СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ЛИПОПОЛИСАХАРИДНЫХ АНТИГЕНОВ В ПОЧВЕ

1. Способ определения бактериальных липополисахаридных антигенов в почве, включающий приготовление почвенной суспензии с последующей сорбцией бактериальных клеток и липополисахаридов в составе микроосадка из полученной суспензии, проведение иммунноферментного анализа сформированного микроосадка с антителами на липополисахариды с измерением оптической плотности продуктов иммуноферментной реакции, сравнение измеренных значений оптической плотности с контрольными значениями, при этом о наличии бактериальных липополисахаридных антигенов судят по величине отклонения измеренных значений от контрольных на величину не менее 10-15%.
2. Способ определения бактериальных липополисахаридных антигенов в почве по п.1, отличающийся тем, что при приготовлении почвенной суспензии образцы почвы ресуспендируют в 0,05-молярном натрий-карбонатном буферном растворе из расчета на 1 часть почвы - 35-45 частей буферного раствора, после чего полученную суспензию титруют последовательными двойными разведениями с использованием вышеупомянутого буферного раствора в лунках планшета для проведения иммуноферментного анализа.
3. Способ определения бактериальных липополисахаридных антигенов в почве по п.1, отличающийся тем, что при проведении иммуноферментного анализа в лунки с почвенной суспензией вносят по 100 мкл 0,05%-ного раствора полиэтиленгликоля с молекулярной массой 15000-25000 в качестве балластного блокирующего соединения, затем удаляют блокирующий раствор, после чего вносят в лунки по 50 мкл специфических антител на липополисахариды, растворенных в забуференном фосфатами физиологическом растворе, содержащем 0,02% Твин-20 и 0,005% полиэтиленгликоля, после многократной промывки лунок, достаточной для избавления от неспецифически связанных антител, вносят по 50 мкл раствора, содержащего 0,02% Твин-20 и 0,005% полиэтиленгликоля, в который были добавлены меченые пероксидазой козьи антикроличьи антитела в количестве 1-5 мкг/мл, затем планшеты дважды промывают забуференным фосфатами физиологическим раствором, содержащим 0,02% Твин-20, и в лунки вносят по 50 мкл субстрата для оценки пероксидазной активности, представляющего собой 0,03% орто-фенилендиамина и 0,02% перекиси водорода в 0,1 М натрий-цитратном буфере (рН 4.5).
4. Способ определения бактериальных липополисахаридных антигенов в почве по п.4, отличающийся тем, что при ресуспендировании образцов почвы сначала проводят разведение образцов почвы из расчета на 1 г почвы - 10 мл 0,05-молярного натрий-карбонатного буфера (рН 9,6), после чего взвесь встряхивают в течение 25-35 с, затем отбирают 250 мкл взвеси и разводят ее тем же буфером, доводя объем до 1 мл.
5. Способ определения бактериальных липополисахаридных антигенов в почве по п.4, отличающийся тем, что для проведения сорбции антигена из полученной почвенной суспензии планшеты с нанесенными образцами почвенной суспензии выдерживают в течение 30-60 мин на виброшейкере при температуре 18-22°C, затем выдерживают в течение 18 ч при температуре 4°C, после чего производят декантирование суспензии.