КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ ЛЕЧЕНИЯ, НАПРАВЛЕННЫЕ ПРОТИВ CD20

1. Гуманизированная СD20-связывающая молекула, содержащая вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина (VH) и вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина (VL), содержащие каркасные области и области CDR1, CDR2 и CDR3, где указанные каркасные области представляют собой каркасные области человеческих иммуноглобулинов и где:
(a) аминокислотная последовательность домена VH содержит аминокислотную последовательность CDR3 тяжелой цепи, приведенную в любой из SEQ ID NO:1-59; или
(b) аминокислотная последовательность домена VL содержит аминокислотную последовательность CDR3 легкой цепи, приведенную в любой из SEQ ID NO:1-59; или
(с) гуманизированная CD20-связывающая молекула содержит аминокислотную последовательность VH по (а) и аминокислотную последовательность VL по (b); или
(d) гуманизированная CD20-связывающая молекула содержит аминокислотную последовательность VH по (а) и аминокислотную последовательность VL по (b), где указанные VH и VL содержатся в одной и той же эталонной последовательности; или
(e) аминокислотная последовательность домена VH содержит аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 тяжелой цепи в любой из SEQ ID NO:1-59; или
(f) аминокислотная последовательность домена VL содержит аминокислотные последовательности CDR1, CDR2 и CDR3 легкой цепи в любой из SEQ ID NO:1-59; или
(g) гуманизированная СD20-связывающая молекула содержит аминокислотную последовательность VH по (e) и аминокислотную последовательность VL по (f); или
(h) гуманизированная СD20-связывающая молекула содержит аминокислотную последовательность VH по (e) и аминокислотную последовательность VL по (f), где указанные VH и VL содержатся в одной и той же эталонной последовательности; или
(i) аминокислотная последовательность домена VH содержит аминокислотную последовательность домена VH, приведенную в любой из SEQ ID NO:1-59; или
(j) аминокислотная последовательность домена VL содержит аминокислотную последовательность домена VL, приведенную в любой из SEQ ID NO:1-59; или
(k) как VH по (i), так и VL по (j); или
(l) VH по (i) и VL по (j), которые содержатся в одной и той же эталонной последовательности; или
(m) аминокислотная последовательность домена VH содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности домена VH, приведенной в любой из SEQ ID NO:1-59; или
(n) аминокислотная последовательность домена VL содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична аминокислотной последовательности домена VL, приведенной в любой из SEQ ID NO:1-59; или
(o) как VH по (m), так и VL по (n); или
(p) VH по (m) и VL по (n), которые содержатся в одной и той же эталонной последовательности; или
(q) аминокислотная последовательность домена VH содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична аминокислотной последовательности домена VH, приведенной в любой из SEQ ID NO:1-59; или
(r) аминокислотная последовательность домена VL содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична аминокислотной последовательности домена VL, приведенной в любой из SEQ ID NO:1-59; или
(s) как VH по (q), так и VL по (r); или
(t) VH по (q) и VL по (r), которые содержатся в одной и той же эталонной последовательности;
или CD20-связывающий фрагмент указанной связывающей молекулы.
2. Гуманизированная CD20-связывающая молекула по п.1, представляющая собой гуманизированное антитело или его антиген-связывающий фрагмент, или гуманизированное малое модульное иммунофармацевтическое средство (SMIP).
3. Гуманизированное SMIP, специфически связывающее CD20, где указанное гуманизированное SMIP обладает по меньшей мере одним из следующих свойств:
(а) активность ADCC;
(b) активность CDC;
(с) замедляет рост пересаженных опухолей;
(d) ослабляет прогрессию диссеминированной лимфомы in vivo;
(e) истощает CD19+ В-клетки в периферической крови, костном мозге и лимфатических узлах;
и
(f) связывает тот же самый эпитоп, конкурирует или перекрестно конкурирует с гуманизированной CD20-связывающей молекулой, содержащей аминокислотную последовательность, приведенную в любой из SEQ ID NO:1-59.
4. Гуманизированное SMIP по п.3, содержащее:
(a) шарнирный домен, имеющий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO:60;
(b) шарнирный домен, имеющий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO:60, и эффекторный домен, содержащий аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NO:61.
5. CD20-связывающая молекула по п.1 или 2 или гуманизированное SMIP по п.3 или 4, помеченное детектируемой меткой.
6. Композиция, содержащая CD20-связывающую молекулу по п.1 или 2 или гуманизированное SMIP по п.3 или 4.
7. Набор, содержащий CD20-связывающую молекулу по п.1 или 2, гуманизированное SMIP по п.3 или 4 или композицию по п.6 и инструкции по применению.
8. Нуклеиновая кислота, выбранная из группы,  состоящей из:
a) нуклеиновой кислоты, кодирующей CD20-связывающую молекулу или антиген-связывающий фрагмент по п.1 или 2 или гуманизированное SMIP по п.3 или 4;
b) нуклеиновой кислоты, которая кодирует домен VH и содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность VH, приведенную в любой из SEQ ID NO:1-59;
c) нуклеиновой кислоты, содержащей нуклеотидную последовательность любой из SEQ ID NO:118-126;
d) нуклеиновой кислоты, которая кодирует домен VL и содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность VL, приведенную в любой из SEQ ID NO:1-59; и
e) нуклеиновой кислоты, содержащей нуклеотидную последовательность любой из SEQ ID NO:67-116.
9. Нуклеиновая кислота по п.8, функционально связанная с последовательностью, регулирующей экспрессию.
10. Вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п.8 или 9.
11. Клетка-хозяин, содержащая нуклеиновую кислоту по п.8 или 9 или вектор по п.10.
12. Способ получения гуманизированной CD20-связывающей молекулы или ее антиген-связывающего фрагмента, включающий стадию культивирования клетки-хозяина по п.11 и сбора гуманизированной CD20-связывающей молекулы или антиген-связывающего фрагмента.
13. Способ обнаружения CD20 в биологическом образце субъекта, включающий стадию контактирования образца с CD20-связывающей молекулой или гуманизированным SMIP по п.5 и обнаружения связывания.
14. Применение композиции в производстве лекарственного средства для
a) лечения субъекта, страдающего или вероятно страдающего заболеванием, связанным с аберрантной активностью В-клеток; или
b) уменьшения количества В-клеток у субъекта, нуждающегося в этом,
где композиция представляет собой терапевтически эффективное количество гуманизированной CD20-связывающей молекулы по п.1 или 2, гуманизированного SMIP по п.3 или 4 или композиции по п.6.
15. Применение по п.14, где субъект страдает ревматоидным артритом, красной волчанкой или рассеянным склерозом.