КОНЪЮГАТЫ IG-I-ПОЛИ(ЭТИЛЕНГЛИКОЛЬ)

1. Способ получения полипептида, конъюгированного с поли(этиленгликолевым) фрагментом, заключающийся в том, что осуществляют следующие стадии, на которых
а) получают нуклеиновую кислоту, кодирующую слитый полипептид, которая содержит в направлении 5'→3' I) нуклеиновую кислоту, кодирующую полипептид, и II) нуклеиновую кислоту, кодирующую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 01, и полипептид-мишень, который имеет аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 02, и который ковалентно конъюгирован с поли(этиленгликолевым) фрагментом на С-концевом остатке лизина с помощью мутантной формы трипсина D189K, К60Е, N143H, Е151Н, и
б) выделяют и тем самым получают полипептид, конъюгированный с одним поли(этиленгликолевым) фрагментом.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что инкубация включает
I) инкубацию слитого полипептида и пептида-мишени с гидрохлоридом гуанидиния в забуференном растворе,
II) инкубацию мутантной формы трипсина D189K, К60Е, N143H, Е151Н с Zn(II)-солью,
III) объединение и инкубацию смесей, указанных в подпунктах I) и II).
3. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что слитый полипептид кодируется нуклеиновой кислотой, которая содержит в направлении 5'→3':
I) нуклеиновую кислоту, кодирующую полипептид,
II) нуклеиновую кислоту, кодирующую аминокислотную последовательность, которая представлена в SEQ ID NO: 01, и
III) нуклеиновую кислоту, кодирующую аминокислотную последовательность, которая представлена в SEQ ID NO: 13 или SEQ ID NO: 27.
4. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что продолжительность инкубации составляет от 150 до 180 мин.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, указанная на стадии а), содержит также
III) нуклеиновую кислоту, которая кодирует аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 13.
6. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что инкубацию осуществляют в забуференном HEPES растворе.
7. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что полипептид представляет собой человеческий IGF-I.
8. Способ по п.7, отличающийся тем, что слитый полипептид имеет аминокислотную последовательность, выбранную из последовательностей, которые представлены в SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 или SEQ ID NO: 12.
9. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что нуклеиновая кислота, кодирующая слитый полипептид, представляет собой нуклеиновую кислоту, которая кодирует полипептид, аминокислотная последовательность которого представлена в SEQ ID NO: 10.
10. Полипептид, который имеет аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 28 или SEQ ID NO: 29 и который конъюгирован с одним поли(этиленгликолевым) фрагментом на С-концевом остатке лизина.
11. Фармацевтическая композиция, содержащая полипептид по п.10 или полипептид, полученный с помощью способа по одному из пп.7-9.
12. Применение полипептида по п.10 или полипептида, полученного с помощью способа по одному из пп.7-9, для приготовления лекарственного средства, предназначенного для лечения болезни Альцгеймера.
13. Полипептид по п.10 или полипептид, полученный с помощью способа по одному из пп.7-9, предназначенный для применения в качестве лекарственного средства.
14. Полипептид по п.10 или полипептид, полученный с помощью способа по одному из пп.7-9, предназначенный для лечения или предупреждения болезни Альцгеймера.
15. Способ лечения, заключающийся в том, что вводят индивидууму, который нуждается в этом, в терапевтически эффективном количестве полипептид по п.10 или полипептид, полученный способом по одному из пп.7-9.