СПРЕЙ ДЛЯ ЭКСТРЕННОЙ ПРОФИЛАКТИКИ ОСТРЫХ РЕСПИРАТОРНЫХ ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЙ
SPRAY FOR EMERGENCY PREVENTION OF ACUTE RESPIRATORY VIRAL INFECTIONS

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для изготовления средства, обеспечивающего экстренную профилактику острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ).
Экстренной профилактикой называются мероприятия, направленные на предупреждение заболеваний лиц, общавшихся с заболевшими, в случае их возможного заражения.
ОРВИ - полиэтиологичные заболевания. В настоящее время известно более 200 возбудителей ОРВИ, однако преимущественное значение имеют риновирусы (30-50%) и вирусы гриппа (5-15%), обусловливающие высокую вспышечную заболеваемость в осеннее-зимний период, значительно реже заболевания вызывают аденовирусы, вирусы парагриппа, респираторно-синцитиальный вирус. Профилактика такого заболевания ОРВИ, в т.ч. и гриппа предусматривает либо повышение иммунного статуса пациента за счет предварительной вакцинации перед началом эпидемии либо введение препаратов, обладающих иммуномодулирующими свойствами. Общим недостатком для всех противогриппозных вакцин является обязательное соответствие штамма, из которого изготовлена вакцина, что часто приводит к полной неэффективности вакцинации. В этих случаях применяют химиопрепараты, разрушающие вирусы, например, ремантадин (метил-1- адамантил-метиламина гидрохлорид). Однако, максимальная, ингибирующая вирус активность римантадина проявляется только по отношению к серотипам вируса типа А, в меньшей степени по отношению к вирусу гриппа типа В, а также другим респираторным вирусам. Кроме того, при применении римантадина возможны нарушения органов чувств (ощущение шума в ушах), нарушения органов пищеварительной системы (расстройства стула, боли в области желудка, боли в области живота, тошнота, рвота, повышение уровня билирубина, ощущение сухости во рту, снижение аппетита), нарушения со стороны работы органов дыхательной системы, аллергические реакции.
В качестве профилактических средств для предупреждения ОРВИ используют препараты интерферона (Амиксин, Кагоцел) и индукторы образования интерферона (Гриппферон). Общим недостатком индукторов интерферона является длительность применения препарата для проявления этого терапевтического эффекта, а недостатком Гриппферона является то, что он способен вызывать патологические формы клеток крови; бессонницу, упадок сил, головокружение; повышенное сердцебиение; кожные высыпания; проблемы со стулом; першение в горле, кашель.
Для лечения и профилактики гриппа и других ОРВИ рекомендуются противовирусные препараты нескольких групп, среди которых, например, применявшийся до недавнего времени для лечения и профилактики гриппа А 6 локатор ионного канала (Римантадин). Однако в настоящее время Римантадин не рекомендуют назначать, т.к. подавляющее большинство циркулирующих штаммов вирусов гриппа к нему резистентны, а на возбудителей других ОРВИ он не действует вовсе.
Есть сведения о применении ингибиторов нейраминидазы - осельтамивира (Тамифлю) и занамивира (Реленза) как эффективных средств для лечения гриппа (в том числе пандемического) при назначении не позднее 24-48 ч от начала клинических симптомов заболевания (1).
Однако, эти препараты имеют серьезные побочные действия, что требует обязательного врачебного участия. Например, ингалятор «Реленза» может вызвать одышку и бронхоспазмы. Препараты могут также вызывать аллергические реакции в виде отека. В связи с изложенным имеется высокая потребность в разработке безопасного, простого в применении и не вызывающего серьезных осложнений средства для экстренной неспецифической профилактики ОРВИ.
В Российской Федерации зарегистрированы различные спреи для лечения инфекций верхних дыхательных путей, в т.ч. вирусного происхождения: Гексорал, Мирамистин, Тантум Верде. Однако в инструкциях ни к одному из этих препаратов не содержится указания на возможность применения их для профилактики ОРВИ (2).
В качестве единственного профилактического средства при ОРВИ с официальным указанием на это применение в инструкции по применению препарата выявлен спрей «Аквамарис» (1). Его действие состоит в механическом удалении вирусов ОРВИ со слизистых носа и ротоглотки, что препятствует прикреплению и дальнейшей репликации вирусов. Имеются сведения о положительном влиянии Аквамариса на местный иммунитет слизистых. Однако, это средство не может оказать эффективного влияния на предупреждение проникновения вирусов ОРВИ в клетки слизистых оболочек, поскольку оно не обладает вирулицидной активностью и не изменяет местный иммунитет носа и ротоглотки.
Указанное лекарственное средство Аквамарис выбрано нами в качестве прототипа средства согласно заявленного изобретения.
В качестве средства профилактики ОРВИ, обладающего более высоким профилактическим эффектом нами предлагается спрей раствора гипохлорита натрия.
+
Известно, что гипохлорит натрия в естественных условиях в организме человека продуцируется макрофагами в процессе фагоцитоза бактерий и является веществом с практически универсальными детоксицирующими, антимикробными и противовирусными свойствами. Являясь донором активного кислорода и мощным окислителем, гипохлорит натрия в организме распадается на гипохлорит анион (СlO) и ион натрия (Na). Гипохлорит анион вступает в реакцию с огромным количеством субстратов, находящихся в биологических жидкостях, на мембранах клеток и внутри них. В результате окисления либо хлорирования этих субстратов и проявляется полинаправленное действие гипохлорита натрия на органы и системы организма больного.
Нами не было обнаружено известности применения растворов гипохлорита натрия для профилактики ОРВИ. Имеющиеся в литературе сведения о бактерицидном и антивирусном действии этого средства относятся к лечению бактериальной инфекции и дезинфицирующим свойствам растворов гипохлорита натрия. Применение гипохлорита натрия в стоматологии и оториноларингологии показало безопасность и эффективность нанесения слабых растворов гипохлорита на слизистые ротоглотки и носа для лечения бактериальных инфекций (3, 4).
Техническим результатом изобретения является повышение эффективности профилактики ОРВИ, выражающееся в предупреждении заболевания в период эпидемий у большого числа лиц, а также уменьшение тяжести течения заболевания, снижение количества осложнений у заболевших, обеспечиваемых вирулицидным действием предлагаемого средства, способностью повышать местный иммунитет слизистых, способностью активировать окислительные процессы в тканях.
Этот технический результат достигается тем, что в известном спрее для экстренной профилактики острых респираторных вирусных инфекций, в качестве жидкой фазы спрей содержит раствор гипохлорита натрия с рН равным 8,0-10,0, концентрацией активного хлора 0,30-0,60 мг/л и размером капель 90-110 мкм при следующем содержании ингредиентов в мас.%:
Гипохлорит натрия
0,030-0,060
Хлористый натрий
0,8-1,0
Вода
Остальное до 100,0
Водный раствор гипохлорита натрия с заданными показателями был получен электрохимическим методом, т.е. путем электролиза водного раствора хлорида натрия на аппарате ДЭО-01-МЕДЭК. Гипохлорит натрия получали электрохимическим методом, описанным в кн. В.Л. Кубасов, В.В. Башмаков. Электрохимическая технология неорганических веществ. М.: Химия, 1989 г., с. 136.
Как указывается в руководствах к аппаратам для электролиза поверенной соли соотношение получаемых ингредиентов, т.е. гипохлорита натрия и хлорида натрия зависит от силы, плотности тока, вида электродов и исходной концентрации раствора поваренной соли. В процессе электролиза проводилось изъятие проб и анализ раствора гипохлорита натрия на содержание активного хлора, хлористого натрия и рН.
Количественное определение гипохлорита натрия
Определение количества гипохлорита натрия проводили по количеству активного хора по методике, изложенной ГОСТ 11086-76 «Гипохлорит натрия».
Массовое содержание гипохлорита натрия X, мас. %, вычисляется по формуле:
X=(0,003723×250×10000×V) / (10×10×100),
3
3
где V, см - объем раствора серноватистокислого натрия концентрации точно 0,1 моль/дм, израсходованный на титрование.
3
0,003723 - масса гипохлорита натрия, соответствующая 1 см раствора серноватистокислого натрия концентрации точно 0,1 моль/дм.
3
2
4
Определение хлористого натрия проводили по методу Мора с использованием нитрата серебра (AgNO) и хромата калия (KCrO).
После проведения химического анализа полученного раствора и в случае его соответствия требованиям, этот раствор помещается в контейнер для спрея, конструкция которого позволяла получать спрей с преимущественным размером капель 90-110 мкм.
Воздействие на верхние дыхательные пути раствором гипохлорита натрия в виде спрея осуществлялась следующим образом.
Спрей наносился 2 раза в день: утром (перед контактами с другими возможными носителями ОРВИ лицами) и вечером в 17-20 ч (после контактов). Дозатор спрея был рассчитан на 0,5 мл раствора. Перед распылением с флакона необходимо было снять колпачок и надеть дозирующий клапан, на который необходимо было нажать дважды, чтобы средство доставилось в головку дозатора. Орошать миндалины спреем необходимо было при опущенном языке, чтобы обрабатывались все пораженные ткани и лакуны. Для этого ингалятор нужно было вводить максимально близко к миндалинам. Флакон нужно было держать вертикально. Перед впрыскиванием следовало задержать дыхание и резко нажать на клапан распылителя, дважды, направляя носик дозатора в разные стороны. Рекомендовалось воздержаться от сглатывания слюны около 3-х минут. Носовую полость обрабатывали путем распыления раствора в носовые ходы. При орошении миндалин осуществляли 1-3 нажатия клапана, т.е. вводили 0,5-1,5 мл раствора гипохлорита натрия, а при орошении носа достаточно одного нажатия для каждого носового хода.
Примеры приготовления средства
Пример №1
Путем электролиза 0,9% водного раствора хлорида натрия, имеющего рН 7,4 (после подщелачивания) на аппарате ДЭО-01-МЕДЭК при силе тока 3А в течение 6 минут получен раствор гипохлорита натрия с концентрацией гипохлорита натрия 0,030% в 0,9% растворе хлористого натрия.
рН полученного раствора был равен 8,0.
Раствор был помещен в контейнер для спрея, выполненный из непрозрачного пластика.
Пример №2
Путем электролиза 0,9% водного раствора хлорида натрия с рН 7,9 (после подщелачивания) на аппарате ДЭО-01-МЕДЭК при силе тока 5А в течение 6 минут получен раствор гипохлорита натрия с концентрацией гипохлорита натрия 0,06% в 0,9% растворе хлористого натрия.
рН раствора был равен 8,5. Путем добавления едкого натра рН был повышен до 9,0.
Раствор был помещен в контейнер для спрея.
Пример №3
Путем электролиза 0,9% водного раствора хлорида натрия с рН 7,9 (после подщелачивания) на аппарате ДЭО-01-МЕДЭК при силе тока 5А в течение 6 минут получен раствор гипохлорита натрия с концентрацией гипохлорита натрия 0,06% в растворе хлористого натрия.
рН раствора был равен 8,5. Путем добавления едкого натра РН был повышен до 10,0
Раствор был помещен в контейнер для спрея.
Пример №4
Путем электролиза 0,9% водного раствора хлорида натрия с рН 7,6 (после подщелачивания) на аппарате ДЭО-01-МЕДЭК при силе тока 5 А в течение 6 минут получен раствор гипохлорита натрия с концентрацией гипохлорита натрия 0,060% в растворе хлористого натрия.
рН раствора был равен 8,0.
Раствор был помещен в контейнер для спрея.
Обоснование некоторых параметров предлагаемого средства
Размер капель спрея 90-110 мкм обусловлен следующим.
Размеры капель 90-110 мкм 0,03%-0,06% раствора гипохлорита натрия в большем количестве попадают в крипты и адсорбируются слизистой. Это было подтверждено результатами количественного определения гипохлорита натрия в смывах из носоглотки. Для этого испытуемые после обработки носоглотки спреем гипохлорита натрия трижды полоскали горло стерильным физиологическим раствором по 10-15 мл жидкости. Смывы собирали в широкогорлую стерильную банку, после чего в собранной жидкости определяли количество гипохлорита натрия по методике, изложенной в ГОСТ 11086-76 «Гипохлорит натрия». Обнаружено, что количество гипохлорита натрия, адсорбирующееся на слизистой, наибольшее при размере капель 90-110 мкм. По-видимому, это вызвано следующим. Как нами было выявлено в серии типовых экспериментов капли раствора менее 90 мкм проникают в трахею и бронхи, а капли размером более 110 мкм после нанесения на слизистые сливаются между собой и стекают в пищевод.
Величина рН средства 8,0 -10,0 обусловлена следующим.
В кислой и нейтральной среде растворов гипохлорита натрия доля хлорноватистой кислоты, НСlO, составляет 78%, а гипохлорита - 22%, в щелочной среде, даже при рН=8, доля хлорноватистой кислоты, НСlO, всего- 24%, гипохлорита - 76%. Вместе с тем, устойчивость растворов гипохлорита повышается вместе с повышением рН. Водные растворы гипохлорита натрия весьма неустойчивы и со временем разлагаются даже при обычной температуре (со скоростью 0,08 до 0,1% в сутки). На скорость распада гипохлорита натрия влияет воздействие солнечного излучения, наличие катионов тяжелых металлов и хлоридов щелочных металлов. Следует заметить, что наиболее устойчивы растворы с сильнощелочной средой (значение рН>10) (5).
При хранении при комнатной температуре в контейнерах для спрея 0,057-0,06% растворов гипохлорита натрия при значениях рН 9-10,0 было обнаружено, что через 1 месяц концентрация гипохлорита натрия снижается на 5-7%, а при рН 8-8,5 эта концентрация снижается на 7-8%.
Концентрация гипохлорита натрия в растворе 0,03-0,06% была выбрана после проведения исследования по профилактике и лечению ОРВИ, согласно которым наилучшие результаты давала указанная концентрация.
Средство было апробировано на 200 добровольцах (студенты одного вуза, возраст 19-22 года, 70 из которых использовали спрей гипохлорита с концентрацией 0,03% (1 группа), 70 человек использовали спрей гипохорита натрия концентрацией 0,06% (2 группа), а 60 человек составляли контрольную группу (3 группа), которые распыляли изотонический раствор хлористого натрия в виде спрея. Воздействие на верхние дыхательные пути раствором гипохлорита натрия в виде спрея осуществлялась следующим образом.
Спрей наносился 2 раза в день: утром (перед контактами с другими возможными носителями ОРВИ лицами) и вечером в 17-20 ч (после контактов). Дозатор спрея был рассчитан на 0,5 мл раствора. Перед распылением с флакона необходимо было снять колпачок и надеть дозирующий клапан, на который необходимо было нажать дважды, чтобы средство доставилось в головку дозатора. Орошать миндалины спреем необходимо было при опущенном языке, чтобы обрабатывались все пораженные ткани и лакуны. Для этого ингалятор нужно было вводить максимально близко к миндалинам. Флакон нужно было держать вертикально. Перед впрыскиванием следовало задержать дыхание и резко нажать на клапан распылителя, дважды, направляя носик дозатора в разные стороны. Рекомендовалось воздержаться от сглатывания слюны около 3-х минут. Носовую полость обрабатывали путем распыления раствора в носовые ходы. При орошении миндалин осуществляли 1-3 нажатия клапана, т.е. использовать 0,5-1,5 мл раствора гипохлорита натрия, а при орошении носовой полости достаточно было одного нажатия для каждого носового хода. Профилактику проводили в течение 20 дней. Причем, орошение продолжали и при заболевании испытуемых, на фоне традиционного лечения ОРВИ.
Исследовали тяжесть клинического течения инфекционного процесса у заболевших, состояние слизистых оболочек ротоглотки и миндалин.
Характеристику иммунного статуса осуществляли следующими методами:
1. Общепринятыми гематологическими методами определяли общее содержание лейкоцитов, а также относительное и абсолютное количество лимфоцитов в периферической крови.
2. Определяли секреторный иммуноглобулин A (SIgA) слюны. Забор слюны проводили утром натощак в пробирку, охлажденную до 40°С. В полученных образцах оценивали содержание секреторного IgA наборами ИФА-"Вектор-Бест" г. Новосибирск. Иммуноглобулин A (SIgA) слюны является фактором первичного ответа иммунной системы организма играющий важную роль в защите организма от респираторных вирусов в системе местного иммунитета ротоглотки. Он связывает чужеродные агенты непосредственно в месте их внедрения - на слизистых оболочках полости рта, дыхательных путей и пищеварительного тракта и не дает им проникнуть во внутренние органы (легкие, сердце, печень) (6,7)
3. У заболевших (как правило, заболевание возникало на 7-10 день эксперимента) определяли тип вируса путем проведения иммунофлуоресцентного анализа (ИМФ) реакции торможения гемагглютинации (РТГА) и реакции связывания комплимента (РСК). Диагностическое значение имело 4-кратное увеличение титра антител.
Защитное действие гипохлорита натрия оценивали по величине заболеваемости гриппом и другими ОРВИ, тяжести заболевания и исследуемым показателям иммунного статуса в опытных и контрольной группах.
Из лиц первой группы (70 человек), использующих спрей с концентрацией гипохлорита натрия 0,03% течение 20 дней заболели 8 человек (на 2-4 день эксперимента), что составляет 11%, во 2-й группе использующих спрей с концентрацией гипохлорита натрия 0,06%, заболевших было 4 человека или 5,7%, в контрольной группе (60 человек, 3 группа) заболевших было 20 человек (на 10-20 день эксперимента), что составляет 33%. Таким образом, применение спрея раствора гипохлорита натрия в концентрации 0,03% обеспечило снижение заболеваемости ОРВИ в 3 раза, в концентрации 0,06% почти в 6 раз.
Заболевшие 2 человека в 1-й опытной группе, 1 человек во 2-й опытной группе и 3 человека в контрольной группе имели клинику парагриппа. При этом в контрольной группе тяжесть заболевания была более выраженной. В клинической картине преобладали признаки поражения верхних отделов респираторного тракта, боль и першение в горле, заложенность носа, сухой кашель, симптомы ринофарингита. Клинический диагноз был подтвержден ИМФ методом, показавшим наличие в клетках эпителия слизистой носа вирусов парагриппа HPIV 1.
При помощи РТГА и РСК были исследованы парные сыворотки крови, взятые с интервалом 10-14 дней от начала заболевания. Нарастание титра антител к вирусу типа HPIV 1 подтвердили этот диагноз.
Заболевшие 5 человек в 1-2 опытных группах и 13 человек в контрольной группе имели клинику аденовирусной инфекции. Заболевание у больных контрольной группы начиналось остро с повышения температуры тела, познабливания головной боли, слабости, снижения аппетита, мышечных болей. У заболевших имелись заложенность носа и насморк, ринофарингит и ринофаринготонзиллит. У 3-х больных контрольной группы диагностирован конъюнктивит, а у 5 - диарея. Объективно: увеличение периферических лимфатических узлов. В периферической крови у 6 больных нормоцитоз, у 4-х лейкопения, СОЭ не увеличена. Длительность заболевания в среднем составила 14-20 дней. У 4 человек в опытных группах с лабораторно подтвержденной аденовирусной инфекцией температура тела была в пределах 37,5°С, заболевание ограничивалось ринофарингитом без коньюнктивита. Длительность заболевания составила 7-10 дней. У 3-х длительность заболевания была 11-14 дней с выраженным ринофаринготонзиллитом. ИФЛ, РСК и РТГА показали наличие в организме заболевших серологические типы аденовирусов 3,4 и 7. Длительность заболевания в 1-2 группах составила в среднем 10-12 дней на фоне невысокой температуры, при этом ни в одном случае не наблюдалось развития пневмонии, коньюнктивита, диареи.
4 человека в опытных 1-2 группах и 4 человека в контрольной группе по клинике были отнесены к заболевшим гриппом.
Заболевание начиналось остро, иногда с озноба. Быстро повышалась температура, достигая уже в первые сутки 38-39°С. Отмечались признаки общей интоксикации (слабость, адинамия, потливость, головная боль, слезотечение) и симптомы поражения дыхательных путей (сухой кашель, першение в горле, осиплость голоса, заложенность носа). При обследовании отмечались гиперемия лица и шеи, инъецированность сосудов склер, повышенное потоотделение, брадикардия, гипотензия. Выявлялось диффузное поражение верхних дыхательных путей (ринит, фарингит, ларингит, трахеит). Характерны были гиперемия и своеобразная зернистость слизистой оболочки зева, в периферической крови - лейкопения, нейтропения, СОЭ обычно не повышена.
В последующем у 3 больных из контрольной группы на фоне специфического противогриппозного лечения имелись осложнения в виде пневмонии. У заболевших опытной группы, получавших аналогичное лечение, осложнений не отмечено.
1
1
Диагноз гриппа был подтвержден методом ИМФ, РТГА и РСК У 7 заболевших причиной развития гриппа был вирус гриппа подтипа A (HN), а у 1 больного - вирус типа В.
Вышеизложенное свидетельствует о том, что лица как опытной так и контрольной групп находились в контакте с больными гриппом, парагриппом и аденовирусной инфекцией.
До начала эксперимента а так же на 7, 14 и 20-й день эксперимента у всех участников определяли иммуноглобулин A (SIgA) слюны. Его исходная величина в среднем составила . В процессе эксперимента в опытных группах отмечено достоверное возрастание этого показателя до  на 7 день, и до  на 20 день. В контрольной группе изменения количества A (SIgA) слюны не отмечалось.
Таким образом, представленные результаты свидетельствуют о достоверном профилактическом действии спрея раствора гипохлорита натрия в отношении вирусов типа А, В, а так же в отношении вирусов парагриппа и аденовирусов. Профилактическое и лечебное действие предлагаемого средства проявляются также и в более легком течении заболевания ОРВИ, а также снижении числа осложнений у лиц, использующих спрей.
Действие раствора гипохлорита натрия обусловлено не только его известными вирулицидными свойствами, но и способностью повышать местный иммунитет слизистых оболочек ротоглотки, что выражается в повышении количества A (SIgA) слюны. По видимому, этот ранее не известный эффект является результатом антиоксидантных свойств гипохлорита натрия.
Литература
1. Г.Н. Кареткина «Грипп и ОРВИ: лечение и профилактика в наступившем эпидемическом сезоне «2015-2016 гг.», журнал «ЛЕЧАЩИЙ ВРАЧ» ноябрь 2015, №11.
2. Государственный реестр лекарственных средств. http://www.grls.rosminzdrav.ru.
3. Сулейманов Ю.Б. Автореферат и диссертация: «Местное и системное применение гипохлорита натрия в лечении острых верхнечелюстных синуситов», Москва 2004 г.
4. Перова М.Д. и др. «Гипохлорит натрия и его использование в стоматологии» ж. Стоматология. - 1989. - №2., с. 84-87.
5. http://wwtec.ru/index.php?id=410.
6. Леонова М.В., Ефременкова О.В. Местная иммуномодуляция при заболеваниях верхних дыхательных путей. // Качественная практическая практика. - 2002. - №1. - С. 14-22.
7. Wines B.D., Hogarth P.M. IgA receptors in health and disease. Tissue Antigens. - 2006. - Vol. 68, №2. - P. 103-114.