Клинико-морфологические факторы прогноза и Параметры клеточного цикла при раке тела матки

В. М. Нечушкина, В. Н. Богатырев, В. В. Кузнецов, Н. И. Лазарева,

К. Ю. Морхов, Т. И. Захарова КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ ПРОГНОЗА И ПАРАМЕТРЫ КЛЕТОЧНОГО ЦИКЛА ПРИ РАКЕ ТЕЛА МАТКИ

НИИ клинической онкологии ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН, Москва

Повышенное внимание к проблемам диагностики и лечения рака тела матки объясняется ростом заболеваемости этой опухолью. В статье представлено сопоставление клинико-морфологических факторов прогноза и некоторых параметров клеточного цикла, определяемых методом ДНК-проточной цитофлуорометрии, при раке тела матки. Показано, что любой из неблагоприятных клинико-морфологических факторов прогноза у больных раком тела матки сочетался по крайней мере с одним из параметров ДНК-проточной цитофлуорометрии, свидетельствовавших о повышении пролиферативной активности опухоли.

Ключевые слова: рак тела матки, клеточный цикл, индекс пролиферации, ДНК-проточная цито-флуорометрия.

Повышенное внимание к проблемам диагностики и лечения рака тела матки (РТМ) объясняется ростом распространенности этой опухоли. На сегодняшний день в России это самая частая злокачественная опухоль женских половых органов, прочно удерживающая 4-е место в структуре заболеваемости женщин злокачественными новообразованиями [2].

Классические клинико-морфологические факторы прогноза не всегда позволяют судить о течении РТМ и, следовательно, тактике лечения больных [5]. Это заставляет искать новые факторы прогноза при РТМ, которые должны отражать биологические особенности опухоли, позволяющие судить о риске прогрессирования при локализованном опухолевом процессе [3].

В последнее время в клинической онкологии широко используется ДНК-проточная цитофлуорометрия. Безусловными преимуществами этого метода являются прекрасная воспроизводимость и объективная оценка сразу нескольких индивидуальных биологических характеристик опухоли, отражающих степень ее злокачественности: плоидности, индекса ДНК и ряда параметров клеточного цикла.

Имеющиеся в литературе данные о прогностической роли плоидности и распределения клеток по фазам клеточного цикла при РТМ противоречивы [1; 4; 6]. Все это делает исследование, посвященное клинической оценке параметров ДНК-проточной цитофлуорометрии при РТМ, актуальным и своевременным. Целью данной работы было сопоставление клинико-морфологических факторов и некоторых параметров клеточного цикла, определяемых методом ДНК-проточной цитофлуорометрии, при РТМ.

© Нечушкина В. М., Богатырев В. Н., Кузнецов В. В., Лазарева Н. И., Морхов К. Ю., Захарова Т. И., 2006 УДК 618.14-006.6-087:576.31

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

В исследование включены 102 больные РТМ I—

IV стадий, получавшие лечение в ГУ РОНЦ им. Н. Н. Блохина РАМН с 1997 по 2000 г. Средний возраст больных составил 59,7±0,8 года (34—78 лет). Стадии РТМ по результатам послеоперационного гистологического исследования представлены в табл. 1. При послеоперационном гистологическом исследовании у 68 (66,7%) больных была выявлена аденокарцинома эндометрия, у 23 (22,5%) аденокарцинома эндометрия имела участки плоскоклеточной метаплазии. У 11 (10,8%) больных были диагностированы прогностически неблагоприятные гистологические типы РТМ (папиллярный серозный, плоскоклеточный и светлоклеточный рак).

Методика ДНК-проточной цитофлуорометрии

Параметры клеточного цикла определены методом ДНК-проточной цитофлуорометрии у всех больных, включенных в исследование. Ткань, предназначенную для исследования, измельчали в чашке Петри в небольшом объеме (0,5 мл) трис-НС1-буфера (рН 7,4) или физиологического раствора, предварительно профильтрованных через фильтр с порами диаметром 0,45 мкм. Приготовленную клеточную суспензию в течение 3 мин тщательно перемешивали автоматической пипеткой до получения однородной взвеси клеток. Эту взвесь фильтровали в градуированную центрифужную пробирку сначала через фильтр с порами диаметром 500—600 мкм («E-C Apparatus Corp.», США), затем через стандартный нейлоновый фильтр с порами диаметром 100—130 мкм. При необходимости полученную суспензию клеток фиксировали 70% этиловым спиртом в течение 24 ч при температуре — 15—20°С.

Фиксированную взвесь перед проведением ДНК-про-точной цитофлуорометрии дважды отмывали: сначала в фосфатном буфере (рН 7,4), затем в физиологическом

растворе. Взвесь центрифугировали при 1000 об/мин в течение 5 мин. Клеточный состав и гомогенность суспензии контролировали под микроскопом.

Материал готовили по методике «Cytospin» («Shan-don Co.», Великобритания). Концентрацию клеток в суспензии доводили до 12 x 106мл-1. Затем к 0,2 мл суспензии добавляли 0,4 мл холодного (4°С) раствора пропидиума йодида, полученную смесь несколько раз встряхивали.

Исследование проводили на проточном цитофлуоро-метре «EPICS-XL» («Coulter», США). Диплоидным стандартом служили лимфоциты здоровых доноров. Полученные данные записывали в виде гистограмм, а затем анализировали с помощью компьютерных программ «System II TM» (версия 3.0, «Coulter», США) и «MultiCy-cle» («Phoenix Flow Systems», США), позволяющих анализировать плоидность и распределение опухолевых клеток по фазам клеточного цикла (рис. 1). Последняя программа, кроме того, позволяет детализировать число клеток в S- и G2 + M-фазах клеточного цикла. Содержание клеток в разных фазах клеточного цикла выражали в процентах. Индекс пролиферации представляет собой число клеток, находящихся в S- и G2 + М-фазах клеточного цикла. Его также вычисляли автоматически с помощью компьютерной программы «MultiCycle» («Phoenix Flow Systems», США).

Статистическая обработка данных

Вычисление и сравнение достоверности различий средних величин, а также сравнение достоверности различий частот событий (с использованием t-критерия Стьюдента) выполняли с помощью пакета программ для компьютерного анализа «SAS». Параметры ДНК-проточ-ной цитофлуорометрии в большинстве наблюдений подчинялись нормальному распределению, что позволило использовать для статистического анализа параметрический критерий Стьюдента. При числе наблюдений более 30 применяли также непараметрический анализ по Колмогорову—Смирнову. Статистический анализ и графику выполняли с помощью стандартного пакета «Statisti-ca» (версия 5.0, «Statsoft Inc.», США).

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

В исследование были включены 102 больные РТМ I—

IV стадий по классификации FIGO. У 36 (35,3%) больных опухоли были диплоидными, у 66 (64,7%) — анеуплоидны-ми. При анализе распределения клеток по фазам клеточного цикла в зависимости от плоидности опухоли были получены следующие данные (табл. 2). В диплоидных опухолях по сравнению с анеуплоидными содержалось больше клеток в G0/G1-фазах клеточного цикла (84,9±0,8 и 80,0±1,1% соответственно, p < 0,05). В анеуплоидных опухолях было больше клеток в S-фазе (10,7±0,7% по сравнению с 7,4±0,5%, p < 0,05) и в G2 + M-фазах (9,3±0,6% по сравнению с 7,7±0,6%) клеточного цикла и выше индекс пролиферации (20,0±1,1% по сравнению с 15,1 ±0,8%, p < 0,05). Полученные данные свидетельствуют о более высокой пролиферативной активности анеуплоидных опухолей эндометрия по сравнению с диплоидными.

Диплоидные опухоли статистически достоверно чаще содержали 80—90% клеток в G0/G1-фазах клеточного цикла (80,6% по сравнению с 43,9%, p < 0,05) и статистически достоверно реже — менее 80% таких клеток

Рисунок 1. Анализ данных ДНК-проточной цитофлуорометрии с помощью компьютерной программы «MultiCycle» («Phoenix Flow Systems», США).

Стадия

IA !В 1С IIA ИВ IIIA IIIB IIIC IVB

9

Таблица 1

а

Распределение больных РТМ по стадиям

а В скобках указаны проценты.

(5,6% по сравнению с 40,9%, р < 0,05). Более 90% клеток в G0 / G1-фазах клеточного цикла содержало одинаковое число анеуплоидных и диплоидных опухолей (15,2 и 13,8% соответственно).

Анеуплоидные опухоли чаще содержали более 6% клеток в Я-фазе клеточного цикла (80,3% по сравнению с 69,4%). Аналогичная тенденция наблюдалась и в отношении содержания клеток в G2 + M-фазах клеточного цикла. Опухоли, содержавшие более 10% таких клеток, были обнаружены у 24 (36,4%) больных анеуплоидным и у 8 (22,2%) больных диплоидным РТМ. Анеуплоидные опухоли отличались более высокой пролиферативной активностью по сравнению с диплоидными. Так, индекс пролиферации более 25% наблюдался у 20 (30,3%) больных анеуплоидным РТМ и только у 1 (2,7%) больной с диплоидной опухолью (р < 0,05). Кроме того, анеуплоидные опухоли статистически достоверно реже имели индекс пролиферации менее 18% (40,9% по сравнению с 66,7%, р < 0,05).

Поскольку содержание клеток в G0 / G1-, Я- и G2 + M-фазах клеточного цикла меняется параллельно: повышение содержания клеток в G0/G1-фазах, как правило, сопровождается снижением содержания клеток в Я- и G2 + M-фазах, и наоборот, — мы анализировали эти данные вместе. Для повышения пролиферативной активности характерно уменьшение содержания клеток в G0/G1-фазах клеточного цикла и увеличение содержания клеток в Я- и G2 + M-фазах клеточного цикла.

Нами отмечено повышение пролиферативной активности опухолей у больных старше 70 лет. В этой возрастной группе отсутствовали опухоли, содержавшие более 90% клеток в G0/G1-фазах клеточного цикла

Таблица 2

Распределение клеток по фазам клеточного цикла и индекс пролиферации в зависимости от плоидности опухоли

п — число больных

а Различия между группами статистически достоверны (р<0,05).

(по сравнению с 17,0% в группе больных в возрасте 51— 60 лет и 15,6% в группе больных 61—70 лет, р < 0,05), чаще наблюдались опухоли, содержавшие более 6% клеток в Я-фазе клеточного цикла (90,9% по сравнению с 70,2% в группе больных в возрасте 51—60 лет, р < 0,05) и более 10% клеток в G2 + M-фазах клеточного цикла (р < 0,05 при сравнении со всеми остальными возрастными группами). Повышением пролиферативной активности, по-видимому, объясняются более частое выявление диссеминации и глубокой инвазии миометрия, а также низкая выживаемость больных РТМ старших возрастных групп.

При РТМ II—IV стадий наблюдались преимущественно опухоли, содержавшие менее 80% клеток в G0/G1-фа-зах клеточного цикла (60,0% по сравнению с 30,4% при 1В стадии, р < 0,05) и более 10% клеток в G2 + M-фазах клеточного цикла (55,0% по сравнению с 22,2% при 1А и 21,4% при 1В стадии, р < 0,05). Помимо этого при РТМ II—

IV стадий отмечалась тенденция к увеличению содержания клеток в Я-фазе клеточного цикла. По распределению клеток по фазам клеточного цикла ГС стадия существенно отличалась от !А и Ш стадий РТМ, что свидетельствует о существенном повышении пролиферативной активности опухолей с глубокой инвазией миометрия.

У больных РТМ прогностически неблагоприятных гистологических типов чаще наблюдались опухоли, содержавшие менее 80% клеток в G0/G1-фазах клеточного цикла (63,6% по сравнению с 36,8% в группе больных аденокарциномой эндометрия, р < 0,05) и более 10% клеток в G2 + M-фазах клеточного цикла (54,5% по сравнению с 29,4% в группе больных аденокарциномой тела матки и 26,1% в группе больных аденокарциномой тела матки с плоскоклеточной метаплазией, р < 0,05). У больных РТМ прогностически неблагоприятных гистологических типов отсутствовали опухоли, содержавшие не более 6% клеток в Я-фазе клеточного цикла (р < 0,05 при сравнении с остальными группами больных). Более высокая пролиферативная активность опухолей, относящихся к прогностически неблагоприятным гистологическим типам, объясняет их более агрессивное биологическое поведение.

Снижение степени дифференцировки сопровождалось увеличением числа опухолей, содержавших менее 80% клеток в G0 / G1-фазах клеточного цикла (57,1% при низкодифференцированных и 25,0% при высокодифференцированных опухолях, р < 0,05), более 6% клеток в Я-фазе клеточного цикла (90,5% при низкодифференцированных и 62,5% при высокодифференцированных опухолях, р < 0,05) и более 10% клеток в G2 + M-фазах клеточного цикла (42,9% при низкодифференцированных и 18,8% при высокодифференцированных опухолях, р < 0,05). По распределению клеток по фазам клеточного

Опухоли Содержание, % Индекс пролиферации“, %

G0 / G1" Sa G2+M

Диплоидные (n=36) 84,9±0,8 7,4±0,5 7,7±0,6 15,1±0,8

Анеуплоидные (n=66) 80,0±1,1 10,7±0,7 9,3±0,6 20,0±1,1

цикла опухоли разной степени дифференцировки занимали промежуточное положение между низко- и умереннодифференцированными опухолями.

Опухоли с инвазией более половины толщины миометрия чаще содержали менее 80% клеток в G0 / Gl-фазах клеточного цикла (58,6% по сравнению с 33,3% при инвазии до половины толщины миометрия, p < 0,05), более 6% клеток в S-фазе клеточного цикла (86,2% по сравнению с 73,0% при инвазии до половины толщины миометрия, p < 0,05) и более 10% клеток в G2 + M-фазах клеточного цикла (48,2% по сравнению с 10,0% в отсутствие инвазии и 27,0% при инвазии до половины толщины миометрия, p < 0,05). Эти данные подтверждают отмеченное ранее значительное повышение пролиферативной активности РТМ IC стадии по сравнению с опухолями IA и IB стадий.

У больных РТМ с переходом на шейку матки статистически достоверно чаще наблюдались опухоли, содержавшие менее 80% клеток в G0 / Gl-фазах клеточного цикла (69,2% по сравнению с 36,0%, p < 0,05) и более 10% клеток в G2 + M-фазах клеточного цикла (69,2% по сравнению с 25,8%, p < 0,05). Статистически достоверных различий между числом клеток в S-фазе клеточного цикла и распространением опухоли на шейку матки не выявлено.

У всех больных РТМ с метастазами в яичниках наблюдались опухоли, содержавшие более 6% клеток в S-фазе клеточного цикла (p < 0,05). Статистически достоверных различий в содержании клеток в G2 + M-фазах клеточного цикла у больных РТМ с метастазами и без метастазов в яичниках не выявлено. Кроме того, у больных РТМ с метастазами в яичниках не встречались опухоли, содержавшие более 90% клеток в G0/G1-фазах клеточного цикла (p < 0,05). Сходные результаты получены при анализе изучаемых параметров ДНК-проточной цитофлуорометрии в зависимости от распространения опухоли по брюшине. Это, по-видимому, объясняется частым сочетанием этих неблагоприятных факторов прогноза. У всех больных РТМ с распространением по брюшине наблюдались опухоли, содержавшие менее 80% клеток в G0/G1-фазах клеточного цикла и более 6% клеток в S-фазе клеточного цикла (p < 0,05). Помимо этого у больных РТМ с диссеминацией по брюшине чаще встречались опухоли, содержавшие более 10% клеток в G2 + M-фазах клеточного цикла (66,7% по сравнению с 31,3% в группе больных без распространения по брюшине).

При наличии метастазов в лимфатических узлах чаще наблюдались опухоли, содержавшие менее 80% клеток в G0 / G1-фазах клеточного цикла (66,7% по сравнению с 39,4% в группе больных РТМ без метастазов в лимфатических узлах) и более 10% клеток в G2 + M-фазах клеточного цикла (66,7 и 30,3% соответственно). Статистически достоверных различий между группами больных РТМ с поражением и без поражения лимфатических узлов по этим параметрам не получено, что объясняется небольшим числом наблюдений РТМ с метастазами в лимфатических узлах. По тем же причинам между этими группами не выявлено статистически достоверных различий по содержанию клеток в S-фазе клеточного цикла.

Опухоли эндометрия диаметром более 2 см характеризовались более высокой пролиферативной активностью. Они статистически достоверно чаще содержали

менее 80% клеток в G0/G 1-фазах клеточного цикла (48,1% по сравнению с 13,0% при опухолях менее 2 см, р < 0,05) и более 10% клеток в G2 + M-фазах клеточного цикла (38,0% по сравнению с 13,0% при опухолях менее 2 см, р < 0,05). Статистически достоверных различий в зависимости от содержания клеток в Я-фазе клеточного цикла и размера опухоли не отмечено. Распределение клеток по фазам клеточного цикла демонстрирует высокую пролиферативную активность опухолей с распространением по лимфатическим щелям. Эти опухоли статистически достоверно чаще содержали менее 80% клеток в G0/G1-фазах клеточного цикла (75,0% по сравнению с 37,2% в отсутствие раковых эмболов в лимфатических щелях, р < 0,05), более 6% клеток в Я-фазе клеточного цикла (100,0% по сравнению с 74,5%, р < 0,05) и более 10% клеток в G2 + M-фазах клеточного цикла (75,0% по сравнению с 27,7%, р < 0,05).

При выявлении опухолевых клеток в смывах из брюшной полости опухоль чаще содержала менее 80% клеток в G0 / G1-фазах клеточного цикла (66,6% по сравнению с 12,5% в отсутствие опухолевых клеток в смывах, р < 0,05) и более 6% клеток в Я-фазе клеточного цикла (83,3% по сравнению с 37,5%, р < 0,05). Какой-либо зависимости между наличием опухолевых клеток в смывах из брюшной полости и содержанием клеток в G2 + M-фазах клеточного цикла не выявлено, что объясняется небольшим числом больных, которым проводилось цитологическое исследование смывов из брюшной полости. Рецептороположительные опухоли статистически достоверно чаще содержали более 90% клеток в G0 / G1-фазах клеточного цикла (10,6% по сравнению с 0% в отсутствие рецепторов стероидных гормонов в опухоли, р < 0,05) и не более 6% клеток в Я-фазе клеточного цикла (14,9% по сравнению с 0%, р < 0,05). Статистически достоверных различий между рецептороотрицательными и рецептороположительными опухолями в зависимости от числа клеток в G2 + M-фазах клеточного цикла не отмечено.

Наиболее точно пролиферативную активность отражает индекс пролиферации, представляющий собой сумму содержания клеток в Я- и G2 + M-фазах клеточного цикла. При анализе этого показателя в зависимости от классических клинико-морфологических факторов прогноза при РТМ получены следующие данные. У больных РТМ в возрасте старше 70 лет статистически достоверно реже наблюдался индекс пролиферации менее 18% (36,4% по сравнению с 66,7% у больных в возрасте до 51 года, р < 0,05). Индекс пролиферации менее 18% статистически достоверно реже наблюдался при РТМ II—IV стадий (35,0% по сравнению с 67,9% при Ш стадии, р < 0,05). Кроме того, при РТМ II—IV стадий чаще отмечался индекс пролиферации более 25% (50,0% по сравнению с 11,1% при ]Д 10,7% при Ш и 23,5% при ГС стадиях, р < 0,05).

У больных РТМ прогностически неблагоприятных гистологических типов преобладали опухоли с индексом пролиферации более 25%. Они наблюдались у 54,5% больных. Для сравнения при аденокарциноме эндометрия и аденокарциноме эндометрия с плоскоклеточной метаплазией такие опухоли встречались у 16,2 и 17,4% больных соответственно (р < 0,05 при сравнении с группой больных РТМ прогностически неблагоприятных гистологических типов).

Индекс пролиферации более 25% статистически достоверно чаще наблюдался при низкой степени дифференци-ровки опухоли (42,9% по сравнению с 0% при высокодифференцированном и 17,9% при умереннодифференцированном РТМ, р < 0,05). По индексу пролиферации опухоли разной степени дифференцировки занимали промежуточное положение между низкодифференцированными и умереннодифференцированными опухолями. Кроме того, индекс пролиферации более 25% статистически достоверно чаще отмечался при инвазии более половины толщины миометрия (41,4% по сравнению с 0% в отсутствие инвазии и 14,3% при инвазии до половины толщины миометрия, р < 0,05), а также при распространении опухоли на шейку матки (61,5% по сравнению с 14,6% в отсутствие поражения шейки матки, р < 0,05).

По нашим данным, у больных с метастазами в яичники и диссеминацией по брюшине отсутствовали опухоли с индексом пролиферации менее 18% (р < 0,05 при сравнении с группами больных без поражения яичников и диссеминации по брюшине). При наличии метастазов в лимфатических узлах чаще наблюдались опухоли с индексом пролиферации более 25% (66,7% по сравнению с 19,2% в отсутствие лимфогенной диссеминации). Различия статистически не достоверны из-за небольшого числа наблюдений РТМ с метастазами в лимфатических узлах.

При опухолях диаметром менее 2 см статистически достоверно чаще наблюдался индекс пролиферации менее 18% (82,6% по сравнению с 48,1% при опухолях более 2 см, р < 0,05) и реже индекс пролиферации 18— 25% (4,4% по сравнению с 29,1%, р < 0,05). Индекс пролиферации менее 18% статистически достоверно реже отмечался при наличии опухолевых клеток в смывах из брюшной полости (33,3% по сравнению с 87,5% в отсутствие опухолевых клеток в смывах, р < 0,05). У 62,5% больных РТМ с распространением по лимфатическим щелям наблюдались опухоли с индексом пролиферации более 25%. В отсутствие раковых эмболов в лимфатических

щелях такой индекс пролиферации отмечался только у 17,0% больных (p < 0,05). У больных РТМ без распространения по лимфатическим щелям преобладали опухоли с индексом пролиферации менее 18% (60,6% по сравнению с 12,5% при распространении по лимфатическим щелям, p < 0,05). Статистически достоверных различий в зависимости от индекса пролиферации и рецепторного статуса опухоли не получено.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, по данным нашего исследования, любой из неблагоприятных клинико-морфологических факторов прогноза у больных РТМ сочетался по крайней мере с одним из параметров ДНК-проточной цитофлуорометрии, свидетельствовавших о повышении пролиферативной активности опухоли.

ЛИТЕРАТУРА

1. Бычкова Н. В., Мешкова И. Е., Пожарисский К. М. Сравнительное исследование плоидности и пролиферации эпителиальных злокачественных опухолей разной локализации (проточная цитометрия) // Вопр. онкол. — 1998. — Т. 44, №1. — С. 54—59.

2. Давыдов М. И., Аксель Е. М. Злокачественные новообразования в России и странах СНГ в 2002 г. — М.: Медицинское информационное агентство, 2004. — С. 279.

3. Burke T. W., Eifel P. J., Muggia F. M. Cancers of the Uterine Body// V. DeVita, S. Hellman, S. Rosenberg (eds.). Cancer. Principles & Practice of Oncology.— Lippincott Williams& Wilkins, 2001.— P. 1573—1594.

4. Lindahl B., Willen R. Flow cytometrical comparison of different nuclear preparation methods upon number of DNA-populations and S-phase fraction using fresh and formalin-treated normal endometrial tissue // In Vivo. — 1995. — Vol. 9, N3. — P. 207—210.

5. Lurain J. R., Rice B. L., Rademaker A. W. Prognostic factors associated with recurrence in clinical stage I adenocarcinoma of the endometrium // Obstet. Gynecol. — 1991. — Vol. 78, N 1. — P. 63—69.

6. Pfisterer J., Kommoss F., Sauerbrei W. Prognostic value of DNA ploidy and S-phase fraction in stage I endometrial carcinoma // Gynecol. Oncol. — 1995. — Vol. 58, N2. — P. 149—156.

Поступила 01.11.2005

V. M. Nechushkina, V. V. Kuznetsov, V. N. Bogatyrev, N. I. Lazareva,

K. Y. Morkhov, T. I. Zakharova CLINICAL AND PATHOLOGICAL PROGNOSTIC FACTORS AND CELL CYCLE PARAMETERS IN ENDOMETRIAL CANCER

Institute of Clinical Oncology, N. N. Blokhin RCRC RAMS, Moscow

Great attention paid to diagnosis and treatment of endometrial cancer is due to increase in its prevalence. This paper is devoted to comparison of classic clinical and pathological prognostic factors and some cell cycle, which are assessed by flow cytometry. Any unfavourable clinical or pathological pronostic factors was accompanied by at least one of the flow cytometry parameters indicative of high proliferative activity of tumor.

Key words: endometrial cancer, cell cycle, proliferative index, flow cytometry.