УЛУЧШЕННЫЕ АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЕ РЕЦЕПТОРЫ

1. Антигенсвязывающий рецептор, включающий заякоренный трансмембранный домен и внеклеточный домен, включающий антигенсвязывающий фрагмент, где антигенсвязывающий фрагмент способен специфически связываться с доменом мутированного кристаллизующегося (Fc) фрагмента, но не способен специфически связываться с немутированным исходным Fc доменом, где мутированный Fc домен включает по меньшей мере одну аминокислотную замену по сравнению с немутированным исходным Fc доменом.
2. Антигенсвязывающий рецептор по п. 1, где связывание Fc рецептора с мутированным Fc доменом снижено по сравнению со связыванием Fc рецептора с немутированным исходным Fc доменом, в частности, где Fc рецептором является Fcγ рецептор или неонатальный Fc рецептор (FcRn).
3. Антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1 или 2, где антигенсвязывающий фрагмент представляет собой scFv, Fab, crossFab или scFab.
4. Антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-3, где заякоренный трансмембранный домен представляет собой трансмембранный домен, который выбирают из группы, состоящей из трансмембранного домена CD8, CD3z, FCGR3A, NKG2D, CD27, CD28, CD137, ОХ40, ICOS, DAP 10 или DAP 12 или его фрагмента, прежде всего, где заякоренным трансмембранным доменом является CD28 трансмембранный домен или его фрагмент.
5. Антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-4, дополнительно включающий по меньшей мере один стимулирующий сигнальный домен и/или по меньшей мере один костимулирующий сигнальный домен.
6. Антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-5, где по меньшей мере один стимулирующий сигнальный домен индивидуально выбирают из группы, состоящей из внутриклеточного домена CD3z, FCGR3A и NKG2D или их фрагментов, в частности, где по меньшей мере один стимулирующий сигнальный домен представляет собой CD3z внутриклеточный домен или его фрагмент.
7. Антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-6, где по меньшей мере один костимулирующий сигнальный домен индивидуально выбирают из группы, состоящей из внутриклеточного домена CD27, CD28, CD 137, ОХ40, ICOS, DAP10 и DAP12, или их фрагментов, в частности, где по меньшей мере один костимулирующий сигнальный домен представляет собой внутриклеточный домен CD28 или его фрагмент.
8. Антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-7, где антигенсвязывающий рецептор включает один стимулирующий сигнальный домен, включающий внутриклеточный домен CD28 или его фрагмент, и где антигенсвязывающий рецептор включает один костимулирующий сигнальный домен, включающий внутриклеточный домен CD3z или его фрагмент.
9. Антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-8, где антигенсвязывающий фрагмент представляет собой scFv фрагмент, где scFv фрагмент присоединен через С-концевой остаток к N-концевому остатку заякоренного трансмембранного домена, необязательно через пептидный линкер.
10. Антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-9, где антигенсвязывающий фрагмент представляет собой Fab или crossFab фрагмент, где Fab или crossFab фрагмент присоединен через С-концевой остаток тяжелой цепи к N-концевому остатку заякоренного трансмембранного домена, необязательно через пептидный линкер.
11. Антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-10, где мутированный Fc домен включает по меньшей мере одну аминокислотную мутацию в положении, выбранном из группы, состоящей из L234, L235, 1253, Н310, Р331, Р329 и Н435 в соответствии с системой нумерации EU, в частности, где аминокислотной мутацией является L234A, L235A, 1253A, N297A, Н310А, P329G и/или Н435А.
12. Антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-11, где мутированный Fc домен включает аминокислотную мутацию P329G в соответствии с системой нумерации EU, где связывание Fcγ рецептора с мутированным Fc доменом снижено по сравнению со связыванием Fcγ рецептора с немутированным исходным Fc доменом.
13. Антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-11, где мутированный Fc домен включает по меньшей мере одну аминокислотную мутацию в положении, выбранном из группы, состоящей из 1253, Н310 и Н435 в соответствии с EU системой нумерации, предпочтительно аминокислотные мутации 1253А, Н310А и Н435А ("AAA"), где связывание FcRn с мутированным Fc доменом снижено по сравнению со связыванием FcRn с немутированным исходным Fc доменом.
14. Антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-12, где по меньшей мере один антигенсвязывающий фрагмент способен специфически связываться с мутированным Fc доменом, включающим мутацию P329G, но не способен специфически связываться с немутированным исходным Fc доменом, где антигенсвязывающий фрагмент включает:
(i) вариабельную область (VH) тяжелой цепи, включающую:
(а) 1-ую определяющую комплементарность область тяжелой цепи (CDR Н) с аминокислотной последовательностью RYWMN (SEQ ID NO: 1),
(б) CDR Н2 с аминокислотной последовательностью EITPDSSTINYTPSLKD (SEQ ID NO: 2) и
(в) CDR Н3 с аминокислотной последовательностью PYDYGAWFAS (SEQ ID NO: 3), а также
(ii) вариабельную область (VL) легкой цепи, включающую:
(г) 1-ую определяющую комплементарность область легкой цепи (CDR L) с аминокислотной последовательностью RSSTGAVTTSNYAN (SEQ ID NO: 4),
(д) CDR L2 с аминокислотной последовательностью GTNKRAP (SEQ ID NO: 5) и
(е) CDR L3 с аминокислотной последовательностью ALWYSNHWV (SEQ ID NO: 6).
15. Антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-11 или 13, где по меньшей мере один антигенсвязывающий фрагмент способен специфически связываться с мутированным Fc доменом, включающим мутации 1253А, Н310А и Н435А ("AAA"), но не способен специфически связываться с немутированным исходным Fc доменом, где антигенсвязывающий фрагмент включает:
(i) вариабельную область (VH) тяжелой цепи, включающую:
(а) 1-ую определяющую комплементарность область тяжелой цепи (CDR Н) с аминокислотной последовательностью SYGMS (SEQ ID NO: 53),
(б) CDR Н2 с аминокислотной последовательностью SSGGSY (SEQ ID NO: 54) и
(в) CDR НЗ с аминокислотной последовательностью LGMITTGYAMDY (SEQ ID NO: 55), а также
(ii) вариабельную область (VL) легкой цепи, включающую:
(г) 1-ую определяющую комплементарность область легкой цепи (CDR L) с аминокислотной последовательностью RSSQTIVHSTGHTYLE (SEQ ID NO: 56),
(д) CDR L2 с аминокислотной последовательностью KVSNRFS (SEQ ID NO: 57) и
(е) CDR L3 с аминокислотной последовательностью FQGSHVPYT (SEQ ID NO: 58).
16. Трансдуцированная Т-клетка, способная экспрессировать антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-15.
17. Выделенный полинуклеотид, кодирующий антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-15.
18. Вектор, в частности вектор экспрессии, включающий полинуклеотид по п. 17.
19. Трансдуцированная Т-клетка, способная экспрессировать антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-15.
20. Набор, включающий:
(А) трансдуцированную Т-клетку, способную экспрессировать антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-15, и
(Б) антитело, включающее мутированный Fc домен,
где антигенсвязывающий рецептор способен специфически связываться с мутированным Fc доменом, но не способен специфически связываться с немутированным исходным Fc доменом.
21. Набор, включающий:
(А) выделенный полинуклеотид, кодирующий антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-15, и
(Б) антитело, включающее мутированный Fc домен,
где антигенсвязывающий рецептор способен специфически связываться с мутированным Fc доменом, но не способен специфически связываться с немутированным исходным Fc доменом.
22. Набор по любому из пп. 20 или 21, где антитело, включающее мутированный Fc домен, способно специфически связываться с антигеном, который выбирают из группы, состоящей из белка активации фибробластов (FAP), карциноэмбрионального антигена (СЕА), мезотелина (MSLN), CD20, рецептора 1 фолиевой кислоты (FOLR1) и тенасцина (TNC).
23. Набор по любому из пп. 20-22 для применения в качестве лекарственного средства.
24. Набор по любому из пп. 20-22 для применения при лечении заболевания, в частности для применения при лечении злокачественного заболевания.
25. Антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-15 или трансдуцированная Т-клетка по п. 19 для применения в качестве лекарственного средства, где трансдуцированную Т-клетку, экспрессирующую антигенсвязывающий рецептор, вводят до, одновременно с введением или после введения антитела, включающего мутированный Fc домен, где антигенсвязывающий рецептор способен специфически связываться с мутированным Fc доменом, но не способен специфически связываться с немутированным исходным Fc доменом.
26. Антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-15 или трансдуцированная Т-клетка по п. 19 для применения при лечении злокачественного заболевания, где лечение включает введение трансдуцированной Т-клетки, экспрессирующей антигенсвязывающий рецептор, до, одновременно с введением или после введения антитела, включающего мутированный Fc домен, где антигенсвязывающий рецептор способен специфически связываться с мутированным Fc доменом, но не способен специфически связываться с немутированным исходным Fc доменом.
27. Способ лечения заболевания у субъекта, включающий введение субъекту трансдуцированной Т-клетки, способной экспрессировать антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-15, и введение до, одновременно с введением или после введения трансдуцированной Т-клетки, терапевтически эффективного количества антитела, включающего мутированный Fc домен, где антигенсвязывающий рецептор способен специфически связываться с мутированным Fc доменом, но не способен специфически связываться с немутированным исходным Fc доменом.
28. Способ индуцирования лизиса клетки-мишени, включающий контактирование клетки-мишени с трансдуцированной Т-клеткой, способной экспрессировать антигенсвязывающий рецептор по любому из пп. 1-15 в присутствии антитела, включающего мутированный Fc домен, где антигенсвязывающий рецептор способен специфически связываться с мутированным Fc доменом, но не способен специфически связываться с немутированным исходным Fc доменом.
29. Применение антигенсвязывающего рецептора по любому из пп. 1-15, полинуклеотида по п. 17 или трансдуцированной Т-клетки по п. 19 для получения лекарственного средства, предназначенного для лечения злокачественного заболевания.