Обоснование допустимых параметров применения криопунктуры

НАУЧНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ f^

Обоснование допустимых параметров применения криопунктуры

Горбач О.В.1, Сиваков А.П.1, Жукова Т.В.2, Бровка С.С.3

1Белорусская медицинская академия последипломного образования, Минск

2РНПЦ травматологии и ортопедии, Минск

3Белорусский государственный медицинский университет, Минск

Horbach O.V.1, Sivakov A.P.1, Zhukova TV.2, Brovka S.S.3

1Belarusian Medical Academy of Post-Graduate Education, Minsk 2Republic Scientific-Practical Center of Traumatology and Orthopedics, Minsk

3Belarusian State Medical University, Minsk

Substantiation of admissible parameters of cryopuncture application in experiment

Резюме. Цель исследования состоит в том, чтобы установить допустимые параметры применения криопунктуры, изучив в эксперименте влияние данного метода на морфологическую структуру кожи и мягких тканей в зоне воздействия. Были оценены двадцать пять крыс (150-200 граммов). Животные методом случайного отбора были разделены на пять групп в зависимости от времени воздействия: 1 - 5 минут; 2 - 7 минут; 3 -10 минут; 4 -15 минут; 5 - воздействие не осуществлялось. Проведенное исследование доказывает, что влияние фокусированного холодного воздуха с температурой минус 60°С на кожную проекцию аналога точки акупунктуры VB34 крыс в течение 5 и 7 минут не вызывает повреждения кожи. При воздействии в течение 10 минут реакция минимальна и может использоваться для восстановления поврежденных тканей. Проведение процедуры в течение 15 минут является неадекватным для тканей в зоне воздействия. Ключевые слова: акупунктура, криопунктура, повреждение, травма.

Summary. The purpose of the study is to establish admissible parameters of application acupuncture, having studied in experiment influence of the given method on morphological structure of a skin and soft tissues in an influence zone. Twenty five rats (150-200 g) were evaluated. Animals have been divided by a method of casual selection into five groups depending on influence time: 1 - 5 minutes; 2 - 7 minutes; 3 -10 minutes; 4 - 15 minutes; 5 - influence wasn't carried out. The conducted research proves that influence of focused cold air with temperature minus 60°C on a skin projection of analog of the cryopuncture point VB34 of rats within 5 and 7 minutes skin reaction to damage is absent. In case of 10 minutes reaction is minimum and can be used for restoration of the damaged tissues. Influence wtthin 15 minutes is not adequate for tissues in an influence zone. Key words: acupuncture, cryopuncture, damage, trauma.

Увеличение количества острых и хронических спортивных травм является одной из основных проблем в ходе подготовки спортсменов высокого класса. В связи с этим главная задача врача спортивной медицины - быстрое купирование острого болевого синдрома и возвращение спортсмена к предшествовавшему уровню подготовки во время тренировок и соревнований, снижение риска отдаленных негативных последствий, в том числе от специфических хронических спортивных травм [7, 8]. Ужесточение процедуры антидопингового контроля в спорте существенно ограничило возможность применения фармакологических и биологически активных препаратов для этих целей. Поэтому актуальны эффективные немедикаментозные методы воздействия на организм спортсменов.

На протяжении всей истории человечества ведется поиск методов лечения, направленных на запуск компенсаторных механизмов, на восстановление утраченного здоровья, на продление активной жизни человека. Исследования ученых в данном направлении устремлены на включение систем саморегуляции орга-

низма. Криогенная аэротерапия - это комплекс технологий «стресс-терапии» с неспецифическим, немедикаментозным лечением болезней, основанным на активации естественных защитных реакций теплокровного организма.

Криотерапия (КТ) - метод терморефлексотерапии, который представляет собой физический метод воздействия на организм человека, основанный на использовании хо-лодового фактора для отведения тепла от тканей, органов или всего тела человека. Температура тканей снижается в пределах их криоустойчивости, при этом не происходит значимых сдвигов терморегуляции организма [2, 4, 5].

В прошлом столетии немецкий священник и врач Себастьян Кнейп, прыгнув в состоянии бреда в ледяной Дунай, чудесным образом вылечился от крупозной пневмонии благодаря стимуляции защитных механизмов самоизлечения. В дальнейшем он обосновал свои каноны лечения теплом и холодом, которые по сей день использует современная физиотерапия. Система терморегуляции у теплокровных биологических объектов устроена таким образом, что воздействие холодом, без повреждения тканевых структур, каким бы оно ни было,

не может быть глубоким. Распространение тепла в организме зависит главным образом от притока крови по сосудам. Защитный тепловой барьер представлен четырьмя кожными сосудистыми сплетениями. Поэтому пенетрирующий градиент температур при охлаждении чрезвычайно высок и снижение температуры тканей до субдеструктивных значений возникает на глубине не более 0,5-4,5 мм, в зависимости от толщины собственно кожи.

В физиологии И.П.Павловым введено условное деление тканей по температурной зависимости на две различные группы. Покровные ткани, или оболочка, легко переносят значительное переохлаждение; внутренние ткани при охлаждении до минус 10-12°С прекращают нормальную работу. Это условное деление ограничивает область физиологического применения КТ пределами оболочки, так как нарушение теплового режима «ядра» недопустимо. При переохлаждении вначале происходит довольно длительное понижение температуры кожи и лишь спустя некоторое время снижается температура внутренних органов. Когда возможности нейтрализации холода исчерпаны, включается механизм каскадной реакции

сосудистых сплетений. На первом этапе наступает спазм поверхностных капилляров, что на практике проявляется белым ишемическим пятном. Этот феномен означает начало повреждения эпидермиса. Реакция сужения сосудов направлена на предотвращение проникновения холода к внутренним органам (ядру). Для того чтобы предотвратить дальнейшее повреждение тканей, организм отвечает второй реактивной фазой - расширением сосудов. Прямым следствием расширения сосудов является выделение тепла. Все еще находящаяся под воздействием хладагента кожа начинает краснеть, ее температура повышается на несколько градусов. Эшелонированная по глубине тепловая защита направлена на то, чтобы локализовать процесс охлаждения тканей, а если это невозможно, - перевести его из объема в плоскость.

Разработаны три способа проведения локальной воздушной криотерапии. Лабильная методика применяется для достижения равномерного умеренного охлаждения (минус 12-15°С) большой площади поверхности тела. Это достигается направлением воздушного потока с удаления 7-15 см, равномерным распределением воздействия на обрабатываемую площадь круговыми или змееобразными, зигзагообразными (и т.п.) движениями. Используются насадки большого диаметра. Время процедуры составляет 5-10 минут. Пациент испытывает чувство жжения. Стабильная методика применяется для достижения очагового глубокого охлаждения (снижение температуры кожи в области воздействия до 0°С) ограниченной площади поверхности тела. Реализуется методика направлением воздушного потока с расстояния 2-5 см от поверхности кожи пациента, статическим воздействием (допустимы круговые или змееобразные движения низкой амплитуды). Используются насадки среднего и малого диаметра. Время процедуры 3-5 минут, до появления побледнения кожных покровов. Пациент испытывает чувство «глубокого» жжения, ломоты с последующим онемением в области воздействия. Комбинированная методика применяется для комплексного воздействия и представляет собой сочетание лабильной и стабильной методик [2, 4, 5].

Несмотря на то что локальная криотерапия широко используется в клинической практике, в методиках криопунктуры остаются невыясненными вопросы интенсивности, длительности локального воздействия на точки акупунктуры. Нами начаты экспериментальные исследования,

направленные на определение допустимых параметров применения локальной криотерапии и криопунктуры.

Цель исследования - установить допустимые параметры применения крио-пунктры, изучив в эксперименте влияние данного метода на морфологическую структуру кожи и мягких тканей в зоне воздействия.

Материалы и методы

Экспериментальные исследования проведены на белых половозрелых бес-породых крысах массой тела 150-200 г стадной разводки вивария Центральной научно-исследовательской лаборатории Белорусской медицинской академии последипломного образования (ЦНИЛ БелМАПО), находящихся в условиях стандартного содержания и кормления. Животные методом случайного отбора были разделены на пять групп. Во время эксперимента животные находились в состоянии нейролептаналгезии, которая создавалась путем введения внутримышечного комбинированного наркоза: фентанил 0,005% + дроперидол 0,01% в соотношении 2:1, из расчета 0,5 мл на 100 г массы тела животного.

Крыс фиксировали за лапки на специальном деревянном столике с рабочей поверхностью 20x25x0,3 см. Воздействие фокусированным холодным воздухом осуществлялось на заднюю конечность животного в зоне проекции точки акупунктуры VB 34 (ян-линь-цюань). Животных выводили из эксперимента путем введения 3,5 мл 3,5% тиопентала натрия. После декапитации крысы забор материала (коленный сустав с мягкими тканями) осуществляли за минимальное возможное время. Затем лапку крысы фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина. Препараты промывали под проточной водой, мягкие ткани в зоне воздействия фокусированным холодным воздухом разрезали в сагиттальной плоскости. Далее осуществляли проводку биоматериала через спирты и заливку в парафин по общепринятой методике. Из парафиновых блоков на микротоме готовили срезы толщиной 4-5 мкм, окрашивали гематоксилином и эозином, а также по Ван Гизон. Приготовленные гистологические препараты изучали с помощью светового микроскопа DMLS (ув. x 40) с программным обеспечением («Leica», Германия).

Источником холодного воздуха в экспериментальных исследованиях служил официально зарегистрированный в Республике Беларусь аппарат «CrioJet Air C200» фирмы «МесоТек GmbH» (Герма-

ния). Дозируемые параметры процедуры локальной воздушной КТ в эксперименте: способ проведения, мощность (объемная скорость) воздушного потока, диаметр сменной насадки, длительность воздействия, площадь охлаждаемой поверхности тела. В эксперименте использовалась стабильная методика, реализуемая с расстояния воздушного потока 2 см статическим воздействием насадкой малого диаметра (3 мм). Температура генерируемого аппаратом воздуха достигала минус 60°С. Скорость воздушного потока - 1500 л/мин. Длительность воздействия составляла 5, 7, 10 и 15 минут. К животным контрольной группы воздействие фокусированным холодным воздухом не применяли. Данных животных использовали для оценки нормативных значений морфологических показателей.

Воспаление (лат. inflammatio) - это комплексный местный и общий патологический процесс, возникающий в ответ на повреждение (alteratio) клеточных структур организма или действие патогенного раздражителя и проявляющийся в реакциях (exudatio и др.), направленных на устранение продуктов повреждения, а если возможно, то и агентов (раздражителей), а также приводящий к максимальному для данных условий восстановлению (proliferatio и др.) в зоне повреждения. Воспаление - основной механизм естественного (врожденного) иммунитета, равно как начальный и заключительный этапы иммунитета приобретенного. Оно выполняет повседневную работу по очистке внутренней среды организма от микроорганизмов. Как и всякая защитная реакция, воспаление должно сочетать способность распознавать чужеродную для организма частицу с действенным способом ее обезвреживания и удаления из организма. Внешние признаки воспаления определил еще древнеримский писатель Авл Корнелий Цельс: rubor (краснота), tumor (опухоль, припухлость), соЬг (жар), dolor (боль). Клавдий Гален (130-200 гг. н. э.) дополнил, добавив functio laesa (нарушение функции).

Любое воспаление в своем развитии проходит обязательно через 3 стадии, выраженные в той или иной степени: альтерация (повреждение клеток и тканей), экссудация (выход жидкости и клеток крови из сосудов в ткани) и пролиферация (размножение клеток и разрастание ткани, в результате чего и происходит восстановление целостности ткани).

Альтерация характеризуется преобладанием дистрофически-некробиоти-

ческих изменений органов и тканей. В эту фазу воспаления происходит выброс биологически активных веществ - медиаторов воспаления, что мы наблюдали в проведенном опыте. С медиаторами воспаления клеточного происхождения связано не только повышение проницаемости микрососудов и фагоцитоз, - они обладают бактерицидным действием, вызывают вторичную альтерацию, включают иммунные механизмы и воспалительную реакцию, регулируют пролиферацию и дифференцировку клеток на поле воспаления, направленные на репарацию, возмещение или замещение очага повреждения соединительной тканью. Медиаторы плазменного и клеточного происхождения взаимосвязаны и работают по принципу аутокаталитической реакции с обратной связью и взаимной поддержкой. Действие медиаторов опосредовано на поверхности эффекторных клеток. Из этого следует, что смена одних медиаторов другими во времени обусловливает смену клеточных форм на поле воспаления - от полиморфноядерного лейкоцита для фагоцитоза до фибробласта, активируемого монокинами макрофага, для репарации.

Вторая стадия - экссудация характеризуется преобладанием образования экссудата над процессами альтерации и пролиферации.

Результаты и обсуждение

Исследования, проведенные на крысах, показали, что воздействие фокусированным холодным воздухом с температурой до минус 60 °С на кожную проекцию точки акупунктуры УВ 34 крыс с длительностью 5 и 7 минут не вызывает комплексной местной сосудисто-мезен-химальной реакции. Макроскопически место воздействия как на 5-й, так и на 7-й минуте отличается от окружающих тканей лишь побледнением. Микроскопическое изучение препаратов на 5-й и 7-й минутах воздействия не выявило деструктивных морфологических изменений эпидермиса. Структура кожи сохранена. Слои эпидермиса не нарушены. Воспалительная инфильтрация отсутствует (рис. 1).

Изучая гистологические препараты после 10-минутного воздействия фокусированным воздухом с температурой до минус 60°С на кожную проекцию точки акупунктуры УВ 34 животного, мы видим образование микроскопического очага воспаления в фазе альтерации (рис. 2). Альтерация является инициальной фазой воспаления, определяющей кинетику воспалительной реакции. В очаге вос-

Рисунок 1

Морфологическая картина эпидермиса крыс на 5-й и 7-й минутах воздействия фокусированным воздухом с температурой до минус 60 °С на кожу животного. Окраска гематоксилином и эозином

Рисунок 4

Рисунок 2

Морфологическая картина эпидермиса крыс на 10-й минуте воздействия фокусированным воздухом с температурой до минус 60 °С на кожу животного. Окраска гематоксилином и эозином

Рисунок 3

Морфологические изменения в эпидермисе крыс на 15-й минуте воздействия фокусированным воздухом с температурой до минус 60 °С на кожу животного. Окраска гематоксилином и эозином

паления определяются единичные базо-фильные лейкоциты, а также лаброциты. Клетки являются эффекторными, продуцирующими медиаторы воспаления. С медиаторами клеточного происхожде-

Морфологические изменения в эпидермисе крыс на 15-й минуте воздействия фокусированным воздухом с температурой до минус 60 °С на кожу животного. Окраска по Ван Гизон

ния связано не только повышение проницаемости микрососудов и фагоцитоз. Они обладают бактерицидным действием, вызывают вторичную реакцию (гистолиз), включают иммунные механизмы и воспалительную реакцию, регулируют пролиферацию и дифференцировку клеток на поле воспаления, направленные на репарацию, возмещение или замещение очага повреждения соединительной тканью. При воздействии с экспозицией 10 минут реакция тканей минимальная и может вызывать восстановление поврежденных тканей.

При воздействии в течение 15 минут очаг воспаления более крупный, значительно выражена лимфоцитарная инфильтрация, заметно увеличивается гиперкератоз (ороговевание верхних слоев многослойного плоского эпителия). При действии холода в течение 15 минут морфологические изменения в ткани могут расцениваться как пограничные с патологическими изменениями, так как воспаление переходит в фазу экссудации, характеризующуюся реакцией мик-роциркуляторного русла с нарушением реологических свойств крови. Изменения микрососудов характеризуются их рефлекторным спазмом, уменьшением просвета артериол и прекапилляров (рис. 3, 4). Воспалительная гиперемия обусловливает повышение температуры (color) и покраснение (rubor) воспалительного участка. При начальном спазме ток крови в артериолах становится ускоренным, а затем замедленным. В расширенных венулах и посткапиллярах при замедленном токе крови нарушается распределение в кровяном потоке лейкоцитов и эритроцитов. Полиморфно-ядерные лейкоциты (нейтрофилы) выходят из осевого тока, собираются в краевой зоне и распо-

лагаются вдоль стенки сосуда. Краевое расположение нейтрофилов сменяется их краевым стоянием, которое предшествует эмиграции за пределы сосуда.

Изменение гемодинамики и сосудистого тонуса в очаге воспаления приводит к стазу в посткапиллярах и венулах, который сменяется тромбозом, что усиливает отек в тканях. При нарастающем отеке сдавливаются нервные окончания, усиливается боль.

Выводы

1. На воздействие фокусированным холодным воздухом методом криопункту-ры с температурой до минус 60°С на кожную проекцию точки акупунктуры УВ34 крыс в течение 5 и 7 минут сосудисто-ме-зенхимальная реакция на повреждение отсутствует.

2. Воздействие фокусированным холодным воздухом с температурой до минус 60°С на кожную проекцию аналога точки акупунктуры УВ34 крыс в течение 10 минут характеризуется появлением микроскопического очага воспаления в фазе альтерации. В данном случае реакция минимальна и может использоваться для восстановления поврежденных тканей.

3. При воздействии фокусированного холодного воздуха методом криопун-ктуры с температурой до минус 60 °С на кожную проекцию аналога точки акупунктуры УВ34 крыс в течение 15 минут можно установить повреждения кожи, характеризующиеся выраженной лим-фоцитарной инфильтрацией, гиперкератозом (ороговение поверхностных слое в многослойного плоского эпителия).

4. Воздействие фокусированного холодного воздуха с температурой до минус 60 °С на кожную проекцию аналога точки акупунктуры УВ34 крыс в течение 15 минут вызывает локальные изменения в области кожи в виде воспаления, проходящего стадии альтерации, экссудации, пролиферации и является неадекватным для тканей в зоне воздействия.

5. Полученные нами данные указывает на необходимость проведения предварительных экспериментальных исследований до рекомендаций широкого внедрения новой аппаратуры в клиническую практику. Это позволит осуществлять дифференцированный подход к вопросу выбора параметров воздействия криопунктуры и криотерапии и предоставит новые, более

широкие возможности для применения данных методов в практической медицине.

Л И Т Е Р А Т У Р А

1. Абелев, Г.И. Основы иммунитета // Соросовский образовательный журнал. - 1996. - N5. - С. 4-10.

2. Баранов, А.Ю. Общая криотерапия - универсальный метод восстановительной медицины /

A.Ю.Баранов, А.В.Попович, С.М.Козлов // Восстановит. медицина и реабилитация: IV Междунар. конгресс, 25-26 сент., 2007, Москва, 2007. - М., 2007. - С.92-93.

3. Висмонт, Ф.И. Воспаление (патофизиологические аспекты): учеб.-метод. пособие / Ф.И. Висмонт. - Мн.: БГМУ 2006. - 48 с.

4. Волотовская, А.В. Криотерапия: учеб.-ме-тод. пособие / А.В.Волотовская, Г.К.Колтович, Л.Е.Козловская, А.Н.Мумин. - Минск: БелМАПО, 2010. - 26 с.

5. Лувсан, Г. Традиционные и современные аспекты восточной медицины / Г.Лувсан. - М., 2000. -400 с.

6. Портнов, В.В. Локальная воздушная криотерапия: механизм действия и применение в практике /

B.В.Портнов // Курортные ведомости. - 2009. -№2. - 62-64 с.

7. Портнов, В.В. Общая и локальная воздушная криотерапия / под ред. В.В.Портнова. - 2-е изд., пере-раб. и доп. - М., 2008. - 51 с.

8. Черствый, Е.Д. Лекции по патологической анатомии: учеб. пособие / Е.Д.Черствый и др. - Минск, 2006. - 458 с.

9. Joch, W., Fricke, R., Uckert, S. // Leistungssport. -2002. - Vol.32. - P.53-57.

10. Joch, W., Uckert, S. // Leistungssport. - 2003. -Vol.33(6). - P.17-22.

Поступила 16.06.2011 г.

Морфологические изменения в плаценте родильниц, родивших новорожденных с врожденными пороками развития

Сеидбекова Ф.О.

Азербайджанский медицинский университет, Баку

Seidbekova F O.

Azerbaijan Medical University, Baku

Morphological changes in the placenta parturients who gave birth to infants with congenital malformations

Резюме. Цель исследования - микроскопическое изучение хориальной пластинки, ворсинчатого дерева, терминальных и якорных ворсин плацент от родильниц, родивших новорожденных с врожденными пороками развития.

Было изучено 40 плацент от родильниц, родивших здоровых новорожденных, 45 плацент от родильниц с осложненным течением беременности, но родивших новорожденных без врожденных пороков развития, и 64 плаценты от родильниц, родивших новорожденных с врожденными пороками развития. Проведенное микроскопическое исследование плаценты выявило наличие деструкции эпителиального покрова ворсин на фоне незрелости ворсинчатого дерева.

Ключевые слова: плацента, врожденные пороки развития.

Summary. The purpose of research - a microscopic study of the chorionic plate, villous tree and anchor terminal villi of placentas from parturients who gave birth to infants with congenital malformations.

40 placentas from parturients who gave birth to healthy newborns, 45 placentas from parturients wtth complicated pregnancy but who gave birth to babies with no congenital malformations, and 64 of the placenta from parturients who gave birth to infants with congenital malformations were studied. Conducted by microscopic examination of the placenta revealed the presence of degradation of epithelium of the villi in the background of immature villous tree. Keywords: placenta, congenital malformations.

Рождение новорожденного с врожденными пороками развития представляет серьезную медицинскую

и социальную проблему, так как эти дети занимают одно из первых мест по детской заболеваемости, инвалидности

и смертности [1, 2]. По данным ВОЗ за 2010 г., до 80% тяжелых пороков развития заканчиваются смертью ребенка в