ИНГИБИТОРЫ ВЗАИМОДЕЙСТВИЯ МЕЖДУ MDM2 И P53
MDM2 AND P53 INTERACTION INHIBITORS

Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к соединениям и композициям, содержащим указанные соединения, действующим как ингибиторы взаимодействия между MDM2 и р53, в частности как модуляторы взаимодействия MDM2-протеасома. Изобретение также относится к способам получения раскрытых соединений и композиций и способам их применения, например, в качестве лекарственных средств.
р53 представляет собой опухолевый супрессорный белок, который играет основную роль в регуляции баланса между пролиферацией клеток и остановкой роста клеток/апоптозом. В нормальных условиях время полужизни р53 очень короткое, и следовательно, уровень р53 в клетках низкий. Однако в ответ на повреждение клеточной ДНК или клеточный стресс (например, активацию онкогена, разрушение теломеров, гипоксию) уровни р53 повышаются. Такое повышение уровней р53 ведет к активации транскрипции ряда генов, которые управляют клеткой, или к остановке роста, или к процессам апоптоза. Таким образом, важной функцией р53 должно быть предупреждение неконтролируемой пролиферации поврежденных клеток и, таким образом, защита организма от развития рака.
MDM2 является ключевым отрицательным регулятором функции р53. Он формирует отрицательную авторегуляторную петлю посредством связывания аминоконцевого трансактивирующего домена р53, и таким образом, MDM2 как ингибирует способность р53 активировать транскрипцию, так и нацеливает р53 на протеолитическое расщепление. В нормальных условиях такая регуляторная петля ответственна за поддержание низких уровней р53. Однако в опухолях с р53 дикого типа равновесная концентрация активного р53 может повыситься за счет противодействия взаимодействию между MDM2 и р53. Другое действие MDM2 также требуется для разрушения р53, что доказывается накоплением убикитилированного р53, когда фосфорилирование в центральном домене HDM2 отменяется (Blattner et al., Hypophosphorylation of Mdm2 augments р53 stability. (2002) Mol. Cell. Biol., 22, 6170-6182). Ассоциация HDM2 с различными субъединицами протеасомы 26S, такими как S4, S5a, S6a и S6b (3-й симпозиум по Mdm2, сент. 2005, в Констанце, Германия), может играть ключевую роль в таком процессе. Таким образом, концентрации р53 также могут возрастать за счет модуляции взаимодействия MDM2-протеасома. Это приведет к восстановлению р53-опосредуемых проапоптозных и антипролиферативных действий в таких опухолевых клетках. Антагонисты MDM2 могут проявлять даже антипролиферативное действие в опухолевых клетках, которые лишены функционального р53.
Это обстоятельство ставит белок HDM2 в положение привлекательной мишени для разработки противораковой терапии.
MDM2 является клеточным протоонкогеном. Сверхэкспрессию MDM2 наблюдают при ряде онкозаболеваний. MDM2 сверхэкспрессируется в различных опухолях из-за амплификации гена или усиленной транскрипции или трансляции. Механизм, по которому амплификация MDM2 промотирует онкогенез, по меньшей мере, частично связан с его взаимодействием с р53. В клетках, сверхэкспрессирующих MDM2, защитная функция р53 блокируется, и поэтому клетки неспособны реагировать на повреждение ДНК или клеточный стресс повышением уровней р53, ведущим к остановке роста и/или апоптозу клеток. Таким образом, после повреждения ДНК и/или клеточного стресса клетки, сверхэкспрессирующие MDM2, свободны продолжать пролиферировать и принимать онкогенный фенотип. В таких условиях срыв взаимодействия р53 и MDM2 мог бы высвободить р53 и, таким образом, допустить нормальное прохождение сигналов остановки роста и/или апоптоза.
waf1,cip1
MDM2 также может иметь обособленные функции, кроме ингибирования р53. Ряд субстратов MDM2 быстро разрастается. Например, показано, что MDM2 взаимодействует непосредственно с pRb-регулируемым фактором транскрипции E2F1/DP1. Такое взаимодействие может быть критическим для р53-независимых онкогенных активностей MDM2. Домен E2F1 показывает поразительное сходство с MDM2-связывающим доменом р53. Так как взаимодействия MDM2 как с р53, так и с E2F1 локализуются на MDM2 в одном и том же сайте связывания, можно ожидать, что антагонисты MDM2/р53 будут не только активировать клеточный р53, но также модулировать активности E2F1, которые обычно отменены в опухолевых клетках. Другие основные примеры субстратов MDM2 включают р63, р73, p21.
Также терапевтическая эффективность средств, повреждающих ДНК, используемых в настоящее время (химиотерапия и лучевая терапия), может быть ограничена через отрицательную регуляцию р53 MDM2. Так, если ингибирование р53 MDM2 по типу обратной связи прерывается, повышение уровней функционального р53 будет повышать терапевтическую эффективность таких средств за счет восстановления функции р53 дикого типа, что ведет к апоптозу и/или реверсии р53-ассоциированной устойчивости к лекарственным средствам. Показано, что сочетание ингибирования MDM2 и лечений с повреждением ДНК in vivo приводит к синергичному противоопухолевому действию (Vousden K.H., Cell, Vol.103, 691-694, 2000).
Таким образом, нарушение взаимодействия MDM2 и р53 представляет подход для лечебного вмешательства в опухоли с р53 дикого типа или мутантом р53, может даже вызвать антипролиферативное действие в опухолевых клетках, которые лишены функционального р53, и более того, может сделать опухолевые клетки чувствительными к химиотерапии и лучевой терапии.
Предпосылки создания изобретения
В WO 2006/032631 раскрываются ингибиторы взаимодействия между MDM2 и р53, применимые, среди прочего, при лечении опухолей и усилении эффективности химиотерапии и лучевой терапии.
20
Соединения по настоящему изобретению отличаются по строению от соединений WO 2006/032631 при сравнении дополнительного заместителя R на центральном фенильном цикле.
В WO 2007/107543 также раскрываются ингибиторы взаимодействия между MDM2 и р53, применимые, среди прочего, при лечении опухолей и усилении эффективности химиотерапии и лучевой терапии.
Неожиданно, но существенные структурные модификации по настоящему изобретению не уменьшают активность соединений по настоящему изобретению. Следовательно, изобретение дает дополнительный полезный ряд эффективных и сильных небольших молекул, которые ингибируют взаимодействия между MDM2 и р53 и которые могут являться лекарственными средствами.
Описание изобретения
Настоящее изобретение относится к соединениям и композициям и способам ингибирования взаимодействий между MDM2 и р53 для лечения пролиферативного заболевания, в том числе опухолей и рака. Кроме того, соединения и композиции по настоящему изобретению применимы для усиления эффективности химиотерапии и лучевой терапии.
Соответственно в одном аспекте изобретение относится к соединению формулы (I)
включая любую его стереохимически изомерную форму, где
m равен 0, 1 или 2, и когда m равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
n равен 0, 1, 2 или 3, и когда n равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
р равен 0 или 1, и когда р равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
s равен 0 или 1, и когда s равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
t равен 0 или 1, и когда t равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
8
Х представляет собой С(=О) или CHR, где
8
17
18
1-6
3-7
1-6
1-6
1-6
1-6
3-7
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
R выбирают из водорода; С-алкила; С-циклоалкила; -C(=O)-NRR; карбоксила, арил-С-алкилоксикарбонила; гетероарила; гетероарилкарбонила; гетероарил-С-алкилоксикарбонила; пиперазинилкарбонила; пирролидинила; пиперидинилкарбонила; С-алкилоксикарбонила; С-алкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, амино, арила и гетероарила; С-циклоалкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, амино, арила и гетероарила; пиперазинилкарбонила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, гидрокси-С-алкила и гидрокси-С-алкилокси-С-алкила; пирролидинила, замещенного гидрокси-С-алкилом; и пиперидинилкарбонила, замещенного одним или двумя заместителями, выбранными из гидрокси, С-алкила, гидрокси-С-алкила, С-алкилокси-С-алкила, С-алкил(дигидрокси)-С-алкила и С-алкилокси(гидрокси)-С-алкила;
17
18
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
R и R выбирают, каждый независимо, из водорода, С-алкила, ди(С-алкил)амино-С-алкила, арил-С-алкила, С-алкилокси-С-алкила, гидрокси-С-алкила, гидрокси-С-алкил(С-алкила) или гидрокси-С-алкил(арил-С-алкила);
9
9
9
9
9
2
20
1-6
представляет собой -CR=C<, и тогда пунктирная линия представляет собой связь, -С(=О)-СН<, -C(=O)-N<, -CHR-CH< или -CHR-N<, где каждый R представляет собой независимо водород или С-алкил или где R вместе с одним из R или R образует прямую связь;
1
1-6
1-12
1-12
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
3-7
3-7
1-6
R представляет собой водород; арил; гетероарил; С-алкилоксикарбонил; С-алкил или С-алкил, замещенный одним или двумя заместителями, выбранными независимо из гидрокси, арила, гетероарила, амино, С-алкилокси, моно- или ди(С-алкил)амино, морфолинила, пиперидинила, пирролидинила, пиперазинила, С-алкилпиперазинила, арил-С-алкилпиперазинила, гетероарил-С-алкилпиперазинила, С-циклоалкилпиперазинила и С-циклоалкил-С-алкилпиперазинила;
2
20
R и R выбирают, каждый независимо, из
галогена, гидрокси, циано, нитро, карбоксила;
1-6
1-6
полигалоген-С-алкила, полигалоген-С-алкилокси;
1-6
3-7
2-6
1-6
1-6
3-7
1-6
1-6
1-6
1-6
3-7
1-6
3-7
1-6
3-7
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
С-алкила, С-циклоалкила, С-алкенила, арила, гетероарила, арил-С-алкила, гетероарил-С-алкила, С-циклоалкил-С-алкила, морфолинила, пиперидинила, пирролидинила, пиперазинила, С-алкилокси, арилокси, гетероарилокси, С-алкилтио, арилтио, гетероарилтио, С-алкилкарбонила, С-циклоалкилкарбонила, арилкарбонила, гетероарилкарбонила, С-алкилоксикарбонила, С-циклоалкилоксикарбонила, арилоксикарбонила, гетероарилоксикарбонила, С-алкилкарбонилокси, С-циклоалкилкарбонилокси, арилкарбонилокси или гетероарилкарбонилокси, причем любая из указанных групп необязательно и независимо замещена одним или несколькими, предпочтительно одним или двумя, заместителями, выбранными из галогена, гидрокси, циано, нитро, карбоксила, амино, моно- или ди(С-алкил)амино, С-алкила, полигалоген-С-алкила, арила, гетероарила, С-алкилокси, С-алкилкарбонила, С-алкилоксикарбонила и С-алкилкарбонилокси; и
2
w
y
21
22
-(CH)-C(=O))NRR, где
w равен 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6, и когда w равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
y равен 0 или 1, и когда y равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
21
22
1-6
3-7
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
R и R выбирают, каждый независимо, из водорода, С-алкила, С-циклоалкила, С-алкилкарбонила и арил-С-алкилкарбонила, причем любая из указанных групп необязательно и независимо замещена одним или несколькими, предпочтительно одним или двумя, заместителями, выбранными из галогена, гидрокси, амино, моно- или ди(С-алкил)амино, С-алкила, полигалоген-С-алкила, С-алкилокси, арила и гетероарила;
21
22
1-6
1-6
1-6
3-7
3-7
1-6
1-6
1-6
или R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют морфолинил, пиперидинил, пирролидинил или пиперазинил, причем любая из указанных групп необязательно и независимо замещена одним или несколькими, предпочтительно одним или двумя, заместителями, выбранными из С-алкила, полигалоген-С-алкила, С-алкилокси, С-циклоалкила, С-циклоалкил-С-алкила, арил-С-алкила и гетероарил-С-алкила;
2
20
1-6
1-6
1-6
1-6
или R и R вместе с фенильным циклом, к которому они присоединены, образуют нафталинильную группу, необязательно замещенную одним или несколькими, предпочтительно одним или двумя, заместителями, выбранными, каждый независимо, из галогена, гидрокси, амино, моно- или ди(С-алкил)амино, С-алкила, полигалоген-С-алкила, С-алкилокси, арила и гетероарила;
2
20
2
b
1-6
1-6
1-6
1-6
или R и R вместе образуют двухвалентный радикал формулы -(CH)-, где b равен 3, 4 или 5, необязательно замещенный одним или несколькими, предпочтительно одним или двумя, заместителями, выбранными из галогена, гидрокси, амино, моно- или ди(С-алкил)амино, С-алкила, полигалоген-С-алкила, С-алкилокси, арила и гетероарила;
2
20
2
20
9
или один из R или R имеет значения, указанные выше, а другой из R или R вместе с R образует прямую связь;
3
1-6
3-7
1-6
3-7
R представляет собой водород; С-алкил; гетероарил; С-циклоалкил; С-алкил, замещенный заместителем, выбранным из гидрокси, амино, арила и гетероарила; или С-циклоалкил, замещенный заместителем, выбранным из гидрокси, амино, арила и гетероарила;
4
5
1-6
1-6
1-6
1-6
2-6
1-6
R и R представляют собой, каждый независимо, водород, галоген, С-алкил, гидрокси-С-алкил, полигалоген-С-алкил, циано, циано-С-алкил, гидрокси, амино, С-алкенил или С-алкилокси; или
4
5
R и R вместе образуют двухвалентный радикал, выбранный из метилендиокси или этилендиокси;
6
1-6
1-6
R представляет собой водород, С-алкилоксикарбонил или С-алкил;
7
1-6
1-6
когда р равен 1, тогда R представляет собой водород, арил-С-алкил, гидрокси или гетероарил-С-алкил;
Z представляет собой радикал, выбранный из
где
10
11
19
13
14
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
3-7
3-7
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
2-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
2
v
r
u
R или R выбирают, каждый независимо, из водорода, галогена, гидрокси, амино, С-алкила, нитро, полигалоген-С-алкила, циано, циано-С-алкила, тетразоло-С-алкила, арила, гетероарила, арил-С-алкила, гетероарил-С-алкила, арил(гидрокси)-С-алкила, гетероарил(гидрокси)-С-алкила, арилкарбонила, гетероарилкарбонила, С-алкилкарбонила, арил-С-алкилкарбонила, гетероарил-С-алкилкарбонила, С-алкилокси, С-циклоалкилкарбонила, С-циклоалкил(гидрокси)-С-алкила, арил-С-алкилокси-С-алкила, С-алкилокси-С-алкилокси-С-алкила, С-алкилкарбонилокси-С-алкила, С-алкилоксикарбонил-С-алкилокси-С-алкила, гидрокси-С-алкилокси-С-алкила, С-алкилоксикарбонил-С-алкенила, С-алкилокси-С-алкила, С-алкилоксикарбонила, С-алкилкарбонилокси, аминокарбонила, гидрокси-С-алкила, амино-С-алкила, гидроксикарбонила, гидроксикарбонил-С-алкила и -(CH)-(C(=O))-(CHR)-NRR, где
v равен 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6, и когда v равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
r равен 0 или 1, и когда r равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
u равен 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6, и когда u равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
19
1-6
R представляет собой водород или С-алкил;
13
14
15
16
1-12
1-6
1-6
1-6
3-7
3-7
2
k
1-12
1-6
1-6
3-7
1-6
1-6
1-6
R и R выбирают, каждый независимо, из водорода; С-алкила; С-алкилкарбонила; С-алкилсульфонила; арил-С-алкилкарбонила; С-циклоалкила; С-циклоалкилкарбонила; -(CH)-NRR; С-алкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, гидроксикарбонила, циано, С-алкилоксикарбонила, С-алкилокси, арила или гетероарила; или С-циклоалкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, С-алкилокси, арила, амино, арил-С-алкила, гетероарила или гетероарил-С-алкила; или
13
14
1-6
1-6
1-6
1-6
3-7
3-7
1-6
R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют морфолинил, пиперидинил, пирролидинил, пиперазинил или пиперазинил, замещенный заместителем, выбранным из С-алкила, арил-С-алкила, арил-С-алкилоксикарбонила, гетероарил-С-алкила, С-циклоалкила и С-циклоалкил-С-алкила; где
k равен 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6, и когда k равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
15
16
1-12
1-6
3-7
1-12
1-6
3-7
1-6
1-6
1-6
R и R выбирают, каждый независимо, из водорода; С-алкила; арил-С-алкилоксикарбонила; С-циклоалкила; С-алкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, С-алкилокси, арила и гетероарила; и С-циклоалкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, С-алкилокси, арила, арил-С-алкила, гетероарила и гетероарил-С-алкила; или
15
16
1-6
R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют морфолинил, пиперазинил или пиперазинил, замещенный С-алкилоксикарбонилом;
12
1-6
3-7
1-6
1-6
3-7
1-6
R представляет собой водород; С-алкил; С-циклоалкил; С-алкил, замещенный заместителем, выбранным из гидрокси, амино, С-алкилокси и арила; или С-циклоалкил, замещенный заместителем, выбранным из гидрокси, амино, арила и С-алкилокси;
арил представляет собой фенил или нафталинил;
1-6
1-6
1-6
каждый фенил или нафталинил может быть, необязательно, замещен одним, двумя или тремя заместителями, выбранными, каждый независимо, из галогена, гидрокси, С-алкила, амино, полигалоген-С-алкила и С-алкилокси; и
каждый фенил или нафталинил может быть, необязательно, замещен двухвалентным радикалом, выбранным из метилендиокси и этилендиокси;
гетероарил представляет собой пиридинил, индолил, хинолинил, имидазолил, фуранил, тиенил, оксадиазолил, тетразолил, бензофуранил или тетрагидрофуранил;
1-6
1-6
1-6
1-6
каждый пиридинил, индолил, хинолинил, имидазолил, фуранил, тиенил, оксадиазолил, тетразолил, бензофуранил или тетрагидрофуранил может быть, необязательно, замещен одним, двумя или тремя заместителями, выбранными, каждый независимо, из галогена, гидрокси, С-алкила, амино, полигалоген-С-алкила, арила, арил-С-алкила или С-алкилокси; или
каждый пиридинил, индолил, хинолинил, имидазолил, фуранил, тиенил, бензофуранил или тетрагидрофуранил может быть, необязательно, замещен двухвалентным радикалом, выбранным из метилендиокси и этилендиокси;
его N-оксидной форме, его солям присоединения или их сольватам.
Соединения формулы (I) также могут существовать в их таутомерных формах. Хотя такие формы и не указаны ясно в приведенной выше формуле, подразумевается, что они включены в объем настоящего изобретения.
Ряд терминов, используемых в приведенных выше определениях и далее в данном описании, поясняется ниже. Такие термины могут быть использованы как таковые или в сложных терминах.
1-6
1-12
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
2-6
3-7
3-7
Используемый в данном описании термин «галоген» является общим для фтора, хлора, брома и йода. «С-Алкил» обозначает линейные или разветвленные насыщенные углеводородные радикалы с 1-6 атомами углерода, такие как, например, метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил, 1-метилэтил, 2-метилпропил, 2-метилбутил, 2-метилпентил и т.п. «С-Алкил» включает С-алкил и его высшие линейные или разветвленные гомологи с 7-12 атомами углерода, такие как, например, гептил, октил, нонил, децил, ундецил, додецид и т.п. Термин «гидрокси-С-алкил» относится к С-алкилу, имеющему значения, указанные выше, где один или несколько (например, один, два, три или больше) атомов водорода указанного С-алкила заменены заместителем гидроксилом. Термины «полигалоген-С-алкил» и «полигалоген-С-алкилокси» относятся соответственно к С-алкилу или С-алкилокси, имеющим значения, указанные выше, где один, два или больше атомов водорода указанного С-алкила или С-алкилокси заменены одинаковыми или разными галогенозаместителями; соответствующие термины «полигалоген-С-алкил» и «полигалоген-С-алкилокси» также охватывают пергалоген-С-алкил и пергалоген-С-алкилокси, т.е. С-алкил или С-алкилокси, имеющие значения, указанные выше, где все атомы водорода указанного С-алкил или С-алкилокси заменены одинаковыми или разными галогенозаместителями, например, тригалогенметил определяет метил, содержащий три одинаковых или разных галогенозаместителя, такой как, например, трифторметил, или, например, тригалогенметилокси определяет метилокси, содержащий три одинаковых или разных галогенозаместителя, такой как, например, трифторметилокси. «С-Алкенил» определяет линейные или разветвленные углеводородные радикалы, содержащие одну или несколько двойных связей, предпочтительно одну двойную связь, и имеющие от 2 до 6 атомов углерода, такие как, например, этенил, 2-пропенил, 3-бутенил, 2-пентенил, 3-пентенил, 3-метил-2-бутенил и т.п. «С-Циклоалкил» включает алициклические насыщенные и ненасыщенные углеводородные группы с 3-7 атомами углерода, такие как циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклопентенил, циклогексил, циклогексенил, циклогептил и т.п. Предпочтительно С-циклоалкил включает алициклические насыщенные углеводородные группы с 3-7 атомами углерода, такие как циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и т.п.
Термин «соль присоединения» включает соли, которые соединения формулы (I) могут образовывать с органическими или неорганическими основаниями, такими как амины, основания щелочных металлов и основания щелочноземельных металлов или четвертичные аммониевые основания, или с органическими или неорганическими кислотами, такими как минеральные кислоты, сульфоновые кислоты, карбоновые кислоты или фосфорсодержащие кислоты.
Термин «соль присоединения» также включает фармацевтически приемлемые соли, комплексы металлов и их соли, которые могут образовывать соединения формулы (I).
Термин «фармацевтически приемлемые соли» обозначает фармацевтически приемлемые соли присоединения кислот или оснований. Фармацевтически приемлемые соли присоединения кислот или оснований, указанные в данном описании выше, включают терапевтически активные нетоксичные формы солей присоединения кислот и оснований, которые могут образовывать соединения формулы (I). Соединения формулы (I), имеющие основные свойства, можно превратить в их фармацевтически приемлемые соли присоединения кислот, обрабатывая указанную форму основания соответствующей кислотой. Соответствующие кислоты включают, например, неорганические кислоты, такие как галогенводородные кислоты, например хлористоводородная или бромистоводородная кислота, серная, азотная, фосфорная и подобные кислоты; или органические кислоты, такие как, например, уксусная, пропановая, оксиуксусная, молочная, пировиноградная, щавелевая, малоновая, янтарная (т.е. бутандиовая кислота), малеиновая, фумаровая, яблочная, винная, лимонная, метансульфоновая, этансульфоновая, бензолсульфоновая, п-толуолсульфоновая, цикламовая, салициловая, п-аминосалициловая, памовая и подобные кислоты.
Соединения формулы (I), имеющие кислотные свойства, можно превратить в их фармацевтически приемлемые соли присоединения оснований, обрабатывая указанную кислотную форму подходящим органическим или неорганическим основанием. Соответствующие солевые формы оснований включают, например, аммониевые соли, соли щелочных и щелочноземельных металлов, например литиевые, натриевые, калиевые, магниевые, кальциевые соли и т.п., соли с органическими основаниями, например соли бензатина, N-метил-D-глюкамина, гидрабамина, и соли с аминокислотами, такими как, например, аргинин, лизин и т.п.
Предпочтительно термин «соль присоединения» обозначает фармацевтически приемлемую соль присоединения кислоты или основания.
Термин «комплексы металлов» обозначает комплекс, образованный соединением формулы (I) и одной или несколькими органическими или неорганическими солями металлов. Примеры указанных органических или неорганических солей включают галогениды, нитраты, сульфаты, фосфаты, ацетаты, трифторацетаты, трихлорацетаты, пропионаты, тартраты, сульфонаты, например метилсульфонаты, 4-метилфенилсульфонаты, салицилаты, бензоаты и т.п. металлов второй главной группы Периодической системы элементов, например соли магния или кальция, третьей или четвертой главной группы, например алюминия, олова, свинца, а также с первой по восьмую переходных групп Периодической системы, таких как, например, хром, марганец, железо, кобальт, никель, медь, цинк и т.п.
Термин «стереохимически изомерные формы соединений формулы (I)», используемый в данном описании, определяет все возможные соединения, состоящие из одних и тех же атомов, связанных одной и той же последовательностью связей, но имеющие различные трехмерные структуры, которые не являются взаимозаменяемыми, которые могут образовывать соединения формулы (I). Если не упомянуто или не указано иное, химическое обозначение соединения охватывает смесь всех возможных стереохимически изомерных форм, которыми указанное соединение может обладать. Указанная смесь может содержать все диастереомеры и/или энантиомеры основной молекулярной структуры указанного соединения. Подразумевается, что все стереохимически изомерные формы соединений формулы (I) в чистой ли форме или в смеси друг с другом включены в объем настоящего изобретения.
Особый интерес представляют соединения формулы (I), которые являются стереохимически чистыми.
Чистые стереоизомерные формы соединений и промежуточных соединений, указанных в данном описании, определяются как изомеры, по существу, свободные от других энантиомерных или диастереомерных форм одной и той же основной молекулярной структуры указанных соединений или промежуточных соединений. В частности, термин «стереоизомерно чистые» касается соединений или промежуточных соединений, имеющих стереомерный избыток, по меньшей мере, 80% (т.е. минимум 90% одного изомера и максимум 10% других возможных изомеров) и до 100% (т.е. 100% одного изомера и никаких других), более предпочтительно соединений или промежуточных соединений, имеющих стереомерный избыток от 90% до 100%, даже более предпочтительно имеющих стереомерный избыток от 94% до 100% и наиболее предпочтительно имеющих стереомерный избыток от 97% до 100%. Термины «энантиомерно чистые» и «диастереомерно чистые» следует понимать подобным образом, но имеющие отношение к энантиомерному избытку и соответственно к диастереомерному избытку обсуждаемой смеси.
N-Оксидные формы соединения формулы (I) включают такие соединения формулы (I), в которых один или несколько третичных атомов азота окислены до так называемого N-оксида, в частности N-оксиды, в которых N-окисленными являются один или несколько атомов азота пиперидина, пиперазина или пиридазинила.
Соединения формулы (I) можно превратить в соответствующие N-оксидные формы, следуя известным в технике процедурам превращения трехвалентного азота в его N-оксидную форму. Указанную реакцию N-окисления, как правило, можно осуществить взаимодействием исходного вещества формулы (I) с соответствующим органическим или неорганическими пероксидом. Соответствующие неорганические пероксиды включают, например, пероксид водорода, пероксиды щелочных металлов или щелочноземельных металлов, например пероксид натрия, пероксид калия; соответствующие органические пероксиды могут включать, среди прочего, надкислоты, такие как, например, пербензойная кислота или галогензамещенная пербензойная кислота, например 3-хлорпербензойная кислота, пероксоалкановые кислоты, например пероксоуксусная кислота, алкилгидропероксиды, например третбутилгидропероксид. Подходящими растворителями являются, например, вода, низшие спирты, например этанол и т.п., углеводороды, например толуол, кетоны, например 2-бутанон, галогенированные углеводороды, например дихлорметан, и смеси таких растворителей.
Соединения формулы (I) могут образовывать сольваты, например, с водой (т.е. гидраты) или обычными органическими растворителями, например спиртами. Используемый в данном описании термин «сольват» обозначает физическую ассоциацию соединений формулы (I), а также их солей с одной или несколькими молекулами растворителя. Физическая ассоциация включает различные степени ионной и другой связи, в том числе водородной связи. В некоторых случаях сольват можно будет выделить, например, когда одна или несколько молекул растворителя внедрены в кристаллическую решетку кристаллического твердого вещества. Подразумевается, что термин «сольват» охватывает сольваты как в фазе раствора, так и нерастворимые сольваты. Неограничительные примеры подходящих сольватов включают гидраты, этанолаты, метанолаты и т.п.
Кроме того, соединения по настоящему изобретению могут быть аморфными или могут иметь одну или несколько кристаллических полиморфных форм, и подразумевается, что такие формы включены в объем изобретения.
13
14
Изобретение охватывает любые изотопы атомов, присутствующих в соединениях по изобретению. Например, изотопы водорода включают тритий и дейтерий, и изотопы углерода включают С и С.
Когда бы ни использовался в дальнейшем в данном описании термин «соединения формулы (I)», имеется в виду, что он также включает N-оксидные формы, соли присоединения кислот или оснований, в особенности фармацевтически приемлемые соли присоединения кислот или оснований, сольваты и все стереоизомерные формы указанных соединений формулы (I).
Первая группа соединений, представляющих интерес (далее называемая группой «G1»), состоит из таких соединений формулы (I), к которым применимо одно или несколько или все следующие ограничения:
8
а) Х представляет собой С(=О) или CHR, где
8
1-6
3-7
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
3-7
R выбирают из водорода; С-алкила; С-циклоалкила; аминокарбонила; моно- или ди(С-алкил)аминокарбонила; карбоксила; арил-С-алкилоксикарбонила; гетероарил-С-алкилоксикарбонила; С-алкилоксикарбонила; С-алкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, амино, арила и гетероарила; или С-циклоалкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, амино, арила и гетероарила;
1
1-12
1-12
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
3-7
3-7
1-6
b) R представляет собой водород; арил; гетероарил; С-алкил или С-алкил, замещенный одним или двумя заместителями, выбранными независимо из гидрокси, арила, гетероарила, амино, С-алкилокси, моно- или ди(С-алкил)амино, морфолинила, пиперидинила, пирролидинила, пиперазинила, С-алкилпиперазинила, арил-С-алкилпиперазинила, гетероарил-С-алкилпиперазинила, С-циклоалкилпиперазинила и С-циклоалкил-С-алкилпиперазинила;
3
1-6
3-7
1-6
3-7
с) R представляет собой водород; С-алкил; С-циклоалкил; С-алкил, замещенный заместителем, выбранным из гидрокси, амино, арила и гетероарила; или С-циклоалкил, замещенный заместителем, выбранным из гидрокси, амино, арила и гетероарила;
4
5
4
5
1-6
1-6
1-6
2-6
1-6
1-6
1-6
1-6
d) R и R представляют собой, каждый независимо, водород, галоген, С-алкил, гидрокси-С-алкил, полигалоген-С-алкил, гидрокси, амино, С-алкенил или С-алкилокси; в частности, R и R представляют собой, каждый независимо, водород, галоген, С-алкил, полигалоген-С-алкил, гидрокси, амино или С-алкилокси;
4
5
е) R и R вместе образуют двухвалентный радикал, выбранный из метилендиокси или этилендиокси;
6
1-6
f) R представляет собой водород или С-алкил;
7
1-6
1-6
g) когда р равен 1, тогда R представляет собой водород, арил-С-алкил или гетероарил-С-алкил;
h) Z представляет собой радикал, выбранный из (а-1), (а-2), (а-3), (а-4) и (а-5);
10
11
13
14
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
2
v
r
2
u
i) R или R выбирают, каждый независимо, из водорода; гидроксила; амино; С-алкила; нитро; полигалоген-С-алкила; циано; циано-С-алкила; тетразоло-С-алкила; арила; гетероарила; арил-С-алкила; гетероарил-С-алкила; арил(гидрокси)-С-алкила; гетероарил(гидрокси)-С-алкила; арилкарбонила; гетероарилкарбонила; арил-С-алкилкарбонила; гетероарил-С-алкилкарбонила; С-алкилокси; С-алкилокси-С-алкила; С-алкилоксикарбонила; С-алкилкарбонилокси; аминокарбонила; гидрокси-С-алкила; амино-С-алкила; гидроксикарбонила; гидроксикарбонил-С-алкила и -(CH)-(C(=O))-(CH)-NRR;
13
14
15
16
1-12
3-7
2
k
1-12
1-6
3-7
1-6
1-6
1-6
j) R и R выбирают, каждый независимо, из водорода; С-алкила; С-циклоалкила; -(CH)-NRR; С-алкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, С-алкилокси, арила или гетероарила; или С-циклоалкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, С-алкилокси, арила, арил-С-алкила, гетероарила и гетероарил-С-алкила;
13
14
1-6
1-6
1-6
3-7
3-7
1-6
k) R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют морфолинил, пиперидинил, пирролидинил, пиперазинил или пиперазинил, замещенный заместителем, выбранным из С-алкила, арил-С-алкила, гетероарил-С-алкила, С-циклоалкила и С-циклоалкил-С-алкила;
15
16
15
16
1-12
3-7
1-12
1-6
3-7
1-6
1-6
1-6
1-6
3-7
1-12
1-6
3-7
1-6
1-6
1-6
l) R и R выбирают, каждый независимо, из водорода; С-алкила; С-циклоалкила; С-алкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, С-алкилокси, арила и гетероарила; и С-циклоалкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, С-алкилокси, арила, арил-С-алкила, гетероарила и гетероарил-С-алкила; в частности, R и R выбирают, каждый независимо, из водорода; С-алкила; С-циклоалкила; С-алкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, С-алкилокси, арила и гетероарила; и С-циклоалкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, С-алкилокси, арила, арил-С-алкила, гетероарила и гетероарил-С-алкила;
1-6
1-6
1-6
m) гетероарил представляет собой пиридинил, индолил, хинолинил, имидазолил, фуранил, тиенил, бензофуранил или тетрагидрофуранил; и каждый пиридинил, индолил, хинолинил, имидазолил, фуранил, тиенил, бензофуранил или тетрагидрофуранил может быть, необязательно, замещен одним, двумя или тремя заместителями, выбранными, каждый независимо, из галогена, гидрокси, С-алкила, амино, полигалоген-С-алкила и С-алкилокси; и
n) каждый пиридинил, индолил, хинолинил, имидазолил, фуранил, тиенил, бензофуранил или тетрагидрофуранил может быть, необязательно, замещен двухвалентным радикалом, выбранным из метилендиокси или этилендиокси.
Вторая группа соединений, представляющих интерес (далее называемая группой «G2»), состоит из таких соединений формулы (I), к которым применимо одно или несколько или все следующие ограничения:
а) n равен 0, 1 или 2;
b) р равен 0;
8
8
с) Х представляет собой С(=О) или CHR, предпочтительно CHR, где
8
1-6
1-6
R представляет собой водород, аминокарбонил, арил-С-алкилоксикарбонил или С-алкил, замещенный гидрокси;
9
9
d)  представляет собой -CR=C< или -CHR-CH<;
1
1-12
1-12
е) R представляет собой водород, С-алкил или С-алкил, замещенный гетероарилом;
3
1-6
f) R представляет собой водород или С-алкил;
4
5
1-6
g) R и R представляют собой, каждый независимо, водород, галоген или С-алкилокси;
h) Z представляет собой радикал, выбранный из (а-1), (а-2), (а-3) и (а-4);
10
11
13
14
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
2
v
r
2
u
i) R или R выбирают, каждый независимо, из водорода, гидрокси, амино, С-алкила, нитро, полигалоген-С-алкила, циано, арила, арил-С-алкила, арил(гидрокси)-С-алкила, арилкарбонила, С-алкилокси, С-алкилокси-С-алкила, С-алкилоксикарбонила, аминокарбонила, гидрокси-С-алкила, амино-С-алкила, гидроксикарбонила и -(CH)-(C(=O))-(CH)-NRR;
j) v равен 0 или 1;
k) r равен 0 или 1;
l) u равен 0;
13
14
15
16
1-6
2
k
1-12
m) R и R выбирают, каждый независимо, из водорода, С-алкила, -(CH)-NRR и С-алкила, замещенного гидрокси;
13
14
n) R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, могут образовывать пирролидинил;
о) k равен 2;
15
16
1-6
р) R и R, каждый независимо, представляют собой С-алкил;
q) арил представляет собой фенил или фенил, замещенный галогеном; и
r) гетероарил представляет собой пиридинил или индолил.
Третья группа соединений, представляющих интерес (далее называемая группой «G3»), состоит из таких соединений формулы (I), к которым применимо одно или несколько или все следующие ограничения:
а) m равен 0 или 2;
b) n равен 0, 2 или 3;
с) р равен 1;
d) s равен 1;
e) t равен 1;
f) Х представляет собой С(=О);
9
9
g)  представляет собой -С(=О)-СН<, -C(=O)-N<, -CHR-CH< или -CHR-N<;
1
1-6
1-12
1-12
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
3-7
3-7
1-6
h) R представляет собой арил; гетероарил; С-алкилоксикарбонил; С-алкил или С-алкил, замещенный одним или двумя заместителями, выбранными независимо из гидрокси, арила, гетероарила, амино, С-алкилокси, моно- или ди(С-алкил)амино, морфолинила, пиперидинила, пирролидинила, пиперазинила, С-алкилпиперазинила, арил-С-алкилпиперазинила, гетероарил-С-алкилпиперазинила, С-циклоалкилпиперазинила и С-циклоалкил-С-алкилпиперазинила;
3
1-6
3-7
1-6
3-7
i) R представляет собой С-алкил; С-циклоалкил; С-алкил, замещенный заместителем, выбранным из гидрокси, амино, арила и гетероарила; или С-циклоалкил, замещенный заместителем, выбранным из гидрокси, амино, арила и гетероарила;
4
5
1-6
1-6
1-6
1-6
2-6
1-6
1-6
1-6
j) R и R представляют собой, каждый независимо, С-алкил, полигалоген-С-алкил, гидрокси-С-алкил, циано, циано-С-алкил, гидроксил, амино или С-алкенил; в частности С-алкил, полигалоген-С-алкил, циано, циано-С-алкил, гидрокси или амино;
4
5
k) R и R вместе образуют двухвалентный радикал, выбранный из метилендиокси или этилендиокси;
6
1-6
1-6
l) R представляет собой С-алкилоксикарбонил или С-алкил;
7
1-6
1-6
m) R представляет собой водород, арил-С-алкил, гидрокси или гетероарил-С-алкил; и
n) Z представляет собой радикал, выбранный из (а-1), (а-3), (а-4), (а-5), (а-6), (а-7) и (а-8).
Четвертая группа соединений, представляющих интерес (далее называемая группой «G4»), состоит из таких соединений формулы (I), к которым применимо одно или несколько или все следующие ограничения:
8
8
а) Х представляет собой С(=О) или CHR, предпочтительно CHR, где
8
17
18
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
R представляет собой водород, -C(=O)-NRR, арил-С-алкилоксикарбонил, С-алкил, замещенный гидрокси, пиперазинилкарбонил, замещенный гидрокси, гидрокси-С-алкил, гидрокси-С-алкилокси-С-алкил, пирролидинил, замещенный гидрокси-С-алкилом, или пиперидинилкарбонил, замещенный одним или двумя заместителями, выбранными из гидрокси, С-алкила, гидрокси-С-алкила, С-алкилокси-С-алкила, С-алкил(дигидрокси)-С-алкила или С-алкилокси(гидрокси)-С-алкила;
17
18
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
b) R и R выбирают, каждый независимо, из водорода, С-алкила, ди(С-алкил)амино-С-алкила, арил-С-алкила, С-алкилокси-С-алкила и гидрокси-С-алкила;
9
9
9
с)  представляет собой -CR=C<, -CHR-CH< или -CHR-N<;
1
1-6
1-12
1-12
d) R представляет собой водород, гетероарил, С-алкилоксикарбонил, С-алкил или С-алкил, замещенный гетероарилом;
3
1-6
е) R представляет собой водород, С-алкил или гетероарил;
4
5
1-6
1-6
1-6
2-6
1-6
1-6
1-6
1-6
f) R и R представляют собой, каждый независимо, водород, галоген, С-алкил, гидрокси-С-алкил, циано, циано-С-алкил, гидроксил, С-алкенил или С-алкилокси; в частности водород, галоген, С-алкил, циано, циано-С-алкил, гидрокси или С-алкилокси;
7
1-6
g) когда р равен 1, тогда R представляет собой арил-С-алкил или гидрокси;
h) Z представляет собой радикал, выбранный из (а-1), (а-2), (а-3), (а-4), (а-5), (а-7), (а-8) и (а-9);
10
11
19
13
14
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
3-7
3-7
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
2-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
2
v
r
u
i) R или R выбирают, каждый независимо, из водорода, галогена, гидрокси, амино, С-алкила, нитро, полигалоген-С-алкила, циано, циано-С-алкила, тетразоло-С-алкила, арила, гетероарила, гетероарил-С-алкила, арил(гидрокси)-С-алкила, арилкарбонила, С-алкилкарбонила, С-циклоалкилкарбонила, С-циклоалкил(гидрокси)-С-алкила, арил-С-алкилокси-С-алкила, С-алкилокси-С-алкилокси-С-алкила, С-алкилкарбонилокси-С-алкила, С-алкилоксикарбонил-С-алкилокси-С-алкила, гидрокси-С-алкилокси-С-алкила, С-алкилоксикарбонил-С-алкенила, С-алкилокси-С-алкила, С-алкилоксикарбонила, аминокарбонила, гидрокси-С-алкила, амино-С-алкила, гидроксикарбонила, гидроксикарбонил-С-алкила и -(CH)-(C(=O))-(CHR)-NRR;
j) v равен 0 или 1;
k) u равен 0 или 1;
12
1-6
l) R представляет собой водород или С-алкил;
13
14
15
16
1-12
1-6
1-6
1-6
3-7
2
k
1-12
1-6
m) R и R выбирают, каждый независимо, из водорода; С-алкила; С-алкилкарбонила; С-алкилсульфонила; арил-С-алкилкарбонила; С-циклоалкилкарбонила; -(CH)-NRR; С-алкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, гидроксикарбонила, циано, С-алкилоксикарбонила или арила;
13
14
1-6
1-6
n) R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют морфолинил, пирролидинил, пиперазинил или пиперазинил, замещенный заместителем, выбранным из С-алкила или арил-С-алкилоксикарбонила;
о) k равен 2;
15
16
1-12
1-6
1-6
1-6
р) R и R выбирают, каждый независимо, из водорода, С-алкила или арил-С-алкилоксикарбонила; в частности водорода, С-алкила или арил-С-алкилоксикарбонила;
15
16
1-6
q) R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют морфолинил, пиперазинил или пиперазинил, замещенный С-алкилоксикарбонилом;
r) арил представляет собой фенил или фенил, замещенный галогеном;
s) гетероарил представляет собой пиридинил, индолил, оксадиазолил или тетразолил; и
1-6
1-6
t) каждый пиридинил, индолил, оксадиазолил или тетразолил может быть, необязательно, замещен одним заместителем, выбранным из С-алкила, арила или арил-С-алкила.
Пятая группа соединений, представляющих интерес (далее называемая группой «G5»), состоит из таких соединений формулы (I), к которым применимо одно или несколько или все следующие ограничения:
а) m равен 0;
b) n равен 1 или 2;
с) р равен 0;
d) s равен 0;
e) t равен 0;
8
f) Х представляет собой CHR;
8
g) R представляет собой водород;
9
h)  представляет собой -CR=C<;
9
1-6
i) R представляет собой водород или С-алкил;
1
j) R представляет собой водород;
3
k) R представляет собой водород;
4
5
1-6
1-6
2-6
1-6
l) R и R представляют собой, каждый независимо, водород, С-алкил, гидрокси-С-алкил, С-алкенил или С-алкилокси;
6
m) R представляет собой водород;
n) Z представляет собой радикал, выбранный из (а-1), (а-2) и (а-4);
10
11
1-6
о) R и R выбирают, каждый независимо, из водорода, гидрокси или гидрокси-С-алкила;
2
20
21
22
21
22
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
р) R и R выбирают, каждый независимо, из галогена, циано, полигалоген-С-алкила, С-алкила, морфолинила, С-алкилокси, гидрокси-С-алкила, -NRR, где R представляет собой водород и R представляет собой С-алкилкарбонил; или
2
20
R и R вместе с фенильным циклом, к которому они присоединены, образуют нафталинильную группу, или
2
20
2
20
9
один из R или R имеет значения, указанные выше, а другой из R или R вместе с R образует прямую связь.
Шестая группа соединений, представляющих интерес (далее называемая группой «G6»), состоит из таких соединений формулы (I) или их любой подгруппы, в которых
8
8
8
17
18
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
Х представляет собой С(=О) или CHR, предпочтительно CHR, и R представляет собой водород; -C(=O)-NRR; арил-С-алкилоксикарбонил; С-алкил, замещенный гидроксилом; пиперазинлкарбонил, замещенный гидроксилом; гидрокси-С-алкил; гидрокси-С-алкилокси-С-алкил; пирролидинил, замещенный гидрокси-С-алкилом; или пиперидинилкарбонил, замещенный одним или двумя заместителями, выбранными из гидрокси, С-алкила, гидрокси-С-алкила, С-алкилокси-С-алкила, С-алкил(дигидрокси)-С-алкила или С-алкилокси(гидрокси)-С-алкила;
17
18
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
R и R выбирают, каждый независимо, из водорода, С-алкила, ди(С-алкил)амино-С-алкила, арил-С-алкила, С-алкилокси-С-алкила или гидрокси-С-алкила;
9
9
9
представляет собой -CR=C<, -CHR-CH< или -CHR-N<;
1
1-6
1-12
1-12
R представляет собой водород, гетероарил, С-алкилоксикарбонил, С-алкил или С-алкил, замещенный гетероарилом;
3
1-6
R представляет собой водород, С-алкил или гетероарил;
4
5
1-6
1-6
1-6
2-6
1-6
1-6
1-6
1-6
R и R представляют собой, каждый независимо, водород, галоген, С-алкил, гидрокси-С-алкил, циано, циано-С-алкил, гидроксил, С-алкенил или С-алкилокси; в частности водород, галоген, С-алкил, циано, циано-С-алкил, гидрокси или С-алкилокси;
7
1-6
когда р равен 1, тогда R представляет собой арил-С-алкил или гидрокси;
Z представляет собой радикал, выбранный из (а-1), (а-2), (а-3), (а-4), (а-5), (а-7), (а-8) и (а-9);
10
11
19
13
14
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
3-7
3-7
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
2-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
2
v
r
u
R или R выбирают, каждый независимо, из водорода; галогена; гидроксила; амино; С-алкила; нитро; полигалоген-С-алкила; циано; циано-С-алкила; тетразоло-С-алкила; арила; гетероарила; гетероарил-С-алкила; арил(гидрокси)-С-алкила; арилкарбонила; С-алкилкарбонила; С-циклоалкилкарбонила; С-циклоалкил(гидрокси)-С-алкила; арил-С-алкилокси-С-алкила; С-алкилокси-С-алкилокси-С-алкила; С-алкилкарбонилокси-С-алкила; С-алкилоксикарбонил-С-алкилокси-С-алкила; гидрокси-С-алкилокси-С-алкила; С-алкилоксикарбонил-С-алкенила; С-алкилокси-С-алкила; С-алкилоксикарбонила; аминокарбонила; гидрокси-С-алкила; амино-С-алкила; гидроксикарбонила; гидроксикарбонил-С-алкила и -(CH)-(C(=O))-(CHR)-NRR;
v равен 0 или 1;
u равен 0 или 1;
12
1-6
R представляет собой водород или С-алкил;
13
14
15
16
1-12
1-6
1-6
1-6
3-7
2
k
1-12
1-6
R и R выбирают, каждый независимо, из водорода; С-алкила; С-алкилкарбонила; С-алкилсульфонила; арил-С-алкилкарбонила; С-циклоалкилкарбонила; -(CH)-NRR; С-алкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, гидроксикарбонила, циано, С-алкилоксикарбонила или арила; или
13
14
1-6
1-6
R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют морфолинил, пирролидинил, пиперазинил или пиперазинил, замещенный заместителем, выбранным из С-алкила или арил-С-алкилоксикарбонила;
k равен 2;
15
16
1-12
1-6
1-6
1-6
R и R выбирают, каждый независимо, из водорода, С-алкила или арил-С-алкилоксикарбонила; в частности водорода, С-алкила или арил-С-алкилоксикарбонила; или
15
16
1-6
R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют морфолинил, пиперазинил или пиперазинил, замещенный С-алкилоксикарбонилом;
арил представляет собой фенил или фенил, замещенный галогеном; и
1-6
1-6
гетероарил представляет собой пиридинил, индолил, оксадиазолил или тетразолил; и каждый пиридинил, индолил, оксадиазолил или тетразолил может быть, необязательно, замещен одним заместителем, выбранным из С-алкила, арила или арил-С-алкила.
Седьмая группа более предпочтительных соединений (далее называемая группой «G7») состоит из таких соединений формулы (I), в которых
2
1-6
9
9
9
2
20
1
3
6
m равен 0; n равен 1 или 2, в частности 1; р равен 0; s равен 0; t равен 0; Х представляет собой СН;  представляет собой -CR=C<, и R представляет собой водород или С-алкил, предпочтительно водород или метил, более предпочтительно водород, или R вместе с одним из R или R образует прямую связь; R представляет собой водород; R представляет собой водород; и R представляет собой водород.
Восьмая группа более предпочтительных соединений (далее называемая группой «G8») состоит из таких соединений формулы (I) или соединений группы «G7», определение которой дается выше, в которых
4
5
1-6
1-6
1-6
1-6
2-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
R и R представляют собой, каждый независимо, водород, галоген, С-алкил, гидрокси-С-алкил, полигалоген-С-алкил, циано, циано-С-алкил, гидрокси, амино, С-алкенил или С-алкилокси; в частности водород, галоген, С-алкил, полигалоген-С-алкил, циано, циано-С-алкил, гидрокси, амино или С-алкилокси;
4
5
1-6
1-6
1-6
2-6
1-6
1-6
1-6
1-6
более предпочтительно R и R представляют собой, каждый независимо, водород, галоген, С-алкил, гидрокси-С-алкил, полигалоген-С-алкил, гидрокси, амино, С-алкенил или С-алкилокси; в частности водород, галоген, С-алкил, полигалоген-С-алкил, гидрокси, амино или С-алкилокси;
4
5
1-6
1-6
2-6
1-6
1-6
1-6
еще более предпочтительно R и R представляют собой, каждый независимо, водород, галоген, С-алкил, гидроксил-С-алкил, гидроксил, С-алкенил или С-алкилокси; в частности водород, галоген, С-алкил, гидрокси или С-алкилокси;
4
5
4
5
1-6
1-6
2-6
1-6
наиболее предпочтительно R и R представляют собой, каждый независимо, водород, С-алкил, гидрокси-С-алкил, С-алкенил или С-алкилокси (как, например, R и R могут представлять собой, каждый независимо, водород, метил или метилокси).
Девятая группа более предпочтительных соединений (далее называемая группой «G9») состоит из таких соединений формулы (I) или соединений любой из групп «G7» или «G8», определение которым дается выше, в которых
Z представляет собой радикал, выбранный из (а-1), (а-2), (а-3), (а-4) и (а-5);
или предпочтительно Z представляет собой радикал, выбранный из (а-1), (а-2) и (а-4).
Десятая группа более предпочтительных соединений (далее называемая группой «G10») состоит из таких соединений формулы (I) или соединений любой из групп «G7», «G8» или «G9», определение которым дается выше, в которых
10
11
19
13
14
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
3-7
3-7
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
2-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
2
v
r
u
R или R выбирают, каждый независимо, из водорода, галогена, гидрокси, амино, С-алкила, нитро, полигалоген-С-алкила, циано, циано-С-алкила, тетразоло-С-алкила, арила, гетероарила, гетероарил-С-алкила, арил(гидрокси)-С-алкила, арилкарбонила, С-алкилкарбонила, С-циклоалкилкарбонила, С-циклоалкил(гидрокси)-С-алкила, арил-С-алкилокси-С-алкила, С-алкилокси-С-алкилокси-С-алкила, С-алкилкарбонилокси-С-алкила, С-алкилоксикарбонил-С-алкилокси-С-алкила, гидрокси-С-алкилокси-С-алкила, С-алкилоксикарбонил-С-алкенила, С-алкилокси-С-алкила, С-алкилоксикарбонила, аминокарбонила, гидрокси-С-алкила, амино-С-алкила, гидроксикарбонила, гидроксикарбонил-С-алкила и -(CH)-(C(=O))-(CHR)-NRR;
v равен 0 или 1;
r равен 0 или 1;
u равен 0 или 1;
13
14
15
16
1-12
1-6
1-6
1-6
3-7
2
k
1-12
1-6
R и R выбирают, каждый независимо, из водорода; С-алкила; С-алкилкарбонила; С-алкилсульфонила; арил-С-алкилкарбонила; С-циклоалкилкарбонила; -(CH)-NRR; С-алкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, гидроксикарбонила, циано, С-алкилоксикарбонила или арила; или
13
14
1-6
1-6
R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют морфолинил, пирролидинил, пиперазинил или пиперазинил, замещенный заместителем, выбранным из С-алкила или арил-С-алкилоксикарбонила;
k равен 2;
15
16
1-12
1-6
1-6
1-6
R и R выбирают, каждый независимо, из водорода; С-алкила или арил-С-алкилоксикарбонила; в частности водорода, С-алкила или арил-С-алкилоксикарбонила; или
15
16
1-6
R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют морфолинил, пиперазинил или пиперазинил, замещенный С-алкилоксикарбонилом;
12
1-6
R представляет собой водород или С-алкил.
Одиннадцатая группа более предпочтительных соединений (далее называемая группой «G11») состоит из таких соединений группы «G10», определение которой дается выше, в которых
10
11
13
14
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
2
v
r
2
u
R или R выбирают, каждый независимо, из водорода, гидрокси, амино, С-алкила, нитро, полигалоген-С-алкила, циано, арила, арил-С-алкила, арил(гидрокси)-С-алкила, арилкарбонила, С-алкилокси, С-алкилокси-С-алкила, С-алкилоксикарбонила, аминокарбонила, гидрокси-С-алкила, амино-С-алкила, гидроксикарбонила и -(CH)-(C(=O))-(CH)-NRR;
v равен 0 или 1;
r равен 0 или 1;
u равен 0;
13
14
15
16
1-6
2
k
1-12
R и R выбирают, каждый независимо, из водорода, С-алкила, -(CH)-NRR и С-алкила, замещенного гидрокси; или
13
14
R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют пирролидинил;
k равен 2;
15
16
1-6
R и R представляют собой, каждый независимо, С-алкил;
12
1-6
R представляет собой водород или С-алкил, предпочтительно водород.
Двенадцатая группа более предпочтительных соединений (далее называемая группой «G12») состоит из таких соединений группы «G10», определение которой дается выше, в которых
10
11
12
10
11
12
1-6
1-6
R и R выбирают, каждый независимо, из водорода, гидрокси и гидрокси-С-алкила; и R представляет собой водород или С-алкил, предпочтительно водород (как, например, R и R могут быть выбраны, каждый независимо, из водорода, гидрокси и гидроксиметила; и R может представлять собой водород или метил, предпочтительно водород).
Тринадцатая группа более предпочтительных соединений (далее называемая группой «G13») состоит из таких соединений формулы (I) или соединений любой из групп «G7», «G8», «G9», «G10», «G11» или «G12», определение которым дается выше, в которых
арил представляет собой фенил или фенил, замещенный галогеном; и
1-6
1-6
гетероарил представляет собой пиридинил, индолил, оксадиазолил или тетразолил; и каждый пиридинил, индолил, оксадиазолил или тетразолил может быть, необязательно, замещен одним заместителем, выбранным из С-алкила, арила и арил-С-алкила.
Четырнадцатая группа более предпочтительных соединений (далее называемая группой «G14») состоит из таких соединений группы «G13», определение которой дается выше, в которых
арил представляет собой фенил или фенил, замещенный галогеном; и
гетероарил представляет собой пиридинил или индолил.
Пятнадцатая группа особенно предпочтительных соединений (далее называемая группой «G15») состоит из таких соединений формулы (I) или любой их подгруппы, в которых
2
1-6
1-6
1-6
2-6
1-6
1-6
1-6
1-6
9
9
9
2
20
1
3
4
5
6
10
11
m равен 0; n равен 1 или 2, в частности 1; р равен 0; s равен 0; t равен 0; Х представляет собой СН;  представляет собой -CR=C<, и R представляет собой водород или С-алкил, более предпочтительно водород, или R вместе с одним из R или R образует прямую связь; R представляет собой водород; R представляет собой водород; R и R представляют собой, каждый независимо, водород, С-алкил, гидрокси-С-алкил, С-алкенил или С-алкилокси; в частности водород, С-алкил или С-алкилокси; R представляет собой водород; Z представляет собой радикал, выбранный из (а-1), (а-2) и (а-4); и R или R представляет собой, каждый независимо, водород, гидрокси или гидрокси-С-алкил.
Шестнадцатая группа особенно предпочтительных соединений (далее называемая группой «G16») состоит из таких соединений формулы (I) или любой их подгруппы, в которых
2
9
9
9
2
20
1
3
4
5
6
10
11
m равен 0; n равен 1 или 2, в частности 1; р равен 0; s равен 0; t равен 0; Х представляет собой СН;  представляет собой -CR=C<, и R представляет собой водород или метил, или R вместе с одним из R или R образует прямую связь; R представляет собой водород; R представляет собой водород; R и R представляют собой, каждый независимо, водород, метил или метилокси; R представляет собой водород; Z представляет собой радикал, выбранный из (а-1), (а-2) и (а-4); и R или R представляет собой, каждый независимо, водород, гидрокси или гидроксиметил.
Семнадцатая группа особенно предпочтительных соединений (далее называемая группой «G17») состоит из таких соединений формулы (I) или, когда возможно, любой из их подгрупп, определение которым дается выше, в которых
9
9
9
9
9
2
20
9
9
9
9
9
2
20
9
9
9
2
20
1-6
1-6
1-6
представляет собой -CR=C<, и тогда пунктирная линия представляет собой связь, -С(=О)-СН<, -CHR-CH< или -CHR-N<, где каждый R представляет собой независимо водород или С-алкил или где R вместе с одним из R или R образует прямую связь; в частности,  представляет собой -CR=C<, и тогда пунктирная линия представляет собой связь, -CHR-CH< или -CHR-N<, где каждый R представляет собой независимо водород или С-алкил или где R вместе с одним из R или R образует прямую связь; в еще более частном случае  представляет собой -CR=C<, и тогда пунктирная линия представляет собой связь, где каждый R представляет собой независимо водород или С-алкил или где R вместе с одним из R или R образует прямую связь.
2
20
Предпочтительно в соединениях формулы (I), и в частности в соединениях любой из указанных выше групп «G1»-«G17», заместители в центральном фенильном цикле иные, чем R и R, могут находиться в пара(п-)-положении.
2
20
В воплощении, когда m равен 1, когда заместители в центральном фенильном цикле иные, чем R и R, находятся в метаположении, когда s равен 0, и t равен 0, тогда Z может представлять собой радикал, выбранный из (а-1), (а-3), (а-4), (а-5), (а-6), (а-7) или (а-8).
2
20
2
20
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
В предпочтительном воплощении в соединениях формулы (I), и в частности в соединениях любой из указанных выше групп «G1»-«G17» (повторение «любой из указанных выше групп «G1»-«G17», используемое в данном описании, охватывает конкретную ссылку на любую или каждую группу соединений «G1», «G2», «G3», «G4», «G5», «G6», «G7», «G8», «G9», «G10», «G11», «G12», «G13», «G14», «G15», «G16» или «G17», определение которым дается в данном описании), R и R выбирают, каждый независимо, из галогена, циано, амино, моно- или ди(С-алкил)амино, С-алкила, арила, гетероарила, арил-С-алкила, гетероарил-С-алкила, гидрокси-С-алкила, полигалоген-С-алкила, предпочтительно пергалоген-С-алкила, С-алкилокси, полигалоген-С-алкилокси, предпочтительно пергалоген-С-алкилокси, арил-С-алкилокси, гетероарил-С-алкилокси, С-алкилтио, арилтио, предпочтительно фенилтио, С-алкилкарбонила, гидрокси-С-алкилкарбонила, С-алкилоксикарбонила, С-алкилкарбонилокси, С-алкилкарбониламино, морфолинила, пиперидинила, пирролидинила и пиперазинила; или R и R вместе с центральным фенильным циклом образуют нафталинил.
2
20
2
20
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
В другом предпочтительном воплощении в соединениях формулы (I), и в частности в соединениях любой из указанных выше групп «G1»-«G17», R и R выбирают, каждый независимо, из С-алкила, арила, гетероарила, арил-С-алкила, гетероарил-С-алкила, гидрокси-С-алкила, полигалоген-С-алкила, полигалоген-С-алкилокси, С-алкилокси, арил-С-алкилокси, гетероарил-С-алкилокси, С-алкилтио, арилтио, предпочтительно фенилтио, С-алкилкарбонила, гидрокси-С-алкилкарбонила, С-алкилоксикарбонила, С-алкилкарбонилокси, С-алкилкарбониламино, морфолинила, пиперидинила, пирролидинила и пиперазинила, причем любая из указанных групп необязательно и независимо замещена одним или несколькими, предпочтительно одним или двумя, заместителями, выбранными из галогена, гидрокси, циано, амино, моно- или ди(С-алкил)амино, С-алкила, полигалоген-С-алкила, арила, гетероарила и С-алкилокси; или R и R вместе с центральным фенильным циклом образуют нафталинил.
2
20
2
20
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
В особенно предпочтительном воплощении в соединениях формулы (I), и в частности в соединениях любой из указанных выше групп «G1»-«G17», R и R выбирают, каждый независимо, из галогена, циано, С-алкила, гидрокси-С-алкила, полигалоген-С-алкила, предпочтительно пергалоген-С-алкила, С-алкилокси, С-алкилкарбониламино и морфолинила; или R и R вместе с центральным фенильным циклом образуют нафталинил.
2
20
2
20
1-6
1-6
1-6
1-6
В другом предпочтительном воплощении в соединениях формулы (I), и в частности в соединениях любой из указанных выше групп «G1»-«G17», R и R выбирают, каждый независимо, из галогена, С-алкила, полигалоген-С-алкила, предпочтительно пергалоген-С-алкила, и С-алкилокси, или R и R вместе с центральным фенильным циклом образуют нафталинил.
2
20
1-6
1-6
В другом предпочтительном воплощении в соединениях формулы (I), и в частности в соединениях любой из указанных выше групп «G1»-«G17», R и R выбирают, каждый независимо, из галогена, С-алкила и С-алкилокси.
2
20
2
20
1-6
1-6
1-6
В другом предпочтительном воплощении в соединениях формулы (I), и в частности в соединениях любой из указанных выше групп «G1»-«G17», R и R выбирают, каждый независимо, из галогена, С-алкила, С-алкилокси, гидрокси-С-алкила, или R и R вместе с центральным фенильным циклом образуют нафталинил.
2
20
2
20
В другом особенно предпочтительном воплощении в соединениях формулы (I), и в частности в соединениях любой из указанных выше групп «G1»-«G17», R и R выбирают, каждый независимо, из фтора, хлора, брома, циано, метила, гидроксиметила, тригалогенметила, предпочтительно трифторметила, метилокси, метилкарбониламино и морфолинила, или R и R вместе с центральным фенильным циклом образуют нафталинил.
2
20
2
20
В другом предпочтительном воплощении в соединениях формулы (I), и в частности в соединениях любой из указанных выше групп «G1»-«G17», R и R выбирают, каждый независимо, из фтора, хлора, метила, трифторметила и метилокси, или R и R вместе с центральным фенильным циклом образуют нафталинил.
2
20
В другом предпочтительном воплощении в соединениях формулы (I), и в частности в соединениях любой из указанных выше групп «G1»-«G17», R и R выбирают, каждый независимо, из фтора, хлора, метила и метилокси.
2
20
2
20
В другом предпочтительном воплощении в соединениях формулы (I), и в частности в соединениях любой из указанных выше групп «G1»-«G17», R и R выбирают, каждый независимо, из фтора, хлора, брома, метила, метилокси, гидроксиметила, или R и R вместе с центральным фенильным циклом образуют нафталинил.
2
20
21
22
21
22
2
20
2
20
2
20
9
2
20
2
20
2
20
2
20
9
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
3
В другом предпочтительном воплощении в соединениях формулы (I), и в частности в соединениях любой из указанных выше групп «G1»-«G17», R и R выбирают, каждый независимо, из галогена, циано, полигалоген-С-алкила, С-алкила, морфолинила, С-алкилокси, гидроксил-С-алкила, -NRR, где R представляет собой водород и R представляет собой С-алкилкарбонил; или R и R вместе с фенильным циклом, к которому они присоединены, образуют нафталинильную группу, или один из R или R имеет значения, указанные выше, а другой из R или R вместе с R образует прямую связь; в частности, R и R выбирают, каждый независимо, из хлора, фтора, брома, циано, трифторметила, метила, морфолинила, метилокси, гидроксиметила, -NH-C(=O)-CH; или R и R вместе с фенильным циклом, к которому они присоединены, образуют нафталинильную группу, или один из R или R имеет значения, указанные выше, а другой из R или R вместе с R образует прямую связь.
2
20
Некоторые предпочтительные и тем не менее неограничительные воплощения соединений формулы (I), в частности соединений любой из указанных выше групп «G1»-«G17», включают соединения, комбинации заместителей R и R в которых приводятся в таблице 1.
<b>Таблица 1</b>
Комбинация
R<sup>2</sup>
R<sup>20</sup>
1
С<sub>1-6</sub>-алкил
С<sub>1-6</sub>-алкил
2
метил
метил
3
пергалоген-С<sub>1-6</sub>-алкил
пергалоген-С<sub>1-6</sub>-алкил
4
трифторметил
трифторметил
5
галоген
С<sub>1-6</sub>-алкил
6
хлор
метил
7
галоген
галоген
8
фтор
фтор
9
хлор
хлор
10
галоген
С<sub>1-6</sub>-алкилокси
11
фтор
метилокси
12
галоген
С<sub>1-6</sub>-алкилкарбониламино
13
фтор
ацетиламино
14
галоген
гидрокси-С<sub>1-6</sub>-алкил
15
бром
гидроксиметил
16
циано
морфолинил
17
R<sup>2</sup> и R<sup>20</sup> вместе с центральным фенильным циклом образуют нафталинил
2
20
В одном воплощении особенно интересные комбинации R и R включают комбинации №№ 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 и 17, указанные в таблице 1, в особенности комбинации №№ 2, 4, 6, 8, 9, 11 и 17, указанные в таблице 1.
2
20
В другом воплощении особенно интересные комбинации R и R включают комбинации №№ 5, 6, 7, 8, 9, 10 и 11, указанные в таблице 1, в особенности комбинации №№ 10 и 11, указанные в таблице 1.
2
20
В другом воплощении особенно интересные комбинации R и R включают комбинации №№ 1, 2, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 14, 15 и 17, указанные в таблице 1, в особенности комбинации №№ 10 и 11, указанные в таблице 1.
Таким образом, примеры предпочтительных групп соединений состоят из таких соединений формулы (I) или любой их подгруппы, в которых
2
1-6
1-6
1-6
2-6
1-6
1-6
1-6
9
9
1
3
4
5
6
10
11
12
m равен 0; n равен 1 или 2; р равен 0; s равен 0; t равен 0; Х представляет собой СН;  представляет собой -CR=C<, и R представляет собой водород или С-алкил, более предпочтительно водород; R представляет собой водород; R представляет собой водород; R и R представляют собой, каждый независимо, водород, С-алкил, гидрокси-С-алкил, С-алкенил или С-алкилокси; R представляет собой водород; Z представляет собой радикал, выбранный из (а-1), (а-2) и (а-4); R или R представляет собой, каждый независимо, водород, гидрокси или гидрокси-С-алкил; R представляет собой водород или С-алкил, предпочтительно водород; и
2
20
2
20
2
20
2
20
9
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
R и R выбирают, каждый независимо, из галогена, циано, С-алкила, гидрокси-С-алкила, полигалоген-С-алкила, предпочтительно пергалоген-С-алкила, С-алкилокси, С-алкилкарбониламино и морфолинила; или R и R вместе с центральным фенильным циклом образуют нафталинил; или один из R или R имеет значения, указанные выше, а другой из R или R вместе с R образует прямую связь;
2
20
2
20
1-6
1-6
1-6
1-6
более предпочтительно R и R выбирают, каждый независимо, из галогена, С-алкила, полигалоген-С-алкила, предпочтительно пергалоген-С-алкила, и С-алкилокси, или R и R вместе с центральным фенильным циклом образуют нафталинил;
2
20
1-6
1-6
также более предпочтительно R и R можно выбрать, каждый независимо, из галогена, С-алкила и С-алкилокси;
2
20
2
20
1-6
1-6
1-6
а также более предпочтительно R и R можно выбрать, каждый независимо, из галогена, С-алкила, С-алкилокси, гидрокси-С-алкила, или R и R вместе с центральным фенильным циклом образуют нафталинил;
2
20
2
20
2
20
2
20
9
даже более предпочтительно R и R выбирают, каждый независимо, из фтора, хлора, брома, циано, метила, гидроксиметила, тригалогенметила, предпочтительно трифторметила, метилокси, метилкарбониламино и морфолинила; или R и R вместе с центральным фенильным циклом образуют нафталинил; или один из R или R имеет значения, указанные выше, а другой из R или R вместе с R образует прямую связь;
2
20
2
20
еще более предпочтительно R и R выбирают, каждый независимо, из фтора, хлора, метила, трифторметила и метилокси, или R и R вместе с центральным фенильным циклом образуют нафталинил;
2
20
также более предпочтительно R и R выбирают, каждый независимо, из фтора, хлора, метила и метилокси;
2
20
2
20
а также более предпочтительно R и R выбирают, каждый независимо, из фтора, хлора, брома, метила, метилокси, гидроксиметила, или R и R вместе с центральным фенильным циклом образуют нафталинил;
2
20
и также особенно предпочтительно R и R могут иметь значения, указанные в таблице 1.
Другое воплощение состоит из соединений формулы (I)
их N-оксидной формы, солей присоединения, сольватов или стереохимически изомерных форм, где
m равен 0, 1 или 2, и когда m равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
n равен 0, 1, 2 или 3, и когда n равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
р равен 0 или 1, и когда р равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
s равен 0 или 1, и когда s равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
t равен 0 или 1, и когда t равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
8
Х представляет собой С(=О) или CHR, где
8
17
18
1-6
3-7
1-6
1-6
1-6
1-6
3-7
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
R выбирают из водорода, С-алкила, С-циклоалкила, -C(=O)-NRR, карбоксила, арил-С-алкилоксикарбонила, гетероарила, гетероарилкарбонила, гетероарил-С-алкилоксикарбонила, пиперазинилкарбонила, пирролидинила, пиперидинилкарбонила, С-алкилоксикарбонила, С-алкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, амино, арила и гетероарила, С-циклоалкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, амино, арила и гетероарила, пиперазинилкарбонила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, гидрокси-С-алкила и гидрокси-С-алкилокси-С-алкила, пирролидинила, замещенного гидрокси-С-алкилом, и пиперидинилкарбонила, замещенного одним или двумя заместителями, выбранными из гидрокси, С-алкила, гидрокси-С-алкила, С-алкилокси-С-алкила, С-алкил(дигидрокси)-С-алкила и С-алкилокси(гидрокси)-С-алкила;
17
18
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
R и R выбирают, каждый независимо, из водорода, С-алкила, ди(С-алкил)амино-С-алкила, арил-С-алкила, С-алкилокси-С-алкила, гидрокси-С-алкила, гидрокси-С-алкил(С-алкила) или гидрокси-С-алкил(арил-С-алкила);
9
9
9
9
9
2
20
1-6
представляет собой -CR=C<, и тогда пунктирная линия представляет собой связь, -С(=О)-СН<, -C(=O)-N<, -CHR-CH< или -CHR-N<, где каждый R представляет собой независимо водород или С-алкил, или где R вместе с одним из R или R образует прямую связь;
1
1-6
1-12
1-12
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
3-7
3-7
1-6
R представляет собой водород, арил, гетероарил, С-алкилоксикарбонил, С-алкил или С-алкил, замещенный одним или двумя заместителями, выбранными независимо из гидрокси, арила, гетероарила, амино, С-алкилокси, моно- или ди(С-алкил)амино, морфолинила, пиперидинила, пирролидинила, пиперазинила, С-алкилпиперазинила, арил-С-алкилпиперазинила, гетероарил-С-алкилпиперазинила, С-циклоалкилпиперазинила и С-циклоалкил-С-алкилпиперазинила;
2
20
R и R выбирают, каждый независимо, из
галогена, гидрокси, циано, нитро, карбоксила;
1-6
1-6
1-6
1-6
полигалоген-С-алкила, пергалоген-С-алкила, полигалоген-С-алкилокси, пергалоген-С-алкилокси;
1-6
3-7
2-6
1-6
1-6
3-7
1-6
1-6
1-6
1-6
3-7
1-6
3-7
1-6
3-7
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
С-алкила, С-циклоалкила, С-алкенила, арила, гетероарила, арил-С-алкила, гетероарил-С-алкила, С-циклоалкил-С-алкила, морфолинила, пиперидинила, пирролидинила, пиперазинила, С-алкилокси, арилокси, гетероарилокси, С-алкилтио, арилтио, гетероарилтио, С-алкилкарбонила, С-циклоалкилкарбонила, арилкарбонила, гетероарилкарбонила, С-алкилоксикарбонила, С-циклоалкилоксикарбонила, арилоксикарбонила, гетероарилоксикарбонила, С-алкилкарбонилокси, С-циклоалкилкарбонилокси, арилкарбонилокси или гетероарилкарбонилокси, причем любая из указанных групп необязательно и независимо замещена одним или несколькими, предпочтительно одним или двумя, заместителями, выбранными из галогена, гидрокси, циано, нитро, карбоксила, амино, моно- или ди(С-алкил)амино, С-алкила, полигалоген-С-алкила, арила, гетероарила, С-алкилокси, С-алкилкарбонила, С-алкилоксикарбонила и С-алкилкарбонилокси; и
2
w
y
21
22
-(CH)-(C(=O))NRR, где
w равен 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6, и когда w равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
y равен 0 или 1, и когда y равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
21
22
1-6
3-7
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
R и R выбирают, каждый независимо, из водорода, С-алкила, С-циклоалкила, С-алкилкарбонила и арил-С-алкилкарбонила, причем любая из указанных групп необязательно и независимо замещена одним или несколькими, предпочтительно одним или двумя, заместителями, выбранными из галогена, гидрокси, амино, моно- или ди(С-алкил)амино, С-алкила, полигалоген-С-алкила, С-алкилокси, арила и гетероарила,
21
22
1-6
1-6
1-6
3-7
3-7
1-6
1-6
1-6
или R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют морфолинил, пиперидинил, пирролидинил или пиперазинил, причем любая из указанных групп необязательно и независимо замещена одним или несколькими, предпочтительно одним или двумя, заместителями, выбранными из С-алкила, полигалоген-С-алкила, С-алкилокси, С-циклоалкила, С-циклоалкил-С-алкила, арил-С-алкила и гетероарил-С-алкила;
2
20
1-6
1-6
1-6
1-6
или R и R вместе с фенильным циклом, к которому они присоединены, образуют нафталинильную группу, необязательно замещенную одним или несколькими, предпочтительно одним или двумя, заместителями, выбранными из галогена, гидрокси, амино, моно- или ди(С-алкил)амино, С-алкила, полигалоген-С-алкила, С-алкилокси, арила и гетероарила;
2
20
2
b
1-6
1-6
1-6
1-6
или R и R вместе образуют двухвалентный радикал формулы -(CH)-, где b равен 3, 4 или 5, необязательно замещенный одним или несколькими, предпочтительно одним или двумя, заместителями, выбранными из галогена, гидрокси, амино, моно- или ди(С-алкил)амино, С-алкила, полигалоген-С-алкила, С-алкилокси, арила и гетероарила;
2
20
2
20
9
или один из R или R имеет значения, указанные выше, а другой из R или R вместе с R образует прямую связь;
3
1-6
3-7
1-6
3-7
R представляет собой водород, С-алкил, гетероарил, С-циклоалкил, С-алкил, замещенный заместителем, выбранным из гидрокси, амино, арила и гетероарила, или С-циклоалкил, замещенный заместителем, выбранным из гидрокси, амино, арила и гетероарила;
4
5
1-6
1-6
1-6
1-6
R и R представляют собой, каждый независимо, водород, галоген, С-алкил, полигалоген-С-алкил, циано, циано-С-алкил, гидрокси, амино или С-алкилокси, или
4
5
R и R вместе образуют двухвалентный радикал, выбранный из метилендиокси или этилендиокси;
6
1-6
1-6
R представляет собой водород, С-алкилоксикарбонил или С-алкил;
7
1-6
1-6
когда р равен 1, тогда R представляет собой водород, арил-С-алкил, гидрокси или гетероарил-С-алкил;
Z представляет собой радикал, выбранный из
где
10
11
19
13
14
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
3-7
3-7
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
2-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
2
v
r
u
R или R выбирают, каждый независимо, из водорода, галогена, гидрокси, амино, С-алкила, нитро, полигалоген-С-алкила, циано, циано-С-алкила, тетразоло-С-алкила, арила, гетероарила, арил-С-алкила, гетероарил-С-алкила, арил(гидрокси)-С-алкила, гетероарил(гидрокси)-С-алкила, арилкарбонила, гетероарилкарбонила, С-алкилкарбонила, арил-С-алкилкарбонила, гетероарил-С-алкилкарбонила, С-алкилокси, С-циклоалкилкарбонила, С-циклоалкил(гидрокси)-С-алкила, арил-С-алкилокси-С-алкила, С-алкилокси-С-алкилокси-С-алкила, С-алкилкарбонилокси-С-алкила, С-алкилоксикарбонил-С-алкилокси-С-алкила, гидрокси-С-алкилокси-С-алкила, С-алкилоксикарбонил-С-алкенила, С-алкилокси-С-алкила, С-алкилоксикарбонила, С-алкилкарбонилокси, аминокарбонила, гидрокси-С-алкила, амино-С-алкила, гидроксикарбонила, гидроксикарбонил-С-алкила и -(CH)-(C(=O))-(CHR)-NRR, где
v равен 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6, и когда v равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
r равен 0 или 1, и когда r равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
u равен 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6, и когда u равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
19
1-6
R представляет собой водород или С-алкил;
13
14
15
16
1-12
1-6
1-6
1-6
3-7
3-7
2
k
1-12
1-6
1-6
3-7
1-6
1-6
1-6
R и R выбирают, каждый независимо, из водорода, С-алкила, С-алкилкарбонила, С-алкилсульфонила, арил-С-алкилкарбонила, С-циклоалкила, С-циклоалкилкарбонила, -(CH)-NRR, С-алкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, гидроксикарбонила, циано, С-алкилоксикарбонила, С-алкилокси, арила или гетероарила, или С-циклоалкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, С-алкилокси, арила, амино, арил-С-алкила, гетероарила или гетероарил-С-алкила, или
13
14
1-6
1-6
1-6
1-6
3-7
3-7
1-6
R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют морфолинил, пиперидинил, пирролидинил, пиперазинил или пиперазинил, замещенный заместителем, выбранным из С-алкила, арил-С-алкила, арил-С-алкилоксикарбонила, гетероарил-С-алкила, С-циклоалкила и С-циклоалкил-С-алкила; где
k равен 0, 1, 2, 3, 4, 5 или 6, и когда k равен 0, тогда подразумевается прямая связь;
15
16
1-6
1-6
3-7
1-12
1-6
3-7
1-6
1-6
1-6
R и R выбирают, каждый независимо, из водорода, С-алкила, арил-С-алкилоксикарбонила, С-циклоалкила, С-алкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, С-алкилокси, арила и гетероарила, и С-циклоалкила, замещенного заместителем, выбранным из гидрокси, С-алкилокси, арила, арил-С-алкила, гетероарила и гетероарил-С-алкила, или
15
16
1-6
R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют морфолинил, пиперазинил или пиперазинил, замещенный С-алкилоксикарбонилом;
12
1-6
3-7
1-6
1-6
3-7
1-6
R представляет собой водород, С-алкил, С-циклоалкил, С-алкил, замещенный заместителем, выбранным из гидрокси, амино, С-алкилокси и арила, или С-циклоалкил, замещенный заместителем, выбранным из гидрокси, амино, арила и С-алкилокси;
арил представляет собой фенил или нафталинил;
1-6
1-6
1-6
каждый фенил или нафталинил может быть, необязательно, замещен одним, двумя или тремя заместителями, выбранными, каждый независимо, из галогена, гидрокси, С-алкила, амино, полигалоген-С-алкила и С-алкилокси; и
каждый фенил или нафталинил может быть, необязательно, замещен двухвалентным радикалом, выбранным из метилендиокси и этилендиокси;
гетероарил представляет собой пиридинил, индолил, хинолинил, имидазолил, фуранил, тиенил, оксадиазолил, тетразолил, бензофуранил или тетрагидрофуранил;
1-6
1-6
1-6
1-6
каждый пиридинил, индолил, хинолинил, имидазолил, фуранил, тиенил, оксадиазолил, тетразолил, бензофуранил или тетрагидрофуранил может быть, необязательно, замещен одним, двумя или тремя заместителями, выбранными, каждый независимо, из галогена, гидрокси, С-алкила, амино, полигалоген-С-алкила, арила, арил-С-алкила или С-алкилокси; и
каждый пиридинил, индолил, хинолинил, имидазолил, фуранил, тиенил, бензофуранил или тетрагидрофуранил может быть, необязательно, замещен двухвалентным радикалом, выбранным из метилендиокси и этилендиокси.
1
2
20
21
22
21
22
2
20
2
20
2
20
9
3
4
5
6
9
9
10
11
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
2-6
1-6
2
1-6
Другое воплощение особенно предпочтительных соединений состоит из таких соединений формулы (I), в которых s равен 0; t равен 0; m равен 0; р равен 0; n равен 1 или 2; R представляет собой водород; R и R выбирают, каждый независимо, из галогена, циано, полигалоген-С-алкила, С-алкила, морфолинила, С-алкилокси, гидрокси-С-алкила, -NRR, где R представляет собой водород и R представляет собой С-алкилкарбонил; или R и R вместе с фенильным циклом, к которому они присоединены, образуют нафталинильную группу, или один из R или R имеет значения, указанные выше, а другой из R или R вместе с R образует прямую связь; R представляет собой водород; R и R представляют собой, каждый независимо, водород, С-алкил, С-алкилокси, гидрокси-С-алкил, С-алкенил; R представляет собой водород;  представляет собой -CR=C<, и тогда пунктирная линия представляет собой связь; R представляет собой водород или С-алкил; Х представляет собой СН; Z представляет собой радикал, выбранный из (а-1), (а-2) или (а-4); R и R выбирают, каждый независимо, из водорода, гидрокси или гидрокси-С-алкила.
2
20
Следует иметь в виду, что когда в соединениях формулы (I), и в частности в соединениях любой из указанных выше групп «G1»-«G17», R и R вместе с фенильным циклом, к которому они присоединены, образуют нафталинильную группу, необязательно замещенную так, как указано выше, тогда заместители
и
могут быть связаны с одним и тем же циклом или с различными циклами указанной нафталинильной группы.
2
20
В предпочтительном воплощении R и R вместе с фенильным циклом, к которому они присоединены, могут образовывать нафталинильную группу, которая может быть изображена формулами (II-a) и (II-b), более предпочтительно формулой (II-a):
где заместители имеют значения, указанные выше.
2
20
2
20
9
9
20
9
В другом воплощении в соединениях формулы (I), и в частности в соединениях любой из указанных выше групп «G1»-«G17», один из R или R имеет значения, указанные в данном описании ранее, а другой из R или R вместе с R образует прямую связь. Соединение как пример соединения формулы (I), в котором  представляет собой -CR=C< и в котором R вместе с R образует прямую связь, может быть изображено общей формулой (III):
где заместители имеют значения, указанные выше.
2
20
9
2
m
Предпочтительно когда один из R или R вместе с R образует прямую связь, указанная прямая связь может быть связью с атомом углерода центрального фенильного цикла, соседним (т.е. в о-положении) с атомом углерода центрального фенильного цикла, с которым связана группа -(CH)-.
2
20
Как можно представить, в соединениях формулы (I), и в частности в соединениях любой из указанных выше групп «G1»-«G17», заместители R и R могут находиться в орто(о-)-, мета(м-)- или пара(п-)-положениях относительно друг друга в центральном фенильном цикле.
2
20
2
b
Когда R и R вместе образуют двухвалентный радикал формулы -(CH)-, где b равен 3, 4 или 5, необязательно замещенный так, как указано выше, тогда связи указанного двухвалентного радикала предпочтительно присоединяются к центральному фенильному циклу в орто(о-)положении относительно друг друга.
2
20
2
20
Как можно представить, в соединениях формулы (I), и в частности в соединениях любой из указанных выше групп «G1»-«G17», четыре заместителя у центрального фенильного цикла могут находиться в различных положениях относительно друг друга. Например, и без ограничения, в соединениях, в которых заместители у центрального фенильного цикла иные, чем R и R, находятся в пара-положении, т.е. 1-, 4-, заместители R и R могут находиться в положениях 2- и 3-, или в положениях 2- и 5-, или в положениях 2- и 6- и т.д.
В таблице 2 приводится перечень предпочтительных, не являющихся ограничительными примерами соединений формулы (I), которые получены по настоящему изобретению. В таблице используются следующие аббревиатуры: .HCl обозначает соль хлористоводородной кислоты, т.пл. обозначает температуру плавления.
В одном воплощении особенно предпочтительными являются соединения №№ 2, 5, 6, 10, 12, 17, 25, 29, 30, 31, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48 и 49, даже более предпочтительными соединения №№ 5, 6, 10, 17, 29, 30, 31, 34, 35, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48 и 49 и еще более предпочтительными соединения №№ 5, 39, 41, 42, 43 и 47; такие соединения могут показывать особенно выраженные нужные биологические действия.
В другом воплощении особенно предпочтительными являются соединения №№ 7, 9, 17, 29, 30, 31, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47 и 49, даже более предпочтительно соединение № 42; такие соединения могут показывать особенно выраженные нужные биологические действия.
В другом воплощении особенно предпочтительными являются соединения №№ 2, 6, 8, 10, 11, 12, 13, 15, 17, 18, 19, 22, 29, 30, 31, 32, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 51, 52 и 53, даже более предпочтительными соединения №№ 38, 39, 42, 44, 45, 46 и 47; такие соединения могут показывать особенно выраженные нужные биологические действия.
В другом воплощении особенно предпочтительными являются следующие соединения:
<img file="00000027.tif" he="35" wi="64" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000028.tif" he="35" wi="68" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000029.tif" he="43" wi="68" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000030.tif" he="40" wi="73" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000031.tif" he="47" wi="60" img-content="undefined" img-format="tif" />
<img file="00000032.tif" he="55" wi="67" img-content="undefined" img-format="tif" />
в том числе их любые стереохимически изомерные формы;
их N-оксидные формы, их соли присоединения или сольваты.
В другом воплощении особенно предпочтительными являются соединения №№ 39, 41, 42, 47, 49 и 63.
Соединения формулы (I), их N-оксиды, фармацевтически приемлемые соли, сольваты и их стереохимически изомерные формы можно получить обычными способами. Исходные вещества и некоторые промежуточные соединения являются известными соединениями и коммерчески доступны, или их можно получить согласно обычным реакционным процедурам, как правило, известным в технике.
Ряд таких способов получения будет описан далее подробнее. Другие способы получения конечных соединений формулы (I) описаны в примерах.
Соединения формулы (I) можно получить взаимодействием промежуточного соединения формулы (IV) с промежуточным соединением формулы (V), в котором W представляет собой подходящую удаляемую группу, такую как, например, галоген, например фтор, хлор, бром или йод, или радикал сульфонилокси, такой как метилсульфонилокси, 4-метилфенилсульфонилокси и т.п. Взаимодействие можно осуществить в растворителе, инертном для реакции, таком как, например, спирт, например метанол, этанол, 2-метоксиэтанол, пропанол, бутанол и т.п.; простой эфир, например 1,4-диоксан, раствор хлористоводорода в 1,4-диоксане, 1,1'-оксибиспропан и т.п.; кетон, например 4-метил-2-пентанон; или N,N-диметилформамид, нитробензол, ацетонитрил, уксусная кислота и т.п., или их смеси. Добавление соответствующего основания, такого как, например, карбонат щелочного или щелочноземельного металла, или органического карбоната, или органического основания, например триэтиламина, или карбоната натрия, или N,N-диизопропилэтанамина, можно использовать для нейтрализации кислоты, которая высвобождается в ходе реакции. Небольшое количество соответствующего йодида металла, например йодида натрия или калия, можно добавлять для промотирования реакции. Перемешивание может повышать скорость реакции. Взаимодействие можно удобно осуществить при температуре, колеблющейся от комнатной температуры до температуры образования флегмы реакционной смеси, и, если желательно, реакцию можно осуществить при повышенном давлении.
2
3
Соединения формулы (I), в которых Х представляет собой СН, называемые в данном описании соединениями формулы (I-а), можно получить взаимодействием соединений формулы (I), в которых Х представляет собой С(=О), называемых в данном описании соединениями формулы (I-b), с алюмогидридом лития или ВН в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран.
Соединения формулы (I-а) также можно получить взаимодействием соответствующего карбоксальдегида формулы (VI) с промежуточным соединением формулы (VII) в присутствии соответствующего реагента, такого как боргидрид натрия, например тетрагидроборат натрия или цианотригидроборат, нанесенного на полимер, в подходящем растворителе, таком как спирт, например метанол.
Идентичным образом, соединения формулы (I), в которых t равен 1, называемых в данном описании соединениями формулы (I-с), можно получить взаимодействием промежуточного соединения формулы (IV) с соответствующим карбоксальдегидом формулы HC(=O)Z.
Соединения формулы (I), в которых s равен 1, называемые в данном описании соединениями формулы (I-d), можно получить взаимодействием промежуточного соединения формулы (VIII) с алюмогидридом лития в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран.
4
2
Соединения формулы (I), в которых R представляет собой -СН-ОН, называемые в данном описании соединениями формулы (I-е), можно получить взаимодействием промежуточного соединения формулы (XXIV) с алюмогидридом лития в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран.
Соединения формулы (III) можно получить конверсией промежуточного соединения формулы (XIX) в присутствии сильной кислоты, например HCl, в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран.
3
3
9
9
20
Соединения формулы (III), в которых s равен 0 и R представляет собой водород, называемые в данном описании соединениями формулы (III-а), можно получить взаимодействием промежуточных соединений формулы (IV), в которых s равен 0, R представляет собой водород,  представляет собой -CR=C< и R вместе с R образует прямую связь, называемых в данном описании промежуточными соединениями формулы (IV-с), с промежуточным соединением формулы (V), в котором W представляет собой подходящую удаляемую группу, имеющую значения, указанные выше, в растворителе, инертном для реакции, таком как, например, спирт, например метанол, этанол, 2-метоксиэтанол, пропанол, бутанол и т.п.; простой эфир, например 1,4-диоксан, 1,1'-оксибиспропан и т.п.; кетон, например 4-метил-2-пентанон; или N,N-диметилформамид, нитробензол, ацетонитрил, уксусная кислота и т.п. Добавление соответствующего основания, такого как, например, карбонат щелочного или щелочноземельного металла, или органический карбонат, или органическое основание, например триэтиламин или карбонат натрия, можно использовать для нейтрализации кислоты, которая высвобождается в ходе реакции.
6
Соединения формулы (III), в которых R представляет собой водород, называемые в данном описании соединениями формулы (III-b), также можно получить реакцией Фишера (синтез индолов), исходя из промежуточных соединений формулы (XXII) и (XXIII).
Соединения формулы (I) и их промежуточные соединения также можно превращать друг в друга посредством реакций, известных в технике, или преобразования функциональных групп. Ряд таких преобразований уже описан выше. Другими примерами являются гидролиз эфиров карбоновых кислот до соответствующих карбоновых кислот или спиртов; гидролиз амидов до соответствующих карбоновых кислот или аминов; гидролиз нитрилов до соответствующих амидов; аминогруппы у имидазола или фенила можно заменить на водород известными в технике реакциями диазотирования и последующей заменой диазогруппы на водород; спирты можно превратить в сложные эфиры и простые эфиры; первичные амины можно превратить во вторичные или третичные амины; двойные связи можно гидрировать до соответствующих простых связей; йод-радикал у фенильной группы можно превратить в сложноэфирную группу внедрением монооксида углерода в присутствии подходящего палладиевого катализатора; и т.д.
2
2
5
3
Промежуточные соединения формулы (IV), в которых Х представляет собой СН, m равен 0, s равен 0 и R представляет собой водород, называемые в данном описании промежуточными соединениями формулы (IV-а), можно получить реакцией восстановления нитрогруппы до амино, исходя из промежуточного соединения формулы (IX), в присутствии подходящего катализатора, такого как никель Ренея или палладий-на-угле, и соответствующего восстановителя, такого как водород, в подходящем растворителе, таком как метанол, этанол, толуол, тетрагидрофуран или их смеси. В случае соединений, содержащих группы, чувствительные к каталитическому гидрированию, можно использовать Pt/C, необязательно отравленный тиофеном. Можно использовать VO в качестве вспомогательного катализатора. Подходящими растворителями для такой реакции являются тетрагидрофуран или толуол.
3
Промежуточные соединения формулы (IV), в которых Х представляет собой С(=О), s равен 0 и R представляет собой водород, называемые в данном описании промежуточными соединениями формулы (IV-b), можно получить взаимодействием промежуточного соединения формулы (Х) с промежуточным соединением формулы (XI) в присутствии соответствующих реагентов сочетания, таких как моногидрохлорид N'-(этилкарбонимидоил)-N,N-диметил-1,3-пропандиамина (EDC) и 1-гидрокси-1Н-бензотриазол (НОВТ). Взаимодействие можно осуществить в присутствии основания, такого как триэтиламин, в подходящем растворителе, таком как смесь дихлорметана и тетрагидрофурана.
Промежуточные соединения формулы (VI) можно получить взаимодействием промежуточных соединений формулы (XII) с алюмогидридом лития в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран.
Промежуточные соединения формулы (VIII) можно получить взаимодействием промежуточного соединения формулы (XIII) с промежуточным соединением формулы (XIV) в присутствии йодида 2-хлор-1-метилпиридиния и триэтиламина в подходящем растворителе, таком как ацетонитрил.
1-6
3
Промежуточные соединения формулы (IX) можно получить взаимодействием промежуточного соединения формулы (XV) с промежуточным соединением формулы (XVI), в котором А представляет собой подходящую удаляемую группу, такую как, например, галоген, например фтор, хлор, бром или йод, или С-алкилокси, например метилокси, в подходящем растворителе, таком как диметилсульфоксид или толуол, предпочтительно в присутствии основания, такого как NaHCO или N,N-диизопропилэтанамин, необязательно, при повышенных температурах, например при примерно 60°С.
20
2
4
Промежуточные соединения формулы (XIII), в которых R представляет собой -СН-ОН, называемые в данном описании промежуточными соединениями формулы (XVI-а), можно получить восстановлением промежуточного соединения формулы (XXV) подходящим восстановителем, таким как NaBH, в подходящем растворителе, таком как спирт, например метанол.
Промежуточные соединения формулы (XIII) можно получить конверсией промежуточного соединения формулы (XVII) в присутствии гидроксида натрия и воды в подходящем растворителе, таком как этанол.
Промежуточные соединения формулы (XVII) можно получить взаимодействием промежуточного соединения формулы (XVIII), в котором А представляет собой подходящую удаляемую группу, имеющую значения, указанные выше, с промежуточным соединением формулы (XV) в подходящем растворителе, таком как диизопропилэтиламин.
1
Промежуточные соединения формулы (XV), в которых R представляет собой водород, называемые в данном описании промежуточными соединениями формулы (XV-а), можно получить реакцией промежуточного соединения формулы (XXVI) в присутствии подходящего катализатора, такого как никель Ренея, аммиака и подходящего растворителя, такого как спирт, например метанол.
Промежуточные соединения формулы (XXVI) можно получить взаимодействием промежуточного соединения формулы (XXVII), в котором С представляет собой подходящий противоион, такой как, например, йодид, с цианидом натрия в подходящем растворителе, таком как N,N-диметилформамид.
4
5
1-6
3
3
2
3
Промежуточные соединения формулы (XXVI), в которых R или R представляет собой гидрокси-С-алкил (например, -СН(СН)-ОН или -С(СН)-ОН), можно получить из соответствующего альдегида или кетона (например, -С(=О)Н или -С(=О)-СН) взаимодействием с метилмагнийхлоридом в подходящем растворителе, таком как тетрагидрофуран.
4
5
3
3
Промежуточные соединения формулы (XXVI), в которых R или R представляет собой -С(=О)-СН, можно получить из соответствующего соединения -СН(СН)-ОН взаимодействием с подходящим окислителем, таким как реагент Десса-Мартина.
Промежуточные соединения формулы (XXVII) можно получить из соответствующего вторичного амина взаимодействием с подходящим алкилирующим агентом, таким как метилйодид, в подходящем растворителе, таком как спирт, например этанол.
Промежуточные соединения формулы (IV-с) можно получить реакцией восстановления нитрогруппы до амино, исходя из промежуточного соединения формулы (ХХ), в присутствии металлического катализатора, такого как никель Ренея, и соответствующего восстановителя, такого как водород, в подходящем растворителе, таком как метанол или этанол.
2
Промежуточные соединения формулы (XX) можно получить из промежуточных соединений формулы (XXI), в которых D представляет собой соответствующую удаляемую галогеногруппу, такую как, например, бром или йод, реакцией Хека циклических соединений в присутствии основания, такого как, например, MgO, и палладийорганического катализатора, такого как, например, Pd(OAc), в подходящем инертном для реакции растворителе, таком как спирт, например метанол, ацетонитрил или ДМФА.
Промежуточные соединения формулы (XIX) или (XXIV) можно получить согласно взаимодействию, описанному выше для получения соединений формулы (I) из промежуточных соединений формулы (IV) и (V).
Некоторые соединения формулы (I) и некоторые промежуточные соединения могут иметь в своей структуре, по меньшей мере, один стереогенный центр. Любой такой стереогенный центр может присутствовать независимо в R- или S-конфигурации.
Некоторые соединения формулы (I) и некоторые промежуточные соединения по настоящему изобретению могут содержать асимметричный атом углерода. Такие соединения, как полученные процедурами, описанными выше в данном описании, могут, как правило, представлять собой рацемические смеси энантиомеров или диастереоизомеров, которые можно отделить друг от друга, следуя известным в технике процедурам расщепления. Например, диастереоизомеры можно разделить физическими методами, такими как селективная кристаллизация, или методами хроматографии, например противоточной хроматографией, жидкостной хроматографией и подобными методами. Энантиомеры можно получить из рацемических смесей, превращая сначала указанные рацемические смеси с помощью подходящих расщепляющих агентов, таких как, например, хиральные кислоты, в смеси диастереомерных солей или соединений, и затем разделяя указанные смеси диастереомерных солей или соединений, например, селективной кристаллизацией, сверхкритической флюидной хроматографией или методами хроматографии, например жидкостной хроматографией и подобными методами; и, наконец, превращая указанные разделенные диастереомерные соли или соединения в соответствующие энантиомеры. Стереохимически чистые изомерные формы также можно получить из стереохимически чистых изомерных форм соответствующих промежуточных соединений и исходных веществ, при условии, что происходящие реакции происходят стереоспецифически.
Соединения формулы (I), их фармацевтически приемлемые соли присоединения кислот или оснований, N-оксиды и стереоизомерные формы обладают ценными фармакологическими свойствами в том отношении, что они ингибируют взаимодействие между р53 и MDM2.
Термин «MDM2» (мышиный двойной мелкий 2 (Murine Double Minute 2)) используется в данном описании для обозначения белка, полученного в результате экспрессии гена mdm2. В рамках своего значения указанный термин «MDM2» охватывает все белки, кодируемые mdm2, их мутанты, их альтернативные слайс-белки и их фосфорилированные белки. Кроме того, используемый в данном описании термин «MDM2» включает аналоги MDM2, например MDMX, также известный как MDM4, и гомологи MDM2 и аналоги из других животных, например человеческий гомолог HDM2 или человеческий аналог HDMX.
Термины «ингибирование взаимодействия» или «ингибитор взаимодействия», используемые в данном описании, обозначают предупреждение или уменьшение прямой или косвенной ассоциации одной или нескольких молекул, пептидов, белков, ферментов или рецепторов; или предупреждение или ослабление нормальной активности одной или нескольких молекул, пептидов, белков, ферментов или рецепторов.
Термин «ингибитор взаимодействия р53 и MDM2» или «ингибитор р53-MDM2» используется в данном описании для описания агента, который повышает экспрессию р53 в анализе, описанном в С.1. Такое повышение может быть вызвано, но без ограничения, одним или несколькими из следующих механизмов действия:
- ингибирование взаимодействия между р53 и MDM2,
- прямая ассоциация или с MDM2 или с белком р53,
- взаимодействия с верхними или нижними мишенями, например киназами, или активностями ферментов, вовлеченных в убикитинирование или модификацию SUMO,
- секвестрация или перенос MDM2 и р53 в различные клеточные компартменты,
- модуляция белков, ассоциирующих с MDM2, например (но без ограничения) р63, р73, E2F-1, Rb, p21waf1 или cip1, HIF1-альфа, Foxo3A, p14ARF,
- отрицательная модуляция или вмешательство в экспрессию MDM2 и/или активность MDM2, например (но без ограничения) воздействие на его клеточную локализацию, посттрансляционную модификацию, ядерный экспорт, активность убикитинлигазы или вмешательство в связывание MDM2 с протеасомой, модуляцию взаимодействия MDM2-протеасома,
- прямая или косвенная стабилизация белка р53, например удерживание его в его функциональной структурной форме или путем предотвращения ошибочной укладки,
- усиление экспрессии р53 или экспрессии членов семейства р53, например р63 и р73,
- усиление активности р53, например (но без ограничения) усиление его транскрипционной активности, и/или
- усиление экспрессии генов и белков пути передачи сигналов р53, например (но без ограничения) p21waf1, cip1, MIC-1 (GDF-15), PIG-3, Bax, Puma, Noxa и АТФ-3.
Следовательно, настоящее изобретение раскрывает соединения формулы (I) для применения в качестве лекарственных средств, в частности, для лечения рака или родственных заболеваний, для ингибирования роста опухолей, для ингибирования взаимодействия между MDM2 и р53, для модуляции взаимодействия MDM2-протеасома.
Кроме того, изобретение также относится к применению соединения для получения лекарственного средства для лечения расстройства, опосредуемого взаимодействием р53-MDM2, где указанное соединение представляет собой соединение формулы (I).
Термин «лечение», используемый в данном описании, перекрывает любое лечение заболевания и/или состояния у животного, в частности человека, и включает: (i) предупреждение появления заболевания и/или состояния у субъекта, который может быть предрасположен к заболеванию и/или состоянию, но у которого оно пока не диагностировано как имеющееся; (ii) подавление заболевания и/или состояния, т.е. остановку его развития; (iii) ослабление заболевания и/или состояния, т.е. вызывание регрессии заболевания и/или состояния.
Термином «расстройство, опосредуемое взаимодействием р53-MDM2» обозначается любое нежелательное или вредное состояние, которое является результатом взаимодействия между белком MDM2 и р53 или другими клеточными белками, которые индуцируют апоптоз, индуцируют гибель клетки или регулируют клеточный цикл.
Данное изобретение также относится к способу лечения расстройства, опосредуемого взаимодействием р53-MDM2, посредством введения эффективного количества соединения по настоящему изобретению субъекту, например млекопитающему (и более предпочтительно человеку), нуждающемуся в таком лечении.
Соединения по изобретению могут обладать антипролиферативным действием в опухолевых клетках, даже если такие клетки лишены функционального р53. В более частном случае соединения по изобретению могут обладать антипролиферативным действием на опухоли с р53 дикого типа или мутантным р53 и/или на опухоли, сверхэкспрессирующие MDM2.
Таким образом, данное изобретение также относится к способу ингибирования роста опухолей посредством введения эффективного количества соединения по настоящему изобретению субъекту, например млекопитающему (и более предпочтительно человеку), нуждающемуся в таком лечении.
Примеры опухолей, включающие злокачественности у взрослых и детей, которые могут ингибировать соединения по настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются перечисленным, рак легких, в том числе мелкоклеточный рак легких и немелкоклеточный рак легких (например, аденокарциному), панкреатические онкозаболевания, онкозаболевания толстой кишки (например, колоректальные карциномы, такие как, например, аденокарцинома толстой кишки и аденома толстой кишки), рак пищевода, оральную плоскоклеточную карциному, карциному языка, карциному желудка, рак печени, рак носоглотки, опухоли кроветворной системы лимфатического происхождения (например, острый лимфоцитарный лейкоз, В-клеточную лимфому, лимфому Беркитта), неходжкинскую лимфому (например, лимфому клеток ткани, одевающей спорангий), болезнь Ходжкина, миелоидные лейкозы (например, острый миелоидный лейкоз (AML) или хронический миелоидный лейкоз (CML)), острый лимфобластный лейкоз, хронический лимфобластный лейкоз (CLL), фолликулярный рак щитовидной железы, миелодиспластический синдром (MDS), опухоли мезенхимного происхождения, саркомы мягких тканей, липосаркомы, желудочно-кишечные стромальные саркомы, злокачественные опухоли влагалищ периферических нервов (MPNST), саркомы Юинга, лейомиосаркомы, мезинхимные хондросаркомы, лимфосаркомы, фибросаркомы, рабдомиосаркомы, меланомы, тератокарциномы, нейробластомы, опухоли головного мозга, глиомы, доброкачественную опухоль кожи (например, кератоакантомы), карциному молочной железы (например, запущенный рак молочной железы), карциному почек, карциному яичников, цервикальную карциному, эндометриальную карциному, карциному мочевого пузыря, рак предстательной железы, в том числе запущенное заболевание и гормонорефрактерный рак предстательной железы, тестикулярные онкозаболевания, остеосаркомы, рак головы и шеи, эпидермальную карциному, множественную миелому (например, рефрактерную множественную миелому), мезотелиому. Особыми онкозаболеваниями, которые можно лечить соединениями по настоящему изобретению, являются рак молочной железы, колоректальный рак, немелкоклеточный рак легких, острый миелоидный лейкоз (AML).
Соединения по настоящему изобретению также можно использовать для лечения и предупреждения воспалительных состояний.
Таким образом, данное изобретение также относится к способу лечения и предупреждения воспалительных состояний посредством введения эффективного количества соединения по настоящему изобретению субъекту, например млекопитающему (и более предпочтительно человеку), нуждающемуся в таком лечении.
Соединения по настоящему изобретению также можно использовать для лечения аутоиммунных заболеваний и состояний. Термином «аутоиммунное заболевание» обозначается любое заболевание, при котором иммунная система животного реагирует враждебно на собственный антиген. Термином «собственный антиген» обозначается любой антиген, который обычно обнаруживается в организме животного. Характерные аутоиммунные заболевания включают, но не ограничиваются перечисленным, тиреоидит Хашимото, болезнь Грейвса, рассеянный склероз, пернициозную анемию, болезнь Аддисона, инсулинзависимый сахарный диабет, ревматоидный артрит, системную красную волчанку (SLE или волчанку), дерматомиозит, болезнь Крона, гранулематоз Вегенера, антигломерулярную болезнь базальной мембраны, антифосфолипидный синдром, герпетиформный дерматит 25, аллергический энцефаломиелит, гломерулонефрит, мембранозный гломерулонефрит, синдром Гудпасчера, миастенический синдром Лэмберта-Итона, тяжелую псевдопаралитическую миастению, буллезный пемфигоид, полиэндокринопатии, болезнь Рейтера и синдром негнущегося человека.
Таким образом, данное изобретение также относится к способу лечения аутоиммунных заболеваний и состояний посредством введения эффективного количества соединения по настоящему изобретению субъекту, например млекопитающему (и более предпочтительно человеку), нуждающемуся в таком лечении.
Соединения по настоящему изобретению также можно использовать для лечения заболеваний, ассоциированных с конформационно неустойчивыми или неправильно сложенными белками.
Примеры заболеваний, ассоциированных с конформационно неустойчивыми или неправильно сложенными белками, включают, но не ограничиваются перечисленным, муковисцидоз (CFTR), синдром Марфана (фибриллин), амиотрофический боковой склероз (супероксид дисмутаза), цингу (коллаген), болезнь кленового сиропа (комплекс альфа-кетокислота-дегидрогеназа), несовершенный остеогенез (проколлаген про-альфа типа I), болезнь Крейтцфельда-Якоба (прион), болезнь Альцгеймера (бета-амилоид), семейный амилоидоз (лизозим), катаракты (кристаллины), семейную гиперхолистеринемию (LDL-рецептор), дефицит l-антирипсина, болезнь Тея-Сакса (бета-гексозаминидаза), пигментный ретинит (родопсин) и лепречаунизм (инсулиновый рецептор).
Таким образом, данное изобретение также относится к способу лечения заболеваний, ассоциированных с конформационно неустойчивыми или неправильно сложенными белками, посредством введения эффективного количества соединения по настоящему изобретению субъекту, например млекопитающему (и более предпочтительно человеку), нуждающемуся в таком лечении.
С учетом их полезных фармацевтических свойств обсуждаемые соединения можно включить в состав различных фармацевтических форм для целей введения.
Для того чтобы получить композиции по данному изобретению, эффективное количество соединения по настоящему изобретению как активный ингредиент объединяют при тщательном перемешивании с фармацевтически приемлемым носителем, который может принимать самые различные формы в зависимости от формы препарата, нужного для введения. Указанные фармацевтические композиции находятся в соответствии с желанием в единичной дозированной форме, подходящей предпочтительно для введения перорально, ректально, чрескожно или парентеральной инъекцией. Например, при получении композиций в пероральной лекарственной форме можно использовать любые обычные фармацевтические среды, такие как, например, вода, гликоли, масла, спирты и т.п., в случае пероральных жидких препаратов, таких как суспензии, сиропы, эликсиры и растворы; или твердые носители, такие как крахмалы, сахара, каолин, смазывающие вещества, связующие вещества, вещества, способствующие рассыпанию, и т.п., в случае порошков, пилюль, капсул и таблеток.
Из-за легкости введения таблетки и капсулы представляют собой наиболее выгодные пероральные единичные дозированные формы, в которых используют, очевидно, твердые фармацевтические носители. Для парентеральных композиций носитель обычно будет включать стерильную воду, по меньшей мере, по большей части, хотя могут быть включены другие ингредиенты, например, способствующие растворимости. Например, можно получить растворы для инъекций, в которых носитель включает физиологический раствор, раствор глюкозы или смесь физиологического раствора и раствора глюкозы. Также можно получить суспензии для инъекций и в таком случае можно использовать соответствующие жидкие носители, суспендирующие агенты и подобные вещества. В композициях, подходящих для чрескожного введения, носитель, необязательно, включает агент, усиливающий пенетрацию, и/или подходящее смачивающее вещество, необязательно объединенные с подходящими добавками любого характера в меньших пропорциях, которые не оказывают существенного вредного воздействия на кожу. Указанные добавки могут облегчать введение в кожу и/или могут помогать при получении нужных композиций. Указанные композиции можно вводить различными путями, например в виде трансдермального пэтча, в виде капель, в виде мази.
Особенно выгодно получать вышеуказанные фармацевтические композиции в единичной дозированной форме для облегчения введения и равномерности дозировки. Используемый в данном описании и формуле изобретения термин «единичная дозированная форма» относится к физически дискретным единицам, подходящим в качестве однократных дозировок, причем каждая единица содержит предварительно установленное количество активного ингредиента, рассчитанное на получение нужного терапевтического действия, в ассоциации с требуемым фармацевтическим носителем. Примерами таких единичных дозированных форм являются таблетки (включая таблетки с насечками или покрытием), капсулы, пилюли, пакетики с порошками, пастилки, растворы или суспензии для инъекций, чайные ложки, столовые ложки и т.п. и их разделенные множества.
Соединение по изобретению вводят в количестве, эффективном для ингибирования взаимодействия между MDM2 и р53 или другим клеточным белком, который индуцирует апоптоз, индуцирует гибель клеток, регулирует клеточный цикл, регулирует миграцию, или инвазию, или метастаз опухолевых клеток, в частности в количестве, достаточном для модуляции взаимодействия MDM2-протеасома.
Онкогенный потенциал MDM2 определяется не только его способностью подавлять р53, но также его способностью регулировать другие белки супрессоры опухолей, например ретинобластомный белок pRb и тесноассоциированный фактор транскрипции E2F1, р63, р73.
Таким образом, соединение по настоящему изобретению вводят в количестве, эффективном для модуляции взаимодействия между MDM2 и факторами транскрипции E2F1.
Специалисты в данной области техники могут легко определить эффективное количество из результатов испытаний, представленных в данном описании далее. Как правило, предполагается, что терапевтически эффективное количество будет составлять от 0,005 мг/кг до 100 мг/кг массы тела, и в частности от 0,005 мг/кг до 10 мг/кг массы тела. Оно может соответствовать введению требуемой дозы в виде однократной дозы, двух, трех, четырех или более субдоз через соответствующие промежутки времени в течение суток. Указанные субдозы могут быть получены в виде единичных дозированных форм, например, содержащих 0,5-500 мг, в частности от 1 мг до 500 мг, характернее от 10 мг до 500 мг активного ингредиента на стандартную лекарственную форму.
В зависимости от способа введения фармацевтическая композиция будет предпочтительно включать от 0,05 до 99 масс.%, более предпочтительно от 0,1 до 70 масс.%, даже более предпочтительно от 0,1 до 50 масс.% соединения по настоящему изобретению и от 1 до 99,95 масс.%, более предпочтительно от 30 до 99,9 масс.%, даже более предпочтительно от 50 до 99,9 масс.% фармацевтически приемлемого носителя, причем все проценты приводятся относительно общей массы композиции.
В другом аспекте настоящее изобретение относится к сочетанию ингибитора р53-MDM2 с другим противораковым средством, главным образом, для применения в медицине, конкретнее, при лечении рака или родственных заболеваний.
Для лечения вышеуказанных состояний соединения по изобретению можно выгодно использовать в сочетании с одним или несколькими другими лекарственными средствами, характернее с другими противораковыми средствами или адъювантами в противораковой терапии. Примеры противораковых средств или адъювантов (поддерживающие средства в терапии) включают, но не ограничиваются перечисленным:
- координационные соединения платины, например цисплатин, необязательно, в сочетании с амифостином, карбоплатин или оксалиплатин;
- соединения таксана, например паклитаксел, частицы паклитаксела, связанные белком (абраксан™), или доцетаксел;
- ингибиторы топоизомеразы I, такие как соединения камптотецина, например иринотекан, SN-38, топотекан, гидрохлорид топотекана;
- ингибиторы топоизомеразы II, такие как противоопухолевые эпиподофиллотоксины или производные подофиллотоксина, например этопозид, фосфат этопозида или тенипозид;
- противоопухолевые винкаалкалоиды, например винбластин, винкристин или винорелбин;
- противоопухолевые производные нуклеозидов, например 5-фторурацил, лейковорин, гемцитабин, гидрохлорид гемцитабина, капецитабин, кладрибин, флударабин, неларабин;
- алкилирующие средства, такие как азотный аналог горчичного газа или нитрозомочевина, например циклофосфамид, хлорамбуцил, кармустин, тиотепа, мефалан (мелфалан), ломустин, альтретамин, бусульфан, дакарбазин, эстрамустин, ифосфамид, необязательно, в сочетании с месна, пипоброман, прокарбазин, стрептозоцин, телозоломид, урацил;
- противоопухолевые антрациклиновые производные, например даунорубицин, доксорубицин, необязательно, в сочетании с дексразоксаном, доксил, идарубицин, митоксантрон, эпирубицин, гидрохлорид эпирубицина, валрубицин;
- молекулы, которые имеют мишенью рецептор IGF-1, например пикроподофилин;
- производные тетракарцина, например тетракарцин А;
- глюкокортикоиды, например преднизон;
- антитела, например трастузумаб (антитела к HER2), ритуксимаб (антитела к CD20), гемтузумаб, озогамицин гемтузумаба, цетуксимаб, пертузумаб, бевацизумаб, алемтузумаб, экулизумаб, ибритумомаба тиуксетан, нофетумомаб, панитумумаб, тозитумомаб, CNTO 328;
- антагонисты эстрогеновых рецепторов, или селективные модуляторы эстрогеновых рецепторов, или ингибиторы синтеза эстрогенов, например тамоксифен, фулвестрант, торемифен, дролоксифен, фаслодекс, ралоксифен или летрозол;
- ингибиторы ароматазы, такие как эксеместан, анастрозол, летразол, тестолактон и ворозол;
- средства, способствующие дифференцировке, такие как ретиноиды, витамин D, или средства, блокирующие метаболизм ретиноевой кислоты (RAMBA), например аккутан;
- ингибиторы ДНК-метилтрансферазы, например азацитидин или децитабин;
- антифолаты, например premetrexed динатрий;
- антибиотики, например антиномицин D, блеомицин, митомицин С, дактиномицин, карминомицин, дауномицин, левамизол, пликамицин, митрамицин;
- антиметаболиты, например клофарабин, аминоптерин, цитозина арбинозид или метотрексат, азацитидин, цитарабин, флоксуридин, пентостатин, тиогуанин;
- средства, индуцирующие апоптоз, и антиангиогенные средства, такие как ингибиторы Bck-2, например YC 137, BH 312, ABT 737, госсипол, HA 14-1, TW 37 или декановая кислота;
- тубулинсвязывающие средства, например комбрестатин, колхицины или нокодазол;
- ингибиторы киназ (например, ингибиторы EGFR (эпителиальный рецептор фактора роста), MTKI (ингибиторы многоцелевых киназ), ингибиторы mTOP), например флавоперидол, мезилат иматиниба, эрлотиниб, гефитиниб, дазатиниб, лапатиниб, дитозилат лапатиниба, сорафениб, сунитиниб, малеат сунитиниба, темсиролимус;
- ингибиторы фарнезилтрансферазы, например типифарниб;
- ингибиторы гистондеацетилазы (HDAC), например бутират натрия, субероиланилидгидроксамидная кислота (SAHA), депсипептид (FR 901228), NVP-LAQ824, R306465, JNJ-26481585, трихостатин А, вориностат;
- ингибиторы пути убикитин-протеасома, например PS-341, MLN.41 или бортезомиб;
- ионделис;
- ингибиторы теломеразы, например теломестатин;
- ингибиторы металлопротеиназ матрикса, например батимастат, маримастат, приностат или метастат;
- рекомбинантные интерлейкины, например альдеслейкин, денилейкина дифтитокс, интерферон-альфа 2а, интерферон-альфа 2b, пегинтерферон-альфа 2b;
- ингибиторы МАРК;
- ретиноиды, например алитретиноин, бексаротен, третиноин;
- триоксид мышьяка;
- аспарагиназа;
- стероиды, например пропионат дромостанолона, ацетат мегестрола, нандролон (деканоат, фенпропионат), дексаметазон;
- агонисты или антагонисты гонадотропин-высвобождающего гормона, например абареликс, ацетат гозерелина, ацетат гистрелина, ацетат лейпролида;
- талидомид, леналидомид;
- меркаптопурин, митотан, памидронат, пегадемаза, пегаспаргаза, расбуриказа;
- миметики ВН3, например АВТ-737;
- ингибиторы МЕК, например PD98059, AZD6244, CI-1040;
- аналоги колониестимулирующего фактора, например филграстим, пегфилграстим, сарграмостим; эритропоэтин или его аналоги (например, дарбепоэтин-альфа); интерлейкин-11; опрелвекин; золедронат, золедроновая кислота; фентанил; бисфосфонат; палифермин.
Как указано выше, соединения по настоящему изобретению также имеют терапевтические применения при сенсибилизации опухолевых клеток для лучевой терапии и химиотерапии.
Следовательно, соединения по настоящему изобретению можно использовать в качестве «радиосенсибилизатора» и/или «химиосенсибилизатора» или можно давать в сочетании с любым «радиосенсибилизатором» и/или «химиосенсибилизатором».
Термин «радиосенсибилизатор», используемый в данном описании, определяется как молекула, предпочтительно молекула низкой молекулярной массы, вводимая животным в терапевтически эффективных количествах для повышения чувствительности клеток к ионизирующему излучению и/или промотирования лечения заболеваний, которые поддаются лечению ионизирующим излучением.
Термин «химиосенсибилизатор», используемый в данном описании, определяется как молекула, предпочтительно молекула низкой молекулярной массы, вводимая животным в терапевтически эффективных количествах для повышения чувствительности клеток к химиотерапии и/или промотирования лечения заболеваний, которые поддаются лечению химиотерапевтическими средствами.
В литературе предложено несколько механизмов типа действия радиосенсибилизаторов, в том числе: гипоксические клеточные радиосенсибилизаторы (например, соединения 2-нитроимидазола и диоксиды бензотриазина) имитируют кислород или, с другой стороны, ведут себя при гипоксии подобно биовосстановителям; негипоксические клеточные радиосенсибилизаторы (например, галогенированные пиримидины) могут являться аналогами оснований ДНК и преимущественно внедряться в молекулы ДНК и/или препятствовать нормальным механизмам восстановления ДНК; и предполагаются различные другие возможные механизмы действия радиосенсибилизаторов при лечении заболевания.
Во многих протоколах лечения рака в настоящее время используются радиосенсибилизаторы в сочетании с рентгеновским излучением. Примеры радиосенсибилизаторов, активируемых рентгеновским излучением, включают, но не ограничиваются перечисленным, следующие средства: метронидазол, мизонидазол, десметилмизонидазол, пимонидазол, этанидазол, ниморазол, митомицин С, RSU 1069, SR 4233, EO9, RB 6145, никотинамид, 5-бромдезоксиуридин (BUdR), 5-йоддезоксиуридин (IUdR), бромдезоксицитидин, фтордезоксиуридин (FudR), гидроксимочевину, цисплатин и терапевтически эффективные аналоги и производные указанных средств.
Фотодинамическая терапия (PDT) онкозаболеваний использует видимый свет в качестве излучающего активатора сенсибилизатора. Примеры фотодинамических радиосенсибилизаторов включают, но не ограничиваются перечисленным, следующие средства: производные гематопорфирина, фотофрин, производные бензопорфирина, этиопорфирин олова, феоборбид-а, бактериохлорофилл-а, нафталоцианины, фталоцианины, фталоцианин цинка и терапевтически эффективные аналоги и производные указанных средств.
Радиосенсибилизаторы можно вводить в сочетании с терапевтически эффективным количеством одного или нескольких других соединений, включая, но не ограничиваясь перечисленным, соединения, которые промотируют включение радиосенсибилизаторов в клетки-мишени; соединения, которые регулируют поток терапевтических средств, питательных веществ и/или кислорода к клеткам-мишеням; химиотерапевтические средства, которые действуют на опухоль с дополнительным облучением или без него; или другие терапевтически эффективные соединения для лечения рака или других заболеваний.
Химиосенсибилизаторы можно вводить в сочетании с терапевтически эффективным количеством одного или нескольких других соединений, включая, но не ограничиваясь перечисленным, соединения, которые промотируют включение химиосенсибилизаторов в клетки-мишени; соединения, которые регулируют поток терапевтических средств, питательных веществ и/или кислорода к клеткам-мишеням; химиотерапевтические средства, которые действуют на опухоль с дополнительным облучением или без него, или другие терапевтически эффективные соединения для лечения рака или другого заболевания. Найдено, что антагонисты кальция, например верапамил, применимы в сочетании с антинеопластическими средствами для установления чувствительности к химиотерапии в опухолевых клетках, устойчивых к признанным химиотерапевтическим средствам и для потенцирования эффективности таких соединений при злокачественностях, устойчивых к лекарственным средствам.
С учетом их полезных фармакологических свойств компоненты комбинаций по изобретению, т.е. одного или нескольких других лекарственных средств и ингибитора р53-MDM2 по настоящему изобретению, могут быть включены в различные фармацевтические формы для целей введения. Компоненты могут быть введены в отдельные фармацевтические композиции или в единую фармацевтическую композицию, содержащую все компоненты.
Следовательно, настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, включающей одно или несколько других лекарственных средств и ингибитор р53-MDM2 по настоящему изобретению вместе с фармацевтическим носителем.
Настоящее изобретение также относится к применению комбинации по изобретению при получении фармацевтической композиции для ингибирования роста опухолевых клеток.
Настоящее изобретение также относится к продукту, содержащему первый активный ингредиент - ингибитор р53-MDM2 по настоящему изобретению и, в качестве дополнительного активного ингредиента, одно или несколько противораковых средств, как комбинированному препарату для одновременного, раздельного или последовательного применения при лечении пациентов, страдающих от рака.
Одно или несколько других лекарственных средств и ингибитор р53-MDM2 по настоящему изобретению можно вводить одновременно (например, в отдельных или единой композиции) или последовательно в любом порядке. В последнем случае два или больше соединений будут вводиться с периодом и в количестве и способом, которые достаточны для уверенности в том, что достигается выгодное или синергичное действие. Следует иметь в виду, что предпочтительный способ и порядок введения и соответствующие дозировочные количества и режимы для каждого компонента комбинации будут зависеть от вводимых определенного другого средства и ингибитора р53-MDM2, их пути введения, конкретной опухоли, от которой лечат, и конкретного реципиента, которого лечат. Оптимальный путь и порядок введения и дозировочные количества и режимы могут быть легко определены специалистами в данной области техники с использованием обычных способов и с учетом информации, представленной в данном описании.
Массовое соотношение соединения по настоящему изобретению и одного или нескольких других противораковых средств в случае комбинации может быть определено специалистом в данной области техники. Указанное соотношение и точная дозировка и частота введения зависят от используемых определенного соединения по изобретению и другого(их) противоракового(ых) средства(средств), определенного состояния, от которого лечат, тяжести состояния, от которого лечат, возраста, массы, рода, питания, времени введения и общего физического состояния определенного пациента, способа введения, а также другой лекарственной терапии, которую может принимать пациент, что хорошо известно специалистам в данной области техники. Кроме того, очевидно, что эффективное ежесуточное количество может быть снижено или повышено в зависимости от реакции субъекта, которого лечат, и/или в зависимости от оценки врача, выписывающего соединения по настоящему изобретению. Определенное массовое соотношение соединения формулы (I) и другого противоракового средства может колебаться от 1/10 до 10/1, характернее от 1/5 до 5/1, даже характернее от 1/3 до 3/1.
2
2
2
2
Координационное соединение платины выгодно вводить в дозировке 1-500 мг на квадратный метр (мг/м) площади поверхности тела, например 50-400 мг/м, в частности в случае цисплатина в дозировке примерно 75 мг/м и карбоплатина примерно 300 мг/м на курс лечения.
2
2
2
2
Соединение таксана выгодно вводить в дозировке 50-400 мг на квадратный метр (мг/м) площади поверхности тела, например 75-200 мг/м, в частности в случае паклитаксела в дозировке примерно 175-250 мг/м и доцетаксела примерно 75-150 мг/м на курс лечения.
2
2
2
2
Соединение камптотецина выгодно вводить в дозировке 0,1-400 мг на квадратный метр (мг/м) площади поверхности тела, например 1-300 мг/м, в частности в случае иринотекана в дозировке примерно 100-350 мг/м и топотекана примерно 1-2 мг/м на курс лечения.
2
2
2
2
Противоопухолевое производное подофиллотоксина выгодно вводить в дозировке 30-300 мг на квадратный метр (мг/м) площади поверхности тела, например 50-250 мг/м, в частности в случае этопозида в дозировке примерно 35-100 мг/м и тенипозида примерно 50-250 мг/м на курс лечения.
2
2
2
2
Противоопухолевый винкаалкалоид выгодно вводить в дозировке 2-30 мг на квадратный метр (мг/м) площади поверхности тела, в частности в случае винбластина в дозировке примерно 3-12 мг/м, винкристина в дозировке примерно 1-2 мг/м и винорелбина в дозировке примерно 10-30 мг/м на курс лечения.
2
2
2
2
2
Противоопухолевое производное нуклеозида выгодно вводить в дозировке 200-2500 мг на квадратный метр (мг/м) площади поверхности тела, например 700-1500 мг/м, в частности в случае 5-FU в дозировке примерно 200-500 мг/м, в случае гемцитабина в дозировке примерно 800-1200 мг/м и в случае капецитабина примерно 1000-2500 мг/м на курс лечения.
2
2
2
2
2
2
Алкилирующее средство, такое как азотный аналог горчичного газа или нитрозомочевина, выгодно вводить в дозировке 100-500 мг на квадратный метр (мг/м) площади поверхности тела, например 120-200 мг/м, в частности в случае циклофосфамида в дозировке примерно 100-500 мг/м, в случае хлорамбуцила в дозировке примерно 0,1-0,2 мг/м, в случае кармустина в дозировке примерно 150-200 мг/м и в случае ломустина в дозировке примерно 100-150 мг/м на курс лечения.
2
2
2
2
2
Противоопухолевое производное антрациклина выгодно вводить в дозировке 10-75 мг на квадратный метр (мг/м) площади поверхности тела, например 15-60 мг/м, в частности в случае доксорубицина в дозировке примерно 40-75 мг/м, в случае даунорубицина в дозировке примерно 25-45 мг/м и в случае идарубицина в дозировке примерно 10-15 мг/м на курс лечения.
Антиэстрогенное средство выгодно вводить в дозировке 1-100 мг в сутки в зависимости от определенного средства и состояния, от которого лечат. Тамоксифен выгодно вводить перорально в дозировке 5-50 мг, предпочтительно 10-20 мг дважды в день, продолжая терапию в течение времени, достаточного для достижения и поддержания терапевтического эффекта. Торемифен выгодно вводить перорально в дозировке примерно 60 мг один раз в день, продолжая терапию в течение времени, достаточного для достижения и поддержания терапевтического эффекта. Анастрозол выгодно вводить перорально в дозировке примерно 1 мг один раз в день. Дролоксифен выгодно вводить перорально в дозировке примерно 20-100 мг один раз в день. Ралоксифен выгодно вводить перорально в дозировке примерно 60 мг один раз в день. Экземестан выгодно вводить перорально в дозировке примерно 25 мг один раз в день.
2
2
2
Антитела выгодно вводить в дозировке примерно 1-5 мг на квадратный метр (мг/м) площади поверхности тела или так, как известно в технике в случае отличия. Трастузумаб выгодно вводить в дозировке 1-5 мг на квадратный метр (мг/м) площади поверхности тела, в частности 2-4 мг/м на курс лечения.
Указанные дозировки можно вводить, например, однажды, дважды или чаще на курс лечения, который может повторяться, например, каждые 7, 14, 21 или 28 дней.
Соединения формулы (I), их фармацевтически приемлемые соли и стереоизомерные формы могут иметь ценные диагностические свойства в том отношении, что их можно использовать для детекции и идентификации взаимодействия р53-MDM2 в биологическом образце, включающих детекцию или измерение образования комплекса между меченым соединением, и/или р53, и/или MDM2, и/или другими молекулами, пептидами, белками, ферментами или рецепторами.
125
131
3
14
В способах детекции или идентификации можно использовать соединения, которые мечены агентами-метками, такими как радиоизотопы, ферменты, флуоресцентные вещества, люминесцентные вещества и т.д. Примеры радиоизотопов включают I, I, H и С. Ферменты обычно становятся поддающимися детекции за счет конъюгации соответствующего субстрата, который в свою очередь катализирует реакцию, поддающуюся обнаружению. Их примеры включают, например, бета-галактозидазу, бета-глюкозидазу, щелочную фосфатазу, пероксидазу и малатдегидрогеназу, предпочтительно пероксидазу хрена. Люминесцентные вещества включают, например, люминол, производные люминола, люциферин, экворин и люциферазу.
Биологические образцы можно определить как ткань организма или жидкости организма. Примерами жидкостей организма являются спинномозговая жидкость, кровь, плазма, сыворотка, моча, мокрота, слюна и т.п.
Приведенные далее примеры иллюстрируют настоящее изобретение.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
2
3
2
2
3
4
3
3
2
5
4
4
Дале в данном описании термин «DIPEA» обозначает N-этил-N-(1-метилэтил)-2-пропанамин, «KСО» обозначает карбонат калия, «CHCl» обозначает дихлорметан, «СНОН» обозначает метанол, «MgSO» обозначает сульфат магния, «NaHCO» обозначает мононатриевую соль угольной кислоты, «ДМСО» обозначает диметилсульфоксид, «т.пл.» обозначает температуру плавления, «CHCN» обозначает ацетонитрил, «EtOAc» обозначает этилацетат, «DIPE» обозначает диизопропиловый эфир, «ДМФА» обозначает N,N-диметилформамид, «ТГФ» обозначает тетрагидрофуран, «VO» обозначает оксид ванадия, «NaBH» обозначает тетрагидроборат(-1) натрия, «NaCl» обозначает хлорид натрия, «EtOH» обозначает этанол, «NHOH» обозначает гидроксид аммония. Колоночная хроматография на Sunfire обозначает ВЭЖХ с обращенной фазой с использованием колонок Sunfire™ с неподвижной фазой диоксида кремния, связанного с С-18, от Waters Corp. (Milford, Massachusetts).
А. Получение промежуточных соединений
Пример А1
а) Получение промежуточного соединения 1
2
3
2
2
3
4
Смесь 1,2,3-трифтор-5-нитробензола (0,0037 моль), 1Н-индол-3-этанамина (0,0037 моль) и DIPEA (0,0189 моль) перемешивают при 120°С в течение 18 часов, затем охлаждают до комнатной температуры, выливают в 10% водный раствор KСО и экстрагируют смесью CHCl/СНОН (немного). Органический слой отделяют, сушат (MgSO), фильтруют, растворитель выпаривают досуха и получают 1,3 г (>100%) промежуточного соединения 1.
b) Получение промежуточного соединения 2
2
2
4
Смесь промежуточного соединения 1 (0,0037 моль) и 10% Pd/C (0,13 г) в толуоле (50 мл) гидрируют при комнатной температуре в течение 3 суток при атмосферном давлении и затем фильтруют через целит. Фильтрат упаривают досуха. Остаток растворяют в CHCl. Органический слой отделяют, сушат (MgSO), фильтруют, растворитель выпаривают досуха и получают 1,2 г (>100%) промежуточного соединения 2.
Пример А2
а) Получение промежуточного соединения 3
3
2
Смесь 2-хлор-5-нитро-1,3-бис(трифторметил)бензола (0,002 моль), 1Н-индол-3-этанамина (0,0024 моль) и NaHCO (0,0026 моль) в ДМСО (4 мл) перемешивают при 100°С в течение 48 часов, затем охлаждают до комнатной температуры и выливают в НО. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, промывают диэталовым эфиром, сушат и получают 0,41 г (49%) промежуточного соединения 3 (т.пл. 152°С).
b) Получение промежуточного соединения 4
3
2
2
4
Смесь промежуточного соединения 3 (0,0008 моль) и никеля Ренея (0,36 г) в СНОН (10 мл) гидрируют при комнатной температуре в течение 18 часов при атмосферном давлении и затем фильтруют через целит. Фильтрат упаривают досуха. Остаток растворяют в CHCl. Органический слой отделяют, сушат (MgSO), фильтруют, растворитель выпаривают досуха и получают 0,32 г (96%) промежуточного соединения 4.
Пример А3
а) Получение промежуточного соединения 5а
3
4
3
Смесь 1,3-дихлор-2-фтор-5-нитробензола (0,0048 моль), 1Н-индол-3-этанамина (0,0048 моль) и NaHCO (0,0057 моль) в ДМСО (10 мл) перемешивают при 60°С в течение ночи и охлаждают до комнатной температуры. Добавляют смесь воды со льдом. Смесь экстрагируют EtOAc. Органический слой декантируют, сушат (MgSO), фильтруют и растворитель выпаривают досуха. Остаток кристаллизуют из CHCN/DIPE. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, сушат и получают 1,03 г (62%) промежуточного соединения 5а (т.пл. 98°С).
b) Получение промежуточного соединения 6а
2
5
Смесь промежуточного соединения 5а (0,0027 моль) и 5% Pt/C (0,1 г) в VO (0,01 г), 4% растворе тиофена в DIPE (0,1 мл) и ТГФ (20 мл) гидрируют при комнатной температуре в течение 18 часов при атмосферном давлении. Катализатор удаляют фильтрацией. Фильтрат упаривают досуха и получают 0,91 г (100%) промежуточного соединения 6а.
с) Получение промежуточного соединения 5b
3
3
Смесь 1,3-дихлор-2-фтор-5-нитробензола (0,0048 моль), 1Н-индол-2-метил-3-этанамина (0,004 моль) и NaHCO (0,0048 моль) в ДМСО (10 мл) перемешивают при 60°С в течение ночи и охлаждают до комнатной температуры. Добавляют смесь воды со льдом. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, промывают CHCN, сушат и получают 0,48 г (28%) промежуточного соединения 5b (т.пл. 147°С).
d) Получение промежуточного соединения 6b
2
5
Смесь промежуточного соединения 5b (0,0013 моль) и 5% Pt/C (0,05 г) в VO (0,005 г), 4% растворе тиофена в DIPE (0,05 мл) и ТГФ (10 мл) гидрируют при комнатной температуре в течение 18 часов при атмосферном давлении и затем фильтруют. Фильтрат упаривают досуха и получают 0,48 г (100%) промежуточного соединения 6b.
е) Получение промежуточного соединения 5с
3
3
Смесь 1,3-дихлор-2-фтор-5-нитробензола (0,0048 моль), 1Н-индол-6-метокси-3-этанамина (0,0048 моль) и NaHCO (0,0057 моль) в ДМСО (10 мл) перемешивают при 60°С в течение ночи и охлаждают до комнатной температуры. Добавляют смесь воды со льдом. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, промывают CHCN и сушат, растворитель выпаривают досуха и получают 1,2 г (66%) промежуточного соединения 5с (т.пл. 116°С).
f) Получение промежуточного соединения 6с
2
5
Смесь промежуточного соединения 5с (0,0031 моль) и 5% Pt/C (0,12 г) в VO (0,012 г), 4% растворе тиофена в DIPE (0,12 мл) и ТГФ (25 мл) гидрируют при комнатной температуре в течение 18 часов при атмосферном давлении и затем фильтруют через целит. Фильтрат упаривают досуха и получают 1,2 г (100%) промежуточного соединения 6с.
Пример А4
а) Получение промежуточного соединения 7а
3
3
Смесь 1-хлор-5-фтор-4-метил-2-нитробензола (0,0026 моль), 1Н-индол-3-этанамина (0,0026 моль) и NaHCO (0,0032 моль) в ДМСО (5 мл) перемешивают при 60°С в течение ночи и охлаждают до комнатной температуры. Добавляют смесь воды со льдом. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, промывают CHCN, сушат и получают 0,54 г (62%) промежуточного соединения 7а (т.пл. 146°С).
b) Получение промежуточного соединения 8а
2
5
Смесь промежуточного соединения 7а (0,0012 моль) и 5% Pt/C (0,049 г) в VO (0,005 г), 4% растворе тиофена в DIPE (0,049 мл) и ТГФ (10 мл) гидрируют при комнатной температуре в течение 18 часов при атмосферном давлении. Катализатор удаляют фильтрацией. Фильтрат упаривают досуха и получают 0,36 г (100%) промежуточного соединения 8а.
с) Получение промежуточного соединения 7b
3
3
Смесь 1-хлор-5-фтор-4-метил-2-нитробензола (0,0026 моль), 1Н-индол-7-метил-3-этанамина (0,0026 моль) и NaHCO (0,0032 моль) в ДМСО (5 мл) перемешивают при 60°С в течение ночи и охлаждают до комнатной температуры. Добавляют смесь воды со льдом. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, промывают CHCN, растворитель выпаривают досуха и получают 0,53 г (58%) промежуточного соединения 7b (т.пл. 171°С).
d) Получение промежуточного соединения 8b
2
5
Смесь промежуточного соединения 7b (0,0014 моль) и 5% Pt/C (0,05 г) в VO (0,005 г), 4% растворе тиофена в DIPE (0,05 мл) и ТГФ (15 мл) гидрируют при комнатной температуре в течение 18 часов при атмосферном давлении и затем фильтруют через целит. Фильтрат упаривают досуха и получают 0,49 г (100%) промежуточного соединения 8b.
Пример А5
а) Получение промежуточного соединения 9
3
4
2
2
4
К раствору 4-бром-5-фтор-2-нитробензальдегида (0,02 моль) в СНОН (50 мл) при 5°С добавляют по частям NaBH (0,024 моль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. Добавляют насыщенный водный раствор NaCl. Смесь экстрагируют CHCl. Органический слой отделяют, сушат (MgSO), фильтруют, растворитель выпаривают досуха и получают 5 г (100%) промежуточного соединения 9.
b) Получение промежуточного соединения 10
3
3
Смесь промежуточного соединения 9 (0,01 моль), 1Н-индол-3-этанамина (0,01 моль) и NaHCO (0,012 моль) в ДМСО (25 мл) перемешивают при 60°С в течение ночи и затем охлаждают до комнатной температуры. Добавляют смесь воды со льдом. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, промывают CHCN, сушат и получают 1,77 г (45%) промежуточного соединения 10.
с) Получение промежуточного соединения 11
2
5
Смесь промежуточного соединения 10 (0,0045 моль), 5% Pt/C (0,18 г) и VO (0,02 г) в 4% растворе тиофена (0,18 мл) и ТГФ (50 мл) гидрируют при комнатной температуре в течение 48 часов при атмосферном давлении и затем фильтруют через целит. Фильтрат упаривают досуха и получают 1,7 г (100%) промежуточного соединения 11.
Пример А6
а) Получение промежуточного соединения 12
2
2
3
2
3
4
2
2
Смесь 1-фтор-2-метил-4-нитробензола (0,0103 моль), 7-метил-1Н-индол-3-этанамина (0,0103 моль) и DIPEA (0,0515 моль) перемешивают при 120°С в течение 18 часов, затем охлаждают до комнатной температуры, разбавляют смесью CHCl/СНОН (немного) и промывают 10% водным раствором KСО. Органический слой отделяют, сушат (MgSO), фильтруют и растворитель выпаривают досуха. Остаток (4,1 г) очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюент CHCl/циклогексан, 70:30; 15-35 мкм). Чистые фракции собирают, растворитель выпаривают досуха и получают 1,45 г (45%) промежуточного соединения 12.
b) Получение промежуточного соединения 13
Смесь промежуточного соединения 12 (0,0045 моль) и 5% Pt/C (0,15 г) в толуоле (40 мл) гидрируют при комнатной температуре в течение 18 часов при давлении 3 бар и затем фильтруют. Фильтрат упаривают досуха и получают 1,25 г (100%) промежуточного соединения 13.
с) Получение промежуточного соединения 14
3
2
3
4
2
2
3
4
3
Раствор промежуточного соединения 13 (0,04 моль), (7S)-4-хлор-6,7-дигидро-5Н-циклопента[b]пиридин-7-ола (0,0044 моль) и 4 М HCl/диоксан (2 мл) в смеси CHCN/EtOH (150 мл) перемешивают при 65°С в течение уикенда. Добавляют 10% водный раствор KСО и EtOAc. Смесь экстрагируют. Органический слой отделяют, сушат (MgSO), фильтруют и растворитель выпаривают. Остаток (23 г) очищают колоночной хроматографией (элюент CHCl/СНОН/NHOH, 93/7/1). Чистые фракции собирают и растворитель выпаривают. Остаток (14,2 г, 85%) кристаллизуют из CHCN. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, сушат и получают 10,4 г (63%) промежуточного соединения 14.
Пример А7
а) Получение промежуточного соединения 15
3
2
Смесь 1-фтор-2,3-диметил-4-нитробензола (0,003 моль), 1Н-индол-3-этанамина (0,0036 моль) и NaHCO (0,0039 моль) в ДМСО (4 мл) перемешивают при 100°С в течение 3 суток и затем охлаждают до комнатной температуры. Добавляют НО. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, промывают EtOH, затем диэтиловым эфиром и сушат. Часть полученной фракции сушат при 60°С в течение 18 часов в вакууме и получают 0,052 г промежуточного соединения 15 (т.пл. 178°С).
b) Получение промежуточного соединения 16
3
4
Смесь промежуточного соединения 15 (0,0022 моль) и никеля Ренея (0,7 г) в смеси СНОН/ТГФ (90/10) (20 мл) гидрируют при комнатной температуре в течение 3 часов при атмосферном давлении и затем фильтруют через целит. Фильтрат упаривают досуха. Остаток растворяют в диэтиловом эфире. Органический слой отделяют, сушат (MgSO), фильтруют, растворитель выпаривают досуха и получают 0,64 г (100%) промежуточного соединения 16 (т.пл. 161°С).
Пример А8
а) Получение промежуточного соединения 17
3
3
Смесь 6-фтор-2-(4-морфолинил)-3-нитробензонитрила (0,002 моль), 1Н-индол-3-этанамина (0,002 моль) и NaHCO (0,0024 моль) в ДМСО (5 мл) перемешивают при 60°С в течение ночи и охлаждают до комнатной температуры. Добавляют смесь воды со льдом. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, промывают CHCN, сушат и получают 0,64 г (82%) промежуточного соединения 17 (т.пл. 205°С).
b) Получение промежуточного соединения 18
2
5
Смесь промежуточного соединения 17 (0,0015 моль) и 5% Pt/C (0,06 г) в VO (0,01 г), 4% растворе тиофена в DIPE (0,06 мл) и ТГФ (15 мл) гидрируют при комнатной температуре в течение 18 часов при атмосферном давлении. Катализатор удаляют фильтрацией. Фильтрат упаривают досуха и получают 0,61 г (100%) промежуточного соединения 18.
Пример А9
а) Получение промежуточного соединения 19
3
Смесь N-(4,5-дифтор-2-нитрофенил)ацетамида (0,0023 моль), 1Н-индол-3-этанамина (0,0023 моль) и NaHCO (0,0028 моль) в ДМСО (5 мл) перемешивают при 60°С в течение ночи и затем охлаждают до комнатной температуры. Добавляют смесь воды со льдом. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, сушат и получают 0,73 г (88%) промежуточного соединения 19 (т.пл. 166°С).
b) Получение промежуточного соединения 20
3
2
2
4
Смесь промежуточного соединения 19 (0,002 моль) и никеля Ренея (0,8 г) в СНОН (15 мл) гидрируют при комнатной температуре в течение 4 часов при атмосферном давлении и затем фильтруют через целит. Фильтрат упаривают досуха. Остаток растворяют в CHCl. Органический слой отделяют, сушат (MgSO), фильтруют, растворитель выпаривают досуха и получают 0,68 г (100%) промежуточного соединения 20.
Пример А10
а) Получение промежуточного соединения 21
3
3
Смесь 1,2-дифтор-3-метокси-4-нитробензола (0,0074 моль), 7-метокси-1Н-индол-3-этанамина (0,0074 моль) и NaHCO (0,0088 моль) в ДМСО (15 мл) перемешивают при 60°С в течение ночи и затем охлаждают до комнатной температуры. Добавляют смесь воды со льдом. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, промывают CHCN, сушат и получают 2,27 г (85%) промежуточного соединения 21 (т.пл. 164°С).
b) Получение промежуточного соединения 22
2
5
Смесь промежуточного соединения 21 (0,0058 моль), 5% Pt/C (0,21 г) и VO (0,021 г) в 4% растворе тиофена в DIPE (0,21 мл) и ТГФ (30 мл) гидрируют при комнатной температуре в течение 48 часов при атмосферном давлении и затем фильтруют через целит. Фильтрат упаривают досуха и получают 2,1 г (100%) промежуточного соединения 22.
Пример А11
Промежуточные соединения, которые включают другой(ие) заместитель(и) на 1Н-индол-3-ильном цикле, можно получить аналогично вышеописанным взаимодействиям с использованием иначе замещенного 1Н-индол-3-этанамина, например 2-метил-1Н-индол-3-этанамина, 7-метил-1Н-индол-3-этанамина, 6-метокси-1Н-индол-3-этанамина или 7-метокси-1Н-индол-3-этанамина.
Пример А12
а) Получение промежуточного соединения 23
2
2
Смесь 1-метокси-4-нитронафталина (0,0005 моль) и 1Н-индол-3-этанамина (0,0005 моль) в EtOH (3 мл) перемешивают при 100°С в течение 18 часов и затем упаривают досуха. Остаток (0,4 г) очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюент CHCl, 100). Чистые фракции собирают, растворитель выпаривают и получают 0,03 г (10%) промежуточного соединения 23 (т.пл. 211°С).
b) Получение промежуточного соединения 24
2
2
3
4
Смесь промежуточного соединения 23 (0,002 моль) и никеля Ренея (0,7 г) в EtOH (50 мл) гидрируют при комнатной температуре в течение 18 часов при давлении 3 бар и затем фильтруют. Фильтрат упаривают досуха. Остаток (0,6 г) очищают колоночной хроматографией на кромасиле (kromasil) (элюент CHCl/CHOH/NHOH, от 99/1/0,1 до 97/3/0,3; 5 мкм). Чистые фракции собирают, растворитель выпаривают и получают 0,32 г (53%) промежуточного соединения 24 (т.пл. 148°С).
Пример А13
а) Получение промежуточного соединения 25
К раствору метилового эфира 3-[(диметиламино)метил]-1Н-индол-7-карбоновой кислоты (0,0215 моль) в EtOH (50 мл) добавляют по каплям метилйодид (0,0215 моль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 24 часов. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают и промывают EtOH и получают 7,5 г промежуточного соединения 25.
Полученный продукт используют непосредственно на следующей реакционной стадии.
b) Получение промежуточного соединения 26
Смесь промежуточного соединения 25 (0,02 моль) и цианида натрия (0,026 моль) в ДМФА (75 мл) перемешивают при 100°С в течение 2 часов. Добавляют воду. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают и получают 2,2 г промежуточного соединения 26.
Полученный продукт используют непосредственно на следующей реакционной стадии.
с) Получение промежуточного соединения 27
К раствору промежуточного соединения 26 и аммиака (7 М, 25 мл) в атмосфере азота добавляют никель Ренея. Смесь гидрируют при давлении 3 бар при комнатной температуре в течение 5 часов. Сырую смесь фильтруют через целит, растворитель выпаривают и получают 2,2 г промежуточного соединения 27.
d) Получение промежуточного соединения 28
3
Смесь промежуточного соединения 27 (0,00504 моль), 2,3-дифтор-6-нитроанизола (0,00504 моль) и гидрокарбоната натрия (0,00605 моль) в ДМСО (110 мл) греют при 60°С в течение ночи. Смесь охлаждают до комнатной температуры, затем добавляют смесь воды со льдом, выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, промывают CHCN, сушат и получают 0,860 г промежуточного соединения 28.
е) Получение промежуточного соединения 29
3
2
2
2
4
Смесь промежуточного соединения 28 (0,0022 моль) и никеля Ренея (0,0147 моль) в СНОН (25 мл) гидрируют при комнатной температуре при атмосферном давлении Н в течение уикенда. Катализатор удаляют фильтрацией и фильтрат упаривают досуха. Остаток растворяют в CHCl, органический слой сушат над MgSO, фильтруют, упаривают досуха и получают 0,6 г промежуточного соединения 29.
Полученный продукт используют непосредственно на следующей реакционной стадии.
f) Получение промежуточного соединения 30
3
2
3
2
2
4
2
2
3
4
3
Получают смесь промежуточного соединения 29 (0,00168 моль), 4-хлор-6,7-дигидро-5Н-циклопента[b]пиридин-7-ола (0,00168 моль) и 4 М раствора хлористого водорода в диоксане (0,000336 моль) в растворе CHCN/EtOH (25 мл). Смесь перемешивают при 65°С в течение ночи. Добавляют 10% водный раствор KСО, органический слой экстрагируют CHCl, сушат (MgSO), фильтруют и выпаривают растворитель. Остаток (0,9 г) очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюент CHCl/CHOH/NHOH, градиент, 97/3/0,5; 90 г, 15-40 мкм). Чистые фракции собирают и растворитель выпаривают. Остаток кристаллизуют из CHOH и получают 0,160 г промежуточного соединения 30.
Пример А14
а) Получение промежуточного соединения 31
3-[{Диметиламино)метил]-1Н-индол-7-карбоксальдегид (0,13 моль) и йодметан (0,14 моль) в EtOH (300 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 2 суток. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, сушат и получают 47 г промежуточного соединения 31.
b) Получение промежуточного соединения 32
4
Промежуточное соединение 31 (136,5 ммоль) и цианид натрия (177,5 ммоль) в ДМФА (400 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 2 часов. Добавляют воду и реакционную смесь экстрагируют EtOAc. Органический слой отделяют, сушат над MgSO, фильтруют и упаривают. Остаток очищают высокоэффективной жидкостной хроматографией (неоднородный SiOH 20-45 мкм, 1000 г MATREX/подвижная фаза: 70% циклогексана, 30% EtOAc). Чистые фракции собирают, растворитель выпаривают и получают 11,8 г промежуточного соединения 32.
с) Получение промежуточного соединения 33
4
4
К раствору промежуточного соединения 32 (0,022 моль) в ТГФ (50 мл) добавляют по каплям метилмагнийхлорид (0,07 моль). Добавляют 10% водный раствор NHCl и EtOAc. Реакционную смесь экстрагируют и органический слой отделяют, сушат над MgSO, фильтруют и упаривают. Остаток (2,9 г) очищают высокоэффективной жидкостной хроматографией (неоднородный SiOH 20-45 мкм, 450 г MATREX/подвижная фаза: 60% циклогексана, 40% EtOAc). Чистые фракции собирают, растворитель выпаривают и получают 2 г промежуточного соединения 33.
d) Получение промежуточного соединения 34
2
2
2
2
4
К раствору промежуточного соединения 33 (10 ммоль) в CHCl (20 мл) при комнатной температуре добавляют по каплям перйодинан Десса-Мартина (24,9 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа, затем выливают в смесь воды со льдом, фильтруют через целит и фильтрат экстрагируют CHCl. Органический слой отделяют, сушат над MgSO, фильтруют и выпаривают растворитель. Остаток (2,8 г) очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюент циклогексан/EtOAc, 60/40). Чистые фракции собирают, растворитель выпаривают и получают 0,8 г промежуточного соединения 34.
е) Получение промежуточного соединения 35
2
4
4
К раствору промежуточного соединения 34 (4 ммоль) в ТГФ (15 мл) при 5°С в атмосфере N добавляют по каплям метилмагнийхлорид (12,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 минут. При 5°С осторожно добавляют 10% водный раствор NHCl. Добавляют EtOAc и реакционную смесь экстрагируют. Органический слой отделяют, сушат над MgSO, фильтруют и упаривают. Остаток (1,3 г) очищают колоночной хроматографией (элюент циклогексан/EtOAc, 70/30). Чистые фракции собирают, растворитель выпаривают и получают 0,8 г промежуточного соединения 35.
f) Получение промежуточного соединения 36
3
3
2
2
Смесь промежуточного соединения 35 (2,8 ммоль) и никеля Ренея (0,6 г) в растворе СНОН/NH (10 мл) гидрируют при давлении 3 бар при комнатной температуре в течение 2 часов. Остаток фильтруют через целит, промывают CHCl, растворитель выпаривают и получают 0,7 г промежуточного соединения 36.
g) Получение промежуточного соединения 37
2
2
4
Смесь промежуточного соединения 36 (1,60 ммоль), 2,3-дифтор-6-нитроанизола (1,76 ммоль) и натриевой соли угольной кислоты (1,92 ммоль) в ДМСО (5 мл) греют при 60°С в течение ночи. Смесь охлаждают до комнатной температуры. Добавляют смесь воды со льдом. Добавляют CHCl. Реакционную смесь экстрагируют и органический слой отделяют, сушат над MgSO, фильтруют и концентрируют. Остаток (0,8 г) очищают высокоэффективной жидкостной хроматографией (неоднородный SiOH 15-40 мкм, 300 г MERCK/подвижная фаза: 70% циклогексана, 30% EtOAc). Чистые фракции собирают, растворитель выпаривают и получают 450 мг промежуточного соединения 37.
h) Получение промежуточного соединения 38
2
5
2
2
Промежуточное соединение 37 (1,03 ммоль), 5% Pt/C (0,1 г), VO (5 мл) и 4% раствор тиофена в DIPE (30 мкл) в ТГФ (20 мл) гидрируют при атмосферном давлении в течение 1 ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтруют через целит, промывают CHCl, фильтрат упаривают и получают 0,33 г промежуточного соединения 38.
В. Получение конечных соединений
Пример В1
Получение соединения 11
3
2
3
2
2
3
4
2
2
3
4
3
Смесь промежуточного соединения 2 (0,0012 моль), гидрохлорида 4-бромпиридина (1:1) (0,0012 моль) и DIPEA (0,001 моль) в CHCN (10 мл) перемешивают при 65°С в течение 18 часов, затем охлаждают до комнатной температуры, выливают в 10% водный раствор KСО и экстрагируют смесью CHCl/СНОН (немного). Органический слой отделяют, сушат (MgSO), фильтруют и растворитель выпаривают досуха. Остаток (0,47 г) очищают колоночной хроматографией на кромасиле (элюент CHCl/СНОН/NHOH, от 97/3/0,3 до 91/9/0,9; 3,5 мкм). Чистые фракции собирают и растворитель выпаривают. Остаток кристаллизуют из CHCN. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, сушат и получают 0,163 г (36%) соединения 11 (т.пл. 164°С).
Соединения №№ 12, 13 и 65 получают согласно примеру В1.
Пример В2
а) Получение соединения 3
3
2
2
2
3
4
2
2
3
4
3
Смесь промежуточного соединения 4 (0,0002 моль), гидрохлорида 4-бромпиридина (1:1) (0,0002 моль) и DIPEA (0,0002 моль) в CHCN (1 мл) и EtOH (0,5 мл) перемешивают при 65°С в течение 18 часов. Добавляют 4 н. HCl (0,2 экв.) в диоксане (14 мкл). Смесь перемешивают при 65°С в течение 18 часов, затем охлаждают до комнатной температуры, разбавляют CHCl и промывают 10% водным раствором KСО. Органический слой отделяют, сушат (MgSO), фильтруют и растворитель выпаривают досуха. Остаток (0,24 г) очищают колоночной хроматографией на Sunfire (элюент CHCl/СНОН/NHOH, от 100/0/0 до 93/7/0,7; 5 мкм). Чистые фракции собирают и растворитель выпаривают. Остаток (0,073 г, 57%) кристаллизуют из CHCN. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, сушат и получают 0,039 г (30%) соединения 3 (т.пл. 187°С).
Соединение № 4 получают согласно примеру В2а).
b) Получение соединения 5
3
2
2
2
3
4
2
2
3
4
3
Смесь промежуточного соединения 4 (0,0002 моль), 4-хлор-6,7-дигидро-5Н-циклопента[b]пиридин-7-ола (0,0002 моль) в 4 н. растворе HCl/диоксан (14 мкл), CHCN (1 мл) и EtOH (0,5 мл) перемешивают при 65°С в течение 18 часов. Добавляют 4 н. HCl (0,2 экв.) в диоксане (14 мкл). Смесь перемешивают при 65°С в течение 18 часов, затем охлаждают до комнатной температуры, разбавляют CHCl и промывают 10% водным раствором KСО. Органический слой отделяют, сушат (MgSO), фильтруют и растворитель выпаривают досуха. Остаток (0,14 г) очищают колоночной хроматографией на Sunfire (элюент CHCl/СНОН/NHOH, от 100/0/0 до 92/8/0,8; 5 мкм). Чистые фракции собирают и растворитель выпаривают. Остаток (0,072 г, 50%) кристаллизуют из CHCN. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, сушат и получают 0,049 г (30%) соединения 5 (т.пл. 178°С).
Пример В3
Получение соединения 14
3
2
3
2
2
3
4
2
2
3
4
3
Смесь промежуточного соединения 2 (0,0012 моль), 4-хлор-2-пиридинметанола (0,0012 моль) и 4 н. раствора HCl/диоксан (0,0002 моль) в CHCN (10 мл) перемешивают при 65°С в течение 18 часов, затем охлаждают до комнатной температуры, выливают в 10% водный раствор KСО и экстрагируют смесью CHCl/CHOH (немного). Органический слой отделяют, сушат (MgSO), фильтруют и выпаривают растворитель досуха. Остаток (0,52 г) очищают колоночной хроматографией на кромасиле (элюент CHCl/CHOH/NHOH, от 97/3/0,3 до 91/9/0,9; 3-5 мкм). Чистые фракции собирают и растворитель выпаривают. Остаток (0,3 г, 60%) кристаллизуют из CHCN. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, сушат и получают 0,292 г (51%) соединения 14 в виде соли гидрохлорида (.1,52 HCl, т.пл. 110°С).
Соединения №№ 15, 16 и 60 получают согласно примеру В3.
Пример В4
а) Получение соединения 24
3
2
2
2
3
4
Смесь промежуточного соединения 6а (0,0007 моль) и 4-хлор-2-пиридинметанола (0,0007 моль) в 4 н. растворе HCl/диоксан (0,0001 моль), CHCN (2,5 мл) и EtOH (1 мл) перемешивают при 65°С в течение 18 часов. Смесь охлаждают до комнатной температуры, разбавляют CHCl и промывают 10% водным раствором KСО. Органический слой декантируют, сушат (MgSO), фильтруют и растворитель выпаривают до 15 мл. Остаток отфильтровывают, сушат и получают 0,168 г (64%) соединения 24 (т.пл. 115°С).
b) Получение соединения 25
3
2
3
2
2
3
Смесь промежуточного соединения 6b (0,0007 моль) и 4-хлор-2-пиридинметанола (0,0007 моль) в 4 н. растворе HCl/диоксан (0,0001 моль), CHCN (2 мл) и EtOH (0,8 мл) перемешивают при 65°С в течение 18 часов. Смесь охлаждают до комнатной температуры, выливают в 10% водный раствор KСО и экстрагируют CHCl. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, промывают CHCN, сушат и получают 0,155 г (53%) соединения 25 (т.пл. 186°С).
Соединения №№ 26, 27 и 28 получают согласно примеру B4b).
с) Получение соединения 31
3
2
3
2
2
3
Смесь промежуточного соединения 6с (0,0008 моль) и 4-хлорхинолина (0,0009 моль) в 4 н. растворе HCl/диоксан (0,0001 моль), CHCN (2,5 мл) и EtOH (1 мл) перемешивают при 65°С в течение 48 часов. Смесь охлаждают до комнатной температуры, выливают в 10% водный раствор KСО и экстрагируют CHCl. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, промывают CHCN, сушат и получают 0,266 г (71%) соединения 31 (т.пл. 175°С).
Соединения №№ 29, 30 и 32 получают согласно примеру В4с).
Пример В5
Получение соединения 17
3
2
3
2
2
3
4
2
2
3
4
3
Смесь промежуточного соединения 2 (0,0012 моль), 4-хлор-6,7-дигидро-5Н-циклопента[b]пиридин-7-ола (0,0012 моль) и 4 н. раствора HCl/диоксан (0,0025 моль) в CHCN (10 мл) перемешивают при 65°С в течение 18 часов, затем охлаждают до комнатной температуры, выливают в 10% водный раствор KСО и экстрагируют смесью CHCl/СНОН (немного). Органический слой отделяют, сушат (MgSO), фильтруют и растворитель выпаривают досуха. Остаток (0,54 г) очищают колоночной хроматографией на кромасиле (элюент CHCl/СНОН/NHOH, от 97/3/0,3 до 88/12/1,2; 3-5 мкм). Чистые фракции собирают и растворитель выпаривают. Остаток (0,14 г, 26%) кристаллизуют из CHCN. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, сушат и получают 0,113 г (21%) соединения 17 (т.пл. 147°С).
Соединения №№ 18, 19, 20, 21, 22, 23, 33, 34, 35, 36, 37 и 61 получают согласно примеру В5.
Пример В6
а) Получение соединения 9
3
3
2
2
2
3
4
2
2
3
4
3
Смесь промежуточного соединения 8а (0,0006 моль) и 4-хлор-6,7-дигидро-5Н-циклопента[b]пиридин-7-ола (0,006 моль) в 4 н. растворе HCl/диоксан (0,0001 моль), CHCN (2 мл) и CHOH (0,8 мл) перемешивают при 65°С в течение 18 часов и затем охлаждают при комнатной температуре. Добавляют 3 н. HCl (0,0025 моль). Смесь перемешивают при 65°С в течение 18 часов, охлаждают при комнатной температуре, разбавляют CHCl и промывают 10% водным раствором KСО. Органический слой декантируют, сушат (MgSO), фильтруют и растворитель выпаривают досуха. Остаток (0,36 г) очищают колоночной хроматографией на кромасиле (элюент CHCl/СНОН/NHOH, от 98/2/0,2 до 90/10/1; 3,5 мкм). Чистые фракции (0,14 г) кристаллизуют из CHCN. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, сушат и получают 0,120 г (47%) соединения 9 (т.пл. 207°С).
Соединения №№ 7 и 8 получают согласно примеру В6а).
b) Получение соединения 10
3
3
2
3
2
2
4
2
2
3
4
3
Смесь промежуточного соединения 8b (0,0007 моль) и 4-хлор-6,7-дигидро-5Н-циклопента[b]пиридин-7-ола (0,0008 моль) в 4 н. растворе HCl/диоксан (0,0001 моль), CHCN (2 мл) и CHOH (0,8 мл) перемешивают при 65°С в течение 48 часов, затем охлаждают до комнатной температуры, выливают в 10% водный раствор KСО и экстрагируют CHCl. Органический слой отделяют, сушат (MgSO), фильтруют и растворитель выпаривают. Остаток очищают колоночной хроматографией на кромасиле (элюент CHCl/СНОН/NHOH, от 98/2/0,2 до 90/10/1; 3,5 мкм). Чистые фракции собирают и растворитель выпаривают досуха. Остаток кристаллизуют из CHCN. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, сушат и получают 0,055 г (17%) соединения 10 (т.пл. 237°С).
Пример В7
Получение соединения 53
3
2
3
2
2
4
Смесь промежуточного соединения 11 (0,0011 моль), 4-хлорхинолина (0,0012 моль) и 4 н. раствора HCl/диоксан (0,0002 моль) в CHCN (2,5 мл) и EtOH (1 мл) перемешивают при 65°С в течение 18 часов, затем охлаждают до комнатной температуры, выливают в 10% водный раствор KСО и экстрагируют CHCl. Органический слой отделяют, сушат (MgSO), фильтруют и растворитель выпаривают. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, сушат и получают 0,366 г (66%) соединения 53 (т.пл. 192°С).
Соединения №№ 51, 52, 53 и 54 получают согласно примеру В7.
Пример В8
Получение соединения 59
2
3
2
2
4
2
2
3
4
2
2
3
4
Раствор промежуточного соединения 14 (0,0005 моль) в 3 н. HCl (5 мл) и ТГФ (1 мл) перемешивают при 100°С в течение 10 суток. Добавляют 10% водный раствор KСО и CHCl. Смесь экстрагируют. Органический слой отделяют, сушат (MgSO), фильтруют и концентрируют. Остаток (0,2 г) очищают колоночной хроматографией (элюент CHCl/СНОН/NHOH, 93/7/0,1). Остаток (0,010 г, 5%) очищают колоночной хроматографией (элюент CHCl/СНОН/NHOH, 93/7/0,7). Чистые фракции собирают, растворитель выпаривают и получают 0,003 г (1,5%) соединения 59.
Пример В9
а) Получение соединения 1
3
2
3
4
2
2
3
4
Смесь промежуточного соединения 16 (0,0005 моль), гидрохлорида 4-бромпиридина (1:1) (0,0005 моль) и DIPEA (0,0004 моль) в CHCN (1,5 мл) и EtOH (0,5 мл) перемешивают при 65°С в течение 18 часов. Добавляют 4 н. HCl (0,2 экв.) в диоксане (29 мкл). Смесь перемешивают при 65°С в течение 18 часов, затем охлаждают до комнатной температуры, выливают в 10% водный раствор KСО и экстрагируют EtOAc. Органический слой отделяют, сушат (MgSO), фильтруют и растворитель выпаривают досуха. Остаток (0,24 г) очищают колоночной хроматографией на кромасиле (элюент CHCl/СНОН/NHOH, 93/7/0,5; 10 мкм). Чистые фракции собирают, растворитель выпаривают и получают 0,039 г (19%) соединения 1 (т.пл. 186°С).
b) Получение соединения 2
3
2
3
4
2
2
3
4
3
Смесь промежуточного соединения 16 (0,0005 моль), 4-хлор-2-пиридинметанола (0,0005 моль) и 4 н. раствора HCl/диоксан (0,0001 моль) в CHCN (1,5 мл) и EtOH (0,5 мл) перемешивают при 65°С в течение 18 часов. Добавляют 4 н. HCl (0,2 экв.) в диоксане (29 мкл). Смесь перемешивают при 65°С в течение 18 часов, затем охлаждают до комнатной температуры, выливают в 10% водный раствор KСО и экстрагируют EtOAc. Органический слой отделяют, сушат (MgSO), фильтруют и растворитель выпаривают досуха. Остаток (0,18 г) очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюент CHCl/СНОН/NHOH, 93/7/0,5; 10 мкм). Чистые фракции собирают и растворитель выпаривают. Остаток (0,03 г, 14%) кристаллизуют из смеси CHCN/DIPE. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, сушат и получают 0,03 г (9%) соединения 2 (т.пл. 163°С).
Пример В10
Получение соединения 55
3
2
3
2
2
4
2
2
3
4
3
Смесь промежуточного соединения 18 (0,0008 моль) и гидрохлорида 4-бромпиридина (1:1) (0,0008 моль) в DIPEA (0,0006 моль), CHCN (2,5 мл) и EtOH (1 мл) перемешивают при 65°С в течение 18 часов, затем охлаждают при комнатной температуре, выливают в 10% водный раствор KСО и экстрагируют CHCl. Органический слой декантируют, сушат (MgSO), фильтруют и растворитель выпаривают досуха. Остаток (0,357 г) очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюент CHCl/СНОН/NHOH, 95/5/0,5; 15-40 мкм). Растворитель из чистых фракций выпаривают досуха. Остаток (0,135 г) кристаллизуют из смеси CHCN/EtOH/DIPE и получают 0,126 г (35%) соединения 55 в виде соли гидрохлорида (.0,99 HCl, т.пл. 245°С).
Соединения №№ 56, 57 и 58 получают согласно примеру В10.
Пример В11
Получение соединения 50
3
2
3
2
2
4
2
2
3
4
3
Смесь промежуточного соединения 20 (0,001 моль), гидрохлорида 4-бромпиридина (1:1) (0,001 моль) и DIPEA (0,0008 моль) в CHCN (2,5 мл) и EtOH (1 мл) перемешивают при 65°С в течение 18 часов, затем охлаждают до комнатной температуры, выливают в 10% водный раствор KСО и экстрагируют CHCl. Органический слой отделяют, сушат (MgSO), фильтруют и растворитель выпаривают досуха. Остаток (0,37 г) очищают колоночной хроматографией на кромасиле (элюент CHCl/СНОН/NHOH, от 98/2/0,2 до 88/12/1,2; 3,5 мкм). Чистые фракции собирают и растворитель выпаривают досуха. Остаток кристаллизуют из CHCN. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, сушат и получают 0,095 г (23%) соединения 50 (т.пл. 241°С).
Пример В12
Получение соединения 49
3
2
3
2
2
4
2
2
3
4
Смесь промежуточного соединения 22 (0,0015 моль) и 4-хлор-6,7-дигидро-5Н-циклопента[b]пиридин-7-ола (0,0016 моль) в 4 н. растворе HCl/диоксан (0,0003 моль), CHCN (3 мл) и EtOH (1,2 мл) перемешивают при 65°С в течение 18 часов, затем охлаждают при комнатной температуре, выливают в 10% водный раствор KСО и экстрагируют CHCl. Органический слой декантируют, сушат (MgSO), фильтруют и растворитель выпаривают досуха. Остаток (0,74 г) очищают колоночной хроматографией на кромасиле (элюент CHCl/СНОН/NHOH, от 100 до 93/7/0,7; 5 мкм). Растворитель выпаривают досуха. Остаток (0,445 г) кристаллизуют из EtOH. Остаток отфильтровывают, сушат и получают 0,244 г (36%) соединения 49 (т.пл. 123°С).
Соединения №№ 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47 и 48 получают согласно примеру В12.
Пример В13
Получение соединения 6
2
3
2
2
3
4
2
2
3
4
Смесь промежуточного соединения 24 (0,0008 моль) и гидрохлорида 4-бромпиридина (1:1) (0,0008 моль) в ДМФА (3 мл) перемешивают при 105°С в течение 1 часа 30 минут, затем охлаждают до комнатной температуры и выливают в 10% водный раствор KСО. Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, промывают водой несколько раз и растворяют в смеси CHCl/СНОН (немного). Органический слой отделяют, сушат (MgSO), фильтруют и растворитель выпаривают досуха. Остаток (0,38 г) очищают колоночной хроматографией на кромасиле (элюент CHCl/СНОН/NHOH, от 96/4/0,4 до 88/12/1,2; 5 мкм). Чистые фракции собирают и растворитель выпаривают. Сырое масло (0,09 г, 23%) растворяют в изопропаноле и охлаждают на ледяной бане. Добавляют 5 н. раствор HCl/изопропанол (2 экв.). Выпавшее в осадок вещество отфильтровывают, сушат и получают 0,063 г (16%) соединения 6 (т.пл. 166°С).
Пример В14
Получение соединения 62
4
2
2
3
4
К раствору промежуточного соединения 30 в ТГФ при 5°С добавляют по частям 1 М раствор алюмогидрида лития в ТГФ (0,398 ммоль). Смесь перемешивают в течение 2 часов при комнатной температуре. Осторожно при 5°С добавляют воду. Добавляют EtOAc. Реакционную смесь фильтруют через целит и экстрагируют. Органический слой отделяют, сушат над MgSO, фильтруют и концентрируют. Сырое вещество (0,12 г) очищают колоночной хроматографией на силикагеле (элюент CHCl/СНОН/NHOH, 95/5/0,5; 30 г, 15-40 мкм). Чистые фракции собирают, растворитель выпаривают и получают 0,042 г соединения 62.
Пример В15
Получение соединений 63 и 64
и
соединение 63 и соединение 64
3
2
3
4
4
2
2
3
Раствор промежуточного соединения 38 (0,92 ммоль), 4-хлор-6,7-дигидро-5Н-циклопента[b]пиридин-7-ола (1 ммоль) и 4 М раствора хлористого водорода в диоксане (46 мкл) в CHCN (10 мл) греют при 65°С в течение 5 часов. Добавляют 10% водный раствор KСО и EtOAc. Реакционную смесь экстрагируют, органический слой отделяют, сушат над MgSO, фильтруют и упаривают. Остаток (0,4 г) очищают высокоэффективной жидкостной хроматографией (однородный диоксид кремния, 5 мкм, 150×30,0 мм; подвижная фаза 0,2% NHOH; градиент CHCl/СНОН от 98/2 до 88/12) и получают 49 мг соединения 63 и 114 мг соединения 64.
С. Фармакологический пример
Клетки А2780 являются клетками карциномы яичника человека с р53 дикого типа.
Способность соединений сохранять р53 в клетках А2780 можно измерить твердофазным иммуноферментным анализом р53 (ELISA). Анализ р53 является «сэндвич»-иммуноферментным анализом с использованием двух видов поликлональных антител. Поликлональные антитела, специфические для белка р53, иммобилизуют на поверхности пластиковых лунок. Любой р53, присутствующий в анализируемом образце, будет связываться с иммобилизованными антителами. Биотинилированные детекторные поликлональные антитела также распознают белок р53 и будут связываться с любым р53, который удержан иммобилизованными антителами. Детекторные антитела, в свою очередь, связываются стрептавидином, конъюгированным с пероксидазой хрена. Пероксидаза хрена катализирует конверсию хромогенного субстрата о-фенилендиамина, интенсивность которого пропорциональна количеству белка р53, связанного с планшетом. Окрашенный продукт реакции определяют количественно с использованием спектрофотометра. Количественного определения достигают построением стандартной кривой с использованием известных концентраций очищенного рекомбинантного белка р53, меченного HIS (смотрите пример С.1).
С использованием колориметрического анализа на опухолевых клетках А2780 определяют клеточную активность соединений формулы (I) на клеточную токсичность или выживание (смотрите пример С.2).
С.1. ELISA р53
2
Клетки А2780 культивируют в RPMI 1640 с добавлением 10% фетальной телячьей сыворотки (FCS), 2 мМ L-глутамина и гентамицина при 37°С во влажной камере с 5% СО.
Клетки А2780 высевают в 96-луночные планшеты по 20000 клеток на лунку, культивируют в течение 24 часов и обрабатывают соединением в течение 16 часов при 37°С во влажной камере. После инкубации клетки промывают один раз забуференным фосфатом физиологическим раствором и добавляют 30 мкл на лунку буфера RIPA с низким содержанием соли (20 мМ трис, рН 7,0, 0,5 мМ ЭДТК, 1% нонидета Р40, 0,5% DOC, 0,05% SDS, 1 мМ PMSF, 1 мкг/мл апротинина и 0,5 мкг/мл лейпептина). Планшеты помещают на лед на 30 минут для завершения лизиса. Белок р53 детектируют в лизатах, используя сэндвич-ELISA, описанный ниже.
3
Сенсибилизируют 96-луночные планшеты из высокосвязывающего полистирола EIA/RIA (Costar 9018) иммобилизованными антителами pAb1801 (Abcam ab28-100) в концентрации 1 мкг/мл в буфере для сенсибилизации (0,1 М NaHCO, pH 8,2), 50 мкл на лунку. Антителам дают возможность прилипать в течение ночи при 4°С. Сенсибилизированные планшеты промывают один раз забуференным фосфатом физиологическим раствором (PBS)/0,05% твина 20, добавляют 300 мкл блокирующего буфера (PBS, 1% сывороточного бычьего альбумина (BSA)) и инкубируют в течение 2 часов при комнатной температуре. Получают разведения очищенного рекомбинантного белка р53, меченного HIS, в интервале 3-200 нг/мл в блокирующем буфере и используют в качестве стандартов.
2
2
2
4
2
4
Планшеты дважды промывают PBS/0,05% твина 20 и добавляют блокирующий буфер или стандарты по 80 мкл/лунка. К стандартам добавляют 20 мкл буфера для лизиса. Образцы добавляют в другие лунки при 20 мкл лизата на лунку. После инкубации в течение ночи при 4°С, планшеты дважды промывают PBS/0,05% твина 20. Аликвоты в 100 мкл вторых поликлональных антител к р53 (FL-393) (Tebubio, sc-6243) в концентрации 1 мкг/мл в блокирующем буфере добавляют в каждую лунку и оставляют для прилипания на 2 часа при комнатной температуре. Планшеты промывают три раза PBS/0,05% твина 20. Добавляют антикроличьи антитела с HRP для детекции (sc-2004, Tebubio) в концентрации 0,04 мкг/мл в PBS/1% BSA и инкубируют в течение 1 часа при комнатной температуре. Планшеты промывают три раза PBS/0,05% твина 20 и добавляют 100 мкл буфера для субстрата (буфер для субстрата получают непосредственно перед применением, добавляя 1 таблетку в 10 мг о-фенилендиамина (OPD) от Sigma и 125 мкл 3% НО к 25 мл буфера для OPD: 35 мМ лимонной кислоты, 66 мМ NaHPO, рН 5,6). Через 5-10 минут цветную реакцию останавливают, добавляя 50 мкл стоп-буфера (1 М HSO) на лунку. Поглощение при двух длинах волн 490/655 нм измеряют с использованием микропланшет-ридера Biorad и затем анализируют результаты.
Для каждого эксперимента параллельно проводят инкубацию контроля (не содержащего лекарственного средства) и пустышек (не содержащих клеток или лекарственных средств). Величину для пустышки вычитают из величин всех контролей и образцов. Для каждого образца величину для р53 (в единицах поглощения) выражают в виде процента от величины для р53, присутствующего в контроле. Сохранение процента свыше 140% определяют как значимое. В данном случае действие испытываемых соединений выражают в виде наименьшей дозы, дающей, по меньшей мере, 140% от величины для р53, присутствующего в контроле (смотрите таблицу 3 ниже).
В некоторых экспериментах анализ адаптируют для использования 384-луночных культуральных планшетов.
<b>Таблица 3</b><b>Результаты для соединений, которые испытывают по вышеописанному протоколу ELISA р53 (клетки А2780)</b>
Соединение №
р53-elisa LAD [микроМ]
Соединение №
р53-elisa LAD [микроМ]
1
>10,0
33
3,0
2
3,0
34
1,0
3
>10,0
35
1,0
4
>10,0
36
10,0
5
0,3
37
3,0
6
1,0
38
3,0
7
>10,0
39
0,1
8
>10,0
40
1,0
9
>10,0
41
0,3
10
1,0
42
0,1
11
>10,0
43
0,3
12
10,0
44
1,0
13
>10,0
45
1,0
14
>10,0
46
1,0
15
>10,0
47
0,1
16
>10,0
48
1,0
17
1,0
49
1,0
18
>10,0
50
>10,0
19
>10,0
51
>10,0
20
>10,0
52
>10,0
21
>10,0
53
>10,0
22
>10,0
54
>10,0
23
>10,0
55
>10,0
24
>10,0
56
>10,0
25
3,0
57
>10,0
26
>10,0
58
>10,0
27
>10,0
59
-
28
>10,0
60
>10,0
29
1,0
61
0,3
30
1,0
62
3,0
31
1,0
63
1,0
32
>10,0
64
0,3
65
>10,0
С.2. Анализ пролиферации
Клетки глиомы человека U87MG культивируют в среде DMEM с добавлением 2 мМ L-глутамина, 1 мМ пирувата натрия, 1,5 г/л бикарбоната натрия, 50 мкг/мл гентамицина и 10% инактивированной нагреванием фетальной телячьей сыворотки. (Клетки U87MG являются клетками глиобластомы человека с р53 дикого типа. В такой клеточной линии MDM2 строго регулирует экспрессию р53.)
Клетки рака яичника человека А2780 любезно переданы в дар от д-ра T.C. Hamilton (Fox Chase Cancer Centre, Пенсильвания, США). Клетки культивируют в среде RPMI 1640 с добавлением 2 мМ L-глутамина, 50 мкг/мл гентамицина и 10% фетальной телячьей сыворотки.
Реагенты, используемые в анализе с Alamar Blue
2
4
2
4
Резазурин закупают у Aldrich (прод. № 199303). Ферроцианид калия, феррицианид калия, KНРО и KНРО закупают у Sigma (прод. №№ Р9387, Р8131, Р5655 и Р8281 соответственно).
2
4
2
4
Калийфосфатный буфер (РРВ), 0,1 М, получают следующим образом: 2,72 г KНРО и 13,86 г KНРО растворяют в 500 мл деионизованной (milli Q) воды, доводят рН до 7,4 и приводят объем к 1 л деионизованной водой; буфер стерилизуют фильтрацией и хранят при комнатной температуре. Исходный раствор резазурина (РРВ-А) получают свежим, растворяя 45 мг резазурина в 15 мл PBS. Раствор 30 мМ феррицианида калия (РРВ-В) получают, растворяя 0,987 г феррицианида калия в 100 мл PPB. Раствор 30 мМ ферроцианида калия (РРВ-С) получают, растворяя 1,266 г ферроцианида калия в 100 мл PPB.
Смесь РРВ-А, РРВ-В и РРВ-С получают, смешивая равные объемы соответствующих растворов. Рабочий раствор резазурина (называемый в данном случае раствор «Alamar Blue») получают, разбавляя указанную смесь 20× (об./об.) в РРВ и стерилизуя фильтрацией; раствор Alamar Blue можно хранить при 4°С в течение максимум 2 недель.
Процедура анализа с Alamar Blue
3
Для экспериментов в 384-луночных планшетах высевают клетки при плотности 5×10 клеток/мл в 45 мкл культуральной среды в темные культуральные 384-луночные планшеты с прозрачным дном Falcon (Life Technologies, Merelbeke, Бельгия). Клеткам дают прилипать к пластику в течение 24 час. Испытываемое соединение предварительно разводят (1/50 в культуральной среде) и в лунки добавляют 5 мкл предварительно разведенного соединения. После 4-суточной инкубации в каждую лунку добавляют 10 мкл раствора Alamar Blue и клетки инкубируют еще в течение 5 час (А2780) или 6 час (U87MG) при 37°С. Интенсивность флуоресценции измеряют для каждой лунки флуорометром для прочтения планшетов (Fluorskan, Labsystems, возбуждение при 540 нм, испускание при 590 нм).
50
50
50
nd
Антипролиферативную активность вычисляют в виде процента клеток, оставшихся жизнеспособными в условиях обработки, против контроля (необработанные клетки). В рамках эксперимента результат для каждого условия обработки является средним из результатов для 3 повторных лунок. В соответствующих случаях эксперименты повторяют для того, чтобы установить полные кривые зависимости от концентрации. В соответствующих случаях величины IC (концентрация лекарственного средства, необходимая для снижения роста клеток на 50% от контроля) вычисляют с использованием пробит-анализа для ступенчатых данных (Finney D.J., Probit Analyses, 2 ed., Chapter 10, Graded Responses, Cambridge University Press, Cambridge, 1962). В данном описании действие испытываемых соединений выражают в виде pIC (отрицательный log величины IC) (смотрите таблицу 4).
<b>Таблица 4</b><b>Результаты для соединений, которые испытывают по вышеописанному протоколу пролиферации клеток</b>
Соединение №
Ингибирование пролиферации клеток А2780pIC<sub>50</sub>
Ингибирование пролиферации клеток U87MGpIC<sub>50</sub>
Соединение №
Ингибирование пролиферации клеток А2780pIC<sub>50</sub>
Ингибирование пролиферации клеток U87MGpIC<sub>50</sub>
1
<5
<5
33
<5
<5
2
<5
5,11
34
5,67
5,14
3
<5
<5
35
<5
<5
4
<5
<5
36
<5
5,08
5
<5
<5
37
<5
<5
6
<5
5,80
38
~5,23
6,06
7
5,08
<5
39
~5,59
6,07
8
<5
5,41
40
~5,19
5,86
9
5,38
<5
41
5,38
5,83
10
5,45
5,55
42
6,15
6,75
11
<5
5,31
43
5,56
5,81
12
<5
5,62
44
~5,96
6,56
13
<5
5,18
45
6,39
6,14
14
<5
<5
46
~5,46
6,08
15
<5
~5,23
47
~5,74
6,35
16
<5
<5
48
<5
5,26
17
5,08
5,16
49
6,30
6,19
18
<5
5,17
50
<5
<5
19
<5
5,15
51
<5
5,20
20
<5
<5
52
<5
5,33
21
<5
<5
53
<5
5,40
22
<5
5,29
54
<5
-
23
<5
<5
55
<5
<5
24
<5
<5
56
<5
-
25
<5
<5
57
<5
<5
26
<5
<5
58
<5
<5
27
<5
<5
59
-
-
28
<5
<5
60
<5
5,18
29
5,58
<5
61
<5
5,23
30
5,08
5,06
62
6,04
5,89
31
~5,59
5,88
63
7,13
6,33
32
<5
5,48
64
7,07
6,47
65
<5
5,26
~ означает приблизительно
D. Аналитические данные
Общая процедура жидкостной хроматографии (ЖХ)
Измерение ЖХ осуществляют с использованием системы UPLC (сверхэффективная жидкостная хроматография) Acquity (Waters), включающей сдвоенный насос с аппаратом для обезгаживания, автоматический пробоотборник, детектор с диодной матрицей (DAD) и колонку, описанную ниже в соответствующих способах, колонку выдерживают при температуре 40°С. Поток из колонки поступает в МС-детектор. МС-детектор скомпонован с источником ионизации распылением электронов. Напряжение на капиллярной игле 3 кВ, и поддерживают температуру источника 130°С на Quattro (тройной квадрупольный масс-спектрометр от Waters). В качестве газа-распылителя используют азот. Сбор данных осуществляют с помощью системы данных Waters-Micromass MassLynx-Openlynx.
В дополнение к вышеописанной процедуре. UPLC с обращенной фазой осуществляют на колонке Waters Acquity ВЕН (гибрид мостиковый этилсилоксан/диоксид кремния) с С18 (1,7 мкм, 2,1×100 мм) при скорости потока 0,35 мл/мин. Используют две подвижные фазы (подвижная фаза А: 95% 7 мМ ацетата аммония/5% ацетонитрила; подвижная фаза В: 100% ацетонитрила) для прохода в условиях с градиентом от 90% А и 10% В (выдержка в течение 0,5 минуты) до 8% А и 92% В за 3,5 минуты, выдержка в течение 2 мин и возвращение к начальным условиям за 0,5 мин, выдержка в течение 1,5 минуты. Используют объем впрыска 2 мкл. Напряжение на конусе 20 В для ионизации по положительному и отрицательному типу. Масс-спектр получают сканированием от 100 до 1000 в 0,2 секунды с использованием задержки между сканами 0,1 секунды.
<b>Таблица 5</b><b>Аналитические данные ЖХМС: R</b><sub>t</sub><b> представляет собой время удерживания в минутах; [MH]</b><sup>+</sup><b> обозначает протонированную массу соединения</b>
Соединение №
R<sub>t</sub>
[MH]<sup>+</sup>
59
9,28
411
62
2,91
463
63
3,23
491
64
3,72
473
Е. Пример композиции: таблетки с пленочным покрытием
Получение сердцевины таблеток
Смесь 100 г соединения формулы (I), 570 г лактозы и 200 г крахмала тщательно перемешивают и затем увлажняют раствором 5 г додецилсульфата натрия и 10 г поливинилпирролидона в примерно 200 мл воды. Влажную порошковую смесь просеивают, сушат и снова просеивают. Затем к ней добавляют 100 г микрокристаллической целлюлозы и 15 г гидрированного растительного масла. Все тщательно перемешивают и прессуют в таблетки, получают 10000 таблеток, причем каждая включает 10 мг соединения формулы (I).
Нанесение покрытия
К раствору 10 г метилцеллюлозы в 75 мл денатурированного этанола добавляют раствор 5 г этилцеллюлозы в 150 мл дихлорметана. Затем к смеси добавляют 75 мл дихлорметана и 2,5 мл 1,2,3-пропантриола. Расплавляют 10 г полиэтиленгликоля и растворяют в 75 мл дихлорметана. Последний раствор добавляют к первому, затем к смеси добавляют 2,5 г октадеканоата магния, 5 г поливинилпирролидона и 30 мл концентрированной суспензии красителя и все гомогенизируют. На сердцевины таблеток наносят покрытие из полученной таким образом смеси на машине для нанесения покрытий.