НАПРАВЛЕННЫЕ КОНЪЮГАТЫ С РАЗДЕЛЕННЫМИ БИОМОЛЕКУЛАМИ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЗАБОЛЕВАНИЙ, ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОБРАЗОВАНИЙ И НАРУШЕНИЙ И СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ

1. Конъюгат с разделенной биомолекулой, содержащий разделенную эффекторную молекулу, где полипептидные фрагменты разделенного эффектора конъюгированы с одним, по меньшей мере, из двух зондов, специфичных для нуклеиновой кислоты-мишени или полипептида-мишени, где нуклеиновая кислота-мишень или полипептид-мишень находятся в клетке, пораженной заболеванием, малигнизацией или нарушением, где связывание зондов с нуклеиновой кислотой-мишенью или полипептидом-мишенью восстанавливает эффекторную молекулу и где эффекторная молекула летальна для клетки; и/или сенсибилизирует клетку к другому соединению; и/или облегчает заболевание, малигнизацию или нарушение.
2. Конъюгат с разделенной биомолекулой по п.1, где разделенная эффекторная молекула содержит, по меньшей мере, два полипептидных фрагмента эффекторной молекулы; где фрагменты (a) находятся в активированной конформации; (b) не активны сами по себе; (c) дополнительно содержат зонд и (d) в присутствии нуклеиновой кислоты-мишени или полипептида-мишени в реальном времени комплементируют с восстановлением активной эффекторной молекулы.
3. Способ лечения или снижения эффектов заболевания или нарушения у субъекта, включающий:
a. введение субъекту эффективного количества фармацевтической композиции конъюгата с разделенной биомолекулой по п.1, содержащего разделенную эффекторную молекулу, где каждый из полипептидных фрагментов разделенного эффектора конъюгирован, по меньшей мере, с одним из двух зондов, специфичных для конкретных нуклеиновой кислоты-мишени или полипептида-мишени, которые ассоциированы с заболеванием или нарушением; и
b. образование активной эффекторной молекулы, где образование активной эффекторной молекулы облегчается связыванием, по меньшей мере, двух зондов с нуклеиновой кислотой-мишенью или полипептидом-мишенью, которые ассоциированы с заболеванием или нарушением.
4. Способ по п.3, где разделенная эффекторная молекула представляет собой молекулу токсина или ее фрагмент.
5. Способ по п.4, где молекула токсина представляет собой иммунотоксин или его фрагмент.
6. Способ по п.5, где иммунотоксин представляет собой белковый токсин.
7. Способ по п.6, где белковый токсин представляет собой бактериальный токсин или растительный токсин.
8. Способ по п.4, где молекула токсина представляет собой цитотоксическую молекулу.
9. Способ по п.3, где эффекторная молекула представляет собой нуклеазу или обладает эндонуклеазной активностью.
10. Способ по п.3, где разделенная эффекторная молекула представляет собой протеолитический фермент.
11. Способ по п.3, где разделенная эффекторная молекула способна к индукции пути клеточной гибели в клетке.
12. Способ по п.3, где разделенная эффекторная молекула представляет собой проапоптотическую молекулу.
13. Способ по п.3, где разделенная эффекторная молекула способна к ингибированию пути клеточной гибели или индукции пути клеточного выживания в клетке.
14. Способ по п.3, где эффекторная молекула представляет собой антиапоптотическую молекулу.
15. Способ по п.3, где эффекторная молекула представляет собой молекулу или полипептид, которые сенсибилизируют клетку к одному или нескольким вторичным средствам.
16. Способ по п.3, где эффекторная молекула представляет собой молекулу, метящую полипептид-мишень для деградации белка.
17. Способ по п.3, где заболевание или нарушение происходит из-за вызывающей патологию нуклеиновой кислоты.
18. Способ по п.3, где заболевание или нарушение выбрано из группы, включающей злокачественную опухоль; неврологическое заболевание; дегенеративное заболевание; воспалительное заболевание; патогенную инфекцию.
19. Способ по п.3, где конъюгат с разделенной биомолекулой вводят в клетку на предварительно нагруженных полимерных наночастицах и/или на катионных липосомах.
20. Способ по п.1, где разделенная эффекторная молекула, конъюгированная со связывающим нуклеиновую кислоту мотивом, экспрессирована в указанной клетке с экспрессирующего вектора.
21. Способ по п.3, где нуклеиновая кислота-мишень содержит вызывающую патологию последовательность-мишень нуклеиновой кислоты.
22. Способ по п.3, где нуклеиновая кислота-мишень представляет собой ДНК.
23. Способ по п.3, где нуклеиновая кислота-мишень представляет собой РНК.
24. Способ по п.1, где полипептид-мишень содержит патогенный полипептид.
in vitro
in vivo
25. Способ по п.1, где клетка находится  и .
26. Способ по п.3, где зонд представляет собой связывающий нуклеиновую кислоту мотив.
27. Способ по п.3, где зонд представляет собой белок полипептидного детектора.
28. Конъюгат с разделенной биомолекулой клеточной гибели, содержащий разделенную эффекторную молекулу, где полипептидные фрагменты разделенного эффектора содержат, по меньшей мере, два полипептидных фрагмента, каждый из которых конъюгирован с двумя или более зондами, где полипептидные фрагменты разделенного эффектора в присутствии конкретной нуклеиновой кислоты-мишени или полипептида-мишени комбинируют с образованием активной эффекторной молекулы, способной к инициации пути клеточной гибели в клетке.
29. Разрушающий конъюгат с разделенной биомолекулой, содержащий разделенную эффекторную молекулу, где полипептидные фрагменты разделенного эффектора содержат, по меньшей мере, два полипептидных фрагмента, каждый из которых конъюгирован с двумя или более зондами, где полипептидные фрагменты разделенного эффектора в присутствии конкретной нуклеиновой кислоты-мишени или полипептида-мишени комбинируют с образованием активной эффекторной молекулы, способной к разрушению или индукции разрушения нуклеиновой кислоты-мишени или полипептида-мишени в клетке.
30. Сенсибилизирующий конъюгат с разделенной биомолекулой, содержащий разделенную эффекторную молекулу, где полипептидные фрагменты разделенного эффектора содержат, по меньшей мере, два полипептидных фрагмента, каждый из которых конъюгирован с двумя или более зондами, где полипептидные фрагменты разделенного эффектора в присутствии конкретной нуклеиновой кислоты-мишени или полипептида-мишени комбинируют с образованием активной эффекторной молекулы, способной к сенсибилизации клетки к другим вторичным средствам.
31. Конъюгат с разделенной биомолекулой выживания, содержащий разделенную эффекторную молекулу, где полипептидные фрагменты разделенного эффектора содержат, по меньшей мере, два полипептидных фрагмента, каждый из которых конъюгирован с двумя или более зондами, где полипептидные фрагменты разделенного эффектора в присутствие конкретной нуклеиновой кислоты-мишени или полипептида-мишени комбинируют с образованием активной эффекторной молекулы, способной к инициации пути клеточного выживания или ингибированию клеточной гибели в клетке.
32. Конъюгат с разделенной замещающей биомолекулой, содержащий разделенную эффекторную молекулу, где полипептидные фрагменты разделенного эффектора содержат, по меньшей мере, два полипептидных фрагмента, каждый из которых конъюгирован с двумя или более зондами, где полипептидные фрагменты разделенного эффектора в присутствии конкретной нуклеиновой кислоты-мишени или полипептида-мишени комбинируют с образованием активной эффекторной молекулы, способной к замещению в клетке неправильно функционирующего или утраченного полипептида.
33. Способ измерения уровня патогенной нуклеиновой кислоты-мишени или патогенного полипептида-мишени у субъекта, включающий:
a. введение субъекту эффективного количества фармацевтической композиции конъюгата с разделенной биомолекулой, содержащего разделенную детекторную молекулу, где каждый из полипептидных фрагментов разделенного детектора конъюгирован, по меньшей мере, с одним из двух зондов, специфичных для конкретной нуклеиновой кислоты-мишени или полипептида-мишени, которые ассоциированы с заболеванием или нарушением;
b. образование активной детекторной молекулы, где образование активной эффекторной молекулы облегчается связыванием, по меньшей мере, двух зондов с нуклеиновой кислотой-мишенью или полипептидом-мишенью, которые ассоциированы с заболеванием или нарушением;
c. измерение уровня активной детекторной молекулы и где уровень активной детекторной молекулы представляет собой меру нуклеиновой кислоты-мишени или патогенного полипептида-мишени у субъекта.
34. Способ по п.33, где детекторный полипептид выбран из группы, включающей β-лактамазу; DFHR; люциферазу; флуоресцентный белок, или их варианты, или фрагменты.
35. Способ по п.33, дополнительно включающий сравнение уровня патогенной нуклеиновой кислоты-мишени или патогенного полипептида-мишени у субъекта в первой временной точке с уровнем патогенной нуклеиновой кислоты-мишени или патогенного полипептида-мишени во второй временной точке.