СЕЛЕКТИВНЫЙ ЛИЗИС КЛЕТОК С ПОМОЩЬЮ ИОННЫХ ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ

1. Способ селективного лизиса эукариотических клеток в образце, содержащем или предположительно содержащем микроорганизмы, при этом указанный способ включает этапы:
a) обеспечения образца с эукариотическими клетками, содержащего или предположительно содержащего микроорганизмы,
b) добавления ионного поверхностно-активного вещества и буфера к указанному образцу с получением раствора с pH около 9,0 или выше,
c) инкубирования указанного раствора в течение периода времени, достаточно длительного для лизиса эукариотических клеток.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный образец представляет собой образец крови млекопитающего.
3. Способ по п.2, отличающийся тем, что указанный образец крови представляет собой цельную кровь.
4. Способ по любому из пп.1-3, отличающийся тем, что указанный микроорганизм выбирают из группы, состоящей из бактерий и грибов.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный этап инкубирования с) осуществляют в течение от 30 секунд до 10 минут.
6. Способ п.1, отличающийся тем, что соотношение между объемом добавляемого детергента и добавляемого буфера и объемом образца составляет от 2/1 до 1/10.
7. Способ по п.1, отличающийся тем, что ионный детергент присутствует в растворе в концентрации от 0,1 до 5% (% масса/объем или % объем/объем).
8. Способ по п.1, отличающийся тем, что ионное поверхностно-активное вещество выбирают из группы, состоящей из анионных поверхностно-активных веществ и катионных поверхностно-активных веществ, при этом анионное поверхностно-активное вещество предпочтительно выбирают из группы, состоящей из алкилсульфатов, алкилэфирсульфатов, докузатов, фторсодержащих поверхностно-активных веществ с сульфонатными группами, алкилбензолсульфонатов, алкиларилэфирфосфатов, алкилэфирфосфатов, алкилкарбоксилатов и фторсодержащих поверхностно-активных веществ с карбоксилатными группами, более предпочтительно выбирают из группы, состоящей из лаурилсульфата аммония, додецилсульфата натрия (SDS), дезоксихолата натрия, н-додецилбензолсульфоната натрия, лаурилэфирсульфата натрия (SLES), миретсульфата натрия, диоктилсульфосукцината натрия, перфтороктансульфоната (PFOS), перфторбутансульфоната, стеарата натрия, лауроилсаркозината натрия, перфторнонаноата и перфтороктаната (PFOA или PFO), а катионное поверхностно-активное вещество предпочтительно выбирают из группы, состоящей из бромида цетилтриметиламмония (СТАВ), хлорида цетилтриметиламмония (СТАС), хлорида цетилпиридиния (СРС), полиэтоксилированного таллового амина (РОЕА), хлорида бензалкония (ВАС), хлорида бензетония (BZT), 5-бром-5-нитро-1,3-диоксана, хлорида диметилдиоктадециламмония и бромида диоктадецилдиметиламмония (DODAB).
9. Способ по п.8, отличающийся тем, что ионное поверхностно-активное вещество представляет собой додецилсульфат натрия (SDS).
10. Способ по п.1, дополнительно включающий этап центрифугирования указанного инкубированного раствора и выделения указанных микроорганизмов.
11. Способ по п.1, дополнительно включающий этап фильтрования указанного инкубированного раствора через фильтр с размером пор, при котором микроорганизмы удерживаются на указанном фильтре.
12. Способ по п.1, дополнительно включающий этап лизирования указанных микроорганизмов.
13. Способ по п.1, дополнительно включающий молекулярный анализ с применением нуклеиновых кислот.
14. Набор компонентов для осуществления селективного лизиса эукариотических клеток в образце, содержащем или предположительно содержащем микроорганизмы, и выявления указанных микроорганизмов, при этом набор компонентов содержит по меньшей мере щелочной буфер и ионное поверхностно-активное вещество.
15. Устройство (1) для выявления микроорганизмов в образце, содержащее:
- камеру (2) лизиса для приема жидкого образца объемом от 1 до 20 мл,
- резервуар (3), содержащий щелочной буфер с pH около 9,0 или выше и
содержащий ионное поверхностно-активное вещество, или резервуар, содержащий щелочной буфер (31) с pH около 9,0 или выше, и резервуар, содержащий ионное поверхностно-активное вещество (32), при этом указанные резервуары соединены с камерой (2) лизиса,
- фильтр (4), соединенный с камерой (2) лизиса, для фильтрования образца после лизиса, при этом указанный фильтр (4) имеет размер пор, при котором бактерии удерживаются на фильтре, и
- камеру (5) выявления для анализирования наличия ДНК.
16. Устройство по п.15, отличающееся тем, что щелочной буфер имеет pKa выше 9,0, и/или ионное поверхностно-активное вещество представляет собой додецилсульфат натрия.