Способы повышения эффективности препарата на основе нематофагового гриба Duddingtonia flagrans

листьев) регулирующая роль паразитов ослабевает, и паразитокомп-лекс может сдерживать нарастание численности популяции хозяина только при зараженности его на 90 % и более.

Для повышения регуляторной роли комплекса природных паразитов в яблоневых садах необходимо создавать оптимальные условия для их размножения. Как правило, химические обработки в фазе розовый бутон не оказывают отрицательного действия на паразитов, тогда как обработки после цветения резко снижают численность многих энтомофагов. Согласно нашим наблюдениям, в садах, где после цветения применяли высокотоксичные пиретроиды, зараженность листоверток летнего поколения паразитами была в 2-2,3 раза меньше, чем там, где использовали экологически щадящие средства. Замена химических пестицидов микробиопрепаратами резко повышала эффективность природных популяций энтомофагов.

Хорошо зарекомендовал себя прием создания микрорезерватов

энтомофагов для усиления их полезной роли, а именно, высев в отдельных междурядьях сада или в непосредственной близости от него (по продольным периметрам сада) конвейера нектароносов: капустных (горчица, рапс), зонтичных (укроп, фенхель, тмин, кориандр, дикая морковь, анис), а также гречихи и фацелии. Подбор культур должен осуществляться с учетом сроков и продолжительности периодов цветения таким образом, чтобы в нем постоянно присутствовали цветущие растения. Примером для формирования нектароносного конвейера может быть следующий набор культур: рапс, кориандр, фенхель, дикая морковь. Очень удобной культурой для этой цели является гречиха с продолжительным периодом цветения, которая при посеве в 2 срока может цвести все лето. Специальный посев нектароносных растений увеличивает кормовую базу для дополнительного питания энтомофагов, а также способствует привлечению в садовый агроценоз многих хищников и паразитов-полифагов с окружающих территорий.

УДК 632.937

Способы на основе

Г.Г. АНАНЬКО, научный сотрудник Государственного научного центра вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора Т.В. ТЕПЛЯКОВА, заведующая лабораторией e-mail: teplyakova@vector.nsc.ru

История изучения и применения хищных грибов для контроля фито-паразитических нематод насчитывает несколько десятилетий. Использование биопрепаратов имеет свои плюсы и минусы. С одной стороны, оно позволяет получать экологически чистую продукцию и успешно бороться с фитонематодами, резистентными по отношению к химическим нематицидам, с другой, по сравнению с химическими приемами, требует относительно больших норм расхода.

Одним из способов повышения эффективности биопрепаратов является совершенствование технологии их применения, позволяющее существенно снизить их расход. Естественно, что такое совершенствование должно опираться на глубокое знание физиологии и экологии нематофаговых грибов.

Основой сухого биопрепарата, разработанного нами, являются хламидоспоры хищного гриба Duddingtonia flagrans F-882, размещающиеся на поверхности частиц носителя - вспученного вермикулита [1]. Хламидоспоры хищных грибов представляют одну из фаз их жизненного цикла. Данные образования предназначены для сохранения жизнеспособности грибов в неблагоприятных условиях, а также для распространения грибов в новые местообитания. При внесении препарата в почву, в которой есть нематоды, хламидоспоры прорастают, а на гифах гриба формируют-

ЛИТЕРАТУРА

1. Болотникова В.В. Роль паразитических хальцид в снижении численности листо-грызущих вредителей плодового сада // В.В. Болотникова и др. Защита растения -Минск, 1978, в. 2, с. 113-117.

2. Зерова М.Д. Энтомофаги вредителей яблони юго-запада СССР. - Киев: Наукова думка, 1992, 275 с.

3. Сторчевая Е.М. Активизация энтомофагов природных популяций как элемент технологии адаптивно-ландшафтного садоводства / Автореф. диссертации - Краснодар, 1998, 25 с.

4. Третьяков Н.Н. Роль паразитических насекомых в ограничении численности листоверток в плодовом саду //Известия ТСХА, 1989, № 5, с. 96-101.

Аннотация. Приводятся сведения о морфологии, биологических особенностях и эффективности наиболее широко распространенных в яблоневых садах ЦентральноЧерноземного региона паразитов чешуекрылых вредителей, перспективных для использования в биологической борьбе с ними.

Ключевые слова. Чешуекрылые вредители, энтомофаги, эффективность, массовое размножение, биологическая борьба.

Abstract. Information is brought on morphology, biological features and efficiency of the most widespread in the apple orchards of Central Black-Earth region parasites of the pest Lepidoptera, perspective for the use in a biological control against them.

Keywords. Pest Lepidoptera, entomophage, efficiency, mass reproduction, biological control.

БИОМЕТОД: НОВЫЕ АГЕНТЫ, НОВЫЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

повышения эффективности препарата нематофагового гриба Duddingtonia Яagrans

ся ловушки [4-6]. Установлено, что наибольшее количество ловушек у разных штаммов грибов р. Аг^го-Ьо1гув, к которому некоторые авторы [3] относят и D. flaдгans, формируется через 2 недели после внесения их в почву [4].

Чем больше ловушек в единице объема почвы, тем больше вероятность улавливания ими нематод. Однако количество вносимого в почву препарата всегда ограничено экономическими соображениями, поэтому перспективным представляется использование методов, повышающих эффективность биопрепарата.

Недостаток азота в почве зачастую является основным фактором, ограничивающим рост как сельскохозяйственных культур, так и почвенной микрофлоры. В данной работе мы исследовали действие нитрата аммония на процесс формирования хищным грибом ловушек в почве. Для эксперимента готовили образцы по следующей схеме: к 4-суточной жидкой культуре штамма D. flagгans F-882, разбавленной водой в 5 раз, добавляли нитрат аммония в разных концентрациях и вносили нематод Panagгellus гedivivus (тест-культура свободно-живущей нематоды-бактериофага - 100 особей/мл). Через 2 суток производили под микроскопом учет числа образовавшихся ловушек (табл. 1).

Обнаружено, что добавка азота в определенном интервале концентраций (0,2-0,8 %) стимулирует процесс формирования ловушек. Но более высокая концентрация нитрата аммония, напротив, ингибиру-ет этот процесс.

Опираясь на данные, полученные с жидкой культурой D. flagгans, мы исследовали влияние добавок нит-

Таблица 1 Действие разных концентраций нитрата аммония на образование

ловушек в жидкой культуре хищного гриба Б. Ё-882

Вариант Число ловушек*

Контроль (вода) -

0,2 % NH.N0, +++

0,4 % NH_.N0, ++++

0,8 % NH.N0, +++

1 % NH.N0, +

* Ловушек в поле зрения микроскопа: нет (—), единичные ловушки (+), до 5 (++), 5-10 (+++), больше 10 ловушек (++++).

рата аммония на эффективность сухого препарата, внесенного в почву. Образцы для эксперимента готовили следующим образом: навеску почвы увлажняли водой до 15 %, добавляли сухой биопрепарат (с содержанием хламидоспор 4 х 106 в 1 г) в нужной концентрации и нематод Panagгellus гedivivus (200 особей/г). Образец помещали на дно 0,5 л стакана и покрывали слоем

почвы высотой 1 0 см влажностью 15 %, инкубировали при +20 °С. Число жизнеспособных нематод определяли методом Бермана [2], одновременно оценивали разные технологии внесения препарата и добавок нитрата аммония (табл. 2).

Как и ожидали, в варианте с максимальной дозой препарата (2 %) хороший результат был достигнут уже в течение первых 10 суток. В образцах с содержанием 0,5 % и 1 % препарата на первом этапе результаты были не стабильными, то есть сильно варьировали в разных по-вторностях. Однако в последующие 10 суток эффективность 1 и 2 % препаратов была практически одинакова. Минимальная доза препарата (0,25 %) оказалась практически не эффективной, заметная гибель нематод произошла лишь в течение последних 10 суток.

Была также апробирована технология с предварительным (за 4 суток) внесением сухого препарата в

Таблица 2

Динамика гибели нематод при использовании разных технологий применения биопрепарата на основе штамма Б. F-882 и добавок нитрата аммония

Вариант* Доля погибших нематод

10 суток 20 суток

Одновременное внесение в почву нематод (200 особей/г) 0 33±21

и 0,25 % препарата

- " - 0,5 % - " - 44±25 77,3±10

- " - 1 % - " - 55,8±12,4 92,5±0,5

- " - 2 % - " - 88,5±0,7 93,5±1,9

Внесение нематод через 4 суток после внесения 0,25 % препарата 83,1±3 90,5±5,6

- " - 0,5 % - " - 93,3±1 94,1±3,4

-"-1%-"- 94,4±0,1 95±0,4

Одновременное внесение нематод, препарата (0,5 %) 47,5±23,5 85,5±7,3

и 0,25 % раствора NH.NO,

-"-1%-"- 93,5±3,8 99,5±0,5

Одновременное внесение нематод, препарата (1 %) 88,3±2,2 91,5±0,2

и 0,25 % раствора NH.NO,

- " - 1 % 97,7±2,3 99,5±0,5

* Концентрация препарата указана в % от массы почвы, NH.NO, — содержащейся в почве. в % от массы воды,

почву. Высокие и стабильные результаты получили уже в первые 10 суток. Даже при минимальной (0,25 %) дозе препарата за 10 суток погибло 83 % нематод. При дозах 0,5 % и 1 % эффективность практически не отличалась, за 10 суток погибло 94 % нематод. Таким образом, внесение препарата в почву до наступления пиковой численности нематод позволяет без дополнительных затрат существенно (в 4-8 раз) повысить его эффективность.

Добавка нитрата аммония дала заметный положительный эффект. В первые 10 суток добавление 0,25 % нитрата аммония к 0,5 % препарату дает слабые и нестабильные результаты. Однако через 20 суток доля погибших нематод была выше 85 %. Подобная добавка к 1 % препарату стабилизировала результаты и уже в течение 10 суток позволила получить хороший эффект - 94,4 % погибших нематод. Без добавок азота 1 % препарат показал за 10 суток меньшую эффективность (55,8 %). Добавка 1 % нитрата аммония в обоих случаях (0,5 % и 1 % препарат) оказывала отличное стабильное действие уже к 10-м суткам. Фактически в отдельных повторностях мы не обнаружили ни одной живой нематоды. Хотя точность анализа не позволяет выявить меньше 10 живых нематод, это очень хорошие результаты.

Таким образом, наиболее эффективной оказалась добавка 1 % нитрата аммония, хотя в предварительных экспериментах в жидкой культуре (табл. 1) подобные концентрации ингибировали процесс формирования ловушек. Очевидно, что в почве, по сравнению с водным раствором, картина взаимодействия усложняется. Вероятно, часть вносимого с водой азота, адсорбируется частицами почвы так, что реальная концентрация азота в доступной грибам воде становится меньше 1 % и является оп-

тимальной для формирования ловушек.

Для снижения расхода препарата в 4-8 раз без потери эффективности можно рекомендовать следующие приемы:

вносить препарат в дозе 0,5 % от массы почвы с одновременным или последующим (через 2-3 суток) внесением раствора нитрата аммония в дозе 0,15 % от массы почвы (1 % раствор нитрата аммония из расчета 15 л/м2). Добавка нитрата аммония, стимулирующая прорастание хламидоспор, позволяет снизить норму расхода биопрепарата, как минимум, в 4 раза -с 2 до 0,5 %;

внесение сухого препарата в почву заранее позволяет хламидо-спорам прорасти и сформировать сеть мицелия, на котором образуются ловушки. Поэтому препарат лучше вносить в почву, приготовленную для рассады и свободную от паразитических нематод (в горшки или ящики для рассады). Если же требуется сплошное внесение препарата в теплице с зараженной нематодами почвой, то лучше это делать до наступления пиковой численности фитопаразитических нематод (за 2 недели), но с соблюдением гидротермического режима, принятого во время вегетации растений.

ЛИТЕРАТУРА

1. Ананько Г.Г., Теплякова Т.В. Биотехнология получения препарата против паразитических нематод сельскохозяйственных культур. / В сб. «Достижения современной биотехнологии» под ред. И.Г. Дроздова. - Новосибирск, 2008, с. 328-335.

2. Котельников Г.А. Гельминтологические исследования животных и окружающей среды. Справочник. - М.: Колос, 1984, 207 с.

3. Мехтиева Н.А. Хищные нематофаговые грибы-гифомицеты. - Баку: Элм, 1979, 244 с.

4. Теплякова Т.В. Биоэкологические аспекты изучения и использования хищных гри-бов-гифомицетов. - Новосибирск, 1999, 252 с.

5. Morgan M., Behnke J.M., Lucas J.A., Peberdy J.F. In vitro assessment of the influence of nutrition, temperature and larval density on trapping of the infective larvae of Heligmosomoides polygyrus by Arthrobotrys oligospora, Duddingtonia flagrans and Monacrosporium megalosporum. // Parasitology, 1997, v. 115, № 3, p. 303-310.

6. Saxena G., DayalR., MukerjiK.G. Interaction of nematodes with nematophagus fungi: induction of trap formation, attraction and detection of attractants. // FEMS Microbiology Letters, 2006, v. 45, № 6, 319-327.

Аннотация. Нематофаговые грибы давно используются для защиты сельскохозяйственных культур против паразитических нематод. Эффективность биопрепаратов можно повысить за счет совершенствования способов их применения. Мы показали, что внесение в почву биопрепарата на основе штамма D. flagrans F-882 в период до наступления пиковой численности нематод позволяет снизить расход препарата в 48 раз. Добавка нитрата аммония стимулирует процесс формирования ловушек для нематод и также позволяет снизить расход биопрепарата.

Ключевые слова. Нематофаговые грибы, паразитические нематоды растений, стимуляция ловушек, повышение эффективности препарата.

Abstract. Nematophagous fungi for a long time are used for protection of agricultural crops against parasitic нематод. Efficiency of biological preparations can be increased due to perfection of ways of their application. We have shown that entering into soil of a biological biopreparation on the basis of the strain Duddingtonia flagrans F-882 in the period before the peak number of nematodes allows to lower the charge of a preparation in 4-8 times. The additive of nitrate of ammonium stimulates process of formation of traps for nematodes and also allows to lower the charge of a biological preparation.

Keywords. Nematophagous fungi, plant parasitic nematodes, stimulation of traps, increased of efficiency of preparation.