КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ ПОЛИНЕНАСЫЩЕННЫЕ ЖИРНЫЕ КИСЛОТЫ (ПНЖК), И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
COMPOSITIONS CONTAINING POLYUNSATURATED FATTY ACIDS (PUFA), AND METHODS OF APPLICATION THEREOF

Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение предоставляет способы увеличения или усиления синтеза и уровней фосфолипидов, синапсов, синаптических белков и синаптических мембран нервной клеткой или клеткой мозга; способы лечения субъекта с расстройством памяти, с нарушением памяти, неврологическим заболеванием или заболеванием или расстройством мозга, включающие введение субъекту композиции, включающей омега-3 жирную кислоту, омега-6 жирную кислоту, уридин, их метаболический предшественник, или их комбинацию.
Уровень техники
Деменция (слабоумие) представляет собой расстройство мозга, которое серьезно влияет на способность человека осуществлять его ежедневную активность. Наиболее широко распространенной формой деменции среди пожилых людей является болезнь Альцгеймера (AD), которая вначале затрагивает те части мозга, которые контролируют мыслительную деятельность, память и речь. Ухудшение памяти и когнитивной (мыслительной) функции рассматривается большинством специалистов как естественное следствие процесса старения. Люди с возрастными заболеваниями центральной нервной системы (ЦНС) демонстрируют нарушения памяти и способности к обучению, снижение внимания и концентрации, ухудшение мыслительных способностей, использования речи и других ментальных способностей. Способы лечения этих болезней и расстройств крайне необходимы в данной области техники.
Раскрытие изобретения
Настоящее изобретение предоставляет способы увеличения или усиления синтеза и уровней фосфолипидов, синапсов, синаптических белков и синаптических мембран нервной клеткой или клеткой мозга; способы лечения субъекта с расстройством памяти, с нарушением памяти, неврологическим заболеванием или заболеванием или расстройством мозга, включающие введение субъекту композиции, включающей омега-3 жирную кислоту, омега-6 жирную кислоту, уридин, их метаболический предшественник, или их комбинацию.
В одном воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения количества синаптических мембран нервной клетки или клетки мозга субъекта с возрастным расстройством памяти, включающий введение субъекту омега-3 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, что приводит к увеличению количества синаптических мембран нервной клетки или клетки мозга субъекта с возрастным расстройством памяти.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения количества синаптических мембран нервной клетки или клетки мозга субъекта с возрастным расстройством памяти, включающий введение субъекту омега-6 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, что приводит к увеличению количества синаптических мембран нервной клетки или клетки мозга субъекта с возрастным расстройством памяти.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения количества синаптических мембран нервной клетки или клетки мозга субъекта с возрастным расстройством памяти, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, что приводит к увеличению количества синаптических мембран нервной клетки или клетки мозга субъекта с возрастным расстройством памяти.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения количества синаптических мембран нервной клетки или клетки мозга субъекта с возрастным расстройством памяти, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, что приводит к увеличению количества синаптических мембран нервной клетки или клетки мозга субъекта с возрастным расстройством памяти.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с болезнью Альцгеймера, нарушением памяти или потерей памяти, включающий введение субъекту омега-3 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-3 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с болезнью Альцгеймера, нарушением памяти или потерей памяти.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с болезнью Альцгеймера, нарушением памяти или потерей памяти, включающий введение субъекту омега-6 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-6 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с болезнью Альцгеймера, нарушением памяти или потерей памяти.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с болезнью Альцгеймера, нарушением памяти или потерей памяти, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с болезнью Альцгеймера, нарушением памяти или потерей памяти.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с болезнью Альцгеймера, нарушением памяти или потерей памяти, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с болезнью Альцгеймера, нарушением памяти или потерей памяти.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с нарушением памяти, выбираемом из болезни Пика (предстарческая ограниченная атрофия мозга), болезни телец Леви (Lewy Body disease), болезни Гентингтона (Huntington's disease) и минимального когнитивного нарушения (minimal cognitive impairment, MCI), включающий введение субъекту омега-3 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-3 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с нарушением памяти, выбираемым из болезни Пика, болезни телец Леви, болезни Гентингтона и MCI.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с нарушением памяти, выбираемым из болезни Пика, болезни телец Леви, болезни Гентингтона и MCI, включающий введение субъекту омега-6 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-6 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с нарушением памяти, выбираемым из болезни Пика, болезни телец Леви, болезни Гентингтона и MCI.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с нарушением памяти, выбираемым из болезни Пика, болезни телец Леви и болезни Гентингтона, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с нарушением памяти.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с нарушением памяти, выбираемом из болезни Пика, болезни телец Леви и болезни Гентингтона, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с нарушением памяти.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения размера или числа синапсов в мозге субъекта с возрастным нарушением памяти, включающий введение субъекту омега-3 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, обеспечивая, таким образом, увеличение размера или числа синапсов в мозге субъекта с возрастным нарушением памяти.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения размера или числа синапсов в мозге субъекта с возрастным нарушением памяти, включающий введение субъекту омега-6 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, обеспечивая, таким образом, увеличение размера или числа синапсов в мозге субъекта с возрастным нарушением памяти.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения размера или числа синапсов в мозге субъекта с возрастным нарушением памяти, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, обеспечивая, таким образом, увеличение размера или числа синапсов в мозге субъекта с возрастным нарушением памяти.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения размера или числа синапсов в мозге субъекта с возрастным нарушением памяти, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, обеспечивая, таким образом, увеличение размера или числа синапсов в мозге субъекта с возрастным нарушением памяти.
В другом воплощении, любой из способов и любая из композиций настоящего изобретения включает введение омега-3 жирной кислоты и холина. В другом воплощении, любой из способов и любая из композиций настоящего изобретения включает введение омега-3 жирной кислоты и соли холина. В другом воплощении, любой из способов и любая из композиций настоящего изобретения включает введение омега-6 жирной кислоты и холина. В другом воплощении, любой из способов и любая из композиций настоящего изобретения включает введение омега-6 жирной кислоты и соли холина.
В другом воплощении, любой из способов и любая из композиций настоящего изобретения включает введение композиции, включающей омега-3 жирную кислоту, уридин и холин. В другом воплощении, любой из способов и любая из композиций настоящего изобретения включает введение композиции, включающей омега-3 жирную кислоту, уридин и соль холина. В другом воплощении, любой из способов и любая из композиций настоящего изобретения включает введение композиции, включающей омега-6 жирную кислоту, уридин и холин. В другом воплощении, любой из способов и любая из композиций настоящего изобретения включает введение композиции, включающей омега-6 жирную кислоту, уридин и соль холина.
В другом воплощении, любой из способов и любая из композиций настоящего изобретения включает введение омега-6 жирной кислоты и омега-3 жирной кислоты. В другом воплощении, любой из способов и любая из композиций настоящего изобретения включает введение омега-6 жирной кислоты, омега-3 жирной кислоты и уридина. В другом воплощении, любой из способов и любая из композиций настоящего изобретения включает введение омега-6 жирной кислоты, омега-3 жирной кислоты и холина. В другом воплощении, любой из способов и любая из композиций настоящего изобретения включает введение омега-6 жирной кислоты, омега-3 жирной кислоты и соли холина. В другом воплощении, любой из способов и любая из композиций настоящего изобретения включает введение омега-6 жирной кислоты, омега-3 жирной кислоты, уридина и холина. В другом воплощении, любой из способов и любая из композиций настоящего изобретения включает введение омега-6 жирной кислоты, омега-3 жирной кислоты, уридина и соли холина.
Краткое описание фигур
14
14
Фигура 1: ДГК увеличивает синтез фосфолипидов в клетках РС12. Клетки РС12 инкубировались в течение ночи с жирными кислотами, затем инкубировались в среде, содержащей С-меченый холин. График показывает включение метки С в фосфатидилхолин в распадах в минуту (dpm) на микрограмм (мкг) ДНК. ДГК: докозагексаеновая кислота. ОА: олеиновая кислота. РА: пальмитиновая кислота. * - p<0,05.
Фигура 2: Увеличение синтеза фосфолипидов под действием ДГК является дозозависимым. * - p<0,05. ** - p<0,001.
Фигура 3. А. Арахидоновая кислота увеличивает синтез фосфолипидов клетками SHSY-5Y. ДГК: докозагексаеновая кислота. АА: арахидоновая кислота. РА: пальмитиновая кислота. *: p<0,05. **: p<0,001. В. Увеличение синтеза фосфолипидов под действием АА является дозозависимым.
Фигура 4. ДГК и УМФ действуют синергически на увеличение уровней фосфолипидов в мозге при исследовании на целом животном. ”*”: достоверно выше, чем контрольная группа при одностороннем анализе ANOVA. А. пмоль фосфолипида на миллиграмм (мг) белка. Сумма УМФ+ДГК была достоверно выше, чем контроль (p<0,05) (односторонний анализ ANOVA [F(3,28)=4,12; р=0,015]). Двусторонний анализ ANOVA также выявил статистически достоверный эффект ДГК по отношению к контрольной группе [F(1,28)=8,78; р=0,006]. В. пикомоль фосфолипида на мкг ДНК. Сумма УМФ+ДГК была достоверно выше, чем контроль (р=0,020) (односторонний анализ ANOVA [F(3,28)=3,215; р=0,038]).
Фигура 5. Влияние ДГК на уровни ЦДФ-холина (А) и ЦДФ-этаноламина (В) в мозге. Группы из 8 песчанок получали либо контрольную диету, либо УМФ-содержащую диету, и через желудочный зонд ДГК (в виде раствора в 5% гуммиарабике) или раствор 5% гуммиарабика без добавок в течение 28 дней. На 29 день мозги были собраны и проанализированы на содержание ЦДФ-холина. Данные представлены в виде средних значений ± SEM. Статистический анализ проводили с использованием одностороннего или двухстороннего анализа ANOVA с апостериорным тестом Tukey. а: Р<0,05 при сравнении со значениями для группы с контрольной диетой плюс раствор гуммиарабика; b: Р<0,05 при сравнении с значениями для группы с УМФ-содержащей диетой плюс раствор гуммиарабика.
Фигура 6. Влияние УМФ-содержащей диеты и ДГК на уровни NF-70 (А) и NF-M (В) в мозге. Песчанки получали диеты, описанные в подписи к фигуре 5, в течение 21 дня (левые панели) или 28 дней (правые панели). На 22 и 29 дни мозги были собраны и проанализированы на содержание NF-70. Данные представлены в виде средних значений±стандартная ошибка среднего (SEM). Статистический анализ проводили с использование одностороннего анализа ANOVA с последующим тестом Tukey. А. **: Р<0,01; ***: Р<0,001 при сравнении со значениями для группы с контрольной диетой + раствор гуммиарабика. В). *Р<0,05; **Р<0,01. Между группами не было обнаружено достоверных различий в содержании белка цитоскелета бета-тубулина.
Фигура 7. Влияние УМФ-содержащей диеты и ДГК на уровни PSD-95 и синапсина-1 в мозге. А) Песчанки получали либо контрольную диету, плюс, через желудочный зонд, 5% раствор гуммиарабика, либо УМФ-содержащую (0,5%) диету, плюс, через желудочный зонд ДГК (300 мг/кг) в 5% гуммиарабике в качестве носителя в течение 7 дней (левые панели) или 21 дня (правые панели). На следующий день мозги были собраны и проанализированы на содержание PSD-95 (А) или Синапсина-1 (В). А. Данные представлены в виде средних значений ± SEM. Статистический анализ проводили с использованием одностороннего анализа ANOVA с последующим тестом Tukey. ** P<0,01; *** Р<0,001 при сравнении со значениями для группы с контрольной диетой плюс раствор гуммиарабика. В). * Р<0,05; ** Р<0,01.
Фигура 8. Увеличенная плотность дендритных шипиков в гиппокампе взрослых песчанок.
Фигура 9. Влияние уридина и/или ДГК на обучаемость.
14
Фигура 10. Влияние ДГК на синтез фосфолипидов в культуре нейронов гиппокампа. Вертикальная ось: С DPM/50 мкл образца.
Осуществление изобретения
Настоящее изобретение предоставляет способы увеличения или усиления синтеза и уровней фосфолипидов, синапсов, синаптических белков и синаптических мембран нервной клеткой или клеткой мозга; способы лечения субъекта с расстройством памяти, с нарушением памяти, неврологическим заболеванием или заболеванием или расстройством мозга, включающие введение субъекту композиции, включающей омега-3 жирную кислоту, омега-6 жирную кислоту, уридин, их метаболический предшественник, или их комбинацию.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения уровня фосфолипида в нервной клетке субъекта, включающий введение субъекту омега-3 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, что обеспечивает увеличение уровня фосфолипида в нервной клетке субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении способов и композиций настоящего изобретения омега-3 жирная кислота, омега-6 жирная кислота, уридин, холин, соль холина или их комбинация вводятся в фармацевтическую композицию.
В другом воплощении способов и композиций настоящего изобретения, композиция, которая вводится, увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта. В другом воплощении, омега-3 жирная кислота увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта. В другом воплощении, омега-6 жирная кислота увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта. В другом воплощении, уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта. В другом воплощении, холин увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта. В другом воплощении, соль холина увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения уровня фосфолипида в клетке мозга субъекта, включающий введение субъекту омега-3 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, что обеспечивает увеличение уровня фосфолипида в клетке мозга субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения или усиления синтеза фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, включающий введение субъекту омега-3 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, что обеспечивает увеличение или усиление синтеза фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
Как здесь предоставляется, результаты, представленные в примерах 1 и 5, показывают, что введение докозагексаеновой кислоты (ДГК), омега-3 жирной кислоты в нервные клетки и клетки мозга увеличивает в них синтез фосфолипидов, что видно из увеличенного включения меченого холина. Введение омега-3 жирной кислоты увеличивает синтез общих фосфолипидов, фосфатидилхолина и фосфатидилэтаноламина (пример 2), показывая, что ее действие не ограничивается определенными фосфолипидами. Клетки PC 12 демонстрируют дифференцированные функции нервных клеток и обычно используются в данной области техники в качестве модельной клеточной линии нервных клеток. Результаты, представленные в примере 11, показывают, что омега-3 жирные кислоты увеличивают синтез фосфолипидов в нервных клетках в краткосрочной (переживающей) культуре.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения количества синаптических мембран в нервной клетке или клетке мозга субъекта, включающий введение субъекту омега-3 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, что обеспечивает увеличение количества синаптических мембран в нервной клетке или клетке мозга субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, фосфолипид, уровень которого увеличивается с помощью способов и композиций настоящего изобретения, представляет собой фосфатидную кислоту. В другом воплощении, термин «фосфатидная кислота», является синонимом термина «фосфатид». В другом воплощении, фосфолипид представляет собой фосфатидилхолин (”ФХ”; пример 1). В другом воплощении, фосфолипид представляет собой фосфатидилэтаноламин (”ФЭ”; пример 2). В другом воплощении, фосфолипид представляет собой фосфатидилсерин (”ФС”). В другом воплощении, фосфолипид представляет собой фосфатидилинозитол (”ФИ”). В другом воплощении, фосфолипид представляет собой сфингомиелин. В другом воплощении, фосфолипид представляет собой фосфоглицерид. В другом воплощении, фосфолипид представляет собой любой другой фосфолипид, известный в данной области техники. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
3
3
В другом воплощении, значительно увеличенный с помощью способов настоящего изобретения уровень PI действует как резервуар одной или более молекул вторичных мессенджеров. В другом воплощении, молекула вторичного мессенджера представляет собой инозитол-1,4,5-трисфосфат (IP). В другом воплощении, молекула вторичного мессенджера представляет собой диацилглицерол (DAG). В другом воплощении, сигнальный путь через протеинкиназу С (РКС) усиливается с помощью способов и композиций настоящего изобретения. В другом воплощении, сигнальный путь, расположенный ниже места действия IР, активируется с помощью способов и композиций настоящего изобретения. В другом воплощении, уровни внутриклеточного кальция увеличиваются с помощью способов и композиций настоящего изобретения. В другом воплощении, сигнальный путь, расположенный ниже места действия DAG, активируется с помощью способов и композиций настоящего изобретения. В другом воплощении, сигнальный путь, расположенный ниже места действия РКС, активируется с помощью способов и композиций настоящего изобретения. В другом воплощении, сигнальный путь, расположенный ниже места действия внутриклеточного кальция, активируется с помощью способов и композиций настоящего изобретения.
В другом воплощении, сфингомиелин, уровень которого увеличивается с помощью способов и композиций настоящего изобретения, выступает в качестве источника церамида. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, ДГК и/или УМФ в способах и композициях настоящего изобретения действуют как общие предшественники клеточных фосфолипидов. В другом воплощении, УМФ действует путем активации рецепторов P2Y для УМФ, образованного из уридина. В другом воплощении, ДГК действует путем активации синтаксина-3. В другом воплощении, используется комбинация этих механизмов.
В другом воплощении, как видно из представленных здесь данных, введение ДГК и/или УМФ является эффективным для лечения и/или профилактики нарушений, характеризующихся недостаточным образованием синапсов или нарушенной миелинизацией. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
Как показано здесь, введение ПНЖК и/или уридина песчанкам, обмен пиримидинов у которых подобен таковому у человека, увеличивает уровни нейрофибриллярных белков аксонов нервных клеток NF-70 и NF-M, белка постсинаптических плотных участков PSD-95 и везикулярного белка Синапсина-1 (пример 7). Таким образом, введение ПНЖК увеличивает уровни синаптических мембран в клетках мозга и нервов. В другом воплощении, в применяемых здесь условиях, способы и композиции настоящего изобретения также являются полезными для усиления передачи нервных сигналов. В другом воплощении, в применяемых здесь условиях, способы и композиции настоящего изобретения также являются полезными для усиления функционирования нервных клеток. В другом воплощении, в применяемых здесь условиях, способы и композиции настоящего изобретения также являются полезными для усиления прорастания аксонов нервных клеток. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, омега-3 жирная кислота, применяемая в способах и композициях настоящего изобретения, представляет собой омега-3 полиненасыщенную жирную кислоту (ПНЖК). В другом воплощении, омега-3 жирная кислота представляет собой ДГК (примеры 1-2). ДГК представляет собой омега-3 полиненасыщенную, содержащую 22 углеродных атома жирную кислоту, также известную, как 4,7,10,13,16,19-докозагексаеновая кислота.
В другом воплощении, омега-3 жирная кислота представляет собой α-линоленовую кислоту (9,12,15-октадекатриеновую кислоту). В другом воплощении, омега-3 жирная кислота представляет собой стеаридоновую кислоту (6,9,12,15-октадекатетраеновая кислота). В другом воплощении, омега-3 жирная кислота представляет собой эйкозатриеновую кислоту (ЭТК; 11,14,17-эйкозатриеновая кислота). В другом воплощении, омега-3 жирная кислота представляет собой эйкозатетраеновую кислоту (8,11,14,17-эйкозатетраеновая кислота). В другом воплощении, омега-3 жирная кислота представляет собой эйкозапентаеновую кислоту (ЭПК; 5,8,11,14,17-эйкозапентаеновая кислота). В другом воплощении, омега-3 жирная кислота представляет собой эйкозагексаеновую кислоту (также известную, как ”ЭГК”; 5,7,9,11,14,17-эйкозагексаеновая кислота). В другом воплощении, омега-3 жирная кислота представляет собой докозапентаеновую кислоту (ДПК; 7,10,13,16,19-докозапентаеновая кислота). В другом воплощении, омега-3 жирная кислота представляет собой тетракозагексаеновую кислоту (6,9,12,15,18,21-тетракозагексаеновая кислота). В другом воплощении, омега-3 жирная кислота представляет собой любую другую омега-3 жирную кислоту, известную в данной области техники. Каждая омега-3 жирная кислота представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, омега-3 жирная кислота представляет собой противовоспалительную ПНЖК. В другом воплощении, противовоспалительная ПНЖК представляет собой эйкозапентаеновую кислоту (ЭПК; 5,8,11,14,17-эйкозапентаеновая кислота). В другом воплощении, противовоспалительная ПНЖК представляет собой ДГК. В другом воплощении, противовоспалительная ПНЖК представляет собой любую другую противовоспалительную ПНЖК, известную в данной области техники. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
Как здесь показано, ДГК, ЭПК и АА увеличивают уровни фосфолипидов в мозге (пример 8). Таким образом, описанные здесь эффекты не являются специфическими для конкретной ПНЖК, но скорее являются, в применяемых здесь условиях, общими для всего семейства омега-3 и омега-6 ПНЖК.
В другом воплощении, омега-3 жирная кислота представляет собой метаболический предшественник ДГК. В другом воплощении, метаболический предшественник представляет собой ЭПК. В другом воплощении, метаболический предшественник представляет собой докозапентаеновую кислоту (ДПК; 7,10,13,16,19-докозапентаеновая кислота). Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, термин ”метаболический предшественник” обозначает соединение, которое увеличивает концентрацию жирной кислоты в кровотоке или в тканях. В другом воплощении, термин ”метаболический предшественник” обозначает соединение, которое метаболизируется тканью или ферментом субъекта до свободной жирной кислоты. В другом воплощении, термин ”метаболический предшественник” обозначает соединение, которое метаболизируется клеткой-мишенью до свободной жирной кислоты. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении способов и композиций настоящего изобретения, метаболический предшественник омега-3 жирной кислоты представляет собой альфа-линоленовую кислоту, которая выступает в качестве предшественника ЭПК (эйкозапентаеновой кислоты) и ДГК (докозагексаеновой кислоты). В другом воплощении, метаболический предшественник представляет собой любой другой предшественник омега-3 жирной кислоты, известный в данной области техники. Каждый предшественник омега-3 жирной кислоты представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, термин ”ПНЖК” обозначает омега-3 жирную кислоту. В другом воплощении, этот термин обозначает омега-6 жирную кислоту. В другом воплощении, этот термин обозначает жирную кислоту с 2 или более двойными связями. В другом воплощении, этот термин обозначает жирную кислоту с 2 двойными связями. В другом воплощении, этот термин обозначает жирную кислоту с 3 двойными связями. В другом воплощении, этот термин обозначает жирную кислоту с более чем 3 двойными связями. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения количества синаптических мембран в нервной клетке или клетке мозга субъекта, включающий введение субъекту омега-6 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, что обеспечивает увеличение количества синаптических мембран в нервной клетке или клетке мозга субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения уровня фосфолипида в нервной клетке субъекта, включающий введение субъекту омега-6 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, что обеспечивает увеличение уровня фосфолипида в нервной клетке субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения уровня фосфолипида в клетке мозга субъекта, включающий введение субъекту омега-6 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, что обеспечивает увеличение уровня фосфолипида в клетке мозга субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения или усиления синтеза фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, включающий введение субъекту омега-6 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, что обеспечивает увеличение или усиление синтеза фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
Как здесь показано, результаты, представленные в примере 3, демонстрируют, что введение арахидоновой кислоты, омега-6 жирной кислоты, увеличивает синтез фосфолипида нервными клетками и клетками мозга, что видно из увеличенного включения меченого холина. Клетки SHSY-5Y происходят из нейробластомы человека и используются в качестве модельной системы нейрональных функций. В другом воплощении, увеличенный синтез фосфолипидов приводит к увеличению их уровней.
В другом воплощении, омега-6 жирная кислота представляет собой омега-6 полиненасыщенную жирную кислоту (ПНЖК). В другом воплощении, омега-6 жирная кислота представляет собой арахидоновую кислоту (пример 3). Арахидоновая кислота представляет собой омега-6, содержащую 20 углеродных атомов жирную кислоту, также известную как 5,8,11,14-эйкозатетраеновая кислота. В другом воплощении, омега-6 жирная кислота представляет собой метаболический предшественник арахидоновой кислоты. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, омега-6 жирная кислота представляет собой линолевую кислоту (9,12-октадекадиеновая кислота). В другом воплощении, омега-6 жирная кислота представляет собой конъюгированную линолевую кислоту (CLA). В другом воплощении, омега-6 жирная кислота представляет собой γ-линоленовую кислоту (6,9,12-октадекатриеновая кислота). В другом воплощении, омега-6 жирная кислота представляет собой эйкозадиеновую кислоту (11,14-эйкозадиеновая кислота). В другом воплощении, омега-6 жирная кислота представляет собой гомо-γ-линоленовую кислоту (8,11,14-эйкозатриеновая кислота). В другом воплощении, омега-6 жирная кислота представляет собой докозадиеновую кислоту (13,16-докозадиеновая кислота). В другом воплощении, омега-6 жирная кислота представляет собой докозатетраеновую кислоту (7,10,13,16-докозатетраеновая кислота). В другом воплощении, омега-6 жирная кислота представляет собой 4,7,10,13,16-докозапентаеновую кислоту. В другом воплощении, омега-6 жирная кислота представляет собой дигомо-гамма-линоленовую кислоту (DGLA). В другом воплощении, омега-6 жирная кислота представляет собой любую омега-6 жирную кислоту, известную в данной области техники. Каждая омега-6 жирная кислота представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении способов и композиций настоящего изобретения, метаболический предшественник омега-6 жирной кислоты представляет собой линолевую кислоту. В другом воплощении, метаболический предшественник представляет собой транс-вакценовую кислоту (TVA), являющуюся источником линолевой кислоты. В другом воплощении, метаболический предшественник представляет собой любой другой предшественник омега-6 жирной кислоты, известный в данной области техники. Каждый предшественник омега-6 жирной кислоты представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения уровня фосфолипида в нервной клетке субъекта, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, что обеспечивает увеличение уровня фосфолипида в нервной клетке субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
Как здесь показано, каждая из омега-3 жирных кислот и омега-6 жирных кислот действуют синергически с уридином (например, с УМФ) в отношении увеличения синтеза фосфолипидов и уровней фосфолипидов. В другом воплощении, уридинфосфат представляет собой уридинмонофосфат (УМФ).
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения уровня фосфолипида в клетке мозга субъекта, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, что обеспечивает увеличение уровня фосфолипида в клетке мозга субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения уровня фосфолипида в нервной клетке субъекта, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, что обеспечивает увеличение уровня фосфолипида в нервной клетке субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения уровня фосфолипида в клетке мозга субъекта, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, что обеспечивает увеличение уровня фосфолипида в клетке мозга субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения или усиления синтеза фосфолипида в нервной клетке или клетке мозга субъекта, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, что обеспечивает увеличение или усиление синтеза фосфолипида в нервной клетке или клетке мозга субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения или усиления синтеза фосфолипида в нервной клетке или клетке мозга субъекта, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, что обеспечивает увеличение или усиление синтеза фосфолипида в нервной клетке или клетке мозга субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения количества синаптических мембран в нервной клетке или клетке мозга субъекта, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, что обеспечивает увеличение количества синаптических мембран в нервной клетке или клетке мозга субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения количества синаптических мембран в нервной клетке или клетке мозга субъекта, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, что обеспечивает увеличение количества синаптических мембран в нервной клетке или клетке мозга субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
Способы измерения количества синаптических мембран хорошо известны специалистам в данной области техники и описаны, например, в работах Oertner TG et a.l (Facilitation at single synapses probed with optical quantal analysis. Nat Neurosci. 2002 Jul; 5(7):657-64); Bloodgood BL et al. (Neuronal activity regulates diffusion across the neck of dendritic spines. Science. 2005 Nov 4; 310(5749):866-9); El Fakhri G et al. (Generalized five-dimensional dynamic and spectral factor analysis. Med Phys. 2006 Apr; 33(4):1016-24); и Pautler RG. Biological applications of manganese-enhanced magnetic resonance imaging. Methods Mol Med. 2006; 124:365-86). Каждый способ представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с болезнью Альцгеймера, включающий введение субъекту омега-3 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-3 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивают синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с болезнью Альцгеймера.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с болезнью Альцгеймера, включающий введение субъекту омега-6 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-6 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивают синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с болезнью Альцгеймера.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с болезнью Альцгеймера, включающий контактирование нервной клетки субъекта с композицией, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦЦФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с болезнью Альцгеймера.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с болезнью Альцгеймера, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с болезнью Альцгеймера.
Как здесь показано, композиции, включающие омега-3 жирные кислоты, омега-6 жирные кислоты и/или уридин, увеличивают количество синаптических мембран в нервных клетках. Таким образом, композиции настоящего изобретения являются полезными для лечения болезни Альцгеймера.
В другом воплощении способов и композиций настоящего изобретения, стимуляция синтеза фосфолипидов увеличивает уровни фосфолипидов в клетках-мишенях мозга или нервных клетках-мишенях. В другом воплощении, достаточные уровни фосфолипидов являются важными для многих аспектов функционирования нервов, например для передачи сигнала в синапсах, функционирования нейротрансмиттеров, ветвления и прорастания аксонов и т.д., и являются также важными, в другом воплощении, для правильного функционирования мозга.
В другом воплощении, болезнь Альцгеймера находится на ранней стадии развития. В другом воплощении, болезнь Альцгеймера находится на легкой стадии развития. В другом воплощении, болезнь Альцгеймера находится на умеренной стадии развития. В другом воплощении, болезнь Альцгеймера находится на поздней стадии развития. В другом воплощении, болезнь Альцгеймера находится на тяжелой стадии развития. В другом воплощении, болезнь Альцгеймера находится на неопределенной стадии развития. В другом воплощении, болезнь Альцгеймера находится на любой стадии развития болезни, известной в данной области техники. Каждая стадия болезни представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, стадия развития болезни Альцгеймера определяется с использованием шкалы Оценки Стадий Функционального Состояния (Functional Assessment Staging, FAST). Шкала FAST была разработана доктором Райсбергом (Dr Reisberg) с коллегами. Она разделяет развитие болезни Альцгеймера на 16 последовательных стадий, объединяемых в 7 основных групп по функциональным возможностям человека и имеющимся нарушениям. Основными группами являются следующие. Стадия 1 определяется как нормальный взрослый человек без снижения функциональных возможностей или ослабления памяти. Стадия 2 определяется как нормальный пожилой человек, имеющий определенные персональные признаки снижения функциональных возможностей, обычно жалующийся на проблемы с памятью и забывающий имена знакомых людей и названия мест. Стадия 3 (ранняя стадия болезни Альцгеймера) становится заметной в определенных жизненных ситуациях. Признаки этой стадии включают одно или более из следующего: потерю ориентации при путешествии в незнакомых местах; сообщение коллег о снижении работоспособности; сложности с подбором имен или слов; снижение способности пересказать информацию, прочитанную в книге, или вспомнить имя человека, с которым только что познакомился; потерю ценных вещей; снижение концентрации. На стадии 4 (легкая стадия болезни Альцгеймера) пациент может нуждаться в помощи при выполнении сложных задач, таких как планирование встреч или финансовые операции, демонстрирует проблемы, связанные с воспоминаниями о событиях из собственной жизни, а также имеет трудности с концентрированием и с путешествиями. На стадии 5 (умеренная стадия болезни Альцгеймера) пациент нуждается в помощи при выполнении повседневных дел, таких как выбор подходящей одежды. Наблюдается потеря ориентации во времени и неспособность пересказать важную информацию из собственной текущей жизни, однако пациент все еще может вспомнить основную информацию о себе, своей семье и других людях. На стадии 6 (умеренно тяжелая стадия болезни Альцгеймера) пациент начинает забывать значительное количество информации о самом себе и своем окружении и требует помощи при одевании, мытье и при пользовании туалетом. Наблюдается недержание мочи и неспокойный характер сна. Становятся явно заметными изменения личности и эмоциональные изменения. Поскольку пациенты не могут помнить информацию достаточно долго для того, чтобы действовать в соответствии со своими мыслями, они теряют силу воли (когнитивная абулия). На стадии 7 (тяжелая стадия болезни Альцгеймера) способность к разговору становится ограниченной до шести или семи слов, а словарный запас может сократиться до одного слова. Пациент теряет способность передвигаться, сидеть прямо, улыбаться и, в конце концов, не может держать голову. Каждая стадия болезни Альцгеймера представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения уровня ФХ в мозге субъекта, включающий введение субъекту композиции настоящего изобретения, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, увеличивая, таким образом, уровень ФХ в мозге субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения уровня сфингомиелина (СМ) в мозге субъекта, включающий введение субъекту композиции настоящего изобретения, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, увеличивая, таким образом, уровень СМ в мозге субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения уровня ФИ в мозге субъекта, включающий введение субъекту композиции настоящего изобретения, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, увеличивая, таким образом, уровень ФИ в мозге субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения уровня ФЭ в, мозге субъекта, включающий введение субъекту композиции настоящего изобретения, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, увеличивая, таким образом, уровень ФЭ в мозге субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения уровня ФС в мозге субъекта, включающий введение субъекту композиции настоящего изобретения, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, увеличивая, таким образом, уровень ФС в мозге субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ улучшения когнитивной функции субъекта, включающий введение субъекту композиции настоящего изобретения, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, улучшая, таким образом, когнитивную функцию субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
Как здесь показано, ДГК и УМФ улучшают выполнение животными теста на память (пример 10). Таким образом, способы и композиции настоящего изобретения являются эффективными в улучшении и усилении памяти и других когнитивных функций.
Как здесь показано, введение ПНЖК и/или уридина увеличивает уровни и синтез фосфолипидов в мозге, уровни нейрофибриллярных белков аксонов и количество синаптических мембран. Таким образом, композиции и способы настоящего изобретения увеличивают и усиливают когнитивную функцию, неврологическую функцию, мыслительные способности, синаптическую передачу и уровни, и активность нейротрансмиттеров.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ улучшения неврологической функции субъекта, включающий введение субъекту композиции настоящего изобретения, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, улучшая, таким образом, неврологическую функцию субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, неврологической функцией, которая улучшается с помощью способа настоящего изобретения, является синаптическая передача. В другом воплощении, синаптическая передача относится к двигательному нейрону. В другом воплощении, синаптическая передача относится к вставочному нейрону. В другом воплощении, синаптическая передача относится к чувствительному нейрону. Каждый тип синаптической передачи представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, неврологической функцией, которая улучшается или усиливается, является функционирование нейротрансмиттера. В одном воплощении, улучшение или усиление функционирования нейротрансмиттера обеспечивается за счет увеличения уровня нейротрансмиттера в синапсе. В другом воплощении, улучшение или усиление функционирования нейротрансмиттера обеспечивается за счет увеличения освобождения нейротрансмиттера в синапс. В одном воплощении, улучшение или усиление функционирования нейротрансмиттера обеспечивается без изменения уровня или освобождения нейротрансмиттера в синапс. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, ”улучшение” когнитивной или неврологической функции или мыслительных способностей означает 10% улучшение данного параметра. В другом воплощении, этот термин означает 20% улучшение данного параметра. В другом воплощении, этот термин означает 30% улучшение данного параметра. В другом воплощении, этот термин означает 40% улучшение данного параметра. В другом воплощении, этот термин означает 50% улучшение данного параметра. В другом воплощении, этот термин означает 60% улучшение данного параметра. В другом воплощении, этот термин означает 70% улучшение данного параметра. В другом воплощении, этот термин означает 80% улучшение данного параметра. В другом воплощении, этот термин означает 90% улучшение данного параметра. В другом воплощении, этот термин означает 100% улучшение данного параметра. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, улучшение когнитивной или неврологической функции или мыслительных способностей оценивается по сравнению с данной функцией до начала лечения. В другом воплощении, улучшение оценивается по сравнению с субъектом, не подвергавшимся лечению. В другом воплощении, улучшение оценивается согласно стандартизованному критерию, такому как, например, тест или тому подобное. Каждый тип улучшения когнитивной активности представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, улучшение когнитивной или неврологической функции или мыслительных способностей оценивается по числу контактов между нейронами в мозге субъекта. В другом воплощении, улучшение оценивается по числу капилляров в мозге субъекта, или в определенном участке мозга субъекта. В другом воплощении, улучшение оценивается по нервной функции. В другом воплощении, улучшение оценивается по лингвистической функции. В другом воплощении, улучшение оценивается по способности к общению. В другом воплощении, улучшение оценивается по измерению уровней ацетилхолина или других нейротрансмиттеров или других веществ мозга, коррелирующих с когнитивной функцией. В другом воплощении, улучшение оценивается по результатам сканирования мозга субъекта с помощью Позитронной Эмиссионной Томографии (Positron Emission Tomography, PET). В другом воплощении, улучшение оценивается по результатам сканирования мозга субъекта с помощью магнитного резонанса (magnetic resonance imaging, MRI). В другом воплощении, улучшение оценивается с помощью прибора для оценки когнитивных возможностей (Cognitive Abilities Screening Instrument, CAST) (Peila R et al. Stroke. 32: 2882-9,2001). В другом воплощении, улучшение оценивается с помощью теста, такого как, например, раскрываемый здесь тест (пример 13). В другом воплощении, применяется Мини-Ментальный тест (Tsai L et al. The Mini-Mental State Test and computerized tomography. Am J Psychiatry. 1979 Apr; 136(4A):436-8). Дополнительные способы для оценки улучшения когнитивной функции хорошо известны в данной области техники и описаны, например, в Antonova E et al. (Schizophr Res. 2004 Oct 1; 70(2-3): 117-45) и в Cognitive Function analysis (Greenwood Pub Group, 1998). Каждый способ представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ ингибирования снижения числа синапсов в мозге пациента, включающий введение субъекту композиции настоящего изобретения, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, ингибируя, таким образом, снижение числа синапсов в мозге пациента. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения количества или уровня нейротрансмиттера в мозге или ЦНС субъекта, способ, включающий введение субъекту омега-3 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-3 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивает синтез фосфолипида в мозге или ЦНС, увеличивая, таким образом, количество или уровень нейротрансмиттера в мозге или ЦНС субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения количества или уровня нейротрансмиттера в мозге или ЦНС субъекта, способ, включающий введение субъекту омега-6 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-6 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивает синтез фосфолипида в мозге или ЦНС, увеличивая, таким образом, количество или уровень нейротрансмиттера в мозге или ЦНС субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения количества или уровня нейротрансмиттера в мозге или ЦНС субъекта, способ, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида в мозге или ЦНС, увеличивая, таким образом, количество или уровень нейротрансмиттера в мозге или ЦНС субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения количества или уровня нейротрансмиттера в мозге или ЦНС субъекта, способ, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида в мозге или ЦНС, увеличивая, таким образом, количество или уровень нейротрансмиттера в мозге или ЦНС субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В одном воплощении, нейротрансмиттером, уровни или активность или освобождение которого изменяется по способам настоящего изобретения, является ацетилхолин. В другом воплощении, нейротрансмиттер представляет собой глутамат. В другом воплощении, нейротрансмиттер представляет собой дофамин. В другом воплощении, нейротрансмиттер представляет собой серотонин. В другом воплощении, нейротрансмиттер представляет собой 5-гидрокситриптамин (5-НТ). В другом воплощении, нейротрансмиттер представляет собой ГАМК. В другом воплощении, нейротрансмиттер представляет собой любой другой нейротрансмиттер, известный в данной области техники. Каждый тип нейротрансмиттера представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения или усиления способности нервной клетки субъекта неоднократно освобождать эффективное количество нейротрансмиттера в синапс, способ, включающий введение субъекту омега-3 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-3 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивает синтез фосфолипида клеткой мозга, увеличивая или усиливая, таким образом, способность клетки мозга субъекта неоднократно освобождать эффективное количество нейротрансмиттера в синапс. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
Как здесь показано, плотность дендритных шипиков увеличивается у животных, которым вводили ДГК и/или уридин (пример 9). Таким образом, композиции настоящего изобретения увеличивают число и размер синапсов в мозге и способность клеток мозга передавать сигналы с помощью нейротрансмиттеров.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения или усиления способности клетки мозга субъекта неоднократно освобождать эффективное количество нейротрансмиттера в синапс, способ, включающий введение субъекту омега-6 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-6 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивает синтез фосфолипида клеткой мозга, увеличивая или усиливая, таким образом, способность клетки мозга субъекта неоднократно освобождать эффективное количество нейротрансмиттера в синапс. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения или усиления способности клетки мозга субъекта неоднократно освобождать эффективное количество нейротрансмиттера в синапс, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида клеткой мозга, увеличивая или усиливая, таким образом, способность клетки мозга субъекта неоднократно освобождать эффективное количество нейротрансмиттера в синапс. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения или усиления способности клетки мозга субъекта неоднократно освобождать эффективное количество нейротрансмиттера в синапс, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида клеткой мозга, увеличивая или усиливая, таким образом, способность клетки мозга субъекта неоднократно освобождать эффективное количество нейротрансмиттера в синапс. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
Как здесь показано, введение ПНЖК и/или уридина увеличивает уровни и синтез фосфолипидов в мозге, уровни нейрофибриллярных белков в аксонах и количество синаптических мембран. Таким образом, композиции и способы настоящего изобретения увеличивают и усиливают освобождение и количество нейротрансмиттеров.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ улучшения или усиления мыслительных способностей субъекта, включающий введение субъекту композиции настоящего изобретения, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, улучшая или усиливая, таким образом, мыслительные способности субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения числа дендритных шипиков в мозге или определенном участке мозга субъекта, включающий введение субъекту композиции настоящего изобретения, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, увеличивая, таким образом, число дендритных шипиков в мозге или определенном участке мозга субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, мыслительная способность, которая улучшается или усиливается с помощью способов и композиций настоящего изобретения представляет собой способность к языкам. В другом воплощении, мыслительная способность представляет собой музыкальную способность. В другом воплощении, мыслительная способность представляет собой способность ориентироваться в пространстве. В другом воплощении, мыслительная способность представляет собой физическую способность. В другом воплощении, мыслительная способность представляет собой способность к межличностному общению. В другом воплощении, мыслительная способность представляет собой способность к самооценке. В другом воплощении, мыслительная способность представляет собой способность к межличностному общению. В другом воплощении, мыслительная способность представляет собой логико-математические способности. В другом воплощении, мыслительная способность представляет собой любой другой тип мыслительной способности, известный в данной области техники. Каждый тип мыслительной способности представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ облегчения или усиления восстановления мозга, включающий введение субъекту омега-3 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, что обеспечивает облегчение или усиление восстановления мозга. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ облегчения или усиления восстановления мозга, включающий введение субъекту омега-6 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, что обеспечивает облегчение или усиление восстановления мозга. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ облегчения или усиления восстановления мозга, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, что обеспечивает облегчение или усиление восстановления мозга. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ облегчения или усиления восстановления мозга, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, что обеспечивает облегчение или усиление восстановления мозга. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, восстановление мозга облегчается или усиливается после инсульта. В другом воплощении, восстановление мозга облегчается или усиливается после повреждения мозга. В другом воплощении, восстановление мозга облегчается или усиливается после любого другого события, болезни или нарушения, известного в данной области техники, которое требует восстановления мозга. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, субъект, чьи когнитивная функция, неврологическая функция, мыслительные способности, синаптическая передача или уровни и активность нейротрансмиттеров усиливаются или улучшаются с помощью композиции или способа настоящего изобретения, имеет когнитивное нарушение или нарушение памяти. В другом воплощении, субъект является старым. В другом воплощении, субъект не имеет когнитивного нарушения или нарушения памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения чувствительности нейрона к стимулу, включающий контактирование нейрона с композицией настоящего изобретения, что обеспечивает увеличение чувствительности нейрона к стимулу. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
Как здесь показано, введение ПНЖК и/или уридина увеличивает уровни и синтез фосфолипидов в мозге, уровни нейрофибриллярных белков в аксонах и количество синаптических мембран. Таким образом, композиции и способы настоящего изобретения увеличивают и усиливают чувствительность нейронов к стимулам и размер, и число синапсов в мозге и центральной нервной системе (ЦНС).
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения среднего размера синапса в мозге субъекта, включающий введение субъекту композиции настоящего изобретения, что обеспечивает увеличение среднего размера синапса в мозге субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения числа синапсов в мозге субъекта, включающий введение субъекту омега-3 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, что обеспечивает увеличение числа синапсов в мозге субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения числа синапсов в мозге субъекта, включающий введение субъекту омега-6 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, что обеспечивает увеличение числа синапсов в мозге субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения числа синапсов в мозге субъекта, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, что обеспечивает увеличение числа синапсов в мозге субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения числа синапсов в мозге субъекта, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, что обеспечивает увеличение числа синапсов в мозге субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
Методы измерения и определения среднего размера синапса, числа синапсов и уровня синаптической активности и освобождения нейротрансмиттеров в мозге и ЦНС субъекта хорошо известны в данной области техники и раскрываются, например, в Wheeler DW et al. (Estimating use-dependent synaptic gain in autonomic ganglia by computational simulation and dynamic-clamp analysis. J Neurophysiol. 2004 Nov; 92(5):2659-71), Viele K et al. (Estimating the number of release sites and probability of firing within the nerve terminal by statistical analysis of synaptic charge. Synapse. 2003 Jan; 47(1): 15-25), и DeFelipe J et al. (Estimation of the number of synapses in the cerebral cortex: methodological considerations. Cereb Cortex. 1999 Oct-Nov; 9(7):722-32). Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ стимуляции или усиления образования мембран в клетке мозга или в нервной клетке субъекта, включающий введение субъекту омега-3 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, что обеспечивает стимуляцию или усиление образования мембран в клетке мозга или в нервной клетке субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ стимуляции или усиления образования мембран в клетке мозга или в нервной клетке субъекта, включающий введение субъекту омега-6 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, что обеспечивает стимуляцию или усиление образования мембран в клетке мозга или в нервной клетке субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ стимуляции или усиления образования мембран в клетке мозга или в нервной клетке субъекта, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, что обеспечивает стимуляцию или усиление образования мембран в клетке мозга или в нервной клетке субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ стимуляции или усиления образования мембран в клетке мозга или в нервной клетке субъекта, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, что обеспечивает стимуляцию или усиление образования мембран в клетке мозга или в нервной клетке субъекта. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, способы настоящего изобретения увеличивают уровни фосфолипидов, при этом в значительной степени сохраняя соотношения 2 или более фосфолипидов в клетке-мишени мозга или нервной клетке-мишени. В другом воплощении, способы настоящего изобретения увеличивают уровни фосфолипидов, при этом в значительной степени сохраняя соотношения 3 или более фосфолипидов в клетке-мишени мозга или нервной клетке-мишени. В другом воплощении, способы настоящего изобретения увеличивают уровни фосфолипидов, при этом в значительной степени сохраняя соотношения 4 или более фосфолипидов в клетке-мишени мозга или нервной клетке-мишени. В другом воплощении, фосфолипиды выбираются из ФХ, ФЭ, ФС и сфингомиелина (СМ). В другом воплощении, сохранение в значительной степени этих соотношений является важным для указанных выше аспектов функционирования нервов и мозга. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, термин «в значительной степени сохраняет» означает, что отклонение от предшествующего соотношения составляет меньше чем 10%. В другом воплощении, термин «в значительной степени сохраняет» означает, что отклонение составляет меньше чем 15%. В другом воплощении, отклонение составляет меньше чем 20%. В другом воплощении, отклонение составляет меньше чем 25%. В другом воплощении, отклонение составляет меньше чем 30%. В другом воплощении, отклонение составляет меньше чем 35%. В другом воплощении, отклонение составляет меньше чем 40%. В другом воплощении, отклонение составляет меньше чем 45%. В другом воплощении, отклонение составляет меньше чем 50%. В другом воплощении, отклонение составляет меньше чем 55%. В другом воплощении, отклонение составляет меньше чем 60%. В другом воплощении, отклонение составляет меньше чем 65%. В другом воплощении, отклонение составляет меньше чем 70%. В другом воплощении, отклонение составляет меньше чем 75%. В другом воплощении, отклонение составляет меньше чем 80%. В другом воплощении, отклонение составляет меньше чем 85%. В другом воплощении, отклонение составляет меньше чем 90%. В другом воплощении, отклонение составляет меньше чем 95%. В другом воплощении, отклонение составляет меньше чем 90% (100%?). Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
3
В другом воплощении способов настоящего изобретения, стимуляция синтеза фосфолипидов усиливает ветвление аксонов. В другом воплощении, стимуляция синтеза фосфолипидов усиливает прорастание аксонов. В другом воплощении, стимуляция синтеза фосфолипидов увеличивает пул фосфолипидных остатков, которые могут освобождаться через активацию фосфолипаз. Некоторые из фосфолипидных остатков обладают биологической активностью, например, такие как инозитол-1,4,5-трисфосфат (IP), диацилглицерин (DAG) и лизо-фактор активации тромбоцитов (lyso-PAF), который в ходе последующего метаболизма обеспечивает образование биоактивного липида - фактора активации тромбоцитов (PAF, 1-O-алкил-2-ацетил-sn-3-глицерин-3-фосфохолин).
В другом воплощении, стимуляция синтеза фосфолипидов защищает синаптические мембраны от стресса. В другом воплощении, стресс представляет собой окислительный стресс. В другом воплощении, стресс представляет собой любой другой тип стресса, известный в данной области техники.
В другом воплощении, каждый из этих эффектов стимуляции синтеза фосфолипидов усиливает опосредованную нейротрансмиттерами передачу сигналов, замедляя, таким образом, потерю памяти. В другом воплощении, потеря или нарушение памяти останавливается за счет одного из описанных выше эффектов. В другом воплощении, потерянная память восстанавливается за счет одного из описанных выше эффектов. Каждый из описанных выше эффектов стимуляции синтеза фосфолипидов и каждое из описанных выше последствий этой стимуляции представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с нарушением памяти или с потерей памяти, включающий контактирование нервной клетки субъекта с омега-3 жирной кислотой или ее метаболическим предшественником, где омега-3 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивают синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга, что обеспечивает лечение субъекта с нарушением памяти или с потерей памяти.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с нарушением памяти или с потерей памяти, включающий контактирование нервной клетки субъекта с омега-6 жирной кислотой или ее метаболическим предшественником, где омега-6 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивают синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга, что обеспечивает лечение субъекта с нарушением памяти или с потерей памяти.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с нарушением памяти или с потерей памяти, включающий контактирование нервной клетки субъекта с композицией, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга, что обеспечивает лечение субъекта с нарушением памяти или с потерей памяти.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с нарушением памяти или с потерей памяти, включающий контактирование нервной клетки субъекта с композицией, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга, что обеспечивает лечение субъекта с нарушением памяти или с потерей памяти.
В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти является вторичным по отношению к заболеванию сосудов головного мозга. В другом воплощении, нарушение памяти является вторичным по отношению к инсульту. В другом воплощении, инсульт представляет собой клинический инсульт. В другом воплощении, инсульт представляет собой не устанавливаемый клиническими наблюдениями инсульт. В другом воплощении, нарушение памяти является следствием множественных, не устанавливаемых клиническими наблюдениями микроинсультов. В другом воплощении, нарушение памяти является вторичным по отношению к сердечнососудистому заболеванию. В другом воплощении, нарушение памяти является вторичным по отношению к возрастному сердечно-сосудистому заболеванию.
В другом воплощении, нарушение памяти является вторичным по отношению к депрессии, например, является результатом депрессии. Как известно специалистам в данной области техники, подверженные депрессии люди часто демонстрируют нарушения памяти, часто до такой степени, что пожилым людям с депрессией ставят ошибочный диагноз - болезнь Альцгеймера. В другом воплощении, способы и композиции настоящего изобретения будут увеличивать освобождение нейротрансмиттеров, которые, как известно, вовлечены как в развитие депрессии (например, дофамин, норадреналин и серотонин), так и в развитие нарушения памяти (например, ацетилхолин).
В другом воплощении, нарушение памяти является вторичным по отношению к бессоннице.
В другом воплощении, нарушение памяти является следствием любой другой причины нарушения памяти, известной в данной области техники. Каждая причина нарушения памяти или потери памяти представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, термин «возрастной (старческий)» относится к последствиям преклонного возраста. В другом воплощении, это возраст старше 65 лет. В другом воплощении, это возраст старше 60 лет. В другом воплощении, это возраст старше 55 лет. В другом воплощении, это возраст старше 68 лет. В другом воплощении, это возраст старше 70 лет. В другом воплощении, это возраст старше 72 лет. В другом воплощении, это возраст старше 75 лет. В другом воплощении, это возраст старше 78 лет. В другом воплощении, это возраст старше 80 лет. В другом воплощении, это возраст старше 85 лет. В другом воплощении, это возраст старше 90 лет. В другом воплощении, термин «возрастной (старческий)» относится к последствиям любого возраста, связанным с нарушением памяти в результате любой болезни или нарушения, включающим нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
Субъект способов настоящего изобретения, в одном воплощении, представляет собой человека. В другом воплощении, субъект представляет собой женщину. В другом воплощении, субъект представляет собой мужчину. В другом воплощении, субъект представляет собой беременную женщину. В другом воплощении, субъект представляет собой кормящую грудью женщину. В другом воплощении, субъект представляет собой новорожденного. В другом воплощении, субъект представляет собой ребенка. В другом воплощении, субъект представляет собой маленького ребенка. В другом воплощении, субъект представляет собой взрослого человека. В другом воплощении, субъект представляет собой пожилого человека. В другом воплощении, термин «пожилой» относится к любому воплощению, описанному выше. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, термин «новорожденный» обозначает субъекта в возрасте до 1 года. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 18 месяцев. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 6 месяцев. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 7 месяцев. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 8 месяцев. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 9 месяцев. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 10 месяцев. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 11 месяцев. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 13 месяцев. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 14 месяцев. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 16 месяцев. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 20 месяцев. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 2 лет. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта, который еще не отлучен от груди. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта, который уже отлучен от груди, но имеет возраст в пределах указанных выше границ. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, термин «ребенок» обозначает субъекта в возрасте до 18 лет. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 17 лет. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 16 лет. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 15 лет. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 14 лет. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 13 лет. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 12 лет. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 11 лет. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 10 лет. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 9 лет. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 8 лет. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 7 лет.
В другом воплощении, термин «маленький ребенок» обозначает субъекта в возрасте до 7 лет. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 6 лет. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 5 лет. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 4 лет. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 3,5 лет. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 3 лет. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта в возрасте до 2,5 лет. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, термин «взрослый» обозначает субъекта одного из возрастов, указанных выше, который выше границы возраста ребенка. В другом воплощении, этот термин обозначает субъекта одного из возрастов, указанных выше, который выше границы возраста маленького ребенка. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с болезнью Пика, включающий введение субъекту омега-3 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-3 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивают синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с болезнью Пика. В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с болезнью телец Леви, включающий введение субъекту омега-3 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-3 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивают синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с болезнью телец Леви. В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с болезнью Гентингтона, включающий введение субъекту омега-3 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-3 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивают синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с болезнью Гентингтона. В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с незначительным когнитивным нарушением (mild cognitive impairment, MCI), включающий введение субъекту омега-3 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-3 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивают синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с MCI. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с болезнью Пика, включающий введение субъекту омега-6 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-6 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивают синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с болезнью Пика. В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с болезнью телец Леви, включающий введение субъекту омега-6 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-6 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивают синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с болезнью телец Леви. В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с болезнью Гентингтона, включающий введение субъекту омега-6 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-6 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивают синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с болезнью Гентингтона. В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с MCI, включающий введение субъекту омега-6 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-6 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивают синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с MCI. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с болезнью Пика, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с болезнью Пика. В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с болезнью телец Леви, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с болезнью телец Леви. В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с болезнью Гентингтона, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с болезнью Гентингтона. В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с MCI, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с MCI. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с болезнью Пика, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с болезнью Пика. В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с болезнью телец Леви, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с болезнью телец Леви. В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с болезнью Гентингтона, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с болезнью Гентингтона. В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с MCI, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с MCI. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с сосудистой деменцией, включающий введение субъекту композиции настоящего изобретения, где омега-3 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга субъекта, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с сосудистой деменцией.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с возрастным неврологическим нарушением, включающий контактирование нервной клетки субъекта с композицией настоящего изобретения, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с возрастным неврологическим нарушением.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ лечения субъекта с симптомом депрессии, включающий контактирование нервной клетки субъекта с композицией настоящего изобретения, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой или клеткой мозга, обеспечивая, таким образом, лечение субъекта с симптомом депрессии. В другом воплощении, субъект имеет нарушение памяти. В другом воплощении, нарушение памяти представляет собой возрастное (старческое) нарушение памяти. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, симптом депрессии представляет собой грусть. В другом воплощении, симптом депрессии представляет собой сниженную активность. В другом воплощении, симптом депрессии представляет собой усталость. В другом воплощении, симптом депрессии представляет собой слабость. В другом воплощении, симптом депрессии представляет собой изменчивость настроения. В другом воплощении, симптом депрессии представляет собой сниженную концентрацию. В другом воплощении, симптом депрессии представляет собой бессонницу. В другом воплощении, симптом депрессии представляет собой колебания веса. В другом воплощении, симптом депрессии представляет собой сниженное либидо. В другом воплощении, симптом депрессии представляет собой мысли о самоубийстве. Каждый симптом представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, способы и композиции настоящего изобретения, омега-3 жирная кислота, омега-6 жирная кислота, их метаболический предшественник или композиция настоящего изобретения обеспечивает один из перечисленных здесь эффектов путем увеличения синтеза фосфолипида. В другом воплощении, видимый эффект достигается без увеличения синтеза фосфолипида. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, способы и композиции настоящего изобретения включают источник уридина. В другом воплощении, способы и композиции настоящего изобретения включают источник холина. В другом воплощении, термин «источник» обозначает соединение, которое увеличивает концентрацию желаемого соединения (например, уридина, холина и т.д.) в кровотоке или в тканях. В другом воплощении, термин «источник» обозначает соединение, которое метаболизируется тканями или ферментом субъекта с образованием желаемого соединения. В другом воплощении, термин «источник» обозначает соединение, которое метаболизируется в клетке-мишени с образованием желаемого соединения. В другом воплощении, источник уридина представляет собой цитидин, который превращается в уридин в печени человека. В другом воплощении, источник уридина представляет собой цитидин-5'-монофосфат. В другом воплощении, источник уридина представляет собой цитидин-5'-дифосфат. В другом воплощении, источник уридина представляет собой цитидин-5'-трифосфат. В другом воплощении, источник уридина представляет собой любой другой цитидинфосфат, известный в данной области техники. В другом воплощении, источник уридина представляет собой ЦДФ-холин. В другом воплощении, источник уридина представляет собой любой другой источник уридина, известный в данной области техники. Каждый источник уридина представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, уридинфосфат, применяемый в способах настоящего изобретения, представляет собой уридин-5'-монофосфат. В другом воплощении, уридинфосфат представляет собой уридин-5'-дифосфат. В другом воплощении, уридинфосфат представляет собой уридин-5'-трифосфат. В другом воплощении, уридинфосфат представляет собой любой другой уридинфосфат, известный в данной области техники. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В других воплощениях, соединения на основе уридина, отличающиеся от самого уридина, выступают в качестве источников уридина или предшественников уридина. В других воплощениях к ним относятся богатые уридином пищевые продукты или диетические продукты, такие как водоросли, соли уридин-подобных уридинфосфатов, ацилированный уридин и тому подобное. В другом воплощении, также вводятся ацилированные производные уридина или их смеси, например, такие, которые раскрыты в U.S. Pat. No. 5,470,838. Каждый предшественник уридина представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, способ настоящего изобретения дополнительно включает введение холина. В другом воплощении, способ дополнительно включает введение соли холина. В другом воплощении, способ дополнительно включает введение соединения, которое метаболизируется с образованием холина. В другом воплощении, способ дополнительно включает введение источника холина. В другом воплощении, введение одного из вышеуказанных соединений усиливает эффект омега-3 или омега-6 жирной кислоты и/или уридина на синтез мембранных фосфолипидов. Как здесь показано (примеры), введение холина и омега-3 или омега-6 жирной кислоты демонстрирует неожиданное увеличение уровней фосфолипидов, синаптических белков и синаптических мембран в нейронах и ткани мозга и улучшение памяти, мыслительной деятельности и когнитивных и неврологических функций.
В другом воплощении, любой из способов и композиций настоящего изобретения включает введение омега-3 жирной кислоты и холина. В другом воплощении, любой из способов и композиций настоящего изобретения включает введение омега-3 жирной кислоты и соли холина. В другом воплощении, любой из способов и композиций настоящего изобретения включает введение омега-6 жирной кислоты и холина. В другом воплощении, любой из способов и композиций настоящего изобретения включает введение омега-6 жирной кислоты и соли холина.
В другом воплощении, любой из способов и композиций настоящего изобретения включает введение композиции, включающей омега-3 жирную кислоту, уридин и холин. В другом воплощении, любой из способов и композиций настоящего изобретения включает введение композиции, включающей омега-3 жирную кислоту, уридин и соль холина. В другом воплощении, любой из способов и композиций настоящего изобретения включает введение композиции, включающей омега-6 жирную кислоту, уридин и холин. В другом воплощении, любой из способов и композиций настоящего изобретения включает введение композиции, включающей омега-6 жирную кислоту, уридин и соль холина.
В другом воплощении, любой из способов и композиций настоящего изобретения включает введение омега-6 жирной кислоты и омега-3 жирной кислоты. В другом воплощении, любой из способов и композиций настоящего изобретения включает введение омега-6 жирной кислоты, омега-3 жирной кислоты и уридина. В другом воплощении, любой из способов и композиций настоящего изобретения включает введение омега-6 жирной кислоты, омега-3 жирной кислоты и холина. В другом воплощении, любой из способов и композиций настоящего изобретения включает введение омега-6 жирной кислоты, омега-3 жирной кислоты и соли холина. В другом воплощении, любой из способов и композиций настоящего изобретения включает введение омега-6 жирной кислоты, омега-3 жирной кислоты, уридина и холина. В другом воплощении, любой из способов и композиций настоящего изобретения включает введение омега-6 жирной кислоты, омега-3 жирной кислоты, уридина и соли холина.
В другом воплощении, противовоспалительная ПНЖК включается в способы и композиции настоящего изобретения. В другом воплощении, включаются 2 разные омега-3 жирные кислоты. В другом воплощении, 1 из 2 омега-3 жирных кислот представляет собой противовоспалительную ПНЖК. В другом воплощении, 1 из 2 омега-3 жирных кислот представляет собой ДГК. В другом воплощении, 1 из 2 омега-3 жирных кислот представляет собой ЭПК. В другом воплощении, 2 омега-3 жирные кислоты представляют собой ЭПК и ДГК.
В другом воплощении, соотношение 2 омега-3 жирных кислот составляет 0,05:1. В другом воплощении, соотношение составляет 0,1:1. В другом воплощении, соотношение составляет 0,15:1. В другом воплощении, соотношение составляет 0,2:1. В другом воплощении, соотношение составляет 0,3:1. В другом воплощении, соотношение составляет 0,4:1. В другом воплощении, соотношение составляет 0,5:1. В другом воплощении, соотношение составляет 0,6:1. В другом воплощении, the соотношение составляет 0,7:1. В другом воплощении, соотношение составляет 0,8:1. В другом воплощении, соотношение составляет 0,9:1. В другом воплощении, соотношение составляет 1:1. В другом воплощении, ДГК и ЭПК включаются в одном из вышеуказанных соотношений (ДГК:ЭПК). В другом воплощении, ДГК и ЭПК включаются в одном из вышеуказанных соотношений (ЭПК:ДГК).
В другом воплощении, 2 разные омега-6 жирные кислоты включаются в способы и композиции настоящего изобретения.
В другом воплощении, соотношение омега-3 жирной кислоты к омега-6 жирной кислоте в способе или композиции настоящего изобретения составляет 1:1. В другом воплощении, соотношение составляет 1,5:1. В другом воплощении, соотношение составляет 2:1. В другом воплощении, соотношение составляет 3:1. В другом воплощении, соотношение составляет 4:1. В другом воплощении, соотношение составляет 5:1. В другом воплощении, соотношение составляет 6:1. В другом воплощении, соотношение составляет 8:1. В другом воплощении, соотношение составляет 10:1. В другом воплощении, соотношение составляет 12:1. В другом воплощении, соотношение составляет 15:1. В другом воплощении, соотношение составляет 20:1. В другом воплощении, соотношение составляет 30:1. В другом воплощении, соотношение составляет 40:1. В другом воплощении, соотношение составляет 50:1. В другом воплощении, соотношение составляет 60:1. В другом воплощении, соотношение составляет 80:1. В другом воплощении, соотношение составляет 100:1.
Каждая комбинация омега-3 жирной кислоты, омега-6 жирной кислоты, уридина, холина и/или соли холина представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения. Каждая комбинация разных омега-3 жирных кислот представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения. Каждая комбинация разных омега-6 жирных кислот представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения. Каждое соотношение представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, источник холина представляет собой лецитин. В другом воплощении, источник холина представляет собой лецитин. В другом воплощении, источник холина представляет собой ацетилхолин. В другом воплощении, источник холина представляет собой цитихолин или альфа-глицерофосфорилхолин. В другом воплощении, источник холина представляет собой ЦДФ-холин. В другом воплощении, источник холина представляет собой любой другой источник холина, известный в данной области техники. Каждый источник холина представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, соль холина представляет собой сульфонат, например соль длинноцепочечного алкилсульфоната. В другом воплощении, соль холина представляет собой холинхлорид. В другом воплощении, соль холина представляет собой битартрат холина. В другом воплощении, соль холина представляет собой цитрат холина. В другом воплощении, соль холина представляет собой тартрат холина. В другом воплощении, соль холина представляет собой железо-холин нитратный комплекс. В другом воплощении, соль холина представляет собой любую другую соль холина, известную в данной области техники. Каждая соль холина представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет композицию для лечения болезни Альцгеймера, состоящую из любых композиций, раскрываемых в способах настоящего изобретения. Каждая композиция представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет композицию для лечения нарушения памяти или потери памяти, состоящую из любых композиций, раскрываемых в способах настоящего изобретения. Каждая композиция представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения. Кроме того, каждый тип нарушения памяти или потери памяти представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет композицию для лечения болезни Пика, состоящую из любых композиций, раскрываемых в способах настоящего изобретения. В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет композицию для лечения болезни телец Леви, состоящую из любых композиций, раскрываемых в способах настоящего изобретения. В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет композицию для лечения болезни Гентингтона, состоящую из любых композиций, раскрываемых в способах настоящего изобретения. Каждая композиция и каждая из вышеназванных болезней представляют собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, способы и композиции настоящего изобретения проявляют свои эффекты даже у субъектов, которые не имеют дефицита по омега-3 жирным кислотам или омега-6 жирным кислотам. В другом воплощении, фармакологическая доза ПНЖК применяется в способах и композициях настоящего изобретения. В другом воплощении, применяется терапевтическая доза. В другом воплощении, фармакологическая доза является более высокой, чем обычно поступает с пищей в случае богатой ПНЖК диеты. В другом воплощении, уровни мембран у субъекта, не имеющего дефицита по ПНЖК, увеличиваются при введении фармакологических доз ПНЖК и/или уридина. В другом воплощении, результаты настоящего изобретения демонстрируют, что ПНЖК оказывают биохимическое действие на мозг, что говорит в пользу применения фармакологических доз ПНЖК. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, дозировка омега-3 жирной кислоты, включаемой в способы и композиции настоящего изобретения, находится в диапазоне приблизительно 400-2000 мг/день. В другом воплощении, дозировка находится в диапазоне приблизительно 500-2000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 600-2000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 800-2000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 1000-2000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 1200-2000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 1500-2000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 400-3000 мг/день. В другом воплощении, дозировка находится в диапазоне приблизительно 500-3000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 600-3000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 800-3000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 1000-3000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 1200-3000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 1500-3000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 2000-3000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 400-4000 мг/день. В другом воплощении, дозировка находится в диапазоне приблизительно 500-4000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 600-4000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 800-4000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 1000-4000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 1200-4000 мг/день. В другом. воплощении, диапазон составляет приблизительно 1500-4000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 2000-4000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 3000-4000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 400-1000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 500-1000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 600-1000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 800-100 мг/день.
В другом воплощении, дозировка омега-3 жирной кислоты составляет, по меньшей мере, 400 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет, по меньшей мере, 500 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет, по меньшей мере, 600 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет, по меньшей мере, 700 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет, по меньшей мере, 800 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет, по меньшей мере, 900 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет, по меньшей мере, 1 г/день. В другом воплощении, дозировка составляет, по меньшей мере, 1200 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет, по меньшей мере, 1,5 г/день. В другом воплощении, дозировка составляет, по меньшей мере, 2 г/день.
В другом воплощении, дозировка омега-3 жирной кислоты составляет приблизительно 400 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 500 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 600 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 700 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 800 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 900 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 1 г/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 1200 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 1,5 г/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 2 г/день.
В другом воплощении, беременные женщины получают определенную дозировку для достижения нужного результата. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 200-2000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 400-1700 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 600-1500 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 800-1300 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 200-3000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 400-3000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 600-3000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 800-3000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 1000-3000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет приблизительно 2000-3000 мг/день. В другом воплощении, дозировка для беременных женщин составляет приблизительно 1000 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 1500 мг/день, В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 2000 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 3000 мг/день.
В другом воплощении, субъекты с повышенным уровнем холестерина получают определенную дозировку для достижения нужного результата. В другом воплощении, дозировка для субъектов с повышенным уровнем холестерина находится в диапазоне приблизительно 200-4000 мг/день. В другом воплощении, дозировка для субъектов с повышенным уровнем холестерина находится в диапазоне приблизительно 400-3500 мг/день. В другом воплощении, дозировка для субъектов с повышенным уровнем холестерина находится в диапазоне приблизительно 600-3000 мг/день. В другом воплощении, дозировка для субъектов с повышенным уровнем холестерина находится в диапазоне приблизительно 1000-2500 мг/день. В другом воплощении, дозировка для субъектов с повышенным уровнем холестерина находится в диапазоне приблизительно 1500-2300 мг/день. В другом воплощении, дозировка для субъектов с повышенным уровнем холестерина составляет приблизительно 2000 мг/день.
В другом воплощении способов и композиций настоящего изобретения, ДГК включается в одной из вышеназванных доз. В другом воплощении, дозировка ДГК составляет 1-50 мг/кг/день. В другом воплощении, дозировка ДГК составляет 400-1000 мг/день. В другом воплощении, ЭПК включается в одной из вышеназванных доз. В другом воплощении, дозировка ЭПК составляет 1-50 мг/кг/день. В другом воплощении, дозировка ЭПК составляет 400-1000 мг/день. Каждая дозировка представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В других воплощениях, дозировка омега-6 жирной кислоты, включаемой в способы и композиции настоящего изобретения, соответствует любой из дозировок омега-3 жирной кислоты, указанных выше. В другом воплощении, включается арахидоновая кислота в одной из указанных выше доз. В другом воплощении, дозировка арахидоновой кислоты составляет 1-50 мг/кг/день. В другом воплощении, дозировка арахидоновой кислоты составляет 400-1000 мг/день. Каждая дозировка представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, эйкозагексаеновая кислота (ЭПК) вводится вместе, или дополнительно, с другой омега-3 или омега-6 жирной кислотой. В другом воплощении, ЭПК добавляется в дозировке приблизительно 200 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 100-300 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет 150-250 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет 170-230 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет 100-1000 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет 150-800 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет 200-600 мг/день. В другом воплощении, диапазон составляет 300-500 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 300 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 400 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 500 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 600 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 800 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 1000 мг/день.
В другом воплощении, беременным женщинам вводится более высокая доза ЭПК. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 1200 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 1500 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 1800 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 2000 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 2500 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 3000 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 500-3000 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 800-3000 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 1000-3000 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 1500-3000 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 2000-3000 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 500-2000 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 800-2000 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 1000-2000 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 1500-2000 мг/день.
Каждая дозировка омега-3 жирной кислоты, омега-6 жирной кислоты или дополнительно добавленной ЭПК представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, дозировка уридина, включаемого в способы и композиции настоящего изобретения, находится в диапазоне 10-500 мг/день (включительно). В другом воплощении, дозировка составляет 20-500 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 30-500 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 50-500 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 100-500 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 150-500 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 200-500 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 300-500 мг/день. В другом воплощении, дозировка уридина находится в диапазоне 10-400 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 20-400 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 30-400 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 50-400 мг/день, В другом воплощении, дозировка составляет 100-400 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 150-400 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 200-400 мг/день. В другом воплощении, дозировка уридина находится в диапазоне 10-300 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 20-300 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 30-300 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 50-300 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 100-300 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 150-300 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет 200-300 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 50 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 70 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 100 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 150 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 200 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 300 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 400 мг/день. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 500 мг/день.
Каждая дозировка уридина представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, дозировка холина, включаемого в способы и композиции настоящего изобретения, находится в диапазоне 100 мг-10 г/день (включительно). В другом воплощении, дозировка составляет 1 г - 3 г. В другом воплощении, дозировка составляет 150 мг - 8 г. В другом воплощении, дозировка составляет 200 мг - 6 г. В другом воплощении, дозировка составляет 300 мг - 5 г. В другом воплощении, дозировка составляет 400 мг - 4,5 г. В другом воплощении, дозировка составляет 500 мг - 4 г. В другом воплощении, дозировка составляет 600 мг - 4 г. В другом воплощении, дозировка составляет 800 мг - 3,5 г. В другом воплощении, дозировка составляет 1,2 g - 3 г. В другом воплощении, дозировка составляет 1,5 г - 2,5 г. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 0,5 г. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 0,7 г. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 1 г. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 1,2 г. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 1,5 г. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 2 г. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 2,5 г. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 3 г. В другом воплощении, дозировка составляет приблизительно 4 г. Каждая из указанных выше дозировок представляет собой количество эквивалентов холина; таким образом, реальные дозировки соединения холина (например, холинхлорида или тартрата холина) будут соответственно выше.
Каждая дозировка холина представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, композиция настоящего изобретения вводится хронически. В другом воплощении, термин «хронически» обозначает введение в течение, по меньшей мере, 1 недели. В другом воплощении, термин обозначает введение в течение, по меньшей мере, 2 недель. В другом воплощении, период времени составляет, по меньшей мере, 10 дней. В другом воплощении, период времени составляет, по меньшей мере, 3 недели. В другом воплощении, период времени составляет, по меньшей мере, 4 недели. В другом воплощении, период времени составляет, по меньшей мере, 5 недель. В другом воплощении, период времени составляет, по меньшей мере, 6 недель. В другом воплощении, период времени составляет, по меньшей мере, 2 месяца. В другом воплощении, период времени составляет, по меньшей мере, 3 месяца. В другом воплощении, период времени составляет, по меньшей мере, 4 месяца. В другом воплощении, период времени составляет, по меньшей мере, 5 месяцев. В другом воплощении, период времени составляет, по меньшей мере, 6 месяцев. В другом воплощении, период времени составляет, по меньшей мере, 1 год. В другом воплощении, период времени составляет, по меньшей мере, 2 года. В другом воплощении, период времени составляет, по меньшей мере, 3 года. В другом воплощении, период времени составляет, по меньшей мере, 5 лет. В другом воплощении, период времени составляет, по меньшей мере, 10 лет.
В другом воплощении, период времени составляет 1 неделю. В другом воплощении, термин означает введение в течение 2 недель. В другом воплощении, период времени составляет 10 дней. В другом воплощении, период времени составляет 3 недели. В другом воплощении, период времени составляет 4 недели. В другом воплощении, период времени составляет 5 недель. В другом воплощении, период времени составляет 6 недель. В другом воплощении, период времени составляет 2 месяца. В другом воплощении, период времени составляет 3 месяца. В другом воплощении, период времени составляет 4 месяца. В другом воплощении, период времени составляет 5 месяцев. В другом воплощении, период времени составляет 6 месяцев. В другом воплощении, период времени составляет 1 год. В другом воплощении, период времени составляет 2 года. В другом воплощении, период времени составляет 3 года. В другом воплощении, период времени составляет 5 лет. В другом воплощении, период времени составляет 10 лет.
В другом воплощении, представляющий собой ПНЖК компонент композиции настоящего изобретения вводится в течение одного из вышеуказанных периодов времени. В другом воплощении, представляющий собой омега-3 жирную кислоту компонент композиции настоящего изобретения вводится в течение одного из вышеуказанных периодов времени. В другом воплощении, представляющий собой омега-6 жирную кислоту компонент композиции настоящего изобретения вводится в течение одного из вышеуказанных периодов времени. В другом воплощении, представляющий собой уридин компонент композиции настоящего изобретения вводится в течение одного из вышеуказанных периодов времени. В другом воплощении, представляющий собой холин или соль холина компонент композиции настоящего изобретения вводится в течение одного из вышеуказанных периодов времени.
Каждый период времени представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, термин «контактирование» обозначает прямое введение субъекту композиции настоящего изобретения. В другом воплощении, термин «контактирование» обозначает непрямое введение субъекту композиции настоящего изобретения. Таким образом, в другом воплощении, способы настоящего изобретения включают способы, при применении которых субъект вступает в контакт с соединением или композицией, которая метаболизируется с образованием омега-3 или омега-6 жирной кислоты в спинномозговой жидкости, кровотоке и т.д., после чего омега-3 или омега-6 жирная кислота вступает в контакт с клеткой мозга за счет диффузии или за счет любого другого процесса активного или пассивного транспорта, известного в данной области техники, с помощью которого соединения циркулируют в организме. В другом воплощении, соединение метаболизируется клетками-мишенями в омега-3 или омега-6 жирную кислоту. Каждая возможность представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, в способах и композициях настоящего изобретения применяется производное омега-3 или омега-6 жирной кислоты. В другом воплощении, производное представляет собой производное омега-6 жирной кислоты гамма-линоленовую кислоту. В другом воплощении, производное представляет собой любое другое производное омега-3 или омега-6 жирной кислоты, известное в данной области техники. Каждое производное представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения ветвления аксона нервной клетки субъекта, включающий введение субъекту омега-3 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-3 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой, обеспечивая, таким образом, увеличение ветвления аксона нервной клетки. В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения ветвления аксона нервной клетки субъекта, включающий введение субъекту омега-6 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-6 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой, обеспечивая, таким образом, увеличение ветвления аксона нервной клетки субъекта.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения ветвления аксона нервной клетки субъекта, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой, обеспечивая, таким образом, увеличение ветвления аксона нервной клетки. В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения ветвления аксона нервной клетки субъекта, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой, обеспечивая, таким образом, увеличение ветвления аксона нервной клетки субъекта.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения прорастания аксона нервной клетки субъекта, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-3 жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой, обеспечивая, таким образом, увеличение прорастания аксона нервной клетки. В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения прорастания аксона нервной клетки субъекта, включающий введение субъекту композиции, включающей: (а) уридин, его ацильное производное, уридинфосфат или ЦДФ-холин; и (б) омега-6-жирную кислоту или ее метаболический предшественник, где композиция увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой, обеспечивая, таким образом, увеличение прорастания аксона нервной клетки субъекта.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения прорастания аксона нервной клетки субъекта, включающий введение субъекту омега-3 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-3 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой, обеспечивая, таким образом, увеличение прорастания аксона нервной клетки. В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет способ увеличения прорастания аксона нервной клетки субъекта, включающий введение субъекту омега-6 жирной кислоты или ее метаболического предшественника, где омега-6 жирная кислота или ее метаболический предшественник увеличивает синтез фосфолипида нервной клеткой, обеспечивая, таким образом, увеличение прорастания аксона нервной клетки субъекта.
В другом воплощении, настоящее изобретение предоставляет набор, включающий соединения или композицию, применяемую при выполнении способа настоящего изобретения.
В другом воплощении, термин «фармацевтическая композиция» обозначает диетическую добавку. В другом воплощении, термин обозначает пищевую добавку. В другом воплощении, термин обозначает продукты питания любого сорта, которые обогащены омега-3 жирной кислотой. В другом воплощении, термин обозначает продукты питания, которые обогащены омега-6 жирной кислотой. В другом воплощении, термин обозначает продукты питания, которые обогащены уридином. В другом воплощении, термин обозначает продукты питания, которые обогащены холином. В другом воплощении, термин обозначает продукты питания, которые обогащены солью холина.
В другом воплощении, термин «продукты питания» обозначает твердые продукты питания. В другом воплощении, термин обозначает напиток. В другом воплощении, термин обозначает порошковую смесь для получения напитка. В другом воплощении, термин обозначает препараты на основе продуктов питания, функциональные продукты питания, диетические пищевые добавки или нутрицевтики.
В другом воплощении, продукты питания могут быть в разных формах, включая жидкость, суспензию, порошок, полутвердые и твердые продукты. К полутвердым продуктам относятся сладкие кремы, десертные пудинги, жирные кремы, муссы, мороженое (пломбир), йогурты и сладкие желатиновые продукты. Не ограничиваясь конкретными воплощениями, твердая форма может быть приготовлена в виде батончика, подобно питательному батончику, чипсов, булочки, крекера, пасты или вспененного материала, например попкорна или продуктов, подобных рисовым кексам. Некоторые воплощения требуют индивидуального подхода к растворению, суспендированию или размачиванию пищевого продукта.
Каждый тип фармацевтической композиции представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, настоящее изобретение касается применения омега-3 или омега-6 жирной кислоты и/или ее аналога, производного, изомера, метаболита, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтического продукта, гидрата, N-оксида или их комбинации. Таким образом, в другом воплощении, способы настоящего изобретения включают введение аналога ПНЖК. В другом воплощении, способы настоящего изобретения включают введение производного ПНЖК. В другом воплощении, способы настоящего изобретения включают введение изомера ПНЖК. В другом воплощении, способы настоящего изобретения включают введение метаболита ПНЖК. В другом воплощении, способы настоящего изобретения включают введение фармацевтически приемлемой соли ПНЖК. В другом воплощении, способы настоящего изобретения включают введение фармацевтического продукта ПНЖК. В другом воплощении, способы настоящего изобретения включают введение гидрата ПНЖК. В другом воплощении, способы настоящего изобретения включают введение N-оксида ПНЖК. В другом воплощении, способы настоящего изобретения включают введение любой комбинации из аналога, производного, изомера, метаболита, фармацевтически приемлемой соли, фармацевтического продукта, гидрата или N-оксида ПНЖК.
В другом воплощении способов и композиций настоящего изобретения, ПНЖК вводится в виде триглицерида.
В другом воплощении, термин «изомер» включает, но, в другом воплощении, ими не ограничивается, оптические изомеры и аналоги, структурные изомеры и аналоги, конформационные изомеры и аналоги и тому подобное.
В другом воплощении, настоящее изобретение дополнительно включает производные ПНЖК. Термин «производные» включает, но ими не ограничивается, эфирные производные, кислотные производные, амидные производные, сложноэфирные производные и тому подобное. Кроме того, настоящее изобретение дополнительно включает гидраты соединений ПНЖК. Термин «гидрат» включает, но ими не ограничивается, полугидрат, моногидрат, дигидрат, тригидрат и тому подобное.
Настоящее изобретение дополнительно включает метаболиты соединений ПНЖК. Термин «метаболиты» обозначает любое вещество, получаемое из другого вещества в ходе обмена веществ или в результате метаболического процесса.
Настоящее изобретение дополнительно включает фармацевтические продукты соединений ПНЖК. Термин «фармацевтические продукты» обозначает композиции, подходящие для фармацевтического применения (фармацевтические композиции), как здесь определено.
Кроме того, настоящее изобретение включает в себя чистые (Z)- и (Е)-изомеры соединений ПНЖК, определенные здесь, и их смеси, а также чистые (RR, SS)- и (RS, SR)-энантиомерные пары и их смеси.
Фармацевтические композиции и способы введения
В другом воплощении, фармацевтические композиции, содержащие ПНЖК и/или уридин, могут вводиться субъекту любым способом, известным специалисту в данной области техники, например парентерально, параканцерально (внутрь раковой опухоли), трансмукозально (через слизистые), трансдермально (через кожу), внутримышечно, внутривенно, внутрикожно, подкожно, внутрибрюшинно, внутрь желудочка, внутрь черепа, внутривагинально или внутрь опухоли.
В другом воплощении способов и композиций настоящего изобретения, фармацевтические композиции вводятся перорально и, следовательно, готовятся в форме, пригодной для перорального введения, т.е. в виде твердой или жидкой лекарственной формы. Пригодные для перорального применения твердые лекарственные формы включают таблетки, капсулы, пилюли, гранулы, подушечки и тому подобное. Пригодные для перорального применения жидкие лекарственные формы включают растворы, суспензии, дисперсии, эмульсии, масла и тому подобное. В другом воплощении настоящего изобретения, активный ингредиент заключается внутри капсулы. В соответствии с этим воплощением, композиции настоящего изобретения включают в дополнение к активному соединению и инертному носителю или разжижителю, твердую желатиновую капсулу.
В другом воплощении, фармацевтические композиции вводятся внутривенно, внутриартериально или внутримышечно путем инъекции жидкой лекарственной формы. Пригодные жидкие лекарственные формы включают растворы, суспензии, дисперсии, эмульсии, масла и тому подобное. В другом воплощении, фармацевтические композиции вводятся внутривенно и, следовательно, готовятся в форме, пригодной для внутривенного введения. В другом воплощении, фармацевтические композиции вводятся внутриартериально и, следовательно, готовятся в форме, пригодной для внутриартериального введения. В другом воплощении, фармацевтические композиции вводятся внутримышечно и, следовательно, готовятся в форме, пригодной для внутримышечного введения.
В другом воплощении, фармацевтические композиции вводятся локально на поверхности тела и, следовательно, готовятся в форме, пригодной для местного применения. В другом воплощении, пригодные лекарственные формы для местного применения включают гели, мази, кремы, лосьоны, капли и тому подобное.
В другом воплощении, фармацевтическая композиция вводится как суппозиторий, например ректальный суппозиторий или уретральный суппозиторий. В другом воплощении, фармацевтическая композиция вводится путем подкожной имплантации пилюли. В другом воплощении, такая пилюля обеспечивает контролируемое высвобождение ПНЖК и/или уридина в течение определенного промежутка времени.
В другом воплощении, активное соединение доставляется в везикуле, например внутри липосомы.
В других воплощениях, носители или растворители, применяемые в способах настоящего изобретения, включают, но ими не ограничиваются, смолу, крахмал (например, кукурузный крахмал, пептизированный крахмал), сахар (например, лактозу, маннитол, сахарозу, декстрозу), целлюлозный материал (например, микрокристаллическую целлюлозу), акрилат (например, полиметилакрилат), карбонат кальция, оксид магния, тальк или их смеси.
В других воплощениях, фармацевтически приемлемые носители для жидких лекарственных форм представляют собой водные или неводные растворы, суспензии, эмульсии или масла. Примерами неводных растворителей являются пропиленгликоль, полиэтиленгликоль и органические сложные эфиры для инъекций, такие как этилолеат. Водные носители включают воду, алкогольно-водные растворы, эмульсии или суспензии, включая солевые и забуференные среды. Примерами масел являются масла животного, растительного или синтетического происхождения, например арахисовое масло, соевое масло, оливковое масло, подсолнечное масло, масло из печени рыб, другое морское масло или липид из молока или яиц.
В другом воплощении, парентеральные носители (для подкожной, внутривенной, внутриартериальной или внутримышечной инъекции) включают раствор хлорида натрия, декстрозу Рингера, декстрозу и хлорид натрия, лактатный раствор Рингера и нелетучие масла. Внутривенные носители включают восполнители жидкости и питательных веществ, восполнители электролитов, такие как приготовленные на основе декстрозы Рингера и тому подобное. Примерами являются стерильные жидкости, такие как вода и масла, с добавлением или без добавления сурфактанта и других фармацевтически приемлемых вспомогательных средств. В целом, вода, солевой раствор, водные растворы декстрозы и родственных сахаров, и гликоли, такие как пропиленгликоли или полиэтиленгликоль, являются предпочтительными жидкими носителями, в частности, для растворов для инъекций. Примерами масел являются масла животного, растительного или синтетического происхождения, например, арахисовое масло, соевое масло, оливковое масло, подсолнечное масло, масло из печени рыб, другое морское масло или липид из молока или яиц.
В других воплощениях, композиции дополнительно включают связующие вещества (например, гуммиарабик, кукурузный крахмал, желатин, карбомер, этилцеллюлозу, гуаровую смолу, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, повидон), дезинтегрирующие агенты (например, кукурузный крахмал, картофельный крахмал, альгиновую кислоту, двуокись кремния, кроскармелозу натрия, кросповидон, гуаровую смолу, натриевый гликолат крахмала), буферы (например, Трис-HCl, ацетат, фосфат) с различными значениями pH и ионной силы, добавки, такие как альбумин или желатин, для предотвращения абсорбции на поверхностях, детергенты (например, Tween 20, Tween 80, Pluronic F68, соли желчных кислот), ингибиторы протеаз, сурфактанты (например, лаурилсульфат натрия), усилители проницаемости, солюбилизирующие агенты (например, глицерин, полиэтиленглицерин), антиоксиданты (например, аскорбиновую кислоту, метабисульфит натрия, бутилгидроксианизол), стабилизаторы (например, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу), агенты для увеличения вязкости (например, карбомер, коллоидную двуокись кремния, этилцеллюлозу, гуаровую смолу), подстластители (например, аспартам, лимонную кислоту), консерванты (например, Тимеросал, бензиловый спирт, парабены), смазочные вещества (например, стеариновую кислоту, стеарат магния, полиэтиленгликоль, лаурилсульфат натрия), регуляторы текучести (например, коллоидную двуокись кремния), пластификаторы (например, диэтилфталат, триэтилцитрат), эмульгаторы (например, карбомер, гидроксипропилцеллюлозу, лаурилсульфат натрия), полимерные покрытия (например, полоксамеры или полоксамины), агенты, формирующие покрытия и пленки (например, этилцеллюлозу, акрилаты, полиметакрилаты) и/или вспомогательные вещества. Каждый из вышеназванных наполнителей представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
В другом воплощении, предоставляемые здесь фармацевтические композиции представляют собой композиции с контролируемым высвобождением, то есть композиции, в которых ПНЖК и/или уридин высвобождается в течение определенного промежутка времени после введения. Композиции с контролируемым или замедленным высвобождением включают лекарственные формы в липофильных депо (например, в жирных кислотах, восках, маслах). В другом воплощении, композиция представляет собой композицию для немедленного высвобождения, то есть композицию, в которой все ПНЖК и/или уридин высвобождается немедленно после введения.
В другом воплощении, фармацевтическая композиция вводится в систему для контролируемого высвобождения. Например, агент может вводиться с применением внутривенной инфузии, имплантируемого осмотического насоса, трансдермального пластыря, липосом или других способов введения. В одном воплощении, может применяться насос (смотри, Langer, supra; Sefton, CRC Crit. Ref. Biomed. Eng. 14:201 (1987); Buchwald et al. Surgery 88:507 (1980); Saudek et al. N. Engl. J. Med. 321:574 (1989). В другом воплощении, применяются полимерные материалы, например, в микросферах или в имплантате. В еще одном воплощении, система для контролируемого высвобождения помещается в непосредственной близости от терапевтической мишени, например мозга, что требует применения только части системной дозы (смотри, например, Goodson, in Medical Applications of Controlled Release, supra, vol. 2, pp.115-138 (1984); и Langer R, Science 249: 1527-1533 (1990).
В другом воплощении, композиции также включают введение активного материала внутрь или на поверхность определенных форм полимерных соединений, таких как полимолочная кислота, полигликолевая кислота, гидрогели и т.д., или в липосомы, микроэмульсии, мицеллы, однослойные или многослойные везикулы, тени эритроцитов или сферопласты. Такие композиции будут влиять на физическое состояние, растворимость, стабильность, скорость высвобождения in vivo и скорость клиренса in vivo.
В настоящее изобретение также включены определенные композиции, покрытые полимерами (например, полоксамерами или полоксаминами) и соединение, связанное с антителами против тканеспецифичных рецепторов, лигандов или антигенов, или связанное с лигандами тканеспецифических рецепторов.
Настоящее изобретение также охватывает соединения, модифицированные путем ковалентного присоединения к водорастворимым полимерам, таким как полиэтиленгликоль, сополимеры полиэтиленгликоля и полипропиленгликоля, карбоксиметилцеллюлоза, декстран, поливинилалкоголь, поливинилпирролидон или полипролин. Известно, что модифицированные соединения демонстрируют значительно более длительные времена полужизни в крови после внутривенной инъекции, чем соответствующие немодифицированные соединения (Abuchowski et al., 1981; Newmark et al., 1982; и Katre et al., 1987). Такие модификации также могут увеличивать растворимость соединений в водных растворах, устранять агрегацию, повышать физическую и химическую стабильность соединения и значительно снижать иммуногенность и реакционную способность соединения. В результате этого может быть достигнута желаемая in vivo биологическая активность за счет введения таких аддуктов соединения с полимером с меньшей частотой или в меньших дозах, чем при введении немодифицированного соединения.
Получение фармацевтических композиций, которые содержат активный компонент, например, путем смешивания, гранулирования или процесса таблетирования, хорошо известно в данной области техники. Активный терапевтический ингредиент часто смешивается с наполнителями, которые являются фармацевтически приемлемыми и совместимыми с активным ингредиентом. Для перорального введения ПНЖК и/или уридин или их физиологически допустимые производные, такие как соли, сложные эфиры, N-оксиды и тому подобное, смешиваются с обычными для этих целей добавками, такими как средства доставки, стабилизаторы или инертные растворители, и превращаются с применением обычных методов в пригодные формы для введения, такие как таблетки, покрытые таблетки, твердые или мягкие желатиновые капсулы, водные, спиртовые или масляные растворы. Для парентерального введения ПНЖК и/или уридин или их физиологически допустимые производные, такие как соли, сложные эфиры, N-оксиды и тому подобное, превращаются в растворы, суспензии или эмульсии, если это желательно, вместе с веществами, обычными и пригодными для этой цели, например, растворителями или другими веществами.
В другом воплощении, активный компонент вводится в композицию в виде нейтрализованных фармацевтически приемлемых солей. Фармацевтически приемлемые соли включают дополнительные соли кислот (образуемые со свободными аминогруппами молекулы полипептида или антитела), которые образуются с неорганическими кислотами, такими как, например, соляная или фосфорная кислоты, или такими органическими кислотами, как уксусная, щавелевая, винная, миндальная и тому подобное. Соли, образуемые со свободными карбоксильными группами, могут также являться производными неорганических оснований, таких, например, как гидроокиси натрия, калия, аммония, кальция или железа, и таких органических оснований, как изопропиламин, триметиламин, 2-этиламиноэтанол, гистидин, прокаин и тому подобное.
Каждая/каждый из вышеназванных добавок, наполнителей, лекарственных форм и способов введения представляет собой отдельное воплощение настоящего изобретения.
Экспериментальный раздел
Пример 1
Обработка клеток рс-12 омега-3 жирными кислотами увеличивает синтез фосфолипидов
Материалы и экспериментальные методы
Реагенты
14
14
С-меченый холинхлорид был получен от Perkin-Elmer (Boston, МА). ДГК, олеиновая кислота или пальмитиновая кислота были получены от Biomol, (Plymouth Meeting, PA). С-холин был получен от Amersham Biosciences Corp (Piscataway, NJ).
Культура клеток
14
Клетки PC-12 поддерживали в среде Игла, модифицированной Дульбекко (Dulbecco's modified Eagle's medium, DMEM), с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (fetal bovine serum, FBS). Для экспериментов клетки выращивали в пятикратно покрытых коллагеном чашках размером 35 миллиметров (мм). Клетки инкубировали в течение 18 часов (час) в бессывороточной среде DMEM, содержащей 28 мкМ холина +/- 5 мкМ ДГК, олеиновой кислоты или пальмитиновой кислоты. Затем клетки метили в течение 2,5 час С-холином - 0,5 микрокюри (мкКи)/мл в бессывороточной среде DMEM, содержащей 10 мкМ холина.
Количественное определение меченых фосфолипидов
2
4
4
2
4
Клетки гомогенизировали в 100 объемах ледяной деионизированной воды, используя измельчитель тканей (Polytron РТ 10-35, Kinematica AG, Switzerland); затем аликвоты объемом 1 мл смешивали с 3 мл смеси хлороформ + метанол (2:1 по объему, v/v) и энергично перемешивали на вортексе в течение 30 сек. После охлаждения на льду в течение 1 час смесь последовательно смешивали с 3 мл смеси, составленной из смеси хлороформ + метанол (2:1 по объему) и 1 мл ледяной деионизированной воды. Смесь энергично перемешивали на вортексе и выдерживали в течение ночи в холодной комнате (18 час). Органическую (нижнюю) и водную (верхнюю) фазы смесей разделяли центрифугированием (10 мин при 4°С; 1000×g). Аликвоту (2 мл) верхней фазы использовали для определения содержания ЦДФ-холина (см. ниже), и аликвоты нижней фазы объемом 0,1-0,4 мл высушивали под вакуумом для анализа фосфолипидов. Осадки аликвот нижней фазы объемом 0,1 мл были использованы для определения общего содержания фосфолипидов посредством определения фосфора. Осадки аликвот нижней фазы объемом 0,4 мл растворяли в 40 мкл метанола и анализировали методом тонкослойной хроматографии с использованием пластинок с силикагелем (silica G plates, Adsorbosil Plus-1, Alltech), и системы, состоящей из следующих компонентов - хлороформ/этанол/триэтиламин/вода (30:34:30:8) в качестве подвижной фазы. Стандарты фосфолипидов использовали для идентификации соответствующих полос в ультрафиолетовом свете после опрыскивания пластинок 0,1% раствором дифенилгексатриена в петролейном эфире. Полосы, соответствующие индивидуальным классам фосфолипидов (ФХ, ФЭ, СМ, ФС и ФИ), соскабливали с пластинок, и фосфолипиды экстрагировали 1 мл метанола; экстракт высушивали под вакуумом и измеряли содержание фосфора. Общее содержание фосфора определяли посредством сравнения данных с данными калибровочных графиков, полученных при использовании стандарта KHPO при каждом измерении. В каждую пробу добавляли 0,5 мл 4,5% HClO/27% HSO и пробирки выдерживали при 180°С в течение 3 час. После охлаждения проб до комнатной температуры добавляли 5 мл цветного реагента (разведение в отношении 10:1 растворов, содержащих 2,5 мг/мл молибдата аммония, 8,2 мг/мл ацетата натрия и 100 мг/мл аскорбиновой кислоты, соответственно) и пробирки инкубировали в течение 2 час при 37°С. Оптическую плотность измеряли спектрофотометрически при 820 нм. Массу фосфолипидов определяли, умножая содержание фосфора на 25.
Статистический анализ
Данные анализировались с использованием одностороннего анализа ANOVA (анализ различий) с последующим t-тестом Стьюдента.
Результаты
14
Для определения влияния омега-3 жирных кислот на синтез фосфолипидов клетки PC-12 инкубировали с C-меченым холином после 18-часовой преинкубации в присутствии или в отсутствие ДГК. Затем измеряли включение метки в фосфолипиды. Олеиновую кислоту и пальмитиновую кислоту, которые не являются омега-3 жирными кислотами, использовали в качестве отрицательных контролей. Синтез фосфатидилхолина (ФХ) достоверно увеличивался в результате преинкубации с ДГК, но не с олеиновой кислотой или с пальмитиновой кислотой, что подтверждалось увеличением включения метки в ФХ (фигура 1). Таким образом, обработка омега-3 жирными кислотами увеличивает клеточный синтез фосфолипидов.
Пример 2
Омега-3 жирные кислоты увеличивают синтез ряда фосфолипидов дозозависимым образом
14
Для дополнительной характеристики стимуляции синтеза фосфолипидов омега-3 жирными кислотами клетки PC-12 были предварительно обработаны разными дозами ДГК и проинкубированы с меченым холином, как описано в примере 1, затем было измерено включение С-метки в фосфолипиды. Предварительная обработка ДГК приводила к увеличению синтеза фосфолипидов (фигура 2). Увеличение синтеза было дозозависимым. Таким образом, омега-3 жирные кислоты стимулируют синтез фосфолипидов в дозозависимой манере.
Пример 3
Обработка клеток shsy-5y омега-6 жирными кислотами увеличивает синтез фосфолипидов
Материалы и экспериментальные методы
Культура клеток
Клетки SHSY-5Y выращивали почти до конфлюэнтности в среде DMEM с добавлением 10% FBS в 35-мм чашках. Клетки инкубировали в течение 18 час в бессывороточной среде DMEM с добавлением 1% FBS, содержащей 30 мкМ холина +/- 10 мкМ ДГК, арахидоновой кислоты, или пальмитиновой кислоты. Затем клетки метили, и количество меченых фосфолипидов определяли, как описано в примере 1.
Получение комплекса ДГК-БСА
ДГК растворяли в этаноле до конечной концентрации 100 мкМ и замораживали аликвотами по 10 мкл при -80°С. Для каждого эксперимента одну аликвоту разводили этанолом до концентрации 10 мкМ; объем, дающий желаемый конечный раствор в среде инкубации, смешивали с равным объемом раствора БСА (1 г/мл).
Результаты
Эффект омега-6 жирных кислот на синтез фосфолипидов затем был проверен на клетках SHSY-5Y - клеточной линии нейробластомы человека. В этом случае синтез фосфолипидов увеличивался при использовании арахидоновой кислоты - омега-6 жирной кислоты, но не ДГК или пальмитиновой кислоты (фигура 3А).
Пример 4
Омега-6 жирные кислоты увеличивают синтез ряда фосфолипидов дозозависимым образом
Влияние арахидоновой кислоты на синтез фосфолипидов в клетках SHSY-5Y было дополнительно охарактеризовано, как описано для омега-3 жирных кислот и клеток PC-12 в примере 2. Арахидоновая кислота увеличивала общий синтез фосфолипидов, ФХ и фосфатидилэтаноламина в используемом диапазоне дозировок дозозависимым образом, как показано для ДГК (фигура 3В). Таким образом, омега-6 жирные кислоты стимулируют синтез ряда фосфолипидов дозозависимым образом.
Пример 5
Введение пнжк увеличивает уровни фосфолипидов в мозге, и добавление уридина приводит к дополнительному синергическому увеличению
Материалы и экспериментальные методы
Диеты
+
Стандартная контрольная диета (Таблица 4) состояла из Teklad Global 16% белковой диеты грызунов (Harlan Teklad, Madison, WI), которая содержала 0,1% холинхлорида (СС), что соответствует суточной дозе 50 мг/кг/день. УМФ добавляли к контрольной диете, также разработанной фирмой Harlan Teklad, в количестве 0,5% УМФ·2Та по весу, что соответствует 240 мг/кг/день УМФ. ДГК вводили в количестве 300 мг/кг/день в объеме 200 мкл/день в виде раствора в 5% гуммиарабике, в то время как группам, не получающим ДГК, вводили только вещество-носитель (раствор 5% гуммиарабика без добавок). ДГК был предоставлен фирмой Nu-Chek Prep (Elysian, MN), a УМФ - фирмой Numico (Wagenigen, NL). Ни одна из групп не демонстрировала достоверных изменений в весе тела в течение эксперимента.
Таблица 4.
Стандартная контрольная диета.
Экспресс-анализ (%)
Белок
16,7%
Углевод
60,9%
Жир, волокна, зола
13,7%
Холин
0,1%
Жирные кислоты (г/кг)
Насыщенные
7,34
Ненасыщенные
С18:1n-9 олеиновая кислота
8,96
С18:2n-6 линолевая кислота
23,12
С18:3n-3 линоленовая кислота
1,53
Получение мозга
Анестезию песчанкам проводили, используя кетамин и ксилазин (80 и 10 мг/кг веса тела, внутрибрюшинно), животных убивали, погружая голову в жидкий азот на 2 мин и затем обезглавливали. Мозги немедленно и быстро (30 сек) извлекали, используя кусачки для костей, и хранили при -80°С.
Измерение содержания фосфолипидов в мозге
Замороженные полушария мозга взвешивали и гомогенизировали в 100 объемах ледяной деионизированной воды, используя измельчитель тканей (Polytron PT 10-35, Kinematica AG, Switzerland), затем анализировали, как описано в примере 1.
Определение содержания ДНК и белка
Белок в образцах гомогената целого мозга измеряли, используя в качестве регента на белок бицинхониновую кислоту (Perkin Elmer, Norwalk, CT, USA). Содержание ДНК определяли посредством измерения эмиссии образцов при 460 нм на флуориметре в присутствии бис-бензимидизола, флуоресцентного красителя, известного как Hoechst H 33258 (American Hoechst Corporation), который имеет максимум возбуждения при 356 нм и максимум эмиссии при 458 нм, когда связывается с ДНК.
Результаты
Самцы песчанок весом 80-100 г были разделены на 4 группы по 8 песчанок, животным вводили добавки, представленные в таблице 1:
Таблица 1.
Исследуемые группы.
Группа
Добавка
Количество/способ
1
Контрольная диета + носитель (5% гуммиарабик)
2
Na-УМФ + носитель (5% гуммиарабик)
Na-УМФ 0,5% в виде еды.
3
ДГК
300 мг/кг в день через желудочный зонд
4
ДГК + Na-УМФ
Как указано выше
Через 4 недели животные были убиты и 1 полушарие мозга, без мозжечка и ствола мозга, было использовано для определения общего содержания фосфолипидов и содержания ФХ, фосфатидилэтаноламина (ФЭ), сфингомиелина (СМ), фосфатидилинозитола (ФИ) и фосфатидилсерина (ФС). Омега-3 жирные кислоты (ДГК) увеличивали общие уровни фосфолипидов до уровней, достоверно более высоких, чем у контрольной группы (фигура 4 и таблицы 2 и 3). Комбинация ДГК с УМФ приводила к дополнительному увеличению (26%), которое было синергическим (то есть увеличение содержания фосфолипидов в этом случае было больше, чем сумма увеличений, наблюдаемых в группах, получавших ДГК (12%) или УМФ (5%)). Похожие результаты наблюдали для каждого индивидуального фосфолипида (таблицы 2 и 3). Статистически достоверные данные получали в любом из двух случаев - когда содержание фосфолипидов было нормализовано на содержание белка (фигура 4А и таблица 2) или ДНК (фигура 4В и таблица 3).
Таблица 2. Влияние ДГК, УМФ, или использования обоих соединений на уровни фосфолипидов мозга, нормализованные по уровням белка. Данные представлены в виде средних значений +/- стандартная ошибка среднего значения (SEM). Статистический анализ проводили с использованием двустороннего анализа ANOVA и теста Tukey. ”*” означает, что Р<0,05; ”**” - Р<0,01; ”***” - p<0,001 при сравнении со значениями для контрольной группы.
Обработка/Липид
Общее содержание фосфолипидов
ФХ
ФЭ
CM
ФС
ФИ
Контроль
351±8
152±6
64±4
45±2
33±3
21±2
УМФ
367±22
171±8*
84±8*
52±5
35±3
31±2**
ДГК
392±20
185±12*
78±5*
56±3*
39±3
32±2**
УМФ+ДГК
442±24***
220±12***
113±6***
73±4***
46±6***
36±6***
Таблица 3. Влияние ДГК, УМФ, или обоих соединений на уровни фосфолипидов мозга, нормализованные по уровням ДНК. Проведение статистического анализа и представление полученных данных, как описано в подписи к таблице 2.
Обработка/Липид
Общее содержание фосфолипидов
ФХ
ФЭ
CM
ФС
ФИ
Контроль
885±45
332±12
176±13
112±5
79±8
54±5
УМФ
878±18
368±10*
195±9
111±4
86±7
78±6**
ДГК
909±77
366±13*
196±18
126±8
98±7
84±13**
УМФ+ДГК
1058±25***
462±26***
261±30***
169±11***
110±5***
85±10***
Эти данные подтверждают результаты приведенных выше примеров, показывая, что как омега-3 жирные кислоты, так и омега-6 жирные кислоты увеличивают синтез фосфолипидов мозга и уровни фосфолипидов мозга, как общие уровни, так и уровни индивидуальных фосфолипидов. Более того, эти данные показывают, что комбинация ПНЖК с уридином приводит к дополнительным синергическим увеличениям. Кроме того, эти данные показывают, что стимуляция синтеза под действием ПНЖК является общим феноменом и не ограничивается определенным фосфолипидом или экспериментальной моделью.
Пропорциональное увеличение уровней 4 структурных фосфолипидов, которые составляют основную массу клеточных мембран в мозге (4 фосфатида: ФХ, ФЭ, ФС и сфингомиелин), было примерно одинаковым, и уровни каждого из этих четырех соединений возрастали примерно на 20%. Таким образом, пропорциональные соотношения 4 структурных фосфолипидов в мембранах сохранялись. В результате этого, масса мембраны увеличивалась без нарушения нормальной структуры и функции мембраны. Эти данные подтверждают данные предыдущих примеров, обеспечивая дополнительное доказательство того, что композиции настоящего изобретения улучшают и усиливают деятельность мозга.
Пример 6
Введение песчанкам омега-3 жирных кислот снижает уровни цдф-холина в мозге, но увеличивает уровни фосфолипидов в мозге
Материалы и экспериментальные методы
Определение ЦДФ-холина
3
4
2
2
Аликвоты (2 мл) верхней (водной) фазы высушивали под вакуумом, повторно растворяли и вводили в прибор для HPLC. Высушенные пробы растворяли в 100-200 мкл воды и анализировали методом HPLC на анионообменной колонке (Alltech Hypersil APS-2,5 мм, 250×4,6 мм). ЦДФ-холин элюировали, используя линейный градиент буферов А (НРO, 1,75 мМ, pH 2,9) и В (NaHPO, 500 мМ, pH 4,5) от 0 до 100% в течение 30 мин. При использовании этой системы растворителей ЦДФ-холин хорошо отделялся от элюирующихся рядом с ним соединений, таких как УМФ, в изократическом режиме в течение 40 мин. Время удерживания для ЦДФ-холина составило 9,5 мин. Колонку промывали буфером В в конце каждого эксперимента и каждые несколько дней для удаления прочно связавшихся нуклеотидов. Пики индивидуальных нуклеотидов детектировали по поглощению в ультрафиолетовой области при 280 нм и идентифицировали посредством сравнения с положением аутентичных стандартов, а также путем добавления стандартов нуклеотидов в анализируемый образец.
Результаты
Для определения влияния введения ПНЖК на уровни ЦДФ-холина, уровни ЦДФ-холина в мозге были измерены у животных из предыдущего примера. Введение ДГК и/или УМФ снижало уровни ЦДФ-холина (фигура 5А) и уровни ЦДФ-этаноламина (фигура 5 В). ДГК понижал уровни ЦДФ-холина на 26% (по сравнению с уровнями у животных, получавших только контрольную диету и вещество-носитель ДГК), и у песчанок, получавших УМФ, на 21% (по сравнению с уровнями у животных, получавших УМФ-содержащую диету и вещество-носитель ДГК) (в обоих случаях Р<0,05). Двусторонний анализ ANOVA выявил достоверное влияние ДГК [F(1,28)=31,7; Р<0,001].
В другом опыте, введение УМФ в стандартную диету без сопутствующего введения ДГК достоверно увеличивало уровни в мозге ФХ, ФЭ и ФИ на 13%, 29% и 48%, соответственно (таблица 5А). Введение ДГК без УМФ также достоверно увеличивало уровни в мозге этих фосфатидов (на 22%, 20% и 52%, соответственно), а также сфингомиелина (на 24%). УМФ+ДГК увеличивали уровни всех фосфолипидов больше, чем в сумме увеличивали УМФ или ДГК, используемые по отдельности.
Далее была исследована временная зависимость этого увеличения. После 1 недели обработки УМФ не обеспечивал достоверного эффекта, тогда как УМФ+ДГК вызывали небольшое, но достоверное увеличение содержания в мозге ФХ (21%) и ФС (38%). Обработка УМФ+ДГК в течение 3 недель вызывала достоверное увеличение (21-48%) всех 5 фосфолипидов; один УМФ вызывал меньшее, но, тем не менее, достоверное увеличение (таблица 5В).
Таблица 5.
Влияние УМФ и/или ПНЖК на уровни фосфолипидов мозга.
Обработка (группы)
Общее содержание фосфолипидов (нмоль/мг белка)
ФХ (нмоль/мг белка)
ФЭ (нмоль/мг белка)
CM (нмоль/мг белка)
ФС (нмоль/мг белка)
ФИ (нмоль/мг белка)
А
Контрольная диета + носитель
351±8
152±6
65±4
45±2
33±3
21±2
Диета с УМФ + носитель
367±22
171±8*
84±8*
52±5
35±3
31±2**
Контрольная диета + ДГК
392±20
185±12*
78±5*
56±3*
39±3
32±2**
Диета с УМФ+ДГК
442±24***
220±12***
113±6***
73±4***
46±6***
36±3***
В
Контрольная диета + носитель
403±23
155±8
69±3
47±3
34±1
20±2
Одна неделя
УМФ + носитель
390±21
154±6
63±4
49±3
39±1
20±4
УМФ+ДГК
435±15
188±8*
79±6
57±6
47±1***
23±1
Три недели
УМФ + носитель
479±5*
199±5***
87±4*
70±4*
42±2*
25±1
УМФ+ДГК
502±12***
217±5***
102±4***
73±5**
41±1*
27±1*
Таким образом, в этих условиях, эффект введения ПНЖК на фосфолипиды мозга реализуется через увеличение превращения ЦДФ-холина в ФХ и родственные ему фосфатиды.
Пример 7
Введение песчанкам омега-3 жирных кислот и/или уридина увеличивает уровни синаптических белков
Материалы и экспериментальные методы
Измерение уровня синоптических белков
Синаптические белки определяли методом Слот-блот и методом Вестерн-блоттинга. Для Вестерн-блоттинга аликвоты гомогенатов мозга смешивали с 2×KFL буфером для нанесения и кипятили в течение 5 мин перед проведением гель-электрофореза. На гель наносили равные количества белка и разделение проводили, используя полиакриламидный гель с додецилсульфатом натрия SDS-PAGE (4-20%; Bio-Rad, Hercules, CA, USA). Затем белки переносили на мембраны PVDF (Immobilon-P, Millipore, Billerica, MA, USA). Оставшиеся свободными центры связывания блокировали, используя 4% обезжиренное сухое молоко (Vamation, Glendale, CA, USA) в течение 30 мин в растворе Трис-буфера, содержащем Твин (Tris-buffered saline-Tween, TBST). 2×KFL буфер для нанесения готовили, смешивая 3,76 мл 1М TRIS, pH 6.8; 6 мл 20% додецилсульфата натрия; 6 мл глицерина; 1,5 мл меркаптоэтанола; 2 мл 1% краски бромфенолового синего; и 10,74 мл воды.
Для Слот-блоттинга два набора аликвот (18-21 мкл; содержащих 20 мкг белка) гомогенатов мозга в деионизованной воде переносили прямо на поливинилидендифторидные мембраны (PVDF, Immobilon-P, Millipore, Billerica, MA, USA) с помощью вакуумной фильтрации, используя прибор для слот-блот микрофильтрации [Minifold II Slot Blot System (SCR 072/0); Schleicher & Schuell, Inc., Keene, NH, USA]. Оставшиеся свободными центры связывания блокировали, используя 4% обезжиренное сухое молоко (Vamation, Glendale, CA, USA) в TBST в течение 30 мин. Мембраны (после слот-блоттинга и Вестерн-блоттина) затем отмывали 5 раз в буфере TBST и инкубировали в растворе TBST, содержащем нужные антитела (мышиные анти-NF-70, кроличьи анти-NF-M, мышиные анти-PSD-95 и мышиные анти-синапсин-1). После инкубации в течение ночи и пяти промывок в буфере TBST блоты инкубировали в течение 1 час с подходящими вторичными антителами, связанными с пероксидазой. Затем блоты отмывали пять раз в буфере TBST, и комплексы белок-антитело детектировали и визуализировали, используя систему ECL (Amersham Biosciences, Piscataway, NJ, USA) и пленку Kodak X-AR. Пленки отцифровывали, используя сканнер Supervista S-12 с адаптером для просвечивания (UMAX Technologies, Freemont, CA, USA). Иммуно-реактивные полосы сравнивали по плотности с использованием программы Public Domain NIH Image program. Площади под кривой поглощения нормализовали в процентах от площади, полученной для контрольных групп на том же самом блоте. Уровни белков выражали в процентах от уровней тех же белков у контрольных животных.
Результаты
Уровни 4 синаптических белков мозга были измерены у животных (n=8), получавших как УМФ, так и ДГК в количествах, указанных в примере 5. После 3 или 4 недель обработки количество нейрофибриллярных белков аксонов NF-70 и NF-M возрастало на 43% (Р<0,01) или 102% (Р<0,001), и на 19% (Р<0,05) или 48% (Р<0,01), соответственно (фигура 6). Уровни белка постсинаптических плотных участков PSD-95 и везикулярного белка Синапсина-1 возрастали на 38% и 41% после 3 недель (в обоих случаях Р<0,001) и на 35% (Р<0,01) или 25% (Р<0,05) после 1 недели (Фигура 7).
Эти данные дают дополнительное доказательство того, что введение ПНЖК и уридина увеличивает количество синаптических мембран. Эти увеличения были подобны увеличениям, наблюдаемым для уровней фосфолипидов, что говорит о росте числа синапсов в мозге.
Пример 8
Дгк, эпк и арахидоновая кислота (аа) увеличивают уровни фосфолипидов в мозге
Материалы и экспериментальные методы
Взрослые песчанки получали стандартную контрольную диету (таблица 4) с добавлением или без добавления 0,5% УМФ и/или 300 мг/кг/день ДГК, ЭПК или АА. Группам, не получавшим ДГК, вводили только носитель (5% раствор гуммиарабика).
Результаты
Песчанкам вводили УМФ и/или ПНЖК в течение 3 недель, после чего умерщвляли и измеряли уровни разных фосфолипидов в мозге. Как показано в таблице 6, ДГК, ЭПК и АА все увеличивали уровни фосфолипидов.
Таблица 6.
Уровни фосфолипидов мозга после введения ПНЖК и/или уридина.
Обработка
Общее содержание фосфолипидов
ФХ
ФЭ
CM
ФС
ФИ
Контроль + носитель
333±9
113±6
63±4
19±1
25±2
15±1
УМФ + носитель
332±5
131±2
70±1
22±1
29±1
16±1
Контроль + ДГК
344±16
133±6
77±2
24±2
34±3
18±2
Контроль + ЭПК
347±19
125±8
76±4
26±3
31±1
22±2
УМФ + ДГК
374±17
147±6
88±3
28±3
39±2
22±2
УМФ + ЭПК
407±22
148±3
91±4
30±1
41±2
26±2
УМФ + АА
389±28
127±8
88±10
25±2
31±3
22±2
Пример 9
Омега-3 жирные кислоты и уридин увеличивают число дендритных шипиков в мозге взрослых и развивающихся песчанок и крыс
Обычные взрослые песчанки получали контрольную диету или диету, обогащенную УМФ (240 мг уридина/кг) и ДГК (300 мг/кг, через желудочный зонд), ежедневно в течение 2 недель. Животных декапитировали, после чего фиксированные срезы гиппокампа окрашивали карбоцианиновым красителем мембран DiI(C18)3 (”DiI,” Molecular Probes, Eugene, OR) в конце обработки. Снимки нейронов гиппокампа были получены с использованием двухфотонной микроскопии. У животных, получавших ДГК+УМФ, плотность дендритных шипиков (число отростков на единицу длины дендрита) достоверно увеличивалось в пирамидальных нейронах СА1 гиппокампа (увеличение 27%, р=0,001 по сравнению с контрольной группой; фигура 8).
В другом опыте беременным крысам в течение 10 дней до родов и 20 дней вскармливания давали ad libitum (без ограничений) либо холин-содержащую контрольную диету, либо такую же диету, обогащенную уридином в виде УМФ; половина каждой группы также ежедневно получала ДГК или его растворитель через желудочный зонд. Затем детенышей умерщвляли, и срезы мозга исследовали для определения количества дендритных шипиков в гиппокампе. Сами по себе и УМФ, и ДГК увеличивали количество дендритных шипиков, тогда как их комбинация обеспечивала дополнительное увеличение их числа (таблица 7).
Таблица 7.
Увеличение числа дендритных шипиков у развивающихся животных в ответ на введение УМФ и ДГК.
Обработка
Число шипиков
Превышение над контролем (%)
Контроль
53
-
УМФ
68
28%
ДГК
70
32%
УМФ+ДГК
75
42%
Пример 10
Дгк и умф улучшают способность к обучению
Материалы и экспериментальные методы
Животных обеспечивали кормом и водой ad libitum до дня тестирования, после чего песчанок держали сначала голодными в течение 17 часов в течение ночи и затем им давали корм с 11 утра до 6 вечера. Песчанки получали обогащенный УМФ корм и/или 300 мг/кг ДГК, начиная с возраста 3 месяцев (n=8 в каждой группе) в течение 4 недель до начала тренировок на поведение и вплоть до конца периода тренировок. Сначала в течение 4 дней животные привыкали к условиям проведения теста. В течение последующих 4 дней они привыкали к лабиринту, в отсеки которого помещались кусочки корма, и животным давали 3 мин на поиск корма. Песчанкам давали 1 попытку в день, причем между попытками все поверхности обрабатывали 10% этанолом. Тренировка заключалась в том, что кусочки корма помещались в дальний конец лабиринта всегда в одни и те же 2 отсека во всех попытках. Песчанку помещали в центр лабиринта и давали 2 мин для того, чтобы найти корм. Ошибка рабочей памяти происходила, если песчанка повторно входила в отсек, который содержал кусочек корма, и который она уже посещала во время этой попытки. Ошибка долговременной памяти происходила, если песчанка входила в отсек, в котором никогда не было корма во время предыдущих попыток. Регистрировался процент найденных кусочков корма.
Результаты
Для определения влияния уридина и/или ДГК на обучаемость животным давали уридин- и/или ДГК-содержащую диету и затем проводили тест на память. ДГК и УМФ увеличивали процент животных, способных выполнить тест (фигура 9).
Пример 11
Омега-3 жирные кислоты увеличивают синтез фосфолипидов в нейронах в переживающей культуре
Материалы и экспериментальные методы
14
14
Клетки гиппокампа крысы культивировали в течение 3 недель в среде Neutrobasal plus B27, до достижения полного созревания. В день эксперимента клетки инкубировали в среде DMEM + холин, с добавлением или без добавления ДГК. Затем добавляли С-холин, и клетки инкубировали еще в течение 2 час, далее новообразованный ФХ, меченный C, экстрагировали и определяли его количество, как описано в примере 1.
Результаты
Для определения эффекта ДГК на фосфолипиды в нейронах в переживающей культуре, нейроны предварительно обрабатывали смесью ДГК+холин. ДГК увеличивал синтез фосфолипидов более чем в 2 раза по сравнению с клетками, предварительно обработанными одним холином ("контроль") (фигура 10; Р=0,04). Эти данные подтверждают, что ДГК увеличивает уровни фосфолипидов в клетках мозга и нервных клетках.