ПРОИЗВОДНЫЕ АДАМАНТИЛА, ПОЛЕЗНЫЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ JNK-ОПОСРЕДОВАННОГО РАССТРОЙСТВА
ADAMANTYL DERIVATIVES USEFUL FOR TREATMENT OF JNK-MEDIATED DISORDER

c-Jun-N-концевые киназы (JNK) являются членами семейства митоген-активируемых протеинкиназ вместе с р38 и регулируемыми внеклеточными сигналами киназами (ERK). Было идентифицировано три разных гена (jnk1, jnk2 и jnk3), кодирующих 10 сплайс-вариантов. JNK1 и JNK2 экспрессируются в целом ряде тканей, тогда как JNK3 экспрессируется главным образом в нейронах и в меньшей степени в сердце и семенниках. Члены JNK-семейства активируются провоспалительными цитокинами, такими как фактор некроза опухоли α (TNF-α) и интерлейкин-1β (IL-1β), a также экзогенными стрессовыми факторами. Активация JNK опосредуется расположенными выше них в каскаде киназами, МКК4 и МКК7, посредством фосфорилирования двух остатков Thr-183 и Tyr-185. Показано, что МКК4 и МКК7 могут активироваться различными расположенными выше киназами, включая МЕКК1 и МЕКК4, в зависимости от внешних стимулов и клеточного окружения. Специфичность JNK-опосредованной передачи сигнала достигается в результате образования JNK-специфичного передающего сигнал комплекса, содержащего многочисленные компоненты киназного каскада посредством применения каркасных белков, называемых JNK-взаимодействующими белками. Показано, что JNK играют важную роль в воспалении, Т-клеточных функциях, апоптозе и клеточной выживаемости, фосфорилируя специфические субстраты, включая транскрипционные факторы, такие как c-Jun, компонент семейства активаторных белков-1 (АР1), и ATF2, а также нетранскрипционные факторы, такие как IRS-1 и Bcl-2. Считается, что сверхактивация JNK представляет собой важный механизм при аутоиммунных, воспалительных, метаболических, неврологических заболеваниях, а также при раке.
Ревматоидный артрит (RA) представляет собой системное аутоиммунное заболевание, характеризующееся хроническим воспалением суставов. Помимо опухания сустава и боли, которые вызваны воспалительным процессом, у большей части пациентов с RA в конечном итоге развивается инвалидизирующее поражение суставов и деформация. Несколько линий убедительных фармакологических и генетических данных, полученных на клеточных и животных моделях, дают веские основания предполагать необходимость и важность участия активированной JNK в патогенезе RA. Во-первых, аномальная активация JNK была зарегистрирована как в пораженных артритом суставах человека на пациентах с RA, так и в пораженных артритом суставах грызунов в животных моделях артрита. Кроме этого, ингибирование активации JNK селективными ингибиторами JNK блокировало продуцирование провоспалительных цитокинов и ММР в синовиоцитах, макрофагах и лимфоцитах человека. Важно, что введение селективных ингибиторов JNK крысам с адъювантным артритом или мышам с индуцируемым коллагеном артритом эффективно защищало суставы от разрушения и значительно уменьшало степень опухания лап в результате ингибирования экспрессии цитокина и коллагеназы.
Астма представляет собой хроническое воспалительное заболевание дыхательных путей, характеризующееся наличием клеточного воспалительного процесса и бронхиальной гиперчувствительностью, ассоциированной со структурными изменениями дыхательных путей. Показано, что в это расстройство вовлечены многие типы клеток в дыхательных путях, включая Т-лимфоциты, эозинофилы, тучные клетки, нейтрофилы и эпителиальные клетки. На основании последних исследований в отношении доказательства правильности концепции выяснено, что JNK являются перспективными терапевтическими мишенями в лечении астмы: показано, что ингибиторы JNK значительно блокировали продуцирование RANTES в активированных гладкомышечных клетках дыхательных путей человека. Более важно, что ингибиторы JNK демонстрировали хорошую эффективность в крысиных и мышиных моделях этого хронического состояния благодаря своей способности снижать клеточную инфильтрацию, воспаление, гиперчувствительность, пролиферацию гладкомышечных клеток и продуцирование IgE. Эти наблюдения позволяют высказать предположение относительно важной роли JNK в аллергическом воспалении и процессе ремоделирования дыхательных путей, ассоциированном с гиперчувствительностью. Таким образом, ожидается, что блокирование активности JNK будет полезно для лечения астмы.
307
-/-
-/-
-/-
Диабет 2 типа представляет собой наиболее серьезное и распространенное метаболическое заболевание, характеризующееся инсулинорезистентностью и нарушением секреции инсулина, являющимися результатом хронического низкоуровневого воспаления, и аномальным метаболизмом липидов, ассоциированным с окислительным стрессом. Сообщалось, что при заболеваниях ожирением и диабетом активность JNK в различных тканях, являющихся мишенями для диабета, аномально повышена. Активация JNK-пути под действием провоспалительных цитокинов и окислительных стрессов регулирует передачу инсулинового сигнала по типу отрицательной обратной связи посредством фосфорилирования субстрата-1 инсулинового рецептора (IRS-1) по остатку Ser, вследствие чего вносит вклад в инсулинорезистентность и толерантность к глюкозе. Убедительные генетические данные были получены в изящных исследованиях на животных моделях с использованием jnk мышей, скрещенных либо с генетически модифицированными (ob/ob) тучными мышами, либо мышами с индуцированным диетой ожирением. Утрата функции JNK1 (JNK1), но не функции JNK2 (jnk2), защищала тучных мышей от прироста массы тела, повышения стационарных уровней глюкозы в крови и снижения уровней инсулина в плазме. Эти исследования продемонстрировали потенциальную применимость ингибитора JNK в лечении ожирения/диабета 2 типа.
Нейродегенеративные заболевания, такие как болезнь Альцгеймера (AD), Паркинсона (PD) и инсульт, представляют собой заболевания ЦНС, характеризующиеся потерей синапсов, атрофией и смертью нейронов. Показано, что JNK-путь, приводящий к активации c-Jun, играет причинную роль в апоптозе изолированных первичных нейронов эмбрионов и многочисленных линий нервных клеток после индукции различных стимулов. Наблюдали сверхактивацию JNK в образцах человеческого головного мозга пациентов с AD или отделах головного мозга грызунов, полученных из животных моделей нейродегенеративных заболеваний. Например, повышение уровней фосфо-JNK детектировали в посмертных образцах головного мозга пациентов с AD. Введение JNK-ингибирующего пептида (пептида JIP-1) в модели AD, индуцированного у грызунов посредством введения β-амилоидного пептида, предотвращало нарушение синаптической пластичности. В животных моделях PD (в МРТР-модели) параллельно с гибелью нервных клеток наблюдали повышенные уровни фосфо-МКК4 и фосфо-JNK. Аденовирус-опосредованный перенос гена JNK-ингибирующего пептида (пептида JIP-1) в полосатое тело мышей ослаблял поведенческое нарушение путем ингибирования МРТР-опосредованной активации JNK, c-Jun и каспазы, тем самым блокируя гибель нейронов в черной субстанции. Помимо этого, в животной модели ишемического инсульта, индуцированного глутаматной эксайтотоксичностью, мыши, дефицитные по JNK3, но не по JNK1 или JNK2, были резистентны к опосредуемой каиновой кислотой (агонистом глутаматного рецептора) конвульсии или к гибели нейронов. Эти данные позволяют предположить, что JNK3 была ответственна главным образом за глутаматную эксайтотоксичность, важный компонент в ишемических состояниях. На основании этих данных, собранных вместе, высказано предложение использовать JNK в качестве привлекательной мишени при многочисленных заболеваниях ЦНС, ассоциированных с гибелью нервных клеток.
Неконтролируемые клеточный рост, пролиферация и миграция наряду с разрегулированным ангиогенезом вызывают образование злокачественных опухолей. Путь передачи сигнала через JNK может функционировать не только лишь при апоптозе; недавно было сделано заключение, что устойчивая активация JNK, приводящая к активации АР1, вносит вклад в выживаемость клеток конкретных типов раковых опухолей, таких как глиальные опухоли, и BCL/ABL-трансформированных В-лимфобластов. В случае глиальных опухолей повышенную активность JNK/AP1 наблюдали в большинстве образцов первичных опухолей головного мозга. Что касается трансформированных В-лимфобластов, то было показано, что BCL-ABL активирует JNK-путь, что в свою очередь активировало экспрессию антиапоптотического гена bcl-2. Интересно, что множественная лекарственная устойчивость и гиперпролиферация, наблюдаемые у пациентов с трудно поддающимся лечению AML (острым миелоидным лейкозом), принципиально связаны с устойчивой активностью JNK, обнаруженной в этих AML-образцах. Активация JNK в лейкозных клетках приводила к индуцированной экспрессии эффлюксных насосов, таких как mdr1 и MRP1, отвечающих за множественную лекарственную устойчивость. Кроме того, гены, несущие преимущество в плане выживаемости в ответ на окислительный стресс, включая гены глутатион-S-трансферазы π и γ-глутамил-цистеинсинтазы, также активировались под действием активированного JNK-пути.
Заболевания почек характеризуются потерей функции нефронов, вызванной прогрессирующим гломерулосклерозом и тубулоинтерстициальным фиброзом. Почечное заболевание может развиться вследствие многих состояний, включая воспаление, гипертензию, диабет или острое поражение ткани, вызванное антибиотиками, контрастирующими агентами или другими нефротоксичными веществами. Показано, что JNK-опосредованная передача сигнала активирована в патологических образцах многих почечных заболеваний человека, включая опосредуемый и неопосредуемый через иммунную систему гломерулонефрит, диабетическую нефропатию, гипертензию, острое повреждение и, по-видимому, играет роль в передаче сигнала при поликистозном заболевании почек. Убедительные данные в отношении центральной роли JNK и терапевтического потенциала ингибиторов JNK подкреплены исследованиями на животных моделях повреждения почек. Уровень JNK возрастал в крысиной модели гломерулонефрита, индуцированного антителом против клубочковой базальной мембраны, и улучшение почечной функции наблюдали при использовании специфического ингибитора в примерах как острого, так и хронического заболевания. Уровень JNK также возрастал у соль-чувствительной гипертензивной крысы линии Dahl, модели гипертензивного почечного заболевания, а также в моделях ишемического/реперфузионного повреждения почек. Клеточные механизмы, посредством которых JNK может участвовать в повреждении почек, действуют, в некоторой степени, путем активации провоспалительных медиаторов в макрофагах, а также путем активации профибротического и проапоптотического путей непосредственно в клетках почечного клубочка и эпителия канальцев. На основании способности к улучшению почечной функции путем ингибирования JNK, обнаруженному в многочисленных моделях заболевания, предлагается использовать JNK в качестве привлекательных мишеней для терапии почечных заболеваний различной этиологии.
В одном из аспектов согласно данной заявке предложено соединение формулы I,
где:
R представляет собой фенил или пиридонил, возможно замещенный одним или более R’;
R’ представляет собой галогено или метокси;
X представляет собой СН или N;
1
3
X представляет собой Н или С(=O)ОСН или 2-оксазол;
Y представляет собой СН или N;
1
1’
1’
1’
1’
1’
2
2
3
2
2
3
2
3
2
Y представляет собой ОН, OC(=O)Y, N(Y), NHS(=O)Y, NHC(=O)Y, NHC(=O)C(CH)OH, NHCHC(CH)OH или NHC(=O)C(CH)OC(=O)Y;
1’
каждый Y независимо представляет собой Н, низший алкил, низший гидроксиалкил или циклоалкил;
2
Y представляет собой Н, галогено или галогеноалкил;
или его фармацевтически приемлемая соль.
В одном из аспектов согласно данной заявке предложен способ лечения JNK-опосредованного расстройства у субъекта, имеющего JNK-опосредованное расстройство, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества любого из приведенных выше соединений.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства таким JNK-опосредованным расстройством является заболевание почек.
В одном из аспектов согласно данной заявке предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из вышеупомянутых воплощений в смеси по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом или разбавителем.
Определения
Если не указано иное, следующие термины, использованные в этой заявке, в том числе в описании и формуле изобретения, имеют приведенные ниже определения. Необходимо отметить, что, как использовано в описании и прилагаемой формуле изобретения, формы единственного числа (по англ. выражаемые артиклями "a", "an" и "the") включают объекты в форме множественного числа, если контекст ясно не предусматривает иное. Таким образом, фраза "какой-либо (что выражено англ. артиклями "а" или "an") объект", использованная в данном описании, относится к одному или более чем одному такому объекту; например, соединение относится к одному или более соединениям или по меньшей мере к одному соединению. Как таковые, термины "а" (или "an"), "один или более" и "по меньшей мере один/одна/одно" могут использоваться в данном описании взаимозаменяемо.
Использованные в этом описании термины "содержат(ит)" и "содержащий", независимо от того, применяются ли они в переходной фразе или в описании изобретения, следует интерпретировать как имеющие неограничивающее значение. То есть, эти термины следует интерпретировать как синонимы фразам "имеющий по меньшей мере" или "включающий по меньшей мере". При использовании в контексте способа, термин "включающий" означает, что данный способ включает по меньшей мере перечисленные стадии, но может включать дополнительные стадии. При использовании в контексте соединения или композиции, термин "содержащий" означает, что соединение или композиция включает по меньшей мере перечисленные признаки или компоненты, но может включать дополнительные признаки или компоненты.
Как использовано в данном описании, если конкретно не указано иное, слово "или" используется во "включающем" смысле термина "и/или", а не в "исключающем" смысле термина "или/или".
Термин "независимо" используется в данном описании для указания на то, что переменная величина в каждом случае применяется безотносительно присутствия или отсутствия переменной величины, имеющей то же самое или другое определение для одного и того же соединения. Таким образом, в том соединении, в котором Rʺ появляется дважды и определяется как "независимо углерод или азот", оба Rʺ могут представлять собой углерод, оба Rʺ могут представлять собой азот или один Rʺ может представлять собой углерод, и другой - азот.
1
1
2
Если какая-либо переменная величина (например, R, X, X, Y и Y) присутствует более чем один раз в какой-либо группировке или формуле, изображающей и описывающей соединения, примененные или заявленные в настоящем изобретении, ее определение для каждого случая не зависит от ее определения в каждом другом случае. Кроме того, комбинации заместителей и/или переменных допустимы только в том случае, если такие соединения являются стабильными соединениями.
Символ "*" на конце связи или символ, "------", проведенный поперек связи, каждый означает место присоединения функциональной группы или другой химической группировки к остальной части молекулы, частью которой она является. Так, например:
Символ “”, использованный в данном описании, относится к связи, которая может быть либо в цис-, либо транс-конфигурации.
Связь, проведенная к кольцевой системе (в отличие от присоединения в отдельной вершине), указывает на то, что это может быть связь с любым из подходящих атомов в кольце.
Термин "возможный" или "возможно", использованный в данном описании, означает, что описываемое впоследствии событие или обстоятельство может иметь место, но происходит не обязательно, и что данное описание включает случаи, когда это событие или обстоятельство происходит, и случаи, в которых это не так. Например, "возможно замещенный" означает, что возможно замещенная группировка может содержать атом водорода или заместитель.
Термин "примерно" используется в данном описании для обозначения таких понятий, как приблизительно, в области, ориентировочно или около. В том случае, когда термин "примерно" используется вместе с численным диапазоном, этот диапазон может изменяться путем расширения границ выше и ниже указанных численных значений.
Некоторые соединения по изобретению могут демонстрировать таутомерию. Таутомерные соединения могут существовать в виде двух или более взаимопревращаемых разновидностей. Прототропные таутомеры являются результатом миграции ковалентно связанного атома водорода между двумя атомами. Как правило, таутомеры существуют в равновесии, и попытки выделить индивидуальные таутомеры обычно дают смесь, химические и физические свойства которой соответствуют смеси соединений. Положение равновесия зависит от химических особенностей строения молекулы. Например, у многих алифатических альдегидов и кетонов, таких как ацетальдегид, преобладает кето-форма, при этом у фенолов преобладает енольная форма. Обычные Прототропные таутомеры включают таутомерную пару кето/енол (-С(=O)-СН- ↔ -С(-ОН)=СН-), таутомерию амид/имидокислота (-С(=O)-NH- ↔ -С(-ОН)=N-) и таутомеры амидина (-C(=NR)-NH- ↔ -C(-NHR)=N-). Двое последних, в частности, обычно встречаются в гетероарильных и гетероциклических кольцах, и настоящее изобретение охватывает все таутомерные формы соединений.
th
Технические и научные термины, использованные в данном описании, имеют значение, обычно понимаемое специалистом в области техники, к которой настоящее изобретение относится, если не указано иное. В этом описании дается ссылка на различные методологии и вещества, известные специалистам в данной области. Стандартные справочники, в которых изложены основные принципы фармакологии, включают Goodman and Gilman's, The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10 Ed., McGraw Hill Companies Inc., New York (2001). При осуществлении настоящего изобретения могут быть использованы любые подходящие вещества и/или способы, известные специалистам. Однако описываются предпочтительные вещества и способы. Вещества, реагенты и им подобные, на которые дается ссылка в следующих далее описании и примерах, получают из коммерческих источников, если не указано иное.
Определения, изложенные в данном описании, могут быть дополнены с образованием химически-релевантных комбинаций, таких как "гетероалкиларил", "галогеноалкилгетероарил", "арилалкилгетероциклил", "алкилкарбонил", "алкоксиалкил" и им подобные. В том случае, когда термин "алкил" используется в качестве окончания после другого термина, как в "фенилалкиле" или "гидроксиалкиле", подразумевается, что он относится к алкильной группе, определенной выше, которая замещена одним-двумя заместителями, выбранными из другой, конкретно обозначенной группы. Так, например, "фенилалкил" относится к алкильной группе, имеющей от одного до двух фенильных заместителей, и поэтому включает бензил, фенилэтил и дифенилметил. "Алкиламиноалкил" представляет собой алкильную группу, имеющую от одного до двух заместителей алкиламино. "Гидроксиалкил" включает 2-гидроксиэтил, 2-гидроксипропил, 1-(гидроксиметил)-2-метилпропил, 2-гидроксибутил, 2,3-дигидроксибутил, 2-(гидроксиметил), 3-гидроксипропил и так далее. Соответственно, использованный в данном описании термин "гидроксиалкил", применяется для определения подгруппы гетероалкильных групп, определенных ниже. Термин "-(ар)алкил" относится или к незамещенному алкилу, или к аралкильной группе. Термин (гетеро)арил или (гет)арил относится или к арильной, или гетероарильной группе.
1-6
Термин "ацил", использованный в данном описании, означает группу формулы -C(=O)R, где R представляет собой водород или низший алкил, определенный в данном описании. Термин "алкилкарбонил", использованный в данном описании, означает группу формулы C(=O)R, где R представляет собой алкил, определенный в данном описании. Термин Сацил относится к группе -C(=O)R, где R содержит 1-6 атомов углерода. Термин "арилкарбонил", использованный в данном описании, означает группу формулы C(=O)R, где R представляет собой арильную группу; термин "бензоил", использованный в данном описании, представляет собой "арилкарбонильную" группу, где R представляет собой фенил.
1-10
Термин "алкил", использованный в данном описании, означает неразветвленный или разветвленный, насыщенный моновалентный углеводородный остаток, содержащий 1-10 атомов углерода. Термин "низший алкил" означает прямой или разветвленный углеводородный остаток, содержащий 1-6 атомов углерода. "Салкил" использованный в данном описании, относится к алкилу, состоящему из 1-10 атомов углерода. Примеры алкильных групп включают, но не ограничиваются этим, низшие алкильные группы, которые включают метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил или пентил, изопентил, неопентил, гексил, гептил и октил.
В том случае, когда термин "алкил" используется в качестве окончания после другого термина, как в "фенилалкиле" или "гидроксиалкиле", подразумевается, что он относится к алкильной группе, определенной выше, которая замещена одним-двумя заместителями, выбранными из другой, конкретно обозначенной группы. Так, например, "фенилалкил" означает радикал R’Rʺ-, где R’ представляет собой фенильный радикал, а Rʺ представляет собой алкиленовый радикал, определенный в данном описании, при этом понимается, что местом присоединения фенилалкильной группировки будет алкиленовый радикал. Примеры арилалкильных радикалов включают, но не ограничиваются этим, бензил, фенилэтил, 3-фенилпропил. Термины "арилалкил" или "аралкил" интерпретируются аналогично за исключением того, что R’ представляет собой арильный радикал. Термины "(гет)арилалкил" или "(гет)аралкил" интерпретируются аналогично за исключением того, что R’ возможно представляет собой арильный или гетероарильный радикал.
2
n
2
2
Термин "алкилен", использованный в данном описании, означает двухвалентный насыщенный линейный углеводородный радикал из 1-10 атомов углерода (например, (CH)) или разветвленный насыщенный двухвалентный углеводородный радикал из 2-10 атомов углерода (например, -СНМе- или -СНСН(i-Pr)СН-), если не указано иное. За исключением случая метилена, свободные валентности алкиленовой группы не присоединены к одному и тому же атому. Примеры алкиленовых радикалов включают, но не ограничиваются этим, метилен, этилен, пропилен, 2-метил-пропилен, 1,1-диметил-этилен, бутилен, 2-этилбутилен.
1-10
1-10
Термин "алкокси", использованный в данном описании, означает группу -O-алкил, где алкил является таким, как определено выше, такую как метокси, этокси, н-пропилокси, изопропилокси, н-бутилокси, изобутилокси, трет-бутилокси, пентилокси, гексилокси, включая их изомеры. "Низший алкокси", использованный в данном описании, означает алкоксигруппу с группой "низший алкил", которая определена ранее, "Cалкокси", использованный в данном описании, относится к -O-алкилу, где алкил представляет собой Cалкил.
"Арил" означает моновалентную циклическую ароматическую углеводородную группировку, состоящую из моно-, би- или трициклического ароматического кольца. Арильная группа возможно может быть замещена, как определено в данном описании. Примеры арильных группировок включают, но не ограничиваются этим, возможно замещенный фенил, нафтил, фенантрил, флуоренил, инденил, пенталенил, азуленил, оксидифенил, бифенил, метилендифенил, аминодифенил, дифенилсульфидил, дифенилсульфонил, дифенилизопропилиденил, бензодиоксанил, бензофуранил, бензодиоксилил, бензопиранил, бензоксазинил, бензоксазинонил, бензопиперидинил, бензопиперазинил, бензопирролидинил, бензоморфолинил, метилендиоксифенил, этилендиоксифенил и им подобные, в том числе их частично гидрированные производные.
Термин "основание" включает в себя, но не ограничивается этим, NaOH, КОН, LiOH и карбонаты щелочных металлов, такие как карбонат калия, карбонат натрия, карбонат лития, бикарбонат натрия, карбонат цезия и им подобные.
"Циклоалкил" или "карбоциклическое кольцо" означает моновалентную насыщенную карбоциклическую группировку, состоящую из моноциклических, бициклических или трициклических колец. Циклоалкил возможно может быть замещен одним или более заместителями, где каждый заместитель независимо представляет собой гидрокси, алкил, алкокси, галогено, галогеноалкил, амино, моноалкиламино или диалкиламино, если конкретно не указано иное. Примеры циклоалкильных группировок включают, но не ограничиваются этим, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и им подобные, в том числе их частично ненасыщенные производные.
a
b
a
b
"Гетероциклоалкил-(низший алкил)" означает группировку формулы -R-R, где R представляет собой низший алкилен, a R представляет собой гетероциклоалкил, определенный в данном описании.
Термин "гетероарил" или "гетероароматический", использованный в данном описании, означает моноциклический или бициклический радикал из 5-12 кольцевых атомов, имеющий по меньшей мере одно ароматическое кольцо, содержащее от четырех до восьми атомов на одно кольцо, включая один или более чем один гетероатом N, О или S, причем остальные кольцевые атомы представляют собой углерод, при этом понимается, что местом присоединения гетероарильного радикала будет ароматическое кольцо. Как хорошо известно специалистам в данной области, гетероарильные кольца проявляют ароматический характер в меньшей степени, чем их состоящие полностью из атомов углерода аналоги. Так, для задач данного изобретения необходимо, чтобы гетероарильная группа проявляла ароматический характер только в некоторой степени. Примеры гетероарильных группировок включают моноциклические ароматические гетероциклы, имеющие 5-6 кольцевых атомов и 1-3 гетероатома, в том числе, но не ограничиваясь этим, пиридинил, пиримидинил, пиразинил, пирролил, пиразолил, имидазолил, оксазол, изоксазол, тиазол, изотиазол, триазолин, тиадиазол и оксадиаксолин, который возможно может быть замещен одним или более, предпочтительно одним или двумя заместителями, выбранными из гидрокси, циано, алкила, алкокси, тио, низшего галогеноалкокси, алкилтио, галогено, галогеноалкила, алкилсульфинила, алкилсульфонила, галогена, амино, алкиламино, диалкиламино, аминоалкила, алкиламиноалкила и диалкиламиноалкила, нитро, алкоксикарбонила и карбамоила, алкилкарбамоила, диалкилкарбамоила, арилкарбамоила, алкилкарбониламино и арилкарбониламино. Примеры бициклических группировок включают, но не ограничиваются этим, хинолинил, изохинолинил, бензофурил, бензотиофенил, бензоксазол, бензизоксазол, бензотиазол и бензизотиазол. Бициклические группировки возможно могут быть замещены по одному кольцу из двух; однако место присоединения находится на кольце, содержащем гетероатом.
0-2
Термин "гетероциклил", "гетероцикл" или "гетероциклоалкил", использованный в данном описании, означает моновалентный насыщенный циклический радикал, состоящий из одного или более колец, предпочтительно одного-двух колец, содержащих три-восемь атомов на одно кольцо, включая один или более кольцевых гетероатомов (выбранных из N, O или S(O)), и который возможно может быть независимо замещен одним или более, предпочтительно одним или двумя заместителями, выбранными из гидрокси, оксо, циано, низшего алкила, низшего алкокси, низшего галогеноалкокси, алкилтио, галогено, галогеноалкила, гидроксиалкила, нитро, алкоксикарбонила, амино, алкиламино, алкилсульфонила, арилсульфонила, алкиламиносульфонила, ариламиносульфонила, алкилсульфониламино, арилсульфониламино, алкиламинокарбонила, ариламинокарбонила, алкилкарбониламино, арилкарбониламино, если не указано иное. Примеры гетероциклических радикалов включают, но не ограничиваются этим, азетидинил, пирролидинил, гексагидроазепинил, оксетанил, тетрагидрофуранил, тетрагидротиофенил, оксазолидинил, тиазолидинил, изоксазолидинил, морфолинил, пиперазинил, пиперидинил, тетрагидропиранил, тиоморфолинил, хинуклидинил и имидазолинил.
Термин "гидроксиалкил", использованный в данном описании, означает алкильный радикал, определенный в данном описании, где от одного до трех атомов водорода у разных атомов углерода заменены на гидроксильные группы.
2
2
2
2
3
3
2
6
4
2
Обычно используемые сокращения включают: ацетил (Ас), азо-бис-изобутирилнитрил (AIBN), атмосферы (атм.), 9-борабицикло[3.3.1]нонан (9-BBN или BBN), трет-бутоксикарбонил (Вос), ди-трет-бутилпирокарбонат или boc-ангидрид (BOCO), бензил (Bn), бутил (Bu), регистрационный номер в Chemical Реферат (CASRN), бензилоксикарбонил (CBZ или Z), карбонилдиимидазол (CDI), 1,4-диазабицикло[2.2.2]октан (DABCO), трифторид диэтиламиносеры (DAST), дибензилиденацетон (dba), 1,5-диазабицикло[4.3.0]нон-5-ен (DBN), 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (DBU), N,N'-дициклогексилкарбодиимид (DCC), 1,2-дихлорэтан (DCE), дихлорметан (DCM), диэтилазодикарбоксилат (DEAD), ди-изопропилазодикарбоксилат (DIAD), ди-изобутилалюминийгидрид (DIBAL или DIBAL-H), ди-изопропилэтиламин (DIPEA), N,N-диметилацетамид (DMA), 4-N,N-диметиламинопиридин (DMAP), N,N-диметилформамид (DMF), диметилсульфоксид (DMSO), 1,1'-бис-(дифенилфосфино)этан (dppe), 1,1'-бис-(дифенилфосфино)ферроцен (dppf), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорид (EDC), этил (Et), этилацетат (EtOAc), этанол (EtOH), 2-этокси-2Н-хинолин-1-карбоновой кислоты сложный этиловый эфир (EEDQ), диэтиловый эфир (EtO), O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония гексафторфосфат (HATU), уксусную кислоту (HOAc), 1-N-гидроксибензотриазол (HOBt), жидкостную хроматографию высокого давления (HPLC), изопропанол (IPA), гексаметилдисилазан лития (LiHMDS), метанол (МеОН), точку плавления (т.пл.), MeSO- (мезил или Ms), метил (Me), ацетонитрил (МеСМ), м-хлорпербензойную кислоту (МСРВА), масс-спектр (ms), простой метил-трет-бутиловый эфир (МТВЕ), N-бромсукцинимид (NBS), N-карбоксиангидрид (NCA), N-хлорсукцинимид (NCS), N-метилморфолин (NMM), N-метилпирролидон (NMP), хлорхромат пиридиния (РСС), дихромат пиридиния (PDC), фенил (Ph), пропил (Pr), изопропил (i-Pr), фунты на квадратный дюйм (ф/кв. дюйм), пиридин (pyr), комнатную температуру (кт или КТ), трет-бутилдиметилсилил или трет-BuMeSi (TBDMS), триэтиламин (TEA или EtN), 2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксил (TEMPO), трифлат или CFSO- (Tf), трифторуксусную кислоту (TFA), O-бензотриазол-1-ил-N,N,N',N'-тетраметилурония тетрафторборат (TBTU), тонкослойную хроматографию (TLC), тетрагидрофуран (THF), триметилсилил или MesSi (TMS), п-толуолсульфоновой кислоты моногидрат (TsOH или pTsOH), 4-Ме-CHSO- или тозил (Ts), N-уретан-N-карбоксиангидрид (UNCA). Традиционная номенклатура, включающая префиксы нормальный (н-), изо (i-), вторичный (втор-), третичный (трет-) и нео-, имеют свое общепринятое значение при использовании вместе с алкильной группировкой. (J. Rigaudy and D.P. Klesney, Nomenclature in Organic Chemistry, IUPAC 1979 Pergamon Press, Oxford).
4
7
n
a
b
c
d
a
b
c
d
d
d
"Гетероалкил" означает алкильную группировку, определенную в данном описании, включая разветвленный С-Салкил, где один, два или три атома водорода заменены на заместитель, независимо выбранный из группы, состоящей из -OR, -NFR и -S(O)R (где n представляет собой целое число от 0 до 2), при этом понимается, что присоединение гетероалкильного радикала осуществляется через атом углерода, где R представляет собой водород, ацил, алкил, циклоалкил или циклоалкилалкил; R и R независимо друг от друга представляют собой водород, ацил, алкил, циклоалкил или циклоалкилалкил; и где n равно 0, Rпредставляет собой водород, алкил, циклоалкил или циклоалкилалкил; когда n равно 1, R представляет собой алкил, циклоалкил или циклоалкилалкил; и когда n равно 2, R представляет собой алкил, циклоалкил, циклоалкилалкил, амино, ациламино, моноалкиламино или диалкиламино. Репрезентативные примеры включают, но не ограничиваются этим, 2-гидроксиэтил, 3-гидроксипропил, 2-гидрокси-1-гидроксиметилэтил, 2,3-дигидроксипропил, 1-гидроксиметилэтил, 3-гидроксибутил, 2,3-дигидроксибутил, 2-гидрокси-1-метилпропил, 2-аминоэтил, 3-аминопропил, 2-метилсульфонилэтил, аминосульфонилметил, аминосульфонилэтил, аминосульфонилпропил, метиламиносульфонилметил, метиламиносульфонилэтил, метиламиносульфонилпропил и им подобные.
"Гетероарил" означает моноциклическую или бициклическую группировку из 5-12 кольцевых атомов, имеющую по меньшей мере одно ароматическое кольцо, содержащее один, два или три кольцевых гетероатома, выбранных из N, О или S, причем остальные кольцевые атомы представляют собой С, при этом понимается, что место присоединения гетероарильного радикала будет находиться на ароматическом кольце. Гетероарильное кольцо возможно может быть замещено, как определено в данном описании. Примеры гетероарильных группировок включают, но не ограничиваются этим, возможно замещенный имидазолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, оксадиазолил, тиадиазолил, пиразинил, тиенил, тиофенил, фуранил, пиранил, пиридинил, пирролил, пиразолил, пиримидил, пиридазинил, хинолинил, изохинолинил, бензофурил, бензофуранил, бензотиофенил, бензотиопиранил, бензимидазолил, бензоксазолил, бензооксадиазолил, бензотиазолил, бензотиадиазолил, бензопиранил, индолил, изоиндолил, индазолил, триазолил, триазинил, хиноксалинил, пуринил, хиназолинил, хинолизинил, нафтиридинил, птеридинил, карбазолил, азепинил, диазепинил, акридинил и им подобные, в том числе их частично гидрированные производные.
Термины "галогено", "галоген" и "галогенид" используются в данном описании взаимозаменяемо и относятся к фторо, хлоро, бромо и иодо.
2
2
3
2
3
2
3
3
"Галогеноалкил" означает алкил, определенный в данном описании, в котором один или более атомов водорода заменены на одинаковые или разные атомы галогена. Термин "низший галогеноалкил" означает прямой или разветвленный углеводородный остаток, содержащий 1-6 атомов углерода, замещенный одним или более чем одним атомом галогена. Типичные галогеноалкилы включают -CHCl, -CHCF, -CHCCl, -CFCF, -CF и им подобные.
"Гетероциклил" или "гетероциклоалкил" означает моновалентную насыщенную группировку, состоящую из одного-двух колец, включающих в себя один, два или три либо четыре гетероатома (выбранных из азота, кислорода или серы). Гетероциклильное кольцо возможно может быть конденсировано с гетероарильной группой, определенной в данном описании. Гетероциклильное кольцо возможно может быть замещено, как определено в данном описании. Примеры гетероциклильных группировок включают, но не ограничиваются этим, возможно замещенный пиперидинил, пиперазинил, гомопиперазинил, азепинил, пирролидинил, пиразолидинил, имидазолинил, имидазолидинил, пиридинил, пиридазинил, пиримидинил, оксазолидинил, изоксазолидинил, морфолинил, тиазолидинил, изотиазолидинил, хинуклидинил, хинолинил, изохинолинил, бензимидазолил, тиадиазолилидинил, бензотиазолидинил, бензоазолилидинил, дигидрофурил, тетрагидрофурил, дигидропиранил, тетрагидропиранил, тиаморфолинил, тиаморфолинил-сульфоксид, тиаморфолинилсульфон, дигидрохинолинил, дигидроизохинолинил, тетрагидрохинолинил, тетрагидроизохинолинил, октагидро-пирроло[1,2-а]пиразин, октагидро-пиридо[1,2-а]пиразин, 5,6,7,8-тетрагидро-[1,2,4]триазоло[4,3-а]пиразин, 5,6,7,8-тетрагидро-имидазо[1,2-а]пиразин и им подобные.
"Возможно замещенный" означает наличие заместителя, который замещен независимо заместителями в количестве от нуля до трех, выбранными из низшего алкила, галогено, ОН, циано, амино, нитро, низшего алкокси или галогено-(низшего алкила).
"Уходящая группа" означает группу, имеющую значение, традиционно ассоциируемое с ней в синтетической органической химии, т.е. атом или группу, замещаемые в условиях реакции замещения. Примеры уходящих групп включают, но не ограничиваются этим, галоген, алкан- или ариленсульфонилокси, такой как метансульфонилокси, этансульфонилокси, тиометил, бензолсульфонилокси, тозилокси и тиенилокси, дигалогенофосфиноилокси, возможно замещенный бензилокси, изопропилокси, ацилокси и им подобные.
Термин "возможный" или "возможно" означает, что описываемое впоследствии событие или обстоятельство может иметь место, но происходит не обязательно, и что данное описание включает случаи, когда это событие или обстоятельство происходит, и случаи, в которых это не так.
"Агонист" относится к соединению, которое повышает активность другого соединения или рецепторного участка.
"Антагонист" относится к соединению, которое ослабляет или предотвращает действие другого соединения или рецепторного участка.
Термин "лекарственное средство-кандидат" относится к соединению или препарату, которые подлежат тестированию на предмет возможного эффекта в лечении болезненного состояния у животного, независимо от того, обладает ли указанное лекарственное средство-кандидат какой-либо известной биологической активностью.
Термин "гомологичный", использованный в данном описании, относится к вариантам белка, которые осуществляют по существу одну ту же функцию в объектах другого вида и имеют значительную идентичность последовательности, в той мере, в которой они признаны в данной области техники как представляющие собой варианты того же самого белка, отличающиеся главным образом в тех видах, в которых они обнаружены. Так, например, ERG человека, ERG мыши и ERG крысы все считаются гомологичными друг другу.
"Модулятор" означает молекулу, которая взаимодействует с мишенью. Во взаимодействия включены, но не ограничиваются этим, агонист, антагонист и им подобные, определенные в данном описании.
"Заболевание" и "болезненное состояние" означает любое заболевание, состояние, симптом, расстройство или показание.
Термин "клеточная линия" относится к клону иммортализованных клеток млекопитающих. "Стабильная" клеточная линия представляет собой клеточную линию, которая демонстрирует по существу неизменные характеристики в течение некоторого периода времени (например, при каждом удвоении). Стабильная клеточная линия в терминах данного изобретения обеспечивает значительную долю клеток, которые способны давать сопротивление утечки более чем примерно 50 МОм, амплитуду тока более чем примерно 200 пА, и обеспечивает амплитуду тока, которая не меняется в течение одного часа в контрольных условиях более чем на приблизительно 20%.
Термин "фармацевтически приемлемые соли" соединения означает соли, которые являются фармацевтически приемлемыми, как определено в данном описании, и которые обладают желаемой фармакологической активностью исходного соединения. Такие соли включают:
(1) соли присоединения кислоты, образованные с неорганическими кислотами, такими как соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и им подобные; или образованные с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, бензолсульфоновая кислота, бензойная кислота, камфорсульфоновая кислота, лимонная кислота, этансульфоновая кислота, фумаровая кислота, глюкогептоновая кислота, глюконовая кислота, глутаминовая кислота, гликолевая кислота, гидроксинафтойная кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, молочная кислота, малеиновая кислота, яблочная кислота, малоновая кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, муконовая кислота, 2-нафталинсульфоновая кислота, пропионовая кислота, салициловая кислота, янтарная кислота, винная кислота, п-толуолсульфоновая кислота, триметилуксусная кислота и им подобные; или
(2) соли, образованные в том случае, когда кислотный протон, присутствующий в исходном соединении, либо заменен на ион металла, например, ион щелочного металла, ион щелочноземельного металла или ион алюминия; либо образует координационную связь с органическим или неорганическим основанием. Приемлемые органические основания включают диэтаноламин, этаноламин, N-метилглюкамин, триэтаноламин, трометамин и им подобные. Приемлемые неорганические основания включают гидроксид алюминия, гидроксид кальция, гидроксид калия, карбонат натрия и гидроксид натрия.
Следует понимать, что все ссылки на фармацевтически приемлемые соли в случае одной и той же соли присоединения кислоты включают формы присоединения растворителя (сольваты) или кристаллические формы (полиморфы), которые определены в данном описании.
Предпочтительными фармацевтически приемлемыми солями являются соли, образованные из уксусной кислоты, соляной кислоты, серной кислоты, метансульфоновой кислоты, малеиновой кислоты, фосфорной кислоты, винной кислоты, лимонной кислоты, натрия, калия, кальция, цинка и магния.
2
Термин "сольваты" означает формы присоединения растворителя, которые содержат или стехиометрические, или нестехиометрические количества растворителя. Некоторые соединения в кристаллическом твердом состоянии имеют тенденцию захватывать молекулы растворителя в фиксированном молярном соотношении с образованием таким образом сольвата. Если растворителем является вода, то образованный сольват представляет собой гидрат, в том случае, когда растворителем является спирт, образованный сольват представляет собой алкоголят. Гидраты образуются в результате объединения одной или более молекул воды с одним из веществ, в комбинации с которым вода сохраняет свое молекулярное состояние в виде НО, при этом такая комбинация способна образовывать один или более чем один гидрат.
Термин "субъект" включает в себя млекопитающих и птиц. Термин "млекопитающие" обозначает любого члена класса млекопитающих, включая, но не ограничиваясь этим, людей; не являющихся людьми приматов, таких как шимпанзе и другие обезьяны и виды макак; сельскохозяйственных животных, таких как крупный рогатый скот, лошади, овцы, козы и свиньи; домашних животных, таких как кролики, собаки и кошки; лабораторных животных, в том числе грызунов, таких как крысы, мыши и морские свинки; и им подобных. Термин "субъект" не указывает на конкретный возраст или пол.
"Терапевтически эффективное количество" означает количество соединения, которое при введении субъекту для лечения болезненного состояния, является достаточным для осуществления такого лечения данного болезненного состояния. "Терапевтически эффективное количество" будет варьировать в зависимости от соединения, подвергаемого лечению болезненного состояния, тяжести или подвергаемого лечению заболевания, возраста и относительного состояния здоровья субъекта, пути и формы введения, проницательности лечащего врача или ветеринара и других факторов.
Термин "фармакологическое действие", использованный в данном описании, охватывает действия, производимые в организме субъекта, которые достигают намеченной цели терапии. Например, фармакологическое действие будет представлять собой действие, которое выражается в предупреждении, облегчении или уменьшении недержания мочи у подвергаемого лечению пациента.
"Подвергание лечению" или "лечение" болезненного состояния включает (1) предупреждение болезненного состояния, т.е. выполнение мероприятий, не позволяющих клиническим симптомам болезненного состояния развиться у субъекта, который может быть подвержен или предрасположен к этому болезненному состоянию, но все еще не испытывает или проявляет симптомы болезненного состояния; (2) подавление болезненного состояния, т.е. приостановку развития болезненного состояния или его клинических симптомов; или (3) облегчение болезненного состояния, т.е. вызывание временной или постоянной ремиссии болезненного состояния или его клинических симптомов.
Все патенты и публикации, указанные в данном описании, включены в данное описание посредством ссылки во всей своей полноте.
Ингибиторы JNK
В одном из аспектов согласно данной заявке предложено соединение формулы I,
где:
R представляет собой фенил или пиридонил, возможно замещенный одним или более R';
R' представляет собой галогено или метокси;
X представляет собой СН или N;
1
3
X представляет собой Н или С(=O)ОСН или 2-оксазол;
Y представляет собой СН или N;
1
1'
1'
1'
1'
1'
2
2
3
2
2
3
2
3
2
Y представляет собой ОН, OC(=O)Y, N(Y), NHS(=O)Y, NHC(=O)Y, NHC(=O)С(СН)OH, NHCHC(СН)OH или NHC(=O)С(СН)OC(=O)Y;
1'
каждый Y независимо представляет собой Н, низший алкил, низший гидроксиалкил или циклоалкил;
2
Y представляет собой Н, галогено или галогеноалкил;
или его фармацевтически приемлемая соль.
1
3
В одном из вариантов формулы I Х представляет собой СН, и Xпредставляет собой С(=O)ОСН.
В одном из вариантов формулы I R представляет собой фенил.
1
3
В одном из вариантов формулы I R представляет собой фенил, Х представляет собой СН, и X представляет собой С(=O)ОСН.
2
В одном из вариантов формулы I Y представляет собой СН, и Yпредставляет собой Cl.
2
В одном из вариантов формулы I Y представляет собой N, и Yпредставляет собой Н.
1
2
3
В одном из вариантов формулы I Х представляет собой СН, Xпредставляет собой С(=O)ОСН, R представляет собой фенил, Y представляет собой СН, и Y представляет собой Cl.
1
2
3
В одном из вариантов формулы I Х представляет собой СН, Xпредставляет собой С(=O)ОСН, R представляет собой фенил, Y представляет собой N, и Y представляет собой Н.
1
1'
В одном из вариантов формулы I Y представляет собой ОН или OC(=O)Y.
1
1
3
В одном из вариантов формулы I Х представляет собой СН, Xпредставляет собой С(=O)ОСН, R представляет собой фенил, и Y представляет собой ОН.
1
2
В одном из вариантов формулы I Y представляет собой NH.
1
1
3
2
В одном из вариантов формулы I Х представляет собой СН, Xпредставляет собой С(=O)ОСН, R представляет собой фенил, и Y представляет собой NH.
1
1'
2
В одном из вариантов формулы I Y представляет собой NHS(=O)Y.
1
1
1'
3
2
В одном из вариантов формулы I Х представляет собой СН, Xпредставляет собой С(=O)ОСН, R представляет собой фенил, и Y представляет собой NHS(=O)Y.
1
1'
В одном из вариантов формулы I Y представляет собой NHC(=O)Y.
1
1
1'
3
В одном из вариантов формулы I Х представляет собой СН, Xпредставляет собой С(=O)ОСН, R представляет собой фенил, и Y представляет собой NHC(=O)Y.
1
3
2
3
В одном из вариантов формулы I Y представляет собой NHC(=O)С(СН)OC(=O)СН.
1
1
3
3
2
3
В одном из вариантов формулы I Х представляет собой СН, Xпредставляет собой С(=O)ОСН, R представляет собой фенил, и Y представляет собой NHC(=O)С(СН)OC(=O)СН.
1
3
2
В одном из вариантов формулы I Y представляет собой NHC(=O)С(СН)OH.
1
1
3
3
2
В одном из вариантов формулы I Х представляет собой СН, Xпредставляет собой С(=O)ОСН, R представляет собой фенил, и Y представляет собой NHC(=O)С(СН)OH.
1
3
В одном из вариантов формулы I Y представляет собой NHC(=O)СН.
1
1
3
3
В одном из вариантов формулы I Х представляет собой СН, Xпредставляет собой С(=O)ОСН, R представляет собой фенил, и Y представляет собой NHC(=O)СН.
1
3
3
В одном из вариантов формулы I Y представляет собой NHC(=O)С(СН).
1
1
3
3
3
В одном из вариантов формулы I Х представляет собой СН, Xпредставляет собой С(=O)ОСН, R представляет собой фенил, и Y представляет собой NHC(=O)С(СН).
В одном из аспектов согласно данной заявке предложено соединение, выбранное из группы, состоящей из:
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-3-[4-((1S,2R,3R,5S,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-7-хлор-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-7-хлор-3-[4-((1S,2R,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-4-(7-хлор-4-оксо-1-пиридин-2-ил-1,4-дигидро-хинолин-3-илметил)-N-((1S,2S,3R,5S,75S)-5-гидрокси-адамантан-2-ил)-бензамида;
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-ацетокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-3-[4-((1S,2R,3R,5S,7S)-5-амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-ацетиламино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-7-хлор-3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2,2-диметил-пропиониламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2-ацетокси-2-метил-пропиониламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-7-хлор-3-{4-[(1S,2S,3R,7S)-5-(2-гидрокси-2-метил-пропиониламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-7-хлор-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-циклопропансульфониламино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-7-хлор-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-метансульфониламино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-7-хлор-3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2-гидрокси-2-метил-пропиламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-ацетиламино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-циклопропансульфониламино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-метансульфониламино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2,2-диметил-пропиониламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2-ацетокси-2-метил-пропиониламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2-гидрокси-2-метил-пропиониламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-2-метокси-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-3-[2-фтор-4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-7-трифторметил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира;
rel-7-Хлор-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-2-оксо-2Н-пиридин-1-илметил]-4-оксо-1-фенил-1,4-Дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира; и
rel-4-(7-хлор-2-оксазол-2-ил-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-3-илметил)-N-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-ил)-бензамида.
В одном из аспектов согласно данной заявке предложен способ лечения JNK-опосредованного расстройства у субъекта, имеющего JNK-опосредованное расстройство, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества любого из приведенных выше соединений.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства такое JNK-опосредованное расстройство характеризуется клеточной пролиферацией.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства таким JNK-опосредованным расстройством является артрит.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства таким JNK-опосредованным расстройством является ревматоидный артрит.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства таким JNK-опосредованным расстройством является астма.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства таким JNK-опосредованным расстройством является диабет.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства таким JNK-опосредованным расстройством является болезнь Альцгеймера.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства таким JNK-опосредованным расстройством является болезнь Паркинсона.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства таким JNK-опосредованным расстройством является ишемический инсульт.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства таким JNK-опосредованным расстройством является рак.
В некоторых воплощениях способа для лечения JNK-опосредованное расстройство, где JNK-опосредованным расстройством является рак, этот рак представляет собой рак головного мозга.
В некоторых воплощениях способа для лечения JNK-опосредованное расстройство, где JNK-опосредованным расстройством является рак, этот рак представляет собой лейкоз.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства, таким JNK-опосредованным расстройством является заболевание почек.
В одном из аспектов согласно данной заявке предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из вышеупомянутых воплощений, вместе с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом или разбавителем.
В одном из аспектов согласно данной заявке предложен способ лечения JNK-опосредованного расстройства, включающий совместное введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества противовоспалительного соединения в комбинации с соединением по любому из вышеупомянутых воплощений, вариантов или аспектов (не только для воспаления).
Согласно данной заявке предложено применение соединения формулы I или формула II в изготовлении лекарственного средства для лечения аутоиммунных и воспалительных заболеваний, ассоциированных с модулированием JNK.
Соединение, способ или применение, как изложено в данном описании.
Все публикации, цитируемые в данном описании, включены в данное описание посредством ссылки во всей своей полноте.
Соединения
Соединения, описанные ниже, представляют собой ингибиторы JNK, полезные для ингибирования JNK и лечения JNK-опосредованных расстройств и им подобным. Примеры репрезентативных соединений, охваченных настоящим изобретением и находящихся в пределах объема изобретения, приведены в Таблице I как соединения.
В общем случае, использованная в этой заявке номенклатура основывается на компьютеризированной системе института Бейльштейна AUTONOMTM, v.4.0, для создания систематической номенклатуры IUPAC. Если есть несоответствие между изображенной структурой и названием, приданным этой структуре, то изображенную структуру следует считать более весомой. К тому же, если стереохимия структуры или части структуры не указана, например, жирными или пунктирными линиями, то эту структуру или часть структуры следует интерпретировать как охватывающую все ее стереоизомеры.
Синтез. Общие реакционные схемы
Схема 1
1
1
Соединения формулы IV, где Х может представлять собой азот, и R может представлять собой водород или трифторметил, и соединение формулы II, где Х может представлять собой углерод, и R может представлять собой хлоро, легко доступны из коммерческих источников.
1
Соединение формулы III, где Х может представлять собой углерод, и R может представлять собой хлоро, может быть получено из соединения формулы II путем обработки соответствующим реагентом Гриньяра (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
1
1
Соединение формулы IIa, где Х может представлять собой азот, и R может представлять собой трифторметил, может быть получено из соединения формулы IV, где Х может представлять собой азот, и R может представлять собой трифторметил, путем обработки анилином в основных условиях (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
1
1
Соединение формулы IIIa, где Х может представлять собой азот, и R может представлять собой трифторметил, может быть получено из соединения формулы IIa, где Х может представлять собой азот, и R может представлять собой трифторметил, путем обработки N,О-диметилгидроксиламина гидрохлоридом в соответствующих условиях сочетания (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
1
Соединение формулы V, где Х может представлять собой азот, и R может представлять собой водород, может быть получено из соединения формулы IV путем обработки данного соединения N,O-диметилгидроксиламина гидрохлоридом в соответствующих условиях сочетания (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
1
1
Соединение формулы VI, где Х может представлять собой азот, и R может представлять собой водород, может быть получено из соединения формулы V, где Х может представлять собой азот, и R может представлять собой водород, путем обработки данного соединения соответствующим реагентом Гриньяра (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
1
1
Соединение формулы VII, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, и Y может представлять собой углерод или азот, может быть получено из соединения формулы III, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, и Y может представлять собой углерод или азот, путем обработки соответствующим арилгалогенидом в условиях катализируемой металлами реакции сочетания (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
1
1
Соединение формулы VII, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород, и Y может представлять собой углерод, может быть получено из соединения формулы VI, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород, и Y может представлять собой углерод, путем обработки ароматическим амином (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
1
1
Соединение формулы VII, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой трифторметил, и Y может представлять собой углерод, может быть получено из соединения формулы VI, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой трифторметил, и Y может представлять собой углерод, и может быть получено путем обработки соответствующим реагентом Гриньяра (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
2
Соединение формулы VIII, где R может представлять собой фторо, может быть легко доступен из коммерческих источников.
2
2
Соединение формулы IX, где R может представлять собой фторо, может быть получено из соединения формулы VIII, где R может представлять собой фторо, с использованием стандартных методов превращения арилкислоты в арилметиловый эфир (см., например, Gauuan P.J.F, Trova Т.ПЛ., Gregor-Boros L., Bocckino S.B., Crapo J.D. and Day B.J., Bioorg. Med. Chem., 2002, 10, 3013-3021).
2
2
Соединение формулы X, где R может представлять собой фторо, может быть получено из соединения формулы IX, где R может представлять собой фторо, в стандартных условиях радикального бромирования (см., например, Gauuan P.J.F, Trova M.P., Gregor-Boros L., Bocckino S.B., Crapo J.D. and Day B.J., Bioorg. Med. Chem., 2002, 10, 3013-3021). Полученный бромид затем можно превратить непосредственно в соответствующий альдегид, используя такие условия, как нитрат серебра (см., например, Gauuan P.J.F, Trova M.P., Gregor-Boros L, Bocckino S.B., Crapo J.D. and Day B.J., Bioorg. Med. Chem., 2002, 10, 3013-3021).
2
2
Соединение формулы X, где R может представлять собой гидрокси, может быть получено из соответствующей бензойной кислоты. 4-Формил-3-гидроксибензойная может иметься в продаже. Гидроксикислоту можно обработать в стандартных условиях метилирования с получением соединения формулы X, где R может представлять собой метокси (см., например, Adediran S.A., Cabaret D., Drouillat В., Pratt R.F., Wakselman M., Bioorg. Med. Chem., 2001, 9, 1175-1183).
1
2
1
2
Соединение формулы XI, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород или трифторметил, Y может представлять собой углерод, и R может представлять собой водород, фторо или метокси, может быть получено путем обработки соединения формулы VII, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород или трифторметил, и Y может представлять собой углерод, соединением формулы X, где R может представлять собой водород, фторо или метокси, в стандартных условиях альдольной конденсации (см., например, PCT WO 2008/138920 А1).
1
2
1
2
Соединение формулы XI, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, R может представлять собой водород, и Y может представлять собой углерод или азот, может быть получено путем обработки соединения формулы VII, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, и Y может представлять собой углерод или азот, соединением формулы X, где R может представлять собой водород, в стандартных условиях альдольной конденсации (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
1
2
1
2
Соединение формулы XII, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород или трифторметил, Y может представлять собой углерод, и R может представлять собой водород, фторо или метокси, может быть получено из соединения формулы XI, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород или трифторметил, Y может представлять собой углерод, и R может представлять собой водород, фторо или метокси, в стандартных условиях гидрирования (см., например, PCT WO 2008/138920 А1).
1
2
1
2
Соединение формулы XII, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод или азот, и R может представлять собой водород, может быть получено из соединения формулы XI, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод или азот, и R может представлять собой водород, в стандартных условиях гидрирования (см., например, PCT WO 2008/138920 А1).
1
2
1
2
Соединение формулы XIII, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород или трифторметил, Y может представлять собой углерод, и R может представлять собой водород, фторо или метокси, может быть получено из соединения формулы XII, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород или трифторметил, Y может представлять собой углерод, и R может представлять собой водород, фторо или метокси, путем обработки метилоксалилхлоридом (см., например, PCT WO 2008/138920 А1).
1
2
1
2
Соединение формулы XIII, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод, и R может представлять собой водород, может быть получено из соединения формулы XII, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод, и R может представлять собой водород, путем обработки метилоксалилхлоридом (см., например, PCT WO 2008/138920 А1).
1
2
3
1
2
Соединение формулы XIV, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород или трифторметил, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, фторо или метокси, R может представлять собой метиловый эфир, и Q может представлять собой водород или метил, может быть получено из соединения формулы XIII, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород или трифторметил, Y может представлять собой углерод, и R может представлять собой водород, фторо или метокси, путем обработки карбонатом калия в метаноле (см., например, PCT WO 2008/138920 А1).
1
2
3
1
2
Соединение формулы XIV, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, R может представлять собой метиловый эфир, и Q может представлять собой водород или метил, может быть получено из соединения формулы XIII, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод, и R может представлять собой водород, путем обработки карбонатом калия в метаноле (см., например, PCT WO 2008/138920 А1).
1
2
3
1
2
Соединение формулы XIV, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой азот, R может представлять собой водород, R может представлять собой водород, и Q может представлять собой метил, может быть получено из соединения формулы XII, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой азот, и R может представлять собой водород, путем обработки реагентом Вильсмейера (см., например, Mendelson W.L., Hayden S., Syn. Comm., 1996, 26(3), 603-10).
1
2
3
1
2
3
Соединение формулы XV, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород или трифторметил, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, фторо или метокси, и R может представлять собой метиловый эфир, может быть получено из соединения формулы XIV, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород или трифторметил, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, фторо или метокси, R может представлять собой метиловый эфир, и Q может представлять собой метил, путем гидролиза бензойной кислоты метилового эфира до бензойной кислоты в стандартных условиях реакции гидролиза (см., например, PCT WO 2008/138920 А1).
1
2
3
1
2
3
Соединение формулы XV, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, может быть получено из соединения формулы XIV, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, R может представлять собой метиловый эфир, и Q может представлять собой метил, путем гидролиза бензойной кислоты метилового эфира до бензойной кислоты в стандартных условиях реакции гидролиза (см., например, PCT WO 2008/138920 А1).
1
2
3
1
2
3
Соединение формулы XV, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой азот, R может представлять собой водород, R может представлять собой водород, может быть получено из соединения формулы XIV, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой азот, R может представлять собой водород, R может представлять собой водород, и Q может представлять собой метил, путем гидролиза бензойной кислоты метилового эфира до бензойной кислоты в стандартных условиях реакции гидролиза (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
Соединение формулы XVI (цис-изомер, транс-изомер или их смесь) может быть получено известными способами синтеза (см., например, РСТ WO 2007/107470 А2). Соединение формулы XVI, амин, может представлять собой свободный амин или соль амина, такую как гидрохлоридная соль.
1
2
3
1
2
3
Соединение формулы I, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород или трифторметил, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, фторо или метокси, и R может представлять собой метиловый эфир, может быть получено из соединения формулы XV, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород или трифторметил, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, фторо или метокси, и R может представлять собой метиловый эфир, путем обработки соединением формулы XVI в соответствующих условиях сочетания (см., например, PCT WO 2007/107470 А2).
1
2
3
1
2
3
Соединение формулы I, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, может быть получено из соединения формулы XV, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, путем обработки соединением формулы XVI в соответствующих условиях сочетания (см., например, PCT WO 2007/107470 А2).
1
2
3
1
2
3
Соединение формулы I, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой азот, R может представлять собой водород, и R может представлять собой водород, может быть получено из соединения формулы XV, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой азот, R может представлять собой водород, и R может представлять собой водород, путем обработки соединением формулы XVI в соответствующих условиях сочетания (см., например, PCT WO 2007/107470 А2).
1
2
3
1
2
3
Соединение формулы XVII, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород или трифторметил, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, фторо или метокси, и R может представлять собой метиловый эфир, может быть получено из соединения формулы I, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород или трифторметил, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, фторо или метокси, и R может представлять собой метиловый эфир, путем применения стандартных условий превращения первичного спирта в первичный амин (см., например, Jirgensons A., Kauss V., Kalvinsh I., Gold M.R., Synthesis, 2000, 12, 1709-1712).
1
2
3
1
2
3
Соединение формулы XVII, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, может быть получено из соединения формулы I, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, путем применения стандартных условий превращения первичного спирта в первичный амин (см., например, Jirgensons A., Kauss V., Kalvinsh I., Gold M.R., Synthesis, 2000, 12, 1709-1712).
4
1
2
3
1
2
3
Соединение формулы XVIII, где R может представлять собой алкил-карбоксильную группировку, Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, может быть получено из соединения формулы XVII, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, с использованием стандартной методики ацилирования амина (см., например, РСТ WO 2006/024627 А2). Если полученное соединение содержит защитную группу, то эта защитная группа может быть удалена в стандартных условиях удаления защиты (см., например, Greene T.W. Protective Groups in Organic Synthesis; John Wiley & Sons, Inc.: New York, 1991).
4
1
2
3
1
2
3
Соединение формулы XVIII, где R может представлять собой алкил-карбоксильную группировку, Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, может быть получено из соединения формулы XVII, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, с использованием стандартной методики ацилирования амина (см., например, РСТ WO 2006/024627 А2). Если полученное соединение содержит защитную группу, то эта защитная группа может быть удалена в стандартных условиях удаления защиты (см., например, Greene T.W. Protective Groups in Organic Synthesis; John Wiley & Sons, Inc.: New York, 1991).
4
1
2
3
1
2
3
Соединение формулы XVIII, где R может представлять собой алкил-сульфонильную группировку, Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, может быть получено из соединения формулы XVII, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, с использованием стандартной методики сульфонилирования амина (см., например, РСТ WO 2006/024627 А2). Если полученное сульфонилированное соединение содержит защитную группу, то эта защитная группа может быть удалена в стандартных условиях удаления защиты (см., например, Greene T.W. Protective Groups in Organic Synthesis; John Wiley & Sons, Inc.: New York, 1991).
4
1
2
3
1
2
3
Соединение формулы XVIII, где R может представлять собой алкил-сульфонильную группировку, Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, может быть получено из соединения формулы XVII, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, с использованием стандартной методики сульфонилирования амина (см., например, РСТ WO 2006/024627 А2). Если полученное сульфонилированное соединение содержит защитную группу, то эта защитная группа может быть удалена в стандартных условиях удаления защиты (см., например, Greene T.W. Protective Groups in Organic Synthesis; John Wiley & Sons, Inc.: New York, 1991).
4
1
2
3
1
2
3
Соединение формулы XVIII, где R может представлять собой алкильную группировку, Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, может быть получено из соединения формулы XVII, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, с использованием стандартной методики алкилирования амина (см., например, РСТ WO 2006/024627 А2). Если полученное соединение содержит защитную группу, то эта защитная группа может быть удалена в стандартных условиях удаления защиты (см., например, Greene T.W. Protective Groups in Organic Synthesis; John Wiley&Sons, Inc.: New York, 1991).
4
1
2
3
1
2
3
Соединение формулы XVIII, где R может представлять собой алкильную группировку, Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, может быть получено из соединения формулы XVII, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, с использованием стандартной методики алкилирования амина (см., например, РСТ WO 2006/024627 А2). Если полученное соединение содержит защитную группу, то эта защитная группа может быть удалена в стандартных условиях удаления защиты (см., например, Greene T.W. Protective Groups in Organic Synthesis; John Wiley&Sons, Inc.: New York, 1991).
4
1
2
3
1
2
3
Соединение формулы XVIII, где R может представлять собой алкильную группировку, Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, может быть получено из соединения формулы XVII, где Х может представлять собой азот, R может представлять собой водород, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, в условиях раскрытия эпоксидного кольца (см., например, Calet S., Urso F., Alper H., J. Amer. Chem. Soc., 1989, 111, 931-934). Если полученное соединение содержит защитную группу, то эта защитная группа может быть удалена в стандартных условиях удаления защиты (см., например, Greene T.W. Protective Groups in Organic Synthesis; John Wiley & Sons, Inc.: New York, 1991).
4
1
2
3
1
2
3
Соединение формулы XVIII, где R может представлять собой алкильную группировку, Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, может быть получено из соединения формулы XVII, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир в условиях раскрытия эпоксидного кольца (см., например, Calet S., Urso F., Alper H., J. Amer. Chem. Soc., 1989, 111, 931-934). Если полученное соединение содержит защитную группу, то эта защитная группа может быть удалена в стандартных условиях удаления защиты (см., например, Greene T.W. Protective Groups in Organic Synthesis; John Wiley & Sons, Inc.: New York, 1991).
5
1
2
3
1
2
3
Соединение формулы XIX, где R может представлять собой ацетил, Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир, может быть получено из соединения формулы I, где Х может представлять собой углерод, R может представлять собой хлоро, Y может представлять собой углерод, R может представлять собой водород, и R может представлять собой метиловый эфир в условиях реакции Риттера (см., например, Jirgensons A., Kauss V., Kalvinsh I., Gold M.R., Synthesis, 2000, 12, 1709-1712).
1
Соединение формулы XXI, где R может представлять собой хлоро, может быть получено из имеющихся в продаже исходных веществ, таких как 2-бром-4-хлорбензойная кислота, в стандартных условиях катализируемого металлами замещения с использованием арилгалогенидов (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
1
1
Соединение формулы XXII, где R может представлять собой хлоро, может быть получено из соединения формулы XXI, где R может представлять собой хлоро, в результате обработки N,О-диметилгидроксиламина гидрохлоридом в соответствующих условиях сочетания (см., например, PCT WO 2008/138920 А1).
1
1
Соединение формулы XXIII, где R может представлять собой хлоро, может быть получено из соединения формулы XXII, где R может представлять собой хлоро, путем обработки соответствующим реагентом Гриньяра (см., например, PCT WO 2008/138920 А1).
1
1
Соединение формулы XXIV, где R может представлять собой хлоро, может быть получено из соединения формулы XXIII, где R может представлять собой хлоро, путем обработки метилоксалилхлоридом (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
1
1
Соединение формулы XXV, где R может представлять собой хлоро, может быть получено из соединения формулы XXIV, где R может представлять собой хлоро, путем обработки карбонатом калия в метаноле (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
1
1
Соединение формулы XXVI, где R может представлять собой хлоро, может быть получено из соединения формулы XXV, где R может представлять собой хлоро, в стандартных условиях радикального бромирования (см., например, Gauuan P.J.F, Trova M.P., Gregor-Boros L., Bocckino S.B., Crapo J.D. and Day B.J., Bioorg. Med. Chem., 2002, 10, 3013-3021).
1
1
Соединение формулы XXVII, где R может представлять собой хлоро, может быть получено из соединения формулы XXVI, где R может представлять собой хлоро, в результате обработки соответствующим нуклеофилом в основных условиях (см., например, WO 2008/041075)
1
1
Соединение формулы XXVIII, где R может представлять собой хлоро, может быть получено из соединения формулы XXVII, где R может представлять собой хлоро, путем гидролиза бензойной кислоты метилового эфира до бензойной кислоты в стандартных условиях реакции гидролиза (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
1
1
Соединение формулы XXIX, где R может представлять собой хлоро, может быть получено из соединения формулы XXVIII, где R может представлять собой хлоро, путем обработки соединением формулы XVI в соответствующих условиях сочетания (см., например, PCT WO 2007/107470 А2).
Синтез соединения 2 можно осуществить, следуя реакции, приведенной на схеме 3. Имеющийся в продаже 2-амино-4-хлор-бензонитрил можно подвергнуть обработке в стандартных условиях реакции Гриньяра, затем обработке кислотой, с получением соединения 1 (см., например, РСТ WO 2005/097800). Соединение 1 можно подвергнуть по аминогруппе сочетанию с арилиодидом в стандартных условиях катализируемой металлами реакции сочетания с получением соединения 2 (см., например, PCT WO 2008/138920 А1).
Синтез соединения 3 можно осуществить, следуя реакции, приведенной на схеме 4. Соединение 1 можно подвергнуть по аминогруппе сочетанию посредством замещения хлора в 2-хлорпиридине в стандартных условиях катализируемой металлами реакции сочетания с получением соединения 3 (см., например, Yin J., Zhao M.M., Huffman M.A., McNamara J.M., Org. Lett., 2002, 4(20), 3881-3484).
Синтез соединения 5 можно осуществить, следуя реакциям, приведенным на схеме 5. Имеющуюся в продаже 3-фтор-4-метил-бензойную кислоту можно превратить в метилбензоат в стандартных условиях образования метилового эфира (см., например, Gauuan P.J.F, Trova M.P., Gregor-Boros L., Bocckino S.B., Crapo J.D. и Day B.J., Bioorg. Med. Chem., 2002, 10, 3013-3021). Метильную группу, расположенную рядом с заместителем фторо в соединении 4, можно подвергнуть бромированию, используя стандартные условия радикального бромирования (см., например, Gauuan P.J.F, Trova M.P., Gregor-Boros L., Bocckino S.B., Crapo J.D. and Day B.J., Bioorg. Med. Chem., 2002, 10, 3013-3021), и затем превратить в соответствующий альдегид, используя такие реагенты как нитрат серебра (см., например, Gauuan P.J.F, Trova M.P., Gregor-Boros L., Bocckino S.B., Crapo J.D. and Day B.J., Bioorg. Med. Chem., 2002, 10, 3013-3021).
Синтез соединения 6 можно осуществить, следуя реакциям, приведенным на схеме 6. Имеющуюся в продаже 4-формил-3-гидрокси-бензойную кислоту можно превратить в соединение 6 в стандартных условиях метилирования (см., например, Adediran S.A., Cabaret D., Drouillat В., Pratt R.F., Wakselman M., Bioorg. Med. Chem., 2001, 9, 1175-1183).
Синтез соединения 15а-х можно осуществить, следуя реакциям, приведенным на схеме 7. Имеющуюся в продаже 2-хлор-никотиновую кислоту можно обработать N,O-гидроксиламина гидрохлоридом в стандартных условиях сочетания с образованием амида Вайнреба, соединения 7 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Соединение 7 можно обработать хлоридом метилмагния в стандартных условиях реакции Гриньяра с получением соединения 8 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Соединение 8 можно обработать анилином в стандартных условиях реакции замещения с получением соединения 9 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Полученный кетон, соединение 9, затем можно обработать альдегидом 5 в стандартных условиях альдольной конденсации с получением олефина, соединения 10 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
Олефин, соединение 10, затем можно подвергнуть восстановлению в стандартных условиях гидрирования с получением насыщенной системы, соединения 11 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Соединение 11 затем можно обработать метилоксалилхлоридом с получением соединения 12 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Метилоксалилат, соединение 12, затем можно подвергнуть циклизации, используя карбонат калия, с получением соединения 13 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Если бензоат циклизованного продукта, соединение 13, не подвергся гидролизу ранее в реакционных условиях, использованных для осуществления циклизации, то соединение 13 можно обработать в стандартных условиях гидролиза с образованием соответствующего производного бензойной кислоты, соединения 14 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Полученную бензойную кислоту, соединение 14, в присутствии соответствующих аминов затем можно обработать в стандартных условиях образования амидной связи с получением соединений 15а-х (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
Синтез соединения 21а-х можно осуществить, следуя реакциям, приведенным на схеме 8. Имеющуюся в продаже 2-хлор-никотиновую кислоту можно обработать N,О-гидроксиламина гидрохлоридом в стандартных условиях сочетания с образованием амида Вайнреба, соединения 7 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Соединение 7 можно обработать хлоридом метилмагния в стандартных условиях реакции Гриньяра с получением соединения 8 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Соединение 8 можно обработать анилином в стандартных условиях реакции замещения с получением соединения 9 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Полученный кетон, соединение 9, затем можно обработать альдегидом 6 в стандартных условиях альдольной конденсации с получением олефина, соединения 16 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Олефин, соединение 16, затем можно подвергнуть восстановлению в стандартных условиях гидрирования с получением соединения 17 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Соединение 17 затем можно обработать метилоксалилхлоридом с получением соединения 18 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Метилоксалилат, соединение 18, затем можно подвергнуть циклизации, используя карбонат калия, с получением соединения 19 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Если бензоат циклизованного продукта, соединение 19, не подвергся гидролизу ранее в реакционных условиях, использованных для осуществления циклизации, то соединение 19 можно обработать в стандартных условиях гидролиза с образованием соответствующего производного бензойной кислоты, соединения 20 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Полученную бензойную кислоту, соединение 20, в присутствии соответствующих аминов затем можно обработать в стандартных условиях образования амидной связи с получением соединений 21а-х (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
Синтез соединения 27а-х можно осуществить, следуя реакциям, приведенным на схеме 9. Имеющуюся в продаже 2-хлор-никотиновую кислоту можно обработать N,O-гидроксиламина гидрохлоридом в стандартных условиях сочетания с образованием амида Вайнреба, соединения 7 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Соединение 7 можно обработать бромидом метилмагния в стандартных условиях реакции Гриньяра с получением соединения 8 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Соединение 8 можно обработать анилином в стандартных условиях реакции замещения с получением соединения 9 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Полученный кетон, соединение 9, затем можно обработать имеющимся в продаже метил-4-формилбензоатом в стандартных условиях альдольной конденсации с получением олефина, соединения 22 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Олефин, соединение 22, затем можно подвергнуть восстановлению в стандартных условиях гидрирования с получением соединения 23 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Соединение 23 затем можно обработать метилоксалилхлоридом с получением соединения 24 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Метилоксилат, соединение 24, затем можно подвергнуть циклизации, используя карбонат калия, с получением соединения 25 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Если бензоат циклизованного продукта, соединение 25, не подвергся гидролизу ранее в реакционных условиях, использованных для осуществления циклизации, то соединение 25 можно обработать в стандартных условиях гидролиза с образованием соответствующего производного бензойной кислоты, соединения 26 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Полученную бензойную кислоту, соединение 26, в присутствии соответствующих аминов затем можно обработать в стандартных условиях образования амидной связи с получением соединений 27а-х (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
Синтез соединения 36а-х можно осуществить, следуя реакциям, приведенным на схеме 10. Имеющуюся в продаже 2-хлор-6-трифторметил-никотиновую кислоту можно обработать в стандартных условиях реакции замещения с использованием галогенидов с получением соединения 28 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Соединение 28 можно обработать N,O-гидроксиламина гидрохлоридом в стандартных условиях сочетания с образованием амида Вайнреба, соединения 29 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Соединение 29 можно обработать хлоридом метилмагния в стандартных условиях реакции Гриньяра с получением соединения 30 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Полученный кетон, соединение 30, затем можно обработать имеющимся в продаже 4-формил-метилбензоатом в стандартных условиях альдольной конденсации с получением олефина, соединения 31 (см., например, PCT WO 2008/138920 А1). Олефин, соединение 31, затем можно подвергнуть восстановлению в стандартных условиях гидрирования с получением соединения 32 (см., например, PCT WO 2008/138920 А1). Соединение 32 затем можно обработать метилоксалилхлоридом с получением соединения 33 (см., например, PCT WO 2008/138920 А1). Метилоксалилат, соединение 33, затем можно подвергнуть циклизации, используя карбонат калия, с получением соединения 34 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Если бензоат циклизованного продукта, соединение 34, не подвергся гидролизу ранее в реакционных условиях, использованных для осуществления циклизации, то соединение 34 можно обработать в стандартных условиях гидролиза с образованием соответствующего производного бензойной кислоты, соединения 35 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Полученную бензойную кислоту, соединение 35, в присутствии соответствующих аминов затем можно обработать в стандартных условиях образования амидной связи с получением соединений 36а-х (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
Синтез соединения 41а-х можно осуществить, следуя реакциям, приведенным на схеме 11. Соединение 3 можно обработать имеющимся в продаже 4-формил-бензойной кислоты метиловым эфиром в стандартных условиях альдольной конденсации с получением олефина, соединения 37 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Олефин, соединение 37, затем можно подвергнуть восстановлению в стандартных условиях гидрирования с получением соединения 38 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Соединение 38 затем можно обработать реагентом Вильсмейера с получением соединения 39 (см., например, Mendelson W.L., Hayden S., Syn. Comm., 1996, 26(3), 603-10). Метиловый эфир соединения 39 можно обработать в стандартных условиях гидролиза с образованием соответствующего производного бензойной кислоты, соединения 40 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Полученную бензойную кислоту, соединение 40, в присутствии соответствующих аминов затем можно обработать в стандартных условиях образования амидной связи с получением соединений 41а-х (см., например, PCT WO 2008/138920 А1).
Синтез соединения 47а-х можно осуществить, следуя реакциям, приведенным на схеме 12. Соединение 2 можно обработать имеющимся в продаже 4-формил-бензойной кислоты метиловым эфиром в стандартных условиях альдольной конденсации с получением олефина, соединения 42 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). (Примечание: в процессе этой реакции могут быть получены разные количества гидролизованного сложного эфира.) Олефин, соединение 42, затем можно подвергнуть восстановлению в стандартных условиях гидрирования с получением соединения 43 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Соединение 43 затем можно обработать метилоксалилхлоридом с получением соединения 44 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Метилоксалилат, соединение 44, затем можно подвергнуть циклизации, используя карбонат калия, с получением соединения 45 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Метиловый эфир соединения 45 можно обработать в стандартных условиях гидролиза с образованием соответствующего производного бензойной кислоты, соединения 46 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Полученную бензойную кислоту, соединение 46, в присутствии соответствующих аминов затем можно обработать в стандартных условиях образования амидной связи с получением соединений 47а-х (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
Синтез соединения 49 можно осуществить, следуя реакциям, приведенным на схеме 13. Соединение 27а можно обработать в стандартных условиях реакции Риттера для осуществления превращения в хлорацетиламин, соединение 48 (см., например, Jirgensons A., Kauss V., Kalvinsh I., Gold M.R., Synthesis, 2000, 12, 1709-1712). Соединение 48 затем можно обработать в соответствующих условиях с получением соединения 49 (см., например, Jirgensons A., Kauss V., Kalvinsh I., Gold M.R., Synthesis, 2000, 12, 1709-1712). Соединение 49 можно превратить в соответствующую соль, такую как соль соляной кислоты, путем обработки раствором, содержащим соответствующую кислоту, с последующим концентрированием полученного раствора.
Синтез соединения 51 можно осуществить, следуя реакциям, приведенным на схеме 14. Соединение 47а можно обработать в стандартных условиях реакции Риттера для осуществления превращения в хлорацетиламин, соединение 50 (см., например, Jirgensons A., Kauss V., Kalvinsh I., Gold M.R., Synthesis, 2000, 12, 1709-1712). Соединение 50 затем можно обработать в соответствующих условиях с получением соединения 51 (см., например, Jirgensons A., Kauss V., Kalvinsh I., Gold M.R., Synthesis, 2000, 12, 1709-1712). Соединение 51 можно превратить в соответствующую соль, такую как соль соляной кислоты, путем обработки раствором, содержащим соответствующую кислоту, с последующим концентрированием полученного раствора.
Синтез соединений 52а-х можно осуществить, следуя реакциям, приведенным на схеме 15. Соединение 49 можно обработать в условиях алкилирования, ацилирования или сульфонилирования с получением соединений 52а-х (см., например, РСТ WO 2006/024627 А2). Соединение 49 также можно обработать в условиях раскрытия эпоксидного кольца с получением соединений 52а-х (см., например, Calet S., Urso F., Alper H., J. Amer. Chem. Soc., 1989, 111, 931-934). Для получения желаемого конечного соединения может потребоваться окончательное удаление защиты или химическое превращение соединений 52а-х.
Синтез соединений 53а-х можно осуществить, следуя реакциям, приведенным на схеме 16. Соединение 51 можно обработать в условиях алкилирования, ацилирования или сульфонилирования с получением соединений 53а-х (см., например, РСТ WO 2006/024627 А2). Соединение 51 также можно обработать в условиях раскрытия эпоксидного кольца с получением соединений 53а-х (см., например, Calet S., Urso F., Alper H., J. Amer. Chem. Soc., 1989, 111, 931-934). Для получения желаемого конечного соединения может потребоваться окончательное удаление защиты или химическое превращение соединений 53а-х.
Синтез соединения 62а-х можно осуществить, следуя реакциям, приведенным на схеме 17. Имеющуюся в продаже 2-бром-4-хлорбензойную кислоту можно обработать анилином в стандартных условиях катализируемой металлами реакции замещения с использованием арилгалогенидов с получением соединения 54 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Соединение 54 можно обработать N,О-гидроксиламина гидрохлоридом в стандартных условиях сочетания с образованием амида Вайнреба, соединения 55 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Соединение 55 можно обработать бромидом этилмагния в стандартных условиях реакции Гриньяра с получением соединения 56 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Соединение 56 затем можно обработать метилоксалилхлоридом с получением соединения 57 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Метилоксалилат, соединение 57, затем можно подвергнуть циклизации, используя карбонат калия, с получением соединения 58 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Соединение 58 затем можно обработать в стандартных условиях радикального бромирования с получением соединения 59 (см., например, Gauuan P.J.F, Trova M.P., Gregor-Boros L., Bocckino S.B., Crapo J.D. and Day B.J., Bioorg. Med. Chem., 2002, 10, 3013-3021). Соединение 59 затем можно обработать соответствующим нуклеофилом в основных условиях с получением соединения 60 (см., например, WO 2008/041075). Метиловый эфир соединения 60 можно обработать в стандартных условиях гидролиза с образованием соответствующего производного бензойной кислоты, соединения 61 (см., например, WO 2008/138920 А1). Полученную бензойную кислоту, соединение 61, в присутствии соответствующих аминов затем можно обработать в стандартных условиях образования амидной связи с получением соединений 62а-х (см., например, WO 2008/138920 А1).
Синтез соединения 63 можно осуществить, следуя реакциям, приведенным на схеме 18. Соединение 47а можно обработать в стандартных условиях реакции Риттера с получением соединения 63 (см., например, Jirgensons A., Kauss V., Kalvinsh I., Gold M.R., Synthesis,, 2000, 12, 1709-1712).
Синтез соединения 66 можно осуществить, следуя реакциям, приведенным на схеме 19. Соединение 43 можно обработать 2-оксазолкарбонилхлоридом и гексаметилдисилазаном натрия с получением хинолона 64 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1). Метиловый эфир соединения 64 можно обработать в стандартных условиях гидролиза с образованием соответствующего производного бензойной кислоты, соединения 65. Полученную бензойную кислоту, соединение 65, в присутствии соответствующих аминов затем можно обработать в стандартных условиях образования амидной связи с получением соединения 66 (см., например, РСТ WO 2008/138920 А1).
Фармацевтические композиции и введение
Изобретение включает фармацевтические композиции, содержащие по меньшей мере одно соединение по настоящему изобретению или один индивидуальный изомер, одну рацемическую или нерацемическую смесь изомеров или их фармацевтически приемлемые соль или сольват вместе по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем и возможно другими терапевтическими и/или профилактическими ингредиентами.
В общем случае соединения по изобретению будут введены в терапевтически эффективном количестве любым из способов введения, приемлемых для средств, используемых при аналогичных состояниях. Подходящие диапазоны дозировок обычно составляют 1-500 мг один раз в сутки, предпочтительно 1-100 мг один раз в сутки и наиболее предпочтительно 1-30 мг один раз в сутки в зависимости от многочисленных факторов, таких как тяжесть подлежащего лечению заболевания, возраст и относительное состояние здоровья субъекта, эффективность используемого соединения, путь и форма введения, показание, в отношении которого направлено такое введение, а также предпочтения и опыт лечащего врача. Средний специалист в области лечения таких заболеваний будет способен, без излишнего экспериментирования и руководствуясь личным опытом и описанием этой заявки, определить терапевтически эффективное количество соединений по настоящему изобретению для данного заболевания.
Соединения по изобретению могут быть введены в виде фармацевтических композиций, включая композиции, подходящие для перорального (в том числе трансбуккального и сублингвального), ректального, назального, местного, легочного, вагинального или парентерального (в том числе внутримышечного, интраартериального, интратекального, подкожного и внутривенного) введения, или в форме, подходящей для введения посредством ингаляции или инсуффляции. Предпочтительным способом введения обычно является пероральный с использованием удобного режима введения один раз в сутки, который можно регулировать в соответствии с тяжестью заболевания.
Соединение или соединения по изобретению вместе с одним или более чем одним традиционным адъювантом, носителем или разбавителем могут быть представлены в форме фармацевтических композиций и стандартных лекарственных форм. Фармацевтические композиции и стандартные лекарственные формы могут содержать традиционные ингредиенты в обычных пропорциях с добавлением или без добавления дополнительных активных соединений или действующих начал, и такие стандартные лекарственные формы могут содержать любое подходящее эффективное количество активного ингредиента в соответствии с предполагаемым диапазоном суточных дозировок, который будет использован. Фармацевтические композиции могут быть использованы в виде твердых веществ, таких как таблетки или заполненные капсулы, полутвердых веществ, порошков, композиций с непрерывным высвобождением или жидкостей, таких как растворы, суспензии, эмульсии, эликсиры или заполненные капсулы для перорального применения; или в форме суппозиториев для ректального или вагинального введения; или в форме стерильных инъекционных растворов для парентерального применения.
Соответственно, композиции, содержащие примерно один (1) мг активного ингредиента или, в более широком диапазоне, от примерно 0,01 до примерно ста (100) мг на одну таблетку, представляют собой подходящие репрезентативные стандартные лекарственные формы.
Соединения по изобретению могут быть введены в состав широкого ряда лекарственных форм для перорального введения. Фармацевтические композиции и лекарственные формы в качестве активного компонента могут содержать соединение или соединения по настоящему изобретению или их фармацевтически приемлемые соли. Фармацевтически приемлемые носители могут быть или в твердой, или в жидкой форме. Препараты в твердой форме включают порошки, таблетки, пилюли, капсулы, облатки, суппозитории и диспергируемые гранулы. Твердым носителем может быть одно или более веществ, которые также могут действовать в качестве разбавителей, корригенов, солюбилизаторов, смазывающих веществ, суспендирующих агентов, связующих веществ, консервантов, разрыхлителей для таблеток или инкапсулирующего материала. Носитель в порошках обычно является тонкоизмельченным твердым веществом, которое представляет собой смесь вместе с тонкоизмельченным активным компонентом. Активный компонент в таблетках обычно смешан в подходящих пропорциях с носителем, обладающим необходимой связывающей способностью, и скомпактизован до желаемых формы и размера. Порошки и таблетки предпочтительно содержат от примерно одного (1) до примерно семидесяти (70) процентов активного соединения. Подходящие носители включают, но не ограничиваются этим, карбонат магния, стеарат магния, тальк, сахар, лактозу, пектин, декстрин, крахмал, желатин, трагакант, метилцеллюлозу, натриевую соль карбоксиметилцеллюлозы, легкоплавкий воск, масло какао и им подобное. Подразумевается, что термин "препарат" включает в себя композицию активного соединения с инкапсулирующим материалом в качестве носителя, обеспечивающим получение капсулы, в которой активный компонент с носителями или без них окружен носителем, который оказывается ассоциированным с ним. Аналогичным образом включены облатки и пастилки для рассасывания. Таблетки, порошки, капсулы, пилюли, облатки и пастилки для рассасывания могут быть в виде твердых форм, подходящих для перорального введения.
Другие формы, подходящие для перорального введения, включают препараты в жидкой форме, в том числе эмульсии, сиропы, эликсиры, водные растворы, водные суспензии или препараты в твердой форме, предназначенные для преобразования их в препараты в жидкой форме незадолго до применения. Эмульсии могут быть приготовлены в растворах, например, в воднопропиленгликолиевых растворах, или могут содержать такие эмульгирующие агенты, как например лецитин, моноолеат сорбитана или аравийская камедь. Водные растворы могут быть приготовлены путем растворения активного компонента в воде и добавления подходящих красителей, корригентов, стабилизаторов и загустителей. Водные суспензии могут быть приготовлены путем диспергирования тонкоизмельченного активного компонента в воде с вязким веществом, таким как природные или синтетические камеди, смолы, метилцеллюлоза, натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы и другие хорошо известные суспендирующие агенты. Препараты в жидкой форме включают растворы, суспензии и эмульсии и могут содержать помимо активного компонента красители, корригенты, стабилизаторы, буферы, искусственные и природные подсластители, диспергирующие вещества, загустители, солюбилизирующие агенты и им подобные.
Соединения по изобретению могут быть введены в состав композиций для парентерального введения (например, путем инъекции, например болюс-инъекции или непрерывной инфузии) и могут быть представлены в стандартной лекарственной форме в ампулах, предварительно заполненных шприцах, капельницах небольшого объема или в контейнерах для многократного введения с добавленным консервантом. Композиции могут принимать такие формы, как суспензии, растворы или эмульсии в масляных или водных разбавителях, например растворы в водном полиэтиленгликоле. Примеры масляных или неводных носителей, разбавителей, растворителей или наполнителей включают пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла (например, оливковое масло) и инъекционные органические сложные эфиры (например, этилолеат) и могут содержать такие входящие в состав композиции агенты, как консерванты, увлажняющие, эмульгирующие или суспендирующие, стабилизирующие и/или диспергирующие агенты. Альтернативно, активный ингредиент может быть в порошковой форме, полученной в результате выделения стерильного твердого вещества в асептических условиях или в результате лиофилизации из раствора, для повторного разведения перед применением с подходящим разбавителем, например, стерильной апирогенной водой.
Соединения по изобретению могут быть введены в состав композиций для местного введения в эпидермис в виде мазей, кремов или лосьонов или в виде трансдермального пластыря. Мази и кремы могут быть изготовлены, например, с использованием водной или масляной основы с добавлением подходящих загущающих и/или желатинизирующих агентов. Лосьоны могут быть изготовлены с использованием водной или масляной основы и в общем случае также будут содержать один или более эмульгирующих агентов, стабилизирующих агентов, диспергирующих агентов, суспендирующих агентов, загустителей или красителей. Композиции, подходящие для местного введения в ротовую полость, включают пастилки для рассасывания, содержащие активные агенты в корригентной основе, обычно сахарозе и аравийской или трагакантовой камеди; пастилки, содержащие активный ингредиент в инертной основе, такой как желатин и глицерин или сахароза и аравийская камедь; и жидкости для полоскания рта, содержащие активный ингредиент в подходящем жидком носителе.
Соединения по изобретению могут быть введены в состав композиций для введения в виде суппозиториев. Сначала расплавляют легкоплавкий воск, такой как смесь глицеридов жирных кислот или масло какао, и в нем гомогенно диспергируют активный компонент, например, путем перемешивания. Расплавленную гомогенную смесь затем выливают в формы удобного размера, оставляют охладиться и отвердеть.
Соединения по изобретению могут быть введены в состав композиций для вагинального введения. Пессарии, тампоны, кремы, гели, пасты, пенки или спреи содержат помимо активного ингредиента такие носители, которые известны в данной области как приемлемые.
Соединения, являющиеся предметом изобретения, могут быть введены в состав композиций для назального введения. Растворы или суспензии вводят непосредственно в носовую полость традиционными способами, например, с использованием капельницы, пипетки или спрея. Композиции могут быть представлены в лекарственной форме для однократного или многократного приема. В последнем случае с использованием капельницы или пипетки этого можно достичь путем введения пациентом соответствующего, предварительно определенного объема раствора или суспензии. В случае спрея этого можно достичь, например, посредством дозирующего мелкодисперсно распыляющего насоса.
Соединения по изобретению могут быть введены в состав композиций для аэрозольного способа введения, в частности в респираторный тракт, и в том числе для интраназального введения. Как правило, соединение будет иметь размер, соответствующий мелким частицам, например порядка пяти (5) микронов или меньше. Такого размера частиц можно добиться средствами, известными в данной области техники, например путем микронизации. Активный ингредиент представлен в находящейся под давлением упаковке вместе с подходящим пропеллентом, таким как хлорфторуглерод (CFC), например, дихлордифторметан, трихлорфторметан или дихлортетрафторэтан, либо диоксид углерода или другой подходящий газ. Удобно, если аэрозоль также может содержать поверхностно-активное вещество, такое как лецитин. Дозу лекарственного средства можно контролировать посредством дозирующего клапана. Альтернативно, активные ингредиенты могут быть представлены в форме сухого порошка, например порошковой смеси соединения в подходящей порошковой основе, такой как лактоза, крахмал, производные крахмала, как например, в гидроксипропилметилцеллюлозе и поливинилпирролидине (PVP). Порошковый носитель будет образовывать гель в носовой полости. Порошковая композиция может быть представлена в стандартной лекарственной форме, например в капсулах или картриджах из, например желатина, или блистерных упаковках, из которых находящийся там порошок может быть введен посредством ингалятора.
При желании композиции могут быть изготовлены с энтеросолюбильными покрытиями, адаптированными к введению активного ингредиента с непрерывным или регулируемым высвобождением. Например, соединения по настоящему изобретению могут быть введены в состав устройств для трансдермальной или подкожной доставки лекарственных средств. Такие системы доставки, имеющие преимущество в случае непрерывного высвобождения соединения, необходимы и тогда, когда соблюдение больным режима и схемы лечения является принципиальным. Соединения в трансдермальных системах доставки часто нанесены на приклеиваемую к коже твердую подложку. Представляющее интерес соединение также может быть в комбинации с усилителем проницаемости, например, азоном (1-додецилазациклогептан-2-оном). Системы доставки с непрерывным высвобождением вводят подкожно в субдермальный слой путем хирургической манипуляции или инъекции. В подкожных имплантатах соединение заключено в липидорастворимую оболочку, например, из силиконового каучука или биоразлагаемого полимера, например, полимолочной кислоты.
Фармацевтические препараты предпочтительно находятся в стандартных лекарственных формах. Препарат в такой форме подразделен на стандартные дозы, содержащие соответствующие количества активного компонента. Стандартная лекарственная форма может представлять собой упакованный препарат, при этом такая упаковка содержит дискретные количества препарата, как например упакованные таблетки, капсулы и порошки во флаконах или ампулах. Кроме того, стандартная лекарственная форма может представлять собой капсулу, таблетку, облатку или пастилку как таковую, или это может быть соответствующее количество любой из них в упакованной форме.
Другие подходящие фармацевтические носители и их композиции описаны в Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 1995, под редакцией E.W. Martin, Mack Publishing Company, 19-е издание (Easton, Pennsylvania). Репрезентативные фармацевтические композиции, содержащие соединение по настоящему изобретению, описаны ниже.
Фармацевтические композиции на основе соединений, являющихся предметом изобретения для введения различными путями готовят, как описано в этом примере.
Ингредиенты смешивают и распределяют по капсулам, содержащим примерно по 100 мг каждая; одна капсула приблизительно будет соответствовать общей суточной дозировке.
Ингредиенты объединяют и подвергают грануляции, используя такой растворитель, как метанол. Затем композицию сушат и формируют в таблетки (содержащие примерно 20 мг активного соединения) с помощью соответствующей таблеточной машины.
Ингредиенты смешивают с образованием суспензии для перорального введения.
Активный ингредиент растворяют в порции воды для инъекций. Затем при перемешивании добавляют достаточное количество хлорида натрия, чтобы сделать раствор изотоническим. Раствор подводят до нужного веса, используя оставшуюся часть воды для инъекций, фильтруют через мембранный фильтр (0,2 микрона) и упаковывают в стерильных условиях.
Дополнительные задачи, преимущества и новые признаки этого изобретения станут очевидны специалистам в данной области после изучения следующих далее примеров, которые не предназначены для ограничения.
Показания и способы лечения
Соединения по данному изобретению представляют собой ингибиторы JNK, и в силу этого ожидается, что они будут эффективны в лечении большого разнообразия JNK-опосредованных расстройств. Типичные JNK-опосредованные расстройства включают, но не ограничиваются этим, заболевание почек, аутоиммунные расстройства, воспалительные нарушения, метаболические расстройства, неврологическое заболевание и рак. Соответственно, соединения по изобретению могут быть применены для лечения одного или более чем одного из таких расстройств. В некоторых воплощениях соединения по изобретению могут быть применены для лечения JNK-опосредованного расстройства, такого как ревматоидный артрит, астма, диабет II типа, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона или инсульт.
В одном из аспектов согласно данной заявке предложен способ лечения JNK-опосредованного расстройства у субъекта, имеющего JNK-опосредованное расстройство, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества любого из приведенных выше соединений.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства JNK-опосредованное расстройство характеризуется клеточной пролиферацией.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства таким JNK-опосредованным расстройством является артрит.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства артрит представляет собой ревматоидный артрит.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства таким JNK-опосредованным расстройством является астма.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства таким JNK-опосредованным расстройством является диабет.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства таким JNK-опосредованным расстройством является болезнь Альцгеймера.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства таким JNK-опосредованным расстройством является болезнь Паркинсона.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства таким JNK-опосредованным расстройством является ишемический инсульт.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства таким JNK-опосредованным расстройством является рак.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства, где JNK-опосредованным расстройством является рак, этот рак представляет собой рак головного мозга.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства, где JNK-опосредованным расстройством является рак, этот рак представляет собой лейкоз.
В некоторых воплощениях способа лечения JNK-опосредованного расстройства, таким JNK-опосредованным расстройством является заболевание почек.
Комбинированная терапия (не только для воспаления)
В одном из аспектов согласно данной заявке предложен способ лечения JNK-опосредованного расстройства, включающий совместное введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества противовоспалительного соединения в комбинации с соединением по любому из вышеупомянутых воплощений, вариантов или аспектов.
ПРИМЕРЫ
Далее приведены подготовительные примеры и примеры, которые дают возможность специалистам в данной области более четко понимать и применять на практике настоящее изобретение. Их не следует рассматривать как ограничивающие объем данного изобретения, а только как иллюстрирующие и характеризующие его.
Сокращения
2
2
2
AcO: уксусный ангидрид; АсОН: уксусная кислота; DBU: 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен; DCE: 1,2-дихлорэтан; DCM: дихлорметан/метилен-хлорид; DIPEA: диизопропилэтиламин; DMF: N,N-диметилформамид; DMSO: диметилсульфоксид; EDCI: 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорид; EtO: диэтиловый эфир; EtOH: этанол/этиловый спирт; EtOAc: этилацетат; HOBt: 1-гидроксибензотриазол; LDA: диизопропиламид лития; LiHMDS: бис(триметилсилил)амид лития; м-СРВА: 3-хлорпероксибензойная кислота; МеОН: метанол/метиловый спирт; MW: микроволновое излучение; NMP: 1-метил-2-пирролидинон; РМВ: 4-метоксибензил; КТ: комнатная температура; ТВМЕ: трет-бутил-метиловый эфир; TFA: трифторуксусная кислота; TfO: трифторметансульфоновый ангидрид; THF: тетрагидрофуран; TLC: тонкослойная хроматография.
Общие положения
Соединения по изобретению могут быть получены разными способами, представленными в иллюстративных реакциях синтеза, описанных ниже в разделе
Примеры
Исходные вещества и реагенты, используемые при получении этих соединений, обычно либо приобретают у коммерческих поставщиков, таких как Aldrich Chemical Co., либо их получают способами, известными специалистам в данной области, следуя методикам, изложенным в таких ссылках, как Fieser L.F. and Fieser M. Reagents for Organic Synthesis; Wiley & Sons: New York, 1991, Volumes 1-15; Rodd (ed.) Chemistry of Carbon Compounds, Elsevier Science Publishers, 1989, Volumes 1-5 and Supplementals; и Organic Reactions, Wiley & Sons: New York, 1991, Volumes 1-40. Следует понимать, что приведенные в разделе Примеры схемы реакций синтеза являются лишь иллюстрацией некоторых способов, согласно которым могут быть синтезированы соединения по изобретению, и могут быть выполнены различные модификации этих схем реакций синтеза, и они будут предложены специалисту в данной области со ссылкой на описание, содержащееся в этой заявке.
Исходные вещества и промежуточные соединения на схемах реакций синтеза при желании могут быть выделены и очищены с использованием традиционных методов, включая, но не ограничиваясь этим, фильтрацию, дистилляцию, кристаллизацию, хроматографию и им подобные. Такие вещества могут быть охарактеризованы с использованием традиционных средств, включая данные о физических константах и спектральные данные.
Если нет указаний на обратное, реакции, изложенные в данном описании, в типичном случае проводят в атмосфере инертного газа при атмосферном давлении в диапазоне температур реакции от примерно -78°С до примерно 150°С, обычно от примерно 0°С до примерно 125°С и наиболее часто и в целях удобства примерно при комнатной температуре (или температуре окружающей среды), например, примерно 20°С.
Препаративную обращенно-фазовую жидкостную хроматографию высокого давления (RP HPLC) проводили с использованием одной из следующих систем: (А) насос/контроллер Delta Prep 4000 от Waters, детектор 486 с установкой при 215 нм и коллектор фракций Ultrorac от LKB; или (В) LC/MS-система Sciex с масс-спектрометром 150 EX с одной квадрупольной линзой, LC-система от Shimadzu, устройство для автоматического ввода проб LEAP и коллектор фракций от Gilson. Образец растворяли в смеси ацетонитрил/20 мМ водный ацетат аммония или ацетонитрил/вода/TFA, наносили на колонку Pursuit C-18 (20×100 мм) и элюировали при скорости потока 20 мл/мин линейным градиентом 10%-90% В, где (А): 20 мМ водный ацетат аммония (рН 7,0) и (В): ацетонитрил, или (А): вода с 0,05% TFA и (В): ацетонитрил с 0,05% TFA.
Подготовительные примеры
3-(4-Карбокси-бензил)-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
В трехгорлую колбу, оснащенную капельной воронкой, термометром и верхнеприводной механической мешалкой, загружали 2-амино-4-хлорбензонитрил (150 г; 983 ммоль) и тетрагидрофуран (3,0 л). Реакционную колбу охлаждали до 15°С и затем обрабатывали хлоридом метилмагния (825 мл; 2,48 моль). По завершении добавления хлорида метилмагния охлаждающую баню удаляли. Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение ночи. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 5°С и затем медленно обрабатывали раствором воды (500 мл) и концентрированной соляной кислоты (300 мл), все время поддерживая температуру реакции ниже 25°С. Полученную густую суспензию перемешивали при 25°С в течение 3 ч. На этом этапе смесь охлаждали до 5°С и обрабатывали твердым гидроксидом натрия (300 г) малыми порциями. Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение ночи. На этом этапе декантировали органические слои. Оставшуюся густую массу распределяли между водой (2 л) и метил-трет-бутиловым эфиром (2 л). Органические слои объединяли, концентрировали в вакууме и затем абсорбировали на диоксиде кремния. После флэш-хроматографии (колонка силикагеля 4ʺ×16ʺ; 1-3% этилацетат/гексаны) с последующим концентрированием соответствующих фракций, суспендирования с гексанами, фильтрации и сушки получали 1-(2-амино-4-хлорфенил)этанон (81 г; 48,6%) в виде желтого твердого вещества. Это вещество использовали без дополнительной очистки.
В 3-горлую круглодонную колбу, оснащенную механической мешалкой, датчиком термопары, обратным холодильником и барботером азота, загружали 1-(2-амино-4-хлорфенил)этанон (81 г; 478 ммоль) в ди-н-бутиловом эфире (1 л). Затем реакционную смесь обрабатывали порошкообразным карбонатом калия (200 г; 1,45 моль) и порошком меди (5 г; 78 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником при 140-145°С в течение 3 ч. На этом этапе добавляли дополнительное количество карбоната калия (100 г; 0,72 моль), иодбензола (100 г; 0,49 моль) и порошка меди (2 г; 31 ммоль). Полученную смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 25°С, фильтровали и промывали метил-трет-бутиловым эфиром. Фильтрат концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (колонка силикагеля 4ʺ×16ʺ; 0-2% этилацетат/гексаны) с последующим концентрированием соответствующих фракций, суспендирования с гексанами, фильтрации и сушки получали 1-(4-хлор-2-фениламино-фенил)-этанон (79,3 г; 67,6%) в виде желтого твердого вещества. Это вещество использовали без дополнительной очистки.
В 3-горлую круглодонную колбу емкостью 2 л, оснащенную мешалкой, барботером азота, капельной воронкой и термометром, загружали 1-(4-хлор-2-(фениламино)фенил)этанон (79,3 г; 323 ммоль) и метанол (628 г; 793 мл). Реакционную смесь обрабатывали при перемешивании раствором метилата натрия (25 масс.%-ным в метаноле, 119 мл; 520 ммоль) с последующим добавлением метил-4-формилбензоата (53,0 г; 323 ммоль). Реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение ночи. На этом этапе реакционную смесь охлаждали в ледяной бане. Полученные твердые вещества собирали фильтрацией, промывали холодным метанолом и сушили, получая 4-[(Е)-3-(4-хлор-2-фениламино-фенил)-3-оксо-пропенил]-бензойной кислоты метиловый эфир (115 г; 90,9%) в виде красного твердого вещества. Это вещество использовали без дополнительной очистки.
В круглодонную колбу емкостью 500 мл, оснащенную мешалкой, загружали 4-[(Е)-3-(4-хлор-2-фениламино-фенил)-3-оксо-пропенил]-бензойной кислоты метиловый эфир (5,5 г; 14,0 ммоль) и этилацетат (100 мл). Полученную смесь перемешивали в атмосфере водорода в течение 1 ч. На этом этапе катализатор удаляли фильтрацией и промывали этилацетатом. Фильтраты концентрировали в вакууме, получая 4-[3-(4-хлор-2-фениламино-фенил)-3-оксо-пропил]-бензойной кислоты метиловый эфир (5,5 г; 99,5%) в виде смолистого твердого вещества. Это вещество использовали без дополнительной очистки.
В круглодонную колбу емкостью 1 л, оснащенную магнитной мешалкой, обратным холодильником с водяным охлаждением, барботером азота и термометром, загружали 4-[3-(4-хлор-2-фениламино-фенил)-3-оксо-пропил]-бензойной кислоты метиловый эфир (54 г; 137 ммоль), толуол (2 л; 18,8 моль) и метил-2-хлор-2-оксоацетат (200 мл; 2,17 моль). Полученную смесь нагревали до температуры дефлегмации в течение ночи. На этом этапе реакционную смесь концентрировали до получения густого смолообразного вещества. Этот остаток растворяли в метаноле (1 л), обрабатывали карбонатом калия (31 г) и перемешивали в течение ночи. На этом этапе реакционную смесь фильтровали для удаления твердых веществ. Фильтрат обрабатывали уксусной кислотой (50 мл) и затем концентрировали в вакууме. Остаток абсорбировали на силикагеле. После флэш-хроматографии (колонка 2ʺ×6ʺ; 50-66% этилацетат/гексаны) с последующим концентрированием соответствующих фракций получали твердое вещество. Это твердое вещество суспендировали в смеси 1:1 этилацетат/гексаны, собирали фильтрацией и сушили в вакууме, получая 7-хлор-3-(4-метоксикарбонил-бензил)-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (34 г; 53,7%) в виде беловатого твердого вещества. Это вещество использовали без дополнительной очистки.
В трехгорлую круглодонную колбу емкостью 2 л, оснащенную механической мешалкой, барботером азота и термометром, загружали 7-хлор-3-(4-метоксикарбонил-бензил)-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (34 г; 73,6 ммоль), метанол (600 мл) и 1,4-диоксан (300 мл). Полученную смесь обрабатывали гидроксидом лития (3,52 г; 146 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение выходных. На этом этапе реакционную смесь нагревали до 35°С и перемешивали при 35°С в течение ночи. Затем реакционную смесь обрабатывали дополнительным количеством гидроксида лития (3,5 г; 1,46 ммоль) и водой (10 мл) и продолжали перемешивать при 35°С в течение ночи. На этом этапе к реакционной смеси добавляли дополнительное количество 1,4-диоксана (300 мл). Реакционную смесь перемешивали при 35°С в течение ночи. Затем реакционную смесь нагревали до 40°С, перемешивали при этой температуре в течение 8 ч и далее перемешивали при 35°С в течение ночи. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 25°С, обрабатывали концентрированной соляной кислотой (25 мл) и метилацетатом (500 мл) и концентрировали в вакууме. Полученные твердые вещества собирали фильтрацией, промывали метанолом и сушили в вакууме, получая 3-(4-карбокси-бензил)-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (27,5 г). Дополнительное количество 3-(4-карбокси-бензил)-7-хлор-4-оксо-1 -фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (3 г; общий выход: 92,5%) получали после концентрирования фильтрата и сбора полученных твердых веществ. Эти вещества использовали без дополнительной очистки.
3-(4-Карбокси-бензил)-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
Раствор 2-хлорникотиновой кислоты (20,0 г; 127 ммоль) в N,N-диметил-формамиде (600 мл; 0,21 М) обрабатывали N,N-диизопропилэтиламином (66 мл; 379 ммоль), N,О-диметилгидроксиламина гидрохлоридом (13,63 г; 140 ммоль) и бензотриазол-1-ил-окси-трис-(диметиламино)-фосфония гексафторфосфатом (84,25 г; 190 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 3 сут. Полученную реакционную смесь концентрировали в вакууме, переносили в этилацетат (400 мл) и промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (2×250 мл), насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (2×250 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (250 мл). Органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали, промывали этилацетатом и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (колоночная хроматография на IntelliFlash 280 от AnaLogix, колонка с 400 г силикагеля, 25-50% этилацетат/гексаны) получали 2-хлор-N-метокси-N-метил-никотинамид (23,58 г; 93%) в виде светло-желтого масла.
Раствор 2-хлор-N-метокси-N-метил-никотинамида (23,6 г; 118 ммоль) в тетрагидрофуране (350 мл; 0,34 М) при 0°С обрабатывали по каплям, используя капельную воронку, хлоридом метилмагния (3,0 М раствор в тетрагидрофуране; 100 мл; 300 ммоль). Реакционная смесь превращалась в очень густую непрозрачную белую смесь, и ее разбавляли дополнительным количеством тетрагидрофурана (150 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. На этом этапе реакцию осторожно гасили водой (250 мл) и реакционную смесь затем распределяли между дополнительным количеством воды (250 мл) и этилацетатом (250 мл). Водный слой повторно экстрагировали этилацетатом (2×250 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия (250 мл), сушили над сульфатом магния, фильтровали, промывали этилацетатом и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (IntelliFlash 280 от AnaLogix, колонка с 400 г силикагеля, 25-50% этилацетат/гексаны) получали 1-(2-хлор-пиридин-3-ил)-этанон (13,17 г; 72%) в виде желтого масла.
Раствор 1-(2-хлор-пиридин-3-ил)-этанона (6,42 г; 41,3 ммоль) и 1,4-диоксана (70 мл; 0,59 М) в большом герметично закрываемом цилиндрическом сосуде обрабатывали DL-10-камфорсульфоновой кислотой (23,96 г; 103 ммоль). Сосуд герметично закрывали, помещали за взрывозащитный экран и нагревали до 75°С. На этом этапе реакционный сосуд удаляли из масляной бани, осторожно открывали, содержимое быстро обрабатывали анилином (5,6 мл; 61,5 ммоль), герметично закрывали и опускали обратно в масляную баню. Затем реакционную смесь нагревали до 80°С и перемешивали при этой температуре в течение 3 ч. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 25°С, разбавляли этилацетатом (250 мл) и промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (3×250 мл), водой (150 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (150 мл). Органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали, промывали этилацетатом и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (IntelliFlash 280 от AnaLogix, колонка с 220 г силикагеля, 1-20% этилацетат/гексаны) получали 1-(2-фениламино-пиридин-3-ил)-этанон (3,14 г; 36%) в виде желтого твердого вещества.
Раствор 1-(2-фениламино-пиридин-3-ил)-этанона (2,13 г; 10,0 ммоль) в метаноле (42 мл; 0,24 М) обрабатывали метилатом натрия (25 масс.%-ный раствор в метаноле; 4,6 мл; 20,1 ммоль) и метил-4-формилбензоатом (2,04 г; 12,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 3 сут. На этом этапе реакционную смесь разбавляли водой (100 мл), подкисляли 1Н. водным раствором соляной кислоты и экстрагировали 10%-ным раствором метанола в метиленхлориде. Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом магния, фильтровали, промывали метиленхлоридом и концентрировали в вакууме на силикагеле. После флэш-хроматографии (IntelliFlash 280 от AnaLogix, колонка с 80 г силикагеля, 20% этилацетат/гексаны) получали 4-[(Е)-3-оксо-3-(2-фениламино-пиридин-3-ил)-пропенил]-бензойной кислоты метиловый эфир (3,43 г; 95%) в виде оранжевого твердого вещества.
Смесь 4-[(Е)-3-оксо-3-(2-фениламино-пиридин-3-ил)-пропенил]-бензойной кислоты метилового эфира (2,45 г; 6,84 ммоль) и этилацетата (280 мл; 0,024 М) обрабатывали 10%-ным палладием на угле (0,24 г; 10% от массы использованного исходного вещества). Колбу присоединяли к баллону с водородом и реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение ночи. На этом этапе реакционную смесь фильтровали через набивку Celite, промывали этилацетатом и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (IntelliFlash 280 от AnaLogix, колонка с 80 г силикагеля, 1-20% этилацетат/гексаны) получали 4-[3-оксо-3-(2-фениламино-пиридин-3-ил)-пропил]-бензойной кислоты метиловый эфир (2,00 г; 81%) в виде оранжевого твердого вещества.
Раствор 4-[3-оксо-3-(2-фениламино-пиридин-3-ил)-пропил]-бензойной кислоты метилового эфира (2,00 г; 5,55 ммоль) в толуоле (100 мл; 0,055 М) обрабатывали метилоксалилхлоридом (5,0 мл; 54,2 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 130°С и перемешивали при этой температуре в течение 6 ч. На этом этапе реакционную смесь концентрировали в вакууме, получая 4-{3-[2-(метоксиоксалил-фенил-амино)-пиридин-3-ил]-3-оксо-пропил}-бензойной кислоты метиловый эфир. Это вещество использовали без дополнительной очистки.
Раствор 4-{3-[2-(метоксиоксалил-фенил-амино)-пиридин-3-ил]-3-оксо-пропил}-бензойной кислоты метилового эфира (предположительно 5,55 ммоль) в метаноле (55 мл; 0,10 М) обрабатывали карбонатом калия (7,69 г; 55,6 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 85°С и перемешивали при этой температуре в течение 4 ч. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 25°С и затем концентрировали в вакууме. Затем остаток переносили в воду (200 мл) и экстрагировали диэтиловым эфиром (100 мл). Водный слой подкисляли до рН 2-3, используя 1Н. водный раствор соляной кислоты. Полученный осадок фильтровали, промывали водой и сушили в вакууме, получая 3-(4-карбокси-бензил)-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (1,89 г; 82% за 2 стадии) в виде светло-коричневого твердого вещества.
Пример 1
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-Гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
+
+
1
-1
34
33
3
5
6
Раствор 3-(4-карбокси-бензил)-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (6,44 г; 15,5 ммоль) в метиленхлориде (150 мл; 0,1 М) обрабатывали N,N-диизопропилэтиламином (20,0 г; 27 мл; 153 ммоль), (1S,3R,4S,5S,7S)-4-амино-адамантан-1-ола гидрохлоридом (см. WO 2007/107470 А2; 3,33 г; 16,3 ммоль), 1-[3-диметиламинопропил]-3-этилкарбодиимида гидрохлоридом (4,91 г; 25,4 ммоль) и 1-гидроксибензо-триазолом (3,41 г; 24,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 2 сут. На этом этапе реакционную смесь разбавляли метиленхлоридом (200 мл) и промывали 1Н. водным раствором соляной кислоты (2×200 мл), насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (2×200 мл) и водой (200 мл). Органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали, промывали метиленхлоридом и концентрировали в вакууме. Остаток разбавляли небольшим количеством метиленхлорида и абсорбировали на силикагеле. Флэш-хроматография (IntelliFlash 280 от AnaLogix, колонка с 220 г силикагеля, 100%-ный этилацетат, затем 1-5% метанол/метиленхлорид). Фракции, содержащие чистый продукт, объединяли, концентрировали в вакууме, затем перерастворяли в метаноле, концентрировали в вакууме (четыре раза) и сушили под высоким вакуумом, получая 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (сольват в метаноле) в виде тонкоизмельченного светло-желтого порошка (6,59 г; 75%). ES-HRMS m/e рассчит. для CHNO [М+H] 564,2493; обнаружено 564,2493; H ЯМР (300 МГц, DMSO-d) δ млн 1.32 (d, J=11,49 Гц, 2Н), 1.50-1.80 (m, 6H), 1.85-2.17 (m, 5H), 3.45 (s, 3H), 3.77-3.96 (m, 3H), 4.41 (s, 1H), 7.33 (d, J=8,29 Гц, 2Н), 7.38-7.59 (m, 6H), 7.69 (d, J=8,29 Гц, 2Н), 7.78 (d, J=6,78 Гц, 1Н), 8.58 (dd, J=7,91; 1,88 Гц, 1Н), 8.68 (dd, J=4,52; 1,88 Гц, 1Н).
Пример 2
rel-3-[4-((1S,2R,3R,5S,7S)-5-Гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
f
34
33
3
5
6
f
+
+
1
-1
Раствор 3-(4-карбокси-бензил)-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (0,18 г; 0,43 ммоль) в N,N-диметил-формамиде (2,2 мл; 0,2 М) обрабатывали N,N-диизопропилэтиламином (225 мкл; 1,29 ммоль), 4-амино-адамантан-1-ола гидрохлоридом (смесью цис- и трансизомеров) (83,5 г; 0,45 ммоль) и бензотриазол-1-ил-окси-трис-(диметиламино)-фосфония гексафторфосфатом (0,29 г; 0,65 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение ночи. На этом этапе реакционную смесь промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (колонка с 40 г силикагеля; 0,5-4% метанол/метиленхлорид) получали два набора содержащих продукт фракций. Фракции внутри каждого набора объединяли, концентрировали в вакууме, затем перерастворяли в этаноле, концентрировали и сушили под высоким вакуумом. Из фракции, содержащей продукт - соединение, характеризующееся более высоким значением R, получали 3-[4-((1S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (78,6 мг; 32,1%) в виде светло-желтого твердого вещества. ES -HRMS m/e рассчит. для CHNO [М+Н] 564,2493; обнаружено 564,2493; H ЯМР (300 МГц, DMSO-d) δ млн 1.35 (d, J=11,77 Гц, 2Н), 1.48-1.73 (m, 6Н), 1.81-2.22 (m, 5H), 3.36-3.51 (m, 3H), 3.73-3.87 (m, 3Н), 4.32 (s, 1H), 7.32 (d, J=8,45 Гц, 2Н), 7.39-7.57 (m, 6Н), 7.68 (d, J=8,15 Гц, 2Н), 7.71-7.82 (m, 1H), 8.56 (dd, J=8,00; 1,96 Гц, 1H), 8.67 (dd, J=4,53; 1,81 Гц, 1H). Из фракции, содержащей продукт - соединение, характеризующееся более высоким значением R, получали 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (128,7 мг; 53%) в виде беловатого твердого вещества.
Пример 3
rel-7-Хлор-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
+
+
1
-1
35
33
2
5
6
Раствор 3-(4-карбокси-бензил)-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (100 мг; 223 мкмоль) в метиленхлориде (10 мл) обрабатывали N,N-диизопропилэтиламином (291 мг; 2,25 ммоль), (1S,3R,5S,7S)-4-амино-адамантан-1-ола гидрохлоридом (см. WO 2007/107470 А2; 71,8 мг; 335 мкмоль), 1-[3-диметиламинопропил]-3-этилкарбодиимида гидрохлоридом (69,2 мг; 357 мкмоль) и 1-гидроксибензотриазолом (55,8 мг; 357 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 18 ч. На этом этапе реакционную смесь разбавляли метиленхлоридом и промывали 1Н. водным раствором соляной кислоты, 1 М водным раствором карбоната калия, водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток разбавляли небольшим количеством метиленхлорида и абсорбировали на силикагеле. После флэш-хроматографии (Intelliflash 310 от Varian, колонка с 12 г силикагеля, 0-6% метанол/метиленхлорид) получали 7-хлор-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (33,3 мг; 25%) в виде белого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHClNO [M+H] 597,2151; обнаружено 597,2151; H ЯМР (DMSO-d) 6 млн 8.22 (d, J=8,8 Гц, 1Н), 7.73-7.81 (m, 1Н), 7.63-7.70 (m, 5H), 7.53-7.60 (m, 2H), 7.47 (dd, J=8,8; 1,8 Гц, 1Н), 7.31 (d, J=8,2 Гц, 2H), 6.71 (d, J=1,8 Гц, 1Н), 4.41 (s, 1Н), 3.85-3.96 (m, 1Н), 3.81 (s, 2H), 3.43 (s, ЗН), 1.89-2.11 (m, 5H), 1.55-1.75 (m, 6H), 1.31 (d, J=11,8 Гц, 2H).
Пример 4
rel-7-Хлор-3-[4-((1S,2R,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
+
+
1
-1
35
33
2
5
6
Раствор 3-(4-карбокси-бензил)-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (100 мг; 223 мкмоль) в метиленхлориде (10 мл) обрабатывали N,N-диизопропилэтиламином (291 мг; 2,25 ммоль), (1S,3R,5S,7S)-4-амино-адамантан-1-ола гидрохлоридом (см. WO 2007/107470 А2; 71,8 мг; 335 мкмоль), 1-[3-диметиламинопропил]-3-этилкарбодиимида гидрохлоридом (69,2 мг; 357 мкмоль) и 1-гидроксибензотриазолом (55,8 мг; 357 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 18 ч. На этом этапе реакционную смесь разбавляли метиленхлоридом, промывали 1Н. водным раствором соляной кислоты, 1 М водным раствором карбоната калия, водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия. Органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток разбавляли небольшим количеством метиленхлорида и абсорбировали на силикагеле. После флэш-хроматографии (Intelliflash 310 от Varian, колонка с 12 г силикагеля, 0-6% метанол/метиленхлорид) получали 7-хлор-3-[4-((1S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (50,3 мг; 37,7%) в виде белого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHClNO [М+Н]; 597,2151 обнаружено 597,2149; H ЯМР (DMSO-d) δ млн 8.23 (d, J=8,7 Гц, 1Н), 7.79 (d, J=5,7 Гц, 1Н), 7.62-7.73 (m, 5Н), 7.53-7.61 (m, 2H), 7.47 (dd, J=8,7; 1,9 Гц, 1Н), 7.32 (d, J=8,5 Гц, 2Н), 6.71 (d, J=1,9 Гц, 1Н), 4.33 (s, 1Н), 3.82 (s, 2H), 3.74-3.85 (m, 1Н), 3.44 (s, 3Н), 2.16 (br. s., 2H), 2.01 (br.s., 1Н), 1.94 (d, J=12,1 Гц, 2H), 1.50-1.71 (m, 6H), 1.37 (d, J=11,8 Гц, 2Н).
Пример 5
rel-4-(7-Хлор-4-оксо-1-пиридин-2-ил-1,4-дигидро-хинолин-3-илметил)-N-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-ил)-бензамид
В трехгорлую колбу емкостью 2 литра, оснащенную капельной воронкой, входным отверстием для аргона и верхнеприводной механической мешалкой, загружали 2-амино-4-хлорбензонитрил (15 г; 0,098 моль) и безводный диэтиловый эфир (1,2 л). Реакционную колбу заполняли газообразным аргоном. Затем смесь охлаждали до 0°С в бане с ледяной водой. На этом этапе проводили обработку реакционной смеси раствором хлорида метилмагния (3,0 М в тетрагидрофуране; 100 мл; 0,30 моль). Процесс добавления проводили в течение 90 мин. На этом этапе реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение еще 90 мин. Затем реакционную смесь нагревали до 25°С и перемешивали при 25°С в течение 20 мин. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до -60°С, используя баню со смесью сухой лед/ацетон, и затем медленно по каплям обрабатывали 6 н. водным раствором соляной кислоты (100 мл). Затем реакционную смесь оставляли нагреваться до 18°С с перемешиванием в течение 3 ч. На этом этапе проводили обработку реакционной смеси дополнительным количеством 6 н. водного раствора соляной кислоты (100 мл). На этом этапе реакционную смесь переносили в делительную воронку. Органический слой отделяли и отставляли в сторону. Величину рН водного слоя подводили до 9, медленно с перемешиванием добавляя твердый гидроксид калия. Затем полученную смесь экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические слои сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая 1-(2-амино-4-хлорфенил)этанон (16,1 г; 96%) в виде рыжевато-коричневого твердого вещества. Это вещество использовали без дополнительной очистки.
+
+
1
-1
13
11
2
6
Раствор 1-(2-амино-4-хлорфенил)этанона (1000 мг; 5,9 ммоль) в диоксане (14,7 мл) при 25°С в толстостенной реакционной колбе для работы под высоким давлением обрабатывали фенолятом натрия (958 мг; 8,25 ммоль), 4,5-бис(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантеном (108 мг; 118 мкмоль), трис(дибензилиденацетон)-дипалладием(0) (75,1 мг; 130 мкмоль) и 2-хлорпиридином (669 мг; 5,9 ммоль). Реакционную колбу плотно закрывали и затем нагревали до 100°С в течение 2 сут. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 25°С, разбавляли 10%-ным раствором метанола в метиленхлориде (50 мл) и фильтровали через набивку Celite, промывая 10%-ным раствором метанола в метиленхлориде (2×30 мл). Фильтрат концентрировали в вакууме. Неочищенное вещество очищали, используя обращенно-фазовую хроматографию (ацетат аммония/ацетонитрил с трифторуксусной кислотой), получая 1-[4-хлор-2-(пиридин-2-иламино)-фенил]-этанон, соль трифторуксусной кислоты, (544 мг; 25,6%) в виде беловатого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHClNO [М+Н] 247,0633; обнаружено 247,0628; H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ млн 12.26 (br. s., 1H), 8.87 (s, 1H), 8.71 (d, J=6,4 Гц, 1Н), 8.14 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 7.65 (d, J=8,5 Гц, 1H), 7.28-7.45 (m, 3Н), 7.19 (br. s., 1H), 1.82 (br. s., 3H).
Смесь 1-[4-хлор-2-(пиридин-2-иламино)-фенил]-этанона, соли трифторуксусной кислоты, (273 мг; 757 мкмоль) в метаноле (3,78 мл) при 25°С обрабатывали метил-4-формилбензоатом (124 мг; 757 мкмоль) и метилатом натрия в метаноле (4,37 M; 520 мкл; 2,27 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 3 сут. На этом этапе реакционную смесь разбавляли водой (50 мл), нейтрализовали 1Н. водным раствором соляной кислоты и экстрагировали метиленхлоридом (3×50 мл). Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая 4-{(Е)-3-[4-хлор-2-(пиридин-2-иламино)-фенил]-3-оксо-пропенил}-бензойной кислоты метиловый эфир (287,3 мг; 96,6%) в виде оранжевого твердого вещества. Это вещество использовали без дополнительной очистки.
Смесь 4-{(Е)-3-[4-хлор-2-(пиридин-2-иламино)-фенил]-3-оксо-пропенил}-бензойной кислоты метилового эфира (287 мг; 731 мкмоль) в метаноле (12,2 мл) при 25°С обрабатывали оксидом платины(IV) (8,3 мг; 36,5 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере газообразного водорода (баллон) при 25°С в течение 18 ч. На этом этапе реакционную смесь фильтровали через набивку Celite для удаления катализатора. Celite промывали 10%-ным раствором метанола в метиленхлориде (2×30 мл). Фильтрат концентрировали в вакууме, получая 4-{3-[4-хлор-2-(пиридин-2-иламино)-фенил]-3-оксо-пропил}-бензойной кислоты метиловый эфир (291 мг; колич.) в виде темно-зеленого твердого вещества. Это вещество использовали без дополнительной очистки.
+
+
1
-1
23
17
2
3
6
Раствор N,N-диметилформамида (268 мг; 286 мкл; 3,67 ммоль) и тетрагидрофурана (2,94 мл), охлажденный до 0°С, обрабатывали оксалилхлоридом (373 мг; 256 мкл, 2,94 ммоль). В процессе добавления происходило бурное выделение газа, реакционная смесь становилась мутной, и образовывался густой белый осадок. На этом этапе ледяную баню удаляли. Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 45 мин и затем концентрировали в вакууме. Полученную белую густую массу обрабатывали толуолом (11,8 мл) и 4-{3-[4-хлор-2-(пиридин-2-иламино)-фенил]-3-оксо-пропил}-бензойной кислоты метиловым эфиром (290 мг; 734 мкмоль). Затем эту смесь нагревали до 115°С в течение 5 ч и далее перемешивали при 25°С в течение ночи. На этом этапе реакционную смесь разбавляли водой (30 мл) и экстрагировали метиленхлоридом (3×30 мл). Органические экстракты сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (колонка 40 г; 1-10% метанол/метиленхлорид) получали 4-(7-хлор-4-оксо-1-пиридин-2-ил-1,4-дигидро-хинолин-3-илметил)-бензойной кислоты метиловый эфир (28,7 мг; 9,65%) в виде коричневого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHClNO [М+Н] 405,1000; обнаружено 405,0995; H ЯМР (300 МГц, DMSO-d) δ млн 8.73 (d, J=4,7 Гц, 1Н), 8.29 (s, 1H), 8.14-8.24 (m, 2H), 7.85 (d, J=8,2 Гц, 2H), 7.79 (d, J=7,9 Гц, 1H), 7.63-7.72 (m, 1H), 7.47 (d, J=8,2 Гц, 2H), 7.43 (m, 1H), 7.21 (d, J=1,7 Гц, 1H), 3.89 (s, 2H), 3.82 (s, 3Н).
+
+
1
-1
22
15
2
3
6
Раствор 4-(7-хлор-4-оксо-1 -пиридин-2-ил-1,4-дигидро-хинолин-3-илметил)-бензойной кислоты метилового эфира (28 мг; 69,2 мкмоль) в тетрагидрофуране (553 мкл) при 25°С обрабатывали раствором моногидрата гидроксида лития (5,8 мг; 138 мкмоль) в воде (138 мкл). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 24 ч. На этот момент времени по данным LCMS реакция прошла не до конца. Проводили обработку реакционной смеси дополнительным количеством моногидрата гидроксида лития (5,8 мг; 138 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 25°С. На этот момент времени по данным LCMS реакция по-прежнему не прошла полностью. Проводили обработку реакционной смеси третьей порцией моногидрата гидроксида лития (5,8 мг; 138 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при 25°С. На этом этапе реакционную смесь разбавляли водой (30 мл) и экстрагировали метиленхлоридом (1×30 мл). Затем водный слой подкисляли 1Н. водным раствором соляной кислоты и экстрагировали 10%-ным раствором метанола в метиленхлориде (3×50 мл). Эти органические экстракты сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая 4-(7-хлор-4-оксо-1-пиридин-2-ил-1,4-дигидро-хинолин-3-илметил)-бензойную кислоту (18 мг; 66,6%) в виде светло-коричневого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHClNO [М+Н] 391,0844; обнаружено 391,0835; H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ млн 12.79 (br. s., 1H), 8.73 (dd, J=4,8; 1,2 Гц, 1Н), 8.29 (s, 1H), 8.17-8.25 (m, 1H), 7.77-7.86 (m, 3Н), 7.68 (dd, J=7,1; 5,2 Гц, 1H), 7.41-7.48 (m, 3H), 7.22 (d, J=1,8 Гц, 1H), 3.88 (s, 1H).
+
+
1
-1
32
30
3
3
6
Раствор 4-(7-хлор-4-оксо-1 -пиридин-2-ил-1,4-дигидро-хинолин-3-илметил)-бензойной кислоты (16 мг; 40,9 мкмоль), (1S,3R,4S,5S,7S)-4-амино-адамантан-1-ола гидрохлорида (см. WO 2007/107470 А2; 6,85 мг; 40,9 мкмоль), 1-[3-диметиламино]пропил]-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (12,7 мг; 65,5 мкмоль) и 1-гидроксибензотриазола (9,03 мг; 65,5 мкмоль) в метиленхлориде (1,64 мл) обрабатывали N,N-диизопропилэтиламином (53,4 мг; 72,2 мкл, 409 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 2 сут. На этом этапе реакционную смесь разбавляли метиленхлоридом (50 мл) и промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (1×100 мл) и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (1×100 мл). Органические слои сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (1,5-5% метанол/метиленхлорид) получали 4-(7-хлор-4-оксо-1-пиридин-2-ил-1,4-дигидро-хинолин-3-илметил)-N-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-ил)-бензамид (7,8 мг; 35,3%) в виде светло-коричневого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHClNO [М+Н] 540,2048; обнаружено 540,2038; H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ млн 8.74 (dd, J=4,8; 1,4 Гц, 1Н), 8.26 (s, 1Н), 8.23 (d, J=8,7 Гц, 1Н), 8.21 (td, J=7,8; 1,8 Гц, 1Н), 7.76-7.84 (m, 2H), 7.65-7.72 (m, 3Н), 7.45 (dd, J=8,7; 1,8 Гц, 1H), 7.41 (d, J=8,1 Гц, 2H), 7.21 (d, J=1,8 Гц, 1H), 4.43 (s, 1H), 3.90 (br. s., 1H), 3.87 (s, 2H), 1.91-2.13 (m, 5H), 1.56-1.76 (m, 6H), 1.32 (d, J=12,3 Гц, 2H).
Пример 6
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-Ацетокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
37
35
2
6
6
+
1
-1
Смесь 7-хлор-3-[4-(5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (74,9 мг; 125 мкмоль) и хлорацетонитрила (102 мг; 85 мкл; 1,32 ммоль) обрабатывали ледяной уксусной кислотой (105 мг; 100 мкл; 1,74 ммоль). Полученную суспензию охлаждали до 0°С и затем обрабатывали концентрированной серной кислотой (184 мг; 100 мкл; 1,79 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин. На этом этапе реакционную смесь оставляли медленно нагреваться до 25°С и перемешивали при этой температуре в течение 3,5 ч. На этом этапе реакционную смесь хранили в холодильнике в течение ночи. На этом этапе реакционную смесь оставляли нагреваться до 25°С и перемешивали при 25°С в течение 1 сут. На этом этапе реакционную смесь разбавляли ледяной водой (3 мл) и затем дополнительно разбавляли большим количеством воды (9 мл). Полученную смесь перемешивали при 25°С в течение 30 мин. На этом этапе полученный осадок собирали фильтрацией, промывали водой и сушили в течение ночи в условиях обеспечения вакуумом с использованием вспомогательного оборудования (under house vacuum). После обращенно-фазовой жидкостной хроматографии (колонка Pursuit C-18; ацетат аммония/модификатор ацетонитрил) получали 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-ацетокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (10 мг; 12,5%) в виде белого твердого вещества. LC/MS-ES(+/-) рассчит. для CHClNO [М] 638; обнаружено 638. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ млн 1.23 (s, 2Н), 1.41 (d, J=12,09 Гц, 2Н), 1.93 (s, 3Н), 1.96-2.23 (m, 10Н), 3.44 (s, 3Н), 3.82 (s, 2H), 3.97 (d, J=6,04 Гц, 1Н), 6.71 (d, J=2,01 Гц, 1Н), 7.32 (d, J=8,26 Гц, 2Н), 7.47 (dd, J=8,66; 1,81 Гц, 1Н), 7.53-7.59 (m, 2H), 7.63-7.72 (m, 5H), 7.86 (d, J=6,45 Гц, 1Н), 8.22 (d, J=8,66 Гц, 1Н).
Пример 7
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
Смесь 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (80,4 мг; 143 мкмоль) и хлорацетонитрила (64,6 мг; 54 мкл; 856 мкмоль) в ледяной уксусной кислоте (67,9 мкл), охлажденную до 0°С, обрабатывали серной кислотой (126 мг; 68,4 мкл; 1,28 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. Затем ее оставляли постепенно нагреваться до 25°С и перемешивали при этой температуре в течение ночи. На этом этапе для облегчения перемешивания и растворения добавляли дополнительное количество серной кислоты (0,12 мл) и уксусной кислоты (0,12 мл). Реакционную смесь продолжали перемешивать в течение еще 24 ч. На этом этапе реакционную смесь разбавляли водой и затем нейтрализовали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Этот раствор экстрагировали метиленхлоридом (3×30 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая 3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2-хлор-ацетиламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (112,1 мг) в виде светло-желтого твердого вещества. Данное вещество использовали без дополнительной очистки.
+
+
1
-1
34
34
4
4
6
Раствор 3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2-хлор-ацетиламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (91,4 мг; 143 мкмоль) и тиомочевины (15,2 мг; 200 мкмоль) в этаноле (1,19 мл), охлажденный до 0°С, обрабатывали ледяной уксусной кислотой (238 мкл). Реакционную смесь нагревали до температуры дефлегмации и перемешивали при этой температуре в течение ночи. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 25°С, разбавляли водой (5 мл) и нейтрализовали, добавляя по каплям насыщенный водный раствор бикарбоната натрия. Этот раствор затем экстрагировали метиленхлоридом (3×30 мл). Органические экстракты сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (4 г; 2-10% метанол/метиленхлорид) получали 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (26,6 мг; 33,1%) в виде беловатого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHNO [М+Н] 563,2653; обнаружено 563,3642; H ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ млн 8.68 (dd, J=4,3; 1,8 Гц, 1Н), 8.57 (dd, J=8,1; 2,0 Гц, 1Н), 7.89 (d, J=6,0 Гц, 1Н), 7.69 (d, J=8,1 Гц, 2Н), 7.52-7.58 (m, 3H), 7.50 (dd, J=8,1; 4.5 Гц, 1Н), 7.40-7.46 (m, 2Н), 7.33 (d, J=8,6 Гц, 2Н), 7.11 (br. s, 2Н), 3.88-3.96 (m, 1Н), 3.84 (s, 2Н), 3.44 (s, 3H), 2.12 (br. s., 2Н), 1.98-2.07 (m, 3H), 1.81-1.88 (m,2H), 1.75-1.81 (m, 2Н), 1.73 (br. s., 2Н), 1.37 (d, J=12,1 Гц, 2Н).
Пример 8
rel-3-[4-((1S,2R,3R,5S,7S)-5-Амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
Смесь 3-[4-((1S,2R,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (103,3 мг; 183 мкмоль), хлорацетонитрила (83,0 мг; 69,4 мкл, 1,1 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (87,3 мкл), охлажденную до 0°С, обрабатывали концентрированной серной кислотой (162 мг; 87,9 мкл; 1,65 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. На этом этапе реакционную смесь разбавляли водой и затем нейтрализовали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Этот раствор экстрагировали метиленхлоридом (3×30 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая 3-{4-[(1S,2R,3R,5S,7S)-5-(2-xлop-ацетиламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир. Это вещество использовали без дополнительной очистки.
+
+
1
-1
34
34
4
4
6
Раствор 3-{4-[(1S,2R,3R,5S,7S)-5-(2-хлор-ацетиламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (117 мг; 183 мкмоль) и тиомочевины (19,5 мг; 256 мкмоль) в этаноле (1,52 мл), охлажденный до 0°С, обрабатывали ледяной уксусной кислотой (305 мкл). Реакционную смесь нагревали до температуры дефлегмации и перемешивали при этой температуре в течение ночи. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 25°С, разбавляли водой (5 мл) и нейтрализовали, добавляя по каплям насыщенный водный раствор бикарбоната натрия. Этот раствор затем экстрагировали метиленхлоридом (3×30 мл). Органические экстракты сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (4 г; 2-10% метанол/метиленхлорид), затем сверхкритической жидкостной хроматографии (колонка PVA-SIL от YMC; модификатор: 40%-ный этанол; скорость потока: 60 мл; длина волны: 250 нм) получали 3-[4-((1S,2R,3R,5S,7S)-5-амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (10,6 мг; 10,3%) в виде белого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHNO [M+H] 563,2653; обнаружено 563,2645; H ЯМР (300 МГц, DMSO-d) δ млн 8.68 (dd, J=4.4; 1,9 Гц, 1Н), 8.57 (dd, J=7,8; 1,9 Гц, 1Н), 7.69 (d, J=8,2 Гц, 2H), 7.64-7.75 (m, 1Н), 7.40-7.58 (m, 6H), 7.33 (d, J=8,2 Гц, 2Н), 4.32-4.39 (m, 1Н), 3.84 (s, 3H), 3.44 (s, 3H), 2.07 (br. s., 2H), 1.77-1.98 (m, 3Н), 1.53-1.68 (m, 4H), 1.16-1.50 (m, 6H).
Пример 9
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-Амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
Смесь 7-хлор-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (1,01 г; 1,69 ммоль) и хлорацетонитрила (759 мг; 635 мкл; 10,1 ммоль) в ледяной уксусной кислоте (2,5 мл), охлажденную до 0°С, обрабатывали концентрированной серной кислотой (4,6 г; 2,5 мл; 46,9 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. На этом этапе реакционную смесь оставляли постепенно далее нагреваться до 25°С и перемешивали при этой температуре в течение 36 ч. На этом этапе еще раз добавляли хлорацетонитрил (759 мг; 635 мкл; 10,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение еще 18 ч. На этом этапе реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и рН подводили до 5-6 насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Этот раствор затем экстрагировали 10%-ным раствором метанола в метиленхлориде (3×100 мл). Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая 7-хлор-3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2-хлор-ацетиламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир в виде белого пенообразного твердого вещества. Это вещество использовали без дополнительной очистки в следующей реакции.
2
35
34
3
4
6
+
+
1
-1
Раствор 7-хлор-3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2-хлор-ацетиламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (1,14 г; 1,69 ммоль) в этаноле крепости 200 (15 мл) обрабатывали тиомочевиной (0,19 г; 2,5 ммоль). Смесь охлаждали до 0°С в бане лед/вода и затем обрабатывали ледяной уксусной кислотой (3 мл). Далее колбу соединяли с обратным холодильником и нагревали до 100°С. Реакционную смесь нагревали до 100°С в течение 18 ч. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 25°С и разбавляли водой (50 мл). Полученное густое гелеобразное вещество нейтрализовали до рН 6, используя насыщенный водный раствор бикарбоната натрия. Этот раствор экстрагировали 10%-ным раствором метанола в метиленхлориде. Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом магния, фильтровали, промывали метиленхлоридом и концентрировали в вакууме, получая 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир в виде вязкого прозрачного твердого вещества. Дальнейшая очистка с использованием сверхкритической жидкостной хроматографии (пирамидальная колонка (pyr-amide column); давление CO: 100 бар (10 МПа); скорость потока: 2 мл/мин; модификатор: 35%-ный метанол) позволила получить 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (0,31 г; 31%) в виде белого твердого вещества: ES-HRMS m/e рассчит. для CHClNO [М+Н] 596,2311; обнаружено 596,2302; H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ млн 8.22 (d, J=8,7 Гц, 1Н), 7.79 (d, J=6,4 Гц, 1H), 7.63-7.72 (m, 5H), 7.57 (dd, J=6,6; 3.0 Гц, 2Н), 7.47 (dd, J=8,7; 2,0 Гц, 1H), 7.32 (d, J=8,3 Гц, 2Н), 6.71 (d, J=2,0 Гц, 1H), 3.90 (br. s., 1H), 3.82 (s, 2Н), 3.44 (s, 3H), 1.87-2.18 (m. 7H), 1.47-1.68 (m, 6H), 1.31 (d, J=12,3 Гц, 2Н).
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-Амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира гидрохлоридная соль
+
+
1
-1
35
34
3
4
6
Смесь 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (26 мг; 43,6 мкмоль) разбавляли диоксаном (5 мл). Раствор нагревали с использованием струйного сушильного аппарата до полного растворения всех частиц. Полученный раствор оставляли охлаждаться до 25°С. На этом этапе раствор обрабатывали 0,5 М раствором соляной кислоты в диоксане. По мере добавления по каплям этого кислотного раствора образовывался белый осадок. В общей сложности добавляли 20 капель 0,5 М раствора соляной кислоты в диоксане. Полученные твердые вещества собирали фильтрацией, используя воронку с фильтром из среднепористого спеченного стекла, промывали гексанами и сушили в вакууме, получая 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира гидрохлоридную соль (25,7 мг; 93,1%) в виде белого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHClNO [М+Н] 596,2311; обнаружено 596,2309; H ЯМР (300 МГц, DMSO-d) δ млн 8.23 (d, J=8,7 Гц, 1H), 7.93 (d, J=6,6 Гц, 1H), 7.86 (br. s., 3H), 7.61-7.74 (m, 5H), 7.52-7.61 (m, 2Н), 7.48 (dd, J=8,7; 1,9 Гц. 1H), 7.34 (d, J=8,1 Гц, 2Н), 6.72 (d, J=1,9 Гц, 1H), 3.94 (br. s., 1H), 3.83 (s, 2Н), 3.44 (s, 3H), 2.00-2.21 (m, 5H), 1.76-1.96 (m, 6H), 1.39 (d, J=11,1 Гц, 2Н).
Пример 10
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-Ацетиламино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
+
+
1
-1
37
36
3
5
6
Раствор 3-(4-карбокси-бензил)-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (45,1 мг; 101 мкмоль), бензотриазол-1-илокситрис(диметиламино)-фосфония гексафторфосфата (71,4 мг; 161 мкмоль) и N,N-диизопропилэтиламина (44,4 мг; 60,0 мкл; 342 мкмоль) в метиленхлориде (1 мл) обрабатывали N-(4-амино-адамантан-1-ил)-ацетамидом (см., например РСТ WO 2008/138920 А1; 27,4 мг; 132 мкмоль). Обработку полученной реакционной смеси метиленхлоридом (1 мл) проводили еще раз, помогая солюбилизации реакционной смеси. Реакционную смесь встряхивали при 25°С в течение 2 сут. На этом этапе реакционную смесь концентрировали в вакууме, получая светло-желтое смолообразное вещество. После сверхкритической жидкостной хроматографии (колонка OD; 50%-ный метанол) и лиофилизации из смеси ацетон итрил/вода получали 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-ацетиламино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (45 мг, 75%) в виде белого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHClNO [M+H] 638,2416; обнаружено 638,2415; H ЯМР (300 МГц, DMSO-d) δ млн 8.23 (d, J=8,6 Гц, 1Н), 7.82 (d, J=6,3 Гц, 1Н), 7.62-7.72 (m, 5H), 7.52-7.62 (m, 2H), 7.47 (dd, J=8,6; 1,9 Гц, 1Н), 7.28-7.40 (m, 3H), 6.71 (d, J=1,9 Гц, 1Н), 3.89-3.98 (m, 1Н), 3.82 (s, 2H), 3.44 (s, 3H), 1.85-2.11 (m, 11H), 1.75 (s, 3H), 1.39 (d, J=11,8 Гц, 2H).
Пример 11
rel-7-Хлор-3-{4-1(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2,2-диметил-пропиониламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
+
+
1
-1
40
42
3
5
6
Раствор 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (99,8 мг; 167 мкмоль) в метиленхлориде (5,0 мл) обрабатывали триэтиламином (84,9 мг; 117 мкл, 839 мкмоль), триметилацетилхлоридом (51 мг; 52 мкл, 423 мкмоль) и каталитическим количеством N,N-диметиламинопиридина (на кончике шпателя). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 2 сут. На этом этапе после флэш-хроматографии (IntelliFlash 280 от AnaLogix, колонка с 12 г силикагеля; 1%-10% метанол/метиленхлорид) получали 7-хлор-3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2,2-диметил-пропиониламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (80,9 мг; 71%) в виде белого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHClNO [М+Н] 680,2886; обнаружено 680,2867; Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d) δ млн 8.23 (d, J=8,7 Гц, 1Н), 7.81 (d, J=6,6 Гц, 1Н), 7.63-7.74 (m, 5H), 7.53-7.61 (m, 2H), 7.47 (dd, J=8,7; 1,9 Гц, 1Н), 7.32 (d, J=8,3 Гц, 2Н), 6.71 (d, J=1,9 Гц, 1Н), 6.40 (s, 1H), 3.95 (d, J=5,7 Гц, 1Н), 3.82 (s, 2H), 3.44 (s, 3H), 1.89-2.13 (m, 11H), 1.39 (d, J=11,7 Гц, 2Н), 1.07 (8,9 Н).
Пример 12
rel-3-{4-1(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2-Ацетокси-2-метил-пропиониламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
+
+
1
-1
41
42
3
7
6
Раствор 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (250 мг; 419 мкмоль) в метиленхлориде (11,5 мл) обрабатывали триэтиламином (211 мг; 290 мкл; 2,08 ммоль), 2-ацетоксиизобутирилхлоридом (173 мг; 152 мкл; 1,05 ммоль) и каталитическим количеством N,N-диметиламинопиридина (на кончике шпателя). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 18 ч. На этом этапе после флэш-хроматографии (IntelliFlash 280 от AnaLogix; колонка с 40 г силикагеля; 60%-100% этилацетат/гексаны) получали 3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2-ацетокси-2-метил-пропиониламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (291,1 мг; 96%) в виде беловатого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHNOCl [М+Н] 724,2784; обнаружено 724,2788. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ млн 8.23 (d, J=8,8 Гц, 1Н), 7.83 (d, J=6,5 Гц, 1Н), 7.63-7.72 (m, 5Н), 7.53-7.60 (m, 2H), 7.47 (dd, J=8,8; 1,9 Гц, 1Н), 7.32 (d, J=8,5 Гц, 2Н), 6.67-6.74 (m, 2H), 3.95 (br. s., 1Н), 3.82 (s, 2H), 3.44 (s, 3Н), 2.00 (s, 3H), 1.84-2.13 (m, 11H), 1.43 (s, 6H), 1.39 (d, J=12,5 Гц, 2H).
Пример 13
rel-7-Хлор-3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2-гидрокси-2-метил-пропиониламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
+
+
1
-1
39
40
3
6
6
Раствор 3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2-ацетокси-2-метил-пропиониламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (98,8 мг; 136 мкмоль) в метаноле (1 мл) обрабатывали карбонатом калия (101,3 мг; 733 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 30-35 мин. На этом этапе реакционную смесь распределяли между 1Н. водным раствором соляной кислоты (25 мл) и метиленхлоридом (25 мл). Слои встряхивали и разделяли. Водный слой повторно экстрагировали метиленхлоридом (25 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия (25 мл), сушили над сульфатом магния, фильтровали, промывали метиленхлоридом и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (хроматограф IntelliFlash 280 от AnaLogix; колонка с 12 г силикагеля; 75%-100% этилацетат/гексаны) получали 7-хлор-3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2-гидрокси-2-метил-пропиониламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (74,1 мг; 80%) в виде белого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит.для CHNOCl [М+H] 682,2679; обнаружено 682,2680. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) 6 млн 8.23 (d, J=8,8 Гц, 1Н), 7.84 (d, J=6,5 Гц, 1Н), 7.62-7.73 (m, 7H), 7.53-7.61 (m, 3H), 7.47 (dd, J=8,8; 1,9 Гц, 2Н), 7.33 (d, J=8,3 Гц, 3H), 6.84 (s, 1Н), 6.71 (d, J=1,9 Гц, 1Н), 5.45 (s, 2Н), 3.97 (d, J=5,8 Гц, 2Н), 3.82 (s, 3H), 3.44 (s, 3H), 1.90-2.12 (m, 11H), 1.41 (d, J=12,3 Гц, 2Н), 1.21 (s, 6H).
Пример 14
rel-7-Хлор-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-циклопропансульфониламино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
+
+
1
-1
38
38
3
6
6
Раствор 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (39,0 мг; 65,4 мкмоль) в метиленхлориде (2 мл) обрабатывали триэтиламином (33,4 мг; 46 мкл, 330 мкмоль), циклопропансульфонилхлоридом (11,0 мг; 8,0 мкл; 78,5 мкмоль) и каталитическим количеством N,N-диметиламино-пиридина (на кончике шпателя). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение ночи. На этом этапе после флэш-хроматографии (IntelliFlash 280 от AnaLogix; колонка с 4 г силикагеля; 1%-10% метанол/метиленхлорид) получали 7-хлор-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-циклопропансульфониламино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир в виде белого твердого вещества (2,9 мг; 6%). ES-HRMS m/e рассчит. для CHNOSCl [M+H] 700,2243; обнаружено 700,2239. H ЯМР (300 МГц, DMSO-d) 5 млн 8.22 (d, J=8,7 Гц, 1Н), 7.82 (d, J=6,6 Гц, 1Н), 7.62-7.71 (m, 5H), 7.52-7.59 (m, 1Н), 7.47 (dd, J=8,7; 1,9 Гц, 1Н), 7.32 (d, J=8,3 Гц, 1Н), 6.87 (s, 1H), 6.71 (d, J=1,9 Гц, 1H), 3.94 (br.s., 1Н), 3.82 (s, 2H), 3.43 (s, 3H), 2.54-2.58 (m, 1Н), 1.84-2.12 (m, 11H), 1.37 (d, J=11,3 Гц, 2H), 0.84-0.99 (m, 4H).
Пример 15
rel-7-Хлор-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-метансульфониламино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
+
+
1
-1
36
36
3
6
6
Раствор 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (48,0 мг; 80,5 мкмоль) в метиленхлориде (2,5 мл) обрабатывали триэтиламином (42,8 мг; 59 мкл; 423 мкмоль), метансульфонилхлоридом (22,0 мг; 15,0 мкл; 192 мкмоль) и каталитическим количеством N,N-диметиламинопиридина (на кончике шпателя). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение ночи. На этом этапе реакционную смесь разбавляли метиленхлоридом (25 мл), промывали водой (25 мл), сушили над сульфатом магния, фильтровали, промывали метиленхлоридом и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (IntelliFlash 280 от AnaLogix, колонка с 12 г силикагеля; 1%-5% метанол/метиленхлорид) получали 7-хлор-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-метан-сульфониламино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (44,0 мг; 81%) в виде белого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHClNOS [M+H] 674,2086; обнаружено 674,2074. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) 6 млн 8.23 (d, J=8,7 Гц, 1Н), 7.85 (br. s., 1Н), 7.62-7.72 (m, 5H), 7.57 (br. s., 2H), 7.47 (d, J=7,5 Гц, 1Н), 7.32 (d, J=7,3 Гц, 2H), 6.90 (br. s., 1Н), 6.71 (s, 1Н), 3.93 (br. s., 1Н), 3.82 (br. s., 2H), 3.44 (br. s., 3H), 2.95 (s, 3H), 1.82-2.12 (m, 11H), 1.37 (d, J=12,1 Гц, 2Н).
Пример 16
rel-7-Хлор-3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2-гидрокси-2-метил-пропиламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
+
+
1
-1
39
42
3
5
6
Раствор 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (48,7 мг; 81,7 мкмоль) в метаноле (0,5 мл) обрабатывали 2,2-диметилоксираном (8,0 мкл; 90,1 мкмоль). Колбу плотно закрывали и нагревали до 100°С в течение 2,75 ч. На этом этапе реакционную смесь упаривали досуха. Во флакон снова загружали метанол (500 мкл) и вторую аликвоту 2,2-диметилоксирана (16 мкл). Колбу плотно закрывали и нагревали до 100°С в течение ночи. На этом этапе осуществляли концентрирование реакционной смеси в вакууме. После препаративной хроматографии (препаративная колонка PVA-SIL (3×35) от YMC; скорость потока = 70 мл; длина волны = 220 нм; модификатор - метанол) получали 7-хлор-3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2-гидрокси-2-метил-пропиламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (23,6 мг; 43%) в виде белого твердого вещества (23,6 мг; 43%); ES-HRMS m/e рассчит. для CHClNO [М+Н] 668,2886; обнаружено 668,2877. H ЯМР (300 МГц, DMSO-d) δ млн 8.22 (d, J=8,7 Гц, 1Н), 7.78 (d, J=6,2 Гц, 1Н), 7.62-7.72 (m, 5Н), 7.53-7.59 (m, 2H), 7.47 (dd, J=8,7; 1,8 Гц, 1Н), 7.32 (d, J=8,1 Гц, 2H), 6.71 (d, J=1,8 Гц, 1Н), 4.10 (br. s., 1Н), 3.91 (br. s., 1Н), 3.82 (s, 2H), 3.43 (s, 3H), 2.40 (br. s., 2H), 1.87-2.19 (m, 5Н), 1.61 (d, J=18,3 Гц, 6Н), 1.35 (d, J=12,2 Гц, 2H), 1.07 (s, 6H).
Пример 17
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-Ацетиламино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
+
+
1
-1
36
36
4
5
6
Раствор 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (98,8 мг; 176 мкмоль) в метиленхлориде (5 мл) обрабатывали тризтиламином (124 мкл; 890 мкмоль), ацетилхлоридом (31 мкл; 436 мкмоль) и каталитическим количеством N,N-диметиламинопиридина (на кончике шпателя). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение ночи. На этом этапе после флэш-хроматографии (IntelliFlash 280 от AnaLogix, колонка с 25 г силикагеля; 1%-10% метанол/метиленхлорид) получали 3-[4-((1S,2S,2R,5S,7S)-5-ацетиламино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (79,5 мг; 75%) в виде белого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHNO [M+H] 605,2759; обнаружено 605,2758. H ЯМР (300 МГц, DMSO-d) δ млн 8.68 (dd, J=4,3; 1,6 Гц, 1Н), 8.58 (dd, J=7,9; 1,6 Гц, 1Н), 7.82 (d, J=6,8 Гц, 1Н), 7.69 (d, J=8,2 Гц, 2Н), 7.42-7.59 (m, 6H), 7.36 (br. s., 1Н), 7.34 (d, J=8,2 Гц, 2Н), 3.96 (br. s., 1Н), 3.84 (s, 2Н), 3.43 (s, 3Н), 1.89-2.10 (m, 11H), 1.75 (s, 3H), 1.40 (d, J=12,2 Гц, 2Н).
Пример 18
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-Циклопропансульфониламино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
+
+
1
-1
37
38
4
6
6
Раствор 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (73,0 мг; 130 мкмоль) в метиленхлориде (4,0 мл) обрабатывали триэтиламином (93 мкл; 667 мкмоль), циклопропансульфонилхлоридом (34 мкл; 334 мкмоль) и каталитическим количеством N,N-диметиламинопиридина (на кончике шпателя). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение ночи. На этом этапе добавляли вторую аликвоту циклопропансульфонилхлорида (46,9 мг; 34 мкл; 334 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение ночи. На этом этапе проводили очистку реакционной смеси. После флэш-хроматографии (IntelliFlash 280 от AnaLogix, колонка с 12 г силикагеля; 1% - 10% метанол/метиленхлорид) получали 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-циклопропан-сульфониламино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (39,1 мг; 45,2%) в виде белого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHNOS [M+H] 667,2585; обнаружено 667,2576. H ЯМР (300 МГц, DMSO-d) δ млн 8.68 (dd, J=4,4; 2,0 Гц, 1Н), 8.57 (dd, J=7,9; 2,0 Гц, 1Н), 7.83 (d, J=6,6 Гц, 1Н), 7.69 (d, J=8,3 Гц, 2H), 7.52-7.59 (m, 3H), 7.50 (dd, J=7,9; 4,4 Гц, 1Н), 7.40-7.46 (m, 2H), 7.33 (d, J=8,3 Гц, 2H), 6.87 (s, 1Н), 3.89-3.99 (m, 1Н), 3.84 (s, 2H), 3.44 (s, 3H), 2.53-2.62 (m, 1Н), 1.81-2.16 (m, 11H), 1.38 (d, J=12,1 Гц, 2H), 0.83-1.01 (m, 4H).
Пример 19
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-Метансульфониламино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
+
+
1
-1
35
36
4
6
6
Раствор 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (10,3 мг; 18,3 мкмоль) в метиленхлориде (0,5 мл) обрабатывали триэтиламином (13 мкл; 93,3 мкмоль), метансульфонилхлоридом (1,6 мкл; 20,5 мкмоль) и каталитическим количеством N,N-диметиламинопиридина (на кончике шпателя). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение ночи. На этом этапе после флэш-хроматографии (IntelliFlash 280 от AnaLogix, колонка с 4 г силикагеля; 1% - 10% метанол/метиленхлорид) получали 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-метансульфониламино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (1,6 мг; 14%) в виде белого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHNOS [М+Н] 641,2428; обнаружено 641,2413. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ млн 8.67 (dd, J=4,4; 2,0 Гц, 1Н), 8.57 (dd, J=8,0; 2,0 Гц, 1Н), 7.85 (d, J=6,6 Гц, 1Н), 7.68 (d, J=8,3 Гц, 2Н), 7.51-7.58 (m, 3H), 7.50 (dd, J=8,0; 4,4 Гц, 1Н), 7.42-7.47 (m, 1Н), 7.33 (d, J=8,3 Гц, 2Н), 6.89 (s, 1Н), 3.92 (br. s., 1Н), 3.83 (s, 2Н), 3.43 (s, 3H), 2.94 (s, 3H), 1.83-2.10 (m, 11H), 1.37 (d, J=12,5 Гц, 2Н).
Пример 20
rel-3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2,2-Диметил-пропиониламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
+
+
1
-1
39
42
4
5
6
Раствор 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (18,1 мг; 32,2 мкмоль) в метиленхлориде (1,0 мл) обрабатывали триэтиламином (22,5 мкл, 161 мкмоль), триметилацетилхлоридом (10 мкл; 81,3 мкмоль) и каталитическим количеством N,N-диметиламинопиридина (на кончике шпателя). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 2 сут. На этом этапе после флэш-хроматографии (IntelliFlash 280 от AnaLogix, колонка с 12 г силикагеля; 1% - 10% метанол/метиленхлорид) получали 3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2,2-диметил-пропиониламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир в виде белого твердого вещества (13,8 мг; 66%). ES-HRMS m/e рассчит. для CHNO [M+H] 647,3228; обнаружено 647,3212. H ЯМР (300 МГц, DMSO-d) δ млн 8.67 (dd, J=4,4; 1,9 Гц, 1Н), 8.56 (dd, J=8,0; 1,9 Гц, 1Н), 7.81 (d, J=6,6 Гц, 1Н), 7.68 (d, J=8,3 Гц, 2Н), 7.52-7.57 (m, 3H), 7.49 (dd, J=8,0; 4,4 Гц, 1Н), 7.39-7.46 (m, 2H), 7.33 (d, J=8,3 Гц, 2H), 6.39 (s, 1Н), 3.96 (or. s., 1Н), 3.83 (s, 2H), 3.43 (s, 3H), 1.88-2.12 (m, 11H), 1.39 (d, J=10,9 Гц, 2Н), 1.06 (s, 9H).
Пример 21
rel-3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2-Ацетокси-2-метил-пропиониламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
+
+
1
-1
40
42
4
7
6
Раствор 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-амино-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (102,5 мг; 182 мкмоль) в метиленхлориде (5 мл) обрабатывали триэтиламином (126 мкл, 904 мкмоль), 1-хлор-2-метил-1-оксопропан-2-илацетатом (64 мкл; 447 мкмоль) и каталитическим количеством N,N-диметиламинопиридина (на кончике шпателя). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 18 ч. На этом этапе после флэш-хроматографии (IntelliFlash 280 от AnaLogix, колонка с 25 г силикагеля; 1%-10% метанол/метиленхлорид) получали 3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2-ацетокси-2-метил-пропиониламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (96,2 мг; 76%) в виде белого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHNO [М+H] 691,3126; обнаружено 691,3129. H ЯМР (300 МГц, DMSO-d) δ млн 1.26-1.54 (m, 8H), 1.84-2.15 (m, 14H), 3.39-3.50 (m, 3H), 3.84 (s, 2H), 3.94 (br. s., 1H), 6,69 (s, 1H), 7.33 (d, J=8,48 Гц, 2H), 7.38-7.61 (m, 6H), 7.69 (d, J=8,29 Гц, 2H), 7.82 (d, J=6,40 Гц, 1H), 8.57 (dd, J=7,91; 1.88 Гц, 1H), 8.68 (dd, J=4,43; 1,98 Гц, 1H).
Пример 22
rel-3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2-Гидрокси-2-метил-пропиониламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
+
+
1
38
40
4
6
6
Раствор 3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2-ацетокси-2-метил-пропиониламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (69,7 мг; 101 мкмоль) в метаноле (0,7 мл) обрабатывали карбонатом калия (77,5 мг; 561 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 1 ч. На этом этапе проводили распределение реакционной смеси между 1Н. водным раствором соляной кислоты (25 мл) и метиленхлоридом (25 мл). Слои встряхивали и разделяли. Водный слой повторно экстрагировали метиленхлоридом (25 мл). Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом магния, фильтровали, промывали метиленхлоридом и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (хроматограф IntelliFlash 280 от AnaLogix, колонка с 25 г силикагеля; 1-10% метанол/метиленхлорид) получали 3-{4-[(1S,2S,3R,5S,7S)-5-(2-гидрокси-2-метил-пропиониламино)-адамантан-2-илкарбамоил]-бензил}-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (50,4 мг; 77%) в виде белого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHNO [M+H] 649,3021; обнаружено 649,3020. Н ЯМР (300 МГц, DMSO-d) δ 8.68 (dd, J=1,98; 4,43 Гц, 1Н), 8.57 (dd, J=1,88; 7,91 Гц, 1Н), 7.83 (d, J=6,40 Гц, 1Н), 7.69 (d, J=8,29 Гц, 2Н), 7.47-7.56 (m, 4H), 7.42-7.47 (m, 2Н), 7.33 (d, J=8,48 Гц, 2Н), 6.84 (s, 1Н), 3.97 (br. s., 1Н), 3.84 (s, 2H), 3.39-3.49 (m, 3H), 1.90-2.14 (m, 11H), 1.41 (d, J=11,49 Гц, 2Н), 1.21 (s, 6H).
Пример 23
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-Гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-2-метокси-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
+
+
10
10
4
Смесь 4-формил-3-гидрокси-бензойной кислоты (1 г; 6,01 ммоль) в диметилсульфоксиде (10 мл) при 25°С обрабатывали карбонатом калия (5,1 г; 37,3 ммоль) и метилиодидом (1,3 мл; 20,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 4 ч. На этом этапе реакционную смесь разбавляли водой (100 мл) и затем экстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Органические экстракты промывали водой (2×100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая 4-формил-3-метокси-бензойной кислоты метиловый эфир (830,2 мг; 71,1%) в виде светло-желтого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHO [М+H] 195,0652; обнаружено 195,0652.
+
+
23
20
2
4
Смесь 1-(2-фениламино-пиридин-3-ил)-этанона (833 мг; 3,92 ммоль) в метаноле (16,5 мл) при 25°С обрабатывали 4-формил-3-метокси-бензойной кислоты метиловым эфиром (508 мг; 2,61 ммоль) и метилатом натрия в метаноле (4,37 М; 1,2 мл; 5,23 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 48 ч. На этом этапе реакционную смесь разбавляли водой (100 мл), нейтрализовали 1Н. водным раствором соляной кислоты и экстрагировали метиленхлоридом (3×75 мл). Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (колонка с 40 г диоксида кремния; 10-50% этилацетат/гексаны) получали 3-метокси-4-[(Е)-3-оксо-3-(2-фениламино-пиридин-3-ил)-пропенил]-бензойной кислоты метиловый эфир (880 мг; 86,8%) в виде красного твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHNO [М+Н] 389,1496; обнаружено 389,1494.
Раствор 3-метокси-4-[(Е)-3-оксо-3-(2-фениламино-пиридин-3-ил)-пропенил]-бензойной кислоты метилового эфира (875 мг; 2,25 ммоль) в этилацетате обрабатывали 10%-ным палладием на активированном угле (83 мг). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере газообразного водорода (баллон) в течение 6 ч. На этом этапе реакционную смесь фильтровали через набивку Celite, промывали этилацетатом и концентрировали в вакууме. Данные LCMS показали неполное превращение в желаемый продукт. Из-за проблем с растворимостью остаток растворяли в ацетоне (200 мл) при 25°С и обрабатывали 10%-ным палладием на активированном угле (83 мг). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере газообразного водорода (баллон) в течение 2 сут. На этом этапе реакционную смесь фильтровали через набивку Celite, энергично промывали ацетоном и концентрировали в вакууме. Данные LCMS по-прежнему показали неполное превращение в желаемый продукт. Остаток растворяли в метиленхлориде (150 мл) при 25°С и обрабатывали 10%-ным палладием на активированном угле (83 мг). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере газообразного водорода (баллон) в течение 4 сут. На этом этапе реакционную смесь фильтровали через набивку Celite, промывали метиленхлоридом (2×50 мл) и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (колонка с 40 г диоксида кремния; 10-25% этилацетат/гексаны) получали 3-метокси-4-[3-оксо-3-(2-фениламино-пиридин-3-ил)-пропил]-бензойной кислоты метиловый эфир (313,4 мг; 35,6%) в виде желтого твердого вещества.
Раствор 3-метокси-4-[3-оксо-3-(2-фениламино-пиридин-3-ил)-пропил]-бензойной кислоты метилового эфира (139,6 мг; 358 мкмоль) в толуоле (7,15 мл) обрабатывали метилоксалилхлоридом (52,6 мг; 39,6 мкл; 429 мкмоль). Реакционную смесь нагревали до 130°С в течение 4 ч. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 25°С и концентрировали в вакууме, получая 3-метокси-4-{3-[2-(метоксиоксалил-фенил-амино)-пиридин-3-ил]-3-оксо-пропил}-бензойной кислоты метиловый эфир в виде коричневого масла. Остаток использовали без дополнительной очистки.
Раствор 3-метокси-4-{3-[2-(метоксиоксалил-фенил-амино)-пиридин-3-ил]-3-оксо-пропил}-бензойной кислоты метилового эфира (171 мг; 358 мкмоль) в метаноле (3,58 мл) обрабатывали карбонатом калия (495 мг; 3,58 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 85°С в течение 2 ч. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 25°С и разбавляли водой (50 мл). Раствор экстрагировали метиленхлоридом (1×75 мл). Органические экстракты сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая 3-(2-метокси-4-метоксикарбонил-бензил)-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир в виде желтого твердого вещества (162,7 мг). Затем водный слой подкисляли 1Н. водным раствором соляной кислоты и после этого экстрагировали 10%-ным раствором метанола в метиленхлориде (3×75 мл). Эти органические экстракты сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая неочищенный 3-(4-карбокси-2-метокси-бензил)-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир в виде желтого твердого вещества (88,1 мг; 55,4%). Это вещество использовали без дополнительной очистки.
+
+
1
-1
35
35
3
6
6
Раствор 3-(4-карбокси-2-метокси-бензил)-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (27,6 мг; 62,1 мкмоль), (1S,3R,4S,5S,7S)-4-амино-адамантан-1-ола гидрохлорида (см. WO 2007/107470 А2; 10,4 мг; 62,1 мкмоль), 1-[3-диметиламино]пропил]-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (19,0 мг; 99,4 мкмоль) и 1-гидроксибензотриазола (13,4 мг; 99,4 мкмоль) в метиленхлориде (0,62 мл) обрабатывали N,N-диизопропилэтиламином (80,3 мг; 108 мкл; 621 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 18 ч. На этом этапе реакционную смесь разбавляли метиленхлоридом (50 мл) и промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (1×100 мл) и насыщенным раствором бикарбоната натрия (1×100 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (12 г; 1-10% метанол/метиленхлорид) получали 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-2-метокси-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир в виде светло-желтого твердого вещества (15,5 мг; 42%). ES-HRMS m/e рассчит. для CHNO [M+H] 594,2599; обнаружено 594,2591. H ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ млн 8.69 (dd, J=4,5; 1,7 Гц, 1Н), 8.57 (dd, J=7,8; 1,7 Гц, 1Н), 7.77 (d, J=6,5 Гц, 1Н), 7.48-7.57 (m, 5H), 7.43-7.48 (m, 2H), 7.29 (d, J=1,2 Гц, 1Н), 7.27 (dd, J=8,0; 1,2 Гц, 1Н), 7.09 (d, J=8,0 Гц, 1Н), 4.41 (s, 1Н), 3.87 (s, 3H), 3.82-3.95 (m, 1Н), 3.78 (s, 2H), 3.35 (s, 3H), 2.09 (br. s., 2H), 1.92-2.02 (m, 3H), 1.68-1.75 (m, 2H), 1.57-1.66 (m, 4H), 1.33 (d, J=12,6 Гц, 2Н).
Пример 24
rel-3-[2-Фтор-4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
+
+
1
-1
9
9
2
6
Раствор 3-фтор-4-метил-бензойной кислоты (2,5 г; 16,2 ммоль) в ацетоне (27,0 мл) обрабатывали карбонатом калия (5,83 г; 42,2 ммоль) и диметилсульфатом (6,14 г; 4,6 мл; 48,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 24 ч и затем нагревали до 90°С в течение 8 ч. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 25°С и перемешивали при 25°С в течение 6 суток. На этом этапе реакционную смесь фильтровали, используя воронку с фильтром из пористого стекла. Осадок карбоната калия на фильтре тщательно промывали ацетоном. Фильтрат концентрировали в вакууме. Затем остаток переносили в этилацетат (30 мл) и триэтиламин (7 мл) и перемешивали при 25°С в течение 30 мин. После этого раствор переносили в делительную воронку, промывали водой (1×75 мл), 2 н. водным раствором соляной кислоты (1×75 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (1×75 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая 3-фтор-4-метил-бензойной кислоты метиловый эфир (2,26 г; 82,9%) в виде светло-желтого масла. ES-HRMS m/e рассчит. для CHOF [M+H] 169,0660; обнаружено 169,0659. H ЯМР (300 МГц, DMSO-d) δ млн 7.70 (dd, J=7,8; 1,5 Гц, 1Н), 7.62 (dd, J=10,3; 1,5 Гц, 1Н), 7.46 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 3.85 (s, 3Н), 2.31 (d, J=1,5 Гц, 3Н).
Раствор 3-фтор-4-метил-бензойной кислоты метилового эфира (2,26 г; 13,4 ммоль) в четыреххлористом углероде (168 мл) обрабатывали N-бромсукцинимидом (6,7 г; 37,6 ммоль) и 2,2’-азобис(2-метилпропионитрилом) (110 мг; 99,4 мкл; 672 мкмоль). Реакционную смесь нагревали до температуры дефлегмации при 100°С в течение 20 ч. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 25°С и затем концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в этилацетате (100 мл), затем промывали водой (1×150 мл), насыщенным водным раствором бисульфита натрия (1×150 мл) и насыщенным раствором хлорида натрия (1×150 мл). Органические экстракты сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в ацетоне (80 мл) и воде (18 мл) (0,14 М; 5:1) и обрабатывали нитратом серебра (6,39 г; 37,6 ммоль). Колбу закрывали оловянной фольгой и верхний свет (hood light) выключали. Реакционную смесь перемешивали в этих условиях в течение 24 ч. На этом этапе реакционную смесь фильтровали с использованием воронки с фильтром из крупнопористого стекла. Фильтрат концентрировали в вакууме. Полученный раствор переносили в делительную воронку, разбавляли метиленхлоридом (100 мл) и обрабатывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (1×100 мл). При добавлении насыщенного водного раствора бикарбоната натрия образовывался белый осадок. Этот осадок удаляли фильтрацией с использованием воронки с фильтром из крупнопористого стекла и промывали метиленхлоридом (20 мл). Фильтрат переносили в другую делительную воронку, промывали водой (1×100 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (1×100 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (40 г; 5-15% этилацетат/гексаны) получали смесь (~1:1) 3-фтор-4-формил-бензойной кислоты метилового эфира и 4-бромметил-3-фтор-бензойной кислоты метилового эфира (1,56 г) в виде бесцветного масла. Это вещество использовали без дополнительной очистки.
Смесь 1-(2-фениламино-пиридин-3-ил)-этанона (700 мг; 3,3 ммоль) в метаноле (16,5 мл) при 25°С обрабатывали 3-фтор-4-формил-бензойной кислоты метиловым эфиром (601 мг; 3,3 ммоль; из расчета на 50%-ную смесь) и метилатом натрия в метаноле (4,37 М; 1,51 мл; 6,6 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 48 ч. На этом этапе реакционную смесь разбавляли водой (50 мл), нейтрализовали 2 н. водным раствором соляной кислоты и экстрагировали метиленхлоридом (3×75 мл). Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом натрия и фильтровали. К фильтрату добавляли силикагель, концентрировали в вакууме и сушили под высоким вакуумом. После флэш-хроматографии (колонка с 40 г диоксида кремния; 1% метанол/метиленхлорид) получали 3-фтор-4-[(Е)-3-оксо-3-(2-фениламино-пиридин-3-ил)-пропенил]-бензойной кислоты метиловый эфир (1 г; 80,6%) в виде красного твердого вещества.
Раствор 3-фтор-4-[(Е)-3-оксо-3-(2-фениламино-пиридин-3-ил)-пропенил]-бензойной кислоты метилового эфира (890 мг; 2,36 ммоль) в метаноле (59,1 мл) и этилацетате (59,1 мл) при 25°С обрабатывали оксидом платины(IV) (26,8 мг; 118 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере газообразного водорода (баллон) в течение 18 ч. На этом этапе реакционную смесь фильтровали через набивку Celite и промывали 10-ным раствором метанола в метиленхлориде (3×75 мл). Фильтрат концентрировали в вакууме, получая 3-фтор-4-[3-оксо-3-(2-фениламино-пиридин-3-ил)-пропил]-бензойной кислоты метиловый эфир (860 мг; 96,2%) в виде темно-зеленого твердого вещества. Это вещество использовали без дополнительной очистки.
Раствор 3-фтор-4-[3-оксо-3-(2-фениламино-пиридин-3-ил)-пропил]-бензойной кислоты метилового эфира (860,8 мг; 2,27 ммоль) в толуоле (45,5 мл) обрабатывали метилоксалилхлоридом (1,39 г; 1,05 мл; 11,4 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 130°С в течение 5 ч. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 25°С и концентрировали в вакууме, получая 3-фтор-4-{3-[2-(метоксиоксалил-фенил-амино)-пиридин-3-ил]-3-оксо-пропил}-бензойной кислоты метиловый эфир. Остаток использовали без дополнительной очистки.
Раствор 3-фтор-4-{3-[2-(метоксиоксалил-фенил-амино)-пиридин-3-ил]-3-оксо-пропил}-бензойной кислоты метилового эфира (1,05 г; 2,27 ммоль) в метаноле (22,7 мл) обрабатывали карбонатом калия (3,14 г; 22,7 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 85°С в течение 3 ч. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 25°С и разбавляли водой (100 мл). Раствор экстрагировали метиленхлоридом (2×100 мл). Затем водный слой подкисляли 3 н. водным раствором соляной кислоты и после этого экстрагировали 10-ным раствором метанола в метиленхлориде (3×75 мл). Эти органические экстракты сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая неочищенный 3-(4-карбокси-2-фтор-бензил)-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир в виде светло-желтого твердого вещества (520 мг; 53%). Это вещество использовали без дополнительной очистки.
+
+
1
-1
34
32
3
5
6
Раствор 3-(4-карбокси-2-фтор-бензил)-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (150 мг; 347 мкмоль), (1S,3R,4S,5S,7S)-4-амино-адамантан-1-ола гидрохлорида (см. WO 2007/107470 А2; 70,7 мг; 347 мкмоль), 1-[3-диметиламино]пропил]-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (107 мг; 555 мкмоль) и 1-гидроксибензотриазола (76,5 мг; 555 мкмоль) в метиленхлориде (3,47 мл) обрабатывали N,N-диизопропилэтил-амином (453 мг; 612 мкл; 3,47 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 2 сут. На этом этапе реакционную смесь разбавляли метиленхлоридом (50 мл), промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (1×100 мл) и насыщенным раствором бикарбоната натрия (1×100 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (24 г; 1-10% метанол/метиленхлорид) получали 3-[2-фтор-4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир в виде беловатого твердого вещества (113,7 мг; 56,4%). ES-HRMS m/e рассчит. для CHFNO [М+H] 582,2399; обнаружено 582,2387. H ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ млн 8.69 (dd, J=4,5; 2,0 Гц, 1Н), 8.58 (dd, J=8,1; 2,0 Гц, 1Н), 7.88 (d, J=6,5 Гц, 1Н), 7.60 (dd, J=10,6; 1,5 Гц, 1Н), 7.50-7.57 (m, 5H), 7.44-7.49 (m, 2H), 7.31 (t, J=7,8 Гц, 1Н), 4.41 (s, 1Н), 3.87-3.96 (m, 1Н), 3.86 (s, 2H), 3.39 (s, 3H), 2.07 (br. s., 2H). 1.97 (d, J=16,1 Гц, 3H), 1.66-1.78 (m,2H), 1.55-1.66 (m,4H), 1.32 (d, J=12,1 Гц, 2H).
Пример 25
rel-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-Гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-7-трифторметил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
Раствор 2-хлор-6-трифторметил-никотиновой кислоты (5 г; 22,2 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл), охлажденный до -78°С, обрабатывали бис(триметилсилил)амидом лития (1,0 М раствором в тетрагидрофуране; 66,5 мл; 66,5 ммоль). Этот раствор перемешивали при -78°С в течение 2 ч. На этом этапе проводили обработку реакционной смеси раствором анилина (19,6 г; 19,2 мл; 210 ммоль) в тетрагидрофуране (20 мл). Реакционную смесь оставляли постепенно нагреваться до 25°С и перемешивали при 25°С в течение ночи. На этом этапе реакционную смесь разбавляли этилацетатом (250 мл), промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (2×150 мл), водой (1×50 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (1×50 мл). Органические слои сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток растирали в эфире, получая 2-фениламино-6-трифторметил-никотиновую кислоту (6,19 г; 96,9%) в виде светло-коричневого твердого вещества.
Раствор 2-фениламино-6-трифторметил-никотиновой кислоты (6,2 г; 22,0 ммоль), N,О-диметилгидроксиламина гидрохлорида (2,79 г; 28,6 ммоль) и 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония гексафторфосфата (13,3 г; 35,2 ммоль) в N,N-диметилформамиде (120 мл) обрабатывали N,N-диизопропил-этиламином (8,88 г; 12 мл; 68,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 4 ч. На этом этапе реакционную смесь разбавляли метиленхлоридом (400 мл), промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (1×300 мл), насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (1×300 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (1×200 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (колонка с 250 г диоксида кремния; 10-35% этилацетат/гексаны) получали N-метокси-N-метил-2-фениламино-6-трифторметил-никотинамид (6,86 г; 96%) в виде коричневого масла, которое после растирания с эфиром превращалось в коричневое твердое вещество.
Раствор N-метокси-N-метил-2-фениламино-6-трифторметил-никотинамида (5,10 г; 15,7 ммоль) в тетрагидрофуране (100 мл), охлажденный до 0°С, обрабатывали 3М раствором хлорида метилмагния (15,7 мл; 47,0 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 90 мин. На этом этапе реакционную смесь нагревали до 25°С и гасили водой (150 мл). Затем реакционную смесь распределяли между этилацетатом (250 мл) и водой (250 мл). Водный слой повторно экстрагировали этилацетатом (2×150 мл). Объединенные органические экстракты промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл), фильтровали, промывали этилацетатом и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (20%-40% этилацетат/гексаны) получали 1-(2-фениламино-6-трифторметил-пиридин-3-ил)-этанон (4,28 г; 97,4%) в виде желтого твердого вещества.
Смесь 1-(2-фениламино-6-трифторметил-пиридин-3-ил)-этанона (4,28 г; 15,3 ммоль) в метаноле (60,4 мл) при 25°С обрабатывали метил-4-формилбензоатом (3,01 г; 18,3 ммоль) и метилатом натрия в метаноле (25 масс.%, 6,99 мл; 30,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 2 сут. На этом этапе реакционную смесь разбавляли водой (50 мл), нейтрализовали 2 н. водным раствором соляной кислоты и экстрагировали метиленхлоридом (3×75 мл). Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом натрия и фильтровали. К фильтрату добавляли силикагель, концентрировали в вакууме и сушили под высоким вакуумом. После флэш-хроматографии (колонка с 40 г диоксида кремния; 10-100% этилацетат/гексаны) получали 4-[(Е)-3-оксо-3-(2-фениламино-6-трифторметил-пиридин-3-ил)-пропенил]-бензойной кислоты метиловый эфир (4,04 г; 62%) в виде оранжевого твердого вещества.
Раствор 4-[(Е)-3-оксо-3-(2-фениламино-6-трифторметил-пиридин-3-ил)-пропенил]-бензойной кислоты метилового эфиа (4,02 г; 9,43 ммоль) в ацетоне (150 мл) при 25°С обрабатывали 10%-ным палладием на активированном угле (402 мг; 3,78 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере газообразного водорода (баллон) в течение 18 ч. На этом этапе реакционную смесь фильтровали через набивку Celite и промывали 10-ным раствором метанола в метиленхлориде (3×75 мл). Фильтрат концентрировали в вакууме, получая 4-[3-оксо-3-(2-фениламино-6-трифторметил-пиридин-3-ил)-пропил]-бензойной кислоты метиловый эфир (2,64 г; 65,4%) в виде желтого твердого вещества. Это вещество использовали без дополнительной очистки.
Раствор 4-[3-оксо-3-(2-фениламино-6-трифторметил-пиридин-3-ил)-пропил]-бензойной кислоты метилового эфира (101 мг; 236 мкмоль) в толуоле (4,72 мл) обрабатывали метилоксалилхлоридом (289 мг; 218 мкл; 2,36 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 130°С в течение 2 сут. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 25°С и концентрировали в вакууме, получая 4-{3-[2-(метоксиоксалил-фенил-амино)-6-трифторметил-пиридин-3-ил]-3-оксо-пропил}-бензойной кислоты метиловый эфир (121 мг). Остаток использовали без дополнительной очистки.
Раствор 4-{3-[2-(метоксиоксалил-фенил-амино)-6-трифторметил-пиридин-3-ил]-3-оксо-пропил}-бензойной кислоты метилового эфира (121 мг; 236 мкмоль) в метаноле (2,36 мл) обрабатывали карбонатом калия (326 мг; 2,36 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 85°С в течение 2 ч. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 25°С и разбавляли водой (50 мл). Раствор экстрагировали метиленхлоридом (1×30 мл). Водный слой затем нейтрализовали 1Н. водным раствором соляной кислоты и затем экстрагировали 10-ным раствором метанола в метиленхлориде (3×50 мл). Органические экстракты сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая неочищенный 3-(4-карбокси-бензил)-4-оксо-1-фенил-7-трифторметил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир в виде желтого твердого вещества (20 мг; 17,6%). Это вещество использовали без дополнительной очистки.
+
+
1
-1
35
32
3
3
5
6
Раствор 3-(4-карбокси-бензил)-4-оксо-1-фенил-7-трифторметил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (51,2 мг; 106 мкмоль), (1S,3R,5S,7S)-4-амино-адамантан-1-ола гидрохлорида (см. WO 2007/107470 А2; 19,5 мг; 95,7 мкмоль) и бис(2-оксо-3-оксазолидинил)фосфиновой кислоты хлорида (40,5 мг; 159 мкмоль) в N,N-диметилформамиде (531 мкл) обрабатывали N,N-диизопропилэтиламином (41,2 мг; 55,5 мкп; 318 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 2 сут. На этом этапе реакционную смесь разбавляли метиленхлоридом (50 мл), промывали насыщенным водным раствором хлорида аммония (1×50 мл) и насыщенным раствором бикарбоната натрия (1×50 мл), сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (12 г; 20-100% этилацетат/гексаны) получали 3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-бензил]-4-оксо-1-фенил-7-трифторметил-1,4-дигидро-[1,8]нафтиридин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (11,3 мг; 16,9%) в виде светло-желтого твердого вещества. ES-HRMS m/e рассчит. для CHFNO [M+H] 632,2367; обнаружено 632,2366. H ЯМР (300 МГц, DMSO-d) δ млн 8.82 (d, J=7,8 Гц, 1Н), 7.93 (d, J=8,2 Гц, 1Н), 7.80 (d, J=6,6 Гц, 1Н), 7.69 (d, J=8,5 Гц, 2Н), 7.52-7.60 (m, 3Н), 7.44-7.53 (m, 2H), 7.34 (d, J=8,5 Гц, 2H), 4.42 (s, 1H), 3.90 (br. s., 1H), 3.86 (s, 2H), 3.45 (s, 3Н), 1.91-2.12 (m, 4H), 1.54-1.77 (m, 6H), 1.20-1.39 (m, 3Н).
Пример 26
rel-7-Хлор-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-2-оксо-2Н-пиридин-1-илметил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир
Раствор 2-бром-4-хлорбензойной кислоты (25,0 г; 106,0 ммоль) в 2-этокси-этаноле (40 мл) обрабатывали порошком меди (0,74 г; 11,6 ммоль), оксидом меди(1) (0,76 г; 5,3 ммоль) и карбонатом калия (15,8 г; 114,0 ммоль) при 25°С в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 5 мин. На этом этапе проводили обработку реакционной смеси анилином (11,2 мл; 124 ммоль) и затем нагревали при 135°С в течение 48 ч. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 25°С, разбавляли водой (30 мл) и подкисляли 1Н. водным раствором соляной кислоты. Полученную смесь перемешивали при 25°С в течение ночи. На этом этапе полученный осадок собирали фильтрацией с использованием воронки с фильтром из пористого стекла. Твердые вещества промывали избыточным количеством воды (2×100 мл) и затем сушили под высоким вакуумом, получая 4-хлор-2-фениламино-бензойную кислоту (19 г; 72,3%) в виде коричневого твердого вещества. Это вещество использовали без дополнительной очистки.
1
-1
+
+
6
15
15
2
2
2
6
Раствор 4-хлор-2-фениламино-бензойной кислоты (10,1 г; 41,0 ммоль) в N,N-диметилформамиде (200 мл) при 25°С обрабатывали O-бензотриазол-N,N,N',N'-тетраметилурония гексафторфосфатом (31,2 г; 82,0 ммоль), N,O-диметилгидроксиламина гидрохлоридом (7,94 г; 82,0 ммоль) и N,N-диизопропил-этиламином (45,0 г; 350 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 25°С в течение 24 ч. На этом этапе реакционную смесь разбавляли этилацетатом (600 мл), промывали водой (4×200 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (1×200 мл). Органические слои сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (силикагель, 100-200 меш, этилацетат/гексаны: 10-25%) получали 4-хлор-N-метокси-N-метил-2-фениламино-бензамид (6,62 г; 56,4%) в виде желтого твердого вещества. H ЯМР (DMSO-d) 5 млн 7.93 (s, 1H), 7.20-7.39 (m, 3H), 7.02-7.17 (m, 3Н), 6.88-6.99 (m, 2H), 3.50 (s, 3H), 3.20 (s, 3H); MS m/e рассчит. для CHClNO [(M+H)] 291,0; обнаружено 291,0; [(M-CHNO)] 230,0; обнаружено 230,0.
1
-1
6
Раствор 4-хлор-N-метокси-N-метил-2-фениламино-бензамида (5,0 г; 17,2 ммоль) в тетрагидрофуране (60 мл) обрабатывали по каплям бромидом этилмагния (1 М раствором в тетрагидрофуране; 70 мл; 70 ммоль). По завершении добавления смесь оставляли медленно нагреваться до 25°С и перемешивали при этой температуре в течение 2 ч. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 0°С, гасили 1Н. водным раствором соляной кислоты (50 мл) и затем экстрагировали этилацетатом (2×300 мл). Объединенные органические экстракты промывали водой (100 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. После флэш-хроматографии (силикагель; 100-200 меш, этилацетат/гексаны: 10-25%) получали 1-(4-хлор-2-фениламино-фенил)-пропан-1-он (4,15 г; 92,9%) в виде желтого масла. H ЯМР (DMSO-d) δ млн 10.53 (s, 1H), 8.00 (d, J=8,7 Гц, 1H), 7.34-7.51 (m, 2H), 7.28 (d, J=7,7 Гц, 2H), 7.13-7.23 (m, 1Н), 7.07 (d, J=1,8 Гц, 1Н), 6.82 (dd, J=8,6; 1,9 Гц, 1Н), 3.07 (q, J=7,2 Гц, 2H), 1.09 (t, J=7,3 Гц, 3H).
Раствор 1-(4-хлор-2-фениламино-фенил)-пропан-1-она (13,0 г; 50,2 ммоль) в толуоле (150 мл) при 25°С обрабатывали метилхлороксоацетатом (42,86 г; 350 ммоль). Затем реакционную смесь нагревали при 110°С в течение 16 ч. На этом этапе реакционную смесь концентрировали в вакууме, получая N-(5-хлор-2-пропионил-фенил)-N-фенил-оксаламовой кислоты метиловый эфир (15,2 г; 87,6%). Это вещество использовали без дополнительной очистки.
1
-1
+
6
18
14
3
Перемешиваемую суспензию N-(5-хлор-2-пропионил-фенил)-N-фенил-оксаламовой кислоты метилового эфира (15,0 г; 43,5 ммоль) в метаноле (200 мл) обрабатывали карбонатом калия (35,0 г; 253 ммоль) при 25°С. Затем смесь нагревали при 80°С в течение 1 ч. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 25°С. Полученные твердые вещества собирали фильтрацией с использованием воронки с фильтром из пористого стекла и затем промывали метанолом (2×50 мл). Фильтрат концентрировали в вакууме. Полученный остаток растворяли в этилацетате (500 мл) и промывали водой (2×200 мл). Органические экстракты сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Полученные твердые вещества растирали с гексанами и диэтиловым эфиром, получая 7-хлор-3-метил-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (10,5 г; 73,4%). H ЯМР (DMSO-d) δ млн 8.24 (d, J=8,7 Гц, 1Н), 7.28-7.78 (m, 6H), 6.69 (d, J=1,7 Гц, 1Н), 3.49 (s, 3Н), 1.97 (s, 3H); MS m/e рассчит. для CHClNO [(M+H)] 328,0; обнаружено 327,9.
Раствор 7-хлор-3-метил-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (1,6 г; 4,88 ммоль), N-бромсукцинимида (869 мг; 4,88 ммоль) и перекиси бензоила (118 мг; 488 мкмоль) в четыреххлористом углероде (50 мл) нагревали при 100°С в течение 5 ч. На этом этапе реакционную смесь охлаждали до 25°С. Полученные твердые вещества собирали фильтрацией, получая 3-бромметил-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (1,7 г; 85,6%) в виде белого твердого вещества. Это вещество использовали без дополнительной очистки.
25
19
2
6
+
Раствор 3-бромметил-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (550 мг; 1,35 ммоль), метил-2-гидрокси-изоникотината (290 мг; 1,89 ммоль) и карбоната калия (280 мг; 2,03 ммоль) в N,N-диметилформамиде (15 мл) перемешивали при 25°С в течение ночи. На этом этапе осуществляли концентрирование реакционной смеси в вакууме. После флэш-хроматографии (колонка ISCO, 40% этилацетат/гексаны) получали 7-хлор-3-(4-метоксикарбонил-2-оксо-2Н-пиридин-1-илметил)-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (300 мг, 46%) в виде белого твердого вещества. MS m/e рассчит. для CHClNO [(M+H)] 479,0; обнаружено 479,0.
Раствор 7-хлор-3-(4-метоксикарбонил-2-оксо-2H-пиридин-1-илметил)-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (0,22 г; 459 мкмоль) в тетрагидрофуране (10 мл) при 25°С обрабатывали 1Н. водным раствором гидроксида натрия (0,7 мл; 459 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 2 ч. На этом этапе реакционную смесь подкисляли 1 н. водным раствором соляной кислоты и затем концентрировали в вакууме, получая 3-(4-карбокси-2-оксо-2Н-пиридин-1-илметил)-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир. Это вещество использовали без дополнительной очистки.
1
-1
+
6
34
32
3
6
Раствор 3-(4-карбокси-2-оксо-2Н-пиридин-1-илметил)-7-хлор-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метилового эфира (80 мг; 172 мкмоль), (1S,3R,4S,5S,7S)-4-амино-адамантан-1-ола гидрохлорида (см. WO 2007/107470 А2; 34,8 мг; 172 мкмоль) и бром-трис-пирролидинофосфония гексафторфосфата (120 мг; 258 мкмоль) в метиленхлориде (10 мл) при 25°С обрабатывали N,N-диизопропилэтиламином (120 мкл, 688 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при 25°С в течение 24 ч. На этом этапе осуществляли концентрирование реакционной смеси в вакууме. После флэш-хроматографии (12 г; 40-100% этилацетат/гексаны) получали 7-хлор-3-[4-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-илкарбамоил)-2-оксо-2Н-пиридин-1-илметил]-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир (32 мг, 30%) в виде светло-коричневого твердого вещества. H ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ млн1.30 (d, J=12,55 Гц, 2Н), 1.52-1.75 (m, 6H), 1.85-2.11 (m, 5H), 2.53 (s, 2H), 3.43 (s, 3Н), 3.86 (br. s., 1H), 4.41 (s, 1H), 5.00 (s, 2H), 6.41 (dd, J=7,15; 1,88 Гц, 1Н), 6.73 (dd, J=12,17; 1,88 Гц, 2H), 7.45-7.62 (m, 3Н), 7.63-7.72 (m, 3Н), 7.86 (d, J=7,28 Гц, 1H), 8.08 (d, J=6,53 Гц, 1H), 8.26 (d, J=8,78 Гц, 1H); MS m/e рассчит. для CHClNO [(М+)] 614,0; обнаружено 614,0.
Пример 27
rel-4-(7-Хлор-2-оксазол-2-ил-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-3-ил)-N-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-ил)-бензамид
2
2
В круглодонной колбе емкостью 250 мл объединяли оксазол-2-карбоновую кислоту (полученную от Princeton Biomolecular Research; 0,30 г; 2,6 ммоль) и N,N-диметилформамид (50 мкл) с CHCl (6 мл), получая белую суспензию. По каплям добавляли оксалилхлорид (0,8 мл; 9,3 ммоль), затем реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. По истечении этого времени реакционная смесь становилась слегка желтой гомогенной смесью. Реакционную смесь концентрировали на роторном испарителе, далее неочищенный оксазол-2-карбонилхлорид использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.
4
Отдельно в круглодонной колбе емкостью 100 мл проводили объединение метил-4-(3-(4-хлор-2-(фениламино)фенил)-3-оксопропил)бензоата (898 мг; 2,28 ммоль) с THF с получением желтого раствора. Добавляли 1,0 М раствор NaHMDS в THF (5,7 мл; 5,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут. К реакционной смеси по каплям добавляли указанную выше гетерогенную смесь оксазол-2-карбонилхлорида, THF (5 мл), DMF (500 мкл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную колбу охлаждали до 0°С, затем реакцию гасили водой. Полученную гетерогенную смесь экстрагировали этилацетатом, органическую фазу сушили над MgSO, фильтровали, затем концентрировали. Неочищенный продукт растворяли в метиленхлориде, затем концентрировали, пропуская через силикагель. Силикагель, в котором содержался неочищенный продукт, загружали на колонку (80 граммов) от Analogix. После флэш-хроматографии (15% EtOAc-гексаны → 55% EtOAc-гексаны) получали 4-(7-хлор-2-оксазол-2-ил-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-3-илметил)-бензойной кислоты метиловый эфир (28 мг; 2,6%) в виде светло-желтого твердого вещества.
Раствор 4-(7-хлор-2-оксазол-2-ил-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-3-илметил)-бензойной кислоты метилового эфира (28 мг; 60 мкмоль) в THF (1 мл) объединяли с водным раствором гидроксида натрия (1 мл; 100 мкмоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакцию гасили 1Н. водным HCl, затем проводили концентрирование до получения твердого вещества. Неочищенную 4-(7-хлор-2-оксазол-2-ил-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-3-илметил)-бензойную кислоту использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
2
2
6
36
33
3
4
1
+
В круглодонной колбе емкостью 20 мл проводили объединение 4-(7-хлор-2-оксазол-2-ил-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-3-илметил)-бензойной кислоты (0,027 г; 59 мкмоль), 1-гидроксибензотриазола (14,5 мг; 94,6 мкмоль), 1-[3-диметил-аминопропил]-3-этилкарбодиимида гидрохлорида (18,1 мг; 94,6 мкмоль) и N,N-диизопропилэтиламина (103 мкл; 590 мкмоль) с CHCl (5 мл). Смесь перемешивали в течение 10 минут, затем добавляли (1S,3R,4S,5S,7S)-4-амино-адамантан-1-ола гидрохлорид (см. WO 2007/107470 А2; 9,9 мг; 59 мкмоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Неочищенную смесь загружали на колонку Isco (40 г диоксида кремния; 1% → 10% метанол/метиленхлорид), получая 4-(7-хлор-2-оксазол-2-ил-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-3-илметил)-N-((1S,2S,3R,5S,7S)-5-гидрокси-адамантан-2-ил)-бензамид (10,5 мг; 28%) в виде белого порошка. H ЯМР (DMSO-d) δ: 8.28 (d, J=8,5 Гц, 1Н), 8.06 (s, 1H), 7.76 (d, J=6,5 Гц, 1Н), 7.63 (d, J=8,0 Гц, 2Н), 7.39-7.54 (m, 6Н), 7.26 (s, 1Н), 7.14 (d, J=8,0 Гц, 2Н), 6.71 (d, J=1,8 Гц, 1Н), 4.41 (s, 1Н), 3.85-3.96 (m, 1Н), 3.72 (s, 2Н), 2.06 (br. s., 2Н), 1.96 (d, J=14,1 Гц, 3Н), 1.65-1.75 (m, 2Н), 1.54-1.64 (m, 4H), 1.31 (d, J=12,0 Гц, 2Н); MS m/e рассчит. для CHClNO [(М+Н)] 606,2; обнаружено 606,3.
Биологические примеры
Анализ JNK1 in vitro
2
3
4
50
Активность JNK1 измеряли по фосфорилированию белка GST-c-Jun (аминокислотные остатки 1-79). Киназная реакционная смесь содержала активную киназу JNK1 (0,2 нМ) и GST-c-Jun (26,7 нМ) в присутствии 2 мкМ АТФ. Реакционный буфер содержал 50 мМ HEPES, рН 7,0; 10 мМ MgCl; 1 мМ DTT; 0,1 мМ NaVO и BSA (0,2 мг/мл). После инкубации в течение 30 мин при комнатной температуре реакцию останавливали, добавляя буфер, содержащий 8 мМ EDTA и поликлональное антитело против фосфо-c-Jun (Cell Signaling; №92611), затем инкубировали в течение еще 30 мин при комнатной температуре. Далее добавляли смесь детектирующих реагентов, содержащую 2 нМ меченное европием козье антикроличье антитело и 20 нМ меченное аллофикоцианином антитело против GST (Columbia Biosciences; № D3-1310). Через 1 ч измеряли сигналы, связанные с резонансным переносом энергии флуоресценции с временным разрешением (TR-FRET), на ридере EnVision (Perkin Elmer). Эффективность соединений оценивали для 10 концентраций, приготовленных посредством серийных разведений. Чтобы получить значение IC для каждого соединения, определяли процент ингибирования для каждой концентрации.
Анализ ингибиторов JNK. основанный на применении клеток
В анализе, основанном на применении клеток, использовали метод ELISA в клетке для определения способности соединений предупреждать образование фосфо(Ser63)-с-jun в клетках НК-2 (клетках проксимальных канальцев человека) в ответ на стимуляцию фактором некроза опухоли α (TNFα). Кратко, для количественного определения фосфо(Ser63)-с-jun проводили фиксацию и пермеабилизацию клеток (в 96-луночном формате), затем их инкубировали последовательно с первым антителом - кроличьим антителом против фосфо-c-jun, специфичным к присутствию эпитопа фосфо-Ser63, и вторым антителом - ослиным антителом против IgG кролика, связанным с пероксидазой хрена (HRP), для колориметрического количественного определения связывания. Для определения неспецифического связывания первого антитела содержимое лунок для холостой пробы предварительно инкубировали с мышиным блокирующим антителом против фосфо(Ser63)-с-jun, которое предотвращало специфическое связывание первого антитела с эпитопом фосфо-Ser63, но которое не распознавалось вторым антителом - ослиным антителом против IgG кролика. Таким образом, остаточный сигнал относился только к неспецифическому связыванию, и его использовали в качестве величины 100%-ного ингибирования (величина для холостой пробы). В лунки для холостой пробы не вносили ни TNFα для стимуляции, ни тестируемого соединения. В дополнительные контрольные лунки вносили TNFα для стимуляции, но не вносили соединение. В этом случае получаемый сигнал принимали за величину 0%-ного ингибирования (контрольная величина).
2
2
50
Исходные культуры клеток НК-2 (АТСС, Manassas, VA) выращивали в атмосфере 5% CO/95% О при 37°С в среде Keratinocyte-SFM (KSFM, Invitrogen, Grand Island, NY), содержащей эпидермальный фактор роста (5 мкг/л) и экстракт гипофиза быка (5 мг/л) (оба поставляются вместе со средой), помимо этого дополненной 10% (об./об.) фетальной телячьей сыворотки (PCS; Invitrogen, Grand Island, NY) и 1% (об./об.) антибиотического-противогрибкового средства (АВАМ: Sigma, St. Louis, МО). Для проведения анализов клетки рассевали в покрытые коллагеном 96-луночные полистироловые планшеты (BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ) при плотности 40000 клеток/лунка и культивировали в течение 24 ч в этой же среде (100 мкл/лунка), затем в течение еще 16-24 ч в 100 мкл аналогичной среды, но без FCS. Эту среду затем заменяли на среду для анализа (100 мкл/лунка) (KSFM, дополненную только АВАМ, как и выше, и 0,2% (масс./об.) бычьего сывороточного альбумина с низким содержанием эндотоксинов (BSA, Sigma, St. Louis, МО). Концентрированные растворы тестируемых соединений в диметилсульфоксиде (DMSO) разбавляли в среде для анализа до желаемых концентраций таким образом, чтобы конечная концентрация DMSO во всех случаях составляла 1% (об./об.). Для определения EC соединение использовали в шести концентрациях (4-кратные разведения). Готовили 1%-ную по DMSO, но без соединения, среду для анализа для лунок с холостой пробой и контрольных лунок. Чтобы инициировать анализ, эту среду заменяли на среду для анализа, содержащую соединение, и культивирование продолжали в течение 60 минут, после чего добавляли 5 мкл раствора TNFα (Sigma, St. Louis, МО) в забуференном фосфатом физиологическом растворе (PBS; Invitrogen, Grand Island, NY), получая конечную концентрацию TNFα 10 нг/мл (за исключением лунок для холостой пробы и контрольных лунок с PBS, в которые добавляли только PBS). Клетки инкубировали в течение еще 30 минут, затем среду отсасывали и лунки промывали PBS (100 мкл/лунка), после чего добавляли 100 мкл 3,7%-ного (об./об.) формальдегида (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ) в PBS. Затем планшеты оставляли стоять при комнатной температуре в течение 20 минут, после чего промывали PBS из расчета 200 мкл/лунка. (Дальнейшие стадии осуществляли незамедлительно или хранили планшеты при 4°С и анализ завершали на следующий день.) В каждую лунку добавляли по 100 мкл 1%-ного (об./об.) раствора тритона Х-100 (Sigma, St. Louis, МО) в PBS, затем отставляли на 20 минут при комнатной температуре, промывали PBS (200 мкл/лунка), добавляли по 100 мкл/лунка буфера для гашения (1%-ная (об./об.) перекись водорода (Sigma, St. Louis, МО) и 0,1%-ный (масс./об.) азид натрия (Fisher Scientific, Fair Lawn, NJ)) в PBS и отставляли еще на 20 минут при комнатной температуре. Затем планшеты дважды промывали 0,1%-ным (об./об.) раствором твина-20 (Teknova, Hollister, СА) в PBS (200 мкл/лунка), после чего добавляли смесь 2% BSA/0,1% твина-20 в PBS (200 мкл/лунка) и отставляли еще на 1 час при комнатной температуре. На этом этапе буфер удаляли из лунок с холостой пробой и заменяли на мышиное антитело против фосфо-с-jun-Ser63 (BD Bioscience, 558036), разведенное 1:4000 в PBS, содержащем 1% BSA/0,1% твина-20 (буфер для разведения антител), из расчета 90 мкл/лунка. Во всех других лунках производили замену на кроличье антитело против фосфо-с-jun-Ser63 (Cell Signaling, 9261), разведенное 1:250 в буфере для разведения антител, из расчета 90 мкл/лунка. Еще через один час непосредственно в раствор в лунках для холостой пробы добавляли кроличье антитело против фосфо-с-jun-Ser63, делая при этом разведение для данного антитела, равное 1:250. Затем планшеты помещали на ночь на медленно вращающуюся платформу при температуре 4°С. Далее лунки трижды промывали смесью PBS/0,1% твина-20 (200 мкл/лунка). По окончании третьей промывки планшеты помещали на медленно вращающуюся платформу на 15 минут при комнатной температуре. После заключительной промывки смесью PBS/твин-20 производили замену ее на раствор (100 мкл/лунка) второго антитела - ослиного антикроличьего HRP-меченного антитела (Jackson ImmunoResearch Laboratory, West Grove, PA), разбавленного 1:10000 в буфере для разведения антител, и планшеты помещали на медленно вращающуюся платформу на 1 час при комнатной температуре. Далее лунки промывали четыре раза смесью PBS/0,1% твина-20 (200 мкл/лунка) с медленным вращением в течение 30 минут во время третьей промывки и в течение 10 минут во время заключительной промывки. Затем лунки промывали один раз 200 мкл PBS без твина-20. После этого в каждую лунку добавляли по 100 мкл раствора ТМВ (Sigma, St. Louis, МО), далее инкубировали при комнатной температуре в течение 8 минут и затем добавляли 3%-ную (об./об.) фосфорную кислоту (100 мкл/лунка) (Sigma, St. Louis, МО). Поглощение определяли при длине волны 450 нм, используя спектрофотометр (Molecular Devices SpectraMax 250).
Анализы in vivo
Пример А. Анализ in vivo ТМРα-индуцируемого Фосфо-c-jun в почках и печени мышей
Самцов мышей C57/BL6 в возрасте 10-12 недель получали из Jackson Labs, и они проходили акклиматизацию в течение по меньшей мере одной недели перед использованием. Мышам (n=8 на одну группу) вводили через пероральный желудочный зонд соединение l-1 (группа 3; 50 мг/кг из препарата в концентрации 12,5 мг/мл в смеси 20% (об./об.) DMSO/80% (об./об.) ПЭГ400) или только разбавитель (группы 1 и 2). Спустя один час мышам вводили внутривенно провокационную пробу рекомбинантного мышиного TNFα (5 мкг/кг; Sigma) в физиологическом растворе (группы 2 и 3) или только физиологический раствор (группа 1). Еще через 1 ч животных умерщвляли посредством ингаляции углекислого газа. Почки и печени извлекали, быстро замораживали в жидком азоте и хранили при -80 градусах до проведения анализа.
В случае анализа почек добавляли целые замороженные органы к денатурирующему буферу для электрофореза (1×LDS-содержащему буферу для образцов (Invitrogen)), дополненному 1×восстанавливающим агентом для образцов (Invitrogen) и 25 мМ пирофосфатом натрия (Sigma), при комнатной температуре и гомогенизировали в течение приблизительно 5 секунд, используя политрон Tissumizer. Аликвоты подвергали SDS-PAGE общепринятым способом. Идентификацию фосфо-c-jun осуществляли, используя первичное антитело - кроличье антитело против фосфо-(Ser63)-с-jun (Epitomics) и вторичное козье антикроличье антитело, имеющее флуоресцентную метку (LI-COR). Выполняли количественное определение интенсивности полос, используя сканер LI-COR Odyssey и программное обеспечение LI-COR.
В случае анализа образцов печени гомогенизировали кусочки замороженной ткани (100-200 мг) в лизирующем буфере (Cell Signaling Technology), дополненном коктейлем-1 ингибиторов фосфатаз (Sigma), коктейлем-2 ингибиторов фосфатаз (Sigma), коктейлем ингибиторов протеаз (Sigma) в количестве 1% (об./об.) каждый и 1 мМ AEBSF (Sigma). Количественное определение содержания фосфо-(Ser63)-с-jun выполняли, используя набор Ikz ELISA (Cell Signaling Technology).
Результаты, отнесенные к показанной в группе 2 величине, принятой за 100%, представлены ниже в Таблице III.
Пример В. Анализ in vivo ТМРα-индуцируемого фосфо-c-jun в почках и печени мышей
Экспериментальные методики были идентичны примеру А, но использовали 7-хлор-3-(4-метансульфонил-бензил)-4-оксо-1-фенил-1,4-дигидро-хинолин-2-карбоновой кислоты метиловый эфир. Никакого значительного влияния этого соединения на уровни фосфо-(Ser63)-с-jun в образцах печени или почек мышей обнаружено не было.
Пример С. Анализ in vivo ТМРα-индуцируемого Фосфо-c-jun в почках крыс Самцов крыс Sprague-Dawley в возрасте 6-8 недель получали от Charles River, и они проходили акклиматизацию в течение по меньшей мере одной недели перед использованием. Крысам (n=8 на одну группу) вводили через пероральный желудочный зонд соединение I-1 (группа 3; 75 мг/кг, из изготовленной микроосаждением нерасфасованной порошковой композиции, ресуспендированной в разбавителе клуцеле в концентрации 18,75 мг/мл) или только разбавитель (группы 1 и 2). Спустя семь часов крысам вводили внутривенно провокационную пробу рекомбинантного крысиного TNFα (2,5 мкг/кг; Sigma) в физиологическом растворе (группы 2 и 3) или только физиологический раствор (группа 1). Еще через 1 ч животных умерщвляли посредством ингаляции углекислого газа. Почки извлекали, быстро замораживали в жидком азоте и хранили при -80 градусах до проведения анализа.
Анализ образцов проводили, как описано для почек мышей в примере А.
Результаты, отнесенные к показанной в группе 2 величине, принятой за 100%, приведены ниже в Таблице IV.
Пример D. Анализ in vivo ТМРα-индуцируемого фосфо-c-jun в почках крыс
Самцов крыс Sprague-Dawley в возрасте 6-8 недель получали от Charles River, и они проходили акклиматизацию в течение по меньшей мере одной недели перед использованием. Крысам (n=8 на одну группу) вводили через пероральный желудочный зонд соединение I-1 (группы 3 и 4; 75 мг/кг, из изготовленной микроосаждением нерасфасованной порошковой композиции, ресуспендированной в разбавителе клуцеле в концентрации 18,75 мг/мл) или только разбавитель (группы 1 и 2). Группа 3 получала дополнительную идентичную дозу спустя 12 часов. Группа 4 получала дополнительную идентичную дозу через 8 и 16 часов после первой дозы. Через двадцать три часа после первоначального введения крысам вводили внутривенно провокационную пробу рекомбинантного крысиного TNFα (2,5 мкг/кг; Sigma) в физиологическом растворе (группы 2, 3 и 4) или только физиологический раствор (группа 1). Еще через 1 ч животных умерщвляли посредством ингаляции углекислого газа. Почки извлекали, быстро замораживали в жидком азоте и хранили при -80 градусах до проведения анализа.
Анализ образцов проводили, как описано для почек мышей в примере А.
Результаты, отнесенные к показанной в группе 2 величине, принятой за 100%, приведены ниже в Таблице V.
Несмотря на то, что настоящее изобретение описано со ссылкой на конкретные его воплощения, специалистам в данной области техники следует понимать, что могут быть внесены различные изменения и могут быть сделаны замены на эквиваленты без отклонения от истинной сущности и объема изобретения. Помимо этого могут быть сделаны многочисленные модификации с целью адаптации конкретной ситуации, вещества, композиции объекта (изобретения), способа, стадии или стадий способа к объективной сущности и действительному объему настоящего изобретения. Подразумевается, что все модификации включены в объем формулы изобретения, прилагаемой к заявке.