ТРАНСПЛАНТАЦИЯ ЧЕЛОВЕЧЕСКИХ НЕРВНЫХ КЛЕТОК ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ НЕЙРОДЕГЕНЕРАТИВНЫХ СОСТОЯНИЙ

1. Способ культивирования нервных стволовых клеток млекопитающего, исключая эмбриональные клетки человека, полученные в результате разрушения эмбриона, включающий:
предоставление нервных стволовых клеток млекопитающего;
предварительное инкубирование в культуральном сосуде раствора, содержащего поли-D-лизин в концентрации от 0,1 мкг/мл до 1 мг/мл в течение от 5 мин до 3 ч;
ополаскивание и высушивание культурального сосуда;
высевание нервных стволовых клеток в указанный культуральный сосуд при отсутствии сыворотки;
добавление раствора фибронектина и, по меньшей мере, одного митогена в культуральный сосуд и культивирование нервных стволовых клеток при отсутствии сыворотки; и
пассирование культивируемых нервных стволовых клеток до слияния.
2. Способ по п.1, в котором митоген включает основной фактор роста фибробластов (bFGF).
3. Способ по п.1, в котором раствор поли-D-лизина имеет концентрацию поли-D-лизина приблизительно 100 мкг/мл.
4. Способ по п.1, в котором стадия инкубирования культурального сосуда с раствором поли-D-лизина протекает приблизительно 1 ч.
5. Способ по п.1, в котором раствор фибронектина имеет концентрацию фибронектина приблизительно 1 мкг/мл.
6. Способ по п.1, в котором раствор фибронектина и по меньшей мере одного митогена добавляют в культуральный сосуд с предварительным покрытием одновременно с высеванием нервных стволовых клеток.
7. Способ по п.1, в котором нервные стволовые клетки представляют собой клетки ткани центральной нервной системы.
8 Способ по п.7, в котором ткань центральной нервной системы включает ткань спинного мозга.
9. Способ по п.8, в котором ткань центральной нервной системы получена от посмертных эмбрионов млекопитающих в гестационном возрасте от приблизительно 6,5 до приблизительно 20 недель.
10. Способ по п.1, в котором нервные стволовые клетки млекопитающего предоставлены от эмбриона или от плода, не относящегося к человеку.
11. Способ по п.1, в котором нервную стволовую клетку выделяют из источника, выбранного из группы, состоящей из центральной нервной системы, периферической нервной системы, костного мозга, периферической крови и крови пуповины.
12. Способ по п.11, в котором млекопитающее представляет собой развивающееся млекопитающее.
13. Способ по п.12, в котором гестационный возраст развивающегося млекопитающего составляет от приблизительно 6,5 до приблизительно 20 недель.
14. Способ по п.1, в котором фактор роста выбран из группы, состоящей из bFGF, EGF, TGF-альфа, aFGF и их комбинаций.
15. Способ лечения спастичности, ригидности, спинного мозга или амниотрофического состояния у субъекта, нуждающегося в таком лечении, включающий:
концентрирование нервных стволовых клеток, культивированных по п.1, с получением концентрированных нервных стволовых клеток;
введение терапевтически эффективного количества указанных концентрированных нервных стволовых клеток в область ткани центральной нервной системы пациента с пониженным уровнем ГАМК-продуцирующих или глицин-продуцирующих нейронов; и генерирование ГАМК-продуцирующих или глицин-продуцирующих нейронов в указанной ткани.
16. Способ по п.15, в котором амниотрофическое состояние включает боковой амиотрофический склероз или вялую параплегию.
17. Способ по п.15, в котором стадия введения терапевтически эффективного количества указанных концентрированных нервных стволовых клеток включает инъецирование части концентрированных нервных стволовых клеток.
18. Способ по п.17, в котором концентрированные нервные стволовые клетки в терапевтически эффективном количестве инъецируют посредством множества инъекций.
19. Способ по п.18, в котором по меньшей мере две инъекции из указанного множества инъекций выполняют в участки инъецирования на расстоянии от приблизительно 100 мкм до приблизительно 5000 мкм друг от друга.
20. Способ по п.15, в котором состояния вызваны травматическим повреждением спинного мозга, ишемическим повреждением спинного мозга, травматическим повреждением головного мозга, инсультом, рассеянным склерозом, церебральным параличом, эпилепсией, болезнью Хантингтона, боковым амиотрофическим склерозом, хронической ишемией, наследственными состояниями или любой их комбинацией.
21. Способ по п.15, в котором терапевтически эффективное количество размноженной популяции способно генерировать по меньшей мере 1000 ГАМК-продуцирующих нейронов in vivo.
22. Способ по п.15, в котором терапевтически эффективное количество размноженной популяции способно генерировать по меньшей мере 1000 глицин-продуцирующих нейронов in vivo.
23. Способ по п.15, в котором по меньшей мере 40% размноженной популяции способно генерировать нейроны в спинном мозге.
24. Способ по п.15, в котором введение терапевтически эффективного количества размноженной популяции включает инъецирование по меньшей мере части терапевтически эффективного количества во множество областей спинного мозга пациента.
25. Способ по п.15, в котором по меньшей мере 30% размноженной популяции способно дифференцироваться в нейроны in vitro.