СПОСОБ ПРОГНОЗА ВЕРОЯТНОСТИ НАСТУПЛЕНИЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ БЕРЕМЕННОСТИ У ПЕРВОРОДЯЩИХ ПАЦИЕНТОК ПОЗДНЕГО РЕПРОДУКТИВНОГО ВОЗРАСТА
METHOD FOR PREDICTING THE PROBABILITY OF INDEPENDENT PREGNANCY IN ELDERLY PRIMIGRAVIDA

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии и касается способа прогнозирования вероятности наступления самостоятельной беременности у первородящих женщин позднего репродуктивного возраста.
Тенденция позднего материнства является одной из проблем экономически развитых стран, так как реализация репродуктивной функции отодвигается на второй план [1]. При планировании беременности в позднем репродуктивном возрасте, после 35-37 лет, женщины используют вспомогательные репродуктивные технологии (ВРТ) [2].
По данным Европейского общества репродукции человека и эмбриологии процент пациенток клиник ВРТ в возрасте 35-39 лет составляет приблизительно 36%, в возрасте 40 лет и старше - 17% [3].
По данным Российской Ассоциации репродукции человека за 2018 год общая доля пациенток позднего репродуктивного возраста (старше 35 лет) составляет около 40%, с тенденцией к увеличению данной группы женщин, обращающихся в клиники ВРТ для лечения бесплодия [4].
Так как Уральский регион является йододефицитным, соответственно, эндемическим районом по заболеваниям щитовидной железы [5]. Поэтому болезни щитовидной железы у возрастных пациенток и пациенток оптимального возраста возникают довольно часто, но у пациенток основной группы достоверно чаще, чем в контрольной группе - 34,6% и 16,6% соответственно. (p < 0,05). Это подтверждает, что заболевания щитовидной железы, в том числе гипотиреоз, является одной из причин привычного невынашивания беременности.
Репродуктивная система женщины является наиболее чувствительной к влиянию техногенного загрязнения окружающей среды. Генетические различия в экспрессии и активности ферментов биотрансформации ксенобиотиков связаны с наличием полиморфных аллелей, кодирующих эти ферменты. При наличии функционально ослабленных вариантов генов метаболизма ксенобиотиков увеличивается риск возникновения некоторых частых мультифакториальных заболеваний [6]. Одним из основных генов, отвечающих за эффективность антиоксидантой защиты организма, является SOD2. Полиморфизм SOD2 C47T (rs4880) приводит к замене аминокислоты валин на аминокислоту аланин, изменяет вторичную структуру белка и может влиять на перенос фермента из цитоплазмы в матрикс митохондрий. По данным разных авторов, у носителей Т/С и Т/Т-вариантов активность фермента выше на 33% по сравнению с носителями С/С-варианта [7,8]. Изучена роль полиморфизма  SOD2 в развитии ранних репродуктивных потерь: установлено, что носительство аллельного варианта СС ассоциировано с риском неразвивающейся беременности в I триместре [9].
В связи с этим в современных условиях единственным путём успешного планирования беременности является ранняя диагностика и, в случае необходимости, принятие решения о необходимости применения программ ВРТ.
Аналогами предлагаемого изобретения послужили описанные в литературе методы диагностики, которые различаются в зависимости от необходимых критериев и применяемых методов. Запатентованных аналогов не обнаружено.
Недостатком предложенного изобретения является отсутствие детального рассмотрения наличия гипотериоза, так как необходимо учитывать его генез и степень тяжести, по соотношению гормонов щитовидной железы.
Технический результат - разработка способа прогнозирования вероятности наступления самостоятельной беременности у первородящих женщин позднего репродуктивного возраста.
Способ осуществляется следующим образом: у женщин на предгравидарном этапе проводится сбор акушерско-гинекологического анамнеза, выясняется наличие гипотериоза, проводится генетическое обследование на наличие мутаций в гене SOD2 C47T (rs4880).
Для анализа полиморфизма SOD2 C47T (rs4880) у всех обследуемых на основе письменного информированного согласия проводится забор венозной крови в пробирки с EDTA в качестве антикоагулянта. Геномную ДНК выделяют набором реагентов для выделения нуклеиновых кислот из крови  (ДНК-Кровь-М) (ООО» ТестГен», Россия). На полученных образцах проводят полимеразную цепную реакцию (ПЦР) в режиме «реального времени» с использованием комплектов реагентов и протокола для определения генетических полиморфизмов SOD2 C47T (rs4880) (ООО» ТестГен», Россия). Регистрация и учет результатов проводился автоматическим программным обеспечением для детектирующего амплификатора ДТ-96 (ООО «НПО ДНК-технология», Россия).
На основании полученных информативных показателей, было разработано решающее правило прогноза, позволяющее вычислить прогностический индекс E по формуле:
где:
– генотип SOD2 C47T CC (индикаторная переменная {0,1});
- генотип SOD2 C47T_T (индикаторная переменная {0,1});
–
отягощённый акушерско-гинекологический анамнез (индикаторная переменная {0,1});
- наличие гипотиреоза (индикаторная переменная {0,1});
Если E<0, то прогнозируют высокую вероятность самостоятельного наступления беременности. Если E>0, то прогнозируют низкую вероятность наступления самостоятельной беременности.
Статистическую обработку материала проводили на IBM PC с использованием программ Microsoft Exel 2007 для Windows 7 и IBM SPSS Statistics 22. Полученные результаты обработаны методом вариационной статистики.
Специфичность предложенного метода составила 73%, чувствительность 95%, эффективность 80,7%.
Клинические примеры реализации способа прогноза вероятности наступления самостоятельной беременности у первородящих пациенток позднего репродуктивного возраста.
Пример № 1. Пациентка Ч. 36 лет, без отягощенного акушерского-гинекологического анамнеза, планирует первую беременность. Имеется субклинический гипотиреоз, медикаментозная компенсация. После проведения генетического консультирования и исследования методом ПЦР в режиме реального времени у пациентки выявлено: наличие генотипа TT по полиморфизму C47T гена SOD2.
E= - 2,31 × 0 - 5,985 × 1 + 10,456 × 0 + 1,94 × 1 - 4,505 = -8,55
E<0, т.е. у пациентки высокая вероятность спонтанного наступления беременности. В течение 2 месяцев у пациентки наступила самостоятельная беременность.
Пример № 2. Пациентка Д. 39 лет. В анамнезе у пациентки прерывание беременности по желанию 10 лет назад, эпизод вторичного бесплодия в течение 3 лет. Гипотиреоза нет. По результатам генетического консультирования и исследования методом ПЦР в режиме реального времени у пациентки выявлено: наличие генотипа CC по полиморфизму C47T гена SOD2.
E= - 2,31 × 1 - 5,985 × 0 + 10,456 × 1 + 1,94 × 0 - 4,505 = 3,641
E>0, т.е. у пациентки низкая вероятность самостоятельного наступления беременности. Пациентке было рекомендовано посещение клиники ВРТ.
Таким образом, предложенный способ позволяет на данных анамнеза и генетического исследования прогнозировать возможность самостоятельного наступления беременности и оптимизировать процесс направления пациенток позднего репродуктивного возраста на ВРТ.
Данный способ может быть использован врачами акушерами-гинекологами, генетиками женских консультаций, перинатальных центров.
Источники информации
1. Ермоленко К.С., Радзинский В.Е., Рапопорт С.И. Современное состояние проблемы реализации фертильной функции женщин позднего репродуктивного возраста. Клиническая медицина. – 2016. ─ №94 (1). – С.10-15.
2. Долгушина Н.В., Коротченко О.Е., Бейк Е.П., Абдурахманова Н.Ф., Ильина Е.О., Кулакова Е.В. Клинико - экономический анализ эффективности преимплантационного генетического скрининга у пациенток позднего репродуктивного возраста. Акушерство и гинекология. ─ 2017. ─  №11. ─ С.56-61.
3. European Society of Human Reproduction and Embryology ─ ESHRE, 2017 file:///C:/Users/MatuzkovaIV/Downloads/FOR_Sept17_LR.pdf
4. Регистр ВРТ. Отчет за 2018 г. Российская Ассоциация Репродукции Человека: [Электронный ресурс]. ─ Режим доступа: http://www.rahr.ru, свободный (дата обращения: 07.07.2021).
5. Мельниченко Г.А., Трошина Е.А., Платонова Н.М. и др. Йододефицитные заболевания щитовидной железы в Российской Федерации: современное состояние и проблемы. Аналитический обзор публикаций и данных официальной государственной статистики (Росстат), Consillium Medium, 2019; 21 (4): ─ С.14-20.
6. Ажибеков С.А., Путилова Н.В., Третьякова Т.Б., Пестряева Л.А. Влияние генов энергетического обмена на метаболизм липидов при беременности, осложненной формированием синдрома задержки роста плода. Российский вестник акушера-гинеколога. 2017; 6: 9-13.
7. Морозова К.В., Луценко Н.Н. Роль полиморфизма генов  антиоксидантной системы в генезе невынашивания беременности. Акушерство, гинекология и репродукция. – 2015. − №2. – С.54-61.
. −
. –
8. Hu, X.-Q.; Zhang, L. Hypoxia and Mitochondrial Dysfunction in Pregnancy Complications. Antioxidants. − 2021№10С.405. https://doi.org/10.3390/antiox10030405
9. Minhui Lu, Amanda Nancy Sferruzzi-Perri, Placental mitochondrial function in response to gestational exposures, Placenta, Volume 104. – 2021. − Pages 124-137, ISSN 0143-4004, https://doi.org/10.1016/j.placenta.2020.11.012.