Экспрессия гена адипонектина (AdipoQ) в подкожной и висцеральной жировой ткани и уровень адипонектина в сыворотке крови у детей

Экспрессия гена адипонектина (ADIPOQ) в подкожной и висцеральной жировой ткани и уровень адипонектина в сыворотке крови у детей

А.В. КОСЫГИНА1*, к.б.н. В.В. СОСУНОВ2, проф. В.А. ПЕТЕРКОВА1, акад. И.И. ДЕДОВ1

Expression of the adiponectin gene (ADIPOQ) in the subcutaneous and visceral fatty tissues and the serum adiponectin level in children

A.V. KOSYGINA, V.V. SOSUNOV, V.A. PETERKOVA, I.I. DEDOV

'НИИ детской эндокринологии Эндокринологического научного центра; 2ООО «ДНК-синтез», Москва

Цель работы — исследование особенностей экспрессии гена адипонектина ADIPOQ в подкожной и висцеральной жировой ткани и содержания адипонектина в сыворотке крови у детей, а также выявление взаимосвязи между изучаемыми факторами и основными антропометрическими показателями. Обследованы 62 пациента (31 мальчик и 31 девочка в возрасте от 2,5 до 18 лет, в среднем 13,6 года (8,5—15,1 года), подвергшихся плановым хирургическим вмешательствам. Определяли экспрессию гена ADIPOQ в парных образцах жировой ткани методом полимеразной цепной реакции в реальном времени, а также уровень адипонектина в сыворотке крови. Не выявлено зависимости экспрессии гена ADIPOQ от возраста и пола обследованных детей. Не найдено статистически значимых различий по уровню экспрессии гена ADIPOQ между подкожной и висцеральной жировой тканью. Наиболее высокий уровень мРНК ADIPOQ отмечается у детей на стадии полового развития Таннер 2—3. По сравнению с группой детей с нормальной массой тела у детей с избыточной массой тела ген адипонектина экспрессировался на 22% выше в подкожной и на 22,6% в висцеральной жировой ткани. Экспрессия гена ADIPOQ в подкожной жировой ткани отрицательно коррелирует с содержанием адипонектина в сыворотке крови (R=-0,47; р=0,0003). Не выявлено статистически значимых различий содержания адипонектина в зависимости от пола обследованных детей. Уровень адипонектина прогрессивно снижается по мере полового созревания у детей. Обнаружена сильная отрицательная корреляция уровня адипонектина в сыворотке крови с индексом массы тела — ИМТ (R=-0,38; р=0,002), SD ИМТ (R=-0,35; р=0,004) и окружностью талии (R=-0,36; р=0,004), что указывает на необходимость дальнейшего изучения патофизиологической роли адипонектина в развитии ожирения и связанных с ним метаболических осложнений.

Ключевые слова: жировая ткань, адипонектин, экспрессия гена.

The primary objective of the present work was to study specific features of adiponectin gene (ADIPOQ) expression in the subcutaneous and visceral fatty tissues along with the serum adiponectin level in children. The secondary objective was to elucidate the relationship between these variables and the basic anthropometric characteristics. The study included a total of 62 patients (31 boys and 31 girls at the age from 2.5 to 18 (median 13.6 (8.5—15.1) years] after they underwent planned surgical interventions. The expression of the adiponectin gene ADIPOQ was determined in paired samples of adipose tissue using the polymerase chain reaction in the real time; in addition, the serum adiponectin levels were measured. The expression of the adiponectin gene ADIPOQ was shown to be unrelated either to the age or to the sex of the children. Nor was there any significant difference between its expression in the subcutaneous and visceral tissues. The highest expression of mRNA encoding for adiponectin was recorded in the children at the Tanner stages 2—3 of sexual development. The ADIPOQ gene expression in the subcutaneous and visceral tissues of overweight children was 22% and 22.6% higher respectively than in the same tissues of normal weight children. Gene expression in the subcutaneous adipose tissue negatively correlated with the serum adiponectin level ( R = -0.38, p = 0.002), BMI SD (R = -0.35, p = 0.004 ), and the waist circumference (R = -0.36, p = 0.004). The results of the study suggest the necessity of further studies to clarify the pathophysiological role of adiponectin in the development of obesity and the related metabolic disturbances.

Key words: adipose tissue, adiponectin, gene expression.

В последние годы активно обсуждается самостоятельная роль жировой ткани в патогенезе ожирения и связанных с ним осложнений. Жировая ткань является ключевым фактором в развитии и прогрес-сировании инсулинорезистентности (ИР). Среди множества адипокинов, секретируемых жировой тканью и влияющих на развитие ИР и метаболических нарушений, наибольший интерес вызывает адипонектин — уникальный адипокин, обладаю-

щий антидиабетической, противовоспалительной и антиатерогенной активностью.

Адипонектин — белок с молекулярной массой 30 кД, продукт гена ЛБ1РО0 ^27), обладающий высокой степенью сродства к коллагену VIII и X типов и C1q-компоненту комплемента. Этот адипокин был идентифицирован четырьмя независимыми группами исследователей в 1995 и 1996 гг., использовавших различные методы его выделения, поэтому

© Коллектив авторов, 2010 ПРОБЛЕМЫ ЭНДОКРИНОЛОГИИ, 6, 2010

*e-mail: annakosygina@gmail.com

ему были даны различные названия: apM1 (Adipose Most abundant Gene transcript 1), Acrp30 (Adipocyte complement related protein), adipoQ и GBP28 (gelatine binding protein 28) [1—4].

Адипонектин экспрессируется зрелыми адипо-цитами. По данным ряда авторов [5], у взрослых людей ген ADIPOQ экспрессируется преимущественно в подкожной жировой ткани, и его экспрессия снижена при ожирении. В недавнем исследовании [6] было выявлено, что у детей с избыточной массой тела экспрессия адипонектина снижена в висцеральной жировой ткани.

В крови адипонектин циркулирует в виде нескольких изоформ (тример, гексамер, мультимер); при этом наибольшей биологической активностью обладает именно высокомолекулярная форма адипонектина [7]. У взрослых людей содержание циркулирующего адипонектина в кровотоке составляет около 10—16 мкг/мл (0,1% от общего количества белка в сыворотке крови) [8].

Снижение уровня адипонектина в сыворотке крови выявляется у людей, страдающих ожирением, сахарным диабетом 2-го типа (СД2), артериальной гипертонией, дислипидемией и ишемической болезнью сердца. Более того, низкий уровень ади-понектина является независимым фактором риска развития СД2 и дислипидемий [9—15].

Материал и методы

В исследование включили 62 ребенка (31 мальчик и 31 девочка, в возрасте от 2,5 до 18 лет (в среднем 13,6 года (8,5—15,1 года), подвергшихся плановым лапароскопическим вмешательствам (герниотомия,

холецистэктомия, пластика пищеводного отверстия диафрагмы и др.). Критериями исключения являлись сопутствующая хроническая патология, острые воспалительные заболевания (аппендицит, острый холецистит). Все дети, включенные в исследование, не имели патологических отклонений в общеклиническом и биохимическом анализах крови и анализе мочи.

Антропометрические измерения включали измерение роста, массы тела, окружности талии (ОТ). Антропометрические данные обрабатывали с учетом пола и возраста пациента и оценивали в стандартных отклонениях (SD) от среднего. Индекс массы тела (ИМТ) рассчитывали как отношение массы тела (кг) к длине тела (м), возведенной в квадрат. ИМТ оценивали индивидуально по нормативам для конкретного возраста и пола и представляли в виде числа SD от среднего. Половое развитие оценивали согласно классификации Таннера (1968). Объем тестикул измеряли с помощью орхидометра Prader. Клиническая характеристика обследованных пациентов представлена в табл. 1.

С целью исследования особенностей экспрессии гена ADIPOQ в жировой ткани был произведен интраоперационный забор парных образцов висцеральной (ВЖТ) и подкожной жировой ткани (ПЖТ) объемом около 1 мл. Образцы крови для гормонального исследования забирали перед операцией в утреннее время, натощак.

Гормональные исследования включали определение общего адипонектина (Human Adiponectin ELISA, BioVendor, США) в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа.

Определение экспрессии гена ADIPOQ в ВЖТ и ПЖТ проводили методом полимеразной цепной ре-

Таблица 1. Характеристика обследованных пациентов

Характеристика Всего Нормальная масса тела Избыточная масса тела р

Число пациентов 62 43 19

Возраст, годы 13,6 (8,5; 15,1) 11,7 (6,6; 15,1) 14 (13,4; 15,1) 0,02

Пол, мальчики/девочки 31/31 20/23 11/8

Половое развитие:

Таннер 1

Таннер 2—3

Таннер 4—5

SD роста 0,34 (-0,36; 0,98) 0,33 (-0,47; 0,8) 0,46 (0,04; 1,35) 0,3

ОТ, см 70 (56; 78) 62 (52; 70) 85 (78; 95) <0,01

ИМТ, кг/м2 20,8 (16,5; 23,6) 18,4 (15,4; 20,9) 26,1 (23,7; 27,3) <0,01

SD ИМТ 0,65 (-0,07; 1,46) 0,29 (-0,36; 0,72) 1,92 (1,6; 2,4) <0,01

Примечание. Данные представлены в виде Me (25; 75). SD — стандартное отклонение от среднего.

Таблица 2. Последовательности праймеров и зондов

Ген

Праймер

Зонд

ADIPOQ

F=GGTTTCACCGATGTCTCCCTT R=CGTGATGGCAGAGATGGCA

FAM-CCTGGATCTCCTTTCTCACCCTTCTCA-BHQ1

акции в реальном времени. РНК из жировой ткани выделяли с помощью набора SV Total RNA Isolation System (Promega). После выделения РНК обрабатывали ДНКазой (RQ1 RNase-Free DNase, Promega) и еще раз очищали с помощью набора SV Total RNA Isolation System (Promega). Полученную РНК хранили при температуре —70°С до проведения анализа. Синтез кДНК проводили из полученной РНК с помощью набора First Strand cDNA Synthesis Kit (Fermentas) (в реакцию брали 2 мкг РНК, полученную кДНК разводили до 200 мкл). Реакцию проводили в объеме 25 мкл.

Программа для проведения полимеразной цепной реакции в реальном времени: 1 цикл: 95°C — 3 мин; 45 циклов: 95°C — 15 с; 60 °C — 1 мин (измерение флуоресценции).

Последовательности ген-специфичных прайме-ров и зондов для ADIPOQ указаны в табл. 2. Уровень экспрессии изучаемого гена оценивали относительно экспрессии house-keeping гена (постоянно экспрес-сирующийся ген, ген «домашнего хозяйства») B2M.

Статистическую обработку данных проводили с использованием пакета прикладных программ Statistica (StatSoft Inc., США, версия 8.0). Так как большинство изучаемых показателей не имело приближенно-нормального распределения, все данные представлены в виде медианы и интерквартиль-ных размахов — Ме [25; 75]. Статистическую обработку данных выполняли с помощью непараметрических критериев статистического анализа. Для оценки статистической значимости различий между изучаемыми группами пациентов использовали критерий Манна—Уитни и дисперсионный анализ Краскела—Уоллиса с дальнейшим последующим сравнением групп методом множественных парных сравнений. Уровни экспрессии гена ADIPOQ в ВЖТ и ПЖТ сравнивали с использованием критерия Вилкоксона. Корреляционный анализ проводили с использованием непараметрического критерия Спирмена и гамма-корреляции. Критический уровень статистической значимости различий принимали равным 0,05.

Результаты и обсуждение

Экспрессия гена ЛDIPOQ в ПЖТ и ВЖТ. Экспрессия гена ЛDIPOQ в ПЖТ и ВЖТ была проанализирована у 51 пациента (28 мальчиков и 23 девочки, средний возраст 13,6 года (8,5—15,1 года). У всей группы обследованных детей не выявлено статистически значимых различий между уровнями экспрессии в ПЖТ и ВЖТ (табл. 3), а также между экспрессией гена ЛDIPOQ в ВЖТ и ПЖТ в зависимости от половой принадлежности обследованных детей. Однако у мальчиков отмечалась тенденция к более высокой экспрессии гена ЛDIPOQ в ВЖТ — 4,05 [3,14; 4,94] против 3,5 [2,68; 3,9] в ПЖТ (р=0,08).

По результатам сравнения групп детей с нормальной и с избыточной массой тела, уровень экспрессии гена ЛDIPOQ как в ПЖТ, так и в ВЖТ был статистически незначимо выше у детей с избыточной массой тела и ожирением на 22 и 22,6% соответственно (см. табл. 3).

Исследуя особенности экспрессии гена ЛDIPOQ в жировой ткани, мы выявили, что наиболее высокий уровень экспрессии гена как в ВЖТ, так и в ПЖТ, отмечается у детей на стадии полового развития Таннер 2—3. Дисперсионный анализ позволил выявить статистически значимые различия уровня экспрессии гена адипонектина в зависимости от стадии полового развития: р=0,0044 для экспрессии ЛDIPOQ в ВЖТ и р=0,035 для ЛDIPOQ в ПЖТ (рис. 1). При проведении множественных парных сравнений статистически значимые различия были выявлены между группами Таннер 1 и Таннер 2—3 (табл. 4).

Корреляционный анализ по Спирмену не выявил статистически значимых корреляций экспрессии гена ЛDIPOQ с возрастом обследованных детей. Однако была обнаружена статистически значимая корреляция между уровнем экспрессии гена ЛDIPOQ в ПЖТ и такими показателями, как рост (Д=0,31; р=0,02), масса тела (Д=0,33; р=0,01), ОТ (Я=0,3; р=0,027), ИМТ (Д=0,36;р=0,007), SD ИМТ (Д=0,33; р=0,01).

Таблица 3. Депо-специфические особенности экспрессии гена ADIPOQ в жировой ткани у детей

ADIPOQ Всего

ВЖТ 3,7

р*=0,3

ПЖТ 3,6

р*=0,076

рш 0,12 0,15 0,46

Примечание. Уровень экспрессии гена ADIPOQ выражен относительно экспрессии гена B2M. Данные представлены в виде Me (25; 75). Различия экспрессии гена между ПЖТ и ВЖТ оценены с помощью критерия Вилкоксона для парных сравнений (р*). Различия между группами обследованных с нормальной и с избыточной массой тела оценены с использованием критерия Манна—Уитни (р*).

ADIPOQ visceral: р = 0,0044°

ADIPOQ sc: p = 0,035

Стадия полового развития по Таннеру

g ADIPOQ visceral  ADIPOQ sc

Экспрессия гена ADIPOQ в висцеральной и подкожной жировой ткани в зависимости от стадии полового развития.

Кроме того, выявлена корреляция между уровнем экспрессии ADIPOQ в ВЖТ и ростом (R=0,39; /»=0,002), массой тела (R=0,34; р=0,008), ОТ (R=0,33; р=0,009), ИМТ (R=0,3; р=0,02).

Уровень экспрессии гена ADIPOQ в ВЖТ положительно, но статистически незначимо коррелировал с SD ИМТ (R=0,22; р=0,09).

Адипонектин в сыворотке крови у детей. Уровень адипонектина в сыворотке крови был исследован у 62 детей. Его средняя концентрация составила 9,15 (6,43; 11,0) мкг/мл. У мальчиков уровень адипонектина был статистически незначимо выше, чем у девочек - 9,7 (8,2; 11,1) и 7,9 (6,3; 10,1) мкг/мл соответственно (р=0,085).

Наиболее высокий уровень адипонектина отмечается у детей в препубертатном периоде, при

этом он отрицательно коррелирует со стадией полового развития по Таннеру (К=—0,34;р=0,0006, где К — коэффициент корреляции). При проведении дисперсионного анализа статистически значимые различия концентрации адипонектина в сыворотке в зависимости от стадии полового развития были отмечены между группами Таннер 1 и Таннер 4—5 (р=0,04). При проведении анализа отдельно для группы мальчиков и группы девочек тенденция к снижению уровня адипонектина по мере полового созревания сохранялась (табл. 5).

Концентрация адипонектина в сыворотке крови у детей с нормальной массой тела составила 9,6 (7,78; 12,1 мкг/мл), в то время как в группе с избыточной массой тела — 8,1 (6,06; 10,2 мкг/мл) (р=0,15).

Корреляционный анализ по Спирмену позволил выявить отрицательную взаимосвязь между уровнем адипонектина в сыворотке крови и возрастом обследованных детей (К=—0,3; р=0,015), ростом (К=-0,35; р=0,005), массой тела (К=-0,41; р=0,0008), ОТ (К=-0,36; р=0,004), ИМТ (К=-0,38; р=0,002), SD ИМТ (К=-0,35; р=0,004).

Исследуя взаимосвязь экспрессии гена ЛБ1РО0 в жировой ткани с содержанием адипонектина в сыворотке крови, мы обнаружили, что уровень мРНК ЛБ1РО0 в ПЖТ отрицательно коррелирует с содержанием адипонектина в кровотоке (К=—0,47; р=0,0003), в то время как экспрессия гена в ВЖТ не ассоциирована с данным показателем (К=—0,1; р=0,4).

Таким образом, не выявлена зависимость экспрессии гена ЛБ1РО0 от возраста и пола обследованных детей. Не найдено также статистически значимых различий по уровню экспрессии гена ЛБ1РО0 между ПЖТ и ВЖТ, хотя отмечалась тенденция к более высокой экспрессии гена адипо-

Таблица 4. Экспрессия гена ADIPOQ в зависимости от стадии полового развития

ADIPOQ Стадия полового развития

Таннер 1 («=18) Таннер 2—3 («=25) Таннер 4—5 («=8) Р

ВЖТ 2,8 (1,68; 3,88) 5,27 (4,32; 6,2) 3,8 (2,87; 4,7) 0,003*

ПЖТ 2,86 (2,1; 3,62) 4,4 (3,48; 5,3) 3,2 (2,28; 4,2) 0,03*

Примечание. Уровень экспрессии гена ЛВ1РО0 выражен относительно экспрессии гена В2М. Данные представлены в виде Ме (25; 75). * — для различий между группами Таннер 1 и Таннер 2—3.

Таблица 5. Уровень адипонектина в сыворотке крови в зависимости от стадии полового развития

Адипонектин, Стадия полового развития

мкг/мл Таннер 1 Таннер 2—3 Таннер 4—5 р

Вся группа «=21 «=28 «=13 0,04*

9,8 [8,9; 13,1] 9,0 [6,5; 9,95] 6,3 [5,9; 11,0]

Мальчики «=13 «=13 «=5 >0,05

9,8 [9,2; 12,1] 9,1 [8,1; 10,2] 8,5 [6,3; 11,0]

Девочки «=8 «=15 «=8 >0,05

12,1

Примечание. Данные представлены в виде Me (25; 75). * — для различий между группами Таннер 1 и Таннер 4—5.

нектина в ВЖТ у мальчиков. У детей с избыточной массой тела ген адипонектина экспрессировался на 22% выше в ПЖТ и на 22,6% в ВЖТ по сравнению с группой детей с нормальной массой тела. Кроме того, была выявлена положительная корреляция уровня экспрессии гена адипонектина с основными антропометрическими показателями. Установлено, что наиболее высокий уровень мРНК ЛDIPOQ как в ВЖТ, так и в ПЖТ отмечается у детей на стадии полового развития Таннер 2—3. Известно, что в пубертатный период в значительной мере изменяются гормональный профиль и биохимический состав организма. В этот период увеличивается общее количество жировой ткани, особенно ее висцеральный компонент, развивается так называемая пубертатная ИР. В генезе данного феномена немаловажную роль играют физиологические изменения в оси гормон роста — инсулиноподобный фактор роста 1-го типа, а также изменение уровней кортикосте-роидов и половых стероидов в сыворотке крови. Вполне вероятно, что эти же факторы могут влиять и на уровень экспрессии генов адипокинов. Так, в недавно проведенном исследовании было выявлено, что у детей по мере полового созревания в ВЖТ увеличивается экспрессия 11Ь-гидроксистероидде-гидрогеназы 1-го типа — фермента, участвующего в биосинтезе кортизола, и вследствие этого повышается локальная концентрация кортизола, что может влиять на экспрессию и секрецию адипонектина [16]. Экспрессия гена ЛDIPOQ в ПЖТ отрицательно коррелирует с содержанием адипонектина в сыворотке крови, что указывает на сложные механизмы регуляции секреции адипонектина жировой тканью и подтверждает данные предыдущих исследований [17, 18].

Средняя концентрация адипонектина в сыворотке крови у детей составила 9,15 (6,43; 11,0 мкг/мл). Не было выявлено статистически значимых различий содержания адипонектина в завистимости от пола обследованных детей, хотя отмечена тенденция к более высокому содержанию его у мальчиков. Выявлено, что уровень адипонектина прогрессивно снижается по мере полового созревания у детей.

Это подтверждает данные литературы о непосредственном влиянии половых стероидов на секрецию адипонектина. В работе А. Войпег и соавт. было показано, что снижение уровня адипонектина в пубертатном периоде ассоциировано с повышением концентраций андрогенов в сыворотке крови — тестостерона и ДЭА-С. При проведении регрессионного анализа в группе мальчиков с нормальной массой тела стадия полового развития была более сильным, чем ИМТ, прогностическим фактором снижения содержания адипонектина в сыворотке крови [19]. В другом исследовании [20] были получены данные о том, что тестостерон ингибирует секрецию адипо-нектина адипоцитами, не изменяя уровень мРНК гена ЛDIPOQ, что предполагает посттранскрипционный характер регуляции продукции адипонекти-на тестостероном.

В результате проведенного исследования мы не обнаружили статистически значимых различий концентрации адипонектина между группами детей с нормальной и избыточной массой тела, что может быть следствием недостаточного числа обследованных детей. Тем не менее сильная отрицательная корреляция уровня адипонектина в сыворотке крови с показателями ИМТ, SD ИМТ и ОТ указывает на необходимость дальнейшего изучения патофизиологической роли адипонектина в развитии ожирения и связанных с ним метаболических осложнений.

Выводы

1. Не обнаружено статистически значимых различий по уровню экспрессии гена ЛDIPOQ в ПЖТ и ВЖТ, наиболее высокий уровень экспрессии отмечается у детей на стадии полового развития Таннер 2—3.

2. Экспрессия гена ЛDIPOQ в ПЖТ отрицательно коррелирует с содержанием адипонектина в сыворотке крови.

3. Уровень адипонектина в сыворотке крови отрицательно коррелирует с показателями ИМТ, SD ИМТ, ОТ и степенью полового созревания.

ЛИТЕРАТУРА

Hu E., Liang P., Spiegelman B.M. AdipoQ is a novel adipose-specific gene dysregulated in obesity. J Biol Chem 1996;271:10697— 10703.

Maeda K., Okubo K., Shimomura I. cDNA cloning and expression of a novel adipose specific collagen-like factor, apM1 (AdiPose Most abundant Gene transcript 1). Biochem Biophys Res Commun 1996; 221: 286—289.

Nakano Y., Tomita M. et al. Isolation and characterization of GBP28, a novel gelatin-binding protein purified from human plasma. J Biochem (Tokyo) 1996;120:803—812.

Scherer P.E., Williams S. et al. A novel serum protein similar to C1q, produced exclusively in adipocytes. J Biol Chem 1995;270:26746-26749.

Fain J.N., Bahouth S.W. et al. Comparison of the release of adi-pokines by adipose tissue, adipose tissue matrix, and adipocytes from visceral and subcutaneous abdominal adipose tissues of obese humans. Endocrinology 2004; 145: 2273—2282. Xiaonan L., Lindquist S., Ängsten G. et al. Adiponectin and peroxisome proliferator-activated receptor gamma expression in subcutaneous and omental adipose tissue in children. Acta Paediat 2008;97:630—635.

7. Chandran M., Henry R.R. et al. Adiponectin: more than just another fat cell hormone? Diabet Care 2003;26:2442-2450.

8. Kadowaki T., Yamauchi T. Adiponectin and Adiponectin Receptors. Endocrine Rev 2005;26:3:439-451.

9. Adamczak M., Wiecek A., Funahashi T. et al. Decreased plasma adiponectin concentration in patients with essential hypertension. Am J Hypertens 2003;16:72-75.

10. Arita Y., Kihara S., Ouchi N. Paradoxical decrease of an adipose-specific protein, adiponectin, in obesity. Biochem Biophys Res Commun 1999;257:79-83.

11. Choi K.M., Lee J., Lee K.W. et al. Serum adiponectin concentrations predict the developments of type 2 diabetes and the metabolic syndrome in elderly koreans. Clin Endocrinol (Oxf) 2004;61:75— 80.

12. Dzielinska Z., Januszewicz A., Wiecek A. et al. Decreased plasma concentration of a novel anti-inflammatory protein adiponectin in hypertensive men with coronary artery disease. Thromb Res 2003;110:365—369.

13. Lindsay R.S., Funahashi T., Hanson R.L. et al. Adiponectin and development of type 2 diabetes in the pima indian population. Lancet 2002;360:57-58.

14. Matsubara M., Maruoka S., Katayose S. Inverse relationship between plasma adiponectin and leptin concentrations in normal-weight and obese women. Eur J Endocrinol 2002;147:173-180.

15. Matsubara M., Maruoka S., Katayose S. Decreased plasma adiponectin concentrations in women with dyslipidemia. J Clin Endocrinol Metab 2002;87:2764-2769.

16. Li X., Lindquist S., Chen R. et al. Depot-specific messenger RNA expression of 11 betahydroxysteroid dehydrogenase type 1 and lep-tin in adipose tissue of children and adults. Int J Obes (London) 2007;31:820-828.

17. Behre C.J., Gummesson A., JernasM., Lystig T.C. Dissociation between adipose tissue expression and serum levels of adiponectin during and after diet-induced weight loss in obese subj ects with and without the metabolic syndrome. Metabolism 2007;56:8:1022-1028.

18. Savu M.K., Phillips S.A., Oh D.K. et al. Response of adiponectin and its receptors to changes in metabolic state after gastric bypass surgery: dissociation between adipose tissue expression and circulating levels. Surg Obes Relat Dis 2009;5:2:172-180.

19. Bottner A., Kratzsch J., Muller G. Gender differences ofadiponectin levels develop during the progression of puberty and are related to serum androgen levels. J Clin Endocrinol Metab 2004;89:4053-4061.

20. Nishizawa H., Shimomura I., Kishida K. Androgens Decrease Plasma Adiponectin, an Insulin-Sensitizing Adipocyte-Derived Protein. Diabetes 2002;51:9:2734-2741.