ПРИМЕНЕНИЕ ДЕТСКОЙ МОЛОЧНОЙ СМЕСИ С КРУПНЫМИ ЛИПИДНЫМИ ГЛОБУЛАМИ
APPLICATION OF INFANT MILK FORMULA WITH LARGE LIPID GLOBULES

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к области детского питания и, в частности, к области отдаленных последствий для здоровья питания в раннем возрасте.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Грудное вскармливание является предпочтительным способом кормления младенцев. Однако существуют обстоятельства, которые делают грудное вскармливание невозможным или менее желательным. В этих случаях детские молочные смеси являются хорошей альтернативой. Состав современных детских молочных смесей адаптирован таким образом, что они отвечают многим из специальных питательных потребностей быстро растущего и развивающегося младенца. Однако похоже, что состав детских молочных смесей еще может быть усовершенствован.
В отличие от детской молочной смеси грудное молоко содержит липидные капли, которые до 10 раз больше по размеру. Судя по всему, у людей, которые в раннем возрасте были на грудном вскармливании, в зрелом возрасте наблюдаются пониженные уровни холестерина в крови по сравнению с уровнями у людей, которые в детстве были на искусственном вскармливании. (Marmot, 1980, J Epid. Comm Health 34: 164-167; Owen, 2006 Pediatrics 110: 597-608). Это может объяснить повышенный риск развития атеросклероза и аналогичных сосудистых заболеваний в более позднем возрасте у людей, которые были на искусственном вскармливании, по сравнению с теми, которые были на грудном вскармливании.
На сегодняшний день неинфекционные заболевания (НИЗ) (NCD), такие как сердечнососудистые заболевания, включая атеросклероз, болезнь сердца и высокое кровяное давление, являются причиной 35 миллионов смертей в год, что составляет 60% всех случаев смерти в мире. Независимо от уровня доходов, высокий уровень холестерина является одним из 10 ведущих факторов риска смертельного исхода. По-прежнему большой вклад в рост числа НИЗ вносят страны с низким и средним уровнем доходов, особенно по мере того как в них происходит улучшение социально-экономических условий вслед за сокращением случаев инфекционных заболеваний. Согласно прогнозам ВОЗ число НИЗ в мировом масштабе увеличится на 17% в течение следующего десятилетия.
Настоящее изобретение относится к такому отдаленному влиянию детских молочных смесей на здоровье, в частности, на уровни холестерина в крови и сосудистые заболевания в более позднем возрасте.
В EP 2305049 описана композиция для кормления младенцев в возрасте младше 36 месяцев, содержащая липид, белок, усваиваемый углевод и холестерин, предназначенная для применения в профилактике сердечнососудистых заболеваний, атеросклероза и/или высоких уровней холестерина в крови в более позднем возрасте.
В WO 2009/138680 описано использование молочного жира для детского питания с различными целями, включая регулирование уровня холестерина в крови.
В WO 2008/054192 описано использование детской молочной смеси (ДМС) с определенным профилем жирных кислот для профилактики дислипидемии в более позднем возрасте.
Стандартные детские молочные смеси содержат растительный жир в качестве липидного компонента. Липиды гомогенизируют для получения стабильной эмульсии, и липидные глобулы имеют небольшой размер, с объемным взвешенным модовым диаметром примерно 0,3-0,6 мкм. Менее 55 объемных % в расчете на общее количество липидов, как правило, менее 35 об.%, имеют размер от 2 до 12 мкм. Липидные глобулы по большей части покрыты молочными белками, в частности, казеином. В статье Michalski et al., 2005, J Dairy Sci 88: 1927-1940 описано распределение по размерам липидных глобул в человеческом молоке и детской молочной смеси.
В WO 2010/0027258 описано детское питание, содержащее крупные липидные глобулы, которое предназначено для предотвращения ожирения в более позднем возрасте.
Однако в данных документах не рассматривается роль размера липидных глобул в питании на ранних этапах жизни для снижения уровней холестерина в крови в более позднем возрасте.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Авторы изобретения использовали животную модель, являющуюся репрезентативной для физиологических программирующих эффектов диеты, используемой в раннем возрасте. В данной модели для кормления животных в раннем возрасте используют различные диеты, а в дальнейшем для их кормления используют одну и ту же диету западного стиля, диету с высоким содержанием жира и высоким содержанием холестерина. Данная модель позволяет изучать, каким образом диета в раннем возрасте через программирующие организм эффекты оказывает влияние на здоровье в более позднем возрасте и как диета в раннем возрасте влияет на то, как организм в более позднем возрасте переносит диету западного стиля, диету с высоким содержанием жира и холестерина.
Авторы изобретения с удивлением обнаружили, что уровень общего холестерина в крови в более позднем возрасте после использования диеты западного стиля, диеты с высоким содержанием жира и холестерина, зависел от размера липидных глобул диеты в раннем возрасте. Если эта диета включала крупные липидные глобулы, уровень общего холестерина в крови в более позднем возрасте преимущественно был пониженным. С другой стороны, если диета в раннем возрасте содержала мелкие липидные глобулы, которые, как правило, содержатся в коммерческих ДМС, уровень общего холестерина в крови в более позднем возрасте был повышен. Эффект снижения уровней холестерина в крови в более позднем возрасте также имел место, если крупные липидные глобулы были покрыты фосфолипидами. Известно, что крупные липидные глобулы, покрытые фосфолипидами, дополнительно уменьшают ожирение в более позднем возрасте. В случаях, когда в диете присутствовали фосфолипиды и холестерин, оказалось важным, чтобы эти фосфолипиды и холестерин присутствовали в виде покрытия на поверхности липидных глобул. В противном случае, в более позднем возрасте это плохо влияло на уровни холестерина в крови. Прямой корреляции между уровнями холестерина в крови в более позднем возрасте и ожирением в более позднем возрасте или относительным количеством жировой массы не наблюдали. Прямого влияния диеты на снижение уровней холестерина в крови не наблюдали, вместо этого наблюдали небольшое увеличение.
Таким образом, настоящее изобретение относится к питательной композиции, содержащей липид, в которой липид присутствует в виде липидных глобул, при этом указанные липидные глобулы имеют больший размер, чем обычно принято в коммерческой детской молочной смеси для кормления людей в раннем возрасте, предназначенной для применения в профилактике гиперхолестеринемии и/или гиперлипопротеинемии, профилактике атеросклероза или других сосудистых заболеваний, снижения уровней холестерина в крови, уровней ЛПНП (липопротеинов низкой плотности) в крови и/или уровней ЛПОНП (липопротеинов очень низкой плотности) в крови в более позднем возрасте.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к способу
a) снижения уровней холестерина в крови и/или
b) снижения уровней ЛПНП и/или ЛПОНП в крови
у субъекта-человека в более позднем возрасте, предпочтительно у субъекта-человека, достигшего возраста старше 36 месяцев,
путем кормления питательной композицией, содержащей липид, в которой липид присутствует, предпочтительно липид в основном присутствует в виде липидных глобул, при этом указанные липидные глобулы имеют объемный взвешенный модовый диаметр более 1,0 мкм, содержащей также триглицериды растительного происхождения,
субъекта-человека в раннем возрасте, предпочтительно субъекта-человека в возрасте от 0 до 36 месяцев.
В контексте настоящего изобретения способ снижения уровней холестерина в крови и/или снижения уровней ЛПНП и/или ЛПОНП в крови считается немедицинским способом.
Можно также сказать, что изобретение относится к применению питательной композиции, содержащей липид, в которой липид присутствует, предпочтительно липид в основном присутствует в виде липидных глобул, при этом указанные липидные глобулы имеют объемный взвешенный модовый диаметр более 1,0 мкм, содержащей также триглицериды растительного происхождения,
для кормления субъекта-человека в раннем возрасте, предпочтительно для кормления субъекта-человека в возрасте от 0 до 36 месяцев, с целью
a) снижения уровней холестерина в крови и/или
b) снижения уровней ЛПНП и/или ЛПОНП в крови
в более позднем возрасте, предпочтительно, когда указанный субъект-человек достиг возраста старше 36 месяцев.
Предпочтительно применение не является терапевтическим.
Для некоторых юрисдикций, можно также сказать, что изобретение относится к применению липида для получения питательной композиции, в которой липид присутствует, предпочтительно липид в основном присутствует, в виде липидных глобул, при этом указанные липидные глобулы имеют объемный взвешенный модовый диаметр более 1,0 мкм, содержащей также триглицериды растительного происхождения, предназначенной для кормления субъекта-человека в раннем возрасте, предпочтительно для кормления субъекта-человека в возрасте от 0 до 36 месяцев, с целью
a) снижения уровней холестерина в крови и/или
b) снижения уровней ЛПНП и/или ЛПОНП в крови
в более позднем возрасте предпочтительно, когда указанный субъект-человек достиг возраста старше 36 месяцев.
Можно даже сказать, что изобретение относится к питательной композиции, содержащей липид, в которой липид присутствует, предпочтительно липид в основном присутствует, в виде липидных глобул, при этом указанные липидные глобулы имеют объемный взвешенный модовый диаметр более 1,0 мкм, содержащей также триглицериды растительного происхождения, предназначенной для кормления субъекта-человека в раннем возрасте, предпочтительно для кормления субъекта-человека в возрасте от 0 до 36 месяцев, с целью
a) снижения уровней холестерина в крови и/или
b) снижения уровней ЛПНП и/или ЛПОНП в крови
в более позднем возрасте предпочтительно, когда указанный субъект-человек достиг возраста старше 36 месяцев.
Изобретение также относится к способу
a) профилактики гиперхолестеринемии и/или гиперлипопротеинемии, и/или
b) профилактики сосудистых заболеваний, выбранных из группы, состоящей из атеросклероза, сердечнососудистых заболеваний, цереброваскулярных заболеваний, ишемии, заболевания периферических сосудов и заболевания почечных артерий,
у субъекта-человека в более позднем возрасте предпочтительно, когда указанный субъект-человек достиг возраста старше 36 месяцев,
путем кормления питательной композицией, содержащей липид, в которой липид присутствует, предпочтительно липид в основном присутствует, в виде липидных глобул, при этом указанные липидные глобулы имеют объемный взвешенный модовый диаметр более 1,0 мкм, содержащей также триглицериды растительного происхождения,
субъекта-человека в раннем возрасте, предпочтительно субъекта-человека в возрасте от 0 до 36 месяцев.
Можно также сказать, что изобретение относится к применению липида для получения питательной композиции, в которой липид присутствует, предпочтительно липид в основном присутствует, в виде липидных глобул, при этом указанные липидные глобулы имеют объемный взвешенный модовый диаметр более 1,0 мкм, содержащей также триглицериды растительного происхождения, предназначенной для кормления субъекта-человека в раннем возрасте, предпочтительно для кормления субъекта-человека в возрасте от 0 до 36 месяцев, с целью
a) профилактики гиперхолестеринемии и/или гиперлипопротеинемии, и/или
b) профилактики сосудистого заболевания, выбранного из группы, состоящей из атеросклероза, сердечнососудистых заболеваний, цереброваскулярных заболеваний, ишемии, заболевания периферических сосудов, и заболевания почечных артерий,
в более позднем возрасте предпочтительно, когда указанный субъект-человек достиг возраста старше 36 месяцев.
Можно также сказать, что изобретение относится к питательной композиции, содержащей липид, в которой липид присутствует, предпочтительно липид в основном присутствует, в виде липидных глобул, при этом указанные липидные глобулы имеют объемный взвешенный модовый диаметр более 1,0 мкм, содержащей также триглицериды растительного происхождения, предназначенной для кормления субъекта-человека в раннем возрасте, предпочтительно для кормления субъекта-человека в возрасте от 0 до 36 месяцев, с целью
a) профилактики гиперхолестеринемии и/или гиперлипопротеинемии, и/или
b) профилактики сосудистого заболевания, выбранного из группы, состоящей из атеросклероза, сердечнососудистых заболеваний, цереброваскулярных заболеваний, ишемии, заболевания периферических сосудов (артерий?) и заболевания почечных артерий,
в более позднем возрасте предпочтительно, когда указанный субъект-человек достиг возраста старше 36 месяцев.
В контексте данного изобретения субъекта-человека в возрасте от 0 до 36 месяцев также называют младенцем.
Липидный компонент
Настоящая питательная композиция содержит липид. Липид предпочтительно обеспечивает от 30 до 60% общего количества калорий в композиции. Более предпочтительно настоящая композиция содержит липид, обеспечивающий от 35 до 55% общего количества калорий, еще более предпочтительно настоящая композиция содержит липид, обеспечивающий от 40 до 50% общего количества калорий. Находящаяся в жидкой форме, например, в виде готовой к употреблению жидкости, композиция предпочтительно содержит от 2,1 до 6,5 г липида в 100 мл, более предпочтительно от 3,0 до 4,0 г в 100 мл. В расчете на сухую массу настоящая композиция предпочтительно содержит от 10 до 50 масс.%, более предпочтительно от 12,5 до 40 масс.% липида, еще более предпочтительно от 19 до 30 масс.% липида.
Липиды включают полярные липиды (такие как фосфолипиды, гликолипиды, сфингомиелин и холестерин), моноглицериды, диглицериды, триглицериды и свободные жирные кислоты. Предпочтительно композиция содержит по меньшей мере 75 масс.%, более предпочтительно по меньшей мере 85 масс.% триглицеридов от общего количества липидов.
Липид по настоящему изобретению включает растительные липиды. Наличие растительных липидов предпочтительно обеспечивает оптимальный профиль жирных кислот с высоким содержанием (поли)ненасыщенных жирных кислот и/или более напоминающий человеческий молочный жир. Использование только липидов из молока коров или других домашних млекопитающих не обеспечивает оптимальный профиль жирных кислот. Этот недостаточно оптимальный профиль жирных кислот, например, с большим количеством насыщенных жирных кислот, как известно, приводит к повышенным уровням холестерина. Предпочтительно настоящая композиция содержит по меньшей мере один, предпочтительно по меньшей мере два источника липидов, выбранные из группы, состоящей из льняного масла (масла льняного семени), рапсового масла (например, сурепного масла, рапсового масла с низким содержанием эруковой кислоты и масла канолы), подсолнечного масла, подсолнечного масла с высоким содержанием олеиновой кислоты, сафлорового масла, сафлорового масла с высоким содержанием олеиновой кислоты, оливкового масла, кокосового масла, пальмового масла и пальмоядрового масла. Предпочтительно настоящая композиция содержит по меньшей мере один, предпочтительно по меньшей мере два источника липидов, выбранные из группы, состоящей из льняного масла, масла канолы, кокосового масла, подсолнечного масла и подсолнечного масла с высоким содержанием олеиновой кислоты. Коммерчески доступные растительные липиды, как правило, предоставляются в виде непрерывной масляной фазы. Находящаяся в жидкой форме, например, в виде готовой к употреблению жидкости, композиция предпочтительно содержит от 2,1 до 6,5 г растительного липида в 100 мл, более предпочтительно от 3,0 до 4,0 г в 100 мл. В расчете на сухую массу настоящая композиция предпочтительно содержит от 10 до 50 масс.%, более предпочтительно от 12,5 до 40 масс.% растительного липида, еще более предпочтительно от 19 до 30 масс.% Предпочтительно композиция содержит от 45 до 100 масс.% растительных липидов от общего количества липидов, более предпочтительно от 70 до 100 масс.%, еще более предпочтительно от 75 до 97 масс.%. Ввиду этого следует отметить, что настоящая композиция также может содержать нерастительные липиды. Подходящие нерастительные липиды включают морские масла, микробные масла, яичный жир и молочный жир. Подходящие и предпочтительные нерастительные липиды дополнительно указаны ниже.
Размер липидных глобул
В соответствии с настоящим изобретением, липид присутствует в композиции в виде липидных глобул. В жидкой форме композиции эти липидные глобулы эмульгированы в водной фазе. Альтернативно, липидные глобулы находятся в виде порошка, и порошок подходит для растворения в воде или в другой пищевой водной фазе. Липидные глобулы содержат растительный жир и предпочтительно содержат по меньшей мере 90 масс.% триглицеридов, и более предпочтительно состоят в основном из триглицеридов. Не все растительные жиры, которые присутствуют в композиции, обязательно должны быть заключены в липидные глобулы, или в ядро липидных глобул, однако предпочтительно, если основная часть, предпочтительно более 50 масс.%, более предпочтительно более 70 масс.%, еще более предпочтительно более 85 масс.%, еще более предпочтительно более 95 масс.%, наиболее предпочтительно более 98 масс.% растительных липидов, присутствующих в композиции, заключены в ядре липидных глобул. В одном варианте осуществления липидные глобулы содержат по меньшей мере 70 масс.% триглицеридов растительного происхождения, более предпочтительно ядро липидных глобул содержит по меньшей мере 85 масс.%, более предпочтительно по меньшей мере 95 масс.% триглицеридов растительного происхождения.
Липидные глобулы по настоящему изобретению имеют объемный взвешенный модовый диаметр более 1,0 мкм, предпочтительно более 2,0 мкм, более предпочтительно более 3,0 мкм, более предпочтительно 4,0 мкм или более, предпочтительно от 1,0 до 10 мкм, более предпочтительно от 2,0 до 8,0 мкм, еще более предпочтительно от 3,0 до 8,0 мкм, наиболее предпочтительно от 4,0 мкм до 8,0 мкм. Кроме того, предпочтительно, если распределение по размерам является таким, что по меньшей мере 45 объемных %, предпочтительно по меньшей мере 55 объемных %, еще более предпочтительно по меньшей мере 65 объемных %, еще более предпочтительно по меньшей мере 75 объемных % имеют диаметр от 2 до 12 мкм. Более предпочтительно, по меньшей мере 45 объемных %, предпочтительно по меньшей мере 55 объемных %, еще более предпочтительно по меньшей мере 65 объемных %, еще более предпочтительно по меньшей мере 75 объемных % имеют диаметр от 2 до 10 мкм. Еще более предпочтительно, по меньшей мере 45 объемных %, предпочтительно по меньшей мере 55 объемных %, еще более предпочтительно по меньшей мере 65 объемных %, еще более предпочтительно по меньшей мере 75 объемных % имеют диаметр от 4 до 10 мкм. Было обнаружено, что крупные липидные глобулы лучше влияют на уровни холестерина в крови в более позднем возрасте.
Процентная доля липидных глобул рассчитана, исходя из объема всего липида. Модовый диаметр соответствует диаметру, который более всего представлен, исходя из объема всего липида, или пиковой величине в графическом представлении, если ось X соответствует диаметру, а ось Y соответствует объему (%). Объем липидных глобул и распределение их по размеру можно соответствующим образом определять при помощи анализатора размеров частиц, такого как Mastersizer (Malvern Instruments, Malvern, UK), например, методом, описанным в статье Michalski et al., 2001, Lait 81: 787-796.
Способы получения липидных глобул с покрытием из фосфолипидов и имеющих увеличенные размеры раскрыты в WO 2010/0027258. Размер липидных глобул можно изменять путем корректировки этапов процесса, с помощью которого изготавливают настоящую композицию. В стандартной детской молочной смеси липидную фракцию (как правило, включающую растительный жир, небольшое количество полярных липидов и жирорастворимые витамины) смешивают с водной фракцией (как правило, содержащей воду, обезжиренное молоко, сыворотку, усваиваемые углеводы, такие как лактоза, водорастворимые витамины и минералы, а также, необязательно, неусваиваемые углеводы) путем гомогенизации под высоким давлением, в результате чего получаются небольшие липидные глобулы. При отсутствии гомогенизации очень быстро будет происходить расслоение, то есть, липидная часть будет отделяться от водной части и собираться наверху. Вследствие этого в стандартной молочной смеси первого уровня или молочной смеси третьего уровня липид гомогенизируют для создания стабильной эмульсии, и липидные глобулы имеют небольшой размер с объемным взвешенным модовым диаметром примерно 0,3-0,6 мкм, как правило, менее 0,5 мкм. Менее 55 объемных % в расчете на общее количество липидов, как правило, менее 35 об.%, имеют диаметр от 2 до 12 мкм. Липидные глобулы по большей части покрыты молочными белками, в частности, казеином.
Покрытие фосфолипидами
В соответствии с настоящим изобретением, питательная композиция предпочтительно содержит фосфолипиды. Предпочтительно фосфолипиды присутствуют в виде покрытия на поверхности липидной глобулы. Под «покрытием» подразумевают, что внешний поверхностный слой липидной глобулы содержит полярные липиды, при том, что эти полярные липиды практически отсутствуют в ядре липидной глобулы. Не все фосфолипиды и/или гликолипиды, присутствующие в композиции, обязательно должны входить в покрытие, однако предпочтительно, если большая их часть входит. Предпочтительно более 50 масс.%, более предпочтительно более 70 масс.%, еще более предпочтительно более 85 масс.%, наиболее предпочтительно более 95 масс.% фосфолипидов и/или гликолипидов, присутствующих в композиции, входят в покрытие липидных глобул. Фосфолипиды расположены на поверхности липидной глобулы, то есть, в виде покрывающего или внешнего слоя. Подходящим методом определения того, расположены ли фосфолипиды на поверхности липидных глобул, является лазерная сканирующая микроскопия, описанная в WO 2010/0027259.
В стандартной детской молочной смеси из-за небольшого размера липидных глобул (результатом чего является большая поверхность липидов) и очень низких уровней присутствующих фосфолипидов (как правило, менее 0,15 масс.%, исходя из общего содержания жира) липидные глобулы не покрыты фосфолипидами, а покрыты по большей части белком, таким как казеин.
Фосфолипиды
В соответствии с настоящим изобретением, питательная композиция предпочтительно содержит фосфолипиды. Фосфолипиды необходимы для формирования поверхностного слоя, покрытия липидных глобул, в которых может находиться диетический холестерин. Фосфолипиды являются полярными липидами. Полярные липиды являются амфипатическими по своей природе и включают глицерофосфолипиды, гликосфинголипиды, сфингомиелин и/или холестерин. Фосфолипидами в совокупности называют глицерофосфолипиды и сфингомиелин. В соответствии с настоящим изобретением, фосфолипиды предпочтительно присутствуют в виде покрытия на липидных глобулах. Под «покрытием» подразумевают, что внешний поверхностный слой липидной глобулы содержит полярные липиды, в частности, фосфолипиды, при том, что эти полярные липиды практически отсутствуют в ядре липидной глобулы. Наличие фосфолипидов в виде покрытия или внешнего слоя липидной глобулы в диете, потребляемой в раннем возрасте, позволяет холестерину располагаться в поверхностном слое, и это, как было установлено, способствует дальнейшему снижению уровней холестерина в крови в более позднем возрасте.
Настоящая композиция предпочтительно содержит глицерофосфолипиды. Глицерофосфолипиды представляют собой класс липидов, образованных из жирных кислот, эстерифицированных по гидроксильным группам на атоме углерода 1 и атоме углерода 2 каркасного фрагмента глицерина, и отрицательно заряженной фосфатной группы, присоединенной к атому углерода 3 глицерина через сложноэфирную связь, и необязательно, холиновой группы (в случае фосфатидилхолина, ФХ), сериновой группы (в случае фосфатидилсерина, ФС), этаноламиновой группы (в случае фосфатидилэтаноламина, ФЭ), инозитоловой группы (в случае фосфатидилинозитола, ФИ) или глицериновой группы (в случае фосфатидилглицерина, ФГ), присоединенной к фосфатной группе. Лизофосфолипиды представляют собой класс фосфолипидов с одной жирной ацильной цепью. Предпочтительно настоящая композиция содержит ФХ, ФС, ФИ и/или ФЭ, более предпочтительно, по меньшей мере ФХ.
Настоящая композиция предпочтительно содержит сфингомиелин. Сфингомиелины содержат молекулу фосфорилхолина или фосфорилэтаноламина, эстерифицированную по 1-гидроксильной группе церамида. Они классифицируются как фосфолипид, а также как сфинголипид, но не классифицируются ни как глицерофосфолипид, ни как гликосфинголипид. Сфингомиелин является особенно предпочтительным, поскольку он взаимодействует с холестерином. Предпочтительно фосфолипиды получают из молочных липидов. Предпочтительным источником фосфолипидов, в частности ФХ, является соевый лецитин и/или подсолнечный лецитин.
Предпочтительно настоящая композиция дополнительно содержит гликосфинголипиды. В настоящем изобретении термин «гликосфинголипиды», в частности, относится к гликолипидам с аминоспиртом сфингозином. Сфингозиновый каркас связан посредством атома O с заряженной головной группой, такой как этаноламиновый, сериновый или холиновый каркас. Каркас также связан посредством амида с жирной ацильной группой. Гликосфинголипиды представляют собой церамиды с одним или более сахарными остатками, соединенными β-гликозидной связью с гидроксильной группой в положении 1. Предпочтительно настоящая композиция содержит ганглиозиды, более предпочтительно по меньшей мере один ганглиозид, выбранный из группы, состоящей из GM3 и GD3.
Предпочтительно массовое отношение фосфолипиды:гликосфинголипиды составляет от 2:1 до 10:1, более предпочтительно от 2:1 до 5:1.
Предпочтительно настоящая композиция содержит от 0,5 до 20 масс.% фосфолипидов в расчете на общее количество липидов, более предпочтительно от 0,5 до 10 масс.%, более предпочтительно от 1 до 10 масс.%, еще более предпочтительно от 2 до 10 масс.%, еще более предпочтительно от 3 до 8 масс.% фосфолипидов в расчете на общее количество липидов.
Предпочтительно настоящая композиция содержит по меньшей мере 5 масс.% сфингомиелина в расчете на общее количество фосфолипидов, более предпочтительно по меньшей мере 10 масс.%, еще более предпочтительно по меньшей мере 15 масс.%, предпочтительно не более 60 масс.%.
Диетический холестерин
Настоящая композиция предпочтительно содержит холестерин. Настоящая композиция предпочтительно содержит по меньшей мере 0,01 масс.% холестерина в расчете на общее количество липидов, более предпочтительно по меньшей мере 0,02 масс.%, более предпочтительно по меньшей мере 0,04 масс.%, еще более предпочтительно по меньшей мере 0,1 масс.% в расчете на общее количество липидов. Поскольку эффекты снижения уровня холестерина в более позднем возрасте уже наблюдаются при отсутствии или очень низких уровнях холестерина, предпочтительно, чтобы количество холестерина не превышало 5 масс.% в расчете на общее количество липидов, более предпочтительно не превышало 2 масс.%, более предпочтительно не превышало 1 масс.% от общего количества липида, еще более предпочтительно не превышало 0,3 масс.% в расчете на общее количество липидов. В случае его присутствия, холестерин предпочтительно присутствует в фосфолипидном слое, покрывающем липидные глобулы.
Предпочтительными источниками для обеспечения фосфолипидами и/или холестерином являются яичные липиды, молочный жир, жир пахты и жир масляной сыворотки (такой, как жир бета-сыворотки). Предпочтительно фосфолипид и/или холестерин получают из коровьего молока. Предпочтительно фосфолипид и холестерин получают из одного и того же источника. Это будет увеличивать присутствие диетического холестерина в слое фосфолипида в конечном питательном продукте. Полученные из молока липиды включают липиды молока, липиды сливок, липиды масляной сыворотки, липиды молочной сыворотки, липиды сыра и/или липиды пахты, а также выделенные из них липиды. Липиды пахты, как правило, получают в процессе производства пахты. Липиды масляной сыворотки или липиды бета-сыворотки, как правило, получают в процессе производства безводного молочного жира из масла. Предпочтительно фосфолипиды, гликосфинголипиды и/или холестерин получают из молочных сливок. Композиция предпочтительно содержит фосфолипиды, гликосфинголипиды и/или холестерин из молока коров, кобыл, овец, коз, буйволиц, лошадей и верблюдиц. Наиболее предпочтительно использовать липидный экстракт, выделенный из коровьего молока. Преимуществом использования фосфолипидов из молочного жира является содержание мембран глобул молочного жира, которые больше напоминают ситуацию с человеческим молоком. Одновременное использование фосфолипидов, полученных из молока домашних животных, и триглицеридов, полученных из растительных липидов, позволяет производить покрытые липидные глобулы с покрытием, более напоминающим то, которое имеет место в человеческом молоке, и в то же время обеспечивает оптимальный профиль жирных кислот. Подходящими коммерчески доступными источниками молочных фосфолипидов, включая сфингомиелин и/или холестерин, являются BAEF, SM2, SM3 и SM4 порошки от Corman, Salibra от Glanbia и LacProdan MFGM-10 или PL20 от Arla. Предпочтительно источник молочных фосфолипидов содержит по меньшей мере 4 масс.% фосфолипидов в расчете на общее количество липидов, более предпочтительно от 7 до 75 масс.%, наиболее предпочтительно от 20 до 70 масс.% фосфолипидов в расчете на общее количество липидов. Предпочтительно массовое отношение фосфолипидов к белку превышает 0,10, более предпочтительно превышает 0,20, еще более предпочтительно превышает 0,3. Предпочтительно по меньшей мере 25 масс.%, более предпочтительно по меньшей мере 40 масс.%, наиболее предпочтительно по меньшей мере 75 масс.% фосфолипидов получены из молочных фосфолипидов.
Жирно-кислотный состав
В данном документе ЛК означает линолевую кислоту и/или ацильную цепь (18:2 n6); АЛК означает α-линоленовую кислоту и/или ацильную цепь (18:3 n3); ДЦПЖК означает длинноцепочечные полиненасыщенные жирные кислоты и/или ацильные цепи, содержащие по меньшей мере 20 атомов углерода в жирной ацильной цепи и с 2 или более ненасыщенными связями; ДГК означает докозагексаеновую кислоту и/или ацильную цепь (22:6, n3); ЭПК означает эйкозапентаеновую кислоту и/или ацильную цепь (20:5 n3); АРК означает арахидоновую кислоту и/или ацильную цепь (20:4 n6); ДПК означает докозапентаеновую кислоту и/или ацильную цепь (22:5 n3). Среднецепочечные жирные кислоты (СЦЖК) означают жирные кислоты и/или ацильные цепи с длиной цепи в 6, 8 или 10 атомов углерода.
ЛК предпочтительно присутствует в количестве, достаточном для того, чтобы способствовать здоровому росту и развитию, однако в количестве как можно более низком, чтобы предотвратить развитие ожирения в более позднем возрасте. Вследствие этого композиция предпочтительно содержит менее 15 масс.% ЛК в расчете на общее количество жирных кислот, предпочтительно от 5 до 14,5 масс.%, более предпочтительно от 6 до 10 масс.%. Предпочтительно композиция содержит более 5 масс.% ЛК от количества жирных кислот. Предпочтительно АЛК присутствует в количестве, достаточном для того, чтобы способствовать здоровому росту и развитию младенца. Вследствие этого настоящая композиция предпочтительно содержит по меньшей мере 1,0 масс.% АЛК в расчете на общее количество жирных кислот. Предпочтительно композиция содержит по меньшей мере 1,5 масс.% АЛК в расчете на общее количество жирных кислот, более предпочтительно по меньшей мере 2,0 масс.%. Предпочтительно композиция содержит менее 10 масс.% АЛК, более предпочтительно менее 5,0 масс.% в расчете на общее количество жирных кислот. Массовое отношение ЛК/АЛК должно быть хорошо сбалансированным, чтобы предотвратить ожирение и гипертриглицеридемию в более позднем возрасте, в то же время обеспечивая нормальный рост и развитие. Вследствие этого настоящая композиция предпочтительно имеет массовое отношение ЛК/АЛК от 2 до 15, более предпочтительно от 2 до 7, более предпочтительно от 4 до 7, более предпочтительно от 3 до 6, еще более предпочтительно от 4 до 5,5, еще более предпочтительно от 4 до 5.
Поскольку СЦЖК способствуют снижению уровня холестерина в крови, настоящая композиция предпочтительно содержит по меньшей мере 3 масс.% СЦЖК в расчете на общее количество жирных кислот, более предпочтительно по меньшей мере 10 масс.%, еще более предпочтительно по меньшей мере 15 масс.%. Предпочтительно настоящая композиция преимущественно содержит менее 50 масс.% СЦЖК в расчете на общее количество жирных кислот, более предпочтительно менее 40 масс.%, еще более предпочтительно менее 25 масс.%.
Предпочтительно настоящая композиция содержит n-3 ДЦПЖК, поскольку n-3 ДЦПЖК благотворно влияют на риск развития сердечнососудистых заболеваний и на жирно-кислотный состав мембран сосудов. Более предпочтительно настоящая композиция содержит ЭПК, ДПК и/или ДГК, еще более предпочтительно ДГК. Поскольку низкая концентрация ДГК, ДПК и/или ЭПК уже является эффективной и нормальный рост и развитие важны, содержание n-3 ДЦПЖК в настоящей композиции предпочтительно не превышает 15 масс.% от общего содержания жирных кислот, предпочтительно не превышает 10 масс.%, еще более предпочтительно не превышает 5 масс.%. Предпочтительно настоящая композиция содержит по меньшей мере 0,2 масс.%, предпочтительно по меньшей мере 0,5 масс.%, более предпочтительно по меньшей мере 0,75 масс.% n-3 ДЦПЖК от общего содержания жирных кислот. Предпочтительно настоящая композиция содержит по меньшей мере 0,2 масс.%, предпочтительно по меньшей мере 0,5 масс.%, более предпочтительно по меньшей мере 0,75 масс.% суммарно ДГК, ДПК и ЭПК от общего содержания жирных кислот.
Поскольку группа n-6 жирных кислот, особенно арахидоновая кислота (АРК) и ЛК как ее предшественник, противодействует группе n-3 жирных кислот, особенно ДГК и ЭПК, и АЛК как их предшественнику, настоящая композиция содержит относительно небольшое количество АРК. Содержание n-6 ДЦПЖК предпочтительно не превышает 5 масс.%, более предпочтительно не превышает 2,0 масс.%, более предпочтительно не превышает 0,75 масс.%, еще более предпочтительно не превышает 0,5 масс.% в расчете на общее количество жирных кислот. Поскольку АРК важна для оптимального функционирования мембран у детей, особенно мембран неврологических тканей, количество n-6 ДЦПЖК предпочтительно составляет по меньшей мере 0,02 масс.%, более предпочтительно по меньшей мере 0,05 масс.%, более предпочтительно по меньшей мере 0,1 масс.% в расчете на общее количество жирных кислот, более предпочтительно по меньшей мере 0,2 масс.%. Наличие АРК является преимуществом в композиции с низким содержанием ЛК, поскольку она устраняет дефицит ЛК. Наличие, предпочтительно, небольших количеств АРК полезно в питании младенцев в возрасте младше 6 месяцев, поскольку для этих младенцев детские молочные смеси, как правило, являются единственным источником питания.
Предпочтительно в дополнение к растительным липидам присутствует липид, выбранный из рыбьего жира (предпочтительно рыбьего жира из тунца) и масла одноклеточных организмов (например, масла из водорослей, микробного масла и грибкового масла). Эти источники масла подходят в качестве источников ДЦПЖК. Предпочтительно в качестве источника n-3 ДЦПЖК используют масло одноклеточных организмов, включая масло из водорослей и микробное масло, поскольку эти источники масла имеют низкое отношение ЭПК/ДГК. Таким образом, в одном варианте осуществления настоящая композиция дополнительно содержит по меньшей мере один липид, выбранный из группы, состоящей из рыбьего жира, морского масла, масла из водорослей, грибкового масла и микробного масла.
Усвояемый углеводный компонент
Настоящая питательная композиция предпочтительно содержит усвояемый углевод. Усвояемый углевод предпочтительно обеспечивает от 30 до 80% общего количества калорий в композиции. Предпочтительно усвояемый углевод обеспечивает от 40 до 60% общего количества калорий. Находящаяся в жидкой форме, например, в виде готовой к употреблению жидкости, композиция предпочтительно содержит от 3,0 до 30 г усвояемого углевода в 100 мл, более предпочтительно от 6,0 до 20, еще более предпочтительно от 7,0 до 10,0 г в 100 мл. В расчете на сухую массу настоящая композиция предпочтительно содержит от 20 до 80 масс.%, более предпочтительно от 40 до 65 масс.% усвояемых углеводов.
Предпочтительными источниками усвояемых углеводов являются лактоза, глюкоза, сахароза, фруктоза, галактоза, мальтоза, крахмал и мальтодекстрин. Лактоза является основным усвояемым углеводом в человеческом молоке. Настоящая композиция предпочтительно содержит лактозу. Настоящая композиция предпочтительно содержит усвояемый углевод, причем по меньшей мере 35 масс.%, более предпочтительно по меньшей мере 50 масс.%, более предпочтительно по меньшей мере 75 масс.%, еще более предпочтительно по меньшей мере 90 масс.%, наиболее предпочтительно по меньшей мере 95 масс.% усвояемого углевода составляет лактоза. В расчете на сухую массу настоящая композиция предпочтительно содержит по меньшей мере 25 масс.% лактозы, предпочтительно по меньшей мере 40 масс.%.
Неусвояемые углеводы
Предпочтительно настоящая питательная композиция содержит неусвояемые олигосахариды. Предпочтительно настоящая композиция содержит неусвояемые олигосахариды со степенью полимеризации (СП) от 2 до 250, более предпочтительно от 3 до 60. Неусвояемые олигосахариды, в качестве питательных волокон, могут оказывать благотворное влияние, снижая риск развития сердечнососудистых заболеваний.

Предпочтительно настоящая питательная композиция содержит фруктоолигосахариды, галактоолигосахариды и/или олигосахариды галактуроновой кислоты, более предпочтительно галактоолигосахариды, наиболее предпочтительно трансгалактоолигосахариды. В предпочтительном варианте осуществления композиция содержит смесь трансгалактоолигосахаридов и фруктоолигосахаридов. Подходящими неусвояемыми олигосахаридами являются, например, Vivinal GOS (Frieslandcampina DOMO), рафтилин HP или рафтилоза (Orafti). Трансгалактоолигосахарид является предпочтительным, поскольку он способен повышать чувствительность к инсулину.
Предпочтительно питательная композиция содержит от 80 мг до 2 г неусвояемых олигосахаридов в 100 мл, более предпочтительно от 150 мг до 1,50 г, еще более предпочтительно от 300 мг до 1 г в 100 мл. В расчете на сухую массу композиция предпочтительно содержит от 0,25 масс.% до 20 масс.%, более предпочтительно от 0,5 масс.% до 10 масс.%, еще более предпочтительно от 1,5 масс.% до 7,5 масс.%. Меньшее количество неусвояемых олигосахаридов будет менее эффективным для снижения риска сердечнососудистого заболевания, в то время как слишком большое количество приведет к побочным эффектам, таким как вздутие живота и дискомфорт в брюшной полости.
Белок
Настоящая питательная композиция предпочтительно содержит белки. Белковый компонент предпочтительно обеспечивает от 5 до 15% общего количества калорий. Предпочтительно настоящая композиция содержит белковый компонент, который обеспечивает от 6 до 12% общего количества калорий. Более предпочтительно белок присутствует в композиции в количестве не более 9% в пересчете на калории, более предпочтительно композиция содержит от 7,2 до 8,0% белка в расчете на общее количество калорий, еще более предпочтительно от 7,3 до 7,7% в расчете на общее количество калорий. Человеческое молоко содержит меньше белка в расчете на общее количество калорий, чем коровье молоко. Концентрация белка в питательной композиции определяется суммой белков, пептидов и свободных аминокислот. В расчете на сухую массу композиция предпочтительно содержит не более 12 масс.% белка, более предпочтительно от 9,6 до 12 масс.%, еще более предпочтительно от 10 до 11 масс.%. В виде готового к употреблению жидкого продукта композиция предпочтительно содержит не более 1,5 г белка в 100 мл, более предпочтительно от 1,2 до 1,5 г, еще более предпочтительно от 1,25 до 1,35 г.
Источник белка следует выбирать таким образом, чтобы были соблюдены минимальные требования в отношении содержания незаменимых аминокислот и был обеспечен достаточный рост. Вследствие этого предпочтительными являются источники белка на основе белков коровьего молока, такие как молочная сыворотка, казеин и их смеси, а также белки сои, картофеля или гороха. В случае использования белков сыворотки, источник белка предпочтительно является кислой сывороткой или сладкой сывороткой, изолятом сывороточных белков или их смесями и может содержать α-лактальбумин и β-лактоглобулин. Более предпочтительно источником белка является кислая сыворотка или сладкая сыворотка, из которой удален казеин-глико-макропептид (КГМП). Предпочтительно композиция содержит по меньшей мере 3 масс.% казеина в расчете на сухую массу. Предпочтительно казеин является интактным и/или негидролизованным. Для настоящего изобретения понятие «белок» включает пептиды и свободные аминокислоты.
Другое
Предпочтительно настоящая питательная композиция особенно подходит для обеспечения ежедневных питательных потребностей человека в возрасте до 36 месяцев, особенно младенца в возрасте до 24 месяцев, еще более предпочтительно младенца в возрасте до 18 месяцев, наиболее предпочтительно в возрасте до 12 месяцев. Таким образом, питательная композиция предназначена для кормления или используется для кормления субъекта-человека. Настоящая композиция предпочтительно содержит липид, белок и усвояемый углевод, при этом липид предпочтительно обеспечивает от 30 до 60% общего количества калорий, белок предпочтительно обеспечивает от 5 до 20%, более предпочтительно от 5 до 15 масс.% общего количества калорий и усвояемый углевод предпочтительно обеспечивает от 25 до 75% общего количества калорий. Предпочтительно настоящая питательная композиция содержит липид, обеспечивающий от 35 до 50% общего количества калорий, белок, обеспечивающий от 6 до 12% общего количества калорий, и усвояемый углевод, обеспечивающий от 40 до 60% общего количества калорий. В одном варианте осуществления белок обеспечивает от 5 до 9% общего количества калорий. Общее количество калорий определяется суммой калорий, полученных из белка, липидов и усвояемых углеводов.
Настоящая композиция не является человеческим грудным молоком. Настоящая композиция не является (сырым) молоком коровы или (сырым) молоком другого млекопитающего. Настоящая композиция содержит растительные липиды. Композиция по изобретению предпочтительно содержит другие ингредиенты, такие как витамины и минералы, в соответствии с международными нормами для детских молочных смесей.
В одном варианте осуществления питательная композиция по изобретению или питательная композиция для применения по изобретению представляет собой молочную смесь для недоношенных детей, молочную смесь первого уровня, молочную смесь второго уровня или молочную смесь третьего уровня.
В целях удовлетворения потребности младенца в калориях композиция предпочтительно содержит от 50 до 200 ккал/100 мл жидкости, более предпочтительно от 60 до 90 ккал/100 мл жидкости, еще более предпочтительно от 60 до 75 ккал/100 мл жидкости. Это калорийность обеспечивает оптимальное соотношение между водой и потребляемыми калориями. Осмолярность настоящей композиции предпочтительно составляет от 150 до 420 мОсмоль/л, более предпочтительно от 260 до 320 мОсмоль/л.
-1
Предпочтительно композиция находится в жидкой форме и имеет вязкость ниже 35 мПа·с, более предпочтительно ниже 6 мПа·с, по результатам измерения при помощи вискозиметра Брукфильда при 20°C со скоростью сдвига 100 с. В одном варианте осуществления настоящая композиция представляет собой порошок. Соответственно, композиция находится в порошковой форме, которая может быть растворен в воде или в другой пищевой водной жидкости с получением жидкой формы, или в форме жидкого концентрата, который должен быть разбавлен водой. Было обнаружено, что липидные глобулы сохраняют свой размер и покрытие при растворении влагосодержания.
Если композиция находится в жидкой форме, предпочтительный ежесуточно вводимый объем находится в диапазоне примерно от 80 до 2500 мл, более предпочтительно примерно от 450 до 1000 мл в сутки.
Применение
Авторы изобретения неожиданно обнаружили, что, когда мышей в младенческом и детском возрасте кормили пищевой композицией, содержащей крупные липидные глобулы, то наблюдали особое и существенное влияние на уровни холестерина в крови в более позднем возрасте по сравнению с мышами, которых в младенческом и детском возрасте кормили пищевой композицией, имеющей сходный состав по жирным кислотам, которые, однако, находились в форме мелких липидных глобул. Начиная со дня 42, обе группы животных переводили на диету западного стиля с высоким содержанием жира и холестерина. Неожиданно, в день 98, который является моментом времени, соответствующим периоду ранней зрелости у человека, мыши, которые ранее питались пищевой композицией по настоящему изобретению до перехода на диету западного стиля, имели более низкий уровень холестерина в крови, чем мыши, которые получали контрольную композицию с мелкими липидными глобулами. В случае если присутствовали фосфолипиды и предпочтительно также холестерин, они преимущественно присутствовали в виде покрытия на липидных глобулах. Если это было не так, то в более позднем возрасте эффект на уровни холестерина в крови пропадал. Аналогичный эксперимент, проведенный на крысах, продемонстрировал такие же результаты и, кроме того, свидетельствовал о том, что в день 42, сразу же после введения в действие диеты и в момент времени, соответствующий возрасту детства у человека, эти эффекты на уровень холестерина в крови еще не проявлялись. Эффект снижения уровня холестерина, таким образом, в основном определялся эффектами, возникающими в процессе применения диеты западного стиля, то есть, тем, как метаболизм справляется с диетой западного стиля с высоким содержанием жира и холестерина. Взаимно однозначной корреляции с массой жировой ткани или с относительной массой жировой ткани, или с массой висцеральной жировой ткани не наблюдали. Так же происходит и у людей, когда в некоторых случаях у тучных субъектов может и не быть гиперхолестеринемии, а с другой стороны, не страдающие ожирением субъекты могут иметь гиперхолестеринемию. См., например, статью Rigaud et al. (2009) Diabetes Metab. 35: 57-63, в которой описаны случаи высоких уровней холестерина у пациентов с нервной анорексией. Также не наблюдали взаимно однозначной корреляции с уровнями триглицеридов в крови.
Настоящую композицию вводят субъектам-людям на протяжении первых 36 месяцев жизни. Этот период от рождения до детства является критическим периодом, в течение которого питание программирует метаболизм и композицию тела, которое в это время продолжает развиваться, в отношении его функций/параметров в более позднем возрасте. Настоящую композицию преимущественно вводят человеку в возрасте от 0 до 24 месяцев, более предпочтительно человеку в возрасте от 0 до 18 месяцев, еще более предпочтительно человеку в возрасте от 0 до 12 месяцев, наиболее предпочтительно человеку в возрасте от 0 до 6 месяцев. Настоящее изобретение, в частности, направлено на снижение уровней холестерина в крови в более позднем возрасте и не относится к лечению с целью снижения существующих высоких уровней холестерина в крови. Предпочтительно композицию следует применять к младенцам, имеющим массу тела, соответствующую гестационному возрасту.
Настоящую композицию предпочтительно вводят перорально младенцу. Настоящее изобретение также направлено на предотвращение гиперхолестеринемии и/или гиперлипопротеинемии в возрасте старше 36 месяцев. Повышенные уровни холестерина в крови, гиперхолестеринемия и/или гиперлипопротеинемия являются важными факторами риска и вызывают сосудистые заболевания. В настоящем изобретении уровни холестерина в крови, уровни ЛПВП, ЛПНП или ЛПОНП в крови также относятся к уровням холестерина, ЛПВП, ЛПНП или ЛПОНП в плазме. Иными словами, если заявлено, что питательные композиции оказывают влияние на уровни холестерина, ЛПВП, ЛПНП или ЛПОНП в плазме, сюда входит и влияние на уровни холестерина, ЛПВП, ЛПНП или ЛПОНП в крови.
Таким образом, в одном варианте осуществления настоящий способ предназначен для профилактики сосудистых заболеваний, выбранных из группы, состоящей из атеросклероза, сердечнососудистого заболевания, цереброваскулярного заболевания, ишемии, заболевания периферических сосудов и заболевания почечных артерий, особенно атеросклероза, у субъекта-человека, когда указанный субъект-человек находится в возрасте старше 36 месяцев, предпочтительно, когда указанный субъект-человек находится в возрасте старше 5 лет, конкретно, старше 13 лет, более конкретно, старше 17 лет. Настоящее изобретение также направлено на улучшение сердечнососудистой функции в более позднем возрасте. Настоящее изобретение также направлено на снижение уровней холестерина в крови и/или на снижение уровней ЛПНП и/или ЛПОНП в крови у субъекта-человека, когда указанный субъект-человек находится в возрасте старше 36 месяцев. В одном варианте осуществления настоящий способ предназначен для снижения уровней холестерина в крови и/или для снижения уровней ЛПНП и/или ЛПОНП в крови у субъекта-человека, когда указанный субъект-человек находится в возрасте старше 36 месяцев, предпочтительно, когда указанный субъект-человек находится в возрасте старше 5 лет, конкретно, старше 13 лет, более конкретно, старше 17 лет. Снижение уровней холестерина, уровней ЛПОНП и/или ЛПНП в крови означает пониженную концентрацию по сравнению с концентрацией у субъектов, которых в младенчестве искусственно вскармливали стандартными детскими молочными смесями. В одном варианте осуществления снижение уровней холестерина, уровней ЛПОНП и/или ЛПНП в крови означает пониженную концентрацию по сравнению с концентрацией у субъектов, которых в младенчестве искусственно вскармливали стандартными молочными смесями, и сходную с концентрацией у субъектов, которые были на грудном вскармливании в течение по меньшей мере 3 месяцев.
«Более поздний возраст» означает возраст, превышающий возраст, в котором применяется данная диета, предпочтительно превышающий указанный возраст на по меньшей мере один год.
У недоношенных и/или маленьких для гестационного возраста младенцев часто случается задержка роста в раннем возрасте. Это, как правило, рассматривается как фактор риска для высоких уровней холестерина и сосудистых заболеваний в более позднем возрасте. Поэтому композицию по настоящему изобретению преимущественно используют в случаях недоношенных младенцев или маленьких для гестационного возраста (МГВ) младенцев, в частности, для кормления недоношенных младенцев или маленьких для гестационного возраста младенцев. Недоношенным или преждевременно рожденным младенцем является младенец, рожденный до окончания стандартного периода беременности, ранее или на сроке 37 недель беременности матери, то есть, ранее или на сроке 37 недель от начала последнего менструального периода у матери. МГВ детьми являются дети, чей вес при рождении лежит ниже 10-го процентиля для этого гестационного возраста. Недоношенные и/или МГВ младенцы включают младенцев с низкой массой тела при рождении (НМТ младенцы), младенцев с очень низкой массой тела при рождении (ОНМТ младенцы) и младенцев с экстремально низкой массой тела при рождении (ЭНМТ младенцы). НМТ младенцев определяют как младенцев с массой тела менее 2500 г. ОНМТ младенцев определяют как младенцев с массой тела менее 1500 г и ЭНМТ младенцев определяют как младенцев с массой тела менее 1000 г.
В данном документе и в относящейся к нему формуле изобретения глагол «включать» и его спряжения используют в не ограничивающем смысле для указания на то, что наименования, следующие за этим словом, включены, однако наименования, не упомянутые конкретно, не исключены. Кроме того, употребление единственного числа применительно к элементу не исключает возможности того, что присутствует более чем один элемент, если из контекста четко не следует, что присутствует один и только один элемент. Таким образом, единственное число существительного, как правило, означает «по меньшей мере один».
ПРИМЕРЫ
Пример 1: Программирующий эффект архитектуры липидных глобул на уровни холестерина в плазме в более позднем возрасте
Детские молочные смеси готовили как в примере 1B в WO 2010/0027258.
1) контрольная ДМС: данная диета содержала 255 г липида на кг сухой массы. Липидные глобулы были мелкими. Полярные липиды не добавляли. Липиды соответствовали примерно 47%, усвояемые углеводы примерно 45% и белок примерно 8% от общего количества калорий.
2) ДМС по настоящему изобретению, содержащая крупные липидные глобулы: Полярные липиды не добавляли.
3) ДМС по настоящему изобретению: Эта диета отличалась от диеты 2 тем, что она содержала фосфолипиды, которые добавляли к порошкообразной ДМС методом сухого смешивания. Фосфолипиды не присутствовали в виде покрытия вокруг липидных глобул.
4) ДМС по настоящему изобретению: Эта диета отличалась от диеты 3 тем, что фосфолипиды присутствовали в виде покрытия вокруг липидных глобул.
Различий в размерах липидных глобул достигали за счет различий в давлении гомогенизации, как описано в примере 1 в WO 2010/0027258. Давление гомогенизации составляло 10/5 для диет 2-4 и 550/50 для диеты 1. Объемный модовый диаметр липидных глобул диеты 1 составлял 0,27 мкм. Менее 10 об.% имели диаметр от 2 до 12 мкм. Объемный модовый диаметр липидных глобул в диетах 2-4 составлял 3,0 или более. Более 50 об.% имели диаметр от 2 до 12 мкм. Источником фосфолипидов для диет 2-4 служил SM2 порошок от Corman, который использовали в конечной концентрации примерно 1,3% фосфолипида в расчете на общее количество липидов, и примерно 0,045 масс.% холестерина в расчете на общее количество липидов. Количество сфингомиелина составляло примерно 20 масс.% в расчете на общее количество фосфолипидов.
Жирно-кислотный состав экспериментальных диет был очень сходным в отношении насыщенных, мононенасыщенных, полиненасыщенных и длинноцепочечных полиненасыщенных жирных кислот, с рассчитанным содержанием линолевой кислоты (ЛК) примерно 14 масс.% в расчете на общее количество жирных кислот, и альфа-линоленовой кислоты (АЛК) примерно 2,6 масс.% в расчете на общее количество жирных кислот и с массовым отношением ЛК/АЛК примерно 5,4. Количество ДГК составляло 0,2 масс.% в расчете на общее количество жирных кислот во всех 4 диетах, и количество АРК составляло примерно 0,35 масс.% в расчете на общее количество жирных кислот. Уровни ЭПК и ДПК составляли примерно 0,04 и 0,01 масс.% в расчете на общее количество жирных кислот.
Затем готовили диеты для грызунов, содержащие 282 г ДМС 1, 2, 3, 4 на кг. Остальная часть диеты представляла собой белок, углеводы и пищевые волокна из AIN-93 G. Все липиды (примерно 72 г на кг диеты для грызунов), имеющиеся в диете, были из ДМС.
Потомство самок мышей C57/BL6 отлучали от матерей, начиная со дня 15. Выкармливание экспериментальными диетами после отлучения продолжали до дня 42 (n=12 на каждую диету). С дня 42 до дня 98 всех детенышей кормили одинаковой диетой на основе диеты AIN-93 G со скорректированной липидной фракцией (содержащей 20 масс.% липида, из которого 50 масс.% составляло сало и 1% составлял холестерин, в расчете на общее количество липидов), с показателем 4520 кДж на 100 г, содержащей 52 масс.% усвояемых углеводов, 4,75 масс.% пищевых волокон и 17,9 масс.% белка, что является типичным для диеты западного стиля, диеты с высоким содержанием жира и высоким содержанием холестерина. В диете западного стиля массовое отношение ЛК/АЛК составляло 9,15. ДЦПЖК отсутствовали.
2
2
В возрасте 98 дней брали образец крови и уровни ЛПВП (липопротеина высокой плотности), ЛПОНП (липопротеина очень низкой плотности), ЛПНП (липопротеина низкой плотности), а также уровни общего холестерина определяли в плазме крови методом, известным в данной области. Вскоре после лишения животных пищи получали образцы крови сердечной пункцией под общим наркозом (изофлуран/NO/O). Образцы крови собирали в покрытые K3ЭДТА 1-мл микропробирки (Greiner Bio-one, Germany), центрифугировали в течение 15 минут при 4°C (3500 об/мин, Biofuge fresco, Heraeus), и образцы плазмы и эритроцитов хранили при -80°C до дальнейшего анализа. Уровни холестерина в плазме измеряли с помощью колориметрического анализа после ферментативного гидролиза холестеринэстеров (общий), в присутствии избирательного детергента (ЛПВП) и после осаждения (ЛПНП) для получения нескольких холестериновых фракций (Reinier de Graaf laboratory, Delft, The Netherlands). Уровень фракции ЛПОНП рассчитывали, исходя из уровней общего, ЛПНП и ЛПВП холестерина.
Массу тела измеряли, и композицию тела (% жировой массы) определяли при помощи DEXA сканирования. Собирали жировую ткань, и сумму эпидидимального жира (ЭЖ), забрюшинного жира (ЗЖ) и периренального жира (ПР) принимали за количество висцерального жира.
Таблица 1Уровни в крови общего холестерина (ммоль/л) и жировая масса в день 98 мышей, потреблявших различные диеты с дня 15 до дня 42
Диета
Холестерин
Жир, %
Масса висцерального жира (г)
1
мелкие,без ФЛ
среднееS.E.
3,570,19
23,11,16
1,430,11
2
крупные,без ФЛ
среднееS.E.
3,130,27
24,171,49
1,380,17
3
крупныедобавлен ФЛ
среднееS.E.
3,400,30
22,351,31
1,300,15
4
крупные,ФЛ покрытие
среднееS.E.
3,100,20
19,771,23
1,140,16
Результаты приведены в таблице 1. Удивительно, но уровень общего холестерина в крови в более позднем возрасте отличался, если присутствовавшие в диете липидные глобулы, вводимые в раннем возрасте, были разного размера. Если в диете присутствовали мелкие липидные глобулы, уровень общего холестерина в крови в более позднем возрасте был повышен. Если в диете присутствовали крупные липидные глобулы, уровень общего холестерина в крови в более позднем возрасте был преимущественно понижен. Этот понижающий уровень эффект был аналогичным, если фосфолипиды присутствовали в диете в виде покрытия, окружающего липидные глобулы. Однако если фосфолипиды были добавлены путем сухого смешивания, наблюдали меньшее снижение уровня общего холестерина в крови в более позднем возрасте. Таким образом, если фосфолипиды должны быть добавлены к диете (например, потому, что они уменьшают ожирение в более позднем возрасте), они должны присутствовать в виде покрытия, окружающего липидные глобулы. Такие же эффекты наблюдали для ЛПВП, ЛПНП и ЛПОНП с очень небольшим совокупным влиянием на отношение общий холестерин/ЛПВП или ЛПНП/ЛПВП (данные не представлены). Снижение уровня общего холестерина и ЛПНП, а также ЛПОНП, является наиболее прогностическим параметром для снижения риска развития атеросклероза и других сосудистых заболеваний. Мыши, потреблявшие диету 4, имели самую низкую относительную массу жировой ткани (по отношению к общей массе тела) в более позднем возрасте, так что не наблюдалось никакой четкой взаимосвязи между уровнями холестерина в крови и относительной массой жировой ткани в более позднем возрасте. Мыши, потреблявшие диету 3, имели более низкую относительную массу жировой ткани (по отношению к массе тела) в более позднем возрасте, чем мыши, потреблявшие диету 2. Однако для уровней холестерина наблюдался обратный эффект, вновь указывающий на то, что не всегда имеет место корреляция между массой жировой ткани, количеством висцерального жира и уровнем холестерина.
В эксперименте на мышах, в котором прямые диетические эффекты аналогичных диет из примера 1 изучали только в день 42, удалось продемонстрировать, что уровни холестерина вследствие прямых диетических эффектов были слегка выше у животных, потреблявших диету 4, по сравнению с животными, потреблявшими диету 2. С другой стороны, животные, потреблявшие диету 3, имели слегка пониженный уровень холестерина. В то же время, уровни триглицеридов были слегка повышены в случае диеты 3 и сравнимы в случае диет 2 и 4 (данные не представлены).
Пример 2: Программирующий эффект архитектуры липидных глобул на уровни холестерина в плазме в более позднем возрасте
Эксперимент из примера 1 повторяли с диетами, аналогичными диетам 1 и 4 из примера 1. Вместо мышей использовали самцов крыс Wistar. Вместо дня 98 кровь анализировали и в день 42 (прямой эффект диеты), и в день 130 (в более позднем возрасте, программирующий эффект). Количество фосфолипида в диете 4 составляло 1,6 масс.% в расчете на общее количество жира (0,11 масс.% в диете 1). Количество холестерина составляло 0,03 масс.% в диете 4 в расчете на общее количество жира. Линолевая кислота и альфа-линоленовая кислота в диетах 1 и 4 были такими же, как в примере 1. Объемный модовый диаметр липидных глобул диеты 1 составлял 0,5 мкм. Менее 10 об.% имели диаметр от 2 до 12 мкм. Объемный модовый диаметр липидных глобул в диете 4 составлял 1,7 мкм. Более 45 об.% имели диаметр от 2 до 12 мкм.
Таблица 2Уровни общего холестерина и уровни триглицеридов в крови (ммоль/л) в дни 42 и 130 у крыс, потреблявших различные диеты со дня 15 до дня 42
Общий холестерин
ТГ
Диета 1
день 42
среднееS.E.
2,780,13
1,280,37
день 130
среднееS.E.
3,280,36
2,410,41
Диета 4
день 42
среднееS.E.
2,830,18
0,930,11
день 130
среднееS.E.
3,020,46
1,760,35
Результаты приведены в таблице 2. Как видно из результатов для дня 42, представляющих прямые эффекты диеты, различия в уровнях холестерина в крови были очень небольшими. Наблюдали небольшое статистически незначимое повышение в случае диеты 4. Результаты для дня 130, представляющие программирующие эффекты в более позднем возрасте, демонстрировали более выраженный эффект, аналогичный эффекту в эксперименте 1, заключающийся в снижении уровня общего холестерина в крови; уровни триглицеридов в крови, с другой стороны, были снижены как непосредственно в день 42, так и в более позднем возрасте у крыс, потреблявших диету 4, диету по настоящему изобретению.