Представление о системе мезенхимопоэза и мезенхимальных стволовых клетках

УДК 612.11 ББК 28.912

Шахов Владимир Павлович

доктор медицинских наук г. Челябинск Shachow Wladimir Pavlovich Doctor medical science Chelyabinsk Латюшин Ян Витальевич кандидат психологических наук, доцент г. Челябинск Latyushin Yan Vitalyevich Candidate of Psychological Sciences, Assistant Professor Chelyabinsk

Представление о системе мезенхимопоэза и мезенхимальных стволовых

клетках

Concept about mesenchymopoiesis system and mesenchymal stem cells

В работе представлены данные о существовании в организме системы мезенхимопоэза. Система состоит из центрального органа (костный мозг) и периферического отдела. В костном мозге происходит хранение, созревание мезенхимальных стволовых клеток. При действии стрессовых факторов они пролиферируют и дифференцируются в созревающие и зрелые формы, способные мигрировать через кровь в ткани и органы.

This work represents data about existence of mesenchymopoiesis system in organism. It consists of central organ (bone marrow) and peripheral'section. Bone marrow is responsible for storage and ripening of mesenchymal stem cells. They

proliferate and differentiate into ripening and ripe forms under influence of stressful factors and then are able to migrate through blood into tissues and organs.

Ключевые слова: мезенхимальная стволовая клетка, мезенхимопоэз, костный мозг, стволовые клетки, цитокины, стресс.

Key words: mesenchymopoiesis system; stem cells; bone marrow; cytokines; stress.

Основоположником учения о мезенхимальных стволовых клетках считается наш соотечественник А.Я. Фридентштейн, открывший в начале 70-х годов прошлого века популяцию костномозговых не гемопоэтических клеток, которые в культуре ткани формировали так называемые колониеобразующие единицы фибробластов (КОЕф). В его лаборатории было установлено, что данная популяция родоначальных клеток обнаруживается не только в костном мозге, но в лимфоидных и других органах (Friedenstein A.J., et al.,1982).

Часть из этих клеток способна к циркуляции в крови (Jaganathan B. et al.,2007). При этом стоит отметить, что один из первых описал эти клетки А.А.Максимов в 1927 г., который также еще в 1907 г. предложил термин стволовая клетка (Деев Р.В., 2005; Maximov AA., 1907, 1927).

Популяция мезенхимальных стволовых клеток (МСК) является чрезвычайно разнородной и ее пластические возможности до конца не изучены. Поэтому часть авторов эти клетки называют мезенхимальными (по происхождению), другие исследователи говорят о стромальных стволовых клетках (по их основной функции в организме). Недавно был предложен объединительный термин мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки (ММСК) (Tsai M.S. et al., 2000; Bianco P., Robey P.G.,2000; Bianco P., Riminucci M., Gronthos S. et al. 2001).

Мезенхимальные клетки являются примордиальными клетками мезодермальной природы, формирующими систему соединительной ткани организма. Мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки (ММСК) в эмбриогенезе и постнатальном периоде дифференцируются по двум

направлениям, включая фибробласты, кардиомиоциты, поперечнополосатые и гладкомышечные клетки, нервные (глиальные) клетки, остеобласты, хондроциты, адипоциты, эндотелиальные клетки и стромальные элементы, формирующие гемопоэзиндуцирующее микроокружение (ГИМ) (Caplan A.I.,1994; Dennis J., Charbord P.., 2002; Sudo K. et el., 2007).

Количество ММСК в костном мозге обычно варьирует в пределах 1-5х106, которое с возрастом уменьшается. Они имеют фенотип CD 13+,29+, 44+,105+,14-,16-, 34-,45-,56-, 104-, 106-, c-kit-, проявляют антиген для стволовых клеток, не экспрессируют антигены гистосовместимости HLA-I и HLA-DR-. ММСК экспрессируют гены для ИЛ (интерлейкина) -11,15,27, рецепторы для ИЛ-10, 13,17, ФНО - ß (фактор некроза опухоли- ß-ß) и костимулирующие молекулы для Т-клеток типа CD80 и CD86 (Симбирцев А.С., 2004; Tsai M.S., et al., 2000; Ozaki K. еt al., 2007; Latyushin Y.V., 2007). Около 66% МСК человека в обычных условиях находятся в G1 фазе клеточного цикла. Следует подчеркнуть, что мультипотентностью во взрослом организме обладают не только ММСК, но и другие типы СК, например, нейральные и эпителиальные (табл.1). Кроме того, существует класс более дифференцированных СК, которые могут определяться и в отдельных органах и тканях, обладая ограниченным дифференцировочным потенциалом, и их роль, очевидно, ограничивается самоподдержанием. В частности речь идет о сателлитных мышечных клетках, овальных клетках в печени, клетках-предшественницах в базальном слое роговицы и т.д. (Caplan A.I. et al., 1991; Dennis J. et al., 1996; Dennis J. et al., 2002; Minguell J.J. et al.2001; Wagers A.J. et al., 2004).

Кроме того, предполагается, что в костном мозге могут находиться еще более примитивные СК, способные к более, чем к 60 удвоениям в культуре ткани, дифференцирующиеся не только в клетки мезенхимальной линии, но и в эндотелиальные и эндодермальные прекурсоры, в частности с формированием печеночных и эпителиоидных клеток. Все это делает МСК идеальным источником стволовых клеток для проведения клеточной терапии различных заболеваний. Раскрытие пролиферативного и дифференцировочного

потенциала МСК и других типов СК открывает новое направление в клеточной биотехнологии, биоинженерии, создании гибридных интеллектуальных органов, нанобиороботов и тканей, обладающих максимальной биосовместимостью (Карлов А.В., Шахов В.П., 2001; ОЬп1дЬ1_8.е1 а1.,2004; Кап I., е! а1.,2005; О2аУ К. е! а1.,2007).

В настоящем разделе мы остановимся только на классе мезенхимальных (мезенхимных) стволовых клеток костного мозга. Это продиктовано тем, что данная категория прогениторных клеток наиболее изучена в отношении их морфофункциональных свойств, фенотипу, способности к коммитированию, пролиферации, дифференцировке в направлении кардиомиогенеза, ангиогенеза, фиброгенеза и других линий тканей, принимающих участие в механизмах адаптации и восстановления поврежденных структур сердца (ЭИшбЫ Б. е! а1., 2007).

Главными функциями МСК костного мозга(Б1апео Р. е! а1., 2000, 2001) являются:

1. Формирование гемопоэз индуцирующего микроокружения (ГИМ).

2. Формирование специфического микроокружения тканей и органов (СМ).

3. Участие в морфогенезе, закладке тканей и органов в эмбриогенезе.

4. Самоподдержание и восстановление пула стромальных клеток.

5. Участие в гомеостатических реакциях организма, а также в процессах регенерации, репарации и адаптации системы мезенхимальных клеток (костного мозга, сердечной, мышечной, костной, хрящевой и др. тканей) в норме и при патологии.

С филогенетических позиций мезенхимальные клетки возникают раньше, чем кроветворная и сосудистая системы, по-видимому, во время появления группы животных, лишенных крови и полостных жидкостей (губок, кишечнополостных и плоских червей) (Мах1шоу А., 1927; Заварзин А.А., 1953, 1985). У губок, очевидно, они представляли собой так называемые амебоциты, располагающиеся в мезоглеи и характеризующиеся полифункциональными свойствами. Амебоциты иглокожих при контакте с различными поверхностями

обладали способностью уплощаться и формировать однородный синцитий. Кроме того, они могут формировать многоклеточные агрегаты и многоядерные симпласты (Хадорн, Венер, 1989).

Следует подчеркнуть, что миграция МСК из костного мозга в органы в большинстве случаев происходит только тогда, когда происходит опустошение (истощение) в периферическом компартменте системы МСК или при повреждении ткани. Такой процесс наблюдается при переломах костей, повреждении мышечной ткани. В обычных условиях процессы физиологической регенерации в этих тканях не требует дополнительного притока МСК из центрального органа и осуществляются за счет собственных резервов. Несколько иная ситуация наблюдается в миокарде, нервной и других тканях при их повреждении, в которых собственные и циркулирующие стволовые клетки не способны включить механизмы репаративной регенерации (Kan I., et al.,2005).

Синонимами обозначения МСК могут выступать такие термины, как КОЕф, мезенхимальные прогенираторные клетки, костномозговые стромальные клетки, мультипотентные стволовые клетки костного мозга, мезенхимные или мезодермальные СК. Большинство названий отражают скорее смысловую, нежели функциональную сторону вопроса. В нашей работе мы будем использовать термины - мультипотентные мезенхимальные стволовые клетки (ММСК), мезенхимопоэз, система или пул мезенхимальных стволовых клеток (МСК) (Friedenstein A.J., et al.,1982; Bianco P., Robey P.G.,2000; Bianco P., Riminucci M., Gronthos S. et al. 2001; Tsai M.S. et al., 2000).

В жидкой культуре костного мозга с низкой плотностью клеток МСК формируют колонии, состоящие преимущественно из фибробластоподобных клеток разной степени зрелости. Исследование клеточного цикла показало, что только 10% клеток в мезенхимальных колониях участвуют в процессах пролиферации (фазы: S+G2+M). Большинство фибробластоподобных элементов находится в состоянии покоя (фазы^Ю^. В свою очередь на основании анализа ДНК и РНК, а также характера культивирования было установлено, что

покоящиеся МСК представляют собой неоднородную группу. Часть из них, по-видимому, встала на путь коммитирования и дифференцировки в том или ином направлении. Гетерогенность клеток, входящих в состав колоний, отчетливо проявляет различный пролиферативный потенциал. Так, одни МСК способны к 3-4 удвоениям, тогда как другие к 15 и более. Многие авторы подчеркивают, что такой разнобой в полученной информации может быть вызван не только функциональными особенностями МСК, но и техникой выделения, культивирования клеток, состояния донора и его возраста, наличия той или иной патологии и т.п. (Tsai M.S. et al., 2000; Bianco P., Robey P.G.,2000; Bianco P., Riminucci M., Gronthos S. et al. 2001 Miura Y. et al, 2006;. Jaganathan B.. et al. 2007;).

В процессе культивирования МСК, как правило, сохраняют свой кариотип и теломеразную активность. В отличие от кроветворных стволовых клеток, МСК не несут на своей поверхности рецепторы CD45+, CD34- и CD14+. МСК формируют достаточно динамичную сложноорганизованную

гистогенетическую систему как в костном мозге, состоящую из дифференцированных фибробластов, ретикулярных клеток, эндотелия, компонентов экстрацеллюлярного матрикса (ЭЦМ), цитокинов, интегринов, так и в других тканях и органах, работающую, очевидно, по каскадоподобноному механизму. При этом взаимодействие между собой и с другими клетками осуществляется через специфические рецепторы и молекулы адгезии. Особенно важным в этом процессе является экспрессия CD44 антигена. Трансмембранный протеин CD44 представляет собой рецептор для различных лиганд, таких, как гиаулоран и остеопонтин. Эти рецепторные взаимодействия, могут играть важную роль для пространственной организации межклеточного материала не только в костном мозге, но и в костной ткани. Основные функциональные и фенотипические характеристики МСК представлены в табл.1, 2. (Minguell J. et al., 2001).

С помощью культуральных методов был выявлен ряд факторов, способных вызвать дифференцировку МСК в том или ином направлении. Следует

подчеркнуть, что ни в одном исследовании (кроме опытов c трансфекцией специфических кардиомиогенных генов) не удалось вызвать превышающее 4060% данной категории СК методами биохимического перепрограммирования. Когда культуры костномозговых МСК исследуют по отношению их пролиферативного статуса, то часто выявляется их неоднородность. Так, в 2000 г. D. Colter et al. показали, что в культуре ткани обнаруживается так называемый некоммитированный пул МСК (МСКн). МСКн представлены незначительным количеством малых и агранулярных клеток с низкой способностью к формированию колоний, не реагирующих на специфический Ki-67 антиген клеточного цикла, отличающихся от более дифференцированных (коммитированных) МСК с низкой пролиферативной активностью. Число покоящихся МСКн в культуре ткани обычно не превышает 1%. Они вступают на путь коммитирования и дифференцировки под продолжительным действием эмбриональной телячьей сыворотки (ЭТС) и зависят от присутствия фактора роста фибробластов 2 типа (ФРФ-2).

Таблица 1

Основные функциональны и фенотипические характеристики

костномозговых МСК

Тип маркерных молекул или факторов Характеристика, тип

Специфические антигены БШ, БНЗ, БШ 8ТЯО-1 -актин гладких мышц МАВ1740

Продуцируемые цитокины и ростовые факторы Интерлейкины: 1а, 6, 7, 8, 11, 12, 14, 15; ЛИФ, ФСК, Бк-3, лиганды для ГМ-КСФ, Г-КСФ, М-КСФ1

Рецепторы для цитокинов и ростовых факторов ИЛ-1,3,4,6,7; ЛИФ, ФСК, Г-КСФ, ИФ*, ФНО-2, ТФР-В1, ТФРВП,  -ФРФ, ЭПФР, ФРВТр

Молекулы адгезии Интегрины: «уВЗ, «уВ5 ; Интегриновые ветви: а1, «2, «3, «4, а

5, . .v, В1, В3, В4 ICAM-1, ICAM-2, VCAM-1, ALCAM-1, LFA-3, L-селектин, эндоглин, CD44

Молекулы экстрацеллюлярного матрикса Коллаген типы: I, III, IV, V, VI, фибронектин, ламинин, гиалуроновая кислота, протеогликаны

МСКн, практически не чувствительны к антиметаболиту - 5-фторурацилу, не несут маркеров, характерных для остеогенных, адипогенных клеток, имеют низкое содержание РНК и высокий уровень экспрессии гена для ODC, что указывает на непролиферативный статус клетки. Логично предположить, что между различными субпопуляциями МСК существует тесная взаимосвязь. Очевидно, что более примитивные прогениторные клетки, к которым можно отнести пул МСКн, являются базовым звеном, обеспечивающим самоподдержание стволовых клеток в костном мозге на постоянном уровне и слабо реагирующим на факторы активации и супрессии. Более дифференцированные МСК обеспечивают пластичность и адекватный ответ на действие экстремальных факторов. Ряд авторов считает, что такое взаимодействие регулируется по аутокринному механизму. Однако прямых доказательств, подтверждающих или опровергающих эти предположения нет. Следует подчеркнуть, что доказательства существования МСКн получены в основном при изучении клональных культур костного мозга in vitro. Несмотря на все успехи, еще предстоит выяснить, имеются ли в целостном организме аналогии МСКн. Это чрезвычайно трудная задача, т.к. количество «обычных», коммитированных МСК в костном мозге не превышает 1-10х106, тогда как количество МСКн, согласно культуральным исследованиям, еще меньше и не превышает величины 0,1-1х10 (Minguell J. et. al , 2001; Toma C. et al, 2002).

Коммитированные МСК костного мозга

Как уже было сказано, в культуре костного мозга, наряду с пулом МСКн, существует более многочисленная категория, обладающая высоким

пролиферативным потенциалом, которую можно отнести к коммитированным МСК (МСКк) (Minguell J. et al., 2001;.Toma C. et al.,2002). Эти прогенираторные клетки также не являются однородными. Условно среди них можно выделить МСКк, способные дифференцироваться в:

а) кардиомиоциты, скелетные миоциты, гладкомышечные миоциты, остеоциты, хондроциты и адипоциты;

б) нейральные и сосудистые элементы;

в) эндотелиоидные клетки.

Дифференцировку МСКк в том или ином направлении в системе in vitro можно добиться путем добавления индукторов и супрессоров. Так, например, остеогенную дифференцировку можно вызвать при добавлении в культуру - в-глицерофосфата и аскорбиновой кислоты, стимулировать адипогенез за счет введения дексаметазона, изобутилметилксантиана и метиндола. Хондрогенез активирует ТФР-а , миогенез и кардиомиогенез - аскорбиновая кислота, дексаметазон и 5-азацитидин (таблица 2).

Таблица 2

Активаторы и супрессоры, влияющие на дифференцировку МСК в системе in vitro (Hamada H. et al., 2005; Kassem M., et al., 2005, с

дополнениями)

Путь дифференци ровки Активаторы Супрессоры Фенотипические маркеры:

молекулрные клеточные

Кардиомиоци ты, мышечные клетки, гладкомышеч ные клетки GATA-4,5,6, MEF-2C; BTEB-2, витамин С, 5-азацитидин, ДМСО, дексаметазон ИЛ-3, ФРФ MyoD Myf 5 и 6 MEF-2, Миогенин,п MRF4, Сокращающие ся клетки

Адипоциты PPAR-42; С/ЕВР-л/, дексаметазон, Wnt-10P; GATA-2 PPARi 2, C/EBPB, Липидные вакуоли в

изобутилметаксантин, инсулин, индометацин адипсин, лептин, липаза цитоплазме

Хондроциты Бох-9, ТФР-Р, аскорбиновая кислота №АТ-р Ша-1, аггрикан Матрикс из коллагена-11, IX типов

Остеобласты Ша-1, МБК-2, дексаметазон, витамин С, В-глицерофосфат) РРАЯ- 2 Остеопонтин, остекальцин, щелочная фосфатаза, Ша-1 Коллаген - I и III типов

Примечание: СЬГа-1 - основной-связывающий фактор А1 ; РРАЯ-Т2 - пероксисомный

активизированный рецептор пролифератор 2' ; С/ЕВР- ./В - фактор, связывающий протеин . /В; №АТ-р - ядерный Т фактор активации; МЕБ-2С - миоцит специфический связывающий фактор-2С; ВТЕВ-2 - основной транскрипторный регулираторный элемент связывающий белок, МБК - морфогенетический белок кости.

Таким образом, мезенхимопоэз на уровне коммитированных МСК представляет собой сложный многоступенчатый процесс постепенного ограничения пролиферативной и дифференцировочной способности прогениторных клеток. По мере продвижения исходных клеток к конечному фенотипу, они, с одной стороны, теряют способность к самовосстановлению и, с другой - усиливают процессы дифференцировки.

Рис. 1. Электронная микроскопия «округлой» МСК костного мозга мыши Fi(CBAxC57Bl/6). Увеличение 19243х .

Большинство исследователей придерживаются мнения, что коммитирование, пролиферация, дифференцировка и созревание любых типов СК, включая и мезенхимальные, зависят от интегрального действия разнообразных факторов, формирующих индуцирующее микроокружение, например, в виде «ниш» (Watt F.M., Hogan B.L., 2000).

Исходя из этого посыла, ряд авторов пытаются построить иерархическую структуру мезенхимальных клеток, как для обычных, так и экстремальных условий. Первые попытки схематично изобразить иерархическую структуру развития МСК были предприняты в 1995, когда A. Каплан (A. Caplan) предложил "гипотезу мезенгенного процесса". Вслед за этим последовал ряд моделей, большинство из которых предполагали наличие иерархической структуры для так называемых исходных примитивных стволовых клеток, принимающих участие в процессе развития более дифференцированных потомков. Основными недостатками иерархической модели мезенхимопоэза является то, что многие цитокины, ростовые и дифференцирующие факторы, активаторы, супрессоры и ингибиторы, действующие на уровне МСК, пока еще не определены. Кроме того, пластичность МСК, их способность изменять свой фенотип в зависимости от обстоятельств, а также отсутствие надежных генов-маркеров, в частности, для МСКн или МСКк, достаточно трудно объяснить с вышеуказанных позиций.

Рис.2. Фрагмент незрелой мезенхимальной колонии (ув. 400х), сосотоящий из многочисленных округлых клеток, выросшей на 7 сутки культивирования клеток костного мозга мыши Б1(СВАхС57В1/6). Окраска азуром П-эозином.

Рис.3. Многочисленные макроколонии, выросшие на 14-е сутки культивирования клеток костного мозга мыши Б1(СВАхС57В1/6). Окраска азуром П-эозином. Зрелая колония, состоящая из многочисленных фибробластоподобных клеток, выросшая при культивировании костного мозга мыши Б1(СВАхС57В1/6) (14 сутки). Увеличение 100х. Окраска азуром П-эозином.

На 14-18 сутки культивирования (клонирования) костного мозга человека клетки дифференцируются в фибробластоидные, миоцитоподобные, ретикулярные, хондрогенные, остеогенные, адипоцитоцитогенные, эндотелиоидные, нейро-подобные и др. элементы, что соответствует данным других авторов (Фриденштейн, Лурия, 1980; Bianco et al.,2000, 2002). Некоторые типы клеток представлены на рис 2-4.

Рис. 4. Фибробластопободные, ретикулярные, нейральные, эндотелиоидные, миоцитоподобные клетки, адипоциты, недифференцированные элементы, делящимиеся кариоцитами, обнаруженные в культуре ткани костного мозга мыши F1(CBAxC57Bl/6) на 14 сутки клонирования. Увеличение 400х. Окраска азуром II-эозином.

Таким образом, мезенхимальной ткани присущи все черты, характерные для любой системы. Она имеет центральный орган - костный мозг, циркулирующий пул и периферический отдел. Однако отличительной особенностью мезенхимопоэза, например, по сравнению с гемопоэзом, является то, что сохраняются черты незрелой эмбриональной ткани, которой присуща достаточно большая пластичность. Четкой границы между центральным и периферическим отделами провести чрезвычайно трудно. МСК способны к одновременному развитию по нескольким направлениям, т.е. они имеют «плавающий» фенотип. Очевидно данный процесс находится под влиянием многочисленных индуктивных и супрессорных факторов, которые часто действуют одновременно. Это сопровождается появлением маркеров для разных типов дифференцировки и затрудняет идентификацию клеток. Другая интересная особенность МСК, отличающая их от кроветворных, кишечных и эпидермальных СК, заключается в том, что дифференцированные потомки данных клеток способны к реверсии, т.е. к экспрессии генов в материнских клетках. Интересно, что их дифференцировка не является необратимой, и они могут включать различные пути своего дальнейшего развития. С теоретических позиций мультилинейность МСК может быть объяснена стохастической моделью, где пластичность коммитированных клеток открывает новый дифференцировочный путь. Этот механизм, по-видимому, носит общебиологический характер. Во многом аналогичная функциональная «гибкость» наблюдается и не только у МСК, но и у мононуклеарных фагоцитов, лимфоидных, нейро-эктодермальных (нейроны, астроциты и олигодендроциты) и энтодермальных (гепатоциты) стволовых клеток (Маянский Д.Н., 1981; Shakhov V. et al., 1999; Watt F.M., Hogan B.L., 2000).

Библиографический список

1. Гистология: Учебник. 2-е изд. /Под ред. Э.Г. Улумбекова, Ю.А. Челышева. - М.: ГЭОТАР-МЕД- 2001 - 327с.

2. Деев, Р.В. Научное наследие Александра Максимова и современность // Р.В. Деев / Клеточная трансплантология и тканевая инженерия.-2005.- №1.- С.4-8.

3. Заварзин, А.А. Избранные труды. Т.4. Очерки по эволюционной гистологии // А.А. Заварзин - М.-Л.: Изд-во АН СССР.-1953.- 718 с.

4. Заварзин, А.А. Основы сравнительной гистологии // А.А. Заварзин - Л.: ЛГУ.- 1985.- 400 с.

5. Карлов, А.В. Системы внешней фиксации и регуляторные механизмы оптимальной биомеханики // А.В. Карлов, В.П. Шахов - Томск: STT. - 2001.- 480 с.

6. Маянский, Д.Н. Клетки Купфера и система моннонуклеарных фагоцитов // Д.Н. Маянский -Наука.- Новосибирск.-1981.- 172 с.

7. Симбирцев, А.С. Цитокины: классификация и биологические функции // А.С. Симбирцев / Цитокины и воспаление. - 2004.-Т. 3, № 2.-С. 16-22.

8. Friedenstein, A.J. Marrow Microenvironment Transfer by Heterotopic Transplantation of Freshly Isolated and Cultured Cells in Porous Sponges// A.J. Friedenstein, N.W. Latzinik, A.G. Grosheva et al. / Exp Hematol. - 1982. - V.10. - P.217-227.

9. Shakhov, VP. Role of Neuro-Endocrine, -Lymphocitary, Reticuloendothelial Systems in Regulation of Topic Bone Formation in Vivo at Fractures // VP. Shakhov, A.V. Karlov, S.S. Shakhova, I.N. Kurilov / IV Congress of European Federation of National Associated of Orthopaedic and Traumatology. - Brussels, 1999. - Р. 75.

10. Barry, F.P. Biology and Clinical Applications of Mesenchymal Stem Cells // F.P. Barry / Birth. Defects. Res. C. Embryo Today. - 2003.-Vol.69, N 3.-P.250-256.

11. Barry, F.P. Mesenchymal Stem Cells: Clinical Applications and Biological Characterization. // F.P. Barry, J.M. Murphy / Int. J. Biochem. Cell Biol. - 2004.-Vol. 36, N 4.-P.568-584.

12. Bianco, P. Bone Marrow Stromal Stem Cells: Nature, Biology, and Potential Applications // P. Bianco, M. Riminucci, S. Gronthos et al. / Stem cell. - 2001.-№19. - С.180-192.

13. Bianco, P. Marrow Stromal Stem Cells // P. Bianco, P.G. Robey / J Clin Invest. - 2000.-№105. -С.1663-1668.

14. Caplan, A.I. The Mesengenic Process // A.I. Caplan / Clin Plast Surg. - 1994. - №21. - С.429-435.

15. Dennis, J. Origin and Differentiation of Human and Murine Stroma Stem Cells // J. Dennis, P. Charbord / Cells. - 2002. - №20. - С.205-214.

16. Edwards, R.G. Stem Cells Today: B1. Bone Marrow Stem Cells // Edwards R.G. / Reprod. Biomed. Online. - 2004. - Vol. ;9, N 5).-P. 541-583.

17. Hamada, H. Mesenchymal Stem Cells (MSC) as Therapeutic Cytoreagents for Gene Therapy//

H. Hamada, M. Kobune, K. Nakamura et al. / Cancer Sci.-2005.-Vol. 96, N 3.-P.149-156.

18. Jaganathan, B. Rho Inhibition Induces Migration of Mesenchymal Stromal Cells // B. Jaganathan, B. Ruester, L. Dressel et al. / Stem Cells. - 2007. - V. 25. - P. 1966 -1974.

19. Jiang, Y. Pluripotency of Mesenchymal Stem Cells Derived From Adult Marrow // Y. Jiang, B.N. Jahagirdar, R.L. Reinhardt et al. / Nature.-V. 2002.-V.418.-P.41-49.

20. Kan, I. Integral Therapeutic Potential of Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells // I. Kan, E. Melamed, D. Offen / Current Drug Targets. - 2005.-Vol. 6.-P. 1-11.

21. Kassem, M. Mesenchymal Stem Cells: Biological Characteristics and Potential Clinical Applications // M. Kassem / Cloning Stem Cells.-2004.-Vol.6, N 4.-P.369-374.

22. Kassem, M. Mesenchymal Stem Cells: Cell Biology and Potential use in Therapy // M. Kassem, M. Kristiansen, B.M. Abdallah / Basic Clin. Pharmacol. Toxicol.-2004.-Vol.95, 5.-P. 209-914.

23. Latyushin, Y.V. The Disadaptive Action of the Nervous and Immune Systems in the Acute and Chronis Stress // Y.V. Latyushin / International Symposium «Interaction of the Nervous and Immune Systems in Health and Disease». - Saint-Petersburg, 2007. P.43.

24. Maximow, A.Ä. Experimentalle Untersuchunger zur Postfotalen Histogenese des Myeloiden Gewebes // A. А. Maximow / Ziegl. Beitr. Pat. Anat. - 1907.-P. 41.

25. Maximov, A.A. Handbuch der Mikroskopischen Anatomie des Menschen, II/1 Die Gewebe I // А.А. Maximow / Herausgegeben von W.Mollendorff. - Berlin: Verlag von J.Springer, 1927. -S.232-549.

26. Maxmiov, A.A. Bindegewebe unb Blutblidende// Handbuch der Mirk Oskopischen Anatomie des Menschen // A.A. Maxmiov / W. Mollendorff. - Berlin, 1927. - Bd.2.-233-583.

27. Minguell, J.J. Mesenchymal Stem Cells // J.J. Minguell, A. Erices, P. Conget / Exp. Biol. Med.-2001.- Vol. 226.- P. 507-520.

28. Miura, Y. Mesenchymal Stem Cell-Organized Bone Marrow Elements: An Alternative Haematopoietic Progenitor Resource // Y. Miura, Z. Gao, M. Miu et al. / Stem Cells.- 2006.-Vol. 24, N. 11.- P. 2428 -2436.

29. Ohnishi, S. Mesenchymal Stem Cells for the Treatment of Heart Failure // S. Ohgushi, H. Ohgushi, S. Kitamura, N. Nagaya / Int. J. Hematol.- 2007.-Vol.86, N 1.-P.17-21.

30. Ozaki, K. Mechanisms of Immunomodulation by Mesenchymal Stem Cells // K. Ozaki, K. Sato,

I. Oh et al. / Int. J. Hematol.- 2007.-Vol. 86, N 1.-P.5-7.

31. Sudo, K. Mesenchymal Progenitors Able to Differentiate Into Osteogenic, Chondrogenic, and/or Adipogenic Cells in Vitro are Present in Most Primary Fibroblast-Like Cell Populations // K. Sudo, M. Kanno, K. Miharada et al. / Stem Cells.-2007. -Vol. 25, N. 7.-P. 1610-1617.

32. Toma, C. Human Mesen^ymal Stem Cells Differentiate to a Cardiomyocyte Phenotype in Adult Murine Heart // C. Toma, M F. Pittenger, K S. Cahil et al. / Circulation.- 2002.- V. 105.-P. 93-98.

33. Tsai, M.S. Isolation of Human Multipotent Mesenchymal Stem Cells From Second-Trimester Amniotic Fluid Using a Novel Two-Stage Culture Protocol // M.S. Tsai, J.L. Lee, Y.J. Chang, S.M. Hwang / Hum. Reprod.-2004.-V. 19.-P. 1450-1456.

34. Tzukerman, M. Telomeres and Telomerase in Human Health and Disease // M. Tzukerman, S. Selig, K. Skorecki / J. Pediatr. Endocrinol. Metab. - 2002.-Vol. 15, N 3.-P.:229-240.

35. Wagers, A.J. Plasticity of Adult Stem Cells // A.J. Wagers, I.L. Weissman / Cell. - 2004. - Vol. 116.-P. 639-648.

36. Watt, F.M. Out of Edam: Stem Cells and Their Niches // F.M. Watt, B.L. Hogan / Science. -2000. - V. 287. - P.1427-1430.

Bibliography

1. Histology: Textbook. 2d edition / Int. E. G. Ulumbekov, Y. A. Chelishev. - M.: GEOTAR-MED. - 2001. - 327p.

2. Deev, R.V. Scientific heritage of A. Maksimov and contemporaneity // R.V. Deev / Cellular transplantology and tissue engineering. - 2005. - #1. P. 4-8.

3. Zavarzin, A.A. Selected works. T.4. Essays in evolutional histology // A.A. Zavarzin. - M. - L.: Publishers AN USSR. - 1953. - 718 p.

4. Zavarzin, A.A. Fundamentals of comparative histology // A.A. Zavarzin. - L.: LGU. - 1985. -400 p.

5. Karlov, A.V. Systems of external fixation and control mechanisms of optimal biomechanics // A.V. Karlov, V P. Shahov. - Tomsk: STT. - 2001. 480 p.

6. Mayansky, D.N. Kupfer cells and the system of mononuclear phagocytes // D.N. Mayansky / Nauka. - Novosibirsk. - 1981. - 172 p.

7. Simbirtsev, A.S. Cytokines: classification and biological functions // A.S. Simbirtsev / Cytokines and inflammation. 2004. - T. 3.

8. Friedenstein, A.J. Marrow Microenvironment Transfer by Heterotopic Transplantation of Freshly Isolated and Cultured Cells in Porous Sponges// A.J. Friedenstein, N.W. Latzinik, A.G. Grosheva et al. / Exp Hematol. - 1982. - V.10. - P.217-227.

9. Shakhov, VP. Role of Neuro-Endocrine, -Lymphocitary, Reticuloendothelial Systems in Regulation of Topic Bone Formation in Vivo at Fractures // VP. Shakhov, A.V. Karlov, S.S. Shakhova, I.N. Kurilov / IV Congress of European Federation of National Associated of Orthopaedic and Traumatology. - Brussels, 1999. - Р. 75.

10. Barry, F.P. Biology and Clinical Applications of Mesenchymal Stem Cells // F.P. Barry / Birth. Defects. Res. C. Embryo Today. - 2003.-Vol.69, N 3.-P.250-256.

11. Barry, F.P. Mesenchymal Stem Cells: Clinical Applications and Biological Characterization. // F.P. Barry, J.M. Murphy / Int. J. Biochem. Cell Biol. - 2004.-Vol. 36, N 4.-P.568-584.

12. Bianco, P. Bone Marrow Stromal Stem Cells: Nature, Biology, and Potential Applications // P. Bianco, M. Riminucci, S. Gronthos et al. / Stem cell. - 2001.-№19. - C.180-192.

13. Bianco, P. Marrow Stromal Stem Cells // P. Bianco, P.G. Robey / J Clin Invest. - 2000.-№105. -C.1663-1668.

14. Caplan, A.I. The Mesengenic Process // A.I. Caplan / Clin Plast Surg. - 1994. - №21. - C.429-435.

15. Dennis, J. Origin and Differentiation of Human and Murine Stroma Stem Cells // J. Dennis, P. Charbord / Cells. - 2002. - №20. - C.205-214.

16. Edwards, R.G. Stem Cells Today: B1. Bone Marrow Stem Cells // Edwards R.G. / Reprod. Biomed. Online. - 2004. - Vol. ;9, N 5).-P. 541-583.

17. Hamada, H. Mesenchymal Stem Cells (MSC) as Therapeutic Cytoreagents for Gene Therapy// H. Hamada, M. Kobune, K. Nakamura et al. / Cancer Sci.-2005.-Vol. 96, N 3.-P.149-156.

18. Jaganathan, B. Rho Inhibition Induces Migration of Mesenchymal Stromal Cells // B. Jaganathan, B. Ruester, L. Dressel et al. / Stem Cells. - 2007. - V. 25. - P. 1966 -1974.

19. Jiang, Y. Pluripotency of Mesenchymal Stem Cells Derived From Adult Marrow // Y. Jiang, B.N. Jahagirdar, R.L. Reinhardt et al. / Nature.-V. 2002.-V.418.-P.41-49.

20. Kan, I. Integral Therapeutic Potential of Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells // I. Kan, E. Melamed, D. Offen / Current Drug Targets. - 2005.-Vol. 6.-P. 1-11.

21. Kassem, M. Mesenchymal Stem Cells: Biological Characteristics and Potential Clinical Applications // M. Kassem / Cloning Stem Cells.-2004.-Vol.6, N 4.-P.369-374.

22. Kassem, M. Mesenchymal Stem Cells: Cell Biology and Potential use in Therapy // M. Kassem, M. Kristiansen, B.M. Abdallah / Basic Clin. Pharmacol. Toxicol.-2004.-Vol.95, 5.-P. 209-914.

23. Latyushin, Y.V. The Disadaptive Action of the Nervous and Immune Systems in the Acute and Chronis Stress // Y.V. Latyushin / International Symposium «Interaction of the Nervous and Immune Systems in Health and Disease». - Saint-Petersburg, 2007. P.43.

24. Maximow, A.Ä. Experimentalle Untersuchunger zur Postfotalen Histogenese des Myeloiden Gewebes // A.Ä. Maximow / Ziegl. Beitr. Pat. Anat. - 1907.-P. 41.

25. Maximov, A.A. Handbuch der Mikroskopischen Anatomie des Menschen, II/1 Die Gewebe I // Ä.Ä. Maximow / Herausgegeben von W.Mollendorff. - Berlin: Verlag von J.Springer, 1927. -S.232-549.

26. Maxmiov, A.A. Bindegewebe unb Blutblidende// Handbuch der Mirk Oskopischen Anatomie des Menschen // A.A. Maxmiov / W. Mollendorff. - Berlin, 1927. - Bd.2.-233-583.

27. Minguell, J.J. Mesenchymal Stem Cells // J.J. Minguell, A. Erices, P. Conget / Exp. Biol. Med.-2001.- Vol. 226.- P. 507-520.

28. Miura, Y. Mesenchymal Stem Cell-Organized Bone Marrow Elements: An Alternative Haematopoietic Progenitor Resource // Y. Miura, Z. Gao, M. Miu et al. / Stem Cells.- 2006.-Vol. 24, N. 11.- P. 2428 -2436.

29. Ohnishi, S. Mesenchymal Stem Cells for the Treatment of Heart Failure // S. Ohgushi, H. Ohgushi, S. Kitamura, N. Nagaya / Int. J. Hematol.- 2007.-Vol.86, N 1.-P.17-21.

30. Ozaki, K. Mechanisms of Immunomodulation by Mesenchymal Stem Cells // K. Ozaki, K. Sato, I. Oh et al. / Int. J. Hematol.- 2007.-Vol. 86, N 1.-P.5-7.

31. Sudo, K. Mesenchymal Progenitors Able to Differentiate Into Osteogenic, Chondrogenic, and/or Adipogenic Cells in Vitro are Present in Most Primary Fibroblast-Like Cell Populations // K. Sudo, M. Kanno, K. Miharada et al. / Stem Cells.-2007. -Vol. 25, N. 7.-P. 1610-1617.

32. Toma, C. Human Mesenchymal Stem Cells Differentiate to a Cardiomyocyte Phenotype in Adult Murine Heart // C. Toma, MF. Pittenger, K S. Cahil et al. / Circulation.- 2002.- V. 105.-P. 93-98.

33. Tsai, M.S. Isolation of Human Multipotent Mesenchymal Stem Cells From Second-Trimester Amniotic Fluid Using a Novel Two-Stage Culture Protocol // M.S. Tsai, J.L. Lee, Y.J. Chang, S.M. Hwang / Hum. Reprod.-2004.-V. 19.-P. 1450-1456.

34. Tzukerman, M. Telomeres and Telomerase in Human Health and Disease // M. Tzukerman, S. Selig, K. Skorecki / J. Pediatr. Endocrinol. Metab. - 2002.-Vol. 15, N 3.-P.:229-240.

35. Wagers, A.J. Plasticity of Adult Stem Cells // A.J. Wagers, I.L. Weissman / Cell. - 2004. - Vol. 116.-P. 639-648.

36. Watt, F.M. Out of Edam: Stem Cells and Their Niches // F.M. Watt, B.L. Hogan / Science. -2000. - V. 287. - P.1427-1430.