СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РИСКА РАЗВИТИЯ ОЛИГОЗООСПЕРМИИ У МУЖЧИН С НОРМОЗООСПЕРМИЕЙ
METHOD FOR DETERMINING RISK OF OLIGOZOOSPERMIA IN MEN WITH NORMOZOOSPERMIA

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике, андрологии, репродуктологии, и может быть использовано для оценки риска развития олигозооспермии у мужчин с нормозооспермией.
Доля бесплодных пар в РФ превышает критический уровень, установленный Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ) для простого воспроизводства и составляет 17% (4 млн пар) [1]. Частота «мужского» фактора семейного бесплодия только за последние 20 лет достигла критического для популяционной репродукции показателя в 50% [2]. Спермограмма является наиболее оптимальным методом исследования репродуктивной функции мужчин, тем не менее, она не позволяет спрогнозировать риски ухудшения качества эякулята.
Известен способ прогнозирования нарушения фертильности у мужчин [3], заключающийся в выявлении аллельного полиморфизма генов семейства глутатион-S-трансфераз M1 и Р1 методом ПЦР. При выявлении у мужчины генотипов GSTM1 0/0, GSTP1 В/В, GSTP1 В/С, GSTP1 С/С прогнозируется риск развития нарушения фертильности спермы в виде астенозооспермии.
Недостатком данного способа является трудоемкость выполнения, необходимость наличия специализированной ПЦР-лаборатории. Кроме того, данный способ позволяет выявить группу риска только по нарушению подвижности сперматозоидов, не учитывая концентрацию и изменение морфологии нормальных сперматозоидов.
Известен способ прогнозирования риска нарушений фертильности у мужчин с ожирением [4], заключающийся в выявлении аллеля А полиморфных вариантов rs2414096 и rs749292 гена ароматазы CYP19A методом ПЦР, при наличии которых прогнозируют риск нарушения фертильности у мужчин с ожирением.
Недостатком данного способа является возможность его применения только для пациентов с ожирением.
Известен способ прогнозирования развития репродуктивных нарушений [5], заключающийся в определении уровня интерлейкина-1-бета и интерферона-гамма одновременно в эякуляте методом ИФА. При содержании интерлейкина-1-бета больше 38,8±3,8 пг/мл и одновременном содержании интерферона-гамма больше 8,1±0,5 пг/мл прогнозируют формирование репродуктивных нарушений.
Недостатками способа являются многоэтапность исследования, возможность спрогнозировать нарушения репродуктивной функции связанные, преимущественно, с инфекционными факторами.
Известен способ определения активности аспартатаминтрасферазы (АсАТ), лактатдегидрогеназы (ЛДГ) и концентрации лактата в спермальной плазме при различных морфофункциональных состояниях эякулята [6], однако в указанной работе отсутствуют интервалы интерпретации значений указанных аналитов при оценке риска развития олигозооспермии. Данный способ принят за прототип.
Целью предлагаемого изобретения является разработка способа определения риска развития олигозооспермии у мужчин с нормозооспермией с концентрацией сперматозоидов 15-49,9 млн/мл, для улучшения ранней диагностики риска развития бесплодия.
Это достигается тем, что при активности аспартатаминотрансферазы менее 245,3 Е/л, лактатдегидрогеназы менее 2068,1 Е/л, концентрации лактата менее 4,39 ммоль/л прогнозируют высокий риск развития олигозооспермии; при активности аспартатаминотрансферазы более или равной 245,3 Е/л, лактатдегидрогеназы более или равной 2068,1 Е/л, концентрации лактата более или равной 4,39 ммоль/л прогнозируют низкий риск развития олигозооспермии.
Использование предлагаемого способа не требует проведения инвазивных манипуляций, может применяться в качестве скринингового исследования для выявления групп риска среди пациентов по развитию олигозооспермии.
Критериальные значения активности АсАТ, ЛДГ и концентрации лактата в спермальной плазме определены нами при обследовании 61 пациента с нормозооспермией, при этом было сформировано две группы лиц с концентрацией сперматозоидов 15-49,9 млн/мл (n=18) и с концентрацией сперматозоидов более или равное 50 млн/л (n=43). Всем пациентам было проведено определение активности аспартатаминотрансферазы, лактатдегидрогеназы и концентрации лактата в спермальной плазме согласно предлагаемому способу. Оказалось, что средняя активность АсАТ у мужчин с концентрацией сперматозоидов 15-49,9 млн/мл составляет 207,5 Е/л, а в группе с концентрацией сперматозоидов более или равное 50 млн/л - 292,4 Е/л (р<0,001). Средняя активность ЛДГ у мужчин с концентрацией сперматозоидов 15-49,9 млн/мл составляет 1194,5 Е/л, а в группе с концентрацией сперматозоидов более или равное 50 млн/л - 2395,5 Е/л (р<0,001). Содержание лактата у мужчин с концентрацией сперматозоидов 15-49,9 млн/мл составляет 4,93 ммоль/л, а в группе с концентрацией сперматозоидов более или равное 50 млн/л - 5,72 ммоль/л (р<0,05).
Проведенный корреляционный анализ выявил достоверные умеренные корреляционные связи активности АсАТ с концентрацией сперматозоидов в эякуляте при нормозооспермии (коэффициент корреляции Спирмена составил 0,548; р<0,001); активности ЛДГ с концентрацией сперматозоидов в эякуляте при нормозооспермии (коэффициент корреляции Спирмена составил 0,565; р<0,001); содержания лактата с концентрацией сперматозоидов в эякуляте при нормозооспермии (коэффициент корреляции Спирмена составил 0,534; р<0,001).
Проведенный ROC-анализ продемонстрировал высокую прогностическую способность определения активности АсАТ (AUC=0,775, р<0,001), ЛДГ (AUC=0,747, р<0,001), содержания лактата (AUC=0,766, р<0,001) в спермальной плазме при концентрацией сперматозоидов 15-49,9 млн/мл и более или равное 50 млн/л у пациентов с нормозооспермией; позволил установить оптимальные пороговые значение активности АсАТ (более 245,3 Е/л), ЛДГ (более 2068,1 Е/л), концентрации лактата (более 4,39 ммоль/л) и приемлемые уровни чувствительности (73,4%, 68,7% и 84,4% соответственно) и специфичности (72,2%, 72,2% и 61,1% соответственно) для выбранных пороговых значений.
Сущность предложенного метода заключается в следующем: при установлении у мужчины нормозооспермии с количеством сперматозоидов от 15 до 49,9 млн/мл при проведении морфологического исследования эякулята определяют активность АсАТ, ЛДГ и концентрацию лактата в спермальной плазме; при активности АсАТ менее 245,3 Е/л, ЛДГ менее 2068,1 Е/л, концентрации лактата менее 4,39 ммоль/л прогнозируют высокий риск развития олигозооспермии; при активности АсАТ более или равной 245,3 Е/л, ЛДГ более или равной 2068,1 Е/л, концентрации лактата более или равной 4,39 ммоль/л прогнозируют низкий риск развития олигозооспермии.
В случае определения количества сперматозоидов более 50 млн/мл взаимосвязи между данными биохимическими параметрами спермальной плазмы и риском развития олигозооспермии не наблюдается.
Предлагаемый способ позволяет получить данные о степени риска развития олигозооспермии у мужчин с нормозооспермией с количеством сперматозоидов от 15 до 49,9 млн/мл по активности АсАТ, ЛДГ, концентрации лактата в спермальной плазме.
Способ поясняется следующими примерами.
Пример 1. Пациент Н., 29 лет, при первичном исследовании эякулята установлена нормозооспермия (концентрация сперматозоидов 35 млн/мл), при этом активность АсАТ в спермальной плазме составила 302 Е/л (более 245,3 Е/л); активность ЛДГ - 2334 Е/л (более 2068,1 Е/л); концентрация лактата - 6,0 ммоль/л (более 4,39 ммоль/л) - определен низкий риск развития олигозооспермии. При динамическом наблюдении (через 6 месяцев) установлена нормозооспермия (концентрация сперматозоидов 40 млн/мл).
Результаты исследования спермограммы в динамике подтверждают полученные с помощью предлагаемого способа данные.
Пример 2. Пациент В., 38 лет, при первичном исследовании эякулята установлена нормозооспермия (концентрация сперматозоидов 21 млн/мл), при этом активность АсАТ в спермальной плазме составила 181 Е/л (менее 245,3 Е/л); активность ЛДГ - 1330 Е/л (менее 2068,1 Е/л); концентрация лактата - 3,2 ммоль/л (менее 4,39 ммоль/л) - определен высокий риск развития олигозооспермии. При динамическом наблюдении (через 6 месяцев) установлена олигозооспермия (концентрация сперматозоидов 12 млн/мл). Результаты исследования спермограммы в динамике подтверждают полученные с помощью предлагаемого способа данные. Пациенту рекомендовано динамическое наблюдение и, при ухудшении качества эякулята, воспользоваться криоконсервацией сперматозоидов с возможностью дальнейшего применения в процедурах вспомогательных репродуктивных технологий.
Способ может применяться в центрах планирования семьи и репродукции, в качестве скринингового метода при обследовании у андрологов.
Источники информации
1. Овсянникова Т.В. Эпидемиология бесплодного брака. Практическая гинекология. Под ред. акад. РАМН Кулакова В.И. и проф. Прилепской В.Н., ред. М.: 2001: 366-81.
2. Кравцова Н.С., Роживанов Р.В., Курбатов Д.Г. Современные методы гормональной стимулирующей терапии нарушений сперматогенеза у мужчин. Вестник репродуктивного здоровья. 2010;12: 9-13.
3. Фетисова И.Н., Дюжев Ж.А., Липин М.А., Серебрянников А.С. Способ прогнозирования нарушения фертильности у мужчин. Патент RU 2314530 С1, 2008 год.
4. Гамидов С.И., Тажетдинов О.Х., Овчинников Р.И., Попова А.Ю., Трофимов Д.Ю., Файзуллин Л.З. Способ прогнозирования риска нарушений фертильности у мужчин с ожирением. Патент RU 2498314 С1, 2013 год.
5. Михайлова Е.А., Сетко Н.П., Жеребятьева О.О., Воронина Л.Г., Махалова Г.О., Первушина Л.А., Миронов А.Ю., Константинова О.Д., Харсеева Г.Г., Махалов В.Ю., Пострелко М.Д. Способ прогнозирования развития репродуктивных нарушений. Патент RU 2495431 С1, 2013 год.
6. Гусякова О.А., Мурский С.И., Тукманов Г.В., Комарова М.В. Особенности метаболического состава спермальной плазмы при различных морфофункциональных патологиях эякулята. Клиническая лабораторная диагностика. 2019; 64 (8): 469-476.