Изучение качественного состава фенольных соединений в различных органах хатьмы тюрингенской, произрастающей на территории Алтайского края

Al

SSM

ЛИТЕРАТУРА

1. Altantsetseg Sh., Shatar S., Javzmaa N. Comparative study of essential oil constituents of Bupleurum species from Mongolia. Mongolian Journal of Chemistry. 2012. № 13 (39). P. 28-30.

2. Akin M., Sarajoglu H.T., Demirci B. et. al. Chemical composition and antibacterial activity of essential oils from different parts of Bupleurum rotundifolium L. Records of natural products. 2012. № 6 (3). P. 316-320.

3. Тыхеев Ж.А. Володушка козелецелистная: компонентный состав эфирного масла и липидной фракции надземной части флоры Бурятии, Забайкальского края и Монголии. Экология России и сопредельных территорий: мат-лы XIX междунар. конф. 2014. С. 213.

Tyheev Zh.A. Volodushka kozelecelistnaja: komponentnyj sostav jefirnogo masla i lipidnoj frakcii nadzemnoj chasti flory Burjatii, Zabajkal'skogo kraja i Mongolii. Jekologija Rossii i sopredel'nyh territorij: mat-li XIX mezhdunar. konf. 2014. S. 213.

4. Зыкова И.Д., Ефремов А.А. Володушка козелецелистная: компонентный состав эфирного масла надземной части. Сибирский медицинский журнал. 2014. № 2. С. 97-98.

Zykova I.D., Efremov A.A. Volodushka kozelecelistnaja: komponentnyj sostav jefirnogo masla nadzemnoj chasti. Sibirskij medicinskij zhurnal. 2014. № 2. S. 97-98.

5. Зыкова И.Д. Изменение состава эфирного масла володушки козелеце-листной (Bupleurum scorzonerifolium L.), произрастающей в Сибирском регионе, в зависимости от метеорологических условий. Вестник КрасГАУ. 2015. № 7. С. 33-38.

Zykova I.D. Izmenenie sostava jefirnogo masla volodushki kozelecelistnoj (Bupleurum scorzonerifolium L.), proizrastajushhej v Sibirskom regione, v zavisi-mosti ot meteorologicheskih uslovij. Vestnik KrasGAU. 2015. № 7. S. 33-38.

6. Olennikov D.N., Partilkhaev V.V. (2013) Flavonoids and phenylpropanoids from several species of Bupleurum growing in Burytia. Chemistry of Natural Compounds. Vol. 48 (6). P. 1078-1082.

7. Петухова С.А., Мирович В.М. Состав биологически активных веществ володушки козелецелистной (Bupleurum scorzonerifolium Willd.) травы, произрастающей в Восточной Сибири. Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сборник научных трудов. 2016. Вып. 71. С. 57-59.

Petuhova S.A., Mirovich V.M. Sostavbiologicheskiaktivnyh veshhestv volodushki kozelecelistnoj (Bupleurum scorzonerifolium Willd.) travy, proizrastajushhej v Vostochnoj Sibiri. Razrabotka, issledovanie i marketing novoj farmacevtiches-kojprodukcii: sbornik nauchnyh trudov. 2016. Vyp. 71. S. 57-59.

8. Pharmacopoeia of the peoples Republic of China. Guangzhou: Guangdong science and technology Press. 1992.

9. Государственная фармакопея Российской Федерации: в 3 томах [Электронный ресурс] / ред. Г.В. Авраменко, О.Г. Потанина, Е.В. Буданова. XIII изд. М. 2015. - Режим доступа: http://femb.ru/feml (дата обращения: 25.11.2016).

Gosudarstvennaja farmakopeja Rossijskoj Federacii: v 3 tomah [Jelektronnyj resurs]/red. G.V. Avramenko, O.G. Potanina, E.V. Budanova. XIII izd. M. 2015. -Rezhim dostupa: http://femb.ru/feml.

ш

УДК: 615.2 :57].151(570.15) Код специальности ВАК: 14.04.02

ИЗУЧЕНИЕ КАЧЕСТВЕННОГО СОСТАВА ФЕНОЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ В РАЗЛИЧНЫХ ОРГАНАХ ХАТЬМЫ ТЮРИНГЕНСКОЙ, ПРОИЗРАСТАЮЩЕЙ НА ТЕРРИТОРИИ АЛТАЙСКОГО КРАЯ

Л.М. Федосеева, О.А. Мызникова,

ФГБОУ ВО «Алтайский государственный медицинский университет», г. Барнаул

Федосеева Людмила Михайловна - e-mail: ludmila@agmu.ru

Дата поступления 02.05.2017

Цель работы: изучение качественного состава фенольных соединений в вегетативных органах и цветках хатьмы тюрингенской, заготовленных на территории Алтайского края. Анализ проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии. В корнях обнаружены производные кофейной, хло-рогеновой кислот, умбеллиферона; в траве и стеблях - производные кофейной кислоты, соединения кумариновой природы, флавоноиды групп флавона и катехина; в листьях - производные хлорогеновой и феруловой кислот, производные кверцетина, кемпферола, флавона; в цветках - фенологликозиды, производные кемпферола и флавона. Исследования направлены на расширение сырьевой базы источников биологически активных соединений. В качестве морфологической группы сырья для дальнейшего изучения и внедрения в медицину целесообразно использование травы хатьмы тюрингенской.

Ключевые слова: Lavatera thuringiaca L., фенольные соединения.

The aim of the work is to study the qualitative composition of phenolic compounds in vegetative organs and flowers of the Lavatera thuringiaca L. collected in the Altai Territory. The analysis was carried out by highperformance liquid chromatography. In the roots are founded the derivatives of coffeic and chlorogenic acids, umbelliferone; in aerial part and stems - derivatives of coffeic acid, compounds of coumarin nature, flavonoids of flavone and catechin groups; in leaves - derivatives of chlorogenic and ferulic acids, derivatives of quercetin, kaempferol, flavone; In flowers - phenolic glycosides, derivatives of kaempferol and flavone. Research is aimed at expanding the resource base of sources of biologically active compounds. As a morphological group of raw materials for further study and introduction into medicine, it is advisable to use the Lavatera thuringiaca herba.

Key words: Lavatera thuringiaca L., phenolic compounds.

Введение

В народной медицине растения сем. Мальвовые (Malvaceae Juss.) широко применяются как отхаркивающие, обволакивающие, противовоспалительные средства [1]. В научной медицине используются только алтей лекарствен-

ный (Althaea officinalis L.), алтей армянский (Althaea armeniaca Ten.). На территории Алтайского края алтей практически не встречается, в связи с чем возникает необходимость в расширении сырьевой базы за счёт поиска дополнительных растительных источников и комплексного их использования.

Значительный интерес для изучения представляет хатьма тюрингенская (Lavatera thuringiaca L.) сем. Мальвовые, которая произрастает повсеместно на территории Алтайского края. Данное растение содержит комплекс биологически активных соединений (БАС), включающий полисахариды, дубильные вещества, флавоноиды, кумарины и др. [2]. Для лекарственного растительного сырья (ЛРС), которое изучается впервые, следует обосновать выбор морфологической группы. Необходимо провести сравнительный анализ состава БАС, содержащихся в различных органах растения.

Цель данной работы: изучение качественного состава фенольных соединений, содержащихся в вегетативных органах и цветках хатьмы тюрингенской.

Материал и методы

Объекты исследования - корни, трава, стебли, листья, цветки хатьмы тюрингенской, произрастающей на территории Бийского района Алтайского края. Надземные органы растения заготавливали в период цветения (июль 2016 г.), подземные - после плодоношения (сентябрь 2016 г.).

Для изучения качественного состава фенольных соединений исследуемых образцов получали извлечения. В качестве экстрагента использовали спирт этиловый 70%. Соотношение «сырьё - экстрагент» - 1:10. Время экстракции -

30 мин при нагревании с обратным холодильником. Полученные извлечения исследовали методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) на микроколоночном жидкостном хроматографе «МилиХром А-02» с УФ-детектором. Условия анализа: хроматографическая колонка 2,0 х 75 мм; сорбент NudeoSIL-120-5-С18 с размером частиц 5 мкм; элюент А - раствор кислоты трифторук-сусной водный 0,01%, элюент Б - ацетонитрил. Скорость подачи элюента - 100 мкл/мин, объём пробы - 2 мкл, температура колонки 35°С; градиент 5-55% элюента Б за 30 мин [3]. Детектирование веществ проводили при длинах волн 220, 254, 268, 300, 324, 360 нм. Соединения идентифицировали по временам удерживания (т) и спектральным характеристикам (Атах), сопоставляя их с аналогичными показателями стандартных образцов (СО) производства компании <^дта-АМпсЬ> и литературными данными [4-6]. Проводили по пять параллельных определений.

Результаты и их обсуждение

В результате хроматографирования спиртовых извлечений получены следующие данные (таблица).

В спиртовом извлечении корней: пик 1 - производное хлорогеновой кислоты (т=9,5 мин; Атах=212; 235 пл; 305 пл; 330 нм), пик 2 - производное умбеллиферона

РИС. 1.

Хроматограмма спиртового извлечения корней хатьмы тюрингенской и спектры поглощения соединений: 1 - производное хлорогеновой кислоты, 2 - производное умбеллиферона, 3 - производное кофейной кислоты, 4 - производное умбеллиферона.

1

5щ

ТАБЛИЦА.

Результаты исследований состава фенольных соединений вегетативных органов и цветков хатьмы тюрингенской

№ пика Время удерживания, мин Максимум поглощения, нм Соединение

Корни

1 9,5 212; 235 пл; 305 пл; 330 Производноехлорогеновой кислоты

2 12,2 220 пл; 315 Производное умбеллиферона

3 13,1 219; 235 пл; 330 Производное кофейной кислоты

4 13,6 218 пл; 330 Производное умбеллиферона

Трава

1 9,6 213; 235 пл; 305 пл; 330 Производноехлорогеновой кислоты

2 11,5 202; 268; 330 Флавоноид группы флавона

3 12,0 198;215 пл; 270; 328 Соединения кумаринового ряда

4 12,5 196; 213 пл; 275; 298 пл; 330

5 13,5 198;212пл; 270; 328

6 14,8 200; 270 Производное катехина

7 15,3 200; 270; 335 Флавоноиды группы флавона

8 15,7 200; 270; 330

9 16,5 200; 270; 330

10 16,7 200; 268; 335

11 18,0 200;275 Производные катехина

12 18,3 200;270

13 21,0 222пл;268;315 Флавоноиды группы флавона

14 21,5 268;310

Стебли

1 8,1 200;320 Производное катехина

2 10,6 218; 235 пл; 305 пл; 330 Хлорогеновая кислота

3 12,3 206; 270; 327 Флавоноид группы флавона

4 12,6 205; 220 пл; 270; 328 Соединение кумаринового ряда

5 13,6 218; 235 пл; 330 Производное кофейной кислоты

6 15,1 200; 275; 325 Производное катехина

7 16,2 200; 295 пл; 330 Соединение кумаринового ряда

8 16,7 202; 275; 345 Флавоноид группы флавона

Листья

1 9,6 212; 235 пл; 305 пл; 330 Производноехлорогеновой кислоты

2 10,7 204; 265; 355 Производное кверцетина

3 11,9 270;325 Производное кемпферола

4 12,4 218; 240; 300 пл; 330 Производные феруловой кислоты

5 13,1 218; 240; 300 пл; 330

6 16,2 204; 264; 355 Кверцитрин

7 19,5 268;315 Флавоноид группы флавона

Цветки

1 9,5 214; 235 пл; 305 пл; 330 Производноехлорогеновой кислоты

2 10,3 240;330 Фенологликозиды

3 11,6 230;320

4 12,2 230;320

5 13,0 215; 330

6 14,1 200 пл; 268; 318 Производные кемпферола

7 15,0 200 пл; 265; 315

8 21,0 268;312 Флавоноид группы флавона

9 21,5 202пл; 268; 310 Производное кемпферола

Стандартные образцы

1 10,2 218; 235 пл; 305 пл; 327 Хлорогеновая кислота

2 12,0 220; 240; 305 пл; 325 Кофейная кислота

3 16,5 218; 240; 300 пл; 325 Феруловая кислота

4 14,8 200; 215; 325 Умбеллиферон

5 15,1 195; 278 Пирокатехин

6 16,2 203; 257; 350 Кверцитрин

7 19,3 250; 294; 307 пл Флавон

8 20,3 202; 255 Кверцетин

9 24,2 195; 267 Кемпферол

АЛЬМАНАХ

РИС. 2.

Хроматограмма спиртового извлечения травы хатьмы тюрингенской и спектры поглощения соединений: 1 - производное хлорогеновой кислоты, 2 - флавоноид группы флавона, 3-5 - соединения кумаринового ряда, 6 - производное катехина, 7-10 - флавоноиды группы флавона, 11-12 - производные катехина, 13-14 - флавоноиды группы флавона.

АЛЬМАНАХ

(т=12,2 мин; Xmax=220 пл; 315 нм), пик 3 - производное кофейной кислоты (т=13,1 мин; Xmax=219; 235 пл; 330 нм), пик 4 - производное умбеллиферона (т=13,6 мин; Xmax=218 пл; 330 нм). Наиболее выраженные пики 1 и 3 образуют оксикоричные кислоты (рис. 1).

В спиртовом извлечении травы: пик 1 - производное хло-рогеновой кислоты (т=9,6 мин; Xmax=213; 235 пл; 305 пл; 330 нм), пик 2 - флавоноид группы флавона (т=11,5 мин; Xmax=202; 268; 330 нм), пики 3-5 - соединения кумари-нового ряда (т=12,0 мин; Xmax=198; 215 пл; 270; 328 нм; т=12,5 мин; Xmax=196; 213 пл; 275; 298 пл; 330 нм; т=13,5 мин; Xmax=198; 212 пл; 270; 328 нм), пик 6 - произ-

водное катехина (т=14,8 мин; Хтах=200; 270 нм), пики 7-10 - флавоноиды группы флавона (т=15,3 мин; Хтах=200; 270; 335 нм; т=15,7 мин; Хтах=200; 270; 330 нм; т=16,5 мин; Хтах=200; 270; 330 нм; т=16,7 мин; Хтах=200; 268; 335 нм), пики 11-12 - производные катехина (т=18,0 мин; Хтах=200; 275 нм; т=18,3 мин; Хтах=200; 270 нм), пики 13-14 - флавоноиды группы флавона (т=21,0 мин; Хтах=222 пл; 268; 315 нм; т=21,5 мин; Хтах=268; 310 нм).

Наиболее выраженные пики 1, 2, 13, 14 образуют производное хлорогеновой кислоты, флавоноиды группы флавона (рис. 2).

0.6- f \ 0.7- )\ 0.42-

05 \ Л ( \ 0.35-

04 V \ / 0£. \ ш 0.28-О

\ / t \ f \ 0.2t -

0.21 - V / 0 30.2- V, \ 0.14-

А

А

V

\

г

\

\

/

V

5

\

0.24

0.20

ui 0.18 О

0.12 0.0S л пл

РИС. 3.

Хроматограмма спиртового извлечения стебляхатьмы тюрингенской и спектры поглощения соединений: 1 - хлорогеновая кислота, 2 - флавоноид группы флавона, 3 - соединение кумариновой природы, 4 - производное кофейной кислоты, 5 - производное катехина, 6 - производное умбеллиферона, 7 - флавоноид группы флавона.

1

2

3

5

1

6

4

АЛЬМАНАХ

В спиртовом извлечении стеблей: пик 1 - хлорогеновая кислота (т=10,6 мин; Атах=218; 235 пл; 305 пл; 330 нм), пик 2 - флавоноид группы флавона (т=12,3 мин; Атах= 206; 270; 327 нм), пик 3 - соединение кумаринового ряда (т=12,6 мин; Атах=205; 220 пл; 270; 328 нм), пик 4 -производное кофейной кислоты (т=13,6 мин; Атах=218; 235 пл; 330 нм), пик 5 - производное катехина (т=15,1 мин; Атах=200; 275; 325 нм), пик 6 - соединение кумаринового ряда (т=16,2 мин; Атах=200; 295 пл; 330 нм), пик 7 -флавоноид группы флавона (т=16,7 мин; Атах=202; 275 пл; 345 нм). Наиболее выраженные пики 1 и 4 образуют окси-коричные кислоты (рис. 3).

Спиртовое извлечение листьев: пик 1 - производное хло-рогеновой кислоты (т=9,6 мин; Атах=212; 235 пл; 305 пл;

330 нм), пик 2 - производное кверцетина (т=10,7 мин; Атах=204; 265 пл; 355 нм), пик 3 - производное кемпферо-ла (т=11,9 мин; Атах=270 пл; 325 нм), пики 4-5 - производные феруловой кислоты (т=12,4 мин; Атах=218; 240; 300 пл; 330 нм и т=13,1 мин; Атах=218; 240; 300 пл; 330 нм), пик

6 - кверцитрин (т=16,2 мин; Атах=204; 264 пл; 355 нм), пик

7 - флавоноид группы флавона (т=19,5 мин; Атах=268 пл; 315 нм). Наиболее выраженные пики 1, 2, 7 образуют хлорогеновая кислота, производные кверцетина и флавона (рис. 4).

В спиртовом извлечении цветков: пик 1 - производное хлорогеновой кислоты (т=9,5 мин; Атах=214; 235 пл; 305 пл; 330 нм), пики 2-5 - фенологликозиды (т=10,3 мин; Атах=240 пл; 330 нм; т=11,6 мин; Атах=230 пл; 320 нм; т=12,2 мин; Атах=230 пл; 320 нм; т=13,0 мин; Атах=215 пл;

РИС. 4.

Хроматограмма спиртового извлечения листьев хатьмы тюрингенской и спектры поглощения соединений: 1 - производное хлорогеновой кислоты, 2 - производное кверцетина, 3 - производное кемпферола, 4-5 - производные феруловой кислоты, 6 - кверцитрин, 7 - флавоноид группы флавона.

АЛЬМАНАХ

0.20- 0.28-

0.38- |

0.21 -

ц! 0.10- 0.27 -

1 Л Л \ О 0.05- . О 0,4 " V / Л \ ° 0 18

V / / \

ООО- N \ / / / 0.07 - [V,- \ / X 0.09-

0.03- X 71- ч ч

0.00-

190 210 230 250 270 290 310 330 350 Длина волны, им

190 210 230 250 270 290 310 330 350 Длина волны, ни

190 210 230 250 270 290 310 330 350 Длина волны, ни

193 210 230 250 270 290 310 330 350 Длина волны, ни

0.30- 0.400.32-

\ 0.24-

ш 0186 \ / \ О 0.16- \

0.12- \ / 0.08- 4

0.05 - V /

190 210 230 250 270 290 310 330 350 Длина волны, ни

190 210 230 250 270 290 310 330 350 Длина волны, ни

0.15 0.10 0.05. О.ОЗ

1

\

\

V

^_ V \у

190 210 230 250 270 290 310 330 350 Длина волны, ни

190 210 230 250 270 290 310 330 350 Длина волны, ни

0.30 0.24 0.18 0.12 0.05

\

\

V

190 210 230 250 270 293 310 330 350 Длина ЕОПКЫ, ни

9

РИС. 5.

Хроматограмма спиртового извлечения цветков хатьмы тюрингенской и спектры поглощения соединений:

1 - производное хлорогеновой кислоты, 2-5 - фенологликозиды, 6-7 - производные кемпферола, 8 - флавоноид группы флавона, 9 - производное кемпферола.

3

2

4

1

5

8

6

7

МЕДИЦИНСКИЙ

АЛЬМАНАХ

330 нм), пики 6-7 - производные кемпферола (т=14,1 мин; Хтах=200; 268 пл; 318 нм и т=15,0 мин; Хтах=200; 265 пл; 315 нм), пик 8 - флавоноид группы флавона (т=21,0 мин; Хтах=268 пл; 312 нм), пик 9 - производное кемпферола (т=21,5 мин; Хтах=202 пл; 268; 310 нм). Наиболее выраженный пик 8 образует производное флавона (рис. 5).

Таким образом, во всех органах обнаружены оксикорич-ные кислоты. В траве, стеблях, листьях и цветках -флавоноиды. Флавоноиды травы и стеблей представлены производными катехина и флавона, листьев и цветков -флавоноидами групп флавонола (производные кверцети-на, кемпферола) и флавона. В корнях, траве, стеблях содержатся кумарины, в цветках - фенологликозиды.

При сравнении качественного состава фенольных соединений вегетативных органов установлено, что трава содержит комплекс фенольных соединений, обнаруженных во всех частях растения, поэтому в качестве ЛРС целесообразно использовать траву.

Выводы

Методом высокоэффективной жидкостной хроматографии установлен состав комплекса фенольных соединений вегетативных органов и цветков хатьмы тюрингенской, заготовленной на территории Алтайского края. В корнях обнаружены производные кофейной, хлорогеновой кислот и умбеллиферона; в траве и стеблях - производные хлороге-новой кислоты, флавоноиды групп флавона и катехина, соединения кумариновой природы; в листьях - производные хлорогеновой и феруловой кислот, производные кверцети-на (кверцитрин и др.), кемпферола, флавона; в цветках -фенологликозиды, производные кемпферола и флавона.

ЛИТЕРАТУРА

1. Махлаюк В.П. Лекарственные растения в народной медицине. Саратов: Приволжское книжное издательство, 1993. 544 с.

Mahlayuk V.P. Lekarstvennye rasteniya v narodnoj meditsine. Saratov: Privolzhskoe knizhnoe izdatel'stvo, 1993. 544 s.

2. Федосеева Л.М., Мызникова О.А. Определение состава БАС хатьмы тюрингенской травы, произрастающей на территории Алтайского края. Актуальные проблемы фармакологии и фармации: ежегодн. сб. науч. и метод. раб. препод., молод. уч. и студ. фарм. фак. Барнаул. 2016. Вып. 13. С. 204-206.

Fedoseeva L.M., Myznikova O.A. Opredelenie sostava BAS hat'my tyu-ringenskoj travy, proizrastayushhej na territorii Altajskogo kraya. Aktu-al'nye problemy farmakologii i farmacii: ezhegodn. sb. nauch. i metod. rab. prepod., molod. uch. i stud. farm. fak. Barnaul. 2016. Vyp. 13. S. 204-206.

3. Кирьякова В.О. Фармакогностическое изучение некоторых видов рода Urtica, произрастающих на территории Алтайского края: автореф. дис. ... к. фарм. н. / В.О. Кирьякова. Пермь, 2013. 191 с.

Kir'yakova V.O. Farmakognosticheskoe izuchenie nekotoryh vidov roda Urtica, proizrastayushhih na territorii Altajskogo kraya: avtoref. dis. ... k. farm. n./V.O. Kir'yakova. Perm', 2013. 191 s.

4. Корулькин Д.Ю., Абилов Ж.А., Музычкина Р.А., ТолстиковГ.А. Природные флавоноиды. Новосибирск: Академическое изд-во «Гео», 2007. 232 с.

Korul'kin D.Yu.,Abilov Zh.A., Muzychkina R.A., Tolstikov G.A. Prirodnye flava-noidy. Novosibirsk: Akademicheskoe izd-vo «Geo», 2007. 232 s.

5. Mabry T.J., Markham K.R., Thomas M.B. The systematic identification of Flavonoids. Berlin-Heidelberg-New York: Springer Verlag. 1970. 354 p.

6. Wagner H., Bauer R., Melchart D., Xiao P.-G., Staudinger A. Chromatographic Fingerprint Analysis of Herbal Medicines. Wien-New York: Springer Wien New York.

2011. 1012 p. E3