ФИТОТЕСТИРОВАНИЕ ПОЧВ, ЗАГРЯЗНЕННЫХ НЕФТЕПРОДУКТАМИ

DOI: https://doi.org/10.23670/IRJ.2020.102.12.048

ФИТОТЕСТИРОВАНИЕ ПОЧВ, ЗАГРЯЗНЕННЫХ НЕФТЕПРОДУКТАМИ

Обзорная статья

Тишин А.С.*

Сургутский государственный университет, Сургут, Россия * Корреспондирующий автор

Аннотация

В данной статье представлен краткий обзор научных данных о фитотестировании нефтезагрязненных почв, его основных принципов, растений, используемых в качестве тест-объектов, их тест-реакции. В фитотестировании нефтезагрязнений применяется немалое количество различных растений, наиболее широко из которых применяют кресс-салат L. sativum, редис R. sativus, подсолнечник H. annuus, горчица S. alba, рапс B. napus, турнепс B. rapa, горох P. sativum, клевер T. pratense, лук A. cepa, кукуруза Z. mays и т.д. Для количественной оценки действия факторов в условиях техногенного загрязнения используют различные физиологические, биохимические и цитогенетические параметры тест-систем растений: всхожесть семян, длина корней и стеблей проростков, энергия прорастания семян, прирост фитомассы тестируемых растений, количество формирующихся цветков, семян и плодов, размеры отдельных органов растения, например, околоцветника и т.д.

Ключевые слова: фитотестирование; биотестирование; нефть; углеводороды нефти; нефтепродукты; нефтезагрязнение; нефтезагрязненные почвы; растительные тест-объекты; прорастание семян.

PHYTOTESTING OF SOILS CONTAMINATED WITH PETROLEUM PRODUCTS

Review article

Tishin A.S.*

Surgut State University, Surgut, Russia

* Corresponding author

Abstract

This article provides a brief overview of scientific data on phytotesting of oil-contaminated soils, its basic principles and plants used as test subjects as well as their test reactions. The most widely used plants in the phytotesting of oil-contaminations are L. sativum, radish R. sativus, sunflower H. annuus, mustard S. alba, rapeseed B. napus, turnip B. rapa, peas P. sativum, clover T. pratense, onion A. cepa, corn Z. mays, etc. The study uses various physiological, biochemical and cytogenetic parameters of plant test systems to quantify the effect of factors in conditions of anthropogenic pollution: seed germination, length of roots and stems of seedlings, seed germination energy, phytomass growth of the tested plants, the number of forming flowers, seeds and fruits, the size of individual plant organs such as the perianth, etc.

Keywords: phytotesting; biotesting; oil; petroleum hydrocarbons; petroleum products; oil pollution; oil-contaminated soils; plant test subjects; seed germination.

Введение

Попадание повышенных концентраций нефти и ее углеводородов в почву приводит к изменению ее физических свойств [1, С. 335]. Происходит нарушение водного и воздушного обмена в почве, снижению поступления питательных веществ, необходимых для жизнедеятельности почвенных организмов. Почвы в результате пропитывания нефтью изменяют свою структуру, свойства и даже химический состав [2, С. 207]. В первую очередь это приводит к изменениям в гумусовом слое. Так, в нем значительно увеличивается количество углерода. Но из-за присутствия битуминозного вещества происходит снижение плодородных свойств почвы, она теряет свою функцию субстрата для роста растений. Частицы нефти из-за своих гидрофобных свойств препятствуют проникновению достаточного количества влаги к корням растений. Это снижает показатели их роста и развития [3, С. 1963]. Отмечается подавление фотосинтетической активности растительных организмов. В нефтезагрязненных почвах происходят значительные изменения в окислительно-восстановительных процессах, изменяется их интенсивность и даже направленность; наблюдается ухудшение агрофизических и агрохимических свойств почв и уменьшение активности почвенных ферментов и микроорганизмов [4, С. 48]. Это может послужить фактором потери плодородия почв, что, в свою очередь, инициирует их изъятие из сельскохозяйственного оборота. Нефтяное загрязнение грозит деградацией растительного покрова, а также снижением биологического разнообразия растений в экосистеме нефтезагрязненных биотопов. Также следует отметить, что процессы трансформации нефтяных углеводородов приводят к формированию токсичных соединений, которые могут оказывать негативные эффекты на растительные организмы, что обусловлено их способностью к мутагенезу и канцерогенезу [5, С. 370].

Таким образом, нефтепродукты являются одними из приоритетнейших загрязнителей окружающей среды, в первую очередь почв.

Наряду с мероприятиями по очистке нефтезагрязненных почв, важнейшим направлением является разработка и применение способов обнаружения загрязнения природных объектов нефтяными углеводородами, качественной и количественной оценки степени загрязнения. С этой целью, наряду с химическим анализом загрязнителей, широко используются методы биотестирования [6, С. 121]. Они позволяют по различным организмам и их реакциям определить уровни загрязнения, и, что более важно, оценить воздействие этих загрязнителей на экосистему в целом или ее отдельные компоненты. При биотестировании нефтезагрязненных почв в качестве тест-объектов используют почвенные микроорганизмы и беспозвоночные [7, С. 67], а также широко применяют растения [8, С. 67]. Фитотестирование основано на фиксации различных параметров и показателей растительных организмов в процессах

их развития в испытуемых образцах загрязненной почвы, их сопоставление с контрольными вариантами, культивируемыми в образцах, не содержащих исследуемых загрязнителей.

Цель данного исследования - обзор литературных источников о принципах и способах фитотестировании нефтезагрязненных почв.

Общие принципы фитотестирования нефтезагрязненных почв

Для определения токсичности почв методами фитотестирования используются 2 варианта фитотестирования:

1) определения токсичности почв путем проращивания семян высших растений непосредственно в почве;

2) определение токсичности водных вытяжек из почв по их влиянию на различные показатели прорастания семян высших растений.

Следует отметить, что во многих научных работах исследователями было показано [9, С. 47], что результаты фитотестирования, полученные первым и вторым из вышеописанных способов, существенно различаются. Метод фитотестирования, предполагающий анализ роста растений непосредственно в почве, более чувствителен, чем определение токсичности водных вытяжек из этих почв.

Методы фитотестирования подразделяются на лабораторный, вегетационный (горшечный) и микроплощадочный варианты [10, С. 1106]. Такое подразделение подразумевается в зависимости от используемого масштаба. Среди трех указанных вариантов наиболее широко применяется лабораторный метод фитотестирования. Это связано с его более высокой чувствительностью, простотой применения, компактностью, относительной дешевизной, доступностью и сохранностью тест-объекта (растительных семян).

Фитотестирование применяется не только для обнаружения нефтяного загрязнения и оценки степени загрязненности почв. Оно может быть использовано для контроля процессов обезвреживания поллютантов и ремедиации нефтезагрязненных почв, для оценки эффективности тех или иных ремедиационных агентов (химических реагентов и сорбентов различной природы, связывающих углеводороды нефти; микроорганизмов-биоремедиантов и препаратов на их основе). Кроме того, перспективно применение методов биотестирования, основанных на использовании растений и их семян, для изучения комбинированных эффектов углеводородов нефти с другими загрязнителями почв.

Тест-объекты в фитотестировании нефтезагрязненных почв

В биотестировании нефтяного загрязнения используют большое количество различных растений.

Многие отечественные и зарубежные работы показывают эффективность использования семян салата (Lepidium sativum). Это один из наиболее часто применяемых в качестве тест-объекта в фитотестировании, используемых для биотестирования водных проб, донных отложений, почвенных образцов, различных отходов и субстратов, определения токсичности различных химических соединений и их смесей [11, С. 4]. Эта тест-культура дает информативный ответ при анализе загрязнения объектов окружающей среды и различных образцов и субстратов поллютантами, относящимися к самым различным типам и химических классам (нефть, нефтепродукты и нефтяные углеводороды, ионы тяжелых металлов, полициклические ароматические углеводороды, поверхностно-активные вещества, радиоактивные изотопы и др.), а также анализе их совместного присутствия в средах и вызываемых эффектов при комплексном загрязнении среды.

Фитотоксичность нефтезагрязненных почв оценивается также с использованием редиса Raphanus sativus var. Radícula Pers. [12, С. 11], который отличается высокой чувствительностью семян.

Сорго (Sorghum bicolor L.) и бобы (Phaseolus vulgaris L.) используются для определения токсичности реактивного топлива и гербицидов. Рост корней проса (Panicum miliaceum L.) служит для определения токсичности фенолов и хлорфенолов. Продемонстрирована эффективность использования семян лука (Allium cepa L.) в качестве эффективной тест-культуры для изучения токсического действия широкого спектра химических веществ. В своих работах С. Илларионов [13, С. 343] изучал фитотоксичность нефтезагрязненных почв с использованием клевера. Показателями фитотоксичности явились снижение всхожести и выживаемости семян, а также масса сухой биомассы выращенных растений.

В соответствии с международным стандартом ISO 11269-1, в технике биотестирования рекомендовано применять в качестве тест-объекта ячмень (Hordeum vulgare). Также стандарт указывает на возможность использования и других растений. Более того, международный стандарт ISO 11269-2 рекомендует использовать при фитотестировании не одного растения, а по крайней мере, два вида. При этом желательно использовать одно тест-растение из однодольных, второе - из двудольных растений [14, С. 369].

В работе [12, С. 11] показана эффективность применения семян горчицы, салата и сорго при фитотестировании почв, загрязненных одновременно поллютантами 2 типов - тяжелыми металлами и нефтепродуктами. При этом по чувствительности к исследуемым образцам загрязненных почв растения располагались в следующем порядке: L. sativum (кресс-салат) <S. alba (горчица) < S. saccharatum (сорго).

В других работах по фитотестированию различных образцов (наноматериалы, отходы фосфогипса, почвенных биоматериалы) по их влиянию на показатели семян Sinapis alba (горчица белая) показана хорошая воспроизводимость результатов в экспериментах и чувствительность тест-объекта к указанным образцам и загрязнениям, что свидетельствовало о приемлемости использования этого растения для подобных анализов.

В работе [15, С. 67.] авторы оценивали с использованием метода фитотестирования остаточную токсичность нефтепродуктов после применения на почве модельного опыта препаратов нефтедеструкторов Бак-Верад, Дестройл и почвенного кондиционера Life Force. Основным показателем наличия токсического воздействия техногенно загрязненных почв являлся низкий процент всхожести и уменьшение, по сравнению с контролем длины корней проростков, пшеницы мягкой Triticum vulgare L.

Авторами [16, С. 22] приведены исследования по оценке всхожести показателей длины надземной и подземной частей тест-культур: кукурузы (Zea mays), овса обыкновенного (Avena sativa), гороха (Písum), эспарцета (Onobrychis), подсолнечника (Helianthus), костра полевого (Bromus) и мятлика лугового (Poapratensis). Описанные исследователями результаты выявили, что по показателю всхожести семян наибольшую устойчивость к нефтяному загрязнению из испытуемых тест-объектов оказались кукуруза, овес и горох. Их всхожесть в экспериментах составляла 88,3; 85 и 67,86 %, соответственно. В экспериментах показано, что нефтяное загрязнение оказывает как стимулирующее, так и ингибирующее действие на тестовые параметры испытуемых растений. По воздействию нефтяного загрязнения на показатели роста корней наиболее чувствительным из испытанных растений оказался овес [16, С. 23].

Перечень используемых в фитотестировании растений приведен в таблице 1.

Таблица 1 - Тест-объекты, применяемые при фитотестировании нефтезагрязненных почв

Двудольные растения Однодольные растения

R. sativus

L. sativum

B. vulgaris

C. sativus

D. carota

H. annuus

L. sativa

S. alba

B. campestris var. ohinensis

B. napus

B. oleracea var. oapitate

B. rapa

G. max

Ph. vulgaris

P. sativum

T. pratense

V. sativa

L. usitatissimum

F. esculentum

S. lycopersicon

При этом в процедуре фитотестирования к тест-объекту предъявляется ряд «технических» требований - семена должны быть одного сорта, поставщика и партии, иметь примерно одинаковый размер.

Тест-реакции в фитотестировании нефтезагрязненных почв

Для количественной оценки действия факторов в условиях техногенного загрязнения подходят физиологические, биохимические и цитогенетические параметры тест-систем растений. Среди контролируемых тестовых функций в методах биотестирования на основе высших растений оценивают всхожесть семян, энергию прорастания семян, длину корней и стеблей проростков семян, интенсивность роста побегов, фитомассу растений и некоторые другие параметры [9, С. 49]. Фиксируемые тест-параметры растений делают возможным количественное выражение тест-функций растительных организмов, позволяют отразить в количественном выражении реакцию растения на внешнее воздействие (загрязняющий компонент). В качестве критерия токсичности используют значение испытуемого параметра и степень его отклонения от контрольного образца. Реже при диагностике и оценке токсичности нефтезагрязненных почв обычно используются такие факторы, как количество цветков, размер околоцветника, количество плодов и семян, например, клевера ползучего [17, С. 83].

Наиболее простыми в использовании для фитотестирования являются методы, основанные на оценке ингибирования прорастания семян и изменения процесса роста проростков (интенсивность роста и пр.). При фитотестировании необходимо осуществлять отбор тестовых культур растений в соответствии со следующими критериями:

- высокая скорость прорастания семян: тестовая растительная культура должна иметь быстро прорастающие семена;

- не обязательным, но желательным фактором является выбор для фитотестирования семян «местных» растений -тех, которых выращивают в регионе, чтобы была возможность доступа к необходимому количеству тест-объекта однородного качества;

Чтобы получить максимально информативный ответ при фитотестировании, наиболее полную информацию о нефтяном загрязнении, рекомендуется использовать одновременно не только несколько тест-объектов, но и рассматривать несколько тест-функций одного тест-объекта. Именно рассмотрение такого комплекса тест-функций тест-объекта при фитотестировании является наиболее правильным.

В качестве тест-параметров рекомендовано применять следующие показатели растительных организмов: всхожесть (количество проросших семян - в % от общего количества семян, взятых в эксперимент); энергию прорастания (количество семян, проросших в первые 3 сут - в % от общего количества семян, взятых в эксперимент); дружность прорастания (среднее количество семян, проросших за 1 сут. от начала эксперимента - в % от общего количества семян, взятых в эксперимент); скорость прорастания (количество семян, прорастающих ежедневно -выражается как сумма средних значений проросших семян за определенные сутки экспонирования) [18, С. 27].

Также при фитотестировании фиксируют интенсивность начальных процессов роста формируемых из семени проростков. Это характеризует состояние и жизнеспособность растительного тест-объекта. Для этого регистрируют длину корней и стеблей проростков семян, их общую фитомассу, полученные за первые 3-4 сут прорастания [18, С. 27].

Так, например, в работе [19, С. 184] авторы использовали проростки люцерны (M. sativa L.) сорго (S. bicolor L. Moench) для оценки фитотоксического эффекта целого ряда полициклических ароматических углеводородов (ПАУ) и их производных, которые могут образовываться в процессах микробной трансформации ПАУ. В данной серии экспериментов авторами показано, что из испытанных растительных тест-организмов наименьшей чувствительностью отличался параметр всхожести семян, что, в принципе, соотносится с данными других авторов. Показатель, отражающий длину проростков семян, оказался более информативным. При этом ряд испытанных веществ, например, пирен и флуорантен даже стимулировали рост проростков. Использование фитотеста позволило авторам выявить более высокую токсичность продуктов трансформации фенантрена по сравнению с самим фенантреном [19, С. 184].

В качестве тест-реакций применяются и другие параметры растений. Например, в работе [20, С. 37-39], в которой авторы анализировали токсичность нефтезагрязненных почв, наряду с длиной корней и побегов регистрировали также сухой вес корня, стебля, листьев и проростков Pennisetum glaucum, количество листьев и площадь листьев растения. Площадь листа, их количество, общая сухая масса проростков заметно снизились в почве с 10 и 15% загрязнением по сравнению с контролем [20, С. 37-39].

Выводы

Фитотестирование широко применяется при обнаружении нефтяного загрязнения почв. Наиболее широко распространенными растениями выступают кресс-салат L. sativum, редис R. sativus, подсолнечник H. annuus, горчица S. alba, рапс B. napus, турнепс B. rapa, горох P. sativum, клевер T. pratense, лук A. cepa, кукуруза Z. mays и т.д. Для количественной оценки действия факторов в условиях техногенного загрязнения используют различные физиологические, биохимические и цитогенетические параметры тест-систем растений: всхожесть и энергию прорастания семян, параметры длины корней и проростков семян, интенсивность роста побегов растения, интенсивность наращивания его фитомассы, количество формирующихся цветков, семян и плодов, размеры некоторых частей растения, например, околоцветников, листьев и т. д. Фитотестирование пригодно для обнаружения нефтяного загрязнения, для оценки степени загрязненности почв, а также немаловажную роль могут играть при оценке и контроле процессов обезвреживания поллютантов и ремедиации нефтезагрязненных почв. Методы фитотестирования применяют для оценки эффективности тех или иных ремедиационных агентов (химических реагентов и сорбентов различной природы, связывающих углеводороды нефти; микроорганизмов-биоремедиантов и препаратов на их основе). Кроме того, перспективно применение методов биотестирования, основанных на использовании растений, для изучения комбинированных токсических эффектов углеводородов нефти с другими загрязнителями почв.

Конфликт интересов Conflict of Interest

Не указан. None declared.

Список литературы / References

1. Brown D. M. Heavy hydrocarbon fate and transport in the environment / D. M. Brown, M. Bonte, R. Gill, J. Dawick, P. J. Boogaard // Quarterly Journal of Engineering Geology and Hydrogeology. 2017. 50 (3). Р. 333-346. doi: https://doi.org/10.1144/qjegh2016-142

2. Trellu C. Characteristics of PAH tar oil contaminated soils - Black particles, resins and implications for treatment strategies / C. Trellu, A. Miltner, R. Gallo, D. Huguenot, et al // Journal of Hazardous Materials. 2017. Vol. 327. P. 206-215. https://doi.org/10.1016/jjhazmat.2016.12.062.

3. Bekbaeva V. K. Agroecological characteristics of soils disturbed by oil production and methods of their recultivation in dossor / V. K. Bekbaeva, G. P. Metaksa, A. T. Kanaev // EurAsian Journal of BioSciences. 2019. 13. 1967-1972.

4. Исмаилов Н. М. Микробиология и ферментативная активность нефтезагрязненных почв / Н. М. Исмаилов. М .: Наука, 1988. С. 42-56.

5. Tumanyan A. F. Influence of Oil Pollution on Various Types of Soil / A. F. Tumanyan, N. V. Tyutyuma, A. N. Bondarenko et al. // Chem Technol Fuels Oils. 2017. 53. Р. 369-376. https://doi.org/10.1007/s10553-017-0813-7

6. Shen W. Ecotoxicity monitoring and bioindicator screening of oil-contaminated soil during bioremediation / W. Shen, N. Zhu, J. Cui, H. Wang, et al. // Ecotoxicol Environ Saf. 2016. 124. Р. 120-128. doi: 10.1016/j.ecoenv.2015.10.005.

7. Киреева Н. А. Комплексное биотестирование нефтезагрязнённых почв / Н. А. Киреева, Т. Р. Кабиров, И. Е. Дубовик // Теоретическая и прикладная экология. № 1. 2007. С. 65-69.

8. Зильберман М. В. Биотестирование почв, загрязненных нефтью и нефтепродуктами / М. В. Зильберман, Е. А. Порошина, Е. В. Зырянова. Пермь: ФГУ УралНИИ Экология, 2005. 111 с.

9. Арзамазова А. В. Опыт применения яровой пшеницы (Triticum aestivum l.) в целях фитотестирования нефтезагрязненных почв / А. В. Арзамазова, Р. Р. Кинжаев, С. Я. Трофимов // Проблемы агрохимии и экологии. 2016. № 2. С. 47-51.

10. Nikolaeva O. V. Improvement of laboratory phytotest for the ecological evaluation of soils / O. V. Nikolaeva, V. A. Terekhova // Eurasian Soil Sc. 2017. 50. 1105-1114. https://doi.org/10.1134/S1064229317090058

11. Shulaev N. S. Phytotoxic properties of electrically-cleaned oil-contaminated soils (the use of Lepidium sativum L. biotest) / N. S. Shulaev, V. V. Pryanichnikova, R. R. Kadyrov, N. A. Bykovsky, R. M. Damineva, I. V. Ovsyannikova // IOP Conf. Series: Materials Science and Engineering 862 (2020) 062021 doi:10.1088/1757-899X/862/6/062021

12. Trofimov I. Assessment of phytotic toxicity of mixed aviation fuels using of plant testers / I. Trofimov, L. Pavliukh, T. Novakivska, D. Bondarenko // International independent scientific journal. 2020. №11. Р. 9-17.

13. Илларионов С. А. Роль микромицетов в фитотоксичности нефтезагрязненных почв / С. А. Илларионов, А. В. Назаров, И. Г. Калачникова // Экология. 2003. № 5. С. 341-346.

14. Czerniawska-Kusza I. Comparison of the Phytotoxkit microbiotest and chemical variables for toxicity evaluation of sediments / I. Czerniawska-Kusza, T. Ciesielczuk, G. Kusza, A. Cichon // Environmental Toxicology. 2006. 21(4). P. 367372.

15. Киселёв М. В. Определение степени токсичности почвы, очищенной от нефтезагрязнения биологическими препаратами, в условиях северо-запада РФ / М. В. Киселёв, М. В. Башарина // Известия Санкт-Петербургского государственного аграрного университета. 2020. С. 64-69.

16. Талайбекова Г. Т. Фитотестирование нефтезагрязненных почв с помощью фитотолерантных растений / Г. Т. Талайбекова, К. А. Кожобаев, Ж. К. Токпаева, Г. К. Эсенжанова, Н. Э. Тотубаева // Проблемы региональной экологии, Издательство: ООО Издательский дом "Камертон" (Москва). 2019. № 2. С. 20-24.

17. Горшкова Т. А. Использование клевера ползучего (Trifolium repens L.) в биоиндикации разных видов антропогенной нагрузки / Т. А. Горшкова // Научные труды Калужского государственного университета имени К.Э. Циолковского. 2016. С. 83-88.

18. Чеснокова С. М. Биологические методы оценки качества объектов окружающей среды : учеб. пособие. В 2 ч. Ч. 2. Методы биотестирования / С. М. Чеснокова, Н. В. Чугай // Владимир : Изд-во Владим. гос. ун-та. 2008. 92 с.

19. Дубровская Е. В. Изменение фитотоксичности полициклических ароматических углеводородов в процессе их микробной деградации / Е. В. Дубровская, Н. Н.Позднякова, А. Ю. Муратова, О. В. Турковская // Физиология растений. 2016. Т. 63. № 1. С. 180-188.

20. Shahid H. Effects of crude oil polluted soil on the seedling growth of Pennisetum glaucum (L.) R. Br. / H. Shahid, M. Z. Iqbal, M. Shafiq, M. Athar // J. Plant Develop. 2017. 24. Р. 33-43.

Список литературы на английском языке / References in English

1. Brown D. M. Heavy hydrocarbon fate and transport in the environment / D. M. Brown, M. Bonte, R. Gill, J. Dawick, P. J. Boogaard // Quarterly Journal of Engineering Geology and Hydrogeology. 2017. 50 (3). Р. 333-346. doi: https://doi.org/10.1144/qjegh2016-142

2. Trellu C. Characteristics of PAH tar oil contaminated soils - Black particles, resins and implications for treatment strategies / C. Trellu, A. Miltner, R. Gallo, D. Huguenot, et al // Journal of Hazardous Materials. 2017. Vol. 327. P. 206-215. https://doi.org/10.1016/jj hazmat.2016.12.062.

3. Bekbaeva V. K. Agroecological characteristics of soils disturbed by oil production and methods of their recultivation in dossor / V. K. Bekbaeva, G. P. Metaksa, A. T. Kanaev // EurAsian Journal of Biosciences. 2019. 13. 1967-1972.

4. Ismailov N. M. Mikrobiologija i fermentativnaja aktivnost' neftezagrjaznennyh pochv. [Microbiology And Enzymatic Activity Of Oil-Contaminated Soils] / N. M. Ismailov. Moscow: Nauka, 1988, pp. 42-56. [in Russian]

5. Tumanyan A. F. Influence of Oil Pollution on Various Types of Soil / A. F. Tumanyan, N. V. Tyutyuma, A. N. Bondarenko et al. // Chem Technol Fuels Oils. 2017. 53. Р. 369-376. https://doi.org/10.1007/s10553-017-0813-7

6. Shen W. Ecotoxicity monitoring and bioindicator screening of oil-contaminated soil during bioremediation / W. Shen, N. Zhu, J. Cui, H. Wang, et al. // Ecotoxicol Environ Saf. 2016. 124. Р. 120-128. doi: 10.1016/j.ecoenv.2015.10.005.

7. Kireeva N. A. Kompleksnoe biotestirovanie neftezagrjaznjonnyh pochv [Complex Biotesting Of Oil-Contaminated Soils]/ N. A. Kireeva, T. R. Kabirov, I. E. Dubovik // Teoreticheskaja i prikladnaja jekologija. [Theoretical and Applied Ecology.], no. 1, 2007, PP. 65-69. [in Russian]

8. Zilberman M. V. Biotestirovanie pochv, zagrjaznennyh neft'ju i nefteproduktami. [Biotesting Of Soils Contaminated with Oil and Petroleum Products] / M. V. Zilberman, E. A. Poroshina, E. V. Zyryanova. Perm: FGU UralNII Jekologija [FGU Ural Institute of Ecology], 2005. 111 p. [in Russian]

9. Arzamazova A.V. Opyt primenenija jarovoj pshenicy (Triticum aestivum l.) v celjah fitotestirovanija neftezagrjaznennyh pochv [Experience Of Using Spring Wheat (Triticum Aestivum L.) For Phytotesting Of Oil-Contaminated Soils]/ A. V. Arzamazova, R. R. Kinzhaev, S. Ya Trofimov // Problemy agrohimii i jekologii. [Problems Of Agrochemistry And Ecology.] 2016. no. 2. PP. 47-51. [in Russian]

10. Nikolaeva O. V. Improvement of laboratory phytotest for the ecological evaluation of soils / O. V. Nikolaeva, V. A. Terekhova // Eurasian Soil Sc. 2017. 50. 1105-1114. https://doi.org/10.1134/S1064229317090058

11. Shulaev N. S. Phytotoxic properties of electrically-cleaned oil-contaminated soils (the use of Lepidium sativum L. biotest) / N. S. Shulaev, V. V. Pryanichnikova, R. R. Kadyrov, N. A. Bykovsky, R. M. Damineva, I. V. Ovsyannikova // IOP Conf. Series: Materials Science and Engineering 862 (2020) 062021 doi:10.1088/1757-899X/862/6/062021

12. Trofimov I. Assessment of phytotic toxicity of mixed aviation fuels using of plant testers / I. Trofimov, L. Pavliukh, T. Novakivska, D. Bondarenko // International independent scientific journal. 2020. №11. Р. 9-17.

13. Illarionov, S. A. Rol' mikromicetov v fitotoksichnosti neftezagrjaznennyh pochv [The Role Of Micromycetes In The Phytotoxicity Of Oil-Contaminated Soils] / S. A. Illarionov, A. V. Nazarov, I. G. Kalashnikov // Jekologija. [Ecology.] 2003. No. 5. pp. 341-346. [in Russian]

14. Czerniawska-Kusza I. Comparison of the Phytotoxkit microbiotest and chemical variables for toxicity evaluation of sediments / I. Czerniawska-Kusza, T. Ciesielczuk, G. Kusza, A. Cichon // Environmental Toxicology. 2006. 21(4). P. 367372.

15. Kiselev M. V. Opredelenie stepeni toksichnosti pochvy, ochishhennoj ot neftezagrjaznenija biologicheskimi preparatami, v uslovijah severo-zapada RF [Determination of the degree of toxicity of the soil cleared of oil pollution by biological preparations in the conditions of the North-West of the Russian Federation] / M. V. Kiselev, M. V. Basharina // Izvestija Sankt-Peterburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. [Bulletin of the St. Petersburg State Agrarian University.] 2020, pp. 64-69. [in Russian]

16. Alibekova G. T. Fitotestirovanie neftezagrjaznennyh pochv s pomoshh'ju fitotolerantnyh rastenij [Phytotesting Of Oil-Contaminated Soils Using Phyto-Tolerant Plants]/ G. T. Alibekova, K. A. Kolbaev, Zh. K. Tokbaeva et al. // Problemy regional'noj jekologii [Problems Of Regional Ecology], Publishing house: "Kamerton" LLC (Moscow). 2019. No. 2, pp. 20 -24. [in Russian]

17. Gorshkova T. A. Ispol'zovanie klevera polzuchego (Trifolium repens L.) v bioindikacii raznyh vidov antropogennoj nagruzki [Use Of White Clover (Trifolium Repens L.) In Bioindication Of Different Types Of Anthropogenic Load] / T. A. Gorshkova // Nauchnye trudy Kaluzhskogo gosudarstvennogo universiteta imeni K.Je. Ciolkovskogo. [Scientific Works Of Tsiolkovsky Kaluga State University.] 2016, pp. 83-88. [in Russian]

18. Chesnokova S. M. Biologicheskie metody ocenki kachestva ob#ektov okruzhajushhej sredy : ucheb. posobie. V 2 ch. Ch. 2. Metody biotestirovanija [Biological Methods for Assessing the Quality of Environmental Objects: Textbook In Two Parts. Part 2. Methods of Biotesting] / S. M. Chesnokova, N. V. Chugay // Vladimir: Publishing House of Vladimir State University. 2008. 92 P. [in Russian]

19. Dubrovskaya E. V. Izmenenie fitotoksichnosti policiklicheskih aromaticheskih uglevodorodov v processe ih mikrobnoj degradacii [Changes In The Phytotoxicity Of Polycyclic Aromatic Hydrocarbons During Their Microbial Degradation] / E. V. Dubrovskaya, N. N. Pozdnyakova, A. Yu. Muratova et al. 2016. Vol. 63. No. 1. pp. 180-188. [in Russian]

20. Shahid H. Effects of crude oil polluted soil on the seedling growth of Pennisetum glaucum (L.) R. Br. / H. Shahid, M. Z. Iqbal, M. Shafiq, M. Athar // J. Plant Develop. 2017. 24. P. 33-43.