СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ХИМИЧЕСКИ ПОЛИСИАЛИРОВАННОЙ РЕКОМБИНАНТНОЙ БУТИРИЛХОЛИНЭСТЕРАЗЫ ЧЕЛОВЕКА

1. Способ получения сиалированной рекомбинантной бутирилхолинэстеразы человека, включающий стадии:
- культивирования клеток СНО, трансформированных вектором экспрессии, содержащим ген бутирилхолинэстеразы человека с сайтом полиаденилирования под контролем эукариотического промотора и ген маркера селекции, и вектором экспрессии, содержащим ген PRAD с сайтом полиаденилирования под контролем промотора фактора элонгации (EF) человека и ген маркера селекции, в безбелковой питательной среде;
- очистки полученной рекомбинантной бутирилхолинэстеразы человека последовательно путем ультра-фильтрации, аффинной хроматографии, анионообменной хроматографии и диафильтрации; и
- химического сиалирования очищенной рекомбинантной бутирилхолинэстеразы человека при pH 6,0-7,0, соотношении [САO27]/[рчБуХЭ] от 20 до 100, в присутствии цианоборгидрида.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный вектор экспрессии, содержащий ген бутирилхолинэстеразы человека, под контролем эукариотических промоторов, выбран из SV40/FerH/mEF1, hEF1-HTLV, hFerL и hFerH.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что вектор, содержащий ген бутирилхолинэстеразы человека, содержит дополнительно не промоторные регуляторы экспрессии, и/или MAR/SAR-последовательности.
4. Способ по п.3, отличающийся тем, что не промоторный регулятор экспрессии представляет собой энхансер.
5. Способ по п.4, отличающийся тем, что энхансер представляет собой энхансер CMV мыши.
6. Способ по п.3, отличающийся тем, что, MAR- последовательность представляет собой MAR-последовательность гена р-интерферона человека.
7. Способ по любому из пп.1-6, отличающийся тем, что химическое сиалирование осуществляют при температуре приблизительно +25°C.
8. Способ по любому из пп.1-6, отличающийся тем, что концентрация цианоборгидрида составляет от 2,5 до 4 мг/мл.
9. Способ по любому из пп.1-6, отличающийся тем, что концентрация цианоборгидрида составляет 3,16 мг/мл.
10. Сиалированная рекомбинантная бутирилхолинэстераза человека, полученная способом по любому из пп.1-9.
11. Фармацевтическая композиция для лечения, предотвращения, подавления или снижения токсических эффектов фосфорорганических соединений, содержащая бутирилхолинэстеразу по п.10 в эффективном количестве и фармацевтически приемлемый носитель.
12. Способ лечения, предотвращения, подавления или снижения токсических эффектов фосфорорганических соединений у животного, включающий введение указанному животному бутирилхолинэстеразы по п.10 или композиции по п.11.
13. Способ по п.12, отличающийся тем, что животное является человеком.
14. Способ по п.12 или 13, отличающийся тем, что введение бутирилхолинэстеразы по п.10 или композиции по п.11 осуществляют до контакта животного с фосфорорганическим соединением.