ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ БЕРБЕРИНА
THERAPEUTIC USE OF MEDICINAL FORMS OF BERBERINE

ТЕРАПЕВТИЧЕСКОЕ ПРИМЕНЕНИЕ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ БЕРБЕРИНА
ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[001]
Воспаления кожи, сопровождающиеся покраснением лица, имеющие сходные симптомы и, возможно, сходные патологические причины, включают в себя розацеа, юношеские угри, себорейный дерматит, фотодерматит и контактный дерматит. Такие условия, связанные с покраснением лица, могут включать ощущения от чувства жара и чувствительности до прилива крови или жара с большой чувствительностью. Пациенты с воспалениями кожи, сопровождающимися покраснением лица, часто демонстрируют высокую чувствительность к факторам окружающей среды и топическим факторам. Стероид-индуцированный розацеаподобный дерматит (или стероидная розацеа) — это папулезная или пустулезная сыпь с эритематозной и эдематозной основой с или без телеангиэктазии, вызываемой длительным применением топических стероидов на лице или рецидивирующее состояние после прекращения применения топических стероидов.
[002]
Кожная токсичность — это известные побочные эффекты на коже, связанные с таргетными видами терапии или иммунотерапией, имеющие сходные симптомы и, возможно, сходные патологические причины воспалений кожи, сопровождающихся покраснением лица. Таргетные виды терапии, например, ингибиторами рецептора эпидермального фактора роста (EGFR), ингибиторами мультитирозин-киназы (MTK, ингибиторами MEK, ингибиторами фосфоинозитид 3-киназы (PI3K), ингибиторами протеин киназы B (AKT), ингибиторами BRAF, ингибиторами HER2, мультикиназными ингибиторами ангиогенеза, ингибиторами mTOR, ингибиторами ALK/c-met, мультикиназными ингибиторами Abl, ингибиторами BTK, ингибиторами HDAC, ингибиторами протеасом и агонистами ретиноидных Х-рецепторов (RXR); иммунотерапия, например, противораковые вакцины, агенты цитокина (например, гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF), интерфероны и интерлейкин-2 (IL-2)), клеточная терапия (например, лимфоциты, инфильтрующие опухоль (TILs), лимфоциты периферической крови (PBL), полученные при помощи рецепторов Т-клеток (TCR), и PBL, полученные при помощи химерных антигенных рецепторов (CAR)), ингибиторы белка иммунных контрольных точек (например, PD-1, PD-L1, CTLA-4, TIM-3, LAG-3, BTLA, VISTA и TIGIT) и стимуляторы белка иммунных контрольных точек (например, CD28, ICOS, 4-1BB, OX40, BITR, CD27, TWEAKR, HVEM, TIM-1 и CD-40); или комбинация любых вышеуказанных видов терапии, может вызывать токсичность, включая папулезно-пустулезную сыпь, макуло-папулезную сыпь, эритему, телеангиэктазию, паронихию и трещины, изменения волосяного покрова, ксероз, мукозит, зуд и реакцию кожи на руках и ногах, что может произойти с более чем 90% пациентов, также возможно суперинфицирование бактериями, например, золотистым стафилококком (Wollenberg, Kroth et al., Cutaneous side effects of EGFR inhibitors--appearance and management, Dtsch Med Wochenschr 2010; Lacouture, Maitland et al., A proposed EGFR inhibitor dermatologic adverse event-specific grading scale from the MASCC skin toxicity study group, Support Care Cancer, 2010; Curry, Torres-Cabala et al., Dermatologic toxicities to targeted cancer therapy: shared clinical and histologic adverse skin reactions, International Journal of Dermatology, 2014; Jeffrey S. Weber et. al., Toxicities of Immunotherapy for the Practitioner, Journal of Clinical Oncology, Vol. 33, 2015; Grace K. Dy and Alex A. Adjei, Understanding, Recognizing, and Managing Toxicities of Targeted Anticancer Therapies, CA Cancer J Clin, Vol. 63, 2013; Ahmad Tarhini, Immune-Mediated Adverse Events Associated with Ipilimumab CTLA-4 Blockade Therapy: The Underlying Mechanisms and Clinical Management, Scientifica, 2013; J Larkin et al., Combined Nivolumab and Ipilimumab or Monotherapy in Untreated Melanoma, N. Engl. J. Med., Vol. 373, 2015). Результаты гистопатологических исследований такой кожной токсичности показали, что часто присутствует воспаление, которое приводит к акневидной сыпи. Папулезно-пустулезная сыпь более часто встречалась при использовании ингибиторов EGFR, таких как цетуксимаб (83% пациентов) и афатиниб (90% пациентов), и ингибиторов MEK, таких как селуметиниб (93% пациентов) и траметиниб (80% пациентов). Макуло-папулезная сыпь чаще встречалась при использовании ингибиторов PI3K, таких как BKM-120 (37% пациентов), МК2206 (52% пациентов), ингибиторов белка иммунных контрольных точек, таких как ингибитор анти-CTLA-4 ипилимумаб (33% пациентов), ингибитор анти-PD-1 ниволумаб (26% пациентов) или комбинация ипилимумаба и ниволумаба (более 40% пациентов).
[003]
Берберин (натуральный желтый 18, 5,6-дигидро-9,10-диметоксибензо(g)-1,3- бензодиксоло(5,6-a)хинолизиний) — это изохинолиновый алкалоид, присутствующий в травяных растениях, таких как коптис (Coptidis rhizome), феллодендрон, шлемник байкальский, магония падуболистная и барбарис. Было обнаружено, что берберин и его производные соединения обладают антимикробной и противомалярийной активностью. Он может действовать против различных видов патогенов, например, грибков, сахаромицетов, паразитов, бактерий и вирусов.
[004]
Берберин также имеет противовоспалительную функцию, но точный механизм еще не известен.
[005]
Патент США № 6440465 относится к лекарственным формам глюкозамина для местного применения со смягчающей основой, содержащим берберин, для лечения псориаза. Патентная публикация США № 2005/0158404 относится к питательному продукту, биологически активной добавке к пище или фармацевтической композиции, содержащей витамин А, витамин Е, селен, витамин В6, цинк, хром и растительный источник берберина, для лечения акне посредством перорального введения. Патент США № 6974799 относится к фармацевтическим композициям для местного применения, содержащим трипептид (N-пальмитоил-Gly-His-Lys) и тетрапептид (N-пальмитоил-Gly-Gln-Pro-Arg) для устранения видимых признаков старения, включая морщины, растяжки, темные круги. Лекарственная форма может содержать дополнительные ингредиенты, включая берберин. В данных изобретениях берберин включен как один из множества ингредиентов, и его концентрация не указана.
[006]
TM
Патент США № 2004/0146539 относится к нутрицевтическим фармацевтическим композициям для местного применения со свойствами уменьшения объемов тела, увеличения тонуса и предотвращения старения, которые могут быть использованы для предотвращения старения кожи, морщин, отшелушивания кожи, лечения акне, розацеа и других проблем с кожей. В состав данного изобретения входят антимикробные агенты, отобранные из нескольких агентов, включая берберин. В данных нутрицевтических композициях берберин включен как один из множества ингредиентов, и его концентрация не указана. Существовал крем с 10% содержанием магонии падуболистной (Relieva, Apollo Pharmaceutical Canada Inc), содержащий 0,1% берберина для лечения псориаза.
[007]
Патент США № 2012/0165357 раскрывает использование берберина для лечения различных воспалений кожи, сопровождающихся покраснением лица, но не раскрывает специальные лекарственные формы берберина, которые могли бы быть определены как эффективные для лечения определенных состояний.
[008]
Таким образом, все еще присутствует необходимость разработки новых эффективных методов для лечения различных заболеваний кожи, сопровождающихся покраснением лица, а также кожной токсичности, вызванной таргетной терапией и/или иммунотерапией.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[009]
Настоящее изобретение предлагает фармацевтические композиции для лечения и/или предотвращения различных заболеваний кожи, сопровождающихся покраснением лица, и кожной токсичности, вызванной таргетной терапией и/или иммунотерапией. Предлагаемые лекарственные формы являются кремовыми (например, крем) или гелеобразными.
[010]
В частности, данное изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую берберин, где указанная композиция — это кремовая лекарственная форма, содержащая водную фазу и масляную фазу.
[011]
В одном варианте осуществления изобретения концентрация берберина в указанной кремовой лекарственной форме составляет от 0,01% до 10%, предпочтительно от 0,01% до 0,3% масс., более предпочтительно — от 0,1% до 0,2% масс., еще более предпочтительно — от 0,1% до 0,15% масс., и наиболее предпочтительно — 0,12% масс.
[012]
Если явно не указано иное, то, когда в заявке указывают количество или концентрацию в формате «по массе», масса каждого ингредиента определяется, исходя из общей массы лекарственной формы.
[013]
Фармацевтические композиции изобретения могут дополнительно содержать вещество, способствующее проникновению.
[014]
В одном варианте осуществления вещество, способствующее проникновению, это анионное вещество, способствующее проникновению.
[015]
В другом варианте осуществления вещество, способствующее проникновению, содержит Tween 60 и глицерин.
[016]
В одном варианте осуществления изобретения берберин является единственным фармацевтически активным компонентом в представленных лекарственных формах.
[017]
В одном варианте осуществления изобретения фармацевтические композиции изобретения имеют pH приблизительно от 4 до 7, более предпочтительно — около 5,5.
[018]
В предпочтительном варианте осуществления изобретение предлагает фармацевтическую композицию, содержащую берберин как единственный фармацевтически активный компонент, где указанный берберин имеет концентрацию от 0,1% до 0,2% масс., где указанная композиция представляет собой кремовую лекарственную форму, содержащую водную фазу и масляную фазу, где указанная композиция содержит вещество, способствующее проникновению, консервант и стабилизатор, и где указанная композиция имеет pH приблизительно от 4 до 7.
[019]
В более предпочтительном варианте осуществления изобретение предлагает фармацевтическую композицию, содержащую берберин как единственный фармацевтически активный компонент, где указанный берберин имеет концентрацию около 0,12% масс., где указанная композиция — это кремовая лекарственная форма, содержащая водную фазу и масляную фазу, где указанная композиция содержит вещество, способствующее проникновению, консервант и стабилизатор, и где указанная композиция имеет pH приблизительно 5,5.
[020]
В другом варианте данное изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую берберин, где указанная композиция представляет собой гелеобразную лекарственную форму, где указанная композиция содержит анионное вещество, способствующее проникновению.
[021]
В предпочтительном варианте осуществления анионное вещество, способствующее проникновению, содержит натрий додецилсульфат (SDS).
[022]
В одном варианте осуществления в гелеобразных фармацевтических композициях, предлагаемых изобретением, средний размер около 90%  частиц берберина составляет менее 10 мкм.
[023]
В другом варианте осуществления в гелеобразных фармацевтических композициях, предлагаемых изобретением, средний размер около 50% частицы берберина составляет менее 4 мкм.
[024]
В одном варианте осуществления изобретения концентрация берберина в указанной гелеобразной лекарственной форме составляет от 0,01% до 0,3% масс., более предпочтительно — от 0,1% до 0,2% масс., еще более предпочтительно — от 0,1% до 0,15% масс., и наиболее предпочтительно — около 0,12% масс.
[025]
В изобретении также предложены способы лечения воспалений кожи, сопровождающихся покраснением лица, содержащие введение пациенту фармацевтически эффективного количества фармацевтической композиции изобретения.
[026]
В варианте осуществления изобретения воспаление кожи, сопровождающееся покраснением лица, выбирают из группы, состоящей из розацеа, юношеских угрей, себорейного дерматита, контактного дерматита, стероид-индуцированного розацеаподобного дерматита и воспаления кожи, вызванного ингибитором рецептора эпидермального фактора роста (EGFR).
[027]
Согласно изобретению далее предложены способы лечения и/или предотвращения кожной токсичности, вызванной таргетной терапией и/или иммунотерапией, содержащие введение пациенту фармацевтически эффективного количества берберина и/или его биологически эквивалентного аналога.
[028]
В предпочтительном варианте осуществления таргетная терапия включает в себя терапию ингибиторами EGFR, ингибиторами MTK, ингибиторами MEK, ингибиторами PI3K, ингибиторами AKT, ингибиторами BRAF, ингибиторами HER2, мультикиназными ингибиторами ангиогенеза, ингибиторами mTOR, ингибиторами ALK/c-met, мультикиназными ингибиторами Abl, ингибиторами BTK, ингибиторами HDAC, ингибиторами протеасом и агонистами RXR.
[029]
В предпочтительном варианте осуществления иммунотерапия включает в себя терапию при помощи противораковых вакцин, агентов цитокина (например, гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF)), интерфероны и интерлейкин-2 (IL-2)), клеточная терапия (например, лимфоциты, инфильтрующие опухоль (TILs), лимфоциты периферической крови (PBL), полученные при помощи рецепторов Т-клеток (TCR), и PBL, полученные при помощи химерных антигенных рецепторов (CAR)), ингибиторы белка иммунных контрольных точек (например, PD-1, PD-L1, CTLA-4, TIM-3, LAG-3, BTLA, VISTA и TIGIT) и стимуляторы белка иммунных контрольных точек (например, CD28, ICOS, 4-1BB, OX40, BITR, CD27, TWEAKR, HVEM, TIM-1 и CD-40).
[030]
В предпочтительном варианте осуществления берберин и/или его биологически эквивалентный аналог вводят пациенту в лекарственной форме фармацевтической композиции для местного применения.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
[031]
Патент или заявка содержит как минимум один тоновый  рисунок. Копии данного патента или патентной заявки с тоновым(и) чертежом(ами) будут предоставлены ведомством по запросу и при уплате необходимых взносов.
[032]
2
Фигура 1 представляет собой график общего количества проникшего берберина (нг/см) в зависимости от времени для шести лекарственных форм берберина, прошедших испытания.
[033]
2
Фигура 2 представляет собой график общего количества проникшего берберина (нг/см) в зависимости от времени для трех лекарственных форм берберина в виде гелевой суспензии (G22, G23 и G24).
[034]
Фигура 3 представляет собой изображение гематоксилин-эозинового (H&E) окрашивания двусторонней биопсии кожи с носогубных складок пациента, принимающего афатиниб и на одну сторону лица которого наносят гелевую лекарственную форму (G23).
[035]
Фигура 4 представляет собой изображение гематоксилин-эозинового (H&E) окрашивания двусторонней биопсии кожи с носогубных складок пациента, принимающего афатиниб ингибитор EGFR и на другую сторону лица которого наносят гелевую основу (G23 без берберина).
[036]
Фигура 5 представляет собой график количества папул в зависимости от времени для пациента, принимающего афатиниб, на одну сторону лица которого наносят гелевую лекарственную форму (G23) и на другую сторону лица которого наносят гелевую основу (G23 без берберина) (* обозначено P< 0,05 согласно знаковому ранговому коэффициенту Уилкоксона).
[037]
Фигура 6 представляет собой график количества пустул в зависимости от времени для пациента, принимающего афатиниб, на одну сторону лица которого наносят гелевую лекарственную форму (G23) и на другую сторону лица которого наносят гелевую основу (G23 без берберина) (* обозначено P< 0,05 согласно знаковому ранговому коэффициенту Уилкоксона).
[038]
Фигура 7 представляет собой график суммарного количества (папул и пустул) в зависимости от времени для пациента, принимающего афатиниб, на одну сторону лица которого наносят гелевую лекарственную форму (G23) и на другую сторону лица которого наносят гелевую основу (G23 без берберина) (* обозначено P< 0,05 согласно знаковому ранговому коэффициенту Уилкоксона).
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[039]
В зависимости от определенного воспаления, подвергающегося лечению, важно, чтобы берберин эффективно проникал в кожу. Берберин является гидрофильным соединением (коэффициент распределения 1,07 в октанол-водной системе), что затрудняет проникновение берберина через роговой слой для достижения заданного места, например, дермы или эпидермиса, где могут происходить воспаления кожи, сопровождающиеся покраснением лица, или кожная токсичность, вызванная таргетной терапией. Кроме того, берберин достаточно растворимый (растворимость 1,57 мг/мл) и будет быстро выпущен в заданные клетки, что приводит к временному эффекту.
[040]
Настоящее изобретение, таким образом, предлагает фармацевтические композиции с увеличенной скоростью проникновения берберина для лечения и/или предотвращения различных заболеваний кожи, сопровождающихся покраснением лица, и кожной токсичности, вызванной таргетной терапией и/или иммунотерапией. Предлагаемые лекарственные формы являются кремовыми лекарственными формами (например, кремы) или гелеобразными лекарственными формами.
[041]
В частности, данное изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую берберин, где указанная композиция — это кремовая лекарственная форма, содержащая водную фазу и масляную фазу.
[042]
Так как кремовые лекарственные формы изобретения могут способствовать проникновению берберина в кожу, относительно малого количества берберина достаточно для достижения требуемого эффекта от лечения. В одном варианте осуществления изобретения концентрация берберина в указанной кремовой лекарственной форме составляет от 0,01% до 10% масс., предпочтительно от 0,01% до 0,3% масс., более предпочтительно — от 0,1% до 0,2% масс., еще более предпочтительно — от 0,1% до 0,15% масс., и наиболее предпочтительно — 0,12% масс, исходя из общей массы препарата.
[043]
Фармацевтические композиции изобретения могут дополнительно содержать вещество, способствующее проникновению.
[044]
В одном варианте осуществления вещество, способствующее проникновению, это анионное вещество, способствующее проникновению. Например, анионное вещество, способствующее проникновению, может содержать натрий додецилсульфат (SDS).
[045]
В другом варианте осуществления вещество, способствующее проникновению, содержит Tween 60 и глицерин. Кремовые лекарственные формы изобретения предпочтительно должны содержать Tween 60 и глицерин в качестве веществ, способствующих проникновению. Когда те же вещества, способствующие проникновению, используют в некремовых лекарственных формах, они не увеличивают скорость проникновения, что позволяет предположить, что лекарственные формы на кремовой основе обладают уникальными свойствами.
[046]
В одном варианте осуществления изобретения берберин является единственным фармацевтически активным компонентом в представленных лекарственных препаратах. Даже если ингредиент представленных лекарственных форм может быть активным компонентом в лекарственных формах  предыдущего уровня техники для задач, отличающихся от кожной токсичности, вызванной таргетной терапией или иммунотерапией, он все еще рассматривается как фармацевтическое вспомогательное вещество для задач этих представленных лекарственных форм, поскольку данный ингредиент не присутствует в количестве, достаточном для эффективного лечения кожной токсичности, вызванной таргетной терапией или иммунотерапией.
[047]
В одном варианте осуществления изобретения фармацевтические композиции изобретения имеют pH приблизительно от 4 до 7, более предпочтительно — около 5,5.
[048]
В предпочтительном варианте осуществления изобретение предлагает фармацевтическую композицию, содержащую берберин как единственный фармацевтически активный компонент, где указанный берберин имеет концентрацию от 0,1% до 0,2% масс., где указанная композиция — это кремовая лекарственная форма, содержащая водную фазу и масляную фазу, где указанная композиция содержит вещество, способствующее проникновению, консервант и стабилизатор, и где указанная композиция имеет pH приблизительно от 4 до 7.
[049]
В более предпочтительном варианте осуществления изобретение предлагает фармацевтическую композицию, содержащую берберин как единственный фармацевтически активный компонент, где указанный берберин имеет концентрацию около 0,12% масс., где указанная композиция — это кремовая лекарственная форма, содержащая водную фазу и масляную фазу, где указанная композиция содержит вещество, способствующее проникновению, консервант и стабилизатор, и где указанная композиция имеет pH приблизительно 5,5.
[050]
Удивительно и неожиданно было обнаружено, что кремовые лекарственные формы изобретения обладают лучшей скоростью проникновения по сравнению с некремовыми лекарственными формами берберина.
[051]
В другом варианте осуществления данное изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую берберин, где указанная композиция — это гелеобразная лекарственная форма, где указанная композиция содержит анионное вещество, способствующее проникновению.
[052]
В предпочтительном варианте осуществления анионное вещество, способствующее проникновению, содержит натрий додецилсульфат (SDS). Включение натрий додецилсульфата (SDS) в качестве анионного вещества, способствующего проникновению, приводит к тому, что лекарственные формы на гелевой основе становятся гидрофобными (коэффициент распределения 50,1 в октанол-водной системе) и обладают намного меньшей растворимостью около 0,011 мг/мл, что обеспечивает медленный выпуск берберина в заданные клетки и приводит к удлиненной кривой высвобождения.
[053]
В настоящем изобретении было обнаружено, что при pH от 4 до 7 растворимость берберина в присутствии SDS составляет от 0,01 до 0,06 мг/мл, т.е. в 25–150 раз меньше, чем растворимость водного берберина (1,57 мг/мл), и относительно мала при pH 5,5.
[054]
С удивлением было обнаружено, что из всех испытанных веществ, способствующих проникновению (SDS, глицерин, пропилен гликоль, PEG 400, этанол и Tween) добавление SDS в лекарственные формы на гелевой основе приводило к наиболее высокой скорости проникновения и увеличенной местной концентрации берберина в эпидермисе и дерме.
[055]
В одном варианте осуществления в гелеобразных фармацевтических композициях, предлагаемых изобретением, около средний размер около 90% частиц берберина составляет менее 10 мкм.
[056]
В другом варианте осуществления в гелеобразных фармацевтических композициях, предлагаемых изобретением, средний размер около 50% частиц берберина составляет менее 4 мкм.
[057]
Также с удивлением было обнаружено, что в лекарственных формах на гелевой основе присутствовала прямая зависимость между количеством SDS и скоростью проникновения и обратная зависимость между размером берберина и скоростью проникновения.
[058]
Так как лекарственные формы изобретения на гелевой основе могут способствовать проникновению берберина в кожу, относительно малого количества берберина достаточно для достижения требуемого эффекта от лечения. В одном варианте осуществления изобретения концентрация берберина в указанной лекарственной форме на гелевой основе составляет от 0,01% до 0,3% масс., более предпочтительно от 0,1% до 0,2% масс., еще более предпочтительно — от 0,1% до 0,15% масс., и наиболее предпочтительно — 0,12% масс, исходя из общей массы лекарственной формы.
[059]
В изобретении также предложены способы лечения воспалений кожи, сопровождающихся пок0раснением лица, содержащие введение пациенту фармацевтически эффективного количества фармацевтической композиции изобретения.
[060]
В варианте осуществления изобретения воспаление кожи, сопровождающееся покраснением лица, выбирают из группы, состоящей из розацеа, юношеских угрей, себорейного дерматита, контактного дерматита, стероид-индуцированного розацеаподобного дерматита и воспаления кожи, вызванного ингибитором рецептора эпидермального фактора роста (EGFR).
[061]
Согласно изобретению далее предложены способы лечения и/или предотвращения кожной токсичности, вызванной таргетной терапией и/или иммунотерапией, содержащие введение пациенту фармацевтически эффективного количества фармацевтической композиции изобретения.
[062]
В одном варианте осуществления указанную таргетную терапию выбирают из группы, включающей в себя: ингибиторы рецептора эпидермального фактора роста (EGFR),  ингибиторы мультитирозин-киназы (MTK), ингибиторы MEK, ингибиторы фосфоинозитид 3-киназы (PI3K), ингибиторы протеин киназы B (AKT), ингибиторы BRAF, ингибиторы HER2, мультикиназные ингибиторы ангиогенеза, ингибиторы mTOR, ингибиторы ALK/c-met, мультикиназные ингибиторы Abl, ингибиторы BTK, ингибиторы HDAC, ингибиторы протеасом и агонисты ретиноидных Х-рецепторов (RXR); указанную иммунотерапию выбирают из группы, включающей в себя: противораковые вакцины, агенты цитокина (например, гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор (GM-CSF), интерфероны и интерлейкин-2 (IL-2)), клеточную терапию (например, лимфоциты, инфильтрующие опухоль (TILs), лимфоциты периферической крови (PBL), полученные при помощи рецепторов Т-клеток (TCR), и PBL, полученные при помощи химерных антигенных рецепторов (CAR)), ингибиторы белка иммунных контрольных точек (например, PD-1, PD-L1, CTLA-4, TIM-3, LAG-3, BTLA, VISTA и TIGIT) и стимуляторы белка иммунных контрольных точек (например, CD28, ICOS, 4-1BB, OX40, BITR, CD27, TWEAKR, HVEM, TIM-1 и CD-40); и указанную кожную токсичность, вызванную таргетной терапией и/или иммунотерапией, выбирают из группы, включающей в себя,  папулезно-пустулезную сыпь, макуло-папулезную сыпь, эритему, телеангиэктазию, паронихию и трещины, изменения волосяного покрова, ксероз, мукозит, зуд и реакция кожи на руках и ногах.
[063]
Концентрации берберина в эпидермисе, дерме и приемнике (т.е. контейнере, заполненном фосфатным буфером ФСБР, контактирующим с кожей) измеряются при помощи следующего подхода. Установка диффузионной ячейки Франца по существу представляет собой кожу, зажатую между двумя зажимами. Препарат наносится с одной стороны кожи (сверху), и концентрация препарата измеряется в полученной пробе (снизу) установки.
[064]
2
Используемый в настоящем документе термин «скорость проникновения» относится к количеству берберина, приходящемуся на грамм ткани эпидермиса или дермы, или количеству берберина, приходящемуся на смкожи в приемнике, по истечении определенного периода времени после нанесения лекарственной формы на кожу.
[065]
Количество препарата, измеренное в приемнике, отражает общее количество, проникшее через область рогового слоя, эпидермиса и дермы кожи. Фармацевтическая композиция данного изобретения увеличила скорость проникновения, и предпочтительный диапазон скорости проникновения следующий:
Эпидермис: от 0,4 до 4000 мкг берберина на грамм ткани
Дерма: от 0,003 до 30 мкг берберина на грамм ткани
2
Приемник: от 0,0001 до 1 мкг берберина на 1X1 см кожи.
[066]
В Таблице 1 представлены различные ингредиенты, которые могут быть использованы в составе изобретения. Однако данный список представлен только в целях иллюстрации, не имеет ограничительного характера для объема данного изобретения. Кроме того, различные ингредиенты / вспомогательные вещества могут действовать более чем одним способом, например, функционировать как вещество, способствующее проникновению, эмульгирующий агент, увлажняющий агент и т.д.
ТАБЛИЦА 1
Вспомогательное вещество
Функция
Диапазон концентрации (%)
Заменители/аналоги
Лаурилсульфатнатрия
Анионное вещество, способствующее проникновению
0,5-2,5
сульфат, сульфонат, фосфат, олеат, моностеарат и карбоксилаты
Карбопол 934P
Гелеобра-зующий агент
0,3-3
Карбопол 940, карбопол 941, карбопол 971, карбопол 974, карбопол 980, карбопол 981, карбопол 5984EP, карбопол ETD 2020, гидроксиэтилметилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза (с низкой степенью замещения), метилцеллюлоза, метилгидроксипропилцеллюлоза
Гидроксиэтилцеллюлоза
Гелеобразующий агент
0,5-8
Метилпарабен
Консерванты
0,02-0,3
Четвертичные соединения аммония, амино арил кислый эфир, алкиловые/ариловые спирты, алкиловые/ариловые кислоты, алкиловые/ариловые амиды, ртутьорганические соединения, доноры формальдегида, бигуаниды, фенолы
Пропилпарабен
0,01-0,8
ЭДТК
Антиоксидант
0,005-0,1
Дикалий эдетат, динатрий эдетат, эдетат кальций динатрий, натрий эдетат, тринатрий эдетат
Глицерин
Смачиватель
0,01-30
Пропиленгликоль, полиэтиленгликоль
Tween 80
Увлажняющий агент
0,1-3
Полиэтиленгликоль, эфиры сорбита
Лимонная кислота моногидрат
Буферный агент
0,1-2
Кислота лимонная безводная, фумаровая кислота, яблочная кислота, натрия цитрат дигидрат, винная кислота
Натрия цитрат дигидрат
0,3-2
Натрия цитрат безводный; моногидрат лимонной кислоты
Вода
Вода
-
-
Стеариновая кислота
Масляная основа
1-20
Стеарат кальция, стеарат магния, полиоксиэтилен стеараты, очищенная стеариновая кислота, стеарат цинка, лауриновая кислота, миристиновая кислота, пальмитиновая кислота, олеиновая кислота
Касторовое масло
Масляная основа
5-12,5
Минеральное масло, миндальное масло, масло какао, кукурузное масло, кокосовое масло, хлопковое масло, льняное масло, оливковое масло, соевое масло
Белый вазелин
Масляная основа
4-56
Желтый вазелин, вазелиновое масло, парафин, церезин, микрокристаллический воск, Plastibase
Вспомогательное вещество
Функция
Диапазон концент-рации (%)
Заменители/аналоги
SPAN 60
Эмульгирующий агент
1-15
Полиоксиэтиленовый эфир сорбита и жирной кислоты,
Tween 60
Эмульгирующий агент
1-15
Полиэтиленгликоль, эфиры сорбита
[067]
Используемый в настоящем документе термин «берберин» относится к 5,6-дигидро-9,10-диметоксибензо(g)-1,3-бензодиксоло (5,6-a) хинолизинию. Данное изобретение также предполагает использование аналогов берберина, содержащих, но не ограничивающихся следующим: ятроризин, пальматин, коптизин, 9-деметилберберин, 9-деметипальматин, 13-гидроксиберберин, берберрубин, пальматрубин, 9-O-этилберберрубин, 9-O-этил-13-этилберберрубин, 13-метилдигидроберберин N-метиловая соль, терагидропротоберберины и их N-метиловые соли, 9-лауроилберрубин хлор и фармацевтически приемлемые соли всех этих соединений.
[068]
Используемый в настоящем документе термин «фармацевтически приемлемые соли» включает в себя соли кислотной или основной группы. Примеры фармацевтически приемлемых солей содержат соли, полученные из неорганических кислот, таких как соляная, бромисто-водородная, азотная, угольная, моногидрогенкарбоновая, фосфорная, моногидрогенфосфорная, дигидрогенфосфорная, серная, моногидрогенсерная, йодистоводородная или фосфорная кислоты и т.п., а также соли, полученные из относительно нетоксичных органических кислот, таких как уксусная, пропионовая, изомасляная, малеиновая, малоновая, бензойная, янтарная, субериновая, фумаровая, миндальная, фталевая, бензолсульфоновая, толуолсульфоновая, включая p-толуолсульфоновую, m-толуолсульфоновую и о-толуольсульфоновую, лимонная, винная, метансульфоновая и т.п. Также сюда входят соли аминокислот, такие как аргинат и т.п., и соли органических кислот, таких как глюкуроновая кислота или галактуроновая кислота и т.п.
[069]
Используемый в настоящем документе термин «лечение» включает в себя сдерживание заболевания или текущего состояния, что приводит к снижению тяжести и/или частоты возникновения симптомов и/или первопричины, предотвращению возникновения симптомов и/или их первопричины, улучшению состояния пациента. Таким образом, «лечение» пациента указанными композициями изобретения содержит предотвращение определенных воспалений у предрасположенного индивидуума, а также контроль течения лечения индивидуума с клиническими симптомами, чтобы замедлить воспаление или заболевание или вызвать его регресс, и поддержание текущего состояния и/или предотвращение прогресса воспаления или заболевания. Лечение может содержать профилактику, терапию или курс лечения.
[070]
Используемый в настоящем документе термин «фармацевтически эффективное количество» соединений и/или для фармацевтических композиций данного изобретения относится к достаточному количеству соединения и/или композиции для лечения, сдерживания, улучшения или предотвращения различных воспалений кожи, сопровождающихся покраснением лица, включая, но не ограничиваясь, кожной токсичностью, вызванной таргетной терапией, с разумным отношением «риск/польза», применяемым к любому медицинскому лечению. Однако следует понимать, что общее количество для ежедневного применения соединений и/или композиций данного изобретения должно быть установлено лечащим врачом по результатам тщательной медицинской оценки. Индивидуальный эффективный уровень дозы для определенного пациента будет зависеть от различных факторов, включая воспаление, подвергающееся лечению, и тяжесть воспаления; активность индивидуального задействованного соединения; индивидуальную задействованную композицию; возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол и диету пациента; время введения, способ введения и интенсивность экскреции индивидуального задействованного соединения; продолжительность лечения; препараты, используемые совместно или одновременно с индивидуальным задействованным соединением; и подобные факторы, хорошо известные специалистам в области медицины. Например, специалистам в данной области техники хорошо известно, что необходимо начинать с доз композиции с уровнем меньше требуемого, чтобы достичь требуемого терапевтического эффекта, и постепенно увеличивать дозировку до тех пор, пока не будет достигнут требуемый эффект.
[071]
Фармацевтическая композиция может дополнительно содержать фармацевтически приемлемый носитель и находиться в твердой или жидкой форме, включая, но не ограничиваясь, таблетки, порошки, капсулы, пеллеты, растворы, суспензии, эликсиры, эмульсии, гели, кремы, пластыри или свечи, включая ректальные и уретральные свечи.
[072]
Используемый в настоящем документе термин «фармацевтически приемлемый носитель» относится к фармацевтически приемлемому материалу, композиции или основе, таким как жидкий или твердый наполнитель, разбавитель, вспомогательное вещество, растворитель или инкапсулирующий материал. Фармацевтически приемлемый носитель совместим с другими ингредиентами композиции, со способом введения и не наносит вреда пациенту. Фармацевтически приемлемый носитель может быть на водной или неводной основе. Фармацевтически приемлемый носитель содержит смолы, крахмал, сахара, целлюлозные материалы и их смеси. Некоторые примеры материалов, которые могут служить в качестве фармацевтически приемлемых носителей, включают, но не ограничиваются, следующие: (а) сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; (b) крахмал, такой как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; (c) целлюлоза и ее производные, такие как натриевая карбоксиметилцеллюлоза, этилцеллюлоза и ацетилцеллюлоза; (d) трагакант в порошке; (e) солод; (f) желатин; (g) тальк; (h) вспомогательные вещества, такие как масло какао и свечной воск; (i) масла, такие как арахисовое масло, хлопковое масло, подсолнечное масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло и соевое масло; (j) гликоли, такие как пропиленгликоль; (k) полиолы, такие как глицерин, сорбитол, маннит и полиэтиленгликоль; (l) эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; (m) агар; (n) буферные агенты, такие как гидроксид магния, гидроксид алюминия, борная кислота и борат натрия и фосфатный буфер; (о) альгиновая кислота; (p) апирогенная вода; (q) изотонический раствор; (r) раствор Рингера; (s) этиловый спирт; (t) растворы фосфатного буфера; и (u) прочие нетоксичные совместимые вещества, подходящие для использования в фармацевтических композициях.
[073]
Композиции изобретения могут вводиться при помощи любых средств, известных в данной области, включая, но не ограничиваясь, пероральными, назальными, парентеральными, для местного применения, трансдермальными или ректальными способами введения. Предпочтительно, чтобы композиции были адаптированы для перорального или местного введения. Например, активный ингредиент композиции может быть объединен с вспомогательными веществами для приготовления таблеток, капсул, пеллет, пастилок, леденцов, растворов, порошков или гранул, суспензий, твердых или мягких капсул, пластырей и любых других подходящих форм.
[074]
В изобретении также предложен способ лечения и/или предотвращения кожной токсичности, вызванной таргетной терапией и/или иммунотерапией, содержащий введение пациенту фармацевтически эффективного количества берберина или его биологически эквивалентного аналога.
[075]
Согласно изобретению далее предложен способ лечения и/или предотвращения кожной токсичности, вызванной таргетной терапией и/или иммунотерапией, содержащий местное нанесение на пораженную кожу фармацевтически эффективного количества фармацевтической композиции для местного применения, содержащей берберин или его биологически эквивалентный аналог.
[076]
В ином варианте осуществления фармацевтическая композиция для местного применения находится в форме лосьона, крема, мази, пасты, геля, спрея, суспензии, эмульсии, пены, пластыря, порошка и жидкой мази.
[077]
В ином варианте осуществления фармацевтическая композиция для местного применения содержит как минимум 0,02% масс., предпочтительно от 0,1% до 2% масс. берберина или его биологически эквивалентного аналога, при этом это количество приходится на общую массу композиции.
[078]
В ином варианте осуществления изобретения берберин или биологически эквивалентный аналог берберина является первичным фармацевтически приемлемым активным компонентом.
[079]
В другом варианте осуществления изобретения берберин или биологически эквивалентный аналог берберина является единственным фармацевтически приемлемым активным компонентом.
[080]
Следующие примеры показывают некоторые аспекты данного изобретения. Примеры не носят ограничительного характера для изобретения.
Пример 1
Исследование проникновения лекарственных форм берберина
в кожу мышей
[081]
Сравнивали следующие шесть лекарственных форм берберина: C8, 0,125%, 0,3%, G22, G23 и G24.
Лекарственные формы
[082]
Рассматривали следующие лекарственные формы:
C8 (лекарственная форма на основе крема):
Водная фаза
берберин (0,12%), Tween 60 (1%), глицерин (3%), метилпарабен (0,1%), пропилпарабен (0,02%), NaOH (для регулировки pH до 5,5) и этилендиаминтетрауксусная кислота  (ЭДТК)  (0,02%).
Масляная фаза
стеариновая кислота (7,5%), касторовое масло (8%), белый вазелин (6%) и SPAN 60 (2%).
0,125% (лекарственная форма на гелевой основе):
берберин (0,125%), этанол (2,5%), глицерин (10%), феноксиэтанол (0,3%), карбомер.
0,3% (лекарственная форма на гелевой основе):
берберин (0,3%), пропиленгликоль (9,25%), PEG 400 (5,03%), метилпарабен (0,1%), пропилпарабен (0,02%), NaOH (0,4%), ЭДТК (0,02%), карбомер 934P (1%).
G22 (лекарственная форма на гелевой основе):
берберин (0,1%), SDS (0,086%), глицерин (10%), Tween 80 (0,5%), метилпарабен (0,1%), пропилпарабен (0,02%), лимонная кислота (0,033%), натрия цитрат дигидрат (0,115%), NaOH, ЭДТК (0,02%), карбомер 934P (0,3%), HEC 250 HHX (1,2%). Распределение размера частиц: 3,83/11,34/27,24 (в формате D10/D50/D90, где каждое значение относится к соответствующему проценту частиц размера меньше указанного, т. е. 10% частиц меньше 3,83 и т. д.).
G23 (лекарственная форма на гелевой основе):
берберин (0,1%), SDS (0,086%), глицерин (10%), Tween 80 (0,5%), метилпарабен (0,1%), пропилпарабен (0,02%), лимонная кислота (0,033%), натрия цитрат дигидрат (0,115%), NaOH, ЭДТК (0,02%), карбомер 934P (0,3%), HEC 250 HHX (1,2%). Распределение размера частиц: 1.45/2.85/9.30
G24 (лекарственная форма на гелевой основе):
берберин (0,1%), SDS (0,043%), глицерин (10%), Tween 80 (0,5%), метилпарабен (0,1%), пропилпарабен (0,02%), лимонная кислота (0,033%), натрия цитрат дигидрат (0,115%), NaOH, ЭДТК (0,02%), карбомер 934P (0,3%), HEC 250 HHX (1,2%). Распределение размера частиц: 1,55/2,86/5,44
[083]
Размер частиц лекарственных форм G22, G23 и G24 был определен следующим образом.
[084]
Была подготовлена очищенная вода, затем были добавлены хлорид берберина, Tween 80 и лаурил сульфат натрия (SDS). После того как смесь была хорошо размешана, ее тонко измельчили. Затем размер частиц был измерен дифракционным анализатором.
Условия эксперимента
[085]
Мыши были выведены из эксперимента посредством цервикальной дислокации. Полнослойный образец кожи с бока был удален и помещен на диффузионную ячейку, контактирующую с рецепторной фазой, которой было 0,01M ФСБР (pH 7,4 при 37℃). Буферы были перекачаны через отсек приемника со скоростью 3–4 мл/ч. В донорской камере на поверхность кожи было добавлено 300 μл лекарственных форм. Растворы из приемника отбирались для анализа методом ВЭЖХ в часы 0, 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10 и 12. Скорость чрескожного проникновения была рассчитана из наклона линейной части суммарного количества проникшего хлорида берберина в зависимости от временного графика.Результаты
[086]
2
Фигура 1 отображает график общего количества проникшего берберина (нг/см) в зависимости от времени для всех шести лекарственных форм, прошедших испытания. Как видно, C8 (кремовая лекарственная форма) и G23 (лекарственная форма на гелевой основе) проникли лучше по сравнению с остальными лекарственными формами. Это было неожиданно, так как теоретически все шесть лекарственных форм должны осуществлять проникновение с равной скоростью в связи с физическими свойствами берберина в водной фазе.
[087]
2
Фигура 2 отображает график общего количества проникшего берберина (нг/см) в зависимости от времени для трех лекарственных форм в виде гелевой суспензии (G22, G23 и G24). Как видно, скорость проникновения имеет прямую зависимость от вещества, способствующего проникновению, (SDS) и обратную зависимость от размера берберина. G23 и G24 с размером берберина менее 10 мкм (D90) обладают меньшей скоростью проникновения, чем G22 с более 10 мкм (D90).
Пример 2
Исследование проникновения лекарственных форм берберина
в кожу мини-свинок
[088]
Сравнивали следующие лекарственные формы берберина: 1) C8, G22 и G23; и 2) 0,125%, 0,30% и G23.
[089]
Кожа: Кожа мини-свинки (свинка Lanyu или свинка Lee sung) дерматомирована до 700 μм с электрическим сопротивлением > 10 кОм (Millicell-ERS, Millipore).
Эксперименты на проникновение
[090]
3
4
3
Кожа свинки была помещена на диффузионную ячейку так, что сторона дермы контактировала с рецепторной фазой, которая была заполнена ФСБР (pH 7,4 при 37℃). В донорской камере на поверхность кожи было добавлено 20 μл лекарственных форм. Через 8 часов остатки лекарственной формы на поверхности кожи были удалены тремя сухими ватными палочками. По истечении 12 и 24 часов обработки лекарственными формами кожа была снята с диффузионной ячейки, и поверхность кожи снова была аккуратно очищена тремя смоченными в воде ватными палочками. Было сделано 10 соскобов липкой лентой для удаления рогового слоя. Затем кожа была помещена на стеклянный диск и разделена с нагреванием на эпидермис и дерму в водяной бане с температурой 60° C в течение 90 секунд. Отделенные эпидермис и дерма были взвешены, измельчены и экстрагированы 0,5 мл растворителя (1%HPO:CHOH (1:1)). Экстракты кожи были центрифугированы при 14 500 об/мин в течение 20 мин. Концентрации хлорида берберина в растворах приемника и надосадочных жидкостях из экстрактов кожи были определены методом ВЭЖХ. Восстановление хлорида берберина из кожи было определено посредством добавления известного количества препарата в ткани кожи и обработки согласно указанному выше.
Результаты
[091]
В Таблице 2 собраны результаты данного эксперимента.
[092]
Результаты исследования проникновения в кожу мини-свинок показали, что: а) С8 (кремовая лекарственная форма) проникает удивительно хорошо; b) лекарственные формы, содержащие частицы берберина, постоянно высвобождались в течение 24 часов (G22, G23 в сравнении с C8, 0,125% и 0,3%); c) G22 и G23 (лекарственные формы, содержащие частицы берберина) удерживали больше берберина в эпидермисе и дерме через 24 часа по сравнению с С8 (кремовая лекарственная форма); d) лекарственные формы, содержащие частицы берберина, проникали лучше, чем лекарственные формы с раствором берберина (G23 по сравнению с 0,3%); е) G23 удерживала приблизительно такое же количество берберина в эпидермисе и больше берберина в дерме через 24 часа по сравнению с лекарственной формой 0,3%, несмотря на то, что G23 содержала только 0,1% берберина; и f) в сравнении с другими веществами, способствующими проникновению (этанол и глицерол в лекарственной форме 0,125% и пропиленгликоль и PEG 400 в лекарственной форме 0,3%), добавление SDS в G23 привело к увеличению скорости проникновения и увеличило местную концентрацию берберина в эпидермисе и дерме.
Пример 3
Результаты биопсии кожи пациента, подвергавшегося лечению лекарственной формой для местного применения, содержащей берберин
[093]
Субъектом испытаний был мужчина возраста 56 лет, принимавший афатиниб, ингибитор EGFR, для лечения немелкоклеточного рака легких (НМРЛ). После приема афатиниба субъект начал наносить гель местного применения лекарственной формы G23 на одну сторону лица и гелевую основу (G23 без берберина) на другую сторону лица ежедневно.
[094]
У субъекта была взята двусторонняя биопсия кожи с носогубных складок (с обеих сторон носа) по завершении двухнедельного местного применения. Образцы кожи размером 1,0 см х 0,5 см были получены посредством инцизионной биопсии, а затем прошли гистологическую обработку с применением гематоксилин-эозинового окрашивания. Оценка производилась обученным дерматологом.
[095]
Результаты гематоксилин-эозинового окрашивания (Фигуры 3 и 4) показывают, что фолликулярная структура остается неизменной, и на области кожи, обработанной G23 (Фигура 3), отсутствует инфильтрат воспалительных клеток, в то время как наблюдалось разрушение фолликулярной структуры, обильная инфильтрация воспалительных клеток в околофолликулярной области, вакуолярные изменения соединения дерма-эпидермис фолликулярного эпителия для кожи, обработанной гелевой основой (Фигура 4), что отображает потенциальный противовоспалительный эффект берберина (G23) для лечения кожной токсичности, связанной с ингибитором EGFR.
Пример 4
Результаты поражения кожи лица пациента, подвергавшегося лечению лекарственной формой для местного применения, содержащей берберин
[096]
Субъекты, принимавшие ингибитор афатиниб (терапия EGFRI) были зарегистрированы для нанесения на одну половину лица G23, а на другую половину лица — гелевой основы (G23 без берберина) в течение четырехнедельного периода лечения. Субъектам было назначено определить сторону лица для нанесения исследуемых препаратов в соотношении 1:1. Субъекты начинали применять исследуемые препараты за 1 день до или после начала EGFRI терапии. Исследуемый препарат наносили один раз ежедневно (QD) перед сном (HS) на соответствующую половину лица.
[097]
Количество поражений лица (папул и пустул) оценивали во время еженедельных визитов в течение четырех недель. Как показано на Фигурах с 5 по 7, была обнаружена явная тенденция к тому, что количество поражений на половине лица, обработанной G23, было значительно меньше, чем на другой половине, что отражает потенциальный терапевтический эффект берберина для лечения кожной токсичности, вызванной ингибитором EGFR, другой таргетной терапией или иммунотерапией.