Способ количественного определения содержания 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии
METHOD FOR QUANTITATIVE DETERMINATION OF THE CONTENT OF 4-HYDROXY-2,2,6,6-TETRAMETHYLPIPERIDINE-1-OXYL IN THE AIR OF THE WORKING AREA BY HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY

Изобретение относится к области аналитической химии органических соединений и может быть использовано лабораториями учреждений государственной санитарно-эпидемиологической службы, научно-исследовательскими институтами, работающими в области гигиены окружающей среды при осуществлении контроля качества воздуха рабочей зоны и профилактики неблагоприятного воздействия на здоровье человека при изучении профессионального риска.
Под рабочей зоной воздуха понимается зона дыхания работника.
4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксил относится к нитроксильным соединениям и используется, например, в качестве ингибитора в органическом синтезе полимерных материалов, в качестве катализатора при производстве ароматизаторов, агрохимикатов и других химических веществ, применяется для синтеза многих активных фармацевтических ингредиентов [Pennington J., Cohen R.D., Tian Y., Boulineau F. Development of an LC-MS method for ultra trace-level determination of 2,2,6,6-tetramethylpiperidine-1-oxl (TEMPO), a potential genotoxic impurity within active pharmaceutical ingredients. Jounal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2015, 114, 488-492.] В воздухе рабочей зоны может находиться в виде взвешенных частиц.
Для контроля содержания 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в воздухе рабочей зоны, например, предприятий органического синтеза, необходима разработка селективного и высокочувствительного метода анализа.
Существующие методики разработаны главным образом для определения 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила посредством газовой хроматографии в качестве примеси в лекарственных препаратах, а не в воздушных средах. Часть разработанных методик касаются определения 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в сточных водах производства фармацевтических препаратов, а также ароматизаторов, агрохимикатов [Zamojc K., Zdrowowicz М., Wiczk W., Jacewicz D., Chmurzynski L. Dihydroxycoumarins as highly selective fluorescent probes for the fast detection of 4-hydroxy-TEMPO in aqueous solution. RSC Adv., 2015, 5, pp. 63807-63812.]. Однако, для характеристики общего подхода к анализу указанного органического соединения газохроматографическим методом ниже приведено описание нескольких методик.
3
Метод 1. В источнике информации [Strohmeyer Н.Е., Sluggett G.W. Determination and control of TEMPO, a potentially genotoxic free radical reagent used in the synthesis of filibuvir // Jounal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2012, 62, 216-219.] описан способ определения 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в лекарственном препарате (филибувире) методом газохроматографического анализа равновесной паровой фазы (далее - Метод 1). При реализации этого метода паровую фазу создавали нагреванием раствора препарата в герметичном флаконе при температуре 60°C в течение 15 минут. Температура линии передачи паровой фазы в дозирующую петлю хроматографа, источника ионизации и квадруполя составляла 280°C, 230°C и 150°C соответственно. Хроматографическое разделение проводилось на капиллярной колонке VF-624MS длиной 30 м и внутренним диаметром 0,32 мм в режиме повышения температуры колонки от 40°C до 280°C. Количественное определение проводилось на масс-спектрометрическом детекторе в диапазоне концентраций 4-60 мг/дм, точность определения ±14%, степень извлечения 50-80%. Недостатком указанного способа является то, что условие работы газового хроматографа при высоких температурах приводит к термической деструкции аналита на стадии хроматографического разделения.
Метод 2. Известен способ обнаружения и количественного определения 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с использованием диодно-матричного детектора в водном растворе в форме производного, образующегося при взаимодействии аналита с 6,7-дигидроксикумарином, используемого в качестве флуориметрической метки. Количественный анализ деривата проводится на диодно-матричном детекторе при длине волны 350 нм, разделение на колонке с обращенной фазой в режиме изократической подачи элюента: дистиллированной воды и ацетонитрила (90:10). Предел обнаружения 285 микроМоль (49 г/л) [Zamojc K., Zdrowowicz М., Wiczk W., Jacewicz D., Chmurzynski L. Dihydroxycoumarins as highly selective fluorescent probes for the fast detection of 4-hydroxy-TEMPO in aqueous solution // RSC Adv., 2015, 5, pp. 63807-63812.]. Недостатком является низкая чувствительность.
3
Метод 3. Известен метод высокоэффективной жидкостной хроматографии/масс-спектрометрии для определения 2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила - потенциальной генотоксической примеси в составе активных фармацевтических ингредиентов. Хроматографическое разделение проводится на колонке xBridge С18 длиной 100 мм и внутренним диаметром 3,0 мм зернением 5 мкм в режиме градиентного элюирования. Температура колонки 55°C, температура автоматического пробоотборника 5°C для обеспечения стабильности образца. Подвижная фаза: смесь 0,05 М раствора формиата аммония (рН 4,0) с метанолом в объемном соотношении 95:5 (компонент А) и в объемном соотношении 5:95 (компонент Б). Скорость потока 0,5 мл/мин. Режим градиента подвижной фазы: 70%А и 30%Б в течение 3,5 мин, увеличение до 100% В и удерживание до 5,0 мин. Количественное определение проводится с помощью одноквадрупольного масс-спектрометрического детектора методом внутреннего стандарта, ионизация осуществляется электростатическим распылением. 2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксил контролируется при m/z 158. Диапазон измеряемых концентраций составляет 0,5-100 мг/дм, степень извлечения 68%, среднее квадратическое отклонение 15,3% [Pennington J., Cohen R.D., Tian Y., Boulineau F. Development of an LC-MS method for ultra trace-level determination of 2,2,6,6-tetramethylpiperidine-1-oxl (TEMPO), a potential genotoxic impurity within active pharmaceutical ingredients // Jounal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2015, 114, 488-492.].
Метод 4. В уровне техники описан метод газовой хроматографии с использованием пламенно-ионизационного детектора для определения 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в лекарственном препарате (саксаглиптине). Извлечение аналита проводится способом жидкостной экстракции с использованием в качестве экстрагента метиленхлорида с добавлением муравьиной кислоты, степень экстракции 89%. Анализ осуществляется на капиллярной колонке DB-FFAP длиной 30 м и внутренним диаметром 0,53 мм в режиме программирования температуры колонки от 20°C до 220°C. Температура инжектора 220°C, температура детектора 260°C, газ-носитель азот. Нижний предел количественного измерения составляет 6 мкг/г препарата (термодеструкция 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила наступает при температуре >140°C) [Nachaka S.K., Nowduri A., Boju S., Battula V.R., Sharma H.K., Kadiyala R., Vundavilli J.K., Kothapalli P.K. Development and validation of TEMPO content in Saxagliptin by Gas chromatography // International Journal of advances in Pharmacy, Biology and Chemistry, 2017, 6, 2277-4688.].
Недостатками указанных известных методов являются следующие:
- в методах 1-4 невозможность определения 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в воздушной среде;
- в методах 1 и 4 газохроматографический анализ проводится в условиях программирования температуры термостата колонок от 40°C до 280°C и от 20°C до 220°C соответственно, при этом 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксил стабилен в нормальных условиях и при температуре до 70°C, и разложение аналита происходит уже при температуре >140°C, что сказывается на точности определения;
- в методе 2 проводится предварительная дериватизация 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила при взаимодействии аналита с 6,7-дигидроксикумарином, что усложняет в целом процедуру анализа, увеличивает длительность анализа и понижает точность измерения;
в методе 3 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксил подвергается диспропорционированию в растворе и в процессе ионизации электроспреем в восстановленную и окисленную формы. Присутствие аналита в трех формах делает индивидуальное определение ненадежным, кроме того, в данной методике используется дорогостоящее оборудование, недоступное для большинства аналитических лабораторий.
В доступной научной и патентной литературе, а также в методической базе отсутствуют методики определения 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в воздухе.
При этом из уровня техники не были выявлены известные способы количественного определения содержания 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, поэтому сделать выбор ближайшего аналога к заявляемому объекту не представляется возможным.
3
3
Техническая задача, решаемая предлагаемым способом, заключается в обеспечении возможности определения 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в воздухе рабочей зоны на уровне от 0,09 мг/м, что равно 0,05 рекомендуемого ориентировочного безопасного уровня воздействия (ОБУВ) в воздухе рабочей зоны соединения (ОБУВ=1,8 мг/м).
Технический результат предлагаемого способа заключается в обеспечении высокой чувствительности и точности определения содержания 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в воздухе рабочей зоны.
3
3
3
3
Указанный технический результат достигается предлагаемым способом количественного определения содержания 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, согласно которому проводят отбор пробы воздуха рабочей зоны путем протягивания исследуемого воздуха объемом 600 дм через аналитический фильтр из кварцевых микроволокон, фиксируют температуру воздуха и атмосферное давление на момент отбора пробы, фильтр помещают в стакан, добавляют 10 см дистиллированной воды, закрывают стакан с фильтром крышкой, производят выдержку в течение 15 минут для перевода 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила с фильтра в водный раствор, полученный экстракт фильтруют через шприцевую фильтрующую насадку из политетрафторэтилена с диаметром пор 0,45 мкм, 1 см фильтрата вносят в стеклянную хроматографическую виалу, и далее с помощью метода высокоэффективной жидкостной хроматографии производят определение в отфильтрованном экстракте содержание 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила с использованием градуировочного графика и с учетом приведения объема воздуха, отобранного для анализа, к нормальным условиям, причем хроматографирование градуировочных растворов и анализируемого фильтрата производят при следующих условиях: подвижная фаза для элюирования: смесь ацетонитрила и дистиллированной воды в соотношении 15:85 (объемные доли); режим элюирования - изократический; скорость движения элюента - 0,25 см/мин; температура термостата колонки - 35°C; диодно-матричный детектор - длина волны 430 нм; время удерживания 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила - (5,2±0,1) мин.
2
В качестве фильтра из кварцевых микроволокон используют фильтр марки Munktell Ahlstrom диаметром 47 мм и с площадью рабочей поверхности 10 см.
Указанный технический результат достигается за счет следующего.
3
Предлагаемый способ отличается от описанных методов 1, 3 и 4 способом измерения, основанном на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии для хроматографического разделения в обращено-фазном режиме и использования детектора для детектирования непосредственно 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила, процедурой отбора проб воздуха рабочей зоны, условиями пробоподготовки, установлением метрологических характеристик. При этом хроматографирования непосредственно 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила производится без перевода его в производное соединение в результате проведения реакции дериватизации при отборе пробы воздуха рабочей зоны объемом 600 дм.
Таким образом, заявляемый технический результат обеспечивается за счет использования высокочувствительного и селективного метода высокоэффективной жидкостной хроматографии со спектрофотометрическим детектированием, совокупности определенных операций, их последовательности и режимов в заявляемом способе (процедуры отбора проб, приемов и условий подготовки проб, подбора условий хроматографического анализа, включающего выбор условий хроматографического разделения и режима детектирования).
Предлагаемый способ был опробован в лабораторных условиях. Для его реализации были использованы следующие вещества и оборудование:
- аналитический стандарт 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксил, массовая доля основного вещества не менее 98%. Относительная погрешность аттестованных значений (при Р=0,95) не более ±2,0% (Производитель Sigma-Aldrich, кат. №176141);
- ацетонитрил для хроматографии, особо чистый, ТУ 6-09-14-2167;
- дистиллированная вода, ГОСТ 6709;
- мембранный фильтр из полиамида (ПА, нейлон) диаметром 47 мм для фильтрации растворителей с размером пор 0,45 мкм;
2
2
- фильтры из кварцевых микроволокон, например, марки Munktell Ahlstrom диаметром 47 мм и площадью рабочей поверхности 10 см (этот фильтр для отбора проб воздуха, его размер: диаметр 47 мм, дополнительные характеристики фильтра: плотность 85 г/м и проникновение в материал твердых частиц размером 0,3 мкм)
- шприцевые фильтрующие насадки гидрофильные из политетрафторэтилена (ПТФЭ) диаметром 30 мм, размер пор 0,45 мкм; (эти фильтры надеваются на шприц медицинский, назначение одно - через них фильтруют пробу перед вводом в хроматограф, чтобы не засорять прибор).
- жидкостной хроматограф Agilent 1200, включающий: диодно-матричный детектор; автосамплер; дегазатор; насос для подачи подвижной фазы по двум каналам; термостат колонок; программное обеспечение для обработки результатов измерений; хроматографическая колонка металлическая длиной 150 мм и внутренним диаметром 2,1 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом С18 зернением 5 мкм; предколонка длиной 12,5 мм и внутренним диаметром 2,1 мм, заполненная обращенно-фазным сорбентом С18 зернением 5 мкм;
- аспиратор для отбора проб воздуха (ТУ 4215-000-11696625);
- шкаф сушильный электрический, диапазон рабочих температур (50-200)°C;
- устройство для очистки воды, позволяющее получать воду чистоты «для жидкостной хроматографии» и выше;
- устройство для фильтрации растворителей.
При приготовлении растворов и подготовки проб к анализу соблюдают следующие условия:
- температура воздуха (20±5)°C;
- атмосферное давление от 84,0 до 106,7 кПа (630-800 мм рт. ст.);
- влажность воздуха от 30% до 80%.
Выполнение измерений на жидкостном хроматографе проводят в соответствии с «Руководством по правилам эксплуатации» прибора. Приготовление основных растворов:
- растворы стандартного образца с использованием аналитического стандарта 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила с массовой долей основного вещества не менее 98%.
3
- исходный раствор 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в дистиллированной воде с концентрацией 2 мг/см. Готовят из аналитического стандарта 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1 -оксила; используют свежеприготовленный раствор.
3
- рабочий раствор 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в дистиллированной воде с концентрацией 0,2 мг/см. Готовят из исходного раствора;
Приготовление подвижной фазы для элюирования:
В стеклянной емкости смешивают ацетонитрил и дистиллированную воду в соотношении 15:85 (объемные доли) или задают состав подвижной фазы на двух каналах насоса жидкостного хроматографа. Перед использованием фильтруют подвижную фазу (или ее составляющие) через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм с использованием устройства для фильтрации. Срок хранения подвижной фазы 1 сутки при комнатной температуре.
Контрольный раствор (холостая проба)
3
В стаканчик для взвешивания помещают фильтр из кварцевых микроволокон, с помощью пипетки приливают 10 см дистиллированной воды, закрывают крышкой, осторожно перемешивают содержимое стаканчика и оставляют на 15 минут для проведения экстракции.
Приготовление градуировочных растворов:
Для приготовления градуировочных растворов помещают фильтры из кварцевых микроволокон в стаканчики для взвешивания, с помощью дозатора или пипетки наносят на фильтры исходный или рабочий растворы и дистиллированную воду в количествах, указанных в таблице 1. Стаканчики закрывают крышками, осторожно перемешивают и оставляют на 15 минут для экстракции. Полученные экстракты фильтруют с помощью шприца типа «Луер» через шприцевые насадки из ПТФЭ с диаметром пор 0,45 мкм. Используют свежеприготовленные градуировочные растворы. Перед анализом градуировочных растворов хроматографируют контрольный раствор (холостую пробу). Объем анализируемых проб 5 мкл.
Установление градуировочной характеристики (градуировочного графика):
3
Градуировочную характеристику, выражающую зависимость величины площади хроматографического пика (в условных единицах, у.е.) от концентрации вещества в анализируемом растворе (мг/дм), устанавливают на 5 сериях градуировочных растворов 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила. Каждую серию, состоящую из семи градуировочных растворов, готовят из исходного и рабочего растворов 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила.
Построение градуировочной характеристики, обработка и хранение результатов градуировки выполняются программным обеспечением хроматографа.
Градуировочный коэффициент рассчитывают по формуле:
i
3
где C - массовая концентрация 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в i-ом градуировочном растворе, мг/дм;
i
S - среднее значение 5 измерений площади пика 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила, полученное при анализе i-го градуировочного раствора, условные единицы, у.е.;
n - количество градуировочных смесей (n=7).
На рисунке 1 представлен градуировочный график для определения массовых концентраций 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в экстракте.
Предлагаемый способ осуществляют следующим образом:
3
- проводят отбор проб воздуха рабочей зоны, аспирируя 600 см воздуха через фильтры из кварцевых микроволокон.
- далее проводят подготовку проб экстракцией 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила с кварцевых фильтров дистиллированной водой.
- экстракты фильтруют через шприцевые насадки из ПТФЭ.
3
- подготовленный фильтрат в объеме 1 см переносят в хроматографическую виалу вместимостью 1,5 см и используют для проведения измерений массовых концентраций 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила на жидкостном хроматографе.
Полученные предлагаемым способом результаты измерения стандартных растворов 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила, нанесенного на кварцевые фильтры, и прошедших всю процедуру подготовки проб и измерения на жидкостном хроматографе, представлены в таблице 2.
Данные, представленные в таблице 2, показывают, что извлечение аналита из пробы составляет не менее 94%, что соответствует требованиям ГОСТ Р ИСО 30011-2017 (допустимо 90±10%).
Кроме того, из представленных в таблице 2 результатов видно, что найденные значения массовых концентраций 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила соответствует внесенному количеству.
Одновременно с подготовкой экспонированных фильтров готовят холостую пробу. Холостой пробой служат неэкспонированные фильтры. Холостые пробы проводят через весь ход анализа.
3
Результат определения 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила представляют как среднее двух параллельных измерений анализируемого раствора пробы , мг/дм.
3
Массовую концентрацию анализируемого 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в воздухе рабочей зоны (мг/м) вычисляют по формуле:
3
где X - массовая концентрация 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в воздухе рабочей зоны, мг/м,
3
- среднее значение двух измерений массовой концентрации 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в экстракте анализируемой пробы, найденных по градуировочной характеристике, мг/дм;
3
- среднее значение двух измерений массовой концентрации 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в экстракте холостой пробы, найденных по градуировочной характеристике, мг/дм;
1
3
3
V - объем водного экстракта, см (10 см);
20
3
V - объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, дм, в соответствии с ГОСТ 8.395 80 при температуре 293 К (20°C) и атмосферном давлении 101,3 кПа (760 мм рт. ст.), рассчитывают по формуле:
где
3
V - объем пробы воздуха рабочей зоны, отобранный для анализа, дм;
Р - измеренное атмосферное давление при отборе пробы воздуха, мм рт. ст.;
t - температура воздуха в месте отбора пробы, °C.
За окончательный результат принимают результат измерения единичной отобранной пробы воздуха.
n
3
Экспериментальные данные по измерению 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила предлагаемым способом, представлены в таблице 3 (по этим результатам измерений рассчитывают показатели повторяемости и воспроизводимости результатов). Одновременно по результатам определений (X), приведенным в данных таблицах, можно судить о чувствительности метода (аналитическая стадия от 10,8 мг/дм).
Данные, приведенные в таблице 3, показывают что результаты, полученные предлагаемым способом имеют хорошую повторяемость (результаты отличаются друг от друга не более, чем на 6%) и воспроизводимость (отличаются друг от друга в условиях внутрилабораторной прецизионности не более, чем на 10%).
3
Для расчета метрологических характеристик предлагаемого способа использовали способ «введено - найдено». Проводили анализ проб с добавлением в них определенного количества 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила (добавка составляет 100% от концентрации в рабочей пробе) для выяснения правильности и точности анализа (относительная погрешность). Полученные результаты измерений 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в подготовленной пробе с добавками приведены в таблице 4. В данном примере величина добавки 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила С=20 мг/дм.
Данные, приведенные в таблице 4, показывают, что значение найденной добавки соответствует введенному количеству, при этом систематическая ошибка (показатель правильности) определения составляет 11%, а погрешность определения (показатель точности) не превышает 22%.
В ходе лабораторных испытаний предлагаемого способа были установлены следующие метрологические характеристики: диапазон измерений 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в растворе аналитической пробы (экстракте), в воздухе рабочей зоны, значения показателей точности, правильности, повторяемости, воспроизводимости.
В таблице 5 представлены диапазоны измерений в экстракте, в воздухе рабочей зоны, показатель точности методики с учетом стадии отбора проб, рекомендуемый ОБУВ для 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила.
3
Приведенные в таблице 5 данные показывают, что предлагаемый способ позволяет с высокой точностью определять в воздухе рабочей зоны 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксил в диапазоне концентраций 0,009-2,5 мг/м. Чувствительность метода позволяет обнаруживать концентрации 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксил в воздухе рабочей зоны на уровне 0,3-1,4 нормативного показателя ориентировочного безопасного уровня воздействия в воздухе рабочей зоны соединения (ОБУВ), что обеспечивает получение достоверных результатов воздействия 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила как в концентрациях в 3 раза ниже допустимого значения ОБУВ (1,8 мг/м3), так и высокие концентрации, позволяющие оценить кратность превышения нормативного показателя.
Условия хроматографирования градуировочных растворов и анализируемых проб:
- колонка длиной 150 мм и внутренним диаметром 2,1 мм с обращенной фазой С18 зернением 5 мкм;
- подвижная фаза для элюирования: смесь ацетонитрила и дистиллированной воды в соотношении 15:85 (объемные доли);
- режим элюирования изократический;
3
- скорость движения элюента 0,25 см/мин;
- температура термостата колонки 35°C
- диодно-матричный детектор, длина волны 30 нм;
- время удерживания 4-гидрокси-2,2,6,6-
тетраметилпиперидин-1-оксила (5,2±0,1) мин.
Таким образом, предлагаемый способ количественного определения содержания 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксил в воздухе рабочей зоны методом высокоэффективной жидкостной хроматографии характеризуется следующими показателями, превышающими известные методы:
3
- позволяет определять указанный 4-гидрокси-2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксила в воздухе рабочей зоны с высокой чувствительностью в широком диапазоне концентраций 0,009-2,5 мг/м;
- точность определения составляет 22%;
- предложенный метод прост в выполнении.