СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ ЧАСТОТЫ ИМПЛАНТАЦИИ ЭМБРИОНА У СУБЪЕКТА ЖЕНСКОГО ПОЛА, СТРАДАЮЩЕГО СИНДРОМОМ ПОЛИКИСТОЗНЫХ ЯИЧНИКОВ
METHOD FOR INCREASING THE FREQUENCY OF EMBRYO IMPLANTATION IN A FEMALE SUBJECT SUFFERING FROM POLYCYSTIC OVARIAN SYNDROME

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к области способов повышения частоты имплантации эмбрионов, а также лечения симптомов синдрома поликистозных яичников (PCOS).
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Европейской Ассоциацией Репродуктологов
Американским обществом репродуктивной медицины
Синдром поликистозных яичников (PCOS) представляет собой сложное и гетерогенное заболевание, при котором гинекологические нарушения сопутствуют метаболическим отклонениям. Для диагностики PCOS требуется два из трех согласованных  и в Роттердаме критериев: клинический и/или биохимический гиперандрогенизм, олиго- или ановуляция и поликистозная морфология яичников по УЗИ (Роттердамская рабочая группа по консенсусу PCOS, финансируемая ESHRE/ASRM 2004). Однако использование критериев, согласованных в Роттердаме, вероятно, повышает высокий показатель распространения PCOS, и в настоящее время PCOS является наиболее распространенной эндокринопатией у женщин, поражающей 7-14% женщин детородного возраста во всем мире (Bozdag et al., Hum Reprod. 2016 Dec;31(12):2841-2855).
Проявления гиперандрогении (угри, себорея, гирсутизм и андрогенная алопеция) и ожирение, обычно по мужскому типу, являются клиническими проявлениями PCOS, а также олигоменорея, вторичная аменорея и дисфункциональная метроррагия вследствие гиперплазии эндометрия. Для женщин с PCOS также характерно повышение параметров, связанных с сердечно-сосудистым риском, нарушением регуляции гормонов яичников (ответственных за появление кист) и повышенной резистентностью к инсулину.
Лечение направлено на коррекцию гиперандрогении, хронической ановуляции и метаболических изменений, связанных с инсулинорезистентностью и гиперинсулинизмом. В связи с чем, для нормализации инсулинорезистентности, применялись такие соединения, как метформин, троглитазон и инозит (D-хироинозит (DCI) или миоинозит (MI)).
В случае применения миоинозитола (MI), хотя он также был эффективен при лечении PCOS, требуемые дозы в 4 раза выше, чем применяемые дозы D-хироинозитола (DCI). MI является наиболее распространенным инозитолом в организме и является предшественником DCI, который синтезируется из MI посредством инсулинзависимой эпимеразы. Уровни преобразования специфичны для каждого органа, поэтому отношение MI/DCI изменяется от одного органа к другому.
На репродуктивном уровне, инозитол был обнаружен в овариальном фолликуле, а также, по-видимому, задействован в мейозе ооцитов. В яичнике у женщин с PCOS, в отличие от всех других тканей, наблюдается дефицит MI, сопровождающийся увеличением доли DMI. Было отмечено, что существует связь между добавлением в пищу MI и овуляцией и непланируемой беременностью. Действительно, в рандомизированных клинических исследованиях, репродуктивные переменные, такие как требуемое количество фолликулостимулирующего гормона (FSH), количество зрелых ооцитов и качество эмбрионов у пациентов с PCOS, подвергающихся репродуктивному лечению, были улучшены после лечения MI, а также нормализовались липидный профиль и избыточная масса (Papaleo E. et al., Fertik Steru 2009;91:1750-4; Ciotta K. et al., Eur Rev Med Pharma Col Sci 2011; 15509-14). Было показано, что добавки MI более эффективны при экстракорпоральном оплодотворении, чем добавки DCI (De Leo V. et al., Minerva Ginecol 2012; 64 (6):531-8). Это согласуется с ключевой ролью MI в качестве ооцитов. Более того, сообщалось, что DCI при высокой концентрации может оказывать негативное влияние на качество ооцитов. (Isabelle et al, Journal of Ovarian Research 2012, 5:14).
Исследования, проведенные с сочетанием MI/DCI для решения проблем фертильности, связанных с PCOS, осуществлялись с соотношением 40:1. Авторы рекомендуют использовать это соотношение исходя из плазматического соотношения стереоизомеров (Unfer V. et al., Expert Rev Clin Pharmacol. 2014; 7(5):623-31). Рекомендуется, чтобы количественная доля DCI была низкой, поскольку при PCOS в яичниках существует дефицит MI и избыточная продукция DCI вследствие нарушения регуляции эпимеразной активности. Более того, в предыдущем исследовании наблюдалось негативное влияние повышение доз на качество ооцитов (Isabella R. et al., J Ovarian Res. 2012 May 15;5(1):14). Это исследование показало, что введение DCI женщинам, страдающим PCOS, увеличивает количество незрелых ооцитов, уменьшает количество зрелых ооцитов MII и количество эмбрионов I степени.
Соответственно, в данной области до сих пор существует потребность в альтернативных и эффективных способах лечения проблем фертильности и способов повышения частоты имплантации эмбриона у субъектов женского пола, страдающих PCOS.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Авторы изобретения неожиданно обнаружили, что введение женщинам, страдающим PCOS, сочетания MI/DCI в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 значительно повышает частоту беременности вследствие нормализации фазы имплантации эмбрионов, несмотря на высокую долю DCI относительно MI. Кроме того, другой важный вывод заключается в том, что женщины, страдающие PCOS и в отношении которых применялась вспомогательная репродуктивная технология, имеют меньший риск подвергнуться гиперстимуляции яичников при лечении сочетанием MI/DCI в массовом соотношении в диапазоне от 1:1 до 9:1.
Таким образом, в первом аспекте изобретение относится к способу увеличения частоты имплантации эмбриона в матке, включающему введение композиции, содержащей миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно, субъекту женского пола, страдающему синдромом поликистозных яичников.
Изобретение также относится к способу предотвращения неудачной имплантации эмбрионов у субъекта женского пола, страдающего синдромом поликистозных яичников, включающему введение композиции, содержащей миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1, указанному субъекту.
В другом аспекте изобретение относится к способу повышения частоты наступления беременности, включающему введение композиции, содержащей миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно, субъекту женского пола, страдающему синдромом поликистозных яичников. В другом аспекте, изобретение относится к способу стимулирования беременности у субъекта женского пола, страдающего синдромом поликистозных яичников, включающему введение указанному субъекту женского пола композиции, содержащей миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно.
В другом аспекте, изобретение относится к композиции, содержащей миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно, для применения в лечении или профилактике синдрома поликистозных яичников у субъекта женского пола.
В другом аспекте, изобретение относится к композиции, содержащей миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно, для применения в лечении или профилактике бесплодия у субъекта женского пола, страдающего синдромом поликистозных яичников.
В другом аспекте, изобретение относится к композиции, содержащей миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно, для применения в профилактике или снижении риска развития синдрома гиперстимуляции яичников у субъекта женского пола, страдающего синдромом поликистозных яичников и подвергнутого процедуре стимуляции яичников.
В другом аспекте изобретение относится к мягкой капсуле, содержащей:
а) мягкую капсульную оболочку и
b) фармацевтическую композицию, содержащую миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно.
Краткое описание чертежей
Фигура 1.
.
Схема исследования
Подробное описание изобретения
Способы
В одном аспекте, изобретение относится к способу повышения частоты имплантации эмбриона в матке, включающему введение композиции, содержащей миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно, субъекту женского пола, страдающему синдромом поликистозных яичников.
Изобретение также относится к способу предотвращения неудачной имплантации эмбрионов у субъекта женского пола, страдающего синдромом поликистозных яичников, включающему введение указанной женщине композиции, содержащей миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1.
Профилактика относится к снижению восприимчивости к клиническому состоянию, в частности к неудачной имплантации эмбрионов.
Используемый в настоящем документе термин “эмбрион” включает бластулу, бластоцисту, оплодотворенную яйцеклетку или организм на ранних стадиях развития, в частности до того, как он достигнет различимо узнаваемой формы, которая должна быть имплантирована реципиенту женского пола.
Термин “имплантация” используется для описания процесса прикрепления и инвазии в эндометрий матки бластоцисты (продукт зачатия) у плацентарных животных. “Частота имплантации” соответствует проценту эмбрионов, которые успешно подверглись имплантации, по сравнению с количеством эмбрионов, перенесенных в данный период. Практически эта частота обычно определяется как количество внутриматочных гестационных мешков, наблюдаемых с помощью трансвагинальной ультрасонографии, деленное на количество перенесенных эмбрионов. В качестве иллюстративного примера, сообщалось, что частота имплантации при экстракорпоральном оплодотворении (ЭКО) составляет 37% в материнском возрасте, младше 35 лет, 30% в возрасте от 35 до 37 лет, 22% в возрасте от 38 до 40 лет и 12% в возрасте от 41 до 42 лет.
Используемый в настоящем изобретении термин “повышенная частота имплантации” относится к более высокому проценту эмбрионов, которые успешно имплантируются обработанному субъекту в соответствии с изобретением, по сравнению с процентом эмбрионов, которые успешно имплантируются необработанному субъекту. В предпочтительном варианте осуществления, частота имплантации увеличивается, по меньшей мере, на 5%, по меньшей мере, на 10%, по меньшей мере, на 20%, по меньшей мере, на 30%, по меньшей мере, на 40%, по меньшей мере, на 50%, по меньшей мере, на 60%, по меньшей мере, на 70% , по меньшей мере, на 80%, по меньшей мере, на 90%, по меньшей мере, на 100%, по меньшей мере, на 110%, по меньшей мере, на 120%, по меньшей мере, на 130%, по меньшей мере, на 140%, по меньшей мере, на 150%, по меньшей мере, на 160%, по меньшей мере, на 170% не менее на 180% или больше.
Имплантация согласно изобретению может представлять собой естественную имплантацию или имплантацию с применением вспомогательной репродуктивной технологии, такой как искусственная инсеминация или вспомогательная репродуктивная технология (ART), экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО), интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ICSI) или после трансплантации свежего или замороженного или иным образом сохраненного эмбриона(ов) и гамет, перенос гаметы в маточную трубу (GIFT) или перенос зиготы в маточную трубу (ZIPT). В предпочтительном варианте осуществления, имплантация обусловлена экстракорпоральным оплодотворением (ЭКО). В предпочтительном варианте осуществления, вспомогательная репродуктивная технология представляет собой ICSI.
Используемый в настоящем документе термин “неудачная имплантации” относится к случаю, когда эмбрионы подходящего качества не могут имплантироваться после естественного оплодотворения или нескольких циклов экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). Принимая во внимание существующий уровень успешности проведения процедур ЭКО и среднее число эмбрионов, перенесенных в каждом цикле, неудачная имплантация обычно определяется как неудачная имплантации, по крайней мере, в трех последовательных попытках осуществления ЭКО, при которых в каждом из них переносится 1-2 эмбриона высокого качества в каждом цикле.
Используемое в настоящем документе “экстракорпоральное оплодотворение”, ЭКО, относится к процессу оплодотворения, при котором яйцеклетка объединяется со спермой вне организма, in vitro. Процедура ЭКО выполняется общеизвестным способом. Подробная информация об извлечении ооцитов из фолликулов в яичнике, культивировании выделенных ооцитов, используемой культуральной среде, оплодотворении спермой и переносе эмбриона в маточную трубу, приведена в литературе, например, в описании к патенту США №5693534.
В результате осуществления способа изобретения частота возникновения беременности повышается. Следовательно, изобретение также относится к способу повышения частоты наступления беременности, включающему введение композиции, содержащей миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно, субъекту женского пола, страдающему синдромом поликистозных яичников. Все предпочтительные варианты осуществления способа повышения имплантации эмбрионов также применяются к способу предотвращения неудачной имплантации эмбрионов и к способу повышения частоты наступления беременности.
В предпочтительном варианте осуществления способа повышения частоты наступления беременности, композиция, содержащая миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно, не содержит фолиевую кислоту.
“Улучшенная частота наступления беременности” включает положительный исход беременности или улучшенную перинатальную выживаемость или общую жизнеспособность после искусственной инсеминации спермой или естественной инсеминации или после трансплантации свежих или замороженных или иным образом сохраненных эмбрионов. Частота наступления беременности может быть определена различными способами, в иллюстративном неограничивающем примере может основываться на сердцебиении плода, наблюдаемом при ультразвуковом исследовании. В предпочтительном варианте осуществления частота наступления беременности повышается на 5%, 10%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, по крайней мере, на 60%, по крайней мере, на 70%, по крайней мере, на 80%, по крайней мере, на 90%, по крайней мере, на 100%, по крайней мере, на 110%, по крайней мере, на 120%, по крайней мере, на 130%, по крайней мере, на 140%, по крайней мере, на 150%, по крайней мере, на 160%, по крайней мере, на 170%, по крайней мере, на 180% или больше. В более предпочтительном варианте осуществления, способ по изобретению относится к способу повышения частоты наступления беременности, по крайней мере, на 50%.
В другом предпочтительном варианте осуществления, способ по изобретению относится к способу повышения частоты наступления беременности в результате проведения ЭКО.
В соответствии со способом по изобретению, композицию следует вводить субъекту женского пола, страдающему синдромом поликистозных яичников.
Термин “субъект женского пола” относится к самке млекопитающего, включая, но ими не ограничивается, отряд грызунов, например мышей; отряд зайцеобразных, таких как кролики; в частности, отряд плотоядные, включая семейство кошачьи (кошек) и семейство псовых (собак); еще более конкретно, отряд парнокопытных, крупный рогатый скот (коровы) и свинообразных (свиньи); и отряд непарнокопытных, включая представителей семейства лошадиных (лошади); и в особенности отряд приматов, цебидов и Simoids (обезьяны) и антропоидов (человек и человекообразные обезьяны). Млекопитающим в соответствии с предпочтительными вариантами осуществления является человек.
Используемый в настоящем документе “синдром поликистозных яичников” относится к часто встречающийся проблеме здоровья, вызванной дисбалансом репродуктивных гормонов. Признаки и симптомы PCOS включают нерегулярные менструальные циклы или их отсутствие, меноррагия, избыточный волосяной покров на теле и лице, угри, боли в области таза, трудность забеременеть и участки с толстой, темной, бархатистой кожей. Сопутствующие состояния включают диабет 2 типа, ожирение, синдром обструктивного апноэ во сне, болезнь сердечно-сосудистой системы, расстройства настроения и рак эндометрия.
2
В предпочтительном варианте осуществления, субъект женского пола находится в репродуктивном возрасте, между менархе и менопаузой. В другом предпочтительном варианте осуществления, у субъекта женского пола лечат стимуляцию яичников и продукцию ооцитов. В другом предпочтительном варианте осуществления, субъект женского пола представляет собой пациента - человека женского пола. В другом предпочтительном варианте осуществления, субъект женского пола имеет индекс массы тела (BMI) ниже 30 кг/м, соответственно субъект женского пола не показывает ожирения. В другом предпочтительном варианте осуществления, пациента женского пола лечат фолиевой кислотой.
В другом предпочтительном варианте осуществления, субъект женского пола подвергается стимуляции яичников после введения композиции по способу изобретения.
Используемый в настоящем документе термин “лечение стимуляции яичников” относится к применению лекарственных средств для стимуляции роста одного или нескольких фолликулов. Могут использоваться различные лекарства, такие как цитрат кломифена, гонадотропины (FSH и LH) или хорионические гонадотропины человека (hCG). В предпочтительном варианте осуществления, лечение стимуляции яичников представляет собой антагонист гонадотропин-рилизинг гормона и ФСГ.
Композиция, используемая в способе по изобретению, содержит миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно. Настоящее изобретение охватывает все возможные соотношения в диапазоне от 1:1 до 9:1.
Используемый в настоящем документе термин “композиция” относится к любой смеси химически связанных веществ, содержащей компоненты по изобретению, то есть миоинозитол и D-хироинозитол. Следует понимать, что композиция может быть получена в виде отдельного компонента или, альтернативно, она может быть получена в виде отдельных соединений, которые затем могут быть объединены с целью их совместного введения. Композиции по изобретению также могут быть представлены в виде набора компонентов, в котором каждый из компонентов получен отдельно, но упакован в один контейнер. Термин “композиция” по изобретению включает все типы твердых, полутвердых и жидких композиций. Термин “композиция” также включает питательную композицию и БАД.
Термин “питательная композиция” по настоящему изобретению относится к продукту, который, независимо от предоставления питательных веществ субъекту, который их принимает, оказывает благоприятное воздействие на одну или несколько функций организма, обеспечивая лучшее состояние здоровья и оздоровление. Соответственно, такую питательную композицию можно использовать для профилактики и/или лечения заболевания или фактора, вызывающего заболевание, или в способе по изобретению. Следовательно, термин “питательная композиция” по настоящему изобретению может использоваться в качестве синонима для функционального пищевого продукта или пищевого продукта для конкретного лечебного питания или диетологических задач. Питательная композиция имеет внешний вид, аналогичный обычному пищевому продукту, и употребляется как часть обычного рациона питания.
Под “БАД”, биологически активной добавкой, подразумевается продукт, изготовленный из пищевых продуктов, при этом его можно найти в форме таблеток, порошков и других лекарственных форм, обычно не ассоциирующихся с пищевыми продуктами и обладающих полезными свойствами для лечения и/или профилактики заболеваний.
Используемый в настоящем документе термин “миоинозитол”, MI, (прежние названия мезо-инозитол или i-инозитол или цис-1,2,3,5-транс-4,6-циклогексанегексол) относится к наиболее широко распространенной стероизомерной форме инозитола в природе.
Используемый в настоящем документе термин “D-хироинозитол”, DCI, 1D-хироинозитол относится к цис-1,2,4-транс-3,5,6-циклогексангексолу 1D-1,2,4/3,5,6-циклогексангексолу, компонент инозитол-фосфогликан, который усиливает работу инсулина в организме.
В предпочтительном варианте осуществления, композиция для введения согласно способу увеличения частоты имплантации эмбриона содержит миоинозитол:D-хироинозитол в диапазоне массовых соотношений от 1:1 до 3:1, более предпочтительно 1:1, 1,5:1, 2:1, 2,5:1 или 3:1. В другом предпочтительном варианте осуществления, миоинозитол:D-хироинозитол находится в диапазоне массовых соотношений от 3:1 до 5:1, более предпочтительно 3:1, 3,5:1, 4:1, 4,5:1 или 5:1. В другом предпочтительном варианте осуществления миоинозитол:D-хироинозитол находится в диапазоне массовых соотношений от 5:1 до 7:1, более предпочтительно 5:1, 5,5:1, 6:1, 6,5:1 или 7:1. В другом предпочтительном варианте осуществления, миоинозитол:D-хироинозитол находится в диапазоне массовых соотношений от 7:1 до 9:1, более предпочтительно, 7:1, 7,5:1, 8:1, 8,5:1 или 9:1.
В другом предпочтительном варианте осуществления, миоинозитол:D-хироинозитол находится в диапазоне массовых соотношений от 2:1 до 5:1, более предпочтительно, от 2:1, 2,5:1, 3:1, 3,5:1, 4:1, 4,5:1 и 5:1. В другом предпочтительном варианте осуществления, массовое соотношение миоинозитол:D-хироинозитол составляет 3,1: 1, 3,2:1, 3,3:1, 3,4:1, 3,5:1, 3,6:1, 3,7:1, 3,8:1 или 3,9:1. В более предпочтительном варианте осуществления, массовое соотношение миоинозитол:D-хироинозитол составляет 3,66:1.
В другом предпочтительном варианте осуществления, композиция для введения в соответствии со способами по изобретению состоит из миоинозитола и D-хироинозитола в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно в качестве активных веществ.
Используемый в настоящем документе термин “активное вещество или активный ингредиент” относится к лекарственным средствам или химическим веществам в фармацевтическом препарате, которые оказывают фармакологическое действие, не включая фармацевтическое вспомогательное вещество или носитель.
Специалист в данной области техники может понять, что желаемое массовое соотношение миоинозитол:D-хироинозитол может быть получено с использованием различных количеств миоинозитола и D-хироинозитола, все которые включены в настоящее изобретение. В предпочтительном варианте осуществления способа по изобретению, содержание миоинозитола и D-хироинозитола в композиции составляет 550 мг миоинозитола и 150 мг D-хироинозитола или 1100 мг миоинозитола и 300 мг D-хироинозитола. В другом предпочтительном варианте осуществления, содержание миоинозитола составляет 1000-2000 мг, и содержание D-хироинозитол составляет 300-500 мг.
В другом предпочтительном варианте осуществления, композиция для введения в соответствии со способами по изобретению содержит от 1000 до 2000 мг миоинозитола. В другом предпочтительном варианте осуществления, композиция для введения в соответствии со способами по изобретению содержит от 300 до 500 мг D-хироинозитола. В другом предпочтительном варианте осуществления, содержание миоинозитола и D-хироинозитола в композиции составляют 1000 мг миоинозитола и 150 мг D-хироинозитола. В другом предпочтительном варианте осуществления, содержание миоинозитола и D-хироинозитола в композиции составляют 2000 мг миоинозитола и 300 мг D-хироинозитола.
Композиция для введения в способе по изобретению может быть в форме фармацевтической композиции, содержащей миоинозитол:D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1, соответственно, с фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами и/или носители для получения фармацевтической композиции.
Используемая в настоящем документе “фармацевтическая композиция” относится к композициям и молекулярным веществам, которые являются физиологически переносимыми и обычно не вызывают аллергическую реакцию или подобную неблагоприятную реакцию, такую как желудочные расстройства, головокружение и тому подобное, при введении человеку или животному.
Термин “вспомогательное вещество” или “носитель” относится к носителю, разбавителю или адъюванту, который вводят вместе с активным ингредиентом. Предпочтительно термин “фармацевтически приемлемый” означает, что вещество одобрено регулирующим органом штата или федерального правительства и/или включено в фармакопею США и/или другую общепризнанную фармакопею для применения у животных и, в частности, человека.
Подходящие фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества включают, например, воду, солевые растворы, спирт, масла, включая масла, получаемые из нефтепродуктов, масла животного, растительного или синтетического происхождения, такие как арахисовое масло, соевое масло, минеральное масло, подсолнечное масло, кунжутное масло и тому подобное; полиэтиленгликоли, желатин, лактоза, амилоза, стеарат магния, тальк, поверхностно-активные вещества, кремниевая кислота, вязкий парафин, глицерин, парфюмерное масло, моноглицериды и диглицериды жирных кислот, петроэтральные сложные эфиры жирных кислот, гидроксиметилцеллюлоза, поливинилпирролидон и тому подобное; софтизан, воски, такие как пчелиный клеверный желтый воск, лецитины, такие как лецитин подсолнечника.
Питательные композиции или БАДы, используемые в способе по изобретению, могут объединяться с обычными вспомогательными веществами и адъювантами для пероральных композиций или пищевых добавок, такими как, без ограничений, жировые компоненты, водные компоненты, увлажнители, консерванты, структурирующие вещества, ароматизаторы, антиоксиданты и общеизвестные пигменты в пищевой отрасли.
Композиции, содержащие миоинозитол:D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно, или фармацевтические композиции могут находиться в любой фармацевтической форме введения, которая считается соответствующей выбранному способу введения, например, системному (например, внутривенному, подкожному, внутримышечному введению), пероральному, парентеральному или местному введению, для которого она будет включать фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, необходимые для обеспечения желаемого способа введения. Предпочтительным способом доставки является пероральный. В другом предпочтительном варианте осуществления способ доставки является вагинальным. Кроме того, также возможно вводить композицию по изобретению, как определено выше, интраназально или сублингвально, что обеспечивает системное введение неагрессивным образом. Кроме того, можно вводить композицию вагинальным способом введения. Предпочтительными формами введения являются вагинальные суппозитории, вагинальные таблетки, вагинальные овулы, вагинальные кольца или полутвердые вагинальные препараты, такие как мази, кремы или гели.
В случаях введения, отличных от внутривенного, композиция может содержать незначительные количества смачивающих или эмульгирующих веществ или рН-буферных средств. Композиция может представлять собой жидкий раствор, суспензию, эмульсию, гель, полимер или состав с замедленным высвобождением. Композиция может быть получена с использованием обычных связующих и носителей, известных в данной области. Композиции могут включать стандартные носители, такие как фармацевтической степени чистоты маннит, лактозу, крахмал, стеарат магния, сахарид натрия, целлюлозу, карбонат магния и т.д., инертные носители, обладающие общепризнанной функциональностью при производстве фармацевтических препаратов. Различные системы доставки хорошо известны и могут быть использованы для введения композиции по настоящему изобретению, включая инкапсуляцию в липосомы, микрочастицы, микрокапсулы и тому подобное.
При необходимости композиция содержится в композиции, также включающей солюбилизирующее средство и местный анестетик, для облегчения любой боли в месте инъекции. Обычно, ингредиенты поставляются либо по отдельности, либо в смешанном виде в стандартной лекарственной форме, например, в виде сухого лиофилизированного порошка или безводного концентрата в герметически закрытом контейнере, таком как ампула или саше, с указанием количества активного вещества. При необходимости введения композиции вводить путем инфузии, композиция может быть дозирована посредством сосуда для инфузии, содержащего стерильную воду или физиологический раствор фармацевтической степени чистоты. При введении композиции путем инъекции, может быть предоставлена ампула, содержащая стерильную воду для инъекции или физиологический раствор, для того, чтобы ингредиенты могли быть смешаны перед введением.
Твердые лекарственные формы для перорального введения могут включать обычные капсулы, капсулы с замедленным высвобождением, обычные таблетки, таблетки с замедленным высвобождением, таблетки с модифицированным высвобождением, жевательные таблетки, сублингвальные таблетки, шипучие таблетки, пилюли, суспензии, порошки, гранулы и гели. В этих твердых дозированных формах активные соединения могут быть смешаны, по меньшей мере, с одним инертным вспомогательным веществом, таким как сахароза, лактоза или крахмал. Такие лекарственные формы могут также содержать, например в обычной практике, дополнительные вещества, отличные от инертных разбавителей, например, смазывающие вещества, такие как стеарат магния. В случае применения капсул, таблеток, шипучих таблеток и пилюль, лекарственные формы также могут содержать буферные вещества. Таблетки и пилюли могут быть получены с энтеросолюбильным покрытием. Кроме того, лекарственные формы для перорального введения питательной композиции или БАД, используемые в способе по изобретению, могут быть в форме питательных напитков, пудингов, кондитерских изделий (то есть, конфет), мороженого, замороженных кондитерских изделий или незапеченных экструдированных пищевых продуктов. Пищевая добавка может быть получена в виде закуски, которая будет употребляться в виде части рациона питания.
Жидкие лекарственные формы для перорального введения могут включать фармацевтически приемлемые эмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры, содержащие инертные разбавители, обычно используемые в способах получения, такие как вода. Эти композиции могут также включать адъюванты, такие как смачивающие вещества, эмульгирующие и суспендирующие вещества, а также подсластители, ароматизаторы и отдушки.
Инъецируемые препараты, например, стерильные инъецируемые водные или масляные суспензии, могут быть получены известным способом с использованием подходящих диспергирующих веществ, смачивающих агентов и/или суспендирующих веществ. В число приемлемых носителей и растворителей, которые можно использовать, включены вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Также в качестве растворителей или суспендирующих сред обычно используются стерильные масла.
Для местного применения, композиция по изобретению может быть получена в виде кремов, гелей, лосьонов, жидкостей, помад, распыляемых растворов, дисперсий, твердых батончиков, эмульсий, микроэмульсий и аналогичных веществ, которые могут быть получены обычными способами, в которых используются подходящие вспомогательные вещества, такие как, например, эмульгаторы, поверхностно-активные вещества, загустители, красители и сочетание двух или более этих веществ.
Кроме того, композицию по изобретению, как определено выше, или фармацевтически приемлемую композицию для применения в соответствии с настоящим изобретением можно вводить в форме трансдермальных пластырей или устройств для ионтофореза и электропорации. В одном из вариантов осуществления, композицию по изобретению вводят посредством трансдермального пластыря, например, посредством трансдермального пластыря с замедленным высвобождением. Подходящие трансдермальные пластыри известны в данной области.
Некоторые системы доставки лекарственных средств хорошо известны и могут быть использованы для введения композиции по изобретению, включая, например, инкапсуляцию в липосомы, микропузырьки, эмульсии, микрочастицы, микрокапсулы и тому подобное. Требуемая доза может быть введена в единичной стандартной лекарственной форме или в форме с замедленным высвобождением.
Формы с замедленным высвобождением и соответствующие вещества и способы их получения описаны, например, в “Modified-Release Drug Delivery Technology”, Rathbone, M. J. Hadgraft, J. and Roberts, M. S. (eds.), Marcel Dekker, Inc., New York (2002), “Handbook of Pharmaceutical Controlled Release Technology”, Wise, D. L. (ed.), Marcel Dekker, Inc. New York, (2000). В одном из вариантов осуществления изобретения, перорально вводимая форма композиции, используемая в соответствии с изобретением, находится в форме замедленного высвобождения, дополнительно включающей, по меньшей мере, одно покрытие или матрицу. Покрытие или матрица для замедленного высвобождения включают, без ограничения, природные, полусинтетические или синтетические нерастворимые в воде, модифицированные полимеры, воски, жиры, жирные спирты, жирные кислоты, природные полусинтетические или синтетические пластификаторы или сочетание двух или более этих веществ. Энтеросолюбильные покрытия могут наноситься с использованием обычных способов, известных специалистам в данной области техники, как описано, например, в Johnson, J. L., "Pharmaceutical tablet coating", Coatings Technology Handbook (Second Edition), Satas, D. and Tracton, A. A. (eds), Marcel Dekker, Inc. New York, (2001), Carstensen, T., "Coating Tablets in Advanced Pharmaceutical Solids", Swarbrick, J. (ed.), Marcel Dekker, Inc. New York (2001), 455-468.
В предпочтительном варианте осуществления, композиция, используемая в способе изобретения, находится в твердой лекарственной форме для перорального введения.
В более предпочтительном варианте осуществления, композиция для использования в способе по изобретению может быть в форме порошков, гранул, гранулятов, саше, таблеток, капсул, шипучих таблеток, жевательных таблеток, пилюль, крахмальных капсул, таблеток с немедленным высвобождением и таблеток с модифицированным высвобождением, а также текучих или жидких лекарственных формах, таких как, например, растворы, суспензии, эмульсии, дисперсии и смеси. Кроме того, композиция может быть в форме порошков, диспергируемых порошков или гранул, подходящих для приготовления водной суспензии путем добавления жидкой среды, такой как, например, водная среда. В еще более предпочтительном варианте осуществления, композиция, используемая в способе по изобретению, находится в форме капсулы, более конкретно, в мягкой капсуле.
Термин “мягкая капсула” хорошо известен в данной области техники и относится к единичной стандартной твердой лекарственной форме, состоящей из жидкого или полутвердого наполнителя, окруженного цельной герметически закрытой эластичной внешней оболочкой. Капсула имеет мягкую оболочку, в отличие от твердых капсул, которые состоят из жесткой оболочки. В зависимости от полимера, образующего оболочку, их можно подразделить на две категории, а именно: мягкие желатиновые капсулы или “гелевые капсулы” и нежелатиновые мягкие капсулы.
Мягкая оболочка капсулы обычно состоит из желатина, воды и пластификатора в различных сочетаниях, что придает стенкам (оболочке) эластичность и мягкость. Мягкие капсулы обычно формируются целиком, в отличие от твердых капсул, которые состоят из оболочки, состоящей из двух частей, которые соединяются вместе.
В предпочтительном варианте осуществления, мягкая капсула содержит желатиновую оболочку.
В одном из вариантов осуществления, оболочка мягкой капсулы содержит желатин и пластификатор, выбранный из группы, состоящей из глицерина, сорбита, пропиленгликоля, полиэтиленгликоля, дибутилсебацината, диэтилфталата, диметилфталата, триацетина, трибутилцитрата, триэтилцитрата и их смесей; предпочтительно пластификатор, выбранный из группы, состоящей из глицерина, сорбита и их смесей.
Желатины, используемые для изготовления мягких оболочек капсул, одобрены местными властями для фармацевтического или пищевого применения. Эти желатины, в основном, бывают двух разных типов: щелочные (тип В) или кислотные (тип А) со средней прочностью геля (средний “Блум”, например 150-200 грамм по Блуму). Оба типа могут использоваться в сочетании или отдельно. Предпочтительно используется сочетание желатина типа A и желатина типа B. Примерами желатинов типа B являются костный желатин щелочной экстракции и шкурный желатин щелочной экстракции. Примерами желатинов типа А являются желатин из свиной шкуры, желатин из шкур животных кислотной экстракции и желатин рыбного происхождения.
В одном из вариантов осуществления, мягкая оболочка капсулы дополнительно содержит фармацевтически приемлемое затемняющее вещество и/или фармацевтически приемлемый краситель. Затемняющие вещества добавляют к мягкой оболочке капсулы, чтобы сделать оболочку непрозрачной и, таким образом, защитить мягкое наполнение капсулы, то есть фармацевтическую композицию, от света. Подходящие затемняющие вещества известны в данной области и включают диоксид титана, тальк и тому подобное. Красители добавляют к мягкой оболочке капсулы, чтобы придать оболочке желаемый цвет. Подходящие красители известны в данной области техники и включают желтый “солнечный закат” FCF (E-110), индигокармин (E-132), эритрозин (E-127), хинолиновый желтый (E-104), оксиды железа E-172 желтого или коричневого цвета, диоксид титана Е-171 и тому подобное.
В дополнительном варианте осуществления, композиция, используемая в соответствии с изобретением, дополнительно содержит кальций или его фармацевтически приемлемое производное, предпочтительно ионы кальция (Ca2+). Кальций и его фармацевтически приемлемые производные относятся к любому фармацевтически приемлемому источнику кальция или ионов кальция, таким как фармацевтически приемлемые соли кальция, гидроксид кальция и гидроксиапатит. Примерами указанных фармацевтически приемлемых солей кальция являются карбонат кальция, хлорид, гексагидрат хлорида, цитрат, формиат, глицинат, бисглицинат, глюкогептонат, глюконат, глюконолактат, глутамат, глицерофосфат, гидрофосфат, лактат, лактобионат, лактофосфат, левулинат, олеат, одноосновный или трехосновный фосфат, пидолат, сульфат. Предпочтительно ион кальция или кальция предоставляется в виде глицината кальция, бисглицината кальция, гидроксида кальция или их смесей. Более предпочтительно ион кальция или кальция предоставляется в виде глицината кальция, бисглицината кальция или их смесей.
В дополнительном варианте осуществления, композиция по изобретению дополнительно содержит железо или его фармацевтически приемлемое производное; витамин В12; витамин B9 (также известный как фолиевая кислота или фолат), витамин D, левомефолиевую кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль; и/или незаменимые ненасыщенные жирные кислоты или их смеси.
Железо и его производные относятся к любому фармацевтически приемлемому источнику железа, такому как ионы железа (Fe2+ и/или Fe3+), который может быть представлен в виде фармацевтически приемлемых солей железа; и элементарное железо, которое может быть предоставлено в виде металлопротеина или координационного комплекса, где железо (Fe(III) или Fe(II)) координируется азотными, кислородными или серными центрами, принадлежащими аминокислотным остаткам белка или другого фармацевтически приемлемого органического соединения. Примерами указанных фармацевтически приемлемых солей железа являются соли двухвалентного железа и соли трехвалентного железа, предпочтительно такие, как цитрат аммония железа, фосфат железа, пирофосфат железа, ферритин, феррохолинат, аскорбат железа, аспартат железа, хлорид железа, сульфат железа, тартрат железа, фумарат железа, глюконат железа, глюцептат железа, глицин сульфата железа, лактат железа, оксалат железа и сукцинат железа. Примерами указанных металлопротеинов железа или координационных комплексов являются глицинатный комплекс железа, глюкозный комплекс железа, фруктозный комплекс железа, полимальтозный комплекс железа и сахарозный комплекс железа.
Для использования в настоящем изобретении, композицию по настоящему изобретению вводят в эффективном количестве.
Термин “эффективное” количество или “терапевтически эффективное количество” лекарственного средства или фармакологически активного вещества означает нетоксичное, но достаточное количество лекарственного средства или вещества для обеспечения желаемого эффекта.
Даже при том, что индивидуальные потребности изменяются, определение оптимальных диапазонов эффективных количеств композиции по изобретению относится к общему опыту специалистов в данной области. Обычно необходимая для обеспечения эффективного количества такого соединения доза, которая может быть скорректирована специалистом в данной области, будет изменяться в зависимости от возраста, состояния здоровья, физической формы, пола, режима питания, массы пациента, частоты лечения и характера и степени патологии или заболевания, состояния здоровья пациента, способа введения, фармакологических факторов, таких как активность, эффективность, фармакокинетический и токсикологический профиль конкретной используемой композиции, если применяется системная доставка лекарственного средства, а также если соединение вводят как часть сочетания лекарственных средств.
Эффективное количество композиции по изобретению может изменяться в широких пределах и, обычно, будет изменяться в зависимости от конкретных обстоятельств применения, продолжительности воздействия и других факторов.
В предпочтительном варианте осуществления, если композиция содержит 550 мг миоинозитола и 150 мг D-хироинозитола и субъектом женского пола является человек, то композицию вводят два раза в сутки, а если композиция содержит 1100 мг миоинозитола и 300 мг D-хироинозитол и пациентом женского пола является человек, то композицию вводят один раз в сутки.
В предпочтительном варианте осуществления способов по изобретению, композицию вводят, по меньшей мере, в течение 12 недель.
Медицинские применения
В другом аспекте изобретение относится к композициям, содержащим миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно, для применения в лечении или профилактике синдрома поликистозных яичников у субъекта женского пола (первое медицинское применение).
Альтернативно, изобретение относится к способу лечения или профилактики синдрома поликистозных яичников, включающему введение композиции, содержащей миоинозитол и D-хироинозитол, в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно, субъекту женского пола, нуждающемуся в лечении.
Альтернативно, изобретение относится к композиции, содержащей миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно, для получения лекарственного средства для лечения или профилактики синдрома поликистозных яичников у субъекта женского пола.
В другом аспекте изобретение относится к композициям, содержащим миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно, для применения в лечении или профилактике бесплодия у субъекта женского пола, страдающего синдромом поликистозных яичников (второе медицинское применение).
Альтернативно, изобретение относится к способу лечения или профилактики бесплодия у пациента, страдающего синдромом поликистозных яичников, включающему введение композиции, содержащей миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно, субъекту женского пола, нуждающемуся в лечении.
Альтернативно, изобретение относится к композициям, содержащим миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно, для получения лекарственного средства для лечения или профилактики бесплодия у субъекта женского пола, страдающего синдромом поликистозных яичников.
Используемый в настоящем документе термин “бесплодие” относится к неспособности женщины к репродукции естественным образом. В частности, это заболевание репродуктивной системы, характеризуемое неспособностью достичь клинической беременности после 12 и более месяцев регулярной незащищенной половой жизни (при этом отсутствуют другие причины, например, грудное вскармливание или послеродовая аменорея). Бесплодие может быть вызвано несколькими причинами. В предпочтительном варианте осуществления, субъект женского пола, подлежащий лечению, демонстрирует отсутствие имплантации эмбриона.
В другом аспекте, изобретение относится к композиции, содержащей миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно, для применения в профилактике или снижении риска развития синдрома гиперстимуляции яичников у субъекта женского пола, страдающего синдромом поликистозных яичников и подвергшегося процедуре стимуляции яичников (третье медицинское применение).
Альтернативно, изобретение относится к применению композиции, содержащей миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно, в получении лекарственного средства для профилактики или снижения риска развития синдрома гиперстимуляции яичников у субъекта женского пола, страдающего синдромом поликистозных яичников и подвергшегося процедуре стимуляции яичников.
Альтернативно, изобретение относится к способу профилактики или снижения риска возникновения синдрома гиперстимуляции яичников у субъекта женского пола, страдающего синдромом поликистозных яичников и подвергшегося процедуре стимуляции яичников, причем способ включает введение композиции, содержащей миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении между от 1:1 до 9:1 соответственно, пациенту, нуждающемуся в таком лечении.
Используемый в настоящем документе “синдром гиперстимуляции яичников” или OHSS относится к медицинскому состоянию, которое может возникнуть у некоторых женщин, которые принимают лекарства от бесплодия для стимуляции созревания яйцеклетки. Для OHSS характерно наличие множества лютеинизированных кист в яичниках, что приводит к увеличению яичника и вторичным осложнениям. Основным признаком клинически значимого OHSS является развитие гиперпроницаемости сосудов и, как следствие, перемещение жидкости в третье пространство. Синдром гиперстимуляции яичников, в частности, ассоциирован с введением гормона - хорионического гонадотропина человека (hCG), который используется для индукции окончательного созревания ооцитов и/или стимулирования высвобождения ооцитов. Риск дополнительно увеличиватся при многократных дозах hCG после овуляции и в случае, если процедура приводит к беременности.
В предпочтительном варианте осуществления, субъект женского пола подвергается лечению стимуляции яичников, более предпочтительно перед медицинским применением изобретения. В более предпочтительном варианте осуществления, средство для лечения стимуляции яичников представляет собой антагонист гонадотропин-рилизинг гормона и/или ФСГ (FSH).
Используемые в настоящем документе термины “лечить”, “лечение” или “обработка” относятся к уменьшению вероятности возникновения определенного заболевания или расстройства, уменьшению возникновения определенного заболевания или расстройства и/или снижению тяжести определенного заболевания или расстройства, предпочтительно, до такой степени, при которой субъект больше не испытывает дискомфорт и/или обусловленное им нарушение работоспособности. Например, “лечение” может относиться к способности композиции по изобретению, при введении субъекту, предотвращать возникновение определенного заболевания или расстройства и/или лечить или ослаблять симптомы, признаки или причины определенного заболевания. “Лечение” также относится к уменьшению или ослаблению, по крайней мере, одного клинического симптома и/или ингибированию или задержке прогрессирования состояния и/или предотвращению или задержке начала расстройства или заболевания. Таким образом, термины “лечить”, “лечение” или “обработка” (или грамматически эквивалентные термины) относятся как к профилактическим, так и к терапевтическим режимам лечения. В частности, термин “лечение”, используемый в настоящем документе, относится к введению композиции по изобретению или фармацевтической композиции по изобретению субъекту женского пола, страдающему синдромом поликистозных яичников, включая введение на начальной или ранней стадии заболевания, при котором целью является предотвращение или замедление (уменьшение) нежелательного физиологического изменения или расстройства.
Настоящее изобретение относится к способам и композициям, в значительной мере обеспечивающим терапевтический эффект или желаемые клинические результаты. Терапевтический эффект не обязательно является методом устранения конкретного заболевания или расстройства, но тем не менее включает результат, который наиболее характерно включает облегчение заболевания или расстройства или увеличение выживаемости, устранение заболевания или расстройства, уменьшение или облегчение симптома, ассоциированного с заболеванием или расстройством, предотвращение или облегчение вторичного заболевания, расстройства или состояния, возникающего в результате возникновения первичного заболевания или расстройства, уменьшения степени заболевания, стабилизированное (то есть не прогрессирующее) состояние заболевания, задержку или замедление прогрессирования заболевания, уменьшение интенсивности или ослабление болезненного состояния и ремиссию (частичную или полную), определяемую или не обнаруживаемую, и/или профилактику заболевания или расстройства. “Лечение” также означает увеличение выживаемости по сравнению с ожидаемой выживаемостью, если лечение не проводится. В предпочтительном варианте осуществления, термин “лечение” относится к ослаблению, по меньшей мере, одного симптома заболевания, выбранного из группы, состоящей из бесплодия, резистентности к инсулину, гирсутизма, алопеции, угрей, избыточной массы. В другом предпочтительном варианте осуществления, термин охватывает ослабление двух или более симптомов PCOS.
Используемые в настоящем документе термины “профилактика”, “предотвращение” или “предотвращать” относятся к введению композиции в соответствии с изобретением или фармацевтической композиции в соответствии с изобретением субъекту женского пола, у которого не был диагностирован синдром поликистозных яичников или синдром гиперстимуляции яичников во время введения, но у которого обычно ожидается развитие указанного заболевания или который имеет повышенный риск возникновения указанного заболевания. Профилактика направлена на предупреждение возникновения указанного заболевания. Профилактика может быть полной (например, полное отсутствие заболевания). Профилактика также может быть частичной, так что, например, возникло менее интенсивное заболевание у субъекта, чем то, которое возникло бы без введения сочетания или композиции по настоящему изобретению. Профилактика также относится к снижению предрасположенности к клиническому состоянию. Профилактика также включает снижение риска заболевания. Термины “композиция”, “миоинозитол”, “D-хироинозитол” и их варианты были описаны ранее и в равной степени применимы к этому аспекту изобретения.
В предпочтительном варианте осуществления медицинских применений изобретения, композиция содержит миоинозитол:D-хироинозитол в диапазоне массовых соотношений от 1:1 до 3:1, более предпочтительно 1:1, 1,5:1, 2:1, 2,5:1 или 3:1. В другом упомянутом варианте осуществления, миоинозитол:D-хироинозитол находится в интервале массовых соотношений от 3:1 до 5:1, более предпочтительно 3:1, 3,5:1, 4:1, 4,5:1 или 5:1. В другом предпочтительном варианте осуществления, миоинозитол:D-хироинозитол находится в интервале массовых соотношений от 5:1 до 7:1, более предпочтительно 5:1, 5,5:1, 6:1, 6,5:1 или 7:1. В другом предпочтительном варианте осуществления, миоинозитол:D-хироинозитол находится в диапазоне массовых соотношений от 7:1 до 9:1, более предпочтительно 7:1, 7,5:1, 8:1, 8,5:1 или 9:1.
В другом предпочтительном варианте осуществления, миоинозитол:D-хироинозитол находится в диапазоне массовых соотношений от 2:1 до 5:1, более предпочтительно, от 2:1, 2,5:1, 3:1, 3,5:1, 4:1, 4,5:1 и 5:1. В другом предпочтительном варианте осуществления, массовое соотношение миоинозитол:D-хироинозитол составляет 3,1:1, 3,2:1, 3,3:1, 3,4:1, 3,5:1, 3,6:1, 3,7:1, 3,8:1 или 3,9:1. В более предпочтительном варианте осуществления, массовое соотношение миоинозитол:D-хироинозитол составляет 3,66:1.
Специалист в данной области техники может понять, что желаемое массовое соотношение миоинозитол:D-хироинозитол может быть получено с использованием различных количеств миоинозитола и D-хироинозитола, все которые включены в настоящее изобретение. В предпочтительном варианте осуществления медицинских применений изобретения, содержания миоинозитола и D-хироинозитола в композиции составляет 550 мг миоинозитола и 150 мг D-хироинозитола или 1100 мг миоинозитола и 300 мг D-хироинозитола.
В другом предпочтительном варианте осуществления, композиция для введения в соответствии с медицинскими применениями по изобретению включает от 1000 до 2000 мг миоинозитола. В другом предпочтительном варианте осуществления, содержания миоинозитола и D-хироинозитола в композиции составляют 1000 мг миоинозитола и 150 мг D-хироинозитола. В другом предпочтительном варианте осуществления, содержания миоинозитола и D-хироинозитола в композиции составляют 2000 мг миоинозитола и 300 мг D-хироинозитола.
В другом предпочтительном варианте осуществления, в случае, когда композиция содержит 550 мг миоинозитола и 150 мг D-хироинозитола и субъект женского пола представляет собой человека, то композицию вводят два раза в сутки, и в случае, когда композиция содержит 1100 мг миоинозитола и 300 мг D-хироинозитол и субъект женского пола человека, то композицию вводят один раз в сутки. В предпочтительном варианте осуществления композицию вводят по меньшей мере 12 недель.
В предпочтительном варианте осуществления, композиция, используемая в способе по изобретению, находится в твердой лекарственной форме для перорального введения.
В более предпочтительном варианте осуществления, композиция для использования в способе по изобретению может быть в форме порошков, гранул, гранулятов, саше, таблеток, капсул, шипучих таблеток, жевательных таблеток, пилюль, крахмальных капсул, таблеток с немедленным высвобождением и таблеток с модифицированным высвобождением, а также текучих или жидких лекарственных формах, таких как, например, растворы, суспензии, эмульсии, дисперсии и смеси. Кроме того, композиция может быть в форме порошков, диспергируемых порошков или гранул, подходящих для приготовления водной суспензии путем добавления жидкой среды, такой как, например, водная среда. В еще более предпочтительном варианте осуществления, композиция, используемая в способе по изобретению, находится в форме капсулы, более конкретно, в мягкой капсуле. В предпочтительном варианте осуществления, мягкая капсула содержит желатиновую оболочку.
В предпочтительном варианте осуществления медицинских применений по изобретению, композиция дополнительно содержит соединение, подходящее для лечения синдрома поликистозных яичников.
Большинство предписанных методов лечения направлены на конкретные проявления PCOS и не устраняют первопричины заболевания. Соединения, подходящие для лечения синдрома поликистозных яичников или любого из его проявлений, представляющие собой, например, избыток андрогена и ассоциированные с ним симптомы (например, гирсутизм, угри), обычно лечат эстроген-прогестиновыми контрацептивами, антиандрогенами, средствами против угревой сыпи, рецептурными препаратами и безрецептурными препараатами для удаления или замедления роста нежелательных волос, такими как спиронолактон, флурамид, финастерид или эфлорнитин. Кроме того, проблемы ановуляции и фертильности лечат с помощью лекарственных средств, стимулирующих овуляцию (например, инъекциями кломифена, летрозола или фолликулостимулирующего гормона (ФСГ)). Другие виды лечения назначают пациентам с PCOS, страдающим гипертонией (например, антигипертензивными препаратами), гиперлипидемией (например, статинами, другими средствами, снижающими холестерин) и резистентность к инсулину/диабет 2 типа (например, метформином, другими лекарственными средствами для лечения диабета).
Все термины и варианты осуществления, описанные выше, в равной степени применимы к этому аспекту изобретения.
Мягкая капсула и способ получения
В другом аспекте изобретение относится к мягкой капсуле, содержащей:
a) мягкую капсульную оболочку и
b) фармацевтическую композицию, содержащую миоинозитол и D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 9:1 соответственно.
Термины “мягкая капсула”, “фармацевтическая композиция”, “миоинозитол”, “D-хироинозитол” и их варианты осуществления были ранее описаны в отношении способа увеличения имплантации эмбрионов и в равной степени применимы к этому аспекту изобретения. В предпочтительном варианте осуществления, оболочка дополнительно содержит желатин.
В предпочтительном варианте осуществления, композиция содержит миоинозитол:D-хироинозитол в массовом соотношении от 1:1 до 3:1, более предпочтительно 1:1, 1,5:1, 2:1, 2,5:1 или 3:1. В другом предпочтительном варианте осуществления, миоинозитол:D-хироинозитол находится в диапазоне массовых соотношений от 3:1 до 5:1, более предпочтительно 3:1, 3,5:1, 4:1, 4,5:1 или 5:1. В другом предпочтительном варианте осуществления, миоинозитол:D-хироинозитол находится в диапазоне массовых соотношений от 5:1 до 7:1, более предпочтительно 5:1, 5,5:1, 6:1, 6,5:1 или 7:1. В другом предпочтительном варианте осуществления, миоинозитол:D-хироинозитол находится в диапазоне массовых соотношений от 7:1 до 9:1, более предпочтительно, 7:1, 7,5:1, 8:1, 8,5:1 или 9:1.
В другом предпочтительном варианте осуществления, миоинозитол:D-хироинозитол находится в диапазоне массовых соотношений от 2:1 до 5:1, более предпочтительно, от 2:1, 2,5:1, 3:1, 3,5:1, 4:1, 4,5. :1 и 5:1. В другом предпочтительном варианте осуществления, массовое соотношение миоинозитол:D-хироинозитол составляет 3,1:1, 3,2:1, 3,3:1, 3,4:1, 3,5:1, 3,6:1, 3,7:1, 3,8:1 или 3,9:1. В более предпочтительном варианте осуществления, массовое соотношение миоинозитол:D-хироинозитол составляет 3,66:1.
Специалист в данной области техники может понять, что желаемое массовое соотношение миоинозитол:D-хироинозитол может быть получено с использованием различных количеств миоинозитола и D-хироинозитола, все которые включены в настоящее изобретение. В предпочтительном варианте осуществления, содержание миоинозитола и D-хироинозитола в композиции составляет 550 мг миоинозитола и 150 мг D-хироинозитола или 1100 мг миоинозитола и 300 мг D-хироинозитола.
В другом предпочтительном варианте осуществления, композиция содержит от 1000 до 2000 мг миоинозитола. В другом предпочтительном варианте осуществления, композиция содержит от 300 до 500 мг D-хироинозитола. В другом предпочтительном варианте осуществления, содержания миоинозитола и D-хироинозитола в композиции составляют 1000 мг миоинозитола и 150 мг D-хироинозитола. В другом предпочтительном варианте осуществления, содержания миоинозитола и D-хироинозитола в композиции составляют 2000 мг миоинозитола и 300 мг D-хироинозитола.
В другом аспекте, изобретение относится к способу получения мягкой капсулы согласно изобретению.
Мягкие капсулы по настоящему изобретению могут быть получены посредством любого обычного производственного процесса, известного в данной области техники для получения мягких капсул (как описано, например, в Gurava reddy, R. et al., Int. J. Adv. Pharm. Gen. Res., 2013, 1, 20-29), например, методом прессования, роторно-матричным методом, посредством матричной машины возвратно-поступательного действия или машины Аccogel. В иллюстративном неограничивающем примере изготовления желатиновых капсул, метод прессования включает размещение желатинового листа на матричной плите, содержащей множество полостей, создание вакуума для втягивания листа в полости матрицы, заполнение полостей жидким или пастообразным веществом, помещение второго желатинового листа поверх заполненных полостей и прессование матричного “сэндвича” из которого формируются и вырезаются капсулы. В иллюстративном неограничивающем примере роторно-матричного метода, фармацевтическая композиция, подлежащая капсулированию, течет под действием силы тяжести, при этом желатиновые ленты подаются на валики, содержащие небольшое отверстие, располагающееся на одной линии с полостью матрицы в матричном валике. Две пластифицированные желатиновые ленты непрерывно и одновременно подаются с жидким или пастообразным наполнением между валиками роторно-матричного механизма, в котором капсулы одновременно заполняются, формуются, герметично закрываются и отрезаются от желатиновой ленты. Герметизация капсулы может достигаться путем механического давления на матричные валики и нагревания (37-40°С) лент клиновидным устройством. Все термины и варианты осуществления, описанные выше, в равной степени применимы к этому аспекту изобретения.
Следующие примеры иллюстрируют изобретение и не должны рассматриваться в качестве ограничивающих настоящее изобретение.
Примеры
Вещества и способы
Дизайн исследования
Это исследование было двойным слепым сравнительным, фаза 2/фаза 3; многоцентровым рандомизированным клиническим исследованием (RCT) с четверным маскированием (участник, поставщик медицинских услуг, исследователь и оценщик результатов). Это исследование проводилось на пяти участках в Испании с февраля 2016 года по апрель 2017 года и проводилось в соответствии с директивами Хельсинкской декларации и надлежащей клинической практики; зарегистрировано на Clinicaltrials.gov с идентификационным номером NCT03201601.
Для исследование по доказательству более высокой эффективности, чтобы проверить, что частота наступления беременности выше при экспериментальном лечении, с удвоенной частотой наступления беременности, чем при обычном лечении, при условии, что частота наступления беременности составляет 30% при контрольном лечении со статистической мощностью 80% и уровнем значимости 5%, необходимая выборка на группу составляла 30 пациентов на группу. То есть в течение исследования частота наступления беременности 60% в группе лечения (допустимый предел 30%), и, следовательно, потребность в выборке составляет 30 пациентов на группу.
Субъекты
Женщин с PCOS, которые планировали осуществить внутрицитоплазматическую инъекцию сперматозоидов (ICSI), проверяли на возможное включение в исследование и их включали в исследование до забора ооцитов и переноса эмбрионов (период набора в исследование был с февраля 2016 года по апрель 2017 года; последнего субъекта распределяли в группу случайным образом 19 апреля 2017 года ). Пациентов проходили скрининг на соответствие требованиям и давали информированное согласие на предполагаемое клиническое исследование после подтверждения диагноза PCOS.
Критерии включения: в исследование включали женщин в возрасте 18-40 лет с PCOS по Роттердамским критериям с ИМТ (BMI) <30 и исходным уровнем ФСГ <10 МЕ/л, которые подвергались процедуре введения сперматозоида в цитоплазму ооцита (ICSI) и без принуждения соглашались участвовать в исследовании и подписывать документ информированного согласия. Все участники должны были иметь нормальную полость матки.
Критерии исключения:
Противопоказания к процедуре ICSI: врожденная гиперплазия надпочечников, гиперпролактинемия, заболевание щитовидной железы, тяжелый эндометриоз (III или IV стадии), слабый ответ на предшествующее репродуктивное лечение, низкий уровень соблюдения предписанного режима лечения и/или сотрудничества, и тяжелый мужской фактор бесплодия (криптозооспермия).
Способы
Исследование было разработано для проверки того, является ли MYO/DCI (3,6:1) лучшим лечением по сравнению с MYO/DCI (40:1) для параметров ICSI, а также для достижения беременности у женщин с PCOS, подвергающихся процедуре ICSI.
Шестьдесят субъектов случайным образом распределяли в группы либо для получения перорально 550 мг MYO+150 мг DCI два раза в сутки (3,6: 1) (исследуемая группа -SG-), либо 550 мг MYO+13,8 мг DCI два раза в сутки (40: 1) (контрольная группа -CG-) в течение 12 недель. DCI и MYO были предоставлены Biosearch Life (Испания). DCI получали из рожкового дерева (Ceratonia siliqua L.) (Caronositol). Обе обработки проводились с использованием мягких желатиновых капсул, которые имели одинаковый внешний вид без какой-либо указаний на их содержимое, поэтому ни добровольцы, ни исследователи не знали группу, к которой они принадлежали. Каждый участник принимал по две капсулы каждой процедуры лечения ежесуточно, утром и ночью, без каких-либо ограничений в своем рационе питания или своих ежедневных привычках. Потребление других витаминов или антиоксидантов во время исследования не разрешалось, за исключением фолиевой кислоты (400 мкг/сутки). Пациенты продолжали принимать исследуемый препарат до теста на беременность (две недели после переноса эмбрионов).
Начальную стимуляцию овуляции проводили однообразно во всех центрах проведения исследования с применением антагонистов GnRH в циклах и начальной дозы, составляющей 150 единиц, рекомбинантного FSH в течение пяти дней (Gonal-F, Merck Serono, Швейцария; Puregon, MSD; США). После первоначальной стимуляции, каждого пациента обрабатывали индивидуально в соответствии с его реакцией, которую измеряли каждые двое суток с помощью ультразвукового исследования влагалища, а также в соответствии с уровнями эстрадиола и лютеинизирующего гормона (LH). Во всех случаях инициирование осуществляли 0,2 мг трипторелина (Decapeptyl; Ferring, Швейцария). Пункцию фолликулов предусматривали осуществить примерно через 36-37 часов после инициирования. Перенос эмбрионов осуществляли индивидуально в соответствии с характеристиками каждого добровольца и его реакцией, хотя ни в одном из случаев не переносили более трех эмбрионов. Во всех случаях, когда осуществлялся перенос эмбрионов, назначали лечение микронизированным натуральным прогестероном (Progeffik, Effik; Utrogestan, SEID (в дозе 400 мг в сутки) для поддержания лютеиновой фазы.
Измерения
При скрининге посещения были нормированы для всех участков исследования, и на каждом участке проведения исследования использовались идентичные индивидуальные регистрационные карты, подготовленные Data Coordination Center в Biosearch. Формы и процедуры сбора данных были идентичны для обеих групп.
ИМТ (BMI) вычисляли по измерениям роста и массы, выполненным во время визита скринингового обследования. Участников исследования взвешивали в легкой одежде, без обуви. Рост измеряли без обуви. Гирсутизм оценивали у всех участников по гирсутному числу шкалы Ферримана-Голлвея (Ferriman and Gallwey, 1961).
В начале и в конце лечения отбирали два образца крови по 7,5 мл каждый. Экстракцию и образцы анализировали в соответствующей клинике. Авторы изобретения использовали HOMA (оценку гомеостатической модели для определения чувствительности к инсулину) в качестве меры резистентности к инсулину (IR) (Majid et al 2017). Уровни инсулина определяли посредством хемилюминесцентного иммуноанализа, при этом общие концентрации тестостерона в плазме определяли с помощью фермент-связанного флуоресцентного анализа (ELFA).
Результаты лечения
Основным результатом была частота наступления беременности, а вторичными результатами были: качество ооцитов, качество эмбрионов, уровень тестостерона и чувствительность к инсулину.
Качество ооцитов определяли по проценту ооцитов метафазы II (MII).
Качество эмбриона определяли по количеству бластомеров, степени фрагментации, многократноcти зародышеобразования и размеру бластомеров:
Очень хорошее качество (A): 4/8 мононуклеарных бластомеров одинакового размера в день +2/3 с <10% фрагментации
Хорошее качество (B): >50% бластомеров с количеством и размером, соответствующими стадии развития; мононуклеарные клетки с 10-25% фрагментации
Низкое качество (C): >50% бластомеров с количеством и размером, которые не соответствуют стадии развития; многократноcть зародышеобразования с >25% фрагментации
Участников, которым удалось зачать ребенка, обследовали в клинике для ультразвукового исследования жизнеспособной внутриутробной беременности (сердцебиение плода) и направлялись для оказания родовспомогательной помощи. Информацию о ходе беременности и результатах родов получали в результате анализа медицинской карты матери и ребенка. Исходы беременности определяли как:
Беременность определена по положительному тесту через две недели после переноса эмбрионов.
Клиническая беременность: беременность посредством сонографического исследования одного или нескольких гестационных мешков.
Текущая беременность: беременность посредством ультразвукового исследования одного или нескольких гестационных мешков и сердцебиением плода через 12 недель беременности.
Клиническая частота наступления беременности за цикл: процент пациентов, которые забеременели за цикл выполненной стимуляции.
Клиническая частота наступления беременности при переносе: процент пациентов, которые забеременели в результате переноса эмбрионов.
Частота имплантации: процент эмбрионов, которые были имплантированы в матку после переноса.
Одобрение Этического комитета
Исследование было одобрено в каждом месте проведения клинического исследования. За каждым пациентом закрепляли ключ для обеспечения конфиденциальности его аналитических оценок. Пациенты подписывали документ информированного согласия, информирующий их о процедуре и возможных рисках проведения исследования. Процедуру ICSI проводили во всех случаях в зависимости от потребности нормальной спермы, пациентов информировали о возможных более высоких аномалиях плода при ICSI относительно ЭКО.
Пациент, прекративший участие в исследовании
Пациенты, прекратившие участие в исследовании относятся к участникам, которые отказались от лечения и исследования, и не принимали дальнейшее участие в исследовании. Выбывшие из исследования женщины исключались из заключительного анализа.
Между группами лечения отсутствовали какие-либо существенные различия в отношении причины прекращения участие в исследовании. Аналогичные пропорции и причины отсева отмечались в двух группах лечения: одна женщина в исследуемой группе по личным причинам (3,45%); две женщины в контрольной группе, одна по личным причинам и одна случайным образом (7,41%). Большинство личных причин заключалось в том, что эти женщины решили не подвергаться процедуре ICSI.
Статистическая методология
Во-первых, группа лечения предоставила описание выборки и личную информацию о женщинах, включая употребление табака, алкоголя, активность и историю болезни. Статистические тесты с двумя переменными для персональных переменных, предоставленных в проведенном лечении, проводились для определения единообразия характеристик женщин между группами лечения. Вычисляли частоты и проценты, и выполняли тесты хи-квадрат (точные или асимптотические, в зависимости от распределения частот) на качественных переменных. Для количественных переменных получали среднее, стандартное отклонение (SD) и 95% доверительные интервалы, а для сравнения групп выполняли асимптотический t-критерий или метод бутстрэпа (bootstrap) для t-критерия (в зависимости от предположения о нормальности распределения). Кроме того, аналогичные анализы проводились для подгруппы женщин, которые завершили исследование, для сбора информации о яйцеклетках и эмбрионах.
Затем проводили описательные анализы основного и вторичного результатов. Количество ооцитов суммировали по среднему значению и среднеквадратическому отклонению (SD) для каждой группы, а также с учетом данных подсчета в группе, предоставляя частоты случаев ооцитов для каждой группы и соотношение частот случаев (IRR) с 95% доверительным интервалом. Тот же подход был использован для суммирования количества эмбрионов. Количество зрелых ооцитов описывали по среднему значению и SD на группу. Кроме того, ответ с учетом биномиального распределения с n - общим числом ооцитов и p - вероятностью быть зрелым ооцитом из n возможных ооцитов от пациента, получали в итоге как вероятность успешного созревания ооцитов на группу и отношение шансов (OR) (95% доверительный интервал). Аналогичные данные расчетов получали для числа эмбрионов типа A, B или C от всех эмбрионов от пациента. Кроме того, вычисляли соотношение зрелых ооцитов у каждого пациента, и проверяли и исследовали различия в соотношениях между группами. Основной результат успеха беременности определяли в виде частоты и процентного соотношения на группу, а также с вероятностью беременности на группу с соответствующим OR и его доверительным интервалом. Количество дней стимуляции классифицировали как меньшее или равное 10 дням и больше 10 дней, частоты и процентное соотношение определяли для каждой группы и проводили критерий хи-квадрат. Относительно перенесенных эмбрионов, ответы классифицировали как меньше или равно 1, 2 или >2 переносов эмбрионов. Тестирование различий в распределении ответов на группу проводили с помощью t-критерия хи-квадрата. Количество сумок также сравнивали между группами, используя критерий хи-квадрат, и вычисляли вероятность одной или нескольких сумок.
Чтобы сделать вывод об эффекте лечения с вероятностью успешного созревания ооцитов и беременности, использовали многомерные обобщенные регрессионные модели. Модели подбирали по индивидуальным характеристикам пациентов и получали скорректированные отношения вероятностей для групп лечения.
В начале исследования и в конце исследования между группами сравнивали глюкозу, инсулин, HOMA и тестостерон. В каждый момент времени, для проверки различий средних значений между группами, использовали независимые исследования. Кроме того, для проверки различий между группами в отношении динамики параметров, в которых использовались многомерные модели линейной смешанной регрессии с внутрисубъектным случайным эффектом, применяли многомерное статистическое моделирование и устанавливали характеристики пациентов.
Для процедуры выбора многомерной модели использовали ручное введения в прямой пошаговой метод, где переменные исследовали в качестве возможных искажающих результаты факторов, и были выполнены условия взаимодействия между переменными, введенными в модель. Когда выбор переменных с использованием описанного метода был завершен, проводили вторую процедуру с использованием ручного обратного пошагового метода для проверки возможных изменений в эффектах переменных, которые были первоначально исключены. Существенное влияние отдельных факторов, изменения оценочных параметров, если переменная была исключена, информационный критерий Байеса и информационный критерий Акаике (AIK) проверяли на всех этапах выбора модели. Использовали R проект 3.3.
Пример 1
Шестьдесят женщин с PCOS случайным образом распределяли в группы для включения в исследование. Четыре женщины были исключены после этого распределения, и согласия было аннулировано по личным причинам (они решили не подвергаться процедуре ICSI) или потому, что они соответствовали критериям исключения. В конечном итоге в исследовании приняли участие 56 (93,33%) женщин с PCOS. В начале исследования не было обнаружено различий между двумя группами (см. таблицу 1).
Таблица 1. Характеристики пациентов на стадии включения в исследование
<b>Исследуемая группа</b>
<b>Контрольная группа</b>
<b>T-тест</b>
<b>(N=29)</b>
<b>(N=27)</b>
<b>Количественные характеристики пациентов на стадии включения в исследование</b>
95% CI
95% CI
Среднее (SD)
(Нжняя граница, верхняя граница)
Среднее (SD)
(Нижняя граница, верхняя граница)
p-значение
Возраст
31,67 (0,86)
(29,91-33,42)
31,74 (0,89)
(29,91-33,57)
0,953
Масса
67,31 (2,33)
(62,53-72,09)
67,11 (2,09)
(62,82-71,4)
0,950
Рост
162,67 (1,32)
(159,97-165,37)
164,11 (1,06)
(161,93-166,29)
0,404
BMI
25,51 (0,86)
(23,73-27,28)
24,88 (0,69)
(23,45-26,3)
0,576
Продолжительность неспособности к деторождению
3,35 (0,36)
(2,69-4)
2,57 (0,24)
(2,13-3,04)
0,088<sup>*</sup>
<b>Качественные характеристики пациентов на стадии включения в исследование N (%)</b>
Нормальная активность
10 (33,33%)
6(22,22%)
0,351
Употребление алкоголя
9(30%)
6(22,22%)
0,506
Курение
7(23,33%)
7(25,93%)
0,820
Отсутствие предыдущей беременности
28 (93,33%)
23 (85,19%)
0,408
*
Оценочные данные методом бутстрэпа
BMI= индекс массы тела
Три пациента не завершили исследование по личным причинам (по одному в каждой группе), и одна женщина в контрольной группе не завершила исследование в результате несчастного случая. Еще девять субъектов не достигли стадии пункции яичников: трое покинули исследование по причине незапланированной беременности (два в исследуемой группе и один в контрольной группе), а трое были исключены из исследования вследствие риска развития синдрома гиперстимуляции яичников (OHSS) (один в исследуемой группе и два в контрольной группе). Еще три пациента в контрольной группе также не подвергались переносу эмбрионов вследствие риска OHSS. В целом, процент исключений вследствие риска OSSH был ниже в исследуемой группе (3,44 относительно 18,5%, р=0,07). Последующее наблюдение участников показано на фигуре 1.
В случае, если перенос эмбриона не был достигнут вследствие риска OSSH, тесты на инсулин, глюкозу и тестостерон выполняли во время пункции яичников.
В конце исследования продолжительность стимуляции яичников была одинаковой в обеих группах. Аналогично, общий уровень тестостерона, глюкозы и инсулина, HOMA, количество ооцитов MII и процентное содержание эмбрионов хорошего качества также были одинаковыми в обеих группах (таблица 2).
Таблица 2 Сводные результаты для качественных вторичных результатов
Исследуемая группа
Контрольная группа
95% CI
95% CI
N
Среднее (SD)
(нижняя граница, верхняя граница)
N
Среднее (SD)
(нижняя граница, верхняя граница)
p-значение
Количество ооцитов
25
13,46 (1,01)
(11,38-15,54)
22
13,76 (1,48)
(10,67-16,85)
0,864
Отсутствие зрелых ооцитов
25
3 (0,49)
(1,98-4,02)
22
3,1 (0,55)
(1,98-4,25)
0,898
Зрелые ооциты
25
10,46 (0,88)
(8,65-12,28)
22
10,67 (1,57)
(7,4-13,94)
0,910
Соотношение зрелые ооциты/N ооциты
25
0,77 (0,04)
(0,7-0,84)
22
0,74 (0,05)
(0,63-0,84)
0,575
Количество эмбрионов
25
6,88 (0,77)
(5,65-8,2)
22
7,19 (1,41)
(4,52-9,89)
0,858
Эмбрионы типа А
25
3,08 (0,71)
(2-4,27)
22
3,86 (1,22)
(1,76-6,38)
0,571
Эмбрионы типа B
25
1,5 (0,31)
(1-2,04)
22
1,35 (0,44)
(0,75-2,1)
0,467
Эмбрионы типа С
25
1,81 (0,38)
(1,15-2,49)
22
1,6 (0,38)
(0,85-2,55)
0,754
Инсулин на стадии включения в исследование
29
11,75 (1,31)
(9,5-14,55)
27
11,53 (2,12)
(8,28-15,38)
0,929
Инсулин в конце исследования
25
9,04 (0,95)
(7,22-11,16)
22
9,05 (1,13)
(7,19-11,07)
0,993
Разница в инсулине
25
2,8 (1,04)
(1,15-4,83)
22
2,97 (2,19)
(-0,64-7,41)
0,951
Тестостерон Инсулин на стадии включения в исследование
29
0,57 (0,04)
(0,48-0,66)
27
0,56 (0,05)
(0,45-0,67)
0,911
Тестостерон в конце исследования
25
0,41 (0,04)
(0,34-0,49)
22
0,46 (0,05)
(0,36-0,56)
0,430
Разница тестостерона
25
0,14 (0,03)
(0,07-0,21)
22
0,12 (0,03)
(0,05-0,18)
0,607
Глюкоза на стадии включения в исследование
29
90,82 (1,77)
(87,2-94,43)
27
91,85 (2,48)
(87,81-96,88)
0,757
Глюкоза в конце исследования
25
85,96 (1,1)
(83,7-88,22)
22
86,62 (1,51)
(83,49-89,76)
0,720
Разница глюкозы
25
4,61 (1,96)
(0,59-8,64)
22
5,77 (2,55)
(1,58-11,28)
0,727
HOMA на стадии включения в исследование
29
2,64 (1,66)
(2,02-3,26)
27
2,65 (2,6)
(1,62-3,69)
0,288
HOM в конце исследования
25
1,94 (1,1)
(1,51-2,37)
22
1,96 (1,23)
(1,43-2,49)
0,719
Разница HOMA
25
0,72 (1,31)
(0,21-1,24)
22
0,82 (2,52)
(-0,27-1,91)
0,408
Таблица 2(продолжение) Сводные результаты для качественных вторичных результатов
N
%
N
%
p-значение
День стимуляции
<=10
16
64
15
68,18
0,632
>10
9
36
7
31,82
Сорок пять пациентов подверглись процедуре переноса эмбрионов (25 в исследуемой группе и 20 в контрольной группе). Различий в среднем количестве перенесенных эмбрионов и проценте женщин с более чем одним перенесенным эмбрионом не было обнаружено. Тем не менее, частоты наступления беременности и живорождения были достоверно выше в исследуемой группе, чем в контрольной группе (65,5 относительно 25,9, р=0,003 и 55,2 относительно 14,8, р=0,002). Кроме того, беременность после переноса эмбрионов (ET) была выше в исследуемой группе, чем в контрольной группе (68% относительно 31,6%, p=0,017). Основные данные по каждой частоте наступления беременности приведены в таблице 3.
Таблица 3. Исходы беременности
Количество случаев на группу лечения
<b>SG</b>
<b>CG</b>
<b>коэффициент риска</b>
<b>95% CI</b>
<b>ОШ (A/B)</b>
<b>95% CI</b>
<b>p-значение</b>
<b>Нижняя граница</b>
<b>Верхняя граница</b>
<b>Нижняя граница</b>
<b>Верхняя граница</b>
Частота наступления беременности
Нет
10
20
0,40
0,20
0,79
5,25
1,51
20,33
0,003
Да
19
7
Частота выкидышей
Нет
16
4
2,71
0,71
10,42
0,27
0,02
2,76
0,146
Да
3
3
Клиническая частота беременности
Нет
10
20
0,40
0,20
0,79
5,25
1,51
20,33
0,003
Да
19
7
Коэффициент продолжающейся беременности
Нет
13
23
0,27
0,10
0,70
6,81
1,72
34,12
0,002
Да
16
4
Частота беременности по циклу стимуляции
Нет
8
16
0,40
0,19
0,84
5,44
1,38
24,35
0,005
Да
17
6
Беременность при переносе эмбрионов
Нет
8
13
0,46
0,23
0,95
4,43
1,09
20,30
0,017
Да
17
6
Коэффициент живорождения
Нет
13
23
0,27
0,10
0,70
6,81
1,72
34,12
0,002
Да
17
4
SG= Исследуемая группа; CG= Контрольная группа
Для успеха беременности была применена модель многомерной логистической регрессии (переменная частота наступления беременности). На результаты беременности оказывает существенное влияние лечение, так как женщины в исследуемой группе имеют больше шансов забеременеть, чем женщины в контрольной группе. В частности, шансы на беременность в 5,43 раза выше в исследуемой группе, чем в контрольной группе (ОШ (OR) = 5,43; 95% доверительный интервал (CI) (1,75, 18,61); р=0,022). Ни один из исследуемых факторов не был достоверно связан с беременностью. Кроме того, для оценки вероятности наличия >= 1 мешков применяли модель логистической регрессии (при этом только у одного пациента было 2 мешка). Был обнаружен значительный эффект лечения с более низкой вероятностью мешков в контрольной группе (OR=0,23; 95% доверительный интервал (CI) (0,05, 0,85); p=0,043). Ни один из других рассмотренных факторов не был значительной степени ассоциирован с мешками.
Проводили апостериорные вычисления статистической мощности для проверки точности результатов при уменьшенной выборке вследствие отсева в исследовании. Результаты показывают 25,9% частоты наступления беременности в контрольной группе и 65,5% в экспериментальной группе с 27 пациентами для группы CG и 29 пациентами для группы SG с уровнем значимости 5%. Статистическая мощность для нескорректированного OR 0,19 составляет 0,852 для контроля в течение обработки и 0,980 для скорректированного OR=0,102.
Что касается уровней тестостерона, линейную смешанную модель с внутрисубъектным случайным эффектом согласовывали с данными. В конце исследования не было обнаружено значительных различий между обработками, скорректированными по исходным значениям (разница CG-SG = -0,007; 95% доверительный интервал (CI) (-0,13, 0,12); p=0,904). С исходного уровня до конца исследования была обнаружена существенная разница, однако разница была одинаковой в обеих группах (разница =-0,13; 95% (-0,17, -0,08); p-значение <0,001). Результаты многомерной модели, примененной к параметру HOMA, показывают незначительный эффект лечения р=0,875, хотя снижение от исходного уровня до конца исследования наблюдалось в обеих группах (разница = -0,70; 95% доверительный интервал (CI) (-1,23, -0,16); р=0,011).
В заключение необходимо отметить, что сочетание MYO-DCI в высоких дозах DCI повышает частоту живорождения (и все остальные показатели) относительно его физиологической концентрации. Это же сочетание снижает риск возникновения OHSS. Эти результаты подчеркивают важность добавки DCI у женщин с PCOS, перенесших ICSI.