Применение клеток диплоидного штамма фибробластов человека ЭФЧ 01/05 в сочетании с коллагеном при лечении дефектов мягких тканей челюстно-лицевой области

ной близости, что снизило риск отторжения донорской кожи. После полного обследования донора произведены 3 кожные пластики, с интервалом в 6 - 7 дней, перфоративными лоскутами и марочным способом. Па 14 сутки после пластики в области проксимальной фаланги правой кисти появились признаки краевого некроза донорской кожи; в последующем, после удаления некротизированных участков посредством краевой эпители-запии эти места закрылись самостоятельно. На остальных участках тела пересаженные лоскуты донорской кожи прижились удовлетворительно. Дополнительные хирургические манипуляции не проводились.

По стабилизации состояния ребенок был переведен из ОАРИТ в хирургическое отделение, а затем в отделение иммунологической реабилитации. В целом лечение продолжалось в течение 5 месяцев, включая коррекцию иммунного статуса, анемии и дистрофии и выписан в удовлетворительном состоянии под наблюдение участкового врача.

Заключение:Проблема сосудистых поражений кожи является актуальной, и число таких больных значительно увеличилось в последние годы. Заболевание является полиэтиологичным, но чаще других развивается под влиянием гиперергических механизмов, инфекционных болезней, токсических, фармакологических факторов. Патогенетически поражения кожи трактуют как аутоиммунные, аутоаллергические. Терапия генерализованных форм многокомпонентна, требует индивидуального подхода и совместных действий многих специалистов. В исключительных случаях может быть приемлемым и такой метод хирургического лечения как аллодер-мопластика, что с успехом было использовано в нашем клиническом случае. Литература

1 . Аллергические болезни у детей, под редакцией Т. С. Соколовой и М. Я. Студеникина. - Москва. - 2009. - С. 53 - 75.

2. Детская аллергология, под редакцией А. А. Баранова, И. И. Балаболкина . - Москва. - 2008. - С. 13 - 21.

3. Аллергические болезни. Диагностика и лечение. Рой Паттерсон, Лесли К. Греммер, Пол А. Гринберг

4. Клиническая педиатрия. Руководство по педиатрии. С. X Аюпова

5. Руководство но детской дерматовенерологии. Ю.В. Скрипкин, Ф. А. Зверькова, Г. Я. Шарапова, А. А. Студе-никин

Аллодермопластика балалардагы токсикалык эпидермальды некролиздi хирургиялык емдеудеп

тавдаулы эдк ретшде Бирюк М.А

Осы ж^мыста 5 айльщ баладагы токсикальщ эпидермальды некролиздщ клиникальщ жагдайы керсеплген. Балалардагы б^л патология медикаментозды аллергиялык; терi задымыныц ец ауыр варианты. Балага анасынан аллодермопластика журпзвдг

Allodermoplastika - as a choice of method of surgical treatment for a child with a toxic epidermal necrolysis

Biryk M

This paper presents a clinical case of toxic epidermal necrolysis in a child 5 months. This pathology in children is the hardest choice of medical allergic skin lesions. The child was held allodermoplastika skin of the mother.

УДК 579.083.13

ПРИМЕНЕНИЕ КЛЕТОК ДИПЛОИДНОГО ШТАММА ФИБРОБЛАСТОВ ЧЕЛОВЕКА ЭФЧ 01/05 В СОЧЕТАНИИ С КОЛЛАГЕНОМ ПРИ ЛЕЧЕНИИ ДЕФЕКТОВ МЯГКИХ ТКАНЕЙ ЧЕЛЮСТНО-ЛИЦЕВОЙ ОБЛАСТИ

Тулеуов К.Т, Бименов Кауламбаева М.З.

Казахский национальный медицинский университет им. С.Д. Асфендиярова Научно-производственное предприятие «Антиген», Алматы,

Фибробласты - представляют собой клетки соединительной ткани. Морфологически характеризуются как клетки круглой или удлиненной, веретенообразной плоской формы с отростками и плоским овальным ядром Фибробласты в культуре сохраняют диплоидный кариотип и имеют ограниченную продолжительность жизни, низкую экспрессию антигенов гистосовместимости и отсутствие онкогенных потенций [1].

Пересаженные аллогенные фибробласты оказывают непосредственное влияние на заживление и эпите-лизацию ран. Фибробласты продуцируют коллагены I и II типов, компоненты внеклеточного матрикса: лами-нин, нидоген, тинасцин, хондроитин-4-сульфат, протеогликан, фибронектин, некоторые факторы роста, а также другие вещества [ 1, 2].

В настоящее время имеется значительное число работ, свидетельствующих о большой роли факторов роста в эпителизации кожи. Факторы роста — это регуляторные пептиды (тканевые гормоны), вырабатываемые клетками различных типов, которые в значительной степени ускоряют регенераторный процесс. Многие факторы роста продуцируются фибробластами [1, 3 ].

Культивируемые вне организма диплоидные фибробласты человека используются для производства иммунобиологических медицинских препаратов и для терапевтических целей [ 4]. Научные исследования и клинические разработки в данном направлении протекают очень интенсивно, что связано с общим подъемом развития клеточных технологий в биотехнологии и медицине

Проблема эффективного купирования патологического процесса и восстановления утраченной тканей всё ещё требует разработок современных лечебных технологий и для успешного восстановительного лечения возникает необходимость применения оптимизаторов регенерации тканей.

В этом направлении особый интерес представляет применение культуры клеток эмбриональных фиб-робластов человека и коллагена для лечения дефектов мягких тканей. Культура фибробластов способна выделять ростовые факторы, обладает регенирирующими свойствами и способна усиливать репаративные процессы при дефектах мягких тканей. Коллаген - кроме общеизвестных репаративных и противовоспалительных свойств обладает высокой адгезией к биологическим тканям, обеспечивает герметичность и изоляцию раны от внешней среды с сохранением депо клеточной культуры.

В лаборатории «Клеточных технологий» научно-производственного предприятия «Антиген» был получен диплоидный штамм фибробластов человека (ЭФЧ 01/05), который обладает всеми культурально -морфологическими свойствами, характерными для данного типа ткани и свободный от посторонних контами-нантов. Диплоидный штамм фибробластов человека паспортизирован и депонирован в Республиканской коллекции микроорганизмов. Мы исследовали данный штамм фибробластов для определения условий культивирования, криоконсервации, сохранности и применения для лечения костных дефектов, ран, операционных швов и парадонтита в эксперименте.

Целью настоящей работы было проведения клинического обоснования применения культуры диплоидных клеток эмбриональных фибробластов человека ЭФЧ 01/05 и коллагенового матрикса для лечения дефектов мягких тканей в ЧЛО.

Материал и методы. Клетки диплоидного штамма эмбриональных фибробластов человека (ЭФЧ 01/05) культивировали на среде а-МЕМ с 10% сыворотки крови КРС в течение трех суток. По достижению монослоя клетки снимали диспергирующей смесью, состоящей из 0,02% раствора вересена и 0,25% раствора трипсина в соотношение 3:1. Клетки отмывали от сывороточных белков в сбалансированном растворе Хенкса центрифугированием при 1300 об/мин в течение 10 минут. Суспензию клеток разводили физиологическим раствором до концентрации 3,5-4 млн.клеток/см3. Коллагеновую губку пропитывали физиологическим раствором до гелеобразного состояния.

Раны обрабатывали асептическим раствором ( 3% раствор перекиси водорода и раствором фурацили-на), В область раны инъекционно по всей площади в множество точек вводили 1 см3 суспензии клетки диплоидного штамма эмбриональных фибробластов человека (ЭФЧ 01/05). Один см3 суспензии клеток смешивали с коллагеновым гелем и апликационно наносили на рану. Область раны закрывали коллагеновой мембраной. Коллагеновые мембраны выполняли барьерную функцию. Процедуры повторяли 3-4 раза в зависимости от состояния раны.

Результаты и их обсуждение. В условиях стационара было проведено лечение дефектов мягких тканей ЧЛО с применением диплоидного штамма эмбриональных фибробластов человека (ЭФЧ 01/05) и коллагена трем больным с информированным согласием.

Больной А - возраст 23 года, поступил АМКБ с диагнозом посттравматический дефект мягких тканей в височной и затылочной областей

Больной Б - возраст 49 лет, поступил АМКБ с диагнозом посттравматический дефект мягких тканей в затылочной областей ( рис.3). Рана в затылочной области была закрыта кожным лоскутом на сосудистой ножке В дальнейшем произошла некротизация лоскута и дефект в затылочной области лечили с применением клеточной технологии в сочетании с коллагеном (рис.4). В результате проведенного лечения через 2 недели в про-изошао полная эпителизация раны.

Больная В - возраст 3 года, поступила АМКБ с диагнозом посттравматический дефект мягких тканей лобной области ( рис.5). После неудачного лечения с применением традиционных методов, лечили с применением клеточной технологии в сочетании с коллагеном (рис.6).

Рисунок 1. Дефект мягких тканей затылочной и височных областях до лечения

Рисунок 2. Дефект мягких тканей затылочной области после лечения

Рисунок 6. Дефект мягких тканей лобной области после лечения

В результате проведенного лечения через три недели произошло полное заживление раны без образования грубой рубцовой ткани. Заключение

В результате проведенных исследований можно сделать следующие выводы:

- применение клеток диплоидного штамма эмбриональных фибробластов человека (ЭФЧ 01/05) в сочетание с коллагеном значительно ускоряет регенерацию мягких тканей;

- применение новых технологий дает возможность избежать нанесения повторных ран больному и образования грубой рубцовой ткани;

- применение клеточных технологий в сочетании с тканевой инженерией значительно уменьшает этапы лечения и сокращает сроки пребывания больного в стационаре.

Литература

1. Степанова ЛГ, Алексеев СБ, Згурский АА, Ломанова ГА, Шалунова НВ. Получение и характеристика нового штамма диплоидных клеток из эмбриональной ткани легкого человека. Цитология 1986;28(12):1373-1376.

2. Алексеев А.А., Попов С.В. «Комбустиология», 1, 1999.

3. Келлер Г., Себастиан Дж., Лакомбе Ю., Тофт К., Ласк Г., Ревазова Е. Сохранность инъецируемых аутологич-ных человеческих фибробластов. «Бюл. эксп. биол. мед.», 2000, т.130, №8, 203-206.

4. Терехов СМ. Усовершенствованный метод клонирования диплоидных фибробластов человека. Цитология 1981;23(6):717-718.

Адамныц эмбриональды фибробласттарыньщ диплоидты жасуша штамдарын коллагенмен 6ipiKTipe бет элпет аймаFындаFы ж^мсак тшдердщ акауларын емдеуде колдану

Тулеуов К.Т, Бименов Кауламбаева М.З. ЖYргiзiлген зеттеу нэтижелерше жупне отырып, келес корытынды жасауга болады: -Адамныц эмбриональды фибробласттарыньщ диплоидты жасуша штамдарын коллагенмен бiрiктiре колдану ж^мсак пндердщ регенерациясын жылдамдатады.

-Жаца технологияларды колдану наукасты кайта жаракаттамауга жэне жараныц тыртыктанбай жазылуына мYмкiндiк тудырады.

-Жасушалы технологиямен тiндiк инженерияны колдану барысында емдеу кезецдерi азайып, наукастардыц ауруханада жату мерзiмi кыскарады.

The using of collgen with man's embryological fibroblastic's cells at the treatment the defects of maxillo -facial

region

Tuleuov K.T., Bimenov., Kaulambayeva M.Z. In the results of our research we have next conclusion:

-the using of collagen with man's embryological fibroblastic cells make more quickly regeneration of soft tissue. -the using of new technology in the combination with tissue engineer make more diminish the time of the treatment and the time of the stay in the hospital.

-use new technology's give us possibility to avoid inflict secondary wounds and formation pectoral scar tissue.

ПОДГОТОВКА ГЛУБОКИХ ОЖОГОВЫХ РАН К РАННЕЙ АУТОДЕРМОПЛАСТИКЕ У ДЕТЕЙ

А.Б. Марденов

Карагандинский государственный медицинский университет

Дан сравнительный анализ результатов местного лечения ожогов у детей. Применение открытого метода лечения, ранней некрзктомии и аутодермопластики с использованием лампы «Биоптрон» и ультразвукового бескровного скальпеля позволило улучшить результаты лечения ожоговых ран и сократить сроки пребывания больного в стационаре.

Ключевые слова: ожог, аутодермопластика, дети.

Основной проблемой современной комбустиологии является лечение больных с глубокими и обширными ожогами. В настоящее время проведение раннего хирургического лечения глубоких ожогов является аксиомой, поскольку исходы ожоговой болезни напрямую зависят от сроков восстановления кожного покрова [1,2,3].

Вместе с тем остаются спорными вопросы о сроках и объеме некрэктомий, способах и времени закрытия раневой поверхности. До конца не выяснено влияние ранних оперативных вмешательств на течение и исход ожоговой болезни. Отсутствуют и четкие объективные критерии подготовки ожоговых ран к аутодермопласти-ке [4].

Цель данного исследования - улучшение результатов лечения и подготовки обширных ожоговых ран у детей к ранней аутодермопластике.