Резервные возможности системы периферического кровообращения и функции эндотелия при экспериментальном адреналовом повреждении миокарда у крыс

лабораторных кроликов. Однако, если в самом миокарде гомеостаз поддерживался преимущественно за счет включения активных механизмов регуляции, то в кожных покровах произошло нарастание интенсивности пассивных механизмов контроля.

Выявленные изменения состояния кожной микроциркуляции могут быть использованы в качестве дополнительных диагностических критериев в клинической практике при оценке степени тяжести состояния больных с пороками аортального клапана и ишемической болезнью сердца, инфарктом миокарда для оценки эффективности проводимой терапии и прогноза течения заболевания.

ЛИТЕРАТУРА

1. Бокерня, Л.А. Интервеционные методы лечения ишемической болезни сердца / Л.А. Бокерия, Б.Г. Алекян, А. Коломбо и др. // М.: Изд НЦСХХ им. А.Н. Бакулева РАМН. 2002. -С.11-15.

2. Крупаткин, А.И. Функциональная диагностика состояниямикроциркуляторно-тканевых систем: Колебания, информация, нелинейность (руководство для врачей) / А.И.Крупаткин, В.В.Сидоров // М.: Книжный дом «ЛИБРОКОМ». - 2013. - 496 с.

3. Меерсон, Ф.З. Гиперфункция, гипертрофия и недостаточность сердца // М.: Медицина. -1968. - 388 с.

4. Микроциркуляция и функция эндотелия: теоретические основы, принципы диагностики нарушений, значение для клинической практики: научно-методическое пособие / Под ред. О.В.Молоткова, О.В.Халепо. - Смоленск, 2015. - 111 с.

5. Bregagnollo, E.A. Relative role of left ventricular geometric remodeling and of morphological and functional myocardial remodeling in the transition from compensated hypertrophy to heart failure in rats with supravalvar aortic stenosis / E.A.Bregagnollo, M.A Mestrinel, K.Okoshi et al. // Arq.Bras. Cardiol. - 2007. - V. 88. - № 2. - P. 225-233.

УДК: 615.127:616.1

РЕЗЕРВНЫЕ ВОЗМОЖНОСТИ СИСТЕМЫ ПЕРИФЕРИЧЕСКОГО КРОВООБРАЩЕНИЯ И ФУНКЦИИ ЭНДОТЕЛИЯ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ АДРЕНАЛОВОМ ПОВРЕЖДЕНИИ МИОКАРДА У КРЫС Халепо О.В., Молотков О.В., Баженов С.М., Петросян Н.С., Семёнов Е.Д.,

Шапошникова М.Б., Яковлева Е.В.

Смоленский государственный медицинский университет, Смоленск

а1епа_уакоу1еуа_00@таИ ги

Резюме. На 12 крысах было смоделировано адреналовое ишемическое повреждение миокарда, подтвержденное морфологически. Изучение состояния периферического кровообращения в кожных покровах показало, что через 2 часа после введения адреналина произошло снижение перфузии в микроциркуляторном русле, что может быть связано с его непосредственным влиянием на сосудистый тонус. На 1 и 3 сутки наблюдения уровень перфузии не различался с исходными значениями при повышении вклада активных механизмов регуляции микрогемодинамики и увеличением вазомоторной активности микрососудов. На 7 и 10 сутки обнаружено максимальное напряжение резервных возможностей периферического кровообращения, нарастание способности микрососудов к эндотелий-зависимой вазодилатации, что сопровождалось стабилизацией состояния микрогемодинамики. На 21 сутки выраженность резервных возможностей микроциркуляторного русла снизилась, что может быть обусловлено истощением компенсаторных механизмов в условиях ишемического повреждения миокарда.

Изучение периферического кровообращения в кожных покровах и его резервных возможностей с использованием нагрузочных проб на микроциркуляторное русло может быть использовано в качестве дополнительного метода оценки тяжести состояния при

ишемической болезни сердца, имеет прогностическое значение, может быть использовано для оценки эффективности проводимой терапии.

Ключевые слова: адреналовое ишемическое повреждение миокарда, лазерная допплеровская флоуметрия, резервные возможности микрогемодинамики, функция эндотелия, нагрузочные пробы

THE RESERVE POSSIBILITIES OF THE PERIPHERAL CIRCULATION SYSTEM AND THE FUNCTION OF THE ENDOTHELIUM AT EXPERIMENTAL ADRENAL DAMAGE OF MYOCARDIA IN RATS

Halepo O. V., Molotkov O. V., Bazhenov S.M., Petrosyan N.S., Semenov E.D.,

Shaposhnikova M.B., Yakovleva E. V.

Smolensk State Medical University, Smolensk, Russia

alena_yakovleva_00@mail.ru

Abstract. In 12 rats, adrenal ischemic myocardial damage was modeled, morphologically confirmed. The study of the state of the peripheral blood circulation in the skin showed that 2 hours after the administration of adrenaline, there was a decrease in the perfusion in the microvasculature, which may be due to its direct effect on the vascular tone. On days 1 and 3 of observation, the level of perfusion did not differ from baseline with an increase in the contribution of active mechanisms of microhemodynamic regulation and an increase in vasomotor activity of microvessels. On days 7 and 10, the maximum voltage of the reserve capacity of the peripheral blood circulation was found, the increase in the ability of microvessels to endothelium-dependent vasodilation, which was accompanied by the stabilization of the microhemodynamics state. On day 21, the severity of the reserve capacity of the microcirculatory bed decreased, which may be due to the depletion of compensatory mechanisms in conditions of ischemic myocardial damage.

The study of peripheral blood circulation in the skin and its reserve capabilities using stress tests on the microcirculatory bed can be used as an additional method for assessing the severity of the condition in ischemic heart disease, has a prognostic value, can be used to assess the effectiveness of therapy.

Keywords: adrenal ischemic myocardial damage, laser Doppler flowmetry, microhemodynamic reserve capabilities, endothelial function, stress testing

Введение. В настоящее время основной причиной смертности населения в экономически развитых странах являются сердечно-сосудистые заболевания, среди которых ведущее место занимает инфаркт миокарда (ИМ). Такие его осложнения, как кардиогенный шок, острая сердечная недостаточность, нарушения ритма и проводимости сердца могут приводить к летальному исходу. Однако при своевременном включении ряда компенсаторно-приспособительных механизмов возможно поддержание гомеостаза.

Сама система периферического кровообращения находится под сложным многофакторным контролем со стороны центральных регуляторных влияний, определяющих сосудистый тонус, и местных активных факторов, в том числе биологически активных веществ, выделяемых клетками сосудистого эндотелия.

Изменение состояния микроциркуляторного русла, за счет включения его резервных возможностей, приводит к оптимизации транскапиллярного обмена, что позволяет определенное время поддерживать тканевой гомеостаз даже в условиях тяжелой патологии. Таким образом, состояние резервных возможностей микроциркуляторного русла в условиях такой тяжелой патологии, как ишемический некроз миокарда, оказывает влияние как на течение заболевания, его тяжесть, развитие осложнений, так и определяет прогноз.

Целью работы было изучение состояния периферического кровообращения и его компенсаторных возможностей в динамике формирования и развития адреналового ишемического поражения миокарда у крыс с использованием функциональных нагрузочных проб на микроциркуляторное русло.

Материал и методы. Работа выполнена на 12 белых беспородных крысах обоего пола массой 177±12 г. Животные содержались в условиях вивария на стандартном лабораторном рационе. С помощью аппарата ЛАКК-М (НПП «ЛАЗМА», Россия) методом лазерной допплеровской флоуметрии (ЛДФ) под общим наркозом («Золетил», VirbacSanteAnimale, Франция в дозе 4 мг/кг) регистрировали исходное состояние периферического кровообращения в предварительно эпилированных кожных покровах внутренней поверхности левого бедра. Обработку допплерограмм проводили с помощью программы ЛДФ 3.0.2.376, позволяющей оценивать состояние тканевого кровотока и механизмы его регуляции с учетом частоты дыхательных движений и сердечного ритма мелких лабораторных животных. Оценивали средние значения перфузии: показатель микроциркуляции (ПМ), среднеквадратичное отклонение показателя микроциркуляции (СКО) и коэффициент вариации (Кв). Вейвлет-преобразование ЛДФ-грамм позволило оценить влияние отдельных механизмов регуляции на тонус микрососудов: нейрогенного, миогенного тонуса и его эндотелий-зависимого компонента (НТ, МТ, ЭЗКТ), которые относят к активным механизмам регуляции; дыхательного и сердечного ритмов (ДР, СР), которые относят к пассивным механизмам регуляции [1].

Для оценки особенностей влияния нейрогенных и метаболических факторов (в частности NO) в условиях повышенных нагрузок на периферический кровоток выполняли пробу с линейным локальным нагревом со скоростью 2° в минуту в температурных границах от 38° до 50 °С и одновременной регистрацией допплерограмм. По результатам пробы оценивали максимальный уровень перфузии (ПМмакс.), время достижения максимума ^макс.) и резерв капиллярного кровотока (РКК).

Для оценки функции сосудистого эндотелия проводили функциональные пробы на эндотелий-независимую вазодилатацию (введение 1% раствора натрия нитропруссида, экзогенного донатора NO, ЭНВД) и эндотелий-зависимую вазодилатацию (введение 1% раствора ацетилхолина, ЭЗВД). По результатам выполнения проб оценивали амплитуду прироста величины перфузии (ДПМ) и вклад отдельных механизмов в регуляцию сосудистого тонуса (НТ, МТ, ЭЗКТ, ДР, СР) [2].

После регистрации исходного состояния микроциркуляции и ее резервных возможностей моделировали ишемическое повреждение миокарда (ИПМ) посредством подкожного введения 0,1% раствора адреналина гидрохлорида в дозе 2мг/кг (Маркель А.Л., 1985). Через 2 часа регистрировали ЭКГ в трёх стандартных и трёх усиленных отведениях (ЭК12Т-01-"Р-Д"), что позволяло верифицировать ИПМ. Последующее изучение состояния микроциркуляции и регистрацию ЭКГ и проводили под общим наркозом через 2 часа после введения адреналина гидрохлорида, на 1, 3, 7, 10 и 21 сутки развития ИПМ. На 21 сутки ИПМ животные выводились из эксперимента, а сердца были забраны на морфологическое исследование.

Статистическую обработку результатов проводили с помощью программы StatSoft «Statistica 10.0» с использованием критерия Колмогорова-Смирнова, U-теста Манна Уитни, t-критерия Стьюдента.

Результаты.

ИПМ у всех животных было подтверждено морфологически. На гистологических срезах были выявлены признаки нарушения кровообращения в микроциркуляторном русле миокарда. Со стороны кардиомиоцитов имели место признаки повреждения и гибели отдельных мышечных клеток. В отдельных зонах кардиомиоциты полностью или частично утрачивали поперечную исчерченность, выявлялись признаки кариорексиса и кариолизиса. Реакция на повреждение мышечных клеток была очень незначительной, выявлялись только отдельные лимфоциты и сегментоядерные нейтрофилы, преимущественно в области верхушки левого желудочка.

Результаты изучения состояния периферического кровообращения свидетельствуют, что исходное состояние кожной микроциркуляции у всех животных соответствовало нормальным показателям в соответствии с данными литературы [3].

Через 2 часа после введения адреналина состояние периферического кровотока изменилось. ПМ снизился и составил 67% от исходного (р=0,03), а показатели, характеризующие механизмы регуляции микрогемодинамики оставались в пределах исходных значений.

На 1 сутки ИПМ сохранилась тенденция к снижению ПМ, в то время как вазомоторная активность микрососудов увеличилась. Выявлено повышение СКО в 1,7 раза (р=0,0023), Кв в 2,1 раза (р=0,022). На 3 сутки после введения адреналина гидрохлорида ПМ продолжил снижаться, а вазомоторная активность микрососудов нарастала: Кв увеличился в 1,7 раза (р=0,034). На 7 сутки наблюдения ПМ вернулся к исходному значению, однако Кв оставался повышенным на 10% (р=0,022). На 10 сутки все показатели перфузии статистически достоверно не различались с исходными величинами. Однако, на 21 сутки моделирования ИПМ состояние периферического кровообращения вновь существенно изменилось: ПМ снизился в 1,6 раза (р=0,031), а Кв увеличился в 2 раза (р=0,0065) по сравнению с исходными значениями.

В ходе дальнейшей работы для выявления резервных возможностей микроциркуляторного русла были проведены нагрузочные пробы.

Результаты тепловой пробы свидетельствуют, что состояние перфузии во все сроки исследования статистически достоверно не различалось с исходными значениями. Однако, на 1 сутки имелась тенденция к снижению ПМмакс. и уменьшению 1макс.

На 1 сутки ИПМ обнаружено снижение выраженности всех активных механизмов контроля, характеризующих период тепловой вазодилатации: НТ на 31,7%, ЭЗКТ - на 19,1%, МТ - на 23,3% (р<0,05 во всех случаях). На 10 сутки после введения адреналина гидрохлорида показатели, характеризующие процесс тепловой вазодилатации не различались с исходными значениями. На 21 сутки произошло снижение показателей НТ на 25,7%, МТ на 16,9%, ЭЗКТ на 25,2% и ПМмакс. на 26,7% ниже исходных значений, что сопровождалось уменьшением 1макс. на 12,6% (р<0,05 во всех случаях)..

Обнаружено, что способность микрососудов к ЭНВД не различалась в динамике наблюдения, хотя с 10 суток исследования имелась тенденция к снижению ДПМ, и снижение ЭЗКТ в 1,9 раза (р=0,0038) по сравнению с исходными показателями. Более значительным было изменение способности сосудов микроциркуляторного русла к ЭЗВД. На 1 сутки ДПМ увеличился в 2 раза относительно исходных значений (р=0,025), что сопровождалось снижением влияния активных механизмов контроля: НТ в 1,2 раза (р=0,031) и ЭЗКТ в 1,3 раза (р=0,004). На 3 и 7 сутки достоверных различий в способности к ЭЗВД не имелось, а на 10 сутки она увеличилась: ДПМ оказалась в 6 раз больше (р=0,017), чем у здоровых животных. Произошло изменение активных механизмов: НТ увеличился в 1,3 раза (р<0,05), ЭЗКТ в 1,6 раза (р=0,0086). На 21 сутки имелась тенденция к увеличению способности к ЭЗВД, однако статистически достоверных различий не наблюдалось.

Выводы. Выявленное через 2 часа после моделирования адреналового повреждения миокарда снижение перфузии может быть связанно с прямым эффектом адреналина гидрохлорида на сосудистое русло.

Поддержание уровня перфузии на 1 и 3 сутки ИПМ обеспечивалось за счет повышения вклада активных механизмов регуляции, что сопровождалось нарастанием вазомоторной активности и ограничением резервных возможностей микроциркуляторного русла, выявленным при проведении пробы с нагреванием.

На 7 и 10 сутки выявлено максимальное напряжение резервных возможностей микроциркуляторного русла, значительное нарастание ЭЗВД, что привело к определенной стабилизации состояния периферического кровообращения.

Однако на 21 сутки ИПМ выраженность компенсаторных механизмов микроциркуляции снизилась, что может быть связано с их истощением и возможностью формирования в дальнейшем тканевых расстройств.

Таким образом, использование нагрузочных проб для оценки резервных возможностей системы периферического кровообращения в динамике формирование ИПМ

является информативным методом, позволяющим оценить тяжесть течения заболевания, прогноз и возможность формирования осложнений, оценить эффективность проводимой терапии.

ЛИТЕРАТУРА

1. Крупаткин А.И., Сидоров В.В. Функциональная диагностика состояния микроциркуляторно-тканевых систем: Колебания, информация, нелинейность / А.И. Крупаткин, В.В. Сидоров. - Москва: Книжный дом «ЛИБРОКОМ», 2013. - 496 с.

2. Молотков О.В., Халепо О.В. Микроциркуляция и функция эндотелия: теоритические основы, принципы диагностики нарушений, значение для клинической практики: научно-методическое пособие / О.В.Молотков, О.В.Халепо. - Смоленск, 2015. - 111с.

3. Халепо О.В., Ешкина С.Л., Пугачев В М., Лучкина О.А. Использование метода лазерной доплеровской флоуметрии для оценки роли микроциркуляторных нарушений при патологии / О.В. Халепо [и др.] // Вестник восстановительной медицины - 2008. - N3. - С. 64-69.

УДК: 616.127-005.8-085:591.821

ПРИМЕНЕНИЕ ФАКТОРОВ РОСТА ЭНДОТЕЛИЯ И МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК ЖИРОВОЙ ТКАНИ ДЛЯ СТИМУЛЯЦИИНЕОАНГИОГЕНЕЗАПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ

МОДЕЛИРОВАНИИ ОСТРОГО ИНФАРКТА МИОКАРДА Шевченко Ю.Л.1, Гудымович В.Г.1, Борщев Г.Г.1, Мамадалиев Д.М.1, Халепо О.В.2,

I Молотков О.йД Брындин С.В.2 1. Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медико-хирургический Центр имени Н.И. Пирогова» Министерства здравоохранения Российской

Федерации, Москва, Россия

2. Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Смоленский государственный медицинский университет» Министерства

здравоохранения Российской Федерации, Смоленск, Россия depshi4@mail.ru, glebcenter@mail.ru, halepo71@mail.ru Выполнено экспериментальное исследованиекомбинированной стимуляции экстракардиальной реваскуляризации миокарда после моделирования инфаркта миокарда у лабораторных животных.Использование плазмы, обогащенной тромбоцитами, как основы факторов роста эндотелия в комплексе с мезенхимальными клетками жировой ткани приводит к увеличению сосудообразования в полости перикарда, обеспечивая кровоснабжение зоны миокарда, нуждающейся в коллатеральном кровотоке после моделирования инфаркта.

Ключевые слова: ишемическая болезнь, инфаркт миокарда, стимуляция, ангиогенеза, обогащенная тромбоцитами плазма, мезенхимальные клетки жировой ткани, липидно-тромбоцитарная матрица.

APPLICATION OF ENDOTHELIAL GROWTH FACTORS AND MESENCHYMAL STEM CELLS FROM ADIPOSE TISSUE FOR STIMULATION OF NEOANGIOGENESIS IN EXPERIMENTAL MODEL WITH ACUTE HEART ATTACK Shevchenko Yu.L.1, Gudymovich G.G.1, Borshchev G.G.1, Mamadaliev D.M.1, Halepo O.V.2,

, Bryndin S.V.2

1. Pirogov National Medical & Surgical Center, Moscow, Russia 2. Smolensk state medical university, Smolensk, Russia depshi4@mail.ru, glebcenter@mail.ru, halepo71@mail.ru

Molotkov O. V.