ЛЕКАРСТВЕННЫЙ ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ДИАБЕТА И СПОСОБ ЕГО ИЗГОТОВЛЕНИЯ
DRUG PREPARATION FOR TREATING DIABETES AND METHOD FOR PREPARING IT

СФЕРА ПРИМЕНЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Данное изобретение относится к четырем технологиям приготовления лекарственного препарата для лечения сахарного диабета (диабета) и лекарственному препарату, изготовленному по данным технологиям.
ПРЕДПОСЫЛКИ ДЛЯ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Сахарный диабет (СД) - хроническое прогрессирующее пожизненное заболевание, вызванное нарушением обмена веществ организма: углеводного, белкового и жирового, характерными проявлениями которого являются гипергликемия и глюкозоурия. Данное заболевание может давать осложнения на сердце и почки, вызывать слепоту и даже приводить к ампутации конечностей. Недавние клинические исследования показали, что численность заболеваний СД растет с каждым годом. На настоящий момент количество больных СД насчитывает до 1,5 сотни миллионов по всему миру. В Китае количество больных СД составляет более 40 млн. В случае с СД у большинства больных наблюдается инсулиннезависимый сахарный диабет (ИНСД, II тип), и лишь у немногих - инсулинзависимый СД (I тип). Таким образом, большинство больных СД нуждаются в пожизненном лечении.
В настоящее время основную часть лечения СД составляют химические препараты, такие как сульфаниламидные препараты, бигуаниды, ингибитор глюкозидазы, глиниды, инсулин-сенсибилизатор и т.д. Однако продолжительное применение этих препаратов может привести к возникновению побочных эффектов.
Традиционная китайская медицина (ТКМ) долгое время занималась вопросами профилактики и лечения СД. В результате тысячелетней практики был накоплен драгоценный опыт и создана академическая система. В классической ТКМ есть записи о многих сахароснижающих средствах, например: Rhizoma Alismatis (корневище частухи восточной), Rhizoma Anemarrhenae (корневище анемаррены), Radix panacis quinquefolii (корень американского женьшеня), Radix Puerariae Lobatae (корень пуэрарии лопастной), Radix Rehmanniae (корень ремании) и пыльцевые зерна и т.д. Обычно лечение СД методами ТКМ базируется на клинических симптомах согласно теории «Sanxiao» (Саньсяо), но не обладает хорошими терапевтическими методами для лечения на стадии нарушения толерантности к глюкозе и ранних стадиях СД.
Главными причинами возникновения СД являются нарушения работы печени и желудка, иссушающий жар в организме является основой патогенеза заболевания «Xiaoke» (Сяоке) (название СД в ТКМ). В свете теории КТМ о снятии угнетенного состояния печени и устранения влажности селезенки, необходимо принять метод регулирования за главное значение, которое считается терапевтическим методом, нацеленным на патогенез. Танминьлин (Tangminling) (китайское название лекарственного препарата данного изобретения) устраняет стагнацию, что снимает жар в желудке, подпитывает энергию инь, что понижает жар и очищает органы фу от мутности. Препарат воздействует как на симптомы, так и главную причину. Когда иссушающий жар снижается, ци и инь автоматически восстанавливаются. Как отмечено в разделе Xiaodan (Сяодань) Zheng Zhi Zhun Sheng (Чжен Чжи Чжунь Шен) (ведущая работа, написанная Ван Кэнь Тан из династии Мин), открытые пути и стремительная жидкость организма доставляют ци и кровь, предназначенные друг другу - и болезнь уходит. Соответственно терапевтический метод лечения СД должен устранить стагнацию, что снимает жар в желудке, обогатить энергию инь с целью понижения жара и очистить органы фу от мутности.
Согласно теории ТКМ, желудочно-кишечная стагнация, вызванная перееданием и малоподвижным образом жизни, мешает продвижению ци в «Чжунцзяо» (средний обогреватель), что приводит к нарушению очищающей функции печени и желчного пузыря. Застой превращается в жар, жар «Саньцзяо» (тройного обогревателя, находящегося в печени, желчном пузыре, желудке, кишечнике и легких). Таким образом, Rhizoma Coptidis и Radix et Rhizoma Rhei используются в качестве главных компонентов, из которых Rhizoma Coptidis снижает жар в желудке, а Radix et Rhizoma Rhei высасывает кишечный жар, основываясь на теории лечения сладкого горечью. Далее следуют Radix Paeoniae Alba, Radix Scutellariae и Radix Bupleuri, где Radix Paeoniae Alba питает печень и связывает инь, помогает основным компонентам снимать жар в «Саньцзяо», не повреждая инь; Radix Bupleuri действует на меридиан желчного пузыря Шаоян и меридиан печени Цзюэинь, снимая жар печени и желчного пузыря, очищая селезенку и желудок; Radix Scutellariae устраняет жар легких и печени. Fructus Aurantii Immaturus и сырые Fructus Crataegi регулируют ци, помогают переваривать пищу и разжижать застои, взаимодействуя с Radix et Rhizoma Rhei, способствуют работе желудка и кишечника; Rhizoma Pinelliae вместе с Rhizoma Coptidis переносят открытие острых веществ и подавление горечи на открытый средний обогреватель. Поэтому все три компонента используются в качестве вспомогательных. Fructus Mume связывает инь для регенерации жидкости организма на основании теории лечения сладкого кислым, вместе с Radix Trichosanthis делает инь желудка стремительной. Поэтому этот компонент можно считать направляющим.
На основании теории иссушающего жара был изобретен лекарственный препарат, в состав которого входят Radix Trichosanthis (корень трихозанта), Radix Bupleuri (корень володушки), Fructus Aurantii Immaturus (плоды незрелых померанцев), Radix et Rhizoma Rhei (корень и корневище ревеня), Rhizoma Pinelliae (корневище пинеллии), Radix Scutellariae (корень шлемника байкальского), Rhizoma Coptidis (корневища коптиса китайского), Radix Paeoniae Alba (корня пиона белого), Fructus Mume (плодов черной сливы) и т.д. Данный препарат более эффективен при лечении СД. Препарат был описан ранее в патентной заявке в Китае от заявителя (№200410020220.7). Однако использованная технология основывалась на традиционном способе спиртового экстрагирования. Из-за ограниченных химических свойств раствора, приготовленного по данной технологии, действие многих водорастворимых активных компонентов было утеряно. Полезность и содержание активных компонентов экстракта низкое. Исходя из этого, назначаемая дозировка высокая, и следовательно возрастает риск проявления побочных эффектов.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Целью данного изобретения является создание лекарственного препарата для лечения СД согласно следующей количественной формуле. Лекарственный препарат изготовлен по описанной ниже технологии, что может разрешить проблемы, указанные ранее в ограничительной части формулы.
Другая цель данного изобретения состоит в предоставлении технологии приготовления лекарственного препарата для лечения СД и лекарственного препарата, приготовленного по данной технологии. Лекарственный препарат настоящего изобретения представляет собой экстракт следующего лекарственного сырья в таких массовых долях: 5-40 массовых долей Radix Trichosanthis, 10-30 массовых долей Radix Bupleuri, 3-15 массовых долей Fructus Aurantii Immaturus, 1-6 массовых долей Radix et Rhizoma Rhei, 1-12 массовых долей Rhizoma Pinelliae, 3-15 массовых долей Radix Scutellariae, 1-12 массовых долей Rhizoma Coptidis, 3-5 массовых долей Radix Paeoniae Alba и 5-20 массовых долей Fructus Mume, и дополнительно может содержать вспомогательные фармацевтически приемлемые вещества. Лекарственный препарат может быть приготовлен в соответствии с одним из следующих четырех способов.
Первый способ состоит из следующих этапов:
а. смешать лекарственное сырье в пропорции согласно массовым долям, указанным выше;
b. приготовить экстракт лекарственного сырья с помощью водяной экстракции, отфильтровать экстрагированную жидкость и сконцентрировать его под вакуумом;
с. добавить этиловый спирт в концентрированный жидкий экстракт таким образом, чтоб доля спирта составляла 65-75%, и отфильтровать;
d. сконцентрировать фильтрат под вакуумом для получения экстракта;
е. при необходимости добавить вспомогательные вещества во время этапа (d) для получения фармацевтически приемлемой дозировки;
Второй способ состоит из следующих этапов:
а. смешать лекарственное сырье в пропорции согласно массовым долям, указанным выше;
b. приготовить экстракт лекарственного сырья с помощью водяной экстракции, охладить экстрагированную жидкость, отфильтровать и смешать для получения фильтрата;
с. пропустить фильтрат через макропористые адсорбционные смолы, предварительно промыв водой, выделить элюат, непрерывно промывать этиловым спиртом до получения нужной концентрации, смешать спиртовой элюат и испарить этиловый спирт под вакуумом для получения экстракта;
d. при необходимости добавить вспомогательные вещества во время этапа (с) для получения фармацевтически приемлемой дозировки;
Третий способ состоит из следующих этапов:
а. смешать лекарственное сырье в пропорции согласно массовым долям, указанным выше;
b. получить спиртовой экстракт следующего лекарственного сырья при определенной концентрации: Radix Bupleuri, Radix Paeoniae Alba, Fructus Aurantii Immaturus, Radix et Rhizoma Rhei, Radix Scutellariae и Rhizoma Coptidis, охладить экстрагированную жидкость, отфильтровать и смешать;
с. добавить другие компоненты в остаток сырья, полученный после этапа (b), непрерывно экстрагировать водой, сконцентрировать экстрагированную жидкость под вакуумом, затем добавить этиловый спирт в концентрированную экстрагированную жидкость (уровень спирта должен составлять 65-75%) и отфильтровать;
d. соединить фильтраты, полученные после этапов (b) и (с), и сконцентрировать в экстракт;
е. при необходимости добавить вспомогательные вещества во время этапа (d) для получения фармацевтически приемлемой дозировки;
Четвертый способ состоит из следующих этапов:
а. смешать лекарственное сырье в пропорции согласно массовым долям, указанным выше;
b. получить экстракт Radix Scutellaria с помощью водной экстракции, смешать экстрагированную жидкость, установить рН 1,5-2,0, удерживая температуру, настоять, отфильтровать, промыть остаток водой до получения уровня рН 5-6, высушить до получения сухого порошкообразного экстракта Radix Scutellariae;
с. получить экстракт Rhizoma Coptidis с помощью спиртовой экстракции, смешать экстрагированную жидкость, отфильтровать, испарить этиловый спирт до полного исчезновения спиртового запаха, установить рН 1-2, дать настояться ночь при низкой температуре, отфильтровать, промыть остаток водой до получения уровня рН 5-6, высушить до получения сухого порошкообразного экстракта Rhizoma Coptidis;
d. получить водяной экстракт остального лекарственного сырья, смешать экстрагированную жидкость, затем добавить 95% этиловый спирт, установить содержание этилового спирта 70%, сконцентрировать, настоять, отфильтровать, испарить этиловый спирт для получения экстракта, высушить до получения сухого порошкообразного экстракта и
е. тщательно смешать три порошкообразных экстракта, полученных после трех вышеуказанных этапов, при необходимости добавить вспомогательные вещества для приготовления в фармацевтически приемлемой дозировке.
Согласно одному из вариантов воплощения настоящего изобретения, в оптимальный состав препарата, приготовленного по технологии настоящего изобретения, входит следующее лекарственного сырье: 9 массовых долей Radix Trichosanthis, 12 массовых долей Radix Bupleuri, 9 массовых долей Fructus Aurantii Immaturus, 3 массовые доли Radix et Rhizoma Rhei, 6 массовых долей Rhizoma Pinelliae, 9 массовых долей Radix Scutellariae, 6 массовых долей Rhizoma Coptidis, 9 массовых долей Paeoniae Alba и 9 массовых долей Fructus Mume.
На основании приведенной формулы, в состав лекарственного препарата можно добавить Fructus Crataegi (плоды боярышника). Это объясняется рядом причин: Fructus Crataegi подкисляет сладость и питает инь, не только предотвращая разрушение инь, вызванное гашением остроты, но также подавляя сладость кислотой и горечью. Данный препарат эффективен для рассеивания хандры и снятия жара при взаимодействии с другими компонентами. Таким образом предпочтительная формула состоит из следующего лекарственного сырья: 5-40 массовых долей Radix Trichosanthis, 10-30 массовых долей Radix Bupleuri, 3-15 массовых долей Fructus Aurantii Immaturus, 1-6 массовых долей Radix et Rhizoma Rhei, 1-12 массовых долей Rhizoma Pinelliae, 3-15 массовых долей Radix Scutellariae, 1-12 массовых долей Rhizoma Coptidis, 3-15 массовых долей Radix Paeoniae Alba, 5-20 массовых долей Fructus Mume и 3-15 массовых долей Fructus Crataegi.
Более оптимальный состав настоящего изобретения включает в себя такое лекарственное сырье в следующих массовых долях: 10-30 массовых долей Radix Trichosanthis, 10-30 массовых долей Radix Bupleuri, 3-15 массовых долей Fructus Aurantii Immaturus, 1-6 массовых долей Radix et Rhizoma Rhei, 1-12 массовых долей Rhizoma Pinelliae, 3-15 массовых долей Radix Scutellariae, 1-12 массовых долей Rhizoma Coptidis, 3-15 массовых долей Radix Paeoniae Alba, 5-20 массовых долей Fructus Mume и 3-15 массовых долей Fructus Crataegi.
Наиболее оптимальный состав данного лекарственного препарата согласно настоящему изобретению включает такое лекарственное сырье в следующих массовых долях: 30 массовых долей Radix Trichosanthis, 12 массовых долей Radix Bupleuri, 9 массовых долей Fructus Aurantii Immaturus, 3 массовые доли Radix et Rhizoma Rhei, 6 массовых долей Rhizoma Pinelliae, 9 массовых долей Radix Scutellariae, 6 массовых долей Rhizoma Coptidis, 9 массовых долей Radix Paeoniae Alba, 15 массовых долей Fructus Mume и 9 массовых долей Fructus Crataegi, или состав данного лекарственного препарата согласно настоящему изобретению включает лекарственное сырье в следующих массовых долях: 15 массовых долей Radix Trichosanthis, 12 массовых долей Radix Bupleuri, 9 массовых долей Fructus Aurantii Immaturus, 3 массовых долей Radix et Rhizoma Rhei, 6 массовых долей Rhizoma Pinelliae, 9 массовых долей Radix Scutellariae, 6 массовых долей Rhizoma Coptidis, 9 массовых долей Radix Paeoniae Alba, 15 массовых долей Fructus Mume и 9 массовых долей Fructus Crataegi.
Первый способ согласно данному изобретению, предпочтительно включает следующие этапы:
a) На этапе (b) экстрагирование выполняют предпочтительно дважды по 1,5 часа, причем объем воды в 10 раз больше (10-кратный) массы лекарственного сырья. Предпочтительно сконцентрировать экстрагированную жидкость до конечного объема (Л), которой относится к весу лекарственного сырья в пропорции 1:1;
b) На этапе (с) концентрация этилового спирта составляет 90-100%, предпочтительно - 95%. После добавления этилового спирта концентрированная экстрагированная жидкость содержит 70% этилового спирта.
Благодаря использованию описанного способа водного экстрагирования и экстрагирования этиловым спиртом, содержание активных компонентов в лекарственном препарате значительно увеличилось, а содержание примесей заметно снизилось. Соответственно, назначаемая дозировка также стала меньше.
Во втором способе согласно настоящему изобретению следующие этапы являются предпочтительными:
1. На этапе (b) экстрагирование выполняют предпочтительно дважды по 1 часу, причем объем воды в 10 раз больше (10-кратный) массы лекарственного сырья.
2. На этапе (с) предпочтительно использовать макропористые смолы типа АВ-8; соотношение веса смолы к весу лекарственного сырья составляет 1:1,5-1,3, наиболее предпочтительная пропорция - 1:2. Экстрагированную жидкость предпочтительно пропускают с часовым расходом, который в 4-6 раз превышает объем колонки. Количество воды при промывке превышает объем колонки предпочтительно в 4-6 раз. Концентрация этилового спирта при промывке предпочтительно составляет 80-95%, наиболее предпочтительно - 90%; объем этилового спирта при промывке предпочтительно превышает объем колонки в 2-5 раз. Этиловый спирт испаряется под вакуумом, при температуре 60-80°С. После испарения этилового спирта под вакуумом получается экстракт с относительной плотностью 1,25-1,35, предпочтительная плотность - 1,30.
В вышеуказанном способе применяется водная экстракция, что позволяет более эффективно получать экстракт из водорастворимых активных компонентов, таких как сайкосапонин, береберин (берберина гидрохлорид), байкалин, хризофанол, пеонофлорин, синефрин и т.д. Данный способ состоит из многих продуктивных этапов, включая адсорбцию макропористыми смолами и промывку водой для очищения от примесей, элюирование активных компонентов с помощью водно-спиртового раствора. Благодаря этому способу большая часть примесей может быть удалена, а активные компоненты удержаны.
Характерным для лекарственного препарата, приготовленного по вышеуказанному методу, является значительное увеличение содержания активных компонентов и заметное уменьшение содержания примесей, и соответственно, снижение назначаемой дозировки. К тому же между смесями обеспечивается стабильная связь.
В третьем способе, согласно настоящему изобретению, следующие этапы являются предпочтительными:
1. На этапе (b) концентрация этилового спирта составляет 75-90%, предпочтительно - 80%; и экстрагирование выполняется дважды (предпочтительно) по 1,5 часа с использованием этилового спирта, объем которого в 10 раз превышает вес лекарственного сырья на этапе (b).
2. На этапе (с) экстрагирование выполняют дважды (предпочтительно) по 1,5 часа с использованием воды, объем которой превышает вес лекарственного сырья на этапе (с) и остатка от сырья после этапа (b); экстрагированную жидкость предпочтительно концентрируют до конечного объема (л), который соотносится с весом лекарственного сырья (кг) в пропорции 1:1. Предпочтительно концентрация этилового спирта составляет 90-100%, наиболее предпочтительно - 95%; после добавления этилового спирта содержание этилового спирта в концентрированной экстрагированной жидкости составляет 65-75%, предпочтительное содержание - 70%.
3. Согласно способу, описанному выше, экстракт из шести видов лекарственного сырья of Radix Bupleuri, Radix Paeoniae Alba, Fructus Aurantii Immaturus, Radix et Rhizoma Rhei, Radix Scutellariae и Rhizoma Coptidis первоначально получают с помощью этилового спирта, затем полученный остаток смешивают с оставшимся сырьем и экстрагируют водой. Данный способ обеспечивает полное экстрагирование активных компонентов шести видов лекарственного сырья. В то время, как из остального сырья экстракт получают только с помощью воды для выделения водорастворимых компонентов, поскольку все активные компоненты этого сырья считаются водорастворимыми. В лекарственном препарате, приготовленном вышеуказанным способом, содержание активных компонентов значительно повышается, а содержание примесей заметно снижается. Поэтому назначаемая дозировка также уменьшается.
В четвертом способе, согласно настоящему изобретению, следующие этапы являются предпочтительными:
1. На этапе (b) экстракцию выполняют дважды по 1 часу с использованием воды, объем которой превышает вес Radix Scutellariae в 10 раз; уровень предпочтительной температуры экстрагированной жидкости - 75-85°С, наиболее предпочтительная температура - 80°С.
2. На этапе (с) экстракция выполняется дважды (предпочтительно) по 2 часа с использованием этилового спирта, объем которого превышает Rhizoma Coptidis в 10 раз; предпочтительно концентрация этилового спирта - 70-85%, наиболее предпочтительно - 75%. На этапах (b) и (с) уровень рН регулируют концентрированной хлористоводородной кислотой.
3. На этапе (d) экстрагирование производят дважды (предпочтительно) по 1 часу с использованием воды, объем которой превышает вес лекарственного сырья в 10 раз; комбинированную экстрагированную жидкость концентрируют до относительной плотности - 1,03-1,07, предпочтительная плотность - 1,05; после добавления этилового спирта, испарения спирта, предпочтительная плотность экстракта составляет 1,25-1,35, более предпочтительная плотность - 1,30.
В соответствии с данной технологией, из Radix Scutellariae, Rhizoma Coptidis и другого лекарственного сырья добывают соответствующий экстракт. Вид экстрагирования, водного или спиртового, выбирают согласно их различным химическим свойствам, затем устанавливают уровень рН. В лекарственном препарате, приготовленном по вышеописанной формуле, содержание активных компонентов значительно увеличилось, а содержание примесей заметно уменьшилось. Поэтому назначаемая дозировка также снижается.
В соответствии с описанной выше формулой данного изобретения, можно приготовить лекарственный препарат с указанным составом для лечения сахарного диабета. Препарат, согласно данному изобретению, может быть приготовлен по традиционной технологии в любой традиционной дозировке с использованием традиционных вспомогательных веществ, указанных в ограничительной части патентной формулы. Например, вышеперечисленное лекарственное сырье может быть приготовлено в различных формах: порошок, завариваемый водой; экстрагированное вещество, высушенное, измельченное, просеянное, порошкообразное, завариваемое водой; также полученный экстракт изготавливают в виде таблеток или капсул для перорального применения, или полученный экстракт изготавливают для применения в виде инъекций, и т.д. Но применение данного изобретения не ограничивается перечисленными формами.
Действие лекарственного препарата, изготовленного по технологии в соответствии с данным изобретением, заключается в снижении уровня сахара в крови, что является эффективным для клинического лечения СД.
В данном изобретении понятия «концентрация этилового спирта» или «содержание этилового спирта» (содержание этилового спирта в системе) выражаются в процентных долях и относятся к объемному процентному содержанию, если не указано иначе.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Следующие предварительные и экспериментальные примеры приведены только для иллюстрации, но никаким образом не ограничивают масштабы данного изобретения.
Пример 1
Состав: 750 г Radix Trichosanthis, 1500 г Radix Bupleuri, 450 г Fruckus Aurantii Immaturus, 150 г Radix et Rhizoma Rhei, 150 г Rhizoma Pinelliae, 450 г Radix Scutellariae, 150 г Rhizoma Coptidis, 450 г Radix Paeoniae Alba и 750 г Fructus Mume.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Девять вышеперечисленных компонентов экстрагируют дважды водой, объем которой превышает массу лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции - 1,5 часа. Экстрагированную жидкость фильтруют, концентрируют под вакуумом до конечного объема (л), который соотносится с начальным весом лекарственного сырья (кг) в пропорции 1:1, добавляют 90% этиловый спирт для получения содержания этилового спирта - 65%. Полученную экстрагированную жидкость фильтруют и концентрируют под вакуумом до густого экстракта.
Пример 2
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 1.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Из данных шести компонентов (Radix Bupleuri, Radix Paeoniae Alba, Fructus Aurantii Immaturus, Radix et Rhizoma Rhei, Radix Scutellariae и Rhizoma Coptidis) получают экстракт дважды, с использованием 75% этилового спирта, объем которого превышает вес лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции -1,5 часа. В результате получают экстрагированную жидкость (1) и остаток от лекарственного сырья. Экстрагированную жидкость (1) фильтруют для дальнейшего использования.
После добавления Radix Trichosanthls, Fructus Mume и Rhizoma Pinelliae в остаток лекарственного сырья дважды проводят экстрагирование водой, объем которой превышает общий вес этих трех компонентов и остатка в 10 раз, каждая операция - 1,5 часа. В результате получают экстрагированную жидкость (2). Экстрагированную жидкость (2) концентрируют до конечного объема (л), который соотносится с начальным весом лекарственного сырья (кг) в пропорции 1:1. Добавляют 90% этиловый спирт для получения содержания этилового спирта в составе - 65%. Проводят фильтрацию для дальнейшего использования.
Данные экстрагированные жидкости смешивают, концентрируют под вакуумом до получения густого экстракта.
Пример 3
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 1.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Девять перечисленных компонентов лекарственного сырья дважды экстрагируют водой, при каждой полуторачасовой операции экстрагирования добавляют по 48,5 кг воды; экстрагированную жидкость охлаждают, фильтруют и смешивают. Комбинированный фильтрат пропускают через 3,2 кг макропористой адсорбционной смолы типа АВ-8 с часовым расходом, в 4 раза превышающим объем колонки. После промывания водой, объем которой в 4 раза превышает объем колонки, выделяют элюат. Далее проводят промывку 80% этиловым спиртом, объем которого превышает объем колонки в 2 раза, спиртовой элюат смешивают. Из комбинированного элюата испаряют спирт при 80°С под вакуумом для получения экстракта с относительной плотностью - 1,25. Проводят вакуумную сушку при температуре 70°С для получения сухого экстракта, который измельчают и просеивают через сито 80 меш. В просеянный сухой порошок добавляют лактозу. Из смеси изготавливают капсулы.
Пример 4
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 1. Препарат изготавливают согласно следующей технологии:
Radix Scutellariae дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес Radix Scutellariae в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1 час; экстрагированную жидкость смешивают, рН устанавливают хлористоводородной кислотой на уровне 1,5-2,0; температуру экстрагированной жидкости поддерживают на уровне 75°С в течение 1 часа, дают настояться, фильтруют, промывают остатки водой до установления рН 5-6, высушивают, полученный сухой экстракт измельчают и просеивают через сито 80 Меш для получения экстракта Radix Scutellariae.
Rhizoma Coptidis дважды экстрагируют 70% этиловым спиртом, объем которого превышает вес Rhizoma Coptidis в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 2 часа; экстрагированную жидкость смешивают, фильтруют, этиловый спирт испаряют до исчезновения запаха этилового спирта, рН устанавливают 1-2 с помощью концентрированной хлористоводородной кислоты, настаивают ночь при низкой температуре, фильтруют, промывают остатки водой до установления рН 5-6, высушивают, полученный сухой экстракт измельчают и просеивают через сито 80 Меш для получения экстракта Rhizoma Coptidis.
Остальные семь компонентов дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес данных компонентов в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1 час; смешанную экстрактную жидкость концентрируют до относительной плотности - 1,03, охлаждают, добавляют 95% этиловый спирт до получения содержания этилового спирта 70%, настаивают, фильтруют, выделяют этиловый спирт, получая экстракт с относительной плотностью - 1,25, высушивают, полученный сухой экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш.
Сухие порошкообразные экстракты, полученные в результате описанных этапов, тщательно смешивают, добавляют лактозу. Из смеси готовят капсулы.
Пример 5
Состав: 1200 г Radix Trichosanthis, 900 г Radix Bupleuri, 450 г Fructus Aurantii Immaturus, 180 г Radix et Rhizoma Rhei, 360 г Rhizoma Pinelliae, 450 г Radix Scutellariae, 360 г Rhizoma Coptidis, 450 г Radix Paeoniae Alba и 600 г Fructus Mume.
Препарат изготавливают в соответствии со следующей технологией:
Перечисленные девять компонентов дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. Экстрагированную жидкость фильтруют, концентрируют под вакуумом до конечного объема (л), который соотносится с начальным весом лекарственного сырья (кг) в пропорции 1:1, добавляют обезвоженный этиловый спирт до получения содержания этилового спирта в составе 75%. Полученную экстрагированную жидкость фильтруют и концентрируют под вакуумом до густого экстракта.
Пример 6
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 5.
Препарат изготовлен по следующей технологии:
Шесть компонентов лекарственного сырья (Radix Bupleuri, Radix Paeoniae Alba, Fructus Aurantii Immaturus, Radix et Rhizoma Rhei, Radix Scutellariae и Rhizoma Coptidis) экстрагируют дважды 90% этиловым спиртом, объем которого превышает вес лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. В результате получают экстрагированную жидкость (1) и остаток лекарственного сырья. Экстрагированную жидкость (1) фильтруют для дальнейшего использования.
В остаток добавляют Radix Trichosanthis, Fructus Mume и Rhizoma Pineliiae, дважды экстрагируют водой, объем которой превышает общий вес данных трех компонентов и остатка в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. В результате получают экстрагированную жидкость (2). Экстрагированную жидкость (2) концентрируют до конечного объема (л), который соотносится с начальным весом (кг) лекарственного сырья в пропорции 1:1. Обезвоженный этиловый спирт добавляют до получения содержания этилового спирта 75%, фильтруют для дальнейшего использования.
Данные экстрагированные жидкости смешивают и концентрируют под вакуумом до получения густого экстракта.
Пример 7
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 5.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Перечисленные девять компонентов экстрагируют добавлением по 49,5 кг воды при каждом одночасовой операции экстракции/экстрагированную жидкость охлаждают, фильтруют и смешивают. Смешанную жидкость фильтруют и пропускают через 1,7 кг макропористой адсорбционной смолы типа АВ-8 с часовым расходом, в 6 раз превышающим объем колонки. После промывания водой, объем которой больше объема колонки в 6 раз, выделяют элюат. Затем снова проводят промывание 95% этиловым спиртом, объем которого превышает объем колонки в 5 раз, спиртовой элюат смешивают. Этиловый спирт испаряют из смешанного спиртового элюата при температуре 70°С и под вакуумом для получения экстракта с относительной плотностью - 1,35. Для получения сухого экстракта проводят вакуумную сушку при 90°С, экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш. В сухой просеянный порошок добавляют крахмал для изготовления таблеток.
Пример 8
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 5.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Radix Scutellariae дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес Radix Scutellariae в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1 час; экстрагированную жидкость смешивают, рН устанавливают с помощью концентрированной хлористоводородной кислоты на уровне 1,5-2,0; экстрагированную жидкость выдерживают в течение одного часа при температуре 85°С, настаивают, фильтруют, остаток промывают водой до получения уровня рН 5-6, высушивают, полученный сухой экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш, в результате чего получают экстракт Radix Scutellariae.
Rhizoma Coptidis экстрагируют дважды 85% этиловым спиртом, объем которого превышает вес Rhizoma Coptidis в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 2 часа; экстрагированную жидкость смешивают, фильтруют, этиловый спирт испаряют до исчезновения запаха этилового спирта, рН устанавливают с помощью концентрированной хлористоводородной кислоты на уровне 1-2, дают настояться ночь при низкой температуре, фильтруют, промывают остаток водой до установления рН 5-6, высушивают, полученный сухой экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш, в результате получают экстракт Rhizoma Coptidis.
Остальные семь компонентов экстрагируют водой, объем которой 10-кратно превышает вес данных компонентов, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1 час; смешанную экстрагированную жидкость концентрируют до относительной плотности - 1,07, охлаждают, добавляют 95% этиловый спирт до получения содержания этилового спирта до 70%, настаивают, фильтруют, этиловый спирт испаряют до установления относительной плотности экстракта 1,35, высушивают, полученный сухой экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш.
Сухие порошкообразные экстракты, полученные в результате описанных этапов, тщательно смешивают, добавляют крахмал. Смесь изготавливают в виде таблеток.
Пример 9
Состав: 630 г Radix Trichosanthis, 840 г Radix Bupleuri, 630 г Fructus Aurantii Immaturus, 210 г Radix et Rhizoma Rhei, 420 г Rhizoma Pinelliae, 630 г Radix Scuteliariae, 420 г Rhizoma Coptidis, 630 г Radix Paeoniae Alba и 630 г Fructus Mume.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Указанные девять компонентов дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. Экстрагированную жидкость фильтруют, концентрируют под вакуумом до конечного объема (л), который соотносится с начальным весом (кг) лекарственного сырья в пропорции 1:1; добавляют 95% этиловый спирт для установления содержания спирта до 70%. Полученную экстрагированную жидкость фильтруют и концентрируют под вакуумом до густого экстракта.
Пример 10
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 9.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Шесть компонентов (Radix Bupleuri, Radix Paeoniae Alba, Fructus Aurantii Immaturus, Radix et Rhizoma Rhei, Radix Scuteliariae и Rhizoma Copkidis) дважды экстрагируют 80% этиловым спиртом, объем которого превышает вес лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа; в результате получают экстрагированную жидкость (1) и остаток. Экстрагированную жидкость (1) фильтруют для дальнейшего использования.
В остаток добавляют Radix Trichosanthis, Fructus Mume и Rhizoma Pinelliae дважды экстрагируют водой, объем которой превышает общий вес данных трех компонентов и остатка в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа; в результате получают экстрагированную жидкость (2), которую концентрируют до конечного объема (л), который соотносится с начальным весом (кг) лекарственного сырья в пропорции 1:1. 95% этиловый спирт добавляют до установления содержания этилового спирта 70%, фильтруют для дальнейшего использования.
Данные экстрагированные жидкости смешивают, концентрируют под вакуумом до густого экстракта.
Пример 11
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 9.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Данные девять компонентов экстрагируют водой, добавляя по 50,4 кг воды при каждой одночасовой операции экстрагирования; экстрагированную жидкость охлаждают, фильтруют и смешивают. Комбинированный фильтрат пропускают через 2,5 кг макропористой адсорбционной смолы типа АВ-8 с расходом, в 5 раз превышающим объем колонки. После промывания водой объемом, превышающим объем колонки в 5 раз, выделяют элюат. Затем снова проводят промывание 90% этиловым спиртом, объем которого превышает объем колонки в 3 раза, спиртовой элюат смешивают. Из спиртового элюата при температуре 70°С под вакуумом испаряют этиловый спирт для получения экстракта с относительной плотностью - 1,30. Для получения сухого экстракта проводят вакуумную сушку при 80°С, экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш. В просеянный порошкообразный экстракт добавляют микрокристаллическую целлюлозу с целью изготовления концентрированных пилюль.
Пример 12
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 9. Препарат изготавливают по следующей технологии:
Radix Scutellarlae дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес Radix Scutellariae в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа; экстрагированную жидкость смешивают, рН устанавливают концентрированной хлористоводородной кислотой на уровне 1,5-2,0; экстрагированную жидкость выдерживают при температуре 80°С в течение 1 часа, настаивают, фильтруют, остаток промывают водой до установления уровня рН 5-6, высушивают, полученный сухой экстракт размельчают и просеивают через сито 80 меш. В результате получают экстракт Radix Scutellariae.
Остальные семь компонентов дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес данных семи компонентов в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1 час; комбинированную экстрагированную жидкость концентрируют до экстрагированной жидкости с относительной плотностью - 1,05, охлаждают, затем добавляют 95% этиловый спирт для установления содержания этилового спирта - 70%, охлаждают, фильтруют, этиловый спирт испаряют до установления относительной плотности экстракта - 1/30, экстракт высушивают, полученный сухой экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш.
Сухие порошкообразные экстракты, полученные в результате трех описанных этапов, тщательно смешивают, добавляют микрокристаллическую целлюлозу, изготавливают концентрированные пилюли.
Пример 13
Состав: 750 г Radix Trichosanthis, 1500 г Radix Bupleuri, 450 г Fructus Aurantii Immaturus, 150 г Radix et Rhizoma Rhei, 150 г Rhizoma Pinelliae, 450 г Radix Scutellariae, 150 г Rhizoma Coptidis, 450 г Radix Paeoniae Alba, 750 г Fructus Mume и 450 г Fructus Crataegi.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Перечисленные девять компонентов экстрагируют водой, объем которой превышает вес лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. Экстрагированную жидкость фильтруют, концентрируют под вакуумом до конечного объема (л), который соотносится с начальным весом (кг) лекарственного сырья в пропорции 1:1, 90% этиловый спирт добавляют для установления содержания спирта до 65%. Полученную экстрагированную жидкость фильтруют и концентрируют под вакуумом до густого экстракта.
Пример 14
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 13.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Шесть компонентов (Radix Bupleuri, Radix Paeoniae Alba, Fructus Aurantii Immaturus, Radix et Rhizoma Rhei, Radix Scutellariae и Rhizoma Copkidis) дважды экстрагируют 75% этиловым спиртом, объем которого превышает объем лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. В результате получают экстрагированную жидкость (1) и остаток. Экстрагированную жидкость (1) фильтруют для дальнейшего использования.
В остаток добавляют Radix Trichosanthis, Fructus Mume и Rhizoma Pinelliae и дважды экстрагируют водой, объем которой превышает общий вес этих трех компонентов и остальных компонентов в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. В результате получают экстрагированную жидкость (2), которую концентрируют до конечного объема (л), который соотносится с начальным весом (кг) лекарственного сырья в пропорции 1:1. 90% этиловый спирт добавляют для установления содержания спирта 65%, фильтруют для дальнейшего использования.
Данные экстрагированные жидкости смешивают и концентрируют под вакуумом до густого экстракта.
Пример 15
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 13.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Перечисленные десять компонентов дважды экстрагируют водой, добавляя по 52,5 кг воды при каждой одночасовой операции экстрагирования; экстрагированную жидкость охлаждают, фильтруют и смешивают. Смешанный фильтрат пропускают через 3,5 кг макропористой адсорбционной смолы типа АВ-8 с часовым расходом, в 4 раза превышающим объем колонки. После промывания водой объемом, превышающим объем колонки в 4 раза, выделяют элюат. Далее снова проводят промывание 80% этиловым спиртом, объем которого превышает объем колонки в 2 раза, спиртовой элюат смешивают. Из комбинированного спиртового элюата испаряют этиловый спирт при температуре 80°С под вакуумом до получения экстракта с относительной плотностью - 1,35. Сухой экстракт получают с помощью проведения вакуумной сушки при температуре 70°С, измельчают и просеивают через сито 80 меш. В просеянный порошок добавляют лактозу и изготавливают в виде капсул.
Пример 16
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 13.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Radix Scutellariae дважды экстрагируют водой, объем которой в 10 раз превышает вес Radix Scutellariae, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1 час; экстрагированную жидкость смешивают, рН устанавливают с помощью концентрированной хлористоводородной кислоты на уровне 1,5-2,0; экстрагированную жидкость выдерживают при температуре 75°С в течение 1 часа, настаивают, фильтруют, остаток промывают водой до установления рН 5-6, высушивают, полученный сухой экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш. В результате получают экстракт Radix Scutellariae.
Rhizoma Coptidis дважды экстрагируют 70% этиловым спиртом, объем которого превышает вес Rhizoma Coptidis в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 2 часа; экстрагированную жидкость смешивают, фильтруют, этиловый спирт испаряют до исчезновения запаха спирта, рН устанавливают концентрированной хлористоводородной кислотой на уровне 1-2, экстракт выдерживают ночь при низкой температуре, фильтруют, остаток промывают водой до установления уровня рН 5-6, высушивают, полученный сухой экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш. В результате получают экстракт Rhizoma Coptidis.
Остальные восемь компонентов дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес данных восьми компонентов, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1 час; комбинированную экстрагированную жидкость концентрируют до относительной плотности - 1,07, охлаждают, фильтруют, этиловый спирт испаряют до получения экстракта с относительной плотностью - 1,25, высушивают, полученный сухой экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш.
Данные порошкообразные экстракты, полученные в результате трех описанных этапов, тщательно смешивают, добавляют лактозу, изготавливают в виде капсул.
Пример 17
Состав: 1200 г Radix Trichosanthis, 900 г Radix Bupleuri, 450 г Fructus Aurantii Immaturus, 180 г Radix et Rhizoma Rhei, 360 г Rhizoma Pinelliae, 450 г Radix Scutellariae, 360 г Rhizoma Coptidis, 450 г Radix Paeoniae Alba, 600 г Fructus Mume и 450 г Fructus Crataegi.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Перечисленные десять компонентов дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. Экстрагированную жидкость фильтруют, концентрируют под вакуумом до конечного объема (л), который соотносится с весом (кг) лекарственного сырья в пропорции 1:1, добавляют обезвоженный этиловый спирт до получения содержания спирта 75%. Полученную экстрагированную жидкость фильтруют и концентрируют под вакуумом до густого экстракта.
Пример 18
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 17.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Шесть компонентов лекарственного сырья (Radix Bupleuri, Radix Paeoniae Alba, Fructus Aurantii Immaturus, Radix et Rhizoma Rhei, Radix Scutellariae и Rhizoma Coptidis) дважды экстрагируют 90% этиловым спиртом, объем которого превышает вес лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. В результате получают экстрагированную жидкость (1) и остаток лекарственного сырья. Экстрагированную жидкость (1) фильтруют для дальнейшего использования.
В остаток добавляют Radix Trichosanthis, Fructus Mume, Rhizoma Pinelliae и Fructus Crataegi и дважды экстрагируют водой, объем которой превышает общий вес данных четырех компонентов и остатка лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. В результате получают экстрагированную жидкость (2), которую концентрируют до получения экстрагированной жидкости, конечный объем (л) которой соотносится с начальным весом (кг) лекарственного сырья в пропорции 1:1. Обезвоженный этиловый спирт добавляют до получения содержания спирта 75%, фильтруют для дальнейшего использования.
Данные экстракты смешивают и концентрируют под вакуумом до получения густого экстракта.
Пример 19
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 17.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Данные десять компонентов дважды экстрагируют водой, добавляя по 54 кг воды при каждой операции экстрагирования, продолжительность каждой операции составляет 1 час; экстрагированную жидкость охлаждают, фильтруют и смешивают. Комбинированный фильтрат пропускают через 1,8 кг макропористой адсорбционной смолы типа АВ-8 со скоростью, в 6 раз превышающей пропускную способность колонки за час. После промывания водой объемом, в 6 раз превышающим объем колонки, выделяют элюат. Затем снова проводят промывание 95% этиловым спиртом, объем которого превышает объем колонки в 5 раз, спиртовой элюат смешивают. Из спиртового элюата испаряют этиловый спирт при температуре 70°С под вакуумом для получения экстракта с относительной плотностью 1,25. Сухой экстракт получают с помощью вакуумной сушки при 90°С, экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш. В просеянный порошок добавляют лактозу, из смеси изготавливают капсулы.
Пример 20
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 17.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Radix Scutellariae дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес Radix Scutellariae в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1 час; экстрагированную жидкость смешивают, рН устанавливают с помощью хлористоводородной кислоты на уровне 1,5-2,0; экстрагированную жидкость выдерживают при температуре 80°С в течении 1 часа, настаивают, фильтруют, остаток промывают водой до установления рН 5-6, высушивают, полученный высушенный экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш. В результате получают экстракт Radix Scutellariae.
Rhizoma Coptidis дважды экстрагируют 70% этиловым спиртом, объем которого в 10 раз превышает вес Rhizoma Coptidis, продолжительность каждой операции экстрагирования - 2 часа; экстрагированную жидкость смешивают, фильтруют, этиловый спирт испаряют до исчезновения запаха спирта, рН устанавливают с помощью хлористоводородной кислоты на уровне 1-2, выдерживают ночь при низкой температуре, фильтруют, остаток промывают до установления рН 5-6, высушивают, полученный сухой экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш. В результате получают экстракт Rhizoma Coptidis.
Оставшиеся восемь компонентов лекарственного сырья дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес данных восьми компонентов в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1 час; смешанную экстрагированную жидкость концентрируют до относительной плотности - 1,03, охлаждают, далее добавляют 95% этиловый спирт до установления уровня содержания спирта 70%, настаивают, фильтруют, испаряют этиловый спирт до получения экстракта с относительной плотностью - 1,35, высушивают, полученный сухой экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш.
Сухой порошкообразный экстракт, полученный в результате трех описанных этапов, тщательно смешивают, добавляют лактозу для приготовления смеси в виде капсул.
Пример 21
Состав: 833 г Radix Trichosanthis, 667 г Radix Bupleuri, 500 г Fructus Aurantii Immaturus, 167 г Radix et Rhizoma Rhei, 333 г Rhizoma Pinelliae, 500 г Radix Scutellariae, 333 г Rhizoma Coptidis, 500 г Radix Paeoniae Alba, 833 г Fructus Mume и 500 г Fructus Crataegi.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Перечисленные десять компонентов лекарственного сырья дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. Экстрагированную жидкость фильтруют, концентрируют под вакуумом до конечного объема (л), который соотносится с начальным весом (кг) лекарственного сырья в пропорции 1:1, добавляют 95% этиловый спирт до установления содержания спирта 70%. Полученную экстрагированную жидкость фильтруют и концентрируют под вакуумом до густого экстракта.
Пример 22
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 21.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Шесть компонентов лекарственного сырья (Radix Bupleuri, Radix Paeoniae Alba, Fructus Aurantii Immaturus, Radix et Rhizoma Rhei, Radix Scutellariae и Rhizoma Coptidis) дважды экстрагируют 80% этиловым спиртом, объем которого превышает вес лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. В результате, получают экстрагированную жидкость (1) и остаток лекарственного сырья. Экстрагированную жидкость (1) фильтруют для дальнейшего использования.
В остаток добавляют Radix Trichosanthis, Fructus Mume, Rhizoma Pinelliae и Fructus Crataegi и дважды экстрагируют водой, объем которой превышает общий вес данных четырех компонентов и остатка лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. В результате получают экстрагированную жидкость (2), которую концентрируют до конечного объема (л), который соотносится с начальным весом (кг) лекарственного сырья в пропорции 1:1. 95% этиловый спирт добавляют до получения содержания спирта 70%, фильтруют для дальнейшего использования.
Данные экстракты смешивают и концентрируют под вакуумом до получения густого экстракта.
Пример 23
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 21.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Данные десять компонентов дважды экстрагируют водой, добавляя 51,7 кг воды при каждом этапе экстрагирования, продолжительность каждой операции составляет 1 час; экстрагированную жидкость охлаждают, фильтруют и смешивают. Комбинированный фильтрат пропускают через 2,6 кг макропористой адсорбционной смолы типа АВ-8 с часовым расходом, в 5 раз превышающим объем колонки. После промывания водой объемом, в 5 раз превышающим объем колонки, выделяют элюат. Затем, снова проводят промывание 90% этиловым спиртом, объем которого превышает объем колонки в 3 раза, спиртовой элюат смешивают. Из спиртового элюата испаряют этиловый спирт при температуре 70°С под вакуумом для получения экстракта с относительной плотностью 1,30. Сухой экстракт получают с помощью вакуумной сушки при 80°С, экстракт измельчают, и просеивают через сито 80 меш. В просеянный сухой порошок добавляют микрокристаллическую целлюлозу, из смеси изготавливают концентрированные пилюли.
Пример 24
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 21.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Radix Scutellariae дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес Radix Scutellariae в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1 час; экстрагированную жидкость смешивают, рН устанавливают с помощью хлористоводородной кислоты на уровне 1,5-2,0; экстрагированную жидкость выдерживают при температуре 80°С в течение 1 часа, настаивают, фильтруют, остаток промывают водой до установления уровня рН 5-6, высушивают, полученный высушенный экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш. В результате, получают экстракт Radix Scutellariae.
Rhizoma Coptidis дважды экстрагируют 75% этиловым спиртом, объем которого в 10 раз превышает вес Rhizoma Coptidis, продолжительность каждой операции экстрагирования - 2 часа; экстрагированную жидкость смешивают, фильтруют, этиловый спирт испаряют до исчезновения запаха спирта, рН устанавливают с помощью хлористоводородной кислоты на уровне 1-2, выдерживают ночь при низкой температуре, фильтруют, остаток промывают до установления уровня рН 5-6, высушивают, полученный сухой экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш. В результате, получают экстракт Rhizoma Coptidis.
Оставшиеся восемь компонентов лекарственного сырья дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес данных восьми компонентов в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1 час; смешанную экстрагированную жидкость концентрируют до получения концентрированной экстрагированной жидкости с относительной плотностью - 1,05, охлаждают, далее добавляют 95% этиловый спирт до установления содержания спирта 70%, настаивают, фильтруют, испаряют этиловый спирт до относительной плотности - 1,30, высушивают, полученный сухой экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш.
Данные сухие порошкообразные экстракты, полученные в результате трех описанных этапов, тщательно смешивают, добавляют микрокристаллическую целлюлозу для приготовления смеси в виде концентрированных пилюль.
Пример 25
Состав: 500 г Radix Trichosanthis, 750 г Radix Bupieuri, 500 г Fructus Aurantii Immaturus, 250 г Radix et Rhizoma Rhei, 500 г Rhizoma Pinelliae, 500 г Radix Scutellariae, 500 г Rhizoma Coptidis, 500 г Radix Paeoniae Alba, 500 г Fructus Mume и 500 г Fructus Crataegi. Препарат изготавливают по следующей технологии:
Перечисленные десять компонентов лекарственного сырья дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. Экстрагированную жидкость фильтруют, концентрируют под вакуумом до конечного объема (Л), который соотносится с начальным весом (кг) лекарственного сырья в пропорции 1:1, добавляют 95% этиловый спирт до установления уровня содержания спирта 70%. Полученную экстрагированную жидкость фильтруют и концентрируют под вакуумом до густого экстракта.
Пример 26
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 25.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Шесть компонентов лекарственного сырья (Radix Bupleuri, Radix Paeoniae Alba, Fructus Aurantii Immaturus, Radix et Rhizoma Rhei, Radix Scutellariae и Rhizoma Coptidis) дважды экстрагируют 80% этиловым спиртом, объем которого превышает вес лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. В результате получают экстрагированную жидкость (1) и остаток лекарственного сырья. Экстрагированную жидкость (1) фильтруют для дальнейшего использования.
В остаток добавляют Radix Trichosanthis, Fructus Mume, Rhizoma Pinelliae и Fructus Crataegi и дважды экстрагируют водой, объем которой превышает общий вес данных четырех компонентов и остатка лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. В результате, получают экстрагированную жидкость (2), которую концентрируют до конечного объема (л), который соотносится с начальным весом (кг) лекарственного сырья в пропорции 1:1. 95% этиловый спирт добавляют до получения уровня содержания спирта 70%, фильтруют для дальнейшего использования.
Данные экстрагированные жидкости смешивают и концентрируют под вакуумом до получения густого экстракта.
Пример 27
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 25.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Данные десять компонентов дважды экстрагируют водой, добавляя по 50 кг воды при каждой операции экстрагирования, продолжительность каждой операции составляет 1 час; экстрагированную жидкость охлаждают, фильтруют и смешивают. Комбинированный фильтрат пропускают через 2,5 кг макропористой адсорбционной смолы типа АВ-8 с часовым расходом, в 4 раз превышающим объем колонки. После промывания водой объемом, в 5 раз превышающим объем колонки, выделяют элюат. Затем, снова проводят промывание 92% этиловым спиртом, объем которого превышает объем колонки в 4 раза, спиртовой элюат смешивают. Из смешанного спиртового элюата испаряют этиловый спирт при температуре 75°С под вакуумом для получения экстракта с относительной плотностью 1,25. Сухой экстракт получают с помощью вакуумной сушки при 85°С, экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш. В просеянный сухой порошок добавляют декстрин, смесь изготавливают в форме таблеток.
Пример 28
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 25.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Radix Scutellariae дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес Radix Scutellariae в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1 час; экстрагированную жидкость смешивают, рН устанавливают с помощью хлористоводородной кислоты на уровне 1,5-2,0; экстрагированную жидкость выдерживают при температуре 85°С в течение 1 часа, настаивают, фильтруют, остаток промывают водой до установления рН 5-6, высушивают, полученный высушенный экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш. В результате, получают экстракт Radix Scutellariae.
Rhizoma Coptidis дважды экстрагируют 85% этиловым спиртом, объем которого в 10 раз превышает вес Rhizoma Coptidis, продолжительность каждой операции экстрагирования - 2 часа; экстрагированную жидкость смешивают, фильтруют, этиловый спирт испаряют до исчезновения запаха спирта, рН устанавливают с помощью хлористоводородной кислоты на уровне 1-2, выдерживают ночь при холодной температуре, фильтруют, остаток промывают до установления уровня рН 5-6, высушивают, полученный сухой экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш. В результате, получают экстракт Rhizoma Coptidis.
Оставшиеся восемь компонентов лекарственного сырья дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес данных восьми компонентов в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1 час; смешанную экстрагированную жидкость концентрируют до относительной плотности - 1,05, охлаждают, далее добавляют 95% этиловый спирт до установления уровня содержания спирта 70%, настаивают, фильтруют, испаряют этиловый спирт до получения экстракта с относительной плотностью - 1,25, высушивают, полученный сухой экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш.
Данные сухие порошкообразные экстракты, полученные в результате трех описанных этапов, тщательно смешивают, добавляют декстрин для приготовления смеси в виде таблеток.
Пример 29
Состав: 1200 г Radix Trichosanthis, 800 г Radix Bupieuri, 600 г Fructus Aurantii Immaturus, 200 г Radix et Rhizoma Rhei, 400 г Rhizoma Pinelliae, 400 г Radix Scutellariae, 200 г Rhizoma Coptidis, 400 г Radix Paeoniae Alba, 400 г Fructus Mume и 400 г Fructus Crataegi.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Перечисленные десять компонентов лекарственного сырья дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. Экстрагированную жидкость фильтруют, концентрируют под вакуумом до конечного объема (л), который соотносится с начальным весом (кг) лекарственного сырья в пропорции 1:1, добавляют 90% этиловый спирт до установления содержания спирта 68%. Полученную экстрагированную жидкость фильтруют и концентрируют под вакуумом до густого экстракта.
Пример 30
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 29.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Шесть компонентов лекарственного сырья (Radix Bupleuri, Radix Paeoniae Alba, Fructus Aurantii Immaturus, Radix et Rhizoma Rhei, Radix Scutellariae и Rhizoma Coptidis) дважды экстрагируют 85% этиловым спиртом, объем которого превышает вес лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. В результате получают экстрагированную жидкость (1) и остаток лекарственного сырья. Экстрагированную жидкость (1) фильтруют для дальнейшего использования.
В остаток добавляют Radix Trichosanthis, Fructus Mume, Rhizoma Pinelliae и Fructus Crataegi и дважды экстрагируют водой, объем которой превышает общий вес данных четырех компонентов и остатка лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. В результате, получают экстрагированную жидкость (2), которую концентрируют до конечного объема (л), который соотносится с начальным весом (кг) лекарственного сырья в пропорции 1:1. 90% этиловый спирт добавляют до получения уровня содержания спирта 68%, фильтруют для дальнейшего использования. Данные экстрагированные жидкости смешивают и концентрируют под вакуумом до получения густого экстракта.
Пример 31
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 29.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Данные десять компонентов дважды экстрагируют водой, добавляя 50 кг воды при каждой операции экстрагирования, продолжительность каждой операции составляет 1 час; экстрагированную жидкость охлаждают, фильтруют и смешивают. Комбинированный фильтрат пропускают через 2,0 кг макропористой адсорбционной смолы типа АВ-8 с часовым расходом, в 6 раз превышающим объем колонки. После промывания водой объемом, в 4 раз превышающим объем колонки, выделяют элюат. Затем, снова проводят промывание 92% этиловым спиртом, объем которого превышает объем колонки в 3 раза, спиртовой элюат смешивают. Из смешанного спиртового элюата испаряют этиловый спирт при температуре 65°С под вакуумом для получения экстракта с относительной плотностью 1,30. Сухой экстракт получают с помощью вакуумной сушки при 75°С, экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш. В просеянный сухой порошок добавляют лактозу, смесь изготавливают в форме капсул.
Пример 32
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 29.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Radix Scutellariae дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес Radix Scutellariae в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1 час; экстрагированную жидкость смешивают, рН устанавливают с помощью хлористоводородной кислоты на уровне 1,5-2,0; экстрагированную жидкость выдерживают при температуре 75°С в течение 1 часа, настаивают, фильтруют, остаток промывают водой до установления уровня рН 5-6, высушивают, полученный высушенный экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш. В результате, получают экстракт Radix Scutellariae.
Rhizoma Coptidis дважды экстрагируют 75% этиловым спиртом, объем которого в 10 раз превышает вес Rhizoma Coptidis, продолжительность каждой операции экстрагирования - 2 часа; экстрагированную жидкость смешивают, фильтруют, этиловый спирт испаряют до исчезновения запаха спирта, рН устанавливают с помощью хлористоводородной кислоты на уровне 1-2, выдерживают ночь при низкой температуре, фильтруют, остаток промывают до установления уровня рН 5-6, высушивают, полученный сухой экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш. В результате, получают экстракт Rhizoma Coptidis.
Оставшиеся восемь компонентов лекарственного сырья дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес данных восьми компонентов в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1 час; смешанную экстрагированную жидкость концентрируют до получения экстрагированной жидкости с относительной плотностью - 1,05, охлаждают, далее добавляют 95% этиловый спирт до установления уровня содержания спирта 70%, настаивают, фильтруют, испаряют этиловый спирт до получения экстракта с относительной плотностью - 1,35, высушивают, полученный сухой экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш.
Сухие порошкообразные экстракты, полученные в результате трех описанных этапов, тщательно смешивают, добавляют лактозу для приготовления смеси в виде капсул.
Пример 33
Состав: 1000 г Radix Trichosanthis, 600 г Radix Bupleuri, 600 г Fructus Aurantii Immaturus, 250 г Radix et Rhizoma Rhei, 300 г Rhizoma Pinelliae, 500 г Radix Scutellariae, 300 г Rhizoma Coptidis, 500 г Radix Paeoniae Alba, 500 г Fructus Mume и 300 г Fructus Crataegi.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Перечисленные десять компонентов лекарственного сырья дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. Экстрагированную жидкость фильтруют, концентрируют под вакуумом до конечного объема (л), который соотносится с начальным весом (кг) лекарственного сырья в пропорции 1:1, добавляют 99% этиловый спирт до установления уровня содержания спирта 74%. Полученную экстрагированную жидкость фильтруют и концентрируют под вакуумом до густого экстракта.
Пример 34
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 33.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Шесть компонентов лекарственного сырья (Radix Bupleuri, Radix Paeoniae Alba, Fructus Aurantii Immaturus, Radix et Rhizoma Rhei, Radix Scutellariae и Rhizoma Coptidis) дважды экстрагируют 90% этиловым спиртом, объем которого превышает вес лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. В результате получают экстрагированную жидкость (1) и остаток лекарственного сырья. Экстрагированную жидкость (1) фильтруют для дальнейшего использования.
В остаток добавляют Radix Trichosanthis, Fructus Mume, Rhizoma Pinelliae и Fructus Crataegi и дважды экстрагируют водой, объем которой превышает общий вес данных четырех компонентов и остатка лекарственного сырья в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1,5 часа. В результате, получают экстрагированную жидкость (2), которую концентрируют до конечного объема (л), который соотносится с начальным весом (кг) лекарственного сырья в пропорции 1:1. 99% этиловый спирт добавляют до получения уровня содержания спирта 74%, фильтруют для дальнейшего использования.
Данные экстрагированные жидкости смешивают и концентрируют под вакуумом до получения густого экстракта.
Пример 35
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 33.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Данные десять компонентов дважды экстрагируют водой, добавляя по 48,5 кг воды при каждой операции экстрагирования, продолжительность каждой операции составляет 1 час; экстрагированную жидкость охлаждают, фильтруют и смешивают. Комбинированный фильтрат пропускают через 1,7 кг макропористой адсорбционной смолы типа АВ-8 с часовым расходом, в 5 раз превышающим объем колонки. После промывания водой объемом, в 5 раз превышающим объем колонки, выделяют элюат. Затем снова проводят промывание 85% этиловым спиртом, объем которого превышает объем колонки в 5 раз, спиртовой элюат смешивают. Из смешанного спиртового элюата испаряют этиловый спирт при температуре 70°С под вакуумом для получения экстракта с относительной плотностью 1,35. Сухой экстракт получают с помощью вакуумной сушки при 90°С, экстракт измельчают и просеивают через сито 80 Меш. В просеянный сухой порошок добавляют лактозу, смесь изготавливают в форме капсул.
Пример 36
Состав препарата идентичен составу, указанному в Примере 33.
Препарат изготавливают по следующей технологии:
Radix Scutellariae дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес Radix Scutellariae в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1 час; экстрагированную жидкость смешивают, рН устанавливают с помощью хлористоводородной кислоты на уровне 1,5-2,0; экстрагированную жидкость выдерживают при температуре 80°С в течение 1 часа, настаивают, фильтруют, остаток промывают водой до установления рН 5-6, высушивают, полученный высушенный экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш. В результате, получают экстракт Radix Scutellariae.
Rhizoma Coptidis дважды экстрагируют 80% этиловым спиртом, объем которого в 10 раз превышает вес Rhizoma Coptidis, продолжительность каждой операции экстрагирования - 2 часа; экстрагированную жидкость смешивают, фильтруют, этиловый спирт испаряют до исчезновения запаха спирта, рН устанавливают с помощью хлористоводородной кислоты на уровне 1-2, выдерживают ночь при низкой температуре, фильтруют, остаток промывают до установления рН 5-6, высушивают, полученный сухой экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш. В результате, получают экстракт Rhizoma Coptidis.
Оставшиеся восемь компонентов лекарственного сырья дважды экстрагируют водой, объем которой превышает вес данных восьми компонентов в 10 раз, продолжительность каждой операции экстрагирования - 1 час; смешанную экстрагированную жидкость концентрируют до относительной плотности - 1,05, охлаждают, далее добавляют 95% этиловый спирт до установления содержания спирта 70%, настаивают, фильтруют, испаряют этиловый спирт до получения экстракта с относительной плотностью - 1,30, высушивают, полученный сухой экстракт измельчают и просеивают через сито 80 меш.
Сухие порошкообразные экстракты, полученные в результате трех описанных этапов, тщательно смешивают, добавляют лактозу для приготовления смеси в виде капсул.
Экспериментальный пример 1.
Исследование воздействия
1. Животные.
Шестьдесят самцов крыс линии Спраг Доули, беспатогенные, вес - 200-220 г.
2. Реагенты, лекарственные препараты и оборудование. Стрептозотоцин (СТЗ) был приобретен у компании Сигма (Sigma) (США), номер партии - 024K1211.
6
8
7
2
Безводная лимонная кислота (СНС·НО) была приобретена у компании «Тяньцзиньский химический комбинат по производству реагентов №1» (Tianjin Chemical Reagent No.1 Factory), номер партии - 011121.
3
6
5
7
2
Натрий цитрат (NaCHO·2HO) был приобретен у компании «Тяньцзиньский химический комбинат по производству реагентов №1» (Tianjin Chemical Reagent No.1 Factory), номер партии - 011219.
Метформин (250 мг/таблетка) был приобретен у компании Tianjin Pacific Ocean Pharmaceutical Co., Ltd., номер партии - 040121.
Тестируемые лекарственные препараты (TL-1, TL-2 и TL-3) представляли собой порошок экстракта, приготовленного согласно Примерам 3, 8 и 9.
Глюкометр (марки One-Touch Ultra) был приобретен у компании Lifescan Inc. (США), номер сертификата - 20032400735.
3. Подготовка модельных животных.
Крыс Спраг Доули не кормили вечером накануне эксперимента после однонедельной адаптации, им была введена внутрибрюшная инъекция 2% раствора (вес/объем) СТЗ, приготовленного с 0,1 ммоль/л буферного раствора лимонной кислоты (рН 4.4) (65 мг/кг). Через три дня из хвостовой вены были взяты образцы крови для измерения уровня глюкозы. Те животные, у которых уровень содержания глюкозы в крови равнялся или был выше 16,7 ммоль/л, были признаны удачными моделями.
4. Способы назначения и показатели наблюдения.
Модельные крысы были вразброс разделены на модельные группы: группу, получавшую метформин (125 мг/кг), и группу, получавшую другое лечение (15,5 г лекарственного сырья/кг соответственно). После недели адаптации и анализа на уровень глюкозы в крови крысам были назначены желудочные инфузии, по одной в день. Все препараты растворялись физиологическим раствором согласно назначаемой дозировке. Животные имели доступ к пище и воде в течении 15-дневного периода исследования. На седьмой и четырнадцатый дни после назначения крысам не давали корм в течении двух часов после назначения. Соответственно, из хвостовой вены были взяты образцы крови на анализ уровня глюкозы с помощью глюкометра (марки One Touch Ultra). В то же время измерялась масса тела крыс.
5. Статистика.
<mrow><mrow><mo>(</mo><mrow><mover accent="true"><mi>X</mi><mo stretchy="true">¯</mo></mover><mo>±</mo><mi>S</mi><mi>D</mi></mrow><mo>)</mo></mrow></mrow>
Результаты выражены как ср. знач.±среднеквадратичное отклонение
, при этом использовался t-критерий для определения значительных различий между данными исследования двух групп.
6. Результаты.
Как показано в Таблице 1 - седьмой и четырнадцатый дни назначения - было определено, что уровень глюкозы в крови у крыс с высоким содержанием глюкозы от СТЗ значительно снизился (Р<0.01) в группе, которой было назначено другое лечение с дозировкой 15,5 г/кг.
Таблица 1
Сравнение и изменение уровня глюкозы в крови в группах <maths num="2"><math display="block"><mrow><mrow><mo>(</mo><mrow><mover accent="true"><mi>X</mi><mo stretchy="true">¯</mo></mover><mo>±</mo><mi>S</mi><mi>D</mi><mo>⋅</mo><mi>n</mi><mo>=</mo><mn>10</mn></mrow><mo>)</mo></mrow></mrow></math><img file="00000002.tif" he="7" wi="33" img-content="undefined" img-format="tif" /></maths>
Дозировка
Уровень глюкозы в крови до назначения (ммоль/л)
Уровень глюкозы в крови через 7 дней после назначения (ммоль/л)
Уровень глюкозы в крови через 14 дней после назначения (ммоль/л)
Контрольная группа
-
5.99±0.202
6.06±0.165
6.01±0.223
Модельная группа
-
21.47±2.351<sup>*</sup>
22.35±1.707<sup>*</sup>
22.33±1.614<sup>*</sup>
Метформин (Metformin) группа
125 мг/мг
21.61±2.066<sup>*</sup>
18.64±0.783<sup>*</sup>
17.54±1.222<sup>*</sup>
TL-1
15.5 г лекарственного сырья/кг
21.48±1.686<sup>*</sup>
18.13±1.103<sup>*</sup>
17.21±1.214<sup>*</sup>
TL-2
15.5 г лекарственного сырья/кг
21.62±1.734<sup>*</sup>
17.97±0.687<sup>*</sup>
17.04±1.431<sup>*</sup>
TL-3
15.5 г лекарственного сырья/кг
21.53±1.752<sup>*</sup>
17.32±0.625<sup>*</sup>
17.02±1.256<sup>*</sup>
<sup>*</sup> В сравнении с контрольной группой, р<0.01;
<sup></sup> В сравнении с модельной группой, р<0.01.