СПОСОБЫ ИССЛЕДОВАНИЙ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ СОЕДИНЕНИЙ, МОДУЛИРУЮЩИХ ГОРЬКИЙ ВКУС

1. Способ выявления соединения, которое модулирует горький вкус за счет соли калия, включающий:
a) обеспечение первой и второй клеток,
причем каждая из указанных клеток экспрессирует один или более рецепторов горького вкуса, восприимчивых к соли калия, и
при этом каждая из указанных клеток экспрессирует один или более одинаковых рецепторов горького вкуса;
b) приведение указанной первой клетки в контакт с веществом, стимулирующим чувство вкуса, которое активирует' один или более из рецепторов горького вкуса, восприимчивых к соли калия;
c) приведение указанной второй клетки в контакт с исследуемым соединением и веществом, которое стимулирует чувство вкуса;
d) исследование указанных первой и второй клеток для определения активации рецептора горького вкуса и
e) сравнение степени активации рецептора горького вкуса указанной первой клетки со степенью активации рецептора горького вкуса указанной второй клетки,
причем рецепторы горького вкуса, восприимчивые к соли калия, выбраны из группы, состоящей из TAS2R4, TAS2R9, TAS2R13, TAS2R14, TAS2R38, TAS2R39, TAS2R44 и TAS2R60; и
при этом исследуемое соединение представляет собой модулятор горького вкуса за счет соли калия, если активность рецептора горького вкуса указанной второй клетки отличается от активности рецептора горького вкуса указанной первой клетки.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанную первую клетку отмывают после исследования активности рецептора горького вкуса, чтобы обеспечить указанную вторую клетку.
3. Способ выявления соединения, которое селективно модулирует горький вкус за счет соли калия, включающий:
а) обеспечение первой и второй панелей клеточных линий,
причем каждая клеточная линия содержит клетки, которые экспрессируют один или более рецепторов горького вкуса, восприимчивых к соли калия,
при этом каждый рецептор экспрессируется по меньшей мере в одной клеточной линии и при этом первая и вторая панели содержат одинаковые клеточные линии;
b) приведение каждой клеточной линии в первой панели в контакт с веществом, стимулирующим чувство вкуса, которое активирует по меньшей мере два из рецепторов горького вкуса, восприимчивых к соли калия;
c) приведение каждой клеточной линии во второй панели в контакт с исследуемым соединением и веществом, стимулирующим чувство вкуса;
d) исследование каждой клеточной линии для определения активации рецептора горького вкуса;
причем рецепторы горького вкуса, восприимчивые к соли калия, выбраны из группы, состоящей из TAS2R4, TAS2R9, TAS2R13, TAS2R14, TAS2R38, TAS2R39, TAS2R44 и TAS2R60; и
при этом исследуемое соединение представляет собой селективный модулятор горького вкуса за счет соли калия, если активность рецептора горького вкуса по меньшей мере двух из рецепторов горького вкуса, восприимчивых к соли калия, во второй панели отличается от активности в первой панели.
4. Способ по п. 3, отличающийся тем, что активность рецептора горького вкуса по меньшей мере трех из рецепторов горького вкуса, восприимчивых к соли калия, во второй панели отличается от активности в первой панели.
5. Способ по п. 3, отличающийся тем, что активность рецептора горького вкуса по меньшей мере четырех из рецепторов горького вкуса, восприимчивых к соли калия, во второй панели отличается от активности в первой панели.
6. Способ по п. 3, отличающийся тем, что активность рецептора горького вкуса по меньшей мере пяти из рецепторов горького вкуса, восприимчивых к соли калия, во второй панели отличается от активности в первой панели.
7. Способ по п. 3, отличающийся тем, что активность рецептора горького вкуса по меньшей мере шести из рецепторов горького вкуса, восприимчивых к соли калия, во второй панели отличается от активности в первой панели.
8. Способ по п. 3, отличающийся тем, что активность рецептора горького вкуса по меньшей мере семи из рецепторов горького вкуса, восприимчивых к соли калия, во второй панели отличается от активности в первой панели.
9. Способ по п. 3, отличающийся тем, что активность рецептора горького вкуса каждого из рецепторов горького вкуса, восприимчивых к соли калия, во второй панели отличается от активности в первой панели.
10. Способ по любому из пп. 3-9, отличающийся тем, что каждая панель содержит клеточные линии, которые экспрессируют рецептор горького вкуса, выбранный из группы, состоящей из: рецептора горького вкуса TAS2R1, TAS2R3, TAS2R4, TAS2R5, TAS2R7, TAS2R8, TAS2R9, TAS2R10, TAS2R13, TAS2R14, TAS2R16, TAS2R38, TAS2R39, TAS2R40, TAS2R41, TAS2R43, TAS2R44, TAS2R45, TAS2R46, TAS2R47, TAS2R48, TAS2R49, TAS2R50, TAS2R55 и TAS2R60,
причем каждый рецептор экспрессируется по меньшей мере в одной клеточной линии, и при этом первая и вторая панели содержат одинаковые клеточные линии.
11. Способ по любому из пп. 3-9, отличающийся тем, что указанные клеточные линии из первой панели отмывают после исследования активности рецептора горького вкуса, чтобы обеспечить указанную вторую панель клеточных линий.
12. Способ выявления соединения, которое модулирует горький вкус за счет соли калия, включающий:
a) обеспечение клетки,   +которая экспрессирует один или более рецепторов горького вкуса, восприимчивых к соли калия;
b) приведение указанной клетки в контакт с веществом, стимулирующим чувство вкуса, которое активирует один или более из рецепторов горького вкуса, восприимчивых к соли калия;
c) исследование указанной клетки для определения активации рецептора горького вкуса;
d) отмывку указанной клетки;
e) приведение указанной клетки в контакт с исследуемым соединением и веществом, стимулирующим чувство вкуса;
f) исследование указанной клетки для определения активации рецептора горького вкуса и
g) сравнение степени активации рецептора горького вкуса указанной клетки на этапе (с) со степенью активации рецептора горького вкуса указанной клетки на этапе (f),
причем рецепторы горького вкуса, восприимчивые к соли калия, выбраны из группы, состоящей из TAS2R4, TAS2R9, TAS2R13, TAS2R14, TAS2R38, TAS2R39, TAS2R44 и TAS2R60; и
при этом исследуемое соединение представляет собой модулятор горького вкуса за счет соли калия, если активность рецептора горького вкуса на этапе (f) отличается от активности рецептора горького вкуса на этапе (с).
13. Способ по п. 12, отличающийся тем, что указанное исследуемое соединение является ингибитором горького вкуса за счет соли калия или иона калия, если активность рецептора горького вкуса в присутствии исследуемого соединения и вещества, которое стимулирует чувство вкуса, меньше активности рецептора горького вкуса в присутствии вещества, которое стимулирует чувство вкуса, без исследуемого соединения.
14. Способ по п. 12, отличающийся тем, что указанное исследуемое соединение является усилителем горького вкуса за счет соли калия или иона калия, если активность рецептора горького вкуса в присутствии исследуемого соединения и вещества, которое стимулирует чувство вкуса, больше активности рецептора горького вкуса в присутствии вещества, которое стимулирует чувство вкуса, без исследуемого соединения.
15. Способ по п. 12, отличающийся тем, что по меньшей мере один из рецепторов горького вкуса, восприимчивых к соли калия, выбран из группы, состоящей из TAS2R38 и TAS2R39.
16. Способ по п. 12, отличающийся тем, что указанное вещество, которое стимулирует чувство вкуса, представляет собой калийсодержащее вещество, которое стимулирует чувство вкуса, или универсальное горькое соединение.
17. Способ по п. 16, отличающийся тем, что указанное калийсодержащее вещество, которое стимулирует чувство вкуса, выбрано из группы, состоящей из KCl, лактата калия, ацесульфама К, бензоата калия, сорбата калия, нитрата калия, фосфата калия (двухосновного), глюконата калия, ацетата калия и сульфата калия.
18. Способ по п. 16, отличающийся тем, что указанное вещество, которое стимулирует чувство вкуса, не является KCl, лактатом калия или ацесульфамом К.
19. Способ по п. 18, отличающийся тем, что указанное калийсодержащее вещество, которое стимулирует чувство вкуса, выбрано из группы, состоящей из бензоата калия, сорбата калия, нитрата калия, фосфата калия (двухосновного), глюконата калия, ацетата калия и сульфата калия.
20. Способ по п. 12, отличающийся тем, что указанный рецептор горького вкуса находится в комплексе с G-белком.
21. Способ по п. 20, отличающийся тем, что указанный G-белок представляет собой Gq-белок, альфа-трансдуцин или альфа-гастдуцин.
22. Способ по п. 21, отличающийся тем, что указанный Gq-белок представляет собой Gα15-белок.
23. Способ по п. 12, отличающийся тем, что активность рецептора горького вкуса определяют путем измерения внутриклеточной концентрации кальция.
24. Способ по п. 23, отличающийся тем, что внутриклеточную концентрацию кальция определяют с использованием кальцийчувствительного флуоресцентного красителя.
25. Способ по п. 24, отличающийся тем, что указанный кальцийчувствительный флуоресцентный краситель представляет собой краситель флуо-4 или кальций-3.
26. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанные первая и вторая клетки присутствуют в клеточных линиях в условиях in vitro.
27. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанные первая и вторая клетки присутствуют в панелях клеточных линий в условиях in vitro.
28. Способ по любому из пп. 16-27, отличающийся тем, что указанное универсальное горькое соединение представляет собой денатониум бензоат или денатониум сахарид.
29. Способ по любому из пп. 20-27, отличающийся тем, что указанная соль калия представляет собой KCl и согласно которому рецепторы горького вкуса, восприимчивые к соли калия, выбраны из группы, состоящей из TAS2R38 и TAS2R39.
30. Способ по п. 29, дополнительно содержащий второй рецептор горького вкуса, восприимчивый к соли калия, выбранный из группы, состоящей из TAS2R4, TAS2R9, TAS2R13, TAS2R14, TAS2R44 и TAS2R60.
31. Способ по любому из пп. 12-27, отличающийся тем, что указанная соль калия представляет собой ацесульфам К и согласно которому рецепторы горького вкуса, восприимчивые к соли калия, выбраны из группы, состоящей из TAS2R38 и TAS2R39.
32. Способ по п. 31, дополнительно включающий второй рецептор горького вкуса, восприимчивый к соли калия, выбранный из группы, состоящей из TAS2R1, TAS2R4, TAS2R9, TAS2R13, TAS2R14, TAS2R16 и TAS2R44.
33. Способ по любому из пп. 12-27, отличающийся тем, что указанная соль калия представляет собой лактат калия и согласно которому рецептор горького вкуса, восприимчивый к соли калия, выбран из группы, состоящей из TAS2R4, TAS2R9, TAS2R13, TAS2R14, TAS2R44, TAS2R46 и TAS2R60.
34. Способ по любому из пп. 12-27, отличающийся тем, что указанная соль калия представляет собой бензоат калия.
35. Способ по любому из пп. 12-27, отличающийся тем, что указанная соль калия представляет собой сорбат калия.
36. Способ по любому из пп. 12-27, отличающийся тем, что указанная соль калия представляет собой нитрат калия.
37. Способ по п. 36, отличающийся тем, что указанные рецепторы горького вкуса, восприимчивые к соли калия, выбраны из группы, состоящей из TAS2R4, TAS2R9, TAS2R13, TAS2R14, TAS2R38, TAS2R39 и TAS2R44.
38. Способ по любому из пп. 12-27, отличающийся тем, что указанная соль калия представляет собой фосфат калия (двухосновный).
39. Способ по п. 38, отличающийся тем, что указанные рецепторы горького вкуса, восприимчивые к соли калия, выбраны из группы, состоящей из TAS2R4, TAS2R9, TAS2R13, TAS2R14, TAS2R38, TAS2R39 и TAS2R44.
40. Способ по любому из пп. 12-27, отличающийся тем, что указанная соль калия представляет собой глюконат калия и согласно которому рецептор горького вкуса, восприимчивый к соли калия, выбран из группы, состоящей из TAS2R4, TAS2R9, TAS2R13, TAS2R14, TAS2R38, TAS2R39 и TAS2R44.
41. Способ по любому из пп. 12-27, отличающийся тем, что указанная соль калия представляет собой ацетат калия и согласно которому рецепторы горького вкуса, восприимчивые к соли калия, выбраны из группы, состоящей из TAS2R4, TAS2R9, TAS2R13, TAS2R14, TAS2R44 и TAS2R60.
42. Способ по любому из пп. 12-27, отличающийся тем, что указанная соль калия представляет собой сульфат калия.
43. Способ по любому из пп. 12-27, отличающийся тем, что указанные рецепторы горького вкуса, восприимчивые к соли калия, выбраны из группы, состоящей из TAS2R4, TAS2R9, TAS2R13, TAS2R14, TAS2R38, TAS2R39 и TAS2R44.
44. Способ по п. 43, дополнительно содержащий второй рецептор горького вкуса, восприимчивый к соли калия, который представляет собой TAS2R60.
45. Способ по любому из пп. 12-27, отличающийся тем, что указанные рецепторы горького вкуса, восприимчивые к соли калия, выбраны из группы, состоящей из TAS2R4, TAS2R9, TAS2R13, TAS2R14, TAS2R38 и TAS2R44.
46. Способ по п. 45, дополнительно содержащий второй рецептор горького вкуса, восприимчивый к соли калия, выбранный из группы, состоящей из TAS2R39 и TAS2R60.
47. Способ по любому из пп. 12-27, отличающийся тем, что указанные рецепторы горького вкуса, восприимчивые к соли калия, выбраны из группы, состоящей из TAS2R4, TAS2R9, TAS2R13, TAS2R14 и TAS2R44.
48. Способ по п. 47, дополнительно содержащий второй рецептор горького вкуса, восприимчивый к соли калия, выбранный из группы, состоящей из TAS2R38, TAS2R39 и TAS2R60.
49. Способ по п. 48, отличающийся тем, что указанный TAS2R38 представляет собой TAS2R38 PAV.