Оценка риска гемотрансфузионной передачи вирусного гепатита с

ИНФЕКЦИОННЫЕ БОЛЕЗНИ

Оценка риска гемотрансфузионной передачи вирусного гепатита С

О.А.Тарасенко13, Ю.Ф.Шубина2

1Российский государственный медицинский университет им. Н.И.Пирогова, кафедра клинической лабораторной диагностики ФУВ, Москва (зав. кафедрой - проф. Р.Т.Тогузов);

2Станция переливания крови Департамента здравоохранения г. Москвы (главный врач - проф. ОА.Майорова);

3ФГУЗ «Головной центр гигиены и эпидемиологии» ФМБА России, Москва

I Целью исследования явилось определение остаточного риска гемотрансфузионной передачи вирусного гепатита С во взаимосвязи с совершенствованием методов лабораторной диагностики. Для оценки остаточного риска использовалась математическая модель «период окна/инцидентность». Определено, что внедрение тестирования РНК вируса гепатита С снижает риск посттрансфузионного заражения до 1,1 на 1 млн донаций. Ключевые слова: остаточный риск, вирусный гепатит С, инфекционная безопасность гемотрансфузии

The residual risk of transfusion HCV

O.A.Tarasenko13, Yu.F.Shubina2

1N.I.Pirogov Russian State Medical University, Department of Clinical Laboratory Diagnostics of DIF, Moscow

(Head of the Department - Prof. R.T.Toguzov);

2Blood Transfusion Station of Healthcare Department, Moscow

(Chief Doctor - Prof. O.A.Mayorova);

3Head Center for Hygiene and Epidemiology of Russia FMBA, Moscow

I The aim of the study was to calculate the residual risk of transfusion-transmitted HCV before and after Nucleic Acid Testing (NAT) screening in Russia. For this measurement we used the mathematical model «incidence/window period». The residual risk of transfusion-transmitted HCV after NAT was 1.1 per million donation.

Key words: residual risk. HCV, infectious blood transfusion safety

Вирусный гепатит С (ВГС) - кровяная инфекция с контактным механизмом передачи, наиболее контагиозным путем которого является артифициальное заражение при проведении гемотрансфузий. Особенности механизмов и путей передачи вирусного гепатита С ставят данное заболевание в разряд социальнозначимых [1]. Анализ эпидемической ситуации в Российской Федерации показал, что с начала официальной регистрации в 1994 г. и до 2001 г. в РФ отмечался ежегодный рост заболеваемости вирусным гепатитом С и достиг уровня 20,7 на 100 тыс. населения. С 2002 г. заболеваемость ВГС начала снижаться и в 2008 г.

Для корреспонденции:

Тарасенко Ольга Анатольевна, кандидат медицинских наук, ведущий

научный сотрудник НИЛ нуклеинового и белкового обмена Российского

государственного медицинского университета им. Н.И.Пирогова,

заместитель главного врача ФГУЗ ГЦГиЭ ФМБА России

Адрес: 117997, Москва, ул. Островитянова, 1

Телефон: (499) 190-4969

E-mail: dvoryanka@mail.ru

Статья поступила 31.10.2008 г., принята к печати 24.02.2010 г.

составила 3,4 на 100 тыс. Таким образом, уровень заболеваемости ВГС к 2008 г. снизился в 6 раз по сравнению с 2001 г. [2]. Немалое значение в достижении несомненного успеха в борьбе с ВГС сыграло и будет играть совершенствование методов лабораторной диагностики, в том числе в учреждениях службы крови. Рациональный алгоритм лабораторной диагностики вирусного гепатита С у доноров крови позволяет снизить риск развития посттрансфузионного вирусного гепатита С у потенциальных реципиентов и сохранить кадровых доноров.

Материалы и методы

В исследовании использованы данные Единого донорского центра Станции переливания крови Департамента здравоохранения города Москвы (ЕДЦ), который в режиме реального времени получает информацию о донорах, их донациях и результатах лабораторных исследований крови доноров Станции переливания крови (СПК), 15 отделений

О.А.Тарасенко, Ю.Ф.Шубина / Вестник РГМУ, 2010, №2, с. 51-53

Таблица 1. Тест-системы, используемые для выявления маркеров ВГС у доноров крови КДЛ СПК ДЗ г. Москвы в период с 2000 по 2008 гг.

Год Тип тест-систем Период

серологического

окна

2000 ИФА тест-ситемы 2 поколения 66 дней

2001 ИФА тест-ситемы 2 поколения 66 дней

2002 ИФА тест-ситемы 3 поколения 66 дней

2003 ИФА тест-ситемы 3 поколения Иммуноблотинг 48 дней

2004 ИФА тест-ситемы 3 поколения Иммуноблотинг 48 дней

2005 ИФА тест-ситемы 3 поколения Иммуноблотинг 48 дней

2006 ИФА тест-ситемы 3 поколения Иммуноблотинг 48 дней

2007 ИФА тест-ситемы 3 поколения Иммуноблотинг 48 дней

2008 ИФА тест-ситемы 3 поколения Иммуноблотинг РНК ВГС ПЦР-анализ 7 дней

переливания крови лечебно-профилактических учреждений Департамента здравоохранения города Москвы (ОПК) и отдела государственной регистрации заболеваний. Данные предоставлялись в виде общих отчетов за определенный период наблюдения и карт доноров, содержащих информацию о дате и типе проведенной донации, а также результатах лабораторных исследований.

Были проанализированы 341952 карты доноров за период с 01.01.2000 г. по 31.12.2008 г. В исследование включены только данные об аллогенных донациях цельной крови, процедурах плазма- и тромбоцитофереза.

За период наблюдения в системе скрининга крови доноров на наличие маркеров ВГС произошло усовершенствование тест-систем для определения антител к возбудителю вируса гепатита С (анти-HCV), переход с ИФА тест-систем второго на тест-системы третьего и четвертого поколения. Все тест-системы официально зарегистрированы и разрешены к применению на территории РФ (табл. 1).

В период 2000-2001 гг. постановка лабораторного диагноза «положительная реакция на гепатит С» производилась по результатам двух постановок ИФА на наличие анти-HCV. Положительной реакция считалась при получении оптической плотности в исследуемой сыворотке ОПобр.а ОПкрит. - 0,1 ОПкрит., то есть с учетом «серой зоны» 10%, в соответствии с рекомендациями производителя реагентов. С 2002 г. с целью улучшения скрининга на основании анализа предыдущих лет работы лаборатории «серая зона» была расширена до 20% и положительными на наличие маркеров ВГС считались образцы дважды положительные в ИФА со значениями ОПобр. а ОПкрит. -0,2 ОПкрит.. В период с 2003 г. по 2007 г. лабораторный диагноз «положительная реакция на гепатит С» ставился после двух постановок ИФА и подтверждающего теста на анти-HCV - линейного иммуноблотинга.

С декабря 2007 г. в скрининг крови доноров на наличие маркеров ВГС внедрена процедура тестирования всех се-ронегативных образцов на наличие РНК ВГС. Анализ проводился в минипулах по 5 образцов. Выделение нуклеиновых кислот производилось на автоматическом анализаторе Cobas Ampliprep, амплификация и детекция в режиме ре-

ального времени осуществлялись на анализаторе Cobas Amplicor (США) по стандартной методике, рекомендованной производителем.

Для оценки эффективности внедренного алгоритма лабораторной диагностики ВГС у доноров крови был произведен расчет остаточного риска гемотрансфузионной передачи ВГС с использованием математической модели «инцидентность/период окна»[3].

Уровень инфицирования ВГС на 1 тыс. донаций был определен как отношение общего числа доноров с подтвержденным лабораторным диагнозом «положительная реакция на гепатит С» к общему числу донаций за анализируемый период. Уровни заболеваемости были отдельно рассчитаны для первичных и повторных доноров, которые во время своей первой донации были здоровы. Уровень заболеваемости на тыс. человеко-лет был вычислен только с учетом повторных доноров, имевших 2 и более донации за период наблюдения. Для всех доноров с отрицательной реакцией на гепатит С показатель «человеко-годы» рассчитывался как сумма всех временных промежутков между донациями за период наблюдения. Для доноров с подтвержденной положительной реакцией на гепатит С показатель «человеко-годы» рассчитывался как сумма всех междонационных периодов плюс половина серокон-версионного периода.

Период «серологического окна» был определен производителем тест-систем и представлен в инструкции по эксплуатации.

Остаточный риск гемотрансфузионной передачи вирусного гепатита С на 1 млн донаций был рассчитан как произведение уровня заболеваемости и периода «серологического окна», выраженное в годах.

Статистическая обработка результатов при оценке полученных данных проводилась общепринятыми методами с использованием программы Statistica 6.0 (Statsoft, США) и статистического пакета программы Excel 2003 (Microsoft, США).

Оценка достоверности результатов исследования проводилась по критерию t (критерию Стьюдента). Все значения p < 0,05 считались статистически значимыми.

Результаты исследования и их обсуждение

В 2000 г. была проанализирована 71 066 донаций цельной крови и плазмы. Из них 1076 оказались положительными на анти-HCV. Следует отметить, что все случаи выявления наличия антител к ВГС были впервые выявленными, так как лица с ранее выявленными маркерами инфекционных заболеваний к донациям не допускаются. Уровень инфицирования ВГС составил 15,14 на тыс. донаций. В 2002 г. показатель инфицированности вырос до 16,08 на тыс. донаций, а в 2008 г. составил 5,65 на тыс. донаций. Изменение тенденции инфицированности доноров вирусным гепатитом С соответствует тенденциям заболеваемости ВГС населения Российской Федерации в целом за период наблюдения. В целях обеспечения безопасности гемокомпонентов, не подлежащих карантинизации, в период до внедрения метода тестирования нуклеиновых кислот (NAT-тестирования) на СПК было введено увеличение размера «серой зоны», что привело к незначите-

Оценка риска гемотрансфузионной передачи вирусного гепатита С

Таблица 2. Резидуальный риск гемотрансфузионной передачи вирусного гепатита С в г. Москве (математическая модель

«Инцидентность/период окна»)

Годы Число доноров

2000 38320 43 37259,06 66 115,5155 5,7 4,1-7,3

2001 38512 47 37359,37 66 125,1627 5,3 3,7-6,9

2002 33510 46 32383,99 66 141,0574 4,6 3,1-6,3

2003 35704 31 34947,74 48 87,78823 5,5 3,9-7,1

2004 38860 25 38251,64 48 64,52011 7,4 5,9-9,0

2005 35580 23 35014,04 48 65,5737 7,3 5,7-8,9

2006 37070 19 36592,78 48 52,90662 9,0 7,5-10,7

2007 37250 20 36863,69 48 54,25393 8,8 7,3-10,4

2008 47146 28 46666,8 7 59,99983 1,1 0-2,8

льному увеличению ложноположительных результатов, которые трактовались как «положительная реакция на гепатит С» для выбраковки гемопродукции, но не постановки лабораторного диагноза и отвода донора от донорства. Данные действия привели к увеличению выявляемо-сти ВГС у доноров в 2002 г., что не коррелирует с общей тенденцией по данному показателю в стране. Вместе с тем, именно эти действия позволили предотвратить инфицирование реципиентов гемопродуктами (выявлено дополнительно 8 случаев наличия анти-HCV у доноров крови), которые при меньшем размере «серой зоны» были бы перелиты реципиентам.

Внедрение в алгоритм лабораторной диагностики ВГС у доноров крови подтверждающего теста - линейного иммунобло-та позволило нивелировать наличие ложноположительных результатов, определяемых при завышении «серой зоны».

Внедрение метода тестирования нуклеиновых кислот вируса гепатита С позволило в 2008 г. дополнительно выявить 11 инфицированных доноров крови и предотвратить гемо-трансфузионное заражение ВГС около 40 реципиентов.

Объективным показателем для определения тенденции к повышению безопасности гемотрансфузий является оценка остаточного (резидуального) риска гемотрансфузионной передачи вирусных инфекций. Остаточный риск в основном зависит от «периода диагностического окна» - периода от момента заражения донора вирусной инфекцией до появления маркеров данной инфекции в крови. Изменение резидуального риска гемотрансфузионной передачи вирусного гепатита С напрямую зависит от совершенствования методов лабораторной диагностики.

Для оценки эффективности внедрения метода определения РНК ВГС был вычислен остаточный риск гемотрансфузионной передачи ВГС за период с 2000 г. по 2008 г. (табл. 2).

Как видно из представленных в табл. 2 данных, внедрение тестирования РНК HCV позволило снизить с 8,8 до 1,1 на 1 млн донаций в 2008 г. резидуальный риск развития посттрансфузионного вирусного гепатита С в отделениях службы крови, лабораторные исследования для которых проводятся в ЦКДЛ СПК, что соответствует мировым показателям [4-6].

Выводы

Впервые в Российской Федерации для учреждения службы крови определен остаточный риск гемотрансфузионной передачи вирусного гепатита С, который в настоящее время составляет 1,1 на 1 млн донаций.

Внедрение современных методов лабораторной диагностики, в частности определения РНК HCV при скрининге донорской крови, позволяет в значительной степени увеличить инфекционную безопасность гемотрансфузионной терапии и, как следствие, предупредить развитие посттрансфузионного инфицирования вирусным гепатитом С и снизить заболеваемость вирусным гепатитом в РФ.

Литература

1. Постановление Правительства Российской Федерации от 1 декабря 2004 г. №715 «Об утверждении перечня социально значимых заболеваний и перечня заболеваний, представляющих опасность для окружающих».

2. О санитарно-эпидемиологической обстановке в Российской Федерации в 2007 году: Государственный доклад. -М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2008. - 399 с.

3. Chiavetta J .A, Escobar M. et al. Incidence and estimated rates of residual risk for HIV, hepatitis C, hepatitis B and T-cell lymphotropic viruses in blood donors in Canada, 1990-2000 // CMAJ. - 2003. - V.169(8). -P.169-172.

4. Moor C.F. Transfusion-transmitted diseases: risk, prevention and perspectives. -Portugal, Lisbon, Blood Safety-Europe. - 1998. - P.109-116.

5. Pillonel J., Laperche S. et al. Trends in risk of transfusion-transmitted viral infections (HIV, HCV, HBV) in France between 1992 and 2003 and impact of nucleic acid testing (NAT) // Eurosurveillance. - 2005. - V.10 (2). - P. 5-8.

6. Seifried E., Roth W.K. First statistical survey of HCV, HBV, HIV-I NAT technology screening of blood donors in the Red Gross service centres in Germany // Transfusion. - 2000. - V.40. - P. 29-30.

Информация об авторах:

Шубина Юлия Федоровна, кандидат медицинских наук, врач клинической

лабораторной диагностики Станции переливания крови Департамента

здравоохранения г. Москвы

Адрес: 117997, Москва, Поликарпова, 14, корп. 3

Телефон: (499) 326-4472

E-mail: shubinaj@mail.ru