СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГИАЛУРОНОВОЙ КИСЛОТЫ ИЗ КУРИНЫХ ГРЕБНЕЙ

1. Способ получения гиалуроновой кислоты из куриных гребней, включающий отмывание от крови, измельчение, трехстадийную экстракцию, фильтрацию, объединение экстрактов, расслоение полученного раствора уксусной кислотой, сливание жидкой фазы, выделение целевого продукта центрифугированием, обработку целевого продукта, сушку, отличающийся тем, что перед экстракцией гребешки охлаждают во льду в течение 2 ч, экстракцию проводят раствором 0,1М трис-ацетатным с pH 7-8, содержащим ЭДТА (этилендиаминтетрауксусная кислота) 1 мМ и ацетат натрия 100 мМ, при соотношении сырье:раствор 1:2, причем измельчение проводят во время первой экстракции, перед фильтрацией смесь выдерживают на льду в течение трех часов, после объединения экстрактов раствор фильтруют и выдерживают на льду в течение 30 мин, после расслоения раствора уксусной кислотой выдерживают раствор на льду в течение 20-30 ч, обработка целевого продукта заключается в растворении в 1%-ной уксусной кислоте, добавлении свежеприготовленного 2%-ного раствора (масса/объем) пепсина в 10 мМ соляной кислоте pH 4 до конечной концентрации 0,5%, нагревании, инкубируют 2 ч при 37°C, добавлении охлажденного этилового спирта до появления осадка, выдерживании при 4°C в течение суток, отделении водной фазы, выделении целевого продукта центрифунированием, подсушивании в вакууме, растворении в 8М мочевине с рН 4 (уксусная кислота), выдерживании 3-4 ч, доведении рН до 2 ледяной уксусной кислотой, осаждении ГК постепенным добавлением охлажденного спирта до помутнения раствора, выдерживании в течение суток при 4°С, промывании осадка 2-3 раза 70%-ным спиртом и 2-3 раза 95%-ным, высушивание проводят под вакуумом или концентрируют ультрафильтрацией.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что последовательность процедур растворения полученного продукта в 8М мочевине с рН 4, выдерживания 3-4 ч, доведения рН до 2 ледяной уксусной кислотой, осаждения ГК постепенным добавлением охлажденного спирта до помутнения раствора, выдерживания в течение суток при 4°С, промывания осадка 2-3 раза 70%-ным спиртом и 2-3 раза 95%-ным повторяют перед сушкой многократно.