Морфологические и метаболические преобразования брыжеечных лимфатических узлов крыс в условиях токсических доз селенита натрия и после коррекции

ва, В.В. Удут, Б.Н. Зырьянов // Вопросы онкологии. 2003. Т.49, №

1. С. 93-94.

2.Гришкин П.С., Кугрышова Г.Г., Арбузова ОМ., Ганичев Г.В., Подкопалова В.К., Березина ГМ., Козлова Н.А., Казеев В.Т., Сундуков Е.П., Судакова Л.В. Сборник Госкомстата Республики Мордовия. Саранск, 2008. 300 с.

3.Богуш Е.А., Кинзирская Ю.А., Кирсанов В.Ю., Богуш Т.А. Снижение гепатотоксичности противоопухолевой химиотерапии путем регуляции метаболической активности печени: от эксперимента - в клинику. Монография / Под ред. М.И. Давыдова.- М..

: Изд-.во. 2007.

4Жаринов Г.М., Некласова Н.Ю. Некоторые малозатратные подходы к повышению эффективности лечения онкологических больных // Вопросы онкологии. 2006. Т.52, №3. С. 367-371.

5.Орел Н.Ф. Кардиотоксичность антрациклинов: возможности преодоления // Современная онкология. 2004. Т.6, №3. С. 121-122.

6.Сипров. А.В. Морфо-функциональные измененя в печени, сердце и опухолевой ткани у мышей с экспериментальной неоплази-ей при комбинированной терапии доксорубицином и эмоксипином // Морфологические ведомости. 2008. № 1-2. С. 95-96.

7.Сивашинский М.С. Некоторые пути повышения эффективности химиотерапии больных с диссеминированным солидными опухолями // Вопросы онкологии. 2004. Т.50, №2. С. 237-241.

8Митрохин Н.М., Насейкина ЕМ., Скачилова С.Я., Кесарев О.Г., Сернов Л.Н. Способность антиоксидантов мексидол и этокси-дол корригировать липидный обмен у крыс при атерогенной диете // XV Рос. нац. конгресс «Человек и лекарство». 2008. С.668.

9.Успенская Ю.А. Роль нарушений межклеточных взаимодействий в патогенезе миелотоксического действия ксенобиотиков антрациклинового ряда. Автореф. дис... докт. биол. наук. Иркутск, 2007.

MORPHOLOGICAL CHANGES IN SOME ORGANS OF GASTROINTESTINAL MICE WITH CHEMOTHERAPY AND CORRECTION

V.P. BALASHOV, V.N. ABRAMOV, P.P. KRUGLYAKOV, N.R. KRIZHANOVSKAYA

Mordovia State University Cytology, Histology and Embryology Department

The work represents research on negative influence of adrib-lastina and vepesid on structural components of gastrointestinal tract and corrective influence of aetoxidol on these changes.Bringing cytostatics in, in the mucous coat of stomach and to a less extent in the mucous coat of small intestine erosive lesions occurred, necrotic liver changes being observed. Aetoxidol partially neutralized the negative influence of adriblastin and vepesid. It maintained the integrity of epithelial layer of mucous coats of stomach and small intestine. However its protecting effect on liver was momentary and minimal.

Key words: gastrointestinal, cytostatics, mucous coat.

УДК 616.36/383:611.3+615.099:546.23

МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ И МЕТАБОЛИЧЕСКИЕ ПРЕОБРАЗОВАНИЯ БРЫЖЕЕЧНЫХ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛОВ КРЫС В УСЛОВИЯХ ТОКСИЧЕСКИХ ДОЗ СЕЛЕНИТА НАТРИЯ И ПОСЛЕ КОРРЕКЦИИ

О.А. ЗАЙКО, И.Н. ПУТАЛОВА, В.Д. КОНВАЙ*

Пероральное введение крысам селенита натрия в дозе 5 мг/кг массы в течение 5 суток ведет к гипоксии и увеличению уровня активных кислородных метаболитов, сопряженных с развитием дефицита глу-татиона и чрезмерной липопероксидацией мембранных структур. Ежедневное пероральное введение животным предшественников биосинтеза глутатиона (глутамата натрия, ацетилцистеина и глицина в дозах 20, 100, 10 мг/кг массы соответственно) способствует уменьшению этих нарушений.

Ключевые слова: глутатион, перорально, брызжеечные лимфатические узлы.

В последние годы с целью профилактики заболеваемости населения сердечно-сосудистой, онкологической и другими видами патологии проводится массовая селенизация продуктов питания. Бесконтрольное использование препаратов селена в ряде случаев

* ГОУ ВПО Омская ГМА РОСЗДРАВА (644043 г.Омск-43, ул. Партизанская, 20, каф. анатомии человека

грозит передозировкой селена с последующим развитием отравления организма. Механизм развития его, особенно воздействие этого микроэлемента на органы, осуществляющие барьерную функцию, в частности на лимфоидную ткань, до конца не изучены. Оно может быть связано с окислением селеном сульфгидрильных групп некоторых соединений, в частности глутатиона, играющего важную роль в функционировании антиоксидантной системы. Это лимитирует разработку методов детоксикации, что и определило необходимость настоящего исследования.

Цель исследования - выявление особенностей морфологических преобразований и показателей антиоксидантной системы и перекисного окисления липидов брыжеечных лимфатических узлов при экспериментальном токсическом (селеновом) воздействии и после коррекции предшественниками биосинтеза глутатиона (ПБГ).

Материалы и методы мсследования. Опыты проводили на 20 белых крысах-самцах линии Вистар массой 190-220 г, выращенных и содержащихся в стандартных условиях вивария Омской ГМА. В процессе проведения эксперимента соблюдались требования Европейской конвенции по защите подопытных животных. В качестве контроля (К) служили 8 интактных крыс, которым перорально вводили воду.

Животным опытной группы (Се) один раз в день в течение пяти суток вводили перорально раствор селенита натрия в дозе 5 мг/кг. Крысам группы Се+ПБГ вместе с селенитом натрия вводили глутамат натрия, ацетилцистеин и глицин в дозах соответственно 20, 100, 10 мг/кг массы. В таком соотношении данные аминокислоты находятся в составе глутатиона. Животным группы ПБГ вводили только данные аминокислоты в таких же дозах. На 6 сутки после начала эксперимента животных опытных и контрольных групп декапитировали под наркозом, забирали у них брыжеечные лимфатические узлы (БЛУ). Из последних готовили надмитохондриальную фракцию, в которой определяли активность супероксиддисмутазы [КФ 1.15.1.1] (СОД), каталазы [КФ 1.11.1.6], глутатионпероксидазы [КФ 1.11.1.9] (ГлПО), глутатионредуктазы [КФ 1.6.4.2] (ГлР), глюкозо-6-

фосфатдегидрогеназы [КФ 1.1.1.49] (Г-6-Ф ДГ), содержание глутатиона (0-8Ы) и малонового диальдегида (МДА).

Таблица

Показатели перекисного окисления липидов в брыжеечных лимфатических узлах контрольных крыс (К) и подвергшихся затравке селенитом натрия без введения ПБГ (Се), с его применением (Се+ПБГ) и у интактных животных, которым вводились лишь ПБГ (ПБГ) М±т, п=7-8

Показатели К Се Се+ПБГ

0-8Ы, мкмоль/мг белка 309±32 210±22к 290±24с

АОАЛ, мэкв/мг липидов 2,55±0,15 2,10±0,05к 2,48±0,16с

СОД, ед./мг белка 5,80±0,52 4,12±0,32к 5,42±0,48с

Каталаза, ед./мг белка 2,80±0,50 2,15±0,15к 2,83±0,26с

ДК, мэкв/мг липидов 0,28±0,03 0,34±0,04к 0,32±0,04

МДА, ед./мг белка 3,36±0,34 5,62±0,61к 4,05±0,32

ЛФПП, ед./мг липидов 6,8±0,6 15,7±1,4к 11,7±0,9с

ГПО, ед./мг белка 2,03±0,16 0,90±0,14к 1,22±0,10

ГР, ед./мг белка 62,8±8,8 97,0±5,5к 86,4±9,2

Г-6-ФДГ, ед./мг белка 17,8±1,5 19,0±1,7 18,2±2,3

Примечание: Обозначения - в методике. к- различие достоверно по сравнению с контролем, с- с группой Се

В приготовленных из БЛУ липидных экстрактах - антиокис-лительную активность липидов, содержание диеновых коньюгатов (ДК) и липофусциноподобного пигмента (ЛФПП). Используемые в работе биохимические методы исследования описаны в статье [2]. Материал для морфологического исследования фиксировали в жидкости Теллесницкого в течение 24 часов, затем обезвоживали в серии спиртов восходящей концентрации, просветляли в ксилолах, заключали в парафин-воск. С помощью ротационного микротома изготовляли срезы толщиной 7-10 мкм, которые окрашивали гематоксилином Майера и эозином, по методу Ван Гизона. С помощью окулярной сетки при увеличении в 32 раза под МБС-10 определяли площади основных структурных компонентов органа. Результаты исследования обработаны статистически с использованием критерия Стьюдента и непараметрических методов математического анализа.Из представленных в табл. данных видно, что введение крысам токсических доз селенита натрия на фоне ПБГ способствует лучшей сохранности фонда глутатиона в брыжеечных лимфатических узлах (БЛУ). Содержание этого трипептида соответствует контрольному, но превышает уровень того же показателя у особей группы Се на 38,1%. Лучшая обеспеченность клеток глутатионом

способствует более эффективному восстановлению в БЛУ фонда липидных антиоксидантов. Показатель антиокислительной активности липидов в БЛУ на 18,1% превышает показатель у животных группы Се, но не отличается от уровня у крыс контрольной группы.

Применение ПБГ предотвращает также торможение функции энзимов антирадикальной защиты. Активность супероксиддисмутазы и каталазы в БЛУ животных группы СЕ+ПБГ превышает соответствующие показатели у крыс, которым вводили токсическую дозу селенита натрия (группа Се) без введения им данных веществ, соответственно на 31,5 и 31,9%. Этот показатель аналогичен контрольному.

Увеличение эффективности неферментативной и ферментативной систем антирадикальной защиты уменьшает степень липопероксидации мембранных структур. Содержание диеновых коньюгатов, малонового диальдегида и липофусциноподобного пигмента в БЛУ крыс, которым вводили токсическую дозу селена на фоне ПБГ, снижено по сравнению с аналогичными показателями у животных группы Се, соответственно на 18,0, 27,9 и 25,5%. В двух последних случаях различие значимое. Вместе с тем уровень липофусциноподобного пигмента на 72% выше соответствующего показателя у крыс контрольной группы.

Снижению степени липопероксидации мембранных структур, наряду с восстановлением фонда глутатиона, способствует сохранность функции ферментов антиперекисной защиты. Активность глутатионпероксидазы в БЛУ крыс группы Се+ПБГ превышает аналогичный показатель у животных группы Се на 46,7%. Тем не менее, она продолжает оставаться более низкой, чем у животных контрольной группы на 35,5%. При этом введение ПБГ не оказывает существенного влияния на ферменты, участвующие в восстановлении образующегося в глутатионпе-роксидазной реакции глутатиондисульфида.

Активность глутатионредуктазы в БЛУ крыс группы Се+ПБГ, которая под действием селенита натрия в группе Се увеличивается, при введении ПБГ снижается незначительно. При морфологическом исследовании у животных группы Се обнаружили выраженные структурные преобразования БЛУ, выражающиеся в увеличении площади коркового вещества, преимущественно за счет возрастания площади вторичных лимфоидных узелков, и снижения площади мозгового вещества за счет уменьшения площади мозговых синусов.

В группе животных (Се+ПБГ), которым на фоне введения токсической дозы селенита натрия применяли предшественники биосинтеза глутатиона, в структуре возрастает площади паракорти-кальной зоны, синусной системы, что свидетельствует об активизации детоксикационнной и дренажно-транспортной функций БЛУ.

Таким образом, добавление ПБГ на фоне введения токсической дозы селенита натрия сглаживает повреждающий эффект селенита натрия в БЛУ.

Это может быть связано с уменьшением явлений гипоксии, отмеченных нами ранее, как на уровне организма, так и в тканях печени и лимфатической системе, и ведущих к усилению продукции ксантиноксидазой активных кислородных метаболитов, истощающих антиоксидантную систему с усилением липоперок-сидации мембранных структур клеток [1]. Защитный эффект оказывает и восполнение фонда глутатиона в клетках лимфатической системы, способствуя непосредственному связыванию этим трипептидом поступающего в организм избытка селена.

Литература

1.Зенков Н. К., Ланкин В.З., Меньшикова Е. Б. Окислительный стресс: биохимические и патологические аспекты. М.: МАИК «Наука / Интерпериодика», 2001. 343с.

2.Конвай В.Д., Золин П.П.// Омский научный вестник.2003. №3, Т. 24. С. 168-171.

MORPHOLOGICAL AND METABOLICAL REORGANIZATION OF MESENTERIC LYMPH NODES OF RATS IN CONDITIONS OF TOXICAL

SELENIUM DOSES AND AFTER GLUTATION CORRECTION

O.A. ZAYKO, I.N. PUTALOVA. V.D. KONVAY Omsk State Medical Academy Anthroponomy Department

Peroral introduction of selenium in dose of 5 mg per 1 kg into rats during 5 days gives a development of hypoxia with following escalation of active oxygen metabolite level with shortage of glu-

tathione and excessive lipid peroxidation. Daily peroral injection of glutation predecessors to animais promotes decrease of such disorders. Key words: glutation, peroral (-ly), mesenteric lymph nodes

УДК 599.323:616.36:591.8:546.815

ГИСТОПАТОЛОГИЧЕСКИЕ ИЗМЕНЕНИЯ В ПЕЧЕНИ КРЫС ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ИНГАЛЯЦИОННОМ ВОЗДЕЙСТВИИ ЛЮМИНОФОРА, СОДЕРЖАЩЕГО ФТАЛАТ СВИНЦА

О.В. ЗДОРНОВА, Е.И. ПИСКАРЕВА, Г.Л. РАДЦЕВА*

При хроническом ингаляционном воздействии люминофора, содержащего фталат свинца, в печени крыс возникают нарушения кровообращения, дистрофическим изменениям гепатоцитов вплоть до развития некроза. Степень выраженности изменений зависит от концентрации вводимого вещества.

Ключевые слова: печень, гепатоциты, свинец, люминофор.

Загрязнение почвы, воды, воздуха, продуктов питания соединениями различных металлов является в настоящее время актуальной проблемой, особенно в регионах с развитой химической промышленностью, где концентрация металлов вблизи предприятий очень высока [8]. Металлы относятся к наиболее распространенным загрязнителям воды, почвы и воздуха, включаясь через цепь питания, концентрируются в микроорганизмах, растениях, животных и таким образом поражают людей. Степень тяжести интоксикации, как известно, обычно зависит от концентрации вредного вещества и длительности контакта с ним. В развитии патологических процессов важное значение имеет кумуляция металлов, в результате чего токсические вещества накапливаются в костях, печени, почках, подкожной клетчатке и т.д. [6]. Доминирующая роль печени в адаптивных реакциях организма к воздействиям различного рода веществ обусловлена тем, что она является органом-мишенью [2].

Свинец и его соединения среди представителей многочисленного класса тяжелых металлов считаются одними из наиболее токсичных [5,10]. Соединения свинца могут попадать в продовольственное сырье и пищевые продукты из почвы, воды, воздуха, кормов сельскохозяйственных животных по пищевой цепи, довольно большое количество свинца получают курильщики, в том числе и пассивные. Определенное значение имеет и возможность прямого загрязнения в промышленных условиях. Известно, что в результате производственных процессов, где используется свинец, характерно его воздействие на человека в виде аэрозолей, образующихся вследствие конденсации и окисления паров на воздухе.

Около 35-60% свинца поступает через легкие, 5-10% - через желудочно-кишечный тракт. Таким образом, основным путем проникновения свинца в организм является ингаляционный. Поглощенный свинец поступает в кровь и распределяется в органах и тканях в зависимости от их кровоснабжения и тропности к металлу, вызывая изменения на клеточном, молекулярном, органном и системном уровнях [3]. Опасность свинца обусловлена многоплановым воздействием на системы организма, высокой устойчивостью в объектах окружающей среды и в организме, способностью к биоаккумуляции, что ведет к высокой вероятности отдаленных последствий. Свинец, как антропогенное химическое вещество, участвует в формировании и увеличении онкологических заболеваний населения, так как обладает канцерогенными свойствами, установленными в экспериментальных условиях [4].

Цель исследования — изучение морфо-функционального состояния печени в норме и при хроническом ингаляционном воздействии люминофоров, содержащих фталат свинца в различных концентрациях.

Материалы и методы исследования. Работа по изучению токсичности пыли свинецсодержащих люминофоров носила экспериментальный характер и выполнена на 105 белых беспородных половозрелых крысах самцах массой 180-220 г.

Возникающие у лабораторных животных изменения сопоставляли с известными показателями нормы [9]. Отбор и содержание животных, формирование групп проводилось по общепринятым схемам. В условиях вивария животных выдерживали на карантине не менее 14 дней. Животные с подозрением на спонтанную патологию выбраковывались.

Хроническая ингаляционная экспозиция пылью люминофоров, содержащих фталат свинца, осуществлялась в вертикальных камерах по 4 часа 6 раз в неделю. Режим работы камер предварительно отра-

* Ставропольская ГМА, кафедра гистологии, цитологии с эмбриологией. 355000 г. Ставрополь, ул. Мира 310, тел. (8652)35-34-40.