Биспецифичные связывающиеся агенты, нацеленные на синдекан-1 и рецептор фактора роста фибробластов

1. Биспецифичный связывающий агент, включающий:
(a) антитело или его антигенсвязывающую часть, которая специфически связывается с синдеканом-1 (CD138); и
(b) финомер, который специфически связывается с рецептором-3 фактора роста фибробластов (FGFR3), причем финомер включает полипептид, имеющий аминокислотную последовательность
1
2
3
4
5
6
(i) GVTLFVALYDYEVYGPTPMLSFHKGEKFQIL(X)(X)(X)(X)GPYWEARSL(X)TGETG(X)IPSNYVAPVDSIQ (SEQ ID NO: 99) или
7
1
2
3
4
5
6
7
(ii) GVTLFVALYDYEVMSTTALSFHKGEKFQILSQSPHGQYWEARSLTTGETG(X)IPSNYVAPVDSIQ (SEQ ID NO: 113), где аминокислоты (X), (X), (X), (X), (X), (X) и (X) означают любые аминокислоты.
2. Биспецифичный связывающий агент по п. 1, при этом антитело или его антигенсвязывающая часть содержит следующие определяющие комплементарность участки (CDR) легкой цепи и тяжелой цепи:
(i) CDR-L1 (CDR1 легкой цепи), имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 2-15;
(ii) CDR-L2 (CDR2 легкой цепи), имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 16-26;
(iii) CDR-L3 (CDR3 легкой цепи), имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 27-33;
(iv) CDR-H1 (CDR1 тяжелой цепи), имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 45-59;
(v) CDR-H2 (CDR2 тяжелой цепи), имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 60-71; и
(vi) CDR-H3 (CDR3 тяжелой цепи), имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 72-81.
3. Биспецифичный связывающий агент по п. 2, при этом
(i) CDR-L1 имеет аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 3;
(ii) CDR-L2 имеет аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 18;
(iii) CDR-L3 имеет аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 28;
(iv) CDR-H1 имеет аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 46;
(v) CDR-H2 имеет аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 60; и
(vi) CDR-H3 имеет аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 72.
4. Биспецифичный связывающий агент по п. 2, при этом
(i) CDR-L1 имеет аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 2;
(ii) CDR-L2 имеет аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 17;
(iii) CDR-L3 имеет аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 27;
(iv) CDR-H1 имеет аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 47;
(v) CDR-H2 имеет аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 61; и
(vi) CDR-H3 имеет аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 73.
5. Биспецифичный связывающий агент по п. 3 или 4, при этом антитело или его антигенсвязывающая часть содержит гуманизированную вариабельную область легкой цепи, аминокислотная последовательность которой по меньшей мере на 85% идентична аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 41, 42 и 43, и гуманизированную вариабельную область тяжелой цепи, аминокислотная последовательность которой по меньшей мере на 85% идентична аминокислотной последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 89, 90, 91 и 92.
6. Биспецифичный связывающий агент по п. 5, при этом антитело или его антигенсвязывающая часть содержит гуманизированную вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 41, и гуманизированную вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 90.
7. Биспецифичный связывающий агент по п. 5, при этом антитело или его антигенсвязывающая часть содержит гуманизированную легкую цепь, имеющую аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 44, и/или гуманизированную тяжелую цепь, имеющую аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 93.
8. Биспецифичный связывающий агент по п. 2, при этом
(i) CDR-L1 имеет аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 4;
(ii) CDR-L2 имеет аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 20;
(iii) CDR-L3 имеет аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 29;
(iv) CDR-H1 имеет аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 50;
(v) CDR-H2 имеет аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 63; и
(vi) CDR-H3 имеет аминокислотную последовательность по SEQ ID NO: 75.
9. Биспецифичный связывающий агент по любому из пп. 1-8, при этом финомер специфически связывается с изоформой 3b FGFR3 человека и с изоформой 3c FGFR3 человека.
10. Биспецифичный связывающий агент по любому из пп. 1-9, при этом
1
(X) означает N, R или K;
2
(X) означает S, G, K или R;
3
(X) означает S или G;
4
(X) означает E, Q, D, S или K;
5
(X) означает T или A; и
6
(X) означает Y, W или L.
11. Биспецифичный связывающий агент по п. 10, при этом
1
(X) означает R или K;
2
(X) означает G, K или R;
3
(X) означает S;
4
(X) означает Q, D, S или K;
5
(X) означает T или A; и
6
(X) означает W или L.
12. Биспецифичный связывающий агент по любому из пп. 1-11, при этом финомер включает полипептид, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из
13. Биспецифичный связывающий агент по любому из пп. 1-12, при этом финомер ковалентно присоединен к антителу или его антигенсвязывающей части при помощи линкера.
14. Биспецифичный связывающий агент по любому из пп. 1-13, дополнительно содержащий антинеопластическое средство.
15. Биспецифичный связывающий агент по п. 14, при этом антинеопластическое средство включает пирролобензодиазепиновый токсин.
16. Биспецифичный связывающий агент по любому из пп. 1-15, при этом антитело или его антигенсвязывающая часть конкурирует за связывание с синдеканом-1 со вторым связывающим агентом, содержащим CDR-L1, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 2-15, CDR-L2, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 16-26, CDR-L3, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 27-33, CDR-H1, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 45-59, CDR-H2, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 60-71, и CDR-H3, имеющий аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 72-81.
17. Фармацевтическая композиция, содержащая биспецифичный связывающий агент по любому из пп. 1-16 и фармацевтически приемлемый эксципиент, разбавитель, добавку или носитель.
18. Фармацевтическая композиция по п. 17 для применения при лечении неоплазии.
19. Фармацевтическая композиция по п. 17 или 18, при этом неоплазия выбрана из карциномы, саркомы, неоплазии нервной системы, лимфомы, миеломы, лейкемии, меланомы, мезотелиомы, опухолей твердых или мягких тканей и вторичного рака.