КОМПОЗИЦИЯ И ЕЕ ПРИМЕНЕНИЕ В ЛЕЧЕНИИ АНАЛЬНЫХ ТРЕЩИН
COMPOSITION AND USE THEREOF IN TREATING ANAL FISSURES

Настоящее изобретение относится к композиции, содержащей по меньшей мере один белковый экстракт гибискуса и/или по меньшей мере один бета-глюкан. Кроме того, настоящее изобретение относится к применению указанной композиции для лечения анальных трещин.
Анальная трещина представляет собой изъязвление эпителия нижней части анального канала, обычно расположенное на уровне задней спайки канала и сопровождающееся контрактурой внутреннего сфинктера.
Разрывы анальной слизистой оболочки в месте трещины приводят к незначительному кровотечению при дефекации. Состояние контрактуры внутреннего сфинктера приводит к гипертонусу анального канала, который является причиной боли (основного симптома). Боль настолько интенсивна и остра, особенно во время и после дефекации (до 3-4 часов), что она заставляет субъекта избегать дефекации, следствием чего является возможное затвердевание кала и, вследствие этого, обострение проблемы.
Анальные трещины могут возникать у индивидов разного возраста без половых различий; тем не менее, в эксперименте продемонстрировано, что риск их возникновения максимален у индивидов в возрасте 20-40 лет. Анальные трещины являются второй по частоте причиной обращения к проктологу, уступая только патологии геморроидальных вен; фактически, частота анальных трещин в амбулаторной проктологической практике составляет 9-12%. Согласно данным годового отчета SICCR (Итальянского общества колоректальной хирургии (Italian Society of Colorectal Surgery)) за 2009 г., было отмечено в общей сложности 5199 случаев анальных трещин, и у 37% пациентов (1924) было проведено хирургическое вмешательство.
Несмотря на то, что клинические проявления трещин хорошо известны, их этиопатогенез до сих пор не ясен.
Согласно механической теории, провоцирующим фактором часто являются затрудненная дефекация и травма из-за прохождения твердого кала. Это приводит к сильной персистирующей боли, заставляющей индивида подавлять позывы и откладывать дефекацию, что ведет к еще большему затвердеванию кала и ухудшению состояния.
Поэтому возможно, что травматический фактор провоцирует появление трещин, которые, тем не менее, при отсутствии других факторов заживают. Первым из них является постоянный гипертонус внутреннего анального сфинктера, и вторым является состояние ишемии, локализованной на уровне анального канала. Фактически, кровоснабжение анального канала, в котором расположены трещины, происходит по нижней прямокишечной артерии. Однако у 85% индивидов с трещинами можно наблюдать (при ангиографии) относительную артериальную недостаточность на уровне задней спайки анального канала. Кроме того, кровоток уменьшается при повышении давления в заднем проходе, и наоборот. Поэтому гипертонус и ишемия представляют собой тесно связанные явления.
Можно выделить острую и хроническую форму анальных трещин.
Острая форма представляет собой поверхностное радиальное поражение анодермы (то есть эпителиальной выстилки анального канала), характеризующееся ровными краями и розовой окраской дна. Обычно она связана с очень сильной болью. Острая форма имеет тенденцию к рубцеванию, но часто рецидивирует или переходит в хроническую форму.
Трещину считают острой, если она существует менее 6 недель. Спонтанное заживление острых анальных трещин происходит в 70% случаев.
Терапевтическое лечение острой трещины является консервативным; фактически, хирургическое вмешательство проводят только при неэффективности терапевтического лечения.
Хроническая анальная трещина представляет собой глубокое радиальное поражение анодермы, характеризующееся приподнятыми беловатыми краями с видимыми волокнами гладкомышечного сфинктера на дне. Она часто сопровождается наличием гипертрофированных анальных сосочков, то есть небольших мягких выпячиваний эпителия анального канала. Трещину считают хронической, если она существует более 6 недель. Спонтанное заживление хронических трещин происходит не более чем в 20% случаев.
В свете того факта, что хронические анальные трещины имеют очень небольшой процент заживления, множество исследований было проведено с целью выявления новых улучшенных способов лечения как консервативного, так и хирургического типа.
Острые анальные трещины можно лечить консервативно, устраняя спазм внутреннего сфинктера, приводящего к гипертонусу.
Консервативная терапия предусматривает диету, богатую грубой пищей, и обильный прием жидкостей, а также очень тщательную и деликатную местную гигиену. Когда трещины связаны с запором, рекомендовано применение масел и/или волокон для размягчения кала.
Задачей консервативного терапевтического подхода является снижение гипертонуса внутреннего анального сфинктера, что способствует заживлению трещин.
Недавние исследования патофизиологии анального сфинктера продемонстрировали, что оксид азота является ингибитором тонуса внутреннего анального сфинктера. Поэтому можно проводить так называемую «обратимую химическую сфинктеротомию» путем местного нанесением мази на основе тринитроглицерина (ТНГ), позволяющую расслабить внутренний анальный сфинктер.
Средний процент заживления за два месяца терапии составил 58% с рецидивами в 11-46,2% случаев.
Наиболее частым осложнением этого лечения является головная боль, возникающая в среднем в 57% случаев и иногда приводящая к необходимости прекращения лечения. Альтернативно, консервативная терапия трещин предусматривает инъекции ботулотоксина в гладкомышечный внутренний сфинктер для их заживления, благодаря снижению тонуса внутреннего анального сфинктера. Обычно через несколько часов после введения токсина развивается слабый паралич, имеющий тенденцию к сохранению в течение 3-4 месяцев.
В 2-96% случаев в течение двух месяцев после лечения происходит рубцевание трещин с рецидивами в 30% случаев.
Однако в 18% случаев это лечение приводит к крайне неблагоприятному побочному эффекту, то есть временному недержанию кала.
Еще одной терапевтической альтернативой является введение блокаторов кальциевых каналов. Это приводит к снижению максимального давления сфинктера в покое с серьезными побочными эффектами при превышении дозы у пациентов с заболеваниями сердца и диабетом.
При неудовлетворительном ответе на консервативное или фармацевтическое терапевтическое лечение или при рецидивировании и усугублении трещин с течением времени возникает необходимость в хирургическом лечении, которое может включать различные более или менее инвазивные методики. Возможно проведение «современного» варианта расширения заднего прохода (в настоящее время признанного устаревшим), называемого «механической анальной сфинктероклазией». Согласно этой методике используют резиновый баллон, который вводят в анальный канал и надувают при контролируемом давлении. Посредством этого внутренний сфинктер расширяют на несколько минут (примерно 5), что позволяет устранить его гипертонус. Негативным явлением может быть возникновение недержания кала различной степени выраженности, также персистирующего, в значительном проценте случаев (8-35%).
«Золотым стандартом» лечения анальных трещин является «латеральная внутренняя сфинктеротомия». Ее называют «открытой» при разрезе кожи с выделением сфинктера, и ее называют «закрытой», когда ее проводят чрескожно без выделения сфинктера.
Обе методики позволяют гарантировать заживление у большой процентной доли пациентов (более чем в 90% случаев заживление происходит за 2 месяца после лечения).
Наиболее серьезным осложнением является недержание кала, в большинстве случаев транзиторное (8,9%-13,0% случаев), но в некоторых случаях персистирующее (0,6-6,9%).
Хирургическое вмешательство может также включать «регулируемую латеральную внутреннюю сфинктеротомию», позволяющую регулировать размер участка, подлежащего рассечению, по степени выраженности трещин, длине сфинктера и измеренной степени гипертонуса. Она позволяет снизить частоту неудач, обусловленных персистенцией или рецидивированием трещин, и осложнений, связанных с недержанием.
С учетом широкой распространенности данного патологического состояния, в большинстве случаев связанного с очень сильной болью, приводящей к нетрудоспособности, все еще существует острая потребность в новых терапевтических методах, позволяющих лечить анальные трещины или, по меньшей мере, облегчать обусловленную ими боль. В частности, в клинических исследованиях в этой области особое внимание всегда было сосредоточено на выявлении новых способов консервативной терапии, например фармакологических протоколов, позволяющих уменьшить потребность в хирургических вмешательствах, которые, как описано выше, позволяют обеспечить заживление анальных трещин, но часто приводят к недержанию, являющемуся нефизиологичным состоянием, в равной степени тягостным для индивида, особенно с социально-психологической точки зрения.
Настоящее изобретение вписывается в данный контекст и относится к композиции, содержащей по меньшей мере один белковый экстракт гибискуса и по меньшей мере один бета-глюкан или его соль, как описано в прилагаемой формуле изобретения.
Кроме того, настоящее изобретение относится к применению композиции, содержащей по меньшей мере один белковый экстракт гибискуса и/или по меньшей мере один бета-глюкан или его соль, для лечения анальных трещин, как описано в прилагаемой формуле изобретения.
В действительности, авторы изобретения неожиданно обнаружили, что нанесение композиции, содержащей один белковый экстракт гибискуса и/или один бета-глюкан, на анальные трещины позволяет улучшить симптоматическое или асимптоматическое состояние, обусловленное анальными трещинами, сразу после самого первого нанесения.
В частности, авторы изобретения неожиданно обнаружили, что эта композиция позволяет облегчить боль, связанную с дефекацией, оказывая репаративное действие на местный эпителий, и, сходным образом, снизить гипертонус внутреннего сфинктера, способствуя тем самым расслаблению гладких мышц анального канала.
Первый аспект настоящего изобретения относится к по меньшей мере одному белковому экстракту гибискуса, предпочтительно представляющему собой белковый экстракт Hybiscus esculentus, также известного как окра или Abelmoschus esculentus, то есть растения, принадлежащего семейству Malvaceae, обычно произрастающего в тропических регионах.
Указанный, по меньшей мере один белковый экстракт гибискуса предпочтительно представляет собой по меньшей мере белковую фракцию, более предпочтительно по меньшей мере одну растворимую белковую фракцию, предпочтительно происходящую от семян гибискуса. В частности, белковый экстракт имеет происхождение от семян гибискуса, предпочтительно размолотых семян гибискуса, более предпочтительно делипидированных и/или размолотых семян.
Указанный белковый экстракт или указанная белковая фракция предпочтительно представляют собой белковый гидролизат, предпочтительно получаемый из нативного белка. Гидролизат может быть получен ферментативным гидролизом и/или химическим гидролизом. Альтернативно, гидролизат может быть получен биотрансформацией.
В контексте настоящего изобретения биотрансформация означает процесс, позволяющий повысить растворимость вещества в воде, например, его функционализацей посредством гидролиза, окисления, восстановления или конъюгации с введением гидрофильных групп или их выведением на поверхность молекулы.
В некоторых воплощениях указанный гидролизат представляет собой смесь олигопептидов. Предпочтительно, указанный гидролизат находится в смеси со связующим агентом, более предпочтительно с декстрином. В предпочтительных воплощениях соотношение указанного гидролизата и указанного связующего агента предпочтительно составляет 1:1.
Смесь олигопептидов, предпочтительная для задач настоящего изобретения, представляет собой коммерческий продукт торговой марки Myoxinol™.
Концентрация указанного по меньшей мере одного белкового экстракта гибискуса находится в диапазоне от 0,1 до 10%, предпочтительно от 0,4 до 5%.
Второй аспект настоящего изобретения относится к бета-глюкану, предпочтительно представляющему собой карбоксиметил бета-глюкан и/или его соль, более предпочтительно карбоксиметил бета-глюкан натрия.
Концентрация указанного бета-глюкана находится в диапазоне от 0,004 до 0,4%, предпочтительно от 0,02 до 0,08%.
Соотношение указанного по меньшей мере одного белкового экстракта гибискуса и указанного по меньшей мере одного бета-глюкана предпочтительно составляет 50-10:1, более предпочтительно 35-20:1.
Композиция по настоящему изобретению характеризуется рН в диапазоне от 5 до 8, предпочтительно от 5,5 до 6,5. С целью коррекции рН композиции по изобретению может быть использован рН-регулирующий агент (называемый далее регулятором рН), предпочтительно основное вещество, например, триэтаноламин.
Концентрация указанного агента находится в диапазоне от 0,03 до 1%, предпочтительно от 0,1 до 0,6%.
В предпочтительных воплощениях композиция по изобретению, предпочтительно изготовленная в форме гель-крема (то есть гель-эмульсии), характеризуется вязкостью, предпочтительно входящей в диапазон от 5000 до 30000, более предпочтительно от 7000 до 25000 (мПа·с).
Композиция по настоящему изобретению может дополнительно содержать по меньшей мере один фармакологически приемлемый эксципиент или соединение, приемлемое для фармацевтического применения или для косметического применения, полезное при изготовлении композиции и, как правило, биологически безопасное и нетоксичное.
Указанный эксципиент может представлять собой по меньшей мере один кондиционирующий агент, предпочтительно увлажняющий, окклюзивный или смягчающий кондиционирующий агент для кожи или волос.
В частности, указанный кондиционирующий агент выбран из группы, состоящей из диметикона или диметилполисилоксана, предпочтительно линейного, глицерина, миндального масла (предпочтительно масла Prunus amygdalus dulcis), фенилтриметикона, масла бурачника (предпочтительно масла из семян Borago officinalis), экстракта и/или растительного клея мальвы, предпочтительно растительного клея Malva sylvetris, пантенола, экстракта календулы, предпочтительно экстракта Calendula officinalis, этилгексилглицерина, каприлилгликоля, аспарагиновой кислоты, мальтодекстринов и глицерилстеарата.
Концентрация указанного кондиционирующего агента находится в диапазоне от 15 до 35%, предпочтительно от 20 до 25%.
Предпочтительно концентрация указанного диметикона или диметилполисилоксана находится в диапазоне от 2,5 до 10%, более предпочтительно от 3,5 до 7%.
Предпочтительно концентрация указанного глицерина находится в диапазоне от 2,5 до 10%, более предпочтительно от 3,5 до 7%.
Предпочтительно концентрация указанного миндального масла находится в диапазоне от 2 до 8%, более предпочтительно от 3 до 6%.
Предпочтительно концентрация указанного фенилтриметикона находится в диапазоне от 1 до 4%, более предпочтительно от 1,5 до 3%.
Предпочтительно концентрация указанного масла бурачника находится в диапазоне от 1 до 4%, более предпочтительно от 1,5 до 3%.
Предпочтительно концентрация указанного экстракта мальвы находится в диапазоне от 1 до 4%, более предпочтительно от 1,5 до 3%.
Предпочтительно концентрация указанного пантенола находится в диапазоне от 0,5 до 2%, более предпочтительно от 0,75 до 1,5%.
Предпочтительно концентрация указанного экстракта календулы находится в диапазоне от 0,1 до 0,4%, более предпочтительно от 0,15 до 0,3%.
Предпочтительно концентрация указанного каприлилгликоля находится в диапазоне от 0,1 до 0,4%, более предпочтительно от 0,15 до 0,3%.
Предпочтительно концентрация указанных мальтодекстринов находится в диапазоне от 0,1 до 0,4%, более предпочтительно от 0,15 до 0,3%.
Предпочтительно концентрация указанного глицерилстеарата находится в диапазоне от 0,4 до 1,8%, более предпочтительно от 0,5 до 1,2%.
Предпочтительно концентрация указанного этилгексилглицерина находится в диапазоне от 0,05 до 0,2%, более предпочтительно от 0,75 до 0,15%.
Предпочтительно концентрация указанной аспарагиновой кислоты находится в диапазоне от 0,0002 до 0,001%, более предпочтительно от 0,0003 до 0,0008%.
Указанный эксципиент может дополнительно представлять собой поверхностно-активное вещество, предпочтительно эмульгирующее или очищающее поверхностно-активное вещество. Более предпочтительно указанное поверхностно-активное вещество выбрано из группы, состоящей из цетилового спирта, цетила(20) ОЕ или цетета-20, стеарила(20) ОЕ или стеарета-20 и стеарата PEG-75.
Концентрация указанного поверхностно-активного вещества предпочтительно находится в диапазоне от 1 до 3%, более предпочтительно от 1,2 до 2%.
Концентрация указанного цетилового спирта предпочтительно находится в диапазоне от 0,5 до 1%; или концентрация указанного стеарата PEG-75 предпочтительно находится в диапазоне от 0,2 до 1%; или концентрация указанного цетета-20 или указанного стеарета-20 предпочтительно находится в диапазоне от 0,05 до 0,25%.
Кроме того, указанный эксципиент может представлять собой консервант, предпочтительно феноксиэтанол; или указанный эксципиент может представлять собой антиоксидант, предпочтительно выбранный из токоферола и сухого экстракта солодки (Glycyrrhiza glabra).
Концентрация указанного консерванта предпочтительно находится в диапазоне от 0,3 до 1%, более предпочтительно от 0,5 до 1%; концентрация указанного антиоксиданта предпочтительно находится в диапазоне от 0,1 до 1%, более предпочтительно от 0,2 до 0,6%.
Указанный эксципиент также может представлять собой связующий агент, предпочтительно выбранный из декстринов; или указанный эксципиент может представлять собой стабилизирующий агент, предпочтительно эмульгирующий стабилизирующий агент, более предпочтительно сшитый акриловый сополимер; или указанный эксципиент может представлять собой хелатирующий агент, предпочтительно этилдиамин дисукцинат тринатрия. Предпочтительно, концентрация указанного связующего агента находится в диапазоне от 0,5 до 2%, более предпочтительно от 0,75 до 1,5%; концентрация указанного хелатирующего агента предпочтительно находится в диапазоне от 0,01 до 0,08%, более предпочтительно от 0,02 до 0,06%; и концентрация указанного стабилизирующего агента предпочтительно находится в диапазоне от 0,15 до 0,6%, более предпочтительно от 0,2 до 0,4%.
Проценты, приведенные выше для концентрации различных компонентов композиции по изобретению, следует рассматривать как массовые (мас./мас.) проценты, и, таким образом, они относятся к 100 граммам продукта.
Композицию по настоящему изобретению изготавливают в растворителе, представляющем собой воду и/или 1,2-гександиол.
Указанным растворителем композицию доводят до 100% ее окончательной массы.
Другой аспект настоящего изобретения относится к композиции по изобретению, изготовленной для местного применения, в частности изготовленной в форме крема, гель-крема, геля, масла, эмульсии, гель-эмульсии (эмульгеля), мази, спрея, суппозитория или стика (такой, как стик из масла какао).
Альтернативно, композиция по настоящему изобретению может быть изготовлена для перорального применения, предпочтительно в форме пастилок, таблеток или гранул, или для инъекционного применения.
Композиция может быть изготовлена для быстрого высвобождения или для замедленного и/или контролируемого высвобождения ее активных ингредиентов после введения.
Еще один аспект настоящего изобретения относится к применению композиции, содержащей по меньшей мере один экстракт гибискуса и по меньшей мере один бета-глюкан или его соль, в качестве лекарственного средства.
Еще один аспект настоящего изобретения относится к применению композиции, содержащей по меньшей мере один экстракт гибискуса и/или по меньшей мере один бета-глюкан или его соль, для лечения анальных трещин, предпочтительно острых анальных трещин.
В предпочтительном воплощении композицию по изобретению применяют местно, предпочтительно по меньшей мере один раз в сутки, более предпочтительно по меньшей мере два раза в сутки.
Введение предпочтительно проводят на протяжении периода продолжительностью по меньшей мере одну неделю, более предпочтительно по меньшей мере две недели. Наилучшие результаты получают при лечении на протяжении по меньшей мере двадцати суток.
Композицию по настоящему изобретению можно вводить саму по себе или в комбинации с дополнительными агентами, эффективными в лечении трещин или способствующими лечению трещин.
Альтернативно, композицию можно применять вместе с другими способами и/или протоколами лечения анальных трещин. В предпочтительных примерах указанных способов и/или протоколов применяют средства, расслабляющие задний проход.
Еще один аспект настоящего изобретения относится к способу изготовления композиции, содержащей по меньшей мере один белковый экстракт гибискуса и/или по меньшей мере один бета-глюкан, по настоящему изобретению.
Указанный способ включает следующие стадии:
(1) плавление кондиционирующих агентов, предпочтительно окклюзивных и/или смягчающих кондиционирующих агентов, и/или поверхностно-активных веществ, предпочтительно эмульгирующих и/или очищающих поверхностно-активных веществ, при температуре в диапазоне от 70 до 90ºС, более предпочтительно в диапазоне от 75 до 80ºС;
(2) смешивание растворителя, кондиционирующих агентов, предпочтительно увлажняющих кондиционирующих агентов, хелатирующих агентов и/или эмульгирующих стабилизирующих агентов с исходными материалами, расплавленными на стадии (1);
(3) добавление по меньшей мере одного экстракта гибискуса в смесь, полученную на стадии (2);
(4) добавление по меньшей мере одного бета-глюкана в смесь, полученную на стадии (3).
Указанный экстракт гибискуса, используемый на стадии (3), солюбилизируют, предпочтительно в воде и более предпочтительно в очищенной воде. Предпочтительно солюбилизацию проводят при температуре в диапазоне от 40 до 60ºС, более предпочтительно от 50 до 55ºС.
Указанный по меньшей мере один бета-глюкан, используемый на стадии (4), предпочтительно добавляют в форме 1-5%-го раствора (массовые проценты (масс/масс.)), более предпочтительно 1,5-2,5%-го раствора. Температура смеси, в которую добавляют указанный по меньшей мере один бета-глюкан, предпочтительно находится в диапазоне от 35 до 45ºС, более предпочтительно от 32 до 37ºС.
Смешивание компонентов композиции по изобретению предпочтительно продолжают до получения полуфабриката. Указанный полуфабрикат может быть готов к применению или упаковке.
Еще один аспект настоящего изобретения относится к набору, содержащему композицию, содержащую по меньшей мере один белковый экстракт гибискуса и/или по меньшей мере один бета-глюкан или его соль.
Предпочтительно композиция, входящая в набор, изготовлена в форме крема, геля или эмульсии-геля. Более предпочтительно, набор содержит по меньшей мере один, предпочтительно по меньшей мере двадцать дозаторов (например, мягких туб), содержащих композицию по изобретению, предпочтительно в предварительно дозированном количестве. Дозаторы предпочтительно являются одноразовыми, более предпочтительно снабжены аппликатором, предпочтительно встроенным в указанный дозатор, с целью облегчения нанесения композиции на трещину, подлежащую лечению.
Предпочтительно характеристики дозаторов позволяют доставлять при нанесении предварительно дозированное необходимое и достаточное количество композиции.
Примеры
Способ получения композиции по настоящему изобретению в форме гель-крема
Исходные материалы помещают в мешалку, следуя методике и количествам, представленным в рецептуре. Исходные материалы, которые необходимо расплавлять перед смешиванием с другими ингредиентами рецептуры, расплавляют в плавильном агрегате при температуре в диапазоне 75-80ºС.
Затем температуру смеси снижают до 50-55ºС и добавляют миоксинол, солюбилизированный в горячей очищенной воде (50-55ºС), после чего добавляют бета-глюкан (2%-й раствор) вместе с другими компонентами, не требующими плавления или солюбилизации. Эти ингредиенты добавляют в смесь при температуре ниже 35ºС и перемешивание продолжают до получения полуфабриката, готового к применению/упаковке.
Примеры композиций
Пример композиции по изобретению, изготовленной в форме геля/крема и используемой для задач заявленного применения, приведен ниже в Таблице 1.
Анализ раздражения слизистой оболочки прямой кишки с использованием композиции по изобретению
Проводили анализ раздражения слизистой оболочки прямой кишки с использованием композиции по изобретению в форме гель-крема. Исследование проводили у 6 самцов кроликов-альбиносов.
Конкретно, 3 кроликам вводили 1 мл композиции в форме гель-крема, 3 кроликам вводили 1 мл физиологического раствора (контроль). Гель/крем (вводимые образцы) или физиологический раствор (контрольные образцы) вводили непосредственно в прямую кишку каждого животного с использованием мягкого катетера. Введение повторяли 5 дней подряд.
Проводили ежедневный осмотр слизистой оболочки прямой кишки каждого животного с целью выявления любых признаков раздражения, например, эритемы и/или наличия корок.
Через двадцать четыре часа после последнего дня введения животных умерщвляли и отбирали образцы слизистой оболочки прямой кишки животных для проведения гистологического исследования.
Выявленные микроскопические реакции оценивали на основании данных, показанных в Таблице 3.
При макроскопическом исследовании воспалительные реакции, выявленные в области нанесения у животных, которым вводили анализируемую композицию, сравнивают с соответствующими реакциями, выявленными у контрольных животных.
Баллы, полученные при анализе микроскопических реакций у всех животных, которым вводили анализируемую композицию, складывают и делят на число животных с получением среднего раздражающего потенциала для каждой группы введения. Такие же расчеты проводят для контрольной группы.
Балл 9 при микроскопической оценке контрольных тканей может указывать на сопутствующую патологию или, у контрольного животного, может указывать на травму при введении. В обеих ситуациях может быть необходим повторный анализ, если другие животные в анализируемой или контрольной группе демонстрируют такие же высокие показатели. Для получения индекса раздражения средний показатель контрольной группы вычитают из среднего показателя анализируемой группы.
Индексы раздражения показаны в Таблице 4.
Результаты макроскопической оценки показаны в Таблице 5.
У животных не было выявлено аномалий, обусловленных введением анализируемой композиции или физиологического раствора.
Результаты микроскопической оценки представлены в Таблице 6.
Согласно результатам, показанным в Таблице 6, композиция по настоящему изобретению демонстрирует нулевой раздражающий потенциал. Индекс раздражения прямой кишки, фактически, равен нулю.
В завершение, можно считать, что композиция по настоящему изобретению не раздражает слизистую оболочку прямой кишки.
Анализ отсроченной гиперчувствительности - максимизированная проба у морских свинок (GPMT) с использованием композиции по изобретению
Анализ проводили у самок белых морских свинок; конкретно, группе из 10 животных (группа 1) вводили композицию по изобретению, в то время как 5 животных были включены в контрольную группу (группу 2).
Группе 1 вводили композицию в форме гель-крема, в то время как группе 2 вводили физиологический раствор.
Группе 1 проводили внутрикожную инъекцию (образец 1) 1-50:50 (об./об.) стабильной эмульсии полного адъюванта Фрейнда (FCA) с физиологическим раствором и анализируемого продукта, разведенного 50:50 (об./об.) стабильной эмульсией FCA с физиологическим раствором (50%).
Животным группы 2 проводили внутрикожную инъекцию (образец 2) 1-50:50 (об./об.) стабильной эмульсии полного адъюванта Фрейнда (FCA) с физиологическим раствором. Физиологический раствор разводили 50:50 (об./об.) стабильной эмульсией FCA с физиологическим раствором (50%).
Животные, использованные в исследовании, были случайным образом отобраны из подходящих животных, доступных во время исследования. Животных разделяли на группы, помещая в каждую клетку не более 5 животных.
2
За двадцать четыре часа до введения на спине животных выбривали участок площадью приблизительно 50 см.
Анализ состоял из фазы индукции и фазы провокации.
В фазе индукции на нулевые сутки (0) всем животным проводили три пары внутрикожных инъекций, каждая по 0,1 мл образца, описанного выше, в подлопаточных областях по обе стороны от срединной линии.
На шестые сутки фазы индукции, после внутрикожных инъекций, всем животным мягким массажем местно наносили 1 мл 10%-го лаурилсульфата натрия.
На 7 сутки фазы индукции, после внутрикожных инъекций, всем животным под окклюзионной повязкой местно наносили 1 мл образца. Место нанесения выбирали независимо от места инъекции.
Повязку оставляли на 48 часов. В контрольной группе проводили те же процедуры с использованием физиологического раствора вместо композиции по изобретению.
Что касается фазы провокации, на двадцать первые сутки всем морским свинкам на правый бок под окклюзионной повязкой местно наносили 1 мл анализируемой композиции, разведенной, как описано выше. Повязку оставляли на 24 часа.
На двадцать третьи сутки (через 24 часа после снятия повязки) и на двадцать четвертые сутки (через 48 часа после снятия повязки) у всех животных оценивали кожные реакции. Интенсивность эритемы и отека оценивали по шкале Магнуссона-Клигмана, как показано в Таблице 7.
Показатели по шкале Магнуссона-Клигмана 1 или более в анализируемой группе обычно указывают на сенсибилизацию, при условии, что показатели контрольных животных составляют менее 1.
Если показатели контрольных животных составляют 1 или более, можно предполагать, что у анализируемых животных реакции, превышающие наиболее выраженную реакцию у контрольных животных, обусловлены сенсибилизацией.
При неясном ответе необходимо провести повторную провокацию для подтверждения результатов первой провокации. Результат анализа представляют в виде частоты положительных ответов на провокацию у анализируемых и контрольных животных.
Результаты представлены в Таблице 8.
Результаты демонстрируют, что ни у животных, получавших настоящую композицию, ни у контрольных животных не было выявлено никаких отклонений от нормы и что процент сенсибилизированных морских свинок, таким образом, равен нулю (0).
Первое исследование у субъектов с анальными трещинами, получавших композицию по настоящему изобретению
Десять субъектов с острыми анальными трещинами в возрасте от 21 до 72 лет (средний возраст 38,7 года) получали лечение композицией по изобретению. Лечение продолжали в течение одного месяца и проводили путем местной обработки трещин композицией в форме гель-крема три раза в сутки.
Сообщений о каких-либо побочных эффектах от субъектов не поступало. После месяца лечения у 5 из 10 субъектов наступила полная ремиссия болезненных симптомов, в то время как у других 4 субъектов указанные симптомы значительно уменьшились. Боль измеряли с использованием визуально-аналоговой шкалы (VAS), и средний показатель VAS был в диапазоне от 9 до 3,25.
После одного месяца лечения у 6 из 10 субъектов было отмечено полное рубцевание трещин. После окончания местного лечения дальнейшая терапия была необходима для 7 субъектов, которые восприняли это положительно с учетом того факта, что у них было отмечено отчетливое уменьшение симптомов.
На втором осмотре, проведенном через 60 суток, полное рубцевание было отмечено у 9 из 10 субъектов.
У единственного субъекта, у которого не произошло полного заживления, последующую терапию продолжали еще двадцать суток, и на следующем осмотре (то есть через 90 суток после начала лечения) у него было отмечено полное заживление.
Второе исследование у субъектов с анальными трещинами, получавших композицию по настоящему изобретению
Десять субъектов с острыми анальными трещинами получали композицию по изобретению в форме гель-крема.
Лечение проводили в дозах 3 грамма/сутки в течение 30 суток или 3 грамма/сутки в течение 50 суток.
Для диагностики анальных трещин субъектам проводили аноскопию в амбулаторных условиях.
Субъектам проводили инструктаж по нанесению гель-крема и в случае сопутствующего запора назначали терапию на основе агентов, размягчающих кал (FIBRAID, одно саше два раза в сутки), в течение 30 или 50 суток, соответственно.
Клиническое обследование, состоявшее в осмотре и аноскопии, проводили на 10 и 30 сутки.
Первичной конечной точкой было разрешение симптомов, обнаруженных при первичном осмотре.
Вторичной конечной точкой было макроскопическое заживление трещин.
Характеристики субъектов и результаты, полученные при обследовании, представлены в Таблице 9.
Запор был приблизительно у 70% субъектов.
У 58% субъектов, получавших лечение, наблюдали немедленный положительный эффект с разрешением или отчетливым уменьшением симптомов через 10 суток после лечения; на 30 сутки этот процент возрастал до 75%.
Через 10 суток у двух субъектов произошло макроскопическое заживление трещин; у этих субъектов лечение было начато в первый месяц после появления симптомов.
На 30 сутки заживление трещин наблюдали более чем у 50% субъектов.
Общая частота необходимости дальнейшего лечения составила 27%, при этом с 50 суток один субъект выбыл из наблюдения.
Никаких сообщений о нежелательных явлениях или осложнениях в различные периоды наблюдения от субъектов получено не было.