СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ ТЕРМОСТАБИЛЬНЫХ СЕРИНОВЫХ ПРОТЕАЗ

1. Способ получения термостабильной сериновой протеазы, предусматривающий:
(а) трансформацию продуцирующего хозяина с помощью рекомбинантной конструкции, кодирующей термостабильную сериновую протеазу, характеризующуюся по меньшей мере 80% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 3, 8 или 10; и
(b) культивирование продуцирующего хозяина из стадии (а) при температуре выше 37,5°С c повышением уровня экспрессии термостабильной сериновой протеазы.
2. Способ по п. 1, где термостабильную сериновую протеазу необязательно извлекают из продуцирующего хозяина.
3. Культуральный супернатант, содержащий термостабильную сериновую протеазу, полученный с помощью способа по п. 1 или 2.
4. Корм, кормовой продукт, композиция, представляющая собой кормовую добавку, премикс, пищевой или зерновой продукт, содержащие термостабильную сериновую протеазу, характеризующуюся по меньшей мере 80% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 3, 8 или 10, где указанную термостабильную сериновую протеазу можно применять отдельно или в комбинации с по меньшей мере одним пробиотиком.
5. Корм для животных, содержащий термостабильную сериновую протеазу, характеризующуюся по меньшей мере 80% идентичностью последовательности с SEQ ID NO:1, где термостабильная сериновая протеаза присутствует в количестве 1–20 г/тонна корма, и дополнительно при этом указанную термостабильную сериновую протеазу можно применять отдельно или в комбинации с по меньшей мере одним пробиотиком.
6. Композиция, представляющая собой кормовую добавку по п. 4 для применения в корме для животных, дополнительно содержащая 10 и по меньшей мере один компонент, выбранный из группы, состоящей из белка, пептида, сахарозы, лактозы, сорбита, глицерина, пропиленгликоля, хлорида натрия, сульфата натрия, ацетата натрия, цитрата натрия, формиата натрия, сорбата натрия, хлорида калия, сульфата калия, ацетата калия, цитрата калия, формиата калия, ацетата калия, сорбата калия, хлорида магния, сульфата магния, ацетата магния, цитрата магния, формиата магния, сорбата магния, метабисульфита натрия, метилпарабена и пропилпарабена.
7. Гранулированная композиция, представляющая собой кормовую добавку, для применения в корме для животных, содержащая термостабильную сериновую протеазу, характеризующуюся по меньшей мере 80% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 3, 8 или 10, применяемую либо отдельно, либо в комбинации с по меньшей мере одним пробиотиком, где гранулированная композиция, представляющая собой кормовую добавку, содержит частицы, полученные с помощью способа, выбранного из группы, состоящей из гранулирования с высоким усилием сдвига, барабанного гранулирования, экструзии, сферонизации, агломерации в псевдоожиженном слое, нанесения покрытия распылением в псевдоожиженном слое, распылительной сушки, лиофилизации, приллирования, охлаждения распылением, пульверизации с помощью вращающегося диска, коацервации, таблетирования или любой комбинации вышеуказанных способов.
8. Гранулированная композиция, представляющая собой кормовую добавку по п. 7, где средний диаметр частиц составляет более 50 микрон и менее 2000 микрон.
9. Композиция, представляющая собой кормовую добавку по п. 7, где указанная композиция представлена в жидкой форме.
10. Композиция, представляющая собой кормовую добавку по п. 9, где указанная композиция представлена в жидкой форме, подходящей для распылительной сушки с нанесением на кормовую гранулу.
11. Способ гидролиза крахмалсодержащего материала, предусматривающий:
(а) приведение крахмалсодержащего материала в контакт с жидкостью с образованием затора и
(b) осуществление гидролиза крахмала в заторе с образованием разжиженной фракции путем приведения затора в контакт со смесью ферментов, содержащей термостабильную сериновую протеазу, характеризующуюся по меньшей мере 80% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 3, 8 или 10.
12. Способ по п. 11, где смесь ферментов дополнительно содержит по меньшей мере один фермент, выбранный из группы, состоящей из альфа–амилазы, амилоглюкозидазы, фитазы, пуллуланазы, бета–глюканазы, целлюлазы и ксиланазы.
13. Способ получения продуктов ферментации из крахмалсодержащего материала, предусматривающий:
(а) разжижение крахмалсодержащего материала с помощью смеси ферментов, содержащей термостабильную сериновую протеазу, характеризующуюся по меньшей мере 80% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 3, 8 или 10;
(b) осахаривание продукта из стадии (а);
(c) ферментацию с помощью подходящего организма и
(d) необязательно извлечение продукта, полученного на стадии (с).
14. Способ по п. 13, где стадии (b) и (c) выполняют одновременно.
15. Способ по п. 13 или 14, где добавление источника азота исключают или уменьшают на по меньшей мере 60% с помощью применения 1–20 г термостабильной сериновой протеазы/MT крахмалсодержащего материала, которая характеризуется по меньшей мере 80% идентичностью последовательности с SEQ ID NO:3, 8 или 10.
16. Способ по п. 15, где, в случае если продукт ферментации представляет собой этанол, на стадии (с) не требуется кислый протеолитический фермент при применении 1–20 г термостабильной сериновой протеазы/МТ крахмалсодержащего материала, которая характеризуется по меньшей мере 80% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 3, 8 или 10.
17. Способ уменьшения вязкости разжиженного крахмалсодержащего материала, который предусматривает приведение взвеси крахмалсодержащего материала в контакт с термостабильной сериновой протеазой, характеризующейся по меньшей мере 80% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 3, 8 или 10.
18. Способ экстрагирования масла из масличной культуры, предусматривающий:
(a) приведение маслосодержащей фракции масличного семени в контакт с водным экстрагирующим средством с образованием экстрагированной фракции масличного семени и
(b) разделение экстрагированной фракции масличного семени на водную фазу, эмульсию масло–в–воде и нерастворимую фазу;
(c) приведение эмульсии масло–в–воде в контакт с по меньшей мере термостабильной сериновой протеазой, характеризующейся по меньшей мере 80% идентичностью последовательности с SEQ ID NO:3, 8 или 10, либо отдельно, либо в комбинации с по меньшей мере фосфолипазой, в условиях, обеспечивающих активность фермента в течение периода времени, достаточного для дестабилизации эмульсии; и
(d) разделение дестабилизированной эмульсии из стадии (с) на водную фазу, масляную фазу и нерастворимую фазу с получением масла из масличного семени.
19. Способ по п. 18, где фракция масличного семени получена из сои, семени кукурузы, семени рапса, пальмового ядра, семени подсолнечника, семени сафлора, кокоса, арахиса, семени хлопчатника, семени кунжута, льняного семени, семени мака, миндаля, фундука, грецкого ореха, семени примулы вечерней, виноградной косточки, семени конопли, семени черной смородины, семени красной малины, семени моркови, семени тмина, семени черники, семени клюквы, семени петрушки, семени лука, семени тыквы, абрикосовой косточки, семени горчицы, семени льна, семени клещевины или ятрофы.
20. Способ по п. 18, где фракция масличного семени содержит белковую фракцию, которая применима как пищевой продукт, пищевой ингредиент, пищевая добавка или биологически активная пищевая добавка.
21. Масло растительного происхождения, полученное с помощью способа по п. 18.
22. Корм, кормовой продукт, композиция, представляющая собой кормовую добавку, премикс, пищевой или зерновой продукт, содержащие масло по п. 21.
23. Способ получения сусла, предусматривающий:
a) приведение крахмалсодержащего материала, который содержит смесь измельченного зерна, в контакт с водой и термостабильной сериновой протеазой, характеризующейся по меньшей мере 80% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 3, 8 или 10, с образованием затора;
b) медленное нагревание затора из стадии (а) с превращением крахмала в сахара и
c) разделение нагретого затора из стадии (b) на остаточное зерно и жидкое сусло,
где термостабильная протеаза присутствует в количестве 1–30 г/тонна измельченного зерна.
24. Способ по п. 23, где по меньшей мере одну альфа–амилазу добавляют на стадии (а) вместе с термостабильной сериновой протеазой.
25. Способ гидролиза по меньшей мере одного пищевого побочного продукта или побочного продукта животного происхождения, предусматривающий:
(a) приведение пищевого побочного продукта или побочного продукта животного происхождения в контакт с жидкостью и
(b) осуществление гидролиза пищевого побочного продукта или побочного продукта животного происхождения в заторе с образованием разжиженной фракции путем приведения в контакт со смесью ферментов, содержащей термостабильную сериновую протеазу, характеризующуюся по меньшей мере 80% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 3, 8 или 10.
26. Способ по п. 25, где пищевой побочный продукт представляет собой богатый кератином материал, выбранный из группы, состоящей из перьев, волос и шерсти.
27. Способ гидролиза белков в лигноцеллюлозной биомассе, предусматривающий:
(a) приведение биомассы в контакт с жидкостью и
(b) осуществление гидролиза белков в биомассе путем приведения биомассы в контакт со смесью ферментов, содержащей термостабильную сериновую протеазу, характеризующуюся по меньшей мере 80% идентичностью последовательности с SEQ ID NO: 3, 8 или 10.