СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ЗАКРЫТОЙ ТРАВМЫ СЕЛЕЗЕНКИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ НА КРУПНЫХ ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ

Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к патологической физиологии и может быть использовано для моделирования механического поражения селезенки.
Активное внедрение неоперативной тактики лечения при закрытых разрывах селезенки требует детального изучения механизмов отсроченного кровотечения. Объяснение причин развития осложнения позволит выработать наиболее безопасную тактику лечения.
В связи с этим основным требованием к моделированию закрытой травмы селезенки является наиболее сходное по механогенезу травмирование селезенки и работа на крупном лабораторном материале. Модель должна быть воспроизводимой и позволить последующее изучение после воздействия.
Моделирование закрытой травмы селезенки общеизвестным способом заключается в нанесении целенаправленных ударов по левому подреберью в область селезенки тупым предметом. Однако, недостатком указанной модели является ее неконтролируемость, негуманность и при ее использовании будет нарушена воспроизводимость эксперимента. При необходимости наблюдения за животным в течение времени животное может испытывать боль.
С этой целью можно предложить использовать ударное устройство, которое бы позволяло во время лапаротомии под контролем зрения наносить непосредственное, изолированное и целенаправленное воздействие на селезенку (Tang J. et al. Comparison of gray-scale contrast-enhanced ultrasonography with contrast-enhanced computed tomography in different grading of blunt hepatic and splenic trauma: an animal experiment. // Ultrasound Med. Biol. England, 2009. Vol. 35, №4. P. 566-575.). Преимуществом такого устройства является создание требуемой степени воздействия для воспроизводимости модели.
Тем не менее, получаемые в эксперименте повреждения не соответствуют механогенезу закрытой травмы живота, так как механическое воздействие на селезенку в действительности происходит опосредованно через окружающие мягкие ткани с соприкосновением со всей площадью паренхимы. Более того с использованием указанного устройства в эксперименте не получится вызывать травму, соответствующую IV-V степени повреждения селезенки по классификации AAST.
Целью моделирования закрытой травмы живота с разрывом селезенки является изучение механизмов развития отсроченных кровотечений.
Решение поставленной задачи обеспечивается тем, что в способе моделирования закрытой травмы селезенки в эксперименте на крупных лабораторных животных; включающем целенаправленное воздействия на селезенку опосредованное через окружающие мягкие ткани; открыто или при помощи лапароскопической техники выполняют мобилизацию селезенки, по среднеподмышечной линии в проекции селезенки выполняют лапароцентез при помощи троакара, через который пропускают силиконовую трубку с привязанным на конце воздушным баллоном, таким образом, чтобы воздушный баллон был уложен в левом подреберье между селезенкой и реберным каркасом; накладывают бандаж на нижнюю половину живота; животное укладывают на левый бок, проводят нагнетание газовой смеси в баллон через трубку для раздутия баллона до разрыва; при этом либо заполняют желудок водой через желудочный зонд, либо сдавливают грудную клетку животного при помощи грузов требуемой массы или мануального приема при положении животного на левом боку.
Техническим результатом предложенного способа являются соответствие модели с механогенезом закрытой травмы живота; создание одинаковых по силе и направлению воздействий на селезенку для воспроизводимости модели; возможность регулировании силы воздействия и визуального контроля над результатом воздействия; отсутствие общей травматичности воздействия, влияющее на течение травматической болезни животного для того, чтобы избежать получение ложного результата. Немаловажным аспектом является создание такой модели, при которой животное не чувствует боли в послеоперационном периоде.
Предлагаемый способ поясняется подробным описанием, клиническими примерами и иллюстрациями, на которых изображено:
Фиг. 1 - Мобилизация селезенки
Фиг. 2 - Лапароцентез в проекции левого подреберья
Фиг. 3 - Расположение баллона в области селезеночного ложа
Фиг. 4 - Схема размещения резинового баллона в брюшной полости: 1 - селезенка; 2 - место размещения баллона; 3 - реберный каркас левого подреберья
Фиг. 5 - КТ-признак интрапаренхимальной гематомы без экстравазации контраста
Фиг. 6 - Гистологическая картина трабекулярного сосуда, избежавшего сдавление окружающей со всех сторон гематомы
Фиг. 7 - Гистологическая картина сдавленного гематомой сосуда малого калибра
Поставленные задачи достигаются следующим образом. После анестезии и фиксации лабораторного животного выполняют верхнесрединную лапаротомию. Проводят ревизию органов брюшной полости на предмет наличия сопутствующей патологии. Внимательно осматривают селезенку для исключения застарелой травмы и опухолевых образований, наличие которых может повлиять на результат эксперимента. Острым путем выполняют мобилизацию селезенки, освобождая ее от связок (см. фиг. 1). Необходимо учитывать, что иссечение связок выполняют, отступя от края селезенки во избежание ее повреждения. По средне-подмышечной линии в проекции селезенки выполняют лапароцентез при помощи троакара (см. фиг. 2). Подготавливают силиконовую трубку диаметром 1 см с привязанным на конце воздушным баллоном (см. фиг. 3). Через троакар пропускают подготовленную трубку, таким образом, чтобы воздушный баллон (1) был уложен в левом подреберье между селезенкой (2) и реберным каркасом (3) (см. фиг. 4). Редкими швами ушивают переднюю брюшную стенку и накладывают бандаж на нижнюю половину живота. Животное укладывают на левый бок. Оставшийся конец силиконовой трубки подключают к кислородному баллону и производят постепенное нагнетание кислорода. При достижении субпредельного раздутия баллона анестезиолог при помощи мешка Амбу производит временное расправление легких. При разрыве резинового баллона подачу кислорода прекращают.
Таким образом, создается направленное обрушение верхнего этажа органокомплекса на селезенку с одновременным ударением последней о реберный каркас левого подреберья. Описанный механизм подобен кататравме с падением на левый бок, что зачастую вызывает разрыв селезенки. Направленное обрушение органокомплекса создается за счет расправления легких и опущения диафрагмы, а также за счет наложения бандажа на нижнюю половину живота. Сила падения создается за счет тяжести органокомплекса.
Регулировать силу воздействия можно двумя способами. Первый способ заключается в заполнении желудка водой через желудочный зонд. Соответственно сила воздействия будет расти пропорционально объему вливаемой жидкости. Второй способ заключается в сдавливании грудной клетки при помощи грузов требуемой массы или мануального приема при положении животного на левом боку. Таким образом, сдавление происходит по направлению сверху вниз и усиливает эффект обрушения органокомплекса верхнего этажа брюшной полости на селезенку.
Регулирование силы воздействия требуется для решения различных задач эксперимента. При изучении внутрипаренхимальных или подкапсульных гематом не требуется применения дополнительных приемов. Тогда как при изучении тяжелых разрывов будет необходимо усилить воздействие.
При решении задачи снижения травматичности способа моделирования описанную модель можно выполнить при помощи лапароскопической техники. Это позволит устранить нежелательный эффект от лапаротомии, влияющий на общее состояние животного. При этом, так же как при открытой технике, селезенка будет доступна визуализации для оценки качества повреждения, что требуется в отдельных случаях эксперимента.
Преследуя цель изучения механизма отсроченного кровотечения, когда требуется сохранение жизни для обследования в послеоперационном периоде, при таком способе моделирования лабораторное животное не будет испытывать болезненных ощущений.
Ограничением данного метода является непредсказуемость в выявления КТ-признаков сосудистых повреждений, требующее повторение эксперимента.
Пример эксперимента.
Домашней овце С., массой 65 кг, описанным способом выполнено моделирование закрытой травмы живота с разрывом селезенки с целью изучения механизма отсроченного кровотечения. В качестве баллона использовался воздушный шарик стандартного объема, предназначаемый для увеселительных мероприятий. Заполнение баллона осуществлялось при помощи кислородного концентратора с подачей 40% воздушно-кислородной смеси. После разрыва баллона при ревизии отмечалось увеличение селезенки в размере, целостность капсулы не нарушена, данных за продолжающееся кровотечение не получено.
Спустя 1 час после моделирования травмы выполнена компьютерная томография живота с IV фазным контрастированием при которой в паренхиме селезенки визуализируется обширная гематома размером 5,7×3,3 см без экстравазации контраста (см. фиг. 5).
Выполнена релапаротомия с последующей спленэктомией. При гистологическом исследовании выявлена следующая закономерность. Просвет трабекуллярных сосудов в зоне обширной гематомы не был спавшимся (см. фиг. 6), тогда как просвет сосудов с отсутствующей трабекуллярной муфтой был сдавлен (см. фиг. 7). В связи с этим внутрипаренхимальная гематома способна сдавливать окружающие ткани, в том числе и сосуды, вызывая при этом феномен «биологической тампонады». Так как трабекула является прочным стромальным компонентом, состоящим из коллагеновых, эластичных и фиброзных волокон, одной из ее функций является защита крупных сосудов селезенки от повреждения. Поэтому при повреждении сегментарного сосуда самостоятельного гемостаза не возникает, что создает предпосылки к развитию отсроченного кровотечения.