Контроль качества на этапах лабораторного процесса

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА НА ЭТАПАХ ЛАБОРАТОРНОГО ПРОЦЕССА

ников в этих разделах ФСВОК составило 568 лабораторий. В качестве контрольных материалов использовались лиофили-зированные препараты ДНК или инактивированных вирусов. Результаты анализа контрольных образцов были представлены из 86-95% лабораторий, принявших участие в контрольных циклах. Оценка качества методов выявления маркеров возбудителей инфекционных заболеваний проводилась путем сравнения результата анализа с данными производителя контрольного образца, а методов количественного определения концентрации нуклеиновых кислот - путем сравнения результата оцениваемой лаборатории с диапазоном допустимых значений, рассчитанным в десятичной логарифмической шкале как интервал ± 1,64s от среднего геометрического в группе результатов, полученных одним и тем же набором реагентов для амплификации. Набор реагентов для амплификации является основным источником межлабораторных различий как в случае количественного определения, где целевые значения, полученные разными наборами на одном и том же образце, могут различаться на порядок, так и в случае качественного выявления, где показатели чувствительности и специфичности разных наборов также сильно различаются и зависят от концентрации ДНК или РНК в образце.

Н.И. Мезенцева, А.Е. Панова. Внешняя оценка качества лабораторных исследований по выявлению микобакте-рий туберкулеза и их антибиотикочувствительности. НП «ЦВКК», Москва

Туберкулез - серьезная проблема здравоохранения во всем мире, так как микобактериями туберкулезного комплекса (МБТ) инфицировано около трети населения Земли. Обстановка усугубляется тем, что растет число штаммов МБТ с множественной лекарственной устойчивостью одновременно к двум или более активным противотуберкулезным препаратам.

Целью исследования - анализ качества лабораторных испытаний по выявлению МБТ и определению их лекарственной чувствительности в Российской Федерации.

В ФСВОК десять разделов посвящены оценке качества микробиологических и молекулярно-генетических лабораторных исследований, выполняемых при диагностике и лечении туберкулеза.

С 2001 г. по настоящее момент лаборатории участвуют в двух циклах микроскопии мокроты с окраской по Цилю-Нильсену и люминофорами, количество участников в этих циклах колеблется от 1200 до1500. В разделах по оценке качества культурального выявления МБТ и их ЛУ обычно принимают участие от 100 до 150 лабораторий.

Данные, полученные в 2012 г. демонстрируют улучшение качества культуральных методов диагностики туберкулёза (90% правильных результатов) и микроскопических ис-

следований контрольных образцов лабораториями (уровень правильных результатов повысился до 89%). Наряду с этим качество мазков мокроты, изготовленных самими лабораториями, не обеспечивает даже 50% положительных оценок. У значительного числа лабораторий критериям качества не соответствует ни один из представленных препаратов.

Ежегодно растет число участников, использующих молекулярно-генетические методы выявления МБТ и их лекарственной устойчивости, в 2012 году приняли участие 25 лабораторий.

К сожалению, анализ данных показывает, что уровень молекулярно-генетических исследований, особенно по выявлению МБТ, также требует серьезного повышения качества этого вида исследований и подготовки квалифицированного персонала.

Н.С. Абрамова. Оценка качества выявления специфических антител к Treponema pallidum по результатам исследований серологических лабораторий - участников раздела «Серодиагностика сифилиса». НП «ЦВКК», Москва

Внешняя оценка качества клинических лабораторных исследований является неотъемлемой составляющей системы обеспечения качества каждой клинической лаборатории. В данной работе наглядно предоставлены результаты серологических лабораторий, и данные об использованных ими методах за последние пять лет.

Цель работы - оценить качество результатов исследований при выявлении антител к Treponema Pallidum лабораторий, принявших участие в разделе «Серодиагностика сифилиса». Наши задачи - проанализировать доли правильных результатов серологических лабораторий за последние пять лет.

Участники ФСВОК по разделу «Серодиагностика сифилиса» для предоставления результатов анализа заполняют бланк-форму, вписывая названия используемых ими методик. Для выявления антител к Treponema pallidum среди использованных методов или их комбинаций- метод иммунофермент-ного анализа (ИФА), ИФА в иммуноблоте (подтверждающий тест), иммунохемилюминисценция, иммунохроматография, реакция микропреципитации (РМП), реакция преципитации реагиновых антител (РПР), реакция пассивной гемагглюти-нации (РПГА).

Результаты, полученные в данном разделе ФСВОК, позволяют сделать выводы о том, что доли правильных результатов (ответы участников ФСВОК) при тестировании как положительных, так и отрицательных образцов варьируют в пределах 75-100%, на протяжении пяти лет. Отмечается востребованность в диагностике сифилиса таких методов, как ИФА, РМП, РПГА. Ежегодное увеличение числа участников раздела «Серодиагностика сифилиса» в ФСВОК свидетельствует об актуальности внешней оценки контроля качества.

контроль КАЧЕСТВА НА ЭТАПАХ ЛАБОРАТОРНОГО ПРОЦЕССА

Освальд Зоннтаг. Современный контроль качества в клинических лабораториях: дополнительные инструменты после внедрения правил Вестгарда. Использование индикаторов качества. Bio-Rad Laboratories, Германия

Разработка системы правил по контролю качества клинических лабораторных исследований имеет многолетнюю историю. На сегодняшний день данные требования, главным образом, представлены в законодательных документах по обеспечению безопасности пациентов и/или международном стандарте ISO 15189 . Хорошо известные правила Вестгарда не в полной мере учитывают требования к контролю качества и высокий уровень автоматизации лабораторий.

В ходе лекции будут обсуждаться рутинные мероприятия по обеспечению качества исследований в современной лаборатории, начиная с калибровки анализатора, порядка проведения внутренней и внешней оценки качества, использова-

ния контрольных материалов независимого производителя и референсных величин, установления аналитических целей для достижения достоверных результатов.

Для совершенствования качества медицинских исследований необходима разработка дополнительных критериев оценки. Мы обсудим значение таких характеристик, как неопределенность, концепцию прослеживаемости результатов, коммутабельность калибраторов и контрольных материалов правильности, индикаторы качества на пре- и постаналитических этапах исследования, порядок установления аналитических целей.

Будет затронут вопрос вычисления количества сигм и текущих аналитических характеристик методов измерений.

Наконец, мы рассмотрим методы устранения проблем в повседневной работе лабораторий при помощи программ межлабораторного сравнения данных.

КЛИНИЧЕСКАЯ ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА, № 9, 2013

Как известно, от 60 до 80% решений о лечении пациента принимается на основе результатов лабораторных тестов. Программа по контролю качества обеспечит надежность данных результатов и, как следствие, защитит пациентов от ошибочного диагноза и неверного лечения.

Это поможет сэкономить финансовые ресурсы и избежать ненужных расходов, связанных с дополнительными обследованиями. В долгосрочной перспективе данные меры положительным образом отразятся на качестве лечения и на репутации клиники.

ПУБЛИКАЦИИ ПО ПРОБЛЕМЕ

Л.В. Барабаш, В.Б. Хон, С.В. Кремено. Автоматизация внутрилабораторного контроля качества. ФГБУН Томский НИИ курортологии и физиотерапии ФМБА России

Современные требования диктуют необходимость компьютеризации лабораторий. В связи с этим, для обеспечения контроля качества выполняемых лабораторных тестов нами разработана и внедрена программа внутрилабораторного контроля качества (ВлКК) (Свидетельство об отраслевой регистрации разработки № 4405). Система ВлКК предназначена для автоматизации проведения повседневных процедур контроля качества, направленных на выявление допустимых случайных и систематических погрешностей на аналитическом этапе клинических лабораторных исследований, выполняемых количественными методами. Компьютерная система включает в себя программный модуль VLKK, базу данных нормативных материалов и текущих измерений. Система обеспечивает проведение трех стадий оценки погрешностей количественных методов исследования в строгом соответствии с правилами, предписанными отраслевым стандартом (ОСТ 91500.13.001-2003): первая стадия - оценка сходимости результатов измерений, вторая стадия - оценка воспроизводимости и правильности результатов измерений (установочные серии), построение контрольных карт, третья стадия - проведение оперативного ВлКК. На всех стадиях обеспечиваются ввод, обработка и хранение данных, персональная идентификация лаборанта-исследователя. По результатам третьей стадии формируются контрольные карты для нормальных и патологических значений, на которой нанесены среднее значение параметра, контрольные пределы и данные всех измерений до текущего момента. Графическое представление контрольной карты возможно распечатать на принтере.

Таким образом, программа позволяет осуществлять оперативный ежедневный контроль качества лабораторных исследований, позволяя вовремя устранять ошибки при выполнении лабораторных тестов.

Ф.Н. Гильмиярова, О.А. Гусякова, Н.А. Колотьева, Е.А. Шахнович, Н.С. Нефедова, В.М. Радомская, А.В. Бабичев, И.Ф. Сидорова. Минорные компоненты метаболизма в изучении белок-белковых взаимодействий. ГБОУ ВПО Самарский государственный медицинский университет Минздрава России

В основе управления биологическими системами лежит принцип узнавания, белок-лигандного взаимодействия, индуцирующего на клеточном уровне каскад реакций в метаболических, транспортных, иммунологических процессах. Посттрансляционные модификации белков расширяют их функции в отношении распознавания, передачи сигналов и протеолиза.

Цель исследования заключается в выяснении характера ответа белков с различной функцией на действие малых молекул.

Моделью для изучения белок-белкового взаимодействия служила антиген-антительная система АВ0, позволившая выявить различный ответ гликопротеинов А и В на внешние стимулы, в качестве которых использовали этанол и пируват. Показатели содержания метаболитов в крови определяли на биохимическом анализаторе «Integra 400+». Электрофорез белков сыворотки и оценку влияния этанола на физико-химические свойства белков проводили с помощью автома-

тической системы капиллярного электрофореза «MINICAP» (Sebia, Франция). Под влиянием этанола выявлены изменения распределения белков плазмы крови по фракциям: перераспределение фракции р~, у-глобулинов, «слияние» фракций Р1- и р2-глобулинов. По-видимому, этанол, переориентируя заряд молекулы, вызывает изменение изоэлектрической точки белков.

Визуализацию антиген-антительных комплексов осуществляли с помощью конфокальной лазерной сканирующей микроскопии, реализованной при помощи экспериментального стенда, состоящего из конфокального микроскопа Olympus IX 71 («Olympus», Япония), сканирующего блока и лазерного комбайна («ANDOR», Япония) с использованием моноклональных анти-А и анти-В антител, меченных флюоресцеинизотиоционатом FITC («Santa Cruz Biotechnology», США). Установлено изменение размера и уменьшение количества образованных антиген-антительных комплексов гликопротеинов А и В с моноклональными специфическими антителами после действия пирувата.

При постановке чувствительных высокотехнологичных методов (ПЦР, ИФА и др.) необходимо учитывать возможность искажения результатов повышенным уровнем в крови минорных компонентов метаболизма. Разработанная наглядная молекулярная модель может быть рекомендована для тестирования широкого спектра веществ, обладающих биологической и фармакологической активностью.

О.А. Гребёнкина', Е.С. Ларичева2, В.С. Берестовская2. Валидация референсных интервалов производителя аналитической системы. 'Диагностическая лаборатория «Гемотес», Н. Новгород; 2 ГБОУ ВПО Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова, Санкт-Петербург

Считается, что каждая лаборатория должна исследовать применимость ожидаемых значений производителя тест-системы к популяции своего региона, и при необходимости определить собственный диапазон референсных значений. При этом валидация ожидаемых значений реально возможна при анализе данных, хранящихся в лабораторной информационной системе (ЛИС).

Цель исследования - установить ожидаемые значения паратиреоидного гормона (ПТГ) на основе результатов пациентов и провести сравнение результатов с референсными значениями, предложенными производителем.

Робастным методом были разработаны референсные диапазоны на основе 80 результатов ПТГ, полученных из ЛИС PSM Plus. Исследования ПТГ выполнялись на анализаторе Elecsys 2010 (Roche). Для мужчин ожидаемые значения ПТГ составили 8,1-65,2 пг/мл (2,5-97,5 Р), для женщин 13,6-67,5 пг/мл (2,5-97,5 Р). Эти результаты совпадают с данными белорусских коллег (БГМУ, Н.В. Карлович), установивших у здоровых добровольцев без деления по полу референсные значения ПТГ на анализаторе Modular E170 (Roche) как 11,5— 62,2 пг/мл.

Таким образом, результаты ПТГ в лаборатории Гемотес в целом соответствуют данным, приведённым в инструкции к тест-системе (15-65 пг/мл). При этом некоторые отличия по нижней границе производителя в данной работе полностью совпадают с результатами, полученными на оборудовании с аналогичной технологией, но в другом исследовании. Это

1G