Значение цитокинов в патогенезе хронического гастродуоденита, ассоциированного с Н. Pylori, у детей

ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

© Щербак ВА., Витковский ЮА., 2004

В.А. Щербак, Ю.А. Витковский

ЗНАЧЕНИЕ ЦИТОКИНОВ В ПАТОГЕНЕЗЕ ХРОНИЧЕСКОГО ГАСТРОДУОДЕНИТА, АССОЦИИРОВАННОГО С H. PYLORI, У ДЕТЕЙ

Читинская государственная медицинская академия, РФ

Для исследования роли цитокинов в развитии хронического гастродуоденита (ХГД) у детей обследовано 30 больных и 16 здоровых (контрольная группа) в возрасте от 9 до 16 лет. У детей с ХГД увеличено содержание провоспалительных цитокинов IL1ß, IL2, TNFa и IFNa при нормальном уровне противоспалительного IL4. Установлена тесная корреляционная связь между содержанием цитокинов и уровнем антител к H. pylori. Введены коэффициенты отношения провоспалительных цитокинов к IL4.

Authors examined 30 patients with chronic gastroduodenitis and 16 healthy children in the age 9— 16 years old as control group in order to study role of cytokines in chronic gastroduodenitis (CGD) development. Patients with CGD had increased level of pro- inflammatory cytokines ILip, IL2, TNFa, IFNa and normal level of anti-inflammatory cytokine IL4. They showed correlation between cytokines level and level of antibodies to H. pylori. Coefficients of pro-inflammatory cytokines — IL4 rate were outworked.

Проблема хронических гастродуоденитов (ХГД) является весьма актуальной в связи с широким распространением этой патологии среди детей и подростков и не всегда удовлетворительными результатами лечения. При ХГД возникает воспалительная реакция в слизистой оболочке желудка и двенадцатиперстной кишки. Однако некоторые механизмы ее развития не вполне понятны. Так, не исследована роль цитокинов в патогенезе ХГД у детей.

Цитокины — это информационные молекулы, продуцируемые различными клонами макрофагов, моноцитов и лимфоцитов и обеспечивающие кооперацию и ответ клеток в процессе реализации их функций [1]. Клетки, принимающие участие в иммунном ответе, выделяют две группы цитокинов — монокины и лимфокины [2]. К монокинам относятся интерлейкины (IL) 1, 3, 6, 8, 10, 12, 15, фактор некроза опухоли (TNF), к лимфокинам — IL2, 4, 5, 7, 9, 14 и интерфероны (IFN) [3]. У детей с ХГД P.P. Кильдиярова и П.Н. Шараев [4] выявили увеличение уровня TNF в сыворотке по сравнению со здоровыми (5,2±1,5 пкг/мл), однако этот показатель не выходил за пределы контрольных цифр (0—50 пкг/мл), как у больных ХГД с хелико-бактериозом (36,9±6,5 пкг/мл), так и в группе пациентов без H. pylori (13,5±1,3 пкг/мл). Поэтому необходимо уточнение уровня TNF у детей с ХГД.

У взрослых больных язвенной болезнью и ХГД ряд авторов выявили увеличение содержания IL1, IL8 и TNF в сыворотке [5—8]. У детей эти параметры остаются малоизученными. Цель работы состояла в исследовании роли цитокинов в развитии ХГД у детей.

Материалы и методы исследования

Обследовано 30 детей с ХГД и 16 здоровых (контрольная группа) в возрасте от 9 до 16 лет. Средний возраст больных составил 13,6±0,3 года, мальчиков было 12, девочек — 18.

Цитокины сыворотки исследовали методом иммуно-ферментного анализа (ИФА) с помощью тест-систем производства ООО «Цитокин» (Санкт-Петербург, Россия). Забор крови проводили до лечения, повторное исследование осуществляли через 15—20 дней. Всем детям для подтверждения диагноза проведена фиброгастродуоденоскопия и определены антитела (IgG) к H. pylori методом ИФА наборами фирмы Diagnostic System Laboratories (США).

По эндоскопической картине преобладали эрозивные гастродуодениты (21 ребенок), поверхностные гастродуодениты выявлены у 9 детей. У всех пациентов выявлены антитела IgG к H. pylori, средний уровень их составил 187,9±40,4 АЕ/мл.

Больные получали лечение, включавшее диету (стол 1), антихеликобактерные препараты в течение 7 дней (де-нол 10 мг/кг, максимально до 480 мг

12

ПЕДИАТРИЯ № 5, 2005 г.

в сутки, флемоксин 25 мг/кг, максимально до 1 г в сутки и метронидазол 20 мг/кг, максимально до 750 мг в сутки).

Результаты и их обсуждение

До лечения у детей с ХГД по сравнению с контрольной группой (табл. 1) установлено увеличение уровня 1Ь1р в 4,6 раза (р<0,001), 1Ь2 — в 4,5 раза (р<0,001), ТОТа — в 5,9 раза (р<0,001), 1Ша — в 6,1 раза (р<0,001).

Таблица 1

Динамика содержания в сыворотке цитокинов у детей с ХГД

Полученные результаты показывают повышение провоспалительных цитокинов при нормальном уровне IL4. При анализе взаимоотношений исследуемых параметров установлена прямая корреляционная связь между уровнем антител к H. pylori и концентрацией TNFa (r=+0,41; p<0,05) и обратная — между количеством антител к H. pylori и IL4 (r=-0,35; p<0,05).

Возможный патогенетический механизм развития иммунных нарушений у больных ХГД можно представить себе следующим образом. Инфекция H. pylori вызывает воспалительную реакцию в слизистой оболочке желудка и двенадцатиперстной кишки [9, 10]. Антигены H. pylori, проникая через базальную мембрану, активируют макрофаги собственной пластинки [11, 12]. В ответ на это полиморф-ноядерные лейкоциты, макрофаги, моноциты продуцируют в большом количестве провоспалительные цитокины, которые увеличивают дифференцировку тимус- и бурса-зависимых лимфоцитов. Эти клетки распознают и уничтожают H. pylori.

IL1 выделяется при антигенной стимуляции моноцитами, макрофагами, эндотелиальными, эпителиальными клетками, натуральными киллерами, нейтрофилами, В-лимфоцитами. IL1 делится на 2 фракции — a и ß. Практически весь IL1a остается внутри клетки или связан с мембраной. В отличие от IL1a, IL1ß активно секретируется клетками. IL1a является, в основном, медиатором местных реакций, а IL1ß осуществляет свое действие как на местном, так и на системном уровне [1].

INF синтезируется макрофагами, Т-хелперами, цитотоксическими лимфоцитами. Под влиянием TNFa происходит гибель опухолевых клеток. Поскольку H. pylori вызывает метаплазию желудочного эпителия и является одним из факторов риска развития рака желудка, увеличение уровня TNFa может иметь защитное значение. Также TNFa, воздействуя на ДНК и вызывая ее фрагментацию, может приводить к гибели бактерий. Действие TNF на бактерии рода Helicobacter в литературе не описано, но мы предполагаем возможное повреждающее действие TNF и на эти микроорганизмы.

IFNa продуцируется макрофагами, В-лимфоци-тами и гранулоцитами. Он участвует, в основном, в противовирусной защите. Почему при ХГД происходит значительное увеличение этого цитокина, остается не вполне понятным.

IL2 выделяется преимущественно антигенак-тивированными Т-хелперами 1-го типа и натуральными киллерами (CD16+). IL2 является стимулятором роста всех видов Т-лимфоцитов, но особенно цитотоксических клеток (CD8+). Под воздействием IL2 происходят пролиферация и дифференци-ровка В-лимфоцитов, а также синтез и секреция иммуноглобулинов классов А, М и G. Guiraldes E. et al. [13] выявили увеличение содержания этого интерлейкина в ткани слизистой оболочки желудка у детей с хеликобактер-ассоциированными ХГД.

IL4 вырабатывается Т-хелперами 2-го класса, тучными клетками, базофилами, В-лимфоцитами. Он относится к противовоспалительным цитокинам. Этот лимфокин вызывает активацию и пролиферацию В-лимфоцитов. Под его влиянием происходит переход клеток-предшественников в цитотоксические лимфоциты. Уровень IL4 у больных ХГД не отличался от уровня здоровых детей. Это мы расцениваем как неблагоприятную реакцию на внедрение H. pylori, поскольку другие цитокины увеличены в несколько раз, а в слизистой оболочке желудка и двенадцатиперстной кишки происходит воспаление. При равновесии факторов агрессии и защиты концентрация IL4 также была бы быть повышенной.

Мы проанализировали взаимоотношение различных видов цитокинов у детей с ХГД. Для этого мы выразили отношение провоспалительных интер-лейкинов к противовоспалительному IL4 (табл. 2).

До лечения коэффициенты свидетельствовали о значительном преобладании провоспалительных цитокинов над противовоспалительным. Так, показатель IL10/IL4 был увеличен в 10,1 раза (p<0,001), IL2/IL4 — в 3,85 раза (p<0,001), TNFa/IL4 — в 7,89 раза (p<0,001) и IFNa/IL4 — в 8,12 раза (p<0,001) по сравнению с контролем. Применяемые коэффициенты можно использовать для оценки степени тяжести ХГД, и рекомендуются нами для внедрения в клиническую практику.

После лечения провоспалительные цитокины имели только тенденцию к снижению. Статистически значимые различия по сравнению с уровнем до начала терапии были лишь у IL10, однако и он не

Показатели Здоровые дети Больные ХГД

до лечения после лечения

IL1ß, пкг/мл 32,08+1,7 147,69±6,41) 113,56+13,601)2)

IL2, пкг/мл 20,25+3,01 90,67±6,741) 75,13+10,91«

TNFa, пкг/мл 20,04+1,74 118,66+6,32« 88,72+14,36«

IFNa, пкг/мл 25,37+2,07 155,85+7,9« 124,80+15,51«

IL4, пкг/мл 24,14+1,57 25,50+3,3« 19,27+5,08

Здесь и в табл. 2: достоверность различия: 1) при сравнении показателей с контрольной группой, 2) при сравнении показателей до и после лечения.

В.А. Щербак, Ю.А. Витковский

13

Таблица 2

Отношение провоспалительных цитокинов к IL4 у детей с ХГД

достиг показателей здоровых детей. По окончании терапии коэффициенты отношения цитокинов практически не изменились. Нормализация уровня ин-терлейкинов является отражением стабильности иммунных реакций, способствующих заживлению слизистой оболочки желудка и двенадцатиперстной кишки. Поэтому отмеченное после проведения курса общепринятого лечения сохранение повышен-

©

Долгое время считалось, что выработка мелато-нина целиком осуществляется эпифизом и только через 20 лет появились данные о продукции данного гормона эндокринными клетками других органов, в частности энтерохромафинными клетками (ЕС-клетки) желудка и двенадцатиперстной кишки [1, 2]. Существуют данные, доказывающие

ного уровня цитокинов свидетельствует не только о недостаточной его эффективности, но и указывает на наиболее вероятный механизм хронизации патологического процесса у больных ХГД.

Таким образом, цитокины играют важную роль в патогенезе ХГД у детей. Они синтезируются в повышенном количестве под влиянием H. pylori и запускают иммунный ответ организма. Определение цитокинов имеет большое значение для диагностики патологического процесса у детей с ХГД, и эти исследования следует внедрять в широкую клиническую практику.

Выводы

1. У детей, больных ХГД, увеличено содержание провоспалительных цитокинов IL1ß, IL2, TNFa и IFNa.

2. Уровень противоспалительного IL4 остается в норме, что следует расценить как неблагоприятную реакцию.

3. Установлена тесная корреляционная связь между содержанием цитокинов и уровнем антител к H. pylori.

центральную регуляцию периферического гастро-протективного эффекта путем активации выработки эндогенного мелатонина ЕС-клетками [3, 4]. Немногочисленные исследования, касающиеся роли ме-латонина в регуляции функций желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), проведены в основном у взрослых больных.

Показатели Здоровые дети Больные ХГД

до лечения после лечения

IL1ß/IL4 0,87+0,09 8,83+1,39« 9,28+2,64"

IL2/IL4 1,38+0,14 5,32+0,76" 6,49+2,05"

TNFa/ IL4 0,87+0,12 6,87+0,93" 6,30+1,24"

IFNa/IL4 1,13+0,12 9,18+1,49" 10,55+3,40"

ЛИТЕРАТУРА

См. online-версию журнала http://www.pediatriajournal.ru № 5/2005, приложение № 1.

Мальцев C.B., Ишкина ЛА., 2004

C.B. Мальцев, Л.А. Ишкина

КАИНИКО-ФУНКЦИОНААЬНОЕ ЗНАЧЕНИЕ МЕЛАТОНИНА ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ГАСТРОДУОДЕНИТЕ У ПОДРОСТКОВ

Казанская государственная медицинская академия, г. Казань, РФ

Динамическое исследование уровня мелатонина у 40 детей, страдающих хроническим гастро-дуоденитом (ХГД), и 15 практически здоровых детей 12—15 лет показало, что в периоде обострения ХГД происходит повышение содержания данного гормона адекватно тяжести и характеру прогрес-сирования заболевания. Показана возможность использования мелатонина в качестве диагностического и прогностического критерия течения ХГД.

Chromatophorotropic hormone (CTH) level was studied in dynamic in 40 children with chronic gastroduodenitis (CGD) and in 15 practically healthy children in the age 12—15 years old. Authors showed that hormone level was increased during CGD relapse, and these increasing correlated with severity and character on CGD progress. They proved the possibility of CTH usage and diagnostic and prognostic criterion of CGD course.