СПОСОБЫ И КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЯ

1. Способ диагностики заболевания или нарушения у индивидуума, включающий:
(a) введение в клетки указанного индивидуума полинуклеотида; при этом указанный полинуклеотид кодирует генный переключатель, и при этом указанный полинуклеотид включает (1) по меньшей мере одну последовательность фактора транскрипции, функционально связанную с диагностическим промотором переключателя, и при этом указанная по меньшей мере одна последовательность фактора транскрипции кодирует лиганд-зависимый фактор транскрипции, и при этом активность указанного промотора модулируется при наличии у указанного индивидуума указанного заболевания или нарушения, и (2) полинуклеотида, кодирующего репортерный ген, связанный с промотором, который активируется под действием указанного лиганд-зависимого фактора транскрипции, с целью получения модифицированных клеток;
(b) введение лиганда в указанные модифицированные клетки; и
(c) обнаружение экспрессии репортерного гена;
где экспрессия указанного репортерного гена указывает на то, что указанный индивидуум страдает указанным заболеванием или нарушением.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный способ осуществляют ех vivo в клетках, которые были извлечены из организма указанного индивидуума.
3. Способ по п.1, в котором указанные полинуклеотиды вводят в клетки, которые были извлечены из организма указанного индивидуума, с целью получения модифицированных клеток, и модифицированные клетки снова вводят в организм указанного индивидуума.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный способ осуществляют in vivo.
5. Способ мониторинга прогрессирования заболевания или нарушения у индивидуума, включающий:
(а) введение лиганда в модифицированные клетки указанного индивидуума; и
(b) по меньшей мере двукратное обнаружение экспрессии репортерного гена;
при этом изменение уровня экспрессии указанного репортерного гена указывает на прогрессирование указанного заболевания или нарушения в организме указанного индивидуума; и
при этом указанные модифицированные клетки указанного индивидуума включают полинуклеотид, и при этом указанный полинуклеотид кодирует генный переключатель, и при этом указанный полинуклеотид включает (1) по меньшей мере одну последовательность фактора транскрипции, функционально связанную с диагностическим промотором переключателя, и при этом указанная по меньшей мере одна последовательность фактора транскрипции кодирует лиганд-зависимый фактор транскрипции, и при этом активность указанного промотора модулируется при наличии у указанного индивидуума указанного заболевания или нарушения, и (2) полинуклеотида, кодирующего репортерный ген, связанный с промотором, который активируется под действием указанного лиганд-зависимого фактора транскрипции.
6. Способ мониторинга эффективности лечения заболевания или нарушения у индивидуума, включающий:
(a) применение указанного лечения к указанному индивидууму;
(b) введение в клетки указанного индивидуума полинуклеотида; при этом указанный полинуклеотид кодирует генный переключатель, и при этом указанный полинуклеотид включает (1) по меньшей мере одну последовательность фактора транскрипции, функционально связанную с диагностическим промотором переключателя, и при этом указанная по меньшей мере одна последовательность фактора транскрипции кодирует лиганд-зависимый фактор транскрипции, и при этом активность указанного промотора модулируется при наличии у указанного индивидуума указанного заболевания или нарушения, и (2) полинуклеотида, кодирующего репортерный ген, связанный с промотором, который активируется под действием указанного лиганд-зависимого фактора транскрипции, с целью получения модифицированных клеток;
(c) введение лиганда в указанные модифицированные клетки; и
(d) по меньшей мере двукратное обнаружение экспрессии репортерного гена;
при этом изменение уровня экспрессии указанного репортерного гена указывает на эффективность указанного лечения.
7. Способ мониторинга эффективности лечения заболевания или нарушения у индивидуума, включающий:
(a) введение в неаутологичные клетки полинуклеотида, и при этом указанный полинуклеотид кодирует генный переключатель, и при этом указанный полинуклеотид включает (1) по меньшей мере одну последовательность фактора транскрипции, функционально связанную с диагностическим промотором переключателя, и при этом указанная по меньшей мере одна последовательность фактора транскрипции кодирует лиганд-зависимый фактор транскрипции, и при этом активность указанного промотора модулируется при наличии у указанного индивидуума указанного заболевания или нарушения, и (2) полинуклеотида, кодирующего репортерный ген, связанный с промотором, который активируется под действием указанного лиганд-зависимого фактора транскрипции, с целью получения модифицированных клеток;
(b) введение указанных модифицированных клеток в организм указанного индивидуума;
(c) введение лиганда в указанные модифицированные клетки; и
(d) по меньшей мере двукратное обнаружение экспрессии репортерного гена;
при этом изменение уровня экспрессии указанного репортерного гена указывает на эффективность указанного лечения.
8. Способ по п.1, в котором указанные модифицированные клетки окружают барьером перед их введением в организм указанного индивидуума.
9. Способ по п.1, отличающийся тем, что нарушение представляет собой отторжение трансплантата у индивидуума, которому трансплантирован орган или ткань, включающий:
(а) введение в клетки указанного трансплантированного органа или ткани полинуклеотида, и при этом указанный полинуклеотид кодирует генный переключатель, и при этом указанный полинуклеотид включает (1) по меньшей мере одну последовательность фактора транскрипции, функционально связанную с диагностическим промотором переключателя, и при этом указанная по меньшей мере одна последовательность фактора транскрипции кодирует лиганд-зависимый фактор транскрипции, где активность указанного промотор модулируется при возникновении отторжения трансплантата, и (2) полинуклеотида, кодирующего репортерный ген, связанный с промотором, который активируется под действием указанного лиганд-зависимого фактора транскрипции, с целью получения модифицированных клеток;
(b) введение лиганда в указанные модифицированные клетки; и
(c) обнаружение экспрессии репортерного гена;
и при этом экспрессия репортерного гена указывает на обнаружение отторжения трансплантата.
10. Способ по п.9, в котором указанные полинуклеотиды вводят в указанные клетки перед проведением трансплантации.
11. Способ по п.9, в котором указанные полинуклеотиды вводят в указанные клетки после проведения трансплантации.
12. Способ по п.1, отличающийся тем, что нарушение представляет собой отторжение трансплантата у индивидуума, которому трансплантирован орган или ткань, и при этом:
на этапе (а) указанный полинуклеотид вводят в клетки указанного трансплантированного органа или ткани введение лиганда на этапе (b) осуществляют путем введения лиганда в организм указанного индивидуума; и
обнаружение экспрессии репортерного гена из указанных модифицированных клеток на этапе (с) осуществляют по меньшей мере дважды;
при этом изменение уровня экспрессии указанного репортерного гена указывает на отторжение или прогрессирование указанного отторжения трансплантата в организме указанного индивидуума.
13. Способ по п.12, в котором указанные полинуклеотиды вводят в указанные клетки перед проведением трансплантации.
14. Способ по п.12, в котором указанные полинуклеотиды вводят в указанные клетки после проведения трансплантации.
15. Способ по любому из предшествующих пунктов, в котором указанный генный переключатель представляет собой генный переключатель, полученный на основе рецептора экдизона (EcR).
16. Способ по п.15, в котором указанный лиганд связывается с доменом EcR, представляющим собой домен связывания лиганда.
17. Способ по п.15, в котором указанный лиганд представляет собой диацилгидразин.
18. Способ по п.16, в котором указанный лиганд выбран из группы, состоящей из RG-115819, RG-115830 и RG-115932.