Морфофункциональная характеристика тучноклеточных популяций молочной железы крольчих на фоне динамики гормонов

Калякина Р.Г., Абрамова Л.Л.

Оренбургский государственный аграрный университет

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ТУЧНОКЛЕТОЧНЫХ ПОПУЛЯЦИЙ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ КРОЛЬЧИХ НА ФОНЕ ДИНАМИКИ ГОРМОНОВ

Представлены исследования по изучению гистофизиологии молочной железы в период покоя, беременности, родов и лактации. Установлено, что тучные клетки играют роль в паракринной регуляции и общей реакции адаптации элементов структурно-функционального ансамбля молочной железы крольчих при смене функционального состояния.

Молочная железа - уникальный орган репродуктивной системы, продуцирующий молоко - естественную пищу для новорожденных, необходимую для постройки тела и покрытия расходов энергии, связанных с жизненными функциями. Основную структурно-функциональную единицу молочной железы - альвеолу необходимо рассматривать в комплексе с сосудами ГМЦР и нервами. Деятельность альвеолярного отдела молочной железы во многом зависит от действия физиологически активных веществ, медиаторов, гормонов, поступающих из нервных терминалей, и сосудов гемомикро-циркуляторного русла (ГМЦР) через основное вещество межклеточного матрикса (Курбатова Л.В., 1975). Морфофункциональное состояние на уровне микрорайона регулируются веществами, выделяемыми тучными клетками (Виноградов В.В., 1973; Быков В.Л., 2000). Изучение гистофизиологии молочной железы в периоды покоя, беременности, родов и лактации позволит в полной мере выяснить механизмы регуляции ее деятельности как целостного органа, а, следовательно, и целенаправленно влиять на нее в период реализации функции (Абрамова Л.Л., 1999, 2000).

Материал и методы

Объектом исследования служили молочные железы 15 крольчих, из них: 3 интактных (небеременных) в возрасте 12 мес., 9 беременных и 3 лактирующих. Часть гистопроб объемом по 4 мм3 погружали в охлажденную до 40С смесь 2%-х растворов глутарового и параформальдегидов на фосфатном буфере (рН 7,4) с добавлением 0,1% пикриновой кислоты, после чего фиксировали в жидком азоте. Изготовляли криостатные срезы толщиной 10 - 12 мкм и окрашивали тривиальными методиками, им-прегнировали по Бильшовскому-Гросс в модификации Б.И. Лаврентьева. На ультратомах фирмы ЬКВ (Швеция) получали полутонкие

срезы (0,5 - 2 мкм) и окрашивали толуидино-вым синим по Б. Уикли, после чего срезы заключали в полистирол.

Исследования в сыворотке крови самок концентрации лютеинизирующего (ЛГ), фоли-куллостимулирующего (ФСГ) гормонов, про-лактина и прогестерона проводили методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием наборов реактивов: «Гонадотропин ИФА - ЛГ», «Гонадотропин ИФА -ФСГ», «ИФА - пролактин - 01» и «Стероид ИФА - прогестерон - 01».

Количественную информацию о численности тучноклеточных популяций получали в ходе морфометрических исследований при использовании винтового окуляра микрометра МОВ-1-15х (ГОСТ 15150-69). В отдельном образце ткани измерения каждого показателя осуществлялось не менее, чем в 15 полях зрения каждого объекта.

Результаты и обсуждение

Установлено, что в разные периоды физиологической напряженности молочной железы (интактность, беременность, роды, лактация) изменяется соотношение численности популяций тучных клеток и их локализация в различных микрорайонах молочной железы (жировая долька, пролиферирующие эпителиальные тяжи в жировой дольке, развивающиеся и сформировавшиеся железистые дольки) по ходу ветвления сосудов ГМЦР.

У интактных крольчих большую часть объема молочной железы составляет жировая ткань, представленная дольками, разделенными междольковыми соединительнотканными трабекулами. Функционально активными микрорайонами жировой дольки являются скопления адипоцитов, окруженные сетью синусоидных капилляров. Концентрации гормонов (ЛГ, ФСГ, прогестерон, пролактин) в сыворотке крови интактных крольчих представляют соот-

ношение: 2:0,38:1,1:79. Высокие значения концентрации ЛГ в этот период связаны с подготовкой овуляции. При этом в молочной железе преимущественная локализация тучных клеток (65,3%) выявлена в междольковых соединительнотканных трабекулах по ходу кровеносных сосудов и около молочных ходов и сосковых каналов, меньшее число (34,7%) располагается около функционально-активных структур жировых долек. В междольковых соединительнотканных трабекулах сосредоточены все информационные системы органа (кровеносные и лимфатические сосуды, нервные волокна и их терминалии), определяющие морфо-функцио-нальные потенции его перспективного развития. Во всех микрорайонах молочной железы этого периода тучные клетки обнаруживаются единичными экземплярами, их размер в жировой дольке составляет 6,841 мкм, а в междольковых соединительнотканных трабекулах - 4,83 мкм. При этом число и диаметр гранул тучных клеток соотносится как 16:1 в жировой дольке и 11:1 - в междольковых соединительнотканных трабекулах. Количество гранул, вышедших в межклеточное пространство в жировой дольке, было равно 22,4%, в междольковых соединительнотканных трабекулах - 40,4%.

В первую половину беременности вслед за изменением концентрации гормонов в сыворотке крови самок значительно изменяется локализация, численность тучных клеток и их качественные характеристики. Концентрация ЛГ в сыворотке крови крольчих снижается достоверно, а концентрации прогестерона, напротив, возрастает, что свидетельствует о все более возрастающем значении желтого тела беременности. У беременных самок, кроме того, по сравнению с периодом интактности, число тучных клеток существенно увеличивается. При этом в междольковых соединительнотканных трабекулах по ходу сосудов и около молочных ходов и сосковых каналов численность тучных клеток снижается (57,93%), около функционально-активных структур жировой дольки возрастает (42,07%), что, видимо, связано с началом пролиферации эпителия и прорастанием эпителиальных тяжей в жировые дольки. В жировых дольках диаметр тучных клеток - в 1,62 раза, а в междольковых соединительнотканных трабекулах - в 2,24 раза меньше, в сравнении с таковыми в интактный период. В очагах пролиферации эпителия, рядом с эпителиоцитами, тучные клетки имели диаметр 3,045 мкм. При этом

в жировой дольке отношение числа гранул в тучных клетках к диаметру гранул составило 5,7:1, рядом с эпителиоцитами - 11:1, в междоль-ковых соединительнотканных трабекулах -11,6:1. Степень дегрануляции в жировой дольке была равна 5,0%, рядом с очагами пролиферации - 8,7%, в междольковых соединительнотканных трабекулах - 11,2%.

Во вторую половину беременности в сыворотке крови животных снижается содержание ФСГ и прогестерона, но повышается концентрация пролактина. Последнее сопровождается интенсивным развитием железистых долек и началом функционирования молочной железы. Количество тучных клеток в междольковых соединительных трабекулах снижается (39,9%), а около функционально-активных структур (альвеол и формирующихся железистых долек), наоборот, увеличивается (60,1%). При этом размеры тучных клеток повсеместно увеличиваются. Рядом с тяжами пролиферирующей эпителиальной ткани диаметр тучных клеток - в 1,6 раза, в междольковых соединительнотканных трабекулах - в 1,5 раза больше, по сравнению с очагами пролиферации в первой половине беременности. В сформировавшихся железистых дольках тучные клетки имели средний размер 5,22 мкм. При этом в зоне тяжей пролиферирующей эпителиальной ткани отношение числа гранул в тучных клетках к диаметру гранул составило 10:1, около сформировавшихся долек

- 10,6:1, в междольковых соединительнотканных трабекулах - 11:1. Количество гранул, вышедших в межклеточное пространство, было около с тяжей пролиферирующей эпителиальной ткани 13,1%, в сформировавшихся дольках

- 21,0%, в междольковых соединительнотканных трабекулах - 28,2%.

Во время лактации продолжает существенно возрастать концентрация пролактина в сыворотке крови. При этом обнаруживается уменьшение количества тучных клеток во всех микрорайонах железы. В середине лактации тучные клетки в междольковой соединительной ткани по ходу микрососудов в молочных ходах и сосковых каналах обнаруживаются единично.

Таким образом, изменение топографии и численности популяций тучных клеток, их качественного состава, степени дегрануляции в каждом из микрорайонов (жировая долька, пролиферирующие эпителиальные тяжи в жировой дольке, развивающиеся и сформирован-

ные железистые дольки) свидетельствуют о турно-функционального ансамбля молочной

роли тучных клеток в паракринной регуляции железы крольчих при смене функциональных

и общей реакции адаптации элементов струк- состояний.

Список использованной литературы:

1. Абрамова Л.Л. К вопросу об изменении гистофизиологии молочной железы коз в период беременности // Вестник ветеринарии / Научные труды Академии ветеринарной медицины (Оренбургский ГАУ, Оренбургское областное управление ветеринарии). - Оренбург: Издательский центр ОГАУ, 1999. - Вып. 1. - С. 7-9.

2. Абрамова Л.Л., Антипов А.А. Закономерности онтогенеза молочной железы коз при смене функциональных состояний // Вестник ветеринарии / Научные труды Академии ветеринарной медицины (Оренбургский ГАУ, Оренбургское областное управление ветеринарии). - Оренбург: ПМГ ВНИИМСа, 2000. - Вып. 3. - С. 11-13

3. Быков В.Л. Развитие и гетерогенность тучных клеток // Морфология. - С.-Пб., 2000, Т. 117, №2. - С. 86-92

4. Виноградов В.В., Воробьева Н.Ф. Тучные клетки. - Новосибирск: Наука СО, 1973. - 127 с.

5. Курбатова Л.В. О гистологическом строении развивающихся молочных желез крольчих // Труды Свердловская СХИ / Промежуточный обмен веществ, морфогенез и физиология молочной железы у сельскохозяйственных животных. - Свердловск, 1975. - Вып. 39. - С. 68-75.