Коррекция состояния иммунитета и гемостаза при рожистом воспалении

ном клиническом случае ВИЧ-статус больного был первоначально неизвестен, проведенная дифференциальная диагностика поражения головного мозга с использованием современных методов нейровизуализации и молекулярно-генетического исследования спинномозговой жидкости на инфекции, позволила установить церебральный токсоплазмоз. В свою очередь, данный диагноз послужил основанием заподозрить у больного

тяжелый иммунодефицит и обследовать на ВИЧ-инфекцию, которая была подтверждена серологическими методами.

В результате специфического лечения получено значительное улучшение в неврологическом статусе, также подтверждающее этиологическую роль токсоплаз-мы в возникновении энцефалита у больного СПИДом.

THE EXPERIE^E OF DIAGNOSTICS AND TREATMENT FOR TOXOPLASMIC ENCEPHALITIS IN THE PATIENT WITH THE AIDS

V.A. Borisov, A.G. Petrova, A.G. Selezneva, I.V. Kotova, A.A. Kuzmin, S.V. Davydova, N.G. Pustogorodskaja, T.I. Batishcheva, I.A. Kvashenkina

In the article the patient with cerebral-toxoplasmosis is studied: diagnostics, a clinical picture and efficiency of specific treatment of the given rare pathology, taking into account Acquired Immune Deficiency Syndrome.

2.

ЛИТЕРАТУРА 3.

Верещагин Н.В., Миловидов Ю.К., Гулевская Т. С. Невро- 4

логические аспекты синдрома приобретенного иммунного дефицита. (Аналитический обзор зарубежной литературы) // Медицинский реферат. журн. — 1989. — 5

Раздел 9, № 1. — С.3-16. .

Покровский В.В., Ермак Т.Н., Беляева В.В., Юрин О.Г. ВИЧ-инфекция: клиника, диагностика и лечение / Под " " ” ' М.: ГЭОТАР -

ред. В.В. Покровского. МЕД, 2003. - 488 с.

2-е изд.

Рахманова А.Г. ВИЧ-инфекция (клиника и лечение). — СПб.:ССЗ, 2000. - 370 с.

ЯковлевН.А., ЖулевН.М., Слюсарь Т.А. Нейроспид. Неврологические расстройства при ВИЧ-инфекции/ СПИДе: Учебное пособие. - М.:*МИА, 2005. - 278 с. Mussini C, Pezzotti P., Govoni A., et al. Discontinuation of primary prophylaxis for Pneumocystis carinii pneumonia and toxoplasmic encephalitis in human immunodeficiency virus type-I-infected patients: the changes in opportunistic prophylaxis study // J. Infect. Dis. — 2000. — vol. l8l. — P1635-1642.

© ЕМЕЛЬЯНОВА А.Н., ВИТКОВСКИЙ Ю.А., КИЖЛО Л.Б., СЕРГЕЕВАЭ.И., КАЛИНИНАЭ.Н. - 2008

КОРРЕКЦИЯ СОСТОЯНИЯ ИММУНИТЕТА И ГЕМОСТАЗА ПРИ РОЖИСТОМ ВОСПАЛЕНИИ

А.Н. Емельянова, Ю.А. Витковский, Л.Б. Кижло, Э.И. Сергеева, Э.Н. Калинина

Резюме. Применение рекомбинантного интерлейкина-2 (ронколейкина) при рожистом воспалении нормализует состояние клеточного и гуморального иммунитета. В короткие сроки в значительной степени ликвидирует явления ДВС-синдрома. Использование ронколейкина для лечения больных рожистым воспалением сокращает сроки нормализации клинических показателей на 4 дня, способствует уменьшению осложнений и рецидивов.

Ключевые слова: рожистое воспаление, иммунитет, гемостаз, ронколейкин.

В современных условиях заболевания, обусловленные Р-гемолитическим стрептококком группы А (БГСА), продолжают оставаться важной и актуальной проблемой практического здравоохранения многих стран мира, в том числе и России. По данным ВОЗ в мире ежегодно регистрируется не менее 111 млн. случаев заболевания кожи, связанные с БГСА [7].

По мнению В.Л. Черкасова, по частоте регистрации второе место среди стрептококкозов после ангины занимает рожистое воспаление и наносит большой социально-экономический ущерб обществу.

Как один из клинических вариантов течения стрептококковой инфекции, рожа является инфекционным заболеванием, протекающим в острой и хронической формах, и характеризуется очаговым серозным и серозно-геморрагическим воспалением кожи, реже слизистых оболочек, а также лихорадкой и общетоксическими проявлениями.

Заболевание рожей встречается повсеместно в виде спорадических случаев, по выборочным данным в настоящее время заболеваемость в Европейской части России составляет 15-20 тыс. на 10000 тыс. населения.

В последние годы со времени введения в лечебную практику антибактериальных препаратов отмечено изменение клинического течение рожи и ее исходов: снизилась летальность, частота интоксикационного синдрома и развития тяжелых осложнений рожи. Однако от-

мечается рост геморрагических и буллезно-геморрагических форм заболевания с медленной репарацией тканей в очаге воспаления. Не уменьшается частота рецидивов и формирования хронической лимфовенозной недостаточности, которые приводят к длительной потере трудоспособности, а при развитии лимфедемы — к инвалидности часто развиваются гнойно-некротические осложнения заболевания [7,11].

По мнению ряда авторов, в последние годы нарастание числа больных с геморрагическими тяжелыми формами рожи связано не только с изменением М-штаммов БГСА, циркулирующих среди населения, но также с возможными изменениями иммунной реактивности организма и, в частности, характера иммунных реакций кожи, сенсибилизированных к новым сероти-пам стрептококка, с развитием аллергических некро-тизирующих васкулитов, активизацией свертывающей системы крови с появлением местного геморрагического синдрома. Данное предположение подтверждается современными клиническими и экспериментальными исследованиями о выраженном влиянии современных серотипов стрептококка, основных токсических субстанций микроорганизма на активизацию системы гемостаза, фибринолиза. Особое значение в этом аспекте занимает комплексное изучение иммунных и гемос-татических реакций. Известно, что системы иммунитета, гемостаза и неспецифической резистентности

организма составляют единую интегральную клеточногуморальную системы защиты [9]. Установлено, что связующим звеном в этой системе выступают цитокины [5,6]. При развитии инфекционного процесса иммунные и гемостатические реакции проявляются достаточно рано, и их характер во многом определяет особенности развития заболевания.

В связи с этим становится важным не только изучить иммунные и гемостатические механизмы при рожистом воспалении, но и попытаться влиять на него посредством воздействия на защитные системы организма.

Целью наших исследований явилась оценка эффективности, безопасности и переносимости ронколейки-на в комбинации с базисной терапией у больных рожистым воспалением по критериям клинических, гемос-тазиологических и иммунологических ответов.

Материалы и методы

Для решения поставленной задачи использован метод с выделением опытной и контрольной группы. В контрольной группе проводилось медикаментозное лечение по общепринятой схеме. В этой группе наблюдалось 20 человек. Больные контрольной группы получали базисную терапию, включающую антибактериальную, дезинтокси-кационную, десенсибилизирующую терапию, витамины, местное лечение в виде ультрафиолетового облучения. Больным опытной группы (26 человек) наряду с традиционным лечением применяли ронко-лейкин — лекарственную форму рекомбинантного интерлейкина-2 человека (БИО-ТЕХ, Санкт-Петербург, рег. Уд. МЗ РФ № 000122/01-2000) в разовой дозе 250-500 тыс.

ЕД в 400 мл 0,9% раствора хлорида натрия, медленно, внутривенно, капельно. Ронко-лейкин вводили после исследования системы иммунитета и гемостаза под контролем теста лейкоцитарно-тромбоцитарной адгезии. Полученные данные сравнивались с результатами исследований, проведенных в контрольной группе и у 25 здоровых доноров. Многогранность биологической активности рекомбинантного интерлейкина — препарата ронколейкин — позволяет при его применении рассчитывать не только на коррекцию проявлений иммунной недостаточности, но и на оптимизацию функционирования всей системы иммунореактивности.

Методы определения количества иммунокомпетентных клеток: подсчет общего числа лейкоцитов проводили стандартным методом в камере Горяева.

Субпопуляции лимфоцитов определяли методом иммуногистохимии с использованием моноклональных антител ТОО «МедБиоСпектр»

(Москва).

Определение концентрации иммуноглобулинов классов А, М, G проводили иммуноферментным методом с использованием тест-наборов ООО «Вектор-Бест»

[10,11].

Методы исследования системы гемостаза: для исследования свертывания крови использовали реактивы и фиб-ринтаймер фирмы Behring (Германия). Коагуляционный гемостаз оценивался по следующим тестам: время свертывания крови, время рекальцификации плазмы, АЧТВ, про-тромбиновое, тромбиновое время. Концентрацию фибриногена определяли коагулометрическим способом. Содержание антикоагулянтов АТ-III выявляли методом радиальной иммунодиффузии реактивами Behring (Германия). Все методы, применяемые в наших исследованиях, опубликованы в руководствах по исследованию системы гемостаза [1,2,3] и поэтому не нуждаются в дополнительном разъяснении.

Определения показателя лимфоцитарно-тромбоцитар-ной адгезии, относящегося к функциональным тестам оцен-

ки иммунокомпетентных клеток, проводили по методу, предложенному Ю.А. Витковским [6].

Для определения концентрации цитокинов использовали наборы реагентов ТОО «Цитокин» (г. Санкт-Петербург). Измерение уровня цитокинов проводили методом твердофазного ИФА с помощью двойных антител и применением пероксидазы хрена.

Статистическая обработка материала: анализ полученных данных проведен с помощью метода вариационной статистики для связанных и несвязанных между собой наблюдений с определением различий по 1-критерию Стьюдента и вычислен показатель значимости различий. Результаты считались значимыми при р<0,05 [4]. Статистическая обработка осуществлялась при помощи электронной программы (Windows ХР Ехсеї 2001).

Результаты и обсуждение У больных рожистым воспалением в разгар заболевания до лечения по сравнению со здоровыми людьми отмечался лейкоцитоз (табл. 1). Общее и относительное количество лимфоцитов изменялось в зависимости от клинической формы и степени тяжести заболевания. Выявлялись изменения в популяционном составе

Таблица 1

лимфоцитов. На фоне снижения числа клеток, составляющих Т-популяции, уменьшалось количество В-лим-фоцитов. Концентрация у больных слегка снижа-

лось, а содержание 1&А и ^М повышалось. Установлено, что применение ронколейкина приводит к быстрому восстановлению содержания субпопуляций лимфоцитов и устранению дисбаланса основных классов иммуноглобулинов, что свидетельствует о быстрой ликвидации воспалительного очага (табл. 2).

Известно, что ИЛ-2 вызывает гиперкоагуляцию [5], в связи, с чем нами изучена система гемостаза при лечении ронколекином рожистого воспаления. Установлено, что у больных рожистым воспалением отмечается гиперпродукция провосполительных цитокинов, снижается способность лимфоцитов к тромбоцитарной адгезии, развивается типичный синдром внутрисосуди-стого свертывания крови (ДВС-синдром). Использова-

Состав популяций лимфоцитов у больных рожистым воспалением, получавших ронколейкин

Показатели Здоровые лица

до лечения после

Лимфоциты, х 109/л 2,04+0,40 1,95+0,22 p1<0,001 2,57+0,33 p1 <0,001 p, <0,001

CD3 1,32+0,05 0,72+0,08 p1<0,001 1,41+0,28 p1 <0,05 p2 <0,001

CD4 0,89+0,05 0,26+0,02 p1<0,001 0,9+0,08 p1 <0,001 p2 <0,001

Примечание: р1 — значимость различий по сравнению со здоровыми людьми; р2 — значимость различий по сравнению с периодом до и после лечения.

Таблица 2

Содержание иммуноглобулинов у больных рожистым воспалением, получавших

ронколейкин

Группы больных n Иммуноглобулины

А М G

Здоровые 225 75,9+5,8 158,2+8,4 173,6+7,2

Больные рожистым воспалением (до лечения) 226 138,2+9,2 p<0,001 180,5+7,4 p<0,001 147,8+5,3 p<0,05

Больные рожистым воспалением (после лечения) 226 148,6+8,6 p<0,001 176,3+7,6 p>0,05 176,4+8,1 p>0,05

Примечание: p — значимость различий по сравнению со здоровыми людьми.

Таблица 3

Коагулограмма, больных рожистым воспалением, получавших ронколейкин

Показатели Здоровые

до лечения после

Время свертывания крови, с 432,0+15,0 285,0±22,0 p<0,001 373,0+18,0 p<0,05

Время рекальцификации, с 165,0+3,2 108,9±9,4 p<0,001 138,5+8,4 p<0,001

АЧТВ,с 48,6+1,8 31,8±4,0 p<0,001 38,2+3,2 p<0,05

Протромбиновое время, с 12,0+0,5 10,7±0,2 p<0,001 11,8+8,4 p<0,05

Тромбиновое время, с 20,0+0,4 17,5±0,2 p<0,001 19,6+0,1 p<0,05

Антитромбин-Ш, % 100,0+1,2 6,8±0,4 p<0,001 84,4+2,5 p<0,001

Фибриноген, г/л 3,1+0,1 76,8±3,9 p<0,001 4,3+0,2 p<0,01

Примечание: p — значимость различий по сравнению со здоровыми людьми.

ние ронколейкина в комплексном лечении рожистого воспаления положительно сказывается на состоянии системы гемостаза (табл. 3). У больных этой группы к концу лечения отмечается нормализация протромби-нового времени, тромбинового времени, в большей степени снижается уровень фибриногена, повышается концентрация антитромбина-111. Однако остается несколько сокращенным время свертывания крови, АЧТВ.

Приведенные данные свидетельствуют об эффективной ликвидации ДВС-синдрома у больных рожистым воспалением, получавших ронколейкин.

Наряду с лабораторными тестами установлено, что введение ронколейкина у больных с рожистым воспалением оказывает выраженное действие на клинические показатели течения заболевания. У таких больных раньше, чем в контрольной группе, купировались признаки интоксикации, нормализовалась температура, уменьшились отек, боль. Время пребывания в стационаре сократилось на 4 дня. В течение 3 лет у больных не наблюдается рецидивов заболевания.

Таким образом, обнаруженные результаты применения ронколейкина при рожистом воспалении подтверждают, что цитокин способствует более эффективному протеканию механизмов иммунной защиты при болезни, сохранению популяций Т и В лимфоцитов, улучшению показателей гемостаза. Доказательством эффективности такого лечения являются хорошие клинические показатели, указывающие на более быстрый регресс основных клинических симптомов болезни и отсутствие рецидивов заболевания. Использование рекомбинантной молекулы интерлейкина-2 (ронколейкина) при лечении рожистого воспаления является не только патогенетически оправданным методом лечения в сочетании с базисной терапией, но и средством, позволяющим перейти на более высокую ступень в иммунотерапии инфекционных заболеваний.

CORRECTION OF IMMUNITY AND HEMOSTASIS IN ERYSIPELAS

A.N. Emelyanova, Y.A Vitkovski, L.B. Kizhlo, E.I. Sergeyeva, E.N. Kalinina

It was shown that administration of recombinant interleukin 2 (ronkoleukin) in patients witherysi pelas leads to the rehabilitation of lymphocyte population contents and to the elimination of immunoglobulin disbalance. At the same time the disseminated intravascular blood coagulation syndrome was eliminated at the short terms. In these patients within some days the intoxication disappeared, the temperature normalized, the local inflammation, oedema, pain decreased. Terms of treatment were shortened to 4 days. The relapse of disease in patients did not observe during 2 years.

ЛИТЕРАТУРА

1. Балуда В.П., Лукьянов Т.И. Сосудистая тромбофилия и коагуляционный гемостаз // Поражение сосудистой стенки и гемостаз. II Всесоюз. конф.: Сб. науч. трудов.

- Минск, 1983. - С.148-149.

2. Баркаган З.С., Лычев В.Г., Бишевский К.М. Современные проблемы диагностики и патогенетической терапии синдрома диссеминированного внутрисосудисто-го свертывания крови // Тер. архив. — 1979. — ТII, № 9.

3. Баркаган З. С., Момот А.П. Основы диагностики нарушений гемостаза. — М.: Ньюдиамед — АО, 1999. — 224 с.

4. Венчиков А.И., Венчиков В.А. Основные приемы статистической обработки результатов наблюдений в области физиологии. — М., Медицина, 1974. — 152 с.

5. Витковский Ю.А. Роль цитокинов в регуляции системы гемостаза: Автореф. дисс. ... докт. мед. наук. — Чита, 1997. — 40 с.

6. Витковский Ю.А., Кузник Б.И., Солпов А.В. Феномен

лимфоцитарно-тромбоцитарного розеткообразования // Иммунология. — 1999. — № 4. — С.35-37.

7. Еровниченков А.А., Брико Н.И., Анохина Г.И. Актуальные аспекты стрептококковых заболеваний кожи // Тезисы VII Российский съезд инфекционистов. — Нижний Новгород, 2006. — С.105.

8. Иммунологические методы / Под ред. Г. Фримеля (Friemel H.). — М.: Медицина, 1987. — 472 с.

9. Кузник Б.И., Цыбиков Н.Н. Взаимосвязь между иммуногенезом и системой гемостаза: единая система защиты организма //Успехи современной биологии. — 1981.

— Т.92, Вып. 2/5. — С.243-260.

10. Лефковиц И., Пернис Б. Иммунологические методы исследования. — М.: Мир, 1988. — 520 с.

11. Миноранская Н.С., Миноранская Е.И. К анализу клинического течения различных форм рожи // Тезисы VII Российский съезд инфекционистов. — Н. Новгород, 2006. — С.27.