СПОСОБ ИДЕНТИФИКАЦИИ АЛЛЕРГЕННЫХ БЕЛКОВ И ПЕПТИДОВ

1. Способ идентификации аллергенных белков и/или пептидов молока, включающий стадии:
a) получения по меньшей мере одной экспрессионной библиотеки, содержащей ДНК или кДНК, полученную из ткани молочной железы лактирующей коровы,
b) экспрессии по меньшей мере одного белка или пептида, кодируемого указанной экспрессионной библиотекой,
c) определения связывающей способности по меньшей мере одного белка или пептида с IgE по меньшей мере одной сыворотки индивидуума, который чувствителен к молоку коровы,
d) контактирования по меньшей мере одного белка или пептида, проявляющего IgE-связывающую способность, определенную в стадии с), с базофильными клетками, эозинофильными клетками или тучными клетками; и
e) идентификации по меньшей мере одного белка или пептида как являющегося аллергенным, если указанные базофильные клетки, эозинофильные клетки или тучные клетки высвобождают после контакта с указанным по меньшей мере одним белком или пептидом стадии d) по меньшей мере один медиатор.
2. Способ по п.1, где способ дополнительно включает стадию определения аминокислотной последовательности по меньшей мере одного белка или пептида, идентифицированного в стадии е).
3. Способ определения аллергенности содержащей молоко коровы пробы, включающий стадию определения присутствия по меньшей мере одного из белков и пептидов любой из SEQ ID NO:1-84.
4. Способ по п.3, где молоко коровы является гидролизованным молоком коровы.
5. Способ по п.3 или 4, где присутствие по меньшей мере одного белка или пептида определяют масс-спектрометрией.
6. Способ по п.5, где белки и пептиды, присутствующие в этой пробе, выделяют перед масс-спектрометрией.
7. Способ по п.6, где белки и пептиды выделяют электрофоретическим способом или высокоэффективной жидкостной хроматографией.
8. Способ по п.7, где электрофоретический способ является двухмерным электрофорезом.
9. Белок или пептид, идентифицированный способом по любому из пп.1 или 2.
10. Белок или пептид, выбранный из любой из SEQ ID NO:1-84.
11. По меньшей мере один белок или пептид по пп.9 или 10 для применения в диагностике аллергии или предрасположенности к аллергии у индивидуума.
12. По меньшей мере один белок или пептид по п.11 для применения в диагностике аллергии на молоко или предрасположенности к аллергии на молоко у индивидуума.
13. Способ диагностики аллергии или предрасположенности к аллергии у индивидуума, включающий введение по меньшей мере одного белка или пептида по п.9 или 10 индивидууму, являющемуся предположительно аллергенным или становящемуся аллергенным, и оценивание, возникает ли у этого индивидуума аллергическая реакция против белка или пептида.
14. Способ по п.13, где аллергия или предрасположенность к аллергии является аллергией на молоко или предрасположенность к аллергии на молоко.
15. Способ по п.13 или 14, где способ дополнительно включает:
a) кожный тест и/или
b) анализ крови.
16. Способ по п.15,
a) где этот кожный тест выбран из
(i) кожного прик-теста,
(ii) внутрикожного теста,
(iii) аппликационного кожного теста или
(iv) любой комбинации тестов (i)-(iii),
где положительный результат тестов (i)-(iv) является показателем аллергии или предрасположенности к аллергии индивидуума; и/или
b) где анализ крови включает стадии
(i) контактирования по меньшей мере одного белка или пептида по п.9 или 10 с пробой крови, пробой сыворотки или пробой плазмы из указанного индивидуума и
(ii) определения, связывается ли указанный по меньшей мере один белок или пептид с IgE-антителом в указанной пробе крови, пробе сыворотки или пробе плазмы, где связывание указанного по меньшей мере одного белка или пептида с IgE-антителом является показателем аллергии или предрасположенности к аллергии у указанного индивидуума;
и/или
(i') контактирования по меньшей мере одного белка или пептида по п.9 или 10 с базофильными клетками, эозинофильными клетками или тучными клетками указанного индивидуума, и
(ii') определения, высвобождают ли указанные базофильные клетки, эозинофильные клетки или тучные клетки после контакта по меньшей мере с одним белком или пептидом по меньшей мере один медиатор или дегранулируются ли после контакта по меньшей мере с одним белком или пептидом, где высвобождение указанного по меньшей мере одного медиатора после контакта с указанным по меньшей мере одним белком или пептидом или дегрануляция после контакта с указанным по меньшей мере одним белком или пептидом является показателем аллергии или предрасположенности к аллергии у указанного индивидуума.
17. По меньшей мере один белок или пептид по п.9 или 10 для применения в аллерген-иммунотерапии аллергии у индивидуума.
18. Способ аллерген-иммунотерапии для аллергии индивидуума, включающий введение по меньшей мере одного белка или пептида по п.9 или 10.
19. Способ определения аллергии или предрасположенности к аллергии у индивидуума, включающий:
а) контактирование по меньшей мере одного белка или пептида по п.9 или 10 с пробой крови, пробой сыворотки или пробой плазмы, где указанная проба крови, проба сыворотки или проба плазмы выделена из указанного индивидуума, и
b) определение, связывается ли указанный по меньшей мере один белок или пептид с IgE-антителом в указанной пробе крови, пробе сыворотки или пробе плазмы, где связывание указанного по меньшей мере одного белка или пептида с IgE-антителом является показателем аллергии или предрасположенности к аллергии у указанного индивидуума;
и/или
а') контактирование по меньшей мере одного белка или пептида по п.9 или 10 с базофильными клетками, эозинофильными клетками или тучными клетками, где указанные базофильные клетки, эозинофильные клетки или тучные клетки были выделены из указанного индивидуума, и
b') определение,
(i) высвобождают ли указанные базофильные клетки, эозинофильные клетки или тучные клетки после контакта по меньшей мере с одним белком или пептидом по меньшей мере один медиатор, или
(ii) дегранулируются ли после контакта по меньшей мере с одним белком или пептидом,
причем высвобождение указанного по меньшей мере одного медиатора после контакта с указанным по меньшей мере одним белком или пептидом или дегрануляция после контакта с указанным по меньшей мере одним белком или пептидом является показателем аллергии или предрасположенности к аллергии у указанного индивидуума.
20. Способ по п.19, где аллергия или предрасположенность к аллергии является аллергией на молоко или предрасположенностью к аллергии на молоко.
21. Способ по пп.19 или 20, включающий
а) выделение индивидуумов с тяжелой аллергией от индивидуумов, которые являются чувствительными, но бессимптомными, и/или
b) выделение индивидуумов, которые с возрастом утрачивают аллергию, от индивидуумов, которые с возрастом не утрачивают аллергию.
22. Способ идентификации IgE-реактивного неаллергенного белка или пептида молока, кодируемого ДНК или кДНК по меньшей мере одной экспрессионной библиотеки, включающий стадии:
a) получения по меньшей мере одной экспрессионной библиотеки, содержащей ДНК или кДНК, полученные из ткани молочной железы лактирующей коровы,
b) экспрессии по меньшей мере одного белка или пептида, кодируемого указанной экспрессионной библиотекой,
c) определения связывающей способности указанного по меньшей мере одного белка или пептида с IgE по меньшей мере одной сыворотки индивидуума, который чувствителен к молоку коровы,
d) контактирования по меньшей мере одного белка или пептида, проявляющего IgE-связывающую способность, определенную в стадии с), с базофильными клетками, эозинофильными клетками или тучными клетками,
e) определения,
(i) высвобождают ли указанные базофильные клетки, эозинофильные клетки или тучные клетки после контакта по меньшей мере с одним белком или пептидом по меньшей мере один медиатор, или
(ii) дегранулируются ли после контакта по меньшей мере с одним белком или пептидом, и
f) идентификации по меньшей мере одного белка или пептида как являющегося неаллергенным, когда указанные базофильные клетки, эозинофильные клетки или тучные клетки
(i') не высвобождают после контакта по меньшей мере с одним белком или пептидом по меньшей мере один медиатор, или
(ii') не дегранулируются после контакта по меньшей мере с одним белком или пептидом.
23. По меньшей мере один белок или пептид, идентифицированный способом по п.22, для применения при лечении аллергии.
24. Способ лечения аллергии у индивидуума, включающий введение по меньшей мере одного белка или пептида, идентифицированного в п.10.