ОПРЕДЕЛЕНИЕ И ИДЕНТИФИКАЦИЯ МИКРООРГАНИЗМОВ НА ПРОЗРАЧНЫХ ПРОНИЦАЕМЫХ МЕМБРАНАХ

1. Устройство для определения, идентификации, или подсчета микроорганизмов которое включает:
контейнер с питательной средой для поддержания роста микроорганизмов; пористый элемент, находящийся в контакте с питательной средой и который позволяет питательным веществам проходить насквозь и поддерживать рост клеток, где пористый элемент переносится для последующей обработки индикаторами или для визуальной инспекции, и, где пористый элемент прозрачный, водопроницаемый и проницаемый для питательных и индикаторных веществ.
2. Устройство, описанное в п.1, где пористый элемент - водопроницаемая мембрана, которая является непроницаемой для микроорганизмов, но выдерживающая автоклавирование, гидрофильная, нефлуоресцентная, бесцветная, и стойкая к секретируемым клеточным ферментам.
3. Устройство, описанное в п.1, где питательная среда содержит только вещества, которые не предотвращают или подавляют микробный рост, и где питательная среда являются или плотной питательной средой общего назначения или селективной или дифференциальной питательной средой.
4. Устройство, описанное в п.1, включающее пористый элемент установленный сверху питательной среды в контейнере с или без верхнего слоя питательной среды.
5. Устроство, описанное в п.1, где пористый элемент выбирается из группы состоящей из: регенерированной целлюлозы, целофана, купрофана или диализной мембраны.
7
6. Устройство, описанное в п.1, где пористый элемент - проницаемая мембрана с регулярными или нерегулярными порами в пределах 1000-10 Да.
7. Устройство, описанное в п.1, где питательная среда находится в твердом, полутвердом или жидком состоянии и где пористый элемент проводит питательные вещества из среды к микроорганизмам, расположенным сверху пористого элемента.
8. Устройство, описанное в п.1, кроме того включающее:
множество пористых элементов, расположенных на или в питательной среде, параллельно для параллельного тестирования.
9. Тест-набор для определения, идентификации или подсчета микроорганизмов, включающий:
контейнер с питательной средой для поддержания роста микроорганизмов; пористый элемент находящийся в контакте с питательной средой, несущий колонии непосредственно на пористом элементе или на питательной среде расположенной сверху пористого элемента и для переноса колоний для последующего процесса индикации, где пористый элемент прозрачен, водо-проницаем, проницаем для питательных и индикаторных веществ и вторичная среда действующая как носитель для освобождения молекул индикатора для окраски колоний.
10. Тест-система в соответствии с п.9, где вторичная среда выбирается из группы, состоящей из: агарозы, каррагинана, желатины или иного геля, способного к затвердеванию, и где концентрация указанных гелей может быть в примерных пределах 0,1%-10% и растворенных в воде, буфере, растворе хлорида натрия или жидкой питательной среде.
11. Тест-система в соответствии с п.9, где индикатором для микроколоний может служить хромогенный субстрат, флуорогенный субстрат или радиоактивно меченые антитела.
12. Метод для определения, идентификации и подсчета микроорганизмов, включающий шаги:
подготовка контейнера со средой с пористым элементом наверху или под поверхностью среды, где среда имеет питательные вещества для поддержания роста микроорганизмов;
заливка жидкого образца в контейнер по площади пористого элемента;
удержание микроорганизмов на фильтрующем элементе или на среде на поверхности пористого элемента;
инкубирование контейнера;
перенос пористого элемента и любой среды на его поверхности из контейнера на вторичную среду с индикатором с целью оценки микроорганизмов;
перенос пористого элемента со вторичной среды в прибор для определения и идентификации клеток; и
выявление формы колоний для определения, идентификации и подсчета микроорганизмов.
13. Метод, описанный в п.12, где выявление формы производится вручную или с помощью анализатора идентификации и узнавания образов.
14. Метод, описанный в п.12, включающий стадию определения общего числа живых микроорганизмов (ОЧЖМ).
15. Метод, описанный в п.12, где устройством для определения и идентификации клеток служит микроскоп или автоматическая система для анализа образов.
16. Метод, описанный в п.12, где вторичная среда содержит индикаторное вещество, способствующее идентификации микроорганизмов на пористом элементе.
17. Метод, описанный в п.12, где пористый элемент удерживает как нефильтруемые, так и фильтруемые образцы.
18. Метод изготовления устройства для определения микроорганизмов, включающий:
контейнер с питательной средой;
установка пористого элемента сверху среды в контейнере; и
заливка дополнительной жидкой среды на пористый элемент и на верхнюю поверхность среды в контейнере, где и среда в контейнере, и дополнительная жидкая среда имеют питательные вещества, поддерживающие клеточный рост.
19. Метод, описанный в п.18, дополнительно включающий шаги:
создание отверстия в верхней поверхности среды для вставления фильтрующего элемента;
установка фильтрующего элемента в отверстие таким образом, чтобы верхняя поверхность фильтрующего элемента была на одном уровне или ниже, чем верхняя поверхность.
20. Метод, описанный в п.19, где способ создания отверстия включает следующие шаги:
установка прокладки на верхней поверхности среды;
заливка жидкой среды на прокладку и на верхнюю поверхность среды с целью формирования верхней поверхности;
позволить жидкой среде хотя бы частично затвердеть для создания тонкого слоя среды на поверхности прокладки; и
удалить прокладку вместе с тонким слоем среды на поверхности с целью создания отверстия в среде.