СПОСОБ ДЕТЕКТИРОВАНИЯ МОЛЕКУЛЫ-МИШЕНИ И НАБОР ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В ЭТОМ СПОСОБЕ

1. Способ детектирования молекулы-мишени, включающий этап комплексообразования, на котором вступают в реакцию
молекула-мишень,
носитель, модифицированный первым антителом, которое специфически связывается с молекулой-мишенью, и
два или более вторых антитела, которые специфически связываются с молекулой-мишенью и помечены ферментами, обладающими активностью расщепления субстрата и взаимно отличающимися субстратными специфичностями,
с образованием комплекса, состоящего из первого антитела, молекулы-мишени и вторых антител на носителе;
этап детектирования, на котором вступают в реакцию
два или более субстрата, имеющие сайты расщепления ферментами, флуоресцентное вещество, связанное с одной концевой стороной каждого из сайтов расщепления, и гаситель, связанный с другой его концевой стороной, причем флуоресцентные вещества взаимно отличаются по длине волны флуоресценции, и
комплекс,
с детектированием флуоресценции, испускаемой флуоресцентными веществами; и
этап анализа с обработкой двух или более детектирующих сигналов флуоресценции, отличающихся по длине волны, в качестве сигнала детектирования молекулы-мишени.
2. Способ детектирования по п. 1, включающий, между этапом комплексообразования и этапом детектирования, этап введения, на котором носители заключаются по одному в капли, сформированные на подложке.
3. Способ детектирования по п. 1 или 2, отличающийся тем, что носитель представляет собой микрогранулу.
4. Способ детектирования по любому из пп. 1-3, отличающийся тем, что первое антитело и второе антитело связываются с разными эпитопами молекулы-мишени.
5. Способ детектирования по любому из пп. 1-4, отличающийся тем, что способ представляет собой цифровой анализ ELISA.
6. Способ детектирования молекулы-мишени, включающий этап комплексообразования, на котором вступают в реакцию
молекула-мишень,
носитель, модифицированный первым антителом, которое специфически связывается с молекулой-мишенью, и
два или более вторых антитела, которые специфически связываются с молекулой-мишенью и снабжены взаимно отличающимися метками,
с образованием комплекса, состоящего из первого антитела, молекулы-мишени и вторых антител на носителе;
этап детектирования сигналов от меток; и
этап анализа с обработкой двух или более разных сигналов от меток в качестве сигнала детектирования молекулы-мишени.
7. Набор для твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA), содержащий
носитель, модифицированный первым антителом, которое специфически связывается с молекулой-мишенью,
два или более вторых антитела, которые специфически связываются с молекулой-мишенью и помечены ферментами, обладающими активностью расщепления субстрата и взаимно отличающимися субстратными специфичностями, и
два или более субстрата, имеющие сайты расщепления ферментами, флуоресцентное вещество, связанное с одной концевой стороной каждого из сайтов расщепления, и гаситель, связанный с другой его концевой стороной, причем флуоресцентные вещества взаимно отличаются по длине волны флуоресценции.