МАТЕРИАЛ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК, КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Композиция, содержащая:
кондиционированную стволовыми клетками среду;
один или более противомикробный агент; и
один или более пленкообразующий агент.
2. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что кондиционированная среда содержит VEGF или GRO/KG.
3. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что кондиционированная среда содержит по меньшей мере два из ИЛ-10, IP-10, TGF-β1 или TGF-β2.
4. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что кондиционированная среда содержит менее 500 пг/мл OPG или менее 80 пг/мл TGF-β3.
5. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что кондиционированная среда содержит по меньшей мере 500 пг/мл GRO/KC или по меньшей мере 4000 пг/мл VEGF.
6. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что количество VEGF в кондиционированной среде по меньшей мере в 5 раз выше, чем количество OPG.
6
2
7. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что кондиционированная среда кондиционирована стволовыми клетками, имеющими по меньшей мере одну из следующих характеристик, когда 0,7×10 клеток высевают в 75 см флакон и культивируют в течение по меньшей мере 96 часов: (а) клетки продуцируют по меньшей мере 4,5 мМ лактата в течение 24 часов после замены среды; (b) клетки продуцируют по меньшей мере 150 пг/мл GRO/KC в течение 24 часов после замены среды; (с) клетки продуцируют менее 250 пг/мл OPG через 24 часа после замены среды; или (d) клетки продуцируют менее 80 пг/мл TGF-β3 через 24 часа после замены среды.
8. Композиция по п. 7, отличающаяся тем, что стволовые клетки, применяемые для кондиционирования среды, имеют по меньшей мере две указанные характеристики.
9. Композиция по п. 7, отличающаяся тем, что стволовые клетки, применяемые для кондиционирования среды, имеют по меньшей мере три указанные характеристики.
10. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что стволовые клетки, применяемые для кондиционирования среды, характеризуются положительной экспрессией маркеров CD29 и CD44 и отрицательной экспрессией маркеров CD11b и CD45.
11. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что общее количество кондиционированной среды в композиции может варьироваться от 0,00001 до 99,99% по объему.
12. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что пленкообразующий агент представляет собой по меньшей мере одно из производного целлюлозы, поливинилпирролидона, акрилатного полимера, поливинилового спирта (ПВС), силикона, латекса, камеди, крахмала, арабиноксилана, глюкоманнана, глицерина, альгината натрия или их смеси.
13. Композиция по п. 12, отличающаяся тем, что производное целлюлозы выбрано из группы, состоящей из метилцеллюлозы, этилцеллюлозы, гидроксипропилцеллюлозы, гидроксиэтилцеллюлозы, карбоксиэтилцеллюлозы и карбоксиметилцеллюлозы.
14. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что один или более пленкообразующий агент присутствует в композиции в концентрации в диапазоне от около 0,01% до около 2% (масса/объем).
15. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что противомикробный агент представляет собой по меньшей мере одно из аминогликозида, тетрациклина, β-лактама, антибиотика пептидной природы, гликопептидного антибиотика, лантибиотика, полимиксина, колицина, микроцина, ферментного антибактериального препарата, фторхинолона, хлоргексидина, бронопола или их смеси.
16. Композиция по п. 15, отличающаяся тем, что лантибиотик выбран из группы, состоящей из анковенина, циннамицина, дурамицина, эпидермина, галлидермина, гардимицина и низина.
17. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что один или более противомикробный агент присутствует в композиции в концентрации в диапазоне от около 0,001% до около 1,0% (масса/объем).
18. Композиция по п. 1, дополнительно содержащая по меньшей мере одно из буферизирующего агента, регулирующего рН агента, консерванта, кондиционирующего агента для кожи, сурфактанта, пенообразующего агента, красителя или хелатирующего агента.
19. Композиция по п. 1, дополнительно содержащая один или более кондиционирующий агент для кожи, причем кондиционирующий агент для кожи представляет собой по меньшей мере одно из глицерина, пропиленгликоля, полиэтиленгликоля, минерального масла, вазелина, сорбита, лактилата, D-пантенола, гиалуроновой кислоты, поликватерниума-7, стеариновой кислоты, аминокислот шелка, алоэ вера, масла ши, кокосового масла или их смеси.
20. Композиция по п. 19, отличающаяся тем, что один или более кондиционирующий агент для кожи присутствует в композиции в концентрации в диапазоне от около 0,1 до около 30% (масса/объем).
21. Композиция по п. 1, дополнительно содержащая от около 0,005% до около 1,00% (масса/объем) хелатирующего агента, причем хелатирующий агент представляет собой по меньшей мере одно из: ЭДТА или ее щелочных солей, алкилдиамин тетраацетатов, ЭГТА, аспарагиновой кислоты, лимонной кислоты и их смесей.
22. Композиция по п. 21, отличающаяся тем, что хелатирующий агент представляет собой ЭДТА.
23. Композиция по п. 1, дополнительно содержащая от 1% до 99% (масса/объем) одного или более приемлемого носителя.
24. Композиция по п. 23, отличающаяся тем, что носитель включает жидкость, крем, аэрозоль, лосьон, мазь или гидрогель.
25. Композиция по п. 1, дополнительно содержащая от около 0,0001% до около 5,00% (масса/объем) консерванта, причем консервант представляет собой по меньшей мере одно из детергента, оксиданта, хелатирующего агента, ингибитора метаболизма, тимеросала, крезола, формалина, бензалкония хлорида,
парабена, метилпарабена или этилпарабена, карбоновых кислот и солей карбоновых кислот или спирта.
26. Композиция по п. 25, отличающаяся тем, что спирт выбран из группы, состоящей из этилового спирта, изопропилового спирта или бензилового спирта.
27. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что композиция подходит для обработки вымени или соска коровы, а обработка композицией снижает заболеваемость маститом по меньшей мере на 15% по сравнению с обработкой растворами на основе йода.
28. Композиция по п. 1, отличающаяся тем, что композиция подходит для обработки вымени или соска коровы, а обработка композицией снижает среднее количество соматических клеток в коровьем молоке по меньшей мере на 15% по сравнению со средним количеством соматических клеток, присутствовавшим до обработки композицией.
29. Композиция по п. 27, отличающаяся тем, что композицию применяют в течение периода, составляющего по меньшей мере 30 дней.
30. Композиция по п. 1, дополнительно содержащая множество клеток по п. 7.
31. Композиция, содержащая:
кондиционированную стволовыми клетками среду; и
по меньшей мере одно из: (1) противомикробного агента или (2) пленкообразующего агента;
причем кондиционированная среда содержит VEGF или GRO/KC.
32. Композиция по п. 31, отличающаяся тем, что кондиционированная среда содержит менее 500 пг/мл OPG или менее 80 пг/мл TGF-β3.
33. Композиция по п. 31, отличающаяся тем, что кондиционированная среда содержит по меньшей мере два из ИЛ-10, IP-10, TGF-β1 или TGF-β2.
34. Композиция по п. 31, отличающаяся тем, что кондиционированная среда содержит по меньшей мере 150 пг/мл TGF-β2.
35. Композиция по п. 31, отличающаяся тем, что композиция содержит: (а) по меньшей мере 50 пг/мл GRO/KC; или (b) по меньшей мере 500 пг/мл VEGF.
36. Композиция по п. 31, отличающаяся тем, что количество VEGF в композиции по меньшей мере в 5 раз выше, чем количество OPG.
37. Композиция по п. 31, дополнительно содержащая противомикробный агент.
38. Композиция по п. 31, дополнительно содержащая пленкообразующий агент.
39. Композиция по п. 31, отличающаяся тем, что кондиционированную стволовыми клетками среду получают путем поддержания множества стволовых клеток в культуральной среде в течение по меньшей мере 12 часов.
40. Композиция по п. 31, дополнительно содержащая приемлемый носитель, причем носитель присутствует в композиции в концентрации в диапазоне от 50% до 95% (масса/объем).
41. Композиция по п. 31, отличающаяся тем, что кондиционированная среда кондиционирована линией мезенхимальных стволовых клеток, депонированной во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) под номером Н-154.
42. Композиция, полученная при помощи способа, включающего этапы:
поддержания множества стволовых клеток в культуральной среде в течение первого периода кондиционирования, что приводит к кондиционированию культуральной среды;
сбора кондиционированной среды;
смешивания собранной кондиционированной среды по меньшей мере с одним из: (1) противомикробного агента или (2) пленкообразующего агента, для получения композиции.
43. Композиция по п. 42, полученная при помощи способа, дополнительно включающего смешивание композиции с приемлемым носителем.
44. Композиция по п. 42, отличающаяся тем, что первый период кондиционирования составляет по меньшей мере 12 часов.
45. Кондиционированная среда по п. 42, отличающаяся тем, что первый период кондиционирования представляет собой период времени, достаточный для
того, чтобы кондиционированная среда содержала по меньшей мере 150 пг/мл GRO/KC.
46. Композиция по п. 42, отличающаяся тем, что кондиционированная среда содержит VEGF или GRO/KC; и при этом кондиционированная среда содержит менее 500 пг/мл OPG или менее 80 пг/мл TGF-β3.
47. Композиция по п. 42, отличающаяся тем, что композиция содержит: (а) по меньшей мере 50 пг/мл GRO/KC; или (b) по меньшей мере 500 пг/мл VEGF.
48. Композиция по п. 42, отличающаяся тем, что кондиционированную среду концентрируют в 5 раз перед этапом смешивания.
6
2
49. Композиция по п. 42, отличающаяся тем, что кондиционированная среда кондиционирована стволовыми клетками, имеющими по меньшей мере одну из следующих характеристик, когда 0,7×10 клеток высевают в 75 см флакон и культивируют в течение по меньшей мере 96 часов: (а) клетки продуцируют, по меньшей мере 4,5 мМ лактата в течение 24 часов после замены среды; (b) клетки продуцируют, по меньшей мере 150 пг/мл GRO/KC в течение 24 часов после замены среды; (с) клетки продуцируют менее 250 пг/мл OPG через 24 часа после замены среды; или (d) клетки продуцируют менее 80 пг/мл TGF-β3 через 24 часа после замены среды.
50. Способ получения композиции для лечения или предотвращения мастита, включающий: смешивание кондиционированной стволовыми клетками среды по меньшей мере с одним из противомикробного агента или пленкообразующего агента для получения смеси.
51. Способ по п. 50, в котором кондиционированную стволовыми клетками среду получают путем поддержания множества стволовых клеток в культуральной среде в течение первого периода кондиционирования, что приводит к кондиционированию культуральной среды; и сбора кондиционированной среды.
52. Способ по п. 50, дополнительно включающий смешивание композиции с приемлемым носителем.
53. Способ по п. 50, отличающийся тем, что кондиционированная стволовыми клетками среда кондиционирована линией мезенхимальных стволовых
клеток, депонированной во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) под номером Н-154.
54. Способ применения композиции по п. 31, включающий введение терапевтически эффективного количества композиции субъекту.
55. Способ по п. 54, отличающийся тем, что композицию применяют местно путем погружения или распыления.
56. Способ лечения или предотвращения мастита, включающий применение первой композиции к млекопитающему, причем композиция содержит кондиционированную стволовыми клетками среду и по меньшей мере один из противомикробного агента или пленкообразующего агента.
57. Способ по п. 56, отличающийся тем, что кондиционированная среда содержит VEGF или GRO/KC и содержит менее 500 пг/мл OPG или менее 80 пг/мл TGF-β3.
58. Способ по п. 56, отличающийся тем, что композиция содержит: (а) по меньшей мере 50 пг/мл GRO/KC; или (b) по меньшей мере 500 пг/мл VEGF.
59. Способ по п. 56, отличающийся тем, что кондиционированная среда присутствует в композиции в количестве, которое приводит к профилактическому действию против мастита, когда композицию применяют местно.
60. Способ по п. 56, отличающийся тем, что первую композицию применяют местно.
61. Способ по п. 56, дополнительно включающий применение второй композиции к млекопитающему, причем композиция содержит кондиционированную стволовыми клетками среду и приемлемый носитель.
62. Способ по п. 61, отличающийся тем, что вторую композицию применяют перорально.
63. Способ по п. 61, отличающийся тем, что первую и вторую композицию применяют к одному животному в одно время.
64. Способ по п. 56, отличающийся тем, что млекопитающее является коровой, и дополнительно включающий лечение коровы одним или более антибиотиками, если корова проявляет симптомы клинического мастита.
65. Способ по п. 56, отличающийся тем, что обработка вымени или соска коровы терапевтически эффективным количеством композиции снижает заболеваемость маститом по меньшей мере на 15% по сравнению с обработкой растворами на основе йода.
66. Способ по п. 56, отличающийся тем, что обработка вымени или соска коровы терапевтически эффективным количеством композиции снижает среднее количество соматических клеток в коровьем молоке по меньшей мере на 15% по сравнению со средним количеством соматических клеток, присутствовавшим до обработки композицией.