СПОСОБ ПРОМЫШЛЕННОЙ ОЧИСТКИ РОМИПЛОСТИМА

1. Способ очистки рекомбинантного ромиплостима, полученного в прокариотической системе экспрессии, включающий выделение и отмывку телец включения, рефолдинг белка и хроматографическую очистку, отличающийся тем, что основное удаление контаминирующих примесей клеточных белков, нуклеиновых кислот, липидов и эндотоксинов проводят на стадии выделения телец включения путем их последовательной отмывки, а дополнительное удаление примесей включает проведение 2-х последовательных стадий хроматографии на одном и том же катионообменном сорбенте, где первая стадия является разделяющей, а вторая - полирующей и концентрирующей.
2. Способ по п. 1, где хроматографическую очистку проводят последовательно вначале в режиме проскока на сильном анионообменном сорбенте, с последующей сорбцией целевого белка на аффинном сорбенте, модифицированном рекомбинантным белком А, и далее проводят две стадии хроматографии на катионообменном сорбенте.
3. Способ по п. 2, где катионообменный сорбент представляет собой гидрофильную полимерную матрицу с размером частиц приблизительно от 30 мкм до 75 мкм, и размером пор приблизительно 100 нм.
4. Способ по п. 1, где очищенный белок получают переводом в буфер готовой формы гель-фильтрацией.
5. Способ по п. 1, где буфер для отмывки телец включения содержит Triton Х-100, мочевину, NaCl и ЭДТА.
6. Способ по п. 1, где буфер для проведения рефолдинга включает 3 mM цистин и 4 mM цистеин.
7. Способ по п. 1, где рефолдинг проводят при концентрации белка от 0,7 до 1 мг/мл.