АНТИ-CD 16 СВЯЗЫВАЮЩИЕ МОЛЕКУЛЫ

1. Связывающая молекула, обладающая специфичностью по меньшей мере к одному антигену, причем указанный по меньшей мере один антиген представляет собой FcγRIIIA, а указанная связывающая молекула не связывается специфично с FcγRIIIB.
2. Связывающая молекула по п.1, отличающаяся тем, что специфичность по отношению к FcγRIIIA обеспечивается антителом или антигенсвязывающим фрагментом антитела.
3. Связывающая молекула по п.2, отличающаяся тем, что специфичность по отношению к FcγRIIIA обеспечивается антигенсвязывающим фрагментом.
H
L
2
4. Связывающая молекула по п.3, отличающаяся тем, что антигенсвязывающий фрагмент выбирают из группы, состоящей из легкой цепи иммуноглобулина, тяжелой цепи иммуноглобулина, домена V, домена V, Fv, Fab, ди-Fab, Fab', F(ab'), scFv и CDR (гипервариабельного участка).
5. Связывающая молекула по любому из пп.2-4, отличающаяся тем, что антитело или антигенсвязывающий фрагмент включает по меньшей мере один гипервариабельный участок человека.
6. Связывающая молекула по п.5, отличающаяся тем, что гипервариабельный участок имеет последовательность аминокислот, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID №№20, 23, 26, 29, 33, 34, 21, 24, 27, 30, 31, 35, 22, 25, 28, 32, 17, 18 и 19.
7. Связывающая молекула по любому из пп.1-4 или 6, отличающаяся тем, что антитело или антигенсвязывающий фрагмент включает три гипервариабельных участка (CDR) легкой цепи человека.
8. Связывающая молекула по п.7, отличающаяся тем, что последовательность CDR1 легкой цепи человека выбирают из группы, включающей SEQ ID №№20, 23, 26, 29, 33 и 34, последовательность CDR2 легкой цепи человека выбирают из группы, включающей SEQ ID №№21, 24, 27, 30, 31 и 35, и последовательность CDR3 легкой цепи человека выбирают из группы, включающей SEQ ID №№22, 25, 28 и 32.
9. Связывающая молекула по любому из пп.2-4, 6 или 8, отличающаяся тем, что антитело или антигенсвязывающий фрагмент включает три гипервариабельных участка (CDR) тяжелой цепи человека.
10. Связывающая молекула по п.9, отличающаяся тем, что последовательность CDR1 тяжелой цепи человека представляет собой SEQ ID №17, последовательность CDR2 тяжелой цепи человека представляет собой SEQ ID №18, и последовательность CDR3 тяжелой цепи человека представляет собой SEQ ID №19.
11. Связывающая молекула по любому из пп.2-4, 6 или 8, отличающаяся тем, что антитело или антигенсвязывающий фрагмент включает вариабельную область легкой цепи человека.
12. Связывающая молекула по п.11, отличающаяся тем, что вариабельная область легкой цепи человека имеет последовательность аминокислот, выбранную из группы, включающей SEQ ID №№10-16.
13. Связывающая молекула по любому из пп.2-4, 6, 8, 10 или 12, отличающаяся тем, что антитело или антигенсвязывающий фрагмент включает вариабельную область тяжелой цепи человека.
14. Связывающая молекула по п.13, отличающаяся тем, вариабельная область тяжелой цепи человека имеет последовательность аминокислот SEQ ID №9.
15. Связывающая молекула по любому из пп.2-4, 6, 8, 10, 12 или 14, отличающаяся тем, что антитело или антигенсвязывающий фрагмент является полностью человеческим.
16. Связывающая молекула по любому из из пп.1-4, 6, 8, 10, 12 или 14, которая способна активировать клетки человека, экспрессирующие FcγRIIIA.
17. Связывающая молекула по п.16, которая способна индуцировать опосредованный NK-клетками цитолиз клеток.
18. Связывающая молекула по п.15, которая ингибирует активацию клеток человека, экспрессирующих FcγRIIIA.
19. Связывающая молекула по любому из пп.1-4, 6, 8, 10, 12, 14, 17 или 18, отличающаяся тем обладает специфичностью по отношению по меньшей мере к одному дополнительному антигену.
20. Связывающая молекула по п.19, отличающаяся тем, что указанный дополнительный антиген является антигеном клеточной поверхности.
21. Связывающая молекула по п.20, отличающаяся тем, что указанный антиген клеточной поверхности выбран из группы, состоящей из CD19, CD20, CD30, предшественника рецептора ламинина, EGFR1, EGFR2, EGFR3, Ер-САМ, PLAP, антигена Томсена-Фриденрайха, MUC-1, IL4-R альфа, IL13-R, IGFR, FcεRI и CD5.
22. Связывающая молекула по п.20 или 21, отличающаяся тем, что антиген клеточной поверхности представляет собой CD19 или CD30.
23. Связывающая молекула по п.20, отличающаяся тем, указанный дополнительный антиген происходит из инфекционного агента.
24. Связывающая молекула по п.23, отличающаяся тем, что инфекционный агент представляет собой вирус, бактерию, гриб, микоплазму, паразита или прион.
25. Связывающая молекула по любому из пп.20-24, отличающаяся тем, что специфичность по отношению к дополнительному антигену обеспечивается антителом или его антигенсвязывающим фрагментом антитела.
26. Связывающая молекула по п.25, отличающаяся тем, что антитело выбрано из группы, включающей химерное антитело, антитело с пересаженным CDR, гуманизированное антитело и полностью человеческое антитело.
27. Связывающая молекула по п.25 или 26, отличающаяся тем, что специфичность по отношению к указанному дополнительному антигену обеспечивается антигенсвязывающим фрагментом.
H
L
2
28. Связывающая молекула по п.26, отличающаяся тем, что антигенсвязывающий фрагмент выбирают из группы, состоящей из легкой цепи иммуноглобулина, тяжелой цепи иммуноглобулина, домена V, домена V, Fv, Fab, ди-Fab, Fab', F(ab'), scFv и CDR.
29. Связывающая молекула по п.27, отличающаяся тем, она представляет собой димерное антитело (diabody) или тандемное димерное антитело (TandAb).
30. Связывающая молекула по любому из пп.1-4, 6, 8, 10, 12, 14, 17, 18, 20-21, 23, 24, 26 или 28-29, отличающаяся тем, что указанная связывающая молекула дополнительно включает функциональный домен.
31. Связывающая молекула по п.30, отличающаяся тем, что функциональный домен выбран из следующего: Fc-фрагмент антитела, фермент для применения в антитело-зависимой терапии с применением ферментов и пролекарств, пептид, способный связываться с рецепторами Fc, белок или пептид для увеличения периода полужизни связывающей молекулы в сыворотке.
158F
158V
32. Связывающая молекула по любому из пп.1-4, 6, 8, 10, 12, 14, 17, 18, 20-21, 23, 24, 26, 28, 29 или 31, отличающаяся тем, что она способна связываться с аллельным вариантом FcγRIIIA с приблизительно такой же аффинностью, с каким она связывается с аллельным вариантом FcγRIIIA.
33. Связывающая молекула по любому из пп.1-4, 6, 8, 10, 12, 14, 17, 18, 20-21, 23, 24, 26, 28, 29 или 31, отличающаяся тем, что она конъюгирована с молекулой-меткой или токсином.
34. Связывающая молекула по 33, отличающаяся тем, что метка представляет собой радиоактивную метку, флюоресцентную метку или люминесцентную метку.
35. Композиция, включающая связывающую молекулу согласно любому из предыдущих пунктов и по меньшей мере один дополнительный компонент.
36. Композиция согласно п.35, включающая подходящий фармацевтический носитель, наполнитель, разбавитель и/или стабилизатор.
37. Полинуклеотид, кодирующий связывающую молекулу, как определено в любом из пп.1-34.
38. Полинуклеотид по п.37, отличающийся тем, что антитело или антигенсвязывающий фрагмент, обладающие специфичностью к FcγRIIIA, включают
а) вариабельную область легкой цепи человека, кодируемую последовательностью нуклеиновых кислот, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №№2-8 и/или;
б) вариабельную область тяжелой цепи человека, кодируемую последовательностью нуклеиновых кислот SEQ ID №1.
39. Полинуклеотид по п.37 или 38, отличающийся тем, что полинуклеотид кодирует: первую вариабельную область легкой цепи, кодируемую последовательностью нуклеиновых кислот, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №№2-8, первую вариабельную область тяжелой цепи, кодируемую последовательностью нуклеиновых кислот SEQ ID №1, вторую вариабельную область легкой цепи и вторую вариабельную область тяжелой цепи, где указанные вторые вариабельные области легкой и тяжелой цепи обладают аффинностью к CD19.
40. Полинуклеотид по п.37 или 38, отличающийся тем, что указанный полинуклеотид кодирует: первую вариабельную область легкой цепи, кодируемую последовательностью нуклеиновых кислот, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID №№2-8, первую вариабельную область тяжелой цепи, кодируемую последовательностью нуклеиновых кислот SEQ ID №1, вторую вариабельную область легкой цепи и вторую вариабельную область тяжелой цепи, где указанные вторые вариабельные области легкой и тяжелой цепи обладают аффинностью к CD30.
41. Вектор, включающий полинуклеотид по любому из пп.37-40, функционально связанный с областью промотора и, возможно, с областью терминатора транскрипции.
42. Вектор по п.41, отличающийся тем, что полинуклеотид фкнуционально связан с областью промотора и сигнальной последовательностью.
43. Клетка-хозяин, включающая полинуклеотид по любому из пп.37-40 или вектор согласно п.41 или 42.
44. Клетка-хозяин по п.43, отличающаяся тем, что указанная клетка-хозяин выбрана из группы, состоящей из клетки бактерии, клетки гриба, клетки насекомого, клетки млекопитающего и клетки растения.
45. Способ получения связывающей молекулы по любому из пп.1-34, включающий введение в клетку-хозяина полинуклеотида согласно любому из пп.37-40, или вектора согласно п.41 или 42, и культивирование клетки-хозяина в условиях, при которых происходит экспреммия связывающей молекулы.
46. Способ по п.45, дополнительно включающий выделение и, возможно, дальнейшую очистку связывающей молекулы.
47. Способ получения связывающей молекулы по п.33 включающий;
(а) введение в клетку-хозяина полинуклеотида согласно любому из пп.37-40 или вектора по п.41 или 42,
(б) культивирование клетки-хозяина в условиях, при которых происходит экспрессия связывающей молекулы согласно любому из пп.1-32,
(в) выделение связывающей молекулы, экспрессированной на стадии (б), и
(г) конъюгирование выделенной связывающей молекулы со стадии (в) с меткой или токсином.
48. Связывающая молекула по любому из пп.1-34 или композиция согласно п.35 или 36 для применения в диагностике или лечении аутоиммунного заболевания, воспалительного заболевания, инфекционного заболевания, аллергии или рака.
49. Связывающая молекула или композиция по п.48, где рак выбран из группы, состоящей из лимфомы не-Ходжкина, хронического лимфолейкоза, болезни Ходжкина, солидной опухоли, минимальной остаточной болезни, и метастатической опухоли.
50. Применение связывающей молекулы по любому из пп.1-34 или композиции по п.35 или 36 в производстве лекарственного препарата для лечения лимфомы не-Ходжкина, хронического лимфолейкоза, болезни Ходжкина, солидной опухоли, минимальной остаточной болезни и метастатической опухоли.
51. Применение связывающей молекулы по п.33 или 34 в качестве реагента для: окрашивания клеток, экспрессирующих FcγRIIIA, исследования профилей клеток пациента ex-vivo или выделения NK-клеток для терапии ex-vivo.
52. Набор, включающий связывающую молекулу по любому из пп.1-34 и средства для детекции связывающей молекулы, связанной с FcγRIIIA.