МИКРОСПЕКТРАЛЬНЫЙ СПОСОБ ОЦЕНКИ ЭФФЕКТИВНОСТИ ФАРМАКОТЕРАПИИ В РАННИЕ СРОКИ ЛЕЧЕНИЯ КЛЕБСИЕЛЛЕЗА ПТИЦ АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫМИ ПРЕПАРАТАМИ

1. Микроспектральный способ оценки эффективности фармакотерапии в ранние сроки лечения клебсиеллеза птиц антибактериальными препаратами, включающий двухволновый метод люминесцентного спектрального анализа при изучении гистологических срезов, окрашенных специфическими люминесцентными метками-красителями дихлор-симм-триазиниламинофлуоресцеином-1 и этидиумом бромида, отличающийся тем, что проводят исследование гистологических срезов ткани железистого желудка контрольной здоровой птицы и обследуемой птицы, на каждом гистологическом срезе с помощью визуальной микроскопии определяют зону эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки, в которой выделяют пять участков с наибольшей степенью интенсивности люминесценции, с каждого участка получают спектр люминесценции и спектр оптической плотности и проводят их цифровую обработку: в спектре люминесценции регистрируют величину интенсивности люминесценции полосы излучения при длине волны, характерной для белков зоны эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки и равной 528 нм, и при длине волны, характерной для нуклеиновых кислот зоны эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки и равной 624 нм, в спектре оптической плотности регистрируют величину оптической плотности при длине волны 648 нм, которую используют в качестве толщины фотометрируемого участка, затем в каждом участке определяют количество белков и нуклеиновых кислот в условных единицах по отношению полученных значений к величине оптической плотности и к эталону, в качестве которого используют величину интенсивности люминесценции уранового стекла при длине волны 548 нм, затем вычисляют среднее значение количества белков и нуклеиновых кислот в условных единицах из пяти полученных по каждому из них результату, по которым, в свою очередь, рассчитывают показатель состояния внутриклеточного обмена белков в железистом желудке обследуемой птицы путем вычитания из среднего значения количества белков в условных единицах контрольной здоровой птицы среднего значения количества белков в условных единицах обследуемой птицы, а также рассчитывают показатель состояния внутриклеточного обмена нуклеиновых кислот в железистом желудке обследуемой птицы путем вычитания из среднего значения количества нуклеиновых кислот в условных единицах контрольной здоровой птицы среднего значения количества нуклеиновых кислот в условных единицах обследуемой птицы, и при значениях показателя состояния внутриклеточного обмена белков более 0,95 и показателя состояния внутриклеточного обмена нуклеиновых кислот более 0,87 устанавливают низкую эффективность фармакотерапии обследуемой птицы, при значениях показателя состояния внутриклеточного обмена белков 0,95-0,25 и показателя состояния внутриклеточного обмена нуклеиновых кислот 0,87-0,21 - среднюю эффективность фармакотерапии обследуемой птицы, а при значениях показателя состояния внутриклеточного обмена белков менее 0,25 и показателя состояния внутриклеточного обмена нуклеиновых кислот менее 0,21 - высокую эффективность фармакотерапии обследуемой птицы.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что количество белков в условных единицах в каждом из пяти участков зоны эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки рассчитывают по формуле:
<mrow><mi>B</mi><mo>=</mo><mfrac><mrow><msub><mi>I</mi><mi>b</mi></msub></mrow><mrow><mi>D</mi><mo>×</mo><mi>Э</mi></mrow></mfrac></mrow>
;
где В - количество белков в условных единицах в каждом из пяти участков зоны эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки;
b
I - величина интенсивности люминесценции исследуемого участка зоны эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки при длине волны 528 нм;
D - величина оптической плотности фотометрируемого участка при длине волны 648 нм, используемая в качестве его толщины;
Э - величина интенсивности люминесценции уранового стекла ЖС-19 толщиной ~1,5 мм при длине волны 548 нм, используемая в качестве эталона.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что количество нуклеиновых кислот в условных единицах в каждом из пяти участков зоны эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки рассчитывают по формуле:
<mrow><mi>N</mi><mo>=</mo><mfrac><mrow><msub><mi>I</mi><mi>n</mi></msub></mrow><mrow><mi>D</mi><mo>×</mo><mi>Э</mi></mrow></mfrac></mrow>
;
где N - количество нуклеиновых кислот в условных единицах в каждом из пяти участков зоны эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки;
n
I - величина интенсивности люминесценции исследуемого участка зоны эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки при длине волны 624 нм;
D - величина оптической плотности фотометрируемого участка при длине волны 648 нм, используемая в качестве его толщины;
Э - величина интенсивности люминесценции уранового стекла ЖС-19 толщиной ~1,5 мм при длине волны 548 нм, используемая в качестве эталона.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что среднее значение количества белков в условных единицах в зоне эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки рассчитывают по формуле:
<mrow><msub><mi>B</mi><mi>c</mi></msub><mo>=</mo><mfrac><mn>1</mn><mn>5</mn></mfrac><mstyle displaystyle="true"><munderover><mo>∑</mo><mrow><mi>n</mi><mo>=</mo><mn>1</mn></mrow><mn>5</mn></munderover><mrow><msub><mi>B</mi><mi>n</mi></msub></mrow></mstyle></mrow>
;
c
где B - среднее значение количества белков в условных единицах в зоне эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки;
n
B - общее количество белков в условных единицах всех фотометрируемых участков зоны эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки;
n - количество фотометрируемых участков зоны эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что среднее значение количества нуклеиновых кислот в условных единицах в зоне эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки рассчитывают по формуле:
<mrow><msub><mi>N</mi><mi>c</mi></msub><mo>=</mo><mfrac><mn>1</mn><mn>5</mn></mfrac><mstyle displaystyle="true"><munderover><mo>∑</mo><mrow><mi>n</mi><mo>=</mo><mn>1</mn></mrow><mn>5</mn></munderover><mrow><msub><mi>N</mi><mi>n</mi></msub></mrow></mstyle></mrow>
;
c
где N - среднее значение количества нуклеиновых кислот в условных единицах в зоне эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки;
n
N - общее количество нуклеиновых кислот в условных единицах всех фотометрируемых участков зоны эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки;
n - количество фотометрируемых участков зоны эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки.
6. Способ по п.1, отличающийся тем, что показатель состояния внутриклеточного обмена белков в железистом желудке обследуемой птицы рассчитывают по формуле:
b
с
zc
K=В-B;
b
где K - показатель состояния внутриклеточного обмена белков в железистом желудке обследуемой птицы;
c
B - среднее значение количества белков в условных единицах в зоне эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки железистого желудка контрольной здоровой птицы;
zc
B - среднее значение количества белков в условных единицах в зоне эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки железистого желудка обследуемой птицы.
7. Способ по п.1, отличающийся тем, что показатель состояния внутриклеточного обмена нуклеиновых кислот в железистом желудке обследуемой птицы рассчитывают по формуле:
n
c
zc
K=N-N
n
где K - показатель состояния внутриклеточного обмена нуклеиновых кислот в железистом желудке обследуемой птицы;
c
N - среднее значение количества нуклеиновых кислот в условных единицах в зоне эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки железистого желудка контрольной здоровой птицы;
zc
N - среднее значение количества нуклеиновых кислот в условных единицах в зоне эпителия глубоких альвеолярных желез слизистой оболочки железистого желудка обследуемой птицы.