Терапевтическая APAC-молекула, содержащая гепарин, конъюгированный с белком плазмы крови

1. Антитромботическая молекула, обладающая как антитромбоцитарной, так и антикоагулянтной (АРАС) активностью, содержащая белок плазмы крови, к которому присоединены через множество линкерных молекул множество гепариновых цепей, где каждая цепь имеет MW (молекулярная масса) от 10 до 21 кДа, и кроме этого, где количество указанных гепариновых цепей, присоединенных к указанному белку плазмы крови, выбрано из группы, содержащей числа 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 и 16.
2. Антитромботическая молекула по п. 1, где указанная молекула обладает направленным действием и поэтому удерживается в месте применения в течение более 24 часов, 48 часов, 50 часов или до 120 часов включительно.
3. Антитромботическая молекула по п. 1 или 2, где указанный белок плазмы крови выбран из группы, содержащей альбумин, глобулин, фибриноген, сывороточный альбумин и альфа-2-макроглобулин, или состоящей из них.
4. Антитромботическая молекула по любому из пп. 1-3, где указанный гепарин представляет собой нефракционированный гепарин.
5. Антитромботическая молекула по любому из пп. 1-4, где источником указанного гепарина является млекопитающее.
6. Антитромботическая молекула по любому из пп. 1-5, где указанный гепарин представляет собой гепарин человека или является свиным либо бычьим гепарином.
7. Антитромботическая молекула по любому из пп. 1-6, где указанная линкерная молекула, по меньшей мере когда связывание указанного гепарина с указанным белком плазмы крови является полным, представляет собой одиночную линкерную молекулу, которая связана с одной молекулой гепарина.
8. Антитромботическая молекула по п. 7, где указанная линкерная молекула представляет собой аминный линкер и поэтому связывается с аминогруппами в указанных гепарине и белке плазмы крови.
9. Антитромботическая молекула по п. 8, где указанный линкер обеспечивает конъюгирование указанных гепарина и белка плазмы крови посредством дисульфидных мостиков.
10. Антитромботическая молекула по любому из пп. 7-9, где указанным линкером является линкер, представляющий собой N-гидроксисукцинимидный эфир 3-(2-пиридилдитио)пропионовой кислоты (SPDP), или линкер, представляющий собой ди(N-гидроксисукцинимидный эфир) 3,3'-дитиодипропионовой кислоты (DTSP).
11. Антитромботическая молекула по любому из пп. 1-10, где общая формула указанной молекулы является такой, как приведено ниже:
n
(Нер-линкер)-PIPr,
где n равно 4-16;
PIPr представляет собой белок плазмы крови, такой как сывороточный альбумин человека или альфа-2-макроглобулин человека; и
каждая гепариновая (Hep) цепь обладает примерно 10-21 кДа.
12. Антитромботическая молекула по любому из пп. 1-11, где общая формула указанной молекулы является такой, как приведено ниже:
n
(Hep-NH-CO-CH2-CH2-S-S-CH2-CH2-CO-NH)-PIPr,
где n равно 4-16;
PIPr представляет собой белок плазмы крови, такой как сывороточный альбумин человека или альфа-2-макроглобулин человека; и
каждая гепариновая (Hep) цепь обладает примерно 10-21 кДа.
13. Антитромботическая молекула по любому из пп. 1-12, где указанная АРАС-молекула имеет 4, 5 или 6 гепариновых цепей, присоединенных к указанному белку плазмы крови.
14. Антитромботическая молекула по любому из пп. 1-12, где указанная АРАС-молекула имеет 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 или 16 гепариновых цепей, присоединенных к указанному белку плазмы крови.
15. Антитромботическая молекула по любому из пп. 1-12, где указанная АРАС-молекула имеет 7 гепариновых цепей, присоединенных к указанному белку плазмы крови.
16. Антитромботическая молекула по любому из пп. 1-15, где каждая указанная гепариновая цепь имеет MW, выбранную из группы, содержащей числа 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 и 21 кДа.
17. Антитромботическая молекула по любому из пп. 1-16, где указанный гепарин является рекомбинантным.
18. Антитромботическая молекула по любому из пп. 1-17, где указанный белок плазмы крови является рекомбинантным.
19. Антитромботическая молекула по любому из пп. 1-18 для применения в качестве лекарственного средства.
20. Антитромботическая молекула по любому из пп. 1-18 для применения в лечении тромбоза.
21. Антитромботическая молекула для применения в качестве лекарственного средства или для применения в лечении тромбоза по любому из пп. 19 или 20, где указанная АРАС-молекула является локально действующей.
22. Антитромботическая молекула для применения в качестве лекарственного средства или для применения в лечении тромбоза по любому из пп. 19-22, где указанная АРАС-молекула имеет 4, 5 или 6 гепариновых цепей, присоединенных к указанному белку плазмы крови через указанные линкеры, и указанную молекулу используют главным образом или в большей степени в качестве антикоагулянта.
23. Антитромботическая молекула для применения в качестве лекарственного средства или для применения в лечении тромбоза по любому из пп. 19-22, где указанная АРАС-молекула имеет 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15 или 16 гепариновых цепей, присоединенных к указанному белку плазмы крови через указанные линкеры, и указанную молекулу используют главным образом или в большей степени в качестве антитромбоцитарного терапевтического средства / ингибитора тромбоцитов.
24. Антитромботическая молекула для применения в качестве лекарственного средства или для применения в лечении тромбоза по любому из пп. 19-23, где указанную АРАС-молекулу используют для лечения или предупреждения тромботических осложнений, таких как осложнения, связанные с эндогенным разрывом атеросклеротической бляшки; или тромболитической терапией для предотвращения реокклюзии; или экзогенной ангиопластикой; или сосудистой либо микрососудистой хирургией; или вмешательствами на артериях, такими как ангиопластика, в частности, чрескожная транслюминальная (коронарная) ангиопластика со стентированием или без него; или (направленной) артерэктомией; или периферической или легочной тромбэндартерэктомией; или вызываемым тромбоцитами артериальным тромбозом; или сосудистыми либо микрососудистыми повреждениями; или тромботической тромбоцитопенической пурпурой или экзогенными вмешательствами, такими как введение и поддержание артериовенозной фистулы или артериовенозных трансплантатов; или использованием катетеров, или дефицитом антитромбина (AT), или вызываемым тромбоцитами артериальным тромбозом; или сосудистыми либо микрососудистыми повреждениями.
25. Антитромботическая молекула для применения в качестве лекарственного средства или для применения в лечении тромбоза по любому из пп. 19-24, где указанную АРАС-молекулу используют для лечения или предупреждения ишемически-реперфузионного повреждения, или острого почечного повреждения, или инфаркта миокарда, или инсульта, или окклюзионной болезни периферических артерий, или мезентериальной ишемии.
26. Способ получения антитромботической молекулы, обладающей как антитромбоцитарной, так и антикоагулянтной (АРАС) активностью, включающий:
4) модифицирование нефракционированной гепариновой (Hep) цепи с получением реакционноспособного продукта, имеющего сульфгидрильную (-SH) группу;
5) модифицирование белка плазмы крови с получением реакционноспособного продукта, имеющего пиридил-дитиоловую (-PDP) группу; и
6) связывание реакционноспособного продукта со стадии 1) с реакционноспособным продуктом со стадии 2) с использованием гетеро-бифункционального кросс-линкера.
27. Способ по п. 26, где указанным линкером является SPDP линкер, представляющий собой N-гидроксисукцинимидный эфир 3-(2-пиридилдитио)пропионовой кислоты.
28. Способ получения антитромботической молекулы, обладающей как антитромбоцитарной, так и антикоагулянтной (АРАС) активностью, включающий:
1) модифицирование нефракционированной гепариновой (Hep) цепи с получением реакционноспособного продукта, имеющего группу N-гидроксисукцинимидного (-NHS) эфира;
2) связывание реакционноспособного продукта со стадии 1) с белком плазмы крови, таким как сывороточный альбумин, содержащим первичные амины, с использованием гомо-бифункционального кросс-линкера.
29. Способ по п. 28, где указанным линкером является линкер, представляющий собой ди(N-гидроксисукцинимидный эфир) 3,3'-дитиодипропионовой кислоты (DTSP).
30. Способ по любому из пп. 26-28, где указанную антитромботическую молекулу очищают хроматографией с гидрофобным взаимодействием (HIC) или ультра/диафильтрацией.
31. Способ по любому из пп. 26-30, где указанный белок плазмы крови выбран из группы, содержащей альбумин, глобулин, фибриноген, сывороточный альбумин и альфа-2-макроглобулин, или состоящей из них.
32. Способ по п. 31, где указанный белок плазмы крови представляет собой сывороточный альбумин или альфа-2-макроглобулин.
33. Антитромботическая молекула, обладающая как антитромбоцитарной, так и антикоагулянтной (АРАС) активностью, полученная способом по любому из пп. 26-32.