Характеристика ценопопуляций и особенности мезоструктуры листа Orthilia secunda L. на нарушенных промышленностью землях

Известия Самарского научного центра Российской академии наук. 2013. Т. 15, № 3

УДК 581.55:581.552:581.557.24:502

ХАРАКТЕРИСТИКА ЦЕНОИОПУЛЯЦИЙ И ОСОБЕННОСТИ МЕЗОСТРУКТУРЫ ЛИСТА ORTHILIA SECUNDA L. НА НАРУШЕННЫХ ПРОМЫШЛЕННОСТЬЮ ЗЕМЛЯХ

©2013 Н.В. Чукина, М.А. Глазырина, Н.В. Лукина, К.В. Бутырин, М.В. Лихачева

Уральский федеральный университет им. первого Президента России Б.Н. Ельцина, г. Екатеринбург

Поступила 05.06.2013

В статье представлены результаты изучения возрастной, морфологической и пространственной структур це-нопопуляций Orthilia secunda L., мезоструктуры фотосинтетического аппарата и особенностей строения микоризы данного вида, в растительных сообществах на разных техногенных субстратах. Показано, что на нарушенных промышленностью землях, у Orthilia secunda L., происходит изменение мезоструктурных параметров (уменьшение толщины листа, размеров площади ассимилирующей поверхности клеток и хлоропла-стов) по сравнению с естественными местообитаниями.

Ключевые слова: мезоструктура, ценопопуляция, арбутоидная микориза, промышленные отвалы.

В связи с увеличивающимися темпами развития промышленности, усиливается влияние человека на структуру и функции биосферы. Результатом такого воздействия является возникновение техногенных ландшафтов. Среди техногенных ландшафтов особое место по своему отрицательному воздействию на естественные природные комплексы занимают промышленные отвалы. Восстановление растительности на них происходит крайне медленно. В настоящее время проводится изучение структуры, динамики, флористического состава растительных сообществ, изучение ценопопуляций видов, произрастающих на нарушенных промышленностью землях. Вместе с тем, работ по изучению эколого-физиологических механизмов адаптаций растений к техногенным субстратам крайне мало.

Известно, что основным в определении роста и продуктивности растений, является фотосинтетический аппарат, он оказывается наиболее чувствительным к действию неблагоприятных факторов среды, что проявляется в нарушении многих параметров его функционирования [1].

В связи с этим целью наших исследований было изучение возрастной, морфологической и пространственной структур ценопопуляций (ЦП) Orthilia secunda L., а также мезоструктуры фотосинтетического аппарата и особенностей строения микоризы данного вида, в растительных сообществах на разных техногенных субстратах.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

На промышленных отвалах Среднего Урала (таежная зона, подзона южной тайги), на начальных стадиях формирования лесных фитоценозов начинают поселяться типичные лесные виды, в том числе Orthilia secunda L.

Чукина Надежда Владимировна, к.б.н., ассистент кафедры, e-mail: nady_dicusar(a!mail.ru; Глазырина Маргарита Апек-сандровна, к.б.н., доцент, старший научный сотрудник, е-mail: Tamara.Chibrik(a)usimi; Лукина Натапия Вапентинов-на, к.б.н., доцент, старший научный сотрудник, e-mail: Tamara.Chibrik(a)usu.ru; Бутырин Кирилл Владимирович, магистрант, e-mail: Tamara.Clúbrik(a)usu.ra; Лихачева Марина Викторовна, студент, e-mail: Tamara.Chibrik(a)usimi

Наши исследования проводились в июле 2012 г. на следующих объектах:

- Лесной фитоценоз с доминированием Pinns sylvestris L. (сор2 -сорз), Betnla pendula Roth, В. pubescens Elirh., Populus trémula L. (copi), сформировавшийся на золоотвале Верхнетагильской ГРЭС на рекультивированном участке с полосным нанесением потенциально плодородного грунта (ЦЩ). Возраст сообщества около 40 лет, сомкнутость крон деревьев - 0,6-0,8.

- Мелколиственный лес с доминированием Populus trémula (сорз), Betula pendula (сорз) и В. pubescens (copi ), Salix caprea L. (sp), сформировавшийся на золоотвале Верхнетагильской ГРЭС на золе (ЦП:). Возраст сообщества около 30 лет, сомкнутость крон - до 0,7-0,8.

- Лесной фитоценоз с доминированием Pinus sylvestris (сорз ), Populus trémula (copi ), Betula pubescens и Salix caprea (sp), сформировавшийся на Галкинском отвале мраморизированного известняка (ЦЩ ), образованного пустыми породами вскрыши и отходами мелочи с дробильно-обогатительной фабрики известнякового карьера. Основная масса флюсовых известняков содержит СаО - 50-52 %. Возраст фитоценоза около 50 лет, сомкнутость крон - 0,7-0,8.

- Лесной фитоценоз на дамбе гидроотвала Шу-ралино-Ягодного месторождения россыпного золота (ЦЩ), сложенной тяжелосуглинистыми средне-каменистыми вскрышными породами. Возраст растительных сообществ составляет около 18 лет. Древесный ярус представлен: Betida pubescens (sol-sp), Salix caprea (sol-sp), S. viminalis L. (sol-sp), Pinus sylvestris (sol), Picea obovata Ledeb. (sol), Betula pendula (un). Сомкнутость крон достигает 0,3-0,5.

Все объекты характеризуются низким содержанием азота и фосфора. Подробная характеристика субстратов представлена в работах [2, 3].

В качестве контроля (ЦЩ) были отобраны образцы растений в сосняке-черничнике в районе биологической станции УрФУ (таежная зона, подзона южной тайги).

1510

При ценопопуляционных исследованиях Orthiha secunda за единицу возрастной, морфологической и пространственной структуры ЦП принимали вегетативно размножающуюся особь - рамет [4, 5]. Для исследований мезоструктурных характеристик фотосинтетического аппарата генеративных особей данного вида, отбирали с 10-15 растений по 5-10 сформированных листьев из каждого местообитания.

Анализ показателей мезоструктуры листьев проводили на растительном материале, фиксированном в 3,5 % растворе глутарового альдегида в фосфатном буфере (рН=7,0) согласно методике А. Т. Мокроносова, Р. А. Борзенковой [6]. Поперечные срезы листьев получали с использованием замораживающего микротома МЗ-2 (Россия). Определение количества клеток в единице площади листа проводили после мацерации тканей в 20% растворе КОН при нагревании с помощью счетной камеры Горяева. Измерения толщины листа, размеров клеток мезофилла и хлоропластов проводили с помощью специализированного комплекса для анализа мезоструктуры листьев Simagis Mesoplant (ООО «СИАМС», Россия), используя световой микроскоп Meiji МТ 4300L («Meiji Techno», Япония). Изучались следующие параметры: толщина листа, число клеток и число хлоропластов на единицу площади, объем клеток и объем хлоропластов, индексы общей ассимилирующей поверхности клеток и хлоропластов (ИМК и ИМХ), индекс проективной поверхности хлоропластов (ИППХ).

Для исследования микоризы были сделаны поперечные срезы корневых окончаний на замораживающем микротоме, полученные препараты просматривались в поле зрения микроскопа при 120200 увеличении [7].

Orthiha secunda L. - представитель подсемейства Pyroloideae (Грушанковые), циркумполярный бореальный вид, широко распространен на Урале, типичный представитель травяно-кустарничкового яруса в лесах различного типа [8]. Хамефит, ползучий зимне-зеленый поликарпик. Мезофит [9]. В естественных местообитаниях грушанковые как правило микотрофны. У Orthiha secunda микориза ар-бутоидного (экто-эндотрофного) типа, характеризующаяся наличием наружного грибного чехла и однослойной сети Гартига, внутриклеточных клубков гиф и продуктов их переваривания в увеличенных клетках коры корня [7, 10].

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

В результате проведенных исследований установлено, что все ЦП Orthiha secunda являются нормальными неполночленными (рис. 1). Все возрастные спектры имеют две вершины. На нарушенных землях возрастные спектры являются левосторонними, с максимумом в группе виргиниль-ных, либо имматурных особей. В естественном лесном сообществе спектр - правосторонний. Доля генеративных особей выше в более «зрелых» лесных фитоценозах (ЦЩ - 25,0%, ЦП2 - 13,7%, ЦП3 - 11,3 %, ЦП4 - 12,1 %, ЦП5 - 53,6 %).

Рис. 1. Возрастные спектры ценопопуляций Orthilia secunda L.

Тип пространственного распределения всех исследованных ЦП i-5 Orthiha secunda по отношению дисперсии (S2) к среднему числу особей на площадке является групповым (S"/m=3,22; 2,04; 2,50; 19,73 и 2,13 соответственно).

При исследовании биометрических показателей генеративных особей Orthiha secunda, произрастающих на техногенных субстратах и в контроле, достоверных отличий не выявлено (табл. 1).

1511

Известия Самарского научного центра Российской академии наук. 2013. Т. 15, № 3 (5) Таблица 1. Некоторые биометрические показатели генеративных особей Orthilia secunda L.

Признаки ЦП N Хер.±т lim Е Cv

Площадь листовой пластинки генеративной особи, см i 23 26,6±2,9 11,5-69,5 13,9384 52,4

2 8 35,4±4,0 14,8-51,5 11,4000 32,2

3 23 26,8±2,3 11,2-58,0 11,1357 41,6

4 18 28,4±3,3 6,5-65,5 14,1672 49,9

5 33 25,1±1,9 6,5-52,8 10,9794 43,7

Высота генеративного побега, см 1 32 16,5±0,41 13,0-23,0 2,3262 14,1

2 10 17,6±0,38 15,0-19,5 1,1891 6,8

3 25 15,7±0,33 12,5-19,0 1,6503 10,5

4 14 15,5±0,59 12,0-19,5 2,2160 14,3

5 49 16,7±0,35 11,0-22,0 2,4213 14,5

Масса генеративной особи, г 1 32 0,31±0,03 0,09-0,81 0,1615 52,1

2 10 0,40±0,04 0,22-0,54 0,1206 30,2

3 25 0,28±0,02 0,10-0,52 0,0842 30,1

4 14 0,34±0,05 0,17-0,88 0,1980 58,2

5 49 0,38±0,02 0,17-0,75 0,1342 35,3

Известно, что структурно-функциональные параметры мезофилла листа, такие как размеры клеток и хлоропластов, количество клеток мезофилла и хлоропластов в единице площади могут существенно изменяться под действием различных экологических факторов. Тип и диапазон структурных изменений фотосинтетического аппарата под влиянием факторов среды зависят от функциональных особенностей вида, что в свою очередь позволяет оценить состояние, экологические и функциональные свойства вида, популяции, а также прогнозировать реакцию растений на изменение условий среды. Ряд расчетных параметров мезоструктуры листа, таких как площадь ассимиляционной поверхности клеток и хлоропластов, положительно

При сравнении параметров пластид (площади поверхности, площади проекции и объемов хлоропластов) установлено, что особи Orthilia secunda, произрастающие на техногенных объектах, характеризовались достоверно меньшими размерами хлоропластов. В среднем величина объема хлоро-

коррелируют с максимальной интенсивностью фотосинтеза [11, 12].

Результаты исследований структуры фотосинтетического аппарата листьев Orthilia secunda показали, что растения с промышленных отвалов (ЦЩ. 4), в сравнении с особями из контрольного местообитания (ЦЩ), отличались достоверно меньшими размерами толщины листовой пластинки, что в свою очередь связано со снижением толщины слоя мезофильных клеток. При этом отмечено значительное уменьшение количества клеток мезофилла в единице площади листа у растений с промышленных отвалов. Однако статистически достоверных различий в размерах клеток ассимиляционной ткани листа нами обнаружено не было (табл. 2).

пластов у растений из данных местообитаний составляла 50 мкм3, что в 1,3 раза меньше, чем у растений из естественных местообитаний (ЦЩ). Эти различия в итоге выразились в существенном уменьшении (более чем в 1,4 раза) таких важных физиологических параметров как индексы общей

Таблица 2. Параметры мезоструктуры листа растений Orthilia secunda L., произрастающих на различных техногенных субстратах

Параметры ЦП1 цп2 ЦП3 ЦП4 ЦП5

Толщина листа, мкм Хер.±т 143,0±3,5 142,1±3,9 125,9±2,9 137,2±1,6 161,1±3,0

lim 122,7-167,7 116,8-162,1 105,7-147,9 125,3-147,0 134,0-184,0

Число клеток, тыс. /см2 Xcp.±m 295,4±10,5 342,8±12,4 262,3±7,3 269,3±6,3 353,4±17,4

lim 226,5-382,2 245,5-418,9 198,2-316,1 219,4-322,0 198,1-491,7

Число хл., млн. /см2 Xcp.±m 8,9±0,3 12,0±0,4 7,6±0,2 11,8±0,3 11,7±0,6

lim 6,8-11,5 8,6-14,7 5,7-9,2 9,7-14,2 6,5-16,2

Объем клеток, тыс. мкм3 Xcp.±m 31,0±2,0 36,8±2,9 26,4±1,3 23,0±1,3 27,2±1,7

lim 9,5-56,3 17,1-72,4 15,4-42,8 7,4-37,0 14,3-52,2

Объем хлп., мкм3 Xcp.±m 55,7±1,9 54,3±1,6 44,9±1,2 44,4±1,2 64,8±1,6

lim 40,1-79,8 41,1-73,3 28,3-59,3 32,7-57,1 50,9-89,4

ИМК, см2/см2 Xcp.±m 16,6±0,6 20,4±0,7 12,6±0,4 11,6±0,3 17,3±0,9

lim 12,8-21,5 14,6-24,9 9,5-15,2 9,4-13,8 9,7-24,0

ИМХ, см2/см3 Xcp.±m 4,9±0,2 6,5±0,2 3,3±0,1 5,2±0,1 7,6±0,4

lim 3,7-6,3 4,6-7,9 2,5-4,0 4,2-6,2 4,2-10,5

ИППХ, см2/см2 Xcp.±m 1,3±0,0 1,6±0,1 0,8±0,0 1,3±0,0 1,9±0,1

lim 1,0-1,6 1,2-2,0 0,6-1,0 1,1-1,6 1,0-2,6

1512

ассимилирующей поверхности клеток и хлоропла-стов (ИМК и ИМХ). Данные интегральные показатели отражают фотосинтетическую функцию, связанную со скоростью и эффективностью ассимиляции углекислого газа и положительно коррелируют со скоростью максимального фотосинтеза [12].

Растения с нарушенных местообитаний отличались также достоверно низкими значениями индекса проективной поверхности хлоропластов (ИППХ), являющегося аналогом листового индекса в фитоценозе.

Исследование микоризы Orthiha secunda показало, что на поверхности корешков во всех ценопо-пуляциях, как на промышленных отвалах, так и в контроле, имеются лишь единичные септирован-ные гифы, редко - рыхлые корневые чехлы, иногда встречаются булавовидные корневые окончания. На поперечных срезах корней плотных мицелиаль-ных чехлов не обнаружено, в единичных коровых клетках наблюдаются клубки мицелия и продукты переваривания гриба. У особей Orthiha secunda из естественного местообитания обнаружены единичные фрагменты сети Гартига.

Таким образом, проведенные исследования показали, что у Orthiha secunda, произрастающей на нарушенных промышленностью землях, происходит изменение структурно-функциональных параметров фотосинтетического аппарата. Эти изменения имеют приспособительный характер, т.к. связаны как с особенностью субстрата (бедность и низкая доступность биогенных элементов), так и с особенностью светового и водного режимов. Данные морфологические и анатомические изменения являются, на наш взгляд, одной из форм адаптации данного вида к техногенным субстратам.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Мокроносов А.Т. Онтогенетический аспект фотосинтеза. М.: Наука, 1981. 196 с.

2. Экологические основы и опыт биологической рекультивации нарушенных промышленностью земель / Т.С. Чибрик, Н.В. Лукина, Е.И. Филимонова, М.А. Глазырина. Екатеринбург: Изд-во Урал, ун-та, 2011. 286 с.

3. Махонина Г.II. Экологические аспекты почвообразова- ния в техногенных экосистемах Урала. Екатеринбург: Изд-во Урал, ун-та, 2003. 356 с.

4. Ценопопуляции растений (основные понятия и структура). М.: Наука, 1976. 217 с.

5. Онтогенетический атлас лекарственных растений: Научное издание. Т. IV Йошкар-Ола: МарГУ, 2004. 240 с.

6. Фотосинтез: физиология, онтогенез, экология: Коллективная монография / Под ред. Е.С. Роньжиной. Калининград: Изд-во ФГТУ ВПО КГТУ, 2009. 372 с.

7. Селиванов II.A. Микосимбиотрофизм, как форма кон-сортивных связей в растительном покрове Советского Союза. М.: Наука, 1981. 230 с.

8. Определитель сосудистых растений Среднего Урала / П.Л. Горчаковский, Е.А. Шурова, М.С. Князев и др. М.: Наука, 1994. 525 с.

9. Иллюстрированный определитель растений Пермского края / С.А. Овеснов, Е.Г. Ефимик, Т.В. Козьминых и др. / Под ред. д.б.н. С.А. Овеснова. Пермь: Книжный мир, 2007. 743 с.

10. Read D.J. The biology of mycorrhiza in the Ericalis // Botany. 1983. V. 61(3). P. 985-1004.

11. Nobel P.S. Internal Leaf Area and Cellular CO 2 Resistance: Photosynthetic Implications of Variations with Grow Conditions and Plant Species // Physiol. Plant. 1977. V. 40. P. 137-144.

12. Araus J.L., Alegre L., Tapia L., Calafell R, SerretM. Relationships Between Photosynthetic Capacity and Leaf Structure in Several Shade Plants // Amer. J. Bot. 1986. V. 68. P. 1760-1770.

THE CHARACTERISTICS OF CENOPOPULATIONS AND PECULIARITIES OF LEAF MESOSTRUCTURE ORTHILIA SECUNDA L. ON THE DISTURBED INDUSTRIAL LANDS

© 2013 N.V. Chukina, M.A. Glazyrina, N.V. Lukina, K.V. Butyrin, M.V. Lykhacheva

Ural Federal University named after the first President of Russia B.N. Yeltsin, Ekaterinburg

The results of study of age, morphological and spatial structure of cenopopulation Orthilia secunda L., mezostructure of the photosynthetic apparatus and type of mycorrhizae in plant communities in various technogenic substrates are presented in this paper. It is shown that in disturbed industrial lands, Orthilia secunda L. changes its morphology and its mezostructure parameters (decreasing in leaf thickness, size of chloroplasts, internal assimilation surface mezo-phyll and chloroplasts) compared with natural habitats.

Keywords: mezostructure, cenopopulation, arbutoid mycorrhiza, industrial dumps.

Nadezhda Chukina, Candidate of Biology, assistant of chair, email: nady_dicusar(S)mail.ru; Margarita Glazyrina, Candidate of Biology, assistant of professor, senior researcher, e-mail: Tamara.Chibrik(S!usu.ru; Natalia Luldna, Candidate of Biology, assistant of professor, senior researcher, e-mail: Tamara.Chibrik(S!usu.ru; Kirill Butyrin, master student, e-mail: Tamara.Chibrik(S!usu.ru; Marina Lykhacheva, student, e-mail: lmika_l 990(S!mail.ru

1513