ВОЗРАСТНЫЕ ОСОБЕННОСТИ СИСТЕМНОГО ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ИММУННОГО ОТВЕТА У БОЛЬНЫХ ПЕРВИЧНО-ОПЕРАБЕЛЬНЫМ РАКОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ И РАКОМ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ПОЛОСТИ РТА

возрастные особенности системного противоопухолевого иммунного ответа у больных первично-операбельным раком молочной железы и раком слизистой оболочки

полости рта

А.и. черткова, т.н. Заботина, в.т. Циклаури, Е.н. Захарова, д.в. табаков, A.A. Борунова, Э.к. Шоуа, и.А. Задеренко, и.к. воротников, А.м. мудунов, З.Г. кадагидзе

ФГБУ«Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России;

Россия, 115478 Москва, Каширское шоссе, 24

Контакты: Татьяна Николаевна Заботина tatzabotina@yandex.ru

Введение. Возраст — это важный клинико-патологический фактор у онкологических пациентов. Злокачественные опухоли чаще развиваются у лиц старшего возраста, но заболевание у них протекает менее агрессивно, чем у молодых пациентов. По мнению различных авторов, влияние возраста на развитие опухолей в значительной степени обусловлено возрастными особенностями иммунной системы.

Цель исследования — определение взаимосвязи показателей системного противоопухолевого иммунного ответа и возраста больных первично-операбельным раком молочной железы (ПО РМЖ) и раком слизистой оболочки полости рта (РСОПР). Материалы и методы. В исследование были включены больные со всеми подтипами ПО РМЖ (п = 145) и больные РСОПР (п = 29). Проводилось иммунофенотипирование лимфоцитов периферической крови с использованием широкой панели моно-клональных антител к маркерам клеток адаптивного и врожденного иммунитета.

Результаты. У больных ПО РМЖ 40 лет и старше до лечения процент активированных СD25+-лимфоцитов, СD4+CD25+-и CD3+CD4+-Т-клеток, NKT-клеток, активированныхHLA-DR+-лимфоцитов, включая активированные CD3+HLA-DR+-Т-клетки, был статистически значимо выше, чем у больных моложе 40лет. У пациенток этой группы наблюдалось повышение по сравнению с контрольной группой процента цитотоксических Т-лимфоцитов CD8+CD11b+CD28-, снижение числа «наивных» лимфоцитов (CD4- CD62L+ и CD8+CD11b -CD28+), а также тенденция к снижению CD4+CD25+CD127- -Трег на фоне увеличения числа CD4+CD25+-Т-клеmок. У больных РСОПР выявлены увеличение с возрастом количества клеток некоторых популяций эффекторного звена иммунитета и снижение числа лимфоцитов-супрессоров.

Заключение. Полученные результаты позволяют предположить, что возрастные различия в состоянии системного противоопухолевого иммунного ответа вносят свой вклад в более благоприятное течение РМЖ и некоторых других злокачественных новообразований у лиц старшего возраста. Очевидно, что особенности возрастных различий в иммунном ответе на опухоль необходимо учитывать при назначении системной терапии, включая иммунотерапию.

Ключевые слова: первично-операбельный рак молочной железы, рак слизистой оболочки полости рта, возраст, субпопуляци-онный состав лимфоцитов периферической крови

DOI: 10.17650/1726-9784-2019-19-1-81-88

С"}]

AGE-RELATED FEATuRES oF SYSTEMIC ANTITuMoR IMMuNE RESPoNSE IN PATIENTS

with primary operable breast cancer and cancer of the oral mucosa

A.I. Chertkova, T.N. Zabotina, V.T. Tsiklauri, E.N. Zakharova, D. V Tabakov, A.A. Borunova, E.K. Shoua, I.A. Zaderenko, I. K. Vorotnikov, A. M. Mudunov, Z. G. Kadagidze

N. N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology of the Ministry of Health of the Russian Federation;

24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115478, Russia Introduction. Age is considered as an important clinical and pathologicalfactor in cancer patients. Malignant tumors are more likely to develop in older people, but the disease is less aggressive than in young patients. According to various authors, the influence of age on the development of tumors largely depends on the age-related features of the immune system.

The aim of the present study was to determine the relationship of indicators of systemic antitumor immune response with the age of patients with primary operable breast cancer and cancer of the oral mucosa.

Materials and methods. The study included patients with all subtypes of primary-operable breast cancer (n = 145) and patients with cancer of the oral mucosa (n = 29). Immunophenotyping of peripheral blood lymphocytes was performed using a wide panel of monoclonal antibodies to markers of adaptive and innate immunity cells.

Results. In elder patients (40 years and older) with primary-operable breast cancer, the percentage of activated CD25+ lymphocytes and CD4+CD25+ and CD3+CD4+ T cells, NKT cells, activated HLA-DR+ lymphocytes, including activated CD3+HLA-DR+ T cells before treatment, was statistically significantly higher than in patients younger than 40years. Patients of this group showed increase of CD8+CD-11b+CD28- CTLs and a decrease in the number of naive lymphocytes (CD4 - CD62L+ and CD8+CD11b - CD28+) in comparison with control percentage, and the downward trend in CD4+CD25+CD127- T, with increased numbers of CD4+CD25+ T cells. In patients with cancer of the oral mucosa, an increase in the number of cells of some populations of the immune effector link and a decrease in the number of suppressor lymphocytes were revealed with age.

Conclusion. The results suggest that age-related differences in the state of systemic antitumor immune response contribute to a more favorable course of breast cancer and some other malignancies in older persons. It is obvious that the features of age differences in the immune response to the tumor should be taken into account when prescribing systemic therapy, including immunotherapy.

Key words: primary operable breast cancer, cancer of the oral mucosa, age, subpopulation of peripheral blood lymphocytes

Введение

Возраст человека влияет на частоту возникновения злокачественных опухолей, а также на характер течения заболевания и переносимость системной противоопухолевой терапии, поэтому рассматривается как важный клинико-патологический фактор у онкологических больных. Известно, что с увеличением возраста растет частота заболеваний. Так, рак молочной железы (РМЖ) у женщин старше 40 лет возникает гораздо чаще, чем у более молодых [1]. Раком полости рта, по данным многоцентрового исследования, также чаще всего болеют люди в возрасте 50—80 лет (81,26 %), хотя нередко опухоли возникают и у тех, кто моложе [2]. В то же время у лиц старшего возраста отмечается менее агрессивное течение опухолевого процесса, чем у молодых пациентов. По мнению многих авторов, влияние возраста на развитие опухолей в значительной степени зависит от возрастных особенностей иммунной системы — одного из важнейших факторов, контролирующих опухолевый рост и влияющих на клиническую эффективность различных видов противоопухолевой терапии [3—7]. Иммунная система реагирует на опухолевый рост как на локальном, так и на системном уровне, и циркулирующие иммунные клетки наряду с лимфоцитами, инфильтрирующими опухоль, имеют прогностическое значение [8, 9]. Безусловно, опухолевый рост модулирует иммунный ответ на чужеродные и аутоантигены, это касается как врожденного, так и адаптивного иммунитета. Однако возрастные различия иммунного ответа, по-видимому, сохраняются. В настоящее время взаимосвязь между исходным состоянием (до лечения) системного иммунитета и возрастом пациентов при РМЖ и раке слизистой оболочки полости рта (РСОПР) остается недостаточно изученной. По этой причине изучение субпопуляционного состава периферической крови (ПК) у больных первично-операбельным РМЖ (ПО РМЖ) и РСОПР разных возрастных групп до лечения является актуальным, а полученные результаты могут послужить основой для дифференцированного подхода к назначению системного противоопухолевого

лечения с учетом различий в иммунном ответе на опухоль у больных разного возраста.

Цель исследования — определение взаимосвязи показателей системного иммунного ответа на опухолевый рост и возраста больных ПО РМЖ и РСОПР.

Задачи исследования — проведение сравнительного исследования субпопуляционного состава лимфоцитов ПК больных ПО РМЖ и здоровых доноров 2 возрастных групп (моложе 40 лет и 40 лет и старше); определение характера взаимосвязи субпопуляцион-ного состава лимфоцитов ПК с возрастом у больных РСОПР.

Материалы и методы

В исследование были включены больные со всеми подтипами ПО РМЖ (n = 145). Медиана возраста составила 54 года (от 18 лет до 81 года): моложе 40 лет — 10 пациенток (1-я группа), 40 лет и старше — 135 пациенток (2-я группа). В группы контроля вошли практически здоровые женщины (n = 39) до 40 лет (группа А) и 40 лет и старше (группа Б).

рак слизистой оболочки полости рта. В исследование были включены 29 человек (14 женщин и 15 мужчин). У 18 пациентов был диагностирован рак языка, у 9 — РСОПР и у 2 — первично-множественное злокачественное образование. Медиана возраста пациентов составила 43,5 года (от 15 до 84 лет). В контрольной группе были здоровые доноры соответствующего пола и возраста (n = 77; от 18 до 71 года). Все пациенты дали информированное согласие на проведение иммунологического обследования. Все исследования проводили до начала лечения. Для определения состояния системного иммунитета проводилось им-мунофенотипирование лимфоцитов ПК на 5-пара-метровом проточном цитофлуориметре аналитического типа FACSCalibur (BD Biosciences, США). Лимфоциты выделяли по параметрам светорассеяния и экспрессии CD45. Определяли процентное содержание клеток адаптивного и врожденного иммунитета в составе лимфоцитов ПК путем 2-, 3- и 4-цвет-ного окрашивания клеток с использованием панели моноклональных антител (BD Biosciences, Bekman

Coulter) к поверхностным маркерам лимфоцитов CD3, CD4, CD8, CD16, CD56, CD28, CD11b, HLA-DR, CD19, CD25, CD127 и внутриклеточному антигену перфорину (Perforin). Цитотоксический потенциал (ЦТП) CD16+- и CD8+-лимфоцитов оценивали как процент Perforin-положительных клеток в составе соответствующей популяции. Статистическую обработку результатов проводили с использованием программы Statistica 7,0. Характер распределения показателей определяли с помощью критериев Ша-пиро—Уилка или Колмогорова—Смирнова. Результаты представлены в виде медианы (Me) и квартилей (25-й и 75-й процентили). Для оценки статистической значимости различия показателей использовали непараметрический двусторонний U-критерий Манна— Уитни. Связь между показателями устанавливали с помощью корреляционного анализа Спирмена: результаты представлены в виде коэффициента корреляции (р) и 95 % доверительного интервала (95 % ДИ). 95 % ДИ для коэффициентов корреляции рассчитывали с помощью программы Excel в соответствии с рекомендациями А. Бююля и П. Цёфеля [10]. Уровень статистической значимости учитывали при p = 0,05.

Результаты исследования

В табл. 1 представлены результаты, полученные при сравнении субпопуляционного состава лимфоцитов ПК пациенток с ПО РМЖ 2 возрастных групп между собой и с женщинами соответствующего возраста из контрольной группы (в таблицу включены только субпопуляции лимфоцитов, в которых наблюдались статистически значимые различия). Изменения субпопуляционного состава лимфоцитов ПК, связанные с возрастом, были обнаружены и у пациенток с ПО РМЖ, и у лиц контрольной группы, однако они были в большинстве случаев различны и касались не всех популяций лимфоцитов. Совпадение наблюдалось только для 2 популяций: клеток, экспрес-сирующих активационный маркер CD25, и активированных CD4+CD25+-Т-клеток. Процент активированных CD25+-лимфоцитов, включая CD4+CD25+-популяцию, был статистически значимо выше у больных 2-й группы. Подобное возрастное различие этих показателей было обнаружено и в контрольной группе, в которой повышение возраста сопровождалось также статистически значимым увеличением ЦТП как CD16+-, так и CD8+-лимфоцитов. У пациентов эти различия отсутствовали. Возрастные различия у больных ПО РМЖ были обнаружены для следующих популяций лимфоцитов: процент CD3+CD4+- и активированных CD3+HLA-DR-Т-клеток, общее число активированных лимфоцитов HLA-DR+, процент NKT-клеток и величина соотношения CD4/CD8 были статистически значимо выше у больных старшего возраста, а процент «наивных» и клеток памя-

ти CD4- CD62L+ — у более молодых женщин. При изучении отклонений иммунологических показателей больных ПО РМЖ от контрольных значений отмечено как их сходство, так и различие между группами пациенток разного возраста. Статистически значимое снижение общего числа СБ3+-Т-клеток и СБ3+СБ4+-Т-клеток наблюдалось у больных обеих групп, однако в случае CD3+CD4+-Т-лимфоцитов снижение было более выраженным в 1-й группе (р = 0,000). Статистически значимое снижение числа CD3+CD8+-Т-лимфоцитов по сравнению с контрольной группой наблюдалось у пациенток 2-й группы. Количество CD8+CD28 - -лимфоцитов было выше нормы у пациенток обеих возрастных групп. Кроме того, отмечено некоторое различие в отклонении от контрольных показателей в процентном содержании CD8+Perfo-гт+-лимфоцитов у больных моложе 40 лет и 40 лет и старше. У лиц младше 40 лет процент этих клеток статистически значимо превышал контрольные значения, однако различия между 2 возрастными группами пациенток отсутствовали. Что касается клеток врожденного иммунитета, то процент NK-клеток, экспрессирующих CD8 ^3 - CD16+ и CD8+CD16+), был статистически значимо выше в обеих группах по сравнению с контрольной. Процент NKT-клеток у пациенток 40 лет и старше был статистически значимо выше не только по сравнению с более молодыми женщинами, но и превышал контрольные значения. У пациенток моложе 40 лет процент CD16+Perfo-гт+-клеток и их ЦТП были выше контрольных показателей, но различий со значениями 2-й группы не было. Следует отметить, что, хотя процент активированных HLA-DR+-лимфоцитов в обеих группах не отличался от данных контрольной группы, в 1-й, как было указано ранее, их количество было статистически значимо ниже, чем во 2-й. Такого различия между возрастными показателями в контрольной группе не наблюдалось. Количество регуляторных CD4+CD25+CD127--Т-клеток было ниже, чем у здоровых, только у лиц старшей группы, хотя различия между группами отсутствовали.

Результаты, полученные при определении характера взаимосвязи субпопуляционного состава лимфоцитов ПК и возраста у больных РСОПР, представлены в табл. 2.

В контрольной группе с увеличением возраста незначительно повышался процент CD8+CD28- -лимфоцитов и ЦТП CD8+-клеток и снижалось количество NK-клеток. В то же время у пациентов с возрастом изменялось значительно большее число показателей. Отмечена средняя положительная корреляция с ЦТП CD8+-клеток и процентом CD16+Per-&пп+^К-клеток, а также слабая положительная корреляция с CD16+-, CD11b+-лимфоцитами и ци-тотоксическими Т-лимфоцитами CD8+CD11b+CD28-.

Таблица 1. Субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови больных первично-операбельным раком молочной железы 2 возрастных групп

Table 1. Subpopulation composition ofperipheral blood lymphocytes in patients primary operable breast cancer of two age groups

Пациенты с ПО РМЖ

Patients primary operable breast cancer

Субпопуляции лимфоцитов периферической крови

Subpopulation of peripheral blood lymphocytes

1-я группа

Me

I!

Контрольная группа Control group

P1-;

Группа А

Группа Б

Me

Pl-A

CD3+ 62,6 (48,6; 65,3) 70,5 (58,0; 77,0) 73,4 (66,0; 81,2) 75,0 (71,4; 80,0) 0,023 0,015

CD3+CD4+ 22,9 (17,5; 26,5) 35,3 (29,5; 43,7) 0,000 41,0 (34,2; 44,0) 40,9 (38,7; 51,8) 0,001 0,002

CD3+CD8+ 23,3 (19,4; 31,9) 23,4 (16,0; 30,5) 29,7 (26,5; 31,6) 28,7 (24,6; 31,9) 0,097 0,036

CD3-CD8+ 16,8 (13,2; 18,3) 11,0 (6,8; 15,5) 6,8 (5,0; 11,0) 8,0 (5,9; 9,0) 0,002 0,009

CD3+HLA-DR+ 3,6 (1,0; 4,9) 5,4 (3,3; 9,9) 0,016 4,7 (3,6; 5,6) 7,2 (5,0; 9,2) 0,097 0,359

HLA-DR 9,6 (8,3; 12,4) 14,4 (10,6; 19,9) 0,006 12,6 (9,9; 16,7) 15,4 (12,1; 18,6) 0,135 0,901

CD3+CD16+CD56+ 9,2 (4,9; 11,0) 13,1 (8,3; 19,2) 0,045 9,0 (5,2; 14,3) 6,4 (5,0; 13,0) 0,979 0,003

CD8+CD28- 21,8 (11,3; 26,6) 18,3 (12,6; 23,3) 9,7 (6,4; 12,5) 12,8 (8,0; 19,5) 0,003 0,036

CD4-CD62L+ 27,9 (26,0; 32,2) 22,9 (17,2; 28,0) 0,022 30,9 (25,4; 43,5) 28,1 (16,7; 40,0) 0,421 0,151

CD4+CD25+ 4,7 (2,2; 8,8) 9,2 (5,9; 13,8) 0,007 7,4 (5,3; 10,3) 10,2 (7,8; 16,7) 0,029 0,149 0,321

CD25+ 9,6 (7,7; 12,8) 15,6 (10,7; 21,5) 0,032 10,1 (5,3; 13,4) 14,6 (10,8; 19,6) 0,015 0,816 0,992

CD8+CD16+ 13,3 (8,1; 19,8) 11,1 (6,8; 15,2) 5,9 (3,7; 8,5) 7,9 (4,9; 10,4) 0,002 0,040

CD16+Perforin+ 24,3 (15,1; 27,3) 17,7 (14,2; 23,9) 14,0 (11,8; 18,4) 18,7 (12,9; 22,2) 0,021 0,634

ЦТП CD16 CTP CD16 91,5 (89,5; 93,7) 91,7 (84,3; 96,0) 82,5 (77,5; 88,7) 93,8 (88,4; 96,6) 0,015 0,018 0,436

CD8+Perforin+ 17,7 (15,8; 22,4) 17,5 (12,6; 22,1) 10,7 (8,4; 16,6) 13,9 (9,3; 18,4) 0,009 0,126

ЦТП CD8 CTP CD8 48,1 (36,7; 55,3) 53,2 (43,4; 63,9) 32,1 (25,7; 44,8) 42,2 (38,3; 53,3) 0,029 0,013 0,007

CD4/CD8 0,56 (0,38; 0,76) 0,98 (0,71; 1,37) 0,001 1,2 (0,87; 1,39) 1,2 (0,95; 1,59) 0,001 0,082

CD11b+ 29,5 (19,0; 40,3) 34,8 (25,8; 45,9) 30,2 (27,3; 35,2) 24,2 (17,5; 34,6) 0,738 0,001

CD50+ 95,8 (92,4; 97,2) 97,0 (95,1; 98,4) 98,6 (98,0; 99,0) 95,4 (93,6; 98,5) 0,000 0,005 0,366

CD4+CD25+CD127- 7,7 (6,8; 8,9) 7,2 (5,9; 8,8) 9,0 (7,7; 10,6) 9,6 (7,1; 10,1) 0,079 0,021

CD8+CD11b+CD28- 60,9 (51,3; 73,0) 67,1 (52,3; 74,9) 60,2 (48,8; 86,0) 54,9 (48,4; 63,1) 1,000 0,035

CD8+CD11b-CD28+ 22,9 (17,1; 25,2) 19,7 (13,4; 30,0) 28,5 (7,3; 32,5) 30,1 (27,1; 35,4) 0,905 0,021

Примечание. ПО РМЖ — первично-операбельный рак молочной железы; ЦТП — цитотоксический потенциал. Note. CTP — citotoxic potential.

В то же время с увеличением возраста снижался (отрицательная корреляция) процент CD8+CD-11b+CD28+- и CD4+CD25+CD127- -лимфоцитов.

Обсуждение

Возраст человека — это важный клинико-патоло-гический фактор, влияющий на частоту возникнове-

ния злокачественных опухолей, а также на характер течения заболевания и переносимость системной противоопухолевой терапии. Так, РМЖ у женщин старше 40 лет возникает значительно чаще, чем у более молодых женщин [11]. Раком полости рта, по данным многоцентрового исследования, также чаще всего болеют люди в возрасте 50—80 лет (81,26 %),

Таблица 2. Связь показателей системного иммунитета с возрастом у больных раком слизистой оболочки полости рта

Table 2. The relationship of systemic immunity with age in patients with cancer of the oral mucos

Субпопуляции лимфоцитов периферической крови, % Пациенты с РСОПР

Patients with cancer of the oral mucosa (n = 29) нишшн

Subpopulation of peripheral blood lymphocytes, % P 95 % ДИ P P 95 % ДИ P

CD3CD16+CD56+ 0,236 -0,160; 0,567 0,216 -0,233 -0,437; -0,006 0,043

CD8+CD28- -0,333 -0,634; -0,056 0,077 0,233 0,006; 0,437 0,044

ЦТП CD8+ CTP CD8+ 0,507 0,309; 0,663 0,005 0,281 0,063; 0,484 0,019

CD16+-Perforin+ 0,508 0,306; 0,666 0,004 -0,234 -0,438; -0,074 0,053

CD16+ 0,467 0,256; 0,635 0,011 -0,228 -0,433; -0,000 0,059

CD11b+ 0,399 0,177; 0,582 0,032 -0,103 -0,323; 0,127 0,387

CD8+CD11b+CD28- 0,397 0,134; 0,608 0,033 -0,094 -0,315; 0,136 0,512

CD8+CD11b+CD28+ -0,536 -0,708; -0,303 0,003 -0,011 -0,238; 0,217 0,936

CD4+CD25+CD127- -0,397 -0,581; -0,175 0,033 -0,061 -0,284; 0,169 0,615

Примечание. РСОПР — рак слизистой оболочки полости рта; ЦТП — цитотоксический потенциал; р — коэффициент корреляции Спирмена; ДИ — доверительный интервал.

Note. CTP - citotoxic potential; р — Spearman correlation coefficient; CI — confidence interval.

значительно реже случаи заболевания наблюдаются в более молодом возрасте [2]. С другой стороны, у лиц старшего возраста заболевание протекает менее агрессивно. В связи с этим оценка возрастных факторов у онкологических пациентов в настоящее время приобретает все большее значение. По мнению ряда авторов, различия в характере течения опухолевого процесса у лиц разного возраста в значительной степени зависят от возрастных особенностей иммунной системы [3, 4, 12]. Доказано, что иммунная система способна контролировать все этапы опухолевого роста: возникновение, рост и развитие, кроме того, она оказывает влияние на клиническую эффективность различных видов противоопухолевой терапии [5—7]. В ответ на опухолевый рост генерируется как системный, так и локальный иммунный ответ, и прогностическое значение имеют и лимфоциты, инфильтрирующие опухоль, и циркулирующие иммунные клетки [8, 9, 13—17]. В настоящее время взаимосвязь между исходным состоянием системного иммунитета (субпопуляционный состав лимфоцитов ПК) и возрастом больных при злокачественных новообразованиях остается недостаточно изученной. В связи с этим исследование особенностей системного иммунного ответа на опухоль у больных ПО РМЖ и РСОПР разных возрастных групп, проведенное в настоящей работе, является актуальным, и очень важно его учитывать при назначении системного, в том числе иммунотерапевтического, противоопухолевого лечения больным разного возраста.

Безусловно, опухолевый рост модулирует системный иммунный ответ и может вызывать значительные изменения субпопуляционного состава лимфоцитов. Однако возрастные различия сохраняются, причем они могут существенно отличаться от изменений, характерных для здоровых лиц. Полученные в данной работе результаты показали, что субпопуляционный состав лимфоцитов ПК в определенной степени зависит от возраста и у здоровых женщин, и у больных ПО РМЖ. Но возрастные особенности системного иммунного ответа у онкологических больных отличаются от таковых у здоровых доноров (см. табл. 1 и 2). Основные совпадения с контрольной группой касались 3 клеточных популяций. При увеличении возраста и у здоровых доноров, и у больных ПО РМЖ повышалось количество CD25+-лимфоцитов и CD4+CD25+-Т-клеток, а число регуляторных CD4+CD25+CD127--Т-клеток (Трег) в составе CD4+CD25+-популяции оставалось на одном уровне. Таким образом, процент CD4+-CD25+-Т-лимфоцитов с возрастом и в контрольной группе, и у больных пациенток повышался, скорее всего, за счет эффекторных активированных CD4+-Т-лимфоцитов.

Повышение процента активированных СD25+-лимфоцитов и СD4+CD25+-Т-клеток, обнаруженное у больных во 2-й группе, по-видимому, является благоприятным фактором при РМЖ. Известно, что молекула CD25 — а-цепь рецептора интерлейкина 2 — играет ключевую роль в запуске пролиферативного ответа и дифференцировки Т-лимфоцитов [18]. Ранее

86 Оригинальные статьи

мы обнаружили, что исходное снижение количества Это предположение в определенной степени под-CD25+- и CD4+CD25+-T-KreTOK ассоциировалось тверждается результатами, полученными у больных с увеличением вероятности прогрессирования забо- РСОПР (см. табл. 2). У обследованной группы паци-левания у больных трижды негативным РМЖ [17]. ентов повышение возраста ассоциировалось с увели-У больных 40 лет и старше количество CD3+CD4+-T- чением количества клеток эффекторных популяций и NKT-клеток также было статистически значимо лимфоцитов ПК: CD16+ и CD16+Perforin+-NK-клеток, выше, чем у более молодых пациенток. CD4+-Т-клет- CDllb-экспрессирующих лимфоцитов (эта молеку-ки играют важнейшую роль в противоопухолевом ла экспрессируется на клетках-эффекторах с высокой иммунном ответе. По данным ряда авторов, исходное цитотоксической активностью) и цитотоксических количество CD4+-клеток в ПК при различных злока- CD8+CDПb+CD28--Т-клеток, а также с увеличением чественных опухолях ассоциируется с благоприятным ЦТП CD8+-лимфоцитов [23, 24]. С другой стороны, прогнозом заболевания [19, 20]. Было выявлено, что возраст пациентов отрицательно коррелировал с ко-повышенное до лечения количество CD3+CD4+-T- личеством CD8+CD11b+CD28+-Т-клеток («наивные»/ клеток ПК ассоциировалось с увеличением общей клетки памяти) и супрессорных CD4+CD25+CD127-и безрецидивной выживаемости больных трижды Т-клеток (см. табл. 2). Можно предположить, что по-негативным РМЖ [21]. NKT-клетки могут оказывать вышение значимости эффекторного звена иммуните-как отрицательное, так и положительное влияние та у больных старшего возраста в определенной на противоопухолевый иммунный ответ [22]. В наших степени связано со снижением активности клеток-су-исследованиях у больных трижды негативным РМЖ прессоров. В настоящее время причины возрастных повышение количества NKT-клеток в ПК до лечения различий в состоянии системного противоопухолево-ассоциировалось со снижением вероятности прогрес- го иммунного ответа до конца не ясны, однако можно сирования заболевания [17]. На увеличение актив- предположить, что они вносят свой вклад в более бла-ности системного иммунитета у больных 40 лет гоприятное течение РМЖ и некоторых других злока-и старше указывает и обнаруженное только у них чественных новообразований у лиц старшего возраста. повышение по сравнению с показателями контрольной группы процента цитотоксических Т-лимфоцитов Заключение CD8+CD11b+CD28-, а также снижение числа «на- Оценка биологического возраста онкологических ивных» лимфоцитов (CD4CD62L+ и CD8+CD11b- пациентов приобретает все большее значение, по-CD28+). Благоприятными факторами у больных скольку с годами иммунная система человека пре-2-й группы оказались тенденция к снижению CD4+- терпевает определенные изменения. Опухолевый рост CD25+CD127--Трег на фоне увеличения числа CD4+- модулирует иммунный ответ на чужеродные и ауто-CD25+-Т-клеток и повышение количества активиро- антигены, и хотя возрастные различия в состоянии ванных CD3+HLA-DR+-Т-лимфоцитов и других иммунной системы сохраняются, они могут суще-HLA-DR+-клеток. HLA-DR+ является маркером ственно отходить от нормы. Это касается как поздней активации лимфоцитов, в частности Т-кле- врожденного, так и адаптивного иммунитета. Безус-ток, а увеличение в ПК числа лимфоцитов, экспрес- ловно, проблема взаимосвязи возраста и противо-сирующих этот маркер, может являться одним из по- опухолевого иммунного ответа, а также характера казателей продолжительной активации системного течения опухолевого процесса требует дальнейших противоопухолевого иммунного ответа [11]. В то же исследований как системного, так и местного имму-время у более молодых пациенток отмечалось только нитета у лиц разного возраста. Очевидно, что особен-повышение по сравнению с контрольной группой ности возрастных различий в иммунном ответе процента CD16+Perforin+-NK-клеток, их ЦТП, а так- на опухоль следует учитывать при назначении си-же процента CD8+Perforin+-лимфоцитов. Таким об- стемной терапии, в том числе иммунотерапии. В свя-разом, обнаруженные различия в субпопуляционном зи с этим проведенное в настоящем исследовании составе лимфоцитов ПК у больных разных возраст- изучение особенностей системного иммунного отве-ных групп позволили предположить, что системный та на опухоль у больных РМЖ и РСОПР разных воз-иммунный ответ у пациенток 40 лет и старше растных групп может внести определенный вклад (2-я группа) значительно более выражен, чем у боль- в повышение эффективности и безопасности системных моложе 40 лет. ного лечения онкологических пациентов.

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ | RUSSiAN JOURNAL OF BiOTHERAPY 12020 том 19 | vol. 19

Оригинальные статьи 87

ЛИТЕРАТУРА / REFERENCES

1. Kataoka A., Iwamoto T., Tokunaga E. et al. Young adult breast cancer patients have a poor prognosis independent

of prognostic clinicopathological factors: a study from the Japanese Breast Cancer Registry. Breast Cancer Res Treat 2016;160(1):163-72. DOI: 10.1007/s10549-016-3984-8.

2. Dhanuthai K., Rojanawatsirivej S., Thosaporn W. et al. Oral cancer: a multicenter study. Med Oral Patol Oral Cir Bucal 2018;23(1):23-9.

DOI: 10.4317/medoral.21999.

3. Stervbo U., Meier S., Mälzer J.N. et al. Effects of aging on human leukocytes (part I): immunophenotyping

of innate immune cells. Age (Dordr) 2015;37(5):92. DOI: 10.1007/s11357-015-9828-3.

4. Stervbo U., Bozzetti C., Baron U. et al. Effects of aging on human leuko-cytes(part II): immunophenotyping

of adaptive immune B and T cell subsets. Age (Dordr) 2015;37(5):93. DOI: 10.1007/s11357-015-9829-2.

5. Chen D.S., Mellman I. Oncology meets immunology: the cancer-immunity cycle. Immunity 2013;39(1):1-10. DOI: 10.1016/j.immuni.2013.07.012.

6. Kepp O., Senovilla L., Kroemer G. Immunogenic cell death inducers as anticancer agents. Oncotarget 2014;5(14):5190-1.

DOI: 10.18632/oncotarget.2266.

7. Muraro E., Furlan C., Avanzo M. et al. Local high-dose radiotherapy induces systemic immunomodulating effects of potential therapeutic relevance

in oligometastatic breast cancer. Front

Immunol 2017;8:1476.

DOI: 10.3389/fimmu.2017.01476.

8. Standish L.J., Sweet E.S., Novack J. et al. Breast cancer and the immune system. J Soc Integr Oncol 2008;6(4):158-68.

9. Péguillet I., Milder M., Louis D. et al. High numbers of differentiated effector CD4 T cells are found in patients with cancer and correlate with clinical response after neoadjuvant therapy

of breast cancer. Cancer Res 2014;74(8):2204-16. DOI: 10.1158/0008-5472.CAN-13-2269. 10. Бююль А., Цёфель П. SPSS: искусство обработки информации. Анализ ста-

тистических данных и восстановление скрытых закономерностей. СПб.: ДиаСофтЮП, 2005. 608 с. [Buul A., Cefel P. SPSS: art of information processing. Analysis of statistical data and recovery of hidden patterns. St. Petersburg: Diasoftyup, 2005. 608 p. (In Russ.)].

11. Melichar B., Touskova M., Dvorak J. et al. The peripheral blood leukocyte phenotype in patients with breast cancer: effect of doxorubicin/paclitaxel combination chemotherapy. Immunopharma-col Immunotoxicol 2001;23(2):163-73. DOI: 10.1081/IPH-100103857.

12. Gravekamp C., Chandra D. Aging and cancer vaccines. Crit Rev Oncog 2013;18(6):585-95.

DOI: 10.1615/critrevoncog.2013010588.

13. Schnell A., Schmidl C., Herr W.,

Siska P.J. The peripheral and intratumor-al immune cell landscape in cancer patients: a proxy for tumor biology and a tool for outcome prediction. Biomedicines 2018;6(1):25. DOI: 10.3390/biomedicines6010025.

14. He Q., Li G., Ji X. et al. Impact

of the immune cell population in peripheral blood on response and survival in patients receiving neoadjuvant chemotherapy for advanced gastric cancer. Tumour Biol 2017;39(5):1010428317697571. DOI: 10.1177/1010428317697571.

15. Spitzer M.H., Carmi Y., Reticker-Flynn N.E. et al. Systemic immunity

is required for effective cancer Immunotherapy. Cell 2017;168(3):487-502.e15. DOI: 10.1016/j.cell.2016.12.022.

16. Cheng H., Luo G., Lu Y. et al.

The combination of systemic inflammation-based marker NLR and circulating regulatory T cells predicts the prognosis of resectable pancreatic cancer patients. Pancreatology 2016;16(6):1080-4. DOI: 10.1016/j.pan.2016.09.007.

17. Черткова А.И., Славина Е.Г.,

Шоуа Э.К. и др. Основные параметры клеточного иммунитета у больных раком молочной железы с тройным негативным фенотипом: связь с эффективностью химиотерапии. Медицинская иммунология 2018;20(5):667-80. DOI: 10.15789/ 1563-0625-2018-5-667-680. [Chertko-va A.I., Slavina E.G., Shoua E.K. et al.

The main parameters of cellular immunity in patients with breast cancer with triple negative phenotype: relationship with the effectiveness of chemotherapy. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology 2018;20(5): 667-80. (In Russ.)].

18. Benczik M., Gaffen S.L. The interleukin (IL)-2 family cytokines: survival

and proliferation signaling pathways in T lymphocytes. Immunol Invest 2004;33(2):109-42. DOI: 10.1081/IMM-120030732.

19. Tredan O., Manuel M., Clapisson G.

et al. Patients with metastatic breast cancer leading to CD4+ T cell lymphopaenia have poor outcome. Eur J Cancer 2013;49(7):1673-82. DOI: 10.1016/j.ejca.2012.11.028.

20. Peron J., Cropet C., Tredan O. et al. CD4 lymphopenia to identify end-of-life metastatic cancer patients. Eur J Cancer 2013;49(5):1080-9.

DOI: 10.1016/j.ejca.2012.11.003.

21. Черткова А.И., Славина Е.Г., Окружнова М.А. и др. Эффекторные и регуляторные Т-лимфоциты периферической крови больных раком молочной железы с тройным негативным фенотипом: связь с клиническим эффектом химиотерапии. Вестник РОНЦ им. Н.Н. Блохина 2016;27(2):89-97. [Chertkova A.I., Slavina E.G., Okruzhnova M.A. et al. Effector and regulatory T-lymphocytes of peripheral blood of breast cancer patients with triple negative phenotype: relationship with the clinical effect

of chemotherapy. Vestnik RONTS im. N.N. Blokhina = Journal of N.N. Blokhin RCRC 2016;27(2): 89-97. (In Russ.)].

22. Terabe M., Berzofsky J.A. The role of NKT cells in tumor immunity. Adv Cancer Res 2008;101:277-348. DOI: 10.1016/S0065-230X(08)00408-9.

23. McFarland H.I., Nahill S.R., Maciaszek J.W., Welsh RM. CD11b (Mac-1): a marker for CD8+ cytotoxic T cell activation and memory in virus infection. J Immunol 1992;149(4):1326-33.

24. Fu B., Tian Z., Wei H. Subsets of human natural killer cells and their regulatory effects. Immunology 2014;141(4):483-9. DOI: 10.1111/imm.12224.

Вклад авторов

A.И. Черткова: научная интерпретация данных, написание текста рукописи; Т.Н. Заботина: написание текста рукописи, научное редактирование статьи;

B.Т. Циклаури, И.А. Задеренко: получение клинических данных и участие в их анализе, предоставление материалов исследования; Е.Н. Захарова, А.А. Борунова: анализ полученных данных;

Д.В. Табаков: анализ полученных данных, перевод; Э.К. Шоуа: получение данных для анализа;

И.К. Воротников, А.М. Мудунов: разработка дизайна исследования, утверждение окончательного варианта статьи, участие в анализе клинических данных и обсуждении рукописи;

З.Г. Кадагидзе: обзор публикаций по теме статьи, обсуждение рукописи, редактирование статьи. Author's contributions

A.I. Chertkova: scientific interpretation of data, writing the manuscript; T.N. Zabotina: writing the manuscript, scientific editing of an article;

V.T. Tsiklauri, I.A. Zaderenko: obtaining clinical data and participating in their analysis, providing research materials; E.N. Zakharova, A.A. Borunova: analysis of the obtained data;

D.V. Tabakov: analysis of the obtained data, translation;

E.K. Shoua: obtaining data for analysis;

И.К. Воротников, A.M. Mudunov: developing the research design, approving final version of the article, analyzing clinical data, article discussion and editing;

Z.G. Kadagidze: reviewing of publications of the article's theme, article discussion and editing. ORCID авторов/ ORCID of authors

A.И. Черткова/A.I. Chertkova: https://orcid.org/0000-0001-9146-5986 Т.Н. Заботина/T.N. Zabotina: https://orcid.org/0000-0001-7631-5699

B.Т. Циклаури/V.T. Tsiklauri: https://orcid.org/0000-0002-3090-695X Е.Н. Захарова/E.N. Zakharova: https://orcid.org/0000-0003-2790-6673 Д.В. Табаков/D.V. Tabakov: https://orcid.org/0000-0002-1509-2206 А.А. Борунова/A.A. Borunova: https://orcid.org/0000-0002-1854-3455 Э.К. Шоуа/E.K. Shoua: https://orcid.org/0000-0003-3937-474X

И.А. Задеренко/I.A. Zaderenko: https://orcid.org/0000-0003-0183-4827 А.М. Мудунов/A.M. Mudunov: https://orcid.org/0000-0002-0918-3857 З.Г. Кадагидзе/Z.G. Kadagidze: https://orcid.org/0000-0002-0058-098

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.

Финансирование. Исследование выполняется в рамках НИР по теме «Оптимизация панели молекулярных маркеров иммунокомпе-тентных клеток системного и локального иммунитета как средства выявления надежных прогностических и предиктивных факторов эффективности противоопухолевой терапии для персонализации лечения онкологических больных» (сроки исполнения: 01.01.2019— 31.12.2021, руководитель - Т.Н. Заботина). АААА-А19-119022090028-6.

Financing. The study is carried out within the framework of research on the topic "Optimization of the panel of molecular markers of immunocompetent cells (ICCS) of systemic and local immunity as a means of identifying reliable prognostic and predictive factors of the effectiveness of anti-cancer therapy for personalization of treatment of cancer patients" (deadlines: 01.01.2019-31.12.2021, head — T.N. Zabotina). AAAA-A19-119022090028-6.

Информированное согласие. Все пациенты подписали информированное согласие на участие в исследовании. Informed consent. All patients gave written informed consent to participate in the study.

Статья поступила: 22.11.2019. Принята к публикации: 19.12.2019. Article submitted: 22.11.2019. Accepted for publication: 19.12.2019.