СПОСОБ ВИТРИФИКАЦИИ ОВАРИАЛЬНОЙ ТКАНИ

Способ витрификации овариальной ткани, включающий подготовку образцов овариальной ткани, их двухэтапное насыщение криопротекторами в среде, содержащей 7,5% раствор ДМСО и 7,5% ЭГ, 0,5 М сахарозы, фрагменты ткани хранят в стерильных криопробирках с жидким азотом, отличающийся тем, что подготовку образцов ткани яичника для витрификации проводят путем удаления кортикального слоя от мозгового слоя яичника, толщину кортикального слоя задают не более 1 мм и делят на фрагменты по 2-5 мм × 2-5 мм. при +4°С, затем фрагменты ткани насыщают растворами криопротекторов в два этапа: на первом этапе фрагменты ткани пропитывают в течение до 20 мин в среде для витрификации, содержащей неорганические соли - 10,5 г/л, аминокислоты - 1,0 г/л, витамины - 0,10 г/л, глюкозу 1,0 - г/л, пенициллин-стрептомицин (100х) 10 мл/л и криопротекторы ДМСО - 7,5 об %, ЭГ - 7,5 об % с добавлением эмбриональной телячьей сыворотки до 20 об %, на втором этапе фрагменты ткани выдерживают до 10 мин в среде для витрификации, содержащей неорганические соли - 10,0 г/л, аминокислоты - 1,0 г/л, витамины - 0,10 г/л, глюкозу 1,0 г/л, пенициллин-стрептомицин (100х) 10 мл/л и криопротекторы ДМСО от 17,0 до 20,0 об. % и ЭГ от 10,0 до 13,0 об. %, 0,5-0,6 М сахарозы, подготовленные фрагменты кортикального слоя овариальной ткани помещают в стерильные маркированные криопробирки с жидким азотом для хранения при -196°С.