398 (M+H).
[0233]
Пример 82: Синтез 2,5-дифтор-4-{[4-(2-изопропилпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино}бензойной кислоты (M-28)
2-Изопропилпиримидин-5-илбороновую кислоту использовали вместо пинаколового эфира 3,6-дигидро-2H-пиран-4-бороновой кислоты, полученного на стадии 1 примера 81, и указанное в заголовке соединение синтезировали аналогичным способом.
+
MS (ESI) m/z 434 (M+H).
[0234]
Пример 83: Синтез метил (2S)-2-амино-3-[5-(1,3,4-триметил-2,6-диоксопиримидин-5-5-ил)-2-пиридил]пропаноат (M-29)
(Стадия 1) Метил (2S)-2-(трет-бутоксикарбониламино)-3-[(5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-пиридил]-пропаноат
Метил (2S)-3-(5-бром-2-пиридил)-2-(трет-бутоксикарбонил-амино)пропаноат (556 мг, 1,55 ммоль) растворяли в N,N'-диметилформамиде (10 мл), добавляли бис(пинаколато)диборан (588 мг, 2,32 ммоль), [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]дихлор-палладий(II) (57 мг, 0,078 ммоль) и ацетат калия (456 мг, 4,64 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 80°C в течение ночи. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и фильтровали через целит, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли этилацетат, и смесь последовательно промывали водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Растворитель отгоняли при пониженном давлении, и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (гексан/этилацетат) с получением указанного в заголовке соединения.
+
MS (ESI) m/z 407 (M+H).
[0235]
(Стадия 2) (2S)-2-Амино-3-[5-(1,3,4-триметил-2,6-диоксо-пиримидин-5-5-ил)-2-пиридил]пропаноат (M-29)
Соединение, полученное на стадии 1, использовали вместо N-(трет-бутоксикарбонил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-L-фенилаланината, полученного на стадии 5 примера 2, и указанное в заголовке соединение синтезировали аналогичным способом.
+
MS (ESI) m/z 333 (M+H).
[0236]
Пример 84: Синтез метил 3-[6-(1-метил-2,4-диоксо-1,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-3(2H)-ил)пиридин-3-ил]-L-аланината (M-30)
(Стадия 1) Метил 3-({[(5-бромпиридин-2-ил)амино]карбонил}-амино)изоникотинат
Метил 3-аминоизоникотинат (4,80 г, 32,0 ммоль) и диизопропилэтиламин (8,20 г, 64,0 ммоль) растворяли в метиленхлориде (100 мл), добавляли раствор трифосгена (3,10 г, 10,4 ммоль) в метиленхлориде (20 мл), и полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 3 часов. К этому раствору добавляли 5-бромпиридин-2-амин (4,60 г, 26,6 ммоль), и полученную смесь дополнительно перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении, затем добавляли этилацетат, полученную смесь промывали насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия, водой и насыщенным раствором хлорида натрия и сушили над безводным сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир/этилацетат=1:1-1:2) с получением указанного в заголовке соединения (6,2 г, 67%).
1
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 11,0 (с, 1H), 10,3 (с, 1H), 9,4 (с, 1H), 8,39 (д, J=5,2 Гц, 2H), 8,0 (д, J=8,8 Гц, 1H), 7,54 (д, J=4,8 Гц, 1H), 7,48 (д, J=8,8 Гц, 1H), 3,92 (с, 3H).
[0237]
(Стадия 2) 3-(5-Бромпиридин-2-ил)-1-метилпиридо[3,4-d]-пиримидин-2,4(1H,3H)дион
Метил 3-({[(5-бромпиридин-2-ил)амино]карбонил}амино)-изоникотинат (6,20 г, 17,7 ммоль) растворяли в N,N'-диметилформамиде (60 мл), добавляли водный раствор (4,0 мл) карбоната калия (600 мг, 4,34 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. К реакционной смеси добавляли метиловый эфир п-толуолсульфоновой кислоты (4,40 г, 23,6 ммоль) и карбонат калия (3,00 г, 21,7 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Реакционный раствор разбавляли водой (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (100 мл × 3). Экстракты объединяли, промывали насыщенным солевым раствором и сушили над безводным сульфатом натрия, и затем растворитель удаляли при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир/этилацетат=1:1) с получением указанного в заголовке соединения (5,2 г, 88%).
1
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 9,00 (с, 1H), 8,77 (д, J=2,4 Гц, 1H), 8,58 (д, J=4,8 Гц, 1H), 8,32-8,30 (м, 1H), 7,91 (д, J=4,8 Гц, 1H), 7,52 (д, J=8,8 Гц, 1H), 3,61 (с, 3H).
[0238]
(Стадия 3) Метил N-(трет-бутоксикарбонил)-3-[6-(1-метил-2,4-диоксо-1,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-3(2H)-ил)пиридин-3-ил]-L-аланинат
Цинк (2,40 г, 36,7 ммоль) нагревали при 200°C в течение 30 минут и охлаждали до комнатной температуры, эту операцию повторяли 3 раза, затем добавляли раствор дибромметана (0,340 г, 1,82 ммоль) в N,N'-диметилформамиде (5,0 мл). Повторяли дважды операцию нагревания полученной реакционной смеси до 90°C и охлаждения реакционной смеси до комнатной температуры, затем добавляли хлортриметилсилан (40,0 мг, 0,364 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Добавляли по каплям раствор метил N-(трет-бутоксикарбонил)-3-йод-L-аланината (2,00 г, 6,08 ммоль) в N,N'-диметилформамиде (5,0 мл), полученную смесь перемешивали при 35°C в течение 2,5 часов, затем к реакционной смеси добавляли дополнительное количество 3-(5-бромпиридин-2-ил)-1-метилпиридо[3,4-d]пиримидин-2,4(1H,3H)-диона (2,60 г, 7,80 ммоль) и бис(трифенилфосфин)палладия(II) хлорида (230 мг, 0,328 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 70°C в течение 2 часов. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом (20 мл × 3). Экстракты объединяли, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, и затем растворитель удаляли. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир/этилацетат=1:1-1:2) с получением указанного в заголовке соединения (300 мг, 11%).
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,83 (с, 1H), 8,62 (д, J=3,6 Гц, 1H), 8,46 (с, 1H), 8,05 (д, J=3,2 Гц, 1H), 7,75 (д, J=4,4 Гц, 1H), 7,29-7,27 (м, 1H), 5,16-5,12 (м, 1H), 4,69-4,67 (м, 1H), 3,76 (с, 3H), 3,72 (с, 3H), 3,23-3,20 (м, 2H), 1,45 (с, 9H).
[0239]
(Стадия 4) Метил 3-[6-(1-метил-2,4-диоксо-1,4-дигидро-пиридо[3,4-d]пиримидин-3(2H)-ил)пиридин-3-ил]-L-аланинат (M-30)
4 N хлористоводородную кислоту/этилацетат (5,0 мл) добавляли к метил N-(трет-бутоксикарбонил)-3-[6-(1-метил-2,4-диоксо-1,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-3(2H)-ил)пиридин-3-ил]-L-аланинату (300 мг, 0,659 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Полученное белое твердое вещество фильтровали и сушили при пониженном давлении с получением гидрохлорида указанного в заголовке соединения (M-30) (253 мг, 98%).
1
+
3
H ЯМР (400 МГц, CDOD): δ 9,29 (с, 1H), 8,77 (д, J=6,0 Гц, 1H), 8,62 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,6 Гц, 1H), 8,09 (дд, J=8,0, 2,0 Гц, 1H), 7,64 (дд, J=15,6, 8,0 Гц, 1H), 4,55-4,51 (м, 1H), 3,88 (с, 3H), 3,76 (с, 3H), 3,52-3,48 (м, 1H), 3,46-3,41 (м, 1H); MS (ESI) m/z 356 (M+H).
[0240]
Пример 85: (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-(2-изопропоксиметил)-пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[4-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)фенил]пропановая кислота (A-24)
Указанное в заголовке соединение получали способом, аналогичным способу стадии 1 примера 27, используя метил 4-(1-метил-2,4-диоксо-1,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-3(2H)-ил)-L-фенил-аланинат (M-8) и 2,5-дифтор-4-[[4-[2-(изопропоксиметил)-пиримидин-5-ил]фенил]-сульфониламино]бензойную кислоту (M-19).
1
+
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,97 (с, 1H), 9,16 (с, 2H), 8,96 (с, 1H), 8,60 (дд, J=8,0, 2,6 Гц, 1H), 8,55 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,09-8,01 (м, 2H), 8,00-7,94 (м, 2H), 7,87 (д, J=4,9 Гц, 1H), 7,36 (д, J=8,3 Гц, 2H), 7,34-7,23 (м, 2H), 7,21 (д, J=8,3 Гц, 1H), 4,68-4,58 (м, 4H), 3,77 (sep, J=6,1 Гц, 1H), 3,58 (с, 3H), 3,25-3,18 (м, 1H), 3,12-3,01 (м, 1H), 1,15 (д, J=6,1 Гц, 6H); MS (ESI) m/z 786 (M+H).
[0241]
Пример 86: (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[4-(1,3,4-триметил-2,6-диоксопиримидин-5-ил)фенил]пропановая кислота (A-25)
Указанное в заголовке соединение получали способом, аналогичным способу стадии 1 пример 27, используя метил (2S)-2-амино-3-[4-(1,3,4-триметил-2,6-диоксопиримидин-5-ил)фенил]пропаноат (M-2) и 2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]-сульфониламино]бензойную кислоту (M-11).
1
+
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,95 (с, 1H), 9,14 (с, 2H), 8,54 (дд, J=8,0, 2,6 Гц, 1H), 8,13-7,99 (м, 2H), 7,99-7,81 (м, 2H), 7,40-7,16 (м, 4H), 7,16-6,65 (м, 2H), 4,85-4,47 (м, 1H), 4,22-3,89 (м, 2H), 3,89-3,54 (м, 2H), 3,38 (с, 3H), 3,29-3,08 (м, 5H), 3,00 (дд, J=13,9, 9,9 Гц, 1H), 2,05 (с, 3H), 2,00-1,64 (м, 4H) ; MS (ESI) m/z 775 (M+H).
[0242]
Пример 87: (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[(4-тетрагидропиран-4-ил-фенил)сульфониламино]бензоил]амино]-3-[4-(1,3,4-триметил-2,6-диоксопиримидин-5-ил)фенил]пропановая кислота (A-26)
Указанное в заголовке соединение получали способом, аналогичным способу стадии 1 примера 27, используя метил (2S)-2-амино-3-[4-(1,3,4-триметил-2,6-диоксопиримидин-5-ил)фенил]пропаноат (M-2) и 2,5-дифтор-4-[(4-тетрагидропиран-4-илфенил)сульфониламино]бензойную кислоту (M-27).
1
+
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,72 (с, 1H), 8,45 (дд, J=8,0, 2,7 Гц, 1H), 7,70 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,42 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,30-7,17 (м, 4H), 7,17-6,88 (м, 2H), 4,67-4,42 (м, 1H), 3,97-3,76 (м, 2H), 3,68-3,25 (м, 5H), 3,14 (с, 3H), 3,13-3,07 (м, 1H), 3,00-2,86 (м, 1H), 2,86-2,68 (м, 1H), 2,00 (м, 3H), 1,75-1,46 (м, 4H); MS (ESI) m/z 697 (M+H).
[0243]
Пример 88: (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[(4-(2-изопропил-пиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[4-(1,3,4-триметил-2,6-диоксопиримидин-5-ил)фенил]пропановая кислота (A-27)
Указанное в заголовке соединение получали способом, аналогичным способу стадии 1 примера 27, используя метил (2S)-2-амино-3-[4-(1,3,4-триметил-2,6-диоксопиримидин-5-ил)фенил]пропаноат (M-2) и 2,5-дифтор-4-{[4-(2-изопропилпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино}-бензойную кислоту (M-28).
1
+
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,95 (с, 1H), 9,11 (с, 2H), 8,53 (дд, J=8,0, 2,6 Гц, 1H), 8,02 (д, J=8,6 Гц, 2H), 7,99-7,84 (м, 2H), 7,40-7,16 (м, 4H), 7,16-6,94 (м, 2H), 4,76-4,35 (м, 1H), 3,37 (с, 3H), 3,28-3,10 (м, 5H), 3,00 (дд, J=13,9, 9,9 Гц, 1H), 2,05 (с, 3H), 1,31 (д, J=6,9 Гц, 6H); MS (ESI) m/z 733 (M+H).
[0244]
Пример 89: (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[5-(1,3,4-триметил-2,6-диоксопиримидин-5-ил)-2-пиридил]пропановая кислота (A-28)
Указанное в заголовке соединение получали способом, аналогичным способу стадии 1 примера 27, используя метил (2S)-2-амино-3-[5-(1,3,4-триметил-2,6-диоксопиримидин-5-5-ил)-2-пиридил]пропаноат (M-29) и 2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]-сульфониламино]бензойную кислоту (M-11).
1
+
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,98 (с, 1H), 9,13 (с, 2H), 8,72 (дд, J=7,9, 3,6 Гц, 1H), 8,41 (д, J=2,2 Гц, 1H), 8,11-8,00 (м, 2H), 8,00-7,89 (м, 2H), 7,73 (д, J=7,9 Гц, 1H), 7,47 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,34 (дд, J=10,3, 6,4 Гц, 1H), 7,27 (дд, J=11,4, 6,3 Гц, 1H), 5,04-4,70 (м, 1H), 4,13-3,89 (м, 2H), 3,46 (с, 2H), 3,41 (с, 3H), 3,35-3,24 (м, 1H), 3,22 (с, 3H), 3,18-3,02 (м, 2H), 2,11 (с, 3H), 1,98-1,60 (м, 4H); MS (ESI) m/z 776 (M+H).
[0245]
Справочный пример 1: (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]-бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропановая кислота (A-29)
Указанное в заголовке соединение получали способом, аналогичным способу стадии 1 примера 27, используя метил 3-[6-(1-метил-2,4-диоксо-1,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-3(2H)-ил)пиридин-3-ил]-L-аланинат (M-30) и 2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-ил-пиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]бензойную кислоту (M-11).
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 10,95 (с, 1H), 9,13 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,69 (дд, J=8,2, 2,2 Гц, 1H), 8,56 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,46 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,06-7,99 (м, 2H), 7,99-7,92 (м, 2H), 7,92-7,85 (м, 2H), 7,43-7,36 (м, 1H), 7,33-7,22 (м, 2H), 4,74-4,63 (м, 1H), 4,00-3,90 (м, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,54-3,42 (м, 2H), 3,29 (дд, J=14,1, 4,6 Гц, 1H), 3,19-3,03 (м, 2H), 1,95-1,74 (м, 4H); MS(ESI) m/z 799,51(M+H).
[0246]
Справочный пример 2: (2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[4-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-фенил]пропановая кислота (A-30)
Указанное в заголовке соединение получали способом, аналогичным способу стадии 1 примера 27, используя метил 4-(1-метил-2,4-диоксо-1,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-3(2H)-ил)-L-фенилаланинат (M-8) и 2,5-дифтор-4-[[4-[2-(изопропоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]-сульфониламино]бензойную кислоту (M-19).
1
+
6
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d): δ 10,97 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,96 (с, 1H), 8,60 (дд, J=8,0, 2,6 Гц, 1H), 8,55 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,10-8,02 (м, 2H), 8,02-7,94 (м, 2H), 7,88 (д, J=5,0 Гц, 1H), 7,40-7,24 (м, 4H), 7,24-7,17 (м, 2H), 4,63 (с, 3H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,23 (дд, J=14,0, 4,5 Гц, 1H), 3,06 (дд, J=14,0, 9,9 Гц, 1H); MS(ESI) m/z 758,54(M+H).
[0247]
Пример 90: Изопропил (2S)-2-[[4-[[4-(1-аллил-2-оксо-пиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]-2,5-дифтор-бензоил]амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]пропаноат (C-32)
2
3
Изопропиловый спирт (4 мл) и 4 N хлористоводородную кислоту/диоксан (2 мл) добавляли к A-5 (80 мг, 0,10 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 60°C в течение 2 часов. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, полученный остаток очищали методом ВЭЖХ с обращенной фазой (система HO/CHCN, содержащая 0,1% TFA) с получением TFA-соли указанного в заголовке соединения (53 мг, 57%).
1
+
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,90 (с, 1H), 9,04 (д, J=3,4 Гц, 1H), 9,00 (с, 1H), 8,85 (дд, J=7,6, 3,3 Гц, 1H), 8,74 (д, J=3,4 Гц, 1H), 8,58 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,46 (дд, J=2,4, 0,7 Гц, 1H), 7,93-7,84 (м, 5H), 7,74 (дд, J=8,2, 2,5 Гц, 1H), 7,47 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,38 (дд, J=10,3, 6,3 Гц, 1H), 7,26 (дд, J=11,3, 6,3 Гц, 1H), 6,07-5,95 (м, 1H), 5,26-5,17 (м, 2H), 4,94-4,79 (м, 2H), 4,54 (дт, J=5,9, 1,4 Гц, 2H), 3,61 (с, 3H), 3,36-3,23 (м, 2H), 1,15 (д, J=6,2 Гц, 3H), 1,10 (д, J=6,2 Гц, 3H); MS (ESI) m/z 813 (M+H).
[0248]
Использовали способ, аналогичный способу примера 90, для синтеза C-33 - C-42, применяя в качестве карбоновой кислоты соединения A-5, A-20, A-29 или A-30, и в качестве спирта метанол, этанол, изопропиловый спирт, 3-пентанол, 2-метоксиэтанол или N-(2-гидрокси)морфолин.
[0249]
Пример 91: 1-Этилпропил (2S)-2-[[4-[[4-(1-аллил-2-оксо-пиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]-2,5-дифтор-бензоил]амино]-3-[5-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-2-пиридил]-пропаноат (C-33)
1
+
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,90 (с, 1H), 9,04 (д, J=3,4 Гц, 1H), 9,00 (с, 1H), 8,88 (дд, J=7,6, 3,3 Гц, 1H), 8,73 (д, J=3,4 Гц, 1H), 8,57 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,46 (д, J=2,4 Гц, 1H), 7,94-7,83 (м, 5H), 7,74 (дд, J=8,2, 2,5 Гц, 1H), 7,47 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,35 (дд, J=10,3, 6,3 Гц, 1H), 7,26 (дд, J=11,3, 6,2 Гц, 1H), 6,08-5,93 (м, 1H), 5,27-5,17 (м, 2H), 5,02-4,91 (м, 1H), 4,72-4,61 (м, 1H), 4,57-4,50 (м, 2H), 3,61 (с, 3H), 3,41-3,24 (м, 2H), 1,63-1,32 (м, 4H), 0,86-0,68 (м, 6H); MS (ESI) m/z 841 (M+H).
[0250]
Пример 92: Метил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетрагидро-пиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]-пропаноат (C-34)
1
+
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,99 (с, 1H), 9,14 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,86 (дд, J=8,0, 2,0 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,47 (д, J=2,0 Гц, 1H), 8,07-8,00 (м, 2H), 8,00-7,94 (м, 2H), 7,94-7,85 (м, 2H), 7,41 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,37-7,23 (м, 2H), 4,87-4,67 (м, 1H), 4,05-3,88 (м, 2H), 3,67 (с, 3H), 3,61 (с, 3H), 3,54-3,43 (м, 2H), 3,33-3,22 (м, 1H), 3,22-3,03 (м, 2H), 2,02-1,72 (м, 4H); MS(ESI) m/z 813,47 (M+H).
[0251]
Пример 93: Этил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетрагидро-пиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]-пропаноат (C-35)
1
+
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,98 (с, 1H), 9,14 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,86 (дд, J=7,7, 1,7 Гц, 1H), 8,57 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,47 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,06-8,00 (м, 2H), 7,99-7,94 (м, 2H), 7,94-7,87 (м, 2H), 7,41 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,34-7,24 (м, 2H), 4,78-4,63 (м, 1H), 4,11 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 4,00-3,90 (м, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,49-3,41 (м, 2H), 3,25 (дд, J=14,1, 5,6 Гц, 1H), 3,18-3,07 (м, 2H), 1,98-1,70 (м, 4H), 1,16 (т, J=7,1 Гц, 3H); MS (ESI) m/z 827 (M+H).
[0252]
Пример 94: Изопропил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетра-гидропиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-36)
1
+
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,97 (с, 1H), 9,14 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,87-8,79 (м, 1H), 8,56 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,46 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,03 (д, J=8,6 Гц, 2H), 7,97 (д, J=8,6 Гц, 2H), 7,94-7,85 (м, 2H), 7,40 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,28 (ддд, J=11,1, 6,3, 4,5 Гц, 2H), 4,91 (сеп, J=6,2 Гц, 1H), 4,72-4,61 (м, 1H), 4,02-3,90 (м, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,52-3,39 (м, 2H), 3,28-3,03 (м, 3H), 1,98-1,71 (м, 4H), 1,18 (д, J=6,2 Гц, 3H), 1,13 (д, J=6,2 Гц, 3H); MS (ESI) m/z 841 (M+H).
[0253]
Пример 95: 1-Этилпропил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетра-гидропиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-37)
1
+
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,97 (с, 1H), 9,14 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,86 (д, J=7,8 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,49 (с, 1H), 8,03 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,99-7,91 (м, 3H), 7,89 (д, J=4,9 Гц, 1H), 7,40 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,32-7,20 (м, 2H), 4,82-4,62 (м, 2H), 4,01-3,89 (м, 2H), 3,60 (с, 3H), 3,53-3,42 (м, 2H), 3,33-3,22 (м, 1H), 3,19-3,02 (м, 2H), 1,98-1,74 (м, 4H), 1,63-1,40 (м, 4H), 0,90-0,73 (м, 6H); MS (ESI) m/z 869 (M+H).
[0254]
Пример 96: 2-Метоксиэтил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]-бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-38)
1
+
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,97 (с, 1H), 9,14 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,87 (дд, J=7,9, 1,7 Гц, 1H), 8,56 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,47 (д, J=2,4 Гц, 1H), 8,06-7,99 (м, 2H), 7,98-7,85 (м, 4H), 7,40 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,33-7,22 (м, 2H), 4,81-4,69 (м, 1H), 4,24-4,15 (м, 2H), 4,00-3,90 (м, 2H), 3,59 (с, 3H), 3,54-3,42 (м, 4H), 3,30-3,25 (м, 1H), 3,24 (с, 3H), 3,19-3,04 (м, 2H), 1,94-1,74 (м, 4H); MS (ESI) m/z 857 (M+H).
[0255]
Пример 97: 2-Морфолиноэтил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]сульфониламино]-бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропаноат (C-39)
1
+
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 11,00 (с, 1H), 9,14 (с, 2H), 9,03-8,93 (м, 2H), 8,57 (д, J=4,9 Гц, 1H), 8,49 (д, J=2,3 Гц, 1H), 8,07-7,85 (м, 6H), 7,46-7,40 (м, 1H), 7,39-7,21 (м, 2H), 4,91-4,78 (м, 1H), 4,53-4,35 (м, 2H), 4,00-3,64 (м, 8H), 3,59 (с, 3H), 3,54-3,35 (м, 4H), 3,24-3,02 (м, 5H), 1,96-1,72 (м, 4H); MS (ESI) m/z 912 (M+H).
[0256]
Пример 98: Изопропил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метокси-метил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[4-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)фенил]пропаноат (C-40)
1
+
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,97 (с, 1H), 9,19 (с, 2H), 8,97 (с, 1H), 8,76 (дд, J=7,3, 2,0 Гц, 1H), 8,55 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,16-8,02 (м, 2H), 8,02-7,93 (м, 2H), 7,88 (дд, J=5,0, 0,8 Гц, 1H), 7,42-7,35 (м, 2H), 7,35-7,24 (м, 2H), 7,24-7,12 (м, 2H), 5,02-4,81 (м, 1H), 4,70-4,51 (м, 3H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,26-3,00 (м, 2H), 1,18 (д, J=6,2 Гц, 3H), 1,12 (д, J=6,2 Гц, 3H); MS (ESI) m/z 800 (M+H).
[0257]
Пример 99: 1-Этилпропил (2S)-2-[[2,5-дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]сульфониламино]бензоил]-амино]-3-[4-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-фенил]пропаноат (C-41)
1
+
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,98 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,96 (с, 1H), 8,79 (дд, J=7,7, 1,9 Гц, 1H), 8,55 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,13-8,02 (м, 2H), 8,02-7,93 (м, 2H), 7,88 (д, J=5,0 Гц, 1H), 7,48-7,35 (м, 2H), 7,33-7,24 (м, 2H), 7,25-7,16 (м, 2H), 4,77-4,59 (м, 4H), 3,59 (с, 3H), 3,47-3,37 (м, 3H), 3,27-3,16 (м, 1H), 3,16-3,03 (м, 1H), 1,64-1,37 (м, 4H), 0,90-0,73 (м, 6H); MS(ESI) m/z 828,47 (M+H).
[0258]
Пример 100: Метил (2S)-2-[[4-[[4-(2-этилпиримидин-5-ил)-фенил]сульфониламино]-2,3,5,6-тетрафторбензоил]амино]-3-[4-(1,3,4-триметил-2,6-диоксопиримидин-5-ил)фенил]пропаноат (C-42)
1
+
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,85 (с, 1H), 9,46 (д, J=7,9 Гц, 1H), 9,14 (с, 2H), 8,05 (д, J=8,5 Гц, 2H), 7,90 (д, J=8,4 Гц, 2H), 7,31-7,21 (м, 2H), 7,14-6,91 (м, 2H), 5,03-4,58 (м, 1H), 3,50-3,26 (м, 4H), 3,26-3,11 (м, 6H), 3,11-2,82 (м, 3H), 2,20-1,87 (м, 3H), 1,32 (т, J=7,6 Гц, 3H); MS (ESI) m/z 769 (M+H).
[0259]
Пример 101: 2,5-Дифтор-N-[(1S)-2-(гидроксиамино)-1-[[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]метил]-2-оксо-этил]-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]фенил]-сульфониламино]бензамид (C-43)
2
3
(2S)-2-[[2,5-Дифтор-4-[[4-[2-(метоксиметил)пиримидин-5-ил]-фенил]сульфониламино]бензоил]амино]-3-[6-(1-метил-2,4-диоксо-пиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]пропановую кислоту (A-23) (50,2 мг, 0,0662 ммоль), 1-гидрокси-7-азабензотриазол (10,8 мг, 0,0794 ммоль) и гидроксиамина гидрохлорид (13,8 мг, 0,199 ммоль) растворяли в ацетонитриле (2 мл), добавляли диизопропилэтиламин (45,0 мкл, 0,265 ммоль) и O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N',-тетраметилурония гексафторфосфат (30,2 мг, 0,0794 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную жидкость концентрировали при пониженном давлении, полученный остаток очищали методом ВЭЖХ с обращенной фазой (система HO/CHCN, содержащая 0,1% TFA) с получением TFA-соли указанного в заголовке соединения (26,5 мг, 45%).
1
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,94 (с, 1H), 10,86 (с, 1H), 9,18 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,70-8,61 (м, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,54-8,41 (м, 1H), 8,09-8,02 (м, 2H), 8,00-7,94 (м, 2H), 7,92-7,83 (м, 2H), 7,40 (д, J=8,1 Гц, 1H), 7,26 (ддд, J=13,0, 10,6, 6,3 Гц, 2H), 4,67-4,58 (м, 3H), 3,59 (с, 3H), 3,40 (с, 3H), 3,11 (дд, J=14,0, 5,0 Гц, 1H), 3,02 (дд, J=14,0, 9,8 Гц, 1H); MS (ESI) m/z 774 (M+H).
[0260]
Использовали способ, аналогичный способу примера 101, для синтеза C-44 и C-45, применяя в качестве карбоновой кислоты соединение A-29 и в качестве амина гидроксиамина гидрохлорид или метоксиамина гидрохлорид.
[0261]
Пример 102: 2,5-Дифтор-N-[(1S)-2-(гидроксиамино)-1-[[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]метил]-2-оксоэтил]-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]-сульфониламино]бензамид (C-44)
+
MS(ESI) m/z 814,63 (M+H).
[0262]
Пример 103: 2,5-Дифтор-N-[(1S)-2-(метоксиамино)-1-[[6-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)-3-пиридил]метил]-2-оксоэтил]-4-[[4-(2-тетрагидропиран-4-илпиримидин-5-ил)фенил]-сульфониламино]бензамид (C-45)
1
+
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 11,43 (с, 1H), 10,96 (с, 1H), 9,14 (с, 2H), 8,99 (с, 1H), 8,70 (д, J=8,0 Гц, 1H), 8,57 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,45 (д, J=2,4 Гц, 1H), 8,04 (д, J=8,3 Гц, 2H), 7,97 (д, J=8,3 Гц, 2H), 7,93-7,82 (м, 2H), 7,41 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,38-7,16 (м, 2H), 4,67-4,47 (м, 1H), 4,05-3,87 (м, 2H), 3,60 (с, 3H), 3,51 (с, 3H), 3,50-3,42 (м, 2H), 3,23-2,98 (м, 3H), 2,03-1,69 (м, 4H); MS(ESI) m/z 828,71 (M+H).
[0263]
Пример 104: Изопропил (2S)-2-[[4-[[4-(4-этилтриазол-1-ил)-фенил]сульфониламино]-2,5-дифторбензоил]амино]-3-[4-(1-метил-2,4-диоксопиридо[3,4-d]пиримидин-3-ил)фенил]пропаноат (C-46)
Для получения карбоновой кислоты использовали способ, аналогичный способу стадии 1 примера 27, применяя метил 4-(1-метил-2,4-диоксо-1,4-дигидропиридо[3,4-d]пиримидин-3(2H)-ил)-L-фенилаланинат (M-8) и 4-[[4-(4-этилтриазол-1-ил)фенил]-сульфониламино]-2,5-дифторбензойную кислоту (M-26), и затем синтезировали изопропиловый эфир полученного продукта, используя способ, аналогичный способу примера 90, для получения указанного в заголовке соединения.
1
+
H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ 10,93 (с, 1H), 8,97 (с, 1H), 8,76 (дд, J=7,4, 1,8 Гц, 1H), 8,69 (с, 1H), 8,55 (д, J=5,0 Гц, 1H), 8,23-8,09 (м, 2H), 8,09-7,93 (м, 2H), 7,88 (д, J=5,0 Гц, 1H), 7,36 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,34-7,23 (м, 2H), 7,21 (д, J=8,2 Гц, 2H), 5,06-4,72 (м, 1H), 4,72-4,53 (м, 1H), 3,59 (с, 3H), 3,26-3,00 (м, 2H), 2,72 (кв, J=7,6 Гц, 2H), 1,25 (т, J=7,5 Гц, 3H), 1,18 (д, J=6,2 Гц, 3H), 1,12 (д, J=6,2 Гц, 3H); MS (ESI) m/z 773 (M+H).
[0264]
(1) Испытание соединений на их ингибирующую активность в отношении связывания α4β1-интегрина с VCAM-1
Исследовали способность испытуемых соединений ингибировать связывание клеточного штамма Jurkat, T-клеточной линии человека, которая, как известно, экспрессирует α4β1-интегрин, с лигандом VCAM-1.
96-луночный титрационный микропланшет в течение ночи при 4°C покрывали раствором рекомбинантного человеческого VCAM-1/Fc (R&D systems), разбавленным с помощью буфера A (карбонатного буфера, pH 9,6). После одноразового промывания с помощью PBS, добавляли 150 мкл/лунка блокирующего реагента Block Ace (фирмы Snow Brand Milk Products Co., Ltd.), и инкубировали при комнатной температуре в течение 2 часов. После удаления планшета из термостата, его промывали один раз с помощью PBS.
2
50
В планшет с нанесенным на него VCAM-1/Fc добавляли 100 мкл каждого из испытуемых соединений и клетки Jurkat, разбавленные до различных концентраций с помощью связывающего буферного раствора (среды DMEM, содержащей 40 мM HEPES, 0,2% BSA и 4 мM MnCl), и планшет инкубировали при 30°C в течение от 15 минут до 60 минут. После того, как клетки связывались в лунках, несвязанные клетки удаляли промыванием с помощью PBS. В планшет добавляли 50 мкл/лунка буферного раствора C (PBS, содержащий 1,5% Triton X-100) для растворения связанных клеток Jurkat. Добавляли 30 мкл субстратного буфера (Promega, CytoTox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay) к 30 мкл клеточного лизата для проведения реакции в течение 30 минут при комнатной температуре в темном месте. Добавляли 30 мкл останавливающего раствора (Promega, CytoTox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay) для определения поглощения при 490 нм на планшет-ридере. Величину поглощения получали путем детектирования активности лактат-дегидрогеназы (LDH), извлеченной в надосадочную жидкость каждой лунки, то есть, величина поглощения пропорциональна числу клеток Jurkat, остающихся на планшете в результате связывания с VCAM-1. Испытание проводили два раза, и определяли степень связывания клеток при различных концентрациях соединений, при этом величину поглощения лунки, не содержащей испытуемого соединения, принимали за 100% для расчета концентрации IC, при которой 50% связывания было ингибировано. В качестве испытуемых соединений использовали соединения карбоновой кислоты (соединения A-1 - A-28) наряду с соединениями, синтезированными в соответствующих примерах. Аналогичный подход используют и в следующем далее описании.
[0265]
(2) Испытание соединений на их ингибирующую активность в отношении связывания α4β7-интегрина с MAdCAM-1
Исследовали способность испытуемых соединений ингибировать связывание клеточного штамма RPMI-8866, В-клеточной линии человека, которая, как известно, экспрессирует α4β1-интегрин, с лигандом MAdCAM-1.
96-луночный титрационный микропланшет в течение ночи при 4°C покрывали раствором рекомбинантного мышиного MAdCAM-1/Fc (R&D systems), разбавленным с помощью буфера A (карбонатного буфера, pH 9,6). После одноразового промывания с помощью PBS, добавляли 150 мкл/лунка блокирующего реагента Block Ace (фирмы Snow Brand Milk Products Co., Ltd.), и инкубировали при комнатной температуре в течение 2 часов. После удаления планшета из термостата, его промывали один раз с помощью PBS.
2
50
В планшет с нанесенным на него MAdCAM-1/Fc добавляли 100 мкл каждого из испытуемых соединений и клетки RPMI-8866, разбавленные до различных концентраций с помощью связывающего буферного раствора (среды DMEM, содержащей 40 мM HEPES, 0,2% BSA и 4 мM MnCl), и планшет инкубировали при 30°C в течение от 15 минут до 60 минут. После того, как клетки связывались в лунках, несвязанные клетки удаляли промыванием с помощью PBS. В планшет добавляли 50 мкл/лунка буферного раствора C (PBS, содержащий 1,5% Triton X-100) для растворения связанных клеток RPMI-8866. Добавляли 30 мкл субстратного буфера (Promega, CytoTox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay) к 30 мкл клеточного лизата для проведения реакции в течение 30 минут при комнатной температуре в темном месте. Добавляли 30 мкл останавливающего раствора (Promega, CytoTox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay) для определения поглощения при 490 нм на планшет-ридере. Величину поглощения получали путем детектирования активности лактат-дегидрогеназы (LDH), извлеченной в надосадочную жидкость каждой лунки, то есть, величина поглощения пропорциональна числу клеток RPMI-8866, остающихся на планшете в результате связывания с MAdCAM-1. Испытание проводили два раза, и определяли степень связывания клеток при различных концентрациях соединений, при этом величину поглощения лунки, не содержащей испытуемого соединения, принимали за 100% для расчета концентрации IC, при которой 50% связывания было ингибировано.
50
50
Селективность определяли путем деления величины IC, полученной при испытании соединений на их ингибирующую активность в отношении связывания α4β1-интегрина с VCAM-1, на величину IC, полученную при испытании соединений на их ингибирующую активность в отношении связывания α4β1-интегрина с MAdCAM-1.
[0266]
(3) Испытание соединений на их ингибирующую активность в отношении связывания α4β7-интегрина с MAdCAM-1 в присутствии сыворотки
Исследовали способность испытуемых соединений ингибировать связывание клеточного штамма RPMI-8866, В-клеточной линии человека, которая, как известно, экспрессирует α4β1-интегрин, с лигандом MAdCAM-1.
96-луночный титрационный микропланшет в течение ночи при 4°C покрывали раствором рекомбинантного мышиного MAdCAM-1/Fc (R&D systems), разбавленным с помощью буфера A (карбонатного буфера, pH 9,6). После одноразового промывания с помощью PBS, добавляли 150 мкл/лунка блокирующего реагента Block Ace (фирмы Snow Brand Milk Products Co., Ltd.), и инкубировали при комнатной температуре в течение 2 часов. После удаления планшета из термостата, его промывали один раз с помощью PBS.
2
50
В планшет с нанесенным на него MAdCAM-1/Fc добавляли 100 мкл каждого из испытуемых соединений и клетки RPMI-8866, разбавленные до различных концентраций с помощью связывающего буферного раствора (среды DMEM, содержащей 40 мM HEPES, 0,2% BSA и 4 мM MnCl), в результате чего конечная концентрация сыворотки человека составляла 50%, и планшет инкубировали при 30°C в течение от 15 минут до 60 минут. После того, как клетки связывались в лунках, несвязанные клетки удаляли промыванием с помощью PBS. В планшет добавляли 50 мкл/лунка буферного раствора C (PBS, содержащий 1,5% Triton X-100) для растворения связанных клеток RPMI-8866. Добавляли 30 мкл субстратного буфера (Promega, CytoTox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay) к 30 мкл клеточного лизата для проведения реакции в течение 30 минут при комнатной температуре в темном месте. Добавляли 30 мкл останавливающего раствора (Promega, CytoTox 96 Non-Radioactive Cytotoxicity Assay) для определения поглощения при 490 нм на планшет-ридере. Величину поглощения получали путем детектирования активности лактат-дегидрогеназы (LDH), извлеченной в надосадочную жидкость каждой лунки, то есть, величина поглощения пропорциональна числу клеток RPMI-8866, остающихся на планшете в результате связывания с MAdCAM-1. Испытание проводили два раза, и определяли степень связывания клеток при различных концентрациях соединений, при этом величину поглощения лунки, не содержащей испытуемого соединения, принимали за 100% для расчета концентрации IC, при которой 50% связывания было ингибировано.
[0267]
50
50
Результаты приведены в таблице 1 и таблице 2. Было подтверждено, что все описанные в изобретении соединения обладают селективностью, которую определяли путем деления величины IC, полученной при испытании соединений на их ингибирующую активность в отношении связывания α4β1-интегрина с VCAM-1, на величину IC, полученную при испытании соединений на их ингибирующую активность в отношении связывания α4β1-интегрина с MAdCAM-1, составляющей 100 раз или более, и, таким образом, все эти соединения обладают требуемыми свойствами. Испытание соединений на их ингибирующую активность в отношении связывания α4β1-интегрина с VCAM-1 и испытание соединений на их ингибирующую активность в отношении связывания α4β7-интегрина с MAdCAM-1 проводили в соответствии с упомянутыми выше способами, описанными в испытаниях (1) и (2).
[0268]
Таблица 1
Пример №
α4β7-сывороткиОценка активности при добавлении α4β7-сыворотки1-10 нM: A,10-50 нM: B,50-200 нM: C,>200 нM: D
Пример 26
B
Пример 27
C
Пример 28
B
Пример 29
C
Пример 30
B
Пример 33
B
Пример 34
B
Пример 36
C
Пример 37
B
Пример 38
B
Пример 39
B
Пример 40
C
Пример 41
D
Пример 42
C
Пример 43
D
Пример 44
C
Пример 45
B
Пример 46
D
Пример 47
B
Пример 51
B
Таблица 2
Пример №
α4β7 сывороткиОценка активности при добавлении α4β7-сыворотки1-10 нM: A,10-50 нM: B,50-200 нM: C,>200 нM: D
Пример 85
B
Пример 86
B
Пример 87
D
Пример 88
C
Пример 89
D
[0269]
50
50
Как видно из результатов по селективности, определяемой путем деления величины IC, полученной при испытании соединений на их ингибирующую активность в отношении связывания α4β1-интегрина с VCAM-1, на величину IC, полученную при испытании соединений на их ингибирующую активность в отношении связывания α4β1-интегрина с MAdCAM-1, соединения настоящего изобретения по сравнению с соединением, описанным в патентной публикации 1, имеют высокую селективность с низкой активностью в отношении α4β1 и высокой активностью в отношении α4β7, и их результатов, представленных в таблице 1, видно, что, в частности, высокой является ингибирующая активность в отношении связывания α4β7-интегрина с MAdCAM-1 в присутствии сыворотки. Высокая селективность, характеризующаяся низкой активностью в отношении α4β1 и высокой активностью в отношении α4β7, может уменьшать воздействие на α4β1, который подавляет инфильтрацию лимфоцитов, циркулирующих по всему организму, и может значительно подавлять воздействие на α4β7, который специфически воздействует на кишечник, и, поэтому, высокая селективность имеет преимущество в том, что дает возможность эффективного лечения адаптационных болезней.