ПИРИДИН-2-ИЛЬНЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ В КАЧЕСТВЕ ИММУНОМОДУЛИРУЮЩИХ АГЕНТОВ
PYRIDIN-2-YL DERIVATIVES AS IMMUNOMODULATORY AGENTS

Область изобретения
Настоящее изобретение относится к агонистам S1P1/EDG1 рецептора (липид-активируемый, сопряженный с G-белком, специфичный в отношении сфингозин-1-фосфата рецептор) формулы (I) и их применению в качестве активных ингредиентов при получении фармацевтических композиций. Изобретение также касается родственных аспектов, включающих способы получения соединений, фармацевтические композиции, содержащие соединение формулы (I), и их применение в качестве соединений, улучшающих сосудистую функцию, и в качестве иммуномодулирующих агентов, либо самостоятельно, либо в комбинации с другими активными соединениями или методами лечения.
Предпосылки создания изобретения
Человеческая иммунная система призвана защищать организм от посторонних микроорганизмов и субстанций, вызывающих инфекцию или болезнь. Комплексные регуляторные механизмы обеспечивают направленность иммунного ответа против внедрившейся субстанции или организма, но не направленного против хозяина. В некоторых случаях в таких контрольных механизмах нарушается регуляция, что может приводить к возникновению аутоиммунных ответов. Следствием неконтролируемого ответа на воспаление является серьезная опасность для органа, клетки, ткани или сустава. При современных методах лечения иммунная система в таких случаях в целом обычно подавляется, но при этом и способность организма реагировать на инфекцию также подвергается серьезному риску. Типичные лекарства, применяемые в этом случае, включают азатиоприн, хлорамбуцил, циклофосфамид, циклоспорин или метотрексат. Кортикостероиды, которые ослабляют воспаление и подавляют иммунный ответ, могут вызывать побочные эффекты при длительном лечении. Нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП) могут уменьшать боль и воспаление, однако, они также проявляют нежелательные побочные эффекты. Альтернативные методы лечения включают применение агентов, активирующих или блокирующих цитокиновую передачу сигнала.
Орально активные соединения с иммуномодулирующими свойствами, без опасных иммунных ответов и с пониженными побочными эффектами значительно улучшают современные методы лечения воспалительных заболеваний.
В области трансплантации органов иммунный ответ хозяина должен быть супрессирован для предотвращения отторжения органа. Трансплантируемый орган реципиента может подвергаться риску частичного отторжения даже при использовании иммунодепрессивных лекарств. Отторжение чаще всего происходит в первые несколько недель после трансплантации, но случаи отторжения могут наступить также и спустя нескольких месяцев или даже лет после трансплантации. Комбинации вплоть до трех или четырех лекарственных препаратов, используемых вместе, максимально защищают от отторжения и при этом минимизируют побочные эффекты. Современные стандартные лекарства, используемые для лечения отторжения трансплантируемых органов, входят во взаимодействие с дискретным метаболизмом при активации Т-типа или В-типа лимфоцитов. Примерами таких лекарств служат циклоспорин, даклицумаб, вазиликсимаб, эверолимус или FK506, которые взаимодействуют с процессами цитокиновой секреции или передачи сигнала; азатиоприн или лефлуномид, которые ингибирует синтез нуклеотидов; или 15-деоксиспергуалин, являющийся ингибитором дифференцировки лейкоцитов.
Наилучшие результаты, полученные при иммуносупрессивной терапии крови, относятся к действию, оказываемому этими лекарственными препаратами; однако генерализованная иммуносупрессия, которая достигается с помощью этих лекарств, ослабляет иммунную защиту организма против инфекции и злокачественных новообразований. Кроме того, стандартные иммуносупрессивные лекарства часто используются в больших дозах и могут быть причиной или ускорять повреждение органа.
Описание изобретения
Настоящее изобретение предлагает новые соединения формулы (I), которые являются агонистами для G белок-сопряженного рецептора S1P1/EDG1 и обладают сильнодействующим и продолжительным иммуномодулирующим эффектом, который достигается посредством сокращения числа циркулирующих и инфильтрацирующих Т- и В-лимфоцитов, без оказания при этом повреждающего воздействия на их созревание, память или экспансию. Сокращение циркуляции Т- и В-лимфоцитов в результате S1P1/EDG1 агонизма, возможно в комбинации с наблюдаемым улучшением функции эндотелиального клеточного слоя, ассоциируемого с S1P1/EDG1 активацией, делает возможным применение таких соединений для лечения неконтролируемой воспалительной болезни и улучшения сосудистой функциональности.
Соединения по настоящему изобретению могут применяться самостоятельно или в комбинации со стандартными лекарственнями средствами, ингибирующими Т-клеточную активацию, предоставляя новую иммуномодулирующую терапию с пониженной предрасположенностью к инфекциям по сравнению со стандартной иммуносупрессивной терапией. Кроме того, соединения по настоящему изобретению могут применяться в комбинации с пониженными дозами лекарств, традиционно используемых в иммуносупрессивной терапии для достижения иммуномодулирующей активности, что является очень важным, учитывая, что снижение повреждения пересаженного органа ассоциируется с применением более высоких доз иммуносупрессивных лекарств. Результаты наблюдения по улучшению функции эндотелиального клеточного слоя, ассоциируемого с S1P1/EDG1 активацией, дополнительно свидетельствуют в пользу рассматриваемых соединений в связи с вызываемым ими улучшением сосудистой функции.
50
Нуклеотидная и аминокислотная последовательности для человеческого S1P1/EDG1 рецептора известны из области техники по публикациям, например, Hla Т., and Maciag Т., J. Biol. Chem., 265 (1990), 9308-9313; WO 91/15583 (опубликован 17 октября 1991 г.); WO 99/46277 (опубликован 16 сентября 1999 г.). Потенциальная возможность и эффективность соединений формулы (I) исследовались с помощью GTPγS анализа по определению EC величин и посредством измерения циркулирующих лимфоцитов у крыс после орального введения, соответственно (см. в примерах).
i) Изобретение относится к новым пиридиновым соединениям формулы (I)
где
А представляет собой
,  или
где звездочками обозначена связь, через которую осуществляется присоединение к пиридиновой группе формулы (I);
1
2
3
2-5
1-4
R представляет собой метил, этил или метоксигруппу; R представляет собой водород; и R представляет собой Салкил или Салкоксигруппу; или
1
2
3
2-5
1-4
R представляет собой Салкил или Салкоксигруппу; R представляет собой водород; и R представляет собой метил или этил; или
1
2
3
3-5
R представляет собой метил, этил или метоксигруппу; R представляет собой Салкил; и R представляет собой водород;
4
R представляет собой водород или метоксигруппу;
5
1-3
R представляет собой водород, Cалкил или метоксигруппу;
6
61
62
61
62
61
62
63
63
64
64
2
2
n
2-4
1-2
1-2
2
2
n
1-5
1-5
2
2
1
5
1-5
1-5
2
2
n
2
2
2
2
2
2
n
2
2
R представляет собой -CH-(CH)-CONRR, 1-(3-карбоксиазетидинил)-3-пропионил, 1-(2-карбоксипирролидинил)-3-пропионил, 1-(3-карбоксипирролидинил)-3-пропионил, гидроксигруппу, гидроксиСалкоксигруппу, ди-(гидроксиСалкил)-Cалкоксигруппу, 2,3-дигидроксипропоксигруппу, -OCH-(CH)-NRR, 2-[(азетидин-3-карбоновой кислоты)-1-ил]этоксигруппу, 2-[(Салкиловый эфир азетидин-3-карбоновой кислоты)-1-ил]этоксигруппу, 2-[(пирролидин-3-карбоновая кислота)-1-ил]этоксигруппу, 2-[(Салкиловый эфир пирролидин-3-карбоновой кислоты)-1-ил]этоксигруппу, -OCH-CH(OH)-CH-NRR, 3-[(азетидин-3-карбоновая кислота)-1-ил]-2-гидроксипропоксигруппу, 3-[(C-алкиловый эфир азетидин-3-карбоновой кислоты)-1-ил]-2-гидроксипропоксигруппу, 2-гидрокси-3-[(пирролидин-3-карбоновая кислота)-1-ил]пропоксигруппу, 2-гидрокси-3-[(Салкиловый эфир пирролидин-3-карбоновой кислоты)-1-ил]пропоксигруппу, 2-гидрокси-3-[(пирролидин-2-карбоновая кислота)-1-ил]пропоксигруппу, 2-гидрокси-3-[(Салкиловый эфир пирролидин-2-карбоновой кислоты)-1-ил]пропоксигруппу, -ОСН-(СН)-NHSOR, -OCH-CH(OH)-CH-NHSOR, -OCH-(CH)-NHCOR или -ОСН-СН(ОН)- CH-NHCOR;
61
1-5
1
5
R представляет собой водород, метил, этил, 2-гидроксиэтил, карбоксиметил, 1-(Салкилкарбокси)метил, 2-карбоксиэтил, 2-(C-алкилкарбокси)этил, 2-аминоэтил или 2-метиламйноэтил;
62
R представляет собой водород или метил;
63
1-3
R представляет собой Cалкил, метиламиногруппу, этиламиногруппу или диметиламиногруппу;
64
R представляет собой гидроксиметил, 2-гидроксиэтил, аминометил, метиламинометил, 2-аминоэтил или 2-метиламиноэтил;
n представляет собой целое число 1 или 2; и
7
R представляет собой водород, метил или хлор.
Общие термины, используемые в данном описании выше и далее, в рамках данного изобретения, предпочтительно имеют следующие значения, если не указано иначе.
x-y
1-5
1-5
Термин «Cалкил», где x и y каждый обозначает целое число, относится к насыщенным, линейным или разветвленным алкильным группам, содержащим от x до y атомов углерода. Например, Салкильная группа содержит от одного до пяти атомов углерода. Характерные примеры Салкильных групп включают метил, этил, н-пропил, н-бутил, изобутил, н-пентил, 3-пентил и изопентил. Предпочтительными примерами
1-3
2-5
2-4
Cалкильных групп являются метил и этил. Предпочтительными примерами Салкильных групп являются этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, н-пентил, 3-пентил и изопентил. Предпочтительными примерами Салкильных групп являются этил, н-пропил, изопропил, н-бутил и изобутил.
x-y
Термин «Cалкоксигруппа» (x и y каждый обозначает целое число) относится к алкил-O-группе, где алкильная группа относится к линейной или разветвленной углеводородной цепи, содержащей от x до y атомов углерода.
Например,
1-4
1-4
2-4
1-3
Салкоксигруппа содержит от одного до четырех атомов углерода и включает метоксигруппу, этоксигруппу, н-пропоксигруппу, изопропоксигруппу, н-бутоксигруппу, изобутоксигруппу, втор-бутоксигруппу и трет-бутоксигруппу. Предпочтительными примерами Салкоксигрупп являются этоксигруппа, пропоксигруппа, изопропоксигруппа и изобутоксигруппа. Предпочтительными примерами Салкоксигрупп являются этоксигруппа, н-пропоксигруппа и изопропоксигруппа. Примерами Cалкоксигрупп являются метоксигруппа, этоксигруппа, н-пропоксигруппа и изопропоксигруппа.
ii) Другой вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно варианту i), где А представляет собой
или
где звездочками обозначена связь, через которую осуществляется присоединение к пиридиновой группе формулы (I).
iii) Другой вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно варианту i), где А представляет собой
где звездочками обозначена связь, через которую осуществляется присоединение к пиридиновой группе формулы (I).
1
2
3
2
4
1-3
iv) Другой вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-iii), где R представляет собой метил или метоксигруппу, R представляет собой водород, и R представляет собой С-алкил или Cалкоксигруппу.
1
2
3
2-4
1
3
v) Другой вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-iii), где R представляет собой метил, R представляет собой водород, и R представляет собой Салкил или С-алкоксигруппу.
1
2
3
2
4
1-3
vi) Другой вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-iii), где R представляет собой C-алкил или Салкоксигруппу, R представляет собой водород и R представляет собой метил.
1
2
3
2
4
vii) Другой вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-iii), где R представляет собой С-алкил, R представляет собой водород и R представляет собой метил.
1
2
3
2-4
viii) Другой вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-iii), где R представляет собой метил, R представляет собой Салкил и R представляет собой водород.
4
5
7
ix) Другой вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-viii), где, по крайней мере, одна из групп R, R и R отличается от водорода.
4
5
7
x) Другой особый вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-viii), где Rпредставляет собой метоксигруппу, и R и R представляют собой водород.
4
5
7
1-3
xi) Другой особый вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-viii), где Rпредставляет собой водород, R представляет собой Cалкил или метоксигруппу, и R представляет собой метил или хлор.
4
5
7
1-2
xii) Другой особый вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-viii), где Rпредставляет собой водород, R представляет собой Салкил или метоксигруппу, и R представляет собой метил или хлор.
4
5
7
xiii) Другой особый вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-viii), где Rпредставляет собой водород, R представляет собой этил или метоксигруппу, и R представляет собой метил или хлор.
4
5
7
xiv) Другой особый вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-viii), где Rпредставляет собой водород, R представляет собой этил, и R представляет собой метил.
6
61
62
61
62
61
62
64
2
2
n
1-2
1-2
2
2
n
1-5
2
2
1
3
1-5
1-5
2
2
xv) Другой вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-xiv), где R представляет собой -СН-(CH)-CONRR, 1-(3-карбоксиазетидинил)-3-пропионил, 1-(2-карбоксипирролидинил)-3-пропионил, 1-(3-карбоксипирролидинил)-3-пропионил, ди-(гидроксиСалкил)-Салкоксигруппу, 2,3-дигидроксипропоксигруппу, -OCH-(CH)-NRR, 2-[(азетидин-3-карбоновая кислота)-1-ил]этоксигруппу, 2-[(С1-5алкиловый эфир азетидин-3-карбоновой кислоты)-1-ил]этоксигруппу, 2-[(пирролидин-3-карбоновая кислота)-1-ил]этоксигруппу 2-[(Салкиловый эфир пирролидин-3-карбоновой кислоты)-1-ил]этоксигруппу, -OCH-CH(OH)-CH-NRR, 3-[(азетидин-3-карбоновая кислота)-1-ил]-2-гидроксипропоксигруппу, 3-[(С-алкиловый эфир азетидин-3-карбоновой кислоты)-1-ил]-2-гидроксипропоксигруппу, 2-гидрокси-3-[(пирролидин-3-карбоновая кислота)-1-ил]пропоксигруппу, 2-гидрокси-3-[(Салкиловый эфир пирролидин-3-карбоновой кислоты)-1-ил]пропоксигруппу, 2-гидрокси-3-[(пирролидин-2-карбоновая кислота)-1-ил]пропоксигруппу, 2-гидрокси-3-[(Салкиловый эфир пирролидин-2-карбоновой кислоты)-1-ил]пропоксигруппу или -ОСН-СН(ОН)-CH-NHCOR.
6
61
62
61
62
64
2
2
n
2
2
1
5
1-5
1-5
2
2
xvi) Другой вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-xiv), где R представляет собой -СН-(CH)-CONRR, 1-(3-карбоксиазетидинил)-3-пропионил, 1-(2-карбоксипирролидинил)-3-пропионил, 1-(3-карбоксипирролидинил)-3-пропионил, 2,3-дигидроксипропоксигруппу, -OCH-CH(OH)-CH-NRR, 3-[(азетидин-3-карбоновая кислота)-1-ил]-2-гидроксипропоксигруппу, 3-[(C-алкиловый эфир азетидин-3-карбоновой кислоты)-1-ил]-2-гидроксипропоксигруппу, 2-гидрокси-3-[(пирролидин-3-карбоновая кислота)-1-ил]пропоксигруппу, 2-гидрокси-3-[(Салкиловый эфир пирролидин-3-карбоновой кислоты)-1-ил]пропоксигруппу, 2-гидрокси-3-[(пирролидин-2-карбоновая кислота)-1-ил]пропоксигруппу, 2-гидрокси-3-[(Салкиловый эфир пирролидин-2-карбоновой кислоты)-1-ил]пропоксигруппу или -ОСН-СН(ОН)-CH-NHCOR.
6
64
2
2
xvii) Другой вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-xiv), где R представляет собой 2,3-дигидроксипропоксигруппу, 3-[(азетидин-3-карбоновая кислота)-1-ил]-2-гидроксипропоксигруппу, 2-гидрокси-3-[(пирролидин-3-карбоновая кислота)-1-ил]пропоксигруппу, 2-гидрокси-3-[(пирролидин-2-карбоновая кислота)-1-ил]пропоксигруппу или -OCH-CH(OH)-CH-NHCOR.
6
64
2
2
xviii) Другой вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-xiv), где Rпредставляет собой 2,3-дигидроксипропоксигруппу или -ОСН-СН(ОН)-СН-NHCOR.
6
64
2
2
xix) Другой вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-xiv), где R представляет собой -OCH-CH(OH)-CH-NHCOR.
61
хх) Другой вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-xvi), где R представляет собой метил, 2-гидроксиэтил, карбоксиметил, 2-аминоэтил или 2-метиламиноэтил.
62
xxi) Другой вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-xvi) и хх), где R представляет собой водород.
63
xxii) Другой вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-xiv) и xx)-xxi), где R представляет собой метил.
64
xxiii) Другой вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-xxii), где Rпредставляет собой гидроксиметил.
xxiv) Другой вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно одному из вариантов i)-xvi) и xx)-xxiii), где n представляет собой целое число 1.
xxv) Другой вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно варианту i), где
А представляет собой  или ,
где звездочками обозначена связь, через которую осуществляется присоединение к пиридиновой группе формулы (I);
1
2
3
4
R представляет собой метил или метоксигруппу; R представляет собой водород; и R представляет собой Салкил; или
1
2
3
4
R представляет собой Салкил; R представляет собой водород; и Rпредставляет собой метил; или
1
2
R представляет собой метил; R представляет собой С4алкил; и R представляет собой водород;
4
R представляет собой водород;
5
R представляет собой метил или этил;
6
61
62
61
62
64
2
2
n
2
2
2
R представляет собой -CH-(CH)-CONRR, гидроксигруппу, 2,3-дигидроксипропоксигруппу, -OCH-CH(OH)-CH-NRR или -ОСН-СН(ОН)-CH2-NHCOR;
61
R представляет собой водород, метил, 2-гидроксиэтил, карбоксиметил, 2-карбоксиэтил или 2-аминоэтил;
62
R представляет собой водород;
64
R представляет собой гидроксиметил;
7
n представляет собой целое число 1; и R представляет собой метил.
xxvi) Другой вариант осуществления изобретения относится к производным пиридина согласно варианту i), где А представляет собой
,  или
где звездочками обозначена связь, через которую осуществляется присоединение к пиридиновой группе формулы (I);
1
2
3
2-5
R представляет собой метил или метоксигруппу; R представляет собой водород; и R представляет собой Салкил такой, как изобутил или 1-этилпропил; или
1
2
3
2-5
R представляет собой Салкил такой, как изобутил; R представляет собой водород; и R представляет собой метил; или
1
2
3
3-5
R представляет собой метил; R представляет собой Салкил такой, как изобутил; и R представляет собой водород;
R представляет собой водород или метоксигруппу;
5
1-3
R представляет собой водород, Cалкил (такой, как метил, этил или н-пропил), или метоксигруппу;
6
61
62
61
62
61
62
63
63
64
64
2
2
n
2-4
1
2
1-2
2
2
n
2
2
2
2
n
2
2
2
2
2
2
n
2
2
R представляет собой -CH-(CH)-CONRR, гидроксигруппу, гидрокси-Салкоксигруппу (такую, как 2-гидроксиэтоксигруппа), ди-(гидрокси-С-алкил)-Салкоксигруппу (такую, как ди-(гидроксиметил)метоксигруппа или 3-гидрокси-2-гидроксиметилпропоксигруппа), 2,3-дигидроксипропоксигруппу, -OCH-(CH)-NRR, 2-[(азетидин-3-карбоновая кислота)-1-ил]этоксигруппу, -OCH-CH(OH)-CH-NRR,-OCH-(CH)-NHSOR,-OCH-CH(OH)-CH-NHSOR, -OCH-(CH)-NHCOR или -OCH-CH(OH)-CH-NHCOR;
61
1-5
R представляет собой водород, метил, 2-гидроксиэтил, 2-карбоксиэтил, 2-(Салкилкарбокси)этил (такой, как 2-(метилкарбокси)этил), или 2-аминоэтил;
62
R представляет собой водород или метил;
63
1-3
R представляет собой Cалкил (такой, как этил), или диметиламиногруппу;
64
R представляет собой гидроксиметил или метиламинометил;
n представляет собой целое число 1; и
7
R представляет собой водород, метил или хлор.
Соединения формулы (I) могут содержать один или более стереогенных или асимметрических центров таких, как один или более асимметрических атомов углерода. Соединения формулы (I) могут, таким образом, присутствовать в виде смеси стереоизомеров или, предпочтительно, в виде чистых стереоизомеров. Смеси стереоизомеров могут быть разделены с использованием методов, известных специалистам в области техники.
При использовании множественной формы соединений, солей, фармацевтических композиций, болезней и им подобных терминов, имеется в виду также единичная форма соединения, соли или им подобные термины.
Любая ссылка выше и далее на соединение формулы (I) подразумевает также ссылку на соли, особенно фармацевтически приемлемые соли соединения формулы (I), и ее использование является уместным и целесообразным.
Термин "фармацевтически приемлемые соли" относится к нетоксичным, аддитивным солям неорганической или органической кислоты и/или основания. Ссылка может быть сделанапубликацию "Salt selection for basic drugs", Int. J. Pharm.(1986), 33,201-217.
Примеры пиридиновых соединений формулы (I) выбирают из группы, включающей:
N-((S)-3-{2-этил-4-[5-(6-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}-2-гидроксипропил)-2-гидроксиацетамид; N-((S)-3-{2-этил-4-[5-(4-изобутил-6-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}-2-гидроксипропил)-2-гидроксиацетамид;
2-гидрокси-N-((R)-2-гидрокси-3-{4-[5-(6-изобутил-4-метоксипиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-2,6-диметилфенокси}пропил)ацетамид;
2-гидрокси-N-((S)-2-гидрокси-3-{4-[5-(6-изобутил-4-метоксипиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-2,6-диметилфенокси}пропил)ацетамид;
N-((S)-3-{2-этил-4-[5-(6-изобутил-4-метоксипиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}-2-гидроксипропил)-2-гидроксиацетамид;
(S)-3-{4-[5-(6-изобутил-4-метоксипиридин-2-ил)-[1,3,4]оксадиазол-2-ил]-2,6-диметилфенокси}пропан-1,2-диол;
(R)-3-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}пропан-1,2-диол;
(S)-3-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}пропан-1,2-диол;
N-((S)-3-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}-2-гидроксипропил)-2-гидроксиацетамид;
3-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенил}-N-(2-гидроксиэтил)пропионамид; и
3-(3-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенил}пропиониламино)пропионовая кислота.
Следущие примеры пиридиновых соединений формулы (I) выбирают из:
2-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}этиламин;
3-(2-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}этиламин)пропионовая кислота;
N-(2-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}этил)-2-гидроксиацетамид;
2-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}пропан-1,3-диол;
(S)-1-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}-3-(2-гидроксиэтиламин)пропан-2-ол;
((S)-3-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}-2-гидроксипропил)амид этансульфоновой кислоты;
3-((S)-3-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}-2-гидроксипропиламино)пропионовая кислота;
(S)-3-(2-этил-4-{5-[6-(1-этилпропил)-4-метилпиридин-2-ил]-[1,2,4]оксадиазол-3-ил}-6-метилфенокси)пропан-1,2-диол;
N-[(S)-3-(2-этил-4-{5-[6-(1-этилпропил)-4-метилпиридин-2-ил]-[1,2,4]оксадиазол-3-ил}-6-метилфенокси)-2-гидроксипропил]-2-гидроксиацетамид. (S)-3-(2-этил-4-{5-[6-(1-этилпропил)-4-метоксипиридин-2-ил]-[1,2,4]оксадиазол-3-ил}-6-метилфенокси)пропан-1,2-диол;
(S)-3-(2-хлор-4-{5-[6-(1-этилпропил)-4-метоксипиридин-2-ил]-[1,2,4]оксадиазол-3-ил}-6-метилфенокси)пропан-1,2-диол;
N-[(S)-3-(2-этил-4-{5-[6-(1-этилпропил)-4-метоксипиридин-2-ил]-[1,2,4]оксадиазол-3-ил}-6-метилфенокси)-2-гидроксипропил]-2-гидроксиацетамид;
N-[(S)-3-(4-{5-[6-(1-этилпропил)-4-метоксипиридин-2-ил]-[1,2,4]оксадиазол-3-ил}-2,6-диметилфенокси)-2-гидроксипропил]-2-гидроксиацетамид;
N-[(S)-3-(2-хлор-4-{5-[6-(1-этилпропил)-4-метоксипиридин-2-ил]-[1,2,4]оксадиазол-3-ил}-6-метилфенокси)-2-гидроксипропил]-2-гидроксиацетамид;
N-[(S)-3-(4-{5-[6-(1-этилпропил)-4-метоксипиридин-2-ил]-[1,2,4]оксадиазол-3-ил}-2-метокси-6-метилфенокси)-2-гидроксипропил]-2-гидроксиацетамид; и
N-((2S)-3-{2-этил-4-[3-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-5-ил]-6-метилфенокси}-2-гидроксипропил)-2-гидроксиацетамид.
Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли могут быть применены в качестве лекарственных средств, например, в форме фармацевтических композиций для энтерального или парентерального введения, и являются пригодными для уменьшения количества циркулирующих лимфоцитов и для профилактики и/или лечения болезней или заболеваний, связанных с активированной иммунной системой.
Приготовление фармацевтических композиций может быть осуществлено с использованием методов, известных любому специалисту в области техники (см., например: Remington, The Science and Ppactice of Pharmacy, 21st Edition (2005), Part 5, "Pharmaceutical Manufacturing" [published by Lippincott Williams & Wilkins]) посредством введения соединений формулы (I) или их фармацевтически приемлемых солей, необязательно в комбинации с другими терапевтически полезными субстанциями, в лекарственную форму вместе с соответствующим, нетоксичным, инертным, фармацевтически приемлемым твердым или жидким веществом, используемым в качестве носителя, и, если необходимо, стандартными фармацевтическими наполнителями.
Фармацевтические композиции, включающие соединение формулы (I) применимы для профилактики и/или лечения заболеваний или нарушений, ассоциированных с активированной иммунной системой.
Такие заболевания или нарушения, ассоциированные с активированной иммунной системой, для профилактики и/или лечения которых могут применяться соединения формулы (I), включают отторжение пересаженных органов, тканей или клеток; болезни «трансплантат против хозяина», возникающие при трансплантации; аутоиммунные синдромы, включая ревматоидный артрит; системную красную волчанку; антифосфолипидный синдром; тироидит Хашимото; лимфотический тироидит; рассеянный склероз; тяжелую псевдопаралитическую миастению; диабет типа I; увеит (воспаление сосудистой оболочки глаза); эписклерит; склерит; болезнь Кавасаки, увеоритинит; задний увеит; увеит, связанный с болезнью Бехчета; синдром увеоменингита; аллергический энцефаломиелит; хроническую аллотрансплантатную васкулопатию; постинфекционные аутоиммунные болезни, включая ревматическую лихорадку и постинфекционный гломерулонифрит; воспалительные и гиперпролиферативные кожные болезни; псориаз; псориатический артрит; атопический дерматит; миопатию; миозит; остеомиелит; контактный дерматит; экзематозный дерматит; себоррейный дерматит; плоский лишай; пузырчатку; буллезную пузырчатку; врожденный буллезный эпидермолиз; крапивницу; ангиодему; васкулит; эритему; кожную эозинофилию; угри; склеродерму; гнездную алопецию; кератоконьюктивит; хронический двухсторонний коньюктивит; кератит; герпический кератит; эпителиальную дистрофию роговицы; лейкому роговицы; глазную пузырчатку; язву Мурена; язвенный керотит; склерит; офтальмопатию Гравса; синдром Вогта-Коунаги-Харада; саркоидоз; сенную лихорадку; обратимую обструктивную болезнь дыхательных путей; бронхиальную астму; аллергическую астму; врожденную астму; полученную извне астму; пылевую астму; хроническую или застарелую астму; позднюю астму и гипервосприимчивость дыхательных путей; бронхиолит; бронхит; эндометриоз; орхит; язву желудка; ишемические болезни кишечника; воспалительные болезни кишечника; некротический энтероколит; повреждения кишечного тракта, связанные с термальными ожогами; болезнь брюшины; проктит; эозинофильный гастроэнтерит; мастоцитоз; болезнь Крона; язвенный колит; сосудистые повреждения, вызванные ишемической болезнью и тромбозом; атеросклероз; тучное сердце; миокардит; инфаркт миокарда; синдром воспаленной аорты; общий упадок сил, вызванный вирусной болезнью; тромбоз сосудов; мигрень; ринит; экзему; интерстициальный нефрит; IgA-индуцированную нефропатию; синдром Гудпасчера; гемолитико-уремический синдром; диабетическую нефропатию; гломерулосклероз; гломерулонефрит; табулоинтерстициальный нефрит; интерстициальный цистит; дерматомиозит; синдром Гийена-Барре; болезнь Миньера; полиневрит; мультиплетный неврит; миелит; мононеврит; радикулопатию; гипертиоридизм; базедову болезнь; тиротоксикоз; беспримесную красноклеточную аплазию; апластическую анемию; гипопластическую анемию; идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру; аутоиммунную гемолитическую анемию; аутоиммунную тромбоцитопению; агранулоцитоз; злокачественную анемию; мегалобластическую анемию; анеритроплазию; остеопароз; фиброидное легкое; идиопатическую интерстициальную пневмонию; дерматит; лейкодерму vulgaris; диффузную кератому vulgaris; фотоаллергическую чувствительность; кожную Т-клеточную лимфому; нодозный полиартрит; хорею Хантингтона; хорею Сиденхама; миокардоз; миокардит; склеродерму; гранулему Вегенера; синдром Шегрена; адипоз; эозинофильный фасцит; повреждения десен, периодонта, альвеольной соединительной ткани, зубной субстанции при лечении; мужскую очаговую алопецию или старческую алопецию; мускульную дистрофию; пиодерму; синдром Сезари; гипофизит; хроническую недостаточность надпочечников; болезнь Аддисона; ишемически-реперфузионное повреждение органов, имеющее место при хранении; эндотоксический шок; псевдомембранный колит; колит, вызываемый лекарством или радиацией; острую ишемическую почечную недостаточность; хроническую почечную недостаточность; рак легкого; злокачественность лимфоидного происхождения; острую или хроническую лимфотическую лейкемию; лимфому; энфизему легких; катаракту; сидероз; воспаление сетчатой оболочки глаза; старческую пятнистую дегенерацию; рубцевание стекловидного тела; щелочной ожог роговицы; дерматитную эритему; буллезный дерматит; цементный дерматит; воспаление десен; периодонтит; сепсис; панкреатит; болезнь периферийных артерий; карциогенез; твердые раковые опухоли; метастаз карциномы; гепербаропатию; аутоиммунный гепатит; первичный цирроз печени; склеротический холангит; частичную резекцию печени; острый некроз печени; цирроз; алкогольный цирроз; печеночную недостаточность; скоротечную печеночную недостаточность; скрытую печеночную недостаточность; и "нацеленную на хроническую" печеночную недостаточность.
Предпочтительные заболевания и нарушения, подлежащие лечению и/или профилактике с помощью соединений формулы (I), выбирают из группы, включающей отторжение пересаженных органов таких, как почка, печень, сердце, легкое, поджелудочная железа, роговица и кожа; болезни «трансплантат против хозяина», возникающие при трансплантации клеток спинного мозга; аутоиммунные синдромы, включающие ревматоидный артрит, рассеянный склероз, воспалительные заболевания кишечника такие, как болезнь Крона и язвенный колит, псориаз, псориатический артрит, тироидит такой, как тироидит Хашимото, увеоретинит; атонические болезни такие, как ринит, коньюктивит, дерматит; астму; диабет типа I; постинфекционные аутоиммунные болезни, включая ревматоидную лихорадку и постинфекционный гломерулонефрит; твердые виды рака и опухолевое метастазирование.
Особенно предпочтительные заболевания или нарушения, подлежащие лечению и/или профилактике с помощью соединений формулы (I), выбирают из группы, включающей отторжение пересаженных органов таких, как почка, печень, сердце и легкое; болезнь «трансплантат против хозяина», возникающуя при трансплантации клеток спинного мозга; аутоиммунные синдромы, включающие ревматоидный артрит, рассеянный склероз, псориаз, псориатический артрит, болезнь Крона и тироидит Хашимото; и атопический дерматит. Наиболее предпочтительными болезнями или заболеваниями, подлежащими лечению и/или профилактике с помощью соединений формулы (I), являются рассеянный склероз и псориаз.
Настоящее изобретение относится также к способу профилактики или лечения болезней или заболеваний, упомянутых в описании выше, заключающемуся во введении субъекту фармацевтически активного количества соединения формулы (I).
Кроме того, соединения формулы (I) также применяются в комбинации с одним или несколькими иммуномодулирующими агентами, используемыми для профилактики и/или лечения болезней или заболеваний, упомянутых в описании выше. Согласно предпочтительному варианту осуществления изобретения, названные агенты выбираются из группы, включающей иммуносупрессанты, кортикостероиды, НПВП, цитотоксические лекарства, ингибиторы молекулярной адгезии, цитокины, ингибиторы цитокинов, антагонисты рецептора цитокина и рекомбинантные рецепторы цитокина.
Настоящее изобретение относится также к применению соединения формулы (I) для получения фармацевтической композиции, необязательно для применения в комбинации с одним или несколькими иммуномодулирующими агентами, используемыми для профилактики и/или лечения заболеваний или нарушений, упомянутых в описании выше.
Соединения формулы (I) могут быть получены методами, приведенными ниже, методами, приведенными в примерах, или аналогичными методами. Оптимальные реакционные условия варьируются в зависимости от применяемых реагентов или растворителей, причем такие условия могут быть выбраны специалистом в области техники с помощью ряда оптимизированных методик.
Соединения формулы (I) по настоящему изобретению могут быть получены согласно общей последовательности реакций, представленной ниже. Далее описаны только некоторые из возможных синтетических путей, приводящих к соединениям формулы (I).
2
3
2
3
3
3
3
4
10
Соединения формулы (I), которые представлены производным 5-пиридин-2-ил-[1,2,4]оксадиазола, получают из соединения структуры (1) в растворителе таком, как ксилол, толуол, бензол, пиридин, ДМФ, ТГФ, диоксан, ДМЭ, дихлорметан, уксусная кислота, трифторуксусная кислота, и им подобные, при комнатной или повышенных температурах в присутствии или отсутствии вспомогательных веществ таких, как кислоты (например, ТФК, уксусная кислота, HCl, и им подобные), основания (например, NaH, NaOAc, NaCO, KCO, NEt, и им подобные), соли тетраалкиламмония, или водопоглащающие агенты (например, оксалилхлорид, ангидрид карбоновой кислоты, POCl, PCl, PO, молекулярные сита, реагент Бургесса, и им подобные) (см., например, А.R. Gangloff, J. Litvak, E.J. Shelton, D. Sperandio, V.R. Wang, K.D. Rice, Tetrahedron Lett., 42 (2001), 1441-1443; Т. Suzuki, K. Iwaoka, N. Imanishi, Y. Nagakura, K. Miyta, H. Nakahara, M. Ohta, T. Mase, Chem. Pharm. Bull., 47 (1999), 120-122; R.F. Poulain. A.L. Tartar, B.P. Deprez, Tetrahedron Lett., 42 (2001), 1495-1498; R.M. Srivastava, F.J.S. Oliveira, D.S. Machado, R.M. Souto-Maior, Synthetic Commun., 29 (1999), 1437-1450; E.O. John, J.M. Shreeve, Inorganic Chemistry, 27 (1988), 3100-3104; В. Kaboudin, K. Navaee, Heterocycles, 60 (2003), 2287-2292).
3
2
3
Соединения структуры (1) могут быть получены реакцией соединения структуры (2) с соединением структуры (3) в растворителе таком, как ДМФ, ТГФ, ДХМ и им подобные, в присутствии или отсутствии одного или более конденсирующих агентов таких, как ТБТУ, ДЦК, ЭДК, ГБТУ, КДИ и им подобных, в присутствии или отсутствии основания такого, как NEt, ДИПЭА, NaH, KCO, и им подобных (см., например, A. Hamze, J.-F. Hernandez, P. Fulcrand, J. Martinez, J. Org. Chem. 68 (2003) 7316-7321; и литература, цитированная выше).
Соединения формулы (I), которые представлены производным 3-пиридин-2-ил-[1,2,4]оксадиазола, получают аналогичным образом (см., например, С.Т. Brain, J.M. Paul, Y. Loong, P.J. Oakley, Tetrahedron Lett., 40 (1999) 3275-3278) путем взаимодействия соединения структуры (4) с соединением структуры (5) и последующей циклизацией соответствующего промежуточного гидроксиамидинового сложного эфира.
2
3
2
3
3
Соединения структуры (3) и (4) могут быть получены реакцией соединения структуры (6) и (7), соответственно, с гидроксиламином или одной из его солей в растворителе таком, как МеОН, EtOH, пиридин, и им подобные, в присутствии или отсутствии основания такого, как NaCO, KCO, трет-бутилат калия, NEt, и им подобные (см.,: например, Е. Meyer, А.С. Joussef, H. Gallardo, Synthesis, 2003, 899-905; WO 2004/035538 (Merck & Co., Inc., USA)).
4
7
6
rd
4
7
6
В зависимости от природы присутствующей функциональной группы в остатках R-R, в частности R, в структурах (3), (5) и (7) этим функциональным группам может потребоваться временная защита. Соответствующие защитные группы известны специалистам в области техники и включают, например, бензильную или триалкилсилильную группу для защиты спирта, кетальную группу для защиты диола, и т.п. Эти защитные группы могут быть применены согласно стандартным методам (например, Т.W. Greene, P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3 Edition, Wiley New York, 1991; P.J. Kocienski, Protecting Groups, Thieme Stuttgart, 1994). Альтернативно, требуемые остатки R-R, в частности R, могут быть также введены на более поздних стадиях, которые следуют за конденсацией пиридиновых соединений структуры (2) или (4) с фенильными производными структуры (3) или (5), соответственно, с использованием подходящего предшествующего соединения структуры (3) или (5). Фенильные соединения структуры (3) и (5) или их предшественники либо являются коммерчески доступными, либо могут быть получены согласно методам, известным специалистам в области техники.
3
4
4
3
2
5
3
Соединения формулы (I), которые представлены производным 2-пиридин-2-ил-[1,3,4]оксадиазола, получают аналогично реакцией соединения структуры (2) с гидразином (с использованием конденсирующих агентов, таких как ТБТУ, ДЦК, ЭДК, ГБТУ, РуВОР, КДИ, и им подобных) с получением соединения структуры (8), которое затем конденсируют с соединением структуры (5), получая соединение структуры (9). Соединение структуры (9) может быть получено посредством следующей обратной реакционной последовательности, то есть вначале путем конденсации структуры (5) с гидразином с последующей реакцией соответствующего промежуточного гидразида с соединением структуры (2). Дегидратация соединения структуры (9) с образованием требуемого производного 2-пиридин-2-ил-[1,3,4]оксадиазола осуществляется путем обработки соединения структуры (9) реагентом таким, как POCl; CCl и CBr в комбинации с PPh, PO, реагентом Бургесса, и им подобным, в растворителе таком, как толуол, MeCN, диоксан, ТГФ, CHCl, и им подобные, при температурах от 20 до 120°С в присутствии или отсутствии микроволнового облучения, (см., например, М.A. Garcia, S. Martin-Santamaria, M. Cacho, F. Moreno de la Llave, M. Julian, A. Martinez, B. De Pascual-Teresa, A. Ramos, J. Med. Chem. 48 (2005) 4068-4075; С.Т. Brain, J.M. Paul, Y. Loong, P.J. Oakley, Tetrahedron Lett., 40 (1999) 3275-3278).
Альтернативно, связи между пиридиновым или фенильным кольцом и центральным оксадиазольным кольцом могут быть образованы при применении палладиевого катализатора с помощью реакций поперечной конденсации.
Методы, эффективные для превращения соединения структуры (2) или (5) в соединение структуры (6) или (7), соответственно, или наоборот, известны специалистам в области техники.
1
2
3
2
5
Соединения структуры (2), где R представляет собой метил, этил или метоксигруппу, R представляет собой водород и R представляет собой C-алкил (структура 13), могут быть получены путем последовательно проведенных реакций, представленных ниже:
Пиколиновая кислота структуры (13) может быть получена путем обработки соединения структуры (10) (либо коммерчески доступного, либо полученного аналогично методам, описанным в литературе, например, Т. Kaminski, P. Gros, Y. Fort, Eur. J. Org. Chem., 19 (2003) 3855-3860; U. Ziener, E. Breuning, J.-M. Lehn, E. Wegelius, K. Rissanen, G. Baum, D. Fenske, G. Vaughan, Chemistry-A European Journal, 6 (2000) 4132-4139; R.-A. Fallahpour, Synthesis, 2000 1665-1667; В.G. Szczepankiewicz, et al. J. Med. Chem., 49 (2006) 3563-3580) с 2,4,6-тривинил-циклотрибораксаном в условиях проведения реакции Сузуки с образованием соединения структуры (11), которое окисляют и превращают в сложный эфир пиколиновой кислоты структуры (12) (R представляет собой например, метил, этил, изопропил, трет-бутил). Окисление, за которым следует получение сложного эфира коммерчески доступного соединения структуры (14), может также приводить к соединению структуры (12). Соединение структуры (12) затем либо вводят в реакцию поперечной конденсации в условиях проведения реакции Сузуки с использованием подходящего 2,4,6-триалкенил-циклотрибораксана (полученного согласно F. Kerins, D.F. O'Shea, J. Org. Chem., 67 (2002) 4968-4971), гидрируют и омыляют, либо обрабатывают соответствующим алкил-Zn-реагентом в условиях реакции Негиши (см., например, Н. Matsushita, E. Negishi, J. Org. Chem., 47 (1982) 4161-4165) до проведения омыления, получая требуемое соединение структуры (13).
1
2
3
1-4
Соединения структуры (2), где R представляет собой метил, этил или метоксигруппу, R представляет собой водород и R представляет собой Салкоксигруппу (структура 17), могут быть получены путем последовательно проведенных реакций, представленных ниже:
4
Соединение структуры (10) обрабатывают соответствующим спиртом в присутствии основания, предпочтительно, алкоголятом натрия или калия, при температурах в пределах от 0 до 80°С (см., например, С. Burstein, С.W. Lehmann, F. Glorius, Tetrahedron, 61 (2005), 6207-6217; T. Nguyen, M.A. Wicki, V. Snieckus, J. Org. Chem., 69 (2004), 7816-7821), получая соединение структуры (15). Реакция Сузуки соединения структуры (15) с 2,4,6-тривинил-циклотрибораксаном дает доступ к соединению структуры (16), которое может быть окислено, например, с помощью KMnO в ацетоне, до требуемого соединения структуры (17).
1
2
3
2-5
Соединения структуры (2), где R представляет собой Салкил, Rпредставляет собой водород и R представляет собой метил или этил (структура 22), могут быть получены путем последовательно проведенных реакций, представленных ниже:
4
2
2
8
2
4
4
2
4
Так, соединение структуры (18) (либо коммерчески доступное, либо полученное аналогично методам, описанным в литературе, например, J.Р. Simeone et al., Bioorg. Med. Chem. Letters, 12 (2002), 3329-3332; D.L. Comins, N.B. Mantio, J. Org. Chem., 50 (1985), 4410-4411) обрабатывают (NH)SO в смеси метанола, воды и HSO при повышенных температурах (реакция Minisci, см., например, R.В. Katz, J. Mistry, M.B. Mitchell, Synth. Commun., 19 (1989) 317-325; M.A.A. Biyouki, R.A.J. Smith, J.J. Bedford, J.P. Leader, Synth. Commun., 28 (1998) 3817-3825), получая соединение структуры (19). Это соединение может быть окислено в соединение структуры (20) с использованием, например, KMnO в ацетоне. Путем обработки соединения структуры (20) спиртом таким, как метанол, этанол, изопропанол в присутствии кислоты такой, как HSO или HCl, может быть получено соответствующее соединение структуры (21) (R представляет собой, например, метил, этил или изопропил). Соединение структуры (21) затем либо вводят в реакцию поперечной конденсации в условиях проведения реакции Сузуки с использованием подходящего 2,4,6-триалкенил-циклотрибораксана, гидрируют и омыляют, либо обрабатывают соответствующим алкил-Zn-реагентом в условиях проведения реакции Негиши до проведения омыления, получая требуемое соединение структуры (22).
1
2
3
1-4
Соединения структуры (2), где R представляет собой Салкоксигруппу, R представляет собой водород и R представляет собой метил или этил (структура 26), могут быть получены путем последовательно проведенных реакций, представленных ниже:
4
Следовательно, соединение структуры (23) (например, полученное согласно методикам, описанным в публикациях: В.G. Szczepankiewicz et al., J. Med. Chem., 49 (2006) 3563-3580; M. Inouye, M. Waki, H. Abe, J. Am. Chem. Soc., 126 (2004), 2022-2027) вводят в реакцию с 2,4,6-тривинилцикло-трибораксаном, получая соединение структуры (24). Окисление с использованием, например, KMnO в ацетоне, соединения структуры (24) с последующим превращением в сложный эфир приводит к соединению структуры (25) (R = метил, этил, изопропил, трет-бутил, и им подобные). Соединения структуры (25) затем либо вводят в реакцию поперечной конденсации в условиях проведения реакции Сузуки с использованием подходящего 2,4,6-триалкенил-циклотрибораксана, гидрируют и омыляют, либо обрабатывают соответствующим алкил-Zn-реагентом в условиях реакции Негиши до проведения омыления, получая требуемое соединение структуры (26).
1
2
3
3-5
Соединения структуры (2), где R представляет собой метил или этил, Rпредставляет собой Салкил и R представляет собой водород (структура 31), могут быть получены путем последовательно проведенных реакций, поепставленных ниже:
1-4
Так, соединение структуры (27) (либо коммерчески доступное, либо полученное аналогично методам, описанным в литературе, например, Р. Pierrat, Р. Gros, Y. Fort, Synlett, 2004, 2319-2322) вводят в реакцию с 2,4,6-тривинилцикло-трибораксаном в условиях проведения реакции Сузуки с образованием соединения структуры (28), которое окисляют и превращают в сложный эфир, получая соединение структуры (29) (где R представляет собой Салкил). Реакция Сузуки с соответствующим (2,4,6-триалкенил-циклотрибораксаном, гидрирование и омыление, или реакция Негиши с соответствующим алкил-Zn-реагентом с последующим омылением соединения структуры (30) приводит к соединениям структуры (31).
1
2
3
3-5
Соединения структуры (2), где R представляет собой метоксигруппу, Rпредставляет собой Салкил и R представляет собой водород (структура 32), могут быть получены путем последовательно проведенных реакций, представленных ниже:
Посредством применения реакционной последовательности, включающей либо реакцию Сузуки, гидрирование, омыление и превращение в сложный эфир, либо реакцию Негиши и омыление, коммерчески доступное соединение структуры (32) может быть превращено в соединение структуры (33). Соединения структуры (32) могут быть получены, например, реакцией 4,5-дихлорпиколиновой кислоты с водой в присутствии кислоты (см., например, J. Prakt. Chem., 27 (1883), 293), приводящей к 4-хлор-5-гидроксипиколиновой кислоте. Это соединение может быть затем алкилировано аналогично методам, описанным в литературе (Т. Vermonden; D. Branowska; А.Т.М. Marcelis; Е.J.R. Sudholter; Tetrahedron, 59 (2003), 5039-5045), с получением метилового эфира 4-хлор-5-метоксипиколиновой кислоты, которое далее гидролизуют в кислых или щелочных условиях с получением требуемого соединения структуры (32).
Поскольку соединения формулы (I) получают в виде смеси энантиомеров, энантиомеры могут быть разделены с помощью методов, известных любому специалисту в области техники: например, путем образования и разделения диастереомерных солей с помощью ВЭЖХ с использованием хиральной стационарной фазы такой, как Regis Whelk-O1(R,R) (10 мкм) колонка, Daicel ChiralCel OD-H (5-10 мкм) колонка или Daicel ChiralPak IA (10 мкм) или AD-H (5 мкм) колонка. Типичные условия хиральной ВЭЖХ включают использование изократной смеси элюента A (EtOH, в присутствии или отсутствии амина такого, как триэтиламин или диэтиламин) и элюента Б (гексан), при скорости истечения от 0,8 до 150 мл/мин.
Экспериментальная часть
Следующие примеры иллюстрируют данное изобретение, не лимитируя при этом его объема.
Все температуры измерены в °С.
Соединения охарактеризованы с помощью:
1
13
Н-ЯМР (400 МГц) или С-ЯМР (100 МГц) (Bruker; химические сдвиги приведены в м. д. относительно используемого растворителя; мультиплеты: s = одиночный, d = дублет, t = триплет; p = пентлет, hex = гексет, hept = гептет, m = мультиплет, константы сопряжения приведены в Гц);
R
254
ЖХ-МС (Finnigan Navigator с HP 1100 Binary Pump и DAD, колонка: 4,6×50 мм, Zorbax SB-AQ, 5 мкм, 120 Å, градиент: 5-95% ацетонитрила в воде, 1 мин, с 0,04% трифторуксусной кислоты, скорость истечения: 4,5 мл/мин), t (время удерживания) приведено в мин, (времена удерживания или ЖХ-МС, помеченные *, относятся к ЖХ, проводимой с использованием основных условий, например, градиентным элюированием раствором ацетонитрила в воде, содержащем 13 мкм гидроксида аммония, или других установленных условий; времена удерживания или ЖХ-МС, помеченные **, относятся к ЖХ, проводимой в следующих условиях: колонка: Zorbax Extended C18, 1,8 мкМ, 4,6×20 мм, градиент: 5-95% MeCN в воде, 1 мин, с 0,04% ТФК, истечение: 4,5 мл/мин); ТСХ (ТСХ-пластины от фирмы Merck, силикагель 60 F); или с помощью температур плавления.
Соединения очищают с помощью препаративной ВЭЖХ (колонка: X-terra RP18, 50×19 мм, 5 мкм, градиент: 10-95% MeCN в воде, содержащей 0,5% муравьиной кислоты) или с помощью СДЖХ (Labomatic MD-80-100 насос, Linear UVIS-201 детектор, колонка: 350×18 мм, Labogel-RP-18-5s-100, градиент: от 10% МеОН в воде до 100% МеОН).
Аббревиатуры (используемые в данном описании):
R
Бок - трет-бутоксикабонил, БСА - бычий сывороточный альбумин, Bu - бутил, реагент Бургесса - гидроксид метоксикарбонилсульфамоилтриэтиламмония, СДИ - карбонилдиимидазол, ДЦК - дициклогексилкарбодиимид, ДХМ - дихлорметан, ДЭАД - диэтилазодикарбоксилат, ДИРЭА - диизопропилэтиламин (основание Хюнига, этилдиизопропиламин), ДМЭ - 1,2-диметоксиэтан, ДМФ - диметилформамид, ДМСО - диметилсульфоксид, dppf - 1,1'-бис-(дифенилфосфино)ферроцен, ДФФП - 1,3-бис-(дифенилфосфино)пропан, ЭА - этилацетат, ЭДК - N-(3-диметиламинопропил)-N' - этилкарбодиимид, Et - этил, EtOH - этанол, экв. -эквивалент(ы), ч - час(ы), ГБТУ - гексафторфосфат O-(бензотриазол-1-ил)-N,N,N',N' - тетраметилурония, ГОБТ - 1-гидроксибензотриазол, ВЭХЖ - высокоэффективная жидкостная хроматография, ЖХ-МС - жидкостная хроматография-масс-спектрометрия, MeCN - ацетонитрил, Me - метил, МеОН - метанол, мин - минута(ы), СДЖХ - жидкостная хроматография среднего давления, NaOAc - ацетат натрия, NEts - триэтиламин, ОАс - ацетат, Ph - фенил, РуБОФ - гексафторфосфат бензотриазол-1-илокси-трис-пирролидинфосфония, преп. - препаративный, насыщ. - насыщенный, SIP - сфингозин 1-фосфат, ТБМЭ - трет-бутилметиловый эфир, ТБТУ - тетрафторборат 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,2,3,3-тетраметилурония, ТФК - трифторуксусная кислота, ТГФ - тетрагидрофуран, ТСХ - тонкослойная хроматография, t - время удерживания.
5-Изобутил-4-метилпиридин-2-карбоновая кислота (гидрохлорид)
2
3
3
4
3
4
а) К раствору 2,5-дибром-4-пиколина (9,00 г, 35,9 ммолей) в ДМЭ (96 мл) добавляют комплекс 2,4,6-тривинилциклотрибораксан-пиридин (8,63 г, 35,9 ммолей) и 2-нормальный водный раствор KCO (36 мл). Смесь дегазируют и держат в атмосфере аргона перед добавлением Pd(PPh) (746 мг, 0,646 ммолей). Смесь перемешивают при температуре 80°С в течение 15 ч, после чего охлаждают до комнатной температуры, разбавляют диэтиловым эфиром (50 мл), промывают насыщенным водным раствором NaHCO (дважды по 30 мл), высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан: ЭА в соотношении 9:1 и получая 5-бром-4-метил-2-винилпиридин (7,04 г) в виде желтого масла.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=0,75 мин; [М+1]=198,22; Н ЯМР (CDCl): δ 2,41 (s, 3H), 5,50 (d, J=10,8 Гц, 1Н), 6,21 (d, J=17,3 Гц, 1Н), 6,74 (dd, J=17,3, 10,8 Гц, 1Н), 7,22 (s, 1Н), 8,59 (s, 1Н).
4
б) К раствору 5-бром-4-метил-2-винилпиридина (7,04 г, 35,5 ммолей) в ацетоне (280 мл) и воде (280 мл) добавляют KMnO (28,81 г, 71,1 ммолей). Темноокрашенную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 дней, после чего ее отфильтровывают через пористый стеклянный фильтр. Бесцветный фильтрат выпаривают, получая сырую 5-бром-4-метилпиридин-2-карбоновую кислоту (10,9 г калиевой соли) в виде белого твердого вещества.
R
+
ЖХ-МС: t=0,64 мин, [М+1]=215,90.
2
4
3
4
в) К суспензии сырой 5-бром-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (10,9 г, приблизительно 35,5 ммолей) в этаноле (120 мл) добавляют HSO (0,5 мл). Смесь перемешивают при температуре 70°С в течение 18 ч. Величину pH прозрачного раствора доводят до pH 9 добавлением насыщенного водного раствора NaHCO, и смесь экстрагируют диэтиловым эфиром (трижды по 300 мл). Объединенные органические экстракты высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют, получая этиловый эфир 5-бром-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (8,20 г) в виде зеленого масла.
R
+
ЖХ-МС: t=0,87 мин, [М+1]=243,91.
2
3
3
4
3
4
г) К раствору этилового эфира 5-бром-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (4,03 г, 16,5 ммолей) в ДМЭ (43 мл) прибавляют комплекс 2,4,6-три-(2-метилпропенил)циклобороксан-пиридин (5,36 г, 16,5 ммолей), а затем 2-нормальный водный раствор KCO (16 мл). Смесь дегазируют и держат в атмосфере аргона, после чего добавляют Pd(PPh) (343 мг, 0,297 ммолей). Смесь перемешивают при температуре 80°С в течение 6 ч, затем охлаждают до комнатной температуры, разбавляют диэтиловым эфиром (50 мл), промывают насыщенным водным раствором NaHCO (трижды по 30 мл), высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан: ЭА в соотношении 7:3 и получая при этом этиловый эфир 4-метил-5-(2-метилпропенил)пиридин-2-карбоновой кислоты (1,33 г) в виде желтого масла.
R
+
ЖХ-МС: t=0,87 мин, [М+1]=220,08.
д) К раствору этилового эфира 4-метил-5-(2-метилпропенил)пиридин-2-карбоновой кислоты (1,33 г, 6,06 ммолей) в ТГФ (10 мл) и этаноле (10 мл) осторожно добавляют Pd/C (300 мг, 10%-ный Pd). Суспензию перемешивают при комнатной температуре в течение 15 ч под давлением водорода (2 бар). Катализатор отфильтровывают и фильтрат концентрируют и высушивают, получая этиловый эфир 5-изобутил-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (1,27 г) в виде бесцветного масла.
R
+
ЖХ-МС: t=0,86 мин, [М+1]=222,10.
е) Раствор этилового эфира 5-изобутил-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (1,27 г, 5,76 ммолей) в 6-нормальном водном растворе HCl (110 мл) перемешивают при температуре 65°С в течение 48 ч, после чего растворитель выпаривают в вакууме. Оставшийся остаток суспендируют в ДХМ и фильтруют. Твердый продукт дополнительно промывают ДХМ и высушивают в высоком вакууме, получая гидрохлорид 5-изобутил-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (1,05 г) в виде белого твердого вещества.
R
6
+
1
ЖХ-МС: t=0,59 мин; [М+1]=194.28; Н ЯМР (D-ДМСО): δ 0,90 (d, J=6,3 Гц, 6Н), 1,85-1,96 (m, 1Н), 2,69 (d, J=7,0 Гц, 2Н), 8,18 (s, 1Н), 8,58 (s, 1Н), 11,80 (s расширенный, 1Н).
6-Изобутил-4-метилпиридин-2-карбоновая кислота (гидрохлорид)
4
4
а) Раствор н-BuLi (21,1 мл, 33,8 ммолей, 1,6-молярный) в ТГФ охлаждают до температуры -78°С, а затем по каплям добавляют раствор 2,6-дихлорпиридина (5,0 г, 33,8 ммолей) в ТГФ (36 мл) в течение 20 мин. Реакционную смесь перемешивают при температуре -78°С в течение 30 мин, после чего добавляют йодметан (4,79 г, 33,8 ммолей). Затем смесь снова перемешивают в течение 30 мин и гасят насыщенным водным раствором NHCl при температуре -78°С. Смесь экстрагируют диэтиловым эфиром, органический экстракт высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан: ЭА в соотношении 9:1 и получая при этом 2,6-дихлор-4-метилпиридин (2,34 г) в виде бесцветного масла, содержащий пространственный изомер 2,6-дихлор-3-метилпиридина.
R
+
ЖХ-МС: t=0,89 мин, [М+1]=161,97.
2
3
3
4
3
4
4
б) К раствору 2,6-дихлор-4-метилпиридина (2,34 г, 14,4 ммолей) и комплекса 2,4,6-тривинилциклотрибораксан-пиридин (1,75 г, 7,26 ммолей) в ДМЭ (27 мл) прибавляют 2-молярный водный раствор KCO (10 мл). Смесь дегазируют и держат в атмосфере аргона перед добавлением Pd(PPh) (300 мг, 0,26 ммолей). Затем смесь перемешивают при температуре 80°С в течение 3 ч, после чего ее охлаждают до комнатной температуры, разбавляют диэтиловым эфиром и промывают насыщенным водным раствором NaHCO. Органический экстракт высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан: ЭА в соотношении в соотношении 9:1. Полученный таким образом продукт растворяют в этилацетате, повторно промывают 5%-ным водным раствором лимонной кислоты, высушивают над MgSO, фильтруют и выпаривают, получая 6-хлор-4-метил-2-винилпиридин (1,24 г) в виде бесцветного масла.
R
+
ЖХ-МС: t=0,90 мин, [М+1]=154,03.
4
R
2
4
3
4
+
в) К раствору 6-хлор-4-метил-2-винилпиридина (1,24 г, 8,06 ммолей) в воде (50 мл) и ацетоне (50 мл) прибавляют KMnO (6,53 г, 41,3 ммолей). Темноокрашенная смесь при этом разогревается (40°С) и ее перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч, после чего фильтруют через пористый стеклянный фильтр. Затем из бесцветного фильтрата выпаривают растворитель, получая сырую калиевую соль 6-хлор-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (3,2 г) в виде бесцветного твердого вещества; ЖХ-МС: t=67 мин, [М+1]=171,99. Это вещество суспендируют в этаноле (150 мл) и добавляют HSO (2 мл) до образования бесцветного раствора. Смесь нагревают до температуры 70°С в течение 18 ч, а затем осторожно разбавляют насыщенным водным раствором NaHCO до pH 9. Затем смесь трижды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан: ЭА в соотношении 3:2 и получая при этом этил-6-хлор-4-метилпиридин-2-карбоксилат (500 мг) в виде бледножелтого масла.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=0,87 мин; [М+1]=200,04; Н ЯМР (CDCl): δ 1,45 (t, J=7,3 Гц, 3Н), 2,45 (s, 3Н), 4,48 (q, J=6,8 Гц, 2Н), 7,35 (s, 1Н), 7,89 (s, 1Н).
2
3
3
4
3
4
3
1
г) К раствору этил-6-хлор-4-метилпиридин-2-карбоксилата (500 мг, 2,51 ммолей) и комплекса 2,4,6-трис-(2-метилпропенил)циклотрибораксан-пиридин (814 мг, 2,51 ммолей) в ДМЭ (32 мл) прибавляют 2-молярный водный раствор KCO (12 мл). Смесь дегазируют и держат в атмосфере аргона перед добавлением Pd(PPh) (52 мг, 0,045 ммолей). Затем смесь перемешивают при температуре 80°С в течение 6 ч, после чего ее охлаждают до комнатной температуры, разбавляют диэтиловым эфиром (50 мл) и промывают насыщенным водным раствором NaHCO (дважды по 30 мл). Органический экстракт высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан: ЭА в соотношении 9:1 и получая при этом этиловый эфир 4-метил-6-(2-метилпропенил)пиридин-2-карбоновой кислоты (176 мг) в виде желтого масла. Н ЯМР (CDCl): δ 1,45 (t, J=7,0 Гц, 3Н), 1,97 (s, 3Н), 2,12 (s, 3Н), 2,42 (s, 3Н), 4,46 (q, J=7,0 Гц, 2Н), 6,41 (s, 1Н), 7,17 (s, 1Н), 7,75 (s, 1Н).
д) К раствору этилового эфира 4-метил-6-(2-метилпропенил)пиридин-2-карбоновой кислоты (175 мг, 0,80 ммолей) в ТГФ (5 мл) и этаноле (5 мл) добавляют 10%-ный Pd/C (50 мг). Смесь перемешивают при температуре 50°С в течение 15 мин под давлением водорода (1 бар). Катализатор отфильтровывают через целит и из фильтрата выпаривают растворитель, получая этиловый эфир 6-изобутил-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (174 мг) в виде бесцветного масла.
R
+
ЖХ-МС: t=0,84 мин, [M+1]=222,48.
е) Раствор этилового эфира 6-изобутил-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (174 мг, 0,78 ммолей) в 6-нормальном водном растворе HCl (20 мл) перемешивают при температуре 65°С в течение 18 ч. Растворитель выпаривают, а оставшийся остаток высушивают в высоком вакууме, получая гидрохлорид 6-изобутил-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты в виде зеленого масла.
R
+
ЖХ-МС: t=0,58 мин, [М+1]=194,09.
6-(1-Этилпропил)-4-метилпиридин-2-карбоновая кислота
а) Метил 6-хлор-4-метилпиридин-2-карбоксилат получают аналогично получению этил-6-хлор-4-метилпиридин-2-карбоксилата.
R=
3
+
1
ЖХ-МС**: t0,49 мин, [M+1]=186,25; Н ЯМР (CDCl): δ 2,46 (s, 3H), 4,02 (s, 3H), 7,37 (s, 1H), 7,92 (s, 1H).
б) Метил-6-хлор-4-метилпиридин-2-карбоксилат (500 мг, 2,69 ммолей) обрабатывают 1-этилпропилцинкбромидом и омыляют, как описано при синтезе 6-(1-этилпропил)-4-метоксипиридин-2-карбоновой кислоты, получая названное в заголовке соединение (220 мг) в виде бледно-желтого масла.
R
3
+
1
ЖХ-МС**: t=0,37 мин, [М+1]=208,29; Н ЯМР (CDCl): δ 0,80 (t, J=7,3 Гц, 6Н), 1,69-1,81 (m, 4H), 2,48 (s, 3H), 2,58-2,67 (m, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,91 (s, 1H).
4-Изобутил-6-метилпиридин-2-карбоновая кислота (гидрохлорид)
2
4
3
4
а) К раствору 4-бром-2-метилпиридина (5,70 г, 32,14 ммолей) в метаноле (100 мл) добавляют HSO (0,3 мл). Смесь нагревают с обратным холодильником, после чего осторожно добавляют раствор пероксидисульфата аммония (7,33 г, 32,14 ммолей) в воде (53 мл). Смесь перемешивают при при нагревании с обратным холодильником в течение 2 ч, после чего добавляют еще две порции пероксидисульфата аммония (дважы по 7,33 г) в виде насыщенного водного раствора. Перемешивание продолжают при нагревании с обратным холодильником в течение 3 ч. Затем метанол удаляют при пониженном давлении, а оставшийся раствор разбавляют насыщенным водным раствором NaHCO и экстрагируют этилацетатом. Органический экстракт высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан: ЭА в соотношении 3:7 и получая при этом (4-бром-6-метилпиридин-2-ил)метанол (1,31 г) в виде бледно-желтого твердого вещества.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=0,31 мин; [М+1]=201,96; Н ЯМР (CDCl): δ 2,55 (s, 3H), 3,59 (s расширенный, 1H), 4,72 (s расширенный, 2H), 7,28 (s, 2H).
4
б) К раствору (4-бром-6-метилпиридин-2-ил)метанола (1,31 г, 6,48 ммолей) в ацетоне (150 мл) добавляют KMnO (2,61 г, 16,5 ммолей). Смесь перемешивают при температуре 40°С в течение 2 ч, после чего ее фильтруют через стеклянную воронку с пористым дном. Фильтрат выпаривают без досушивания и оставшееся твердое вещество промывают водой и высушивают в высоком вакууме, получая калиевую соль 4-бром-6-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (1,91 г) в виде белого твердого вещества.
R
+
ЖХ-МС: t=0,45 мин, [М+1]=217,89.
2
4
3
4
в) К суспензии калиевой соли 4-бром-6-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (253 мг, 0,996 ммолей) в этаноле (100 мл) добавляют по каплям HSO (2 мл). Смесь нагревают до температуры 70°С в течение 16 ч, после чего ее осторожно разбавляют насыщенным водным раствором NaHCO. Смесь затем трижды экстрагируют диэтиловым эфиром. Объединенные органические экстракты высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью препаративной ТСХ, используя при этом смесь гептан: ЭА в соотношении 3:2 и получая при этом этиловый эфир 4-бром-6-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (105 мг) в виде бледно-желтого масла.
R
+
ЖХ-МС: t=0,85 мин, [М+1]=244,22.
R
3
+
1
г) Гидрохлорид 4-изобутил-6-метилпиридин-2-карбоновой кислоты получают исходя из этилового эфира 4-бром-6-метилпиридин-2-карбоновой кислоты, следуя методам, используемым на стадиях г)-е) при получении 6-изобутил-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты. ЖХ-МС: t=0,58 мин; [М+1]=194,08; Н ЯМР (CDCl): δ 1,01 (d, J=6,3 Гц, 6Н), 2,04-2,16 (m, 1Н), 2,80 (d, J=7,0 Гц, 2Н), 3,09 (s, 3Н), 7,56 (s, 1Н), 8,04 (s, 1Н), 9,74 (s расширенный, ~1Н).
6-Изобутил-4-метоксипиридин-2-карбоновая кислота (гидрохлорид)
а) К перемешиваемому раствору 6-хлор-4-метоксипиридин-2-карбоновой кислоты (5,00 г, 26,7 ммолей) в этаноле (75 мл) добавляют хлортриметилсилан (15 мл). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч, после чего растворитель выпаривают. Остаток высушивают в вакууме, получая этиловый эфир 6-хлор-4-метокси-2-карбоновой кислоты (5,95 г) в виде бледно-желтого масла.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=0,85 мин; [М+1]=215,97; Н ЯМР (CDCl): δ 1,44 (t, J=7,0 Гц, 3Н), 3,94 (s, 3Н), 4,48 (q, J=7,0 Гц, 2Н), 7,01 (d, J=2,0 Гц, 1Н), 7,61 (d, J=2,0 Гц, 1Н).
R
3
+
1
б) Названное в заголовке соединение получают из этилового эфира 6-хлор-4-метокси-2-карбоновой кислоты, следуя методам, используемым на стадиях г)-е) при получении 6-изобутил-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты. ЖХ-MC: t=0,51 мин; [М+1]=210,31; Н ЯМР (CDCl): δ 1,04 (d, J=6,5 Гц, 6Н), 2,21-2,32 (m, 1 H), 3,27 (d, J=7,0 Гц, 2 Н), 4,20 (s, 3H), 7,12 (s, 1H), 7,83 (s, 1H).
6-(1-Этилпропил)-4-метоксипиридин-2-карбоновая кислота
а) Метиловый эфир 6-хлор-4-метокси-2-карбоновой кислоты (1,89 г) получают аналогично получению этилового эфира 6-хлор-4-метокси-2-карбоновой кислоты исходя из 6-хлор-4-метоксипиридин-2-карбоновой кислоты (2,00 г; 10,7 ммолей).
r
3
+
1
ЖХ-МС**: t=0,48 мин; [М+1]=202,23; Н ЯМР (CDCl): δ 3,95 (s, 3H), 4,01 (s, 3H), 7,03 (d, J=2,3 Гц, 1Н), 7,63 (d, J=2,3 Гц, 1Н).
4
б) Раствор метилового эфира 6-хлор-4-метокси-2-карбоновой кислоты (2,63 г, 13,0 ммолей) в диоксане (150 мл) дегазируют и держат в атмосфере аргона, после чего добавляют Pd(dppf) (109 мг, 133 мкмолей). Затем к этой смеси по каплям добавляют 1-этилпропилцинкбромид (50 мл 0,5-молярный раствор в ТГФ, 25,0 ммолей). Смесь перемешивают при температуре 76°С в течение 15 ч, охлаждают до комнатной температуры, разбавляют водой и дважды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью ЖХСД на силикагеле, элюируя градиентной смесью этилацетата в гептане и получая при этом метиловый эфир 6-(1-этилпропил)-4-метоксипиридин-2-карбоновой кислоты (450 мг) в виде бледно-желтого масла.
R
+
ЖХ-МС**: t=0,46 мин; [М+1]=238,34.
в) Раствор метилового эфира 6-(1-этилпропил)-4-метоксипиридин-2-карбоновой кислоты (450 мг, 1,90 ммолей) в 25%-ном водном растворе HCl перемешивают при температуре 65°С в течение 18 ч. Смесь концентрируют и высушивают, получая названное в заголовке соединение (592 мг) в виде гидрохлорида.
R
+
ЖХ-МС**: t=0,38 мин; [М+1]=224,32.
N-Гидрокси-5-изобутил-4-метилпиридин-2-карбоксамидин
3
3
R
3
2
4
+
а) Раствор изопропилового эфира 5-изобутил-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (655 мг, 2,78 ммолей, полученный аналогично соответствующему этиловому эфиру) в 7-нормальном растворе NH в метаноле (40 мл) перемешивают в запаянной ампуле при температуре 75°С в течение 72 ч. Затем растворитель удаляют в вакууме и остаток снова растворяют в 7-нормальном растворе NH в метаноле. Полученный раствор снова перемешивают при температуре 75°С в течение 24 ч. Растворитель выпаривают, получая сырой амид 5-изобутил-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (535 мг); ЖХ-МС: t=0,80 мин; [М+1]=193,01. Это вещество растворяют в ДХМ (20 мл) и добавляют пиридин (1,08 г, 11,13 ммолей). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 мин, после чего прикалывают ангидрид трифторуксусной кислоты (1,75 г, 1,18 ммолей). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч, разбавляют ДХМ (100 мл), промывают насыщенным водным раствором NaHCO (трижды по 50 мл) и рассолом (50 мл). Органический экстракт высушивают над NaSO, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью ЖХСД на силикагеле, элюируя градиентной смесью этилацетата в гептане и получая при этом 5-изобутил-4-метилпиридин-2-карбонитрил (106 мг) в виде бледно-желтого масла.
R
+
ЖХ-МС: t=0,96 мин; [M+1]=175,03.
3
4
б) К раствору 5-изобутил-4-метилпиридин-2-карбонитрила (106 мг, 608 мкмолей) в метаноле (3 мл) добавляют триэтиламин (123 мг, 1,22 ммолей) и гидрохлорид гидроксиламина (63 мг, 913 мкмолей). Смесь перемешивают при температуре 75°С в течение 18 ч, после чего концентрируют. Остаток растворяют в водном растворе NaHCO (pH 7-8) и экстрагируют ДХМ (6 раз по 50 мл). Органические экстракты объединяют, высушивают над MgSO, фильтруют, концентрируют и высушивают, получая названное в заголовке соединение (155 мг) в виде белого твердого вещества.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=0,67 мин, [М+1]=208,01; Н ЯМР (CDOD): δ 0,97 (d, J=6,8 Гц, 6Н), 1,84-1,96 (m, 1Н), 2,37 (s, 3Н), 2,58 (d, J=7,3 Гц, 2Н), 7,67 (s, 1Н), 8,26 (s, 1Н).
3-Этил-4-гидрокси-5-метилбензонитрил
Названное в заголовке соединение получают из 3-этил-4-гидрокси-5-метилбензальдегида, следуя литературным методам (A.K. Chakraborti, G. Kaur, Tetrahedron, 55 (1999) 13265-13268).
R
3
1
ЖХ-МС: t=0,90 мин; Н ЯМР (CDCl): δ 1,24 (t, J=7,6 Гц, 3Н), 2,26 (s, 3H), 2,63 (q, J=7,6 Гц, 2Н), 5,19 (s, 1Н), 7,30 (s, 2Н).
3-Хлор-4-гидрокси-5-метилбензонитрил
Названное в заголовке соединение получают из коммерчески доступного 2-хлор-6-метилфенола аналогично литературным методам (см.: 3-этил-4-гидрокси-5-метилбензонитрил).
R
3
1
ЖХ-МС: t=0.85 мин. Н ЯМР (CDCl): δ 2,33 (s, 3Н), 6,10 (s, 1Н), 7,38 (s, 1H), 7,53 (d, J=1,8 Гц, 1Н).
4-Гидрокси-3-метокси-5-метилбензонитрил
Названное в заголовке соединение получают из коммерчески доступного 2-гидрокси-3-метокситолуола аналогично литературным методам (см.: 3-этил-4-гидрокси-5-метилбензонитрил).
R
3
1
ЖХ-МС: t=0,84 мин, Н ЯМР (CDCl): δ 2,27 (s, 3Н), 3,93 (s, 3Н), 6,24 (s, 1Н), 6,97 (d, J=1,3 Гц, 1Н), 7,12 (s, 1Н).
3-Хлор-4-гидрокси-5-метоксибензонитрил
Названное в заголовке соединение получают из коммерчески доступного 3-хлор-4-гидрокси-5-метоксибензальдегида аналогично литературным методам (см.: 3-этил-4-гидрокси-5-метилбензонитрил).
R
3
1
ЖХ-МС: t=0,82 мин; Н ЯМР (CDCl): δ 3,98 (s, 3Н), 6,36 (s, 1 Н), 7,04 (s, 1Н), 7,34 (s, 1Н).
4-Гидрокси-2-метоксибензонитрил
Названное в заголовке соединение получают из коммерчески доступного 4-гидрокси-2-метоксибензальдегида аналогично литературным методам (см.: 3-этил-4-гидрокси-5-метилбензонитрил).
R
6
1
ЖХ-МС: t=0,74 мин, Н ЯМР (D-ДМСО): δ 3,84 (s, 3Н), 6,47 (d, J=8,5 Гц, 1Н), 6,54 (s, 1Н), 7,49 (d, J=8,5 Гц, 1Н), 10,6 (s, 1H).
4,N-Дигидрокси-3,5-диметилбензамидин
Названное в заголовке соединение получают из коммерчески доступного 4-гидрокси-3,5-диметилбензонитрила согласно литературным методам (например, Е. Meyer, А.С. Joussef, H. Gallardo, Synthesis, 2003, 899-905);
1
3
Н ЯМР (CDOD): δ 7,20 (s, 2H), 2,20 (s, 6H).
3-Этил-4,N-дигидрокси-5-метилбензамидин
Названное в заголовке соединение получают из коммерчески доступного 2-этил-6-метилфенола, следуя литературным методам (G. Trapani, A. Latrofa, М. Franco, С. Altomare, Е. Sanna, М. Usala, G. Biggio, G. Liso, J. Med. Chem., 41 (1998) 1846-1854; A.K. Chakraborti, G. Kaur, Tetrahedron, 55 (1999) 13265-13268; Е. Meyer, А.С. Joussef, H. Gallardo, Synthesis, 2003, 899-905).
R
6
1
ЖХ-МС: t=0,55 мин; H ЯМР (D-ДМСО): δ 9,25 (s расширенный, 1Н), 7,21 (s, 2H), 5,56 (s, 2H), 2,55 (q, J=7,6 Гц, 2H), 2,15 (s, 3H), 1,10 (t, J=7,6 Гц, 3Н).
4,N-Дигидрокси-3-метил-5-пропилбензамидин
Названное в заголовке соединение получают из коммерчески доступного 2-метил-6-пропилфенола аналогично литературным методам (см., например, В. Roth et al. J. Med. Chem, 31 (1988) 122-129; и цитируемая литература для синтеза 3-этил-4,N-дигидрокси-5-метилбензамидина).
R
6
+
1
ЖХ-МС: t=0,54 мин; [M+1]=209,43; Н ЯМР (D-ДМСО): δ 0,90 (t, J=7,3 Гц, 3Н), 1,48-1,59 (m, 3H), 2,19 (s, 3H), 2,56 (t, J=7,3 Гц, 2H), 7,37 (s, 1H), 7,40 (s, 1H), 9,34 (s, 1H).
3-Хлор-4,N-дигидрокси-5-метилбензамидин
Названное в заголовке соединение получают из коммерчески доступного 2-хлор-6-метилфенола аналогично литературным методам (например, В. Roth et al. J. Med. Chem., 31 (1988) 122-129; и цитируемая литература для синтеза 3-этил-4,N-дигидрокси-5-метилбензамидина); 3-хлор-4-гидрокси-5-метилбензальдегид:
R
6
+
1
1
ЖХ-МС: t=0,49 мин; [М+1]=201,00; Н ЯМР δ 2,24 (s, 2Н), 2,35 (s, 4H), 5,98 (s расширенный, 1Н), 7,59 (d, J=1,8 Гц, 1Н), 7,73 (d, J=1,8 Гц, 1Н), 9,80 (s, 1H); 3-хлор-4,N-дигидрокси-5-метилбензамидин: Н ЯМР (D-ДМСО): δ 2,21 (s, 3H), 5,72 (s расширенный, 2Н), 7,40 (s, 1H), 7,48 (s, 1H), 9,29 (s расширенный, 1Н), 9,48 (s расширенный, 1Н).
рац-4-(2,2-Диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)-N-гидрокси-3,5-диметилбензамидин
а) К раствору 3,5-диметил-4-гидроксибензонитрила (5,0 г, 34,0 ммолей) в ТГФ (40 мл) добавляют рац-(2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-ил)метанол (4,49 г, 34,0 ммолей), а затем трифенилфосфин (13,4 г, 50,9 ммолей). Смесь охлаждают на ледяной бане, после чего добавляют по каплям ДЭАД (8,87 г, 50,9 ммолей, 23,4 мл 40%-ного раствора в толуоле). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч, растворитель удаляют в вакууме, а остаток очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан: ЭА в соотношении от 9:1 до 92:8 и получая при этом рац-4-(2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)-3,5-диметилбензонитрил (7,20 г) в виде бледно-желтого масла;
R
+
ЖХ-МС: t=0,99 мин, [М+1]= не определялось.
3
б) К раствору трет-бутилата калия (6,18 г, 55,1 ммолей) в метаноле (125 мл) добавляют гидрохлорид гидроксиламина (5,74 г, 82,7 ммолей), а затем раствор рац-4-(2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)-3,5-диметилбензонитрила (7,20 г, 27,6 ммолей) в метаноле (40 мл). Смесь нагревают с обратным холодильником в течение 72 ч, после чего растворитель удаляют в вакууме. Остаток очищают с помощью препаративной ВЭЖХ (XBridge Prep С 18, 30×75 мм, 5 мкм, 2-95% ацетонитрила в воде, содержащей 0,5% насыщенного водного раствора NH), получая названное в заголовке соединение (4,85 г) в виде бледно-желтого твердого вещества.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=0,67 мин, [М+1]=295,06; Н ЯМР (CDCl): δ 1,43 (s, 3H), 1,48 (s, 3H), 2,29 (s, 6H), 3,76-3,81 (m, 1H), 3,83-3,88 (m, 1H), 3,93-3,99 (m, 1 H), 4,17-4,23 (m, 1H), 4,47-4,54 (m, 1H), 5,02 (s расширенный, 1H), 7,28 (s, 2H).
(S)-4-(2,2-Диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)-N-гидрокси-3,5-диметилбензамидин
Названное в заголовке соединение получают аналогично получению рац-4-(2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)-N-гидрокси-3,5-диметилбензамидина, используя (S)-(2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-ил)метанол.
R
+
ЖХ-МС: t=0,67 мин, [М+1]=295,01.
(R)-4-(2,2-Диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)-3-этил-N-гидрокси-5-метилбензамидин
Названное в заголовке соединение получают аналогично получению рац-4-(2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)-N-гидрокси-3,5-диметилбензамидина из 3-этил-4-гидрокси-5-метилбензонитрила и (R)-(2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-ил)метанола.
R
6
+
1
ЖХ-МС**: t=0,46 мин, [М+Н]=309,23; Н ЯМР (D-ДМСО): δ 1,17 (t, J=7,5 Гц, 3Н), 1,33 (s, 3Н), 1,38 (s, 3Н), 2,25 (s, 3Н), 2,57-2,69 (m, 2Н), 3,73-3,84 (m, 3Н), 4,12 (t, J=7,0 Гц, 1Н), 4,39-4,45 (m, 1Н), 5,76 (s расширенный, 2Н), 7,34 (s, 1Н), 7,36 (s, 1Н), 9,47 (s, 1Н).
(R)-3-Хлор-4-(2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)-N-гидрокси-5-метилбензамидин
Названное в заголовке соединение получают в виде бесцветного масла (1,39 г) аналогично получению рац-4-(2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)-N-гидрокси-3,5-диметилбензамидина исходя из 3-хлор-4-гидрокси-5-метилбензонитрила и L-α,β-изопропилиденглицидола.
R
+
ЖХ-МС: t=0,66 мин, [М+Н]=314,96.
(R)-4-(2,2-Диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)-N-гидрокси-3-метокси-5-метилбензамидин
Названное в заголовке соединение получают в виде бежевого масла (1,16 г) аналогично получению рац-4-(2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)-N-гидрокси-3,5-диметилбензамидина исходя из 4-гидрокси-3-метокси-5-метилбензонитрила и L-α,β-изопропилиденглицидола.
R
+
ЖХ-МС: t=0,65 мин, [М+Н]=311,0.
(R)-3-Хлор-4-(2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)-N-гидрокси-5-метоксибензамидин
Названное в заголовке соединение получают аналогично получению рац-4-(2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)-N-гидрокси-3,5-диметилбензамидина исходя из 3-хлор-4-гидрокси-5-метоксибензонитрила и L-α,β-изопропилиденглицидола.
R
6
+
1
ЖХ-МС: t=0,42 мин, [М+Н]=331,17; Н ЯМР (D-ДМСО): δ 1,30 (s, 3Н), 1,34 (s, 3Н), 3,86 (s, 3Н), 3,87-3,93 (m, 2Н), 4,00-4,12 (m, 2Н), 4,36 (квинтет, J=5,8 Гц, 1Н), 5,90 (s, 2H), 7,32 (d, J=2,0 Гц, 1Н), 7,34 (d, J=2,0 Гц, 1Н),9,71 (s, 1Н).
(R)-4-(2,2-Диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)-N-гидрокси-2-метоксибензамидин
Названное в заголовке соединение получают в виде бежевого масла (2,46 г) аналогично получению рац-4-(2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)-N-гидрокси-3,5-диметилбензамидина исходя из 4-гидрокси-2-метоксибензонитрил и L-α,β-изопропилиденглицидола.
R
+
ЖХ-МС: t=0,62 мин, [М+Н]=296,97.
(S)-4-(3-Амино-2-гидроксипропокси)-3-этил-5-метилбензонитрил
3
а) К раствору 3-этил-4-гидрокси-5-метилбензонитрила (5,06 г, 31,4 ммолей) в ТГФ (80 мл) добавляют PPh (9,06 г, 34,5 ммолей) и (R)-глицидол (2,29 мл, 34,5 ммолей). Смесь охлаждают до температуры 0°С, после чего добавляют ДЭАД в толуоле (15,8 мл, 34,5 ммолей). Смесь перемешивают в течение 18 ч, при этом она нагревается до комнатной температуры. Растворитель выпаривают и сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан: ЭА в соотношении 7:3 и получая при этом 3-этил-5-метил-4-оксиранилметоксибензонитрил (5,85 г) в виде желтого масла.
R
+
ЖХ-МС: t=0,96 мин; [М+42]=259,08.
3
б) Полученный выше эпоксид растворяют в 7-нормальном растворе NH в метаноле (250 мл), после чего раствор перемешивают при температуре 65°С в течение 18 ч. Растворитель затем выпаривают, получая сырой (S)-4-(3-амино-2-гидроксипропокси)-3-этил-5-метилбензонитрил (6,23 г) в виде желтого масла.
R
+
ЖХ-МС: t=0,66 мин; [M+1]=235,11.
N-((S)-3-[2-Этил-4-(N-гидроксикарбамимидоил)-6-метилфенокси1-2-гидроксипропил)-2-гидроксиацетамид
3
4
а) К раствору (S)-4-(3-амино-2-гидроксипропокси)-3-этил-5-метилбензонитрила (6,23 г, 26,59 ммолей) в ТГФ (150 мл) добавляют гликолевую кислоту (2,43 г, 31,9 ммолей), ГОБТ (4,31 г, 31,9 ммолей) и ЭДК-гидрохлорид (6,12 г, 31,9 ммолей). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч, после чего ее разбавляют насыщенным водным раствором NaHCO и дважды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии, используя ДХМ, содержащий 8% метанола, получая при этом (S)-N-[3-(4-циано-2-этил-6-метилфенокси)-2-гидроксипропил]-2-гидроксиацетамид (7,03 г) в виде желтого масла.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=0,74 мин; [М+1]=293,10; Н ЯМР (CDCl): δ 1,25 (t, J=7,5 Гц, 3 Н), 2,32 (s, 3Н), 2,69 (q, J=7,5 Гц, 2Н), 3,48-3,56 (m, 3Н), 3,70-3,90 (m, 3Н), 4,19 (s, расширенный, 3Н), 7,06 (m, 1Н), 7,36 (s, 1Н), 7,38 (s, 1Н).
б) Полученный выше нитрил превращают в N-гидроксибензамидин согласно литературным методам (например, Е. Meyer, А.С. Joussef, Н. Gallardo, Synthesis, 2003, 899-905).
R
6
+
1
ЖХ-МС: t=0,51 мин; [M+l]=326,13; Н ЯМР (D-ДМСО): δ 1,17 (t, J 7,4 Гц, 3Н), 2,24 (s, 3H), 2,62 (q, J 7,4 Гц, 2Н), 3,23 (m, 1Н), 3,43 (m, 1Н), 3,67 (m, 2Н), 3,83 (s, 2Н), 3,93 (m, 1Н), 5,27 (s расширенный, 1Н), 5,58 (s расширенный, 1Н), 5,70 (s, 2Н), 7,34 (s, 1Н), 7,36 (s, 1Н), 7,67 (m, 1Н), 9,46 (s расширенный, 1Н).
(S)-2-Гидрокси-N-{2-гидрокси-3-[4-(N-гидроксикарбамимидоил)-2,6-диметилфенокси] пропил} ацетамид
Названное в заголовке соединение получают аналогично получению N-((S)-3-[2-этил-4-(N-гидроксикарбамимидоил)-6-метилфенокси]-2-гидроксипропил)-2-гидроксиацетамида.
R
+
ЖХ-МС: t=0,23 мин, [М+1]=312,25.
N-((S)-3-[2-Этил-4-(N-гидроксикарбамимидоил)-6-метилфенокси]-2-гидроксипропил)-2-гидроксиацетамид
3
а) К раствору 3-этил-4-гидрокси-5-метилбензонитрила (5,06 г, 31,4 ммолей) в ТГФ (80 мл) добавляют PPh (9,06 г, 34,5 ммолей) и (R)-глицидол (2,29 мл, 34,5 ммолей). Смесь охлаждают до температуры 0°С, после чего добавляют ДЭАД в толуоле (15,8 мл, 34,5 ммолей). Смесь перемешивают в течение 18 ч, при этом она нагревается до комнатной температуры. Растворитель выпаривают, а сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан:ЭА в соотношении 7:3 и получая при этом 3-этил-5-метил-4-оксиранилметоксибензонитрил (5,85 г) в виде желтого масла.
R
+
ЖХ-МС: t=0,96 мин; [M+42]=259,08.
3
б) Полученный выше эпоксид растворяют в7-нормальном растворе NH в метаноле (250 мл) и раствор перемешивают при температуре 65°С в течение 18 ч. Затем растворитель выпаривают, получая сырой (S)-4-(3-амино-2-гидроксипропокси)-3-этил-5-метилбензонитрил (6,23 г) в виде желтого масла.
R
+
ЖХ-МС: t=0,66 мин; [М+1]=235,11.
3
4
в) К раствору (S)-4-(3-амино-2-гидроксипропокси)-3-этил-5-метилбензонитрила (6,23 г, 26,59 ммолей) в ТГФ (150 мл) добавляют гликолевую кислоту (2,43 г, 31,9 ммолей), ГОБТ (4,31 г, 31,9 ммолей) и ЭДК-гидрохлорид (6,12 г, 31,9 ммолей). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч, после чего ее разбавляют насыщенным водным раствором NaHCOи дважды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии, используя ДХМ, содержащий 8% метанола, получая при этом (S)-N-[3-(4-циано-2-этил-6-метилфенокси)-2-гидроксипропил]-2-гидроксиацетамид (7,03 г) в виде желтого масла.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=0,74 мин; [М+1]=293,10; Н ЯМР (CDCl): δ 1,25 (t, J=7,5 Гц, 3Н), 2,32 (s, 3Н), 2,69 (q, J=7,5 Гц, 2Н), 3,48-3,56 (m, 3Н), 3,70-3,90 (m, 3Н), 4,19 (s, расширенный, 3Н), 7,06 (m, 1Н), 7,36 (s, 1Н), 7,38 (s, 1Н).
г) Полученный выше нитрил превращают в названное в заголовке соединение согласно литературным методам (например, Е.Meyer, А.С. Joussef, Н. Gallardo, Synthesis, 2003, 899-905).
R
6
+
1
ЖХ-МС: t=0,51 мин; [М+1]=326,13; Н ЯМР (D-ДМСО): δ 1,17 (t, J=7,4 Гц, 3Н), 2,24 (s, 3H), 2,62 (q, J 7,4 Гц, 2Н), 3,23 (m, 1Н), 3,43 (m, 1Н), 3,67 (m, 2Н), 3,83 (s, 2Н), 3,93 (m, 1H), 5,27 (s расширенный, 1H), 5,58 (s расширенный, 1Н), 5,70 (s, 2Н), 7,34 (s, 1Н), 7,36 (s, 1Н), 7,67 (m, 1Н), 9,46 (s расширенный, 1H).
(S)-N-(3-[2-Хлор-4-(N-гидроксикарбамимидоил)-6-метилфенокси1-2-гидроксипропил)-2-гидроксиацетамид
Названное в заголовке соединение получают в виде бежевого воскообразного вещества (1,1 г) аналогично получению N-((S)-3-[2-этил-4-(N-гидроксикарбамимидоил)-6-метилфенокси]-2-гидроксипропил)-2-гидроксиацетамида исходя из 3-хлор-4-гидрокси-5-метилбензонитрила.
R
ЖХ-МС: t=0,48 минп, [М+Н]+=331,94.
(S)-2-Гидрокси-N-(2-гидрокси-3-[4-(N-гидроксикарбамимидоил)-2-метокси-6-метилфенокси]пропил)ацетамид
Названное в заголовке соединение получают в виде красноватого масла (1,3 г) аналогично получению N-((S)-3-[2-этил-4-(N-гидроксикарбамимидоил)-6-метилфенокси]-2-гидроксипропил)-2-гидроксиацетамида исходя из 4-гидрокси-3-метокси-5-метилбензонитрила.
r
+
ЖХ-МС: t=0,49 мин, [М+Н]=327,98.
4-(2,2-Диметил-[1,3]диоксан-5-илметокси)-3-этил-N-гидрокси-5-метилбензамидин
К раствору 3-этил-4-гидрокси-5-метилбензонитрила (480 мг, 2,98 ммолей) в ТГФ (10 мл) прибавляют трифенилфосфин (1,17 г, 4,47 ммолей) и (2,2-диметил-[1,3]диоксан-5-ил)метанол (478 мг, 3,28 ммолей). Смесь охлаждают до температуры 4°С, после чего добавляют ДЭАД (1,94 г, 4,47 ммолей, 2,05 мл 40%-ного раствора в толуоле). Перемешивание продолжают при температуре 4°С в течение 15 мин, а затем при комнатной температуре в течение 1 ч. Растворитель удаляют в вакууме, и сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан: ЭА в соотношении 9:1 и получая 4-(2,2-диметил-[1,3]диоксан-5-илметокси)-3-этил-5-метилбензонитрил (240 мг) в виде желтого масла;
R
3
+
ЖХ-МС: t=1,04 мин; [M+1+CHCN]=330,97.
3
4
К раствору этого вещества (240 мг, 829 мкмолей) в метаноле (5 мл) добавляют гидрохлорид гидроксиламина (86 мг, 1,24 ммолей) и NaHCO (104 мг, 1,24 ммолей). Смесь перемешивают при температуре 60°С в течение 5 ч, после чего ее разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический экстракт высушивают над MgSO, фильтруют, концентрируют и высушивают, получая названное в заголовке соединение (280 мг) в виде бледножелтого масла.
R
3
+
ЖХ-МС: t=0,72 мин; [M+1+CHCN]=323,01.
3-Этил-4-[(S)-2-гидрокси-3-(2-гидроксиацетиламино)пропокси1-5-метилбензойной кислоты
2
4
2
2
4
4
а) К охлаждаемому льдом раствору HSO (150 мл) в воде (250 мл) добавляют 2-этил-6-метиланилин (15,0 г, 111 ммолей). Затем раствор обрабатывают льдом (150 г), после чего по каплям добавляют раствор NaNO(10,7 г, 155 ммолей) в воде (150 мл) и лед (50 г). Смесь перемешивают при температуре 0°С в течение 1 ч, прибавляют 50%-ный водный раствор HSO (200 мл) и перемешивание продолжают при комнатной температуре в течение 18 ч. Смесь затем экстрагируют ДХМ и органические экстракты высушивают над MgSO и выпаривают. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан:ЭА в соотношении 9:1 и получая при этом 2-этил-6-метилфенол (8,6 г) в виде темнокрасного масла.
R
3
1
ЖХ-МС: t=0,89 мин; Н ЯМР (CDCl): δ 7,03-6,95 (m, 2H), 6,80 (t, J=7,6 Гц, 1H), 4,60 (s, 1H), 2,64 (q, J=7,6 Гц, 2H), 2,25 (s, 3Н), 1,24 (t, J=7,6 Гц, 3Н).
3
4
б) Раствор 2-этил-6-метилфенола (8,40 г, 61,7 ммолей) и гексаметилентетрамина (12,97 г, 92,5 ммолей) в уксусной кислоте (60 мл) и воде (14 мл) нагревают до температуры 115°С. Воду затем удаляют дистилляцией при температуре 117°С и отбирают с помощью аппарата Дина-Старка. Водный сепаратор заменяют на обратный холодильник, и смесь нагревают в течение 3 ч. Затем смесь охлаждают до комнатной температуры, разбавляют водой (100 мл) и экстрагируют этилацетатом. Органический экстракт промывают насыщенным водным раствором NaHCO, высушивают над MgSO и выпаривают. Оставшееся твердое вещество растворяют в этилацетате и обрабатывают гептаном для инициирования кристаллизации. Твердый продукт отделяют и высушивают, получая 3-этил-4-гидрокси-5-метилбензальдегид (3,13 г) в виде бесцветного кристаллического порошка.
1
3
Н ЯМР (CDCl): δ 9,83 (s, 1H), 7,58-7,53 (m, 2H), 5,30 (s расширенный, 1H), 2,69 (q, J=7,6 Гц, 2H), 2,32 (s, 3Н), 1,28 (t, J=7,6 Гц, 3Н).
2
3
в) К раствору 3-этил-4-гидрокси-5-метилбензальдегида (25,0 г, 152 ммолей) в ацетонитриле (250 мл) добавляют KCO (42,1 г, 305 ммолей), а затем бензилбромид (26,0 г, 152 ммолей). Суспензию перемешивают при температуре 60°С в течение 18 ч, после чего смесь разбавляют водой (150 мл) и этилацетатом (150 мл). Органический экстракт отделяют, а водную фазу еще раз экстрагируют этилацетатом (100 мл). Объединенные органические экстракты промывают водой (150 мл) и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан: ЭА в соотношении 9:1 и получая при этом 4-бензилокси-3-этил-5-метилбензальдегид (27,2 г) в виде желтого масла.
R
6
1
ЖХ-МС: t=1,09 мин; Н ЯМР (D-ДМСО): δ 1,19 (t, J=7,5 Гц, 3Н), 2,35 (s, 3Н), 2,70 (q, J=7,5 Гц, 2Н), 4,90 (s, 2Н), 7,37-7,41 (m, 1Н), 7,42-7,46 (m, 2Н), 7,49-7,52 (m, 2Н), 7,65-7,69 (m, 2Н), 9,92 (s, 1Н).
4
4
г) К раствору 4-бензилокси-3-этил-5-метилбензальдегида (25,0 г, 98,3 ммолей) в ацетоне (500 мл) прибавляют KMnO (20,2 г, 127,8 ммолей). Смесь при этом разогревается (45°С). Ее перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч, после чего фильтруют через стеклянный фильтр. Прозрачный бесцветный фильтрат концентрируют, разбавляют водой и подкисляют 2-нормальным водным раствором HCl, а затем дважды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушивают над MgSO, фильтруют, концентрируют и высушивают, получая 4-бензилокси-3-этил-5-метилбензойную кислоту (19,2 г) в виде бледно-желтого твердого вещества.
R
6
1
ЖХ-МС: t=1,00 мин; Н ЯМР (D-ДМСО): δ 1,13-1,22 (m, 3Н), 2,32 (s, 3Н), 2,64-2,72 (m, 2Н), 4,87 (s, 2Н), 7,34-7,56 (m, 5Н), 7,69 (m, 2Н), 12,66 (s расширенный, 1Н).
2
3
4
д) К суспензии 4-бензилокси-3-этил-5-метилбензойной кислоты (10,0 г, 37,0 ммолей) в толуоле (150 мл) добавляют ди-трет-бутилацеталь N,N-диметилформамида (22,6 г, 111 ммолей). Смесь нагревают с обратным холодильником в течение 24 ч, после чего добавляют еще одну порцию ди-трет-бутилацеталя N,N-диметилформамида (22,6 г, 111 ммолей). Нагревание с обратным холодильником продолжают в течение еще 24 ч, затем добавляют другую порцию ди-трет-бутилацеталя N,N-диметилформамида (22,6 г, 111 ммолей). Затем смесь снова нагревают с обратным холодильником в течение 24 ч, охлаждают до комнатной температуры, разбавляют этилацетатом и промывают насыщенным водным раствором NaCO. Органический экстракт высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан: ЭА в соотношении 9:1 и получая при этом трет-бутиповъш эфир 4-бензилокси-3-этил-5-метилбензойной кислоты (9,02 г) в виде бледножелтого масла.
R
ЖХ-МС: t=1,17 мин.
е) К раствору трет-бутилового эфира 4-бензилокси-3-этил-5-метилбензойной кислоты (9,02 г, 27,6 ммолей) в ТГФ (50 мл) и этаноле (50 мл) добавляют 10%-ный Pd/C (400 мг). Суспензию перемешивают при комнатной температуре в течение 24 ч под давлением водорода (1 бар). Катализатор затем удаляют фильтрованием, фильтрат концентрируют, снова растворяют в ТГФ (50 мл) и этаноле (50 мл), и снова прибавляют 10%-ный Pd/C (400 мг). Суспензию снова перемешивают при комнатной температуре в течение 24 ч под давлением водорода (1 бар), катализатор удаляют фильтрованием, и фильтрат концентрируют и высушивают, получая трет-бутловыи эфир 3-этил-4-гидрокси-5-метилбензойной кислоты (7,13 г) в виде бледно-желтого масла.
R
3
1
ЖХ-МС: t=1,01 мин; Н ЯМР (CDCl): δ 1,28 (t, J=7,8 Гц, 3H), 1,61 (s, 9H), 2,30 (s, 3H), 2,67 (q, J=7,5 Гц, 2Н), 5,13 (s расширенный, 1Н), 7.67 (s, 1H), 7,69 (s, 1H).
ж) трет-Бутиловый эфир 3-этил-4-[(S)-2-гидрокси-3-(2-гидроксиацетиламино)пропокси]-5-метилбензойной кислоты (5,94 г) получают исходя из полученного выше трет-бутилового эфира 3-этил-4-гидрокси-5-метилбензойной кислоты (6,53 г, 27.6 ммолей), следуя методу, приведенному для получения N-((S)-3-[2-этил-4-(N-гидроксикарбамимидоил)-6-метилфенокси]-2-гидроксипропил)-2-гидроксиацетамида.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=0,87 мин; [M+H]=368,11; Н ЯМР (CDCl): δ 1,17 (t, J=7,5 Гц, 3Н), 1,53 (s, 9H), 2.28 (s, 3H), 2,66 (q, J=7,5 Гц, 2Н), 3,17-3,26 (m, 1H), 3,38-3,46 (m, 1H), 3,65-3,75 (m, 2H), 3,83 (d, J=5,5 Гц, 2H), 3,91-3,97 (m, 1H), 5,28 (d, J=5,3 Гц, 1H), 5,54 (t, J=5,5 Гц, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,68 (t,J=5,5 Гц, 1H).
з) К охлажденному (0°С) раствору трет-бутилового эфира 3-этил-4-[(S)-2-гидрокси-3-(2-гидроксиацетиламино)пропокси]-5-метилбензойной кислоты (5,94 г, 16,2 ммолей) в ДХМ (100 мл) прибавляют ТФК (5 мл). Смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в течение 2 ч, затем концентрируют, растворяют в ацетонитриле с водой (6 мл) и выделяют с помощью препаративной ВЭЖХ, получая названное в заголовке соединение (2,20 г) в виде белого порошка.
R
+
ЖХ-МС: t=0,41 мин; [М+Н]=312,18.
Гидразид 4-бензилокси-3,5-диметилбензойной кислоты
Названное в заголовке соединение получают аналогично получению гидразида 4-бензилокси-3-этил-5-метилбензойной кислоты, как описано ниже.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=0,78 мин; [М+1]=271,19; Н ЯМР (CDCl): δ 2,30 (s, 6Н), 3,86 (s расширенный, 2Н), 4,82 (s, 2Н), 7,30-7,50 (m, 7Н), 7,58 (s расширенный, 1H).
Гидразид 4-бензилокси-3-этил-5-метилбензойной кислоты
2
3
а) К раствору 3-этил-4-гидрокси-5-метилбензальдегида (34,9 г, 0,213 молей, получен из 2-этил-6-метилфенола согласно литературным ссылкам, приведенным для получения 3-этил-4,N-дигидрокси-5-метилбензамидина) в MeCN (350 мл) добавляют KCO (58,7 г, 0,425 молей) и бензилбромид (36,4 г, 0,213 молей). Смесь перемешивают при температуре 60°С в течение 2 ч, после чего ее охлаждают до комнатной температуры, разбавляют водой и дважды экстрагируют этилацетатом. Органические экстракты промывают водой и концентрируют, получая сырой 4-бензилокси-3-этил-5-метилбензальдегид (45 г) в виде оранжевого масла.
1
3
Н ЯМР (CDCl): δ 1,29 (t, J=7,5 Гц, 3Н), 2,40 (s, 3Н), 2,77 (q, J=7,8 Гц, 2Н), 4,90 (s, 2Н), 7,31-7,52 (m, 5Н), 7,62 (d, J=1,5 Гц, 1Н), 7,66 (d, J=1,8 Гц, 1Н), 9,94 (s, 1Н).
2
4
2
б) К смеси 4-бензилокси-3-этил-5-метилбензальдегида (132 г, 0,519 молей) и 2-метил-2-бутена (364 г, 5,19 молей) в трет-бутаноле (1500 мл) прибавляют раствор дигидрата NaHPO (249 г, 2,08 молей) в воде (1500 мл). К этой смеси порциями добавляют NaClO (187,8 г, 2,08 молей). Температуру реакционную смесь поддерживают ниже 30°С, при этом наблюдается выделение газа. После завершения добавления оранжевую двухфазную смесь тщательно перемешивают в течение 3 ч, после чего ее разбавляют ТБМЭ (1500 мл). Органический слой отделяют и промывают 20%-ным водным раствором NaHS (1500 мл) и водой (500 мл). Органическую фазу затем трижды экстрагируют 0,5-нормальным водным раствором NaOH (1000 мл), водную фазу подкисляют 25%-ным водным раствором HCl (500 мл) и дважды экстрагируют ТБМЭ (1000 мл). Эти органические экстракты объединяют и выпаривают без досушивания, получая 4-бензилокси-3-этил-5-метилбензойную кислоту.
1
6
Н ЯМР (D-ДМСО): δ 1,17 (t, J=7,5 Гц, 3Н), 2,31 (s, 3Н), 2,67 (q, J=7,5 Гц, 2Н), 4,86 (s, 2Н), 7,34-7,53 (m, 5Н), 7,68 (s, 2Н), 12,70 (s, 1Н).
в) 4-Бензилокси-3-этил-5-метилбензойную кислоту превращают в гидразид 4-бензилокси-3-этил-5-метилбензойной кислоты, следуя стадии в) синтеза гидразида 4-аллилокси-3,5-диметилбензойной кислоты.
R
+
ЖХ-МС: t=0,82 мин, [М+1]=285,44.
трет-Бутиловый эфир 3-[4-(N-гидроксикарбамимидоил)-2,6-диметилфенил]пропионовой кислоты
4
а) К охлажденному льдом раствору метилового эфира 4-гидрокси-3,5-диметилбензойной кислоты (7,52 г, 41,7 ммолей) в ДХМ (250 мл) и пиридине (10 мл) прибавляют ангидрид трифторметансульфоновой кислоты (13,0 г, 45,9 ммолей) в течение 20 мин. После завершения добавления ледяную баню удаляют и реакционную смесь перемешивают в течение еще 1 ч при комнатной температуре. Смесь затем разбавляют ДХМ (150 мл), промывают 10%-ным водным раствором лимонной кислоты, а затем рассолом, высушивают над MgSO, фильтруют и выпаривают. Остаток очищают с помощью ускоренной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан: ЭА в соотношении 9:1, получая при этом метиловый эфир 3,5-диметил-4-трифторметансульфонилоксибензойной кислоты (11,8 г) в виде бесцветных мелких кристаллов.
R
ЖХ-МС: t=1,08 мин.
2
2
3
4
б) К перемешиваемому раствору полученного выше трифлата (11,8 г, 37,8 ммолей) в сухом ДМФ (155 мл) последовательно добавляют в атмосфере азота триэтиламин (7,6 г, 75,6 ммолей), трет-бутилакрилат (48,4 г, 378 ммолей), ДФФП (779 мг, 1,89 ммолей) и Pd(OAc) (424 мг, 1,89 ммолей). Смесь перемешивают при температуре 115°С в течение 18 ч, после чего добавляют вторую порцию ДФФП (160 мг, 0,39 ммолей) и Pd(OAc) (80 мг, 0,36 ммолей). Перемешивание продолжают в течение 4 ч при температуре 115°С, а затем смесь охлаждают до комнатной температуры, разбавляют диэтиловым эфиром (350 мл) и промывают 1-нормальным водным раствором HCl и насыщенным водным раствором NaHCO. Органический экстракт высушивают над MgSO, фильтруют и выпаривают. Остаток очищают с помощью ускоренной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан: ЭА в соотношении 4:1 и получая при этом метиловый эфир 4-(2-трет-бутоксикарбонилвинил)-3,5-диметилбензойной кислоты (11,21 г) в виде бесцветного твердого вещества.
R
ЖХ-MC: t=1,09 мин.
в) К раствору метилового эфира 4-(2-трет-бутоксикарбонилвинил)-3,5-диметилбензойной кислоты (11,2 г, 38,6 ммолей) в этаноле (50 мл) и ТГФ (50 мл) прибавляют 10%-ный Pd/C (1,0 г). Смесь перемешивают в течение 16 ч при комнатной температуре под давлением водорода (2,5 бар). Затем катализатор отфильтровывают, фильтрат концентрируют и высушивают в высоком вакууме, получая метиловый эфир 4-(2-трет-бутоксикарбонилэтил)-3,5-диметилбензойной кислоты (10,8 г) в виде бесцветного масла.
R
ЖХ-МС: t=1,08 мин.
4
г) К раствору метилового эфира 4-(2-трет-бутоксикарбонилэтил)-3,5-диметилбензойной кислоты (10,8 г, 37,0 ммолей) в этаноле (100 мл) прибавляют 2-молярный водный раствор LiOH (50 мл) при температуре 0°С. Мутную смесь перемешивают при температуре 0°С в течение 30 мин, а затем при комнатной температуре в течение 4 ч, разбавляют 10%-ным водным раствором лимонной кислоты и трижды экстрагируют диэтиловым эфиром. Объединенные органические экстракты высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют. Твердый остаток суспендируют в смеси диэтиловый эфир/гептан, перемешивают при комнатной температуре и фильтруют. Указанную процедуру в смеси диэтиловый эфир/гептан повторяют еще раз. Твердый продукт отделяют и высушивают в высоком вакууме, получая 4-(2-трет-бутоксикарбонилэтил)-3,5-диметилбензойную кислоту (5,09 г) в виде белого кристаллического порошка.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=0,95 мин, [М+1]=279,14; Н ЯМР (CDCl): δ 1,47 (s, 9H), 2,30-2,40 (m, 2H), 2,39 (s, 6H), 2,94-3,03 (m, 2H), 7,75 (s, 2H).
3
4
д) К суспензии 4-(2-трет-бутоксикарбонилэтил)-3,5-диметилбензойной кислоты (8,00 г, 28,7 ммолей) в изопропаноле (100 мл) прибавляют ГОБТ (4,27 г, 31,6 ммолей), а затем ЭДК-гидрохлорид (6,34 г, 33,1 ммолей). После перемешивание при комнатной температуре в течение 1 ч добавляют 25%-ный водный раствор аммиака (16,1 мл). Перемешивание продолжают в течение 30 мин, после чего изопропанол выпаривают при пониженном давлении. Оставшийся раствор разбавляют изопропилацетатом (200 мл), трижды промывают приблизительно 0,5-нормальным водным раствором NaHCO (100 мл), а затем водой (50 мл), высушивают над MgSO, фильтруют, концентрируют и высушивают, получая трет-бутиловый эфир 3-(4-карбамоил-2,6-диметилфенил)пропионовой кислоты (7,5 г) в виде грязно-белого твердого вещества.
е) К охлажденному льдом раствору трет-бутилового эфира 3-(4-карбамоил-2,6-диметилфенил)пропионовой кислоты (7,00 г, 25,2 ммолей) и триэтиламина (7,66 г, 75,7 ммолей) в ДХМ (100 мл) медленно прибавляют ангидрид трифторуксусной кислоты (6,06 г, 28,8 ммолей), поддерживая температуру реакции ниже 15°С. Прозрачный желтый раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч, после чего дважды промывают водой (100 мл) и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью перекристаллизации из метанола, получая трет-бутиловый эфир 3-(4-циано-2,6-диметилфенил)пропионовой кислоты (4,2 г) в виде белого твердого вещества.
1
3
Н ЯМР (CDCl): δ 1,48 (s, 9H), 2,33-2,37 (m, 2H), 2,38 (s, 6H), 2,94-3,01 (m, 2H), 7,31 (s, 2H).
4
ж) Раствор трет-бутилового эфира 3-(4-циано-2,6-диметилфенил)пропионовой кислоты (4,1 г, 15,8 ммолей), гидрохлорида гидроксиламина (1,65 г, 23,7 ммолей) и триэтиламина (3,20 г, 31,6 ммолей) в метаноле (40 мл) нагревают с обратным холодильником в течение 2 ч, после чего растворитель удаляют в вакууме. Остаток переносят в изопропилацетат (50 мл) и дважды промывают водой (50 мл). Органический экстракт высушивают над MgSO, фильтруют, выпаривают и высушивают, получая отреот-бутиловый эфир 3-[4-(N-гидроксикарбамимидоил)-2,6-диметилфенил]пропионовой кислоты (4,4 г) в виде белого твердого вещества.
трет-Бутиловый эфир 3-[2-этил-4-(N-гидроксикарбамимидоил)-6-метилфенил]пропионовой кислоты
Названное в заголовке соединение получают аналогично получению трет-бутилового эфира 3-[4-(N-гидроксикарбамимидоил)-2,6-диметилфенил]пропионовой кислоты.
1
3
Н ЯМР (CDCl): δ 1,26 (t, J=7,5 Гц, 3H), 2,34-2,41 (m, 5H), 2,70 (q, J=7,8 Гц, 2Н), 2,94-3,01 (m, 2H), 4,85 (s расширенный, 1Н), 7,28 (s, 1H), 7,32 (s, 1H).
3-{2-Этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенил}пропионовая кислота
3
4
R
+
а) К раствору 5-изобутил-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (246 мг, 1,07 ммолей) и ДИПЭА (415 мг, 3,21 ммолей) в ДМФ (4 мл) прибавляют РуВОР (589 мг, 1,13 ммолей) при температуре 0°С. Смесь перемешивают в течение 15 мин при этой температуре, после чего добавляют трет-бутиловый эфир 3-[2-этил-4-(N-гидроксикарбамимидоил)-6-метилфенил]пропионовой кислоты (328 мг, 1,07 ммолей) и перемешивание продолжают в течение 1 ч при температуре 0°С. Реакцию останавливают, добавляя воду, реакционную смесь разбавляют насыщенным водным раствором NaHCO и дважды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют, получая сырой промежуточный гидроксиамидиновый сложный эфир; ЖХ-МС; t=1,10 мин, [М+Н]=482,27. Этот продукт растворяют в диоксане (10 мл) и смесь перемешивают при температуре 80°С в течение 15 ч. Растворитель выпаривают и сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан: ЭА в соотношении 7:3 и получая при этом трет-бутиловъш эфир 3-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенил}пропионовой кислоты (420 мг) в виде бесцветного масла.
R
+
ЖХ-МС: t=1,26 мин, [М+Н]=464,34.
б) Полученный выше трет-бутиловый эфир (437 мг, 0,943 ммолей) растворяют в 6-нормальном водном растворе HCl и смесь перемешивают при температуре 65°С в течение 18 ч. Растворитель удаляют в вакууме, а остаток промывают этилацетатом и высушивают в высоком вакууме, получая названное в заголовке соединение (371 мг) в виде белого твердого вещества.
R
6
+
1
ЖХ-МС: t=1,10 мин. [М+Н]=408,21; Н ЯМР (D-ДМСО): δ 0,93 (d, J=6,5 Гц, 6Н), 1,23 (t, J=7,5 Гц, 3Н), 1,91 (гептет, J=6,8 Гц), 2,37-2,43 (m, 5Н), 2,44 (s, 3Н), 2,62 (d, J=7,0 Гц, 2Н), 2,74 (q, J=7,5 Гц, 2Н), 2,91-2,98 (m, 2Н), 7,75 (s, 1Н), 7,76 (s, 1Н), 8,16 (s, 1Н), 8,53 (s, 1Н), 10,26 (s расширенный, 1Н).
Примеры
Пример 1: N-((S)-3-{2-Этил-4-[5-(6-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}-2-гидроксипропил)-2-гидроксиацетамид
3
4
3
К раствору 6-изобутил-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (100 мг, 0,435 ммолей) и ДИПЭА (169 мг, 1,31 ммолей) в ДМФ (5 мл) прибавляют ТБТУ (210 мг, 0,653 ммолей) при температуре 0°С. Смесь перемешивают в течение 15 мин при температуре 0°С, после чего добавляют N-((S)-3-[2-этил-4-(N-гидроксикарбамимидоил)-6-метилфенокси]-2-гидроксипропил)-2-гидроксиацетамид (170 мг, 0,522 ммолей). Перемешивание продолжают при температуре 0°С в течение 1 ч. Затем реакцию останавливают, добавляя воду. Смесь разбавляют насыщенным водным раствором NaHCO и экстрагируют этилацетатом и дважды ДХМ. Объединенные органические экстракты высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют, получая сырой промежуточный гидроксиамидиновый сложный эфир. Этот продукт растворяют в диоксане (5 мл) и смесь перемешивают при температуре 80°С в течение 24 ч. Растворитель выпаривают, а сырой продукт очищают с помощью препаративной ТСХ, используя ДХМ, содержащий 10% 7-нормального раствора NH в метаноле, а затем с помощью препаративной ВЭЖХ, получая названное в заголовке соединение (21 мг) в виде бледно-желтого масла.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=1,00 мин, [М+Н]=483,26; Н ЯМР (CDCl): δ 0,99 (d, J=6,8 Гц, 6Н), 1,29 (t, J=7,5 Гц, 3Н), 2,21 (гептет, J=6,8 Гц, 1Н), 2,36 (s, 3Н), 2,48 (s, 3Н), 2,72 (q, J=7,5 Гц, 2Н), 2,79 (d, J=7,3 Гц, 2Н), 3,47-3,55 (m, 1Н), 3,74-3,92 (m, 3Н), 4,16-4,24 (m, 3Н), 7,18 (s, 1Н), 7,23 (t расширенный, J=5,8 Гц, 1Н), 7,88 (s, 1Н), 7,90 (s, 1Н), 7,99 (s, 1Н).
Пример 2: 2-Этил-4-[5-(4-изобутил-6-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенол
3
4
R
+
К раствору 4-изобутил-6-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (480 мг, 2,09 ммолей) и ДИПЭА (810 мг, 6,27 ммолей) в ДМФ (20 мл) прибавляют РуВОР (1150 мг, 2,21 ммолей) при температуре 0°С. Смесь перемешивают в течение 15 мин при этой температуре, после чего добавляют 3-этил-4,Н-дигидрокси-5-метилбензамидин (429 мг, 2,21 ммолей) и перемешивание продолжают в течение 1 ч при этой же температуре. Реакцию останавливают, добавляя воду, реакционную смесь разбавляют насыщенным водным раствором NaHCO и дважды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют, получая сырой промежуточный гидроксиамидиновый сложный эфир. ЖХ-МС: t=0,90 мин, [М+Н]=370,16. Этот продукт растворяют в диоксане (10 мл) и смесь перемешивают при температуре 80°С в течение 15 ч. Затем растворитель выпаривают, а сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан: ЭА в соотношении 7:3 и получая при этом названное в заголовке соединение (112 мг) в виде красноватого масла.
R
+
ЖХ-МС: t=1,12 мин, [М+Н]=352,17.
Пример 3: (S)-3-{2-Этил-4-[5-(4-изобутил-6-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси} пропан-1,2-диол
4
К раствору 2-этил-4-[5-(4-изобутил-6-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенола (41 мг, 0,116 ммолей) в изопропаноле (3 мл) и 3-нормальном водном растворе NaOH (0,4 мл) прибавляют (S)-3-хлор-1,2-пропандиол (66 мг, 0,577 ммолей). Смесь перемешивают при температуре 65°С в течение 16 ч, после чего добавляют еще одну порцию (S)-3-хлор-1,2-пропандиола (66 мг, 0,577 ммолей) и 3-нормальный водный раствор NaOH (0,4 мл). Перемешивание продолжают при температуре 65°С в течение 24 ч. Смесь охлаждают до комнатной температуры, разбавляют водой, и снова экстрагируют диэтиловым эфиром. Объединенные органические экстракты высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью препаративной ТСХ, используя смесь ДХМ: метанол в соотношении 9:1 и получая при этом названное в заголовке соединение (16 мг) в виде бесцветного масла.
R
+
ЖХ-МС: t=1,02 мин, [М+Н]=426,17.
Пример 4: (S)-1-амино-3-{2-этил-4-[5-(4-изобутил-6-метилпиридин-2-ил)-[1,2,41оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}пропан-2-ол
а) К раствору 2-этил-4-[5-(4-изобутил-6-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенола (79 мг, 0,224 ммолей) в ТГФ (6 мл) прибавляют (R)-(+)-глицидол (25 мг, 0,335 ммолей) и трифенилфосфин (88 мг, 0,335 ммолей). Смесь перемешивают и охлаждают до температуры 0°С, после чего добавляют ДЭАД (58 мг, 0,335 ммолей, в виде 40%-ного раствора в толуоле). Смесь нагревают до комнатной температуры, и перемешивание продолжают в течение 4 ч. Затем добавляют еще одну порцию (R)-(+)-глицидола (8 мг, 0,112 ммолей), трифенилфосфина (30 мг, 0,112 ммолей) и ДЭАД (19 мг, 0,112 ммолей). Перемешивание продолжают в течение 4 ч, после чего растворитель выпаривают. Сырой продукт очищают с помощью препаративной ТСХ, используя смесь гептан:ЭА в соотношении 7:3 и получая при этом 2-[3-((S)-3-этил-5-метил-4-оксиранилметоксифенил)-[1,2,4]оксадиазол-5-ил]-4-изобутил-6-метилпиридин (46 мг) в виде желтого масла.
R
+
ЖХ-МС: t=1,17 мин, [М+Н]=408,19.
3
3
б) Полученный выше эпоксид (46 мг, 0,114 ммолей) растворяют в 7-нормальном растворе NH в метаноле (10 мл) и смесь перемешивают при температуре 45°С в течение 6 ч в запаянной ампуле. Растворитель выпаривают, и сырой продукт очищают с помощью препаративной ТСХ, используя ДХМ, содержащий 6% 7-нормального раствора NH в метаноле и получая при этом названное в заголовке соединение (38 мг) в виде белого твердого вещества.
R
+
ЖХ-МС: t=0,88 мин, [М+Н]=425,24.
Пример 5: N-((S)-3-{2-Этил-4-[5-(4-изобутил-6-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}-2-гидроксипропил)-2-гидроксиацетамид
3
4
К раствору (S)-1-амино-3-{2-этил-4-[5-(4-изобутил-6-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}пропан-2-ола (36 мг, 86 мкмолей), ГОБТ (14 мг, 103 мкмолей) и гликолевой кислоты (8 мг, 103 мкмолей) в ТГФ (3 мл) добавляют ЭДК-HCl (20 мг, 103 мкмолей). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч, после чего ее разбавляют насыщенным водным раствором NaHCO и дважды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью препаративной ТСХ, используя ДХМ, содержащий 11% метанола, получая при этом названное в заголовке соединение (36 мг) в виде бледно-желтого масла.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=0,98 мин, [М+Н]=483,21; Н ЯМР (CDCl): δ 0,98 (d, J=6,3 Гц, 6Н), 1,31 (t, J=7,5 Гц, 3Н), 1,97-2,08 (m, 1Н), 2,38 (s, 3Н), 2,59 (d, J=6,8 Гц, 2Н), 2,69-2,78 (m, 5Н), 2,81 (s расширенный, 1H), 3,42 (s расширенный, 1Н), 3,48-3,57 (m, 2Н), 3,74-3,93 (m, 2Н), 4,17-4,25 (m, 3Н), 7,05 (s расширенный, 1Н), 7,19 (s, 1Н), 7,93 (s, 1Н), 7,94 (s, 2Н).
Пример 6: 4-[5-(6-Изобутил-4-метоксипиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-2,6-диметилфенол
Названное в заголовке соединение получают аналогично получению соединения примера 2 исходя из 6-изобутил-4-метоксипиридин-2-карбоновой кислоты и 4,N-дигидрокси-3,5-диметилбензамидина.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=1,01 мин, [М+Н]=354,28; Н ЯМР (CDCl): δ 0,99 (d, J=6,8 Гц, 6Н). 2,19-2,28 (m, 1Н), 2,35 (s, 6Н), 2,78 (d, J=7,5 Гц, 2Н), 3,98 (s, 3Н), 4,96 (s, 1Н), 6,85 (d, J=2,3 Гц, 1Н), 7,70 (d, J=2,3 Гц, 1Н), 7,88 (s, 2Н).
Примеры 7-10
Соединения следующих примеров получают аналогично получению соединений предыдущих примеров исходя из 4-[5-(6-изобутил-4-метоксипиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-2,6-диметилфенола.
Пример
Аналогичный пример
R
ЖХ-МС
t<sub>R</sub> [мин]
[М+Н]<sup>+</sup>
7
4
<img file="00000021.tif" he="15" wi="32" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,98*
427,04
8
4
<img file="00000022.tif" he="15" wi="32" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,98*
427,02
9
5
<img file="00000023.tif" he="17" wi="36" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,86*
485,26
10
5
<img file="00000024.tif" he="17" wi="36" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,85*
485,21
Пример 10
1
3
Н ЯМР (CDCl): δ 0,99 (d, J=6,5 Гц, 6Н), 2,16-2,27 (m, 1Н), 2,36 (s, 6Н), 2,78 (d, J=7,3 Гц, 2Н), 3,47-3,71 (m, 2Н), 3,72-3,92 (m, 4Н), 3,98 (s, 3Н), 4,14-4,23 (m, 3Н), 6,86 (d, J=2,3 Гц, 1Н), 7,15 (t, J=5,3 Гц), 7,69 (d, J=2,0 Гц, 1Н), 7,88 (s, 2Н).
Пример 11: 2-Этил-4-[5-(6-изобутил-4-метоксипиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенол
Названное в заголовке соединение получают аналогично получению примера 2 исходя из 6-изобутил-4-метоксипиридин-2-карбоновой кислоты и 3-этил-4,N-дигидрокси-5-метилбензамидина.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=1,11 мин, [M+H]=368,12; Н ЯМР (CDCl): δ 0,99 (d, J=6,8 Гц, 6Н), 1,32 (t, J=7,8 Гц, 3Н), 2,24 (гептет, J=6,8 Гц), 2,35 (s, 3Н), 2,73 (q, J=7,8 Гц, 2Н), 2,78 (d, J=7,3 Гц, 2Н), 3,98 (s, 3Н), 5,02 (s, 1Н), 6,85 (d, J=1,3 Гц, 1Н), 7,70 (d, J=1,3 Гц, 1Н), 7,89 (s, 2Н).
Примеры 12-17
Соединения следующих примеров получают аналогично получению соединений предыдущих примеров исходя из 2-этил-4-[5-(6-изобутил-4-метоксипиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенола.
Пример
Аналогичный пример
R
ЖХ-МС
t<sub>R</sub> [мин]
[M+H]<sup>+</sup>
12
3
<img file="00000026.tif" he="15" wi="30" img-content="undefined" img-format="tif" />
1.01
442,12
13
3
<img file="00000027.tif" he="15" wi="30" img-content="undefined" img-format="tif" />
1,01
442,11
14
4
<img file="00000021.tif" he="15" wi="32" img-content="undefined" img-format="tif" />
1,02*
441,26
15
4
<img file="00000022.tif" he="15" wi="32" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,86
441,27
16
5
<img file="00000023.tif" he="17" wi="36" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,96
499,11
17
5
<img file="00000024.tif" he="17" wi="36" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,97
499,19
Пример 17
1
3
Н ЯМР (CDCl): δ 0,99 (d, J=6,5 Гц, 6Н), 1,31 (t, J=7,3 Гц, 3Н), 2,18-2,28 (m, 1Н), 2,37 (s, 3Н), 2,73 (q, J=7,5 Гц, 2Н), 2,78 (d, J=7,3 Гц, 2Н), 3,01 (s расширенный, 1Н), 3,46-3,56 (m, 2Н), 3,74-3,93 (m, 3Н), 3,98 (s, 3H), 4,16-4,24 (m, 3Н), 6,86 (s, 1Н), 7,08 (s расширенный, 1Н), 7,70 (s, 1Н), 7,90 (s, 1Н), 7,91 (s, 1Н).
Пример 18: 4-[5-(6-Изобутил-4-метоксипиридин-2-ил)-П,3.4]оксадиазол-2-ил]-2,6-диметилфенол
2
4
2
4
R
2
4
2
4
+
а) К раствору 6-изобутил-4-метоксипиридин-2-карбоновой кислоты (270 мг, 1,10 ммолей), гидразида 4-бензилокси-3,5-диметилбензойной кислоты (327 мг, 1,21 ммолей) и ДИПЭА (455 мг, 3,52 ммолей) в ДХМ (15 мл) добавляют РуВОР (858 мг, 1,65 ммолей) при температуре 0°С. Смесь перемешивают в течение 30 мин при комнатной температуре, разбавляют диэтиловым эфиром и промывают 1-нормальным водным раствором NaOH, а затем 1-молярным водным раствором NaHPO. Органический экстракт высушивают над NaSO, фильтруют и концентрируют, получая сырой промежуточный гидразид; ЖХ-МС: t=1,00 мин, [М+Н]=462,23. Этот продукт (1,13 г) растворяют в ДХМ (15 мл) и пиридине (1 мл) и охлаждают до температуры 0°С, после чего добавляют по каплям ангидрид трифторметансульфоновой кислоты (1,38 г, 4,89 ммолей). Затем смесь нагревают до комнатной температуры, и перемешивание продолжают в течение 16 ч. Реакцию останавливают, добавляя 3-диметиламино-1-пропиламин (50 мг, 0,49 ммолей). Реакционную смесь дважды промывают 1-нормальным водным раствором NaHPO, а затем водой, высушивают над NaSO, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан: ЭА в соотношении 4:1 и получая при этом 2-[5-(4-бензилокси-3,5-диметилфенил)-[1,3,4]оксадиазол-2-ил]-6-изобутил-4-метоксипиридин (414 мг) в виде желтого масла.
R
+
ЖХ-МС: t=1,15 мин, [М+Н]=444,21.
б) Полученный выше бензиловый эфир (414 мг, 0,934 ммолей) растворяют в ТГФ (5 мл) и метаноле (5 мл), после чего добавляют 10%-ный Pd/C (200 мг). Суспензию гидрируют при комнатной температуре под давлением водорода (1 бар) в течение 72 ч. Катализатор удаляют фильтрованием, а фильтрат концентрируют и высушивают, получая названное в заголовке соединение (308 мг) в виде белого твердого вещества.
r
3
+
1
ЖХ-МС: t=0,77* мин, [М+Н]=354,30; Н ЯМР (CDCl): δ 1,01 (d, J=6,5 Гц, 6Н), 2,19-2,30 (m, 1Н), 2,36 (s, 6Н), 2,76 (d, J=7,3 Гц, 2Н), 3,97 (s, 3Н), 5,07 (s, 1Н), 6,80 (d, J=2,3 Гц, 1Н), 7,66 (d, J=2,3 Гц, 1Н), 7,88 (s, 2Н).
Примеры 19-24
Соединения следующих примеров получают исходя из примера 18 аналогично получению соединений предыдущих примеров.
Пример
Аналогичный пример
R
ЖХ-МС
t<sub>R</sub> [мин]
[M+H]<sup>+</sup>
19
3
<img file="00000026.tif" he="15" wi="30" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,91*
428,18
20
3
<img file="00000027.tif" he="15" wi="30" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,98
428,16
21
4
<img file="00000021.tif" he="15" wi="32" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,84*
427,07
22
4
<img file="00000022.tif" he="15" wi="32" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,84*
427,04
23
5
<img file="00000023.tif" he="17" wi="36" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,78*
489,25
24
5
<img file="00000024.tif" he="17" wi="36" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,78
489,24
Пример 20
1
3
Н ЯМР (CDCl): δ 0,99 (d, J=6,8 Гц, 6Н), 2,15 (s расширенный, 1Н), 2,19-2,27 (m, 1Н), 2,39 (s, 6Н), 2,78 (d, J=7,3 Гц, 2Н), 3,82-3,97 (m, 5Н), 3,98 (s, 3Н), 4,13-4,20 (m, 1Н), 6,86 (d, J=2,3 Гц, 1Н), 7,70 (d, J=2,0 Гц, 1Н), 7,91 (s, 2Н).
Пример 25: 2-Этил-4-[5-(6-изобутил-4-метоксипиридин-2-ил)-[1,3,4]оксадиазол-2-ил]-6-метилфенол
Названное в заголовке соединение получают аналогично получению соединения примера 18 исходя из 6-изобутил-4-метоксипиридин-2-карбоновой кислоты и гидразида 4-бензилокси-3-этил-5-метилбензойной кислоты.
R
+
ЖХ-МС: t=1,04 мин, [М+Н]=368,33.
Примеры 26-31
Соединения следующих примеров получают исходя из примера 25 аналогично получению соединений предыдущих примеров.
Пример
Аналогичный пример
R
ЖХ-МС
t<sub>R</sub> [мин]
[M+H]<sup>+</sup>
26
3
<img file="00000026.tif" he="15" wi="30" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,94*
442,24
27
3
<img file="00000027.tif" he="15" wi="30" img-content="undefined" img-format="tif" />
1,00
442,11
28
4
<img file="00000021.tif" he="15" wi="32" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,88*
441,26
29
4
<img file="00000022.tif" he="15" wi="32" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,87*
441,25
30
5
<img file="00000023.tif" he="17" wi="36" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,80*
499,26
31
5
<img file="00000024.tif" he="17" wi="36" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,80*
499,26
Пример 31
1
3
Н ЯМР (CDCl): δ 1,01 (d, J=6,5 Гц, 6Н), 1,31 (t, J=7,5 Гц, 3Н), 2,19-2,28 (m, 1Н), 2,39 (s, 3Н), 2,70-2,79 (m, 4Н), 3,49-3,58 (m, 1Н), 3,76-3,93 (m, 4Н), 3,97 (s, 3H), 4,18-4,25 (m, 3H), 6,82 (d, J=2,0 Гц, 1Н), 7,07 (s расширенный, 1Н), 7,66 (d, J=2,0 Гц, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,91 (s, 1H).
Пример 32: 2-Этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенол
Названное в заголовке соединение получают аналогично получению соединения примера 2 исходя из 5-изобутил-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты и 3-этил-4,N-дигидрокси-5-метилбензамидина.
R
+
ЖХ-МС: t=1,12 мин, [М+Н]=352,12.
Примеры 33-36
Соединения следующих примеров получают исходя из соединения примера 32 аналогично получению соединений предыдущих примеров.
Пример
Аналогичный пример
R
ЖХ-МС
t<sub>R</sub> [мин]
[M+H]<sup>+</sup>
33
3
<img file="00000026.tif" he="15" wi="30" img-content="undefined" img-format="tif" />
1,02
426,12
34
3
<img file="00000027.tif" he="15" wi="30" img-content="undefined" img-format="tif" />
1,01
426,45
35
4
<img file="00000022.tif" he="15" wi="32" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,86
425,46
36
5
<img file="00000031.tif" he="17" wi="36" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,98
483,16
Пример 33
1
3
Н ЯМР (CDCl): δ 1,00 (d, J=6,8 Гц, 6H), 1,32 (t, J=7,5 Гц, 3Н), 1,89-2,01 (m, 1H), 2,10 (t расширенный, J=5,8 Гц, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,47 (s, 3H), 2,63 (d, J=7,3 Гц, 2H), 2,72-2,80 (m, 3H), 3,81-3,98 (m, 4H), 4,13-4,20 (m, 1H), 7,95 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 8,09 (s, 1H), 8,55 (s, 1H).
Пример 36
1
3
Н ЯМР (CDCl): δ 0,99 (d, J=6,8 Гц, 6Н), 1,29 (t, J=7,5 Гц, 3Н), 1,94 (гептет, J=6,8 Гц), 2,36 (s, 3Н), 2,46 (s, 3Н), 2,62 (d, J=7,0 Гц, 2Н), 2,72 (q, J=7,5 Гц, 2Н), 3,37 (s расширенный, 1Н), 3,47-3,55 (m, 1Н), 3,64 (s расширенный, 2Н), 3,74-3,92 (m, 3Н), 4,16-4,24 (m, 3Н), 7,16 (t, J=5,3 Гц, 1Н), 7,91 (s, 1Н), 7,93 (s, 1Н), 8,09 (s, 1Н), 8,53 (s, 1Н).
Пример 37: 3-{2-Этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенил}-N-метилпропионамид
3
4
К раствору 3-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенил}пропионовой кислоты (40 мг 89 мкмолей) в ДМФ (5 мл) прибавляют ДИПЭА (35 мг, 268 мкмолей). Смесь охлаждают до температуры 0°С, после чего добавляют РуВОР (51 мг, 98 мкмолей). Смесь перемешивают при температуре 0°С в течение 15 мин, после чего добавляют метиламин (58 мкл 2-молярного раствора в ТГФ). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч, разбавляют насыщенным водным раствором NaHCO и дважды экстрагируют этилацетатом. Объединенные органические экстракты высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью препаративной ТСХ, используя смесь гептан: ЭА в соотношении 1:4 и получая при этом названное в заголовке соединение (35 мг) в виде белого твердого вещества.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=1,10 min, [М+Н]=421,25; Н ЯМР (CDCl): δ 1,00 (d, J=6,5 Гц, 6Н), 1,31 (t, J=7,3 Гц, 3Н), 1,89-2,00 (m, 1Н), 2,34-2,41 (m, 2Н), 2,44 (s, 3Н), 2,47 (s, 3Н), 2,63 (d, J=7,0 Гц, 2Н), 2,76 (q, J=7,8 Гц, 2Н), 2,85 (d, J=4,5 Гц, 3Н), 3,06-3,13 (m, 2Н), 5,38 (s расширенный, 1Н), 7,91 (s, 1Н), 7,93 (s, 1Н), 8,10(s, 1H), 8,55 (s, 1Н).
Пример 38: 3-{2-Этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенил}-N-(2-гидроксиэтил)пропионамид
Названное в заголовке соединение получают аналогично получению соединения примера 37, используя этаноламин.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=1,02 мин, [М+Н]=451,23; Н ЯМР (CDCl): δ 1,00 (d, J=6,3 Гц, 6Н), 1,31 (t, J=7,3 Гц, 3Н), 1,89-2,01 (m, 1Н), 2,37-2,45 (m, 6Н), 2,47 (s, 3Н), 2,63 (d, J=7,0 Гц, 2Н), 2,73-2,81 (m, 2Н), 3,07-3,14 (m, 2Н), 3,44-3,50 (m, 2Н), 3,73-3,79 (m, 2H), 5,84 (s расширенный, 1Н), 7,91 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 8,10 (s, 1 H), 8,55 (s, 1H).
Пример 39: N-(2-Аминоэтил)-3-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенил}пропионамид
а) трет-Бутиловый эфир [2-(3-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенил}пропиониламино)этил]карбаминовой кислоты получают аналогично получению соединения примера 37 конденсацией трет-бутилового эфира (2-аминоэтил)карбаминовой кислоты с 3-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенил}пропионовой кислотой.
R
+
ЖХ-МС: t=1,14 мин, [M+H]=550,33.
3
б) Раствор полученного выше трет-бутилоксикарбонил-защищенного амина (44 мг, 80 мкмолей) в 4-молярном растворе HCl в диоксане (5 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель удаляют в вакууме, а сырой продукт очищают с помощью препаративной ТСХ, используя ДХМ, содержащий 4% 7-нормального раствора NH в метаноле, и получая при этом названное в заголовке соединение в виде белого твердого вещества.
R
+
ЖХ-МС: t=0,89 мин, [М+Н]=450,21.
Пример 40: 3-(3-{2-Этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенил}пропиониламино)пропионовая кислота
а) трет-Бутиловый эфир 3-(3-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенил}пропиониламино)пропионовой кислоты получают аналогично получению соединения примера 37 конденсацией гидрохлорида трет-бутипового эфира 3-аминопропионовой кислоты с 3-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенил}пропионовой кислотой.
R
+
ЖХ-МС: t=1,18 мин, [М+Н]=535,33.
б) Раствор полученного выше трет-бутилового эфира (40 мг, 75 мкмолей) в 4-молярном растворе HCl в диоксане (5 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч, после чего растворитель выпаривают. Сырой продукт очищают с помощью препаративной ТСХ, используя смесь ДХМ: метанол в соотношении 9:1 и получая при этом названное в заголовке соединение (23 мг) в виде белого твердого вещества.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=1,03 мин, [М+Н]=479,30; H ЯМР (CDCl): δ 0,99 (d, J=6,3 Гц, 6Н), 1,26 (t, J=7,8 Гц, 3Н), 1,87-1,98 (m, 1Н), 2,34-2,41 (m, 5Н), 2,43-2,51 (m, 5Н), 2,61 (d, J=6,8 Гц, 2Н), 2,68-2,77 (m, 2Н), 3,01-3,09 (m, 2Н), 3,39-3,61 (m, 2Н), 6,34 (s расширенный, 1Н), 7,82 (s, 1Н), 7.84 (s, 1Н), 8,06 (s, 1Н), 8,52 (s, 1Н).
Пример 41: 2-Этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,3,4]оксадиазол-2-ил]-6-метилфенол
Названное в заголовке соединение получают аналогично получению соединения примера 18 исходя из 5-изобутил-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты и гидразида 4-бензилокси-3-этил-5-метилбензойной кислоты.
R
+
ЖХ-МС: t=1,07 мин, [М+Н]=357,18.
Примеры 42-44
Соединения следующих примеров получают исходя из соединения примера 41 аналогично получению соединений предыдущих примеров.
Пример
Аналогичный пример
R
ЖХ-МС
t<sub>R</sub> [мин]
[M+H]<sup>+</sup>
42
3
<img file="00000027.tif" he="15" wi="30" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,96
426,15
43
4
<img file="00000022.tif" he="15" wi="32" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,83
425,27
44
5
<img file="00000033.tif" he="17" wi="36" img-content="undefined" img-format="tif" />
0,92
483,23
Пример 42
1
3
Н ЯМР (CDCl): δ 1,00 (d, J=6,5 Гц, 6Н), 1,31 (t, J=7,3 Гц, 3Н), 1,94 (гептет, J=6,5 Гц, 1Н), 2,40 (s, 3Н), 2,45 (s, 3Н), 2,61 (d, J=7,0 Гц, 2Н), 2,76 (q, J=7,5 Гц, 2Н), 3,81-3,98 (m, 4H), 4,15-4,21 (m, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 8,12 (s, 1H), 8,50 (s, 1H).
Пример 45: 2-Этил-4-[5-(6-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-Г1.2,4]оксадиазол-3-ил1-6-метилфенол
Названное в заголовке соединение (30 мг) получают в виде бледно-желтого масла аналогично получению соединения примера 2 исходя из 6-изобутил-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (100 мг, 435 мкмолей) и 3-этил-4,N-дигидрокси-5-метилбензамидина (85 мг, 435 мкмолей).
R
+
ЖХ-МС: t=1,13 мин, [М+Н]=352,28.
Пример 46: (S)-3-{2-Этил-4-[5-(6-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-Г1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}пропан-1,2-диол
Названное в заголовке соединение (32 мг) получают в виде бесцветного масла аналогично получению соединения примера 3 исходя из соединения примера 45 (30 мг, 85 мкмолей).
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=1,07 мин, [М+Н]=426,49; Н ЯМР (CDCl): δ 0,98 (d, J=6,8 Гц, 6Н), 1,31 (t. J=7,5 Гц, 3Н), 2,22 (гептет, J=7,0 Гц, 1Н), 2,38 (s, 3H), 2,45 (s расширенный, 1Н), 2,47 (s, 3H), 2,75 (q, J=7,5 Гц, 2Н), 2,79 (d, J=7,3 Гц, 2Н), 3,00 (s расширенный, 1Н), 3,80-3,96 (m, 4H), 4,13-4,20 (m, 1H), 7,17 (s, 1H), 7,91 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,99 (s, 1H).
Пример 47: 2-{2-Этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил1-6-метилфенокси}этанол
4
К раствору соединения примера 32 (1,00 г, 2,85 ммолей) в изопропаноле (10 мл) и 3-молярного водного раствора NaOH (3 мл) прибавляют 2-бромэтанол (1,42 г, 11,4 ммолей). Смесь перемешивают при температуре 60°С в течение 24 ч, после чего добавляют еще одну порцию 2-бромэтанола (176 мг, 1,41 ммолей). Перемешивание продолжают при температуре 60°С в течение 6 ч. Смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический экстракт высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан:ЭА в соотношении от 4:1 до 3:1 и получая при этом названное в заголовке соединение (900 мг) в виде бесцветного масла.
R
+
ЖХ-МС: t=1,10 мин, [М+Н]=396,09.
Пример 48: 2-{2-Этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}этиламин
4
а) Раствор соединения примера 47 (900 мг, 2,.28 ммолей) и триэтиламина (322 мг, 3,18 ммолей) в ДХМ (20 мл) охлаждают до температуры 0°С, после чего добавляют метансульфонилхлорид (313 мг, 2,73 ммолей). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 90 мин, разбавляют ДХМ и промывают водой. Органический экстракт высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью гептан: ЭА в соотношении 1:1 и получая при этом 2-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}этиловый эфир метансульфоновой кислоты (1,10 г) в виде белого твердого вещества.
R
+
ЖХ-МС: t=1,16 мин, [М+Н]=474,02.
3
б) Раствор полученного выше сложного эфира метансульфоновой кислоты (318 мг, 671 мкмолей) в 7-нормальном растворе NH в метаноле (10 мл) перемешивают в запаянной ампуле при температуре 60°С в течение 27 ч. Растворитель выпаривают и сырой продукт очищают с помощью препаративной ТСХ, используя смесь ДХМ: метанол в соотношении 9:1 и получая при этом названное в заголовке соединение (220 мг) в виде бесцветного масла.
R
+
ЖХ-МС: t=0,86 мин, [М+Н]=395,08.
Пример 49: 1-(2-{2-Этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}этил)-азетидин-3-карбоновая кислота
4
Раствор 2-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}этилового эфира метансульфоновой кислоты (300 мг, 633 мкмолей), метилового эфира азетидин-3-карбоновой кислоты (218 мг, 1,84 мкмолей) и триэтиламина (129 мг, 1,26 ммолей) в этаноле (10 мл) перемешивают в запаянной ампуле при температуре 80°С в течение 96 ч. Смесь охлаждают до комнатной температуры, разбавляют 3-молярным водным раствором NaOH и снова перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь подкисляют, добавляя водный раствор HCl, и затем экстрагируют этилацетатом (дважды по 25 мл). Органические экстракты объединяют, высушивают над MgSO, фильтруют и концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью препаративной ВЭЖХ, получая названное в заголовке соединение (170 мг) в виде бесцветного масла.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=0,90 мин, [М+Н]=479,10; Н ЯМР (CDCl): δ 0,98 (d, J=6,5 Гц, 6Н), 1,282 (t, J=7,0 Гц, 3Н), 1,93 (гептет, J=7,0 Гц, 1Н), 2,38 (s, 3Н), 2,45 (s, 3Н), 2,61 (d, J=7,3 Гц, 2Н), 2,73 (q, J=7,3 Гц, 2Н), 3,71-3,82 (m, 2Н), 3,97-4,08 (m, 1Н), 4,19-4,27 (m, 2Н), 4,37-4,62 (m, 2Н), 4,73-4,97 (m, 2Н), 7,87 (s, 1Н), 7,89 (s, 1Н), 8,07 (s, 1Н), 8,53 (s, 1Н).
Пример 50: 3-(2-{2-Этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}этиламин)пропионовая кислота
3
Раствор этилового эфира гидрохлорида β-аланина (88 мг, 570 мкмолей) в этаноле (2 мл) фильтруют через PL-НСО МР SPE ионообменную смолу. Промежуточный сложный эфир метансульфоновой кислоты примера 48 (90 мг, 190 мкмолей) и триэтиламин (77 мг, 760 мкмолей) добавляют к фильтрату и смесь перемешивают в запаянной ампуле при температуре 80°С в течение 18 ч. Затем смесь охлаждают до комнатной температуры и растворитель выпаривают. Сырой этиловый эфир 3-(2-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}этиламин)пропионовой кислоты растворяют в этаноле (2 мл) и 1-нормальном водном растворе NaOH (2 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч. Смесь нейтрализуют, добавляя 1-нормальный водный раствор HCl, растворитель удаляют в вакууме, а остаток выделяют с помощью препаративной ВЭЖХ, получая названное в заголовке соединение (24 мг) в виде белого твердого вещества.
r
3
+
1
ЖХ-МС: t=0,90 мин, [М+Н]=466,79; Н ЯМР (CDCl): δ 1,00 (d, J=6,5 Гц, 6Н), 1,30 (t, J=7,3 Гц, 3Н), 1,90-1,99 (m, 1Н), 2,38 (s, 3Н), 2,46 (s, 3Н), 2,60-2,68 (m, 4Н), 2,73 (q, J=7,5 Гц, 2Н), 3,20-3,27 (m, 2Н), 3,27-3,33 (m, 2Н), 4,07-4,15 (m, 2Н), 7,92 (s, 1Н), 7,94 (s, 1Н), 8,08 (s, 1Н), 8,54 (s, 1Н).
Пример 51: N-(2-{2-Этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}этил)-2-гидроксиацетамид
К раствору соединения примера 48 (50 мг, 127 мкмолей) в ТГФ (2 мл) и ДМФ (2 мл) прибавляют ЭДК-гидрохлорид (27 мг, 139 мкмолей), ГОБТ (19 мг, 139 мкмолей), ДИПЭА (25 мг, 190 мкмолей) и гликолевую кислоту (11 мг, 139 мкмолей). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч, после чего концентрируют и выделяют с помощью препаративной ВЭЖХ названное в заголовке соединение (32 мг) в виде бесцветного масла.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=1,05 мин, [М+Н]=453,08; Н ЯМР (CDCl): δ 1,00 (d, J=6,5 Гц, 6Н), 1,31 (t, J=7,3 Гц, 3Н), 1,89-2,00 (m, 1Н), 2,37 (s, 3Н), 2,47 (s, 3Н), 2,63 (d, J=7,0 Гц, 2Н), 2,73 (q, J=7,5 Гц, 2Н), 3,75-3,83 (m, 2Н), 3,93-3,99 (m, 2Н), 4,23 (s, 2Н), 7,03-7,15 (m, 1Н), 7,94 (s, 2Н), 8,09 (s, 1Н), 8,55 (s, 1Н).
Пример 52: N-(2-{2-Этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}этил)-2-метиламиноацетамид
К раствору соединения примера 48 (50 мг, 127 мкмолей) в ТГФ (2 мл) и ДМФ (2 мл) прибавляют ЭДК-гидрохлорид (27 мг, 139 мкмолей), ГОБТ (19 мг, 139 мкмолей), ДИПЭА (25 мг, 190 мкмолей) и Бок-саркозин (26 мг, 139 мкмолей). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч, после чего концентрируют. Остаток растворяют в 4-молярном растворе HCl в диоксане (2 мл), смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин, концентрируют и выделяют с помощью препаративной ВЭЖХ названное в заголовке соединение (23 мг) в виде красноватого масла.
R
+
ЖХ-МС: t=0,89 мин, [М+Н]=466,05.
Пример 53: (2-{2-Этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}этил)амид этансульфоновой кислоты
Раствор промежуточного сложного эфира метансульфоновой кислоты примера 48 (25 мг, 53 мкмолей) и калиевой соли этансульфонамида (16 мг, 106 мкмолей) в ДМФ (2 мл) перемешивают при температуре 60°С в течение 18 ч. Смесь концентрируют и выделяют с помощью препаративной ВЭЖХ названное в заголовке соединение (5 мг) в виде бесцветного масла.
R
+
ЖХ-МС: t=1,14 мин, [М+H]=487,14.
Пример 54: Амид N-(2-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}этил)-N',N'-диметилсульфаминовой кислоты
К раствору соединения примера 48 (100 мг, 253 мкмолей) и ДИПЭА (39 мг, 304 мкмолей) в ацетонитриле (2 мл) добавляют N,N-диметилсульфамоилхлорид (40 мг, 279 мкмолей). Смесь перемешивают при температуре 60°С в течение 18 ч. Растворитель удаляют в вакууме, а сырой продукт очищают с помощью препаративной ВЭЖХ, получая названное в заголовке соединение (47 мг) в виде белого твердого вещества.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=1,16 мин, [М+Н]=502,17; Н ЯМР (CDCl): δ 1,00 (d, J=6,5 Гц, 6Н), 1,32 (t, J=7,5 Гц, 3Н), 1,89-2,01 (m, 1Н), 2,39 (s, 3Н), 2,47 (s, 3Н), 2,63 (d, J=7,3 Гц, 2Н), 2,75 (q, J=7,5 Гц, 2Н), 2,89 (s, 6Н), 3,51 (q, J=5,3 Гц, 2Н), 3,98 (t, J=5,0 Гц, 2Н), 4,75 (t, J=6,0 Гц, 1Н), 7,95 (s, 1Н), 7,96 (s, 1Н), 8,09 (s, 1Н), 8,55 (s, 1Н).
Пример 55: 2-{2-Этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}пропан-1,3-диол
2
3
R
4
+
К раствору соединения примера 32 (100 мг, 285 мкмолей) в ацетонитриле (2 мл) прибавляют KCO (56 мг, 427 мкмолей), а затем диметилхлормалонат (57 мг, 341 мкмолей). Смесь перемешивают при температуре 65°С в течение 18 ч, разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический экстракт концентрируют и сырой продукт очищают с помощью препаративной ТСХ, используя смесь гептан: ЭА в соотношении 4:1 и получая при этом диметиловый эфир 2-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}малоновой кислоты (95 мг) в виде бесцветного масла; ЖХ-МС: t=1,17 мин, [М+Н]=482,01. Этот продукт (95 мг, 197 мкмолей) растворяют в этаноле (10 мл) и обрабатывают NaBH (60 мг, 1,58 ммолей). Смесь перемешивают при температуре 60°С в течение 1 ч, после чего реакцию останавливают, добавляя воду. Смесь дважды экстрагируют этилацетатом и объединенные экстракты концентрируют. Сырой продукт очищают с помощью препаративной ТСХ, используя смесь гептан: ЭА в соотношении 1:1 и получая при этом названное в заголовке соединение (44 мг) в виде бесцветного масла.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=1,02 мин, [М+Н]=426,01; Н ЯМР (CDCl): δ 1,00 (d, J=6,5 Гц, 6Н), 1,31 (t, J=7,3 Гц, 3Н), 1,95 (гептет, J=6,3 Гц, 1Н), 2,08 (t расширенный r, J=5,5 Гц, 2Н), 2,42 (s, 3Н), 2,47 (s, 3Н), 2,63 (d, J=7,0 Гц, 2Н), 2,80 (q, J=7,5 Гц, 2Н), 3,91-4,05 (m, 4Н), 4,19 (квинтет, J=4,5 Гц, 1Н), 7,95 (s, 1Н), 7,98 (s, 1Н), 8,10 (s, 1Н), 8,55 (s, 1Н).
Пример 56: 2-{2-Этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил1-6-метилфеноксиметил} пропан-1,3-диол
R
+
2-{3-[4-(2,2-Диметил-[1,3]диоксан-5-илметокси)-3-этил-5-метилфенил]-[1,2,4]оксадиазол-5-ил}-5-изобутил-4-метилпиридин (200 мг) получают в виде бесцветного масла аналогично получению соединения примера 1 исходя из 4-(2,2-диметил-[1,3]диоксан-5-илметокси)-3-этил-N-гидрокси-5-метилбензамидина (281 мг, 871 мкмолей) и 5-изобутил-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (200 мг, 871 мкмолей); ЖХ-МС: t=1,24 мин, [М+Н]=480,20. Этот продукт (200 мг, 417 мкмолей) растворяют в 4-молярном растворе HCl в диоксане (5 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч. Растворитель выпаривают, а сырой продукт очищают с помощью препаративной ТСХ, используя смесь гептан: ЭА в соотношении 1:1 и получая при этом названное в заголовке соединение в виде бесцветного масла.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=1,06 мин, [М+Н]=440,05; Н ЯМР (CDCl): δ 1,00 (d, J=6,5 Гц, 6Н), 1,31 (t, J=7,5 Гц, 3Н), 1,90-2,00 (m, 1Н), 2,27-2,35 (m, 1Н), 2,39 (s, 3Н), 2,47 (s, 3Н), 2,63 (d, J=7,3 Гц, 2Н), 2,75 (q, J=7,8 Гц, 2Н), 3,94-4,04 (m, 4Н), 4,05 (d, J=5,5 Гц, 4Н), 7,94 (s, 1Н), 7,95 (s, 1Н), 8,09 (s, 1Н), 8,55 (s, 1Н).
Пример 57: (S)-1-{2-Этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}-3-метиламинопропан-2-ол
а) К раствору соединения примера 32 (315 мг, 896 мкмолей) в изопропаноле (10 мл) и 3-нормальном водном растворе NaOH (2 мл) прибавляют (R)-эпихлоргидрин (249 мг, 2,69 ммолей). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч, после чего прибавляют еще одну порцию (R)-эпихлоргидрина (249 мг, 2,69 ммолей) и перемешивание продолжают при комнатной температуре в течение 24 ч. Затем смесь разбавляют этилацетатом и промывают водой. Органический экстракт концентрируют и сырой продукт очищают с помощью препаративной ТСХ, используя смесь гептан: ЭА в соотношении 7:3 и получая при этом 2-[3-((S)-3-этил-5-метил-4-оксиранилметоксифенил)-[1,2,4]оксадиазол-5-ил]-5-изобутил-4-метилпиридин (233 мг) в виде бесцветного масла.
R
+
ЖХ-МС: t=1,18 мин, [М+Н]=408,09.
б) Раствор полученного выше промежуточного эпоксида (20 мг, 49 мкмолей) в 41%-ном растворе метиламина в воде (2 мл) и ДМФ (0,5 мл) перемешивают при температуре 80°С в течение 18 ч. Растворитель удаляют в вакууме, а сырой продукт выделяют с помощью препаративной ВЭЖХ, получая названное в заголовке соединение (6 мг) в виде красноватого масла.
R
+
ЖХ-МС: t=0,89 мин, [М+Н]=439,07.
Пример 58: 1-{2-Этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}-3-((2S)-2-гидроксиэтиламин)пропан-2-ол
Раствор промежуточного эпоксида примера 57 (стадия а, 25 мг, 61 мкмолей) и этаноламина (19 мг, 18 мкмолей) в этаноле (5 мл) перемешивают при температуре 60°С в течение 18 ч. Растворитель удаляют в вакууме, а сырой продукт очищают с помощью препаративной ВЭЖХ, получая названное в заголовке соединение (9 мг) в виде белого твердого вещества.
R
+
ЖХ-МС: t=0,87 мин, [М+Н]=469,12.
Пример 59: ((2S)-3-{2-Этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}-2-гидроксипропил)амид этансульфоновой кислоты
Раствор промежуточного эпоксида примера 57 (стадия а, 25 мг, 61 мкмолей) и калиевой соли этансульфонамида (27 мг, 184 мкмолей) в ДМФ (2 мл) перемешивают при температуре 60°С в течение 18 ч. Растворитель удаляют в вакууме, а сырой продукт очищают с помощью препаративной ВЭЖХ, получая названное в заголовке соединение (8 мг) в виде бесцветного масла.
R
+
ЖХ-МС: t=1,07 мин, [М+Н]=517,12.
Пример 60: Метиловый эфир 3-((2S)-3-{2-этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}-2-гидроксипропиламино)пропионовой кислоты
Раствор промежуточного эпоксида примера 57 (стадия а, 150 мг, 368 мкмолей), гидрохлорида метилового эфира β-аланина (113 мг, 736 мкмолей) и триэтиламина (93 мг, 920 мкмолей) в метаноле (5 мл) перемешивают при температуре 60°С в течение 20 ч. Растворитель удаляют в вакууме, а сырой продукт очищают с помощью препаративной ТСХ, используя смесь ДХМ: метанол в соотношении 10:1 и получая при этом названное в заголовке соединение (53 мг) в виде бесцветного масла.
R
+
ЖХ-МС: t=0,92 мин, [М+Н]=511,18.
Пример 61: 3-((2S)-3-{2-Этил-4-[5-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-3-ил]-6-метилфенокси}-2-гидроксипропиламино)пропионовая кислота
Раствор соединения примера 60 (53 мг, 101 мкмолей) в этаноле (1 мл) и 1-молярном водном растворе NaOH (1 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч. Затем этанол выпаривают, а оставшийся раствор нейтрализуют, добавляя 1-нормальный водный раствор HCl, после чего смесь разделяют с помощью препаративной ВЭЖХ, получая названное в заголовке соединение (23 мг) в виде белого твердого вещества.
R
3
+
1
ЖХ-МС: t=0,88 мин, [М+Н]=497,08; Н ЯМР (CDCl): δ 0,98 (d, J=6,5 Гц, 6Н), 1,27 (t, J=7,3 Гц, 3Н), 1,93 (гептет, J=7,0 Гц, 1Н), 2,34 (s, 3Н), 2,44 (s, 3Н), 2,60 (d, J=7,3 Гц, 2Н), 2,65-2,83 (m, 4Н), 3,18-3,40 (m, 4Н), 3,82-3,96 (m, 2Н), 4,52-4,61 (m, 1Н), 7,88 (s, 1Н), 7,92 (s, 1Н), 8,06 (s, 1Н), 8,51 (s, 1Н).
Пример 62: (S)-3-(2-Этил-4-{5-[6-(1-этилпропил)-4-метилпиридин-2-ил]-[1,2,4]оксадиазол-3-ил}-6-метилфенокси)пропан-1,2-диол
2-{(R)-3-[4-(2,2-Диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)-3-этил-5-метилфенил]-[1,2,4]оксадиазол-5-ил}-6-(1-этилпропил)-4-метилпиридин (42 мг) получают конденсацией и циклизацией 6-(1-этилпропил)-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (67 мг, 323 мкмолей) с (R)-4-(2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)-3-этил-N-гидрокси-5-метилбензамидином (130 мг, 420 мкмолей), как описано в примере 1. Этот продукт растворяют в диоксане (5 мл) и 2-молярном водном растворе HCl (1 мл) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 16 ч. Затем смесь концентрируют и сырой продукт очищают с помощью препаративной ТСХ, используя ДХМ, содержащий 10% 7-нормального раствора NH3 в метаноле, и получая при этом названное в заголовке соединение (25 мг) в виде бледно-желтого стеклообразного вещества.
R
3
+
1
ЖХ-МС**: t=0,80 мин, [М+Н]=440,27; Н ЯМР (CDCl): δ 0,85 (t, J=7,3 Гц, 6Н), 1,32 (t, J=7,3 Гц, 3Н), 1,79 (квинтет, J=7,3 Гц, 4Н), 2,40 (s, 3Н), 2,49 (s, 3Н), 2,72-2,83 (m, 4Н), 3,82-4,00 (m, 5Н), 4,13-4,21 (m, 1Н), 7,16 (s, 1Н), 7,91 (s, 1Н), 7,92 (s, 1Н), 8,00 (s, 1Н).
Пример 63: N-[(S)-3-(2-Этил-4-{5-[6-(1-этилпропил)-4-метилпиридин-2-ил]-[1,2,4]|оксадиазол-3-ил}-6-метилфенокси)-2-гидроксипропил1-2-гидроксиацетамид
Названное в заголовке соединение (35 мг) получают конденсацией и циклизацией 6-(1-этилпропил)-4-метилпиридин-2-карбоновой кислоты (67 мг, 323 мкмолей) и N-((S)-3-[2-этил-4-(N-гидроксикарбамимидоил)-6-метилфенокси]-2-гидроксипропил)-2-гидроксиацетамида (137 мг, 420 мкмолей), как описано в примере 1.
R
3
+
1
ЖХ-МС*: t=1,01 мин, [М+Н]=497,23; Н ЯМР (CDCl): δ 0,85 (t, J=7,5 Гц, 6Н), 1,31 (t, J=7,3 Гц, 3Н), 1,79 (квинтет, J=7,0 Гц, 4Н), 2,38 (s, 3Н), 2,49 (s, 3Н), 2,70-2,80 (m, 3Н), 3,48-3,56 (m, 2Н), 3,75-3,93 (m, 3Н), 4,18-4,24 (m, 3Н), 7,11 (t, J=5,5 Гц, 1Н), 7,16 (s, 1Н), 7,90 (s, 1Н), 7,91 (s, 1Н), 8,00 (s, 1Н).
Примеры 64-68
Соединения следующих примеров получают аналогично получению соединения примера 62 исходя из 6-(1-этилпропил)-4-метоксипиридин-2-карбоновой кислоты и соответствующего 4-(2,2-диметил-[1,3]диоксолан-4-илметокси)-N-гидроксибензамидина.
Пример
R<sub>a</sub>
R<sub>b</sub>
R<sub>c</sub>
ЖХ-МС
t<sub>R</sub> [мин]
[M+H]<sup>+</sup>
64
Н
CH<sub>3</sub>
CH<sub>2</sub>CH<sub>3</sub>
0,78
456,32
65
Н
CH<sub>3</sub>
Cl
0,78
462,17
66
Н
CH<sub>3</sub>
OCH<sub>3</sub>
0,75
458,29
67
Н
OCH<sub>3</sub>
Cl
0,77
478,18
68
OCH<sub>3</sub>
Н
Н
0,68
444,21
Пример 64
1
3
Н ЯМР (CDCl): δ 0,87 (t, J=7,3 Гц, 6Н), 1,33 (t, J=7,5 Гц, 3Н), 1,79 (квинтет, J=7,3 Гц, 4Н), 2,09 (t расширенный, J=5,3 Гц, 1Н), 2,41 (s, 3Н), 2,72-2,81 (m, 4Н), 3,82-3,94 (m, 2Н), 3,94-3,97 (m, 2Н), 3,99 (s, 3Н), 4,14-4,20 (m, 1H), 6,85 (d, J=2,3 Гц, 1H), 7,71 (d, J=2,3 Гц, 1Н), 7,92 (s, 1H), 7,92 (s, 1H).
Примеры 69-72
Соединения следующих примеров получают аналогично получению соединения примера 62 исходя из 6-(1-этилпропил)-4-метоксипиридин-2-карбоновой кислоты и соответствующего 2-гидрокси-N-{2-гидрокси-3-[4-(N-гидроксикарбамимидоил)фенокси]пропил}ацетамида.
Пример
R<sub>a</sub>
R<sub>b</sub>
R<sub>c</sub>
ЖХ-МС**
t<sub>R</sub> [мин]
[M+H]<sup>+</sup>
69
H
CH<sub>3</sub>
CH<sub>2</sub>CH<sub>3</sub>
0,75
513,80
70
H
CH<sub>3</sub>
CH<sub>3</sub>
0,73
499,22
71
H
CH<sub>3</sub>
Cl
0,75
519,25
72
H
CH<sub>3</sub>
OCH<sub>3</sub>
0,72
515,20
Пример 69
1
3
Н ЯМР (CDCl): δ 0,86 (t, J=7,5 Гц, 6H), 1,31 (t, J=7,5 Гц, 3Н), 1,78 (квинтет, J=7,3 Гц, 4H), 2,38 (s, 3H), 2,71-2,79 (m, 3H), 2,92 (s расширенный, 1H), 3,45-3,56 (m, 2H), 3,76-3,81 (m, 1H), 3,84 (dd, J=9,5, 6,3 Гц, 1H), 3,90 (dd, J=9,5, 4,8 Гц, 1H), 3,99 (s, 3H), 4,19-4,24 (m, 3H), 6,85 (d, J=2,3 Гц, 1H), 7,07 (t, J=5,3 Гц), 7,71 (d, J=2,3 Гц, 1H), 7,90 (s, 1H), 7,91 (s, 1H).
Пример 73: 4-{5-[6-(1-Этилпропил)-4-метоксипиридин-2-ил]-[1,2,4]оксадиазол-3-ил}-2-метил-6-пропилфенол
Названное в заголовке соединение (3 мг) получают конденсацией и циклизацией гидрохлорида 6-(1-этилпропил)-4-метоксипиридин-2-карбоновой кислоты (64 мг, 246 мкмолей) и 4, N-дигидрокси-3-метил-5-пропилбензамидина (54 мг, 259 мкмолей), как описано в примере 1.
R
+
ЖХ-МС**: t=0,88 мин, [М+Н]=396,29.
Пример 74: N-((2S)-3-{2-Этил-4-[3-(5-изобутил-4-метилпиридин-2-ил)-[1,2,4]оксадиазол-5-ил]-6-метилфенокси}-2-гидроксипропил)-2-гидроксиацетамид
Названное в заголовке соединение (32 мг) получают конденсацией и циклизацией N-гидрокси-5-изобутил-4-метилпиридин-2-карбоксамидина (40 мг, 193 мкмолей) с 3-этил-4-[(S)-2-гидрокси-3-(2-гидроксиацетиламино)пропокси]-5-метилбензойной кислотой (60 мг, 193 мкмолей), как описано в примере 1.
R
+
ЖХ-МС: t=0,95 мин, [М+Н]=482,86.
50
Пример 75: GTPγS анализ определения ЕС величин
2
2
4
2
4
35
35
35
35
Анализы GTPγS-связывания проводят в 96-ячеистых планшетах для титрования (Nunc, 442587) с конечным объемом 200 мкл, с использованием мембранных препаратов СНО клеток, экспрессирующих рекомбинантный человеческий S1P1 рецептор. Условия проведения анализа: 20 мМ Hepes (фирма Fluka, 54461), 100 мМ NaCl (фирма Fluka, 71378), 5 мМ MgCl (фирма Fluka, 63064), 0,1% БСА (фирма Calbiochem, 126609), 1 мкМ GDP (фирма Sigma, G-7127), 2,5% ДМСО (фирма Fluka, 41644), 50 pM S-GTPγS (фирма Amersham Biosciences, SJ1320), pH 7,4. Тестируемые соединения растворяют и разбавляют, используя 100% ДМСО, и предварительно инкубируют при комнатной температуре в течение 30 мин в 150 мкл названного выше буфера для анализа, в отсутствии S-GTPγS. После добавления 50 мкл S-GTPγS, анализируемую смесь инкубируют в течение 1 ч при комнатной температуре. Анализ прерывают посредством переноса реакционной смеси в Multiscreen планшет (Millipore, MAHFC1H60), используя коллектор клеток от фирмы Packard Biosciences, после чего планшеты промывают охлажденным льдом раствором 10 мМ NaHPO/NaHPO (в соотношении 70%:30%), высушивают, герметизируют в нижнем отделе и, после добавления 25 мкл MicroScint20 (Packard Biosciences, order# 6013621), герметизируют в верхней части. Мембранное связывание S-GTPγS измеряют с помощью TopCount от фирмы Packard Biosciences.
50
35
ЕС представляет собой концентрацию агониста, включающую 50% максимального специфического S-GTPγS связывания. Специфическое связывание определяется вычитанием неспецифического связывания из максимального связывания. Максимальное связывание представляет собой число импульсов в мин, связанных с Multiscreen планшетом в присутствии 10 мкМ S1P. Неспецифическое связывание представляет собой число связываний в отсутствии агониста при анализе.
50
50
50
50
Были измерены ЕС величины соединений примеров 2, 6, 7, 8, 11, 14, 15, 21, 22, 28, 29, 45 и 60. Агонистические активности (EC величины) всех других приведенных в примерах соединений также были измерены. Измеренная ЕС величина соединения примера 43 составляла более 10 мкМ. ЕС величины всех других приведенных в примерах соединений лежат в интервалах от 0,2 до 7600 нМ со средней величиной, составляющей 345 нМ. Агонистические активности некоторых соединения формулы (I) приведены в таблице 1.
Таблица 1
Соединение примера
ЕС<sub>50</sub> [нМ]
1
1,2
10
2,7
17
2,3
33
7,2
34
9,1
40
3,3
50
5,1
51
8,8
55
4,7
58
11,2
59
11,9
61
2,3
62
2,2
65
9,4
69
3,1
70
2,8
71
0,8
72
8,8
74
9,0
Пример 76: Оценка эффективности в условиях in vivo
Эффективность соединений формулы (I) оценивалась измерением циркулирующих лимфоцитов после орального введения от 3 до 30 мг/кг соединения формулы (I) нормотензивным мужским особям крыс Wistar. Животные содержались в условиях с контролируемым климатом с 12 ч-свет/темнота циклом и имели доступ к нормальной крысиной пище и питьевой воде. Кровь отбиралась перед и через 3, 6 и 24 ч после введения лекарства. Кровь целиком подвергалась гематологическому анализу с использованием Advia Hematology system (Bayer Diagnostics, Zurich, Switzerland).
Все данные представлены, как средние±SEM. Статистические анализы проводились с помощью вариантного анализа (ANOVA) с использованием Statistica (StatSoft) и Student-Newman-Keuls метода для мультиплетных сравнений. Сводящаяся к нулю гипотеза отбрасывалась при p<0,05.
В качестве примера в таблице 2 представлен эффект, оказываемый на количество лимфоцитов, через 6 ч после введения 10 мг/кг некоторых соединений по настоящему изобретению нормотензивным мужским особям крыс Wistar по сравнению с группой животных, обрабатываемых только растворителем. Число лимфоцитов измерялось через 6 ч после орального введения для соединений 7 примеров (таблица 2) и лежало в области от -35% до -74% со средней величиной, составляющей -64%.
Таблица 2
Соединение примера
Число лимфоцитов
1
-74%
5
-67%
17
-66%
34
-70%
36
-74%
40
-35%
55
-65%*
* через 3 ч после введения