СПОСОБ ВАКЦИНОПРОФИЛАКТИКИ РЕСПИРАТОРНЫХ БОЛЕЗНЕЙ ТЕЛЯТ
METHOD FOR VACCINAL PREVENTION OF RESPIRATORY DISEASES IN CALVES

Изобретение относится к ветеринарной иммунологии, касается способа иммунопрофилактики, в частности вакцинопрофилактики, и может быть использовано для специфической защиты телят от смешанных респираторных болезней вирусной этиологии.
Синдром острых респираторных вирусных инфекций у телят развивается при воздействии респираторных вирусов, преимущественно парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальных и аденовирусов, на фоне неблагоприятных факторов внешней среды. Вирусные агенты вызывают первичные повреждения слизистых оболочек верхних дыхательных путей, оказывая иммуносупрессорное действие на местный иммунитет респираторного тракта, что способствует проникновению в легкие бактериальной микрофлоры, осложняющей патологический процесс. Особенностью распространения вирусов инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи, респираторно-синцитиальной инфекции является то, что данные возбудители у молодняка до 1 месяца могут вызывать энтериты, у более старших животных - респираторные заболевания, а у взрослых половозрелых коров и быков - нарушение воспроизводительной функции. Кроме того, вирус парагриппа-3 широко распространен у телят старше 1-го месячного возраста при нарушениях технологии выращивания, т.е. при стрессовых воздействиях на организм, вызывая поражения дыхательных путей. По тропизму все вышеуказанные возбудители могут репродуцироваться в клетках респираторного и желудочно-кишечного тракта, половых органах, иммунокомпетентных клетках, то есть они пантропны. Это обусловливает их высокую контагиозность и тяжесть течения болезни.
Разрыв инфекционной цепи и при возможности предотвращение перехода эпизоотического процесса в скрытое состояние рассматривается как основной принцип борьбы с энзоотиями, одним из основных инструментов которой является иммунопрофилактика. Иммунопрофилактика предполагает создание искусственной невосприимчивости организма введением биологических препаратов против соответствующего возбудителя, при этом различают активную (с использованием вакцин и анатоксинов) и пассивную (с использованием антител в виде сывороток или глобулина) иммунизацию.
Известны способы иммунопрофилактики вирусных респираторных болезней телят с применением моновалентных (живых и инактивированных) или поливалентных вакцин /1/. Известные способы иммунопрофилактики основаны на комплексных мероприятиях, включающих интраназальную прививку телят в первые недели жизни, их ревакцинацию (парентерально) через 3-4 месяца, а также вакцинацию коров /2/. Вакцинация телят обеспечивает им защиту от инфекции через 10-14 дней (при использовании живых вакцин) или через 21 день (при использовании инактивированных) после повторного введения вакцины /3/.
В качестве предпочтительного аналога рассматривается способ специфической профилактики инфекционных болезней крупного рогатого скота с применением инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней, которую вводят телятам в возрасте 30 дней дважды с интервалом 20-25 суток /4/.
На эффективность вакцинации отрицательно влияет наличие у телят колостральных антител, которые блокируют антигены вводимых вакцин, тем самым блокируя формирование иммунитета и усугубляя инфекционный процесс. Кроме того, вакцины могут вызывать поствакцинальные реакции (реактогенность и аллергенность вакцин), снижающие в течение определенного времени (1-10 дней) качество здоровья животных, а их применение почти всегда сопровождается временным (на 7-14 дней) иммунодефицитным состоянием организма животных. Применение живых или инактивированных вакцин не предотвращает латенции вирулентных вирусов в организме животных.
Цель изобретения - повышение эффективности профилактики массовых респираторных болезней телят вирусной этиологии.
Поставленная цель достигается сочетанием пассивной (с применением гипериммунной сыворотки животных-доноров) и активной (с применением инактивированной вакцины) иммунизации по оригинальной схеме.
Способ осуществляется следующим образом.
Клинически здоровых телят 20-30-дневного возраста иммунизируют трехкратно с интервалом в 10-12 дней подкожными инъекциями гипериммунной сыворотки животных-доноров, содержащей антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 (в титре не ниже 1:1280), к вирусу инфекционного ринотрахеита (в титре 1:256), к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых (в титре 1:1024), к респираторно-синтициальному вирусу - (в титре 1:128), к ротавирусу и коронавирусу (в титре 1:128), в дозе 1 мл/кг живой массы, а через 15 дней после последней инъекции вакцинируют двукратным введением инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней, с интервалом в 21 день в дозах по наставлению.
Эффективность способа профилактики респираторных болезней телят полиэтиологичной природы определяли в научно-производственных опытах в условиях хозяйств, длительно неблагополучных по респираторным болезням, обусловленным воздействием на организм ассоциаций вирусов, патогенной и условно патогенной микрофлоры на фоне нарушения условий содержания и кормления стельных коров и телят. Вирусологическими исследованиями подтверждена этиологическая роль вирусов парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальных вирусов, рота- и коронавирусов. Гипериммунную сыворотку готовили по методу Н.И. Горбань (1981) из крови клинически здоровых взрослых животных-доноров живой массой не менее 300 кг того же хозяйства, свободных от инфекционных и кровепаразитарных болезней.
Сущность способа поясняется примерами.
Пример 1. В условиях хозяйства, длительно неблагополучного по вирусным заболеваниям телят, протекающим как смешанная инфекция, вызванная вирусами инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальным, рота- и коронавирусами (заболеваемость - 80,0%, летальность - 20%), по принципу аналогов формировали три группы клинически здоровых телят 20-дневного возраста. Телят первой группы иммунизировали трехкратно с интервалом в 10 дней подкожными инъекциями гипериммунной сыворотки животных-доноров, содержащей антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 (в титре не ниже 1:1280), к вирусу инфекционного ринотрахеита (в титре 1:256), к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых (в титре 1:1024), к респираторно-синцитиальному вирусу (в титре 1:128), к ротавирусу и коронавирусу (в титре 1:128), в дозе 1 мл/кг живой массы; телят второй группы иммунизировали двукратными с интервалом в 21 день инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней, телят третьей группы иммунизировали трехкратно с интервалом в 10 дней подкожными инъекциями гипериммунной сыворотки животных-доноров, содержащей антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 (в титре не ниже 1:1280), к вирусу инфекционного ринотрахеита (в титре 1:256), к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых (в титре 1:1024), к респираторно-синцитиальному вирусу - (в титре 1:128), к ротавирусу и коронавирусу (в титре 1:128), в дозе 1 мл/кг живой массы, а через 15 дней после последней инъекции - двукратными с интервалом в 21 день инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней. За животными вели клиническое наблюдение, регистрировали количество заболевших животных и характер течения заболевания. Срок наблюдения 3 месяца. Результаты представлены в таблице 1.
Таблица 1
Основные клинические показатели телят
Показатели
Группы животных
1-я группа: гипериммунной сыворотки животных-доноров*
2-я группа: вакцина «Комбовак»
3-я группа: гипериммунной сыворотки животных-доноров*+вакцина «Комбовак»
Количество животных, гол.
10
10
10
Заболело, гол. (%):
4 (40,0)
3 (30,0)
1 (10,0)
- вирусные желудочно-кишечные болезни (ЖКБ)
3
2
1
- вирусные респираторные болезни (РБ)
1
1
Форма переболевания:
- легкая
1 (ЖКБ)
2 (ЖКБ)
1
- тяжелая
2 (ЖКБ, РБ)
1 (РБ)
Пало, гол (%)
2
1
-
Сохранность, %
80,0
90,0
100,0
Среднесуточный прирост живой массы, г
516,2±16,5
528,0±18,6
748,0±20,1
*Гипериммунная сыворотка животных-доноров, содержащая антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 (в титре не ниже 1:1280), к вирусу инфекционного ринотрахеита (в титре 1:256), к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых (в титре 1:1024), к респираторно-синцитиальному вирусу - (в титре 1:128), к ротавирусу и коронавирусу (в титре 1:128).
Как видно из таблицы 1, вирусные заболевания регистрировали во всех группах, причем респираторная патология в 1-й и 2-й группах протекала в тяжелой форме (1 группа - 2 случая, 2 группа - 1 случай). Телят лечили традиционными способами с применением симптоматических средств, в том числе антибактериальных. Полного излечения достигнуть не удалось, и животные были вынужденно убиты. Иммунизация гипериммунной сывороткой с последующей вакцинацией не только снижала заболеваемость и обеспечивала переболевание в легкой форме, но и способствовала лучшему развитию телят, что подтверждалось повышением среднесуточного прироста живой массы на 232,0 г в сравнении с 1-й группой и на 220,0 г в сравнении со 2-й группой.
Пример 2. В условиях хозяйства, длительно неблагополучного по вирусным заболеваниям телят, протекающим как смешанная инфекция, вызванная вирусами инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальными, рота- и коронавирусами (заболеваемость - 60,0%, летальность - 10%), по принципу аналогов формировали две группы клинически здоровых телят 30-дневного возраста. Телят первой группы иммунизировали трехкратно с интервалом в 10 дней подкожными инъекциями гипериммунной сыворотки животных-доноров, содержащей антигемагглютинины к вирусу парагриппа-3 (в титре не ниже 1:1280), к вирусу инфекционного ринотрахеита (в титре 1:256), к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых (в титре 1:1024), к респираторно-синцитиальному вирусу (в титре 1:128), к ротавирусу и коронавирусу (в титре 1:128), в дозе 1 мл/кг живой массы, а через 15 дней после последней инъекции - двукратными с интервалом в 21 день инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней. Телят второй группы иммунизировали двукратными с интервалом в 21 день инъекциями инактивированной комбинированной вакцины «Комбовак» против инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальной, рота- и коронавирусных болезней. Эффективность профилактики оценивали по следующим показателям: относительное и абсолютное содержание Т- и В-лимфоцитов (определяли в реакции спонтанного розеткообразования по методу Н.И. Блинова, 1980), функциональная активность нейтрофилов крови (определяли в реакции восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест) по методу М.Е. Виксмана и А.M. Маянского, 1979), уровень иммуноглобулинов отдельных изотипов (G, М) (определяли по методу Manchini, 1964), лизоцимная активность сыворотки крови (определяли по методу О.И. Смирновой и Т.А. Кузьминой, 1966), уровень вируснейтрализующих антител к вирусам парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи-болезни слизистых, респираторно-синцитиальному вирусу и к рота- и коронавирусу (определяли в реакции торможения гемагглютинации, реакции непрямой гемагглютинации и методом иммуноферментного анализа). Взятие крови для иммунобиологических исследований проводили до вакцинации, через 21 день после вакцинации и через 21 день после ревакцинации. Учитывали результаты клинических наблюдений (число заболевших животных, среднесуточный прирост живой массы, сохранность).
Результаты представлены в таблицах 2 и 3.
Таблица 2
Иммунобиологические показатели телят
Показатели
Группы животных
1-я группа: гипериммунная сыворотка животных-доноров + вакцина «Комбовак»
2-я группа: вакцина «Комбовак»
до вакцинации
21 день после вакцинации
21 день после ревакцинации
до вакцинации
21 день после вакцинации
21 день после ревакцинации
Т-лимфоциты, %
24,7±1,0
26,8±0,9
31,0±0,8***
22,3±1,0
23,8±0,5
26,0±0,6
Т-лимфоциты, 10<sup>9</sup>/л
1,8±0,1
1,5±0,08
2,1±0,2***
1,5±0,1
1,5±0,08
1,8±0,2
В-лимфоциты, %
7,5±0,2
8,2±0,4
8,4±0,3*
7,4±0,5
8,3±0,4
8,9±0,3
В-лимфоциты, 10<sup>9</sup>/л
0,5±0,04
0,5±0,04
0,6±0,01**
0,5±0,04
0,5±0,04
0,6±0,01*
Функциональная активность нейтрофилов крови, %:
- спонтанный тест
7,6±0,3
8,0±0,4
8,6±0,3***
7,4±0,3
7,1±0,4
7,8±0,3
- индуцированный тест
25,2±0,8
30,4±0,8
36,6±0,7***
23,3±0,7
26,4±0,7
28,6±0,5
Иммуноглобулины, мг/мл
G
17,6±0,4
19,8±0,6
24,0±0,3***
17,9±0,5
19,0±0,3
22,5±0,4
М
1,1±0,09
1,6±0,05
1,8±0,03***
1,0±0,06
1,1±0,05
1,3±0,05
Лизоцимная активность сыворотки крови, %
2,4±0,02
2,8±0,1
3,2±0,08***
2,2±0,05
2,5±0,09
3,0±0,1
Титр вируснейтрализующих антител к вирусу HPT-3, log<sub>2</sub>
1,1±0,4
4,8±0,2
7,2±0,3***
1,1±0,4
4,2±0,3
6,4±0,4
Титр вируснейтрализующих антител к вирусу ПГ-3, log<sub>2</sub>
1,9±0,5
6,6±0,2
8,0±0,2**
1,9±0,7
5,9±0,2
7,0±0,2
Титр вируснейтрализующих антител к вирусу ВД-БС, log<sub>2</sub>
2,0±0,4
6,4±0,3
10,2±0,2***
1,8±0,4
5,8±0,05
8,2±0,2
Титр вируснейтрализующих антител к вирусу PC, log<sub>2</sub>
1,2±0,6
6,2±0,3
7,2±0,7***
1,2±0,8
5,9±0,4
6,4±0,2
Титр вируснейтрализующих антител к ротавирусу, log<sub>2</sub>
2,0±0,4
6,8±0,2
9,4±0,2***
1,8±0,4
6,0±0,2
8,0±0,3
Титр вируснейтрализующих антител к коронавирусу, log<sub>2</sub>
1,9±0,3
6,0±0,4
8,2±0,4***
1,7±0,4
5,7±0,2
6,7±0,2
* р<0,05; ** р<0,02; *** р<0,01; **** р<0,001.
Таблица 3
Результаты клинических наблюдений
Показатели
Группы телят
Опытная, n=15
Контрольная, n=15
Гипериммунная сыворотка животных-доноров+вакцина «Комбовак»
Вакцина «Комбовак»
Заболело, гол., (%)
1 (6,7)
3 (20,0)
Форма переболевания, гол.:
- легкая
1
1
- тяжелая
0
2
Пало, гол., (%)
0
1 (6,7)
Профилактическая эффективность, %
93,3
80,0
Среднесуточный прирост живой массы, г
648,0±20,1
528,0±18,6
Сохранность, гол., (%)
100
90,0
Как видно из таблицы 2, вакцинация телят приводила к формированию иммунного ответа, причем у телят первой группы напряженность была выше, чем у телят второй группы, что выражалось в статистически достоверном приросте антител ко всем вирусам. Максимальное содержание антител ко всем вирусам регистрировали через 21 день после ревакцинации, оно превышало соответствующие показатели до вакцинации: титр нейтрализующих антител к вирусу инфекционного ринотрахеита в 6,5 раза (1 группа) и 5,8 раза (вторая группа); к вирусу парагриппа-3 - в 4,2 раза (первая группа) и 3,7 раза (вторая группа); к вирусу вирусной диареи-болезни слизистых - в 5,1 раза (первая группа) и 4,6 раза (вторая группа); к респираторно-синцитиальному вирусу - в 6 раз (первая группа) и 5,3 раза (вторая группа); к ротавирусу - в 4,7 раза (первая группа) и 4,4 раза (вторая группа); к коронавирусу - в 4,3 раза (первая группа) и 3,9 раза (вторая группа). Вакцинация в первой группе проводилась на фоне более высоких показателей иммунного статуса, что свидетельствовало о лучшей адаптации к воздействию неблагоприятных факторов внешней среды и способствовало подготовке иммунной системы к формированию адекватного ответа. Высокий уровень специфического иммунитета у телят первой группы обеспечивал профилактическую эффективность на уровне 93,3% (по сравнению с 80% во второй группе) и сохранность - на уровне 100,0% (по сравнению с 90,0% во второй группе). У заболевшего теленка первой группы респираторная инфекция протекала в легкой форме и после курса медикаментозной терапии полное выздоровление отмечалось через 8 дней. У 2 телят из 3 заболевших во второй группе респираторная инфекция протекала в тяжелой, у 1 теленка - в легкой форме. После курса медикаментозной терапии у 1 теленка с тяжелой формой переболевания полное выздоровление наступало через 14 дней, у теленка с легкой формой переболевания - через 10 дней. 1 теленок пал.
Проведенные исследования показали, что заявленный способ обеспечивал повышение поствакцинального иммунитета и стимуляцию продукции антител в результате активизации клеточного и гуморального иммунитета и оптимизации естественной резистентности организма.
Источники информации
1. Урбан В.П., Найманов И.Л. Болезни молодняка в промышленном животноводстве. - М.: Колос, 1984. - С.192-196.
2. Инфекционные болезни животных. Справочник./Сост. Ю.Ф. Борисович, Л.В. Кириллов; под ред. Д.Ф. Осидзе. - М.: Агропромиздат, 1987. - С.99.
3. Ефанова Л.И. Защитные механизмы организма. Иммунодиагностика и иммунопрофилактика инфекционных болезней животных. - Воронеж: ВГАУ, 2004. - 391 с.
4. RU 2395298 C1, 2010.