Определение фенолкарбоновых кислот в сборе «Панкреофит»

И.Г. Николаева и др. Определение фенолкарбоновых кислот в сборе «Панкреофит»

40. Sierra C., Coca A., Schiffrin E.L. Vascular mechanisms in the pathogenesis of stroke // Curr Hypertens Rep. - 2011. - Jun. - Vol. 13, № 3. - Р. 200-207.

41. Shenoy R. et al. Functional MRI brain imaging studies using the Contact Heat Evoked Potential Stimulator (CHEPS) in a human volunteer topical capsaicin pain model // J Pain Res. - 2011. - № 4. -Р. 365-71.

42. Stuckey S.L. et al. Hyperintensity in the subarachnoid space on FLAIR MRI // AJR Am J Roentgenology. - 2007. - Oct. - Vol. 189, № 4. -Р. 913-921.

43. Turk A. et al. CT perfusion-guided patient selection for endovascular treatment of acute ischemic stroke is safe and effective // J Neurointerv Surg. - 2011. - Sep. 19.

44. Vinters H.V. General pathology of central nervous system. In: Love S, Louis DN, Ellison DW. Greenfield's neuropathology. - 8th ed. - London: Hodder Arnold, 2008. - Р. 1-62.

45. Lobar intracerebral hemorrhage. A clinical, radiographic, and pathological study of 29 consecutive

operated cases with negative angiography / Wakai S. et al. // J Neurosung. - 1992. - №76 (2). - Р. 231-238.

46. Warren D.J. et al. Imaging in acute ischaemic stroke: essential for modern stroke care // Postgrad Med J. - 2010. - Jul. - Vol. 86, №1017. - Р. 409-18.

47. Wechsler L.R. Imaging evaluation of acute ischemic stroke // Stroke. - 2011. - Jan. - № 42(1 Suppl). - Р. 12-5.

48. WG. Bradley jr. MR appearance of hemorrhage in the brain // Radiology. - 1993. - № 189 (1). - Р. 15-26.

49. Wintermark M, Meuli R, Browaeys P, et al.: Comparison of CT perfusion and angiography and MRI in selecting stroke patients for acute treatment. Neurology. - 2007. - № 68. - Р. 694- 697.

50. Wintermark M. et al. Perfusion-CT assessment of infarct core and penumbra: receiver operating characteristic curve analysis in 130 patients suspected of acute hemispheric stroke // Stroke. - 2006. - № 37. -Р. 979-985.

Гомбоева Номин Архиповна- аспирант, Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова. Е-mail: nami 83@mail.ru

Gomboeva Nomin Arhipovna - postgraduate student, the First Moscow State Medical University named after I.M. Sechenov. Е-mail: nami 83@mail.ru

УДК 615.1/.4

И.Г. Николаева, Г.Г. Николаева, Т.А. Туртуева, Я.Г. Разуваева, Л.Д. Раднаева

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФЕНОЛКАРБОНОВЫХ КИСЛОТ В СБОРЕ «ПАНКРЕОФИТ»

Определено содержание фенолкарбоновых кислот в сборе «Панкреофит». Подобраны параметры ВЭЖХ, обеспечивающие максимальное разделение фенолкарбоновых кислот.

Ключевые слова: фенолкарбоновые кислоты, сбор «Панкреофит».

I.G. Nikolaeva, G.G. Nikolaeva, ТА. Turtueva, Ya.G. Razuvaeva, L.D. Radnaeva

THE IDENTIFICATION OF PHENOLCARBONIC ACIDS IN THE SPECIES «PANCREOPHYT»

The content of phenolcarbonic acids in the species «Pancreophyt» has been determined. The parameters of HPLC providing the maximum separation of phenolcarbonic acids have been selected.

Ключевые слова: phenolcarbonic acids, species «Pancreophyt».

Для лечения и профилактики различных заболеваний наряду с базисной терапией широко используются лекарственные средства растительного происхождения в качестве средств дополнительной терапии в период обострения заболевания, а также в качестве профилактических средств на начальных стадиях заболевания и на этапе противорецидивной терапии [6]. Средства на основе растений влияют на организм человека как корригирующая система благодаря гармоничному сочетанию содержащихся биологически активных веществ, они малотоксичны, обладают мягким и разноплановым дей-

ствием, при этом есть возможность рационального сочетания их между собой, что существенно расширяет их терапевтические возможности

[3].

Нами разработано растительное многокомпонентное средство, обладающее антиоксидант-ной и панкреозащитным действием [4, 5].

Действие растительных средств обусловлено присутствием в них биологически активных веществ: полифенолов, полисахаридов, минеральных веществ, аминокислот, органических кислот, витаминов и других, которые обеспечива-

ют широкий спектр фармакологического действия фитопрепаратов.

Целью работы является определение содержания фенолкарбоновых кислот в сборе «Пан-креофит» и подбор оптимальных параметров ВЭЖХ, обеспечивающих максимальное разделение фенолкарбоновых кислот.

ВЭЖХ-анализ проводили на приборе Р1а1тВ1ие (Кпаиег). При выборе режима элюи-рования смеси фенолкарбоновых кислот (тип хроматографической колонки, состав подвижной фазы, длины волн детектирования) основывались на строении фенолкарбоновых кислот. Структура исследуемых соединений, содержащих хромофорные группы и обладающих достаточной гидрофобностью, позволила сделать вывод о возможности проведения анализа в условиях обращенно-фазовой ВЭЖХ со спектрофо-тометрическим детектированием и использования хорошо изученного элюента - смеси ацето-нитрила с водным раствором трифторуксусной кислоты.

При подборе параметров ВЭЖХ, обеспечивающих максимальное разделение фенолкарбо-новых кислот, изначально готовили серию растворов кислот (галловой, протокатеховой, окси-бензойной, ванилиновой, сиреневой, кофейной, вератровой, кумаровой, синаповой, анисовой, коричной) 1 мкг вещества в 1 мл ацетонитрила с добавлением 0,05%-ного раствора трифторук-сусной кислоты и хроматографировали отдельно для установления времени удерживания кислот. Далее хроматографировали смесь кислот, добиваясь их лучшего разделения на хроматограмме.

Подобраны следующие параметры, обеспечивающие максимальное разделение фенолкарбо-новых кислот: колонка Диасфер С10-СК, 5 мкм, 2х120 мм (БиоХимМак СТ), подвижная фаза -смесь ацетонитрила и 0,05%-ного водного раствора трифторуксусной кислоты, элюирование -градиентное (от 6 до 12% АСК за 13 мин, далее до 24% АСК за 9 мин), объем вводимой пробы 5 мкл, скорость потока 0,3 мл/мин, детектирование при 260 и 315 нм.

На рис. 1 приведена хроматограмма модельной смеси фенолкарбоновых кислот, наличие которых предполагалось в исследуемом экстракте.

Можно видеть, что кислоты разделяются достаточно хорошо, а при использовании детектора с диодной матрицей, позволяющего визуализировать спектры элюируемых соединений, становится возможным контролировать присутствие и оценивать содержание фенолкарбоно-вых кислот в экстрактах.

Согласно данным Н.А. Верниковской [2], экстракцию выполняли водой, в качестве экст-рагента использовали 10%-ный водный раствор изопропилового спирта, обладающий хорошей экстрагирующей способностью [1].

Методика приготовления водного извлечения: около 0,2000 г (точная навеска) измельченного сбора (степень измельчения = 1 мм) помещают в плоскодонную колбу вместимостью 100 мл, добавляют 25 мл воды очищенной, закрывают притертой пробкой, помещают на 30 мин в ультразвуковую баню (1=60 °С), затем охлаждают и проводят через бумажный фильтр.

Рис. 1. Хроматограмма модельной смеси фенолкарбоновых кислот

И. Г. Николаева и др. Определение фенолкарбоновых кислот в сборе «Панкреофит»

Методика приготовления 10%-ного изопро-панольного извлечения: около 0,2500 г (точная навеска) измельченного сырья (степень измельчения = 1 мм) помещают в плоскодонную колбу вместимостью 100 мл, добавляют 20 мл 10%-ного изопропанола, закрывают притертой пробкой, оставляют на 2 суток при комнатной температуре экстрагироваться, проводят через бумажный фильтр.

Получены результаты количественного определения содержания фенолкарбоновых кислот в извлечениях сбора (водное и 10%-ное изопро-панольное) (табл. 2).

В результате проведенных исследований подобраны параметры ВЭЖХ, обеспечивающие максимальное разделение фенолкарбоновых ки-

слот: колонка Диасфер С10-СК, 5 мкм, 2х120 мм (БиоХимМак СТ), подвижная фаза - смесь аце-тонитрила и 0,05%-ного водного раствора триф-торуксусной кислоты, элюирование - градиентное (от 6 до 12% АСК за 13 мин, далее до 24% АСК за 9 мин), объем вводимой пробы 5 мкл, скорость потока 0,3 мл/мин, детектирование при 260 и 315нм. Идентифицировано только четыре фенолкарбоновой кислоты, выход кислот повышается при использовании в качестве экстраген-та 10%-ного изопропилового спирта и составляет 2,09 мкг/мл галловой, 1,90 мкг/мл протокате-ховой, 4,90 мкг/мл кофейной, 0,37 мкг/мл кума-ровой кислот в извлечениях сбора «Панкрео-фит».

Таблица 2

Количественное содержание фенолкарбоновых кислот в сборе «Панкреофит»

Кислота Содержание в экстрактах Площадь пика

водный 10%-ный изопропиловый стандартного

площадь пика при концентра- площадь пика концентрация вещества при

соответствующей ция кисло- при соответ- кислоты в 10 мкг/мл

длине волны ты в растворе экстракта ствующей длине волны растворе экстракта

1 Галловая 150 1,36 230 2,09 1100 260 нм

2 Протокатеховая 80 0,50 300 1,90 1600 260

3 Кофейная 150 0,76 960 4,90 1960 315нм

4 Кумаровая 110 0,37 110 0,37 2900 315

Литература

1. Флавоноиды зверобоя продырявленного при выращивании в Западной Сибири / И.И. Баяндина и др. // Труды Белорусского государственного университета. - 2013. - Т. 8, ч. 2. - С. 49-52.

2. Берниковская Н.А. Хроматографическое определение фенольных соединений и флавоноидов в лекарственных растениях: автореф. дис. ... канд. хим. наук. - Краснодар, 2011. - 24 с.

3. Николаев С.М. Системная фитофармаколо-гия - основа рациональной фитофармакологии и фи-тофармакопрофилактики заболеваний // Вестник Бурятского государственного университета. - 2011. -Вып. 12. - С. 3-5.

4. Николаев С.М., Николаева И.Г., Разуваева Я.Г., Доржиев А.М. Антиоксидантная активность нового панкреозащитного средства «Панкреофит» и изучение его флавоноидного состава» // Химико-фармацевтический журнал. - 2011. - Т. 45, №5. -С. 134-136.

5. Разработка растительного средства «Пан-креафит», обладающего антиоксидантным и панкреа-защитным действием / И.Г. Николаева и др. // Бюллетень БСНЦ СО РАМН. - 2011. - №2. - С. 159-162.

6. Соколов С.Я. Фитотерапия и фитофармако-логия: руководство для врачей. - М., 2000. - 976 с.

Работа выполнена при поддержке фонда Михаила Прохорова «Академическая мобильность» 2014 г.

Николаева Ирина Геннадьевна - кандидат фармакологических наук, старший научный сотрудник лаборатории медико-биологических исследований Института общей и экспериментальной биологии СО РАН. E-mail: i-nik@mail.ru.

Николаева Галина Григорьевна - доктор фармакологических наук, профессор, ведущий научный сотрудник лаборатории медико-биологических исследований. E-mail: g-g-nik @mail.ru

Туртуева Татьяна Анатольевна - аспирант лаборатории медико-биологических исследований Института общей и экспериментальной биологии СО РАН.

Разуваева Янина Геннадьевна - доктор биологических наук, старший научный сотрудник лаборатории безопасности биологически активных веществ Института общей и экспериментальной биологии СО РАН; старший преподаватель Медицинского института Бурятского государственного университета. Тел.: 8(3012)433713, факс: 8(3012)433034. E-mail: tatur75@mail.ru

Раднаева Лариса Доржиевна - доктор химических наук, профессор, заведующая лабораторией природных систем Байкальского института природопользования СО РАН. E-mail: radl@mail.ru

Nikolaeva Irina Gennadevna - candidate of pharmaceutical sciences, senior researcher, laboratory of medical and biological researches, Institute of General and Experimental Biology SB RAS.

Nikolaeva Galina Grigorevna - doctor of pharmaceutical sciences, professor, leading researcher, laboratory of medical and biological researches, Institute of General and Experimental Biology SB RAS. Tel. 8-9021-65-43-47.

Turtueva Tatyana Anatolevna - postgraduate student, laboratory of medical and biological researches, Institute of General and Experimental Biology SB RAS.

Razuvaeva Yanina Gennadevna - doctor of biological sciences, senior researcher, laboratory of safety of biologically active substances, Institute of General and Experimental Biology SB RAS; senior lecturer, Medical Institute, Buryat State University. Tel. 433713, fax 433034. E-mail: tatur75@mail.ru

Radnaeva Larisa Dorzhievna - doctor of chemical sciences, professor, head of the laboratory of natural system, Baikal Institute of Nature Management SB RAS.

УДК 615.1/.4

© Л.П. Цыбиктарова, Г.Г. Николаева, И.Г. Николаева, Л.Л. Гармаева

МИКРОЭЛЕМЕНТНЫЙ СОСТАВ СЕРПУХИ ВАСИЛЬКОВОЙ

Впервые изучен микроэлементный состав надземной части и подземных органов серпухи васильковой (Serratula centauroides L., сем. Asteraceae). Обнаружены макро- и микроэлементы, такие как Na, Ca, Mg, Ba, P, V, Fe, Ag, Si, Mn, Cu, Zn, Mo, Al, Cr.

Ключевые слова: Serratula centauroides L., макро- и микроэлементы.

L.P. Tsybiktarova, G.G. Nikolaeva, I.G. Nikolaeva, L.L. Garmaeva

THE MICROELEMENTAL COMPOSITION OF SERRATULA CENTAUROIDES

The microelemental composition of aerial part and underground organs of serratula centauroides (Serratula centauroides L. Family Asteraceae) was studied for the first time. The following macro- and microelements were found, such as Na, Ca, Mg, Ba, P, V, Fe, Ag, Si, Mn, Cu, Zn, Mo, Al, Cr.

Keywords: Serratula centauroides L., macro- and microelements.

Изучение микроэлементного состава лекарственных растений имеет важное значение для медицины, так как в этиологии многих заболеваний существенную роль играют нарушения микроэлементного соотношения в организме человека. В настоящее время большое внимание уделяется комплексным препаратам, содержащим не только биологически активные вещества, но и минеральные вещества. Микроэлементы не только сами обладают определенными физиологическим действием, но и могут также проявлять синергизм по отношению к целому ряду веществ. Кроме того, микроэлементы растительного происхождения лучше усваиваются человеческим организмом, так как они находятся в растении в «биологических» концентрациях

[2, 5].

В настоящее время большой интерес к использованию в качестве растительного сырья для получения новых адаптогенных лекарственных препаратов, тонизирующих пищевых добавок представляют экдистероидсодержащие рас-

тения. К перспективным экдистероидсодержа-щим растениям на территории Бурятии относится серпуха васильковая БеггаШ1а centauroides Ь.

Целью работы является определение микроэлементного состава надземной части и подземных органов серпухи васильковой (БеггаШ1а centauroides Ь., сем. Л81егаееае).

Методы и материалы

Определение минерального состава проводили на спектрографе ДФС-8 с плоской дифракционной решеткой методом эмиссионного спектрального анализа.

Объектом изучения служили надземная часть и подземные органы серпухи васильковой. В качестве образцов взяты зола общая надземной части и подземных органов серпухи васильковой.

Золу общую получали по методики ГФ XI [1]. Результаты анализа минерального состава надземной части и подземных органов серпухи васильковой представлены в табл. 1.