Использование густого экстракта фасоли, метформина и глибенкламида для коррекции осложнений дитизонового диабета у кроликов

ФАРМАКОЛОГИЯ, КЛИНИЧЕСКАЯ ФАРМАКОЛОГИЯ

© РЫБАК В.А., МАЛОШТАН Л.Н., 2015

ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ГУСТОГО ЭКСТРАКТА ФАСОЛИ, МЕТФОРМИНА И ГЛИБЕНКЛАМИДА ДЛЯ КОРРЕКЦИИ ОСЛОЖНЕНИЙ ДИТИЗОНОВОГО ДИАБЕТА У КРОЛИКОВ

РЫБАК В.А., МАЛОШТАН Л.Н.

Национальный фармацевтический университет, Украина

Резюме.

Изучено влияние густого экстракта фасоли (ГЭФ), метформина и глибенкламида на уровень глюкозы и кетоновых тел в моче, рН мочи на модели дитизонового диабета у кроликов. Через 7, 10, 12 и 14 дней исследования ГЭФ снижал уровень глюкозы в моче у животных и преобладал над действием метформина на 9,8%, 9,7%, 31,2% и 37,4%, но уступал действию глибенкламида на 4,5%, 5,9%, 1,3% и 0,7%. ГЭФ снижал уровень кетоновых тел в моче у животных через 7, 10, 12 и 14 дней исследования и преобладал над действием метформина на 5,5%, 10,2%, 8,4% и 12,0%, но уступал действию глибенкламида через 7, 10 и 14 дней исследования на 4,1%, 3,8% и 3,3%, а через 12 дней - преобладал над действием глибенкламида на 2,4%. На 14 день исследования ГЭФ способствовал нормализации рН мочи у животных, что соответствовало (8,4±0,38) щелочной среде. В группе животных, в лечении которых применяли глибенкламид, показатель рН мочи приблизился к исходным данным (7,9±0,40), а при использовании в лечении животных метформина, рН мочи еще была кислой (7,5±0,51). Установлено, что при длительном введении ГЭФ, начиная с 7 дня и на протяжении 14 дней исследования, снижал уровень глюкозы и кетоновых тел в моче, способствовал нормализации рН мочи у животных с дитизоновым диабетом, преобладал над действием метформина и приближался к действию глибенкламида. ГЭФ является перспективным гипогликемическим средством в комплексной терапии острой инсулиновой недостаточности, а также лечении СД 2-го типа у животных, что позволит предупредить развитие осложнений заболевания.

Ключевые слова: дитизоновый диабет, метформин, глибенкламид, густой экстракт фасоли. Abstract.

We have studied the influence of the thick bean extract (TBE), metformin and glibenclamide on the level of glucose and ketone bodies in the urine, urine pH on the model of dithizone diabetes in rabbits. In 7, 10, 12 and 14 days of the research the TBE reduced glucose level in the urine of animals and prevailed over the effect of metformin by 9,8%, 9,7%, 31,2% and 37,4%, but was inferior to the action of glibenclamide by 4,5%, 5,9 %, 1,3% and 0,7%. The TBE reduced the level of ketone bodies in the urine of the animals in 7, 10, 12 and 14 days of the study, and prevailed over the effect of metformin by 5,5%, 10,2%, 8,4% and 12,0%, but was inferior to the action of glibenclamide in 7, 10 and 14 days of the study by 4,1%, 3,8% and 3,3%, and in 12 days - the TBE predominated over the effect of glibenclamide by 2,4%. On the 14th day of the research the TBE facilitated the normalization of urine pH in the animals, which corresponded (8,4±0,38) to alkaline medium. In the group of animals for the treatment of which glibenclamide was applied, urine pH approximated to the original data (7,9±0,40), but urine pH was still acidic (7,5±0,51) when metformin was used in the treatment of animals. It was found out that the long-term administration of the TBE, beginning with the 7th day and during 14 days of the study decreased blood glucose and ketone bodies levels in the urine, helped to normalize urine pH in the animals with dithizone diabetes, prevailed over the action of metformin and approximated to the action of glibenclamide. Thus the TBE is a promising hypoglycemic agent in the complex treatment of acute insulin deficiency, as well as in the treatment of DM of the 2nd type in animals, which will enable the prevention of the development of the disease complications. Key words: dithizone diabetes, metformin, glibenclamide, thick bean extract.

Сахарный диабет (СД) - это группа метаболических заболеваний, характеризующихся гипергликемией, которая является результа-

том дефектов секреции инсулина, действия инсулина или обоих этих факторов [1]. Хроническая гипергликемия при СД сочетается

с повреждением или дисфункцией различных органов, особенно глаз, почек, нервной системы, сердца и кровеносных сосудов [2, 3].

Клиническая картина СД является следствием острого или хронического дефицита инсулина, который, в свою очередь, может быть абсолютным или относительным. Острый дефицит инсулина вызывает развитие быстрой декомпенсации углеводного и других видов обмена и сопровождается яркой клиникой в виде гипергликемии, глюкозурии, полиурии, полидипсии, похудения вместе с гиперфагией, кетоазидозом вплоть до развития диабетической комы. Хронический дефицит инсулина на фоне субкомпенсированного СД, чаще 2-го типа, имеет менее выраженные симптомы декомпенсации метаболизма, однако нередко уже в дебюте заболевания выявляются поздние сосудистые осложнения СД. Это свидетельствует о том, что данный тип заболевания длительное время протекал бессимптомно [4, 5].

Острыми осложнениями СД являются диабетическая кетоацидотическая, гиперос-молярная (некетонемическая) и лактатацидо-тическая комы, а хроническими - изменения сосудов, наблюдающиеся при длительном течении - диабетические микроангиопатии, характеризующиеся изменениями венул, артери-ол и капилляров [6].

Патология почек при СД встречается в виде специфических повреждений - диабетической болезни почек или диабетической не-фропатии (ДН) (диффузный гломерулоскле-роз, узелковый гломерулосклероз или синдром Киммельстила-Вильсона) и неспецифических поражений почек - бактериурии, пиелонефрита, карбункула почки, апостематозного нефрита, абсцесса почки, туберкулеза почки, некротического папилита или папиллярного некроза [7, 8].

ДН наблюдается при продолжительности заболевания от 20 до 30 лет и составляет при СД 1-го типа 30-40%, а при СД 2-го типа 35-50% [9].

Несмотря на достаточно широкий арсенал современных антидиабетических средств, проблема лечения и профилактики СД остается окончательно не решенной, что побуждает к поиску и созданию новых лекарственных препаратов для коррекции осложнений заболевания.

Сахароснижающим действием обладают порядка 200 растений, содержащих инулин, инозин, галенин. Они оказывают ощелачива-ющий эффект, а в слабощелочной среде глюкоза превращается в маннозу или фруктозу, расщепление которых производится без инсулина, что позволяет снизить потребность в нем. Литературные данные свидетельствуют о применении галеновых препаратов из стручков фасоли при лечении СД 2-го типа. Действующим веществом фасоли является гуани-дин и его производные [10].

Экспериментальные исследования выполнены согласно планам научно-исследовательских работ Национального фармацевтического университета по проблемам МЗ Украины «Фармакологические исследования биологически активных веществ и лекарственных средств синтетического и естественного происхождения, их применение в медицинской практике» (№ Государственной регистрации 0103Ш00478).

Целью исследования явилось изучение влияния густого экстракта фасоли (ГЭФ), мет-формина и глибенкламида на уровень глюкозы и кетоновых тел в моче, рН мочи на модели дитизонового диабета у кроликов.

Материалы и методы

Экспериментальные исследования были проведены на 25 кроликах породы Шиншилла массой 2,5-3,0 кг в соответствии с требованиями комиссии по биоэтике и «Общих этических принципов экспериментов на животных» (Киев, 2001), что соответствуют положениям «Европейской конвенции о защите позвоночных животных, что используются для экспериментальных и других научных целей» (Страсбург, 1985) [11].

Дитизоновый диабет (абсолютную ин-сулиновую недостаточность прямого бета-ци-тотоксического генеза) индуцировали внутривенной инъекцией дитизона (35 мг/кг массы тела) самцам кроликам, которые предварительно голодали на протяжении 16-18 часов [11].

В первой серии исследований, при изучении влияния ГЭФ, метформина и глибенкла-мида на уровень глюкозы и кетоновых тел в моче, 20 животных с дитизоновым диабетом были разделены на 4 группы (по 5 в каждой).

Животные 1 группы (диабетический контроль) внутрижелудочно получали эквивалентное количество питьевой воды, 2 группы - метфор-мин, 3 группы - глибенкламид и 4 группы -ГЭФ.

Во второй серии исследований, при изучении влияния ГЭФ, метформина и глибен-кламида на рН мочи, были использованы те же самые группы животных, что и в первой серии исследований, с добавлением 5 животных группы интактного контроля. Животные 1 и 2 группы (интактный контроль и диабетический контроль) внутрижелудочно получали эквивалентное количество питьевой воды, 3 группы

- метформин, 4 группы - глибенкламид и 5 группы - ГЭФ.

В первую серию исследований не включены животные группы интактный контроль, так как глюкозы и кетоновых тел в моче не было обнаружено [12].

Начиная со 2 суток исследований, животным с дитизоновым диабетом вводили пе-рорально (два раза в день) на протяжении двух недель ГЭФ в дозе 40 мг/кг и препараты сравнения - метформин в дозе 30 мг/кг и глибен-кламид в дозе 5 мг/кг.

В качестве референс-препаратов были выбраны метформин (диаформин, табл. 0,5 г) и глибенкламид (табл. 0,005 г) производства ОАО «Фармак», Украина в пересчете на животное [13].

Влияние ГЭФ, препаратов сравнения

- метформина и глибенламида на уровень глюкозы и кетоновых тел в моче, рН мочи на модели дитизонового диабета изучали при длительном введении (через 3, 5, 7, 10, 12 и 14 дней).

Для исследования использовали утреннюю мочу животных, собранную при помощи катетера. После забора материала определяли наличие глюкозы и кетоновых тел в моче, а также рН мочи с помощью диагностических тест-полосок «Phan Laura» для анализатора мочи «Laura Smart» фирмы «Pliva-Lashema Diagnostika», Чехия.

Статистическую обработку полученных результатов проводили при помощи программы «Statistica 6.1». При проверке статистических гипотез рассчитывались статистические критерии и находились соответствующие им статистические значимости р. Порог статистической значимости принят равным 0,05. При

р<0,05 принималось решение о статистической значимости различий, а при р>0,05 принималось решение об отсутствии статистически значимых различий.

Проверка нормальности распределений проведена с помощью критериев Шапиро-Уилка и Колмогорова-Смирнова. Установлено, что данные распределены по нормальному закону на уровне статистической значимости р>0,05. Учитывая нормальность распределений, результаты представлены как среднее значение х и стандартное отклонение БО (х ±ББ).

Для проверки однородности дисперсий использован критерий Левена. Установлено, что дисперсии однородны на уровне статистической значимости р>0,05.

Учитывая нормальность распределений и однородность дисперсий, в работе использован параметрический дисперсионный анализ. Множественные сравнения средних значений проведены при помощи критерия Шеффе.

Результаты и обсуждение

Через 3 дня после моделирования дити-зонового диабета у кроликов наблюдалось снижение массы тела, повышение базальной гипергликемии и уровня гликозилированного гемоглобина в крови [14], что свидетельствовало о развитии диабета.

Гипергликемия обусловлена снижением утилизации глюкозы периферическими тканями вследствие недостатка инсулина или уменьшения количества рецепторов к инсулину и их аффинности. Гипергликемия, в свою очередь, приводит к глюкозурии. Глюкоза полностью реабсорбируется в канальцах почек в том случае, если ее концентрация в крови превышает 10 ммоль/л. Превышение этой концентрации становится причиной выделения глюкозы с мочой [1].

Через 3 дня исследования в контрольной группе животных развивалась глюкозурия, которая через 10 дней исследования увеличилась до 93,1±5,51 ммоль/л, а через 14 дней незначительно снизилась до 86,6±3,02 ммоль/л (табл. 1).

При декомпенсированном СД усиливаются процессы липолиза, что сопровождается потерей массы тела и появлением кетоновых тел в моче (кетонурия, ацетонурия). Накопление кетоновых тел вызывает развитие состоя-

Таблица 1 - Влияние ГЭФ на уровень глюкозы в моче у кроликов с дитизоновым диабетом,

Исследуемый объект/мг/кг Динамика содержания глюкозы

Исходное количество глюкозы через 3 дня через 5 дней Через 7 дней через 10 дней через 12 дней через 14 дней

Контрольная патология, п=5 68,6±4,99 79,1± 6,34 82,2± 5,74 86,6± 5,26 93,1± 5,51 89,9± 3,60 86,6± 3,02

Метформин (30 мг/кг), п=5 65,8±4,33 75,3± 5,88 70,1± 4,35* 59,6± 3,79* 48,3± 2,62* 44,1± 3,05* 40,0± 2,29*

Глибенкламид (5 мг/кг), п=5 69,3±4,67 77,4± 7,05 68,0± 5,07* 47,2± 3,54*/# 33,8± 2,42*/# 14,9± 1,35*/# 7,0± 1,22*/#

ГЭФ (40 мг/кг), п=5 66,9±3,92 73,5± 4,68 70,2± 5,54* 51,2± 4,15* 39,3± 3,07*/# 16,1± 1,40*/# 7,6± 1,41*/#

Примечание: * - статистически значимые различия (р<0,05) всех групп по отношению к контрольной патологи; # - статистически значимые различия (р<0,05) групп «Глибенкламид» и «ГЭФ» по отношению к «Метформину».

ния диабетического кетоацидоза и приводит к уменьшению рН и тканевой гипоксии [15, 16].

Концентрация кетоновых тел в моче у животных контрольной группы увеличивалась в течение всего периода исследования и через 14 дней достигла показателя 9,1±0,34 ммоль/л (табл. 2).

Появление кетоновых тел в моче у животных свидетельствует о серьезных метаболических сдвигах, нарушениях пластического и энергетического дисбаланса в организме при СД.

Через 3 дня развития дитизонового диабета и лечения животных ГЭФ, метформином и глибенкламидом наблюдалось повышение

уровня глюкозы в моче, а через 5 дней - незначительное снижение.

Уровень кетоновых тел в моче у животных через 3 дня исследования, получавших в лечении метформин, не изменился по сравнению с исходным количеством, а при лечении глибенкламидом и ГЭФ - незначительно увеличился. Через 5 дней исследования, под действием метформина и ГЭФ, наблюдалось увеличение кетоновых тел в моче, а под действием глибенкламида - уменьшение.

Через 7, 10, 12 и 14 дней лечения животных глибенкламидом происходило выраженное снижение уровня глюкозы в моче на 45,5%,

Таблица 2 - Влияние ГЭФ на уровень кетоновых тел в моче у кроликов с дитизоновым диабетом,

Динамика содержания кетоновых тел

Исследуемый объект/мг/кг Исходное количество кетоновых тел через 3 дня через 5 дней через 7 дней через 10 дней через 12 дней через 14 дней

Контрольная 4,7±0,35 5,1± 6,8± 7,3± 7,9± 8,4± 9,1±

патология, п=5 0,40 0,50 0,43 0,48 0,33 0,34

Метформин 4,8±0,34 4,8± 5,4± 5,1± 5,1± 4,7± 4,6±

(30 мг/кг), п=5 0,37 0,33* 0,32* 0,29* 0,32* 0,25*

Глибенкламид 4,6±0,29 4,8± 4,1± 4,4± 4,0± 4,2± 3,2±

(5 мг/кг), п=5 0,45 0,31*/# 0,34* 0,31*/# 0,39* 0,32*/#

ГЭФ 5,0±0,30 5,4± 6,2± 4,7± 4,3± 4,0± 3,5±

(40 мг/кг), п=5 0,34 0,50 ◊ 0,38* 0,33* 0,34*/# 0,30*/#

Примечание: * - статистически значимые различия (р<0,05) всех групп по отношению к контрольной патологи; # - статистически значимые различия (р<0,05) групп «Глибенкламид» и «ГЭФ» по отношению к «Метформину»; ◊ - статистически значимые различия (р<0,05) группы «ГЭФ» по отношению к «Глибен-кламиду».

63,7%, 83,4% и 91,9% по сравнению с контролем.

На протяжении всего исследования зафиксировано скачкообразное действие глибен-кламида на уровень кетоновых тел в моче у животных. Выраженный результат зафиксирован на 5, 10 и 14 день, что соответствовало 39,7%, 49,4% и 64,8% по сравнению с контролем.

ГЭФ способствовал плавному снижению уровню глюкозы в моче у животных через 7, 10, 12 и 14 дней исследования на 41,0%; 57,8%, 82,1% и 91,2% по сравнению с контролем.

Через 7, 10 и 14 дней исследований ГЭФ снижал количество кетоновых тел в моче у животных на 35,6%, 45,6% и 61,5% по сравнению с контролем и приближался к действию гли-бенкламида, а через 12 дней - преобладал над действием глибенкламида на 4,8%.

Под действием метформина через 7, 10, 12 и 14 дней исследования наблюдается снижение содержания глюкозы в моче у животных на 31,2%, 48,1%, 50,9% и 53,8%, а кетоновых тел - на 30,1%, 35,4%, 44,0% и 49,5% по сравнению с контролем.

Таким образом, ГЭФ снижал уровень глюкозы и кетоновых тел в моче у животных с дитизоновым диабетом, преобладал над действием метформина и приближался к действию глибенкламида.

У интактных животных реакция мочи была щелочной, находилась в пределах 7,9-8,2

и практически не менялась на протяжении всего исследования (табл. 3).

У животных с дитизоновым диабетом и без лечения (контрольная патология) на протяжения всего исследования прослеживалось изменение реакции мочи в сторону кислой, особенно к 14 дню исследования - 5,2±0,28.

В группах животных, получавших лечение метформином, глибенкламидом и ГЭФ, так же, как и в контрольной группе, через 3 и 5 дней исследования реакция мочи изменялась в сторону кислой, что свидетельствовало о развитии диабета у животных.

Через 7-12 дней лечения животных ГЭФ, метформином и глибенкламидом наблюдалось незначительное изменение реакции мочи, приближающееся к исходным данным.

На 14 день исследования ГЭФ способствовал нормализации рН мочи у животных, что соответствовало (8,4±0,38) щелочной среде. В группе животных, в лечении которых применяли глибенкламид, рН мочи приблизилась к исходным данным (7,9±0,40), а при использовании в лечении животных метформи-на, рН мочи еще была кислой (7,5±0,51).

Заключение

1. При длительном введении ГЭФ, начиная с 7 дня и на протяжении всего периода исследования, снижал уровень глюкозы и

Таблица 3 - Влияние ГЭФ на рН мочи кроликов с дитизоновым диабетом,

Исследуемый объект/мг/кг Динамика реакции мочи, единицы рН

Исходные данные через 3 дня через 5 дней через 7 дней через 10 дней через 12 дней через 14 дней

Интактный контроль, п=5 8,2±0,28 8,0± 0,35 7,9± 0,40 8,1± 0,28 8,1± 0,42 7,9± 0,33 7,9± 0,28

Контрольная патология, п=5 8,1±0,42 6,9± 0,34* 6,3± 0,30* 6,2± 0,32* 6,0± 0,28* 5,7± 0,3* 5,2± 0,28*

Метформин (30 мг/кг), п=5 7,8±0,54 6,6± 0,30* 6,3± 0,35* 6,7± 0,36* 7,2± 0,48*/** 7,3± 0,49** 7,5± 0,51**

Глибенкламид (5 мг/кг), п=5 8,0±0,50 7,0± 0,38* 6,7± 0,40* 6,9± 0,32* 7,3± 0,41** 7,6± 0,36** 7,9± 0,40**

ГЭФ (40 мг/кг), п=5 7,9±0,47 6,8± 0,38* 6,5± 0,28* 7,0± 0,38*/** 7,6± 0,44** 8,0± 0,41** 8,4± 0,38**/#

Примечание: * - статистически значимые различия (р<0,05) всех групп по отношению к интактному контролю; ** - статистически значимые различия (р<0,05) групп «Метформин», «Глибенкламид» и «ГЭФ» по отношению к контрольной патологи; # - статистически значимые различия (р<0,05) групп «Глибенкла-мид» и «ГЭФ» по отношению к «Метформину».

кетоновых тел в моче, способствовал нормализации рН мочи у животных с дитизоновым диабетом, преобладал над действием метфор-мина и приближался к действию глибенкла-мида.

2. ГЭФ может быть использован как перспективное гипогликемическое средство в лечении экспериментального СД, что позволит предупредить острые осложнения заболевания у животных - глюкозурию и кетонурию.

Литература

1. Дедов, И. И. Сахарный диабет : руководство для врачей / И. И. Дедов, М. В. Шестакова. -М. : Универсум Паблишинг, 2003. - 455 с.

2. KDOQI Clinical Practice Guidelines and Clinical Practice recommendations for Diabetes and Chronic Kidney Disease // AJKD. - 2007 Feb. -Vol. 49, 2 Suppl. 2. - P. S12-S154.

3. Caner risk in diabetic patients treated with metformin: a systematic review and meta-analysis / H. Noto [et al.] // PLoS One. - 2012. - Vol. 7, N 3. - P. e33411.

4. Балаболкин, М. И. Лечение сахарного диабета и его осложнений : учеб. пособие / М. И. Балаболкин, Е. М. Клебанова, В. М. Креминская. -М. : Медицина, 2005. - 512 с.

5. Marshall, S. M. Diabetic ketoacidosis and hyperglycaemic non-ketotic coma / S. M. Marshall, M. Walker, K. G. M. Alberti // Alberti, K. G. M. Iternational Textbook on Diabetes Mellitus / K. G. M. Alberti, P. Zimmet, R. A. DeFronzo. - New York : John Wiley, 1997. - Р. 1215-1229.

6. Dronavalli, S. The pathogenesis of diabetic nephropathy / S. Dronavalli, I. Duka, G. L. Bakis // Nat. Clin. Pract. Endocrinol. Metab. - 2008 Aug. - Vol. 4, N 8. - P. 444-452.

7. Currie, C. J. The influence of glucose-lowering

therapies on cancer risk in tyre 2 diabetes / C. J. Currie, C. D. Poole, E. A. Gale // Diabetologia. -2009 Sep. - Vol. 52, N 9. - P. 1766-1777.

8. Evans, T. C. Diabetic nephropathy / T. C. Evans, P. Capell // Clinical Diabetes. - 2000. - Vol. 18, N 1. - P. 1-16.

9. Шуляренко, Л. В. Хротчна ддабетична хвороба нирок: сучасний погляд на проблему / Л. В. Шуляренко // Ендокринолопя. - 2013. - Т. 18, № 1. - С. 73-82.

10. Сучасш аспекти перорально! фармакотерапл цукрового ддабету 2 типу. Досягнення НфаУ : монографiя / В. П. Черних [та шт.]. - Харюв : БУРУН i К, 2010. - 208 с.

11. Доклинические исследования лекарственных средств : метод. рек. / под ред. А. В. Стефанова.

- Киев : Авиценна, 2001. - 528 с.

12. Лабораторные животные. Разведение, содержание, использование в эксперименте / И. П. Западнюк [и др.]. - Киев : Вища школа, 1983.

- 383 с.

13. Рыболовлев, Ю. Р. Дозирование веществ для млекопитающих по константе биологической активности / Ю. Р. Рыболовлев // Доклады АН СССР. - 1979. - Т. 247, № 6. - С. 1513-1516.

14. Рыбак, В. А. Изучение гипогликемической активности густого экстракта фасоли на модели дитизонового диабета / В. А. Рыбак, Л. Н. Ма-лоштан // Медицина и образование в Сибири.

- 2014. - № 3. - Режим доступа: http://ngmu.ru/ cozo/mos/article/text_full.php&id=1441.

15. Маньковський, Б. М. Вчасна ддагностика цукрового дiабету: результата дослвдження Дiа Скрин 50 / Б. М. Маньковський, О. С. Ларш // Клшчна ендокринолопя та ендокринолопчна х1рурыя. - 2007. - № 1. - С. 42-48.

16. Камышников, В. С. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике / В. С. Камышников. - М. : МЕДпресс-информ, 2009. - 896 с.

Поступила 11.09.2014 г. Принята в печать 06.02.2015 г.

Сведения об авторах:

Рыбак В.А. - к.б.н., доцент кафедры биологии Национального фармацевтического университета, Украина; Малоштан Л.Н. - д.б.н., профессор, заведующая кафедрой физиологии и анатомии человека Национального фармацевтического университета, Украина.

Адрес для корреспонденции: Украина, 61002, г. Харьков, ул. Мельникова, 12, Национальный фармацевтический университет, кафедра биологии. Тел.раб.: (057) 706-23-42, е-тай: vitarybak@mail.ru - Рыбак Виктория Анатольевна.