СПОСОБ СПЕЦИФИЧЕСКОГО ОТБОРА ВЫСОКОАФФИННЫХ МОЛЕКУЛ ДНК (ДНК-АПТАМЕРОВ) К РЕКОМБИНАНТНЫМ БЕЛКАМ

Способ специфического отбора высокоаффинных молекул ДНК (ДНК-аптамеров) к рекомбинантным белкам, проводимого из одноцепочечных олигонуклеотидных библиотек, по отношению к рекомбинантному белку-мишени, отличающийся тем, что рекомбинантный белок-мишень синтезируют в виде единой полипептидной цепи с аминокислотной последовательностью, представляющей собой уникальный сайт, расщепляемый протеазой (летальным фактором Bacillus anthracis), и с последовательностью глютатион-S-трансферазы для связывания рекомбинантного белка на парамагнитных частицах с иммобилизованным глютатионом, предусматривающий сепарацию олигонуклеотидов, аффинных к данному белку, от неафинных в потоке жидкости за счет удержания полипептида на парамагнитных частицах, находящихся в поле действия неодимового магнита, и последующее отщепление рекомбинантного белка со связанными олигонуклеотидами с поверхности магнитных частиц летальным фактором Bacillus anthracis для выделения и амплификации аффинных к рекомбинантному белку-мишени последовательностей ДНК в полимеразной цепной реакции, обработка продуктов которой 5′-экзонуклеазой фага лямбда приводит к получению набора одноцепочечных ДНК-аптамеров, специфичных к рекомбинантному белку.