Перибилиарные железы желчных протоков как ниша мультипотентных стволовых клеток

Обзоры

29

ПЕРИБИЛИАРНЫЕ ЖЕЛЕЗЫ ЖЕЛЧНЫХ ПРОТОКОВ КАК НИША МУЛЬТИПОТЕНТНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК

Э.И. Шарипова 12, И.М. Газизов 1 2, А.А. Гумерова 1, А.П. Киясов 1

1 Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань, Россия

2 Казанский государственный медицинский университет, Казань, Россия

Peribiliary glands of biliary tree as a niche of multipotent stem cells

E.I. Sharipova 12, I.M. Gazizov12, AA. Gumerova 1, A.P. Kiassov1

1 Kazan (Volga region) Federal University, Kazan, Russia

2 Kazan State Medical University, Kazan, Russia

Перибилиарные железы — это трубчато-альвеолярные железы, расположенные в стенке крупных желчных протоков или около них и открывающиеся в их просвет. Они описаны у человека и многих животных. Долгое время единственной их функцией считали продукцию муцина, однако в настоящее время появились сообщения о наличии в перибилиарных железах ниши мультипотентных стволовых клеток, которые могут дифференцироваться в гепатоциты, холангиоциты и клетки островков поджелудочной железы. В настоящем обзоре рассмотрены строение и функции перибилиарных желез, а также возможности и перспективы применения стволовых клеток, связанных с перибилиарными железами, в регенеративной медицине.

Ключевые слова: перибилиарные железы, жёлчные протоки, стволовые клетки.

Жёлчные пути представляют собой совокупность трубчатых образований (жёлчных протоков) увеличивающегося диаметра, осуществляющих транспорт жёлчи от жёлчных капилляров печени до двенадцатиперстной кишки [1]. Выделяют две группы жёлчных протоков: внепечёночные и внутрипечёночные. К внепечёночным жёлчным протокам относятся левый и правый печёночные протоки, общий печёночный проток, жёлчный пузырь с пузырным протоком, общий жёлчный проток и печёночноподжелудочная ампула. Внутрипечёночные протоки начинаются каналами Геринга, продолжаются в жёлчные проточки, внутридольковые, междольковые, септальные протоки. После них идут региональные (area) протоки (area ducts), описываемые в зарубежной классификации [1], и сегментарные протоки. Последние два относят к крупным внутрипеченочным жёлчным протокам. В отечественной классификации промежуточного звена между септальными и сегментарными протоками не выделяют. Септальные протоки считают переходным звеном между крупными внутрипечёночными протоками и междольковыми протоками [2]. Поверхность как внутрипечёночных, так и внепечёночных жёлчных протоков изнутри выстлана эпителиальными клетками — холангиоцитами [3].

С гистологической точки зрения общей уникальной характеристикой для крупных внутрипечёночных и внепечёночных протоков является наличие в их стенке железистых элементов. В научной литературе их называют перибилиарными железами (ПБЖ) или peribiliary glands (PBG) [2], но, согласно последней анатомической номенклатуре, правильным является термин «железы жёлчных протоков» [1]. ПБЖ внепеченочных жёлчных протоков описаны у человека, лабораторных животных (крыс, мышей) [4—7], а также у большинства млекопитающих [8], не обнаружены они пока только у рептилий [9].

е-mail: Elwish@mail.ru

Peribiliary glands are located along the large bile ducts. They are found in human and majority of the animals. Other than mucous production, their function had not been defined until recently. But nowadays the question of their multiple functions is actively studied. Due to the last years reports peribiliary glands contain multipotent stem cells, which can differentiate into hepatocytes, cholangiocytes or pancreatic islets cells. The structure and function of peribiliary glands, known experimental models and perspectives of peribiliary glands use in regenerative medicine are discussed in the review.

Key words: peribiliary glands, biliary tree, stem cells.

ПБЖ — это трубчато-альвеолярные железы со слизистыми и серозными ацинусами [2, 9]. Они располагаются в стенке жёлчных протоков и непосредственно связаны с их просветом. Наибольшее количество этих желез локализуется в месте отхождения пузырного протока, в области печёночно-поджелудочной ампулы, а также в области ворот печени. В жёлчном пузыре ПБЖ нет [10]. Во внутрипечёночных жёлчных путях ПБЖ были обнаружены только в стенке крупных протоков (сегментарных и региональных). Иногда ПБЖ обнаруживают и на уровне септальных жёлчных протоков в виде небольших выпячиваний (эвагинаций) эпителия жёлчных протоков, междольковые жёлчные протоки желез не содержат [1].

Выделяют две разновидности желез: интрамуральные и экстрамуральные ПБЖ [1, 2]. Интрамуральные ПБЖ локализуются в стенке жёлчных протоков и состоят из клеток, продуцирующих муцин (PAS+клетки). Экстрамуральные перибилиарные железы — вне их стенки, и состоят из PAS-клеток.

Несмотря на очевидность существования ПБЖ, вопрос об их функции на данный момент остается дискутабельным. Вплоть до 2011 года единственной основной функцией ПБЖ считали продукцию муцина [1, 11], который, вероятно, защищает стенку жёлчных протоков от повреждающего действия жёлчи. Y. Nakanuma полагает, что ПБЖ, выделяя специфические панкреатические ферменты (а-амилазу, трипсин и липазу), способны принимать участие в переваривании белков и липидов и играть важную роль в физиологии жёлчи [1]. Благодаря наличию в составе ПБЖ лактоферрина и лизоцима, они играют протективную роль, противодействуя инфекционным агентам [12] и обеспечивая стерильность жёлчи [1, 6, 13]. Вероятнее всего, это далеко не все функции ПБЖ.

В 2010—2011 гг. появились сведения о наличии в ПБЖ ниши мультипотентных стволовых клеток,

Гены & Клетки Том IX, № 3, 2014

30

Обзоры

которые способны при определенных условиях культивирования давать начало как билиарному эпителию, так и клеткам печени и поджелудочной железы [11]. Уникальная способность этих клеток дифференцироваться как в клетки жёлчных протоков, так и в клетки печени и поджелудочной железы может быть связана с тем, что в ходе эмбрионального развития эпителиальные клетки этих органов имеют общее происхождение из эпителия двенадцатиперстной кишки [1].

V. Cardinale с соавт. (2012) при исследовании плодов человека на 18-22-й нед. гестации обнаружили зачатки ПБЖ в виде мешковидных выпячиваний эпителия во внепечёночных жёлчных протоках. Муцин-продуцирующие клетки в них на этом сроке не были выявлены. При иммуногистохимическом окрашивании в клетках ПБЖ были обнаружены маркеры энтодермальных стволовых и (или) прогенитор-ных клеток: epithelial cell adhesion molecule (EpCAM), pancreatic and duodenal homeobox 1 (PDX1), транскрипционный фактор SOX17, рецептор Lgr5 (leucine-rich repeat-containing G-protein-coupled receptor 5); такие клетки располагались преимущественно на дне формирующихся желез. На этом же сроке эмбрионального развития во внутрипечёночных жёлчных протоках зачатки ПБЖ выявлены не были [1]. Более того, сроки, когда начинают формироваться внутрипечёночные ПБЖ, в настоящее время не установлены.

У человека ПБЖ заканчивают свое формирование к 15 годам [13]. По мере роста человека жёлчные протоки удлинняются, что приводит и к перераспределению ПБЖ, которые начинают локализоваться группами преимущественно в области разветвлений жёлчных протоков [5, 14]. Количество ПБЖ остается постоянным в течение всей жизни [5].

У взрослого человека ПБЖ внепечёночных желчных протоков состоят из холангиоцитов и муцин-про-дуцирующих клеток, которые составляют более 60% всех клеток ПБЖ. Иммуногистохимический анализ показал, что около 12% клеток в составе ПБЖ экспрессируют поверхностные маркеры (EpCAM, нейрональную молекулу клеточной адгезии (Neuronal Cell Adhesion Molecule, NCAM), хемокиновый рецептор (chemokine receptor 4, CXCR4), LGR5) и (или) транскрипционные факторы (FOXa2, SOX9, OCT4), характерные для энтодермальных стволовых и про-гениторных клеток [1]. Мультипотентные стволовые и прогениторные клетки в ПБЖ внепечёночных жёлчных протоков сохраняются на протяжении всей жизни человека [11].

При исследовании организации ПБЖ в зрелом организме выявлено, что клетки, подобные про-гениторным, располагаются на дне ПБЖ вблизи фибромускулярного слоя, то есть они имеют ту же локализацию, что и в фетальном периоде [1, 15]. Для них характерна высокая экспрессия генов плю-рипотентных клеток NANOG, OCT4, SOX2, KLF4 и транскрипционных факторов SOX9, SOX17 и PDX1, необходимых для развития печени и поджелудочной железы, а также различных маркеров стволовых клеток (NCAM, CD133, CXCR4 и SALL4) [1, 16]. При этом, однако, обращает на себя внимание тот факт, что здесь и далее ко-экспрессия в единичных клетках установлена только для генов SOX17 и PDX1 [11]. Следовательно, весьма вероятно, что популяция данных клеток может быть весьма гетерогенной. Интересно, что эти клетки окрашиваются позитивно

при постановке иммуногистохимических реакций с антителами к маркерам пролиферации Ki67 и PCNA, и количество пролиферирующих клеток уменьшается по направлению от дна железы к её поверхности [1, 15].

В средней части железистых ацинусов располагаются так называемые промежуточные клетки. Двойное иммуногистохимическое окрашивание антителами к эпителиальной молекуле адгезии EpCAM и к различным маркерам (periodic acid schiff (PAS) — маркер бокаловидных клеток, secretin receptor (SR) — маркер зрелых холангиоцитов, инсулин — маркер b-клеток островков поджелудочной железы, альбумин — маркер гепатоцитов) показало наличие большой гетерогенной популяции промежуточных клеток (EpCAM+/PAS + , EpCAM+/SR + , EpCAM+^нсулин^ EpCAM+/альбумин + ), которые составляют порядка 26%±6,52% всех клеток ПБЖ. S.M. Yoon и соавт. (2011) считают, что эти клетки могут быть производными прогениторных клеток, расположенных в нижних отделах ПБЖ [17].

Полностью дифференцированные зрелые клетки (холангиоциты) находятся в непосредственной близости к просвету жёлчных канальцев. Кроме того, на уровне печёночно-поджелудочной ампулы в составе ПБЖ есть клетки, продуцирующие небольшое количество инсулина, а на уровне внепечёночных жёлчных протоков вблизи ворот печени — клетки, продуцирующие альбумин и специфический маркер гепатоцитов HepPar-1 [1, 15]. Также с помощью иммунофлуоресцентного окрашивания было показано, что на уровне печёночно-поджелудочной ампулы клетки ПБЖ экспрессируют маркеры бокаловидных клеток (PAS), зрелых холангиоцитов (SR), р-клеток островков (инсулин) [1].

В печёночном и пузырном протоке клетки ПБЖ экспрессируют те же маркёры, но при этом процент инсулин+ клеток на этом уровне значительно ниже, а HepPar-1 + клеток становится больше по сравнению с печёночно-поджелудочной ампулой [1]. Таким образом, очевидно, что чем ближе ПБЖ располагаются к поджелудочной железе, тем больше в их составе клеток, экспрессирующих панкреатические маркеры, тогда как в ПБЖ, расположенных ближе к печени, больше клеток, экспрессирующих гепатоци-тарные маркеры (табл.).

Эта закономерность сохраняется при рассмотрении ПБЖ внутрипечёночных желчных протоков, уходящих вглубь печени. Количество инсулин+ клеток в них меньше, чем в общем печёночном протоке, а количество HepPar-1 + клеток больше, чем в печёночно-поджелудочной ампуле. В ПБЖ крупных внутрипечёночных жёлчных протоков присутствуют клетки, экспрессирующие EpCAM, PDX1, SOX17, NCAM, CD133, CXCR4, LGR5. На уровне междолевых жёлчных протоков клетки, коэкспрессирующие EpCAM, PDX1 и SOX17, не обнаружены. Выявлены только единичные EpCAM + клетки [1, 11].

Жёлчный пузырь не содержит ПБЖ [1, 10], однако, в эпителии его стенки было выявлено небольшое количество клеток, экспрессирующих EpCAM, NCAM, CD133, CXCR4, LGR5, PDX1 и SOX17 [1]. Также получены доказательства пролиферативной активности этих клеток, они экспрессируют Ki67

[18]. R. Kuver (2007) не исключает способности эпителиальных клеток жёлчного пузыря при культивировании в определенных условиях дифференцироваться в клетки с фенотипом гепатоцитов, поскольку

Гены & Клетки Том IX, № 3, 2014

Обзоры

31

они экспрессируют гены, характерные для гепатоци-тов, такие как альдолаза В, альбумин, ядерный фактор гепатоцитов (Hepatocyte nuclear factors, HNF-4) и др. [19].

В настоящее время проводятся различные исследования ПБЖ, включая эксперименты in vitro и in vivo. Так, ряд авторов считает, что прогениторные клетки ПБЖ могут быть легко выделены из нормальной ткани доноров любого возраста и могут быть культивированы в определенных условиях в бессывороточной среде [11, 20—22]. Однако чистота выделенной культуры авторами не была подтверждена, и четкий пошаговый протокол выделения про-гениторных клеток ПБЖ в статьях не приводится, что не позволяет воспроизвести результаты, полученные авторами.

Далее было показано [11], что описанные ство-ловые/прогениторные клетки ПБЖ могут сохраняться в недифференцированном состоянии в культуре в среде Кубота в течение 4—8 нед. На протяжении всего времени они экспрессируют EpCAM. К моменту пересева этих клеток в различные среды для

дифференцировки они формируют колонии и экспрессируют маркеры стволовых клеток, такие как CXCR4, SOX9, SOX17, PDX1, CD133 и ничтожно малый уровень генов дифференцированных клеток (альбумин, SR, инсулин). Для последующей диффе-ренцировки этих клеток их пересевали в различные среды в зависимости от того, какие клетки в дальнейшем планировалось получать: в среду HDM-L для получения гепатоцитов, в среду HDM-C для получения холангиоцитов, в среду HDM-P — для получения клеток островков поджелудочной железы. Среды для культивирования содержали различные факторы роста и гормоны, их состав разработан авторами исследования [11]. Клетки контрольной группы культивировали в первоначальной среде Кубота. В результате в среде HDM-L авторами были обнаружены клетки, экспрессирующие одновременно цитокератин 18 (CK18) и альбумин, которые составляли 36,7±10,4% от общего числа клеток колонии в монослое. Они были локализованы преимущественно по периферии колонии, в центре располагались недифференцированные клетки, которые экспрессировали

Основные маркеры мультипотентных стволовых и (или) прогениторных клеток в печени, желчных протоках и поджелудочной железе [20]

Печень Желчные протоки Поджелудочная железа

Клетки Гепатобласты, смежные с каналами Геринга [25, 26] Стволовые клетки печени в каналах Геринга [25, 27-29] Субпопуляции стволовых клеток желчных протоков в перибилиарных железах (ПБЖ) [1, 11,20, 30, 31] Детерминированные прогениторы поджелудочной железы в железах панкреатического протока [20]

Энтодермальные маркеры SOX 9 SOX 9 SOX 17 SOX 9 SOX 17 SOX 9 SOX 17 PDX1 SOX 9 PDX1 SOX 9 PDX1

Эпителиальные маркеры CK8 и 18, CK19

Молекулы клеточной адгезии ICAM-1 EpCAM NCAM EpCAM NCAM EpCAM LGR5 NCAM NCAM EpCAM LGR5 EpCAM

Гены плюрипотентности - - OCT4A, SOX2, NANOG, KLF4 -

Другие маркеры стволовых клеток 16, 20, 22 CXCR4 CD133 SALL4 CXCR4, CD133, SALL4 CD117 [27, 37] CXCR4, CD133, SALL4 CXCR4 [32], CD133 [33, 34, 35, 36], CD24 [37]

Маркеры гепатоцитов альбумин++ AFP+++ P450A7 гликоген [27, 28] альбумин +/-, AFP- [27, 28] - -

Панкреатические маркеры ISL1 PROX 1 NeuroD PAX4 NGN3 MAFA MUC6 [39, 40]

CK — цитокератин, AFP — а-фетопротеин.

Гены & Клетки Том IX, № 3, 2014

32

Обзоры

EpCAM. При культивировании этих клеток на матриксе на основе гиалуронового гидрогеля с коллагеном были обнаружены тяжи кубовидных клеток с ультраструктурными и функциональными характеристиками гепатоцитов, что сопровождалось значительным увеличением в экспрессии генов, специфичных для гепатоцитов (HNFa4, a-фетопротеин, CK8 и 18, альбумин). В группе контроля клетки с маркерами гепатоцитов не были найдены. В среде HDM-C по периферии колонии были выявлены клетки, которые экспрессировали маркеры холангиоцитов ЦК7, SR, трансмембранный регулятор муковисцидоза (Cystic Fibrosis Transmembrane conductance Regulator, CFTR) (49,2%±11,1% от общего числа клеток в колонии). При культивировании на матриксе клетки образовывали ветвящиеся протоки. В группе контроля маркеры холангиоцитов экспрессировало минимальное число клеток (3,2±2,6% от общего числа клеток в колонии). В среде HDM-P формирование островковоподобных структур происходило при культивировании как на пластике, так и на матриксе на основе гиалуронового гидрогеля с коллагеном. Культивируемые клетки экспрессировали C-peptide, PDX1, а также инсулин, глюкагон и соматостатин. Также была показана их способность регулировать уровень глюкозы на 7—10 сут. культивирования [20].

Также авторы показали способность изучаемых клеток ПБЖ дифференцироваться в зрелые клетки печени in vivo. Клетки ПБЖ выделяли из желчных протоков печени и поджелудочной железы человека, непригодных для трансплантации [11]. В первом эксперименте 500 тыс. прогениторных клеток, выделенных из ПБЖ жёлчных протоков человека, были трансплантированы непосредственно в печень здоровых мышей, и через 30 сут. животных выводили из эксперимента. Данный способ введения клеток вызывает, однако, некоторые сомнения. Гидростатическое давление в печени обычно приводит к «вытеканию» введенной суспензии, а место инъекции кровоточит, в связи с чем при необходимости доставки трансплантируемых клеток в печень их обычно вводят в селезенку или в воротную вену [23, 24]. Человеческие клетки, по данным авторов, были обнаружены у этих мышей в месте инъекции, а также некоторые из них — в синусоидах перипор-тальной и внутридолевой паренхимы: около 6±2,5% общей площади доли печени занимали зрелые гепа-тоциты, которые экспрессировали HepPar-1 и альбумин человека, а во внутрипечёночных желчных протоках 12,7%±5,5% холангиоцитов экспрессировали ЦК7 человека, что, по мнению авторов, указывает на неразрывную связь этих клеточных типов. Опухолевой трансформации обнаружено не было. В контрольной группе животных, которым вводили среду RPMI без клеток, человеческих клеток в печени не выявлено [11]. Однако полученные

ЛИТЕРАТУРА:

1. Carpino G., Cardinale V., Onori P. et al. Biliary tree stem/ progenitor cells in glands of extrahepatic andintraheptic bile ducts: an anatomical in situ study yielding evidence of maturational lineages. J. Anat. 2012; 220(2): 186-99.

2. Nakanuma Y., Hoso M., Sanzen T. et al. Microstructure and development of the normal and pathologic biliary tract in humans,including blood supply. A review. Microsc. Res. Tech. 1997; 15: 552-70.

3. Cardinale V., Wang Y., Carpino G. et al. The biliary tree — are reservoir of multipotent stem cells. Gastroenterology & Hepatology 2012; 9: 231-40.

результаты вызывают ряд вопросов. Во-первых, для мечения клеток человека не были использованы специальные маркеры. Применение же для идентификации введенных клеток антител к антигенам человека не обязательно указывает на их принадлежность именно к человеческим клеткам ввиду возможности межвидового перекрестного взаимодействия антител. Во-вторых, даже если допустить специфичность окрашивания именно антигенов человека, этот факт может указывать не на прямую дифференцировку введенных клеток в гепатоциты и холангиоциты, а на слияние их с клетками реципиента.

Второй эксперимент вызывает еще больше вопросов. В данном случае авторы извлекали расположенную вокруг придатка яичка жировую клетчатку, вводили в нее агрегаты стволовых клеток ПБЖ человека (0,3—0,5 млн клеток) и затем помещали данный комплекс в полость живота мышей со стрептозоциновым сахарным диабетом. Через 2 мес. после трансплантации у экспериментальных животных происходило достоверное непрерывное снижение уровня глюкозы в крови, в то время как у контрольной группы (без введения клеток), уровень глюкозы оставался постоянно высоким [11]. Однако механизмы, которые могли обеспечить снижение уровня гликемии, остаются непонятными, так как возможности дифференцировки введенных клеток и морфология поджелудочной железы не были изучены авторами.

Подводя итог, можно сказать, что прогениторные клетки ПБЖ несомненно могут стать новым перспективным источником для разработки методов клеточной терапии заболеваний печени и поджелудочной железы, в том числе сахарного диабета. Наиболее оптимальным источником получения стволовых клеток ПБЖ, вероятно, является печеночно-поджелудочная ампула ввиду их наибольшей концентрации именно в этой области. Однако эта популяция клеток требует дальнейшего активного изучения, поскольку в настоящее время вопросы их выделения, фенотипическая характеристика, возможности дифферен-цировки в различных условиях, методы трансплантации изучены явно недостаточно, а имеющиеся результаты порой неоднозначны и противоречивы.

Благодарности

Работа выполнена в рамках государственной программы повышения конкурентоспособности Казанского (Приволжского) федерального университета среди ведущих мировых научно-образовательных центров. Работа финансировалась за счет субсидии, выделенной Казанскому федеральному университету для выполнения государственного задания в сфере научной деятельности.

4. Spitz L. Choledochal cyst. Surg. Gynecol. Obstet. 1978; 147: 444—52.

5. Terada T., Nakanuma Y. Development of human intrahepatic peribiliary glands. Histological, keratin immunohistochemical, and mucus histochemical analyses. Lab. Invest. 1993; 68: 261—9.

6. Terada T., Kida T., Nakanuma Y. Extrahepatic peribiliary glands express a-amylase isozymes, trypsin and pancreatic lipase: an immunohistochemical analysis. Hepatology 1993; 18: 803—8.

7. Terada T., Nakanuma Y. Pancreatic lipase is a useful phenotypicmarker of intrahepatic large and septal bile ducts, peribiliary glands, and their malignant counterparts. Mod. Pathol. 1993; 6: 419—26.

Гены & Клетки Том IX, № 3, 2014

Обзоры

33

8. Royce S.G., Hughes N.R., Binos S. et al. Vertebrate phylogeny of antigen D10: identification of a conserved foregut cell lineage. Histochem. Cell Biol. 2000; 114(2): 125-35.

9. Katayanagi K., Kono N., Nakanuma Y. Isloation, culture and characterization of biliary epithelial cells from different anatomical levels of the intrahepatic and extrahepatic biliary tree from a mouse. Liver 1998; 18: 90-8.

10. Cardinale V., Wang Y., Carpino G. Multipotent stem cells in the biliary tree. Ital. J. Anat. Embryol. 2010; 115(1-2): 85-90.

11. Cardinale V. et al. Multipotent stem/progenitor cells in human biliary tree give rise to hepatocytes, cholangiocytes and pancreatic islets. Hepatology 2011; 54: 2159-72.

12. Saito K., Nakanuma Y. Lactoferrin and lysozyme in the intrahepatic bile duct of normal livers and hepatolithiasis. An. immunohistochemical study. J. Hepatol. 1992; 15(1-2): 147-53.

13. Nakanuma Y., Katayanagi K., Terada T., Saito K. Intrahepatic peribiliary glands of humans. I. Anatomy, developvent and presumed functions. J. Gastroenterol. Gepatol. 1994; 9(1): 75-9.

14. Song S.Y., Gannon M., Washington M.K. et al. Expansion of Pdx1-expressing pancreatic epithelium and islet neogenesis in transgenic mice overexpressing transforming growth factor a. Gastroenterology. 1999; 117: 1416-26.

15. Lanzoni G., Oikawa T., Wang Y. et al. Concise Review: Clinical Programs of stem cell therapies for liver and pancreas. Stem Cells 2013: 31: 2047-60.

16. Oikawa T., Kamiya A., Zeniya M. et al. SALL4, a stem cell biomarker for liver cancers. Hepatology 2013; 57: 1469-83.

17. Yoon S.M., Gerasimidou D., Kuwahara R. et al. Epithelial cell adhesion molecule (EpCAM) marks hepatocytes newly derived from stem/progenitor cells in humans. Hepatology 2011; 53: 964-73.

18. Sutton M.E., op den Dries S., Koster M.H. et al. Regeneration of human extrahepatic biliary epithelium: the peribiliary glands as progenitor cell compartment. Liver Int. 2012: 32(4):554-9.

19. Kuver R., Savard, C.E., Lee et al. Murine gallbladder epithelial cells can differentiate into hepatocyte-like cells in vitro. Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 2007; 293: G944-G955.

20. Wang Y., Lanzoni G., Carpino G. et al. Biliary tree stem cells, precursorsto pancreatic committed progenitors: Evidence for life-long pancreaticorganogenesis. Stem Cells 2013; 31: 1966-79.

21. Schmelzer E., Zhang L., Bruce A. et al. Human hepatic stem cellsfrom fetal and postnatal donors. J. Exp. Med. 2007; 204: 1973-87.

22. Wang Y., Yao H-l, Barbier C. et al. Lineage-dependent epithelial mesenchymal paracrine signals dictate growth versus differentiation of human hepatic stem cells to adult fates. Hepatology 2010; 52: 1443-54.

23. Андреева Д.И., Газизов И.М., Йылмаз Т.С. и др. Возможные направления дифференцировки мононуклеаров пуповинной крови человека в регенерирующей печени крыс. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия 2013; VIII (3): 95-100.

24. Шафигуллина А.К., Трондин А.А., Бурганова Г.Р. и др. Сравнение различных методов выделения, мечения и трансплантации звездчатых клеток печени крысы. Клеточная трансплантология и тканевая инженерия 2013; VIII (3): 147-51.

25. Zhang L., Theise N., Chua M., et al. Human hepatic stem cells and hepatoblasts: Symmetry between Liver Development and Liver Regeneration. Hepatology 2008; 48: 1598-1607.

26. Kubota H., Reid L.M. Clonogenic hepatoblasts, common precursors for hepatocytic and biliary lineages, are lacking classical major histocompatibility complex class I antigens. PNAS USA 2000; 97: 12132-7.

27. Schmelzer E., Zhang L., Bruce A., et al. Human hepatic stem cells from fetal and postnatal donors. Journal of Experimental Medicine. 2007; 204: 1973-87.

28. Schmelzer E., Wauthier E., Reid L.M. Phenotypes of pluripotent human hepatic progenitors. Stem Cell 2006; 24: 1852-8.

29. Schmelzer E., Reid LM. Telomerase activity in human hepatic stem cells, hepatoblasts and hepatocytes from neonatal, pediatric, adult and geriatric donors. Eur. J. Hepatology and Gastroenterol. 2009; 21: 1191-8.

30. Semeraro R., Carpino G., Cardinale V. et al. Multipotent Stem/ Progenitor Cells in the Human Foetal Biliary Tree. J. Hepatology 2012; 220: 186-99.

31. Furth M.E., Wang Y., Cardinale V. et al. Stem Cell Populations Giving Rise to Liver, Biliary Tree and Pancreas. In: Sell S, ed. The Stem Cells Handbook, 2nd Edition. New York City, New York: Springer Science Publishers, NY; 2013.

32. Koblas T., Zacharovova K., Berkova Z. et al. Isolation and characterization of human CXCR4-positive pancreatic cells. Folia Biol. (Praha). 2007; 53: 13-22.

33. Lardon J., Rooman I., Bouwens L. Nestin expression in pancreatic stellate cells and angiogenic endothelial cells. Histochem. Cell Biol. 2002; 117: 535-40.

34. Lardon J., Corbeil D., Huttner W.B. et al. Stem cell marker prominin-1/AC133 is expressed in duct cells of the adult human pancreas. Pancreas. 2008; 36: e1-6.

35. Seaberg R.M., Smukler S.R., Kieffer T.J. et al. Clonal identification of multipotent precursors from adult mouse pancreas that generate neural and pancreatic lineages. Nat. Biotechnol. 2004; 22: 1115-24.

36. Hori Y., Fukumoto M., Kuroda Y. Enrichment of putative pancreatic progenitor cells from mice by sorting for prominin1 (CD133) and platelet-derived growth factor receptor beta. Stem Cells 2008; 26: 2912-20.

37. Huch M., Dorrell C., Boj S.F. et al. In vitro expansion of single Lgr5+ liver stem cells induced by Wnt-driven regeneration. Nature 2013; 494: 247-50.

38. Jiang W., Sui X., Zhang D. et al. CD24: a novel surface marker for PDX1-positive pancreatic progenitors derived from human embryonic stem cells. Stem Cells 2011; 29: 609-17.

39. Schaffer A.E., Freude K.K., Nelson S.B. et al. Nkx6 transcription factors and Ptf1a function as antagonistic lineage determinants in multipotent pancreatic progenitors. Dev. Dyn. 2010; 18: 1022-9.

40. Zaret K. Genetic programming of liver and pancreas progenitors: lessons for stem-cell differentiation. Nature Reviews 2008; 9: 329-4.

Поступила: 23.07.2014

Гены & Клетки Том IX, № 3, 2014