Использование иммунологических методов в диагностике опухолевых заболеваний

Результаты: CD95 антиген был экспрессирован на 35,8±7,5% бластов костного мозга детей, имевших тотальный бластоз. Сравнение частоты встречаемости антигена при различных иммунологических иодвариантов показало, что наиболее часто (63%) экспрессия определялась при наиболее благоприяном пре-пре-В-подварианте ОЛЛ. Особый интерес представляет ретроспективный анализ общей выживаемости у группы детей (п=22), которые находятся под наблюдением с 1987 по 1997 г. Анализ 10-летнен выживаемости показал, что медиана продолжительности жизни составляет, на момент исследования, 118,5 мес. В CD95' группе медиана общей выживаемости составляет только 24 мес. Медиана безрецидивной выживаемости у CD95* группы -115 мес., у CD95' группе-13,2 мес. Мы продолжили изучение экспрессии антигена в 1994 г., обследовав еще 16 детей. Корреляционный анализ по объединенной группе показал, что за исключением степени риска, ни один из иммунологических и клинико-гематологических показателей не коррелирует с экспрессией антигена CD95. Однако выявлена прямая корреляционная зависимость экспрессии антигена CD 10 и CD95 в группе больных пре-пре-В ОЛЛ (р<0,05). Медиана безрецидивной выживаемости в CD95’ группе не достигнута, так как более 50% детей находятся в ремиссии, в CD95' негативной группе медиана составила 19,5 мес. Различия в безрецидивной выживаемости нашли отражение в общей выживаемости: в CD95* группе медиана не достигнута, в CD95' негативной группе медиана состав ила 25,2 мес.

Заключение: Экспрессия антигена CD95 на мембране бластных клеток является прогностически благоприятным признаком, увеличивающим как безрецидивную, так и общую выживаемость, а отсутствие его экспрессии на поверхности бластов позволяет говорить о плохом прогнозе заболевания.

Использование иммунологических методов в диагностике опухолевых заболеваний

Власова И.А., Казанцева С.В., Вушуеиа Т.В.

Центральная научно-исследовательская паборатория Уральской Государственной медицинской академии Екатеринбург, Россия

Работа выполнена в рамках городской программы “Ранняя диагностика и профилактика онкологической заболеваемости населения г. Верхняя Пышма”, где проведено обследование рабочих вредных производств с последующим формированием групп риска по онкозаболеваемости.

Иммунологической лабораторией ЦНИЛ УГМА проведено определение количества онкомаркеров в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа на пла-шечном спектрофотометре Multiscan Plus, с программным обеспечением “Ифан”. В работе были использованы маркеры—СЕА, AFP, СА-125, MCA фирмы LABSYSTEMS. Определение СА 15-3 проведено на люминесцентном иммуноанализаторе фирмы BYK-SANGEC.

При профилактическом осмотре рабочих завода “Уралэлектромедь” онколог отбирал людей, которым необходимо провести иммунологическое исследование.

Всего было обследовано 96 человек. Они распределились следующим образом: цех электролиза меди — 33 человека, порошковый цех — 16, химикометаллургический цех (ХМЦ)— 13. остальные цеха— 14,т.е. рабочих из цехов обследовано — 76 человек; группу сравнения составили 20 больных, состоящих на учете у онколога по поводу злокачественных заболеваний.

У четырех мужчин из электролизного цеха было определено незначительное повышение величины раковоэмбрионального антигена (от 6 до 12 и/т1), при легальном обследовании у них не было выявлено никакой патологии. Резко повышенными были концентрации у одного обследованного из порошкового цеха (110,4 при норме СЕА — 3 и/ті). С помощью фиброгастроскопии у него выявлен рак желудка. В группе сравнения из четырех человек с диагнозом колоректальный рак относительно невысокие результаты выявлены у троих (5,0; 6,0; 10,0 и/т1). Уровень альфа-фегопротеина у всех обследованных не превышал нормальный (15 11/т1).

Так как большинство женщин, направленных онкологом на исследование, имели заболевание молочной железы, то на эту патологию анализ проведен по двум маркерам — СА 15-3 и МСА. Из 33 человек цеха электролиза меди обследовано 16 женщин, из них у троих уровень СА 15-3 был выше нормы (30 и/т1): 50,4; 42,7; 44,0 Іі/ті. В ХМЦ из 10 обследованных у четырех результат был выше нормы — 50,1; 53,1; 88,8; 44,011/т1. При цитологическом исследовании всем женщинам поставлен диагноз мастопатия (очаговая, фибрознокистозная и др.) В группе сравнения повышенные результаты были выявлены у четырех человек, из них диагноз рак молочной железы имела одна.

Муциноподобный раково-ассоциированный антиген (МСА) превышал норму в два раза у четырех пациенток электролизного цеха и у одной обследуемой в три раза (из ХМЦ).

У двух работниц ХМЦ по обеим исследованиям (СА 15-3 и МСА) показатели были выше нормы; такая же закономерность наблюдалась у одной женщины порошкового цеха, и у двоих — электролиза меди. В группе сравнения положительный результат по двум маркерам СА 15-3 и МСА отмечен у трех пациенток. У одной рабочей порошкового цеха превышали норму три онкомаркера: СА 15-3, СА-125, МСА (диагноз— фиброаденоматоз матки, мастопатия).

Из 16 работниц порошкового цеха у двоих было установлено незначительное увеличение СА-125 в сыворотке крови (52,0; 43,7 и/ш1), в химико-металлургическом цехе—у двоих (67,1 и 130,0 при норме 35 и/т1). Из группы сравнения одна, с диагнозом рак яичников, имела СА-125 — 34,6 и/т1; у двоих женщин, с диагнозом рак матки, значения СА-125 были в пределах нормы.

Таким образом, в обследованной группе рабочих положительные результаты имели 19 человек (25 %). Хотя основная часть их попала в так называемую “неопреде-

ленную” зону, когда доброкачественные процессы в организме определяют значения онкомаркеров, выходящие за пределы нормы. Все женщины с повышенными результатами взяты на учет в областной онкоцентр, им назначено лечение соответствующих заболеваний.

Верхняя Пышма, несмотря на высокую канцероопасность производства, размещенного в этом городе, является по он-копатологии относительно спокойным городом. Средний за 10 лет показатель заболеваемости по всем локализациям опухолей в сумме на 100 тыс. населения составил 3 человека (в г. Екатеринбурге — 234; в расчет не взяты города экологического бедствия). Только по трем локализациям рака в В. Пыш-ме показатели выше, чем в среднем по области — это рак молочной железы (32,2 при 23,3 среднеобластных), легкого (68,8 против 61,8), кожи (24,6 прот ив 22,2). Однако рак молочной железы не является профессиональным заболеванием.

Таким образом, использование онкомаркеров дает возможность расширить круг пациентов с подозрением на наличие опухоли (как злокачественной, так и доброкачественной природы). Акцент противораковых мероприятий целесообразно сделать на профосмотрах, так как основная часть населения трудится на промышленных предприятиях.

Мониторинг сывороточных опухоле-ассоциированных антигенов у ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС

Дрыгнна Л.Б., Смольянннов П.Н., Алхутова Н.А., Калинина Н.М.

Всероссийский центр экстренной и радиационной медицины МЧС России, Санкт-Петербург, Россия

Ликвидаторы последствий аварии (ЛПА) на ЧАЭС представляют собой группу населения, для которой характерно осложнённое течение соматических заболеваний и высокая вероятность возникновения предраковых состояний и онкологической патологии, причём наиболее вероятно образование солидных опухолей с латентным периодом не менее 10 лет от момента радиационного воздействия до начала заболевания. Для обнаружения ранних признаков развития неоплазий актуальным является определение уровня сывороточных опухолеассоциированных антигенов (ОМ). Цель настоящего исследования заключалась в проведении программы скрининга ОМ у ЛПА для выявления лице высоким онкологическим риском в отдалённые сроки (через 10 лет).

Для этого использовалось количественное иммунофер-ментное определение онкомаркеров — РЭА, АФП, СА19-9, Г1СА и НСЕ (тест-системы фирмы HOFFMAN LA-ROCH Е, Швейцария). За дискриминационные концентрации (ДК) маркеров были приняты наибольшие значения их содержания в сыворотке (плазме) крови практически здоровых людей. Нами были проанализированы образцы крови 84 ЛПА 1986-87 гг. в возрасте 30-55лет, получивших дозу облучения 2 -30 сГр и 25 практически здоровых людей. В случае превы-

шения ДК образцы крови исследовались повторно после лечения для исключения неспецифического повышения уровня ОМ, связанног о с острой формой имеющихся заболеваний. Средний уровень РЭА у здоровых людей составил 1,92±0,29 иг/мл, у ЛПА — 2,72±0,75 нг/мл, превышение ДК (более 5 нг/мл) отмечено у 7 человек (8,3%). Средний уровень СА 19-9 у доноров составил 6,63± 1,19 Е/мл, у ЛПА — 12,33± 1,16 Е/мл и был достоверно выше, чем у доноров (р<0,05). Повышенный уровень СА 19-9 (свы ше 37 Е/мл) выявлен у 6 ЛПА (7,1%). Средний уровень АФП у доноров и ЛПА составил 1,95±0,65 иЗ,48±0,55 МЕ/мл соответственно (р<0,05). Превышение ДК свыше 10 МЕ/мл у ЛПА зафиксировано в 3 случаях (3,6 %). Концентрация ПСЕ в норме и у ЛПА составила соответственно 9,42±2,44 и 35,43±8,73 нг/мл (достоверность различия р<0,01), причём гювышенныиуро-вень НСЕ (более 22 нг/мл) был отмечен у 17 ЛПА (20,2%). Повышенная концентрация ПСА у Л ПА, при среднем уровне 2,51 ±0,36 нг/мл, выявлена у 20 человек (23,8 %), однако степень повышения (от 4 до 10 нг/мл) была характерна для доброкачественных гиперплазий. Из 84 ЛПА у 10 (11,9 %) было зарегистрировано одновременное повышение концентрации нескольких сывороточных ОМ. Нормализация показателей концентрации ОМ после лечения произошла не во всех случаях. В результате выполненных исследований была определена группа болы )ых (7,1 %), требующих углублённого обследования и динамического наблюдения, что подтверждает необходимость проведения скрининга ОМ среди ЛПА в отдаленном периоде после воздействия комплекса факторов радиационной катастрофы.

Иммуногенная сепарация на основе использования моноклональных антител

Иванов П.К., Блохин Д.Ю., Донская О.Н.,

Полосухина Е.Р.,Хулуп Г.Я.,Барышников А.Ю.

Российский онкологический научный центр

им.Н.Н.Блохина РАМН, Витебский Государственный

медицинский институт, Беларусь

Применение высокодозной химио- и лучевой терапии приводит не только к подавлению опухолевого процесса, но и к гибели активно пролиферирующих стволовых клеток костного мозга, являющихся предшественниками всех ростков гемопоэза. Одним из путей преодоления гемотоксичности является аутотрансплантация костного мозга, которая предполагает, что трансплантированный костный мозг не должен быть контаминирован метастатическими клетками. Перспективным методом позитивной селекции является иммуномагнитная сепарация на основе применения моноклональных антител (МКА) к CD34 антигену. С другой стороны, иммуномагнитная сепарация может эффективно применяться и для негативной селекции, а именно для выявления и удаления метастазирующих клеток при раке молочной железы с помощью МКА, реагирующих с опухолевыми клетками.

Целью работы явилась отработка условий применения в модельных системах иммуносорбента (ИММС) на