ПОЛИСАХАРИДНЫЕ КОМПОЗИЦИИ, НЕ ОБЛАДАЮЩИЕ АНТИКОАГУЛЯНТНЫМИ СВОЙСТВАМИ

1. Фармацевтическая композиция, включающая препарат полисахарида, имеющий следующие характеристики:
(a) анти-Xa-активность менее чем 20 МЕ/мг и анти-IIa-активность менее чем 20 МЕ/мг;
(b) более 5% и менее 25% остатков гликольно расщепленной уроновой кислоты; и
(c) препарат полисахарида имеет такое молекулярно-массовое распределение, что 10-40% олигосахаридов препарата имеют молекулярную массу <3000 Да, 45-65% олигосахаридов имеют молекулярную массу 3000-8000 Да, и 15-30% олигосахаридов имеют молекулярную массу >8000 Да.
2. Фармацевтическая композиция по п. 1, где препарат содержит более чем 5% и менее чем 20% остатков гликольно расщепленной уроновой кислоты.
3. Фармацевтическая композиция по п. 1, где препарат содержит 10-20% остатков гликольно расщепленной уроновой кислоты.
G
4. Фармацевтическая композиция по п. 1, где препарат полисахарида содержит одну или более цепей, имеющих остаток гликольно расщепленной уроновой кислоты, и где каждая из полисахаридных цепей препарата содержит не более 3 гликольно расщепленных остатков уроновой кислоты (U).
G
5. Фармацевтическая композиция по п. 4, где в препарате каждая цепь полисахарида содержит не более 2 остатков гликольно расщепленной уроновой кислоты (U).
6. Фармацевтическая композиция по п. 4, имеющая в среднем
G
0,2-3 остатков гликольно расщепленной уроновой кислоты (U) на каждую цепь полисахарида.
G
7. Фармацевтическая композиция по по п. 6, содержащая в среднем от 0,2 до 1 остатка гликольно расщепленной уроновой кислоты (U) на каждую цепь полисахарида.
2S
NS,6S
8. Фармацевтическая композиция по п. 1, включающая цепи полисахарида, содержащие более 40% дисахаридных остатков UH.
2S
NS,6S
9. Фармацевтическая композиция по п. 8, содержащая более 70% дисахаридных остатков UH.
10. Фармацевтическая композиция по п. 1, включающая препарат полисахарида, имеющий степень десульфатирования менее 40%.
11. Фармацевтическая композиция по п. 1, включающая препарат полисахарида, имеющий степень десульфатирования менее 30%.
12. Фармацевтическая композиция по п. 1, включающая препарат полисахарида, имеющий степень десульфатирования менее 10%.
13. Фармацевтическая композиция по п. 1, где препарат по существу состоит из полисахаридов формулы I:
w
x,y,z
m
G
x,y,z
n
[U-H]~[U-H],
где в каждом случае U обозначает остаток уроновой кислоты и где в каждом случае Н обозначает остаток гексозамина;
где m и n - целые числа, а именно
m=4-16, и
n=1-4;
где каждый из w, x, y и z независимо для каждого
w
x,y,z
w
x,y,z
U-H являются одинаковыми или различными, и где каждый x, y и z независимо для каждого U-Hявляются одинаковыми или различными, где
w = -2OS или -2OH;
x = -NS или -NAc;
y = -3OS или -3OH;
z = -6OS или -6OH;
где символ ~ указывает на то, что звенья, отмеченные m и n, распределены вдоль полисахаридной цепи и необязательно следуют одно за другим.
14. Фармацевтическая композиция по п. 1, где композиция по существу стоит из полисахаридов формулы II:
w
x,y,z
m
G
x,y,z
n
w
x,y,z
o
G
x,y,z
p
w
x,y,z
q
[U-H]-[U-H]-[U-H]-[U-H]-[U-H],
где в каждом случае U обозначает остаток уроновой кислоты и Н обозначает остаток гексозамина;
где m-q - целые числа, а именно
m=0-10;
n=0-3;
o=0-10;
p=0-3;
q=0-10;
где сумма n+p меньше или равна 3, 2, 1 или 0, и где сумма m+n+o+p+q составляет более 2;
w
x,y,z
где каждый из w, x, y и z независимо может быть одинаковым или различным для каждого [U-H] и каждый x, y и z независимо может быть одинаковым или различным для каждого
G
x,y,z
[U-H], где
w = -2OS или -2OH;
x = -NS или -NAc;
y = -3OS или -3OH;
z = -6OS или -6OH;
15. Фармацевтическая композиция по п. 1, где препарат полисахарида содержит уроновую кислоту на нередуцирующем конце.
16. Фармацевтическая композиция по п. 1, где препарат полисахарида имеет анти-Ха-активность менее чем 15 МЕ/мг.
17. Фармацевтическая композиция по п. 1, где препарат полисахарида имеет анти-Ха-активность менее чем 10 МЕ/мг.
18. Фармацевтическая композиция по п. 1, где препарат полисахарида имеет анти-IIa-активность 3 МЕ/мг или менее.
19. Фармацевтическая композиция по п. 1, где нередуцирующая конечная уроновая кислота цепи полисахаридов препарата содержит 4,5-ненасыщенность.
20. Фармацевтическая композиция по п. 19, где около 30% полисахаридов препарата содержит нередуцирующую уроновую кислоту с 4,5-ненасыщенностью.
21. Фармацевтическая композиция по п. 1, где редуцирующий конец дополнительно включает остаток 2,5-ангидроманнита.
22. Фармацевтическая композиция по п. 21, где около 50%
редуцирующих концов включают остаток 2,5-ангидроманнита.
23. Фармацевтическая композиция по п. 1, где препарат имеет полидисперсность около 1,2-1,7.
24. Фармацевтическая композиция, включающая препарат полисахарида, по п. 1, где композиция характеризуется содержанием одного или более компонентов, выбранных из содержания натрия менее 30%, содержания иода менее 20 млн/ч., содержания серы менее 30%, и содержания бора менее 50 млн/ч. бора.
25. Фармацевтическая композиция по п. 1, включающая препарат полисахарида, имеющий среднемассовую молекулярную массу цепи 3500―7000 Да.
26. Фармацевтическая композиция, включающая препарат полисахарида, имеющий следующие характеристики:
(а) анти-Xa-активность менее чем 20 МЕ/мг и анти-IIa-активность 3 МЕ/мг или менее;
(b) более 5% и менее 25% остатков гликольно расщепленной уроновой кислоты; и
(с) препарат полисахарида имеет такое молекулярно-массовое распределение, что 10-40% олигосахаридов препарата имеют молекулярную массу <3000 Да, 45-65% олигосахаридов имеют молекулярную массу 3000-8000 Да, и 15-30% олигосахаридов имеют молекулярную массу >8000 Да.
27. Фармацевтическая композиция, включающая препарат полисахарида, имеющий следующие характеристики:
(а) анти-Xa-активность менее чем 20 МЕ/мг и анти-IIa-активность менее чем 3 МЕ/мг для каждой активности;
(b) более 5% и менее 25% остатков гликольно расщепленной
уроновой кислоты;
(с) препарат полисахарида имеет такое молекулярно-массовое распределение, что 10-40% олигосахаридов препарата имеют молекулярную массу <3000 Да, 45-65% олигосахаридов имеют молекулярную массу 3000-8000 Да, и 15-30% олигосахаридов имеют молекулярную массу >8000 Да; и
(d) препарат полисахарида содержит уроновую кислоту на нередуцирующем конце.
28. Фармацевтическая композиция, включающая препарат полисахарида, имеющий следующие характеристики:
(а) препарат полисахарида имеет такое молекулярно-массовое распределение, что 10-40% полисахаридов препарата имеют молекулярную массу <3000 Да, 45-65% полисахаридов имеют молекулярную массу 3000-8000 Да, и 15-30% полисахаридов имеют молекулярную массу >8000 Да;
(b) более 5% и менее 25% остатков гликольно расщепленной уроновой кислоты;
(с) анти-Xa-активность менее чем 15 МЕ/мг и анти-IIa-активность 1 МЕ/мг или менее,
где препарат по существу состоит из полисахаридов формулы I:
w
x,y,z
m
G
x,y,z
n
[U-H]~[U-H],
где в каждом случае U обозначает остаток уроновой кислоты и где в каждом случае Н обозначает остаток гексозамина;
где m и n - целые числа, а именно
m=4-16, и
n=0-3;
где каждый из w, x, y и z независимо для каждого
w
x,y,z
G
x,y,z
U-H являются одинаковыми или различными, и где каждый x, y и z независимо для каждого U-Hявляются одинаковыми или различными, где
w = -2OS или -2OH;
x = -NS или -NAc;
y = -3OS или -3OH;
z = -6OS или -6OH;
где символ ~ указывает на то, что звенья, отмеченные m и n, распределены вдоль полисахаридной цепи и необязательно следуют одно за другим; и
где большинство полисахаридов в препарате включают остаток 2,5-ангидроманнита на редуцирующем конце и неприродную уроновую кислоту на нередуцирующем конце.
29. Способ лечения метастатического заболевания, заболевания, опосредованного VEGF, FGF, SDF-1α и/или селектином, воспалительного заболевания, инфекционного заболевания, аутоиммунного заболевания, фиброза или заболевания, включающего ангиогенез, у субъекта, включающий этап, на котором субъекту вводят фармацевтическую композицию по любому из пп. 1-28.
30. Способ по п. 29, где фармацевтическую композицию вводят постоянно.
31. Способ по п. 29, где заболеванием является рак.
32. Способ по п. 31, где рак представляет собой рак поджелудочной железы, рак молочной железы, рак толстой кишки, рак яичника, рак легких, рак простаты, рак головы и шеи, рак печени, глиому, рак пищевода, саркому, лимфому, множественную миелому, меланому, рак тонкой кишки или рак щитовидной железы.
33. Способ по п. 32, где рак представляет собой рак поджелудочной железы.
34. Способ по п. 32, где рак представляет собой колоректальный рак.
35. Способ по п. 29, где препарат не обладает существенной антикоагулянтной активностью.
36. Способ по п. 31, где рак представляет собой метастатический рак.
37. Способ по п. 36, где метастатический рак представляет собой метастатический рак поджелудочной железы.
38. Способ по п. 29, где препарат вводят внутривенно.
39. Способ по п. 29, где препарат вводят подкожно.
40. Способ по п. 29, где препарат вводят ежедневно.
41. Способ по п. 29, где препарат вводят в комбинации со второй терапией.
42. Способ по п. 41, где вторая терапия представляет собой введение одного или более терапевтических средств.
43. Способ по п. 42, где одно или более терапевтическое средство представляет собой цитотоксическое или цитостатическое средство или их сочетание.
44. Способ по п. 42, где одно или более терапевтическое средство представляет собой доцетаксел, лейковорин или флуроурацил.
45. Способ по п. 42, где одно или более терапевтическое средство представляет собой гемцитабин.
46. Способ по п. 31, где фармацевтическую композицию вводят в комбинации с хирургическим вмешательством, лучевой терапией, химиотерапевтическим средством, антителом или ингибитором тирозинкиназы.
47. Способ по п. 31, где фармацевтическую композицию вводят субъекту в дозировке 5-50 мг/кг.
48. Способ получения фармацевтической композиции, содержащей препарат полисахарида, включающий этапы:
(1) деполимеризации нефракционированного гепарина (UFH) обработкой около 0,02-0,04 М азотистой кислоты (HONO) при рН около 2-4 в течение около 1-5 ч при температуре около 10-30°С с образованием препарата полисахарида;
(2) окисляют препарат полисахарида периодатом;
(3) восстанавливают окисленный препарат полисахарида боргидридом натрия; и
(4) выделяют препарат полисахарида для приготовления композиции LMWH (низкомолекулярный гепарин).
49. Способ по п. 48, где этап окисления включает этап, на котором препарат полисахарида обрабатывают периодатом в количестве около 0,05-0,2М в течение около 10-20 ч при температуре около 0-10°С.
50. Способ по п. 48, где этап восстановления включает этап, на котором окисленный препарат полисахарида обрабатывают боргидридом натрия в количестве около 0,5-2,0% (вес/объем) в течение около 0,5-1,5 ч при рН около 6,0-7,0 и при температуре около 0-10°С.
51. Способ по любому из пп. 48-50, где фармацевтическая композиция включает препарат полисахарида, охарактеризованный в пп. 1-28.
52. Набор, включающий фармацевтическую композицию по п. 1 и инструкции по её терапевтическому применению.
53. Набор по п. 52, дополнительно включающий инструкции по применению в комбинации с дополнительным терапевтическим средством.
54. Набор по п. 53, где дополнительное терапевтическое средство представляет собой химиотерапевтическое средство, антитело или ингибитор тирозинкиназы.
55. Набор по п. 54, где ингибитор тирозинкиназы ингибирует тирозинкиназу, выбранную из HER-2, EGFR, VEGFR, BCR-ABL и c-KIT.
56. Набор по п. 55, где ингибитор тирозинкиназы выбран из гефитиниба, эрлотиниба, лапатиниба, сорафениба, сунитиниба, иматиниба, дасатиниба и нилотиниба.
57. Набор по п. 54, где антитело представляет собой антитело против рецепторов клеточных мембран, включая EGF-EGFR, VEGF-VEGFR, CD19, CD20, CD3 и CTLA-4.
58. Набор по п. 57, где антитело представляет собой антитело, выбранное из трастузумаба, цетуксимаба, панитумумаба, бевацизумаба, ритуксимаба и тозитумомаба.
59. Набор по п. 54 где химиотерапевтическое средство выбирают из группы, содержащей антимикротубулярные средства, ингибиторы топоизомеразы, антиметаболиты, ингибиторы синтеза и деградации белков, ингибиторы митоза, алкилирующие агенты, платинирующие агенты, ингибиторы синтеза нуклеиновых кислот, ингибиторы гистондеацетилазы и ДНК-метилтрансферазы, азотистые
иприты, нитрозомочевины, этиленимины, алкилсульфонаты, триазины, аналоги фолата, аналоги нуклеозидов, ингибиторы рибонуклеотидредуктазы, алкалоиды барвинка, таксаны, эпотилоны, интеркалирующие средства, средства, способные препятствовать сигнальной трансдукции, средства, вызывающие апоптоз и конъюгаты антител, которые связываются с поверхностью белка для доставки токсичного средства.
60. Набор по п. 54, где химиотерапевтическое средство выбирают из группы, содержащей платину, циклофосфамид, дакарбазин, метотрексат, флуроурацил, гемцитабин, капецитабин, гидроксимочевина, топотекан, иринотекан, азацитидин, вориностат, иксабепилон, бортезомиб, таксаны, включая паклитаксел и доцетаксел, цитохалазин В, грамицидин D, бромид этидия, эметин, митомицин, этопозид, тенопозид, винкристин, винбластин, винорелбин, колхицин, антрациклины, включая доксорубицин и эпирубицин, даунорубицин, дигидроксиантрацендион, митоксантрон, митрамицин, актиномицин D, адриамицин, 1-дегидротестостерон, глюкокортикоиды, прокаин, тетракаин, лидокаин, пропранолол, пуромицин, рицин и майтанзиноиды.
61. Набор по п. 54, дополнительно содержащий по меньшей мере одно дополнительное средство, такое как диагностическое или терапевтическое средство.
62. Набор по п. 54, где химиотерапевтическое средство представляет собой гефитиниб.
63. Набор по п. 54, где химиотерапевтическое средство представляет собой доцетаксел, лейковорин или флуроурацил.