Экспрессия молекул адгезии лимфоцитами периферической крови женщин с гипертензивными расстройствами при беременности

2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue

Иммунология репродукции Immunology of reproduction

очередь могут сопровождаться формированием различных осложнений беременности, в том числе и сахарным диабетом 1 типа (СД1), являющимся крайне неблагоприятным состоянием как для матери, так и для плода.

Известно, что цитокины участвуют в межклеточных и межсистемных взаимодействиях, дифференцировке, функциональной активности клеток и других процессах. К числу данных полипептидов относятся, прежде всего, интерлейкины, хемокины, факторы роста и другие представители этого типа регуляторов.

Целью настоящей работы явилось изучение содержания цитокинов: фактора некроза опухолей a (TNFa) и интерлейкина 1р (IL-1P) в сыворотке крови и околоплодных водах (ОВ) у беременных женщин с СД1.

Обследовано 45 женщин, из которых у 20 беременность и роды протекали без осложнений (контрольная группа), а у 25 был диагностирован СД1 (основная группа). Материалом исследования служили сыворотка крови, взятая накануне и после родов, и ОВ. Уровень цитокинов (TNFa и IL-1P) определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа с помощью наборов R&D system (USA).

При осложненной СД1 беременности генерация изученных цитокинов в сыворотке крови имела свои особенности. Так, содержание TNFa, запускающего каскад провоспалительных цитокинов, было повышено накануне родов на 51% (р < 0,01), а после родов, напротив, снижалось на 47% (р < 0,05). Уровень IL-ф до родов имел тенденцию к повышению, а после родов снижался при данной патологии на 67% (р < 0,01) по сравнению с физиологической беременностью.

Современное представление о составе и роли ОВ позволяет с высокой значимостью использовать их для диагностики состояния плода и новорожденного. Так, в них по сравнению с физиологическими показателями были увеличены уровни TNFa в 1,7 раза (р < 0,01), IL-1P — на 50% (р < 0,05).

Проведенный нами сравнительный анализ содержания цитокинов в сыворотке крови и ОВ у женщин с СД1, позволил сделать заключение о наличии отрицательной корреляционной связи между ними (г = -0,78). Это подтверждает взаимосвязь системных и локальных механизмов регуляции гестационных процессов.

Из представленных данных следует, что изменение продукции цитокинов в сыворотке крови и ОВ при осложненной беременности до родов однонаправлено, хотя степень изменений различна, а после родов — разнонаправлено.

Таким образом, состояние интерлейкинового баланса или дисбаланса в гестационных биосредах имеет высокую информативную ценность для суждения о течении беременности и о внутриутробном развитии плода.

ЭКСПРЕССИЯ МОЛЕКУЛ АДГЕЗИИ ЛИМФОЦИТАМИ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ ЖЕНЩИН С ГИПЕРТЕНЗИВНЫМИ РАССТРОЙСТВАМИ ПРИ БЕРЕМЕННОСТИ

Кудряшова А.В., Панова И.А., Рокотянская Е.А.

ФГБУ«Ивановский научно-исследовательский институт материнства и детства им. В.Н. Городкова» Министерства здравоохранения РФ, г. Иваново, Россия

Введение. По данным литературы известно, что развитие гипертензии во многом определяется воспалительными реакциями в различных структурах больших и малых сосудов. При этом у беременных женщин с ги-

пертензивными расстройствами состав лейкоцитарного инфильтрата стенок сосудов значительно отличается от такового у больных с хронической артериальной гипер-тензией (ХАГ). В ряде исследований была показана значимость лимфоцитов, в развитии ХАГ, в то время как при преэклампсии (ПЭ) на первый план выступают реакции нейтрофилов, естественных киллеров(ЕК) и цитотокси-ческих Т-лимфоцитов (ЦТЛ).

Цель. На основании изучения характера экспрессии молекул адгезии, выявить особенности трансмиграционного потенциала лимфоцитов периферической крови у беременных женщин с гипертензивными расстройствами различного генеза.

Материалы и методы. обследовали беременных женщин в 22-34 недели гестации. Из них 53 — с неосложнен-ной беременностью (контроль), 34 — с ХАГ, 40 — с ПЭ, присоединившейся к ХАГ (ХАГ+ПЭ), 78 женщин с ПЭ (45 с умеренной ПЭ — УПЭ и 33 с тяжелой ПЭ — ТПЭ). В периферической крови методом проточной цитофлуо-риметрии определяли уровень CD11b+, CD11c+, CD31+, CD62L+, CD99+ лимфоцитов, в популяциях CD4+ и CD8+ лимфоцитов исследовали относительное содержание CD31+, CD62L+, CD99+ клеток.

Результаты. Проведенные исследования выявили достоверное снижение содержания CD62L+ периферических лимфоцитов, а также уровня CD62L-позитивных клеток в популяции CD4+ лимфоцитов в группах ХАГ, ХАГ+ПЭ, ПЭ по сравнению с показателями при неосложненной беременности. Отличительной чертой групп ХАГ и ХАГ+ПЭ было — снижение уровня CD11c+ лимфоцитов, в то время как в группе ПЭ и в подгруппе ТПЭ данный показатель был достоверно выше, чем в контрольной группе. Наряду с этим в группах ПЭ и ХАГ+ПЭ, и в подгруппе ТПЭ, в периферической крови достоверно возрастало содержание CD11b+ лимфоцитов. Содержание CD31+ клеток в популяции лимфоцитов во всех исследуемых группах женщин с гипертензивными расстройствами при беременности не имело достоверных различий по сравнению с показателями при неосложненной беременности, однако, в популяции CD8+ лимфоцитов отмечалось снижение уровня CD31+ клеток в группах ПЭ и ХАГ+ПЭ, в подгруппах УПЭ и ТПЭ. Причем при тяжелой преэклампсии уровень CD31+ клеток снижался и в популяции CD4+ лимфоцитов по сравнению с контролем. Уровень CD99+ клеток в популяции CD8+ лимфоцитов в группах ПЭ и ХАГ+ПЭ был достоверно снижен по сравнению с таковым в группе с ХАГ.

Заключение. Выявленные закономерности изменений в экспрессии молекул адгезии могут определять различия в патогенетической значимости лимфоцитов и их популяцийпри ХАГ и при ПЭ у беременных. Во всех исследованных группах снижалось содержание клеток экс-прессирующих L-селектин,обеспечивающего начальное прикрепление и роллинг лимфоцитов по стенке сосудов, в наибольшей степени в популяции Th. Возможно, данный факт определялся усилением дифференцировки Th до вы-сокоэффекторных стадий, не экспрессирующих молекулы L-селектина, с последующей задержкой в системном кровотоке и участием этих клеток в развитии SIRS. В то же время в группах с преэклампсией лимфоциты усиливали экспрессию молекул, способствующих плотному прикреплению к эндотелию (CD11b, CD11c), но снижали экспрессию молекул, обеспечивающих экстравазацию клеток в более глубокие структуры стенки сосуда (CD31, CD99). Так как молекулы CD11b и CD11c в большей степени экспрессиру-ются ЦТЛ и ЕК, а снижение уровня CD31+ и CD99+ клеток

«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017

Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya

в основном было отмечено в популяции ЦТЛ, можно предположить, что такое соотношение экспрессии молекул адгезии способствовало развитию цитотоксических реакций в эндотелии сосудов, в максимальной степени проявляющихся при тяжелой форме преэклампсии.

ПРОГНОСТИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ СИСТЕМЫ МАКРОФАГАЛЬНОГО КОЛОНИЕСТИМУЛИРУЮЩЕГО ФАКТОРА (M-CSF) У ЖЕНЩИН С ТРУБНО-ПЕРИТОНЕАЛЬНОЙ ФОРМОЙ БЕСПЛОДИЯ

Лапштаева А.В., Радаева О.А., Новикова Л.В.

ФГБОУ ВО «Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева», Саранск, Россия

Введение. Роль цитокинов в основных репродуктивных процессах: фолликулогенезе, овуляции, оплодотворении и имплантации плодного яйца не вызывает сомнения. Однако в классических рекомендациях по ведению пациенток с бесплодием клинико-патогенетическая значимость данных факторов недооценена. Ввиду достаточно низкой результативности и высокой стоимости проведения экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) возникает необходимость в новых исследованиях иммуноопосредован-ных механизмов наступления беременности.

Цель. Изучить взаимосвязь сывороточного уровня M-CSF и полиморфных вариантов гена его рецептора CSF1R с наступлением беременности при проведении процедуры ЭКО у женщин с трубно-перитонеальной формой бесплодия.

Материалы и методы. Проведено комплексное обследование 120 женщин с трубно-перитонеальной формой бесплодия (возраст — 35,2±2,5 лет), с коротким протоколом ЭКО, завершившимся переносом эмбрионов. Контрольная группа — 100 здоровых женщин с доказанной фертильно-стью, сопоставимых по возрасту. Первичным результатом считали наступление беременности по результатам УЗИ, проведенного через 14 дней после получения положительного результата ХГЧ. Концентрацию M-CSF определяли иммуноферментным методом с помощью тест-систем производства R&D Systems (США). Материалом для генетического исследования служили образцы ДНК, выделенные из лимфоцитов венозной крови женщин на автоматической станции QIAcube с использованием набора реагентов QIAamp DNA MiniKit (оборудование и реактивы производства QIAGEN, Германия). В гене CSF1R методом ПЦР с последующим секвенированием исследовали следующие полиморфные маркеры: rs3216780 и динуклеотидный полиморфизм rs386693509 в 3'UTR области гена. В качестве референсной использовали нуклеотидную последовательность NG_012303.1. Данные представлены в виде среднего арифметического и стандартного отклонения.

Результаты. Анализ содержания M-CSF в сыворотке крови женщин с трубно-перитонеальным бесплодием показал значимое его увеличение (р < 0,05) по сравнению с контрольной группой 326 (5,8) пг/мл и 56 (1,3) пг/мл соответственно. При интерквартильном анализе распределения сывороточных концентраций M-CSF и эффективности цикла ЭКО выявлено, что у женщин, относящихся ко II квартилю повышения M-CSF ([241320 пг/мл], 44 чел.) частота наступления беременности была максимальной — 59% (26 чел.). У женщин с труб-но-перитонеальной формой бесплодия не выявлено достоверных различий в распределении полиморфных вариантов в rs386693509 в 3'UTR области гена CSF1R

(ТС/ТС - 59,2% (71 чел.), СА/СА - 6,6% (8 чел.), ТС/СА-34,2% (41 чел.)) и в rs3216780 в 3'UTR области гена CSF1R (G/G - 40% (48 чел.), DEL/G - 54,2% (65 чел.), DEL/ DEL- 5,8% (7 чел.)), по сравнению со здоровыми женщинами (ТС/ТС - 62% (62 чел.), СА/СА - 10% (10 чел.), ТС/СА - 28% (28 чел.)), и (G/G - 33% (33 чел.), DEL/G -59% (59 чел.), DEL/DEL - 8% (8 чел.)), х2 = 1,47, р > 0,05 и х2 = 1,33, р > 0,05 соответственно. Следовательно, генотипы ТС/СА (OR = 9,66, 95% ДИ = [3,95-23,6], р < 0,05) и DEL/G (OR = 9,12, 95% ДИ = [3,22-25,8], р < 0,05) выступают как условно прогностически благоприятные для наступления беременности при проведении процедуры ЭКО. При моноанализе на основе выбранных генетических характеристик вероятность наступления беременности у женщин с трубно-перитонеальной формой бесплодия в результате проведения протокола ЭКО определяется с низкой чувствительностью - 40%, но высокой специфичностью - 82%. Ввиду того что благоприятный исход процедуры ЭКО ассоциирован с концентрацией M-CSF 241-320 пг/мл и генотипами ТС/СА в rs386693509 и DEL/G в rs3216780 в 3'UTR области гена CSF1R при их одновременном анализе специфичность при определении вероятности наступления беременности возрастает до 87%, а чувствительность - 79%

Заключение. Анализ уровня M-CSF с учетом генетических особенностей женщин с трубно-перитонеальным бесплодием открывает перспективы персонализированного подхода при определении вероятности наступления беременности в результате цикла ЭКО.

ПАССИВНАЯ ИММУНОТЕРАПИЯ В КОМПЛЕКСНОМ ЛЕЧЕНИИ РАЗЛИЧНЫХ ФОРМ СТЕРИЛЬНОСТИ

Левкова Е.А.1, Савин С.З.2, Емельянова Э.Б.3, Смиренина И.В.4, Гребеняк О.А.4, Пушкарь В.А.5

1 Социально-гуманитарный институт ФГОУ ВО «Дальневосточный государственный университет путей сообщений», Хабаровск, Россия

2 Вычислительный Центр ДВО РАН, Хабаровск, Россия

3 ГБУЗ «Городская клиническая больница имени

С.П. Боткина» Департамента здравоохранения города Москвы, Москва, Россия

4 КГБОУДПО «Институт повышения квалификации специалистов здравоохранения» Хабаровск, Россия

5 ООО «Иммунореабилитационный центр», Хабаровск, Россия

Введение. Сокращение численности населения Российской Федерации рассматривается сейчас как угроза национальной безопасности России. Отсутствие воспроизводства населения уже в ближайшем будущем приведет к сокращению трудоспособной доли населения и увеличению доли населения пенсионного возраста. Это вызовет увеличение нагрузки на социальные статьи бюджета, снижение темпов экономического роста и деградацию общества. По данным Министерства здравоохранения РФ, бесплодные браки составляют 17% от всех брачных пар, около 6 млн супружеских пар бесплодны. Из общих причин бесплодия в браке на патологию иммунной системы приходится более 10%. Наиболее значимыми факторами в решении проблемы бесплодного брака являются детализация причин бесплодного брака и способов их устранения.

Цель и задачи. Применение пассивной иммунотерапии для лечения пациенток с различными формами