Цитоархитектоника лимфоидной ткани стенок пищевода и желудка у свиньи

Цитоархитектоника лимфоидной ткани стенок пищевода и желудка у свиньи

И.В. Пестова, аспирантка, А.Б. Панфилов, д.б.н., профессор, Вятская ГСХА

В данной работе исследовалась цитоархитектоника лимфоидной ткани стенок пищевода и желудка у свиньи. Здесь дается клеточный состав лимфоидных узелков в стенках пищевода и желудка в разном возрасте.

На протяжении своей жизни все живые организмы подвергаются самым различным воздействиям окружающей среды, из которых далеко не все способствуют нормальному физиологическому функционированию организма.

Установлено, что в ответ на конкретный антигенный раздражитель в лимфоидной ткани происходит реакция, заканчивающаяся созданием иммунного состояния организма. Готовность организма к иммунологическому ответу непосредственно зависит от развития лимфоидной ткани [1].

Лимфоидная ткань стенок пищевода и желудка — составная часть «лимфоидной ткани, ассоциированной со слизистыми оболочками» (mucosa associated lymphoid tissue — MALT), которая в целом выполняет антигенный контроль за содер-

жимым желудочно-кишечного тракта и принимает участие в механизмах иммунной защиты.

В составе лимфоидных образований функционируют иммунокомпетентные клетки, которые участвуют в общих и местных иммунных реакциях, образуя единую функциональную систему. Полный иммунный локальный ответ слизистых оболочек включает все клеточные элементы для его формирования.

В анализируемой общедоступной литературе нам не встретились сведения о клеточном составе лимфоидных образований в стенках пищевода и желудка у свиньи, что и привело нас к изучению данной проблемы.

Цель исследования — изучение особенностей клеточного состава лимфоидной ткани в стенках пищевода и желудка у свиньи.

Материал и методы исследования. Для проведения исследования по принципу аналогов подобрано девять животных в возрасте 1 месяца, 6 месяцев и 2—3 года, клинически здоровых.

Для гистологического исследования фиксировали участки пищевода и желудка в 10%-ном нейтральном формалине. Биоматериал по общепринятой методике заливали в парафин. На

томе изготовляли срезы толщиной 4—5 мкм. Полученные срезы окрашивали гематоксилином Гарриса с докраской эозином. Подсчет клеточного состава по морфофункциональным зонам — в куполе и герминативном центре в солитарных лимфоидных узелках производили под микроскопом МБИ-3 У 42 (об. 100 Ч ок. 10), специализированной усовершенствованной сеткой [2]. Идентификацию учтенных в работе клеток проводили согласно методу Г.С. Катинас с соавт. [3].

Для электронно-микроскопического исследования брали кусочки лимфоидной ткани стенки пищевода и желудка. Материал фиксировали в 2%-ном буферном растворе глутарового альдегида, дофиксировали в 4-хлористом осмии. Обезвоживали материал в спиртах возрастающей крепости и ацетоне. На ультрамикротоме типа Nova получали ультратонкие срезы. Полученные срезы окрашивали 1%-ным раствором толуидиново-го синего по Рейнольдсу. Просматривали ультра-тонкие срезы на трансмиссионном электронном микроскопе JEM-1011.

Полученные в работе цифровые данные обработаны методами вариационной статистики [2].

Результаты исследований. Лимфоидная ткань в стенке пищевода и желудка представлена скоплениями диффузной лимфоидной ткани и овальными лимфоидными узелками. Диффузная лимфоидная ткань располагается обычно вокруг протоков слизистых желез. Несмотря на то, что в ней клеточные элементы лежат довольно плотно, четких границ эти образования не имеют. Лимфоидные узелки в стенке пищевода имеют купол и герминативный центр. Лежат под эпителием, округлой или овальной формы (рис. 1).

У поросят в возрасте 1 месяца в большей степени встречаются лимфоидные узелки без герминативного центра (первичные). В 6-месячном возрасте вторичные лимфоидные узелки имеют хорошо развитый герминативный центр (рис. 2).

Рис. 1 - Лимфоидное скопление в стенке пищевода у поросенка в возрасте 1 месяц. Гематоксилин-эозин. Об. 10 Ок. 10:

1 - эпителий пищевода; 2 - лимфоидное скопление; 3 - железы

Основными клетками лимфоидного ряда в куполе и герминативном центре стенок пищевода и желудка являются малые лимфоциты, составляющие выше 68% (табл.). В куполе их находится больше, чем в герминативных центрах. При световой микроскопии они видны в виде округлых темноокрашенных клеток (рис. 3). На электронной микроскопии большую часть клетки занимает округлое или овальное ядро. Гетерохроматин располагается возле ядерной оболочки прерывистыми скоплениями, эухроматин распределен равномерно по объему ядра. Цитоплазма в виде узкого ободка. Митохондрии округлой формы располагаются вблизи ядра (рис. 4).

Кроме лимфоцитов встречаются в меньшей степени ретикулярные клетки, иммунобласты, плазмобласты, незрелые и зрелые плазмоциты, макрофаги, митотически делящиеся клетки.

Количество ретикулярных клеток больше в куполе. Их количество составляет 6—7% в 1-й месяц жизни и в 6-месячном возрасте. В 2—3 года их число возрастает как в куполе, так и в герминативном центре и составляет 10—12% в куполе и 9—17% в герминативных центрах. При световой микроскопии они видны в виде вытянутых клеток с большим количеством отростков. На

Рис. 2 - Лимфоидный узелок в стенке кардиальной области желудка у свиньи в возрасте 6 месяцев. Гематоксилин-эозин. Об. 10 Ок. 10:

1 - лимфоидный узелок: а - купол, б - герминативный центр; 2 - эпителий желудка; 3 - желудочные ямки; 4 - диффузная лимфоидная ткань

Цитоархитектоника солитарных лимфоидных узелков в стенках пищевода

и желудка у свиньи

Клетки Зона лимфоидного узелка

1 месяц 6 месяцев 2-3 года

купол герминативный центр купол герминативный центр купол герминативный центр

Лимфоидный узелок краниальной части пищевода

Лимфоциты Иммунобласты Плазмобласты Незрелые плазм-е Зрелые плазм-е Ретикулярные Макрофаги Митозы 90,3±0,8 1,1±0,58 0,7±0,3 6,3±0,9 1,3±0,3 0,3±0,1 77,3±0,9 4,7±0,9 7,3±1,3 2,0±0,6 5,7±0,3 1,7±0,3 1,3±0,3 84,6±1,9 1,7±0,3 2,3±0,3 1,7±1,2 7,0±1,2 1,7±0,3 1,0±0,0 68,4±2,3 5,0±0,6 9,0±0,6 1,0±0,0 5,3±0,7 4,3±0,3 4,0±1,2 3,0±0,6 85,0±1,2 0,3±0,1 2,0±0,8 1,3±0,3 10,7±1,2 0,7±0,3 81,7±2,0 0,3±0,1 3,7±0,9 0,3±0,1 3,3±0,9 9,1±1,5 1,3±0,3 0,3±0,1

Лимфоидный узелок кардиальной области желудка

Лимфоциты Иммунобласты Плазмобласты Незрелые плазм-е Зрелые плазм-е Ретикулярные Макрофаги Митозы 85,4±1,5 1,3±0,3 2,7±0,7 0,7±0,3 7,3±0,9 1,3±0,3 1,3±0,3 78,0±4,0 3,7±1,5 6,3±1,2 0,7±0,3 4,0±1,2 3,3±0,7 2,3±0,9 1,7±0,3 85,3±1,2 1,3±0,3 2,7±0,7 1,7±0,3 6,3±0,7 1,7±0,3 1,0±0,3 74,0±1,2 3,3±0,3 7,0±0,6 0,7±0,3 5,3±0,9 3,0±0,6 4,0±1,2 2,7±0,9 84,4±0,3 0,3±0,1 1,0±0,3 1,0±0,3 12,3±1,5 1,0±0,3 76,3±1,7 0,3±0,1 1,7±0,2 2,3±0,8 17,3±1,5 1,7±0,7 0,3±0,1

Рис. 3 - Клеточный состав герминативного центра в лимфоидном узелке стенки пищевода у поросенка в возрасте 1 месяца. Гематоксилин-эозин. Об. 100 Ок. 10:

1 - лимфоциты; 2 - венула; 3 - митотически делящаяся клетка; 4 - ретикулярная клетка

Рис. 4 - Клетки в лимфоидном узелке стенки желудка у поросенка в возрасте 1 месяц. Ув. 4000:

1 - лимфоциты; 2 - ретикулярная клетка

электронной микроскопии характеризуются большим округлым центрально расположенным светлым (с преобладанием эухроматина) ядром с крупным ядрышком. Клетки имеют многочисленные цитоплазматические выросты и инвагинации (рис. 4).

Иммунобласты встречаются в пределах от 1 до 5% в 1 и 6 месяцев и около 0,3±0,1% в возрасте 2—3 лет. Наибольшее число данных клеток находится в герминативных центрах. При световой микроскопии — клетки большого размера, со светлоокрашенной цитоплазмой, ядро бледнее, чем у лимфоцитов.

При электронной микроскопии — клетки правильной округлой формы с четкими контурами. Ядро — крупное, круглое, занимает большую часть клетки, расположено центрально, хроматина немного, при этом он имеет вид мелкопетлистой сети. Ядрышко одно или несколько. Цитоплазма окружает ядро равномерным узким ободком.

Плазмобласты в узелках варьируют в пределах от 1 до 9%. Преобладающее их количество находится в герминативных центрах. Ядро несколько меньше, чем у иммунобласта, и в подавляющем большинстве случаев располагается эксцентрично.

Рис. 5 - Макрофаг в лимфоидном узелке стенки желудка у свиньи в возрасте 6 месяцев. Ув. 15000:

1 - ядро, 2 - цитоплазматические выросты, 3 - лизо-сомы

Незрелые и зрелые плазмоциты в основном обнаруживаются в герминативных центрах и достигают 1—5%. Зрелые плазматические клетки круглой или овальной формы, имеют маленькие размеры. На электронной микроскопии ядро — округлое, расположено эксцентрично, содержит крупные глыбки гетерохроматина, которые располагаются в виде радиальных тяжей («спиц колеса»). Ядрышко крупное, лежит в центре ядра или эксцентрично.

Количество макрофагов и митотически делящихся клеток в герминативных центрах незначительно и составляет по 1—4% (рис. 5). В других зонах они обнаруживаются непостоянно. Наибольшее их количество встречается в возрасте 6 месяцев и составляет 4,0+1,2% и 3,0±0,6% соответственно.

На основании проведенного исследования клеточный состав лимфоидной ткани стенок пищевода и желудка представлен лимфоцитами, иммунобластами, плазмобластами, незрелыми и зрелыми плазмоцитами, макрофагами, ретикулярными и митотически делящимися клетками.

Большое количество диффузной лимфоидной ткани в пищеводе объясняется тем, что пища в нем не задерживается, а быстро проходит в желудок. Если даже какие-то частицы задерживаются в стенках органа, то выпиваемая жидкость и проглатываемая слюна смывают эти частицы, проталкивая их в желудок.

Отсюда становится понятным присутствие в стенках пищевода скоплений диффузной лимфо-

идной ткани, в которой в любой момент могут образоваться лимфоидные узелки [4].

Достаточно большое количество плазмоблас-тов и плазматических клеток в возрасте 6 месяцев связано с выработкой иммуноглобулинов, особенно ^ А. Он обладает чрезвычайно важными свойствами, необходимыми для защиты слизистых оболочек, — не допускает прилипания чужеродных веществ к эпителиоцитам [5].

Изменения клеточного состава соответствуют росту и развитию лимфоидной ткани стенок пищевода и желудка. После рождения в лимфоидных узелках идет рост и иммунологическое созревание. К 6-месяцам возрастает число им-мунобластов, плазмобластов, плазматических клеток до 5—9%. У 2—3-летних свиней регистрируется угасание выработки иммунокомпетентных клеток, увеличивается количество ретикулярных клеток до 17%.

Проанализировав вышеизложенное, можно сделать следующие выводы:

1. В 6-месячном возрасте в солитарных лимфоидных узелках у поросят сформирован герминативный центр и обособлен купол. Главными клетками лимфоидных узелков у свиней являются лимфоциты. Их число колеблется от 68 до 90%.

2. Вторичными клетками по количеству являются ретикулоциты, причем большая их часть находится в куполе и достигает до 17%.

3. Иммунобласты (1—5%), плазмобласты (1—9%), незрелые и зрелые плазматические клетки (1% и 1—5% соответственно), митотически делящиеся клетки (0,3—3%), макрофаги (1—4%) немногочисленны и наиболее часто встречаются в герминативных центрах.

4. Количество иммунобластов, плазмобластов, зрелых плазмоцитов с возрастом увеличивается и в 6-месячном возрасте составляет 5—9%, а затем снижается, и к 2—3 годам число их достигает 0,3—2%.

Литература

1. Алаотс, Я.В. О фило- и онтогенетическом аспекте иммунитета // Сб. науч. тр. Эстонской с.-х. академии, 1983. Т. 141. С. 11-19.

2. Стефанов, С.Б. Ускоренный способ количественного сравнения морфологических признаков: методические рекомендации. Благовещенск: РИО Амурупрполиграфиздата, 1988. 27 с.

3. Катинас, Г.С. Динамика количества клеток лимфоидного ряда в паракортикальной зоне лимфатических узлов у мышей С57В / Г.С. Катинас, О.Г. Ляшко, И.А. Баженова // Временная и пространственная организация тканей. Л.: Изд. 1-го Лен. мед. ин-та, 1981. С. 47-54.

4. Сапин, М.Р. Иммунные структуры пищеварительной системы. М.: Медицина, 1987. 224 с.

5. Аруин, Л.И. Морфологическая диагностика болезней желудка и кишечника / Л.И. Аруин, Л.Л. Капуллер, В.А. Исаков. М.: Триада — Х, 1998. 496 с.