СПОСОБЫ И КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ТРАНСПЛАНТАЦИИ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК

1.     Способ трансплантации стволовых клеток у нуждающегося в этом субъекта, предусматривающий:
(а) наращивание гемопоэтических стволовых клеток или клеток-предшественников (HSPC) путем контактирования HSPC с эндотелиальными клетками (EC) с исходным отношением EC/HSPC в течение первого периода времени в условиях, позволяющих наращивать HSPC, для получения нарощенной клеточной популяции, содержащей HSPC и EC в нарощенном соотношении HSPC/EC; а также
(b) трансфузию нарощенной клеточной популяции, полученной на стадии (а), субъекту;
причем поддерживается непрерывное взаимодействие между HSPC и EC на протяжении всей стадии наращивания и трансфузии.
2.     Способ по п. 1, при котором HSPC представляют собой гемопоэтические стволовые клетки.
3.     Способ по п. 1, при котором HSPC являются аллогенными по отношению к субъекту.
4.     Способ по п. 3, при котором HSPC представляют собой HSPC пуповинной крови.
5.     Способ по п. 1, при котором HSPC являются аутологичными по отношению к субъекту.
6.     Способ по п. 5, при котором HSPC представляют собой генетически модифицированные HSPC в стабильном состоянии, полученные из костного мозга.
7.     Способ по п. 1, при котором EC представляют собой сосудистые EC.
8.     Способ по п. 1, при котором EC митотически инактивируют перед наращиванием.
9.     Способ по п. 1, при котором EC представляют собой E4ORF1+ сконструированные EC.
10.     Способ по п. 1, при котором EC представляют собой E4ORF1+ ETV2+ сконструированные EC.
11.     Способ по п. 10, при котором EC представляют собой также E4ORF6+.
12.     Способ по п. 10, при котором EC содержат рекомбинантную молекулу нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид ETV2.
13.     Способ по п. 10, при котором EC содержат рекомбинантную молекулу нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид E4ORF1 аденовируса.
14.     Способ по п. 11, при котором EC содержат рекомбинантную молекулу нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид E4ORF6 аденовируса.
15.     Способ по любому из пп. 12-14, при котором молекула нуклеиновой кислоты находится в форме плазмидного вектора.
16.     Способ по любому из пп. 12-14, при котором молекула нуклеиновой кислоты интегрирована в геномную ДНК сконструированных ЕС.
17.     Способ по любому из пп. 12-16, при котором ЕС представляют собой дифференцированные ЕС.
18.     Способ по любому из пп. 12-16, при котором EC представляют собой взрослые EC.
19.     Способ по любому из пп. 12-16, при котором EC не представляют собой эмбриональные EC.
20.     Способ по любому из пп. 12-16, при котором EC представляют собой человеческие EC.
21.     Способ по любому из пп. 12-16, при котором EC представляют собой первичные EC.
22.     Способ по любому из пп. 12-16, при котором EC представляют собой EC пупочной вены человека (HUVEC).
23.     Способ по п. 1, при котором начальное соотношение EC/HSPC составляет по меньшей мере приблизительно 200:1.
24.     Способ по п. 1, при котором первый период времени составляет от приблизительно 1 дня до приблизительно 24 дней.
6
8
25.     Способ по п. 1, при котором нарощенная клеточная популяция содержит приблизительно от 1,0 × 10 до приблизительно 1,0 × 10 HSPC/кг массы субъекта.
26.     Способ по п. 1, при котором нарощенное соотношение HSPC/EC составляет от приблизительно 10:1 до приблизительно 1:10.
27.     Способ по п. 1, при котором непрерывное взаимодействие между HSPC и EC предусматривает непрерывный контакт между HSPC и EC во время стадии наращивания и непрерывную близость HSPC и EC во время объединенной стадии наращивания и трансфузии.
28.     Способ по п. 1, при котором количество тромбоцитов в циркулирующей крови субъекта составляет по меньшей мере приблизительно 20000/мкл через приблизительно от 15 дней до приблизительно 35 дней после трансфузии субъекту нарощенной клеточной популяции.
29 .    Способ по п. 1, при котором абсолютное количество нейтрофилов в циркулирующей крови субъекта составляет по меньшей мере приблизительно 100 мкМ через приблизительно от 5 дней до приблизительно 20 дней после трансфузии субъекту нарощенной клеточной популяции.
30.     Способ по п. 1, при котором абсолютное количество нейтрофилов в циркулирующей крови субъекта составляет по меньшей мере приблизительно 500 мкл через приблизительно от 10 дней до приблизительно 25 дней после трансфузии субъекту нарощенной клеточной популяции.
31.     Способ по п. 1, при котором абсолютное количество нейтрофилов в циркулирующей крови субъекта составляет по меньшей мере приблизительно 500 мкл приблизительно через 1000 дней после трансфузии субъекту нарощенной клеточной популяции.
32.     Способ по п. 1, при котором субъект характеризуется дефицитом гемопоэза, вызванным миелоаблативным лечением, или нарушением, выбранным из гематологического заболевания, нарушения, которое требует трансплантации гемопоэтических стволовых клеток костного мозга, инфекционного иммунодефицита, влияющего на Т-клетки инфекционного заболевания, ВИЧ, генетического иммунодефицита, тяжелого комбинированного иммунодефицита, поражающего эритроциты генетического заболевания, анемии и анемии Фанкони.
33.     Способ по п. 1, при котором субъект представляет собой человека.
34.     Содержащая HSPC и EC композиция для применения в трансплантации стволовых клеток у нуждающегося в этом субъекта, причем трансплантация стволовых клеток предусматривает способ по п. 1.
35.     Композиция по п. 34, в которой HSPC представляют собой гемопоэтические стволовые клетки.
36.     Композиция по п. 34 или 35, в которой HSPC являются аллогенными по отношению к субъекту.
37.     Композиция по п. 36, в которой HSPC представляют собой HSPC пуповинной крови.
38.     Композиция по п. 34 или 35, в которой HSPC являются аутологичными по отношению к субъекту.
39     Композиция по п. 38, в которой HSPC представляют собой генетически модифицированные HSPC в стабильном состоянии, полученные из костного мозга.
40.     Композиция по п. 34, в которой EC представляют собой сосудистые EC.
41.     Композиция по п. 34, в которой EC митотически инактивированы до наращивания.
42.     Композиция по п. 34, в которой EC представляют собой E4ORF1+ сконструированные EC.
43.     Композиция по п. 34, в которой EC представляют собой E4ORF1+ ETV2+ сконструированные EC.
44.     Композиция по п. 43, в которой EC представляют собой также E4ORF6+.
45.     Композиция по п. 43, в которой EC содержат рекомбинантную молекулу нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид ETV2.
46     Композиция по п. 43, в которой EC содержат рекомбинантную молекулу нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид E4ORF1 аденовируса.
47.     Композиция по п. 44, в которой EC содержат рекомбинантную молекулу нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид E4ORF6 аденовируса.
48.     Композиция по п. 45, в которой молекула нуклеиновой кислоты находится в форме плазмидного вектора.
49.     Композиция по п. 45, в которой молекула нуклеиновой кислоты интегрирована в геномную ДНК сконструированных ЕС.
50.     Композиция по п. 45, в которой ЕС представляют собой дифференцированные ЕС.
51.     Композиция по п. 45, в которой EC представляют собой взрослые EC.
52.     Композиция по п. 45, в которой EC не представляют собой эмбриональные EC.
53.     Композиция по п. 45, в которой EC представляют собой человеческие EC.
54.     Композиция по п. 45, в которой EC представляют собой первичные EC.
55.     Композиция по п. 45, в которой EC представляют собой EC пупочной вены человека (HUVEC).
56.     Композиция по п. 34, в которой исходное соотношение EC/HSPC составляет по меньшей мере приблизительно 200:1.
57.     Композиция по п. 34, в которой первый период времени составляет от приблизительно 1 дня до приблизительно 24 дней.
6
8
58.     Композиция по п. 34, в которой нарощенная клеточная популяция содержит приблизительно от 1,0 × 10 до приблизительно 1,0 × 10 клеток HSPC/кг массы субъекта.
59.     Композиция по п. 34, в которой нарощенное соотношение HSPC/EC составляет от приблизительно 10:1 до приблизительно 1:10.
60.     Композиция по п. 34, в которой непрерывное взаимодействие между HSPC и EC предусматривает непрерывный контакт между HSPC и EC во время стадии наращивания и непрерывную близость HSPC и EC во время объединенных стадий наращивания и трансфузии.
61.     Композиция по п. 34, в которой количество тромбоцитов в циркулирующей крови субъекта составляет по меньшей мере приблизительно 20000/мкл через приблизительно от 15 дней до 35 дней после трансфузии субъекту нарощенной клеточной популяции.
62.     Композиция по п. 34, в которой абсолютное количество нейтрофилов в циркулирующей крови субъекта составляет по меньшей мере приблизительно 100 мкМ через приблизительно от 5 дней до приблизительно 20 дней после трансфузии субъекту нарощенной клеточной популяции.
63.     Композиция по п. 34, в которой абсолютное количество нейтрофилов в циркулирующей крови субъекта составляет по меньшей мере приблизительно 500 мкл через приблизительно от 10 дней до приблизительно 25 дней после трансфузии субъекту нарощенной клеточной популяции.
64.     Композиция по п. 34, в которой абсолютное количество нейтрофилов в циркулирующей крови субъекта составляет по меньшей мере приблизительно 500 мкМ приблизительно через 1000 дней после трансфузии субъекту нарощенной клеточной популяции.
65.     Композиция по п. 34, в которой субъект характеризуется дефицитом гемопоэза, вызванного миелоаблативным лечением, или нарушением, выбранным из гематологического заболевания, нарушения, которое требует трансплантации гемопоэтических трансплантатов костного мозга, инфекционного иммунодефицита, влияющего на Т-клетки инфекционного заболевания, ВИЧ, генетического иммунодефицита, тяжелого комбинированного иммунодефицита, поражающего эритроциты генетического заболевания, анемии и анемии Фанкони.
66.     Композиция по п. 34, в которой субъект представляет собой человека.