КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ 15-HEPE, И СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ ИЛИ ПРЕДОТВРАЩЕНИЯ ФИБРОЗА С ПРИМЕНЕНИЕМ УКАЗАННЫХ КОМПОЗИЦИЙ
COMPOSITIONS CONTAINING 15-HEPE, AND METHODS OF TREATING OR PREVENTING FIBROSIS USING SAID COMPOSITIONS

Заявление о праве на приоритет
[0001]
Настоящая заявка испрашивает приоритет на основании предварительной заявки на патент США № 62/086535 поданной 2 декабря 2014 г., содержание которой полностью включено в настоящую заявку посредством ссылки.
Область техники
[0002]
Согласно настоящему изобретению предложены композиции, лекарственные формы и способы лечения или предотвращения фиброза (например, фиброза печени) путем введения фармацевтической композиции, содержащей 15-гидроксиэйкозапентаеновую кислоту (также обозначаемую как 15-HEPE или 15-OHEPA) нуждающемуся в этом субъекту.
Уровень техники
[0003]
J. Clin. Invest.
Фиброз характеризуется образованием избыточной соединительной ткани в органе или ткани. Как правило, фиброз возникает в ответ на повреждение органа или ткани. Поскольку этот процесс может включать сшивание молекул соединительной ткани, эффективные способы лечения для регрессии фиброза немногочисленны и редки. Хотя теоретически возможность профилактического лечения уже давно предсказана, механизм фиброза до сих пор оказывается слишком сложным для объяснения. На сегодняшний день, например, не существует одобренных FDA способов лечения фиброза печени, и только несколько предложенных способов лечения продемонстрировали потенциал в течение последних двух десятилетий. См., например, Schuppan and Kim, , vol. 123(5), с. 1887-1901 (2013).
[0004]
Поэтому существует потребность в улучшенных способах лечения и/или предотвращения фиброза.
Краткое описание изобретения
[0005]
Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения предложены способы лечения и/или предотвращения фиброза у нуждающегося в этом субъекта, причем этот способ включает введение субъекту композиции, содержащей 15-HEPE.
[0006]
Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения предложены способы лечения фиброза у субъекта, который находится в процессе лечения фиброза, причем этот способ включает введение субъекту композиции, содержащей 15-HEPE.
[0007]
Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения предложены композиции для лечения и/или предотвращения фиброза у нуждающегося в этом субъекта, причем композиции содержат эффективное количество 15-HEPE.
[0008]
Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения предложены способы применения 15-HEPE для получения лекарственного средства для лечения и/или предотвращения фиброза у субъекта.
[0009]
Другие особенности и преимущества раскрытой в настоящей заявке технологии будут очевидны из последующего подробного описания.
Краткое описание чертежей
[0010]
На Фиг. 1 показаны различия в триглицеридах в сыворотке крови у мышей, получавших однократную дозу стептозотоцина после рождения, рацион кормления которых отличался высоким содержанием жиров в течение 4 недель, затем лечили в течение 8 недель с использованием носителя, телмисартана (2-(4-{[4-метил-6-(1-метил-1Н-1,3-бензодиазол-2-ил)-2-пропил-1Н-1,3-бензодиазол-1 ил]метил}фенил)бензойной кислоты, также называемого MICARDIS), 15-гидроксиэйкоза-8(Z),11(Z),13(E)-триеновой кислоты (15-HETrE) или 15-HEPE.
[0011]
На Фиг. 2 показаны различия в уровнях липопротеинов очень низкой плотности (ЛПОНП) у мышей, получавших однократную дозу стептозотоцина после рождения, рацион кормления которых отличался высоким содержанием жиров в течение 4 недель, затем лечили в течение 8 недель с использованием носителя, телмисартана, 15-HETrE или 15-HEPE.
[0012]
На Фиг.3 показаны различия в уровнях липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) у мышей, получавших однократную дозу стептозотоцина после рождения, рацион кормления которых отличался высоким содержанием жиров в течение 4 недель, затем лечили в течение 8 недель с использованием носителя, телмисартана, 15-HETrE или 15-HEPE.
[0013]
На Фиг. 4 показаны различия в уровнях общего холестерина у мышей, получавших однократную дозу стептозотоцина после рождения, рацион кормления которых отличался высоким содержанием жиров в течение 4 недель, затем лечили в течение 8 недель с использованием носителя, телмисартана, 15-HETrE или 15-HEPE.
[0014]
На Фиг. 5 показаны различия в уровнях гидроксипролина у мышей, получавших однократную дозу стептозотоцина после рождения, рацион кормления которых отличался высоким содержанием жиров в течение 4 недель, затем лечили в течение 8 недель с использованием носителя, телмисартана, 15-HETrE или 15-HEPE.
[0015]
На Фиг. 6 показаны различия в уровнях аланинаминотрансферазы (АЛТ) в плазме у мышей, получавших однократную дозу стептозотоцина после рождения, рацион кормления которых отличался высоким содержанием жиров в течение 4 недель, затем лечили в течение 8 недель с использованием носителя, телмисартана, 15-HETrE или 15-HEPE.
[0016]
На Фиг.7А показана гистология (окраска сириусом красным, увеличение x200), указывающая на образование коллагена у мышей, получавших однократную дозу стептозотоцина после рождения, рацион кормления которых отличался высоким содержанием жиров в течение 4 недель, затем лечили в течение 8 недель с использованием носителя. На Фиг.7B показана гистология (окраска сириусом красным, увеличение x200), указывающая на образование коллагена у мышей, получавших однократную дозу стептозотоцина после рождения, рацион кормления которых отличался высоким содержанием жиров в течение 4 недель, затем лечили в течение 8 недель с использованием телмисартана. На Фиг.7C показана гистология (окраска сириусом красным, увеличение x200), указывающая на образование коллагена у мышей, получавших однократную дозу стептозотоцина после рождения, рацион кормления которых отличался высоким содержанием жиров в течение 4 недель, затем лечили в течение 8 недель с использованием 15-HEPE. На Фиг.7D графически показана степень окраски сириусом красным, наблюдаемая в гистологических образцах на Фиг. 7А-7С.
[0017]
На Фиг.8А показана гистология (окраска гематоксилином и эозином, увеличение x200) тканей печени, полученных от мышей, получавших однократную дозу стептозотоцина после рождения, рацион кормления которых отличался высоким содержанием жиров в течение 4 недель, затем лечили в течение 8 недель с использованием носителя. На Фиг.8B показана гистология (окраска гематоксилином и эозином, увеличение x200) тканей печени, полученных от мышей, получавших однократную дозу стептозотоцина после рождения, рацион кормления которых отличался высоким содержанием жиров в течение 4 недель, затем лечили в течение 8 недель с использованием телмисартана. На Фиг.8С показана гистология (окраска гематоксилином и эозином, увеличение x200) тканей печени, полученных от мышей, получавших однократную дозу стептозотоцина после рождения, рацион кормления которых отличался высоким содержанием жиров в течение 4 недель, затем лечили в течение 8 недель с использованием 15-HEPE. На Фиг. 8D показаза шкала активности НАЖБП (NAS) для мышей, получавших однократную дозу стептозотоцина после рождения, рацион кормления которых отличался высоким содержанием жиров в течение 4 недель, затем лечили в течение 8 недель с использованием носителя, телмисартана, 15-HETrE (низкой или высокой дозой) или 15-HEPE (низкой или высокой дозой).
[0018]
На Фиг. 9 показано действие 15-HЕPE по сравнению с носителем, телмисартаном и ЭПК после 4 недель в модели на мышах.
[0019]
На Фиг. 10 показано ингибирование TGF-бета индуцированного продуцирования альфа-SMA с использованием 15-HEPE при 100 мкг/мл.
[0020]
На Фиг.11 показана концентрация 15-HEPE в печени и легких у животных, которым вводили 15-HEPE (DS102) в количестве 500 мг/кг в течение 7 дней по сравнению с животными, не проходившими лечение.
Подробное описание
[0021]
Согласно настоящему изобретению предложены композиции, содержащие 15-HEPE, и способы применения указанных композиций для лечения и/или предотвращения фиброза у нуждающегося в этом субъекта.
[0022]
15-гидрокси-эйкоза-5,8,11,13,17-пентаеновая кислота представляет собой функционализированную жирную кислоту, имеющую общую структуру, показанную на Формуле (I).
Формула (I)
[0023]
1-4
3
2
3
S
15-HEPE может быть синтезирована из эйкозапентаеновой кислоты (ЭПК) согласно способам, известным в данной области техники. Используемый в настоящей заявке термин «15-HEPE» может относиться к 15-HEPE в форме ее свободной кислоты (например, 15-гидрокси-эйкоза-5,8,11,13,17-пентаеновая кислота; R=R'=H в Формула (I)) и/или к ее производной, такой как фармацевтически приемлемый сложный эфир (R≠H), конъюгат или соль (R представляет собой ион), согласующейся с Формулой (I), или смеси любых из вышеперечисленных соединений. Производная 15-HEPE (например, R≠H и/или R'≠H) может быть использована в качестве альтернативы. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения 15-HEPE используют в форме свободной кислоты (т.е., R=H). Согласно некоторым альтернативным вариантам реализации настоящего изобретения используют фармацевтически приемлемые сложные эфиры или соли 15-HEPE. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения 15-HEPE находится в форме сложного Cалкилового эфира, например, в форме метилового эфира (R=CH) или этилового эфира (R=CHCH). 15-HEPE представляет собой хиральную молекулу и может быть использована в виде 15(S)- или 15(R)- энантиомерной формы, энантиомерно обогащенной формы или в виде рацемической смеси. Используемый в настоящей заявке термин «15-HEPE» включает все такие формы без ограничения по стереоспецифичности. Согласно другому варианту реализации изобретения 15-HEPE включает в себя 15(S) форму: 15()-гидрокси-(5Z,8Z,11Z,13E,17Z)-эйкозапентаеновую кислоту или ее производную. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения 15-HEPE может быть использована в форме сложного этилового эфира.
[0024]
Используемый в настоящей заявке термин «ЭПК» относится к эйкоза-5,8,11,14,17-пентаеновой кислоте, также известной как 20:5n-3, омега-3 жирная кислота. ЭПК легко доступна из коммерческих источников.
[0025]
Таким образом, согласно одному варианту настоящего изобретения предложен способ лечения и/или предотвращения фиброза у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества композиции, содержащей 15-HEPE.
[0026]
Согласно настоящему изобретению предложена 15-HEPE или композиция, содержащая 15-HEPE, для применения при лечении и/или предотвращении фиброза.
[0027]
Согласно настоящему изобретению предложено применение 15-HEPE или композиции, содержащей 15-HEPE, для получения лекарственного средства для лечения и/или предотвращения фиброза.
[0028]
В другом варианте настоящего изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество 15-HEPE. 15-HEPE может быть единственным активным ингредиентом (например, API) в фармацевтической композиции и в способах и способах применения, как указано в настоящей заявке. 15-HEPE может представлять собой единственный активный ингредиент. В альтернативном варианте 15-HEPE может быть скомбинирована с другим средством или средствами для лечения и/или предотвращения фиброза для приготовления лекарственной формы или совместного введения. При использовании дополнительного средства или средств, 15-HEPE может быть представлена в виде комбинированной единичной дозированной формы, или 15-HEPE и дополнительное терапевтическое средство для лечения фиброза могут быть представлены в виде двух или нескольких единиц дозирования для координированного, комбинированного или сопутствующего введения.
[0029]
Согласно настоящему изобретению также предложены лекарственные формы 15-HEPE и лекарственные формы, содержащие 15-HEPE, и способы применения этих лекарственных форм для лечения и/или предотвращения фиброза.
[0030]
Согласно настоящему изобретению дополнительно предложена фармацевтическая композиция для пероральной доставки, содержащая 15-HEPE. Данная композиция может содержать фармацевтически приемлемый эксципиент. 15-HEPE может быть представлена в любой форме, как описано в настоящей заявке. 15-HEPE может присутствовать в количестве от примерно 50 мг до примерно 3000 мг.
15-
Гидроксиэйкозапентаеновая кислота (15-HEPE)
[0031]
Согласно одному варианту реализации изобретения композиции по настоящему изобретению содержат 15-HEPE в качестве активного ингредиента. 15-HEPE является аббревиатурой для 15-гидроксиэйкозапентаеновой кислоты, метаболита эйкозапентаеновой кислоты (ЭПК), которая может быть синтезирована способами, известными в данной области техники, такими как воздействие эйкозапентаеновой кислоты на фермент 15-липоксигеназу. Используемый в настоящей заявке термин «15-HEPE» относится к 15-HEPE в форме ее свободной кислоты (например, 15- гидроксиэйкозапентаеновой кислоты) и/или к ее фармацевтически приемлемому сложному эфиру, конъюгату или соли, или к смесям любых из вышеперечисленных соединений. Может быть использована производная 15-HEPE в качестве альтернативы, тем не менее эта производная не включает в себя любую производную соединения, у которой отсутствует гидроксигруппа 15-HEPE. Термин «фармацевтически приемлемый» в данном контексте означает, что рассматриваемое вещество не вызывает неприемлемую токсичность для субъекта или неприемлемое взаимодействие с другими компонентами композиции.
[0032]
1
5
Согласно одному варианту реализации изобретения 15-HEPE находится в форме сложного эфира (также обозначенного в настоящей заявке как E-15-HEPE или этил-15-HEPE). Согласно другому варианту реализации изобретения 15-HEPE содержит сложный C - C алкиловый эфир 15-HEPE. Согласно другому варианту реализации изобретения 15-HEPE содержит сложный метиловый эфир 15-HEPE, пропиловый эфир 15-HEPE или бутиловый эфир 15-HEPE. Согласно еще одному варианту реализации изобретения 15-HEPE содержит оптически активную 15(S)-гидрокси-(5Z,8Z,11Z,13E,17Z)-эйкозапентаеновую кислоту. Данный изомер может быть использован в любой форме из рассмотренных выше.
[0033]
Согласно другому варианту реализации изобретения 15-HEPE содержит литиевую соль 15-HEPE, моно-, ди- или триглицерид 15-HEPE, или любой другой сложный эфир, или соль 15-HEPE, или 15-HEPE в форме свободной кислоты.
[0034]
Согласно различным вариантам реализации настоящего изобретения предложены фармацевтические композиции, например, композиции для пероральной доставки, содержащие 15-HEPE. Согласно одному варианту реализации изобретения композиции содержат терапевтически эффективное количество 15-HEPE. Согласно одному варианту реализации изобретения фармацевтическая композиция содержит от примерно 0,1% до примерно 99%, от примерно 1% до примерно 95%, от примерно 5% до примерно 90% масс. 15-HEPE.
[0035]
Согласно одному варианту реализации изобретения фармацевтическая композиция содержит по меньшей мере примерно 70%, по меньшей мере 80% или по меньшей мере 90% масс. 15-HEPE. Согласно одному варианту реализации изобретения фармацевтическая композиция содержит по меньшей мере примерно 50%, по меньшей мере примерно 60%, по меньшей мере примерно 70%, по меньшей мере примерно 80% или по меньшей мере примерно 90% масс. 15-HEPE.
[0036]
Согласно одному варианту реализации изобретения 15-HEPE присутствует в композиции по настоящему изобретению в количестве от примерно 1 мг до примерно 10000 мг, 25 мг до примерно 7500 мг, от примерно 25 мг до примерно 5000 мг, от примерно 50 мг до примерно 5000 мг, от примерно 50 мг до примерно 3000 мг, от примерно 75 мг до примерно 2500 мг, или от примерно 100 мг до примерно 1000 мг, например, примерно 25мг, примерно 50мг, примерно 75 мг, примерно 100 мг, примерно 125 мг, примерно 150 мг, примерно 175 мг, примерно 200 мг, примерно 225 мг, примерно 250 мг, примерно 275 мг, примерно 300 мг, примерно 325 мг, примерно 350 мг, примерно 375 мг, примерно 400 мг, примерно 425 мг, примерно 450 мг, примерно 475 мг, примерно 500 мг, примерно 525 мг, примерно 550 мг, примерно 575 мг, примерно 600 мг, примерно 625 мг, примерно 650 мг, примерно 675 мг, примерно 700 мг, примерно 725 мг, примерно 750 мг, примерно 775 мг, примерно 800 мг, примерно 825 мг, примерно 850 мг, примерно 875 мг, примерно 900 мг, примерно 925 мг, примерно 950 мг, примерно 975 мг, примерно 1000 мг, примерно 1025 мг, примерно 1050 мг, примерно 1075 мг, примерно 1100 мг, примерно 1025 мг, примерно 1050 мг, примерно 1075 мг, примерно 1200 мг, примерно 1225 мг, примерно 1250 мг, примерно 1275 мг, примерно 1300 мг, примерно 1325 мг, примерно 1350 мг, примерно 1375 мг, примерно 1400 мг, примерно 1425 мг, примерно 1450 мг, примерно 1475 мг, примерно 1500 мг, примерно 1525 мг, примерно 1550 мг, примерно 1575 мг, примерно 1600 мг, примерно 1625 мг, примерно 1650 мг, примерно 1675 мг, примерно 1700 мг, примерно 1725 мг, примерно 1750 мг, примерно 1775 мг, примерно 1800 мг, примерно 1825 мг, примерно 1850 мг, примерно 1875 мг, примерно 1900 мг, примерно 1925 мг, примерно 1950 мг, примерно 1975 мг, примерно 2000 мг, примерно 2025 мг, примерно 2050 мг, примерно 2075 мг, примерно 2100 мг, примерно 2125 мг, примерно 2150 мг, примерно 2175 мг, примерно 2200 мг, примерно 2225 мг, примерно 2250 мг, примерно 2275 мг, примерно 2300 мг, примерно 2325 мг, примерно 2350 мг, примерно 2375 мг, примерно 2400 мг, примерно 2425 мг, примерно 2450 мг, примерно 2475 мг, примерно 2500 мг, примерно 2525 мг, примерно 2550 мг, примерно 2575 мг, примерно 2600 мг, примерно 2625 мг, примерно 2650 мг, примерно 2675 мг, примерно 2700 мг, примерно 2725 мг, примерно 2750 мг, примерно 2775 мг, примерно 2800 мг, примерно 2825 мг, примерно 2850 мг, примерно 2875 мг, примерно 2900 мг, примерно 2925 мг, примерно 2950 мг, примерно 2975 мг, примерно 3000 мг, примерно 3025 мг, примерно 3050 мг, примерно 3075 мг, примерно 3100 мг, примерно 3125 мг, примерно 3150 мг, примерно 3175 мг, примерно 3200 мг, примерно 3225 мг, примерно 3250 мг, примерно 3275 мг, примерно 3300 мг, примерно 3325 мг, примерно 3350 мг, примерно 3375 мг, примерно 3400 мг, примерно 3425 мг, примерно 3450 мг, примерно 3475 мг, примерно 3500 мг, примерно 3525 мг, примерно 3550 мг, примерно 3575 мг, примерно 3600 мг, примерно 3625 мг, примерно 3650 мг, примерно 3675 мг, примерно 3700 мг, примерно 3725 мг, примерно 3750 мг, примерно 3775 мг, примерно 3800 мг, примерно 3825 мг, примерно 3850 мг, примерно 3875 мг, примерно 3900 мг, примерно 3925 мг, примерно 3950 мг, примерно 3975 мг, примерно 4000 мг, примерно 4025 мг, примерно 4050 мг, примерно 4075 мг, примерно 4100 мг, примерно 4125 мг, примерно 4150 мг, примерно 4175 мг, примерно 4200 мг, примерно 4225 мг, примерно 4250 мг, примерно 4275 мг, примерно 4300 мг, примерно 4325 мг, примерно 4350 мг, примерно 4375 мг, примерно 4400 мг, примерно 4425 мг, примерно 4450 мг, примерно 4475 мг, примерно 4500 мг, примерно 4525 мг, примерно 4550 мг, примерно 4575 мг, примерно 4600 мг, примерно 4625 мг, примерно 4650 мг, примерно 4675 мг, примерно 4700 мг, примерно 4725 мг, примерно 4750 мг, примерно 4775 мг, примерно 4800 мг, примерно 4825 мг, примерно 4850 мг, примерно 4875 мг, примерно 4900 мг, примерно 4925 мг, примерно 4950 мг, примерно 4975 мг, примерно 5000 мг, примерно 5025 мг, примерно 5050 мг, примерно 5075 мг, примерно 5100 мг, примерно 5125 мг, примерно 5150 мг, примерно 5175 мг, примерно 5200 мг, примерно 5225 мг, примерно 5250 мг, примерно 5275 мг, примерно 5300 мг, примерно 5325 мг, примерно 5350 мг, примерно 5375 мг, примерно 5400 мг, примерно 5425 мг, примерно 5450 мг, примерно 5475 мг, примерно 5500 мг, примерно 5525 мг, примерно 5550 мг, примерно 5575 мг, примерно 5600 мг, примерно 5625 мг, примерно 5650 мг, примерно 5675 мг, примерно 5700 мг, примерно 5725 мг, примерно 5750 мг, примерно 5775 мг, примерно 5800 мг, примерно 5825 мг, примерно 5850 мг, примерно 5875 мг, примерно 5900 мг, примерно 5925 мг, примерно 5950 мг, примерно 5975 мг, примерно 6000 мг, примерно 6025 мг, примерно 6050 мг, примерно 6075 мг, примерно 6100 мг, примерно 6125 мг, примерно 6150 мг, примерно 6175 мг, примерно 6200 мг, примерно 6225 мг, примерно 6250 мг, примерно 6275 мг, примерно 6300 мг, примерно 6325 мг, примерно 6350 мг, примерно 6375 мг, примерно 6400 мг, примерно 6425 мг, примерно 6450 мг, примерно 6475 мг, примерно 6500 мг, примерно 6525 мг, примерно 6550 мг, примерно 6575 мг, примерно 6600 мг, примерно 6625 мг, примерно 6650 мг, примерно 6675 мг, примерно 6700 мг, примерно 6725 мг, примерно 6750 мг, примерно 6775 мг, примерно 6800 мг, примерно 6825 мг, примерно 6850 мг, примерно 6875 мг, примерно 6900 мг, примерно 6925 мг, примерно 6950 мг, примерно 6975 мг, примерно 7000 мг, примерно 7025 мг, примерно 7050 мг, примерно 7075 мг, примерно 7100 мг, примерно 7125 мг, примерно 7150 мг, примерно 7175 мг, примерно 7200 мг, примерно 7225 мг, примерно 7250 мг, примерно 7275 мг, примерно 7300 мг, примерно 7325 мг, примерно 7350 мг, примерно 7375 мг, примерно 7400 мг, примерно 7425 мг, примерно 7450 мг, примерно 7475 мг, примерно 7500 мг, примерно 7525 мг, примерно 7550 мг, примерно 7575 мг, примерно 7600 мг, примерно 7625 мг, примерно 7650 мг, примерно 7675 мг, примерно 7700 мг, примерно 7725 мг, примерно 7750 мг, примерно 7775 мг, примерно 7800 мг, примерно 7825 мг, примерно 7850 мг, примерно 7875 мг, примерно 7900 мг, примерно 7925 мг, примерно 7950 мг, примерно 7975 мг, примерно 8000 мг, примерно 8025 мг, примерно 8050 мг, примерно 8075 мг, примерно 8100 мг, примерно 8125 мг, примерно 8150 мг, примерно 8175 мг, примерно 8200 мг, примерно 8225 мг, примерно 8250 мг, примерно 8275 мг, примерно 8300 мг, примерно 8325 мг, примерно 8350 мг, примерно 8375 мг, примерно 8400 мг, примерно 8425 мг, примерно 8450 мг, примерно 8475 мг, примерно 8500 мг, примерно 8525 мг, примерно 8550 мг, примерно 8575 мг, примерно 8600 мг, примерно 8625 мг, примерно 8650 мг, примерно 8675 мг, примерно 8700 мг, примерно 8725 мг, примерно 8750 мг, примерно 8775 мг, примерно 8800 мг, примерно 8825 мг, примерно 8850 мг, примерно 8875 мг, примерно 8900 мг, примерно 8925 мг, примерно 8950 мг, примерно 8975 мг, примерно 9000 мг, примерно 9025 мг, примерно 9050 мг, примерно 9075 мг, примерно 9100 мг, примерно 9125 мг, примерно 9150 мг, примерно 9175 мг, примерно 9200 мг, примерно 9225 мг, примерно 9250 мг, примерно 9275 мг, примерно 9300 мг, примерно 9325 мг, примерно 9350 мг, примерно 9375 мг, примерно 9400 мг, примерно 9425 мг, примерно 9450 мг, примерно 9475 мг, примерно 9500 мг, примерно 9525 мг, примерно 9550 мг, примерно 9575 мг, примерно 9600 мг, примерно 9625 мг, примерно 9650 мг, примерно 9675 мг, примерно 9700 мг, примерно 9725 мг, примерно 9750 мг, примерно 9775 мг, примерно 9800 мг, примерно 9825 мг, примерно 9850 мг, примерно 9875 мг, примерно 9900 мг, примерно 9925 мг, примерно 9950 мг, примерно 9975 мг или примерно 10000 мг.
[0037]
Согласно одному варианту реализации изобретения 15-HEPE, которая присутствует в композиции по настоящему изобретению, содержит по меньшей мере 90% масс. 15-HEPE. 15-HEPE композиции могут содержать 15-HEPE даже более высокой чистоты, например, по меньшей мере 95% масс. 15-HEPE или по меньшей мере 97% масс.15-HEPE, где 15-HEPE представляет собой любую форму 15-HEPE, как изложено в настоящей заявке. Чистоту 15-HEPE можно дополнительно определить (например, профиль примесей) с помощью любой из описанных в настоящей заявке характеристик 15-HEPE.
[0038]
Выше рассмотрены количества 15-HEPE в фармацевтической композиции и их чистота. Природа незаменимых жирных кислот и их синтез таковы, что композиция 15-HEPE может содержать молекулы других незаменимых жирных кислот в метаболическом каскаде незаменимых жирных кислот.
[0039]
Согласно одному варианту реализации изобретения композиция по настоящему изобретению содержит не более чем примерно 10%, не более чем примерно 9%, не более чем примерно 8%, не более чем примерно 7%, не более чем примерно 6%, не более чем примерно 5%, не более чем примерно 4%, не более чем примерно 3%, не более чем примерно 2%, не более чем примерно 1% или не более чем примерно 0,5% масс. других омега-3 жирных кислот, включая альфа-линоленовую кислоту, стеаридоновую кислоту, докозагексаеновую кислоту (ДГК) или их производные. Согласно другому варианту реализации изобретения такие другие жирные омега-3 кислоты в значительной степени отсутствуют или отсутствуют полностью.
[0040]
Согласно другому варианту реализации изобретения 15-HEPE представляет собой по меньшей мере примерно 60%, по меньшей мере примерно 70%, по меньшей мере примерно 80%, по меньшей мере примерно 90%, по меньшей мере примерно 95%, по меньшей мере примерно 97%, по меньшей мере примерно 98%, по меньшей мере примерно 99% или 100% масс. всех жирных кислот, присутствующих в композиции по настоящему изобретению.
[0041]
Может присутствовать некоторое остаточное количество эйкозапентаеновой кислоты из синтеза 15-HEPE. Может присутствовать не более, чем примерно 10%, не более, чем примерно 9%, не более, чем примерно 8%, не более, чем примерно 7%, не более, чем примерно 6%, не более, чем примерно 5%, не более, чем примерно 4%, не более, чем примерно 3%, не более, чем примерно 2%, не более, чем примерно 1% или не более, чем примерно 0,5% масс. ЭПК. В альтернативном варианте ЭПК в форме, которая не была модифицирована до гидроксильной формы, в значительной степени отсутствует или отсутствует полностью.
Дополнительные активные средства
[0042]
Согласно одному варианту реализации изобретения фармацевтическая композиция дополнительно содержит по меньшей мере одно или несколько дополнительных активных средств. Согласно одному варианту реализации изобретения фармацевтическая композиция содержит количество дополнительного активного средства, которое меньше, чем общепринятое терапевтически эффективное количество этого средства. Согласно одному варианту реализации изобретения фармацевтическая композиция содержит количество дополнительного активного средства, которое равно или больше общепринятого терапевтически эффективного количества этого средства.
[0043]
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, дополнительное активное средство представляет собой неантивирусное средство против вируса гепатита С (HCV), антивирусное средство против HCV, неантивирусное средство против вируса гепатита B (HBV), антивирусное средство против HBV, средство против первичного билиарного цирроза, средство против алкогольного гепатита, средство против первичного склерозирующего холангита, средство против неалкогольного стеатогепатита (НАСГ), средство против аутоиммунного гепатита, средство против легочного фиброза, средство против кистозного фиброза, средство против фиброза почек, средство против фиброза кожи, средство против миелофиброза, средство против эозинофильного эзофагита, анти-TGF-β средство, анти-CTGF средство, средство рекомбинантного человеческого сывороточного амилоида Р, анти-IL-4 средство, анти-IL-5 средство (например, меполизумаб), анти-IL-13 средство, средство нейрохимического действия на рецепторы, анти-IL-17A средство, Hh или Hh(R) SMO антагонист, CCR5 антагонист, ингибитор CCR4 рекрутинга клеток, CXCR4 антагонист, анти-CXCR4 средство, CXCR3 антагонист, анти-CCL17 средство, ингибитор NOX, копаксон, адипонектин, агонист AMPK, Y-бокс связывающий белок-1, ингибитор рекрутинга миофибробластов, анти-Th17 MMP индуктор, соединение против осаждения внеклеточной матрицы, антагонист аденозиновых рецепторов, средство микроРНК (miR), стволовая клетка, тенофовир, антиколлагенное сшивающее средство (например, симтузумаб, могамулизумаб) или блокатор рецепторов ангиотензина II (БРА), выбранный из группы, состоящей из валсартана, телмисартана, лозартана, ирбесартана, азилсартана, эпросартана, олмесартана, или комбинацию любых из вышеперечисленных средств.
[0044]
Согласно одному варианту реализации изобретения одно или несколько дополнительных активных средств содержат, состоят в основном из или состоят из телмисартана.
[0045]
Согласно одному варианту реализации изобретения 15-HEPE и одно или несколько активных средств присутствуют в композиции по настоящему изобретению или их вводят совместно в массовом соотношении 15-HEPE: дополнительное средство от примерно 1: 1000 до примерно 1000: 1, от примерно 1: 500 до примерно 500: 1, от примерно 1: 100 до примерно 100: 1, от примерно 1:50 до примерно 50: 1, от примерно 1:25 до примерно 25: 1, от примерно 1:10 до примерно 10:1, от примерно 1: 5 до примерно 5: 1, от примерно 1: 4 до примерно 4: 1, от примерно 1: 3 до примерно 3: 1, от примерно 1: 2 до примерно 2: 1 или примерно 1: 1.
Лекарственные формы
[0046]
Композиция для применения в соответствии с изобретением может быть приготовлена в виде одной или нескольких единиц дозирования. Термины «стандартная доза» и «единица дозирования» в настоящей заявке относятся к части фармацевтической композиции, которая содержит количество терапевтического средства, пригодного для однократного введения, для обеспечения терапевтического эффекта. Такие единицы дозирования можно вводить от одного до нескольких (то есть от 1 до примерно 10, от 1 до 8, от 1 до 6, от 1 до 4 или от 1 до 2) раз в день или столько раз, сколько необходимо для получения терапевтического ответа.
[0047]
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения композиции по настоящему изобретению находятся в виде лекарственных форм или единиц дозирования для пероральной доставки. Неограничивающие примеры подходящих лекарственных форм включают таблетки (например, суспендируемые таблетки, раскусываемые суспендируемые таблетки, быстродиспергируемые таблетки, жевательные таблетки и т.д.), каплеты, капсулы (например, мягкую или твердую желатиновую капсулу или ГПМЦ капсулу), таблетки-леденцы, леденцы, саше, крахмальные капсулы, пастилки, пеллеты, суспензии, эликсиры, сиропы или любую другую твердую лекарственную форму, достоверно приспособленную для перорального введения. Термины «пероральная доставка» и «пероральное введение» в настоящей заявке включают любую форму доставки, при которой средство или композицию помещают в ротовую полость субъекту, проходящему лечение, вне зависимости от того, проглатывают ли средство или композицию или нет. Таким образом "пероральное введение" включает буккальное и сублингвальное введение, а также введение в пищевод.
[0048]
В альтернативном варианте композиции по настоящему изобретению могут быть также приготовлены для ректальной, местной или парентеральной (например, подкожной, внутримышечной, внутривенной и внутрикожной или инфузионной) доставки.
[0049]
Рассматриваемые количества 15-HEPE в композиции по настоящему изобретению, могут быть разделены на несколько лекарственных форм. Существует ограничение по размеру для перорального введения. Если субъекту требуется вводить от 1 до 4 г 15-HEPE в день, то ему могут вводить до 4 капсул, каждая из которых содержит 1г 15-HEPE.
[0050]
Композиции по настоящему изобретению могут быть представлены в виде жидких лекарственных форм или стандартных доз для непосредственного всасывания, или они могут быть смешаны с пищей или напитками перед приемом внутрь. Неограничивающие примеры подходящих жидких лекарственных форм включают растворы, суспензии, эликсиры, сиропы, жидкие аэрозольные лекарственные формы и т.д.
[0051]
Согласно другому варианту реализации изобретения композиции по настоящему изобретению содержат один или несколько фармацевтически приемлемых вспомогательных веществ. Термин «фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество» в настоящей заявке означает любое вещество, само не являющееся терапевтическим средством, используемое в качестве носителя или средства для доставки терапевтического средства субъекту, или добавленное к фармацевтической композиции для улучшения ее технологических свойств или стойкости при хранении, или для обеспечения или облегчения приготовления стандартных доз композиции, и которое не вызывает неприемлемой токсичности или неприемлемого взаимодействия с другими компонентами композиции. Только в качестве примера фармацевтическая композиция согласно настоящему изобретению может содержать один или несколько из: антиоксидантов, поверхностно-активных веществ, консервантов, ароматизаторов, сорастворителей, вяжущих добавок, суспензирующих вспомогательных средств и липофильных фаз.
[0052]
Согласно одному варианту реализации изобретения фармацевтическая композиция содержит один или несколько антиоксидантов, таких как аскорбиновая кислота, пальмитиновая кислота, аскорбилпальмитат, α-токоферол, идебенон, убихинон, феруловая кислота, кофермент Q10, ликопин, зеленый чай, катехины, эпигаллокатехин-3-галлат (EGCG), полифенолы зеленого чая (GTP), силимарин, кофейные бобы, ресвератрол, виноградные зерна, экстракты граната, генистеин, пикногенол, ниацинамид, бутилгидрокситолуол (BHT), бутилгидроксианизол (BHA) и т.д. Согласно одному варианту реализации изобретения фармацевтическая композиция содержит от примерно 0,01% масс. до примерно 2% масс. антиоксиданта, например, примерно 0,01% масс., примерно 0,02% масс., примерно 0,03% масс., примерно 0,04% масс., примерно 0,05% масс., примерно 0,06% масс., примерно 0,07% масс., примерно 0,08% масс., примерно 0,09% масс., примерно 0,1% масс., примерно 0,11% масс., примерно 0,12% масс., примерно 0,13% масс., примерно 0,14% масс., примерно 0,15% масс., примерно 0,16% масс., примерно 0,17% масс., примерно 0,18% масс., примерно 0,19% масс., примерно 0,2% масс., примерно 0,21% масс., примерно 0,22% масс., примерно 0,23% масс., примерно 0,24% масс., примерно 0,25% масс., примерно 0,26% масс., примерно 0,27% масс., примерно 0,28% масс., примерно 0,29% масс., примерно 0,3% масс., примерно 0,31% масс., примерно 0,32% масс., примерно 0,33% масс., примерно 0,34% масс., примерно 0,35% масс., примерно 0,36% масс., примерно 0,37% масс., примерно 0,38% масс., примерно 0,39% масс., примерно 0,4% масс., примерно 0,41% масс., примерно 0,42% масс., примерно 0,43% масс., примерно 0,44% масс., примерно 0,45% масс., примерно 0,46% масс., примерно 0,47% масс., примерно 0,48% масс., примерно 0,49% масс., примерно 0,5% масс., примерно 0,51% масс., примерно 0,52% масс., примерно 0,53% масс., примерно 0,54% масс., примерно 0,55% масс., примерно 0,56% масс., примерно 0,57% масс., примерно 0,58% масс., примерно 0,59% масс., примерно 0,6% масс., примерно 0,61% масс., примерно 0,62% масс., примерно 0,63% масс., примерно 0,64% масс., примерно 0,65% масс., примерно 0,66% масс., примерно 0,67% масс., примерно 0,68% масс., примерно 0,69% масс., примерно 0,7% масс., примерно 0,71% масс., примерно 0,72% масс., примерно 0,73% масс., примерно 0,74% масс., примерно 0,75% масс., примерно 0,76% масс., примерно 0,77% масс., примерно 0,78% масс., примерно 0,79% масс., примерно 0,8% масс., примерно 0,81% масс., примерно 0,82% масс., примерно 0,83% масс., примерно 0,84% масс., примерно 0,85% масс., примерно 0,86% масс., примерно 0,87% масс., примерно 0,88% масс., примерно 0,89% масс., примерно 0,9% масс., примерно 0,91% масс., примерно 0,92% масс., примерно 0,93% масс., примерно 0,94% масс., примерно 0,95% масс., примерно 0,96% масс., примерно 0,97% масс., примерно 0,98% масс., примерно 0,99% масс., примерно 1% масс., примерно 1,1% масс., примерно 1,2% масс., примерно 1,3% масс., примерно 1,4% масс., примерно 1,5% масс., примерно 1,6% масс., примерно 1,7% масс., примерно 1,8% масс., примерно 1,9% масс. или примерно 2% масс. одного или нескольких антиоксидантов.
Терапевтические способы
[0053]
Композиции и лекарственные формы, описанные в настоящей заявке, могут применяться для лечения фиброза. Согласно одному варианту реализации изобретения фиброз связан с органом или тканью, относящейся к легким, печени, сердцу, почкам, одному или обоим глазам, средостению, костному мозгу, забрюшинному пространству, коже, кишечнику, суставу, репродуктивному органу или к их комбинации. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения фиброз связан с тканью печени. Согласно одному варианту реализации изобретения фиброз включает идиопатический легочный фиброз.
[0054]
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения фиброз связан с неалкогольной жировой болезнью печени (НАЖБП). Согласно некоторым вариантам реализации изобретения оценка по шкале активности НАЖБП (NAS) снижается у субъекта после введения композиции. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения NAS снижается у субъекта по сравнению с исходным уровнем. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения NAS снижается по сравнению со вторым субъектом, которому не вводили композицию. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения второму субъекту вводили плацебо. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения второй субъект находится в процессе лечения фиброза.
[0055]
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения субъект находится в процессе лечения фиброза. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения лечение фиброза продолжают во время введения композиции. Согласно другим вариантам реализации изобретения лечение фиброза прекращают во время введения композиции. Например, согласно некоторым вариантам реализации изобретения субъект находится в процессе лечения телмисартаном, и после начала терапевтического способа, включающего введение композиции, содержащей 15-HEPE, как описано в настоящей заявке, лечение телмисартаном прекращают.
[0056]
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения композицию вводят перорально.
[0057]
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения 15-HEPE является единственным активным ингредиентом в композиции. Согласно другим вариантам реализации изобретения композиция дополнительно содержит дополнительное средство для воздействия на лечение фиброза.
[0058]
Согласно некоторым вариантам реализации настоящего изобретения предложен способ лечения фиброза у субъекта, находящегося в процессе лечения фиброза, причем данный способ включает введение субъекту композиции, содержащей 15-HEPE. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения фиброз связан с органом или тканью, выбранными из группы, состоящей из легких, печени, сердца, почек, глаз, средостения, костного мозга, забрюшинного пространства, кожи, кишечника, сустава, репродуктивного органа и их комбинации. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения фиброз является фиброзом печени. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения фиброз связан с неалкогольной жировой болезнью печени (НАЖБП). Согласно некоторым вариантам реализации изобретения оценка по шкале активности НАЖБП (NAS) снижается у субъекта после введения композиции. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения NAS снижается у субъекта по сравнению с исходным уровнем. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения NAS уменьшается по сравнению со вторым субъектом, которому не вводили композицию. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения второму субъекту вводили плацебо. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения второй субъект находится в процессе лечения фиброза. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения лечение фиброза включает введение неантивирусного HCV средства, антивирусного HCV средства, неантивирусного HBV средства, антивирусного HBV средства, средства против первичного билиарного цирроза, средства против алкогольного гепатита, средства против первичного склерозирующего холангита, средства против НАСГ, средства против аутоиммунного гепатита, средства против легочного фиброза, средства против кистозного фиброза, средства против фиброза почек, средства против фиброза кожи, средства против миелофиброза, средства против эозинофильного эзофагита, анти-TGF-β средства, анти-CTGF средства, средства рекомбинантного человеческого сывороточного амилоида Р, анти-IL-4 средства, анти-IL-5 средства (например, меполизумаба), анти-IL-13 средства, средства нейрохимического действия на рецепторы, анти-IL-17A средства, Hh или Hh(R) SMO антагониста, CCR5 антагониста, ингибитора CCR4 рекрутинга клеток, CXCR4 антагониста, анти-CXCR4 средства, CXCR3 антагониста, анти-CCL17 средства, ингибитора NOX, копаксона, адипонектина, агониста AMPK, Y-бокс связывающего белка-1, ингибитора рекрутинга миофибробластов, анти-Th17 MMP индуктора, соединения против осаждения внеклеточной матрицы, антагониста аденозиновых рецепторов, средства микроРНК (miR), стволовой клетки, тенофовира, антиколлагенного сшивающего средства (например, симтузумаба, могамулизумаба) или блокатора рецепторов ангиотензина II (БРА), выбранного из группы, состоящей из валсартана, телмисартана, лозартана, ирбесартана, азилсартана, эпросартана, олмесартана, или комбинации любых из вышеперечисленных средств. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения субъект находится в процессе лечения фиброза. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения лечение фиброза продолжают во время введения композиции. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения второй субъект находится в процессе лечения фиброза. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения композицию вводят перорально.
[0059]
Согласно некоторым вариантам реализации способов, описанных в настоящей заявке, 15-HEPE является единственным активным ингредиентом в композиции. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения, композиция дополнительно содержит дополнительное средство для воздействия на лечение фиброза.
[0060]
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения способ дополнительно включает диагностирование у субъекта фиброза перед введением композиции, содержащей 15-HEPE. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения способ дополнительно включает диагностирование у субъекта повышенного риска развития фиброза перед введением композиции, содержащей 15-HEPE. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения этап установления диагноза включает в себя определение NAS, относящейся к субъекту. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения NAS, относящаяся к субъекту, составляет по меньшей мере 3. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения этап установления диагноза включает скрининг на генетическую мутацию в молекуле нуклеиновой кислоты, относящийся к субъекту. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения этап установления диагноза включает в себя получение анализа крови и/или сыворотки крови, относящейся к субъекту. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения этап установления диагноза включает в себя исследование ткани, относящейся к субъекту. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения этап исследования включает в себя анализ образца гистологической ткани (например, биопсию), относящегося к субъекту.
[0061]
Согласно некоторым вариантам реализации изобретения способы по настоящему изобретению приводят к уменьшению значения NAS у субъекта. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения способ дополнительно содержит определение второй, более низкой NAS, относящейся к субъекту, через период времени после введения композиции.
[0062]
Согласно одному варианту реализации изобретения способ включает введение фармацевтической композиции, как описано в настоящей заявке, субъекту один раз в день, два раза в день, три раза в день или более трех раз в день.
[0063]
Согласно одному варианту реализации настоящего изобретения предложено применение 15-HEPE или композиции, содержащей 15-HEPE, для лечения или предотвращения фиброза у нуждающегося в этом субъекта и в случае, когда выполняется любое одно или несколько из (а) - (н):
[0064]
(а) фиброз связан с органом или тканью, выбранными из группы, состоящей из легких, печени, сердца, средостения, костного мозга, забрюшинного пространства, кожи, кишечника, сустава, репродуктивного органа и их комбинации;
[0065]
(б) фиброз представляет собой фиброз печени или идиопатический легочный фиброз;
[0066]
(в) фиброз связан с неалкогольной жировой болезнью печени (НАЖБП);
[0067]
(г) оценка по шкале активности НАЖБП (NAS) снижается у субъекта после введения композиции;
[0068]
(д) NAS снижается у субъекта по сравнению с исходным уровнем;
[0069]
(е) NAS снижается по сравнению со вторым субъектом, которому не вводили композицию, и/или со вторым субъектом, которому вводили плацебо;
[0070]
(ж) субъект находится в процессе лечения лечения фиброза;
[0071]
(з) лечение фиброза продолжается во время введения композиции;
[0072]
(и) 15-HEPE или композицию вводят перорально;
[0073]
(к) 15-HEPE представлена в форме свободной кислоты;
[0074]
(л) 15-HEPE представлена в этерифицированной форме;
[0075]
(м) этерифицированная форма представляет собой сложный алкиловый эфир или триглицеридную форму;
[0076]
(н) 15-HEPE представлена в форме соли;
[0077]
(о) 15-HEPE содержит 15(S)-HEPE; и/или
[0078]
(п) 15-HEPE содержит 15(R)-HEPE.
[0079]
Если не указано иное, все технические и научные термины, используемые в настоящей заявке, имеют то же значение, что, как правило, понимает специалист обычной квалификации в данной области техники, к которой относится настоящее изобретение. Хотя способы и материалы, аналогичные или эквивалентные тем, которые описаны в настоящей заявке, могут быть использованы на практике по настоящему изобретению, пригодные способы и материалы описаны ниже. Все публикации, патентные заявки, патенты и другие ссылки, упомянутые в настоящей заявке, явным образом полностью включены в настоящую заявку посредством ссылки. В случаях конфликта настоящее описание, включая определения, будет иметь преимущественную силу. Кроме того, материалы, способы и примеры, описанные в настоящей заявке, являются только иллюстративными и не предназначены для ограничения.
[0080]
Хотя настоящее изобретение может быть воплощено в различных формах, приведенное ниже описание нескольких вариантов реализации изобретения представлено с пониманием того, что настоящее изобретение следует рассматривать как пример настоящего изобретения, и оно не предназначено для ограничения раскрытой в настоящей заявке технологии проиллюстрированными конкретными вариантами реализации. Заголовки приводятся только для удобства и не должны рассматриваться как ограничивающие каким-либо образом раскрытую в настоящей заявке технологию. Варианты реализации изобретения, проиллюстрированные под любым заголовком, могут быть объединены с вариантами реализации, проиллюстрированными под любым другим заголовком.
[0081]
Числовые значения, используемые для различных количественных характеристик, указанных в настоящей заявке, если явно не указано иное, устанавливаются как приблизительные, как если бы минимальному и максимальному значению в указанных диапазонах предшествовало слово «примерно». Таким образом, незначительные отклонения от указанного значения могут быть использованы для достижения по существу тех же результатов, что и указанное значение. Кроме того, раскрытие диапазонов подразумевает непрерывный диапазон, включающий каждое значение между указанными минимальным и максимальным значениями, а также любые диапазоны, которые могут быть образованы такими значениями. Также раскрытые в настоящей заявке любые и все отношения (и диапазоны любых таких отношений), которые могут быть образованы путем деления указанного числового значения на любое другое указанное числовое значение. Таким образом, квалифицированный специалист примет во внимание, что многие такие отношения, диапазоны и диапазоны отношений могут быть однозначно получены из числовых значений, представленных в настоящей заявке, и во всех случаях такие отношения, диапазоны и диапазоны отношений представляют различные варианты реализации настоящего изобретения.
[0082]
Используемый в настоящей заявке термин «лечение» заболевания, нарушения или состояния включает в себя по меньшей мере выборочно: (1) предотвращение заболевания, нарушения или состояния, то есть является причиной того, что клинические симптомы заболевания, нарушения или состояния, не развиваются у млекопитающего, которое подвержено или предрасположено к заболеванию, нарушения или состоянию, но еще не испытывает или не демонстрирует симптомы заболевания, нарушения или состояния; (2) ингибирование заболевания, нарушения или состояния, т.е. остановку или замедление развития заболевания, нарушения или состояния, или его клинических симптомов; или (3) ослабление болезни, нарушения или состояния, то есть вызывает регрессию заболевания, нарушения или состояния, или его клинических симптомов. Термин «предотвращение» относительно данного заболевания или нарушения означает: предотвращение развития заболевания, если оно ранее не имело место, предотвращение возникновения заболевания или нарушения у субъекта, который может быть предрасположен к нарушению или заболеванию, но которому еще не диагностировали нарушение или заболевание, и/или предотвращение дальнейшего развития заболевания/нарушения, в случае его наличия.
[0083]
Термин «эффективное количество», используемый в настоящей заявке, относится к количеству активной композиции, которое требуется для сообщения терапевтического эффекта субъекту. Термин «терапевтически эффективное количество», используемый в настоящей заявке, относится к достаточному количеству средства или вводимого соединения, которое в некоторой степени ослабит один или несколько симптомов заболевания, нарушения или состояния, подлежащего лечению. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения результатом является ослабление и/или уменьшение признаков, симптомов или причин заболевания или любое другое требуемое изменение биологической системы. Например, согласно некоторым вариантам реализации изобретения «эффективное количество» для терапевтических применений представляет собой количество композиции, включающей соединение, как раскрыто в настоящей заявке, необходимое для обеспечения клинически значимого уменьшения симптомов заболевания без наличия нежелательных побочных эффектов. Согласно некоторым вариантам реализации изобретения необходимое «эффективное количество» в любом конкретном случае определяется с использованием методик, таких как исследование с увеличением дозы. Термин «терапевтически эффективное количество» включает, например, профилактически эффективное количество. Согласно другим вариантам реализации изобретения «эффективное количество» описанного в настоящей заявке соединения, такого как соединение Формулы (А) или Формулы (I), представляет собой количество, которое будет эффективно для достижения требуемого фармакологического эффекта или терапевтического улучшения без наличия нежелательных побочных эффектов. Согласно другим вариантам реализации изобретения подразумевается, что «эффективное количество» или «терапевтически эффективное количество» варьируется от субъекта к субъекту в зависимости от изменения метаболизма, возраста, массы, общего состояния субъекта, состояния, подлежащего лечению, тяжести состояния, подлежащего лечению, и суждения лечащего врача. Термин «фармацевтически приемлемый» в данном контексте означает, что рассматриваемое вещество не вызывает неприемлемую токсичность для субъекта или неприемлемое взаимодействие с другими компонентами композиции.
[0084]
Без дополнительного описания полагают, что специалист обычной квалификации в данной области техники может, используя предшествующее описание и приведенные ниже наглядные примеры, изготовить и использовать соединения по настоящему изобретению и применять на практике заявленные способы. Следующие демонстрационные примеры предоставлены для облегчения применения на практике настоящего изобретения и никоим образом не должны истолковываться как ограничивающие остальную часть изобретения.
Примеры
ПРИМЕР 1.
[0085]
Цель данного исследования состояла в изучении воздействия 15-HEPE и 15-HETrE по сравнению с носителем и телмисартаном в модели НАЖБП на мышах.
Протокол
[0086]
Мыши C57/BL6, полученные от Charles River Laboratories, были разделены на 6 исследуемых групп следующим образом:
[0087]
Группа 1 (Носитель): Каждой из двенадцати мышей вводили однократную дозу стептозотоцина после рождения и их рацион кормления отличался высоким содержанием жиров в течение четырех недель. Затем мышам вводили с пищей носитель в объеме 10 мл/кг один раз в день в период с 5 по 12 неделю.
[0088]
Группа 2 (телмисартан): Каждой из двенадцати мышей вводили однократную дозу стептозотоцина после рождения и их рацион кормления отличался высоким содержанием жиров в течение четырех недель. Затем мышам вводили с пищей телмисартан в количестве 5 мг/кг один раз в день в период с 5 по 12 неделю.
[0089]
Группа 3 (15-HEPE, низкая доза): Каждой из двенадцати мышей вводили однократную дозу стептозотоцина после рождения и их рацион кормления отличался высоким содержанием жиров в течение четырех недель. Затем мышам вводили с пищей 15-HEPE в количестве 50 мг/кг один раз в день в период с 5 по 12 неделю.
[0090]
Группа 4 (15-HEPE, высокая доза): Каждой из двенадцати мышей вводили однократную дозу стептозотоцина после рождения и их рацион кормления отличался высоким содержанием жиров в течение четырех недель. Затем мышам вводили с пищей 15-HEPE в количестве 500 мг/кг один раз в день в период с 5 по 12 неделю.
[0091]
Группа 5 (15-HETrE, низкая доза): Каждой из двенадцати мышей вводили однократную дозу стептозотоцина после рождения и их рацион кормления отличался высоким содержанием жиров в течение четырех недель. Затем мышам вводили с пищей 15-HETrE в количестве 10 мг/кг один раз в день в период с 5 по 12 неделю.
[0092]
Группа 6 (15-HETrE, высокая доза): Каждой из двенадцати мышей вводили однократную дозу стептозотоцина после рождения и их рацион кормления отличался высоким содержанием жиров в течение четырех недель. Затем мышам вводили с пищей 15-HETrE в количестве 100 мг/кг один раз в день в период с 5 по 12 неделю.
[0093]
В возрасте 12 недель всех мышей оценивали на изменения в:
• биохимии сыворотки (например, уровни АЛТ, уровни ЛПНП, уровни ЛПОНП, уровни ЛПВП, уровни триглицеридов, уровень общего холестерина),
• фиброзе (например, гистология с использованием окраски сириусом красным) и
• шкала активности НАЖБП (включая, например, гистологию с использованием окраски H & E).
Результаты
[0094]
Как показано на Фиг. 1, уровень триглицеридов в сыворотке был значительно ниже (Mann Whitney) для группы, получавшей низкую дозу 15-HETrE, чем для группы, получавшей носитель. Аналогичным образом уровни ЛПОНП и ЛПНП были значительно ниже для группы, получавшей низкую дозу 15-HETrE, по сравнению с группой, получавшей носитель (Фиг.2-3). Уровни общего холестерина были значительно ниже для групп, получавших низкую дозу 15-HETrE и низкую дозу 15-HEPE, по сравнению с группой, получавшей носитель (Фиг.4). Уровни гидроксипролина существенно не различались ни для одной группы по сравнению с группой, получавшей носитель, как показано на Фиг. 5. Как показано на Фиг. 6, уровни АЛТ в плазме были значительно ниже для группы, получавшей высокую дозу 15-HEPE, по сравнению с группой, получавшей носитель, и по сравнению с группой, получавшей высокую дозу 15-HETrE. Причем, группа, получавшая телмасартан, не показала статистически значимого снижения уровня триглицеридов в сыворотке крови, ЛПОНП, ЛПНП, общего холестерина, гидроксипролина или АЛТ в плазме по сравнению с группой, получавшей носитель.
[0095]
Гистологические результаты (окраска сириусом красным) показаны на Фиг. 7A-7D, и показывают, что у группы, получавшей высокую дозу 15-HEPE, развилось статистически эквивалентное низкое количество фиброза как и у группы, получавшей телмисартан, по сравнению с группой, получавшей носитель.
[0096]
Как показано на Фиг. 8A-D, группа мышей, получавших высокую дозу 15-HEPE, (Фиг.8C) продемонстрировала значительно более низкую NAS (p<0,01), чем группа мышей, получавших плацебо (Фиг.8A). Группа мышей, получавших телмисартан, (Фиг.8В) также продемонстрировала значительно более низкую NAS (р<0,001) по сравнению с группой мышей, получавших носитель.
ПРИМЕР 2
[0097]
Неалкогольный стеатогепатит (НАСГ) индуцировали у мышей однократной подкожной инъекцией 200 мкг стрептозотоцина (Sigma Aldrich) через два дня после рождения и их рацион кормления отличался высоким содержанием жиров (57 ккал% жира, CLEA Japan) в течение периода четырех недель. Методом случайного отбора каждой мыши вводили перорально носитель, телмисартан (10 мг/кг), 15-HEPE (500 мг/кг) или ЭПК (500 мг/кг) один раз в день в период с 5 по 9 неделю. В конце 9-й недели мышей умерщвляли и проводили анализ.
[0098]
Как показано на Фиг. 9, 15-HEPE (500 мг/кг) была более эффективна при лечении и/или предотвращении фиброза печени в модели на мышах, чем ЭПК (500 мг/кг) или носитель (Фиг.9).
ПРИМЕР 3
[0099]
Фибробласты легких от пациентов с идиопатическим легочным фиброзом (ИЛФ) высевали в количестве 10000 клеток на лунку планшета в их соответствующих средах для роста и оставляли на ночь для прикрепления. После прикрепления клетки предварительно обрабатывали 15(S)-HEPE в течение 2 часов в их соответствующих средах для количественного определения. Затем спустя 2 часа клетки обрабатывали соединениями +/- TGF-бета (20нг/мл) в течение 48 часов. Через 48 часов кондиционированную среду собирали и замораживали при -80°С для последующего анализа коллагена. После сбора клетки окрашивали для экспрессии SMA I. Определение коллагена с использованием ELISA проводили в соответствии с инструкциями производителя. Как показано на Фиг. 10, 15-HEPE при 100 мкг/мл ингибировала TGF-бета индуцированное продуцирование альфа-SMA. Никакой цитотоксичности не наблюдалось.
ПРИМЕР 4
[00100]
Крысам (n=5) вводили дозы 15-HEPE (DS102) 500 мг/кг в течение 7 дней и органы вырезали для анализа уровней 15-HEPE в тканях проходивших лечение животных по сравнению с животными, не проходившими лечение. Как показано на Фиг. 11, у животных, проходивших лечение, было значительно больше 15-HEPE в печени и легких по сравнению с контрольной группой, не проходившей лечение.