Иммунохимическая характеристика антигенного спектра Taenia hydatigena и протосколексов Cysticercus taenuicollis

практике // М.: Триада-Х. - 1997. - С. 334-342. З.Юдин М.Ф. // Ветеринария -2001. - №2. - С.38-41.

Sorbent agent “MTox+” ability to reduce intoxication in animals following treatment by anthelmintics. Belova L.M., Kuzmin V.A.,Tokarev A.N. Saint-Petersburg State Academy of Veterinary Medicine.

Summary. Application of detoxicant “MTox+” given at the maximum dose level of 60 mg per cow on 6 hours post treatment by anthelmintic monizen reduced intoxication in animals caused by agent itself and toxins of died parasites. The sorbent agent didn’t affect the therapeutic efficacy of anthelmintic.

ИММУНОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА АНТИГЕННОГО СПЕКТРА TAENIA HYDATIGENA И ПРОТОСКОЛЕКСОВ CYSTICERCUS TAENUICOLLIS

Бережко В.К.

ГНУ ВНИИ гельминтологии им. К.И. Скрябина

Введение. Необходимым условием получения эффективных

диагностических препаратов из гельминтов является характеристика антигенного спектра используемых для этих целей белковых экстрактов, из которых выделяют специфические антигены диагностической направленности.

Экспериментальными исследованиями установлено, что значительное количество компонентов в белковом спектре экстрактов из разных видов гельминтов являются общими, причем это сходство свидетельствует об общности некоторой части их биоструктур и является отображением их филогенетического родства (13; 2; 5; 10).

Антигенная связь установлена между гельминтами, принадлежащими к разным классам, однако число перекрестно реагирующих компонентов с уменьшением степени филогенетического родства значительно сокращается (7). Результаты серологических исследований в определенной степени согласуются с морфологическим родством паразитов.

Иммунохимическая характеристика белковых экстрактов близкородственных видов гельминтов позволяет использовать наиболее доступные в получении в качестве источника диагностических антигенных препаратов.

Исходя из этих соображений, мы провели иммунохимическую характеристику белковых экстрактов из половозрелых Taenia hydatigena и протосколексов Cysticercus tenuicollis с целью определения в них общих и специфических антигенов.

59

Материалы и методы. Материалом исследования служили белковые экстракты, приготовленные из половозрелых T. hydatigena и протосколексов C. tenuicollis.

Половозрелых паразитов выделяли из кишечника зараженных собак, а протосколексы C. tenuicollis из тенуикольных пузырей, полученных от естественно инвазированных тенуикольными цистицерками овец.

Собранный паразитологический материал тщательно промывали физраствором и использовали для получения белковых экстрактов (4). Содержание белка в экстрактах определяли на спектрофотометре СФ-26 при длине волны 280 нм по колибровочной кривой на основании бычьего сывороточного альбумина (фракция 5) по методу Layne E. (1957).

Иммунохимический анализ проводили реакцией иммунодиффузии (РИД) в 1,2%-ном агаровом геле (Difco) на физиологическом растворе с использованием гипериммунных сывороток, полученных иммунизацией кроликов (3). Для установления наличия специфических компонентов в исследуемых экстрактах использовали метод адсорбции гетерологичных антител, который осуществляли следующим образом: к определенному объему гипериммунной сыворотки добавляли по каплям гетерологичный антигенный препарат, смесь встряхивали и ставили в термостат на 1 час (370С), а затем на ночь в холодильную камеру (40С). В результате гомологичные антигенные компоненты связывались с антителами, образуя комплексы антиген-антитело (АГ-АТ), выпадающие в осадок. Надосадочную жидкость проверяли в РИД на полноту истощения. При необходимости процесс адсорбции повторяли, а затем РИД определяли количество специфических антигенных компонентов.

Результаты и обсуждение. Анализ экстракта T. hydatigena в РИД с гомологичной гипериммунной сывороткой позволил определить в нем не менее 7 антигенных компонентов, проявившихся в геле четко выраженными линиями. При аналогичном анализе этого экстракта с кроличьей антисывороткой против антигенов протосколексов C. tenuicollis (гетерологичная система) было определено не более 4 преципитирующих систем АГ -АТ. Причем представляющие эти комплексы линии преципитации имели диффузный характер и располагались ближе к лунке с антигеном, что свидетельствует о недостаточной активности этой антисыворотки. В гомологичном варианте РИД между антисывороткой к антигенам экстракта протосколексов C. tenuicollis и экстрактом протосколексов C. tenuicollis проявилось не менее 5-6 линий преципитации, которые также были недостаточно четкими. В гетерологичном варианте РИД с этой антисывороткой и антигенном-экстрактом T. hydatigena проявилось 4 комплекса АГ-АТ.

Последующий анализ гипериммунных сывороток к антигенам-экстрактам из половозрелых T. hydatigena и протосколексов C. tenuicollis, предварительно обработанных гетерологичными антигенными препаратами,

60

позволил определить в них наличие специфических антигенных препаратов (Таблица).

Таблица

Специфические компоненты в антигене-экстракте из половозрелых

T. hydatigena и просколексов C. tenuicollis

Антисыворотки Число выявленных антигенных компонентов

Taenia hydatigena протосколексы Cysticercus tenuicollis

К АГ половозрелых T. hydatigena после адсорбции АГ протосколексов C. tenuicollis 3 0

К АГ протосколексов C. tenuicollis после адсорбции АГ из половозрелых T. hydatigena 0 1

Таким образом, методом адсорбции гетерологичных антител установили в экстракте из половозрелых T. hydatigena 3, а в экстракте из протосколексов C. tenuicollis - 1 специфический антигенный компонент, что позволяет сделать заключение о значительном антигенном сходстве личинок паразита с половозрелой формой.

В литературе имеются данные об идентичности значительного числа антигенов личиночных и имагинальных форм цестод, таких как T. solium и C. cellulosae (11); Taeniarhynchus saginatus и C. bovis (1; 9).

Значительное антигенное родство установлено между Multiceps multiceps и Coenurus cerebralis (6), а также между экстрактами из цестод T. hydatigena, T. pisiformis, E. granulosus и экскреторно-секреторными продуктами протосколексов ларвоцист этих паразитов. При проверке диагностических свойств в ELISA установили наибольшую антигенную близость между T. hydatigena и T. pisiformis (12). Располагая данными по иммунохимической характеристике антигенов цестод можно проводить целенаправленный отбор наиболее эффективных для иммунодиагностических целей.

Литература: 1. Баллад Н.Е., Соколовская О.М. / Мед. паразитол. и паразитарные болезни. - 1968. - № 2. - с. 193-198. 2. Бережко В.К. / Тр. Всес. ин-та гельминтол. - 1972. - т. 19. - с. 14-23. 3. Бережко В.К., Хайдаров К.А., Дахно И.С., Шкурка Е.П./ Матер. докл. науч. конф. «Теория и практика с паразитарными болезнями». - М. - 2008. - в. 9. - с. 69-73. 4. Бережко В.К.,

61

Тхакахова А.А./ Матер. докл. науч. конф. «Теория и практика с паразитарными болезнями». - М. - 2011. - в. 12. - с. 62-66. 5. Полетаева О.Г. / Мед. паразитол. и паразитарн. болезни. - 1983. - № 2. - с. 40-43. 6. Яраев Р.Г. / Тр. Всес. ин-та гельминтол. - 1971. - т. 17. - с. 285-286. 7. Espinoza B., Flisser A.// Arch. Invest. med. - 1986. - v. 17. - 3. - p. 115-127. 8. Layne E. // Methods Enzymol. - 1957. - v. 3. - p. 447-454. 9. Machnicka B.// Bull. Acad. Pol. Sci. Ser. Sci. Biol. - 1974. - V.22, №3. - P.197-199. 10. Manas-Almendros I., Campos-Bueno M. et al. // Rev. ider. Parasitol. - 1985. - v. 45. - N 2. - p. 159-168. 11. Nascimento E. Aravio F.G. // Rev. inst. Med. Trop. (S. Paulo). - 1982. - v. 24. - N 6. - p. 359-336. 12. Rickard M.D., Jenkins D.J.// 2th Inter. Symp. Taeniasis/ Cysticercosis and Hydatidosis/ Echinococcosis, Ceske Budejovice. - 1986. - p. 7876. 13. Tomanek J. Procxhazka Z. // Veterin. Med. - 1967. - v. 12. - N. 1. - p. 3542.

Immunochemical characteristics of Taenia hydatigena and Cysticercus tenuicollis protoscolices antigenic spectrum. Berezhko V.K. All-Russian K.I. Skryabin Scientific Research Institute of Helminthology.

Summary. One represented the results of immunochemical analysis of antigenic spectrum of extracts of mature T. hydatigena and C. tenuicollis protoscolices by immunodiffussion in agarose gel using immune sera. It was established that 7 and 4 antigenic components presented in homologous and heterologous reaction systems of T. hydatigena extract as while the same indices in C. tenuicollis extract appeared to 6 and 4 ones respectively. Using method of heterologous antibodies adsorption the presence of 3 and 1 specific antigenic components from T. hydatigena and C. tenuicollis extracts was found respectively.

КОРРЕКЦИЯ ЭНДОГЕННОГО ТОКСИКОЗА ПРИ ФАСЦИОЛЕЗЕ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА

БеспаловаН.С., Чухлебова О.М., КопаеваМ.С.

ФГБОУ ВПО Воронежский государственный аграрный университет им. императора Петра I

Введение. Паразитирование фасциол в печени животных вызывает эндогенную интоксикацию, которая усугубляется введением антигельминтиков. В результате нарушается протеиносинтезирующая, ферментативная и другие функии печени, снижается ее роль в иммунных процессах [1,2,3,4]. Развивающиеся патологические состояния требуют корректировки [5,6,7].

Целью наших исследований являлось изучение метаболических изменений в организме крупного рогатого скота при фасциолезе и антигельминтной терапии, а также разработка методов фармакологической

62