КЛЕТКИ ДЛЯ ИММУНОТЕРАПИИ, СКОНСТРУИРОВАННЫЕ ДЛЯ НАЦЕЛИВАНИЯ НА АНТИГЕН, ПРИСУТСТВУЮЩИЙ ОДНОВРЕМЕННО НА ИММУННЫХ КЛЕТКАХ И НА ПАТОЛОГИЧЕСКИХ КЛЕТКАХ

1. Способ получения иммунных клеток, предпочтительно Т-клеток, для иммунотерапии против патологических клеток, включающий стадию:
а. Генетического инактивирования или мутирования гена в иммунной клетке, который участвует в экспрессии или презентации антигенного маркера, причем указанный антигенный маркер присутствует на поверхности, как указанной иммунной клетки, так и патологической клетки;
б. Экспрессии в указанной иммунной клетке трансгена, кодирующего химерный антигенный рецептор, направленный против указанного антигенного маркера, присутствующего на поверхности указанной патологической клетки.
2. Способ по п. 1, в котором указанный антигенный маркер выбран из маркеров, перечисленных в таблице 4.
3. Способ по п. 1, в котором указанным антигенным маркером является CD38 или его иммунореактивный фрагмент.
4. Способ по любому из пп. 1-3, где указанный способ включает дополнительную стадию инактивирования и размножения иммунных клеток.
5. Способ по любому из пп. 1-4, где указанный способ включает дополнительную стадию очистки получаемых иммунных клеток путем исключения клеток, презентирующих указанный маркерный антиген на поверхности.
6. Способ по любому из пп. 1-5, где указанный способ включает предшествующую стадию получения иммунных клеток от донора.
7. Способ по любому из пп. 1-5, где указанный способ включает предшествующую стадию получения иммунных клеток от пациента, болезнь которого вызвана развитием указанных патологических клеток.
8. Способ по любому из пп. 1-7, где указанная иммунная клетка является производной первичной стволовой клетки, клетки iPS или hES.
9. Способ по п. 8, в котором указанная иммунная клетка происходит от клетки iPS, полученной от указанного пациента, болезнь которого вызвана развитием указанных патологических клеток.
10. Способ по любому из пп. 1-9, в котором стадию а) осуществляют, используя редкощепящую эндонуклеазу.
11. Способ по п. 10, в котором стадию а) осуществляют, используя TAL-нуклеазу.
12. Способ по п. 10, в котором стадию а) осуществляют, используя РНК-направляемую эндонуклеазу.
13. Способ по п. 12, в котором РНК-направляемой эндонуклеазой является Cas9.
14. Способ по п. 12, в котором РНК-направляемая эндонуклеаза расщепляется по меньшей мере на 2 полипептида, один из которых включает RuvC, а другой включает HNH.
15. Способ по п. 10, в котором указанная эндонуклеаза экспрессируется с трансфецированной мРНК.
16. Способ по любому из пп. 1-15, который включает дополнительную стадию инактивирования гена, кодирующего компонент рецептора Т-клеток (TCR).
17. Способ по п. 16, в котором указанным компонентом рецептора Т-клеток является TCRα.
18. Способ по любому из пп. 1-15, который включает дополнительную стадию инактивирования гена, кодирующего компонент HLA.
19. Способ по любому из пп. 1-15, который включает дополнительную стадию инактивирования гена, кодирующего β2m.
20. Способ по любому из пп. 1-15, который включает дополнительную стадию инактивирования гена, кодирующего белок иммунной контрольной точки, выбранный из CTLA4, РРР2СА, РРР2СВ, PTPN6, PTPN22, PDCD1, LAG3, HAVCR2, BTLA, CD160, TIGIT, CD96, CRTAM, LAIR1, SIGLEC7, SIGLEC9, CD244, TNFRSF10B, TNFRSF10A, CASP8, CASP10, CASP3, CASP6, CASP7, FADD, FAS, TGFBRII, TGFRBRI, SMAD2, SMAD3, SMAD4, SMAD10, SKI, SKIL, TGIF1, IL10RA, IL10RB, HMOX2, IL6R, IL6ST, EIF2AK4, CSK, PAG1, SIT1, FOXP3, PRDM1, BATF, GUCY1A2, GUCY1A3, GUCY1B2 и GUCY1B3.
21. Способ по п. 20, в котором указанный генный локус участвует в экспрессии генов PD1 или CTLA-4.
22. Способ по любому из пп. 1-15, который включает дополнительную стадию инактивирования гена, определяющего чувствительность иммунных клеток к химиотерапевтическим или иммуносупрессорным лекарственным средствам.
23. Способ по п. 22, в котором указанный дополнительный ген кодирует CD52.
24. Способ по п. 22, в котором указанный дополнительный ген является геном гипоксантингуанин-фосфорибозилтрансферазы (HPRT).
25. Способ по п. 22, в котором указанный дополнительный ген кодирует глюкокортикоидный рецептор (GR).
26. Способ по п. 22, в котором указанный дополнительный ген участвует в регуляторном метаболическом пути DCK, в частности в экспрессии DCK.
27. Способ по любому из пп. 1-26, в котором указанные иммунные клетки на стадии а) являются производными от воспалительных Т-лимфоцитов, цитотоксических Т-лимфоцитов, регуляторных Т-лимфоцитов или Т-лимфоцитов-хелперов.
28. Способ по п. 27, в котором указанные Т-клетки являются производными от CD4+ Т-лимфоцитов и/или CD8+ Т-лимфоцитов.
29. Способ по любому из пп. 1-28, в котором указанные трансформированные иммунные клетки размножают in vitro.
30. Способ по любому из пп. 1-28, в котором указанные трансформированные иммунные клетки размножают in vivo.
31. Способ по любому из пп. 1-30, в котором указанные патологические клетки выбраны из злокачественных или инфицированных клеток.
32. Способ по любому из пп. 1-30, в котором указанные патологические клетки являются В-клетками.
33. Способ по любому из пп. 1-30, в котором указанные патологические клетки являются клетками солидных опухолей.
34. Способ по любому из пп. 1-30 для получения иммунных клеток, используемых в качестве лекарственного средства.
35. Способ по п. 31 для получения иммунных клеток для лечения рака, иммунного заболевания или инфекции у пациента, нуждающегося в таком лечении.
36. Способ по п. 32 для лечения лимфомы.
37. Способ по п. 32 для лечения лейкоза.
38. Способ по п. 34 для лечения хронического лимфоцитарного лейкоза (CLL).
39. Сконструированная иммунная клетка, получаемая способом по любому из пп. 1-35.
+
-
40. Сконструированная иммунная клетка по п. 39, получившая фенотип [CAR CD38][CD38].
+
-
41. Сконструированная иммунная клетка по п. 39, получившая фенотип [CAR CD70][CD70].
+
-
42. Сконструированная иммунная клетка по п. 39, получившая фенотип [CAR CS1][CS1].
43. Способ лечения пациента, включающий:
а. диагностирование указанного пациента на наличие патологических клеток, презентирующих специфические антигенные маркеры подобно иммунным клеткам;
б. получение популяции сконструированных иммунных клеток по пп. 39-42 или способом по любому из пп. 1-35, и
в. введение указанных сконструированных иммунных клеток указанному пациенту, у которого диагностированы указанные патологические клетки.