ИМИДАЗОПИРАЗИНЫ
IMIDAZOPYRAZINES

[0001] Настоящее изобретение относится к имидазо[1,2-a]пиразинам, которые действуют в качестве ингибиторов Fms-подобного тирозина 3 (FLT3) и полезны ослаблении симптомов, лечении или контролировании рака, конкретно острого миелоидного лейкоза (AML).
[0002] Известно, что киназы являются важными клеточными ферментами, которые осуществляют регуляцию клеточных функций, таких как деление и пролиферация клеток (WO 2008/047307). Fms-подобный тирозин 3 (FLT3) представляет собой рецепторную тирозинкиназу (RTK), которая, как сообщают, мутирует в 25-30% случаев острого миелоидного лейкоза (AML) (смотри Miguel Sanz et al., "FLT3 inhibition as a targeted therapy for acute myeloid leukemia," Current Opinion Oncol. (2009) 21: 594-600). Конкретно, мутация во внутренней тандемной дупликации (ITD) гена Fms-подобного тирозина 3 (FLT3), как сообщают, является вторым наиболее распространенным генетическим изменением, ассоциированным с цитогенетически нормальным AML. Эта мутация, как указано, является важным прогностическим фактором для этого класса пациентов, так как мутации ITD связаны с плохим прогнозом заболевания (Sanz, смотри ссылку, приведенную выше). Таким образом, FLT3 представляет собой общепризнанную молекулярную мишень для разработки новых терапевтических средств против AML (Sanz, смотри ссылку, приведенную выше, с.596; Qi Chao et al, "Identification of …(AC220), a Uniquely Potent, Selective and Efficiacious FMS-Like Tyrosine Kinase-3 (FLT3) Inhibitor", J. Med. Chem. (2009) 52:7808-7816). В настоящее время целый ряд селективных ингибиторов FLT3 находятся на стадии исследований в качестве средств для лечения AML (в том числе тандутиниб и AC220), а сунитиниб, представляющий собой многоцелевой ингибитор киназ (включая FLT3), уже получил разрешение на продажу (смотри Chao ef al., смотри ссылку, приведенную выше; Sanz et al., смотри ссылку, приведенную выше). Другие ингибиторы FLT3, которые находятся в разработке, рассмотрены в Sanz, ссылке, приведенной выше, и в Thomas Fischer et al., J Clinical Oncol. (2010) 28: 4339-4345.
[0003] Одним аспектом изобретения является соединение формулы I
1
2
3
4
или его фармацевтически приемлемая соль, где X, R, R, R и R такие, как определено ниже.
[0004] Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим одно или более соединений по изобретению, или фармацевтически приемлемую соль, и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
[0005] Настоящее изобретение также относится к способу лечения, ослабления симптомов или контролирования рака, в том числе конкретно AML, включающему введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения по изобретению или его фармацевтически приемлемой соли.
Определения
[0006] Ниже даны определения терминов, использованных в данном документе.
1-6
1-4
[0007] Термины "Cалкил" или "Cалкил" относятся к насыщенным углеводородным группам с прямой или разветвленной цепью, имеющим от 1 до 6 или от 1 до 4 атомов углерода соответственно. Примерами алкильных групп являются, без ограничения, метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, трет-бутил, н-пентил и втор-пентил.
[0008] "Алкокси, алкоксил или низший алкокси" относятся к любой из вышеуказанных алкильных групп, которая присоединена к остатку молекулы через атом кислорода (RO-). Типичными алкоксигруппами являются метокси, этокси, изопропокси или пропокси, бутилокси и т.п. В определение алкокси также входят множественные алкокси боковые цепи, например этокси-этокси, метокси-этокси, метокси-этокси-этокси и т.п. и замещенные алкокси боковые цепи, например диметиламино-этокси, диэтиламино-этокси, диметокси-фосфорил-метокси и т.п.
[0009] "Арил" означает замещенный или незамещенный одновалентный, моноциклический или бициклический, ароматический карбоциклический углеводородный радикал, предпочтительно 6-10-членную ароматическую кольцевую систему. Предпочтительными арильными группами являются, без ограничения, фенил, нафтил, толил и ксилил.
[0010] Термин "циклоалкил" в данном документе означает замещенную или незамещенную стабильную моноциклическую или полициклическую систему, состоящую только из атомов углерода, все кольца которой являются насыщенными. Примерами циклоалкилов являются, без ограничения, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил, бициклоалкилы, в том числе бициклооктаны, такие как [2.2.2]бициклооктан или [3.3.0]бициклооктан, бициклононаны, такие как [4.3.0]бициклононан, и бициклодеканы, такие как [4.4.0]бициклодекан (декалин), или спиросоединения.
[0011] "Галоген" означает Cl, F и Br.
[0012] "Гетероарил" означает замещенную или незамещенную ароматическую гетероциклическую кольцевую систему, содержащую вплоть до двух колец. Предпочтительными гетероарильными группами являются, без ограничения, тиенил (или тиофенил), фурил, индолил, пирролил, пиридинил, пиразинил, оксазолил, тиаксолил, хинолинил, пиримидинил, имидазолил, триазолил и тетразолил.
[0013] Следует иметь в виду, что в случае бициклического гетероарила одно кольцо может представлять собой арил, а другое представляет собой гетероарил, и оба независимо могут быть замещенными или незамещенными.
[0014] "Гетероатом" означает атом, выбранный из N, O и S.
[0015] "Гетероцикл" или "гетероциклическое кольцо" означает замещенный или незамещенный 5-10-членный, моно- или бициклический, неароматический углеводород, в котором от 1 до 3 атомов углерода заменены гетероатомом, выбранным из атома азота, кислорода или серы. Примерами являются тетрагидропиран, пирролидинил, в том числе пирролидин-1-ил, пирролидин-2-ил и пирролидин-3-ил; пиперазинил; пиперидинил; морфолинил, в том числе морфолин-4-ил; и т.п., которые в свою очередь могут быть замещенными.
[0016] Следует иметь в виду, что в случае бициклического гетероцикла одно кольцо может представлять собой гетероцикл, а другое представляет собой циклоалкил, и любое из них или оба независимо могут быть замещенными. Примером такого бициклического гетероцикла является 8-окса-3-аза-бицикло[3.2.1]октан.
[0017] Гидрокси или гидроксил является префиксом, означающим присутствие одновалентной группы -O-H.
50
50
[0018] "IC" относится к концентрации конкретного соединения, необходимой для ингибирования 50% специфической измеренной активности. IC может быть измерена, inter alia, как описано далее в Примерах 92 и 93.
[0019] "Фармацевтически приемлемый", например фармацевтически приемлемый носитель, эксципиент и т.д., означает фармакологически приемлемый и по существу нетоксичный для субъекта, которому вводят данное конкретное соединение.
[0020] "Фармацевтически приемлемая соль" относится к обычным солям присоединения кислоты или солям присоединения основания, которые сохраняют биологическую эффективность и свойства соединений по настоящему изобретению и образованы с подходящими нетоксичными органическими или неорганическими кислотами или органическими или неорганическими основаниями. Примеры солей присоединения кислоты включают соли, образуемые с неорганическими кислотами, такими как соляная кислота, бромоводородная кислота, йодоводородная кислота, серная кислота, сульфаминовая кислота, фосфорная кислота and азотная кислота, и соли, образуемые с органическими кислотами, такими как пара-толуолсульфоновая кислота, салициловая кислота, метансульфоновая кислота, щавелевая кислота, янтарная кислота, лимонная кислота, яблочная кислота, молочная кислота, фумаровая кислота, трифторуксусная кислота и т.п. Примеры солей присоединения основания включают соли, образуемые с гидроксидами аммония, калия, натрия и четвертичными аммониевыми гидроксидами, такими как, например, гидроксид тетраметиламмония. Химическая модификация фармацевтического соединения (т.е. лекарственного средства) с превращением его в соль является методом, известным специалистам в области фармацевтической химии как метод повышения физической и химической стабильности, гигроскопичности, сыпучести и растворимости соединений (смотри, например, Ansel et al., Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems (1995), pgs.456-457).
[0021] "Замещенный", например в выражении "замещенный алкил", означает, что замещение может иметь место в одном или более положениях, и, если не указано иное, что заместители в каждом центре замещения независимо выбраны из указанных вариантов. Термин "возможно замещенный" означает, что один или более атомов водорода химической группы (с одним или более атомами водорода) может быть замещен другим заместителем, но не обязательно должен быть замещен им.
[0022] В одном воплощении настоящее изобретение относится к соединениям формулы I
где
X выбран из CH или N,
1
2
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из
(а) H,
1-4
(б) Салкила,
1-4
2
5
5
6
7
(в) Салкила, замещенного группами в количестве вплоть до 3, выбранными из циклоалкила, гетероцикла, OR, NRR, SOR или CN,
(г) гетероцикла,
1-4
8
8
9
(д) гетероцикла, замещенного группами в количестве вплоть до трех, выбранными из Cалкила, OR, NRR или CN,
(е) циклоалкила и
1-4
8
8
9
(ж) циклоалкила, замещенного группами в количестве вплоть до трех, выбранными из Cалкила, OR, NRR или CN; или
1
2
1-4
альтернативно, NRR вместе могут представлять собой гетероцикл, который возможно может быть замещен Cалкилом;
3
R выбран из группы, состоящей из
1-6
(а) Cалкила
1-6
(б) Cалкила, замещенного группами в количестве вплоть до 3, выбранными из
арила,
3
3
арила, замещенного Cl, F, CH или CF,
гетероарила,
циклоалкила,
гетероцикла,
OH,
3
OCH,
8
9
NRR и
CN;
(в) арила,
1-4
3
(г) арила, замещенного Cl, F, Cалкилом или CF,
(д) гетероарила,
5
(е) циклоалкила, возможно замещенного OR, и
(ж) гетероцикла;
4
8
9
R, R и R независимо выбраны из группы, состоящей из
(а) H и
1-4
(б) Cалкила; или
3
4
1-4
альтернативно, NRR вместе могут представлять собой гетероцикл, который возможно замещен Cалкилом;
5
6
R и R независимо выбраны из группы, состоящей из
(а) H и
1-4
(б) Cалкила; и
7
R выбран из группы
1-4
(а) Cалкил и
(б) циклоалкил; или их фармацевтически приемлемым солям.
[0023] В другом воплощении изобретение относится к соединениям формулы Ia, имеющим структуру
1
2
3
4
где R, R, R и R такие, как определено выше, или к их фармацевтически приемлемым солям.
[0024] В другом воплощении изобретение относится к соединениям формулы Ib, имеющим структуру
1
2
3
4
где R, R, R и R такие, как определено выше, или к их фармацевтически приемлемым солям.
1
1-4
[0025] В другом воплощении изобретение относится к соединениям формулы I, включая соединения формул Ia и Ib, где R представляет собой Cалкил, или к их фармацевтически приемлемым солям.
1
1-4
[0026] В другом воплощении изобретение относится к соединениям формулы I, включая соединения формул Ia и Ib, где R представляет собой Cалкил, который возможно замещен гетероциклом, или к их фармацевтически приемлемым солям.
1
5
1-4
[0027] В другом воплощении изобретение относится к соединениям формулы I, включая соединения формул Ia и Ib, где R представляет собой Салкил, который возможно замещен OR, включая конкретно OH, или к их фармацевтически приемлемым солям.
1
7
7
1-4
2
1-4
[0028] В другом воплощении изобретение относится к соединениям формулы I, включая соединения формул Ia и Ib, где R представляет собой Cалкил, который возможно замещен SOR, или их фармацевтически приемлемым солям. В одном из воплощений R представляет собой Cалкил, конкретно метил, или к их фармацевтически приемлемым солям.
1
[0029] В другом воплощении изобретение относится к соединениям формулы I, включая соединения формул Ia и Ib, где R представляет собой циклоалкил, или к их фармацевтически приемлемым солям.
1
8
9
2
[0030] В другом воплощении изобретение относится к соединениям формулы I, включая соединения формул Ia и Ib, где R представляет собой циклоалкил, который замещен NRR, включая конкретно NH, или к их фармацевтически приемлемым солям.
1
[0031] В другом воплощении изобретение относится к соединениям формулы I, включая соединения формул Ia и Ib, где R представляет собой гетероцикл, включая конкретно пиперидин и морфолин, или к их фармацевтически приемлемым солям.
1
2
[0032] Другое воплощение изобретения относится к соединениям формулы I, включая соединения формул Ia и Ib, где R такой, как определено непосредственно выше, и R представляет собой H, или к их фармацевтически приемлемым солям.
1
2
1-4
[0033] Другое воплощение изобретения относится к соединениям формулы I, включая соединения формул Ia и Ib, где R такой, как определено непосредственно выше, и R представляет собой Cалкил, или к их фармацевтически приемлемым солям.
1
2
1-4
[0034] Другое воплощение изобретения относится к соединениям формулы I, включая соединения формул Ia и Ib, где NRR вместе представляют собой гетероцикл, включая конкретно пиперазин, который возможно может быть замещен Cалкилом, включая конкретно метил, или к их фармацевтически приемлемым солям.
1
2
3
1-4
1-4
[0035] Другое воплощение изобретения относится к соединениям формулы I, включая соединения формул Ia и Ib, где R и R такие, как определено непосредственно выше, и R представляет собой Cалкил, в частности Cалкил, или к их фармацевтически приемлемым солям.
1
2
3
1-4
2
[0036] Другое воплощение изобретения относится к соединениям формулы I, включая соединения формул Ia и Ib, где R и R такие, как определено непосредственно выше, и R представляет собой Cалкил, который замещен группами в количестве вплоть до 2, выбранными из NH, тиофена и фенила, или к их фармацевтически приемлемым солям. Фенильная группа возможно может быть замещена Cl.
1
2
3
[0037] Другое воплощение изобретения относится к соединениям формулы I, включая соединения формул Ia и Ib, где R и R такие, как определено непосредственно выше, и R представляет собой циклоалкил, включая конкретно циклогексан, который возможно может быть замещен ОН, или к их фармацевтически приемлемым солям.
1
2
3
[0038] Другое воплощение изобретения относится к соединениям формулы I, включая соединения формул Ia и Ib, где R и R такие, как определено непосредственно выше, и R представляет собой арил, включая конкретно фенил, или к их фармацевтически приемлемым солям.
1
2
3
[0039] Другое воплощение изобретения относится к соединениям формулы I, включая соединения формул Ia и Ib, где R и R такие, как определено непосредственно выше, и R представляет собой гетероцикл, конкретно тетрагидропиран или морфолин, или к их фармацевтически приемлемым солям.
1
2
3
4
[0040] Другое воплощение изобретения относится к соединениям формулы I, включая соединения формул Ia и Ib, где R, R и R такие, как определено непосредственно выше, и R представляет собой H, или к их фармацевтически приемлемым солям.
1
2
3
4
1-4
[0041] Другое воплощение изобретения относится к соединениям формулы I, включая соединения формул Ia и Ib, где R и R такие, как определено непосредственно выше, и NRR вместе образуют гетероцикл, включая конкретно морфолин и пиперазин, причем указанный гетероцикл возможно замещен Cалкилом, включая конкретно метил, или к их фармацевтически приемлемым солям.
1
2
3
4
5
6
3
[0042] Другое воплощение изобретения относится к соединениям формулы I, включая соединения формул Ia и Ib, где R, R, R и R такие, как определено непосредственно выше, а R и R независимо представляют собой H или CH, или к их фармацевтически приемлемым солям.
1
2
3
4
5
6
7
8
9
1-4
[0043] Другое воплощение изобретения относится к соединениям формулы I, включая соединения формул Ia и Ib, где R, R, R, R, R и R такие, как определено непосредственно выше, а R, R и R независимо выбраны из Cалкильной группы, включая конкретно метил, или к их фармацевтически приемлемым солям.
[0044] Подразумевается, что соли соединений формулы I, такие как соль гидрохлорид или соль с трифторуксусной кислотой, включают соли с множественными сопряжениями, такие как моно-HCl, ди-HCl и т.д.
[0045] В еще одном воплощении настоящего изобретения предложены соединения формулы I, где
1
(1-4)
2
3
R представляет собой Cалкил, который является незамещенным или замещен заместителем, выбранным из -OH, -S(O)-CH и морфолинила;
- пиперидинила;
2
- циклогексила, который является незамещенным или замещен -NH; и
2
R представляет собой водород; или
1
2
R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют пиперазиновое кольцо; и
3
R представляет собой циклогексил, который является незамещенным или замещен -OH;
- тетрагидро-пиранил;
- фенил;
(1-6)
2
- Салкил, который является незамещенным или замещен заместителем, выбранным из фенила, хлор-фенила, тиофенила и -NH; и
4
R представляет собой водород; или
3
4
R и R вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют морфолиновое кольцо; и
X выбран из CH или N; и
их фармацевтически приемлемые соли.
[0046] В еще одном воплощении настоящего изобретения предложены соединения, которые определены в абзаце [0045], где X представляет собой атом азота.
[0047] Соединения по изобретению включают:
изопропил-[3-(2-фениламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин (Пример 12);
2-[3-(2-фениламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-этанол (Пример 13);
(2-метансульфонил-этил)-{3-[2-(тетрагидро-пиран-4-иламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-амин (Пример 14);
(2-метансульфонил-этил)-[3-(2-морфолин-4-ил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин (Пример 15);
[3-(2-изопропиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-(2-метансульфонил-этил)-амин (Пример 16);
4-[4-(8-изопропиламино-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил)-пиримидин-2-иламино]-циклогексанол (Пример 17);
изопропил-{3-[2-(тетрагидро-пиран-4-иламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-амин (Пример 18);
изопропил-[3-(2-морфолин-4-ил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин (Пример 19);
метил-[3-(2-фениламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин (Пример 20);
метил-[3-(2-морфолин-4-ил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин (Пример 21);
пиперидин-4-ил-{3-[2-(тетрагидро-пиран-4-иламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-амин (Пример 22);
[3-(2-морфолин-4-ил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-пиперидин-4-ил-амин (Пример 23);
[3-(2-изопропиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-пиперидин-4-ил-амин (Пример 24);
изопропил-[3-(2-изопропиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин (Пример 25);
[3-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-пиперидин-4-ил-амин (Пример 26);
4-{4-[8-(2-метансульфонил-этиламино)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанол (Пример 27);
2-{3-[2-(тетрагидро-пиран-4-иламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-этанол (Пример 28);
2-[3-(2-морфолин-4-ил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-этанол (Пример 29);
2-[3-(2-изопропиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-этанол (Пример 30);
2-[3-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-этанол (Пример 31);
изопропил-[3-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин (Пример 32);
(2-метансульфонил-этил)-[3-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин (Пример 33);
метил-{3-[2-(тетрагидро-пиран-4-иламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-амин (Пример 34);
метил-[3-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин (Пример 35);
N1-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-1-фенил-этан-1,2-диамин, гидрохлорид (Пример 52);
N1-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-1-фенил-пропан-1,3-диамин, гидрохлорид (Пример 54);
N1-{6-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-1-фенил-этан-1,2-диамин, гидрохлорид (Пример 55); *
бензил-{6-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-амин (Пример 56);
бензил-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-амин (Пример 57);
(2-хлор-бензил)-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-амин, гидрохлорид (Пример 58);
(4-хлор-бензил)-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-амин, гидрохлорид (Пример 59);
N1-{6-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-a]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-1-фенил-пропан-1,3-диамин, гидрохлорид (Пример 60);
{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-тиофен-3-илметил-амин (Пример 61);
1-(3-хлор-фенил)-N1-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-пропан-1,3-диамин, гидрохлорид (Пример 63);
{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-тиофен-2-илметил-амин, гидрохлорид (Пример 64);
(2-хлор-бензил)-{6-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-амин, гидрохлорид (Пример 65);
(3-хлор-бензил)-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-амин, гидрохлорид (Пример 66);
N-{3-[2-(3-хлор-бензиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид (Пример 67);
N-[3-(2-бензиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид (Пример 68);
N1-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-1-тиофен-3-ил-пропан-1,3-диамин, гидрохлорид (Пример 70);
(4-хлор-бензил)-{6-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-амин, гидрохлорид (Пример 71);
[3-(2-бензиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-(2-морфолин-4-ил-этил)-амин, гидрохлорид (Пример 72);
N-[3-(6-бензиламино-пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид (Пример 73);
N1-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-1-тиофен-3-ил-этан-1,2-диамин, гидрохлорид (Пример 75);
N-{3-[2-(3-амино-1-фенил-пропиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид (Пример 76);
N-{3-[2-(2-амино-1-фенил-этиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид (Пример 77);
1-(3-хлор-фенил)-N1-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-этан-1,2-диамин, гидрохлорид (Пример 79);
N-{3-[6-(2-амино-1-фенил-этиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид (Пример 80);
N-{3-[6-(3-амино-1-фенил-пропиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид (Пример 81);
N-{3-[6-(3-хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид (Пример 82);
N-{3-[2-(2-хлор-бензиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид (Пример 83);
N-(3-{6-[(тиофен-3-илметил)-амино]-пиридин-2-ил}-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид (Пример 84);
N-{3-[6-(2-хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклстексан-1,4-диамин, гидрохлорид (Пример 85);
N-{3-[6-(4-хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид (Пример 86);
N-(3-{6-[(тиофен-2-илметил)-амино]-пиридин-2-ил}-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид (Пример 87);
{3-[2-(2-хлор-бензиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-(2-морфолин-4-ил-этил)-амин, гидрохлорид (Пример 88);
{3-[2-(3-хлор-бензиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-(2-морфолин-4-ил-этил)-амин, гидрохлорид (Пример 89);
1-(3-хлор-фенил)-N1-{6-[8-(2-морфолин-4-ил-этиламино)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-пропан-1,3-диамин, гидрохлорид (Пример 90); и
1-(3-хлор-фенил)-N-{6-[8-(2-морфолин-4-ил-этиламино)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-этан-1,2-диамин гидрохлорид (Пример 91); и фармацевтически приемлемые соли вышеуказанных соединений.
[0048] Соединения формулы I, а также их соли, которые имеют по меньшей мере один асимметрический атом углерода, могут существовать в виде рацемических смесей или в виде разных стереоизомеров. Различные изомеры могут быть выделены известными методами разделения, например хроматографией.
[0049] Соединения, раскрытые в данном документе, и охваченные формулой I, приведенной выше, могут проявлять таутомерию или структурную изомерию. Подразумевается, что изобретение охватывает любые таутомерные или структурные изомерные формы этих соединений или смеси таких форм, и не ограничено какой-либо одной таутомерной или структурной изомерной формой, изображенной в формулах, приведенных выше.
Дозировки
[0050] Соединения по настоящему изобретению являются ингибиторами FLT3 и полезны в лечении, ослаблении симптомов или контролировании клеточных пролиферативных расстройств, в частности в химиопредупреждении рака. Химиопредупреждение означает ингибирование развития инвазивного рака либо путем блокирования инициирующего мутагенного события, либо путем блокирования развития предзлокачественных клеток, которые уже претерпели повреждающее воздействие ингибирования рецидива опухоли. Ожидается, что эти соединения и композиции, содержащие указанные соединения, особенно полезны в лечении или контролировании острого миелоидного лейкоза (AML).
[0051] "Терапевтически эффективное количество" или "эффективное количество" соединения по данному изобретению означает количество соединения, которое является эффективным для облегчения, ослабления или контролирования симптомов заболевания или пролонгирования выживания субъекта, которого лечат.
[0052] Терапевтически эффективное количество или дозировка соединения по данному изобретению может варьировать в широких пределах. Такую дозировку будут корректировать в зависимости от индивидуальных условий в каждом конкретном случае, включая конкретное(ые) вводимое(ые) соединение(я), путь введения, состояние, которое лечат, а также пациента, которого лечат. Как правило, в случае перорального или парентерального введения взрослым людям с массой тела приблизительно 70 кг подходящей будет суточная дозировка от примерно 10 мг до примерно 10000 мг, предпочтительно от примерно 200 мг до примерно 1000 мг, хотя верхний предел может быть превышен, когда для этого есть показания. Суточную дозировку можно вводить в однократной дозе или в разделенных дозах, или, в случае парентерального введения, ее можно вводить в виде непрерывной инфузии.
Композиции/препараты
[0053] В альтернативном воплощении настоящее изобретение охватывает фармацевтические композиции, содержащие по меньшей мере одно соединение формулы I, или его фармацевтически приемлемую соль, и фармацевтически приемлемый эксципиент и/или носитель.
[0054] Эти фармацевтические композиции могут быть пригодны для перорального, назального, местного (включая трансбуккальное и сублингвальное), ректального, вагинального и/или парентерального введения. Препараты для удобства могут быть представлены в стандартной лекарственно форме и могут быть изготовлены способами, известными в области фармации. Количество активного ингредиента, которое может быть объединено с веществом-носителем для изготовления однократной лекарственной формы, будет варьировать в зависимости от хозяина, которого лечат, а также от конкретного способа введения. Количество активного ингредиента, которое может быть объединено с веществом-носителем для изготовления однократной лекарственной формы обычно будет равно количеству соединения формулы I, которое обеспечивает терапевтический эффект. Как правило, из ста процентов это количество будет составлять от примерно 1 процента до примерно девяноста девяти процентов активного ингредиента, предпочтительно от примерно 5 процентов до примерно 70 процентов, наиболее предпочтительно от примерно 10 процентов до примерно 30 процентов.
[0055] Способы изготовления этих препаратов или композиций включают стадию объединения соединения по настоящему изобретению с носителем и, возможно, с одним или более вспомогательными ингредиентами. Обычно препараты изготавливают путем равномерного и однородного смешивания соединения по настоящему изобретению с жидкими носителями, или с тонкоизмельченными твердыми носителями, или и с теми и с другими, а затем, если это необходимо, формования продукта.
[0056] Препараты по изобретению, подходящие для перорального введения, могут быть изготовлены в форме капсул, облаток, саше, пилюль, таблеток, леденцов (с использованием корригированной основы, обычно сахарозы и аравийской камеди или трагаканта), порошков, гранул, или в виде раствора или суспензии в водной или неводной жидкости, или в виде жидкой эмульсии типа масло-в-воде или вода-в-масле, или в виде эликсира или сиропа, или в виде пастилок (с использованием инертной основы, такой как желатин и глицерин, или сахароза и аравийская камедь), и/или в виде полосканий для рта и т.п., каждая(ый) из которых содержит предопределенное количество соединения по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента. Соединение по настоящему изобретению можно вводить также в виде болюса, электуария или пасты.
[0057] Фармацевтические препараты по изобретению могут также содержать консерванты, солюбилизаторы, стабилизаторы, увлажняющие агенты, эмульгаторы, подсластители, красители, корригенты, соли для варьирования осмотического давления, буферные агенты, покровные агенты или антиоксиданты. Они могут также содержать другие терапевтически ценные вещества, включая дополнительные активные ингредиенты, иные, чем соединения формулы I.
Общий синтез соединений по изобретению
[0058] Согласно настоящему изобретению предложены также способы синтеза имидазол[1,2-a]пиразинов по изобретению.
[0059] Соединения по изобретению могут быть получены способами, известными в данной области техники. Подходящие способы синтеза этих соединений приведены также в Примерах. Как правило, соединения формулы I могут быть синтезированы согласно одному из описанных ниже путей синтеза.
1
2
[0060] Исходные вещества либо коммерчески доступны, либо могут быть синтезированы способами, известными в данной области техники. Соединения формулы Ia, где X представляет собой N, могут быть синтезированы, начиная с известного 3-бром-8-хлор-имидазо[1,2-а]пиразина (4) (Lumma, Jr., W.С.; Randall, W.С.; Cresson, E.L.; Huff, J.R.; Hartman, R.D.; Lyon, T.F. J. Med. Chem. 1983, 26, 357-363; Meurer, L.C.; Tolman, R.L.; Chapin, E.W.; Saperstein, R.; Vicario, P.P.; Zrada, M.M.; MacCoss, M. J. Med. Chem. 1992, 35, 3845-3857). В соответствии со Схемой 1, приведенной ниже, 2-амино-3-хлорпиразин (1) может быть подвергнут взаимодействию с 2-бром-1,1-диметокси-этаном (2) с получением 8-хлор-имидазо[1,2-a]пиразина (3), который может быть подвергнут бромированию с получением 3-бром-8-хлор-имидазо[1,2-а]пиразина (4). Соединение 4 может быть подвергнуто взаимодействию с соответствующим амином (HNRR) либо в избытке, либо в присутствии другого основания, такого как диизопропилэтиламин, в подходящем растворителе, таком как этанол или бутанол, при температуре от комнатной температуры до температуры дефлегмации с получением соединения 5. Соединение 5 затем может быть подвергнуто реакции конденсации с 2-метилсульфанил-4-трибутилстаннанил-пиримидином (6) в присутствии подходящего палладиевого катализатора с получением промежуточного соединения 7.
[0061] В случаях, когда некоторые амины содержат дополнительные функциональные группы, для облегчения синтеза можно использовать подходящие защитные группы (например трет-бутоксикарбонильную группу). При использовании таких защитных групп удаление таких защитных групп с получением соединений по изобретению может быть осуществлено стандартными методами, известными специалистам в области органического синтеза.
Схема 1
1. 48% водн. HBr, дефлегмация
3
2. NaHCO, 2-PrOH
3. Дефлегмация
1
2
[0062] Альтернативно, промежуточное соединение 7, используемое в синтезе соединений формулы Ia, может быть получено согласно Схемам 2-4, приведенным ниже. 2-Метилсульфанил-пиримидин-4-карбальдегид (8) может быть подвергнут реакции конденсации с (метоксиметил)трифенилфосфонийхлоридом (реакция Виттига (Wittig)) с получением 4-(2-метокси-винил)-2-метилсульфанил-пиримидина (9). В результате окисления соединения (9) N-бромсукцинимидом в метаноле образуется 4-(1-бром-2,2-диметокси-этил)-2-метилсульфанил-пиримидин (10). В результате реакции конденсации соединения (10) с 2-амино-3-хлорпиразином (1) в водном растворе кислоты и сорастворителе, таком как ацетон, образуется 8-хлор-3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин (11). Соединение 11 затем может быть подвергнуто взаимодействию с соответствующим амином (HNRR) либо в избытке, либо в присутствии другого основания, такого как диизопропилэтиламин, в подходящем растворителе, таком как этанол или бутанол, при температуре от комнатной температуры до температуры дефлегмации с получением промежуточного соединения 7. Промежуточное соединение 7 может быть также получено через этиловые гомологи 9′ и 10′ по Схеме 4, приведенной ниже. Соединение 9′ (этиловый гомолог) может быть получено в результате реакции этил-этинилового эфира (13) с боран-тетрагидрофурановым комплексом с последующим осуществлением катализируемой палладием реакции сочетания с 4-хлор-2-(метилтио)пиримидином (12). Окисление соединения 9′ N-бромсукцинимидом в этаноле приводит к образованию этилового гомолога 10′. Гомолог 10′ может быть превращен в промежуточное соединение 7 таким же способом, как соединение 10.
Схема 2
Схема 3
Схема 4
3
4
[0063] Промежуточное соединение 7 может быть превращено в соединения формулы Ia по данному изобретению по Схеме 5, приведенной ниже. После окисления подходящим окислителем, таким как перкислота или Oxone, с получением либо сульфоксида (14, n=1), либо сульфона (14, n=2). Полученный сульфоксид или сульфон 14 может быть превращен в соединения формулы Ia по данному изобретению путем нагревания его с соответствующим амином (HNRR).
3
4
[0064] Соединения формулы Ib по данному изобретению могут быть получены способом, аналогичным способу получения соединений формулы Ia, как показано ниже на Схемах 6-7. Начиная с 6-бром-пиридин-2-карбальдегида (15) вместо пиримидинового аналога 8, может быть получено соответствующее промежуточное соединение 19. Промежуточное соединение 19 затем может быть превращено в соединения формулы Ib по данному изобретению в результате катализируемой палладием реакции с соответствующим амином (HNRR).
Схема 6
Схема 7
Кристаллические Формы
[0065] Специалистам в данной области понятно, что если соединения по изобретению являются твердыми веществами, то эти соединения и их соли могут существовать в разных кристаллических или полиморфных формах, которые все входят в объем настоящего изобретения и охвачены конкретно указанными формулами.
Примеры
[0066] Соединения по настоящему изобретению могут быть синтезированы известными способами. Приведенные ниже примеры и ссылки представлены для лучшего понимания настоящего изобретения. Однако примеры не предназначены для ограничения изобретения, истинный объем которого изложен в прилагаемой формуле изобретения. Названия в примерах присвоены конечным продуктам с использованием AutoNom 2000 Add-in v4.0 SP2 (функция в ISIS Draw, Elsevier/MDL) или AutoNom 2000 TT v4.01.305 (Elsevier/MDL), или функций, доступных в ChemDraw Pro Control 11.0.2 (CambridgeSoft Corp.).
Сокращения, использованные в Примерах:
ATP
аденозин трифосфат
Boc<sub>2</sub>O
ди-трет-бутилдикарбонат
<sup>n</sup>BuOH
н-бутанол
CDCl<sub>3</sub>
хлороформ-d
CD<sub>3</sub>OD
дейтерированный метанол
CH<sub>2</sub>Cl<sub>2</sub>
дихлорметан
CH<sub>3</sub>CN
ацетонитрил
СН<sub>3</sub>ОН
метанол
CO<sub>2</sub>
диоксид углерода
DCM
дихлорметан
DEAD
диэтилазодикарбоксилат
DIPE
диизопропиловый эфир
DIPEA
N,N-диизопропилэтиламин
DMAP
4-(диметиламино)пиридин
DMF
N,N-диметилформамид
DMSO
диметилсульфоксид
DMSO-d<sub>6</sub>
дейтерированный диметилсульфоксид
Et<sub>3</sub>N
триэтиламин
Et<sub>2</sub>O
диэтиловый эфир
EtOAc
этилацетат
EtOH
этанол
FBS
сыворотка плода коровы
HCl
хлористый водород
Концентрированная HCl
концентрированная соляная кислота
H<sub>2</sub>O
вода
HPLC
высокоэффективная жидкостная хроматография
iPrOH
2-пропанол
LAH
алюмогидрид лития
LC-MS
жидкостная хроматография/масс-спектроскопия
LDA
диизопропиламид лития
LiAIH<sub>4</sub>
алюмогидрид лития
KCN
цианид калия
K<sub>2</sub>CO<sub>3</sub>
карбонат калия
mCPBA
мета-хлор-пербензойная кислота
MeCN
ацетонитрил
MeOH
метанол
MgCl<sub>2</sub>
хлорид магния
MgSO<sub>4</sub>
сульфат магния
N<sub>2</sub>
газ азот
NaHCO<sub>3</sub>
бикарбонат натрия
NaOH
гидроксид натрия
NaOtBu
трет-бутоксид натрия
Na<sub>2</sub>SO<sub>4</sub>
сульфат натрия
NH<sub>3</sub>
аммиак
Pd<sub>2</sub>(dba)<sub>3</sub>
трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0)
PPh<sub>3</sub>
трифенилфосфин
TFA
трифторуксусная кислота
THF
тетрагидрофуран
TLC
тонкослойная хроматография
[0067] У перечисленных ниже поставщиков были приобретены следующие исходные вещества:
LDA
Sigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co., Ltd
Этил-этиниловый эфир
Alfa Aesar China (Tianjin) Co., Ltd.
Боран-тетрагидрофуран
Alfa Aesar China (Tianjin) Co., Ltd.
Oxone
Beijing huaxue shiji
(Метоксиметил)трифенилфосфоний-хлорид
Alfa Aesar China (Tianjin) Co., Ltd.
4-Хлор-2-(метилтио)пиримидин
Alfa Aesar China (Tianjin) Co., Ltd.
1,1′-Бис(дифенилфосфино)ферроцен
Shanghai Aopudishi
2-Дициклогексилфосфино-2(N,N-диметиламино)бифенил
Alfa Aesar China (Tianjin) Co., Ltd.
X-Phos
Alfa Aesar China (Tianjin) Co., Ltd.
1,1′-Бис(дифенилфосфино)ферроцен)-дихлорпалладий
Shanghai Aopudishi
2-Амино-3-хлорпиразин
Alfa Aesar China (Tianjin) Co., Ltd.
2-Хлорбензиламин
Alfa Aesar China (Tianjin) Co., Ltd.
3-Хлорбензиламин
Alfa Aesar China (Tianjin) Co., Ltd.
4-Хлорбензиламин
Alfa Aesar China (Tianjin) Co., Ltd.
2-Тиофенметиламин
Alfa Aesar China (Tianjin) Co., Ltd.
2-Метилсульфанил-пиримидин-4-карбальдегид
Alfa Aesar China (Tianjin) Co., Ltd.
4-(2-Аминоэтил)морфолин
Alfa Aesar China (Tianjin) Co., Ltd.
Трифенилфосфин
Beijing huaxue shiji
N-Бромсукцинимид
Beijing Ouhe
3-Хлорпероксибензойная кислота
Beijing Ouhe
Оксихлорид фосфора
Beijing Huagong
пара-Толуолсульфоновая кислота
Beijing Huagong
2-(Метилтио)-4-(трибутилстаннил)пиримидин
Alfa Aesar
Пример 1
3-Бром-8-хлор-имидазо[1,2-а]пиразин
[0068] 3-Бром-8-хлор-имидазо[1,2-а]пиразин был получен по методикам, писанным в Lumma, Jr., W.С.; Randall, W.С.; Cresson, E.L.; Huff, J.R.; Hartman, R.D.; Lyon, T.F. J. Med. Chem. 1983, 26, 357-363; Meurer, L.C.; Tolman, R.L.; Chapin, E.W.; Saperstein, R.; Vicario, P.P.; Zrada, M.M.; MacCoss, M. J. Med. Chem. 1992, 35, 3845-3857.
Пример 2
2-(3-Бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино)-этанол
n
1
3
4
6
[0069] 3-Бром-8-хлор-имидазо[1,2-a]пиразин (0,70 г, 3,0 ммоль) (из Примера 1, приведенного выше) перемешивали в BuOH (10 мл) и добавляли этаноламин (0,22 мл, 3,65 ммоль), затем основание Хюнига (1,04 мл, 6,0 ммоль). Эту реакционную смесь затем нагревали при 100°C в течение ночи. Смесь концентрировали досуха и добавляли воду (150 мл), затем добавляли насыщенный водный раствор NaHCO (50 мл). Реакционную смесь затем экстрагировали EtOAc (3×20 мл), и органические фазы объединяли, промывали водой (2×20 мл), сушили над MgSO и концентрировали досуха с получением 2-(3-бром-имидазо[1,2-a]пиразин-8-иламино)-этанола (выход 0,59 г, 77%). Н (400 МГц; DMSO-d) δ 3.52-3.56 (2H, m), 3.58-3.62 (2H, m), 4.79 (1H, t, J=5.4 Гц), 7.42 (2H, d, J=5 Гц), 7.56 (1H, d, J=5 Гц), 7.66 (1H, s).
Пример 3
(3-Бром-имидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)-(2-метилсульфанил-этил)-амин
[0070] (3-Бром-имидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)-(2-метилсульфанил-этил)-амин был получен способом, аналогичным способу, который описан в Примере 2, начиная с 3-бром-8-хлор-имидазо[1,2-а]пиразина и 2-метилсульфанил-этиламина.
Пример 4
трет-Бутиловый эфир (3-бром-имидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)-(2-метилсульфанил-этил)-карбаминовой кислоты
2
2
2
4
f
3
1
[0071] (3-Бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-(2-метилсульфанил-этил)-амин (1,33 г, 4,63 ммоль) (из Примера 3, приведенного выше) перемешивали в 1,4-диоксане (30 мл) и BocO (1,00 г, 4,63 ммоль), затем добавляли DMAP (30 мг, 0,25 ммоль), и эту реакционную смесь нагревали при 90°C в течение 5 часов. После этого дополнительно добавляли BocO (1,00 г, 4,63 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при 90°C в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали досуха и добавляли EtO (50 мл). Органический слой промывали водой (4×25 мл), сушили над MgSO и концентрировали досуха. Неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле (от 100% петролейного эфира до 40% EtOAc в петролейном эфире, TLC R=0,52, 30% EtOAc в петролейном эфире) с получением трет-бутилового эфира (3-бром-имидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)-(2-метилсульфанил-этил)-карбаминовой кислоты (выход 1,15 г, 64%). Н (400 МГц; CDCl) δ 1.41 (9H, s); 2.10 (3H, s); 2.85-2.89 (2H, m), 4.07-4.11 (2H, m), 7.75 (1H, s), 7.81 (1H, d, J=5 Гц), 7.95 (1H, d, J=5 Гц).
Пример 5
трет-Бутиловый эфир (3-бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-(2-метансульфонил-этил)-карбаминовой кислоты
3
4
f
3
1
[0072] трет-Бутиловый эфир (3-бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-(2-метилсульфанил-этил)-карбаминовой кислоты (1,52 г, 3,93 ммоль) (из Примера 4, приведенного выше) перемешивали в DCM (25 мл), охлаждали во льду и порциями добавляли mCPBA (2,20 г, максимальная чистота 77%, 9,82 ммоль) в течение 3 минут. Реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут, затем разбавляли DCM (50 мл) и промывали 10%-ным метабисульфитом натрия (25 мл), 10%-ным NaHCO (3×25 мл), сушили над MgSO и концентрировали досуха. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир-EtOAc; TLC R=0,23, 60% EtOAc в петролейном эфире) с получением трет-бутилового эфира (3-бром-имидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)-(2-метансульфонил-этил)-карбаминовой кислоты (выход 1,61 г, 98%). Н (400 МГц; CDCl) δ 1.40 (9Н, s), 3.04 (3Н, s), 3.61 (2Н, t, J=7 Гц), 4.31-4.35 (2Н, m), 7.74 (1Н, s), 7.83 (1Н, d, J=5 Гц), 7.99 (1Н, d, J=5 Гц).
Пример 6
(3-Бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-метил-амин
[0073] (3-Бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-метил-амин был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 2, начиная с 3-бром-8-хлор-имидазо[1,2-а]пиразина и избытка метиламина (33 масс.% в EtOH) при комнатной температуре в EtOH.
Пример 7
трет-Бутиловый эфир (3-бром-имидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)-метил-карбаминовой кислоты
[0074] трет-Бутиловый эфир (3-бром-имидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)-метил-карбаминовой кислоты был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 4, начиная с (3-бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-метил-амина (из Примера 6, приведенного выше).
Пример 8
трет-Бутиловый эфир метил-[3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-a]пиразин-8-ил]-карбаминовой кислоты
f
3
1
+
[0075] 2-Метилсульфанил-4-трибутилстаннанил-пиримидин (19,1 г, 46,0 ммоль) перемешивали в дегазированном толуоле (достигается в результате барботирования растворителя через него в течение 2 часов) (200 мл) в атмосфере азота, затем добавляли трет-бутиловый эфир (3-бром-имидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)-метил-карбаминовой кислоты (13,1 г, 40,0 ммоль) (из Примера 7, приведенного выше), затем добавляли хлорид бис(трифенилфосфин)палладия(М) (1,12 г, 1,60 ммоль), и эту реакционную смесь нагревали при температуре дефлегмации. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали досуха. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир-EtOAc, TLC R=0,17, 20% EtOAc в петролейном эфире) и затем растирали с DIPE с получением трет-бутилового эфира метил-[3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-карбаминовой кислоты (выход 8,00 г, 54%). Н (400 МГц; CDCl) δ 1.42 (9Н, s), 2.67 (3Н, s), 3.48 (3Н, s), 7.36 (1Н, d, J=4 Гц), 7.93 (1Н, d, J=4 Гц), 8.37 (1Н, s), 8.55 (1Н, d, J=4 Гц), 9.64 (1Н, d, J=4 Гц). LC-MS: [М+Н] 373.3.
Пример 9
(3-Бром-имидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)-изопропил-амин
[0076] (3-Бром-имидазо[1,2-a]пиразин-8-ил)-изопропил-амин был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 2, начиная с 3-бром-8-хлор-имидазо[1,2-а]пиразина и изопропиламина.
Пример 10
трет-Бутиловый эфир (3-бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-изопропил-карбаминовой кислоты
[0077] трет-Бутиловый эфир (3-бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-изопропил-карбаминовой кислоты был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 4, начиная с (3-бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-изопропил-амина (из Примера 9, приведенного выше).
Пример 11
трет-Бутиловый эфир изопропил-[3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-карбаминовой кислоты
[0078] трет-Бутиловый эфир изопропил-[3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-карбаминовой кислоты был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 8, начиная с трет-бутилового эфира (3-бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-изопропил-карбаминовой кислоты (из Примера 10, приведенного выше).
Пример 12
Изопропил-[3-(2-фениламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин
n
+
[0079] К трет-бутиловому эфиру изопропил-[3-(2-метансульфонил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-карбаминовой кислоты (117 мг, 0,27 ммоль) (из Примера 11, приведенного выше) добавляли анилин (38 мкл, 0,42 ммоль) в BuOH (3 мл), затем добавляли конц. HCl (38 мкл, 0,46 ммоль),  и реакционную смесь встряхивали при 95°C в течение ночи. После этого реакционную смесь концентрировали досуха, растворяли в DMSO (1,8 мл) и затем очищали препаративной HPLC с получением изопропил-[3-(2-фениламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амина (выход 27,3 мг, 29%). LC-MS: [М+Н] 346,3.
Пример 13
2-[3-(2-Фениламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-этанол
+
[0080] 2-[3-(2-Фениламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-этанол был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с 2-(3-бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино)-этанола (из Примера 2, приведенного выше), 2-метилсульфанил-4-трибутилстаннанил-пиримидина и анилина. LC-MS: [М+Н] 348,3.
Пример 14
(2-Метансульфонил-этил)-{3-[2-(тетрагидро-пиран-4-иламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-амин
+
[0081] (2-Метансульфонил-этил)-{3-[2-(тетрагидро-пиран-4-иламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-амин был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с трет-бутилового эфира (3-бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-(2-метансульфонил-этил)-карбаминовой кислоты (из Примера 5, приведенного выше), 2-метилсульфанил-4-трибутилстаннанил-пиримидина и 4-амино-тетрагидропирана. LC-MS: [М+Н] 418,2.
Пример 15
(2-Метансульфонил-этил)-[3-(2-морфолин-4-ил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин
+
[0082] (2-Метансульфонил-этил)-[3-(2-морфолин-4-ил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с трет-бутилового эфира (3-бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-(2-метансульфонил-этил)-карбаминовой кислоты (из Примера 5, приведенного выше), 2-метилсульфанил-4-трибутилстаннанил-пиримидина и морфолина. LC-MS: [М+Н] 404,2.
Пример 16
[3-(2-Изопропиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-(2-метансульфонил-этил)-амин
+
[0083] [3-(2-Изопропиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-(2-метансульфонил-этил)-амин был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с трет-бутилового эфира (3-бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-(2-метансульфонил-этил)-карбаминовой кислоты (из Примера 5, приведенного выше), 2-метилсульфанил-4-трибутилстаннанил-пиримидина и изопропиламина. LC-MS: [М+Н] 376,3.
Пример 17
4-[4-(8-Изопропиламино-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил)-пиримидин-2-иламино]-циклогексанол
+
[0084] 4-[4-(8-Изопропиламино-имидазо[1,2-a]пиразин-3-ил)-пиримидин-2-иламино]-циклогексанол был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с трет-бутилового эфира изопропил-[3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-карбаминовой кислоты (из Примера 11, приведенного выше) и транс-4-амино-циклогексанола. LC-MS: [М+Н] 368,3.
Пример 18
Изопропил-{3-[2-(тетрагидро-пиран-4-иламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-амин
+
[0085] Изопропил-{3-[2-(тетрагидро-пиран-4-иламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-амин был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с трет-бутилового эфира изопропил-[3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-карбаминовой кислоты (из Примера 11, приведенного выше) и 4-амино-тетрагидропирана. LC-MS: [М+Н] 354,3.
Пример 19
Изопропил-[3-(2-морфолин-4-ил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин
+
[0086] Изопропил-[3-(2-морфолин-4-ил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с трет-бутилового эфира изопропил-[3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-карбаминовой кислоты (из Примера 11, приведенного выше) и морфолина. LC-MS: [М+Н] 340,3.
Пример 20
Метил-[3-(2-фениламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин
+
[0087] Метил-[3-(2-фениламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с трет-бутилового эфира метил-[3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-карбаминовой кислоты (из Примера 8, приведенного выше) и анилина. LC-MS: [М+Н] 318,2.
Пример 21
Метил-[3-(2-морфолин-4-ил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин
+
[0088] Метил-[3-(2-морфолин-4-ил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с трет-бутилового эфира метил-[3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-карбаминовой кислоты (из Примера 8, приведенного выше) и морфолина. LC-MS: [М+Н] 312,3.
Пример 22
Пиперидин-4-ил-{3-[2-(тетрагидро-пиран-4-иламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-амин
+
[0089] Пиперидин-4-ил-{3-[2-(тетрагидро-пиран-4-иламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-амин был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с 3-бром-8-хлор-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 1, приведенного выше), трет-бутилового эфира 4-амино-пиперидин-1-карбоновой кислоты, 2-метилсульфанил-4-трибутилстаннанил-пиримидина и 4-амино-тетрагидропирана. LC-MS: [М+Н] 395,4.
Пример 23
[3-(2-Морфолин-4-ил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-пиперидин-4-ил-амин
+
[0090] [3-(2-Морфолин-4-ил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-пиперидин-4-ил-амин был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с 3-бром-8-хлор-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 1, приведенного выше), трет-бутилового эфира 4-амино-пиперидин-1-карбоновой кислоты, 2-метилсульфанил-4-трибутилстаннанил-пиримидин и морфолина. LC-MS: [М+Н] 381.3.
Пример 24
[3-(2-Изопропиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-пиперидин-4-ил-амин
+
[0091] [3-(2-Изопропиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-пиперидин-4-ил-амин был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с 3-бром-8-хлор-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 1, приведенного выше), трет-бутилового эфира 4-амино-пиперидин-1-карбоновой кислоты, 2-метилсульфанил-4-трибутилстаннанил-пиримидина и изопропиламина. LC-MS: [М+Н] 353,3.
Пример 25
Изопропил-[3-(2-изопропиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин
+
[0092] Изопропил-[3-(2-изопропиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с трет-бутилового эфира изопропил-[3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-карбаминовой кислоты (из Примера 11, приведенного выше) и изопропиламина. LC-MS: [М+Н] 312,3.
Пример 26
[3-(2-Метиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-пиперидин-4-ил-амин
[0093] [3-(2-Метиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-пиперидин-4-ил-амин был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с 3-бром-8-хлор-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 1, приведенного выше), трет-бутилового эфира 4-амино-пиперидин-1-карбоновой кислоты, 2-метилсульфанил-4-трибутилстаннанил-пиримидина и метиламина. LC-MS: [М+Н]+325,3.
Пример 27
4-{4-[8-(2-Метансульфонил-этиламино)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанол
+
[0094] 4-{4-[8-(2-Метансульфонил-этиламино)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-иламино}-циклогексанол был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с трет-бутилового эфира (3-бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-(2-метансульфонил-этил)-карбаминовой кислоты (из Примера 5, приведенного выше), 2-метилсульфанил-4-трибутилстаннанил-пиримидина и транс-4-амино-циклогексанола. LC-MS: [М+Н] 432,1.
Пример 28
2-{3-[2-(Тетрагидро-пиран-4-иламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-этанол
+
[0095] 2-{3-[2-(Тетрагидро-пиран-4-иламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-этанол был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с 2-(3-бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино)-этанола (из Примера 2, приведенного выше), 2-метилсульфанил-4-трибутилстаннанил-пиримидина и 4-амино-тетрагидропирана. LC-MS: [М+Н] 356,3.
Пример 29
2-[3-(2-Морфолин-4-ил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-этанол
+
[0096] 2-[3-(2-Морфолин-4-ил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-этанол был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с 2-(3-бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино)-этанола (из Примера 2, приведенного выше), 2-метилсульфанил-4-трибутилстаннанил-пиримидина и морфолина. LC-MS: [М+Н] 342,3.
Пример 30
2-[3-(2-Изопропиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-этанол
+
[0097] 2-[3-(2-Изопропиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-этанол был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с 2-(3-бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино)-этанола (из Примера 2, приведенного выше), 2-метилсульфанил-4-трибутилстаннанил-пиримидина и изопропиламина. LC-MS: [М+Н] 314,3.
Пример 31
2-[3-(2-Метиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-этанол
+
[0098] 2-[3-(2-Метиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-этанол был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с 2-(3-бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино)-этанола (из Примера 2, приведенного выше), 2-метилсульфанил-4-трибутилстаннанил-пиримидина и метиламина. LC-MS: [М+Н] 286,2.
Пример 32
Изопропил-[3-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин
+
[0099] Изопропил-[3-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с трет-бутилового эфира изопропил-[3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-карбаминовой кислоты (из Примера 11, приведенного выше) и метиламина. LC-MS: [М+Н] 284,3.
Пример 33
(2-Метансульфонил-этил)-[3-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин
+
[00100] (2-Метансульфонил-этил)-[3-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере. 12, начиная с трет-бутилового эфира (3-бром-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-(2-метансульфонил-этил)-карбаминовой кислоты (из Примера 5, приведенного выше), 2-метилсульфанил-4-трибутилстаннанил-пиримидина и метиламина. LC-MS: [М+Н] 348,2.
Пример 34
Метил-{3-[2-(тетрагидро-пиран-4-иламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-амин
+
[00101] Метил-{3-[2-(тетрагидро-пиран-4-иламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-амин был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с трет-бутилового эфира метил-[3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-карбаминовой кислоты (из Примера 8, приведенного выше) и 4-амино-тетрагидропирана. LC-MS: [М+Н] 326,3.
Пример 35
Метил-[3-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин
+
[0100] Метил-[3-(2-метиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-амин был получен способом, аналогичным способу, описанному в Примере 12, начиная с трет-бутилового эфира метил-[3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-карбаминовой кислоты (из Примера 8, приведенного выше) и метиламина. LC-MS: [М+Н] 256,2.
Пример 36
2-Бром-6-(-2-метокси-винил)-пиридин
2
4
+
[0101] К суспензии (метоксиметил)трифенилфосфонийхлорида (34,5 г, 100,6 ммоль) в THF (500 мл) при -10°C добавляли LDA (60 мл, 2 моль/л). Эту смесь перемешивали при -10°C в течение 1 часа, затем добавляли 6-бромпиколинальдегид (10 г, 53,8 ммоль) в THF (200 мл). Реакционную смесь затем оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали при комнатной температуре в течение 12 часов. Раствор затем распределяли между водой и диэтиловым эфиром. Водную фракцию отделяли и экстрагировали дважды диэтиловым эфиром. Органические слои промывали рассолом и сушили над NaSO и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали хроматографией (петролейный эфир:этилацетат, 20:1) с получением 2-бром-6-(-2-метокси-винил)-пиридина (выход 9,3 г, 80%). LC-MS: [М+Н] 215.
Пример 37
2-Бром-6-(1-бром-2,2-диметокси-этил)-пиридин
+
[0102] 2-Бром-6-(-2-метокси-винил)-пиридин (из Примера 36, приведенного выше) (9,3 г, 43,4 ммоль) растворяли в метаноле (200 мл), и к этому раствору добавляли NBS (9,3 г, 52,3 ммоль) при 0°C. После перемешивания при той же температуре в течение 30 минут к смеси добавляли воду. Объединенный реакционный раствор экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали рассолом, сушили и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением остатка, который очищали хроматографией (петролейный эфир:этилацетат, 20:1) с получением 2-бром-6-(1-бром-2,2-диметокси-этил)-пиридина (выход 11,9 г, 84%). LC-MS: [М+Н] 324.
Пример 38
3-(6-Бром-пиридин-2-ил)-8-хлор-имидазо[1,2-а]пиразин
2
3
2
2
3
+
[0103] Смесь 2-бром-6-(1-бром-2,2-диметокси-этил)-пиридина (из Примера 37, приведенного выше) (5,267 г, 16,2 ммоль), 3-хлорпиразин-2-амина (2,1 г, 16,2 ммоль) и pTsOH·HO (2,1 г, 11 ммоль) в CHCN (900 мл) и воды (90 мл) перемешивали и нагревали при температуре дефлегмации в течение ночи. Реакционную смесь затем охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали хроматографией (CHCl:CHOH, 100:1) с получением 3-(6-бром-пиридин-2-ил)-8-хлор-имидазо[1,2-а]пиразина (выход 4,86 г, 52%). LC-MS: [М+Н] 309.
Пример 39
3-(6-Бром-пиридин-2-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин
2
2
2
4
2
2
3
+
[0104] Смесь 3-(6-бром-пиридин-2-ил)-8-хлор-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 38, приведенного выше) (1,44 г, 4,65 ммоль), 1-метилпиперазина (2,1 г, 21 ммоль) и диизопропилэтиламина (2,7 г, 21 ммоль) в 2-пропаноле (300 мл) перемешивали и нагревали при температуре дефлегмации в течение ночи. Раствор затем охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении. Полученное твердое вещество промывали водой и распределяли между CHCl и рассолом. Органический слой сушили над NaSO и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Неочищенный продукт очищали хроматографией (CHCl:CHOH, 100:1) с получением 3-(6-бром-пиридин-2-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (выход 1,27 г, 73%). LC-MS: [М+Н] 373.
Пример 40
трет-Бутиловый эфир {4-[3-(6-бром-пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты
2
3
2
2
3
+
[0105] Смесь 3-(6-бром-пиридин-2-ил)-8-хлор-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 38, приведенного выше) (1,94 г, 6,27 ммоль), трет-бутилового эфира транс-(4-амино-циклогексил)-карбаминовой кислоты (1,61 г, 7,52 ммоль), KCO (1,04 г, 7,52 ммоль) в DMF (20 мл) перемешивали при 140°C в течение 15 часов. Раствор затем охлаждали до комнатной температуры и вливали в воду. Полученное твердое вещество фильтровали и промывали водой. Неочищенный продукт очищали хроматографией (CHCl:CHOH, 100:1) с получением трет-бутилового эфира {4-[3-(6-бром-пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (выход 0,512 г, 17%). LC-MS: [М+Н] 487.
Пример 41
[3-(6-Бром-пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-(2-морфолин-4-ил-этил)-амин
3
2
2
3
+
[0106] Смесь 3-(6-бром-пиридин-2-ил)-8-хлор-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 38, приведенного выше) (3,09 г, 10,0 ммоль), 2-морфолин-4-ил-этиламина (2,6 г, 20,0 ммоль), NEt (2,02 г, 20,0 ммоль) в 2-пропаноле (300 мл) перемешивали и нагревали при температуре дефлегмации в течение 16 часов. Раствор затем охлаждали до комнатной температуры и вливали в воду. Полученное твердое вещество фильтровали и промывали водой. Неочищенный продукт очищали хроматографией (CHCl:CHOH, 20:1) с получением [3-(6-бром-пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-(2-морфолин-4-ил-этил)-амина (выход 2,5 г, 62%). LC-MS: [М+Н] 403.
Пример 42
4-(2-Метокси-винил)-2-метилсульфанил-пиримидин
+
[0107] (Метоксиметил)трифенилфосфонийхлорид (68,6 г, 0,2 моль) растворяли в THF (1000 мл), и к этому раствору добавляли диизопропиламид лития (100 мл, 0,2 моль) при -20°C. После перемешивания при комнатной температуре в течение 0,5 часа к этому раствору по каплям добавляли раствор 2-(метилтио)пиримидин-4-карбальдегида (15,4 г, 0,1 моль) в THF (400 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем к этой смеси добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония (200 мл), экстрагировали этилацетатом (1500 мл) и сушили над безводным сульфатом натрия. Органический слой концентрировали и очищали хроматографией (петролейный эфир:этилацетат, 3:1) с получением 4-(2-метокси-винил)-2-метилсульфанил-пиримидина в виде желтого твердого вещества (выход 11,2 г, 61,2%). LC-MS: [М+Н] 183.
Пример 43
4-(1-Бром-2,2-диметокси-этил)-2-метилсульфанил-пиримидин
+
[0108] К перемешиваемому раствору 4-(2-метокси-винил)-2-метилсульфанил-пиримидина (из Примера 42, приведенного выше) (11,2 г, 61,2 ммоль) в метаноле (100 мл) добавляли N-бромсукцинимид (12 г, 67,3 ммоль) при 0°C. После перемешивания при комнатной температуре в течение 1 часа к этой смеси добавляли воду (100 мл), экстрагировали этилацетат (200 мл), и органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Затем фильтрат концентрировали и очищали хроматографией (петролейный эфир: этил ацетат, 5:1) с получением 4-(1-бром-2,2-диметокси-этил)-2-метилсульфанил-пиримидина в виде желтого масла (выход 11,5 г, 64,1%). LC-MS: [М+Н] 293.
Пример 44
8-Хлор-3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин
+
[0109] Смесь 4-(1-бром-2,2-диметокси-этил)-2-метилсульфанил-пиримидина (из Примера 43, приведенного выше) (7,5 г, 25,6 ммоль), 3-хлорпиразин-2-амина (3,96 г, 30,7 ммоль) и пара-толуолсульфоновой кислоты (1,594 г, 9,22 ммоль) в смеси растворителей ацетонитрил/вода (120 мл:6 мл) нагревали при температуре дефлегмации в течение 6 часов. Реакционную смесь концентрировали и очищали хроматографией (дихлорметан:метанол, 20:1) с получением 8-хлор-3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина в виде белого твердого вещества (выход 2,3 г, 32,4%). LC-MS: [М+Н] 278.
Пример 45
8-(4-Метил-пиперазин-1-ил)-3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин
+
[0110] К раствору 8-хлор-3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 44, приведенного выше) (1,36 г, 4,91 ммоль) в iPrOH (100 мл) добавляли 1-метилпиперазин (0,64 г, 6,38 ммоль), затем добавляли диизопропилэтиламин (0,82 г, 6,38 ммоль). Эту реакционную смесь перемешивали при температуре дефлегмации в течение 15 часов, и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток экстрагировали дихлорметаном (150 мл) и промывали водой (3×25 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали с получением 8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (выход 1,4 г, 83,7%). LC-MS: [М+Н] 342.
Пример 46
3-(2-Метансульфонил-пиримидин-4-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин
+
[0111] 8-(4-Метил-пиперазин-1-ил)-3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин (из Примера 45, приведенного выше) (0,9 г, 2,64 ммоль) растворяли в дихлорметане (40 мл) и медленно добавляли m-CPBA (1,07 г, 5,28 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и твердое вещество очищали колоночной хроматографией (диоксид кремния, 20 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, 1:1) с получением 3-(2-метансульфонил-пиримидин-4-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (выход 0,9 г, 91,4%). LC-MS: [М+Н] 374.
Пример 47
трет-Бутиловый эфир {4-[3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты
+
[0112] К раствору 8-хлор-3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 44, приведенного выше) (0,9 г, 3,24 ммоль) в DMF (25 мл) добавляли трет-бутиловый эфир транс-(4-амино-циклогексил)-карбаминовой кислоты (1,04 г, 4,86 ммоль), затем добавляли диизопропилэтиламин (0,63 г, 4,86 ммоль). Эту реакционную смесь перемешивали при 95°C в течение 15 часов, и смесь вливали в воду. Образовавшийся осадок отфильтровывали, и полученное твердое вещество очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, 50:1) с получением трет-бутилового эфира {4-[3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (выход 1,23 г, 83,4%). LC-MS: [М+Н] 456.
Пример 48
трет-Бутиловый эфир {4-[3-(2-метансульфинил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты
+
[0113] трет-Бутиловый эфир {4-[3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (из Примера 47, приведенного выше) (150 мг, 0,323 ммоль) растворяли в дихлорметане (20 мл), затем медленно добавляли m-CPBA (134 мг, 0,659 ммоль). Эту реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и твердое вещество очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, 20:1) с получением трет-бутилового эфира (4-[3-(2-метансульфинил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (выход 110 мг, 70,8%). LC-MS: [М+Н] 472.
Пример 49
[3-(2-Метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-(2-морфолин-4-ил-этил)-амин
+
[0114] К раствору 8-хлор-3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 44, приведенного выше) (400 мг, 1,44 ммоль) в iPrOH (20 мл) добавляли 2-морфолино-этанамин (244 мг, 1,88 ммоль), затем добавляли диизопропилэтиламин (242 мг, 1,88 ммоль). Эту реакционную смесь перемешивали при температуре дефлегмации в течение 15 часов, и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток экстрагировали дихлорметаном (150 мл) и промывали водой (3×25 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали с получением [3-(2-метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-(2-морфолин-4-ил-этил)-амина (выход 410 г, 76,8%). LC-MS: [М+Н] 372.
Пример 50
[3-(2-Метансульфонил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-(2-морфолин-4-ил-этил)-амин
+
[0115] [3-(2-Метилсульфанил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-(2-морфолин-4-ил-этил)-амин (из Примера 49, приведенного выше) (410 мг, 1,11 ммоль) растворяли в дихлорметане (20 мл). Медленно добавляли m-CPBA (449 мг, 2,21 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 часов. Растворитель затем удаляли при пониженном давлении, и твердое вещество очищали колоночной хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, 1:3) с получением [3-(2-метансульфонил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-(2-морфолин-4-ил-этил)-амина (выход 300 мг, 67,4%). LC-MS: [М+Н] 404.
Пример 51
трет-Бутиловый эфир (2-амино-2-фенил-этил)-карбаминовой кислоты
[0116] трет-Бутиловый эфир (2-амино-2-фенил-этил)-карбаминовой кислоты был получен по методике, описанной в литературе (Seefeld, М.A.; Rouse, М.В.; Heerding, D.A.; Peace, S.; Yamashita, D.S.; McNulty, K.С. WO 2008/098104, August 14, 2008).
Стадия A
трет-Бутиловый эфир (2-гидрокси-2-фенил-этил)-карбаминовой кислоты
2
[0117] К перемешиваемому раствору 2-амино-1-фенилэтанола (20 г, 145,8 ммоль) в THF (300 мл) добавляли раствор BocO (31,1 г, 153,1 ммоль) в THF (100 мл) при 0°C. После добавления смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 часа. Эту смесь концентрировали с получением чистого трет-бутилового эфира (2-гидрокси-2-фенил-этил)-карбаминовой кислоты в виде белого твердого вещества (выход 34,4 г, 100%).
Стадия B
трет-Бутиловый эфир [2-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-изоиндол-2-ил)-2-фенил-этил]-карбаминовой кислоты
3
3
1
+
[0118] К раствору трет-бутилового эфира (2-гидрокси-2-фенил-этил)-карбаминовой кислоты (34,4 г, 145,0 ммоль), фталимида (21,3 г, 145 ммоль) и PPh (49,4 г, 188,5 ммоль) по каплям добавляли DEAD (32,8 г, 188,5 ммоль) при перемешивании при 0°C. После добавления смесь перемешивали при комнатной температуре в течение еще 1 часа. Смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат, от 20:1 до 5:1) с получением трет-бутилового эфира [2-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-изоиндол-2-ил)-2-фенил-этил]-карбаминовой кислоты в виде белого твердого вещества (выход 39 г, 74%) Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7.88-7.80 (m, 2Н), 7.74-7.68 (m, 2Н), 7.49-7.47 (m, 2Н), 7.38-7.26 (m, 3H), 5.56-5.50 (m, 1H), 4.83 (brs, 1H), 4.28-4.22 (m, 1H), 3.93-3.87 (m, 1H), 1.35 (s, 9Н). LC-MS: [М-Вос+Н] 267.
Стадия C
трет-Бутиловый эфир (2-амино-2-фенил-этил)-карбаминовой кислоты
3.
2
3
1
+
[0119] К раствору трет-бутилового эфира [2-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-изоиндол-2-ил)-2-фенил-этил]-карбаминовой кислоты (23 г, 63 ммоль) в THF (180 мл) и MeOH (180 мл) медленно добавляли 85% гидразингидрат (37 мл, 630 ммоль). Полученную смесь нагревали до 65°C в течение 15 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем концентрировали досуха. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан:МеОН, 100:1, 1% NHHO) с получением трет-бутилового эфира (2-амино-2-фенил-этил)-карбаминовой кислоты в виде белого твердого вещества (выход 7,4 г, 50%). Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7.35-7.24 (m, 5Н), 4.81 (brs, 1H), 4.08-4.03 (m, 1H), 3.38-3.21 (m, 2Н), 1.44 (s, 9Н). LC-MS: [М+Н] 237.
Пример 52
N1-{4-[8-(4-Метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-1-фенил-этан-1,2-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир (2-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-иламино}-2-фенил-этил)-карбаминовой кислоты
+
[0120] Смесь 3-(2-метансульфонил-пиримидин-4-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 46, приведенного выше) (120 мг, 0,32 ммоль) и трет-бутилового эфира (2-амино-2-фенил-этил)-карбаминовой кислоты (из Примера 51, приведенного выше) (305 мг, 1,29 ммоль) нагревали при 140°C при перемешивании в течение 2 часов. Полученное масло очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, от 50:1 до 20:1) с получением неочищенного трет-бутилового эфира (2-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-иламино}-2-фенил-этил)-карбаминовой кислоты (Выход 44 мг). LC-MS: [М+Н] 530.
Стадия B
N1-{4-[8-(4-Метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-1-фенил-этан-1,2-диамин, гидрохлорид
1
+
2
[0121] К раствору неочищенного трет-бутилового эфира (2-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-иламино}-2-фенил-этил)-карбаминовой кислоты (44 мг, 0,083 ммоль) в этаноле (3 мл) медленно добавляли концентрированную соляную кислоту (3 мл). Эту реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и затем твердое вещество очищали препаративной HPLC. К фракциям с продуктом добавляли несколько капель концентрированной HCl. После обработки ультразвуком в течение нескольких минут раствор концентрировали при пониженном давлении с получением N1-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-1-фенил-этан-1,2-диамина гидрохлорида (Выход 41 мг, 100%). Н ЯМР (300 МГц, DO): δ 8.49 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.15 (d, 1H, J=6.3 Гц), 7.47-7.23 (m, 7Н), 5.45 (brs, 1H), 4.96-4.94 (m, 2Н), 3.61-3.46 (m, 6Н), 3.26-3.22 (m, 2Н), 2.86 (s, 3H). LC-MS: [М+Н] 430.
Пример 53
трет-Бутиловый эфир (3-амино-3-фенил-пропил)-карбаминовой кислоты
[0122] трет-Бутиловый эфир (3-амино-3-фенил-пропил)-карбаминовой кислоты был получен по методике, описанной в литературе (Seefeld, М.A.; Rouse, М.В.; Heerding, D.A.; Peace, S.; Yamashita, D.S.; McNulty, K.С. WO 2008/098104, August 14, 2008).
Стадия A
3-Амино-1-фенил-пропан-1-ол
+
[0123] К перемешиваемой суспензии LAH (20 г, 517 ммоль) в сухом THF (500 мл) по каплям добавляли раствор 3-оксо-3-фенилпропаннитрила (30 г, 207 ммоль) в сухом THF (300 мл) при 0°C в атмосфере азота. Смесь нагревали до 25°C и затем нагревали при 70°C в течение 2 часов. После охлаждения до 0°C по каплям добавляли насыщенный раствор гидроксида натрия и экстрагировали дихлорметаном (200 мл). Органический раствор сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали досуха. Остаток очищали колоночной хроматографией (метанол:дихлорметан, 1:10) с получением неочищенного 3-амино-1-фенил-пропан-1-ола (выход 30 г). LC-MS: [М+Н] 152.
Стадия В
трет-Бутиловый эфир (3-гидрокси-3-фенил-пропил)-карбаминовой кислоты
3
2
+
[0124] EtN (1,36 г, 14 ммоль) добавляли к раствору 3-амино-1-фенил-пропан-1-ола (1,7 г, 11,3 ммоль) в THF (20 мл) при перемешивании. К этому раствору по каплям добавляли BocO (3,0 г, 13,7 ммоль) в THF (20 мл) при 0°C. Затем полученную смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение еще 2 часов. Смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат, 3:1) с получением трет-бутилового эфира (3-гидрокси-3-фенил-пропил)-карбаминовой кислоты (выход 1,7 г, 60%). LC-MS: [M+H] 274.
Стадия C
трет-Бутиловый эфир [3-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-изоиндол-2-ил)-3-фенил-пропил]-карбаминовой кислоты
3
3
1
+
[0125] К раствору трет-бутилового эфира (3-гидрокси-3-фенил-пропил)-карбаминовой кислоты (10,4 г, 41,4 ммоль), фталимида (5,2 г, 36,6 ммоль) и PPh (14,6 г, 55,5 ммоль) в THF (204 мл) добавляли по каплям DEAD (8,9 мл, 55 ммоль) при перемешивании при 0°C. Затем полученную смесь нагревали до комнатной температуры в течение еще 2 часов. Смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (петролейный эфир:этилацетат, 3:1) с получением трет-бутилового эфира [3-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-изоиндол-2-ил)-3-фенил-пропил]-карбаминовой кислоты (выход 10,5 г, 66,8%). Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7.81-7.75 (m, 2Н), 7.69-7.64 (m, 2Н), 7.53-7.50 (m, 2Н), 7.34-7.23 (m, 3H), 5.44-5.38 (m, 1H), 4.74 (brs, 1H), 3.29-3.07 (m, 2Н), 2.83-2.75 (m, 1H), 2.51-2.42 (m, 1H), 1.42 (s, 9Н). LC-MS: [М-Вос+H] 281.
Стадия D
трет-Бутиловый эфир (3-амино-3-фенил-пропил)-карбаминовой кислоты
3.
2
3
1
+
[0126] Гидразингидрат (85%, 5,1 мл, 74 ммоль) добавляли к раствору трет-бутилового эфира [3-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-изоиндол-2-ил)-3-фенил-пропил]-карбаминовой кислоты (2,8 г, 7,4 ммоль) в THF (25 мл) и МеОН (25 мл). Полученную смесь нагревали до 65°C в течение 6 часов. Затем осадок отфильтровывали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, который очищали колоночной хроматографией на силикагеле (дихлорметан:МеОН, 100:1, 1% NHHO) с получением трет-бутилового эфира (3-амино-3-фенил-пропил)-карбаминовой кислоты в виде не совсем белого твердого вещества (выход 1,7 г, 92%). Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7.31-7.18 (m, 5Н), 6.82 (brs, 1H), 3.78-3.74 (m, 1H), 2.92 (brs, 2Н), 1.82 (s, 2Н), 1.63-1.61 (m, 2Н), 1.37 (s, 9Н). LC-MS: [М+Н] 251.
Пример 54
N1-{4-[8-(4-Метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-1-фенил-пропан-1,3-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир (3-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-иламино}-3-фенил-пропил)-карбаминовой кислоты
+
[0127] Смесь 3-(2-метансульфонил-пиримидин-4-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 46, приведенного выше) (120 мг, 0,32 ммоль) и трет-бутилового эфира (3-амино-3-фенил-пропил)-карбаминовой кислоты (из Примера 53, приведенного выше) (322 мг, 1,29 ммоль) нагревали при 140°C при перемешивании в течение 2 часов. Полученное масло очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, от 50:1 до 20:1) с получением неочищенного трет-бутилового эфира (3-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-иламино}-3-фенил-пропил)-карбаминовой кислоты (выход 51 мг). LC-MS: [М+Н] 544.
Стадия B
N1-{4-[8-(4-Метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-1-фенил-пропан-1,3-диамин, гидрохлорид
1
+
2
[0128] К раствору неочищенного трет-бутилового эфира (3-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-иламино}-3-фенил-пропил)-карбаминовой кислоты (51 мг, 0,094 ммоль) в этаноле (3 мл) медленно добавляли концентрированную соляную кислоту (3 мл). Эту реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и твердое вещество затем очищали препаративной HPLC. К фракциям с продуктом добавляли несколько капель концентрированной HCl. После обработки ультразвуком в течение нескольких минут раствор концентрировали при пониженном давлении с получением N1-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-1-фенил-пропан-1,3-диамина, гидрохлорида (выход 59 мг, 100%). Н ЯМР (300 МГц, DO): δ 8.31 (brs, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.09 (brs, 1H), 7.45-7.16 (m, 6H), 5.15 (brs, 1H), 4.99-4.94 (m, 2H), 3.62-3.26 (m, 4H), 3.26-3.02 (m, 4H), 2.87 (s, 3H), 2.28-2.21 (m, 2H). LC-MS: [M+H] 444.
Пример 55
N1-{6-[8-(4-Метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-1-фенил-этан-1,2-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир (2-{6-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-иламино}-2-фенил-этил)-карбаминовой кислоты
2
3
2
3
2
2
2
2
3
+
[0129] Через смесь 3-(6-бром-пиридин-2-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 39, приведенного выше) (0,56 г, 1,5 ммоль), трет-бутилового эфира (2-амино-2-фенил-этил)-карбаминовой кислоты (из Примера 51, приведенного выше) (0,425 г, 1,8 ммоль), Pd(dba) (90 мг), Davephos (120 мг), KCO (0,25 г, 1,8 ммоль) в диоксане (40 мл) в герметичной пробирке барботировали N в течение нескольких минут, и затем смесь нагревали в атмосфере N при 130°C в течение ночи. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток сначала очищали хроматографией (CHCl:CHOH, 100:1), затем препаративной HPLC с получением трет-бутилового эфира (2-{6-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-иламино}-2-фенил-этил)-карбаминовой кислоты (выход 30 мг, 3,8%). LC-MS: [М+Н] 529.
Стадия B
N1-{6-[8-(4-Метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-1-фенил-этан-1,2-диамин, гидрохлорид
1
+
3
[0130] Смесь трет-бутилового эфира (2-{6-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-иламино}-2-фенил-этил)-карбаминовой кислоты (30 мг, 0,06 ммоль) и концентрированной HCl (3 мл) в этаноле (3 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. Реакционную смесь затем концентрировали при пониженном давлении с получением N1-{6-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-1-фенил-этан-1,2-диамина, гидрохлорида (выход 40 мг). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.54 (brs, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.64-7.46 (m, 3H), 7.31-7.10 (m, 5Н), 6.92 (d, 1H, J=8.1 Гц), 5.44 (brs, 3H), 3.93 (brs, 2Н), 3.72-3.69 (m, 2Н), 3.52-3.34 (m, 4Н), 2.92 (s, 3H). LC-MS: [М+Н] 429.
Пример 56
Бензил-{6-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-амин
2
3
2
2
2
2
3
3
1
+
[0131] Через смесь 3-(6-бром-пиридин-2-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 39, приведенного выше) (0,187 г, 0,5 ммоль), бензиламина (0,075 г, 0,7 ммоль), Pd(dba) (30 мг), Davephos (40 мг), NaOtBu (70 мг, 0,73 ммоль) в диоксане (20 мл) барботировали N в течение нескольких минут, и затем ее нагревали в атмосфере N при температуре дефлегмации в течение ночи. Раствор затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали сначала хроматографией (CHCl:CHOH, 100:1), затем препаративной HPLC с получением бензил-{6-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-амина (выход 70 мг, 35%). Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8.70 (d, 1H, J=4.5 Гц), 7.88 (s, 1H), 7.51-7.24 (m, 7Н), 7.02 (d, 1H, J=7.2 Гц), 6.37 (d, 1H, J=8.1 Гц), 5.03-5.02 (m, 1H), 4.62 (d, 2H, J=3.9 Гц), 4.24 (brs, 4H), 2.61-2.58 (m, 4H), 2.36 (s, 3H). LC-MS: [M+H] 400.
Пример 57
Бензил-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-амин
1
+
3
[0132] Смесь 3-(2-метансульфонил-пиримидин-4-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 46, приведенного выше) (150 мг, 0,402 ммоль) и бензиламина (51,7 мг, 0,482 ммоль) нагревали при 140°C при перемешивании в течение 2 часов. Полученное масло очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, от 30:1 до 10:1) с получением неочищенного продукта, который очищали препаративной HPLC и концентрировали с получением бензил-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-амина (выход 25 мг, 15,5%). Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8.71 (brs, 1H), 8.31 (d, 1H, J=4.8 Гц), 8.04 (s, 1H), 7.42-7.28 (m, 5Н), 6.94 (d, 1H, J=5.4 Гц), 5.68 (brs, 1H), 4.71 (d, 2Н, J=5.7 Гц), 4.24 (brs, 4Н), 2.60-2.57 (m, 4 Н), 2.36 (s, 3H). LC-MS: [М+Н] 401.
Пример 58
(2-Хлор-бензил)-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-амин, гидрохлорид
1
+
3
[0133] Смесь 3-(2-метансульфонил-пиримидин-4-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 46, приведенного выше) (150 мг, 0,402 ммоль) и 2-хлорбензиламина (228 мг, 1,608 ммоль) нагревали при 140°C при перемешивании в течение 2 часов. Полученное масло очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, 30:1-10:1) с получением неочищенного продукта (90 мг). Неочищенный продукт очищали препаративной HPLC. К фракциям с продуктом добавляли несколько капель концентрированной HCl. После обработки ультразвуком в течение нескольких минут раствор концентрировали при пониженном давлении с получением (2-хлор-бензил)-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-амина, гидрохлорида (выход 25 мг, 14,3%). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.62 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.52-7.38 (m, 4Н), 7.23 (brs, 2Н), 5.49-5.45 (m, 2Н), 4.87(brs, 2Н), 3.56 (brs, 4Н), 3.24 (brs, 2Н), 2.87 (s, 3H). LC-MS: [М+Н] 435.
Пример 59
(4-Хлор-бензил)-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-амин, гидрохлорид
1
+
3
[0134] Смесь 3-(2-метансульфонил-пиримидин-4-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 46, приведенного выше) (150 мг, 0,402 ммоль) и 4-хлорбензиламина (228 мг, 1,608 ммоль) нагревали при 140°C при перемешивании в течение 2 часов. Полученное масло очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, 30:1-10:1) с получением неочищенного продукта (100 мг). Неочищенный продукт очищали препаративной HPLC. К фракциям с продуктом добавляли несколько капель концентрированной HCl. После обработки ультразвуком в течение нескольких минут раствор концентрировали при пониженном давлении с получением (4-хлор-бензил)-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-амина, гидрохлорида (выход 38 мг, 21,8%). Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8.68 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.53 (d, 1H, J=6.9 Гц), 7.38-7.29 (m, 6Н), 5.48-5.43 (m, 2Н), 4.76 (brs, 2Н), 3.68-3.61 (m, 4H), 3.34-3.27 (m, 4Н), 2.89 (s, 3H). LC-MS: [М+Н] 435.
Пример 60
N1-{6-[8-(4-Метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-1-фенил-пропан-1,3-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир (3-{6-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-иламино}-3-фенил-пропил)-карбаминовой кислоты
2
3
2
3
2
2
2
2
3
+
[0135] Через смесь 3-(6-бром-пиридин-2-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 39, приведенного выше) (0,56 г, 1,5 ммоль), трет-бутилового эфира (3-амино-3-фенил-пропил)-карбаминовой кислоты (из Примера 53, приведенного выше) (0,45 г, 1,8 ммоль), Pd(dba) (90 мг), Davephos (120 мг), KCO (0,25 г, 1,8 ммоль) в диоксане (60 мл) в герметичной пробирке барботировали N в течение нескольких минут, и затем смесь нагревали в атмосфере N при 130°C в течение 15 часов. Раствор затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали сначала хроматографией (CHCl:CHOH, 100:1), затем препаративной-HPLC с получением трет-бутилового эфира (3-{6-[8-(4-Метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-иламино}-3-фенил-пропил)-карбаминовой кислоты (выход 44 мг, 5,4%). LC-MS: [М+Н] 543.
Стадия B
N1-{6-[8-(4-Метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-1-фенил-пропан-1,3-диамин, гидрохлорид
2
2
3
1
+
[0136] Раствор трет-бутилового эфира (3-{6-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-иламино}-3-фенил-пропил)-карбаминовой кислоты (44 мг, 0,08 ммоль) в этаноле (4 мл) и концентрированной HCl (4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. Реакционную смесь затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток суспендировали в CHCl и концентрировали при пониженном давлении с получением N1-{6-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-1-фенил-пропан-1,3-диамина, гидрохлорида (выход 25 мг). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.39 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.61 (t, 1H, J=5.7 Гц), 7.40-7.48 (m, 7Н), 6.78 (brs, 1H), 5.39 (brs, 1H), 5.01 (brs, 1H), 3.81-3.66 (m, 4Н), 3.37 (brs, 2Н), 3.12-2.91 (m, 7Н), 2.16-2.14 (m, 2Н). LC-MS: [М+Н] 443.
Пример 61
{4-[8-(4-Метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-тиофен-3-илметил-амин
1
+
6
[0137] Смесь 3-(2-метансульфонил-пиримидин-4-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 46, приведенного выше) (120 мг, 0,32 ммоль) и тиофен-3-илметанамина (145 мг, 1,28 ммоль) нагревали при 140°C при перемешивании в течение 2 часов. Полученное масло очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, от 30:1 до 10:1) с получением {4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-тиофен-3-илметил-амина (выход 69 мг, 52,8%). Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d): δ 8.41 (s, 1H), 8.35 (d, 1H, J=5.4 Гц), 7.94 (t, 1H, J=5.7 Гц), 7.51-7.34 (m, 3H), 7.20-7.12 (m, 2Н), 4.56 (d, 2Н, J=5.7 Гц), 4.17 (brs, 4Н), 2.52-2.44 (m, 4H), 2.23 (s, 3H). LC-MS: [M+H] 407.
Пример 62
трет-Бутиловый эфир [3-амино-3-(3-хлор-фенил)-пропил]-карбаминовой кислоты
[0138] трет-Бутиловый эфир [3-амино-3-(3-хлор-фенил)-пропил]-карбаминовой кислоты был получен способом, аналогичным способу, описанному в литературе (Seefeld, М.A.; Rouse, М.В.; Heerding, D.A.; Peace, S.; Yamashita, D.S.; McNulty, K.С. WO 2008/098104, August 14, 2008).
Стадия A
3-Амино-1-(3-хлор-фенил)-пропан-1-ол
+
[0139] К перемешиваемой суспензии LAH (16 г, 90 ммоль) в сухом THF (200 мл) по каплям добавляли раствор 3-(3-хлорфенил)-3-оксопропаннитрила (10,4 г, 270 ммоль) в сухом THF (200 мл) при 0°C в атмосфере азота. Эту смесь нагревали до 25°C и затем нагревали при 60°C в течение 3 часов. После охлаждения до 0°C по каплям добавляли насыщенное раствор гидроксида натрия и экстрагировали этилацетатом (200 мл). Раствор сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали досуха. Полученный неочищенный 3-амино-1-(3-хлор-фенил)-пропан-1-ол использовали на следующей стадии без дополнительной очистки (выход 14,5 г). LC-MS: [М+Н] 186.
Стадия B
трет-Бутиловый эфир [3-(3-хлор-фенил)-3-гидрокси-пропил]-карбаминовой кислоты
2
+
[0140] К перемешиваемому раствору неочищенного 3-амино-1-(3-хлор-фенил)-пропан-1-ола (29 г, 156 ммоль) в THF (300 мл) добавляли BocO (40,5 г, 187 ммоль). Через 0,5 часа смесь концентрировали досуха. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат:петролейный эфир, 1:20) с получением трет-бутилового эфира [3-(3-хлор-фенил)-3-гидрокси-пропил]-карбаминовой кислоты (выход 23 г, 52%). LC-MS: [M+Na] 308.
Стадия C
трет-Бутиловый эфир [3-(3-хлор-фенил)-3-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-изоиндол-2-ил)-пропил]-карбаминовой кислоты
3
+
[0141] К перемешиваемому раствору трет-бутилового эфира [3-(3-хлор-фенил)-3-гидрокси-пропил]-карбаминовой кислоты (12 г, 42 ммоль), фталимида (6,2 г, 42 ммоль) и PPh (14,3 г, 55 ммоль) в THF (150 мл) по каплям добавляли DEAD (9,0 мл, 55 ммоль) при примерно 5°C.Через 1 час смесь концентрировали досуха. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат:петролейный эфир, 1:8) с получением трет-бутилового эфира [3-(3-хлор-фенил)-3-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-изоиндол-2-ил)-пропил]-карбаминовой кислоты (выход 15,65 г, 90%). LC-MS: [М+Н] 415.
Стадия D
трет-Бутиловый эфир [3-амино-3-(3-хлор-фенил)-пропил]-карбаминовой кислоты
+
[0142] К перемешиваемому раствору трет-бутилового эфира [3-(3-хлор-фенил)-3-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-изоиндол-2-ил)-пропил]-карбаминовой кислоты (0,15 г, 0,36 ммоль) в THF (2 мл) и метаноле (2 мл) добавляли гидразингидрат (0,18 г, 3,6 ммоль). Эту смесь нагревали до 55°C в течение 2 часов. Затем реакционную смесь концентрировали и экстрагировали этилацетатом (10 мл). Органическую смесь промывали водой (3×1 мл), рассолом (1 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали досуха. Остаток очищали колоночной хроматографией (метанол:дихлорметан, 1:100) с получением трет-бутилового эфира [3-амино-3-(3-хлор-фенил)-пропил]-карбаминовой кислоты (выход 0,061 г, 60%). LC-MS: [М+Н] 285.
Пример 63
1-(3-Хлор-фенил)-N1-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-пропан-1,3-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир (3-(3-хлор-фенил)-3-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-иламино}-пропил)-карбаминовой кислоты
+
[0143] Смесь 3-(2-метансульфонил-пиримидин-4-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 46, приведенного выше) (100 мг, 0,27 ммоль) и трет-бутилового эфира [3-амино-3-(3-хлор-фенил)-пропил]-карбаминовой кислоты (из Примера 62, приведенного выше) (307 мг, 1,08 ммоль) нагревали при 140°C при перемешивании в течение 2 часов. Полученное масло очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, от 50:1 до 20:1) с получением неочищенного трет-бутилового эфира (3-(3-хлор-фенил)-3-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-иламино}-пропил)-карбаминовой кислоты (выход 123 мг). LC-MS: [М+Н] 578.
Стадия B
1-(3-Хлор-фенил)-N1-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-пропан-1,3-диамин, гидрохлорид
1
+
2
[0144] К раствору неочищенного трет-бутилового эфира (3-(3-хлор-фенил)-3-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-иламино}-пропил)-карбаминовой кислоты (120 мг, 0,21 ммоль) в этаноле (3 мл) медленно добавляли концентрированную соляную кислоту (3 мл). Эту реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и затем твердое вещество очищали препаративной HPLC. К фракциям с продуктом добавляли несколько капель концентрированной HCl. После обработки ультразвуком в течение нескольких минут раствор концентрировали при пониженном давлении с получением 1-(3-хлор-фенил)-N1-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-пропан-1,3-диамина, гидрохлорида (выход 70 мг, 48,3%). Н ЯМР (300 МГц, DO): δ 8.28 (brs, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.05 (brs, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.36-7.12 (m, 5Н), 5.08-4.88 (m, 3H), 3.56-3.38 (m, 4Н), 3.20-2.95 (m, 4Н), 2.91 (s, 3H), 2.25-2.10 (m, 2Н). LC-MS: [М+Н] 478.
Пример 64
{4-[8-(4-Метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-тиофен-2-илметил-амин, гидрохлорид
1
+
3
[0145] Смесь 3-(2-метансульфонил-пиримидин-4-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 46, приведенного выше) (150 мг, 0,402 ммоль) и тиофен-2-илметанамина (182 мг, 1,608 ммоль) нагревали при 140°C при перемешивании в течение 2 часов. Полученное масло очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, от 30:1 до 10:1) с получением неочищенного продукта (115 мг). Неочищенный продукт очищали препаративной HPLC. К фракциям с продуктом добавляли несколько капель концентрированной HCl. После обработки ультразвуком в течение нескольких минут раствор концентрировали при пониженном давлении с получением {4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-тиофен-2-илметил-амина, гидрохлорида (выход 34 мг, 21,2%). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 9.02 (brs, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.39 (d, 1H, J=6.3 Гц), 7.69-7.63 (m, 2Н), 7.40 (brs, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.06-7.03 (m, 1H), 5.62-5.51 (m, 2Н), 5.06-4.99 (m, 2Н), 3.88-3.75 (m, 4Н), 3.48-3.37 (m, 2Н), 3.00 (s, 3H). LC-MS: [М+Н] 407.
Пример 65
(2-Хлор-бензил)-{6-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-амин, гидрохлорид
2
3
2
2
3
1
1
+
[0146] Через смесь 3-(6-бром-пиридин-2-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 39, приведенного выше) (0,187 г, 0,5 ммоль), 2-хлор-бензиламина (71 мг, 0,5 ммоль), Pd(dba) (30 мг), Davephos (40 мг), NaOtBu (70 мг, 0,73 ммоль) и диоксана (20 мл) в герметичной пробирке барботировали N в течение нескольких минут и затем нагревали в атмосфере N при 100°C в течение 15 часов. Раствор затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный неочищенного продукт очищали препаративной HPLC. Полученный продукт растворяли в этаноле и затем добавляли концентрированную HCl (1 мл) и перемешивали в течение 1 ч. Смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученное твердое вещество суспендировали в дихлорметане и концентрировали с получением (2-хлор-бензил)-{6-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-амина, гидрохлорида (выход 47 мг). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.39 (d, 1H, J=5.4 Гц), 8.17 (s, 1H), 7.73 (t, 1H, J=7.8 Гц), 7.40-7.36 (m, 2Н), 7.22-7.09 (m, 4Н), 6.87 (d, Н, J=8.4 Гц), 5.43 (brs, 2Н), 4.64 (s, 2Н), 3.86-3.66 (m, 4Н), 3.41-3.37 (m, 2Н), 2.91 (s, 3H). LC-MS: [М+Н] 435.
Пример 66
(3-Хлор-бензил)-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-амин, гидрохлорид
1
+
3
[0147] Смесь 3-(2-метансульфонил-пиримидин-4-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 46, приведенного выше) (150 мг, 0,402 ммоль) и 3-хлорбензиламина (228 мг, 1,608 ммоль) нагревали при 140°C при перемешивании в течение 2 часов. Полученное масло очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, от 30:1 до 10:1) с получением неочищенного продукта (120 мг). Затем неочищенный продукт очищали препаративной HPLC. К фракциям с продуктом добавляли несколько капель концентрированной HCl. После обработки ультразвуком в течение нескольких минут раствор концентрировали при пониженном давлении с получением (3-хлор-бензил)-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-амина, гидрохлорида (выход 45 мг, 25,8%). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.77 (s, 2Н), 8.36 (brs, 1H), 7.64-7.36 (m, 6Н), 5.59-5.55 (m, 3H), 4.98-4.96 (m, 1H), 3.69-3.63 (m, 4Н), 3.41 (brs, 2Н), 3.00 (s, 3H). LC-MS: [М+Н] 436.
Пример 67
М-{3-[2-(3-Хлор-бензиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир (4-{3-[2-(3-хлор-бензиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты
+
[0148] Смесь трет-бутилового эфира {4-[3-(2-метансульфинил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (из Примера 48, приведенного выше) (100 мг, 0,212 ммоль) и 3-хлорбензиламина (120,3 мг, 0,849 ммоль) нагревали при 140°C при перемешивании в течение 2 часов. Полученное масло очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, от 50:1 до 30:1) с получением неочищенного трет-бутилового эфира (4-{3-[2-(3-хлор-бензиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты (выход 80 мг).LC-MS: [М+Н] 549.
Стадия B
N-{3-[2-(3-Хлор-бензиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
1
+
3
[0149] К раствору неочищенного трет-бутилового эфира (4-{3-[2-(3-хлор-бензиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты (110 мг, 0,205 ммоль) в этаноле (5 мл) медленно добавляли концентрированную соляную кислоту (5 мл). Эту реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и затем твердое вещество очищали препаративной HPLC. К фракциям с продуктом добавляли несколько капель концентрированной HCl. После обработки ультразвуком в течение нескольких минут раствор концентрировали при пониженном давлении с получением N-{3-[2-(3-хлор-бензиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамина, гидрохлорида (выход 58 мг, 60,9%). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.75 (s, 1H), 8.45 (brs, 1H), 7.66-7.53 (m, 2Н), 7.42-7.26 (m, 5Н), 4.92 (brs, 2Н), 4.07 (brs, 1H), 3.25 (brs, 1H), 2.23 (brs, 4Н), 1.78-1.75 (m, 4Н). LC-MS: [М+Н] 450.
Пример 68
N-[3-(2-Бензиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир {4-[3-(2-бензиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты
+
[0150] Смесь трет-бутилового эфира {4-[3-(2-метансульфинил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (из Примера 48, приведенного выше) (130 мг, 0,276 ммоль) и бензиламина (118,2 мг, 1,104 ммоль) нагревали при 140°C при перемешивании в течение 2 часов. Полученное масло очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, от 50:1 до 30:1) с получением неочищенного трет-бутилового эфира {4-[3-(2-бензиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (выход 80 мг). LC-MS: [М+Н] 515.
Стадия B
N-[3-(2-Бензиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
1
+
3
[0151] К раствору неочищенного трет-бутилового эфира {4-[3-(2-бензиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (400 мг, 0,182 ммоль) в этаноле (5 мл) медленно добавляли концентрированную соляную кислоту (5 мл). Эту реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и затем твердое вещество очищали препаративной HPLC. К фракциям с продуктом добавляли несколько капель концентрированной HCl. После обработки ультразвуком в течение нескольких минут раствор концентрировали при пониженном давлении с получением N-[3-(2-бензиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-циклогексан-1,4-диамина, гидрохлорида (выход 33 мг, 28,9%). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.73 (s, 1H), 8.45 (brs, 2Н), 7.61-7.32 (m, 7Н), 4.91 (brs, 2Н), 4.11 (brs, 1H), 3.25 (brs, 1H), 2.23 (brs, 4Н), 1.77-1.75 (m, 4Н). LC-MS: [М+Н] 415.
Пример 69
трет-Бутиловый эфир (3-амино-3-тиофен-3-ил-пропил)-карбаминовой кислоты
[0152] трет-Бутиловый эфир (3-амино-3-тиофен-3-ил-пропил)-карбаминовой кислоты был получен способом, аналогичным способу, описанному в литературе (Seefeld, М.A.; Rouse, М.В.; Heerding, D.A.; Peace, S.; Yamashita, D.S.; McNulty, K.С. WO 2008/098104, August 14, 2008).
Стадия A
3-Амино-1-тиофен-3-ил-пропан-1-ол
1
3
1
2
1
2
[0153] К перемешиваемой суспензии LAH (1,45 г, 38,1 ммоль) в сухом THF (120 мл) по каплям добавляли раствор 3-оксо-3-(тиофен-3-ил)пропаннитрила (4,8 г, 31,8 ммоль) в сухом THF (40 мл) при 0°C в атмосфере азота. Эту смесь нагревали до 25°C и затем нагревали при 65°C в течение 6 часов. После охлаждения до 0°C по каплям добавляли насыщенный раствор гидроксида натрия (2 мл), и смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали досуха с получением неочищенного 3-амино-1-тиофен-3-ил-пропан-1-ола, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7.29-7.26 (m, 2Н), 7.05 (dd, 1H, J=4.8 Гц, J=1.2 Гц), 5.04 (dd, 1H, J=8.1 Гц, J=3.0 Гц), 3.10-3.05 (m, 2Н), 1.82-1.77 (m, 2Н).
Стадия B
трет-Бутиловый эфир (3-гидрокси-3-тиофен-3-ил-пропил)-карбаминовой кислоты
2
3
1
+
[0154] К перемешиваемому раствору неочищенного 3-амино-1-тиофен-3-ил-пропан-1-ола (23 г) в THF (100 мл) добавляли BocO (31,6 г, 146,3 ммоль). Эту смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа и затем концентрировали досуха. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат:петролейный эфир, 1:10) с получением трет-бутилового эфира (3-гидрокси-3-тиофен-3-ил-пропил)-карбаминовой кислоты (выход 21,5 г, 51% за две стадии). Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 8.08-8.06 (m, 1H), 7.55-7.53 (m, 1H), 7.34-7.30 (m, 1H), 5.10 (s, 1H), 3.52-3.48 (m, 2Н), 3.13-3.09 (m, 2Н), 1.42 (s, 9Н). LC-MS: [M+Na] 280.
Стадия C
трет-Бутиловый эфир 3-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-изоиндол-2-ил)-3-тиофен-3-ил-пропил]-карбаминовой кислоты
1
+
3
1
2
[0155] К перемешиваемому раствору трет-бутилового эфира (3-гидрокси-3-тиофен-3-ил-пропил)-карбаминовой кислоты (21,5 г, 83,6 ммоль), фталимида (12,3 г, 83,6 ммоль) и PPh3 (28,5 г, 108,6 ммоль) в THF (400 мл) по каплям добавляли DEAD (17,6 мл, 108,6 ммоль) при 25°C. Эту смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 14 часов, затем концентрировали. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат:петролейный эфир, 1:6) с получением трет-бутилового эфира 3-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-изоиндол-2-ил)-3-тиофен-3-ил-пропил]-карбаминовой кислоты (выход 12 г, 38%). Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7.82-7.77 (m, 2Н), 7.72-7.68 (m, 2Н), 7.36 (d, 1H, J=1.8 Гц), 7.26-7.18 (m, 2Н), 5.50 (dd, 1H, J=9.6 Гц, J=6 Гц), 4.65 (brs, 1H), 3.24-3.07 (m, 2Н), 2.72-2.67 (m, 1H), 2.47-2.40 (m, 1H), 1.40 (s, 9Н). LC-MS: [М+Н-Вос] 287.
Стадия D
трет-Бутиловый эфир (3-амино-3-тиофен-3-ил-пропил)-карбаминовой кислоты
3.
2
3
1
+
[0156] К перемешиваемому раствору трет-бутилового эфира 3-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-изоиндол-2-ил)-3-тиофен-3-ил-пропил]-карбаминовой кислоты (12 г, 31,1 ммоль) в метаноле (150 мл) добавляли гидразингидрат (18 мл, 85%-ный водный). Эту смесь нагревали при температуре дефлегмации в течение 14 часов. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали, и остаток очищали колоночной хроматографией (метанол:дихлорметан, от 1:50 до 1:20, 0,1% NHHO) с получением трет-бутилового эфира (3-амино-3-тиофен-3-ил-пропил)-карбаминовой кислоты (выход 7,6 г, 95%). Н ЯМР (300 МГц, CDCl): δ 7.49 (s, 1H), 7.25-7.08 (m, 2Н), 6.82 (brs, 1H), 3.85 (t, 1H, J=6.0 Гц), 3.18-2.95 (m, 4Н), 1.75-1.62 (m, 2Н), 1.37 (s, 9Н). LC-MS: [М+Н] 257.
Пример 70
N1-{4-[8-(4-Метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-1-тиофен-3-ил-пропан-1,3-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир (3-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-иламино}-3-тиофен-3-ил-пропил)-карбаминовой кислоты
[0157] Смесь 3-(2-метансульфонил-пиримидин-4-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 46, приведенного выше) (150 мг, 0,402 ммоль) и трет-бутилового эфира (3-амино-3-тиофен-3-ил-пропил)-карбаминовой кислоты (из Примера 69, приведенного выше) (412 мг, 1,608 ммоль) нагревали при 140°C при перемешивании в течение 2 часов. Полученное масло очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, от 50:1 до 20:1) с получением неочищенного трет-бутилового эфира (3-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-иламино}-3-тиофен-3-ил-пропил)-карбаминовой кислоты (выход 400 мг).
Стадия B
N1-{4-[8-(4-Метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-1-тиофен-3-ил-пропан-1,3-диамин, гидрохлорид
1
+
3
[0158] К раствору неочищенного трет-бутилового эфира (3-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-иламино}-3-тиофен-3-ил-пропил)-карбаминовой кислоты (400 мг, 0,182 ммоль) в этаноле (3 мл) медленно добавляли концентрированную соляную кислоту (3 мл). Эту реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и затем твердое вещество очищали препаративной HPLC. К фракциям с продуктом добавляли несколько капель концентрированной HCl. После обработки ультразвуком в течение нескольких минут раствор концентрировали при пониженном давлении с получением N1-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-1-тиофен-3-ил-пропан-1,3-диамина, гидрохлорида (выход 27 мг, 14,9%). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.76 (s, 2Н), 8.41 (brs, 1H), 7.68-7.52 (m, 4Н), 7.32 (d, 1H, J=5.1 Гц), 5.55 (brs, 1H), 4.85 (brs, 2Н), 3.75-3.72 (m, 4Н), 3.40 (brs, 2Н), 3.18-3.15 (m, 2Н), 3.00 (s, 3H), 2.44 (brs, 2Н). LC-MS: [М+Н] 450.
Пример 71
(4-Хлор-бензил)-{6-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-амин, гидрохлорид
2
3
2
2
3
1
+
[0159] Смесь 3-(6-бром-пиридин-2-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 39, приведенного выше) (0,373 г, 1,0 ммоль), 4-хлор-бензиламина (0,14 г, 1,0 ммоль), Pd(dba) (60 мг), Davephos (80 мг), NaOtBu (140 мг, 1,46 ммоль) суспендировали в диоксане (25 мл). Через этот раствор в течение нескольких минут барботировали N и затем его нагревали в атмосфере N при 100°C в течение 15 часов. Раствор затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищали препаративной HPLC с получением (4-хлор-бензил)-{6-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-амина, гидрохлорида (выход 31 мг, 7,1%). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.54 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.76 (t, 1H, J=8.1 Гц), 7.42-7.35 (m, 4Н), 7.25-7.20 (m, 2Н), 6.88-6.85 (m, 1H), 5.50-5.46 (m, 2Н), 4.65 (s, 2Н), 3.78-3.74 (m, 4Н), 3.42 (brs, 2Н), 3.01 (s, 3H). LC-MS: [М+Н] 434.
Пример 72
[3-(2-Бензиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-(2-морфолин-4-ил-этил)-амин, гидрохлорид
1
+
3
[0160] Смесь [3-(2-метансульфонил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-(2-морфолин-4-ил-этил)-амина (из Примера 50, приведенного выше) (120 мг, 0.30 ммоль) и бензиламина (128 мг, 1,19 ммоль) нагревали при 140°C при перемешивании в течение 2 часов. Полученное масло очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, от 30:1 до 10:1) с получением неочищенного продукта (100 мг). Неочищенный продукт очищали препаративной HPLC. К фракциям с продуктом добавляли несколько капель концентрированной HCl. После обработки ультразвуком в течение нескольких минут раствор концентрировали при пониженном давлении с получением [3-(2-бензиламино-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-(2-морфолин-4-ил-этил)-амина, гидрохлорида (выход 25 мг, 19,5%). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.77 (s, 1H), 8.57-8.38 (m, 2Н), 7.62 (d, 1H, J=6.6 Гц), 7.48-7.34 (m, 6Н), 4.82 (brs, 2Н), 4.21 (brs, 2Н), 3.99 (brs, 4Н), 3.63-3.47 (m, 6H). LC-MS: [М+Н] 431.
[0161]
Пример 73
N-[3-(6-Бензиламино-пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир {4-[3-(6-бензиламино-пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты
2
3
2
2
+
[0162] Через смесь трет-бутилового эфира {4-[3-(6-Бром-пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (из Примера 40, приведенного выше) (0,487 г, 1,0 ммоль), бензиламина (0,214 г, 2,0 ммоль), Pd(dba) (60 мг), Davephos (80 мг), NaOtBu (140 мг, 1,46 ммоль) в диоксане (25 мл) в герметичной пробирке в течение нескольких минут барботировали N, и затем смесь нагревали в атмосфере N при 110°C в течение 15 часов. Раствор затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищали препаративной HPLC с получением трет-бутилового эфира {4-[3-(6-бензиламино-пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (выход 80 мг). LC-MS: [М+Н] 514.
Стадия B
N-[3-(6-Бензиламино-пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
1
+
3
[0163] Смесь трет-бутилового эфира {4-[3-(6-бензиламино-пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (80 мг, 0,156 ммоль) в этаноле (4 мл) и концентрированной HCl (4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. Эту реакционную смесь затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищали препаративной-HPLC с получением N-[3-(6-бензиламино-пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-циклогексан-1,4-диамина, гидрохлорида (выход 50 мг). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.16 (s, 1H), 8.06 (d, 1H, J=5.7 Гц), 7.93 (t, 1H, J=8.4 Гц), 7.45-7.17 (m, 7Н), 7.09 (d, 1H, J=9.0 Гц), 4.70 (s, 2Н), 4.04 (brs, 1H), 3.23 (brs, 1H), 2.22-2.15 (m, 4Н), 1.80-1.75 (m, 4Н). LC-MS: [М+Н] 414.
Пример 74
трет-Бутиловый эфир (2-амино-2-тиофен-3-ил-этил)-карбаминовой кислоты
[0164] трет-Бутиловый эфир (2-амино-2-тиофен-3-ил-этил)-карбаминовой кислоты был получен способом, аналогичным способу, описанному в литературе (Seefeld, М.A.; Rouse, М.В.; Heerding, D A.; Peace, S.; Yamashita, D.S.; McNulty, K.С. WO 2008/098104, August 14, 2008).
Стадия A
Гидрокси-тиофен-3-ил-ацетонитрил
3
+
[0165] К перемешиваемой суспензии KCN (18,6 г, 286 ммоль) в метаноле (100 мл) добавляли тиофен-3-карбальдегид (20 мл, 178 ммоль) при 0°C в атмосфере азота. Затем по каплям добавляли уксусную кислоту (4,4 мл) при 0°C. Через 30 минут смесь нагревали до 15°C и перемешивали в течение 20 часов. Добавляли NaHCO (15 г). Смесь концентрировали и экстрагировали этилацетатом (200 мл). Органическую смесь промывали водой (3×25 мл), рассолом (25 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали досуха. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат:петролейный эфир, 1:10) с получением гидрокси-тиофен-3-ил-ацетонитрила (выход 15 г, 60%). LC-MS: [M+Na] 162.
Стадия B
2-Амино-1-тиофен-3-ил-этанол
2
+
[0166] К перемешиваемой суспензии LAH (8,7 г, 225 ммоль) в сухом THF (300 мл) по каплям добавляли раствор гидрокси-тиофен-3-ил-ацетонитрила (12,5 мл, 90 ммоль) в сухом THF (50 мл) при 0°C в атмосфере азота. Затем смесь нагревали до 25°C и перемешивали в течение ночи. После охлаждения до 10°C к этому раствору добавляли Н20 (8,7 мл), затем добавляли раствор NaOH (8,7 мл, 15%), затем HO (26 мл). Реакционную смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали досуха с получением неочищенного 2-амино-1-тиофен-3-ил-этанола (выход 12,9 г, неочищенного). LC-MS: [М+Н] 144.
Стадия C
трет-Бутиловый эфир (2-гидрокси-2-тиофен-3-ил-этил)-карбаминовой кислоты
2
+
[0167] К перемешиваемому раствору неочищенного 2-амино-1-тиофен-3-ил-этанола (12,9 г, неочищенный) в THF (150 мл) добавляли BocO (21,6 г, 99 ммоль). После перемешивания в течение 1 часа смесь концентрировали досуха, и остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат:петролейный эфир, 1:5) с получением трет-бутилового эфира (2-гидрокси-2-тиофен-3-ил-этил)-карбаминовой кислоты (выход 15,3 г, 70%). LC-MS: [M+Na] 266.
Стадия D
трет-Бутиловый эфир [2-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-изоиндол-2-ил)-2-тиофен-3-ил-этил]-карбаминовой кислоты
3
+
[0168] К перемешиваемому раствору трет-бутилового эфира (2-гидрокси-2-тиофен-3-ил-этил)-карбаминовой кислоты (15,3 г, 63 ммоль), фталимида (9,5 г, 63 ммоль), PPh (21,4 г, 82 ммоль) в THF (400 мл) по каплям добавляли DEAD (12,6 мл, 82 ммоль) при 25°C. Через 20 часов смесь концентрировали досуха. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат:петролейный эфир, 1:6) с получением неочищенного трет-бутилового эфира [2-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-изоиндол-2-ил)-2-тиофен-3-ил-этил]-карбаминовой кислоты (выход 23 г). LC-MS: [M+Na] 395.
Стадия E
трет-Бутиловый эфир (2-амино-2-тиофен-3-ил-этил)-карбаминовой кислоты
+
[0169] К перемешиваемому раствору трет-бутилового эфира [2-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-изоиндол-2-ил)-2-тиофен-3-ил-этил]-карбаминовой кислоты (23 г, неочищенного) в THF (100 мл) и метаноле (100 мл) добавляли гидразингидрат (63 г, 1,26 моль). Эту смесь нагревали до 60°C в течение 2 часов и затем охлаждали до 20°C. Реакционную смесь фильтровали, и фильтрат концентрировали досуха. Остаток очищали колоночной хроматографией (метанол:дихлорметан, 1:50) с получением трет-бутилового эфира (2-амино-2-тиофен-3-ил-этил)-карбаминовой кислоты (выход 8,6 г, 57% за две стадии). LC-MS: [М+Н] 243.
Пример 75
N1-{4-[8-(4-Метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-1-тиофен-3-ил-этан-1,2-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир (2-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-иламино}-2-тиофен-3-ил-этил)-карбаминовой кислоты
+
[0170] Смесь 3-(2-метансульфонил-пиримидин-4-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 46, приведенного выше) (200 мг, 0,536 ммоль) и трет-бутилового эфира (2-амино-2-тиофен-3-ил-этил)-карбаминовой кислоты (из Примера 74, приведенного выше) (520 мг, 2,14 ммоль) нагревали при 140°C при перемешивании в течение 2 часов. Полученное масло очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, от 10:1 до 4:1) с получением неочищенного трет-бутилового эфира (2-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-иламино}-2-тиофен-3-ил-этил)-карбаминовой кислоты (выход 150 мг). LC-MS: [М+Н] 536.
Стадия B
N1-{4-[8-(4-Метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-1-тиофен-3-ил-этан-1,2-диамин, гидрохлорид
1
+
3
[0171] К раствору неочищенного трет-бутилового эфира (2-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-иламино}-2-тиофен-3-ил-этил)-карбаминовой кислоты (150 мг, 0,280 ммоль) в этаноле (5 мл) медленно добавляли концентрированную соляную кислоту (5 мл). Эту реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и затем твердое вещество очищали препаративной HPLC. К фракциям с продуктом добавляли несколько капель концентрированной HCl. После обработки ультразвуком в течение нескольких минут раствор концентрировали при пониженном давлении с получением N1-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-1-тиофен-3-ил-этан-1,2-диамина, гидрохлорида (выход 13 мг, 5,57%). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.81 (brs, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.29 (d, 1H, J=6.0 Гц), 7.61-7.52 (m, 3H), 7.46-7.43 (m, 1H), 7.23 (d, 1H, J=5.1 Гц), 5.72 (brs, 1H), 5.47-5.43 (m, 2Н), 3.63-3.60 (m, 4Н), 3.50-3.48 (m, 2Н), 3.29-3.26 (m, 2Н), 2.89 (s, 3H). LC-MS: [М+Н] 436.
Пример 76
N-{3-[2-(3-Амино-1-фенил-пропиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир (4-{3-[2-(3-трет-бутоксикарбониламино-1-фенил-пропиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты
+
[0172] Смесь трет-бутилового эфира {4-[3-(2-метансульфинил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (из Примера 48, приведенного выше) (170 мг, 0,36 ммоль) и трет-бутилового эфира (3-амино-3-фенил-пропил)-карбаминовой кислоты (из Примера 53, приведенного выше) (361 мг, 1,44 ммоль) нагревали при 140°C при перемешивании в течение 2 часов. Полученное масло очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, от 50:1 до 30:1) с получением неочищенного трет-бутилового эфира (4-{3-[2-(3-трет-бутоксикарбониламино-1-фенил-пропиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты (выход 110 мг). LC-MS: [М+Н] 658.
Стадия B
N-{3-[2-(3-Амино-1-фенил-пропиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
1
+
3
[0173] К раствору неочищенного трет-бутилового эфира (4-{3-[2-(3-трет-бутоксикарбониламино-1-фенил-пропиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты (110 мг, 0,17 ммоль) в этаноле (5 мл) медленно добавляли концентрированную соляную кислоту (5 мл). Эту реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и затем твердое вещество очищали препаративной HPLC. К фракциям с продуктом добавляли несколько капель концентрированной HCl. После обработки ультразвуком в течение нескольких минут раствор концентрировали при пониженном давлении с получением N-{3-[2-(3-амино-1-фенил-пропиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамина, гидрохлорида (выход 27 мг, 16,4%). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.67 (s, 2Н), 8.43 (brs, 1H), 7.57-7.55 (m, 3H), 7.44-7.31 (m, 4Н), 5.38 (s, 1H), 4.08 (brs, 1H), 3.21-3.16 (m, 3H), 2.42-2.25 (m, 6Н), 1.75-1.73 (m, 4Н). LC-MS: [М+Н] 458.
Пример 77
N-{3-[2-(2-Амино-1-фенил-этиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир (4-{3-[2-(2-трет-бутоксикарбониламино-1-фенил-этиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты
+
[0174] Смесь трет-бутилового эфира {4-[3-(2-метансульфинил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (из Примера 48, приведенного выше) (170 мг, 0,36 ммоль) и трет-бутилового эфира (2-амино-2-фенил-этил)-карбаминовой кислоты (из Примера 51, приведенного выше) (341 мг, 1,44 ммоль) нагревали при 140°C при перемешивании в течение 2 часов. Полученное масло очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, от 50:1 до 30:1) с получением неочищенного трет-бутилового эфира (4-{3-[2-(2-трет-бутоксикарбониламино-1-фенил-этиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты (выход 100 мг). LC-MS: [М+Н] 644.
Стадия B
N-{3-[2-(2-Амино-1-фенил-этиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
1
+
3
[0175] К раствору неочищенного трет-бутилового эфира (4-{3-[2-(2-трет-бутоксикарбониламино-1-фенил-этиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты (100 мг, 0,16 ммоль) в этаноле (5 мл) медленно добавляли концентрированную соляную кислоту (5 мл). Эту реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и затем твердое вещество очищали препаративной HPLC. К фракциям с продуктом добавляли несколько капель концентрированной HCl. После обработки ультразвуком в течение нескольких минут раствор концентрировали при пониженном давлении с получением N-{3-[2-(2-амино-1-фенил-этиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамина, гидрохлорида (выход 26 мг, 16,3%). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.68 (s, 2Н), 8.46 (brs, 1H), 7.63-7.61 (m, 3H), 7.46-7.32 (m, 4Н), 5.78 (s, 1H), 4.05 (brs, 1H), 3.61-3.48 (m, 2Н), 3.23 (brs, 1H), 2.22 (brs, 4Н), 1.76-1.71 (m, 4Н). LC-MS: [М+Н] 444.
Пример 78
трет-Бутиловый эфир [2-амино-2-(3-хлор-фенил)-этил]-карбаминовой кислоты
[0176] трет-Бутиловый эфир [2-амино-2-(3-хлор-фенил)-этил]-карбаминовой кислоты был получен способом, аналогичным способу, описанному в литературе (Seefeld, М.A.; Rouse, М.В.; Heerding, D.A.; Peace, S.; Yamashita, D.S.; McNulty, K.С. WO 2008/098104, August 14, 2008).
Стадия A
(3-Хлор-фенил)-гидрокси-ацетонитрил
+
[0177] К перемешиваемой суспензии KCN (5,04 г, 78 ммоль) в метаноле (20 мл) добавляли 3-хлорбензальдегид (7,0 г, 50 ммоль) при 0°C в атмосфере азота. Затем по каплям добавляли уксусную кислоту (4,4 мл) при 0°C. Через 30 минут смесь нагревали до 15°C и перемешивали в течение 5 часов. Затем реакционную смесь концентрировали досуха и экстрагировали этилацетатом (200 мл). Органический раствор промывали водой (3×25 мл), рассолом (25 мл), сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали досуха. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат:петролейный эфир, 1:15) с получением (3-хлор-фенил)-гидрокси-ацетонитрила (выход 8,2 г, 97%). LC-MS: [M+Na] 190.
Стадия B
2-Амино-1-(3-хлор-фенил)-этанол
+
[0178] К перемешиваемой суспензии LAH (2,36 г, 59 ммоль) в сухом THF (70 мл) по каплям добавляли раствор (3-хлор-фенил)-гидрокси-ацетонитрила (4,0 г, 24 ммоль) в сухом THF (55 мл) при 0°C в атмосфере азота. Эту смесь нагревали до 25°C и затем нагревали при 60°C в течение 2 часов. После охлаждения до 0°C по каплям добавляли насыщенный раствор гидроксида натрия и экстрагировали дихлорметаном (200 мл). Органический раствор сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали досуха. Остаток очищали колоночной хроматографией (метанол:дихлорметан, 1:10) с получением 2-амино-1-(3-хлор-фенил)-этанола (выход 2,86 г, 70%). LC-MS: [М+Н] 172.
Стадия C
трет-Бутиловый эфир [2-(3-хлор-фенил)-2-гидрокси-этил]-карбаминовой кислоты
2
+
[0179] К перемешиваемому раствору 2-амино-1-(3-хлор-фенил)-этанола (2,86 г, 16,7 ммоль) в THF (100 мл) добавляли BocO (4.3 г, 20 ммоль). Через 1 час смесь концентрировали досуха. Остаток очищали колоночной хроматографией (метанол:дихлорметан, 1:100) с получением трет-бутилового эфира [2-(3-хлор-фенил)-2-гидрокси-этил]-карбаминовой кислоты (выход 3,9 г, 72%). LC-MS: [M+Na] 294.
Стадия D
трет-Бутиловый эфир [2-(3-хлор-фенил)-2-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-изоиндол-2-ил)-этил]-карбаминовой кислоты
3
+
[0180] К перемешиваемому раствору трет-бутилового эфира [2-(3-хлор-фенил)-2-гидрокси-этил]-карбаминовой кислоты (20 г, 73,5 ммоль), фталимида (11,1 г, 73,5 ммоль) и PPh (25,1 г, 95,5 ммоль) в THF (500 мл) по каплям добавляли DEAD (11,4 мл, 95,5 ммоль) при температуре от -5 до 0°C. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Затем смесь концентрировали досуха. Остаток очищали колоночной хроматографией (этилацетат:петролейный эфир, 1:10) с получением трет-бутилового эфира [2-(3-хлор-фенил)-2-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-изоиндол-2-ил)-этил]-карбаминовой кислоты (выход 20 г, 69%). LC-MS: [М+Н] 401.
Стадия E
трет-Бутиловый эфир [2-амино-2-(3-хлор-фенил)-этил]-карбаминовой кислоты
2
+
[0181] К перемешиваемому раствору трет-бутилового эфира [2-(3-хлор-фенил)-2-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-изоиндол-2-ил)-этил]-карбаминовой кислоты (2,5 г, 6,2 ммоль) в THF (10 мл) и метаноле (10 мл) добавляли гидразингидрат (3,1 г, 62 ммоль). Эту смесь нагревали при 55°C в течение 1 часа. Затем ее концентрировали досуха, растворяли в HO (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (50 мл). Органическую смесь концентрировали и очищали колоночной хроматографией (метанол:дихлорметан, 1:100) с получением трет-бутилового эфира [2-амино-2-(3-хлор-фенил)-этил]-карбаминовой кислоты (выход 1,325 г, 79%). LC-MS: [М+Н] 271.
Пример 79
1-(3-Хлор-фенил)-N1-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-этан-1,2-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир (2-(3-хлор-фенил)-2-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил)-пиримидин-2-иламино}-этил)-карбаминовой кислоты
+
[0182] Смесь 3-(2-метансульфонил-пиримидин-4-ил)-8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразина (из Примера 46, приведенного выше) (210 мг, 0,563 ммоль) и трет-бутилового эфира [2-амино-2-(3-хлор-фенил)-этил]-карбаминовой кислоты (из Примера 78, приведенного выше) (611 мг, 2,25 ммоль) нагревали при 140°C при перемешивании в течение 2 часов. Полученное масло очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, от 10:1 до 4:1) с получением неочищенного трет-бутилового эфира (2-(3-хлор-фенил)-2-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-иламино}-этил)-карбаминовой кислоты (выход 150 мг). LC-MS: [М+Н] 564.
Стадия B
1-(3-Хлор-фенил)-N1-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-этан-1,2-диамин, гидрохлорид
1
+
3
[0183] К раствору неочищенного трет-бутилового эфира (2-(3-хлор-фенил)-2-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-иламино}-этил)-карбаминовой кислоты (150 мг, 0,266 ммоль) в этаноле (5 мл) медленно добавляли концентрированную соляную кислоту (5 мл). Эту реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и затем твердое вещество очищали препаративной HPLC. К фракциям с продуктом добавляли несколько капель концентрированной HCl. После обработки ультразвуком в течение нескольких минут раствор концентрировали при пониженном давлении с получением 1-(3-хлор-фенил)-N1-{4-[8-(4-метил-пиперазин-1-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиримидин-2-ил}-этан-1,2-диамина, гидрохлорида (выход 28 мг, 10,7%). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.79 (brs, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.30 (d, 1H, J=6.3 Гц), 7.59-7.45 (m, 4Н), 7.37-7.27 (m, 2Н), 5.62 (brs, 1H), 5.45 (brs, 2Н), 3.64-3.60 (m, 4Н), 3.48-3.38 (m, 4Н), 2.89 (s, 3H). LC-MS: [М+Н] 465.
Пример 80
N-{3-[6-(2-Амино-1-фенил-этиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир (4-{3-[6-(2-трет-бутоксикарбониламино-1-фенил-этиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты
2
3
2
3
2
2
2
2
[0184] В герметичную пробирку загружали смесь трет-бутилового эфира {4-[3-(6-бром-пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (из Примера 40, приведенного выше) (487 мг, 1,0 ммоль), трет-бутилового эфира (2-амино-2-фенил-этил)-карбаминовой кислоты (из Примера 51, приведенного выше) (354 мг, 1,5 ммоль), Pd(dba) (46 мг, 0,05 ммоль), Davephos (78 мг, 0,2 ммоль), KCO (207 мг, 1,5 ммоль) и диоксана (20 мл). Через эту смесь в течение нескольких минут барботировали N, и смесь затем нагревали в атмосфере N при 135°C в течение 17 часов. Раствор затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией (CHCl:MeOH, 100:1) с получением неочищенного трет-бутилового эфира (4-{3-[6-(2-трет-бутоксикарбониламино-1-фенил-этиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты (выход 0,38 г).
Стадия B
N1-{3-[6-(2-Амино-1-фенил-этиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
1
+
3
[0185] К раствору трет-бутилового эфира (4-{3-[6-(2-mpem-бутоксикарбониламино-1-фенил-этиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты (0,38 г, неочищенного) в этаноле (4 мл) добавляли концентрированную HCl (8 мл). Эту реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часа и затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной HPLC с получением N-{3-[6-(2-амино-1-фенил-этиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамина, гидрохлорида (выход 47 мг). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.45 (d, 1Н, J=5.7 Гц), 8.13 (s, 1H), 7.65 (t, 1H, J=7.2 Гц), 7.53-7.51 (m, 2Н), 7.43-7.06 (m, 5Н), 6.85 (d, 1Н, J=8.7 Гц), 5.47-5.41 (m, 1H), 4.03 (brs, 1H), 3.43-3.23 (m, 3H), 2.20 (brs, 4Н), 1.73 (brs, 4Н). LC-MS: [М+Н] 443.
Пример 81
N-{3-[6-(3-Амино-1-фенил-пропиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир (4-{3-[6-(3-трет-бутоксикарбониламино-1-фенил-пропиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты
2
3
2
3
2
2
2
2
+
[0186] Через смесь трет-бутилового эфира {4-[3-(6-бром-пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (из Примера 40, приведенного выше) (0,487 г, 1,0 ммоль), трет-бутилового эфира (3-амино-3-фенил-пропил)-карбаминовой кислоты (из Примера 53, приведенного выше) (0,375 г, 1,5 ммоль), Pd(dba) (60 мг), Davephos (80 мг), KCO (207 мг, 1,5 ммоль) в диоксане (25 мл) в герметичной пробирке в течение нескольких минут барботировали N и затем нагревали в атмосфере N при 130°C в течение 15 часов. Раствор затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали сначала хроматографией (CHCl:MeOH, 100:1), затем препаративной HPLC с получением трет-бутилового эфира (4-{3-[6-(3-трет-бутоксикарбониламино-1-фенил-пропиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты (выход 250 мг). LC-MS: [М+Н] 657.
Стадия B
N-{3-[6-(3-Амино-1-фенил-пропиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
1
+
3
[0187] Смесь трет-бутилового эфира (4-{3-[6-(3-трет-бутоксикарбониламино-1-фенил-пропиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты (250 мг, 0,38 ммоль) в этаноле (4 мл) и концентрированной HCl (4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной HPLC с получением N-{3-[6-(3-амино-1-фенил-пропиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамина, гидрохлорида (выход 18 мг). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.20 (brs, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.74-7.70 (m, 1H), 7.50-7.37 (m, 4Н), 7.32-7.30 (m, 1H), 7.17-7.07 (m, 2Н), 6.89 (d, 1H, J=8.4 Гц), 5.13-5.10 (m, 1H), 4.05 (brs, 1H), 3.22-3.17 (m, 3H), 2.26-2.24 (m, 6Н), 1.73 (brs, 4Н). LC-MS: [М+Н] 457.
Пример 82
N-{3-[6-(3-Хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир (4-{3-[6-(3-хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты
2
3
2
2
+
[0188] Через смесь трет-бутилового эфира {4-[3-(6-бром-пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (из Примера 40, приведенного выше) (0,487 г, 1,0 ммоль), 3-хлор-бензиламина (0,283 г, 2,0 ммоль), Pd(dba) (60 мг), Davephos (80 мг), NaOtBu (200 мг, 0,2 ммоль) в диоксане (25 мл) в герметичной пробирке в течение нескольких минут барботировали N, и смесь затем нагревали в атмосфере N при 110°C в течение 15 часов. Раствор затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищали препаративной HPLC с получением трет-бутилового эфира (4-{3-[6-(3-хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты (выход 430 мг). LC-MS: [М+Н] 548.
Стадия B
N-{3-[6-(3-Хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклстексан-1,4-диамин, гидрохлорид
1
+
3
[0189] Смесь трет-бутилового эфира (4-{3-[6-(3-хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты (430 мг, 0,78 ммоль) в этаноле (4 мл) и концентрированной HCl (4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный неочищенный продукт очищали препаративной HPLC с получением N-{3-[6-(3-хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамина, гидрохлорида (выход 100 мг). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.16-8.13 (m, 2Н), 7.91 (t, 1H, J=8.1 Гц), 7.46 (s, 1H), 7.38-7.31 (m, 3H), 7.22-7.17 (m, 2Н), 7.04 (d, 1H, J=8.7 Гц), 4.69 (s, 2Н), 4.06 (s, 1H), 3.23 (brs, 1H), 2.21 (brs, 4Н), 1.76-1.70 (m, 4Н). LC-MS: [М+Н] 448.
Пример 83
N-{3-[2-(2-Хлор-бензиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир (4-{3-[2-(2-хлор-бензиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты
[0190] Смесь трет-бутилового эфира {4-[3-(2-метансульфинил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (из. Примера 48, приведенного выше) (100 мг, 0,21 ммоль) и 2-хлорбензиламина (120 мг, 0,84 ммоль) нагревали при 140°C при перемешивании в течение 2 часов. Полученное масло очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, от 50:1 до 30:1) с получением неочищенного трет-бутилового эфира (4-{3-[2-(2-хлор-бензиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты (выход 60 мг).
Стадия B
N-{3-[2-(2-Хлор-бензиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
1
+
3
[0191] К раствору неочищенного трет-бутилового эфира (4-{3-[2-(2хлор-бензиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты (60 мг, 0,11 ммоль) в этаноле (5 мл) медленно добавляли концентрированную соляную кислоту (5 мл). Эту реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 часов. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и затем твердое вещество очищали препаративной HPLC. К фракциям с продуктом добавляли несколько капель концентрированной HCl. После обработки ультразвуком в течение нескольких минут раствор концентрировали при пониженном давлении с получением N-{3-[2-(2-хлор-бензиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамина, гидрохлорида (выход 23 мг, 24,2%). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.70 (s, 1H), 8.44 (brs, 2Н), 7.60-7.49 (m, 3H), 7.35 (brs, 2Н), 7.15 (s, 1H), 4.84 (s, 2Н), 4.06 (brs, 1H), 3.23 (s, 1H), 2.25-2.19 (m, 4Н), 1.78-1.68 (m, 4Н). LC-MS: [М+Н] 449.
Пример 84
N-(3-{6-[(Тиофен-3-илметил)-амино]-пиридин-2-ил}-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир [4-(3-{6-[(тиофен-3-илметил)-амино]-пиридин-2-ил}-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино)-циклогексил]-карбаминовой кислоты
2
3
2
2
2
2
[0192] Через смесь трет-бутилового эфира {4-[3-(6-бром-пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (из Примера 40, приведенного выше) (0,244 г, 0,5 ммоль), тиофен-3-ил-метиламина (0,113 г, 1,0 ммоль), Pd(dba) (30 мг), Davephos (40 мг), NaOtBu (100 мг, 0,1 ммоль) в диоксане (12 мл) в герметичной пробирке в течение нескольких минут барботировали N, и затем смесь нагревали в атмосфере N при 110°C в течение 16 часов. Раствор затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией (CHCl:MeOH, 100:1) с получением трет-бутилового эфира [4-(3-{6-[(тиофен-3-илметил)-амино]-пиридин-2-ил}-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино)-циклогексил]-карбаминовой кислоты (выход 70 мг, 27%).
Стадия B
N-(3-{6-[(Тиофен-3-илметил)-амино]-пиридин-2-ил}-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
1
+
3
[0193] Смесь трет-бутилового эфира [4-(3-{6-[(тиофен-3-илметил)-амино]-пиридин-2-ил}-имидазо[112-а]пиразин-8-иламино)-циклогексил]-карбаминовой кислоты (70 мг, 0,135 ммоль) в этаноле (4 мл) и концентрированной HCl (4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 15 ч. Реакционную смесь затем концентрировали при пониженном давлении с получением N-(3-{6-[(тиофен-3-илметил)-амино]-пиридин-2-ил}-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-циклогексан-1,4-диамина, гидрохлорида (выход 83 мг). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.06 (s, 1H), 7.94 (d, 1H, J=5.4 Гц), 7.87 (t, 1H, J=8.7 Гц), 7.39-7.34 (m, 2Н), 7.16-7.03 (m, 4Н), 4.62 (s, 2Н), 3.98 (brs, 1H), 3.14 (brs, 1H), 2.14-2.09 (brs, 4Н), 1.70-1.60 (m, 4Н). LC-MS: [М+Н] 420.
Пример 85
N-{3-[6-(2-Хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир (4-{3-[6-(2-хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты
2
3
2
2
2
2
[0194] Через смесь трет-бутилового эфира (4-[3-(6-бром-пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (из Примера 40, приведенного выше) (0,244 г, 0,5 ммоль), 2-хлор-бензиламина (0,143 г, 1,0 ммоль), Pd(dba) (30 мг), Davephos (40 мг), NaOtBu (100 мг, 0,1 ммоль) в диоксане (12 мл) в герметичной пробирке в течение нескольких минут барботировали N, и затем смесь нагревали в атмосфере N при 110°C в течение ночи. Раствор затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией (CHCl:MeOH, 100:1) с получением трет-бутилового эфира (4-{3-[6-(2-хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты (выход 227 мг, 83%).
Стадия B
N-{3-[6-(2-Хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
1
1
+
3
[0195] Смесь трет-бутилового эфира (4-{3-[6-(2-хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты (227 мг, 0,41 ммоль) в этаноле (4 мл) и концентрированной HCl (4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной HPLC с получением N-{3-[6-(2-хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамина, гидрохлорида (выход 60 мг). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.25 (d, Н, J=5.7 Гц), 8.19 (s, 1H), 7.88 (t, 1H, J=8.7 Гц), 7.53-7.50 (m, 2Н), 7.35-7.22 (m, 3H), 7.10 (d, 1H, J=5.7 Гц), 7.02 (d, 1H, J=8.7 Гц), 4.77 (s, 2Н), 4.05 (brs, 1H), 3.32 (brs, 1H), 2.23 (brs, 4Н), 1.81-1.74 (m, 4Н). LC-MS: [М+Н] 448.
Пример 86
N-{3-[6-(4-Хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир (4-{3-[6-(4-хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты
2
3
2
2
2
2
[0196] Через смесь трет-бутилового эфира {4-[3-(6-бром-пиридин-2-ил)-имидазр[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (из Примера 40, приведенного выше) (0,244 г, 0,5 ммоль), 4-хлор-бензиламина (0,143 г, 1,0 ммоль), Pd(dba) (30 мг), Davephos (40 мг), NaOtBu (100 мг, 0,1 ммоль) в диоксане (12 мл) в герметичной пробирке в течение нескольких минут барботировали N, и затем смесь нагревали в атмосфере N при 110°C в течение 14 часов. Раствор затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией (CHCl:MeOH, 100:1) с получением трет-бутилового эфира (4-{3-[6-(4-хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты (выход 214 мг, 78%).
Стадия B
N-{3-[6-(4-Хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
1
1
+
3
[0197] Смесь трет-бутилового эфира (4-{3-[6-(4-хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино}-циклогексил)-карбаминовой кислоты (214 мг, 0,39 ммоль) в этаноле (4 мл) и концентрированной HCl (4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной HPLC с получением N-{3-[6-(4-хлор-бензиламино)-пиридин-2-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-циклогексан-1,4-диамина, гидрохлорида (выход 80 мг). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.22 (d, 1H, J=5.7 Гц), 8.19 (s, 1H), 7.89 (t, Н, J=8.7 Гц), 7.46-7.39 (m, 4Н), 7.23 (d, 1H, J=6.9 Гц), 7.17 (d, 1H, J=5.7 Гц), 7.02 (d, 1H, J=8.7 Гц), 4.70 (s, 2Н), 4.04 (brs, 1H), 3.25 (brs, 1H), 2.23 (brs, 4Н), 1.81-1.71 (m, 4Н). LC-MS: [М+Н] 448.
Пример 87
N-(3-{6-[(Тиофен-2-илметил)-амино]-пиридин-2-ил}-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир [4-(3-{6-[(тиофен-2-илметил)-амино]-пиридин-2-ил}-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино)-циклогексил]-карбаминовой кислоты
2
3
2
2
2
2
+
[0198] Через смесь трет-бутилового эфира {4-[3-(6-бром-пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино]-циклогексил}-карбаминовой кислоты (из Примера 40, приведенного выше) (0,244 г, 0,5 ммоль), тиофен-2-ил-метиламина (0,113 г, 1,0 ммоль), Pd(dba) (30 мг), Davephos (40 мг), NaOtBu (100 мг, 0,1 ммоль) в диоксане (15 мл) в герметичной пробирке в течение нескольких минут барботировали N, и затем смесь нагревали в атмосфере N при 110°C в течение 16 часа. Раствор затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали сначала хроматографией (CHCl:MeOH, 100:1), затем препаративной HPLC с получением трет-бутилового эфира [4-(3-{6-[(тиофен-2-илметил)-амино]-пиридин-2-ил}-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино)-циклогексил]-карбаминовой кислоты (выход 100 мг, 38%). LC-MS: [М+Н] 520.
Стадия B
N-(3-{6-[(Тиофен-2-илметил)-амино]-пиридин-2-ил}-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-циклогексан-1,4-диамин, гидрохлорид
1
+
3
[0199] Смесь трет-бутилового эфира [4-(3-{6-[(тиофен-2-илметил)-амино]-пиридин-2-ил}-имидазо[1,2-а]пиразин-8-иламино)-циклогексил]-карбаминовой кислоты (100 мг, 0,193 ммоль) в этаноле (4 мл) и концентрированной HCl (4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь затем концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной HPLC с получением N-(3-{6-[(тиофен-2-илметил)-амино]-пиридин-2-ил}-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил)-циклогексан-1,4-диамина, гидрохлорида (выход 30 мг). H ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.59-8.56 (m, 1H), 8.38 (brs, 1H), 7.82 (d, 1H, J=9.0 Гц), 7.42-7.34 (m, 1H), 7.16-7.04 (m, 2Н), 6.98-6.85 (m, 2Н), 6.43-6.39 (m, 1H), 4.70 (d, 2Н, J=5.1 Гц), 3.89-3.85 (m, 1H), 3.23-3.07 (m, 1H), 2.20-2.05 (m, 4Н), 1.60-1.37 (m, 4Н). LC-MS: [М+Н] 420.
Пример 88
{3-[2-(2-Хлор-бензиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-(2-морфолин-4-ил-этил)-амин, гидрохлорид
1
+
3
[0200] Смесь [3-(2-метансульфонил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-(2-морфолин-4-ил-этил)-амина (из Примера 50, приведенного выше) (200 мг, 0,50 ммоль) и 2-хлорбензиламина (281 мг, 1,99 ммоль) нагревали при 140°C при перемешивании в течение 2 часов. Полученное масло очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол от 50:1 до 20:1) с получением неочищенного продукта (110 мг). Затем неочищенный продукт очищали препаративной HPLC. К фракциям с продуктом добавляли несколько капель концентрированной HCl. После обработки ультразвуком в течение нескольких минут раствор концентрировали при пониженном давлении с получением {3-[2-(2-хлор-бензиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-(2-морфолин-4-ил-этил)-амина, гидрохлорида (выход 58 мг, 25,1%). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.72 (s, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.59 (d, 1H, J=6.9 Гц), 7.46-7.28 (m, 5Н), 4.75 (brs, 2Н), 4.17 (brs, 2Н), 3.93 (brs, 4Н), 3.59-3.28 (m, 5Н). LC-MS: [М+Н] 466.
Пример 89
(3-[2-(3-Хлор-бензиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-(2-морфолин-4-ил-этил)-амин, гидрохлорид
1
+
3
[0201] Смесь [3-(2-метансульфонил-пиримидин-4-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-(2-морфолин-4-ил-этил)-амина (из Примера 50, приведенного выше) (200 мг, 0,50 ммоль) и 3-хлорбензиламина (281 мг, 1,99 ммоль) нагревали при 140°C при перемешивании в течение 2 часов. Полученное масло очищали хроматографией (силикагель, 10 г, 200-300 меш, элюируя смесью дихлорметан:метанол, 50:1-20:1) с получением неочищенного продукта (125 мг). Затем неочищенный продукт очищали препаративной HPLC. К фракциям с продуктом добавляли несколько капель концентрированной HCl. После обработки ультразвуком в течение нескольких минут раствор концентрировали при пониженном давлении с получением {3-[2-(3-хлор-бензиламино)-пиримидин-4-ил]-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил}-(2-морфолин-4-ил-этил)-амина, гидрохлорида (выход 60 мг, 26,0%). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.71 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.59 (d, 1H, J=6.6 Гц), 7.49-7.28 (m, 5Н), 4.87 (brs, 2Н), 4.16 (brs, 2Н), 3.93 (brs, 4Н), 3.58-3.28 (m, 5Н). LC-MS: [М+Н] 466.
Пример 90
1-(3-Хлор-фенил)-N1-{6-[8-(2-морфолин-4-ил-этиламино)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-пропан-1,3-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир (3-(3-хлор-фенил)-3-{6-[8-(2-морфолин-4-ил-этиламино)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-иламино}-пропил)-карбаминовой кислоты
2
3
2
3
2
2
+
[0202] Через смесь [3-(6-бром-пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-(2-морфолин-4-ил-этил)-амина (из Примера 41, приведенного выше) (0,403 г, 1,0 ммоль), трет-бутилового эфира [3-амино-3-(3-хлор-фенил)-пропил]-карбаминовой кислоты (из Примера 62, приведенного выше) (0,427 г, 1,5 ммоль), Pd(dba) (60 мг), Davephos (80 мг), KCO (207 мг, 1,5 ммоль) в диоксане (25 мл) в герметичной пробирке в течение нескольких минут барботировали N, и затем смесь нагревали в атмосфере N при 130°C в течение ночи. Раствор затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали препаративной-HPLC с получением трет-бутилового эфира (3-(3-хлор-фенил)-3-{6-[8-(2-морфолин-4-ил-этиламино)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-иламино}-пропил)-карбаминовой кислоты (выход 50 мг). LC-MS: 607 [М+Н] 607.
Стадия B
1-(3-Хлор-фенил)-N1-{6-[8-(2-морфолин-4-ил-этиламино)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-пропан-1,3-диамин, гидрохлорид
1
+
3
[0203] Смесь трет-бутилового эфира (3-(3-хлор-фенил)-3-{6-[8-(2-морфолин-4-ил-этиламино)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-иламино}-пропил)-карбаминовой кислоты (50 мг, 0,08 ммоль) в этаноле (4 мл) и концентрированной HCl (4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь затем концентрировали при пониженном давлении с получением 1-(3-хлор-фенил)-N1-{6-[8-(2-морфолин-4-ил-этиламино)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-пропан-1,3-диамина, гидрохлорида (выход 50 мг). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.51 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.66-7.63 (m, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.45-7.19 (m, 5Н), 6.84-6.80 (m, 1H), 5.11 (brs, 1H), 4.24 (brs, 2Н), 4.00 (brs, 4H), 3.65-3.49 (m, 6Н), 3.24-3.10 (m, 2Н), 2.23 (brs, 2Н). LC-MS: 508 [М+Н] 508.
Пример 91
1-(3-Хлор-фенил)-N1-{6-[8-(2-морфолин-4-ил-этиламино)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-этан-1,2-диамин, гидрохлорид
Стадия A
трет-Бутиловый эфир (2-(3-хлор-фенил)-2-{6-[8-(2-морфолин-4-ил-этиламино)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-иламино}-этил)-карбаминовой кислоты
2
3
2
3
2
2
2
2
+
[0204] Смесь [3-(6-бром-пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-а]пиразин-8-ил]-(2-морфолин-4-ил-этил)-амина (из Примера 41, приведенного выше) (0,403 г, 1,0 ммоль), трет-бутилового эфира [2-амино-2-(3-хлор-фенил)-этил]-карбаминовой кислоты (из Примера 78, приведенного выше) (0,406 г, 1,5 ммоль), Pd(dba) (60 мг), Davephos (80 мг), KCO (207 мг, 1,5 ммоль) в диоксане (25 мл) в герметичной пробирке в течение нескольких минут барботировали N, и затем смесь нагревали в атмосфере N при 130°C в течение ночи. Раствор затем охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией (CHCl:MeOH, от 50:1 до 20:1) с получением неочищенного трет-бутилового эфира (2-(3-хлор-фенил)-2-{6-[8-(2-морфолин-4-ил-этиламино)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-иламино}-этил)-карбаминовой кислоты (выход 210 мг). LC-MS: [М+Н] 593.
Стадия B
1-(3-Хлор-фенил)-N1-{6-[8-(2-морфолин-4-ил-этиламино)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-этан-1,2-диамин, гидрохлорид
1
+
3
[0205] Смесь неочищенного трет-бутилового эфира (2-(3-хлор-фенил)-2-{6-[8-(2-морфолин-4-ил-этиламино)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-иламино}-этил)-карбаминовой кислоты (210 мг, 0,35 ммоль) в этаноле (4 мл) и концентрированной HCl (4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь затем концентрировали при пониженном давлении с получением 1-(3-хлор-фенил)-N1-{6-[8-(2-морфолин-4-ил-этиламино)-имидазо[1,2-а]пиразин-3-ил]-пиридин-2-ил}-этан-1,2-диамина, гидрохлорида (выход 150 мг). Н ЯМР (300 МГц, CDOD): δ 8.58 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.68-7.63 (m, 2Н), 7.51-7.39 (m, 3H), 7.31-7.27 (m, 2H), 6.73 (d, 1H, J=8.4 Гц), 5.48-5.41 (m, 1H), 3.99-3.92 (m, 6H), 3.53-3.2 4 (m, 8H). LC-MS: [M+H] 493.
[0206] Фармацевтические свойства соединений по данному изобретению могут быть подтверждены множеством фармакологических анализов. Иллюстративные анализы в отношении антипролиферативной активности, которые приведены ниже, были проведены с соединениями по изобретению.
Пример 92
Анализ в отношении киназы FLT3
2
50
[0207] Киназа FLT3 для анализа была получена из CIaiper Life Sciences (номер по каталогу 200-0423). Анализ проводили с рекомбинантной FLT3 человека (0,287 нМ), флуоресцирующей в меченом пептидном субстрате (с пептидной последовательностью EAIYAAPFAKKK, 1,5 мкМ) и с тестируемыми соединениями (в последовательном разведении) с использованием 384-луночных планшетов, количественно оцениваемых по технологии Caliper. Киназную реакцию проводили в 100 мМ HEPES, pH 7,5, 4% DMSO, 0,003% Brij-35, 0,004% Tween, 10 мМ MgCl и 100 мкМ ATP (для определения IC), инкубировали при 28°C в течение 90 минут. После инкубирования продукт реакции анализировали методом сдвига электрофоретической подвижности, выполняемым на Caliper согласно протоколу производителя.
50
50
[0208] IC представляет собой количество тестируемого соединения, которое ингибирует 50% активности FLT3 в этом анализе. В некоторых случаях, когда значения IC не определяли, тогда вместо них может быть указан % ингибирования при концентрации тестируемого соединения 10 мкМ. Результаты этого анализа для проиллюстрированных соединений по изобретению приведены в Таблице I ниже.
Пример 93
Анализ жизнеспособности клеток Glo (люминесценция)
2

[0209] Клетки Molm13, клеточная линия острого моноцитарного лейкоза человека, и клетки MV4-11, клеточная линия лейкоза человека, которые известны как клетки, экспрессирующие мутировавшую FLT3 (обе из АТСС), высевали по отдельности в количестве 2000 клеток на лунку в 90 мкл среды RPMI1640, дополненной 10% FBS, в 96-луночные планшеты с черными стенками (BD Falcon). Тестируемые соединения разводили в десять раз с получением аналитических концентраций, и по 10 мкл добавляли в лунки в двух повторах. Планшеты инкубировали при 37°C с 5% CO в течение 5 суток. Жизнеспособность клеток анализировали методом люминесцентного анализа жизнеспособности клеток CellTiter-Glo (Promega) согласно протоколу производителя.
50
[0210] Результаты этого анализа, приведенные в виде значений EC, показывают концентрацию тестируемого соединения, которая ингибирует 5 пролиферацию клеток опухоли на 50%. Результаты этого анализа для соединений по изобретению также приведены в Таблице I ниже.
Таблица 1
Активность в отношении фермента киназы и в отношении клеток
Активность в отношении фермента
Активность в отношении клеток
Активность в отношении клеток
IC<sub>50</sub> (мкМ)
EC<sub>50</sub> (мкМ)
EC<sub>50</sub> (мкМ)
Пример
FLT3
Molm13
MV4-11
12
NT
NT
NT
13
NT
NT
NT
14
0,045
NT
NT
15
NT
NT
NT
16
NT
NT
NT
17
NT
NT
NT
18
NT
NT
NT
19
NT
NT
NT
20
<0,005
0,052
0,041
21
0,122
NT
NT
22
NT
NT
NT
23
1,29
NT
NT
24
NT
NT
NT
25
NT
NT
NT
26
0,105
2,557
1,118
27
NT
NT
NT
28
NT
NT
NT
29
0,589
NT
NT
30
0,166
2,188
0,745
31
0,218
NT
NT
32
0,102
NT
NT
Активность в отношении фермента
Активность в отношении клеток
Активность в отношении клеток
IC<sub>50</sub> (мкМ)
EC<sub>50</sub> (мкМ)
EC<sub>50</sub> (мкМ)
Пример
FLT3
Molm13
MV4-11
33
NT
NT
NT
34
NT
NT
NT
35
0,025
NT
NT
52
0,539
NT
NT
54
4,93
NT
NT
55
0,54
NT
NT
56
7,155
NT
NT
57
1,281
NT
NT
58
1,355
NT
NT
59
29,2%
NT
NT
60
5,78
NT
NT
61
1,096
NT
NT
63
1,83
NT
NT
64
33,5%
NT
NT
65
1,33
NT
NT
66
0,868
NT
NT
67
<0,005
0,049
0,017
68
<0,005
0,061
0,052
70
0,051
NT
NT
71
13,2%
NT
NT
72
0,008
0,171
0,124
73
0,006
0,077
0,04
75
0,082
1,693
0,878
76
<0,005
0,301
0,232
77
<0,005
0,08
0,015
79
0,321
1,966
1,012
80
<0,005
0,041
<0,014
81
0,003
0,255
0,288
82
0,01
0,119
0,049
83
<0,005
0,021
0,016
Активность в отношении фермента
Активность в отношении клеток
Активность в отношении клеток
IC<sub>50</sub> (мкМ)
EC<sub>50</sub> (мкМ)
EC<sub>50</sub> (мкМ)
Пример
FLT3
Molm13
MV4-11
84
<0,005
0,056
0,068
85
<0,005
0,014
<0,014
86
0,064
0,353
0,385
87
0,006
0,074
0,07
88
0,006
0,037
0,055
89
0,019
0,075
0,06
90
<0,005
0,034
<0,014
91
<0,005
<0,014
<0,014
NT: не тестировали