Влияние секреторного иммуноглобулина а грудного молока на состав кишечной микрофлоры ребенка

Влияние секреторного иммуноглобулина A грудного молока на состав кишечной микрофлоры ребенка

И.В. Николаева, В.А. Анохин, О.Д. Зинкевич, Н.А. Сафина

Казанский государственный медицинский университет; Центральная научно-исследовательская лаборатория Казанской государственной медицинской академии

Effect of human milk secretory immunoglobulin A on the composition of enteric microflora in a baby

I.V. Nikolayeva, V.A. Anokhin, O.D. Zinkevich, N.A. Safina

Kazan State Medical University; Central Research Laboratory, Kazan State Medical Academy

Определено общее содержание SIgA и SIgA, специфичных к антигенам условно-патогенных микроорганизмов и эндотоксину, в «зрелом» грудном молоке у 46 матерей, вскармливающих детей с клинически выраженным дисбактериозом кишечника. Большинство (71,7%) женщин имели низкую концентрацию SIgA (<0,2 мг/мл) в грудном молоке. Антитела к ли-пополисахариду E. coli выявлены в 95,7% случаев, к антигенам протея — в 91,3%, стрептококков — в 42,3%, клебсиелл — в 41,3%, S.aureus — в 39,1%, Pseudomonas aeruginosa — в 34,7%, к Re-гликолипиду — в 28,3% и к антигенам Candida spp. — в 15,2% случаев. Антимикробные SIgA грудного молока не влияли на частоту колонизации толстой кишки ребенка S.aureus, Streptococcus spp., Proteus spp., Klebsiella spp., Candida albicans, а также энтерококками и эшерихиями. Выявлена обратная корреляционная связь между концентрацией SIgA, специфичных к гликолипиду, и численностью эшерихиозной флоры, а также концентрацией антистрептококковых SIgA и содержанием энтерококков в фекалиях ребенка.

Ключевые слова: дети, грудное молоко, SIgA, кишечная микрофлора, условно-патогенные микроорганизмы, эндотоксин.

The total level of Slg A and the level of Slg A specific for antigens of opportunistic microorganisms and for endotoxin in mature breast milk were determined in 46 mothers who breastfed babies with clinical enteric dysbacteriosis. The most (71,7%) of women had a low human breast Slg A concentration (<0,2 mg/ml). There were antibodies to E. colilipopolysaccharide in 95,7%, to antigens of Proteus in 91,3%, Streptococci in 42,3%, Klebsiella in 41,3%, S.aureus in 39,1%, Pseudomonas aeruginosa in 34,7%, to Re glycolipid in 28,3%, and to antigens of Candida spp. in 15,2% of cases. Antimicrobial breast milk Slg A did not affect the rate of colonization of the baby's large bowel with S.aureus, Streptococcus spp, Proteus spp., Klebsiella spp., Candida albicans, enterococci, and E. coli. An inverse correlation was found between the concentration of glycolipid-specific Slg A and the size of the Escherichia flora and between the concentration of antistreptoccal Slg A and the content of enterococci in the baby's feces.

Key words: infants, breast milk, Slg A, enteric microflora, opportunistic microorganisms, endotoxin.

Секреторные иммуноглобулины грудного

молока являются одной из важных составляющих противоинфекционной защиты ребенка. Они компенсируют транзиторный физиологический дефицит секреторных иммуноглобулинов ребенка первых месяцев жизни и защищают его слизистые от возбудителей кишечных, респираторных, уринарных инфекций [1—3]. Имеющиеся работы в основном посвящены исследованию протектив-ных свойств грудного молока в отношении патоген-

© Коллектив авторов, 2011

Ros Vestn Perinatol Pediat 2011; 6:16-20

Адрес для корреспонденции: Николаева Ирина Венидиктовна — к.м.н., доц. каф. детских инфекций Казанского государственного медицинского университета

Анохин Владимир Алексеевич — д.м.н., проф., зав. каф. детских инфекций 420012 Татарстан, Казань, ул. Бутлерова, 49А

Зинкевич Олег Данилович — к.б.н., в.н.с. ЦНИЛ Казанской государственной медицинской академии

Сафина Неля Ахметовна — к.б.н., ст.н.с. ЦНИЛ Казанской государственной

медицинской академии

420012 Казань, ул. Муштари, д. 11

ных возбудителей кишечных инфекций: ротавиру-сов, энтеропатогенных E. coli,, Entamoeba histolytica и др. [4, 5]. В настоящее время недостаточно изучено влияние специфических SIgA грудного молока на колонизацию кишечника условно-патогенными микроорганизмами, которые являются частыми возбудителями кишечных инфекций у детей грудного возраста [6].

Цель исследования: изучить содержание общего и специфичных к антигенам условно-патогенных микроорганизмов и эндотоксину SIgA в грудном молоке и оценить их возможное влияние на состав кишечной микрофлоры ребенка.

характеристика обследованных и методы исследования

Исследования проводились на базе кабинета микроэкологии матери и ребенка Республиканской инфекционной клинической больницы Казани. Обследовано 46 пар мать — ребенок. Средний воз-

Николаева И.В. и соает. Влияние секреторного иммуноглобулина А грудного молока на состав кишечной микрофлоры ребенка

раст обследованных матерей составил 28,7±0,5 года. Средний возраст детей и соответственно срок лактации у матерей составил 3,9±0,4 мес. В исследование включены доношенные дети с клинически выраженными формами дисбактериоза кишечника, рожденные естественным путем, получавшие грудное вскармливание и прикормы в соответствии с возрастом. В структуре патологических синдромов в периоде адаптации у обследованных детей преобладали перинатальное поражение ЦНС (у 21,7%), гнойно-воспалительные заболевания (у 15,2%), коньюгационные желтухи (у 13%). В связи с неудовлетворительным состоянием ребенка или матери в послеродовом периоде 27 (58,6%) детей поздно приложены к груди; 11 (23,9%) детей в раннем неонатальном периоде получили антибактериальную терапию.

У всех детей дисфункция кишечника отмечалась с периода новорожденности и проявлялась разжиженным стулом с частотой до 4—12 раз в сутки. На момент обследования у 10 (21,7%) детей стул был нормальным, у 13 (28,3%) — кашицеобразным с патологическими примесями (слизь, зелень), у 23 (50%) — жидкий, плохо переваренный с примесью воды и (или) слизи до 5—6 раз в сутки.

Различные неблагоприятные факторы в анамнезе имели 42 (91,3%) обследованные женщины. Следует отметить достаточно высокую частоту патологии беременности (26,1%), осложненных родов (21,7%), гнойно-септической патологии (17,4%) и антибактериальной терапии (21,7%) в послеродовом периоде у матерей данной группы. Эпизоды лактостаза, мастит, трещины сосков имели место в анамнезе у 24 (52,1%) женщин. Абсолютно здоровыми на момент обследования были 13 (11,1%) матерей. В структуре материнской патологии преобладали хронические заболевания органов желудочно-кишечного тракта (47,2%), хронические гнойно-воспалительные процессы различной локализации — гайморит, тонзиллит, фурункулез (26%) и инфекционно-воспали-тельные заболевания мочеполовой системы (19,6%).

Определение общего содержания SIgA в грудном молоке проводили методом радиальной иммунодиф-фузии по Манчини. Количественные результаты выражали в мг/мл. Концентрацию антиэндотоксиновых и антибактериальных антител в грудном молоке определяли методом иммуноферментного анализа. В качестве антигенов эндотоксинов использовали гли-колипид Salmonella minnesota RE 595 (Sigma, США), липополисахарид E. coli (Sigma, США). В качестве антигенов Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Staph. aureus, Streptococcus pneumoniae, Klebsiella pneumoniae, Candida albicans использовали ультразвуковые дезин-теграты этих бактерий, подвергнутые ультрацентрифугированию, гель-фильтрации и очистке от нуклеиновых кислот цетавлоном [7]. Результаты анализа выражали в мкг/мл.

Одновременно проведено бактериологическое исследование состава кишечной микрофлоры у детей. Бактериологическое исследование фекалий и оценку количественного и качественного состава кишечной микрофлоры толстой кишки осуществляли в соответствии с Отраслевым стандартом «Протокол ведения больных. Дисбактериоз кишечника» (ОСТ 91500.11.0004—2003, приказ Министерства здравоохранения РФ № 231 от 09.06.2003).

Для статистической обработки результатов использована программа Statistica 8.0. Рассчитывали: среднее значение (М), ошибку средней величины (ш), ошибку доли. Анализ категориальных данных проводили с помощью точного критерия Фишера ^-критерий). Для изучения степени выраженности связи между признаками использовался коэффициент корреляции Спирмена.

результаты

Большинство обследованных женщин (71,7%), вскармливающих детей с клинически выраженными формами дисбактериоза кишечника, имели концентрацию SIgA в грудном молоке менее 0,2 мг/мл (табл. 1).

Таблица 1. Содержание SIgA в грудном молоке

Содержание SIgA, мг/мл Количество обследованных женщин

абс. %

0,05—0,08 13 28,2

0,16—0,18 20 43,5

0,2—0,38 10 21,7

0,4—0,54 3 6,5

В грудном молоке наиболее часто обнаруживались SIgA, специфичные к антигенам грамотрицательных энтеробактерий: SIgA к эндотоксину E. coli и антигенам протея выявлены в 91,3—95,7% случаев, к антигенам клебсиелл — в 41,3%, к антигенам Pseudomonas aeruginosa — в 34,7%, к Re-гликолипиду — в 28,3% случаев (табл. 2). Реже были обнаружены SIgA к антигенам грамположительных микроорганизмов и грибов. SIgA к антигенам стрептококков выявлены в 41,3%, к антигенам стафилококков — в 39,1%, к антигенам кандид — в 15,2% случаев. Для каждой женщины был характерен индивидуальный спектр специфических SIgA грудного молока. У 1 (2,2%) женщины антитела к антигенам условно-патогенных микроорганизмов не были обнаружены. Антитела к представителям 2 родов условно-патогенных микроорганизмов выявлены у 18 (39,1%) матерей, 3-4 родов— у 11 (23,9%), 5-6 родов — у 10 (21,7%), 7-8 родов — у 6 (13,4%).

Изучено влияние SIgA грудного молока, специфичных к эндоксину E. coli, к Re-гликолипиду, к антигену Streptococcus spp, на процесс колониза-

Таблица 2. частота обнаружения и содержание SIgA, специфичных к антигенам условно-патогенных микроорганизмов и эндотоксину в грудном молоке

Антиген Частота обнаружения

Эндотоксин E. coli 44 (95,7±3,0%) 7,8±0,9

Proteus spp. 42 (91,3±4,2%) 10,3±1,5

Klebsiella spp. 19 (41,3±7,3%) 8,3±1,6

P. aeruginoza 16 (34,7±7,0%) 7,3±0,9

Re-гликолипид 13 (28,3±6,6%) 8,7±1,2

S.aureus 18 (39,1±7,2%) 11,4±2,4

Streptococcus spp. 19 (41,3±7,3%) 7,8±1,8

Candida 7 (15,2±5,3%) 10,2±2,3

ции толстой кишки и численность в фекалиях сим-биотических бактерий — лактозопозитивной E. coli, Enterococcus spp. (табл. 3). Выявлено, что специфические SIgA не влияют на частоту колонизации толстой кишки нормальной E. coli и энтерококками, но оказывают влияние на их численность. Достоверная отрицательная корреляционная связь обнаружена между титрами антител к Re-гликолипиду и содержанием E. coli (r= — 0,5; р=0,04), а также между титрами антител к антигенам Streptococcus spp. и популяционным уровнем Enterococcus spp. (r= — 0,47; р=0,025).

Частота колонизации детей различными видами условно-патогенной микрофлоры при вскармливании грудным молоком, содержащим и не содержащим специфические антитела (серопозитивное и сероне-гативное), достоверно не различалась. Не выявлено достоверной корреляционной связи между титрами SIgA к Re-гликолипиду и численностью грамотрица-тельных условно-патогенных энтеробактерий, а также титрами специфических SIgA грудного молока и количеством протеев, клебсиелл, S.aureus в фекалиях детей. Грибы рода Candida обнаружены в фекалиях у 2 из 7 детей, получавших «серопозитивное» грудное молоко, а P. aeruginosa не обнаружены ни у одного ребенка. В связи с этим определить наличие корреляционной связи между содержанием специфических SIgA в грудном молоке матери и содержанием данных микроорганизмов у детей не представлялось возможным.

обсуждение

Известно, что влияние грудного вскармливания на формирование кишечной микрофлоры ребенка во многом обусловлено присутствием в грудном молоке SIgA. Материнские SIgA способствуют колонизации желудочно-кишечного тракта ребенка симбиотическими бактериями («иммунное включение») и предупреждают колонизацию патогенными микроорганизмами («иммунное исключение») [8]. Однако несмотря на грудное вскармливание, у детей достаточно часто из фекалий выделяются условно-патогенные бактерии, которые могут быть причиной развития оппортунистической инфекции желудочно-кишечного тракта грудного ребенка [9—11]. Вопрос влияния SIgA грудного молока на процесс колонизации кишечника детей условно-патогенной микрофлорой в настоящее время изучен недостаточно.

В нашей работе мы определили содержание в грудном молоке общего SIgA и SIgA, специфичных к антигенам условно-патогенных микроорганизмов и эндотоксину, у 46 женщин, вскармливающих детей с клинически выраженными формами дисбактерио-за кишечника. Следует отметить, что с учетом сроков лактации

Таблица 3. частота колонизации и содержание индигенных бактерий в фекалиях ребенка при наличии в грудном молоке специфических SIgA

Антитела к условно-патогенным микроорганизмам в грудном молоке (n=46) Частота колонизации и количество индигенных бактерий в фекалиях ребенка R* Р

микроорганизм число случаев lg КОЕ/г

К эндотоксину E. coli (n=44) E. coli с нормальными ферментативными свойствами 44 7,0±0,2 -0,25 0,1

К Re-гликолипиду (n=13) То же 3 7,0±0,2 -0,5 0,04

К Streptococcus spp. (n=19) Enterococcus spp. 19 6,4±0,2 -0,47 0,025

Примечание. R — коэффициент корреляции Спирмена между содержанием антител и условно-патогенных микроорганизмов.

Николаева И.В. и соавт. Влияние секреторного иммуноглобулина А грудного молока на состав кишечной микрофлоры ребенка

матерей содержание SIgA было ниже 0,2 мг/мл. По сведениям литературы, содержание SIgA в грудном молоке женщин зависит от разных факторов: срока гестации, срока лактации, иммунного статуса матери, наличия у неё послеродовых инфекций, стресса и др. [14—16]. Мы не исключаем, что низкие показатели SIgA грудного молока у большинства женщин в нашем исследовании были связаны с перенесенными в послеродовом периоде гнойно-септическими процессами, а также хроническими воспалительными заболеваниями.

Грудное молоко большинства женщин содержало антитела к эндотоксину E. coli (95,7%) и антигену протея (91,3%). Реже обнаруживались SIgA, специфичные к антигену стрептококков, клебси-елл, S.aureus, P. aeruginosa, Re-гликолипиду и антигену Candida spp. Для каждой женщины был характерен индивидуальный спектр SIgA грудного молока, от полного их отсутствия у 1 (2,2%) матери до наличия антител ко всем изученным антигенам у 6 (13,4 %). Выявление в грудном молоке специфических антител в настоящее время рассматривают как эпидемиологический маркер перенесенной женщиной инфекции различной локализации. В связи с этим спектр обнаруживаемых в грудном молоке антител, по-видимому, является отражением иммунного ответа организма матери на воздействие различных оппортунистических возбудителей.

Мы попытались выяснить роль антимикробных и антиэндотоксиновых антител в процессах колонизации кишечника ребенка различными представителями условно-патогенных и симбиотических микроорганизмов. Известно, что энтерококки и E. coli являются представителями нормальной кишечной микрофлоры человека и играют важную роль в обеспечении колонизационной резистентности слизистых пищеварительного тракта [17]. У новорожденных детей энтерококки и E. coli являются одними из первых «колонизаторов» кишечника и обнаруживаются уже в первые дни жизни ребенка [18]. Однако при избыточном росте данные микроорганизмы могут приобретать патогенный потенциал и вызывать аутоинфекцию [17, 19]. Существуют различные механизмы иммунорегуляции численности эшерихиоз-ной флоры и энтерококков. В работе L. van der Waaij (1988) показано, что энтерококки, энтеробактерии и другие аэробные бактерии кишечника покрыты SIgA, что препятствует адгезии этих бактерий на слизистой кишечника и способствует их выведению [2]. В то же время есть данные о том, что SIgA способствуют E. coli в формировании биопленки на кишечном эпителии и таким образом участвуют в процессах становления нормальной кишечной микрофлоры [8]. В работах отечественных авторов показано, что антитела крови класса IgG к Re-гликолипиду регулируют численность эшерихий в кишечнике у детей и взро-

слых [19—21]. При параллельном изучении содержания антител к Re-гликолипиду в пуповинной крови и содержания эшерихий в фекалиях новорожденных выявлено, что при низких титрах антител количество бактерий в 1 г испражнений превышало 1010 [20].

В нашей работе показано, что антиэндотоксино-вые и антистрептококковые SIgA грудного молока не влияют на частоту колонизации толстой кишки E. coli и энтерококками у детей, но оказывают влияние на численность микроорганизмов. Достоверная отрицательная корреляционная связь обнаружена между содержанием антител к Re-гликолипиду и содержанием E. coli (р=0,04), а также между содержанием антител к антигенам Streptococcus spp. и попу-ляционным уровнем Enterococcus spp. (р=0,01). Таким образом, установлено, что антиэндотоксиновые антитела грудного молока ограничивают избыточный рост эшерихиозной флоры, а антистрептококковые SIgA — кишечных энтерококков у ребенка. Известно, что эндотоксин и антиэндотоксиновый иммунитет играют важную роль в патологии новорожденных и грудных детей. Доказано, что тяжелые бактериальные инфекции у этих детей, как правило, развиваются на фоне угнетения антиэндотоксинового иммунитета [21]. При рождении у детей в пуповинной крови определяются материнские антитела класса IgG к Re-гликолипиду, полученные трансплацентар-но. Обнаружение в нашем исследовании в грудном молоке антител класса SIgA к эндотоксину E. coli у 95,7% и Re-гликолипиду у 28,3% обследованных женщин свидетельствует, что грудное молоко является важным источником антител для формирования у грудного ребенка пассивного антиэндотоксинового иммунитета в постнеонатальном периоде.

В группах детей, получавших «серопозитивное» и «серонегативное» грудное молоко, частота колонизации толстой кишки одним и тем же видом условно-патогенных микроорганизмов (S.aureus, клебсиелла-ми, протеями, кандидами) достоверно не различалась. Также не выявлено достоверной корреляционной связи между титрами специфичных SIgA и попу-ляционным уровнем протеев, клебсиелл и S.aureus в фекалиях колонизированных детей. Специфичные антитела грудного молока, хотя и не препятствовали колонизации кишечника условно-патогенной микрофлорой, но, по-видимому, предупреждали развитие или ослабляли симптомы оппортунистической инфекции, поскольку в наблюдаемой группе детей, несмотря на присутствие условно-патогенных микроорганизмов (в том числе в высокой концентрации), не было зарегистрировано симптомов кишечной инфекции, а дисфункция кишечника носила умеренно выраженный характер.

Противоинфекционный эффект грудного молока в отношении условно-патогенной микрофлоры также может быть обусловлен неспецифическими

факторами защиты (олигосахариды, гликопротеины, лактоферрин, пероксидаза, антимикробные липиды, пептиды, лизоцим и др.) и нейтрализующим действием антител в отношении токсинов, продуцируемых условно-патогенными бактериями. Примером тому являются случаи бессимптомной колонизации кишечника грудных детей токсигенными штаммами C.difficile на фоне грудного вскармливания. Отсутствие диареи у этих детей связывается с нейтрализацией токсина А клостридий специфическими секреторными IgA грудного молока [22]. Имеется предположение, что в присутствии специфических антител грудного молока возбудители инфекционных заболеваний, попавшие в организм ребенка, в основном оказывают на него иммунизирующее действие [16].

Полученные нами данные свидетельствуют о том, что антимикробные SIgA грудного молока не выполняют функции «иммунного исключения» не только к симбиотическим бактериям, но и по отношению к условно-патогенной флоре. Этим можно объяснить возможность «оппортунистической колонизации» желудочно-кишечного тракта на первом этапе раз-

ЛИТЕРАТУРА

1. Куваева И.Б., Ладодо К.С. Микроэкологические и иммунные нарушения у детей. М: Медицина 1991; 240.

2. Van der Waaij L.A., Limburg P. C, Mesander G, van der Waaij D. In vivo IgA coating of anaerobic bacteria in human faeces. Gut 1996; 38: 3: 348—354.

3. Lawrence R.M., Pane C.A. Human breast milk: current concepts of immunology and infectious diseases. Curr Probl Pediat Adolesc Health Care 2007; 37: 2: 37—36.

4. Тришина Н.В. Связь между развитием дисбактериоза кишечника и состоянием антиэндотоксинового иммунитета: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. М 2003; 21.

5. Morrow A.L., Rangel J.M. Human milk protection against infectious diarrhea: implications for prevention and clinical care. Semin Pediat Infect Dis 2004; 15: 4: 221—228.

6. Takahashi T., Yoshida Y., Hatano S. et al. Reactivity of secretory IgA antibodies in breast milk from 107 Japanese mothers to 20 environmental antigens. Biol Neonate 2002; 82: 238—242.

7. Бондаренко В.М., Сафина Н.А., Зинкевич О.Д. и др. Особенности гуморального антибактериального иммунитета у детей раннего возраста с заболеваниями органов дыхания. Журн микробиол эпидемиол и иммунобиол 1999; 2: 65—68.

8. Bollinger R.R. Everett M.L., Palestrant D. et al. Human secretory immunoglobulin A may contribute to biofilm formation in the gut. Immunology 2003; 109: 4: 580—587.

9. Мазанкова Л.Н., Запруднов А.М. Микроэкология кишечника у детей в норме и при патологии. Рос мед вести 1996; 1: 34—43.

10. Николаева И.В., Анохин В.А., Айнутдинова И.А. Характеристика кишечной микрофлоры у здоровых детей раннего возраста Казани. Рос вестн перинатол и педи-ат 2009; 2: 30—33.

11. Самсыгина Г.А. Особенности становления биоценоза кишечника и кишечный дисбактериоз. Педиатрия. Приложение к журналу Consilium Medicum 2003; 2 30—33.

вития кишечной микрофлоры ребенка, а также достаточно высокую частоту колонизации кишечника условно-патогенными микроорганизмами у здоровых детей на фоне грудного вскармливания в постнео-натальном периоде. Известно, что аэробы и факультативные анаэробы (E. coli и другие энтеробактерии, энтерококки и стафилококки), которые первыми колонизируют кишечник новорожденного, подготавливают анаэробные условия для колонизации его облигатной флорой. Кроме того, условно-патогенные микробы наряду с симбиотическими микроорганизмами кишечника являются важным стимулом развития иммунной системы ребенка. Все это позволяет нам рассматривать колонизацию кишечника детей грудного возраста условно-патогенными микроорганизмами как естественный и, возможно, биологически целесообразный этап в процессе формирования сложной кишечной микробиоты человека. Это предположение подтверждает тот факт, что выделяющиеся в составе грудного молока секреторные иммуноглобулины к этим микробам не предотвращают колонизации кишечника условно-патогенной микрофлорой.

12. Jevinen K.M., Laine S.T., Järvenpää A.L., Suomalainen H.K. Does Low IgA in Human Milk Predispose the Infant to Development of Cow's Milk Allergy? Pediat Res 2000; 48: 4: 457—462.

13. Wang F., Wang Shi F.C. Secretory immunoglobulin A in human milk and infants' feces at 1-4 months after delivery. Chung Hua Fu Chan Ko Tsa Chih 1995; 30: 10: 588—590.

14. Araüjo E.D., Gongalves A.K., Cornetta M.C. et al. Evaluation of the secretory immunoglobulin A levels in the colostrum and milk of mothers of term and pre-term newborns. Braz J Infect Dis 2005; 5: 357—362.

15. Groer M, Davis M, Steele K. Associations between human milk SIgA and maternal immune, infectious, endocrine, and stress variables. J Hum Lact 2004; 20: 2: 153—158.

16. Zinkernagel R.M., Rozen N.F. Maternal antibodies, childhood infections, and autoimmune diseases. N Engl J Med 2001; 345: 18: 1331—1335.

17. Бондаренко В.М., Суворов А.Н. Симбиотические энтерококки и проблемы энтерококковой оппортунистической инфекции. М 2007; 30.

18. Martin R, Langa S., Reviriego C. et al. Human milk is a source of lactic acid bacteria for the infant gut. J Pediat 2003; 143: 6: 754—758.

19. Бондаренко В.М., Лиходед В.Г., Воробьев А.А. Иммуно-регуляция численности грамотрицательной микрофлоры кишечника. Журн микробиол 2004; 4: 90—93.

20. Лиходед В.Г., Бондаренко В.М. Антиэндотоксиновый иммунитет в регуляции численности эшерихиозной микрофлоры кишечника. М: Медицина 2007; 216.

21. Чемлев А.В. Состояние антиэндотоксинового иммунитета у доношенных новорожденных с инфекционной и неврологической патологией. I сессия РМАПО: сборник трудов. М 1995; 74.

22. Dallas S.D., Rolfe R.D. Binding of Clostridium difficile toxin A to human milk secretory component. J Med Microbiol 1998; 47: 10: 879—888.

Поступила 15.09.11