СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К ЛЕКАРСТВАМ В ОТНОШЕНИИ ЧЕЛОВЕЧЕСКИХ ИЛИ ГУМАНИЗИРОВАННЫХ ЛЕКАРСТВЕННЫХ АНТИТЕЛ С ПОДАВЛЕННОЙ ЭФФЕКТОРНОЙ ФУНКЦИЕЙ

1. Иммуноанализ антитела к лекарству для определения присутствия в образце антитела к лекарству в отношении человеческого или гуманизированного лекарственного антитела с подавленной эффекторной функцией, включающий следующие стадии в следующем порядке:
инкубирование образца, содержащего сыворотку крови млекопитающего, с полноразмерным человеческим рецептором I Fc-гамма или его фрагментом, связывающимся с областью Fc, таким образом, что образуется комплекс между антителом к лекарству в отношении человеческого или гуманизированного лекарственного антитела с подавленной эффекторной функцией, присутствующим в образце, и человеческим рецептором I Fc-гамма или его фрагментом, связывающимся с областью Fc, при этом полноразмерный человеческий рецептор I Fc-гамма или его фрагмент, связывающийся с областью Fc, конъюгирован с выявляемой меткой,
выделение комплекса, образовавшегося между антителом к лекарству в отношении человеческого или гуманизированного лекарственного антитела с подавленной эффекторной функцией и человеческим рецептором I Fc-гамма или его фрагментом, связывающимся с областью Fc, и
определение комплекса посредством выявляемой метки.
2. Иммуноанализ антитела к лекарству для определения присутствия в образце антитела к лекарству (ADA) в отношении человеческого или гуманизированного лекарственного антитела с подавленной эффекторной функцией (EFS-DA), включающий следующие стадии в следующем порядке:
а) инкубирование твердой фазы, на которой было иммобилизовано человеческое или гуманизированное лекарственное антитело с подавленной эффекторной функцией, с образцом, содержащим сыворотку крови млекопитающего (таким образом, что образуется комплекс лекарственное антитело, связанное с твердой фазой - антитело к лекарству),
б) инкубирование твердой фазы (с которой связан комплекс лекарственное антитело - антитело к лекарству, образовавшийся на стадии а)) с полноразмерным человеческим рецептором I Fc-гамма или его фрагментом, связывающимся с областью Fc, при этом полноразмерный человеческий рецептор I Fc-гамма или его фрагмент, связывающийся с областью Fc, конъюгирован с выявляемой меткой и
в) определение образования на стадии б) комплекса, связанного с твердой фазой, посредством определения присутствия выявляемой метки и, посредством этого, определение присутствия в образце антитела к лекарству в отношении человеческого или гуманизированного лекарственного антитела с подавленной эффекторной функцией.
3. Иммуноанализ антитела к лекарству для определения присутствия в образце антитела к лекарству (ADA) в отношении человеческого или гуманизированного лекарственного антитела с подавленной эффекторной функцией (EFS-DA), включающий следующие стадии в следующем порядке:
а) инкубирование твердой фазы, на которой был иммобилизован Fab человеческого или гуманизированного лекарственного антитела с подавленной эффекторной функцией, с образцом, содержащим сыворотку крови млекопитающего (таким образом, что образуется комплекс Fab, связанный с твердой фазой - антитело к лекарству),
б) инкубирование твердой фазы (с которой связан комплекс Fab-антитело к лекарству, образовавшийся на стадии а)) с полноразмерным человеческим рецептором I Fc-гамма или его фрагментом, связывающимся с областью Fc, при этом полноразмерный человеческий рецептор I Fc-гамма или его фрагмент, связывающийся с областью Fc, конъюгирован с выявляемой меткой и
в) определение образования на стадии б) комплекса, связанного с твердой фазой, посредством определения присутствия выявляемой метки и, посредством этого, определение присутствия антитела к лекарству в отношении человеческого или гуманизированного лекарственного антитела с подавленной эффекторной функцией.
4. Иммуноанализ антитела к лекарству для определения присутствия в образце антитела к лекарству (ADA) в отношении человеческого или гуманизированного лекарственного антитела с подавленной эффекторной функцией (EFS-DA), включающий следующие стадии в следующем порядке:
а) добавление (избытка) лекарственного антитела в образец (для переноса (любого) антитела к лекарству, присутствующего в образце, в комплекс лекарственное антитело-антитело к лекарству), где образец содержит сыворотку крови млекопитающего,
б) инкубирование твердой фазы, на которой был иммобилизован антиген, с которым специфично связывается EFS-DA, с образцом, полученным на стадии а) (таким образом, что образуется комплекс антиген, связанный с твердой фазой - лекарственное антитело - антитело к лекарству),
в) инкубирование твердой фазы (с которой связан комплекс антиген-лекарственное антитело-антитело к лекарству, образовавшийся на стадии б)) с полноразмерным человеческим рецептором I Fc-гамма или его фрагментом, связывающимся с областью Fc, при этом полноразмерный человеческий рецептор I Fc-гамма или его фрагмент, связывающийся с областью Fc, конъюгирован с выявляемой меткой и
г) определение образования на стадии в) комплекса, связанного с твердой фазой, посредством определения присутствия выявляемой метки и, посредством этого, определение присутствия в образце антитела к лекарству в отношении человеческого или гуманизированного лекарственного антитела с подавленной эффекторной функцией.
5. Иммуноанализ антитела к лекарству для определения присутствия в образце антитела к лекарству (ADA) в отношении человеческого или гуманизированного лекарственного антитела с подавленной эффекторной функцией (EFS-DA), включающий следующие стадии в следующем порядке:
а) добавление (избытка) лекарственного антитела в образец (для переноса (любого) антитела к лекарству, присутствующего в образце, в комплекс лекарственное антитело-антитело к лекарству), где образец содержит сыворотку крови млекопитающего,
б) инкубирование твердой фазы, на которой был иммобилизован полноразмерный человеческий рецептор I Fc-гамма или его фрагмент, связывающийся с областью Fc, с образцом, полученным на стадии а) (таким образом, что образуется комплекс рецептор, связанный с твердой фазой -лекарственное антитело - антитело к лекарству),
в) инкубирование твердой фазы (с которой связан комплекс рецептор - лекарственное антитело - антитело к лекарству, образовавшийся на стадии б)) с антигеном лекарственного антитела, при этом данный антиген конъюгирован с выявляемой меткой и
г) определение образования на стадии в) комплекса, связанного с твердой фазой, посредством определения присутствия выявляемой метки и, посредством этого, определение присутствия в образце антитела к лекарству в отношении человеческого или гуманизированного лекарственного антитела с подавленной эффекторной функцией.
6. Иммуноанализ антитела к лекарству для определения присутствия в образце антитела к лекарству (ADA) в отношении человеческого или гуманизированного лекарственного антитела с подавленной эффекторной функцией (EFS-DA), включающий следующие стадии в следующем порядке:
а) добавление (избытка) лекарственного антитела в образец (для переноса (любого) антитела к лекарству, присутствующего в образце, в комплекс лекарственное антитело-антитело к лекарству), где образец содержит сыворотку крови млекопитающего,
б) инкубирование твердой фазы, на которой было иммобилизовано антитело к лекарству в отношении лекарственного антитела, с образцом, полученным на стадии а) (таким образом, что образуется комплекс антитело к лекарству, связанное с твердой фазой - лекарственное антитело - антитело к лекарству),
в) инкубирование твердой фазы (с которой связан комплекс антитело к лекарству-лекарственное антитело-антитело к лекарству, образовавшийся на стадии б)) с полноразмерным человеческим рецептором I Fc-гамма или его фрагментом, связывающимся с областью Fc, при этом полноразмерный человеческий рецептор I Fc-гамма или его фрагмент, связывающийся с областью Fc, конъюгирован с выявляемой меткой и
г) определение образования на стадии в) комплекса, связанного с твердой фазой, посредством определения присутствия выявляемой метки и, посредством этого, определение присутствия в образце антитела к лекарству в отношении человеческого или гуманизированного лекарственного антитела с подавленной эффекторной функцией.
7. Иммуноанализ по любому из пп. 1-6, в котором после каждой стадии инкубации следует следующая стадия:
промывка твердой фазы для удаления несвязавшихся соединений.
8. Иммуноанализ по любому из пп. 1-7, где данный анализ предназначен для определения в образце присутствия и количества антитела к лекарству (ADA) в отношении человеческого или гуманизированного лекарственного антитела с подавленной эффекторной функцией (EFS-DA) и включает в качестве конечных стадий:
определение образования на предыдущей стадии комплекса, связанного с твердой фазой, посредством определения присутствия выявляемой метки и определение количества антитела к лекарству в отношении человеческого или гуманизированного лекарственного антитела с подавленной эффекторной функцией в образце посредством связывания количества выявляемой метки с количеством антитела к лекарству с использованием стандартной кривой.
9. Иммуноанализ по любому из пп. 1-8, в котором человеческое или гуманизированное лекарственное антитело с подавленной эффекторной функцией принадлежит к человеческому подклассу IgG1 или IgG4.
10. Иммуноанализ по любому из пп. 1-9, в котором человеческое или гуманизированное лекарственное антитело с подавленной эффекторной функцией принадлежит к человеческому подклассу IgG1 и имеет мутации L234A, L235A и P329G в обоих полипептидах области Fc, или где человеческое или гуманизированное лекарственное антитело с подавленной эффекторной функцией принадлежит к человеческому подклассу IgG4 и имеет мутации S228P, L235E и P329G в обоих полипептидах области Fc (нумерация согласно системе нумерации EU согласно Kabat).
11. Иммуноанализ по любому из пп. 1-10, в котором человеческое или гуманизированное лекарственное антитело с подавленной эффекторной функцией представляет собой биспецифичное антитело.
12. Иммуноанализ по любому из пп. 1-11, в котором человеческое или гуманизированное лекарственное антитело с подавленной эффекторной функцией не индуцирует ADCC (антителозависимая клеточная цитотоксичность).
13. Иммуноанализ по любому из пп. 1-12, в котором сыворотка крови млекопитающего представляет собой сыворотку крови человека или сыворотку крови яванского макака.
14. Иммуноанализ по любому из пп. 1-13, в котором сыворотка крови млекопитающего была получена от млекопитающего, которому было введено человеческое или гуманизированное лекарственное антитело с подавленной эффекторной функцией первый раз по меньшей мере за 2 суток до получения образца.
15. Иммуноанализ по любому из пп. 1-14, в котором образец содержит от 0,5% (об./об.) до 8% (об./об.) сыворотки млекопитающего, предпочтительно примерно 2% (об./об.) сыворотки млекопитающего.
16. Иммуноанализ по любому из пп. 1-15, в котором антитело к лекарству в отношении человеческого или гуманизированного лекарственного антитела с подавленной эффекторной функцией принадлежит к классу IgG.
17. Иммуноанализ по любому из пп. 1-16, в котором присутствие и/или количество метки определяется с использованием связанной с ферментом цветной реакции, поверхностного плазмонного резонанса, электрохемилюминисценции или радиоиммуноанализа.
18. Иммуноанализ по любому из пп. 1-17, в котором комплекс представляет собой мономерный комплекс.
19. Иммуноанализ по любому из пп. 1-18, в котором комплекс представляет собой комплекс 1:1 или 1:1:1.