Молекулярно-генетическая оценка роли микроорганизмов в этиологии осложнений гестационного периода беременности

2012, Т. 2, № 1-2

Современное лабораторное обеспечение.

По данным эпидемиологического расследования начало вспышки носило пищевой характер с последующим распространением инфекции контактно-бытовым путем.

МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА РОЛИ МИКРООРГАНИЗМОВ В ЭТИОЛОГИИ ОСЛОЖНЕНИЙ ГЕСТАЦИОННОГО ПЕРИОДА БЕРЕМЕННОСТИ

К.Р. Бондаренко, А.Н. Еникеев, У.Р. Хамадьянов, А.Р. Мавзютов

ГБОУ ВПО БГМУМинздравсоцразвития России, Уфа

Не существует единого мнения о роли бактерий в развитии гестоза (Chen H., 2000; Серов В.Н., 2005), однако установлено, что они могут нарушать полноценную инвазию трофобласта, рассматривающуюся как ведущий механизм формирования гестоза (Pennington K.A. et al., 2012). Наиболее часто указанное связывают с представителями семейств Mycoplasmataceae и Chlamydiaceae (Прилепская В.Н., Кисина В.И., 2000), обычными методами невыяв-ляемыми. В этой связи целью нашего исследования явилась сравнительная качественная и количественная молекулярно-генетическая оценка степени колонизации генитального тракта представителями Mycoplasmataceae и Chlamydiaceae при нормальной и осложненной (гестоз) беременности. Методами ПЦР (специфическая детекция безусловных патогенов — С. trachomatis, M. genitalium) и ПЦР в реальном времени (количественная оценка обсемененно-сти условно-патогенными M. hominis, U. urealyticum, U. parvum) («ИнтерЛабСервис», Россия) исследованы (соскоб цилиндрического эпителия цервикаль-ного канала) 74 образца от женщин с гестозом и 60 образцов беременных с физиологическим течением гестационного периода, полученных в ходе планового обследования беременных и с их согласия.

Частота выявления C.trachomatis при гестозе составила 10,8% (8), что в 2 раза выше частоты их выявления в группе контроля (менее 5% (3), (p < 0,001)). Инфицированность М. genitalium в основной группе составила 2,7% (2) при полном их отсутствии в контроле. Средняя концентрация (медиана) U. parvum, выявленных в 23% (17) случаев в основной группе, составила 6,2 lg копий/мл против 3,8 lg копий/мл, выявленных в 15% (9) в группе контроля, (p < 0,001). Аналогичные данные были получены относительно M. hominis и U. urealyticum, выявленных в 17,6% (13) и 20% (12) случаев в основной группе, тогда как в контрольной — лишь в 11% (8) и 15% (9), соответственно, (p < 0,001). Средняя концентрация M. hominis в основной группе превышала таковую в группе контроля в 2,5 раза и составила, соответственно, 7,5 lg копий/мл и 3,1 lg копий/мл (p < 0,001). Концентрация U. urealyticum в основной группе была выше в 3 раза, нежели в контрольной (8,1 lg копий/мл и 2,7 lg копий/мл, p < 0,001). Таким образом, степень обсемененности генитального тракта С. trachomatis, M.genitalium, M. hominis, U. urealyticum, U. parvum у беременных с гестозом была существенно выше нежели при физиологическом течении гестацион-ного периода.

Работа выполнена при поддержке ФЦП «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009—2013 гг., в рамках реализации мероприятия № 1.2.1. ГК№ П385от 30.07.2009.

МОНИТОРИНГ ШТАММОВ B. PERTUSSIS, ВЫДЕЛЕННЫХ ОТ БОЛЬНЫХ КОКЛЮШЕМ В РОССИИ

О.Ю. Борисова, И.К. Мазурова, Н.Т. Гадуа, Г.А. Ивашинникова, И.А. Рудакова

ФБУНМНИИэпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора, Москва

Массовая иммунизация детского населения АКДС-вакциной против коклюша позволила коренным образом изменить характер течения эпидемического процесса коклюшной инфекции. Однако, несмотря на очевидные успехи вакцинопрофилактики, до настоящего времени регистрируются периодические подъемы заболеваемости, как за счет непривитых, так и привитых детей, единичные летальные случаи, тяжелые формы заболевания, высокая заболеваемость детей раннего возраста и увеличилась заболеваемость детей школьного возраста. Все это свидетельствует о продолжающейся циркуляции возбудителя среди населения. Нами проводится микробиологический и молекулярно-генетический мониторинг штаммов B. pertussis, который позволяет оценить особенности распространения возбудителя в различные периоды эпидпроцесса коклюшной инфекции. Изучены 371 штаммов B.pertussis, выделенных от больных коклюшем в 1948—2010 гг., и показано, что штаммы с новыми «невакцинными» аллелями основных генов патогенности постепенно вытеснили штаммы со старыми «вакцинными» аллелями. В настоящее время доминирующее положение занимают штаммы с новыми «невакцинными» аллелями — ptxAl аллелем гена, кодирующего А-комплекс (в 94,9% случаях), ptxC2 аллелем гена, кодирующего S3 субъединицу В-комплекса (в 91,2% случаях) коклюшного токсина, prn2 аллелем гена, кодирующего пертактин (в 92,8% случаях); появляются единичные штаммы с новыми мутационными изменениями, приводящими к еще более существенным изменениям структуры и функции, основных антигенных детерминант. Штаммы, используемые для производства коклюшного компонента АКДС-вакцины, несут старые «вакцинные» аллели этих генов. Для оценки клонального состава популяции штаммов B.pertussis использован метод мультилокусного секвенирования фрагментов трех генов — ptxA и ptxC (кодирующих S1 и S3 субъединицы коклюшного токсина) и tcfA (кодирующего фактор колонизации трахеи) с последующей идентификацией аллельного профиля и определением сиквенс-типа (ST) штамма. Всего идентифицировано пять сиквенс-типов — ST1, ST2, ST3, ST5 и ST8, из которых — ST1-ST2 являются «вакцинными», а ST5-ST3-ST8 — «невакцинными» типами. Среди штаммов B.pertussis, выделенных в 2000—2010 гг., преобладают штаммы с новой клональной структурой — ST5 (85,5%) и ST3 (9,3%), в единичных случаях регистрируются штаммы со старыми «вакцинными» ST1-ST2 типами и появились единичные штаммы с другой новой клональной структурой «невакцинным» ST8 типом.