СПОСОБ ХАРАКТЕРИЗАЦИИ РЕКОМБИНАНТНОГО ПОЛИКЛОНАЛЬНОГО БЕЛКА

1. Способ характеризации вида легкой цепи в композиции рекомбинантных поликлональных антител, включающий стадии:
a) производства и очистки композиции рекомбинантных поликлональных антител;
b) восстановления цистеиновых мостиков, соединяющих тяжелую и интактную легкую цепи;
с) отделения тяжелых цепей от интактных легких цепей;
d) по меньшей мере одного хроматографического анализа интактных легких цепей, в котором белки разделяются согласно физико-химическим свойствам;
e) масс-спектрометрии разделенных интактных легких цепей со стадии (d); и
f) анализа данных, полученных на стадии (e) для характеризации вида интактной легкой цепи в композиции рекомбинантных поликлональных антител.
2. Способ по п.1, где интактные легкие цепи содержат полую аминокислотную последовательность легкой цепи.
3. Способ по п.1 или 2, где интактные легкие цепи имеют N-концевой аминокислотный остаток, отличный от глутамина.
4. Способ по п.1, где указанный хроматографический анализ основан на, по меньшей мере, одном физико-химическом свойстве, отличном от размера.
5. Способ по п.4, включающий индивидуальный хроматографический анализ на основе, по меньшей мере, одного физико-химического свойства, выбранного из группы, состоящей из суммарного заряда, гидрофобности, изоэлектрической точки и аффинности.
6. Способ по п.5, где индивидуальный хроматографический анализ основан на суммарном заряде.
7. Способ по п.1, где указанные хроматографические анализы осуществляют в виде многомерной хроматографии.
8. Способ по п.1, где хроматографический анализ представляет собой или включает жидкостную хроматографию высокого разрешения.
9. Способ по п.1, где указанная композиция поликлональных антител представляет собой фракцию клеточной культуры, содержащую клетки указанной культуры.
10. Способ по п.1, где стадия (a) включает получение композиции поликлональных антител из одного или нескольких супернатантов клеточных культур.
11. Способ по п.1, где характеризация вида легкой цепи в композиции рекомбинантных поликлональных антител включает определение присутствия или отсутствия вида легкой цепи в композиции рекомбинантных поликлональных антител.
12. Способ по п.1, где характеризация вида легкой цепи в композиции рекомбинантных поликлональных антител включает определение относительного содержания вида легкой цепи в композиции рекомбинантных поликлональных антител.
13. Способ по п.1, где стадия (f) включает сравнение данных, полученных на стадии (е), с данными, полученными, по меньшей мере, одним дополнительным аналитическим методом, выбранным из группы, состоящей из дополнительного метода характеризации белка и генетического метода.
14. Способ по п.13, где, по меньшей мере, один дополнительный аналитический метод представляет собой генетический анализ полинуклеотидов, кодирующих легкие цепи.
15. Способ по п.13 или 14, где генетический анализ выбран из RFLP, T-RFLP, анализа микрочипов, количественной ПЦР и секвенирования нуклеиновых кислот.
16. Способ по п.13, где дополнительный метод характеризации представляет собой метод характеризации белка, выбранный из N-концевого секвенирования, и характеризации комплексных смесей гомологичных белков со специфическими детекторными молекулами, такими как анти-идиотипические антитела или анти-идиотипические пептиды.
17. Способ детектирования вариации между популяцией интактных легких цепей в двух или более композициях рекомбинантных поликлональных антител, включающий осуществление способа по любому из пп.1-16 для каждой из двух или более композиций рекомбинантных поликлональных антител, и определение любой дисперсии между популяциями интактных легких цепей в двух или более композициях рекомбинантных поликлональных антител.
18. Способ по п.17, где две или более композиции рекомбинантных поликлональных антител получают из одной поликлональной клеточной культуры в различные моменты времени в процессе культивирования.
19. Способ по п.17, где две или более композиции рекомбинантных поликлональных антител получают из различных поликлональных клеточных культур в конкретный момент времени.