Идентификация продуктов разложения алкилнитрозомочевин различного строения методом газожидкостной хроматографии

56

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

MMLV PT kit («Евроген») по методике производителя. Уровень экспрессии генов sod2, cat и txn определяли методом ПЦР в реальном времени с помощью qPCRmix-HS SYBR («Евроген») согласно методике производителя. Для инги-бирования функциир53 использовали -пифитрин.

Результаты. Установлено, что исследуемые соединения вызывают накопление белка р53 в ядрах клеток часов, при этом также повышается экспрессия гена р21 — прямой мишени белка р53. Это говорит о р53-зависимом механизме действия исследуемых комплексов. Установлено, что исследуемые соединения увеличивают экспрессию генов АОС sod2, cat, а также гена txn. Наиболее выраженный эффект наблюдается при действии комплекса ВС-131. Установлено, что а-пифитрин подавляет транслокацию белка р53 из цитоплазмы в ядро и тем самым может инги-бировать р53-зависимую транскрипцию генов. Использование а-пифитрина заметно снижало накопление белка р53 в ядрах клеток, а также подавляло экспрессию гена р21 до уровня контроля. Аналогичное снижение уровня экспрессии до контрольного уровня при использовании а-пифитрина наблюдали для изученных генов АОС.

Заключение. Установлено, что цисплатин и комплекс ВС-131, вызывая накопление белка р53 в ядрах, повышают экспрессию генов АОС, при этом а-пифитрин снижает как эффективность транслокации белка р53 в ядро, так и экспрессию генов p21, sod2, cat и txn. Полученные результаты говорят об участии опухолевого супрессора р53 в регуляции АОС на уровне экспрессии генов.

В.В. Мусияк, М.Г. Первова, Т.В. Матвеева, Г.Л. Левит, В.П. Краснов

ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПРОДУКТОВ РАЗЛОЖЕНИЯ АЛКИЛНИТРОЗОМОЧЕВИН РАЗЛИЧНОГО СТРОЕНИЯ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского УрО РАН, Екатеринбург, Россия

Введение. Противоопухолевое действие алкилнитро-зомочевин (АНМ) обусловлено их способностью к гидролитическому разложению в условиях организма с образованием активных алкилирующих и карбамоилирующих частиц, вступающих во взаимодействие с фрагментами ДНК опухолевой клетки. В связи с этим важной задачей представляется установление механизма разложения АНМ, в частности применяющихся в клинической практике препаратов кармустин и лизомустин, а также нового препарата ормустин.

Цель исследования — идентификация летучих продуктов гидролитического разложения противоопухолевых препаратов кармустин, лизомустин, лрмустин, протекающего в условиях, близких к физиологическим.

Материалы и методы. Гидролитическое разложение активных фармацевтических субстанций противоопухолевых препаратов кармустин (1,3-бис (2-хлорэтил) — 1-ни-трозомочевина), лизомустин (смесь №-нитрозо-№-[(2-хлорэтил) — карбамоил] -L-лизина и Ne- [(2-хлорэ-тил) — N-нитрозокарбамоил] -L-лизина) и ормустин (смесь Nd-нитрозо-Nd- [(2-хлорэтил) карбамоил] -L-ор-нитина и Nd- [(2-хлорэтил) — N-нитрозокарбамоил] -L-

орнитина), а также индивидуальных изомеров положения нитрозогруппы, входящих в состав препаратов лизомустин и ормустин: №-нитрозо-№- [(2-хлорэтил) карбамоил] лизина и №-нитрозо-№- [(2-хлорэтил) — карбамоил] орнитина проводили в условиях, близких к физиологическим (температура 37 °С, трис-буфер, рН 7,1). Методом газожидкостной хроматографии проведен парофазный анализ состава реакционной смеси, а также исследован состав полученного на ее основе эфирного экстракта.

Результаты. Показано, что при разложении кармусти-на происходит образование винилхлорида, ацетальдегида,

1.2-дихлорэтана, 2-хлорэтанола, 2-хлорэтилизоцианата,

1.3-бис- (2-хлорэтил) мочевины, что согласуется с литературными данными. При разложении лизомустина и ормус-тина установлено образование винилхлорида, ацетальде-гида, 1,2-дихлорэтана, 1,3-бис- (2-хлорэтил) мочевины. Также при разложении ормустина помимо указанных продуктов зафиксировано образование пропена. Следует отметить, что при разложении индивидуального №-нитрозо-№- [(2-хлорэтил) карбамоил] ^-лизина наблюдали образование только 1,3-бис- (2-хлорэтил) мочевины и винилхлорида, а при разложении №-нитрозо-№- [(2-хлорэ-тил) карбамоил] ^-орнитина — 1,3-бис- (2-хлорэтил) мочевины и пропена.

Заключение. Согласно полученным данным, разложение лизомустина и ормустина происходит, так же как и кар-мустина, через образование промежуточных алкилдиазо-гидроксидов и алкилизоцианатов. Образование пропена при разложении ормустина и №-нитрозо-№- [(2-хлорэ-тил) карбамоил] ^-орнитина, по видимому, связано с протекающим в условиях реакции превращением 5- (2-амино-1-карбоксипентил) карбокатиона. Образование винилхлорида при разложении №-нитрозо-№- [(2-хлорэ-тил) карбамоил] ^-лизина, вероятно, указывает на протекание в реакционной смеси процесса перенитрозирования.

Р.Д. Мустафаев, Г.В. Тихов, Р. Ч. Муршудли МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ БРЮШИНЫ ПРИ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ САНАЦИИ

ФГБУ«Государственный научный центр лазерной медицины ФМБА России», Москва, Россия

Введение. Одним из наиболее важных и ответственных этапов при оперативных вмешательствах, выполняемых в условиях перитонита, является адекватная санация брюшной полости. Развитие фотодинамической терапии (ФДТ) и успешное внедрение данной методики в клиническую практику позволяют осуществить попытку изучения возможности применения ФДТ для лечения распространенного перитонита.

Цель исследования — изучить и описать динамику морфологических изменений в брюшине у лабораторных животных с острым перитонитом после проведения сеансов ФДТ

Материалы и методы. В работе использованы 96 крыс-самцов линии Вистар массой тела 200—250 г. Для создания модели калового перитонита воспользовались модифицированной методикой В.А. Лазаренко и соавт., основанной на использовании профильтрованной 10 % каловой взвеси в дозе 0,5 мл на 100 г. На 3-и сутки животных во всех груп-

Спецвыпуск / том 16 / 2017

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ