СПОСОБ ОЦЕНКИ СТЕПЕНИ ТЯЖЕСТИ СИНДРОМА ЭНДОГЕННОЙ ИНТОКСИКАЦИИ У БОЛЬНЫХ С ТЕРМИЧЕСКОЙ ТРАВМОЙ
EVALUATION METHOD OF SEVERITY LEVEL OF ENDOINTOXICATION SYNDROME OF PATIENTS WITH HEAT INJURY

Предлагаемое изобретение относится к медицине, в частности к способам оценки степени тяжести синдрома эндогенной интоксикации у больного с термической травмой.
ой
2
2
ой
ей
2
ой
В качестве прототипа выбран способ диагностики степени тяжести синдрома эндогенной интоксикации (СЭИ), заключающийся в определении степени тяжести, течения, прогноза исхода заболевания подсчетом количества двулучепреломляющих кристаллов (ДЛПК) в образцах плазмы без- и с добавлением ингибитора протеаз (эпсилон-аминокапроновой кислоты - ЭАКК), в измерении площади дендрита ингибитора протеаз и последующей диагностике I степени СЭИ при количестве ДЛПК в образцах цитратной плазмы от 15 до 300 и площади дендрита ЭАКК 243-291 мм, при ДЛПК от 301 до 1000 и площади дендрита ЭАКК 242-162 мм - II степени, при ДЛПК от 1001 до 5000, площади дендрита ЭАКК от 15 до 1000 - III степени, при ДЛПК в образцах плазмы без ингибитора от 5000 до 15000 и в образцах с ингибитором от 1000 до 15000 и площади дендрита ЭАКК от 80 мм до полного исчезновения - IV степени СЭИ (см. патент №2158923, G01N 33/48, 2000 г.).
Однако известный способ является длительным, трудоемким, субъективным и не дает возможности ранней диагностики степени тяжести синдрома эндогенной интоксикации у больного с термической травмой.
Задача предлагаемого изобретения - раннее выявление интоксикации организма у больного.
Поставленная задача решается за счет того, что в способе, включающем исследование крови, определяют активность альдегиддегидрогеназы и по разнице активности фермента при ожоге по сравнению с нормой судят о степени тяжести синдрома эндогенной интоксикации у больного с термической травмой: при уменьшении активности фермента от 3 до 15% определяют первую степень тяжести, от 15 до 30% - вторую степень тяжести, от 30 до 50% - третью степень тяжести и от 50 до 70% определяют четвертую степень тяжести синдрома эндогенной интоксикации.
Способ оценки степени тяжести синдрома эндогенной интоксикации у больного с термической травмой осуществляют следующим образом: в течение первых шести часов после травмы у больного забирают кровь из вены (0,1 мл) в пробирку, содержащую 3,9 мл дистиллированной воды, получая гемолизат крови. Затем в спектрофотометрическую кювету помещают 2,8 мл 0,1 М глицин-щелочного буфера (pH 10), 0,05 мл 18 мМ ацетальдегида, 0,1 мл 0,8 мМ окисленного никотинамидадениндинуклеотида (НАД) и добавляют в смесь 0,05 мл гемолизата крови. Содержимое кюветы (3 мл) быстро перемешивают, измеряют величину его оптической плотности при 340 нм с интервалом 15 с в течение 1 минуты и определяют активность фермента - альдегиддегидрогеназы (А, нмоль НАДН/мин) по формуле:
где
340
340
1
2
2
ΔЕ - величина оптической плотности, измеренной при 340 нм и рассчитанной следующим образом: ΔЕ=(ΔE-ΔЕ/2)+ΔЕ
1
30
0
2
60
0
ΔE=Е-Е; ΔЕ=Е-Е;
3 - объем пробы в кювете в мл;
9
10 - коэффициент пересчета моль в нмоль;
6
6,22×10 - коэффициент молярной экстинкции для восстановленного никотинамидадениндинуклеотида (НАДН);
t - время, в течение которого измеряют активность альдегиддегидрогеназы в мин.
Затем вычисляют процент активности альдегиддегидрогеназы при ожоге от общей активности альдегиддегидрогеназы в норме математическим способом по правилу "креста". Норма представлена кровью здоровых людей, которая составляет 7,04 нмоль НАДН/мин и принимается за 100%. По разнице процентов между активностью фермента - альдегиддегидрогеназы при ожоге по сравнению с нормой судят о степени тяжести синдрома эндогенной интоксикации у больного с термической травмой: при снижении активности альдегиддегидрогеназы на 3-15% по сравнению с нормой диагностируют I степень СЭИ; при снижении активности альдегиддегидрогеназы на 15-30% диагностируют II степень СЭИ; при снижении на 30-50% - определяют III степень СЭИ; при снижении активности фермента на 50-70% определяют IV степень синдрома эндогенной интоксикации.
Результаты исследования активности альдегиддегидрогеназы (нмоль НАДН/мин) в гемолизате крови 46 ожоговых больных представлены в таблице 1.
Таблица 1Активность альдегиддегидрогеназы (нмоль НАДН/мин) в гемолизате крови в норме и при ожоге
№
Норма
I
% от нормы
II
% от нормы
III
% от нормы
IV
% от нормы
1
6,85
6,83
97%
5,70
81%
4,58
65%
3,17
45%
2
7,14
6,34
90%
4,93
70%
4,72
67%
2,39
34%
3
7,12
6,41
91%
5,42
77%
3,94
56%
2,60
37%
4
6,90
6,55
93%
5,21
74%
4,08
58%
2,75
39%
5
6,82
6,76
96%
5,14
73%
3,73
53%
3,10
44%
6
6,99
6,27
89%
5,50
78%
3,80
54%
3,38
48%
7
7,17
5,28
75%
4,22
60%
8
6,63
4,99
71%
4,29
61%
9
7,46
5,07
72%
4,36
62%
10
7,35
5,21
74%
3,66
52%
11
7,01
5,28
75%
3,80
54%
12
7,08
5,07
72%
4,01
57%
13
7,07
5,35
76%
4,15
59%
14
5,56
79%
3,73
53%
15
5,63
80%
3,87
55%
16
4,99
71%
3,59
51%
17
5,63
80%
3,52
50%
M±m
7,04±0,06
6,53±0,09
5,29±0,06
4,00±0,08
2,90±0,15
Примечания: I - активность альдегиддегидрогеназы при I степени СЭИ у больного с термической травмой (6 больных); II - активность альдегиддегидрогеназы при II степени СЭИ (17 больных); III - активность фермента при III степени СЭИ (17 больных); IV - активность фермента при IV степени СЭИ (6 больных).
Клинический пример №1.
340
Будилов М.П., 25 лет, № истории болезни 200473, получил ожог пламенем на площади 45% поверхности тела. Спустя несколько часов после травмы взяли 0,1 мл крови, приготовили гемолизат, 0,05 мл которого поместили в спектрофотометрическую кювету и измерили величину оптической плотности при длине волны 340 нм (Е) в течение 1 минуты с интервалом 15 секунд:
Время
0
15 с
30 с
45 с
1 мин
Е<sub>340</sub>
0,100
0,103
0,105
0,106
0,109
340
1
2
2
1
2
340
Рассчитали величину оптической плотности при 340 нм за мин по формуле: ΔЕ=(ΔE-ΔЕ/2)+ΔЕ, где ΔE - величина оптической плотности, измеренная за 30 с, ΔЕ - величина оптической плотности, измеренная за 1 мин. Таким образом, ΔЕ=(0,005-0,0045)+0,009=0,0095.
После этого рассчитали активность фермента - альдегиддегидрогеназы - по формуле:
, где
340
ΔЕ - величина оптической плотности, измеренной при 340 нм за мин;
3 - объем пробы в кювете;
9
10 - коэффициент пересчета моль в нмоль;
6
6,22×10 - коэффициент молярной экстинкции для восстановленного никотинамидадениндинуклеотида;
t - время, в течение которого измеряют активность фермента в мин.
Таким образом,
Затем определили по правилу "креста", какой процент от общей активности здоровых людей составила активность альдегиддегидрогеназы крови данного больного. Норма составляет 7,04 нмоль/мин, которую принимают за 100%:
7,04 - 100%
4,58 - х%
х=65%
Затем вычислили разницу между активностью фермента при ожоге и нормой: 100%-65%=35%.
Активность альдегиддегидрогеназы крови у Будилова М.П. снижена на 35% по сравнению с нормой, что свидетельствует о развитии у него III степени синдрома эндогенной интоксикации.
Клинический пример №2.
340
Соколов А.П., 35 лет, № истории болезни 201059, получил термический ожог на площади 20% поверхности тела. Сразу после поступления в ННИИТО взяли 0,1 мл крови, приготовили гемолизат, 0,05 мл которого поместили в спектрофотометрическую кювету, и измерили величину оптической плотности при длине волны 340 нм (Е) в течение 1 минуты с интервалом 15 секунд:
Время
0
15 с
30 с
45 с
1 мин
Е<sub>340</sub>
0,100
0,103
0,104
0,105
0,106
340
1
2
2
1
2
340
Рассчитали величину оптической плотности при 340 нм за мин по формуле: ΔЕ=(ΔE-ΔЕ/2)+ΔЕ, где ΔE - величина оптической плотности, измеренная за 30 с, ΔЕ - величина оптической плотности, измеренная за 1 мин. Таким образом, ΔЕ=(0,004-0,003)+0,006=0,007
После этого рассчитали активность фермента - альдегиддегидрогеназы - по формуле:
, где
340
ΔЕ - величина оптической плотности, измеренной при 340 нм за мин;
3 - объем пробы в кювете;
9
10 - коэффициент пересчета моль в нмоль;
6
6,22×10 - коэффициент молярной экстинкции для восстановленного никотинамидадениндинуклеотида;
t - время, в течение которого измеряют активность фермента в мин.
Таким образом,
Затем определили по правилу "креста", какой процент от общей активности здоровых людей составила активность альдегиддегидрогеназы крови данного больного. Норма составляет 7,04 нмоль/мин, которую принимают за 100%:
7,04 - 100%,
3,38 - х%,
х=48%.
Затем вычислили разницу между активностью фермента при ожоге и нормой: 100%-48%=52%.
Активность альдегиддегидрогеназы крови у Соколова А.П. снижена на 52% по сравнению с нормой, что свидетельствует о развитии у него IV степени синдрома эндогенной интоксикации.
Способ оценки степени тяжести синдрома эндогенной интоксикации у больного с термической травмой простой и быстрый в исполнении, не требует дорогостоящего оборудования и большого количества биологического материала.