МОДУЛИРОВАНИЕ БЕТА-ДАМАСЦЕНОНА У РАСТЕНИЙ

1. Мутантная, не встречающаяся в природе или трансгенная растительная клетка, содержащая:
(i) полинуклеотид, содержащий последовательность, кодирующую неоксантин-синтазу и имеющую по меньшей мере 60% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 6, или состоящий или фактически состоящий из нее;
(ii) полипептид, кодируемый полинуклеотидом, изложенным в (i);
(iii) полипептид, обладающий по меньшей мере 66% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 2 или по меньшей мере 60% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 7; или
(iv) конструкт, вектор или вектор экспрессии, содержащий выделенный полинуклеотид, изложенный в (i),
и причем экспрессия или активность неоксантин-синтазы изменена по сравнению с контрольным растением или растением дикого типа.
2. Мутантное, не встречающееся в природе или трансгенное растение, содержащее растительную клетку по п. 1.
3. Способ изменения содержания каротиноидов у растения, включающий следующие стадии:
(a) изменение экспрессии или активности неоксантин-синтазы у растения, предпочтительно, причем неоксантин-синтаза охватывает:
(i) полинуклеотид, содержащий последовательность, кодирующую неоксантин-синтазу и имеющую по меньшей мере 60% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 6, или состоящий или фактически состоящий из нее;
(ii) полипептид, кодируемый полинуклеотидом, изложенным в (i); или
(iii) полипептид, обладающий по меньшей мере 66% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 2 или по меньшей мере 60% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 7;
(b) измерение содержания каротиноидов по меньшей мере в части мутантного, не встречающегося в природе или трансгенного растения, полученного на стадии (а); и
(c) выявление мутантного, не встречающегося в природе или трансгенного растения, у которого было модифицировано содержание каротиноидов в нем по сравнению с контрольным растением, у которого экспрессия или активность неоксантин-синтазы не была изменена.
4. Способ по п. 3, где у растения также изменяют экспрессию или активность ликопин-бета-циклазы или 9-цис-эпоксикаротиноиддиоксигеназы или их комбинации.
5. Способ по п. 4, где ликопин-бета-циклаза охватывает полинуклеотидную последовательность, изложенную в SEQ ID NO: 8, или обладает с ней по меньшей мере 60% идентичности последовательности, или полипептидная последовательность охватывает изложенную в SEQ ID NO: 9 или обладает с ней по меньшей мере 60% идентичности последовательности, и причем 9-цис-эпоксикаротиноиддиоксигеназа охватывает полинуклеотидную последовательность, изложенную в SEQ ID NO: 13, или обладает с ней по меньшей мере 60% идентичности последовательности.
6. Способ изменения содержания бета-дамасценона у растения, включающий следующие стадии:
(a) изменение экспрессии или активности неоксантин-синтазы у растения, предпочтительно, причем неоксантин-синтаза охватывает:
(i) полинуклеотид, содержащий последовательность, кодирующую неоксантин-синтазу и имеющую по меньшей мере 60% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 6, или состоящий или фактически состоящий из нее;
(ii) полипептид, кодируемый полинуклеотидом, изложенным в (i); или
(iii) полипептид, обладающий по меньшей мере 66% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 2 или по меньшей мере 60% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 7;
(b) измерение содержания бета-дамасценона по меньшей мере в части мутантного, не встречающегося в природе или трансгенного растения, полученного на стадии (а), или его аэрозоле; и
(c) выявление мутантного, не встречающегося в природе или трансгенного растения, у которого было модифицировано содержание бета-дамасценона по сравнению с контрольным растением, у которого экспрессия или активность неоксантин-синтазы не была изменена.
7. Мутантное, не встречающееся в природе или трансгенное растение, или растительный материал, который происходит или может происходить от них и который получен или который можно получить с помощью способа по п. 6.
8. Мутантное, не встречающееся в природе или трансгенное растение, у которого экспрессия неоксантин-синтазы или активность кодируемого таким образом белка была повышена; причем содержание лютеина в зеленом листе или содержание бета-каротина или комбинированное содержание лютеина и бета-каротина растения является более высоким, чем в контрольном растении, у которого экспрессия или активность неоксантин-синтазы не была повышена; и причем содержание бета-дамасценона в аэрозоле высушенного растительного материала по меньшей мере на 10% выше, чем в аэрозоле из контрольного растения, предпочтительно, причем: (i) содержание лютеина в зеленом листе растения составляет по меньшей мере приблизительно 18 мг / 100 г; (ii) содержание бета-каротина у растения составляет по меньшей мере приблизительно 12 мг / 100 г; и (iii) содержание бета-дамасценона в полученном в результате нагревания аэрозоле составляет по меньшей мере приблизительно 1 нг/мг.
9. Растительный материал, включающий биомассу, семя или листья растения по любому из пп. 2, 7 или 8.
10. Табачный продукт, содержащий растительную клетку по п. 1, по меньшей мере часть растения по любому из пп. 2, 7 или 8 или растительный материал по п. 9.
11. Способ получения бета-дамасценона, включающий следующие стадии:
(a) получение по меньшей мере части растения по любому из пп. 2, 7 или 8, растительного материала по п. 9 или табачного продукта по п. 10; и
(b) подача к ним тепла с получением аэрозоля, содержащего бета-дамасценон.
12. Выделенный полинуклеотид, содержащий последовательность, кодирующую неоксантин-синтазу и обладающую по меньшей мере 60% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 6, или состоящий или фактически состоящий из нее.
13. Выделенный полипептид, кодируемый полинуклеотидом по п. 12.
14. Выделенный полипептид, обладающий по меньшей мере 66% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 2 или по меньшей мере 60% идентичности последовательности с SEQ ID NO: 7.
15. Конструкция, вектор или вектор экспрессии, содержащий выделенный полинуклеотид по п. 12.