ОПТИМИЗИРОВАННЫЙ СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ РЕКОМБИНАНТНОЙ ФОРМЫ ТКАНЕВОГО АКТИВАТОРА ПЛАЗМИНОГЕНА

1. Способ получения обладающего биологической активностью in vivo тканевого активатора плазминогена, заключающийся в том, что
(а) выращивают в пригодных питательных средах клетки-хозяева, трансформированные или трансфектированные выделенной последовательностью ДНК, выбранной из группы, которая включает (I) последовательности ДНК, представленные в SEQ ID NO:1 и SEQ ID NO:2, или (II) последовательности ДНК, которые гибридизуются в строгих условиях с последовательностями ДНК, указанными в (I) и (II), или их комплементарными цепями; и
(б) выделяют из среды указанный продукт, представляющий собой тканевый активатор плазминогена.
2. Способ получения обладающего биологической активностью in vivo продукта, представляющего собой тканевый активатор плазминогена, который заключается в том, что трансформируют клетку-хозяина синтезированной последовательностью ДНК, представленной в SEQ ID NO:1 или 2, которая кодирует тканевый активатор плазминогена, и выделяют продукт из клетки-хозяина или среды для его выращивания.
3. Способ по п.1 или 2, в котором клетки-хозяева представляют собой клетки млекопитающего.
4. Способ по п.1 или 2, в котором клетки-хозяева предпочтительно представляют собой СНО K1-клетки.
5. Способ получения растворимой формы тканевого активатора плазминогена, обладающего биологической активностью in vivo в отношении лечения сердечного приступа и стенокардии, который заключается в том, что
а) выращивают в пригодных питательных средах клетки млекопитающего, содержащие промоторную ДНК, которая отлична от промоторной ДНК тканевого активатора плазминогена, функционально связанную с ДНК, которая кодирует аминокислотную последовательность зрелого эритропоэтина, представленную в SEQ ID NO:3; и
б) выделяют полипептид гликозилированного эритропоэтина, экспрессируемый клетками.
6. Способ по п.5, в котором промоторная ДНК представляет собой вирусную промоторную ДНК.
7. Способ получения обладающего биологической активностью in vivo продукта, представляющего собой тканевый активатор плазминогена, который заключается в том, что клетку-хозяина трансформируют векторной конструкцией, представленной на фиг.7 или 8, и выделяют продукт, представляющий собой тканевый активатор плазминогена, из клетки-хозяина или среды для ее выращивания.
8. Способ по п.7, в котором вектор представляет собой экспрессионный вектор, специфический для клетки млекопитающего, и наиболее предпочтительно вектор, представленный на фиг.7 и 8.
9. Фармацевтическая композиция, содержащая человеческий тканевый активатор плазминогена в терапевтически эффективном количестве и фармацевтически приемлемый разбавитель, адъювант или носитель, где тканевый активатор плазминогена очищен из клеток млекопитающего, выращенных в культуре.