Эффективность туберкулина очищенного при выявлении животных, инфицированных Mycobacterium tuberculosis

Для проведения исследований была приобретена проходная рыба голец (рыба, уходящая для размножения из рек в море). В ней также были обнаружены личинки анизакид в количестве 7-10 экземпляров на рыбу.

Для оценки жизнеспособности личинок выдерживали при 34-35 0С в физиологическом растворе до 3 дней (в эти сроки личинки проявляют свою активность), после этого раздражение личинок препаровальной иглой не стимулировало их движение, что указывало на их нежизнеспособность.

Заключение. В результате проведенных нами исследований было установлено, что личинками анизакид оказались поражены следующие виды рыб: сельдь атлантическая, мойва, терпуг, аргентина, скумбрия, хек, минтай, треска, сайра, морской окунь, голец, корюшка, сайка, сельдь-иваси, масляная рыба, горбуша и кальмар. Экстенсивность инвазии составила от 10 % (аргентина и горбуша) до 100 % (путассу, сельдь, минтай и терпуг), интенсивность инвазии варьировала от 1-2 личинок (аргентина, сайра, кальмары) до 120 (путассу). Все обнаруженные личинки анизакид оказались нежизнеспособными. Результаты исследований позволяют утверждать, что завозимые в республику Беларусь морепродукты, в частности рыба и кальмары, не являются потенциальным источником заражения людей анизакидозом, так как проходят соответствующее обеззараживание путем замораживания перед поступлением в розничную торговую сеть.

ЛИТЕРАТУРА

1. Авдеева, Е. В. Болезни морских рыб / Е. В. Авдеева, Т. Е. Буторина, Е. Б. Евдокимова. - М., 2011. - 114 с.

2. Гаевская, А. В. Анизакидные нематоды и заболевания, вызываемые ими у животных и человека / А. В. Гаевская // Национальная академия наук Украины. Институт биологии южных морей им. А. О. Ковалевского. - Севастополь, 2005. -223 с.

3. Гаевская, А. В. Паразиты и болезни морских и океанических рыб в природных и искусственных условиях / А. В. Гаевская. - Севастополь, 2004. - 236 с.

4. Григорьева, В. В. Оценка эффективности обеззараживания рыбы при анизакидозе / В. В. Григорьева // Аграрный вестник Урала. - 2009. - № 3. - С. 83.

5. Ихтиопатология / Н. А. Головина [и др.]. - М.: Мир, 2007. - 447 с.

6. Тихонова, Л. В. Динамика пораженности личинками анизакид некоторых видов рыб водоемов юга Сахалина / Л. В. Тихонова, А. А. Чайко // Фундаментальные исследования. - 2007. - № 4. - С. 11-13.

7. Микулич, Е. Л. Видовое разнообразие паразитофауны минтая и хека, реализуемых в разничной торговле в потрошеном и обезглавленном виде / Е. Л. Микулич // Животноводство и ветеринарная медицина. - 2011. - № 3. - С. 43-48.

8. CoolReferat.com>Товарная экспертиза рыбы. 5.01.2013 г.

9. yaplakatcom>Картинки>topic316204.html Куда пропала сельдь-иваси? 5.01.2013 г.

УДК 619:616.98:579.873.21-07

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ТУБЕРКУЛИНА ОЧИЩЕННОГО ПРИ ВЫЯВЛЕНИИ ЖИВОТНЫХ, ИНФИЦИРОВАННЫХ MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS

А. Н. ПРИТЫЧЕНКО

УО «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины»,

г. Витебск, Республика Беларусь, 210026

Резюме. В статье приведены данные об эффективности туберкулина очищенного для млекопитающих при выявлении животных, инфицированных Mycobacterium tuberculosis. Установлено, что у животных, зараженных возбудителем туберкулеза, стандартный раствор туберкулина очищенного имеет одинаковую или несколько большую активность (на 13,3 %), чем стандартные растворы ППД AN5 Biovet Польша, PPD AN5 Аргентина и ППД ФГУП «Курская биофабрика». У животных, зараженных нетуберкулезными микобактериями, реакции на туберкулин очищенный бывают на 33-42 % реже, чем на ППД туберкулины.

Активность туберкулина очищенного, установленная на морских свинках и в полевом опыте на спонтанно больных туберкулезом коровах, полностью совпадает и составляет 21657 IU/ml и 21367 IU/ml соответственно. Для повышения чувствительности диагностики туберкулин очищенный целесообразно использовать в дозе 5000 МЕ (2000 IU/ml) во всех хозяйствах республики (исключая неблагополучные стада). Туберкулин очищенный можно использовать в симультанной пробе с КАМ или ППД туберкулином для птиц. Туберкулин очищенный для млекопитающих производства ОАО «БелВитуни-фарм» пригоден для выявления животных, инфицированных Mycobacterium tuberculosis, в том числе и молодняка крупного рогатого скота.

Ключевые слова: туберкулин, Mycobacterium tuberculosis, туберкулёз, крупный рогатый скот.

Summary. The article is concerned with the data on efficacy of the purified tuberculin for mammals infected with Mycobacterium tuberculosis. The compound has proved to be equal to or more effective (by 13 %) than PPD AN5 Biovet Poland, PPD AN5 Argentina and PPD "Kursk Manufacture ". The animals infected with non mycobacteria have a 33-42% lower reaction to purified tuberculin than to tuberculin PPD. The efficacy of the compound established on guinea-pigs and that established during field trials on cows spontaneously infected with tuberculosis are equal (21657 IU/ml и 21367 IU/ml). For more effective use a dose of5000 ME of tuberculin (2000 IU/ml) is recommended on all farms (excluding affected herds). The purified tuberculin can be used in a simultaneous test with CAM and PPD for poultry. The compound for mammals produced by «BelVitunifarm» is useful for revealing animals infected with Mycobacterium tuberculosis including the calves.

Key words: tuberculin, Mycobacterium tuberculosis, tuberculosis, cattle.

Введение. Туберкулез (Tuberculosis) - хроническая инфекционная болезнь человека и животных с образованием в органах и тканях специфических гранулем (туберкулов, бугорков) [6].

В инфекционной патологии человека и животных туберкулез остается серьезной мировой проблемой. В нашей стране эпидемическая и эпизоотическая ситуация по туберкулезу неоднозначна.

Среди животных туберкулез чаще встречается у крупного рогатого скота. Туберкулез у крупного рогатого скота и других животных вызывают микобактерии бычьего вида (Mycobacterium bovis), реже человеческого вида (Mycobacterium tuberculosis) [21]. При тесном контакте крупного рогатого скота с больной птицей, заболевание может быть вызвано Mycobacterium avium [15].

Наибольшую экономическую и социальную опасность представляет туберкулез крупного рогатого скота. У больных животных снижаются молочная продуктивность (на 11,6-30 %), приросты, живая масса (на 7,1-11,1 %), выход телят (на 6,5 %). Потери также связаны с затратами на диагностику, убой животных, обезвреживание молока, санацию помещений и территории, а также с ограничениями продажи и экспорта животных [6, 20].

Социальная опасность туберкулеза крупного рогатого скота состоит в том, что молоко и мясо от больных и инфицированных особей, а также сами животные представляют серьезную угрозу здоровью людей. До начала широкой борьбы с туберкулезом и внедрения термического обеззараживания молока до 20 % случаев туберкулеза человека и смертность до 30 % детей младше 5 лет были связаны с заражением возбудителем туберкулеза бычьего вида.

Анализ источников. Основным методом прижизненной диагностики туберкулеза у животных является аллергическая проба с туберкулином очищенным (ТО) для млекопитающих производства ОАО «БелВитунифарм». Проведение массовых мероприятий обеспечивает благополучие по туберкулезу [14].

В республике с 80-х годов прошлого века Mycobacterium tuberculosis у крупного рогатого скота не выделяли. Однако в последние десятилетия заболеваемость туберкулезом человека вышла на уровень эпидемического порога (более 50 случаев на 100000 населения), а профессия животновода оказалась в группе риска (до 193 случаев на 100000 работающих) [10].

Роль Mycobacterium tuberculosis в индукции реакций на туберкулин остается малоизученной, вероятно, из-за того, что этот вид редко вызывает у крупного рогатого скота туберкулезные изменения, а бактериологическое выделение возбудителя затруднено потому, что иммунная система эффективно противостоит нетиповому возбудителю и он персистирует в измененной форме. Проведенные нами исследования показали, что латентная инфекция вызванная M. tuberculosis встречается в условиях республики [4]. Учитывая это, интерес представляло изучение эффективности ТО для выявления животных, инфицированных M. tuberculosis. Наиболее сложным моментом в решении задачи, являлось подтверждение факта, что реакции на туберкулин индуцируются M. tuberculosis.

Цель работы - изучение эффективности туберкулина очищенного при выявлении животных, инфицированных Mycobacterium tuberculosis.

Материал и методика исследований. Работа выполнена на кафедре микробиологии и вирусологии УО ВГАВМ, ОАО «БелВитунифарм», в отделе зоонозов и разработки диагностических препаратов РУП «Институт экспериментальной ветеринарии им. С. Н. Вышелесского».

В работе использовали штаммы M. bovis № 8, M. bovis Vallee, полученные в 1971 г. из ВГНКИ, депонированные в РУП «Институт экспериментальной ветеринарии им. С. Н. Вышелесского», штамм M. bovis БЦЖ-1 246 пассажа Государственного научно-контрольного института им. Л. А. Тарасевича (Москва), а также штаммы M. bovis БЦЖ и M. bovis СП2.

Культуральные свойства изучали путем посева на среду Гельберга и МПА с последующей инкубацией при 20, 37 и 45 °С, а также на средах Сотона и Павловского. Морфологические и тинкториальные свойства культур изучали микроскопией препаратов-мазков, окрашенных по Цилю-Нильсену (Ц-Н), патогенные свойства - заражением морских свинок и кроликов в дозе 1 мг влажного веса бактериальной массы.

Кровь от 49 реагировавших коров была исследована в ИФА для определения уровня антител к антигенам M. bovis, М. tuberculosis, НТМБ и подвергнута бактериологическому исследованию с помощью «Набора для ускоренного выявления микобактерий туберкулеза» ТУ BY 600049853.084-2007.

Для идентификации штаммов в полимеразной цепной реакции (ПЦР) применяли праймеры IS1081, IS81, IS6110, ET, реакцию ставили по стандартному протоколу.

С помощью источника тока «Power pac 300» (Bio-Rad) ампликоны подвергали электрофорезу в 1,5 % агарозном геле с 1 % бромистым этидием в течение 30 минут при 10 В/см.

Для оценки результатов использовали трансиллюминатор 2000 (Bio-Rad) с длиной волны 310 нм и видеосистему для регистрации «Samsung» с программой «Се11 Ехр1огег» версия 1,0.

ДНК изолятов из туберкулинов исследовали в ПЦР в реальном времени (набор реагентов НПА «Нарвак») с зондами FAM (M. tuberculosis-M. bovis complex) и JOE (M. tuberculosis).

Результаты исследований и их обсуждение. С использованием ТО было исследовано 7484 головы крупного рогатого скота, в том числе 3663 коровы, и выявлено 234 реагирующие особи (3,13 %) с утолщениями кожной складки на 3-27 мм.

В ИФА 71,4 % сывороток крови реагировавших на туберкулин животных давали более выраженные реакции с антигенами микобактерий туберкулеза млекопитающих, чем с НТМБ, причем во всех случаях с антигенами М. tuberculosis они были на 7-32 % интенсивнее, чем с антигенами M. bovis. Это указывало на высокую вероятность инфицирования животных микобактериями человеческого вида.

Посев крови для ускоренной бактериологической диагностики дал рост культур в 23 пробах (46,9 %) в виде крупных некислотоустойчивых кокков, палочек, в том числе частично кислотоустойчивых (рис. 1). Десять выделенных культур (43,5 %) дали положительный результат в ПЦР, свидетельствовавший об их принадлежности к комплексу М. tuberculosis-M. bovis (рис. 2).

По показателям аллергической пробы, ИФА и посева крови провели убой 14 коров. Туберкулезные изменения в органах обнаружены не были.

Рис. 1. Изолят из крови коровы, реагировавшей на ТО. Частично кислотоустойчивые палочки

St. - В1 В2 ВЗ В4 В5 В6 В 7 В8 В9 BIO В11 В1

St. - Ml М2 МЗ 14/14 М5 Мб М7 М8 М9 MIO Mil М

Рис. 2. Электрофорез продуктов амплификации ДНК-культур, выделенных из крови реагировавших на туберкулин коров

При посеве лимфатических узлов на среду Гельберга был получен типичный рост возбудителя туберкулеза с характерной морфологией и тинкториальными свойствами (рис. 3, 4).

Рис. 3. Морфология и тинкториальные свойства культуры со среды Гельберга из материала от коровы №8

Рис. 4. Морфология и тинкториальные свойства культуры со среды Гельберга из материала от коровы N»13

Выделенные культуры идентифицировали в ПЦР в реальном времени с флуоресцентными метками FAM (комплекс M. tuberculosis-bovis) и JOE (для идентификации M. tuberculosis).

Все выделенные культуры реагировали с зондами FAM и JOE, что указывало на их принадлежность к M. tuberculosis. Таким образом, было подтверждено, что ТО эффективно выявляет животных, инфицированных возбудителем туберкулеза человеческого вида.

Известно, что реактивность инфицированного молодняка крупного рогатого скота невысока. В стаде, где было обнаружено инфицирование M. Tuberculosis, провели исследование ТО животных разных половозрастных групп. Установлено, что инфицированные телята, телки и коровы реагировали на ТО с утолщением кожной складки в пределах 4-6 мм. Реакции с утолщением кожной складки на 4 мм были в 57,2 % случаев, на 5 мм - 33,3 %, на 6 мм - 9,5 %. Результаты кожной пробы были подтверждены бактериологическим методом диагностики с изучением культуральных свойств изоля-тов и исследованием их в ПЦР.

Для подтверждения диагностических свойств ТО было важно провести сравнение с зарубежными образцами ППД туберкулинов. В контролируемом комиссионном опыте на экспериментально зараженном крупном рогатом скоте было установлено, что активность стандартного раствора ТО на крупном рогатом скоте, зараженном M. bovis, была одинаковой, или несколько выше (13,3 %), чем у стандартных растворов ППД туберкулина AN5 Biovet Польша, PPD tuberculina AN5 Аргентина и ППД туберкулина ФГУП «Курская биофабрика». Вместе с тем животные, зараженные нетуберкулезными микобактериями M. avium 16Q3, M. terrae 17522, M. fortuitum 342, на 33-42 % реже давали значимые (на 3 мм и более) реакции на ТО, чем на испытанные препараты ППД. Необходимо отметить, что в доступной научной литературе практически нет сведений о видовой специфичности различных туберкулинов или они указывают на примерно одинаковые диагностические свойства. Полученные нами результаты показали, что разработанная технология очистки позволяет получить туберкулин с лучшими диагностическими свойствами, чем ППД [2, 3].

В соответствии с OIE Mannual и инструкцией National Institute for Biological Standards and Control UK (NIBSC) для контроля ТО были проведены исследования на спонтанно больных коровах. Препаратом сравнения служил сопоставимый по содержанию туберкулопротеинов стандартный раствор ППД туберкулина Biovet Pulawy AN5, стандартизированный по требованиям EС относительно международного эталона. Было установлено, что ТО выявил больных животных на 13 % больше, причем его активность составила 98,7 % от заявленной, или 21367 IU/ml, что полностью совпало с активностью, определенной на морских свинках, относительно международного стандарта туберкулина -21657 IU/ml [23].

Сравнение в неблагополучном по туберкулезу стаде ТО и ППД Курской биофабрики показало их диагностическую равноценность. На оба препарата реагировали одни и те же коровы. При испытаниях в благополучных стадах животным, помимо ТО, вводили ППД и КАM Курской биофабрики, что позволило объективнее судить о возможном инфицировании. Как ожидалось, около 98 % животных не реагировали на ТО и ППД. В 45,5 % случаях реакции совпали на оба туберкулина. В 18,2 % случаев были отмечены реакции только на ППД, но при более интенсивной реакции на КАM, что, согласно существующим мнениям, можно расценить как результат более высокой видовой специфичности ТО. В 4,5 % случаев ТО выявил животных при отсутствии реакции на КАM, что свидетельствует о его более высокой специфической активности [17, 18]. Только в 11 % случаев из числа реагировавших между показаниями ТО и ППД имелись различия, которые было трудно интерпретировать. Этот факт можно расценить, как существенно не влияющий на качество диагностики. Расхождения результатов при одновременном использовании разных туберкулинов нередко бывают и более значительными, порядка 4Q % [12, 13]. По всей вероятности, это связано с тем, что в зависимости от особенностей штаммов-продуцентов и условий выращивания синтезируется одинаковый набор антигенов, но значительно различающийся по концентрации индивидуальных компонентов [19].

В условиях эксперимента и в стадах с разной эпизоотической ситуацией доказано, что ТО пригоден для симультанной пробы. Исходя из литературных данных, такая «пригодность» или «биоэквивалентность» связана с правильной стандартизацией активности туберкулина [7, 8].

Важным моментом был выбор диагностической дозы ТО. В принципе, несмотря на определенную сложность эпизоотической ситуации по туберкулезу в республике, можно считать, что «кампания по ликвидации болезни» была успешно завершена к началу 21 века. В этой связи, по рекомендациям OIE Mannual, можно применять пониженную дозу туберкулина, т. е. 5QQQ ME (2QQQ IU), хотя в научной литературе существуют противоречивые взгляды на эффективность этой меры [23]. На экспериментально зараженных животных и в полевых условиях было доказано, что доза ТО 5QQQ ME эффек-

тивно выявляет животных, зараженных возбудителем туберкулеза, но в благополучных стадах при инфицировании НТМБ, число ложноположительных реакций снижается, в ряде случаев в 8 раз.

Особый интерес представляет изучение диагностических свойств ТО у животных, инфицированных M. tuberculosis. В научной литературе вопросы туберкулинодиагностики при инфицировании животных M. tuberculosis, особенно при спонтанном, освещены скудно из-за сложности подтверждения факта инфицирования, особенно прижизненного [5, 12]. Провести исследование удалось благодаря предварительному изучению статуса животных с помощью определения специфичности антител в ИФА, выделению из крови измененных форм M. tuberculosis и подтверждению видовой принадлежности в ПЦР. Оказалось, что при инфицировании крупного рогатого скота M. tuberculosis реакции на ТО отмечались в пределах 3-27 мм, но преобладали реакции с интенсивностью 4-6 мм, что укладывается в категорию «реагирующие на туберкулин» по требованиям ЕС [22]. Интересно отметить, что число туберкулинпозитивных животных относительно всех обследованных составило 3,13 %, а относительно дойного стада - 6,4 %. В тоже время, по данным Н. А. Кузнецова [9], выявление в стаде 6 % реагирующих и более указывает на высокую вероятность туберкулезной инфекции.

Несмотря на установившееся мнение о том, что молодняк крупного рогатого скота анергичен к туберкулину [11], нами выявлено, что инфицированные телята и телки, также как и коровы, реагировали на ТО с утолщениями кожной складки 4-6 мм. Необходимо отметить, что существует мнение о том, что при инфицировании коров НТМБ интенсивность реакций находится в пределах 3-5 мм [1, 14, 16]. Полученные данные показали, что в этих пределах могут быть реакции на туберкулин и у особей, инфицированных M. tuberculosis.

Заключение. У животных, зараженных возбудителем туберкулеза, стандартный раствор туберкулина очищенного имеет одинаковую или несколько большую активность (на 13,3 %), чем стандартные растворы ППД AN5 Biovet Польша, PPD AN5 Аргентина и ППД ФГУП «Курская биофабрика». У животных, зараженных нетуберкулезными микобактериями, реакции на туберкулин очищенный бывают на 33-42 % реже, чем на ППД туберкулины. Активность туберкулина очищенного, установленная на морских свинках и в полевом опыте на спонтанно больных туберкулезом коровах, полностью совпала и соответственно составила 21657 IU/ml и 21367 IU/ml. Для повышения чувствительности диагностики туберкулин очищенный целесообразно использовать в дозе 5000 МЕ (2000 IU/ml) во всех хозяйствах республики (исключая неблагополучные стада), что позволит существенно снизить необоснованный убой крупного рогатого скота. Туберкулин очищенный можно использовать в симультанной пробе с КАМ или ППД туберкулином для птиц. Туберкулин очищенный пригоден для выявления животных, инфицированных M. tuberculosis, в том числе и молодняка. Интенсивность реакций у основной массы инфицированных животных 4-6 мм с преобладанием реакций на нижнем пределе критерия положительной реакции.

ЛИТЕРАТУРА

1. Агапова, М. Ф. Эпизоотологическое обоснование и экономическая эффективность рациональной дифференциальной диагностики туберкулиновых реакций у крупного рогатого скота: автореф. дис. ... канд. вет. наук: 16.00.03 / М. Ф. Агапова; ГНУ Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока СО РАСХН. - Новосибирск, 2006. - 19 с.

2. Активность и специфичность туберкулина очищенного в сравнении с PPD bovine и ППД туберкулином для млекопитающих / А. П. Лысенко [и др.] // Эпизоотология. Иммунобиология. Фармакология. Санитария. - 2006. - № 2. - С. 3-11.

3. Активность и специфичность туберкулинов у экспериментально зараженного и спонтанно больного туберкулезом крупного рогатого скота / А. П. Лысенко [и др.] // Экология и животный мир. - 2008. - № 3. - С. 56-62.

4. Архипов, И. Н. Серологические, бактериологические и молекулярно-генетические маркеры туберкулезной инфекции крупного рогатого скота: автореф. дис. ... канд. вет. наук: 06.02.02 / И. Н. Архипов; Институт экспериментальной ветеринарии им. С. Н. Вышелесского. - Минск, 2011 - 26 с.

5. Бактериологические маркеры микобактериальной инфекции и антитела в крови у животных после введения туберкулина / А. П. Лысенко [и др.] // Ветеринарна медицина: межшдомчий темтичный науковий зб1рник по материалам 92 М1жнароднай науково-практичной конференцп «Мониторинг, прогназування, хвороб тварин 1з використанням сучасних мотодв етзоотолои, молекулярно! бюлогии та бютехнологи» (м. Феодооя, 14-17 вересня 2009 р.). - Харюв, 2009. - С. 294-298.

6. Болезни сельскохозяйственных животных / науч. ред. П. А. Красочко [ и др.]. - Минск: Бизнесофсет, 2005. - 800 с.

7. Евглевский, А. А. Совершенствование аллергической диагностики и специфической профилактики туберкулеза крупного рогатого скота: автореф. дис. ... канд. вет. наук: 16.00.03 / А. А. Евглевский; Воронежский государственный аграрный университет. - Воронеж, 1992. - 26 с.

8. Качкин, М. В. Комплексная эпизоотологическая оценка проявления туберкулиновых реакций у животных на территориальном и популяционном уровне с использованием информационных технологий: автореф. дис. ... канд. вет. наук: 16.00.03 / М. В. Качкин; ГНУ Институт экспериментальной ветеринарии Сибири и Дальнего Востока СО РАСХН. - Новосибирск, 2007. - 22 с.

9. Лысенко, А. П. Туберкулез животных и человека в свете новых данных о возбудителе болезни / А. П. Лысенко // Ветеринарная наука - производству: научные труды / РНИУП ИЭВ. - Минск, 2005. - Т. 37. - C. 73-78.

10. Найманов, А. Х. Сравнительное изучение внутрикожного и глазного методов применения ППД-туберкулина для млекопитающих / А. Х. Найманов // Бюллетень ВИЭВ. - М., 1981. - Т. 43: Проблемы профилактики и борьбы с туберкулезом и бруцеллезом животных. - С. 12-16.

11. Новик, Т. П. Выделение и свойства жизнеспособных микроорганизмов из термически инактивированных суспензий микобактерий туберкулеза и туберкулинов: автореф. дис. ... канд. биол. наук: 06.02.02 / Т. П. Новик; Институт экспериментальной ветеринарии им. С. Н. Вышелесского. - Минск, 2010 - 21 с.

12. Оздоровление неблагополучных по туберкулезу стад крупного рогатого скота с использованием двукратной внутри-кожной туберкулиновой пробы / В. О. Бусол [и др.] - Киев, 2011. - 20 с.

13. Притыченко, А. Н. Туберкулин очищенный для млекопитающих (оптимизация очистки, диагностические и имму-нохимические свойства): автореф. дис. ... канд. вет. наук: 16.00.03 / А. Н. Притыченко; БНИИ экспериментальной ветеринарии им. С. Н. Вышелесского. - Минск, 2002. - 17 с.

14. Туберкулез крупного рогатого скота в Беларуси (анализ эпизоотической ситуации, прогноз и проблемы ликвидации) / А. А. Холод [и др.] // Ветеринарная медицина Беларуси. - 2002. - № 4. - С. 12-13.

15. Тузова, Р. В. Туберкулез сельскохозяйственных животных и птицы / Р. В. Тузова. - Минск: Ураджай, 1983. - 263 с.

16. Ходун, Л. П. Оптимизация аллергической и лабораторной диагностики туберкулёза крупного рогатого скота: автореф. дис. ... д-ра вет. наук: 16.00.03 / Л. П. Ходун; Казанская государственная академия ветеринарной медицины. - Казань, 1997. - 31 с.

17. Холод, А. А. Эпизоотическая ситуация по туберкулезу крупного рогатого скота в Республике Беларусь / А. А. Холод, А. П. Лысенко, И. И. Румачик // Зооантропонозные болезни, меры профилактики и борьбы: материалы Междунар. науч.-практ. конф. - Гродно, 1997. - С. 64.

18. Comparison ot lhe specificity of human and bovine tuberculin PPD for testing cattle / I. W. Leslie [et al] // Vet. Rec. - 1975. -Vol. 96. - P. 332-341.

19. Doherty, M. L. Effect of recent injection of PPD on diagnostic tests for tuberculosis in cattle infected with Mycobacterium bovis / M. L. Doherty, M. L. Monaghan, H. F.Bassett // Res. vet. sci. - 1995. - Vol. 58, № 3. - P. 217-221.

20. Kantor, I. N. An update on bovine tuberculosis programmes in Latin American and Caribbean countries / I. Kantor, V. Ritacco // Veterinary Microbiology. - 2006. - Vol. 112, № 2-4. - P. 111-118.

21. Mycobacterial antigen-specific antibody responses in bovine tuberculosis: an ELISA with potential to confirm disease status / K. A. Lightbody [et al] // Vet Rec. - 1998. - Vol. 12. - № 142. - P. 295-300.

22. OIE Manual of Diagnostic Test and Vaccines for Terrestrial Animals // Fifth Edition. - 2004. - Vol. 1. - P. 723.

23. Zhang, Y. Persistent and dormant tubercle bacilli and latent tuberculosis / Y. Zhang // Front Biosci. - 2004. - № 1. -P. 1136-1156.

УДК 636.4.082.453: [619:615.33]

ВЛИЯНИЕ АНТИБИОТИЧЕСКИХ СРЕДСТВ В РАЗБАВИТЕЛЕ ДЛЯ СПЕРМЫ ХРЯКОВ НА РЕПРОДУКТИВНЫЕ КАЧЕСТВА СВИНОМАТОК

Г. Ф. МЕДВЕДЕВ, Н. Е. СЕМЕНЧЕНКО, Н. И. ГАВРИЧЕНКО

УО «Белорусская государственная сельскохозяйственная академия» г. Горки, Республика Беларусь, 213407

Н. Д. КОЛОМИЕЦ

УО «Белорусская государственная медицинская академия последипломного образования»

г. Минск, Республика Беларусь, 220013

Резюме. Изучены микробная обсемененность спермы хряков и маточной среды свиноматок в послеродовой период и определена эффективность экспериментального препарата фертилифил С в разбавителе для спермы. Из спермы хряков выделены аэробные и факультативно анаэробные микроорганизмы: E. coli, Staph. epidermidis и Proteus mirabilis, а в содержимом матки свиноматок - Citrobacter freundii, Enterococcus faecalis, E. coli. Выделенные микроорганизмы проявляли высокую чувствительность к различным антибиотикам и препарату.

При осеменении свиноматок спермой с добавлением гентамицина или фертилифила С оплодотворяемость в обеих группах была одинаковой: опоросилось по 88,8 % животных. Однако репродуктивная способность животных различалась. При включении в разбавитель фертилифила С увеличивалось количество технологических поросят за счет уменьшения числа свиноматок, в помете которых имелись мертворожденные, увеличения массы гнезд и массы новорожденных и некоторого увеличения числа поросят в помете. После отъема поросят большее число свиноматок проявляло половую охоту в первые 4-5 дней. Эффективность использования препарата для спермы среднеплодовитых хряков была более высокой, чем для спермы высокоплодовитых. Различие наиболее существенное в числе технологичных поросят.

Ключевые слова: фертилифил С, гентамицин, хряк, сперма, микроорганизмы, репродуктивная способность.

Summary. Bacterial content of boar semen and of uterine medium in sows during postnatal period was studied and efficacy of the investigational agent fertilifil C in the boar semen extender was determined. Aerobic and facultative anaerobic microorganisms such as E. coli, Staph. Epidermidis ahd Proteus mirabilis were found in boar semen; Citrobacter freundii, Enterococcus faecalis,