Исследование возможности применения соединения кремния в качестве мелиоранта-стабилизатора ионов тяжелых металлов в загрязненной почве

ВЕСТНИК ПНИПУ

2017 Химическая технология и биотехнология № 2

DOI: 10.15593/2224-9400/2017.2.02 УДК 628.516:606-047.37

А.В. Виноградова, А.С. Зоричева

Пермский национальный исследовательский политехнический университет, Пермь, Россия

ИССЛЕДОВАНИЕ ВОЗМОЖНОСТИ ПРИМЕНЕНИЯ СОЕДИНЕНИЯ КРЕМНИЯ В КАЧЕСТВЕ МЕЛИОРАНТА-СТАБИЛИЗАТОРА ИОНОВ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ В ЗАГРЯЗНЕННОЙ ПОЧВЕ

Среди всех химических веществ ионы тяжелых металлов особенно отрицательно влияют на экологию. Под их действием происходит угнетение практически всего растительного, почвенного и животного мира суши и водоемов. При этом тяжелые металлы накапливаются в живых организмах и действуют на биоту на генетическом уровне. Главная опасность тяжелых металлов заключается в их способности включаться в метаболические циклы при накоплении в организме, а также переходить из одной природной среды в другую, не подвергаясь разложению.

Учитывая данную проблему, многие исследователи разрабатывают мероприятия, уменьшающие поступление тяжелых металлов в биосферу, а также технологии ремедиации загрязненных почв и методы снижения их токсического действия в природных средах. Однако эти методы часто трудоемки, дороги, энергоза-тратны.

В работе исследованы в качестве мелиоранта-стабилизатора тяжелых металлов в почве силикаты в составе натриевого жидкого стекла. В результате проведенных исследований показано, что силикаты жидкого стекла могут связывать ионы тяжелых металлов (Pb2+ и Zn2+) в почве. Их внесение в загрязненную почву практически в 2 раза и более уменьшает концентрацию водорастворимых и подвижных форм этих металлов.

Эффект снижения биодоступности тяжелых металлов при использовании жидкого стекла в качестве мелиоранта-стабилизатора подтвержден методами биотестирования (токсичность загрязненной почвы снижается на 30-60 %).

Ключевые слова: ионы тяжелых металлов, ремедиация, почва, мелиорант-стабилизатор, силикаты жидкого стекла, биотестирование.

A.V. Vinogradova, A.S. Zoricheva

Perm National Research Polytechnic University, Perm, Russian Federation

THE STUDY OF SILICON COMPOUND APPLICABILITY AS AN AMELIORANT STABILIZER OF HEAVY METALS' IONS IN THE POLLUTED SOIL

Among all chemicals ions of heavy metals have special ecological value. Their influence depresses almost all plants, animals, and soils. At the same time heavy metals collect in living organisms, and affect biota at the genetic level. The main danger of heavy metals lies in their ability to join in metabolic cycles at accumulation in an organism, and also to pass from one environment into another, without being exposed to decomposition.

Considering this problem, efforts of many researchers are directed to the reduction of heavy metals' impact on the biosphere, development of technologies of a remediation of the polluted soils, and decreasing their toxic effect. However existing methods are often labor-consuming, expensive, energy-intensive.

In this paper silicates as a part of sodium silicate are investigated as an ameliorant stabilizer of heavy metals in the soil. The conducted researches have shown that silicates of a liquid silica glass can connect ions of heavy metals (Pb2+ and Zn2+) in the soil. Their addition to the polluted soil reduces the concentration of water-soluble forms of these metals by half.

The decrease in bioavailability of heavy metals when using a liquid silica glass as an ameliorant stabilizer is confirmed by biotesting methods (toxicity of the polluted soil decreases by 30-60%).

Keywords: ions of heavy metals, remediation, soil, ameliorant stabilizer, silicates of a liquid silica glass, biotesting.

1. Экспериментальная часть

Содержание ионов тяжелых металлов в почве предлагается снижать различными физическими, химическими, физико-химическими и биологическими методами [1-3]. Среди множества методов очистки почв наиболее приемлемым нам видится связывание поллютантов мелиорантом-стабилизатором в нерастворимые и труднодоступные соединения [4, 5].

При выборе силикатов жидкого стекла в качестве мелиоранта-стабилизатора учитывали его доступность, широкое применение в народном хозяйстве, а также отсутствие его ПДК в почве [6, 7]. Поллю-

тантами-загрязнителями почвы в проведенных исследованиях выступали ионы свинца и цинка, относящиеся по степени опасности к 1-му классу загрязняющих веществ [8].

В экспериментах использовали супесчаную почву, отобранную в лесополосе вдали от промышленных и транспортных предприятий. Почву высушивали до воздушно-сухого состояния, убирали посторонние включения, просеивали через сито с диаметром отверстий 1 мм.

Воздушно-сухие навески почвы помещали в пластиковые контейнеры. В качестве поллютантов вносили водные растворы солей (РЬ(КО3)2) и (2иС12) из расчета 0,5 и 1 г ионов металла на 1 кг почвы. Почву тщательно перемешивали и выдерживали сутки. После этого добавляли водный раствор жидкого стекла в соотношении с ионами металла 0,5:1, 1:1, 2:1. Влажность контрольных и экспериментальных образцов поддерживали за счет внесения одинакового объема воды (для растворения солей, жидкого стекла и увлажнения). Концентрации ионов металлов определяли методом атомно-абсорбционной спектроскопии (ААС) в водных (водорастворимая форма металлов) и в аммо-нийно-ацетатных (подвижная форма металлов) почвенных вытяжках с последующим перерасчетом на 1 кг почвы.

Для проверки экологической безопасности метода для биоты почвы проводили определение каталазной активности до и после реме-диации. Каталазная активность может выступать показателем безопасности метода, так как отражает биологическую активность почвы, коррелирующую с содержанием микроорганизмов.

Эффективность связывания тяжелых металлов в почве соединениями кремния оценивали так же, т. е. проводя биотестирование почвы до и после ремедиации. В качестве тест-объектов использовали люминесцентные бактерии, водоросли Scenedesmus quadricauda, семена овса.

2. Результаты и их обсуждение

Как показали результаты анализа водных и аммонийно-ацетатных буферных вытяжек загрязненной металлами почвы методом ААС, силикаты жидкого стекла связывают ионы свинца и цинка в труднорастворимые соединения. Так, при содержании ионов свинца в почве 0,5 г/кг после обработки жидким стеклом их содержание снижалось на 26-71 %, а при исходной концентрации 1 г/кг концентрация его водорастворимых фракций составила 0,35-0,60 г/кг, а подвижных - 9,7-14,1 г/кг (табл. 1). При этом увеличение соотношения ионов металла и жидкого стекла

от 1:0,5 до 1:2 приводило во всех случаях к увеличению процента связывания, а значит, и к снижению биодоступности поллютанта.

Таблица 1

Содержание ионов тяжелых металлов в почве в процессе ремедиации

Заданная Соотношение Концентрация Концентрация

концентрация металл : жидкое водорастворимых подвижных форм

ионов металла, стекло форм ионов металла ионов металлов

г/кг почвы в вытяжке, в почве в вытяжке, в почве

мг/л мг/кг мг/л мг/кг

Контроль - почва без внесения дополнительных реагентов

- - 0,0007 0,35 0,08 4,0

По ионам свинца

1,0 - 0,015 0,75 19,75 987,30

0,5 1:0,5 0,009 0,45 7,35 367,70

0,5 1:1 0,007 0,35 4,14 207,24

0,5 1:2 0,003 0,15 2,91 145,56

1,0 1:0,5 0,012 0,60 14,09 704,38

1,0 1:1 0,010 0,50 12,63 631,45

1,0 1:2 0,007 0,35 9,66 482,81

По ионам цинка

1,0 - 0,018 0,90 19,17 958,93

0,5 1:0,5 0,010 0,50 6,54 327,05

0,5 1:1 0,006 0,30 3,89 194,56

0,5 1:2 0,005 0,25 2,16 108,13

1,0 1:0,5 0,011 0,55 14,65 732,54

1,0 1:1 0,008 0,40 11,99 599,30

1,0 1:2 0,004 0,20 8,74 436,93

Подобная закономерность наблюдалась и в отношении иона цинка. В этом случае силикатами связывалось от 39 до 77 % водорастворимых форм соединений от исходного их содержания и 23-54 % подвижных. Увеличение дозировки силиката в 4 раза в том и другом случае вызывало увеличение процента связывания ионов практически в 2 раза.

Активность почвенных ферментов, источниками которых в почве являются микроорганизмы и растения, - чувствительный индикатор состояния плодородия почвы. Изменение биодоступности ионов тяжелых металлов за счет связывания их силикатом в труднорастворимые соединения было проконтролировано по каталазной активности почвы [9]. Результаты определения выделившегося кислорода при взаимодействии почвенных образцов с перекисью водорода отражены в табл. 2.

Таблица 2

Каталазная активность почвы в зависимости от соотношения концентраций внесенных ионов РЬ2+, 2п2+ и жидкого стекла

Концентрация Соотношение Каталазная активность

ионов металлов ион металла : жидкое объем выделившегося ингибирование, %

в почве, г/кг стекло О2, мл

Почва без дополнительных внесений

- - 3,9 -

Почва, загрязненная ионами Pb2+

1,0 - 1,3 66,67

0,5 1:0,5 2 48,72

0,5 1:1 2,3 41,03

0,5 1:2 2,5 35,90

1,0 1:0,5 2,6 33,33

1,0 1:1 2,9 25,64

1,0 1:2 3,2 17,95

Почва, загрязненная ионами Zn2+

1,0 - 1,7 56,41

0,5 1:0,5 2,4 38,46

0,5 1:1 2,6 33,33

0,5 1:2 2,9 25,64

1,0 1:0,5 2,7 30,77

1,0 1:1 3,4 12,82

1,0 1:2 3,7 5,13

Как показали данные экспериментов, присутствие ионов свинца и цинка в почве в концентрации 1 г/кг снижает объем выделяемого кислорода и ингибирует образование каталазы на 66 и 56 % соответственно. Это негативное воздействие металлов снижается при внесении в почву силикатов. Причем увеличение дозы внесения жидкого стекла от 0,5 до 2 г/кг повышает ферментативную активность. Так, ингибиро-вание металлами выделение кислорода в эксперименте снижалось до 18 % по свинцу и до 5 % по цинку (см. табл. 2).

Значения каталазной активности почвы после ремедиации подтвердило безопасность использования силикатов в составе жидкого стекла. Внесение мелиоранта-стабилизатора в загрязненную почву увеличивало выделение О2 во всех случаях примерно на 50 %. Критерием связывания ионов тяжелых металлов в труднодоступные соединения может выступать токсичность образцов почвы до и после внесения мелиоранта-стабилизатора. Токсичность определяли путем биотестирования на различных тест-объектах.

В основе метода определения токсичности на приборе «Биотокс-10м» лежит зависимость интенсивности свечения генно-инженерного

штамма микроорганизмов от воздействия токсичных веществ [10]. Люминесцентные бактерии в составе препарата «Эколюм» содержат люциферазу (окислительный фермент, катализирующий реакцию, сопровождающуюся испусканием света, биолюминесценцией), которая осуществляет трансформацию энергии химических связей жизненно важных метаболитов.

Биолюминесценция является аналитическим сигналом, который можно качественно и количественно зафиксировать; изменение биолюминесценции обратно пропорционально токсическому эффекту.

Как следует из представленных в табл. 3 данных, почва, загрязненная свинцом более токсична, чем почва, загрязненная ионами цинка при одинаковых исходных концентрациях. При концентрации ионов свинца 1 г/кг токсичность почвы по интенсивности свечения бактерий составила 74 %, при той же концентрации ионов цинка - 44 %.

Таблица 3

Токсичность почвы в зависимости от соотношения содержания ионов РЬ2+, 2п2+ и жидкого стекла

Концентрация Соотношение Интенсивность Токсичность, Снижение

иона металла ион металла : свечения, имп/с % токсичности,

в почве, г/кг жидкое стекло %

Почва без дополнительных внесений

- - 79167 - -

Почва, загрязненная ионами РЬ2+

1,0 - 19734 74,33

0,5 1:0,5 44937 41,49

0,5 1:1 48377 37,07

0,5 1:2 51772 32,65

1,0 1:0,5 34937 54,55 26,61

1,0 1:1 36674 52,29 29,65

1,0 1:2 42054 45,49 38,30

Почва, загрязненная ионами 1н2+

1,0 - 43251 43,73 -

0,5 1:0,5 54310 29,83

0,5 1:1 56246 26,83

0,5 1:2 61294 20,52

1,0 1:0,5 45243 41,14 5,92

1,0 1:1 49910 35,07 19,80

1,0 1:2 52638 31,52 27,92

Внесение жидкого стекла в почву снижает токсичность, при этом увеличение соотношения металл : жидкое стекло в сторону жидкого стекла способствует снижению токсичности почвы в 1,5-2 раза, так при ис-

ходной концентрации свинца 1 г/кг токсичность снижается с 74 до 46 %, а в случае цинка при той же исходной концентрации с 44 до 31 %.

В качестве тест-объекта также использовали альгологически чистую культуру микроводорослей Scenedesmusquadricauda, находящуюся в фазе экспоненциального роста. Данный вид микроорганизмов относится к ценобиальным организмам, у которых размножение происходит путем образования внутри материнской клетки 2-, 4-, реже 8-и 16-клеточных ценобиев (смыкание одноклеточных водорослей в колонию из клеток одной и той же генерации) [11].

В качестве питательной среды использовали среду Успенского № 1 с добавлением вытяжек исследуемых образцов почв при различных разведениях. Подсчет численности клеток проводили под микроскопом в камере Горяева. Выживаемость клеток микроводорослей и скорость их размножения коррелируют с наличием в культуральной среде токсичных для данного микроорганизма соединений, что позволяет расчетным путем определить токсичность исследуемых образцов (табл. 4).

Таблица 4

Токсичность почвы по выживаемости клеток водорослей

Концентрация Соотношение Численность Токсичность, Снижение

металла в почве, ион металла : клеток через % токсичности, %

г/кг жидкое стекло 72 ч, тыс. кл.

Почва без дополнительных внесений

- - 302,8 - -

Почва, загрязненная ионами Pb2+

1,0 - 105,4 65,2 -

1,0 1:1 153,2 49,4 24,23

Почва, загрязненная ионами Zn2+

1,0 - 135,4 55,3 -

1,0 1:1 193,8 36,0 34,9

В связи с трудоемкостью проведения анализа проверяли только несколько проб почвы, а именно незагрязненную - в качестве контроля и с внесением ионов в концентрации 1 г/кг почвы до и после связывания их силикатом.

Полученные данные подтверждают принципиальную возможность стабилизации ионов тяжелых металлов в почве за счет внесения жидкого стекла в качестве мелиоранта-стабилизатора. Его внесение в почву в соотношении с металлом 1:1 снижает токсичность в 1,5-2,5 раза.

Фитотест основан на способности семян растений адекватно реагировать на экзогенное химическое воздействие путем изменения интенсивности прорастания корней, что позволяет длину последних принимать за показатель тест-функции: критерием вредного действия считается ингибирование роста корней семян (рисунок). Определение фитотоксического эффекта метода оценивали при сравнении тест-функции контрольных и исследуемых образцов (табл. 5) [12].

а б

Рис. Пример влияния водных вытяжек почвы на интенсивность роста корней: а - до обработки силикатами; б - после обработки силикатами

Таблица 5

Оценка токсичности почвы по длине проростков семян овса

Концентрация Соотношение Результаты фитотеста Снижение

металла в почве, ион металла : средняя длина токсичность % токсичности,

г/кг жидкое стекло проростков, см %

Почва без дополнительных внесений

- - 4.59 - -

Почва, загрязненная ионами РЬ2+

1,0 - 1,45 68,41 -

0,5 1:0,5 3,3 28,10

0,5 1:1 3,55 22,66

0,5 1:2 3,86 15,9

1,0 1:0,5 1,42 67,5 1,33

1,0 1:1 2,92 51,63 24,53

1,0 1:2 3,59 21,79 68,15

Почва, загрязненная ионами 1п2+

1,0 - 2,18 52,5 -

0,5 1:0,5 2,62 42,92

0,5 1:1 4,16 9,37

0,5 1:2 4,39 4,81

1,0 1:0,5 2,85 37,91 27,79

1,0 1:1 2,89 37,0 29,52

1,0 1:2 3,85 16,12 69,30

По данным, приведенным в табл. 5, наблюдается сохранение закономерностей, полученных ранее. Также заметно снижение токсичности загрязненной металлами почвы при увеличении дозы внесения силикатов. Токсичность почвы, загрязненной ионами свинца, и в этом тесте значительно выше, нежели токсичность почвы, загрязненной цинком. Общее снижение токсичности составило от 18 до 70 % за счет связывания ионов тяжелых металлов силикатами жидкого стекла.

Таким образом, аналитическим методом и методами биотестирования почвы, загрязненной свинцом и цинком до и после ее ремедиа-ции, наглядно и достоверно показана возможность использования силикатов в составе жидкого стекла для связывания металлов в трудно растворимые и трудно утилизируемые соединения, не оказывающие влияния на токсичность почвы. При такой обработке загрязненной почвы снижается концентрация свободных и подвижных форм тяжелых металлов и увеличивается ее биологическая доброкачественность.

Список литературы

1. Градова Н.Б., Кузнецов А.Е. Прикладная экобиотехнология: учеб. пособие: в 2 т. - 2-е изд. - М.: Бином, 2012. - Т. 2. - 629 с.

2. Экология и безопасность в техносфере: современные проблемы и пути решения: сб. тр. Всерос. науч.-практ. конф. / В.М. Гришарин [и др.]. - М.; Берлин: Директ медиа, 2015. - 443 с.

3. Костина Л.В., Куюкина М.С., Ившина И.Б. Методы очистки загрязненных тяжелыми металлами почв с использованием (био)сурфактантов // Вестник Пермского университета. Биология. -2009. - Вып. 10. - С. 96-110.

4. Портнова А.В. Ремедиация почвы, загрязненной тяжелыми металлами, с помощью мелиорантов-стабилизаторов: автореф. дис. ... канд. хим. наук. - Пермь: Изд-во Перм. гос. техн. ун-та, 2009. - 16 с.

5. Носенко Е. А., Леонтьева Г. В. Понижение уровня биодоступности тяжелых металлов в загрязненной почве // Химия и экология: тез. докл. краевой науч.-практ. конф. студентов и молодых ученых. -Пермь: Изд-во Перм. нац. исслед. политехн. ун-та, 2015. - С. 60-62.

6. ГОСТ 13078-81. Стекло натриевое жидкое. Технические условия с изм. № 1, 2. - М.: Стандартинформ, 2005. - 11 с.

7. Паспорт безопасности химической продукции. Стекло натриевое жидкое [Электронный ресурс]. - URL: http://stproduct.ru/data/ pasport_hb.pdf (дата обращения: 15.05.2017).

8. ГОСТ 17.4.1.02-83. Охрана природы. Почвы. Классификация химических веществ для контроля загрязнения. - М.: Госстандарт, 1983. - 12 с.

9. Практикум по агрохимии / В.Г. Минеев [и др.]. - Изд. 2-е, пе-рераб. и доп. - М.: Изд-во МГУ, 2001. - 689 с.

10. Определение общей токсичности почв по интенсивности биолюминесценции бактерий [Электронный ресурс]. - URL: http:// www.biotox.ru/why_job (дата обращения: 15.05.2017).

11. ФР 1.39.2007.03223. Биологические методы контроля. Методика определения токсичности вод, водных вытяжек из почв, осадков сточных вод и отходов по изменению уровня флуоресценции хлорофилла и численности клеток водорослей [Электронный ресурс]. - URL: http://www.opengost.ru/download/4343/FR_1_39_2007_03223_Biologiche skie_metody_kontrolya_Metodika_opredeleniya_toksichnosti_vod_po_izm eneniyu_urovnya_fluorescencii_hlorofilla_i_chislennosti_kletok_vodorosle y.html (дата обращения: 15.05.2017).

12. МР 2.1.7.2297-07. Обоснование класса опасности отходов производства и потребления по фитотоксичности [Электронный ресурс]. - URL: http://www.infosait.ru/norma_doc/52/52957/index.htm (дата обращения: 15.05.2017).

References

1. Gradova N.B., Kuznetsov A.E. Prikladnaia ekobiotekhnologiia. Tom 2 [Applied ecobiotechnology. Vol. 2]. 2nd ed. Moscow, Izdatel'stvo Binom, 2012, 629 p.

2. Grisharin V.M. et al. Ekologiia i bezopasnost' v tekhnosfere: sovremennye problemy i puti resheniia [Ecology and safety in the technosphere: current problems and solutions]. Sbornik trudov vserossiiskoi nauchno-prakticheskoi konferentsii. Moscow, Berlin, Direkt media, 2015, 443 p.

3. Kostina L.V., Kuiukina M.S., Ivshina I.B. Metody ochistki zagriaznennykh tiazhelymi metallami pochv s ispol'zovaniem (bio)surfaktantov [Methods for cleaning soils contaminated with heavy metals using (bio) surfactants]. Vestnik Permskogo universiteta. Seriia: Biologiia, iss. 10, 2009, pp. 96-110.

4. Portnova A.V. Remediatsiia pochvy, zagriaznennoi tiazhelymi metallami, s pomoshch'iu meliorantov-stabilizatorov [Remediation of soil contaminated with heavy metals, with the help of meliorant stabilizers]. Abstract of Ph. D. thesis. Perm, PGTU, 2009, 16 p.

5. Nosenko E.A., Leont'eva G.V. Ponizhenie urovnia biodostupnosti tiazhelykh metallov v zagriaznennoi pochve [Decrease in bioavailability of heavy metals in contaminated soil]. Khimiia i ekologiia. Tezisy dokladov kraevoi nauchno-prakticheskoi konferentsii studentov i molodykh uchenykh. Perm, Izdatel'stvo PNIPU 2015, рр. 60-62.

6. GOST 13078-81. Steklo natrievoe zhidkoe. Tekhnicheskie usloviia s izm. №1, 2 [Sodium liquid glass. Specifications with change no. 1,2]. Moscow, Izdatel'stvo Standartinform, 2005, 11 p.

7. Pasport bezopasnosti khimicheskoi produktsii. Steklo natrievoe zhidkoe [Safety data sheet for chemical products. Sodium liquid glass], available at: http://stproduct.ru/data/pasport_hb.pdf (accessed 15 May 2017).

8. GOST 17.4.1.02-83. Okhrana prirody. Pochvy. Klassifikatsiia khimicheskikh veshchestv dlia kontrolia zagriazneniia [Protection of Nature. Soil. Classification of chemicals for pollution control]. Moscow, Gosstandart, 1983, 12 р.

9. Mineev V.G. et al. Praktikum po agrokhimii [Workshop on agrochemistry]. 2nd ed. Moscow, Izdatel'stvo MGU, 2001, 689 p.

10. Opredelenie obshchei toksichnosti pochv po intensivnosti bioliuminestsentsii bakterii [Determination of the general toxicity of soils according to the intensity of bioluminescence of bacteria], available at: http://www.biotox.ru/why_job (accessed 15 May 2017).

11. FR 1.39.2007.03223. Biologicheskie metody kontrolia. Metodika opredeleniia toksichnosti vod, vodnykh vytiazhek iz pochv, osadkov stochnykh vod i otkhodov po izmeneniiu urovnia fluorestsentsii khlorofilla i chislennosti kletok vodoroslei [Biological methods of control. Method for determining the toxicity of water, water extracts from soils, sewage sludge and waste by changing the fluorescence level of chlorophyll and the number of algal cells], available at: http://www.opengost.ru/download/4343/ FR_1_39_2007_03223_Biologicheskie_metody_kontrolya_Metodika_opred eleniya_toksichnosti_vod_po_izmeneniyu_urovnya_fluorescencii_hlorofilla _i_chislennosti_kletok_vodorosley.html (accessed 15 May 2017).

12. MR 2.1.7.2297—07 Obosnovanie klassa opasnosti otkhodov proizvodstva i potrebleniia po fitotoksichnosti [Substantiation of hazard class of production and consumption waste by phytotoxicity], available at: http://www.infosait.ru/norma_doc/52/52957/index.htm (accessed 15 May 2017).

Получено 01.06.2017

Об авторах

Виноградова Ангелина Васильевна (Пермь, Россия) - кандидат биологических наук, доцент кафедры химии и биотехнологии Пермского национального исследовательского политехнического университета (614990, г. Пермь, Комсомольский пр., 29, e-mail: angvin@yandex.ru).

Зоричева Анастасия Сергеевна (Пермь, Россия) - магистрант кафедры химии и биотехнологии Пермского национального исследовательского политехнического университета (614990, г. Пермь, Комсомольский пр., 29, e-mail: yezha@yandex.ru).

About the authors

Angelina V. Vinogradova (Perm, Russian Federation) - Ph.D. of Biological Scinces, Asociate Department of Chemistry and Biotechnology, Perm National Research Politechnic University (29, Komsomolsky av., 614990, Perm, Russian Federation e-mail angvin@yandex.ru).

Anastasiya S. Zoricheva (Perm, Russian Federation) - Master Student, Department of Chemistry and Biotechnology, Perm National Research Politechnic University (29, Komsomolsky av., 614990, Perm, Russian Federation, e-mail yezha@yandex.ru).