СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ РАССЕЯННОГО СКЛЕРОЗА (ВАРИАНТЫ)
METHOD FOR TREATING MULTIPLE SCLEROSIS (VERSIONS)

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к области медицины, в частности к способам терапии и/или профилактики рассеянного склероза (РС) путем введения гормона роста (соматотропина) и/или соматомедина С (ИФР-1) или их физиологических индукторов, нуждающемуся в этом субъекту.
ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Миелин представляет собой многослойную плазматическую мембрану, образующую миелиновую оболочку вокруг нервных волокон, в частности вокруг олигодендроцитов в центральной нервной системе и шванновских клеток в периферической нервной системе, вокруг аксонов нейронов, которая выполняет роль электроизолятора, что способствует увеличению скорости проведения нервного импульса. Разрушение миелиновой оболочки, состоящей приблизительно на 70 % из липидов и приблизительно на 30 % из белков, приводит к возникновению склерозов и аутоиммунных заболеваний.
Рассеянный склероз (РС) представляет собой хроническое аутоиммунное заболевание, в ходе которого поражается миелиновая оболочка нервных волокон вследствие атаки иммунной системы на центральную нервную систему. В результате образования очагов повреждения миелина (демиелинизации) белого вещества головного и спинного мозга нарушается проводимость сигналов между нервными клетками. РС представляет собой мультифакторное заболевание, в патогенез которого могут быть вовлечены как внешние факторы, например вирусные инфекции, так и внутренние, а именно генетическая предрасположенность. Этиология РС до сих пор не представляется ясной, что является препятствием для разработки этиотропного лечения.
Клинические проявления РС оценивают с использованием шкал состояния субъекта, оценивающих степень выраженности симптомов поражения различных проводящих систем мозга и степени инвалидизации, например шкалы состояния функциональных систем (FSS) и расширенной шкалы оценки инвалидизации (EDSS) (Kurtzke JF (1983). "Rating neurologic impairment in multiple sclerosis: an expanded disability status scale (EDSS)". Neurology 33 (11): 1444-1452; Collins et al. A comparative analysis of Patient-Reported Expanded Disability Status Scale tools. Mult Scler. 2016 Sep; 22(10): 1349–1358).
Описаны 4 типа РС (Neurology (1996) 46; 901-911): ремиттирующий-рецидивирующий (РРРС, RRMS), при котором периоды обострения сменяются периодами восстановления (ремиссии) без ухудшения симптомов между рецидивами; вторично-прогрессирующий (ВПРС, SPMS), характеризующийся ремиттирующим-рецидивирующим течением заболевания с последующим ухудшением неврологических проявлений; первично-прогрессирующий (ППРС, PPMS), отличающийся тем, что у пациентов с таким типом течения РС не бывает периодов ремиссии после исходных симптомов; прогрессирующий-рецидивирующий (ПРРС, PRMS), проявляющийся в устойчивом неврологическом ухудшении с самого начала заболевания и развитием явных обострений на фоне медленного прогрессирования.
Симптомы РС разнообразны и проявляются в периоды рецидивов заболевания с постепенным прогрессирующим истощением неврологических функций. Симптомы могут выражаться мышечной слабостью, нарушением согласованности движений мышц (атаксией) туловища и конечностей, парезом, тремором, нарушением зрительных функций. Часто наблюдают снижение чувствительности, в том числе без четкой локализации, нарушение функций тазовых органов, снижение интеллекта, депрессию, нарушение поведения. Первые клинические симптомы рассеянного склероза обычно появляются у пациентов возрастом от 18 до 45 лет, хотя дебют РС описан и для детей, и для пожилых людей.
В WO 2010/128035 раскрыто использование антитела, специфичного в отношении GM-CSF (гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор) или его рецептора, в лечении или профилактике рассеянного склероза. Введение субъекту антитела к GM-CSF приводит к снижению пролиферации Т-клеток, высвобождению ими IL-17 (интерлейкин-17).
В WO 2010/147665 раскрыт способ снижения частоты рецидивов и уменьшения развития физической инвалидизации при ремиттирующем-рецидивирующем РС (РРРС) путем ежедневного перорального введения 0,6 мг лаквинимода, представляющего собой производное фенилхинолона.
В US 2017290842 и WO 2012/123938 описано применение семейства соединений, включающего СХ-5461 и его производные, обладающих противовоспалительной активностью, для лечения и/или регуляции РРРС путем введения СХ-5461, который ингибирует активность РНК-полимеразы I, и подавляет таким образом воспаление и усиливает апоптоз аутореактивных лимфоцитов.
В WO 2017165367 описан способ индуцирования ремиелинизации для лечения РРРС с помощью композиции, содержащей миРНК (малая интерферирующая РНК), которая ингибирует активность, синтез или экспрессию белка, связанного с липопротеином низкой плотности 1 (LRP1).
Известен препарат для лечения рассеянного склероза Бетаферон, содержащий рекомбинантный человеческий интерферон-β-1b, от компании Байер Фарма АГ. Недостатками данного препарата является достаточно низкая эффективность его применения – снижение частоты обострений заболевания и их тяжести происходит лишь на 30%, а также наличие таких побочных эффектов как усиление депрессивной симптоматики (Соколова Е.С., Тотолян Н.А., Клименко В.М. 2003. Психоэмоциональные изменения при лечении бетафероном пациентов с рассеянным склерозом // «Стресс и поведение» VII Междисциплинарная конференция по биологической психиатрии, Новосибирск).
Известен иммуномодулирующий препарат Копаксон, содержащий действующее вещество глатирамера ацетата, от компании Teva, представляющий собой полимер из четырех левовращающих изомеров уксуснокислых солей синтетических полипептидов глутамина, лизина, аланина и тирозина. Копаксон не показывает преимуществ при лечении первично-прогрессирующего и вторично-прогрессирующего рассеянного склероза.
Несмотря на разнообразие имеющихся терапевтических средств в данной области сохраняется потребность в разработке эффективных подходов лечения рассеянного склероза. Это необходимо в первую очередь с целью увеличить арсенал возможных терапевтических средств для выбора лечащим врачом, в том числе, предоставить новые терапевтические возможности для пациентов, не отвечающих или неудовлетворительно отвечающих на существующую терапию, либо страдающих от побочных эффектов такой терапии, а также предложить новые возможности комбинационной терапии, предлагая новые терапевтические подходы, которые можно комбинировать с существующими для достижения указанных выше целей. Также необходимо снизить стоимость лечения для пациентов, поскольку средства, имеющиеся на рынке, как правило являются дорогостоящими. Настоящее изобретение направлено на решение указанных задач.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Автор настоящего изобретения неожиданно обнаружил, что для эффективной терапии рассеянного склероза можно использовать такие активные вещества, как соматотропин и иммуноглобулиновый фактор роста 1 (ИФР-1, также обозначаемый как соматомедин С), причем в таких количествах, которые превышают количества этих веществ, которые считали допустимыми для введения пациентам. Кроме того, автор обнаружил, что задача по изобретению решается равным образом и при использовании физиологических индукторов соматотропина и/или ИФР-1. Под терапией рассеянного склероза здесь понимается, в частности, облегчение симптомов, уменьшение частоты возникновения рецидивов и стимуляция регенерации миелиновых оболочек нейронов, т. е. все то, что оказывает благоприятные эффекты на течение заболевания у субъекта.
Таким образом, настоящее изобретение позволяет осуществлять терапию рассеянного склероза эффективно, но при этом обеспечивая необходимую безопасность в смысле возникновения и/или тяжести побочных эффектов.
Соматотропин (также называемый соматотропным гормоном или гормоном роста) представляет собой гипофизарный гормон роста, имеющий молекулярную массу около 22 кДа и 191 аминокислотный остаток. Соматотропин необходим для постнатального роста и для нормализации углеводного, липидного, азотного и минерального обмена. Известно, что на секрецию соматотропина влияет ряд веществ, в том числе белковая пища, некоторые аминокислоты, например аргинин, лизин, орнитин и глутамин, клофелин, моксонидин, баклофен, эстрогены, дофамин, гормоны кишечника, такие как релизинг пептиды гормона роста (GHRP) и грелин, серотонин, амфетамин, пропанолол, глюкагон, тиреоидные гормоны, вазопрессин и другие.
Ростовые эффекты соматотропина опосредуются главным образом ИФР-1 – белком, сходным с инсулином. ИФР-1 состоит из 70 аминокислотных остатков, имеет молекулярную массу 7,6 кДа и поступает в кровь в основном из печени, а его секреция стимулируется соматотропином. Известно, что ИФР-1 оказывает прямое регулирующее воздействие на гематопоэз, в особенности лимфопоэз и функционирование иммунной системы (Clark P., 1997), стимулирует дифференцировку и переход про-В- в пре-В-клетки (Landgreth K. et al, 1992) и в синергизме с ИЛ-7 активирует пролиферацию В-клеток (Gibson L.F. et al, 1993), функционирует в метаболизме олигодендроцитов и миелина in vivo (Komoly, S. et al. (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:1894-1898). На секрецию ИФР-1 влияют такие вещества как глутамин, аргинин, ангиотензин-II, баклофен, грелин, тиреоидные гормоны, соматотропин, стерилглюкозиды (SG), такие как ацилированные стерил-β-глюкозиды (ASG) и другие.
Таким образом, вышеуказанное открытие автора изобретения привело к созданию следующих технических решений, решающих поставленную задачу.
В одном из воплощений изобретения предложен способ лечения рассеянного склероза, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту соматотропина в терапевтически эффективном количестве.
В еще одном воплощении изобретения предложен способ лечения рассеянного склероза, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту инсулиноподобного фактора роста 1 (ИФР-1) в терапевтически эффективном количестве.
В другом воплощении изобретения предложен способ лечения рассеянного склероза, включающий введение нуждающемуся в этом субъекту физиологического индуктора соматотропина и/или ИФР-1 в терапевтически эффективном количестве.
Равным образом, изобретение охватывает применение соматотропина в качестве лекарственного средства для лечения рассеянного склероза у субъекта, применение ИФР-1 в качестве лекарственного средства для лечения рассеянного склероза у субъекта, и, наконец, применение физиологического индуктора соматотропина и/или ИФР-1 в качестве лекарственного средства для лечения рассеянного склероза у субъекта.
Кроме того, изобретение относится к применению соматотропина и/или ИФР-1 и/или их физиологических индукторов для изготовления лекарственного средства для лечения и/или профилактики рассеянного склероза или его отдельных симптомов.
Применяемое количество соматотропина согласно изобретению может составлять, например, от 0,05 до 0,5 МЕ/кг массы тела субъекта. Применяемое количество ИФР-1 согласно изобретению может составлять, например, от 50 до 500 мкг/кг массы тела субъекта. Предпочтительный режим введения соматотропина, ИФР-1, а также их физиологических индукторов может составлять один или два раза в сутки на протяжении 10-60 суток. При этом следует отметить, что в зависимости от терапевтической целесообразности могут быть выбраны иные дозы и режим введения. Активные вещества по изобретению вводят, как правило, в виде фармацевтической композиции, имеющей подходящую для желаемого введения лекарственную форму.
Способы и активные вещества по изобретению могут быть использованы в комбинации для лечения одного и того же субъекта, например соматотропин, ИФР-1 и один или более их физиологических индукторов могут вводиться субъекту в любом сочетании в виде одной комбинированной композиции или в нескольких композициях по отдельности.
Целесообразно также комбинировать способы и применения по изобретению с другими известными терапевтическими факторами. В одном из воплощений изобретения введение соматотропина, ИФР-1 или их физиологических индукторов может сопровождаться дополнительным введением интерферона-β-1b, в частности рекомбинантного человеческого интерферона-β-1b. Предпочтительно рекомбинантный человеческий интерферон-β-1b вводят в количестве от 33 до 330 мг/кг массы тела субъекта; режим введения может совпадать с режимом введения соматотропина, ИФР-1 и их физиологических индукторов, предпочтительно один или два раза в сутки на протяжении 10-60 суток.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Определения
Если не определено иное в данной заявке, научные и технические термины, используемые в связи с настоящим изобретением, имеют значения, которые обычно понятны специалистам в данной области. В общем, используемые номенклатура и методы клеточной и тканевой культуры, молекулярной биологии, иммунологии, микробиологии, генетики и химии белков и нуклеиновых кислот, гибридизации, аналитической химии, синтетической органической химии и медицинской и фармацевтической химии, описанные в данной заявке, представляют собой номенклатуру и методы, хорошо известные и обычно использующиеся в данной области.
Используемая здесь терминология предназначена для целей описания конкретных вариантов воплощения изобретения и не является ограничивающей. При использовании в настоящем описании и формуле изобретения формы единственного числа включают множественное число, если контекст явным образом не указывает на иное.
Термин "индуктор" относится к молекуле, которая стимулирует экспрессию генов, находящихся в неактивном состоянии. Индукторы также могут функционировать путём связывания с активаторами. В отсутствии индуктора активаторы, как правило, слабо связываются с ДНК, тогда как при образовании комплекса индуктора с активатором, многократно повышается активность последнего, после чего такой комплекс связывается с активируемой последовательностью и запускает транскрипцию целевого гена. Примерами таких индукторов могут быть аргинин, лизин, орнитин и глутамин, клофелин, моксонидин, баклофен, эстрогены, дофамин, гормоны кишечника, такие как релизинг пептиды гормона роста (GHRP) и грелин, серотонин, амфетамин, пропанолол, глюкагон, тиреоидные гормоны, вазопрессин, ангиотензин-II, стерилглюкозиды (SG), такие как ацилированные стерил-β-глюкозиды (ASG) и другие вещества.
nd
Ссылки на аминокислотные остатки, использованные в настоящей заявке, обозначены однобуквенным или трехбуквенным кодом (см., например, Lehninger, Biochemistry, 2 edition, Worth Publishers, New York, 1975, p. 72).
Термин “пептид” или “полипептид” относится к полимеру из аминокислот независимо от длины полимера; таким образом, фрагменты белка, олигопептиды и белки включены в определение пептида или полипептида. Этот термин также не определяет или не исключает постэкспрессионные модификации полипептидов, например, полипептидов, которые включают ковалентное присоединение гликозильных групп, ацетильных групп, фосфатных групп, липидных групп и тому подобного, однозначно охвачены термином “полипептид”. В данное определение также включены полипептиды, которые содержат один или более аналогов аминокислоты (включая, например, не встречающиеся в природе аминокислоты, аминокислоты, которые встречаются в природе только вне неродственной биологической системы, модифицированные аминокислоты из систем млекопитающих и т.д.), полипептиды с замещенными связями, а также другие модификации, известные в данной области, как природные, так и не природные.
Термин "приблизительно" и аналогичные ему, такие как "около" и "примерно", при использовании здесь вместе с определенным значением, указывают на то, что это значение может изменяться в пределах типичной погрешности измерений.
Термин "лечение" применительно к человеку, животному или иному субъекту относится к терапевтическому лечению, профилактическим или превентивным мерам для исследовательских и диагностических применений. Термин "лечение" относится к обращению, облегчению, ингибированию прогрессирования или предупреждению расстройства или состояния, по отношению к которому употребляется данный термин, или одного или более симптомов такого расстройства или состояния. Термин охватывает полный спектр методов лечения для конкретного состояния, от которого страдает субъект, например, введение активного вещества или композиции, содержащей его, с целью облегчения или ослабления симптомов или осложнений; замедления прогрессирования состояния, частичного купирования клинических проявлений заболевания или нарушения; излечения или устранения состояния, заболевания или нарушения и/или предотвращения или снижения риска развития состояния, заболевания или нарушения. При этом термины "предотвращение" или "профилактика" означают систему мер и уход за пациентом с целью препятствования развитию состояния, заболевания или нарушения и подразумевают введение активных соединений для предотвращения или снижения риска возникновения симптомов или осложнений.
Термин "введение" при применении к биологическим объектам, таким как животное, человек, подопытный субъект, клетка, ткань, орган или биологическая жидкость, относится к приведению в контакт экзогенного фармацевтического, терапевтического агента, диагностического агента или композиции с биологическим объектом, включающим животное, человека, субъекта, клетку, ткань, орган или биологическую жидкость. Термин "введение" может относиться, например, к терапевтическим, фармакокинетическим, диагностическим, исследовательским и экспериментальным способам. Обработка клеток включает в себя приведение в контакт реагента с клеткой, а также приведение в контакт реагента с текучей средой, где текучая среда находится в контакте с клеткой. Термин "введение" также означает методы обработки in vitro и ex vivo, например, клетки, реагентом, диагностическим средством, связывающим соединением или другой клеткой.
Термин "аутоиммунное заболевание" понимается в его обычном значении, и относится к заболеванию, развившемуся в результате иммунного ответа против собственных тканей или компонентов тканей, включая как гуморальный иммунный ответ, так и клеточно-опосредованные ответы.
Термин "субъект" при использовании здесь относится к любому млекопитающему, включая грызунов, таких как мышь или крыса, морских свинок и приматов, таких как яванский макак (Масаса fascicularis), макак-резус (Масаса mulatta) или человек (Homo sapiens). Предпочтительно субъектом является примат, наиболее предпочтительно человек.
В настоящем документе термины "терапевтически эффективная доза", или "терапевтически эффективное количество", или "фармацевтически эффективная доза", или "фармацевтически эффективное количество" означает дозу, оказывающую эффекты, для которых ее вводят. Как правило, терапевтический агент вводят в количестве, эффективном для облегчения одного или более заболевания или состояния пациента или популяции, подлежащего (-ей) лечению, либо посредством индукции регрессий этих заболеваний или состояний, либо посредством ингибирования прогрессирования таких заболеваний или состояний в какой-либо клинически измеримой степени.
Термин "фармацевтическая композиция" относится к смеси, содержащей одно или более активных веществ в соответствии с настоящим изобретением вместе с другими компонентами, в частности физиологически/фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами (эксципиентами). Фармацевтическая композиция должна иметь состав, оптимизированный для желаемого пути введения активного ингредиента в организм и, в конечном итоге, проявления биологического действия.
"Фармацевтический” или “фармацевтически приемлемый” относится к химическим соединениям и композициям, которые не приводят к побочной, аллергической или другой нежелательной реакции при введении млекопитающему, в частности человеку, или такие реакции сведены к минимуму. Фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество относится к нетоксичному твердому, мягкому или жидкому наполнителю, разбавителю, материалу капсулы или другому вспомогательному веществу любого типа.
Термин "фармацевтически приемлемая соль" относится к соли, образованной соединениями, использующимися в настоящем изобретении, и кислотой или основанием, которая подходит для включения в состав лекарственного средства. Фармацевтически приемлемые соли включают неорганические и органические соли. Предпочтительным типом солей являются соли, образованные соединениями согласно настоящему изобретению и кислотой. Подходящие солеобразующие кислоты включают: неорганические кислоты, такие как соляная кислота, бромоводородная кислота, фтороводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и тому подобное; органические кислоты, такие как муравьиная кислота, уксусная кислота, трифторуксусная кислота, пропионовая кислота, щавелевая кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, фумаровая кислота, малеиновая кислота, молочная кислота, яблочная кислота, винная кислота, лимонная кислота, пикриновая кислота, бензойная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, п-толуолсульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, нафталинсульфоновая кислота и тому подобное; и аминокислоты, такие как пролин, фенилаланин, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота и тому подобное, но не ограничиваются ими. Другим предпочтительным типом солей являются соли, образованные соединениями согласно настоящему изобретению и основаниями, например, соли щелочных металлов (например, соли натрия или калия), соли щелочно-земельных металлов (например, соли кальция или магния), аммонийные соли (например, аммонийные соли низших алканолов или другие фармацевтически приемлемые соли амина), например, соль метиламина, соль этиламина, соль пропиламина, соль диметиламина, соли триметиламина, соли диэтиламина, соли триэтиламина, соли трет-бутиламина, соли этилендиамина, соли гидроксиэтиламина, соли дигидроксиэтиламина, соли тригидроксиэтиламина и соли амина, образованные морфолином, пиперазином и лизином.
"Фармацевтически приемлемый носитель" означает один или более чем один совместимый твердый, полутвердый или жидкий наполнитель, которые подходят для введения субъекту и должны иметь достаточную чистоту и достаточно низкую токсичность. "Совместимость" в данном документе означает, что компоненты композиции можно смешивать с соединениями согласно изобретению или друг с другом, и они не будут значительно снижать эффективность соединений. Некоторые примеры фармацевтически приемлемых носителей включают целлюлозу и ее производные (такие как натрий-карбоксиметилцеллюлоза, натрий-этилцеллюлоза, ацетат целлюлозы и т. д.), желатин, тальк, твердые смазывающие вещества (такие как стеариновая кислота, стеарат магния), сульфат кальция, растительные масла (такие как соевое масло, кунжутное масло, арахисовое масло, оливковое масло и т.д.), полиолы (такие как пропиленгликоль, глицерин, маннит, сорбит и т.д.), эмульгаторы (такие как Tween), увлажнитель (такой как додецилсульфат натрия), красители, корригенты, стабилизаторы, антиоксиданты, консерванты, апирогенную воду и т.д.
th
Термин "пролекарство" относится к пептидам, которые быстро преобразуются in vivo, с образованием основного соединения приведенных выше формул, например, путем гидролиза в крови или путем метаболизма в клетках, таких как, например, клетки базальных ганглиев. Подробное обсуждение приведено в публикациях T. Higuchi and V. Stella, «Pro-drugs as Novel Delivery Systems», Vol. 14 of the A.C.S. Symposium Series, и в Bioreversible Carriers in Drug Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987. Примеры пролекарств включают фармацевтически приемлемые нетоксичные сложные эфиры соединений по настоящему изобретению. Сложные эфиры соединений по настоящему изобретению можно получать общепринятыми методами: «March's Advanced Organic Chemistry, 5 Edition» M. B. Smith & J. March, John Wiley & Sons, 2001.
Способы введения активных веществ по изобретению. Фармацевтическая композиция
th
Соматотропин, ИФР-1 или их индукторы вводят, как правило, в виде фармацевтической композиции. Соответственно, в одном из воплощений изобретение также относится к фармацевтической композиции для лечения и/или профилактики рассеянного склероза, содержащей соматотропин. В другом воплощении изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения и/или профилактики рассеянного склероза, содержащей ИФР-1. В еще одном воплощении изобретение относится к фармацевтической композиции для лечения и/или профилактики рассеянного склероза, содержащей соматотропин и ИФР-1. В одном из воплощений изобретение также относится к композиции, содержащей один или несколько физиологических индукторов соматотропина и/или ИФР-1. Фармацевтические композиции или вещества по изобретению могут содержать фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества (эксципиенты), в том числе носители, разбавители, адъюванты и т. п. Примеры вспомогательных веществ хорошо известны специалистам и, например, описаны в Remington: The Science и Practice of Pharmacy, 20 Edition, Gennaro, Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA, 2000.
Композиции по изобретению можно изготавливать различными способами, в соответствии с методиками, хорошо известными специалисту в данной области, например, из Remington: The Science and Practice of Pharmacy (Lippincott Williams & Wilkins; Twenty first Edition, 2005), WO 1993025222, WO 1990011070, EU 1991462959. Фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, которые могут применяться, представляют собой, в частности, описанные в Handbook of Pharmaceuticals Excipients, American Pharmaceutical Association (Pharmaceutical Press; 6th revised edition, 2009).
В одном из воплощений фармацевтическая композиция по изобретению содержит соматотропин и/или ИФР-1 и/или один или несколько физиологических индукторов самототропина и/или ИФР-1 в количестве, эффективном для обеспечения терапии рассеянного склероза (РС), в частности, для снижения и/или замедления степени инвалидизации при РС. В одном из предпочтительных воплощений, композиция по изобретению дополнительно содержит рекомбинантный человеческий интерферон-β-1b в терапевтически эффективном количестве.
Введение композиции по изобретению может быть выполнено различными путями, включая без ограничений пероральный, подкожный, внутривенный, парентеральный, интраназальный, интраортикальный, интраокулярный, ректальный, вагинальный, трансдермальный, интраперитонеальный, внутримышечный, внутрилегочный или интратекальный путь введения.
Композиция по изобретению может быть введена параллельно с другими терапевтическими агентами, т. е. терапевтические агенты, описанные в данном документе, могут быть введены параллельно, одновременно или последовательно с другими фармакотерапевтическими агентами или на фоне иных терапевтических воздействий на организм, например радиационной терапии, физиотерапии, хирургического вмешательства и т. д. Любое из активных веществ, входящих в состав композиций по изобретению, можно вводить опосредованно путем введения экзогенной нуклеиновой кислоты, например ДНК или РНК, кодирующей соответствующее активное вещество, в результате чего осуществляется экспрессия введенной нуклеиновой кислоты.
Фармацевтическим композициям по изобретению придают лекарственную форму, подходящую для желаемого пути введения.
В некоторых вариантах воплощения композиция по изобретению имеет твердую форму, включающую капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В данных твердых лекарственных формах активные соединения смешаны по меньшей мере с одним традиционным инертным вспомогательным веществом, например с любым из следующих компонентов: (а) наполнитель или агент, улучшающий совместимость, например крахмал, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит или салициловая кислота: (б) связующие вещества, например гидроксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза и гуммиарабик; (в) увлажнитель, такой как глицерин; (г) разрыхлители, такие как агар, карбонат кальция, картофельный крахмал или тапиоковый крахмал, альгиновая кислота, определенные смешанные силикаты и карбонат натрия; (д) средства, замедляющие растворение, такие как парафин; (е) ускорители абсорбции, например, четвертичные аммониевые соединения; (ж) пластификаторы, такие как цетиловый спирт и глицерилмоностеарат; (з) адсорбенты, например, каолин; и (и) смазывающие вещества, такие как тальк, стеарин кальция, стеарат магния, твердый полиэтиленгликоль, лаурилсульфат натрия или их смеси. Лекарственные формы могут также содержать буферные вещества.
Твердые лекарственные формы, такие как таблетки, капсулы, пилюли и гранулы могут содержать покрытие и оболочки, такие как растворимые в кишечнике покрытия и любые другие материалы, известные в данной области. Они могут содержать непрозрачный агент. Высвобождение активных соединений или соединений в композициях может быть замедленным в определенной части пищеварительного тракта. Примеры капсулирующих компонентов включают полимеры и воски. При необходимости активные соединения и одно или более чем одно приведенное выше вспомогательное вещество могут образовывать микрокапсулы.
Твердая фармацевтическая композиция по изобретению может быть выполнена в виде лиофилизата, подходящего для получения жидкого препарата для инъекционного введения (внутримышечного, подкожного и т. п.) или перорального введения.
Жидкие лекарственные формы могут, например, представлять собой раствор или суспензию одного или более настоящих соединений и факультативно фармацевтические адъюванты в носителе, таком как, например, вода, физиологический раствор, водный раствор декстрозы, глицерин, этанол и тому подобные. При необходимости фармацевтическая композиция для введения может также содержать другие нетоксичные вспомогательные вещества, такие как смачивающие или эмульгирующие средства, средства для забуферивания рН и т. п. Типичными примерами таких вспомогательных средств являются ацетат натрия, монолаурат сорбитана, триэтаноламин, ацетат натрия, олеат триэтаноламина и т. д. Практические способы приготовления таких лекарственных форм известны или будут очевидны для специалистов в данной области техники, например, см. Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 16th Edition, 1980. В одном варианте осуществления для парентерального введения используют растворы пептидов, применяемых по настоящему изобретению, в стерильном водном растворе, в водном пропиленгликоле или в кунжутном или арахисовом масле. Водные растворы должны быть соответствующим образом забуферены, когда это целесообразно, и жидкий разбавитель сделан изотоническим, например, с помощью соответствующего солевого раствора или глюкозы. Водные растворы особенно подходят для внутривенного, внутримышечного, подкожного и внутрибрюшинного введения. Все используемые стерильные водные среды легко могут быть получены стандартными методами, известными специалистам в данной области.
Подходящие фармацевтические носители включают инертные твердые разбавители или наполнители, стерильные водные растворы и различные органические растворители. Примерами твердых носителей являются лактоза, магнезия, сахароза, циклодекстрин, тальк, желатин, агар, пектин, гуммиарабик, стеарат магния, стеариновая кислота и низшие алкильные эфиры целлюлозы. Примерами жидких носителей являются сироп, арахисовое масло, оливковое масло, фосфолипиды, жирные кислоты, амины жирных кислот, полиоксиэтилен и вода. Кроме того, носитель или разбавитель может включать любой материал замедленного высвобождения, известный в данной области, такой как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат, самостоятельно или в смеси с воском. Фармацевтические композиции, полученные путем объединения соединений, применяемых по настоящему изобретению, и фармацевтически приемлемых носителей, затем могут быть легко введены в различных лекарственных формах, подходящих для описанных путей введения. Препараты могут быть для удобства предоставлены в стандартной лекарственной форме с помощью методов, известных в области фармацевтики.
Активные вещества по изобретению могут находится в фармацевтической композиции будучи заключенными в микрокапсулы, например из сополимера лактид-гликолид (PLGA), а также в липосомы или вирусоподобные частицы и т. п.
Соматотропин для использования в изобретении может быть получен любым известным способом; может быть природного или синтетического происхождения. Наиболее удобным является использование рекомбинантного соматотропина (rhGH), способы получения которого хорошо известны, например из US 8178108.
Соматотропин может быть представлен в любой модификации, при которой сохраняется активность гормона и при этом придаются преимущественные свойства. Например, соматотропин может находиться в виде комплексов, в частности комплекса с цинком. Другая модификация включает конъюгаты соматотропина с полимерами, например с полиэтиленгликолем. Кроме того, может быть использован гибридный соматотропин, содержащий дополнительные домены, например облегчающие доставку белка к мишени, например слитый белок соматотропин-трансферрин. Наконец, могут быть использованы различные изоформы соматотропина. В настоящем описании и в формуле изобретения все указанные варианты охватываются термином «соматотропин», «гормон роста» и т. п.
Аналогично, ИФР-1 также может представлять собой белок природного или синтетического происхождения, например рекомбинантный ИФР-1, способ получения которого известен, например, из US5262308. Также как и в случае соматотропина, ИФР-1 может представлять собой комплекс, конъюгат, гибрид, изоморфу, в случае которых сохраняется активность и появляются дополнительные преимущественные свойства. В настоящем описании и в формуле изобретения все указанные варианты охватываются термином «ИФР-1», «соматомедин С» и т. п.
Физиологические индукторы соматотропина и/или ИФР-1 могут быть получены известными способами, химическими или микробиологическими, и равным образом могут быть получены из природных источников, что также касается аминокислот, в частности лизина, аргинина и глутамина, ацилированных стерил-β-глюкозидов и других индукторов.
Способы лечения
С целью лечения субъекта, страдающего от рассеянного склероза, ему вводят терапевтически эффективные дозы активных веществ как указано выше, в частности в составе фармацевтической композиции по изобретению.
В одном из воплощений настоящее изобретение относится к способу лечения, предотвращения и/или профилактики рассеянного склероза и/или одного или нескольких его симптомов, который включает введение субъекту активного вещества, представляющего собой соматотропин и/или инсулиноподобный фактор роста 1 (ИФР-1) и/или их физиологические индукторы, выбранные из группы, состоящей из аргинина, лизина, глутамина и ацилированного стерил-β-глюкозида, или композиции, содержащей указанное активное вещество, в терапевтически эффективном количестве. В частности, субъекту вводят композицию, содержащую одно или более чем одно активное вещество согласно изобретению. В альтернативном воплощении субъекту вводят несколько композиций, содержащих отдельные активные вещества по изобретению. При этом они могут вводиться одновременно, последовательно или раздельно.
Лечение субъекта, страдающего от рассеянного склероза, не обязательно исчерпывается введением активных веществ или композиций по изобретению; могут быть использованы любые другие терапевтические воздействия, известные специалистам, включая другие активные вещества, в частности интерферон-β-1b. Данное вещество может быть включено в состав описанных выше композиций или вводиться отдельно, в частности в составе другой фармацевтической композиции, одновременно, последовательно или раздельно относительно активных веществ или композиций по изобретению.
Дозы и длительность лечения
Количества вводимых активных веществ по изобретению определяют, как правило, исходя из массы тела субъекта.
Соматотропин предпочтительно используют в количестве приблизительно от 100 до 600 мкг/кг массы тела субъекта. Например, это количество может составлять от 100, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 275 или 300 мкг/кг массы тела субъекта и до 600, 575, 550, 500, 475, 450, 425, 400, 375, 350 или 325 мкг/кг массы тела субъекта. Количество соматотропина может быть выражено в международных единицах и составлять от 0,05 до 0,5 МЕ/кг массы тела субъекта. Например, это количество может составлять от 0,06, 0,07, 0,08, 0,09, 0,1, 0,11, 0,12, 0,13, 0,14, 0,15, 0,16, 0,17, 0,18, 0,19 или 0,2 МЕ/кг массы тела субъекта; и до 0,49, 0,48, 0,47, 0,46, 0,45, 0,44, 0,43, 0,42, 0,41, 0,4, 0,39, 0,38, 0,37, 0,36, 0,35, 0,34, 0,33, 0,32, 0,31 или 0,3 МЕ/кг массы тела субъекта, включая, в частности, указанные значения.
ИФР-1 предпочтительно используют в количестве от 50 до 500 мкг/кг массы тела субъекта. Например, это количество может составлять от 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195 или 200 мкг/кг массы тела субъекта; и до 495, 490, 485, 480, 475, 470, 465, 460, 455, 450, 445, 440, 435, 430, 425, 420, 415, 410, 405, 400, 395, 390, 385, 380, 375, 370, 365, 360, 355, 350, 345, 340, 335, 330, 325, 320, 315, 310, 305 или 300 мкг/кг массы тела субъекта, включая, в частности, указанные значения.
Физиологические индукторы предпочтительно используют в количестве от 1 нг/кг до 50 г/кг массы тела субъекта в зависимости от типа используемого индуктора. Например, это количество может составлять от 1, 5, 10, 20, 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950 или 1000 нг/кг массы тела субъекта и до 10000, 9000, 8000, 7000, 6000, 5000, 4000, 3000 или 2000 нг/кг массы тела субъекта, включая, в частности, указанные значения. Например, количество физиологического индуктора может составлять от 1, 5, 10, 20, 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950 или 1000 мкг/кг массы тела субъекта и до 10000, 9000, 8000, 7000, 6000, 5000, 4000, 3000 или 2000 мкг/кг массы тела субъекта, включая, в частности, указанные значения. Например, количество может составлять от 1, 5, 10, 20, 50, 100, 150, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 650, 700, 750, 800, 850, 900, 950 или 1000 мг/кг массы тела субъекта и до 10000, 9000, 8000, 7000, 6000, 5000, 4000, 3000 или 2000 мг/кг массы тела субъекта. Например, количество может составлять от 1, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6 1,7, 1,8, 1,9, 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4 или 2,5 г/кг массы тела субъекта и до 5, 4,9, 4,8, 4,7, 4,6, 4,5, 4,4, 4,3, 4,2, 4,1, 4,0, 3,9, 3,8, 3,7, 3,6, 3,5, 3,4, 3,3, 3,2, 3,1 или 3,0 г/кг массы тела субъекта, включая, в частности, указанные значения. Например, количество может составлять от 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30 или 40 и до 50, 40, 30, 25, 20, 15, 10, 9, 8, 7 или 6 г/кг массы тела субъекта, включая, в частности, указанные значения. Например, количество может быть выражено в международных единицах и составлять от 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20 или 25 МЕ/кг массы тела субъекта и до 30, 25, 20, 15, 109, 8, 7, 6, 5, 4, 3 или 2 МЕ/кг массы тела субъекта.
Например, аргинин вводят в количестве от 50, 60, 70, 80, 90, 100, 125, 150, 175, 200, 250, 300, 350, 400 или 450 мг/кг массы тела субъекта и до 500, 450, 400, 350, 300, 250, 200, 175, 150, 125, 100, 90, 80, 70 или 60 мг/кг массы тела субъекта, включая, в частности, указанные значения. Например, аргинин вводят в количестве от 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30 или 40 и до 50, 40, 30, 25, 20, 15, 10, 9, 8, 7 или 6 г/кг массы тела субъекта, включая, в частности, указанные значения.
Например, глутамин или лизин вводят в количестве от 50, 60, 70, 80, 90, 100, 125, 150, 175, 200, 250 или 300 мг/кг массы тела субъекта и до 350, 300, 250, 200, 175, 150, 125, 100, 90, 80, 70 или 60 мг/кг массы тела субъекта, включая, в частности, указанные значения.
Например, ацилированный стерил-β-глюкозид вводят в количестве от 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4 или 1,5 мг/кг массы тела субъекта и до 1,6, 1,5, 1,4, 1,3, 1,2, 1,1, 1, 0,9, 0,8, 0,7, 0,6, 0,5, 0,4, 0,3, 0,2 или 0,1 мг/кг массы тела субъекта, включая, в частности, указанные значения.
Все указанные дозы являются разовыми и их вводят предпочтительно 1 или 2 раза в сутки. Однако в зависимости от необходимости, определяемой врачом, частота введения может быть как уменьшена, так и увеличена. Например, если используется лекарственная форма с длительным высвобождением, частота введения может быть уменьшена до 1 раза в 2 суток, 1 раза в 3 суток, 1 раза в 4 суток, 1 раза в 5 суток, 1 раза в 6 суток или 1 раза в неделю. С другой стороны, частота может быть увеличена до более двух раз в сутки, например 3, 4 или 5 раз в сутки.
Длительность введения активных веществ или композиций по изобретению составляет предпочтительно от 10 до 60 суток, например от 10, 14, 21, 28 суток и/или до 56, 49, 42, 35, 30 суток. Безусловно, в зависимости от выраженности терапевтического эффекта и возможных побочных эффектов длительность лечения может быть как уменьшена, так и увеличена относительно указанных значений. Лечение может включать несколько курсов введения активных веществ или композиций по изобретению или их по существу постоянный прием.
Точная дозировка будет зависеть от цели лечения и должна определяться лечащим врачом с помощью известных рекомендаций. Количество терапевтического агента, которое является эффективным для облегчения какого-либо конкретного заболевания или состояния (также обозначено термином "терапевтически эффективное количество") может изменяться в соответствии с несколькими факторами, такими как статус заболевания, возраст и масса тела пациента и другими. Дозировка может при необходимости быть скорректирована непосредственно в процессе лечения в зависимости от выраженности терапевтического эффекта и побочных эффектов.
Количество соматотропина и/или ИФР-1, и/или их физиологических индукторов в композициях для применения согласно изобретению может варьировать в широких пределах в зависимости от желаемой лекарственной формы. В любом случае, содержание активных веществ в композициях по изобретению может быть подобрано исходя из примерных доз, указанных выше, таким образом, чтобы готовая лекарственная форма обеспечила наиболее легкое следование пациента предписанному ему режиму лечения.
Настоящее изобретение не ограничено объемом приведенных в качестве примера вариантов осуществления, которые предполагаются только в качестве иллюстраций или специфических аспектов настоящего изобретения. Различные модификации настоящего изобретения, дополнительные к раскрытым в данном документе, будут понятны специалистам с учетом имеющихся знаний в области техники. Предполагается, что все такие модификации охватываются прилагаемой формулой изобретения.
ПРИМЕРЫ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Пример 1. Животная модель рассеянного склероза
В качестве патоморфологической экспериментальной модели рассеянного склероза широко применяется экспериментальный аллергический энцефаломиелит (ЭАЭ) (Cross A.H., Stark J.L. 2005. Humoral immunity in multiple sclerosis and its animal model, experimental autoimmune encephalomyelitis // Immunol. Res. 32, N 1-3. P.8598).
Для индукции аутоиммунного энцефаломиелита у животных получают энцефалитогенную эмульсию (гомогенат гомологичного мозга животных в полном адъюванте Фрейнда), которую вводят в подушечки задних лап морских свинок (Абдурасулова И.Н., Сердюк С.Е., Гмиро В.Е. 2007. // Нейроиммунология. V, N 1. С.4-10).
Затем морским свинкам, разделенным на группы по 20 особей, в течение 8 недель ежедневно внутримышечно вводили лекарственные средства соответствующих активных веществ: 3,3 мг/мл соматотропина человека в растворимой смеси (опыты 1 и 2), 3,3 мг/мл ИФР-1 человека в растворимой смеси (опыт 3), интерферон-β человека в составе стандартного коммерчески доступного препарата Ребиф (опыт 4).
Для выявления клинической эффективности ежедневно оценивали неврологический статус животных. Регистрировали сроки начала заболевания, тяжесть неврологических нарушений, которую оценивали в баллах по клиническому индексу, и летальные случаи.
Клинический индекс (КИ) определяли по выраженности и распространенности неврологических проявлений: мышечная слабость одной конечности – 0,5 балла, парез – 1 балл, паралич – 1,5. При поражении нескольких конечностей баллы суммировали. При наличии дополнительных симптомов (парез сфинктеров) добавляли еще по 1 баллу за каждый симптом. Отсутствие видимых нарушений принимали за 0 баллов, в случае летального исхода – 6 баллов.
Для оценки эффективности нейропротективного действия исследуемого лекарственного средства на модели ЭАЭ для каждой группы животных рассчитывали следующие показатели:
1) общее число заболевших животных (в % от числа морских свинок в группе);
2) средний клинический индекс (КИ) на пике заболевания;
3) количество летальных случаев.
Все показатели сравнивали с соответствующими показателями животных контрольной группы (с индуцированным ЭАЭ, но без введения препаратов).
Результаты исследований развития у животных проявлений аллергического энцефаломиелита представлены в таблице и свидетельствуют о высокой потенциальной клинической эффективности препарата соматотропина в отношении рассеянного склероза.
Результаты.
В контрольной группе из двадцати морских свинок признаки заболевания наступили у шестнадцати животных (80%). Десять морских свинок погибли в течение трех недель наблюдения (50%).
Таблица 1. Влияние рекомбинантного соматотропина, ИФР-1 и интерферона-β на клинические проявления экспериментального аллергического энцефаломиелита
Группа
Лечение<img file="00000001.jpg" he="7" wi="1" img-content="undefined" img-format="jpg" />
Частота развития энцефаломиелита
Средний КИ на пике заболевания
Частота летального исхода
Контрольn равно 20
-
80%
5,2
50%
Опыт 1
соматотропин, 0,1 МЕ/кг
40%
2,2*
10%
Опыт 2
соматотропин, 0,2 МЕ/кг
30%
2,0*
20%
Опыт 3
ИФР-1, 0,3 мг/кг
40%
2,5*
20%
Опыт 4
интерферон-β-1b, 1 мкг/кг
70%
3,6*
35%
* достоверность различия с контролем при Р меньше 0,05.
Пример 2. Клиническое исследование
Соматотропин в количестве 4 МЕ вводили 16 субъектам со средним весом 70 кг, страдающему от рассеянного склероза. Введение композиции осуществляли ежедневно утром за 1 час до приема пищи. Перед лечением и на протяжении всего периода исследования проводили опрос субъектов, оценивая субъективную симптоматику по 10-балльной шкале, при этом оценка 10 соответствовала наиболее сильному проявлению симптома, а оценка 1 – наименее слабому проявлению симптома.
Результаты.
Таблица 2. Оценка изменения клинических симптомов у пациента с РС в результате терапии соматотропином, средний балл
Симтомы при рассеянном склерозе
Перед лечением
1-я неделя
2-я неделя
3-я неделя
4-я неделя
5-я неделя
Головокружение
7
5
5
4
3
2
Усталость к вечеру
10
8
7
5
4
5
Раздражительность
7
4
4
4
3
2
Депрессия
8
4
3
2
1
1
Насколько расправляются ноги при ходьбе
10
9
8
6
5
5
Как вообще переносится ходьба
10
10
9
7
6
5
Онемение конечностей
6
1
1
1
1
1
Как видно из результатов исследования, введение соматотропина в дозе приблизительно 0,05 МЕ/кг/сут значительно снижало степень проявления симптомов заболевания, начиная с первой недели лечения; к концу пятой недели лечения до минимума снижены проявления головокружения, раздражительности, депрессии, онемения конечностей, значительно снижены проявления симптомов, связанных с усталостью и ходьбой.