СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ РАНОЗАЖИВЛЕНИЯ
METHOD FOR MORE EFFECTIVE WOUND-HEALING

Изобретение относится к способам повышения эффективности раноза-живления, повышения прочности рубца и уменьшения признаков воспаления раны. Оно может найти применение при лечении инфицированных ран и ожогов.
Каждый десятый житель России ежегодно получает ранения различной степени тяжести, поэтому лечение и уход за ранами различной этиологии продолжает оставаться актуальной задачей современной медицины [Федосов П.А. Разработка и изучение ранозаживляющих свойств геля, содержащего хитозан: дис… канд. фарм. наук / П.А.Федосов; Воронеж, гос. ун-т., каф. фармакологии. - Воронеж, 2017. - С. 172].
После хирургической обработки используют трицилин для припудривания ран, гидракарбонат натрия в смеси с йодом - для дренирования ран и гнойно-некротических полостей. Если рана осложнена гнойной или анаэробной инфекцией, применяют хлорид кальция для дренирования гноящихся ран; при вялых, отечных, кровоточивых грануляциях - перманганат калия для орошения ран и вскрытых анаэробных очагов 2%-ный раствор хлорамина для длительного орошения полости раны.
Так же применяют коллагеновые губки - перспективный материал в силу своей структурной биологической совместимости с соединительной тканью живого организма. Имея рад положительных свойств, коллагеновые препараты образуют проточные комплексы с лекарственными веществами и стимулируют регенеративно-воспалительные процессы. Все вышеприведенные фармакологические средства однокомпонентные и имеют ограниченное действие на процессы заживления ран [Коломиец Ю.В. Средства для лечения ран у животных / Ю.В. Коломиец // Достижения науки и техники АПК. - 2008. - №9. - С. 42-43].
Применяют также антисептики - диоксидин, мирамистин; мази на полиэтиленгликолевой основе, современные биологически активные перевязонные средства, ферментные препараты [Блатун Л.А. Местное медикаментозное лечение ран / Л.А. Блатун // Хирургия. - 2011. - №4. - С.51-59].
При лечении очагов инфекции кожи и мягких тканей различной локализации и генеза применяется новый комбинированный препарат Банеоцин. Он включает 2 бактерицидных компонента - бацитрацина (полипептидный антибиотик, ингибирующий синтез клеточной оболочки бактерий) и неомицина (аминогликозид, ингибирующий синтез белков). Бацитрацин затрудняет дефосфорилирование С55-изопренил-пирофосфатазы, молекулы важнейшего компонента синтеза пептидогликанов бактериальной клетки. В монотерапии активен по отношению к стафилококкам. Бацитрацин повышает проницаемость стенки бактерии для неомицина, что приводит к увеличению внутриклеточной концентрации последнего. Вследствие различия в точке приложения антибактериального действия бацитрацина и неомицина их комбинация преодолевает резистентность отдельных штаммов стафилококков. Пара препарата проявляют синергизм по отношению ко многим возбудителям гнойных процессов [Блатун Л.А. Банеоцин - перспективы использования в комплексном хирургическом лечении гнойно-некротических поражений нижних конечностей у больных с синдромом диабетической стопы / Л.А. Блатун // Журн. им. проф. Б.М. Костюченко. Раны и раневые инфекции. - 2015. - №3. - С. 36-45].
Со временем многие лекарственные средства утрачивают свою эффективность, особенно это касается лекарственных препаратов, содержащих антибактериальные компоненты, вследствие развития антибиотикорезистентности. Вследствие этого возникла необходимость разработки новых ранозаживляющих препаратов предпочтительно природного происхождения и без включения в их состав антибиотиков. Примером может служить минерал из группы алюмосиликатов - глауконит. В настоящее время алюмосиликаты, такие как глауконит и сходные с ним смектиты, в основном, используются внутрь в качестве энтеросорбентов, Использование порошка глауконита в качестве средства для лечения ран ранее не изучалось.
Наиболее близким по технической сущности является способ раноза-живления посредством применения препарата - Пантенолспрей, производства AEROPHARM, Германия. Препарат Пантенолспрей выпускается в форме аэрозоля для наружного применения в алюминиевых баллонах с защитным клапаном и распыляющей насадкой объемом 130 г. Препарат в форме аэрозоля влияет на процессы заживления и восстановления тканей после повреждений их целостности. Активное вещество препарата Дексапантенол при взаимодействии с кожей превращается в пантотеновую кислоту, которая является коферментом А и принимает активное участие в процессах окисления и метаболизма. После нанесения препарата на кожу наблюдается смягчающее и противовоспалительное действие [Справочник лекарственных средств VIDAL [Электронный ресурс]. - Режим доступа: https://www.vidal.ru (дата обращения: 02.04.2018)].
Такие признаки прототипа, как дисперсность и готовая форма, не требующая смешения компонентов или перемешивания состава перед нанесением на раневую поверхность, совпадают с существенными признаками заявляемого способа.
Технической задачей является разработка способа повышения эффективности ранозаживления, повышения прочности рубца и уменьшения признаков воспаления раны посредством нанесения на ее поверхность природной, не содержащей антибиотиков субстанции глауконита в форме присыпки. Использование субстанции глауконита способствует решению проблемы импортозамещения и снижению затрат на лечение и уход за ранами.
Данная техническая задача решается посредством сравнения параметров ранозаживления у аутбредных конвенциональных крыс опытной и контрольной группы, которым местно наружно на поверхность линейной пол-нослойной кожной раны ежедневно однократно в одно и то же время наносят равное количество глауконита в форме присыпки или Пантенолспрей.
Сущность способа заключается в том, что глауконит иммобилизует бактерицидные компоненты, и, таким образом, играет роль средства для антибактериальной терапии [Некоторые аспекты применения глауконита в медицине / С.Б. Вениг, В.Г. Сержантов, Е.И. Селифонова // Методы компьютерной диагностики в биологии и медицине: материалы Всероссийской молодежной конференции, Саратов, 10-12 нояб. 2015 г. - Саратов, 2015. - С. 217-220.].
2
2
3
2
2
3
2
2
2
5
3
Глауконит Бондарского месторождения Тамбовской области содержит: SiO (66,9…75,81%); MgO (1,02…1,62%), AlO (3,1…6,57%), KO (1,51…2,43%), FeO (6,87…12,0%), NaO (0,1…0,23%), FeO (0,28%), TiO (0,12…0,34%), PO (0,33…3,38%), MnO (0,012…0,019%), SO (0,06…0,15%), CaO (1,08…5,14%) [Вигдорович В.И. Адсорбционные процессы: учеб. пособ. для студентов хим. специальностей университетов / В.И. Вигдорович, Л.Е. Цыганкова, Н.В. Шель. - Тамбов. - 2014. - 150 с.]. Многочисленные исследования [Изучение микробиоценоза кожи и кишечника у больных атопическим дерматитом / О.В. Джорджиева [и др.] // Эффективная фармакотерапия. - 2012. - №11. - С. 32-35, Некоторые аспекты применения глауконита в медицине / С.Б. Вениг, В.Г. Сержантов, Е.И. Селифонова // Методы компьютерной диагностики в биологии и медицине: материалы Всероссийской молодежной конференции, Саратов, 10-12 нояб. 2015 г. - Саратов, 2015. - С 217-220, Хребтова О.М. Биотестирование глауконита на инфузориях / О.М. Хребтова // Вестник Балтийского Федерального ун-та им. И. Канта. - 2016. - №2. - С. 73-76, Энтеросорбент и способ его получения: пат.(19) RU (11) 2545711 (13) С1 Рос. Федерация: МПК A61K 33/06, A61K 33/26, A61K 9/107, А61Р 1/00 / М.Ю. Волков, А.А. Калилец. №2013151541/15; заявл. 20.11.2013; опубл. 10.04.2015, Бюл. №10.- С. 2-7.] показывают, что глауконит не обладает токсическим действием и по классификации химических веществ и по степени опасности в соответствии с ГОСТ 12.1.007.76 относится к классу 4 - незначительно опасных веществ.
Для проведения доклинических исследований по оценке ранозаживляющей активности глауконит Бондарского месторождения Тамбовской области истирали в ступке до получения тонкодисперсного порошка, состоящего из изодиаметричных частиц размером менее 200 мкм с краями закругленной формы (микроскопическая оценка), что свидетельствует о его пригодности для применения в качестве присыпки для нанесения на раневую поверхность. Затем субстанцию глауконита стерилизовали в сушильном шкафу при температуре 180°С в течение 60 минут. Доклинические исследования субстанции глауконита проведены на 16 аутбредных конвенциональных крысах самцах и самках массой 210-320 г, не менее чем по 5 животных в каждой группе. Животные содержались в стандартных условиях в виварии фармацевтического факультета ФГБОУ ВО "Воронежский государственный университет", кормление полнорационным комбикормом, поение вволю через ниппельные поилки. При проведении исследований соблюдали международные принципы по гуманному обращению с животными [Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств: в 2 ч. / под ред. А.Н. Миронова. - Москва: Гриф и К, 2012. - 944 с.]. За сутки до эксперимента в шейно-грудной области удаляли шерстный покров площадью 20 см с помощью депиляционного крема. В условиях обезболивания, достигаемого ингаляционным хирургическим наркозом, при помощи хирургических ножниц наносили линейную полнослойную кожную рану длиной 5,0 см, края раны сближали и накладывали 2 шва на равном расстоянии. В качестве шовного материала использовали стерильную шелковую нить, которую удаляли на 5 сутки эксперимента. Раны оставались открытыми до окончания эксперимента [Губайдуллин Н.М. Эффективность использования глауконита при откорме бычков / Н.М. Губайдуллин, И.В. Миронова // Известия ОГАУ. - 2008. - №20-1. - С. 61-63., Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств: в 2 ч. / под ред. А.Н. Миронова. - Москва: Гриф и К, 2012. - 944 с.]. Исходно и на 5 день электронным термометром определяли ректальную температуру тела. В начале, на 5 сутки и в конце эксперимента определяли массу тела животных, ежедневно проводили наблюдения за клиническим состоянием животных, потреблением корма и воды. Животным опытной группы местно наружно на поверхность раны ежедневно однократно в одно и то же время наносили по 100 мг глауконита в форме присыпки. Доза определена по данным для сходного объекта - присыпки монтмориллонита [Круть У.А. Доклиническое исследование фармакологической коррекции гнойного раневого процесса фитоминералсорбентом на основе монтмориллонита: дис. канд. биол. наук / У.А. Круть. - Белгород, 2017. - С. 13-21.]. Экспериментально показано, что этого количества порошка достаточно для полного покрытия всей поверхности раневого дефекта. В качестве препарата сравнения использовали известный ранозаживляющий препарат - Пантенолспрей, схема применения являлась аналогичной. На 12-е сутки проводили гуманную эвтаназию путем передозировки хлороформного наркоза, вырезали лоскут раневой поверхности кожи размером 2×3 см. С помощью ранотензиометра [Пат. 163084 Российской Федерации, МПК А61В 17/02. Механический ранотензиометр / В.А. Николаевский [и др.]; заявитель и патентообладатель ФГБОУ ВО ВГУ. - №2015151598/14: заявл. 01.12.15; опубл. 10.07.16, Бюл. №19. - 2 с.] согласно рекомендациям Руководства по проведению доклинических исследований лекарственных средств, определяли прочность рубца на разрыв, результат выражали в граммах на метр квадратный площади кожного лоскута (г/мм) [Абаев Ю.К. Справочник хирурга. Раны и раневая инфекция / Ю.К. Абаев. - Ростов-на-Дону: Феникс, 2006. - 427 с.].
Установлено, что впервые 3-е суток после моделирования ран все животные проявляли пониженную двигательную активность, наблюдалось уменьшение потребления корма и воды, что логично обусловлено последствиями экспериментального воздействия и ранения.
У животных контрольной группы на 5 сутки наблюдалось незначительное снижение массы тела на 1,7%, ректальная температура тела составила 37,7°С, то есть субфебрильная. При проведении осмотра на 5 сутки после удаления швов выявлено плотное смыкание краев раны при отсутствии отека, гиперемии или нагноения. У половины животных на поверхности раны имелся плотный струп, представленный некротическими массами, у другой половины животных наблюдалось начало заживления раны «по первичному натяжению».
У животных опытной группы на фоне применения субстанции глауконита наблюдалось незначительное снижение массы тела не более чем на 5% и незначительное повышение ректальной температуры тела до 38,2°С, что является следствием раневого процесса. На фоне применения присыпки глауконита выявлено плотное смыкание краев раны, не выявлено отека, гиперемии, рана являлась сухой и чистой. Только у одной особи из всех сформировалась ограниченная зона воспаления в подлежащих тканях, к 12 суткам воспаление значительно уменьшилось. На 12 сутки проводили гуманную эвтаназию путем передозировки хлороформного наркоза, вырезали лоскут раневой поверхности кожи 2×3 см. С помощью ранотензиометра определяли прочность рубца на разрыв.
Результаты ранотензиометрических исследований на 12 сутки от начала эксперимента показали, что глауконит в форме присыпки обеспечил значительное достоверное повышение разрывной прочности раневого рубца в 2 раза, что несколько уступало по эффективности препарату сравнения Пантенолспрей, который повышал прочность рубца на разрыв в 3 раза.
Предложенный способ повышения эффективности ранозаживления, повышения прочности рубца и уменьшения признаков воспаления раны за счет применения субстанции глауконита природного происхождения, не содержащей антибиотиков, при местном применении в форме присыпки является эффективным, поскольку обладает ранозаживляющим действием и достоверно в 2 раза повышает прочность рубца на разрыв и способствует уменьшению признаков воспаления.