АЗАИНДОЛИЛПИРИДОНЫ И ДИАЗАИНДОЛИЛПИРИДОНЫ
AZAINDOLYL PYRIDONE AND DIAZAINDOLYL PYRIDONE

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Согласно изобретению предложены новые соединения азаиндолилпиридонов и диазаиндолилпиридонов формулы (I), фармацевтические композиции, содержащие такие соединения, и способы применения таких соединений в лечении заболеваний, включая рак и диабет II типа.
ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Ферменты, принадлежащие семейству фосфатидилинозитид-3-киназ (PI3K), представляют собой регуляторы нескольких важных клеточных событий. Данное семейство состоит из трех классов, I, II и III, и в то время как группа, принадлежащая классу I, в течение многих лет представляла собой интересную мишень для лекарственных средств, ферменты классов II и III используются в меньшей степени. PI3K класса III, вакуолярный сортирующий белок 34 (Vps34, PIK3C3), образует гетеродимер со своей регуляторной субъединицей р 150 (Vps15), и этот димер участвует в работе нескольких комплексов, регулирующих события, связанные с везикулярным транспортом, такие как аутофагия, эндоцитоз, экзоцитоз и микропиноцитоз (Amaravadi et al., Clin. Cancer Res., 2011, 17: 654-666; Carpentier et al., 2013, Traffic). Данный фермент отвечает за фосфорилирование фосфатидилинозита (PI) с образованием фосфатидилинозит-(3)-фосфата (PI3P). Связывание данного лиганда с доменами РХ и FYVE приводит к рекрутированию и делокализации этих эффекторных белков, результатом чего является образование, элонгация и движение везикул (Backer et al., J. Biochem., 2008, 410: 1-17).
Аутофагия представляет собой катаболический процесс, при котором клеточные компоненты подвергаются разрушению посредством заключения их в везикулы с двухслойной мембраной, аутофагосомы, которые сливаются с содержащими протеазы лизосомами. Для клетки это является способом переработки поврежденных органелл и неправильно свернутых белков и тем самым поддержания функционирования клетки. Этот путь также является способом рециркуляции содержимого клетки с образованием новых структурных единиц (Boya et al., Nat. Cell Biol., 2013, 15: 713-720). Аутофагия представляет собой клеточный ответ на связанные со стрессом состояния, такие как нехватка питательных веществ, ацидоз и гипоксия, а также лечение лекарственными средствами. Ввиду этого ингибирование аутофагии является средством усиления действия противораковых лекарственных средств и десенсибилизации опухолей, устойчивых к лекарственным средствам (Nagelkerke et al., Semin. Cancer Biol., 2014, 31: 99-105). Опухоли на самых последних стадиях развития демонстрируют сильную активацию аутофагического потока (Leone et al. Trends in Endocrin. Metab., 2013, 24: 209-217). Общепринятым маркером для изучения аутофагического потока является обнаружение в аутофагосоме "аутофагического пятна" в форме липидированного белка LC3 (легкая цепь ассоциированного с микротрубочками белка 1 (МАР1)). Ингибирование Vps34 приводит к ингибированию аутофагии по результатам измерений перераспределения LC3 в пятне (Dowdle et al., Nat. Cell Biol., 2014, 16: 1069-79).
Как было недавно описано, удаление регуляторной субъединицы р150 приводит к повышению чувствительности к инсулину in vivo ввиду снижения интернализации инсулиновых рецепторов (Nemazanyy, Nature Commun., 2015, 6: 8283). В животной модели с гетерозиготным генотипом в отношении мутации, приводящей к инактивации киназы (kinase dead), этот результат подтвержден повышенной толерантностью к глюкозе и повышенной чувствительностью к инсулину (WO 2013076501).
Ингибирование Vps34 могло бы быть выгодным при различных болезненных состояниях, включая рак, воспалительные заболевания, аутоиммунные заболевания, нейродегенеративные расстройства, сердечно-сосудистые расстройства, диабет II типа и вирусные инфекции (рассмотрены в Rubinsztein et al., Nat. Rev., 2012, 11: 709-730). Виды рака, при которых будет выгодно ингибирование Vps34, включают, но не ограничиваются этим, рак молочной железы, такой как трижды негативный рак молочной железы, рак мочевого пузыря, рак печени, рак шейки матки, рак поджелудочной железы, лейкоз, лимфому, рак почки, рак толстой кишки, глиому, рак предстательной железы, рак яичников, меланому и рак легкого, а также гипоксические опухоли. Таким образом, существует потребность в новых и сильнодействующих ингибиторах Vps34.
Предыдущие изобретения, описывающие ингибиторы Vps34 для применения при оказании воздействия на заболевания, включают WO 2015150555, WO 2015150557, WO 2015108861, WO 2015108881, WO 2012085815, WO 2012085244, WO 2013190510, Farkas, J. Biol. Chem., 2011, 286(45): 38904-12.
ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Целью данного изобретения является разработка новых и сильнодействующих ингибиторов Vps34. Другой целью изобретения является разработка новых и сильнодействующих ингибиторов Vps34, которые могут быть использованы для лечения рака и других заболеваний, таких как диабет II типа.
Согласно одному из аспектов изобретения предложены соединение формулы (I),
где
1
X представляет собой N или CR;
1
1
3
1
3
1
3
1
3
3
6
1
3
1
3
3
6
1
3
1
3
1
3
1
3
1
3
1
3
R выбран из Н, С-Салкила, С-Сгалогеналкила, С-СалкоксиС-Салкила, С-Сциклоалкила, циано, фенила, моноциклического гетероарила, при этом указанный фенил и указанный гетероарил возможно и независимо замещены одним или более заместителями, выбранными из галогена, N-С-Салкиламино, N,N-диС-Салкиламино, С-Сциклоалкила, С-СалкоксиС-Салкила, С-Сгалогеналкила, С-Сгалогеналкокси, С-Салкокси и С-Салкила;
2
1
3
1
3
R выбран из атома водорода, С-С галогеналкила и С-Салкила;
3
4
R выбран из А, фенила и моноциклического гетероарила, при этом указанный фенил и указанный гетероарил возможно и независимо замещены одним или более R;
4
5
6
7
1
6
1
6
1
6
1
3
1
3
2
2
3
6
1
3
1
3
1
3
1
6
R независимо выбран из COR, галогена, С-Салкила, С-Салкокси, С-Сгалогеналкокси, амино, N-С-Салкиламино, N,N-диС-Салкиламино, 1-пирролидинила, 1-пиперидинила, 1-азетидинила, NHSOR, SOR, гидрокси, С-Сциклоалкила, С-СалкоксиС-Салкила, С-Сцианоалкила и С-С галогеналкила;
5
1
3
1
3
1
3
R выбран из С-Салкокси, N-С-Салкиламино, N,N-диС-Салкиламино, 1-пирролидинила, 1-пиперидинила и 1-азетидинила;
6
1
3
1
3
R представляет собой С-Сгалогеналкил или С-Салкил;
7
8
8
1
6
1
3
1
3
1
3
1
3
1
6
1
3
1
3
R выбран из R, С-Салкила, N-C-Салкиламино, N,N-диС-Салкиламино и С-СалкоксиС-Салкила, при этом указанный С-Салкил и указанный С-СалкоксиС-Салкил возможно замещены одним R и/или одним или более чем одним атомом галогена;
8
9
3
6
R выбран из фенила, моноциклического гетероарила, С-Сциклоалкила, гетероциклила, каждый из которых возможно замещен одним или более R;
9
1
3
1
3
1
3
1
3
1
3
1
3
1
3
3
6
1
3
R выбран из галогена, N-С-Салкиламино, N,N-диС-Салкиламино, С-СалкоксиС-Салкила, амино, С-Сгалогеналкила, С-Салкокси, С-Сгалогеналкокси, С-Сциклоалкила и С-Салкила;
А представляет собой
10
11
12
10
1
6
1
3
1
3
1
6
3
6
1
3
1
3
R выбран из атома водорода, галогена, COR, С-Салкила, С-СалкоксиС-Салкила, С-Салкокси, С-Сциклоалкила, С-Сцианоалкила, С-Сгалогеналкила, фенила и гетероарила, при этом указанный фенил и указанный гетероарил возможно и независимо замещены одним или более R, и при условии, что когда R представляет собой фенил или гетероарил, то X представляет собой N или СН;
11
1
3
1
3
1
3
R выбран из С-Салкокси, N-С-Салкиламино, N,N-диС-Салкиламино, 1-пирролидинила, 1-пиперидинила и 1-азетидинила;
2
2
2
2
13
7
14
7
7
Y представляет собой СН, S, SO, SO, NR, NCOR, NCOOR, NSOR, NCOCHR, О или связь;
12
1
6
3
6
1
3
1
3
1
3
1
3
1
3
1
3
1
3
R выбран из С-Салкила, С-Сциклоалкила, С-СалкоксиС-Салкила, С-Сгалогеналкила, галогена, N-С-Салкиламино, N,N-диС-Салкиламино, C-Сгалогеналкокси и С-Салкокси;
13
1
3
1
3
1
3
1
3
3
6
R выбран из Н, С-С галогеналкила, С-СалкоксиС-Салкила, С-Салкила, С-Сциклоалкила;
14
8
8
1
6
1
3
1
3
1
6
1
3
1
3
R выбран из R, С-Салкила и С-СалкоксиС-Салкила, при этом указанный С-Салкил и указанный С-СалкоксиС-Салкил возможно замещены одним R и/или одним или более чем одним атомом галогена;
или его фармацевтически приемлемая соль либо фармацевтически приемлемые соли.
2
1
3
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R представляет собой атом водорода или С-Салкил.
1
1
3
1
3
3
6
1
3
3
6
1
3
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из Н, С-Салкила, С-Сгалогеналкила, С-Сциклоалкила, циано, фенила, гетероарила, при этом указанный фенил и указанный гетероарил возможно и независимо замещены одним или более заместителями, выбранными из С-Сгалогеналкила, галогена, С-Сциклоалкила и С-Салкила.
2
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R представляет собой атом водорода.
1
1
3
1
3
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения указанный гетероарил в определении R выбран из пиридила, оксазолила, тиенила и пиримидинила, каждый из которых возможно и независимо замещен одним или более заместителями, выбранными из галогена, циклопропила, С-Сфторалкила и С-Салкила.
1
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из
1
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из
3
4
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из А, фенила и моноциклического гетероарила, выбранного из пиридила, тиенила, фурила, пиримидинила и пиразолила, при этом указанный фенил и указанный гетероарил возможно и независимо замещены одним или двумя R.
3
4
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из А, фенила и моноциклического гетероарила, выбранного из пиридила, тиенила и пиразолила, при этом указанный фенил и указанный гетероарил возможно и независимо замещены одним или двумя R.
3
4
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из А, фенила и пиридила, при этом указанный фенил и указанный пиридил возможно замещены одним R.
3
4
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из А, фенила и пиридила, при этом указанный фенил и указанный пиридил возможно и независимо замещены одним или двумя R.
4
7
1
3
3
6
1
3
2
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из атома фтора, атома хлора, С-Салкила, С-Сциклоалкила, С-Сфторалкила и SOR.
4
7
1
3
1
3
2
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из атома хлора, С-Салкила, С-Сфторалкила и SOR.
2
2
7
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения Y представляет собой СН, NSOR, О или связь.
10
12
1
3
3
6
1
3
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из атома водорода, С-Салкила, С-Сциклоалкила, фенила, моноциклического гетероарила и С-Сгалогеналкила, при этом указанный фенил и указанный гетероарил возможно и независимо замещены одним R; и
12
1
3
3
1
3
1
3
R выбран из С-Салкила, циклопропила, CF, галогена, С-Сгалогеналкокси и С-Салкокси.
10
1
3
1
3
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из атома водорода, С-Салкила, фенила, С-Сгалогеналкила.
7
8
8
1
3
1
3
1
3
1
3
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из R, N,N-диС-Салкиламино, С-Салкила и метоксиС-Салкила, при этом указанный С-Салкил возможно замещен одним R.
7
1
3
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из С-Салкила и фторфенила.
7
1
3
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из С-Салкила и фторбензила.
8
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из фенила, пиридила, имидазолила, изоксазолила, оксазолила, циклопропила, циклопентила, пирролидинила, тетрагидрофурила, каждый из которых возможно замещен одним или более заместителями, выбранными из циклопропила, метила и атома фтора.
3
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из
3
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из
3
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из
2
где Y выбран из СН, О и связи;
4
3
R выбран из CF, атома фтора и атома хлора, циклопропила и метила; и
10
3
R выбран из циклопропила, метила, фторфенила, хлорфенила, метоксифенила и CF.
3
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из
2
где Y выбран из СН, О и связи;
4
3
R выбран из CF, атома хлора и метила; и
10
3
R выбран из метила, фенила и CF.
3
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из
2
2
7
где Y выбран из СН, О, NSOR и связи;
4
3
R выбран из CF, атома фтора, циклопропила и метила; и
10
3
R выбран из атома водорода, фенила, циклопропила, метила и CF.
3
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из
2
2
7
где Y выбран из СН, О, NSOR и связи;
4
3
R выбран из CF, атома хлора и метила; и
10
3
R выбран из атома водорода, фенила, метила и CF.
3
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из
2
где Y выбран из СН, О и связи;
4
3
R выбран из CF, циклопропила, атома фтора и атома хлора; и
10
3
R представляет собой CF или циклопропил.
3
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из
2
где Y выбран из СН, О и связи;
4
3
R выбран из CF и атома хлора; и
10
3
R представляет собой CF.
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения X представляет собой N.
1
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения X представляет собой CR.
1
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из
2
R представляет собой атом водорода; и
3
R выбран из
1
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из
2
R представляет собой атом водорода; и
3
R выбран из
1
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения R выбран из
2
R представляет собой атом водорода; и
3
R выбран из
2
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения X представляет собой N; R представляет собой атом водорода; и
3
R выбран из
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения указанное соединение представляет собой:
4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-[2-(трифторметил)фенил]-1Н-пиридин-2-он;
6-(3-метил-4-пиридил)-4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он;
6-(2-фенилпирролидин-1-ил)-4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он;
4-(2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-(3-пиридил)-1Н-пиридин-2-он;
4-(2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-морфолино-1Н-пиридин-2-он;
6-(2-хлорфенил)-4-(2-оксазол-5-ил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он;
6-(2-хлорфенил)-4-[2-(3-пиридил)-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;
6-(2-хлорфенил)-4-(2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он;
4-(2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]-1Н-пиридин-2-он;
4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]-1Н-пиридин-2-он;
4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-[3-(трифторметил)морфолин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;
6-[3-(трифторметил)морфолин-4-ил]-4-[2-[3-(трифторметил)фенил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;
4-[2-(5-метил-2-тиенил)-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-6-[3-(трифторметил)морфолин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;
4-(1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-4-ил)-6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]-1Н-пиридин-2-он;
6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]-4-[2-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;
6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]-4-[2-[6-(трифторметил)-3-пиридил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;
6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]-4-[2-[5-(трифторметил)-3-пиридил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;
4-(2-циклопропил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-[4-этилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-1Н-пиридин-2-он;
6-[4-этилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он;
6-[4-[(4-фторфенил)метилсульфонил]-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он;
6-[4-этилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-4-(2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он;
4-[2-[4-этилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-6-оксо-1Н-пиридин-4-ил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-2-карбонитрил;
4-(2-циклопропил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-[2-(трифторметил)фенил]-1Н-пиридин-2-он;
4-[2-оксо-6-[2-(трифторметил)фенил]-1Н-пиридин-4-ил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-2-карбонитрил;
4-(1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-4-ил)-6-[2-(трифторметил)фенил]-1Н-пиридин-2-он;
6-[4-метилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-4-(1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он.
Согласно одному из воплощений этого аспекта изобретения указанное соединение представляет собой:
4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-[2-(трифторметил)фенил]-1Н-пиридин-2-он;
6-(3-метил-4-пиридил)-4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он;
6-(2-фенил пиррол ид ин-1-ил)-4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он;
4-(2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-(3-пиридил)-1Н-пиридин-2-он;
4-(2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-морфолино-1Н-пиридин-2-он;
6-(2-хлорфенил)-4-(2-оксазол-5-ил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он;
6-(2-хлорфенил)-4-[2-(3-пиридил)-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;
6-(2-хлорфенил)-4-(2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он;
4-(2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]-1Н-пиридин-2-он;
4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]-1Н-пиридин-2-он;
4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-[3-(трифторметил)морфолин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;
6-[3-(трифторметил)морфолин-4-ил]-4-[2-[3-(трифторметил)фенил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;
4-[2-(5-метил-2-тиенил)-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-6-[3-(трифторметил)морфолин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;
4-(1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-4-ил)-6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]-1Н-пиридин-2-он;
6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]-4-[2-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;
6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]-4-[2-[6-(трифторметил)-3-пиридил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;
6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]-4-[2-[5-(трифторметил)-3-пиридил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он;
4-(2-циклопропил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-[4-этилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-1Н-пиридин-2-он;
6-[4-этилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он; или
6-[4-[(4-фторфенил)метилсульфонил]-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он.
Согласно одному из аспектов изобретения предложено соединение по настоящему изобретению для применения в лечении или профилактике заболевания.
Согласно одному из аспектов изобретения предложено соединение по настоящему изобретению для применения в лечении рака. Обычно указанный рак выбран из рака молочной железы, такого как трижды негативный рак молочной железы, рака мочевого пузыря, рака печени, рака шейки матки, рака поджелудочной железы, лейкоза, лимфомы, рака почки, рака толстой кишки, глиомы, рака предстательной железы, рака яичников, меланомы и рака легкого, а также гипоксических опухолей.
Согласно одному из аспектов изобретения предложено соединение по настоящему изобретению для применения в лечении гипоксических опухолей.
Согласно одному из аспектов изобретения предложено соединение по настоящему изобретению для применения в лечении диабета II типа.
Согласно одному из аспектов изобретения предложено соединение по настоящему изобретению для применения в лечении заболевания, выбранного из воспалительных заболеваний, аутоиммунных заболеваний, нейродегенеративных расстройств, сердечно-сосудистых расстройств и вирусных инфекций.
Согласно одному из аспектов изобретения предложено применение соединения по настоящему изобретению для приготовления лекарственного средства для лечения рака. Обычно указанный рак выбран из рака молочной железы, такого как трижды негативный рак молочной железы, рака мочевого пузыря, рака печени, рака шейки матки, рака поджелудочной железы, лейкоза, лимфомы, рака почки, рака толстой кишки, глиомы, рака предстательной железы, рака яичников, меланомы и рака легкого, а также гипоксических опухолей.
Согласно одному из аспектов изобретения предложено применение соединения по настоящему изобретению для приготовления лекарственного средства для лечения гипоксических опухолей.
Согласно одному из аспектов изобретения предложено применение соединения по настоящему изобретению для приготовления лекарственного средства для лечения диабета II типа.
Согласно одному из аспектов изобретения предложено применение соединения по настоящему изобретению для приготовления лекарственного средства для лечения заболевания, выбранного из воспалительных заболеваний, аутоиммунных заболеваний, нейродегенеративных расстройств, сердечнососудистых расстройств и вирусных инфекций.
Согласно одному из аспектов изобретения предложен способ лечения рака, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению пациенту, нуждающемуся в этом. Обычно указанный рак выбран из рака молочной железы, такого как трижды негативный рак молочной железы, рака мочевого пузыря, рака печени, рака шейки матки, рака поджелудочной железы, лейкоза, лимфомы, рака почки, рака толстой кишки, глиомы, рака предстательной железы, рака яичников, меланомы и рака легкого, а также гипоксических опухолей.
Согласно одному из аспектов изобретения предложен способ лечения гипоксических опухолей, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению пациенту, нуждающемуся в этом.
Согласно одному из аспектов изобретения предложено соединение по настоящему изобретению для применения в лечении рака, при этом указанное лечение рака дополнительно включает лучевую терапию.
Согласно одному из аспектов изобретения предложен способ лечения рака, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретение пациенту, нуждающемуся в этом, вместе с лучевой терапией.
Соединения по настоящему изобретению также могут быть использованы для лечения рака вместе с лучевой терапией и/или хирургическим вмешательством. Обычно, применение цитотоксических и/или цитостатических агентов в комбинации с соединением или композицией по настоящему изобретению будет способствовать:
(1) достижению лучшей эффективности в снижении роста опухоли или даже устранению опухоли по сравнению со случаем введения каждого из агентов по отдельности;
(2) обеспечению введения меньших количеств применяемых химиотерапевтических агентов;
(3) предоставлению химиотерапевтического лечения, которое хорошо переносится пациентом, при этом количество вредных фармакологических осложнений будет меньше наблюдаемого в случае химиотерапии одним агентом и некоторыми другими видами комбинированной терапии;
(4) обеспечению лечения более широкого спектра разных типов рака у млекопитающих, в особенности у людей;
(5) достижению более высокого значения коэффициента ответа среди подвергаемых лечению пациентов;
(6) обеспечению более продолжительного периода времени выживания среди подвергаемых лечению пациентов по сравнению со стандартными методами химиотерапии;
(7) обеспечению задержки прогрессирования опухолей; и/или
(8) получению по меньшей мере таких же удовлетворительных результатов по эффективности и переносимости, как и в случаях применения агентов, используемых по-отдельности, по сравнению с известными случаями, когда другие комбинации противораковых агентов оказывают антагонистические эффекты.
Согласно одному из аспектов изобретения предложен способ лечения гипоксических опухолей, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению, пациенту, нуждающемуся в этом.
Согласно одному из аспектов изобретения предложен способ лечения диабета II типа, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению, пациенту, нуждающемуся в этом.
Согласно одному из аспектов изобретения предложен способ лечения заболевания, выбранного из воспалительных заболеваний, аутоиммунных заболеваний, нейродегенеративных расстройств, сердечно-сосудистых расстройств и вирусных инфекций, включающий введение терапевтически эффективного количества соединения по настоящему изобретению, пациенту, нуждающемуся в этом.
Согласно одному из аспектов изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение по настоящему изобретению и фармацевтически приемлемый разбавитель, носитель и/или эксципиент.
Согласно одному из аспектов изобретения предложена фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество соединения по настоящему изобретению и другого противоракового средства, выбранного из алкилирующих агентов, антиметаболитов, противораковых производных камптотецина, противораковых средств растительного происхождения, антибиотиков, ферментов, координационных комплексов платины, ингибиторов тирозинкиназ, гормонов, антагонистов гормонов, моноклональных антител, интерферонов и модификаторов биологического ответа.
1
6
1
6
1
6
Использованный в данном описании термин "С-Салкил" означает насыщенные углеводородные группы как с линейной, так и разветвленной цепью, состоящие из 1-6 атомов углерода. Примеры С-Салкильных групп включают метильную, этильную, н-пропильную, изопропильную, н-бутильную, изобутильную, втор-бутильную, трет-бутильную, н-пентильную, 4-метил-бутильную, н-гексильную, 2-этил-бутильную группы. Среди неразветвленных С-Салкильных групп типичными являются метильная, этильная, н-пропильная, н-бутильная, н-пентильная и н-гексильная группы. Среди разветвленных алкильных групп можно упомянуть изопропильную, изобутильную, втор-бутильную, трет-бутильную, 4-метил-бутильную и 2-этил-бутильную группы.
1
3
1
3
Использованный в данном описании термин "С-Салкил" означает насыщенные углеводородные группы как с линейной, так и разветвленной цепью, состоящие из 1-3 атомов углерода. Примеры С-Салкильных групп включают метильную, этильную, н-пропильную и изопропильную группы.
1
6
1
6
1
6
Использованный в данном описании термин "С-Салкокси" означает группу О-алкил, при этом используют "С-Салкил", как он описан выше. Примеры групп С-Салкокси включают, но не ограничиваются этим, группы метокси, этокси, изопропокси, н-пропокси, н-бутокси, н-гексокси, 3-метил-бутокси.
1
3
1
3
1
3
Использованный в данном описании термин "С-Салкокси" означает группу О-алкил, при этом используют "С-Салкил", как он описан выше. Примеры групп С-Салкокси включают, но не ограничиваются этим, группы метокси, этокси, изопропокси и н-пропокси.
1
6
1
6
Использованный в данном описании термин "С-Сгалогеналкил" означает насыщенные углеводородные группы как с линейной, так и разветвленной цепью, состоящие из 1-6 атомов углерода, и в которых от 1 до всех атомов водорода замещены атомом(ами) галогена разного или одного и того же типа. Примеры С-Сгалогеналкильных групп включают метильные группы, замещенные 1-3 атомами галогена, этильные группы, замещенные 1-5 атомами галогена, н-пропильные или изопропильные группы, замещенные 1-7 атомами галогена, н-бутильные или изобутильные группы, замещенные 1-9 атомами галогена, и втор-бутильные или трет-бутильные группы, замещенные 1-9 атомами галогена.
1
3
1
3
Использованный в данном описании термин "С-Сгалогеналкил" означает насыщенные углеводородные группы как с линейной, так и разветвленной цепью, состоящие из 1-3 атомов углерода, и в которых от 1 до всех атомов водорода замещены атомом(ами) галогена разного или одного и того же типа. Примеры С-Сгалогеналкильных групп включают метил, замещенный 1-3 атомами галогена, этил, замещенный 1-5 атомами галогена, и н-пропил или изопропил, замещенный 1-7 атомами галогена.
1
3
1
3
Использованный в данном описании термин "С-Сгалогеналкокси" означает насыщенные группы алкокси как с линейной, так и разветвленной цепью, состоящие из 1-3 атомов углерода, и в которых от 1 до всех атомов водорода замещены атомом(ами) галогена разного или одного и того же типа. Примеры групп С-Сгалогеналкокси включают группу метокси, замещенную 1-3 атомами галогена, группу этокси, замещенную 1-5 атомами галогена, и группу н-пропокси или изопропокси, замещенную 1-7 атомами галогена.
1
3
1
3
Использованный в данном описании термин "С-Сфторалкил" означает насыщенные углеводородные группы как с линейной, так и разветвленной цепью, состоящие из 1-3 атомов углерода, и в которых от 1 до всех атомов водорода замещены атомом(ами) фтора. Примеры С-Сфторалкильных групп включают метил, замещенный 1-3 атомами фтора, этил, замещенный 1-5 атомами фтора, и н-пропил или изопропил, замещенный 1-7 атомами фтора.
1
3
1
3
Использованный в данном описании термин "С-Сфторалкокси" означает насыщенные группы алкокси как с линейной, так и разветвленной цепью, состоящие из 1-3 атомов углерода, и в которых от 1 до всех атомов водорода замещены атомом(ами) фтора. Примеры групп С-Сфторалкокси включают группу метокси, замещенную 1-3 атомами фтора, группу этокси, замещенную 1-5 атомами фтора, и группу н-пропокси или изопропокси, замещенную 1-7 атомами фтора.
3
6
3
6
Использованный в данном описании термин "С-Сциклоалкил" означает циклическую насыщенную углеводородную группу, состоящую из 3-6 атомов углерода. Примеры С-Сциклоалкильных групп включают циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил.
1
3
1
3
1
3
1
3
Использованный в данном описании термин "С-СалкоксиС-Салкил" означает насыщенную углеводородную группу как с линейной, так и разветвленной цепью, состоящую из 1-3 атомов углерода, замещенную группой алкокси из 1-3 атомов углерода. Примеры С-СалкоксиС-Салкильных групп приведены ниже:
1
3
1
3
Использованный в данном описании термин "С-Сцианоалкил" означает циано(CN)-производное как с линейной, так и разветвленной цепью, содержащее от одного до трех атомов углерода, включая атом углерода, который составляет часть цианогруппы. Примеры С-Сцианоалкильных групп приведены ниже:
1
3
1
3
1
3
Использованный в данном описании термин "N-C-Салкиламино" означает амино-содержащий заместитель, несущий одну С-Салкильную группу, как она определена выше. Примеры N-С-Салкиламино приведены ниже:
1
3
1
3
1
3
Использованный в данном описании термин "N,N-диС-Салкиламино" означает амино-содержащий заместитель, несущий две С-Салкильные группы, как они определены выше. Примеры N,N-диС-Салкиламино приведены ниже:
Использованный в данном описании термин "галоген" означает фтор, хлор, бром или йод. Использованный в данном описании термин "атом галогена" означает атом фтора, хлора, брома или йода.
Использованный в данном описании термин "арил" означает моноциклическую ароматическую карбоциклическую группу. Примеры таких групп включают фенил.
Использованный в данном описании термин "моноциклический арил" означает моноциклическую ароматическую карбоциклическую группу. Примеры моноциклических арильных групп включают фенил.
Использованный в данном описании термин "гетероарил" означает моноциклическую или бициклическую ароматическую группу, состоящую из атомов углерода, в которой от одного до трех атомов углерода заменены на один или несколько гетероатомов, независимо выбранных из атомов азота, кислорода или серы. В бициклическом ариле одно из колец может быть частично насыщенным. Примеры таких групп включают индолинил, дигидробензофуран и 1,3-бензодиоксолил.
Использованный в данном описании термин "моноциклический гетероарил" означает моноциклическую ароматическую группу, состоящую из атомов углерода, в которой от одного до трех атомов углерода заменены на один или несколько гетероатомов, независимо выбранных из атомов азота, кислорода или серы.
Примеры моноциклических гетероарильных групп включают, но не ограничиваются этим, фурил, тиенил, пирролил, оксазолил, тиазолил, имидазолил, оксадиазолил, тиадиазолил, пиридил, триазолил, триазинил, пиридазил, изотиазолил, изоксазолил, пиразинил, пиразолил и пиримидинил.
Примеры бициклических гетероарильных групп включают, но не ограничиваются этим, хиноксалинил, хиназолинил, пиридопиразинил, бензоксазолил, бензотиофенил, бензимидазолил, нафтиридинил, хинолинил, бензофурил, индолил, индазолил, бензотиазолил, пиридопиримидинил и изохинолинил.
Использованный в данном описании термин "гетероциклил" означает циклическую группу, состоящую из атомов углерода, в которой от одного до трех атомов углерода заменены на один или несколько гетероатомов, независимо выбранных из атомов азота, кислорода или серы. Примеры гетероциклильных групп включают, но не ограничиваются этим, тетрагидрофурил, тетрагидропиранил, пирролидинил, пиперидинил, пиперазинил, морфолинил и диоксанил.
В зависимости от заместителей, имеющихся в соединениях формулы (I), соединения могут образовывать соли, которые находятся в пределах объема настоящего изобретения. Соли соединений формулы (I), подходящие для применения в медицине, представляют собой соли, где противоион является фармацевтически приемлемым.
1
4
Подходящие соли по изобретению включают соли, образованные при взаимодействии с органическими или неорганическими кислотами или основаниями. В частности, подходящие соли, образованные при взаимодействии с кислотами согласно изобретению, включают соли, образованные при взаимодействии с минеральными кислотами, с сильными органическими карбоновыми кислотами, такими как алканкарбоновые кислоты, состоящие из 1-4 атомов углерода, которые являются незамещенными или замещенными, например, атомом галогена, такими как насыщенные или ненасыщенные дикарбоновые кислоты, такими как гидроксикарбоновые кислоты, такими как аминокислоты, или с органическими сульфоновыми кислотами, такими как (С-С)алкил- или -арилсульфоновые кислоты, которые являются незамещенными или замещенными, например, атомом галогена. Фармацевтически приемлемые соли присоединения кислоты включают соли, образованные из соляной, бромистоводородной, серной, азотной, лимонной, винной, уксусной, фосфорной, молочной, пировиноградной, уксусной, трифторуксусной, янтарной, перхлорной, фумаровой, малеиновой, гликолевой, молочной, салициловой, щавелевоуксусной, метансульфоновой, этансульфоновой, п-толуолсульфоновой, муравьиной, бензойной, малоновой, нафталин-2-сульфоновой, бензолсульфоновой, изэтионовой, аскорбиновой, яблочной, фталевой, аспарагиновой и глутаминовой кислот, лизина и аргинина.
Фармацевтически приемлемые соли с основаниями включают соли аммония, соли щелочных металлов, например, соли калия и натрия, соли щелочноземельных металлов, например, соли кальция и магния, и соли с органическими основаниями, например, дициклогексиламином, N-метил-D-глюкамином, морфолином, тиоморфолином, пиперидином, пирролидином, с низшими моно-, ди- или триалкиламинами, например, этил-, трет-бутил-, диэтил-, диизопропил-, триэтил-, трибутил- или диметил-пропиламином, либо с низшим моно-, ди- или три-гидроксиалкиламином, например, моно-, ди- или три-этаноламином. Кроме того, могут быть образованы соответствующие внутренние соли.
Соединения по изобретению можно использовать для профилактики и/или лечения в том виде, как они есть, или в форме фармацевтической композиции. Несмотря на существующую возможность введения активного ингредиента как такового, также возможно его нахождение в составе фармацевтической композиции. Соответственно, согласно изобретению предложена фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) и фармацевтически приемлемый разбавитель, эксципиент и/или носитель. Фармацевтические композиции по изобретению могут быть в форме фармацевтической композиции, которая описана ниже.
Типичные композиции для перорального введения включают суспензии, которые могут содержать, например, микрокристаллическую целлюлозу для придания объема, альгиновую кислоту или альгинат натрия в качестве суспендирующего агента, метил целлюлозу в качестве усилителя вязкости и подсластители или ароматизаторы, как например известные в данной области техники; и таблетки с немедленным высвобождением, которые могут содержать, например, микрокристаллическую целлюлозу, двузамещенный фосфат кальция, крахмал, стеарат магния, сульфат кальция, сорбит, глюкозу и/или лактозу и/или другие эксципиенты, связующие вещества, сухие наполнители, разрыхлители, разбавители и смазывающие вещества, как например известные в данной области техники. Подходящие связующие вещества включают крахмал, желатин, природные сахара, такие как глюкоза или бета-лактоза, сахаристые вещества из кукурузы, природные и синтетические камеди, такие как аравийская камедь, трагакантовая камедь или альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлозу, полиэтиленгликоль, воски и тому подобное. Разрыхлители включают, без ограничения, крахмал, метил целлюлозу, агар, бентонит, ксантановую камедь и тому подобное. Доставку соединений формулы (I) также можно осуществлять через ротовую полость посредством сублингвального и/или трансбуккального введения. Формованные таблетки, прессованные таблетки или сублимационно высушенные таблетки представляют собой типичные формы, которые могут быть использованы. Типичные композиции включают композиции, в состав которых входит(ят) соединение(я) по настоящему изобретению с быстро растворяющимися разбавителями, такими как маннит, лактоза, сахароза и/или циклодекстрины. В такие композиции также могут быть включены высокомолекулярные эксципиенты, такие как целлюлозы (авицел) или полиэтиленгликоли (ПЭГ). Такие композиции также могут включать в себя эксципиент, способствующий адгезии к слизистой оболочке, такой как гидроксипропилцеллюлоза (НРС), гидроксипропилметилцеллюлоза (НРМС), натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы (SCMC), сополимер на основе малеинового ангидрида (например, Gantrez) и агенты, регулирующие высвобождение, такие как сополимер на основе полимера акриловой кислоты (например, карбопол 934). Для простоты изготовления и применения также могут быть добавлены смазывающие вещества, скользящие вещества, ароматизаторы, красители и стабилизаторы. Смазывающие вещества, используемые в этих лекарственных формах, включают олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и тому подобное. Для перорального введения в жидкой форме компоненты перорального лекарственного средства могут быть объединены с каким-либо пригодным для перорального введения нетоксичным, фармацевтически приемлемым инертным носителем, таким как этанол, глицерин, вода и тому подобное.
Композиции по настоящему изобретению, подходящие для перорального введения, могут быть представлены в виде дискретных единиц, таких как капсулы, облатки, пилюли или таблетки, каждая из которых содержит предварительно заданное количество активного ингредиента; в виде порошка или гранул; в виде раствора или суспензии в водной жидкости или неводной жидкости, например, в виде эликсиров, настоек, суспензий или сиропов; или в виде жидкой эмульсии типа масло-в-воде либо жидкой эмульсии типа вода-в-масле. Активный ингредиент также может быть представлен в виде болюса, электуария или пасты.
Таблетка может быть изготовлена путем прессования или формования, возможно с одним или несколькими дополнительными ингредиентами. Прессованные таблетки могут быть изготовлены в подходящей машине путем прессования активного ингредиента в свободно текучей форме, такой как порошок или гранулы, возможно в смеси со связующим веществом, смазывающим веществом, инертным разбавителем, поверхностно-активным веществом или диспергирующим агентом. Формованные таблетки могут быть изготовлены в подходящей машине путем формования смеси измельченного соединения, увлажненного инертным жидким разбавителем. Возможно, что таблетки могут иметь покрытие или риску и могут быть изготовлены с тем, чтобы обеспечить медленное или регулируемое высвобождение из нее активного ингредиента. Например, соединения по настоящему изобретению можно вводить в форме, подходящей для немедленного высвобождения или продолжительного высвобождения. Немедленное высвобождение или продолжительное высвобождение может быть осуществлено посредством применения подходящих фармацевтических композиций, содержащих соединения по настоящему изобретению, или, особенно в случае продолжительного высвобождения, посредством применения таких устройств, как подкожные имплантаты или осмотические насосы. Соединения по настоящему изобретению также можно вводить с использованием липосом.
Типичными композициями в стандартной лекарственной форме являются такие, которые содержат активный ингредиент в эффективной дозе, как приведено ранее, или в соответствующей ее доле.
Следует понимать, что помимо ингредиентов, в частности, упомянутых выше, композиции по данному изобретению могут включать в себя другие агенты, традиционно применяемые в данной области техники с учетом типа рассматриваемой композиции, например, те, которые подходят для перорального введения, могут включать в себя ароматизаторы.
Данные композиции могут быть представлены в стандартной лекарственной форме и могут быть приготовлены любым из способов, хорошо известных в области фармацевтики. Такие способы могут включать стадию объединения активного ингредиента с носителем, который состоит из одного или нескольких дополнительных ингредиентов. Композиции могут быть приготовлены путем непрерывного и равномерного объединения активного ингредиента с жидкими носителями или тонкоизмельченными твердыми носителями либо с ними обоими и затем, при необходимости, придания продукту формы желаемой композиции.
Соединения по настоящему изобретению также можно вводить в составе систем доставки с использованием липосом, таких как малые однослойные везикулы, большие однослойные везикулы и многослойные везикулы. Липосомы могут быть образованы из разнообразных фосфолипидов, 1,2-дипальмитоилфосфатидилхолина, фосфатидилэтаноламина (цефалина), фосфатидилсерина, фосфатидилинозита, дифосфатидилглицерина (кардиолипина) или фосфатидилхолина (лецитина).
Композиции для парентерального введения включают водные и неводные стерильные растворы для инъекций, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостатические средства и растворенные вещества, делающие композицию изотоничной крови предполагаемого реципиента; и водные и неводные стерильные суспензии, которые могут включать в себя суспендирующие агенты и загустители. Данные композиции могут быть представлены в однодозовых или многодозовых контейнерах, например, герметично запаянных ампулах и герметично закрытых флаконах, и могут храниться в сублимационно высушенном (лиофилизированном) состоянии, требующем только добавления стерильного жидкого носителя, например, физиологического раствора или воды для инъекций, непосредственно перед применением. Из стерильных порошков, гранул и таблеток описанного ранее вида могут быть приготовлены экстемпоральные растворы и суспензии для инъекций. Типичные композиции для парентерального введения включают инъекционные растворы или суспензии, которые могут содержать, например, подходящие нетоксичные парентерально приемлемые разбавители или растворители, такие как полиэтиленгликоль, этанол, 1,3-бутандиол, вода, раствор Рингера, изотонический раствор хлорида натрия, или другие подходящие диспергирующие или увлажняющие и суспендирующие агенты, включая синтетические моно- или диглицериды, и жирные кислоты, в том числе олеиновую кислоту или кремофор.
Типичные композиции для назального, аэрозольного или ингаляционного введения включают растворы в физиологическом растворе, которые могут содержать, например, бензиловый спирт или другие подходящие консерванты, стимуляторы всасывания для усиления биодоступности и/или другие солюбилизирующие или диспергирующие агенты, например, агенты, известные в данной области техники.
Композиции для ректального введения могут быть представлены в виде суппозитория с типичными носителями, такими как масло какао, синтетические эфиры на основе глицерина (глицериды) или полиэтиленгликоль. Как правило, такие носители являются твердыми при обычных температурах, но расплавляются и/или растворяются в прямой кишке с высвобождением лекарственного средства.
Композиции для местного введения в полость рта, например, трансбуккально или сублингвально, включают пастилки, содержащие активный ингредиент в ароматизированной основе, такой как сахароза и аравийская или трагакантовая камедь, и пастилки, содержащие активный ингредиент в такой основе, как желатин и глицерин или сахароза и аравийская камедь. Типичные композиции для местного введения включают в себя носитель для местного применения, такой как Plastibase (минеральное масло с загустителем полиэтиленом).
Соединения формулы (I) можно вводить в виде единственного фармацевтического агента или в комбинации с одним или более чем одним дополнительным терапевтическим агентом, при этом данная комбинация не оказывает никаких неприемлемых, неблагоприятных эффектов. Такая фармацевтическая композиция подразумевает введение единой композиции фармацевтических средств, которая содержит соединение формулы (I) и один или более чем один дополнительный терапевтический агент, а также введение соединения формулы (I) и каждого дополнительного терапевтического агента в составе своей собственной отдельно вводимой фармацевтической композиции. Например, соединение формулы (I) и терапевтический агент можно вводить пациенту вместе в единой перорально вводимой композиции, такой как капсула или таблетка, или каждый агент можно вводить в композициях с отдельной дозировкой.
В случае использования композиций для раздельного введения введение соединения формулы (I) и одного или более чем одного дополнительного терапевтического агента может быть осуществлено по существу параллельно (например, одновременно) или с разнесением по времени (например, последовательно).
Количество активного ингредиента, которое необходимо для достижения терапевтического эффекта, несомненно, будет варьировать в зависимости от конкретного соединения, пути введения, подвергаемого лечению субъекта, в том числе типа, вида, возраста, массы, пола и состояния здоровья данного субъекта и функции почек и печени у данного субъекта, и конкретного подвергаемого лечению расстройства или заболевания, а также его тяжести. Врач, ветеринар или врач-клиницист, имеющий обычную квалификацию, может легко определить и прописать эффективное количество лекарственного средства, необходимое для предотвращения, противодействия или задержки прогрессирования данного состояния.
Пероральные дозировки по настоящему изобретению, в случае использования для достижения указанных эффектов, будут находиться в диапазоне от примерно 0,01 мг на кг массы тела в сутки (мг/кг/сутки) до примерно 100 мг/кг/сутки, предпочтительно от 0,01 мг на кг массы тела в сутки (мг/кг/сутки) до 10 мг/кг/сутки и наиболее предпочтительно от 0,1 до 5,0 мг/кг/сутки для взрослого человека. В случае перорального введения композиции могут быть приготовлены в форме таблеток или в других формах представления, приготовленных в дискретных единицах, содержащих 0,01, 0,05, 0,1, 0,5, 1,0, 2,5, 5,0, 10,0, 15,0, 25,0, 50,0, 100 и 500 миллиграммов активного ингредиента, для корректировки дозировки симптоматической терапии пациента, подлежащего лечению. Обычно лекарственное средство содержит от примерно 0,01 мг до примерно 500 мг активного ингредиента, предпочтительно от примерно 1 мг до примерно 100 мг активного ингредиента. Если внутривенно, то наиболее предпочтительные дозы будут находиться в диапазоне от примерно 0,1 до примерно 10 мг/кг/минута при инфузировании с постоянной скоростью. Соединения по настоящему изобретению можно вводить в однократной суточной дозе, или общую суточную дозировку можно вводить в разделенных дозах в режиме двух, трех или четырех раз в сутки. Кроме того, соединения по настоящему изобретению можно вводить в интраназальной форме посредством местного применения вместе с подходящими интраназальными наполнителями или можно вводить трансдермальными путями, используя такие формы трансдермальных накожных пластырей, которые хорошо известны специалистам средней квалификации в данной области техники. В случае введения в форме трансдермальной системы доставки введение дозы, несомненно, будет непрерывным, а не прерывистым в ходе всего режима дозирования.
Получение соединений
ом
Соединения по настоящему изобретению могут быть получены в виде свободного основания или его фармацевтически приемлемой соли описанным ниже способом. При последующем описании таких способов подразумевается, что там, где это целесообразно, к различным реагентам и промежуточным соединениям будут добавлены и впоследствии удалены из них подходящие защитные группы методом, совершенно очевидным специалисту в области органического синтеза. Традиционные методики использования таких защитных групп, а также примеры подходящих защитных групп описаны, например, в Protective Groups in Organic Synthesis под редакцией T.W. Greene, P.G.M Wutz, в 4 издании, Wiley-Interscience, New York, 2006. Очевидно, что для альтернативного нагревания реакционных смесей можно использовать микроволновое излучение.
2
3
Согласно другому аспекту настоящего изобретения предложен способ получения соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли, где R, R и X являются такими, если не указано иное, как определено в данном описании. Указанный способ включает:
(1) образование соответствующего соединения формулы (I)
X
X
X
X
X
3
3
3
3
3
3
3
Соединение формулы (I) может быть получено (схема 1) исходя из, например, соединения формулы (II), где R может представлять собой F, ОСН, ОС(СН) или OSiR'R''R''' (где R', R'' и R''' независимо представляют собой арил (такой как фенил) или алкил (такой как метил или трет-бутил)). Если R представляет собой F, то превращение в соединение (I) может быть осуществлено посредством, например, кислотного гидролиза с использованием водного раствора HCl. Если R представляет собой ОСН, то превращение в соединение (I) может быть осуществлено в результате взаимодействия, например, с триметилсилилиодидом в подходящем растворителе, таком как хлороформ, или в результате взаимодействия с HBr в подходящем растворителе, таком как уксусная кислота, или в результате взаимодействия с BBr в подходящем растворителе, таком как дихлорметан. Если R представляет собой ОС(СН), то превращение в соединение (I) может быть осуществлено в результате взаимодействия, например, с трифторуксусной кислотой в подходящем растворителе, таком как дихлорметан. Если R представляет собой OSiR'R''R''', то превращение в соединение (I) может быть осуществлено с использованием, например, HCl в подходящем растворителе, таком как метанол, или с использованием фторида тетрабутиламмония в тетрагидрофуране. Если в этой реакции используется энантиомерно чистое или обогащенное соединение (II), то получают энантиомерно чистое или энантиомерно обогащенное соединение (I).
Соединения формулы (II) имеются в продаже или известны из литературных источников, либо их получают стандартными способами, известными в данной области техники. Соединение формулы (I) или (II) может быть разделено на свои энантиомеры стандартными способами, известными в данной области техники, например, посредством хроматографии на хиральной неподвижной фазе.
Общие методы
Все использованные растворители были сорта "чистый для анализа", и имеющиеся в продаже безводные растворители в рабочем порядке использовали для проведения реакций. Исходные вещества были получены из коммерческих источников или получены в соответствии с опубликованными в литературе методиками. Комнатная температура означает +20-25°С. Составы смесей растворителей приведены в объемных процентах или в объемных соотношениях.
Нагревание микроволновым излучением выполняли в микроволновом резонаторе Initiator от Biotage, осуществляющем непрерывное облучение при 2,45 ГГц. Очевидно, что для нагревания реакционных смесей можно использовать микроволновое излучение.
Нормально-фазовую хроматографию выполняли в ручном варианте на силикагеле 60 (0,040-0,063 мм) от Merck или в автоматизированном варианте с использованием системы ISCO Combiflash Companion™, применяя колонки SiliaSep™ для нормально-фазовой флэш-хроматографии и указанную систему растворителей.
-1
-1
6
3
4
Спектры ядерного магнитного резонанса (ЯМР) регистрировали на ЯМР-спектрометре при 400 МГц (или в более сильном поле), оснащенном датчиком подходящей конфигурации. Спектры регистрировали при температуре окружающей среды, если не указано иное. Химические сдвиги приведены в млн в сторону слабого и сильного поля по отношению к сигналу TMS (тетраметилсилан) (0.00 млн). Использовали следующие референсные сигналы: остаточный сигнал растворителя DMSO-d δ 2.5, CDCl δ 7.26 или метанола-d δ 3.31. Мультиплетности резонансных сигналов обозначаются как s, d, t, q, m и br для синглетного, дублетного, триплетного, квартетного, мультиплетного и уширенного сигналов, соответственно.
3
Жидкостную хроматографию высокого давления (HPLC) проводили на колонке с обращенной фазой. Применяли линейный градиент, используя, например, подвижную фазу А (водный 0,1%-ный раствор NH, или водный 0,1%-ный раствор уксусной кислоты, или водный 0,1%-ный раствор муравьиной кислоты) и В (ацетонитрил или метанол). Масс-спектрометрические (MS) анализы проводили в режиме положительных ионов, используя ионизацию электрораспылением (ES+).
3
Препаративную хроматографию проводили на Gilson-PREP GX271 или GX281 с использованием Trilution Ic в качестве программного обеспечения на колонке с обращенной фазой. Применяли линейный градиент, используя, например, подвижную фазу А (водный 0,1%-ный раствор NH, или водный 0,1%-ный раствор уксусной кислоты, или водный 0,1%-ный раствор муравьиной кислоты) и В (ацетонитрил или метанол).
Препаративную хиральную хроматографию для разделения энантиомеров проводили на системе Thar для SFC, используя сверхкритическую жидкостную хроматографию (SFC) на хиральной неподвижной фазе. Применяли линейный градиент, используя подвижную фазу А (двуокись углерода) и В (ацетонитрил, или метанол, или этанол, или 2-пропанол, или любые их смеси). Могут быть использованы вспомогательные вещества (такие как диэтиламин, или изопропиламин, или аммиак, или муравьиная кислота, или TFA).
Названия соединений приведены с использованием BIOVIA Draw 16.1.
Сокращения
Amphos - (4-(N,N-диметиламино)фенил)ди-трет-бутилфосфин;
безв. - безводный;
водн. - водный;
BuLi - бутиллитий;
DCM - дихлорметан;
DMAc - N,N-диметилацетамид;
DME - 1,2-диметоксиэтан;
DMF - N,N-диметилформамид;
DMSO - диметилсульфоксид;
EtOAc - этилацетат;
EtOH - этанол;
ч - час(ы);
HPLC - высокоэффективная жидкостная хроматография (или высокого давления);
KOtBu - трет-бутилат калия;
LCMS - жидкостная хроматография в сочетании с масс-спектрометрией;
MeCN - ацетонитрил;
2-MeTHF - 2-метил-тетрагидрофуран;
МеОН - метанол;
мин - минута(ы);
ЯМР - ядерный магнитный резонанс;
PEPPSI-iPr - [1,3-бис(2,6-диизопропилфенил)имидазол-2-илиден](3-
хлорпиридил)палладия(М) дихлорид;
2
Pd(OAc) - ацетат палладия(М);
2
PdCl(dppf) - [1,1'-бис(дифенилфосфино)ферроцен]-дихлорпалладий(II);
колич. - количественный;
КТ - комнатная температура;
насыщ. - насыщенный;
S-Phos - 2-дициклогексилфосфино-2',6'-диметоксибифенил;
TFA - трифторуксусная кислота;
THF - тетрагидрофуран.
Промежуточный пример 1
трет-Бутил-4-(2,6-дихлор-4-пиридил)пирроло[2,3-b]пиридин-1-карбоксилат
2
3
2
2
3
2
+
трет-Бутил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пирроло[2,3-b]пиридин-1-карбоксилат (1,07 г; 3,1 ммоль), 2,6-дихлор-4-иод-пиридин (850 мг; 3,1 ммоль), PdCl(PPh) (109 мг; 0,16 ммоль) и KCO (1,07 г; 7,76 ммоль) переносили в смесь DME:HO:EtOH (6:3:1; 8 мл) и полученную смесь перемешивали при 70°С в течение ночи. После охлаждения до КТ смесь концентрировали и полученный остаток переносили в DCM (10 мл). Смесь фильтровали и фильтрат очищали на колонке с силикагелем с элюированием 0-40% EtOAc в гептане, получая продукт в виде твердого вещества (270 мг; 33%). MS ES+ m/z365 [М+Н].
Промежуточный пример 2
4-(2-трет-Бутокси-6-хлор-4-пиридил)-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин
3
2
4
+
трет-Бутил-4-(2,6-дихлор-4-пиридил)индол-1-карбоксилат (500 мг; 1,37 ммоль), KOtBu (462 мг; 4,12 ммоль) и толуол (10 мл) смешивали и перемешивали при 100°С в течение 5 ч. После охлаждения до КТ смесь разбавляли EtOAc (20 мл) и добавляли 1 М водн. раствор HCl (10 мл). Через 10 мин значение рН подводили до 7, используя насыщ. водн. раствор NaHCO. Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (2×10 мл). Объединенные органические экстракты промывали рассолом, обрабатывали NaSO, фильтровали и концентрировали, получая продукт в виде смолообразного вещества (460 мг; колич.). MS ES+ m/z 302 [М+Н].
Промежуточный пример 3
4-[2-трет-Бутокси-6-[2-(трифторметил)фенил]-4-пиридил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин
2
2
3
2
2
4
+
4-(2-трет-Бутокси-6-хлор-4-пиридил)-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин (220 мг; 0,73 ммоль), [2-(трифторметил)фенил]бороновую кислоту (190 мг; 1 ммоль), PdCl(dppf) (30 мг; 0,04 ммоль) и KCO (302 мг; 2,19 ммоль) переносили в смесь 1,4-диоксан:HO:EtOH (6:3:1; 4 мл) и полученную смесь перемешивали при 80°С в течение ночи. После охлаждения до КТ добавляли EtOAc (3 мл) и рассол (3 мл) и органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc (2×3 мл). Объединенные органические экстракты обрабатывали NaSO, фильтровали и концентрировали, получая продукт (300 мг; колич.). MS ES+ m/z 412 [М+Н].
Пример 4
4-(1Н-Пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-[2-(трифторметил)фенил]-1Н-пиридин-2-он
3
2
4
6
1
+
4-[2-трет)-Бутокси-6-[2-(трифторметил)фенил]-4-пиридил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин (300 мг; 0,73 ммоль) переносили в DCM (3 мл) при КТ. Добавляли TFA (0,27 мл; 3,65 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение 1 ч. Смесь концентрировали и полученный остаток переносили в EtOAc (10 мл) и насыщ. водн. раствор NaHCO. Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (2×10 мл). Объединенные органические экстракты обрабатывали NaSO, фильтровали, концентрировали и очищали препаративной HPLC, получая продукт в виде твердого вещества (14 мг; 5%). Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ=12.10 (br. s., 1Н), 11.95 (br. s., 1Н), 8.30 (d, 1Н), 7.89 (d, 1Н), 7.83-7.76 (m, 1Н), 7.75-7.65 (m, 2Н), 7.61 (t, 1Н), 7.24 (d, 1Н), 6.75 (br. s., 1Н), 6.58 (d, 1Н). MS ES+ m/z 355 [М+Н].
Промежуточный пример 5
4-[2-трет-Бутокси-6-(3-метил-4-пиридил)-4-пиридил]-1Н-пирроло [2,3-b]пиридин
2
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 3, с использованием (3-метил-4-пиридил)бороновой кислоты и Pd(amphos)Cl, получая продукт (125 мг; 53%). MS ES+ m/z 359 [М+Н].
Пример 6
6-(3-Метил-4-пиридил)-4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он
1
+
6
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 4, с использованием 4-[2-трет-бутокси-6-(3-метил-4-пиридил)-4-пиридил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридина, получая продукт (70 мг; 66%). Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ=11.94 (br. s., 1Н), 11.78 (br. s., 1Н), 8.57 (s., 1Н), 8.52 (s., 1Н), 8.31 (s., 1Н), 7.61 (s., 1Н), 7.47 (s.,1H), 7.29 (s., 1Н), 6.77 (s., 1Н), 6.70 (s., 1Н), 6.63 (s., 1Н), 2.38 (s., 3Н). MS ES+ m/z303 [М+Н].
Промежуточный пример 7
4-[2-трет-Бутокси-6-(2-фенилпирролидин-1-ил)-4-пиридил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин
2
3
4
+
4-(2-трет-Бутокси-6-хлор-4-пиридил)-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин (134 мг; 0,44 ммоль) и 2-фенилпирролидин (131 мг; 0,89 ммоль) растворяли в толуоле (5 мл). Добавляли Pd(dba) (23 мг; 0,03 ммоль), Xphos (23 мг; 0,05 ммоль) и KOtBu (160 мг; 1,43 ммоль) и суспензию перемешивали при 100°С в течение 2 ч. Добавляли рассол и EtOAc, органический слой отделяли и водную фазу экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали 2 М водн. раствором HCl, водой, рассолом, обрабатывали MgSO, фильтровали и концентрировали, получая продукт (92 мг; 50%). MS ES+ m/z413 [М+Н].
Пример 8
6-(2-Фенилпирролидин-1-ил)-4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он
1
-1
+
6
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 4, с использованием 4-[2-трет-бутокси-6-(2-фенилпирролидин-1-ил)-4-пиридил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридина, получая продукт (6 мг; 8%). Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ млн 1.84 (br. s., 1Н), 1.94 (br. s., 2Н), 2.35-2.45 (m, 1Н), 3.66 (d, 1Н), 3.86 (br. s., 1Н), 4.98 (br. s., 1Н), 5.72-6.01 (m, 2Н), 7.02 (d, 1Н), 7.17-7.41 (m, 7Н), 8.20 (d, 1Н), 11.73 (br. s., 1Н). MS ES+ m/z 357 [М+Н].
Промежуточный пример 9
2-Метокси-6-(3-пиридил)пиридин-4-амин
2
2
3
4
+
2-Хлор-6-метокси-пиридин-4-амин (2 г; 12,61 ммоль), 3-пиридилбороновую кислоту (1,55 г; 0,01 моль), Pd(Amphos)Cl (0,73 г; 0,63 ммоль) и KCO (3,49 г; 0,03 моль) растворяли в MeCN (6 мл) и воде (2 мл) и смесь нагревали в микроволновом реакторе при 130°С в течение 30 мин. Смесь фильтровали и органический слой упаривали. Полученный остаток растворяли в EtOAc, промывали водой, рассолом, сушили над MgSO и концентрировали, получая продукт в виде твердого вещества (1,2 г; 47%). MS ES+ m/z 202 [М+Н].
Промежуточный пример 10
4-Хлор-2-метокси-6-(3-пиридил)пиридин
4
+
2-Метокси-6-(3-пиридил)пиридин-4-амин (1 г; 4,92 ммоль) и хлорид меди(I) (779 мг; 7,87 ммоль) суспендировали в ацетонитриле (25 мл) и охлаждали в ледяной бане. Добавляли изопентилнитрит (1,06 мл; 7,87 ммоль) и смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Добавляли воду (60 мл) и смесь экстрагировали этилацетатом (2×20 мл). Объединенные органические экстракты промывали рассолом (20 мл), обрабатывали MgSO, фильтровали, концентрировали и очищали на колонке с силикагелем с элюированием 0-30% EtOAc в гептане, получая продукт в виде твердого вещества (403 мг; 37%). MS ES+ m/z222 [М+Н].
Промежуточный пример 11
1-(Бензолсульфонил)-4-[2-метокси-6-(3-пиридил)-4-пиридил]-2-метил-пирроло[2,3-b]пиридин
2
3
2
2
3
2
4
+
4-Хлор-2-метокси-6-(3-пиридил)пиридин (90 мг; 0,41 ммоль), 1-(бензолсульфонил)-2-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пирроло[2,3-b]пиридин (187 мг; 0,47 ммоль), PdCl(PPh) (14 мг; 0,02 ммоль) и KCO (141 мг; 1,02 ммоль) переносили в MeCN (3 мл) и воду (0,5 мл) и полученную смесь нагревали в микроволновом реакторе при 140°С в течение 15 мин. Добавляли дополнительное количество 1-(бензолсульфонил)-2-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пирроло[2,3-b]пиридина (120 мг; 0,3 ммоль) и смесь еще раз нагревали при 140°С в течение 15 мин. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали. Полученный остаток переносили в EtOAc (10 мл) и воду (10 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (10 мл). Объединенные органические экстракты промывали рассолом, обрабатывали NaSO, фильтровали, концентрировали и очищали на колонке с силикагелем с элюированием 0-80% EtOAc в гептане, получая продукт (182 мг; 55%). MS ES+ m/z 457 [М+Н].
Пример 12
4-(2-Метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-(3-пиридил)-1Н-пиридин-2-он
1
+
6
1-(Бензолсульфонил)-4-[2-метокси-6-(3-пиридил)-4-пиридил]-2-метил-пирроло[2,3-b]пиридин (287 мг; 0,63 ммоль) переносили в 1,4-диоксан (2 мл) и добавляли 2 М водн. раствор HCl (2 мл). Полученную смесь нагревали в микроволновом реакторе при 130°С в течение 1,5 ч. Добавляли конц. HCl (0,5 мл) и смесь еще раз нагревали при 140°С в течение 1 ч. После охлаждения до КТ рН подводили до значения, превышающего 7, используя 2 М водн. раствор NaOH, и образовавшийся осадок отфильтровывали, промывали водой, EtOAc и сушили. Неочищенный продукт переносили в МеОН (4 мл) и нагревали в микроволновом реакторе при 150°С в течение 3 мин. После охлаждения до КТ полученный осадок отфильтровывали, последовательно промывали МеОН, 2-пропанолом, пентаном и сушили, получая продукт в виде твердого вещества (65 мг; 34%). Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ=12.03 (br. s., 1Н), 11.76 (br. s., 1Н), 9.11 (br. s., 1Н), 8.66 (d, 1Н), 8.30 (d, 1Н), 8.20 (d, 1Н), 7.59-7.48 (m, 1Н), 7.29 (d, 1Н), 7.20 (br. s., 1H), 6.80 (br. s., 1H), 6.40 (s, 1H), 2.44 (s, 3H). MS ES+ m/z 303 [M+H].
Промежуточный пример 13
4-(6-Хлор-4-иод-2-пиридил)морфолин
2
3
2
4
+
2,6-Дихлор-4-иод-пиридин (1,37 г; 5 ммоль), морфолин (0,56 мл; 6,5 ммоль), L-пролин (115 мг; 1 ммоль), CuI (95 мг; 0,5 ммоль) и KCO (1,38 г; 10 ммоль) переносили в DMSO (4 мл) и полученную смесь перемешивали при 70°С в течение ночи. После охлаждения до КТ добавляли воду (25 мл) и EtOAc (10 мл) и органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc (2×10 мл). Объединенные органические экстракты промывали рассолом, обрабатывали NaSO, фильтровали, концентрировали и очищали на колонке с силикагелем с элюированием 20-50% EtOAc в гептане, получая продукт в виде твердого вещества (865 мг; 53%). MS ES+ m/z 325 [М+Н].
Промежуточный пример 14
4-[4-[1-(Бензолсульфонил)-2-метил-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-6-хлор-2-пиридил]морфолин
3
4
2
3
2
2
4
+
1-(Бензолсульфонил)-2-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пирроло[2,3-b]пиридин (518 мг; 1,3 ммоль), 4-(6-хлор-4-иод-2-пиридил)морфолин (325 мг; 1 ммоль), Pd(PPh) (58 мг; 0,05 ммоль) и KCO (415 мг; 3 ммоль) переносили в смесь 1,4-диоксан:HO:EtOH (6:3:1; 10 мл) и полученную смесь перемешивали при 80°С в течение 2 ч. После охлаждения до КТ добавляли EtOAc (5 мл) и рассол (5 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (5 мл). Объединенные органические экстракты обрабатывали NaSO, фильтровали, концентрировали и очищали на колонке с силикагелем с элюированием 0-50% EtOAc в гептане, получая продукт в виде твердого вещества (470 мг; колич.). MS ES+ m/z 470 [М+Н].
Промежуточный пример 15
4-[6-Хлор-4-(2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-2-пиридил]морфолин
2
4
+
4-[4-[1-(Бензолсульфонил)-2-метил-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-6-хлор-2-пиридил]морфолин (335 мг; 0,71 ммоль), (2,4-диметоксифенил)метанол (144 мг; 0,86 ммоль), KOtBu (400 мг; 3,57 ммоль) и толуол (1 мл) смешивали и перемешивали при 90°С в течение 3 ч. После охлаждения до КТ добавляли EtOAc (10 мл), воду (5 мл) и рассол (5 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (2×5 мл). Объединенные органические экстракты промывали рассолом, обрабатывали NaSO, фильтровали и концентрировали, получая продукт в виде твердого вещества (300 мг; 64%). MS ES+m/z 330 [М+Н].
Пример 16
4-(2-Метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-морфолино-1Н-пиридин-2-он
2
3
2
4
6
1
+
4-[6-Хлор-4-(2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-2-пиридил]морфолин (300 мг; 0,46 ммоль), Pd(dba) (21 мг; 0,02 ммоль), XPhos (22 мг; 0,05 ммоль), 2 М водн. раствор KOH (1 мл) и 1,4-диоксан (2 мл) смешивали и нагревали в микроволновом реакторе при 150°С в течение 30 мин. После охлаждения до КТ смесь разбавляли EtOAc и водой. Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали рассолом, обрабатывали NaSO, фильтровали и очищали препаративной HPLC, получая продукт в виде твердого вещества (4 мг; 3%). Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ=11.66 (br. s., 1Н), 10.43 (br. s., 1Н), 8.14 (d, 1Н), 7.13 (d, 1Н), 6.38 (br. s., 1Н), 6.31 (s, 1Н), 6.22 (br. s., 1Н), 3.75-3.66 (m, 4Н), 3.43 (br. s., 4Н), 2.42 (s, 3Н). MS ES+ m/z 311 [М+Н].
Промежуточный пример 17
6-(2-Хлорфенил)-4-гидрокси-1 Н-пиридин-2-он
+
Этил-3-оксобутаноат (6,33 мл; 50 ммоль) по каплям добавляли к 60%-ной суспензии NaH (1,92 г; 50 ммоль) в 2-MeTHF (60 мл) при -78°С в атмосфере азота. Через 5 мин охлаждающую баню удаляли и смесь перемешивали при КТ в течение 20 мин. Смесь еще раз охлаждали до -78°С и медленно в течение 20 мин добавляли 1,6 М раствор н-BuLi (31,25 мл). Полученный раствор перемешивали при -78°С в течение 30 мин. Затем одной порцией добавляли 2-хлорбензонитрил (6,88 г; 50 ммоль) в виде твердого вещества и реакционную смесь перемешивали в охлаждающей бане с тающим льдом в течение ночи. Смесь охлаждали до 0°С и медленно добавляли МеОН (15 мл). Охлаждающую баню удаляли и смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин и затем еще раз охлаждали до 0°С. Смесь нейтрализовали, медленно добавляя конц. HCl, и полученный осадок отфильтровывали, промывали EtOH, пентаном и сушили, получая продукт в виде твердого вещества (11,08 г; 87%). MS ES+ m/z 222 [М+Н].
Промежуточный пример 18
2,4-Дихлор-6-(2-хлорфенил) пиридин
3
2
4
+
6-(2-Хлорфенил)-4-гидрокси-1Н-пиридин-2-он (5 г; 22,56 ммоль) переносили в POCl (40 мл) и медленно добавляли N,N-диметиланилин (5,5 мл; 43,4 ммоль). Полученную смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи. После охлаждения до КТ смесь выливали на лед (600 мл) и перемешивали при КТ в течение 30 мин. Осадок отфильтровывали и промывали водой. Твердое вещество растворяли в EtOAc (100 мл), обрабатывали NaSO, фильтровали и концентрировали, получая продукт в виде твердого вещества (7 г; 83%). MS ES+ m/z258 [М+Н].
Промежуточный пример 19
4-Хлор-6-(2-хлорфенил)-1Н-пиридин-2-он
2
4
4
+
2,4-Дихлор-6-(2-хлорфенил)пиридин (5,7 г; 22,05 ммоль) и KOtBu (6,19 г; 55,12 ммоль) переносили в толуол (75 мл) и полученную смесь перемешивали при 100°С в течение 2 ч. После охлаждения до КТ добавляли воду (40 мл) и органический слой отделяли. Водный слой слегка подкисляли, используя конц. HCl, и экстрагировали EtOAc (2×40 мл). Объединенные органические экстракты промывали рассолом (50 мл), обрабатывали NaSO, фильтровали и концентрировали. Полученный остаток переносили в DCM (30 мл) и добавляли TFA (5 мл; 67,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч, концентрировали и полученный остаток переносили в МеОН (25 мл). Добавляли 30%-ный раствор NHOH (20 мл) и воду (20 мл) и смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Образовавшийся осадок отфильтровывали, промывали водой, EtOH, пентаном и сушили, получая продукт в виде твердого вещества (4,13 г; 78%). MS ES+ m/z 240 [М+Н].
Промежуточный пример 20
1-(Бензолсульфонил)-4-хлор-пирроло[2,3-b]пиридин-2-карбальдегид
4
2
4
+
Бутиллитий (2,5 М раствор; 2,8 мл; 7 ммоль) медленно добавляли к раствору N-изопропилпропан-2-амина (1 мл; 7,14 ммоль) в 2-MeTHF (15 мл) при 0°С. Полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 5 мин и затем охлаждали до -78°С. По каплям добавляли раствор 1-(бензолсульфонил)-4-хлор-пирроло[2,3-b]пиридина (1,5 г; 5,12 ммоль) в 2-MeTHF (10 мл). Полученную смесь перемешивали при -78°С в течение 20 мин, затем охлаждающую баню удаляли. Смесь перемешивали при КТ в течение 10 мин, получая суспензию, и затем еще раз охлаждали до -78°С. По каплям добавляли DMF (1,2 мл; 15,6 ммоль), полученную смесь перемешивали в охлаждающей бане с тающим льдом в течение 30 мин и затем при КТ в течение 30 мин. Добавляли насыщ. водн. раствор NHCl (12 мл) и органический слой отделяли. Водный слой экстрагировали EtOAc (2×10 мл) и объединенные органические экстракты промывали 0,5 М водн. раствором HCl (20 мл), рассолом (15 мл), обрабатывали NaSO, фильтровали и концентрировали, получая продукт в виде смолообразного вещества (1,7 г; колич.). MS ES+ m/z 321 [М+Н].
Промежуточный пример 21
5-(4-Хлор-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-2-ил)оксазол
2
3
+
1-(Бензолсульфонил)-4-хлор-пирроло[2,3-b]пиридин-2-карбальдегид (1 г; 3,12 ммоль), TosMIC (толуолсульфонилметилизоцианид) (609 мг; 3,12 ммоль) и KCO (431 мг; 3,12 ммоль) переносили в МеОН (40 мл) и полученную смесь перемешивали при 70°С в течение 2 ч. После охлаждения до КТ смесь фильтровали и осадок промывали МеОН. Фильтрат концентрировали и полученный остаток перекристаллизовывали из EtOH, получая продукт в виде твердого вещества (120 мг; 18%). MS ES+ m/z 220 [М+Н].
Промежуточный пример 22
5-[4-(4,4,5,5-Тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-2-ил]оксазол
2
2
2
4
+
5-(4-Хлор-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-2-ил)оксазол (120 мг; 0,55 ммоль), 4,4,5,5-тетраметил-2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1,3,2-диоксаборолан (208 мг; 0,82 ммоль) и KOAc (161 мг; 1,64 ммоль) переносили в 1,4-диоксан (10 мл) и через смесь в течение 5 мин барботировали азот. Затем добавляли S-Phos (22 мг; 0,06 ммоль) и Pd(OAc) (6 мг; 0,03 ммоль) и полученную смесь перемешивали при 100°С в течение ночи. Еще раз добавляли 4,4,5,5-тетраметил-2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1,3,2-диоксаборолан (208 мг; 0,82 ммоль), KOAc (161 мг; 1,64 ммоль), S-Phos (22 мг; 0,06 ммоль) и Pd(OAc) (6 мг; 0,03 ммоль) и полученную смесь перемешивали при 100°С в течение ночи. Добавляли Pd-118 (25 мг) и перемешивание продолжали при 100°С в течение ночи. После охлаждения до КТ смесь фильтровали и к фильтрату добавляли воду (10 мл), рассол (10 мл) и EtOAc (10 мл). Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (2×10 мл). Объединенные органические экстракты сушили над NaSO, концентрировали и очищали на колонке с силикагелем с элюированием 0-10% МеОН в DCM, получая продукт в виде твердого вещества (160 мг; 66%). MS ES+ m/z 312 [М+Н].
Пример 23
6-(2-Хлорфенил)-4-(2-оксазол-5-ил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он
2
3
2
2
3
2
+
5-[4-(4,4,5,5-Тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-2-ил]оксазол (160 мг; 0,36 ммоль), 4-хлор-6-(2-хлорфенил)-1Н-пиридин-2-он (75 мг; 0,31 ммоль), PdCl(PPh) (11 мг; 0,02 ммоль) и KCO (130 мг; 0,94 ммоль) переносили в смесь 1,4-диоксан:HO:EtOH (6:3:1; 3 мл) и полученную смесь нагревали в микроволновом реакторе при 140°С в течение 15 мин. После охлаждения до КТ добавляли воду (2 мл) и смесь перемешивали при КТ в течение 15 мин. Полученный осадок отфильтровывали, последовательно промывали водой, 1,4-диоксаном и сушили. Неочищенный продукт суспендировали в кипящем 2-пропаноле (5 мл). После охлаждения до КТ осадок отфильтровывали и отбрасывали. Фильтрат концентрировали и полученный остаток суспендировали в небольшом количестве EtOH, фильтровали и концентрировали, получая продукт в виде твердого вещества (11 мг; 9%). MS ES+ m/z 389 [М+Н].
Промежуточный пример 24
1-(Бензолсульфонил)-4-хлор-2-(3-пиридил)пирроло[2,3-b]пиридин
3
4
2
3
4
+
1-(Бензолсульфонил)-4-хлор-2-иод-пирроло[2,3-b]пиридин (2,97 г; 7,09 ммоль), 3-пиридилбороновую кислоту (0,87 г; 7,09 ммоль), Pd(PPh) (0,41 г; 0,35 ммоль) и KCO (1,96 г; 14,2 ммоль) растворяли в MeCN (6 мл) и воде (2 мл) и смесь нагревали в микроволновом реакторе при 130°С в течение 30 мин. Смесь фильтровали и органический слой упаривали. Полученный остаток растворяли в EtOAc, промывали водой, рассолом, сушили над MgSO, концентрировали и очищали на колонке с силикагелем с элюированием 50%-ным EtOAc в гептане, получая продукт в виде твердого вещества (500 мг; 19%). MS ES+ m/z 370 [М+Н].
Промежуточный пример 25
1-(Бензолсульфонил)-2-(3-пиридил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пирроло[2,3-b]пиридин
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 22, с использованием 1-(бензолсульфонил)-4-хлор-2-(3-пиридил)пирроло[2,3-b]пиридина вместо 5-(4-хлор-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-2-ил)оксазола, получая продукт (100 мг; 16%). MS ES+ m/z 462 [М+Н].
Промежуточный пример 26
4-[1-(Бензолсульфонил)-2-(3-пиридил)пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-6-(2-хлорфенил)-1Н-пиридин-2-он
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 23, используя 1-(бензолсульфонил)-2-(3-пиридил)-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пирроло[2,3-b]пиридин вместо 5-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-2-ил]оксазола. После очистки на колонке с силикагелем с элюированием 0-10% МеОН в DCM получали продукт в виде твердого вещества (140 мг; 78%). MS ES+ m/z 462 [М+Н].
Пример 27
6-(2-Хлорфенил)-4-[2-(3-пиридил)-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он
1
+
6
4-[1-(Бензолсульфонил)-2-(3-пиридил)пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-6-(2-хлорфенил)-1Н-пиридин-2-он (140 мг; 0,26 ммоль) переносили в 1,4-диоксан (2 мл) и 2 М водн. раствор HCl (1 мл) и полученную смесь нагревали в микроволновом реакторе при 130°С в течение 30 мин. Добавляли 2 М водн. раствор NaOH (1 мл) и воду (3 мл) и полученный осадок отфильтровывали и промывали водой. Неочищенный продукт переносили в кипящий 2-пропанол (5 мл) и после охлаждения до КТ осадок отфильтровывали и сушили, получая продукт в виде твердого вещества (15 мг; 15%). Н ЯМР (400МГц, DMSO-d) δ=12.59 (br. s., 1Н), 9.27-9.19 (m, 1H), 8.56 (d, 1H), 8.41-8.30 (m, 2H), 7.72-7.58 (m, 2H), 7.57-7.43 (m, 4H), 7.35-7.24 (m, 2H), 6.81 (d, 1H). MS ES+ m/z 399 [M+H].
Промежуточный пример 28
4-[1-(Бензолсульфонил)-2-метил-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-6-(2-хлорфенил)-1Н-пиридин-2-он
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 23, используя 1-(бензолсульфонил)-2-метил-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)пирроло[2,3-b]пиридин вместо 5-[4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-2-ил]оксазола. После очистки на колонке с силикагелем с элюированием 50-100% EtOAc в гептане получали продукт в виде твердого вещества (140 мг; 88%). MS ES+ m/z 476 [М+Н].
Пример 29
6-(2-Хлорфенил)-4-(2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он
1
+
6
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 27, с использованием 4-[1-(бензолсульфонил)-2-метил-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-6-(2-хлорфенил)-1Н-пиридин-2-она вместо 4-[1-(бензолсульфонил)-2-(3-пиридил)пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-6-(2-хлорфенил)-1Н-пиридин-2-она, получая продукт в виде твердого вещества (25 мг; 25%). Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d) δ = 12.03 (br. s., 1Н), 11.75 (br. s., 1Н), 8.18 (d, 1Н), 7.65-7.58 (m, 2Н), 7.54-7.42 (m, 3Н), 7.20 (d, 1 Н), 6.71 (br. s., 1Н), 6.35 (s, 1Н), 2.43 (s, 3Н). MS ES+ m/z 336 [М+Н].
Промежуточный пример 30
4-Бензилокси-2,6-дихлор-пиридин
4
+
60%-ную суспензию NaH (945 мг; 24,7 ммоль) порциями добавляли к раствору 2,4,6-трихлорпиридина (4,5 г; 24,7 ммоль) в DMF (25 мл) при 0°С. Через 20 мин по каплям добавляли фенил метанол (2,7 г; 24,7 ммоль) и смесь перемешивали в течение 3 ч. Добавляли воду (30 мл) и осадок отфильтровывали. Твердое вещество растворяли в EtOAc, обрабатывали MgSO, фильтровали и концентрировали, получая продукт в виде твердого вещества (5 г; 80%). MS ES+ m/z254 [М+Н].
Промежуточный пример 31
4-Бензилокси-2-трет-бутокси-6-хлор-пиридин
+
4-Бензилокси-2,6-дихлор-пиридин (5 г; 19,7 ммоль) и KOtBu (2,2 г; 19,7 ммоль) растворяли в 2-MeTHF (25 мл) и смесь перемешивали при 70°С в течение 2 ч. После охлаждения до КТ смесь фильтровали, концентрировали и очищали на колонке с силикагелем с элюированием 30%-ным EtOAc в гептане, получая продукт (4 г; 70%). MS ES+ m/z 292 [М+Н].
Промежуточный пример 32
4-Бензилокси-2-трет-бутокси-6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]пиридин
+
4-Бензилокси-2-трет-бутокси-6-хлор-пиридин (4 г; 13,7 ммоль), 2-(трифторметил)пиперидин (2,3 г; 15,1 ммоль), PEPPSl-iPr (146 мг; 1,37 ммоль) и KOtBu (3,85 г; 34,3 ммоль) переносили в 1,4-диоксан (30 мл) и смесь перемешивали при 90°С в течение 2 ч. После охлаждения до КТ добавляли воду и EtOAc и органический слой отделяли, фильтровали, концентрировали и очищали на колонке с силикагелем с элюированием 30%-ным EtOAc в гептане, получая продукт (4,1 г; 73%). MS ES+ m/z 409 [М+Н].
Промежуточный пример 33
2-трет-Бутокси-6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]пиридин-4-ол
+
Смесь 4-бензилокси-2-трет-бутокси-6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]пиридина (3,5 г; 8,57 ммоль) и 10%-ного Pd/C (600 мг; 0,56 ммоль) в МеОН и EtOAc гидрировали (1,5 бар (150 кПа)) при КТ в течение 2 ч. Смесь фильтровали через целит и концентрировали, получая продукт (2,7 г; колич.). MS ES+ m/z 319 [М+Н].
Промежуточный пример 34
[2-трет-Бутокси-6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]-4-пиридил]-трифторметансульфонат
3
3
+
2-трет-Бутокси-6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]пиридин-4-ол (2,7 г; 8,48 ммоль) и EtN (1,66 мл; 11,9 ммоль) переносили в DCM (20 мл) при 0°С. По каплям в течение 5 минут добавляли трифторметилсульфонил-трифторметансульфонат (2,54 мл; 11,9 ммоль) и перемешивали в течение 1 ч. Смесь промывали насыщ. водн. раствором NaHCO (2×20 мл), концентрировали и очищали на колонке с силикагелем с элюированием 20%-ным EtOAc в гептане, получая продукт (3,5 г; 92%). MS ES+ m/z 451 [М+Н].
Промежуточный пример 35
2-трет-Бутокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]пиридин
2
+
4,4,5,5-Тетраметил-2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1,3,2-диоксаборолан (2,96 г; 11,7 ммоль), [2-трет-бутокси-6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]-4-пиридил]трифторметансульфонат (3,5 г; 7,77 ммоль), KOAc (1,14 г; 11,7 ммоль) и PdCl(dppf) (215 мг; 0,29 ммоль) переносили в толуол (10 мл) и перемешивали при 90°С в течение 5 ч. После охлаждения до КТ смесь концентрировали и остаток растворяли в EtOAc, промывали водой, концентрировали и очищали на колонке с силикагелем с элюированием 0-60% EtOAc в гептане, получая продукт (2,15 г; 65%). MS ES+ m/z347 [М+Н].
Пример 36
4-(2-Метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]-1Н-пиридин-2-он
2
3
2
4
4
1
-1
+
2-трет-Бутокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]пиридин (110 мг; 0,26 ммоль), 4-хлор-2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин (95 мг; 0,57 ммоль), KCO (89 мг; 0,64 ммоль) и PdCl(dppf) (14 мг; 0,02 ммоль) переносили в 1,4-диоксан и воду и смесь перемешивали при 90°С в течение 2 ч. После охлаждения до КТ добавляли EtOAc и смесь фильтровали. Органический слой отделяли, сушили над MgSO и концентрировали. Полученный остаток растворяли в DCM, добавляли TFA (0,11 мл; 1,54 ммоль), смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин, концентрировали и очищали препаративной HPLC, получая продукт в виде твердого вещества (3,4 мг; 3%). Н ЯМР (500 МГц, метанол-d) δ млн 1.62-1.70 (m, 1Н), 1.76-1.94 (m, 4Н), 2.07-2.16 (m, 1Н), 2.51 (d, 3Н), 3.19-3.28 (m, 1Н), 3.85-4.06 (m, 1Н), 5.37 (br d, 1Н), 6.32 (d, 1Н), 6.36 (d, 1Н), 6.39-6.47 (m, 1Н), 7.17 (d, 1Н), 8.06-8.27 (m, 1Н). MS ES+ m/z 377 [М+Н].
Пример 37
4-(1Н-Пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]-1Н-пиридин-2-он
2
3
2
4
4
1
-1
+
4-Хлор-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин (43 мг; 0,28 ммоль), 2-трет-бутокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]пиридин (100 мг; 0,23 ммоль), KCO (81 мг; 0,58 ммоль) и PdCl(dppf) (13 мг; 0,02 ммоль) переносили в 1,4-диоксан и воду и смесь нагревали в микроволновом реакторе при 120°С в течение 1 ч. После охлаждения до КТ добавляли EtOAc и смесь фильтровали. Органический слой отделяли, сушили над MgSO, концентрировали и очищали препаративной HPLC, получая продукт в виде твердого вещества (3,4 мг; 4%). Н ЯМР (500 МГц, метанол-d) δ млн 1.57-1.69 (m, 1Н), 1.77-1.95 (m, 4Н), 2.07-2.18 (m, 1Н), 3.20-3.31 (m, 1Н), 3.98 (br d, 1Н), 5.27-5.57 (m, 1Н), 6.34 (d, 1Н), 6.46 (s, 1Н), 6.67 (d, 1Н), 7.28 (s, 1Н), 7.49 (d, 1Н), 8.15-8.39 (m, 1Н). MS ES+ m/z 363 [М+Н].
Промежуточный пример 38
4-(4-Бензилокси-6-трет-бутокси-2-пиридил)-3-(трифторметил)морфолин
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 32, с использованием 3-(трифторметил)морфолина вместо 2-(трифторметил)пиперидина, получая продукт в виде масла (1 г; 50%). MS ES+ m/z411 [М+Н].
Промежуточный пример 39
2-трет-Бутокси-6-[3-(трифторметил)морфолин-4-ил]пиридин-4-ол
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 33, получая продукт (780 мг; 99%). MS ES+ m/z 321 [М+Н].
Промежуточный пример 40
[2-трет-Бутокси-6-[3-(трифторметил)морфолин-4-ил]-4-пиридил]-трифторметансульфонат
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 34, получая продукт в виде масла (800 мг; 81%). MS ES+ m/z453 [М+Н].
Промежуточный пример 41
4-[6-трет-Бутокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-пиридил]-3-(трифторметил)морфолин
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 35, получая продукт (270 мг; 33%). MS ES+ m/z431 [М+Н].
Пример 42
4-(1Н-Пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-[3-(трифторметил)морфолин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он
1
-1
+
4
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 36 с, использованием 4-[6-трет-бутокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-пиридил]-3-(трифторметил)морфолина и 4-хлор-1Н-пирроло[2,3-b]пиридина, получая продукт (20 мг; 22%). Н ЯМР (500 МГц, метанол-d) δ млн 3.44-3.51 (m, 1Н), 3.63 (td, 2.99 Гц, 1Н), 3.72-3.83 (m, 2Н), 3.99 (dd, 1Н), 4.26 (d, 1Н), 5.18 (qd, 1Н), 6.35-6.39 (m, 1Н), 6.37 (s, 1Н), 6.41 (s, 1Н), 6.65 (d, 1Н), 7.20 (d, 1Н), 7.43 (d, 1Н), 8.23 (d, 1Н). MS ES+ m/z 365 [М+Н].
Промежуточный пример 43
1-(Бензолсульфонил)-4-хлор-2-[3-(трифторметил)фенил]пирроло[2,3-b]пиридин
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 24, исходя из [3-(трифторметил)фенил]бороновой кислоты, получая продукт (1,5 г; 29%). MS ES+ m/z 437 [М+Н].
Промежуточный пример 44
4-Хлор-2-[3-(трифторметил)фенил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин
2
4
+
5 М раствор NaOH в МеОН (1,37 мл; 6,88 ммоль) добавляли к раствору 1-(бензолсульфонил)-4-хлор-2-[3-(трифторметил)фенил]пирроло[2,3-b]пиридина (1,5 г; 3,44 ммоль) в МеОН (10 мл) и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч. Добавляли воду и смесь экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты обрабатывали NaSO, фильтровали и очищали на колонке с силикагелем, получая продукт в виде твердого вещества (510 мг; 50%). MS ES+ m/z297 [М+Н].
Пример 45
6-[3-(Трифторметил)морфолин-4-ил]-4-[2-[3-(трифторметил)фенил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он
1
-1
+
4
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 36, с использованием 4-[6-трет-бутокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-пиридил]-3-(трифторметил)морфолина и 4-хлор-2-[3-(трифторметил)фенил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридина, получая продукт (7 мг; 7%). Н ЯМР (500 МГц, метанол-d) δ млн 3.46-3.53 (m, 1Н), 3.67 (td, 3,00 Гц, 1Н), 3.81-3.93 (m, 2Н), 4.03 (dd, 1Н), 4.30 (d, 1Н), 5.21-5.28 (m, 1Н), 6.46 (d, 1Н), 6.54 (s, 1Н), 7.14 (s, 1Н), 7.28 (d, 1Н), 7.66-7.70 (m, 2Н), 8.14-8.18 (m, 1Н), 8.21 (s, 1Н), 8.31 (d, 1Н). MS ES+ m/z 509 [М+Н].
Промежуточный пример 46
1-(Бензолсульфонил)-4-хлор-2-(5-метил-2-тиенил)пирроло[2,3-b]пиридин
3
4
4
+
Смесь трибутил-(5-метил-2-тиенил)станнана (6 г; 15,46 ммоль), 1-(бензолсульфонил)-4-хлор-2-иод-пирроло[2,3-b]пиридина (5,1 г; 12,88 ммоль), Pd(PPh) (1,7 г; 0,64 ммоль) и 2 М водн. раствора Na2C03 (12 мл) в 1,4-диоксане (25 мл) продували аргоном и перемешивали при 100°С в течение ночи. После охлаждения до КТ смесь разбавляли EtOAc, промывали водой, рассолом, сушили над MgSO, концентрировали и очищали на колонке с силикагелем, получая продукт в виде твердого вещества (2 г; 33%). MS ES+ m/z 389 [М+Н].
Промежуточный пример 47
4-Хлор-2-(5-метил-2-тиенил)-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 44, исходя из 1-(бензолсульфонил)-4-хлор-2-(5-метил-2-тиенил)пирроло[2,3-b]пиридина, получая продукт (835 мг; 59%). MS ES+ m/z 249 [М+Н].
Пример 48
4-[2-(5-Метил-2-тиенил)-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-6-[3-(трифторметил)морфолин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он
1
-1
+
4
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 36, с использованием 4-[6-трет-бутокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-пиридил]-3-(трифторметил)морфолина и 4-хлор-2-(5-метил-2-тиенил)-1Н-пирроло[2,3-b]пиридина, получая продукт (5 мг; 5%). Н ЯМР (500 МГц, метанол-d) δ млн 2.51 (s, 3Н), 3.43-3.55 (m, 1Н), 3.64 (br d, 1Н), 3.73 (br s, 1Н), 3.81 (br d, 1Н), 4.02 (br d, 1Н), 4.28 (br d, 1Н), 5.11 (br s, 1H), 6.40 (br d, 2H), 6.65-6.71 (m, 1H), 6.76 (br s, 1H), 7.12-7.16 (m, 1H), 7.25-7.31 (m, 1H), 8.17 (br d, 1H). MS ES+ m/z 461 [M+H].
Пример 49
4-(1Н-Пиразоло[3,4-b]пиридин-4-ил)-6-[2-(трифторметил)-1-пиперидил]-1Н-пиридин-2-он
1
-1
+
4
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 36, с использованием 4-хлор-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридина, получая продукт (6 мг; 7%). Н ЯМР (500 МГц, метанол-d) δ млн 1.65 (br d, 1Н), 1.78 (br s, 1Н), 1.80-1.91 (m, 3Н), 2.12 (brd, 1Н), 3.24 (br t, 1H), 4.07 (br d, 1H), 5.47 (br s, 1H), 6.38 (s, 1H), 6.53 (s, 1H), 7.33-7.48 (m, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.61 (d, 1H). MS ES+ m/z461 [M+H].
Промежуточный пример 50
2-[[4-Хлор-2-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,3-b]пиридин-1-ил]метокси]этил-триметил-силан
3
4
2
3
+
Смесь [4-хлор-1-(2-триметилсилилэтоксиметил)пирроло[2,3-b]пиридин-2-ил]бороновой кислоты (2 г; 12,26 ммоль), 5-бром-2-(трифторметил)пиримидина (2,6 г; 12,26 ммоль), Pd(PPh) (1,4 г; 1,22 ммоль) и 2 М водн. раствора NaCO (2 мл) в 1,4-диоксане (30 мл) продували аргоном и перемешивали при 100°С в течение ночи. После охлаждения до КТ смесь концентрировали и очищали на колонке с силикагелем, получая продукт (1,5 г; 28%). MS ES+ m/z 429 [М+Н].
Промежуточный пример 51
4-Хлор-2-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин
+
1 М раствор фторида тетрабутиламмония (TBAF) в THF (20,8 мл; 20,8 ммоль) добавляли к раствору 2-[[4-хлор-2-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]пирроло[2,3-b]пиридин-1-ил]метокси]этил-триметил-силана (2 г; 4,16 ммоль) в THF (10 мл) и полученную смесь кипятили с обратным холодильником в течение ночи. После охлаждения до КТ смесь концентрировали, очищали на колонке с силикагелем, затем препаративной HPLC, получая продукт в виде твердого вещества (530 мг; 43%). MS ES+ m/z 299 [М+Н].
Пример 52
6-[2-(Трифторметил)-1-пиперидил]-4-[2-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он
1
-1
+
6
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 36,с использованием 4-хлор-2-[2-(трифторметил)пиримидин-5-ил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридина, получая продукт (8 мг; 6%). Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ млн 1.46-1.60 (m, 1Н), 1.70 (br s, 2Н), 1.76 (br d, 2Н), 2.02 (br d, 1Н), 3.07 (br s, 1H), 4.15-4.30 (m, 1H), 5.50-5.68 (m, 1H), 6.34 (s, 1H), 6.62 (br s, 1H), 7.32 (d, 1H), 7.55 (s, 1H), 8.42 (d, 1H), 9.65 (s, 2H), 10.45 (br s, 1H), 12.78 (br s, 1H). MS ES+ m/z 509 [M+H].
Промежуточный пример 53
2-[[4-Хлор-2-[6-(трифторметил)-3-пиридил]пирроло[2,3-b]пиридин-1-ил]метокси]этил-триметил-силан
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 50, с использованием 5-бром-2-(трифторметил)пиридина, получая продукт (1,5 г; 79%). MS ES+ m/z 428 [М+Н].
Промежуточный пример 54
4-Хлор-2-[6-(трифторметил)-3-пиридил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 51, получая продукт (520 мг; 50%). MS ES+ m/z 298 [М+Н].
Пример 55
6-[2-(Трифторметил)-1-пиперидил]-4-[2-[6-(трифторметил)-3-пиридил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он
1
-1
+
6
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 36, с использованием 4-хлор-2-[6-(трифторметил)-3-пиридил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридина, получая продукт (6 мг; 5%). Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ млн 1.53 (br d, 1Н), 1.69 (brs, 2Н), 1.72-1.86 (m, 2Н), 2.02 (br d, 1Н), 3.07 (br t, 1H), 4.23 (brd, 1H), 5.58 (brs, 1H), 6.35 (s, 1H), 6.61 (brs, 1H), 7.30 (d, 1H),7.40(s, 1H), 8.02 (d, 1H),8.39 (d, 1H), 8.64 (dd, 1H), 9.40 (d, 1H), 10.44 (brs, 1H), 12.68 (br s, 1H). MS ES+ m/z 508 [M+H].
Промежуточный пример 56
2-[[4-Хлор-2-[5-(трифторметил)-3-пиридил]пирроло[2,3-b]пиридин-1-ил]метокси]этил-триметил-силан
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 50, с использованием 3-бром-5-(трифторметил)пиридина, получая продукт (800 мг; 30%). MS ES+ m/z 428 [М+Н].
Промежуточный пример 57
4-Хлор-2-[5-(трифторметил)-3-пиридил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 51, получая продукт (300 мг; 43%). MS ES+ m/z 298 [М+Н].
Пример 58
6-[2-(Трифторметил)-1-пиперидил]-4-[2-[5-(трифторметил)-3-пиридил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил]-1Н-пиридин-2-он
1
-1
+
6
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 36, с использованием 4-хлор-2-[5-(трифторметил)-3-пиридил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридина, получая продукт (7 мг; 6%). Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ млн 1.47-1.63 (m, 1Н), 1.69 (br s, 2Н), 1.72-1.86 (m, 2Н), 2.02 (br d, 1Н), 3.06 (br t, 1Н), 4.24 (br d, 1H), 5.58 (br s, 1H), 6.36 (s, 1H), 6.61 (br s, 1H), 7.29 (d, 1H), 7.46 (s, 1H), 8.38 (d, 1H), 8.82 (s, 1H), 8.93 (d, 1H), 9.52 (d, 1H), 10.43 (br s, 1H), 12.63 (br s, 1H). MS ES+ m/z508 [M+H].
Промежуточный пример 59
1-[(4-Фторфенил)метилсульфонил]-3-(трифторметил)пиперазин
2
4
+
2-(Трифторметил)-пиперазин (2 г; 13 ммоль) и триэтиламин (TEA; 2,17 мл; 15,6 ммоль) растворяли в DCM (30 мл). Малыми порциями при 0°С добавляли (4-фторфенил)метансульфонилхлорид (2,71 г; 13 ммоль) и смесь перемешивали при КТ в течение ночи. Добавляли воду (45 мл) и смесь экстрагировали DCM (2×80 мл). Объединенные органические экстракты дважды промывали рассолом, обрабатывали NaSO, фильтровали и концентрировали, получая продукт в виде твердого вещества (3,5 г; 83%). MS ES+ m/z 327 [М+Н].
Промежуточный пример 60
1-(4-Бензилокси-6-трет-бутокси-2-пиридил)-4-[(4-фторфенил)метилсульфонил]-2-(трифторметил)пиперазин
2
3
2
+
Смесь 1-[(4-фторфенил)метилсульфонил]-3-(трифторметил)пиперазина (1,2 г; 3,68 ммоль), 4-бензилокси-2-трет-бутокси-6-хлор-пиридина (1,34 г; 4,6 ммоль), CsCO (2,4 г; 7,35 ммоль), XantPhos (4,5-бис(дифенилфосфино)-9,9-диметилксантен) (206 мг; 0,37 ммоль) и Pd(OAc) (83 мг; 0,37 ммоль) в безводном дегазированном 1,4-диоксане (50 мл) кипятили с обратным холодильником в течение ночи в атмосфере аргона. Добавляли воду и смесь экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты обрабатывали Na2S04, фильтровали, концентрировали и очищали на колонке с силикагелем с элюированием 0-100% EtOAc в гептане, получая продукт (1,25 г; 58%). MS ES+ m/z582 [М+Н].
Промежуточный пример 61
2-трет-Бутокси-6-[4-[(4-фторфенил)метилсульфонил]-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]пиридин-4-ол
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 33, получая продукт (1,22 г; 96%). MS ES+ m/z492 [М+Н].
Промежуточный пример 62
[2-трет-Бутокси-6-[4-[(4-фторфенил)метилсульфонил]-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-4-пиридил]трифторметансульфонат
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 34, получая продукт (700 мг; 45%). MS ES+ m/z 624 [М+Н].
Промежуточный пример 63
1-[6-трет-Бутокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-пиридил]-4-[(4-фторфенил)метилсульфонил]-2-(трифторметил)пиперазин
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 35, получая продукт (490 мг; 73%). MS ES+ m/z 602 [М+Н].
Промежуточный пример 64
4-[2-трет-Бутокси-6-[4-[(4-фторфенил)метилсульфонил]-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-4-пиридил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 3, исходя из 1-[6-трет)-бутокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-пиридил]-4-[(4-фторфенил)метилсульфонил]-2-(трифторметил)пиперазина, получая продукт (70 мг; 49%). MS ES+ m/z 592 [М+Н].
Пример 65
6-[4-[(4-Фторфенил)метилсульфонил]-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он
1
-1
+
6
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 4, с использованием 4-[2-трет-бутокси-6-[4-[(4-фторфенил) метил сульфонил]-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-4-пиридил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридина, получая продукт (15 мг; 24%). Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ млн 2.85-3.00 (m, 1Н), 3.10-3.28 (m, 2Н), 3.58-3.66 (m, 1Н), 3.86-3.92 (m, 1Н), 4.28-4.35 (m, 1Н), 4.47-4.56 (m, 1Н), 4.50-4.52 (m, 1Н), 5.56 (br s, 1Н), 6.33-6.40 (m, 1Н), 6.54-6.60 (m, 1Н), 6.61-6.66 (m, 1Н), 7.16-7.26 (m, 3Н), 7.45-7.51 (m, 2Н), 7.55-7.61 (m, 1Н), 8.27-8.32 (m, 1Н), 10.61 (br s, 1Н), 11.85 (br s, 1Н). MS ES+ m/z 536 [М+Н].
Промежуточный пример 66
1-Этилсульфонил-3-(трифторметил)пиперазин
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 59, с использованием этансульфонилхлорида, получая продукт в виде твердого вещества (3 г; 98%). MS ES+ m/z 247 [М+Н].
Промежуточный пример 67
1-(4-Бензилокси-6-трет-бутокси-2-пиридил)-4-этилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 60, с использованием 1-этилсульфонил-3-(трифторметил)пиперазина, получая продукт в виде твердого вещества (2,53 г; 67%). MS ES+ m/z 502 [М+Н].
Промежуточный пример 68
2-трет-Бутокси-6-[4-этилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]пиридин-4-ол
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 33, получая продукт (1,94 г; 85%). MS ES+ m/z 412 [М+Н].
Промежуточный пример 69
[2-трет-Бутокси-6-[4-этилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-4-пиридил]трифторметансульфонат
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 34, получая продукт (1,56 г; 62%). MS ES+ m/z 544 [М+Н].
Промежуточный пример 70
1-[6-трет-Бутокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-пиридил]-4-этилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 35, получая продукт (1,2 г; 86%). MS ES+ m/z 440 [М+Н] (бороновая кислота).
Пример 71
6-[4-Этилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-4-(1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он
1
-1
+
6
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 36, с использованием 1-[6-трет-бутокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-пиридил]-4-этилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазина и 4-хлор-1Н-пирроло[2,3-b]пиридина, получая продукт (6 мг; 7%). Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ млн 1.23 (t, 3Н), 2.97-3.05 (m, 1Н), 3.13 (q, 2Н), 3.22-3.30 (m, 2Н), 3.66 (br d, 1Н), 3.95 (br d, 1Н), 4.34 (br d, 1H), 5.62 (br s, 1H), 6.37 (s, 1H), 6.59 (dd, 1H), 6.65 (br s, 1H), 7.24 (d, 1H), 7.58 (s, 1H), 8.30 (d, 1H), 10.58 (br s, 1H), 11.85 (br s, 1H). MS ES+ m/z456 [M+H].
Пример 72
4-(2-Циклопропил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-[4-этилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-1Н-пиридин-2-он
1
-1
+
4
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 36, с использованием 1-[6-трет-бутокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-пиридил]-4-этилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазина и 4-хлор-2-циклопропил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридина, получая продукт (6 мг; 6%). Н ЯМР (500 МГц, метанол-d) δ млн 0.84-0.94 (m, 2Н), 1.04-1.09 (m, 2Н), 1.36 (t, 3Н), 2.07-2.13 (m, 1Н), 3.03-3.16 (m, 3Н), 3.29 (brs, 1Н), 3.45 (brt, 1Н), 3.80 (br d, 1Н), 4.10-4.21 (m, 2Н), 5.57 (br s, 1Н), 6.28 (s, 1Н), 6.40 (s, 1Н), 6.55 (s, 1Н), 7.17 (d, 1Н), 8.14 (d, 1Н). MS ES+ m/z 496 [М+Н].
Пример 73
6-[4-Этилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-4-(2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он
1
-1
+
6
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 36, с использованием 1-[6-трет-бутокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-пиридил]-4-этилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазина и 4-хлор-2-метил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридина, получая продукт в виде твердого вещества (10 мг; 11%). Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ млн 1.20-1.29 (m, 3Н), 2.43 (s, 3Н), 2.97-3.03 (m, 1Н), 3.09-3.18 (m, 2Н), 3.21-3.30 (m, 2Н), 3.58-3.79 (m, 1Н), 3.95 (br d, 1Н), 4.32 (br d, 1Н), 5.55-5.76 (m, 1Н), 6.23-6.42 (m, 2Н), 6.63 (br s, 1Н), 7.17 (d, 1Н), 8.17 (d, 1Н), 10.54 (brs, 1Н), 11.67 (s, 1Н). MS ES+ m/z470 [М+Н].
Пример 74
4-[2-[4-Этилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-6-оксо-1Н-пиридин-4-ил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-2-карбонитрил
1
-1
+
4
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 36, с использованием 1-[6-трет-бутокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-2-пиридил]-4-этилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазина и 4-хлор-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-2-карбонитрила, получая продукт в виде твердого вещества (6 мг; 6%). Н ЯМР (500 МГц, метанол-d) δ млн 1.36 (t, 3Н), 3.11 (d, 3Н), 3.27-3.32 (m, 1Н), 3.42-3.50 (m, 1Н), 3.72-3.89 (m, 1Н), 4.10-4.17 (m, 1Н), 4.17-4.25 (m, 1Н), 5.64 (br d, 1Н), 6.39 (d, 1Н), 6.57 (s, 1Н), 7.36-7.42 (m, 2Н), 8.51-8.56 (m, 1Н). MS ES+ m/z 481 [М+Н].
Промежуточный пример 75
4-Бензилокси-2-трет-бутокси-6-[2-(трифторметил)фенил]пиридин
2
3
2
2
4
+
4-Бензилокси-2-трет)-бутокси-6-хлор-пиридин (1,46 г; 5 ммоль), [2-(трифторметил)фенил]бороновую кислоту (950 мг; 5 ммоль), KCO (1,73 г; 12,5 ммоль) и PdCl(dppf) (366 мг; 0,5 ммоль) растворяли в 1,4-диоксане (25 мл) и воде (5 мл) и полученную смесь перемешивали при 90°С в течение 2 ч. После охлаждения до КТ смесь разбавляли водой и EtOAc. Органический слой отделяли и водный слой экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты фильтровали через целит, обрабатывали NaSO, фильтровали, концентрировали и очищали на колонке с силикагелем с элюированием 0-80% EtOAc в гептане, получая продукт в виде твердого вещества (1,58 г; 79%). MS ES+ m/z 402 [М+Н].
Промежуточный пример 76
2-трет-Бутокси-6-[2-(трифторметил)фенил]пиридин-4-ол
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 33, получая продукт (948 мг; 72%). MS ES+ m/z 312 [М+Н].
Промежуточный пример 77
[2-трет-Бутокси-6-[2-(трифторметил)фенил]-4-пиридил]-трифторметансульфонат
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 34, получая продукт (720 мг; 54%). MS ES+ m/z 388 [M-tBu].
Промежуточный пример 78
2-трет-Бутокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-6-[2-(трифторметил)фенил]пиридин
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 35, получая продукт (450 мг; 76%). MS ES+ m/z 340 [М+Н] (бороновая кислота).
Пример 79
4-(2-Циклопропил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-4-ил)-6-[2-(трифторметил)фенил]-1Н-пиридин-2-он
1
-1
+
6
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 36, с использованием 2-трет-бутокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-6-[2-(трифторметил)фенил]пиридина и 4-хлор-2-циклопропил-1Н-пирроло[2,3-b]пиридина, получая продукт в виде твердого вещества (10 мг; 10%). Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ млн 0.84-0.91 (m, 2Н), 0.98-1.05 (m, 2Н), 2.04-2.12 (m, 1Н), 6.23-6.29 (m, 1Н), 6.44-6.65 (m, 1Н), 6.69-6.78 (m, 1Н), 7.12-7.17 (m, 1Н), 7.66-7.70 (m, 1Н), 7.71-7.76 (m, 1Н), 7.78-7.83 (m, 1Н), 7.88-7.92 (m, 1Н), 8.13-8.19 (m, 1Н), 11.74 (br s, 1Н), 11.66-11.79 (m, 1Н). MS ES+ m/z 396 [М+Н].
Пример 80
4-[2-Оксо-6-[2-(трифторметил)фенил]-1Н-пиридин-4-ил]-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-2-карбонитрил
1
-1
+
6
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 36, с использованием 2-трет-бутокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-6-[2-(трифторметил)фенил]пиридина и 4-хлор-1Н-пирроло[2,3-b]пиридин-2-карбонитрила и с очисткой промежуточного соединения на короткой колонке с силикагелем и последующим добавлением TFA, получая продукт в виде твердого вещества (5 мг; 3%). Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ млн 6.44-6.69 (m, 1Н), 6.74-6.82 (m, 1Н), 7.38-7.44 (m, 1Н), 7.46-7.52 (m, 1Н), 7.68-7.76 (m, 2Н), 7.76-7.83 (m, 1Н), 7.86-7.91 (m, 1H), 8.54-8.59 (m, 1H), 11.34-12.51 (m, 1H), 12.64-13.76 (m, 1H). MS ES+ m/z 381 [M+H].
Промежуточный пример 81
4-[2-трет-Бутокси-6-[2-(трифторметил)фенил]-4-пиридил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин
2
3
2
2
4
+
Смесь 4-хлор-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридина (61 мг; 0,4 ммоль), 2-трет-бутокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-6-[2-(трифторметил)фенил]пиридина (211 мг; 0,5 ммоль), KCO (111 мг; 0,8 ммоль) и PdCl(Amphos) (15 мг; 0,02 ммоль) в 1,4-диоксане (3 мл) и воде (0,75 мл) перемешивали при 90°С в течение 2,5 ч. После охлаждения до КТ добавляли рассол и смесь экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты обрабатывали NaSO, фильтровали, концентрировали и очищали на колонке с силикагелем с элюированием 0-50% EtOAc в гептане, получая продукт в виде твердого вещества (52 мг; 32%). MS ES+ m/z 413 [М+Н].
Пример 82
4-(1Н-Пиразоло[3,4-b]пиридин-4-ил)-6-[2-(трифторметил)фенил]-1Н-пиридин-2-он
1
-1
+
6
TFA (0,66 мл; 8,83 ммоль) добавляли к раствору 4-[2-трет)-бутокси-6-[2-(трифторметил)фенил]-4-пиридил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридина (52,0 мг; 0,13 ммоль) в DCM (6 мл) при 0°С и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 1 ч. Смесь концентрировали, обрабатывали толуолом и очищали препаративной HPLC, получая продукт в виде твердого вещества (28 мг; 62%). Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ млн 6.67 (br s, 1Н), 6.87 (br s, 1Н), 7.43 (d, 1Н), 7.69-7.77 (m, 2Н), 7.79-7.83 (m, 1Н), 7.90 (d, 1Н), 8.27 (s, 1Н), 8.62 (d, 1Н), 11.61-12.46 (m, 1Н), 13.95 (brs, 1Н). MS ES+ m/z 357 [M+H].
Промежуточный пример 83
1-Метилсульфонил-3-(трифторметил)пиперазин
1
-1
6
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 59, с использованием метансульфонилхлорида, получая продукт в виде твердого вещества (2,2 г; 97%). Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ млн 2.66-2.74 (m, 1Н), 2.76-2.85 (m, 2Н), 2.93 (s, 3Н), 2.96-3.02 (m, 2Н), 3.28-3.34 (m, 2Н), 3.45-3.52 (m, 2Н).
Промежуточный пример 84
1-(4-Бензилокси-6-трет-бутокси-2-пиридил)-4-метилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 60, с использованием 1-метилсульфонил-3-(трифторметил)пиперазина, получая продукт в виде твердого вещества (900 мг; 33%). MS ES+ m/z 488 [М+Н].
Промежуточный пример 85
2-трет-Бутокси-6-[4-метилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]пиридин-4-ол
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 33, с использованием DMF в качестве сорастворителя, получая продукт (750 мг; 92%). MS ES+ m/z 398 [М+Н].
Промежуточный пример 86
[2-трет-Бутокси-6-[4-метилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-4-пиридил]трифторметансульфонат
+
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в промежуточном примере 34, заменяя трифторметилсульфонил-трифторметансульфонат на 1,1,1-трифтор-N-фенил-N-(трифторметилсульфонил)метансульфонамид, перемешивая смесь при КТ в течение ночи и получая продукт в виде твердого вещества (680 мг; 69%). MS ES+ m/z 530 [М+Н].
Промежуточный пример 87
4-[2-трет-Бутокси-6-[4-метилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-4-пиридил]-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин
2
2
3
2
2
4
+
Смесь [2-трет)-бутокси-6-[4-метилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-4-пиридил]трифторметансульфоната (265 мг; 0,5 ммоль), 4,4,5,5-тетраметил-2-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1,3,2-диоксаборолана (152 мг; 0,6 ммоль), KOAc (98 мг; 1 ммоль) и PdCl(dppf) (37 мг; 0,05 ммоль) в 1,4-диоксане (4 мл) в атмосфере аргона нагревали и перемешивали при 95°С в течение ночи. После охлаждения до КТ добавляли 4-бром-1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин (99 мг; 0,5 ммоль), KCO (138 мг; 1 ммоль), PdCl(dppf) (18 мг; 0,03 ммоль) и воду (1 мл) и полученную смесь нагревали и перемешивали при 95°С в течение 3 ч. После охлаждения до КТ добавляли воду и рассол и смесь экстрагировали EtOAc. Объединенные органические экстракты промывали рассолом, обрабатывали NaSO, фильтровали, концентрировали и очищали на колонке с силикагелем с элюированием 0-6% МеОН в DCM, получая продукт в виде твердого вещества (210 мг; 84%). MS ES+ m/z 499 [М+Н].
Пример 88
6-[4-Метилсульфонил-2-(трифторметил)пиперазин-1-ил]-4-(1Н-пиразоло[3,4-b]пиридин-4-ил)-1Н-пиридин-2-он
1
-1
+
6
Указанное в заголовке соединение получали, как описано в примере 82, получая продукт в виде твердого вещества (65 мг; 37%). Н ЯМР (500 МГц, DMSO-d) δ млн 2.90-2.96 (m, 4Н), 3.15-3.24 (m, 1Н), 3.31-3.45 (m, 2Н), 3.62 (brd, 1Н), 3.89 (br d, 1 Н), 4.44 (br d, 1Н), 5.70 (br s, 1H), 6.44 (d, 1H), 6.76 (s, 1H), 7.43 (d, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.62 (d, 1H), 10.56-11.30 (m, 1H). MS ES+ m/z 443 [M+H].
Пример 89
Биохимический анализ Vps34
1
0
2
50
Готовили серии разведений соединений по изобретению в DMSO в концентрации, в 100 раз превышающей конечную концентрацию в анализе (n=n/3; 10 точек). Затем соединения разбавляли до концентрации, в 4 раза превышающей концентрацию в анализе, в буфере для анализа (буфере Q от Life Technologies, PV5125, разбавленном в 5 раз, дополненном 2 мМ дитиотреитом (DTT) и 2 мМ MnCl). По 2,5 мкл разбавленных растворов соединений добавляли в 384-луночный используемый в анализе планшет, затем добавляли по 2,5 мкл 16,5 нМ раствора фермента Vps34 (Life Technologies, PV5126). Проводили предварительную инкубацию фермента и соединений при КТ в течение 15 мин. Затем в лунки, содержащие соединение и фермент, добавляли по 5 мкл субстратной смеси, содержащей 20 мкМ АТФ (Life Technologies, PV3227) и 200 мкМ субстрат PI:PS (фосфатид ил серии) (Life Technologies, PV5122) в буфере для анализа. Смешивание осуществляли посредством многократного пипетирования. Реакционную смесь инкубировали при комнатной температуре в течение 1 ч. Затем для гашения реакции добавляли по 5 мкл смеси для остановки и детектирования, приготовленной так, как описано в инструкциях к набору Adapta™ для анализа киназ (Life Technologies, PV5099), содержащей Eu-меченное антитело к АДФ Adapta™ (2,3 нМ), индикатор на АДФ Alexa Fluor 647 (9 нМ) и EDTA (этилендиаминтетрауксусная кислота; 30 мМ) в буфере для TR-FRET (резонансный перенос энергии флуоресценции с разрешением по времени). Смешивание осуществляли посредством многократного пипетирования. Затем используемый в анализе планшет инкубировали при комнатной температуре в течение 30 мин и выполняли измерения, используя микропланшетный ридер Artemis. Процент ингибирования под действием соединений рассчитывали относительно обработанных DMSO контрольных образцов. Для определения значений IC (концентрации, вызывающей 50%-ное ингибирование) с применением программного обеспечения Dotmatics проводили построение по точкам кривой зависимости процента ингибирования от концентрации соединений.
50
Соединения из примеров эффективно ингибировали Vps34, и результаты анализа показаны в Таблице 1 (средние значения IC в нМ; Adapta™).
Пример 90
Одновременный многопараметрический анализ аутофагии
50
Для определения ингибирующего действия патентуемых соединений на аутофагию использовали клетки остеосаркомы человека (HOS), стабильно экспрессирующие меченную зеленым флуоресцентным белком (GFP) LC3 (GFP-LC3). С этой целью активировали аутофагию, используя ингибитор mTOR (мишень рапамицина у млекопитающих) KU-0063794 в концентрации 500 нМ в присутствии бафиломицина А1 (Sigma-Aid rich) в концентрации 5 нМ. Кратко, клетки высевали на ночь в 96-луночные планшеты с прозрачным дном в среде DMEM (модифицированная Дульбекко среда Игла) с высоким содержанием глюкозы (Hi-Clone, № по каталогу SH30285.01). В начале эксперимента среду удаляли и заменяли на свежую среду, содержащую ингибитор mTOR, бафиломицин А1 и разбавитель или тестируемое соединение, как указано. Через 6 часов среду удаляли, клетки дважды промывали охлажденным во льду забуференным фосфатом физиологическим раствором (PBS) и фиксировали, используя 4%-ный раствор параформальдегида в течение 20 минут при комнатной температуре. Затем клетки дважды промывали охлажденным во льду PBS, после чего добавляли краситель для окрашивания ядер Хехст 33342 в концентрации 1 мкг/мл в PBS. После инкубирования в течение ночи при 4°С клетки один раз промывали PBS для удаления избытка красителя и в каждую лунку добавляли по 100 мкл PBS. Изображения получали при 20-кратном увеличении, по 6 изображений на одну лунку, используя автоматизированный микроскоп ImageXpress (Molecular Devices Inc.), и анализировали с применением программного обеспечения MetaXpress для идентификации очагов LC3-GFP. Для получения кривой зависимости ответа от дозы использовали значения площади очагов из расчета на одну клетку, а значения IC рассчитывали, применяя аппроксимацию нелинейной зависимости в программном обеспечении GraphPad Prism.
50
Протестированные соединения из примеров эффективно ингибировали аутофагию в клетках HOS. Результаты данного анализа показаны в Таблице 2 (средние значения IC в нМ; HOS-LC3).