Особенности продукции и рецепции интерлейкина-2 и интерлейкина-4 при аутоиммунных тиреопатиях

Медицинская иммунология 2012, Т. 14, № 4-5, стр. 365-372 © 2012, СПб РО РААКИ

Оригинальные статьи

ОСОБЕННОСТИ ПРОДУКЦИИ И РЕЦЕПЦИИ ИНТЕРЛЕЙКИНА-2 И ИНТЕРЛЕЙКИНА-4 ПРИ АУТО ИММУННЫХ ТИРЕОПАТИЯХ

Саприна Т.В.

Научно-образовательный центр молекулярной медицины ГБОУ ВПО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития России, г. Томск

Резюме. Целью данного исследования явилось изучение особенностей иммунопатогенеза аутоиммунных тиреопатий (аутоиммунного тиреоидита и болезни Грейвса) с позиции оценки продукции и рецепции интерлейкина-2 и интерлейкина-4 лимфоцитами крови. Установлено наличие закономерностей и особенностей в отклонении иммунного статуса при рассматриваемых заболеваниях. Проведена оценка взаимосвязей показателей продукции и рецепции интерлейкина-2 и -4 с параметрами, отражающими функциональное состояние щитовидной железы. Так, установлено разнонаправленное действие интерлейкина-2 на функционирование щитовидной железы: снижение пролиферации и функциональной активности тиреоцитов при аутоиммунном тиреоидите Хашимото и стимуляция пролиферации и продукции гормонов тиреоцитами при болезни Грейвса.

Ключевые слова: аутоиммунный тиреоидит, болезнь Грейвса, интерлейкин-2, интерлейкин-4, лимфоциты.

Saprina T.V.

FEATURES OF INTERLEUKIN-2 AND INTERLEUKIN-4 PRODUCTION AND RECEPTION IN AUTOIMMUNE THYRoID DIsoRDERs

abstract. The aim of this study was to evaluate some immunopathogenic features of autoimmune thyropathies

Keywords: autoimmune thyroiditis, Graves disease, IL-2, IL-4, lymphocytes.

Введение

Аутоиммунные тиреопатии остаются актуальной проблемой современной эндокринологии, что объясняется как достаточно высоким уровнем заболеваемости среди населения, так и многочисленностью органов и систем, вовлека-

Адрес для переписки:

Саприна Татьяна Владимировна,

Кафедра эндокринологии и диабетологии ГБОУ ВПО СибГМУ Минздравсоцразвития России 634050, г. Томск, Московский тракт, 2.

Тел.: (3822) 53-15-87.

Факс: (3822) 53-33-09.

E-mail: tvsaprina@sibmail.com

емых в патологический процесс в результате изменения продукции тиреоидных гормонов. Ведь, как известно, аутоиммунный тиреоидит (АИТ) ассоциирован с потерей функции щитовидной железы и снижением в крови уровня тиреоидных гормонов, а болезнь Грейвса (БГ), напротив, характеризуется гиперфункцией щитовидной железы и развитием тиреотоксикоза [7, 12]. Кроме того, актуальность изучения проблемы аутоиммунных заболеваний щитовидной железы обусловлена потребностью в получении новых данных о механизмах формирования и прогрессирования различных форм аутореактивных повреждений щитовидной железы с целью совершенствования методов диагностики, прогноза

365

Саприна Т.В.

Медицинская Иммунология

течения заболевания, а также подходов терапевтического воздействия.

Известно, что патогенез аутоиммунного ти-реоидита и болезни Грейвса развивается во многом по схожим иммунологическим механизмам. В частности, сопровождается лимфоцитарной инфильтрацией щитовидной железы и продукцией широкого спектра цитокинов [6]. Вместе с тем клинические проявления данных патологий свидетельствуют о реализации специфических механизмов аутореактивных процессов. Считается, что аутоиммунный тиреоидит протекает преимущественно по ТЫ-типу иммунного ответа с преобладанием продукции цитокинов ТЫ-профиля (в том числе IL-2), которые опосредуют цитотоксическое воздействие иммунокомпетентных клеток на тиреоциты и в последующем гипофункцию щитовидной железы. Тогда как болезни Грейвса свойственно усиление в патогенезе роли ^2-иммунного ответа (опосредованного продукцией IL-4), ведущего к наработке аутоантител к рецепторам тиреотропного гормона и увеличению продукции железой тиреоидных гормонов.

Как показывает клиническая практика, в щитовидной железе могут сочетаться процессы, характерные для АИТ и БГ одновременно. С этим положением согласуются данные относительно повышения частоты спонтанной ремиссии БГ при сочетании ее с АИТ вследствие уменьшения объема функционирующей паренхимы — как результат преобладания цитотоксических реакций против фолликулярного эпителия либо активации цитокин-индуцированного апоптоза тиреоцитов. В последние годы активно ведутся исследования молекулярных механизмов дизре-гуляции иммунной системы при рассматриваемых заболеваниях [8, 9, 11, 15, 18]. На современном этапе изучения данной проблемы становится очевидным, что модель, указывающая на строгую поляризацию иммунного ответа по ТЫ-пути при АИТ и по ^2-пути при БГ, требует существенного дополнения и расширения.

Целью данного исследования явилась оценка продукции и рецепции интерлейкина-2 и интерлейкина-4 лимфоцитами крови как отражение особенностей иммунопатогенеза аутоиммунных тиреопатий (аутоиммунного тиреоидита и болезни Грейвса).

Материалы и методы

В работе приведены результаты обследования 74 пациентов (средний возраст 40±12 лет), в числе которых 46 женщин и 28 мужчин, с установленным на основании критериев «Консенсуса по диагностике и лечению аутоиммунного тирео-идита» (2002 г.) диагнозом хронического аутоим-

мунного тиреоидита Хашимото и болезни Грейвса.

В группу больных АИТ включено 22 пациента. Диагноз АИТ верифицирован на основании клинической картины, данных физикального обследования, наличия характерных ультрасонографических признаков, обнаружения в сыворотке больных повышенного титра антитиреоидных антител (антител к тиреопероксидазе и (или) ти-реоглобулину), а также при обнаружении вышеуказанных признаков и первичного гипотиреоза (повышенного уровня тиреотропного гормона [ТТГ] в сочетании с нормальной или пониженной концентрацией свободных фракций трийод-тиронина [Т3] и тироксина [Т4]).

Группа пациентов с БГ включала 52 человека. При диагностике БГ обращали внимание на наличие характерных жалоб и клинической картины тиреотоксикоза, данных физикального обследования, характерных ультрасонографических признаков, наличие в сыворотке больных повышенного титра антитиреоидных антител (антител к тиреопероксидазе и/или тиреоглобулину, к рецептору ТТГ), характерных изменений гормонального статуса (низкий уровень ТТГ в сочетании с повышенной концентрацией свободных фракций Т3 и Т4).

Группы обследованных лиц были сформированы из пациентов в фазе медикаментозного эу-тиреоза. Состояние эутиреоза у пациентов с АИТ было достигнуто приемом L-тироксина, пациентам с БГ проводилось лечение тиреостатически-ми препаратами (мерказолил, тирозол).

Контрольная группа включала 30 человек, средний возраст — 45,3±5,6 лет, и была сопоставима по полу и возрасту с группами пациентов с аутоиммунными тиреопатиями, не страдавших аутоиммунными заболеваниями, с учетом аналогичных критериев исключения из программы исследования.

Исследование соответствовало требованиям локального этического комитета ГБОУ ВПО Сиб-ГМУ Минздравсоцразвития России, разработанными в соответствии с Хельсинской декларацией Всемирной ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека» с поправками 2000 г. и «Правилами клинической практики в Российской Федерации», утвержденными Приказом Минздрава Российской Федерации от 19.06.2003 г. № 266. Все лица, участвующие в исследовании, подписали информированное согласие.

Материалом исследования являлась венозная кровь обследованных лиц, взятая утром натощак и стабилизированная гепарином (25 Ед/мл).

Мононуклеарные лейкоциты выделяли на градиенте плотности фиколл-верографин

366

2012, Т. 14, № 4-5

IL-2, IL-4 при аутоиммунных тиреопатиях

(«Pharmacia», Швеция) (р = 1,077 г/см3). Для получения супернатантов выделенные клетки ресуспендировали в полной питательной среде, стандартизируя их количество до 2,0 106/мл с дальнейшей инкубацией клеточных суспензий в течение 24 ч.

Определение концентраций интерлейкинов-2 и -4 (IL-2, IL-4) в супернатантах клеточных культур проводили с использованием твердофазного иммуноферментного анализа по инструкциям, предлагаемым производителем тест-систем («Вектор-Бест», Россия). Учет результатов иммуноферментного анализа осуществляли с помощью фотометра для микропланшетов «Multiscan EX» («ThermoLabSystems», Финляндия) при длине волны 450 нм.

Количество клеток крови, несущих мембранно-связанные рецепторы к IL-2 и IL-4, оценивали методом проточной лазерной цитометрии на цитометре BD FACS Cantotm (США) с использованием меченых моноклональных антител (МКАТ) к IL-2Ra (CD25) и IL-4R (CD124). После культивирования клетки отмывали фосфатным буфером (рН = 7,2) и окрашивали стандартными фикоэритрин-меченными флуоресцирующими (X = 585 нм) МКАТ к IL-2Ra и IL-4R («Beckman Coulter», США).

Содержание лимфоцитов, несущих CD3, CD4, CD8, CD16/CD56low, CD19, антигены для оценки иммунного статуса определяли методом проточной лазерной цитометрии на цитометре BD FACS Cantotm (США) с использованием меченых флуоресцирующих моноклональных антител BD Multitest 6-color TBNK Reagent («BD Biosciences», США).

Результаты исследования обрабатывали с использованием пакета программ SPSS 11,5 и пакета программ Microsoft Excel (2007 г). Нормальность распределения проверяли с помощью критерия Шапиро-Уилка. Рассчитывали медиану (Ме) и интерквартильный размах (Qi-Q3). Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез в данном исследовании принимался менее 0,05, при межгрупповом сравнении использовали непараметрический U-критерий Манна-Уитни. Исследование силы взаимосвязей между исследуемыми параметрами осуществляли методом ранговой корреляции по Спирмену.

Результаты

Иммунофенотипические особенности лимфоцитов крови больных аутоиммунным тиреоидитом и болезнью Грейвса

У больных АИТ и БГ отмечено повышение относительного количества Т-лимфоцитов (CD3+) по сравнению с контрольными значениями.

Кроме того, характерным для обеих групп аутоиммунных тиреопатий оказалось снижение относительного и абсолютного содержания в крови циркулирующих NK-клеток (CD16+CD56low), а также повышение абсолютного содержания В-лимфоцитов (CD19+) по отношению к значениям в группе здоровых доноров (табл. 1).

Иммунный статус пациентов с АИТ отличали повышенные значения (относительно контрольной группы) абсолютного и относительного содержания Th-лимфоцитов (CD4+) и процентного содержания В-клеток. В то же время исследование показало, что БГ сопровождалась снижением абсолютного количества цитотоксических Т-клеток (CD8+) по сравнению со значениями в группе здоровых доноров (табл. 1).

Оценка продукции цитокинов мононуклеарными лейкоцитами крови у пациентов с аутоиммунным тиреоидитом и болезнью Грейвса

В результате иммуноферментного исследования продукции IL-2 и IL-4 мононуклеарными лейкоцитами в группах пациентов с аутоиммунными тиреопатиями не было зарегистрировано отличий относительно значений данного показателя в группе контроля. Значения параметров у больных АИТ также были сопоставимы с таковыми у пациентов с БГ (табл. 2).

Оценка состояния рецепторного аппарата лимфоцитов крови у пациентов с аутоиммунным тирео-идитом и болезнью Грейвса

При сравнении количества IL-2R+ лимфоцитов у пациентов с АИТ выявлено статистически значимое повышение числа данных клеток по сравнению с контрольной группой, а также с аналогичными значениями у пациентов с БГ. У пациентов с БГ данный показатель был сопоставим с данными, полученными при обследовании здоровых доноров (табл. 3). Количество лимфоцитов, презентирующих IL-4R, оказалось практически в 9 раз увеличено в группе больных АИТ по сравнению с контрольной группой и практически в 4 раза повышено по сравнению с группой пациентов с БГ. Однако в группе пациентов с БГ уровень IL-4R+ лимфоцитов значимо не отличался от значений показателя контрольной группы (табл. 3).

Оценка взаимосвязей иммунологических параметров с параметрами, отражающими функциональное состояние щитовидной железы

При проведении корреляционного анализа в группах пациентов с изучаемыми тиреопатия-ми был выявлен ряд взаимосвязей иммунологических параметров и параметров, отражающих функциональное состояние щитовидной железы.

Оценка взаимосвязей параметров в группе АИТ показала следующие корреляционные

367

Саприна Т.В.

Медицинская Иммунология

ТАБЛИЦА 1. СОДЕРЖАНИЕ СУБПОПУЛЯЦИЙ ЛИМФОЦИТОВ У БОЛЬНЫХ АУТОИММУННЫМ ТИРЕОИДИТОМ

и болезнью грейвса [Me (q1-q3)]

Показатель Здоровые доноры n = 30 Пациенты с БГ n = 52 Пациенты с АИТ n = 22

CD3+ лимфоциты % 69,70 (65,94-70,90) 74,07 (69,31-77,50) Р1 = 0,03 74,98 (74,27-75,46) р1 = 0,003 р2 > 0,05

106/л 1430,0 (1110,0-1630,0) 1627,3 (931,7-1732,3) р1 > 0,05 1538,6 (1362,0-2026,2) р1 > 0,05 р2 > 0,05

CD8+ лимфоциты % 24,28 (23,93-29,48) 26,05 (22,74-29,43) р1 > 0,05 24,60 (22,83-27,04) р1 > 0,05 р2 > 0,05

106/л 600,0 (400,0-740,0) 457,0 (370,4-591,5) р1 = 0,001 468,5 (425,4-696,4) р1 > 0,05 р2 > 0,05

CD4+ лимфоциты % 44,30 (36,16-45,55) 43,63 (39,15-51,21) р1 > 0,05 45,29 (43,94-52,43) р1 = 0,037 р2 > 0,05

106/л 810,0 (590-1000,0) 975,9 (539,4-1105,3) р1 > 0,05 909,9 (880,3-1304,7) р1 = 0,048 р2 > 0,05

CD16+ CD56low лимфоциты % 17,24 (16,66-18,92) 10,93 (8,02-12,94) р1 = 0,001 9,96 (8,34-11,10) р1 = 0,001 р2 > 0,05

106/л 380,0 (260,0-480,0) 223,2 (130,8-300,0) р1 = 0,001 175,5 (109,6-229,0) р1 = 0,001 р2 > 0,05

CD19+ лимфоциты % 10,78 (8,47-11,62) 11,76 (9,55-16,59) р1 > 0,05 14,89 (12,38-15,52) р1 = 0,027 р2 > 0,05

106/л 240,0 (180,0-340,0) 309,2 (165,9-454,4) р1 = 0,049 311,5 (268,9-345,5) Р1 = 0,022 р2 > 0,05

Примечание. Здесь и в таблицах 2, 3: р, - достоверность различий показателя по сравнению с аналогичным показателем у здоровых доноров, p2 - по сравнению с аналогичным показателем у пациентов с болезнью Грейвса; n - количество обследованных лиц.

взаимоотношения. Была обнаружена сильная обратная зависимость уровня IL-2 с объемом щитовидной железы (г = -0,693, p = 0,001); определялась обратная зависимость уровня IL-2 с содержанием св. Т3 (r = -0,894, p = 0,001); выявлена значимая отрицательная корреляция между количеством IL-2R+ лимфоцитов и концентрацией св. Т3 в сыворотке крови (r = -0,800, p = 0,017).

При БГ были обнаружены прямая зависимость уровня IL-2 (г = 0,482, p = 0,032) и уровня IL-4 (г = 0,566, p = 0,004) с объемом щитовидной железы. Уровень IL-2 положительно коррелировал с концентрацией св. Т3 (r = 0,897, p = 0,001) и Т4 (г = 0,744, p = 0,001). Между концентрацией IL-4 и показателями содержания гормонов щитовидной железы (св. Т3 и св. Т4) выявлена значимая

368

2012, Т. 14, № 4-5

IL-2, IL-4 при аутоиммунных тиреопатиях

ТАБЛИЦА 2. КОНЦЕНТРАЦИЯ IL-2 И IL-4 В СУПЕРНАТАНТАХ КУЛЬТУРЫ МОНОНУКЛЕАРНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ КРОВИ

у больных аутоиммунным тиреоидитом и болезнью грейвса [Me (Q,-q3)]

Показатель, пг/мл Здоровые доноры n = 30 Пациенты с БГ n = 52 Пациенты с АИТ n = 22

IL-2 16,31 (7,78-21,99) 19,16 (13,47-35,21) р1 > 0,05 13,47 (13,47-19,16) р1 > 0,05 р2 > 0,05

IL-4 16,09 (14,92-17,72) 16,33 (15,86-18,19) р1 > 0,05 16,56 (15,85-16,79) р1 > 0,05 р2 > 0,05

таблица 3. количество лимфоцитов Крови у Больных аутоиммунным ТИРЕОИДИТОМ и болезнью ГРЕйвСА, пРЕЗЕНТИРующих РЕцЕпТОРы К IL-2, IL-4

Показатель, % Здоровые доноры Пациенты с БГ Пациенты с АИТ

n = 30 n = 52 n = 22

27,05 (18,6-44,1) р1 > 0,05 37,2

IL-2R 23,9 (21,6-37,8) (31,1-54,8) Р1 = 0,027 р2 = 0,036

8,7 (4,1-55,0) р1 > 0,05 38,2

IL-4R Ю ^ 00 со (11,4-66,0) р1 = 0,001 р2 = 0,027

положительная корреляция (г = 0,897, p = 0,001 и r = 0,457, p = 0,025 соответственно).

Обсуждение

При комплексном рассмотрении полученных результатов видно, что изучаемые тиреопатии имеют ряд общих черт в отклонении иммунного статуса. Увеличение относительного количества Т-лимфоцитов и абсолютного числа В-клеток указывает на активацию клеточного и гуморального звена иммунитета как при АИТ, так и при БГ. Снижение численности популяции циркулирующих в крови NK-лимфоцитов является часто выявляемым фактом при аутоиммунных тиреопатиях и при аутоиммунных заболеваниях в целом [13, 17], что также зафиксировано в нашем исследовании. Предполагается, что данный феномен способствует потере иммунологического контроля над аутореактивными клонами лимфоцитов, их выживанию [10, 13], что во многом определяет активность аутоиммунного воспаления при АИТ и БГ.

Процессы активации иммунокомпетентных клеток и межклеточной кооперации регулируются широким спектром цитокинов, в частности, многогранное влияние на различные этапы иммунного ответа оказывают IL-2 и IL-4 [5]. Выявленное в нашем исследовании увеличение количества IL-2R+ лимфоцитов у больных АИТ

подтверждает, что IL-2 играет существенную роль в патогенезе АИТ и проявляет себя как активатор пролиферации и дифференцировки иммунокомпетентных клеток. С этими данными соотносится наблюдаемое у пациентов с АИТ повышение числа Th-лимфоцитов (CD4+) и В-клеток (CD19+). Кроме иммуномодулирующего эффекта IL-2 способен регулировать пролиферацию фолликулярного эпителия, а также изменять функциональную активность тиреоцитов. Иммуногистохимическим методом установлено, что источником продукции IL-2 в ткани щитовидной железы являются лимфоциты [18], мигрирующие в орган-мишень из кровяного русла. Обнаруженная при АИТ отрицательная взаимосвязь между продукцией in vitro IL-2 с объемом щитовидной железы и уровнем св. Т3, а также отрицательная корреляция между числом лимфоцитов, презен-тирующих рецепторы к IL-2 и уровнем свободного трийодтиронина свидетельствует об угнетающем действии данного цитокина на пролиферацию и функциональную активность тиреоцитов. Реализуется данный эффект за счет активации, пролиферации и дифференцировки лимфоцитов, разрушения тиреоцитов эффекторными клетками путем непосредственного цитотоксического воздействия или опосредованно, с участием системы комплемента и аутоантител [2, 4].

Наряду с повышенным количеством IL^R-пре-зентирующих лимфоцитов у пациентов с АИТ

369

Саприна Т.В.

Медицинская Иммунология

существенно увеличенным оказалось и число лимфоцитов, несущих мембраносвязанный IL-4R. В литературе описана способность IL-4 усиливать опосредованный Th-2-клетками гуморальный иммунный ответ, синтез и секрецию IgG активированными В-лимфоцитами, подавлять освобождение провоспалительных цитокинов (TNFa, IL-1, IL-8) [1, 18]. Показано, что IL-4 может оказывать противовоспалительное действие путем депрессии транскрипции генов и усиления деградации мРНК-цитокинов с провоспалительными свойствами. Также некоторыми исследованиями показано стимулирующее влияние IL-4 на пролиферацию цитотоксических Т-лимфоцитов in vivo [14]. В связи с вышесказанным увеличение презентации IL-4R на лимфоцитах у больных АИТ может расцениваться как фактор, способствующий наработке аутоантител к структурам фолликулярного эпителия, с одной стороны, и как фактор, ограничивающий провоспалительное действие цитокинов Th1-профиля, с другой стороны.

Данные исследований последних лет показывают, что от содержания CD8+ лимфоцитов и их функциональной активности зависит эффективность разрешения аутоиммунных тиреопатий [9]. Обнаруженное в нашем исследовании снижение количества циркулирующих в крови цитотоксических лимфоцитов при БГ может быть результатом механизмов перераспределения иммуно-цитов и миграции данной субпопуляции клеток в ткань щитовидной железы с формированием лимфоидного инфильтрата. Однако нельзя исключить наличие дефекта пролиферации CD8+ клеток при данном заболевании.

Цитокины IL-2 и IL-4 в ткани щитовидной железы при БГ продуцируются преимущественно Т-лимфоцитами [18], мигрирующими из сосудистого русла и являющимися преобладающей популяцией клеток в лимфоидном инфильтрате

[6]. И чем больше выражена очаговая лимфоидная инфильтрация, тем большими оказываются рост и пролиферация тиреоцитов [3]. Оценивая роль IL-2 и IL-4 в развитии БГ, мы обнаружили, что содержание IL-2 оказалось положительно взаимосвязано с объемом щитовидной железы, количеством свободных фракций Т3 и Т4. Данные результаты, в сопоставлении с указанными данными литературы [3, 18], позволяют предположить стимулирующее влияние IL-2 на процессы пролиферации клеток щитовидной железы и их функциональную активность при БГ.

Установлено, что среди клеток лимфоидного инфильтрата при БГ преобладают Т^2 лимфоциты, которые секретируют в основном IL-4 [3]. Корреляционный анализ взаимосвязи продукции IL-4 с показателями функциональной

активности щитовидной железы в группе пациентов с БГ показал сходные с IL-2 эффекты. Содержание IL-4 также было положительно связано с объемом ЩЖ и содержанием св. Т3 и Т4, что говорит о подобном IL-2 стимулирующем влиянии IL-4 на пролиферацию и функционирование тиреоцитов.

Можно заключить, что действие IL-2 на щитовидную железу при БГ обусловлено его пролиферативным влиянием на Т- и В-лимфоциты, с последующей дифференцировкой последних в плазматические клетки и наработкой стимулирующих антител к рецептору тиреотропного гормона. Это процесс поддерживается IL-4, который способен усиливать опосредованный Th-2 клетками гуморальный иммунный ответ [3].

Тем не менее, остается нерешенным вопрос причины противоположно направленных эффектов IL-2 на процессы пролиферации тиреоцитов, функциональной активности щитовидной железы при АИТ и БГ, обнаруженных в нашем исследовании. Начнем с того, что источником IL-2 и IL-4 в ткани щитовидной железы являются только лимфоциты, представленные в инфильтрате, данный факт был неоднократно подтвержден методами иммуногистохимии и полимеразной цепной реакции. Известно также, что IL-2 оказывает разнонаправленные эффекты на рост и функциональную активность нормальных тиреоцитов и тиреоцитов при БГ при непосредственном контакте in silico: показано, что IL-2 дозозависимо угнетает рост и функцию тиреоцитов при БГ и не влияет на функцию фолликулярного эпителия здоровых субъектов, IL-4 не оказывал влияние на рост и функцию тиреоцитов как у здоровых, так и при БГ [16]. Данный биологический феномен может частично прояснить ситуацию с различным вектором корреляционной связи IL-2 с показателями объема и функции ЩЖ при АИТ и БГ. Так, при АИТ IL-2 может непосредственно угнетать пролиферацию фолликулярного эпителия и его функцию, но и посредством генерации цитотоксических лимфоцитов и разрушения ими ткани ЩЖ. Кроме того, при АИТ IL-2 и, в большей степени, IL-4 вызывают пролиферацию и стимуляцию В-клеток, продукцию антител к тиреоидной пероксидазе (ТПО) и тиреоглобу-лину (ТГ), которые относятся к классу абзимов (т.е. обладают каталитической активностью). Количество и активность таких АТ-протеаз обнаруживает коррелятивную зависимость с тяжестью клинической картины при АИТ, а также с явлениями дисфункции и разрушения ЩЖ. При БГ прямые угнетающие эффекты IL-2 на тиреоци-ты нивелированы преобладанием стимуляции В-лимфоцитов, продукцией ими аутоантител к рецептору ТТГ, которые относятся к категории

370

2012, Т. 14, № 4-5

IL-2, IL-4 при аутоиммунных тиреопатиях

антител с функциональным ресурсом и способны стимулировать функцию ЩЖ подобно ТТГ и стимулировать пролиферацию тиреоцитов, а также отсутствием или крайне низкой концентрацией при БГ в классическом варианте аутоантител к ТПО и ТГ. В таком случае уменьшение количества CD8+ лимфоцитов (эффекторных и цитотоксических лимфоцитов) в циркуляции при БГ приходится расценивать не как перераспределение и уход в орган-мишень, а как дефект пролиферации, который может играть немаловажную роль в патогенезе БГ и отличать во многом схожие аутоиммунные тиреопатии — болезнь Грейвса и аутоиммунный тиреоидит.

Заключение

Таким образом, в нашем исследовании подтвердился ряд иммунологических феноменов, связанных с патогенезом аутоиммунных заболеваний в целом и с развитием аутоиммунных тире-опатий в частности, таких как: увеличение относительного количества CD3+ и абсолютного числа CD19+ лимфоцитов, уменьшение относительного и абсолютного количества CD16+CD56low лимфоцитов, что указывает на активацию гуморального и клеточного звена иммунитета при данных заболеваниях. Полученные результаты также указывают на отсутствие однозначной поляризации иммунного ответа по Th1- или ^2-вектору при АИТ и БГ. При этом эффекты иммунорегуляторных цитокинов (IL-2, IL-4) на пролиферативную и функциональную активность щитовидной железы при этих заболеваниях имеют противоположную направленность, обусловленную, видимо, особенностью субпопуляционного состава инфильтрирующих ткань щитовидной железы лимфоцитов и функциональные особенности продуцируемых ими аутоантител.

Исследования выполнены при поддержке Федеральной целевой программы «Научные и научно-педагогические кадры инновационной России» на 2009-2013 годы (ГК № 02.740.11.0311; ГК № 16.740.11.0636); «Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научно-технологического комплекса России на 20072012 годы» (ГК № 16.512.11.2087).

Список литературы

1. Кандрор В.И. Молекулярно-генетические аспекты тиреоидной патологии // Проблемы эндокринологии. — 2001. — Т. 47, № 5. — С. 3-10.

2. Кандрор В.И., Крайнова С.И., Крюкова И.В., Мкртумова Н.А. К механизмам пролиферации и гибели тиреоцитов при аутоиммунных заболеваниях щитовидной железы // Вестник РАМН. - 2006. - № 9-10. - С. 56-60.

3. Кандрор В.И. Механизмы развития болезни Грейвса и действия тиреоидных гормонов // Клиническая и экспериментальная тирео-дология. - 2008. - Т 4, № 1. - С. 26-34.

4. Крайнова С.И., Крюкова И.В., Мкртумова Н.А., Кушлинский Н.Е., Антонова С.С., Юшков П.В., Кандрор В.И. Комплементзависи-мая антитиреоидная цитотоксичность сывороток больных с аутоиммунными заболеваниями щитовидной железы // Проблемы эндокринологии. -2004. - Т. 50, № 5. - С. 7-11.

5. Пальцев М.А., Иванов А.А., Северин С.Е. Межклеточные взаимодействия. - М.: Медицина, 2003. - 288 с.

6. Саприна Т.В., Прохоренко Т.С., Рязанцева Н.В., Ворожцова И.Н. Цитокинопосредован-ные механизмы формирования аутоиммунных тиреопатий // Клиническая экспериментальная тиреоидология. - 2010. - № 4. - С. 22-27.

7. Фадеев В.В., Мельниченко Г.А. Болезнь Грейвса // Русский медицинский журнал [Электронный ресурс] - Электрон. журн. - 2005. -Вып. 353. - Режим доступа к журн.: www.rmj.ru

8. Bretz J.D., Baker J.R. Apoptosis and autoimmune thyroid disease: following a TRAIL to thyroid destruction? // Clin. Endocrinol. - 2001. -Vol. 55, N 1. - P 1-11.

9. Fang Y., Sharp G.C., Braley-Mullen H. Interleukin-10 Promotes Resolution of Granulomatous Experimental Autoimmune Thyroiditis // The American Journal of Pathology. -

2008. - Vol. 172, N 6. - P 1591-1602.

10. Fort M.M., Leach M.W., Rennick D.M. A role for NK cells as regulators of CD4+ T cells in a transfer model of colitis // J. Immunol. - 1998 - Vol. 161 -P. 3256-3261.

11. Gianoukakis A.G., Khadavi N., Smith T.J. Cytokines, Graves’ Disease, and Thyroid-Associated Ophthalmopathy // THYROID. - 2008. - Vol. 18, N 9. - P 953-958.

12. Kahaly G.J., Grebe S.K., Lupo M.A., McDonald N., Sipos J.A. Graves’ disease: diagnostic and therapeutic challenges (multimedia activity) // Am. J. Med. - 2011. - Vol. 124. - P 2-3.

13. Liu R., Van Kaer L., La Cava A., Price M., Campagnolo D.I., Collins M., Young D.A., Vollmer T.L., Shi F. Autoreactive T cells mediate NK cell degeneration in autoimmune disease // J. Immunol. - 2006. - Vol. 176. - P 5247-5254.

14. Morris S.C., Ruwe S., Scott J., Finkelman F.D. IL-4 regulates CD8+ T cell homeostasis in BALB/c but not C57BL/6 mice // The J. of immunology. -

2009. - Vol. 182. - 98.7.

15. Poncin S. Lengele B., Colin I.M., Gerard A.C. Differential interactions between Th1/Th2, Th1/ Th3, and Th2/Th3 cytokines in the regulation of thyroperoxidase and dual oxidase expression, and

371

Саприна Т.В.

Медицинская Иммунология

of thyroglobulin secretion in thyrocytes in vitro // Endocrinology. - 2008. - Vol. 149 (4) - P. 1534-1542.

16. Shimomura N., Itoh M., Okugawa T., Murata Y., Seo H. Effects of interleukins on EGF-stimulated growth promotion in human thyroid cells: differential modifications by IL-2 and IL-6 in Graves’ and normal thyroid cells // Endocr. Regul. — 1994. — Vol. 28, N 2. - P. 55-65.

17. Solerte S.B. Defect of a subpopulation

of natural killer immune cells in Graves disease and Hashimotos thyroiditis: normalizing effect

of dehydroepi-androsterone sulfate // Eur. J. Endocrinol. - 2005. - Vol. 152. - P. 703-712.

18. Weetman A.P., Ajjan R.A. Cytokines and autoimmune thyroid disease // HOT THYROIDOLOGY (www.hotthyroidology.com). -2002. - N 1.

поступила в редакцию 13.12.2011 отправлена на доработку 06.01.2012 принята к печати 09.01.2012

372