ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ
PHARMACEUTICAL COMPOUNDS

Область техники
Настоящее изобретение относится к соединениям бензимидазола и их применению для лечения или предотвращения респираторно-синцитиальной вирусной (РСВ) инфекции.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
РСВ представляет собой вирус семейства парамиксовирусов (Paramyxoviridae), содержащий отрицательно-полярную одноцепочечную РНК. РСВ легко передается через выделения от инфицированного человека через поверхности или при непосредственном контакте. В отличие от гриппа, он не передается воздушно-капельным путем. После успешной инокуляции инкубационный период продолжается от четырех до шести дней, и за это время вирус распространяется от носоглотки до нижних дыхательных путей посредством слияния инфицированных клеток с неинфицированными и путем отслоения некротического эпителия. В сочетании с повышенной секрецией слизи и отеком у младенцев это может привести к закупорке слизью, что вызывает чрезмерное раздувание и коллапс дистальной легочной ткани, что указывает на бронхиолит. При этом обычно наблюдается гипоксия, и из-за нарушения дыхания часто затрудняется возможность кормления. При пневмонии, вызванной РСВ, воспалительная инфильтрация дыхательных путей состоит из одноядерных клеток и является более генерализованной с вовлечением бронхиол, бронхов и альвеол. Было обнаружено, что продолжительность и степень выделения вируса в среду коррелируют с клиническими признаками и тяжестью заболевания.
РСВ является основной причиной тяжелых инфекций дыхательных путей у младенцев и детей младшего возраста во всем мире. Самая высокая заболеваемость и смертность наблюдаются у детей, родившихся недоношенным, а также у детей с хроническими заболеваниями легких или сердца, хотя многие младенцы, госпитализированные с РСВ-инфекцией, не имеют других заболеваний. Тяжелая РСВ-инфекция в младенческом возрасте может привести к возникновению рецидивирующей бронхиальной обструкции в течение нескольких лет и связана с развитием астмы впоследствии.
РСВ также является основной причиной заболеваемости и смертности у пожилых людей и у детей и взрослых с ослабленным иммунитетом, а также тех, кто страдает от хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ) и застойной сердечной недостаточности (ЗСН).
Заболеваемость РСВ имеет сезонный характер; ее можно очень точно прогнозировать, и РСВ наблюдается в зимний период в обоих полушариях, с сентября по май в Европе и Северной Америке, при этом пик заболеваемости приходится на декабрь и январь, а в тропических странах РСВ может наблюдаться в течение всего года. РСВ поражает > 90% младенцев и детей младшего возраста до двух лет, и, поскольку естественный иммунитет является нестойким, многие будут повторно инфицироваться каждый год. Как и в случае гриппа, у пожилых людей РСВ является причиной примерно 10% госпитализаций в зимний период, при этом связанная с ним смертность составляет 10%.
Существующее лечение, направленное против РСВ, включает применение моноклонального антитела к РСВ под названием паливизумаб. Такое применение паливизумаба является профилактическим, а не терапевтическим лечением РСВ. Хотя данное антитело часто является эффективным, его применение ограничивается применением у недоношенных детей и младенцев групп высокого риска. Действительно, ограниченная применимость паливизумаба означает, что он недоступен для многих людей, нуждающихся в лечении РСВ. Соответственно, существует острая необходимость в разработке эффективных альтернатив существующему лечению РСВ.
Кроме того, в качестве ингибиторов РСВ были предложены некоторые соединения, включая соединения на основе бензимидазола. Например, в документе KD Combrink et al., Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 17 (2007), 4784-4790 описано соединение BMS-433771 и его варианты. Другие соединения на основе бензимидазола описаны в WO 02/062290, WO 03/053344 и WO 10/103306.
В WO 2013/068769 и WO 2016/055780 описаны соединения бензимидазола, обладающие активностью в отношении РСВ. Однако существует потребность в обнаружении дополнительных соединений и, в частности, соединений, имеющих благоприятные фармакокинетические профили.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
К настоящему моменту было обнаружено, что новая группа соединений бензимидазола активна в качестве ингибиторов РСВ и имеет благоприятную фармакокинетику. Соответственно, настоящее изобретение относится к соединению, которое представляет собой бензимидазол формулы (I):
(I)
где:
1
4
2
m
R представляет собой -(CH)-R или ;
2
2
m
2
2
n
2;
R представляет собой галоген, -(CH)-NH или -(CH)-C(=NH)-NH
3
R представляет собой H или F;
4
5
5
6
2
2
r
R представляет собой -NH-(CH)-(NH)-R, -NH-(CHRR) или группу следующей формулы (A):
(A)
2
m
2
2
2
2
2
r
2
2
2
r
2
5
W представляет собой -(CH)-, -CH-O-CH-, -CH-S-CH-, -(CH)-S(O)-CH- или -(CH)-NR-CH-;
m представляет собой целое число 1 до 3;
n равно 1 или 2;
р равно 1 и V представляет собой СН; или р равно 0 и V представляет собой N;
q равно 0 или 1;
r равно 0 или 1;
5
2
2
2
3
2
2
2
2
2
R представляет собой H, -SOMe, -SOEt, -SOCF, -COMe, -CONMe, - CONH или -CHCHSOMe;
6
1
6
R представляет собой H или C-C алкил; и
7
2
2
2
3
2
2
2
2
2
R представляет собой -SOMe, -SOEt, -SOCF, -COMe, -CONMe, - CONH или -CHCHSOMe;
или фармацевтически приемлемая соль указанного соединения.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Когда любая группа, кольцо, заместитель или фрагмент, определенные в данном описании, замещены, они обычно замещены посредством Q, как определено ниже.
1-6
1-6
1-4
4-6
1-6
1-6
1-6
C алкильная группа или фрагмент являются неразветвленными или разветвленными. C алкильная группа обычно представляет собой C алкильную группу или C алкильную группу. Примеры С алкильных групп и фрагментов включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, н-пентил, изопентил (т.е. 3-метилбут-1-ил), трет-пентил (т.е. 2-метилбут-2-ил), неопентил (т.е. 2,2-диметилпропан-1-ил), н-гексил, изогексил (т.е. 4-метилпентан-1-ил), трет-гексил (т.е. 3-метилпентан-3-ил) и неопентил (т.е. 3,3-диметилбутан-1-ил). Во избежание сомнений, если в группе присутствуют два алкильных фрагмента, алкильные фрагменты могут быть одинаковыми или разными. C алкильная группа является незамещенной или замещенной обычно одной или более группами Q, как определено ниже. Например, C алкильная группа является незамещенной или замещенной 1, 2 или 3 группами Q, как определено ниже.
1-6
1-6
1-6
1-6
1-4
2
2
2
3
10
1-6
3-10
Q представляет собой галоген, нитро, -CN, OH, C алкокси, C гидроксиалкил, C алкилтио, C галогеналкил, C галогеналкокси, -COR''', -NR''', -SR''', -S(=O)R''', -S(=O)R''', C-C циклоалкил, 5-10-членный гетероциклил, 5-12-членный арил или 5-12-членный гетероарил, где каждый R''' независимо выбран из Н, С алкила, С циклоалкила, 5-10-членного гетероциклила, 5-12 -членного арила и 5-12-членного гетероарила.
1-6
1-4
1-6
С алкоксигруппа является неразветвленной или разветвленной. Обычно эта группа представляет собой С алкоксигруппу, например, группу метокси, этокси, пропокси, изопропокси, н-пропокси, н-бутокси, втор-бутокси или трет-бутокси. C алкоксигруппа является незамещенной или замещенной обычно одной или более группами Q, как определено ниже.
1-6
1-4
1-6
Группа С алкилтио является неразветвленной или разветвленной. Обычно эта группа представляет собой группу С алкилтио, например, группу метилтио, этилтио, пропилтио, изопропилтио, н-пропилтио, н-бутилтио, втор-бутилтио или трет-бутилтио. Группа C алкилтио группа является незамещенной или замещенной обычно одной или более группами Q, как определено ниже.
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
3
3
3
3
3
3
Галоген или галогеновая группа представляет собой F, Cl, Br или I. Предпочтительно F или Cl. C алкильная группа, замещенная галогеном, может быть обозначена как «C галогеналкил», что означает C алкильную группу, как определено выше, в которой один или более атомов водорода замещены галогеном. Аналогично, C алкоксигруппа, замещенная галогеном, может быть обозначена как «C галогеналкокси», что означает C алкоксигруппу, как определено выше, в которой один или более атомов водорода замещены галогеном. Обычно C галогеналкил или C галогеналкокси замещены 1, 2 или 3 атомами галогена. Галогеналкильные группы и галогеналкоксигруппы включают пергалогеналкильные группы и пергалоалкоксигруппы, такие как -CX и -OCX, где X представляет собой галоген, например, -CF -CCl -OCF и -OCCl.
1-6
1-6
C гидроксиалкильная группа представляет собой С алкильную группу, как определено выше, замещенную одной или более ОН группами. Обычно она замещена одной, двумя или тремя группами ОН. Предпочтительно она замещена одной группой OH.
5-12-членная арильная группа представляет собой ароматическую карбоциклическую группу, содержащую от 5 до 12 атомов углерода, например, от 6 до 10 атомов углерода, например, 6 или 10 атомов углерода. Это моноциклическая или конденсированная бициклическая кольцевая система, в которой ароматическое кольцо конденсировано с другим ароматическим карбоциклическим кольцом. Примеры 5-12-членной арильной группы включают фенил и нафтил. При замещении арильная группа обычно замещена
1-4
1-4
C алкилом или группой Q, как определено выше, например, 1, 2 или 3 группами, выбранными из C алкильной группы и группы Q, как определено выше.
3-10
3-10
3
7
3
6
4
6
3-10
С циклоалкильная группа представляет собой насыщенное углеводородное кольцо, содержащее от 3 до 10 атомов углерода. C циклоалкильная группа может представлять собой, например, C-C циклоалкил, такой как циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил или циклогептил. Обычно она представляет собой C-C циклоалкил или C-C циклоалкил, например, циклобутил, циклопентил или циклогексил. В одном варианте реализации она представляет собой циклобутил. C циклоалкильная группа является незамещенной или замещенной обычно одной или более группами Q, как определено ниже.
1-4
5-12-членная гетероарильная группа или фрагмент представляет собой 5-12-членную ароматическую гетероциклическую группу, содержащую 1, 2, 3 или 4 гетероатома, выбранных из О, N и S. Она является моноциклической или бициклической. Обычно она содержит один атом N и 0, 1, 2 или 3 дополнительных гетероатома, выбранных из О, S и N. Она может представлять собой, например, 5-7-членную гетероарильную группу, например, 5- или 6-членную N-содержащую гетероарильную группу. Примеры включают пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, фуранил, тиенил, пиразолидинил, пирролил, оксадиазолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, тиадиазолил, имидазолил и пиразолил. Предпочтительны фуранил, тиенил, пиридил и пиримидил. При замещении гетероарильная группа обычно замещена одной или более, например 1, 2 или 3, группами, выбранными из C алкила и группы Q, как определено выше.
5-10
2
5-10
2
5
6
5-10-членный гетероциклильный фрагмент представляет собой моноциклическое или бициклическое неароматическое, насыщенное или ненасыщенное С карбоциклическое кольцо, в котором по меньшей мере один, например, 1, 2 или 3 атома углерода в кольце заменены на атом или группу, выбранные из O, S, SO, SO, CO и N. Обычно это насыщенное C кольцо, в котором 1, 2 или 3 атома углерода в кольце заменены на атом или группу, выбранные из O, S, SO, CO и NH. Более типично это моноциклическое кольцо, предпочтительно моноциклическое C-C кольцо. Примеры включают пиперидил, пиперидин-2,6-дионил, пиперидин-2-онил, пиперазинил, морфолинил, тиоморфолинил, S,S-диоксотиоморфолинил, 1,3-диоксоланил, пирролидинил, имидазол-2-онил, пирролидин-2-онил, тетрагидрофуранильный и тетрагидропиранильный фрагменты.
Во избежание сомнений, хотя приведенные выше определения гетероарильных и гетероциклильных групп ссылаются на атом «N», который может присутствовать в кольце, как будет очевидно для опытного химика, атом N будет протонирован (или будет нести заместитель, как определено выше), если он присоединен к каждому из соседних атомов в кольце через одинарную связь. Такие протонированные формы включены в настоящее определение гетероарильных и гетероциклильных групп.
1
4
4
5
5
2
m
2
2
r
В одном варианте реализации бензимидазолов формулы (I) R представляет собой -(CH)-R, в котором m равно 2 или 3, а R представляет собой -NH-(CH)-(NH)-R, где r равно 0 или 1 и R выбран из
2
2
2
3
-SOMe, -SOEt и -SOCF.
1
4
4
5
6
5
6
2
m
2
2
1
6
В дополнительном варианте реализации R представляет собой -(CH)-R, где m равно 2 или 3 и R представляет собой -NH-(CHRR), где R представляет собой -CONH или -CONMe и R представляет собой C-C алкил.
1
4
4
4
2
m
2
m
В другом варианте реализации R представляет собой -(CH)-R, где m равно 2 или 3 и R представляет собой -(CH)-R,
4
5
5
2
r
2
2
2
r
2
2
где m равно 2 или 3 и Rпредставляет собой группу формулы (A), где p равно 1, q равно 0, V представляет собой CH и W представляет собой -(CH)-S(O)-CH- или -(CH)-NR-CH-, где r равно 0 и Rпредставляет собой Me или -SOEt.
1
4
4
4
4
2
m
2
m
В еще одном следующем варианте реализации R представляет собой -(CH)-R, где m равно 2 или 3 и R представляет собой (CH)-R, где m равно 2 или 3 и Rпредставляет собой группу формулы (A), в которой p равно 0,
2
m
2
2
2
2
5
V представляет собой N, W представляет собой -(CH)-, где m представляет собой целое число от 1 до 3, q равно 1 и Rпредставляет собой -SOMe, -SOEt, -CONH или -CONMe.
1
4
4
4
4
2
m
2
m
В другом варианте реализации R представляет собой -(CH)-R, где m равно 2 или 3 и R представляет собой -(CH)-R, где m равно 2 или 3 и R представляет собой группу формулы (А), где р равно 0,
2
2
2
2
2
r
2
2
2
r
2
2
2
5
5
V представляет собой N, q равно 0 и W представляет собой -CH-O-CH-, -CH-S-CH-, -(CH)-S(O)-CH- или -(CH)-NR-CH-, где r равно 0 или 1 и Rпредставляет собой -SOMe, -SOEt или -COMe.
1
5
2
2
2
2
2
2
Альтернативно R представляет собой , где Rпредставляет собой H, -SOMe, -SOEt, -COMe, -CONMe или -CHCHSOMe.
4
7
Когда в формуле (I) R представляет собой группу формулы (A) и q равно 1, кольцевой заместитель R может быть связан с любым доступным атомом углерода в кольце.
2
2
5
Когда W в формуле (A) представляет собой -(CH)r-NR-CH-, q обычно равно 0.
Примеры группы формулы (А) включают следующие структуры:
2
2
2
Группа R в формуле (I) обычно представляет собой F, Cl или -CHNH.
Конкретные соединения согласно настоящему описанию включают следующие:
1'-({5-хлор-1-[3-(4-метансульфонилпиперазин-1-ил)пропил]-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2''-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
1'-[(5-хлор-1-{2-[(2-метансульфонилэтил)амино]этил}-1H-1,3-бензодиазол-2-ил)метил]-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
N-[2-({2-[5-хлор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1H-1,3-бензодиазол-1-ил]этил}амино)этил]1,1,1-трифторметансульфонамид;
3-({2-[5-хлор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1H-1,3-бензодиазол-1-ил]этил}амино)-1λ6-тиолан-1,1-дион;
1'-[(5-хлор-1-{2-[(1-метансульфонилпирролидин-3-ил)амино]этил}-1H-1,3-бензодиазол-2-ил)метил]-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
1-{2-[5-хлор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1H-1,3-бензодиазол-1-ил]этил}пирролидин-2-карбоксамид;
1'-({5-хлор-1-[2-(3-метансульфонилпирролидин-1-ил)этил]-1Н-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
1'-({5-хлор-1-[2-(4-метансульфонилпиперидин-1-ил)этил]-1Н-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
1'-({5-хлор-1-[2-(4-метансульфонилпиперазин-1-ил)этил]-1Н-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
1'-[(5-хлор-1-{3-[(2-метансульфонилэтил)амино]пропил}-1H-1,3-бензодиазол-2-ил)метил]-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
1'-{[5-хлор-1-(3-{[2-(этансульфонил)этил]амино}пропил)-1H-1,3-бензодиазол-2-ил]метил}-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
(2S)-2-({3-[5-хлор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1H-1,3-бензодиазол-1-ил]пропил}амино)-3-метилбутанамид;
1'-({5-хлор-1-[3-(3-метансульфонилазетидин-1-ил)пропил]-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
1'-({5-хлор-1-[3-(3-метансульфонилпирролидин-1-ил)пропил]-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
(2S)-1-{3-[5-хлор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1H-1,3-бензодиазол-1-ил]пропил}пирролидин-2-карбоксамид;
3-({3-[5-хлор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1H-1,3-бензодиазол-1-ил]пропил}амино)-1λ6-тиолан-1,1-дион;
1'-[(5-хлор-1-{3-[(1-метансульфонилпирролидин-3-ил)амино]пропил}-1H-1,3-бензодиазол-2-ил)метил]-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
1'-({5-хлор-1-[3-(морфолин-4-ил)пропил]-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
1'-({5-хлор-1-[3-(тиоморфолин-4-ил)пропил]-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
4-{3-[5-хлор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1H-1,3-бензодиазол-1-ил]пропил}-1λ6-тиоморфолин-1,1-дион;
1'-({5-хлор-1-[3-(4-метансульфонилпиперидин-1-ил)пропил]-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
1'-({1-[3-(4-ацетилпиперазин-1-ил)пропил]-5-хлор-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
6'-фтор-1'-[(5-фтор-1-{3-[(2-метансульфонилэтил)амино]пропил}-1H-1,3-бензодиазол-2-ил)метил]-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
(2S)-2-({3-[5-фтор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1H-1,3-бензодиазол-1-ил]пропил}амино)-3-метилбутанамид;
(2S)-1-{3-[5-фтор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1H-1,3-бензодиазол-1-ил]пропил}пирролидин-2-карбоксамид;
6'-фтор-1'-({5-фтор-1-[3-(морфолин-4-ил)пропил]-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
1'-({1-[3-(4-ацетилпиперазин-1-ил)пропил]-5-фтор-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
6'-фтор-1'-({5-фтор-1-[3-(4-метансульфонилпиперазин-1-ил)пропил]-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
1'-{[5-хлор-1-(пиперидин-4-ил)-1H-1,3-бензодиазол-2-ил]метил}-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
1'-{[5-хлор-1-(пиперидин-4-ил)-1H-1,3-бензодиазол-2-ил]метил}-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклобутан-1,3'-индол]-2'-он;
1'-{[1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)-5-хлор-1H-1,3-бензодиазол-2-ил]метил}-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
4-[5-хлор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1H-1,3-бензодиазол-1-ил]-N,N-диметилпиперидин-1-карбоксамид;
1'-{[5-хлор-1-(1-метансульфонилпиперидин-4-ил)-1H-1,3-бензодиазол-2-ил]метил}-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
1'-{[5-хлор-1-(1-метансульфонилпиперидин-4-ил)-1H-1,3-бензодиазол-2-ил]метил}-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклобутан-1,3'-индол]-2'-он;
1'-({5-хлор-1-[1-(этансульфонил)пиперидин-4-ил]-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
1'-({5-хлор-1-[1-(2-метансульфонилэтил)пиперидин-4-ил]-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он;
и фармацевтически приемлемые соли указанных соединений.
Соединения по настоящему изобретению могут содержать асимметричные или хиральные центры и, следовательно, могут существовать в различных стереоизомерных формах. Предполагается, что все стереоизомерные формы соединений по настоящему изобретению, включая, но не ограничиваясь ими, диастереомеры, энантиомеры и атропоизомеры, а также их смеси, такие как рацемические смеси, составляют часть настоящего изобретения. Соединения формулы (I), содержащие один или более хиральных центров, можно применять в энантиомерной или диастереоизомерно чистой форме или в форме смеси изомеров.
Настоящее изобретение охватывает все геометрические и позиционные изомеры соединений по настоящему изобретению, как определено выше. Например, если соединение по настоящему изобретению содержит двойную связь или конденсированное кольцо, в объем изобретения включены цис- и транс-формы, а также их смеси. Как отдельные позиционные изомеры, так и смесь позиционных изомеров также входят в объем настоящего изобретения.
Соединения по настоящему изобретению могут существовать в несольватированных, а также в сольватированных формах с фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода, этанол и тому подобное, и настоящее изобретение охватывает как сольватированные, так и несольватированные формы.
Соединения по настоящему изобретению могут существовать в разных таутомерных формах, и все такие формы включены в объем настоящего изобретения. Термин «таутомер» или «таутомерная форма» относится к структурным изомерам с различными энергиями, которые являются взаимопревращаемыми через низкоэнергетический барьер. Например, протонные таутомеры (также известные как прототропные таутомеры) включают взаимопревращения посредством миграции протона, такие как кетоенольные таутомеризации. Валентные таутомеры включают взаимопревращения путем реорганизации некоторых связывающих электронов.
Соединения по настоящему изобретению можно получать синтетическими способами, описанными в следующих примерах, или по аналогии с такими способами.
Бензимидазол формулы (I) можно превратить в его фармацевтически приемлемую соль, а соль можно превратить в свободное соединение обычными способами. Например, бензимидазол формулы (I) можно приводить в контакт с фармацевтически приемлемой кислотой с образованием фармацевтически приемлемой соли. Фармацевтически приемлемая соль представляет собой соль с фармацевтически приемлемой кислотой или основанием.
p-
Фармацевтически приемлемые кислоты включают как неорганические кислоты, такие как соляная, серная, фосфорная, дифосфорная, бромистоводородная или азотная кислота, так и органические кислоты, такие как лимонная, фумаровая, малеиновая, яблочная, аскорбиновая, янтарная, винная, бензойная, уксусная, метансульфоновая, этансульфоновая, бензолсульфоновая или толуолсульфоновая кислота. Фармацевтически приемлемые основания включают гидроксиды щелочных металлов (например, натрия или калия) и щелочноземельных металлов (например, кальция или магния) и органические основания, например, алкиламины, аралкиламины и гетероциклические амины.
В биологических тестах было обнаружено, что соединения по настоящему изобретению являются ингибиторами респираторно-синцитиального вируса (РСВ). Следовательно, соединения являются терапевтически полезными. Соответственно, настоящее изобретение дополнительно относится к соединению, которое представляет собой бензимидазол формулы (I), как определено выше, или его фармацевтически приемлемую соль, для применения в способе лечения организма человека или животного с помощью терапии. Изобретение также относится к соединению по настоящему изобретению, как определено выше, для применения в способе лечения или предотвращения РСВ-инфекции. Кроме того, настоящее изобретение относится к применению соединения по настоящему изобретению, как определено выше, при получении лекарственного средства для лечения или предотвращения РСВ-инфекции. Таким образом, субъекта, страдающего РСВ-инфекции или подверженного ей, можно лечить способом, включающим введение ему соединения по настоящему изобретению, как определено выше. Тем самым состояние субъекта можно улучшить или облегчить.
РСВ-инфекция обычно представляет собой инфекцию дыхательных путей. РСВ-инфекция может представлять собой инфекцию у ребенка, например, ребенка в возрасте до десяти лет или ребенка в возрасте до двух лет. В одном варианте реализации настоящее изобретение относится к соединению, как определено выше, для применения при лечении или предотвращении РСВ-инфекции у педиатрических пациентов. Альтернативно, инфекция может представлять собой инфекцию у взрослого или пожилого взрослого человека, например, взрослого человека старше 60 лет, взрослого человека старше 70 лет или взрослого человека старше 80 лет. Кроме того, настоящее изобретение относится к соединению для применения для лечения или предотвращения РСВ-инфекции у гериатрических пациентов.
РСВ-инфекция может представлять собой инфекцию у человека с ослабленным иммунитетом или у человека, страдающего ХОБЛ или ЗСН. В другом варианте реализации настоящего изобретения РСВ-инфекция представляет собой инфекцию у человека с неослабленным иммунитетом, например, человека, который в остальном здоров.
Соединение по настоящему изобретению можно вводить в различных дозированных формах, например, перорально, например, в форме таблеток, капсул, таблеток, покрытых сахарной оболочкой или пленкой, жидких растворов или суспензий, или парентерально, например, внутримышечно, внутривенно или подкожно. Следовательно, соединение можно вводить путем инъекции, инфузии или путем ингаляции или распыления с помощью небулайзера. Соединение предпочтительно вводят перорально.
Дозировка зависит от множества факторов, включая возраст, вес и состояние пациента, а также путь введения. Суточные дозы могут варьироваться в широких пределах и будут подбираться в соответствии с индивидуальными требованиями в каждом конкретном случае. Обычно дозировка, принятая для каждого пути введения, когда соединение вводят отдельно взрослым людям, составляет от 0,0001 до 650 мг/кг, чаще всего в диапазоне от 0,001 до 10 мг/кг массы тела, например, от 0,01 до 1 мг/кг. Такую дозировку можно вводить, например, от 1 до 5 раз в сутки. Для внутривенной инъекции подходящая суточная доза составляет от 0,0001 до 1 мг/кг массы тела, предпочтительно от 0,0001 до 0,1 мг/кг массы тела. Суточную дозу можно вводить в виде разовой дозы или в соответствии с графиком разделенных доз.
Единичная дозированная форма, такая как таблетка или капсула, обычно содержит 1-250 мг активного ингредиента. Например, соединение формулы (I) можно вводить пациенту в дозе 100-250 мг один раз в сутки, два или три раза в сутки. Например, соединение формулы (I) можно вводить пациенту в дозе 100-250 мг один раз в сутки, два или три раза в сутки.
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли можно применять сами по себе. Альтернативно их можно вводить в форме фармацевтической композиции. Следовательно, настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы (I) или его фармацевтически приемлемую соль, как определено выше, в сочетании с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом, разбавителем или носителем. Обычные процедуры выбора и приготовления подходящих фармацевтических составов описаны, например, в «Pharmaceuticals - The Science of Dosage Form Designs», M. E. Aulton, Churchill Livingstone, 1988.
В зависимости от способа введения фармацевтическая композиция предпочтительно будет содержать от 0,05 до 99 мас. % (массовых процентов), более предпочтительно от 0,05 до 80 мас. %, еще более предпочтительно от 0,10 до 70 мас. %, и еще более предпочтительно от 0,10 до 50 мас. % активного ингредиента, при этом все массовые проценты приведены по общей композиции.
Настоящее изобретение, кроме того, относится к способу получения фармацевтической композиции согласно настоящему изобретению, включающему смешивание соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено выше, с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом, разбавителем или носителем.
Соединения по настоящему изобретению можно вводить в различных дозированных формах. Таким образом, их можно вводить перорально, например, в виде таблеток, формованных пастилок, пастилок для рассасывания, водных или масляных суспензий, растворов, диспергируемых порошков или гранул. Соединения согласно настоящему изобретению также можно вводить парентерально, будь то подкожно, внутривенно, внутримышечно, внутрикожно, трансдермально, с помощью инфузионных методов или путем ингаляции или распыления с помощью небулайзера. Соединения также можно вводить в виде суппозиториев.
Твердые формы фармацевтической композиции для перорального введения согласно настоящему изобретению могут содержать вместе с активным соединением разбавители, например, лактозу, декстрозу, сахарозу, целлюлозу, кукурузный крахмал или картофельный крахмал; смазывающие вещества, например, диоксид кремния, тальк, стеариновая кислота, стеарат магния или кальция и/или полиэтиленгликоли; связующие агенты; например, крахмалы, аравийская камедь, желатин, метилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза или поливинилпирролидон; дезагрегирующие агенты, например, крахмал, альгиновая кислота, альгинаты или крахмалгликолят натрия; шипучие смеси; красители; подсластители; смачивающие агенты, такие как лецитин, полисорбаты, лаурилсульфаты; и в целом нетоксичные и фармакологически неактивные вещества, используемые в фармацевтических составах. Такие фармацевтические составы можно получать известным способом, например, с помощью процессов смешивания, гранулирования, таблетирования, нанесения сахарного покрытия или пленочного покрытия.
Жидкие дисперсии для перорального введения могут представлять собой сиропы, эмульсии и суспензии. Сиропы могут содержать в качестве носителей, например, сахарозу или сахарозу с глицерином и/или маннитом и/или сорбитом.
Суспензии и эмульсии могут содержать в качестве носителя, например, природную камедь, агар, альгинат натрия, пектин, метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу или поливиниловый спирт. Суспензия или растворы для внутримышечных инъекций могут содержать совместно с активным соединением фармацевтически приемлемый носитель, например, стерильную воду, оливковое масло, этилолеат, гликоли, например, пропиленгликоль, и, если требуется, подходящее количество гидрохлорида лидокаина. Другие подходящие носители для суспензий включают стерильную воду, гидроксипропилметилцеллюлозу (ГПМЦ), полисорбат 80, поливинилпирролидон (ПВП), аэрозоль АОТ (т.е. 1,2-бис(2-этилгексоксикарбонил)этансульфонат натрия), плюроник F127 и/или каптизол (т.е. простой сульфобутиловый эфир-бета-циклодекстрин).
Соединения согласно настоящему изобретению могут, например, быть приготовлены в виде водных суспензий в носителе, выбранном из:
(i) 0,5% мас./об. гидроксипропилметилцеллюлозы (ГПМЦ)/0,1% мас./об. полисорбата 80;
(ii) 0,67% мас./об. поливинилпирролидона (ПВП)/0,33% мас./об. аэрозоля AOT (натрия 1,2-бис(2-этилгексоксикарбонил)этансульфоната);
(iii) 1% мас./об. плуроника F 127; и
(iv) 0,5% мас./об. полисорбата 80.
Носители можно получать стандартными процедурами, известными специалистам в данной области. Например, каждый из носителей (i) - (iv) можно получать при помощи отвешивания необходимого количества вспомогательного вещества в подходящий сосуд, добавления примерно 80% конечного объема воды и перемешивания при помощи магнитной мешалки до образования раствора. Затем носитель доводят до объема при помощи воды. Водные суспензии соединений формулы I можно приготовить путем взвешивания необходимого количества соединения формулы I в подходящий сосуд, добавления 100% необходимого объема носителя и перемешивания при помощи магнитной мешалки.
Растворы для инъекций или инфузий могут содержать в качестве носителя, например, стерильную воду или, предпочтительно они могут быть в форме стерильных водных изотонических солевых растворов.
Соединения согласно настоящему изобретению также можно вводить в комбинации с другими соединениями, применяемыми для лечения вирусных инфекций. Таким образом, настоящее изобретение относится к комбинированной терапии, в которой соединение согласно настоящему изобретению, или его фармацевтически приемлемая соль, или фармацевтическая композиция или состав, содержащие соединение согласно настоящему изобретению, вводят одновременно или последовательно или в виде комбинированного препарата с другим терапевтическим агентом или агентами, для лечения или предотвращения вирусной инфекции, особенно РСВ-инфекции.
Следует понимать, что в настоящем документе термин «комбинация» относится к одновременному, раздельному или последовательному введению. В одном аспекте настоящего изобретения «комбинация» относится к одновременному введению. В одном аспекте настоящего изобретения «комбинация» относится к раздельному введению. В одном аспекте настоящего изобретения «комбинация» относится к последовательному введению. В тех случаях, когда введение является последовательным или раздельным, задержка введения второго компонента должна быть такой, чтобы не потерять полезный эффект комбинации.
Подходящие терапевтические агенты для применения в комбинированной терапии включают
(i) ингибиторы нуклеокапсидного (N)-белка РСВ;
(ii) ингибиторы другого белка РСВ, такие как те, которые ингибируют фосфопротеин (P) и крупный белок (L);
(iii) моноклональные антитела против РСВ, такие как антитела к F-белку;
(iv) иммуномодулирующие соединения, представляющие собой toll-подобные рецепторы;
(v) другие противовирусные средства для лечения респираторного вируса, такие как противогриппозные и противориновирусные соединения; и/или
(vi) противовоспалительные соединения.
Нуклеокапсидный (N)-белок РСВ играет ключевую роль в транскрипции и репликации вируса, опосредуя взаимодействие между геномной РНК и кодируемой вирусом РНК-зависимой РНК-полимеразой. P- и L-белки являются компонентами кодируемой вирусом РНК-зависимой РНК-полимеразы РСВ.
В дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, как определено выше, в комбинации с одним или более терапевтическими агентами, перечисленными в пунктах (i) - (vi) выше для применения для лечения РСВ.
Следующие примеры иллюстрируют изобретение, однако никоим образом его не ограничивают.
Примеры
3
H
C
6
H
C
d
L
Реагенты были получены из коммерческих источников и использовались без дальнейшей очистки. Все значения температуры приведены в °C. Тонкослойную хроматографию (ТСХ) проводили на пластинах с силикагелем на алюминиевой основе с индикатором флуоресценции при 254 нМ (средний размер пор 60 Å). Колоночную флэш-хроматографию проводили с использованием системы Biotage Isolera One с использованием колонок KP-Sil, Ultra или KP-NH. Спектры ЯМР регистрировали на спектрометре 400 МГц при температуре зонда, равной температуре окружающей среды (номинальная 295 К). Химические сдвиги (δ) приведены в ppm и откалиброваны с использованием остаточного пика растворителя в качестве внутреннего стандарта (CDCl, δ= 7,26 ppm, δ= 77,16 ppm; ДМСО-, δ= 2,50 ppm, δ = 39,52 ppm). Константы взаимодействия приведены в герцах (Гц). МСНР регистрировали с помощью компактного масс-спектрометра Advion Plate Express expression, оснащенного источником ионов APCI или ESI.
Сокращения
ДМФА
h,-диметилформамид NN
ДМСО
Диметилсульфоксид
EtOAc
Этилацетат
EtOH
Этанол
ч
час(ы)
iPrOH
Изопропанол
m-CPBA
мета-хлорпероксибензойная кислота
MeCN
Ацетонитрил
MeOH
Метанол
MsCl
Метансульфонилхлорид
NEt<sub>3</sub>
Триэтиламин
КТ
Комнатная температура
ТФК
Трифторуксусная кислота
ТГФ
Тетрагидрофуран
Подготовительные примеры
1A: 4-
хлор-N-(3,3-диэтоксипропил)-2-нитроанилин
2
4
3
1
+
J
J
J
J
J
К раствору 4-хлор-1-фтор-2-нитробензола (1,765 мл, 15 ммоль) в iPrOH (35 мл) добавляли N,N-диизопропилэтиламин (3,397 мл, 19,5 ммоль) с последующим добавлением 3,3-диэтоксипропан-1-амина (3,154 мл, 19,5 ммоль) и нагревали при температуре 80°С в течение 4,5 часов. После охлаждения до комнатной температуры указанную реакционную смесь разбавляли EtOAc (100 мл) и последовательно промывали HO (подкисленным до ~ pH 6 с помощью 0,01 М водной HCl, 4 раза) и рассолом (однократно, 100 мл), сушили (MgSO) и растворитель удаляли при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в виде твердого вещества оранжевого цвета (4,308 г, 97%). H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 8,29 (шир. s, 1H), 8,17 (d,  = 2,6 Гц, 1H), 7,37 (ddd,  = 9,2, 2,6, 0,6 Гц, 1H), 6,83 (d,  = 9,2 Гц, 1H), 4,65 (t,  = 5,0 Гц, 1H), 3,76 - 3,65 (m, 2H), 3,59 - 3,49 (m, 2H), 3,44 - 3,37 (m, 2H), 2,07 - 2,01 (m, 2H), 1,24 (t,  = 7,0 Гц, 6H). МСНР (ESI +) m/z 324,9 [M+H]
Следующие промежуточные соединения получали по той же общей методике.
Подготовительный пример
Название
<sup>1</sup>H ЯМР δ(400 МГц, CDCl<sub>3</sub>)
МСНР
ТСХ значение R<sub>f </sub>
1B
N-(3,3-диэтоксипропил)-4-фтор-2-нитроанилин
-
-
0,66(EtOAc: петролейный эфир 60/40; 1:4)
1C
4-хлор-N-(2,2-диэтоксиэтил)-2-нитроанилин
8,19 - 8,11 (m, 2H), 7,38 (ddd, J = 9,2, 2,6, 0,7 Гц, 1H), 6,85 (d, J = 9,2 Гц, 1H), 4,74 (t, J = 5,6 Гц, 1H), 3,81 - 3,72 (m, 2H), 3,65 - 3,55 (m, 2H), 3,43 (t, J = 5,5 Гц, 2H), 1,25 (t, J = 7,0 Гц, 6H)
ESI+311,0 [M+Na]<sup>+</sup>
-
1D
трет-бутил 4-[(4-хлор-2-нитрофенил)амино]пиперидин-1-карбоксилат
8,19 (d, J = 2,6 Гц, 1H), 8,06 (d, J = 7,4 Гц, 1H), 7,40 - 7,35 (m, 1H), 6,84 (d, J = 9,3 Гц, 1H), 4,09 - 3,95 (m, 2H), 3,69 - 3,60 (m, 1H), 3,09 - 2,98 (m, 2H), 2,09 - 2,00 (m, 2H), 1,57 - 1,50 (m, 2H), 1,47 (s, 9H)
APCI-353,9 [M-H]<sup>-</sup>
-
2A:
4-хлор-N
(3,3-диэтоксипропил)бензол-1,2-диамин
1
-
2
2
2
2
2
4
3
1
+
J
J
J
J
J
J
m/z
В находящейся под давлением круглодонной колбе объемом 250 мл 4-хлор-N-(3,3-диэтоксипропил)-2-нитроанилин (промежуточное соединение 1A) (4,050 г, 13,38 ммоль) растворяли в EtOH (100 мл) и добавляли платину на углеродном носителе (загрузка 5 мас.%, 393 мг). Реакционный сосуд заполняли водородом до давления 50 фунтов на квадратный дюйм (~344,73 кПа) и перемешивали в течение 3 часов. Реакционную смесь фильтровали через фильтр из стекловолокна, промывали EtOH и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очисткой флэш-хроматографией [SiO; CHCl/(CHCl:EtOH:NHOH 80:20:1); 0-25%] получали указанное в заголовке соединение в виде темно-коричневого масла (3,440 г, 94%). H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 6,74 (dd,  = 8,4, 2,4 Гц, 1H), 6,67 (d,  = 2,4 Гц, 1H), 6,53 (d,  = 8,4 Гц, 1H), 4,65 (t,  = 5,4 Гц, 1H), 3,83 - 3,64 (m, 3H), 3,57 - 3,47 (m, 2H), 3,40 (шир. s, 2H), 3,17 (t,  = 6,4 Гц, 2H), 2,02 - 1,96 (m, 2H), 1,23 (t,  = 7,0 Гц, 6H). МСНР (ESI +)  273,1 [M+H]
Следующие промежуточные соединения получали по той же общей методике.
Подготовительный пример
Название
<sup>1</sup>H ЯМР δ(400 МГц, CDCl<sub>3</sub>)
МСНР ESI+
ТСХ значение R<sub>f </sub>
2B
N<sup>1</sup>-(3,3-диэтоксипропил)-4-фторбензол-1,2-диамин
-
279,1 [M+Na]<sup>+</sup>
0,35 (EtOAc:гептан; 1: 2)
2C
4-хлор-N<sup>1</sup>-(2,2-диэтоксиэтил)бензол-1,2-диамин
6,76 (dd, J = 8,3, 2,3 Гц, 1H), 6,71 (d, J = 2,3 Гц, 1H), 6,58 (d, J = 8,4 Гц, 1H), 4,75 (t, J = 5,4 Гц, 1H), 3,86 - 3,71 (m, 2H), 3,70 - 3,54 (m, 3H), 3,48 (s, 2H), 3,22 (d, J = 5,4 Гц, 2H), 1,27 (t, J = 7,0 Гц, 6H).
-
0,41 (EtOAc:гептан; 1:1)
2D
трет-бутил 4-[(2-амино-4-хлорфенил)амино]пиперидин-1-карбоксилат
6,75 - 6,69 (m, 2H), 6,57 (d, J = 8,3 Гц, 1H), 4,03 (шир. s, 2H), 3,54 - 3,26 (m, 3H), 3,00 - 2,86 (m, 2H), 2,04 - 1,96 (m, 2H), 1,42 (s, 9H), 1,42 - 1,30 (m, 2H)
326,3 [M+H]+
-
3A:
5-хлор-2-(хлорметил)-1-(3,3-диэтоксипропил)-1H-1,3-бензодиазол
1
1
+
2
3
J
J
J
m/z
Раствор 4-хлор-N-(3,3-диэтоксипропил)бензол-1,2-диамина (промежуточное соединение 2A) (2,524 г, 9,27 ммоль) и 2-хлор-1,1,1-триэтоксиэтана (2,499 мл) 18,54 ммоль) в EtOH (90 мл) нагревали при температуре 75°C в течение 7,5 часов, затем перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении и реакционную смесь очищали флэш-хроматографией (SiO; EtOAc/петролейный эфир 60/80; 0-60%) с получением продукта в виде твердого вещества коричневого цвета (1,537 г, 50%). H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 7,74 - 7,72 (m, 1H), 7,34 - 7,26 (m, 2H), 4,87 (s, 2H), 4,48 (t,  = 5,0 Гц, 1H), 4,37 (t,  = 7,1 Гц, 2H), 3,68 - 3,58 (m, 2H), 3,49 - 3,39 (m, 2H), 2,21 - 2,14 (m, 2H), 1,20 (t, = 7,1 Гц, 6H). МСНР (APCI+)  331,1 [M+H]
Следующие промежуточные соединения получали по той же общей методике.
Подготовительный пример
Название
<sup>1</sup>H ЯМР δ(400 МГц, CDCl<sub>3</sub>)
МСНРAP-CI+
3B
2-(хлорметил)-1-(3,3-диэтоксипропил)-5-фтор-1Н-1,3-бензодиазол
7,42 (dd, J = 9,2, 2,4 Гц, 1H), 7,34 - 7,30 (m, 1H), 7,08 (td, J = 9,1, 2,4 Гц, 1H), 4,87 (s, 2H), 4,49 (t, J = 5,0 Гц, 1H), 4,37 (t, J = 7,2 Гц, 2H), 3,68 - 3,59 (m, 2H), 3,49 - 3,40 (m, 2H), 2,21 - 2,25 (m, 2H), 1,20 (t, J = 7,1 Гц, 6H)
314,9 [M+H]+
3C
5-хлор-2-(хлорметил)-1-(2,2-диэтоксиэтил)-1Н-1,3-бензодиазол
7,72 (dd, J = 1,9, 0,6 Гц, 1H), 7,35 (dd, J = 8,7, 0,6 Гц, 1H), 7,28 (dd, J = 8,6, 1,9 Гц, 1H), 4,93 (s, 2H), 4,71 (t, J = 5,2 Гц, 1H), 4,36 (d, J = 5,2 Гц, 2H), 3,73 (dq, J = 9,2, 7,0 Гц, 2H), 3,41 (dq, J = 9,2, 7,0 Гц, 2H), 1,12 (t, J = 7,0 Гц, 6H).
318,1 [M+H]+
3D
трет-бутил 4-[5-хлор-2-(хлорметил)-1H-1,3-бензодиазол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилат
7,73 (d, J = 1,9 Гц, 1H), 7,42 (d, J = 8,7 Гц, 1H), 7,24 (dd, J = 8,8, 2,0 Гц, 1H), 4,85 (s, 2H), 4,52 - 4,27 (m, 3H), 2,98 - 2,81 (m, 2H), 2,46 - 2,31 (m, 2H), 2,03 - 1,93 (m, 2H), 1,52 (s, 9H)
383,9 [M+H]+
4A:
6
-фтор-1
,2
-дигидроспиро[циклобутан-1,3
-индол]-2
-он
'''''
2
4
3
н-
J
J
J
m/z
1
+
В сухую круглодонную колбу под N загружали 6-фтор-2-оксиндол (3,00 г, 19,9 ммоль), безводный ТГФ (60 мл) и диизопропиламин (5,7 мл, 40,7 ммоль). Указанную смесь охлаждали до температуры 0°C и по каплям в течение 45 минут добавляли бутиллитий (29,4 мл, 79,4 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 часов при температуре 0°C, затем добавляли по каплям 1,3-дибромпропан (4,03 мл, 39,7 ммоль). Смеси давали нагреться до комнатной температуры в течение 1 часа и перемешивали в течение 20 часов при комнатной температуре. Реакцию гасили HCl (1 М водн.) и экстрагировали EtOAc (3 × 30 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой и рассолом (по 30 мл каждого), сушили (MgSO) и концентрировали при пониженном давлении. При помощи очистки флэш-хроматографией (0-25% EtOAc:гептан) получали продукт в виде твердого вещества оранжевого цвета (1,101 г, 29%). H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 8,11 (s, 1H), 7,40 (dd,  = 8,2, 5,3 Гц, 1H), 6,75 (ddd,  = 9,6, 8,2, 2,3 Гц, 1H), 6,61 (dd,  = 8,8, 2,3 Гц, 1H), 2,78-2,58 (m, 2H), 2,46-2,30 (m, 3H), 2,29-2,04 (m, 1H). МСНР (APCI+)  191,9 [M+H]
5A: 1'-{[5-хлор-1-(3,3-диэтоксипропил)-1H-1,3-бензодиазол-2-ил]метил}-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он
2
3
2
2
4
2
3
1
+
J
J
J
J
m/z
Раствор алкилхлорида (промежуточное соединение 3А) (938 мг, 2,83 ммоль), 6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-она (502 мг, 2,83 ммоль) и KCO (959 мг, 6,94 ммоль) в безводном MeCN (18 мл) нагревали в инертной атмосфере при температуре 75°С в течение 18 часов. После охлаждения до комнатной температуры указанную реакционную смесь разбавляли EtOAc (50 мл) и промывали HO (2 × 15 мл). Водные слои экстрагировали EtOAc (2 × 25 мл), и объединенные органические экстракты последовательно промывали HO и рассолом (по 50 мл каждого), сушили (MgSO) и растворитель удаляли при пониженном давлении. После очистки при помощи флэш-хроматографии (SiO, EtOAc/петролейный эфир 60/80; 8-68%) получали продукт в виде твердого вещества беловатого цвета (1,079 г, 81%). H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 7,77 - 7,75 (m, 1H), 7,31 - 7,21 (m, 3H), 6,75 - 6,65 (m 2H), 5,28 (s, 2H), 4,45 (t,  = 5,4 Гц, 1H), 4,35 (t,  = 7,3 Гц, 2H), 3,62 - 3,52 (m, 2H), 3,45 - 3,35 (m, 2H), 1,97 - 1,89 (m, 2H), 1,78 (q, = 4,0 Гц, 2H), 1,54 (q,  = 4,1 Гц, 1H), 1,16 (t, J = 7,1 Гц, 6H). МСНР (APCI+)  471,9 [M+H]
Следующие соединения получали по той же общей методике.
Подготовительныйпример
Название
<sup>1</sup>H ЯМР δ(400 МГц, CDCl<sub>3</sub>)
МСНРAP-CI+
5B
1'-{[1-(3,3-диэтоксипропил)-5-фтор-1Н-1,3-бензодиазол-2-ил]метил}-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он
7,45 (dd, J = 9,3, 2,4 Гц, 1H), 7,31 - 7,24 (m, 2H), 7,04 (td, J = 9,1, 2,4 Гц, 1H), 6,75 - 6,65 (m, 2H), 5,28 (s, 2H), 4,46 (t, J = 5,5 Гц, 1H), 4,36 (t, J = 7,3 Гц, 2H), 3,62 - 3,55 (m, 2H), 3,46 - 3,36 (m, 2H), 1,97 - 1,90 (m, 2H), 1,78 (q, J = 4,1 Гц, 2H), 1,53 (q, J = 4,2 Гц, 2H), 1,16 (t, J = 7,1 Гц, 6H)
455,9 [M+H]+
5C
1'-{[5-хлор-1-(2,2-диэтоксиэтил)-1Н-1,3-бензодиазол-2-ил]метил}-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он
7,75 (dd, J = 2,0, 0,5 Гц, 1H), 7,35 - 7,30 (m, 1H), 7,29 - 7,21 (m, 2H), 6,76 - 6,65 (m, 2H), 5,30 (s, 2H), 4,61 (t, J = 5,2 Гц, 1H), 4,43 (d, J = 5,2 Гц, 2H), 3,62 (dq, J = 9,3, 7,0 Гц, 2H), 3,35 (dq, J = 9,3, 7,0 Гц, 2H), 1,77 (q, J = 4,1 Гц, 2H), 1,53 (q, J = 4,1 Гц, 2H), 1,03 (t, J = 7,0 Гц, 6H).
458,1 [M+H]+
5D
трет-бутил 4-[5-хлор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1H-1,3-бензодиазол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилат
7,79 (d, J = 2,0 Гц, 1H), 7,38 (d, J = 8,7 Гц, 1H), 7,28 - 7,13 (m, 1H), 7,19 (dd, J = 8,7, 2,0 Гц, 1H), 6,74 - 6,65 (m, 2H), 5,30 (s, 2H), 4,85 - 4,75 (m, 1H), 4,35 - 4,26 (m, 2H), 2,94 - 2,76 (m, 2H), 2,33 - 2,20 (m, 2H), 1,77 - 1,73 (m, 2H), 1,57 - 1,53 (m, 2H), 1,49 (s, 9H)
524,8 [M+H]+
5E
трет-бутил 4-[5-хлор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклобутан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1H-1,3-бензодиазол-1-ил]пиперидин-1-карбоксилат
7,83 (dd, J = 11,2, 2,0 Гц, 1H), 7,52-7,36 (m, 3H), 7,30-7,27 (m, 1H), 6,77 (ddd, J = 9,3, 8,2, 2,3 Гц, 1H), 5,37 (s, 2H), 5,05-4,87 (m, 1H), 4,35-4,25 (m, 2H), 3,03-2,88 (m, 2H), 2,68-2,59 (m, 2H), 2,43-2,23 (m, 6H), 1,70 - 1,61 (m, 2H), 1,50 (s, 9H).
539,8 [M+H]+
6A:
3-[5-хлор-2-({6
-фтор-2
-оксо-1
,2
-дигидроспиро[циклопропан-1,3
-индол]-1
ил}метил)-1H-1,3-бензодиазол-1-ил]пропанал
''''''
3
2
4
2
3
1
+
m/z
HCl (2 М водный раствор, 10 мл) добавляли к раствору промежуточного соединения 5А (1,079 г, 2,29 ммоль) в ТГФ (15 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакцию гасили насыщенным водн. NaHCO (~ 25 мл) и экстрагировали EtOAc (4 × 50 мл). Объединенные органические экстракты последовательно промывали HO и рассолом (по 75 мл каждого), сушили (MgSO) и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка флэш-хроматографией (SiO, 10-100% EtOAc в гептане) давала продукт в виде твердого вещества беловатого цвета (766 мг, 84%). H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 9,69 (s, 1H), 7,67 - 7,55 (m, 2H), 7,30 - 7,26 (m, 1H), 7,10 - 7,04 (m, 2H), 6,85 - 6,79 (m, 1H), 5,37 (s, 2H), 4,59 (t, J = 6,9 Гц, 2H), 3,04 (t, J = 6,8 Гц, 2H), 1,72 - 1,69 (m, 2H), 1,60 - 1,54 (m, 2H). МСНР (APCI+)  397,8 [M+H]
Следующее промежуточное соединение получали по той же общей методике.
Подготовительныйпример
Название
<sup>1</sup>H ЯМР (400 МГц)
МСНР AP-CI+
6B
3-[5-фтор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1Н-1,3-бензодиазол-1-ил]пропанол
(ДМСО-d<sub>6</sub>): δ 9,70 (s, 1H), 7,67 - 7,60 (m, 1H), 7,41 (dd, J = 9,8, 2,4 Гц, 1H), 7,14 - 7,04 (m, 3H), 6,85 - 6,78 (m, 1H), 5,36 (s, 2H), 4,59 (t, J = 6,9 Гц, 2H), 3,04 (t, J = 6,9 Гц, 2H), 1,71 - 1,67 (m, 2H), 1,59 - 1,54 (m, 2H)
382,0 [M+H]+
7A: 2-[5-хлор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1H-1,3-бензодиазол-1-ил]ацетальдегид
3
4
3
1
+
J
J
J
J
2
m/z
HCl (6 М водный раствор; 10 мл) добавляли к раствору промежуточного соединения 5С в безводном ТГФ (11 мл) и нагревали при температуре 60°С в течение 5,5 часов, а затем при температуре 40°С в течение еще 16 часов. Реакцию гасили насыщенным водным раствором NaHCO ( 25 мл) и экстрагировали EtOAc (4 × 50 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой и рассолом (по 25 мл каждого), сушили (MgSO) и концентрировали при пониженном давлении. Очистка флэш-хроматографией (30-70% EtOAc:гептан) давала оранжевое твердое вещество (430 мг, 64%). H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 9,58 (s, 1H), 7,83 (d,  = 1,9 Гц, 1H), 7,39 - 7,31 (m, 1H), 7,30 - 7,25 (m, 1H), 7,06 (d,  = 8,6 Гц, 1H), 6,73 (dd,  = 7,7, 1,6 Гц, 2H), 5,20 (s, 2H), 3,61 (t,  = 6,5 Гц, 2H), 1,77 - 1,71 (m, H), 1,59 - 1,53 (m, 2H). МСНР (APCI+)  384,9 [M+H]
Примеры
Восстановительное аминирование
1. 1'-({5-хлор-1-[3-(4-метансульфонилпиперазин-1-ил)пропил]-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он
3
2
2
2
4
2
2
2
6
1
+
d
J
J
J
J
m/z
Для восстановительного аминирования использовали следующую общую процедуру. 1-метансульфонилпиперазин (27 мг, 0,166 ммоль) добавляли к раствору промежуточного соединения 6А (60 мг, 0,151 ммоль) в 1,2-дихлорэтане (2,5 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 7 часов. Затем добавляли NaBH(OAc) (45 мг, 0,211 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение 18 часов при комнатной температуре. Реакцию гасили NaOH (1 М водный раствор, 4 мл), экстрагировали CHCl (4 × 10 мл), объединенные органические экстракты промывали рассолом (5 мл), сушили (NaSO) и удаляли растворитель при пониженном давлении. Очистка флэш-хроматографией (SiO, 100% EtOAc, затем 0-5% MeOH в CHCl) давала продукт в виде белого твердого вещества (64 мг, 78%). H ЯМР (400 МГц, ДМСО-): δ 7,69 (d,  = 1,9 Гц, 1H), 7,64 (d, J = 8,7 Гц, 1H), 7,28 (dd,  = 8,6, 2,0 Гц, 1H), 7,14 - 7,05 (m, 2H), 6,86 - 6,79 (m, 1H), 5,34 (s, 2H), 4,35 (t, J = 6,7 Гц, 2H), 3,09 - 3,02 (m, 4H), 2,85 (s, 3H), 2,40 - 2,33 (m, 4H), 2,27 (t,  = 6,6 Гц, 1H), 1,90 (p,  = 6,4 Гц, 1H), 1,72 - 1,67 (m, 2H), 1,60 - 1,55 (m, 2H). МСНР (APCI+)  545,7 [M+H]
Следующие соединения согласно настоящему изобретению были получены с промежуточным соединением 7А согласно общей процедуре восстановительного аминирования, описанной для соединения примера 1.
Таблица 1
5-хлороаминоэтильные аналоги, полученные путем восстановительного аминирования
.
Пример
Название
R<sup>1</sup>
<sup>1</sup>H ЯМР δ(400 МГц, CDCl<sub>3</sub>)
МСНР AP-CI+
2
1'-[(5-хлор-1-{2-[(2-метансульфонилэтил)амино]этил}-1H-1,3-бензодиазол-2-ил)метил]-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он
<img file="00000015.jpg" he="13" wi="24" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,78 (t, J = 1,2 Гц, 1H), 7,31 (dd, J = 9,0, 2,0 Гц, 1H), 7,26 - 7,23 (m, 2H), 6,77 - 6,68 (m, 2H), 5,31 (s, 2H), 4,35 (t, J = 6,2 Гц, 2H), 3,08 - 2,96 (m, 4H), 2,93 (t, J = 6,2 Гц, 2H), 2,81 (s, 3H), 1,77 (q, J = 4,0 Гц, 2H), 1,55 (q, J = 4,0 Гц, 2H).
491,1 [M+H]+
3
N-[2-({2-[5-хлор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1Н-1,3-бензодиазол-1-ил]этил}амино)этил]1,1,1-трифторметансульфонамид
<img file="00000016.jpg" he="14" wi="32" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,79 (dd, J = 1,8, 0,7 Гц, 1H), 7,31 - 7,23 (m, 3H), 6,83 - 6,67 (m, 3H), 5,43 (s, 2H), 4,35 (t, J = 6,1 Гц, 2H), 3,38 - 3,29 (m, 2H), 3,02 (q, J = 5,8 Гц, 2H), 2,91 - 2,77 (m, 2H), 1,81 (q, J = 4,2 Гц, 2H), 1,61 (q, J = 4,2 Гц, 2H).
560,1 [M+H]+
4
3-({2-[5-хлор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1H-1,3-бензодиазол-1-ил]этил}амино)-1λ<sup>6</sup>-тиолан-1,1-дион
<img file="00000017.jpg" he="13" wi="25" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,80 (q, J = 1,6 Гц, 1H), 7,41 - 7,24 (m, 3H), 6,86 - 6,63 (m, 3H), 5,42 - 5,29 (m, 2H), 4,37 (t, J = 6,0 Гц, 2H), 3,46 (dt, J = 11,6, 6,5 Гц, 1H), 3,15 (td, J = 13,7, 7,1 Гц, 2H), 3,09 - 2,87 (m, 4H), 2,72 (dd, J = 13,3, 6,2 Гц, 1H), 2,33 - 2,16 (m, 1H), 2,02 - 1,79 (m, 2H), 1,58 (dq, J = 8,4, 4,2 Гц, 3H).
503,7 [M+H]+
5
1'-[(5-хлор-1-{2-[(1-метансульфонилпирролидин-3-ил)амино]этил}-1H-1,3-бензодиазол-2-ил)метил]-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он
<img file="00000018.jpg" he="14" wi="29" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,78 (t, J = 1,2 Гц, 1H), 7,31 (dd, J = 9,0, 2,2 Гц, 1H), 7,26 (d, J = 1,4 Гц, 2H), 6,78 - 6,65 (m, 2H), 5,35 - 5,27 (m, 2H), 4,34 (t, J = 6,0 Гц, 2H), 3,42 - 3,18 (m, 4H), 2,89 (dt, J = 7,8, 2,7 Гц, 3H), 2,66 (s, 3H), 2,00 (d, J = 7,2 Гц, 1H), 1,77 (q, J = 4,0 Гц, 2H), 1,65 - 1,50 (m, 4H)
532,8 [M+H]+
6
1-{2-[5-хлор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1Н-1,3-бензодиазол-1-ил]этил}пирролидин-2-карбоксамид
<img file="00000019.jpg" he="15" wi="20" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,78 (dd, J = 1,8, 0,6 Гц, 1H), 7,37 - 7,32 (m, 1H), 7,29 - 7,17 (m, 2H), 6,79 - 6,69 (m, 2H), 6,62 (s, 1H), 5,41 - 5,16 (m, 2H), 4,94 (s, 1H), 4,52 - 4,32 (m, 2H), 3,24 (t, J = 7,9 Гц, 1H), 3,11 - 2,90 (m, 2H), 2,75 (dt, J = 12,4, 5,8 Гц, 1H), 2,41 - 2,25 (m, 1H), 2,27 - 2,11 (m, 1H), 1,91 - 1,74 (m, 4H), 1,65 - 1,48 (m, 3H).
481,8 [M+H]+
7
1'-({5-хлор-1-[2-(3-метансульфонилпирролидин-1-ил)этил]-1Н-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он
<img file="00000020.jpg" he="14" wi="24" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,78 (t, J = 1,2 Гц, 1H), 7,33 (dd, J = 9,1, 2,1 Гц, 1H), 7,25 (dd, J = 3,2, 1,6 Гц, 2H), 6,77 - 6,57 (m, 2H), 5,35 - 5,15 (m, 2H), 4,43 - 4,34 (m, 2H), 3,54 - 3,40 (m, 1H), 3,01 (dd, J = 10,5, 5,5 Гц, 1H), 2,95 - 2,86 (m, 1H), 2,85 - 2,73 (m, 3H), 2,79 (m, 3H), 2,65 (q, J = 8,3, 7,6 Гц, 1H), 2,31 - 2,09 (m, 2H), 1,78 (q, J = 3,6 Гц, 2H), 1,55 (q, J = 3,6 Гц, 2H)
516,7 [M+H]+
8
1'-({5-хлор-1-[2-(4-метансульфонилпиперидин-1-ил)этил]-1Н-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он
<img file="00000021.jpg" he="14" wi="26" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,81 (dd, J = 1,6, 0,9 Гц, 1H), 7,38 (dd, J = 9,0, 2,1 Гц, 1H), 7,32 - 7,15 (m, 2H), 6,84 - 6,68 (m, 2H), 5,32 (s, 2H), 4,40 (t, J = 6,1 Гц, 2H), 3,06 (d, J = 11,7 Гц, 2H), 2,84 (s, 3H), 2,84 - 2,79 (m, 1H), 2,64 (t, J = 6,1 Гц, 2H), 2,17 - 2,08 (m, 4H), 1,93 - 1,77 (m, 4H), 1,55 (q, J = 4,0 Гц, 2H)
531,8 [M+H]+
9
1'-({5-хлор-1-[2-(4-метансульфонилпиперазин-1-ил)этил]-1Н-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он
<img file="00000022.jpg" he="14" wi="26" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,78 (dd, J = 1,7, 0,6 Гц, 1H), 7,33 (dd, J = 8,9, 2,1 Гц, 1H), 7,28 - 7,20 (m, 2H), 6,76 - 6,68 (m, 2H), 5,30 (s, 2H), 4,38 (t, J = 6,2 Гц, 2H), 3,23 - 3,15 (m, 4H), 2,76 (s, 3H), 2,66 (t, J = 6,2 Гц, 2H), 2,62 - 2,56 (m, 4H), 1,77 (q, J = 4,1 Гц, 2H), 1,56 - 1,50 (m, 2H).
532,1 [M+H]+
Следующие соединения были получены с промежуточным соединением 6А по общей методике, описанной выше для соединения примера 1.
Таблица 2
Примеры 5-хлороаминопропила, полученные путем восстановительного аминирования
.
Пример
Название
R<sup>1</sup>
<sup>1</sup>H ЯМР δ(400 МГц, ДМСО-d<sub>6</sub>)
МСНРAP-CI+
10
1'-[(5-хлор-1-{3-[(2-метансульфонилэтил)амино]пропил}-1H-1,3-бензодиазол-2-ил)метил]-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он
<img file="00000024.jpg" he="13" wi="24" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,68 (d, J = 1,9 Гц, 1H), 7,63 (d, J = 8,7 Гц, 1H), 7,27 (dd, J = 8,6, 2,0 Гц, 1H), 7,11 - 7,05 (m, 2H), 6,86 - 6,79 (m, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,36 (t, J = 7,1 Гц, 2H), 3,22 (t, J = 6,6 Гц, 2H), 3,00 (s, 3H), 2,89 (t, J = 6,5 Гц, 2H), 2,00 (шир, s, 1H), 1,82 (p, J = 6,9 Гц, 2H), 1,72 - 1,67 (m, 5H), 1,60 - 1,55 (m, 2H)
504,8[M+H]<sup>+</sup>
11
1'-{[5-хлор-1-(3-{[2-(этансульфонил)этил]амино}пропил)-1H-1,3-бензодиазол-2-ил]метил}-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он
<img file="00000025.jpg" he="13" wi="28" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,68 (d, J = 1,9 Гц, 1H), 7,63 (d, J = 8,7 Гц, 1H), 7,27 (dd, J = 8,6, 2,0 Гц, 1H), 7,11 - 7,05 (m, 2H), 6,87 - 6,79 (m, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,39 - 4,33 (m, 2H), 3,20 - 3,08 (m, 4H), 2,88 (t, J = 6,7 Гц, 2H), 2,08 (шир, s, 1H), 1,81 (p, J = 6,7 Гц, 2H) 1,72 - 1,67 (m, 2H), 1,59 - 1,55 (m, 2H), 1,19 (t, J = 7,4 Гц, 3H).
519,1[M+H]<sup>+</sup>
12
(2S)-2-({3-[5-хлор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1Н-1,3-бензодиазол-1-ил]пропил}амино)-3-метилбутанамид
<img file="00000026.jpg" he="19" wi="21" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,68 (d, J = 1,9 Гц, 1H), 7,63 (d, J = 8,6 Гц, 1H), 7,34 - 7,30 (m, 1H), 7,26 (dd, J = 8,6, 2,0 Гц, 1H), 7,11 - 7,04 (m, 2H), 6,99 (d, J = 1,9 Гц, 1H), 6,86 - 6,77 (m, 1H), 5,38 - 5,28 (m, 2H), 4,41 - 4,35 (m, 2H), 2,65 - 2,58 (m, 1H), 2,34 - 2,25 (m, 1H), 1,88 - 1,67 (m, 6H), 1,60 - 1,55 (m, 2H), 0,93 - 0,86 (m, 6H)
497,7 [M+H]+
13
1'-({5-хлор-1-[3-(3-метансульфонилазетидин-1-ил)пропил]-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он
<img file="00000027.jpg" he="14" wi="23" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,67 (d, J = 1,9 Гц, 1H), 7,63 (d, J = 8,7 Гц, 1H), 7,27 (dd, J = 8,6, 2,0 Гц, 1H), 7,11 - 7,05 (m, 2H), 6,86 - 6,79 (m, 1H), 5,34 (s, 2H), 4,32 (t, J = 6,9 Гц, 2H), 4,11 (p, J = 7,1 Гц, 1H), 3,47 (t, J = 8,1 Гц, 2H), 3,33 - 3,28 (m, 2H), 2,95 (s, 3H), 2,36 - 2,31 (m, 2H), 1,75 - 1,67 (m, 4H), 1,57 - 1,53 (m, 2H)
516,8 [M+H]+
14
1'-({5-хлор-1-[3-(3-метансульфонилпирролидин-1-ил)пропил]-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он
<img file="00000028.jpg" he="14" wi="24" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,68 (d, J = 1,9 Гц, 1H), 7,65 (d, J = 8,7 Гц, 1H), 7,26 (dd, J = 8,6, 2,0 Гц, 1H), 7,12 - 7,05 (m, 2H), 6,85 - 6,79 (m, 1H), 5,37 - 5,28 (m, 2H), 4,38 - 4,32 (m, 2H), 3,82 - 3,74 (m, 1H), 2,93 (s, 3H), 2,84 - 2,74 (m, 2H), 2,35 - 2,30 (m, 2H), 2,12 - 2,05 (m, 2H), 1,93 - 1,85 (m, 2H), 1,71 - 1,67 (m, 2H), 1,60 - 1,55 (m, 2H)
530,8 [M+H]+
15
(2S)-1-{3-[5-хлор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1Н-1,3-бензодиазол-1-ил]пропил}пирролидин-2-карбоксамид
<img file="00000029.jpg" he="15" wi="20" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,69 (d, J = 1,9 Гц, 1H), 7,65 (d, J = 8,7 Гц, 1H), 7,71 - 7,61 (m, 2H), 7,30 - 7,22 (m, 2H), 7,13 - 7,03 (m, 3H), 6,86 - 6,78 (m, 1H), 5,37 - 5,26 (m, 2H), 4,51 - 4,41 (m, 1H), 4,35 - 4,25 (m, 1H), 3,12 - 3,05 (m, 1H), 2,83 - 2,77 (m, 1H), 2,64 - 2,55 (m, 1H), 2,41 - 2,32 (m, 1H), 2,23 - 2,15 (m, 1H), 2,05 - 1,96 (m, 1H), 1,89 - 1,78 (m, 2H), 1,76 - 1,63 (m, 5H), 1,61 - 1,54 (m, 2H)
495,9 [M+H]+
16
3-({3-[5-хлор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1H-1,3-бензодиазол-1-ил]пропил}амино)-1λ<sup>6</sup>-тиолан-1,1-дион
<img file="00000030.jpg" he="14" wi="25" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,68 (d, J = 2,0 Гц, 1H), 7,63 (d, J = 8,7 Гц, 1H), 7,28 (dd, J = 8,6, 2,0 Гц, 1H), 7,12 - 7,05 (m, 2H), 6,86 - 6,79 (m, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,36 (t, J = 7,3 Гц, 2H), 3,27 - 3,18 (m, 1H), 3,07 - 2,98 (m, 1H), 2,80 (dd, J = 12,9, 6,6 Гц, 1H), 2,31 - 2,21 (m, 2H), 1,96 - 1,77 (m, 3H), 1,72 - 1,67 (m, 2H), 1,60 - 1,55 (m, 2H)
517,2[M+H]<sup>+</sup>
17
1'-[(5-хлор-1-{3-[(1-метансульфонилпирролидин-3-ил)амино]пропил}-1H-1,3-бензодиазол-2-ил)метил]-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он
<img file="00000031.jpg" he="15" wi="29" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,69 (d, J = 1,9 Гц, 1H), 7,63 (d, J = 8,7 Гц, 1H), 7,28 (dd, J = 8,6, 2,0 Гц, 1H), 7,11 - 7,05 (m, 2H), 6,86 - 6,79 (m, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,37 (t, J = 7,3 Гц, 2H), 3,23 - 3,16 (m, 1H), 2,97 (dd, J = 10,2, 4,6 Гц, 1H), 2,86 (s, 3H), 2,00 - 1,90 (m, 2H), 1,86 - 1,77 (m, 2H), 1,73 - 1,61 (m, 3H), 1,60 - 1,55 (m, 2H)
546,3 [M+H]+
18
1'-({5-хлор-1-[3-(морфолин-1-ил)пропил]-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он
<img file="00000032.jpg" he="10" wi="17" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,68 (d, J = 1,9 Гц, 1H), 7,63 (d, J = 8,7 Гц, 1H), 7,27 (dd, J = 8,6, 2,0 Гц, 1H), 7,13 - 7,04 (m, 2H), 6,85 - 6,78 (m, 1H), 5,36 (s, 2H), 4,36 (t, J = 6,8 Гц, 2H), 3,57 - 3,50 (m, 4H), 2,29 - 2,22 (m, 4H), 2,19 (t, J = 6,6 Гц, 2H), 1,94 - 1,84 (m, 2H), 1,71 - 1,66 (m, 2H), 1,59 - 1,55 (m, 2H)
468,9 [M+H]+
19
1'-({5-хлор-1-[3-(тиоморфолин-4-ил)пропил]-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он
<img file="00000033.jpg" he="10" wi="17" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,69 (d, J = 1,9 Гц, 1H), 7,62 (d, J = 8,6 Гц, 1H), 7,27 (dd, J = 8,6, 2,0 Гц, 1H), 7,13 - 7,05 (m, 3H), 6,85 - 6,79 (m, 1H), 5,34 (s, 2H), 4,34 (t, J = 6,8 Гц, 2H), 2,58 - 2,52 (m, 8H), 2,23 (t, J = 6,6 Гц, 2H), 1,88 (p, J = 6,7 Гц, 2H), 1,72 - 1,67 (m, 2H), 1,60 - 1,55 (m, 2H)
484,8 [M+H]+
20
1'-({5-хлор-1-[3-(4-метансульфонилпиперидин-1-ил)пропил]-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он
<img file="00000034.jpg" he="14" wi="26" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,69 (d, J = 2,0 Гц, 1H), 7,62 (d, J = 8,7 Гц, 1H), 7,27 (dd, J = 8,7, 2,0 Гц, 1H), 7,13 - 7,05 (m, 2H), 6,85 - 6,80 (m, 1H), 5,34 (s, 2H), 4,35 (t, J = 6,9 Гц, 2H), 3,05 - 2,96 (m, 1H), 2,94 - 2,87 (m, 5H), 2,21 (t, J = 6,6 Гц, 2H), 1,97 - 1,79 (m, 6H), 1,72 - 1,67 (m, 2H), 1,65 - 1,53 (m, 4H)
544,8 [M+H]+
21
1'-({1-[3-(4-ацетилпиперазин-1-ил)пропил]-5-хлор-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-она
<img file="00000035.jpg" he="11" wi="24" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,69 (d, J = 1,9 Гц, 1H), 7,64 (d, J = 8,7 Гц, 1H), 7,27 (dd, J = 8,6, 2,0 Гц, 1H), 7,13 - 7,05 (m, 3H), 6,86 - 6,79 (m, 1H), 5,36 (s, 2H), 4,37 (t, J = 6,7 Гц, 2H), 3,41 - 3,35 (m, 4H), 2,29 - 2,19 (m, 6H), 1,96 (s, 3H), 1,94 - 1,86 (m, 2H), 1,72 - 1,66 (m, 2H), 1,60 - 1,55 (m, 2H)
509,9 [M+H]+
Следующие соединения были получены с промежуточным соединением 6В по общей методике восстановительного аминирования, описанной в примере 1.
Таблица 3
5-фтораминопропильные аналоги, полученные путем восстановительного аминирования
.
Пример
Название
R<sup>1</sup>
<sup>1</sup>H ЯМР δ(400 МГц, ДМСО-d<sub>6</sub>)
МСНР AP-CI+
22
6'-фтор-1'-[(5-фтор-1-{3-[(2-метансульфонилэтил)амино]пропил}-1H-1,3-бензодиазол-2-ил)метил]-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он
<img file="00000037.jpg" he="13" wi="24" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,60 (dd, J = 8,9, 4,8 Гц, 1H), 7,43 (dd, J = 9,8, 2,4 Гц, 1H), 7,15 - 7,04 (m, 3H), 6,86 - 6,79 (m, 1H), 5,31 (s, 2H), 4,36 (t, J = 7,2 Гц, 2H), 3,22 (t, J = 6,7 Гц, 2H), 3,01 (s, 3H), 2,89 (t, J = 6,7 Гц, 2H), 2,08 - 1,98 (m, 1H), 2,02 (шир. s, 1H), 1,82 (p, J = 6,9 Гц, 2H), 1,72 - 1,67 (m, 5H), 1,60 - 1,55 (m, 2H)
488,8 [M+H]+
23
(2S)-2-({3-[5-хлор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1Н-1,3-бензодиазол-1-ил]пропил}амино)-3-метилбутанамид
<img file="00000038.jpg" he="19" wi="21" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,60 (dd, J = 8,9, 4,8 Гц, 1H), 7,42 (dd, J = 9,8, 2,4 Гц, 1H), 7,32 (d, J = 2,2 Гц, 1H), 7,14 - 7,04 (m, 3H), 6,99 (d, J = 2,0 Гц, 1H), 6,85 - 6,79 (m, 1H), 5,37 - 5,26 (m, 2H), 4,42 - 4,33 (m, 2H), 2,66 - 2,59 (m, 1H), 2,34 - 2,26 (m, 1H), 1,91 - 1,66 (m, 6H), 1,60 - 1,55 (m, 2H), 0,93 - 0,86 (m, 6H)
481,9 [M+H]+
24
(2S)-1-{3-[5-хлор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1Н-1,3-бензодиазол-1-ил]пропил}пирролидин-2-карбоксамид
<img file="00000039.jpg" he="15" wi="20" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,62 (dd, J = 8,9, 4,7 Гц, 1H), 7,43 (dd, J = 9,8, 2,4 Гц, 1H), 7,26 - 7,21 (m, 1H), 7,15 - 7,02 (m, 4H), 6,86 - 6,78 (m, 1H), 5,35 - 5,21 (m, 2H), 4,50 - 4,40 (m, 1H), 4,34 - 4,24 (m, 1H), 3,12 - 3,05 (m, 1H), 2,83 - 2,78 (m, 1H), 2,64 - 2,55 (m, 1H), 2,41 - 2,35 (m, 1H), 2,19 (q, J = 8,2 Гц, 1H), 2,05 - 1,96 (m, 1H), 1,89 - 1,77 (m, 2H), 1,74 - 1,67 (m, 5H), 1,61 - 1,55 (m, 2H)
479,8 [M+H]+
25
6'-фтор-1'-({5-фтор-1-[3-(морфолин-4-ил)пропил]-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он
<img file="00000040.jpg" he="10" wi="17" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,63 - 7,55 (m, 1H), 7,46 - 7,40 (m, 1H), 7,15 - 7,04 (m, 3H), 6,86 - 6,77 (m, 1H), 5,33 (s, 2H), 4,36 (t, J = 6,8 Гц, 2H), 3,57 - 3,37 (m, 4H), 2,34 - 2,15 (m, 6H), 1,93 - 1,83 (m, 2H), 1,71 - 1,66 (m, 2H), 1,59 - 1,55 (m, 2H)
453,3 [M+H]+
26
1'-({1-[3-(4-ацетилпиперазин-1-ил)пропил]-5-фтор-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6'-фтор-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-она
<img file="00000041.jpg" he="11" wi="25" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,61 (dd, J = 8,9, 4,7 Гц, 1H), 7,43 (dd, J = 9,8, 2,4 Гц, 1H), 7,15 - 7,05 (m, 3H), 6,86 - 6,79 (m, 1H), 5,35 (s, 2H), 4,37 (t, J = 6,8 Гц, 2H), 3,42 - 3,39 (m, 4H), 2,30 - 2,18 (m, 6H), 1,96 (s, 3H), 1,94 - 1,86 (m, 2H), 1,72 - 1,67 (m, 2H), 1,60 - 1,55 (m, 2H)
493,9 [M+H]+
27
6'-фтор-1'-({5-фтор-1-[3-(4-метансульфонилпиперазин-1-ил)пропил]-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-2'-он
<img file="00000042.jpg" he="14" wi="26" img-content="undefined" img-format="jpg" />
7,61 (dd, J = 8,9, 4,7 Гц, 1H), 7,43 (dd, J = 9,8, 2,4 Гц, 1H), 7,16 - 7,05 (m, 3H), 6,86 - 6,79 (m, 1H), 5,33 (s, 2H), 4,35 (t, J = 6,9 Гц, 2H), 3,09 - 3,04 (m, 4H), 2,85 (s, 3H), 2,41 - 2,35 (m, 4H), 2,30 - 2,25 (m, 2H), 1,90 (p, J = 6,7 Гц, 1H), 1,72 - 1,66 (m, 2H), 1,60 - 1,55 (m, 2H)
530,0 [M+H]+
28: 4-{3-[5-хлор-2-({6'-фтор-2'-оксо-1',2'-дигидроспиро[циклопропан-1,3'-индол]-1'-ил}метил)-1H-1,3-бензодиазол-1-ил]пропил}-1λ6-тиоморфолин-1,1-дион
m-
d
J
J
J
J
J
m/z
2
2
2
2
3
2
2
3
2
4
2
2
2
4
6
4
1
+
CPBA (чистота ~ 77%, 155 мг, 0,691 ммоль) добавляли к охлажденному (0°C) раствору соединения 19 (112 мг, 0,231 ммоль) в CHCl (5 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 5,5 часов. Реакционную смесь разбавляли CHCl (10 мл) и промывали насыщенным водным раствором NaHCO (3 × 15 мл). Объединенные водные промывки экстрагировали CHCl (2 × 10 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным водным раствором NaHCO (3 × 15 мл), сушили (NaSO) и удаляли растворитель при пониженном давлении. Очистка флэш-хроматографией (SiO, 0-20% MeOH в CHCl с 1% NHOH) давала белое твердое вещество (43 мг, 36%). H ЯМР (400 МГц, ДМСО-): δ 7,71 - 7,69 (m, 2H), 7,28 (dd,  = 8,6, 2,1 Гц, 1H), 7,13 (dd, = 9,6, 2,4 Гц, 1H), 7,08 (dd,  = 8,2, 5,4 Гц, 1H), 6,85 - 6,79 (m, 1H), 5,37 (s, 2H), 4,54 (t,  = 7,3 Гц, 2H), 3,96 - 3,86 (m, 2H), 3,83 - 3,74 (m, 2H), 3,41 - 3,35 (m, 4H), 3,23 - 3,15 (m, 2H). 2,25 (p,  = 7,0 Гц, 2H), 1,72 - 1,67 (m, 2H), 1,60 - 1,55 (m, 2H). МСНР (APCI+)  534,2 [M+NH]
29:
1
-{[5-хлор-1-(пиперидин-4-ил)-1H-1,3-бензодиазол-2-ил]метил}-6
-фтор-1
,2
-дигидроспиро[циклопропан-1,3
-индол]-2
-он
''''''
2
2
3
2
2
2
2
2
4
2
2
4
2
2
6
1
+
d
J
J
J
m/z
Раствор промежуточного соединения 5D (725 мг, 1,38 ммоль) в трифторуксусной кислоте (ТФК; 2,59 мл) и CHCl (8 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. Летучие вещества удаляли при пониженном давлении, остаток распределяли между насыщенным водным раствором NaHCO (20 мл) и CHCl (20 мл) и отделяли. Водный слой экстрагировали CHCl (3 × 20 мл), объединенные органические экстракты промывали рассолом (10 мл), сушили (NaSO) и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка флэш-хроматографией [0-100% EtOH:CHCl:NHOH (50:8:1) в CHCl] давала бледно-коричневое твердое вещество (584 мг, 99%). H ЯМР (400 МГц, ДМСО-): δ 7,79 (d,  = 8,8 Гц, 1H), 7,73 (d,  = 2,1 Гц, 1H), 7,26 (dd,  = 8,8, 2,1 Гц, 1H), 7,11 - 7,04 (m, 2H), 6,84 - 6,78 (m, 1H), 5,36 (s, 2H), 4,67 - 4,57 (m, 1H), 4,36 (шир. s, 1H), 3,16 - 3,09 (m, 2H), 2,65 - 2,56 (m, 2H), 2,30 - 2,17 (m, 2H), 1,72 - 1,64 (m, 4H), 1,58 - 1,55 (m, 2H). МСНР (APCI+)  424,8 [M+H]
30:
1
-{[5-хлор-1-(пиперидин-4-ил)-1H-1,3-бензодиазол-2-ил]метил}-6
-фтор-1
,2
-дигидроспиро[циклобутан-1,3
-индол]-2
-он
''''''
m/z
+
f
2
2
4
Получен по методике, аналогичной описанной для соединения 29 с использованием промежуточного соединения 5Е. МСНР (APCI+)  439,9 [M+H]. R0,02 EtOH:CHCl:NHOH (100:8:1).
31:
1
-{[1-(1-ацетилпиперидин-4-ил)-5-хлор-1H-1,3-бензодиазол-2-ил]метил}-6
-фтор-1
,2
-дигидроспиро[циклопропан-1,3
-индол]-2
-он
''''''
3
2
2
2
2
2
4
2
2
6
1
+
d
J
m/z
Ацетилхлорид (20,1 мкл, 0,280 ммоль) добавляли к охлажденному (0°C) раствору соединения 29 (60 мг, 0,140 ммоль) и NEt (43,3 мкл, 0,310 ммоль) в безводном CHCl (2,5 мл) в атмосфере N и перемешивали при комнатной температуре в течение 17 часов. Реакционную смесь разбавляли CHCl (20 мл), промывали водой и рассолом (по 10 мл каждого), сушили (MgSO) и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка флэш-хроматографией (0-5% EtOH в CHCl) давала твердое вещество бледно-коричневого цвета (36 мг, 54%). H ЯМР (400 МГц, ДМСО-): δ 7,75 - 7,70 (m, 2H), 7,20 (dd,  = 8,7, 2,1 Гц, 1H), 7,12 - 7,05 (m, 2H), 6,85 - 6,79 (m, 1H), 5,40 (s, 2H), 4,83 - 4,74 (m, 1H), 4,65 - 4,58 (m, 1H), 4,06 - 3,98 (m, 1H), 3,19 - 3,10 (m, 1H), 2,65 - 2,54 (m, 1H), 2,39 - 2,27 (m, 1H), 2,16 - 2,03 (m, 4H), 1,86 - 1,75 (m, 2H), 1,72 - 1,68 (m, 2H), 1,60 - 1,55 (m, 2H). МСНР (APCI+)  466,8 [M+H]
32:
4-[5-хлор-2-({6
-фтор-2
-оксо-1
,2
-дигидроспиро[циклопропан-1,3
-индол]-1
-ил}метил)-1H-1,3-бензодиазол-1-ил]-N,N-диметилпиперидин-1-карбоксамид
''''''
N,N-
d
J
J
J
m/z
3
2
2
2
4
2
2
4
2
2
6
1
+
диметилкарбамоилхлорид (19,5 мкл, 0,210 ммоль) добавляли к охлажденному (0°C) раствору соединения 29 (60 мг, 0,140 ммоль) и NEt (30,5 мкл, 0,219 ммоль) в безводном CHCl (2,5 мл) в атмосфере N и перемешивали при комнатной температуре в течение 17 часов. Реакцию гасили насыщенным водным NHCl (10 мл) и экстрагировали CHCl(10 мл). Органические экстракты промывали водой и рассолом (по 10 мл каждого), сушили (MgSO) и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка флэш-хроматографией (0-10% EtOH в CHCl) давала твердое вещество бледно-коричневого цвета (70 мг, 69%). H ЯМР (400 МГц, ДМСО-): δ 7,73 (d,  = 2,0 Гц, 1H), 7,64 (d,  = 8,8 Гц, 1H), 7,24 (dd,  = 8,7, 2,1 Гц, 1H), 7,12 - 7,05 (m, 2H), 6,85 - 6,79 (m, 1H), 5,39 (s, 2H), 4,75 - 4,67 (m, 1H), 3,73 - 3,66 (m, 2H), 2,86 - 2,76 (m, 8H), 2,31 - 2,21 (m, 2H), 1,80 - 1,72 (m, 2H), 1,73 - 1,68 (m, 2H), 1,59 - 1,55 (m, 2H). МСНР (APCI+)  495,8 [M+H]
33:
1
-{[5-хлор-1-(1-метансульфонилпиперидин-4-ил)-1H-1,3-бензодиазол-2-ил]метил}-6
-фтор-1
,2
-дигидроспиро[циклопропан-1,3
-индол]-2
-он
''''''
3
2
2
2
3
2
2
4
2
2
4
2
2
6
1
+
d
J
J
J
m/z
Метансульфонилхлорид (MsCl, 13,1 мкл, 0,170 ммоль) добавляли к охлажденному (0°C) раствору соединения 29 (60 мг, 0,140 ммоль) и NEt (24,6 мкл, 0,180 ммоль) в безводном CHCl (2,5 мл) в атмосфере N и перемешивали при комнатной температуре в течение 17 часов. Добавляли дополнительное количество MsCl (8,7 мкл, 0,113 ммоль) и NEt (15,8 мкл, 0,113 ммоль) и реакционную смесь перемешивали еще в течение 4,5 часов. Указанную реакционную смесь разбавляли CHCl (20 мл), промывали водой и рассолом (по 10 мл каждого), сушили (MgSO) и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка флэш-хроматографией [50-100% EtOAc в гептане, затем 0-10% EtOH:CHCl:NHOH (50:8:1) в CHCl] давала белое твердое вещество (49 мг, 69 %). H ЯМР (400 МГц, ДМСО-): δ 7,72 (d,  = 2,0 Гц, 1H), 7,70 (d,  = 8,8 Гц, 1H), 7,23 (dd, = 8,7, 2,1 Гц, 1H), 7,14 - 7,05 (m, 2H), 6,85 - 6,79 (m, 1H), 5,39 (s, 2H), 4,78 - 4,68 (m, 1H), 3,83 - 3,76 (m, 2H), 3,00 (s, 3H), 2,92 - 2,84 (m, 2H), 2,40 - 2,34 (m, 2H), 1,95 - 1,89 (m, 2H), 1,73 - 1,68 (m, 2H), 1,61 - 1,56 (m, 2H). МСНР (APCI+)  502,8 [M+H]
34:
1
-{[5-хлор-1-(1-метансульфонилпиперидин-4-ил)-1H-1,3-бензодиазол-2-ил]метил}-6
-фтор-1
,2
-дигидроспиро[циклобутан-1,3
-индол]-2
-он
''''''
1
+
d
J
J
J
J
J
J
J
m/z
6
Получен по методике, аналогичной описанной для соединения 33 с использованием промежуточного соединения 30. H ЯМР (400 МГц, ДМСО-) δ 7,74 - 7,59 (m, 3H), 7,23 (dd,  = 8,8, 2,1 Гц, 1H), 7,06 (dd,  = 9,6, 2,4 Гц, 1H), 6,88 (ddd,  = 10,4, 8,2, 2,4 Гц, 1H), 5,28 (s, 2H), 4,75 (t,  = 12,4 Гц, 1H), 3,81 (d,  = 11,8 Гц, 2H), 3,02 (s, 3H), 2,89 (s, 2H), 2,41 - 2,31 (m, 4H), 2,25 (q,  = 7,4 Гц, 2H), 1,91 (d,  = 12,3 Гц, 2H). МСНР (APCI+)  517,9 [M+H]
35:
1
-({5-хлор-1-[1-(этансульфонил)пиперидин-4-ил]-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6
-фтор-1
,2
-дигидроспиро[циклопропан-1,3
-индол]-2
-он
''''''
3
2
2
2
2
2
4
4
3
1
+
J
J
J
m/z
Этансульфонилхлорид (23,4 мкл, 0,247 ммоль) добавляли к охлажденному (0°C) раствору соединения 29 (60 мг, 0,140 ммоль) и NEt (34,5 мкл, 0,248 ммоль) в безводном CHCl (2,5 мл) в атмосфере N и перемешивали при комнатной температуре в течение 19 часов. Указанную реакционную смесь разбавляли CHCl (20 мл), промывали насыщенным водным раствором NHCl, водой (дважды) и рассолом (по 10 мл каждого), сушили (MgSO) и растворитель удаляли при пониженном давлении. Очистка флэш-хроматографией (30-100% EtOAc в гептане) давала беловатое твердое вещество (73 мг, 79%). H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ 7,79 (d,  = 2,0 Гц, 1H), 7,46 (d,  = 8,8 Гц, 1H), 7,34 - 7,30 (m, 1H), 7,23 (dd, J = 8,7, 2,0 Гц, 1H), 6,74 - 6,67 (m, 2H), 5,28 (s, 2H), 4,94 - 4,85 (m, 1H), 4,02 - 3,95 (m, 2H), 3,06 - 2,93 (m, 4H), 2,55 - 2,44 (m, 2H), 1,74 - 1,67 (m, 4H), 1,57 - 1,53 (m, 2H), 1,41 (t,  = 7,4 Гц, 3H). МСНР (APCI+)  516,8 [M+H]
36:
1
-({5-хлор-1-[1-(2-метансульфонилэтил)пиперидин-4-ил]-1H-1,3-бензодиазол-2-ил}метил)-6
-фтор-1
,2
-дигидроспиро[циклопропан-1,3
-индол]-2
-он
''''''
2
6
1
+
d
J
J
J
J
m/z
Метилвинилсульфон (21,2 мкл, 0,240 ммоль) добавляли к охлажденному (0°C) раствору соединения 29 (76 мг, 0,179 ммоль) в безводном ТГФ (2,5 мл) в атмосфере N и перемешивали при комнатной температуре в течение 22 часов. Добавляли дополнительное количество метилвинилсульфона (7,8 мкл, 0,89 ммоль) и указанную реакционную смесь перемешивали еще 1,5 часа. Летучие вещества выпаривали при пониженном давлении и неочищенный остаток очищали непосредственно с помощью флэш-хроматографии (30-100% EtOAc в гептане) с получением продукта в виде бледно-коричневого твердого вещества (54 мг, 57%). H ЯМР (400 МГц, ДМСО-): δ 7,73 (d,  = 2,1 Гц, 1H), 7,62 (d,  = 8,7 Гц, 1H), 7,24 (dd,  = 8,8, 2,1 Гц, 1H), 7,11 - 7,04 (m, 2H), 6,84 - 6,81 (m, 1H), 5,36 (s, 2H), 4,58 - 4,48 (m, 1H), 3,10 - 3,02 (m, 5H), 2,78 (t,  = 6,8 Гц, 2H), 2,35 - 2,24 (m, 3H), 2,17 - 2,08 (m, 2H), 1,77 - 1,67 (m, 4H), 1,60 - 1,55 (m, 2H). МСНР (APCI+)  531,1 [M+H]
Пример 37: Эффективность
in vitro
Соединения подвергали анализу на слияние РСВ и анализу подавления бляшкообразования в соответствии со следующими протоколами.
Анализ слияния РСВ
Клетки НЕК 293T ((ЕСАСС 12022001) культивировали в колбах для культур Т75 в среде Дульбекко (DMEM), содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS), 50 единиц на мл пенициллина и 50 мкг/мл стрептомицина и нагревали до температуры 37°С перед использованием. Клетки пассировали первой кратковременной промывкой при помощи 5 мл забуференного фосфатом солевого раствора (PBS), затем добавляли 2 мл трипсина-этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) для отделения клеток. После отделения клеток от колбы добавляли 8 мл среды и клетки диспергировали пипеткой на дне колбы.
5
2
Клетки подсчитывали и разбавляли до 3 × 10 клеток/мл в свежей среде. В каждую из двух колб Т75 высевали 15,6 мл разбавленных клеток, клетки также пересевали в соотношении от 1:2 до 1:10 для поддержания исходной культуры. Затем колбы инкубировали в течение 24 часов при температуре 37°С и 5% СО.
2
Плазмидную ДНК (для pFR-Luc и pcDNA3. l_Gal4/ NFKB) для трансфекции в клетки HEK 293T сначала получали в бессывороточной среде (Opti-MEM, Invitrogen), содержащей реагент для трансфекции FuGENE 6 (Promega). Бессывороточную среду помещали в пробирку Эппендорфа объемом 1,5 мл, затем в среду добавляли FuGENE 6. Пробирку встряхивали при помощи вихревой мешалки в течение 1 секунды, затем инкубировали при комнатной температуре в течение 5 мин. в пробирку 1 добавляли 7,79 нг плазмидной ДНК pFR_luc и pCDNA3.1_A2_F, а в пробирку 2 добавляли 7,79 нг плазмиды pCDNA3.1_GAL4-NF-κB. Пробирки встряхивали при помощи вихревой мешалки в течение 1 секунды и затем инкубировали при комнатной температуре в течение 15 минут. Затем каждую трансфекционную смесь добавляли в среду одной из колб Т75 с клетками 293Т. Клетки культивировали в течение 24 часов при температуре 37°C, 5% CO в увлажненном инкубаторе.
5
5
Соединения разбавляли (в полипропиленовом планшете на 96 круглодонных лунок) 1:3 по кривой разведения с двенадцатью точками с получением верхнего [конечного] 25 мкл, 3 мкл, 1 мкл или 500 нМ. Контрольное соединение включали в каждый анализ при максимальной концентрации 3 мкМ. Трансфицированные клетки подсчитывали и разбавляли до 4 × 10 клеток/мл в свежей среде. 50 мкл трансфицированной популяции 1 добавляли во все лунки белых непрозрачных аналитических планшетов с 96 лунками с плоским дном. 100 мкл разбавленного соединения (2 ряда на соединение), контрольного соединения (один ряд) и контролей (ДМСО (0% ингибирования, четыре лунки), 3 мкл положительного контроля (100% ингибирования, четыре лунки) и среды (только трансфицированная популяция 1, четыре лунки) были добавлены в соответствующие лунки. Затем добавляли 50 мкл разведенных (4 × 10 клеток/мл) клеток популяции 2 во все лунки, кроме четырех лунок с трансфицированной популяцией 1, куда вводили дополнительные 50 мкл этой популяции клеток.
2
50
Затем планшеты инкубировали в течение 24 часов при температуре 37°С и 5% СО. По истечении этого времени из всех лунок удаляли 100 мкл и добавляли 60 мкл реагента ONE-Glo™ (Promega), предварительно доведенного до комнатной температуры. Затем планшеты инкубировали в течение 3 минут при комнатной температуре, после чего считывали люминесценцию, используя протокол ONE-Glo, на многомодовом считывателе GloMax Explorer System (Promega). Анализ проводился при помощи программы Dotmatics. Перед расчетом IC все необработанные данные были вычтены из фона (вычитание среднего значения положительного контроля 3 мкМ).
Реакция подавления бляшкообразования
2
Клетки HEp-2 (ATCC, CCL23) пассировали в колбах и высевали в 96-луночные планшеты в DMEM, содержащую антибиотики, с добавлением 10% FBS. Во время инокуляции и последующей инкубации клетки культивировали в среде DMEM, содержащей 3% FBS. 100 бляшкообразующих единиц (БОЕ)/лунку РСВ (РСВ A2 VR-1540) смешивали с десятью последовательными разбавлениями соединения. Затем к конфлюэнтным монослоям клеток HEp-2 добавляли 100 мкл смесей вирус/соединение. Клетки и смеси вирус/соединение инкубировали при температуре 35°C в увлажненном инкубаторе с 5% CO в течение 1 дня.
Клетки дважды промывали PBS перед добавлением 50% об./об. EtOH/MeOH, а затем хранили при температуре -20°C. В день окрашивания сначала удаляли с пластин фиксатор. Планшеты промывали 3 раза PBS. Предварительно титрованное количество первичного антитела добавляли в 60 мкл PBS/2% сухого молока и планшеты инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре. Планшеты промывали 3 раза PBS/0,05% Tween 20 перед добавлением антител козы к иммуноглобулину G мыши, коньюгированные с пероксидазой хрена в 60 мкл PBS/2% сухого молока и инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре. После трех стадий промывки PBS/0,05% Tween 20 добавляли 60 мкл готового к использованию TrueBlue и планшеты инкубировали при комнатной температуре в течение 10-15 минут перед добавлением воды MilliQ. Планшеты промывали один раз водой, инкубировали в течение 30-60 мин и после удаления воды сушили на воздухе в темноте.
50
90
Планшеты сканировали и анализировали с использованием УФ-анализатора Immunospot S6, оснащенного программным обеспечением для анализа BioSpot для подсчета иммуноокрашенных бляшек (вироспотов). Количество бляшек было использовано для расчета % заражения относительно среднего количества пятен (SC) в контрольных лунках вируса для РСВ. Значения IC/IC были рассчитаны как уменьшение сигнала на 50% или 90%, соответственно, путем интерполяции кривых ингибирования при четырёхпараметрической нелинейной регрессии с переменным наклоном в GraphPad 5.0 (Prism).
Результаты
Соединение
Анализ слияния РСВ(n ≥ 2)
Анализ подавления бляшкообразования РСВШтамм А2 (n = 1)
IC<sub>50</sub> (нМ)<sup>*</sup>
IC<sub>50</sub> (нМ)
IC<sub>90</sub> (нМ)
14
18
3,5
34
20
12
5,9
7,5
33
3,3
0,49
4,4
35
5,0
0,87
5,2
13
10
4,5
41
11
24
5
41
9
15
4,2
28
10
12
2,5
31
1
19
5,9
50
18
70
7,6
66
12
71
29
200
28
115
9,5
48
*
50
Приведенное значение IC представляет собой среднее значение по крайней мере для 2 независимых экспериментов.
Пример 38: Фармакокинетика
in vitro
Соединения изучали при помощи следующих анализов для исследования стабильности в микросомах печени и проницаемости.
Микросомальная инкубация: Процедура эксперимента
Объединенные микросомы печени были приобретены у известного коммерческого поставщика, перед использованием их хранили при температуре -80°C.
Микросомы (конечная концентрация белка 0,5 мг/мл), 0,1 М фосфатный буфер с рН 7,4 и испытуемое соединение (конечная концентрация субстрата 3 мкМ; конечная концентрация ДМСО 0,25%) предварительно инкубировали при температуре 37°С перед добавлением NADPH (конечная концентрация 1 мМ), чтобы инициировать реакцию. Конечный объем инкубации составлял 50 мкл. Для каждого тестируемого соединения включена контрольная инкубация, где вместо NADPH добавляют 0,1 М фосфатный буфер с pH 7,4 (минус NADPH). Для каждого виде включены два контрольных соединения. Все инкубации проводили отдельно для каждого тестируемого соединения.
Каждое соединение инкубировали в течение 0, 5, 15, 30 и 45 мин. Контроль (минус NADPH) инкубировали только в течение 45 минут. Реакции останавливали путем переноса 20 мкл инкубата в 60 мкл MeOH в соответствующие моменты времени. Терминальные планшеты центрифугировали при 2500 об/мин в течение 20 мин при температуре 4°С для осаждения белка.
После осаждения белка супернатанты образцов объединяли в кассеты, содержащие до 4 соединений, добавляли внутренний стандарт и образцы анализировали методом ЖХ-МС/МС. Из графика зависимости площади пика In (площадь пика соединения/площадь пика внутреннего стандарта) от времени определяли градиент линии. Затем рассчитывали период полувыведения и собственный клиренс.
Проницаемость MDR1-MDCK: Процедура эксперимента
5
2
2
Использовали клетки MDR1-MDCK, полученные из NIH (Национального Института Здоровья) (Rockville, MD, США), для пассажей 6-30. Клетки высевали на чашки Millipore Multiscreen Transwell при 3,4 × 10 клеток/см. Клетки культивировали в DMEM и среду меняли в третий день. На четвертый день проводили исследование проницаемости. Инкубацию клеточной культуры и анализ осуществляли при температуре 37°С в атмосфере 5% СО с относительной влажностью 95%. В день анализа монослои готовили путем промывания как базолатеральной, так и апикальной поверхностей дважды при помощи сбалансированного солевого раствора Хэнкса (HBSS) при желаемом pH при температуре 37°C. Затем клетки инкубировали с HBSS при желаемом рН и в апикальном, и в базолатеральном компартментах в течение 40 минут для стабилизации физиологических параметров.
Дозирующие растворы получали разбавлением исследуемого соединения буфером для анализа с получением конечной концентрации исследуемого соединения 10 мкл (конечная концентрация ДМСО 1% об./об.). В раствор для введения также включали флуоресцентный маркер целостности люцифер желтый. Аналитические стандарты получали из разведений исследуемого соединения в ДМСО и переносили в буфер, поддерживая концентрацию ДМСО в 1% об./об.
Для оценки проницаемости A-B из апикального компартамента удаляли HBSS и заменяли дозирующим раствором исследуемого соединения. Затем вставку апикального компартамента помещали в парный планшет, содержащий свежий буфер (содержащий 1% об./об. ДМСО). Для оценки проницаемости B-A из парного планшета удаляли HBSS и заменяли дозирующим раствором исследуемого соединения. Свежий буфер (содержащий 1% об./об. ДМСО) добавляли во вставку апикального компартамента, которую затем помещали в парный планшет. Через 60 минут вставки апикального компартамента и парные планшеты разделяли и апикальные и базолатеральные образцы разводили для анализа. Проницаемость исследуемого соединения оценивали в двух повторениях. В качестве контролей, на каждом планшете исследовали соединения с известными характеристиками проницаемости.
0
0
Тестируемые и контрольные соединения количественно определяли кассетным анализом ЖХ-МС/МС с использованием 8-точечной калибровки при соответствующем разведении образцов. Исходную концентрацию (C) определяли по раствору для введения и экспериментальному выходу, рассчитанному по C и обеим концентрациям в апикальном и в базолатеральном компартментах. Целостность монослоев в течение всего эксперимента проверяли мониторингом проникновения люцифера желтого с использованием флуориметрического анализа. Проникновение люцифера желтого высокое, если монослой был поврежден.
Результаты
Фармакокинетическое свойство
Значение
Стабильность в микросомах печени[t <sub>½</sub> (мин); крыса / собака / человек]
Соединение 33: 14,8 / 186 / 486
Соединение 35: 5,5 / 166 / 34,6
Проницаемость MDR1-MDCKP<sub>app</sub> (10<sup>-6</sup> смс<sup>-1</sup>) A-B / B-A
Соединение 14: 4,8 / 68
Соединение 20: 1,6 / 61,3
Соединение 33: 12,4 / 35,5
Соединение 35: 12,7 / 22,8
Пример 39: Ингибирование цитохрома P450
Соединения по изобретению тестировали на ингибирование ферментов цитохрома Р450.
50
Исследуемое соединение (0,1, 0,25, 1, 2,5, 10, 25 мкМ в ДМСО; конечная концентрация ДМСО 0,3%) инкубировали с микросомами печени человека (0,25 мг / мл) и NAPPH (1 мМ) в присутствии маркерного субстрата, специфичного для изоформы цитохрома P450. Метаболиты контролировали при помощи ЖХ-МС/МС и уменьшение образования метаболита сравнивали с контролем носителем, используемым для расчета значения IC (концентрация исследуемого соединения, которая вызывает ингибирование на 50%). Специфичный для изоформы цитохрома P450 селективный ингибитор анализировали совместно с исследуемыми соединениями в качестве положительного контроля.
Результаты для соединения 33:
<sup></sup>Изоформа (субстрат)
IC<sub>50</sub> ингибирования цитохрома P450 (мкМ)
Соединение 33
CYP1A2
>25
CYP2B6
>25
CYP2C8
>25
CYP2C9
>25
CYP2C19
>25
CYP2D6
>25
CYP3A4 <sup>*</sup>
0,674
CYP3A4 <sup>†</sup>
3,94
Примечание: *субстрат = мидазолам. †субстрат = тестостерон.
Пример 40: Фармакокинетика
in vivo
in vivo
Фармакокинетику соединений по изобретению изучали  на собаках в дозах 3 мг/кг (РО).
Способы
Собаки породы бигль (n = 3) перорально получали экспериментальные соединения (3 мг/кг). Пероральное введение осуществляли при помощи желудочного зонда в дозе 3 мг/кг в концентрации 0,6 мг/мл в растворе % диметилацетамида, 30% ПЭГ 400 и 65% (2-гидроксипропил)-β-циклодекстрина (20% водн. мас./об.). Серийные образцы крови брали через 0,08, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 6, 8, 12 и 24 часа после дозирования соединения. За животными наблюдали для фиксирования любых явных клинических признаках или симптомов. В определенные моменты времени отбирали серийные образцы плазмы и хранили их, немедленно помещая в условия при температуре -80°C.
После осаждения белка ацетонитрилом образцы анализировали жидкостной хроматографией с тандемной масс-спектрометрией с использованием электрораспылительной ионизации. Использовали кривую с внутренними стандартами и рассчитали ФК-параметры.
Результаты
Соединение 33:
Фармакокинетическое свойство
Значение
t<sub>1/2</sub> (ч)
7,24
T<sub>max</sub> (ч)
0,67
C<sub>max </sub>(нг/мл)
535,40
AUC<sub>last </sub>(ч*нг/мл)
3874,91
AUC<sub>all </sub>(ч*нг/мл)
3874,91
AUC<sub>inf </sub>(ч*нг/мл)
4282,46
Пример 41: Водный состав
Соединение из примера 1 готовили в виде раствора в 30% мас./об. каптизоле (т.е. простом сульфобутиловом эфире- бета-циклодекстрин) при рН 4 в соответствии со следующей процедурой.
Носитель, представляющий собой 30% мас./об. каптизол (т.е. простой сульфобутиловый эфир-бета-циклодекстрин) получали путем взвешивания необходимого количества каптизола в подходящий сосуд, добавления примерно 80% от конечного объема воды и перемешивания при помощи магнитной мешалки до образования раствора. Затем носитель доводили до объема водой.
Водный раствор соединения из примера 1 получали путем взвешивания 175 мг указанного соединения в подходящий сосуд и добавления примерно 80% от необходимого объема носителя. При помощи водного раствора хлороводородной кислоты pH доводили до pH 2 и полученную смесь перемешивали с помощью магнитной мешалки до образования раствора. Затем состав доводили носителем до объема и pH доводили до pH 4 с использованием водного раствора гидроксида натрия.
Пример 42: Композиция таблетки
Таблетки, каждую массой 0,15 г и содержащую 25 мг соединения согласно настоящему изобретению, изготавливали следующим образом:
Композиция для 10000 таблеток
Соединение согласно настоящему изобретению (250 г)
Лактоза (800 г)
Кукурузный крахмал (415 г)
Тальк, порошок (30 г)
Стеарат магния (5 г)
Смешивали соединение согласно настоящему изобретению, лактозу и половину кукурузного крахмала. Затем смесь продавливали через сито с размером отверстий 0,5 мм. Суспендировали кукурузный крахмал (10 г) в теплой воде (90 мл). Полученную пасту использовали для гранулирования порошка. Гранулят сушили и разбивали на мелкие фрагменты на сите с размером отверстий 1,4 мм. Добавляли оставшееся количество крахмала, талька и магния, тщательно смешивали и перерабатывали в таблетки.
Пример 43: Состав для инъекций
Соединение согласно настоящему изобретению
250 мг
0,1М раствор соляной кислоты или 0,1М раствор гидроксида натрия в количестве, достаточном для достижения рН
от 4,0 до 7,0
Стерильная вода в количестве, достаточном для достижения
10 мл
Соединение согласно настоящему изобретению растворяли в большей части воды (35-40°С) и при необходимости рН доводили до 4,0-7,0 с помощью соляной кислоты или гидроксида натрия. Затем партию доводили до объема водой и фильтровали через стерильный микропористый фильтр в стерильный флакон из янтарного стекла объемом 10 мл (1 тип) и герметизировали стерильными пробками и дополнительными крышками.
Пример 44: Внутримышечная инъекция
Соединение согласно настоящему изобретению
250 мг
Бензиловый спирт
0,10 г
Гликофурол 75
1,45 г
Вода для инъекций в количестве, достаточном для достижения
3,00 мл
Соединение согласно настоящему изобретению растворяли в гликофуроле. Затем добавляли и растворяли бензиловый спирт и добавляли воду до 3 мл. Затем смесь фильтровали через стерильный микропористый фильтр и герметизировали в стерильных стеклянных флаконах объемом 3 мл (1 тип).
Пример 45: Состав в форме сиропа
Соединение согласно настоящему изобретению
250 мг
Раствор сорбита
1,50 г
Глицерин
2,00 г
Бензоат натрия
0,005 г
Ароматизатор
0,0125 мл
Очищенная вода в количестве, достаточном для достижения
5,00 мл
Соединение согласно настоящему изобретению растворяли в смеси глицерина и большей части очищенной воды. Затем к раствору добавляли водный раствор бензоата натрия с последующим добавлением раствора сорбита и, наконец, ароматизатора. Очищенной водой доводили до объема и хорошо перемешивали.