ГУМАНИЗИРОВАННЫЕ АНТИТЕЛА К CD19 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ОНКОЛОГИЧЕСКОГО, СВЯЗАННОГО С ТРАНСПЛАНТАЦИЕЙ И АУТОИММУННОГО ЗАБОЛЕВАНИЯ

1. Выделенное очищенное химерное, гуманизированное или человеческое моноклональное антитело или его фрагмент, содержащее/содержащий VH-область, которая включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 237, или VL-область, которая включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 238, где антитело связывается с человеческим антигеном CD19.
2. Антитело по п.1, где антитело содержит VH-область, которая включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 237, и VL-область, которая включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 238.
3. Антитело по п.1, в котором VH-область содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO.: 34, 44, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 191, 192 и 236; и в котором VK содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO.: 52, 62, 68, 70, 74, 76, 78, 80, 110, 111, 193, 194, 195, 196, 917, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206 и 207.
4. Антитело по п.2, в котором VH-область содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO: 34, 44, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 191, 192 и 236; и в котором VK содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO: 52, 62, 68, 70, 74, 76, 78, 80, 110, 111, 193, 194, 195, 196, 917, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206 и 207.
5. Антитело по п.4, где антитело выбрано из группы, включающей
а) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 34, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 68,
б) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 102, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 110,
в) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 103, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 111,
г) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO; 103, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 113,
д) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 104, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 112,
е) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 105, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 111,
ж) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 106, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 111,
з) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 107, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 111,
и) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 108, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 111,
к) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 109, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 111,
л) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 111,
м) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 193,
н) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 194,
о) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 195,
п) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 192, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 196,
р) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 197,
с) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 198,
т) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 106, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 199,
у) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 106, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 200,
ф) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 201,
х) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 202,
ц) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 106, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 203,
ч) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 106, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 198,
ш) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 192, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 204,
щ) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 205,
э) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 206,
ю) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 197 и
я) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 207.
6. Антитело по п.4, где антитело обладает функциональной активностью, выбранной из группы, включающей повышенную ADCC-активность, индукцию В-клеточного апоптоза, ингибирование В-клеточной пролиферации и способность вызывать in vivo В-клеточное истощение.
7. Антитело по п.4, где антитело имеет комплекс сцепленных N-гликозидом сахарных цепей, связанных с Fc-фрагментом, в котором фукоза не связана с N-ацетилглюкозамином на восстанавливающем конце в сахарной цепи.
8. Антитело по п.7, где антитело эффективно опосредует in vitro ADCC-активность в отношении клеточных линий Karpas-422, Karpas-1106P и DB, но не в отношении клеточной линии Granta-519.
9. Антитело по п.7, где антитело обладает способностью вызывать В-клеточное истощение на созданной на животных модели, где В-клетки выбраны из группы, включающей находящиеся в кровотоке В-клетки, В-клетки крови, селезеночные В-клетки, В-клетки маргинальной зоны, фолликулярные В-клетки, перитонеальные В-клетки и/или В-клетки костного мозга.
10. Антитело по п.9, где истощение снижает уровни В-клеток по меньшей мере на 50%, по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 90% или по меньшей мере на 95% через 7 дней после введения антитела в дозе 2,5 мг/кг.
11. Антитело по п.4, где антитело представляет собой вариант Fc-фрагмента, где вариант Fc обладает измененной аффинностью в отношении одного или нескольких лигандов Fc, выбранных из группы, включающей: C1q, FcγRI, FcγRIIA, FcγRIIB, FcγRIIIA и FcγRIV.
12. Антитело по п.11, где вариант Fc обладает аффинностью в отношении Fc-рецептора FcγRIIIA, которая по меньшей мере примерно в 5 раз ниже, чем аффинность соответствующей молекулы, с которой проводится сравнение, и где вариант Fc обладает примерно 2-кратной аффинностью в отношении Fc-рецептора FcγRIIB по сравнению с аффинностью соответствующей молекулы, с которой проводится сравнение.
13. Антитело по п.12, где вариант Fc содержит мутации, приводящие к повышенной ADCC-активности.
14. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая полипептид, который содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO: 34, 44, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 191, 192, 236, 52, 62, 68, 70, 74, 76, 78, 80, 110, 111, 193, 194, 195, 196, 917, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206 и 207.
15. Выделенная клетка, экспрессирующая антитело по п.4.
16. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело по п.4 в фармацевтически приемлемом носителе.
17. Способ лечения В-клеточного заболевания или нарушения у человека, заключающийся в том, что вводят человеку, который нуждается в этом, в терапевтически эффективном количестве антитело,
а) где антитело представляет собой химерное, гуманизированное или человеческое моноклональное антитело или его фрагмент,
б) где антитело содержит VH- или VL-область, при этом VH-область содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, включающий SEQ ID NO: 34, 44, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 191, 192 и 236,
в) где VL-область содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, включающей SEQ ID NO: 52, 62, 68, 70, 74, 76, 78, 80, 110, 111, 193, 194, 195, 196, 917, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206 и 207,
г) где антитело связывается с человеческим антигеном CD19, и
д) где заболевание или нарушение выбирают из группы, включающей В-клеточное злокачественное состояние, аутоиммунное заболевание, аутоиммунное нарушение, гуморальное отторжение трансплантата у больного человека, реакцию трансплантат-против-хозяина (GVHD) и посттрансплантационное лимфопролиферативное нарушение у человека-реципиента трансплантата.
18. Способ по п.17, в котором антитело выбирают из группы, включающей
а) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 34, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 68,
б) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 102, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 110,
в) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 103, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 111,
г) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 103, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 113,
д) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 104, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 112,
е) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 105, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 111,
ж) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 106, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 111,
з) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 107, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 111,
и) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 108, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 111,
к) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 109, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 111,
л) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 111,
м) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 193,
н) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 194,
о) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 195,
п) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 192, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 196,
р) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 197,
с) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 198,
т) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 106, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 199,
у) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 106, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 200,
ф) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 201,
х) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 202,
ц) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 106, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 203,
ч) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 106, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 198,
ш) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 192, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 204,
щ) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 205,
э) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 206,
ю) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 197 и
я) антитело, которое содержит VH-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 191, и VL-область, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 207.
19. Способ по п.17, в котором вызывают истощение В-клеток, выбранных из группы, включающей находящиеся в кровотоке В-клетки, В-клетки крови, селезеночные В-клетки, В-клетки маргинальной зоны, фолликулярные В-клетки, перитонеальные В-клетки и/или В-клетки костного мозга.
20. Способ по п.17, в котором вызывают истощение В-клеток, выбранных из группы, включающей предшественники В-клеток, ранние про-В-клетки, поздние про-В-клетки, большие пре-В-клетки, малые пре-В-клетки, незрелые В-клетки, зрелые В-клетки, стимулированные антигеном В-клетки и/или плазматические клетки.
21. Способ по п.17, в котором антитело имеет повышенную ADCC-активность.
22. Способ по п.21, в котором истощение снижает уровни В-клеток по меньшей мере примерно на 20%, по меньшей мере примерно на 30%, по меньшей мере примерно на 40%, по меньшей мере примерно на 50%, по меньшей мере примерно на 60%, по меньшей мере примерно на 70%, по меньшей мере примерно на 80%, по меньшей мере примерно на 90%, по меньшей мере примерно на 95% или примерно на 100%.
23. Способ по п.21, в котором истощение сохраняется в течение периода времени, выбранного из группы, включающей по меньшей мере 1 неделю, по меньшей мере 2 недели, по меньшей мере 3 недели, по меньшей мере 4 недели, по меньшей мере 5 недель, по меньшей мере 6 недель, по меньшей мере 7 недель, по меньшей мере 8 недель, по меньшей мере 3 месяца, по меньшей мере 4 месяца, по меньшей мере 5 месяцев, по меньшей мере 6 месяцев, по меньшей мере 7 месяцев, по меньшей мере 8 месяцев, по меньшей мере 9 месяцев, по меньшей мере 10 месяцев, по меньшей мере 11 месяцев или по меньшей мере 12 месяцев.