СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ "ТЕНЕЙ"БАКТЕРИАЛЬНЫХ КЛЕТОК (BG)

1. Способ получения препарата "теней" бактериальных клеток, включающий обработку указанных "теней" бактериальных клеток бета-пропиолактоном.
2. Способ по п.1, включающий стадии.
(а) получения препарата "теней" бактериальных клеток и
(б) последующей обработки препарата "теней" бактериальных клеток бета-пропиолактоном в условиях, при которых количество живых бактериальных клеток в указанном препарате "теней" снижается.
3
4
5
6
3. Способ по п.1 или 2, в котором количество оставшихся жизнеспособными бактериальных клеток в указанном препарате "теней" снижается, по меньшей мере, на 10-10, предпочтительно, по меньшей мере, на 10 или 10.
4. Способ по п.1, в котором "тени" бактериальных клеток обрабатываются бета-пропиолактоном в конечной концентрации от 0,01% до 1% (об./об.), предпочтительно - от 0,025% до 0,5%.
5. Способ по п.1, в котором добавление бета-пропиолактона проводится в две последовательные стадии.
6. Способ по п.1, в котором добавление бета-пропиолактона проводится при температуре от 26°С до 50°С, более предпочтительно - при температуре от 35°С до 45°С, даже более предпочтительно - при температуре от 38°С до 43°С.
7. Способ по п.1, в котором "тени" бактериальных клеток инактивируются в течение от 10 до 60 мин, более предпочтительно - в течение от 15 до 45 мин, даже более предпочтительно - в течение от 25 до 35 мин.
8. Способ по п.1, в котором препарат "теней" бактериальных клеток получают путем:
(а) обеспечения бактериальных клеток, содержащих ген, кодирующий литический белок, способный к формированию туннельной структуры в комплексе оболочки бактериальной клетки,
(б) необязательно культивирования бактериальных клеток в условиях, при которых литический ген не экспрессируется,
(в) подвергания бактериальной клетки воздействию условий, при которых литический ген экспрессируется, а цитоплазматические компоненты бактериальных клеток высвобождаются, и
(г) получения готовых "теней" бактериальных клеток.
9. Способ по п.8, в котором ген, кодирующий литический белок, является геном Е бактериофага рhiХ174.
10. Способ по п.8, в котором бактериальные клетки дополнительно кодируют фермент, способный к гидролизу цитоплазматических компонентов в бактериальной клетке, включающий следующие стадии:
(а) необязательно культивирования бактериальных клеток в условиях, при которых ферментный ген не экспрессируется,
(б) подвергания бактериальной клетки воздействию условий, при которых ферментный ген экспрессируется, а цитоплазматические компоненты бактериальных клеток разрушаются.
11. Способ по п.10, в котором ген, кодирующий гидролитический фермент, является геном нуклеазы, предпочтительно геном нуклеазы, продуцируемой Staphylococcus aureus.
12. Способ по п.10, в котором литический ген и ферментный ген оперативно связаны с регулирующей экспрессию контрольной последовательностью.
13. Способ по п.12, в котором каждый из литического гена и ферментного гена оперативно связан с автономной контрольной последовательностью, регулирующей экспрессию, и входит в состав одного или нескольких векторов.
14. Способ по п.13, в котором экспрессия литического гена и экспрессия фермента индуцируются в разные моменты времени.
15. Фармацевтическая композиция, включающая обработанный бета-пропиолактоном препарат "теней" бактериальных клеток и фармацевтически приемлемый носитель, разбавитель и/или адъювант.
16. Композиция по п.15, которая является вакциной.
17. Композиция по п.15, которая является адъювантом.
18. Композиция по любому из предшествующих пп.15-17 для применения в медицине.
19. Композиция по любому из предшествующих пп.15-17 для применения в ветеринарии.
20. Применение бета-пропиолактона в производстве препарата "теней" бактериальных клеток.
21. Применение по п.20, в котором препарат "теней" бактериальных клеток является фармацевтическим препаратом.