СПОСОБ СКРИНИНГА ПРОТИВООПУХОЛЕВЫХ ПРЕПАРАТОВ - ИНГИБИТОРОВ PARP1 НА ОСНОВЕ БИОХИМИЧЕСКИХ МЕТОДОВ АНАЛИЗА

1. Способ скрининга противоопухолевых препаратов - ингибиторов PARP1, включающий сборку нуклеосом из очищенных гистонов на ДНК-матрицах, лигирование с РНК-полимеразой, внесение в полученный комплекс молекулярной мишени - белка PARP1, с последующим внесением буфера транскрипции, содержащего дезоксинуклеотидтрифосфаты (дНТФ) и меченный α-32Ф-ГТФ, а также тестируемых или контрольных химических соединений, проведение транскрипции, оценку продуктов транскрипции.
2. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что РНК полимераза является РНК полимеразой 2 натурального или рекомбинантного происхождения из различных организмов, включая дрожжей, млекопитающих, пресмыкающихся и др.
3. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что в качестве РНК полимеразы используют РНК полимеразу натурального или рекомбинантного прокариотического происхождения, например, РНК полимеразу Е.coli.
4. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что для сборки нуклеосомных матриц используют очищенные препараты гистонов H2A, H2B, H3, H4 натурального происхождения из различных организмов, включая дрожжей, млекопитающих, пресмыкающихся.
5. Способ по п. 4, характеризующийся тем, что при использовании очищенных гистонов H3 и H4 их добавляют в двухкратном, а очищенные гистоны H2A и H2B, в трехкратном избытке по отношению к матричной ДНК.
6. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что для сборки нуклеосомных матриц используют мутантные гистоновые белки, например, Sin-мутанты.
7. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что осуществляют сборку неполных нуклеосом, например, гексасом или тетрасом.
8. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что для сборки гибридных нуклеосомных матриц используют рекомбинантные или синтетические гистоны эукариотического и прокариотического происхождения.
9. Способ по п. 4, характеризующийся тем, что для сборки нуклеосомных матриц дополнительно используют гистон H1 как натурального, так и рекомбинантного происхождения.
10. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что для сборки нуклеосом используют ДНК-матрицу, несущую мутации, ассоциированные с различными заболеваниями или со старением.
11. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что в систему вместе с тестируемым агентом вносят факторы, ремоделирующие хроматин, например, SWI/SNF, ISW2, ACF и др.
12. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что сборка нуклеосом происходит на поверхности лунок планшета или зерен сорбента.
13. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что оценку продуктов транскрипции проводят биохимическими методами анализа, например, электрофоретически.
14. Способ по п. 13, характеризующийся тем, что перед оценкой продуктов транскрипции, дополнительно проводят обработку смеси реагентами для футпринтинга, например, гидроксилами или ДНКАазой1.
15. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что перед внесением агентов в систему проводят предварительное математическое моделирование.