Возможности стационарной и разрешенной во времени сенсибилизированной флуоресценции при определении некоторых тетрациклинов в мицеллярных средах

4. Zhou J., Xue X., Li Y., Zhang J., Chen F., Wu L., Chen L., Zhao J. Multiresidue determination of tetracycline antibiotics in propolis by using HPLC-UV detection with ultrasonic-assisted extraction and two-step solid phase extraction // Food Chem. 2009. Vol. 115. P. 1074-1080.

5. Cinquina A. L., Longo F., Anastasi G., Giannetti L., CozzaniR. Validation of a high-performance liquid chromatography method for the determination of oxytet-racycline, tetracycline, chlortetracycline and doxycycline in bovine milk and muscle // J. Chromatogr. A. 2003. Vol. 987. P. 277-233.

6. Fritz J. W., Zuo Y. Simultaneous determination of tetracycline, oxytetracycline, and 4-epitetracycline in milk by

high-performance liquid chromatography // Food Chem. 2007. Vol. 105. P. 1297-1301.

7. Mamani M. C. V., Reyes F. G. R., Rath S. Multiresidue determination of tetracyclines, sulphonamides and chlor-amphenicol in bovine milk using HPLC-DAD // Food Chem. 2009. Vol. 117. P. 545-552.

8. DeRuyckH., DeRidderH. Determination of tetracycline antibiotics in cow's milk by liquid chromatography/tan-dem mass spectrometry // Rap. Com. Mass Spec. 2007. Vol. 21, № 9. P. 1511-1520.

9. Bruno F., Curini R., Di Corcia A., Nazzari M., Palla-grosi M. An original approach to determination traces of tetracycline antibiotics in milk and eggs by solid-phase extraction and liquid chromatography/mass spectromet-ry // Rap. Com. MassSpec. 2002. № 16. P. 1365-1376.

УДК 546.661:543.426

ВОЗМОЖНОСТИ СТАЦИОНАРНОЙ И РАЗРЕШЕННОЙ ВО ВРЕМЕНИ СЕНСИБИЛИЗИРОВАННОЙ ФЛУОРЕСЦЕНЦИИ ПРИ ОПРЕДЕЛЕНИИ НЕКОТОРЫХ ТЕТРАЦИКЛИНОВ В МИЦЕЛЛЯРНЫХ СРЕДАХ

Т. Д. Смирнова, И. И. Паращенко, Е. А. Желобицкая

Саратовский государственный университет E-mail: Smirnovatd@mail.ru

Изучены особенности влияния природы второго лиганда, мицелл ПАВ на интенсивность сенсибилизированной флуоресценции хелатов европия (III) с некоторыми производными тетрациклина. Предложен подход к флуориметрическому определению суммы трех тетрациклинов и повышению избирательности, заключающийся в измерении интенсивности эмиссии хелатов с помощью стационарной и разрешенной во времени флуоресценции. Установлено оптимальное время задержки измерения сигнала, 100 мкс, позволяющее максимально увеличить соотношение интенсивностей флуоресценции разнолигандных хелатов европия (III) в мицеллярных средах цетилпиридиния определяемых и мешающих антибиотиков. Ключевые слова: сенсибилизированная флуоресценция, те-трациклины, мицеллярные среды, время жизни сенсибилизированной флуоресценции.

Possible Stationary and Time-resolved Sensitized Fluorescencein Defining Some of Tetracycline Micellar Media

T. D. Smirnova, I. I. Parashchenko, E. A. Zhelobitskaya

The features of the influence of the nature of the second ligand, surfactant micelles on the intensity of sensitized fluorescence chelates of europium (III) with some derivatives of tetracycline. Based on the results of the study fluorimetric properties and decay kinetics of the fluorescence ternary complexes proposed approaches to determining the amount of three tetracyclines and tetracycline improve selectiv-

ity in determining the presence of doxycycline and oxytetracycline by measuring the fluorescence signal with a resolution in time. The optimal delay time, 100 ms, to maximize the ratio of emission intensity of ternary chelates of europium (III) in micellar media cetylpyridinium determined and interfering with antibiotics. Key words: sensitized fluorescence, tetracyclines, micellar environment, lifetime of the sensitized fluorescence.

Антибиотики тетрациклинового ряда широко используются в клинике, пищевой промышленности в качестве консервантов мяса, овощей, фруктов, молока. Их применение в рыбном хозяйстве, птицеводстве в процессе лечения и стимуляции роста животных является одной из причин присутствия остаточных концентраций токсичных биологически активных веществ в пищевых продуктах. Микросодержания антибиотиков необходимо контролировать, так как они вызывают резистентность и различные хронические заболевания потребителей [1]. Кроме того, ингибирующие вещества оказывают влияние на микробиологические процессы кисломолочного производства, что приводит к изготовлению недоброкачественной или даже опасной продукции. Современный рынок и громадный оборот пищевых продуктов между странами нуждается

в разработке и применении экспресс-методов контроля антибиотиков в пищевой продукции. Наибольший интерес представляют методики, позволяющие установить интегральные и избирательные показатели содержания ингибиторов. Микробиологические методы тестирования, рекомендованные ГОСТ 51600-2010, не решают такой задачи, определяя только интегральный показатель токсикантов, что ограничивает их применение при оценке качества молочной продукции.

Для обнаружения следового содержания индивидуальных производных тетрациклинов в пищевых продуктах в основном используют метод ВЭЖХ с различными способами детектирования: масс-спектрометрическим [2-4], флуоресцентным [5] и УФ-спектроскопическим [6]. Возможно применение капиллярного электрофореза [7, 8], вольтамперометрии [9]. Известные методики используют дорогостоящее оборудование, отличаются продолжительностью анализа, необходимостью привлечения высококвалифицированного персонала [10-12].

В настоящее время актуальны простые и доступные методики флуориметрического определения тетрациклинов, основанные на измерении интенсивности собственной и сенсибилизированной флуоресценции биологически активных веществ и их хелатов с ионами РЗЭ, которые не уступают другим методам по избирательности и чувствительности. Положение спектра флуоресценции, стоксовый сдвиг, время жизни возбужденного состояния, кинетика затухания эмиссии позволяют получить информацию интегрального характера и повысить избирательность определения аналитов даже в случае полного перекрывания спектров при привлечении к их обработке некоторых приемов хемометрики. Измерение сигнала сенсибилизированной флуоресценции с разрешением во времени, а также привлечение математических методов для анализа многофакторных экспериментов позволяют проводить определение содержания салицилатов в биологических жидкостях [13], хлортетраци-клина и доксициклина - в человеческой моче [14], тетрациклина и окситетрациклина - в бычьей сыворотке [15].

В режиме стационарного измерения сигнала сенсибилизированной флуоресценции с целью повышения чувствительности определения тетрациклинов используют образование разно-лигандных комплексов Еи3+ и мицеллярные

среды ПАВ. Антибиотики тетрациклинового ряда (ТТ, ОТ, ДЦ, ХТ, МЦ) с ионом Еи3+ в нейтральной или слабощелочной средах (рН 6-9) образуют комплексы (1:1 и 1:2), характеризующиеся переносом энергии (^возб = 395 нм, Хфл = = 615 нм), соответствующим 5Б0^7р2 переходу в ионе Еи3+ (рис. 1) [16]. При использовании в качестве второго лиганда хромофорсодержащего реагента наблюдается максимальное возрастание интенсивности флуоресценции в результате одновременного проявления двух эффектов: удаления молекул воды из ближайшего окружения иона Еи3+, а также дополнительной сенсибилизации иона лантанида вторым лигандом [10]. Еще одним фактором, повышающим интенсивность флуоресценции, является солюбилизация хелатов в наноразмерном объеме мицелл ПАВ. Использование организованных сред позволяет повысить эффективность переноса энергии в результате сближения и концентрирования реагирующих компонентов, повышения устойчивости комплекса, экранирования флуоресцирующей частицы от посторонних тушителей [11, 12]. Разработаны методики индивидуального флуориметрического определения доксициклина, метациклина, хлор-тетрациклина, тетрациклина и окситетрациклина с помощью хелата Еи3+ с 1,10-фенантролином в мицеллярных средах додецилбензолсульфоната натрия, апробированные в анализе плазмы крови. Однако их использование для определения суммарного показателя аналитов невозможно ввиду различий в пределах обнаружения, которые отличаются практически на порядок (от 1.4 х 10-8 до 3.2х 10-8 М) [17].

Л отн. ед. 1 -

0,8

0,6

0,4

0,2

0

570

610

650

690

к, нм

-5

Рис. 1. Спектр флуоресценции: Еи3+- ДЦ, Сдц = 1.0х10 М, СЕи3+ = 2.0 х 10-4 М рН = 8.5, Хвозб = 395 нм

Целью настоящей работы явилось изучение возможности использования сенсибилизированной флуоресценции хелатов Еи3+ с

тетрациклинами, измеренной в стационарном режиме и режиме с разрешением во времени для суммарного и индивидуального определения антибиотиков.

Экспериментальная часть

Реагенты. Препараты гидрохлоридов тетрациклина (ТТ), окситетрациклина (ОТ), доксициклина (ДЦ), хлортетрациклина (ХТ), ме-тациклина (МЦ), «ICNBiomedicalsInc» с содержанием основного вещества не менее 98% готовили растворением точных навесок в 1.0*10-2М HCl и бидистиллированной воде. Теноилтриф-торацетон (ТТА) «Fluka», 98%, триоктилфосфи-ноксид (ТОФО), «Sigma», 99%, концентрации 1х10-2 М, готовили растворением в этаноле. Растворы 1,10-фенантролина солянокислого (Фен) «Chemapol», 98%, ЭТДА «Реахим», ч.д.а., концентрации 1*10-2 М готовили растворением навесок препаратов в бидистиллированной воде. Ацетатно-аммиачные буферные растворы готовили из растворов 2М СН3СООН и NH3, ч.д.а.

Поверхностно-активные вещества. Концентрация исходных растворов ПАВ составляла 0.1 М. Цетилпиридиний хлорид с содержанием основного вещества не менее 96% растворяли в бидистиллированной воде. Тритон Х-100 (ТХ-100) «Sigma», Бридж-35 «Acros», Твин 80 «Sigma» и додецилсульфат натрия (ДДС), додецилбензолсульфонат натрия (ДДБС) «AppliChem» (содержание основного вещества во всех ПАВ не менее 99%) растворяли в биди-стиллированной воде.

Раствор хлорида Eu3+, «AcrosOrganics», 99.9%. Исходные растворы соли концентрацией 1х10-2 М готовили растворением точной навески в бидистиллированной воде. Концентрацию устанавливали комплексонометрическим методом с ксиленоловым оранжевым.

Аппаратура. Спектры флуоресценции и возбуждения регистрировали на спектрофлуори-метре LS-55 фирмы «Perkin-Elmer» с источником возбуждения - импульсной ксеноновой лампой. Ширина дифракционной щели возбуждения 10 нм, флуоресценции 5 нм. Скорость регистрации спектров 200 нм/мин. Кварцевая кювета с толщиной слоя 1 см. Сигнал регистрировали под углом 90° к возбуждающему свету в режиме разрешенной во времени флуоресценции.

Электронные спектры поглощения растворов в УФ - и видимой области измеряли на спек-

трофотометре иУ-1800 «Shimadzu» в кварцевых кюветах с длиной оптического пути 1 см.

Значение рН контролировали на рН-метре рН-673 М со стеклянным индикаторным электродом и хлоридсеребряным электродом сравнения.

Экспериментальные данные обрабатывали с помощью программы Оп§тРго 7.5.

Результаты и их обсуждение

На примере комплекса Еи3+ с ДЦ нами экспериментально доказано участие переноса энергии возбуждения от триплета биологически активного лиганда - антибиотика тетрациклино-вого ряда, (18100 см-1) на ближайший уровень иона РЗЭ, Еи3+5^0 17260 см-1 с последующей флуоресценцией лантанида (Хфл = 615 нм)в формировании аналитического сигнала [10].

Определение суммы тетрациклинов. Бинарные хелаты Еи3+ с тетрациклинами, являясь координационно-ненасыщенными, характеризуются малоинтенсивным излучением лантанида вследствие дезактивации, связанной с передачей энергии электронного возбуждения иона металла на колебательные уровни связи -ОН молекул воды. Невысокую интенсивность сенсибилизированной флуоресценции можно также объяснить значительной гидрофильностью тетрациклинов (1§Р = -1.3 ^—0.2). В водных растворах в присутствии второго хромофорного бидентатного лиганда, Фен или ТТА, наблюдается возрастание интенсивности флуоресценции бинарных комплексов Еи3+ с тетрациклинами. Добавки ЭДТА в этих же условиях вызывают уменьшение эмиссии хелатов почти в 2 раза. В присутствии гидрофобного монодентатного ТОФО наблюдается образование осадков. Из-за отсутствия хромофорных групп ТОФО и ЭДТА не участвуют в процессе переноса энергии. В мицеллярных средах ПАВ образование разнолигандных ком -плексов сопровождается иными эффектами. В присутствии мицелл катионного ПАВ - хлорида цетилпиридиния, интенсивность сенсибилизированной флуоресценции комплекса Еи3+ с тетрациклинами в присутствии ЭДТА возрастает в 4.5 раза, что превышает сигнал в присутствии вторых хромофорсодержащих лигандов Фен или ТТА в мицеллярных растворах. Значительное возрастание эффективности переноса энергии в присутствии мицелл катионного ЦПХ, возможно, связано с проявлением одновременно двух факторов: образованием высокогидрофобных

ионных ассоциатов катионов ПАВ с анионными формами тетрациклина и ЭДТА и последующей эффективной солюбилизацией их в мицеллы, подавляющей процессы диссипации.

Выявлены особенности влияния природы ПАВ на флуоресцентные свойства бинарных и разнолигандных хелатов Еи3+ с тетрацикли-нами. Установлено, что в присутствии мицелл анионных ПАВ практически всегда наблюдается уменьшение сенсибилизированной флуоресценции бинарных хелатов, что может быть связано с конкурирующим процессом образования ионных ассоциатов лантанида с анионом ПАВ (рис. 2).

*- отн. ед. 1

0,8

0,6

0,4 -

0,2

330

350

370

390

410

X, нм

Рис. 2. Зависимость интенсивности флуоресценции системы Еи3+- ДЦ - ЭДТА -ПАВ от природы мицелл ПАВ. Спектры возбуждения: 1 - ЦПХ, 2 - без ПАВ, 3 - Твин-80,4 - ДДС, 5 - Тритон Х-100,6 - Бридж-35; СДЦ = = 4.0 х 10-6 М, СЕи3+ = 2.0 х 10-5 М, СЭДТА = 1.0 х10-4 М, Спав = 1.0и10-2 М. рН = 8.5, ^ 615 нм

Дифференцирующий эффект действия ПАВ наблюдается при солюбилизации разнолигандных хелатов Еи3+ с тетрациклинами в присутствии Фен. Так, мицеллы анионных ПАВ (ДДБС, ДДС) тушат флуоресценцию хелата Еи3+- ДЦ и увеличивают эмиссию комплексов Еи3+ с ТТ, ХТ, МЦ, ОТ. Влияние мицелл АПАВ может быть связано с разрушением хелатов в результате связывания иона металла отрицательно заряженной поверхностью анионной мицеллы. Мицеллы катионных (ЦПХ, ЦТАБ) и неионогенных (Тритон Х-100) ПАВ проявляют унифицированный эффект, увеличивая интенсивность сенсибилизированной флуоресценции хелатов всех тетраци-клинов. Причем максимальный рост (в 4.5 раза) наблюдается в случае использования в качестве второго лиганда ЭДТА и ЦПХ. В присутствии мицелл неионогенного ПАВ (Тритон Х-100, Твин-80) флуоресценция хелата Еи3+ - ДЦ - Фен возрастает не более чем в 2 раза.

Таким образом, в случае определения гидрофильных биологически активных лигандов те-трациклинового ряда определяющим фактором, повышающим эффективность переноса энергии, является подавление процессов диссипации путем увеличения липофильности лигандов. В связи с предварительным образованием ионных ассоциатов интенсивность флуоресценции хелата Еи3+- тетрациклин - ЭДТА в присутствии ЦПХ значительно зависит от кислотности среды и максимальна при рН 8.5-9.5 (рис. 3). Найдены оптимальные условия получения максимального аналитического сигнала для определения ТТ, ОТ, ДЦ, ХТ, МЦ с помощью системы Еи3+-ЭДТА-ЦПХ. Необходимо отметить, что спектры возбуждения и флуоресценции комплексов Еи3+ с тетрациклинами в присутствии ЭДТА и ЦПХ характеризуются одинаковой длиной волны

возбуждения (^возб = 395 нм) и флуоресценции (^фл= 615 нм).

I отн. ед. 1

0,8

0,6

0,4

0,2

0

8

10

рН

Рис. 3. Зависимость интенсивности флуоресценции системы Еи3+ - ДЦ-ЭДТА - ЦПХ от кислотности среды. СЕи3+ = 2.0 х 10-5 М, СЭДТА = 1.0 х 10-4 М, СДЦ = = 4.0 х 10-6 М, СЦПХ = 1.0 х 10-2 М, Хвозб = 395 нм,

V = 615 нм

Таким образом, разнолигандные комплексы Еи3+ - ЭДТА с ХТ, МЦ, ДЦ в мицеллярных средах ЦПХ характеризуются близкими интенсив-ностями сенсибилизированной флуоресценции при одинаковых концентрациях антибиотиков и имеют практически одинаковый угол наклона градуировочных графиков, что позволяет осуществить определение их суммарной концентрации при их совместном присутствии. В качестве стандарта нами использован ДЦ, который отличается лучшей растворимостью по отношению к его указанным аналогам. Характеристики флуориметрических методик представлены в

0

табл. 1. Методика построения градуировочного графика для определения показателя суммы тетрациклинов заключается в следующем. В пробирку помещают 1 мл буферного раствора (рН 8.5), 0.16 мл соли Еи3+ 1.0х10-3М, антибиотик (ТТ, ОТ, ДЦ, ХТ, МЦ) в диапазоне концентраций 1х10-8 - 1х10-5 М, 0.4 мл ЭДТА

1.0х10-3 М, 0.25 мл ЦПХ 1.0х10-1 М, буферный раствор до общего объема 4 мл, тщательно перемешивают и измеряют интенсивность флуоресценции (^возб = 395 нм, Хфл = 615 нм). В табл. 2 представлены результаты определения суммы трех антибиотиков при различных их соотношениях.

Некоторые характеристики определения антибиотиков тетрациклинового ряда с помощью системы Еи(111) - ЭДТА - ЦПХ

Таблица 1

Антибиотик Диапазон определяемых содержаний, М Я2 Уравнение градуировочного графика ПрО 108, М

Доксициклин 5.010-8 - 8.010-6 0.999 I = 6.6107 С 2

Метациклин 5.010-8 - 8.010-6 0.999 I = 6.9107 С 2

Хлортетрациклин 5.010-8 - 8.010-6 0.997 I = 6.6107 С 2

Тетрациклин 3.010-8 - 3.010-6 0.999 I = 2.6108 С 0.6

Окситетрациклин 5.010-8 - 6.010-6 0.997 I = 9.4107 С 2

Таблица 2

Определение суммы трех антибиотиков при их различных соотношениях

Введено, М Найдено, М ^эксп

1.5 10-7 (1.4±0.2) 10-7 0.05 2.46

7.510-7 (7.4±0.5) 10-7 0.03 0.71

1.010-6 (9.39±0.09) 10-7 0.04 2.74

1.5 10-6 (1.4±0.2) -10-6 0.05 2.24

Изучение сенсибилизированной флуоресценции в режиме с разрешением во времени.

Изучена кинетика затухания флуоресценции разнолигандных хелатов Еи3+ с производными тетрациклинового ряда ТТ, ОТ, ДЦ, ХТ, МЦ и рассчитаны времена жизни возбужденного состояния соответствующих комплексов (рис. 4, табл. 3).

* отн. ед. 1

0,8

0,6

0,4

0,2

0 . , , .

г, мс

0 0,1 0,2 0,3 0,4

Рис. 4. Кривые затухания флуоресценции разнолигандных хелатов Еи3+ с антибиотиками: 1 - ТТ, 2 - ДЦ, 3 - ОТ. СЕи(Ш) = 4х10-5 М, СТТ,ДЦ,ОТ = 1х10-6 М, Сэдта = 1х10-4 М, СЦПХ = 6.25х10-3 М, рН 8.5, хвозб = 395 нм, Хфл = 615 нм

Таблица 3

Времена жизни флуоресценции хелатов Еи3+ - тетрациклин - ЭДТА в мицеллярных растворах ЦПХ

Тетрациклин т, мкс lg Р [www.rupest.ru]

МЦ 23±2 -0.3

ОТ 26±2 -0.9

ХТЦ 29±2 -0.6

ДЦ 40±2 -0.2

ТЦ 69±2 -1.3

Как видно из табл. 3, комплекс Еи3+ с наиболее липофильным ТТ характеризуется максимальным временем жизни, что позволяет предположить возможность повышения избирательного определения, например, ТТ в присутствии ОТ и ДЦ с помощью измерения сигнала сенсибилизированной флуоресценции с разрешением во времени, несмотря на полное перекрывание аналитических полос в спектрах

флуоресценции. Нами установлено (рис. 5, 100 мкс) оптимальное время задержки измерения сигнала, позволяющее максимально увеличить соотношение интенсивностей эмиссии хелатов определяемого антибиотика и мешающего. Показано, что в таких условиях определению ТЦ не мешают ДЦ и ОТЦ при их молярном соотношении 1:1.

Ашр/^меш. у

5

4

3

2

1

0,1

0,2

0,3

t, мс

Рис. 5. Зависимость отношения сигналов интенсивностей определяемого и мешающего компонентов (/опр / /меш) от продолжительности времени задержки: 1 - ТТ/ОТ, 2 - ДЦ/ОТ, 5 - ТТ/ДЦ. СЕи(пп) = 4х10-5М, СТТ,ДЦ,ОТ = = 1 х 10-6 м, СЭДТА = 1 х 10-4 м, СЦПХ = 6.25 х 10-3 м, РН 8.5Аозб = 395 нм, Хфлу0р= 615 нм

Выводы

1. Изучена кинетика затухания флуоресценции разнолигандных комплексов тетрациклинов с Eu3+ в присутствии ЭДТА и установлены времена флуоресценции соответствующих комплексов;

2. Показана возможность определения суммы трех производных тетрациклинового ряда;

3. Установлена возможность повышения избирательности определения тетрациклинов в их смеси при измерении сенсибилизированной флуоресценции с разрешением во времени. Определению ТЦ не мешают ДЦ и ОТЦ при их молярном соотношении 1:1.

Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ (проект № 12-03-00450а).

Список литературы

1. Кальницкая О. И. Методы определения антибиотиков // Молочная промышленность. 2008. № 6. С. 82-83.

2. Guo L., Chen Y. Q., Zhang L. Y., Yang W. J, He P. L. Development and Validation of a Liquid Chromatographic / Tandem Mass Spectrometric Method for Deter-

mination of Chlortetracycline, Oxytetracycline, Tetracycline, and Doxycycline in Animal Feeds // J. AOAC Int. 2012. Vol. 4, № 95. P. 1010-1015.

3. Neri B., Russo M. V., Buiarelli F., Longo F., Gianne-tti L. Tetracycline Residues in Royal Jelly and Honey by Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry: Validation Study According to Commission Decision 2002/657/EC // Anal. Bioanal. Chem. 2010. Vol. 398, № 2. P. 1017-1023.

4. Andreu V., Vazquez-RoigP., Blasco C., Pico Y. Determination of Tetracycline Residues in Soil by Pressurized Liquid Extraction and Liquid Chromatography Tandem Mass Spectrometry // Anal. Bioanal. Chem. 2009. Vol. 394, № 5. P. 1329-1339.

5. Lu H. -T., Jiang Y., Li H. -B. Simultaneous Determination of Oxytetracycline, Doxycycline, Tetracycline and Chlortetracycline in Tetracycline in Antibiotics by High-Performance Liquid Chromatography with Fluorescence Detection // J. Chromatogr. 2004. Vol. 60, № 5-6. P. 259-264.

6. Yekkala R., Diana J., Adams E. Development of an Improved Liquid Chromatographic Method for the Analysis of Doxycycline // J. Chromatogr. 2003. Vol. 58, № 5-6. P. 313-316.

7. Ibarra I. S., Rodriguez J. A., Miranda J. M., Vega M., Barrado E. Magnetic Solid-Phase Extraction Based on Phenyl Silica Adsorbent for The Determination of Tetracyclines in Milk Samples by Capillary Electrophoresis // J. Chromatogr. A. 2011. Vol. 1218, № 16. P. 2196-2202.

8. Casado-Terrones S., Segura-Carretero A., Busi S., Dinel-li G., Fernandez-Gutierrez A.Determination of Tetracycline Residues in Honey by CZE with Ultraviolet Absorbance Detection // Electrophoresis. 2007. Vol. 16, № 28. P. 2882-2887.

9. Vega D., Agui L., Gonzalez-Cortes A., Yanez-Sede-no P., Pingarron J.M. Voltammetry and Amperometric Detection of Tetracyclines at Multi-wall Carbon Nano-tube-Modified Electrodes // Anal. Bioanal. Chem. 2007. Vol. 3, № 389. P. 951-958.

10. Смирнова Т. Д., Штыков С. Н., Кочубей В. И., Хряч-кова Е. И. Перенос энергии возбуждения в хелате европия с доксициклином в присутствии второго лиганда в мицеллярных растворах неионогенных ПАВ // Оптика и спектроскопия. 2011. Т. 110, № 1. С. 65-71.

11. Штыков С. Н., Горячева И. Ю. Люминесцентная аналитическая спектроскопия в микрогетерогенных супра- и надмолекулярных самоассоциирующих организованных средах // Оптика и спектроскопия. 1997. Т. 83, № 4. С. 698-703.

12. Штыков С. Н. Химический анализ в нанореакто-рах : основные понятия и применение // Журн. аналит. химии. 2002. Т. 57, № 10. С. 1018-1028.

13. Murillo Pulgarin J. A., Alanon Molina A., Sanchez Ferrer-Robles I. Simultaneous determination of salicylic acid and salicylamide in biological fluids // Spectro-chim. Acta. Part A. 2011. Vol. 5, № 79. P. 909-914.

0

14. Murillo Pulgarin J. A., Alanon Molina A., Ferreras F. M. Simultaneous Determination of Doxycycline and Chlortetracycline in Real Samples by Europium-Sensitized Luminescence// Appl. Spectroscopy. 2013. Vol. 67, № 4. P. 371-378.

15. Ibanez G. A. Partial least-squares analysis of time decay data for Eu(III)-tetracycline complexes. Simultaneous luminescent determination of tetracycline and oxytet-racycline in bovine serum // Talanta. 2009. Vol. 75. P. 1028-1034.

16. Izquierdo P., Gomez-Hens A., Perez-Bendito D. Study of the Eu(III) - tetracycline-thenoyltrifluoroacetone system by using the stopped-flow mixing technique : Determination of tetracycline in serum // Anal. Chim. Acta. 1994. Vol. 292, № l-2. P. 133-139.

17. Штыков С. Н., Смирнова Т. Д., Былинкин Ю. Г., Жемеричкин Д. А. Флуориметрическое определение тетрациклинов с помощью хелата европия с 1,10-фе-нантролином в мицеллярных растворах анионных ПАВ // Журн. аналит. химии. 2005. Т. 60, № 1. С. 30-34.

УДК [544.344.016+536.44]:[544.344.2+544.344.015.33]

ФАЗОВАЯ ДИАГРАММА ДВОЙНОЙ СИСТЕМЫ

РОДАНИД КАЛИЯ - ВОДА

К. К. Ильин, Д. Г. Черкасов

Саратовский государственный университет E-mail: ilinkk@info.sgu.ru

Визуально-политермическим методом и методом кривых время-температура изучена фазовая диаграмма двойной системы роданид калия - вода в интервале температур - 35-180 оС. В системе при -32.6 оС осуществляется эвтектическое равновесие, твердыми фазами которого являются лед и индивидуальный роданид калия. Определен состав жидкой фазы эвтектики. Ключевые слова: фазовые равновесия, двойная система, фазовая диаграмма, эвтектика, роданид калия.

Phase Diagram of the Potassium Thiocyanate - Water Binary System

K. K. Il in, D. G. Cherkasov

The phase diagram of the potassium thiocyanate-water binary system was studied by the visual polythermal method and by the method of time-temperature curves over а temperature range - 35-180 оС. There is an eutectic equilibrium at -32.6 оС in the system; the solid phases of this equilibrium are ice and individual potassium thiocyanate. The composition of the liquid phase of the eutectic state was determined. Key words: phase equilibria, binary system, phase diagram, eutectic, potassium thiocyanate.

Двойная система роданид калия - вода входит в состав изучаемой нами тройной системы роданид калия - вода - н-бутиловый спирт [1]. Обзор литературы по исследованию растворимости и фазовых равновесий в системе KNCS-H^O показал, что результаты разных авторов различаются. В работе [2] приведены данные по растворимости компонентов и составам равновесных фаз этой двойной системы. Фазовая диаграмма характеризуется эвтектическим равновесием при -29.5 оС, твердыми фазами которого яв-

ляются лед и кристаллогидрат соли состава ККСБ • 0.5Н20, жидкая фаза эктектики содержит 51.2 мас.% соли. При 6.8 оС в этой системе осуществляется трехфазное равновесие пери-тектического типа, твердыми фазами которого являются ККСБ • 0.5Н20 и а-ККСБ (орторомби-ческая модификация). При 142.3 оС происходит полиморфное превращение орторомбической модификации роданида калия в тетрагональную модификацию (Р-ККСБ). Температура плавления Р-ККСБ равна 177.2 оС. Роданид калия и его кристаллогидрат ККСБ • 0.5Н20 хорошо растворимы в воде и имеют положительный температурный коэффициент растворимости [2].

В справочнике [3] указано, что в системе роданид калия - вода эвтектическое равновесие осуществляется при -31.2 оС и его твердыми фазами являются лед и индивидуальная соль. Жидкая фаза эвтектики содержит 50.24 мас.% соли. Температура плавления соли равна 176.8 оС.

Сравнение результатов исследования фазовых состояний в системе ККСБ-Н20, приведенных в работах [2, 3], показало, что близки только значения температуры эвтектики и содержания соли в эвтектической смеси. Однако в [2] указано, что одной из твердых фаз эвтектики является кристаллогидрат соли, а не индивидуальная соль, как утверждается в [3]. Кроме того, авторы [2] обнаружили образование перитонического фазового состояния в данной системе. Поскольку при-