МОДИФИЦИРОВАННЫЕ САХАРИДЫ

1. Модифицированный капсулярный сахарид, содержащий блокирующую группу в положении гидроксильной группы на, по меньшей мере, одной из моносахаридных единиц соответствующего нативного капсулярного сахарида, где блокирующая группа имеет формулу (Ia) или (Ib):
,
где
2
Х представляет собой С(O), S(O) или SO;
1
2
3
Y представляет собой NRR или R;
1
1-6
R представляет собой Cалкил, замещенный 1, 2 или 3 группами, независимо выбранными из гидроксила, сульфидрила и амина;
2
1-6
R представляет собой Н или Салкил;
3
1-6
R представляет собой Cалкил.
2. Модифицированный капсулярный сахарид по п.1, где блокирующая группа имеет формулу (Ia).
3. Модифицированный сахарид по п.2, где Х представляет собой С(O).
1
2
4. Модифицированный капсулярный сахарид по п.2, где Y представляет собой NRR.
2
5. Модифицированный капсулярный сахарид по п.4, где R представляет собой Н.
1
6. Модифицированный капсулярный сахарид по п.4, где R замещен 1, 2 или 3 гидроксильными группами.
1
1-6
7. Модифицированный капсулярный сахарид по п.4, где R замещен одной группой, причем это замещение происходит на дистальном конце Cалкильной цепи:
1
8. Модифицированный капсулярный сахарид по п.4, где R замещен двумя вицинальными группами.
1
1
1-6
9. Модифицированный капсулярный сахарид по п.4, где сахарид содержит а) по меньшей мере, одну блокирующую группу, в которой Rзамещен одной группой, причем это замещение происходит на дистальном конце Cалкильной цепи, и b) по меньшей мере, одну блокирующую группу, в которой R замещен двумя вицинальными группами.
1
1
10. Модифицированный капсулярный сахарид по п.9, где соотношение блокирующих групп, в которых R замещен одной группой, и блокирующих групп, в которых R замещен двумя вицинальными группами, составляет 90:10.
3
11. Модифицированный капсулярный сахарид по п.2, где Y представляет собой R.
3
3
12. Модифицированный капсулярный сахарид по п.11, где R представляет собой СН.
13. Модифицированный капсулярный сахарид по п.1, где, по меньшей мере, 10% моносахаридных единиц сахарида имеют блокирующие группы.
14. Модифицирующий капсулярный сахарид по п.1, где все моносахаридные единицы сахарида имеют блокирующие группы.
15. Моносахаридный капсулярный сахарид по п.1, где соответствующий нативный капсулярный сахарид содержит моносахаридные единицы, связанные фосфодиэфирными связями.
16. Модифицированный капсулярный сахарид по п.15, где соответствующий нативный капсулярный сахарид представляет собой сахарид серогруппы A Neisseria meningitidis.
17. Модифицированный капсулярный сахарид по п.16, в котором блокирующая группа находится в любом из положений 4 и/или 3 соответствующего сахарида серогруппы A Neisseria meningitidis.
18. Модифицированный капсулярный сахарид по п.17, в котором блокирующая группа находится в любом из положений 4 соответствующего сахарида серогруппы A Neisseria meningitidis.
19. Модифицированный капсулярный сахарид по п.1, где модифицированный капсулярный сахарид представляет собой олигосахарид.
20. Модифицированный капсулярный сахарид по п.1, где модифицированный сахарид содержит терминальную аномерную гидроксильную группу или аминогруппу, полученную из терминальной аномерной гидроксильной группы.
21. Модифицированный капсулярный сахарид по любому из пп.1-19, в котором присутствует, по меньшей мере, одна моносахаридная единица модифицированного капсулярного сахарида, в которой две вицинальные гидроксильные группы соответствующего нативного капсулярного сахарида не содержат блокирующие группы
1
22. Модифицированный капсулярный сахарид по любому из пп.1-19, где одна из моносахаридных единиц сахарида содержит блокирующие группы, в которых R замещен двумя вицинальными гидроксильными группами.
23. Сахарид формулы;
в которой
Т имеет формулу (А) или (В):
n представляет собой целое число от 1 до 100;
каждая группа Z независимо выбирается из ОН, ОАс или блокирующей группы, как определено в пп.1-8 или 11, или 12; и
каждая группа Q независимо выбирается из ОН, ОАс или блокирующей группы, как определено в пп.1-8 или 11, или 12;
2
1
2
2
1
2
V выбирается из -NH, -NНЕ, -NEE, W или -O-D, где: Е, Е и Е представляют собой защитные группы для атома азота, которые могут быть одинаковыми или разными, и D представляет собой защитную группу для кислорода;
W выбирается из -ОН или блокирующей группы, как определено в пп.1-8 или 11-12;
1
W выбирается из -ОН или блокирующей группы, как определено в любом из пп.1-8 или 11 или 12;
2
W выбирается из -ОН или блокирующей группы, как определено в любом из пп.1-8 или 11-12;
и где, по меньшей мере, одна из групп Z и/или, по меньшей мере, одна из групп Q представляют собой блокирующие группы, как определено в пп.1-8 или 11, или 12.
24.Сахарид по п.23, в котором, по меньшей мере, 10% групп Z представляет собой блокирующие группы.
25. Сахарид по п.23, в котором n представляет собой целое число от 15 до 25.
26. Сахарид по любому из пп.23-25, в котором, по меньшей мере, 1% групп Q представляет собой блокирующие группы.
27. Способ модификации капсулярного сахарида, содержащий стадии:
(a) обеспечения капсулярного сахарида, имеющего, по меньшей мере, одну гидроксильную группу на моносахаридной единице; и
(b) превращение указанной, по меньшей мере, одной гидроксильной группы в блокирующую группу, как определено в пп.1-8 или 11, или 12.
1
2
28. Способ по п.27, в котором блокирующая группа представляет собой -OC(O)NRR, и стадия (b) содержит этапы:
(bI) реакции капсулярного сахарида с бифункциональным реагентом в органическом растворителе; и
(b2) реакции продукта стадии (bI) с аминосоединением формулы (I):
,
1
2
где R и R представляют собой группы, определенные в любом из пп.1-8.
3
29. Способ по п.27, где блокирующая группа представляет собой - OC(O)R, и стадия (b) содержит этап:
3
2
(b1) реакции капсулярного сахарида с [(RC(O)]O в присутствии имидазольного катализатора.
30. Способ по п.28 или 29, в котором капсулярный сахарид на стадии (а) представляет собой капсулярный олигосахарид.
31. Способ по п.30, в котором капсулярный сахарид получают деполимеризацией и распределением по размеру соответствующего нативного капсулярного полисахарида.
32. Способ по п.30, в котором капсулярный сахарид на стадии (а) представляет собой нативный капсулярный полисахарид, и способ кроме того содержит стадию (с), на которой продукт со стадии (b) распределяют по размерам, таким образом обеспечивая модифицированный капсулярный олигосахарид.
33. Способ модификации полисахарида серогруппы A Neisseria meningitidis, содержащий стадии:
(a) обеспечения нативного полисахарида серогруппы A Neisseria meningitidis;
(b) деполимеризации и распределения по размерам полисахарида для обеспечения олигосахарида; и
(c) превращения, по меньшей мере, одной гидроксильной группы олигосахарида в блокирующую группу по любому из пп.27-29.
34. Способ модификации полисахарида серогруппы A Neisseria meningitidis, содержащий стадии:
(а) обеспечения нативного полисахарида серогруппы A Neisseria meningitidis;
(b) превращения, по меньшей мере, одной гидроксильной группы полисахарида в блокирующую группу по любому из пп.27-29; и
(c) деполимеризации и распределения по размерам полученного полисахарида.
35. Способ получения модифицированного капсулярного сахарида по пп.1-26, который представляет собой общий способ синтеза, содержащий образование гликозидных связей между двумя или более моносахаридными единицами.
36. Модифицированный капсулярный сахарид, получаемый или полученный способом по любому из пп.27-35.
37. Конъюгат сахарид-белок модифицированного сахарида по любому из пп.1-26 или 36.
38. Конъюгат по п.37, где белок представляет собой бактериальный токсин или анатоксин.
39. Конъюгат по п.38, где бактериальный токсин или анатоксин представляет собой дифтерийный токсин или анатоксин.
197
40. Конъюгат по п.39, где бактериальный токсин или анатоксин представляет собой CRM.
41. Способ создания конъюгата сахарид-белок, содержащий стадии:
(c) обеспечения модифицированного капсулярного сахарида по п.20 и
(d) конъюгирования модифицированного капсулярного сахарида с белком через терминальную аномерную гидроксильную группу или аминогруппу, полученную из терминальной аномерной гидроксильной группы.
42. Способ создания конъюгата сахарид-белок, содержащий стадии:
(a) обеспечения модифицированного капсулярного сахарида по п.21;
(b) превращения, по меньшей мере, одной пары вицинальных гидроксильных групп в альдегидные группы путем окислительного расщепления; и
(c) связывания модифицированного капсулярного сахарида с белком путем восстановительного аминирования.
43. Способ создания конъюгата сахарид-белок, содержащий стадии:
(a) обеспечения модифицированного капсулярного сахарида по п.22;
(b) превращения, по меньшей мере, одной пары вицинальных гидроксильных групп в альдегидные группы путем окислительного расщепления; и
(c) связывания модифицированного капсулярного сахарида с белком путем восстановительного аминирования.
44. Способ по п.43, где все вицинальные гидроксильные группы, присутствующие в блокирующих группах, превращаются в альдегидные группы на стадии (b).
45. Способ по п.43, в котором условия окислительного расщепления выбираются так, чтобы только часть вицинальных гидроксильных групп, присутствующих в блокирующих группах, превратилась в альдегидные группы на стадии (b).
46. Способ по любому из пп.41-45, в котором белок представляет собой белок, определенный в любом из пп.38-40.
47. Конъюгат сахарид-белок модифицированного сахарида, получаемого или полученного способом по любому из пп.41-46.
48. Молекула, содержащая сахаридную составляющую формулы:
где
Т имеет формулу (А) или (В):
n представляет собой целое число от 1 до 100;
каждая группа Z независимо выбирается из ОН или блокирующей группы, как определено в пп.1-8 или 11, или 12; и
каждая группа Q независимо выбирается из ОН или блокирующей группы, как определено в пп.1-8 или 11-12;
W выбирается из ОН или блокирующей группы, как определено в пп.1-8 или 11-12;
L представляет собой О, NH, NE, S или Se;
где L связана с белком-носителем свободной ковалентной связью;
и где белок-носитель, представляет собой тот, который определен в любом из пп.38-40,
и где, по меньшей мере, одна из групп Z и/или, по меньшей мере, одна из групп Q представляют собой блокирующие группы, как определено в пп.1-8 или 11-12.
49. Молекула, содержащая сахарид формулы:
где
Т имеет формулу (А) или (В):
1
n, Z, Q, W, W и V определены в п.23, и по меньшей мере одна из групп Z и/или по меньшей мере одна из групп Q имеют формулу (IIa) или (IIIb):
,
где
2
X представляет собой С(O), S(O) или SO;
2
4
Y' представляет собой NRR;
2
1-6
R представляет собой Н или Cалкил; и
4
1-4
1-5
R представляет собой Cалкилен-СН(О) или Cалкилен-NH-, где группа -NH- представляет собой часть белка-носителя;
и где белок-носитель представляет собой белок, определенный в любом из пп.38-40.
50. Фармацевтическая композиция, содержащая (а) модифицированный сахарид по любому из пп.1-26 или 36 и/или конъюгат сахарид-белок по любому из пп.37-40 или 47 и/или молекулу по п.48 или 49, и (b) фармацевтически приемлемый носитель.
51. Композиция по п.50, кроме того содержащая сахаридный антиген из одной или более серогрупп С/W135 и Y N.meningitidis, причем сахарид при желании может представлять собой олигосахарид и при желании может быть конъюгирован с белком-носителем.
52. Композиция по п.50, кроме того содержащая вакцинный адъювант.
53. Композиция по п.52, где адъювант представляет собой фосфат алюминия.
54. Композиция по любому из пп.50-53, которая представляет собой вакцину против заболевания, вызываемого N.meningitidis.
55. Способ вызова гуморального иммунного ответа у млекопитающего, содержащий введение фармацевтической композиции по пп.50-54 млекопитающему.
56. Модифицированный сахарид по любому из пп.1-26 или 36; конъюгат по любому из пп.37-40 или 47; или молекула по п.48 или 49 для применения в качестве лекарственного средства.
57. Применение модифицированного полисахарида по любому из пп.1-26 или 36, или конъюгата по любому из пп.37-40 или 47, или молекулы по п.48 или 49, в производстве лекарственного средства для предотвращения или лечения заболевания, вызванного одной или более капсулированных бактерий.
58. Применение по п.57, где заболевание представляет собой бактериальный менингит.