Изменения цитокинового профиля у крыс Вистар при длительном воздействии низких доз ддт

ИММУНОЛОГИЯ № 2, 2012

- дефенсинов - в цервикальном секрете до и после ее использования. Результаты исследования показали, что концентрация дефенсинов в цервикальном секрете у больных до начала терапии составила 27,8 ± 5,05 пг/мл. После ультразвуковых кавитационных воздействий содержание дефенсинов в цервикальном секрете достоверно возросло, составив 64,71 ± 5,05 пг/мл (p < 0,02) (табл. 3).

Таким образом, при сравнительном анализе показателей факторов местной противоинфекционной защиты репродуктивного тракта по завершении базисной терапии и комплексного лечения с использованием локального ультразвука низкой частоты установили большую иммунологическую эффективность комбинированного воздействия с использованием ультразвуковой кавитации. Результаты проведенных исследований показали, что после комплексного лечения у больных генитальным микоплазмозом произошла нормализация показателей местного иммунитета по отношению к группе пациенток, пролеченных без применения физиотерапевтических факторов. Обнаруженные нами признаки активации нейтрофилов, способствующих выработке антимикробных пептидов-дефенсинов под воздействием лазерного излучения, несомненно, являются составной частью комплексного многофакторного ответа всех компонентов, задействованных в формировании колонизационной резистентности репродуктивного тракта на действие ультразвука. Полученные данные требуют дальнейшего углубленного анализа для уточнения специфичности кавитационых воздействий на факторы врожденного иммунитета. Неоспоримым, однако, остается тот факт, что, активируя функции фагоцитов в очаге воспаления, ультразвук низкой частоты повышает функциональную активность нейтрофилов цервикального секрета, усиливая их биоцидные, секреторные и поглотительные возможности, и способствует элиминации возбудителя под действием проводимой этиотропной терапии.

Вывод. Проведенная в исследовании оценка иммунологической эффективности ультразвуковых кавитационных воздействий низкой частоты в комплексном лечении воспалительных заболеваний нижнего отдела репродуктивного тракта, вызванных генитальными микоплазмами, продемонстрировала положительное действие ультразвука низкой

интенсивности на динамику показателей местного иммунитета, преимущественно на фагоцитарное звено, содержание дефенсинов в цервикальном секрете у женщин с воспалительными заболеваниями нижнего отдела репродуктивного тракта, ассоциированными с генитальными микоплазмами.

ЛИТЕРАТУРА

1. Долгушин И. И., Бухарин О. В. Нейтрофилы и гомеостаз. - Екатеринбург, 2001.

2. Жархандеев А. В., Зурочка В. А., Нечет В. А. УЗОЛ-1: Бактерицидные эффекты // Мед. иммунол. - 2000. - Т. 11, № 4-5. - С. 406-407.

3. Зырянова К. С. Морфологические изменения в тканях небных миндалин после курса консервативной терапии с применением аппарата низкочастотной ультразвуковой терапии Кавитар (УЗОЛО-01-»Ч») // Вестн. оторинолар. - 2006. - № 5. - С. 374-377.

4. Маянский Д. Н. Хроническое воспаление. - М., 1991.

5. Нестерова И. В. Физиологическая роль нейтрофильных грану-лоцитов в поддержании иммунного гомеостаза // Russ. J. Immunol. - 2004. - Vol. 9, Suppl. 1. - P. 17.

6. Ороситель ультразвуковой УЗОЛ-1: Свидетельство на полезную модель № 99121567 от 10.08.2000.

7. Торчинов А. М., Ежов В. В. Использование низкочастотного ультразвука для лечения бактериального вагиноза и других ИППП // Вопр. гинекол., акуш. и перинатол. - 2008. - Т. 7, № 1. - С. 43-46.

8. Фрейдлин И. С. Ключевая позиция макрофагов в цитокиновой регуляторной сети // Иммунология. - 1995. - № 3. - С. 44-47.

9. Хаитов Р. М., Пинегин Б. В. Современные представления о защите организма от инфекции // Иммунология. - 2000. - № 1. - С. 61-64.

10. Юцковский А. Д., Юцковская Я. А. Эффективность различных методов лечения урогенитальной инфекции // Вестн. дерматол. - 2003. - № 1. - С. 61-62.

11. Klebanoff S. ./.Oxygen metabolites from phagocytes // Inflammation Basic Principles and Clinical Correlated / Eds J. I. Gallin, R. Snyderman. - Philadelphia, 1999. - P. 345-386.

12. ReidM. F. Vulvovaginitis and cervicitis // Principles and Practice of Infection Disease / Ed. G. L. Mandell. - New York, 1995. - P. 1074-1090.

Поступила 12.09.11

ЭКОЛОГИЧЕСКАЯ ИММУНОЛОГИЯ

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2012

УДК 616-092:612.017.1]-02:632.951]-092.9

Н. В. Яглова, Е. П. Родиченко, В. В. Яглов

ИЗМЕНЕНИЯ ЦИТОКИНОВОГО ПРОФИЛЯ У КРЫС ВИСТАР ПРИ ДЛИТЕЛЬНОМ ВОЗДЕЙСТВИИ низких доз ддт

Лаборатория развития эндокринной системы НИИ морфологии человека РАМН

Дихлордифенилтрихлорэтан (ДДТ) - пестицид, применяемый и в настоящее время, является универсальным загрязнителем окружающей среды. Целью настоящего эксперимента стало изучение изменений концентрации в сыворотке крови крыс ряда цитокинов под воздействием ДДТ в дозе не более 2 и 8 мкг на 1 кг массы тела и влияния длительности воздействия ДДТ на изменение этих показателей. Установлено, что воздействие низких доз ДДТ приводит к изменениям продукции цитокинов Т-хелперных клонов лимфоцитов и сдвигам в цитокиновом профиле, связанным с усилением продукции ТМ-цитокинов. Причем при воздействии на организм ДДТ в дозе, не превышающей 2 мкг на 1 кг массы тела, усиление продукции ТМ-цитокинов происходит быстрее, чем при воздействии ДДТ в дозе не более 8 мкг на 1 кг массы тела, и сопровождается активацией механизмов развития иммунной толерантности.

Ключевые слова: ДДТ, иммунная система, цитокины, кортикостерон

- 98 -

ЭКОЛОГИЧЕСКАЯ ИММУНОЛОГИЯ

Yaglova N.V, Rodichenko E.P., Yaglov VV

CHANGES OF THE CYTOKINE PROFILE IN WISTAR RATS UNDER THE LONG-TERM ACTION OF LOW DDT DOSES

Dichlorodiphenyltrichloroethane (DDT), a pesticide contributing to the universal contamination of the environment, continues to be widely applied. The objective of the present experiment was to determine the variation of serum cytokine levels under the action of DDT administered to rats at a dose of less than 2 or 8 mcg/kg body weight. It was shown that low doses of DDT induced changes in the production of cytokines by T-helper lymphocytes and alteration of the cytokine profile attributable to the increased synthesis of Th1-cytokines. DDT at a dose of lower than 2 mcg/kg boy weight caused a more pronounced rise in the production of Th1-cytokins than at a dose of 8 mcg/kg b.w. These changes were accompanied by activation of the mechanisms controlling the development of immune tolerance.

Key words: DDT, immune system, cytokines, corticosterone

Изучение воздействия на организм системных загрязнителей окружающей среды является проблемой, актуальность и значимость которой в последние годы повышается в связи с ухудшением экологической обстановки на планете. К универсальным загрязняющим веществам относится инсектицид широкого действия дихлордифенилтрихлорэтан (ДДТ), который встречается во всех экосистемах материков и океанов, включая Арктику и Антарктиду и способен длительно сохраняться в почве и воде [1, 8]. После запрета ДДТ в 1970-е годы он снова был разрешен к использованию ВОЗ в 2006 г. При длительном употреблении в пищу продуктов, содержащих ДДТ (присутствие ДДТ в продуктах питания и воде регламентировано Роспотребнадзором), он способен в разных количествах накапливаться и длительно сохраняться в органах животных и человека: печени, мозге, тимусе семенниках и в большей мере в жировой ткани [15]. Изучение биологических эффектов и неблагоприятного воздействия ДДТ на организм человека в первую очередь было связано с установлением предельно допустимого уровня воздействия вещества, при котором они не оказывают влияния на развитие и функционирование организма в целом. Влияние воздействия на организм низких доз ДДТ малоизучено, интерес к этой теме возник в связи с выявлением у ДДТ свойств эндокринного дизраптора. Эндокринные дизрапоторы - экзогенные вещества, содержащиеся в почве, воде, воздухе, пищевых продуктах и некоторых промышленных изделиях, которые, поступая в организм, дают гормоноподобные эффекты, нарушающие гомеостатические механизмы регуляции эндогенными гормонами процессов жизнедеятельности живых организмов [7]. В связи с этим приобрели актуальность исследования воздействия ДДТ на функционирование интегрирующих систем организма - эндокринной и иммунной. Известно, что в последние десятилетия как в промышленно развитых, так и развивающихся странах отмечается рост заболеваний как эндокринных желез, так и заболеваний, обусловленных нарушениями в функционировании иммунной системы, таких как аутоиммунные заболевания, аллергические реакции, иммунодефицитные состояния. Многие эксперты такие явления справедливо связывают с глобальными изменениями экологической обстановки. Молекулярные механизмы действия ДДТ на клетки иммунной системы неизвестны. По литературным данным, воздействие ДДТ приводит к изменениям продукции отдельных цитокинов, но эти данные противоречивы [6, 9, 11, 13]. Таким

Яглова Наталья Валентиновна - д-р мед. наук, ст. науч. сотр., тел. 8 (499) 120-80-65, e-mail”morfolhum@mail.ru

образом, изменения цитокинового профиля сыворотки крови у здоровых субъектов, длительно потребляющих ДДТ в низких дозах, и их оценка требуют дальнейших исследований.

Цель настоящего эксперимента - изучение влияния низких доз ДДТ и длительности их воздействия на изменения концентрации в сыворотке крови крыс ряда цитокинов.

Материалы и методы. Эксперимент выполнен на 62 самцах крыс Вистар массой тела 80-100 г. Животных рандомизировали на 6 групп: 2 контрольные и 4 опытные. Животным опытных групп в поилки наливали растворы о,р-ДДТ (“Sigma”, США) концентрацией 20 и 80 мкг/л. Животные контрольных групп получали водопроводную воду. Предварительно образцы водопроводной воды и сухого корма для лабораторных животных проверяли на наличие ДДТ и его метаболитов методом газожидкостной хроматографии. В исследуемых образцах ДДТ не выявлялся. Доступ к воде и пище у крыс был свободным. Учет потребляемой жидкости производили ежедневно. При потреблении крысами раствора ДДТ концентрацией 20 мкг/л среднесуточная доза составила

l, 89 ± 0,086 мкг на 1 кг массы тела, с концентрацией 80 мкг/кг - 7,77 ± 0,17 мкг на 1 кг массы тела. Первая доза соответствует использованию ДДТ в количествах, не превышающих нормативы его содержания в продуктах питания, вторая - концентрации ДДТ в продуктах, превышающей допустимую в 4 раза.

В сыворотке крови методом твердофазного иммуноферментного анализа с помощью коммерческих наборов определяли уровень интерлейкина (ИЛ)-2, ИЛ-10, ИЛ-12, трансформирующего фактора роста Р1 (ТФРР1) (“Bender Medsystems”, Австрия), неоптерина, кортикостерона (IBL, Германия).

Статистическую обработку проводили с помощью пакета прикладных программ STATISTICA (“Statsoft Inc.”, США). Центральные тенденции и рассеяния количественных признаков, имеющих приближенно нормальное распределение, описывали средним значением M и стандартной ошибкой среднего значения

m. Независимые группы по количественному признаку сравнивали с помощью t-критерия Стьюдента с учетом значений критерия Левена о равенстве дисперсий, а также критерия Манна-Уитни. Различия считали статистически значимыми при p = 0,05.

Результаты. При определении концентрации цитокинов в сыворотке крови крыс контрольной группы через 6 и 10 нед после начала эксперимента (см. таблицу) выявили возрастную динамику, выразившуюся в статистически значимом снижении содержания ИЛ-2 (p = 0,), ИЛ-12 (p = 0,0018) и нептерина (p = 0,00087).

У крыс, потреблявших ДДТ в дозе 1,89 ± 0,086 мкг/

- 99 -

ИММУНОЛОГИЯ № 2, 2012

Изменения концентрации цитокинов и кортикостерона в сыворотке крови крыс, потреблявших ДДТ в различных дозах в течение 6 и 10 нед

Аналит Длительность потребления ДДТ

6 нед 10 нед

контроль ДДТ 1,89 ± 0,086 мкг/кг ДДТ 7,77 ± 0,17 мкг/кг контроль ДДТ 1,89 ± 0,086 мкг/кг ДДТ 7,77 ± 0,17 мкг/кг

Неоптерин, нмоль/л 0,93 ± 0,05 1,27 ± 0,09* 1,31 ± 0,13* 0,53 ± 0,09 0,83 ± 0,06* 0,66 ± 0,08

ИЛ-12, пг/мл 2234,98 ± 98,61 1844,77 ± 76,25* 1768,77 ± 90,39* 1817,88 ± 71,01 1662,45 ± 73,55 1421,45 ± 97,45*

ИЛ-2, пг/мл 118,39 ± 33,42 129,17 ± 33,15 76,07 ± 29,52 69,07 ± 19,16 249,24 ± 54,96* 121,94 ± 23,72*

ИЛ-10, пг/мл 35,35 ± 5,81 34,33 ± 6,65 27,26 ± 8,36 40,1 ± 6,65 69,26 ± 14,29* 23,11 ± 3,46*

ТФРР1, нг/мл 105,66 ± 6,72 108,35 ± 6,14 132,80 ± 8,16* 105,39 ± 5,24 128,45 ± 8,04* 103,99 ± 7,41

Кортикостерон, нг/мл 139,09 ± 10,99 108,41 ± 1,94* 103,25 ± 6,61* 127,12 ± 8,99 108,09 ± 2,75* 97,36 ± 5,61*

Примечание. * - статистически значимые отличия от показателей в контрольной группе.

кг, через 6 нед наблюдали статистически значимое повышение концентрации неоптерина (р = 0,0023) и снижение уровня ИЛ-12 (р = 0,00029). Отметили повышение содержания ИЛ-2, но оно не достигло статистической значимости (см. таблицу).

У крыс, потреблявших ДДТ в дозе 7,77 ± 0,17 мкг/кг, через 6 нед также обнаружили повышение концентрации неоптерина (р = 0,012) и снижение уровня ИЛ-12 (р = 0,0012). В отличие от предыдущей опытной группы наблюдали статистически значимое повышение концентрации ТФРР1 (р = 0,015). Содержание ИЛ-2 и ИЛ-10 не отличалось от такового в контрольной группе, но в отличие от предыдущей группы отметили небольшое снижение концентрации ИЛ-2. Уровень сывороточного ИЛ-10 также понизился (см. таблицу).

В обеих опытных группах установили статистически значимое снижение концентрации кортикостеро-на в сыворотке крови (р = 0,0064 и р = 0,0068 соответственно) (см. таблицу). Содержание кортикостерона в сыворотке крови крыс, получавших разные дозы ДДТ, не отличалось (р = 0,45).

Через 10 нед у крыс, потреблявших ДДТ в дозе 1,89 ± 0,086 мкг/кг, в сыворотке крови выявили повышение уровня неоптерина (р = 0,011), ТФРР1 (р = 0,027) и значительное повышение концентрации ИЛ-2 (р = 0,0071). Содержание ИЛ-10 повысилось по сравнению со значениями в контрольной группе и предыдущий срок исследования (р = 0,043 и р = 0,032 соответственно) (см. таблицу).

У крыс, потреблявших ДДТ в дозе 7,77 ± 0,17 мкг/кг, через 10 нед концентрация неоптерина и ТФРР1 соответствовала аналогичному показателю в контрольной группе. Отметили статистически значимое снижение уровня ИЛ-12 по сравнению с таковым в контрольной группе (р = 0,026). Концентрация ИЛ-10 была достоверно ниже как значений в контрольной группе, так и в группе сравнения (р = 0,025 и р = 0,0045 соответственно). Уровень сывороточного ИЛ-2 повысился по сравнению с контрольным, но был значительно ниже, чем в группе сравнения (р = 0,036) (см. таблицу).

Концентрация кортикостерона в сыворотке крыс, потреблявших ДДТ в течение 10 нед, не отличалась от таковой в предыдущий срок исследования и была ниже, чем в контрольной группе (р = 0,034 и р = 0,0059 соответственно).

Обсуждение. При выборе цитокинов для изучения изменений цитокинового профиля под воздей-

ствием ДДТ мы выбрали в качестве показателей функциональной активности Т-хелперных клонов ИЛ-12 как основной цитокин, вызывающий дифференциров-ку ТЮ-лимфоцитов в Th1, и ИЛ-2 как один из Th1-цитокинов в связи с тем, что в данных литературы имелись разрозненные сведения о подавлении продукции ИЛ-2 под воздействием ДДТ in vitro [13] и сдвигом ТЫ—1Ъ2-баланса в сторону Th2 у лиц, ранее подвергавшихся воздействию ДДТ и имевших остаточную концентрацию ДДТ в сыворотке крови [9, 11]. В связи с этим мы также провели определение уровня неопте-рина как интегрального показателя выраженности реакций клеточного иммунитета и ИЛ-10, подавляющего продукцию ИЛ-2 Т-лимфоцитами [12], и ТФРР1 как основного цитокина регуляторных Т-лимфоцитов, оказывающего иммуносупрессивное действие.

Концентрацию цитокинов в сыворотке крови изучали параллельно с определением уровня кортикостерона. Еще в 1960-х годах было установлено, что производные ДДТ оказывают цитостатическое действие на клетки карциномы надпочечников и, соответственно, снижают продукцию глюкокортикоидов [10]. В 1970-е г. препараты на основе ДДТ применялись в химиотерапии карциномы надпочечников, в настоящее время продолжаются разработки новых цитостатических препаратов на основе ДДТ [5]. Но механизм действия ДДТ остается до сих пор невыясненным. Кортикостерон, являющийся основным глюкокортикоидом у крыс, отличается выраженной противовоспалительной активностью и является ингибитором продукции ИЛ-2 и ИЛ1, подавляет пролиферацию Т-лимфоцитов, модулирует синтез и активность нуклеарных факторов АР и NFkB [3, 14, 16].

Через 6 нед потребления ДДТ в различных дозах отмечали повышение концентрации неоптерина и снижение уровня ИЛ-12 на фоне снижения продукции кортикостерона надпочечниками. У крыс, потреблявших ДДТ в более низких дозах, начался рост продукции ИЛ-2. Таким образом, на фоне снижения уровня кортикостерона наметился четкий сдвиг в усилении показателей клеточного иммунитета. Выявленные через 6 нед тенденции подтвердились на более позднем сроке. При употреблении ДДТ в дозе 1,89 - 0,086 мкг/кг через 10 нед зафиксировали рост продукции ИЛ-2 и неоптерина на фоне пониженного уровня кортико-стерона. Следовательно, длительный прием ДДТ в допустимых нормативными документами дозах приводит к превалированию продукции ТЫ-цитокинов.

- 100 -

ЭКОЛОГИЧЕСКАЯ ИММУНОЛОГИЯ

Столь резкое усиление синтеза ИЛ-2 неизбежно должно было спровоцировать усиление дифференцировки Т-регуляторных лимфоцитов, что проявилось повышением концентрации ТФРР1 в сыворотке крови, а также компенсаторным ростом уровня ИЛ-10.

У крыс, потреблявших ДДТ в более высокой дозе, через 6 нед также отмечали рост интегрального показателя реакций клеточного иммунитета неоптерина и снижение содержания ИЛ-12. Наметившееся снижение продукции ИЛ-10 подтвердилось через 10 нед. Длительный прием ДДТ в дозе 7,77 ± 0,17 мкг/кг по сравнению с дозой 1,89 ± 0,086 мкг/кг приводил к более медленному росту уровня неоптерина и ИЛ-2, т. е. к сдвигу в сторону ТЫ-типа иммунного ответа, что подтверждалось прогредиентным снижением в сыворотке крови концентрации как ИЛ-12, так и ИЛ-10 и снижением продукции ТФРР1 через 10 нед по сравнению с таковыми в предыдущий срок исследования (см. таблицу). Цитокиновый профиль крыс, потреблявших ДДТ в дозе 7,77 ± 0,17 мкг/кг, через 10 нед соответствовал значениям, наблюдаемым у крыс, получавших меньшую дозу, через 6 нед приема ДДТ (см. таблицу). Вероятно, это отставание проявлялось вследствие токсического воздействия ДДТ на организм в целом. Эти процессы также протекали на фоне пониженного синтеза кортикостерона надпочечниками.

Наиболее дискутабельным вопросом является способность ДДТ и его метаболитов вызывать сдвиг в ТЫ-ТЬ2-балансе. При изучении продукции цитокинов под воздействием низких доз ДДТ получены данные об увеличении синтеза Th2 и снижении синтеза ТЫ-цитокинов [9, 13]. По имеющимся данным, ДДТ вызывает снижение секреции ИЛ-2 Т-лимфоцитами in vitro [13]. При обследовании группы лиц, занятых в сельскохозяйственных работах и подвергавшихся воздействию ДДТ более 20 лет назад, имеющих низкую концентрацию метаболитов ДДТ в сыворотке крови, авторы отмечалиь снижение продукции ИЛ-2 и повышение содержания в сыворотке крови ИЛ-4 [9]. При изучении функциональных показателей иммунной системы у детей 7-10 лет, имеющих в крови аналогичную низкую концентрацию ДДТ и его метаболитов, обусловленную фоновым содержанием ДДТ в продуктах питания, авторы обнаружили умеренный лейкоцитоз и повышение уровня IgG, IgA, но более всего IgE, что расценили как поляризацию иммунного ответа по Th2-типу [11]. Усиление синтеза ИЛ-2 в сочетании с ростом продукции неоптерина, выявленное в настоящем исследовании, не позволяет согласиться с мнением авторов, утверждающих, что воздействие ДДТ приводит к подавлению синтеза ИЛ-2 и поляризации иммунного ответа по ТЬ2-типу. При воздействии на организм ДДТ в дозе 1,89 ± 0,086 и 7,77 ± 0,17 мкг/кг отмечали прямую зависимость между длительностью приема ДДТ и повышением концентрации ИЛ-2. Повышение уровня ИЛ-2, являющегося фактором пролиферации и дифференцировки CD4+CD25+ Т-регуляторных лимфоцитов, сопровождалось повышением концентрации их основных цитокинов - ТФРР1 и ИЛ-2 [2]. Каковы же были механизмы усиления продукции ИЛ-2 и какова роль изменения секреции кортикостерона в этом процессе? Известно, что основными продуцентами ИЛ-2 являются активированные Th-1-лимфоциты. Активация синтеза ИЛ-2 происходит в том числе и под воздействием различных митогенов, например конканавалина А и

фитогемагглютинина [2], но способность синтезировать ИЛ-2 лимфоциты приобретают в процессе тимического созревания. Полученные данные об изменениях концентрации ИЛ-2 и кортикостерона под воздействием ДДТ показывают, что рост продукции ИЛ-2 происходил на фоне снижения продукции кортикостерона, но между численными значениями не было прямой корреляции. Возможен и другой непрямой механизм активации синтеза ИЛ-2. Снижение синтеза глюкокортикоидов замедляет возрастную инволюцию тимуса, обеспечивая пролиферацию и дифференцировку лимфоцитов. Но, по нашим данным, действие низких доз ДДТ приводило к ускорению инволюции тимуса и снижению пролиферативной активности тимоцитов [4]. Следовательно, увеличение секреции ИЛ-2 имело мультифакториальные механизмы, и, возможно, одними из них были прямое действие и дизрапторное действие ДДТ на органы эндокринной системы. Возможной причиной противоречий с данными других исследовательских групп стали малоизученность изменений цитокинового профиля в динамике, а также зависимость от длительности и дозы потребления ДДТ и сроков между окончанием воздействия ДДТ у профессиональных групп и проводимыми исследованиями.

Выводы. 1. Воздействие низких доз ДДТ провоцирует изменения в цитокиновом профиле, что связано с усилением продукции ТЫ-цитокинов.

2. При воздействии на организм ДДТ в дозе, не превышающей 2 мкг/кг массы тела, т. е. соответствующей нормативам содержания ДДТ в продуктах питания, усиление продукции ТЫ-цитокинов происходит быстрее, чем при воздействии ДДТ в дозе не более 8 мкг на 1 кг массы тела.

3. Выявленное увеличение продукции ИЛ-2, приводящее к повышению синтеза Т-регуляторных цитокинов ТФРР1 и ИЛ-10 под воздействием низких доз ДДТ, указывает на индукцию одного из механизмов аутотолерантности, опосредованного Т-регуляторными клептками.

4. Влияние, оказываемое ДДТ на продукцию цитокинов, зависит в большей степени от длительности приема, нежели от суточной дозы потребления.

ЛИТЕРАТУРА

1. Гигиенические критерии состояния окружающей среды. ДДТ и его производные: Совместное издание Программы ООН по окружающей среде и Всемирной организации здравоохранения. - М., 1982. - С. 12-14.

2. Кетлинский С. А., Симбирцев А. С. Цитокины. - СПб., 2008. - С. 268-269.

3. Ланин Д. В., Зайцева Н. В., Долгих О. В. Молекулярные основы действия и иммуномодулирующие эффекты глюкокортикоидных гормонов // Иммунология. - 2010. - № 6. - С. 334-337.

4. Яглова Н. В., Яглов В. В., Обернихин С. С. Влияние экологически обусловленного потребления дихлордифенилтрих-лорэтана на морфофункциональные показатели иммунной системы крыс // Труды XIX Международной конф. и дискуссионного науч. клуба “Новые информационные технологии в медицине, биологии, фармакологии и экологии”. - Ялта, 2011. - С. 170-172.

5. Asp V., UllerasE., Lindstrom V. et al. Biphasic hormonal responsors to the adrenocorticolytic DDT metabolite 3-methylsulfonyl-DDE in human cells // Boxicol. Appl. Pharmacol. - 2010. - Vol. 242, N 3. - P. 281-289.

- 101

ИММУНОЛОГИЯ № 2, 2012

6. Banerjee B., Koner B., Ray A. Influence of stress on DDT-in-duced humoral immune responsiveness in mice // Environ. Res. - 1997. - Vol. 74, N 1. - P. 43-47.

7. Colborn T., vom Saal F. S., Soto A. M. Development effects of endocrine-disrupting chemicals in wildlife and humans // Environ. Hlth Perspect. - 1993. - Vol. 101, N 5. - P. 378-384.

8. Daly G., Wania F. Organic contaminants in mountains // Environ. Sci. Technol. - 2005. - Vol. 39, N 2. - P. 385-398.

9. Daniel V., Huber W., Bauer K. et al. Associations of dichlorodi-phenyltrichloroethane (DDT) 4.4 and dichlorodiphenyltrichloro-ethlene (DDE) 4.4 blood levels with plasma IL-4 // Arch. Environ. Hlth. - 2002. - Vol. 57, N 6. - P. 541-547.

10. Hoffman D., Mattox V. Treatment of adrenocortical carcinoma with o,p-DDT // Med. Clin. N. Am. - 1972. - Vol. 56, N 4. - P. 999-1012.

11. Karmaus W., Brooks K., Nebe T. et al. Immune function biomarkers in children exposed to lead and organochlorine compounds: a cross-

sectional study // Environ. Hlth. - 2005. - Vol. 14, N 1. - P. 5.

12. Mosman T., Sad S. The expanding universe of T-cell subsets: Th1, Th2 and more // Immunol. Today. - 1996. - Vol. 17, N 3. -P. 138-146.

13. Ndebele K., Tchounwou P., McMurray R. Coumestrol, bisphenol A, DDT. and TCDD modulation of interleukin-2 expression in activated CD4+ Jurkat T cells // Int. J. Environ. Res. Publ. Hlth. - 2004. - Vol. 1, N 1. - P. 3-11.

14. Scudeletti M., Muselli C., Lanza L. et al. The immunological activity of corticosteroids // Recent Progr. Med. - 1996. - Vol. 87, N 10. - P. 508-515.

15. Tebourbi O., DrissM. R., SakleM., Rhouma K. B. Metabolism of DDT in different tissues of young rats // J. Environ. Sci. Hlth. -2006. - Vol. 41, N 2. - P. 167-176.

16. Webster J., Tonelli L., Sternberg E. Neuroendocrine regulation of immunity // Annu. Rev. Immunol. - 2002. - Vol. 20. - P. 125-163.

Поступила 05.09.11

КРАТКИЕ СООБЩЕНИЯ

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2012 УДК 615.276.2/.4.015.44.076.9

С. В. Гейн, Т. А. Баева, В. О. Небогатиков

ВЛИЯНИЕ р-ЭНДОРФИНА НА ПРОЛИФЕРАТИВНУЮ И СЕКРЕТОРНУЮ

активность спленоцитов in vivo

Институт экологии и генетики микроорганизмов УрО РАН

Показано, что внутрибрюшинное введение p-эндорфина мышам в дозах 0,01,0,0005 мкг/кг стимулировало пролиферативную активность спленоцитов в присутствии как В-, так и Т-клеточного митогена, не влияло на продукцию IFN-y , снижало уровень IL-2 и стимулировало секрецию IL-4.

Ключевые слова: в-эндорфин, спленоциты, цитокины, пролиферация, митогены Gem S.V., Bayeva T.A., Nebogatikov V.O.

THE INFLUENCE OF p-ENDORPHIN ON THE IN viTRo PROLIFERATIVE AND SECRETORY ACTIVITIES OF SPLENOCYTES

The intraperitoneal administration of beta-endorphin to mice at a dose of 0.01 and 0.0005 mcg/kg body weight stimulated both proliferative and secretory activities of splenocytes in the presence of B- and T-cell mitogen. Beta-endorphin did not influence the production of interferon-gamma, decreased the IL-2 level, and promoted the secretion of IL-4.

Key words: в-endorphin, splenocytes, cytokines, proliferation, mitogens

Р-Эндорфин является компонентом единой функциональной системы (гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой) и с рядом других гормонов секретируется в периферическую кровь при стрессах, травмах, психоэмоциональных состояниях и физических нагрузках [2]. Помимо этого, пептид продуцируется местно клетками различных органов и тканей, в том числе и клетками иммунной системы, в ответ на попадание антигена либо в присутствии высоких концентраций провоспалительных цитокинов, обусловливая широкий спектр иммунорегуляторных эффектов, реализуемых по пара- и аутокринному механизму [3, 5]. За 30-летнюю историю изучения иммунорегуляторной активности Р-эндорфина накоплен обширный фактический

Гейн Сергей Владимирович - д-р мед. наук, доц., вед. науч. сотр., тел. +7 (342) 210-87-59, e-mail:gein@iegm.ru

материал, выполненный, главным образом, на разнообразных in vitro моделях или с использованием генетически модифицированных животных [4], что создает дополнительные проблемы при формировании интегральной схемы, иллюстрирующей регуляторные эффекты Р-эндорфина на организменном уровне, благодаря наличию in vivo многоуровневых регуляторных систем, процессов межклеточной кооперации, которые крайне трудно искусственно воссоздать в пробирке.

Цель работы - исследовать влияние Р-эндорфина на пролиферативную активность мышиных спленоцитов и продукцию ими IL-2, IL-4 и IFN-y, важнейших факторов Th1/Th2-поляризации.

Материалы и методы. Эксперимент выполнен на белых беспородных мышах-самцах, массой 17-22 г. Р-Эндорфин (“Skytek Laboratories”, США) вводили внутрибрюшинно в

- 102 -