КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ СИМПТОМОВ НИЖНИХ МОЧЕВЫХ ПУТЕЙ, ДОБРОКАЧЕСТВЕННОЙ ГИПЕРПЛАЗИИ ПРЕДСТАТЕЛЬНОЙ ЖЕЛЕЗЫ, ЭРЕКТИЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ И ДРУГИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ИЛИ СИМПТОМОВ
COMPOSITIONS AND METHODS USED FOR TREATING LOWER URINARY TRACT SYMPTOMS, BENIGN PROSTATIC HYPERPLASIA, ERECTILE DYSFUNCTION AND OTHER DISEASES OR SYMPTOMS

В настоящей заявке испрашивается приоритет предварительной заявки на патент США No. 61/902376, поданной 11 ноября, 2013, содержание которой во всей своей полноте  включено в настоящее описание посредством ссылки.
2. Область, к которой относится изобретение
В общих чертах, настоящее изобретение относится к лечению, предупреждению и ослаблению симптомов нижних мочевых путей (СНМП), доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ), эректильной дисфункции (ЭД), недержания мочи и других заболеваний или симптомов.
3. Предшествующий уровень техники
С возрастом, симптомы нижних мочевых путей (СНМП) у мужчин становятся все более выраженными, причем, почти у 50% мужчин в возрасте восьмидесяти лет эти симптомы преобладают в умеренной или тяжелой форме.
СНМП могут быть связаны, а могут быть и не связаны, с доброкачественной гиперплазией предстательной железы (ДГПЖ), то есть, с состоянием, которое гистологически характеризуется незлокачественным разрастанием ткани предстательной железы, расположенной вокруг уретры, и которое встречается у 50% мужчин в возрасте 50 лет и у 90% мужчин в возрасте 80 лет. СНМП могут быть также вызваны возрастной дисфункцией детрузора мочевого пузыря и другими симпатическими состояниями. СНМП также классифицируются как симптомы опорожнения или накопления и определяются по Международной шкале оценок (IPSS), как апробированному способу оценки, широко применяемому в медицинских и научных кругах.
Симптомы опорожнения мочевого пузыря включают прерывистое мочеиспускание, задержка мочеиспускания, периодическое непроизвольное прерывание опорожнения мочевого пузыря, мочеиспускание вялой струей мочи, частые позывы к мочеиспусканию, ощущение неполного опорожнения мочевого пузыря, подтекание мочи, и могут быть вызваны увеличением предстательной железы или воспалением ткани предстательной железы. Симптомы накопления могут включать частое мочеиспускание, никтурию, острые позывы к мочеиспусканию, недержание мочи и боли в области мочевого пузыря, и они могут быть вызваны гиперактивностью детрузора мочевого пузыря. Физиологическими маркерами, ассоциированными с повышенным риском ДГПЖ, являются высокие уровни тестостерона, дигидротестостерона, дегидроэпиандротестостерона и эстрадиола, инсулинподобных факторов роста и маркеров воспаления.
Хотя СНМП, и СНМП, вызываемые ДГПЖ, не представляют угрозу для жизни, однако, они могут существенно влиять на качество жизни (QoL), и в большинстве случаев, во избежание осложнений, они требуют лечения. Для оценки факторов риска обычно учитывается возраст, объем предстательной железы и максимальный объем выделяемой мочи, а также образ жизни, режим питания, потребление алкоголя, физическая активность или генетические факторы. В Соединенных Штатах, приблизительно 34% пациентам, после установления диагноза, рекомендуется внимательно следить за симптомами. Лечение СНМП апробированными фармакологическими препаратами может приводить к развитию ряда побочных эффектов, а поэтому необходимость в разработке новых способов лечения остается актуальной.
По данным специалистов Американской Урологической ассоциации, пациентам со слабо выраженными симптомами (IPSS<8) или пациентам с симптомами умеренной тяжести и пациентам с серьезными симптомами (IPSS≥8), которые не жалуются на СНМП, может быть рекомендовано наблюдение у врача и изменение образа жизни. Если пациента, несмотря на консервативное лечение, все же продолжают беспокоить эти симптомы, то в данном случае показано медикаментозное лечение, а в некоторых случаях, может быть рекомендована хирургическая операция.
По данным специалистов Национального Института Здравоохранения, в Соединенных Штатах эректильной дисфункцией (ЭД) страдают до 30 миллионов мужчин. Частота возникновения ЭД возрастает с возрастом: приблизительно у 4% мужчин в возрасте 50 лет и около 17% мужчин в возрасте 60 лет наблюдается полное отсутствие эрекции. Вероятность появления этого расстройства у мужчин старше 75 лет резко возрастает и достигает 47%.
Доброкачественная гиперплазия предстательной железы (ДГПЖ) является общей проблемой у всех мужчин пожилого возраста, и приводит почти к полной импотенции. Гистологические анализы уже диагностированной гиперплазии предстательной железы показали, что вероятность развития такого расстройства у мужчин возрастает от 8% в возрасте 31-40 лет, и до 40-50% в возрасте 51-60 лет, и до 80% у мужчин старше 80 лет.
Недержание мочи птс редко диагностируемое и часто скрываемое пациентами расстройство, которое все больше возникает с возратом. По поводу этого расстройства, 50-84% пожилых людей находятся в стационарах на длительном лечении. В любом возрасте, у женщин, такие расстройства встречаются в 2 раза чаще, чем у мужчин.
Расстройством, диагностируемым как «гиперактивный мочевой пузырь» (ГМП), страдает 10-18% населения, как мужчины, так и женщины в равной степени. ГМП негативно влияет на качество жизни пациента. СНМП, ассоциированный с ГМП, является серьезной проблемой социального и психологического характера, создает ощутимые неудобства в профессиональной деятельнсоти и в личной жизни, а также влияет на физическое состояние человека.
4.Описание сущности изобретения
Настоящее изобретение частично основано на обнаружении того факта, что добавление семян клюквы или муки из семян клюквы в порошок из высушенных ягод клюквы позволяет получить терапевтическую композицию, которая является эффективной для устранения симптомов нижних мочевых путей (СНМП) и для лечения других заболеваний и симптомов, но при этом не вызывает каких-либо побочных эффектов.
В одном из своих аспектов, настоящее изобретение относится к терапевтической композиции, содержащей порошок из высушенных ягод клюквы и семена высушенных ягод клюквы.
В другом своем аспекте, настоящее изобретение относится к терапевтической композиции, содержащей порошок из высушенных ягод клюквы и муку из семян клюквы.
Vaccinium macrocarpon
В некоторых вариантах осуществления изобретения, клюква принадлежит к роду .
Vaccinium microcarpon
В некоторых вариантах осуществления изобретения, клюква принадлежит к роду .
Vaccinium oxycoccus
В некоторых вариантах осуществления изобретения, клюква принадлежит к роду .
В некоторых вариантах осуществления изобретения, семена клюквы присутствуют в количестве приблизительно от 5% до 50% по массе порошка из высушенных ягод клюквы.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, семена клюквы присутствуют в количестве приблизительно от 15% до 25% по массе порошка из высушенных ягод клюквы.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, семена клюквы присутствуют в количестве приблизительно 20% по массе порошка из высушенных ягод клюквы.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, мука из семян клюквы присутствует в количестве приблизительно от 5% до 50% по массе порошка из высушенных ягод клюквы.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, мука из семян клюквы присутствует в количестве приблизительно от 15% до 25% по массе порошка из высушенных ягод клюквы.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, мука из семян клюквы присутствует в количестве приблизительно 20% по массе порошка из высушенных ягод клюквы.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, композиция содержит приблизительно менее чем 12 масс.% органических кислот.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, композиция содержит приблизительно менее чем 10 масс.% органических кислот.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, композиция содержит приблизительно от 5 масс.% до 8 масс.% органических кислот.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, композиция содержит приблизительно менее чем 15 масс.% сахаров.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, композиция содержит приблизительно менее чем 12 масс.% сахаров.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, композиция содержит приблизительно от 1 до 5 масс.% хинной кислоты.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, композиция содержит приблизительно от 2,2 до 3,2 масс.% хинной кислоты.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, композиция содержит приблизительно от 0,4 до 4 масс.% яблочной кислоты.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, композиция содержит приблизительно от 0,8 до 1,8 масс.% яблочной кислоты.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, композиция содержит приблизительно от 1 до 5 масс.% лимонной кислоты.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, композиция содержит приблизительно от 1,8 до 3,2 масс.% лимонной кислоты.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, композиция содержит: 0,5%-5,0% проантоцианидинов, 0,05%-1,5% кверцетина, 0,001%-0,1% кверцетин-3-глюкозида, 0,001%-0,1% кверцетин-3-рамнозида, 0,001%-0,1% кверцетин-3-ксилозида, 0,001%-0,1% кверцетин-3-аранобинозида, 0,001%-0,5% мирицетина, 0,001%-0,1% пеонидин-3-галактозида, 0,001%-0,1% пеонидин-3-глюкозида, 0,001%-0,1% пеонидин-3-аранобинозида, 0,001%-0,1% цианидин-3-глюкозида, 0,001%-0,1% цианидин-3-галактозида, 0,001%-0,1% цианидин-3-аранобинозида, 0,001%-0,1% протокатехоловой кислоты, 0,001%-0,1% п-кумариновой кислоты, 0,001%-0,1% кафелоил-глюкозида, 0,001%-0,1% кумароил-глюкозида, 0,001%-0,1% кофеиновой кислоты, 0,001%-0,1% хлорогенной кислоты или 0,01-1,5% урсоловой кислоты по массе композиции.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, композиция содержит: 1,0%-1,2% проантоцианидинов, 0,16%-0,20% кверцетина, 0,07%-0,09% кверцетин-3-глюкозида, 0,03%-0,04% кверцетин-3-рамнозида, 0,019%-0,025% кверцетин-3-ксилозида, 0,025%-0,035% кверцетин-3-аранобинозида, 0,010%-0,014% мирицетина, 0,022%-0,030% пеонидин-3-галактозида, 0,0025%-0,0035% пеонидин-3-глюкозида, 0,010%-0,020% пеонидин-3-аранобинозида, 0,0005%-0,0015% цианидин-3-глюкозида, 0,015%-0,030% цианидин-3-галактозида, 0,010%-0,025% цианидин-3-аранобинозида, 0,019%-0,025% протокатехоловой кислоты, 0,04%-0,06% п-кумариновой кислоты, 0,015%-0,025% кафелоил-глюкозида, 0,005%-0,015% кумароил-глюкозида, 0,010%-0,015% кофеиновой кислоты или 0,030%-0,04% хлорогенной кислоты по массе композиции.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, композиция содержит приблизительно: 1,1% проантоцианидинов, 0,18% кверцетина, 0,083% кверцетин-3-глюкозида, 0,034% кверцетин-3-рамнозида, 0,022% кверцетин-3-ксилозида, 0,030% кверцетин-3-аранобинозида, 0,012% мирицетина, 0,027% пеонидин-3-галактозида, 0,003% пеонидин-3-глюкозида, 0,014% пеонидин-3-аранобинозида, 0,001% цианидин-3-глюкозида, 0,022% цианидин-3-галактозида, 0,018% цианидин-3-аранобинозида, 0,022% протокатехоловой кислоты, 0,052% п-кумариновой кислоты, 0,021% кафелоил-глюкозида, 0,011% кумароил-глюкозида, 0,014% кофеиновой кислоты, 0,034% хлорогенной кислоты или 0,92% урсоловой кислоты по массе композиции.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, композиция содержит 1-100 мкг ларициресинола, 1-100 мкг секоизоларициресинола или 1-100 мкг пиноресинола на 100 г массы композиции.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, композиция содержит приблизительно 51 мкг ларициресинола, приблизительно 12 мкг секоизоларициресинола или приблизительно 78 мкг пиноресинола на 100 г массы композиции.
В другом своем аспекте, настоящее изобретение относится к твердой лекарственной форме для перорального введения, содержащей вышеописанную терапевтическую композицию.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, твердой лекарственной формой для перорального введения является таблетка.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, твердой лекарственной формой для перорального введения является капсула.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, твердой лекарственной формой для перорального введения является мягкий гель.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, твердая лекарственная форма для перорального введения содержит 100-500 мг терапевтической композиции.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, твердая лекарственная форма для перорального введения содержит 250 мг терапевтической композиции.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, твердая лекарственная форма для перорального введения содержит 500 мг терапевтической композиции.
В другом своем аспекте, настоящее изобретение относится к способу ослабления симптомов нижних мочевых путей (СНМП) у индивидуума, где указанный способ включает введение индивидууму, нуждающемуся в этом, эффективного количества композиции, описанной выше.
В другом своем аспекте, настоящее изобретение относится к способу ослабления симптомов доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ) у индивидуума, где указанный способ включает введение индивидууму, нуждающемуся в этом, эффективного количества композиции, описанной выше.
В другом своем аспекте, настоящее изобретение относится к способу лечения эректильной дисфункции (ЭД) у индивидуума, где указанный способ включает введение индивидууму, нуждающемуся в этом, композиции, описанной выше.
В другом своем аспекте, настоящее изобретение относится к способу лечения недержания мочи у индивидуума, где указанный способ включает введение индивидууму, нуждающемуся в этом, эффективного количества композиции, описанной выше.
В другом своем аспекте, настоящее изобретение относится к способу лечения гиперактивного мочевого пузыря (ГМП) у индивидуума, где указанный способ включает введение индивидууму, нуждающемуся в этом, эффективного количества композиции, описанной выше.
В другом своем аспекте, настоящее изобретение относится к способу лечения обструкции мочевого пузыря, интерстициального цистита, слабого мочевого пузыря, простатита, воспаления мочевого пузыря и предстательной железы, фиброза предстательной железы или боли в области таза у индивидуума, где указанный способ включает введение индивидууму, нуждающемуся в этом, эффективного количества композиции, описанной выше.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, индивидуумом является человек.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанным человеком является мужчина.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, указанным человеком является женщина.
5. Краткое описание чертежей
Настоящее изобретение описано со ссылкой на прилагаемый графический материал, который представлен лишь в целях иллюстрации и не рассматривается как ограничение объема настоящего изобретения.
На фиг. 1 представлена диаграмма CONSORT по данным для 148 мужчин во время их первого визита к врачу для обследования по поводу СНМП.
На фиг. 2 представлен график кривой зависимости средней разности и соответствующего 95% доверительного интервала, построенной по данным, полученным по Международной шкале оценок симптомов предстательной железы (IPSS) в начале обследования по поводу СНМП, через 3 месяца и через 6 месяцев для плацебо-группы, для группы, принимавшей 250 мг терапевтической композиции, и для группы, принимавшей 500 мг терапевтической композиции.
6. Подробное описание изобретения
6.1 Определения
Цитируемая здесь патентная и научная литература представляет собой информацию, известную специалистам. Выданные патенты США, выдачные заявки, публикации заявок на иностранный патент и цитируемые здесь работы вводятся в настоящее описание посредством ссылки так, как если бы каждый из этих документов был конкретно и отдельно введен в настоящее описание посредством ссылки.
Если в настоящем описании приводятся численные интервалы значений параметров, то это означает, что настоящее изобретение может быть осуществлено с параметром, равным любой величине в данном интервале. Так, например, параметр, который, по существу, является дискретным, может быть равен любому целому числу в пределах этого численного интервала, включая конечные значения данного интервала. Аналогичнным образом, параметр, который, по существу, представляет собой непрерывную величину, может иметь значение, равное любому действительному числу в данном численном интервале, включая конечные значения данного интервала. В качестве неограничивающего примера может служить параметр, который имеет значение от 0 до 2, и который может принимать значения 0, 1 или 2, если этот параметр является, по существу, дискретным, и который может принимать значения 0,0, 0,1, 0,01, 0,001, или любые другие действительные числа от ≥0 и ≤2, если этот параметр является, по существу, непрерывной переменной.
Используемое здесь слово «или», если это не оговорено особо, имеет инклюзивное значение «и/или», но не исключающее значение «или/или».
Используемый здесь термин «приблизительно» означает величину ± 10%. Так, например, термин «приблизительно 1» означает «0,9-1,1», термин «приблизительно 2%» означает «1,8%-2,2%», термин «приблизительно 2%-3%» означает «1,8%-3,3%», а термин «приблизительно 3%-4%» означает «2,7%-4,4%».
6.2 Ягоды клюквы
Vaccinium macrocarpon
Известно, что ягоды клюквы, например, , являются богатым источником органических и феноловых кислот, флавонолов, флаван-3-олов, антоцианинов, проантоцианидинов (PAC) и пентациклических тритерпеноидов, включая урсоловые и олеаноловые кислоты.
Неисчерпывающий список фармакоактивных соединений, которые могут присутствовать в ягодах клюквы, приводятся в таблице 1.
<b></b><b><u>Таблица 1</u></b><b></b>
Производные феноловой кислоты
Кумароилгексоза6-кафелоил-D-глюкоза3-кафелоилхинная кислота (хлорогенная кислота)4-гидроксибензойная кислота3-гидроксибензойная кислота5-п-гидроксибензойная кислота6-п-гидроксибензойная кислотаГалловая кислотаБензойная кислотаКоричная кислотаДигидроксибензойная кислотаo-гидроксикоричная кислота4-гидрокси-3-метоксибензойная кислота (HVA) (ванилиновая кислота)3-гидроксифенилуксусная кислота (3HPAA)3-гидроксибензойная кислота (3HBA)3,4-дигидроксибензойная кислота (3,4DHBA) (протокатехоловая кислота)2,3-дигидроксибензойная кислота (2,3DHBA) (гипогалловая кислота)2,4-дигидроксибензойная кислота (2,4DHBA) (b-резорциклиновая кислота)2,5-дигидроксибензойная кислота (2,5DHBA) (генистиновая кислота)2,6-дигидроксибензойная кислота3-гидроксикоричная кислота (3HCA)4-гидроксикоричная кислота (4HCA) (п-кумариновая кислота)4-гидрокси-3-метоксикоричная кислота (феруловая кислота)3,4-дигидроксикоричная кислота (кофеиновая кислота)3-гидроксифенилпропионовая кислота (3HPPA) (флоретовая кислота)Бензоиламиноуксусная кислота (гиппуровая кислота)Салициловая кислотаСинапиновая кислотаАскорбиновая кислотаЭллаговая кислотаСиреневая кислотаШикимовая кислотаФеррулоилглюкозид4-кафелоилхинная кислота (криптохлорогенная кислота)
Флавонолы
МирицетинКверцетинКверцетин 3-галактозидКверцетин 3-глюкозидКверцетин-3-рамнозидКверцетин-3-ксилозидКверцетин-3-аранобинозидГлюкуронид кверцетинаМирицетин-3-галактозидМирицетин-3-глюкозидИзорамнетин
Флаванолы
(+)-катехин(-)-катехинПроцианидин типа A2, изомер 1Процианидин типа A2, изомер 2Процианидин типа A2, изомер 3(-)-эпикатехин3-метилкатехин4-метилкатехин3-метилэпикатехин4-метилэпикатехин
Кумарины
Скополетин
Антоцианины
3-галактозид цианидина3-глюкозид цианидина3-глюкозид пеонидина3-аранобинозид цианидина3-галактозид пеонидина3-аранобинозид пеонидина
Хальконы
Флоризин
Токоферолы
Ацетат альфа-токоферолаАльфа-токоферолБета-токоферолГамма-токоферолДельта-токоферолАльфа-токотриенолБета-токотриенолГамма-токотриенолДельта-токотриенолВитамин EСтеролыХолестеринСтерол капусты24-метил-холестеринКампестанолКампестеролДельта-7-кампестеролДельта-5,23-стигмастадиенолКлеростеролБета-ситостеролСитостанолДельта-5-авенастеролДельта-5,24-стигмастадиенолДельта-7-стигмастеролДельта-7-авенастерол
Жирные кислоты
Миристиновая кислотаПальмитиновая кислотаПальмитолеиновая кислотаМаргариновая кислотаСтеариновая кислотаОлеиновая кислотаЛинолевая кислотаЛиноленовая кислотаАрахидиновая кислотаГондоевая кислотаБегеновая кислотаЭруковая кислотаЛигноцериновая кислотаНервоновая кислота
Лигнаны
СирингаресинолЛарициресинолМедиоресинолЛарициресинол-сесквилигнанСекоизоларициресинолПинорезинолСекоизоларициресинол-циклоларициресинол7-гидроксиматаирезинолНортрахелогенин7-оксо-матаиресинолМатаиресинолα-конидендрин
6.3 Терапевтические композиции на основе компонентов ягод клюквы
Описанные здесь терапевтические композиции могут содержать один или более компонентов, описанных в разделах, приведенных ниже.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, описанные здесь терапевтические композиции содержат порошок из сушеной клюквы и семена сушеной клюквы. В других вариантах осуществления изобретения, описанные здесь терапевтические композиции содержат порошок из сушеной клюквы и муку из семян клюквы.
Vaccinium macrocarpon,
Vaccinium microcarpon
Vaccinium oxycoccus
Клюква, используемая для получения таких композиций, может принадлежать к роду или . Однако для получения описанных здесь композиций может быть использована клюква, принадлежащая и к другому роду.
Семена клюквы могут присутствовать в терапевтической композиции в количестве, составляюшем приблизительно от 5% до 50%, приблизительно от 15% до 25% или приблизительно 20% по массе порошка из сушеной клюквы. Мука из семян клюквы может присутствовать в терапевтической композиции в количестве, составляюшем приблизительно от 5% до 50%, приблизительно от 15% до 25% или приблизительно 20% по массе порошка из сушеной клюквы.
Терапевтическая композиция может содержать менее чем приблизительно 12%, менее, чем приблизительно 10% или приблизительно от 5% до 8% огранических кислот по массе композиции. Репрезентативными органическими кислотами являются, но не ограничиваются ими, хинная кислота, яблочная кислота и лимонная кислота.
Quinic, Malic and Citric Acids in Cranberry Juice Cocktail and Apple Juice
2
4
Содержание органической кислоты может быть определено в соответствии с нижеследующим модифицированным протоколом AOAC 986.13, озаглавленным  (имеющемся на сайте AOAC International, www.aoac.org). Аналитическая колонка представляет собой обращенно-фазовую колонку C18 с частицами размером частиц 5 мкм, 25 см × 4,6 мм в тандеме с колонкой C18 с частицами размером частиц 5 мкм и длиной 10 см, где указанные колонки снабжены обращенно-фазовыми патронами с C18. При этом используется фосфатный буфер 0,2М KHPO, рН 2,4. Анализ проводится при скорости потока 0,80 мл/мин и при температуре окружающей среды, а длина волны детектирования составляет 214 нм. Разбавление тестируемого агента может быть осуществлено в подвижной фазе. Для стандарта использовали следующие CAS#: CAS-77-92-9 (лимонная кислота), CAS-6915-15-7 (яблочная кислота), CAS-77-95-2 (хинная кислота). Расчет концентрации каждой органической кислоты проводится по формуле: (PA/PA’)×(V’/V)×C, где PA и PA’=площадь пика тестируемого раствора и стандарта, соответственно; V и V’=объем тестируемого раствора и стандарта, соответственно; и C=концентрация стандарта, %. Шикимовая кислота и аскорбиновая кислота также могут быть детектированы этим методом.
Терапевтическая композиция может содержать приблизительно от 1% до 5% или приблизительно от 2,2% до 3,2% хинной кислоты по массе композиции.
Терапевтическая композиция может содержать приблизительно от 0,4% до 4% или приблизительно от 0,8% до 1,8% яблочной кислоты по массе композиции.
Терапевтическая композиция может содержать приблизительно от 1% до 5% или приблизительно от 1,8% до 3,2% лимонной кислоты по массе композиции.
Терапевтическая композиция может содержать приблизительно менее чем 15% или приблизительно менее чем 12% сахаров по массе композиции. Примерами сахаров, обычно присутствующих в клюкве, являются фруктоза, глюкоза и сахароза. Содержание сахара означает общее количество сахаров, и индивидуальная разбивка на партии здесь не представлена.
Содержание сахара может быть определено с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) в соответствии с нижеследующим модифицированным протоколом AOAC 977.20. В колонке используются μ-Bondapak/Углеводы (Waters Associates, № 84038) вместе с предохранительной колонкой или ее эквивалентом. Подвижная фаза состоит из неионного ацетонитрила, разбавленного водой (83/17, об/об). Стандартный раствор сахара состоит из фруктозы (CAS #57-48-7), глюкозы (CAS #50-99-7) и сахарозы (CAS #57-50-1). Образец разводят в воде и фильтруют через 45 мкм-фильтр. 10 мкл образца впрыскивают в колонку при комнатной температуре. Скорость потока составляет 1,0 мл/мин в изократических условиях в течение 20 мин. В этой колонке используется детектор показателя преломления. Количество глюкозы, фруктозы и сахарозы вычисляют исходя из значений, полученных на интеграторе или из высоты пиков по формуле: Масс.% сахара=100×(PH/PH’)×(V/V’)×(W’/W), где PH и PH’=высота пиков (или значения, полученные на интеграторе) образца и стандарта, соответственно; V и V’=миллилитры растворов образца и стандарта (50 и 100), соответственно; и W и W'= граммы образца (5,000) и стандарта, соответственно.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, терапевтическая композиция содержит: 0,5%-5,0% проантоцианидинов, 0,05%-1,5% кверцетина, 0,001%-0,1% кверцетин-3-глюкозида, 0,001%-0,1% кверцетин-3-рамнозида, 0,001%-0,1% кверцетин-3-ксилозида, 0,001%-0,1% кверцетин-3-аранобинозида, 0,001%-0,5% мирицетина, 0,001%-0,1% пеонидин-3-галактозида, 0,001%-0,1% пеонидин-3-глюкозида, 0,001%-0,1% пеонидин-3-аранобинозида, 0,001%-0,1% цианидин-3-глюкозида, 0,001%-0,1% цианидин-3-галактозида, 0,001%-0,1% цианидин-3-аранобинозида, 0,001%-0,1% протокатехоловой кислоты, 0,001%-0,1% п-кумариновой кислоты, 0,001%-0,1% кафелоил-глюкозида, 0,001%-0,1% кумароил-глюкозида, 0,001%-0,1% кофеиновой кислоты, 0,001%-0,1% хлорогенной кислоты или 0,01-1,5% урсоловой кислоты по массе композиции.
Содержание проантоцианидинов и одного или более других компонентов может быть определено с помощью ВЭЖХ-флуоресценции с использованием колонки Develosil Diol или эквивалентной колонки следующим образом. Температуру в колоночных камерах поддерживают на уровне 35°С. При этом были использованы следующие растворители: (А) 2% уксусная кислота в ацетонитриле и (В) метанол/вода/уксусная кислота в отношении 95:3:2. Элюирование проводят в линейном градиенте от 0% до 40% B, 35 мин.; от 40% до 100% В, 40 мин; 100% изократическая смесь B, 45 мин; и от 100% до 0% В, 50 мин.
Содержание антоцианинов (пеонидин-3-галактозида, пеонидин-3-глюкозида, пеонидин-3-аранобинозида, цианидин-3-глюкозида, цианидин-3-галактозида, цианидин-3-аранобинозида) может быть определено с помощью ВЭЖХ-УФ длине волны 535 нм. Для этого используют колонку Synergi Hydro-RP или ее эквивалент. Колоночную камеру выдерживают при комнатной температуре. Подвижная фаза А состоит из 5% водного раствора муравьиной кислоты, а подвижная фаза В состоит из метанола. Элюирование проводят в градиенте 0-2 мин, 5% В; 2-10 мин, 5-20% В; 10-15 мин, 20% Б; 15-30 мин, 20-25% В; 30-35 мин, 25% Б; 35-50 мин, 25-33% B; 50-55 мин, 33% Б; 55-65 мин, 33-36% B; 65-70 мин, 36-45% B; 70-75 мин, 45-53% B; 75-80 мин, 53-55% B; 80-84 мин, 55-70% B; 84-88 мин, 70-5% B; 88- 90 мин, 5% В.
Содержание некоторых других феноловых соединений может быть определено с помощью УФЖХ-МС/МС следующим методом. Для этого используют колонку Acquity Т3 (Waters Associates) или ее эквивалент, и эту колонку помещают в колоночную камеру УФЖХ, поддерживаемую при температуре 30°С. Используемыми растворителями являются 0,1% муравьиная кислота (А) и ацетонитрил (В). Элюирование проводят в линейном градиенте 5% B; 0-4,5 мин, 5–20% B; 4,5-6,45 мин, 20% B; 6,45-13,5 мин, 20-45% B; 13,5-16,5 мин, 45-100% B; 16,5-19,5 мин, 100% изократическая смесь B; 19,5-19,52 мин, 100-5% B; 19,52-22,5 мин. Детектирование осуществляют с помощью МС/МС, а все стандартные соединения подбираются индивидуально.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, терапевтическая композиция содержит: 1,0%-1,2% проантоцианидинов, 0,16%-0,20% кверцетина, 0,07%-0,09% кверцетин-3-глюкозида, 0,03%-0,04% кверцетин-3-рамнозида, 0,019%-0,025% кверцетин-3-ксилозида, 0,025%-0,035% кверцетин-3-аранобинозида, 0,010%-0,014% мирицетина, 0,022%-0,030% пеонидин-3-галактозида, 0,0025%-0,0035% пеонидин-3-глюкозида, 0,010%-0,020% пеонидин-3-аранобинозида, 0,0005%-0,0015% цианидин-3-глюкозида, 0,015%-0,030% цианидин-3-галактозида, 0,010%-0,025% цианидин-3-аранобинозида, 0,019%-0,025% протокатехоловой кислоты, 0,04%-0,06% п-кумариновой кислоты, 0,015%-0,025% кафелоил-глюкозида, 0,005%-0,015% кумароил-глюкозид, 0,010%-0,015% кофеиновой кислоты или 0,030%-0,04% хлорогенной кислоты по массе композиции.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, терапевтическая композиция содержит приблизительно 1,1% проантоцианидинов, 0,18% кверцетина, 0,083% кверцетин-3-глюкозида, 0,034% кверцетин-3-рамнозида, 0,022% кверцетин-3-ксилозида, 0,030% кверцетин-3-аранобинозида, 0,012% мирицетина, 0,027% пеонидин-3-галактозида, 0,003% пеонидин-3-глюкозида, 0,014% пеонидин-3-аранобинозида, 0,001% цианидин-3-глюкозида, 0,022% цианидин-3-галактозида, 0,018% цианидин-3-аранобинозида, 0,022% протокатехоловой кислоты, 0,052% п-кумариновой кислоты, 0,021% кафелоил-глюкозида, 0,011% кумароил-глюкозида, 0,014% кофеиновой кислоты, 0,034% урсоловой кислоты или 0,92% урсоловой кислоты по массе композиции.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, терапевтическая композиция содержит 1-100 мкг или приблизительно 51 мкг ларициресинола на 100 г композиции. В некоторых вариантах осуществления изобретения, терапевтическая композиция содержит 1-100 мкг или приблизительно 12 мкг секоизоларициресинола на 100 г композиции. В некоторых вариантах осуществления изобретения, терапевтическая композиция содержит 1-100 мкг или приблизительно 78 мкг пиноресинола на 100 г композиции.
Содержание лигнанов может быть определено с помощью УФЖХ-МС/МС на обращенно-фазовой колонке ACQUITY BEH C18 или на эквивалентной колонке. Температуру в колоночных камерах поддерживают на уровне 30°C. При этом были использованы следующие растворители: (A) 0,1% муравьиная кислота и (B) ацетонитрил. Элюирование проводят в градиенте 5% B, 8,0 мин, 30% B, 9,0 мин, 30%B, 10,0 мин, 50%B, 12,0 мин, 50%B, 15,0 мин, 95%B, 17,0 мин 95%B, 17,5 мин, 5%B, 23,0 мин, 5%B. Детектирование осуществляют с помощью МС/МС, а все стандартные соединения подбираются индивидуально.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, описанные выше терапевтические композиции могут быть получены без использования ягод клюквы, например, путем объединения ингредиентов, выделенных из природных источников или полученных путем химического синтеза.
6.4 Твердые лекарственные формы и способы их применения
В некоторых вариантах осуществления изобретения, твердая лекарственная форма для перорального введения, содержащая описанную здесь терапевтическую композицию, представляет собой таблетку, капсулу или мягкий гель. В некоторых вариантах осуществления изобретения, такая твердая лекарственная форма для перорального введения содержит от 50 мг до 500 мг терапевтической композиции, например, 50 мг, 100 мг, 150 мг, 200 мг, 250 мг, 300 мг, 350 мг, 400 мг, 450 мг или 500 мг терапевтической композиции.
Твердые лекарственные формы, включающие описанные здесь терапевтические композиции, содержат, но необязательно, определенное количество одного или более фармацевтически приемлемых наполнителей, достаточное для его соответствующего введения индивидууму.
Remington’s Pharmaceutical Sciences
th
Такими фармацевтическими наполнителями могут быть жидкости, такие как вода и масла, включая наполнители, полученные из нефти, наполнители животного и растительного происхождения, или синтетические наполнители, такие как арахисовое масло, соевое масло, минеральное масло, кунжутное масло и т.п. Фармацевтическими наполнителями могут быть физиологический раствор, аравийская камедь, желатин, крахмальная паста, тальк, кератин, коллоидный диоксид кремния, мочевина и т.п. Кроме того, могут быть использованы добавки, стабилизирующие агенты, загустители, лубриканты и красители. В одном из вариантов осуществления, фармацевтически приемлемые наполнители, если они вводятся индивидууму, должны быть стерильными. Подходящими фармацевтическими наполнителями также являются крахмал, глюкоза, лактоза, сахароза, желатин, солод, рис, мука, мел, силикагель, стеарат натрия, моностеарат глицерина, тальк, хлорид натрия, сухое сепарированное молоко, глицерин, пропиленгликоль, вода, этанол и т.п. Терапевтические композиции согласно изобретению могут также содержать, если это необходимо, незначительные количества смачивающих или эмульгирующих агентов или рН-забуферивающих агентов. В одном из вариантов осуществления изобретения, композиция имеет форму капсулы (см., например, патент США № 5698155). Другие примеры подходящих фармацевтических наполнителей описаны в руководстве 1447-1676 (Alfonso R. Gennaro eds., 19 ed., 1995).
В некоторых вариантах осуществления изобретения, описанную здесь терапевтическую композицию приготавливают в соответствии с рутинными процедурами в виде композиции, адаптированной для перорального введения человеку. Композиции для перорального введения могут быть приготовлены в форме таблеток, пастилок, водных или масляных суспензий, гранул, порошков, эмульсий, капсул, мягких гелей, сиропов или, например, эликсиров. Перорально вводимые композиции могут содержать один или более агентов, например, подсластители, такие как фруктоза, аспартам или сахарин; ароматизирующие агенты, такие как перечная мята, масло грушанки или вишни; красители; и консерванты, придающие фармацевтически приемлемому препарату приятные вкусовые свойства. Кроме того, если композиции приготавливают в форме таблеток или драже, то на них может быть нанесено покрытие для замедления дезинтеграции и абсорбции в желудочно-кишечном тракте, что будет обеспечивать пролонгированное действие в течение длительного периода времени. Для перорально вводимых композиций, подходящим покрытием могут быть селективно проницаемые оболочки, которые будут окружать осмотически активную терапевтическую композицию. В этих последних обсуждаемых композициях, жидкость, поступающая из среды, окружающей капсулу, впитывается соединением-стимулятором, которое набухает и вытесняет агент или композицию агента через отверстие. Эти способы доставки могут обеспечивать, по существу, профиль доставки нулевого порядка в отличие от пиковых профилей композиций для немедленного высвобождения. При этом, может быть также использовано соединение, замедляющее высвобождение, такое как моностеарат глицерина или стеарат глицерина. Композиции для перорального введения могут включать стандартные наполнители, такие как маннит, лактоза, крахмал, мальтодекстрин, циклодекстрины, альгинат, аравийскую камедь или гуаровую камедь, стеарат магния, натрий-содержащий сахарин, целлюлоза и карбонат магния. В одном из вариантов осуществления, наполнители имеют фармацевтическую чистоту.
Фармацевтические лекарственные формы для перорального применения могут быть получены путем объединения описанной здесь терапевтической композиции с твердым наполнителем, необязательного измельчения полученной смеси и обработки гранулированной смеси после добавления, если это необходимо, подходящих дополнительных соединений с получением сердцевины таблеток или драже. Подходящими твердыми наполнителями, помимо упоминаемых выше, являются углеводные или белковые наполнители, которые включают, но не ограничиваются ими, сахара, включая лактозу, сахарозу, маннит или сорбит; крахмал из кукурузы, пшеницы, риса, картофеля или других растений; целлюлозу, такую как метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза или натрий-содержащая карбоксиметилцеллюлоза; и камеди, включая аравийскую камедь и трагакантовую камедь; а также белки, такие как желатин и коллаген. Могут быть также использованы мальтодекстрин и циклодекстрины. При желании могут быть добавлены дезинтегрирующие или солюбилизирующие агенты, такие как поперечносшитый поливинилпирролидон, агар, альгиновая кислота или ее соль, такая как альгинат натрия.
Капсулами для перорального применения являются твердые желатиновые капсулы, в которых активный ингредиент смешан с твердым разбавителем, и мягкие желатиновые капсулы, в которых активные ингредиенты смешаны с водой или маслом, таким как арахисовое масло, жидкое вазелиновое масло или оливковое масло.
Мягкие гели для перорального применения могут состоять из желатиновой оболочки, окружающей жидкий наполнитель. Оболочки мягких гелей могут быть изготовлены из комбинации желатина, воды, материала, придающего непрозрачность, и пластификатора, такого как глицерин и/или сорбит.
На сердцевину драже наносят подходящее покрытие. Для этой цели могут быть использованы концентрированные растворы сахаров, которые могут содержать, но необязательно, аравийскую камедь, тальк, поливинилпирролидон, гель карбопол, полиэтиленгликоль и/или диоксид титана, растворы лаков и подходящие органические растворители или смеси растворителей. В покрытия таблеток или драже могут быть добавлены красители или пигменты для идентификации или характеризации различных комбинаций доз активных соединений.
Описанные здесь терапевтические композиции могут быть приготовлены для регулируемого или пролонгированного высвобождения или для их доставки с помощью устройств, хорошо известных специалистам в данной области. Примерами таких композиций являются, но не ограничиваются ими, композиции, описанные в патентах США № 5674533; 5059595; 5120548; 5073543; 5639476 и 5354556, каждый из которых во всей своей полноте вводится в настоящее описание посредством ссылки. Такие лекарственные формы могут быть использованы для регулируемого или пролонгированного высвобождения одного или более активных ингредиентов, достигаемого благодаря использованию, например, гидроксипропилметилцеллюлозы, других полимерных матриц, гелей, проницаемых мембран, осмотических систем, многослойных покрытий, микрочастиц, липосом, микросфер или их комбинаций, чтобы обеспечить желаемый профиль высвобождения в различных пропорциях. Подходящие композиции с регулируемым или пролонгированным высвобождением, включая композиции, описанные в настоящей заявке, известны специалистам в данной области, и такие композиции могут быть легко выбраны для приготовления препаратов, содержащих активные ингредиенты согласно изобретению. Таким образом, настоящее изобретение включает разовые унифицированные лекарственные формы, подходящие для перорального введения, такие как, но не ограничивающиеся ими, таблетки, капсулы, гелевые капсулы и микрокапсулы, адаптированные для регулируемого или пролонгированного высвобождения.
В некоторых вариантах осуществления изобретения, композиция с регулируемым или пролонгированным высвобождением содержит минимальное количество терапевтической композиции, достаточное для ослабления симптомов, а также для лечения или предупреждения симптомов нижних мочевых путей (СНМП), доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ), эректильной дисфункции (ЭД), недержания мочи, обструкции мочевого пузыря, интерстициального цистита, гиперактивного мочевого пузыря (ГМП), слабого мочевого пузыря, простатита, воспаления мочевого пузыря и предстательной железы, фиброза предстательной железы или боли в области таза у пациента в течение определенного периода времени. Преимуществами композиций с регулируемым или пролонгированным высвобождением являются более длительная активность лекарственного средства, возможность снижения частоты введения доз и удобство соблюдения индивидуумом режима приема доз. Кроме того, композиции с регулируемым или пролонгированным высвобождением могут благоприятно влиять на время начала действия лекарственного средства или другие параметры, такие как уровни активных ингредиентов, присутствующих в терапевтической композиции, в крови, и таким образом, могут снижать вероятность возникновения побочных эффектов.
В композициях с регулируемым или пролонгированным высвобождением может сначала высвобождаться определенное количество активного ингредиента, присутствующего в этой композиции, который сразу дает желаемый терапевтический или профилактический эффект, а затем могут постепенно и непрерывно высвобождаться другие количества активных ингредиентов, присутствующих в этой композиции, которые будут поддерживать такой уровень терапевтического или профилактического эффекта в течение длительного периода времени. Для поддержания постоянного уровня активного ингредиента, присутствующего в терапевтической композиции, в организме, активные ингредиенты, присутствующие в такой композиции, должны высвобождаться из лекарственной формы со скоростью, позволяющей восполнять количество активных ингредиентов, присутствующих в терапевтической композиции и подвергающихся метаболизму и выведению из организма. Регулируемое или пролонгированное высвобождение активного ингредиента может стимулироваться в зависимости от различных условий, включая, но не ограничиваясь ими, изменение рН, изменение температуры, концентрацию или доступность ферментов, концентрацию или доступность воды, или от других физиологических условий или от типа соединений.
in vitro
in vivo
Количество терапевтической композиции, которое является эффективным для ослабления симптомов, а также для лечения или предупреждения симптомов нижних мочевых путей (СНМП), доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ), эректильной дисфункции (ЭД), недержания мочи, обструкции мочевого пузыря, интерстициального цистита, гиперактивного мочевого пузыря (ГМП), слабого мочевого пузыря, простатита, воспаления мочевого пузыря и предстательной железы, фиброза предстательной железы или боли в области таза, может быть определено стандартными клиническими методами. Кроме того, для облегчения вычисления оптимальных интервалов доз могут быть проведены, но необязательно, анализы  или . Точная доза может быть также определена в зависимости от способа введения, от тяжести состояния, подвергаемого лечению, от назначения лечащего врача и от индивидуальных особенностей индивидуума, участвующего, например, в клинических исследованиях, проводимых под контролем Регуляторных органов. Однако подходящими эффективными дозами являются дозы, составляющие приблизительно от 1 мг до 5 граммов и вводимые приблизительно через 24 часа, хотя обычно такая доза составляет приблизительно 500 мг или менее и вводится через 24 часа. В одном из вариантов осуществления изобретения, эффективная доза составляет приблизительно 50 мг, приблизительно 100 мг, приблизительно 150 мг, приблизительно 200 мг, приблизительно 250 мг, приблизительно 300 мг, приблизительно 350 мг, приблизительно 400 мг, приблизительно 450 мг, приблизительно 500 мг, приблизительно 600 мг, приблизительно 700 мг, приблизительно 800 мг, приблизительно 900 мг, приблизительно 1 г, приблизительно 1,2 г, приблизительно 1,4 г, приблизительно 1,6 г, приблизительно 1,8 г, приблизительно 2,0 г, приблизительно 2,2 г, приблизительно 2,4 г, приблизительно 2,6 г, приблизительно 2,8 г, приблизительно 3,0 г, приблизительно 3,2 г, приблизительно 3,4 г, приблизительно 3,6 г, приблизительно 3,8 г, приблизительно 4,0 г, приблизительно 4,2 г, приблизительно 4,4 г, приблизительно 4,6 г, приблизительно 4,8 г и приблизительно 5,0 г и вводится через 24 часа. Эквивалентные дозы могут быть введены в различные периоды времени, включая, но не ограничиваясь ими, приблизительно через 2 часа, приблизительно через 4 часа, приблизительно через 6 часов, приблизительно через 8 часов, приблизительно через 24 часа, приблизительно через 36 часов, приблизительно через 48 часов, приблизительно через 72 часа, приблизительно через неделю, приблизительно через две недели, приблизительно через три недели, приблизительно через месяц и приблизительно через два месяца. Используемый здесь термин «эффективная доза» означает общее вводимое количество, то есть, при введении более чем одной терапевтической композиции, эффективная доза соответствует общему вводимому количеству.
Терапевтическую композицию можно вводить до тех пор, пока не исчезнут симптомы, или дольше. В некоторых вариантах осуществления изобретения, терапевтическую композицию вводят в течение 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 или 14 дней.
Схема введения доз описанных здесь терапевтических композиций может быть выбрана в зависимости от ряда факторов, включая тип, вид, возраст, вес, пол и состояние здоровья индивидуума, а также тяжесть состояния, подвергаемого лечению, способ введения и функцию почек или печени индивидуума.
Описанная здесь терапевтическая композиция может быть введена в виде одной суточной дозы, либо эта суточная доза может быть разделена на дробные дозы, вводимые два, три или четыре раза в день.
in vitro
in vivo
Описанная здесь терапевтическая композиция, перед ее введением человеку, может быть проанализирована  или  на желаемую терапевтическую или профилактическую активность. Для подтверждения безопасностии и эффективности могут быть использованы системы животных-моделей.
5. Наборы
В настоящей заявке описаны наборы, которые могут облегчить введения описанной здесь терапевтической композиции индивидууму. Типичный набор включает унифицированную лекарственную форму описанной здесь терапевтической композиции и этикетку или памятку с отпечатанной инструкцией. В некоторых вариантах осуществления изобретения, на этой этикетке или на памятке отпечатаны инструкции по применению унифицированной лекарственной формы для ослабления симптомов, а также для лечения или предупреждения симптомов нижних мочевых путей (СНМП), доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ), эректильной дисфункции (ЭД), недержания мочи, обструкции мочевого пузыря, интерстициального цистита, гиперактивного мочевого пузыря (ГМП), слабого мочевого пузыря, простатита, воспаления мочевого пузыря и предстательной железы, фиброза предстательной железы или боли в области таза.
Набор может также дополнительно включать унифицированную лекарственную форму другого профилактического или терапевтического средства. Примерами других профилактических или терапевтических средств являются, но не ограничиваются ими, средства, перечисленные выше.
6.4. Способы приготовления терапевтических композиций
Описанные здесь терапевтические композиции могут быть приготовлены следующим образом. Ягоды, кожуру, сок или выжимки клюквы взвешивают и смешивают для получения взвеси. Если композицию необходимо обогатить семенами клюквы, то эти семена добавляют к взвеси. Затем в эту взвесь добавляют воду до получения приблизительно 5-15 масс.% твердых веществ. Взвесь пропускают через сито 14 меш насосом со сдвиговым усилием, а затем сушат распылением и измельчают. Если терапевтическая композиция обогащается мукой из семян клюквы, то эту муку добавляют в процессе измельчения. Измельченную композицию пропускают через сито, герметизируют и гранулируют.
6.5. Способы применения терапевтических композиций
6.5.1. Применение терапевтических композиций для лечения симптомов нижних мочевых путей (СНМП)
Описанные здесь терапевтические композиции могут быть использованы для ослабления симптомов, а также для лечения или предупреждения симптомов нижних мочевых путей (СНМП). В соответствии с этим, в настоящей заявке описаны способы ослабления, лечения или предупреждения симптомов нижних мочевых путей (СНМП) у индивидуума, где указанные способы включают введение индивидууму, нуждающемуся в этом, эффективного количества описанной здесь терапевтической композиции. СНМП могут быть связаны, а могут быть и не связаны с доброкачественной гиперплазией предстательной железы (ДГПЖ), то есть с состоянием, которое гистологически характеризуется незлокачественным разрастанием ткани предстательной железы, расположенной вокруг уретры. Ослабление симптомов может быть выявлено путем сравнения с симптомами у того же самого индивидуума до введения ему терапевтической композиции или его лечения с использованием такой терапевтической композиции. Индивидуумом может быть человек, например, мужчина или женщина. В некоторых вариантах осуществления изобретения, таким индивидуумом может быть человек старше 45 лет, старше 50 лет, старше 55 лет, старше 60 лет, старше 65 лет, старше 70 лет, старше 75 лет или старше 80 лет.
6.5.2. Применение терапевтических композиций для лечения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ)
Доброкачественная гиперплазия предстательной железы (ДГПЖ) представляет собой состояние, которое гистологически характеризуется незлокачественным разрастанием ткани предстательной железы, расположенной вокруг уретры.
Описанные здесь терапевтические композиции могут быть использованы для ослабления симптомов, а также для лечения или предупреждения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ). В соответствии с этим, в настоящей заявке описаны способы ослабления симптомов, а также лечения или предупреждения доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ) у индивидуума, где указанные способы включают введение индивидууму, нуждающемуся в этом, эффективного количества описанной здесь терапевтической композиции. Ослабление симптомов доброкачественной гиперплазии предстательной железы (ДГПЖ) может быть выявлено путем сравнения с симптомами у того же самого индивидуума до введения ему терапевтической композиции или его лечения с использованием такой терапевтической композиции. Индивидуумом может быть человек, например, мужчина. В некоторых вариантах осуществления изобретения, таким индивидуумом может быть человек старше 45 лет, старше 50 лет, старше 55 лет, старше 60 лет, старше 65 лет, старше 70 лет, старше 75 лет или старше 80 лет.
6.5.3. Применение терапевтических композиций для лечения эректильной дисфункции (ЭД)
Описанные здесь терапевтические композиции могут быть использованы для ослабления симптомов, а также для лечения или предупреждения доброкачественной эректильной дисфункции (ЭД). В соответствии с этим, в настоящей заявке описаны способы ослабления симптомов, а также лечения или предупреждения эректильной дисфункции (ЭД) у индивидуума, где указанные способы включают введение индивидууму, нуждающемуся в этом, эффективного количества описанной здесь терапевтической композиции. Ослабление симптомов эректильной дисфункции (ЭД) может быть выявлено путем сравнения с симптомами у того же самого индивидуума до введения ему терапевтической композиции или его лечения с использованием такой терапевтической композиции. Индивидуумом может быть человек, например, мужчина. В некоторых вариантах осуществления изобретения, таким индивидуумом может быть человек старше 45 лет, старше 50 лет, старше 55 лет, старше 60 лет, старше 65 лет, старше 70 лет, старше 75 лет или старше 80 лет.
6.5.4. Применение терапевтических композиций для лечения недержания мочи
Описанные здесь терапевтические композиции могут быть использованы для ослабления симптомов, а также для лечения или предупреждения недержания мочи. В соответствии с этим, в настоящей заявке описаны способы ослабления симптомов, а также лечения или предупреждения недержания мочи у индивидуума, где указанные способы включают введение индивидууму, нуждающемуся в этом, эффективного количества описанной здесь терапевтической композиции. Ослабление симптомов недержания мочи может быть выявлено путем сравнения с симптомами у того же самого индивидуума до введения ему терапевтической композиции или его лечения с использованием такой терапевтической композиции. Индивидуумом может быть человек, например, мужчина или женщина. В некоторых вариантах осуществления изобретения, таким индивидуумом может быть человек старше 45 лет, старше 50 лет, старше 55 лет, старше 60 лет, старше 65 лет, старше 70 лет, старше 75 лет или старше 80 лет.
6.5.5. Применение терапевтических композиций для лечения гиперактивного мочевого пузыря (ГМП)
Описанные здесь терапевтические композиции могут быть использованы для ослабления симптомов, а также для лечения или предупреждения гиперактивного мочевого пузыря (ГМП). В соответствии с этим, в настоящей заявке описаны способы ослабления симптомов, а также лечения или предупреждения гиперактивного мочевого пузыря у индивидуума, где указанные способы включают введение индивидууму, нуждающемуся в этом, эффективного количества описанной здесь терапевтической композиции. Ослабление симптомов гиперактивного мочевого пузыря (ГМП) может быть выявлено путем сравнения с симптомами у того же самого индивидуума до введения ему терапевтической композиции или его лечения с использованием такой терапевтической композиции. Индивидуумом может быть человек, например, мужчина или женщина. В некоторых вариантах осуществления изобретения, таким индивидуумом может быть человек старше 45 лет, старше 50 лет, старше 55 лет, старше 60 лет, старше 65 лет, старше 70 лет, старше 75 лет или старше 80 лет.
6.5.6. Применение терапевтических композиций для лечения других заболеваний или симптомов
Описанные здесь терапевтические композиции могут быть использованы для ослабления симптомов, а также для лечения или предупреждения обструкции мочевого пузыря, интерстициального цистита, слабого мочевого пузыря, простатита, воспаления мочевого пузыря и предстательной железы, фиброза предстательной железы или боли в области таза. Ослабление симптомов этих заболеваний или состояний может быть выявлено путем сравнения с симптомами у того же самого индивидуума до введения ему терапевтической композиции или его лечения с использованием такой терапевтической композиции. Индивидуумом может быть человек, например, мужчина или женщина. В некоторых вариантах осуществления изобретения, таким индивидуумом может быть человек старше 45 лет, старше 50 лет, старше 55 лет, старше 60 лет, старше 65 лет, старше 70 лет, старше 75 лет или старше 80 лет.
7. ПРИМЕРЫ
Настоящее изобретение также проиллюстрировано на нижеследующих примерах, которые не должны рассматриваться как ограничение настоящего изобретения. Специалисту в данной области известно или очевидно, что путем не более чем рутинного экспериментирования могут быть получены различные эквиваленты конкретных веществ и проведены процедуры, эквивалентные процедурам, описанным в настоящей заявке. Считается, что такие эквиваленты входят в объем прилагаемой ниже формулы изобретения.
7.1. Пример 1
Получение терапевтической композиции с использованием муки из семян клюквы
Описанные здесь терапевтические композиции могут быть приготовлены следующим образом. Ягоды, кожуру, сок или выжимки клюквы взвешивают и смешивают для получения взвеси. Если композицию необходимо обогатить семенами клюквы, то эти семена добавляют к взвеси. Затем в эту взвесь добавляют воду до получения приблизительно 5-15 масс.% твердых веществ. Взвесь пропускают через сито 14 меш насосом со сдвиговым усилием, а затем сушат распылением и измельчают. Если терапевтическая композиция обогащается мукой из семян клюквы, то эту муку добавляют в процессе измельчения. Измельченную композицию пропускают через сито, герметизируют и гранулируют.
7.2. Пример 2
Характеризация терапевтической композиции
Quinic, Malic and Citric Acids in Cranberry Juice Cocktail and Apple Juice
2
4
Терапевтические композиции были получены, как описано выше и охарактеризованы. В таблице 2 представлен профиль 5 образцов органических кислот, определенный в соответствии с нижследующим модифицированным протоколом AOAC (986.13), озаглавленным . Аналитическая колонка представляет собой обращенно-фазовую колонку C18 с частицами размером частиц 5 мкм, 25 см × 4,6 мм в тандеме с колонкой C18 с частицами размером частиц 5 мкм и длиной 10 см, где указанные колонки снабжены обращенно-фазовыми патронами с C18. При этом используется фосфатный буфер 0,2М KHPO, рН 2,4. Элюирование является изократическим и проводится при скорости потока 0,80 мл/мин и при температуре окружающей среды, а длина волны составляет 214 нм. Этот способ был впервые описан для приготовления сока из клюквы и адаптирован для получения порошков, где разбавление тестируемого агента может быть осуществлено в подвижной фазе. Для стандарта использовали следующие CAS#: CAS-77-92-9 (лимонная кислота), CAS-6915-15-7 (яблочная кислота), CAS-77-95-2 (хинная кислота). Расчет концентрации каждой органической кислоты проводится по формуле: (PA/PA’)×(V’/V)×C, где PA и PA’=площадь пика тестируемого раствора и стандарта, соответственно; V и V’=объем тестируемого раствора и стандарта, соответственно; и C=концентрация стандарта, %. Результаты представлены ниже в таблице 2.
<b></b><b><u>Таблица 2</u></b><b></b>
Образец
Хинная кислота(%)
Яблочная кислота(%)
Лимонная кислота(%)
Всего (%)
1
2,43
1,54
2,38
6,35
2
2,31
0,93
1,94
5,18
3
2,99
1,43
2,99
7,41
4
2,40
1,36
2,15
5,91
5
2,75
1,65
3,00
7,40
Среднее±ср.кв.отк.
2,58±0,28
1,38±0,28
2,49±0,48
6,45±0,97
В таблице 3 указано содержание сахара в 5 образцах, определенное с помощью ВЭЖХ в соответствии со следующей модификацией протокола AOAC 977.20. В колонке использовали 300×4 (вн.д.) μ-Bondapak/Углеводы (Waters Associates, № 84038) вместе с предохранительной колонкой. Подвижная фаза состоит из неионного ацетонитрила, разбавленного водой (83/17, об/об). Стандартный раствор сахара состоит из фруктозы (CAS# 57-48-7), глюкозы (CAS# 50-99-7) и сахарозы (CAS# 57-50-1). Образец разводили в воде и фильтровали через 45 мкм-фильтр. 10 мкл образца впрыскивали в колонку при комнатной температуре. Скорость потока составляла 1,0 мл/мин в изократических условиях в течение 20 мин. В этой колонке использовали детектор показателя преломления. Количество глюкозы, фруктозы и сахарозы вычисляли исходя из значений, полученных на интеграторе или из высоты пиков по формуле: Масс.% сахара=100×(PH/PH’)×(V/V’)×(W’/W), где PH и PH’=высота пиков (или значения, полученные на интеграторе) образца и стандарта, соответственно; V и V’=миллилитры растворов образца и стандарта (50 и 100), соответственно; и W и W'= граммы образца (5,000) и стандарта, соответственно. Результаты представлены ниже в таблице 3.
<b></b><b><u>Таблица 3</u></b><b></b>
Образец
Содержание сахара (г/100г)
6
8,7
7
4,0
8
7,7
9
5,9
10
7,3
Среднее ± ср.кв.от.
6,7±1,8
Концентрацию проантоцианидинов анализировали с помощью ВЭЖХ-флуоресценции с использованием колонки Develosil Diol или эквивалентной колонки. Колонка имела размер 250 мм × 4,6 мм, а размер частиц составлял 5 микрон. Температуру в колоночных камерах поддерживали на уровне 35°С. При этом были использованы следующие растворители: (А) 2% уксусная кислота в ацетонитриле и (В) метанол/вода/уксусная кислота в отношении 95:3:2. Элюирование проводили в линейном градиенте от 0% до 40% B, 35 мин; от 40% до 100% В, 40 мин; 100% изократическая смесь B, 45 мин; и от 100% до 0% В, 50 мин.
Антоцианины (пеонидин-3-галактозид, пеонидин-3-глюкозид, пеонидин-3-аранобинозид, цианидин-3-глюкозид, цианидин-3-галактозид, цианидин-3-аранобинозид) анализировали с помощью ВЭЖХ-УФ на длине волны 535 нм. Для этого использовали колонку Synergi Hydro-RP размером 250 мм × 4,6 мм, где размер частиц составлял 4 мкм. Колоночную камеру выдерживали при комнатной температуре. Подвижная фаза А состоит из 5% водного раствора муравьиной кислоты, а подвижная фаза В состоит из метанола. Элюирование проводили в градиенте 0-2 мин, 5% В; 2-10 мин, 5-20% В; 10-15 мин, 20% Б; 15-30 мин, 20-25% В; 30-35 мин, 25% Б; 35-50 мин, 25-33% B; 50-55 мин, 33% Б; 55-65 мин, 33-36% B; 65-70 мин, 36-45% B; 70-75 мин, 45-53% B; 75-80 мин, 53-55% B; 80-84 мин, 55-70% B; 84-88 мин, 70-5% B; 88-90 мин, 5% В.
Остальные феноловые соединения анализировали с помощью УФЖХ-МС/МС следующим методом. Для этого использовали колонку Acquity Т3 (внутренний диаметр 150 мм x 2,1 мм, размер частиц 1,8 мкм) (Waters Associates), и эту колонку помещали в колоночную камеру УФЖХ, поддерживаемую при температуре 30°С. Используемыми растворителями являются 0,1% муравьиная кислота (А) и ацетонитрил (В). Элюирование проводили в линейном градиенте 5% B; 0-4,5 мин, 5–20% B; 4,5-6,45 мин, 20% B; 6,45-13,5 мин, 20-45% B; 13,5-16,5 мин, 45-100% B; 16,5-19,5 мин, 100% изократическая смесь B; 19,5-19,52 мин, 100-5% B; 19,52-22,5 мин. Детектирование осуществляли с помощью МС/МС, а все стандартные соединения подбирали индивидуально. Результаты представлены в таблице 4.
<b></b><b><u>Таблица 4</u></b><b></b>
Класс
Подкласс
Фитохимические соединения
Концентрация (мг/100 г)
Флавоноиды
Флаван-3-олы
Проантоианидины
1078,9*
Флавонолы
Кверцетин
176,6
Кверцетин-3-глюкозид
83,2
Кверцетин-3-рамнозид рамнозид
34,2
Кверцетин-3-ксилозид
21,9
Кверцетин-3-аранобинозид
30,2
Мирицетин
11,8
Антоцианин
Пеонидин-3-галактозид
27,2
Пеонидин -3-глюкозид
2,9
Пеонидин -3-аранобинозид
14,3
Цианидин-3-глюкозид
1,1
Цианидин-3-галактозид
22,5
Цианидин-3-аранобинозид
17,7
Феноловые кислоты
Гидроксибензойные к-ты
Протокатехоловая к-та кислота
21,7
Гидроксикоричная к-та
п-Кумариновая кислота
51,7
Кафелоил-глюкозид
21,2
Кумароил-глюкозид
10,7
Кофеиновая кислота
14,3
Хлорогенная кислота
33,8
* Определено с помощью УФЖХ-МС/МС.
J. Sci Food Agric.
J. Agri. Food. Chem
Methods in Enzymology
Уровни проантоцианидина обычно составляют >0,3%, при измерении методом BL-DMAC (Prior et al., «Multi-laboratory validation of a standard method for quantifying proanthocyanidins in cranberry powders»  90:1473-8 (2010)), >1,5%, при измерении модифицированным ВЭЖХ-методом, в котором количество мономеров катехина (определенное с помощью ВЭЖХ-УФ) вычитали из общего количества полифенолов, определенного с использованием фолина (Sakakibara et al., «Simultaneous Determination of All Polyphenols in Vegetables, Fruits and Teas» ., Vol. 51. Pp 572-580 (2003); , Volume 299, «Oxidants and Antioxidants Part A» Pages 152-178, 1999 (modified)), или >5%, при измерении модифицированным методом, описанным в Европейской Фармакопее (European Pharmacopoeia 6,0; 01/2008:1220), и >1% при измерении методом ВЭЖХ-флуоресценции.
Лигнаны анализировали с помощью УФЖХ-МС/МС на обращенно-фазовой колонке ACQUITY BEH C18 размером 2,1 мм x 150 мм, где размер частиц составляет 1,7 мкм. Температуру в колоночных камерах поддерживали на уровне 30°C. При этом были использованы следующие растворители: (A) 0,1% муравьиная кислота и (B) ацетонитрил. Элюирование проводили в градиенте 5%B, 8,0 мин, 30% B, 9,0 мин, 30%B, 10,0 мин, 50%B, 12,0 мин, 50%B, 15,0 мин, 95%B, 17,0 мин. 95%B, 17,5 мин, 5%B, 23,0 мин, 5%B. Детектирование проводили с помощью МС/МС, а все стандартные соединения подбирали индивидуально. Результаты представлены в Таблице 5.
<b></b><b><u>Таблица 5</u></b><b></b>
Название
Концетрация (мкг/100 г)
Ларициресинол
51,3
Ларициресинол-сесквилигнан
3,8
Секоизоларициресинол
12,0
Пиноресинол
77,8
7.3. Пример 3
Определение эффективности терапевтических композиций против СНМП
Была использована терапевтическая композиция, поставляемая NATUREX-DBS LLC., USA. Капсулы состояли либо из 500 мг терапевтической композиции, либо из комбинации 250 мг терапевтической композиции и 250 мг плацебо, либо из 500 мг плацебо. Плацебо имел следующий состав: мальтодекстрин низкой плотности STAR-DRI 1015A, масло канолы, красный лак 40, силикат натрия-алюминия и синий лак 1. Капсулы имели одинаковый внешний вид. Все капсулы были упакованы в одинаковые пластиковые упаковки из безопасного герметичного материала.
Исследование представляет собой 6-месячное, одноцентровое, рандомизированное, плацебо-контролируемое испытание двойным слепым методом, и в этом исследовании участвовали пациенты, которые были распределены на три параллельные лечебные группы. Критериями включения являются: баллы по шкале IPSS от 8 до 19, лица старше 45 лет и концентрация антигена, специфичного для предстательной железы (PSA), ниже значения 2,5 нг/мл. Критериями исключения являются: пищевые аллергии, простатит в анамнезе, хронические заболевания печени или почек, а также нервные расстройства, расстройства желудочно-кишечного тракта или нарушение метаболизма, либо любое другое хроническое заболевание, такое как диабет, или расстройство, вызываемое избыточным потреблением кофеина или алкоголя. Индивидуумы были также исключены из программы испытаний, если они ранее проходили курс инвазивной терапии ДГПЖ, недавно проходили курс лечения α-блокаторами (в течение 1 месяца) или ингибиторами 5α-редуктазы (в течение 6 месяцев), фитотерапию, включая прием биологической добавки Со Пальметто, бета-ситостерола, Pygeum или другую вспомогательную терапию (в течение 3 месяцев). Основным критерием эффективности являются баллы IPSS, оцениваемы на базовом уровне и через 3 и 6 месяцев. Другими критериями эффективности являются качество жизни (КЖ) в на базовом уровне и через 3 и 6 месяцев, а также полностью опорожненный мочевой пузырь (Vol), максимальная скорость потока выделяемой мочи (Qmax), средняя скорость потока выделяемой мочи (Qave) и ультразвуковое исследование остаточного объема мочи после опорожнения (PVR), сывороточный PSA, селен, интерлейкин-6 (IL-6) и С-реактивный белок (CRP) на базовом уровне и через 6 месяцев.
Участники были произвольно распределены по группам, которые ежедневно получали 500 мг терапевтической композиции (n=40), 250 мг терапевтической композиции (n=43) или плацебо (n=41) в течение 6 месяцев. План рандомизации для назначения лечения индивидуумам был разработан с помощью компьютерной программы QuickCalcs (GraphPad Software Inc., США, дата последнего доступа - 2 июля 2014 года) и выполнялся персоналом, осуществляющим такое исследование.
Участники испытания были обследованы до начала проведения эксперимента, на день 90 (через 3 месяца) и на день 180 (через 6 месяцев). Во время медицинского осмотра в первый день, и день 180 были проведены следующие необходимые процедуры и были оценены следующие клинические параметры: (i) подробная история болезни, (ii) все сопутствующие медицинские препараты и методы лечения, (iii) пищевые привычки, (iv) оценка баллов после завершения опроса по анкете IPSS, включая вопрос о КЖ, (v) анализ мочи, (vi) урофлуометрия, (vii) УЗИ почек и мочевого пузыря и (viii) лабораторный анализ крови, включая анализ на PSA. На день 90 были проведены только физическое обследование и оценка по опроснику IPSS. Бутыли с терапевтической композицией собирали на день 90 и в конце исследования. Выполнение пациентом режима лечения оценивали путем подсчета оставшихся капсул.
Данные урофлуометрии: Qmax и Qave были измерены с использованием FlowMic (Medkonsult, Czech Republic). Индивидуумы было рекомендовано не мочиться в течение нескольких часов до начала проведения испытания и пить по меньшей мере 1 л жидкости, чтобы обеспечить полное наполнение мочевого пузыря. Qmax и Qave были вычислены путем измерения Vol за единицу времени. PVR оценивали на ультразвуковом устройстве BK Medical Viking 2400 с использованием абдоминального зонда с 3-7 МГц. Vol и PVR были вычислены по формуле для сжатого эллипсоида (ширина × длина × высота × 0,523). Qmax, Qave, Vol и PVR были измерены на день 0 и день 180.
2
Основные биохимические и гематологические параметры были определены во всех образцах с использованием модульного анализатора HITACHI Modular Evo P (Hitachi, Japan). Уровень PSA в сыворотке определяли с использованием анализатора Architect типа LEIA (Abbott Laboratories, Abbott Park, IL, USA). CRP определяли на приборе Quikread 101, а IL-6 определяли на системе Modular Analytics. Содержание селена в плазме оценивали с помощью атомно-абсорбционной спектрометрии на приборе AA6300 (Shimadzu, Japan). Гемоглобин (Hb), гематокрит (Htc), эритроциты (RBC), тромбоциты (PLT) и лейкоциты (WBC) измеряли в NaEDTA-крови.
Данные, полученные для пациентов этих лечебных групп, сравнивали с базовыми данными с использованием парного критерия Уилкоксона. Данные первичны и вторичных анализов были получены в соответствии с протоколом опроса пациентов, которые были включены в лечебные группы, и которые прошли весь курс лечения. Сравнение данных, полученных от пациентов в лечебной группе, и данных, полученных от пациентов в плацебо-группе, проводили с использованием U-критерия Манна-Уитни. P-величины <0,05 считались значимыми.
Для того, чтобы проверить, влияет ли доза на оценки результатов в конце лечения, был проведен ковариационный анализ. В этом ковариационном анализе, суточную дозу 250 мг использовали в качестве непрерывной переменной, а базовые значения в результатах анализа использовали в качестве ковариата. Для того чтобы определить, имеют ли остатки колоколообразную форму и является ли это признаком нелинейного эффекта дозы, была построена «ящиковая» диаграмма остатков для различных доз (0, 250, 500 мг).
PVR определяли с применением двухстадийного способа, поскольку некоторые участники не имели каких-либо зарегистрированных данных по PVR. Эта группа участников служила моделью биномиального распределения. Объем мочи участников с PVR служил моделью усеченного пуассоновского распределения. Такая двухступенчатая модель была создана с использованием пороговой функции в пакете программ «pscl» (Stanford University), работающих на R версии 3.0.0. Для этой модели оценивали следующие параметры: доза/250 мг, базовый уровень PVR и базовый уровень по IPSS.
Для исследования было предварительно отобрано всего 148 мужчин. На фиг. 1 представлена диаграмма CONSORT, построенная по данным для 148 мужчин во время их первого визита к врачу на стадии предварительного обследования. В общей сложности, 124 мужчины были произвольно распределены по группам: 41 пациент был включен в плацебо-группу, 43 пациента были включены в группу, получавшую 250 мг терапевтической композиции, а 40 пациентов были включены в группу, получавшую 500 мг терапевтической композиции. В группе, получавшей 500 мг терапевтической композиции, 2 участника были исключены до завершения эксперимента и не были включены в анализ по протоколу.
В таблице 6 представлены данные базовых параметров и данные по функции НМП для трех анализируемых групп. Результаты представлены как средние значения ± стандартное отклонение (ср.кв.откл.).
<b></b><b><u>Таблица 6</u></b><b></b>
Плацебо (n=41)
Терапевтическаякомпозиция, 250 мг (n=43)
Терапевтическаякомпозиция, 500 мг (n=38)
Возраст (годы)
54,0±5,1
53,3±5,2
52,5±5,4
Масса (кг)
89,3±11,9
91,2±11,9
90,1±8,0
Рост (см)
178,5±6,6
180,6±6,6
180,7±6,2
Индекс массы тела
28,1±3,8
27,9±2,9
27,7±3,0
Систолическое кровяное давление (мм рт.ст.)
131,1±12,1
130,6±10,1
132,1±11,5
Диастолическое кровяное давление (мм рт.ст.)
80,1±7,3
80,5±7,2
80,9±7,4
Частота сердечных сокращений (ударов/мин)
68,9±3,5
67,8±4,6
68,1±4,4
IPSS (баллы)
9,1±2,0
9,7±3,1
9,4±2,0
PVR (мл)
15,0±19,2
15,9±23,2
17,8±21,0
Q<sub>max</sub> (мл/сек)
22,0±7,8
20,5±7,1
19,5±7,5
Q<sub>ave</sub> (мл/сек)
14,3±5,2
12,5±4,6
12,5±5,5
Объем мочевого пузыря (мл)
408,5±117,9
339,9±114,4
339,0±118,9
Участники эксперимента имели средний возраст 53,3±5,4 лет со средним баллом по шкале IPSS 9,4±2,4. Посещаемость врача по запланированному графику визитов составляла 98,4%. Соблюдение режима лечения составило 100%.
Данные IPSS для симптомов опорожнения и накопления по подшкале и по КЖ в течение 6-месячного курса лечения представлены в таблице 7. Баллы для симптомов опорожнения и накопления по подшкале оценок соответствуют вопросам: 1 (неполное опорожнение мочевого пузыря), 3 (прерывистое мочеиспускание), 5 (вялая струя мочи), 6 (затрудненное мочеиспускание) и вопросам: 2 (частое мочеиспускание), 4 (резкие позывы к мочеиспусканию), 7 (никтурия), соответственно. При этом наблюдалось снижение баллов по шкале IPSS в группах, принимавших 250 мг и 500 мг терапевтической композиции по окончании 6-месячного курса лечения со значительным различием по сравнению с плацебо-группой (р=0,05 и р<0,001, соответственно, по U-критерию Манна-Уитни).
Баллы по опроснику IPSS для участников эксперимента, баллы по симптомам опорожнения и накопления и показатели качества жизни до начала эксперимента (день 0), через 3 месяца (день 90) и через 6 месяцев (день 180) после приема плацебо, после приема 250 мг терапевтической композиции или после приема 500 мг терапевтической композиции представлены в таблице 7 и в таблице 8. В таблице 7, результаты представлены как среднее значение±стандартное отклонение и как медианы вместе с первым и третьим квартилем.
<b></b><b><u>Таблица 7</u></b><b></b>
День 0
День 90
День 180
% изменения на день 180
Группа
Среднее ± SD
p-величина*
медиана (1<sup>й</sup> и 3<sup>й</sup> квартиль)
Общая оценка IPSS
Плацебо
9,1±2,0
7,4±2,0
7,6±2,6
8,0(8,0–9,0)
7,0 (6,0-8,0)
8,0(6,0–9,0)
0%
Терапевтическая композиция, 250 мг
9,7±3,1
0,63
7,6±3,7
0,60
6,6±3,4
0,05
8,0(8,0–0,0)
7,0(5,0–10,0)
6,0(5,0–8,0)
-25%
Терапевтическая Композиция, 500 мг
9,4±2,0
0,26
6,5±2,6
0,11
5,3±2,5
<0,001*
9,0(8,0–0,0)
7,0(4,0–8,0)
5,0(4,0–7,0)
-44%
Оценка симптомов опорожнение/обструкция
Плацебо
4,9±1,8
5,1±2,4
4,6±1,8
5,0(3,75–,0)
4,0(4,0–6,0)
4,0(3,0–6,0)
-20%
Терапевтическая Композиция, 250 мг
3,7±1,7
0,89
3,6±2,7
0,44
2,9±1,7
0,18
3,0 (3,0–5,0)
3,0(2,0–5,0)
3,0(2,0–4,0)
0%
Терапевтическая Композиция, 500 мг
3,8±2,4
0,55
3,4±2,8
0,03*
2,3±1,4
<0,001*
4,0(2,0–5,25)
3,0(1,0–5,0)
2,0(1,0–3,0)
-50%
Оценка симптомов накопление/раздражение
Плацебо
4,2±1,3
4,6±1,5
4,8±1,6
4,0(3,75–5,0)
4,0(4,0–5,75)
4,5(4,0–6,0)
+13%
Терапевтическая Композиция, 250 мг
3,7±1,4
0,27
3,8±1,8
0,72
3,6±2,0
0,13
4,0(3,0–4,25)
4,0(2,0–4,75)
3,5(2,0-5,0)
-13%
Терапевтическая Композиция, 500 мг
3,7±1,4
0,18
3,3±1,5
0,61
3,0±2,0
0,018*
4,0(3,0–5,0)
3,0(2,0–4,0)
3,0(2,0–4,0)
-25%
Качество жизни
Плацебо
2,4±0,9
2,1±0,8
1,9±0,7
2,0(2,0–3,0)
2,0(2,0–2,0)
2,0(1,75–2,0)
0%
Терапевтическая композиция, 250 мг
2,4±0,8
0,64
2,2±0,9
0,52
2,0±0,7
0,71
2,0 (2,0–3,0)
2,0(2,0–3,0)
2,0(2,0–2,0)
0%
Терапевтическая композиция, 500 мг
2,1±0,7
0,03
2,0±0,7
0,72
1,9±0,5
0,63
2,0(2,0–2,0)
2,0(2,0–2,0)
2,0(2,0–2,0)
0%
* Означает значимое различие по сравнению с плацебо-группой, оцененное с использованием U-критерия Манна-Уитни в каждый отдельный момент времени (p<0,05).
В таблице 8, результаты представлены как среднее±стандартная ошибка среднего (SEM).
<b></b><b><u>Таблица 8</u></b><b></b>
Группа
День 0Общая оценка IPSS Среднее ± SEM
День 90Изменение IPSS по сравнению с исходным уровнемСреднее ± SEM
День 180Изменение IPSS по сравнению с исходным уровнемСреднее ± SEM
Плацебо
9,1±0,3
-1,71±0,36
-1,54±0,33
Терапевтическая композиция, 250 мг
9,7±0,5
-2,16±0,38
-3,09±0,46*
Терапевтическая композиция, 500 мг
9,4±0,3
-2,89±0,36*
-4,08±0,31*
* Означает значимое различие по сравнению с плацебо-группой, оцененное с использованием U-критерия Манна-Уитни в каждый отдельный момент времени (p<0,05).
На фиг. 2 представлены кривые зависимости средней разности оценок по IPSS, которые были получены в начале эксперимента, через 3 месяца и 6 месяцев для трех групп. Экспериментальные точки представляет собой среднюю разность ± стандартную ошибку среднего. Звездочка указывает на величину р<0,05 по сравнению с плацебо, полученную в ковариационном анализе в конце лечения. Через 6 месяцев, средняя разность и соответствующий 95% доверительный интервал (ДИ) составляли -1,5 (-2,2, -0,89) для плацебо-группы, -3,1 (-4,0, -2,2) для группы, принимавшей 250 мг терапевтической композиции, и - 4,1 (-4,7, -3,5) для группы, принимавшей 500 мг терапевтической композиции.
Ковариационный анализ для IPSS, проводимый через 6 месяцев, где базовое значение IPSS включено как ковариат, показал значимый дозозависимый эффект (t119=-4,8, p<0,0001) и значимое отличие от базовой оценки (t119=8,3, p<0,0001).
Оценка опорожнения по подшкале IPSS значительно снижалась по сравнению с оценкой, полученной при введении плацебо, для группы, принимавшей 500 мг терапевтической композиции через 3 месяца и через 6 месяцев после начала лечения (р=0,03 и р<0,001 соответственно), в то время как оценка накопления по подшкале IPSS значительно снижалась по сравнению с оценкой, полученной при введении плацебо, только в конце исследования (р=0,018). Для группы, принимавшей 250 мг терапевтической композиции, какого-либо статистически значимого улучшения оценок накопления по подшкале IPSS не наблюдалось. В соответствии с данными, полученными по пункту КЖ в анкете, каких-либо изменений качества жизни для пациентов, принимавших обе эти дозы, не наблюдалось.
Было зарегистрировано значимое улучшение всех урофлуометрических параметров, оцененных по сравнению с базовыми значениями после введения терапевтической композиции в дозе 500 мг (р<0,05). В таблице 9 представлены результаты измерения функции НМП на базовом уровне (день 0) и через 6 месяцев (день 180) после введения плацебо, терапевтической композиции в дозе 250 мг или терапевтической композиции в дозе 500 мг. Результаты представлены в таблице 9 как среднее значение±ср.кв.откл.
<b></b><b><u>Таблица 9</u></b><b></b>
Q<sub>max, </sub>мл/с
Q<sub>ave, </sub>мл/с
PVR, мл
Объем, мл
Плацебо
День 0
22,0±7,8
14,3±5,2
15,0±19,2
408,5±117,9
День 180
21,9±8,6
14,2±5,1
14,4±18,3
364,3±112,5
p-величина
0,424
0,722
0,956
0,004
Терапевтическая композиция250 мг
День 0
20,5±7,1
12,5±4,6
15,9± 3,2
339,9±114,4
День 180
21,4±6,7
13,2±4,0
13,6±18,1
368,6±104,6
p-величина
0,191
0,107
0,588
0,279
Терапевтическая композиция,500 мг
День 0
19,5±7,5
12,5±5,4
17,8±21,0
339,0±118,9
День 180
21,7±8,9
13,8±5,7
9,9±13,6
393,0±134,0
p-величина
0,018*
0,040*
0,027*
0,014*
* Означает значимое различие по сравнению с базовым уровнем, оцененное с использованием парного критерия Уилкоксона.
Был проведен дополнительный анализ для того, чтобы определить, достигается ли дозозависимый эффект по окончании исследования, и для того, чтобы определить, можно ли эти данные скорректировать исходя из данных, полученных до начала исследования.
Значительная часть участников эксперимента сообщили об отсутствии заметного PVR (17/41 для дозы 0 мг; 22/43 для дозы 250 мг и 19/38 для дозы 500 мг). Если значение ненулевого PVR было номинально ниже у групп, которым вводили 250 мг и 500 мг, то никакого дозозависимого эффекта не наблюдалось. Однако, если учесть наличие остаточного объема, то можно сказать, что этот объем в значительной степени ассоциировался с дозой (z=-3,0, p=0,003). Эта модель указывает на то, что среди участников эксперимента с ненулевым PVR, остаточный объем мочи, как и ожидалось, снижался на 0,09 (95% ДИ: 0,03-0,14) в случае увеличения дозы на 250 мг для каждой группы по сравнению с базовыми значениями PVR и IPSS.
Клинические гематологические параметры, которые были в пределах нормы в начале и в конце исследования, подтвердили безопасность данного терапевтического продукта.
Это рандомизированное, плацебо-контролируемое испытание, проводимое двойным слепым методом, показало эффективность и безопасность ежедневного приема терапевтической композиции в дозе 250 мг или 500 мг у мужчин с СНМП в течение 6 месяцев. В конце исследования, снижение баллов по IPSS было значимым и дозозависимым (-3,1 и -4,1 для групп, получавших дозы 250 мг и 500 мг, р=0,05 и р<0,001, соответственно), по сравнению с плацебо-группой (-1,5), и при этом каких-либо побочных эффектов не наблюдалось.