БИЦИКЛИЧЕСКИЕ ГЕТЕРОАРИЛЬНЫЕ ПРОИЗВОДНЫЕ В КАЧЕСТВЕ СТИМУЛЯТОРОВ CFTR
BICYCLIC HETEROARYL DERIVATIVES AS CFTR STIMULATORS

Область техники, к которой относится изобретние
Настоящее изобретение относится к низкомолекулярным стимуляторам регулятора трансмембранной проводимости при муковисцидозе (CFTR). Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим указанные стимуляторы, необязательно в сочетании с дополнительными терапевтическими средствами, и к способам стимуляции CFTR у млекопитающих, включая людей, путем введения низкомолекулярных стимуляторов CFTR. Настоящее изобретение также относится к лечению муковисцидоза и других нарушений у млекопитающих, включая людей, стимуляторами CFTR. Более конкретно, настоящее изобретение относится к производным 1,3-двузамещенного 1Н-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амина, 5,7-двузамещенногопирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина или 5,7-двузамещенного имидазо[5,1-f][1,2,4]триазин-4-амина, применимым для лечения муковисцидоза (CF), астмы, бронхоэктаза, хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), запора, сахарного диабета, сухого кератоконъюктивита, панкреатита, риносинусита, синдрома Шегрена и других заболеваний, ассоциированных с CFTR.
ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ
et al
Муковисцидоз (CF) представляет собой наиболее широко распространенное летальное генетическое заболевание, поражающее представителей европеоидной расы. CF представляет собой аутосомно рецессивное заболевание с частотой возникновения между 1 на 2000 и 1 на 3000 живорожденных (Cutting, G.R., Accurso, F., Ramsey, B.W., and Welsh, M.J., Online Metabolic & Molecular Bases of Inherited Disease, McGraw-Hill, 2013). Во всем мире от этого заболевания страдают более чем 70000 человек, из них около 33000 в Соединенных Штатах Америки (www.cff.org/What-is-CF/About-Cystic-Fibrosis/). Отличительными признаками CF является чрезмерная секреция слизи и нарушенное выведение слизи, приводящее к обструкции, инфекции и воспалению в дыхательных путях; недостаточность поджелудочной железы; и повышенная концентрация хлорида в поте. CF представляет собой мультисистемное заболевание, поражающее легкие, поджелудочную железу и желудочно-кишечный тракт, гепатобилиарную систему и репродуктивный тракт (R.D. Coakley ., in Cystic Fibrosis, Eds. Hodson, M., Geddes, D., and Bush, A., Edward Arnold, Third Ed., 2007, pp. 59-68).
Для большинства пациентов существует тяжелое бремя забот по проведению поддерживающей терапии, которая не устраняет основную причину заболевания. Поддерживающая терапия включает в себя методики физической очистки дыхательных путей, ингаляции лекарственных средств (муколитики, антибиотики и гипертонический солевой раствор), пероральные противовоспалительные лекарства, заместители ферментов поджелудочной железы и питательные добавки (Cystic Fibrosis Foundation Patient Registry 2011 Annual Data Report to the Center Directors, Cystic Fibrosis Foundation, Bethesda, Maryland, 2012). Средний возраст выживаемости для пациентов с муковисцидозом приходится на четвертое десятилетие жизни.
Муковисцидоз обусловлен мутациями в гене CFTR (регулятор трансмембранной проводимости при муковисцидозе), ионного канала, обнаруженного в эпителии, а также в других тканях. CFTR находится на апикальной мембране эпителиальных клеток в дыхательных путях, кишечнике, поджелудочной железе и потовых железах (G.R. Cutting, Accurso, F., Ramsey, B.W., and Welsh, M.J., Online Metabolic & Molecular Bases of Inherited Disease, McGraw-Hill, 2013). Мутации в CFTR классифицируют на шесть типов Welsh, M.J., and Smith, A.E., Cell, 1993, 73, 1251-1254 и Sloane, P.A., and Rowe, S.M., Curr. Opin. Pulm. Med., 2010, 16, 591-597): 1) преждевременная терминация, обусловленная делецией, нонсенс-мутацией или мутацией со сдвигом рамки считывания, 2) дефектная миграция из эндоплазматического ретикулума вследствие некорректного фолдинга, 3) некорректное открытие канала, 4) сниженная проводимость вследствие изменений в поре канала, 5) сниженное формирование канала вследствие нарушений сплайсинга, и 6) увеличенный эндоцитоз через плазматическую мембрану.
et al.,
Известно, что около 2000 различных мутаций в CFTR вызывают CF. Делеция Phe508 в CFTR (F508del) встречается приблизительно в 70% CFTR аллелей (Bobadilla, J. L. Human Mutation, 2002, 19, 575-606). Приблизительно 50% пациентов гомозиготны по F508del и ~40% являются гетерозиготами, так что по меньшей мере одна копия F508del присутствует приблизительно у 90% пациентов. G551D представляет собой третью наиболее распространенную мутацию и присутствует приблизительно у 4% пациентов (Cystic Fibrosis Foundation Patient Registry 2011 Annual Data Report to the Center Directors, Cystic Fibrosis Foundation, Bethesda, Maryland, 2012).
et al
et al
Мутация F508del вызывает утрату функции CFTR в связи со сниженной плотностью канала одновременно с некорректным открытием канала. Плотность канала на апикальной мембране снижена вследствие неправильного фолдинга белка. Неправильно свернутый CFTR распознается клеточными механизмами контроля качества и подвергается распаду (Ward, C.L. and Kopito, R.R., J. Biol. Chem., 1994, 269, 25710-25718). Функция F508del дополнительно снижается, поскольку он обладает существенно сниженной вероятностью открытия канала (дефект открытия канала) (Dalemans, W. ., Nature, 1991, 354, 526-528). Мутация G551D приводит к белку с нормальным фолдингом, но с нарушенным открытием канала (Illek, B. ., Am. J. Physiol., 1999, 277, C833-C839).
et al
et al
et al
Было показано, что малые молекулы, называемые «корректорами», восстанавливают дефект фолдинга/миграции F508del CFTR и увеличивают плотность CFTR каналов в плазматической мембране (Pedemonte, N. ., J. Clin. Invest., 2005, 115, 2564-2571, Van Goor, F. ., Am. J. Physiol. Lung Cell. Mol. Physiol., 2006, 290, L1117-1130, Van Goor, F. ., Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 2011, 108, 18843-18848). «Стимуляторы» представляют собой малые молекулы, которые увеличивают вероятность открытия канала мутантного CFTR, восстанавливая дефект открытия канала. Считается, что фармакологическое восстановление F508del требует по меньшей мере корректора и стимулятора для устранения дефектов фолдинга и открытия канала, тогда как для восстановления G551D нужен только стимулятор.

1
et al
et al
Kalydeco (ивакафтор, VX-770) представляет собой представленный на рынке стимулятор, который улучшает характеристики открытия канала G551D. У пациентов с G551D он существенно улучшал легочную функцию (расчетный процент FEV достигал 10-13%), позволял набрать вес и снижал частоту легочных рецидивов (Ramsey, B. W. ., New Eng. J. Med., 2011, 365, 1663-1672, Davies, J. C. ., Am. J. Resp. Crit. Care Med., 2013, 187, 1219-1225). Kalydeco также разрешен для людей с мутациями G1244E, G1349D, G178R, G551S, S1251N, S1255P, S549N и S549R, и его применение для других мутаций, включая таковые с частичной функцией, сейчас исследуется.

et al
et al
et al
1
В то время, как монотерапия Kalydeco не приводила к какому-либо очевидному улучшению у гомозиготных по F508del пациентов (Flume, P. A. ., Chest, 2012, 142, 718-724), сочетание корректора (VX-809, лумакафтор или VX-661, тезакафтор) с Kalydeco приводила к умеренному улучшению легочной функции (расчетный процент FEV достигал 3-4%) (Wainwright, C. E. ., N. Engl. J. Med., 2015, 373, 220-231, Pilewski, J. M. ., J. Cystic Fibrosis, 2015, 14, Suppl. 1, S1). Сочетание VX-809 плюс Kalydeco (называемое Orkambi) представляет собой представленную на рынке терапию для гомозиготных по F508del пациентов.

Для обеих популяций пациентов с G551D и F508del считается, что улучшенные виды терапии обеспечат пациентам дополнительную пользу. Большинство пациентов с G551D являются гетерозиготными по G551D/F508del, и лечение сочетанием корректора VX-661 плюс Kalydeco приводило к дополнительному увеличению легочной функции, по сравнению с Kalydeco отдельно (Pilewski, J. M. et al., J. Cystic Fibrosis, 2015, 14, Suppl. 1, S1).
Мутации в CFTR, которые ассоциированы с умеренной дисфункцией CFTR, также очевидны у пациентов с состояниями, которые имеют определенные общие с муковисцидозом проявления заболевания, но не соответствуют диагностическим критериям муковизцидоза. У этих пациентов, дисфункция CFTR может возникать в слоях эпителиальных клеток и вызывать аномальную секрецию слизи и эндокринную секрецию, которые сходны с таковой, характерной для муковисцидоза. Дисфункция CFTR также может быть приобретенной. Хроническое вдыхание дисперсных раздражителей, включая сигаретный дым, загрязнение и пыль, может приводить к сниженной активности CFTR как ионного канала.
Модулирование активности CFTR также может быть полезно для других заболеваний, не вызванных непосредственно мутациями в CFTR, таких как секреторные заболевания и другие заболевания с нарушением фолдинга белка, опосредованные CFTR. CFTR регулирует поток хлорида и бикарбоната через эпителий многих клеток для контроля движения жидкости, солюбилизации белка, вязкости слизи и активности ферментов. Дефекты в CFTR могут вызвать блокаду дыхательных путей или протоков во многих органах, включая печень и поджелудочную железу. Стимуляторы представляют собой соединения, которые стимулируют открытие каналов CFTR, присутствующих в клеточной мембране. Любое заболевание, которое подразумевает сгущение слизи, нарушенную регуляцию жидкости, нарушенное выведение слизи и блокирование протоков, которые приводят к воспалению и разрушению тканей, могут быть кандидатами для стимуляторов. Поэтому, существует значимая терапевтическая потребность в новых малых молекулах, которые действуют в качестве стимуляторов CFTR.
В дополнение к муковисцидозу, связанные с CFTR заболевания или другие заболевания, при которых модулирование активности CFTR может быть благоприятным, включают в себя без ограничения астму, бронхоэктаз, хроническую обструктивную болезнь легких (ХОБЛ), запор, сахарный диабет, сухой кератоконъюктивит, панкреатит, риносинусит и синдром Шегрена.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Первый вариант осуществления первого аспекта настоящего изобретения представляет собой соединение формулы I
n
1
6
1
6
1
6
1
3
3
7
n
3
7
1
6
n
1
6
3
7
n
3
7
1
6
1a
1b
1a
1b
или его фармацевтически приемлемую соль; где Y представляет собой пятичленный гетероарил, содержащий 1-4 гетероатомов, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из N, O и S(O); где гетероарил необязательно замещен 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из галогена, C Cалкила и C Cгалогеналкила; Z представляет собой фенил, необязательно замещенный 1-3 галогенами; каждый R и R независимо выбирают из группы, состоящей из H, OH, галогена, C Cалкила, необязательно замещенного 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из галогена, OH, C Cалкокси, C Cциклоалкила и 4-7-членного гетероциклоалкила, содержащего 1-3 гетероатомов, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из N, O и S(O), C Cциклоалкила, необязательно замещенного 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из OH, галогена и C Cалкила, и 4-7-членного гетероциклоалкила, содержащего 1-3 гетероатомов, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из N, O и S(O); и где 4-7-членный гетероциклоалкил необязательно замещен 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из OH, галогена и C Cалкила; и R и R вместе с углеродом, к которому они присоединены, формируют C Cциклоалкил или 4-7-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатомов, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из N, O и S(O); и где C Cциклоалкил или 4-7-членный гетероциклоалкил необязательно замещены 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из OH, галогена и C Cалкила; и n в каждом случае независимо равен 0, 1 или 2.
1a
1b
1
6
Второй вариант осуществления первого аспекта настоящего изобретения представляет собой соединение согласно первому варианту осуществления, где один из R и R представляет собой C Cалкил, и другой представляет собой -H; или его фармацевтически приемлемую соль.
Третий вариант осуществления первого аспекта настоящего изобретения представляет собой соединение согласно второму варианту осуществления, где фрагмент Y-Z выбирают из группы, состоящей из
или его фармацевтически приемлемую соль.
Четвертый вариант осуществления первого аспекта настоящего изобретения представляет собой соединение согласно третьему варианту осуществления, где Z представляет собой фенил, необязательно замещенный 1-3 фторами или хлорами; или его фармацевтически приемлемую соль.
Первый вариант осуществления второго аспекта настоящего изобретения представляет собой соединение формулы II
n
n
1
6
1
6
1
6
1
6
1
3
3
7
n
3
7
1
6
1
6
3
7
n
3
7
1
6
1
3
1
6
1
6
1
6
3
1a
1b
1a
1b
2
3
или его фармацевтически приемлемую соль; где W представляет собой 5-6-членный гетероарил, содержащий 1-3 гетероатомов, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из N, O и S(O); и где гетероарил необязательно замещен 1-3 R; Y представляет собой пятичленный гетероарил, содержащий 1-4 гетероатомов, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из N, O и S(O); где гетероарил необязательно замещен 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из галогена, C Cалкила и C Cгалогеналкила; Z представляет собой C Cалкил или фенил; где фенил необязательно замещен 1-3 галогенами каждый; R и R независимо выбирают из группы, состоящей из H, OH, галогена, C Cалкила, необязательно замещенного 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из галогена, OH, C Cалкокси, C Cциклоалкила и 4-7-членного гетероциклоалкила, содержащего 1-3 гетероатомов, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из N, O и S(O), C Cциклоалкила, необязательно замещенного 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из OH, галогена и C Cалкила; и 4-7-членного гетероциклоалкила, необязательно замещенного 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из OH, галогена и C Cалкила; или R и R вместе с углеродом, к которому они присоединены, формируют C Cциклоалкил или 4-7-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатомов, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из N, O и S(O); и где C Cциклоалкил или 4-7-членный гетероциклоалкил необязательно замещены 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из OH, галогена и C Cалкила; R выбирают из группы, состоящей из -H, CN, галогена и C Cалкила; R в каждом случае независимо выбирают из группы, состоящей из C Cалкила, C Cалкокси, галогена и C Cгалогеналкила; и n в каждом случае независимо равен 0, 1 или 2.
3
Второй вариант осуществления второго аспекта настоящего изобретения представляет собой соединение согласно первому варианту осуществления второго аспекта настоящего изобретения, где W представляет собой пиримидинил или пиразинил, и где пиримидинил или пиразинил необязательно замещен 1, 2 или 3 R.
Третий вариант осуществления второго аспекта настоящего изобретения представляет собой соединение согласно первому варианту осуществления второго аспекта настоящего изобретения, где фрагмент Y-Z выбирают из группы, состоящей из
или его фармацевтически приемлемую соль.
Первый вариант осуществления третьего аспекта настоящего изобретения представляет собой соединение формулы III
n
n
1
6
1
6
1
6
1
6
1
3
3
7
n
3
7
1
6
1
6
3
7
n
3
7
1
6
1
6
1
6
1
6
3
1a
1b
1a
1b
3
или его фармацевтически приемлемую соль; где W выбирают из группы, состоящей из фенила и 5-6-членного гетероарила, содержащего 1-3 гетероатомов, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из N, O и S(O); где фенил и гетероарил необязательно замещены 1-3 R; Y представляет собой пятичленный гетероарил, содержащий 1-4 гетероатомов, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из N, O и S(O); где гетероарил необязательно замещен 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из галогена, C Cалкила и C Cгалогеналкила; Z представляет собой C Cалкил или фенил; где фенил необязательно замещен 1-3 галогенами; каждый R и R независимо выбирают из группы, состоящей из H, OH, галогена, C Cалкила, необязательно замещенного 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из галогена, OH, C Cалкокси, C Cциклоалкила и 4-7-членного гетероциклоалкила, содержащего 1-3 гетероатомов, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из N, O и S(O), C Cциклоалкила, необязательно замещенного 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из OH, галогена и C Cалкила, и 4-7-членного гетероциклоалкила, необязательно замещенного 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из OH, галогена и C Cалкила; или R и R вместе с углеродом, к которому они присоединены, формируют C Cциклоалкил или 4-7-членный гетероциклоалкил, содержащий 1-3 гетероатомов, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из N, O и S(O); и где C Cциклоалкил или 4-7-членный гетероциклоалкил необязательно замещены 1-3 заместителями, каждый из которых независимо выбирают из группы, состоящей из OH, галогена и C Cалкила; R в каждом случае независимо выбирают из группы, состоящей из C Cалкила, C Cалкокси, галогена и C Cгалогеналкила; и n в каждом случае независимо равен 0, 1 или 2.
Второй вариант осуществления третьего аспекта настоящего изобретения представляет собой соединение согласно первому варианту осуществления третьего аспекта настоящего изобретения, где W представляет собой фенил, который необязательно замещен 1 или 2 галогенами; или его фармацевтически приемлемую соль.
Третий вариант осуществления третьего аспекта настоящего изобретения представляет собой соединение согласно второму варианту осуществления третьего аспекта настоящего изобретения, где соединение представляет собой 5-(4-хлорфенил)-7-{[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]метил}имидазо[5,1-f][1,2,4]триазин-4-амин; или его фармацевтически приемлемую соль.
Пятый вариант осуществления первого аспекта настоящего изобретения представляет собой соединение согласно первому варианту осуществления первого аспекта настоящего изобретения, где соединение выбирают из группы, состоящей из
1-{(1S)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-3-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амина;
1-{(1R)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-3-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амина; и
1-{(1S)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-3-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амина;
или его фармацевтически приемлемую соль.
Четвертый вариант осуществления второго аспекта настоящего изобретения представляет собой соединение согласно первому варианту осуществления второго аспекта настоящего изобретения, где соединение выбирают из группы, состоящей из
7-{(1R)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-(4-метоксипиримидин-5-ил)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина;
7-{(1R)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина;
7-{(1S)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина;
4-амино-7-{[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]метил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1S)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1R)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
7-{(1R)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина;
4-амино-7-{(1S)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1R)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
7-{(1R)-1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина;
7-{(1R)-1-[1-(2,5-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина;
7-{(1S)-1-[1-(3,4-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина;
4-амино-7-{[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]метил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1R)-1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1R)-1-[1-(2,5-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1S)-1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1R)-1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1R)-1-[1-(3,4-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1R)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1S)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
7-{(1R)-1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина;
4-амино-7-{(1S)-1-[3-(2-фторфенил)-1,2-оксазол-5-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1R)-1-[3-(2-фторфенил)-1,2-оксазол-5-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-5-[2-(дифторметил)пиримидин-5-ил]-7-{[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]метил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{[3-(2-фторфенил)-1,2-оксазол-5-ил]метил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1R)-1-[1-(пропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1S)-1-[1-(пропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1R)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1S)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1R)-1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-пиразол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1S)-1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-пиразол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1R)-1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила; и
4-амино-7-{(1S)-1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
или его фармацевтически приемлемую соль.
Пятый вариант осуществления второго аспекта настоящего изобретения представляет собой соединение согласно первому варианту осуществления второго аспекта настоящего изобретения, где соединение выбирают из группы, состоящей из
7-{(1R)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-(4-метоксипиримидин-5-ил)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина;
7-{(1R)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина;
4-амино-7-{(1R)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
7-{(1R)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина;
4-амино-7-{(1R)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
7-{(1R)-1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина;
7-{(1R)-1-[1-(2,5-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина;
7-{(1S)-1-[1-(3,4-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина;
4-амино-7-{[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]метил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1R)-1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1R)-1-[1-(2,5-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1R)-1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1R)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1S)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
7-{(1R)-1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина;
4-амино-7-{(1S)-1-[3-(2-фторфенил)-1,2-оксазол-5-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1R)-1-[3-(2-фторфенил)-1,2-оксазол-5-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-5-[2-(дифторметил)пиримидин-5-ил]-7-{[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]метил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{[3-(2-фторфенил)-1,2-оксазол-5-ил]метил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1S)-1-[1-(пропан-2-ил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1R)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1S)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1R)-1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-пиразол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1S)-1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-пиразол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
4-амино-7-{(1R)-1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила; и
4-амино-7-{(1S)-1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрила;
или его фармацевтически приемлемую соль.
Шестой вариант осуществления первого аспекта настоящего изобретения представляет собой соединение 1-{(1S)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-3-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амин или его фармацевтически приемлемую соль.
Шестой вариант осуществления второго аспекта настоящего изобретения представляет собой соединение 4-амино-5-[2-(дифторметил)пиримидин-5-ил]-7-{[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]метил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрил или его фармацевтически приемлемую соль.
Седьмой вариант осуществления второго аспекта настоящего изобретения представляет собой соединение 4-амино-7-{(1S)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрил или его фармацевтически приемлемую соль.
Восьмой вариант осуществления второго аспекта настоящего изобретения представляет собой соединение 4-амино-7-{(1S)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрил или его фармацевтически приемлемую соль.
Девятый вариант осуществления второго аспекта настоящего изобретения представляет собой соединение 4-амино-7-{[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]метил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрил или его фармацевтически приемлемую соль.
Первый вариант осуществления четвертого аспекта настоящего изобретения представляет собой способ лечения муковисцидоза, астмы, бронхоэктаза, хронической обструктивной болезни легких (ХОБЛ), запора, сахарного диабета, сухого кератоконъюктивита, панкреатита, риносинусита или синдрома Шегрена у нуждающегося в лечении пациента, причем способ включает в себя введение нуждающемуся в лечении пациенту терапевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли упомянутого соединения в соответствии с любым из первого шестого вариантов осуществления первого аспекта, или с любым из первого девятого вариантов осуществления второго аспекта, или с любым из первого третьего вариантов осуществления третьего аспекта.
Второй вариант осуществления четвертого аспекта настоящего изобретения представляет собой способ лечения муковисцидоза у нуждающегося в лечении пациента, причем способ включает в себя введение нуждающемуся в лечении пациенту терапевтически эффективного количества соединения или фармацевтически приемлемой соли упомянутого соединения в соответствии с любым из первого шестого вариантов осуществления первого аспекта, или с любым из первого девятого вариантов осуществления второго аспекта, или с любым из первого третьего вариантов осуществления третьего аспекта.
Первый вариант осуществления пятого аспекта настоящего изобретения представляет собой соединение или его фармацевтически приемлемую соль в соответствии с любым из первого шестого вариантов осуществления первого аспекта, или с любым из первого девятого вариантов осуществления второго аспекта, или с любым из первого третьего вариантов осуществления третьего аспекта, для применения при лечении муковисцидоза.
Первый вариант осуществления шестого аспекта настоящего изобретения представляет собой фармацевтическую композицию, содержащую терапевтически эффективное количество соединения в соответствии с любым из первого шестого вариантов осуществления первого аспекта, или с любым из первого девятого вариантов осуществления второго аспекта, или с любым из первого третьего вариантов осуществления третьего аспекта, или его фармацевтически приемлемой соли вместе с фармацевтически приемлемым носителем.
Второй вариант осуществления шестого аспекта настоящего изобретения представляет собой фармацевтическую композицию согласно первому варианту осуществления шестого аспекта, дополнительно содержащую одно или несколько дополнительных терапевтических средств.
Третий вариант осуществления шестого аспекта настоящего изобретения представляет собой фармацевтическую композицию согласно второму варианту осуществления шестого аспекта, где одно или несколько дополнительных терапевтических средств выбирают из группы, состоящей из стимулятора CFTR, корректора CFTR, ингибитора эпителиального натриевого канала (ENaC), усилителя CFTR, стабилизатора CFTR, средства сквозного прочитывания, олигонуклеотидной заплатки, индуктора аутофагии и модулятора протеостаза.
Четвертый вариант осуществления шестого аспекта настоящего изобретения представляет собой фармацевтическую композицию согласно третьему варианту осуществления шестого аспекта, где стимулятор CFTR в каждом случае выбирают из группы, состоящей из VX-770 (ивакафтор), GLPG-1837, GLPG-2451, QBW-251, FDL-176, FDL-129, CTP656 и PTI-P271.
Пятый вариант осуществления шестого аспекта настоящего изобретения представляет собой фармацевтическую композицию согласно третьему варианту осуществления шестого аспекта, где корректор CFTR в каждом случае выбирают из группы, состоящей из VX809 (лумакафтор), VX-661 (тезакафтор), VX-983, VX-152, VX-440, VX-659, GLPG2737, P247-A, GLPG-2222, GLPG-2665, GLPG-2851, FDL-169 и PTIC1811.
Шестой вариант осуществления шестого аспекта настоящего изобретения представляет собой фармацевтическую композицию согласно третьему варианту осуществления шестого аспекта, где ингибитор эпителиальных натриевых каналов (ENaC) в каждом случае выбирают из группы, состоящей из SPX-101, QBW-276 и VX-371.
Седьмой вариант осуществления шестого аспекта настоящего изобретения представляет собой фармацевтическую композицию согласно третьему варианту осуществления шестого аспекта, где усилитель CFTR в каждом случае выбирают из группы, состоящей из PTI428 и PTI-130.
Восьмой вариант осуществления шестого аспекта настоящего изобретения представляет собой фармацевтическую композицию согласно третьему варианту осуществления шестого аспекта, где стабилизатор CFTR представляет собой N-91115 (кавосонстат).
Девятый вариант осуществления шестого аспекта настоящего изобретения представляет собой фармацевтическую композицию согласно третьему варианту осуществления шестого аспекта, где средство сквозного прочитывания представляет собой аталурен (PTC124).
Десятый вариант осуществления шестого аспекта настоящего изобретения представляет собой фармацевтическую композицию согласно третьему варианту осуществления шестого аспекта, где индуктор аутофагии в каждом случае выбирают из группы, состоящей из CX-4945 и сочетания цистеамина и эпигаллокатехина галлата (EGCG).
Первый вариант осуществления седьмого аспекта настоящего изобретения представляет собой способ лечения муковисцидоза у нуждающегося в лечении пациента, причем способ включает в себя введение фармацевтической композиции в соответствии с любым из первого - десятого вариантов осуществления шестого аспекта.
Первый вариант осуществления восьмого аспекта настоящего изобретения представляет собой фармацевтическую композицию в соответствии с любым из первого - десятого вариантов осуществления шестого аспекта для применения при лечении муковисцидоза.
определения
1
6
н
н
втор
трет-
Термин «алкил» относится к линейному или разветвленному насыщенному гидрокарбильному заместителю (т.е., заместителю, полученному из углеводорода путем удаления водорода), согласно одному варианту осуществления, от 1 до 6 атомов углерода (т.е., C Cалкил). Примеры таких заместителей включают в себя метил, этил, пропил (включая -пропил и изопропил), бутил (включая  бутил, изобутил, -бутил и бутил), пентил, изоамил, гексил, и т. п.
1
6
1
6
Термин «галогеналкил» относится к алкилу, в котором по меньшей мере один водород замещен атомом галогена. Термин «C Cгалогеналкил» относится к C Cалкильной группе, определенной в настоящем документе, в которой 1, 2, 3, 4, 5 или 6 атомов водорода заменены галогеном. Согласно определенным вариантам осуществления, в которых два и более атомов водорода заменены атомами галогена, все атомы галогена являются одинаковыми. Согласно другим вариантам осуществления, в которых два и более атомов водорода заменены атомами галогена, все атомы галогена не являются одинаковыми. Примеры галогеналкилов включают в себя: хлорметил, фторметил, дифторметил, трифторметил, 1,1-дифторэтил, 2-фторэтил, 2,2-дифторэтил, 2-хлор-3-фторпентил, и т. п.
1
6
н
н
трет-
Термин «алкокси» относится к относится к линейному или разветвленному насыщенному гидрокарбильному заместителю (т.е., заместителю, полученному из углеводорода путем удаления водорода), который в свою очередь присоединен к атому кислорода, согласно одному варианту осуществления, от 1 до 6 атомов углерода (т.е., C Cалкокси). Примеры таких заместителей включают в себя метокси, этокси, пропокси (включая -пропокси и изопропокси), бутокси (включая -бутокси, изобутокси, втор бутокси и бутокси), пентокси и т. п.
3
7
Термин «циклоалкил» относится к карбоциклическому заместителю, полученному путем удалению атома водорода из насыщенной карбоциклической молекулы и содержащему указанное число атомов углерода. Согласно одному варианту осуществления, циклоалкильный заместитель содержит от 3 до 7 атомов (т.е., C Cциклоалкил). Примеры циклоалкила включают в себя циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и циклогептил. Термин «циклоалкил» включает в себя моно-, би- и трициклические насыщенные карбоциклы, а также связанные мостиковой связью и конденсированные карбоциклы, а также спиро-конденсированные циклические системы.
n
Используемый в настоящем документе термин «гетероциклоалкил» относится к моноциклической кольцевой системе, содержащей указанные гетероатомы N, O или S(O). Термин «гетероциклоалкил» относится к заместителю полученному путем удаления атома водорода из насыщенной или частично насыщенной кольцевой структуры, содержащей указанное число кольцевых атомов; где по меньшей мере один из кольцевых атомов представляет собой гетероатом (т.е. кислород, азот или серу), а остальные кольцевые атомы независимо выбирают из группы, состоящей из углерода, кислорода, азота или серы. Если гетероциклоалкильный заместитель в свою очередь замещен группой или заместителем, то группа или заместитель могут быть связаны с гетероатомом азота, или они могут быть связаны с атомом углерода, в зависимости от ситуации. В некоторых случаях, число атомов в циклическом заместителе, содержащем один или несколько гетероатомов (т.е., в гетероариле или гетероциклоалкиле) указывают приставкой «x-y-членный», где x представляет собой минимальное число, а y представляет собой максимальное число атомов, формирующих циклический фрагмент заместителя. Таким образом, например, «4-7-членный гетероциклоалкил» относится к гетероциклоалкилу, содержащему от 4 до 7 атомов, включая один или несколько гетероатомов, в циклическом фрагменте гетероциклоалкила. Примеры гетероциклоалкилов с один кольцом включают в себя азетидинил, оксетанил, тиетанил, дигидрофуранил, тетрагидрофуранил, дигидротиофенил, тетрагидротиофенил, пирролинил, пирролидинил, имидазолинил, имидазолидинил, пиразолинил, пиразолидинил, тиазолинил, изотиазолинил, тиазолидинил, изотиазолидинил, дигидропиранил, пиперидинил, морфолинил, пиперазинил, азепинил, оксепинил и диазепинил.
n
Термин «гетероарил» относится к ароматической кольцевой структуре, содержащей указанное число кольцевых атомов, в которой по меньшей мере один из кольцевых атомов представляет собой гетероатом (т.е. кислород, азот или серу), а остальные кольцевые атомы независимо выбирают из группы, состоящей из углерода, кислорода, азота или серы. Пяти-шестичленный гетероарил представляет собой ароматическую кольцевую систему, в которой содержится 5 или 6 атомов, причем по меньшей мере один из кольцевых атомов представляет собой N, O или S(O).
фуранил
фуранил
Примеры гетероарильных заместителей включают в себя 6-членные циклические заместители, такие как пиридинил, пиразинил, пиримидинил и пиридазинил; 5-членные циклические заместители, такие как пирролил, тиенил, , триазолил, имидазолил, , тиофенил, пиразолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, 1,2,3-, 1,2,4-, 1,2,5- или 1,3,4-оксадиазолил и изотиазолил. В группе, которая содержит гетероарильный заместитель, кольцевой атом гетероарильного заместителя, который связан с группой, может представлять собой по меньшей мере один гетероатом, или он может представлять собой кольцевой атом углерода, где кольцевой атом углерода может находиться в том же кольце, что и по меньшей мере один гетероатом, или где кольцевой атом углерода может находиться в кольце, отличном от кольца, в котором находится по меньшей мере один гетероатом. По аналогии, если гетероарильный заместитель в свою очередь замещен группой или заместителем, то группа или заместитель могут быть связаны по меньшей мере с один гетероатомом, или они могут быть связаны с кольцевым атомом углерода, где кольцевой атом углерода может находиться в том же кольце, что и по меньшей мере один гетероатом, или где кольцевой атом углерода может находиться в кольце, отличном от кольца, в котором находится по меньшей мере один гетероатом. Термин «гетероарил» также включает в себя пиридинил-N-оксиды и группы, содержащие пиридин-N-оксидное кольцо. Вышеупомянутые группы, производные от перечисленных выше групп, могут быть C-присоединенными или N-присоединенными, где такое возможно. Например, группа, производная от пиррола, может представлять собой пиррол-1-ил (N-присоединенный) или пиррол-3-ил (C-присоединенный). Кроме того, группа, производная от имидазола, может представлять имидазол-1-ил (N-присоединенный) или имидазол-2-ил (C-присоединенный).
Термин «галоген-» или «галоген» относится к фтору (который может обозначаться как -F), хлору (который может обозначаться как Cl), брому (который может обозначаться как -Br) или йоду (который может обозначаться как -I).
Термин «водород» относится к водородному заместителю и может обозначаться как -H.
Термин «гидрокси» или «гидроксил» относится к OH. Соединения, содержащие атом углерода, к которому присоединен один или несколько гидроксильных заместителей, включают в себя, например, спирты, енолы и фенол.
6
5
Термин «фенил» относится к ароматическому кольцу, содержащему радикал CH, полученный из бензола путем удаления атома водорода. Фенил, будучи указанным таким образом, может быть необязательно конденсирован с 5- или 6-членным циклоалкильным или гетероциклоалкильным кольцом с формированием бициклических соединений. Примеры таких бициклических соединений включают в себя 1,2,3,4-тетрагидронафталин, 2,3-дигидробензо[1,4]оксазин, 2,3-дигидро-1H-инден, изоиндолин и 2,3-дигидробензо[1,4]диоксин.
Если заместитель описан как «независимо выбранный» из группы, то в каждом случае заместитель выбирают независимо от других. Поэтому, каждый заместитель может быть идентичен другому(им) заместителю(ям) или отличать от него(них).
Используемый в настоящем документе термин «формула I» или «формула (I)»; «формула II» или «формула (II)»; или «формула III» или «формула (III)» могут называться «соединением(ями) согласно настоящему изобретению». Также определено, что такие термины включают в себя все формы соединения формулы I, включая его гидраты, сольваты, изомеры, кристаллические и некристаллические формы, изоморфы, полиморфы и метаболиты. Например, соединения согласно настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемые соли могут существовать в несольватированной и сольватированной формах. В том случае, когда растворитель или вода прочно связаны, комплекс будет характеризоваться хорошо определенной стехиометрией, независимой от влажности. Тем не менее, если растворитель или вода связаны слабо, как в случае канальных сольватов и гигроскопичных соединений, содержание воды/растворителя будет зависеть от влажности и условий сушки. В таких случаях, отсутствие стехиометрии будет нормой.
Соединения согласно настоящему изобретению могут существовать в виде клатратов или других комплексов. В объем настоящего изобретения включены комплексы, такие как клатраты, комплексы включения лекарство-хозяин, где лекарство и хозяин присутствуют в стехиометрических или нестехиометрических количествах. Также включены комплексы соединений согласно настоящему изобретению, содержащие два или несколько органических и/или неорганических компонентов, которые могут присутствовать в стехиометрических или нестехиометрических количествах. Полученные комплексы могут быть ионизированы, частично ионизированы или не ионизированы. Для обзора таких комплексов, см. J. Pharm. Sci., 64 (8), 1269-1288, Haleblian, J.K. (August 1975).
Соединения согласно настоящему изобретению могут содержать асимметрические атомы углерода. Углерод-углеродные связи соединений согласно настоящему изобретению могут отображаться в настоящем документе с использованием сплошной черты (), сплошного клина () или штрихового клина (). Использование сплошной линии для отображения связей с асимметрическими атомами углерода указывает на включение всех возможных стереоизомеров (например, конкретные энантиомеры, рацемические смеси, и т. д.) по этому атому углерода. Использование сплошного или штрихового клина для отображения связей с асимметрическими атомами углерода указывает на включение только представленного стереоизомера. Возможно, что соединения формул I, II или III могут содержать более одного асимметрического атома углерода. В таких соединениях, использование сплошной линии для отображения связей с асимметрическими атомами углерода указывает на включение всех возможных стереоизомеров. Например, если не утверждается иное, то предполагается, что соединения формул I, II или III могут существовать в виде энантиомеров и диастереоизомеров или в виде рацематов и их смесей. Использование сплошной линии для отображения связей с одним или несколькими асимметрическими атомами углерода в соединении формул I, II или III и использование сплошного или штрихового клина для отображения связей с другими асимметрическими атомами углерода в том же соединении указывает на присутствие смеси диастереоизомеров.
цис
транс
Стереоизомеры формул I, II или III включают в себя  и  изомеры, оптические изомеры, такие как R и S энантиомеры, диастереоизомеры, геометрические изомеры, ротамеры, конформационные изомеры и таутомеры соединений согласно настоящему изобретению, включая соединения, проявлявшие более одного типа изомерии, и их смеси (такие как рацематы и пары диастереоизомеров). Также включены кислотно-аддитивные и основно-аддитивные соли, в которых противоион является оптически активным, например, D-лактат или L-лизин, или рацемический, например, DL-тартрат или DL-аргинин.
Если какой-либо рацемат кристаллизуется, то возможны кристаллы двух различных типов. Первый тип представляет собой рацемическое соединение (истинный рацемат), речь о котором шла выше, где получается одна гомогенная форма кристалла, содержащая оба энантиомера в эквимолярных количествах. Второй тип представляет собой рацемическую смесь или конгломерат, где в эквимолярных количествах получаются две формы кристалла, каждая из которых содержит один энантиомер.
Настоящее изобретение включает в себя таутомерные формы соединений согласно настоящему изобретению. Если структурные изомеры являются взаимопревращаемыми с прохождением через низкоэнергетический барьер, то может возникать таутормерная изомерия («таутомерия»). Это может принимать форму протонной таутомерии в соединениях согласно настоящему изобретению, содержащих, например, имино, кето или оксимную группу, или так называемую таутомерию связей в соединениях, которые содержат ароматический фрагмент. Из этого следует, что одно соединение может проявлять более одного типа изомерии. Различные соотношения таутомеров в твердой или жидкой форме зависят от различных заместителей в молекуле, а также от методики кристаллизации, использованной для выделения соединения.
Примеры типов возможной таутомерии, представленной соединениями согласно настоящему изобретению, включают в себя гидроксипиридин пиридон; амид гидроксилимин и кетоенольная таутомерия:
in vitro
Соединения согласно настоящему изобретению могут использоваться в форме солей, полученных из неорганических или органических кислот. В зависимости от конкретного соединения, соль соединения может быть предпочтительна по причине одного или нескольких из физических свойств соли, таких как улучшенная фармацевтическая стабильность при изменяющихся значения температуры и влажности, или желаемая растворимость в воде или масле. В некоторых случаях, соль соединения также может использоваться для способствования выделению, очистке и/или расщеплению соединения. Если соль предназначена для введения пациенту (а не для использования, например, ), то соль предпочтительно является фармацевтически приемлемой. Термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к соли, полученной путем объединения соединения формул I, II или III с кислотой, чей анион, или с основанием, чей катион, обычно считается подходящим для приема человеком. Фармацевтически приемлемые соли особенно применимы в качестве продуктов способом согласно настоящему изобретению вследствие их лучшей растворимости в воде по сравнению с исходным соединением. Для применения в медицине, соли соединений согласно настоящему изобретению являются нетоксичными «фармацевтически приемлемыми солями». Соли, охватываемые термином «фармацевтически приемлемые соли» относится к нетоксичным солям соединений согласно настоящему изобретению, которые обычно получают путем осуществления взаимодействия свободного основания с подходящей органической или неорганической кислотой.
пара
пара
Подходящие фармацевтически приемлемые кислотно-аддитивные соли соединений согласно настоящему изобретению, если возможны, включают в себя соли, полученная из неорганических кислот, таких как соляная, бромистоводородная, фтористоводородная, борная, фторборная, фосфорная, метафосфорная, азотная, угольная, сульфоновая и серная кислоты, и органических кислот, таких как уксусная, бензолсульфоновая, бензойная, лимонная, этансульфоновая, фумаровая, глюконовая, гликолевая, изотионовая, молочная, лактобионовая, малеиновая, яблочная, метансульфоновая, трифторметансульфоновая, янтарная, толуолсульфоновая, винная и трифтоуксусная кислоты. Подходящие органические кислоты обычно включают в себя, например, алифатический, циклоалифатический, ароматический, аралифатический, гетероциклический, карбоновый и сульфоновый классы органических кислоты. Конкретные примеры подходящих органических кислот включают в себя ацетат, трифторацетат, формиат, пропионат, сукцинат, гликолят, глюконат, диглюконат, лактат, малат, тартрат, цитрат, аскорбат, глюкуронат, малеат, фумарат, пируват, аспартат, глутамат, бензоат, антранилат, стеарат, салицилат, -гидроксибензоат, фенилацетат, манделат, эмбонат (памоат), метансульфонат, этансульфонат, бензолсульфонат, пантотенат, толуолсульфонат, 2-гидроксиэтансульфонат, сульфанилат, циклогексиламиносульфонат, -гидроксибутират, галакторат, галактуронат, адипат, альгинат, бутират, камфорат, камфорсульфонат, циклопентан-пропионат, додецилсульфат, гликогептаноат, глицерофосфат, гептаноат, гексаноат, никотинат, 2-нафталисульфонат, оксалат, пальмоат, пектинат, 3-фенилпропионат, пикрат, пивалат, тиоцианат и ундеканоат.
Кроме того, если соединения согласно настоящему изобретению содержат кислотный фрагмент, то их подходящие фармацевтически приемлемые соли могут включать в себя соли щелочных металлов, т.е., соли натрия и калия; соли щелочно-земельных металлов, например, соли кальция и магния; и соли, сформированные с подходящими органическими лигандами, например, соли четвертичного аммония. Согласно другому варианту осуществления, основные соли образуются из оснований, которые формируют нетоксичные соли, включая в себя алюминий, аргинин, бензатин, холин, диэтиламин, диоламин, глицерин, лизин, меглумин, оламин, трометамин и соли цинка.
1
6
Органические соли могут быть получены из солей вторичного, третичного или четвертичного амина, такого как трометамин, диэтиламин, N,N'-дибензилэтилендиамин, хлорпрокаин, холин, диэтаноламинамин, этилендиамин, меглумин (N-метилглюкамин) и прокаин. Содержащие основный азот группы могут быть кватернизованы такими агентами, как низшие алкил(C C)галогениды (например, метил-, этил-, пропил- и бутилхлориды, бромиды и йодиды), диалкилсульфаты (т.е., диметил-, диэтил-, дибутил- и диамилсульфаты), длинноцепочечные галогениды (например, децил-, лаурил-, миристил- и стеарилхлориды, бромиды и йодиды), арилалкилгалогениды (например, бензил- и фенэтилбромиды), и другие.
Согласно одному варианту осуществления, также могут формироваться полусоли кислот и оснований, например, гемисульфаты и полукальциевые соли.
В объем настоящего изобретения также включены так называемые «пролекарства» соединения согласно настоящему изобретению. Так, определенные производные соединения согласно настоящему изобретению, которые сами по себе могут характеризоваться слабой фармакологической активностью или не иметь таковой, при введении в или на тело преобразуются в соединение согласно настоящему изобретению, характеризующееся требуемой активностью, например, посредством гидролитического расщепления. Такие производные называю «пролекарствами». Дополнительная информация по применению пролекарств может быть найдена в "Pro-drugs as Novel Delivery Systems", Vol. 14, ACS Symposium Series (T. Higuchi and V. Stella, Eds.), American Chemical Society, 1975 Washington, D.C. и в "Bioreversible Carriers in Drug Design", Pergamon Press, 1987 (E.B. Roche, Ed.) American Pharmaceutical Association. Пролекарства в соответствии с настоящим изобретением могут быть получены, например, путем замены соответствующих функциональных групп, присутствующих в соединениях согласно любой из формул I, II или III, определенными фрагментами, известными специалистам в данной области техники как «профрагменты», описанные, например, в Bundgaard, H. 1985. Design of Prodrugs. New York: Elsevier.
2
3
13
11
14
15
18
17
32
35
18
36
3
14
3
14
2
in vivo
Настоящее изобретение также включает в себя меченые изотопами соединения, которые идентичны соединениям, изложенным в формуле I, если не считать, что один или несколько атомов заменены атомом, характеризующимся атомной массой или массовым числом, отличными от атомной массы или массового числа, обычно встречающихся в природе. Примеры изотопов, которые могут быть включены в состав соединений согласно настоящему изобретению, включают в себя изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, серы, фтора и хлора, такие как H, H, C, C, C, N, O, O, P, S, F и Cl, соответственно. Соединения согласно настоящему изобретению, их пролекарства и фармацевтически приемлемые соли упомянутых соединений или упомянутых пролекарств, которые содержат упомянутые выше изотопы и/или другие изотопы других атомов включены в объем настоящего изобретения. Определенные меченые изотопами соединения согласно настоящему изобретению, например, соединения, в состав которых включены радиоактивные изотопы, такие как H и C, применимы при исследованиях распределения в тканях лекарства и/или субстрата. Меченые тритием, т.е., H, и углеродом-14, т.е., C, изотопы являются особенно предпочтительными вследствие простоты их получения и способности к обнаружению. Кроме того, замещение более тяжелыми изотопами, таким как дейтерий, т.е., H, может обеспечивать определенные терапевтические преимущества, являющиеся результатом большей метаболической стабильностью, например, увеличенным временем полужизни  или сниженными требованиями к дозировке, а потому могут быть предпочтительны в некоторых обстоятельствах. Меченые изотопами соединения формул I, II или III согласно настоящему изобретению и их пролекарства, как правило, могут быть получены посредством осуществления методик, раскрытых в представленных ниже Схемах и/или в Примерах и Подготовительных примерах, путем замены немеченого реагента легкодоступным меченым реагентом.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЕ
Обычно, соединение согласно настоящему изобретению вводят в количестве, эффективном для лечения состояния, описанного в настоящем документе. Соединения согласно настоящему изобретению вводят посредством любого подходящего пути введения в форме фармацевтической композиции, адаптированной для такого пути введения, и в дозе эффективной для предполагаемого лечения. Терапевтически эффективные дозы соединений, требуемые для лечения прогрессирования медицинского состояния, легко устанавливаются средним специалистом в данной области техники с использованием доклинических и клинических подходов, известных в области медицины.
Если не указано особо, то используемый в настоящем документе термин «лечение» означает инвертирование, облегчение, ингибирование прогрессирования или профилактику нарушения или состояния, к которому относится этот термин, или одного или нескольких симптомов такого нарушения или состояния. Если не указано особо, то используемый в настоящем документе термин «проведение лечения» относится к процессу лечения, так как термин «лечение» определен выше. Термин «лечение» также включает в себя адъювантную и нео-адъювантную терапию субъекта. Соединения согласно настоящему изобретению можно вводить перорально. Пероральное введение может включать в себя проглатывание, так что соединение попадает в желудочно-кишечный тракт, или может использоваться буккальное или сублингвальное введение, посредством которого соединение попадает в кровоток непосредственно из ротовой полости.
Согласно другому варианту осуществления, соединения согласно настоящему изобретению можно вводить непосредственно в кровоток, в мышцу или во внутренний орган. Подходящие способы для парентерального введения включают в себя внутривенный, интраартериальный, интраперитонеальный, интратекальный, интравентрикулярный, интрауретральный, интрастернальный, интракраниальный, внутримышечный и подкожный. Подходящие устройства для парентерального введения включают в себя игольные (включая микроигольные) инъекторы, безигольные инъекторы и инфузионные методики. Согласно другому варианту осуществления, соединения согласно настоящему изобретению также можно вводить местно в кожу или слизистую, то есть дермально или трансдермально. Согласно другому варианту осуществления, соединения согласно настоящему изобретению также можно вводить интраназально или посредством ингаляции. Согласно другому варианту осуществления, соединения согласно настоящему изобретению можно вводить ректально или вагинально. Согласно другому варианту осуществления, соединения согласно настоящему изобретению также можно вводить непосредственно в глаз или ухо.
Схема приема для соединений и/или содержащих соединения композиций основывается на ряде факторов, включая тип, возраст, вес, пол и медицинское состояние пациента; тяжесть состояния; путь введения; активность конкретного используемого соединения. Поэтому, схема приема может варьировать очень широко. Примерные уровни дозирования приблизительно от 0,01 мг приблизительно до 100 мг на килограмм массы тела применимы для лечения вышеуказанных состояний. Согласно одному варианту осуществления, суммарная суточная доза соединения согласно настоящему изобретению (вводимая однократно или в виде отдельных доз), обычно составляет приблизительно от 0,01 приблизительно до 100 мг/кг. Согласно другому варианту осуществления, суммарная суточная доза соединения согласно настоящему изобретению составляет приблизительно от 0,1 приблизительно до 50 мг/кг, и согласно другому варианту осуществления приблизительно от 0,5 приблизительно до 30 мг/кг (т.е., мг соединения согласно настоящему изобретению на кг массы тела). Согласно одному варианту осуществления, дозирование составляет от 0,01 до 10 мг/кг в сутки. Согласно другому варианту осуществления, дозирование составляет от 0,1 до 1,0 мг/кг в сутки. Стандартные лекарственные композиции могут содержать такие количества или их дольные единицы для получения в сумме суточной дозы. Во многих ситуациях введение соединения будет повторяться многократно в сутки (обычно не более чем 4 раза). Множественные принимаемые за сутки дозы обычно могут быть использованы для увеличения при желании суммарной суточной дозы.
Для перорального введения композиции могут быть предусмотрены в форме таблеток, содержащих приблизительно от 0,01 мг приблизительно до 500 мг активного ингредиента, или согласно другому варианту осуществления, приблизительно от 1 мг приблизительно до 100 мг активного ингредиента. Для внутривенного введения, дозы могут варьировать приблизительно от 0,1 приблизительно до 10 мг/кг в минуту в процессе инфузии с постоянной скоростью.
Подходящие субъекты в соответствии с настоящим изобретением включают в себя субъекты-млекопитающие. Млекопитающие в соответствии с настоящим изобретением включают в себя без ограничения собак, кошек, крупный рогатый скот, коз, лошадей, овец, свиней, грызунов, зайцев, приматов и т. п., и охватывают млекопитающих во внутриутробном развитии. Согласно одному варианту осуществления, люди являются подходящими субъектами. Субъекты-люди могут быть любого пола и на любой стадии развития.
Согласно другому варианту осуществления, настоящее изобретение включает в себя использование одного или нескольких соединений согласно настоящему изобретению для приготовления лекарственного средства для лечения состояний, перечисленных в этом документе.
per se
Для лечения состояний, описанных выше, соединение согласно настоящему изобретению можно вводить . В качестве альтернативы, фармацевтически приемлемые соли подходят для медицинских применений, поскольку обладают более высокой растворимостью в воде по сравнению с исходным соединением.
Согласно другому варианту осуществления, настоящее изобретение включает в себя фармацевтические композиции. Такие фармацевтические композиции содержат соединение согласно настоящему изобретению с фармацевтически приемлемым носителем. Носитель может быть твердым, жидким, или и тем, и другим, и он может быть составлен вместе с соединением в виде однократной дозированной композиции, например, таблетки, которая содержит от 0,05 масс.% до 95 масс.% активных соединений. Соединение согласно настоящему изобретению может быть сочетано с подходящими полимерами в качестве направленных носителей лекарств. Также могут присутствовать другие фармакологически активные вещества.
Соединения согласно настоящему изобретению можно вводить посредством любого подходящего пути, предпочтительно в форме фармацевтической композиции, адаптированной для такого пути введения, и в дозе, эффективной для предполагаемого лечения. Активные соединения и композиции, например, можно вводить перорально, ректально, парентерально или местно.
Пероральное введение твердой лекарственной формы может быть представлено, например, в виде введения дискретных единиц, таких как твердые или мягкие капсулы, пилюли, облатки, леденцы или таблетки, каждая из которых содержит предопределенное количество по меньшей мере одного соединения согласно настоящему изобретению.
Согласно другому варианту осуществления, пероральное введение может быть представлено в виде введения порошка или гранул. Согласно другому варианту осуществления, пероральное введение может быть представлено в виде введения дисперсии, высушенной распылением. Согласно другому варианту осуществления, пероральная лекарственная форма представляет собой сублингвальную форму, такую как, например, леденцы. В таких твердых лекарственных формах, соединения формул I, II или III обычно сочетаны с одним или несколькими адъювантами. Такие капсулы или таблетки могут содержать составы с контролируемым высвобождением. В случае капсул, таблеток и пилюль, лекарственные формы также могут содержать буферные средства, или они могут быть приготовлены с кишечно-растворимыми покрытиями.
Согласно другому варианту осуществления, пероральное введение может быть представлено в виде введения жидкой лекарственной формы. Жидкие лекарственные формы для перорального введения включают в себя, например, фармацевтически приемлемые эмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры, содержащие инертные разбавители, обычно используемые в данной области техники (например, воду). Такие композиции также могут содержать адъюванты, такие как увлажнители, эмульгаторы, средства, способствующие суспендированию, вкусоароматизаторы (например, подсластители) и/или ароматизаторы.
Согласно другому варианту осуществления, настоящее изобретение включает в себя парентеральную лекарственную форму. «Парентеральное введение» включает в себя, например, подкожные инъекции, внутривенные инъекции, интраперитонеальные инъекции, внутримышечные инъекции, интрастернальные инъекции и инфузию. Инъекционные препараты (например, стерильные инъекционные водные или масляные суспензии) могут быть составлены в соответствии с известным уровнем техники с использованием подходящих средств, способствующих диспергированию, или увлажняющих средств и средств, способствующих суспендированию.
Согласно другому варианту осуществления, настоящее изобретение включает в себя местные лекарственные формы. «Местное введение» включает в себя, например, чрескожное введение, такое как введение посредством чрескожных пластырей или устройств для ионтофореза, внутриглазное введение или интраназальное или ингаляционное введение. Композиции для местного введения также включают в себя, например, местные гели, спреи, мази и кремы. Местные составы могут содержать соединение, которое усиливает абсорбцию или пенетрацию активного ингредиента через кожу или другие задействованные области. Если соединения согласно настоящему изобретению вводят посредством чрескожного устройства, то введение будет выполнено с использованием пластыря либо типа резервуара и пористой мембраны, либо варианта на твердой матрице.
Обычные составы для этой цели включают в себя гели, гидрогели, лосьоны, растворы, кремы, мази, присыпки, повязки, пены, пленки, кожные пластыри, капсулы, импланты, губки, волокна, бандажи и микроэмульсии. Также могут быть использованы липосомы. Обычные носители включают в себя спирт, воду, минеральное масло, жидкий вазелин, белый вазелин, глицерин, полиэтиленгликоль и пропиленгликоль. В состав могут быть включены усилители проникновения (см., например, J. Pharm. Sci., 88 (10), 955-958, by Finnin and Morgan (October 1999)).
Составы, подходящие для местного введения в глаз, включают в себя, например, глазные капли, в которых соединение согласно настоящему изобретению растворено или суспендировано в подходящем носителе. Обычный состав, подходящий для глазного или ушного введения, может находиться в форме капель микронизированной суспензии или раствора в изотоническом pH-регулируемом стерильном солевом растворе. Другие составы, подходящие для глазного и ушного введения, включают в себя мази, биоразлагаемые (например, рассасывающиеся гелевые губки, коллаген) и биологически не разлагаемые (например, силикон) импланты, капсулы, линзы и конкретные везикулярные системы, такие как ниосомы или липосомы. Полимер, такой как перекрестно-сшитая полиакриловая кислота, поливиниловый спирт, гиалуроновая кислота, полимер целлюлозы, например, (гидроксипропил)-метилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза или метилцеллюлоза, или полимер гетерополисахарида, например, геллановая камедь, может быть включен в состав вместе с консервантом, таким как бензалкония хлорид. Такие составы также могут быть доставлены посредством ионтофореза.
Для интраназального введения или введения посредством ингаляции, активные соединения согласно настоящему изобретению подходящим образом доставляют в форме раствора или суспензии через контейнер пульверизатор, который пациент сдавливает или накачивает, или в виде аэрозольного спрея, доставляемого через контейнер под давлением или небулайзер, с использованием подходящего пропеллента. Составы, подходящие для интраназального введения обычно вводят в форме сухого порошка (либо отдельно в виде смеси, например, в сухой смеси с лактозой, либо в виде частиц из смешанных компонентов, например, смешанных с фосфолипидами, такими как фосфатидилхолин) через ингалятор для сухих порошков или в виде аэрозольного спрея через контейнер под давлением, помпу, спрей, атомайзер (предпочтительно, атомайзер с использованием электрогидродинамики для получения мелкодисперсного тумана), или небулайзер, и использованием или без подходящего пропеллента, такого как 1,1,1,2-тетрафторэтан или 1,1,1,2,3,3,3-гептафторпропан. Для интраназального применения порошок может содержать биоадгезивное средство, например, хитозан или циклодекстрин.
Согласно другому варианту осуществления, настоящее изобретение включает в себя ректальную лекарственную форму. Такая ректальная лекарственная форма может находиться в форме, например, суппозитория. Масло какао традиционно представляет собой основу для суппозитория, но при необходимости могут быть использованы различные альтернативы.
Также могут быть использованы другие вещества-носители и способы введения, известные в области фармацевтики. Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению можно приготовить посредством любой хорошо известной методики в области фармации, такой как эффективные методики приготовления и введения. Вышеуказанные рассуждения касательно эффективных составов и методик введения хорошо известны в данной области техники и описаны в стандартных руководствах. Составление лекарств обсуждается, например, в Hoover, John E., Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pennsylvania, 1975; Lieberman et al., Eds., Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Dekker, New York, N.Y., 1980; и Kibbe et al., Eds., Handbook of Pharmaceutical Excipients (3rd ed.), American Pharmaceutical Association, Washington, 2000.
Соединения согласно настоящему изобретению можно использовать отдельно или в сочетании с другими терапевтическими средствами при лечении различных состояний или болезненных состояний. Соединение(я) согласно настоящему изобретению и другое(ие) терапевтическое(ие) средство(а) можно вводить одновременно (например в одной и той же лекарственной форме или в отдельных лекарственных формах) или последовательно.
Два или несколько соединений можно вводить одновременно, параллельно или последовательно. Кроме того, одновременное введение можно проводить путем смешивания соединений перед введением или путем введения соединений в одно и то же время, но в различные анатомические области с использованием различных путей введения.
Фразы «параллельное введение», «совместное введение», «одновременное введение» и «ввели одновременно» означают, что соединения вводят в сочетании.
Настоящее изобретение включает в себя использование сочетания соединения-стимулятора CFTR, предусмотренного формулами I, II или III, и одного или нескольких дополнительных фармацевтически активных средств. Если вводят сочетание активных средств, то их можно вводить последовательно или одновременно в отдельных лекарственных формах, или сочетано в одной лекарственной форме. Соответственно, настоящее изобретение также включает в себя фармацевтические композиции, содержащие некоторое количество: (а) первого средства, содержащего соединение формул I, II или III или фармацевтически приемлемую соль соединения; (b) второго фармацевтически активного средства; (c) необязательно третьего фармацевтически активного средства; и (d) фармацевтически приемлемого носителя, основы или разбавителя.
Различные фармацевтически активные средства могут быть выбраны для использования в сочетании с соединениями формул I, II или III, в зависимости от подлежащего лечению заболевания, нарушения или состояния. Например, фармацевтическая композиция для использования при лечении муковисцидоза может содержать соединение формул I, II или III, или его фармацевтически приемлемую соль, вместе с одним или несколькими средствами, такими как модулятор CFTR, например, другой стимулятор CFTR, корректор CFTR, включая ингибитор CAL (CFTR-ассоциированный лиганд), корректор продукции CFTR или средство сквозного прочитывания, стабилизатор CFTR, включая ингибитор CFTR-Dab2 (деактивированный гомолог 2), или усилитель CFTR; ингибитор/блокатор эпителиальных натриевых каналов (ENaC); олигонуклеотидная заплатка; индуктор аутофагии; модулятор протеостаза, включая ингибитор гистондеацетилазы (HDAC); или поддерживающие виды терапии, такие как муколитическое средство, бронходилятатор, антибиотик, противовирусное средство, противовоспалительное средство, антихолинергетик, стабилизатор тучных клеток, кортикостероид, питательное средство или ферментативный заместитель.
Сочетание может включать в себя несколько средств из конкретного класса средств, например, сочетание соединения формул I, II или III с двумя или несколькими корректорами CFTR. Фармацевтически активные средства, которые можно использовать в сочетании с соединениями формул I, II или III и их композициями, включают в себя без ограничения:
(i) усилители CFTR, такие как VX-770 (ивакафтор), GLPG-1837, GLPG-2451, QBW-251, GLPG-3067, FDL-129, CTP-656, FDL-176, PTI-P271 и CTP-656;
(ii) корректоры CFTR, такие как VX-809 (лумакафтор), VX-661 (тезакафтор), VX-983 VX-152, VX-440, VX-659, GLPG-2737, P247-A, FDL-169, FDL-304, GLPG-2222, GLPG-2665, GLPG-2851, PTI-C1811, NU-001 и NU-002;
(iii) усилители CFTR, такие как PTI-428 и PTI-130;
(iv) средства сквозного считывания, такие как аталурен;
(v) стабилизаторы CFTR, такие как N91115 (кавосонстат, ингибитор S-нитрозоглутатионредуктазы ʺGSNORʺ);
(vi) ингибиторы эпителиальных натриевых каналов (ENaC), такие как SPX-101, QBW-276 и VX-371;
(vii) олигонуклеотидные патчи, такие как QR-010;
(viii) индукторы аутофагии, такие как CX-4945, сочетание цистеамина и галлата эпигаллокатехина (EGCG), цистеамин и рапамицин;
(ix) модуляторы протеостаза, такие как ингибиторы гистондеацетилазы (HDAC), включая 4-фенилбутират (4-PBA);
(x) поддерживающие виды терапии, такие как албутерол, салметерол, ципрофлоксацин, флутиказон, преднизон, ипратропия бромид, липаза, протеаза и амилаза.
Настоящее изобретение дополнительно включает в себя наборы, которые подходят для использования при осуществлении способов лечения, описанных выше. Согласно одному варианту осуществления, набор содержит первую лекарственную форму, содержащую одно или несколько из соединений согласно настоящему изобретению необязательно в сочетании с одним или несколькими дополнительными терапевтическими средствами, и контейнер для лекарственной формы, в количествах, достаточных для проведения способов лечения согласно настоящему изобретению. Согласно другому варианту осуществления, набор согласно настоящему изобретению содержит одно или несколько соединений согласно настоящему изобретению необязательно вместе с одним или несколькими дополнительными терапевтическими средствами.
Общие схемы синтеза
Соединения согласно настоящему изобретению могут быть получены любым способом, известным из уровня техники для получения соединений аналогичной структуры. В частности, соединения согласно настоящему изобретению могут быть получены методиками, описанными посредством ссылки на последующие схемы, или конкретными способами, описанными в Примерах, или сходными с любым из них способами.
Специалисту следует понимать, что представленные на последующих схемах экспериментальные условия являются иллюстративными из числа условий, подходящих для осуществления представленных преобразований, и что может быть необходимо или желательно варьировать точными условиями, используемыми для получения соединений формулы (I). Также следует понимать, что для получения целевого соединения согласно настоящему изобретению может быть необходимо или желательно проводить преобразования в порядке, отличного от описанного на схемах, или модифицировать одно или несколько из преобразований.
Все производные формул I, II и III могут быть получены методиками, описанными в представленных ниже общих способах, или их общеиспользуемыми модификациями. Настоящее изобретение также охватывает любой один или несколько из указанных способов для получения производных формул I, II и III в дополнение к любым использованным в них новым промежуточным продуктам. Специалисту в данной области техники следует понимать, что последующие реакционные смеси могут быть нагреты термически или в условиях обработки микроволновым излучением.
Представленные ниже пути, включая упомянутые в Примерах и Подготовительных примерах, иллюстрируют способы синтеза соединений формул I, II и III. Специалисту следует понимать, что соединения согласно настоящему изобретению и промежуточные продукты их получения могут быть получены способами, отличными от конкретно описанных в настоящем документе, например, путем приспособления описанных в настоящем документе способов, например, способами, известными из уровня техники. Подходящими руководствами к синтезу, взаимными преобразованиями функциональных групп, применениями защитных групп, и т. д., являются, например: ʺComprehensive Organic Transformationsʺ by RC Larock, VCH Publishers Inc. (1989); Advanced Organic Chemistryʺ by J. March, Wiley Interscience (1985); ʺDesigning Organic Synthesisʺ by S Warren, Wiley Interscience (1978); ʺOrganic Synthesis - The Disconnection Approachʺ by S Warren, Wiley Interscience (1982); ʺGuidebook to Organic Synthesisʺ by RK Mackie and DM Smith, Longman (1982); ʺProtective Groups in Organic Synthesisʺ by TW Greene and PGM Wuts, John Wiley and Sons, Inc. (1999); и ʺProtecting Groupsʺ by PJ Kocienski, Georg Thieme Verlag (1994); и любая новая редакция упомянутых стандартных работ.
Кроме того, специалисту следует понимать, что на любой стадии синтеза соединений согласно настоящему изобретению может быть необходимо или желательно защитить одну или несколько чувствительных групп для того, чтобы предотвратить нежелательные побочные реакции. В частности, может быть необходимо или желательно защитить аминогруппы или карбоксильные группы. Защитные группы, используемые для получения соединений согласно настоящему изобретению, могут использоваться традиционным способом. Смотри, например, защитные группы, описанные в работе 'Greene's Protective Groups in Organic Synthesis' by Theodora W Greene and Peter GM Wuts, fifth edition, (John Wiley and Sons, 2014), включенный в настоящий документ посредством ссылки, в которой также описаны способы удаления таких групп.
Если не указано иное, то в описанных ниже общих способах синтеза значения заместителей определены выше в отношении представленных выше соединений формулы (I). Если не указано иное, то в случае указанных соотношений растворителей соотношения являются объемными.
Соединения согласно настоящему изобретению могут быть получены любым способом, известным из уровня техники для получения соединений аналогичной структуры. В частности, соединения согласно настоящему изобретению могут быть получены методиками, описанными посредством ссылки на последующие схемы, или конкретными способами, описанными в Примерах, или сходными с любым из них способами.
Специалисту следует понимать, что представленные на последующих схемах экспериментальные условия являются иллюстративными из числа условий, подходящих для осуществления представленных преобразований, и что может быть необходимо или желательно варьировать точными условиями, используемыми для получения соединений формулы (I).
Последующие общие способы отражают получение соединений формул (I),(II) и (III), представленных ниже.
2
2
В соответствии с первым способом, соединения формулы (IIC) (соединение формулы II, где R представляет собой CN) могут быть получены из соединений формул (IIA) и (IIB, соединение формулы II, где R представляет собой Hal), как представлено на Схеме 1, где Hal представляет собой хлор, бром или йод, предпочтительно бром.
Схема 1
2
2
2
3
in situ
На схеме 1, соединение формулы (IIA) преобразуют до соединения формулы (IIB) путем обработки подходящим галогенирующим агентом, таким как N-(Hal)сукцинимид, предпочтительно NBS (где Hal представляет собой бром), в подходящем растворителе, таком как DCM или DMF, при соответствующей температуре, такой как 0°C. Специалист также знает, что альтернативные способы введения определенным образом подходящей галогеновой группы, такой как Br, достижимы с использованием альтернативных реагентов, растворителей и значений температуры. Соединение формулы (IIB) преобразуют до соединения формулы (IIC) путем обработки подходящим металлоорганическим источником цианида, таким как Zn(CN) или CuCN в присутствии подходящего катализатора, такого как Pd(dppf)Cl (или Pd(dba)+dppf) в подходящем растворителе, таком как DMF или NMP, при подходящей температуре. Специалист также знает, что альтернативные стратегии металлоорганического сочетания могут быть использованы с применением альтернативных партнеров сочетания, металлов и комбинаций растворителей. Специалисту хорошо понятно, что соединение формулы (IIB) получают и выделяют, как описано выше, или получают  без выделения в стратегии последовательных реакций, приводящих к формуле (IIC).
В соответствии со вторым способом, соединения формулы (II) могут быть получены из соединений формул (IID), (IIE) и (V), как представлено на Схеме 2, где Hal представляет собой хлор, бром или йод.
Схема 2
2
2
3
4
2
На Схеме 2, соединения формулы (II) могут быть получены из соединений формул (IIE) и (V) с использованием подходящей реакции металлорганического кросс-сочетания, такой как реакция кросс-сочетания по Судзуки, которой при необходимости предшествует формирование бороновой кислоты или эфира. Обычные условия кросс-сочетания по Судзуки включают в себя палладиевый катализатор, содержащий подходящие фосфиновые лиганды, в присутствии неорганического основания, в водном диоксане, при повышенных значениях температуры, полученных термически или в условиях обработки микроволновым излучением. Предпочтительные условия включают в себя Pd(OAc), Pd(dppf)Cl или Pd(PPh) с карбонатом натрия, цезия или калия в водном диоксане или метаноле при температуре от комнатной до 120°C. При необходимости, соединения формулы (V) могут быть получены с использованием обычных условий формирования боронового эфира, включающих в себя Pd(dppf)Cl и ацетат калия с бис(пинаколато)дибором, с соединениями формулы (XXXIII) (где Hal представляет собой Cl, Br или I) в диоксане при нагревании с обратным холодильником. Соединения формулы (IIE) могут быть получены из соединений формулы (IID) с использованием подходящей реакции галогенирования, такой как NBS (если Hal представляет собой бром), в подходящем растворителе, таком как DCM, при подходящей температуре такой как от 0°C до комнатной температуры. Соединения формулы (V) могут быть получены из коммерческих источников или по аналогии со способами, описанными в настоящем документе.
В соответствии с третьим способом, соединения формулы (III) могут быть получены из соединений формулы (IIIA), как представлено на Схеме 3, где LG представляет собой уходящую группу, такую как OH или Hal (где Hal представляет собой хлор, бром или йод).
Схема 3
3
На Схеме 3, соединения формулы (III) могут быть получены из соединений формулы (IIIA) (где LG представляет собой OH) использованием подходящей реакции взаимного преобразования функциональных групп, такой как двустадийный процесс с использованием подходящей реакции галогенирования с последующей подходящей реакцией аминирования. Предпочтительные условия хлорирования включают в себя обработку соединения формулы (IIIA) триазолом, оксихлоридом фосфора и подходящим основанием, таким как EtN, в подходящем растворителе, таком как DCM, при подходящей температуре от 0°C до 70°C, предпочтительно в DCM при 70°C в герметизированной пробирке. Промежуточные соединения формулы (IIIB) (где LG=Hal) могут быть преобразованы до соединений формулы (III) путем обработки аммиаком в диоксане и/или водным раствором гидроксида аммония в подходящем растворителе при подходящей температуре, такой как 120°C, в течение соответствующего времени, такого как 1-18 часов, в герметизированной пробирке в присутствии или в отсутствие микроволнового излучения. Стадии реакций, отраженные на Схеме 3, могут проводиться либо по отдельности, либо могут быть объединены в один процесс получения.
В соответствии с четвертым способом, соединения формулы (I) могут быть получены из соединений формул (IA), (IB) и (IX), как представлено на Схеме 4, где Hal представляет собой хлор, бром или йод.
Схема 4
2
2
3
4
2
3
На Схеме 4, соединения формулы (I) могут быть получены из соединений формулы (IB) и представленного 2-трифторметил-пиримидинилбороната с использованием подходящей реакции металлорганического кросс-сочетания, такой как реакция кросс-сочетания по Судзуки. Обычные условия кросс-сочетания по Судзуки включают в себя палладиевый катализатор, содержащий подходящие фосфиновые лиганды, в присутствии неорганического основания, в водном диоксане, при повышенных значениях температуры, полученных термически или в условиях обработки микроволновым излучением. Предпочтительные условия включают в себя Pd(OAc), Pd(dppf)Cl или Pd(PPh) с карбонатом натрия, цезия или калия в водном диоксане или метаноле при температуре от комнатной до 120°C. Соединения формулы (IB) могут быть получены путем подходящей реакции алкилирования с использованием соединений формулы (IA) и (IX) в присутствии подходящего основания, такого как CsCO, в подходящем растворителе, таком как DMF, при подходящей температуре от комнатной температуры до 100°C. Соединения формулы (IA) могут быть получены из коммерческих источников или по аналогии со способами, описанными в настоящем документе.
В соответствии с пятым способом, соединения формулы (IIA') могут быть получены из соединений формул (IIG), (IIF), (IID''), (IID'), (IIE'), (V) и (XII), как представлено на Схеме 5, где Hal представляет собой хлор, бром или йод.
Схема 5
3
1a
На Схеме 5, соединения формулы (IIA') могут быть получены из соединений формул (IID'), (IIE') и (V) с использованием подходящей реакции галогенирования и реакции металлорганического кросс-сочетания, такой как реакция кросс-сочетания по Судзуки, которой при необходимости предшествует формирование бороновой кислоты или эфира по аналогии с тем, что описано на Схеме 2. Соединения формулы (IID') могут быть получены из соединений формулы (IID'') с использованием подходящего реагента, такого как EtSiH, в присутствии TFA в подходящем растворителе, таком как DCM, при подходящей температуре, такой как от 0°C до комнатной температуры, в течение соответствующего времени, равного 1-18 часам. В качестве альтернативы, соединения формулы (IID'') могут быть получены из соединений формулы (IIF) и подходящего альдегида (XII) (где R=H). Соединения формулы (IID'') могут быть получены из соединения формулы (XI) и альдегида (XII) с использованием подходящей реакции алкилирования. Соединения формулы (IIF) могут претерпевать подходящую реакцию обмена галоген-металл с использованием подходящего металлоорганического реагента, такого как реактив Гриньяра, такой как комплекс изопропилмагнийхлорида и хлорида лития, в подходящем растворителе, таком как THF, при подходящей температуре от -30°C до комнатной температуры с последующим добавлением подходящего карбонильного соединения формулы (XII). Соединения формулы (IIF) могут быть получены из соединений формулы (IIG) и избытка диметилформамида диметилацеталя при подходящей температуре, такой как 90°C, в течение подходящего времени, такого как 2-18 часов. Соединения формулы (IIG) могут быть получены из коммерческих источников или по аналогии со способами, описанными в настоящем документе.
В соответствии с шестым способом, соединения формулы (IXA) и (XII) могут быть получены из соединений формул (XIII) и (XIV), как представлено на Схеме 6.
Схема 6
2
На Схеме 6, соединения формулы (XIV) могут быть получены из соединений формул (XIII) с использованием подходящего нуклеофил-углеродного соединения формулы (XV), такого как подходящий реактив Гриньяра (где M представляет собой Mg, L представляет собой Hal), в подходящем растворителе, таком как THF, при подходящей температуре, такой как от 0°C до комнатной температуры. Соединения формулы (XII) могут быть получены из соединений формулы (XIV) путем окисления с использованием подходящего реагента, такого как MnO, в подходящем растворителе, таком как DCM, при подходящей температуре, такой как от комнатной температуры до температуры возгонки. Соединения формулы (IXA) могут быть получены из соединений формулы (XIV) с использованием подходящего галогенирующего агента, такого как тионилхлорид (Hal=Cl), в подходящем растворителе, таком как DCM при подходящей температуре, такой как комнатная температура. Соединения формулы (XIII) могут быть получены из коммерческих источников или по аналогии со способами, описанными в настоящем документе.
1b
В соответствии с седьмым способом, соединения формулы (IIA'') (соединение формулы (II), где R=OH) могут быть получены из соединений формул (IID''), (IIE'') и (V), как представлено на Схеме 7, где Hal представляет собой хлор, бром или йод.
Схема 7
На Схеме 7, соединения формулы (IIA'') могут быть получены из соединений формул (IID''), (IIE'') и (V) с использованием подходящей реакции галогенирования и реакции металлорганического кросс-сочетания, такой как реакция кросс-сочетания по Судзуки, которой при необходимости предшествует формирование бороновой кислоты или эфира по аналогии со способами на Схеме 2.
В соответствии с восьмым способом, соединения формулы (IIIA') могут быть получены из соединений формул (XVI), (XVII), (XVIII), (XIX), (XX), (XXI) и (XXII), как представлено на Схеме 8, где Hal представляет собой хлор, бром или йод, и Rx представляет собой подходящую алкильную группу, такую как метил или этил.
Схема 8
t
На Схеме 8, соединения формулы (IIIA') могут быть получены путем нагревания соединений формулы (XXII), формамида и формамидана ацетата в герметизированной пробирке при подходящей температуре, такой как 130°C, в условиях обработки микроволновым излучением в течение подходящего времени, такого как 2 часа. Специалисту в данной области техники следует понимать, что существуют альтернативные подходящие способы добиться формирования гетероцикла. Соединения формулы (XXII) могут быть получены из соединений формулы (XXI) и O (дифенилфосфинил)-гидроксиламина в присутствии подходящего основания, такого как LiHMDS, в подходящем растворителе, таком как DMF, при подходящей температуре, такой как от 0°C до комнатной температуры, в течение подходящего времени, такого как 18 часов. Соединения формулы (XXI) могут быть получены путем нагревания соединений формулы (XX) и ацетата аммония в уксусной кислоте в герметизированной пробирке в условиях обработки микроволновым излучением при подходящей температуре, такой как 130°C. Соединения формулы (XX) могут быть получены из соединений формулы (XVIII) и (XIX) с использованием стадии формирования амидной связи, опосредованной подходящим сочетанием агента сочетания амидной связи и органического основания. Предпочтительные условия включают в себя HATU с NMM в подходящем растворителе, таком как DMF, при комнатной или повышенной температуре. Соединения формулы (XVIII) могут быть получены из соединений формулы (XVI) и (XVII) в присутствии в присутствии подходящего основания, такого как KOBu, в подходящем растворителе, таком как THF, при подходящей температуре, такой как от -70°C до -50°C, с последующей обработкой конц. HCl. Соединения формул (XVI), (XVII) и (XIX) могут быть получены из коммерческих источников или по аналогии со способами, описанными в настоящем документе.
t
В соответствии с девятым способом, соединения формулы (IID''') могут быть получены из соединений формул (XV), (XXIII), (XXIV), (XXV), (XXVI), (XXVII), (XXVIII) и (XXIX), как представлено на Схеме 9, где PG представляет собой подходящую азот-защитную группу (например, Boc).
Схема 9
3
2
2
t
На Схеме 9, соединения формулы (IID''') могут быть получены из соединений формулы (XXIX) с использованием подходящего реагента, такого как EtSiH, в присутствии TFA в подходящем растворителе, таком как DCM, при подходящей температуре, такой как от 0°C до комнатной температуры, в течение подходящего времени, равного 1-18 часам. Соединения формулы (XXIX) могут быть получены из соединений формулы (XXVIII) с использованием подходящего нуклеофил-углеродного соединения формулы (XV), такого как подходящий реактив Гриньяра (где M представляет собой Mg, L представляет собой Hal), в подходящем растворителе, таком как THF, при подходящей температуре, такой как от 0°C до комнатной температуры. Соединения формулы (XXVIII) могут быть получены из соединений формулы (XXVII) путем окисления с использованием подходящего реагента, такого как MnO, в подходящем растворителе, таком как DCM, при подходящей температуре, такой как от комнатной температуры до температура возгонки. Соединения формулы (XXVII) могут быть получены из соединений формул (XXV) и (XXVI) в присутствии подходящего основания, такого как DIPEA, в подходящем растворителе, таком как толуол и BuOH, при подходящей температуре, такой как комнатная температура. Соединения формулы (XXV) могут быть получены из соединений формулы (XXIV) и этинилмагнийбромида в подходящем апротонном растворителе, таком как THF, при подходящей температуре, такой как от 0°C до комнатной температуры. Соединения формулы (XXIV) могут быть получены из соединений формулы (XXIII) и (Boc)O в присутствии DMAP в подходящем растворителе, таком как DCM, при подходящей температуре, такой как комнатная температура. Соединения формул (XV), (XXIII) и (XXVI) могут быть получены из коммерческих источников или по аналогии со способами, описанными в настоящем документе.
В соответствии с десятым способом, соединения формулы (I') могут быть получены из соединений формул (IA), (XXX), (XXXI), и (IB') и 2-трифторметилпиримидинилбороната, как представлено на Схеме 10, где Hal представляет собой хлор, бром или йод.
Схема 10
2
2
3
4
2
3
t
На Схеме 10, соединения формулы (I') могут быть получены из соединений формулы (IB') и подходящего 2-трифторметил-пиримидинилбороната с использованием подходящей реакции металлорганического кросс-сочетания, такой как реакция кросс-сочетания по Судзуки. Обычные условия кросс-сочетания по Судзуки включают в себя палладиевый катализатор, содержащий подходящие фосфиновые лиганды, в присутствии неорганического основания, в водном диоксане, при повышенных значениях температуры, полученных термически или в условиях обработки микроволновым излучением. Предпочтительные условия включают в себя Pd(OAc), Pd(dppf)Cl или Pd(PPh) с карбонатом натрия, цезия или калия в водном диоксане или метаноле при температуре от комнатной до 120°C. Соединения формулы (IB') могут быть получены из соединений формул (XXXI) и (XXVI) в присутствии подходящего основания, такого как DIPEA, в подходящем растворителе, таком как толуол и BuOH, при подходящей температуре, такой как комнатная температура. Соединения формулы (XXXI) могут быть получены из соединений формул (XXX) и (IA) в присутствии подходящего основания, такого как CsCO, в подходящем растворителе, таком как DMF, при подходящей температуре, такой как комнатная температура. Соединения формул (IA) и (XXVI) могут быть получены из коммерческих источников или по аналогии со способами, описанными в настоящем документе.
1a
1b
1a
1b
1
3
В случае соединений, описанных во всех из предшествующих общих схемах метода, в которых R и R являются различными группами (например, где R представляет собой (C C)алкил, и R представляет собой H), приводя к присутствию хирального центра, специалисту хорошо понятно, что с использованием подходящего способа разделения, такого как SFC, отдельные энантиомеры могут быть разделены с получением (+) и (-)-энантиомеров указанных соединений. Специалисту хорошо понятно, что отдельный энантиомер соединения, описанного в предшествующих общих схемах метода, получают и выделяют, как описано выше, или выделяют с использованием альтернативной методики разделения, такой как HPLC, с использованием подходящей хиральной неподвижной фазы, элюируя подходящей подвижной фазой, определенной как необходимая для выделения требуемых энантиомеров.
Последующие неограничивающие Подготовительные примеры и Примеры иллюстрируют получение соединений и солей согласно настоящему изобретению. В последующих Примерах и Подготовительных, представленных ниже, и в упомянутых выше Схемах, могут приводиться следующие сокращения, определения и аналитические методики. Также используются другие сокращения, общеизвестные в данной области техники. Используется стандартная номенклатура IUPAC.
трет-
трет-
трет-
трет-
н
втор
трет-
трет-
трет-
2
4
3
2
3
2
3
3
2
2
2
2
3
4
3
4
4
2
4
2
4
2
3
3
4
2
4
2
2
3
3
4
4
3
2
2
2
2
4
4
2
3
2
2
2
3
3
4
2
2
4
2
.
.
,4
Могут быть использованы следующие сокращения: AcOH представляет собой уксусную кислоту; Ar представляет собой аргон; водн. представляет собой водный; Bn представляет собой бензил; Boc представляет собой бутоксикарбонил; BocO представляет собой ди-бутилдикарбонат; ушир. представляет собой уширенный; tBu представляет собой бутил; tBuOH представляет собой бутанол; n-BuLi представляет собой  бутиллитий; BuNCl представляет собой хлорид тетрабутиламмония; °C представляет собой градусы Цельсия; CDCl представляет собой дейтерохлороформ; CsCO представляет собой карбонат цезия; CsF представляет собой фторид цезия; CuCN представляет собой цианид меди (I); CuI представляет собой йодид меди (I); δ представляет собой химический сдвиг; д представляет собой дублет; DCM представляет собой дихлорметан или метиленхлорид; DIAD представляет собой диизопропилазодикарбоксилат; DIPEA представляет собой N-этилдиизопропиламин или N,N-диизопропилэтиламин; DMA представляет собой N,N-диметилацетамид; DMAP представляет собой 4-диметиламинопиридин; DMF представляет собой N,N-диметилформамид; DMF-DMA представляет собой N,N-диметилформамида диметилацеталь; DMSO представляет собой диметилсульфоксид; DPPA представляет собой дифенилфосфорилазид; Dppf представляет собой 1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен; EDA представляет собой этилендиамин; EtO представляет собой диэтиловый спирт; EtOAc представляет собой этилацетат; EtOH представляет собой этанол; EtN представляет собой триэтиламин; EtSiH представляет собой триэтилсилан; г представляет собой грамм; HATU представляет собой 1-[бис(диметиламино)метилен]-1H-1,2,3-триазоло[4,5-b]пиридиний-3-оксидгексафторфосфат; HCl представляет собой соляную кислоту; HCOH представляет собой муравьиную кислоту; HPLC представляет собой жидкостную хроматографию высокого давления; H представляет собой водород; HO представляет собой воду; ч представляет собой час или часы; KCO представляет собой карбонат калия; KHSO представляет собой гидросульфат калия; KOAc представляет собой ацетат калия; KPO представляет собой фосфат калия; л представляет собой литр; LCMS представляет собой жидкостную хроматографию/масс-спектрометрию; LDA представляет собой диизопропиламид лития; LiAlH или LAH представляет собой алюмогидрид лития; LiCl представляет собой хлорид лития; LiHMDS представляет собой бис(триметилсилил)амид лития; LiOHHO представляет собой моногидрат гидроксида лития; Li-Selectride представляет собой три--бутилборгидрид лития; м представляет собой мультиплет; M представляет собой молярную концентрацию; MeCN представляет собой ацетонитрил; MeMgBr представляет собой метилмагнийбромид; MeOH представляет собой метанол; 2-MeTHF представляет собой 2-метилтетрагидрофуран; мг представляет собой миллиграмм; MgSO представляет собой сульфат магния; МГц представляет собой мегагерц; мин представляет собой минуту; мл представляет собой миллилитр; ммоль представляет собой миллимоль; MnO представляет собой диоксид марганца; моль представляет собой моль; MS m/z представляет собой пик масс-спектра; MTBE представляет собой бутилметиловый эфир; MsCl представляет собой мезилхлорид; NaCN представляет собой цианид натрия; NaBH представляет собой боргидрид натрия; NaCO представляет собой карбонат натрия; NaH представляет собой гидрид натрия; NaHCO представляет собой гидрокарбонат натрия; NaHSO представляет собой гидросульфат натрия; NaHMDS представляет собой бис(триметилсилил)амид натрия; NaOH представляет собой гидроксид натрия; NaOAc представляет собой ацетат натрия; NaOMe представляет собой метоксид натрия; NaSO представляет собой сульфат натрия; NaSO представляет собой тиосульфат натрия; NBS представляет собой N-бромсукцинимид; NCS представляет собой N-хлорсукцинимид; NH представляет собой аммиак; NHCl представляет собой хлорид аммония; NHHCO представляет собой гидрокарбонат аммония; NHNHHO представляет собой гидразингидрат; NHOHHCl представляет собой гидрохлорид гидроксиламина; NHOH представляет собой гидроксид аммония; NHOAc представляет собой ацетат аммония; NiI представляет собой йодид никеля; NIS представляет собой N-йодсукцинимид; нМ представляет собой наномолярную концентрацию; NMP представляет собой 1-метил-2-пирролидинон; NMR представляет собой ядерный магнитный резонанс; Pd/C представляет собой палладий на угле; Pd(dba) представляет собой трис(дибензилиденацетон)дипалладий; Pd(dppf)Cl представляет собой [1,1'-бис(дифенилфосфино)-ферроцен]дихлорпалладий (II); Pd(OH) представляет собой гидроксид палладия; Pd(OAc) представляет собой ацетат палладия; PPh представляет собой трифенилфосфин; Pd(PPh) представляет собой тетракис(трифенилфосфин)палладий (0); петрол. эфир представляет собой петролейный эфир; pH представляет собой водородный показатель; м.д. представляет собой миллионные доли; PtO представляет собой оксид платины (IV); кв представляет собой квартет; к.т. представляет собой комнатную температуру; RT представляет собой время удерживания; с представляет собой синглет; SCX представляет собой сильный катионный обмен; SEM Cl представляет собой 2-(триметилсилил)этоксиметилхлорид; SFC представляет собой сверхкритическую жидкостную хроматографию; SM представляет собой исходное вещество; S-Phos представляет собой 2-дициклогексилфосфино-2',6'-диметоксидифенил; SOCl представляет собой тионилхлорид; т представляет собой триплет; T3P представляет собой пропилфосфоновый ангидрид; TBAF представляет собой фторидбутиламмония; TBD представляет собой 1,5,7-триазабицикло[4.4.0]дец-5-ен; TBME представляет собой бутилдиметиловый эфир; TFA представляет собой трифторуксусную кислоту; TFP представляет собой три(2-фурил)фосфин; THF представляет собой тетрагидрофуран; Ti(OiPr) представляет собой изопропоксид титана (IV); TPTU представляет собой тетрафторборат 2-(2-пиридон-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония; мкл представляет собой микролитр; мкмоль представляет собой микромоль; XPhos представляет собой 2-дициклогексилфосфино-2',4',6'-триизопропилбифенил; и Zn(CN) представляет собой цианид цинка.
1
19
1
19
3
6
4
Спектры H и F ядерного магнитного резонанса (ЯМР) во всех случаях соответствовали предложенным структурам. Характеристические химические сдвиги (δ) приводили в миллионных долях в сторону слабого поля относительно тетраметилсилана (для H-ЯМР) и в сторону сильного поля относительно трихлорфторметана (для F-ЯМР) с использованием традиционных сокращений для обозначения основных пиков: например,с - синглет; д - дублет; т - триплет; кв - квартет; м - мультиплет; ушир. - уширенный. Для общеизвестных растворителей использовали следующие сокращения: CDCl - дейтерохлороформ; DMSO-d - дейтеродиметилсульфоксид; и MeOH-d - дейтерометанол. В соответствующих случаях, таутомеры могут регистрироваться в рамках данных ЯМР; и некоторые способные к обмену протоны могут не быть видимыми.
Масс-спектры, MS (m/z), регистрировали с использованием либо ионизации электрораспылением (ESI), либо химической ионизации при атмосферном давлении (APCI).
19
35
79
127
В соответствующих случаях, если не указано иное, то данные m/z представлены для изотопов F, Cl, Br и I.
В случае использования препаративной TLC или хроматографии на силикагеле, специалист в данной области техники может использовать любое сочетание подходящих растворителей для очистки целевого соединения.
Далее представлены способы аналитической и препаративной хроматографии, использованные для анализа и очистки промежуточных продуктов и соединений согласно настоящему изобретению.
Способы препаративной SFC
Способ F1 SFC: Колонка: CHIRALPAK ID, 5,0 см внутр. диам. × 25 см длина; Изократическая подвижная фаза: гексан/EtOAc/DEA, 60/40/0,1 (об./об./об.); Скорость потока: 60 мл/мин; Температура: 35°C.
Способы аналитической SFC
Способ F2 SFC: Колонка: CHIRALPAK ID, 0,46 см внутр. диам. × 15 см длина; Подвижная фаза: гексан/EtOAc/DEA, 60/40/0,1 (об./об./об.); Скорость потока: 1,0 мл/мин; Длина волны: УФ 214 нм; Температура: 35°C.
Способы препаративной HPLC
Способ B2 HPLC: Колонка: CHIRALCEL OJ-H 2,5 см внутр. диам. × 25 см длина; Изократическая подвижная фаза: MeOH/DEA, 100/0,1 (об./об.); Скорость потока: 30 мл/мин; Температура: 35°C.
Способ C20A HPLC: Колонка: CHIRALPAK IC, 2,5 см внутр. диам. × 25 см длина; Изократическая подвижная фаза: DCM/MeOH, 95/5 (об./об.); Скорость потока: 30 мл/мин; Температура: 35°C.
Способ C20B HPLC: Колонка: CHIRALPAK IC, 5,0 см внутр. диам. × 25 см длина; Изократическая подвижная фаза: DCM/MeOH, 95/5 (об./об.); Скорость потока: 60 мл/мин; Температура: 35°C.
Способ C22A HPLC: Колонка: CHIRALPAK IC, 2,5 см внутр. диам. × 25 см длина; Изократическая подвижная фаза: DCM/MeOH/DEA, 95/5/0,1 (об./об./об.); Скорость потока: 30 мл/мин; Температура: 35°C.
Способ C22B HPLC: Колонка: CHIRALPAK IC, 5,0 см внутр. диам. × 25 см длина; Изократическая подвижная фаза: DCM/MeOH/DEA, 95/5/0,1 (об./об./об.); Скорость потока: 30 мл/мин; Температура: 35°C.
Способ C23A HPLC: Колонка: CHIRALPAK IC, 5,0 см внутр. диам. × 25 см длина; Изократическая подвижная фаза: DCM/EtOH, 90/10 (об./об.); Скорость потока:60 мл/мин; Температура: 35°C.
Способ C23B HPLC: Колонка: CHIRALPAK IC, 2,5 см внутр. диам. × 25 см длина; Изократическая подвижная фаза: DCM/EtOH, 90/10 (об./об.); Скорость потока: 60 мл/мин; Температура: 35°C.
Способ C24A HPLC: Колонка: CHIRALPAK IC, 5,0 см внутр. диам. × 25 см длина; Изократическая подвижная фаза: DCM/EtOH, 95/5 (об./об.); Скорость потока: 60 мл/мин; Температура: 35°C.
Способ C24B HPLC: Колонка: CHIRALPAK IC, 2,5 см внутр. диам. × 25 см длина; Изократическая подвижная фаза: DCM/EtOH, 95/5 (об./об.); Скорость потока: 60 мл/мин; Температура: 35°C.
Способ C27 HPLC: Колонка: CHIRALPAK IC, 5,0 см внутр. диам. × 25 см длина; Изократическая подвижная фаза: гексан/EtOAc/DEA, 60/40/0,1 (об./об./об.); Скорость потока: 60 мл/мин; Температура: 35°C.
Способ C28 HPLC: Колонка: CHIRALPAK IC, 2,5 см внутр. диам. × 25 см длина; Изократическая подвижная фаза: гексан/EtOH, 85/15 (об./об.); Скорость потока: 30 мл/мин.
Способ D4 HPLC: Колонка: CHIRALPAK AD-H, 25 см внутр. диам. × 250 см длина; Изократическая подвижная фаза: EtOH/MeCN, 80/20 (об./об.); Скорость потока: 20 мл/мин; Температура: 35°C.
Способ D5 HPLC: Колонка: CHIRALPAK AD-H, 2,5 см внутр. диам. × 25 см длина; Изократическая подвижная фаза: гексан/EtOH, 70/30 (об./об.); Скорость потока: 30 мл/мин; Температура: 35°C.
Способ D6 HPLC: Колонка: CHIRALPAK AD-H, 2,5 см внутр. диам. × 25 см длина; Изократическая подвижная фаза: MeOH/MeCN, 90/10 (об./об.); Скорость потока: 30 мл/мин.
Способ D7 HPLC: Колонка: CHIRALPAK AD-H, 5,0 см внутр. диам. × 25 см длина; Изократическая подвижная фаза: гексан/IPA, 70/30 (об./об.); Скорость потока: 60 мл/мин.
Способ E3 HPLC: Колонка: CHIRALPAK IE, 2,5 см внутр. диам. × 25 см длина; Изократическая подвижная фаза: гексан/EtOH, 70/30, (об./об.); Скорость потока: 60 мл/мин; Температура: 35°C.
Способ E4 HPLC: Колонка: CHIRALPAK IE, 5,0 см внутр. диам. × 25 см длина; Изократическая подвижная фаза: DCM/EtOH, 95/5 (об./об.); Скорость потока: 55 мл/мин; Температура: 35°C.
Способ E5 HPLC: Колонка: CHIRALPAK IE 5,0 см внутр. диам. × 25 см длина; Изократическая подвижная фаза: гексан/EtOH, 80/20 (об./об.); Скорость потока: 60 мл/мин; Температура: 35°C.
Способ G1 HPLC: Колонка: Waters Sunfire C18 (19×100 мм, 5 мкм); Подвижная фаза: MeCN (0,05%TFA)-вода (0,05%TFA); Градиент: 20%-60% MeCN в течение 8,5 мин, 60%-100% MeCN в течение 0,5 мин, выдерживание при 100% MeCN в течение 1 мин; Скорость потока: 25 мл/мин.
Способы аналитической HPLC
Способ A HPLC: Колонка: Acquity BEH C18 50×2,1 мм, 1,7 мкм; Подвижная фаза: MeCN (0,05%TFA)-вода (0,05%TFA); Градиент: 5%-95% MeCN в течение 2 мин, выдерживание при 95% MeCN в течение 0,5 мин; обратное уравновешивание до 5% MeCN к 2,7 мин; Скорость потока: 0,8 мл/мин; Температура: 45°C.
Способ B1 HPLC: Колонка: CHIRALCEL OJ-H, 0,46 см внутр. диам. × 15 см длина; Введение: 20,0 мкл; Подвижная фаза: MeOH/MeCN, 90/10 (об./об.); Скорость потока: 1,0 мл/мин; Длина волны: УФ 254 нм; Температура: 35°C.
Способ C1 HPLC: Колонка: CHIRALPAK IC, 0,46 см внутр. диам. × 25 см длина; Подвижная фаза: DCM/EtOH, 95/5 (об./об.); Скорость потока: 1,0 мл/мин; Длина волны: УФ 214 нм; Температура: 25°C.
Способ C2 HPLC: Колонка: CHIRALPAK IC, 0,46 см внутр. диам. × 15 см длина; Подвижная фаза: DCM/EtOH, 95/5 (об./об.); Скорость потока: 1,0 мл/мин; Длина волны: УФ 214 нм; Температура: 25°C.
Способ C4 HPLC: Колонка: CHIRALPAK IC, 0,46 см внутр. диам. × 25 см длина; Подвижная фаза: DCM/MeOH, 95/5 (об./об.); Скорость потока: 1,0 мл/мин; Температура: 25°C.
Способ C5 HPLC: Колонка: CHIRALPAK IC, 0,46 см внутр. диам. × 15 см длина, 5 мкм; Подвижная фаза: DCM/MeOH, 95/5(об./об.); Скорость потока: 1,0 мл/мин; Длина волны: УФ 254 нм; Температура: 35°C.
Способ C10 HPLC: Колонка: CHIRALPAK IC, 0,46 см внутр. диам. × 15 см длина; Подвижная фаза: DCM/EtOH/DEA, 90/10/0,1 (об./об.); Скорость потока: 1,0 мл/мин; Длина волны: УФ 254 нм; Температура: 25°C.
Способ C12 HPLC: Колонка: CHIRALPAK IC, 0,46 см внутр. диам. × 15 см длина; Подвижная фаза: гексан/EtOH, 85/15 (об./об.); Скорость потока: 1,0 мл/мин; Длина волны: УФ 214 нм; Температура: 35°C.
Способ C13 HPLC: Колонка: CHIRALPAK IC, 0,46 см внутр. диам. × 15 см длина; Подвижная фаза: гексан/EtOAc/DEA, 60/40/0,1 (об./об./об.); Скорость потока: 1,0 мл/мин; Длина волны: УФ 214 нм; Температура: 35°C.
Способ C14 HPLC: Колонка: CHIRALPAK IC, 0,46 см внутр. диам. × 15 см длина; Подвижная фаза: гексан/EtOH, 80/20 (об./об.); Скорость потока: 1,0 мл/мин; Длина волны: УФ 214 нм; Температура: 35°C.
Способ D1: Колонка: CHIRALPAK AD-H, 0,46 см внутр. диам. × 15 см длина; Подвижная фаза: EtOH/MeCN, 80/20 (об./об.); Скорость потока: 1,0 мл/мин; Длина волны: УФ 214 нм; Температура: 35°C.
Способ D2: Колонка: CHIRALPAK AD-H, 0,46 см внутр. диам. × 15 см длина; Подвижная фаза: гексан/EtOH, 70/30 (об./об.); Скорость потока: 1,0 мл/мин; Длина волны: УФ 214 нм; Температура: 35°C.
Способ E1: Колонка: CHIRALPAK IE, 0,46 см внутр. диам. × 15 см длина; Подвижная фаза: гексан/EtOH, 70/30 (об./об.); Скорость потока: 1,0 мл/мин; Длина волны: УФ 214 нм; Температура: 25°C.
Способ G2 HPLC: Колонка: Waters Atlantis dC18 (4,6×50 мм, 5 мкм); Подвижная фаза: MeCN (0,05% TFA)-вода (0,05% TFA); Градиент: 5%-95% MeCN в течение 4 мин, выдерживание при 95% MeCN в течение 1 мин; Скорость потока: 2 мл/мин.
Получение промежуточных продуктов
Подготовительный пример 1: 5-Бром-7-{[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]метил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амин
1
+
3
m/z
К раствору 7-{[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]метил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина (Подготовительный пример 45, 1,2 г, 3,88 ммоль) в DCM (35 мл) при 0°C порциями добавляли NBS (0,76 г, 4,27 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 0°C в течение 1 ч. Смесь вливали в воду, полученное белое твердое вещество отфильтровывали и сушили в условиях вакуума с получением указанного в заголовке продукта в виде белого твердого вещества (1,3 г, 86%). H-ЯМР (400 МГц, CDCl): 4,47 (с, 2H), 6,19 (ушир. с, 2H), 6,64 (с, 1H), 7,27-7,33 (м, 2H), 7,43 (м, 1H), 7,92-7,98 (м, 3H). LCMS =388,0 [MH].
Подготовительный пример2: 5-Бром-7-{1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]этил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амин
2
2
3
2
4
2
6
1
+
m/z
К перемешанному раствору 7-{1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]этил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина (Подготовительный пример 17, 220 мг, 0,68 ммоль) в DMF (2 мл) и DCM (10 мл) при 0°C порциями добавляли NBS (115 мг, 0,64 ммоль), и перемешивали полученную реакционную смесь при 0°C в течение 20 мин. Смесь гасили добавлением 5% водного раствора NaSO (10 мл), слои разделяли, и экстрагировали водный слой DCM (10 мл × 2). Объединенные органические экстракты сушили (NaSO), фильтровали, и концентрировали фильтрат в условиях вакуума. Остаток очищали методом препаративной HPLC элюируя MeCN:HO (0,1% TFA) (40:60 → 50:50) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (260 мг, 98%). H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 1,69 (д, 3H), 4,88 (кв, 1H), 6,68 (с, 1H), 6,70-6,80 (ушир. с, 1H), 7,40 (м, 1H), 7,52-7,62 (м, 2H), 7,78 (м, 1H), 7,95 (с, 1H), 7,98-8,15 (ушир. с, 1H), 8,41 (с, 1H). LCMS =402,1, 404,1 [MH].
Подготовительный пример3: 5-Бром-7-{1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амин
1
+
6
m/z
Указанное в заголовке соединение получали в виде белого твердого вещества (310 мг, 52%) из 7-{1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина (Подготовительный пример 20), следуя методике, аналогичной описанной в Подготовительном примере 2. H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 0,87 (т, 3H), 2,10 (м, 2H), 4,72 (м, 1H), 6,81 (ушир. с, 1H), 7,31 (м, 1H), 7,64 (м, 1H), 7,85-7,95 (м, 2H), 8,46 (с, 1H). LCMS =434,1, 436,1 [MH].
Подготовительные примеры 4-16
2
2
3
2
4
К охлажденному на льду раствору соответствующего исходного вещества (1 экв.) в DCM порциями добавляли NBS (0,9-1,0 экв.), и перемешивали полученную реакционную смесь при 0°C в течение 15-60 минут до тех пор, пока все исходное вещество не было израсходовано. Смесь гасили добавлением 5% раствора NaSO и экстрагировали DCM (3×). Объединенные органические экстракты сушили (NaSO), фильтровали, и упаривали экстракт в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии, элюируя смесью EtOAc:петрол. эфир или DCM:MeOH с подходящим градиентом с получением целевого соединения.
a
b
DMF использовали в качестве реакционного растворителя вместо DCM, THF использовали в качестве реакционного растворителя.
Подготовительный пример 17: 7-{1-[1-(2-Фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]этил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амин
3
3
2
4
6
1
+
m/z
Смесь 1-(4-аминопирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-7-ил)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]этанола (Подготовительный пример 31, 400 мг, 1,2 ммоль) в EtSiH (2 мл) и TFA (6 мл) перемешивали при к.т. в течение 16 ч. Смесь концентрировали в условиях вакуума, добавляли водн. раствор NaHCO (25 мл) и экстрагировали смесь EtOAc (20 мл × 3). Объединенные органические экстракты сушили (NaSO), фильтровали, и концентрировали фильтрат в условиях вакуума. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью EtOAc:петрол. эфир (0:100 → 70:30) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (220 мг, 57%). H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 1,72 (д, 3H), 4,88 (кв, 1H), 6,58 (д, 1H), 7,05 (с, 1H), 7,40 (м, 1H), 7,54-7,58 (м, 2H), 7,75 (м, 1H), 7,97 (с, 1H), 8,10-8,25 (ушир. с, 2H), 8,37 (с, 1H). LCMS =324,1 [MH].
Подготовительный пример 18: 7-{1-[1-(2,4-Дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]этил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амин
3
m/z
+
К раствору 1-(4-аминопирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-7-ил)-1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]этанола (Подготовительный пример 32, 1,5 г, 4,2 ммоль) в DCM (10 мл) при 0°C медленно добавляли EtSiH (5 мл) и TFA (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 16 ч, а потом концентрировали в условиях вакуума. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью петрол. эфир:EtOAc (34:66) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (1,2 г, 84%). LCMS =342,1 [MH]; RT [Способ A HPLC]=1,445 мин.
Подготовительный пример 19: 7-{1-[1-(2-Фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амин
трет-
m/z
3
3
2
4
+
К раствору бутил-(7-{1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]-1-гидроксипропил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)карбамата (Подготовительный пример 44, 1,3 г, 2,87 ммоль) в DCM (5 мл) при 0°C медленно добавляли TFA (3 мл). Медленно добавляли EtSiH (3 мл), реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч, а затем концентрировали в условиях вакуума. Остаток растворяли в DCM (15 мл), и корректировали до pH 8 добавлением водн. раствора NaHCO. Органическую фазу сушили (NaSO), растворители удаляли в условиях пониженного давления, и очищали неочищенный продукт методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя DCM:MeOH (91:9) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (0,6 г, 80%). LCMS =338,1, 339,1 [MH]; RT [Способ A HPLC]=1,364 мин.
Подготовительные примеры 20-29
Следующие соединения получали из соответствующего исходного спирта, следуя методике, аналогичной описанной в Подготовительном примере 19.
a
EtOAc/петрол. эфир использовали в качестве элюента колонок.
Подготовительный пример 30: 7-{1-[1-(2-Фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]этил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амин
3
3
2
4
2
2

+
m/z
Смесь 1-(4-аминопирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-7-ил)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]этанола (Подготовительный пример 38, 6,5 г, 19,2 ммоль) в EtSiH (15 мл) и TFA (45 мл) перемешивали при к.т. в течение 14 ч. Растворитель удаляли в условиях пониженного давления, добавляли водн. раствор NaHCO (100 мл), и экстрагировали смесь EtOAc (50 мл ×3). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (50 мл), сушили (NaSO), фильтровали, и концентрировали фильтрат в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью EtOAc:петрол. эфир (0:100 → 60:40) с получением указанного в заголовке соединения в виде масла с примесью 7-(1-(1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил)винил)-пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина. Масло растворяли в MeOH (20 мл), добавляли Pd/C (500 мг), смесь дегазировали в атмосфере N, а затем продували H. Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч, затем фильтровали через Celite, промывая MeOH. Объединенные фильтраты упаривали в условиях пониженного давления с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества (5 г, 83%). LCMS =323,1 [MH].
Подготовительный пример31: 1-(4-Аминопирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-7-ил)-1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]этанол
2
4
2
2
4
6
1
+
m/z
К перемешанному раствору N'-(7-бромпирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)-N,N-диметилимидоформамида (Подготовительный пример 50, 1 г, 3,73 ммоль) в THF (30 мл) при -30°C в атмосфере N добавляли iPrMgCl (комплекс с LiCl) (1,3 M в THF) (11,5 мл, 14,9 ммоль), и перемешивали смесь при к.т. в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждали на льду, добавляли охлажденный на льду раствор 1-(1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил)этанона (918 мг, 4,5 ммоль) в THF (20 мл), и перемешивали реакционную смесь при к.т. в течение 2 ч. Смесь гасили добавлением водн. NHCl (10 мл), и удаляли растворитель в условиях пониженного давления. Остаток распределяли между HO (50 мл) и EtOAc (40 мл), слои разделяли, и экстрагировали водную фазу EtOAc (40 мл × 2). Объединенные органические экстракты сушили (NaSO), фильтровали, и концентрировали фильтрат в условиях вакуума. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью EtOAc:петрол. эфир (0:100 → 90:10) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (400 мг, 31%). H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 2,05 (с, 3H), 6,09 (с, 1H), 6,64 (д, 1H), 6,85 (д, 1H), 7,40 (м, 1H), 7,50-7,70 (м, 5H), 7,78 (м, 1H), 8,31 (с, 1H). LCMS =340,1 [MH]; RT [Способ A HPLC]=1,224 мин.
Подготовительные примеры 32-44
Следующие соединения получали из N'-(7-бромпирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)-N,N-диметилимидоформамида (Подготовительный пример 50) и соответствующего кетона или альдегида, следуя способу, аналогичному описанному в Подготовительном примере 31.
трет-
Подготовительный пример 44: Бутил-(7-{1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]-1-гидроксипропил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)карбамат
трет-
m/z
4
+
К раствору бутил-(7-{[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]карбонил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)карбамата (Подготовительный пример 46, 1,5 г, 3,53 ммоль) в THF (30 мл) при 0°C добавляли этилмагнийбромид (8,84 ммоль, 8,84 мл), и после завершения добавления перемешивали реакционную смесь при 0°C в течение 30 мин. Медленно добавляли раствор NHCl, и экстрагировали смесь EtOAc (100 мл × 2). Объединенные органические экстракты концентрировали в условиях вакуума с получением указанного в заголовке соединения, которое использовали без дополнительной очистки (1,7 г, колич.). LCMS =454,1 [MH]; RT [Способ A HPLC]=1,712 мин.
Подготовительный пример 45: 7-{[1-(2-Фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]метил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амин
трет-
m/z
3
3
2
4
4
1
+
К охлажденному на льду раствору бутил-(7-{[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]карбонил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)карбамата(Подготовительный пример 46, 5,01 г, 11,79 ммоль) в DCM (40 мл) добавляли EtSiH (10 мл) и TFA (10 мл), и перемешивали реакционную смесь при к.т. в течение 18 ч. Смесь концентрировали в условиях вакуума, остаток суспендировали в EtOAc (100 мл), промывали насыщенным раствором NaHCO и солевым раствором (2 × 100 мл), сушили (NaSO) и концентрировали в условиях вакуума. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя MeOH:DCM (5:95 → 9:91) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (1,2 г, 25%). H-ЯМР (400 МГц, MeOD-d): 4,55 (с, 2H), 6,81 (м, 1H), 7,38-7,44 (м, 3H), 7,60 (м, 1H), 7,85 (м, 1H), 8,04 (с, 1H), 8,31 (с, 1H). LCMS =310,1 [MH].
трет-
Подготовительный пример46: Бутил-(7-{[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]карбонил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)карбамат
трет-
m/z
2
+
К раствору бутил-(7-{[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил](гидроксил)метил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)карбамата (Подготовительный пример 47, 4,0 г, 9,4 ммоль) в DCM (50 мл) добавляли MnO (4,09 г, 47 ммоль), и нагревали смесь с обратным холодильником в течение 32 ч. Охлажденную смесь фильтровали, фильтрат промывали DCM (100 мл × 3) и концентрировали в условиях вакуума. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью петрол. эфир:EtOAc (50:50) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (1,5 г, 37%). LCMS =426,1 [MH]; RT [Способ A HPLC]=1,684 мин.
трет-
Подготовительный пример 47: Бутил-(7-{[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил](гидроксил)метил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)карбамат
трет-
m/z
2
+
К раствору бутил-[7-(1-гидроксипроп-2-ин-1-ил)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил]карбамата (Подготовительный пример 48, 2,4 г, 8,33 ммоль) в толуоле (30 мл) и t-BuOH (15 мл) добавляли 1-азидо-2-фторбензол (2,28 г, 16,67 ммоль), CuI (1,5 г, 8,33 ммоль) и DIPEA (3,22 г, 24,99 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при к.т. в атмосфере N в течение 16 ч. Смесь концентрировали в условиях вакуума, и очищали неочищенный продукт методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя DCM:MeOH (97:3) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (2,6 г, 73,4%). LCMS =426,1 [MH]; RT [Способ A HPLC]=1,604 мин.
трет-
Подготовительный пример 48: Бутил-[7-(1-гидроксипроп-2-ин-1-ил)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил]карбамат
трет-
m/z
4
2
4
3
+
К охлажденному на льду раствору бутил-(7-формил-пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)карбамата (Подготовительный пример 49, 2,5 г, 9,54 ммоль) в THF (40 мл) медленно добавляли этинилмагнийбромид (42 мл, 0,5M в THF, 21 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при к.т. в течение 2 ч. К реакционной смеси медленно добавляли нас. водн. NHCl, смесь экстрагировали EtOAc (50 мл × 2), объединенные органические экстракты сушили (NaSO) и концентрировали в условиях вакуума. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью петрол. эфир:EtOAc (50:50) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (2,4 г, 87%). LCMS =233,1 [M-(CHO)].
трет-
Подготовительный пример49: Бутил-(7-формилпирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)карбамат
2
2
4
m/z
+
К раствору 4-аминопирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-7-карбальдегида (WO2007064931, 6,0 г, 37 ммоль) в DCM (100 мл) медленно добавляли (Boc)O (12 г, 56 ммоль), а затем DMAP (4,5 г, 37 ммоль), и перемешивали реакционную смесь в течение 30 мин. Реакционную смесь разбавляли водой, смесь экстрагировали DCM (100 мл × 2), объединенные органические экстракты сушили (NaSO) и концентрировали в условиях вакуума. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью петрол. эфир:EtOAc (77:23) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (2,5 г, 25%). LCMS =285,1 [MNa].
Подготовительный пример50: N'-(7-бромпирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-ил)-N,N-диметилимидоформамид
1
+
6
m/z
Смесь 7-бромпирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина (40 г, 0,19 ммоль) и N,N-диметилформамида диметилацеталя (2 л) нагревали до 90°C в течение 2 ч. Охлажденную смесь концентрировали в условиях вакуума. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя DCM:EtOAc (91:9) с получением указанного в заголовке соединения (100 г, 69%). H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 3,19 (с, 3H), 3,25 (с, 3H), 6,90 (м, 2H), 8,16 (с, 1H), 8,95 (с, 1H). LCMS =268,0 [MH]; RT [Способ A HPLC]=0,934 мин.
Подготовительный пример 51: 1-[-(2,4-Дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропан-1-он
2
4
3
1
+
m/z
К раствору пент-1-ин-3-она (1,3 г, 15,84 ммоль) в MeOH/HO (30 мл/5 мл) добавляли 1-азидо-2,4-дифторбензол (2,95 г, 19 ммоль), L-аскорбат натрия (1,57 г, 7,92 ммоль) и CuSO (1,27 г, 7,92 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при к.т. в течение 12 ч. Растворитель удаляли в условиях пониженного давления, и очищали остаток методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью EtOAc:петрол. эфир (0:100 → 20:80) с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества (2,5 г, 67%). H-ЯМР (400 МГц, CDCl): 1,27 (т, 3H), 3,22 (кв, 2H), 7,12 (м, 2H), 7,94 (м, 1H), 8,53 (с, 1H). LCMS =238,1 [MH]; RT [Способ A HPLC]=1,605 мин.
Подготовительный пример 52: 1-[-(2,5-Дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропан-1-он
1
+
3
m/z
Указанное в заголовке соединение получали в виде не совсем белого твердого вещества (1,75 г, 61%) из пент-1-ин-3-она и 2-азидо-1,4-дифторбензола, следуя методике, описанной в Подготовительном примере 51. H-ЯМР (400 МГц, CDCl): 1,25 (т, 3H), 3,21 (кв, 2H), 7,20 (м, 1H), 723-7,33 (м, 1H), 7,79 (м, 1H), 8,64 (с, 1H). LCMS =238,1 [MH].
Подготовительный пример53: 1-[-(3,4-Дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропан-1-он
1
+
3
m/z
Указанное в заголовке соединение получали в виде не совсем белого твердого вещества (1,70 г, 59%) из пент-1-ин-3-она и 4-азидо-1,2-дифторбензола, следуя методике, описанной в Подготовительном примере 51. H-ЯМР (400 МГц, CDCl): 1,27 (т, 3H), 3,22 (кв, 2H), 7,26-7,39 (м, 1H), 7,51 (м, 1H), 7,70 (м, 1H), 8,45 (с, 1H). LCMS =238,1 [MH].
Подготовительный пример54: 1-[1-(2-Фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропан-1-он
трет-
m/z
1
+
4
К смеси 1-[5-амино-1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропан-1-она (Подготовительный пример 56, 5 г, 21,44 ммоль) в THF (150 мл) при к.т. по каплям добавляли бутилнитрил (4,1 г, 39,8 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 65°C в течение 4 ч. Растворитель выпаривали в условиях пониженного давления, и очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью петрол. эфир:EtOAc (10:1 → 1:1) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого масла (2 г, 42,75%). H-ЯМР (400 МГц, MeOD-d): 1,08 (т, 3H), 2,82 (кв, 2H), 7,24-7,31 (м, 2H), 7,36-7,40 (м, 1H), 7,71 (м, 1H), 8,09 (с, 1H), 8,57 (д, 1H). LCMS =219,1 [MH].
Подготовительный пример 55: 1-[1-(2,4-Дифторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропан-1-он
1
+
4
m/z
Указанное в заголовке соединение (2 г, 42%) получали из 1-[5-амино-1-(2,4-дифторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропан-1-она (Подготовительный пример 57), следуя методике, описанной в Подготовительном примере 54. H-ЯМР (400 МГц, MeOD-d): 1,19 (т, 3H), 2,92 (кв, 2H), 7,17 (м, 1H), 7,27 (м, 1H), 7,84 (м, 1H), 8,22 (с, 1H), 8,65 (д, 1H). LCMS =237,1 [MH].
Подготовительный пример56: 1-[5-Амино-1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропан-1-он
3
2
m/z
+
Дегазированную смесь (E)-2-(этоксиметилен)-3-оксопентаннитрила (6 г, 39,17 ммоль), EtN (11,89 г, 117,5 ммоль) и (2-фторфенил)гидразина гидрохлорида (9,55 г, 58,75 ммоль) в EtOH (200 мл) перемешивали при нагревании с обратным холодильником в течение 2 ч в атмосфере N. Охлажденную реакционную смесь концентрировали в условиях вакуума, и очищали остаток методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью петрол. эфир:EtOAc (10:1 → 1:1) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого масла (5 г, 54,74%). LCMS =234,1 [MH].
Подготовительный пример57: 1-[5-Амино-1-(2,4-дифторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропан-1-он
m/z
+
Указанное в заголовке соединение получали в виде желтого масла (5 г, 51%) из (E)-2-(этоксиметилен)-3-оксопентаннитрила и (2,4-дифторфенил)гидразина гидрохлорида, следуя методике, описанной в Подготовительном примере 56. LCMS =252,1 [MH].
Подготовительный пример58: 1-{1-[1-(2-Фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-3-йод-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амин
2
3
2
6
1
+
m/z
К раствору 3-йод-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амина (0,9 г, 3,78 ммоль) в DMF (30 мл) добавляли 4-(1-хлорпропил)-1-(2-фторфенил)-1H-пиразол (Подготовительный пример 61, 1,08 г, 4,54 ммоль) и CsCO (6,16 г, 18,9 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 90°C в атмосфере N в течение 18 ч. Охлажденную смесь разбавляли водой, затем экстрагировали EtOAc, органический слой промывали солевым раствором, сушили и упаривали. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя DCM:MeOH (95:5) с получением указанного в заголовке соединения (0,5 г, 28%). H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 0,75 (т, 3H), 2,18-2,29 (м, 1H), 2,33-2,39 (м, 1H), 5,84 (м, 1H), 7,32 (м, 1H), 7,40-7,48 (м, 2H), 7,74 (м, 2H), 8,19 (с, 1H), 8,26 (с, 1H). LCMS =463,9 [MH].
Подготовительный пример59: 1-{1-[1-(2-Фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-3-йод-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амин
2
6
1
+
m/z
К перемешанному раствору 3-йод-1-(пент-1-ин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амина (Подготовительный пример 60, 7 г, 21,40 ммоль) в толуоле (25 мл) добавляли 1-азидо-2-фторбензол (5,87 г, 42,80 ммоль), DIPEA (13,8 г, 107,0 ммоль) и t-BuOH (100 мл). Добавляли CuI (2,45 г, 12,84 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при к.т. в атмосфере N в течение 16 ч. Смесь концентрировали в условиях пониженного давления и очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя DCM:MeOH (97:3) с получением указанного в заголовке соединения (5,4 г, 54%). H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 0,79 (т, 3H), 2,46 (м, 2H), 6,03 (м, 1H), 7,41 (м, 1H), 7,45-7,60 (м, 2H), 7,83 (м, 1H), 8,28 (с, 1H), 8,61 (с, 1H). LCMS =464,9 [MH].
Подготовительный пример60: 3-Йод-1-(пент-1-ин-3-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амин
2
3
2
4
m/z
+
К раствору 3-йод-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амина (10,2 г, 39 ммоль) и CsCO (38 г, 117 ммоль) в DMF (200 мл) добавляли 3-бромпент-1-ин (8,6 г, 58,5 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при к.т. в течение 16 ч. Смесь концентрировали в условиях вакуума, остаток разбавляли водой и экстрагировали EtOAc (300 мл × 3). Объединенные органические фазы промывали солевым раствором (300 мл × 2), сушили (NaSO) и концентрировали с получением указанного в заголовке соединения в виде коричневого твердого вещества (7 г, 55%). LCMS =327,9 [MH].
Подготовительный пример61: 4-(1 Хлорпропил)-1-(2-фторфенил)-1H-пиразол
2
К раствору 1-(1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил)пропан-1-ола (Подготовительный пример 62, 1 г, 4,54 ммоль) в DCM (30 мл) по каплям добавляли SOCl (5 мл), и перемешивали реакционную смесь при к.т. в течение 2 ч. Смесь упаривали в условиях пониженного давления с получением указанного в заголовке соединения (1,08 г, колич.).
Подготовительный пример 62: 1-[1-(2-Фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропан-1-ол
1
+
3
m/z
К раствору 1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-карбальдегида (3 г, 15,8 ммоль) в THF (50 мл) при 0°C по каплям добавляли EtMgBr (31,6 мл, 31,6 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при к.т. в течение 2 ч. Для гашения реакционной смеси добавляли воду, и экстрагировали смесь EtOAc. Органический слой собирали, промывали солевым раствором, сушили и упаривали. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя DCM:MeOH (95:5) с получением указанного в заголовке соединения (3 г, 86%). H-ЯМР (400 МГц, CDCl): 1,00 (т, 3H), 1,74 (ушир. с, 1H), 1,88 (м, 2H), 4,71 (т, 1H), 7,19-7,27 (м, 3H), 7,71 (с, 1H), 7,88 (м, 1H), 7,96 (д, 1H). LCMS =221,2 [MH].
Подготовительный пример 63: 5-(4 Хлорфенил)-7-{[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]метил}имидазо[5,1-f][1,2,4]триазин-4-ол
1
+
6
m/z
Смесь этил-1-амино-4-(4-хлорфенил)-2-{[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]метил}-1H-имидазол-5-карбоксилата (Подготовительный пример 64, 72 мг, 0,16 ммоль), формамида (1,63 мл, 0,6M) и формамидинацетата (42,5 мг, 0,408 ммоль) дегазировали в течение 2 мин, а затем нагревали при 130°C в условиях обработки микроволновым излучением в течение 2 ч. Дополнительно добавляли формамидинацетат (50 мг, 0,48 ммоль), и нагревали реакционную смесь до 150°C дополнительно в течение 2 ч. Охлажденную смесь фильтровали и сушили с получением указанного в заголовке соединения в виде рыжеватого твердого вещества (42 мг, 62%). H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 4,53 (с, 2H), 7,40-7,63 (м, 5H), 7,80 (м, 1H), 7,98 (с, 1H), 8,38 (д, 2H), 8,50 (с, 1H), 11,95 (ушир. с, 1H). LCMS =422,2 [MH].
Подготовительный пример64: Этил-1-амино-4-(4-хлорфенил)-2-{[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]метил}-1H-имидазол-5-карбоксилат
2
4
3
1
+
m/z
К охлажденному на льду раствору этил-4-(4-хлорфенил)-2-{[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]метил}-1H-имидазол-5-карбоксилата (Подготовительный пример 65, 70 мг, 0,16 ммоль) в DMF (1,1 мл) по каплям добавляли LiHMDS (1,0M в THF, 0,181 мл, 0,181 ммоль). Двумя порциями добавляли O-(дифенилфосфоринил)-гидроксиламин (53,7 мг, 0,23 ммоль), поддерживая внутреннюю температуру при 0°C. Полученную белую суспензию разбавляли DMF (5 мл), и перемешивали раствор при к.т. в течение 18 ч. Реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали DCM (4×50 мл). Объединенные органические слои сушили (NaSO) и концентрировали в условиях вакуума. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью EtOAc:гептан (0:100 → 100:0) с получением указанного в заголовке соединения (35 мг, 50%). H-ЯМР (400 МГц, CDCl): 1,26 (т, 3H), 4,32 (кв, 2H), 4,50 (с, 2H), 6,18 (ушир. с, 2H), 7,25-8,23 (м, 9H). LCMS =441,2 [MH].
Подготовительный пример65: Этил-4-(4-хлорфенил)-2-{[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]метил}-1H-имидазол-5-карбоксилат
m/z
+
Смесь этил-3-(4-хлорфенил)-2-{2-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]ацетамидо}-3-оксопропаноата (Подготовительный пример 66, 281 мг, 0,632 ммоль) и ацетата аммония (300 мг, 3,89 ммоль) в уксусной кислоте (3,16 мл) нагревали при 150°C в течение 2 ч в условиях обработки микроволновым излучением. Охлажденную смесь концентрировали в условиях пониженного давления и очищали остаток методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью EtOAc:гептаны (0:100 → 100:0) с получением указанного в заголовке соединения (72 мг, 27%). LCMS =426,3 [MH].
Подготовительный пример66: Этил-3-(4-хлорфенил)-2-{2-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]ацетамидо}-3-оксопропаноат
4
2
4
+
Смесь этил-2-амино-3-(4-хлорфенил)-3-оксопропаноата (Подготовительный пример 67, 246 мг, 1,02 ммоль), 2-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]уксусной кислоты (150 мг 0,678 ммоль), NMM (0,261 мл, 2,37 ммоль), HATU (387 мг, 1,02 ммоль) в DMF (4,52 мл) перемешивали при к.т. в течение 18 ч. Смесь разбавляли NHCl, экстрагировали 3×100 мл EtOAc, объединенные органические растворы промывали нас. раствором LiCl, сушили (NaSO) и фильтровали. Фильтрат упаривали в условиях пониженного давления, остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя MeOH:DCM (0:100 → 20:80) с получением указанного в заголовке соединения (311 мг, х%). LCMS m/z=445,3 [MH].
Подготовительный пример67: Этил-2-амино-3-(4-хлорфенил)-3-оксопропаноат
трет
m/z
1
+
6
К раствору -бутоксида калия (15 мл в THF) при -78°C через канюлю в течение 30 мин добавляли раствор этил-2-(дифенилметиленамино)ацетат (5 г, 18,7 ммоль) в THF (35 мл), и перемешивали раствор в течение 35 мин. По каплям добавляли 4 хлорбензоилхлорид (2,57 мл, 20 ммоль) в THF (10 мл), реакционную смесь перемешивали при -78° C в течение 25 мин, затем оставляли нагреваться до -50°C, и перемешивали в течение 40 мин. Реакционную смесь гасили добавлением раствора конц. HCl (2,15 мл, 25,2 моль) в 1 мл воды, и оставляли смесь нагреваться до к.т. Реакционную взвесь фильтровали для удаления неорганических солей, фильтрат упаривали и подвергали азеотропной перегонке для удаления остаточной воды. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя MeOH:DCM (0:100 → 10:90) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (1,01 г, 22%). H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 1,07 (т, 3H), 4,15 (кв, 2H), 6,28 (с, 1H), 7,72 9d, 2H), 8,20 (д, 2H), 9,05 (ушир. с, 2H). LCMS =242,3 [MH].
ПРИМЕРЫ
Примеры 1-19
Следующие соединения получали путем хирального разделения соответствующего исходного рацемического материала с использованием способов HPLC, описанных ранее.
Пример 20 и Пример 21: 4-Амино-7-{1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-пиразол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрил, энантиомеры 1 и 2
2
3
2
2
2
4
4
1
+
m/z
К смеси 6-бром-7-{1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-пиразол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина (Пример 47, 250 мг, 0,442 ммоль), Pd(dba) (202,4 мг, 0,22 ммоль) и dppf (245 мг, 0,44 ммоль) в NMP (10 мл) добавляли Zn(CN) (208 мг, 1,768 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 160°C в течение 3 ч в условиях обработки микроволновым излучением в атмосфере N. Охлажденную смесь фильтровали, промывали EtOAc, фильтрат вливали в воду и экстрагировали EtOAc (30 мл × 3). Объединенные органические экстракты сушили (NaSO), фильтровали и упаривали в условиях пониженного давления. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью EtOAc:петрол. эфир (30:70 → 100:0) с получением желтого твердого вещества (75 мг, 33,18%). Это твердое вещество дополнительно очищали Способом D5 HPLC с получением Примера 20, энантиомера 1. H-ЯМР (400 МГц, MeOD-d): 1,91 (д, 3H), 5,14 (кв, 1H), 7,10 (м, 1H), 7,17 (м, 1H), 7,72 (м, 2H), 8,05 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 9,10 (с, 2H). LCMS =512,0 [MH]; RT [Способ D2 HPLC]=9,308 мин.
1
+
4
m/z
Последующим элюированием получали Пример 21, энантиомер 2. H-ЯМР (400 МГц, MeOD-d): 1,91 (д, 3H), 5,14 (кв, 1H), 7,10 (м, 1H), 7,17 (м, 1H), 7,72 (м, 2H), 8,05 (с, 1H), 8,09 (с, 1H), 9,10 (с, 2H). LCMS =512,0 [MH]; RT [Способ D2 HPLC]=12,255 мин.
Примеры 22-31
2
2
3
2
2
4
К раствору соответствующего исходного бромида (1 экв.) в DMF (10 мл/ммоль SM), медленно добавляли Zn(CN) (1,5-3 экв.), dppf (0,1-0,2 экв.) и Pd(dba) (0,1 экв.), и перемешивали реакционную смесь при 140-150°C в течение 1,5-2 ч в условиях обработки микроволновым излучением. Реакционную смесь фильтровали, остаток распределяли между EtOAc и HO, слои разделяли, водную фазу экстрагировали EtOAc, объединенные органические фазы сушили (NaSO), фильтровали и концентрировали в условиях вакуума. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью EtOAc:петрол. эфир с подходящим градиентом с получением целевого соединения.
a
b
c
2
2
3.
DCM:MeOH использовали в качестве растворителя для колонки, NMP использовали в качестве реакционного растворителя, Pd(dppf)Cl использовали вместо Pd(dba)
Пример 32: 4-Амино-7-{1-[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрил
2
2
3
2
4
m/z
+
К раствору 6-бром-7-{1-[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина (Пример 46, 270 мг, 0,49 ммоль) в NMP (15 мл) во флаконе для обработки микроволновым излучением добавляли Zn(CN) (173 мг, 1,47 ммоль), dppf (56 мг, 0,1 ммоль) и Pd(dba) (46 мг, 0,05 ммоль). Герметизированный флакон обрабатывали микроволновым излучением при 140°C в течение 2 ч. Охлажденную смесь разбавляли водой (10 мл) и экстрагировали DCM (15 мл × 2). Объединенные органические экстракты промывали солевым раствором (60 мл), сушили (NaSO), фильтровали и упаривали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью EtOAc:петрол. эфир (10:90 → 90:10) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (170 мг, выход 70%). LCMS =494,1 [MH].
Пример 33: 4-Амино-7-{1-[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрил
m/z
+
Указанное в заголовке соединение получали в виде желтого твердого вещества (50 мг, выход 66%) из 6-бром-7-{1-[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина (Пример 48), следуя методике, сходной с описанной в Примере 32. LCMS =508,1 [MH].
Пример 34: 4-Амино-7-{1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрил
2
3
2
2
2
4
4
1
+
m/z
К смеси 6-бром-7-{1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина (Пример 49, 250 мг, 0,43 ммоль), Pd(dba) (197 мг, 0,215 ммоль) и dppf (238 мг, 0,43 ммоль) в NMP (10 мл) добавляли Zn(CN) (202 мг, 1,72 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 160°C в течение 3 ч в условиях обработки микроволновым излучением в атмосфере N. Охлажденную смесь фильтровали, промывали EtOAc, фильтрат вливали в воду и экстрагировали EtOAc (30 мл × 3). Объединенные органические экстракты сушили (NaSO), фильтровали и концентрировали в условиях вакуума. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью EtOAc:петрол. эфир (30:70 → 0:100) с получением целевого соединения в виде желтого твердого вещества (90 мг, 39,83%). H-ЯМР (400 МГц, MeOD-d):1,02 (т, 3H), 2,34-2,41 (м, 1H), 2,43-2,52 (м, 1H), 4,90 (м, 1H), 7,10 (м, 1H), 7,21 (м, 1H), 7,70-7,77 (м, 2H), 8,07 (д, 2H), 9,12 (с, 2H). LCMS =526,1 [MH].
Пример 35: 4-Амино-7-{[3-(2-фторфенил)-1,2-оксазол-5-ил]метил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрил
3
2
4
6
1
+
m/z
К раствору 6-бром-7-{[3-(2-фторфенил)-1,2-оксазол-5-ил]метил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина (Пример 51, 120 мг, 0,225 ммоль) в DMF (5 мл) медленно добавляли CuCN (20 мг, 0,45 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 160°C в течение 4 ч в условиях обработки микроволновым излучением. К охлажденной смеси добавляли EtOAc (100 мл), раствор промывали водн. NH (50 мл), сушили (NaSO) и концентрировали в условиях вакуума. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя DCM:MeOH (91:9) с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (11,2 мг, 10%). H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 4,79 (с, 2H), 6,82 (с, 1H), 7,32-7,42 (м, 2H), 7,54 (м, 1H), 7,84 (м, 1H), 8,20 (с, 1H), 9,20 (с, 2H). LCMS =481,0 [MH].
Пример 36: 4-Амино-7-{1-[3-(2-фторфенил)-1,2-оксазол-5-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрил
2
3
4
2
4
m/z
+
К раствору 6-бром-7-{1-[3-(2-фторфенил)-1,2-оксазол-5-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина (Пример 52, 1,0 г, 1,83 ммоль) в NMP (15 мл) добавляли Zn(CN) (0,32 г, 2,74 ммоль) и Pd(PPh)(0,2 г, 0,183 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 160°C в течение 2 ч в условиях обработки микроволновым излучением. Охлажденную смесь фильтровали, добавляли воду и EtOAc (100 мл), слои разделяли, органическую фазу промывали солевым раствором, сушили (NaSO) и концентрировали в условиях вакуума. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью петрол. эфир:EtOAc (34:66) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (135 мг, 15%). LCMS =495,0 [MH].
Примеры 37-52
2
2
3
2
4
К раствору соответствующего исходного триазин-4-амина (1 экв.) в DCM при 0°C по каплям добавляли NBS (1,05-2,0 экв.), смесь оставляли нагреваться до к.т. и перемешивали до тех пор, пока все исходное вещество не было израсходовано. Смесь гасили добавлением водн. раствора NaSO и экстрагировали EtOAc. Органический слой промывали солевым раствором (2×), сушили (NaSO) и концентрировали в условиях вакуума. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя подходящими растворителями с получением указанного в заголовке соединения.
a
b
c
DMF использовали в качестве реакционного растворителя, DMF/DCM использовали в качестве реакционного растворителя, THF использовали в качестве реакционного растворителя.
Примеры 53-68
Следующие соединения получали путем хирального разделения соответствующего исходного рацемического материала с использованием способов HPLC, описанных ранее.
a
2
дополнительно очищали методом препаративной HPLC с использование колонки Gemini C18 150*21,2 мм, 5 мкм, элюируя MeCN:HO (0,1 TFA%).
Пример 69: 7-{1-[1-(2-Фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амин
2
2
2
3
2
2
2
4
2
6
1
+
m/z
К смеси 5-бром-7-{1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]этил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина (Подготовительный пример 2, 260 мг, 0,65 ммоль) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-(трифторметил)пиримидина (266 мг, 0,97 ммоль) в 1,4-диоксане (9 мл) и HO (3 мл) добавляли PdCl(dppf) (48 мг, 0,065 ммоль) и NaCO (138 мг, 1,3 ммоль), и перемешивали реакционную смесь в атмосфере N при 95°C в течение 2 ч. Охлажденную смесь концентрировали в условиях пониженного давления, и распределяли остаток между HO (30 мл) и EtOAc (30 мл). Слои разделяли, водную фазу экстрагировали EtOAc (30 мл × 3), объединенные органические экстракты сушили (NaSO), фильтровали, и концентрировали фильтрат в условиях вакуума. Остаток очищали методом HPLC, элюируя MeCN:HO (0,1% TFA) (45:55 → 55:45), с получением указанного в заголовке соединения в виде белого твердого вещества (130 мг, 42%). H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 1,77 (д, 3H), 4,97 (кв, 1H), 6,90 (с, 1H), 7,15-7,25 (м, 2H), 7,48-7,62 (м, 4H), 8,05 (с, 1H), 8,45 (с, 1H), 9,05 (с, 2H). LCMS =470,2 [MH]; RT [Способ A HPLC]=1,658 мин.
Примеры 70-79
Следующие Примеры получали из соответствующего исходного бромида и боронатного эфира, следуя методике, аналогичной описанной в Примере 69, и очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя подходящими растворителями.
a
b
c
2
3
очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью петрол. эфир:EtOAc,  в качестве растворителя для колонки использовали DMF вместо диоксана,  KCO использовали в качестве основания.
Пример 80: 7-{[3-(2-Фторфенил)-1,2-оксазол-5-ил]метил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амин
2
2
3
2
2
m/z
+
К раствору 5-бром-7-{[3-(2-фторфенил)-1,2-оксазол-5-ил]метил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина (Подготовительный пример 14, 250 мг, 0,644 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) медленно добавляли 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-(трифторметил)пиримидин (1,3 г, 4,86 ммоль), Pd(dppf)Cl (0,26 г, 0,324 ммоль) и NaCO (0,69 г, 6,48 ммоль) в HO (2 мл), и перемешивали реакционную смесь при 100°C в течение 16 ч в атмосфере N. Охлажденную смесь концентрировали в условиях вакуума, и очищали неочищенный продукт методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя DCM:MeOH (91:9) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (150 мг, 51%). LCMS =456,0 [MH].
Пример 81: 7-{[1-(2-Фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]метил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амин
2
3
2
2
2
m/z
+
К раствору 5-бром-7-{[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]метил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина (Подготовительный пример 1, 500 мг, 1,27 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) медленно добавляли 2-(трифторметил)пиримидин-5-илбороновую кислоту (867 мг, 4,52 ммоль), KCO (356 мг, 2,58 ммоль) в HO (5 мл) и Pd(dppf)Cl (105 мг, 0,129 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 105°C в течение 2 ч в атмосфере N. Охлажденную смесь концентрировали в условиях вакуума, и очищали неочищенный продукт методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя DCM:MeOH (91:9) с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (260 мг, 44%). LCMS =456,1 [MH]; RT [Способ A HPLC]=1,717 мин.
Пример 82: 7-{1-[1-(2-Фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амин
1
+
6
m/z
Указанное в заголовке соединение получали в виде белого твердого вещества (7,5 г, 72%) из 5-бром-7-{1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина (Подготовительный пример 5) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-(трифторметил)пиримидина, следуя методике, описанной в Примере 80. H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 0,93 (т, 3H), 2,20 (м, 2H), 4,82 (м, 1H), 6,97 (с, 1H), 7,15-7,30 (ушир. с, 2H), 7,44 (м, 1H), 7,55 (м, 2H), 7,82 (м, 1H), 8,04 (с, 1H), 8,50 (с, 1H), 9,05 (с, 2H). LCMS =484,1 [MH]; RT [Способ A HPLC]=1,743 мин.
Пример 83: 7-{1-[1-(2-Фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-(4-метоксипиримидин-5-ил)пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амин
1
4
Указанное в заголовке соединение получали в виде желтого твердого вещества (160 мг, 50%) из 5-бром-7-{1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина (Подготовительный пример 5) и 4-метоксипиримидин-5-илбороновой кислоты, следуя методике, описанной в Примере 81. H-ЯМР (400 МГц, MeOD-d): 1,05 (т, 3H), 2,35 (м, 2H), 4,08 (с, 3H), 4,91 (кв, 1H), 7,00 (с, 1H), 7,38-7,45 (м, 2H), 7,60 (м, 1H), 7,82 (м, 1H), 8,09 (с, 1H), 8,40 (д, 1H), 8,58 (с, 1H), 8,87 (с, 1H). RT [Способ A HPLC]=1,288 мин.
Пример 84: 7-{1-[1-(2,4-Дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амин
2
3
2
2
3
4
m/z
+
К суспензии 5-бром-7-{1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина (Подготовительный пример 13, 250 мг, 0,58 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-(трифторметил)пиримидина (238 мг, 0,87 ммоль) и NaCO (123 мг, 1,16 ммоль) в DMF:HO (12 мл:3 мл) в атмосфере N добавляли Pd(PPh) (70 мг, 0,06 ммоль), и перемешивали реакционную при 100°C в течение 12 ч. Охлажденную смесь вливали в воду со льдом (10 мл) и экстрагировали EtOAc (3 × 10 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (3 × 10 мл), сушили и упаривали в условиях пониженного давления. Остаток очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя смесью EtOAc:петрол. эфир (0:100 → 80:20) с получением указанного в заголовке соединения в виде не совсем белого твердого вещества (100 мг, 35%). LCMS =502,2 [MH]; RT [Способ A HPLC]=1,718 мин.
Пример 85: 7-{1-[1-(2,4-Дифторфенил)-1H-пиразол-4-ил]этил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амин
2
m/z
+
Указанное в заголовке соединение получали в виде светло-желтого твердого вещества (0,5 г, 43%) из 5-бром-7-{1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-пиразол-4-ил]этил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина (Подготовительный пример 11) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-(трифторметил)пиримидина, следуя методике, описанной в Примере 84, за исключением того, что в качестве реакционного растворителя использовали диоксан/HO. LCMS =487,1 [MH]; RT [Способ A HPLC]=1,867 мин.
Пример 86: 7-{1-[1-(2,4-Дифторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-5-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амин
2
m/z
+
Указанное в заголовке соединение получали в виде светло-желтого твердого вещества (1,5 г, 5%) из 5-бром-7-{1-[1-(2,4-дифторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}пирроло[2,1-f][1,2,4]триазин-4-амина (Подготовительный пример 13) и 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-(трифторметил)-пиримидина, следуя методике, описанной в Подготовительном примере 84, за исключением того, что в качестве реакционного растворителя использовали диоксан/HO. LCMS =501,1 [MH]; RT [Способ A HPLC]=1,912 мин.
Примеры 87 и 88: 1-{1-[1-(2-Фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-3-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амин, энантиомеры 1 и 2
1
+
6
m/z
1-{1-[1-(2-Фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-3-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амин (Пример 91, 0,17 г) очищали с использованием Способа E5 HPLC, с получением Примера 87, энантиомера 1 (52,7 мг). H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 0,81 (т, 3H), 2,24-2,30 (м, 1H), 2,41-2,50 (м, 1H), 6,01 (м, 1H), 7,31-7,43 (м, 5H), 7,73 (м, 1H), 7,89 (с, 1H), 8,28 (с, 1H), 8,35 (с, 1H), 9,29 (с, 2H). LCMS =484,2 [MH]; RT [Способ C14 HPLC]=4,799 мин.
1
+
6
m/z
Последующим элюированием получали Пример 88, энантиомер 2 (47,6 мг). H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 0,81 (т, 3H), 2,24-2,30 (м, 1H), 2,41-2,50 (м, 1H), 6,01 (м, 1H), 7,31-7,43 (м, 5H), 7,73 (м, 1H), 7,89 (с, 1H), 8,28 (с, 1H), 8,35 (с, 1H), 9,29 (с, 2H). LCMS =484,2 [MH]; RT [Способ C14 HPLC]=6,068 мин.
Примеры 89 и 90: 1-{1-[1-(2-Фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-3-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амин, энантиомеры 1 и 2
1
+
6
m/z
1-{1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-3-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амин (Пример 92, 1,6 г) очищали с использованием Способа C23A HPLC с получением Примера 89, энантиомера 1 (504 мг). H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 0,85 (т, 3H), 2,43-2,50 (м, 2H), 6,19 (м, 1H), 7,35-7,45 (м, 3H), 7,55-7,65 (м, 2H), 7,80 (м, 1H), 8,36 (с, 1H), 8,66 (с, 1H), 9,28 (с, 2H). LCMS =485,1 [MH]; RT [Способ C5 HPLC]=2,437 мин.
1
+
6
m/z
Последующим элюированием получали Пример 90, энантиомер 2 (508 мг). H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 0,85 (т, 3H), 2,43-2,50 (м, 2H), 6,19 (м, 1H), 7,35-7,45 (м, 3H), 7,55-7,65 (м, 2H), 7,80 (м, 1H), 8,36 (с, 1H), 8,66 (с, 1H), 9,28 (с, 2H). LCMS =485,1 [MH]; RT [Способ C5 HPLC]=3,489 мин.
Пример 91: 1-{1-[1-(2-Фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-3-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амин
2
3
3
4
m/z
+
К раствору 1-{1-[1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил]пропил}-3-йод-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амина (Подготовительный пример 58, 0,3 г, 0,45 ммоль) в DMF (25 мл) добавляли 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-(трифторметил)пиримидин (355 мг, 0,90 ммоль) и раствор NaCO (7 мл). Добавляли Pd(PPh) (52 мг, 0,045 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 100°C в течение 18 ч. Охлажденную смесь распределяли между EtOAc и водой, и разделяли слои. Органический слой промывали солевым раствором, сушили и упаривали в условиях вакуума. Неочищенный продукт очищали методом колоночной хроматографии на силикагеле, элюируя DCM:MeOH (95:5) с получением указанного в заголовке соединения (170 мг, 78%). LCMS =484,1 [MH].
Пример 92: 1-{1-[1-(2-Фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-3-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амин
2
2
2
3
2
6
1
+
m/z
Перемешанный раствор 1-{1-[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]пропил}-3-йод-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амина (Подготовительный пример 59, 3 г, 6,46 ммоль) в смеси диоксан/HO (100 мл/25 мл) в атмосфере N добавляли 2-(трифторметил)-пиримидин-5-илбороновую кислоту (1,86 г, 9,69 ммоль), KCO (2,67 г, 19,38 ммоль) и Pd(dppf)Cl (236 мг, 0,323 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при 90°C в течение 2 ч. Охлажденную смесь фильтровали, фильтрат концентрировали в условиях пониженного давления, остаток разбавляли водой и экстрагировали EtOAc (3 × 100 мл). Объединенные органические экстракты концентрировали в условиях вакуума и очищали методом препаративной HPLC с получением указанного в заголовке соединения в виде желтого твердого вещества (1,6 г, 51%). H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 0,85 (т, 3H), 2,44 (м, 2H), 6,18 (м, 1H), 7,40 (м, 3H), 7,59 (м, 2H), 7,77 (м, 1H), 8,35 (с, 1H), 8,65 9s, 1H), 9,27 (с, 2H). LCMS =484,7 [MH].
Пример 93: 5-(4 Хлорфенил)-7-{[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]метил}имидазо[5,1-f][1,2,4]триазин-4-амин трифторацетат
3
3
3
+
К раствору триазола (62,2 мг, 0,90 ммоль) в MeCN (5 мл) при 0°C добавляли POCl (0,033 мл, 0,36 ммоль). В течение 20 мин по каплям добавляли EtN (0,126 мл, 0,90 ммоль), раствор оставляли нагреваться до к.т. и перемешивали в течение 30 мин. Порциями добавляли 5-(4 хлорфенил)-7-{[1-(2-фторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил]метил}имидазо[5,1-f][1,2,4]триазин-4-ол (Подготовительный пример 63, 38 мг, 0,09 ммоль), раствор разбавляли DCM (2 мл), а затем перемешивали при 70°C в течение 18 ч. Добавляли 0,5 M NH в диоксане (7 мл) и NH4OH (1 мл), и перемешивали реакционную смесь в условиях обработки микроволновым излучением в течение 1 ч при 120°C. Смесь охлаждали, полученный осадок отфильтровывали, и упаривали экстракт в условиях пониженного давления. Остаток очищали с использованием Способа G1 HPLC с получением указанного в заголовке соединения в виде твердого вещества (12,1 мг, 32%). LCMS m/z=421,2 [MH].
Следующие Примеры получали по аналогии со способами, описанными ранее.
1
+
3
m/z
Пример 94: 1-[1-(1-фенил-1H-1,2,3-триазол-4-ил)пропил]-3-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амин, энантиомер 1; разделяли с использованием Способа C30 HPLC; H-ЯМР (400 МГц, CDCl): 0,98 (т, 3H), 2,50-2,63 (м, 2H), 5,82 (ушир. с, 2H), 6,33 (м, 1H), 7,45-7,52 (м, 3H), 7,69 (м, 2H), 8,08 (с, 1H), 8,50 (с, 1H), 9,28 (с, 2H). LCMS =467,1 [MH]; RT [Способ C10 HPLC]=3,125 мин.
1
+
4
m/z
Пример 95: 1-[1-(1-фенил-1H-1,2,3-триазол-4-ил)пропил]-3-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амин, энантиомер 2; разделяли с использованием Способа C30 HPLC; H-ЯМР (400 МГц, MeOD-d): 0,95 (т, 3H), 2,51-2,67 (м, 2H), 6,27 (м, 1H), 7,48 (м, 2H), 7,52 (м, 3H), 8,39 (с, 1H), 8,66 (с, 1H), 9,31 (с, 2H). LCMS =467,2 [MH]; RT [Способ C10 HPLC]=2,244 мин.
1
+
6
m/z
Пример 96: 4-амино-5-(2-(дифторметил)пиримидин-5-ил)-7-(1-(1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил)этил)пирроло[1,2-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрил, энантиомер 1; разделяли с использованием Способа F1 SFC; H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 1,82 (д, 3H), 5,02 (кв, 1H), 7,07 (т, 1H), 7,31-7,48 (м, 3H), 7,73-7,77 (м, 2H), 8,15-8,16 (м, 2H), 9,05 (с, 2H); LCMS =476,2 [MH]; RT [Способ F2 SFC]=6,049 мин.
1
+
6
m/z
Пример 97: 4-амино-5-(2-(дифторметил)пиримидин-5-ил)-7-(1-(1-(2-фторфенил)-1H-пиразол-4-ил)этил)пирроло[1,2-f][1,2,4]триазин-6-карбонитрил, энантиомер 2; разделяли с использованием Способа F1 SFC; H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 1,82 (д, 3H), 5,02 (кв, 1H), 7,07 (т, 1H), 7,31-7,48 (м, 3H), 7,73-7,77 (м, 2H), 8,15-8,16 (м, 2H), 9,05 (с, 2H); LCMS =476,2 [MH]; RT [Способ F2 SFC]=6,599 мин.
1
+
6
m/z
Пример 98: 7-(1-(1-(2,5-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил)этил)-5-(2-(трифторметил)пиримидин-5-ил)пирроло[1,2-f][1,2,4]триазин-4-амин, энантиомер 1; разделяли с использованием Способа C24A HPLC; H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 1,55 (д, 3H), 4,76 (кв, 1H), 6,68 (с, 1H), 7,04 (ушир. с, 2H), 7,26 (м, 1H), 7,42 (м, 1H), 7,59 (м, 1H), 7,83 (с, 1H), 8,27 (д, 1H), 8,83 (с, 2H); LCMS =488,0 [MH]; RT [Способ C1 HPLC]=4,359 мин.
1
+
6
m/z
Пример 99: 1-(1-(1-(2,4-дифторфенил)-1H-1,2,3-триазол-4-ил)пропил)-3-(2-(трифторметил)пиримидин-5-ил)-1H-пиразоло[3,4-d]пиримидин-4-амин, энантиомер 1; разделяли с использованием Способа B2 HPLC;H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d): 0.85 (т, 3H), 2.45 (м, 2H), 6.18 (м, 1H), 7.34 (м, 1H), 7.48 (ушир. с, 2H), 7.68 (м, 1H), 7.87 (м, 1H), 8.36 (с, 1H), 8.65 (с, 1H), 9.28 (с, 2H); LCMS =503.2 [MH]; RT [Способ C10 HPLC]=3.734 мин.
Применение электрофизиологического метода анализа стимуляции CFTR в эпителиальных клетках бронхов пациента с CF, проводимого в формате камеры
2
2
Эпителиальные клетки бронхов человека с первичным муковисцидозом (CF hBE) высеивали и культивировали в соответствии с опубликованными способами (Neuberger et al., Ch. 4 of Cystic Fibrosis, Methods in Molecular Biology vol. 741, pp. 39-54 (2011)). Хорошо дифференцированные клетки (>30 суток в воздушно/водных условиях) на фильтрах Snapwell (Corning Costar, кат.№ 3801) помещали в камеры Уссинга (Physiologic Instruments, Inc., San Diego, CA). Культуры клеток F508del/F508del подвергали анализу при температуре 27°C, а клетки G551D/F508del подвергали анализу при температуре 35°C. Буферный физиологический раствор HEPES (композиция (в мМ): 137 NaCl, 4 KCl, 1 MgCl, 1,8 CaCl, 10 HEPES Na) использовали как в апикальной, так и в базолатеральной камерах. Камеры барботировали воздухом для усиления перемешивания, и устанавливали напряжение на ноль. С перерывами в 20-25 минут между добавлениями последовательно добавляли амилорид (30 мкМ), форсколин (10 мкМ), тестируемое соединение (4 увеличивающиеся концентрации) и CFTRinh-172 (20 мМ). Токи замыкания получали и анализировали с использованием LabScribe2. Ответы на тестируемое соединение пересчитывали исходя из ответа на DMSO (0%) и максимального ответа на стимулятор положительного контроля (100%).
Метод анализа стимулирования ионного потока через F508del CFTR в FRT
2
2
4
2
4
2
2
Линии клеток щитовидной железы крыс Фишера (FRT), стабильно экспрессирующие рекомбинантный F508del V470 CFTR и галоид-чувствительный желтый флуоресцентный белок (Pedemonte et al., J. Clin. Invest. 115(9) 2564-71 (2005)) высевали в количестве 25000 клеток на лунку в 50 мкл на лунку культуральной среды в 384-луночные планшеты для тканевых культур с черными стенками и прозрачным дном (Corning, кат. № 3712). Через сутки клетки предварительно инкубировали при 27°C/5% CO в течение 16-24 часов. Клетки затем отмывали в dPBS и обрабатывали форсколином (20 мкМ) и тестируемым соединением в течение 30 минут путем добавления 20 мкл буфера для разбавления соединения (dPBS, содержащий форсколин и тестируемое соединение). Планшеты загружали в спектрофотометр FLIPR384 для считывания планшетов для визуализации флуоресценции (Molecular Devices). После начального считывания флуоресценции добавляли йодидный буфер (25 мкл) (композиция (в мМ): 137 NaI, 1,5 KPO, 8,1 NaHPO, 2,7 KCl, 0,5 MgCl, 1 CaCl), и приблизительно через 21 секунду проводили второе считывание флуоресценции. Обработка данных включала в себя деление значения второго считывания флуоресценции на значение начального считывания флуоресценции, а затем пересчет полученной нормированной конечной флуоресценции относительно ответа на DMSO (0%) и на стимулятор положительного контроля (100%).
н/о означает «не определяли».