ЗАМЕЩЕННОЕ ПРОИЗВОДНОЕ ДИГИДРОПИРРОЛОПИРАЗОЛА
SUBSTITUTED DIHYDROPYRROLOPYRAZOLE DERIVATIVE

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
[0001] Настоящее изобретение относится к соединению замещенного дигидропирролопиразола или его фармакологически приемлемой соли, которые обладают высокой ингибирующей активностью в отношении CDK7 и которые могут применяться в качестве лекарственного препарата (например, лекарственного препарата для лечения или предотвращения рака, воспалительного заболевания, аллергического заболевания или хронического респираторного заболевания).
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[0002] CDK (циклин-зависимые киназы) являются факторами регуляции клеточного роста, которые вовлечены в начало синтеза ДНК (S-фазы) клеточного цикла и митотической фазы (M-фазы) и так далее, и известны многие типы CDK. Кроме того, активация CDK контролируется на нескольких стадиях путем фосфорилирования или дефосфорилирования треонинового остатка активной петли (Т-петли) в ее трехмерной структуре. При фосфорилировании конкретного треонинового остатка CDK, он образует комплекс с конкретным циклином и активируется. Этот комплекс, который является важным для регуляции клеточного цикла, включает CDK1, CDK2/циклин A, CDK1/циклины B1-B3 и CDK2, CDK4, CDK5, CDK6/циклины D1-D3 и CDK2/циклин E, которые, соответственно, вовлечены в конкретные периоды клеточного цикла. CDK7 образует CDK-активирующую киназу (CAK) вместе с циклином H и MAT1 в метазоанах и участвует в фосфорилировании CDK (например, CDK1, CDK2, CDK4 и CDK6), необходимых для развития клеточного цикла (смотрите непатентный документ 1).
[0003] Избыточный рост клеток вследствие аномальной активации CDK является общей характерной чертой многих видов рака, и известно, что это связано с потерей функций контрольных точек, участвующих в регуляции клеточных циклов раковых клеток (смотрите непатентный документ 2). Также известно, что циклин-зависимые киназы имеют функции, отличные от управления клеточным циклом, и известно, что CDK7 способствует связыванию РНК-полимеразы II (RNAPII) с ДНК и ее удлинению для положительного контроля транскрипции посредством фосфорилирования серина в COOH-концевом домене RNAPII (смотрите непатентный документ 3).
[0004] Ингибиторы CDK7 оказывают ингибирующее действие при исследованиях клеточного роста различных раковых клеток и моделей раковых заболеваний на мышах, и ожидается, что ингибирование может найти применение в качестве вариантов противораковой терапии (смотрите непатентные документы 4 и 5).
[0005] Кроме того, сообщалось, что в случае моделей индуцированного коллагеном ревматизма у мышей, путем ингибирования CDK7 достигается улучшение клинических оценок и уменьшение повреждения ткани, снижение уровней индуцированных воспалением цитокинов, таких как IL-6, IL-1 и IL-17, и анти-CII-IgG2, и снижение доли клеток Th17 (смотрите непатентный документ 6).
[0006] К тому же, предполагается, что ингибиторы CDK7, которые играют важную роль в развитии клеточного цикла, могут также тормозить развитие инфекционных заболеваний, вызванных такими вирусами, как ВИЧ, вирус Эпштейна-Барра (EBV) и вирус гепатита С (HCV), и кардиомегалии (смотрите непатентные документы 7 и 8). Примеры заболеваний, для которых применение ингибиторов CDK7 может дать положительные результаты, помимо заболеваний, описанных выше, включают аутоиммунные заболевания, типичными представителями которых являются псориаз и множественный склероз; нейродегенеративные заболевания, такие как болезнь Альцгеймера и другие подобные заболевания; аллергические заболевания, типичным представителями которых являются дерматит и другие подобные заболевания; хронические респираторные заболевания, типичным представителями которых являются хроническое обструктивное заболевание легких (COPD) и другие подобные заболевания; и фиброз, типичными представителями которого являются идиопатический легочный фиброз и другие подобные заболевания (смотрите непатентные документы 9-11 и непатентные документы 16-18).
[0007] Несмотря на то, что в настоящее время проводится много исследований по разработке ингибиторов CDK, тем не менее, имеется немного соединений, обладающих высоким ингибирующим действием в отношении CDK7 (смотрите непатентный документ 15).
СПИСОК ПРОТИВОПОСТАВЛЕННЫХ МАТЕРИАЛОВ
Патентные документы
[0008]
Патентный документ 1: WO 2002/012242
Патентный документ 2: WO 2004/056827
Патентный документ 3: WO 2004/080457
Патентный документ 4: WO 2007/068637
Патентный документ 5: WO 2007/072153
Патентный документ 6: WO 2007/099171
Патентный документ 7: WO 2008/043745
Патентный документ 8: WO 2008/125945
Патентный документ 9: WO 2011/044264
Патентный документ 10: WO 2008/151304
Патентный документ 11: WO 2013/128028
Патентный документ 12: WO 2013/128029
Патентный документ 13: WO 2014/063068
Патентный документ 14: WO 2015/058126
Патентный документ 15: WO 2015/058140
Патентный документ 16: WO 2015/058163
Патентный документ 17: WO 2015/124941
Патентный документ 18: WO 2015/154022
Патентный документ 19: WO 2015/154038
Патентный документ 20: WO 2015/154039
Непатентные документы
[0009]
Непатентный документ 1: Journal of Cell Science 2005, 118 (20), 5171-5180
Непатентный документ 2: Nature Reviews Cancer 2009, 9, 153-166
Непатентный документ 3: Biochim Biophys Acta 2004, 1677, 64-73
Непатентный документ 4: Nature 2014, 511, 616-620
Непатентный документ 5: Cancer Res 2009, 69, 6208-6215
Непатентный документ 6: Clin. Exp. Med. 2015, 15, 269-275
Непатентный документ 7: Curr HIV Res 2003, 1 (2), 131-152
Непатентный документ 8: Mol Cell Biol 1998, 18 (11), 6729-6736
Непатентный документ 9: Br J Dermatol 2000, 143 (5), 950-956
Непатентный документ 10: Biochem Biophys Res Commun 2013, 435 (3), 378-384
Непатентный документ 11: Neurobiol Aging 2000, 6, 807-813
Непатентный документ 12: Journal of Medicinal Chemistry 2012, 55 (10), 4728-4739
Непатентный документ 13: Bioorganic & Medicinal Chemistry 2010, 18 (5), 1844-1853
Непатентный документ 14: ChemMedChem 2007, 2, 841-852
Непатентный документ 15: Current Drug Targets, 2010, 11, 291-302
Непатентный документ 16: Clinical & Experimental Allergy, 2011, 41, 673-687
Непатентный документ 17: Cell Death and Differentiation, 2012, 19, 1950-1961
Непатентный документ 18: Am. J. Physiol. Lung Cell Mol, 2004, 286, 727-733
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Техническая задача
[0010] Авторы настоящего изобретения провели исследования по поиску новых соединений замещенного дигидропирролопиразола с целью разработки высокоактивных ингибиторов CDK7 и создали настоящее изобретение, обнаружив, что новое соединение замещенного дигидропирролопиразола, имеющее конкретную структуру, или его фармакологически приемлемая соль обладает высокой ингибирующей активностью в отношении CDK7 и может применяться в качестве лекарственного препарата (например, лекарственного препарата для лечения или предотвращения онкологических заболеваний, воспалительных заболеваний, аллергических заболеваний или хронических респираторных заболеваний).
[0011] В патентных документах 1-9 и непатентных документах 12-14 описано соединение, имеющее структуру 6,6-диметил-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразола, но в них не раскрыто соединение по настоящему изобретению или его фармакологически приемлемая соль.
[0012] В качестве соединений, ингибирующих CDK7, в патентном документе 10 раскрыты производные пиразолопиримидина, в патентных документах 11 и 12 раскрыты производные пиразолотриазина, в патентном документе 13 и непатентном документе 4 раскрыты фенильные производные, и в патентных документах 14-20 раскрыты гетероциклические соединения; однако, не раскрыто соединение, имеющее структуру 4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразола.
Решение задачи
[0013] В настоящем изобретении предлагается новое соединение замещенного дигидропирролопиразола или его фармакологически приемлемая соль, которые обладают высокой ингибирующей активностью в отношении CDK7;
фармацевтическая композиция, предпочтительно, фармацевтическая композиция для лечения или предотвращения онкологических заболеваний, доброкачественной опухоли, ангиогенеза, воспалительных заболеваний (например, аутоиммунных заболеваний), инфекционных заболеваний, вызванных вирусами (ВИЧ, вирусом Эпштейна-Барра (EBV), вирус гепатита С (HCV) и другими подобными вирусами), нейродегенеративных заболеваний (например, болезни Альцгеймера), аллергических заболеваний (например, атопического дерматита), хронических респираторных заболеваний (например, хронического обструктивного заболевания легких (COPD)), фиброза (например, идиопатического легочного фиброза), заболеваний системы кровообращения, таких как кардиомегалия, или импотенции, включающая соединение замещенного дигидропирролопиразола или его фармакологически приемлемую соль в качестве активного ингредиента;
применение соединения замещенного дигидропирролопиразола или его фармакологически приемлемой соли для приготовления фармацевтической композиции для лечения или предотвращения (предпочтительно, лечения) заболеваний (предпочтительно, описанных выше заболеваний);
способ лечения или предотвращения (предпочтительно, лечения) заболеваний (предпочтительно, описанных выше заболеваний) путем введения фармацевтически эффективного количества соединения замещенного дигидропирролопиразола или его фармакологически приемлемой соли теплокровному животному (предпочтительно, человеку); и способ получения соединения замещенного дигидропирролопиразола его фармакологически приемлемой соли или его промежуточного соединения.
Примеры онкологических заболеваний включают рак мочевого пузыря, рак молочной железы, рак толстого кишечника (например, колоректальный рак, например, аденокарциному толстой кишки и аденому толстой кишки), рак почки, эпидермальный рак, рак печени, рак легкого (например, аденокарциному, мелкоклеточный рак легкого и немелкоклеточный рак легкого), рак пищевода, рак желчного пузыря, рак яичников, рак поджелудочной железы (например, экзокринный рак поджелудочной железы), рак желудка, рак шейки матки, эндометриальный рак, рак щитовидной железы, рак носа, рак головы и шеи, рак предстательной железы, рак кожи (например, плоскоклеточный рак), опухоли кроветворных органов лимфатической системы (например, лейкоз, острый лимфолейкоз, хронический лимфолейкоз, В-клеточную лимфому (например, диффузную В-крупноклеточную лимфому), Т-клеточную лимфому, множественную миелому, лимфому Ходжкина, неходжкинскую лимфому, волосатоклеточную лимфому и лимфому Беркитта), опухоли кроветворных органов миелоидной системы (например, острый или хронический миелолейкоз, миелодиспластический синдром и промиелоцитарный лейкоз), фолликулярную карциному щитовидной железы, мезенхимальные опухоли (например, фибросаркому, саркому Юинга и рабдомиосаркому), опухоли центральной или периферической нервной системы (например, астроцитому, нейробластому, глиому, опухоль головного мозга и шванному), меланому, семиному, тератому, остеосаркому, пигментную ксеродерму, кератоакантому, фолликулярную карциному щитовидной железы и саркому Капоши.
Примеры аутоиммунных заболеваний включают множественный склероз, синдром Гийена - Барре, тяжелую миастению, хронический атрофический гастрит, аутоиммунный гепатит, первичный биллиарный цирроз, язвенный колит, болезнь Крона, первичный склерозирующий холангит, аутоиммунный панкреатит, аортитный синдром, синдром Гудпасчера, быстропрогрессирующий гломерулонефрит, мегалобластическую анемию, аутоиммунную гемолитическую анемию, аутоиммунную нейтропению, идиопатическую тромбоцитопеническую пурпуру, болезнь Грейвcа, болезнь Хашимото, первичный гипотиреоз, идиопатическую болезнь Аддисона, сахарный диабет 1 типа, очаговую склеродермию, приобретенный буллезный эпидермоз, витилиго обыкновенное, аутоиммунную оптическую нейропатию, аутоиммунное заболевание внутреннего уха, идиопатическую азооспермию, ревматоидный артрит, системную эритематозную волчанку, лекарственную эритематозную волчанку, синдром Шегрена, полимиозит, псориаз, дерматомиозит, склеродермию, васкулитный синдром, смешанное заболевание соединительной ткани и воспалительное заболевание кишечника. В данном случае, воспалительное заболевание кишечника (IBD) представляет собой общее название для заболеваний, которые вызывают хроническое воспаление или язву в слизистой оболочки толстого кишечника или тонкого кишечника, и его примеры включают болезнь Крона и язвенный колит.
[0014] Согласно одному аспекту, настоящее изобретение предлагает следующие пункты [1] - [79]:
[1] Соединение, представленное формулой (Ia), или его фармакологически приемлемая соль:
[Химическая формула 1]
где
1-3
2-5
два R фрагмента каждый независимо представляет собой C алкильную группу или представляют собой группы, которые, будучи связанными друг с другом, образуют C алкиленовую группу;
6-10
1-6
A представляет собой необязательно замещенную C арильную группу или необязательно замещенную гетероарильную группу, и Z представляет собой атом водорода или необязательно замещенную C алкильную группу, или группа, представленная Z-N-A, образует необязательно замещенную бициклическую конденсированную гетероциклическую группу в результате образования связи между A и Z; и
1
2
3
1-4
R, R и R каждый независимо представляет собой необязательно замещенную линейную или разветвленную C алкильную группу.
[2] Соединение, представленное формулой (I), или его фармакологически приемлемая соль:
[Химическая формула 2]
где
1-3
2-5
два R фрагмента каждый независимо представляет собой C алкильную группу или представляют собой группы, которые, будучи связанными друг с другом, образуют C алкиленовую группу;
6-10
A представляет собой необязательно замещенную C арильную группу или необязательно замещенную гетероарильную группу; и
1
2
3
1-4
R, R и R каждый независимо представляет собой необязательно замещенную линейную или разветвленную C алкильную группу.
[3] Соединение, представленное формулой (IIa), или его фармакологически приемлемая соль:
[Химическая формула 3]
где
6-10
1-6
A представляет собой необязательно замещенную C арильную группу или необязательно замещенную гетероарильную группу, и Z представляет собой атом водорода или необязательно замещенную C алкильную группу, или группа, представленная Z-N-A, образует необязательно замещенную бициклическую конденсированную гетероциклическую группу в результате образования связи между A и Z; и
1
2
3
1-4
R, R и R каждый независимо представляет собой необязательно замещенную линейную или разветвленную C алкильную группу.
[4] Соединение, представленное формулой (II), или его фармакологически приемлемая соль:
[Химическая формула 4]
где
6-10
A представляет собой необязательно замещенную C арильную группу или необязательно замещенную гетероарильную группу; и
1
2
3
1-4
R, R и R каждый независимо представляет собой необязательно замещенную линейную или разветвленную C алкильную группу.
[5] Соединение, представленное формулой (IIIa), или его фармакологически приемлемая соль:
[Химическая формула 5]
где
6-10
1-6
A представляет собой необязательно замещенную C арильную группу или необязательно замещенную гетероарильную группу, и Z представляет собой атом водорода или необязательно замещенную C алкильную группу, или группа, представленная Z-N-A, образует необязательно замещенную бициклическую конденсированную гетероциклическую группу в результате образования связи между A и Z; и
1
2
3
1-4
R, R и R каждый независимо представляет собой необязательно замещенную линейную или разветвленную C алкильную группу.
[6] Соединение, представленное формулой (III), или его фармакологически приемлемая соль:
[Химическая формула 6]
где
6-10
A представляет собой необязательно замещенную C арильную группу или необязательно замещенную гетероарильную группу; и
1
2
3
1-4
R, R и R каждый независимо представляет собой необязательно замещенную линейную или разветвленную C алкильную группу.
[7] Соединение, представленное формулой (IVa), или его фармакологически приемлемая соль:
[Химическая формула 7]
где
6-10
1-6
A представляет собой необязательно замещенную C арильную группу или необязательно замещенную гетероарильную группу, и Z представляет собой атом водорода или необязательно замещенную C алкильную группу, или группа, представленная Z-N-A, образует необязательно замещенную бициклическую конденсированную гетероциклическую группу в результате образования связи между A и Z; и
1
2
3
1-4
R, R и R каждый независимо представляет собой необязательно замещенную линейную или разветвленную C алкильную группу.
[8] Соединение, представленное формулой (IV), или его фармакологически приемлемая соль:
[Химическая формула 8]
где
6-10
A представляет собой необязательно замещенную C арильную группу или необязательно замещенную гетероарильную группу; и
1
2
3
1-4
R, R и R каждый независимо представляет собой необязательно замещенную линейную или разветвленную C алкильную группу.
[9] Соединение, выбранное из группы, состоящей из следующих соединений:
6,6-Диметил-N-фенил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
6,6-Диметил-N-(п-толил)-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(4-метоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(4-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
6,6-Диметил-N-(пиридин-3-ил)-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
6,6-Диметил-N-(о-толил)-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
6,6-Диметил-N-(м-толил)-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-([1,1'-бифенил]-3-ил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(3-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(3-хлорфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-метоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-хлорфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-([1,1'-бифенил]-2-ил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
6,6-Диметил-N-(пиридин-2-ил)-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-этилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2,6-диметилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2,3-дифторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2,3-диметилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-фтор-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-[2-(дифторметокси)фенил]-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-этоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
6,6-Диметил-N-[2-(трифторметокси)фенил]-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-фтор-4-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2,6-дифторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-[2-(третбутил)фенил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
6,6-Диметил-N-[2-(трифторметил)фенил]-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(3-фтор-2-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-цианофенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(4-фтор-2-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-хлор-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-фтор-3-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-фтор-5-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(5-фтор-2-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2,4-дифторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2,5-дифторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2,5-диметилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-хлор-6-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2,4-диметилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
3-[1-(Этилдиметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-N-(2-фтор-фенил)-6,6-диметил-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
6,6-Диметил-N-(3-метилизотиазол-4-ил)-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
6,6-Диметил-N-(тиофен-2-ил)-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-2,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
6,6-Диметил-N-(тиофен-3-ил)-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-2,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2,6-дифтор-4-метоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-фтор-6-метоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-[2-фтор-6-(трифторметил)фенил]-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(5-хлор-2-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2,5-дихлорфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-циклопропилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2,6-дихлорфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
6,6-Диметил-N-(2,4,6-трифторфенил)-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-этил-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-бромфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-хлор-5-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(5-хлор-2-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
6,6-Диметил-N-(2,3,6-трифторфенил)-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-хлор-6-метоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-[2-(1,1-дифторэтил)фенил]-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(6-хлор-2-фтор-3-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-фтор-6-(метокси-d3)фенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-фтор-6-метокси-3-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2,6-дифтор-3-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-[2-(дифторметокси)-6-фторфенил]-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-бром-6-хлорфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-хлор-6-фтор-3-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-этил-6-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-бром-6-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-бром-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-хлор-5-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(6-фтор-2,3-дигидробензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-циано-6-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-хлор-6-циклопропилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-фтор-3,6-диметилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(6-фторбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-хлор-3-фтор-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-[2-(дифторметокси)-6-фторфенил]-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклопропанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2,6-дихлорфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-пропанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2,6-дихлорфенил)-6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметил-силил)пропанамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-[2-(дифторметокси)-6-фторфенил]-6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметилсилил)пропанамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2,6-дихлор-4-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-этил-6-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклопропанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-бром-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклопропанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-хлор-5-метоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-этил-6-фторфенил)-6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметил-силил)пропанамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-бром-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметил-силил)пропанамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(6-фторбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[2-метил-2-(три-метилсилил)пропанамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(6-фторбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклопропанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N,6,6-триметил-N-фенил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(6-фтор-3-метилбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-(2-хлор-6-фторбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид,
N-[5-(индолин-1-карбонил)-6,6-диметил-1,4,5,6-тетрагидро-пирроло[3,4-c]пиразол-3-ил]-1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамид,
N-[5-(3,4-дигидро-2H-бензо[b][1,4]оксазин-4-карбонил)-6,6-диметил-1,4,5,6-тетрагидропирроло[3,4-c]пиразол-3-ил]-1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамид,
N-(6-фтор-2-метилбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид и
N-[5-(1H-индол-1-карбонил)-6,6-диметил-1,4,5,6-тетрагидро-пирроло[3,4-c]пиразол-3-ил]-1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамид
или их фармакологически приемлемая соль.
[10] N-(2-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид или его фармакологически приемлемая соль.
[11] 6,6-Диметил-N-(о-толил)-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид или его фармакологически приемлемая соль.
[12] N-(2-хлор-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид или его фармакологически приемлемая соль.
[13] N-(5-фтор-2-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид или его фармакологически приемлемая соль.
[14] N-(2,5-диметилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид или его фармакологически приемлемая соль.
[15] N-(2-хлор-6-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид или его фармакологически приемлемая соль.
[16] N-(2-бром-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид или его фармакологически приемлемая соль.
[17] N-(2-фтор-3,6-диметилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид или его фармакологически приемлемая соль.
[18] N-(6-фторбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид или его фармакологически приемлемая соль.
[19] N-(2-хлор-6-фторбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид или его фармакологически приемлемая соль.
[20] N-(6-фтор-2-метилбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид или его фармакологически приемлемая соль.
[21] Фармацевтическая композиция, включающая соединение или его фармакологически приемлемую соль по любому из пунктов [1] - [20].
[22] Фармацевтическая композиция по пункту [21], где фармацевтическая композиция представляет собой ингибитор CDK7.
[23] Фармацевтическая композиция по пункту [21] или [22], где фармацевтическая композиция применяется для лечения или предотвращения рака, воспалительного заболевания, аллергического заболевания или хронического респираторного заболевания.
[24] Фармацевтическая композиция по пункту [23], где рак представляет собой рак крови или солидный рак.
[25] Фармацевтическая композиция по пункту [24], где рак крови представляет собой множественную миелому, хронический миелолейкоз, гематологическую опухоль, гематологическую злокачественную опухоль, детский лейкоз, детскую лимфому, болезнь Ходжкина, лимфоцитарную лимфому, кожную лимфому, острый лейкоз, хронический лейкоз, острый лимфобластный лейкоз, острый миелолейкоз, хронический миелолейкоз, плазмоклеточное новообразование, опухоль лимфоидной ткани или СПИД-ассоциированный рак.
[26] Фармацевтическая композиция по пункту [24], где солидный рак представляет собой рак мочевого пузыря, рак молочной железы, рак толстой кишки, рак почки, рак печени, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, немелкоклеточный рак легкого, рак головы и шеи, рак пищевода, рак желчного пузыря, рак яичников, рак поджелудочной железы, рак желудка, рак шейки матки, рак щитовидной железы, рак предстательной железы, рак кожи, в том числе плоскоклеточную карциному, фибросаркому, рабдомиосаркому, астроцитому, нейробластому, глиому и неврилеммому, меланому, семиному, тератокарциному, остеосаркому, пигментную ксеродерму, кератоакантому, фолликулярный рак щитовидной железы или саркому Капоши.
[27] Фармацевтическая композиция по пункту [23], где воспалительное заболевание представляет собой аутоиммунное заболевание.
[28] Фармацевтическая композиция по пункту [27], где аутоиммунное заболевание представляет собой ревматоидный артрит.
[29] Фармацевтическая композиция по пункту [27], где аутоиммунное заболевание представляет собой псориаз.
[30] Фармацевтическая композиция по пункту [27], где аутоиммунное заболевание представляет собой множественный склероз.
[31] Фармацевтическая композиция по пункту [27], где аутоиммунное заболевание представляет собой воспалительное заболевание кишечника.
[32] Фармацевтическая композиция по пункту [23], где хроническое респираторное заболевание представляет собой хроническое обструктивное заболевание легких.
[33] Фармацевтическая композиция по пункту [23], где аллергическое заболевание представляет собой атопический дерматит.
[34] Фармацевтическая композиция по любому из пунктов [21] - [33], где фармацевтическую композицию вводят в комбинации с одним или более дополнительными лекарственными средствами, выбранными из группы, состоящей из противораковых средств, противоревматических средств, лекарственных средств для лечения псориаза, лекарственных средств для лечения множественного склероза, лекарственных средств для лечения воспалительного заболевания кишечника, лекарственных средств для лечения хронического обструктивного заболевания легких и лекарственных средств для лечения атопического дерматита.
[35] Фармацевтическая композиция по любому из пунктов [21] - [33], где фармацевтическую композицию вводят одновременно или в разные моменты времени с композицией, включающей в качестве активного ингредиента одно или более дополнительных лекарственных средств, выбранных их группы, состоящей из противораковых средств, противоревматических средств, лекарственных средств для лечения псориаза, лекарственных средств для лечения множественного склероза, лекарственных средств для лечения воспалительного заболевания кишечника, лекарственных средств для лечения хронического обструктивного заболевания легких и лекарственных средств для лечения атопического дерматита.
[36] Фармацевтическая композиция по любому из пунктов [21] - [33], дополнительно включающая в качестве активного ингредиента одно или более дополнительных лекарственных средств, выбранных их группы, состоящей из противораковых средств, противоревматических средств, лекарственных средств для лечения псориаза, лекарственных средств для лечения множественного склероза, лекарственных средств для лечения воспалительного заболевания кишечника, лекарственных средств для лечения хронического обструктивного заболевания легких и лекарственных средств для лечения атопического дерматита.
[37] Фармацевтическая композиция по любому из пунктов [34] - [36], где дополнительное лекарственное средство выбирают из группы, состоящей из ингибиторов тирозинкиназы, ингибиторов иммунных контрольных точек, средств, алкилирующих ДНК, ингибиторов синтеза ДНК, лекарственных средств, содержащих платину, антиметаболитов, ингибиторов топоизомеразы I, ингибиторов топоизомеразы II, активатора табулина, антагонистов гормонов, ингибиторов ароматазы, индукторов дифференцировки, ингибиторов протеосомы, ингибиторов фосфолипида киназы, ингибиторов аденозиндеаминазы, антиангиогенных средств, ингибиторов гистондеацетилазы (HDAC), ингибиторов бромодомена белков BET, ингибиторов гистондеметилазы, ингибиторов гистонметилтрансферазы, ингибиторов матриксной металлопротеиназы, ингибиторов фарнезилтрансферазы, препаратов бисфосфоната, ингибиторов Hsp90, ингибиторов кинезин Eg5, ингибиторов серин-треонинкиназы, антицитокиновых средств, иммунодепрессантов, иммуномодуляторов, препарата активной формы витамина D3 для наружного применения, антагонистов S1P1 рецептора, препаратов интерферона, антихолинергических лекарственных средств, антагонистов лейкотриена, ингибиторов PDE4, антагонистов PGD2 рецептора, ингибиторов нейтрофил-эластазы, антигистаминных средств, классических нестероидных противовоспалительных средств, ингибиторов циклооксигеназы, высвобождающих оксид азота нестероидных противовоспалительных средств, препаратов золота, пеницилламина, препаратов аминосалициловой кислоты, противомалярийных лекарственных средств, ингибиторов синтеза пиримидина, ингибиторов TNF, ингибиторов интерлейкина, антагонистов рецептора интерлейкина, интерлейкиновых лекарственных средств, ингибиторов активации В-клеток, препаратов связанной с белком костимулирующей молекулы, ингибиторов MAPK, лекарственных средств для регуляции генов, ингибиторов продукции цитокинов, ингибиторов TNF--конвертирующего фермента, ингибиторов интерлейкин-1-конвертирующего фермента, антагонистов хемокина, терапевтической вакцины, генной терапии, антисмысловых соединений, ингибиторов протеасомы, ингибиторов JAK, ингибиторов Т-клеток, ингибиторов инозинмонофосфатдегидрогеназы (IMPDH), ингибиторов адгезивной молекулы, талидомида, ингибиторов катепсина, ингибиторов глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, ингибиторов дигидрооротат-дегидрогеназы (DHODH), ингибиторов фосфолипазы A2, ингибиторов iNOS, стимуляторов микротрубочек, антимикротрубочковых средств, антагонистов MHC класс II, антагонистов CD4, антагонистов CD23, антагонистов лейкотриен B4 рецептора, ингибиторов 5-липоксигеназы, ингибиторов катепсина В, стимуляторов остеогенеза, ингибиторов дипептидилпепдидазы, агонистов коллагена, кремов капсаицина, сульфамидных препаратов, производных гиалуроновой кислоты, сульфата глюкозамина, амиприлозы, ингибиторов CD20, ингибиторов CD52, противоастматических лекарственных средств, лекарственных средств для лечения атопического дерматита, лекарственных средств для лечения аллергического ринита, агонистов опиоидного рецептора, иммуноглобулинов, глатирамер ацетата, вакцин Т-клеточного рецептора, ингибиторов адгезивной молекулы, мышечных релаксантов, местных анестетиков, кетамина, антагонистов мускаринового рецептора быстрого и длительного действия, антагонистов  рецептора быстрого и длительного действия, ингалируемых стероидов, пероральных стероидов, комбинированных лекарственных средств агонистов  рецептора и ингалируемых стероидов, производных витаминов и адренокортикоидных стероидов.
[38] Фармацевтическая композиция по любому из пунктов [34] - [36], где дополнительное лекарственное средство выбирают из группы, состоящей из цисплатина, доксорубицина, таксотера, таксола, этопозида, иринотекана, топотекана, паклитаксела, доцетаксела, эпотилона, тамоксифена, 5-фторурацила, финголимода, метотрексата, темозоломида, циклофосфамида, SCH 66336, R115777, L778,123, BMS 214662, гефитиниба, эрлотиниба, панитумумаба, афатиниба, дазатиниба, босутиниба, вандетаниба, сунитиниба, акситиниба, пазопаниба, ленватиниба, лапатиниба, нинтеданиба, нилотиниба, кризотиниба, церитиниба, алектиниба, ибрутиниба, иматиниба, сорафениба, вемурафениба, дабрафениба, траметиниба, палбоциклиба, интерферона альфа-2b, цитарабина, адриамицина, цитоксана, гемцитабина, урамустина, хлорметина, ифосфамида, мелфалана, хлорамбуцила, пипобромана, триэтиленмеламина, триэтилентиофосфорамина, офатумумаба, бусульфана, кармустина, ломустина, стрептозоцина, дакарбазина, флоксуридина, 6-меркаптопурина, 6-тиогуанина, регорафениба, рамуцирумаба, флударабин фосфата, оксалиплатина, фолината, пентостатина, винбластина, винкристина, виндезина, блеомицина, дактиномицина, даунорубицина, доксорубицина, эпирубицина, идарубицина, митрамицина, дезоксикоформицина, митомицина-С, L-аспарагиназы, тенипозида, 17-этинилэстрадиола, диэтилстилбестрола, тестостерона, преднизона, флуоксиместерона, дростанолон пропионата, тестолактона, мегестрол ацетата, метилпреднизолона, метилтестостерона, преднизолона, хлортрианисена, гидроксипрогестерона, аминоглутетимида, эстрамустина, медроксипрогестерона ацетата, лейпролид ацетата, флутамида, торемифена, гозерелина, карбоплатина, гидроксимочевины, амсакрина, прокарбазина, митотана, митоксантрона, левамизола, навелбина, анастрозола, летрозола, капецитабина, релоксафина, дролоксифена, гексаметилмеламина, бевацизумаба, омализумаба, меполизумаба, гемтузумаб озогамицина, могамулизумаба, пертузумаба, окрелизумаба, алемтузумаба, инотузумаба, тозитумомаба, бортезомиба, ибритутомаб тиуксетана, триоксида мышьяка, винорелбина, порфимера натрия, тиотепы, алтретамина, трастузумаба, летрозола, фулвестранта, эксеместана, ритуксимаба, цетуксимаба, базиликсимаба, ниволумаба, ипилимумаба, пембролизумаба, дурвалумаба, атезолизумаба, авелумаба, алкофенака, ацеклофенака, сулиндака, толметина, этодолака, фенопрофена, тиапрофеновой кислоты, меклофенамовой кислоты, мелоксикама, теноксикама, лорноксикама, набуметона, ацетаминофена, фенацетина, этензамида, сулпирина, антипирина, мигренина, аспирина, мефенамовой кислоты, флумефенамовой кислоты, фенилбутазона, индометацина, ибупрофена, кетопрофена, напроксена, оксапрозина, флурбипрофена, фенбуфена, пранопрофена, флоктафенина, пироксикама, эпиризола, тиарамид гидрохлорида, залтопрофена, габексата мезилата, камостат мезилата, улинастатина, колхицина, пробенецида, сульфинпиразона, бензбромарона, аллопуринола, брентуксимаб ведотина, ауротиомалата натрия, гиалуроната натрия, атропина, скополамина, морфина и его солей, петидина, леворфанола, оксиморфона, целекоксиба, эторикоксиба, валдекоксиба, локсопрофена, ауранофина, D-пеницилламина, сульфасалазина, месалазина, олсалазина, балсалазида, хлорохина, лефлуномида, такролимуса, инфликсимаба, этанерцепта, адалимумаба, цертолизумаб пегола, голимумаба, PASSTNF-, растворимого TNF- рецептора, TNF--связывающего белка, анти-TNF- антител, деносумаба, анакинры, антител против растворимого интерлейкин-1 рецептора, тоцилизумаба, анти-интерлейкин-6 антител, интерлейкина-10, устекинумаба, бриакинумаба, секукинумаба (AIN-457), иксекизумаба (LY-2439821), AMG827, ритуксана, белимумаба, абатасепта, BMS-582949, ингибиторов молекул, вовлеченных в сигнальную трансдукцию, ингибиторов MAPK, мазей, содержащих салициловую кислоту, мазей, содержащих мочевину, игуратимода, тетомиласта, белнакасана, HMPL-004, антагонистов IL-8, двойных антагонистов CXCR1-CXCR2, репариксина, антагонистов CCR9, денилейкин дифтитокса, CCX025, N-{4-хлор-2-[(1-оксидопиридин-4-ил)карбонил]фенил}-4-(пропан-2-илокси)бензолсульфонамида, антагонистов MCP-1, ирбесартана, вакцин TNF-, ISIS-104838, натализумаба, ведолизумаба, AJM300, TRK-170, E6007, MX-68, BMS-188667, CKD-461, римексолона, циклоспорина A, мизорибина, гусперимуса, сиролимуса, темсиролимуса, эверолимуса, антилимфоцитарной сыворотки, лиофилизированного сульфированного нормального иммуноглобулина, эритропоэтина, колониестимулирующих факторов, атипримода дигидрохлорида, азатиоприна, интерферона , интерферона -1b, интерферона -1a, тофацитиниба, барицитиниба, карфилзомиба, руксолитиниба, дексаметазона, гексэстрола, метимазола, бетаметазона, триамцинолона ацетонида, флуоцинонида, флуоцинолона ацетонида, гидрокортизона ацетата, гидрокортизона, фторметолона, беклометазона пропионата, эстриола, мофетила микофенолата, аликафорсена натрия, ингибиторов селектина, ингибиторов ELAM-1, ингибиторов VCAM-1, ингибиторов ICAM-1, V-85546, рофлумиласта, апремиласта, VAS203, реумакона, занолимумаба, DW-1350, зилейтона, ингибиторов Tyk2, синвиска (хилана G-F 20), ортовиска, атацисепта, блисибимода, тизанидина, эперизона, афлоквалона, баклофена, диазепама, дантролена натрия, производных витамина D3, производных витамина D2, изопреналина гидрохлорида, сальбутамола сульфата, прокатерола гидрохлорида, тербуталина сульфата, триметохинола гидрохлорида, тулобутерола гидрохлорида, орципреналина сульфата, фенотерола гидробромида, эфедрина гидрохлорида, ипратропия бромида, окситропия бромида, флутропия бромида, теофиллина, аминофиллина, хромогликата натрия, траниласта, репиринаста, амлексанокса, ибудиласта, кетотифена, терфенадина, мехитазина, азеластина, озагрела гидрохлорида, пранлукаста гидрата, сератродаста, циклезонида, хлорфенирамина малеата, алимемазина тартрата, клемастина фумарата, гомохлорциклизина гидрохлорида, фексофенадина, кетотифена фумарата, цетирихина гидрохлорида, оксатомида, эбастина, эпинастина гидрохлорида, лоратадина, трамадола, прометазина, гидроксизина, гомохлорциклизина, ципрогептадина, мехитазина, эмедастина фумарата, псевдоэфедрина, бепотастина безилата, левоцетирихина, олопатадина гидрохлорида, мофетила микофенолата, даклизумаба, галиксимаба, метформина гидрохлорида, визилизумаба, аминоптерина, пазопаниба гидрохлорида, фезакинумаба, руксолитиниба фосфата, иксекизумаба, гуселькумаба, SLx-2119, PRX-167700, лидокаина, тиотропия бромида, салметерола ксинафоата, формотерола фумарата, флутиказона пропионата, беклометазона пропионата, будезонида и комбинации салметерола ксинафоата и флутиказона пропионата.
[39] Фармацевтическая композиция по любому из пунктов [34] - [36], где дополнительное лекарственное средство представляет собой 5-фторурацил.
[40] Фармацевтическая композиция по любому из пунктов [34] - [36], где дополнительное лекарственное средство представляет собой оксалиплатину.
[41] Фармацевтическая композиция по любому из пунктов [34] - [36], где дополнительное лекарственное средство представляет собой иринотекан.
[42] Способ лечения или предотвращения рака, воспалительного заболевания, аллергического заболевания или хронического респираторного заболевания, включающий введение соединения или его фармакологически приемлемой соли по любому из пунктов [1] - [20] субъекту, нуждающемуся в этом.
[43] Способ по пункту [42], где рак представляет собой рак крови или солидный рак.
[44] Способ по пункту [43], где рак крови выбирают из группы, состоящей из множественной миеломы, хронического миелолейкоза, гематологической опухоли, гематологической злокачественной опухоли, детского лейкоза, детской лимфомы, болезни Ходжкина, лимфоцитарной лимфомы, кожной лимфомы, острого лейкоза, хронического лейкоза, острого лимфобластного лейкоза, острого миелолейкоза, хронического миелолейкоза, плазмоклеточного новообразования, опухоли лимфоидной ткани и СПИД-ассоциированного рака.
[45] Способ по пункту [43], где солидный рак выбирают из группы, состоящей из рака мочевого пузыря, рака молочной железы, рака толстой кишки, рака почки, рака печени, рака легкого, мелкоклеточного рака легкого, немелкоклеточного рака легкого, рака головы и шеи, рака пищевода, рака желчного пузыря, рака яичников, рака поджелудочной железы, рака желудка, рака шейки матки, рака щитовидной железы, рака предстательной железы, рака кожи, в том числе плоскоклеточной карциномы, фибросаркомы, рабдомиосаркомы, астроцитомы, нейробластомы, глиомы и неврилеммомы, меланомы, семиномы, тератокарциномы, остеосаркомы, пигментной ксеродермы, кератоакантомы, фолликулярного рака щитовидной железы и саркомы Капоши.
[46] Способ по пункту [42], где воспалительное заболевание представляет собой аутоиммунное заболевание.
[47] Способ по пункту [46], где аутоиммунное заболевание представляет собой ревматоидный артрит.
[48] Способ по пункту [46], где аутоиммунное заболевание представляет собой псориаз.
[49] Способ по пункту [46], где аутоиммунное заболевание представляет собой множественный склероз.
[50] Способ по пункту [46], где аутоиммунное заболевание представляет собой воспалительное заболевание кишечника.
[51] Способ по пункту [42], где хроническое респираторное заболевание представляет собой хроническое обструктивное заболевание легких.
[52] Способ по пункту [42], где аллергическое заболевание представляет собой атопический дерматит.
[53] Способ по любому из пунктов [42] - [52], где соединение или его фармакологически приемлемую соль вводят в комбинации с одним или более дополнительными лекарственными средствами, выбранными из группы, состоящей из противораковых средств, противоревматических средств, лекарственных средств для лечения псориаза, лекарственных средств для лечения множественного склероза, лекарственных средств для лечения воспалительного заболевания кишечника, лекарственных средств для лечения хронического обструктивного заболевания легких и лекарственных средств для лечения атопического дерматита.
[54] Способ по любому из пунктов [42] - [52], где соединение или его фармакологически приемлемую соль вводят одновременно или в разные моменты времени с композицией, включающей в качестве активного ингредиента одно или более дополнительных лекарственных средств, выбранных их группы, состоящей из противораковых средств, противоревматических средств, лекарственных средств для лечения псориаза, лекарственных средств для лечения множественного склероза, лекарственных средств для лечения воспалительного заболевания кишечника, лекарственных средств для лечения хронического обструктивного заболевания легких и лекарственных средств для лечения атопического дерматита.
[55] Способ по любому из пунктов [42] - [52], где введение соединения или его фармакологически приемлемой соли представляет собой введение композиции, содержащей в качестве активных ингредиентов соединение его фармакологически приемлемую соль и одно или более дополнительных лекарственных средств, выбранных из группы, состоящей из противораковых средств, противоревматических средств, лекарственных средств для лечения псориаза, лекарственных средств для лечения множественного склероза, лекарственных средств для лечения воспалительного заболевания кишечника, лекарственных средств для лечения хронического обструктивного заболевания легких и лекарственных средств для лечения атопического дерматита.
[56] Способ по любому из пунктов [53] - [55], где дополнительное лекарственное средство выбирают из группы, состоящей из ингибиторов тирозинкиназы, ингибиторов иммунных контрольных точек, средств, алкилирующих ДНК, ингибиторов синтеза ДНК, лекарственных средств, содержащих платину, антиметаболитов, ингибиторов топоизомеразы I, ингибиторов топоизомеразы II, активатора табулина, антагонистов гормонов, ингибиторов ароматазы, индукторов дифференцировки, ингибиторов протеосомы, ингибиторов фосфолипида киназы, ингибиторов аденозиндеаминазы, антиангиогенных средств, ингибиторов гистондеацетилазы (HDAC), ингибиторов бромодомена белков BET, ингибиторов гистондеметилазы, ингибиторов гистонметилтрансферазы, ингибиторов матриксной металлопротеиназы, ингибиторов фарнезилтрансферазы, препаратов бисфосфоната, ингибиторов Hsp90, ингибиторов кинезин Eg5, ингибиторов серин-треонинкиназы, антицитокиновых средств, иммунодепрессантов, иммуномодуляторов, препарата активной формы витамина D3 для наружного применения, антагонистов S1P1 рецептора, препаратов интерферона, антихолинергических лекарственных средств, антагонистов лейкотриена, ингибиторов PDE4, антагонистов PGD2 рецептора, ингибиторов нейтрофил-эластазы, антигистаминных средств, классических нестероидных противовоспалительных средств, ингибиторов циклооксигеназы, высвобождающих оксид азота нестероидных противовоспалительных средств, препаратов золота, пеницилламина, препаратов аминосалициловой кислоты, противомалярийных лекарственных средств, ингибиторов синтеза пиримидина, ингибиторов TNF, ингибиторов интерлейкина, антагонистов рецептора интерлейкина, интерлейкиновых лекарственных средств, ингибиторов активации В-клеток, препаратов связанной с белком костимулирующей молекулы, ингибиторов MAPK, лекарственных средств для регуляции генов, ингибиторов продукции цитокинов, ингибиторов TNF--конвертирующего фермента, ингибиторов интерлейкин-1-конвертирующего фермента, антагонистов хемокина, терапевтической вакцины, генной терапии, антисмысловых соединений, ингибиторов протеасомы, ингибиторов JAK, ингибиторов Т-клеток, ингибиторов инозинмонофосфатдегидрогеназы (IMPDH), ингибиторов адгезивной молекулы, талидомида, ингибиторов катепсина, ингибиторов глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, ингибиторов дигидрооротат-дегидрогеназы (DHODH), ингибиторов фосфолипазы A2, ингибиторов iNOS, стимуляторов микротрубочек, антимикротрубочковых средств, антагонистов MHC класс II, антагонистов CD4, антагонистов CD23, антагонистов лейкотриен B4 рецептора, ингибиторов 5-липоксигеназы, ингибиторов катепсина В, стимуляторов остеогенеза, ингибиторов дипептидилпепдидазы, агонистов коллагена, кремов капсаицина, сульфамидных препаратов, производных гиалуроновой кислоты, сульфата глюкозамина, амиприлозы, ингибиторов CD20, ингибиторов CD52, противоастматических лекарственных средств, лекарственных средств для лечения атопического дерматита, лекарственных средств для лечения аллергического ринита, агонистов опиоидного рецептора, иммуноглобулинов, глатирамер ацетата, вакцин Т-клеточного рецептора, ингибиторов адгезивной молекулы, мышечных релаксантов, местных анестетиков, кетамина, антагонистов мускаринового рецептора быстрого и длительного действия, антагонистов  рецептора быстрого и длительного действия, ингалируемых стероидов, пероральных стероидов, комбинированных лекарственных средств агонистов  рецептора и ингалируемых стероидов, производных витаминов и адренокортикоидных стероидов.
[57] Способ по любому из пунктов [53] - [55], где дополнительное лекарственное средство выбирают из группы, состоящей из цисплатина, доксорубицина, таксотера, таксола, этопозида, иринотекана, топотекана, паклитаксела, доцетаксела, эпотилона, тамоксифена, 5-фторурацила, финголимода, метотрексата, темозоломида, циклофосфамида, SCH 66336, R115777, L778,123, BMS 214662, гефитиниба, эрлотиниба, панитумумаба, афатиниба, дазатиниба, босутиниба, вандетаниба, сунитиниба, акситиниба, пазопаниба, ленватиниба, лапатиниба, нинтеданиба, нилотиниба, кризотиниба, церитиниба, алектиниба, ибрутиниба, иматиниба, сорафениба, вемурафениба, дабрафениба, траметиниба, палбоциклиба, интерферона альфа-2b, цитарабина, адриамицина, цитоксана, гемцитабина, урамустина, хлорметина, ифосфамида, мелфалана, хлорамбуцила, пипобромана, триэтиленмеламина, триэтилентиофосфорамина, офатумумаба, бусульфана, кармустина, ломустина, стрептозоцина, дакарбазина, флоксуридина, 6-меркаптопурина, 6-тиогуанина, регорафениба, рамуцирумаба, флударабин фосфата, оксалиплатина, фолината, пентостатина, винбластина, винкристина, виндезина, блеомицина, дактиномицина, даунорубицина, доксорубицина, эпирубицина, идарубицина, митрамицина, дезоксикоформицина, митомицина-С, L-аспарагиназы, тенипозида, 17-этинилэстрадиола, диэтилстилбестрола, тестостерона, преднизона, флуоксиместерона, дростанолон пропионата, тестолактона, мегестрол ацетата, метилпреднизолона, метилтестостерона, преднизолона, хлортрианисена, гидроксипрогестерона, аминоглутетимида, эстрамустина, медроксипрогестерона ацетата, лейпролид ацетата, флутамида, торемифена, гозерелина, карбоплатина, гидроксимочевины, амсакрина, прокарбазина, митотана, митоксантрона, левамизола, навелбина, анастрозола, летрозола, капецитабина, релоксафина, дролоксифена, гексаметилмеламина, бевацизумаба, омализумаба, меполизумаба, гемтузумаб озогамицина, могамулизумаба, пертузумаба, окрелизумаба, алемтузумаба, инотузумаба, тозитумомаба, бортезомиба, ибритутомаб тиуксетана, триоксида мышьяка, винорелбина, порфимера натрия, тиотепы, алтретамина, трастузумаба, летрозола, фулвестранта, эксеместана, ритуксимаба, цетуксимаба, базиликсимаба, ниволумаба, ипилимумаба, пембролизумаба, дурвалумаба, атезолизумаба, авелумаба, алкофенака, ацеклофенака, сулиндака, толметина, этодолака, фенопрофена, тиапрофеновой кислоты, меклофенамовой кислоты, мелоксикама, теноксикама, лорноксикама, набуметона, ацетаминофена, фенацетина, этензамида, сулпирина, антипирина, мигренина, аспирина, мефенамовой кислоты, флумефенамовой кислоты, фенилбутазона, индометацина, ибупрофена, кетопрофена, напроксена, оксапрозина, флурбипрофена, фенбуфена, пранопрофена, флоктафенина, пироксикама, эпиризола, тиарамид гидрохлорида, залтопрофена, габексата мезилата, камостат мезилата, улинастатина, колхицина, пробенецида, сульфинпиразона, бензбромарона, аллопуринола, брентуксимаб ведотина, ауротиомалата натрия, гиалуроната натрия, атропина, скополамина, морфина и его солей, петидина, леворфанола, оксиморфона, целекоксиба, эторикоксиба, валдекоксиба, локсопрофена, ауранофина, D-пеницилламина, сульфасалазина, месалазина, олсалазина, балсалазида, хлорохина, лефлуномида, такролимуса, инфликсимаба, этанерцепта, адалимумаба, цертолизумаб пегола, голимумаба, PASSTNF-, растворимого TNF- рецептора, TNF--связывающего белка, анти-TNF- антител, деносумаба, анакинры, антител против растворимого интерлейкин-1 рецептора, тоцилизумаба, анти-интерлейкин-6 антител, интерлейкина-10, устекинумаба, бриакинумаба, секукинумаба (AIN-457), иксекизумаба (LY-2439821), AMG827, ритуксана, белимумаба, абатасепта, BMS-582949, ингибиторов молекул, вовлеченных в сигнальную трансдукцию, ингибиторов MAPK, мазей, содержащих салициловую кислоту, мазей, содержащих мочевину, игуратимода, тетомиласта, белнакасана, HMPL-004, антагонистов IL-8, двойных антагонистов CXCR1-CXCR2, репариксина, антагонистов CCR9, денилейкин дифтитокса, CCX025, N-{4-хлор-2-[(1-оксидопиридин-4-ил)карбонил]фенил}-4-(пропан-2-илокси)бензолсульфонамида, антагонистов MCP-1, ирбесартана, вакцин TNF-, ISIS-104838, натализумаба, ведолизумаба, AJM300, TRK-170, E6007, MX-68, BMS-188667, CKD-461, римексолона, циклоспорина A, мизорибина, гусперимуса, сиролимуса, темсиролимуса, эверолимуса, антилимфоцитарной сыворотки, лиофилизированного сульфированного нормального иммуноглобулина, эритропоэтина, колониестимулирующих факторов, атипримода дигидрохлорида, азатиоприна, интерферона , интерферона -1b, интерферона -1a, тофацитиниба, барицитиниба, карфилзомиба, руксолитиниба, дексаметазона, гексэстрола, метимазола, бетаметазона, триамцинолона ацетонида, флуоцинонида, флуоцинолона ацетонида, гидрокортизона ацетата, гидрокортизона, фторметолона, беклометазона пропионата, эстриола, мофетила микофенолата, аликафорсена натрия, ингибиторов селектина, ингибиторов ELAM-1, ингибиторов VCAM-1, ингибиторов ICAM-1, V-85546, рофлумиласта, апремиласта, VAS203, реумакона, занолимумаба, DW-1350, зилейтона, ингибиторов Tyk2, синвиска (хилана G-F 20), ортовиска, атацисепта, блисибимода, тизанидина, эперизона, афлоквалона, баклофена, диазепама, дантролена натрия, производных витамина D3, производных витамина D2, изопреналина гидрохлорида, сальбутамола сульфата, прокатерола гидрохлорида, тербуталина сульфата, триметохинола гидрохлорида, тулобутерола гидрохлорида, орципреналина сульфата, фенотерола гидробромида, эфедрина гидрохлорида, ипратропия бромида, окситропия бромида, флутропия бромида, теофиллина, аминофиллина, хромогликата натрия, траниласта, репиринаста, амлексанокса, ибудиласта, кетотифена, терфенадина, мехитазина, азеластина, озагрела гидрохлорида, пранлукаста гидрата, сератродаста, циклезонида, хлорфенирамина малеата, алимемазина тартрата, клемастина фумарата, гомохлорциклизина гидрохлорида, фексофенадина, кетотифена фумарата, цетирихина гидрохлорида, оксатомида, эбастина, эпинастин гидрохлорида, лоратадина, трамадола, прометазина, гидроксизина, гомохлорциклизина, ципрогептадина, мехитазина, эмедастина фумарата, псевдоэфедрина, бепотастина безилата, левоцетирихина, олопатадина гидрохлорида, мофетила микофенолата, даклизумаба, галиксимаба, метформина гидрохлорида, визилизумаба, аминоптерина, пазопаниба гидрохлорида, фезакинумаба, руксолитиниба фосфата, иксекизумаба, гуселькумаба, SLx-2119, PRX-167700, лидокаина, тиотропия бромида, салметерола ксинафоата, формотерола фумарата, флутиказона пропионата, беклометазона пропионата, будезонида и комбинации салметерола ксинафоата и флутиказона пропионата.
[58] Способ по любому из пунктов [53] - [55], где дополнительное лекарственное средство представляет собой 5-фторурацил.
[59] Способ по любому из пунктов [53] - [55], где дополнительное лекарственное средство представляет собой оксалиплатин.
[60] Способ по любому из пунктов [53] - [55], где дополнительное лекарственное средство представляет собой иринотекан.
[61] Применение соединения или его фармакологически приемлемой соли по любому из пунктов [1] - [20] для приготовления фармацевтической композиции, которая является ингибитором CDK7.
[62] Применение соединения или его фармакологически приемлемой соли по любому из пунктов [1] - [20] для ингибирования CDK7.
[63] Применение соединения или его фармакологически приемлемой соли по любому из пунктов [1] - [20] для лечения или предотвращения рака, воспалительного заболевания, аллергического заболевания или хронического респираторного заболевания.
[64] Применение по пункту [63], где рак представляет собой рак крови или солидный рак.
[65] Применение по пункту [64], где рак крови выбирают из группы, состоящей из множественной миеломы, хронического миелолейкоза, гематологической опухоли, гематологической злокачественной опухоли, детского лейкоза, детской лимфомы, болезни Ходжкина, лимфоцитарной лимфомы, кожной лимфомы, острого лейкоза, хронического лейкоза, острого лимфобластного лейкоза, острого миелолейкоза, хронического миелолейкоза, плазмоклеточного новообразования, опухоли лимфоидной ткани и СПИД-ассоциированного рака.
[66] Применение по пункту [64], где солидный рак выбирают из группы, состоящей из рака мочевого пузыря, рака молочной железы, рака толстой кишки, рака почки, рака печени, рака легкого, мелкоклеточного рака легкого, немелкоклеточного рака легкого, рака головы и шеи, рака пищевода, рака желчного пузыря, рака яичников, рака поджелудочной железы, рака желудка, рака шейки матки, рака щитовидной железы, рака предстательной железы, рака кожи, в том числе плоскоклеточной карциномы, фибросаркомы, рабдомиосаркомы, астроцитомы, нейробластомы, глиомы и неврилеммомы, меланомы, семиномы, тератокарциномы, остеосаркомы, пигментной ксеродермы, кератоакантомы, фолликулярного рака щитовидной железы и саркомы Капоши.
[67] Применение по пункту [63], где воспалительное заболевание представляет собой аутоиммунное заболевание.
[68] Применение по пункту [67], где аутоиммунное заболевание представляет собой ревматоидный артрит.
[69] Применение по пункту [67], где аутоиммунное заболевание представляет собой псориаз.
[70] Применение по пункту [67], где аутоиммунное заболевание представляет собой множественный склероз.
[71] Применение по пункту [67], где аутоиммунное заболевание представляет собой воспалительное заболевание кишечника.
[72] Применение по пункту [63], где хроническое респираторное заболевание представляет собой хроническое обструктивное заболевание легких.
[73] Применение по пункту [63], где аллергическое заболевание представляет собой атопический дерматит.
[74] Соединение или его фармакологически приемлемая соль по любому из пунктов [1] - [20] для применения в качестве активного ингредиента в фармацевтической композиции.
[75] Соединение или его фармакологически приемлемая соль по пункту [74], где фармацевтическая композиция является фармацевтической композицией для лечения рака, воспалительного заболевания, аллергического заболевания или хронического респираторного заболевания.
[76] Соединение или его фармакологически приемлемая соль по пункту [75], где рак представляет собой рак крови или солидный рак.
[77] Соединение или его фармакологически приемлемая соль по пункту [75], где рак крови выбирают из группы, состоящей из множественной миеломы, хронического миелолейкоза, гематологической опухоли, гематологической злокачественной опухоли, детского лейкоза, детской лимфомы, болезни Ходжкина, лимфоцитарной лимфомы, кожной лимфомы, острого лейкоза, хронического лейкоза, острого лимфобластного лейкоза, острого миелолейкоза, хронического миелолейкоза, плазмоклеточного новообразования, опухоли лимфоидной ткани и СПИД-ассоциированного рака.
[78] Соединение или его фармакологически приемлемая соль по пункту [75], где солидный рак выбирают из группы, состоящей из рака мочевого пузыря, рака молочной железы, рака толстой кишки, рака почки, рака печени, рака легкого, мелкоклеточного рака легкого, немелкоклеточного рака легкого, рака головы и шеи, рака пищевода, рака желчного пузыря, рака яичников, рака поджелудочной железы, рака желудка, рака шейки матки, рака щитовидной железы, рака предстательной железы, рака кожи, в том числе плоскоклеточной карциномы, фибросаркомы, рабдомиосаркомы, астроцитомы, нейробластомы, глиомы и неврилеммомы, меланомы, семиномы, тератокарциномы, остеосаркомы, пигментной ксеродермы, кератоакантомы, фолликулярного рака щитовидной железы и саркомы Капоши.
[79] Соединение или его фармакологически приемлемая соль по пункту [75], где воспалительное заболевание представляет собой аутоиммунное заболевание.
[80] Соединение или его фармакологически приемлемая соль по пункту [79], где аутоиммунное заболевание представляет собой ревматоидный артрит.
[81] Соединение или его фармакологически приемлемая соль по пункту [79], где аутоиммунное заболевание представляет собой псориаз.
[82] Соединение или его фармакологически приемлемая соль по пункту [79], где аутоиммунное заболевание представляет собой множественный склероз.
[83] Соединение или его фармакологически приемлемая соль по пункту [79], где аутоиммунное заболевание представляет собой воспалительное заболевание кишечника.
[84] Соединение или его фармакологически приемлемая соль по пункту [75], где хроническое респираторное заболевание представляет собой хроническое обструктивное заболевание легких.
[85] Соединение или его фармакологически приемлемая соль по пункту [75], где аллергическое заболевание представляет собой атопический дерматит.
3
2
3
2
2
2
2
[0015] Конкретные примеры соединения, представленного общей формулой (I), по настоящему изобретению могут включать соединения, приведенные в таблицах 1-49 ниже. В таблицах 1-49 ниже, D обозначает дейтерий, Br обозначает атом брома, Cl обозначает атом хлора, F обозначает атом фтора, Me обозначает метильную группу, Et обозначает этильную группу, nPr обозначает н-пропильную группу, iPr обозначает изопропильную группу, cPr обозначает циклопропильную группу, tBu обозначает третбутильную группу, Ph обозначает фенильную группу, и MeO обозначает метоксильную группу. В качестве конкретных примеров, "CF" обозначает трифторметильную группу, "CHFO" обозначает дифторметоксильную группу, "CD" обозначает группу, в которой три атома водорода, которые входят в состав метильной группы, заменены на атомы дейтерия, "1,1-diF-Et" обозначает группу, в которой этильная группа замещена в положении 1 двумя атомами фтора, то есть, 1,1,-дифторэтильную группу, "2,6-diF-Ph" обозначает группу, в которой фенильная группа замещена в положениях 2 и 6 атомами фтора, соответственно, то есть, 2,6-дифторфенильную группу, "2,4-diCl-6-Me-Ph" обозначает группу, в которой фенильная группа замещена в положениях 2 и 4 атомами хлора, соответственно, и замещена в положении 6 метильной группой, то есть, 2,4-дихлор-6-метилфенильную группу, и "CHCHCHCH" обозначает 1,4-бутиленовую группу, образованную путем присоединения двух R фрагментов друг к другу.
[0016] [Таблица 1]
[0017] [Таблица 2]
[0018] [Таблица 3]
[0019] [Таблица 4]
[0020] [Таблица 5]
[0021] [Таблица 6]
[0022] [Таблица 7]
[0023] [Таблица 8]
[0024] [Таблица 9]
[0025] [Таблица 10]
[0026] [Таблица 11]
[0027] [Таблица 12]
[0028] [Таблица 13]
[0029] [Таблица 14]
[0030] [Таблица 15]
[0031] [Таблица 16]
[0032] [Таблица 17]
[0033] [Таблица 18]
[0034] [Таблица 19]
[0035] [Таблица 20]
[0036] [Таблица 21]
[0037] [Таблица 22]
[0038] [Таблица 23]
[0039] [Таблица 24]
[0040] [Таблица 25]
[0041] [Таблица 26]
[0042] [Таблица 27]
[0043] [Таблица 28]
[0044] [Таблица 29]
[0045] [Таблица 30]
[0046] [Таблица 31]
[0047] [Таблица 32]
[0048] [Таблица 33]
[0049] [Таблица 34]
[0050] [Таблица 35]
[0051] [Таблица 36]
[0052] [Таблица 37]
[0053] [Таблица 38]
[0054] [Таблица 39]
[0055] [Таблица 40]
[0056] [Таблица 41]
[0057] [Таблица 42]
[0058] [Таблица 43]
[0059] [Таблица 44]
[0060] [Таблица 45]
[0061] [Таблица 46]
[0062] [Таблица 47]
[0063] [Таблица 48]
[0064] [Таблица 49]
ПОЛОЖИТЕЛЬНЫЕ ЭФФЕКТЫ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0065] Соединение замещенного дигидропирролопиразола, представленное общей формулой (Ia), или его фармакологически приемлемая соль обладают высокой ингибирующей активностью в отношении CDK7, высокой селективностью ингибирующего действия в отношении киназы, высокой безопасностью и хорошими фармакокинетическими свойствами. В силу этого, соединение, представленное общей формулой (Ia), или его фармакологически приемлемая соль может применяться в качестве лекарственного препарата, в частности, терапевтического лекарственного препарата и/или профилактического лекарственного препарата для рака, воспалительного заболевания, аллергического заболевания или хронического респираторного заболевания.
Описание вариантов осуществления
[0066] Один вариант осуществления настоящего изобретения будет описан ниже. В настоящем изобретении, каждое "соединение, представленное общей формулой (Ia)" и так далее также обозначаются для удобства как "соединение (Ia)" и так далее. Различные заместители, определяемые или иллюстрируемые ниже, могут произвольно быть выбраны и объединены. В настоящем изобретении, "соединение замещенного дигидропирролопиразола" также называют "производным замещенного дигидропирролопиразола".
[0067] Одним вариантом осуществления настоящего изобретения является соединение, представленное общей формулой (Ia), или его фармацевтически приемлемая соль.
[Химическая формула 9]
[0068] В общей формуле (Ia),
1-3
2-5
два R фрагмента каждый независимо представляет собой C алкильную группу или представляют собой группы, которые, будучи связанными друг с другом, образуют C алкиленовую группу;
6-10
1-6
A представляет собой необязательно замещенную C арильную группу или необязательно замещенную гетероарильную группу, и Z представляет собой атом водорода или необязательно замещенную C алкильную группу, или группа, представленная Z-N-A, образует необязательно замещенную бициклическую конденсированную гетероциклическую группу в результате образования связи между A и Z; и
1
2
3
1-4
R, R и R каждый независимо представляет собой необязательно замещенную линейную или разветвленную C алкильную группу.
[0069] В настоящем изобретении, термин "необязательно замещенная" означает, что группа может быть незамещенной или может быть дополнительно замещена заместителем.
1-6
3-6
2-6
3-6
2-6
1-6
1-6
2
1-6
1-6
1-6
1-3
6-10
1-6
1-6
6-10
4
4
[0070] Под заместителем подразумевают одновалентную группу, и его примеры включают линейные или разветвленные C алкильные группы, C циклоалкильные группы, линейные или разветвленные C алкенильные группы, C циклоалкенильные группы, линейные или разветвленные C алкинильные группы, C алкоксильные группы, атомы галогенов, гидроксильную группу, цианогруппу, оксогруппу (=O), аминогруппу, C алкиламиногруппы, нитрогруппу, карбоксильную группу (-COOH), карбамоильную группу (-CONH), N-моно-C алкилкарбамоильные группы, N,N-ди-C алкилкарбамоильные группы (две алкильные группы могут быть различными), C алканоилоксильные группы (-OCOR; R представляет собой C алкильную группу), C арильные группы и гетероциклические группы. Заместитель может быть дополнительно замещен атомом галогена, гидроксильной группой, аминогруппой, цианогруппой, оксогруппой (=O), линейной или разветвленной C алкильной группой, C алкоксильной группой, C арильной группой, гетероциклической группой или другой подобной группой. В случае, когда заместитель представляет собой аминогруппу или карбоксильную группу, он может находиться в форме ее соли.
[0071] В случае, когда рассматриваемая группа имеет два или более заместителей, два заместителя могут быть связаны друг с другом с образованием циклической структуры. Примеры случая, когда два заместителя связаны друг с другом с образованием циклической структуры, включают циклопропильную группу, метилендиоксильную группу и оксиэтиленовую группу. В частности, в случае, когда метилендиоксильная группа связана с бензольным кольцом, заместитель превращается в 1,3-бензодиоксольную группу; в случае, когда оксиэтиленовая группа связана с бензольным кольцом, заместитель превращается в 2,3-дигидробензофуранильную группу.
1-6
1-6
1-6
[0072] Описанная в настоящем изобретении линейная или разветвленная C алкильная группа обозначает линейную или разветвленную алкильную группу, имеющую от 1 до 6 углеродных атомов. Примеры линейной или разветвленной C алкильной группы включают C алкильные группы, такие как метильная группа, этильная группа, пропильная группа, изопропильная группа, бутильная группа, изобутильная группа, вторбутильная группа, третбутильная группа, пентильная группа, изопентильная группа, неопентильная группа, третпентильная группа, 1-этилпропильная группа, 1-метилбутильная группа, 2-метилбутильная группа, 1,2-диметилпропильная группа, гексильная группа, 1-метилпентильная группа, 2-метилпентильная группа, 3-метилпентильная группа, 4-метилпентильная группа, 1-этилбутильная группа, 2-этилбутильная группа, 1,1-диметилбутильная группа, 2,2-диметилбутильная группа, 3,3-диметилбутильная группа, 1,2-диметилбутильная группа, 1,3-диметилбутильная группа и 2,3-диметилбутильная группа. Предпочтительно, чтобы заместитель представлял собой метильную группу, этильную группу, пропильную группу, изопропильную группу, бутильную группу, изобутильную группу, вторбутильную группу или третбутильную группу.
1-6
[0073] Примеры C алкильной группы, замещенной атомом галогена, включают хлорметильную группу, бромметильную группу, йодметильную группу, дифторметильную группу, дихлорметильную группу, дибромметильную группу, дийодметильную группу, трифторметильную группу, трихлорметильную группу, 1-фторэтильную группу, 2-фторэтильную группу, 2-хлорэтильную группу, 2-бромэтильную группу, 2,2-дифторэтильную группу, 2,2,2-трифторэтильную группу, пентафторэтильную группу, 2,2-дихлорэтильную группу, 2,2,2-трихлорэтильную группу, 1-фторпропильную группу, 2-фторпропильную группу, 3-фторпропильную группу, 3,3,3-трифторпропильную группу, перфторпропильную группу, 1-фторметилэтильную группу, 1-дифторметилэтильную группу, 1-трифторметилэтильную группу, 1-фтор-1-метилэтильную группу, 4-фторбутильную группу, перфторбутильную группу, 5-фторпентильную группу, перфторпентильную группу, 6-фторгексильную группу и перфторгексильную группу.
1-6
7-11
7-11
[0074] C алкильная группа, замещенная арильной группой, может представлять собой, например, C аралкильную группу. C аралкильная группа обозначает алкильную группу, имеющую арильную группу и имеющую суммарно от 7 до 11 углеродных атомов, и ее примеры включают бензильную группу, фенилэтильную группу и нафтилметильную группу.
3-6
3-6
[0075] Описанная в настоящем изобретении C циклоалкильная группа обозначает циклическую алкильную группу, имеющую от 3 до 6 углеродных атомов. Примеры C циклоалкильной группы включают моноциклические кольца, такие как циклопропильная группа, циклобутильная группа, циклопентильная группа и циклогексильная группа; конденсированные кольца, такие как бицикло[3,1,0]гексильная группа; и спирокольца, такие как спиро[2,3]гексильная группа. Предпочтительно, чтобы заместитель представлял собой циклопропильную группу или циклобутильную группу.
2-6
2-6
[0076] Описанная в настоящем изобретении линейная или разветвленная C алкенильная группа обозначает линейную или разветвленную алкенильную группу, имеющую от 2 до 6 углеродных атомов. Примеры линейной или разветвленной C алкенильной группы включают алкенильные группы, такие как винильная группа, пропен-1-ильная группа, пропен-2-ильная группа, 1-бутенильная группа, 2-бутенильная группа, 3-бутенильная группа, 1-метил-1-пропенильная группа, 2-метил-1-пропенильная группа, 1-пентенильная группа, 2-пентенильная группа, 3-пентенильная группа, 4-пентенильная группа, 5-пентенильная группа, 1-метил-1-бутенильная группа, 2-метил-1-бутенильная группа, 3-метил-1-бутенильная группа, 4-метил-1-бутенильная группа, 1-метил-2-бутенильная группа, 2-метил-2-бутенильная группа, 3-метил-2-бутенильная группа, 4-метил-2-бутенильная группа, 1-метил-3-бутенильная группа, 2-метил-3-бутенильная группа, 3-метил-3-бутенильная группа, 4-метил-3-бутенильная группа, 1,2-диметил-1-пропенильная группа, 1-гексенильная группа, 2-гексенильная группа, 3-гексенильная группа, 4-гексенильная группа, 5-гексенильная группа, 6-гексенильная группа, и их структурные изомеры.
3-6
3-6
[0077] Описанная в настоящем изобретении C циклоалкенильная группа обозначает циклоалкенильную группу, имеющую от 3 до 6 углеродных атомов. Примеры C циклоалкенильной группы включают циклопропенильную группу, циклобутенильную группу, циклопентенильную группу и циклогексенильную группу.
2-6
2-6
[0078] Описанная в настоящем изобретении C алкинильная группа обозначает алкинильную группу, имеющую от 2 до 6 углеродных атомов. Примеры C алкинильной группы включают этинильную группу, пропаргильную группу, бутинильную группу, пентенильную группу и гексенильную группу.
1-6
1-6
3-6
1-6
[0079] Описанная в настоящем изобретении C алкоксильная группа обозначает группу, состоящую из оксильной группы (-O-) и линейной или разветвленной C алкильной группы или C циклоалкильной группы, связанной с оксильной группой. Примеры C алкоксильной группы включают метоксильную группу, этоксильную группу, пропилоксильную группу, изопропилоксильную группу, циклопропилоксильную группу, бутоксильную группу, циклобутоксильную группу, пентилоксильную группу, циклопентилоксильную группу, гексилоксильную группу и циклогексилоксильную группу.
1-6
1-6
3-6
1-6
[0080] Описанная в настоящем изобретении C алкиламиногруппа обозначает аминогруппу, замещенную одной или более независимо выбранными упомянутыми выше линейными или разветвленными C алкильными группами или C циклоалкильными группами. Примеры C алкиламиногруппы включают метиламиногруппу, этиламиногруппу, пропиламиногруппу, изопропиламиногруппу, циклопропиламиногруппу, бутиламиногруппу, циклобутиламиногруппу, пентиламиногруппу, циклопентил-аминогруппу, гексиламиногруппу, циклогексиламиногруппу, диметиламиногруппу, диэтиламиногруппу, этил(метил)аминогруппу, изопропил(метил)аминогруппу и циклопропил(метил)аминогруппу.
[0081] Описанный в настоящем изобретении атом галогена обозначает атом фтора, атом хлора, атом брома или атом йода.
6-10
6-10
[0082] Описанная в настоящем изобретении C арильная группа обозначает арильную группу, имеющую от 6 до 10 углеродных атомов. Примеры C арильной группы включают фенильную группу и нафтильную группу.
[0083] Описанная в настоящем изобретении гетероциклическая группа обозначает циклическую группу, имеющую, по меньшей мере, один атом азота, атом кислорода или атом серы, и может представлять собой ароматическую гетероциклическую группу или может представлять собой неароматическую гетероциклическую группу. Примеры ароматической гетероциклической группы включают пиридиновую группу, пиримидиновую группу, пиридазиновую группу, пиразиновую группу, триазиновую группу, пирроловую группу, имидазоловую группу, пиразоловую группу, индоловую группу, индазоловую группу, фурановую группу, бензофурановую группу, тиофеновую группу, бензотиофеновую группу, тиазоловую группу, изотиазоловую группу, оксазоловую группу, изоксазоловую группу и оксадиазоловую группу. Примеры неароматической гетероциклической группы включают пирролидинильную группу, пиперидинильную группу, пиперазинильную группу, морфолинильную группу и тиоморфолинильную группу.
2-5
2-5
1-6
2-5
[0084] Cалкиленовая группа, образованная двумя R фрагментами, связанными друг с другом, обозначает двухвалентную группу, полученную путем дополнительного удаления одного атома водорода из C алкильной группы, которая соответствует группе, имеющей от 2 до 5 углеродных атомов, из числа описанных выше C алкильных групп. Примеры C алкиленовых групп включают 1,2-этиленовую группу, 1,2-пропиленовую группу, 1,3-пропиленовую группу, 1,2-бутиленовую группу, 1,3-бутиленовую группу, 1,4-бутиленовую группу, 2,3-бутиленовую группу, 1,2-пенгруппу, 1,5-пентиленовую группу, 2,3-пентиленовую группу и 2,4-пентиленовую группу.
1-4
1-6
1
2
3
[0085] Линейная или разветвленная C алкильная группа в качестве R, R или R представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, имеющую от 1 до 4 углеродных атомов, и соответствует группе, имеющей от 1 до 4 углеродных атомов, из числа описанных выше C алкильных групп.
1-3
1-6
1-3
4
[0086] C алкильная группа в качестве R представляет собой алкильную группу, имеющую от 1 до 3 углеродных атомов, и соответствует группе, имеющей от 1 до 3 углеродных атомов, из числа описанных выше C алкильных групп. Примеры C алкильной группы включают метильную группу, этильную группу, пропильную группу и изопропильную группу.
[0087] Гетероарильная группа в качестве A соответствует ароматической гетероциклической группе из числа описанных выше гетероциклических групп.
[0088] Соединение по настоящему варианту осуществления может представлять собой соединение, представленное любой химической формулой из общей формулы (I), общей формулы (IIa), общей формулы (IIIa) или общей формулы (IVa), или может представлять собой соединение, представленное любой химической формулой из общей формулы (II), общей формулы (III) или общей формулы (IV).
[0089] [Химическая формула 10]
[Химическая формула 11]
[Химическая формула 12]
1
2
3
В общей формуле (I), общей формуле (IIa), общей формуле (IIIa), общей формуле (IVa), общей формуле (II), общей формуле (III) и общей формуле (IV), R, R, R, A и Z определены в общей формуле (Ia).
1-3
2-5
[0090] В общей формуле (Ia) и общей формуле (I), два R фрагмента могут каждый независимо представлять собой C алкильную группу или могут представлять собой группы, связанные друг с другом с образованием C алкиленовой группы.
1
2
3
1-4
[0091] В общей формуле (I), общей формуле (IIa), общей формуле (IIIa), общей формуле (IVa), общей формуле (II), общей формуле (III) и общей формуле (IV), R, R и R может каждый независимо представлять собой необязательно замещенную линейную или разветвленную C алкильную группу.
6-10
[0092] В общей формуле (I), общей формуле (IIa), общей формуле (IIIa), общей формуле (IVa), общей формуле (II), общей формуле (III) и общей формуле (IV), A может представлять собой необязательно замещенную C арильную группу или необязательно замещенную гетероарильную группу.
[0093] Предпочтительно, чтобы соединение (Ia) выбирали из группы следующих соединений:
6,6-диметил-N-фенил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-1)
6,6-диметил-N-(п-толил)-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-25)
N-(4-метоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-79)
N-(4-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-7)
6,6-диметил-N-(пиридин-3-ил)-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-1019)
N-(2-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-3)
6,6-диметил-N-(о-толил)-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-21)
6,6-диметил-N-(м-толил)-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-23)
N-([1,1'-бифенил]-3-ил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-71)
N-(3-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-5)
N-(3-хлорфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-11)
N-(2-метоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-75)
N-(2-хлорфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-9)
N-([1,1'-бифенил]-2-ил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-69)
6,6-диметил-N-(пиридин-2-ил)-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-1007)
N-(2-этилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-27)
N-(2,6-диметилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-381)
N-(2,3-дифторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-99)
N-(2,3-диметилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-375)
N-(2-фтор-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-129)
N-[2-(дифторметокси)фенил]-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-87)
N-(2-этоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-81)
6,6-диметил-N-(2-(трифторметокси)фенил)-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-93)
N-(2-фтор-4-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-125)
N-(2,6-дифторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-105)
N-[2-(третбутил)фенил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-57)
6,6-диметил-N-(2-(трифторметил)фенил)-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-51)
N-(3-фтор-2-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-357)
N-(2-цианофенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-63)
N-(4-фтор-2-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-359)
N-(2-хлор-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-215)
N-(2-фтор-3-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-123)
N-(2-фтор-5-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-127)
N-(5-фтор-2-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-361)
N-(2,4-дифторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-101)
N-(2,5-дифторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-103)
N-(2,5-диметилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-379)
N-(2-хлор-6-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-113)
N-(2,4-диметилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-377)
3-[1-(этилдиметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-N-(2-фтор-фенил)-6,6-диметил-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-4)
6,6-диметил-N-(3-метилизотиазол-4-ил)-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-1035)
6,6-диметил-N-(тиофен-2-ил)-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-2,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-1043)
6,6-диметил-N-(тиофен-3-ил)-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-2,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-1045)
N-(2,6-дифтор-4-метоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-615)
N-(2-фтор-6-метоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-161)
N-[2-фтор-6-(трифторметил)фенил]-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-153)
N-(5-хлор-2-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-367)
N-(2,5-дихлорфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-197)
N-(2-циклопропилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-39)
N-(2,6-дихлорфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-199)
6,6-диметил-N-(2,4,6-трифторфенил)-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-599)
N-(2-этил-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-389)
N-(2-бромфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-15)
N-(2-хлор-5-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-191)
N-(5-хлор-2-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-111)
6,6-диметил-N-(2,3,6-трифторфенил)-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-597)
N-(2-хлор-6-метоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-247)
N-[2-(1,1-дифторэтил)фенил]-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-45)
N-(6-хлор-2-фтор-3-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-629)
N-[2-фтор-6-(метокси-d3)фенил]-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-177)
N-[2-хлор-6-(трифторметил)фенил]-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-239)
N-(2-фтор-6-метокси-3-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-689)
N-(2,6-дифтор-3-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-609)
N-[2-(дифторметокси)-6-фторфенил]-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-169)
N-(2-бром-6-хлорфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-207)
N-(2-хлор-6-фтор-3-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-703)
N-(2-этил-6-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-137)
N-(2-бром-6-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-121)
N-(2-бром-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-299)
N-(2-хлор-5-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-213)
N-(6-фтор-2,3-дигидробензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-997)
N-(2-циано-6-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-185)
N-(2-хлор-6-циклопропилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-231)
N-(2-фтор-3,6-диметилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-669)
N-(6-фторбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-1049)
N-(2-хлор-3-фтор-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-747)
N-[2-(дифторметокси)-6-фторфенил]-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклопропанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № III-169)
N-(2,6-дихлорфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-пропанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № III-199)
N-(2,6-дихлорфенил)-6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметил-силил)пропанамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № II-199)
N-[2-(дифторметокси)-6-фторфенил]-6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметилсилил)пропанамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № II-164)
N-(2,6-дихлор-4-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-709)
N-(2-этил-6-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклопропанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № III-137)
N-(2-бром-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклопропанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № III-299)
N-(2-хлор-5-метоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-245)
N-(2-этил-6-фторфенил)-6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметил-силил)пропанамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № II-137)
N-(2-бром-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметил-силил)пропанамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № II-290)
N-(6-фторбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[2-метил-2-(три-метилсилил)пропанамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № II-1049)
N-(6-фторбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклопропанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № III-1049)
N,6,6-триметил-N-фенил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № I-965)
N-(6-фтор-3-метилбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-1061)
N-(2-хлор-6-фторбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-1063)
N-[5-(индолин-1-карбонил)-6,6-диметил-1,4,5,6-тетрагидро-пирроло[3,4-c]пиразол-3-ил]-1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамид (соединение № I-1000)
N-[5-(3,4-дигидро-2H-бензо[b][1,4]оксазин-4-карбонил)-6,6-диметил-1,4,5,6-тетрагидропирроло[3,4-c]пиразол-3-ил]-1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамид (соединение № I-1036)
N-(6-фтор-2-метилбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-1059)
N-[5-(1H-индол-1-карбонил)-6,6-диметил-1,4,5,6-тетрагидро-пирроло[3,4-c]пиразол-3-ил]-1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамид (соединение № I-997)
[0094] Соединение (Ia) или его фармакологически приемлемая соль может быть индивидуальным оптическим изомером или может быть смесью множества оптических изомеров.
[0095] В случае, когда геометрические изомеры или ротамеры присутствуют в соединении (Ia), эти изомеры также включены в настоящее изобретение. В случае, когда таутомеры присутствуют в соединении по настоящему варианту осуществления, эти таутомеры также включены в настоящее изобретение.
[0096] На "фармакологически приемлемую соль" по настоящему варианту осуществления не накладывают конкретных ограничений, при условии, что она является приемлемой в качестве лекарственного средства, и ее примеры включают соли с неорганическими кислотами, такими как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, йодистоводородная кислота, азотная кислота, серная кислота и фосфорная кислота; соли с органическими карбоновыми кислотами, такими как уксусная кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота, янтарная кислота, лимонная кислота, винная кислота, адипиновая кислота, молочная кислота и трифторуксусная кислота; соли с органическими сульфоновыми кислотами, такими как метансульфоновая кислота, трифторметансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, п-толуолсульфоновая кислота и нафталинсульфоновая кислота; соли с щелочными металлами, такими как литий, натрий и калий; соли с щелочноземельными металлами, такими как кальций и магний; и соли с четвертичным аммонием, таким как аммиак, морфолин, глюкозамин, этилендиамин, гуанидин, диэтиламин, триэтиламин, дициклогексиламин, диэтаноламин и пиперазин.
[0097] Соединение (Ia) или его фармакологически приемлемая соль могут образовывать гидрат или сольват, и каждый из них или их смесь включены в настоящее изобретение.
2
3
11
14
18
35
125
[0098] Соединение (Ia) может содержать нехарактерное для природы соотношение атомного изотопа для одного или более из образующих его атомов. Примеры атомного изотопа включают дейтерий (H), тритий (H), углерод-11 (C), углерод-14 (C), фтор-18 (F), серу-35 (S) и йод-125 (I). Эти соединения могут применяться в качестве терапевтических или профилактических средств, реагентов для научных исследований, например, реагентов для анализа, и реагентов для диагностики, например, in vivo диагностических визуализирующих средств. Все изотопные варианта соединения (Ia) включены в настоящее изобретение, независимо от того, являются ли они радиоактивными, или нет.
[0099] Соединение (Ia) или его фармакологически приемлемая соль могут быть использованы, при необходимости, в качестве фармацевтической композиции путем добавления фармакологически приемлемого носителя, такого как вспомогательное вещество, смазывающее вещество, связующее вещество, разрыхлитель, вещество для образования покрытия, стабилизатор, вещество, регулирующее тоничность, буферное вещество, регулятор рН, солюбилизатор, загуститель, консервант, антиокислитель, подсластитель, окрашивающее вещество и/или вещество, корригирующее вкус и запах. Фармацевтическая композиция может быть соответствующим образом приготовлена в зависимости от цели с помощью метода, хорошо известного специалистам в этой области.
[0100] Содержание соединения (Ia) или его фармакологически приемлемой соли в фармацевтической композиции может соответствующим образом регулироваться.
[0101] Фармацевтическая композиция может находиться в лекарственной форме, описанной в Японская фармакопеи (General Rules for Preparations, Japanese Pharmacopoeia 16th edition), например, в форме препарата для перорального введения, такого как таблетки, капсулы, гранулы или порошки, или в форме препарата для парентерального введения, такого как инъекции (например, для внутривенного введения, подкожного введения, внутримышечного введения и интраперитонеального введения), в форме глазных капель, назальных капель, суппозиториев, мазей, лосьонов, кремов, гелей, спреев, пластырей, ингаляционных форм или препаратов для абсорбции через кожу.
[0102] Примеры вспомогательного вещества включают лактозу, маннит, крахмал, кристаллическую целлюлозу, легкую безводную кремниевую кислоту, карбонат кальция и гидрофосфат кальция, и примеры смазывающего средства включают стеариновую кислоту, стеарат магния и тальк. Примеры связующего вещества включают крахмал, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропил-метилцеллюлозу и поливинилпирролидон, и примеры разрыхлителя включают карбоксиметилцеллюлозу, с низкой степенью замещения гидроксипропилметилцеллюлозу и цитрат кальция. Примеры вещества для образования покрытия включают гидроксипропилметилцеллюлозу, макрогол и кремнийорганические смолы, и примеры стабилизатора включают этил п-гидроксибензоат и бензиловый спирт.
[0103] Примеры вещества, регулирующего тоничность, включают глицерин, пропиленгликоль, хлорид натрия, хлорид калия, сорбит и маннит, примеры буферного вещества включают борную кислоту, соли борной кислоты, фосфорную кислоту, соли фосфорной кислоты, лимонную кислоту, соли лимонной кислоты, уксусную кислоту, соли уксусной кислоты, -аминокапроновую кислоту и трометамол, и примеры регулятора рН включают хлористоводородную кислоту, лимонную кислоту, фосфорную кислоту, ледяную уксусную кислоту, гидроксид натрия, гидроксид калия, карбонат натрия и бикарбонат натрия. Примеры солюбилизатора включают полисорбат 80, полиоксиэтилен, гидрированное касторовое масло 60, макрогол 4000, очищенный соевый лецитин и полиоксиэтилен (160) полиоксипропилен (30) гликоль, и примеры загустителя включают полимеры целлюлозы, такие как гидроксипропилметилцеллюлоза и гидроксипропилцеллюлоза, поливиниловый спирт и поливинилпирролидон. Примеры стабилизатора включают эдетовую кислоту и эдетат натрия, и примеры консерванта включают сорбиновую кислоту, сорбат калия, бензалкония хлорид, бензетония хлорид, метил п-гидроксибензоат, пропил п-гидроксибензоат и хлорбутанол.
[0104] Примеры ингредиентов, которые могут содержаться в фармацевтических композициях для чрезкожного введения, таких как мази, лосьоны, кремы, гели и спреи, включают промоторы абсорбции, такие как лауриловый спирт, миристиловый спирт, салициловая кислота, этиленгликоль и пирротиодекан; эфиры жирных кислот, такие как диизопропиладипат, изопропилмиристат, цетиллактат, миристиллактат, изопропилпальмитат, диэтилсебацинат, гексиллаурат и цетилизооктаноат; алифатические спирты, такие как цетиловый спирт, стеариловый спирт, олеиловый спирт, гексадециловый спирт и бегениловый спирт; гликоли, такие как пропиленгликоль, пропилендиол, полиэтиленгликоль и дипропиленгликоль; и поверхностно-активные вещества, такие как сорбитановый эфир жирной кислоты, глицериновый эфир жирной кислоты, полиоксиэтиленсорбитановый эфир жирной кислоты, полиоксиэтиленглицериновый эфир жирной кислоты, полиэтиленгликолевый эфир жирной кислоты, полиоксиэтиленалкиловый эфир, полиоксиэтиленкасторовое масло и полиоксиэтилен-гидрированное касторовое масло.
[0105] Доза соединения (Ia) или его фармакологически приемлемой соли может быть соответствующим образом изменена с учетом симптомов, возраста, лекарственной формы и других факторов. Например, в случае перорального введения, дозу обычно вводят одной порцией или несколькими разделенными порциями от 0,01 до 2000 мг, предпочтительно, от 1 до 500 мг в сутки.
[0106] Что касается мазей, лосьонов, кремов или гелей, то доза с концентрацией от 0,0001% (в отношении веса к объему) до 10% (в отношении веса к объему), предпочтительно, от 0,01% (в отношении веса к объему) до 5% (в отношении веса к объему), обычно может быть введена одной порцией или несколькими разделенными порциями.
[0107] Далее будет описан метод получения соединения (Ia) или его фармакологически приемлемой соли. Соединение или его фармакологически приемлемая соль по настоящему изобретению не ограничивается соединениями или их фармакологически приемлемыми солями, получаемыми методами синтеза, описанными ниже.
[0108] В приведенных ниже методах синтеза, в случае, когда в соединениях присутствуют подструктуры, которые замедляют протекание требуемых реакций или способствуют протеканию побочных реакций (например, гидроксильная группа, аминогруппа, карбонильная группа, карбоксильная группа, амидная группа, тиольная группа и другие подобные группы), требуемые соединения могут быть получены путем введения защитных групп в эти подструктуры, проведения необходимых реакций и затем удаления защитных групп.
[0109] Реакция введения защитной группы и реакция удаления защитной группы могут быть проведены в соответствии с методом, обычно используемым в органическом синтезе (например, методом, описанным, например, в монографии Protective Groups in Organic Synthesis, 4th ed., T.W. Greene, P.G.M. Wuts, John Wiley & Sons Inc. (2006)).
[0110] Далее в качестве метода получения соединения (Ia) или соединения (I) будет описан метод получения соединения (Ia) или соединения (I) с использованием соединения (1) в качестве исходного материала. Метод получения соединения (1) будет описан позже.
[0111] <Метод получения соединения (Ia)>
1
2
3
1
1
1
Этот метод является методом получения соединения (Ia) путем взаимодействия соединения (2), полученного реакцией соединения (1) с ацилирующим реагентом, с соединением амина (3a). В этом методе, R, R, R, R, A и Z определены в общей формуле (Ia). Группа P представляет собой защитную группу для аминогруппы, и X представляет собой уходящую группу. При описании этого метода, ради удобства показана химическая структура соединения (1), в которой фрагмент 4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразола замещен в положении 1 группой P, но соединение (1) может представлять собой соединение, имеющее химическую структуру, соответствующую таутомеру, в которой фрагмент 4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразола замещен в положении 2 группой P.
[Химическая формула 13]
1
1
7-11
1-6
6-10
1-6
6-10
[0112] На группу P не накладывают конкретных ограничений, при условии, что она является заместителем, который известен специалистам в этой области в качестве защитной группы для аминогруппы. Примеры группы P включают необязательно замещенные C аралкильные группы, такие как бензильная группа, п-метоксифенилметильная группа и o-нитрофенилметильная группа; необязательно замещенные C алкилкарбонильные группы, такие как ацетильная группа и трифторацетильная группа; необязательно замещенные C арилкарбонильные группы, такие как бензоильная группа; необязательно замещенные C алкоксикарбонильные группы, такие как метоксикарбонильная группа, этоксикарбонильная группа, Boc группа (третбутоксикарбонильная группа), Cbz группа (бензилоксикарбонильная группа), Fmoc группа (флуоренилметилоксикарбонильная группа) и Teoc группа (триметилсилилэтилоксикарбонильная группа); алкенилокси-карбонильные группы, такие как Alloc группа (аллилоксикарбонильная группа); алкилсульфонильные группы, такие как метансульфонильная группа; и необязательно замещенные C арилсульфонильные группы, такие как п-толуолсульфонильная группа.
1-6
6-10
[0113] На группу X не накладывают конкретных ограничений, при условии, что она является заместителем, который известен специалистам в этой области в качестве уходящей группы. Примеры X включают атомы галогена, такие как атом фтора, атом хлора, атом брома и атом йода; имидазолильную группу; аминооксильную группу, такую как сукцинил-N-оксильная группа и бензотриазолил-N-оксильная группа; необязательно замещенные C алкилкарбонилоксильные группы, такие как пивалоилоксильная группа; и необязательно замещенные C арилкарбонилоксимльные группы, такие как бензоилоксильная группа. В качестве варианта, X может представлять собой гидроксильную группу.
[0114] (Стадия 1)
Стадия 1 представляет собой стадию взаимодействия соединения (1) с ацилирующим реагентом с получением соединения (2).
[0115] В качестве ацилирующего реагента могут быть использованы, например, фосген, дифосген, трифосген, карбонилдиимидазол (CDI), N,N'-дисукцинимидилкарбонат или эфир угольной кислоты.
[0116] Предпочтительно, чтобы количество используемого ацилирующего реагента составляло от 0,4 до 3,0 молей, более предпочтительно, от 0,7 до 1,5 молей, относительно 1 моля соединения (1).
[0117] Реакция на стадии 1 может быть проведена в растворителе или может быть проведена без растворителя. На растворитель не накладывают конкретных ограничений, при условии, что он не оказывает влияния на протекание реакции, и предпочтительным является органический растворитель. Примеры органического растворителя включают дихлорметан, 1,2-дихлорэтан, диэтиловый эфир, 1,2-диметоксиэтан, тетрагидрофуран (THF), N,N-диметилформамид (DMF) и диметилсульфоксид (DMSO).
[0118] На стадии 1, для ускорения протекания реакции может быть дополнительно добавлено основание. Примеры основания включают органические амины, такие как триэтиламин (TEA), диизопропилэтиламин (DIPEA), 1,5-диазабицикло[4,3,0]нонен (DBN), 1,8-диазабицикло[5.4,0]ундецен (DBU), пиридин и 4-диметиламинопиридин (DMAP).
[0119] Предпочтительно, чтобы количество используемого основания составляло от 1 до 10 молей, более предпочтительно, от 3 до 6 молей, относительно 1 моля соединения (1).
[0120] Температура реакции на стадии 1 может быть соответствующим образом определена специалистами в этой области. Температура реакции обычно составляет от -100 до 0C, предпочтительно, от -80 до -60C.
[0121] (Стадия 2)
Стадия 2 представляет собой стадию взаимодействия соединения (2) с соединением амина (3a) с получением соединения (4a).
[0122] Предпочтительно, чтобы количество используемого соединения (3a) составляла от 1 до 20 молей, более предпочтительно, от 2 до 5 молей, относительно 1 моля соединения (2). Соединение (3a) и соединение (2) могут быть растворены в органическом растворителе и добавлены в реакционный раствор.
[0123] Реакция на стадии 2 может быть проведена в растворителе или может быть проведена без растворителя. На растворитель не накладывают конкретных ограничений, при условии, что он не оказывает влияния на протекание реакции, и предпочтительным является органический растворитель. Примеры органического растворителя включают дихлорметан, 1,2-дихлорэтан, 1,2-диметоксиэтан, тетрагидрофуран (THF), 1,4-диоксан, N,N-диметилформамид (DMF) и диметилсульфоксид (DMSO).
[0124] На стадии 2, для ускорения протекания реакции может быть дополнительно добавлено основание. Примеры основания включают органические амины, такие как триэтиламин (TEA), диизопропилэтиламин (DIPEA), 1,5-диазабицикло[4,3,0]нонен (DBN), 1,8-диазабицикло[5.4,0]ундецен (DBU), пиридин и 4-диметиламинопиридин (DMAP); и неорганические основания, такие как карбонат калия и карбонат натрия.
[0125] Предпочтительно, чтобы количество используемого основания составляло от 1 до 20 молей, более предпочтительно, от 2 до 5 молей, относительно 1 моля соединения (1).
[0126] Температура реакции на стадии 2 может быть соответствующим образом определена специалистами в этой области. Температура реакции обычно составляет от 0 до 160C, предпочтительно, от 25 до 120C.
[0127] (Стадия 3)
1
Стадия 3 представляет собой стадию удаления группы P соединения (4a) с получением соединения (Ia).
1
1
1
1
1
1
1
1
1
1
7-11
1-6
6-10
6-10
1-6
[0128] Реакционные условия на стадии 3 могут быть соответствующим образом определены специалистами в этой области, исходя из типа используемой группы P. В случае, когда группа P представляет собой, например, необязательно замещенную C аралкильную группу, группа P может быть удалена гидрогенолизом или может быть удалена путем использования протонной кислоты или кислоты Льюиса. В случае, когда группа P представляет собой необязательно замещенную C алкилкарбонильную группу, необязательно замещенную C арилкарбонильную группу или необязательно замещенную C арилсульфонильную группу, группа P может быть удалена путем использования протонной кислоты или кислоты Льюиса. В случае, когда группа P представляет собой Boc группу, удаление может быть осуществлено путем обработки протонной кислотой или кислотой Льюиса; в случае, когда группа P представляет собой Cbz группу, удаление может быть осуществлено путем гидрогенолиза или путем обработки основанием; и в случае, когда группа P представляет собой Teoc группу, может быть использован реагент, который образует фторид-ион, такой как тетрабутиламмония фторид. В случае, когда группа P представляет собой необязательно замещенную C алкоксикарбонильную группу, такую как метоксикарбонильная группа или этоксикарбонильная группа, группа P может быть удалена путем нагревания в присутствии органического амина, такого как триэтиламин (TEA), диизопропилэтиламин (DIPEA), 2-аминоэтанол или N,N-диметилэтан-1,2-диамин, или неорганического основания, такого как карбонат калия или карбонат натрия.
[0129] Соединение (Ia), полученное на стадии 3, может быть превращено в его фармакологически приемлемую методом, хорошо известным специалистам в этой области.
[0130] <Метод получения соединения (4) 1>
1
2
3
1
Этот метод является методом взаимодействия соединения (1) с соединением изоцианата (5) с получением соединения (4), и затем получения соединения (I) в соответствии со стадией 3, описанной выше. Соединение (4) соответствует общей формуле (4a), где группа Z представляет собой атом водорода. Стадия 3 является такой же, как описанная выше. Этот метод может применяться в случае использования соединения изоцианата (5). В этом методе, R, R, R, R, P и A определены в приведенном выше методе получения соединения (Ia).
[Химическая формула 14]
[0131] (Стадия 4)
Стадия 4 представляет собой стадию взаимодействия соединения (1) с соединением изоцианата (5) с получением соединения (4).
[0132] Предпочтительно, чтобы количество используемого соединения (5) составляло от 1 до 10 молей, более предпочтительно, от 1 до 3 молей, относительно 1 моля соединения (1). Соединение (5) может быть растворено в органическом растворителе и добавлено в реакционный раствор.
[0133] Реакция на стадии 4 может быть проведена в растворителе или может быть проведена без растворителя. На растворитель не накладывают конкретных ограничений, при условии, что он не оказывает влияния на протекание реакции, и предпочтительным является органический растворитель. Примеры органического растворителя включают дихлорметан, 1,2-дихлорэтан, 1,2-диметоксиэтан, тетрагидрофуран (THF), 1,4-диоксан, N,N-диметилформамид (DMF) и диметилсульфоксид (DMSO).
[0134] Температура реакции на стадии 4 может быть соответствующим образом определена специалистами в этой области. Температура реакции обычно составляет от -20 до 100C, предпочтительно, от 0 до 30C.
[0135] <Метод получения соединения (4) 2>
1
2
3
1
Этот метод является методом получения соединения (4) путем взаимодействия соединения изоцианата (6), полученного конверсией из соединения карбоновой кислоты (5), с соединением (1) и затем получения соединения (I) в соответствии со стадией 3, описанной выше. В этом методе, стадия 5 и стадия 6 могут проводиться непрерывно без выделения соединения (6). В этом методе, R, R, R, R, P и A определены в приведенном выше методе получения соединения (Ia).
[Химическая формула 15]
[0136] (Стадия 5)
Стадия 5 представляет собой стадию взаимодействия соединения (5) с дифенилфосфорилазидом и основанием в соответствии с методом, описанным, например, в публикации Journal of the American Chemical Society, 94 (1972), p. 6203-6205 (перегруппировку Курциуса), с получением соединения изоцианата (6).
[0137] Реакция на стадии 5 может быть проведена в растворителе или может быть проведена без растворителя. На растворитель не накладывают конкретных ограничений, при условии, что он не оказывает влияния на протекание реакции, и его примеры включают ароматические углеводороды, такие как толуол и ксилол; и амиды, такие как N,N-диметилформамид (DMF), N,N-диметилацетамид и 1-метил-2-пирролидон. Толуол является предпочтительным.
[0138] Примеры основания включают органические амины, такие как триэтиламин (TEA) и диизопропилэтиламин (DIPEA).
[0139] <Метод получения соединения (4) 3>
1
2
3
1
Этот метод является методом получения соединения (4) путем взаимодействия соединения изоцианата (6), полученного конверсией из соединения амида (7), с соединением (1) и затем получения соединения (I) в соответствии со стадией 3, описанной выше. В этом методе, стадия 7 и стадия 8 могут проводиться непрерывно без выделения соединения (6). Этот метод может применяться в случае использования соединения амида (7). В этом методе, R, R, R, R, P и A определены в приведенном выше методе получения соединения (Ia).
[Химическая формула 16]
[0140] (Стадия 7)
Стадия 7 представляет собой стадию взаимодействия соединения (7) с окислителем в соответствии с методом, описанным, например, в публикации Organic Synthesis, 66 (1988), p. 132-137 (перегруппировка Гофмана), с получением соединения изоцианата (6).
[0141] Реакция на стадии 7 может быть проведена в растворителе или может быть проведена без растворителя. На растворитель не накладывают конкретных ограничений, при условии, что он не оказывает влияния на протекание реакции, и его примеры включают ароматические углеводороды, такие как толуол и ксилол; амиды, такие как N,N-диметилформамид (DMF), N,N-диметилацетамид и 1-метил-2-пирролидон; галогенированные алифатические углеводороды, такие как дихлорметан и 1,2-дихлорэтан; галогенированные ароматические углеводороды, такие как хлорбензол и 1,2-дихлорбензол; и нитрилы, такие как ацетонитрил и пропионитрил. Толуол является предпочтительным.
[0142] На стадии 7, в реакционную смесь может быть добавлено основание. Примеры основания включают органические амины, такие как триэтиламин (TEA) и диизопропилэтиламин (DIPEA); и пиридины, такие как пиридин, 2,6-лутидин и 4-пиколин. Пиридин является предпочтительным.
[0143] Примеры окислителя включают соединения йода с высокой валентностью, такие как [бис(ацетокси)йод]бензол, [бис(трифторацетокси)йод]бензол и йодсилбензол, и [бис(трифторацетокси)йод]бензол является предпочтительным.
[0144] В методах получения 1-3 для соединения (4), описанных выше, соединение (4) может быть превращено в соединение (4a) (где группа Z не является атомом водорода) путем проведения реакции, хорошо известной специалистам в этой области, и соединение (I) может быть превращено в соединение (Ia) (где группа Z не является атомом водорода). Например, на стадии 4, 6 или 8, смесь после реакции может быть подвергнута взаимодействию с алкилирующим реагентом Z-X (где Z определен в общей формуле (1a), и X представляет собой уходящую группу).
[0145] <Метод получения соединения (1)>
Соединение (1) может быть получено, например, приведенным ниже методом, из соединения (8) в качестве исходного материала. Соединение (8) может быть получено, например, как описано в патентном документе WO2007/72153, или путем проведения следующих стадий 11-15.
[Химическая формула 17]
1
3
1
1
1
[0146] Соединение (8) представляет собой 3-амино-6,6-диметил-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол, в котором атом азота на пиразоле может быть замещен группой P, и атом азота в положении 5 может быть замещен группой P. Группа P может замещать кислотный протон пиразола в 4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразоле. Таким образом, группа P может быть введена в положении 1 в 4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразоле или может быть введена в положение 2. Соединение (8) и соединение (10) будут описаны ради удобства с использованием химической формулы, где группу Pвводят в положение 1 в 4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразоле.
1
3
3
7-11
1-6
6-10
1-6
6-10
[0147] In соединение (8), P имеет такое же определение, как в методе получения соединения (Ia). На группу P не накладывают конкретных ограничений, при условии, что она является заместителем, который известен специалистам в этой области в качестве защитной группы для аминогруппы. Примеры группы P включают необязательно замещенные C аралкильные группы, такие как бензильная группа, п-метоксифенилметильная группа и o-нитрофенилметильная группа; необязательно замещенные C алкилкарбонильные группы, такие как ацетильная группа и трифторацетильная группа; необязательно замещенные C арилкарбонильные группы, такие как бензоильная группа; необязательно замещенные C алкоксикарбонильные группы, такие как метоксикарбонильная группа, этоксикарбонильная группа, Boc группа (третбутоксикарбонильная группа), Cbz группа (бензилоксикарбонильная группа), Fmoc группа (флуоренилметилоксикарбонильная группа) и Teoc группа (триметилсилилэтилоксикарбонильная группа); алкенилокси-карбонильные группы, такие как Alloc группа (аллилоксикарбонильная группа); алкилсульфонильные группы, такие как метансульфонильная группа; и необязательно замещенные C арилсульфонильные группы, такие как п-толуолсульфонильная группа.
1
2
3
[0148] В формулах (9) и (10), R, R, R, и R имеют такие же определения, как в соединении (Ia). На группу X не накладывают конкретных ограничений, при условии, что она является заместителем, который известен специалистам в этой области в качестве уходящей группы. Примеры X включают атомы галогена; имидазолильную группу; аминооксильные группы, такие как сукцинил-N-оксильная группа и бензотриазолил-N-оксильная группа; и ацилоксильные группы, такие как пивалоилоксильная группа и бензолоилоксильная группа. В качестве варианта, X может представлять собой гидроксильную группу.
[0149] В случае, когда соединение (9) является карбоновой кислотой (то есть, X представляет собой гидроксильную группу), оно может быть превращено в ангидрид кислоты методом, хорошо известным специалистам в этой области, и затем подвергнуто взаимодействию с соединением (8), или может быть подвергнуто взаимодействию с соединением (8) при использовании реагента, известного специалистом в этой области в качестве реагента конденсации, применяемого в реакции образования амидной связи.
[0150] (Стадия 9)
Стадия 9 представляет собой стадию взаимодействия соединения (8) с соединением (9) с получением соединения (10).
[0151] Предпочтительно, чтобы количество используемого соединения (9) составляло от 1 до 10 молей, более предпочтительно, от 1 до 3 молей, относительно 1 моля соединения (8).
[0152] Реакция на стадии 9 может быть проведена в растворителе или может быть проведена без растворителя. На растворитель не накладывают конкретных ограничений, при условии, что он не оказывает влияния на протекание реакции, и предпочтительным является органический растворитель. Примеры органического растворителя включают дихлорметан, диэтиловый эфир, тетрагидрофуран (THF), N,N-диметилформамид (DMF) и диметилсульфоксид (DMSO).
[0153] На стадии 9, для ускорения протекания реакции может быть дополнительно добавлено основание. Примеры основания включают органические амины, такие как триэтиламин, диизопропилэтиламин (DIPEA), 1,5-диазабицикло[4,3,0]нонен (DBN), 1,8-диазабицикло[5.4,0]ундецен (DBU), пиридин и 4-диметиламинопиридин (DMAP).
[0154] Предпочтительно, чтобы количество используемого основания составляло от 1 до 20 молей, более предпочтительно, от 1 до 5 mol, относительно 1 моля соединения (8).
[0155] Температура реакции на стадии 9 может быть соответствующим образом определена специалистами в этой области. Температура реакции обычно составляет от -40 до 100C, предпочтительно, от -20 до 20C.
[0156] (Стадия 10)
3
Стадия 10 представляет собой стадию проведения реакции удаления защитной группы из соединения (10) с получением соединения (1). Реакция удаления группы P может быть также проведена методом, хорошо известным специалистам в этой области (например, методом, описанным, например, в монографии Protective Groups in Organic Synthesis, 4th ed., T.W. Greene, P.G.M. Wuts, John Wiley & Sons Inc. (2006)).
[0157] <Метод получения соединения (8)>
3
Соединение (8) может быть получено, например, способом, приведенным ниже, из соединения (11) в качестве исходного материала. В общих формулах (13), (14) и (15), группа P определена в соединение (8).
[Химическая формула 18]
[0158] (Стадия 11)
Стадия 11 представляет собой стадию взаимодействия соединения (11) с акрилонитрилом с получением соединения (12).
[0159] Предпочтительно, чтобы количество используемого акрилонитрила составляло от 1 до 10 молей, более предпочтительно, от 1 до 3 молей, относительно 1 моля соединения (11).
[0160] Реакция на стадии 11 может быть проведена в растворителе или может быть проведена без растворителя. На растворитель не накладывают конкретных ограничений, при условии, что он не оказывает влияния на протекание реакции, и вода в качестве растворителя является предпочтительной.
[0161] На стадии 11, для ускорения протекания реакции может быть дополнительно добавлено основание. Примеры основания включают неорганические основания, такие как гидроксид калия. Предпочтительно, чтобы количество используемого основания составляло от 0,8 до 2 молей относительно 1 моля соединения (11).
[0162] Температура реакции of стадия 11 может быть соответствующим образом определена специалистами в этой области. Температура реакции обычно составляет от 0 до 100C, предпочтительно, от 50 до 90C.
[0163] (Стадия 12)
3
3
Стадия 12 представляет собой стадию осуществления защиты аминогруппы соединения (12) с помощью группы P с получением соединения (13). Реакция установления защиты на аминогруппу с помощью группы P может быть осуществлена в соответствии с методом, хорошо известным специалистам в этой области, например, методом, описанном в монографии Protective Groups in Organic Synthesis, 4th ed., T.W. Greene, P.G.M. Wuts, John Wiley & Sons Inc. (2006).
[0164] (Стадия 13)
Стадия 13 представляет собой стадию осуществления реакции циклизации соединения (13) с получением соединения (14).
Реакция на стадии 13 может быть проведена в растворителе или может быть проведена без растворителя. На растворитель не накладывают конкретных ограничений, при условии, что он не оказывает влияния на протекание реакции, и предпочтительным является органический растворитель. Примеры органического растворителя включают диэтиловый эфир, тетрагидрофуран (THF), 1,4-диоксан, N,N-диметилформамид (DMF), толуол.
[0165] На стадии 13, для ускорения протекания реакции может быть дополнительно добавлено основание. Примеры основания включают гидрид натрия, гидрид калия, метоксид натрия, этоксид натрия, н-бутиллитий и третбутоксид калия. Предпочтительно, чтобы количество используемого основания составляло от 1 до 3 молей относительно 1 моля соединения (13).
[0166] Температура реакции на стадии 13 может быть соответствующим образом определена специалистами в этой области. Температура реакции обычно составляет от 20 до 150C, предпочтительно, от 50 до 100C.
[0167] (Стадия 14)
Стадия 14 представляет собой стадию взаимодействия соединения (14) с гидразином с получением соединения (15).
[0168] Реакция на стадии 14 может быть проведена в растворителе или может быть проведена без растворителя. На растворитель не накладывают конкретных ограничений, при условии, что он не оказывает влияния на протекание реакции, и предпочтительным является органический растворитель. Примеры органического растворителя включают этанол, н-пропанол и н-бутанол.
[0169] На стадии 14, для ускорения протекания реакции может быть дополнительно добавлена кислота. Примеры кислоты включают уксусную кислоту, хлористоводородную кислоту и серную кислоту. Предпочтительно, чтобы количество используемой кислоты составляло от 1 до 10 молей относительно 1 моля соединения (14).
[0170] Температура реакции на стадия 14 может быть соответствующим образом определена специалистами в этой области. Температура реакции обычно составляет от 20 до 150C, предпочтительно, от 50 до 120C.
[0171] (Стадия 15)
1
1
Стадия 15 представляет собой стадию осуществления защиты аминогруппы соединения (15) с помощью группы P с получением соединения (8). Реакция установления защиты на аминогруппу с помощью группы P может быть осуществлена в соответствии с методом, хорошо известным специалистам в этой области, например, методом, описанном в монографии Protective Groups in Organic Synthesis, 4th ed., T.W. Greene, P.G.M. Wuts, John Wiley & Sons Inc. (2006).
[0172] Альтернативным вариантом осуществления настоящего изобретения является способ лечения или предотвращения рака, воспалительного заболевания, аллергического заболевания или хронического респираторного заболевания, включающий введение соединения, представленного общей формулой (Ia), или его фармакологически приемлемой соли субъекту, нуждающемуся в этом. В этом контексте, субъект, нуждающийся в соединении, представленном общей формулой (Ia), или его фармакологически приемлемой соли, является, например, пациентом, страдающим от рака, воспалительного заболевания, аллергического заболевания или хронического респираторного заболевания.
[0173] Примеры рака включают онкологические заболевания крови, такие как множественная миелома, хронический миелолейкоз, гематологическая опухоль, гематологическая злокачественная опухоль, детский лейкоз, детский лимфома, болезнь Ходжкина, лимфоцитарная лимфома, кожная лимфома, острый лейкоз, хронический лейкоз, острый лимфобластный лейкоз, острый миелолейкоз, хронический миелолейкоз, плазмоклеточное новообразование, опухоль лимфоидной ткани и СПИД-ассоциированный рак; и типы солидного рака, такие как рак мочевого пузыря, рак молочной железы, рак толстой кишки, рак почки, рак печени, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, немелкоклеточный рак легкого, рак головы и шеи, рак пищевода, рак желчного пузыря, рак яичников, рак поджелудочной железы, рак желудка, рак шейки матки, рак щитовидной железы, рак предстательной железы, рак кожи, в том числе плоскоклеточный рак, фибросаркома, рабдомиосаркома, астроцитома, нейробластома, глиома и неврилеммома, меланома, семинома, тератокарцинома, остеосаркома, пигментная ксеродерма, кератоакантома, фолликулярный рак щитовидной железы и саркома Капоши.
[0174] Примеры воспалительного заболевания включают аутоиммунные заболевания, и, более конкретно, включают ревматоидный артрит, псориаз, множественный склероз и воспалительное заболевание кишечника.
[0175] Примеры хронического респираторного заболевания включают хроническое обструктивное заболевание легких (COPD).
[0176] Примеры аллергического заболевания включают атопический дерматит.
[0177] Когда вводят соединение, представленное общей формулой (Ia), или его фармакологически приемлемую соль, они могут быть введены в комбинации с дополнительным лекарственным средством. Более конкретно, фармацевтическая композиция, содержащая соединение, представленное общей формулой (Ia), его фармакологически приемлемую соль, и другая композиция, содержащая дополнительное лекарственное средство, могут быть раздельно приготовлены и введены одновременно или в разные моменты времени. В качестве варианта, фармацевтическая композиция, содержащая соединение, представленное общей формулой (Ia), или его фармакологически приемлемую соль, может помимо этого содержать дополнительное лекарственное средство.
[0178] Под дополнительным лекарственным средством подразумевают лекарственное средство, необходимое для субъекта, и его примеры включают противораковые средства, противоревматические средства, лекарственные средства для лечения псориаза, лекарственные средства для лечения множественного склероза, лекарственные средства для лечения воспалительного заболевания кишечника, лекарственные средства для лечения хронического обструктивного заболевания легких и лекарственные средств для лечения атопического дерматита.
[0179] Примеры дополнительного лекарственного средства включают ингибиторы тирозинкиназы, ингибиторы иммунных контрольных точек, средства, алкилирующие ДНК, ингибиторы синтеза ДНК, лекарственные средства, содержащие платину, антиметаболиты, ингибиторы топоизомеразы I, ингибиторы топоизомеразы II, активатор табулина, антагонисты гормонов, ингибиторы ароматазы, индукторы дифференцировки, ингибиторы протеосомы, ингибиторы фосфолипида киназы, ингибиторы аденозиндеаминазы, антиангиогенные средства, ингибиторы гистондеацетилазы (HDAC), ингибиторы бромодомена белков BET, ингибиторы гистондеметилазы, ингибиторы гистонметилтрансферазы, ингибиторы матриксной металлопротеиназы, ингибиторы фарнезилтрансферазы, препараты бисфосфоната, ингибиторы Hsp90, ингибиторы кинезин Eg5, ингибиторы серин-треонинкиназы, антицитокиновые средства, иммунодепрессанты, иммуномодуляторы, препараты активной формы витамина D3 для наружного применения, антагонисты S1P1 рецептора, препараты интерферона, антихолинергические средства, антагонисты лейкотриена, ингибиторы PDE4, антагонисты PGD2 рецептора, ингибиторы нейтрофил-эластазы, антигистаминные средства, классические нестероидные противовоспалительные средства (например, индометацин и ибупрофена), ингибиторы циклооксигеназы (также включающие селективные ингибиторы COX-1 и селективные ингибиторы COX-2), высвобождающие оксид азота нестероидные противовоспалительные средства, препараты золота, пеницилламин, препараты аминосалициловой кислоты, противомалярийные лекарственные средства, ингибиторы синтеза пиримидина, ингибиторы TNF, ингибиторы интерлейкина, антагонисты рецептора интерлейкина, интерлейкиновые лекарственные средства, ингибиторы активации В-клеток, препараты связанной с белком костимулирующей молекулы, ингибиторы MAPK, лекарственные средства для регуляции генов, ингибиторы продукции цитокинов, ингибиторы TNF--превращающего фермента, ингибиторы интерлейкин-1-превращающего фермента, антагонисты хемокина, терапевтическую вакцину, генную терапию, антисмысловые соединения, ингибиторы протеасомы, ингибиторы JAK, ингибиторы Т-клеток, ингибиторы инозинмонофосфатдегидрогеназы (IMPDH), ингибиторы адгезивной молекулы, талидомид, ингибиторы катепсина, ингибиторы глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, ингибиторы дигидрооротатдегидрогеназы (DHODH), ингибиторы фосфолипазы A2, ингибиторы iNOS, стимуляторы микротрубочек, антимикротрубочковые средства, антагонисты MHC класс II, антагонисты CD4, антагонисты CD23, антагонисты лейкотриен B4 рецептора, ингибиторы 5-липоксигеназы, ингибиторы катепсина В, стимуляторы остеогенеза, ингибиторы дипептидилпепдидазы, агонисты коллагена, кремы капсаицина, сульфамидные препараты, производные гиалуроновой кислоты, сульфат глюкозамина, амиприлозу, ингибиторы CD20, ингибиторы CD52, противоастматические лекарственные средства, лекарственные средства для лечения аллергического ринита, агонисты опиоидного рецептора, иммуноглобулины, глатирамер ацетат, вакцины Т-клеточного рецептора, ингибиторы адгезивной молекулы, мышечные релаксанты, местные анестетики, кетамин, антагонисты мускаринового рецептора быстрого и продолжительного действия (в том числе M1 рецептора, M2 рецептора и M3 рецептора), агонисты  рецептора (в том числе 1 рецептора, 2 рецептора, 3 рецептора и 4 рецептора) быстрого и продолжительного действия, ингалируемые стероиды, пероральные стероиды, комбинированные лекарственные средства агонистов  рецептора и ингалируемых стероидов, производные витаминов и адренокортикоидные стероиды.
[0180] Дополнительное лекарственное средство может представлять собой, например, цисплатин, доксорубицин, таксотеру, таксол, этопозид, иринотекан, топотекан, паклитаксел, доцетаксел, эпотилон, тамоксифен, 5-фторурацил, финголимод, метотрексат, темозоломид, циклофосфамид, SCH 66336, R115777, L778,123, BMS 214662, гефитиниб, эрлотиниб, панитумумаб, афатиниб, дазатиниб, босутиниб, вандетаниб, сунитиниб, акситиниб, пазопаниб, ленватиниб, лапатиниб, нинтеданиб, нилотиниб, кризотиниб, церитиниб, алектиниб, ибрутиниб, иматиниб, сорафениб, вемурафениб, дабрафениб, траметиниб, палбоциклиб, интерферон альфа-2b, цитарабин (также называемый ара-C), адриамицин, цитоксан, гемцитабин, урамустин, хлорметин, ифосфамид, мелфалан, хлорамбуцил, пипоброман, триэтиленмеламин, триэтилентиофосфорамин, офатумумаб, бусульфан, кармустин, ломустин, стрептозоцин, дакарбазин, флоксуридин, 6-меркаптопурин, 6-тиогуанин, регорафениб, рамуцирумаб, флударабин фосфат, оксалиплатин, фолинат, пентостатин, винбластин, винкристин, виндезин, блеомицин, дактиномицин, даунорубицин, доксорубицин, эпирубицин, идарубицин, митрамицин, дезоксикоформицин, митомицин-С, L-аспарагиназу, тенипозид, 17-этинилэстрадиол, диэтилстилбестрол, тестостерон, преднизон, флуоксиместерон, дростанолон пропионат, тестолактон, мегестрол ацетат, метилпреднизолон, метилтестостерон, преднизолон, хлортрианисен, гидроксипрогестерон, аминоглутетимид, эстрамустин, медроксипрогестерон ацетат, лейпролид ацетат, флутамид, торемифен, гозерелин, карбоплатин, гидроксимочевину, амсакрин, прокарбазин, митотан, митоксантро, левамизол, навелбин, анастрозол, летрозол, капецитабин, релоксафин, дролоксифен, гексаметилмеламин, бевацизумаб, омализумаб, меполизума, гемтузумаб озогамицин, могамулизумаб, пертузумаб, окрелизумаб, алемтузумаб, инотузумаб, тозитумомаб, бортезомиб, ибритутомаб тиуксетан, триоксид мышьяка, винорелбин, порфимер натрия, тиотепу, алтретамин, трастузумаб, летрозол, фулвестрант, эксеместан, ритуксимаб, цетуксимаб, базиликсимаб, ниволумаб, ипилимумаб, пембролизумаб, дурвалумаб, атезолизумаба авелумаб, алкофенак, ацеклофенак, сулиндак, толметин, этодолак, фенопрофен, тиапрофеновую кислоту, меклофенамовую кислоту, мелоксикам, теноксикам, лорноксикам, набуметон, ацетаминофен, фенацетин, этензамид, сулпирин, антипирин, мигренин, аспирин, мефенамовую кислоту, флумефенамовую кислоту, фенилбутазон, индометацин, ибупрофен, кетопрофен, напроксен, оксапрозин, флурбипрофен, фенбуфен, пранопрофен, флоктафенин, пироксикам, эпиризол, тиарамид гидрохлорид, залтопрофен, габексат мезилат, камостат мезилат, улинастатин, колхицин, пробенецид, сульфинпиразон, бензбромарон, аллопуринол, брентуксимаб ведотин, ауротиомалат натрия, гиалуронат натрия, атропин, скополамин, морфин и его соли (например, морфин гидрохлорид), петидин, леворфанол, оксиморфон, производные салициловой кислоты (например, салициловую кислоту, салицилат натрия и метилсалицилат), целекоксиб, эторикоксиб, валдекоксиб, локсопрофен, ауранофин, D-пеницилламин, сульфасалазин, месалазин, олсалазин, балсалазид, хлорохин, лефлуномид, такролимус, инфликсимаб, этанерцепт, адалимумаб, цертолизумаб пегол, голимумаб, PASSTNF-, растворимый TNF- рецептор, TNF--связывающий белок, анти-TNF- антитела, деносумаб, анакинру, антитела против растворимого интерлейкин-1 рецептора (например, рилонацепт и канакинумаб), тоцилизумаб, анти-интерлейкин-6 антитела (например, тоцилизумаб), интерлейкин-10, устекинумаб, бриакинумаб, секукинумаб (AIN-457), иксекизумаб (LY-2439821), AMG827, ритуксан, белимумаб, абатасепт, BMS-582949, ингибиторы молекул (например, NF-, NF-B, IKK-1, IKK-2 и AP-1), вовлеченных в сигнальную трансдукцию (например, диметилфумарат, дегидроксиметилэпоксихиномицин, DTCM-глутаримид, сесквитерпеновый лактон, ресвератрол, куркумин, дииндолилметан носкапин, партенолид, иксазомиб, карфилзомиб, деланзомиб, маризомиб, MLN-4924, IMD-2560, IMD-0354, IMD-1041, BAY-11-7082, BAY-11-7085, MLN120B, BMS-345541, SC-514, PS-1145 деносумаб, вориностат, ромидепсин, SN-50 и T-5224), ингибиторы MAPK (например, SCI0469, BIRB796, SB203580, VX-702, памапимод, PH797804, вемурафениб, дабрафениб, траметиниб, кобиметиниб, CC-359, CC-930, бентамапимод и XG-104), мази, содержащие салициловую кислоту, мази, содержащие мочевину, игуратимод, тетомиласт, белнакасан, HMPL-004, антагонисты IL-8, двойные антагонисты CXCR1-CXCR2 (например, репариксин), антагонисты CCR9 (например, верцирнон натрия), денилейкин дифтитокс, CCX025, N-{4-хлор-2-[(1-оксидопиридин-4-ил)карбонил]фенил}-4-(пропан-2-илокси)бензолсульфонамид, антагонисты MCP-1, ирбесартан, вакцины TNF-, ISIS-104838, натализумаб, ведолизумаб, AJM300, TRK-170, E6007, MX-68, BMS-188667, CKD-461, римексолон, циклоспорин A, мизорибин, гусперимус, сиролимус, темсиролимус, эверолимус, антилимфоцитарную сыворотку, лиофилизированный сульфированный нормальный иммуноглобулин, эритропоэтин, колониестимулирующие факторы, атипримод дигидрохлорид, азатиоприн, интерферон , интерферон -1b, интерферон -1a, тофацитиниб, барицитиниб, карфилзомиб, руксолитиниб, дексаметазон, гексэстрол, метимазол, бетаметазон, триамцинолон ацетонид, флуоцинонид, флуоцинолон ацетонид, гидрокортизон ацетат, гидрокортизон, фторметолон, беклометазон пропионат, эстриол, мофетил микофенолат, аликафорсен натрия, ингибиторы селектина, ингибиторы ELAM-1, ингибиторы VCAM-1, ингибиторы ICAM-1, V-85546, рофлумиласт, апремиласт, VAS203, реумакон, занолимумаб, DW-1350, зилейтон, ингибиторы Tyk2 (например, соединения и их соли, описанные в патентном документе WO2010/142752), синвиск (хилан G-F 20), ортовиск, атацисепт, блисибимод, тизанидин, эперизон, афлоквалон, баклофен, диазепам, дантролен натрия, производные витамина D3 (например, 5,6-транс-холекальциферол, 2,5-гидроксихолекальциферол, 1--гидроксихолекальциферол и кальципотриол), производные витамина D2 (например, 5,6-транс-эргокальциферол), изопреналин гидрохлорид, сальбутамол сульфат, прокатерол гидрохлорид, тербуталин сульфат, триметохинол гидрохлорид, тулобутерол гидрохлорид, орципреналин сульфат, фенотерол гидробромид, эфедрин гидрохлорид, ипратропия бромид, окситропия бромид, флутропия бромид, теофиллин, аминофиллин, хромогликат натрия, траниласт, репиринаст, амлексанокс, ибудиласт, кетотифен, терфенадин, мехитазин, азеластин, озагрел гидрохлорид, пранлукаст гидрат, сератродаст, циклезонид, хлорфенирамин малеат, алимемазин тартрат, клемастин фумарат, гомохлорциклизин гидрохлорид, фексофенадин, кетотифен фумарат, цетирихин гидрохлорид, оксатомид, эбастин, эпинастин гидрохлорид, лоратадин, трамадол, прометазин, гидроксизина гомохлорциклизин, ципрогептадин, мехитазин, эмедастин фумарат, псевдоэфедрин, бепотастин безилат, левоцетирихин, олопатадин гидрохлорид, мофетил микофенолат, даклизумаб, галиксимаб, метформин гидрохлорид, визилизумаб, аминоптерин, пазопаниб гидрохлорид, фезакинумаб, руксолитиниб фосфат, иксекизумаб, гуселькумаб, SLx-2119, PRX-167700, лидокаин, тиотропия бромид, салметерол ксинафоат, формотерол фумарат, флутиказон пропионат, беклометазон пропионат, будезонид или комбинацию салметерола ксинафоата и флутиказона пропионата.
[0181] Предпочтительно, чтобы дополнительным лекарственным средством являлся 5-фторурацил, оксалиплатин или иринотекан.
Примеры
[0182] Далее в настоящем изобретении будет более подробно описано соединение по настоящему варианту осуществления или его фармацевтически приемлемая соль в примерах (примерах 1-95), справочных примерах (справочных примерах 1-43) и примерах испытаний (примерах испытаний 1-20), но эти примеры приводятся только для более лучшего понимания настоящего изобретения, и их ни в коей мере не следует рассматривать в качестве ограничений объема настоящего изобретения.
[0183] При очистке методом препаративной колоночной хроматографии использовали следующие установки:
Установка 1: EPCLC-W-Prep 2XY A-Type (торговое наименование, фирма Yamazen Corp.)
Установка 2: Purif (trademark)-compact (торговое наименование, фирма Moritex Corp.)
Установка 3: Prominence preparative system (торговое наименование, фирма Shimadzu Corp.)
[0184] При очистке методом препаративной колоночной хроматографии использовали следующие неподвижные фазы:
DIOL силикагель: CHROMATOREX (торговое наименование) DIOL MB 100-40/75 (фирмы Fuji Silysia Chemical Ltd.)
DNH силикагель: CHROMATOREX (торговое наименование) DNH MB 100-40/75 (фирмы Fuji Silysia Chemical Ltd.)
ODS силикагель: XBridge C18 Prep (торговое наименование), размер частиц: 5 мкм, OBD, размер: 19  150 мм (фирмы Waters Corp.)
CSH ODS силикагель: XSelect CSH C18 Prep (торговое наименование), размер частиц: 5 мкм, OBD, размер: 19  150 мм (фирмы Waters Corp.)
Fluoro-phenyl силикагель: XSelect CSH Prep Fluoro-phenyl (торговое наименование), размер частиц: 5 мкм, OBD, размер: 19  150 мм (фирмы Waters Corp.)
[0185] В случае, когда регистрируется множество значений масс-спектров в следствии присутствия изотопов, описывался только один масс-спектр, имеющий минимальную величину m/z. DUIS при режиме ионизации масс-спектра является смешанным режимом ESI (электрораспылительной ионизации) и APCI (химической ионизации при атмосферном давлении).
1
[0186] Спектры H-ЯМР характеризуются величиной химического сдвига () относительно тетраметилсилана, используемого в качестве внутреннего стандарта (0 ppm), и константа взаимодействия (величина J) приводится в герцах (Гц), если не указано иначе. Расщепление каждого сигнала на несколько пиков обозначают сокращенно следующим образом: с: синглет, д: дуплет, т: триплет, кв: квартет, уш.с: уширенный синглет, и m: мультиплет.
[0187] Сокращенные обозначения, приводимые в примерах и справочных примерах, обычно имеют те же значения, которые являются общепринятыми в органической химии и фармацевтике. Для специалистов в этой области каждое сокращенное обозначение, используемое далее в примерах, является общепринятым и имеет следующее значение.
АТФ: аденозинтрифосфат
Boc: третбутилоксикарбонил
Cbz: бензилоксикарбонил
CI: химическая ионизация
DIPEA: N,N-диизопропилэтиламин
DMF: N,N-диметилформамид
DMSO: диметилсульфоксид
DPPA: дифенилфосфорилазид
DTT: дитиотреитол
DUIS: двойной источник ионизации
Et: этил
FBS: фетальная бычья сыворотка
HEPES: N-2-гидроксиэтилпиперазин-N'-2-этансульфоновая кислота
MBP: основной миелиновый белок
НАДФ: никотинамидадениндинуклеотидфосфат
PBMC: мононуклеарная клетка периферической крови
PBS: забуференный фосфатом водный раствор хлорида натрия
TBS: третбутилдиметилсилил
TEA: триэтиламин
THF: тетрагидрофуран
Tris: трисгидроксиметиламинометан
[0188] (Пример 1)
6,6-Диметил-N-фенил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-1)
[Химическая формула 19]
К раствору 101 мг (0,229 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 3 мл 1,4-диоксана добавляли 0,116 мл (0,679 ммоль) DIPEA и 0,062 мл (0,68 ммоль) анилина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Затем реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении и добавляли 2 мл метанола и 0,068 мл (1,1 ммоль) 2-аминоэтанола с получением сконцентрированного остатка, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении и добавляли 5 мл этилацетата с получением сконцентрированного остатка, затем промывали два раза 5 мл 5% водным раствором дигидрофосфата калия. Полученный таким образом органический слой целиком промывали 5 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и насыщенного водного солевой раствора, затем сушили над безводным сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении.
Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: этилацетат:метанол=100:0  88:12 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления дихлорметана, и затем осаждали твердое вещество путем добавления н-гексана. Полученное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 77,2 мг названного соединения (выход: 79%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 426 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,27 и 11,86 (уш.с, суммарно 1H), 9,83-9,42 (м, 1H), 8,22-7,91 (м, 1H), 7,56-7,47 (м, 2H), 7,26-7,16 (м, 2H), 6,96-6,88 (м, 1H), 4,64 (уш.с, 2H), 2,55-2,40 (м, 2H), 2,28-2,13 (м, 2H), 1,94-1,74 (м, 2H), 1,67 (уш.с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0189] (Пример 2)
6,6-Диметил-N-(п-толил)-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-25)
[Химическая формула 20]
К раствору 121 мг (0,274 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,15 мл (0,86 ммоль) DIPEA и 92,6 мг (0,864 ммоль) п-толуидина при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при 90C в течение 1,5 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,15 мл (1,4 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамин при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 4 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=70:30  50:50  40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 93,6 мг названного соединения (выход: 78%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 440 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,25 и 11,76 (уш.с, суммарно 1H), 9,75-9,45 (м, 1H), 8,13-7,84 (м, 1H), 7,42-7,36 (м, 2H), 7,05-6,99 (м, 2H), 4,62 (уш.с, 2H), 2,54-2,41 (м, 2H), 2,28-2,12 (м, 5H), 1,92-1,74 (м, 2H), 1,66 (уш.с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0190] (Пример 3)
N-(4-Метоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-79)
[Химическая формула 21]
К раствору 126 мг (0,286 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,18 мл (1,0 ммоль) DIPEA и 121 мг (0,984 ммоль) 4-метоксианилина при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при 90C в течение 1,5 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,16 мл (1,5 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 14,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=70:30  50:50  40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 106 мг названного соединения (выход: 81%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 456 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,47-11,54 (м, 1H), 9,58 (уш.с, 1H), 7,94 (уш.с, 1H), 7,43-7,34 (м, 2H), 6,85-6,76 (м, 2H), 4,59 (с, 2H), 3,70 (с, 3H), 2,54-2,41 (м, 2H), 2,27-2,13 (м, 2H), 1,90-1,74 (м, 2H), 1,66 (с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0191] (Пример 4)
N-(4-Фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-7)
[Химическая формула 22]
К раствору 119 мг (0,270 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,15 мл (0,86 ммоль) DIPEA и 0,080 мл (0,83 ммоль) 4-фторанилина при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при 90C в течение 2 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,15 мл (1,4 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=70:30  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 95,9 мг названного соединения (выход: 80%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 444 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,27 и 11,76 (уш.с, суммарно 1H), 9,71-9,52 (м, 1H), 8,24-8,05 (м, 1H), 7,57-7,45 (м, 2H), 7,11-7,00 (м, 2H), 4,71-4,52 (м, 2H), 2,55-2,40 (м, 2H), 2,28-2,12 (м, 2H), 1,92-1,74 (м, 2H), 1,73-1,57 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0192] (Пример 5)
6,6-Диметил-N-(пиридин-3-ил)-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-1019)
[Химическая формула 23]
К раствору 123 мг (0,278 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,15 мл (0,86 ммоль) DIPEA и 79,7 мг (0,847 ммоль) пиридин-3-амина при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при 90C в течение 5 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,15 мл (1,4 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, силикагель, растворитель для элюирования: дихлорметан:метанол=99:1  98:2  97:3  95:5 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=50:50  30:70 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мM водный раствор дикалия бифосфата=40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении, затем отгоняли ацетонитрил. Полученный сконцентрированный остаток подвергали три раза экстракции этилацетатом, и затем органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 34,5 мг названного соединения (выход: 29%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 427 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,29 и 11,66 (уш.с, суммарно 1H), 9,60 (с, 1H), 8,77-8,64 (м, 1H), 8,44-8,25 (м, 1H), 8,18-8,11 (м, 1H), 7,98-7,91 (м, 1H), 7,26 (дд, J=4,6, 8,3 Гц, 1H), 4,74-4,57 (м, 2H), 2,57-2,41 (м, 2H), 2,28-2,13 (м, 2H), 1,92-1,75 (м, 2H), 1,74-1,59 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0193] (Пример 6)
N-(2-Фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-3)
[Химическая формула 24]
К раствору 118 мг (0,267 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,15 мл (0,86 ммоль) DIPEA и 0,080 мл (0,83 ммоль) 2-фторанилина при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при 90C в течение 9 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,15 мл (1,4 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=70:30  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 62,2 мг названного соединения (выход: 53%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 444 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,27 и 11,85 (уш.с, суммарно 1H), 9,80-9,50 (м, 1H), 7,91-7,69 (м, 1H), 7,68-7,47 (м, 1H), 7,24-7,03 (м, 3H), 4,74-4,51 (м, 2H), 2,56-2,39 (м, 2H), 2,28-2,13 (м, 2H), 1,93-1,74 (м, 2H), 1,72-1,57 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0194] (Пример 7)
6,6-Диметил-N-(о-толил)-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-21)
[Химическая формула 25]
К раствору 117 мг (0,265 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,15 мл (0,86 ммоль) DIPEA и 0,090 мл (0,84 ммоль) o-толуидина при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при 90C в течение 5 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,15 мл (1,4 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=70:30  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 97,7 мг названного соединения (выход: 84%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 440 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,26 и 11,83 (уш.с, суммарно 1H), 9,73-9,49 (м, 1H), 7,76-7,54 (м, 1H), 7,34-7,21 (м, 1H), 7,19-7,07 (м, 2H), 7,02 (дт, J=1,2, 7,4 Гц, 1H), 4,71-4,52 (м, 2H), 2,54-2,40 (м, 2H), 2,27-2,12 (м, 5H), 1,93-1,73 (м, 2H), 1,72-1,54 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0195] (Пример 8)
6,6-Диметил-N-(м-толил)-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-23)
[Химическая формула 26]
К раствору 105 мг (0,238 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,13 мл (0,75 ммоль) DIPEA и 0,080 мл (0,74 ммоль) м-толуидина при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при 90C в течение 2 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,13 мл (1,2 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=70:30  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 90,1 мг названного соединения (выход: 86%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 440 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,26 и 11,71 (уш.с, суммарно 1H), 9,64-9,51 (м, 1H), 8,09-7,91 (м, 1H), 7,39-7,35 (м, 1H), 7,34-7,26 (м, 1H), 7,09 (т, J=7,8 Гц, 1H), 6,77-6,71 (м, 1H), 4,70-4,52 (м, 2H), 2,54-2,42 (м, 2H), 2,29-2,13 (м, 5H), 1,92-1,73 (м, 2H), 1,73-1,58 (м, 6H), 0,14-0,05 (м, 9H).
[0196] (Пример 9)
N-([1,1'-Бифенил]-3-ил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-71)
[Химическая формула 27]
К раствору 101 мг (0,230 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,13 мл (0,75 ммоль) DIPEA и 119 мг (0,700 ммоль) [1,1'-бифенил]-3-амин при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при 90C в течение 4 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,13 мл (1,2 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток суспендировали в смешанном растворителе этилацетат/н-гексан и перемешивали при комнатной температуре, и затем оставшееся нерастворенным твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 92,4 мг названного соединения (выход: 80%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 502 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,28 и 11,71 (уш.с, суммарно 1H), 9,60 (с, 1H), 8,20 (уш.с, 1H), 7,84 (т, J=1,8 Гц, 1H), 7,66-7,54 (м, 3H), 7,51-7,43 (м, 2H), 7,39-7,28 (м, 2H), 7,25-7,19 (м, 1H), 4,67 (уш.с, 2H), 2,56-2,40 (м, 2H), 2,29-2,13 (м, 2H), 1,93-1,75 (м, 2H), 1,69 (уш.с, 6H), 0,10 (с, 9H).
[0197] (Пример 10)
N-(3-Фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-5)
[Химическая формула 28]
К раствору 102 мг (0,231 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,13 мл (0,75 ммоль) DIPEA и 0,070 мл (0,72 ммоль) 3-фторанилина при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при 90C в течение 3,5 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,13 мл (1,2 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=75:25  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 70,6 мг названного соединения (выход: 69%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 444 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,28 и 11,68 (с, суммарно 1H), 9,59 (с, 1H), 8,39-8,24 (м, 1H), 7,49 (тд, J=2,2, 12,4 Гц, 1H), 7,38-7,31 (м, 1H), 7,28-7,19 (м, 1H), 6,76-6,68 (м, 1H), 4,70-4,56 (м, 2H), 2,54-2,41 (м, 2H), 2,28-2,14 (м, 2H), 1,92-1,74 (м, 2H), 1,72-1,60 (м, 6H), 0,15-0,05 (м, 9H).
[0198] (Пример 11)
N-(3-Хлорфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-11)
[Химическая формула 29]
К раствору 108 мг (0,245 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,13 мл (0,75 ммоль) DIPEA и 0,080 мл (0,76 ммоль) 3-хлоранилина при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при 90C в течение 4 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,14 мл (1,3 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 13,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=75:25  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 93,0 мг названного соединения (выход: 82%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 460 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,28 и 11,67 (с, суммарно 1H), 9,64-9,55 (м, 1H), 8,38-8,24 (м, 1H), 7,72 (т, J=2,1 Гц, 1H), 7,53-7,44 (м, 1H), 7,24 (т, J=8,0, 1H), 6,96 (ддд, J=0,8, 2,1, 8,0 Гц, 1H), 4,70-4,56 (м, 2H), 2,56-2,40 (м, 2H), 2,28-2,14 (м, 2H), 1,92-1,74 (м, 2H), 1,72-1,59 (м, 6H), 0,15-0,03 (м, 9H).
[0199] (Пример 12)
N-(2-Метоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-75)
[Химическая формула 30]
К раствору 105 мг (0,238 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,13 мл (0,75 ммоль) DIPEA и 0,13 мл (1,2 ммоль) 2-метоксианилина при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при 90C в течение 3,5 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,13 мл (1,2 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=75:25  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 94,1 мг названного соединения (выход: 87%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 456 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,30 и 11,93 (уш.с, суммарно 1H), 9,85-9,52 (м, 1H), 8,05-7,85 (м, 1H), 7,11 (с, 1H), 7,01 (дд, J=1,4, 8,0 Гц, 1H), 6,99-6,92 (м, 1H), 6,88 (дт, J=1,4, 7,6 Гц, 1H), 4,53 (уш.с, 2H), 3,84 (с, 3H), 2,57-2,40 (м, 2H), 2,28-2,13 (м, 2H), 1,93-1,75 (м, 2H), 1,68 (уш.с, 6H), 0,10 (с, 9H).
[0200] (Пример 13)
N-(2-Хлорфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-9)
[Химическая формула 31]
К раствору 106 мг (0,239 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,13 мл (0,75 ммоль) DIPEA и 0,13 мл (1,2 ммоль) 2-хлоранилина при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при 90C в течение 15 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,13 мл (1,2 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=75:25  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением бледно-желтого твердого вещества.
Полученное твердое вещество подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мM водный раствор дикалия бифосфата=50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении, затем отгоняли ацетонитрил. Полученный сконцентрированный остаток подвергали три раза экстракции этилацетатом, и затем органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 36,5 мг названного соединения (выход: 33%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 460 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,29 и 11,86 (уш.с, суммарно 1H), 9,62 (уш.с, 1H), 7,85-7,52 (м, 2H), 7,45 (дд, J=1,4, 8,0 Гц, 1H), 7,32-7,23 (м, 1H), 7,15-7,05 (м, 1H), 4,62 (уш.с, 2H), 2,58-2,39 (м, 2H), 2,26-2,14 (м, 2H), 1,89-1,74 (м, 2H), 1,67 (с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0201] (Пример 14)
N-([1,1'-Бифенил]-2-ил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-69)
[Химическая формула 32]
К раствору 150 мг (0,340 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 3 мл DMF добавляли 0,304 мл (1,70 ммоль) DIPEA и 173 мг (1,02 ммоль) [1,1'-бифенил]-2-амина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при 80C в течение 2 часов и при комнатной температуре в течение 18 часов при перемешивании. Затем добавляли к нему 0,162 мл (1,70 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=75:25  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 53 мг названного соединения (выход: 31%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 502 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,20 и 11,70 (уш.с, суммарно 1H), 9,54 (с, 1H), 7,67-7,37 (м, 6H), 7,35-7,15 (м, 4H), 4,43-4,20 (м, 2H), 2,57-2,39 (м, 2H), 2,26-2,11 (м, 2H), 1,92-1,72 (м, 2H), 1,49 (с, 6H), 0,08 (с, 9H).
[0202] (Пример 15)
6,6-Диметил-N-(пиридин-2-ил)-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-1007)
[Химическая формула 33]
К раствору 129 мг (0,293 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,16 мл (0,92 ммоль) DIPEA и 90,7 мг (0,964 ммоль) пиридин-2-амина при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при 90C в течение 10,5 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,16 мл (1,5 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Добавляли смешанный растворитель этилацетат/н-гексан с получением сконцентрированного остатка, и после обработки ультразвуком, собирали нерастворимый материал фильтрацией. Собранное в результате фильтрации твердое вещество промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением бледно-желтого твердого вещества.
Полученное твердое вещество подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дикалия бифосфата=40:60  80:20 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении, затем отгоняли ацетонитрил. Полученный сконцентрированный остаток подвергали три раза экстракции этилацетатом, и затем органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток суспендировали в смешанном растворителе этилацетат/н-гексан и перемешивали при комнатной температуре, и затем оставшееся нерастворенным твердое вещество собирали фильтрацией. Собранное в результате фильтрации твердое вещество промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 49,9 мг названного соединения (выход: 40%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 427 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,27 и 11,79 (уш.с, суммарно 1H), 9,60 (уш.с, 1H), 8,31 (уш.с, 1H), 8,22 (ддд, J=0,9, 1,9, 4,9, 1H), 7,89-7,84 (м, 1H), 7,72-7,64 (м, 1H), 6,97 (ддд, J=0,9, 4,9, 7,2 Гц, 1H), 4,78-4,59 (м, 2H), 2,57-2,40 (м, 2H), 2,28-2,13 (м, 2H), 1,92-1,75 (м, 2H), 1,69 (уш.с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0203] (Пример 16)
N-(2-Этилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-27)
[Химическая формула 34]
К раствору 105 мг (0,238 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, и 0,20 мл (1,2 ммоль) DIPEA в 3 мл 1,4-диоксана добавляли 0,085 мл (0,69 ммоль) 2-этиланилина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при 100C в течение 2 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,13 мл (1,2 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали водой и насыщенным водным солевым раствором в указанном порядке, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=80:20  30:70 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мM водный раствор дикалия бифосфата=35:65  55:45 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления этилацетата и насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления этилацетата, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 17,6 мг названного соединения (выход: 16%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 454 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,26 и 11,76 (уш.с, суммарно 1H), 9,62-9,53 (м, 1H), 7,71-7,53 (м, 1H), 7,29-7,16 (м, 2H), 7,15-7,06 (м, 2H), 4,66-4,52 (м, 2H), 2,59 (кв, J=7,6 Гц, 2H), 2,54- 2,40 (м, 2H), 2,27-2,13 (м, 2H), 1,92-1,74 (м, 2H), 1,71-1,57 (м, 6H), 1,13 (т, J=7,6 Гц, 3H), 0,09 (с, 9H).
[0204] (Пример 17)
N-(2,6-Диметилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-381)
[Химическая формула 35]
К раствору 100 мг (0,227 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 3 мл 1,4-диоксана добавляли 0,101 мл (0,566 ммоль) DIPEA и 0,042 мл (0,34 ммоль) 2,6-диметиланилина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при 100C в течение 7 часов. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и проводили реакцию в течение 20 часов. Продукт реакции подвергали дополнительному взаимодействию при 150C в течение 1 часа в микроволновом реакторе. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,053 мл (0,56 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=75:25  49:51 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: 1,2-дихлорэтан:метанол=98:2  90:10 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления этилацетата, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 14,7 мг названного соединения (выход: 14%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 454 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,25 и 11,74 (уш.с, суммарно 1H), 9,55 (уш.с, 1H), 7,62-7,40 (м, 1H), 7,08-6,97 (м, 3H), 4,68-4,48 (м, 2H), 2,58-2,39 (м, 2H), 2,27-2,08 (м, 8H), 1,93-1,73 (м, 2H), 1,71-1,54 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0205] (Пример 18)
N-(2,3-Дифторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-99)
[Химическая формула 36]
К раствору 100 мг (0,227 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,120 мл (0,689 ммоль) DIPEA и 100 мг (0,775 ммоль) 2,3-дифторанилина при комнатной температуре в атмосфере аргона, проводили реакцию при 90C в течение 3 часов при перемешивании, и затем проводили реакцию при 150C в течение 2 часов в микроволновом реакторе. Затем добавляли 0,120 мл (1,10 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=60:40  20:80 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дигидрофосфата калия=50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, подвергали экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали водой, сушили над безводным сульфатом натрия, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления метанола, затем к нему добавляли воду, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 13,0 мг названного соединения (выход: 12%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 462 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,27 и 11,74 (уш.с, суммарно 1H), 9,63 (с, 1H), 8,29-7,91(м, 1H), 7,42-7,24 (м, 1H), 7,17-7,05 (м, 2H), 4,64 (уш.с, 2H), 2,59-2,39 (м, 2H), 2,27-2,12 (м, 2H), 1,92-1,73 (м, 2H), 1,65 (с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0206] (Пример 19)
N-(2,3-Диметилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-375)
[Химическая формула 37]
К раствору 100 мг (0,227 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,120 мл (0,689 ммоль) DIPEA и 82,0 мг (0,677 ммоль) 2,3-диметиланилина при комнатной температуре и проводили реакцию при 170C в течение 1 часа в микроволновом реакторе. Затем добавляли 0,120 мл (1,10 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 16 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=60:40  20:80 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, Фтор-фенил силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дигидрофосфата калия=40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, подвергали экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали водой, сушили над безводным сульфатом натрия, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления метанола, затем к нему добавляли воду, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 12,3 мг названного соединения (выход: 12%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 454 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,25 и 11,74 (уш.с, суммарно 1H), 9,64-9,51 (м, 1H), 7,80-7,62 (м, 1H), 7,10-6,92 (м, 3H), 4,68-4,54 (м, 2H), 2,56-2,40 (м, 2H), 2,29-2,13 (м, 5H), 2,05 (с, 3H), 1,91-1,73 (м, 2H), 1,71-1,56 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0207] (Пример 20)
N-(2-Фтор-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-129)
[Химическая формула 38]
К раствору 133 мг (0,301 ммоль [расчетная величина, исходя из чистоты 100%]) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,21 мл (1,2 ммоль) DIPEA и 151 мг (1,21 ммоль) 2-фтор-6-метиланилина при комнатной температуре, проводили реакцию при 90C в течение 4 часов при перемешивании, и затем проводили реакцию при 160C в течение 1 часа в микроволновом реакторе. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,17 мл (1,6 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 17,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении.
Полученный сконцентрированный остаток суспендировали в смешанном растворителе этилацетат/н-гексан и перемешивали при комнатной температуре, и затем оставшееся нерастворенным твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением бледно-желтого твердого вещества (приблизительно 110 мг). Полученное твердое вещество подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дикалия бифосфата=50:50  80:20 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении, затем отгоняли ацетонитрил. Полученный сконцентрированный остаток подвергали три раза экстракции этилацетатом, и затем органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 33,4 мг названного соединения (выход: 24% [расчетная величина, исходя из чистоты исходного материала, принимаемой за 100%]) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 458 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,26 и 11,69 (с, суммарно 1H), 9,62-9,52 (м, 1H), 7,79-7,63 (м, 1H), 7,18-7,09 (м, 1H), 7,06-6,97 (м, 2H), 4,68-4,50 (м, 2H), 2,57-2,40 (м, 2H), 2,28-2,13 (м, 5H), 1,93-1,72 (м, 2H), 1,71-1,54 (м, 6H), 0,17-0,03 (м, 9H).
[0208] (Пример 21)
N-[2-(Дифторметокси)фенил]-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-87)
[Химическая формула 39]
К раствору 111 мг (0,251 ммоль [расчетная величина, исходя из чистоты 100%]) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,14 мл (0,80 ммоль) DIPEA и 0,10 мл (0,80 ммоль) 2-(дифторметокси)анилин при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при 100C в течение 9,5 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,14 мл (1,3 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=80:20  65:35  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, силикагель, растворитель для элюирования: дихлорметан:метанол=100:0  99:1  98:2  97:3 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 62,9 мг названного соединения (выход: 51% [расчетная величина, исходя из чистоты исходного материала, принимаемой за 100%]) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 492 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,28 и 11,82 (уш.с, суммарно 1H), 9,62 (уш.с, 1H), 7,83-7,43 (м, 2H), 7,26-6,80 (м, 4H), 4,59 (уш.с, 2H), 2,57-2,40 (м, 2H), 2,26-2,13 (м, 2H), 1,91-1,74 (м, 2H), 1,66 (с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0209] (Пример 22)
N-(2-Этоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-81)
[Химическая формула 40]
К раствору 108 мг (0,245 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 3 мл 1,4-диоксана добавляли 0,215 мл (1,23 ммоль) DIPEA и 0,100 мл (0,765 ммоль) 2-этоксианилина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при 100C в течение 3 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,135 мл (1,24 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дикалия бифосфата=60:40  80:20 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления этилацетата и насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления этилацетата, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 52,3 мг названного соединения (выход: 45%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 470 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,31 и 11,84 (уш.с, суммарно 1H), 9,65 (уш.с, 1H), 8,05-7,96 (м, 1H), 7,20 (с, 1H), 7,02-6,97 (м, 1H), 6,96-6,84 (м, 2H), 4,63-4,45 (м, 2H), 4,14-4,02 (м, 2H), 2,55- 2,40 (м, 2H), 2,29-2,11(м, 2H), 1,94-1,59 (м, 8H), 1,38 (т, J=7,0 Гц, 3H), 0,08 (с, 9H).
[0210] (Пример 23)
6,6-Диметил-N-[2-(трифторметокси)фенил]-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-93)
[Химическая формула 41]
К раствору 114 мг (0,259 ммоль [расчетная величина, исходя из чистоты 100%]) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,23 мл (1,3 ммоль) DIPEA и 0,17 мл (1,3 ммоль) 2-(трифторметокси)анилина при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при 100C в течение 18 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,14 мл (1,3 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=80:20  65:35  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, силикагель, растворитель для элюирования: дихлорметан:метанол=99:1  98:2 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 30,2 мг названного соединения (выход: 23% [расчетная величина, исходя из чистоты исходного материала, принимаемой за 100%]) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 510 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,28 и 11,74 (уш.с, суммарно 1H), 9,61 (с, 1H), 7,89 (уш.с, 1H), 7,68-7,55 (м, 1H), 7,36-7,28 (м, 2H), 7,18 (дт, J=1,6, 7,8 Гц, 1H), 4,60 (уш.с, 2H), 2,58-2,39 (м, 2H), 2,26-2,13 (м, 2H), 1,90-1,71 (м, 2H), 1,65 (с, 6H), 0,08 (с, 9H).
[0211] (Пример 24)
N-(2-Фтор-4-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-125)
[Химическая формула 42]
К раствору 117 мг (0,266 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,23 мл (1,3 ммоль) DIPEA и 0,15 мл (1,3 ммоль) 2-фтор-4-метиланилина при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при 100C в течение 6,5 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли 0,15 мл (1,4 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=80:20  65:35  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, силикагель, растворитель для элюирования: дихлорметан:метанол=100:0  99:1  98:2 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 92,8 мг названного соединения (выход: 76%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 458 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,26 и 11,75 (уш.с, суммарно 1H), 9,60 (уш.с, 1H), 7,83-7,57 (м, 1H), 7,38 (уш.с, 1H), 7,03-6,96 (м, 1H), 6,94-6,88 (м, 1H), 4,60 (уш.с, 2H), 2,56-2,40 (м, 2H), 2,27 (с, 3H), 2,25-2,13 (м, 2H), 1,92-1,72 (м, 2H), 1,64 (уш.с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0212] (Пример 25)
N-(2,6-Дифторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-105)
[Химическая формула 43]
К раствору 100 мг (0,227 ммоль [расчетная величина, исходя из чистоты 100%]) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 3 мл 1,4-диоксана добавляли 0,20 мл (1,1 ммоль) DIPEA и 0,073 мл (0,68 ммоль) 2,6-дифторанилина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при 120C в течение 0,5 часа и при 150C в течение 2 часов в микроволновом реакторе. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,11 мл (1,1 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: 1,2-дихлорэтан:метанол=99:1  92:8 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления этилацетата, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 8,2 мг названного соединения (выход: 8% [расчетная величина, исходя из чистоты исходного материала, принимаемой за 100%]) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 462 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,26 и 11,77 (уш.с, суммарно 1H), 9,60 (уш.с, 1H), 7,94 (уш.с, 1H), 7,27 (тт, J=6,3, 8,5 Гц, 1H), 7,13-7,04 (м, 2H), 4,60 (уш.с, 2H), 2,53-2,41 (м, 2H), 2,25-2,14 (м, 2H), 1,89-1,74 (м, 2H), 1,63 (с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0213] (Пример 26)
N-[2-(третбутил)фенил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-57)
[Химическая формула 44]
К раствору 154 мг (0,349 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 3 мл 1,4-диоксана добавляли 0,300 мл (1,72 ммоль) DIPEA и 0,160 мл (1,03 ммоль) 2-(третбутил)анилина при комнатной температуре в атмосфере аргона, проводили реакцию при 100C в течение 12 часов при перемешивании, и затем проводили реакцию при 150C в течение 2 часов в микроволновом реакторе. Затем к реакционному раствору добавляли 0,185 мл (1,70 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дикалия бифосфата=60:40  80:20 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления этилацетата и насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления этилацетата, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 31,4 мг названного соединения (выход: 19%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 482 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,26 и 11,83 (уш.с, суммарно 1H), 9,66-9,49 (м, 1H), 7,53-7,40 (м, 1H), 7,38-7,33 (м, 1H), 7,20-7,12 (м, 2H), 7,11-7,04 (м, 1H), 4,67-4,52 (м, 2H), 2,57-2,39 (м, 2H), 2,27-2,12 (м, 2H), 1,93-1,72 (м, 2H), 1,71-1,53 (м, 6H), 1,35 (с, 9H), 0,08 (с, 9H).
[0214] (Пример 27)
6,6-Диметил-N-[2-(трифторметил)фенил]-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-51)
[Химическая формула 45]
К раствору 108 мг (0,284 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 3 мл 1,4-диоксана добавляли 0,076 мл (0,55 ммоль) 1-изоцианато-2-(трифторметил)бензола при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 0,150 мл (1,38 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дикалия бифосфата=60:40  80:20 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления этилацетата и насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления этилацетата, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 71,9 мг названного соединения (выход: 51%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 494 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,28 и 11,80 (с, суммарно 1H), 9,69-9,55 (м, 1H), 7,88-7,51 (м, 4H), 7,40-7,33 (м, 1H), 4,66-4,49 (м, 2H), 2,56- 2,40 (м, 2H), 2,27-2,13 (м, 2H), 1,91-1,73 (м, 2H), 1,71-1,55 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0215] (Пример 28)
N-(3-Фтор-2-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-357)
[Химическая формула 46]
К раствору 120 мг (0,272 ммоль [расчетная величина, исходя из чистоты 100%]) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,15 мл (0,86 ммоль) DIPEA и 100 мг (0,799 ммоль) 3-фтор-2-метиланилина при комнатной температуре и проводили реакцию при 170C в течение 1 часа в микроволновом реакторе. Затем добавляли к нему 0,15 мл (1,4 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 16 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=60:40  20:80 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дигидрофосфата калия=40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, подвергали экстракции путем добавления этилацетата. Полученный органический слой промывали водой, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления метанола, затем к нему добавляли воду, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 12,4 мг названного соединения (выход: 10% [расчетная величина, исходя из чистоты исходного материала, принимаемой за 100%]) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 458 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,27 и 11,76 (уш.с, суммарно 1H), 9,66-9,54 (м, 1H), 8,02-7,81 (м, 1H), 7,18-7,04 (м, 2H), 6,97-6,89 (м, 1H), 4,71-4,55 (м, 2H), 2,56-2,40 (м, 2H), 2,27-2,13 (м, 2H), 2,06 (д, J=1,4 Гц, 3H), 1,91-1,73 (м, 2H), 1,71-1,55 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0216] (Пример 29)
N-(2-Цианофенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-63)
[Химическая формула 47]
К раствору 160 мг (0,363 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 3 мл 1,4-диоксана добавляли 0,30 мл (1,7 ммоль) DIPEA и 132 мг (1,12 ммоль) 2-аминобензонитрила при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при 150C в течение 6 часов в микроволновом реакторе. Затем добавляли к нему 0,200 мл (1,84 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дикалия бифосфата=60:40  80:20 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления этилацетата и насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления этилацетата, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 24,5 мг названного соединения (выход: 15%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 451 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,29 и 11,72 (уш.с, суммарно 1H), 9,63 (с, 1H), 8,62-8,42 (м, 1H), 7,72 (дд, J=1,3, 7,7 Гц, 1H), 7,64-7,58 (м, 1H), 7,55-7,44 (м, 1H), 7,28-7,20 (м, 1H), 4,72-4,59 (м, 2H), 2,56- 2,41 (м, 2H), 2,26-2,14 (м, 2H), 1,90-1,74 (м, 2H), 1,73-1,59 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0217] (Пример 30)
N-(4-Фтор-2-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-359)
[Химическая формула 48]
К раствору 154 мг (0,349 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 3 мл 1,4-диоксана добавляли 0,30 мл (1,7 ммоль) DIPEA и 0,115 мл (1,03 ммоль) 4-фтор-2-метиланилина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при 100C в течение 5 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,18 мл (1,7 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дикалия бифосфата=50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления этилацетата и насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления этилацетата, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 76,4 мг названного соединения (выход: 48%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 458 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,25 и 11,72 (уш.с, суммарно 1H), 9,61-9,54 (м, 1H), 7,79-7,62 (м, 1H), 7,29-7,15 (м, 1H), 7,02 (дд, J=2,9, 9,7 Гц, 1H), 6,93 (дт, J=2,9, 8,6 Гц, 1H), 4,68-4,50 (м, 2H), 2,56- 2,40 (м, 2H), 2,28-2,11 (м, 5H), 1,92-1,73 (м, 2H), 1,71-1,56 (м, 6H), 0,16-0,03 (м, 9H).
[0218] (Пример 31)
N-(2-Хлор-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-215)
[Химическая формула 49]
К раствору 200 мг (0,454 ммоль [расчетная величина, исходя из чистоты 100%]) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 3 мл 1,4-диоксана добавляли 0,39 мл (2,3 ммоль) DIPEA и 0,16 мл (1,4 ммоль) 2-хлор-6-метиланилина при комнатной температуре в атмосфере аргона, проводили реакцию при 120C в течение 0,5 часа в микроволновом реакторе, и затем проводили реакцию при 150C в течение 2 часов. Затем добавляли к нему 0,21 мл (2,3 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=70:30  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: 1,2-дихлорэтан:метанол=99:1  92:8 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дигидрофосфата калия=50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении, затем отгоняли ацетонитрил. Полученный концентрат подвергали экстракции этилацетатом, и затем органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления этилацетата, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 23,6 мг названного соединения (выход: 11% [расчетная величина, исходя из чистоты исходного материала, принимаемой за 100%]) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 474 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,26 и 11,73 (уш.с, суммарно 1H), 9,58 (с, 1H), 7,81 (уш.с, 1H), 7,30 (дд, J=1,3, 7,8 Гц, 1H), 7,23-7,11 (м, 2H), 4,61 (уш.с, 2H), 2,56-2,41 (м, 2H), 2,27-2,12 (м, 5H), 1,90-1,73 (м, 2H), 1,64 (с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0219] (Пример 32)
N-(2-Фтор-3-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-123)
[Химическая формула 50]
К раствору 120 мг (0,272 ммоль [расчетная величина, исходя из чистоты 100%]) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,150 мл (0,861 ммоль) DIPEA и 100 мг (0,799 ммоль) 2-фтор-3-метиланилина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при 90C в течение 11 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,150 мл (1,38 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 16 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=60:40  20:80 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления метанола, затем к нему добавляли воду, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 42,0 мг названного соединения (выход: 34% [расчетная величина, исходя из чистоты исходного материала, принимаемой за 100%]) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 458 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,27 и 11,76 (уш.с, суммарно 1H), 9,61 (уш.с, 1H), 7,88-7,57 (м, 1H), 7,52-7,29 (м, 1H), 7,02-6,92 (м, 2H), 4,62 (уш.с, 2H), 2,56-2,41 (м, 2H), 2,29-2,13 (м, 5H), 1,93-1,72 (м, 2H), 1,65 (с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0220] (Пример 33)
N-(2-Фтор-5-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-127)
[Химическая формула 51]
К раствору 103 мг (0,273 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,085 мл (0,65 ммоль) 2-фтор-5-метилфенилизоцианата при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 0,140 мл (1,29 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 16 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дигидрофосфата калия=40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, подвергали экстракции путем добавления этилацетата. Полученный органический слой промывали водой, сушили над безводным сульфатом натрия, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления метанола, затем к нему добавляли воду, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 63,6 мг названного соединения (выход: 51%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 458 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,27 и 11,79 (уш.с, суммарно 1H), 9,62 (уш.с, 1H), 7,74 (уш.с, 1H), 7,41 (уш.с, 1H), 7,04 (дд, J=8,4, 10,8 Гц, 1H), 6,91-6,84 (м, 1H), 4,61 (уш.с, 2H), 2,56-2,40 (м, 2H), 2,30-2,14 (м, 5H), 1,93-1,72 (м, 2H), 1,65 (с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0221] (Пример 34)
N-(5-Фтор-2-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-361)
[Химическая формула 52]
К раствору 103 мг (0,273 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,085 мл (0,66 ммоль) 5-фтор-2-метилфенилизоцианата при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали льдом и добавляли к нему 0,140 мл (1,29 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина, и затем проводили реакцию при 0C в течение 16 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Органический слой сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дигидрофосфата калия=40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, подвергали экстракции путем добавления этилацетата. Полученный органический слой промывали водой, сушили над безводным сульфатом натрия, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления метанола, затем к нему добавляли воду, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 42,7 мг названного соединения (выход: 34%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 458 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,28 и 11,78 (уш.с, суммарно 1H), 9,60 (уш.с, 1H), 7,79-7,50 (м, 1H), 7,38-7,11 (м, 2H), 6,83 (дт, J=2,8, 8,4 Гц, 1H), 4,63 (уш.с, 2H), 2,58-2,39 (м, 2H), 2,27-2,12 (м, 5H), 1,92-1,73 (м, 2H), 1,66 (с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0222] (Пример 35)
N-(2,4-Дифторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-101)
[Химическая формула 53]
К раствору 103 мг (0,273 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 3 мл 1,4-диоксана добавляли 0,050 мл (0,42 ммоль) 2,4-дифтор-1-изоцианатобензола при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 0,150 мл (1,38 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным солевым раствором в указанном порядке, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дикалия бифосфата=65:35 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления этилацетата и насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления этилацетата, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 50,2 мг названного соединения (выход: 40%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 462 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,27 и 11,77 (уш.с, суммарно 1H), 9,62 (уш.с, 1H), 7,92 (уш.с, 1H), 7,59-7,39 (м, 1H), 7,22 (ддд, J=2,9, 9,1, 10,7 Гц, 1H), 7,03-6,96 (м, 1H), 4,61 (уш.с, 2H), 2,56-2,40 (м, 2H), 2,26-2,14 (м, 2H), 1,91-1,72 (м, 2H), 1,64 (с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0223] (Пример 36)
N-(2,5-Дифторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-103)
[Химическая формула 54]
К раствору 105 мг (0,277 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 3 мл 1,4-диоксана добавляли 0,048 мл (0,41 ммоль) 2,5-дифторфенилизоцианата при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 0,150 мл (1,38 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа при перемешивании.
К реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дикалия бифосфата=65:35 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления этилацетата и насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления этилацетата, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 55,2 мг названного соединения (выход: 43%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 462 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,29 и 11,80 (уш.с, суммарно 1H), 9,74-9,58 (м, 1H), 8,00-7,75 (м, 1H), 7,68-7,47 (м, 1H), 7,24 (ддд, J=5,2, 9,2, 10,3 Гц, 1H), 6,94-6,84 (м, 1H), 4,71-4,58 (м, 2H), 2,57- 2,41 (м, 2H), 2,27-2,14 (м, 2H), 1,92-1,73 (м, 2H), 1,66 (уш.с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0224] (Пример 37)
N-(2,5-Диметилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-379)
[Химическая формула 55]
К раствору 103 мг (0,273 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 3 мл 1,4-диоксана добавляли 0,060 мл (0,43 ммоль) 2,5-диметилфенилизоцианата при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 0,150 мл (1,38 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным солевым раствором в указанном порядке, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  60:40 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дикалия бифосфата=65:35 (по объему)), и к фракции, содержащей требуемое соединение, добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали водой и насыщенным водным солевым раствором в указанном порядке, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления дихлорметана, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 60,2 мг названного соединения (выход: 49%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 454 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,25 и 11,78 (уш.с, суммарно 1H), 9,67-9,49 (м, 1H), 7,67-7,45 (м, 1H), 7,19-7,06 (м, 1H), 7,03 (д, J=7,6 Гц, 1H), 6,83 (дд, J=1,3, 7,6 Гц, 1H), 4,67-4,50 (м, 2H), 2,57- 2,38 (м, 2H), 2,27-2,09 (м, 8H), 1,91-1,72 (м, 2H), 1,65 (уш.с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0225] (Пример 38)
N-(2-Хлор-6-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-113)
[Химическая формула 56]
К раствору 392 мг (0,890 ммоль [расчетная величина, исходя из чистоты 100%]) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2,5 мл 1,4-диоксана добавляли 0,60 мл (3,4 ммоль) DIPEA и 807 мг (5,54 ммоль) 2-хлор-6-фторанилина при комнатной температуре в атмосфере азота, проводили реакцию при 100C в течение 1 часа при перемешивании, и затем проводили реакцию при 130C в течение 0,5 часа и дополнительно при 150C в течение 2 часов в микроволновом реакторе. Затем добавляли к нему 0,50 мл (4,6 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=80:20  65:35  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, силикагель, растворитель для элюирования: дихлорметан:метанол=100:0  99:1  98:2  97:3 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с получением белого твердого вещества (приблизительно 70 мг). Полученное твердое вещество подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дикалия бифосфата=50:50  80:20 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении, затем отгоняли ацетонитрил. Полученный сконцентрированный остаток подвергали три раза экстракции этилацетатом, и затем органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном, и затем сушили при пониженном давлении с получением 57,1 мг названного соединения (выход: 13% [расчетная величина, исходя из чистоты исходного материала, принимаемой за 100%]) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 478 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,27 и 11,69 (уш.с, суммарно 1H), 9,64-9,54 (м, 1H), 8,09-7,89 (м, 1H), 7,38-7,19 (м, 3H), 4,69-4,52 (м, 2H), 2,56-2,39 (м, 2H), 2,28-2,13 (м, 2H), 1,93-1,73 (м, 2H), 1,70-1,54 (м, 6H), 0,15-0,04 (м, 9H).
[0226] (Пример 39)
N-(2,4-Диметилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-377)
[Химическая формула 57]
К раствору 121 мг (0,273 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,23 мл (1,3 ммоль) DIPEA и 0,17 мл (1,4 ммоль) 2,4-диметиланилина при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при 100C в течение 4 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,15 мл (1,4 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=80:20  65:35  50:50  40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном, и затем сушили при пониженном давлении с получением 99,6 мг названного соединения (выход: 80%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 454 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,25 и 11,72 (уш.с, суммарно 1H), 9,56 (с, 1H), 7,67-7,45 (м, 1H), 7,19-7,05 (м, 1H), 7,00-6,95 (м, 1H), 6,94-6,87 (м, 1H), 4,67-4,50 (м, 2H), 2,56-2,39 (м, 2H), 2,28-2,10 (м, 8H), 1,93-1,72 (м, 2H), 1,71-1,55 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0227] (Пример 40)
3-[1-(Этилдиметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-N-(2-фтор-фенил)-6,6-диметил-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-4)
[Химическая формула 58]
К раствору 118 мг (0,301 ммоль) этил 3-[1-(этилдиметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-6,6-диметил-5,6-дигидропирроло-[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 7, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,050 мл (0,44 ммоль) 1-фтор-2-изоцианатобензола при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 50 минут при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 0,17 мл (1,6 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=80:20  65:35  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дикалия бифосфата=50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении, затем отгоняли ацетонитрил. Полученный концентрат подвергали три раза экстракции этилацетатом, и затем, органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном, и затем сушили при пониженном давлении с получением 65,1 мг названного соединения (выход: 47%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 458 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,28 и 11,76 (уш.с, суммарно 1H), 9,61 (уш.с, 1H), 7,92-7,48 (м, 2H), 7,21-7,13 (м, 1H), 7,13-7,05 (м, 2H), 4,63 (уш.с, 2H), 2,56-2,42 (м, 2H), 2,29-2,14 (м, 2H), 1,93-1,73 (м, 2H), 1,65 (с, 6H), 0,92 (т, J=7,9 Гц, 3H), 0,59 (кв, J=7,9 Гц, 2H), 0,08 (с, 6H).
[0228] (Пример 41)
6,6-Диметил-N-(3-метилизотиазол-4-ил)-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-1035)
[Химическая формула 59]
К раствору 142 мг (0,323 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,28 мл (1,6 ммоль) DIPEA и 197 мг (1,72 ммоль) 3-метилизотиазол-4-амина при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при 100C в течение 2 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,18 мл (1,7 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=70:30  60:40  50:50  40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, силикагель, растворитель для элюирования: дихлорметан:метанол=99:1  98:2  97:3  95:5 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 102 мг названного соединения (выход: 71%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 447 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,28 и 11,79 (уш.с, суммарно 1H), 9,73-9,54 (м, 1H), 8,70-8,54 (м, 1H), 8,00-7,74 (м, 1H), 4,71-4,53 (м, 2H), 2,59-2,40 (м, 2H), 2,33 (с, 3H), 2,27-2,14 (м, 2H), 1,91-1,73 (м, 2H), 1,72-1,57 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0229] (Пример 42)
6,6-Диметил-N-(тиофен-2-ил)-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-1043)
[Химическая формула 60]
К раствору 129 мг (0,341 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,060 мл (0,59 ммоль) 2-изоцианатотиофена при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 0,185 мл (1,98 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=56:44  35:65 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=79:21  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления этилацетата, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 68,7 мг названного соединения (выход: 47%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 432 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,28 и 11,63 (уш.с, суммарно 1H), 9,60 (уш.с, 1H), 9,48-9,28 (м, 1H), 6,84-6,64 (м, 3H), 4,61 (уш.с, 2H), 2,58-2,42 (м, 2H), 2,28-2,14 (м, 2H), 1,93-1,74 (м, 2H), 1,67 (с, 6H), 0,10 (с, 9H).
[0230] (Пример 43)
6,6-Диметил-N-(тиофен-3-ил)-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-1045)
[Химическая формула 61]
К раствору 129 мг (0,341 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,060 мл (0,59 ммоль) 3-изоцианатотиофена при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 0,19 мл (2,0 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=47:53  35:65 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=80:20  59:41 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления этилацетата, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 48,4 мг названного соединения (выход: 33%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 432 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,26 и 11,68 (с, суммарно 1H), 9,58 (с, 1H), 8,62-8,46 (м, 1H), 7,38-7,29 (м, 2H), 7,28-7,18 (м, 1H), 4,66-4,49 (м, 2H), 2,59-2,38 (м, 2H), 2,28-2,13 (м, 2H), 1,93-1,73 (м, 2H), 1,72-1,57 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0231] (Пример 44)
N-(2,6-Дифтор-4-метоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-615)
[Химическая формула 62]
К раствору 164 мг (0,372 ммоль [расчетная величина, исходя из чистоты 100%]) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 1,5 мл 1,4-диоксана добавляли 0,33 мл (1,9 ммоль) DIPEA и 516 мг (3,24 ммоль) 2,6-дифтор-4-метоксианилина при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при 100C в течение 9,5 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему 0,20 мл (1,8 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 4 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=75:25  60:40  45:55 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: 1,2-дихлорэтан:метанол=99:1  98:2  95:5 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном, и затем сушили при пониженном давлении с получением 105 мг названного соединения (выход: 57% [расчетная величина, исходя из чистоты исходного материала, принимаемой за 100%]) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 492 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,26 и 11,72 (уш.с, суммарно 1H), 9,59 (с, 1H), 7,80-7,59 (м, 1H), 6,79-6,69 (м, 2H), 4,64-4,47 (м, 2H), 3,77 (с, 3H), 2,56-2,40 (м, 2H), 2,28-2,11 (м, 2H), 1,92-1,71 (м, 2H), 1,69-1,53 (м, 6H), 0,13-0,05 (м, 9H).
[0232] (Пример 45)
N-(2-Фтор-6-метоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-161)
[Химическая формула 63]
К раствору 58,5 мг (0,344 ммоль) 2-фтор-6-метоксибензойной кислоты и 0,065 мл (0,37 ммоль) DIPEA в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,075 мл (0,35 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, и затем к реакционному раствору добавляли раствор 90 мг (0,24 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 2 мл 1,4-диоксана при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 0,125 мл (1,15 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным солевым раствором в указанном порядке, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=80:20  0:100 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления этилацетата, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 42,8 мг названного соединения (выход: 38%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 474 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,25 и 11,76 (уш.с, суммарно 1H), 9,57 (уш.с, 1H), 7,46-7,27 (м, 1H), 7,19 (дт, J=6,5, 8,4 Гц, 1H), 6,88-6,83 (м, 1H), 6,82-6,75 (м, 1H), 4,61-4,49 (м, 2H), 3,79 (с, 3H), 2,57-2,41 (м, 2H), 2,26-2,13 (м, 2H), 1,90-1,71 (м, 2H), 1,69-1,54 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0233] (Пример 46)
N-[2-Фтор-6-(трифторметил)фенил]-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-153)
[Химическая формула 64]
К раствору 84,2 мг (0,405 ммоль) 2-фтор-6-(трифторметил)бензойной кислоты и 0,075 мл (0,43 ммоль) DIPEA в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,085 мл (0,40 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, и затем к реакционному раствору добавляли раствор 96 мг (0,25 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 2 мл 1,4-диоксана при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 16 часов при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 0,145 мл (1,33 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным солевым раствором в указанном порядке, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дикалия бифосфата=60:40  80:20 (по объему)), и операцию по распределению фракции, содержащей требуемое соединение, между органическим слоем и водным слоем проводили путем добавления этилацетата и насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления этилацетата, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 33,9 мг названного соединения (выход: 26%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 512 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,27 и 11,78 (уш.с, суммарно 1H), 9,68-9,57 (м, 1H), 8,00-7,82 (м, 1H), 7,62-7,49 (м, 3H), 4,66-4,50 (м, 2H), 2,56-2,41 (м, 2H), 2,27-2,14 (м, 2H), 1,92-1,72 (м, 2H), 1,67-1,51 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0234] (Пример 47)
N-(5-Хлор-2-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-367)
[Химическая формула 65]
К раствору 150 мг (0,340 ммоль [расчетная величина, исходя из чистоты 100%]) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,474 мл (2,72 ммоль) DIPEA и 0,204 мл (1,70 ммоль) 5-хлор-2-метиланилина при комнатной температуре в атмосфере аргона, проводили реакцию при 100C в течение 6 часов при перемешивании, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 60 часов. Затем к реакционному раствору добавляли 0,318 мл (3,40 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: 1,2-дихлорэтан:метанол=95:5 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дигидрофосфата калия=50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении, затем отгоняли ацетонитрил. Полученный концентрат подвергали экстракции этилацетатом, и полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления этилацетата, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 50 мг названного соединения (выход: 31% [расчетная величина, исходя из чистоты исходного материала, принимаемой за 100%]) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 474 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,28 и 11,79 (уш.с, суммарно 1H), 9,70-9,55 (м, 1H), 7,84-7,58 (м, 1H), 7,53-7,35 (м, 1H), 7,19 (д, J=8,2 Гц, 1H), 7,06 (дд, J=2,3, 8,2 Гц, 1H), 4,73-4,52 (м, 2H), 2,58-2,39 (м, 2H), 2,29-2,11 (м, 5H), 1,93-1,73 (м, 2H), 1,72-1,56 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0235] (Пример 48)
N-(2,5-Дихлорфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-197)
[Химическая формула 66]
К раствору 344 мг (0,909 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 6 мл 1,4-диоксана добавляли 209 мг (1,11 ммоль) 1,4-дихлор-2-изоцианатобензола при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=93:7  72:28 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2,5-дихлорфенил)-карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 3 мл 1,4-диоксана добавляли 0,49 мл (5,3 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=50:50  30:70 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления этилацетата, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 172 мг названного соединения (выход: 38%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 494 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,31 и 11,84 (уш.с, суммарно 1H), 9,77-9,54 (м, 1H), 8,03-7,81 (м, 1H), 7,81-7,56 (м, 1H), 7,50 (д, J=8,6 Гц, 1H), 7,16 (дд, J=2,5, 8,6 Гц, 1H), 4,65 (уш.с, 2H), 2,57-2,40 (м, 2H), 2,29-2,13 (м, 2H), 1,92-1,74 (м, 2H), 1,67 (с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0236] (Пример 49)
N-(2-Циклопропилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-39)
[Химическая формула 67]
К раствору 257 мг (1,59 ммоль) 2-циклопропилбензойной кислоты в 8 мл толуола добавляли 0,313 мл (1,80 ммоль) DIPEA и 0,353 мл (1,64 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, и затем к реакционному раствору добавляли раствор 400 мг (1,06 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 2 мл толуола при 0C и проводили реакцию при 0C в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=80:20  60:40 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2-циклопропилфенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 5 мл 1,4-диоксана добавляли 0,494 мл (5,28 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=60:40  40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 291 мг названного соединения (выход: 59%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 466 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,28 и 11,81 (уш.с, суммарно 1H), 9,60 (уш.с, 1H), 7,73-7,62 (м, 1H), 7,55 (уш.с, 1H), 7,18-7,08 (м, 1H), 7,07-7,01 (м, 1H), 7,00-6,93 (м, 1H), 4,66 (уш.с, 2H), 2,60-2,39 (м, 2H), 2,28-2,12 (м, 2H), 2,02-1,91 (м, 1H), 1,89-1,75 (м, 2H), 1,68 (с, 6H), 0,97-0,86 (м, 2H), 0,65-0,54 (м, 2H), 0,09 (с, 9H).
[0237] (Пример 50)
N-(2,6-Дихлорфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-199)
[Химическая формула 68]
К раствору 500 мг (1,32 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 6 мл 1,4-диоксана добавляли 260 мг (1,38 ммоль) 1,3-дихлор-2-изоцианатобензола при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 25,0 мг (0,133 ммоль) 1,3-дихлор-2-изоцианатобензола и затем проводили реакцию в течение 1,5 часов при перемешивании. Затем реакционный раствор охлаждали льдом и добавляли к нему 0,580 мл (5,33 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 16 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом натрия, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DNH силикагель, растворитель для элюирования: 1,2-дихлорэтан:метанол=100:0  95:5 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дигидрофосфата калия=52:48 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, собирали, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали водой, сушили над безводным сульфатом натрия, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления водного ацетонитрила и затем лиофилизировали с получением 136 мг названного соединения (выход: 21%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 494 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,28 и 11,75 (уш.с, суммарно 1H), 9,60 (с, 1H), 8,22-8,01 (м, 1H), 7,49 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,28 (т, J=8,1 Гц, 1H), 4,68-4,54 (м, 2H), 2,56-2,41 (м, 2H), 2,26-2,13 (м, 2H), 1,92-1,72 (м, 2H), 1,70-1,55 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0238] (Пример 51)
6,6-Диметил-N-(2,4,6-трифторфенил)-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-599)
[Химическая формула 69]
К раствору 350 мг (1,99 ммоль) 2,4,6-трифторбензойной кислоты и 0,370 мл (2,12 ммоль) DIPEA в 2 мл толуола добавляли 0,430 мл (2,00 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, и затем к реакционному раствору добавляли раствор 500 мг (1,32 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 2 мл толуола при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 0,720 мл (6,61 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным солевым раствором в указанном порядке, сушили над безводным сульфатом натрия, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  60:40 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дигидрофосфата калия=52:48 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, собирали, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали водой, сушили над безводным сульфатом натрия, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 236 мг названного соединения (выход: 37%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 480 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,27 и 11,73 (уш.с, суммарно 1H), 9,61 (с, 1H), 8,00-7,81 (м, 1H), 7,26-7,13 (м, 2H), 4,59 (уш.с, 2H), 2,55-2,41 (м, 2H), 2,26-2,13 (м, 2H), 1,91-1,72 (м, 2H), 1,63 (уш.с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0239] (Пример 52)
N-(2-Этил-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-389)
[Химическая формула 70]
Реакция 1.
К раствору 79,6 мг (0,210 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 1,5 мл 1,4-диоксана добавляли 0,040 мл (0,26 ммоль) 1-этил-2-изоцианато-3-метилбензола при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 0,110 мл (1,01 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 17 часов при перемешивании.
Реакция 2.
К раствору 81,3 мг (0,215 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в смешанном растворителе 1,5 мл 1,4-диоксана и 1,0 мл THF добавляли 0,040 мл (0,26 ммоль) 1-этил-2-изоцианато-3-метилбензола при 0C в атмосфере азота и проводили реакцию при 0C в течение 2 часов при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 0,110 мл (1,01 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 17 часов при перемешивании.
Реакция 3.
К раствору 79,7 мг (0,211 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 1,5 мл дихлорметана добавляли 0,040 мл (0,26 ммоль) 1-этил-2-изоцианато-3-метилбензола при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 0,110 мл (1,01 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 17 часов при перемешивании.
Реакция 4.
К раствору 79,7 мг (0,211 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 1,5 мл дихлорметана добавляли 0,040 мл (0,26 ммоль) 1-этил-2-изоцианато-3-метилбензола при 0C в атмосфере азота и проводили реакцию при 0C в течение 2 часов при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 0,110 мл (1,01 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 17 часов при перемешивании.
Реакция 5.
К раствору 80,2 мг (0,212 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 1,5 мл дихлорметана добавляли 0,080 мл (0,46 ммоль) DIPEA и 0,040 мл (0,26 ммоль) 1-этил-2-изоцианато-3-метилбензола в указанном порядке при 0C в атмосфере азота и проводили реакцию при 0C в течение 2 часов при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 0,110 мл (1,01 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 17 часов при перемешивании.
Реакция 6.
К раствору 79,7 мг (0,211 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 1,5 мл пиридина добавляли 0,040 мл (0,26 ммоль) 1-этил-2-изоцианато-3-метилбензола при 0C в атмосфере азота и проводили реакцию при 0C в течение 2 часов при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 0,110 мл (1,01 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 17 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат из реакции 3, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: 1,2-дихлорэтан:метанол=98:2  97:3  95:5 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с получением 78,6 мг белой пены.
Помимо этого, объединяли реакционные растворы реакций 1, 2, 4, 5 и 6 и затем проводили такую же операцию очистки, как описанная выше, с получением 440 мг белой пены.
Полученные таким образом эти два продукта объединяли, растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 429 мг названного соединения (выход: 72%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 468 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,25 и 11,74 (уш.с, суммарно 1H), 9,56 (с, 1H), 7,51 (уш.с, 1H), 7,11-7,00 (м, 3H), 4,59 (уш.с, 2H), 2,57 (кв, J=7,5 Гц, 2H), 2,53-2,41 (м, 2H), 2,26-2,12 (м, 5H), 1,88-1,73 (м, 2H), 1,63 (с, 6H), 1,11 (т, J=7,5 Гц, 3H), 0,09 (с, 9H).
[0240] (Пример 53)
N-(2-Бромфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-15)
[Химическая формула 71]
К раствору 152 мг (0,345 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, и 0,300 мл (1,72 ммоль) DIPEA в 3 мл 1,4-диоксана добавляли 182 мг (1,06 ммоль) 2-броманилина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при 100C в течение 30 часов при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, и затем к реакционному раствору добавляли 0,185 мл (1,70 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамин при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным солевым раствором в указанном порядке, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  50:50), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дикалия бифосфата=65:35 (по объему)), и проводили операцию распределения фракции, содержащей требуемое соединение, между органическим слоем и водным слоем путем добавления этилацетата и насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления этилацетата, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении. Полученное твердое вещество растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали. Полученное твердое вещество снова подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  50:50), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 20,5 мг названного соединения (выход: 12%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 504 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,30 и 11,89 (уш.с, суммарно 1H), 9,74-9,57 (м, 1H), 7,79-7,54 (м, 3H), 7,36-7,29 (м, 1H), 7,08-7,00 (м, 1H), 4,69-4,55 (м, 2H), 2,58- 2,40 (м, 2H), 2,28-2,14 (м, 2H), 1,91-1,74 (м, 2H), 1,73-1,57 (м, 6H), 0,15-0,04 (м, 9H).
[0241] (Пример 54)
N-(5-Хлор-2-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-111)
[Химическая формула 72]
К раствору 346 мг (1,98 ммоль) 5-хлор-2-фторбензойной кислоты в 10 мл 1,4-диоксана добавляли 0,391 мл (2,25 ммоль) DIPEA и 0,441 мл (2,05 ммоль) DPPA в указанном порядке при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, и затем к реакционному раствору добавляли раствор 500 мг (1,32 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 1 мл 1,4-диоксана при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=95:5  75:25 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(5-хлор-2-фторфенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 5 мл 1,4-диоксана добавляли 0,617 мл (6,60 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=55:45  45:55 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дигидрофосфата калия=50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении, затем отгоняли ацетонитрил. Полученный концентрат подвергали экстракции этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и сушили при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 141 мг названного соединения (выход: 22%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 478 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,29 и 11,77 (уш.с, суммарно 1H), 9,72-9,58 (м, 1H), 8,05-7,84 (м, 1H), 7,84-7,67 (м, 1H), 7,30-7,19 (м, 1H), 7,17-7,08 (м, 1H), 4,71-4,55 (м, 2H), 2,57-2,40 (м, 2H), 2,28-2,13 (м, 2H), 1,92-1,74 (м, 2H), 1,73-1,59 (м, 6H), 0,14-0,04 (м, 9H).
[0242] (Пример 55)
N-(2-Хлор-5-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-191)
[Химическая формула 73]
К раствору 346 мг (1,98 ммоль) 2-хлор-5-фторбензойной кислоты в 5 мл 1,4-диоксана добавляли 0,391 мл (2,25 ммоль) DIPEA и 0,441 мл (2,05 ммоль) DPPA в указанном порядке при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, и затем к реакционному раствору добавляли раствор 500 мг (1,32 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 1 мл 1,4-диоксана при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=95:5  75:25 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2-хлор-5-фторфенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 5 мл 1,4-диоксана добавляли 0,62 мл (6,6 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=55:45  45:55 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дигидрофосфата калия=50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении, затем отгоняли ацетонитрил. Полученный концентрат подвергали экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и сушили при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 163 мг названного соединения (выход: 26%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 478 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,32 и 11,87 (уш.с, суммарно 1H), 9,75-9,58 (м, 1H), 7,86-7,54 (м, 2H), 7,50 (дд, J=5,9, 8,9 Гц, 1H), 7,00-6,91 (м, 1H), 4,73-4,54 (м, 2H), 2,57-2,39 (м, 2H), 2,29-2,12 (м, 2H), 1,93-1,75 (м, 2H), 1,74-1,57 (м, 6H), 0,15-0,03 (м, 9H).
[0243] (Пример 56)
6,6-Диметил-N-(2,3,6-трифторфенил)-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-597)
[Химическая формула 74]
К суспензии 356 мг (2,02 ммоль) 2,3,6-трифторбензойной кислоты в 4,0 мл толуола добавляли 0,380 мл (2,73 ммоль) триэтиламина и 0,430 мл (2,00 ммоль) DPPA в указанном порядке при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, затем добавляли к раствору 509 мг (1,35 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 4,0 мл толуола при 0C, и проводили реакцию при 0C в течение 1,5 часов при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 0,730 мл (6,71 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, н-гексан:этилацетат=80:20  70:30  60:40  50:50), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: 1,2-дихлорэтан:метанол=98:2  97:3 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дигидрофосфата калия=50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении, затем отгоняли ацетонитрил. Осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали водой и затем сушили при пониженном давлении. Затем полученное твердое вещество растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 44,6 мг названного соединения (выход: 7%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 480 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,28 и 11,71 (уш.с, суммарно 1H), 9,61 (с, 1H), 8,18 (уш.с, 1H), 7,41-7,29 (м, 1H), 7,18-7,10 (м, 1H), 4,62 (уш.с, 2H), 2,58-2,40 (м, 2H), 2,28-2,12 (м, 2H), 1,93-1,72 (м, 2H), 1,63 (уш.с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0244] (Пример 57)
N-(2-Хлор-6-метоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-247)
[Химическая формула 75]
К раствору 370 мг (1,98 ммоль) 2-хлор-6-метоксибензойной кислоты в 10 мл 1,4-диоксана добавляли 0,391 мл (2,25 ммоль) DIPEA и 0,427 мл (1,98 ммоль) DPPA в указанном порядке при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, и затем к реакционному раствору добавляли раствор 500 мг (1,32 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 1 мл 1,4-диоксана при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=72:28  30:70 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2-хлор-6-метоксифенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 3 мл 1,4-диоксана добавляли 0,617 мл (6,60 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 15 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=70:30  30:70 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дигидрофосфата калия=50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении, затем отгоняли ацетонитрил. Полученный концентрат подвергали экстракции этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и сушили при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 172 мг названного соединения (выход: 27%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 490 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,25 и 11,75 (уш.с, суммарно 1H), 9,55 (уш.с, 1H), 7,64-7,43 (м, 1H), 7,20 (т, J=8,3 Гц, 1H), 7,08-6,95 (м, 2H), 4,66-4,47 (м, 2H), 3,78 (с, 3H), 2,56-2,39 (м, 2H), 2,28-2,11 (м, 2H), 1,93-1,72 (м, 2H), 1,71-1,52 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0245] (Пример 58)
N-[2-(1,1-Дифторэтил)фенил]-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-45)
[Химическая формула 76]
К суспензии 334 мг (1,79 ммоль) 2-(1,1-дифторэтил)бензойной кислоты в 4,0 мл толуола добавляли 0,410 мл (2,35 ммоль) DIPEA 0,390 мл (1,81 ммоль) DPPA в указанном порядке при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 50 минут и затем при 100C в течение 75 минут при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и затем разбавляли 2,0 мл дихлорметана, и затем этот раствор добавляли к раствору 462 мг (1,22 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-ди-гидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 4,0 мл дихлорметана при 0C и проводили реакцию при 0C в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали три раза этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=80:20  70:30  50:50  40:60  30:70 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-{[2-(1,1-дифторэтил)фенил]карбамоил}-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору 334 мг (0,594 ммоль) полученного этил 5-{[2-(1,1-дифторэтил)фенил]карбамоил}-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата в смешанном растворителе 3,0 мл THF и 0,50 мл этанола добавляли 0,330 мл (3,03 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере азота и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали три раза этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=80:20  65:35  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 246 мг названного соединения (выход: 41%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 490 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,29 и 11,86 (уш.с, суммарно 1H), 9,60 (уш.с, 1H), 7,77-7,63 (м, 1H), 7,54-7,35 (м, 3H), 7,27-7,17 (м, 1H), 4,54 (уш.с, 2H), 2,57-2,39 (м, 2H), 2,29-2,12 (м, 2H), 1,99 (т, J=19,4 Гц, 3H), 1,90-1,74 (м, 2H), 1,66 (уш.с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0246] (Пример 59)
N-(6-Хлор-2-фтор-3-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-629)
[Химическая формула 77]
К суспензии 349 мг (1,85 ммоль) 6-хлор-2-фтор-3-метилбензойной кислоты в 4,0 мл толуола добавляли 0,430 мл (2,47 ммоль) DIPEA и 0,400 мл (1,86 ммоль) DPPA в указанном порядке при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 45 минут, и затем при 90C в течение 1,5 часов при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и затем разбавляли 2,0 мл дихлорметана, и затем этот раствор добавляли по каплям к раствору 443 мг (1,17 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 4,0 мл дихлорметана при 0C и проводили реакцию при 0C в течение 1,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали три раза этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=80:20  70:30  60:40  50:50  40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(6-хлор-2-фтор-3-метилфенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору 401 мг (0,711 ммоль) полученного этил 5-[(6-хлор-2-фтор-3-метилфенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата в 3,0 мл THF добавляли 0,400 мл (3,68 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере азота и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали три раза этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=80:20  65:35  50:50  40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 285 мг названного соединения (выход: 50%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 492 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,26 и 11,69 (уш.с, суммарно 1H), 9,61-9,53 (м, 1H), 8,03-7,83 (м, 1H), 7,26-7,12 (м, 2H), 4,68-4,50 (м, 2H), 2,57-2,39 (м, 2H), 2,28-2,13 (м, 5H), 1,93-1,72 (м, 2H), 1,70-1,54 (м, 6H), 0,17-0,03 (м, 9H).
[0247] (Пример 60)
N-[2-Фтор-6-(метокси-d3)фенил]-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-177)
[Химическая формула 78]
К раствору 300 мг (0,680 ммоль [расчетная величина, исходя из чистоты 100%]) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 5 мл 1,4-диоксана добавляли 0,592 мл (3,40 ммоль) DIPEA и 294 мг (2,04 ммоль) 2-фтор-6-(метокси-d3)анилина, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 9, при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 66 часов, и затем при 100C в течение 20 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=95:5  30:70 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-{[2-фтор-6-(метокси-d3)фенил]-карбамоил}-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 3 мл 1,4-диоксана добавляли 0,318 мл (3,40 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=65:35  40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 77,8 мг названного соединения (выход: 24% [расчетная величина, исходя из чистоты исходного материала, принимаемой за 100%]) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 477 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,25 и 11,73 (уш.с, суммарно 1H), 9,56 (с, 1H), 7,46-7,25 (м, 1H), 7,18 (дт, J=6,5, 8,4 Гц, 1H), 6,88-6,82 (м, 1H), 6,82-6,74 (м, 1H), 4,65-4,45 (м, 2H), 2,56-2,39 (м, 2H), 2,28-2,11 (м, 2H), 1,92-1,72 (м, 2H), 1,70-1,53 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0248] (Пример 61)
N-[2-Хлор-6-(трифторметил)фенил]-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-239)
[Химическая формула 79]
К раствору 389 мг (1,73 ммоль) 2-хлор-6-(трифторметил)-бензойной кислоты и 0,32 мл (1,8 ммоль) DIPEA в 2 мл толуола добавляли 0,37 мл (1,7 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры, и затем к реакционному раствору добавляли раствор 450 мг (1,19 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 2 мл толуола при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 12 часов при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 0,82 мл (7,5 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным солевым раствором в указанном порядке, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, DIOL силикагель, н-гексан:этилацетат=80:20  30:70), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дикалия бифосфата=55:45 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления этилацетата и насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Полученный органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 29,5 мг названного соединения (выход: 5%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (DUIS, m/z): 528 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,27 и 11,72 (уш.с, суммарно 1H), 9,58 (с, 1H), 8,16-7,98 (м, 1H), 7,84 (д, J=8,0 Гц, 1H), 7,73-7,68 (м, 1H), 7,50 (т, J=8,0 Гц, 1H), 4,78-4,38 (м, 2H), 2,55- 2,41 (м, 2H), 2,27-2,12 (м, 2H), 1,91-1,72 (м, 2H), 1,70-1,52 (м, 6H), 0,15-0,03 (м, 9H).
[0249] (Пример 62)
N-(2-Фтор-6-метокси-3-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-689)
[Химическая формула 80]
К раствору 276 мг (1,50 ммоль) 2-фтор-6-метокси-3-метилбензойной кислоты, синтезированной таким же методом, как в справочном примере 11, в 2 мл обезвоженного толуола добавляли 0,350 мл (2,00 ммоль) DIPEA и 0,320 мл (1,49 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему раствор 475 мг (1,25 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 2 мл обезвоженного толуола при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли воду, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом натрия, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  60:40 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2-фтор-6-метокси-3-метилфенил)-карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 2 мл обезвоженного дихлорметана добавляли 0,400 мл (3,67 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали дихлорметаном. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия в указанном порядке, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  60:40 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 466 мг названного соединения (выход: 76%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 488 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,23 и 11,75 (уш.с, суммарно 1H), 9,56 (с, 1H), 7,33 (уш.с, 1H), 7,08-7,01 (м, 1H), 6,78-6,71 (м, 1H), 4,55 (уш.с, 2H), 3,75 (с, 3H), 2,55-2,41 (м, 2H), 2,24-2,13 (м, 5H), 1,88-1,75 (м, 2H), 1,62 (с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0250] (Пример 63)
N-(2,6-Дифтор-3-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-609)
[Химическая формула 81]
К раствору 341 мг (1,98 ммоль) 2,6-дифтор-3-метилбензойной кислоты [приобретенной у фирмы Aurum Pharmatech LLC] в 8 мл толуола добавляли 0,391 мл (2,24 ммоль) DIPEA и 0,44 мл (2,0 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему раствор 500 мг (1,32 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 2 мл толуола при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  70:30 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2,6-дифтор-3-метилфенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 5 мл 1,4-диоксана добавляли 0,617 мл (6,60 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=60:40  40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 409 мг названного соединения (выход: 65%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 476 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,26 и 11,70 (уш.с, суммарно 1H), 9,58 (с, 1H), 7,99-7,75 (м, 1H), 7,20-7,07 (м, 1H), 7,03-6,92 (м, 1H), 4,68-4,49 (м, 2H), 2,56-2,40 (м, 2H), 2,27-2,13 (м, 5H), 1,92-1,74 (м, 2H), 1,70-1,55 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0251] (Пример 64)
N-[2-(Дифторметокси)-6-фторфенил]-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-169)
[Химическая формула 82]
К раствору 325 мг (1,58 ммоль) 2-(дифторметокси)-6-фтор-бензамида, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 12, в 10 мл толуола добавляли 1,02 г (3,17 ммоль) йодбензолдиацетата при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 10 минут, и затем при 60C в течение 0,5 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли 400 мг (1,06 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  70:30 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-{[2-(дифтор-метокси)-6-фторфенил]карбамоил}-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 5 мл 1,4-диоксана добавляли 0,395 мл (4,23 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 16 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=60:40  40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 367 мг названного соединения (выход: 68%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 510 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,27 и 11,69 (уш.с, суммарно 1H), 9,59 (с, 1H), 7,96-7,71 (м, 1H), 7,31 (дт, J=6,2, 8,4 Гц, 1H), 7,23-7,12 (м, 1H), 7,08-7,03 (м, 1H), 7,01 (т, J=74,3 Гц, 1H), 4,68-4,48 (м, 2H), 2,57-2,40 (м, 2H), 2,27-2,12 (м, 2H), 1,94-1,73 (м, 2H), 1,70-1,54 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0252] (Пример 65)
N-(2-Бром-6-хлорфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-207)
[Химическая формула 83]
К суспензии 374 мг (1,59 ммоль) 2-бром-6-хлорбензойной кислоты в 4,0 мл обезвоженного толуола добавляли 0,370 мл (2,12 ммоль) DIPEA и 0,340 мл (1,58 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере азота и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 90C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, затем добавляли к раствору 398 мг (1,05 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 4,0 мл обезвоженного дихлорметана при 0C и проводили реакцию при 0C в течение 3 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали три раза этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, н-гексан:этилацетат=80:20  75:25  65:35), и фракцию, содержащую этил 5-[(2-бром-6-хлорфенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 3,0 мл THF добавляли 0,450 мл (4,13 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере азота и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали три раза этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, н-гексан:этилацетат=80:20  65:35  50:50), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 339 мг названного соединения (выход: 60%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 538 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,26 и 11,71 (уш.с, суммарно 1H), 9,58 (с, 1H), 8,28-7,99 (м, 1H), 7,68-7,61 (м, 1H), 7,56-7,49 (м, 1H), 7,20 (т, J=8,1 Гц, 1H), 4,71-4,51 (м, 2H), 2,55-2,41 (м, 2H), 2,27-2,13 (м, 2H), 1,92-1,73 (м, 2H), 1,71-1,55 (м, 6H), 0,16-0,04 (м, 9H).
[0253] (Пример 66)
N-(2-Хлор-6-фтор-3-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-703)
[Химическая формула 84]
К раствору 299 мг (1,59 ммоль) 2-хлор-6-фтор-3-метилбензойной кислоты [приобретенной у фирмы AOBChem] в 8 мл толуола добавляли 0,313 мл (1,80 ммоль) DIPEA и 0,353 мл (1,64 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему раствор 400 мг (1,06 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 1 мл 1,4-диоксана при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  70:30 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2-хлор-6-фтор-3-метилфенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 3 мл 1,4-диоксана добавляли 0,494 мл (5,28 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=60:40  40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 407 мг названного соединения (выход: 78%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 492 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,26 и 11,74 (уш.с, суммарно 1H), 9,58 (с, 1H), 8,06-7,82 (м, 1H), 7,25 (дд, J=5,7, 8,5 Гц, 1H), 7,17-7,10 (м, 1H), 4,71-4,50 (м, 2H), 2,55-2,40 (м, 2H), 2,32 (с, 3H), 2,26-2,13 (м, 2H), 1,92-1,73 (м, 2H), 1,70-1,54 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0254] (Пример 67)
N-(2-Этил-6-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-137)
[Химическая формула 85]
К раствору 267 мг (1,59 ммоль) 2-этил-6-фторбензойной кислоты, синтезированной таким же методом, как в справочном примере 14, в 8 мл толуола добавляли 0,313 мл (1,80 ммоль) DIPEA и 0,353 мл (1,64 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему раствор 400 мг (1,06 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 2 мл 1,4-диоксана при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  70:30 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2-этил-6-фторфенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 5 мл 1,4-диоксана добавляли 0,494 мл (5,28 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=60:40  40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 325 мг названного соединения (выход: 65%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 472 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,26 и 11,74 (уш.с, суммарно 1H), 9,57 (с, 1H), 7,77-7,55 (м, 1H), 7,19 (дт, J=5,6, 7,9 Гц, 1H), 7,09-6,97 (м, 2H), 4,70-4,48 (м, 2H), 2,60 (кв, J=7,5 Гц, 2H), 2,54-2,39 (м, 2H), 2,27-2,13 (м, 2H), 1,92-1,74 (м, 2H), 1,63 (уш.с, 6H), 1,13 (т, J=7,5 Гц, 3H), 0,09 (с, 9H).
[0255] (Пример 68)
N-(2-Бром-6-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-121)
[Химическая формула 86]
К суспензии 350 мг (1,60 ммоль) 2-бром-6-фторбензойной кислоты в 2 мл обезвоженного толуола добавляли 0,300 мл (1,72 ммоль) DIPEA и 0,340 мл (1,58 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему раствор 500 мг (1,32 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло-[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 2 мл обезвоженного толуола при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли воду, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  60:40 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2-бром-6-фторфенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 2 мл обезвоженного дихлорметана добавляли 0,340 мл (3,12 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали дихлорметаном. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия в указанном порядке, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  60:40 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 319 мг названного соединения (выход: 46%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 522 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,26 и 11,73 (уш.с, суммарно 1H), 9,59 (с, 1H), 8,01 (уш.с, 1H), 7,52-7,46 (м, 1H), 7,30-7,19 (м, 2H), 4,61 (уш.с, 2H), 2,55-2,41 (м, 2H), 2,25-2,14 (м, 2H), 1,88-1,75 (м, 2H), 1,63 (с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0256] (Пример 69)
N-(2-Бром-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-299)
[Химическая формула 87]
К раствору 340 мг (1,58 ммоль) 2-бром-6-метилбензойной кислоты в 2 мл обезвоженного толуола добавляли 0,300 мл (1,72 ммоль) DIPEA и 0,340 мл (1,58 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему раствор 500 мг (1,32 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло-[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 2 мл обезвоженного толуола при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли воду, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  60:40 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2-бром-6-метилфенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 2 мл обезвоженного дихлорметана добавляли 0,340 мл (3,12 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали дихлорметаном. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия в указанном порядке, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  60:40 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 507 мг названного соединения (выход: 74%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 518 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,25 и 11,75 (уш.с, суммарно 1H), 9,57 (с, 1H), 7,82 (уш.с, 1H), 7,49-7,43 (м, 1H), 7,26-7,20 (м, 1H), 7,11-7,03 (м, 1H), 4,61 (уш.с, 2H), 2,56-2,41 (м, 2H), 2,27-2,13 (м, 5H), 1,89-1,74 (м, 2H), 1,64 (с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0257] (Пример 70)
N-(2-Хлор-5-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-213)
[Химическая формула 88]
К суспензии 270 мг (1,58 ммоль) 2-хлор-5-метилбензойной кислоты в 4 мл обезвоженного толуола добавляли 0,368 мл (2,11 ммоль) DIPEA и 0,341 мл (1,58 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему по каплям раствор 400 мг (1,06 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 4 мл обезвоженного дихлорметана при 0C и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 3 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали три раза этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=91:9  70:30 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2-хлор-5-метилфенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 3 мл THF и 3 мл дихлорметана добавляли 0,575 мл (5,28 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали три раза этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=71:29  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 430 мг названного соединения (выход: 86%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 474 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,29 и 11,86 (уш.с, суммарно 1H), 9,80-9,47 (м, 1H), 7,75-7,39 (м, 2H), 7,31 (д, J=8,2 Гц, 1H), 6,91 (дд, J=1,6, 8,2 Гц, 1H), 4,62 (уш.с, 2H), 2,55-2,40 (м, 2H), 2,28 (с, 3H), 2,26-2,14 (м, 2H), 1,92-1,72 (м, 2H), 1,67 (уш.с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0258] (Пример 71)
N-(6-Фтор-2,3-дигидробензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-997)
[Химическая формула 89]
К суспензии 289 мг (1,59 ммоль) 6-фтор-2,3-дигидро-бензофуран-7-карбоновой кислоты, синтезированной таким же методом, как в справочном примере 16, в 4 мл обезвоженного толуола добавляли 0,368 мл (2,11 ммоль) DIPEA и 0,341 мл (1,58 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему по каплям раствор 400 мг (1,06 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 4 мл обезвоженного дихлорметана при 0C и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали три раза этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=47:53  27:73 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(6-фтор-2,3-дигидро-бензофуран-7-ил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 3 мл дихлорметана добавляли 0,575 мл (5,28 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали три раза этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=44:56  23:77 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в 30 мл этилацетата и промывали три раза 5 мл 5% водного раствора бисульфата калия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 401 мг названного соединения (выход: 78%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 486 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,67-11,22 (м, 1H), 9,54 (с, 1H), 7,59 (уш.с, 1H), 7,03 (дд, J=5,3, 8,1 Гц, 1H), 6,61 (дд, J=8,1, 10,2 Гц, 1H), 4,65-4,47 (м, 4H), 3,17 (т, J=8,7 Гц, 2H), 2,57-2,40 (м, 2H), 2,26-2,13 (м, 2H), 1,89-1,74 (м, 2H), 1,62 (с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0259] (Пример 72)
N-(2-Циано-6-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-185)
[Химическая формула 90]
К раствору 4,60 г (25,7 ммоль) метил 2-циано-6-фторбензоата [приобретенного у фирмы AstaTech Inc.] в 20 мл метанола добавляли 28,0 мл 1 N водного раствора гидроксида натрия при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 3 часов при перемешивании.
После завершения реакции, доводили величину рН реакционного раствора до 3 путем добавления 1 N хлористоводородной кислоты, затем экстрагировали дихлорметаном. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 3,42 г сконцентрированного остатка, содержащего 2-циано-6-фторбензойную кислоту.
К раствору 0,654 г полученного сконцентрированного остатка в 10 мл обезвоженного толуола добавляли 0,750 мл (4,29 ммоль) DIPEA и 0,850 мл (3,95 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа при перемешивании. Затем добавляли к нему раствор 1,00 г (2,64 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 2 мл обезвоженного толуола при комнатной температуре и проводили реакцию при 80C в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли воду, охлаждали до комнатной температуры, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  80:20 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2-циано-6-фторфенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 6 мл обезвоженного дихлорметана добавляли 1,15 мл (10,6 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия в указанном порядке, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  60:40 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток снова подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: 1,2-дихлорэтан:метанол=100:0  95:5 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток снова подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дигидрофосфата калия=40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, собирали, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали водой, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 236 мг названного соединения (выход: 19%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (ES TOF MS, m/z): 469 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,29 и 11,71 (уш.с, суммарно 1H), 9,62 (с, 1H), 8,61-8,40 (м, 1H), 7,68-7,58 (м, 2H), 7,45-7,38 (м, 1H), 4,72-4,57 (м, 2H), 2,57-2,41 (м, 2H), 2,26-2,14 (м, 2H), 1,90-1,73 (м, 2H), 1,65 (уш.с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0260] (Пример 73)
N-(2-Хлор-6-циклопропилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-231)
[Химическая формула 91]
К раствору 174 мг (0,885 ммоль) 2-хлор-6-циклопропил-бензойной кислоты, синтезированной таким же методом, как в справочном примере 17, в 2 мл обезвоженного толуола добавляли 0,212 мл (1,21 ммоль) DIPEA и 0,204 мл (0,949 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли раствор 287 мг (0,758 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 2 мл обезвоженного толуола при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли воду, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  60:40 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2-хлор-6-циклопропилфенил)-карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 2 мл обезвоженного дихлорметана добавляли 0,248 мл (2,28 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали дихлорметаном. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия в указанном порядке, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  60:40 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Добавляли 5% водный раствор бисульфата калия с получением сконцентрированного остатка, затем экстрагировали дихлорметаном. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия в указанном порядке, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 219 мг названного соединения (выход: 58%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 500 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,25 и 11,71 (уш.с, суммарно 1H), 9,55 (с, 1H), 7,93-7,74 (м, 1H), 7,30-7,24 (м, 1H), 7,18-7,11 (м, 1H), 6,90-6,84 (м, 1H), 4,71-4,53 (м, 2H), 2,56-2,40 (м, 2H), 2,26-2,14 (м, 2H), 2,14-2,05 (м, 1H), 1,91-1,73 (м, 2H), 1,69-1,56 (м, 6H), 0,92-0,84 (м, 2H), 0,64-0,57 (м, 2H), 0,09 (с, 9H).
[0261] (Пример 74)
N-(2-Фтор-3,6-диметилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-669)
[Химическая формула 92]
К раствору 267 мг (1,59 ммоль) 2-фтор-3,6-диметилбензойной кислоты, синтезированной таким же методом, как в справочном примере 20, в 8 мл толуола добавляли 0,313 мл (1,80 ммоль) DIPEA и 0,353 мл (1,64 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему раствор 400 мг (1,06 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 2 мл толуола при 0C и проводили реакцию при 0C в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  70:30 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2-фтор-3,6-диметилфенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 5 мл 1,4-диоксана добавляли 0,494 мл (5,28 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=60:40  40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 283 мг названного соединения (выход: 57%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 472 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,25 и 11,73 (уш.с, суммарно 1H), 9,56 (с, 1H), 7,75-7,55 (м, 1H), 7,04-6,96 (м, 1H), 6,91 (д, J=7,8 Гц, 1H), 4,68-4,49 (м, 2H), 2,55-2,40 (м, 2H), 2,26-2,12 (м, 8H), 1,91-1,74 (м, 2H), 1,69-1,55 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0262] (Пример 75)
N-(6-Фторбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-1049)
[Химическая формула 93]
К суспензии 287 мг (1,59 ммоль) 6-фторбензофуран-7-карбоновой кислоты, синтезированный таким же методом, как в справочном примере 15, в 4 мл обезвоженного толуола добавляли 0,360 мл (2,11 ммоль) DIPEA, 0,340 мл (1,58 ммоль) DPPA и 1 мл обезвоженного дихлорметана при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа, и затем при 90C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему 2 мл обезвоженного дихлорметана, и этот раствор добавляли по каплям к раствору 403 мг (1,06 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 4 мл дихлорметана при 0C и проводили реакцию при 0C в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали два раза этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия в указанном порядке, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=59:41  39:61 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(6-фторбензофуран-7-ил)-карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 3 мл обезвоженного тетрагидрофурана добавляли 0,540 мл (4,96 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 45 минут при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали два раза этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия в указанном порядке, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=49:51  28:72 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 396 мг названного соединения (выход: 77%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 484 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,27 и 11,71 (с, суммарно 1H), 9,58 (с, 1H), 8,23-8,04 (м, 1H), 8,00 (д, J=2,2 Гц, 1H), 7,48 (дд, J=4,8, 8,6 Гц, 1H), 7,14 (дд, J=8,6, 10,4 Гц, 1H), 6,97 (д, J=2,2 Гц, 1H), 4,76-4,55 (м, 2H), 2,55-2,40 (м, 2H), 2,28-2,12 (м, 2H), 1,94-1,74 (м, 2H), 1,72-1,55 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0263] (Пример 76)
N-(2-Хлор-3-фтор-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-747)
[Химическая формула 94]
К раствору 180 мг (0,954 ммоль) 2-хлор-3-фтор-6-метилбензойной кислоты, синтезированной таким же методом, как в справочном примере 21, в 5 мл толуола добавляли 0,180 мл (1,03 ммоль) DIPEA и 0,225 мл (1,05 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему раствор 302 мг (0,798 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло-[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 5 мл толуола при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли воду, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  70:30 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2-хлор-3-фтор-6-метилфенил)-карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 10 мл тетрагидрофурана добавляли 0,435 мл (4,00 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия в указанном порядке, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=80:20  30:70 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 301 мг названного соединения (выход: 77%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 492 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,27 и 11,74 (уш.с, суммарно 1H), 9,59 (уш.с, 1H), 8,02-7,85 (м, 1H), 7,26-7,15 (м, 2H), 4,69-4,55 (м, 2H), 2,55-2,41 (м, 2H), 2,26-2,14 (м, 5H), 1,91-1,73 (м, 2H), 1,69-1,56 (м, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0264] (Пример 77)
N-[2-(Дифторметокси)-6-фторфенил]-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклопропанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № III-169)
[Химическая формула 95]
К раствору 42 мг (0,20 ммоль) 2-(дифторметокси)-6-фторбензамида, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 12, в 2 мл толуола добавляли 133 мг (0,413 ммоль) йодбензолдиацетата при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 10 минут, и затем при 60C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему 50 мг (0,14 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклопропан-карбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 22, при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 20 минут при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=80:20  60:40 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-{[2-(дифтор-метокси)-6-фторфенил]карбамоил}-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклопропанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 3 мл 1,4-диоксана добавляли 0,051 мл (0,55 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамин при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=60:40  40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 37 мг названного соединения (выход: 54%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 496 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,29 и 11,90 (уш.с, суммарно 1H), 9,78 (уш.с, 1H), 7,92-7,71 (м, 1H), 7,31 (дт, J=6,3, 8,3 Гц, 1H), 7,21-7,13 (м, 1H), 7,08-7,03 (м, 1H), 7,01 (т, J=74,3 Гц, 1H), 4,54 (уш.с, 2H), 1,61 (уш.с, 6H), 1,07-0,94 (м, 2H), 0,80-0,59 (м, 2H), 0,03 (с, 9H).
[0265] (Пример 78)
N-(2,6-Дихлорфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-пропанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № III-199)
[Химическая формула 96]
К раствору 100 мг (0,274 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклопропанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 22, в 3 мл толуола добавляли 61,9 мг (0,329 ммоль) 1,3-дихлор-2-изоцианатобензола при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  70:30 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2,6-дихлор-фенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклопропан-карбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 5 мл 1,4-диоксана добавляли 0,128 мл (1,37 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=60:40  40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 89 мг названного соединения (выход: 68%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 480 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,49-11,61 (м, 1H), 9,78 (с, 1H), 8,09 (уш.с, 1H), 7,49 (д, J=8,1 Гц, 2H), 7,28 (т, J=8,1 Гц, 1H), 4,56 (с, 2H), 1,62 (с, 6H), 1,05-0,97 (м, 2H), 0,75-0,63 (м, 2H), 0,04 (с, 9H).
[0266] (Пример 79)
N-(2,6-Дихлорфенил)-6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметил-силил)пропанамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № II-199)
[Химическая формула 97]
К раствору 100 мг (0,273 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметилсилил)пропанамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 25, в 3 мл толуола добавляли 61,6 мг (0,328 ммоль) 1,3-дихлор-2-изоцианатобензола при 0C в атмосфере аргона и проводили реакцию при 0C в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  70:30 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2,6-дихлор-фенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметилсилил)пропан-амидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 5 мл 1,4-диоксана добавляли 0,128 мл (1,37 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=60:40  40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 107 мг названного соединения (выход: 81%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 482 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,53-11,57 (м, 1H), 9,30 (уш.с, 1H), 8,11 (уш.с, 1H), 7,49 (д, J=8,0 Гц, 2H), 7,28 (т, J=8,0 Гц, 1H), 4,58 (с, 2H), 1,63 (с, 6H), 1,24 (с, 6H), 0,04 (с, 9H).
[0267] (Пример 80)
N-[2-(Дифторметокси)-6-фторфенил]-6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметилсилил)пропанамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № II-169)
[Химическая формула 98]
К раствору 25,2 мг (0,123 ммоль) 2-(дифторметокси)-6-фтор-бензамида, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 12, в 3 мл толуола добавляли 79 мг (0,25 ммоль) йодбензолдиацетата при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 10 минут, и затем при 60C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему 30 мг (0,082 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметилсилил)-пропанамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 25, при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 20 минут при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=85:15  70:30 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-{[2-(дифторметокси)-6-фторфенил]карбамоил}-6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметилсилил)пропанамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 3 мл 1,4-диоксана добавляли 0,031 мл (0,33 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=60:40  40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 8,5 мг названного соединения (выход: 21%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 498 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,43-11,62 (м, 1H), 9,31 (уш.с, 1H), 7,84 (уш.с, 1H), 7,31 (дт, J=6,3, 8,3 Гц, 1H), 7,21-7,14 (м, 1H), 7,07-7,02 (м, 1H), 7,01 (т, J=74,3 Гц, 1H), 4,56 (с, 2H), 1,62 (с, 6H), 1,24 (с, 6H), 0,04 (с, 9H).
[0268] (Пример 81)
N-(2,6-Дихлор-4-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-709)
[Химическая формула 99]
К раствору 166 мг (0,794 ммоль) 2,6-дихлор-4-фторбензойной кислоты [приобретенной у фирмы Abamachem Ltd.] в 5 мл толуола добавляли 0,156 мл (0,896 ммоль) DIPEA и 0,176 мл (0,817 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему по каплям раствор 200 мг (0,528 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 3 мл толуола при 0C и проводили реакцию при 0C в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  70:30 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2,6-дихлор-4-фторфенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 5 мл 1,4-диоксана добавляли 0,247 мл (2,64 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=60:40  40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 149 мг названного соединения (выход: 55%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 512 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,47-11,59 (м, 1H), 9,60 (с, 1H), 8,10 (уш.с, 1H), 7,55 (д, J=8,4 Гц, 2H), 4,60 (с, 2H), 2,57-2,41 (м, 2H), 2,25-2,14 (м, 2H), 1,89-1,73 (м, 2H), 1,63 (с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0269] (Пример 82)
N-(2-Этил-6-фторфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклопропанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № III-137)
[Химическая формула 100]
К раствору 69,2 мг (0,412 ммоль) 2-этил-6-фторбензойной кислоты, синтезированной таким же методом, как в справочном примере 14, в 5 мл толуола добавляли 0,081 мл (0,47 ммоль) DIPEA и 0,092 мл (0,43 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли по каплям раствор 100 мг (0,274 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклопропанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 22, в 2 мл толуола при 0C и проводили реакцию при 0C в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=95:5  80:20 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2-этил-6-фторфенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-пропанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 5 мл 1,4-диоксана добавляли 0,128 мл (1,37 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=70:30  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 98 мг названного соединения (выход: 78%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 458 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,28 и 11,86 (уш.с, суммарно 1H), 9,75 (уш.с, 1H), 7,65 (уш.с, 1H), 7,19 (дт, J=5,6, 7,9 Гц, 1H), 7,10-6,96 (м, 2H), 4,55 (уш.с, 2H), 2,60 (кв, J=7,5 Гц, 2H), 1,62 (с, 6H), 1,12 (т, J=7,5 Гц, 3H), 1,05-0,96 (м, 2H), 0,81-0,60 (м, 2H), 0,04 (с, 9H).
[0270] (Пример 83)
N-(2-Бром-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклопропанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № III-299)
[Химическая формула 101]
К раствору 88 мг (0,41 ммоль) 2-бром-6-метилбензойной кислоты в 5 мл толуола добавляли 0,081 мл (0,47 ммоль) DIPEA и 0,092 мл (0,43 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему по каплям раствор 100 мг (0,274 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклопропанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 22, в 2 мл толуола при 0C и проводили реакцию при 0C в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=85:15  70:30 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2-бром-6-метилфенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-пропанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 5 мл 1,4-диоксана добавляли 0,128 мл (1,37 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=60:40  40:60 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 92 мг названного соединения (выход: 66%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 504 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,28 и 11,85 (уш.с, суммарно 1H), 9,75 (уш.с, 1H), 7,80 (уш.с, 1H), 7,50-7,43 (м, 1H), 7,26-7,19 (м, 1H), 7,12-7,03 (м, 1H), 4,56 (уш.с, 2H), 2,23 (с, 3H), 1,63 (с, 6H), 1,05-0,97 (м, 2H), 0,80-0,58 (м, 2H), 0,04 (с, 9H).
[0271] (Пример 84)
N-(2-Хлор-5-метоксифенил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-245)
[Химическая формула 102]
К раствору 148 мг (0,793 ммоль) 2-хлор-5-метоксибензойной кислоты в 5 мл толуола добавляли 0,156 мл (0,896 ммоль) DIPEA и 0,176 мл (0,817 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему по каплям раствор 200 мг (0,528 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло-[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 2 мл толуола при 0C и проводили реакцию при 0C в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=85:15  70:30 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2-хлор-5-метоксифенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 5 мл 1,4-диоксана добавляли 0,247 мл (2,64 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=50:50  30:70 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 111 мг названного соединения (выход: 43%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 490 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,42-11,71 (м, 1H), 9,63 (уш.с, 1H), 7,59-7,39 (м, 2H), 7,34 (д, J=8,9 Гц, 1H), 6,68 (дд, J=3,1, 8,9 Гц, 1H), 4,62 (уш.с, 2H), 3,75 (с, 3H), 2,56-2,40 (м, 2H), 2,27-2,14 (м, 2H), 1,90-1,74 (м, 2H), 1,67 (с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0272] (Пример 85)
N-(2-Этил-6-фторфенил)-6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметил-силил)пропанамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № II-137)
[Химическая формула 103]
К раствору 55,1 мг (0,328 ммоль) 2-этил-6-фторбензойной кислоты, синтезированной таким же методом, как в справочном примере 14, в 2 мл обезвоженного толуола добавляли 0,076 мл (0,44 ммоль) DIPEA и 0,074 мл (0,34 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему раствор 100 мг (0,273 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметилсилил)пропанамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 25, в 2 мл обезвоженного толуола при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли воду, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  60:40 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2-этил-6-фторфенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметилсилил)пропанамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 2 мл обезвоженного дихлорметана добавляли 0,089 мл (0,82 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали дихлорметаном. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия в указанном порядке, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  60:40 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 64 мг названного соединения (выход: 51%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 460 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,31 и 11,74 (уш.с, суммарно 1H), 9,40-9,18 (м, 1H), 7,76-7,56 (м, 1H), 7,19 (дт, J=5,7, 7,9, 1H), 7,09-6,98 (м, 2H), 4,63-4,49 (м, 2H), 2,60 (кв, J=7,6 Гц, 2H), 1,71-1,53 (м, 6H), 1,24 (с, 6H), 1,13 (т, J=7,6 Гц, 3H), 0,04 (с, 9H).
[0273] (Пример 86)
N-(2-Бром-6-метилфенил)-6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметил-силил)пропанамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № II-290)
[Химическая формула 104]
К раствору 53,0 мг (0,246 ммоль) 2-бром-6-метилбензойной кислоты в 2 мл обезвоженного толуола добавляли 0,057 мл (0,33 ммоль) DIPEA и 0,055 мл (0,26 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему раствор 75,0 мг (0,205 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметилсилил)пропанамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 25, в 2 мл обезвоженного толуола при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли воду, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  60:40 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(2-бром-6-метилфенил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметилсилил)пропанамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 2 мл обезвоженного дихлорметана добавляли 0,067 мл (0,61 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали дихлорметаном. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия в указанном порядке, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=80:20  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 40 мг названного соединения (выход: 39%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 506 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,30 и 11,72 (уш.с, суммарно 1H), 9,40-9,15 (м, 1H), 7,82 (уш.с, 1H), 7,49-7,43 (м, 1H), 7,27-7,20 (м, 1H), 7,07 (т, J=7,8, 1H), 4,59 (с, 2H), 2,24 (с, 3H), 1,64 (уш.с, 6H), 1,24 (с, 6H), 0,04 (с, 9H).
[0274] (Пример 87)
N-(6-Фторбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[2-метил-2-(три-метилсилил)пропанамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № II-1049)
[Химическая формула 105]
К раствору 44,2 мг (0,245 ммоль) 6-фторбензофуран-7-карбоновой кислоты, синтезированной таким же методом, как в справочном примере 15, в 2 мл обезвоженного толуола добавляли 0,057 мл (0,33 ммоль) DIPEA и 0,055 мл (0,26 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему раствор 75,0 мг (0,205 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметилсилил)пропан-амидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 25, в 2 мл обезвоженного толуола при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли воду, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  60:40 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(6-фторбензофуран-7-ил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметилсилил)пропанамидо]-5,6-ди-гидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 2 мл обезвоженного дихлорметана добавляли 0,067 мл (0,61 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали дихлорметаном. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия в указанном порядке, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=80:20  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 14 мг названного соединения (выход: 14%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 472 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,32 и 11,77 (уш.с, суммарно 1H), 9,43-9,20 (м, 1H), 8,14 (уш.с, 1H), 8,00 (д, J=2,2 Гц, 1H), 7,48 (дд, J=4,8, 8,5 Гц, 1H), 7,15 (дд, J=8,5, 10,5 Гц, 1H), 6,97 (д, J=2,2 Гц, 1H), 4,63 (с, 2H), 1,65 (уш.с, 6H), 1,25 (с, 6H), 0,05 (с, 9H).
[0275] (Пример 88)
N-(6-Фторбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклопропанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № III-1049)
[Химическая формула 106]
К раствору 44,5 мг (0,247 ммоль) 6-фторбензофуран-7-карбоновой кислоты, синтезированной таким же методом, как в справочном примере 15, в 2 мл обезвоженного толуола добавляли 0,057 мл (0,33 ммоль) DIPEA и 0,055 мл (0,26 ммоль) DPPA при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа, и затем при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему раствор 75,0 мг (0,206 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклопропанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло-[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 22, в 2 мл обезвоженного толуола при комнатной температуре и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли воду, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  60:40 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(6-фторбензофуран-7-ил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклопропанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 2 мл обезвоженного дихлорметана добавляли 0,067 мл (0,61 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре в атмосфере аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 5% водный раствор бисульфата калия, затем экстрагировали дихлорметаном. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия в указанном порядке, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=80:20  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток снова подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: ацетонитрил:1 мМ водный раствор дигидрофосфата калия=35:65 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, собирали, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали водой, затем сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в этилацетате, затем добавляли к нему н-гексан, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 11 мг названного соединения (выход: 11%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 470 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,29 и 11,85 (уш.с, суммарно 1H), 9,76 (уш.с, 1H), 8,19-8,01 (м, 1H), 8,00 (д, J=2,1 Гц, 1H), 7,48 (дд, J=4,9, 8,5 Гц, 1H), 7,14 (дд, J=8,5, 10,5 Гц, 1H), 6,97 (д, J=2,1 Гц, 1H), 4,67-4,53 (м, 2H), 1,64 (уш.с, 6H), 1,08-0,96 (м, 2H), 0,80-0,60 (м, 2H), 0,04 (с, 9H).
[0276] (Пример 89)
N,6,6-Триметил-N-фенил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № I-965)
[Химическая формула 107]
К раствору 150 мг (включающих примеси, < 0,340 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,180 мл (1,03 ммоль) DIPEA и 0,110 мл (1,02 ммоль) N-метиланилина при комнатной температуре в атмосфере аргона и затем проводили реакцию при 100C в течение 1 часа при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и добавляли к нему 0,200 мл (1,84 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 16 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=60:40  20:80 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли путем добавления метанола, затем к нему добавляли воду, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении с получением 59,6 мг названного соединения (выход: 40% [*расчетная величина, исходя из чистоты исходного материала, принимаемой за 100%]) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 440 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,37-11,66 (м, 1H), 9,41 (уш.с, 1H), 7,33-7,25 (м, 2H), 7,08-7,00 (м, 3H), 3,90 (с, 2H), 3,01 (с, 3H), 2,38-2,27 (м, 2H), 2,17-2,02 (м, 2H), 1,82-1,62 (м, 8H), -0,07 (с, 9H).
[0277] (Пример 90)
N-(6-Фтор-3-метилбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-1061)
[Химическая формула 108]
К раствору 0,296 г (0,520 ммоль) этил 5-[(6-фтор-3-метилбензофуран-7-ил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметил-силил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного в справочном примере 36, в 5 мл THF добавляли 0,17 мл (1,6 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, н-гексан:этилацетат=50:50  28:72 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 217 мг названного соединения (выход: 84%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 498 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,27 и 11,77 (уш.с, суммарно 1H), 9,59 (уш.с, 1H), 8,18-8,01 (м, 1H), 7,80-7,74 (м, 1H), 7,41 (дд, J=4,8, 8,6 Гц, 1H), 7,14 (дд, J=8,6, 10,5 Гц, 1H), 4,70-4,57 (м, 2H), 2,55-2,42 (м, 2H), 2,28-2,13 (м, 5H), 1,92-1,73 (м, 2H), 1,65 (уш.с, 6H), 0,09 (с, 9H).
[0278] (Пример 91)
N-(2-Хлор-6-фторбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-1063)
[Химическая формула 109]
К раствору 210 мг (0,356 ммоль) этил 5-[(2-хлор-6-фторбензофуран-7-ил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного в справочном примере 40, в 5 мл THF добавляли 0,12 мл (1,1 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, н-гексан:этилацетат=50:50  28:72 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 164 мг названного соединения (выход: 89%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 518 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,28 и 11,78 (уш.с, суммарно 1H), 9,61 (уш.с, 1H), 8,34-8,10 (м, 1H), 7,44 (дд, J=4,8, 8,6 Гц, 1H), 7,20 (дд, J=8,6, 10,7 Гц, 1H), 7,05 (с, 1H), 4,72-4,57 (м, 2H), 2,58-2,41 (м, 2H), 2,28-2,13 (м, 2H), 1,92-1,73 (м, 2H), 1,66 (уш.с, 6H), 0,10 (с, 9H).
[0279] (Пример 92)
N-[5-(Индолин-1-карбонил)-6,6-диметил-1,4,5,6-тетрагидро-пирроло[3,4-c]пиразол-3-ил]-1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамид (соединение № I-1000)
[Химическая формула 110]
К раствору 187 мг (0,424 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,24 мл (1,4 ммоль) DIPEA и 0,15 мл (1,3 ммоль) индолина при комнатной температуре в атмосфере аргона и затем проводили реакцию при 100C в течение 110 минут при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и добавляли к нему 0,24 мл (2,2 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, реакционный раствор распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления этилацетата и 5% водного раствора бисульфата калия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, н-гексан:этилацетат=50:50  29:71 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 163 мг названного соединения (выход: 85%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 452 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,31 и 11,93 (уш.с, суммарно 1H), 9,87-9,47 (м, 1H), 7,23-7,18 (м, 1H), 7,09-7,02 (м, 1H), 6,82 (дт, J=0,8, 7,4 Гц, 1H), 6,70-6,60 (м, 1H), 4,62-4,41 (м, 2H), 3,80-3,66 (м, 2H), 3,03-2,92 (м, 2H), 2,44-2,32 (м, 2H), 2,20-2,07 (м, 2H), 1,83-1,64 (м, 8H), 0,01 (уш.с, 9H).
[0280] (Пример 93)
N-[5-(3,4-Дигидро-2H-бенз[b][1,4]оксазин-4-карбонил)-6,6-диметил-1,4,5,6-тетрагидропирроло[3,4-c]пиразол-3-ил]-1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамид (соединение № I-1036)
[Химическая формула 111]
К раствору 192 мг (0,435 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, в 2 мл 1,4-диоксана добавляли 0,24 мл (1,4 ммоль) DIPEA и 180 мг (1,33 ммоль) 3,4-дигидро-2H-1,4-бензоксазина [приобретенного у фирмы Combi-Blocks Inc.] при комнатной температуре в атмосфере аргона и затем проводили реакцию при 100C в течение 3 часов при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и добавляли к нему 0,24 мл (2,2 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, реакционный раствор распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления этилацетата и 5% водного раствора бисульфата калия. Органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, н-гексан:этилацетат=41:59  20:80 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 150 мг названного соединения (выход: 74%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 468 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,30 и 11,99 (уш.с, суммарно 1H), 9,90-9,41 (м, 1H), 6,83-6,74 (м, 4H), 4,53-4,42 (м, 2H), 4,34-4,26 (м, 2H), 3,50-3,46 (м, 2H), 2,43-2,33 (м, 2H), 2,19-2,07 (м, 2H), 1,83-1,66 (м, 8H), 0,09 - -0,09 (м, 9H).
[0281] (Пример 94)
N-(6-Фтор-2-метилбензофуран-7-ил)-6,6-диметил-3-[1-(три-метилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксамид (соединение № IV-1059)
[Химическая формула 112]
К 144 мг (0,742 ммоль) 6-фтор-2-метилбензофуран-7-карбоновой кислоты, синтезированной в справочном примере 43, добавляли 2 мл толуола, затем подвергали азеотропному обезвоживанию при пониженном давлении. К суспензии полученного остатка в 2 мл обезвоженного толуола добавляли 0,170 мл (1,22 ммоль) триэтиламина и 0,200 мл (0,929 ммоль) DPPA при комнатной температуре в атмосфере аргона и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 35 минут, и затем при 85C в течение 1,5 часов при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали и затем добавляли несколькими порциями к раствору 232 мг (0,613 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)цикло-бутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 3 мл обезвоженного толуола при 0C и проводили реакцию при 0C в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, реакционный раствор распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления воды и этилацетата, и затем, органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, н-гексан:этилацетат=63:37  42:58 (по объему)), и фракцию, содержащую этил 5-[(6-фтор-2-метилбензофуран-7-ил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 5 мл THF добавляли 0,22 мл (2,0 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, затем промывали 5% водным раствором бисульфата калия. После разделения на органический слой и водный слой, полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, н-гексан:этилацетат=46:54  25:75 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в водном ацетонитриле и лиофилизировали с получением 230 мг названного соединения (выход: 75%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 498 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,27 и 11,81 (уш.с, суммарно 1H), 9,69-9,49 (м, 1H), 8,16-7,97 (м, 1H), 7,33 (дд, J=5,0, 8,5 Гц, 1H), 7,06 (дд, J=8,5, 10,6 Гц, 1H), 6,60-6,55 (м, 1H), 4,64 (уш.с, 2H), 2,55-2,40 (м, 5H), 2,26-2,14 (м, 2H), 1,89-1,75 (м, 2H), 1,65 (уш.с, 6H), 0,10 (с, 9H).
[0282] (Пример 95)
N-[5-(1H-Индол-1-карбонил)-6,6-диметил-1,4,5,6-тетрагидро-пирроло[3,4-c]пиразол-3-ил]-1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамид (соединение № I-997)
[Химическая формула 113]
К раствору 1,00 г (включающего примеси, <0,916 ммоль) этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 4, и 3,52 г (30,0 ммоль) индола в 10 мл 1,4-диоксана добавляли 1,74 мл (9,99 ммоль) DIPEA при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при 150C в течение 0,5 часа, и затем при 180C в течение 1 часа в микроволновом реакторе. Затем добавляли к нему 1,00 мл (9,19 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 16 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли этилацетат, и полученную смесь промывали два раза 5% водным раствором бисульфата калия и один раз насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, н-гексан:этилацетат=69:31  0:100 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, CSH ODS силикагель, растворитель для элюирования: 0,1 об.% ацетонитрилформиат:0,1 об.% водный раствор муравьиной кислоты=45:55  99:1 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления этилацетата и насыщенного водного раствора бикарбоната натрия. Водный слой подвергали экстракции этилацетатом, и полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток очищали, используя сорбент VARIAN Bond Elute (вода:ацетонитрил=100:0  0:100 (по объему)), и к элюату, содержащему требуемое соединение, добавляли воду и лиофилизировали с получением 15,8 мг названного соединения (выход: 2% [*расчетная величина, исходя из чистоты исходного материала, принимаемой за 100%]) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 450 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,45-11,84 (м, 1H), 11,60-11,40 (м, 1H), 9,87-9,47 (м, 1H), 7,97-7,86 (м, 1H), 7,73 (д, J=2,6 Гц, 1H), 7,47-7,38 (м, 1H), 7,18-7,12 (м, 1H), 7,11-7,04 (м, 1H), 4,86-4,55 (м, 2H), 2,53-2,37 (м, 2H), 2,21-2,10 (м, 2H), 1,87-1,69 (м, 8H), 0,04 (с, 9H).
[0283] (Справочный пример 1)
1-(Триметилсилил)циклобутанкарбоновая кислота
[Химическая формула 114]
К 200 мл THF добавляли 214 мл (428 ммоль) 2 M раствора диизопропиламида лития в THF в атмосфере аргона, и затем добавляли к нему по каплям 10,1 мл (107 ммоль) циклобутанкарбоновой кислоты при перемешивании, охлаждая ледяной водой, и проводили реакцию в течение 4 часов при этом, в зависимости от обстоятельств, температура поднимали до комнатной температуры. Затем добавляли к нему 20 мл (116 ммоль) гексаметилфосфортриамида, добавляли по каплям 51 мл (490 ммоль) хлортриметилсилана при перемешивании с поддержанием внутренней температуры -60C или ниже, используя для охлаждения смесь сухой лед/ацетон, и затем проводили реакцию при -78C в течение 16,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 67 мл метанола, температуру поднимали до 0C, и затем добавляли к нему 134 мл холодной воды. Доводили величину рН полученного раствора до 2,1 путем добавления 2 N хлористоводородной кислоты и распределяли его между органическим слоем и водным слоем путем добавления 268 мл диэтилового эфира, и органический слой промывали 268 мл насыщенного водного раствора хлорида натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления 50 мл 2 N водного раствора гидроксида натрия и 267 мл н-гексана. Затем доводили величину рН водного слоя до 2,7 путем добавления 1 N хлористоводородной кислоты, и этот раствор распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления 267 мл этилацетата. Полученный органический слой сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Добавляли н-гексан с получением сконцентрированного остатка и охлаждали на водяной бане со льдом. Полученное твердое вещество фильтровали, промывали холодным н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 6,24 г названного соединения (выход: 34%) в виде белого твердого вещества. Фильтрат затем концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (растворитель для элюирования: 1,2-дихлорэтан:метанол=100:0  95:5 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении с получением 4,33 г названного соединения (выход: 23%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 173 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 11,64 (уш.с, 1H), 2,45-2,34 (м, 2H), 2,17-2,06 (м, 2H), 1,91-1,70 (м, 2H), 0,06 (с, 9H).
[0284] (Справочный пример 2)
5-третбутил 2-этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]пирроло[3,4-c]пиразол-2,5(4H,6H)-дикарбоксилат
[Химическая формула 115]
К раствору 13,9 г (80,4 ммоль) 1-(триметилсилил)циклобутан-карбоновой кислоты, синтезированный таким же методом, как в справочном примере 1, в 105 мл дихлорметана добавляли по каплям 6,96 мл (81,2 ммоль) оксалилхлорида и 0,32 мл (4,14 ммоль) DMF в указанном порядке в диапазоне температур от -25C и -10C в атмосфере аргона, затем температуру повышали до 0C, и проводили реакцию с полученным веществом в течение 2 часов при перемешивании. Этот реакционный раствор добавляли по каплям к раствору 8,74 г (26,9 ммоль) 5-третбутил 2-этил 3-амино-6,6-диметилпирроло[3,4-c]пиразол-2,5(4H,6H)-дикарбоксилата [синтезированного с помощью метода, описанного в публикации Journal of Medicinal Chemistry 2012, 55 (10), 4728-4739] и 23,5 мл (135 ммоль) DIPEA в 122 мл дихлорметана при 0C в атмосфере аргона, и проводили реакцию при 0C в течение 16 часов при перемешивании.
После завершения реакции, реакционный раствор распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления 486 мл 5% водного раствора бисульфата калия, и затем водный слой подвергали два раза экстракции 200 мл дихлорметана. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=86:14  53:47 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении с получением 8,30 г названного соединения (выход: 64%) в виде белой пены.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 479 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 9,98 и 9,72 и 9,71 (с, суммарно 1H), 4,50-4,37 (м, 4H), 2,53-2,43 (м, 2H), 2,32-2,07 (м, 2H), 2,02-1,72 (м, 2H), 1,65-1,55 (м, 6H), 1,51-1,42 (м, 9H), 1,38-1,31 (м, 3H), 0,10 и 0,06 и 0,01 (с, суммарно 9H).
[0285] (Справочный пример 3)
Этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат
[Химическая формула 116]
К раствору 43,2 г (90,0 ммоль) 5-третбутил 2-этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]пирроло[3,4-c]пиразол-2,5(4H,6H)-дикарбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 2, в 430 мл дихлорметана добавляли по каплям 30 мл (259 ммоль) 2,6-диметилпиридина и 46 мл (255 ммоль) триметилсилилтрифторметансульфоната в указанном порядке при 0C при перемешивании в атмосфере аргона, и проводили реакцию при 0C в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 260 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и 260 мл дихлорметана, затем разделяли на органический слой и водный слой. Водный слой подвергали два раза экстракции 260 мл дихлорметана, и затем полученный таким образом органический слой целиком промывали 260 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и 260 мл насыщенного водного солевого раствора в указанном порядке, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Повторяли операцию добавления толуола с получением сконцентрированного остатка и концентрирование полученного вещества при пониженном давлении с получением 39,7 г названного соединения в виде бледно-желтого твердого вещества.
Названное соединение также синтезировали следующим образом.
К раствору 57,1 г (119 ммоль) 5-третбутил 2-этил 6,6-ди-метил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]пирроло[3,4-c]-пиразол-2,5(4H,6H)-дикарбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 2, в 500 мл дихлорметана добавляли по каплям 28,0 мл (242 ммоль) 2,6-диметилпиридина и 43,0 мл (238 ммоль) триметилсилилтрифторметансульфоната в указанном порядке при 0C в атмосфере азота, и проводили реакцию при 0C в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, реакционный раствор выливали в 1000 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия, затем перемешивали при комнатной температуре, и затем разделяли на органический слой и водный слой. Водный слой подвергали два раза экстракции 500 мл этилацетата, и затем полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Операцию добавления толуола с получением сконцентрированного остатка и концентрирования полученного вещества при пониженном давлении проводили три раза, затем полученное коричневое масло охлаждали в холодильнике в течение ночи, и затем добавляли 50 мл диэтилового эфира и 100 мл н-гексана и перемешивали при комнатной температуре в течение 0,5 часа. Осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 17,0 г названного соединения (выход: 38%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (DUIS, m/z): 379 [M+1].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 9,86 (с, 1H), 4,52 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 4,23 (с, 2H), 2,64-2,52 (м, 2H), 2,38-2,27 (м, 2H), 2,03-1,89 (м, 2H), 1,53-1,42 (м, 9H), 0,14 (с, 9H).
[0286] (Справочный пример 4)
Этил 5-(хлоркарбонил)-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)-циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат
[Химическая формула 117]
К раствору 4,90 г (11,1 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 50 мл дихлорметана добавляли 6,80 мл (39,0 ммоль) DIPEA при комнатной температуре в атмосфере азота, и затем добавляли по каплям раствор 2,34 г (7,89 ммоль) бис(трихлорметил)карбоната в 10 мл дихлорметана при -78C и проводили реакцию при -78C в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли 80 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и перемешивали в течение 5 минут. Добавляли к нему дихлорметан и затем перемешивали, поднимая при этом температуру до комнатной температуры. Реакционный раствор разделяли на органический слой и водный слой, и затем водный слой подвергали два раза экстракции дихлорметаном. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  85:15  75:25 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Добавляли н-гексан с получением сконцентрированного остатка, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении с получением 2,00 г названного соединения (выход: 41%) в виде белого твердого вещества. Кроме того, концентрировали при пониженном давлении полученный фильтрат и сушили при пониженном давлении с получением 2,50 г названного соединения, включающего примеси (выход: 51% [расчетная величина, исходя из чистоты 100%]) в виде бледно-желтой пены.
+
Масс-спектр (DUIS, m/z): 441 [M+1].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 9,94 (с, 1H), 4,97 (с, 2H), 4,55 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 2,64-2,53 (м, 2H), 2,39-2,30 (м, 2H), 2,05-1,93 (м, 2H), 1,78 (с, 6H), 1,48 (т, J=7,1 Гц, 3H), 0,16 (с, 9H).
[0287] (Справочный пример 5)
1-(Этилдиметилсилил)циклобутанкарбоновая кислота
[Химическая формула 118]
К 200 мл THF добавляли 214 мл (428 ммоль) 2 M раствора диизопропиламида лития в THF в атмосфере аргона, и затем добавляли по каплям 10,7 мл (112 ммоль) циклобутанкарбоновой кислоты при охлаждении ледяной водой и перемешивали, повышая при этом, в зависимости от обстоятельств, температуру до комнатной температуры. Затем добавляли к 20 мл (120 ммоль) гексаметилфосфортриамида. После охлаждения смесью сухой лед/этанол, добавляли по каплям 67,6 мл (485 ммоль) хлор(этил)диметилсилана в диапазоне температур от -75C до -69C и перемешивали в течение ночи при температуре -60C или ниже.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли по каплям 67 мл метанола и затем 134 мл холодной воды, и затем доводили температуру до комнатной температуры. Добавляли 240 мл 2 N хлористоводородной кислоты для подкисления (pH 2,0), и добавляли 200 мл диэтилового эфира, затем разделяли на органический слой и водный слой. Полученный органический слой промывали 250 мл насыщенного водного раствора хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Добавляли 41 мл 2 N водного раствора гидроксида натрия с получением сконцентрированного остатка, затем промывали 250 мл н-гексана. Водный слой снова подкисляли (pH 2,0) путем добавления 82 мл 1 N хлористоводородной кислоты. Этот раствор подвергали экстракции 250 мл этилацетата, и органический слой концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (растворитель для элюирования: 1,2-дихлорэтан:метанол=100:0  95:5 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении с получением 11,7 г названного соединения (выход: 59%) в виде белого твердого вещества.
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 11,71 (уш.с, 1H), 2,44-2,33 (м, 2H), 2,19-2,08 (м, 2H), 1,91-1,73 (м, 2H), 0,92 (т, J=7,9 Гц, 3H), 0,55 (кв, J=7,9 Гц, 2H), 0,05 (с, 6H).
[0288] (Справочный пример 6)
5-третбутил 2-этил 3-[1-(этилдиметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-6,6-диметилпирроло[3,4-c]пиразол-2,5(4H,6H)-дикарбоксилат
[Химическая формула 119]
К раствору 11,7 г (62,8 ммоль) 1-(этилдиметилсилил)цикло-бутанкарбоновой кислоты, синтезированной таким же методом, как в справочном примере 5, в 81 мл дихлорметана добавляли 5,3 мл (62 ммоль) оксалилхлорида и 0,24 мл (3,1 ммоль) DMF в указанном порядке при охлаждении ледяной водой в атмосфере аргона и перемешивали при указанной выше температуре в течение 2 часов.
После завершения реакции, реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении при комнатной температуре с получением сконцентрированного остатка. Раствор полученного сконцентрированного остатка в 5 мл обезвоженного дихлорметана добавляли по каплям к раствору 6,73 г (20,7 ммоль) 5-третбутил 2-этил 3-амино-6,6-диметилпирроло[3,4-c]пиразол-2,5(4H,6H)-дикарбоксилата [синтезированного в соответствии со способом, описанном в публикации Journal of Medicinal Chemistry 2012, 55 (10), 4728-4739] и 18 мл (100 ммоль) DIPEA в 94 мл дихлорметана при охлаждении на водяной бане со льдом в атмосфере азота и перемешивали при указанной выше температуре в течение 16 часов.
После завершения реакции, реакционный раствор распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления 350 мл 5% водного раствора бисульфата калия, и затем водный слой подвергали два раза экстракции 150 мл дихлорметана. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния и затем фильтровали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток подвергали колоночной хроматографии на силикагеле (растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=86:14  53:47 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с получением 7,51 г названного соединения (выход: 74%) в виде бледно-желтого масла.
+
Масс-спектр (DUIS, m/z): 493 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 9,82-9,69 (м, 1H), 4,51-4,36 (м, 4H), 2,49-2,42 (м, 2H), 2,32-2,23 (м, 2H), 1,95-1,84 (м, 2H), 1,62-1,55 (м, 6H), 1,49-1,42 (м, 9H), 1,38-1,31 (м, 3H), 0,91 (т, J=7,9 Гц, 3H), 0,57 (кв, J=7,9 Гц, 2H), 0,09 (с, 6H).
[0289] (Справочный пример 7)
Этил 3-[1-(этилдиметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-6,6-диметил-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат
[Химическая формула 120]
К раствору 2,87 г (5,79 ммоль) 5-третбутил 2-этил 3-[1-(этилдиметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-6,6-диметилпирроло-[3,4-c]пиразол-2,5(4H,6H)-дикарбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 6, в 30 мл дихлорметана добавляли по каплям 2,10 мл (18,1 ммоль) 2,6-диметилпиридина и 3,20 мл (17,8 ммоль) триметилсилилтрифторметансульфоната в указанном порядке при 0C в атмосфере азота, и проводили реакцию при 0C в течение 2,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли дихлорметан, затем промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции дихлорметаном. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным солевым раствором, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Операцию добавления толуола с получением сконцентрированного остатка и концентрирования полученного вещества при пониженном давлении проводили два раза. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, силикагель, растворитель для элюирования: дихлорметан:метанол=98:2  95:5  92:8 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении, сушили при пониженном давлении с получением 2,17 г названного соединения (выход: 92%) в виде бледно-желтого масла.
+
Масс-спектр (DUIS, m/z): 393 [M+1].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 9,88 (с, 1H), 4,52 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 4,21 (с, 2H), 2,63-2,52 (м, 2H), 2,39-2,29 (м, 2H), 2,03-1,90 (м, 2H), 1,52-1,42 (м, 9H), 0,96 (т, J=7,9 Гц, 3H), 0,64 (кв, J=7,9 Гц, 2H), 0,13 (с, 6H).
[0290] (Справочный пример 8)
1-Фтор-3-(метокси-d3)-2-нитробензол
[Химическая формула 121]
2
3
К раствору 1,0 г (6,4 ммоль) 3-фтор-2-нитрофенола в 20 мл DMF добавляли 0,79 мл (13 ммоль) (H) метилйодида и 2,20 г (15,9 ммоль) безводного карбоната калия при 0C в атмосфере аргона, и проводили реакцию при 0C в течение 3 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным солевым раствором, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=95:5  75:25 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с получением 1,04 г названного соединения (выход: 94%) в виде бесцветного масла.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 175 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 7,64 (дт, J=6,7, 8,7 Гц, 1H), 7,21 (тд, J=1,0, 8,7 Гц, 1H), 7,15 (ддд, J=1,0, 8,7, 9,6 Гц, 1H).
[0291] (Справочный пример 9)
2-Фтор-6-(метокси-d3)анилин
[Химическая формула 122]
К раствору 1,04 г (5,97 ммоль) 1-фтор-3-(метокси-d3)-2-нитробензола, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 8, в 20 мл этанола добавляли 200 мг 10% Pd-C (содержащего 54,33% воды, PE-type фирмы N.E. Chemcat Corp.) при комнатной температуре в атмосфере аргона, и после замены атмосферы на атмосферу водорода, проводили реакцию при комнатной температуре в течение 4 часов при перемешивании.
После завершения реакции, реакционный раствор разбавляли этилацетатом, затем фильтровали через целит и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=53:47  45:55 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с получением 721 мг названного соединения (выход: 84%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 145 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 6,71-6,63 (м, 2H), 6,52 (дт, J=6,3, 8,3 Гц, 1H), 4,58 (с, 2H).
[0292] (Справочный пример 10)
2-Фтор-4-метокси-1-метилбензол
[Химическая формула 123]
К раствору 1,00 г (7,93 ммоль) 3-фтор-4-метилфенола в 20 мл обезвоженного DMF добавляли 3,30 г (23,9 ммоль) карбоната калия и 0,750 мл (12,0 ммоль) метилйодида при комнатной температуре в атмосфере аргона, и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 16 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли воду, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  80:20 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с получением 725 мг названного соединения (выход: 65%) в виде бесцветного масла.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 141 [M+1].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 7,10-7,01 (м, 1H), 6,62-6,55 (м, 2H), 3,77 (с, 3H), 2,21-2,18 (м, 3H).
[0293] (Справочный пример 11)
2-Фтор-6-метокси-3-метилбензойная кислота
[Химическая формула 124]
К раствору 725 мг (5,17 ммоль) 2-фтор-4-метокси-1-метилбензола, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 10, в 15 мл THF добавляли по каплям 5,70 мл (6,21 ммоль) 1,09 M раствора диизопропиламида лития в THF и гексане при -78C в атмосфере аргона, и проводили реакцию при -78C в течение 1 часа при перемешивании. Затем добавляли к нему в избытке сухой лед при -78C, и проводили реакцию при -78C в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, величину рН реакционного раствора, температуру которого поднимали до комнатной температуры, доводили до 4 путем добавления 1 N хлористоводородной кислоты, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: 1,2-дихлорэтан:метанол=100:0  90:10 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с получением 276 мг названного соединения (выход: 29%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 185 [M+1].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 7,32-7,21 (м, 1H), 6,70 (дд, J=1,0, 8,7 Гц, 1H), 3,94 (с, 3H), 2,28-2,20 (м, 3H).
[0294] (Справочный пример 12)
2-(Дифторметокси)-6-фторбензамид
[Химическая формула 125]
К раствору 400 мг (2,14 ммоль) 2-(дифторметокси)-6-фторбензонитрила [приобретенного у фирмы Enamine Ltd.] в 5 мл этанола и 5 мл DMSO добавляли 6,41 мл (6,41 ммоль) 1 M водного раствора гидроксида натрия и 1,10 мл (10,7 ммоль) 30 масс.% водного раствора пероксида водорода при 0C в атмосфере аргона, и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор тиосульфата натрия и перемешивали в течение 0,5 часа, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=80:20  60:40 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с получением 406 мг названного соединения (выход: 93%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (DUIS, m/z): 206 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 8,01 (уш.с, 1H), 7,75 (уш.с, 1H), 7,49 (дт, J=6,7, 8,4 Гц, 1H), 7,21 (т, J=73,7 Гц, 1H), 7,20-7,14 (м, 1H), 7,11-7,06 (м, 1H).
[0295] (Справочный пример 13)
Метил 2-этил-6-фторбензоат
[Химическая формула 126]
К раствору 2,01 г (8,63 ммоль) метил 2-бром-6-фторбензоата в 20 мл 1,4-диоксана и 4,0 мл воды добавляли 2,80 г (26,4 ммоль) карбоната натрия и 2,90 мл (16,9 ммоль) 4,4,5,5-тетраметил-2-винил-1,3,2-диоксаборолана в атмосфере азота и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут, при этом через реакционный раствор барботировали газообразный аргон. Затем добавляли 1,02 г (0,883 ммоль) тетракис(трифенилфосфин)-палладия(0) при комнатной температуре, и проводили реакцию при 90C в течение 4 часов при перемешивании.
После завершения реакции, реакционный раствор разбавляли водой, затем экстрагировали два раза этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, н-гексан:этилацетат=99:1  98:2  97:3), и фракцию, содержащую метил 2-фтор-6-винилбензоат, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 16 мл 1,4-диоксана и 4,0 мл воды добавляли 1,34 г (12,6 ммоль) карбоната натрия и 1,40 мл (8,16 ммоль) 4,4,5,5-тетраметил-2-винил-1,3,2-диоксаборолана в атмосфере азота и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут, при этом через реакционный раствор барботировали газообразный аргон. Затем добавляли 446 мг (0,386 ммоль) тетракис(трифенилфосфин)-палладия(0) при комнатной температуре, и проводили реакцию при 90C в течение 3 часов при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 1,10 мл (6,41 ммоль) 4,4,5,5-тетраметил-2-винил-1,3,2-диоксаборолана и 133 мг (0,115 ммоль) тетракис(трифенилфосфин)палладия(0), и проводили реакцию при 90C в течение 3 часов при перемешивании.
После завершения реакции, реакционный раствор разбавляли водой, затем экстрагировали два раза этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, н-гексан:этилацетат=99:1  98:2  97:3), и фракцию, содержащую метил 2-фтор-6-винилбензоат, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 20 мл этанола добавляли 0,20 г 10% Pd-C (содержащего 54% воды, PE-type фирмы N.E. Chemcat Corp.) при комнатной температуре в атмосфере азота. Атмосферу внутри реактора заменяли на атмосферу водорода, затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 0,5 часа при перемешивании. Внутри реактора опять создавали атмосферу азота, и затем добавляли 0,36 г 10% Pd-C (содержащего 54% воды, PE-type фирмы N.E. Chemcat Corp.) при комнатной температуре. Атмосферу внутри реактора опять заменяли на атмосферу водорода, затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, внутри реактора создавали атмосферу азота, и затем реакционный раствор фильтровали через целит. Удаленное твердое вещество промывали этилацетатом, и затем фильтрат целиком концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, н-гексан:этилацетат=99:1  98:2  97:3  96:4), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении с получением 664 мг названного соединения (выход: 42% [2 стадии]) в виде бесцветного масла.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 183 [M+1].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 7,32 (дт, J=5,8, 8,0 Гц, 1H), 7,07-7,01 (м, 1H), 6,98-6,90 (м, 1H), 3,94 (с, 3H), 2,71 (кв, J=7,6 Гц, 2H), 1,22 (т, J=7,6 Гц, 3H).
[0296] (Справочный пример 14)
2-Этил-6-фторбензойная кислота
[Химическая формула 127]
К раствору 659 мг (3,62 ммоль) метил 2-этил-6-фторбензоата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 13, в 10 мл этанола добавляли 4,0 мл (20 ммоль) 5 N водного раствора гидроксида натрия при комнатной температуре в атмосфере азота, и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 3,5 часов при перемешивании. Затем к реакционному раствору добавляли 2,0 мл (10 ммоль) 5 N водного раствора гидроксида натрия, и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 3,5 часов и при 60C в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении, и этанол отгоняли. К сконцентрированному остатку добавляли воду, затем промывали два раза толуолом. Величину рН водного слоя доводили до 2 путем добавления 6 N хлористоводородной кислоты, затем экстрагировали два раза этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении с получением 558 мг названного соединения (выход: 92%) в виде желтого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 169 [M+1].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 7,38 (дт, J=5,7, 8,1 Гц, 1H), 7,11-7,05 (м, 1H), 7,03-6,95 (м, 1H), 2,84 (кв, J=7,6 Гц, 2H), 1,27 (т, J=7,6 Гц, 3H).
[0297] (Справочный пример 15)
6-Фторбензофуран-7-карбоновая кислота
[Химическая формула 128]
К раствору 3,76 г (17,5 ммоль) 7-бром-6-фторбензофурана [синтезированного в соответствии со способом, описанном в патентном документе EP1204654, page 14-16] в 50 мл обезвоженного THF добавляли по каплям 12,3 мл (19,3 ммоль) 1,57 M раствора н-бутиллития в н-гексане при -78C в атмосфере азота, и проводили реакцию при -78C в течение 1 часа при перемешивании. Добавляли порциями 36,4 г (827 ммоль) сухого льда при -78C, и проводили реакцию при -78C в течение 1 часа при перемешивании и затем в течение 6,5 часов при поднятии температуры, в зависимости от обстоятельств, до комнатной температуры.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли воду и затем концентрировали при пониженном давлении, и THF отгоняли. Добавляли 1 N водный раствор гидроксида натрия с получением сконцентрированного остатка, который затем промывали два раза толуолом. Величину рН полученного водного слоя доводили до 2 путем добавления 6 N хлористоводородной кислоты, затем экстрагировали три раза этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении, и сушили при пониженном давлении с получением 2,91 г названного соединения (выход: 92%) в виде светло-оранжевого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 181 [M+1].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 7,78 (д, J=2,2 Гц, 1H), 7,75 (дд, J=4,8, 8,6 Гц, 1H), 7,13 (дд, J=8,6, 11,0 Гц, 1H), 6,83 (д, J=2,2 Гц, 1H).
[0298] (Справочный пример 16)
6-Фтор-2,3-дигидробензофуран-7-карбоновая кислота
[Химическая формула 129]
К раствору 729 мг (4,05 ммоль) 6-фторбензофуран-7-карбоновой кислоты, синтезированной таким же методом, как в справочном примере 15, в 15 мл этанола добавляли 255 мг 10% Pd-C (содержащего 54% воды, PE-type фирмы N.E. Chemcat Corp.) при комнатной температуре в атмосфере азота. Атмосферу внутри реактора заменяли на атмосферу водорода, затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1,5 часов при перемешивании. Внутри реактора опять создавали атмосферу азота, и затем добавляли 236 мг 10% Pd-C (containing 54% water, PE-type manufactured by N.E. Chemcat Corp.) при комнатной температуре. Атмосферу внутри реактора заменяли на атмосферу водорода, затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 6,5 часов при перемешивании. Внутри реактора опять создавали атмосферу азота, и затем добавляли 1,03 г 10% Pd-C (содержащего 54% воды, PE-type фирмы N.E. Chemcat Corp.) при комнатной температуре. Атмосферу внутри реактора заменяли на атмосферу водорода, затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, внутри реактора создавали атмосферу азота, и затем реакционный раствор фильтровали через целит. Удаленное твердое вещество промывали этилацетатом, и затем фильтрат целиком концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: 0,1 об.% ацетонитрилформиат:0,1 об.% водный раствор муравьиной кислоты=25:75 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении, затем отгоняли ацетонитрил. Полученный сконцентрированный остаток подвергали три раза экстракции этилацетатом, и полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении с получением 339 мг названного соединения (выход: 46%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 183 [M+1].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 7,31-7,25 (м, 1H), 6,66 (дд, J=8,2, 11,0 Гц, 1H), 4,82 (т, J=8,8 Гц, 2H), 3,28-3,19 (м, 2H).
[0299] (Справочный пример 17)
2-Хлор-6-циклопропилбензойная кислота
[Химическая формула 130]
К раствору 495 мг (3,05 ммоль) 2-циклопропилбензойной кислоты [приобретенной у фирмы WuXi AppTec] в 9,0 мл DMF добавляли 496 мг (3,71 ммоль) N-хлорсукцинимида и 70,3 мг (0,313 ммоль) ацетата палладия(II) при комнатной температуре в атмосфере азота, и проводили реакцию при 100C в течение 2,5 часов при перемешивании. Затем добавляли 70,3 мг (0,313 ммоль) ацетата палладия(II), и проводили реакцию при 100C в течение 1,5 часов при перемешивании. Затем добавляли 344 мг (2,58 ммоль) N- хлорсукцинимида, и проводили реакцию при 100C в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли воду, и затем нерастворимый материал отфильтровывали через целит. Фильтрат подвергали три раза экстракции этилацетатом, и затем полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 1,38 г сконцентрированного остатка.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 8,0 мл DMF добавляли 763 мг (5,71 ммоль) N-хлорсукцинимида и 150 мг (0,668 ммоль) ацетата палладия(II) при комнатной температуре в атмосфере азота, и проводили реакцию при 100C в течение 1,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли воду, и затем нерастворимый материал отфильтровывали через целит. Фильтрат подвергали три раза экстракции этилацетатом, и затем полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 1,43 г сконцентрированного остатка.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 10 мл DMF добавляли 227 мг (1,40 ммоль) 2-циклопропилбензойной кислоты [приобретенной у фирмы WuXi AppTec], 956 мг (7,16 ммоль) N-хлорсукцинимида и 246 мг (1,10 ммоль) ацетата палладия(II) при комнатной температуре в атмосфере азота, и проводили реакцию при 100C в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли воду, и затем нерастворимый материал отфильтровывали через целит. Фильтрат три раза подвергали экстракции этилацетатом, и затем полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, Фтор-фенил силикагель, растворитель для элюирования: 0,1 об.% ацетонитрилформиат:0,1 об.% водный раствор муравьиной кислоты=40:60), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с отгонкой ацетонитрила. Полученный сконцентрированный остаток подвергали три раза экстракции этилацетатом, и затем, полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток снова подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: 0,1 об.% ацетонитрилформиат:0,1 об.% водный раствор муравьиной кислоты=40:60), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с отгонкой ацетонитрила. Полученный сконцентрированный остаток подвергали три раза экстракции этилацетатом, и затем полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении с получением 178 мг названного соединения (выход: 20%).
+
Масс-спектр (CI, m/z): 197 [M+1].
1
2
2
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 7,33-7,23 (м, 2H), 6,97-6,91 (м, 1H), 2,03 (тт, J=5,2, 8,5 Гц, 1H), 1,08-0,93 (м, 2H), 0,81-0,68 (м, 2H).
[0300] (Справочный пример 18)
Метил 6-хлор-2-фтор-3-метилбензоат
[Химическая формула 131]
К раствору 3,00 г (15,9 ммоль) 6-хлор-2-фтор-3-метилбензойной кислоты в 80 мл DMF добавляли 7,26 г (22,3 ммоль) карбоната цезия и 1,19 мл (19,1 ммоль) метилйодида при комнатной температуре в атмосфере аргона, и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  95:5 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с получением 2,81 г названного соединения (выход: 87%) в виде бесцветного масла.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 203 [M+1].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 7,22-7,15 (м, 1H), 7,14-7,07 (м, 1H), 3,97 (с, 3H), 2,30-2,24 (м, 3H).
[0301] (Справочный пример 19)
Метил 2-фтор-3,6-диметилбензоат
[Химическая формула 132]
К раствору 1,00 г (4,94 ммоль) метил 6-хлор-2-фтор-3-метилбензоата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 18, в 20 мл 1,4-диоксана добавляли 2,07 мл (14,8 ммоль) триметилбороксина, 2,73 г (19,8 ммоль) безводного карбоната калия и 336 мг (0,493 ммоль) (1,3-диизопропилимидазол-2-илиден)(3-хлорпиридил)палладия(II) дихлорида при комнатной температуре в атмосфере аргона, и проводили реакцию при 100C в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, реакционный раствор разбавляли этилацетатом и фильтровали через мембранный фильтр. К фильтрату добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  95:5 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с получением 849 мг названного соединения (выход: 94%) в виде бесцветного масла.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 183 [M+1].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 7,12 (т, J=7,8 Гц, 1H), 6,89 (д, J=7,8 Гц, 1H), 3,93 (с, 3H), 2,34 (с, 3H), 2,27-2,22 (м, 3H).
[0302] (Справочный пример 20)
2-Фтор-3,6-диметилбензойная кислота
[Химическая формула 133]
К раствору 843 мг (4,63 ммоль) метил 2-фтор-3,6-диметилбензоата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 19, в 5 мл THF и 10 мл воды добавляли 332 мг (13,9 ммоль) гидроксида лития при комнатной температуре в атмосфере аргона, и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 15 часов и при 80C в течение 8 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор хлорида аммония, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=50:50  30:70 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с получением 565 мг названного соединения (выход: 73%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 169 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 13,42 (уш.с, 1H), 7,23 (т, J=7,9 Гц, 1H), 6,99 (д, J=7,9 Гц, 1H), 2,28 (с, 3H), 2,22-2,18 (м, 3H).
[0303] (Справочный пример 21)
2-Хлор-3-фтор-6-метилбензойная кислота
[Химическая формула 134]
К раствору 4,00 г (26,0 ммоль) 5-фтор-2-метилбензойной кислоты в 100 мл DMF добавляли 0,31 г (1,4 ммоль) ацетата палладия(II) в атмосфере аргона и затем добавляли несколькими порциями 4,35 г (32,6 ммоль) N-хлорсукцинимида при комнатной температуре, и проводили реакцию при 100C в течение 5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, реакционный раствор охлаждали до комнатной температуры и добавляли к нему воду. Полученное твердое вещество фильтровали через целит. Фильтрат подвергали экстракции этилацетатом, и полученный органический слой промывали водой и насыщенным водным раствором хлорида натрия в указанном порядке, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=70:30  30:70 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток снова подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=70:30  30:70 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с получением 182 мг названного соединения (выход: 4%) в виде белого твердого вещества.
-
Масс-спектр (DUIS, m/z): 187 [M-1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 13,91 (уш.с, 1H), 7,37 (т, J=8,9 Гц, 1H), 7,32-7,26 (м, 1H), 2,29-2,25 (м, 3H).
[0304] (Справочный пример 22)
Этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклопропан-карбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат
[Химическая формула 135]
К раствору 9,70 г (61,3 ммоль) 1-(триметилсилил)цикло-пропанкарбоновой кислоты [синтезированной в соответствии со способом, описанным в публикации J. Org. Chem., 1982 (47) 5, 893-895] в 120 мл обезвоженного дихлорметана добавляли 6,60 мл (76,9 ммоль) оксалилхлорида и 0,25 мл (3,2 ммоль) обезвоженного DMF в указанном порядке при 0C в атмосфере азота, и проводили реакцию при 0C в течение 2,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении.
Раствор полученного сконцентрированного остатка в 30 мл обезвоженного дихлорметана добавляли к раствору 19,0 мл (109 ммоль) DIPEA и 9,94 г (30,6 ммоль) 5-третбутил 2-этил 3-амино-6,6-диметилпирроло[3,4-c]пиразол-2,5(4H,6H)-дикарбоксилата [синтезированного в соответствии со способом, описанным в публикации Journal of Medicinal Chemistry 2012, 55 (10), 4728-4739] в 170 мл обезвоженного дихлорметана при 0C в атмосфере азота и проводили реакцию при 0C в течение 24 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия и перемешивали, затем экстрагировали один раз дихлорметаном и два раза этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком сушили над безводным сульфатом магния, затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  70:30 (по объему)), и фракцию, содержащую 5-третбутил 2-этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклопропанкарбоксамидо]пирроло[3,4-c]пиразол-2,5(4H,6H)-дикарбоксилат, концентрировали при пониженном давлении. Сконцентрированный остаток фракции, содержащей примеси, снова подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=90:10  75:25 (по объему)), объединяли с ранее полученной фракцией, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении.
К раствору полученного сконцентрированного остатка в 100 мл этилацетата добавляли 60,0 мл (240 ммоль) смеси 4 N хлористый водород/этилацетат при комнатной температуре в атмосфере азота, и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток суспендировали в диизопропиловом эфире, и суспензию перемешивали при комнатной температуре. Нерастворимый материал собирали фильтрацией и промывали диизопропиловым эфиром. Полученное твердое вещество растворяли в воде и затем добавляли к нему насыщенный водный раствор бикарбоната натрия и дихлорметан и перемешивали при комнатной температуре в течение 5 минут. После разделения на органический слой и водный слой, водный слой подвергали два раза экстракции дихлорметаном. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении с получением 8,15 г названного соединения (выход: 73% [2 стадияs]) в виде светло-оранжевого твердого вещества.
+
Масс-спектр (DUIS, m/z): 365 [M+1].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 10,02 (с, 1H), 4,53 (кв, J=7,2 Гц, 2H), 4,16 (с, 2H), 1,50-1,43 (м, 9H), 1,14-1,08 (м, 2H), 0,84-0,77 (м, 2H), 0,12 (с, 9H).
[0305] (Справочный пример 23)
2-Метил-2-(триметилсилил)пропановая кислота
[Химическая формула 136]
К 100 мл обезвоженного THF добавляли 200 мл (400 ммоль) 2 M раствора диизопропиламида лития в THF в атмосфере аргона и затем добавляли по каплям 4,7 мл (51 ммоль) изобутановой кислоты при 0C, и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 4 часов при перемешивании. Добавляли 10 мл (57 ммоль) гексаметилфосфортриамида при комнатной температуре, и затем добавляли по каплям 29 мл (230 ммоль) хлортриметилсилана при -78C и перемешивали в течение 24 часов, постепенно повышая при этом температуру до комнатной температуры.
После завершения реакции, раствор подкисляли путем добавления к реакционному раствору 25 мл метанола, 50 мл воды и 2 N хлористоводородной кислоты в указанном порядке, затем экстрагировали диэтиловым эфиром. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток растворяли в 2 N водном растворе гидроксида натрия и промывали этилацетатом. Полученный водный слой подкисляли путем добавления 1 N хлористоводородной кислоты, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток суспендировали в н-гексане и подвергали воздействию ультразвука, и затем нерастворимый материал собирали фильтрацией. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: 1,2-дихлорэтан:метанол=100:0  99:1 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, и ранее собранное фильтрацией твердое вещество объединяли, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении с получением 2,66 г названного соединения (выход: 32%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 161 [M+1].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 1,22 (с, 6H), 0,08 (с, 9H).
[0306] (Справочный пример 24)
5-третбутил 2-этил 6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметил-силил)пропанамидо]пирроло[3,4-c]пиразол-2,5(4H,6H)-дикарбоксилат
[Химическая формула 137]
К раствору 888 мг (5,54 ммоль) 2-метил-2-(триметилсилил)-пропановой кислоты, синтезированной таким же методом, как в справочном примере 23, в 15 мл дихлорметана добавляли 0,594 мл (6,93 ммоль) оксалилхлорида и 0,021 мл (0,27 ммоль) DMF при 0C в атмосфере аргона, и проводили реакцию при 0C в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении.
Раствор полученного сконцентрированного остатка в 2 мл 1,4-диоксана добавляли по каплям к раствору 899 мг (2,77 ммоль) 5-третбутил 2-этил 3-амино-6,6-диметилпирроло[3,4-c]пиразол-2,5(4H,6H)-дикарбоксилата [синтезированного в соответствии со способом, описанным в публикации Journal of Medicinal Chemistry 2012, 55 (10), 4728-4739] и 1,93 мл (11,1 ммоль) DIPEA в 5 мл 1,4-диоксана при 0C, и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия, затем экстрагировали этилацетатом. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=95:5  80:20 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с получением 903 мг названного соединения (выход: 70%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (DUIS, m/z): 467 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 10,13-10,03 (м, 1H), 4,49-4,39 (м, 4H), 1,62-1,55 (м, 6H), 1,49-1,42 (м, 9H), 1,35 (т, J=7,1 Гц, 3H), 1,25 (с, 6H), 0,04 (с, 9H).
[0307] (Справочный пример 25)
Этил 6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметилсилил)пропанамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат
[Химическая формула 138]
К раствору 903 мг (1,94 ммоль) 5-третбутил 2-этил 6,6-диметил-3-[2-метил-2-(триметилсилил)пропанамидо]пирроло[3,4-c]-пиразол-2,5(4H,6H)-дикарбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 24, в 15 мл дихлорметана добавляли 0,67 мл (5,8 ммоль) 2,6-лутидина и 1,05 мл (5,82 ммоль) триметилсилилтрифторметансульфоната при 0C в атмосфере аргона, и проводили реакцию при 0C в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия, затем экстрагировали дихлорметаном. Полученный органический слой промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, DIOL силикагель, растворитель для элюирования: метанол:1,2-дихлорэтан=0:100  10:90 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с получением 566 мг названного соединения (выход: 80%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 367 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 10,01 (с, 1H), 4,41 (кв, J=7,2 Гц, 2H), 3,91 (с, 2H), 1,34 (т, J=7,2 Гц, 3H), 1,28 (с, 6H), 1,23 (с, 6H), 0,03 (с, 9H).
[0308] (Справочный пример 26)
Метил 2-{[(бензилокси)карбонил](2-цианоэтил)амино}-2-метилпропаноат
[Химическая формула 139]
К раствору 5,00 г (29,4 ммоль) метил 2-[(2-цианоэтил)амино]-2-метилпропаноата [синтезированного в соответствии со способом, описанным в публикации J. Med. Chem., 1968, 11 (3), 616-618] в 23 мл толуола добавляли 15,5 мл (90,7 mol) DIPEA и 32,0 мл 30-35% раствора бензилхлорформиата в толуоле [приобретенного у фирмы Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.] в указанном порядке при комнатной температуре в атмосфере аргона, и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1,5 часов и затем при 50C в течение 1,5 часов при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, и затем добавляли к нему 4,80 мл (44,1 ммоль) N,N-диметилэтан-1,2-диамина при комнатной температуре и перемешивали в течение 2,5 часов, поддерживая постоянную температуру.
После завершения реакции, реакционный раствор выливали в 2 N хлористоводородную кислоту и перемешивали. Водный и органический слой разделяли, и органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия в указанном порядке, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=84:16  50:50 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с получением 8,32 г названного соединения (выход: 93%) в виде бесцветного масла.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 305 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 7,43-7,28 (м, 5H), 5,07 (с, 2H), 3,64 (т, J=6,7 Гц, 2H), 3,50 (уш.с, 3H), 2,76 (т, J=6,7 Гц, 2H), 1,45 (с, 6H).
[0309] (Справочный пример 27)
Бензил 4-циано-3-гидрокси-2,2-диметил-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-карбоксилат
[Химическая формула 140]
К 52 мл (52 ммоль) 1 моль/л раствора третбутоксида калия в THF, нагретого до 60C, добавляли по каплям раствор 12,1 г (39,7 ммоль) метил 2-{[(бензилокси)карбонил](2-цианоэтил)амино}-2-метилпропаноата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 26, в 30 мл обезвоженного THF в потоке аргона и перемешивали в течение 1 часа при кипячении с обратным холодильником.
После завершения реакции, величину рН реакционного раствора, охлажденного до комнатной температуры, доводили до < 2 путем добавления 90 мл воды и 2 N хлористоводородной кислоты, затем экстрагировали два раза 100 мл этилацетата. Полученный таким образом органический слой целиком промывали 100 мл воды и 100 мл насыщенного водного раствора хлорида натрия в указанном порядке, затем сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с отгонкой половины количества растворителя. К полученному раствору добавляли 12 г активированного угля, перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток разбавляли 10 мл диизопропилового эфира, добавляли к нему 50 мл н-гексана, и осажденное твердое вещество измельчали и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Твердый компонент собирали фильтрацией и сушили при пониженном давлении при 50C с получением 8,27 г названного соединения (выход: 76%) в виде бледно-желтого твердого вещества.
+
Масс-спектр (DUIS, m/z): 273 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 12,32 (уш.с, 1H), 7,46-7,25 (м, 5H), 5,18-5,02 (м, 2H), 4,24-4,02 (м, 2H), 1,51-1,35 (м, 6H).
[0310] (Справочный пример 28)
Бензил 3-амино-6,6-диметил-4,6-дигидропирроло[3,4-c]-пиразол-5(1H)-карбоксилат
[Химическая формула 141]
К раствору 200 мг (0,734 ммоль) бензил 4-циано-3-гидрокси-2,2-диметил-2,5-дигидро-1H-пиррол-1-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 27, в 5 мл этанола добавляли 0,336 мл (5,87 ммоль) уксусной кислоты при комнатной температуре при перемешивании в токе аргона и перемешивали при комнатной температуре в течение 5 минут. Затем добавляли по каплям 0,178 мл (3,66 ммоль) моногидрата гидразина при комнатной температуре при перемешивании и перемешивали в течение 12 часов при кипячении с обратным холодильником.
После завершения реакции, величину рН реакционного раствора, охлажденного до комнатной температуры, доводили 8 путем добавления 15 мл воды и затем водного раствора бикарбоната натрия, затем экстрагировали три раза этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=50:50  0:100 (по объему)  1,2-дихлорэтан:метанол=80:20 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с получением 141 мг названного соединения (выход: 67%) в виде бледно-желтой пены.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 287 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 11,20 (уш.с, 1H), 7,45-7,28 (м, 5H), 5,18-5,05 (м, 2H), 5,05-4,77 (м, 2H), 4,28-4,14 (м, 2H), 1,58- 1,46 (м, 6H).
[0311] (Справочный пример 29)
5-Бензил 2-этил 3-амино-6,6-диметилпирроло[3,4-c]пиразол-2,5(4H,6H)-дикарбоксилат
[Химическая формула 142]
К раствору 400 мг (1,40 ммоль) бензил 3-амино-6,6-диметил-4,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-5(1H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 28, в 4 мл обезвоженного THF добавляли 0,594 мл (3,49 ммоль) DIPEA при комнатной температуре в токе аргона и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 3 минут при перемешивании. Затем добавляли по каплям 0,133 мл (1,40 ммоль) этилхлорформиата при 0C, и проводили реакцию при 0C в течение 30 минут при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли воду, и смешанный раствор подвергали два раза экстракции этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=71:29  30:70 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с получением 200 мг названного соединения (выход: 40%) в виде белой пены и 190 мг изомера названного соединения (5-бензил 1-этил 3-амино-6,6-диметилпирроло[3,4-c]пиразол-1,5(4H,6H)-дикарбоксилата) (выход: 38%) в виде белой пены.
Названное соединение (5-бензил 2-этил 3-амино-6,6-диметил-пирроло[3,4-c]пиразол-2,5(4H,6H)-дикарбоксилат)
+
Масс-спектр (CI, m/z): 359 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 7,45-7,29 (м, 5H), 6,63-6,49 (м, 2H), 5,19-5,04 (м, 2H), 4,41-4,30 (м, 2H), 4,28-4,15 (м, 2H), 1,62-1,49 (м, 6H), 1,36-1,28 (м, 3H).
Изомер названного соединения (5-бензил 1-этил 3-амино-6,6-диметилпирроло[3,4-c]пиразол-1,5(4H,6H)-дикарбоксилат)
+
Масс-спектр (CI, m/z): 359 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 7,45-7,29 (м, 5H), 5,78-5,65 (м, 2H), 5,19-5,05 (м, 2H), 4,36-4,17 (м, 4H), 1,79-1,66 (м, 6H), 1,33-1,25 (м, 3H).
[0312] (Справочный пример 30)
5-Бензил 2-этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]пирроло[3,4-c]пиразол-2,5(4H,6H)-дикарбоксилат
[Химическая формула 143]
К раствору 885 мг (5,14 ммоль) 1-(триметилсилил)циклобутан-карбоновой кислоты, синтезированной таким же методом, как в справочном примере 1, в 20 мл обезвоженного дихлорметана добавляли 0,530 мл (6,17 ммоль) оксалилхлорида и 0,020 мл (0,26 ммоль) DMF в указанном порядке при 0C в атмосфере аргона, и проводили реакцию при 0C в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении.
Раствор полученного сконцентрированного остатка в 10 мл обезвоженного дихлорметана добавляли по каплям к раствору 2,25 мл (12,9 ммоль) DIPEA и 920 мг (2,57 ммоль) 5-бензил 2-этил 3-амино-6,6-диметилпирроло[3,4-c]пиразол-2,5(4H,6H)-дикарбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 29, в 10 мл обезвоженного дихлорметана при 0C в атмосфере аргона, и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 24 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли насыщенный водный раствор бикарбоната натрия, затем экстрагировали два раза дихлорметаном. Полученный таким образом органический слой целиком промывали 5% водным раствором бисульфата калия и насыщенным водным раствором хлорида натрия в указанном порядке, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 2, силикагель, растворитель для элюирования: н-гексан:этилацетат=100:0  70:30 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с получением 991 мг названного соединения (выход: 75%) в виде бледно-желтой пены.
+
Масс-спектр (DUIS, m/z): 513 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 9,78-9,70 (м, 1H), 7,45-7,29 (м, 5H), 5,20-5,08 (м, 2H), 4,63-4,50 (м, 2H), 4,47-4,37 (м, 2H), 2,58-2,41 (м, 2H), 2,31-2,18 (м, 2H), 1,95-1,80 (м, 2H), 1,67-1,51 (м, 6H), 1,39-1,29 (м, 3H), 0,12-0,06 (м, 9H).
[0313] (Справочный пример 31)
Этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутан-карбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат
[Химическая формула 144]
К раствору 150 мг (0,293 ммоль) 5-бензил 2-этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]пирроло[3,4-c]пиразол-2,5(4H,6H)-дикарбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 30, в 4 мл 2-пропанола добавляли 75 мг 10% Pd-C (содержащего 50% воды, PE-type фирмы N.E. Chemcat Corp.) и 1 мл уксусной кислоты в указанном порядке при комнатной температуре. Атмосферу внутри реактора заменяли на атмосферу водорода, затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, атмосферу внутри реактора заменяли на атмосферу азота, и затем к реакционному раствору добавляли этилацетат и фильтровали через целит. К фильтрату добавляли водный раствор бикарбоната натрия и перемешивали, затем экстрагировали два раза этилацетатом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, растворитель для элюирования: 1,2-дихлорэтан:метанол=100:0  86:14 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с получением 101 мг названного соединения (выход: 91%) в виде белой пены.
+
Масс-спектр (DUIS, m/z): 379 [M+1].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 9,86 (с, 1H), 4,52 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 4,22 (с, 2H), 2,65-2,52 (м, 2H), 2,38-2,26 (м, 2H), 2,03-1,88 (м, 2H), 1,50-1,43 (м, 9H), 0,15 (с, 9H).
[0314] (Справочный пример 32)
Третбутил 2-(2-ацетил-5-фторфенокси)ацетат
[Химическая формула 145]
К раствору 1,00 г (6,49 ммоль) 4'-фтор-2'-гидрокси-ацетофенона в 15 мл ацетонитрила добавляли 1,20 мл (8,18 ммоль) третбутилбромацетата и 1,40 г (10,1 ммоль) карбоната калия при перемешивании в атмосфере аргона, и затем проводили реакцию при 80C в течение 2 часов.
После завершения реакции, охлажденный реакционный раствор выливали в воду, затем экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали два раза водой, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Добавляли н-гексан с получением сконцентрированного остатка и снова концентрировали при пониженном давлении. Добавляли н-гексан с получением сконцентрированного остатка и затем подвергали обработке ультразвуком, и осажденное твердое вещество собирали фильтрацией. Полученное твердое вещество промывали н-гексаном и сушили при пониженном давлении при комнатной температуре с получением 1,45 г названного соединения (выход: 83%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 269 [M+1].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 7,84 (дд, J=7,0, 8,8 Гц, 1H), 6,74 (ддд, J=2,3, 7,7, 8,8 Гц, 1H), 6,53 (дд, J=2,3, 10,5 Гц, 1H), 4,60 (с, 2H), 2,70 (с, 3H), 1,50 (с, 9H).
[0315] (Справочный пример 33)
6-Фтор-3-метилбензофуран-2-карбоновая кислота
[Химическая формула 146]
К раствору 0,30 г (1,1 ммоль) третбутил 2-(2-ацетил-5-фторфенокси)ацетата, синтезированного в справочном примере 32, в 6 мл обезвоженного этанола добавляли 0,350 мл (1,75 ммоль) 28% раствора метоксида натрия в метаноле при перемешивании в атмосфере аргона, и проводили реакцию при 80C в течение 20,5 часов.
После завершения реакции, реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении, полученный остаток растворяли путем добавления воды, и затем величину pH доводили приблизительно 2 с помощью 2 N хлористоводородной кислоты. Осажденное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали водой и затем сушили при пониженном давлении при 40C с получением 106 мг названного соединения (выход: 49%) в виде красновато-желтого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 195 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 14,27-12,66 (м, 1H), 7,82 (дд, J=5,5, 8,8 Гц, 1H), 7,61 (дд, J=2,3, 9,4 Гц, 1H), 7,25 (ддд, J=2,3, 8,8, 9,8 Гц, 1H), 2,52 (с, 3H).
[0316] (Справочный пример 34)
6-Фтор-3-метилбензофуран
[Химическая формула 147]
К раствору 99,0 мг (0,510 ммоль) 6-фтор-3-метилбензофуран-2-карбоновой кислоты, синтезированной в справочном примере 33, а 1 мл DMSO добавляли 15,2 мг (0,055 ммоль) карбоната серебра(I) и 3 мкл (0,05 ммоль) уксусной кислоты, и затем проводили реакцию при 120C в течение 18 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к охлажденному реакционному раствору добавляли 2 мл 2 N хлористоводородной кислоты и перемешивали, затем экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали два раза насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, н-гексан:этилацетат=99:1  97:3 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении с получением 28,4 мг названного соединения (выход: 37%) в виде бледно-желтого масла.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 151 [M+1].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 7,42 (дд, J=5,5, 8,5 Гц, 1H), 7,39 (кв, J=1,4 Гц, 1H), 7,16 (дд, J=2,3, 9,0 Гц, 1H), 7,00 (ддд, J=2,3, 8,5, 9,5 Гц, 1H), 2,23 (д, J=1,4 Гц, 3H).
[0317] (Справочный пример 35)
6-Фтор-3-метилбензофуран-7-карбоновая кислота
[Химическая формула 148]
К 150 мг (1,00 ммоль) 6-фтор-3-метилбензофурана, синтезированный таким же методом, как в справочном примере 34, в 5 мл обезвоженного THF добавляли по каплям 1,0 мл (1,6 ммоль) 1,6 M раствор н-бутиллитий в н-гексане при -78C при перемешивании в атмосфере аргона и затем перемешивали при этой же температуре в течение 0,5 часа. Затем добавляли 2,00 г (45 ммоль) сухого льда, и затем проводили реакцию при -78C в течение 10 минут и затем в течение 1 часа, при этом, в зависимости от обстоятельств, поднимая температуру до комнатной температуры.
После завершения реакции, к реакционному раствору добавляли воду и затем концентрировали при пониженном давлении, и THF отгоняли. Добавляли 2 N водный раствор гидроксида натрия с получением сконцентрированного остатка, затем экстрагировали толуолом. Величину pH полученного водного слоя доводили до приблизительно 2 путем добавления 2 N хлористоводородной кислоты, затем экстрагировали два раза этилацетатом. Органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 3, ODS силикагель, растворитель для элюирования: 0,1 об.% ацетонитрилформиат:0,1 об.% водный раствор муравьиной кислоты=20:80  95:5 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении с получением 14,6 мг названного соединения (выход: 8%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 195 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 13,56 (уш.с, 1H), 7,90-7,85 (м, 1H), 7,77 (дд, J=5,1, 8,6 Гц, 1H), 7,23 (дд, J=8,6, 11,0 Гц, 1H), 2,22 (д, J=1,4 Гц, 3H).
[0318] (Справочный пример 36)
Этил 5-[(6-фтор-3-метилбензофуран-7-ил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат
[Химическая формула 149]
К 123 мг (0,634 ммоль) 6-фтор-3-метилбензофуран-7-карбоновой кислоты, синтезированный таким же методом, как в справочном примере 35, добавляли 2 мл толуола, затем проводили азеотропное обезвоживание при пониженном давлении. К суспензии полученного остатка в 2 мл обезвоженного толуола добавляли 0,150 мл (1,08 ммоль) триэтиламина, 0,171 мл (0,794 ммоль) DPPA и затем 0,5 мл дихлорметана при комнатной температуре в атмосфере аргона, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 40 минут и затем при 85C в течение 80 минут при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, затем добавляли несколькими порциями к раствору 203 мг (0,536 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 3 мл обезвоженного толуола при 0C, и проводили реакцию при 0C в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, реакционный раствор распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления воды и этилацетата, и затем органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, н-гексан:этилацетат=70:30  44:56 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении с получением 298 мг названного соединения (выход: 98%) в виде белой пены.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 570 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 9,79 (с, 1H), 8,29 (с, 1H), 7,79-7,76 (м, 1H), 7,43 (дд, J=4,8, 8,5 Гц, 1H), 7,15 (дд, J=8,5, 10,5 Гц, 1H), 4,79 (с, 2H), 4,44 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 2,56-2,45 (м, 2H), 2,32-2,23 (м, 2H), 2,21 (д, J=1,3 Гц, 3H), 1,96-1,86 (м, 2H), 1,66 (с, 6H), 1,36 (т, J=7,1 Гц, 3H), 0,13 (с, 9H).
[0319] (Справочный пример 37)
Третбутил 6-фторбензофуран-7-карбоксилат
[Химическая формула 150]
К раствору 500 мг (2,78 ммоль) 6-фторбензофуран-7-карбоновой кислоты, синтезированной в справочном пример 15, в 5 мл пиридина добавляли несколькими порциями при перемешивании 1167 мг (6,12 ммоль) п-толуолсульфонилхлорида при 0C в атмосфере аргона и затем перемешивали при 0C в течение 15 минут. Затем добавляли 0,260 мл (2,74 ммоль) третбутанола при 0C, затем температуру поднимали до комнатной температуры, и полученную смесь перемешивали в течение 1,5 часов. Затем добавляли 0,270 мл (2,84 ммоль) третбутанола, и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 16 часов.
После завершения реакции, реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении, добавляли 20 мл воды с получением сконцентрированного остатка, и затем величину pH доводили до 8 с помощью 2 N водного раствора гидроксида натрия. После разделения на органический слой и водный слой путем добавления 40 мл этилацетата, органический слой промывали три раза 10 мл 5% водного раствора бисульфата калия и один раз 10 мл насыщенного водного раствора хлорида натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния и фильтровали, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении с получением 632 мг названного соединения (выход: 96%) в виде коричневого масла.
+
Масс-спектр (EI, m/z): 236 [M].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 7,71 (д, J=2,3 Гц, 1H), 7,61 (дд, J=4,9, 8,5 Гц, 1H), 7,05 (дд, J=8,5, 10,8 Гц, 1H), 6,77 (д, J=2,3 Гц, 1H), 1,65 (с, 9H).
[0320] (Справочный пример 38)
Третбутил 2-хлор-6-фторбензофуран-7-карбоксилат
[Химическая формула 151]
К раствору 632 мг (2,67 ммоль) третбутил 6-фторбензофуран-7-карбоксилата, синтезированного в справочном примере 37, в 5 мл обезвоженного DMF добавляли 505 мг (3,78 ммоль) N-хлор-сукцинимида при комнатной температуре при перемешивании в атмосфере аргона, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 1 часа, при 50C в течение 6 часов, и затем при комнатной температуре в течение 15,5 часов при перемешивании.
После завершения реакции, реакционный раствор распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления толуола и воды, и затем водный слой один раз подвергали экстракции толуолом. Полученный таким образом органический слой целиком промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, 5% водным раствором тиосульфата натрия, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия в указанном порядке, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, н-гексан:этилацетат=99:1  97:3 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении с получением 0,20 г названного соединения (выход: 28%) в виде бесцветного масла.
+
Масс-спектр (EI, m/z): 270 [M].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 7,51 (дд, J=4,8, 8,6 Гц, 1H), 7,05 (дд, J=8,6, 10,9 Гц, 1H), 6,58 (с, 1H), 1,65 (с, 9H).
[0321] (Справочный пример 39)
2-Хлор-6-фторбензофуран-7-карбоновая кислота
[Химическая формула 152]
К раствору 200 мг (0,739 ммоль) третбутил 2-хлор-6-фторбензофуран-7-карбоксилата, синтезированного в справочном примере 38, в 1,5 мл дихлорметана добавляли 0,141 мл (1,84 ммоль) трифторуксусной кислоты при комнатной температуре в атмосфере аргона, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 20 часов при перемешивании.
После завершения реакции, реакционный раствор продували газообразным азотом для удаления растворителя. Добавляли смесь диизопропиловый эфир/н-гексан=1/1 (по объему) с получением сконцентрированного остатка, и затем подвергали его обработке ультразвуком, и полученное твердое вещество собирали фильтрацией. Полученное твердое вещество промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении при 30C с получением 120 мг названного соединения (выход: 76%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 215 [M+1].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 7,63 (дд, J=4,8, 8,7 Гц, 1H), 7,13 (дд, J=8,7, 11,0 Гц, 1H), 6,64 (с, 1H).
[0322] (Справочный пример 40)
Этил 5-[(2-хлор-6-фторбензофуран-7-ил)карбамоил]-6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидро-пирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилат
[Химическая формула 153]
К 116 мг (0,541 ммоль) 2-хлор-6-фторбензофуран-7-карбоновой кислоты, синтезированной в справочном примере 39, добавляли 2 мл толуола, затем подвергали азеотропному обезвоживанию при пониженном давлении. К суспензии полученного остатка в 2 мл обезвоженного толуола добавляли 0,140 мл (1,00 ммоль) триэтиламина, 0,155 мл (0,720 ммоль) DPPA и затем 0,5 мл дихлорметана при комнатной температуре в атмосфере аргона, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 40 минут и затем при 85C в течение 1,5 часов при перемешивании. Реакционный раствор охлаждали, затем добавляли несколькими порциями к раствору 182 мг (0,481 ммоль) этил 6,6-диметил-3-[1-(триметилсилил)циклобутанкарбоксамидо]-5,6-дигидропирроло[3,4-c]пиразол-2(4H)-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 3, в 3 мл обезвоженного толуола при 0C, и проводили реакцию при 0C в течение 1 часа при перемешивании.
После завершения реакции, реакционный раствор распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления воды и этилацетата, и затем органический слой промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, н-гексан:этилацетат=70:30  45:55 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении с получением 210 мг названного соединения (выход: 74%) в виде белой пены.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 590 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 9,78 (с, 1H), 8,39 (с, 1H), 7,44 (дд, J=4,8, 8,6 Гц, 1H), 7,20 (дд, J=8,6, 10,7 Гц, 1H), 7,05 (с, 1H), 4,78 (с, 2H), 4,43 (кв, J=7,1 Гц, 2H), 2,57-2,42 (м, 2H), 2,31-2,20 (м, 2H), 1,95-1,84 (м, 2H), 1,66 (с, 6H), 1,35 (т, J=7,1 Гц, 3H), 0,12 (с, 9H).
[0323] (Справочный пример 41)
Третбутил 2-бром-6-фторбензофуран-7-карбоксилат
[Химическая формула 154]
К раствору 2,26 г (9,57 ммоль) третбутил 6-фторбензофуран-7-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 37, в 30 мл ацетонитрила и 10 мл обезвоженного DMF добавляли 1,87 г (10,5 ммоль) N-бром-сукцинимида при 50C в атмосфере аргона, и затем проводили реакцию при 50C в течение 1 часа при перемешивании. Затем добавляли еще 1,81 г (10,2 ммоль) N-бромсукцинимида, и затем проводили реакцию при 50C в течение 0,5 часа.
После завершения реакции, реакционный раствор распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления этилацетата и воды. Полученный органический слой промывали один раз 5% водным раствором тиосульфата натрия и два раза насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, затем сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, н-гексан:этилацетат=99:1  97:3 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток снова подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, н-гексан:этилацетат=99:1  98:2 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении с получением 861 мг названного соединения (выход: 29%) в виде бледно-желтого масла.
+
Масс-спектр (EI, m/z): 314 [M].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 7,52 (дд, J=4,8, 8,7 Гц, 1H), 7,05 (дд, J=8,7, 10,8 Гц, 1H), 6,73 (с, 1H), 1,65 (с, 9H).
[0324] (Справочный пример 42)
Третбутил 6-фтор-2-метилбензофуран-7-карбоксилат
[Химическая формула 155]
К гетерогенному раствору 500 мг (1,59 ммоль) третбутил 2-бром-6-фторбензофуран-7-карбоксилата, синтезированного таким же методом, как в справочном примере 41, в 22 мл толуола и 1,32 мл воды добавляли 1,50 г (7,07 ммоль) безводного фосфата калий и 290 мг (4,84 ммоль) метилбороновой кислоты, и затем проводили замену атмосферы на атмосферу аргона при пониженном давлении при охлаждении на бане сухой лед/ацетон. Затем добавляли 10,7 мг (0,048 ммоль) ацетата палладия(II) и 35,0 мг (0,098 ммоль) бутил ди-1-адамантилфосфина, и затем проводили реакцию при 100C в течение 2 часов при перемешивании.
После завершения реакции, к охлажденному реакционному раствору добавляли 5 г целита, перемешивали в течение 10 минут и затем фильтровали, и твердый остаток промывали этилацетатом. Полученный фильтрат распределяли между органическим слоем и водным слоем путем добавления воды, и затем органический слой сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный сконцентрированный остаток подвергали препаративной колоночной хроматографии (установка 1, силикагель, н-гексан:этилацетат=99:1  96:4 (по объему)), и фракцию, содержащую требуемое соединение, концентрировали при пониженном давлении и сушили при пониженном давлении с получением 240 мг названного соединения (выход: 60%) в виде бледно-желтого масла.
+
Масс-спектр (EI, m/z): 250 [M].
1
3
H-ЯМР спектр (400 МГц, CDCl) : 7,46 (дд, J=4,9, 8,5 Гц, 1H), 6,96 (дд, J=8,5, 10,9 Гц, 1H), 6,35 (кв, J=1,0 Гц, 1H), 2,49-2,47 (м, 3H), 1,65 (с, 9H).
[0325] (Справочный пример 43)
6-Фтор-2-метилбензофуран-7-карбоновая кислота
[Химическая формула 156]
К раствору 237 мг (0,947 ммоль) третбутил 6-фтор-2-метилбензофуран-7-карбоксилата, синтезированного в справочном примере 42, в 1,5 мл обезвоженного дихлорметана добавляли 0,181 мл (2,37 ммоль) трифторуксусной кислоты при комнатной температуре в атмосфере аргона, и затем проводили реакцию при комнатной температуре в течение 4 часов при перемешивании. Затем добавляли еще 1,0 мл обезвоженного дихлорметана и 0,181 мл (2,37 ммоль) трифторуксусной кислоты, и затем дополнительно проводили реакцию в течение 13,5 часов.
После завершения реакции, реакционный раствор концентрировали при пониженном давлении. Добавляли диизопропиловый эфир/н-гексан=1/1 (по объему) с получением сконцентрированного остатка, и затем подвергали остаток обработке ультразвуком, и полученное твердое вещество собирали фильтрацией, промывали н-гексаном и затем сушили при пониженном давлении при 40C с получением 147 мг названного соединения (выход: 80%) в виде белого твердого вещества.
+
Масс-спектр (CI, m/z): 195 [M+1].
1
6
H-ЯМР спектр (400 МГц, DMSO-d) : 7,68 (дд, J=5,2, 8,6 Гц, 1H), 7,15 (дд, J=8,6, 11,1 Гц, 1H), 6,67-6,62 (м, 1H), 2,46-2,45 (м, 3H).
[0326] [Пример испытания 1]
Испытание на ингибирование фермента CDK7
2
33
33
Буферный раствор готовили путем смешения буферного раствора N-2-гидроксиэтилпиперазин-N'-2-этансульфоновой кислоты (буферный раствор HEPES) (рН 7,4), дитиотреитола (DTT), Triton X-100 и хлорида магния (MgCl). Раствор 500 мкМ [-P]ATФ готовили путем разбавления раствора 10 мМ АТФ и выпускаемого промышленностью раствора [-P]ATP (фирмы PerkinElmer, Inc., код NEG-302H) буферным раствором. Раствор CDK7 готовили путем разбавления выпускаемой промышленностью CDK7 (фирмы Carna Biosciences, Inc., № по каталогу 04-108) буферным раствором. Раствор субстрата готовили путем разбавления основного белка миелина (MBP) буферным раствором. Что касается получения реакционного раствора, то смешивали буферный раствор, раствор CDK7 и раствор субстрата при 4C с получением реакционного раствора.
33
Реакцию фермента CDK7 проводили путем добавления 5 мкл раствора испытуемого соединения, приготовленного в смеси 10% DMSO/90% дистиллированная вода для инъекций, и 40 мл реакционного раствора в микропробирку объемом 1,5 мл при 4C и предварительной инкубации микропробирки при 25C в течение 60 минут в инкубаторе с водяным термостатом. Затем реакцию проводили при 30C в течение 20 минут путем добавления 5 мкл раствора 500 мкМ [-P]ATФ. После реакции, в каждую микропробирку добавляли 10% водный раствор трихлоруксусной кислоты (TCA) при охлаждении до 4C и смешивали в вортекс-миксере с целью прерывания реакции. Полученную реакционную смесь выдерживали при 4C в течение 10 минут и затем центрифугировали, и надосадочную жидкость отбрасывали. Затем к осадку добавляли 2% водный раствор трихлоруксусной кислоты (TCA), смешивали в вортекс-миксере и затем центрифугировали, и надосадочную жидкость отбрасывали. Эту операцию промывки выполняли два раза. После промывки, осадки растворяли в 1 н водном растворе гидроксида натрия (NaOH) и измеряли количество энергии (радиоактивность) продукта реакции с помощью жидкого сцинтилляционного счетчика.
33
50
Ингибирующую активность испытуемого соединения в отношении CDK7 рассчитывали в виде концентрации испытуемого соединения, при которой происходит ингибирование 50% количества P, связанного с MBP (величина IC), используя программу EXSUS (version 8.1.0. фирмы CAC Exicare Corp.).
Величину Ki рассчитывали по следующей формуле, где S представляет собой концентрацию АТФ, содержащегося в реакционном растворе, а Km представляет собой константу Михаэлиса-Ментена:
50
Ki=IC/(1+S/Km)
[0327] В этом исследовании, соединения по настоящему изобретению продемонстрировали высокую ингибирующую активность в отношении CDK7. Например, величины Ki соединений, представленных соединениями № I-965, II-137, II-169, II-199, II-290, II-1049, III-137, III-169, III-199, III- 299, III-1049, IV-1, IV-3, IV-9, IV-7, IV-15, IV-21, IV-23, IV-27, IV-39, IV-45, IV-51, IV-63, IV-75, IV-79, IV-87, IV-93, IV-99, IV-101, IV-103, IV-105, IV-111, IV-113, IV-121, 125, IV-127, IV-129, IV-137, IV-153, IV-161, IV-169, IV-177, IV-185, IV-199, IV-207, IV-215, IV-299, IV-231, IV-239, IV-247, IV-357, IV-359, IV-361, IV-367, IV-375, IV-377, IV-379, IV-381, IV-389, 597, IV-599, IV-609, IV-615, IV-629, IV-689, IV-669, IV-703, IV-709, IV-747, IV-997, IV-1019, IV-1035, IV-1043, IV-1045, IV-1049, IV-1059, IV-1061 и IV-1063, составляли 50 нМ или ниже.
[0328] [Пример испытания 2]
Испытание на ингибирование фермента CDK2
2
33
33
33
Буферный раствор готовили путем смешения буферного раствора N-2-гидроксиэтилпиперазин-N'-2-этансульфоновой кислоты (буферный раствор HEPES) (рН 7,4), дитиотреитола (DTT), Triton X-100 и хлорида магния (MgCl). Раствор 500 мкМ [-P]ATФ готовили путем разбавления раствора 10 мМ АТФ и выпускаемого промышленностью раствора [-P]ATP (фирмы PerkinElmer, Inc., код NEG-302H) буферным раствором. Раствор CDK2 готовили путем разбавления выпускаемой промышленностью CDK2 (фирмы Invitrogen Corp., № по каталогу PV3267) буферным раствором. Раствор субстрата готовили путем разбавления основного белка миелина (MBP) буферным раствором. Что касается приготовления реакционного раствора, то смешивали буферный раствор, 500 мкМ [-P]ATФ, раствор CDK2 и раствор субстрата при 4C с получением реакционного раствора.
Реакцию фермента CDK2 проводили путем добавления 5 мкл раствора испытуемого соединения, приготовленного в смеси 10% DMSO/90% дистиллированная вода для инъекций, и 45 мкл реакционного раствора в микропробирку объемом 1,5 мл при 4C и проведения реакции в микропробирке при 30C в течение 20 минут в инкубаторе с водяным термостатом. После реакции, в каждую микропробирку добавляли 10% водный раствор трихлоруксусной кислоты (TCA) при охлаждении до 4C и смешивали в вортекс-миксере с целью прерывания реакции. Полученную реакционную смесь выдерживали при 4C в течение 10 минут и затем центрифугировали, и надосадочную жидкость отбрасывали. Затем к осадку добавляли 2% водный раствор трихлоруксусной кислоты (TCA), смешивали в вортекс-миксере и затем центрифугировали, и надосадочную жидкость отбрасывали. Эту операцию промывки выполняли два раза. После промывки, осадки растворяли в 1 н водном растворе гидроксида натрия (NaOH) и измеряли количество энергии (радиоактивность) продукта реакции с помощью жидкого сцинтилляционного счетчика.
33
50
Ингибирующую активность испытуемого соединения в отношении CDK2 рассчитывали в виде концентрации испытуемого соединения, при которой происходит ингибирование 50% количества P, связанного с MBP (величина IC), используя программу EXSUS (version 8.1.0. фирмы CAC Exicare Corp.).
Величину Ki рассчитывали по следующей формуле, где S представляет собой концентрацию АТФ, содержащегося в реакционном растворе, а Km представляет собой константу Михаэлиса-Ментена:
50
Ki=IC/(1+S/Km)
[0329] В этом исследовании, соединения по настоящему изобретению продемонстрировали низкую ингибирующую активность в отношении CDK2 Например, величины Ki CDK2 ингибирующей активности соединений, представленных соединениями № I-1000, I-1036, II-137, II-169, II-199, II-1049, III-137, III-169, III- 199, III-1049, IV-1, IV-3, IV-9, IV-15, IV-21, IV-27, IV-39, IV-45, IV-75, IV-87, IV-105, IV-113, IV-127, IV-129, IV-137, IV-161, IV-169, IV-177, IV-185, IV-199, IV-207, IV-215, IV-231, 239, IV-247, IV-299, IV-357, IV-359, IV-361, IV-367, IV-377, IV-379, IV-381, IV-389, IV-597, IV-609, IV-615, IV-629, IV-689, IV-669, IV-703, IV-709, IV-747, IV-997, IV-1043, IV-1045, IV-1049, IV-1059, 1061 и IV-1063, составляли 1000 нМ или выше. Одним словом, соединения по настоящему изобретению характеризовались высокой селективностью при ингибировании CDK7 в сравнении с ингибированием CDK2.
[0330] [Пример испытания 3]
Испытание на ингибирование PLK1 (Polo-подобной киназы)
3
2
33
33
33
Буферный раствор готовили путем смешения буферного раствора 3-морфолинопропансульфоновой кислоты (буферный раствор MOPS) (рН 7,0), дитиотреитола (DTT) и ацетата магния (Mg(CHCOO)). Раствор 1 мМ [-P]ATP готовили путем разбавления раствора 10 мМ АТФ и выпускаемого промышленностью раствора [-P]ATP (фирмы PerkinElmer, Inc., код NEG-302H) буферным раствором. Раствор PLK1 готовили путем разбавления выпускаемой промышленностью PLK1 (фирмы Carna Biosciences, Inc., № по каталогу 05-157) с буферным раствором. Раствор субстрата готовили путем разбавления казеина буферным раствором. Что касается приготовления реакционного раствора, то смешивали буферный раствор, 500 мкМ [-P]ATФ, раствор PLK1 и раствор субстрата смешивали при 4C с получением реакционного раствора.
Реакцию фермента PLK1 проводили путем добавления 5 мкл раствора испытуемого соединения, приготовленного в смеси 10% DMSO/90% дистиллированная вода для инъекций, и 45 мкл реакционного раствора в микропробирку объемом 1,5 мл при 4C и проведения реакции в микропробирке при 30C в течение 20 минут в инкубаторе с водяным термостатом. После реакции в каждую микропробирку добавляли 10% водный раствор трихлоруксусной кислоты (TCA) при охлаждении до 4C и смешивали в вортекс-миксере с целью прерывания реакции. Полученную реакционную смесь выдерживали при 4C в течение 10 минут и затем центрифугировали, и надосадочную жидкость отбрасывали. Затем к осадку добавляли 2% водный раствор трихлоруксусной кислоты (TCA), смешивали в вортекс-миксере и затем центрифугировали, и надосадочную жидкость отбрасывали. Эту операцию промывки выполняли два раза. После промывки, осадки растворяли в 1 н водном растворе гидроксида натрия (NaOH) и измеряли количество энергии (радиоактивность) продукта реакции с помощью жидкого сцинтилляционного счетчика.
33
50
Ингибирующую активность испытуемого соединения в отношении PLK1 рассчитывали в виде концентрации испытуемого соединения, при которой происходит ингибирование 50% количества P, связанного с казеином (величина IC), используя программу EXSUS (version 8.1.0. фирмы CAC Exicare Corp.).
Величину Ki рассчитывали по следующей формуле, где S представляет собой концентрацию АТФ, содержащегося в реакционном растворе, а Km представляет собой константу Михаэлиса-Ментена:
50
Ki=IC/(1+S/Km)
[0331] В этом исследовании, соединения по настоящему изобретению продемонстрировали низкую ингибирующую активность в отношении PLK1. Например, величины Ki PLK1 ингибирующей активности соединений, представленных соединениями № I-1000, I-1036, II-137, II-169, II-199, II-1049, III-137, III-169, III- 199, III-1049, IV-3, IV-15, IV-21, IV-27, IV-39, IV-45, IV-87, IV-105, IV-113, IV-121, IV-127, IV-129, IV-137, IV-153, IV-161, IV-169, IV-177, IV-185, IV-199, IV-207, IV-215, IV-231, IV-239, 247, IV-299, IV-357, IV-359, IV-361, IV-367, IV-377, IV-379, IV-381, IV-389, IV-597, IV-609, IV-615, IV-629, IV-669, IV-689, IV-703, IV-709, IV-747, IV-997, IV-1043, IV-1045, IV-1049, IV-1059, IV-1061 и IV -1063, составляли 5000 нМ или выше. Одним словом, соединения по настоящему изобретению характеризовались высокой селективностью при ингибировании CDK7 в сравнении с ингибированием PLK1.
[0332] [Пример испытания 4]
Испытание на ингибирование роста клеток рака толстого кишечника (HCT-116) человека
Измерение действия, ингибирующего рост клеток рака толстого кишечника человека, проводили методом, который являлся модификацией метода, описанного в публикации Simak et al., Cancer Research, 69, 6208 (2009).
3
Линию клеток рака толстого кишечника человека (HCT-116, полученную от фирмы DS Pharma Biomedical Co., Ltd.) культивировали в среде McCoy's 5A (производимой фирмой Thermo Fisher Scientific, Inc.), содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS) (производимой фирмой Thermo Fisher Scientific, Inc.) и смесь 1% пенициллин/стрептомицин/амфотерицин B (производимой фирмой Thermo Fisher Scientific, Inc.), и высевали в 96-луночном планшете при плотности от 0,5 до 2,010 клеток/лунка. После культивирования в течение ночи в инкубаторе с диоксидом углерода, среду на следующий день заменяли свежей средой и добавляли испытуемое соединение, растворенное в DMSO (конечная концентрация DMSO: 0,1%), и выдерживали в инкубаторе с диоксидом углерода. После культивирования в течение 3 дней, измеряли поглощение, используя набор для анализа In Vitro Toxicology Assay Kit Sulforhodamine B based (набор реагентов для исследования цитотоксичности in vitro на основе сульфородамина В фирмы Sigma-Aldrich Co. LLC).
50
Рассчитывали степень ингибирования роста клеток при каждой концентрации, исходя из концентрации испытуемого соединения и поглощения сульфородамина B, и рассчитывали концентрацию испытуемого соединения, необходимую для достижения ингибирования роста 50% клеток (величина GI), используя программу EXSUS (version 8.1.0. фирмы CAC Exicare Corp.).
50
[0333] В этом исследовании, соединения по настоящему изобретению продемонстрировали высокую активность ингибирования роста клеток линии HCT-116. Например, величины GI соединений, представленных соединениями № II-137, II-169, II-199, II-1049, III-137, III-169, III-199, III-299, III-1049, IV- 1, IV-3, IV-4, IV-5, IV-9, IV-7, IV-11, IV-15, IV-21, IV-23, IV-25, IV-27, IV-39, IV-45, IV-51, IV-63, IV-75, IV-79, IV-81, IV-87, IV-93, IV-99, IV-101, IV-103, IV-105, 111, IV-113, IV-121, IV-123, IV-125, IV-127, IV-129, IV-137, IV-153, IV-161, IV-169, IV-177, IV-185, IV-191, IV-197, IV-199, IV-207, IV-213, IV-215, IV-231, IV-239, IV-245, IV-247, IV-299, IV-357, 359, IV-361, IV-367, IV-375, IV-377, IV-379, IV-381, IV-389, IV-597, IV-599, IV-609, IV-615, IV-629, IV-669, IV-689, IV-703, IV-709, IV-747, IV-997, IV-1035, IV-1043, IV-1045, IV-1049, IV-1059, IV-1061 и IV-1063, составляли 100 нМ или ниже.
[0334] [Пример испытания 5]
Испытание на ингибирование роста опухоли у бестимусной мыши, которой подкожно трансплантировали клетки рака толстого кишечника человека (HCT116)
8
Линию клеток рака толстого кишечника человека (HCT116) (HCT-116) культивировали в среде McCoy's 5A, содержащей 10% FBS и смесь 1% пенициллин/стрептомицин/амфотерицин B, и доводили до плотности 1,0  10 клеток/мл с помощью PBS или раствора Хэнкса (HBSS(-)). Полученную суспензию клеток подкожно вводили при 0,1 мл/мышь в правую часть живота самок мышей линии BALB (поставляемых фирмой Charles River Laboratories Japan, Inc.). После выращивания в течение определенного периода, измеряли электронными штангенциркулями наибольший диаметр (мм) и наименьший диаметр (мм) опухоли, и рассчитывали объем опухоли по следующей формуле:
3
Объем опухоли (мм)=(наибольший диаметр)  (наименьший диаметр)  (наименьший диаметр)  0,5
3
Отбирали мышей, у которых объем опухоли находился в диапазоне от 50 до 200 мм, и группировали их таким образом, чтобы объем опухоли в группе был почти одинаковым, затем многократно перорально вводили испытуемое соединение или только растворитель, и измеряли массу тела и объем опухоли. Суспендировали испытуемое соединение в водном растворе 0,5 масс.% метилцеллюлозы (0,5% MC) (фирмы Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) и многократно перорально вводили в дозе 10 мл/кг. Объем опухоли в контрольной группе принимали за 100% и рассчитывали степень ингибирования увеличения объема опухоли (%) для каждой дозы испытуемого соединения.
[0335] В этом исследовании, соединения по настоящему изобретению демонстрировали высокую активность по ингибированию роста опухоли. Например, соединения, представленные соединениями № IV-1, IV-3, IV-15, IV-21, IV-113, IV-121, IV-127, IV-199, IV-215, IV-299, IV- 359, IV-361, IV-379, IV-389, IV-597, IV-669, IV-1049 и IV-1063, характеризовались степенью ингибирования увеличения объема опухоли 50% или более при дозе 100 мг/кг.
[0336] [Пример испытания 6]
Испытание на ингибирования продукции IL-2, индуцированной PBMC CD3/CD28 человека
6
Из крови, собранной у здорового взрослого человека в присутствии гепарина, отделяли и собирали PBMC (мононуклеарные клетки периферической крови), используя синтетическую среду для фракционирования клеток крови Ficoll-Paque (фирмы GE Healthcare Japan Corp.). В 96-луночный планшет для активации T-клеток с помощью анти-CD3 человека (фирмы Becton, Dickinson and Company) добавляли в количестве 100 мкл/лунка среду RPMI1640, содержащую 10% FBS, смесь 1% пенициллин/стрептомицин/амфотерицин B, основные аминокислоты и пировиноградную кислоту, и содержащую испытуемое соединение, растворенное в DMSO, и 2 мкг/мл CD28, и затем добавляли в количестве 100 мкл/лунка суспензия PBMC, приготовленную таким образом, чтобы число клеток составляло 2  10 клеток/мл (конечная концентрация DMSO: 0,1%). В лунки, в которые не вводили испытуемое соединение, аналогично добавляли среду RPMI1640, содержащую 10% FBS и содержащую 0,1% DMSO и 2 мкг/мл CD28. После культивирования в течение 2 дней в инкубаторе с диоксидом углерода, собирали надосадочную жидкость. Собранную культуральную надосадочную жидкость хранили при -20C до проведения измерения содержания IL-2.
50
Для измерения содержания IL-2 в культуральной надосадочной жидкости использовали сэндвич-набор ELISA (Quantikine Human IL-2, фирмы R & D Systems, Inc.). Содержание IL-2 в каждом образце рассчитывали по калибровочной кривой стандарта IL-2, прилагаемой к набору. Количество IL-2, продуцируемое в результате стимуляции с помощью CD3/CD28 в случае добавления только DMSO, принимали за 100%, и рассчитывали степень ингибирования продуцирования IL-2 для каждой концентрации испытуемого соединения. Рассчитывали концентрацию испытуемого соединения, необходимую для ингибирования 50% продукции IL-2 (величина IC), из концентрации добавляемого испытуемого соединения и степень ингибирования продуцирования IL-2 с помощью испытуемого соединения, используя программу EXSUS (version 8.1.0. фирмы CAC Exicare Corp.).
50
[0337] В этом исследовании, соединения по настоящему изобретению демонстрировали высокую ингибирующую активность в отношении продукции IL-2. Например, величины IC соединений № IV-3, IV-21, IV-113, IV-127, IV-161, IV-215, IV-299, IV-361, IV-379, IV-669 и IV-1049 составляли 100 нМ или ниже.
[0338] [Пример испытания 7]
Исследование ингибирования роста кератиноцитов человека
Измерение ингибирующего действия в отношении роста кератиноцитов человека проводили методом, который являлся модификацией метода, описанного в публикации of Schafer et al., British Journal of Pharmacology, 159, 842 (2011).
3
Кератиноциты человека (NHEK-Neo Pooled, фирмы Lonza Group AG) культивировали в среде для выращивания кератиноцитов KGM-Gold из набора Bullet Kit (фирмы Lonza Group AG) и добавляли в 96-луночный планшет в количестве 210 клеток/лунка. После культивирования в течение ночи в инкубаторе с диоксидом углерода, в лунки планшета добавляли испытуемое соединение, растворенное в DMSO (конечная концентрация DMSO: 0,1%), и выдерживали в инкубаторе с диоксидом углерода. После культивирования в течение 2 дней, измеряли поглощение, используя набор для подсчета клеток Cell Counting Kit-8 (фирмы Dojindo Laboratories).
50
Рассчитывали степень ингибирования роста клеток для каждой концентрации, исходя из концентрации испытуемого соединения и данных поглощения набора Cell Counting Kit-8, и рассчитывали концентрацию испытуемого соединения, необходимую для ингибирования 50% роста клеток (величина GI), используя программу EXSUS (version 8.1.0. фирмы CAC Exicare Corp.).
50
[0339] В этом исследовании, соединения по настоящему изобретению демонстрировали высокую ингибирующую активность в отношении роста кератиноцитов человека и, например, величины GI соединений № IV-129, IV-215, IV-247, IV-361 и IV -379 составляли 500 нМ или ниже.
[0340] [Пример испытания 8]
Испытание на торможение процесса утолщения ушной раковины с использованием модели псориаза на мышах, индуцированного имикимодом
Испытание на модели псориаза, индуцированного имикимодом, проводили методом, который являлся модификацией метода, описанного в публикации Leslie van der Fits et al., J. Immunol. 182, 5836 (2009).
В качестве лабораторных животных использовали самок мышей линии BALB/c (поставляемых фирмой Charles River Laboratories Japan, Inc.). В день начала испытания, измеряли толщину правой ушной раковины мышей с помощью толщиномера (фирмы TECLOCK Corp.). Наносили или перорально вводили испытуемое соединение или растворитель, и через определенное время наносили на внутреннюю часть правой ушной раковины определенное количество крема Beselna Cream 5% (содержащего 5% имиквимода, фирмы Mochida Pharmaceutical Co., Ltd.). Нанесение или пероральное введение испытуемого соединения или растворителя и нанесение имиквимода проводили в течение определенного периода времени, и в последний день исследования измеряли толщину правой ушной раковины. Толщину правых ушных раковин сравнивали между группой, в которой вводили растворитель, и группой, в которой вводили испытуемое соединение, и рассчитывали степень ингибирования. Увеличение толщины ушной раковины в группе, в которой вводили растворитель, растворителем, в последний день исследования принимали за 100%, и рассчитывали степень ингибирования увеличения (%) для каждой дозы испытуемого соединения.
[0341] В этом исследовании, соединения по настоящему изобретению демонстрировали высокую активность по торможению процесса утолщения ушной раковины и, например, соединения № IV-129, IV-137, IV-169, IV-199, IV-215, IV-247, IV-299 и IV-389 характеризовались 50% или более степенью ингибирования при нанесении 0,01% раствора соединений в метаноле.
[0342] [Пример испытания 9]
Испытание на ингибирование роста клеток рака молочной железы (MCF-7)
Измерение ингибирования роста раковых клеток молочной железы человека проводили методом, который являлся модификацией метода, описанного в публикации Simak et al., Cancer Research, 69, 6208 (2009).
3
Линию клеток рака молочной железы человека (MCF-7, полученную от фирмы DS Pharma Biomedical Co., Ltd.) культивировали в среде MEM, содержащей 10% FBS и не являющимися основными аминокислоты, и добавляли в лунки в 96-луночного планшета при плотности 3  10 клеток/лунка. После культивирования в течение ночи в инкубаторе с диоксидом углерода, на следующий день среду заменяли свежей средой MEM, содержащей 10% FBS и не являющимися главными аминокислоты, и добавляли испытуемое соединение, растворенное в DMSO (конечная концентрация DMSO: 0,1%), и выдерживали в инкубаторе с диоксидом углерода. После культивирования в течение 3 дней, измеряли поглощение, используя набор для анализа In Vitro Toxicology Assay Kit Sulforhodamine B based (набор реагентов для исследования цитотоксичности in vitro на основе сульфородамина В, фирмы Sigma-Aldrich Co. LLC).
50
Рассчитывали степень ингибирования роста клеток для каждой концентрации, исходя из концентрации испытуемого соединения и поглощения сульфородамина B, и рассчитывали концентрацию испытуемого соединения, необходимую для ингибирования роста 50% клеток (величина GI), используя программу EXSUS (version 8.1.0. фирмы CAC Exicare Corp.).
[0343] [Пример испытания 10]
Испытание на снижение степени распространенности стволовых клеток рака толстого кишечника человека (CD44/CD133-положительная клетка)
Измерение стволовых клеток рака толстого кишечника человека проводили методом, который являлся модификацией метода, описанного в публикации Youzhi et al., Proceedings of the National Academy of Sciences, 112, 6, 1839 (2015).
6
50
Линию клеток рака толстого кишечника человека (HCT-116) культивировали в среде McCoy's 5A, содержащей 10% FBS и смесь 1% пенициллин/стрептомицин/амфотерицин B, и добавляли в лунки 6-луночного планшета с плотностью 1  10 клеток/лунка. После культивирования в течение ночи в инкубаторе с диоксидом углерода, добавляли испытуемое соединение, растворенное в DMSO (конечная концентрация DMSO: 0,1%), и выдерживали в инкубаторе с диоксидом углерода. После культивирования в течение 7 дней, клетки собирали с использованием смеси трипсин/ЭДТА и процеживали через одно ситечко, и затем добавляли FITC-меченое антитело CD44 (Miltenyi Biotec KK) и PE-меченное антитело CD133 (Miltenyi Biotec KK), и проводили реакцию при комнатной температуре в течение 15 минут в темноте. Измеряли степень распространенности клеток, положительных как к CD44, так и к CD133, при каждой концентрации методом проточной цитометрии. Степень распространенности клеток, положительных как к CD44, так и к CD133, в образце, обработанном растворителем, принимали за 100, и рассчитывали концентрацию испытуемого соединения и величину снижения степени распространенности клеток, положительных как к CD44, так и к CD133, и рассчитывали концентрацию испытуемого соединения, необходимую для ингибирования 50% степени распространенности клеток (величина GI), используя программу EXSUS (version 8.1.0. фирмы CAC Exicare Corp.).
[0344] В этом исследовании, соединения по настоящему изобретению демонстрировали высокую величину снижения степени распространенности CD44/CD133-положительных клеток и, например, растворы 1 мкМ соединений № IV-199, IV- 215, IV-299, IV-361 и IV-379 характеризовались величиной снижения 50% или более.
[0345] [Пример испытания 11]
Испытание на ингибирование способности стволовых клеток рака толстого кишечника человека к самообновлению
Сферическое культивирование стволовых клеток рака толстого кишечника человека проводили методом, который являлся модификацией метода, описанного в публикации Youzhi et al., Proceedings of the National Academy of Sciences, 112, 6, 1839 (2015).
3
Линию клеток рака толстого кишечника человека (HCT-116) культивировали в среде McCoy's 5A, содержащей 10% FBS и смесь 1% пенициллин/стрептомицин/амфотерицин B. Клетки собирали из колбы, ресуспендировали в среде Cancer Stem Premium (фирмы ProMab Biotechnologies, Inc.) и добавляли в лунки 96-луночного планшета с ультранизким связыванием при плотности от 1 до 10  10 клеток/лунка. После культивирования в течение 2-7 дней в инкубаторе с диоксидом углерода, добавляли испытуемое соединение, растворенное в DMSO (конечная концентрация DMSO: 0,1%), и выдерживали в инкубаторе с диоксидом углерода. После культивирования в течение 1-3 дней, измеряли поглощение, используя набор Cell Counting kit-8 (фирмы Dojindo Laboratories).
50
Рассчитывали степень ингибирования роста клеток для каждой концентрации, исходя из концентрации испытуемого соединения и поглощения набора Cell Counting kit-8, и рассчитывали концентрацию испытуемого соединения, необходимого для ингибирования роста 50% клеток (величина IC), используя программу EXSUS (version 8.1.0. фирмы CAC Exicare Corp.).
[0346] [Пример испытания 12]
Испытание на ингибирования продукции IL-17, индуцированной стимулирующим коктейлем из различных PBMC человека
Из крови, собранной у здорового взрослого человека в присутствии гепарина, отделяли и собирали PBMC (мононуклеарные клетки периферической крови), используя синтетическую среду для фракционирования клеток крови Ficoll-Paque (фирмы GE Healthcare Japan Corp.). Собранные PBMC дополнительно культивировали в колбе в течение определенного времени, и затем собирали несросшиеся клетки в надосадочной жидкости и использовали их в виде суспензии T-клеток.
5
В 96-луночный планшет для активации T-клеток с помощью анти-CD3 человека (фирмы Becton, Dickinson and Company) добавляли в количестве 100 мкл/лунка среду RPMI1640, содержащую 10% FBS, смесь 1% пенициллин/стрептомицин/амфотерицин B, основные аминокислоты и пировиноградную кислоту, и содержащую испытуемое соединение, растворенное в DMSO, и человеческое антитело CD28, человеческое антитело IFN-, человеческий IL-4, человеческий IL-6, человеческий IL-23, человеческий IL-1 и человеческий TGF-. Затем добавляли в каждую лунку 100 мкл суспензии T-клеток, доведенной до 2  10 клеток/мл (конечная концентрация DMSO: 0,1%). В лунки, в которые не вводили испытуемое соединение, добавляли только DMSO. После культивирования в течение 5 дней в инкубаторе с диоксидом углерода, собирали надосадочную жидкость и хранили при -20C до проведения измерения содержания IL-17.
50
Для измерения содержания IL-17 в культуральной надосадочной жидкости использовали сэндвич-набор ELISA (Quantikine Human IL-2, фирмы R & D Systems, Inc.). Содержание IL-17 в каждом образце рассчитывали по калибровочной кривой стандарта IL-17, прилагаемой к набору. Количество IL-17, продуцируемое коктейлем из различных стимуляторов в случае добавления только DMSO, принимали за 100%, и рассчитывали степень ингибирования продуцирования IL-17 для каждой концентрации испытуемого соединения. Рассчитывали концентрацию испытуемого соединения, необходимую для ингибирования 50% продукции IL-17 (величина IC), из концентрации добавляемого испытуемого соединения и степень ингибирования продуцирования IL-17 с помощью испытуемого соединения, используя программу EXSUS (version 8.1.0. фирмы CAC Exicare Corp.).
50
[0347] В этом исследовании, соединения по настоящему изобретению демонстрировали высокую ингибирующую активность в отношении продукции IL-17. Например, величины IC соединений № IV-3, IV-129, IV-137, IV-199, IV-215, IV-247, IV-299, IV-361, IV-379, IV-389, IV-669 и IV-1049 составляли 100 нМ или ниже.
[0348] [Пример испытания 13]
Испытание на уменьшение отечности лапы в модели адъювантного артрита на крысах
В качестве лабораторных животных использовали самок крыс линии LEW (поставляемых фирмой Charles River Laboratories Japan, Inc.). Для приготовления моделей артрита, в подушечки стопы правых задних лап крыс под ингаляционной анестезией изофлураном (фирмы Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) подкожно вводили в качестве вызывающего воспаление материала адъювант, полученный из убитых нагреванием бактерий Mycobacterium butyricum (фирмы Difco Laboratories Ltd.), и жидкий парафин (фирмы Wako Pure Chemical Industries, Ltd.). Кроме того, для формирования группы животных, не подвергавшихся обработке, животным вводили аналогичным образом жидкий парафин, не содержащий убитых бактерий. Испытуемое соединение суспендировали в водном растворе 0,5 масс.% метилцеллюлозы (0,5% МС) (фирмы Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) и перорально многократно вводили в дозе 10 мл/кг, начиная со дня инъекции адъюванта. Кроме того, в контрольной группе, крысам со смоделированным артритом вместо испытуемого соединения вводили только растворитель. После введения адъюванта измеряли несколько раз объемы правых задних лап и левых задних лап с помощью измерителя объема лапы (TK-101CMP фирмы Unicom Co., Ltd.), и рассчитывали степень отечности по следующей формуле:
Степень отечности (%)=[{(объем лапы на момент измерения) - (объем лапы перед началом испытания)}/(объем лапы перед началом испытания)]  100
Затем рассчитывали степень уменьшения отечности относительно контрольной группы по следующей формуле:
Степень уменьшения отечности (%)=[1 - {(степень отечности в группе, в которой вводили испытуемое соединение) - (степень отечности в группе, в которой животных не подвергали обработке)}/{степень отечности в контрольной группе) - (степень отечности в группе, в которой животных не подвергали обработке)}]  100
[0349] [Пример испытания 14]
Испытание на уменьшение опухания с использованием модели на мышах артрита, индуцированного коллагеном
Испытание на модели артрита у мышей, индуцированного коллагеном, проводили методом, являющимся модификацией метода, описанного в публикации Mihara et al., British Journal of Pharmacology, 154, 153 (2008).
В качестве лабораторных животных использовали самцов мышей линии DBA/1J (поставляемых фирмой Japan SLC, Inc.). Для приготовления моделей артрита, в основания хвостов мышей под ингаляционной анестезией изофлураном (фирмы Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) вводили дважды подкожно адъювант, полученный из раствора коллагена типа II (Collagen Research Center), и адъювант Adjuvant Complete Freund (фирмы Difco Laboratories Ltd.) с целью сенсибилизации.
Кроме того, для формирования контрольной группы, животным вводили аналогичным образом адъювант Adjuvant Complete Freund (фирмы Difco Laboratories Ltd.), не содержащий коллаген типа II. Испытуемое соединение суспендировали в водном растворе 0,5 масс.% метилцеллюлозы (0,5% МС) (фирмы Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) и перорально многократно вводили в дозе 10 мл/кг, начиная со дня введения бустер-дозы, после определенного периода времени от дня инъекции для начальной сенсибилизации. Кроме того, в сравнительной группе, вместо испытуемого соединения вводили только растворитель.
В течение периода проведения испытания, проводили оценку эффективности испытуемого соединения в баллах, характеризующих опухание конечностей (0 баллов: отсутствие болезни, 1 балл: опухание и покраснение или слабое опухание в небольших суставах только одного из пальцев стопы и пальцев передних лап, 2 балла: умеренное опухание в небольших суставах двух или более пальцев стопы и пальцев передних лап, 3 балла: сильное опухание лодыжки или запястья передней лапы, 4 балла: общее сильное опухание). Суммарное количество баллов в группе, которой вводили растворитель, на последний день испытания принимали за 100%, и рассчитывали степень уменьшения оценки в баллах (%) для каждой дозы испытуемого соединения.
[0350] В этом исследовании, соединения по настоящему изобретению демонстрировали высокую ингибирующую активность в отношении опухания, и, например, соединение № IV-361 характеризовалось степенью ингибирования 50% или более при дозе 100 мг/кг.
[0351] [Пример испытания 15]
35-55
Испытание на ослабление паралича с использованием модели на мышах экспериментального MOG-идуцированного аутоиммунного энцефаломиелита (многократное введение)
35-55
Испытание на модели на мышах экспериментального MOG-идуцированного аутоиммунного энцефаломиелита (EAE) проводили методом, описанным в публикации Namiki et al., The Journal of Biological Chemistry, 287, 29, 24228-24238 (2012).
35-55
В качестве лабораторных животных использовали самцов мышей линии C57BL/6J (поставляемых фирмой Charles River Laboratories Japan, Inc.). Для приготовления моделей EAE на мышах, в 4 боковые поверхности конечностей мышей подкожно вводили адъювант, полученный из жидкости M. Tuberculosis H37RA (фирмы Difco Laboratories Ltd.), измельченный и суспендированный в адъюванте Adjuvant Incomplete Freund (фирмы Difco Laboratories Ltd.), и раствор синтетического пептида MOG, и в яремную вену вводили раствор коклюшного токсина (фирмы List Biological Laboratories, Inc.) (для начальной сенсибилизации).
На следующий день после подготовки моделей EAE на мышах, снова вводили мышам раствор коклюшного токсина в яремную вену. Испытуемое соединение суспендировали в водном растворе 0,5 масс.% метилцеллюлозы (0,5% МС) (фирмы Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) и перорально многократно вводили в дозе 10 мл/кг, начиная со дня инъекции для начальной сенсибилизации. Кроме того, в контрольной группе, в модели EAE на мышах вместо испытуемого соединения вводили только растворитель.
В течение периода проведения испытания, проводили оценку эффективности испытуемого соединения в баллах, характеризующих патологические состояния при EAE (0 баллов: отсутствие болезни, 0,5 баллов: частичный паралич хвоста, 1,0 балл: полный паралич хвоста, 1,5 балла: снижение рефлекса выпрямления, 2,0 балла: нарушение рефлекса выпрямления, 2,5 балла: слабость задней конечности, 3,0 балла: паралич задней конечности, 3,5 балла: паралич обеих задних конечностей, 4,0 балла: паралич одной передней конечности, 4,5 балла: паралич обеих передних конечностей, 5 баллов: агония или смерть). Суммарное количество баллов в группе, которой вводили растворитель, на последний день испытания принимали за 100%, и рассчитывали степень ослабления паралича в баллах (%)для каждой дозы испытуемого соединения.
[0352] [Пример испытания 16]
Испытание на ингибирование роста различных раковых клеток человека
В качестве клеточных линий различных типов рака человека использовали клеточную линию рака молочной железы BT-549 (полученную из Американской коллекции типовых культур (АТСС)), линию клеток рака матки C-33A (полученную из АТСС), клеточную линию рака яичников PA-1 (полученную из АТСС), клеточную линию крупноклеточного рака легкого NCI-H460 (полученную из АТСС), клеточную линию мелкоклеточного рака легкого NCI-H82 (полученную из АТСС), клеточную линию рака почки ACHN (полученную из АТСС), клеточную линию рака поджелудочной линии BxPC-3 (полученную из АТСС), клеточную линию злокачественной меланомы А375 (полученную из АТСС), клеточную линию рака горла FaDu (полученную из АТСС), клеточную линию медуллобластомы Daoy (полученную из АТСС), клеточную линию кожной эпителиоидной саркомы VA-ES-BJ (полученную из АТСС), клеточную линию рабдомиосаркомы А-204 (полученную из АТСС), клеточную линию рака предстательной железы DU145 (полученную из АТСС), клеточную линию рака мочевого пузыря T24 (полученную из АТСС), клеточную линию лимфомы SR (полученную из АТСС), клеточную линию нейробластомы SH-SY5Y (полученную от фирмы DS Pharma Biomedical Co., Ltd.), клеточную линию рака печени HepG2 (полученную от фирмы DS Pharma Biomedical Co., Ltd.), клеточную линию рака желудка HGC-27 (полученную от фирмы DS Pharma Biomedical Co., Ltd.) и клеточную линию множественной миелома NCI-H929 (полученную от фирмы DS Pharma Biomedical Co., Ltd.).
3
Каждую клеточную линию культивировали в среде для выращивания клеток, рекомендованной ATCC или DS Pharma Biomedical Co., Ltd., и добавляли в лунки 96-луночного планшета при плотности от 0,3 до 5,0  10 клеток/лунка. Клетки культивировали в течение ночи в инкубаторе с диоксидом углерода при 37C и содержании диоксида углерода 5%. На следующий день, среду заменяли свежей средой, затем заменяли смесью раствора испытуемого соединения в DMSO с различными концентрациями и культуральной среды (конечная концентрация DMSO: 0,1%), и выдерживали в инкубаторе с диоксидом углерода (день 0). В качестве испытуемых соединений использовали IV-361, IV-379, IV-3, IV-215, IV-299, IV-669, IV-1049 и палбоциклиб (для сравнения). Для контрольной группы, в среду для выращивания клеток добавляли DMSO вместо раствора испытуемого соединения в DMSO (конечная концентрация DMSO: 0,1%).
После культивирования в течение заданного периода времени, активность АТФ для BT-549, C-33A, PA-1, NCI-H460, NCI-H82, ACHN, BxPC-3, A375, FaDu, Daoy, VA-ES-BJ, A-204, DU145, T24 и SR измеряли с использованием системы для люминесцентного анализа ATPlite (фирмы PerkinElmer, Inc.). Активность АТФ для SH-SY5Y, HepG2, HGC-27 и NCI-H929 измеряли, используя набор для люминесцентного анализа CellTiter-Glo (фирмы Promega Corp.).
Степень ингибирования роста клеток (%) рассчитывали по приведенной ниже формуле. В частности, в случае, когда разница между активностью АТФ перед культивированием (день 0) и активностью АТФ после культивирования в группе, подвергнутой обработке испытуемым соединением, была такой же, как разница между активностью АТФ перед культивированием (день 0) и активностью АТФ после культивирования в контрольной группе, степень ингибирования роста клеток принимали за 0%.
Степень ингибирования роста клеток=(1 - ((активность АТФ в группе, подвергнутой обработке испытуемым соединением, после культивирования) - (активность АТФ в группе, подвергнутой обработке испытуемым соединением, в день 0))/(активность АТФ в контрольной группе после культивирования) - (активность АТФ контрольной группы в день 0)))  100
50
Рассчитывали концентрацию испытуемого соединения, необходимую для ингибирования 50% роста клеток (величина GI), используя программу EXSUS (version 8.1.0. фирмы CAC Exicare Corp.).
50
[0353] В этом исследовании, соединения по настоящему изобретению демонстрировали высокую активность по ингибированию роста клеток. Кроме того, величины GI соединений № IV-3, IV-215, IV-299, IV-361, IV-379, IV-669 и IV-1049 приведены в таблице 50.
[Таблица 50]
Палбоциклиб
IV-361
IV-379
IV-3
IV-215
IV-299
IV-669
IV-1049
BT-549
C
A
A
A
A
A
A
A
C-33 A
C
A
A
A
A
A
A
A
PA-1
A
A
A
A
A
A
A
A
NCI-H460
A
A
A
A
A
A
A
A
NCI-H82
C
A
A
A
A
A
A
A
ACHN
A
A
A
A
A
A
A
A
BxPC-3
A
A
A
A
A
A
A
A
A375
A
A
A
A
A
A
A
A
FaDu
C
A
A
A
A
A
A
A
Daoy
N.T.
A
A
A
A
A
A
A
VA-ES-BJ
N.T.
A
A
A
A
A
A
A
A-204
C
A
A
A
A
A
A
A
DU 145
N.T.
A
A
A
A
A
A
A
T24
N.T.
A
A
A
A
A
A
A
SR
A
A
A
A
A
A
A
A
HCT-116
B
A
A
A
A
A
A
A
HEPG2
N.T.
B
A
B
A
B
A
A
HGC-27
N.T.
A
A
A
A
A
A
A
NCI-H929
N.T.
A
A
A
A
A
A
A
A=ниже чем 300 нM; B=300 нM или выше и ниже чем 1000 нM; C=1000 нM или выше; N.T.=не определяли
[0354] [Пример испытания 17]
Испытание на ингибирование инфильтрации легочных нейтрофилов у крысы, индуцированной ингаляций липополисахарида (LPS) (однократное введение)
Испытание на ингибирование инфильтрации легочных нейтрофилов у крыс проводили методом, который являлся частичной модификацией метода, описанного в публикации Spond et al., Pulmonary Pharmacology and Therapeutics, 14, 157 (2001). В каждой группе, в которой вводили испытуемое соединение, и в контрольной группе, использовали по пять самцов крыс линии SD (поставляемых фирмой Charles River Laboratories Japan, Inc.), которым не давали корм в течение 16 часов.
Раствор испытуемого соединения для введения готовили путем растворения или суспендирования испытуемого соединения в водном растворе 0,5 масс.% метилцеллюлозы (0,5% МС) (фирмы Wako Pure Chemical Industries, Ltd.).
Приготовленный раствор испытуемого соединения вводили перорально в дозе 10 мл/кг в группе, в которой крыс подвергали обработке тестируемым соединением, и вводили 0,5% MC в дозе 10 мл/кг в контрольной группе. Через 15 минут после проведения введения, крысам в каждой группе вводили раствор липополисахарида (LPS) (фирмы Sigma-Aldrich Co. LLC.) (концентрация 0,5 мг/мл) путем ингаляции в течение 30 минут. При ингаляционном введении использовали два жидкостных ингалятора, и для образования аэрозоля использовали небольшой воздушный компрессор (P0-0,4LES, фирмы Hitachi Industrial Equipment Systems Co., Ltd.) и блок подачи воздуха (AP-678, фирмы Shibata Scientific Technology Ltd.).
Через 4 часа после введения ЛПС, проводили бронхоальвеолярный лаваж, как описано ниже, и собирали жидкость бронхоальвеолярного лаважа (далее сокращенно обозначаемую как BALF).
Метод бронхоальвеолярного лаважа.
Крыс анестезировали изофлураном и затем умерщвляли путем обескровливания в результате разреза нижней полой вены. Обнажали трахею, и вводили в нее оральный зонд для мышей (фирмы Fuchigami Kikai Co., Ltd.), соединенный с одноразовым шприцем (5 мл, фирмы Terumo Corp.), и затем на трахею накладывали лигатуру. Вводили в трахею 3,5 мл физиологического раствора, содержащего BSA (конечная концентрация: 1%), и затем сразу собирали введенный физиологический раствор с получением BALF. Полученную BALF в результате проведения этой операции четыре раза полученный путем центрифугировали (420  g, 10 мин, 4C), затем удаляли надосадочную жидкость до тех пор, пока объем жидкости не достигал 1,5 мл, и осажденные клетки суспендировали с получением суспензии клеток BALF.
Затем измеряли количество нейтрофилов в суспензии клеток BALF с использованием автоматического многопродуктового счетчика форменных элементов крови (XT-2000iV, фирмы Sysmex Corp.). Степень ингибирования инфильтрации нейтрофилов (%) в результате введения испытуемого соединения рассчитывали по следующей формуле:
Степень ингибирования инфильтрации нейтрофилов (%)=100 - [(NEUTc)/(NEUTv)]  100
NEUTv: количество нейтрофилов в суспензии клеток BALF в контрольной группе
NEUTc: количество нейтрофилов в суспензии клеток BALF в группе, в которой вводили испытуемое соединение
[0355] В этом исследовании, соединения по настоящему изобретению демонстрировали высокое ингибирующее воздействие на инфильтрацию легочных нейтрофилов, и, например, соединения № IV-215, IV-299 и IV-379 характеризовались степенью ингибирования 50% или более при дозе 100 мг/кг.
[0356] [Пример испытания 18]
Испытание на уменьшение опухаемости с использованием модели на мышах индуцированного оксазолоном (OXA) дерматита при гиперчувствительности замедленного типа
0,05 мл этанольного раствора OXA (фирмы Sigma-Aldrich Co. LLC.), доведенного до концентрации 2%, наносили в течение 2 дней подряд на брюшки самок мышей линии BALB/c (поставляемых фирмой Japan SLC, Inc.), побритых с кремом для бритья, с получением сенсибилизированных животных. Кроме того, мышей, которым наносили этанол вместо 2% OXA, использовали в качестве несенсибилизированных животных.
Через 5 дней после нанесения, на каждую из двух сторон (переднюю и заднюю поверхности ушных раковин) правых ушей сенсибилизированных животных в группе, в которой должны были наносить испытуемое соединение, наносили 0,01 мл этанольного раствора испытуемого соединения, доведенного до концентрации 1%. Кроме того, наносили 0,01 мл этанола на каждую из двух сторон правых ушей несенсибилизированных животных в контрольной группе. Для группы плацебо, наносили 0,01 мл этанола на каждую из двух сторон правых ушей сенсибилизированных животных. Через час, наносили 0,015 мл этанольного раствора 2% OXA на каждую из обеих сторон правых ушей мышей в каждой группе. На следующий день, измеряли толщину правых ушей толщиномером (фирмы TECLOCK Corp.), и рассчитывали степень уменьшения опухаемости (%) по следующей формуле:
Степень уменьшения опухаемости (%)=(1 - (толщина ушей в группе, в которой наносили испытуемое соединение) - (толщина ушей в контрольной группы))/((толщина ушей в группе плацебо) - (толщина ушей в контрольной группы) ))  100
[0357] В этом исследовании, соединения по настоящему изобретению демонстрировали высокий эффект по снижению опухаемости, и, например, соединения № IV-215, IV-299, IV-379 и IV-1049 в виде 1% раствора характеризовались 50% или более снижением опухаемости.
[0358] [Пример испытания 19]
Оценка ингибирующей активности in vitro в отношении роста клеток рака толстой кишечника человека при комбинированном применении с химиотерапевтическими препаратами
3
Клеточную линию рака толстого кишечника человека HCT-116 (полученную от фирмы DS Pharma Biomedical Co., Ltd.) культивировали в среде McCoy's 5A (фирмы Thermo Fisher Scientific, Inc.), содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS) фирмы Thermo Fisher Scientific, Inc.) и смесь 1% пенициллин/ стрептомицин/амфотерицин B (фирмы Thermo Fisher Scientific, Inc.), и добавляли в лунки 96-луночного планшета при плотности от 0,5 до 2,0  10 клеток/лунка. Клетки культивировали в течение ночи в инкубаторе с диоксидом углерода при 37C и содержании диоксида углерода 5%. На следующий день, среду заменяли свежей средой, и затем добавляли к ней смесь раствора испытуемого соединения (IV-361, 5-FU или SN-38) в DMSO с различными концентрациями и среды для культивирования клеток (конечная концентрация DMSO: 0,2%). При проведении испытания, концентрация испытуемого соединения составляла 10 нМ, концентрация 5-FU (фирмы Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) составляла 1000 нМ, и концентрацию SN-38 (фирмы Tocris Bioscience) доводили до 1 нМ. В случае контрольной группы, вместо раствора испытуемого соединения в DMSO использовали смесь раствора DMSO и среды для культивирования клеток (конечная концентрация DMSO: 0,2%).
После добавления раствора испытуемого соединения в DMSO клетки культивировали в течение 3 дней в инкубаторе с диоксидом углерода. Затем измеряли поглощение (длина волны измерения: 565 нм) в каждой группе, используя набор для анализа In Vitro Toxicology Assay Kit Sulforhodamine B based (набор реагентов для исследования цитотоксичности in vitro на основе сульфородамина В, фирмы Sigma-Aldrich Co. LLC).
Степень ингибирования роста (%) рассчитывали по приведенной ниже формуле. В частности, в случае, когда разница между средней величиной поглощения перед культивированием (день 0) и средней величиной поглощения после культивирования в группе, в которой вводили испытуемое соединение, была такой же, как разница между средней величиной поглощения перед культивированием (день 0) и средней величиной поглощения после культивирования в контрольной группе, степень ингибирования роста клеток принимали за 0%.
Степень ингибирования роста=(1 - ((средняя величина поглощения в группе, в которой вводили испытуемое соединение, после культивирования) - (средняя величина поглощения в группе, в которой вводили испытуемое соединение, в день 0))/((средняя величина поглощения в контрольной группе после культивирования) - (средняя величина поглощения в контрольной группе в день 0)))  100
[0359] В этом исследовании, соединение по настоящему изобретению демонстрировало высокое ингибирующее действие в отношении роста раковых клеток при совместном применении с химиотерапевтическим препаратом, и, например, соединение № IV-361 проявляло синергетический эффект при ингибировании роста раковых клеток, как показано в таблице 51, при его использовании в комбинации с химиотерапевтическим препаратом (5-FU или SN-38).
[Таблица 51]
Испытуемое соединение
Степень ингибирования роста (%)
Соединение № IV-361 (10 нM) монотерапия
11
5-FU (1000 нM) монотерапия
25
SN-38 (1 нM) монотерапия
12
Соединение № IV-361 (10 нM)+5-FU (1000 нM) комбинированная терапия
63
Соединение № IV-361 (10 нM)+SN-38 (1 нM) комбинированная терапия
66
[0360] [Пример испытания 20]
Ингибирование роста опухоли in vivo клеточной линии рака толстого кишечника человека при комбинированном применении с химиотерапевтическими препаратами
8
Клеточную линию рака толстого кишечника человека (HCT-116) культивировали в среде McCoy's 5A (фирмы Thermo Fisher Scientific, Inc.), содержащей 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS) (фирмы Thermo Fisher Scientific, Inc.) и смесь 1% пенициллин/стрептомицин/амфотерицин В (фирмы Thermo Fisher Scientific, Inc.) и доводили до плотности 1,0  10 клеток/мл с помощью PBS или раствора Хэнкса (HBSS(-)). Приготовленную суспензию клеток подкожно вводили при дозе 0,1 мл/мышь в правую часть живота самок бестимусных мышей линии BALB (поставленных фирмой Charles River Laboratories Japan, Inc.). После выращивания опухоли в течение определенного периода времени, измеряли наибольший диаметр (мм) и наименьший диаметр (мм) опухоли электронными штангенциркулями (фирмы Mitsutoyo Corp., № по каталогу 500-712-10), и рассчитывали объем опухоли по следующей формуле:
3
Объем опухоли (мм)=(наибольший диаметр)  (наименьший диаметр)  (наименьший диаметр)  0,5
3
Отбирали мышей, у которых объем опухоли находился в диапазоне от 50 до 200 мм, и группировали их таким образом, чтобы объем опухоли в группе был почти одинаковым. После проведения отбора в группы, мышам в каждой группе многократно вводили испытуемое соединение или только растворитель следующим образом:
Группа монотерапии:
Контрольная группа: растворитель (вводили один раз в сутки)
Группа введения одного соединений № IV-361: 25 мг/кг соединения № IV-361 (вводили один раз в сутки)
Группа введения одного средства 5-фторурацила (5-FU) - 15 мг/кг 5-FU (вводили два раза в неделю)
Группа введения одного средства оксалиплатина: 3 мг/кг оксалиплатина (вводили один раз в сутки)
Группа введения одного средства иринотекана: 12,5 мг/кг иринотекана (вводили один раз в неделю)
Группа комбинированной терапии:
25 мг/кг соединения № IV-361+15 мг/кг 5-FU
25 мг/кг соединения № IV-361+3 мг/кг оксалиплатина
25 мг/кг соединения № IV-361+12,5 мг/кг иринотекана
Соединение № IV-361 принудительно вводили перорально (10 мл/кг). 5-FU, оксалиплатин и иринотекан вводили интраперитонеально (5 мл/кг).
По прошествии заданного периода времени, измеряли массу тела мышей в каждой группе и наибольший диаметр и наименьший диаметр опухоли, и рассчитывали степень уменьшения объема опухоли (%) как отношение объема опухоли в группе, в которой вводили испытуемое соединение, к объему опухоли в контрольной группе.
[0361] В этом исследовании, соединение по настоящему изобретению проявляла высокую ингибирующую активность в отношении роста опухоли в комбинации с химиотерапевтическими препаратами, и, например, соединение № IV-361 характеризовалось высокой степенью подавления увеличения объема опухоли, как показано в таблицах 52-54, при использовании в комбинации с химиотерапевтическими препаратами (5-FU, оксалиплатин или иринотекан).
[Таблица 52]
Доза (мг/кг/сутки)
Степень подавления роста объема опухоли
IV-361
5-FU
25
0
46%
0
15
21%
25
15
63%
[Таблица 53]
Доза (мг/кг/сутки)
Степень подавления роста объема опухоли
IV-361
Оксалиплатин
25
0
46%
0
3
44%
25
3
73%
[Таблица 54]
Доза (мг/кг/сутки)
Степень подавления роста объема опухоли
IV-361
Иринотекан
25
0
20%
0
12,5
92%
25
12,5
103%
[0362] Исходя из результатов, полученных в примерах испытаний 1-20, можно сделать вывод, что соединение по настоящему изобретению обладает высокой ингибирующей активностью в отношении CDK7 и высокой селективностью и может применяться, например, в качестве терапевтического лекарственного средства и/или профилактического лекарственного средства для лечения рака, воспалительного заболевания, аллергического заболевания или хронического респираторного заболевания. Кроме того, соединение по настоящему изобретению проявляет высокие терапевтические эффекты при использовании в комбинации с дополнительным применяемым в настоящее время терапевтическим лекарственным средством.