СОЕДИНЕНИЯ ИМИДАЗОПИРИДИНА, ПОЛЕЗНЫЕ ПРИ ЛЕЧЕНИИ СОСТОЯНИЯ, СВЯЗАННОГО С АКТИВНОСТЬЮ P2X3 И/ИЛИ P2X2/3
IMIDAZOPYRIDINE COMPOUNDS USEFUL IN TREATMENT OF CONDITION ASSOCIATED WITH P2X3 AND/OR P2X2/3 ACTIVITY

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
[1] Настоящее изобретение в целом относится к замещенным соединениям имидазопиридина, в частности, к замещенным соединениям 4-(имидазо[1,2-a]пиридин-2-ил)бензамида и солям указанных соединений. Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям и наборам, содержащим указанное соединение, применению такого соединения (включая, например, способы лечения и получение лекарственных средств), способам получения такого соединения и промежуточным соединениям, используемым в таких способах.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[2] Пуринорецепторы P2X представляют собой семейство ионных каналов, которые активируются внеклеточным аденозинтрифосфатом (АТФ). Пуринорецепторы вовлечены во множество биологических функций, в особенности тех, что связаны с чувствительностью к боли. Субъединица рецептора P2X3 является членом указанного семейства. Первоначально ее клонировали из дорсальных корешковых ганглиев спинного мозга крысы. Chen et al., Nature, vol. 377, стр. 428-431 (1995). На сегодняшний день известны нуклеотидные и аминокислотные последовательности P2X3 крысы и человека. Lewis, et al., Nature, vol. 377, стр. 432-435 (1995); и Garcia-Guzman, et al., Brain Res. Моль. Brain Res., vol. 47, стр. 59-66 (1997).
[3] По имеющимся сведениям, P2X3 вовлечен в афферентные пути, контролирующие рефлексы мочевого пузыря, связанные с его объемом. Следовательно, ингибирование P2X3 может иметь терапевтический потенциал для лечения расстройств хранения и выделения мочи, таких как гиперактивный мочевой пузырь. Cockayne, et al., Nature, vol. 407, стр. 1011-1015 (2000).
[4] P2X3 также селективно экспрессируется в ноцицептивных сенсорных нейронах малого диаметра (т.е. нейронах, которые стимулируются при боли или травме), что указывает на его роль в болевой чувствительности. Кроме того, сообщается, что блокировка рецепторов P2X3 приводит к анальгетическому эффекту в моделях хронической воспалительной или невропатической боли на животных. Jarvis, et al., PNAS, 99, 17179-17184 (2002). Следовательно, предполагается, что способ снижения уровня или активности P2X3 может быть использован для модуляции болевых ощущений у субъекта, страдающего от боли.
[5] Также обсуждались различные другие расстройства, которые возможно лечить с применением соединений, обладающих активностью в отношении P2X3. См., например, WO 2008/136756.
[6] P2X3 также способен образовывать гетеродимеры Р2Х2/3 с Р2Х2, являющимся другим членом семейства пуринергических лиганд-активируемых ионных каналов. Р2Х2/3 широко экспрессируется на окончаниях (центральных и периферических) сенсорных нейронов. Chen, et al., Nature, vol. 377, стр. 428-431 (1995). Результаты недавних исследований также позволяют предположить, что Р2Х2/3 преимущественно экспрессируются (относительно P2X3) в сенсорных нейронах мочевого пузыря, и, скорее всего, играют роль в восприятии заполнения мочевого пузыря и ноцицепции. Zhong, et al., Neuroscience, vol. 120, стр. 667-675 (2003).
[7] Исходя из вышеизложенного, существует потребность в новых лигандах рецепторов P2X3 и/или Р2Х2/3, в особенности антагонистах, которые подходили бы для лечения различных расстройств, связанных с P2X3 и/или Р2Х2/3, и были безопасными.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[8] В настоящее изобретение включены, среди прочего, соединения имидазопиридина; способы лечения с применением указанных соединений имидазопиридина (например, применение имидазопиридина для лечения различных расстройств и в качестве фармакологических инструментов); применение указанных соединений имидазопиридина для получения лекарственных средств; композиции, содержащие указанные соединения имидазопиридина (например, фармацевтические композиции); способы получения указанных соединений имидазопиридина; и промежуточные соединения, используемые в таких способах получения.
[9] В общих чертах, настоящее изобретение относится, в частности, к соединению Формулы I или соли указанного соединения. Формула I соответствует:
.
В указанной формуле:
1
[10] R выбран из группы, состоящей из циано, галогена, метила и этила.
2
[11] R выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, метила и
этила.
3
[12] R выбран из группы, состоящей из галогена, метила и этила.
4
[13] R выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, метила, этила и метокси.
5
6
5
6
1
6
1
6
1
4
[14] R и R независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, C-C-алкила и гидрокси-C-C-алкила. В качестве альтернативы R и R совместно с атомом азота, к которому они оба присоединены, образуют 5-6-членный гетероциклоалкил. Указанный гетероциклоалкил необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена, гидроксила и C-C-алкила.
7
8
1
4
[15] R и R независимо выбраны из группы, состоящей из водорода и C-C-алкила.
9
1
6
3
6
1
6
3
6
1
6
1
6
1
6
1
6
1
6
[16] R выбран из группы, состоящей из C-C-алкила, C-C-Циклоалкила, C-C-алкил-C-C-циклоалкила, галоген-C-C-алкила, C-C-алкокси, галоген-C-C-алкокси и C-C-алкокси-C-C-алкила.
2
[17] X выбран из связи, CH и О.
[18] Настоящее изобретение частично относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение Формулы I или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения. В целом, указанная композиция также содержит по меньшей мере один фармацевтически приемлемый инертный ингредиент. Такие инертные ингредиенты в настоящем патенте иногда объединяют под термином «носители, разбавители или вспомогательные вещества». Указанная композиция также может содержать один или более дополнительных активных ингредиентов. Например, такая композиция может содержать один или более дополнительных соединений Формулы I и/или солей указанных соединений. Указанная композиция также может, например, альтернативно или дополнительно содержать один или более активных ингредиентов, отличных от соединения Формулы I или солью указанного соединения.
[19] Настоящее изобретение частично относится к соединению Формулы I или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения для применения в качестве лекарственного средства.
[20] Настоящее изобретение частично относится к набору, содержащему соединение Формулы I или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения.
[21] Настоящее изобретение также частично относится к применению соединения Формулы I или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения для получения фармацевтической композиции (или «лекарственного средства»). В целом, указанная композиция также содержит по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель или вспомогательное вещество. Такая композиция также может содержать один или более дополнительных активных ингредиентов. Например, такая композиция может содержать одно или более дополнительных соединений Формулы I и/или солей указанных соединений. Указанная композиция также может, например, альтернативно или дополнительно содержать один или более активных ингредиентов, не являющихся соединением Формулы I или солью указанного соединения.
[22] В некоторых вариантах реализации лекарственное средство подходит для лечения патологического состояния, связанного с активностью P2X3 (в особенности излишней активностью) у животного (например, человека).
[23] В некоторых вариантах реализации лекарственное средство подходит для лечения патологического состояния, связанного с активностью Р2Х2/3 (в особенности излишней активностью) у животного (например, человека).
[24] В некоторых вариантах реализации лекарственное средство подходит для лечения боли у животного (например, человека).
[25] В некоторых вариантах реализации лекарственное средство подходит для лечения расстройств мочевыводящих путей у животного (например, человека).
[26] Настоящее изобретение также частично относится к способам лечения расстройства у животного (например, человека), нуждающегося в таком лечении. Указанные способы включают введение животному соединения Формулы I или фармацевтически приемлемой соли указанного соединения. Такие способы включают введение только соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли. Они также включают введение других ингредиентов. Например, соединение Формулы I или его фармацевтически приемлемую соль обычно вводят в составе фармацевтической композиции, которая также содержит один или более носителей, разбавителей или вспомогательных веществ. Соединение Формулы I или его фармацевтически приемлемую соль также можно вводить с одним или более дополнительными активными ингредиентами. Например, возможно введение одного или более дополнительных соединений Формулы I и/или их фармацевтически приемлемых солей. Альтернативно или дополнительно возможно введение одного или более активных ингредиентов, не являющихся соединением Формулы I или его фармацевтически приемлемой солью.
[27] В некоторых вариантах реализации расстройство включает расстройство, связанное с активностью P2X3 (в особенности излишней активностью).
[28] В некоторых вариантах реализации расстройство включает расстройство, связанное с активностью Р2Х2/3 (в особенности излишней активностью).
[29] В некоторых вариантах реализации расстройство включает боль.
[30] В некоторых вариантах реализации расстройство включает расстройство мочевыводящих путей.
[31] В целом, когда соединение Формулы I или его фармацевтически приемлемую соль вводят в качестве единственного активного ингредиента для лечения целевого расстройства, вводимое количество соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли является терапевтически эффективным для лечения целевого расстройства у животного. Когда же, напротив, соединение Формулы I или его фармацевтически приемлемую соль вводят в комбинации с одним или более активными ингредиентами, количество соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли и количество (количества) другого активного ингредиента (ингредиентов), взятые вместе, являются терапевтически эффективными для лечения целевого расстройства у млекопитающего.
[32] Дальнейшие преимущества представленного заявителями изобретения станут очевидными специалисту в данной области при прочтении данного описания.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
P
[33] Фигура 1: Эффективность Примера 15 на 96-часовой FCA-модели воспалительной боли на крысе после перорального введения дозы: гиперальгезия, вызванная высокой температурой (HH). Log free C = логарифм молярной свободной концентрации лекарственного средства в плазме.
P
[34] Фигура 2: Эффективность Примера 15 на 96-часовой FCA-модели воспалительной боли на крысе спустя 30 минут после перорального введения дозы: механическая гиперальгезия (MH). Log free C = логарифм молярной свободной концентрации лекарственного средства в плазме.
[35] На фигурах пунктирная кривая представляет 95% доверительный интервал кривой наилучшего приближения. Вертикальная пунктирная линия показывает Значение IC50 соединения in vitro в P2X3 крысы, измеренное при помощи FLIPR (спектрофотометр для чтения планшетов для визуализации флуоресценции). Горизонтальная пунктирная линия показывает 50% купирование.
ОПИСАНИЕ ИЛЛЮСТРАТИВНЫХ ВАРИАНТОВ РЕАЛИЗАЦИИ
[36] Предполагается, что данное описание иллюстративных вариантов реализации представлено только для ознакомления других специалистов в данной области с изобретением заявителей, его принципами и его практическим применением для того, чтобы другие специалисты в данной области могли адаптировать и применять настоящее изобретение в его различных формах, наиболее подходящих к требованиям конкретного применения. Предполагается, что, хотя данное описание и приведенные в нем конкретные примеры показывают варианты реализации настоящего изобретения, они приведены исключительно в иллюстративных целях. Следовательно, настоящее изобретение не ограничено иллюстративными вариантами реализации, описанными в настоящей заявке, и может быть изменено различными способами.
[37] Как указано выше, настоящее изобретение частично относится к соединению Формулы I или соли указанного соединения. Формула I соответствует:
.
В указанной формуле:
1
[38] R выбран из группы, состоящей из циано, галогена, метила и этила.
1
[39] В некоторых вариантах реализации R представляет собой хлор.
1
[40] В некоторых вариантах реализации R представляет собой йод.
1
[41] В некоторых вариантах реализации R представляет собой фтор.
1
[42] В некоторых вариантах реализации R представляет собой бром.
1
[43] В некоторых вариантах реализации R представляет собой метил.
1
[44] В некоторых вариантах реализации R представляет собой этил.
1
[45] В некоторых вариантах реализации R представляет собой циано.
2
[46] R выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, метила и
этила.
2
[47] В некоторых вариантах реализации R представляет собой водород. В таких вариантах реализации соединение соответствует по структуре Формуле IA:
.
1
2
[48] В некоторых вариантах реализации R представляет собой хлор, и R представляет собой водород.
1
2
[49] В некоторых вариантах реализации R представляет собой йод, и R представляет собой водород.
1
2
[50] В некоторых вариантах реализации R представляет собой фтор, и R представляет собой водород.
1
2
[51] В некоторых вариантах реализации R представляет собой метил, и R представляет собой водород.
1
2
[52] В некоторых вариантах реализации R представляет собой циано, и R представляет собой водород.
3
[53] R выбран из группы, состоящей из галогена, метила и этила.
3
[54] В некоторых вариантах реализации R представляет собой фтор.
3
[55] В некоторых вариантах реализации R представляет собой хлор.
3
[56] В некоторых вариантах реализации R представляет собой йод.
3
[57] В некоторых вариантах реализации R представляет собой бром.
3
[58] В некоторых вариантах реализации R представляет собой метил.
3
[59] В некоторых вариантах реализации R представляет собой этил.
4
[60] R выбран из группы, состоящей из водорода, галогена, метила, этила и метокси.
4
[61] В некоторых вариантах реализации R представляет собой водород. В таких вариантах реализации соединение соответствует по структуре Формуле IB:
.
4
[62] В некоторых вариантах реализации R представляет собой фтор.
4
[63] В некоторых вариантах реализации R представляет собой хлор.
4
[64] В некоторых вариантах реализации R представляет собой йод.
4
[65] В некоторых вариантах реализации R представляет собой бром.
4
[66] В некоторых вариантах реализации R представляет собой метил.
4
[67] В некоторых вариантах реализации R представляет собой этил.
4
[68] В некоторых вариантах реализации R представляет собой метокси.
4
[69] В некоторых вариантах реализации R выбран из группы, состоящей из галогена, метила и этила. В некоторых таких вариантах реализации соединение соответствует по структуре Формуле IC:
.
В других таких вариантах реализации соединение соответствует по структуре Формуле ID:
.
И, в других вариантах реализации соединение соответствует по структуре Формуле IE:
.
3
4
[70] В некоторых вариантах реализации R представляет собой фтор, и R представляет собой водород.
3
4
[71] В некоторых вариантах реализации R представляет собой хлор, и R представляет собой водород.
3
4
[72] В некоторых вариантах реализации R представляет собой метил, и R представляет собой водород.
3
4
[73] В некоторых вариантах реализации R представляет собой фтор, и R представляет собой фтор.
3
4
[74] В некоторых вариантах реализации R представляет собой метил, и R представляет собой фтор.
3
4
[75] В некоторых вариантах реализации R представляет собой хлор, и R представляет собой хлор.
3
4
[76] В некоторых вариантах реализации R представляет собой метил, и R представляет собой хлор.
3
4
[77] В некоторых вариантах реализации R представляет собой фтор, и R представляет собой метил.
3
4
[78] В некоторых вариантах реализации R представляет собой хлор, и R представляет собой метил.
3
4
[79] В некоторых вариантах реализации R представляет собой метил, и R представляет собой метил.
5
6
1
6
1
6
[80] В некоторых вариантах реализации R и R независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, C-C-алкила и гидрокси-C-C-алкила.
5
[81] В некоторых вариантах реализации R представляет собой водород, так, что соединение соответствует по структуре Формуле IF:
.
5
1
6
[82] В некоторых вариантах реализации R представляет собой C-C-алкил.
5
[83] В некоторых вариантах реализации R представляет собой метил.
5
[84] В некоторых вариантах реализации R представляет собой этил.
5
1
6
[85] В некоторых вариантах реализации R представляет собой гидрокси-C-C-алкил.
5
[86] В некоторых вариантах реализации R представляет собой 2-гидроксиэтил. Такой заместитель соответствует по структуре:
.
6
[87] В некоторых вариантах реализации R представляет собой водород.
6
1
6
[88] В некоторых вариантах реализации R представляет собой C-C-алкил.
6
[89] В некоторых вариантах реализации R представляет собой метил.
6
[90] В некоторых вариантах реализации R представляет собой этил.
6
1
6
[91] В некоторых вариантах реализации R представляет собой гидрокси-C-C-алкил.
5
6
[92] В некоторых вариантах реализации каждый из R и R представляет собой водород.
5
6
[93] В некоторых вариантах реализации каждый из R и R представляет собой метил.
5
6
[94] В некоторых вариантах реализации каждый из R и R представляет собой этил.
5
6
[95] В некоторых вариантах реализации R представляет собой водород, и R представляет собой метил.
5
6
[96] В некоторых вариантах реализации R представляет собой водород, и R представляет собой этил.
5
6
[97] В некоторых вариантах реализации R представляет собой водород, и R представляет собой 2-гидроксиэтил. В таких вариантах реализации соединение соответствует по структуре Формуле IG:
.
5
6
[98] В некоторых вариантах реализации R представляет собой метил, и R представляет собой этил.
5
6
5
6
1
4
[99] В других вариантах реализации R и R совместно с атомом азота, к которому они оба присоединены, образуют 5-6-членный гетероциклоалкил. Указанный гетероциклоалкил необязательно замещен одним или более заместителями, независимо выбранными из группы, состоящей из галогена, гидроксила и C-C-алкила. Указанный гетероциклоалкил содержит насыщенную структуру из одного кольца, содержащую 5 или 6 атомов в кольце, которые включают по меньшей 3 атома углерода; атом азота, к которому присоединены оба R и R; и, необязательно, один дополнительный гетероатом, выбранный из группы, состоящей из азота, серы и кислорода. В некоторых вариантах реализации указанный гетероциклоалкил выбран из группы, состоящей из пирролидинила, пиперидинила, пиперазинила, морфолинила и тиоморфолинила.
5
6
[100] В некоторых вариантах реализации R и R совместно с атомом азота, к которому они оба присоединены, образуют незамещенный 5-или 6-членный гетероциклоалкил.
5
6
[101] В некоторых вариантах реализации R и R совместно с атомом азота, к которому они оба присоединены, образуют незамещенный пирролидинил.
5
6
[102] В некоторых вариантах реализации R и R совместно с атомом азота, к которому они оба присоединены, образуют незамещенный пиперидинил.
5
6
[103] В некоторых вариантах реализации R и R совместно с атомом азота, к которому они оба присоединены, образуют незамещенный морфолинил.
5
6
[104] В некоторых вариантах реализации R и R совместно с атомом азота, к которому они оба присоединены, образуют 5-6-членный гетероциклоалкил, замещенный гидрокси.
5
6
[105] В некоторых вариантах реализации R и R совместно с атомом азота, к которому они оба присоединены, образуют гидроксил пиррол и динил.
7
8
1
4
[106] R и R независимо выбраны из группы, состоящей из водорода и C-C-алкила.
7
[107] В некоторых вариантах реализации R представляет собой водород.
7
1
4
[108] В некоторых вариантах реализации R представляет собой C-C-алкил.
7
[109] В некоторых вариантах реализации R представляет собой метил.
8
[110] В некоторых вариантах реализации R представляет собой водород.
8
1
4
[111] В некоторых вариантах реализации R представляет собой C-C-алкил.
8
[112] В некоторых вариантах реализации R представляет собой метил.
7
8
[113] В некоторых вариантах реализации каждый из R и R представляет собой водород. В таких вариантах реализации соединение соответствует по структуре Формуле IH:
.
7
8
1
4
[114] В некоторых вариантах реализации R представляет собой C-C-алкил, и R представляет собой водород. В некоторых таких вариантах реализации соединение соответствует по структуре Формуле II:
.
В других таких вариантах реализации соединение соответствует по структуре Формуле IJ:
.
7
8
[115] В некоторых вариантах реализации R представляет собой метил, и R представляет собой водород.
7
8
7
8
1
4
[116] В некоторых вариантах реализации каждый из R и R представляет собой C-C-алкил. В некоторых таких вариантах реализации R и R связаны с одним и тем же атомом углерода. Например, в некоторых вариантах реализации соединение соответствует по структуре Формуле IK:
.
В других вариантах реализации соединение соответствует по структуре Формуле IL:
.
7
8
[117] В некоторых вариантах реализации каждый из R и R представляет собой метил.
9
1
6
3
6
1
6
3
6
1
6
1
6
1
6
1
6
1
6
[118] R выбран из группы, состоящей из C-C-алкила, C-C-циклоалкила, C-C-алкил-C-C-циклоалкила, галоген-C-Салкила, C-C-алкокси, галоген-C-C-алкокси и C-C-алкокси-C-C-алкила.
9
1
6
[119] В некоторых вариантах реализации R представляет собой C-C-алкил.
9
[120] В некоторых вариантах реализации R представляет собой метил.
9
[121] В некоторых вариантах реализации R представляет собой этил.
9
[122] В некоторых вариантах реализации R представляет собой изопропил.
9
1
6
[123] В некоторых вариантах реализации R представляет собой галоген-C-C-алкил.
9
[124] В некоторых вариантах реализации R представляет собой монофторизопропил.
9
1
6
[125] В некоторых вариантах реализации R представляет собой C-C-алкокси.
9
[126] В некоторых вариантах реализации R представляет собой метокси.
9
[127] В некоторых вариантах реализации R представляет собой трет-бутокси.
9
3
6
[128] В некоторых вариантах реализации R представляет собой C-C-циклоалкил.
9
[129] В некоторых вариантах реализации R представляет собой циклопропил.
9
[130] В некоторых вариантах реализации R представляет собой циклобутил.
9
[131] В некоторых вариантах реализации R представляет собой циклобутил.
9
1
6
1
6
[132] В некоторых вариантах реализации R представляет собой C-C-алкокси-C-C-алкил.
9
[133] В некоторых вариантах реализации R представляет собой метоксиметил.
9
9
1
6
3
6
[134] В некоторых вариантах реализации R представляет собой C-C-алкил-C-C-циклоалкил. В некоторых таких вариантах реализации, например, R представляет собой метилциклопропил.
2
[135] X выбран из связи, CH и O.
[136] В некоторых вариантах реализации X представляет собой связь. В таких вариантах реализации соединение соответствует Формуле (IM):
В некоторых таких вариантах реализации, например, соединение соответствует Формуле (IN):
.
2
[137] В некоторых вариантах реализации X представляет собой CH. В таких вариантах реализации соединение соответствует Формуле (IO):
.
В некоторых таких вариантах реализации, например, соединение соответствует Формуле (IP):
.
В других вариантах реализации соединение соответствует Формуле (IQ):
.
[138] В некоторых вариантах реализации X представляет собой O. В таких вариантах реализации соединение соответствует Формуле (IR):
.
В некоторых таких вариантах реализации соединение соответствует по структуре Формуле (IS):
.
В некоторых вариантах реализации Формулы (IS) соединение соответствует по структуре Формуле (IT):
.
В других вариантах реализации Формулы (IS) соединение соответствует по структуре Формуле (IU):
.
В других вариантах реализации Формулы (IS) соединение соответствует по структуре Формуле (IV):
.
В других вариантах реализации соединение соответствует по структуре Формуле (IW):
.
В некоторых таких вариантах реализации Формулы (IW) соединение соответствует по структуре Формуле (IX):
.
В других вариантах реализации Формулы (IW) соединение соответствует по структуре Формуле (IY):
.
[139] Многие соединения согласно настоящему изобретению включают по меньшей мере один хиральный атом углерода, т.е. атом углерода морфолинила, который связан через метиленовую группу с имидазопиридином. В рамках структуры в настоящей патентной заявке не указана хиральность, предполагается, что структура охватывает любой одиночный хиральный изомер, соответствующий такой структуре, а также любую смесь хиральных изомеров (например, рацемат). Таким образом, например, предполагается, что Формула I, которая не указывает на хиральность, охватывает любой одиночный изомер, соответствующий структуре, а также любую смесь хиральных изомеров. В некоторых вариантах реализации одиночный хиральный изомер получают путем выделения его из смеси изомеров (например, рацемата) с применением, например, хирального хроматографического разделения. В других вариантах реализации одиночный хиральный изомер получают посредством прямого синтеза, например, из хирального исходного вещества.
[140] Когда в структуре показана хиральность атома углерода, она отображает направление одного из заместителей хирального атома углерода при помощи темного клина или заштрихованного клина. Если не указано иное, заместитель атома углерода, указывающий в противоположном направлении, представляет собой водород. Данное обозначение соответствует общим правилам номенклатуры органической химии.
[141] Предполагаемые соли соединений согласно настоящему изобретению включают соли присоединения кислот и соли присоединения оснований. Соль может иметь преимущества в связи с одним или более химическим или физическим свойством, например, стабильностью при изменениях температуры и влажности, или требуемой растворимостью в воде, масле или другом растворителе. В некоторых случаях соль может быть использована для облегчения выделения или очистки соединения. В некоторых вариантах реализации (в особенности тех, где соль предназначена для введения животному или представляет собой реагент для применения в получении соединения или соли для введения животному) соль является фармацевтически приемлемой.
[142] В целом, соль добавления кислоты может быть получена с применением различных неорганических или органических кислот. Такие соли как правило могут быть образованы, например, путем смешивания соединения с кислотой (например, стехиометрическим количеством кислоты) с применением различных способов, известных в данной области. Указанное смешивание может происходить в воде, органическом растворителе (например, простом эфире, этилацетате, этаноле, изопропаноле или ацетонитриле) или водной/органической смеси. Примеры неорганических кислот, которые обычно могут быть использованы для образования солей присоединения кислоты, включают соляную, бромистоводородную, йодистоводородную, азотную, угольную, серную и фосфорную кислоту. Примеры органических кислот включают, например, алифатические, циклоалифатические, ароматические, аралифатические, гетероциклические, карбоциклические и сульфоновые классы органических кислот. Конкретные примеры органических солей включают холат, сорбат, лаурат, ацетат, трифторацетат, формат, пропионат, сукцинат, гликолят, глюконат, диглюконат, лактат, малат, винную кислоту (и ее производные, например, дибензоилтартрат), цитрат, аскорбат, глюкуронат, малеат, фумарат, пируват, аспартат, глутамат, бензоат, антраниловую кислоту, мезилат, стеарат, салицилат, п-гидроксибензоат, фенилацетат, соль миндальной кислоты (и ее производные), эмбонат (памоат), этансульфонат, бензолсульфонат, пантотенат, 2-гидроксиэтансульфонат, сульфанилат, циклогексиламиносульфонат, альгиновую кислоту, β-гидроксимасляную кислоту, галактарат, галактуронат, адипат, альгинат, бутират, камфорат, камфорсульфонат, циклопентанпропионат, додецилсульфат, гликогептаноат, глицерофосфат, гептаноат, гексаноат, никотинат, 2-нафталинсульфонат, оксалат, пальмоат, пектинат, 3-фенилпропионат, пикрат, пивалат, тиоцианат, тозилат и ундеканоат. В некоторых вариантах реализации соль включает гидрохлорид, гидробромид, фосфат, ацетат, фумарат, малеат, тартрат, цитрат, метансульфонат или n-толуолсульфонат.
[143] Применительно к солям присоединения основания возможно формирование соли со щелочным металлом (таким как натрий, калий или литий) или щелочно-земельным металлом (таким как кальций) путем воздействия на соединение согласно настоящему изобретению, имеющее достаточно кислый протон, гидроксидом или алкоксидом щелочного металла или щелочно-земельного металла (например, этоксидом или метоксидом) или достаточно основным органическим амином (например, холином или меглумином) в водной среде.
[144] Предполагается, что соединения Формулы I и их соли охватывают любой таутомер, который может образоваться. «Таутомер» представляет собой любой другой структурный изомер, который находится в равновесии, являющемся результатом миграции атома водорода, например, амидо-имидная таутометрия.
oe
[145] Предполагается, что амин соединения Формулы I или его соли может образовывать N-оксид. Предполагается, что такой N-оксид охвачен соединениями Формулы I и их солями. В целом N-оксид может быть образован путем воздействия на амин окисляющим агентом, таким как пероксид водорода или перкислота (например, перкарбоновая кислота). См., например, Advanced Organic Chemistry, автор Jerry March, 4 издание, Wiley Interscience. N-оксиды также могут быть получены путем проведения реакции между амином и м-хлорпероксибензойной кислотой (МСРВА), например, в инертном растворителе, таком как дихлорметан. См. L.W. Deady, Syn. Comm., 7, стр. 509-514 (1977).
[146] Предполагается, что соединение Формулы I или его соль образуют атропизомер, который может быть выделен, в определенных растворителях при определенных температурах. Предполагается, что соединения Формулы I и их соли охватывают любые такие атропизомеры. Атропизомеры в целом могут быть выделены, например, с применением хиральной ЖХ.
2
3
11
13
14
13
15
15
17
18
18
36
82
75
76
77
123
124
125
131
3
14
11
18
3
14
11
18
[147] Предполагается, что соединения Формулы I и их соли охватывают любые изотопно-меченые (или «радиоизотопно-меченые») производные соединения Формулы I или его соли. Такое производное представляет собой производное соединения Формулы I или его соли, где один или более атомов замещены атомом, имеющим атомную массу или массовое число, отличающиеся от атомной массы или массового числа, встречающегося в природе. Примеры радионуклидов, которые могут быть инкорпорированы, включают H (также обозначается как «D» - дейтерий), H (также обозначается как «T» - тритий), C, С, С, N, N, O, O, O, F, Cl, Br, Br, Br, Br, I, I, I и I. Используемый радионуклид будет зависеть от конкретного применения такого радиоизотопно-меченого производного. Например, для введения метки рецепторов in vitro и конкурентного анализа часто используют H или C. Для построения радио-изображений часто используют C или F. В некоторых вариантах реализации радионуклид представляет собой H. В некоторых вариантах реализации радионуклид представляет собой С. В некоторых вариантах реализации радионуклид представляет собой C. И в некоторых вариантах реализации радионуклид представляет собой F.
[148] Предполагается, что соединения Формулы I и их соли охватывают все твердые формы соединений Формулы I и их солей. Также предполагается, что соединения Формулы I и их соли охватывают все сольватированные (например, гидратированные) и несольватированные формы соединений Формулы I и их солей.
[149] Также предполагается, что соединения Формулы I и их соли охватывают агенты, участвующие в реакции сочетания, в которых соединение Формулы I или его соль связаны с агентом, участвующим в реакции сочетания, путем, например, химического связывания с соединением или солью или физического ассоциирования с ним. Примеры агентов, участвующих в реакции сочетания, включают меченую или репортерную молекулу, поддерживающий субстрат, носитель или транспортную молекулу, эффектор, лекарственное средство, антитело или ингибитор. Агенты, участвующие в реакции сочетания, могут быть ковалентно связаны с соединением Формулы I или его солью через подходящую функциональную группу в составе соединения, такую как гидроксильная, карбоксильная или аминогруппа. Другие производные включают объединение в лекарственную форму соединения Формулы I или его соли с липосомами.
[150] В настоящем изобретении предложены, отчасти, способы лечения различных расстройств у животных, в особенности млекопитающих. К числу млекопитающих относится, например, человек. Также к числу млекопитающих относятся, например, животные-компаньоны (например, собаки, кошки и лошади), сельскохозяйственные животные (например, крупный рогатый скот и свиньи); лабораторные животные (например, мыши и крысы); а также дикие животные, животные, проживающие в зоопарках, и цирковые животные (например, медведи, львы, тигры, приматы и обезьяны).
[151] Как показано ниже в Примере 48, было экспериментально обнаружено, что соединения согласно настоящему изобретению модулируют и, в частности, выступают в качестве антагонистов в отношении P2X3. Соответственно, считается, что соединения и соли согласно настоящему изобретению могут применяться для модуляции P2X3 и/или Р2Х2/3 для лечения различных патологических состояний, опосредуемых P2X3 и/или Р2Х2/3 (или другим образом связанных с ними). В некоторых вариантах реализации соединения и соли согласно настоящему изобретению проявляют одну или более из следующих характеристик: требуемая активность, требуемая эффективность, требуемая стабильность при хранении, требуемая переносимость для выборки пациентов и требуемая безопасность.
[152] Предполагается, что соединение или соль согласно настоящему изобретению может применяться для лечения, например, боли. Такая боль может представлять собой, например, хроническую боль, невропатическую боль, острую боль, боль в спине, боль, вызванную раковым заболеванием, боль, вызванную ревматоидным артритом, мигрень и висцеральную боль.
[153] Также предполагается, что соединение или соль согласно настоящему изобретению может применяться для лечения расстройства мочевыводящих путей. Такие расстройства включают, например, гиперактивный мочевой пузырь (также известное как недержание мочи), повышенную чувствительность почечной лоханки и уретрит.
[154] Также предполагается, что соединение или соль согласно настоящему изобретению может применяться для лечения расстройства желудочно-кишечного тракта. Такие расстройства включают, например, запор и функциональные расстройства желудочно-кишечного тракта (например, синдром раздраженного кишечника или функциональная диспепсия).
[155] Также предполагается, что соединение или соль согласно настоящему изобретению может применяться для лечения ракового заболевания.
[156] Также предполагается, что соединение или соль согласно настоящему изобретению может применяться для лечения сердечно-сосудистого расстройства или для кардиопротекции после инфаркта миокарда.
[157] Также предполагается, что соединение или соль согласно настоящему изобретению может применяться в качестве иммуномодулятора, в особенности для лечения аутоиммунного заболевания (например, артрита); для кожного трансплантата, трансплантата органа или для сходных хирургических применений; при коллагенозе; при аллергии; или в качестве противоопухолевого или противовирусного агента.
[158] Также предполагается, что соединение или соль согласно настоящему изобретению может применяться для лечения рассеянного склероза, болезни Паркинсона или хореи Хантингтона.
[159] Также предполагается, что соединение или соль согласно настоящему изобретению может применяться для лечения депрессии, тревожности, расстройств, связанных со стрессом (например, посттравматическое расстройство, паническое расстройство, социофобия или обсессивно-компульсивное расстройство), преждевременной эякуляции, психических заболеваний, черепно-мозговой травмы, инсульта, болезни Альцгеймера, травмы спины, наркотической зависимости (например, лечения алкогольной, никотиновой, опиоидной зависимости или зависимости от какого-либо другого лекарственного средства) или расстройства симпатической нервной системы (например, гипертонии).
[160] Также предполагается, что соединение или соль согласно настоящему изобретению может применяться для лечения диареи.
[161] Также предполагается, что соединение или соль согласно настоящему изобретению может применяться для лечения легочного расстройства, такого как, например, астма, кашель или эдема легкого.
[162] Предполагается, что соединение Формулы I или фармацевтически приемлемую соль указанного соединения можно вводить перорально, вагинально, ректально, путем ингаляции, путем инсуффляции, интраназально, сублингвально, местно или парентерально (например, внутримышечно, подкожно, интраперитонеально, интраторакально, внутривенно, эпидурально, интратекально, интрацеребровентрикулярно или путем инъекции в суставы).
[163] В некоторых вариантах реализации соединение или соль согласно настоящему изобретению вводят перорально.
[164] В некоторых вариантах реализации соединение или соль согласно настоящему изобретению вводят внутривенно.
[165] В некоторых вариантах реализации соединение или соль согласно настоящему изобретению вводят внутримышечно.
[166] В некоторых вариантах реализации соединение или соль согласно настоящему изобретению применяют для получения лекарственного средства (т.е. фармацевтической композиции). В целом, указанная фармацевтическая композиция содержит терапевтически эффективное количество соединения согласно настоящему изобретению или его соли. Фармацевтические композиции, содержащие соединение или соль согласно настоящему изобретению, могут варьировать в широких пределах. Хотя предполагается, что соединение или соль согласно настоящему изобретению можно вводить само по себе (т.е. без какого-либо другого активного или неактивного ингредиента), обычно фармацевтическая композиция будет содержать один или более дополнительных активных ингредиентов и/или инертных ингредиентов. Указанные инертные ингредиенты, присутствующие в фармацевтических композициях согласно настоящему изобретению, иногда объединяют под термином «носители, разбавители и вспомогательные вещества». Способы получения фармацевтических композиций и применение носителей, разбавителей и вспомогательных веществ широко известны в данной области. См., например, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA, 15th Edition, 1975.
[167] Фармацевтические композиции, содержащие соединение Формулы I или его фармацевтически приемлемую соль, могут варьировать в широких пределах. Например, предполагается, что композиции могут быть составлены для введения через множество подходящих путей и множеством способов, включая пероральное, ректальное, назальное, местное, буккальное, сублингвальное, вагинальное введение, ингаляцию, инсуффляцию или парентеральное введение. Предполагается, что такие композиции могут находиться, например, в твердой форме, в форме водных или масляных растворов, суспензий, эмульсий, кремов, мазей, аэрозолей, гелей, назальных спреев, суппозиториев, тонкодисперсных порошков и аэрозолей или небулайзеров для ингаляций. В некоторых вариантах реализации указанная композиция содержит твердую или жидкую лекарственную форму, которая подходит для перорального введения.
[168] Композиции, находящиеся в твердой форме, могут включать, например, порошки, таблетки, диспергируемые гранулы, капсулы, крахмальные капсулы и суппозитории. Твердый носитель может содержать одно или более веществ. Такие вещества в целом инертны. Носитель также может выступать в качестве, например, разбавителя, вкусовой добавки, солюбилизатора, смазывающего вещества, консерванта, стабилизатора, суспендирующего агента, связывающего агента или разрыхлителя. Также он может выступать, например, в роли материала для инкапсулирования. Примеры часто подходящих носителей включают маннитол фармацевтической степени чистоты, лактозу, карбонат магния, стеарат магния, тальк, лактозу, сахар (например, глюкозу и сахарозу), пектин, декстрин, крахмал, трагакант, целлюлозу, производные целлюлозы (например, метилцеллюлозу и натриевую соль карбоксиметилцеллюлозы), сахарин натрия, легкоплавкий воск и масло какао.
[169] В порошковой форме носитель обычно представляет собой тонкодисперсное твердое вещество, которое находится в смеси с тонкодисперсным активным компонентом. В таблетированной форме активный компонент обычно смешан с носителем, обладающим требуемыми вяжущими свойствами, в подходящих пропорциях, и спрессован в требуемую форму и размер.
[170] Для получения композиций в форме суппозиториев обычно сначала расплавляют легкоплавкий воск (например, смесь глицеридов жирных кислот и масла какао), затем диспергируют в нем активный ингредиент, например, путем перемешивания. Затем расплавленную гомогенную смесь вливают в отливные формы нужного размера и оставляют для охлаждения и затвердевания. Примеры не вызывающих раздражения вспомогательных веществ, которые могут входить в состав композиций в форме суппозиториев, включают, например, масло какао, желатин с глицерином, гидрогенизированные растительные масла, смеси полиэтиленгликолей различной молекулярной массы и жирно-кислотные сложные эфиры полиэтиленгликоля.
[171] Жидкие композиции могут быть получены, например, путем растворения или диспергирования соединения или соли согласно настоящему изобретению в носителе, таком как, например, вода, растворы воды/пропиленгликоля, водно-солевой раствор декстрозы, глицерин или этанол. В некоторых вариантах реализации водные растворы для перорального введения могут быть получены путем растворения соединения или соли согласно настоящему изобретению в воде с солюбилизатором (например, полиэтиленгликолем). Также могут быть добавлены, например, красители, вкусовые добавки, стабилизаторы и загустители. В некоторых вариантах реализации водные суспензии для перорального введения могут быть получены путем диспергирования соединения или соли согласно настоящему изобретению в тонкодисперсной форме в воде, совместно с вязким материалом, таким как, например, одной или более встречающимися в природе синтетическими смолами, смолами, метилцеллюлозой, карбоксиметилцеллюлозой натрия или другими суспендирующими агентами. При необходимости жидкая композиция также может содержать другие нетоксичные вспомогательные инертные ингредиенты, такие как, например, смачивающие или эмульгирующие агенты, буферные агенты и подобные, например, ацетат натрия, сорбитанмонолаурат, ацетат триэтаноламиннатрия, сорбитанмонолаурат, олеат триэтанол амина и т.д. Такие композиции также могут содержать другие ингредиенты, такие как, например, один или более фармацевтических адъювантов.
[172] В некоторых вариантах реализации фармацевтическая композиция содержит примерно от 0,05% примерно до 99% (по массе) соединения или соли согласно настоящему изобретению. В некоторых таких вариантах реализации, например, фармацевтическая композиция содержит примерно от 0,10% примерно до 50% (по массе) соединения или соли согласно настоящему изобретению.
[173] Когда соединение или соль согласно настоящему изобретению вводят в качестве единственной терапии для лечения расстройства, «терапевтически эффективное количество» представляет собой количество, достаточное для уменьшения или полного устранения симптомов или других отрицательных эффектов расстройства; излечения расстройства; обращения, полной остановки или замедления прогрессирования расстройства; снижения риска ухудшения расстройства; или замедления или снижения риска начала развития расстройства.
[174] Оптимальная дозировка и частота введения будут зависеть от конкретного патологического состояния, подвергающегося лечению, и его тяжести; вида пациента; возраста, размера и веса, режима питания и общего физического состояния конкретного пациента; соотношения веса мозга/тела; других лекарственных средств, которые пациент может принимать; пути введения; состава; и различных других факторов, известных лечащим врачам (в контексте пациентов-людей), ветеринарам (в контексте пациентов, не являющихся людьми) и другим специалистам в данной области.
[175] Предполагается, что в некоторых вариантах реализации оптимальное количество соединения или соли согласно настоящему изобретению составляет по меньшей мере примерно 10 пг/кг массы тела в день. В некоторых вариантах реализации оптимальное количество составляет не более 100 мг/кг массы тела в день. В некоторых вариантах реализации оптимальное количество составляет примерно от 10 пг/кг примерно до 100 мг/кг массы тела в день. В некоторых вариантах реализации оптимальное количество составляет примерно от 0,01 примерно до 10 мг/кг массы тела в день. В некоторых вариантах реализации оптимальное количество составляет примерно от 2 примерно до 20 мг/кг массы тела в день. В некоторых вариантах реализации оптимальное количество составляет примерно от 2,5 примерно до 8 мг/кг массы тела в день. В некоторых других вариантах реализации оптимальное количество составляет примерно от 0,8 примерно до 2,5 мг/кг массы тела в день.
[176] Предполагается, что фармацевтические композиции могут находиться в одной или более лекарственных формах. Соответственно, композиция может быть разделена на однократные дозы, содержащие подходящие количества активного компонента. Единичной лекарственной формой может быть, например, капсула, крахмальная капсула или таблетка сами по себе, или подходящее число любых из перечисленных форм в упаковке. В качестве альтернативы единичная лекарственная форма может представлять собой упакованный препарат, где упаковка содержит дискретные количества композиции, например, упакованные таблетки, капсулы или порошки во флаконах или ампулах. Единичные лекарственные формы могут быть получены, например, различными способами, хорошо известными в области фармацевтики.
[177] Предполагается, что дозу можно давать пациенту один раз в день или дробными дозами, например, от 2 до 4 раз в день. В некоторых вариантах реализации дозу обычно заключают в лекарственную форму для перорального применения путем составления примерно от 5 примерно до 250 мг на единицу дозы, например, с одним или более активными ингредиентами с применением общепринятых фармацевтических практик.
[178] В некоторых вариантах реализации соединение или соль согласно настоящему изобретению вводят параллельно, одновременно, последовательно или отдельно от одного или более фармацевтически активных соединений. В некоторых таких вариантах реализации другое фармацевтически активное соединение (соединения) выбрано/выбраны из следующих:
(i) Антидепрессанты, которые, как предполагается, включают, например, один или более из агомелатина, амитриптилина, амоксапина, бупропиона, циталопрама, кломипрамина, дезипрамина, доксепина дулоксетина, эльзасонана, эсциталопрама, флувоксамина, флуоксетина, гепирона, имипрамина, ипсапирона, мапротилина, миртазеприна, нортриптилина, нефазодона, пароксетина, фенелзина, протриптилина, рамелтеона, ребоксетина, робалзотана, селегилина, сертралина, сибутрамина, тионизоксетина, транилципромаина, тразодона, тримипрамина, венлафаксина, а также их эквиваленты и фармацевтически активные изомер(ы) и метаболит(ы).
(ii) Нейролептики, которые, как предполагается, включают, например, один или более из кветиапина и его фармацевтически активных изомера (изомеров) и метаболита (метаболитов); и амисульприда, арипипразола, азенапина, бензисоксидила, бифепрунокса, карбамазепина, клозапина, хлорпромазина, дебензапина, дибензапина, дивалпроекса, дроперидола, дулоксетина, есзопиклона, флуфеназина, галоперидола, илоперидона, ламотригина, лития, локсапина, мезоридазина, молиндона, оланзапина, палиперидона, перлапина, перфеназина, фенотиазина, фенилбутилпиперидина, пимозида, прохлорперазина, рисперидона, сертиндола, сулпирида, сурпроклона, суриклона, тиоридазина, тиотиксена, трифлуоперазина, триметозина, вальпроата, вальпроевой кислоты, зопиклона, зотепина, зипрасидона и их эквивалентов.
(iii) Анксиолитики, которые, как предполагается, включают, например, один или более из алнеспирона, азапиронов, бензодиазепинов, барбитуратов, таких как адиназолам, алпразолам, балезепам, бентазепам, бромазепам, бротизолам, буспирон, клоназепам, клоразепат, хлордиазепоксид, ципразепам, диазепам, дифенгидрамин, эстазолам, фенобам, флунитразепам, флуразепам, фосазепам, лоразепам, лорметазепам, мепробамат, мидазолам, нитразепам, оксазепам, празепам, квазепам, реклазепам, суриклон, траказолат, трепипам, темазепам, триазолам, улдазепам, золазепам, а также их эквиваленты и фармацевтически активные изомер(ы) и метаболит(ы).
(iv) Антиконвульсивные препараты, которые, как предполагается, включают, например, один или более из карбамазепина, окскарбазепина, вальпроата, ламотрогина, габапентина, топирамата, фенитоина, этосуксимида, а также их эквиваленты и фармацевтически активные изомер(ы) и метаболит(ы).
(v) Препараты для лечения болезни Альцгеймера, которые, как предполагается, включают, например, донепезил, галантамин, мемантин, ривастигмин, такрин, а также их эквиваленты и фармацевтически активные изомер(ы) и метаболит(ы).
(vi) Препараты для лечения болезни Паркинсона и агенты для лечения экстрапирамидальных симптомов, которые, как предполагается, включают, например, один или более из леводопы, карбидопы, амантадина, прамипексола, ропинирола, перголида, каберголина, апоморфина, бромкриптина, ингибиторов MAOB (например, селегина и расагилина), ингибиторов COMT (например, энтакапона и толкапона), ингибиторов альфа-2, антихолинэргических средств (например, бензтропина, биперидена, орфенадрина, проциклидина и тригексифенидила), ингибиторов обратного захвата допамина, антагонистов NMDA, агонистов никотина, агонистов допамина и ингибиторов нейрональной синтазы оксидов азота, а также их эквиваленты и фармацевтически активные изомер(ы) и метаболит(ы).
(vii) Препараты для лечения инсульта, которые, как предполагается, включают, например, один или более из абциксимаба, активазы, дисуфентоннатрия, цитиколина, кробенетина, десмотеплазы, репинотана, траксопродила, а также их эквиваленты и фармацевтически активные изомер(ы) и метаболит(ы).
(viii) Препараты для лечения недержания мочи, которые, как предполагается, включают, например, один или более из дапафенацина, дицикломина, фалвоксата, имипрамина, десипрамина, оксибутинина, пропиверина, пропантедина, робалзотана, солифенацина, альфазосина, доксазосина, теразосина, толтеродина, а также их эквиваленты и фармацевтически активные изомер(ы) и метаболит(ы).
(ix) Препараты для лечения бессонницы, которые, как предполагается, включают, например, один или более из аллобарбитала, алонимида, амобарбитала, бензоктамина, бутабарбитала, капурида, хлорала, клоперидона, клоретата, декскламола, эстазолама, эсзопиклина, этхлорвинола, этомидата, флуразепама, глутетимида, галазепама, гидроксизина, меклоквалона, мелатонина, мефобарбитала, метаквалона, мидафлура, мидазолама, нисобамата, пагоклона, пентобарбитала, перлапина, фенобарбитала, пропофола, квазепама, рамелтеона, ролетамида, супроклона, темазепама, триазолама, триклофоса, секобарбитала, залеплона, золпидема, зопиклона, а также их эквиваленты и фармацевтически активные изомер(ы) и метаболит(ы).
(x) Стабилизаторы настроения, которые, как предполагается, включают, например, один или более из карбамазепина, дивалпроекса, габапентина, ламотригина, лития, оланзапина, кветиапина, вальпроата, вальпроевой кислоты, верапамила, а также их эквиваленты и фармацевтически активные изомер(ы) и метаболит(ы).
(xi) Лекарственные средства для лечения ожирения, такие как, например, орлистат, сибутрамин, римонабант и их эквиваленты и фармацевтически активные изомер(ы) и метаболит(ы).
(xii) Агенты для лечения синдрома дефицита внимания с гиперактивностью (СДВГ, ADHD), которые, как предполагается, включают, например, один или более из амфетамина, метамфетамина, декстроамфетамина, атомоксетина, метилфенидата, дексметилафенидата, модафинила, а также их эквиваленты и фармацевтически активные изомер(ы) и метаболит(ы).
(xiii) Агенты для лечения расстройств, связанных со злоупотреблением психоактивными веществами, зависимости и синдрома отмены, которые, как предполагается, включают, например, один или более из никотинзаместительной терапии (например, жевательную резинку, пластыри и назальный спрей); агонисты, частичные агонисты и антагонисты никотинэргических рецепторов (например, варениклин); акомпрозата; бупропиона; клонидина; дисульфирама; метадона; налоксона; налтрексона; а также их эквиваленты и фармацевтически активные изомер(ы) и метаболит(ы).
[179] В некоторых вариантах реализации другой фармацевтически приемлемый ингредиент(ы) включает атипичный антипсихотический агент. Атипичные антипсихотические агенты включают, например, оланзапин (реализуемый на рынке как Зипрекса, Zyprexa), арипипразол (реализуемый на рынке как Абилифай, Abilify), рисперидон (реализуемый на рынке как Риспердал, Risperdal), кветиапин (реализуемый на рынке как Сероквель, Seroquel), клозапин (реализуемый на рынке как Клозарил, Clozaril), зипрасидон (реализуемый на рынке как Геодон, Geodon) и оланзапин/флуоксетин (реализуемый на рынке как Симбиакс, Symbyax).
[180] В некоторых вариантах реализации другой фармацевтически приемлемый ингредиент(ы) включает селективный ингибитор обратного захвата серотонина (или «серотонин-специфичный ингибитор обратного захвата» или СИОЗС). Такие агенты включают, например, флуоксетин (реализуемый на рынке как, например, Прозак, Prozac), пароксетин (реализуемый на рынке как, например, Паксил, Paxil), циталопрам (реализуемый на рынке как, например, Целекса, Celexa), дапоксетин, мезембрин, эксциталопрам (реализуемый на рынке как, например, Лексапро, Lexapro), флувоксамин (реализуемый на рынке как, например, Лувокс, Luvox), зимелидин (реализуемый на рынке как, например, Зелмид, Zelmid) и сертралин (реализуемый на рынке как, например, Золофт, Zoloft).
[181] В некоторых вариантах реализации соединение или соль согласно настоящему изобретению вводят в составе комбинированной терапии с лучевой терапией.
[182] В некоторых вариантах реализации соединение или соль согласно настоящему изобретению вводят составе комбинированной терапии с химиотерапией. Такая химиотерапия может включать одну или более из следующих категорий противоопухолевых агентов:
(i) Антипролиферативные/антинеопластические лекарственные средства, которые, как предполагается, включают, например, алкилирующие агенты, такие как цисплатин, оксалиплатин, карбоплатин, циклофосфамид, хлорметин, мелфалан, хлорамбуцил, бусульфан, темозоламид и нитрозомочевины; антиметаболиты, такие как гемцитабин и антифолаты (например, фторпиримидины (такие как 5-фторурацил и тегафур), ралтитрексед, метотрексат, цитозин, арабинозид и гидроксимочевина); противоопухолевые антибиотики, такие как антрациклины (например, адриамицин, блеомицин, доксорубицин, дауномицин, эпирубицин, идарубицин, митомицин-C, дактиномицин и митрамицин); антимитотические агенты, такие как алкалоиды барвинка (например, винкристин, винбластин, виндезин и винорелбин), таксоиды (например, таксол и таксотер) и ингибиторы полокиназы; и ингибиторы топоизомеразы, такие как эпиподофиллотоксины (например, этопозид и тенипозид), амсакрин, топотекан и камптотецин.
(ii) Цитостатические агенты, которые, как предполагается, включают, например, антиэстрогены, такие как тамоксифен, фулвестрант, торемифен, ралоксифен, дролоксифен и йодксифен; антиандрогены, такие как бикалутамид, флутамид, нилутамид и ципротеронацетат; антагонисты РФЛГ (рилизинг-фактор лютеинизирующего гормона, LHRH); агонисты РФЛГ, такие как госерелин, лейпрорелин и бусерелин; прогестогены, такие как мегестрол ацетат; ингибиторы ароматазы, такие как анастрозол, летрозол, воразол и эксеместан; и ингибиторы 5α-редуктазы, такие как финастерид.
(iii) Противоинвазивные агенты, которые, как предполагается, включают, например, ингибиторы киназ семейства c-Src, такие как 4-(6-хлор-2,3-метилендиоксианилино)-7-[2-(4-метилпиперазин-1-ил)этокси]-5-тетрагидропиран-4-илоксихиназолин (AZD0530, публикация международной заявки на патент WO 01/94341), N-(2-хлор-6-метилфенил)-2-{6-[4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-ил]-2-метилпиримидин-4-иламино}тиазол-5-карбоксамид (дасатиниб, BMS-354825, J. Med. Chem., vol. 47, стр. 6658-6661 (2004)) и босутиниб (SKI-606); ингибиторы металлопротеиназы, такие как маримастат; ингибиторы рецепторной функции активатора плазминогена урокиназы; и антитела к гепараназе.
(iv) Ингибиторы функции фактора роста, которые, как предполагается, включают, например, антитела к фактору роста; антитела к рецепторам фактора роста, такие как анти-erbB1 антитело трастузумаб (Герцептин, Herceptin™), анти-EGFR антитело панитумумаб, анти-erbB1 антитело цетуксимаб (Эрбитукс, Erbitux, С225) и антитела к фактору роста и антитела к рецепторам фактора роста, описанные Stern et al, Critical reviews in oncology/haematology, vol. 54, стр. 11-29 (2005); ингибиторы тирозинкиназы, такие как ингибиторы семейства эпидермального фактора роста (например, такие ингибиторы тирозинкиназ семейства EGFR, как N-(3-хлор-4-фторфенил)-7-метокси-6-(3-морфолинопропокси)хиназолин-4-амин (гефитиниб, ZD1839), N-(3-этинилфенил)-6,7-бис(2-метоксиэтокси)хиназолин-4-амин (эрлотиниб, OSI-774) и 6-акриламидо-N-(3-хлор-4-фторфенил)-7-(3-морфолинопропокси)-хиназолин-4-амин (CI 1033)), и ингибиторы тирозинкиназ семейства erbB2 (например, лапатиниб); ингибиторы семейства фактора роста гепатоцитов; ингибиторы семейства инсулин-подобных факторов роста; ингибиторы семейства фактора роста тромбоцитов, такие как иматиниб и нилотиниб (AMN107); ингибиторы серин/треонин-киназ, такие как ингибиторы передачи сигнала Ras/Raf (например, ингибиторы фарнесилтрансферазы, такие как сорафениб (BAY 43-9006), типифарниб (R115777) и лонафарниб (SCH66336)); ингибиторы передачи клеточных сигналов через MEK- и/или AKT-киназы; ингибиторы c-kit; ингибиторы abl-киназы, ингибиторы PI3-киназы; ингибиторы Plt3-киназы; ингибиторы CSF-1R-киназы; ингибиторы ИПФР-рецептора (инсулин-подобный фактор роста) киназы); ингибиторы aurora-киназы, такие как AZD1152, PH739358, VX-680, MLN8054, R763, MP235, MP529, VX-528 и AX39459; и ингибиторы циклинзависимой киназы, такие как ингибиторы CDK2 и CDK4.
(v) Антиангиогенные агенты, которые, как предполагается, включают, например, агенты, которые ингибируют эффекты фактора роста эндотелия сосудов, такие как ингибитор фактора роста эндотелия сосудов антитело бевацизумаб (Авастин, Avastin™) и ингибитор рецептора VEGF тирозинкиназы (например, вандетаниб (ZD6474), ваталаниб (PTK787), сунитиниб (SU11248), акситиниб (AG-013736), пазораниб (GW 786034) и 4-(4-фтор-2-метилиндол-5-илокси)-6-метокси-7-(3-пирролидин-1-илпропокси)хиназолин (AZD2171, Пример 240 в публикации международной заявки на патент WO 00/47212); соединения, описанные в публикациях международных заявок на патенты WO 97/22596, WO 97/30035, WO 97/32856 и WO 98/13354; и соединения, работающие согласно другим механизмам, такие как линомид, ингибиторы функции интегрина αvβ3 и ангиостатин.
(vi) Сосудоповреждающие агенты, которые, как предполагается, включают, например, комбретастатин A4 и соединения, описанные в публикациях международных заявок на патенты WO 99/02166, WO 00/40529, WO 00/41669, WO 01/92224, WO 02/04434 и WO 02/08213.
(vii) Антагонисты рецептора эндотелина, которые, как предполагается, включают, например, зиботентан (ZD4054) и атрасентан.
(viii) Антисмысловые терапии, которые, как предполагается, включают, например, терапии, направленные на цели, описанные выше, такие как ISIS 2503 (anti-ras антисенс).
(ix) Подходы генной терапии, которые, как предполагается, включают, например, подходы к замене аберрантных генов, таких как аберрантные p53, BRCA1 или BRCA2; подходы GDEPT (геноопосредованная ферментативная пролекарственная терапия), например, те, в которых используют цитозиндеаминазу, тимидинкиназу или фермент бактериальной нитроредуктазы; и подходы к увеличению толерантности пациента к химиотерапии или лучевой терапии, такие как генная терапия множественной лекарственной резистентности.
(x) Подходы иммунотерапии, которые, как предполагается, включают, например, подходы ex-vivo и in-vivo для увеличения иммуногенности опухолевых клеток пациента, такие как трансфекция цитокинов (например, интерлейкин 2, интерлейкин 4 или гранулоцитарно-моноцитарный колониестимулирующий фактор); подходы к ослаблению T-клеточной толерантности; подходы, в которых используют трансфецированные иммунные клетки, такие как цитокин-трансфецированные дендритные клетки; подходы, в которых используют цитокин-трансфецированные линии опухолевых клеток; и подходы, в которых используют антиидиотипические антитела.
[183] Также предполагается, что соединение или соль согласно настоящему изобретению подходят для применения в качестве анальгезирующего агента для применения при общей анестезии или при анестезиологическом сопровождении. Часто применяют комбинации агентов с различными свойствами для достижения баланса эффектов, необходимых для поддержания состояния анестезии (например, амнезии, анальгезии, расслабления мышц и седации). Такая комбинация может содержать, например, один или более ингалируемых анестетиков, снотворных средств, анксиолитиков, миорелаксантов и/или опиоидов.
[184] В некоторых вариантах реализации, в которых применяют комбинированную терапию, количество соединения или соли согласно настоящему изобретению и количество другого фармацевтически активного агента (агентов) при объединении является терапевтически эффективным для лечения целевого расстройства у пациента-животного. В связи с этим, комбинированные количества являются «терапевтически эффективным количеством», если они при объединении являются достаточными для уменьшения или полного устранения симптомов или других отрицательных эффектов расстройства; излечения расстройства; обращения, полной остановки или замедления прогрессирования расстройства; снижения риска ухудшения расстройства; или замедления или снижения риска начала развития расстройства. Обычно такие количества могут быть определены специалистом в данной области, например, начиная с диапазона дозировок, описанных в настоящей заявке для соединения или соли согласно настоящему изобретению, и одобренного или иным образом опубликованного диапазона дозировок другого фармацевтически активного соединения (соединений).
[185] Предполагается, что при применении в составе комбинированной терапии соединение или соль согласно настоящему изобретению и другие активные ингредиенты можно вводить в одной композиции, совершенно раздельных композициях или их комбинации. Также предполагается, что указанные активные ингредиенты можно вводить параллельно, одновременно, последовательно или отдельно. Конкретная композиция (композиции) и частота введения дозы (доз) будут зависеть от ряда факторов, включая, например, путь введения, конкретное патологическое состояние, подвергающееся лечению, вид пациента, любые потенциальные взаимодействия между активными ингредиентами при объединении в одну композицию, любые потенциальные взаимодействия между активными ингредиентами при введении пациенту-животному и различные другие факторы, известные лечащим врачам (в контексте пациентов-людей), ветеринарам (в контексте пациентов, не являющихся людьми), и другим специалистам в данной области.
[186] Настоящее изобретение частично относится к набору, содержащему соединение Формулы I или его соль. В некоторых вариантах реализации набор также содержит один или более дополнительных компонентов, таких как, например: (а) устройство для введения соединения Формулы I или его соли; (б) инструкции по введению соединения Формулы I или его соли; (в) носитель, разбавитель или вспомогательное вещество (например, ресуспендирующий агент); и (г) дополнительный активный ингредиент, который может находиться в той же или отличной от соединения Формулы I или его соли лекарственной форме. В некоторых вариантах реализации (в особенности когда набор предназначен для применения для введения соединения Формулы I или его соли пациенту-животному), соль представляет собой фармацевтически приемлемую соль.
ПРИМЕРЫ
[187] Следующие примеры приведены исключительно для иллюстрации вариантов реализации настоящего изобретения и не ограничивают остальные части настоящего описания каким-либо образом.
[188] В некоторых случаях в следующих примерах структуры соединений связаны с названиями соединений. В целом, такие названия были сгенерированы на основании структур с применением программного обеспечения AutoNom 2000 в ISIS/Draw, ChemDraw 9.0.7, ISIS/Draw 2.5SP4 или ChemDraw 11.0.2. AutoNom (Automatic Nomenclature, Автоматическая номенклатура) и ChemDraw, содержащего программы, которые присваивают систематические химические названия ИЮПАК (IUPAC, Международный союз теоретической и прикладной химии) нарисованным структурам по нажатию кнопки. Однако в некоторых случаях химические названия были проверены на соответствие правилам наименования ИЮПАК вручную. Если имеются какие-либо различия между структурой и названием соединения, соединение должно определяться согласно структуре, если в контексте не указано иное.
Получение соединений
[189] Примеры 1-47 ниже иллюстрируют получение ряда различных соединений согласно настоящему изобретению и промежуточные соединения для получения таких соединений. Предполагается, что специалист в области органического синтеза после прочтения только указанных примеров или в комбинации с общими знаниями в данной области сможет адаптировать и применить способы для получения любого соединения, входящего в объем настоящего изобретения. Общие знания в данной области включают, например:
A) Стандартные способы применения защитных групп и примеры подходящих защитных групп, которые описаны, например, в издании Protective Groups in Organic Synthesis, T.W. Green, P.G.M. Wuts, Wiley-Interscience, New York (1999).
B) Литературные источники, в которых описаны различные реакции органического синтеза, включают учебники по органической химии, такие как например, Advanced Organic Chemistry, March 4th ed, McGraw Hill (1992); и Organic Synthesis, Smith, McGraw Hill, (1994). Они также включают, например, R.C. Larock, Comprehensive Organic Transformations, 2nd ed., Wiley-VCH: New York (1999); F.A. Carey; R.J. Sundberg, Advanced Organic Chemistry, 2nd ed., Plenum Press: New York (1984); L.S. Hegedus, Transition Metals in the Synthesis of Complex Organic Molecules, 2nd ed., University Science Books: Mill Valley, CA (1994); L. A. Paquette, Ed., The Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley: New York (1994); A.R. Katritzky, O. Meth-Cohn, CW. Rees, Eds., Comprehensive Organic Functional Group Transformations, Pergamon Press: Oxford, UK (1995); G. Wilkinson; F.G A. Stone; E.W. Abel, Eds., Comprehensive Organometallic Chemistry, Pergamon Press: Oxford, UK (1982); B.M. Trost; I. Fleming, Comprehensive Organic Synthesis, Pergamon Press: Oxford, UK (1991); A.R. Katritzky, CW. Rees Eds., Comprehensive Heterocyclic Chemistry, Pergamon Press: Oxford, UK (1984); A.R. Katritzky; CW. Rees, E.F.V. Scriven, Eds., Comprehensive Heterocyclic Chemistry II, Pergamon Press: Oxford, UK (1996); C. Hansen; P.G. Sammes; J.B. Taylor, Eds., Comprehensive Medicinal Chemistry: Pergamon Press: Oxford, UK (1990). Кроме того, периодические обзоры методологии синтеза и связанных тем включают: Organic Reactions, John Wiley: New York; Organic Syntheses; John Wiley: New York; The Total Synthesis of Natural Products, John Wiley: New York; The Organic Chemistry of Drug Synthesis, John Wiley: New York; Annual Reports in Organic Synthesis, Academic Press: San Diego CA; и Methoden der Organischen Chemie (Houben-Weyl), Thieme: Stuttgart, Germany.
nd
C) Литературные источники, в которых описана химия гетероциклических соединений, включают, например, Heterocyclic Chemistry, J.A. Joule, К. Mills, G.F. Smith, 3rd ed., Cheapman и Hall, стр. 189-225 (1995); и Heterocyclic Chemistry, T.L. Gilchrist, 2 ed. Longman Scientific and Technical, стр. 248-282 (1992).
D) Базы данных синтетических превращений, в том числе Chemical Abstracts, поиск в которых может проводиться с использованием CAS Online или SciFinder; и Handbuch der Organischen Chemie (Beilstein), поиск в которой может проводиться с использованием SpotFire.
[190] Все исходные вещества в следующих примерах получения соединений являются коммерчески доступными или описаны в литературе. Жидкости и растворы, являющиеся воздухо- или влагочувствительными, перемещали при помощи шприца или канюли, и вводили в реакционные сосуды через резиновые септы. Реагенты и растворители рыночной категории использовали без дальнейшей очистки. Термины «концентрирование под пониженным давлением» и «выпаривали под пониженным давлением» или «концентрировали под вакуумом» относятся к применению роторного испарителя Buchi при приблизительном давлении 15 мм рт.ст.
[191] Микроволновое нагревание осуществляли при помощи СЕМ Discover LabMate или Biotage Initiator System при указанной температуре в рекомендуемых трубках для микроволнового реактора.
18
4
3
2
[192] Колоночную хроматографию (флэш-хроматографию) проводили с использованием 32-63 микронных,  картриджей, предварительно упакованных силикагелем (в системе Biotage или ISCO), или стеклянной колонки и под давлением воздуха. Препаративную ВЭЖХ или ЖХМС (с высоким pH или низким pH) проводили с использованием, например, Waters X-bridge Prep C OBD (размеры колонки: 30 X 50 мм; размер частиц: 5 мкм; подвижная фаза A: вода 10 мМ NHHCO (pH 10) или вода с 0,1% ТФУ; и подвижная фаза B: MeCN). Сверхкритическую жидкостную хроматографию (СЖХ) проводили с использованием прибора MiniGram SFC производства Mettler Toledo с колонкой с нормальной фазой ChiralCel OD-H или колонкой OJ-H, или колонкой ChiralPak AS-Н, или колонкой AD-H или IC (размеры колонки: 10×250 мм; размер частиц: 5 мм; скорость потока: 10 мл/мин) или ChiralPak LA или Lux Cellulose-2 или Lux Amylose-2 (размеры колонки: 4,6×250 мм; размер частиц: 5 мм; скорость потока: 3,5 мл/мин); Элюент: CO, с MeOH или i-PrOH или EtOH + 0,1% диметилэтиламин (ДМЭА) или 1:1 изопропанолом:ацетонитрилом + 0,1% ДМЭА в качестве модификатора; температура: 35°C; обратное давление: 100 Бар; и УФ-детектированием при длине волны 215-254 нм.
[193] Масс-спектры записывали при помощи одноквадрупольных масс-спектрометров, оснащенных источником электрораспыляемых ионов (ES), работающем в положительном или отрицательном ионном режиме, или при помощи трехквадрупольного масс-спектрометра, оснащенного источником ионов с химической ионизацией при атмосферном давлении (APCI), работающем в положительном или отрицательном ионном режиме. Масс-спектрометры сканировали при значениях между m/z 100-1000 с временем сканирования 0,3 сек.
1
[194] H ЯМР-спектры записывали на ЯМР-спектрометре Varian 300 МГц, 400 МГц или в качестве альтернативы на ЯМР-спектрометре Bruker Avance 500 NMR при 500 МГц.
2
3
[195] Если не указано иное, анализ масс-спектрометрии с высоким разрешением (MCBP, HRMS) проводили на ВЭЖХ-хроматографе Agilent 1100 с масс-спектрометром Agilent MSD-TOF и диодно-матричном детекторе Agilent 1100 с колонкой Zorbax C-18 (размеры колонки: 30×4,6 мм; размер частиц: 1,8 мкм, градиент: 5-95% B за 4,5 мин; скорость потока: 3,5 мл/мин; температура: 70°C, элюенты A: 0,05% ТФУ в HO; и элюент B: 0,05% ТФУ в CHCN).
[196] Пример 1. Получение 2,5-дифтор-4-формил-N-метилбензамида.
[197] Часть А. трет-бутил-4-бром-2,5-дифторбензоат.
Раствор хлорида н-бутилмагния (2 M в ТГФ) (19,9 мл, 39,7 ммоль) добавляли к раствору н-бутиллития (2,5 М в гексанах) (31,8 мл, 79,4 ммоль) в безводном толуоле (40 мл) при -10°C. Скорость добавления адаптировали для поддержания внутренней температуры менее -5°C. Полученную смесь перемешивали при -10°C в течение 0,5 ч. Затем добавляли раствор 1,4-дибром-2,5-дифторбензола (25,4 г, 93,4 ммоль) в сухом толуоле (80 мл) при такой скорости, чтобы поддерживать внутреннюю температуру менее -5°C. Затем смесь перемешивали при -10°C в течение 2 ч. Далее добавляли раствор ди-трет-бутилдикарбоната (25,9 г, 0,12 моль) в толуоле (40 мл) при такой скорости, чтобы поддерживать внутреннюю температуру менее -5°C. Смесь постепенно нагревали с -10°C до 10°C в течение периода 2,5 ч. Затем добавляли 10% водный раствор лимонной кислоты (175 мл), и фазы разделяли. Органический слой промывали 10% водным раствором лимонной кислоты (175 мл), высушивали над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением с получением трет-бутил-4-бром-2,5-дифторбензоата, который использовали напрямую на следующей стадии.
[198] Часть B. 4-бром-2,5-дифторбензойная кислота.
1
6
Трифторметансульфоновую кислоту (125 мл) добавляли к раствору трет-бутил-4-бром-2,5-дифторбензоата (27,4 г, 93,4 ммоль) в дихлорметане (125 мл) при 0°C. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре 3 ч, и затем концентрировали под пониженным давлением. Затем к осадку добавляли полунасыщенный солевой раствор (100 мл), и смесь экстрагировали дихлорметаном (2×90 мл). Органические слои объединяли, и продукт экстрагировали 1Н водным раствором гидроксида натрия (1×90 мл и 1×50 мл). Объединенные органические слои затем подкисляли при помощи 3H водного раствора соляной кислоты (80 мл), и продукт экстрагировали EtOAc (3×100 мл). Объединенные органические слои высушивали над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением с получением 4-бром-2,5-дифторбензойной кислоты (13,1 г, 59%) в виде твердого вещества. H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ ppm 7,78 (dd, J=8,63, 6,23 Гц, 1 Н), 7,90 (dd, J=9,72, 5,58 Гц, 1 Н), 13,72 (br s, 1 Н).
[199] Часть С. 4-бром-2,5-дифтор-N-метилбензамид.
1
3
Гидрохлорид метиламина (3,7 г, 54,9 ммоль) и 1-гидроксибензотриазол (5,99 г, 44,3 ммоль) добавляли к раствору 4-бром-2,5-дифторбензойной кислоты (10 г, 42,2 ммоль) в N,N-диметилформамиде (70 мл). Затем при 0°C добавляли триэтиламин (8,8 мл, 63,3 ммоль) и гидрохлорид N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимида (10,5 г, 54,9 ммоль). Полученную смесь перемешивали при температуре от 0°C до комнатной в течение 16 ч. Затем добавляли воду (140 мл), и продукт экстрагировали EtOAc (3×100 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Осадок очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя 10-60% EtOAc в гексанах с получением 4-бром-2,5-дифтор-N-метилбензамида (9,97 г, 95%) в виде твердого вещества. H ЯМР (300 МГц, CDCl) δ ppm 3,03 (d, J=4,73 Гц, 3 H), 6,70 (br s, 1 H), 7,38 (dd, J=10,37, 5,23 Гц, 1 H), 7,88 (dd, J=8,65, 6,69 Гц, 1H).
[200] Часть D. 4-Циано-2,5-дифтор-N-метилбензамид.
2
4
3
1
Цианид цинка (2,81 г, 23,9 ммоль), цинковую пыль (0,26 г, 3,99 ммоль), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (0,73 г, 0,80 ммоль), 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен (0,88 г, 1,60 ммоль) и ацетат натрия (0,13 г, 1,60 ммоль) добавляли к раствору 4-бром-2,5-дифтор-N-метилбензамида (9,97 г, 39,9 ммоль) в N,N-диметилформамиде (150 мл). Полученную смесь газировали N в течение 5 минут, и затем ее перемешивали при 100°C в течение 2 ч. Полученную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли EtOAc (150 мл). Смесь фильтровали через слой диатомита, который затем промывали EtOAc (2×25 мл). Фильтрат промывали водой (300 мл), и водный слой подвергали обратной экстракции EtOAc (2×50 мл), и объединенные органические слои высушивали MgSO, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Неочищенный осадок очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя 10-50% EtOAc в гексанах с получением 4-циано-2,5-дифтор-N-метилбензамида (6,95 г, содержит следы N,N-диметилформамида) в виде твердого вещества. H ЯМР (300 МГц, CDCl) δ ppm 3,05 (d, J=4,81 Гц, 3 Н), 6,78 (br s, 1 Н), 7,43 (dd, J=10,00, 4,78 Гц, 1 Н), 7,97 (dd, J=8,79, 5,85 Гц, 1 Н).
[201] Часть E. Получение 2,5-дифтор-4-формил-N-метилбензамида.
1
+
3
Ренеевский никелевый катализатор (50% в воде) (6,38 г) добавляли к раствору 4-циано-2,5-дифтор-N-метилбензамида (6,95 г, 35,4 ммоль) в муравьиной кислоте (94 мл) и воде (32 мл). Смесь перемешивали при 120°C в течение 6 ч и затем при комнатной температуре в течение 16 ч. Полученную смесь разбавляли метанолом (140 мл). Добавляли силикагель, и смесь тщательно перемешивали 0,25 ч и затем фильтровали через слой диатомита. Указанный слой промывали метанолом, и фильтрат концентрировали под пониженным давлением. Осадок очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя 10-60% EtOAc в гексанах с получением 2,5-дифтор-4-формил-N-метилбензамида (5,25 г, 74%) в виде бледно-желтого твердого вещества. H ЯМР (300 МГц, CDCl) δ ppm 3,06 (d, J=4,84 Гц, 3 H), 6,83 (br s, 1 H), 7,62 (dd, J=10,84, 5,20 Гц, 1 H), 7,97 (dd, J=10,27, 5,62 Гц, 1 H), 10,34 (d, J=2,98 Гц, 1 H); MC (ИЭР) m/z 200,09 [M+H].
[202] Пример 2. Получение 3,5-дифтор-4-формил-N-метилбензамида.
[203] Часть А. Получение 3,5-дифтор-4-формилбензойной кислоты.
4
6
1
+
К раствору 3,5-дифторбензойной кислоты (291 г, 1,84 моль) в 2-метилтетрагидрофуране (4,35 л) добавляли TMEDA (604 мл, 4,03 моль) при комнатной температуре. Полученный раствор охлаждали до -78°C. Затем по каплям добавляли n-BuLi (2,5 М в гексане) (1,77 л, 4,43 моль), при этом температура смеси оставалась на отметке менее -65°C. Затем смесь перемешивали при -78°C в течение 1,5 ч. По каплям добавляли безводный MeOCHO (239 мл, 3,88 моль) при скорости, которая позволяла сохранять температуру менее -65°C. Полученный раствор оставляли для нагревания при комнатной температуре, и затем оставляли для перемешивания при комнатной температуре в течение 18 ч. Затем смесь охлаждали до 0-5°C, и избыток основания гасили 6М водной HCl (2,2 л, 13,2 моль). Затем фазы разделяли, и водный слой 3 раза экстрагировали 2-метилтетрагидрофураном (3×500 мл). Объединенные органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, высушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Осадок растворяли в этилацетате (350 мл) при нагревании с обратным холодильником и охлаждали до комнатной температуры. Затем добавляли гексаны (480 мл), и полученную смесь далее охлаждали до -15°C. Твердое вещество собирали путем фильтрации, промывали гексанами и высушивали под механическим вакуумом с образованием титульного соединения (122 г, 35%) в виде твердого вещества. H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ ppm 7,63-7,70 (m, 2 Н), 10,23 (s, 1 Н); МС m/z (ИЭР) 187,17 [M+H].
[204] Часть В. Получение метил-3,5-дифтор-4-формилбензоата.
2
3
3
4
3
1
+
KCO (14 г, 0,10 моль) и CHI (4,6 мл, 74,5 ммоль) добавляли к раствору 3,5-дифтор-4-формилбензойной кислоты (12,6 г, 67,7 ммоль) в ДМФ (135 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Затем добавляли воду (200 мл), и смесь экстрагировали EtOAc (3×150 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали MgSO, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Неочищенный осадок очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле (0 к 20% EtOAc в гексанах) с образованием метил-3,5-дифтор-4-формилбензоата (6 г, 44%) в виде масла, которое отвердевало после отстаивания. Твердое вещество измельчали в порошок в гексанах, фильтровали, и высушивали под вакуумом с образованием чистого метил-3,5-дифтор-4-формилбензоата (4,5 г, 33%) в виде твердого вещества. H ЯМР (300 МГц, CDCl) δ ppm 3,97 (s, 3 Н), 7,62-7,68 (m, 2 Н), 10,39 (s, 1 Н); МС (ИЭР) m/z 201,30 [M+H].
[205] Часть С. Получение 3,5-дифтор-4-формил-N-метилбензамида.
4
3
1
+
К ледяному раствору 3,5-дифтор-4-формилбензойной кислоты (120 г, 645 ммоль) в дихлорметане (1,5 л) и N,N-диметилформамиде (2,0 г, 27 ммоль) по каплям добавляли оксалилхлорид (90 г, 709 ммоль) при скорости, которая позволяла смеси не превышать внутренней температуры 10°C. Полученную смесь перемешивали при той же температуре в течение 0,5 ч, нагревали до комнатной температуры и перемешивали в течение еще 1,5 ч. Затем раствор охлаждали до 0°C, и по каплям добавляли водный метиламин (40%, 168 мл, 1,94 моль) при скорости, которая позволяла смеси не превышать внутренней температуры 7°C. Затем смесь гасили водной HCl (2М, 335 мл, 670 ммоль) и нагревали до комнатной температуры. Органический слой отделяли, промывали солевым раствором (500 мл), высушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный твердый осадок помещали в МТВЕ (500 мл), и полученную смесь нагревали до кипения в течение 0,5 ч, охлаждали до комнатной температуры и перемешивали в течение 18 ч. Затем смесь охлаждали до 0°C, фильтровали, промывали пентаном и высушивали под вакуумом с образованием титульного соединения (103 г, 80%) в виде твердого вещества. H ЯМР (300 МГц, CDCl) δ ppm 3,03 (d, J=4,86 Гц, 3 H), 6,37 (br s, 1 H), 7,36-7,42 (m, 2 H), 10,36 (s, 1 H); MC m/z 200,06 [M+H](ИЭР).
[206] Пример 3. Получение 4-формил-N,3-диметилбензамида.
2
4
2
3
3
1
4-Бром-3-метилбензойную кислоту (10 г, 46,5 ммоль) суспендировали в сухом ТГФ (400 мл), продували N и охлаждали до 0°C. Добавляли NaH (60% в масле) (1,95 г, 48,8 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин. Затем смесь охлаждали до -78°C. После этого добавляли трет-бутиллитий (1,7 М в пентане, 64 мл, 97,7 ммоль) при скорости, которая позволяла сохранить внутреннюю температуру при значении менее -74°C. После завершения добавления добавляли сухой ДМФА (7,2 мл, 93 ммоль). Полученную смесь перемешивали при -78°C в течение 1 ч и затем оставляли до нагревания до комнатной температуры. Спустя 1,5 ч избыток основания гасили при помощи водного раствора 1М HCl до достижения кислого pH. Затем смесь экстрагировали EtOAc (3×200 мл), и объединенные органические экстракты высушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением с получением 4-формил-3-метилбензойной кислоты. Кислоту растворяли в ДМФ (30 мл), и добавляли MeNH-HCl (4,08 г, 60,5 ммоль) и HOBt (6,91 г, 51,2 ммоль). Полученную смесь охлаждали до 0°C, и затем добавляли EtN (26 мл, 0,19 моль), после чего EDC-HCl (11,6 г, 60,5 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, и затем фильтровали через слой силикагеля, который затем промывали EtOAc. Фильтрат концентрировали под пониженным давлением, и осадок очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (Hex/EtOAc 1:1 к 1:2) с получением титульного соединения (4,5 г, 55%) в виде твердого вещества. H ЯМР (300 МГц, CDCl) δ 2,43 (s, 3H), 3,00 (d, J=4,9 Гц, 3H), 6,12 (m, 1Н), 7,39 (dd, J=8,2, 2,3 Гц, 1H), 7,57 (d, J=8,2 Гц, 1H), 7,64 (d, J=2,1 Гц, 1H).
[207] Пример 4. Альтернативное получение 4-формил-N,3-диметилбензамида.
[208] Часть A. Получение 4-циано-N,3-диметилбензамида.
4
6
2
2
3
2
2
2
2
2
3
1
Смесь 4-бром-N-этил-3-метилнензамида (3,76 г, 16,5 ммоль, может быть синтезирован согласно следующему источнику: Oxford, A.W.; et al EP 533266 (1993)), K[Fe(CN)]-3HO (2,09 г, 4,94 ммоль), NaCO (1,05 г, 9,89 ммоль), Pd(OAc) (75 мг, 0,33 ммоль), 1,4-диазабицикло[2.2.2]октан (74 мг, 0,66 ммоль) и ДМА (20 мл) держали в атмосфере N при 126-130°C в течение 7,5 ч. После этого смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли EtOAc, перемешивали в течение 20 мин и фильтровали через диатомит. Фильтрат концентрировали под пониженным давлением, и осадок (5,52 г) перемешивали в смеси EtO (5 мл) и гексанов (10 мл). Затем твердое вещество собирали путем фильтрации и промывали EtO с образованием титульного соединения (2,53 г). Исходный раствор концентрировали под пониженным давлением, и осадок перемешивали в смеси EtO (2 мл) и гексанов (4 мл) с образованием дополнительного количества соединения (0,265 г) в виде твердого вещества. Обе смеси объединяли (2,80 г, 97%). H ЯМР (300 МГц, CDCl) δ ppm 2,59 (s, 3H), 3,03 (d, J-4,9 Гц, 3H), 6,17 (br s, 1H), 7,61 (dd, J=8,2, 1,5 Гц, 1H), 7,66 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 7,73 (s, 1Н).
[209] Часть B. Получение 4-формил-N,3-диметилбензамида.
К смеси ренеевского никелевого катализатора Raney Nickel 2800 (влажный, 2,02 г) в 75% муравьиной кислоте (40 мл) добавляли 4-циано-N,3-диметилбензамид (1,94 г, 11,1 ммоль). Полученную смесь держали при 100°C в течение 3 ч и затем охлаждали, фильтровали через диатомит и промывали EtOAc и MeOH. Фильтрат концентрировали под пониженным давлением, и осадок очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (EtOAc 100%) с получением титульного соединения (1,94 г, 69%) в виде твердого вещества.
[210] Пример 5. Получение N-этил-4-формил-3-метилбензамида
2
4
2
2
11
14
2
+
Этанамин (0,041 г, 0,91 ммоль) добавляли к 4-формил-3-метилбензойной кислоте (0,15 г, 0,91 ммоль) в ТГФ (10 мл) в атмосфере N. Полученную суспензию перемешивали в течение 30 мин, затем добавляли 4-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-ил)-4-метилморфолин-4-ий (0,243 г, 1,01 ммоль), и суспензию перемешивали в течение еще 18 ч. Полученную смесь концентрировали под пониженным давлением, и осадок растворяли в EtOAc (20 мл) и последовательно промывали водой и солевым раствором. Органический слой высушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Осадок очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя градиентом 0-10% MeOH в CHCl с получением N-этил-4-формил-3-метилбензамида (0,206 г), который содержал ~ 10-20% примеси. Указанное вещество использовали без дальнейшей очистки. ЖХМС(ES+) m/z вычисл. для CHNO [M+H] 192,23, получ. 192,27.
[211] Пример 6. Получение 2-фтор-4-формил-N,5-диметилбензамида.
[212] Часть B. Часть А. Получение 4-бром-5-фтор-2-метилбензальдегида.
4
3
Раствор 5-бром-4-фтор-2-йодтолуола (5 г, 15,9 ммоль) в Et20 (15 мл) по каплям добавляли к раствору n-BuLi (2,5 М в гексане) (7,3 мл, 15,9 ммоль) в Et20 (10 мл) при -100°C, при этом температура смеси оставалась в значении менее -95°C. Спустя 15 мин по каплям добавляли безводный ДМФА (1,35 мл, 17,5 ммоль). Полученную смесь нагревали от -100°C до комнатной температуры в течение 2,5 ч при перемешивании. После этого добавляли водный раствор 1H HCl (50 мл) для доведения pH до 1. Полученную смесь экстрагировали EtOAc (2×50 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Осадок очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле (0-10% EtOAc в гексанах) с получением 4-бром-5-фтор-2-метилбензальдегида (2,9 г, 84%) в виде твердого вещества. 1H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ ppm 2,63 (s, 3 H), 7,50 (d, J=6,5 Гц, 1 H), 7,54 (d, J=8,4 Гц, 1 H), 10,20 (d, J=1,8 Гц, 1 H).
[213] Часть В. Получение метил-2-фтор-4-формил-5-метилбензоата.
3
2
3
2
3
2
4
3
1
EtN (3,5 мл, 25 ммоль) добавляли к раствору 4-бром-5-фтор-2-метилбензальдегида (1,08 г, 5,00 ммоль) в ДМФ (20 мл) и MeOH (20 мл). Полученную смесь газировали CO в течение 10 мин, и затем добавляли PdCl(PhP) (0,35 г, 0,50 ммоль). После этого смесь газировали СО в течение еще 10 мин, и затем смесь нагревали при 70°C в течение 18 ч в атмосфере CO. Раствор охлаждали до комнатной температуры, и концентрировали под пониженным давлением. Осадок разбавляли EtOAc (100 мл), промывали насыщенным водным раствором NaHCO (30 мл), промывали солевым раствором (30 мл), высушивали над NaSO, фильтровали и выпаривали под пониженным давлением. Осадок очищали при помощи колоночной флэш-хроматографии на силикагеле (10-20% EtOAc в гексанах) с образованием титульного соединения в виде твердого вещества (0,403 г, 41%). H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ ppm 2,67 (s, 3H), 3,97 (s, 3H), 7,57 (d, J=10,4 Гц, 1H), 7,83 (d, J=6,4 Гц, 1H), 10,29 (d, J=1,6 Гц, 1H).
[214] Часть C. Получение 2-фтор-4-формил-N,5-диметилбензамида.
+
Смесь метил-2-фтор-4-формил-5-метилбензоата (0,35 г, 1,65 ммоль) в ДМФ (5 мл) и метанамина 40% масс. в воде (4,96 мл, 57,64 ммоль) перемешивали при 50°C в течение 5 ч. Полученную смесь концентрировали под пониженным давлением, и осадок очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя смесью этилацетата (40-100%) и гептана, с получением 2-фтор-4-формил-N,5-диметилбензамида (0,297 г, 92%) в виде твердого вещества. МС m/z (ИЭР) 195,91 [M+H].
[215] Пример 7. Получение (S)-трет-бутил-2-этинилморфолин-4-карбоксилата.
[216] Часть А. Получение тозилазида.
1
3
К раствору азида натрия (37,5 г, 0,577 моль) в воде (100 мл) добавляли этанол (200 мл) при 20°C. К указанному раствору добавляли теплый раствор (40-45°C) тозилхлорида (100,0 г, 0,525 моль) в этаноле (500 мл) в течение 10 мин. Полученную суспензию перемешивали при 20-25°C в течение 2,5 ч. Этанол выпаривали под пониженным давлением, и осадок разбавляли в воде (600 мл). Маслянистый продукт разделяли, и водный слой экстрагировали дихлорметаном (150 мл). Объединенные органические фазы промывали водой (2×100 мл), высушивали над сульфатом натрия и выпаривали под пониженным давлением с получением тозилазида (98,0 г, выход 95%) в виде масла. H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ ppm 2,49 (s, 3 Н), 7,43 (d, J=8,30 Гц, 2 Н), 7,85 (d, J=8,30 Гц, 2 Н).
Источник: Org. Synth. Coll. Vol. V, стр. 179.
[217] Часть В. Получение диметил-(1-диазо-2-оксопропил)фосфоната
1
3
К раствору диметил-(2-оксопропил)фосфоната (91,7 г, 0,552 моль) в ацетонитриле (920 мл) добавляли карбонат калия (91,6 г, 0,662 моль). Суспензию перемешивали при 40°C в течение 1 ч. Затем по каплям добавляли раствор тозилазида (114,4 г, 0,58 моль) в ацетонитриле (460 мл) в течение 45 мин. Во время добавления температуру поддерживали на значениях между 18°C и 24°C. Полученную смесь перемешивали в течение еще 2 ч при 20-25°C и затем фильтровали через диатомит. Фильтровальный осадок промывали ацетонитрилом (2×100 мл), и комбинированные фильтраты выпаривали под пониженным давлением. Осадок очищали при помощи хроматографии (силикагель, элюируя смесью этилацетата/гептанов) с получением диметил-(1-диазо-2-оксопропил)фосфоната (90,5 г, 85%) в виде масла. H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ ppm 2,26 (s, 3 Н), 3,82 (s, 3 Н), 3,85 (s, 3 Н).
[218] Часть С. Получение трет-бутил-(2R)-2-формилморфолин-4-карбоксилата.
1
3
Раствор трет-бутил-(2R)-2-(гидроксиметил)морфолин-4-карбоксилата (91,0 г, 0,418 моль), TEMPO (0,654 г, 0,004 моль), бромида натрия в воде (0,5 М, 84 мл, 0,04 моль) и дихлорметана (910 мл) охлаждали до 0-5°C. pH раствора гипохлорита натрия (1,66 М, 308 мл, 0,52 моль) доводили до pH=9,3 добавлением гидрокарбоната натрия (21 г, 0,21 моль), и полученный раствор по каплям добавляли к полученной смеси в течение 30 мин. Во время добавления температуру поддерживали между 0 и 5°C, используя ледяную баню для охлаждения. Двухфазную смесь затем перемешивали в течение еще 30 мин при 0-5°C. Температуру доводили до 20°C, и добавляли воду (450 мл). Фазы разделяли, и водную фазу экстрагировали дихлометаном (2×180 мл). Объединенные органические фазы промывали водой (2×180 мл), затем высушивали над сульфатом натрия и выпаривали под пониженным давлением с получением трет-бутил-(2R)-2-формилморфолин-4-карбоксилата (63,02 г, 70%) в виде густого оранжевого масла. H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ ppm 1,47 (s, 9 Н), 2,47 -3,13 (m, 2 Н), 3,37-3,72 (m, 2 Н), 3,72-4,19 (m, 3 Н), 9,65 (s, 1 Н).
[219] Часть D. Получение (S)-трет-бутил-2-этинилморфолин-4-карбоксилата
1
3
К раствору диметил-(1-диазо-2-оксопропил)фосфоната (64,7 г, 0,337 моль) в смеси ацетонитрила (526 мл) и метанола (105 мл) добавляли карбонат калия (80,9 г, 0,585 моль). Суспензию перемешивали при 18-20°C в течение 15 мин. Затем по каплям добавляли раствор трет-бутил-(2R)-2-формилморфолин-4-карбоксилата (63,0 г, 0,293 моль) в смеси ацетонитрила (53 мл) и метанола (10 мл) в течение 1 ч при поддержании температуры между 18 и 23°C. Полученную смесь перемешивали в течение 2 ч при 20°C после завершения добавления, и затем оставляли на ночь. Полученную суспензию фильтровали, и фильтрат выпаривали под пониженным давлением. Полученное масло медленно добавляли к воде (950 мл), осадок собирали путем фильтрации, и фильтровальный осадок промывали водой (120 мл). Осадок очищали при помощи хроматографии на силикагеле (элюируя 10% этилацетата в гептанах) с получением (S)-трет-бутил-2-этинилморфолин-4-карбоксилата (45,25 г, выход 64%) в виде твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ ppm 1,47 (s, 9 Н), 2,49 (s, 1 Н), 3,20-3,32 (m, 2 Н), 3,49-3,61 (m, 2 Н), 3,70-3,90 (m, 1 Н), 3,90-3,99 (m, 1 Н), 4,21-4,28 (m, 1 Н); хиральная ВЭЖХ (Chiracel ОВ-Н 0,46×250 мм, гексаны 93% - этанол 3%, 30°C, 0,6 мл/мин, изократ. 30 мин) 97,0% требуемого энантиомера.
[220] Пример 8. (R)-трет-Бутил-2-этинилморфолин-4-карбоксилат.
1
+
3
Указанное соединение получали при помощи способов, сходных с описанными в Примере 6. H ЯМР (300 МГц, CDCl) δ ppm 1,45 (s, 9 Н), 2,47 (d, J=1,81 Гц, 1 H), 3,17-3,37 (m, 2 Н), 3,45-3,62 (m, 2 Н), 3,70-3,87 (m, 1 Н), 3,88-3,98 (m, 1 Н), 4,20 -4,26 (m, 1 Н); МС (ИЭР) m/z 112,17 [М-Вос+Н].
[221] Пример 9. Получение (2R,5R)-трет-бутил-2-(гидроксиметил)-5-метилморфолин-4-карбоксилата.
[222] Часть А. Получение (R)-2-(бензиламнно)пропан-1-ола.
3
2
3
2
2
4
2
2
2
2
4
3
1
Бензальдегид (10,0 г, 94,2 ммоль) и (D)-аланинол (7,08 г, 94,2 ммоль) разбавляли в дихлорэтане (100 мл). Полученную смесь охлаждали до 0°C. Добавляли уксусную кислоту (5,39 мл, 94,2 ммоль), затем, 10 минут спустя, NaBH(OAc) (9,47 г, 44,7 ммоль). После перемешивания в течение 18 ч при комнатной температуре добавляли водный NaCO для доведения pH до 9, и указанное соединение экстрагировали CHCl. Объединенные органические фазы высушивали над MgSO и концентрировали под пониженным давлением. Осадок очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя смесями 100% CHCl к 10/89/1 МеОН/CHCl/NHOH с получением продукта, указанного в названии (5,30 г, 34%), в виде масла. H ЯМР (300 МГц, CDCl) δ ppm 1,08 (d, J=6,3 Гц, 3 Н), 2,04-2,30 (m, 2 Н), 2,79-2,89 (m, 1 Н), 3,28 (dd, J=10,5, 6,9 Гц, 1 Н), 3,59 (dd, J=10,5, 4,2 Гц, 1 Н), 3,73 (d, J=12,9 Гц, 1 Н), 3,86 (d, J=12,9 Гц, 1 Н), 7,24-7,36 (m, 5 Н).
[223] Часть B. Получение (2R,5R)-4-бензил-5-метилморфолин-2-ил)метанола.
4
2
2
4
2
2
3
1
(R)-2-(Бензиламино)пропан-1-ол (5,30 г, 32,1 ммоль) растворяли в толуоле (150 мл). Затем добавляли (S)-эпихлоргидрин (3,76 мл, 48,1 ммоль) и затем LiClO (5,12 г, 48,1 ммоль). Полученную смесь перемешивали в течение 18 ч при комнатной температуре. К смеси по каплям добавляли метоксид натрия (который был получен путем добавления NaOH (3,85 г, 96,2 ммоль) к ледяному раствору МеОН (60 мл) и перемешивания в течение 30 мин). После перемешивания при комнатной температуре в течение 18 ч, добавляли воду. Толуол удаляли под пониженным давлением, и указанное соединение экстрагировали CHCl. Органическую фазу высушивали над MgSO, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Осадок очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле, элюировуя смесями EtO к 5% MeOH/EtO с получением титульного соединения (5,13 г, 72%) в виде масла. H ЯМР (300 МГц, CDCl) δ ppm 1,08 (d, J=6,0 Гц, 3 H), 1,90-2,03 (m, 2 Н), 2,36-2,44 (m, 1 Н), 2,57 (dd, J=11,7, 2,1 Гц, 1 H), 3,05 (d, J=13,2 Гц, 1 H), 3,31-3,64 (m, 4 Н), 3,77 (dd, J=11,7, 3,3 Гц, 1 H), 4,14 (d, J=13,2 Гц, 1 H), 7,23-7,34 (m, 5 Н).
[224] Часть C. Получение (2R,5R)-трет-бутил-2-(гидроксиметил)-5-метилморфолин-4-карбоксилата.
2
2
2
2
2
2
6
1
+
(2R,5R)-4-Бензил-5-метилморфолин-2-ил)метанол (5,10 г, 23,0 ммоль) растворяли в МеОН, и полученную смесь газировали N. Затем добавляли BocO (5,03 г, 23,0 ммоль) и после него Pd(OH) (2,55 г). После перемешивания в течение 18 ч под давлением H 1,01 бар, смесь разбавляли CHCl и фильтровали через слой диатомита. Фильтрат концентрировали под пониженным давлением, и осадок очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя смесями 70% к 80% EtOAc и гексанов с получением титульного соединения (3,20 г, 60%) в виде масла. H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ ppm 1,12 (d, J=6,3 Гц, 3 Н), 1,39 (s, 9 Н), 3,19-3,58 (m, 5 Н), 3,60-3,74 (m, 2 Н), 3,81-3,90 (m, 1 Н), 4,69 (dd, J=6,0, 4,5 Гц, 1 Н). МС (ИЭР) m/z 132,3 [М+Н-Вос].
[225] Пример 10. Получение (2R,5S)-трет-бутил-2-(гидроксиметил)-5-метилморфолин-4-карбоксилата.
1
3
Указанное соединение получали при помощи способов, сходных с описанными в Примере 8. H ЯМР (300 МГц, CDCl) δ ppm 1,22 (d, J=6,86 Гц, 3 Н), 1,46 (s, 9 Н), 1,89-1,95 (m, 1 Н), 2,83-3,00 (m, 1 Н), 3,38-4,04 (m, 7 Н).
[226] Пример 11. трет-бутил-3-этинилпирролидин-1-карбоксилат.
1
+
3
Указанное соединение получали при помощи способов, сходных с описанными в Примере 6, часть D, начиная с коммерчески доступного исходного вещества. H ЯМР (300 МГц, CDCl) δ ppm 1,45 (s, 9 Н), 1,85-2,00 (m, 1 Н), 2,08-2,20 (m, 2 Н), 2,87-3,00 (m, 1 Н), 3,21-3,38 (m, 2 Н), 3,40-3,69 (m, 2 Н); МС (ИЭР) m/z 96,15 [М-Вос+Н].
[227] Пример 12. Трет-бутил-4-этинил-2-метилпирролидин-1-карбоксилат.
[228] Часть А. Получение 1-бензил-5-метилпирролидин-2-она.
1
3
Гидрид натрия (60% суспензия в минеральном масле) (2,54 г, 63,6 ммоль) добавляли к раствору 5-метилпирролидин-2-она (4,2 г, 42,4 ммоль) в N,N-диметилформамиде (27 мл) при 0°C. Затем добавляли бензилбромид (6,05 мл, 50,8 ммоль), и полученную смесь перемешивали в течение 16 ч, позволяя температуре подняться от 0°C до комнатной. Затем медленно добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония (50 мл), и продукт экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенные органические слои промывали 5% водным раствором гидрокарбоната натрия (100 мл), высушивали сульфатом магния, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Осадок очищали при помощи хроматографии на 100 г силикагелевом картридже с применением градиента 5 к 75% EtOAc в гексанах с получением 1-бензил-5-метилпирролидин-2-она (6,88 г, 86%) в виде масла. H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ ppm 1,16 (d, J=6,25 Гц, 3 H), 1,53-1,64 (m, 1 Н), 2,04-2,21 (m, 1 Н), 2,34-2,56 (m, 2 Н), 3,46-3,58 (m, 1 Н), 3,98 (d, J=15,02 Гц, 1 H), 4,97 (d, J=15,02 Гц, 1 H), 7,21-7,35 (m, 5 Н).
[229] Часть В. Получение метил-1-бензил-5-метил-2-оксопирролидин-3-карбоксилата.
1
3
n-Бутиллитий (2,5 М в гексанах) (29 мл, 72,7 ммоль) медленно добавляли к раствору диизопропиламина (10,7 мл, 76,3 ммоль) в тетрагидрофуране (50 мл), охлаждаемому при помощи ледяной бани для поддержания внутренней температуры ниже 10°C. Полученную смесь охлаждали до -78°C, и добавляли раствор 1-бензил-5-метилпирролидин-2-она (6,88 г, 36,4 ммоль) в тетрагидрофуранн (46 мл) при такой скорости, чтобы поддерживать внутреннюю температуру ниже -65°C. После завершения добавления смесь перемешивали при -78°C 0,5 ч. Затем добавляли диметилкарбонат (6,13 мл, 72,7 ммоль), и смесь перемешивали при -78°C 0,25 ч. После этого ледяную баню убирали, и смесь постепенно нагревали до комнатной температуры и перемешивали при этой температуре в течение 16 ч. Добавляли 1Н водный раствор соляной кислоты (100 мл), и продукт экстрагировали этилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические слои промывали водой (150 мл) и затем солевым раствором (150 мл). Органический слой высушивали сульфатом магния, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Неочищенный осадок очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле с применением градиента 10 к 60% EtOAc в гексанах с получением метил-1-бензил-5-метил-2-оксопирролидин-3-карбоксилата (6,85 г, 76%) в виде масла и в виде смеси диастереоизомеров. H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ ppm 1,16 и 1,25 (2 d, J=6,37 и 6,25 Гц, 3 Н), 1,79-1,89 (m, 0,5 Н), 1,97-2,08 (m, 0,5 Н), 2,34-2,54 (m, 1 Н), 3,45-3,74 (m, 2 Н), 3,79 и 3,81 (2 s, 3 Н), 4,01 (dd, J=14,99, 9,43 Гц, 1 Н), 4,99 (dd, J=15,01, 11,63 Гц, 1 Н), 7,21-7,36 (m, 5 Н).
[230] Часть C. Получение (1-бензил-5-метилпирролидин-3-ил)метанола.
Алюмогидрид лития (3,89 г, 0,10 моль) осторожно добавляли к безводному тетрагидрофурану (100 мл) при 0°C. Затем добавляли раствор метил-1-бензил-5-метил-2-оксопирролидин-3-карбоксилата (6,85 г, 27,7 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (39 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре 16 ч, затем охлаждали до 0°C, и очень медленно добавляли воду (4 мл) и затем 15% водный раствор гидроксида натрия (4 мл), и снова воду (12 мл). Полученную суспензию перемешивали при 0°C 1 ч и затем добавляли сульфат магния. Суспензию перемешивали при 0°C 0,25 ч и фильтровали на слое диатомита. Фильтрационный осадок промывали этилацетатом, и фильтрат концентрировали под пониженным давлением с получением (1-бензил-5-метил пирролидин-3-ил)метанола (5,53 г, 97%) в виде масла. Полученный продукт использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.
[231] Часть D. Получение (5-метилпирролидин-3-ил)метанола.
1
3
Раствор (1-бензил-5-метилпирролидин-3-ил)метанола (5,53 г, 26,9 ммоль) в этаноле (192 мл) помещали под вакуумом и трижды заполняли азотом. Добавляли гидроокись палладия на углеродном носителе (20% масс, 50% влаж.) (1,89 г). Суспензию газировали водородом 0,25 ч. Полученную смесь перемешивали под давлением водорода 1,01 бар 6 ч при комнатной температуре. Затем смесь фильтровали на слое диатомита. Фильтрационный осадок промывали этанолом, и фильтрат концентрировали под пониженным давлением с получением (5-метилпирролидин-3-ил)метанола (3,16 г, колич., смесь диастереоизомеров) в виде масла. H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ ppm 0,96-1,06 (m, 0,5 Н), 1,14 и 1,18 (2 d,J-6,35 и 6,19 Гц, 3 Н), 1,37-1,47 (m, 0,5 Н), 1,65-1,74 (m, 0,5 Н), 2,00-2,15 (m, 3 Н), 2,27-2,43 (m, 1 Н), 2,63 (dd, J=10,90, 6,50 Гц, 0,5 Н), 2,86-3,00 (m, 1 Н), 3,06-3,24 (m, 1 Н), 3,48-3,66 (m, 2 Н).
[232] Часть E. Трет-бутил-4-(гидроксиметил)-2-метилпирролидин-1-карбоксилат.
1
3
Карбонат калия (19 г, 0,14 моль) и ди-трет-бутилдикарбонат (5,99 г, 27,4 ммоль) добавляли к раствору (5-метилпирролидин-3-ил)метанола (3,16 г, 27,4 ммоль) в тетрагидрофуране (30 мл) и воде (30 мл) at 0°C. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре 16 ч, и затем добавляли воду (50 мл). Продукт экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (100 мл), высушивали над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Осадок очищали при помощи хроматографии на 100 г силикагелевом картридже с применением градиента 10 к 70% EtOAc в гексанах с получением трет-бутил-4-(гидроксиметил)-2-метилпирролидин-1-карбоксилата (4,38 г, 74%, смесь диастереоизомеров). H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ ppm 1,14-1,28 (m, 3 Н), 1,30-1,70 (m, 2 Н), 1,45 (s, 9 Н), 1,71-1,88 (m, 0,5 Н), 2,17-2,35 (m, 1 Н), 2,42-2,57 (m, 0,5 Н), 3,00 (dd, J=10,97, 8,94 Гц, 0,5 H), 3,05-3,20 (m, 0,5 Н), 3,50 (dd, J=10,98, 7,64 Гц, 0,5 H), 3,55-4,05 (m, 3,5 Н).
[233] Часть F. Трет-бутил-4-формил-2-метилпирролидин-1-карбоксилат.
1
3
Реактив Десса-Мартина (4,23 г, 10,2 ммоль) добавляли к суспензии трет-бутил-4-(гидроксиметил)-2-метилпирролидин-1-карбоксилата (2 г, 9,29 ммоль) и гидрокарбоната натрия (1,17 г, 13,9 ммоль) в дихлорметане (23 мл) при 0°C. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре 2 ч и затем добавляли 10% водный раствор тиосульфата натрия (50 мл) и 5% водный раствор гидрокарбоната натрия (25 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре 16 ч. Фазы разделяли, и водный слой экстрагировали дихлорметаном (1×25 мл). Объединенные органические слои высушивали сульфатом магния, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением с получением трет-бутил-4-формил-2-метилпирролидин-1-карбоксилата (2,09 г, колич., смесь диастереоизомеров) в виде масла. H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ ppm 1,13-1,22 (m, 3 Н), 1,46 (s, 9 Н), 1,71-1,81 (m, 0,5 Н), 1,86-1,96 (m, 0,5 Н), 2,15-2,40 (m, 1 Н), 2,88 -2,98 (m, 0,5 Н), 3,00-3,13 (m, 0,5 Н), 3,48-3,58 (m, 0,5 Н), 3,60-3,75 (m, 1,5 Н), 3,85-4,05 (m, 1 Н) 9,65 и 9,73 (2 d, J=2,14 и 1,51 Гц, 1 Н).
[234] Часть H. Трет-бутил-4-этинил-2-метилпирролидин-1-карбоксилат.
1
+
3
7
12
Карбонат калия (2,6 г, 18,8 ммоль) добавляли к раствору трет-бутил-4-формил-2-метилпирролидин-1-карбоксилата (2,0 г, 9,38 моль) в ацетонитриле (25 мл) и метаноле (5 мл). Затем по каплям добавляли диметил (1-диазо-2-оксопропил)фосфонат (2,16 г, 11,3 ммоль). Суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч и затем концентрировали под пониженным давлением. К неочищенному осадку добавляли 5% водный раствор гидрокарбоната натрия (25 мл). Продукт экстрагировали этилацетатом (3×25 мл). Объединенные органические фазы высушивали сульфатом магния, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Неочищенное вещество очищали при помощи хроматографии на силикагеле с применением градиента 0 к 30% EtOAc в гептанах с получением трет-бутил-4-этинил-2-метилпирролидин-1-карбоксилата (1,31 г, 67%, смесь диастереоизомеров) в виде масла. H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ ppm 1,16 (d, J=6,21 Гц, 1,5 H), 1,31 (br s, 1,5 H), 1,46 (s, 9 H), 1,60-1,72 (m, 0,5 H), 1,85 (ddd, J=12,25, 6,41, 2,53 Гц, 0,5 H), 2,03-2,18 (m, 0,5 H), 2,10 (dd, J=5,13, 2,38 Гц, 1 H), 2,36-2,45 (m, 0,5 H), 2,76-2,88 (m, 0,5 H), 2,96-3,08 (m, 0,5 H), 3,24 (dd, J=10,85, 8,70 Гц, 0,5 H), 3,28-3,40 (m, 0,5 H), 3,59-3,67 (m, 0,5 H), 3,74-4,06 (m, 1,5 H); MC (ИЭР) m/z вычисл. для CHN 110,10 [М-Вос+Н], получ. 110,11.
[235] Пример 13. (2S,5R)-трет-бутил-2-этинил-5-метилморфолин-4-карбоксилат.
1
+
3
Указанное соединение получали при помощи способов, сходных с описанными в Примере 6, часть D. H ЯМР (300 МГц, CDCl) δ ppm 1,24 (d, J=6,64 Гц, 3 Н), 1,46 (s, 9 Н), 2,50 (s, 1 Н), 3,09 (t, J=11,82 Гц, 1 Н), 3,66 (q, J=12,23 Гц, 2 Н), 3,85-3,99 (m, 1 Н), 4,08 (d, J=7,82 Гц, 2 Н); МС (ИЭР) m/z 126,19 [М-Вос+Н].
[236] Пример 14. (2S,5S)-трет-бутил-2-этинил-3-метилморфолин-4-карбоксилат.
1
+
3
Указанное соединение получали при помощи способов, сходных с описанными в Примере 6, часть D. H ЯМР (300 МГц, CDCl) δ ppm 1,24 (d, J=7,01 Гц, 3 Н), 1,47 (s, 9 Н), 2,42 (s, 1 Н), 3,29-3,46 (m, 2 Н), 3,88 (d, J=13,21 Гц, 1 Н), 4,11-4,23 (m, 2 Н), 4,55 (s, 1 Н); MC (ИЭР) m/z 126,21 [М-Вос+Н].
[237] Пример 15. Получение (S)-метил-2-((2-(2,6-дифтор-4-(метилкарбамоил)фенил)-7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метил)морфолин-4-карбоксилата.
[238] Часть A. Получение (S)-трет-бутил-2-((2-(2,6-дифтор-4-(метилкарбамоил)фенил)-7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метил)морфолин-4-карбоксилата. Также иллюстрирует Общие условия циклизации 1.
2
6
1
+
Смесь 4-метилпиридин-2-амина (5,41 г, 0,050 моль), 3,5-дифтор-4-формил-N-метилбензамида (9,96 г, 0,050 моль), (S)-трет-бутил-2-этинилморфолин-4-карбоксилата (10,57 г, 0,050 моль), хлорида меди(I) (1,49 г, 0,015 моль), бис(трифторметилсульфонилокси)меди (5,42 г, 0,015 моль) и толуола (120 мл) помещали в реактор с рубашкой вместимостью 250 мл в атмосфере N. Применяли нагревание, и температура достигала 85°C в течение 5 мин. Затем добавляли N,N-диметилацетамид (1,0 мл), и полученную смесь перемешивали при 85°C в течение 5 ч. Полученную смесь затем охлаждали до 20°C и оставляли при этой температуре на ночь. Слой толуола отделяли путем декантации от твердого остатка, и затем концентрировали под пониженным давлением. Полученный осадок смешивали с твердым осадком, выделенным после декантации, и объединенные твердые вещества растворяли в дихлорметане (300 мл). Раствор сульфида натрия в воде (18% масс./масс.) добавляли к органическому раствору, и смесь перемешивали в течение 15 мин. Затем смесь фильтровали через слой диатомита, и фильтрационный осадок промывали дихлорметаном (2×160 мл). Слои разделяли, и водную фазу экстрагировали дихлорметаном (100 мл). Объединенные органические слои концентрировали под пониженным давлением. Осадок растворяли в этилацетате (500 мл), объединяли с силикагелем (50 г), перемешивали в течение 30 мин и затем фильтровали через слой диатомита. Раствор концентрировали под пониженным давлением и осадок растворяли в дихлорметане (300 мл). Добавляли силикагель (32,5 г), и смесь концентрировали досуха под пониженным давлением. Абсорбированное неочищенное вещество помещали в сухую колонку с силикагелем (80 г) и элюировали этилацетатом-гептаном 50-50 об./об. с получением 13,7 г остаточного вещества, которое затем измельчали в порошок в смеси этилацетата-гептана 30-70 об./об. Твердое вещество собирали путем фильтрации, фильтрационный осадок промывали этилацетатом-гептаном 30-70 об./об., и полученное твердое вещество высушивали при помощи механической вакуумной помпы с получением (S)-трет-бутил-2-((2-(2,6-дифтор-4-(метилкарбамоил)фенил)-7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метил)морфолин-4-карбоксилата в виде твердого белого вещества (11,0 г, 44%). H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ ppm 1,35 (s, 9 Н), 2,36-2,81 (m, 5 Н), 2,85 (d, J=4,46 Гц, 3 Н), 3,06 (d, J=6,12 Гц, 2 Н), 3,24 (t, J=10,93 Гц, 1 Н), 3,43-3,50 (m, 1 Н), 3,56-3,72 (m, 3 Н), 6,85 (d, J=6,84 Гц, 1 Н), 7,37 (s, 1 Н), 7,68 (d, J=7,89 Гц, 2 Н), 8,44 (d, J=6,84 Гц, 1 Н), 8,72 (br. s, 1 Н); МС (ИЭР) m/z 501,16 [M+H]. Для дальнейшего обсуждения, относящегося к указанному способу, см. Chernyak, N, et al., "General and Efficient Copper-Catalyzed Three-Component Coupling Reaction towards Imidazoheterocycles. One-Pot Synthesis of Alpidem and Zolpidem," Angewandte Chemie, vol. 49(15), стр. 2743-2746 (Int'l Ed. 2010).
[239] Часть В. Получение (S)-метил-2-((2-(2,6-дифтор-4-(метилкарбамоил)фенил)-7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метил)морфолин-4-карбоксилата.
1
+
6
23
25
2
4
4
К раствору (S)-трет-бутил-2-((2-(2,6-дифтор-4-(метилкарбамоил)фенил)-7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метил)морфолин-4-карбоксилата (41,0 г, 0,082 моль) в метаноле (330 мл) добавляли раствор 3H хлористого водорода в метаноле (273 мл, 0,819 моль) в течение 15 мин при 20-25°C. Полученную смесь нагревали до 40-45°C и перемешивали в течение 1 ч. Полученную смесь затем охлаждали до 20°C и концентрировали под пониженным давлением. Осадок растворяли в дихлорметане (410 мл), и добавляли N,N-диизопропилэтиламин (26,5 г, 0,205 моль). Затем по каплям добавляли метилхлорформат (9,3 г, 0,098 моль) при 20°C и затем дополнительно N,N-диизопропилэтиламин (5,3 г, 0,040 моль). После перемешивания в течение 16 ч, органический слой промывали водой (100 мл). Водную фазу экстрагировали дихлометаном (50 мл), затем объединенные органические фазы промывали водным гидрокарбонатом калия 20% масс./масс. и концентрировали под пониженным давлением. Осадок перекристаллизовывали из этилацетата (860 мл) с использованием стадии горячей фильтрации для удаления нерастворимого вещества. Осадок собирали путем фильтрации, и фильтрационный осадок промывали этилацетатом (2×40 мл) и затем высушивали под механической вакуумной помпой при 50°C с получением титульного соединения в виде сольвата этилацетата (твердое белое вещество, 31,8 г). Этилацетат удаляли, как описано далее: вещество растворяли в воде (320 мл) путем постепенного добавления 3H соляной кислоты (22,5 мл), и полученный раствор фильтровали через фильтровальную бумагу для удаления нерастворимого вещества. Этилацетат удаляли путем выпаривания под пониженным давлением до получения в приемнике примерно 75 мл смеси этилацетат-вода. Для восстановления дистиллированного объема добавляли воду (75 мл). Раствор переносили в круглодонную колбу с механической мешалкой, pH постепенно доводили до 8,5 путем медленного добавления водного гидрокарбоната калия 20% масс./масс. (135 мл). Полученную суспензию перемешивали в течение ночи при 20-25°C. Продукт собирали путем фильтрации, и фильтрационный осадок промывали водой (30 мл) и затем высушивали в вакуумной печи с получением (S)-метил-2-((2-(2,6-дифтор-4-(метилкарбамоил)фенил)-7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метил)морфолин-4-карбоксилата (25,25 г, 67%) в виде твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ ppm 2,39 (s, 3 Н), 2,85 (s, 4 Н), 3,07 (br s, 2 Н), 3,25 (m, 1 Н), 3,45-3,79 (m, 8 Н), 6,85 (br s, 1 H), 7,37 (br s, 1 H), 7,68 (br s, 2 H), 8,45 (br s, 1 H), 8,72 (br s, 1 H); Macc-спектрометрия с высоким разрешением (MCBP) m/z вычисл. для CHFNO 459,1838 [M+H], получ. 459,1844.
[240] Пример 15B. Получение (R)-трет-бутил-2-((7-метил-2-(2-метил-4-(метилкарбамоил)фенил)имидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метил)морфолин-4-карбоксилата. Иллюстрирует Общие условия циклизации 2.
2
3
1
+
В сосуд для микроволнового реактора вместимостью 0,5-2,0 мл помещали 4-метилпиридин-2-амин (1 экв.), 4-формил-N,3-диметилбензамид (1,05 экв.), (R)-трет-бутил-2-этинилморфолин-4-карбоксилат (1 экв.), хлорид меди(I) (0,05 экв.), бис(трифторметилсульфонилокси)медь (0,05) и толуол (4 мл). Полученную смесь продували N 5 мин. Полученную смесь перемешивали при 140°C в условиях микроволнового облучения в течение 45 мин. Затем смесь растворяли в EtOAc и фильтровали при помощи складчатой фильтровальной бумаги. Фильтрат концентрировали под пониженным давлением, и осадок очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя 2% к 20% этилацетата в метаноле с получением (R)-трет-бутил-2-((7-метил-2-(2-метил-4-(метилкарбамоил)фенил)имидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метил)морфолин-4-карбоксилата (30,3%) в виде масла. H ЯМР (400 МГц, CDOD) δ ppm 1,32-1,48 (m, 10 Н), 2,24 (s, 3 Н), 2,39 (s, 3 Н), 2,46-2,59 (m, 1 Н), 2,70-2,91 (m, 1 Н), 2,95 (s, 3 Н), 2,98-3,10 (m, 2 Н), 3,43-3,58 (m, 1 Н), 3,60-3,79 (m, 3 Н), 6,88 (d, J=7,03 Гц, 1 Н), 7,04 (br. s., 1 Н), 7,40 (d, J=7,42 Гц, 1 Н), 7,70 (d, J=7,42 Гц, 1 Н), 7,79 (s, 1 Н), 8,37 (d, J=5,47 Гц, 1 Н). MC (ИЭР) m/z 479,18 [M+H].
[241] Пример 15С. Получение (S)-трет-бутил-2-((7-метил-2-(2-метил-4-(метилкарбамоил)фенил)имидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метил)морфолин-4-карбоксилата. Также иллюстрирует Общие условия циклизации 3.
2
+
Смесь 4-метилпиридин-2-амина (1 экв.), хлорида меди(I) (0,05 экв.), бис(трифторметилсульфонилокси)меди (0,05 экв.) и 4-формил-N,3-диметилбензамида (1 экв.) в атмосфере N перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин. Добавляли дегазированный толуол (2 мл), (S)-трет-бутил-2-этинилморфолин-4-карбоксилат (1,5 экв.), и полученную смесь перемешивали при 120°C в течение 17 ч. Полученную смесь охлаждали до КТ, концентрировали под пониженным давлением, и осадок очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя 1% к 10% метанола в этилацетате с получением (S)-трет-бутил-2-((7-метил-2-(2-метил-4-(метилкарбамоил)фенил)имидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метил)морфолин-4-карбоксилата (174 мг, 56,2%) в виде масла. МС (ИЭР) m/z 479,58 [M+H].
[242] Пример 15D. Получение (R)-трет-бутил-2-((2-(2,6-дифтор-4-(метилкарбамоил)фенил)-7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метил)морфолин-4-карбоксилата. Также иллюстрирует Общие условия циклизации 4.
2
+
Смесь 4-метилпиридин-2-амина (1 экв.), 3,5-дифтор-4-формил-N-метилбензамида (1 экв.), (R)-трет-бутил 2-этинилморфолин-4-карбоксилата (1 экв.), хлорида меди(I) (0,03 экв.) и бис(трифторметилсульфонилокси)меди (0,03 экв.) в атмосфере N толуоле (4 мл) и ДМА (0,1 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 5 мин. Полученную смесь перемешивали при 85°C в течение 18 ч. Полученную смесь охлаждали до КТ, концентрировали под пониженным давлением, и осадок очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя 2% к 10% метанола в этилацетате с получением (R)-трет-бутил-2-((2-(2,6-дифтор-4-(метилкарбамоил)фенил)-7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метил)морфолин-4-карбоксилата (65,5%) в виде масла. МС (ИЭР) m/z 501,77 [M+H].
[243] Пример 15Е. Получение (2S,5S)-трет-Бутил-5-метил-2-((7-метил-2-(2-метил-4-(метилкарбамоил)фенил)имидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метил)морфолин-4-карбоксилата. Также иллюстрирует Общие условия циклизации 5.
2
a
4-Метилпиридин-2-амин (0,14 г, 1,26 ммоль), 4-формил-N,3-диметилбензамид (0,22 г, 1,26 ммоль), (2S,5S)-трет-бутил 2-этинил-5-метилморфолин-4-карбоксилат (0,28 г, 1,26 ммоль) и хлорид меди(I) (62 мг, 0,63 ммоль) добавляли в круглодонную колбу. Затем добавляли толуол (10 мл) и N,N-диметилацетамид (5 капель). Колбу помещали под вакуум и затем трижды заполняли N. Полученную смесь перемешивали при 90°C в течение 16 ч, и затем охлаждали до комнатной температуры. После этого к смеси добавляли этанол и силикагель, и затем смесь концентрировали под пониженным давлением. Осадок очищали при помощи флэш-хроматографии на 50 г силикагелевом картридже, элюируя 50% к 100% этилацетатом в гексанах, и затем 0% к 20% метанола в этилацетате, с получением (2S,5S)-трет-бутил-5-метил-2-((7-метил-2-(2-метил-4-(метилкарбамоил)фенил)имидазо[1,2-]пиридин-3-ил)метил)морфолин-4-карбоксилата (0,37 г, 60%) в виде масла, которое использовали без дальнейшей очистки.
[244] Соединения из Примеров 16-44 в нижеследующей Таблице 1 были получены с применением способов, сходных с описанными в Примерах 15, 15B, 15С, 15D и 15Е с использованием соответствующих исходных веществ и при одном из общих условий циклизации, как указано ниже.
[245] Пример 45. Получение метил-4-((7-метил-2-(2-метил-4-(метилкарбамоил)фенил)имидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метил)пиперидин-1-карбоксилата.
[246] Часть А. Получение метил-4-(1-этоксивинил)-3-метилбензоата.
2
+
Смесь метил-4-бром-3-метилбензоата (5 г, 21,83 ммоль), PdCl(dbpf) (0,356 г, 0,55 ммоль) и трибутил(1-этоксивинил)станнана (8,11 мл, 24,01 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл) нагревали в микроволновом реакторе при 150°C в течение 15 мин. Смесь фильтровали на слое диатомита, который затем промывали EtOAc (100 мл). К полученной смеси добавляли солевой раствор (60 мл), и фазы разделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc (3 X 60 мл). Объединенные органические экстракты высушивали над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Осадок использовали без дальнейшей очистки на следующей стадии. LCMS m/z 221,09 [M+H] (ИЭР).
[247] Часть В. Получение метил-4-(2-бромацетил)-3-метилбензоата.
1
3
Метил-4-(1-этоксивинил)-3-метилбензоат (4,81 г, 21,83 ммоль) растворяли в ТГФ (30 мл) и воде (15,00 мл) при 22°C, и добавляли 1-бромпирролидин-2,5-дион (3,89 г, 21,83 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 22°C в течение 15 мин. К смеси добавляли EtOAc (70 мл) и воду (50 мл), и фазы разделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc (3 X 50 мл). Объединенные органические экстракты высушивали над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Осадок очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле, элюировали смесями EtOAc и гептана с получением метил-4-(2-бромацетил)-3-метилбензоата (4,51 г, 76%) в виде твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ ppm 2,55 (s, 3 Н), 3,95 (s, 3 Н), 4,41 (s, 2 Н), 7,68 (d, 1 Н), 7,89-8,00 (m, 2 Н).
[248] Часть C. Получение метил-3-метил-4-(7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-2-ил)бензоата.
1
3
Смесь 4-метилпиридин-2-амина (1,149 г, 10,63 ммоль), метил 4-(2-бромацетил)-3-метилбензоата (2,4 г, 8,85 ммоль) и бикарбоната натрия (1,487 г, 17,71 ммоль) в этаноле (8 мл) нагревали в микроволновом реакторе до 120°C в течение 10 мин. После охлаждения до КТ осадок собирали путем фильтрации, промывали водой и высушивали под пониженным давлением с получением метил-3-метил-4-(7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-2-ил)бензоата (1,49 г, 60%) в виде твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, CDOD) δ ppm 2,43 (s, 3 Н), 2,56 (s, 3 Н), 3,92 (s, 3 Н), 6,81 (d, J=6,64 Гц, 1 Н), 7,34 (s, 1 Н), 7,83-7,87 (m, 1 Н), 7,87-7,92 (m, 1 Н), 7,95 (s, 1 Н), 7,99 (s, 1 Н), 8,33 (d, J=7,03 Гц, 1 Н)
+
ЖХМС m/z 281,02 [M+H] (ИЭР).
[249] Часть D. Получение N,3-диметил-4-(7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-2-ил)бензамида.
3
Смесь метил-3-метил-4-(7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-2-ил)бензоата (1,47 г, 5,24 ммоль), 40% водного раствора метанамина (10 мл, 116,17 ммоль) нагревали в микроволновом реакторе до 105°C в течение 10 мин. К полученной смеси добавляли EtOAc (50 мл), смесь фильтровали, и две фазы разделяли. Водную фазу экстрагировали EtOAc (3 X 50 мл). Объединенные органические фазы высушивали над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Осадок очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле, элюировали смесями EtOAc и метанола с получением N,3-диметил-4-(7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-2-ил)бензамида (1,1 г, 75%) в виде твердого вещества. 1H ЯМР (400 МГц, CDOD) δ ppm 2,43 (s, 3 H), 2,56 (s, 3 H), 2,94 (s, 3 H), 6,80 (dd, J=7,03, 1,56 Гц, 1 H), 7,34 (s, 1 H), 7,67-7,74 (m, 1 H), 7,76 (s, 1 H), 7,82 (d, J=7,81 Гц, 1 H), 7,97 (s, 1 H), 8,33 (d, J=7,03 Гц, 1 H).
+
ЖХМС m/z 280,10 [M+H] (ИЭР).
[250] Часть Е. Получение 4-(3-бром-7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-2-ил)-N,3-диметилбензамида.
3
2
2
4
+
Раствор диброма (0,051 мл, 0,99 ммоль) в этаноле (1 мл) по каплям добавляли к раствору N,3-диметил-4-(7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-2-ил)бензамид (184 мг, 0,66 ммоль) в этаноле (1,000 мл) при перемешивании при комнатной температуре. Полученную смесь перемешивали 90 мин, концентрировали под пониженным давлением, и осадок суспендировали в воде. Водную смесь делали основной при помощи NaHCO и экстрагировали CHCl. Органическую фазу высушивали над MgSO, концентрировали под пониженным давлением, и осадок очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле (градиент 7-60% EtOAc в гептане) с получением 4-(3-бром-7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-2-ил)-N,3-диметилбензамида (210 мг, 89%) в виде твердого вещества. ЖХМС m/z 357,98, 359,97 [M+H] (ИЭР).
[251] Часть F. Получение трет-бутил-4-((7-метил-2-(2-метил-4-(метилкарбамоил)фенил)имидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метилен)пиперидин-1-карбоксилата.
2
2
+
К смеси PdCl(dbpf) (60,0 мг, 0,09 ммоль) и хлорида тетрабутиламмония (25,6 мг, 0,09 ммоль) в атмосфере N добавляли 4-(3-бром-7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-2-ил)-N,3-диметилбензамид (330 мг, 0,92 ммоль) и трет-бутил-4-метиленпиперидин-1-карбоксилат (545 мг, 2,76 ммоль) в ДМА (10 мл), и полученную смесь нагревали в микроволновом реакторе при 120°C в течение 45 мин. Полученную смесь фильтровали через диатомит. Фильтрат концентрировали под пониженным давлением, затем добавляли EtOAc (20 мл) и воду (20 мл). Фазы разделяли, и водную фазу экстрагировали EtOAc (3 X 20 мл). Объединенные органические фазы высушивали над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали под пониженным давлением. Осадок использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки. ЖХМС m/z 475,30 [M+H] (ИЭР).
[252] Часть Г. Получение трет-бутил-4-((7-метил-2-(2-метил-4-(метилкарбамоил)фенил)имидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метил)пиперидин-1-карбоксилат.
+
Давление в проточном реакторе H-cube устанавливали на 60 бар, температуру на 60°C, использовали 30 мм картридж, содержащий 10% Pd/C. Раствор трет-бутил-4-((7-метил-2-(2-метил-4-(метилкарбамоил)фенил)имидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метилен)пиперидин-1-карбоксилата в этаноле (5 мл) и этил ацетате (5 мл) прокачивали через H-Cube при скорости мл/мин. После завершения фракции концентрировали, и осадок использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки. МС m/z 477,30 [M+H] (ИЭР).
[253] Часть H. Получение метил-4-((7-метил-2-(2-метил-4-(метилкарбамоил)фенил)имидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метил)пиперидин-1-карбоксилата
2
4
3
4
3
4
25
31
4
3
1
+
Смесь соединения трет-бутил-4-((7-метил-2-(2-метил-4-(метилкарбамоил)фенил)имидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метил)пиперидин-1-карбоксилата, содержащего N,3-диметил-4-(7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-2-ил)бензамид (180 мг, смесь 1:1), и HCl (0,022 мл, 0,71 ммоль) в МеОН (2 мл) нагревали при 70°C в течение 1 ч. Полученную смесь охлаждали до КТ, концентрировали под пониженным давлением, и осадок растворяли в дихлорметане (2,000 мл). К раствору добавляли метилхлорформат (0,028 мл, 0,36 ммоль) и DIPEA (0,250 мл, 1,43 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. После концентрации под пониженным давлением, осадок очищали при помощи препаративной ВЭЖХ МС (подвижная фаза: 30-50% B; A: HO с 10 мМ NHCO и 0,375% NHOH об./об., B: CHCN, запуск 25 мин) на XBridge Prep C18 OBD, 30×150 мм, 5 мкм, колонка с обращенной фазой Waters, с получением метил-4-((7-метил-2-(2-метил-4-(метилкарбамоил)фенил)имидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метил)пиперидин-1-карбоксилата (11,00 мг, 10,63%) в виде твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, МЕТАНОЛ-d) δ ppm 0,81-1,03 (m, 2 Н), 1,49 (d, J=12,50 Гц, 2 Н), 1,71-1,89 (m, 1 Н), 2,30 (s, 3 Н), 2,45 (s, 3 Н), 2,66 (br. s., 2 Н), 2,84 (d, J=7,42 Гц, 2 Н), 2,94 (s, 3 Н), 3,61 (s, 3 Н), 3,92 (d, J=5,08 Гц, 2 Н), 6,88 (dd, J=7,23, 1,76 Гц, 1 Н), 7,32 (s, 1 Н), 7,40 (d, J=7,81 Гц, 1 Н), 7,70 (dd, J=7,81, 1,95 Гц, 1 Н), 7,79 (s, 1 Н), 8,25 (d, J=7,03 Гц, 1 Н). МСВР m/z вычисл. для CHNO 435,2391 [M+H], получ. 435,2405.
[254] Пример 46. Получение 4-(3-((1-ацетилпиперидин-4-ил)метил)-7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-2-ил)-N,3-диметилбензамида.
2
2
2
4
25
31
4
2
1
+
Смесь соединения трет-бутил-4-((7-метил-2-(2-метил-4-(метилкарбамоил)фенил)имидазо[1,2-a]пиридин-3-ил)метил)пиперидин-1-карбоксилата, содержащего N,3-диметил-4-(7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-2-ил)бензамид (200 мг, смесь 1:1), и хлороводорода (32,9 мг, 0,90 ммоль) в МеОН (3,0 мл) нагревали при 70°C в течение 1 ч. После концентрации осадок растворяли в CHCl (3,00 мл) с последующим добавлением пиридина (143 мг, 1,80 ммоль) и уксусного ангидрида (30,7 мг, 0,30 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 0°C в течение 1 ч. После концентрации неочищенное вещество очищали при помощи флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя смесями этилацетата и метанола, и затем очищали при помощи препаративной ВЭЖХ (сбор УФ) с применением метода низкого pH (подвижная фаза: A-H2O с 0,05% ТФУ; B-CH3CN, на Luna С18, 50×250 мм, 15 мкм колонка с обращенной фазой Phenomenex), запуск 20 мин с градиентом 10-20% B в A, с последующей очисткой при помощи ВЭЖХ (сбор МС) с применением метода высокого pH (подвижная фаза: А-H2O с 10 мМ NH5CO3 и 0,375% NH4OH об./об.; B-МеОН, на Gemini-NX С18 110А, Axia, 30×150 мм, 5 мкм колонка с обращенной фазой Phenomenex), запуск 19,5 мин. с градиентом 40-60% B в A, затем очищали при помощи устройства для сверхкритической жидкостной хроматографии MettlerToledo Minigram Supercritical Fluid Chromatography при следующих условиях: колонка Cyano, 10,0×250 мм, размер частиц 6 мкм, 10,0 мл/мин, подвижная фаза: 25% EtOH с 0,1% DMEA, сверхкритический CO, регулятор установлен на 100 Бар, температура колонки установлена на 35°C, УФ 215 нм, с получением 4-(3-((1-ацетилпиперидин-4-ил)метил)-7-метилимидазо[1,2-a]пиридин-2-ил)-N,3-диметилбензамида (7,00 мг, 16,68%) в виде твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, метанол-d). δ ppm 0,82-1,09 (m, 2 Н), 1,35 (d, J=10,55 Гц, 1 Н), 1,46-1,66 (m, 2 Н), 1,87 (ddd, J=15,14, 7,52, 4,30 Гц, 1 Н), 2,00 (s, 3 Н), 2,30 (s, 3 Н), 2,40-2,52 (m, 4 Н), 2,83-3,02 (m, 5 Н), 3,74 (br. s., 1 H), 4,33 (d, J=13,28 Гц, 1 H), 6,89 (dd, J=7,03, 1,56 Гц, 1 H), 7,33 (s, 1 H), 7,41 (d, J=7,81 Гц, 1 H), 7,71 (d, J=8,20 Гц, 1 H), 7,79 (s, 1 H), 8,27 (d, J=7,03 Гц, 1 H); MCBP m/z вычисл. для CHNO 419,2442 [M+H], получ. 419,2437.
a
[255] Пример 47. Получение (R)-4-(3-((4-ацетилморфолин-2-ил)метил)-7-метилимидазо[1,2-]пиридин-2-ил)-N,3-диметилбензамида.
1
+
3
24
29
4
2
t
H ЯМР (400 МГц, CDOD) δ ppm 2,02 (2 s, 3 Н), 2,30 (s, 3 Н), 2,38 (dd, J=13,09, 10,74 Гц, 1 Н), 2,45 (s, 3 Н), 2,60-2,74 (m, 1 Н), 2,84-2,95 (m, 3 Н), 3,03-3,10 (m, 2 Н), 3,10-3,22 (m, 1 Н), 3,59-3,70 (m, 2 Н), 3,81 (dd, J=11,91, 3,32 Гц, 1 Н), 4,21 (d, J=13,28 Гц, 1 Н), 6,86 (d, J=7,03 Гц, 1 Н), 7,31 (s, 1 Н), 7,40-7,51 (m, 1 Н), 7,66-7,76 (m, 1 Н), 7,79 (br. s., 1 Н), 8,37 (dd, J=12,11, 7,03 Гц, 1 Н). MCBP m/z вычисл. для CHNO 421,2234 [M+H], получен 421,2237, R 0,993 мин. Заявители синтезировали указанное соединение с применением относительно сложного способа. Если бы заявители снова синтезировали указанное соединение, они использовали способ, сходный с использованным для получения соединения в Примере 20.
[256] Пример 48. Биологическая оценка соединений в качестве антагонистов рецептора P2X3 человека in vitro.
2
[257] Антагонистические свойства соединений согласно настоящему изобретению анализировали в качестве ингибиторов увеличения уровня кальция внутри клеток, вызванного активацией hP2X3 (пуринергические рецепторы Р2Х подтипа 3 у человека, номер доступа AB016608 для клона A и номер доступа NM_002559 для клона B), экспрессированного в клетках RLE (rat liver endothelium, эндотелий печени крысы), АТСС (Американская коллекция типовых культур). Клетки RLE/hP2X3 выращивали на среде Уильяма IX (Gibco, 12551-032), обогащенной 10% фетальной бычьей сывороткой (Wisent, 090850), 2 мМ L-Глутамина (Wisent, 609-065-EL) и 600 мкг/мл Генетицина G-418 (Wisent, 61234) во влажной камере (5% CO и 37°C).
2
50
[258] Анализ Fluo-4 на FDSS7000 (Hamamatsu) проводили с использованием криоконсервированных клеток RLE, стабильно экспрессирующих hP2X3, инкубированных на 384-луночных планшетах, за 24 ч до эксперимента при плотности, подходящей для получения требуемой конечной конфлюентности. После обработки планшетов с клетками Fluo-4 и осуществления последующей инкубации и затем стадий промывания, проводили двойной добавление. Первое добавление включало тестовые соединения, разбавленные буфером HBSS (сбалансированный солевой раствор Хэнкса), содержащим 2 мМ CaCl, предварительно инкубированным в течение 20 мин перед вторым добавлением. Второе добавление включало 2 мкМ АТФ. Мобилизацию кальция измеряли при помощи FDSS7000 в течение временного интервала 3 мин, и данные по количеству флуоресцирующих клеток экспортировали для анализа. Это приводило к получению значения pIC, которое вычисляли на Activity base при помощи ExcelFit. Коэффициенты Хилла и % ингибирования также могут быть определены.
50
[259] значения IC, полученные при помощи описанных выше способов, показаны в Таблице 2.
[260] Пример 49. Биологическая оценка Примера 15 на модели воспалительной боли in vivo
[261] Проводили оценку одного из соединений согласно настоящему изобретению на модели воспалительной боли in vivo. Пероральное дозирование Примера 15 (0,3-1-3-10-20 мкмоль/кг) приводило к концентрации в свободной плазме, обратно зависимой от конечных точек термической и механической гиперальгезии на 96-часовой FCA-модели воспалительной боли на лапе крысы. Эффективность (концентрация в свободной плазме EC50) примера 15 составляла 18 нМ и 87 нМ соответственно в обращении термической и механической гиперальгезии. Результаты показаны на Фигурах 1 и 2.
[262] Способы характеризации анальгетических эффектов примера 15 на 96-часовой FCA-модели воспалительной боли на крысе:
[263] Для исследований на животных были использованы самцы крыс линии Спраг-Доули (Charles River, St-Constant, Qc, CAN) с массой тела 200-225 г. Животных помещали группами в вентилируемые клетки из поликарбоната (фильтр в крышке) в комнате с контролируемыми условиями (12-часовой цикл света/темноты, 20,5-23,5°C, относительная влажность: 40-70%) со свободным доступом к пище (диета для грызунов с 14% содержанием белка, Harlan Teklad, Madisson, Висконсин, США) и воде.
[264] Воспаление вызывали путем однократного внутриподошвенного инъецирования 40 мкл полного адъюванта Фрейнда (Freund's complete adjuvant, FCA) в левую заднюю лапу крысы. Все эксперименты проводили спустя 96 ч после введения FCA. За 24 часа до поведенческого тестирования животных приносили в лабораторию для акклиматизации к новым условиям. Животных умерщвляли сразу после сбора данных.
[265] Термическую гиперальгезию (подошвенный тест) оценивали с использованием термического стимулятора лап (Paw Thermal Stimulator) для применения контролируемого тепла к поверхности подошвы лапы, в которую вводили FCA. Крыс помещали в отдельные ящики из плексигласа с отверстиями, на стеклянную поверхность устройства, температуру которой поддерживали на уровне 30°C. Крысам давали время для привыкания к своим ящикам, 15-30 минут. Подвижный манипулятор, содержащий источник тепла, с расположенным под углом зеркалом, использовали для размещения источника тепла непосредственно под поврежденной лапой, не беспокоя животное. Затем одновременно включали источник тепла и таймер; когда животное отдергивало заднюю лапу, записывали количество секунд. Тест на каждом животном проводили дважды, с интервалами в 5 минут, для избежания сенситизации, и брали среднее Значение. Для избежания какого-либо повреждения тканей, использовали время окончания воздействия через 20 с.
[266] Механическую гиперальгезию измеряли при помощи анальгезиметра Ugo Basile (Ugo Basile, Комерио, Италия). Животных аккуратно фиксировали, и постоянно увеличивали давление, применяемое к дорсальной поверхности задней лапы, посредством зонда с куполообразным наконечником (диаметром 1 мм). Определяли давление, необходимое для того, чтобы привести к отдергиванию лапы. Время окончания воздействия устанавливали на 295 г. Тест проводили дважды, с интервалами между тестами в 5 минут. Вычисляли порог отдергивания лапы как среднее от двух значений. Животных рандомизировали и определяли в лечебные группы для достижения минимальной статистической мощности 80%. Во всех случаях экспериментатор не знал о том, какое лечение получают животные.
[267] На животных, получавших дозу лекарственного препарата, но использовавшихся только для оценки фармакокинетики (satellite animals), отслеживали концентрацию в свободной плазме примера 15 в дозировках и временных точках, использованных в ноцицептивных тестах. значения ЕС50 в свободной плазме в поведенческих тестах определяли на основании кривых концентрация-ответ с 4 точками с использованием нелинейной регрессии и сигмоидальной логистической модели с переменным наклоном (Prism 4,03, GraphPad Software Inc., США).
*********
[268] Если не указано иное, при чтении настоящей патентной заявки следует использовать следующие определения:
[269] Химическая номенклатура, использованная в настоящей заявке, в целом следует примерам и правилам, установленным в Номенклатуре органической химии (Nomenclature of Organic Chemistry), Секции A, B, C, D, Е, F и Н, Pergamon Press, Oxford, 1979.
m
n
1
6
[270] Переменная «C-C» означает, что изменяемая группа содержит от m до n атомов углерода. Например, термин «C-C-алкил» обозначает алкильную группу, содержащую от 1 до 6 атомов углерода.
[271] Термин «алкил» обозначает алкановый (углеводородный) радикал с прямой или разветвленной группой. Примеры алкильных групп включают, например, метил, этил, пропил, бутил пентил и гексил.
[272] Термин «циклоалкил» относится к полностью насыщенной циклической углеводородной группе. Примеры циклоалкилов включают, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил.
[273] Термин «галоген» обозначает хлор, бром, фтор или йод.
[274] Термин «алкокси» обозначает -O-алкил. Примеры алкокси включают, например, метокси, этокси, пропокси и бутокси.
[275] Термин «возможно замещенный» означает, что изменяемая группа, структура или молекула может быть: (1) замещена заместителем в одном или более подходящих положений или (2) не замещена.
[276] Термин «фармацевтически приемлемый» используют для описания группы (например, соли, лекарственной формы, носителя, разбавителя или вспомогательного вещества) как подходящей для применения в соответствии со здравым медицинским суждением. В целом, фармацевтически приемлемая группа имеет одно или более преимуществ, которые превосходят любое вредное воздействие, которое группа может иметь. Вредные воздействия могут включать, например, избыточную токсичность, раздражение, аллергическую реакцию и другие проблемы и осложнения.
[277] «Ac» обозначает ацетил.
[278] «AcOH» обозначает уксусную кислоту.
[279] «AIBN» обозначает азобисизобутиронитрил.
[280] «атм.» обозначает атмосферу.
[281] «boc» обозначает трет-бутилкарбонил.
[282] «Bu» обозначает бутил.
[283] «d» обозначает дублет.
[284] «ДХМ» обозначает дихлорметан.
[285] «dd» обозначает дублет дублетов.
[286] «ddd» обозначает дублет дублета дублетов.
[287] «DIPEA» обозначает диизопропилэтиламин.
[288] «ДМА» обозначает диметилацетамид.
[289] «DMEA» обозначает диметилэтиламин.
[290] «ДМФА» обозначает N,N-диметилформамид.
6
6
[291] «ДМСО-d» обозначает диметилсульфоксид-d.
[292] «DMT-ММ» обозначает хлорид 4-(4,6-диметокси-1,3,5-триазин-2-ил)-4-метилморфолиния.
[293] «ИЭР» обозначает ионизацию электрораспылением.
[294] «Et» обозначает этил.
2
[295] «EtO» обозначает диэтиловый эфир.
3
[296] «EtN» обозначает триэтиламин.
[297] «EtOAc» обозначает этилацетат.
[298] «EtOH» обозначает этанол.
[299] «Пр.» обозначает пример.
[300] «г» обозначает грамм.
[301] «ч» обозначает час или часы.
1
[302] «H ЯМР» обозначает протонный ядерный магнитный резонанс.
[303] «HATU» обозначает гексафторфосфат O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония.
[304] «HOBT» обозначает 1-гидроксибензотриазол.
[305] «HPLC» обозначает высокоэффективную жидкостную хроматографию.
[306] «MCBP» обозначает масс-спектрометрию с высоким разрешением.
[307] «л» обозначает литр.
[308] «ЖХМС» обозначает жидкостную хроматографию / масс-спектрометрию.
[309] «m» обозначает мультиплет.
[310] «M» обозначает молярный.
[311] «мл» обозначает миллилитр.
[312] «Me» обозначает метил.
[313] «MeCN» обозначает ацетонитрил.
[314] «MeOH» обозначает метанол.
[315] «мг» обозначает миллиграмм.
[316] «МГц» обозначает мегагерц.
[317] «мин» обозначает минуту или минуты.
[318] «ммоль» обозначает милимоль.
[319] «моль» обозначает моль.
[320] «MC» обозначает масс-спектрометрию.
[321] «MTBE» обозначает метил-трет-бутиловый эфир.
[322] «H» обозначает нормальный.
[323] «NBS» обозначает N-бромсукцинимид.
2
[324] «Pd(OH)» обозначает гидроксид палладия.
[325] «Ph» обозначает фенил.
[326] «ppm» обозначает частей на миллион.
[327] «Pr» обозначает пропил.
[328] «q» обозначает квартет.
[329] «qt» обозначает квинтет.
t
[330] «R» обозначает время удерживания (ВЭЖХ).
[331] «s» обозначает синглет.
[332] «SFC» обозначает сверхкритическую жидкостную хроматографию.
[333] «t» обозначает триплет.
[334] «TFA» обозначает трифторуксусную кислоту.
[335] «ТГФ» обозначает тетрагидрофуран.
[336] «ТСХ» обозначает тонкослойную хроматографию.
[337] «TMEDA» обозначает N,N,N',N'-тетраметил-1,2-этилендиамин.
[338] «УФ» обозначает ультрафиолет.
[339] «об./об.» обозначает объем на единицу объема.
[340] «об.» обозначает объем.
[341] Ссылки в единственном числе также могут включать множественное число. Например, формы единственного числа могут относиться к одному или более чем одному.
[342] Слова «включать», «включает» и «включающий» в указанной заявке на патент (включая формулу изобретения) следует интерпретировать как включающие, а не как исключающие. Предполагается, что такая интерпретация полностью соответствует интерпретации, которую имеют указанные слова согласно патентным законам Соединенных Штатов.
[343] Предполагается, что приведенное выше описание иллюстративных вариантов реализации настоящего изобретения представлено только для ознакомления других специалистов в данной области с настоящим изобретением, его принципами и его практическим применением с тем, чтобы другие специалисты в данной области могли адаптировать и применять настоящее изобретение в его различных формах, которые наиболее подходят к требованиям конкретного применения. Следовательно, настоящее изобретение не ограничено приведенными выше вариантами реализации и может быть изменено различными способами.