ПОДАВЛЕНИЕ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ У НАСЕКОМЫХ-ВРЕДИТЕЛЕЙ
INHIBITING GENE EXPRESSION IN INSECT PESTS

Область изобретения
Настоящее изобретение относится в целом к генетическому контролю нападения видов насекомых-вредителей, в частности, предотвращению и/или борьбе с нападением вредителей на растения. Более конкретно, настоящее изобретение относится к подавлению экспрессии генов-мишеней у видов насекомых-вредителей с помощью интерферирующих молекул рибонуклеиновой кислоты (РНК). Также предлагаются композиции и комбинации, содержащие интерферирующие молекулы РНК по настоящему изобретению для использования в местных применениях, например, в форме инсектицидов.
Предпосылки изобретения
Hemiptera
, Coleoptera
, Siphonaptera
, Dichyoptera
Lepidoptera
Orthoptera
Diptera
Существует множество видов насекомых-вредителей, которые могут поражать или нападать на большое множество местообитаний и организмов-хозяев. Насекомые-вредители включают разнообразные виды из отрядов насекомых (клопы) (жуки) (блохи)(тараканы и богомолы),  (моли и бабочки),  (например, кузнечики) и  (настоящие мухи). Нападение вредителей может приводить к значительному ущербу. Насекомые-вредители, которые нападают на виды растений, вызывают особые проблемы в сельском хозяйстве, поскольку они могут приводить к серьезному повреждению сельскохозяйственных культур и значительно снижать урожайность растений. Большое разнообразие различных типов растений, включая товарные культуры, такие как рис, хлопчатник, соя, картофель и кукуруза, чувствительны к нападению вредителей.
Bacillus thuringiensis
Традиционно, нападение насекомых-вредителей предотвращают или контролируют посредством применения химических пестицидов. Однако данные химические вещества не всегда пригодны для применения в обработке сельскохозяйственных культур, так как они могут являться токсичными для других видов и могут наносить значительный ущерб окружающей среде. За последние десятилетия исследователи разработали более экологически безопасные способы контроля нападения вредителей. Например, применялись микроорганизмы, такие как бактерии , которые в естественных условиях экспрессируют белки, токсичные для насекомых-вредителей. Ученые также выделили гены, кодирующие эти инсектицидные белки, и использовали их для создания трансгенных культур, устойчивых к насекомым-вредителям, например, растения кукурузы и хлопчатника, генетически сконструированные для продуцирования белков семейства Cry.
Хотя бактериальные токсины являлись весьма успешными в борьбе с определенными типами вредителей, они не эффективны против всех видов вредителей. Исследователи, следовательно, искали другие, более целенаправленные подходы к борьбе с вредителями и, в частности, к РНК-интерференции или “сайленсингу генов” в качестве средств для борьбы с вредителями на генетическом уровне.
РНК-интерференция или ʺRNAiʺ является процессом, посредством которого экспрессия генов в отношении клетки или всего организма подавляется последовательность-специфическим образом. RNAi является в настоящее время общепризнанным методом в данной области для ингибирования или подавления экспрессии генов у самых разнообразных организмов, включая организмы-вредители, такие как грибы, нематоды и насекомые. Кроме того, предыдущие исследования показали, что подавление экспрессии генов-мишеней у видов насекомых-вредителей можно использовать в качестве средства для борьбы с нападением вредителей.
Lygus
WO2007/074405 описывает способы ингибирования экспрессии генов-мишеней у беспозвоночных вредителей, включая колорадского жука. Кроме того, WO2009/091864 описывает композиции и способы подавления генов-мишеней у видов насекомых-вредителей, включая вредителей из рода .
Хотя применение RNAi для подавления экспрессии генов у видов вредителей в данной области известно, успех данного метода в применении в качестве меры борьбы с вредителями зависит от выбора наиболее подходящих генов-мишеней, а именно тех, у которых потеря функции приводит к значительному нарушению жизненно важного биологического процесса и/или гибели организма. Настоящее изобретение, таким образом, направлено на подавление конкретных генов-мишеней у насекомых-вредителей в качестве средства достижения более эффективного предотвращения и/или борьбы с нападением насекомых-вредителей, в частности на растения.
Краткое описание изобретения
Авторы настоящего изобретения пытались идентифицировать улучшенные средства для предотвращения и/или борьбы с нападением насекомых-вредителей с применением генетических подходов. В частности, они исследовали применение RNAi для подавления генов таким образом, чтобы снизить способность насекомых-вредителей выживать, расти, колонизировать специфические местообитания и/или нападать на организмы-хозяева, и таким образом ограничить ущерб, наносимый вредителем.
Таким образом, в соответствии с одним аспектом настоящего изобретения предлагается интерферирующая рибонуклеиновая кислота (РНК или двухцепочечная РНК), которая функционирует при поглощении видами насекомых-вредителей с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя,
при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, при этом сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень
(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или
(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарную ей последовательность, или
(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или имеющую такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59 -62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или
(iv) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, таким образом, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной соответствующему указанному фрагменту любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или
(v) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43- 46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389, или
(vi) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 70%, предпочтительно по меньшей мере на 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389.
В конкретном аспекте настоящего изобретения молекулы интерферирующей РНК по настоящему изобретению содержат по меньшей мере одну двухцепочечную область, как правило, сайленсирующий элемент интерферирующей РНК, содержащий смысловую цепь РНК, соединенную путем комплементарного спаривания оснований с антисмысловой цепью РНК, где смысловая цепь молекулы dsRNA содержит последовательность нуклеотидов, комплементарную последовательности нуклеотидов, расположенной в пределах РНК-транскрипта гена-мишени.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК или двухцепочечной РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень
(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или
(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или
(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или
(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 75% предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, или
(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233.
Эти гены-мишени кодируют белки, входящие в состав комплекса тропонин/миофиламент.
В дополнительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК или двухцепочечной РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень
(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или
(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или
(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности или
(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 75% предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, или
(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273.
Эти гены-мишени кодируют рибосомальные белки насекомых.
В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей РНК, которая содержит по меньшей мере одну двухцепочечную область, как правило, сайленсирующий элемент молекулы интерферирующей РНК, содержащий смысловую цепь РНК, соединенную путем комплементарного спаривания оснований с антисмысловой цепью РНК, где смысловая цепь молекулы dsRNA содержит последовательность по меньшей мере из 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или 100% комплементарной последовательности нуклеотидов, расположенной в пределах РНК-транскрипта гена-мишени из комплекса тропонин/миофиламент.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок wings up A (тропонин I) насекомых (например, у насекомых ортолог белка CG7178 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 1, 2, 174, 404, 175, 180, 181, 188 и 189. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или несколькими из SEQ ID NO 79, 349, 405, 352 или 356.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок upheld (например, у насекомых ортолог белка CG7107 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 121, 130, 142, 143, 176, 177, 182 и 183. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или несколькими из SEQ ID NO 330, 350 или 353.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок тропомиозин 1 (например, у насекомых ортолог белка CG4898 Dm) или белок тропомиозин 2 (например, у насекомых ортолог белка CG4843 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 123 и 132. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 332.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует тяжелую цепь миозина (например, у насекомых ортолог белка CG17927 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 122, 131, 144, 145, 178 и 179. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или несколькими из SEQ ID NO 331 или 351.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует цитоплазматический белок легкой цепи миозина (например, у насекомых ортолог белка CG3201 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 124 и 133. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 333.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок spaghetti squash (например, у насекомых ортолог белка CG3595 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 125 и 134. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO 334.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок zipper (например, у насекомых ортолог белка CG15792 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 126 и 135. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO 335.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует тропонин C (например, у насекомых ортолог белка CG2981, CG7930, CG9073, CG6514, CG12408, CG9073, CG7930, CG2981, CG12408 или CG6514 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 127 и 136, или 128 и 137, или 184 и 185. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или несколькими из SEQ ID NO 336, 337 и 354.
Согласно другому варианту осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей РНК, которая содержит по меньшей мере одну двухцепочечную область, как правило, сайленсирующий элемент молекулы интерферирующей РНК, содержащий смысловую цепь РНК, соединенную путем комплементарного спаривания оснований с антисмысловой цепью РНК, где смысловая цепь молекулы dsRNA содержит последовательность по меньшей мере из 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или 100% комплементарной последовательности нуклеотидов, расположенной в пределах РНК-транскрипта гена-мишени, который кодирует рибосомный белок насекомых.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S3A (например, у насекомых ортолог белка CG2168 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 11, 12 и 141. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или обеими из SEQ ID NO 84 или 328.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок LP1 (например, у насекомых ортолог белка CG4087 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен посредством SEQ ID NO 3 и 4. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 80.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S3 (например, у насекомых ортолог белка CG6779 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 7 и 8. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 82.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L10Ab (например, у насекомых ортолог белка CG7283 Dm), представленный с помощью SEQ ID NO 9 и 10. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 83.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S18 (например, у насекомых ортолог белка CG8900 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 13 и 14. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 85.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L4 (например, у насекомых ортолог белка CG5502 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 5 и 6. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 81.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S27 (например, у насекомых ортолог белка CG10423 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 15 и 16, 204 и 205. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или обеими из SEQ ID NO 86 и 359.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L6 (например, у насекомых ортолог белка CG11522 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 17 и 18. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 87.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S13 (например, у насекомых ортолог белка CG13389 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 19 и 20. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 88.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L12 (например, у насекомых ортолог белка CG3195 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 21 и 22. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 89.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L26 (например, у насекомых ортолог белка CG6846 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 158 и 159. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 343.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L21 (например, у насекомых ортолог белка CG12775 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 165, 166 и 167. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 347 и 348.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S12 (например, у насекомых ортолог белка CG11271 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 156 и 157. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 342.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S28b (например, у насекомых ортолог белка CG2998 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 160 и 161. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 344.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L13 (например, у насекомых ортолог белка CG4651 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 154 и 155. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 341.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L10 (например, у насекомых ортолог белка CG17521 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 163 и 164. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 345.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L5 (например, у насекомых ортолог белка CG17489 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 152 и 153. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 340.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S15Aa (например, у насекомых ортолог белка CG2033 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 150 и 151. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 339.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L19 (например, у насекомых ортолог белка CG2746 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 200 и 201. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 357.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L27 (например, у насекомых ортолог белка CG4759 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 386. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 390.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок субъединицы II митохондриальной цитохром с-оксидазы (например, у насекомых ортолог белка CG34069 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 25 и 26. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 91.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует γ-цепь АТФ-синтазы (например, у насекомых ортолог белка CG7610 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 129 и 138. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 338.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует убиквитин-5E (например, у насекомых ортолог белка CG32744 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 186 и 187, 202 и 203. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или обеими из SEQ ID NO 355 и 358.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует протеасомную субъединицу бета-типа (например, у насекомых ортолог белка CG17331 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 387. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 391.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок, который у насекомых является ортологом белка CG13704 Dm, при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 388. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 392.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок Rpn12 (например, у насекомых ортолог белка CG4157 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 389. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 393.
В соответствии со вторым аспектом настоящего изобретения предусматривается композиция для предотвращения и/или борьбы с нападением насекомых-вредителей, содержащая по меньшей мере одну интерферирующую рибонуклеиновую кислоту (РНК) и по меньшей мере один подходящий носитель, наполнитель или разбавитель, причем интерферирующая РНК функционирует при поглощении насекомым с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного вредителя,
при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, при этом сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень
(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарную ей последовательность, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей по меньшей мере на 75% идентична любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или
(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или имеющую такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59 -62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или
(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, таким образом, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75% идентичной любому соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или
(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 75% идентична любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389, или
(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389.
Композицию по настоящему изобретению можно применять для предотвращения и/или борьбы с нападением вредителя. В некоторых вариантах осуществления композицию можно применять в качестве пестицида для растения или для материала для размножения или репродуктивного материала растения. В дополнительном аспекте предусматривается комбинация для предотвращения и/или борьбы с нападением насекомых-вредителей, содержащая композицию по настоящему изобретению и по меньшей мере одно активное средство.
В дополнительном аспекте в данном документе предусматривается способ подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя с целью предотвращения и/или борьбы с нападением вредителей, включающий приведение в контакт указанного вида вредителя с эффективным количеством по меньшей мере одной интерферирующей рибонуклеиновой кислоты (РНК), причем интерферирующая РНК функционирует при поглощении вредителем с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень
(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарную ей последовательность, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или
(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность являлась бы по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или
(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, таким образом, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274 -277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась бы по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или
(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена являются подобными в последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389, или
(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предусматривается выделенный полинуклеотид, выбранный из группы, состоящей из:
(i) полинуклеотида, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, которая представлена любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательностью, или
(ii) полинуклеотид, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, представленной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательностью, или
(iii) полинуклеотида, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, которая представлена в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, таким образом, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей указанный полинуклеотид являлся по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичным любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или
(iv) полинуклеотида, который содержит фрагмент по меньшей мере из 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотида, представленного в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, и при этом указанный фрагмент или указанная комплементарная последовательность обладают такой нуклеотидной последовательностью, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или
(v) полинуклеотида, который содержит фрагмент по меньшей мере из 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотида, представленного в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, и при этом указанный фрагмент или указанная комплементарная последовательность обладают такой нуклеотидной последовательностью, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или
(vi) полинуклеотида, кодирующего аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 70%, предпочтительно по меньшей мере на 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389, и
при этом указанный полинуклеотид составляет не более 10000, 9000, 8000, 7000, 6000, 5000, 4000, 3000, 2000 или 1500 нуклеотидов в длину.
Аминокислотные последовательности, кодируемые генами-мишенями по настоящему изобретению, представлены SEQ ID NO 79, 349, 405, 352, 356, 80, 326, 81, 327, 82, 83, 328, 84, 329, 85, 86, 359, 87-91, 330, 350, 353, 331, 351, 332-336, 337, 354, 338-344, 346, 345, 347, 348, 357, 355, 358, 390-393, соответственно.
В конкретном аспекте по настоящему изобретению выделенный полинуклеотид является частью молекулы интерферирующей РНК, как правило, частью сайленсирующего элемента, содержащего по меньшей мере одну двухцепочечную область, содержащую смысловую цепь РНК, соединенную путем комплементарного спаривания оснований с антисмысловой цепью РНК, где смысловая цепь молекулы dsRNA содержит последовательность нуклеотидов, комплементарную последовательности нуклеотидов, расположенной в пределах РНК-транскрипта гена-мишени. Более конкретно, выделенный полинуклеотид клонирован в ДНК-конструкцию в смысловой и антисмысловой ориентации так, что при транскрипции смыслового и антисмыслового полинуклеотида формируется молекула dsRNA, которая функционирует при поглощении вредителем с ингибированием или подавлением экспрессии гена-мишени в указанном вредителе.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к выделенному полинуклеотиду, который клонирован в ДНК-конструкцию в смысловой и антисмысловой ориентации так, что при транскрипции смыслового и антисмыслового полинуклеотида формируется молекула dsRNA, которая функционирует при поглощении насекомым с ингибированием или подавлением экспрессии гена-мишени в пределах комплекса тропонин/миофиламент.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок wings up A (тропонин I) насекомых (например, у насекомых ортолог белка CG7178 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 1, 2, 174, 404, 175, 180, 181, 188 и 189. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или несколькими из SEQ ID NO 79, 349, 405, 352 или 356.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок upheld (например, у насекомых ортолог белка CG7107 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 121, 130, 142, 143, 176, 177, 182 и 183. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или несколькими из SEQ ID NO 330, 350 или 353.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок тропомиозин 1 (например, у насекомых ортолог белка CG4898 Dm) или белок тропомиозин 2 (например, у насекомых ортолог белка CG4843 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 123 и 132. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 332.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует тяжелую цепь миозина (например, у насекомых ортолог белка CG17927 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 122, 131, 144, 145, 178 и 179. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или несколькими из SEQ ID NO 331 или 351.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует цитоплазматический белок легкой цепи миозина (например, у насекомых ортолог белка CG3201 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 124 и 133. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 333.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок spaghetti squash (например, у насекомых ортолог белка CG3595 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 125 и 134. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 334.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок zipper (например, у насекомых ортолог белка CG15792 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 126 и 135. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности с SEQ ID NO 335.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует тропонин C (например, у насекомых ортолог белка CG2981, CG7930, CG9073, CG6514, CG12408, CG9073, CG7930, CG2981, CG12408 или CG6514 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 127 и 136, или 128 и 137, или 184 и 185. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или несколькими из SEQ ID NO 336, 337 и 354.
В соответствии с другими вариантами осуществления настоящее изобретение относится к выделенному полинуклеотиду, который клонирован в ДНК-конструкцию в смысловой и антисмысловой ориентации так, что при транскрипции смыслового и антисмыслового полинуклеотида формируется молекула dsRNA, которая функционирует при поглощении насекомым с ингибированием или подавлением экспрессии гена-мишени, который кодирует рибосомный белок насекомых.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S3A (например, у насекомых ортолог белка CG2168 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 11, 12 и 141. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или обеими из SEQ ID NO 84 или 328.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок LP1 (например, у насекомых ортолог белка CG4087 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 3 и 4. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 80.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S3 (например, у насекомых ортолог белка CG6779 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 7 и 8. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 82.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L10Ab (например, у насекомых ортолог белка CG7283 Dm), представленный с помощью SEQ ID NO 9 и 10. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 83.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S18 (например, у насекомых ортолог белка CG8900 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 13 и 14. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 85.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L4 (например, у насекомых ортолог белка CG5502 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 5 и 6. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 81.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S27 (например, у насекомых ортолог белка CG10423 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 15 и 16, 204 и 205. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с одной или обеими из SEQ ID NO 86 и 359.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L6 (например, у насекомых ортолог белка CG11522 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 17 и 18. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 87.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S13 (например, у насекомых ортолог белка CG13389 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 19 и 20. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 88.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L12 (например, у насекомых ортолог белка CG3195 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 21 и 22. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 89.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L26 (например, у насекомых ортолог белка CG6846 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 158 и 159. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 343.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L21 (например, у насекомых ортолог белка CG12775 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 165, 166 и 167. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 347 и 348.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S12 (например, у насекомых ортолог белка CG11271 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 156 и 157. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 342.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S28b (например, у насекомых ортолог белка CG2998 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 160 и 161. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 344.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L13 (например, у насекомых ортолог белка CG4651 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 154 и 155. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 341.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L10 (например, у насекомых ортолог белка CG17521 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 163 и 164. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 345.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L5 (например, у насекомых ортолог белка CG17489 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 152 и 153. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 340.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок S15Aa (например, у насекомых ортолог белка CG2033 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 150 и 151. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 339.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L19 (например, у насекомых ортолог белка CG2746 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 200 и 201. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 357.
В одном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок L27 (например, у насекомых ортолог белка CG4759 Dm), при этом указанный ген-мишень представлен с помощью SEQ ID NO 386. В предпочтительном варианте осуществления ортолог у насекомого обладает по меньшей мере 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% или 100% идентичности аминокислотной последовательности с SEQ ID NO 390.
Предпочтительно способы по настоящему изобретению находят практическое применение в предотвращении и/или борьбе с нападением насекомых-вредителей, в частности, борьбе с нападением вредителей сельскохозяйственных культур, таких как, но без ограничений, хлопчатник, картофель, рис, клубника, люцерна, соя, томат, канола, подсолнечник, сорго, просо, кукуруза, баклажан, перец и табак. В дополнение, интерферирующую РНК по настоящему изобретению можно вводить в растения, подлежащие защите, с помощью обычных методов генной инженерии.
Во всех аспектах настоящего изобретения в предпочтительных вариантах осуществления ген-мишень
(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарную ей последовательность, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или
(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или
(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или
(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 75% предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, или
(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233.
Эти гены-мишени кодируют белки, входящие в состав комплекса тропонин/миофиламент.
Во всех аспектах настоящего изобретения в предпочтительных вариантах осуществления ген-мишень
(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или
(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266 -269, 165, 167, 166, 270-273 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или
(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или
(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 75% предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, или
(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273.
Эти гены-мишени кодируют рибосомальные белки насекомых.
Во всех аспектах настоящего изобретения в предпочтительных вариантах осуществления ген-мишень (i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарную ей последовательность, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарной ей последовательности, или
(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарной ей последовательности, или
(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарной ей последовательности, или
(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, или
(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313.
Краткое описание таблиц и фигур
Таблица 1
Lygus
hesperus
Новые мишени , идентифицированные из первого анализа.
Таблица 1B
Lygus hesperus
Новые мишени  в пути Lh594.
Таблица 1C
Lygus hesperus
Новые мишени , идентифицированные из второго цикла анализа.
Таблица 2
Lygus hesperus.
Полинуклеотидные последовательности генов-мишеней, идентифицированные у
Таблица 3
Lygus hesperus.
Аминокислотные последовательности генов-мишеней, идентифицированные у
Таблица 4
Lygus hesperus
dsRNA (смысловая цепь, представленная эквивалентной последовательностью ДНК), соответствующие генам-мишеням  и праймерам для продуцирования dsRNA.
Таблица 5
Lygus hesperus
Ранжирование мишеней в соответствии с кривыми дозовой зависимости (DRC) и по сравнению с исходными мишенями Lh423 и Lh105.
Таблица 6
Lygus
hesperus
Мишени из второго цикла анализа-ранжирования в соответствии с DRC и по сравнению с исходными мишенями Lh423 и Lh594.
Таблица 7
Полинуклеотидные последовательности генов-мишеней, идентифицированные у колорадского жука (CPB).
Таблица 8
Аминокислотные последовательности генов-мишеней, идентифицированные у CPB.
Таблица 9
dsRNA (смысловая цепь, представленная эквивалентной последовательностью ДНК), соответствующие CPB генам-мишеням и праймерам для продуцирования dsRNA.
Таблица 10
Полинуклеотидные последовательности генов-мишеней, идентифицированные у коричневого дельфацида (BPH).
Таблица 11
Аминокислотные последовательности генов-мишеней, идентифицированные у BPH.
Таблица 12
dsRNA (смысловая цепь, представленная эквивалентной последовательностью ДНК), соответствующие BPH генам-мишеням и праймерам для продуцирования dsRNA.
Таблица 13
Праймеры, используемые для амплификации cDNA тлей, на основе геномной последовательности гороховой тли.
Таблица 14
Полинуклеотидные последовательности генов-мишеней, идентифицированные у тлей.
Таблица 15
Аминокислотные последовательности генов-мишеней, идентифицированные у тлей.
Таблица 16
dsRNA (смысловая цепь, представленная эквивалентной последовательностью ДНК), соответствующие генам-мишеням тлей и праймерам для продуцирования dsRNA.
Таблица 17
Вырожденные праймеры, используемые для амплификации CPB Ld594 cDNA.
Таблица 18
Вырожденные праймеры, используемые для амплификации BPH cDNA.
Таблица 19:
Leptinotarsa decemlineata
Новые мишени из данного теста.
Таблица 20:
Nilaparvata lugens
Новые идентифицированные мишени .
Таблица 21:
Acyrthosiphon pisum
Новые идентифицированные мишени .
Фигура 1:
Полоски Lh001_009 второго подтверждающего анализа. Темные полосы: смертность в день 3-6, светлые полосы: смертность в день 6-8. Кандидатные клоны названы с применением “Lygxxx” скрининговых кодов и “Lhxxx” номенклатурных кодов мишеней.
Фигура 2:
Полоски Lh010_020 второго подтверждающего анализа. Темные полосы: смертность в день 3-6, светлые полосы: смертность в день 6-8. Кандидатные клоны названы с применением “Lygxxx” скрининговых кодов и “Lhxxx” номенклатурных кодов мишеней.
Фигура 3:
Lygus
Анализ смертности новых мишеней из полосок Lh001-Lh009, выражен в % смертности за 10-дневный период. Контроли обозначены пунктирными линиями. Положительный контроль: Lh423 dsRNA (RpL19). Отрицательные контроли: GFP dsRNA и только корм (контроль).
Фигура 4:
Lygus
Анализ смертности новых мишеней из полосок Lh010-Lh020, выражен в % смертности за 10-дневный период. Контроли обозначены пунктирными линиями. Положительный контроль: Lh423 (RpL19). Отрицательные контроли: GFP и только корм (контроль).
Фигуры 5-9
Lygus
hesperus-
Новые мишени кривые дозовой зависимости при концентрациях очищенной синтетической dsRNA в диапазоне от 0,4 до 0,025 мкг/мкл (на фигуре единица измерения “мкг/мкл” не отображена). GFP dsRNA и воду milliQ применяли как отрицательные контроли. dsRNA мишеней получали с использованием праймеров, как описано в примерном разделе 1.1.
Фигура 10
Lh594 кривая дозовой зависимости, при концентрациях dsRNA в диапазоне от 0,05 до 0,001 мкг/мкл. GFP dsRNA и воду milliQ применяли как отрицательные контроли.
Фигура 11 A
Lygus hesperus
dsRNA активность в биопробе  в отсутствие tRNA. Lh594 (5 мкг/мкл); положительный контроль: Lh423 (5 мкг/мкл); отрицательные контроли: GFP dsRNA (5 мкг/мкл) и вода milliQ; B Идентификация Lh594 предела активности с использованием уменьшающейся концентрации dsRNA (от 5 мкг до 0,25 мкг). Отрицательные контроли: GFP dsRNA (5 мкг/мкл) и вода milliQ.
Фигура 12
Полоски Lh010-Lh020 второго подтверждающего анализа мишеней второго теста. Темные полосы: смертность в день 4-8, светлые полосы: смертность в день 4-6. Кандидатные клоны названы с применением “Lygxxx” скрининговых кодов и “Lhxxx” номенклатурных кодов мишеней.
Фигура 13
Lygus
Результаты анализа для мишеней  пути тропонина, тестированных при 0,5 мкг/мкл фиксировано.
Фигура 14
A-B
Lygus hesperus
Новые мишенииз пути тропонина-кривые дозовой зависимости при концентрациях очищенной синтетической dsRNA в диапазоне от 0,4 до 0,025 мкг/мкл (на фигуре единица измерения “мкг/мкл” не всегда отображена). GFP dsRNA и воду milliQ применяли как отрицательные контроли.
Фигура 15
A-D
Lygus hesperus
Новые мишенииз мишеней второго теста - кривые дозовой зависимости при концентрациях очищенной синтетической dsRNA в диапазоне от 0,5 до 0,05 мкг/мкл. GFP dsRNA и воду milliQ применяли как отрицательные контроли.
Фигура 16
Анализ выживаемости личинок CPB, обработанных с помощью 1 мкг dsRNA Ld594, Ld619 и Ld620. Положительные контроли включали 1 мкг dsRNA исходных мишеней Ld513 и Ld049. Отрицательные контроли включали воду milliQ и FP.
Фигура 17
-й
Эффекты Ld594, Ld619 и Ld620 dsRNA на окукливание CPB 4 возрастной стадии личинок по сравнению с необработанным контролем (UTC). Жукам скармливали 1 мкг dsRNA, распределенной на листовых дисках картофеля, затем предоставляли возможность питаться на необработанных листьях картофеля (A) в течение 4 дней перед помещением на вермикулит. Для оценки эффекта dsRNA мертвых насекомых извлекали из вермикулита (из-за сильных эффектов, индуцированных с помощью Ld594 dsRNA, ни одну куколку невозможно восстановить из вермикулита и, следовательно, никакое изображение не доступно для данной dsRNA-мишени) (B).
Фигура 18
Эффект CPB Ld594, 619 и 620 dsRNA на выживаемость и приспособляемость имаго CPB. Оценки проводили в дни 4, 6, 7, 8, 11 и 13. Контроль MQ: вода milliQ.
Фигура 19
Активность dsRNA из Nl594 пути у коричневого дельфацида. DsRNA тестировали при 0,5 мкг/мкл в присутствии 0,1% CHAPSO. Положительный контроль: Nl537 dsRNA (0,5 мкг/мкл), отрицательные контроли: GFP dsRNA (0,5 мкг/мкл) и только корм.
Фигура 20
A. pisum
Активность dsRNA из Ap594, Ap423, Ap537 и Ap560 на . DsRNA тестировали при 0,5 мкг/мкл в присутствии 5 мкг/мкл tRNA. Отрицательный контроль: GFP dsRNA (0,5 мкг/мкл).
Фигура 21
личинок L. decemlineata
Проценты смертности  на искусственном корме, обработанном с помощью dsRNA. Ld583, Ld584, Ld586 и Ld588 представляют клоны-мишени. Положительный контроль: Ld513; отрицательный контроль: FP.
Подробное описание настоящего изобретения
Авторы настоящего изобретения обнаружили, что подавление экспрессии конкретных генов-мишеней у видов насекомых-вредителей с помощью RNAi можно применять для эффективного предотвращения и/или борьбы с нападением указанного насекомого-вредителя.
Применяемый в данном документе термин “борьба” с нападением вредителей относится к любому воздействию на вредителя, которое служит для ограничения и/или уменьшения количества организмов вредителей и/или повреждения, вызываемого вредителем. Предпочтительные гены-мишени являются, следовательно, жизненно важными генами, которые контролируют или регулируют одну или более жизненно важные биологические функции у насекомых-вредителей, например, деление клеток, размножение, энергетический обмен, пищеварение, неврологическая функция и тому подобное. Подавление данных жизненно важных генов с помощью RNAi методов может вести к гибели насекомого или иным образом значительно замедлять рост и развитие, или нарушать способность вредителей колонизировать местообитание или нападать на организмы-хозяева.
Lygus, Leptinotarsa, Nilaparvata
Acyrthosiphum
Авторы настоящего изобретения в настоящее время идентифицировали лучшие гены-мишени видов насекомых-вредителей, принадлежащих к и родам, чьи мишени предусматриваются для применения в отдельности или в комбинации в качестве эффективных средств для RNAi-опосредованной борьбы с нападением насекомых на, например, агрономически важные культуры. Ортологи этих недавно идентифицированных генов-мишеней можно использовать у других видов насекомых для борьбы с нападением насекомых на соответствующие значимые культуры.
Более конкретно, авторы настоящего изобретения описывают в данном документе, что гены, кодирующие белки комплекса тропонин/миофиламент, образуют отличные гены-мишени для подавления с помощью методики РНК-ингибирования. Один из данных генов-мишеней кодировал белок тропонин I (wings up A) насекомых, который является ортологом белка CG7178 дрозофилы. Данный белок участвует в мышечных сокращениях и принадлежит к физиологическому пути, который еще не полностью исследован для борьбы с (насекомыми) вредителями посредством РНК-ингибирования. Кроме того, поскольку данный белковый комплекс является специфичным для животных, не известен ни один гомолог или ортолог генов растений, что снижает риск нетипичных фенотипов растений при экспрессии dsRNA-мишени в растениях. В дополнение, у дрозофилы тропонин I описывается как гаплонедостаточный ген, проявляющий мутантный фенотип в гетерозиготном состоянии. Такие гены особенно восприимчивы к снижению уровней экспрессии mRNA и как таковые могут считаться идеальными мишенями RNAi.
Дополнительные вызывающие интерес гены-мишени в данном комплексе тропонин/миофиламент перечислены ниже.
ID аннотации
Цитология
Dm идентификатор
up
upheld
CG7107
Tm1
тропомиозин 1
CG4898
Tm2
тропомиозин 2
CG4843
Mhc
тяжелая цепь миозина
CG17927
Mlc-c
цитоплазматическая легкая цепь миозина
CG3201
sqh
spaghetti squash
CG3595
zip
zipper
CG15792
Таким образом, в соответствии с одним вариантом осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень
(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарную ей последовательность, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или
(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или
(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарной ей последовательности, или
(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 75% предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, или
(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233.
В предпочтительном варианте осуществления ген-мишень кодирует белок насекомых, выбранный из комплекса тропонин/миофиламент, выбранный из группы, включающей тропонин I (например, у насекомых ортолог белка CG7178 Dm), белок upheld (например, у насекомых ортолог белка CG7107 Dm), белок тропомиозин 1 (например, у насекомых ортолог белка CG4898 Dm), белок тропомиозин 2 (например, у насекомых ортолог белка CG4843 Dm), тяжелую цепь миозина (например, у насекомых ортолог белка CG17927 Dm), цитоплазматический белок легкой цепи миозина (например, у насекомых ортолог белка CG3201 Dm), белок spaghetti squash (например, у насекомых ортолог белка CG3595 Dm), белок zipper (например, у насекомых ортолог белка CG15792 Dm), тропонин C (например, у насекомых ортолог белка CG2981, CG7930, CG9073, CG6514, CG12408, CG9073, CG7930, CG2981, CG12408 или CG6514 Dm).
В других вариантах осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень
(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или
(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или
(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, или
(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 75% предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, или
(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273.
В предпочтительном варианте осуществления ген-мишень кодирует рибосомный белок насекомых, выбранный из группы, содержащей рибосомный белок S3A (например, у насекомых ортолог белка CG2168 Dm), рибосомный белок LP1 (например, у насекомых ортолог белка CG4087 Dm), рибосомный белок S3 (например, у насекомых ортолог белка CG6779 Dm), рибосомный белок L10Ab (например, у насекомых ортолог белка CG7283 Dm), рибосомный белок S18 (например, у насекомых ортолог белка CG8900 Dm), рибосомный белок L4 (например, у насекомых ортолог белка CG5502 Dm), рибосомный белок S27 (например, у насекомых ортолог белка CG10423 Dm), рибосомный белок L6 (например, у насекомых ортолог белка CG11522 Dm), рибосомный белок S13 (например, у насекомых ортолог белка CG13389 Dm), и рибосомный белок L12 (например, у насекомых ортолог белка CG3195 Dm), рибосомный белок L26 (например, у насекомых ортолог белка CG6846 Dm), рибосомный белок L21 (например, у насекомых ортолог белка CG12775 Dm), рибосомный белок S12 (например, у насекомых ортолог белка CG11271 Dm), рибосомный белок S28b (например, у насекомых ортолог белка CG2998 Dm), рибосомный белок L13 (например, у насекомых ортолог белка CG4651 Dm), рибосомный белок L10 (например, у насекомых ортолог белка CG17521 Dm), рибосомный белок L5 (например, у насекомых ортолог белка CG17489 Dm), рибосомный белок S15Aa (например, у насекомых ортолог белка CG2033 Dm), рибосомный белок L19 (например, у насекомых ортолог белка CG2746 Dm), рибосомный белок L27 (например, у насекомых ортолог белка CG4759 Dm).
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень
(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарную ей последовательность, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарной ей последовательности, или
(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарной ей последовательности, или
(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарной ей последовательности, или
(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, или
(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень
(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 141, 11, 12 или комплементарную ей последовательность, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 141, 11, 12 или комплементарной ей последовательности, или
(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 141, 11, 12 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 141, 11, 12 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 141, 11, 12 или комплементарной ей последовательности, или
(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 141, 11, 12 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 141, 11, 12 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 141, 11, 12 или комплементарной ей последовательности, или
(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 141, 11, 12 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 141, 11, 12, или
(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 141, 11, 12.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень
(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 17, 18 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 17, 18 или комплементарной ей последовательности, или
(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 17, 18 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 17, 18 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 17, 18 или комплементарной ей последовательности, или
(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 17, 18 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 17, 18 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 17, 18 или комплементарной ей последовательности, или
(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 17, 18 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 17, 18, или
(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 17, 18.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень
(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 19, 20 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 19, 20 или комплементарной ей последовательности, или
(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 19, 20 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 19, 20 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 19, 20 или комплементарной ей последовательности, или
(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 19, 20 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 19, 20 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 19, 20 или комплементарной ей последовательности, или
(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 19, 20 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 19, 20, или
(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 19, 20.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень
(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 165, 166, 167 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 165, 166, 167 или комплементарной ей последовательности, или
(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 165, 166, 167 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 165, 166, 167 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 165, 166, 167 или комплементарной ей последовательности, или
(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 165, 166, 167 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 17, 18 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 165, 165, 167 или комплементарной ей последовательности, или
(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 165, 166, 167 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 165, 166, 167, или
(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 165, 166, 167.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень
(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183 или комплементарной ей последовательности, или
(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183 или комплементарной ей последовательности, или
(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183 или комплементарной ей последовательности, или
(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, или
(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень
(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179 или комплементарной ей последовательности, или
(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179 или комплементарной ей последовательности, или
(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179 или комплементарной ей последовательности, или
(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179, или
(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179.
В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя, при этом РНК содержит по меньшей мере один сайленсирующий элемент, причем сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и при этом ген-мишень
(i) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137 или комплементарной ей последовательности, или
(ii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137 или комплементарной ей последовательности, или
(iii) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 21 последовательного нуклеотида из любой из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137 или комплементарной ей последовательности, и при этом при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137 или комплементарной ей последовательности, или
(iv) у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137 или комплементарную ей последовательность, где два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 128, 149, 184, 137, или
(v) выбран из группы генов, имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 85%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137.
В еще одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к интерферирующей рибонуклеиновой кислоте (РНК или двухцепочечной РНК), которая подавляет экспрессию гена-мишени, кодирующего белок субъединицы II митохондриальной цитохром с-оксидазы (например, у насекомых ортолог белка CG34069 Dm).
Таким образом, в одном аспекте настоящее изобретение предлагает интерферирующую рибонуклеиновую кислоту (РНК), которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного насекомого-вредителя.
Применяемый в данном документе термин “ген-мишень” включает любой ген у насекомого-вредителя, который предполагается подавить. В предпочтительном варианте осуществления ген-мишень подавляется так, чтобы бороться с нападением вредителя, например, путем нарушения жизненно важного биологического процесса, происходящего у вредителя, или путем уменьшения патогенности вредителя. Предпочтительные гены-мишени, следовательно, включают, но без ограничений, те, которые играют ключевую роль в регуляции питания, выживания, роста, развития, размножения, нападения и способности вызывать поражение. В соответствии с одним вариантом осуществления ген-мишень является таковым, что при подавлении или ингибировании его экспрессии насекомое-вредитель погибает. В соответствии с другим вариантом осуществления ген-мишень является таковым, что при подавлении или ингибировании его экспрессии рост вредителя предотвращается или замедляется, или останавливается, или задерживается, или затрудняется, размножение вредителя предотвращается, или предотвращается переход через жизненные циклы вредителя. В соответствии еще с другим вариантом осуществления настоящего изобретения ген-мишень является таковым, что при подавлении или ингибировании его экспрессии повреждение, вызванное вредителем и/или способностью вредителя поражать или нападать на местообитания, поверхности и/или растение, или сельскохозяйственную культуру уменьшается; или вредитель прекращает питаться из своих природных пищевых ресурсов, таких как растения и растительные продукты. Термины “нападать” и “поражать” или “нападение” и “поражение”, как правило, используются взаимозаменяемо повсеместно.
Гены-мишени могут экспрессироваться во всех или некоторых клетках насекомых-вредителей. Кроме того, гены-мишени могут экспрессироваться насекомым-вредителем только на определенной стадии его жизненного цикла, например, зрелой стадии имаго, незрелой нимфы или личиночной стадии, или стадии яйца.
Coleoptera, Lepidoptera, Diptera, Dichyoptera, Orthoptera, Hemiptera
Siphonaptera
Применяемые в данном документе виды “вредителей” предпочтительно являются видами насекомых, которые вызывают поражение или нападают, предпочтительно на растения. Виды насекомых могут включать и виды, принадлежащие к отрядам или.
Leptinotarsa
L. decemlineata
L. juncta
L. texana
Leptinotarsa texana
Nilaparvata
N. lugens
коричневый дельфацид
Laodelphax
L. striatellus
Nephotettix
N. virescens,
N. cincticeps
N.nigropictus
Sogatella
S. furcifera
Chilo
C. suppressalis
C. auricilius
Chilo auricilius
C. polychrysus
Sesamia
S. inferens
Tryporyza
T. innotata
Tryporyza innotata
T. incertulas
Anthonomus
A. grandis
Phaedon
P. cochleariae
Epilachna
E. varivetis
Tribolium
T. castaneum
Diabrotica
D. virgifera virgifera
D. barberi
D. undecimpunctata
D. virgifera zeae
Ostrinia
O. nubilalis
Anaphothrips
A. obscrurus
Pectinophora
P. gossypiella
Heliothis
H. virescens
Trialeurodes
T. abutiloneus
Trialeurodes abutiloneus
T. vaporariorum
Bemisia
B. argentifolii
Aphis
A. gossypii
Lygus
L.
lineolaris
Lygus
lineolaris
L.
hesperus
Euschistus
E.
conspersus
Euschistus
conspersus
Chlorochroa
C. sayi
Nezara
N. viridula
Thrips
T. tabaci
Frankliniella
F. fusca
F. occidentalis
Acheta
A. domesticus
Myzus
M. persicae
Macrosiphum
M. euphorbiae
Blissus
B. leucopterus leucopterus
Acrosternum
A. hilare
Acrosternum hilare
Chilotraea
C. polychrysa
Chilotraea polychrysa
Lissorhoptrus
L. oryzophilus
Rhopalosiphum
R. maidis
Anuraphis
A. maidiradicis
Предпочтительными насекомыми, патогенными для растений, в соответствии с настоящим изобретением, являются вредители растений, выбранные из группы, включающей spp. (например,  (колорадский жук),  (ложный картофельный жук), или  (картофельный жук ));  spp. (например,  ());  spp. (например,  (малый коричневый дельфацид));  spp. (например,  или  (зеленая рисовая цикадка), или  (рисовая цикадка));  spp. (или  (белоспинный рисовый дельфацид));  spp. (например,  (огневка азиатская стеблевая),  (огневка ), или  (темноголовая рисовая огневка));  spp. (например,  (розовый сверлильщик));  spp. (например,  (огневка ), или  (желтый рисовый сверлильщик));  spp. (например,  (долгоносик хлопковый));  spp. (например,  (хреновый листоед));  spp. (например,  (зерновка бобовая мексиканская));  spp. (например,  (хрущак каштановый));  spp. (например,  (западный кукурузный жук),  (северный кукурузный жук),  howardi (южный кукурузный жук),  (мексиканский кукурузный корнегрыз);  spp. (например,  (огневка кукурузная));  spp. (например,  (трипс злаковый));  spp. (например,  (розовый коробочный червь хлопчатника));  spp. (например,  (табачная листовертка));  spp. (например,  (белокрылка )  (белокрылка тепличная));  spp. (например,  (белокрылка магнолиевая));  spp. (например,  (тля хлопковая));  spp. (например,  (клоп-слепняк ) или  (слепняк западный матовый));  spp. (например,  (клоп ));  spp. (например,  (клоп Сэя));  spp. (например,  (зеленый овощной клоп));  spp. (например,  (трипс луковый));  spp. (например,  (трипс табачный), или  (западный цветочный трипс));  spp. (например,  (сверчок домовый));  spp. (например,  (тля персиковая зеленая));  spp. (например,  (тля картофельная большая));  spp. (например,  (клоп-черепашка пшеничный североамериканский));  spp. (например,  (клоп-щитник ));  spp. (например,  (огневка ));  spp. (например,  (долгоносик рисовый водяной));  spp. (например,  (тля кукурузная)); и  spp. (например,  (тля кукурузная корневая)).
Leptinotarsa decemlineata
Leptinotarsa juncta
D. undecimpunctata undecimpunctata
D. undecimpunctata howardii
D. longicornis
D. virgifera
D. balteata
В соответствии с более конкретным вариантом осуществления настоящее изобретение применимо к видам, принадлежащим к семейству Chrysomelidae или листоеды. Жуки листоеды, такие как колорадские жуки, блошки, кукурузные корневые жуки, и долгоносики, такие как долгоносик люцерновый, являются особенно важными вредителями. Конкретные виды рода Leptinotarsa, контролируемые в соответствии с настоящим изобретением, включают колорадского жука ( (Say)) и ложного картофельного жука ( (Say)). CPB является (серьезным) вредителем нашего домашнего картофеля, других культурных и диких клубненосных и неклубненосных видов картофеля и других видов растений семейства Solanaceous (пасленовых), включая сельскохозяйственные культуры томатов, баклажанов, перцев, табака (виды рода Nicotiana, включая декоративные), физалиса, риса, кукурузы или хлопчатника; и виды сорняков/травянистых растений, паслен каролинский, черный паслен, дурман обыкновенный, белену и паслен клювообразный. Кукурузные корневые жуки включают виды, основывающие род Diabrotica (например, , , ,  и ). Кукурузные корневые жуки причиняют существенный вред кукурузе и тыквенным.
Myzus persicae
Aphis fabae
Acyrthosiphum pisum
Brevicoryne brassicae
Sitobion avenae
Cavariella aegopodii
Aphis craccivora
Aphis gossypii
Toxoptera aurantii
Cavariella
spp
Chaitophorus
spp
Chaitophorus
Cinara spp.
Cinara
Drepanosiphum platanoides
Elatobium spp
Elatobium
Nilaparvata ssp
N. lugens
Sogatella furcifera
Lygus ssp
Lygus hesperus, Lygus rugulipennis, Lygus lineolaris, Lygus sully
Ulmus spp.
Pinus Pinea
Platanus Acerifolia
Malus alba
Halyomorpha halys)
Euschistus conspersus
Nezara viridula
Pentatoma rufipes
Murgantia histrionica
Oebalus pugnax
В соответствии с более конкретным вариантом осуществления настоящее изобретение применимо к видам, принадлежащим к отряду Hemipterans (семейство Aphidoidea), таким как  (тля персиковая зеленая), (тля свекловичная),  (тля гороховая),  (тля капустная),  (тля большая злаковая),  (тля зонтичная),  (тля арахисовая),  (тля хлопковая),  (тля померанцевая),  (тля тминная),  (тли рода ), (тли рода ),  (тля яворовая),  (тли рода ), которые вызывают повреждение растений, таких как деревья рода сливы, в частности, персик, абрикос и слива; деревьев, которые в основном культивируются для производства древесины, таких как ивы и тополя, пропашных культур, таких как кукуруза, хлопчатник, соя, пшеница и рис, овощных культур из семейств Solanaceae, Chenopodiaceae, Compositae, Cruciferae и Cucurbitaceae, включая, но без ограничений, артишок, спаржу, фасоль, свеклу, брокколи, брюссельскую капусту, кочанную капусту, морковь, цветную капусту, мускусную дыню, сельдерей, кукурузу, огурцы, укроп, капусту кормовую, кольраби, репу, баклажан, салат, горчицу, бамию, петрушку, пастернак, горох, перец, картофель, редис, шпинат, тыкву, томат, репу, кресс водяной и арбуз; или полевых культур, таких как, но без ограничений, табак, сахарная свекла и подсолнечник; цветочных культур или других декоративных растений, таких как сосны и хвойные деревья. Другие Hemipterans относятся к  (например , ) и причиняют вред растениям риса. Другие Hemipterans относятся к  (например, ) и другим видам растительноядных насекомых в семействе Miridae, и причиняют вред хлопчатнику, растениям картофеля, клубнике, хлопчатнику, люцерне, канола, персику, сливам, винограду, латуку, баклажану, луку, зеленым бобам. А также некоторым средиземноморским деревьям и некоторым декоративным деревьям, таким как вяз (), кедровый орех (), платан кленолистный (), яблоня (). Другие Hemipterans относятся к семейству Pentatomoidea, их обычно называют щитники, лесные клопы и клопы-вонючки (например, коричневый мраморный щитник (, клоп-щитник (), зеленый овощной клоп (), щитник красноногий (), клоп капустный (), клоп ()), и они наносят ущерб плодам, включая яблоки, персики, инжир, шелковицу, плодам цитрусовых и хурме, ежевике, и овощам, включая сахарную кукурузу, томаты, соевые бобы, фасоль лимскую и паприку, капусту, цветную капусту, репу, хрен, капусту кормовую, горчицу, брюссельскую капусту, картофель, баклажаны, бамию, бобы, спаржу, свеклу, сорняки, фруктовые деревья и полевые культуры, такие как полевая кукуруза и соевые бобы. Щитники также являются вредителями трав, сорго и риса.
Растение для применения в способах по настоящему изобретению или трансгенное растение в соответствии с настоящим изобретением охватывает любое растение, но предпочтительно является растением, которое является восприимчивым к нападению насекомых, патогенных для растения.
Соответственно, настоящее изобретение распространяется на растения и на способы, описываемые в данном документе, где растение выбирают из следующей группы растений (или сельскохозяйственных культур): люцерна, яблоня, абрикос, артишок, спаржа, авокадо, банан, ячмень, бобы, свекла, ежевика, черника, брокколи, брюссельская капуста, капуста, канола, морковь, маниок, цветная капуста, зерновые, сельдерей, вишня, цитрусы, клементины, кофе, кукуруза, хлопчатник, огурцы, баклажаны, эндивий, эвкалипт, инжир, виноград, грейпфрут, арахис, физалис, киви, латук, лук-порей, лимон, лайм, сосна, кукуруза, манго, дыня, просо, грибы, орехи, овес, бамия, лук, апельсин, декоративное растение или цветок, или дерево, папайя, петрушка, горох, персики, арахис, торфяной мох, перец, хурма, ананас, подорожник, слива, гранат, картофель, тыква, красный эндивий, редис, рапсовое семя, малина, рис, рожь, сорго, соя, соевые бобы, шпинат, клубника, сахарная свекла, сахарный тростник, подсолнечник, сладкий картофель, мандарин, чай, табак, томаты, виноград культурный, арбуз, пшеница, ямс и кабачок.
В конкретных вариантах осуществления настоящее изобретение предусматривает гены-мишени, которые кодируют белки, участвующие в функции белка wings up A (тропонина I), субъединицы II митохондриальной цитохром с-оксидазы или одного из рибосомных белков, как указано в таблице 1.
В предпочтительных вариантах осуществления настоящее изобретение предусматривает гены-мишени, которые выбраны из группы генов (i) имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарную ей последовательность, или имеющих нуклеотидную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или (ii) имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарную ей последовательность, или (iii) имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент по меньшей мере из 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или имеющих такую нуклеотидную последовательность, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного гена, содержащего указанный фрагмент, с любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или (iv) имеющих нуклеотидную последовательность, содержащую фрагмент из по меньшей мере 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, таким образом, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность указанного фрагмента являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или (v) имеющих нуклеотидную последовательность, кодирующую аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 70%, предпочтительно по меньшей мере на 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389, или (vi) ген которой у насекомого-вредителя является ортологом гена, имеющего нуклеотидную последовательность, содержащую любую из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарную ей последовательность, при этом два ортологических гена сходны по последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов ортолог имеет последовательность, которая по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентична любой из последовательностей, представленных в SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389,
и где нуклеотидная последовательность указанного гена составляет не более 10000, 9000, 8000, 7000, 6000, 5000, 4000, 3000, 2000 или 1500 нуклеотидов в длину.
Аминокислотные последовательности, кодируемые генами-мишенями по настоящему изобретению, представлены SEQ ID NO 79, 349, 405, 352, 356, 80, 326, 81, 327, 82, 83, 328, 84, 329, 85, 86, 359, 87-91, 330, 350, 353, 331, 351, 332-336, 337, 354, 338-344, 346, 345, 347, 348, 357, 355, 358, 390-393.
Применяемый в данном документе термин ʺобладающийʺ имеет такое же значение, как ʺсодержащийʺ.
Применяемый в данном документе термин ʺидентичность последовательностейʺ используется для описания сходства последовательностей между двумя или более нуклеотидными или аминокислотными последовательностями. Процент ʺидентичности последовательностейʺ между двумя последовательностями определяется путем сравнения двух оптимально выровненных последовательностей в окне сравнения (определенное число положений), при этом часть последовательности в окне сравнения может содержать присоединения или делеции (т.е. пробелы) по сравнению с контрольной последовательностью с целью достижения оптимального выравнивания. Процент идентичности последовательностей рассчитывается путем определения числа положений, в которых идентичное нуклеотидное основание или аминокислотный остаток встречается в обеих последовательностях, с получением числа ʺсовпадающихʺ положений, деления числа совпадающих положений на общее число положений в окне сравнения и умножения результата на 100. Способы и программное обеспечение для определения идентичности последовательностей доступны в данной области и включают программное обеспечение Blast и GAP-анализ. Для нуклеиновых кислот процент идентичности рассчитывают предпочтительно с помощью инструмента выравнивания BlastN, посредством чего процент идентичности рассчитывают по всей длине запросной нуклеотидной последовательности.
Специалисту в данной области будет понятно, что гомологи или ортологи (гомологи, существующие у различных видов) генов-мишеней, представленные любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389, могут быть идентифицированы. Данные гомологи и/или ортологи вредителей также находятся в рамках настоящего изобретения. Предпочтительные гомологи и/или ортологи являются генами, подобными в нуклеотидной последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух генов гомолог и/или ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80% или 85%, более предпочтительно по меньшей мере на 90% или 95%, и наиболее предпочтительно по меньшей мере приблизительно 99% идентичной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности. Аналогично, также предпочтительными гомологами и/или ортологами являются белки, которые подобны в аминокислотной последовательности до такой степени, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей гомолог и/или ортолог имеет последовательность, которая является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80% или 85%, более предпочтительно по меньшей мере на 90% или 95%, и наиболее предпочтительно по меньшей мере приблизительно 99% идентичной любой из SEQ ID NO 79, 349, 405, 352, 356, 80, 326, 81, 327, 82, 83, 328, 84, 329, 85, 86, 359, 87-91, 330, 350, 353, 331, 351, 332-336, 337, 354, 338-344, 346, 345, 347, 348, 357, 355, 358, 390-393.
Другие гомологи являются генами, которые являются аллелями гена, содержащего последовательность, которая представлена любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389. Дополнительные предпочтительные гомологи являются генами, содержащими по меньшей мере один однонуклеотидный полиморфизм (SNP) по сравнению с геном, содержащим последовательность, которая представлена любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389.
ʺИнтерферирующая рибонуклеиновая кислота (РНК)ʺ по настоящему изобретению охватывает любой тип молекулы РНК, способной подавлять или подвергать ʺсайленсингуʺ экспрессию гена-мишени, включая, но без ограничений, смысловую РНК, антисмысловую РНК, короткую интерферирующую РНК (siRNA), микроРНК (miRNA), двухцепочечную РНК (dsRNA), шпилечную РНК (RNA) и тому подобное. Способы анализа функциональных молекул интерферирующих РНК хорошо известны в данной области и описаны в данном документе в других местах.
Молекулы интерферирующей РНК по настоящему изобретению обеспечивают последовательность-специфическое подавление экспрессии гена-мишени путем связывания с целевой нуклеотидной последовательностью в пределах гена-мишени. Связывание происходит в результате спаривания оснований между комплементарными областями интерферирующей РНК и целевой нуклеотидной последовательности. Применяемый в данном документе термин ʺсайленсирующий элементʺ относится к части или области интерферирующей РНК, содержащей или состоящей из последовательности нуклеотидов, которая комплементарна или по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и которая функционирует как активная часть интерферирующей РНК с непосредственным подавлением экспрессии указанного гена-мишени. В одном варианте осуществления настоящего изобретения сайленсирующий элемент содержит или состоит из последовательности по меньшей мере из 17 последовательных нуклеотидов, предпочтительно по меньшей мере 18 или 19 последовательных нуклеотидов, более предпочтительно по меньшей мере 21 последовательного нуклеотида, еще более предпочтительно по меньшей мере 22, 23, 24 или 25 последовательных нуклеотидов, комплементарных целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени.
Применяемое в данном документе выражение ʺэкспрессия гена-мишениʺ относится к транскрипции и накоплению РНК-транскрипта, кодируемого геном-мишенью, и/или трансляции mRNA в белок. Термин ʺподавлятьʺ предназначен для обозначения любого из способов, известных в данной области, с помощью которого молекулы интерферирующей РНК снижают уровень первичных транскриптов РНК, mRNA или белка, полученного из гена-мишени. В определенных вариантах осуществления подавление относится к ситуации, когда уровень РНК или белка, полученного из гена, уменьшается по меньшей мере на 10%, предпочтительно по меньшей мере на 33%, более предпочтительно по меньшей мере на 50%, еще более предпочтительно по меньшей мере на 80%. В особенно предпочтительных вариантах осуществления подавление относится к снижению уровня РНК или белка, полученного из гена, по меньшей мере на 80%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, более предпочтительно по меньшей мере на 95% и наиболее предпочтительно по меньшей мере на 99% в клетках насекомого-вредителя по сравнению с соответствующим контрольным насекомым-вредителем, которое, например, не подвергалось воздействию интерферирующей РНК или подвергалось воздействию контрольной молекулы интерферирующей РНК. Способы выявления снижения уровней РНК или белка хорошо известны в данной области и включают гибридизацию РНК в растворе, нозерн гибридизацию, обратную транскрипцию (например, количественный анализ ОТ-ПЦР (RT-PCR)), микроматричный анализ, связывание антител, иммуноферментный твердофазный анализ (ELISA) и вестерн-блоттинг. В другом варианте осуществления настоящего изобретения подавление относится к снижению уровней РНК или белка, достаточному для получения выявляемого изменения фенотипа вредителя, по сравнению с соответствующей мерой борьбы с вредителями, например, гибелью клеток, прекращением роста или тому подобное. Подавление, таким образом, можно измерить с помощью фенотипического анализа насекомого-вредителя с использованием методов, обычных в данной области.
В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения интерферирующая РНК подавляет экспрессию гена с помощью РНК-интерференции или RNAi. RNAi является процессом последовательность-специфической генной регуляции, как правило, опосредованной молекулами двухцепочечной РНК, такими как короткие интерферирующие РНК (siRNA). siRNA содержат смысловую цепь РНК, соединенную путем комплементарного спаривания оснований с антисмысловой цепью РНК. Смысловая цепь или “направляющая цепь” молекулы siRNA содержит последовательность нуклеотидов, комплементарную последовательности нуклеотидов, расположенных в пределах РНК-транскрипта гена-мишени. Смысловая цепь siRNA, следовательно, способна соединяться с РНК-транскриптом посредством спаривания оснований по Уотсон-Крику и направлять РНК на деградацию в пределах клеточного комплекса, известного как индуцируемый RNAi сайленсирующий комплекс или RISC. Таким образом, в отношении предпочтительных молекул интерферирующей РНК по настоящему изобретению сайленсирующий элемент, как изложено в данном документе, может являться двухцепочечной областью, содержащей соединенные комплементарные цепи, из которых по меньшей мере одна цепь содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной или по меньшей мере частично комплементарной целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени. В одном варианте осуществления двухцепочечная область составляет в длину по меньшей мере 21, 22, 23, 24, 25, 30, 35, 40, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 125, 150, 175, 200, 300, 400, 500, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 пар оснований.
in vivo, т.е.
Более длинные двухцепочечные молекулы РНК (dsRNA), содержащие один или более функциональных двухцепочечных сайленсирующих элементов, которые описаны в данном документе в других местах, и способные к сайленсингу генов посредством RNAi, также рассматриваются в рамках настоящего изобретения. Такие более длинные молекулы dsRNA содержат по меньшей мере 80, 200, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 пар оснований. Данные молекулы dsRNA могут служить в качестве предшественников активных молекул siRNA, которые направляют РНК-транскрипт к комплексу RISC для последующей деградации. Молекулы dsRNA, присутствующие в среде, окружающей организм или его клетки, могут поглощаться организмом и перерабатываться ферментом, называемым Dicer, с получением молекул siRNA. Альтернативно, dsRNA может быть получена  транскрибирована из полинуклеотида или полинуклеотидов, кодирующих dsRNA, присутствующих в клетке, например, бактериальной клетке или растительной клетке, и впоследствии обработана с помощью Dicer, либо в пределах клетки-хозяина, либо предпочтительно в пределах клеток насекомого-вредителя после поглощения более длинной dsRNA-предшественника. dsRNA может образовываться из двух отдельных (смысловой и антисмысловой) цепей РНК, которые соединяются посредством комплементарного спаривания оснований. Альтернативно, dsRNA может являться одной цепью, способной складываться назад на себя с образованием шпилечной РНК (РНК) или структуры стебель-петля. В случае РНК, двухцепочечная область или ʺстебельʺ образована из двух областей или сегментов РНК, которые являются существенно инвертированными повторами друг друга и обладают достаточной комплементарностью для обеспечения образования двухцепочечной области. Один или более функциональных двухцепочечных сайленсирующих элементов могут присутствовать в данной ʺобласти стебляʺ молекулы. Области инвертированных повторов, как правило, разделены областью или сегментом РНК, известным как область ʺпетлиʺ. Данная область может содержать любую нуклеотидную последовательность, придающую достаточную гибкость для обеспечения осуществления самоспаривания между фланкирующими комплементарными областями РНК. В общем, область петли является по существу одноцепочечной и действует как разделительный элемент между инвертированными повторами.
Все молекулы интерферирующей РНК по настоящему изобретению обеспечивают последовательность-специфическое подавление экспрессии гена-мишени путем связывания с целевой нуклеотидной последовательностью в пределах гена-мишени. Связывание происходит в результате комплементарного спаривания оснований между сайленсирующим элементом интерферирующей РНК и целевой нуклеотидной последовательностью. Молекулы интерферирующей РНК по настоящему изобретению содержат по меньшей мере один или по меньшей мере два сайленсирующих элемента. В одном варианте осуществления настоящего изобретения целевая нуклеотидная последовательность содержит последовательность нуклеотидов, которая представлена РНК-транскриптом гена-мишени или его фрагментом, при этом фрагмент составляет предпочтительно по меньшей мере 17 нуклеотидов, более предпочтительно по меньшей мере 18, 19 или 20 нуклеотидов, или наиболее предпочтительно по меньшей мере 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 нуклеотидов. В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения целевая нуклеотидная последовательность содержит последовательность нуклеотидов, эквивалентную РНК-транскрипту, кодируемому любым из полинуклеотидов, который выбирают из группы, включающей (i) полинуклеотид, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100 или 1115 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, представленной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательностью, или (ii) полинуклеотид, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, представленной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности,
или (iii) полинуклеотида, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, которая представлена в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательностью, таким образом, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей указанный полинуклеотид являлся по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичным любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или (iv) полинуклеотид, который содержит фрагмент по меньшей мере из 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотида, представленного любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательностью, и при этом указанный фрагмент или указанная комплементарная последовательность обладает нуклеотидной последовательностью, таким образом, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности,
или (v) полинуклеотид, который содержит фрагмент по меньшей мере из 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотида, представленного в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательностью, и при этом указанный фрагмент или указанная комплементарная последовательность обладает нуклеотидной последовательностью, таким образом, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или (vi) полинуклеотид, кодирующий аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 70%, предпочтительно по меньшей мере на 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389. В более предпочтительном варианте осуществления вышеупомянутого указанный полинуклеотид составляет в длину не более чем 10000, 9000, 8000, 7000, 6000, 5000, 4000, 3000, 2000 или 1500 нуклеотидов.
Предпочтительно молекулы интерферирующей РНК по настоящему изобретению содержат по меньшей мере одну двухцепочечную область, как правило, сайленсирующий элемент интерферирующей РНК, содержащий смысловую цепь РНК, соединенную путем комплементарного спаривания оснований с антисмысловой цепью РНК, при этом смысловая цепь молекулы dsRNA содержит последовательность нуклеотидов, комплементарную последовательности нуклеотидов, расположенной в пределах РНК-транскрипта гена-мишени.
Сайленсирующий элемент или по меньшей мере одна его цепь, при этом сайленсирующий элемент является двухцепочечным, может являться полностью комплементарным или частично комплементарным целевой нуклеотидной последовательности гена-мишени. Применяемый в данном документе термин ʺполностью комплементарныйʺ означает, что все основания нуклеотидной последовательности сайленсирующего элемента являются комплементарными или ʺсоответствуютʺ основаниям целевой нуклеотидной последовательности. Термин ʺпо меньшей мере частично комплементарныйʺ означает, что существует менее чем 100% совпадения между основаниями сайленсирующего элемента и основаниями целевой нуклеотидной последовательности. Специалисту в данной области будет понятно, что сайленсирующий элемент должен являться лишь по меньшей мере частично комплементарным целевой нуклеотидной последовательности для опосредования подавления экспрессии гена-мишени. Как известно в данной области, последовательности РНК со вставками, делециями и нарушениями комплементарности относительно целевой последовательности все же могут являться эффективными при RNAi. В соответствии с настоящим изобретением предпочтительно, чтобы сайленсирующий элемент и целевая нуклеотидная последовательность гена-мишени обладали по меньшей мере 80% или 85% идентичности последовательности, предпочтительно по меньшей мере 90% или 95% идентичности последовательности или более предпочтительно по меньшей мере 97% или 98% идентичности последовательности, и еще более предпочтительно по меньшей мере 99% идентичности последовательности. Альтернативно, сайленсирующий элемент может содержать 1, 2 или 3 нарушения комплементарности по сравнению с целевой нуклеотидной последовательностью на каждом отрезке из 24 частично комплементарных нуклеотидов.
Специалисту в данной области будет очевидным, что степень комплементарности между сайленсирующим элементом и целевой нуклеотидной последовательностью может варьировать в зависимости от гена-мишени, подлежащего подавлению, или в зависимости от вида насекомого-вредителя, у которого экспрессия гена подлежит контролю.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения сайленсирующий элемент содержит последовательность нуклеотидов, которая является эквивалентом РНК любого из полинуклеотидов, выбранных из группы, включающей полинуклеотид, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100 или 1115 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, представленной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательностью, или (ii) полинуклеотид, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, представленной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, таким образом, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей указанный полинуклеотид являлся по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичным любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или (iii) полинуклеотид, который содержит фрагмент по меньшей мере из 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотида, представленного в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, и при этом указанный фрагмент или указанная комплементарная последовательность обладают такой нуклеотидной последовательностью, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, при этом указанный полинуклеотид составляет не более 10000, 9000, 8000, 7000, 6000, 5000, 4000, 3000, 2000 или 1500 нуклеотидов в длину. Следует понимать, что в таких вариантах осуществления сайленсирующий элемент может содержать или состоять из области двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых, смысловая цепь, содержит последовательность нуклеотидов по меньшей мере частично комплементарную целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени.
Целевую нуклеотидную последовательность можно выбирать из любой подходящей области или нуклеотидной последовательности гена-мишени или его РНК-транскрипта. Например, целевая нуклеотидная последовательность может располагаться в пределах 5’UTR или 3’UTR гена-мишени или РНК транскрипта или в пределах экзонной или интронной областей гена.
in silico
Специалисту в данной области известны способы идентифицирования наиболее подходящих целевых нуклеотидных последовательностей в рамках полноразмерного гена-мишени. Например, множество сайленсирующих элементов, воздействующих на различные области гена-мишени, можно синтезировать и тестировать. Альтернативно, расщепление РНК-транскрипта с помощью ферментов, таких как РНКаза Н, можно использовать для определения сайтов в РНК, которые находятся в конформации, восприимчивой к сайленсингу гена. Сайты-мишени также можно идентифицировать с применением  подходов, например, использование компьютерных алгоритмов, предназначенных для прогнозирования эффективности сайленсинга генов на основе воздействия на различные сайты в пределах гена полной длины.
Интерферирующие РНК по настоящему изобретению могут содержать один сайленсирующий элемент или несколько сайленсирующих элементов, при этом каждый сайленсирующий элемент содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, и которая функционирует при поглощении видом насекомого-вредителя с подавлением экспрессии указанного гена-мишени. Конкатемерные РНК-конструкции данного типа описаны в WO2006/046148, который включен в данном документе в качестве ссылки. В контексте настоящего изобретения термин ʺнесколькоʺ означает по меньшей мере два, по меньшей мере три, по меньшей мере четыре и т.д., и по меньшей мере до 10, 15, 20 или по меньшей мере 30. В одном варианте осуществления интерферирующая РНК содержит несколько копий одного сайленсирующего элемента, т.е. повторов сайленсирующего элемента, который связывается с конкретной целевой нуклеотидной последовательностью в пределах определенного гена-мишени. В другом варианте осуществления сайленсирующие элементы в пределах интерферирующей РНК содержат или состоят из различных последовательностей нуклеотидов, комплементарных различным целевым нуклеотидным последовательностям. Должно быть ясно, что комбинации нескольких копий одного и того же сайленсирующего элемента, комбинированные с сайленсирующими элементами, связывающимися с различными целевыми нуклеотидными последовательностями, находятся в рамках настоящего изобретения.
Различные целевые нуклеотидные последовательности могут происходить из одного гена-мишени у вида насекомого-вредителя для достижения улучшения подавления конкретного гена-мишени у вида насекомого-вредителя. В этом случае сайленсирующие элементы можно комбинировать в интерферирующей РНК в исходном порядке, в котором целевые нуклеотидные последовательности встречаются в гене-мишени, или сайленсирующие элементы можно смешивать и комбинировать случайно в любом порядке ранжирования в рамках интерферирующей РНК по сравнению с порядком целевых нуклеотидных последовательностей в гене-мишени.
Альтернативно различные целевые нуклеотидные последовательности представляют один ген-мишень, но происходят из различных видов насекомых-вредителей.
Альтернативно различные целевые нуклеотидные последовательности могут происходить из различных генов-мишеней. Если интерферирующая РНК предназначена для использования для предупреждении и/или борьбы с нападением вредителей, предпочтительно выбирать различные гены-мишени из группы генов, регулирующих жизненно важные биологические функции вида насекомого-вредителя, включая, но без ограничений, выживание, рост, развитие, размножение и патогенность. Гены-мишени могут регулировать одинаковые или различные биологические пути или процессы. В одном варианте осуществления по меньшей мере один из сайленсирующих элементов содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени, при этом ген-мишень выбран из группы генов, которая описана ранее.
В дополнительном варианте осуществления настоящего изобретения различные гены, на которые воздействуют различные сайленсирующие элементы, происходят из одного вида насекомого-вредителя. Данный подход предназначен для достижения усиленного воздействия на один вид насекомого-вредителя. В частности, различные гены-мишени могут экспрессироваться дифференциально на различных стадиях жизненного цикла насекомого, например, зрелого имаго, незрелой личиночной и стадии яйца. Интерферирующую РНК по настоящему изобретению можно использовать для предотвращения и/или борьбы с нападением насекомых-вредителей на более чем одной стадии жизненного цикла насекомого.
В альтернативном варианте осуществления настоящего изобретения различные гены, на которые воздействуют различные сайленсирующие элементы, происходят из различных видов насекомых-вредителей. Интерферирующую РНК по настоящему изобретению можно, таким образом, использовать для предотвращения и/или борьбы с нападением более чем одного вида насекомых-вредителей одновременно.
Сайленсирующие элементы могут располагаться в виде одной непрерывной области интерферирующей РНК или могут разделяться присутствием линкерной последовательности. Линкерная последовательность может содержать короткую случайную нуклеотидную последовательность, которая не комплементарна ни одной из целевых нуклеотидных последовательностей или генов-мишеней. В одном варианте осуществления линкер является при определенных условиях самостоятельно расщепляющейся последовательностью РНК, предпочтительно pH-чувствительным линкером или гидрофобно-чувствительным линкером. В одном варианте осуществления линкер содержит последовательность нуклеотидов, эквивалентную интронной последовательности. Линкерные последовательности по настоящему изобретению могут находиться в диапазоне длины от приблизительно 1 пары оснований до приблизительно 10000 пар оснований, при условии, что линкер не ухудшает способности интерферирующей РНК подавлять экспрессию гена(генов)-мишени.
В дополнение к сайленсирующему элементу(элементам) и любым линкерным последовательностям интерферирующая РНК по настоящему изобретению может содержать по меньшей мере одну дополнительную полинуклеотидную последовательность. В различных вариантах осуществления настоящего изобретения дополнительную последовательность выбирают из (i) последовательности, способной защитить интерферирующую РНК от РНК процессинга, (ii) последовательности, влияющей на стабильность интерферирующей РНК, (iii) последовательности, обеспечивающей связывание белков, например, для облегчения поглощения интерферирующей РНК клетками вида насекомого-вредителя, (iv) последовательности, облегчающей крупномасштабное производство интерферирующей РНК, (v) последовательности, которая является аптамером, который связывается с рецептором или молекулой на поверхности клеток насекомого-вредителя для облегчения поглощения, или (vi) последовательности, которая катализирует процессинг интерферирующей РНК в клетках насекомого-вредителя и тем самым повышает эффективность интерферирующей РНК. Структуры для повышения стабильности молекулы РНК хорошо известны в данной области и описаны дополнительно в WO2006/046148, который включен в данном документе в качестве ссылки.
Длина интерферирующей РНК по настоящему изобретению должна являться достаточной для поглощения клетками вида насекомого-вредителя и подавления генов-мишеней у вредителя, как описано в данном документе в других местах. Однако верхний предел длины может зависеть от (i) требования к интерферирующей РНК поглощаться клетками вредителя и (ii) требования к интерферирующей РНК подвергаться процессингу в клетках вредителя для опосредования сайленсинга генов путем RNAi. Длина также может зависеть от способа получения и состава для доставки интерферирующей РНК к клеткам. Предпочтительно интерферирующая РНК по настоящему изобретению составляет от 21 до 10000 нуклеотидов в длину, предпочтительно от 50 до 5000 нуклеотидов или от 100 до 2500 нуклеотидов, более предпочтительно от 80 до 2000 нуклеотидов в длину.
Интерферирующая РНК может содержать основания ДНК, неприродные основания или неприродные связи остова, или модификации сахарофосфатного остова, например, для повышения стабильности во время хранения или повышения устойчивости к деградации нуклеазами. Дополнительно, интерферирующая РНК может быть получена химически или ферментативно специалистом в данной области с помощью управляемых вручную или автоматизированных реакций. Альтернативно, интерферирующая РНК может транскрибироваться из полинуклеотида, кодирующего таковую. Таким образом, в настоящем документе предусматривается выделенный полинуклеотид, кодирующий любую из интерферирующих РНК по настоящему изобретению.
Также в настоящем документе предусматривается выделенный полинуклеотид, выбранный из группы, включающей (i) полинуклеотид, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, представленной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательностью, или (ii) полинуклеотид, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100 или 1115 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, представленной любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательностью, или (iii) полинуклеотид, который содержит по меньшей мере 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности так, что при оптимальном выравнивании и сравнении двух последовательностей указанный полинуклеотид является по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичным любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или (iv) полинуклеотид, который содержит фрагмент по меньшей мере из 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотидной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, и при этом указанный фрагмент или указанная комплементарная последовательность обладают такой нуклеотидной последовательностью, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или (v) полинуклеотид, который содержит фрагмент по меньшей мере из 21, предпочтительно по меньшей мере 22, 23 или 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 125, 150, 175, 200, 225, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 1100, 1200, 1300, 1400, 1500, 2000 или 3000 последовательных нуклеотидов нуклеотида, представленного в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, и при этом указанный фрагмент или указанная комплементарная последовательность обладают такой нуклеотидной последовательностью, чтобы при оптимальном выравнивании и сравнении указанного фрагмента с соответствующим фрагментом в любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 указанная нуклеотидная последовательность являлась по меньшей мере на 75%, предпочтительно по меньшей мере на 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной указанному соответствующему фрагменту из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389 или комплементарной ей последовательности, или (vi) полинуклеотид, кодирующий аминокислотную последовательность, которая при оптимальном выравнивании и сравнении двух аминокислотных последовательностей является по меньшей мере на 70%, предпочтительно по меньшей мере на 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98% или 99% идентичной аминокислотной последовательности, кодируемой любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, 310-313, 3, 4, 31-34, 139, 5, 6, 35-38, 140, 7, 8, 39-42, 9, 10, 43-46, 141, 11, 12, 47-50, 13, 14, 51-54, 15, 204, 16, 205, 55-58, 322-325, 17, 18, 59-62, 19, 20, 63-66, 21, 22, 67-70, 23, 24, 71-74, 25, 26, 75-78, 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301, 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293, 123, 132, 214-217, 124, 133, 218-221, 146, 125, 134, 222-225, 147, 126, 135, 226-229, 127, 148, 136, 230-233, 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305, 129, 138, 238-241, 150, 151, 242-245, 152, 153, 246-249, 154, 155, 250-253, 156, 157, 254-257, 158, 159, 258-261, 160, 161, 262-265, 163, 162, 164, 266-269, 165, 167, 166, 270-273, 168, 170, 169, 274-277, 172, 173, 278-281, 200, 201, 314-317, 186, 202, 187, 203, 306-309, 318-321, 386, 387, 388, 389, и при этом указанный полинуклеотид составляет не более 10000, 9000, 8000, 7000, 6000, 5000, 4000, 3000, 2000 или 1500 нуклеотидов в длину.
В предпочтительных вариантах осуществления выделенный полинуклеотид является частью молекулы интерферирующей РНК, как правило, частью сайленсирующего элемента, содержащего по меньшей мере одну двухцепочечную область, содержащую смысловую цепь РНК, соединенную путем комплементарного спаривания оснований с антисмысловой цепью РНК, при этом смысловая цепь молекулы dsRNA содержит последовательность нуклеотидов, комплементарную последовательности нуклеотидов, расположенной в пределах РНК-транскрипта гена-мишени. Смысловая цепь dsRNA, следовательно, способна соединяться с РНК-транскриптом и воздействовать на РНК для деградации в пределах RNAi-индуцируемого сайленсирующего комплекса или RISC.
Полинуклеотиды по настоящему изобретению можно вставлять с помощью рутинных методов молекулярного клонирования в ДНК-конструкции или векторы, известные в данной области. Следовательно, в соответствии с одним вариантом осуществления предусматривается ДНК-конструкция, содержащая любые из полинуклеотидов по настоящему изобретению. Предпочтительно в данном документе предусматривается ДНК-конструкция, содержащая полинуклеотид, кодирующий по меньшей мере одну из интерферирующих РНК по настоящему изобретению. ДНК-Конструкция может являться рекомбинантным ДНК-вектором, например, бактериальным, вирусным или дрожжевым вектором. В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения ДНК-конструкция является экспрессирующей конструкцией, и полинуклеотид функционально связан с по меньшей мере одной регуляторной последовательностью, способной управлять экспрессией полинуклеотидной последовательности. Термин ʺрегуляторная последовательностьʺ следует рассматривать в широком контексте, и он предназначен для обозначения любой нуклеотидной последовательности, способной воздействовать на экспрессию полинуклеотидов, с которыми она функционально связана, включая, но без ограничений, промоторы, энхансеры и другие природные или синтетические элементы-активаторы транскрипции. Регуляторная последовательность может располагаться на 5'-или 3'-конце полинуклеотидной последовательности. Термин ʺфункционально связанныйʺ относится к функциональной связи между регуляторной последовательностью и полинуклеотидной последовательностью, такой, что регуляторная последовательность управляет экспрессией полинуклеотида. Функционально связанные элементы могут являться смежными или несмежными.
Предпочтительно регуляторная последовательность является промотором, выбранным из группы, включающей, но без ограничений, конститутивные промоторы, индуцируемые промоторы, тканеспецифические промоторы и промоторы, специфичные для стадии роста/развития. В одном варианте осуществления полинуклеотид находится под контролем сильного конститутивного промотора, такого как любой, выбранный из группы, включающей CaMV35S промотор, двойной CaMV35S промотор, убиквитиновый промотор, актиновый промотор, rubisco промотор, GOS2 промотор, промотор 34S вируса мозаики норичника.
Необязательно одну или более последовательностей терминации транскрипции можно включать в экспрессирующую конструкцию по настоящему изобретению. Термин ʺпоследовательность терминации транскрипцииʺ охватывает управляющую последовательность в конце транскрипционной единицы, которая сигнализирует о терминации транскрипции, 3’ процессинге и полиаденилировании первичного транскрипта. Дополнительные регуляторные последовательности, включая, но без ограничений, энхансеры транскрипции или трансляции, можно включать в экспрессионную конструкцию, например, как с усиленным двойным промотором CaMV35S.
Настоящее изобретение также охватывает способ создания любой из интерферирующих РНК по настоящему изобретению, включающий этапы: (i) контакта полинуклеотида, кодирующего указанную интерферирующую РНК, или ДНК-конструкции, содержащей полинуклеотид, с бесклеточными компонентами; или (ii) введения в клетку (например, путем трансформации, трансфекции или инъекции) полинуклеотида, кодирующего указанную интерферирующую РНК, или ДНК-конструкции, содержащей полинуклеотид.
Настоящее изобретение, таким образом, также относится к любому двухцепочечному рибонуклеотиду, полученному при экспрессии полинуклеотида, описанного в данном документе.
Escherichia
E. coli
Bacillus
B. thuringiensis
Rhizobium
Lactobacillus
Lactococcus
Pseudomonas
Agrobacterium
Соответственно, также в данном документе предусматривается клетка-хозяин, трансформированная любым из полинуклеотидов, описанных в данном документе. Дополнительно настоящим изобретением охватываются клетки-хозяева, содержащие любую из интерферирующих РНК по настоящему изобретению, любой из полинуклеотидов по настоящему изобретению или ДНК-конструкцию, содержащую любой из полинуклеотидов. Клетка-хозяин может являться прокариотической клеткой, включая, но без ограничений, грамположительные и грамотрицательные бактериальные клетки, или эукариотической клеткой, включая, но без ограничений, клетки дрожжей или клетки растений. Предпочтительно указанная клетка-хозяин является бактериальной клеткой или растительной клеткой. Бактериальную клетку можно выбирать из группы, включающей, но без ограничений, грамположительные и грамотрицательные клетки, включающие  spp. (например, ),  spp. (например, ),  spp.,  spp.,  spp.,  spp. и  spp. Полинуклеотид или ДНК-конструкция по настоящему изобретению может существовать или поддерживаться в клетке-хозяине как внехромосомный элемент, или может являться стабильно включенным в геном клетки-хозяина. Характеристики, представляющие особый интерес при выборе клетки-хозяина для целей настоящего изобретения, включают простоту, с которой полинуклеотид или ДНК-конструкцию, кодирующую интерферирующую РНК, можно ввести в хозяина, доступность совместимых экспрессионных систем, эффективность экспрессии и стабильность интерферирующей РНК в хозяине.
Предпочтительно интерферирующие РНК по настоящему изобретению экспрессируются в растительных клетках-хозяевах. Предпочтительные растения, представляющие интерес, включают, но без ограничений, хлопчатник, картофель, рис, томат, канолу, сою, подсолнечник, сорго, просо, кукурузу, люцерну, землянику, баклажаны, перец и табак.
В ситуациях, где интерферирующая РНК экспрессируется в клетке-хозяине и/или применяется для предотвращения и/или борьбы с нападением вредителя на организм-хозяин, предпочтительно, чтобы интерферирующая РНК не демонстрировала значительных ʺнецелевыхʺ эффектов, т.е. интерферирующая РНК не влияла на экспрессию генов в хозяине. Предпочтительно сайленсирующий элемент не демонстрирует значительной комплементарности с нуклеотидными последовательностями, кроме заданной целевой нуклеотидной последовательности гена-мишени. В одном варианте осуществления настоящего изобретения сайленсирующий элемент демонстрирует менее 30%, более предпочтительно менее 20%, более предпочтительно менее 10% и еще более предпочтительно менее 5% идентичности последовательности с любым геном клетки-хозяина или организма. Если известны данные геномной последовательности для организма-хозяина, можно перепроверить идентичность с сайленсирующим элементом, применяя стандартные инструменты биоинформатики. В одном варианте осуществления отсутствует идентичность последовательности между сайленсирующим элементом и геном из клетки-хозяина или организма-хозяина в области из 17, более предпочтительно в области из 18 или 19 и наиболее предпочтительно в области из 20 или 21 последовательных нуклеотидов.
Coleoptera
Lepidoptera
Diptera
Dichyoptera
Orthoptera
Hemiptera
Siphonaptera
При практическом применении настоящего изобретения интерферирующие РНК по настоящему изобретению можно использовать для предотвращения и/или борьбы с любым насекомым вредителем, принадлежащим к отрядам , , , , ,  и.
Кроме того, в соответствии с другим аспектом настоящего изобретения в настоящем документе предусматривается композиция для предотвращения и/или борьбы с нападением насекомых-вредителей, содержащая по меньшей мере одну интерферирующую рибонуклеиновую кислоту (РНК) и необязательно по меньшей мере один подходящий носитель, наполнитель или разбавитель, причем интерферирующая РНК функционирует при поглощении насекомым с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного вредителя. Интерферирующей РНК может являться любая из тех, которые раскрыты в других разделах данного документа. Предпочтительно интерферирующая РНК содержит или состоит по меньшей мере из одного сайленсирующего элемента, при этом указанный сайленсирующий элемент является областью двухцепочечной РНК, содержащей соединенные комплементарные цепи, одна цепь из которых (смысловая цепь) содержит последовательность нуклеотидов, которая по меньшей мере частично комплементарна целевой нуклеотидной последовательности в пределах гена-мишени. ʺГеном-мишеньюʺ может являться любой ген-мишень, раскрываемый в разделах настоящего документа, включая, но без ограничений, гены, участвующие в регуляции выживания, росте, развитии, размножении и патогенности вредителя. Альтернативно, композиция содержит по меньшей мере одну клетку-хозяина, содержащую по меньшей мере одну интерферирующую молекулу РНК или конструкцию ДНК, кодирующую тот же самый и необязательно по меньшей мере один подходящий носитель, наполнитель или разбавитель, причем интерферирующая РНК функционирует при поглощении клетки-хозяина насекомым с подавлением экспрессии гена-мишени у указанного вредителя.
Coleoptera, Lepidoptera, Diptera, Dichyoptera, Orthoptera, Hemiptera
Siphonaptera.
При практическом применении настоящего изобретения композицию можно использовать для предотвращения и/или борьбы с любым насекомым вредителем, принадлежащим к отрядам  и Таким образом, композиция может быть представлена в любой форме, подходящей для применения по отношению к насекомым-вредителям или для применения к субстратам и/или организмам, в частности растений, чувствительных к нападению указанного насекомого-вредителя. В одном варианте осуществления композиция предназначена для применения в целях предотвращения и/или борьбы с нападением вредителей растений, или материала для размножения, или репродуктивного материала растения и, таким образом, направлена на виды насекомых-вредителей, которые нападают на растения. Композиция по настоящему изобретению особенно эффективна, если насекомое-вредитель относится к категории “грызущих” насекомых, которые наносят значительное повреждение растениям, поедая растительные ткани, такие как корни, листья, цветы, почки, ветки и т.п. Примеры из этой большой категории насекомых включают жуков и их личинок.
Композицию по настоящему изобретению можно применять для борьбы с насекомыми-вредителями на всех этапах их жизненного цикла, например, этапе половозрелой особи, этапах личинки и яйца.
В контексте композиции по настоящему изобретению интерферирующая РНК может быть получена из ДНК-конструкции, в частности экспрессионной конструкции, которые описаны в других разделах данного документа, содержащей полинуклеотид, который ее кодирует. В предпочтительных вариантах осуществления интерферирующая РНК может быть произведена внутри клетки-хозяина или организма, сконструированного для экспрессии указанной интерферирующей РНК с полинуклеотидом, который ее кодирует.
Подходящие организмы-хозяева для применения в композициях по настоящему изобретению включают, но без ограничений, композиции, которые известны как колонизирующие среду на и/или вокруг вызывающих интерес растений или культурных растений, т.е. растений или культурных растений, чувствительных к нападению видов насекомых-вредителей. Такие микроорганизмы включают, но без ограничений, микроорганизмы, которые заселяют филлоплану (поверхность листьев растений) и/или ризосферу (почву, окружающую корни растений). Эти микроорганизмы отбирают так, чтобы они были способны успешно конкурировать с организмами дикого типа, присутствующими в среде растения. Подходящие микроорганизмы для применения в качестве хозяев включают различные виды бактерий, дрожжей и грибов. Понятно, что выбираемые микроорганизмы не должны быть токсичными для растений. Такие композиции, применяемые по отношению к растениям, чувствительным к нападению видов насекомых-вредителей, будут поглощаться насекомыми-вредителями при кормлении на обработанных растениях.
Bacillus
thuringiensis
Организмы-хозяева, которые в естественных условиях не заселяют растение и/или их среду, также находятся в рамках настоящего изобретения. Такие организмы могут служить лишь в качестве средства для получения интерферирующей РНК композиции. Например, в одном варианте осуществления интерферирующая РНК ферментируется/продуцируется в бактериальном хозяине и бактерии после этого инактивируются/погибают. Полученные бактерии могут быть обработаны и использованы в качестве инсектицидного спрея таким же способом, как были использованы штаммы  в качестве инсектицида для нанесения распылением. В некоторых вариантах осуществления бактериальный экстракт или лизат может быть подходящим образом очищен с тем, чтобы оставить экстракт, содержащий, по сути, чистую интерферирующую РНК, который затем составляют в одну из композиций по настоящему изобретению. Стандартные методики экстракции/очистки будут известны специалисту в данной области.
Композиции по настоящему изобретению могут находиться в любой подходящей физической форме для применения по отношению к насекомым. Например, композиция может быть в твердой форме (порошок, таблетка или приманка), жидкой форме (в том числе форма, вводимая в качестве распыляемого инсектицида) или форме геля. В конкретном варианте осуществления композиция может представлять собой покрытие, пасту или порошок, который можно нанести на субстрат с целью защиты указанного субстрата от нападения насекомых. В данном варианте осуществления композицию можно применять для защиты любого субстрата или материала, который чувствителен к нападению насекомых или повреждению, наносимому насекомыми.
Природа наполнителей и физической формы композиции может варьировать в зависимости от природы субстрата, который необходимо обрабатывать. Например, композиция может представлять собой жидкость, которую наносят кистью или распыляют на подлежащий обработке материал или субстрат или впечатывают в него, или покрытие или порошок, который наносят на подлежащий обработке материал или субстрат.
В одном варианте осуществления композиция находится в форме приманки. Приманка предназначена для привлечения насекомого войти в контакт с композицией. После вхождения в контакт с нею композиция поглощается насекомым путем, например, переваривания, и опосредует RNAi, таким образом убивая насекомое. Указанная приманка может содержать пищевой продукт, такой как белковый продукт питания, например, рыбную муку. В качестве приманки также можно применять борную кислоту. Приманка может зависеть от вида, являющегося мишенью. Также можно применять аттрактант. Аттрактантом может быть феромон, такой как, например, феромон самца или самки. Как, например, в настоящем изобретении можно применять феромоны, приведенные в книге ʺInsect Pheremones and their use in Pest Managementʺ (Howse et al., Chapman and Hall, 1998). Аттрактант действует как привлекающий насекомого к приманке и может быть направлен на конкретное насекомое или может привлекать целый спектр насекомых. Приманка может быть в любой подходящей форме, такой как твердая, пастообразная форма, форма таблетки или порошковая форма.
Приманка также может быть принесена насекомым обратно в колонию. Затем приманка может играть роль источника питания для других членов колонии, обеспечивая, таким образом, эффективную борьбу с большим количеством насекомых и, потенциально, всей колонией насекомых-вредителей. Это является преимуществом, связанным с применением двухцепочечной РНК по настоящему изобретению, поскольку замедленное действие RNAi-опосредованных эффектов на вредителей делает возможным перенос приманки обратно в колонию, таким образом доставляя максимальный эффект в смысле воздействия на насекомых.
Кроме того, композиции, которые контактируют с насекомыми, могут оставаться на кутикуле насекомого. При очистке, независимо от того, чистится ли отдельное насекомое самостоятельно, или насекомые чистят друг друга, композиции могут быть поглощены и, таким образом, могут опосредовать свои эффекты на насекомых. Для этого необходимо, чтобы композиция была достаточно стабильной с тем, чтобы интерферирующая РНК оставалась интактной и была способна опосредовать RNAi даже при воздействии внешних условий среды в течение длительного периода времени, который может представлять собой, например, период длительностью несколько дней.
Приманки могут быть представлены в подходящем ʺкорпусеʺ или ʺловушкеʺ. Такие корпуса и ловушки коммерчески доступны, а существующие ловушки могут быть адаптированы для включения композиций по настоящему изобретению. Любой корпус или ловушка, которые могут заманивать насекомого зайти, включены в объем настоящего изобретения. Корпус или ловушка могут иметь форму, например, коробки, и могут быть представлены в заранее сформированном состоянии или могут быть, например, в форме складываемого картона. Подходящие материалы для корпуса или ловушки включают пластмассу и картон, в частности, гофрированный картон. Подходящими размерами для такого корпуса или ловушки являются, например, ширина 7-15 см, длина 15-20 см и высота 1-5 см. Внутренние поверхности ловушек могут быть оклеены липким веществом с тем, чтобы ограничить движение насекомого после попадания в ловушку. Корпус или ловушка могут иметь внутри подходящее углубление, которое может удерживать на месте приманку. Ловушка отличается от корпуса, поскольку насекомое после входа не может легко покинуть ловушку, в то время как корпус играет роль ʺкормушкиʺ, которая обеспечивает насекомому предпочтительную среду, в которой они могут кормиться и чувствовать себя в безопасности от хищников.
Соответственно, в дополнительном аспекте настоящее изобретение предлагает корпус или ловушку для насекомых, которые содержат композицию по настоящему изобретению, которая может включать любой из признаков описываемой в данном документе композиции.
В дополнительном альтернативном варианте осуществления композиция может быть представлена в форме спрея. Таким образом, человек-пользователь может непосредственно опрыскивать композицией вредителя. Композиция затем усваивается насекомым, откуда она может опосредовать РНК-интерференцию, таким образом борясь с насекомым. Предпочтительно спрей представляет собой распыляемый под давлением спрей/спрей в виде аэрозоля или спрей для пульверизатора. Частицы могут иметь подходящий размер так, чтобы они прикреплялись к насекомому, например к экоскелету, и могли поглощаться оттуда. Размер частиц может быть измерен известными способами, такими как применение Mastersizer, который является коммерчески доступным устройством.
В еще одном дополнительном варианте осуществления носитель представляет собой электростатически заряженный порошок или частицу, которая прикрепляется к насекомому. Подходящие порошки и частицы, которые могут прикрепляться к насекомому и, таким образом, доставлять РНК-конструкции по настоящему изобретению, описаны подробно в WO 94/00980 и WO 97/33472, обе из которых включены в данный документ в качестве ссылки.
Альтернативно, носитель может содержать магнитные частицы, которые прикрепляются к кутикуле насекомого. Подходящие магнитные частицы, которые могут прикрепляться к насекомому и, таким образом, доставлять РНК-конструкции по настоящему изобретению, описаны подробно в WO 00/01236, ссылка на которую включена в данный документ.
В еще одном дополнительном варианте осуществления носитель композиции содержит металлические частицы, которые изначально не намагничены, но которые могут стать магнитно поляризованными под воздействием электрического поля, производимым организмом насекомого. Этот механизм действия подробно описан в WO 2004/049807 и включен в данный документ в качестве ссылки.
Предпочтительно композиция включает носитель, который увеличивает поглощение интерферирующей РНК насекомым-вредителем. Такой носитель может представлять собой липидный носитель, предпочтительно содержащий одно или несколько из следующего: эмульсии типа масла в воде, мицеллы, холестерин, липополиамины и липосомы. Другие средства, которые способствуют поглощению конструкций по настоящему изобретению, хорошо известны специалистам в данной области и включают поликатионы, декстраны и (трис)-катионные липиды, такие как CS096, CS102 и т.п. Коммерчески доступные липосомы включают LIPOFECTIN и CELLFECTIN и т.п. Ряд подходящих носителей перечислены под заголовком ʺУсиливающее трансфекцию средствоʺ в патентной заявке WO 03/004644, а каждый из приведенных примеров, таким образом, включен в качестве ссылки.
В дополнительном предпочтительном варианте осуществления носитель представляет собой конденсирующее нуклеиновую кислоту средство. Предпочтительно конденсирующее нуклеиновую кислоту средство включает спермидин или протамина сульфат или его производное.
Если композиция по настоящему изобретению предназначена для применения в предотвращении и/или борьбе с нападением насекомых на растение, то композиция может содержать подходящий с точки зрения сельского хозяйства носитель. Таким носителем может быть любой материал, который переносит подлежащее обработке растение, который не причиняет ненадлежащий вред для среды или других находящихся в ней организмов и который позволяет интерферирующей РНК оставаться эффективной по отношению к видам насекомых-вредителей. В частности, композиции по настоящему изобретению могут быть составлены для доставки растениям согласно установившимся сельскохозяйственным методикам, применяемым в биоинсектицидной промышленности. Композиция может содержать дополнительные компоненты, способные осуществлять другие функции, включая, но без ограничений, (i) усиление или повышение поглощения интерферирующей РНК клетками вредителя и (ii) стабилизацию активных компонентов композиции. Конкретными примерами таких дополнительных компонентов, содержащихся в композиции, включающей интерферирующую РНК, являются tRNA дрожжей или общая РНК дрожжей.
Композиции могут быть составлены для непосредственного применения или в виде концентрата основной композиции, который необходимо разбавить перед применением. Альтернативно, композиция может поставляться в виде набора, содержащего интерферирующую РНК или клетку-хозяина, ее содержащую или экспрессирующую, в одной емкости и подходящий разбавитель или носитель для РНК или клетки-хозяина в отдельной емкости. При конкретном применении настоящего изобретения композицию можно применять по отношению к растению или любой части растения на любом этапе развития растения. В одном варианте осуществления композицию применяют по отношению к надземным частям растения, например, при культивировании растительных культур в полевых условиях. В дополнительном варианте осуществления композицию применяют по отношению к семенам растения либо пока они находятся в хранилище, либо сразу после высадки в почву. Обычно важно хорошо осуществлять борьбу с вредителями на ранних стадиях роста растения, поскольку это время, когда растение может быть наиболее тяжело повреждено видами вредителей.
Композицию можно вносить в среду насекомых-вредителей при помощи различных методик, включая, но без ограничений, опрыскивание, распыление, опыление, рассеивание, полив, нанесение покрытия на семена, обработка семян, внесение в почву и введение в поливную воду. При обработке растений, чувствительных к нападению вредителей, композиция может быть доставлена на растение или часть растения до появления вредителя (с целью предотвращения) или после начала появления признаков нападения вредителя (с целью борьбы с вредителем).
В дополнительном варианте осуществления настоящего изобретения композиции по настоящему изобретению могут быть составлены так, чтобы они содержали по меньшей мере одно дополнительное активное средство. Таким образом, композиция может быть представлена в виде ʺнабора частейʺ, включающего композицию, содержащую интерферирующую РНК, в одной емкости и один или несколько подходящих активных ингредиентов, например химический или биологический пестицид, в отдельной емкости. Альтернативно, композиции могут быть представлены в виде смесей, которые стабильны и подлежат применению в сочетании друг с другом.
Подходящие активные ингредиенты, которые могут действовать дополняющим образом по отношению к интерферирующим молекулам РНК по настоящему изобретению, включают, но без ограничений, следующие: хлорпирофос, аллетрин, ресметрин, тетрабромэтил, диметол-циклопропанкарбоновая кислота (которую обычно включают в жидкие композиции); и гидраметилнон, авермектин, хлорпирофос, сульфурамид, гидропрен, фипронил (рецептор GABA), изопропилфенилметилкарбамат, индоксакарб (PARA), новифлумурон (ингибитор синтеза хитина), имипротрин (PARA), абамектин (глутамат-зависимый канал для ионов хлора), имидаклоприд (ацетилхолиновый рецептор) (которые включены в композиции приманок).
В предпочтительном варианте осуществления активный ингредиент известен как предпочтительный инсектицид в плане проблем, связанных со здравоохранением и окружающей средой, такой как, например, гидраметилнон и авермектин.
Bacillus thuringiensis
Xenorhabdus
Photorhabdus
Bacillus laterosporous
Bacillus spaericus
Bacillus thuringiensis
В следующем варианте осуществления настоящего изобретения композицию составляют так, чтобы она содержала по меньшей мере одно агрономическое средство, например, гербицид или дополнительный пестицид. Применяемое в данном документе выражение ʺвторой пестицидʺ или ʺдополнительный пестицидʺ относится к пестициду, отличному от первой или изначальной интерферирующей молекулы РНК композиции. Альтернативно, композиция по настоящему изобретению может быть доставлена в комбинации по меньшей мере с одним другим агрономическим средством, например, гербицидом или вторым пестицидом. В одном варианте осуществления композиция представлена в комбинации с гербицидом, выбранным из любого известного из уровня техники, например, глифосатом, имидазолиноном, сульфонилмочевиной и бромоксинилом. В следующем варианте осуществления композиция представлена в комбинации по меньшей мере с одним дополнительным пестицидом. Дополнительный пестицид может быть выбран из любых известных из уровня техники пестицидов и/или может включать интерферирующую рибонуклеиновую кислоту, которая функционирует при поглощении вредителем с подавлением экспрессии гена-мишени указанного вида вредителя. В одном варианте осуществления целевым вредителем является вид насекомого-вредителя, а интерферирующая РНК выбрана из любой из описанных в данном документе интерферирующих РНК. В следующем варианте осуществления дополнительный пестицид включает интерферирующую РНК, которая функционирует с подавлением экспрессии известного гена у любого целевого вида вредителя, но не ограничиваясь вредителями-насекомыми. Изначальная интерферирующая молекула РНК композиции и второй или дополнительный пестицид(ы) могут целенаправленно воздействовать на один вид насекомого-вредителя или могут быть направлены на воздействие на различные виды насекомых-вредителей. Например, изначальная интерферирующая РНК и второй пестицид могут целенаправленно воздействовать на различные виды насекомых-вредителей или может целенаправленно воздействовать на различные семейства или классы организмов-вредителей, например, грибы, или нематоды, или насекомые. Специалисту в данной области будет понятно, как протестировать комбинации интерферирующих молекул РНК и других агрономических средств в отношении синергических эффектов. В предпочтительном варианте осуществления композиция содержит первую интерферирующую молекулу РНК, описанную в других разделах данного документа, и один или несколько дополнительных пестицидов, каждый из которых токсичен для одного и того же насекомого-вредителя, причем один или несколько дополнительных пестицидов выбраны из пататина, инсектицидного белка , инсектицидного белка , инсектицидного белка , инсектицидного белка , инсектицидного белка  и лигнина, и при этом указанный инсектицидный белок  выбран из группы, состоящей из Cry1Ab, Cry1C, Cry2Aa, Cry3, TIC851, CryET70, Cry22, VIP, TIC901, TIC1201, TIC407, TIC417, бинарного инсектицидного белка, выбранного из CryET33 и CryET34, CryET80 и CryET76, TIC100 и TIC101 и PS149B1, и инсектицидных химер любого из перечисленных инсектицидных белков.
Различные компоненты описанных в данном документе комбинаций можно вводить, например, организму-хозяину, чувствительному к нападению вредителя, в любом порядке. Компоненты на подлежащую обработке территорию или организм можно доставлять одновременно или последовательно.
Также в данном документе предусматривается способ предотвращения и/или борьбы с нападением вредителей, при котором вид насекомого-вредителя контактирует с эффективным количеством по меньшей мере одной интерферирующей РНК, при этом РНК функционирует при поглощении указанным вредителем с подавлением экспрессии жизненно важного гена-мишени вредителя. Жизненно важным геном-мишенью может являться любой ген вредителя, участвующий в регуляции жизненно важного биологического процесса, необходимого вредителю для инициирования или поддержания нападения, включая, но без ограничений, выживание, рост, развитие, размножение и патогенность. В частности, ген-мишень может являться любым из генов вредителя, как описано в данном документе в других местах.
Leptinotarsa texana
Lygus lineolaris
В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, или 310-313, или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук )); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк ) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук).
Leptinotarsa texana
Lygus lineolaris
В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 1, 174, 404, 180, 188, 2, 175, 181, 189, 27-30, 282-285, 294-297, или 310-313, или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук )); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк ) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук),
где ортологические гены кодируют белок, обладающий аминокислотной последовательностью, которая является по меньшей мере на 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% идентичной аминокислотной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO 79, 349, 405, 352 или 356 (при оптимальном выравнивании указанных кодируемых белков).
Leptinotarsa texana
Lygus lineolaris
В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 141, 11, 12, 47-50 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук )); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк ) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук).
Leptinotarsa texana
Lygus lineolaris
В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 141, 11, 12, 47-50 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук )); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк ) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук), при этом ортологические гены кодируют белок, обладающий аминокислотной последовательностью, которая является по меньшей мере на 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% идентичной аминокислотной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO 328 или 84 (при оптимальном выравнивании указанных кодируемых белков).
Leptinotarsa texana
Lygus lineolaris
В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарный по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду в любой из SEQ ID NO 17, 18, 59-62 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук )); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк ) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук).
Leptinotarsa texana
Lygus lineolaris
В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 17, 18, 59-62 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук )); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк ) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук), при этом ортологические гены кодируют белок, обладающий аминокислотной последовательностью, которая является по меньшей мере на 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% идентичной аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO 87 (при оптимальном выравнивании указанных кодируемых белков).
Leptinotarsa texana
Lygus lineolaris
В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 19, 20, 63-66 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук )); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк ) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук).
Leptinotarsa texana
Lygus lineolaris
В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарный по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду в любой из SEQ ID NO 19, 20, 63-66 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук )); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк ) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук), при этом ортологические гены кодируют белок, обладающий аминокислотной последовательностью, которая является по меньшей мере на 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% идентичной аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO 88 (при оптимальном выравнивании указанных кодируемых белков).
Leptinotarsa texana
Lygus lineolaris
Leptinotarsa texana
Lygus lineolaris
В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук )); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк ) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук). В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 165, 167, 166, 270-273 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук )); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк ) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук), при этом ортологические гены кодируют белок, обладающий аминокислотной последовательностью, которая является по меньшей мере на 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% идентичной аминокислотной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO 347 или 348 (при оптимальном выравнивании указанных кодируемых белков).
Leptinotarsa texana
Lygus lineolaris
В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарный по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду в любой из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук )); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк ) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук).
Leptinotarsa texana
Lygus lineolaris
В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 143, 121, 142, 176, 182, 130, 177, 183, 206-209, 286-289, 298-301 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук )); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк ) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук),
при этом ортологические гены кодируют белок, обладающий аминокислотной последовательностью, которая является по меньшей мере на 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% идентичной аминокислотной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO 330, 350 или 353 (при оптимальном выравнивании указанных кодируемых белков).
Leptinotarsa texana
Lygus lineolaris
В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук )); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк ) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук).
Leptinotarsa texana
Lygus lineolaris
В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду в любой из SEQ ID NO 145, 122, 144, 178, 131, 179, 210-213, 290-293 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук )); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк ) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук), при этом ортологические гены кодируют белок, обладающий аминокислотной последовательностью, которая является по меньшей мере на 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% идентичной аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO 331 или 351(при оптимальном выравнивании указанных кодируемых белков).
Leptinotarsa texana
Lygus lineolaris
В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук )); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк ) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук).
Leptinotarsa texana
Lygus lineolaris
В способах, описанных в данном документе, для подавления экспрессии гена-мишени у вида насекомого-вредителя, молекулы двухцепочечной РНК, содержащей по меньшей мере 21 пару оснований, одна цепь которой содержит или состоит из последовательности нуклеотидов, комплементарной по меньшей мере 21 последовательному нуклеотиду из любой из SEQ ID NO 128, 149, 184, 137, 185, 234-237, 302-305 или комплементарной ей последовательности, можно применять для подавления экспрессии ортологического гена-мишени у жесткокрылых, полужесткокрылых, чешуекрылых или двукрылых насекомых, выбранных из группы, включающей, но без ограничений, Leptinotarsa spp. (например, L. decemlineata (колорадский жук), L. juncta (ложный картофельный жук) или L. texana (картофельный жук )); Nilaparvata spp. (например, N. lugens (коричневый дельфацид)); Lygus spp. (например, L. lineolaris (клоп-слепняк ) или L. hesperus (слепняк западный матовый)); Myzus spp. (например, M. persicae (тля персиковая зеленая)); Diabrotica spp. (например, D. virgifera virgifera (западный кукурузный жук), D. barberi (северный кукурузный жук), D. undecimpunctata howardi (южный кукурузный жук) или D. virgifera zeae (мексиканский кукурузный жук), при этом ортологические гены кодируют белок, обладающий аминокислотной последовательностью, которая является по меньшей мере на 85%, 90%, 92%, 94%, 96%, 98%, 99% идентичной аминокислотной последовательности, представленной в любой из SEQ ID NO 337 или 354 (при оптимальном выравнивании указанных кодируемых белков).
Кроме того, в данном документе предусматривается способ предотвращения и/или борьбы с нападением вредителей в поле культурных растений, при этом указанный способ включает экспрессию в указанных растениях эффективного количества интерферирующей РНК, описываемой в данном документе.
В способе, предназначенном для борьбы с нападением вредителя, фраза ʺэффективное количествоʺ распространяется на количество или концентрацию интерферирующей РНК, необходимые для получения фенотипического эффекта у вредителя таким образом, чтобы уменьшались количества организмов-вредителей, поражающих организм-хозяин, и/или уменьшалось количество повреждений, вызванных вредителем. В одном варианте осуществления фенотипическим эффектом является гибель вредителя, и интерферирующая РНК используется для достижения по меньшей мере 20%, 30%, 40%, предпочтительно по меньшей мере 50%, 60%, 70%, более предпочтительно по меньшей мере 80% или 90% смертности вредителей по сравнению с контрольными насекомыми-вредителями. В дополнительном варианте осуществления фенотипические эффекты включают, но без ограничений, остановку роста вредителя, прекращение питания и уменьшение яйцекладки. Общее количество организмов-вредителей, поражающих организм-хозяин, можно таким образом уменьшить по меньшей мере на 20%, 30%, 40%, предпочтительно по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, более предпочтительно по меньшей мере на 80% или 90% по сравнению с контрольными вредителями. Альтернативно, ущерб, наносимый насекомыми-вредителями, можно уменьшить по меньшей мере на 20%, 30%, 40%, предпочтительно по меньшей мере на 50%, 60%, 70%, более предпочтительно по меньшей мере на 80% или 90% по сравнению с контрольными насекомыми-вредителями. Таким образом, способ по настоящему изобретению можно применять для достижения по меньшей мере 20%, 30%, 40%, предпочтительно по меньшей мере 50%, 60%, 70%, более предпочтительно по меньшей мере 80% или 90% эффективности при борьбе с вредителями.
Применяемый в данном документе термин ʺрастениеʺ может содержать любой репродуктивный материал или материал для размножения растения. Ссылка на растение также может включать клетки растений, протопласты растений, культуры тканей растений, растительные каллусы, маточные корневища растений и растительные клетки, которые являются интактными в растениях или частях растений, такие как зародыши, пыльца, семяпочки, семена, листья, цветы, ветки, фрукты, ядра, колосья, початки, шелуха, стебли, корни, кончики корней и тому подобное.
Также в данном документе предусматривается применение интерферирующей рибонуклеиновой кислоты (РНК), описываемой в данном документе, или ДНК-конструкции, описываемой в данном документе, для предотвращения и/или борьбы с нападением насекомых-вредителей, предпочтительно нападением насекомых-вредителей на растения.
Настоящее изобретение будет дополнительно понятно со ссылкой на следующие неограничивающие примеры.
Примеры
Пример 1 Идентификация генов-мишеней у видов насекомых вредителей
Lygus hesperus
1.1. Нормализованная cDNA-библиотека  и получение dsRNA в многолуночных планшетах для скрининговых исследований
Lygus hesperus
Escherichia coli
Нуклеиновые кислоты выделили из нимф  различных стадий жизни, включая только что вылупившихся нимф 2, 4, 6 и 9 дневных нимф и взрослых. Библиотеку cDNA получали с использованием ПЦР-набора для синтеза cDNA SMARTer™, следуя инструкциям производителя (Clontech кат. № 634925). Библиотеку cDNA нормализовали с использованием Trimmer kit (Evrogen кат. № NK001) и клонировали в векторе PCR4-TOPO (Invitrogen). Нормализация введенных в клоны адаптеров M2 (Trimmer Kit, Evrogen, SEQ ID NO 92: AAGCAGTGGTATCAACGCAG), противоположно ориентированных на каждом конце клонов. Рекомбинантные конструкции векторов трансформировали в клетки , штамм TOP10 (Invitrogen). Трансформированные клетки затем разбавляли и высевали с целью получения отдельных колоний или клонов. Клоны проверяли для подтверждения того, что избыточность клонов для библиотеки не превышает 5%. Отдельные клоны отбирали в жидкую LB (бульон Лурия) среду, в 96-луночные планшеты с глубокими лунками, и выращивали в течение ночи при 37°C. Планшеты также включали положительные (Lh423) и отрицательные (FP) контрольные клоны.
Для создания dsRNA с помощью ПЦР создали смысловой и антисмысловой фрагменты ДНК, содержащие последовательность промотора T7. Вкратце, помещали по 1 мкл бактериальной суспензии на клон в многолуночные ПЦР-планшеты, содержащие REDTaq (Sigma кат. № D4309) и праймеры oGCC2738 (SEQ ID NO 93: AAGCAGTGGTATCAACGCAG) и oGCC2739 (SEQ ID NO 94: GCGTAATACGACTCACTATAGGAAGCAGTGGTATCAACGCAG) на основе M2 и T7-M2 последовательностей, соответственно. За ПЦР-реакцией следовала in vitro транскрипция, где добавляли 6 мкл продукта ПЦР на клон к 9 мкл RiboMAX™ Large Scale RNA Production System-T7 (Promega кат. № P1300) и инкубировали в течение ночи при 37°C. Конечный раствор dsRNA разбавляли в 2 раза в L. hesperus сахарозной пище, содержащей 15% сахарозы и 5 мкг/мкл дрожжевой tRNA (Invitrogen кат. № 15401-029) и использовали для скрининга. dsRNA, соответствующей положительному контрольному клону Lh423, является SEQ ID NO 101, и отрицательному FP контрольному клону является SEQ ID NO 104 (см. таблицу 4).
1.2. Скрининг на новые и эффективные гены-мишени
Lygus hesperus
с использованием cDNA-библиотеки экспрессируемых dsRNA
Lygus hesperus
Разработали новое скрининговое исследование на эффективные мишени . Постановка анализа являлась следующей: каждая лунка 96-луночного планшета содержит однодневную L. hesperus нимфу под действием саше из парафильма, содержащего сахарозную пищу, которая включает либо тестируемую dsRNA, либо контрольную dsRNA в присутствии tRNA. Каждый планшет содержал dsRNA из 90 различных клонов, 3×Lh423 (положительный контроль) и 3×FP (флуоресцентный белок; отрицательный контроль). Каждый клон (тестируемая dsRNA) реплицировали на трех планшетах. После трех дней воздействия зарегистрировали число выживших нимф и заменили пищу на свежую пищу (комплексной) для выращивания, не содержащую dsRNA. Смертность оценивали в дни 4, 6 и 8. Идентичную постановку использовали для подтверждающих анализов первого и второго цикла, соответственно с 8 и 20 насекомыми, с одной нимфой на лунку.
Систему анализа проверяли с использованием dsRNA, соответствующей мишени Lh423, в качестве положительного контроля и dsRNA флуоресцентного белка в качестве отрицательного контроля: более 90% являлись истинно положительными и менее 5% являлись ложноположительными, соответственно.
Протестировали двадцать 96-луночных планшетов, поименованных Lh001-Lh020 (см. нижнюю линию на фигурах 1 и 2), содержащих 1800 отдельных клонов. 205 кандидатов идентифицировали и протестировали в первом подтверждающем анализе. Устанавливая пороговую величину на показателе ≥50% смертности, 41 отдельный клон идентифицировали и продвинули во второй цикл подтверждения. В анализе клоны сравнивали с положительными контролями Lh423 (RpL19) и Lh105.2 (Sec23) и отрицательным контролем Pt (кодирующим флуоресцентный белок коралла). dsRNA, соответствующей положительному контрольному клону(Lh423), является SEQ ID NO 101, соответствующей положительному контрольному клону Lh105.2 является SEQ ID NO 102 и отрицательному контрольному клону (Pt), является SEQ ID NO 104 (см. таблицу 4).
Подтверждающие анализы второго цикла, тестирующие 20 насекомых/тестируемых dsRNA, начали для всех тестируемых dsRNA, показывающих ≥50% смертности в первом подтверждении (фигуры 1 и 2). Подходящие мишени, соответствующие подтвержденным тестируемым dsRNA, обозначили с помощью ʺLhxxx числоʺ (см. таблицу 1). Применяя то же пороговое значение при ≥50% смертности, в первом скрининге подтвердили 15 мишеней.
Lygus hesperus
Выполнили второй скрининг для идентификации новых мишеней . Результаты подтверждающих анализов второго цикла представлены на фигуре 12. Применяя то же пороговое значение при ≥50% смертности, несколько мишеней подтвердили во втором скрининге (см. таблицу 1С).
1.3. Идентификация мишеней Lygus
Drosophila
Triboliu
Одновременно с подтверждающими анализами на насекомых, вставки, соответствующие положительным клонам, секвенировали и для подтверждения идентичности мишеней использовали BlastX поиски по сравнению с базами данных белков  и . В таблице 1 приводится краткое изложение биоинформационного анализа и текущая аннотация новых идентифицированных целевых последовательностей L. hesperus.
Пятнадцать новых мишеней L. hesperus идентифицировали в первом скрининге и 11 новых мишеней L. Hesperus идентифицировали во втором скрининге. Все мишени проявляют высокую эффективность против нимф L. hesperus, указывая на то, что cDNA, кодирующие двухцепочечные РНК, содержащиеся в них, являются существенно важными для выживания вредителя и, таким образом, представляют гены-мишени, представляющие интерес в целях борьбы с вредителями. Последовательности ДНК и предсказанные аминокислотные последовательности данных генов-мишеней, следовательно, определили и представили в таблицах 2 и 3, соответственно.
Lygus hesperus
Drosophila
Lh594, ортолог  к тропонину I , участвующему в сокращении мышц и, следовательно, отсутствующему у растений, представляет новый класс мишеней, относящихся к специфическому для животных физиологическому пути, еще не изученному на GM-RNAi. У плодовой мушки тропонин I описан как гаплонедостаточный ген, проявляющий мутантный фенотип в гетерозиготном состоянии. Такие гены могут являться особенно восприимчивыми к снижению уровней экспрессии mRNA и, таким образом, могут рассматриваться как идеальные мишени для RNAi.
Tribolium
Lygus hesperus
В данном пути Lh594 отобрали восемь мишеней (см. таблицу 1B). Для каждой мишени до 4 пар вырожденных праймеров ПЦР сконструировали на основе выравнивания последовательностей различных насекомых, включая пчелу,  и тлю. Данные праймеры применяют для амплификации фрагментов из мишеней . Последовательности ДНК и предсказанные аминокислотные последовательности данных генов-мишеней определили и представили в таблицах 2 и 3, соответственно.
<b>Таблица 1</b><b>новые мишени </b><b><i>Lygus hesperus</i></b><b>, ранжированные по % смертности в соответствии с результатами второго подтверждающего анализа (первый скрининг)</b>
ID мишени
позиция во 2-м подтвер-ждении
Лучшие попадания Drosophila
НАЗВАНИЕ
ОБОЗНАЧЕНИЕ
Lh594
1
CG7178
wings up A (тропонин I)
wupA
Lh618
2
CG2168
рибосомный белок S3A
RpS3A
Lh609
3
CG4087
рибосомный белок LP1
RpLP1
Lh595
4
-
не обнаружено попаданий для Drosophila, специфическая мишень/последовательность Lygus
Lh611
5
CG6779
рибосомный белок S3
RpS3
Lh560
6
CG10423
рибосомный белок S27
RpS27
Lh596
7
-
не обнаружено попаданий для Drosophila, специфическая мишень/последовательность Lygus
RpL34b
Lh615
8
CG11522
рибосомный белок L6
RpL6
Lh617
9
CG7283
рибосомный белок L10Ab
RpL10Ab
Lh612
10
CG13389
рибосомный белок S13
RpS13
Lh246
11
CG3195
рибосомный белок L12
RpL12
Lh429
12
CG8900
рибосомный белок S18
RpS18
Lh610
13
CG5502
рибосомный белок L4
RpL4
Lh597
14
не обнаружено попаданий
Lh598
15
CG34069
субъединица II митохондриальной цитохром с-оксидазы
mt:CoII
Lh614
-
CG7610
γ-цепь ATP синтазы
ATPsyn-γ
<b>Таблица 1B</b><b>новые мишени </b><b><i>Lygus hesperus</i></b><b> в пути Lh594</b>
ID мишени
Лучшее попадание (попадания)
НАЗВАНИЕ
ОБОЗНАЧЕНИЕ
Lh619
CG7107
тропонин T (upheld)
up
Lh620
CG17927
тяжелая цепь миозина
Mhc
Lh621
CG4843
Тропомиозин2 (Tm2)
Tm2
Lh622
CG3201
цитоплазматическая легкая цепь миозина
Mlc-c
Lh623
CG3595
spaghetti squash
sqh
Lh624
CG15792
zipper
zip
Lh625
*CG2981,CG7930,CG9073,CG6514,CG12408
тропонин C
Lh626
*CG9073,CG7930,CG2981,CG12408,CG6514
тропонин C
* не ясно: несколько попаданий в семействе ранжированы в соответствии с собственным значением.
<b>Таблица 1C</b><b>новые мишени </b><b><i>Lygus hesperus</i></b><b>, ранжированные по % смертности в соответствии с результатами второго подтверждающего анализа (второй скрининг)</b>
ID мишени
позицияво 2-м подтверждении
Лучшие попадания Drosophila
НАЗВАНИЕ
ОБОЗНАЧЕНИЕ
Lh631
1
CG6846
Рибосомный белок L26
RpL26
Lh634.2
2
CG12775
Рибосомный белок L21
RpL21
Lh634.1
3
CG12775
Рибосомный белок L21
RpL21
Lh630
4
CG11271
Рибосомный белок S12
RpS12
Lh632
5
CG2998
Рибосомный белок S28b
RpS28b
Lh618.2
6
CG2168
Рибосомный белок S3A
RpS3A
Lh629
7
CG4651
Рибосомный белок L13
RpL13
Lh633.2
8
CG17521
Рибосомный белок L10
RpL10
Lh628
9
CG17489
Рибосомный белок L5
RpL5
Lh633
10
CG17521
Рибосомный белок L10
RpL10
Lh627
11
CG2033
Рибосомный белок S15Aa
RpS15A
1.4. Клонирование полноразмерной cDNA с помощью RACE (быстрая амплификация концов cDNA)
Для клонирования полноразмерной cDNA, начиная от известного клона внутреннего фрагмента из самых эффективных мишеней, использовали набор 5’/3’ RACE (Roche, кат. № 1734792; на основе Sambrook, J. & Russell, D.M). Следовали стандартному протоколу, описанному в руководстве по эксплуатации. Вкратце, для 5’ RACE сконструировали антисмысловой праймер, специфический для целевой последовательности, на известной последовательности и применяли для синтеза первой цепи cDNA, применяя РНК Lygus в качестве матрицы. К первой цепи cDNA добавили хвост и использовали в качестве якоря для синтеза второй цепи и амплификации неизвестной концевой части транскрипта. Для 3’ RACE применяли якорный олиго-dT праймер для синтеза первой цепи cDNA. Для 5’ и 3’ RACE во второй реакции ПЦР применяли вложенные праймеры, специфические для целевой последовательности. Фрагменты ПЦР анализировали на агарозном геле, очищали, клонировали и секвенировали для подтверждения.
Последовательности полноразмерной cDNA, соответствующие мишеням, собрали в VectorNTi, полностью интегрированном пакете программного обеспечения для анализа последовательности, с целью анализа последовательности ДНК (Invitrogen).
Пример 2. In vitro получение двухцепочечных РНК для сайленсинга генов
2.2. Получение dsRNA, соответствующих частичным последовательностям генов-мишеней
Lygus hesperus
Двухцепочечную РНК синтезировали в миллиграммовых количествах. Сначала две отдельные матрицы 5' T7 РНК-полимеразного промотора (смысловая матрица и антисмысловая матрица) создали с помощью ПЦР. ПЦР разрабатывали и проводили таким образом, чтобы получить смысловой и антисмысловой матричные полинуклеотиды, каждый из которых обладает T7 промотором в различной ориентации по отношению к целевой последовательности, подлежащей транскрибированию.
Для каждого из генов-мишеней создали смысловую матрицу, применяя мишень-специфический T7 прямой праймер и мишень-специфический обратный праймер. Антисмысловые матрицы создали, применяя мишень-специфический прямой праймер и мишень-специфический T7 обратный праймер. Последовательности соответствующих праймеров для амплификации смысловой и антисмысловой матриц посредством ПЦР для каждого из генов-мишеней приведены в таблице 4. ПЦР-продукты анализировали с помощью электрофореза в агарозном геле и очистили. Полученные смысловую и антисмысловую T7 матрицы смешали и транскрибировали путем добавления T7 РНК-полимеразы. Одноцепочечным РНК, полученным путем транскрипции с матриц, предоставили возможность соединиться, обработали с помощью ДНКазы и РНКазы и очистили осаждением. Смысловая цепь образующейся в результате dsRNA, полученная от каждого из генов-мишеней, приведена в таблице 4.
2.2. Испытания анализа выживаемости для новых мишеней
Lygus hesperus
Для создания возможности ранжирования в соответствии с эффективностью, in vitro dsRNA, соответствующие новым мишеням, синтезировали и применили к L. hesperus в 10-дневных биопробах анализа выживаемости. Вкратце, однодневных нимф L. hesperus поместили в 96-луночные планшеты с сахарозными пленками, содержащими 0,5 мкг/мкл dsRNA-мишени, с добавлением 5 мкг/мкл дрожжевой tRNA. Планшеты инкубировали в течение 3 дней в стандартных условиях выращивания Lygus. В дни 3, 6 и 8 пищевые пленки обновляли пленками, содержащими только пищу Lygus. Lh423 (RpL19) использовали в качестве положительного контроля, а GFP dsRNA и сахарозную пищу использовали в качестве отрицательного контроля.
Результаты анализа выживаемости подтвердили данные первого и второго подтверждающих анализов. Lh594 установили в качестве высокоэффективной мишени с активностью и скоростью поражения, более сильной, чем сильный контроль Lh423.
До сих пор скрининг Lygus на новые мишени идентифицировал новые мишени с активностями более высокими или находящимися в диапазоне положительного контроля Lh423, которые включают Lh429, Lh594, Lh609, Lh610, Lh611, Lh617 и Lh618. Смертность, вызванная данными мишенями, показана на фигурах 3 и 4.
Для обеспечения более точного ранжирования мишеней в соответствии с их активностью выполнили анализы концентрации в зависимости от дозы. Новые мишени тестировали в in vitro анализах при концентрации в диапазоне от 0,4 до 0,025 мкг/мкл. Согласно условию, 24-дневных нимф тестировали в постановке с 96-луночным планшетом, в сахарозной пище с добавлением dsRNA и носителя tRNA. Результаты представлены в виде % выживаемости в течение 10-дневного эксперимента (фигуры 5-9) и суммированы в таблице 5.
На основе анализа кривой концентрации мишени ранжировали путем сравнения с исходными контролями Lh423 и Lh105 (таблица 5).
<b>Таблица 5</b><b>ранжирование новых мишеней Lygus в соответствии с DRC и по сравнению с исходными мишенями Lh423 и Lh105</b>
IDмишени
Эффективность, выраженная в мкг/мкл dsRNA, необходимая для достижения 90% уничтожения в день 7
Lh594
0,025 (в день 6)
Lh618
0,05-0,1
Lh612
0,05
Lh615
0,05
Lh423
0,1
Lh595
0,1
Lh560
0,1
Lh610
0,1
Lh617
0,1
Lh105
0,2
Lh614
0,2 (в день 6)
Lh611
0,2
Lh596
0,3
Lh609
Не определено
Lh429
Не определено
Эффективность Lh594 подтвердили дополнительно. Эффект данной мишени отчетливо наблюдается по меньшей мере за один день до эффекта других мишеней и исходного положительного контроля Lh105 и Lh423. Так как Lh594 являлась высокоэффективной, в стандартном DRC эксперименте с концентрацией в диапазоне от 0,4 до 0,025 мкг/мкл dsRNA LD50 не достигли (фигура 6), следовательно, Lh594 эксперимент повторили, включая более низкие концентрации в диапазоне от 0,05 до 0,001 мкг/мкл dsRNA (фигура 10). В заключение, активность Lh594 наблюдали при такой низкой концентрации, как 0,0025 мкг/мкл, и получили примерно 90% уничтожение (что соответствует примерно 10% выживаемости) в день 6 при 0,025 мкг dsRNA.
Lygus hesperus
Для дополнительного изучения эффективности Lh594 и роли носителя tRNA в ответе на RNAi у  дополнительные in vitro анализы питания подготовили в отсутствие носителя tRNA. Lh594, Lh423 (исходный контроль) и GFP (отрицательный контроль) dsRNA получили in vitro, применяя стандартный способ. dsRNA очистили и тестировали при 5 мкг/мкл в отсутствие tRNA (фигура 11 A).
В отсутствие tRNA, мишени Lh594 и Lh423 индуцировали высокую летальность у нимф Lygus. Результаты данного эксперимента были воспроизведены позднее. dsRNA-мишень обладала способностью индуцировать эффекты RNAi-путем-кормления у нимф Lygus в отсутствие tRNA.
Для исследования активности dsRNA при более низких концентрациях в отсутствие носителя tRNA, поставили дополнительные эксперименты, применяя уменьшение количеств dsRNA (фигура 11 B).
Lygus
Аналогичный подход применялся для мишеней , которые идентифицировали во втором скрининге. Для обеспечения ранжирования мишеней в соответствии с их активностью выполнили анализы концентрации в зависимости от дозы. Новые мишени тестировали в in vitro анализах при концентрациях в диапазоне от 0,5 до 0,05 мкг/мкл. Согласно условию, 24-дневных нимф тестировали в постановке с 96-луночным планшетом, в сахарозной пище с добавлением dsRNA и носителя tRNA. Результаты представлены в виде % выживаемости в течение 9-дневного эксперимента (фигуры 15 A-D). Lh594 и Lh423 включили в анализ в качестве эталонных мишеней. Результаты суммированы в таблице 6. На основе анализа кривой концентрации мишени ранжировали путем сравнения с исходным контролем Lh423.
<b>Таблица 6</b><b>новые мишени Lygus из второго скрининга, ранжирование в соответствии с DRC и по сравнению с исходными мишенями Lh423 и Lh594</b>
ID мишени
Эффективность, выраженная в мкг/мкл dsRNA, необходимой для достижения 90% уничтожения в день 7
Lh594
0,025 (в день 6)
Lh634
0,1
Lh423
0,1
Lh631
0,4
Lh633
0,4
Lh627
0,5
Lh628
0,5
Lh630
0,5
Lh632
0,5
Lh629
Не определено
Пример 3. Скрининг пути тропонина
Для создания возможности тестирования мишеней пути тропонина, in vitro полученные dsRNA, соответствующие Lh619, Lh620, Lh621, Lh622, Lh622, Lh623, Lh624, Lh625 и Lh626, синтезировали и применили к L. hesperus в 10-дневных биопробах анализа выживаемости. Вкратце, однодневных нимф L. hesperus поместили в 96-луночные планшеты с сахарозными пленками, содержащими 0,5 мкг/мкл dsRNA-мишени, с добавлением 5 мкг/мкл дрожжевой tRNA. Планшеты инкубировали в течение 3 дней в стандартных условиях выращивания Lygus. В дни 3, 6 и 8 пищевые пленки обновляли пленками, содержащими только пищу Lygus. Lh594 (тропонин I) использовали в качестве положительного контроля и GFP dsRNA и сахарозную пищу использовали в качестве отрицательных контролей (фигура 13). Четыре мишени затем включили в анализы кривой дозовой зависимости в in vitro анализе, с концентрациями в диапазоне от 0,4 до 0,025 мкг/мкл. Согласно условию, 24-дневных нимф тестировали в постановке с 96-луночным планшетом, в сахарозной пище с добавлением dsRNA и носителя tRNA. Результаты представлены в виде % выживаемости в течение 10-дневного эксперимента (фигуры 14 A-B).
Пример 4. Идентификация генов-мишеней у
Leptinotarsa decemlineata
4.1. Нормализованная cDNA-библиотека
Leptinotarsa decemlineata
и получение dsRNA в многолуночных планшетах для скрининговых исследований
Нуклеиновые кислоты выделили из личинок Leptinotarsa decemlineata различных стадий. Библиотеку cDNA получали с использованием ПЦР-набора для синтеза cDNA SMARTer™, следуя инструкциям производителя (Clontech кат. № 634925). Библиотеку cDNA нормализовали, применяя набор Trimmer kit (Evrogen кат. № NK001), и клонировали в PCR-BLUNTII-TOPO вектор (Invitrogen). При нормализации клонов вводили M2 адаптеры (Trimmer Kit, Evrogen, SEQ ID NO 92: AAGCAGTGGTATCAACGCAG), противоположно ориентированных на каждом конце клонов. Рекомбинантные конструкции векторов трансформировали в клетки Escherichia coli, штамм TOP10 (Invitrogen). Трансформированные клетки затем разбавляли и высевали с целью получения отдельных колоний или клонов. Клоны проверяли для подтверждения того, что избыточность клонов для библиотеки не превышает 5%. Отдельные клоны инокулировали в жидкую LB (бульон Лурия) среду, в 96-луночные планшеты, и выращивали в течение ночи при 37°C. Планшеты также включали положительный (Ld513) и отрицательный (FP) контрольные клоны.
Для создания dsRNA с помощью ПЦР создали смысловой и антисмысловой фрагменты ДНК, содержащие последовательность T7 промотора. Вкратце, на клон, 1 мкл бактериальной суспензии помещали в многолуночные ПЦР-планшеты, содержащие REDTaq (Sigma кат. № D4309) и праймеры oGCC2738 (SEQ ID NO 93: AAGCAGTGGTATCAACGCAG) и oGCC2739 (SEQ ID NO 94: GCGTAATACGACTCACTATAGGAAGCAGTGGTATCAACGCAG) на основе последовательностей M2 и T7-M2, соответственно. За ПЦР реакцией следовала in vitro транскрипция, при этом на клон использовали 6 мкл ПЦР-продукта в 20 мкл реакционного объема, содержащего реагенты для транскрипции, обеспеченные набором RiboMAX™ Large Scale RNA Production System-T7 kit (Promega кат. № P1300), и инкубировали в течение ночи при 37°C. Конечный раствор dsRNA разбавляли стерильной водой Milli-Q и использовали для скрининга. dsRNA, соответствующей положительному Ld513 контрольному клону, является SEQ ID NO 400 (см. таблицу 9), и отрицательному FP контрольному клону, является SEQ ID NO 104 (см. таблицу 4).
4.2. Скрининг на новые и эффективные гены мишени
Leptinotarsa decemlineata
с использованием cDNA-библиотеки экспрессируемых dsRNA
Каждая лунка 48-луночного планшета содержала 0,5 мл искусственной пищи, предварительно обработанной с помощью наружного покрытия 25 мкл (или 1 мкг) тестируемой или контрольной dsRNA. Одну L2 личинку помещали в каждую лунку и на клон тестировали 3 личинки. Количества выживших CPB оценивали в дни 4, 7 и 10.
Во второй биопробе личинок CPB кормили пищей, обработанной наружно наносимой тестируемой dsRNA, полученной из клонов, полученных из нормализованной библиотеки cDNA. Одну личинку помещали в лунку 48-луночного мультипланшета, содержащего 0,5 мл пищи, предварительно обработанной с помощью наружного покрытия 25 мкл 40 нг/мкл dsRNA раствора. Всего на обработку (клон) тестировали двадцать четыре личинки. Количество выживших насекомых оценивали в дни 4, 5, 6, 7, 8 и 11. Процент смертности личинок рассчитывали относительно дня 0 (начало исследования) (см. фигуру 21).
4.3. Идентификация мишеней у
L. decemlineata
жуков
Lygus
L. decemlineata
Новые целевые последовательности из скрининга в 5.2. и целевые последовательности, соответствующие мишеням пути тропонина, ортологическим  Lh594, Lh619 и Lh620 последовательностям, идентифицировали у . Праймеры, которые обеспечили соответствующие фрагменты cDNA для Ld594, перечислены в таблице 17. Последовательности cDNA и предсказанные аминокислотные последовательности данных генов-мишеней определили и представили в таблицах 7 и 9, соответственно.
4.4. Получение dsRNA, соответствующих частичным последовательностям
L. decemlineata
генов-мишеней
dsRNA синтезировали с использованием праймеров, которые указаны в таблице 9. Смысловая цепь полученной в результате dsRNA, полученная из генов-мишеней, приведена в таблице 9.
4.5. Испытания анализа выживаемости для новых
L. decemlineata
мишеней
Ранний личиночный анализ
et al
Синтетические dsRNA получили для 3 мишеней, Ld594, Ld619 и Ld620, и тестировали в анализе с питанием на личинках CPB (см. фигуру 16). 10-дневный анализ проводили в 48-луночных планшетах, на искусственной пище (на основе Gelman , J Ins Sc,1:7, 1-10: Artificial diets for rearing the Colorado Potato Beetle), с добавлением 1 мкг dsRNA/лунку с 12 личинками согласно условиям.
Наблюдали четкий эффект на развитие личинок. Второй анализ поставили для изучения эффекта данных dsRNA в течение окукливания и метаморфоза (см. анализ окукливания ниже).
Анализ окукливания
in vitro
Анализ окукливания CPB поставили для изучения эффекта RNAi нокдауна Ld594, Ld619 и Ld620 в течение окукливания и метаморфоза. Личинок четвертой возрастной стадии кормили 1 мкг синтезированной dsRNA, распределенной на листовых дисках картофеля, и затем переносили в коробку с необработанными свежими листьями картофеля. Через четыре дня выживших насекомых помещали на вермикулит для обеспечения окукливания. Обработанные с помощью Lh594 насекомые были медленными, более мелкими и, в основном, не способными пройти окукливание. Вылупление куколки оценивали в конце эксперимента. Для необработанного контроля 24 личинки окуклились и все вылупились в здоровых имаго. Для Ld620 наблюдали снижение численности личинок, прогрессирующих в окукливание. Для трех протестированных мишеней отсутствовали личинки, развившиеся в здоровые куколки, и ни одна не вылупилась в имаго. Мертвые насекомые, извлеченные из вермикулита, демонстрировали различную степень пороков развития (фиг. 17).
Ld594, Ld619 и Ld620 вначале предстали в качестве несмертельных мишеней в анализе личинок CPB, хотя снижение жизнеспособности отчетливо наблюдалось у насекомых, обработанных dsRNA. С другой стороны, в анализе окукливания все 3 мишени индуцировали сильные эффекты и ингибировали вхождение в окукливание и/или метаморфоз.
Анализ имаго
Для оценки активности Ld594, Ld619 и Ld620 у имаго CPB поставили анализ листовых дисков. Листовые диски картофеля (1,7 см в диаметре) покрыли dsRNA или контролями и поместили в 3,5 см чашки Петри с одним взрослым жуком. На следующий день насекомым предоставили свежий обработанный листовой диск. На третий день имаго перенесли в коробку, содержащую достаточно свежих, необработанных листьев картофеля для поддержания выживания необработанных контролей. На обработку тестировали 6 имаго и подсчитывали количества выживших и умирающих насекомых с регулярными интервалами от дня 6 до дня 13. Насекомые считались умирающими, если они не могли перевернуться после укладывания на спину.
Несмотря на относительно высокий уровень фона в отрицательном контроле в данном конкретном анализе, наблюдали четкие эффекты на насекомых, которых подвергли воздействию Ld594 или Ld619 dsRNA (фиг. 18).
Пример 5. Идентификация генов-мишеней у
Nilaparvata lugens
5.1. Идентификация мишеней
Nilaparvata lugens
Nilaparvata lugens
Новые целевые последовательности, соответствующие мишеням пути тропонина и названные Nl594 (тропонин I), Nl619 (тропонин T) и Nl626 (тропонин C), идентифицировали у коричневого дельфацида, . Ортологические последовательности генов Lygus, названные Nl594 (тропонин I), Nl619 (тропонин T) и Nl625/626 (тропонин C), клонировали посредством ПЦР с вырожденными праймерами с использованием BPH cDNA в качестве матрицы. В дополнение, полноразмерную cDNA идентифицировали для Nl594, применяя RACE (см. способ выше). ПЦР-систему AmpliTaq Gold (Applied Biosystems) применяли, следуя инструкциям производителя и в стандартных условиях для реакции ПЦР с вырожденными праймерами, как правило, следующим образом: 1 цикл в 10 минут при 95°C, с последующими 40 циклами по 30 секунд при 95°C, 1 минуту при 50°C и 1 минуту при 72°C, с последующими 10 минутами при 72°C. Для увеличения степени успеха до 10 различных вырожденных праймеров, прямых и обратных, разработали на основе выравниваний ортологических последовательностей у других видов и использовали в различных комбинациях. Полученные ПЦР-фрагменты очищали из геля с помощью набора для экстракции геля (Qiagen Cat. No 28706) и клонировали в TOPO TA вектор (Invitrogen). Клоны секвенировали и консенсусные последовательности использовали в Blast поисках в отношении различных доступных баз данных последовательностей насекомых для подтверждения значимости вставки. Вырожденные праймеры, которые привели к успешной амплификации, перечислены в таблице 18.
Последовательности ДНК и предсказанные аминокислотные последовательности данных генов-мишеней и еще одного гена-мишени (Nl537) определили и представили в таблицах 10 и 11, соответственно.
5.2 Получение dsRNA, соответствующих частичным последовательностям генов-мишеней
Nilaparvata lugens
dsRNA синтезировали с использованием праймеров, которые указаны в таблице 12. Смысловая цепь образующейся в результате dsRNA, полученная от каждого из генов-мишеней, приведена в таблице 12.
5.3. Испытания анализа выживаемости для новых мишеней
Nilaparvata lugens
dsRNA синтезировали и тестировали в предварительно оптимизированных анализах RNAi-путем-кормления у BPH, в присутствии цвиттерионного детергента, CHAPSO, при 0,1% конечной концентрации. dsRNA тестировали при 0,5 мкг/мкл конечной концентрации. Nl537, эффективную мишень в анализах BPH, использовали в качестве исходной мишени в данном анализе. Выживаемость насекомых оценивали на протяжении 9 дней.
Результаты биопробы показали, что у BPH Nl594, Nl619 и Nl626 также являлись эффективными мишенями RNAi у BPH (фиг. 19).
Пример 6. Идентификация генов-мишеней у
Acyrthosiphon pisum
6.1 Идентификация мишеней
Acyrthosiphon pisum
Acyrthosiphon pisum
http://www.aphidbase.com/
Новые целевые последовательности идентифицировали у тлей и назвали Ap423, Ap537, Ap560 и Ap594, следуя той же номенклатуре: “Apxxx”, где “Ap” соответствует и “xxx” соответствует ID мишени. Праймеры разрабатывали на основе открытого источника предсказания генов в AphidBase (ref: ) (таблица 13).
Последовательности ДНК и предсказанные аминокислотные последовательности данных генов-мишеней определили и представили в таблицах 14 и 15, соответственно.
6.2 Получение dsRNA, соответствующих частичным последовательностям генов-мишеней тли
dsRNA синтезировали с использованием праймеров, которые указаны в таблице 16. Смысловая цепь образующейся в результате dsRNA, полученная от каждого из генов-мишеней, приведена в таблице 16.
6.3 Испытания анализа выживаемости для новых мишеней у тлей
Acyrthosiphon pisum
RNAi-путем-кормления тестировали у  (гороховая тля) с 4 мишенями Ap594, Ap423, Ap560, Ap537. Последовательности амплифицировали с помощью ПЦР с использованием праймеров, разработанных на основе открытого источника информации о последовательностях (http://www.aphidbase.com), и cDNA, полученной из тлей. Синтетические dsRNA получали и тестировали в конечной концентрации 0,5 мкг/мкл в присутствии 5 мкг/мкл дрожжевой tRNA в сахарозной пище. Десять новорожденных нимф гороховой тли поместили в маленькую чашку Петри (32 мм). Пятьдесят мкл пищи (с tRNA и dsRNA) наносили пипеткой на верхнюю часть первого слоя парафильма. Второй слой парафильма покрывал пищу и создавал пакетик для кормления, где тли могли питаться. На каждую мишень подготовили пять повторов 10 новорожденных нимф. GFP dsRNA использовали в качестве отрицательного контроля. Пищу обновляли в дни 4 и 7 анализов и оценивали выживаемость (фиг. 20).
<b>Таблица 2</b>
ID мишени
Последовательность cDNA (смысловая цепь) 5’→3’
Lh594
SEQ ID NO 1
Lh609
SEQ ID NO 3
Lh610
SEQ ID NO 5
Lh610 (b)
SEQ ID NO 139
Lh611
SEQ ID NO 7
Lh611 (b)
SEQ ID NO 140
Lh617
SEQ ID NO 9
Lh618
SEQ ID NO 11
Lh618 (b)
SEQ ID NO 141
Lh429
SEQ ID NO 13
Lh423
SEQ ID NO 95
Lh105.2
SEQ ID NO 96
Lh560
SEQ ID NO 15
Lh615
SEQ ID NO 17
Lh612
SEQ ID NO 19
Lh246
SEQ ID NO 21
Lh597
SEQ ID NO 23
Lh598
SEQ ID NO 25
Lh619
SEQ ID NO 121
Lh619 (b)
SEQ ID NO 142
Lh619 (c)
SEQ ID NO 143
Lh620
SEQ ID NO 122
Lh620 (b)
SEQ ID NO 144
Lh620 (c)
SEQ ID NO 145
Lh621
SEQ ID NO 123
Lh622
SEQ ID NO 124
Lh623
SEQ ID NO 125
Lh623 (b)
SEQ ID NO 146
Lh624
SEQ ID NO 126
Lh624 (b)
SEQ ID NO 147
Lh625
SEQ ID NO 127
Lh625 (b)
SEQ ID NO 148
Lh626
SEQ ID NO 128
Lh626 (b)
SEQ ID NO 149
Lh614
SEQ ID NO 129
Lh627
SEQ ID NO 150
Lh628
SEQ ID NO 152
Lh629
SEQ ID NO 154
Lh630
SEQ ID NO 156
Lh631
SEQ ID NO 158
Lh632
SEQ ID NO 160
Lh633.1
SEQ ID NO 162
Lh633.2
SEQ ID NO 163
Lh634.1
SEQ ID NO 165
Lh634.2
SEQ ID NO 167
Lh595.1
SEQ ID NO 168
Lh595.2
SEQ ID NO 170
Lh596
SEQ ID NO 172
<b>Таблица 3</b>
ID мишени
Соответствующая аминокислотная последовательностьcDNA клона, представленного в таблице 2
Lh594
SEQ ID NO 79
Lh609
SEQ ID NO 80
Lh610
SEQ ID NO 81
Lh610 (b)
SEQ ID NO 326
Lh611
SEQ ID NO 82
Lh611 (b)
SEQ ID NO 327
Lh617
SEQ ID NO 83
Lh618
SEQ ID NO 84
Lh618 (b)
SEQ ID NO 328
Lh429
SEQ ID NO 85
Lh429 (b)
SEQ ID NO 329
Lh423
SEQ ID NO 99
Lh105.2
SEQ ID NO 100
Lh560
SEQ ID NO 86
Lh615
SEQ ID NO 87
Lh612
SEQ ID NO 88
Lh246
SEQ ID NO 89
Lh597
SEQ ID NO 90
Lh598
SEQ ID NO 91
Lh619
SEQ ID NO 330
Lh620
SEQ ID NO 331
Lh621
SEQ ID NO 332
Lh622
SEQ ID NO 333
Lh623
SEQ ID NO 334
Lh624
SEQ ID NO 335
Lh625
SEQ ID NO 336
Lh626
SEQ ID NO 337
Lh614
SEQ ID NO 338
Lh627
SEQ ID NO 339
Lh628
SEQ ID NO 340
Lh629
SEQ ID NO 341
Lh630
SEQ ID NO 342
Lh631
SEQ ID NO 343
Lh632
SEQ ID NO 344
Lh633.1
SEQ ID NO 345
Lh633.2
SEQ ID NO 346
Lh634.1
SEQ ID NO 347
Lh634.2
SEQ ID NO 348
<b>Таблица 4</b>
ID мишени
Прямые праймеры5’→3’
Обратные праймеры5’→3’
dsRNA: смысловая цепь, представленная эквивалентной последовательностью ДНК5’→3’
Lh594
SEQ ID NO 27SEQ ID NO 29
SEQ ID NO 28SEQ ID NO 30
SEQ ID NO 2
Lh609
SEQ ID NO 31SEQ ID NO 33
SEQ ID NO 32SEQ ID NO 34
SEQ ID NO 4
Lh610
SEQ ID NO 35SEQ ID NO 37
SEQ ID NO 36SEQ ID NO 38
SEQ ID NO 6
Lh611
SEQ ID NO 39SEQ ID NO 41
SEQ ID NO 40SEQ ID NO 42
SEQ ID NO 8
Lh617
SEQ ID NO 43SEQ ID NO 45
SEQ ID NO 44SEQ ID NO 46
SEQ ID NO 10
Lh618
SEQ ID NO 47SEQ ID NO 49
SEQ ID NO 48SEQ ID NO 50
SEQ ID NO 12
Lh429
SEQ ID NO 51SEQ ID NO 53
SEQ ID NO 52SEQ ID NO 54
SEQ ID NO 14
Lh423
SEQ ID NO 105SEQ ID NO 107
SEQ ID NO 106SEQ ID NO 108
SEQ ID NO 101
Lh105.2
SEQ ID NO 109SEQ ID NO 111
SEQ ID NO 110SEQ ID NO 112
SEQ ID NO 102
GFP
SEQ ID NO 113SEQ ID NO 115
SEQ ID NO 114SEQ ID NO 116
SEQ ID NO 103
Pt
SEQ ID NO 117SEQ ID NO 119
SEQ ID NO 118SEQ ID NO 120
SEQ ID NO 104
Lh560
SEQ ID NO 55SEQ ID NO 57
SEQ ID NO 56SEQ ID NO 58
SEQ ID NO 16
Lh615
SEQ ID NO 59SEQ ID NO 61
SEQ ID NO 60SEQ ID NO 62
SEQ ID NO 18
Lh612
SEQ ID NO 63SEQ ID NO 65
SEQ ID NO 64SEQ ID NO 66
SEQ ID NO 20
Lh246
SEQ ID NO 67SEQ ID NO 69
SEQ ID NO 68SEQ ID NO 70
SEQ ID NO 22
Lh597
SEQ ID NO 71SEQ ID NO 73
SEQ ID NO 72SEQ ID NO 74
SEQ ID NO 24
Lh598
SEQ ID NO 75SEQ ID NO 77
SEQ ID NO 76SEQ ID NO 78
SEQ ID NO 26
Lh619
SEQ ID NO 206SEQ ID NO 208
SEQ ID NO 207SEQ ID NO 209
SEQ ID NO 130
Lh620
SEQ ID NO 210SEQ ID NO 212
SEQ ID NO 211SEQ ID NO 213
SEQ ID NO 131
Lh621
SEQ ID NO 214SEQ ID NO 216
SEQ ID NO 215SEQ ID NO 217
SEQ ID NO 132
Lh622
SEQ ID NO 218SEQ ID NO 220
SEQ ID NO 219SEQ ID NO 221
SEQ ID NO 133
Lh623
SEQ ID NO 222SEQ ID NO 224
SEQ ID NO 223SEQ ID NO 225
SEQ ID NO 134
Lh624
SEQ ID NO 226SEQ ID NO 228
SEQ ID NO 227SEQ ID NO 229
SEQ ID NO 135
Lh625
SEQ ID NO 230SEQ ID NO 232
SEQ ID NO 231SEQ ID NO 233
SEQ ID NO 136
Lh626
SEQ ID NO 234SEQ ID NO 236
SEQ ID NO 235SEQ ID NO 237
SEQ ID NO 137
Lh614
SEQ ID NO 238SEQ ID NO 240
SEQ ID NO 239SEQ ID NO 241
SEQ ID NO 138
Lh627
SEQ ID NO 242SEQ ID NO 244
SEQ ID NO 243SEQ ID NO 245
SEQ ID NO 151
Lh628
SEQ ID NO 246SEQ ID NO 248
SEQ ID NO 247SEQ ID NO 249
SEQ ID NO 153
Lh629
SEQ ID NO 250SEQ ID NO 25
SEQ ID NO 251SEQ ID NO 253
SEQ ID NO 155
Lh630
SEQ ID NO 254SEQ ID NO 256
SEQ ID NO 255SEQ ID NO 257
SEQ ID NO 157
Lh631
SEQ ID NO 258SEQ ID NO 260
SEQ ID NO 259SEQ ID NO 261
SEQ ID NO 159
Lh632
SEQ ID NO 262SEQ ID NO 264
SEQ ID NO 263SEQ ID NO 265
SEQ ID NO 161
Lh633.2
SEQ ID NO 266SEQ ID NO 268
SEQ ID NO 267SEQ ID NO 269
SEQ ID NO 164
Lh634.1
SEQ ID NO 270SEQ ID NO 272
SEQ ID NO 271SEQ ID NO 273
SEQ ID NO 166
Lh595
SEQ ID NO 274SEQ ID NO 276
SEQ ID NO 275SEQ ID NO 277
SEQ ID NO 169
Lh596
SEQ ID NO 278SEQ ID NO 280
SEQ ID NO 279SEQ ID NO 281
SEQ ID NO 173
<b>Таблица 7</b>
ID мишени
Последовательность cDNA (смысловая цепь)5’→3’
Ld594
SEQ ID NO 174
Ld594(b)
SEQ ID NO 404
Ld619
SEQ ID NO 176
Ld620
SEQ ID NO 178
Ld583
SEQ ID NO 386
Ld584
SEQ ID NO 387
Ld586
SEQ ID NO 388
Ld588
SEQ ID NO 389
Ld513
SEQ ID NO 394
<b>Таблица 8</b>
ID мишени
Соответствующая аминокислотная последовательность cDNA клона, представленного в таблице 9
Ld594
SEQ ID NO 349
Ld594(b)
SEQ ID NO 405
Ld619
SEQ ID NO 350
Ld620
SEQ ID NO 351
Ld583
SEQ ID NO 390
Ld584
SEQ ID NO 391
Ld586
SEQ ID NO 392
Ld588
SEQ ID NO 393
Ld513
SEQ ID NO 395
<b>Таблица 9</b>
ID мишени
Прямые праймеры5’→3’
Обратные праймеры5’→3’
dsRNA: смысловая цепь, представленная эквивалентной последовательностьюДНК 5’→3’
Ld594
SEQ ID NO 282SEQ ID NO 284
SEQ ID NO 283SEQ ID NO 285
SEQ ID NO 175
Ld619
SEQ ID NO 286SEQ ID NO 288
SEQ ID NO 287SEQ ID NO 289
SEQ ID NO 177
Ld620
SEQ ID NO 290SEQ ID NO 292
SEQ ID NO 291SEQ ID NO 293
SEQ ID NO 179
Ld513
SEQ ID NO 396SEQ ID NO 398
SEQ ID NO 397SEQ ID NO 399
SEQ ID NO 400
<b>Таблица 10</b>
ID мишени
Последовательность cDNA (смысловая цепь)5’→3’
Nl594
SEQ ID NO 180
Nl619
SEQ ID NO 182
Nl626
SEQ ID NO 184
Nl537
SEQ ID NO 186
<b>Таблица 11</b>
ID мишени
Соответствующая аминокислотная последовательность cDNA клона, представленного в таблице 12
Nl594
SEQ ID NO 352
Nl619
SEQ ID NO 353
Nl626
SEQ ID NO 354
Nl537
SEQ ID NO 355
<b>Таблица 12</b>
ID мишени
Прямые праймеры5’→3’
Обратные праймеры5’→3’
dsRNA: смысловая цепь, представленная эквивалентной последовательностью ДНК5’→3’
Nl594
SEQ ID NO 294SEQ ID NO 296
SEQ ID NO 295SEQ ID NO 297
SEQ ID NO 181
Nl619
SEQ ID NO 298SEQ ID NO 300
SEQ ID NO 299SEQ ID NO 301
SEQ ID NO 183
Nl626
SEQ ID NO 302SEQ ID NO 304
SEQ ID NO 303SEQ ID NO 305
SEQ ID NO 185
Nl537
SEQ ID NO 306SEQ ID NO 308
SEQ ID NO 307SEQ ID NO 309
SEQ ID NO 187
<b>Таблица 13</b>
Мишень
Прямой праймер
Обратный праймер
Ap594
SEQ ID NO 369
SEQ ID NO 370
Ap423
SEQ ID NO 371
SEQ ID NO 372
Ap537
SEQ ID NO 373
SEQ ID NO 374
Ap560
SEQ ID NO 375
SEQ ID NO 376
<b>Таблица 14</b>
ID мишени
Последовательность cDNA (смысловая цепь) 5’→3’
Ap594
SEQ ID NO 188
Ap423
SEQ ID NO 200
Ap537
SEQ ID NO 202
Ap560
SEQ ID NO 204
<b>Таблица 15</b>
ID мишени
Соответствующая аминокислотная последовательность cDNA клона, представленного в таблице 16
Ap594
SEQ ID NO 356
Ap423
SEQ ID NO 357
Ap537
SEQ ID NO 358
Ap560
SEQ ID NO 359
<b>Таблица 16</b>
ID мишени
Прямые праймеры5’→3’
Обратные праймеры5’→3’
dsRNA: смысловая цепь, представленная эквивалентной последовательностью ДНК5’→3’
Ap594
SEQ ID NO 310SEQ ID NO 312
SEQ ID NO 311SEQ ID NO 313
SEQ ID NO 189
Ap423
SEQ ID NO 314SEQ ID NO 316
SEQ ID NO 315SEQ ID NO 317
SEQ ID NO 201
Ap537
SEQ ID NO 318SEQ ID NO 320
SEQ ID NO 319SEQ ID NO 321
SEQ ID NO 203
Ap560
SEQ ID NO 322SEQ ID NO 324
SEQ ID NO 323SEQ ID NO 325
SEQ ID NO 205
<b>Таблица 17</b>
Мишень
Прямой праймер
Обратный праймер
Ld594
SEQ ID NO 377
SEQ ID NO 378
<b>Таблица 18</b>
Мишень
Прямой праймер
Обратный праймер
Nl594
seq id no 379
seq id no 380
Nl619
seq id no 381
seq id no 382
Nl626
seq id no 383
seq id no 384
<b>Таблица 19</b>
ID мишени
Лучшие попадания Drosophila
НАЗВАНИЕ
ОБОЗНАЧЕНИЕ
Ld583
CG4759
Рибосомный белок L27
RpL27
Ld584
CG 17331
Протеасома, субъединица бета-типа
Ld586
CG13704
неизвестный
Ld588
CG4157
Rpn12
<b>Таблица 20</b>
ID мишени
Лучшие попадания Drosophila
НАЗВАНИЕ
ОБОЗНАЧЕНИЕ
Nl594
CG7178
wings up A (тропонин I)
wupA
Nl619
CG7107
тропонин T (upheld)
up
Nl626
*CG9073, CG7930, CG2981, CG12408, CG6514, CG2981, CG7930, CG9073, CG6514, CG12408
тропонин C
Nl537
CG32744
Убиквитин-5E; способ модификации белка
*неясно: несколько попаданий в семействе
<b>Таблица 21</b>
ID мишени
Лучшие попадания Drosophila
НАЗВАНИЕ
ОБОЗНАЧЕНИЕ
Ap594
CG7178
wings up A (тропонин I)
wupA
Ap423
CG2746
рибосомный белок L19
RpL19
Ap537
CG32744
Убиквитин-5E; способ модификации белка
Ap560
CG10423
рибосомный белок S27
RpS27
Специалистам в данной области будет очевидно, что многочисленные изменения и/или модификации можно внести в вышеупомянутые анализы без отступления от сущности или объема данного анализа, который описан в общем. Специалисты в данной области обнаружат или смогут установить, применяя не более чем обычное экспериментирование, многие эквиваленты конкретных примеров, и такие эквиваленты охватываются настоящим изобретением. Настоящий пример, таким образом, следует рассматривать во всех отношениях как иллюстративный, а не ограничительный.
--->
СПИСОК ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЕЙ
<110>  ДЕВГЕН НВ
<120>  ПОДАВЛЕНИЕ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ У НАСЕКОМЫХ-ВРЕДИТЕЛЕЙ
<130>  NLW/P122274WO01
<160>  405
<170>  PatentIn версия 3.5
<210>  1
<211>  1096
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  1
gcgatctaag gcaggtggca gacagctcga tgacggcagt gggccaagca ataatggata       60
gtcattcata gcaccccagc tttactaagc tctgccgtag tgttggattg ggagcggata      120
caattcacca cagaacagct atgacatgat acgcagtccg aataccctca taaaggacta      180
gtctgcaggt ttaacgatcg cgtagcagtg tatcacgcag agtacatggg gagtgactgt      240
gtgaacctgc tgggtacatc atcacccctc tccttcttca gttatataag acacagtccc      300
taaaggacac cagcaaaaat ggcggatgat gaggcgaaga aggccaaaca ggccgaaatc      360
gagaggaagc gcgctgaagt gcgcaagagg atggaggaag cctctaaggc gaagaaagcc      420
aagaagggtt tcatgacccc ggaaaggaag aagaaactcc gactcctgct gaggaaaaaa      480
gccgctgagg aactgaagaa ggagcaggaa cgcaaagcag ctgagaggag gcgaacgatt      540
gaggagcgct gcgggcaaat tgccgacgtc gacaacgcca atgaagcaac cttgaagaaa      600
ctctgcacag actaccataa gcgaattgac gctctggaga ggagtaaaat tgacatcgaa      660
ttcgaagtgg agagacgtga ccttgagatc gccgacctca acagccaggt caacgacctc      720
cgtggtaaat tcgtcaaacc taccttgaaa aaggtttcca agtacgaaaa caaattcgcc      780
aagctccaga agaaggctgc cgagttcaac ttcagaaacc aactcaaggt cgtcaaaaag      840
aaagaattca ccctggaaga agaagacaaa gagccgaaga aatcggaaaa ggcggagtgg      900
cagaagaaat gaagggaaaa caagcacacc atctcacaaa ataaaataaa cgaaaatctt      960
tcacacgttt accaatttta taacacggtc ctcacaaatt atgttcctta aataatttgt     1020
ataatccatc ctcgcactac aatcaatatt aatatttaaa tacaaaacca aaaaaaaaaa     1080
aaaaaaaaaa aaaaaa                                                     1096
<210>  2
<211>  491
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  2
caaacaggcc gaaatcgaga ggaagcgcgc tgaagtgcgc aagaggatgg aggaagcctc       60
taaggcgaag aaagccaaga agggtttcat gaccccggaa aggaagaaga aactccgact      120
cctgctgagg aaaaaagccg ctgaggaact gaagaaggag caggaacgca aagcagctga      180
gaggaggcga acgattgagg agcgctgcgg gcaaattgcc gacgtcgaca acgccaatga      240
agcaaccttg aagaaactct gcacagacta ccataagcga attgacgctc tggagaggag      300
taaaattgac atcgaattcg aagtggagag acgtgacctt gagatcgccg acctcaacag      360
ccaggtcaac gacctccgtg gtaaattcgt caaacctacc ttgaaaaagg tttccaagta      420
cgaaaacaaa ttcgccaagc tccagaagaa ggctgccgag ttcaacttca gaaaccaact      480
caaggtcgtc a                                                           491
<210>  3
<211>  431
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  3
atgggcatca tgtcgaaagc tgaactcgct tgtgtttact ccgctctcat cctcatcgac       60
gacgatgtcg ccgtgacggg tgagaagatt caaaccatcc tgaaggctgc cagtgtcgac      120
atcgagccgt actggcccgg tctgttcgcc aaggccctcg agggtatcaa ccccaaagac      180
ctcatctcct ccattggaag cggagttggt gctggagcgc cggctgtcgg tggagctgca      240
cctgccgccg ctgctgcccc tgccgctgag gctaagaagg aagagaagaa gaaggtcgaa      300
agcgatccag aatccgatga tgacatgggc ttcggtcttt tcgactaaga gcattccaca      360
gcgggttctc atttgttttt aagattttct tttaaaaaat aaaacttcca aaaaaaaaaa      420
aaaaaaaaaa g                                                           431
<210>  4
<211>  332
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  4
gggcatcatg tcgaaagctg aactcgcttg tgtttactcc gctctcatcc tcatcgacga       60
cgatgtcgcc gtgacgggtg agaagattca aaccatcctg aaggctgcca gtgtcgacat      120
cgagccgtac tggcccggtc tgttcgccaa ggccctcgag ggtatcaacc ccaaagacct      180
catctcctcc attggaagcg gagttggtgc tggagcgccg gctgtcggtg gagctgcacc      240
tgccgccgct gctgcccctg ccgctgaggc taagaaggaa gagaagaaga aggtcgaaag      300
cgatccagaa tccgatgatg acatgggctt cg                                    332
<210>  5
<211>  468
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  5
atgggggcag gtcttctcca taaccataga ttatcttcgt gtatcgtgtc gggctttcgg       60
ctgaggtcct aattagtaaa taatgattcc gcctacgtcg cggcctcagg tcactgtcta      120
cagtgacaaa aatgaggcca ccgggactct cctcaacctc ccggctgtct tcaacgcccc      180
cattcgcccc gatgttgtga acttcgttca ccaaaatgtc gctaaaaacc acaggcagcc      240
ctactgtgtc tccgctcaag ctggtcatca gacttcagct gagtcctggg gtaccggtcg      300
tgctgtggct cgtatccccc gtgttcgcgg aggtggtact caccgctcag gtcagggtgc      360
ttttggcaac atgtgtcgcg gcggtaggat gttcgctccc actcgcccat ggcgtcgttg      420
gcaccgcaaa atcaacgtta accaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaa                   468
<210>  6
<211>  429
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  6
gggcaggtct tctccataac catagattat cttcgtgtat cgtgtcgggc tttcggctga       60
ggtcctaatt agtaaataat gattccgcct acgtcgcggc ctcaggtcac tgtctacagt      120
gacaaaaatg aggccaccgg gactctcctc aacctcccgg ctgtcttcaa cgcccccatt      180
cgccccgatg ttgtgaactt cgttcaccaa aatgtcgcta aaaaccacag gcagccctac      240
tgtgtctccg ctcaagctgg tcatcagact tcagctgagt cctggggtac cggtcgtgct      300
gtggctcgta tcccccgtgt tcgcggaggt ggtactcacc gctcaggtca gggtgctttt      360
ggcaacatgt gtcgcggcgg taggatgttc gctcccactc gcccatggcg tcgttggcac      420
cgcaaaatc                                                              429
<210>  7
<211>  523
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  7
atgggatctc tatgctgaaa aggtcgccac cagaggtttg tgtgctattg cacaagctga       60
atccctccgt tacaaactca ttggcggtct tgctgtccga ggggcttgct atggtgtcct      120
tcgcttcatc atggaaaatg gtgccaaggg ttgcgaagtc gtagtatctg gaaaactgcg      180
tggtcagaga gccaagtcaa tgaagttcgt ggatggtttg atgatccaca gtggggatcc      240
ctgtaacgaa tatgttgata ctgctacccg acatgtgctc cttagacaag gtgtcctggg      300
aataaaggtg aagattatgt tgccgtggga cgttaccggc aaaaatgggc cgaagaaccc      360
tcttcccgac cacgtcagcg ttctcttacc taaggaggag ctaccaaatt tggccgttag      420
tgtgcctgga tccgacatca aaccaaagcc tgaagtacca gcacccgctt tgtgaatata      480
aacttctttt ttgtaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaa                        523
<210>  8
<211>  431
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  8
attgcacaag ctgaatccct ccgttacaaa ctcattggcg gtcttgctgt ccgaggggct       60
tgctatggtg tccttcgctt catcatggaa aatggtgcca agggttgcga agtcgtagta      120
tctggaaaac tgcgtggtca gagagccaag tcaatgaagt tcgtggatgg tttgatgatc      180
cacagtgggg atccctgtaa cgaatatgtt gatactgcta cccgacatgt gctccttaga      240
caaggtgtcc tgggaataaa ggtgaagatt atgttgccgt gggacgttac cggcaaaaat      300
gggccgaaga accctcttcc cgaccacgtc agcgttctct tacctaagga ggagctacca      360
aatttggccg ttagtgtgcc tggatccgac atcaaaccaa agcctgaagt accagcaccc      420
gctttgtgaa t                                                           431
<210>  9
<211>  823
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  9
catggggaca ctctcttttt cttcatcgcg tggctcgctg ccgtgtggtt agggagtttc       60
ctactttaat tttttagtgt aattcatctt caaaatgacg tcgaaggttt ctcgtgagac      120
cctctacgag tgcatcaatg gagtcatcca gtcctcccag gagaagaaga ggaacttcgt      180
ggagactgtg gagatccaga tcggtctgaa gaactacgat ccccagaagg acaagcgttt      240
ctcgggaact gtcaagctga agcacattcc aaggcctaaa atgcaggttt gcatcctcgg      300
agatcaacag cattgcgacg aggccaaagc caacaacgtg ccctacatgg acgtcgaggc      360
tctgaagaag ctcaacaaaa acaagaagct cgtcaagaaa ttggccaaga aatacgacgc      420
tttcctcgcc tcagaagccc tcatcaagca gatccccagg ctcctcggac ccggtctcaa      480
caaggcgggc aagttccctg gtctcctctc tcaccaggag tccatgatga tgaagatcga      540
cgaagtcaag gccaccatca agttccaaat gaagaaggtg ttgtgcctct cagtggctgt      600
cggtcacgtc ggcatgactg ctgatgagct cgtccagaac gtgcacttgt cggtcaactt      660
cctcgtttcg ctcctcaaga agcactggca gaacgtcagg tctctccacg tcaaatccac      720
gatgggacct ccccagaggc tttactaaac atcttgtttt ttacttttga cgaataaaat      780
tcgttttatt ctcgaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaa                        823
<210>  10
<211>  607
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  10
ccctctacga gtgcatcaat ggagtcatcc agtcctccca ggagaagaag aggaacttcg       60
tggagactgt ggagatccag atcggtctga agaactacga tccccagaag gacaagcgtt      120
tctcgggaac tgtcaagctg aagcacattc caaggcctaa aatgcaggtt tgcatcctcg      180
gagatcaaca gcattgcgac gaggccaaag ccaacaacgt gccctacatg gacgtcgagg      240
ctctgaagaa gctcaacaaa aacaagaagc tcgtcaagaa attggccaag aaatacgacg      300
ctttcctcgc ctcagaagcc ctcatcaagc agatccccag gctcctcgga cccggtctca      360
acaaggcggg caagttccct ggtctcctct ctcaccagga gtccatgatg atgaagatcg      420
acgaagtcaa ggccaccatc aagttccaaa tgaagaaggt gttgtgcctc tcagtggctg      480
tcggtcacgt cggcatgact gctgatgagc tcgtccagaa cgtgcacttg tcggtcaact      540
tcctcgtttc gctcctcaag aagcactggc agaacgtcag gtctctccac gtcaaatcca      600
cgatggg                                                                607
<210>  11
<211>  435
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  11
atgggaccaa taaagatcaa ctttcccaga gaaagacttg ctatgcccag cataatcagg       60
tccgagaaat ccgcaaaaag atggttaaaa acatcagtga cagcatttcc agctgtgatt      120
tgaggagtgt tgtgaacaag ctgatcccag actccatcgc taaagatata gaaaagaatt      180
gccaaggaat ctacccactc cacgatgtgt acattcggaa ggtgaaggtg ttgaagaagc      240
cgaggttcga gctcagcaag ctccttgagc ttcacgtcga tggcaaaggg atcgacgaac      300
ccggcgcgaa agtgacgagg actgacgctt acgagcctcc agttcaagag tctgtctaag      360
taaacatttt atataaagtt aacaaaaaat aaaggtgtct cgcctgacta aaaaaaaaaa      420
aaaaaaaaaa aaaaa                                                       435
<210>  12
<211>  353
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  12
ccaataaaga tcaactttcc cagagaaaga cttgctatgc ccagcataat caggtccgag       60
aaatccgcaa aaagatggtt aaaaacatca gtgacagcat ttccagctgt gatttgagga      120
gtgttgtgaa caagctgatc ccagactcca tcgctaaaga tatagaaaag aattgccaag      180
gaatctaccc actccacgat gtgtacattc ggaaggtgaa ggtgttgaag aagccgaggt      240
tcgagctcag caagctcctt gagcttcacg tcgatggcaa agggatcgac gaacccggcg      300
cgaaagtgac gaggactgac gcttacgagc ctccagttca agagtctgtc taa             353
<210>  13
<211>  474
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  13
catgggtacg aatatcgacg gtaaaagaaa ggtgatgttc gccatgaccg ccatcaaagg       60
tgtcggcaga cggtacgcca acattgtcct caagaaggcc gatgtcaact tggacaagag      120
ggccggcgaa tgctccgaag aagaagttga aaagatcgtt accatcatgc aaaaccctag      180
gcaatacaaa attcccaact ggttcctcaa cagacaaaaa gacaccgtcg agggcaaata      240
ctctcagttg acttcctccc tgctggattc caagctccgt gacgaccttg agcgactcaa      300
gaagatcagg gcccacagag gcatgaggca ctactggggt ttgagggtgc gtggtcaaca      360
cacgaagacc accggaagga gaggacgaac tgttggtgtg tccaagaaga agtaatttta      420
atttcctaat aaattggttt tttcaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaa            474
<210>  14
<211>  332
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  14
gaaaggtgat gttcgccatg accgccatca aaggtgtcgg cagacggtac gccaacattg       60
tcctcaagaa ggccgatgtc aacttggaca agagggccgg cgaatgctcc gaagaagaag      120
ttgaaaagat cgttaccatc atgcaaaacc ctaggcaata caaaattccc aactggttcc      180
tcaacagaca aaaagacacc gtcgagggca aatactctca gttgacttcc tccctgctgg      240
attccaagct ccgtgacgac cttgagcgac tcaagaagat cagggcccac agaggcatga      300
ggcactactg gggtttgagg gtgcgtggtc aa                                    332
<210>  15
<211>  440
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  15
gtgagttctt ctgttgatta gtttttcctt ccctgaaatt atttcgttga agttaatttg       60
gattaccctg aaagaatccg ctgctttttc tctcgctaaa aatcttttac acccgtcacc      120
acggccccct gtgggcaggc acaagctgaa gcacctgccc gtgcacccta actcgcactt      180
catggacgtc aactgccctg ggtgttataa aatcccaacg gtgttctccc ccgcccagaa      240
cgacttcggc tgctggacct gttccaccat cctctgcctg cccacagggg gccgtgccga      300
cctcaccaaa agatgctcgt ttaggagaaa tcaacattat tattcttggt gggaacactt      360
attttttttg taattaaatt tcaaactaca aaataacttt tccgaaaaac actacaaaaa      420
aaattaaaaa caaaaaaaaa                                                  440
<210>  16
<211>  324
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  16
cttccctgaa attatttcgt tgaagttaat ttggattacc ctgaaagaat ccgctgcttt       60
ttctctcgct aaaaatcttt tacacccgtc accacggccc cctgtgggca ggcacaagct      120
gaagcacctg cccgtgcacc ctaactcgca cttcatggac gtcaactgcc ctgggtgtta      180
taaaatccca acggtgttct cccccgccca gaacgacttc ggctgctgga cctgttccac      240
catcctctgc ctgcccacag ggggccgtgc cgacctcacc aaaagatgct cgtttaggag      300
aaatcaacat tattattctt ggtg                                             324
<210>  17
<211>  357
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  17
atgggttcaa gagagttaaa gccaagaggg ccaagaagga cgacggtgag atatttgccg       60
ctaaaaagga agtctacaag ccctctgagc agaggaaagc agaccagaaa aacattgaca      120
aacagaccct gaaagccatc aagcgactca agggagacgc ttgcctcatg aggaaatacc      180
tttgcaccat gttcggattc aggagcagtc aatatcccca ccgtatgaag ttttaatatg      240
ttttcagcca ataaataagt gaaagtttct cttttttatt actacagact caaattttta      300
ttttctgaaa attattaaaa attcttaatg gcaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaa         357
<210>  18
<211>  223
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  18
gttcaagaga gttaaagcca agagggccaa gaaggacgac ggtgagatat ttgccgctaa       60
aaaggaagtc tacaagccct ctgagcagag gaaagcagac cagaaaaaca ttgacaaaca      120
gaccctgaaa gccatcaagc gactcaaggg agacgcttgc ctcatgagga aatacctttg      180
caccatgttc ggattcagga gcagtcaata tccccaccgt atg                        223
<210>  19
<211>  632
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  19
atgggacctt ttttccgtgt gtctggctta ggcctcgcgt gttcttgtat ttttacggga       60
aatttagtga aaaagtgtaa atttaacgcg taaaaatggg tcgtatgcac gcacctggta      120
agggtatttc ccagtcagct ctcccctatc gtcgtagcgt cccaacatgg ctgaagctca      180
ctcctgacga cgtcaaggat cagattttca aactcaccaa gaaaggactg actccatctc      240
agatcggtgt catcctcagg gattctcacg gtgtggctca agtcagattc gtcaccgggt      300
cgaagatcct caggatcatg aaagccatcg gcctcgctcc tgacctccca gaggacctct      360
acttcctcat caaaaaagcc gttgctatca ggaaacatct tgaaagaaat aggaaagaca      420
aagactctaa attcggactt atccccgtcg agtccaggat ccacaggttg gcaagatact      480
acaaaaccaa gggcaccctt ccacccacct ggaaatacga gtccagcacc gcctctgctc      540
tggtggcttg aatattcaac tttttatttg tctactgttt aattaatata atgtgattta      600
gcaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aa                                    632
<210>  20
<211>  457
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  20
gggtcgtatg cacgcacctg gtaagggtat ttcccagtca gctctcccct atcgtcgtag       60
cgtcccaaca tggctgaagc tcactcctga cgacgtcaag gatcagattt tcaaactcac      120
caagaaagga ctgactccat ctcagatcgg tgtcatcctc agggattctc acggtgtggc      180
tcaagtcaga ttcgtcaccg ggtcgaagat cctcaggatc atgaaagcca tcggcctcgc      240
tcctgacctc ccagaggacc tctacttcct catcaaaaaa gccgttgcta tcaggaaaca      300
tcttgaaaga aataggaaag acaaagactc taaattcgga cttatccccg tcgagtccag      360
gatccacagg ttggcaagat actacaaaac caagggcacc cttccaccca cctggaaata      420
cgagtccagc accgcctctg ctctggtggc ttgaata                               457
<210>  21
<211>  407
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  21
atgggaccgt ttgcctcaca atccagaaca gacaggctgc catatccgtc gtcccctctg       60
cagcctccct cgtaatcaag gccctcaaag agcccccgag ggacaggaag aagaacaaga      120
acatcaaaca cgacggtaac ctgagtatgg atgacattct cggaattgcc aaaaccatga      180
ggccgaggtc gatgtccagg aaactggaag gaaccgtcaa ggaaatcctt gggacagctc      240
agtctgtcgg atgcacgatc gaaggccgag ctccccacga cgtcatcgac tccatcaaca      300
acggcgaaat ggaaatccct gacgaataaa ctgttcatga gtttatggat tttatataaa      360
aaataaaaag ttgaaaaatc caaaaaaaaa aaaaaaaaag aaaaaaa                    407
<210>  22
<211>  302
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  22
accgtttgcc tcacaatcca gaacagacag gctgccatat ccgtcgtccc ctctgcagcc       60
tccctcgtaa tcaaggccct caaagagccc ccgagggaca ggaagaagaa caagaacatc      120
aaacacgacg gtaacctgag tatggatgac attctcggaa ttgccaaaac catgaggccg      180
aggtcgatgt ccaggaaact ggaaggaacc gtcaaggaaa tccttgggac agctcagtct      240
gtcggatgca cgatcgaagg ccgagctccc cacgacgtca tcgactccat caacaacggc      300
ga                                                                     302
<210>  23
<211>  794
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  23
catggggagt caatttggat ctatcgccag atgaagatgt ctcctgccgt gttcgctgtt       60
ctgctggtac tttcagcttc ccaggtcttg ggagatgatg catccaagtt ccaacacgag      120
gaaatcatgg aagtcctcag ctcggtcaac aaaaccgtca acaaattgta cgacttgatg      180
tccacgcaga aggaaagaga tattgacttt atcgagaaga aaatggatga gacgtaccag      240
caactcagga acaagaggga ggcgccggct gagaaccctg aagccattga caagatccaa      300
aacgcgttca aaagctttca agacggcgtc aaggacttcg tcaagtccgc ttcttcctcg      360
gacctctaca agaaggttca ggaaatcggc gaggacctgt agaacaaagg caaagagctc      420
ggagagaagc tgcaagaaac catcaataac gccagaacga aaaactcaga cgagaagaag      480
gactaaactg aggattttga ctctgcacaa acgcccgttg gtgtttaaac gtatttctta      540
cgtttattat catcggggtt catgaaatca aaaatacacc atcgcatacc acctcgaaaa      600
gaacataata tatgtgaaaa gacaagaaaa ggtgttcaat tgtgtcttta actggtggtt      660
atcacgattc acatgaaata ctactaagaa aacccaaaaa ccgtcatgaa acccgaagta      720
tgcttctgta ttacctaatt gtgctgataa ttcttaataa aatattatac tgagaaaaaa      780
aaaaaaaaaa aaaa                                                        794
<210>  24
<211>  278
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  24
ttctgctggt actttcagct tcccaggtct tgggagatga tgcatccaag ttccaacacg       60
aggaaatcat ggaagtcctc agctcggtca acaaaaccgt caacaaattg tacgacttga      120
tgtccacgca gaaggaaaga gatattgact ttatcgagaa gaaaatggat gagacgtacc      180
agcaactcag gaacaagagg gaggcgccgg ctgagaaccc tgaagccatt gacaagatcc      240
aaaacgcgtt caaaagcttt caagacggcg tcaaggac                              278
<210>  25
<211>  437
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  25
atgggatcca ataataacca ttaaggcaat tggacatcaa tgatactgaa catatgaata       60
ttcagatatc aaaaatatcg aaatagaatc atatataaaa ccaactaacg cattagaaaa      120
taacgaattc cgattacttg aagtagacaa tcgaatcgta ttacctataa aatcaactat      180
ccgaattcta gttacatcat ctgatgtaat tcattcatga accatcccaa gtttgggaat      240
caaaattgat ggcacaccag gacgattaaa tcaagggaga ataaacataa accgaccagg      300
actaatatat gggcaatgtt ctgaaatttg tggagcaaac cacagattta taccaatcgt      360
aattgaaaga gtttcaatta atcaatttat aaactgatta aattcaaaat aaaaaaaaaa      420
aaaaaaaaaa aaaaaaa                                                     437
<210>  26
<211>  327
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  26
aacgcagagt acatgggatc caataataac cattaaggca attggacatc aatgatactg       60
aacatatgaa tattcagata tcaaaaatat cgaaatagaa tcatatataa aaccaactaa      120
cgcattagaa aataacgaat tccgattact tgaagtagac aatcgaatcg tattacctat      180
aaaatcaact atccgaattc tagttacatc atctgatgta attcattcat gaaccatccc      240
aagtttggga atcaaaattg atggcacacc aggacgatta aatcaaggga gaataaacat      300
aaaccgacca ggactaatat atgggca                                          327
<210>  27
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  27
gcgtaatacg actcactata ggcaaacagg ccgaaatcga ga                          42
<210>  28
<211>  23
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  28
tgacgacctt gagttggttt ctg                                               23
<210>  29
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  29
caaacaggcc gaaatcgaga                                                   20
<210>  30
<211>  45
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  30
gcgtaatacg actcactata ggtgacgacc ttgagttggt ttctg                       45
<210>  31
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  31
gcgtaatacg actcactata gggggcatca tgtcgaaagc tg                          42
<210>  32
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  32
cgaagcccat gtcatcatcg                                                   20
<210>  33
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  33
gggcatcatg tcgaaagctg                                                   20
<210>  34
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  34
gcgtaatacg actcactata ggcgaagccc atgtcatcat cg                          42
<210>  35
<211>  44
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  35
gcgtaatacg actcactata gggggcaggt cttctccata acca                        44
<210>  36
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  36
gattttgcgg tgccaacgac                                                   20
<210>  37
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  37
gggcaggtct tctccataac ca                                                22
<210>  38
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  38
gcgtaatacg actcactata gggattttgc ggtgccaacg ac                          42
<210>  39
<211>  44
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  39
gcgtaatacg actcactata ggattgcaca agctgaatcc ctcc                        44
<210>  40
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  40
attcacaaag cgggtgctgg                                                   20
<210>  41
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  41
attgcacaag ctgaatccct cc                                                22
<210>  42
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  42
gcgtaatacg actcactata ggattcacaa agcgggtgct gg                          42
<210>  43
<211>  44
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  43
gcgtaatacg actcactata ggccctctac gagtgcatca atgg                        44
<210>  44
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  44
cccatcgtgg atttgacgtg                                                   20
<210>  45
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  45
ccctctacga gtgcatcaat gg                                                22
<210>  46
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  46
gcgtaatacg actcactata ggcccatcgt ggatttgacg tg                          42
<210>  47
<211>  47
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  47
gcgtaatacg actcactata ggccaataaa gatcaacttt cccagag                     47
<210>  48
<211>  25
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  48
ttagacagac tcttgaactg gaggc                                             25
<210>  49
<211>  25
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  49
ccaataaaga tcaactttcc cagag                                             25
<210>  50
<211>  47
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  50
gcgtaatacg actcactata ggttagacag actcttgaac tggaggc                     47
<210>  51
<211>  44
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  51
gcgtaatacg actcactata gggaaaggtg atgttcgcca tgac                        44
<210>  52
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  52
ttgaccacgc accctcaaac                                                   20
<210>  53
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  53
gaaaggtgat gttcgccatg ac                                                22
<210>  54
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  54
gcgtaatacg actcactata ggttgaccac gcaccctcaa ac                          42
<210>  55
<211>  47
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  55
gcgtaatacg actcactata ggcttccctg aaattatttc gttgaag                     47
<210>  56
<211>  28
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  56
caccaagaat aataatgttg atttctcc                                          28
<210>  57
<211>  25
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  57
cttccctgaa attatttcgt tgaag                                             25
<210>  58
<211>  50
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  58
gcgtaatacg actcactata ggcaccaaga ataataatgt tgatttctcc                  50
<210>  59
<211>  47
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  59
gcgtaatacg actcactata gggttcaaga gagttaaagc caagagg                     47
<210>  60
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  60
catacggtgg ggatattgac tg                                                22
<210>  61
<211>  25
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  61
gttcaagaga gttaaagcca agagg                                             25
<210>  62
<211>  44
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  62
gcgtaatacg actcactata ggcatacggt ggggatattg actg                        44
<210>  63
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  63
gcgtaatacg actcactata gggggtcgta tgcacgcacc tg                          42
<210>  64
<211>  23
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  64
tattcaagcc accagagcag agg                                               23
<210>  65
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  65
gggtcgtatg cacgcacctg                                                   20
<210>  66
<211>  45
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  66
gcgtaatacg actcactata ggtattcaag ccaccagagc agagg                       45
<210>  67
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  67
gcgtaatacg actcactata ggaccgtttg cctcacaatc ca                          42
<210>  68
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  68
tcgccgttgt tgatggagtc                                                   20
<210>  69
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  69
accgtttgcc tcacaatcca                                                   20
<210>  70
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  70
gcgtaatacg actcactata ggtcgccgtt gttgatggag tc                          42
<210>  71
<211>  45
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  71
gcgtaatacg actcactata ggggtatcaa cgcagagtac atggg                       45
<210>  72
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  72
gtccttgacg ccgtcttgaa                                                   20
<210>  73
<211>  23
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  73
ggtatcaacg cagagtacat ggg                                               23
<210>  74
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  74
gcgtaatacg actcactata gggtccttga cgccgtcttg aa                          42
<210>  75
<211>  44
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  75
gcgtaatacg actcactata ggtgcccata tattagtcct ggtc                        44
<210>  76
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  76
aacgcagagt acatgggatc                                                   20
<210>  77
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  77
tgcccatata ttagtcctgg tc                                                22
<210>  78
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  78
gcgtaatacg actcactata ggaacgcaga gtacatggga tc                          42
<210>  79
<211>  197
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  79
Met Ala Asp Asp Glu Ala Lys Lys Ala Lys Gln Ala Glu Ile Glu Arg
1               5                   10                  15
Lys Arg Ala Glu Val Arg Lys Arg Met Glu Glu Ala Ser Lys Ala Lys
20                  25                  30
Lys Ala Lys Lys Gly Phe Met Thr Pro Glu Arg Lys Lys Lys Leu Arg
35                  40                  45
Leu Leu Leu Arg Lys Lys Ala Ala Glu Glu Leu Lys Lys Glu Gln Glu
50                  55                  60
Arg Lys Ala Ala Glu Arg Arg Arg Thr Ile Glu Glu Arg Cys Gly Gln
65                  70                  75                  80
Ile Ala Asp Val Asp Asn Ala Asn Glu Ala Thr Leu Lys Lys Leu Cys
85                  90                  95
Thr Asp Tyr His Lys Arg Ile Asp Ala Leu Glu Arg Ser Lys Ile Asp
100                 105                 110
Ile Glu Phe Glu Val Glu Arg Arg Asp Leu Glu Ile Ala Asp Leu Asn
115                 120                 125
Ser Gln Val Asn Asp Leu Arg Gly Lys Phe Val Lys Pro Thr Leu Lys
130                 135                 140
Lys Val Ser Lys Tyr Glu Asn Lys Phe Ala Lys Leu Gln Lys Lys Ala
145                 150                 155                 160
Ala Glu Phe Asn Phe Arg Asn Gln Leu Lys Val Val Lys Lys Lys Glu
165                 170                 175
Phe Thr Leu Glu Glu Glu Asp Lys Glu Pro Lys Lys Ser Glu Lys Ala
180                 185                 190
Glu Trp Gln Lys Lys
195
<210>  80
<211>  115
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  80
Met Gly Ile Met Ser Lys Ala Glu Leu Ala Cys Val Tyr Ser Ala Leu
1               5                   10                  15
Ile Leu Ile Asp Asp Asp Val Ala Val Thr Gly Glu Lys Ile Gln Thr
20                  25                  30
Ile Leu Lys Ala Ala Ser Val Asp Ile Glu Pro Tyr Trp Pro Gly Leu
35                  40                  45
Phe Ala Lys Ala Leu Glu Gly Ile Asn Pro Lys Asp Leu Ile Ser Ser
50                  55                  60
Ile Gly Ser Gly Val Gly Ala Gly Ala Pro Ala Val Gly Gly Ala Ala
65                  70                  75                  80
Pro Ala Ala Ala Ala Ala Pro Ala Ala Glu Ala Lys Lys Glu Glu Lys
85                  90                  95
Lys Lys Val Glu Ser Asp Pro Glu Ser Asp Asp Asp Met Gly Phe Gly
100                 105                 110
Leu Phe Asp
115
<210>  81
<211>  121
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  81
Met Ile Pro Pro Thr Ser Arg Pro Gln Val Thr Val Tyr Ser Asp Lys
1               5                   10                  15
Asn Glu Ala Thr Gly Thr Leu Leu Asn Leu Pro Ala Val Phe Asn Ala
20                  25                  30
Pro Ile Arg Pro Asp Val Val Asn Phe Val His Gln Asn Val Ala Lys
35                  40                  45
Asn His Arg Gln Pro Tyr Cys Val Ser Ala Gln Ala Gly His Gln Thr
50                  55                  60
Ser Ala Glu Ser Trp Gly Thr Gly Arg Ala Val Ala Arg Ile Pro Arg
65                  70                  75                  80
Val Arg Gly Gly Gly Thr His Arg Ser Gly Gln Gly Ala Phe Gly Asn
85                  90                  95
Met Cys Arg Gly Gly Arg Met Phe Ala Pro Thr Arg Pro Trp Arg Arg
100                 105                 110
Trp His Arg Lys Ile Asn Val Asn Gln
115                 120
<210>  82
<211>  133
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  82
Trp Asp Leu Tyr Ala Glu Lys Val Ala Thr Arg Gly Leu Cys Ala Ile
1               5                   10                  15
Ala Gln Ala Glu Ser Leu Arg Tyr Lys Leu Ile Gly Gly Leu Ala Val
20                  25                  30
Arg Gly Ala Cys Tyr Gly Val Leu Arg Phe Ile Met Glu Asn Gly Ala
35                  40                  45
Lys Gly Cys Glu Val Val Val Ser Gly Lys Leu Arg Gly Gln Arg Ala
50                  55                  60
Lys Ser Met Lys Phe Val Asp Gly Leu Met Ile His Ser Gly Asp Pro
65                  70                  75                  80
Cys Asn Glu Tyr Val Asp Thr Ala Thr Arg His Val Leu Leu Arg Gln
85                  90                  95
Gly Val Leu Gly Ile Lys Val Lys Ile Met Leu Pro Trp Asp Val Thr
100                 105                 110
Gly Lys Asn Gly Pro Lys Asn Pro Leu Pro Asp His Val Ser Val Leu
115                 120                 125
Leu Pro Lys Glu Glu
130
<210>  83
<211>  217
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  83
Met Thr Ser Lys Val Ser Arg Glu Thr Leu Tyr Glu Cys Ile Asn Gly
1               5                   10                  15
Val Ile Gln Ser Ser Gln Glu Lys Lys Arg Asn Phe Val Glu Thr Val
20                  25                  30
Glu Ile Gln Ile Gly Leu Lys Asn Tyr Asp Pro Gln Lys Asp Lys Arg
35                  40                  45
Phe Ser Gly Thr Val Lys Leu Lys His Ile Pro Arg Pro Lys Met Gln
50                  55                  60
Val Cys Ile Leu Gly Asp Gln Gln His Cys Asp Glu Ala Lys Ala Asn
65                  70                  75                  80
Asn Val Pro Tyr Met Asp Val Glu Ala Leu Lys Lys Leu Asn Lys Asn
85                  90                  95
Lys Lys Leu Val Lys Lys Leu Ala Lys Lys Tyr Asp Ala Phe Leu Ala
100                 105                 110
Ser Glu Ala Leu Ile Lys Gln Ile Pro Arg Leu Leu Gly Pro Gly Leu
115                 120                 125
Asn Lys Ala Gly Lys Phe Pro Gly Leu Leu Ser His Gln Glu Ser Met
130                 135                 140
Met Met Lys Ile Asp Glu Val Lys Ala Thr Ile Lys Phe Gln Met Lys
145                 150                 155                 160
Lys Val Leu Cys Leu Ser Val Ala Val Gly His Val Gly Met Thr Ala
165                 170                 175
Asp Glu Leu Val Gln Asn Val His Leu Ser Val Asn Phe Leu Val Ser
180                 185                 190
Leu Leu Lys Lys His Trp Gln Asn Val Arg Ser Leu His Val Lys Ser
195                 200                 205
Thr Met Gly Pro Pro Gln Arg Leu Tyr
210                 215
<210>  84
<211>  118
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  84
Gly Thr Asn Lys Asp Gln Leu Ser Gln Arg Lys Thr Cys Tyr Ala Gln
1               5                   10                  15
His Asn Gln Val Arg Glu Ile Arg Lys Lys Met Val Lys Asn Ile Ser
20                  25                  30
Asp Ser Ile Ser Ser Cys Asp Leu Arg Ser Val Val Asn Lys Leu Ile
35                  40                  45
Pro Asp Ser Ile Ala Lys Asp Ile Glu Lys Asn Cys Gln Gly Ile Tyr
50                  55                  60
Pro Leu His Asp Val Tyr Ile Arg Lys Val Lys Val Leu Lys Lys Pro
65                  70                  75                  80
Arg Phe Glu Leu Ser Lys Leu Leu Glu Leu His Val Asp Gly Lys Gly
85                  90                  95
Ile Asp Glu Pro Gly Ala Lys Val Thr Arg Thr Asp Ala Tyr Glu Pro
100                 105                 110
Pro Val Gln Glu Ser Val
115
<210>  85
<211>  128
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  85
Lys Val Met Phe Ala Met Thr Ala Ile Lys Gly Val Gly Arg Arg Tyr
1               5                   10                  15
Ala Asn Ile Val Leu Lys Lys Ala Asp Val Asn Leu Asp Lys Arg Ala
20                  25                  30
Gly Glu Cys Ser Glu Glu Glu Val Glu Lys Ile Val Thr Ile Met Gln
35                  40                  45
Asn Pro Arg Gln Tyr Lys Ile Pro Asn Trp Phe Leu Asn Arg Gln Lys
50                  55                  60
Asp Thr Val Glu Gly Lys Tyr Ser Gln Leu Thr Ser Ser Leu Leu Asp
65                  70                  75                  80
Ser Lys Leu Arg Asp Asp Leu Glu Arg Leu Lys Lys Ile Arg Ala His
85                  90                  95
Arg Gly Met Arg His Tyr Trp Gly Leu Arg Val Arg Gly Gln His Thr
100                 105                 110
Lys Thr Thr Gly Arg Arg Gly Arg Thr Val Gly Val Ser Lys Lys Lys
115                 120                 125
<210>  86
<211>  122
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  86
Val Leu Leu Leu Ile Ser Phe Ser Phe Pro Glu Ile Ile Ser Leu Lys
1               5                   10                  15
Leu Ile Trp Ile Thr Leu Lys Glu Ser Ala Ala Phe Ser Leu Ala Lys
20                  25                  30
Asn Leu Leu His Pro Ser Pro Arg Pro Pro Val Gly Arg His Lys Leu
35                  40                  45
Lys His Leu Pro Val His Pro Asn Ser His Phe Met Asp Val Asn Cys
50                  55                  60
Pro Gly Cys Tyr Lys Ile Pro Thr Val Phe Ser Pro Ala Gln Asn Asp
65                  70                  75                  80
Phe Gly Cys Trp Thr Cys Ser Thr Ile Leu Cys Leu Pro Thr Gly Gly
85                  90                  95
Arg Ala Asp Leu Thr Lys Arg Cys Ser Phe Arg Arg Asn Gln His Tyr
100                 105                 110
Tyr Ser Trp Trp Glu His Leu Phe Phe Leu
115                 120
<210>  87
<211>  77
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  87
Gly Phe Lys Arg Val Lys Ala Lys Arg Ala Lys Lys Asp Asp Gly Glu
1               5                   10                  15
Ile Phe Ala Ala Lys Lys Glu Val Tyr Lys Pro Ser Glu Gln Arg Lys
20                  25                  30
Ala Asp Gln Lys Asn Ile Asp Lys Gln Thr Leu Lys Ala Ile Lys Arg
35                  40                  45
Leu Lys Gly Asp Ala Cys Leu Met Arg Lys Tyr Leu Cys Thr Met Phe
50                  55                  60
Gly Phe Arg Ser Ser Gln Tyr Pro His Arg Met Lys Phe
65                  70                  75
<210>  88
<211>  151
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  88
Met Gly Arg Met His Ala Pro Gly Lys Gly Ile Ser Gln Ser Ala Leu
1               5                   10                  15
Pro Tyr Arg Arg Ser Val Pro Thr Trp Leu Lys Leu Thr Pro Asp Asp
20                  25                  30
Val Lys Asp Gln Ile Phe Lys Leu Thr Lys Lys Gly Leu Thr Pro Ser
35                  40                  45
Gln Ile Gly Val Ile Leu Arg Asp Ser His Gly Val Ala Gln Val Arg
50                  55                  60
Phe Val Thr Gly Ser Lys Ile Leu Arg Ile Met Lys Ala Ile Gly Leu
65                  70                  75                  80
Ala Pro Asp Leu Pro Glu Asp Leu Tyr Phe Leu Ile Lys Lys Ala Val
85                  90                  95
Ala Ile Arg Lys His Leu Glu Arg Asn Arg Lys Asp Lys Asp Ser Lys
100                 105                 110
Phe Gly Leu Ile Pro Val Glu Ser Arg Ile His Arg Leu Ala Arg Tyr
115                 120                 125
Tyr Lys Thr Lys Gly Thr Leu Pro Pro Thr Trp Lys Tyr Glu Ser Ser
130                 135                 140
Thr Ala Ser Ala Leu Val Ala
145                 150
<210>  89
<211>  108
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  89
Gly Thr Val Cys Leu Thr Ile Gln Asn Arg Gln Ala Ala Ile Ser Val
1               5                   10                  15
Val Pro Ser Ala Ala Ser Leu Val Ile Lys Ala Leu Lys Glu Pro Pro
20                  25                  30
Arg Asp Arg Lys Lys Asn Lys Asn Ile Lys His Asp Gly Asn Leu Ser
35                  40                  45
Met Asp Asp Ile Leu Gly Ile Ala Lys Thr Met Arg Pro Arg Ser Met
50                  55                  60
Ser Arg Lys Leu Glu Gly Thr Val Lys Glu Ile Leu Gly Thr Ala Gln
65                  70                  75                  80
Ser Val Gly Cys Thr Ile Glu Gly Arg Ala Pro His Asp Val Ile Asp
85                  90                  95
Ser Ile Asn Asn Gly Glu Met Glu Ile Pro Asp Glu
100                 105
<210>  90
<211>  133
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  90
His Gly Glu Ser Ile Trp Ile Tyr Arg Gln Met Lys Met Ser Pro Ala
1               5                   10                  15
Val Phe Ala Val Leu Leu Val Leu Ser Ala Ser Gln Val Leu Gly Asp
20                  25                  30
Asp Ala Ser Lys Phe Gln His Glu Glu Ile Met Glu Val Leu Ser Ser
35                  40                  45
Val Asn Lys Thr Val Asn Lys Leu Tyr Asp Leu Met Ser Thr Gln Lys
50                  55                  60
Glu Arg Asp Ile Asp Phe Ile Glu Lys Lys Met Asp Glu Thr Tyr Gln
65                  70                  75                  80
Gln Leu Arg Asn Lys Arg Glu Ala Pro Ala Glu Asn Pro Glu Ala Ile
85                  90                  95
Asp Lys Ile Gln Asn Ala Phe Lys Ser Phe Gln Asp Gly Val Lys Asp
100                 105                 110
Phe Val Lys Ser Ala Ser Ser Ser Asp Leu Tyr Lys Lys Val Gln Glu
115                 120                 125
Ile Gly Glu Asp Leu
130
<210>  91
<211>  118
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  91
Thr Tyr Glu Tyr Ser Asp Ile Lys Asn Ile Glu Ile Glu Ser Tyr Ile
1               5                   10                  15
Lys Pro Thr Asn Ala Leu Glu Asn Asn Glu Phe Arg Leu Leu Glu Val
20                  25                  30
Asp Asn Arg Ile Val Leu Pro Ile Lys Ser Thr Ile Arg Ile Leu Val
35                  40                  45
Thr Ser Ser Asp Val Ile His Ser Thr Ile Pro Ser Leu Gly Ile Lys
50                  55                  60
Ile Asp Gly Thr Pro Gly Arg Leu Asn Gln Gly Arg Ile Asn Ile Asn
65                  70                  75                  80
Arg Pro Gly Leu Ile Tyr Gly Gln Cys Ser Glu Ile Cys Gly Ala Asn
85                  90                  95
His Arg Phe Ile Pro Ile Val Ile Glu Arg Val Ser Ile Asn Gln Phe
100                 105                 110
Ile Asn Leu Asn Ser Lys
115
<210>  92
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Адаптер
<400>  92
aagcagtggt atcaacgcag                                                   20
<210>  93
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  93
aagcagtggt atcaacgcag                                                   20
<210>  94
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  94
gcgtaatacg actcactata ggaagcagtg gtatcaacgc ag                          42
<210>  95
<211>  717
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  95
aaagtgtggt tctcttcgtc cgaccatgag ttcgctcaaa ctgcagaaga ggctcgccgc       60
ctcggtgatg agatgcggca agaagaaagt gtggttggac cctaatgaaa tcaacgaaat      120
cgccaacacc aactctaggc aaaacatccg taagctgatc aaggatggtt tgatcatcaa      180
aaagcctgtg gctgtccact ccagagcccg cgtccgtaaa aacacagaag ccagacggaa      240
gggtcgtcat tgtggcttcg gtaagaggaa gggtaccgcc aacgccagaa tgcctgtgaa      300
ggtcctgtgg gtcaacagaa tgagagtcct gcgacggctc cttaaaaaat acagagaagc      360
caagaagatc gataggcaaa tgtaccacga cctttacatg aaagccaaag gtaacgtctt      420
caaaaacaag agggtactga tggacttcat tcacaagaag aaggctgaaa aggcgagatc      480
aaagatgttg aaggaccagg cagaggcgag acgtttcaag gtcaaggagg cgaagaagag      540
gcgcgaggag aggatcgcca ccaagaagca agagatcatg caggcgtacg cccgagaaga      600
cgaggctgcc gtcaaaaagt gatctcgccc cctccgtttt taaattttaa acaaaaaacg      660
tattttgtac aaaaatttac aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaa         717
<210>  96
<211>  2304
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  96
atgacgacct acgaggagtt cattcaacag agcgaggagc gcgacggtat caggttcact       60
tggaacgtct ggccatcaag tcgcatcgaa gccaccaggt tggtcgtacc cgtaggatgt      120
ctctatcaac cactaaaaga acgcacggat cttccagcta ttcaatacga tcccgttcta      180
tgcactagga atacctgtag agccatactc aacccgatgt gccaagtaaa ctatagggca      240
aagttgtggg tgtgtaactt ctgtttccag aggaatccgt tcccaccaca atacgccgca      300
atttccgagc agcatcagcc tgctgagttg attccatcat tctcaactat agagtatact      360
atatctagag ctcaattttt gcctcctata ttcctattgg tggtggatac gtgtttggat      420
gatgacgagc taggagctct gaaagattcg ttacaaacgt ctctatcttt gctaccaacc      480
aactccctag ttggtctgat cacgtttggt aaaatggtcc aagttcacga acttgggtgt      540
gaaggttgtt cccggagcta cgtgttcaga ggcaccaagg atttgacgtc caagcaagta      600
caggacatgc ttgggatcgg aaaggtttcc gcttctcctc agcaacagca gcaaagggca      660
atgggcggtc agcagccatt ccccaccaat cggttcattc agccgattca aagttgtgac      720
atgagcctca ccgacttgtt gggcgaaatg cagcgtgatc catggccagt gggtcagggt      780
aagcgacctc ttagatcaac gggtgctgct ctagctattg ccattgggtt gttggagtgc      840
tcctacccca acacgggagc aaaagtcatg ttgttccttg gtggcccttg ttcccaaggg      900
cctggtcaag ttgtcaatga tgacctgagg gaacctatcc gctctcatca tgacatccag      960
aaagataatg cccgctacat gaaaaaagcc attaaacatt acgattcttt ggcattgaga     1020
gcagccacta atgggcattc agtagacatt tattcctgtg ctttagatca gacaggtttg     1080
gcggaaatga agcaatgttg caattctact gggggtcata tggtgatggg tgacaccttc     1140
aactccactt tgttcaaaca gacgttccag agggtgctct cccgtgatca aaaaggcgaa     1200
ttcaaaatgg ctttcaatgg cgtagttgaa gtcaaaacct cccgagagct aaaagttatg     1260
ggagccattg ggccttgcgt ttcattgaat acgaaaggtc cgtgtgttag tgaaactgac     1320
atagggcttg gaggaacttg ccagtggaag ttctgcacat ttaaccaaaa taccactgct     1380
gccatgttct ttgaggtagt aaaccaacac gctgctccta tccctcaagg tggaagagga     1440
tgtatacagt tcataactca ataccagcat gcgtcgggcc aaaggcgcat ccgagtaacc     1500
actgtagcca ggaattgggc tgatgcgact accaacatgc accatgttag tgcaggattt     1560
gatcaggaag ctggagcggt actcatggcc aggatggtcg ttcacagagc tgaaactgat     1620
gatggacctg atgtcatgag atgggctgat cgcatgttga ttcgtctttg ccagaaattc     1680
ggcgagtaca acaaggatga tccaaatagt ttccgcctcc cagaaaactt ctcgctttac     1740
ccacagttca tgtatcactt gagaaggtcc caattcttgc aggtattcaa caacagccca     1800
gacgaaacgt cgtactatcg tcacatcttg atgcgggaag atttgtcgca gagcttgatc     1860
atgattcagc cgatcctgta cagttacagt ttcaacggtc cagaaccagt ccttttggac     1920
acttccagca ttcaacctga tcggatcctg ctgatggaca ccttcttcca aatcctcatc     1980
ttccacggcg agaccatcgc ccagtggcgt gcccaaaggt accaggacct acctgaatat     2040
gagaacttca agcagctcct acaggctcct gtagacgatg ctaaggaaat cctgcacact     2100
cggttcccca tgccgaggta cattgacacc gaacagggcg gatcacaagc tagattcctt     2160
ctctccaaag tcaacccatc ccaaactcac aacaacatgt acggctatgg aggggaattt     2220
ggagcccctg tgctcactga tgatgtttcc ctccaagtct tcatggaaca ccttaaaaag     2280
ctagccgttt catttactgc ctag                                            2304
<210>  97
<211>  311
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  GUS
<400>  97
ccagcgtatc gtgctgcgtt tcgatgcggt cactcattac ggcaaagtgt gatggagcat       60
cagggcggct atacgccatt tgaagccgat gtcacgccgt atgttattgc cgggaaaagt      120
gtacgtatct gaaatcaaaa aactcgacgg cctgtgggca ttcagtctgg atcgcgaaaa      180
ctgtggaatt gatccagcgc cgtcgtcggt gaacaggtat ggaatttcgc cgattttgcg      240
acctcgcaag gcatattcgg gtgaaggtta tctctatgaa ctgtgcgtca cagccaaaag      300
ccagacagag t                                                           311
<210>  98
<211>  170
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Интрон
<400>  98
ctcgagcctg agagaaaagc atgaagtata cccataacta acccattagt tatgcattta       60
tgttatatct attcatgctt ctactttaga taatcaatca ccaaacaatg agaatctcaa      120
cggtcgcaat aatgttcatg aaaatgtagt gtgtacactt accttctaga                 170
<210>  99
<211>  198
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  99
Met Ser Ser Leu Lys Leu Gln Lys Arg Leu Ala Ala Ser Val Met Arg
1               5                   10                  15
Cys Gly Lys Lys Lys Val Trp Leu Asp Pro Asn Glu Ile Asn Glu Ile
20                  25                  30
Ala Asn Thr Asn Ser Arg Gln Asn Ile Arg Lys Leu Ile Lys Asp Gly
35                  40                  45
Leu Ile Ile Lys Lys Pro Val Ala Val His Ser Arg Ala Arg Val Arg
50                  55                  60
Lys Asn Thr Glu Ala Arg Arg Lys Gly Arg His Cys Gly Phe Gly Lys
65                  70                  75                  80
Arg Lys Gly Thr Ala Asn Ala Arg Met Pro Val Lys Val Leu Trp Val
85                  90                  95
Asn Arg Met Arg Val Leu Arg Arg Leu Leu Lys Lys Tyr Arg Glu Ala
100                 105                 110
Lys Lys Ile Asp Arg Gln Met Tyr His Asp Leu Tyr Met Lys Ala Lys
115                 120                 125
Gly Asn Val Phe Lys Asn Lys Arg Val Leu Met Asp Phe Ile His Lys
130                 135                 140
Lys Lys Ala Glu Lys Ala Arg Ser Lys Met Leu Lys Asp Gln Ala Glu
145                 150                 155                 160
Ala Arg Arg Phe Lys Val Lys Glu Ala Lys Lys Arg Arg Glu Glu Arg
165                 170                 175
Ile Ala Thr Lys Lys Gln Glu Ile Met Gln Ala Tyr Ala Arg Glu Asp
180                 185                 190
Glu Ala Ala Val Lys Lys
195
<210>  100
<211>  767
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  100
Met Thr Thr Tyr Glu Glu Phe Ile Gln Gln Ser Glu Glu Arg Asp Gly
1               5                   10                  15
Ile Arg Phe Thr Trp Asn Val Trp Pro Ser Ser Arg Ile Glu Ala Thr
20                  25                  30
Arg Leu Val Val Pro Val Gly Cys Leu Tyr Gln Pro Leu Lys Glu Arg
35                  40                  45
Thr Asp Leu Pro Ala Ile Gln Tyr Asp Pro Val Leu Cys Thr Arg Asn
50                  55                  60
Thr Cys Arg Ala Ile Leu Asn Pro Met Cys Gln Val Asn Tyr Arg Ala
65                  70                  75                  80
Lys Leu Trp Val Cys Asn Phe Cys Phe Gln Arg Asn Pro Phe Pro Pro
85                  90                  95
Gln Tyr Ala Ala Ile Ser Glu Gln His Gln Pro Ala Glu Leu Ile Pro
100                 105                 110
Ser Phe Ser Thr Ile Glu Tyr Thr Ile Ser Arg Ala Gln Phe Leu Pro
115                 120                 125
Pro Ile Phe Leu Leu Val Val Asp Thr Cys Leu Asp Asp Asp Glu Leu
130                 135                 140
Gly Ala Leu Lys Asp Ser Leu Gln Thr Ser Leu Ser Leu Leu Pro Thr
145                 150                 155                 160
Asn Ser Leu Val Gly Leu Ile Thr Phe Gly Lys Met Val Gln Val His
165                 170                 175
Glu Leu Gly Cys Glu Gly Cys Ser Arg Ser Tyr Val Phe Arg Gly Thr
180                 185                 190
Lys Asp Leu Thr Ser Lys Gln Val Gln Asp Met Leu Gly Ile Gly Lys
195                 200                 205
Val Ser Ala Ser Pro Gln Gln Gln Gln Gln Arg Ala Met Gly Gly Gln
210                 215                 220
Gln Pro Phe Pro Thr Asn Arg Phe Ile Gln Pro Ile Gln Ser Cys Asp
225                 230                 235                 240
Met Ser Leu Thr Asp Leu Leu Gly Glu Met Gln Arg Asp Pro Trp Pro
245                 250                 255
Val Gly Gln Gly Lys Arg Pro Leu Arg Ser Thr Gly Ala Ala Leu Ala
260                 265                 270
Ile Ala Ile Gly Leu Leu Glu Cys Ser Tyr Pro Asn Thr Gly Ala Lys
275                 280                 285
Val Met Leu Phe Leu Gly Gly Pro Cys Ser Gln Gly Pro Gly Gln Val
290                 295                 300
Val Asn Asp Asp Leu Arg Glu Pro Ile Arg Ser His His Asp Ile Gln
305                 310                 315                 320
Lys Asp Asn Ala Arg Tyr Met Lys Lys Ala Ile Lys His Tyr Asp Ser
325                 330                 335
Leu Ala Leu Arg Ala Ala Thr Asn Gly His Ser Val Asp Ile Tyr Ser
340                 345                 350
Cys Ala Leu Asp Gln Thr Gly Leu Ala Glu Met Lys Gln Cys Cys Asn
355                 360                 365
Ser Thr Gly Gly His Met Val Met Gly Asp Thr Phe Asn Ser Thr Leu
370                 375                 380
Phe Lys Gln Thr Phe Gln Arg Val Leu Ser Arg Asp Gln Lys Gly Glu
385                 390                 395                 400
Phe Lys Met Ala Phe Asn Gly Val Val Glu Val Lys Thr Ser Arg Glu
405                 410                 415
Leu Lys Val Met Gly Ala Ile Gly Pro Cys Val Ser Leu Asn Thr Lys
420                 425                 430
Gly Pro Cys Val Ser Glu Thr Asp Ile Gly Leu Gly Gly Thr Cys Gln
435                 440                 445
Trp Lys Phe Cys Thr Phe Asn Gln Asn Thr Thr Ala Ala Met Phe Phe
450                 455                 460
Glu Val Val Asn Gln His Ala Ala Pro Ile Pro Gln Gly Gly Arg Gly
465                 470                 475                 480
Cys Ile Gln Phe Ile Thr Gln Tyr Gln His Ala Ser Gly Gln Arg Arg
485                 490                 495
Ile Arg Val Thr Thr Val Ala Arg Asn Trp Ala Asp Ala Thr Thr Asn
500                 505                 510
Met His His Val Ser Ala Gly Phe Asp Gln Glu Ala Gly Ala Val Leu
515                 520                 525
Met Ala Arg Met Val Val His Arg Ala Glu Thr Asp Asp Gly Pro Asp
530                 535                 540
Val Met Arg Trp Ala Asp Arg Met Leu Ile Arg Leu Cys Gln Lys Phe
545                 550                 555                 560
Gly Glu Tyr Asn Lys Asp Asp Pro Asn Ser Phe Arg Leu Pro Glu Asn
565                 570                 575
Phe Ser Leu Tyr Pro Gln Phe Met Tyr His Leu Arg Arg Ser Gln Phe
580                 585                 590
Leu Gln Val Phe Asn Asn Ser Pro Asp Glu Thr Ser Tyr Tyr Arg His
595                 600                 605
Ile Leu Met Arg Glu Asp Leu Ser Gln Ser Leu Ile Met Ile Gln Pro
610                 615                 620
Ile Leu Tyr Ser Tyr Ser Phe Asn Gly Pro Glu Pro Val Leu Leu Asp
625                 630                 635                 640
Thr Ser Ser Ile Gln Pro Asp Arg Ile Leu Leu Met Asp Thr Phe Phe
645                 650                 655
Gln Ile Leu Ile Phe His Gly Glu Thr Ile Ala Gln Trp Arg Ala Gln
660                 665                 670
Arg Tyr Gln Asp Leu Pro Glu Tyr Glu Asn Phe Lys Gln Leu Leu Gln
675                 680                 685
Ala Pro Val Asp Asp Ala Lys Glu Ile Leu His Thr Arg Phe Pro Met
690                 695                 700
Pro Arg Tyr Ile Asp Thr Glu Gln Gly Gly Ser Gln Ala Arg Phe Leu
705                 710                 715                 720
Leu Ser Lys Val Asn Pro Ser Gln Thr His Asn Asn Met Tyr Gly Tyr
725                 730                 735
Gly Gly Glu Phe Gly Ala Pro Val Leu Thr Asp Asp Val Ser Leu Gln
740                 745                 750
Val Phe Met Glu His Leu Lys Lys Leu Ala Val Ser Phe Thr Ala
755                 760                 765
<210>  101
<211>  511
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  101
ggtgatgaga tgcggcaaga agaaagtgtg gttggaccct aatgaaatca acgaaatcgc       60
caacaccaac tctaggcaaa acatccgtaa gctgatcaag gatggtttga tcatcaaaaa      120
gcctgtggct gtccactcca gagcccgcgt ccgtaaaaac acagaagcca gacggaaggg      180
tcgtcactgt ggcttcggta agaggaaggg taccgccaac gccagaatgc ctgtgaaggt      240
cctgtgggtc aacagaatga gagtcctgcg acggctcctt aaaaaataca gagaagccaa      300
gaagatcgat aggcaaatgt accacgacct ttacatgaaa gccaaaggta acgtcttcaa      360
aaacaagagg gtactgatgg acttcattca caagaagaag gctgaaaagg cgagatcaaa      420
gatgttgaag gaccaggcag aggcgagacg tctcaaggtc aaggaggcga agaagaggcg      480
cgaggagagg atcgccacca agaagcaaga g                                     511
<210>  102
<211>  1145
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  102
tgggttgttg gagtgctcct accccaacac gggagcaaaa gtcatgttgt tccttggtgg       60
cccttgttcc caagggcctg gtcaagttgt caatgatgac ctgagggaac ctatccgctc      120
tcatcatgac atccagaaag ataatgcccg ctacatgaaa aaagccatta aacattacga      180
ttctttggca ttgagagcag ccactaatgg gcattcagta gacatttatt cctgtgcttt      240
agatcagaca ggtttggcgg aaatgaagca atgttgcaat tctactgggg gtcatatggt      300
gatgggtgac accttcaact ccactttgtt caaacagacg ttccagaggg tgctctcccg      360
tgatcaaaaa ggcgaattca aaatggcttt caatggcgta gttgaagtca aaacctcccg      420
agagctaaaa gttatgggag ccattgggcc ttgcgtttca ttgaatacga aaggtccgtg      480
tgttagtgaa actgacatag ggcttggagg aacttgccag tggaagttct gcacatttaa      540
ccaaaatacc actgctgcca tgttctttga ggtagtaaac caacacgctg ctcctatccc      600
tcaaggtgga agaggatgta tacagttcat aactcaatac cagcatgcgt cgggccaaag      660
gcgcatccga gtaaccactg tagccaggaa ttgggctgat gcgactacca acatgcacca      720
tgttagtgca ggatttgatc aggaagctgg agcggtactc atggccagga tggtcgttca      780
cagagctgaa actgatgatg gacctgatgt catgagatgg gctgatcgca tgttgattcg      840
tctttgccag aaattcggcg agtacaacaa ggatgatcca aatagtttcc gcctcccaga      900
aaacttctcg ctttacccac agttcatgta tcacttgaga aggtcccaat tcttgcaggt      960
attcaacaac agcccagacg aaacgtcgta ctatcgtcac atcttgatgc gggaagattt     1020
gtcgcagagc ttgatcatga ttcagccgat cctgtacagt tacagtttca acggtccaga     1080
accagtcctt ttggacactt ccagcattca acctgatcgg atcctgctga tggacacctt     1140
cttcc                                                                 1145
<210>  103
<211>  258
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  GFP
<400>  103
agatacccag atcatatgaa acggcatgac tttttcaaga gtgccatgcc cgaaggttat       60
gtacaggaaa gaactatatt tttcaaagat gacgggaact acaagacacg taagtttaaa      120
cagttcggta ctaactaacc atacatattt aaattttcag gtgctgaagt caagtttgaa      180
ggtgataccc ttgttaatag aatcgagtta aaaggtattg attttaaaga agatggaaac      240
attcttggac acaaattg                                                    258
<210>  104
<211>  745
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Флуоресцентный белок коралла Pt
<400>  104
agtgtaataa cttactttga gtctaccgtc atgagtgcaa ttaaaccagt catgaagatt       60
gaattggtca tggaaggaga ggtgaacggg cacaagttca cgatcacggg agagggacaa      120
ggcaagcctt acgagggaac acagactcta aaccttacag tcactaaagg cgtgcccctt      180
cctttcgctt tcgatatctt gtcaacagca ttccagtatg gcaacagggt atttaccaaa      240
tacccagatg atataccgga ctatttcaag cagacctttc cggaaggata ttcgtgggaa      300
agaactttca aatatgaaga gggcgtttgc accacaaaga gtgacataag cctcaagaaa      360
ggccaaccag actgctttca atataaaatt aactttaaag gggagaagct tgaccccaac      420
ggcccaatta tgcagaagaa gaccctgaaa tgggagccat ccactgagag gatgtacatg      480
gacgtggata aagacggtgc aaaggtgctg aagggcgatg ttaatgcggc cctgttgctt      540
gaaggaggtg gccattatcg ttgtgacttt aacagtactt acaaggcgaa gaaaactgtg      600
tccttcccag catatcactt tgtggaccac cgcattgaga ttttgagcca caatacggat      660
tacagcaagg ttacactgta tgaagttgcc gtggctcgca attctcctct tcagattatg      720
gcgccccagt aaaggcttaa cgaaa                                            745
<210>  105
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  105
gcgtaatacg actcactata ggtgatgaga tgcggcaaga ag                          42
<210>  106
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  106
ctcttgcttc ttggtggcga tc                                                22
<210>  107
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  107
ggtgatgaga tgcggcaaga ag                                                22
<210>  108
<211>  44
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  108
gcgtaatacg actcactata ggctcttgct tcttggtggc gatc                        44
<210>  109
<211>  44
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  109
gcgtaatacg actcactata ggtgggttgt tggagtgctc ctac                        44
<210>  110
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  110
ggaagaaggt gtccatcagc ag                                                22
<210>  111
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  111
tgggttgttg gagtgctcct ac                                                22
<210>  112
<211>  44
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  112
gcgtaatacg actcactata ggggaagaag gtgtccatca gcag                        44
<210>  113
<211>  46
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  113
gcgtaatacg actcactata ggagataccc agatcatatg aaacgg                      46
<210>  114
<211>  24
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  114
caatttgtgt ccaagaatgt ttcc                                              24
<210>  115
<211>  24
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  115
agatacccag atcatatgaa acgg                                              24
<210>  116
<211>  46
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  116
gcgtaatacg actcactata ggcaatttgt gtccaagaat gtttcc                      46
<210>  117
<211>  43
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  117
gcgtaatacg actcactata ggagtgtaat aacttacttt gag                         43
<210>  118
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  118
tttcgttaag cctttactgg                                                   20
<210>  119
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  119
agtgtaataa cttactttga g                                                 21
<210>  120
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  120
gcgtaatacg actcactata ggtttcgtta agcctttact gg                          42
<210>  121
<211>  473
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  121
tgccgggccg ctcgccgaac catctgggaa gcttggaatg ggctcgactg ccgaactgat       60
caactttttc ggtccacacc ttttctatca actccttata ccgctccagg atgccgcctt      120
caaacagttt tttcttgtcg tcataagatc tggtgtcaac tcttcgttca tatttggagg      180
cgacttggat tttgggtggg tacttgccgg tgagggcctc agggtccaag ccttttttca      240
aggctttgtg ccgaagttgt tgcttctgtc tttccttcag ttctttaaga tcgtagtctt      300
gcctcttttg cctttcctca agatcgtatt tctcggtctc aagtttgaca atggcttccc      360
agagttcctg agctttgatg cgtagcctgt ctatgctcat attttctatc gccaggggct      420
tgagcctaat gctgagggag atacgtttct cttcctccag ctgctccttg gtc             473
<210>  122
<211>  773
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  122
gctgctcgcc gtccagttcg ttttcgagtt ccctgacacg ttgttccagc ttggcgatgg       60
ccttcttgcc tcccttgagg gcgttgtttt cggcttcgtc caacctgact tggagttcct      120
tgatttgcgt ttccagagcc ttgcggagct tctcctgggt ctgagcgtgg tcctgttctg      180
ccctgagttc atcagctaac ctagcggcat caaccattgc cttcttggcc ttctcttcgg      240
agttcttggc ttcgttgaga agttcgtcga ggtcagcatg aagtgtctgc aactctccct      300
caagcttgcg tttggcggct gaggcgctgg tagcttgggc agccaactcg ttgatctgtt      360
cgtgggcatc tccaagttct tgttcggctt ggcgcctgcc cctgtcggcc tgttcgagga      420
gagtgcgcga ctcctcgagc tcgtttccga gagcgttggc cctcctttcg gcgattccga      480
gttgttcacg agcatcgtcg cgtgcccttt gttcttcctc aagagcggtc tgtacgtcct      540
tgagttgttg ttggtatttc ttgatggtct tctgggcttc ggcgttagcc ttgttggcgt      600
ggtcgagagc gatttcgagt tcgttgatgt cggcttcaag cttcttcttc atgcgaagag      660
cctcagcctt acccttggct tcagcctcca agctggcttg catggagtcg agtgcccgtt      720
ggtggttctt cctggtgttc tcgaactcct cctccttttc ctggatccgc cgg             773
<210>  123
<211>  771
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  123
tggacgccat caagaagaaa atgcaggcga tgaagatgga gaaggacacg gccatggaca       60
aggccgacac ctgcgagggg caggccaagg acgctaacac ccgcgccgac aaaatccttg      120
aagatgtgag ggacctccaa aagaaactca accaggtaga aagtgatctc gaaaggacca      180
agagggaact cgagacgaaa accaccgaac tcgaagagaa ggagaaggcc aacaccaacg      240
ctgagagcga ggtcgcctcc ctcaacagga aagtccagat ggttgaagag gacttggaaa      300
gatctgaaga aaggtccggc accgcacaac aaaaactgtc cgaagcctcc cacgccgctg      360
atgaagcctc tcgtatgtgc aaagtattgg agaacaggtc acaacaggat gaggagagga      420
tggaccagct caccaaccag ctgaaagaag cccgactcct cgctgaagac gccgacggca      480
aatcggatga ggtatcaagg aagctggcct tcgttgaaga cgaactggaa gtagctgaag      540
atcgtgtcaa atctggagac tcgaagatca tggagcttga ggaggagttg aaagttgtcg      600
gtaacagctt gaaatctctc gaagtttcag aggagaaggc caaccagcga gtcgaagagt      660
acaaacgtca aatcaagcaa ctgactgtca agttgaagga ggctgaagct cgcgctgagt      720
tcgccgaaaa gacagtcaag aagttgcaga aagaggtgga ccggctggag g               771
<210>  124
<211>  257
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  124
tgcgggccct ggggcagaat cccacagaat ctgacgtgaa gaagttcacc caccagcaca       60
aaccagatga aagaatcagc ttcgaggtgt ttctcccgat ataccaagcc atatcgaagg      120
gtaggacgtc agacacagct gaagacttca tcgagggtct cagacacttt gacaaagatg      180
gaaatggctt catttcaaca gctgagcttc gccacttgct cacaactttg ggcgaaaaac      240
tgaccgacga cgaggtg                                                     257
<210>  125
<211>  410
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  125
gccacctcca acgtgtttgc catgttcgat caggctcaga ttcaagaatt caaggaggca       60
ttcaacatga tcgaccagaa cagggacggc ttcgtggata aggaagacct ccatgacatg      120
ctcgcttccc taggtaagaa cccctcagac gagtatctcg aggggatgat gaacgaggcg      180
cctggtccca tcaacttcac aatgttcctc accctcttcg gtgagcggct tcagggaact      240
gatccggagg aggttatcaa gaacgcattt gggtgttttg acgaagacaa caacggattc      300
atcaacgagg aaagactgcg cgagctgctc acctccatgg gggacaggtt cactgatgaa      360
gacgtggacg aaatgtaccg agaggccccc atcaagaacg gcatgttcga                 410
<210>  126
<211>  1021
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  126
tgttcatcct ggagcaggag gagtatcaga gagaaggtat tgaatggaag ttcatcgact       60
tcggacttga tcttcagccg accattgatc tcattgataa gccaatggga gtcatggctc      120
tcctggatga agaatgttgg ttccccaaag ccactgacaa gaccttcgtt gagaagctgg      180
tcggtgctca cagcgttcac cccaaattca tcaaaactga tttccgtgga gtcgccgact      240
ttgctgtcgt ccattatgcc ggaaaagtcg attattcggc ggcgcagtgg ctgatgaaga      300
acatggaccc tctgaacgaa aacgtcgtgc agctcctcca gaactcgcaa gatccgttcg      360
tcatccacat ctggaaggac gcagagatcg tcggcatggc tcaccaagct ctcagcgaca      420
ctcagtttgg agctcgtacc aggaagggta tgttccgaac cgtgtctcaa ctctacaaag      480
accagctgtc caaactcatg atcacacttc gcaacacgaa ccccaacttc gtccgttgca      540
tcctccccaa ccacgagaag agagctggca agatcgatgc tcctttggtg ctggatcagc      600
tcagatgcaa cggtgtgttg gaaggcatca gaatttgcag acaaggtttc ccgaatagaa      660
tcccattcca ggaattccgg caaagatacg agctcttaac tcccaatgtc atccccaaag      720
ggttcatgga cggtaaaaag gcttgcgaga agatgatcaa cgctctcgaa ctggacccta      780
atctctacag agttggtcag tccaagatat tcttcagagc tggagtctta gctcatctag      840
aagaagagcg cgactataag attactgatc tgatagccaa tttccgggct ttctgtaggg      900
gatatcttgc ccgaaggaac taccaaaagc gtcttcagca gctcaacgcc attcgtatta      960
tccagcgaaa ttgctcagct tacttgaagt tgaggaactg gcaatggtgg cggctgtaca     1020
c                                                                     1021
<210>  127
<211>  325
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  127
cggtcatcat ctccatgaac tcgtcgaagt caacagttcc ggaaccgtca gaatcaattt       60
cagcaatcat catgtcaagt tcttgggagg tgattttgtc gtcgagttcc ttcaggattt      120
ccctcaagac gtcagtggta atgtaaccgt tcccttcctt gtcgtagagc ctgaaggcct      180
ccctcagttc ttgctgcatg gcctcagcat cttgtgtctc atcttctgtc aggaaaccgg      240
cagccaaggc tacgaactcc tcaaattcaa gttgtccaga gccatcagcg tcgacctccg      300
caatgatctc ctccaggatc ttctt                                            325
<210>  128
<211>  463
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  128
cggtcatcat ctccatgaac tcgtcgaagt cgacagttcc ggatccgtca gagtcgatct       60
cctcgatgat catgtccagc tcctcgttgg tcagctgctc gtccaattca tgaaggattt      120
ctttgaggca ggaggtcggg atgtagccat taccttcttt gtcgtagaga cggaaggctt      180
ctcgcagctc tttctgcatg gcttcatcgt cttcctcaac aatgaacttg gctgccaacg      240
tgatgaactc ttcaaactcc agccttcccg atttgtcagc gtcaacttct tcgatgagtt      300
catcgagaat cttcttgttg aagggttgac ccatgagtct gaggatgtcg gccaccatgt      360
ccgtcgggat ggaacccgag tgatcccggt cgaaagcgtt caacgcgatg gtcatgatgg      420
ggataattcg gttaattctg ttagaccagt ccgattagtg acg                        463
<210>  129
<211>  413
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  129
atgggtgaag gagggtgcct gctcagagca gtcctccagg atgacggcta tggacaacgc       60
ctcgaagaac gccgctgaga tgatcgacaa gctgaccttg acgttcaaca ggactcggca      120
agccgtcatc accagggagc tcatcgaaat catctccggt gcctctgctt tggagtaacg      180
tctcagctca cccagccacc tcccgtagat ccactagtgc tgcgagagac cgagtacctc      240
gttctattca ccctgtacat ttcttaatca atattattgg aattcgattc gatagtcgta      300
tgctgggaaa tatcttgttc atattcatga tacttgttca acattgttct ggtaaataat      360
ttatgtaata caggttgagt taccaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaa             413
<210>  130
<211>  449
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  130
gcagctggag gaagagaaac gtatctccct cagcattagg ctcaagcccc tggcgataga       60
aaatatgagc atagacaggc tacgcatcaa agctcaggaa ctctgggaag ccattgtcaa      120
acttgagacc gagaaatacg atcttgagga aaggcaaaag aggcaagact acgatcttaa      180
agaactgaag gaaagacaga agcaacaact tcggcacaaa gccttgaaaa aaggcttgga      240
ccctgaggcc ctcaccggca agtacccacc caaaatccaa gtcgcctcca aatatgaacg      300
aagagttgac accagatctt atgacgacaa gaaaaaactg tttgaaggcg gcatcctgga      360
gcggtataag gagttgatag aaaaggtgtg gaccgaaaaa gttgatcagt tcggcagtcg      420
agcccattcc aagcttccca gatggttcg                                        449
<210>  131
<211>  719
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  131
aggagttcga gaacaccagg aagaaccacc aacgggcact cgactccatg caagccagct       60
tggaggctga agccaagggt aaggctgagg ctcttcgcat gaagaagaag cttgaagccg      120
acatcaacga actcgaaatc gctctcgacc acgccaacaa ggctaacgcc gaagcccaga      180
agaccatcaa gaaataccaa caacaactca aggacgtaca gaccgctctt gaggaagaac      240
aaagggcacg cgacgatgct cgtgaacaac tcggaatcgc cgaaaggagg gccaacgctc      300
tcggaaacga gctcgaggag tcgcgcactc tcctcgaaca ggccgacagg ggcaggcgcc      360
aagccgaaca agaacttgga gatgcccacg aacagatcaa cgagttggct gcccaagcta      420
ccagcgcctc agccgccaaa cgcaagcttg agggagagtt gcagacactt catgctgacc      480
tcgacgaact tctcaacgaa gccaagaact ccgaagagaa ggccaagaag gcaatggttg      540
atgccgctag gttagctgat gaactcaggg cagaacagga ccacgctcag acccaggaga      600
agctccgcaa ggctctggaa acgcaaatca aggaactcca agtcaggttg gacgaagccg      660
aaaacaacgc cctcaaggga ggcaagaagg ccatcgccaa gctggaacaa cgtgtcagg       719
<210>  132
<211>  737
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  132
gcaggcgatg aagatggaga aggacacggc catggacaag gccgacacct gcgaggggca       60
ggccaaggac gctaacaccc gcgccgacaa aatccttgaa gatgtgaggg acctccaaaa      120
gaaactcaac caggtagaaa gtgatctcga aaggaccaag agggaactcg agacgaaaac      180
caccgaactc gaagagaagg agaaggccaa caccaacgct gagagcgagg tcgcctccct      240
caacaggaaa gtccagatgg ttgaagagga cttggaaaga tctgaagaaa ggtccggcac      300
cgcacaacaa aaactgtccg aagcctccca cgccgctgat gaagcctctc gtatgtgcaa      360
agtattggag aacaggtcac aacaggatga ggagaggatg gaccagctca ccaaccagct      420
gaaagaagcc cgactcctcg ctgaagacgc cgacggcaaa tcggatgagg tatcaaggaa      480
gctggccttc gttgaagacg aactggaagt agctgaagat cgtgtcaaat ctggagactc      540
gaagatcatg gagcttgagg aggagttgaa agttgtcggt aacagcttga aatctctcga      600
agtttcagag gagaaggcca accagcgagt cgaagagtac aaacgtcaaa tcaagcaact      660
gactgtcaag ttgaaggagg ctgaagctcg cgctgagttc gccgaaaaga cagtcaagaa      720
gttgcagaaa gaggtgg                                                     737
<210>  133
<211>  205
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  133
cagaatccca cagaatctga cgtgaagaag ttcacccacc agcacaaacc agatgaaaga       60
atcagcttcg aggtgtttct cccgatatac caagccatat cgaagggtag gacgtcagac      120
acagctgaag acttcatcga gggtctcaga cactttgaca aagatggaaa tggcttcatt      180
tcaacagctg agcttcgcca cttgc                                            205
<210>  134
<211>  326
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  134
ggaggcattc aacatgatcg accagaacag ggacggcttc gtggataagg aagacctcca       60
tgacatgctc gcttccctag gtaagaaccc ctcagacgag tatctcgagg ggatgatgaa      120
cgaggcgcct ggtcccatca acttcacaat gttcctcacc ctcttcggtg agcggcttca      180
gggaactgat ccggaggagg ttatcaagaa cgcatttggg tgttttgacg aagacaacaa      240
cggattcatc aacgaggaaa gactgcgcga gctgctcacc tccatggggg acaggttcac      300
tgatgaagac gtggacgaaa tgtacc                                           326
<210>  135
<211>  944
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  135
gacttgatct tcagccgacc attgatctca ttgataagcc aatgggagtc atggctctcc       60
tggatgaaga atgttggttc cccaaagcca ctgacaagac cttcgttgag aagctggtcg      120
gtgctcacag cgttcacccc aaattcatca aaactgattt ccgtggagtc gccgactttg      180
ctgtcgtcca ttatgccgga aaagtcgatt attcggcggc gcagtggctg atgaagaaca      240
tggaccctct gaacgaaaac gtcgtgcagc tcctccagaa ctcgcaagat ccgttcgtca      300
tccacatctg gaaggacgca gagatcgtcg gcatggctca ccaagctctc agcgacactc      360
agtttggagc tcgtaccagg aagggtatgt tccgaaccgt gtctcaactc tacaaagacc      420
agctgtccaa actcatgatc acacttcgca acacgaaccc caacttcgtc cgttgcatcc      480
tccccaacca cgagaagaga gctggcaaga tcgatgctcc tttggtgctg gatcagctca      540
gatgcaacgg tgtgttggaa ggcatcagaa tttgcagaca aggtttcccg aatagaatcc      600
cattccagga attccggcaa agatacgagc tcttaactcc caatgtcatc cccaaagggt      660
tcatggacgg taaaaaggct tgcgagaaga tgatcaacgc tctcgaactg gaccctaatc      720
tctacagagt tggtcagtcc aagatattct tcagagctgg agtcttagct catctagaag      780
aagagcgcga ctataagatt actgatctga tagccaattt ccgggctttc tgtaggggat      840
atcttgcccg aaggaactac caaaagcgtc ttcagcagct caacgccatt cgtattatcc      900
agcgaaattg ctcagcttac ttgaagttga ggaactggca atgg                       944
<210>  136
<211>  318
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  136
atcctggagg agatcattgc ggaggtcgac gctgatggct ctggacaact tgaatttgag       60
gagttcgtag ccttggctgc cggtttcctg acagaagatg agacacaaga tgctgaggcc      120
atgcagcaag aactgaggga ggccttcagg ctctacgaca aggaagggaa cggttacatt      180
accactgacg tcttgaggga aatcctgaag gaactcgacg acaaaatcac ctcccaagaa      240
cttgacatga tgattgctga aattgattct gacggttccg gaactgttga cttcgacgag      300
ttcatggaga tgatgacc                                                    318
<210>  137
<211>  423
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  137
atccccatca tgaccatcgc gttgaacgct ttcgaccggg atcactcggg ttccatcccg       60
acggacatgg tggccgacat cctcagactc atgggtcaac ccttcaacaa gaagattctc      120
gatgaactca tcgaagaagt tgacgctgac aaatcgggaa ggctggagtt tgaagagttc      180
atcacgttgg cagccaagtt cattgttgag gaagacgatg aagccatgca gaaagagctg      240
cgagaagcct tccgtctcta cgacaaagaa ggtaatggct acatcccgac ctcctgcctc      300
aaagaaatcc ttcatgaatt ggacgagcag ctgaccaacg aggagctgga catgatcatc      360
gaggagatcg actctgacgg atccggaact gtcgacttcg acgagttcat ggagatgatg      420
acc                                                                    423
<210>  138
<211>  252
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  138
ggtgaaggag ggtgcctgct cagagcagtc ctccaggatg acggctatgg acaacgcctc       60
gaagaacgcc gctgagatga tcgacaagct gaccttgacg ttcaacagga ctcggcaagc      120
cgtcatcacc agggagctca tcgaaatcat ctccggtgcc tctgctttgg agtaacgtct      180
cagctcaccc agccacctcc cgtagatcca ctagtgctgc gagagaccga gtacctcgtt      240
ctattcaccc tg                                                          252
<210>  139
<211>  1110
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  139
gtctccgctc aagctggtca tcagacttca gctgagtcct ggggtaccgg tcgtgctgtg       60
gctcgtatcc cccgtgttcg cggaggtggt actcaccgct caggtcaggg tgcttttggc      120
aacatgtgtc gcggcggtag gatgttcgct cccactcgcc catggcgtcg ttggcaccgc      180
aagatcaacg ttaaccaaaa acgttatgcc gtcgtgtccg ccatcgctgc atccggcgtc      240
ccagccctcg tcatgtccaa aggacacatg gtgcaaagcg tccctgaatt cccccttgtt      300
gtgtctgaca aagttcagga atacactaaa accaaacagg ctgtcatctt ccttcaccgc      360
atcaaagcct ggcaagacat ccagaaagtg tacaagtcga agaggttccg tgctggtaag      420
ggtaaaatga ggaaccgcag gaggatccag aggcgtggac ccctcatcat ctacgaccag      480
gatcagggtc tgaacagggc tttccgtaac attcccggcg tcgatttgat cgaagtgagc      540
cgcctcaact tgctgaagct cgctccagga ggtcacatcg gccggttcgt catctggact      600
cagtcggcct tcgagaagtt ggacgccctc tacggcacct ggaagaagaa gtccaccctc      660
aaggctggat acaatctccc catgcccaag atggccaaca ccgacctttc ccgcctcttc      720
aaggccccgg agatcaaggc tgtcctcagg aatcccaaga agaccatcgt acgacgagtg      780
cgcaaactga accctctccg caacaccagg gctatgctgc gtctcaaccc atacgctgct      840
gtcctcaaga ggaaggccat ccttgatcaa aggaagttga aactccagaa gctcgtagaa      900
gctgccaaga agggagatac caagctgtcg ccccgcgtcg agcgtcacct gaagatgatc      960
gagagaagga aagccctgat caagaaagcc aaggctgcca agcccaagaa gcccaaaacg     1020
gccaagaaac ccaagaccgc cgagaaggca ccagcacccg ccaagaaggc ggcagcgccc     1080
aaaaaggcca ccacccctgc caagaaatga                                      1110
<210>  140
<211>  729
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  140
atggccaatg ctaagcctat ttctaagaag aagaagtttg tgtctgacgg tgtcttcaaa       60
gccgaattga acgaatttct taccagagaa ctcgctgaag aggggtactc aggtgttgag      120
gtccgagtga cccccaacaa gacagaaatt atcatcatgg cgacaaggac acaaagcgtt      180
cttggtgata agggccgccg aatcagggag ctcacgtctg tagttcagaa aagattcaat      240
ttcaagcctc agactttgga tctctatgct gaaaaggtcg ccaccagagg tttgtgtgct      300
attgcacaag ctgaatccct ccgttacaaa ctcattggcg gtcttgctgt ccgaggggct      360
tgctatggtg tccttcgctt catcatggaa aatggtgcca agggttgcga agtcgtagta      420
tctggaaaac tgcgtggtca gagagccaag tcaatgaagt tcgtggatgg tttgatgatc      480
cacagtgggg atccctgtaa cgaatatgtt gatactgcta cccgacatgt gctccttaga      540
caaggtgtcc tgggaataaa ggtgaagatt atgttgccgt gggacgttac cggcaaaaat      600
gggccgaaga accctcttcc cgaccacgtc agcgttctct tacctaagga ggagctacca      660
aatttggccg ttagtgtgcc tggatccgac atcaaaccaa agcctgaagt accagcaccc      720
gctttgtga                                                              729
<210>  141
<211>  789
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  141
atggctgttg gtaaaaataa gggtctatcg aaaggaggaa agaagggagt taaaaaaaag       60
gtagtggacc ctttcaccag gaaggattgg tacgatgtta aggctccttc catgttcaaa      120
aagcgtcaag ttggcaaaac tttggtcaac cgaactcagg gaaccaagat tgcttctgaa      180
gggttgaaag gacgagtttt cgaagtttcg ctcgctgata tccaggagga cactgatgcc      240
gagcgctcct tcaggaaatt caggctcatc gctgaagatg tccaagccag aaacgtcctt      300
accaatttcc acggtatgga tttgaccact gacaaactcc ggagcatggt caagaagtgg      360
cagactctca tcgaagccaa cgttgacgtc aagaccaccg acggctacct cctgcgcgtc      420
ttctgcatag gattcaccaa taaagatcaa ctttcccaga gaaagacttg ctatgcccag      480
cataatcagg tccgagaaat ccgcaaaaag atggttaaaa acatcagtga cagcatttcc      540
agctgtgatt tgaggagtgt tgtgaacaag ctgatcccag actccatcgc taaagatata      600
gaaaagaatt gccaaggaat ctacccactc cacgatgtgt acattcggaa ggtgaaggtg      660
ttgaagaagc cgaggttcga gctcagcaag ctccttgagc ttcacgtcga tggcaaaggg      720
atcgacgaac ccggcgcgaa agtgacgagg actgacgctt acgagcctcc agttcaagag      780
tctgtctaa                                                              789
<210>  142
<211>  473
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  142
gaccaaggag cagctggagg aagagaaacg tatctccctc agcattaggc tcaagcccct       60
ggcgatagaa aatatgagca tagacaggct acgcatcaaa gctcaggaac tctgggaagc      120
cattgtcaaa cttgagaccg agaaatacga tcttgaggaa aggcaaaaga ggcaagacta      180
cgatcttaaa gaactgaagg aaagacagaa gcaacaactt cggcacaaag ccttgaaaaa      240
aggcttggac cctgaggccc tcaccggcaa gtacccaccc aaaatccaag tcgcctccaa      300
atatgaacga agagttgaca ccagatctta tgacgacaag aaaaaactgt ttgaaggcgg      360
catcctggag cggtataagg agttgataga aaaggtgtgg accgaaaaag ttgatcagtt      420
cggcagtcga gcccattcca agcttcccag atggttcggc gagcggcccg gca             473
<210>  143
<211>  1463
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  143
gggtctcagc tgaggcacat tccatctcgt cgcaaatctt tcctgcatct ctcctgggtg       60
acctttaggt gaccaatcac atccatcatg tcggacgagg agtattcgga gtcggaggaa      120
gagacccagc cggaaccaca gaaaaaacca gaggctgaag gaggcggcga cccagaattc      180
gtcaagcgta aggaagccca gacctcagcc ttagacgagc agcttaaaga ctatatcgca      240
gaatggagga aacaaagagc tcgcgaagaa gaagacctca agaagctgaa ggagaagcaa      300
gccaagcgca aggtcgctcg ggcagaagaa gaaaagagat tggcggaaaa gaagaagcag      360
gaagaagaac gacgtgtgag ggaagcagaa gagaagaaac agagggaaat cgaagagaag      420
aggcgaaggc ttgaagaggc cgagaagaag agacaagcca tgatggctgc tctcaaggac      480
cagagcaaaa cgaagggacc caattttgtc gttaataaga aagccgaaac ccttggcatg      540
tcctccgctc aaattgagcg caacaagact aaggaacagc ttgaggaaga aaaacgtatc      600
tccctcagca ttaggctcaa gcccctggcg atagaaaata tgagcataga caggctacgc      660
ataaaagctc aggaactctg ggaagccatt gtcaaacttg agaccgagaa atacgatctt      720
gaggaaaggc aaaagaggca agactacgat cttaaagaac tgaaggaaag acagaagcaa      780
caacttcggc acaaagcctt gaaaaaaggc ttggaccctg aggccctcac cggcaagtac      840
ccacccaaaa tccaagtcgc ctccaaatat gaacgaagag ttgacaccag atcttatgac      900
gacaagaaaa aactgtttga aggcggcatc ctggagcggt ataaggagtt gatagaaaag      960
gtgtggaccg aaaaagttga tcagttcggc agtcgagccc attccaagct tcccagatgg     1020
ttcggcgagc ggcccggcaa gaagaaggat gcccctgaaa gcccggaaga agaggaagtg     1080
aaggtagaag atgaacctga agctgaacca agcttcatgc tcgacgaaga agaagaagaa     1140
gcggaagaag aggaggcgga agaggaagag gaagccgagg aagaggagga agaagaagag     1200
gaagaggaag aggaggagga ggaagaagaa taggtctttt tcaacatttc actgcaccca     1260
cagttccacg gtctttccgc ccacaaactc aatctgtgct cacgagatct tagcaggaaa     1320
agtattgcga cccgataaga acaaattaaa ttatttttgg aatatctcgt tcagttattt     1380
cgtgagaaac aattttattc atgtaaacga ttaaaagatc ccatacattt ccaaaaaaaa     1440
aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaa                                             1463
<210>  144
<211>  773
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  144
ccggcggatc caggaaaagg aggaggagtt cgagaacacc aggaagaacc accaacgggc       60
actcgactcc atgcaagcca gcttggaggc tgaagccaag ggtaaggctg aggctcttcg      120
catgaagaag aagcttgaag ccgacatcaa cgaactcgaa atcgctctcg accacgccaa      180
caaggctaac gccgaagccc agaagaccat caagaaatac caacaacaac tcaaggacgt      240
acagaccgct cttgaggaag aacaaagggc acgcgacgat gctcgtgaac aactcggaat      300
cgccgaaagg agggccaacg ctctcggaaa cgagctcgag gagtcgcgca ctctcctcga      360
acaggccgac aggggcaggc gccaagccga acaagaactt ggagatgccc acgaacagat      420
caacgagttg gctgcccaag ctaccagcgc ctcagccgcc aaacgcaagc ttgagggaga      480
gttgcagaca cttcatgctg acctcgacga acttctcaac gaagccaaga actccgaaga      540
gaaggccaag aaggcaatgg ttgatgccgc taggttagct gatgaactca gggcagaaca      600
ggaccacgct cagacccagg agaagctccg caaggctctg gaaacgcaaa tcaaggaact      660
ccaagtcagg ttggacgaag ccgaaaacaa cgccctcaag ggaggcaaga aggccatcgc      720
caagctggaa caacgtgtca gggaactcga aaacgaactg gacggcgagc agc             773
<210>  145
<211>  5446
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  145
tcaggaaaac tggctggtgc tgatattgag acctatctgc tggagaaggc tcgtgtcatc       60
tcccaacaaa cactcgagag atcctaccac attttctacc agatgatgtc tggagctgtc      120
aagggcgtca aggaaatgtg cttgctggtc gacgatatct atacgtacaa cttcatatcc      180
cagggtaaag tcagcattgc aggcgttgat gacggagagg aaatggttct gaccgatcaa      240
gccttcgaca tcttgggttt caccaagcaa gagaaggaag acatctacaa gatcaccgcc      300
gctgtcattc acatgggtac catgaagttc aagcaaaggg gtcgtgaaga gcaggctgaa      360
gccgatggaa ctgaggaagg cggtaaggtc ggtgtgctcc tcggtatcga cggtgacgac      420
ttgtacaaga atatgtgcaa gcccagaatc aaggtcggaa ctgagttcgt gacccaggga      480
aagaacgtca accaggtctc atactctctc ggtgccatgt ccaagggtat gttcgatcgt      540
ctcttcaaat tcttggtcaa gaaatgtaac gaaactctgg acaccaaaca gaagagacag      600
cacttcattg gtgtactgga tattgccggg ttcgaaattt tcgacttcaa cggttttgag      660
caactgtgta tcaacttcac caacgagaaa ttgcaacaat tcttcaacca ccacatgttc      720
gtactcgagc aagaagagta caagagggaa ggcattaact gggctttcat tgatttcgga      780
atggacttgc tcgcttgtat tgaactgatt gagaagccca tgggtatctt gtccatcctt      840
gaagaagagt ctatgttccc caaggctact gacaagacct ttgaggacaa actcatcacc      900
aaccacttgg gcaaatctcc caacttcagg aagcccgccg ttccaaagcc tggccaacaa      960
gctggtcact tcgccatcgc tcactacgct ggttgcgtgt catacaacat caccggctgg     1020
cttgagaaga acaaggatcc gttgaacgac actgttgtcg atcagtacaa gaagggaacc     1080
aacaaactgt tgtgcgagat cttcgctgat catcctggcc aatctggtgc ccctggtggt     1140
gatgctggtg gcaagggtgg tcgtggcaag aaaggtggtg gcttcgccac tgtgtcatct     1200
tcctacaagg aacaattgaa caacttgatg accactttga agagcacaca gcctcacttc     1260
gtccgttgta tcatccccaa cgaattgaaa cagcccggtg ttattgattc tcacttggtc     1320
atgcaccagc tgacttgtaa cggtgtactt gaaggcatcc gtatttgccg taaaggcttc     1380
cccaacagga tgaactaccc tgacttcaag ctccgataca agatccttaa ccccgctgcc     1440
gtggacagag agagtgatat cctcaaggct gctggtctcg tccttgagtc aactgggctc     1500
gaccctgata tgtaccgtct cggccacacc aaggtgttct tcagggccgg agttttgggt     1560
caacttgaag aattgcgtga cgacaggctt agcaagatca tcggatggat gcaggccttc     1620
atgcgcggtt acctcgtcag gaaggagtac aagaagctcc aggaacagag gttagccctc     1680
caagttgtcc agcgcaactt gagaaggtac ctccaactga ggacctggcc ctggtggaag     1740
atgtggtcca gggtcaagcc cctcctcaac gtcgccaacg tcgaagagga gatgcggaaa     1800
ctcgaagagt tggtcgccga gacccaggcc gctttggaga aggaggagaa gctgaggaag     1860
gaggccgaag cccttaacgc caagcttctc caagagaaga ccgaccttct caggaacttg     1920
gaaggagaga agggatccat cagcggtatc caggaacgat gtgccaagct gcaagcccaa     1980
aaggccgatc ttgagtctca actcatggac acccaagaaa ggctgcagaa cgaagaagat     2040
gccaggaacc agctcttcca acagaagaag aaattggaac aagaagccgc tgccctcaag     2100
aaggacatcg aagatctcga actctccaac caaaagaccg accaagataa ggccagcaag     2160
gaacaccaaa tcagaaacct caatgacgag atcgctcacc aagatgactt gatcaacaag     2220
ctcaacaagg agaagaaaat ccagagcgaa ctcaaccaaa agactgctga agaacttcag     2280
gccgctgaag acaaaatcaa ccacctcacc aaggttaagg tcaagcttga acagaccttg     2340
gatgaactcg aagacaccct cgaacgtgaa aagaaactcc gaggagatgt cgaaaaggcc     2400
aagaggaaga ctgaaggcga cctcaagctc actcaggaag ccgttgccga tcttgaaagg     2460
aacaagaaag aactcgaaca gaccatccag aggaaagaca aggaaattgc ttccctcacc     2520
gccaagctcg aagacgaaca atccatcgtc aacaagactg gcaaacagat caaggaactc     2580
cagagccgca ttgaagagct cgaggaggaa gtcgaggctg agaggcaagc ccgcggaaag     2640
gctgagaagc aacgtgctga cctcgcccgc gaacttgagg aactcggcga gaggttagag     2700
gaagctggtg gtgccacctc tgcccagatc gagctcaaca agaagcgtga agctgagatg     2760
agcaaactca ggagggacct ggaagaagcc aacatccagc acgaaggcac gctcgccaac     2820
ctccgcaaga agcacaacga tgctgtcagt gagatgggag accaaatcga ccagctcaac     2880
aaacttaaga ccaaggttga aaaggagaag tctcaatacc tcggtgaact caacgacgtc     2940
cgcgcctcca ttgaccactt gaccaacgag aaggctgcca ctgaaaaggt tgccaagcaa     3000
ctgcaacacc aaatcaatga agttcaaggc aaacttgatg aagctaacag gacgctcaac     3060
gacttcgatg ctgccaagaa gaagttgtct attgagaact ctgacctcct cagacagttg     3120
gaggaagctg agagccaagt ttctcaactt agcaagatca agatctccct caccactcaa     3180
ctcgaggaca ctaagcgtct cgccgatgag gaagctaggg aacgcgcaac ccttcttggc     3240
aagttccgca acttggaaca cgaccttgac aacctgaggg aacaggtgga ggaagaagcc     3300
gaagctaagg ctgatatcca acgtcaactc agcaaggcca acgctgaagc tcagttgtgg     3360
cgcagcaagt acgaaagcga gggtgttgcc cgcgctgagg agcttgagga ggccaagagg     3420
aaactccagg cccgtttggc tgaggctgag gagaccattg agtccctcaa ccagaaggtt     3480
atcgcccttg agaagacgaa gcagcgcctt gccactgaag tcgaggatct gcagctcgag     3540
gtcgaccgtg ccaacgccat tgccaatgcc gctgaaaaga aggctaaggc tattgacaag     3600
atcattggtg aatggaaact caaggttgat gaccttgctg ctgagcttga tgctagtcaa     3660
aaggaatgca gaaactactc cactgagctc ttcaggctca agggagctta tgaagaagga     3720
caggaacaac ttgaagctgt ccgcagggag aacaagaacc ttgctgatga agtcaaggac     3780
ttgctcgacc agatcggtga gggtggccgc aacatccacg aaattgagaa gcagcgcaag     3840
aggctcgaag ttgagaagga cgaacttcag gccgctcttg aggaggctga agccgctctt     3900
gaacaggagg agaacaaagt actcagggct caacttgagc tcagccaggt gcgtcaagaa     3960
attgaccgcc gcatccagga gaaggaagag gagttcgaga acaccaggaa gaaccaccaa     4020
cgggcactcg actccatgca agccagcttg gaggctgaag ccaagggtaa ggctgaggct     4080
cttcgcatga agaagaagct tgaagccgac atcaacgaac tcgaaatcgc tctcgaccac     4140
gccaacaagg ctaacgccga agcccagaag accatcaaga aataccaaca acaactcaag     4200
gacgtacaga ccgctcttga ggaagaacaa agggcacgcg acgatgctcg tgaacaactc     4260
ggaatcgccg aaaggagggc caacgctctc ggaaacgagc tcgaggagtc gcgcactctc     4320
ctcgaacagg ccgacagggg caggcgccaa gccgaacaag aacttggaga tgcccacgaa     4380
cagatcaacg agttggctgc ccaagctacc agcgcctcag ccgccaaacg caagcttgag     4440
ggagagttgc agacacttca tgctgacctc gacgaacttc tcaacgaagc caagaactcc     4500
gaagagaagg ccaagaaggc aatggttgat gccgctaggt tagctgatga actcagggca     4560
gaacaggacc acgctcagac ccaggagaag ctccgcaagg ctctggaaac gcaaatcaag     4620
gaactccaag tcaggttgga cgaagccgaa aacaacgccc tcaagggagg caagaaggcc     4680
atcgccaagc tggaacaacg tgtcagggaa ctcgaaaacg aactggacgg cgagcagagg     4740
agacacgccg acgcacaaaa gaacctccgt aaatccgagc gtagaattaa ggagctcagt     4800
ttccagtccg acgaggaccg taagaaccac gaacgcatgc aagacctcgt agacaaactg     4860
caacagaaga tcaagactta caagaggcag attgaagaag ccgaagaaat cgcggccctt     4920
aacctcgcca aattccgcaa agcacaacaa gaactcgaag aagctgaaga acgcgctgat     4980
ctcgctgaac aggctgtttc caaattcaga acaaagggtg gacgcgcagg atctgctgcc     5040
agagcgatga gccctgtcgg ccagaagtga aggaacgaat aagcggacgt ataagctatc     5100
aatacctcgc acacaaacct gccaggcctc aatttgacgg caatgccttc ccaccacgat     5160
tcgatctaca tcccgacgac ttttaagatc tttgatagca acgcaaaaca tcaaatgaaa     5220
atcttttaaa ttttatgtat ttattttgac ctattttatt aagttattgt taatacaaac     5280
ataattccat gagctagata tctagccaac gaaccatcac aatcacgatt attcgaactg     5340
tacgatagaa gcattatttg tacagctgga ccatttacaa aatatttttg cttcgaataa     5400
taaagagttt atatcgcgaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaa                    5446
<210>  146
<211>  964
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  146
tcctcctctg gtgcccgact cttcaaatac ccaaatccag tcatgtcttc ccgtaaaacc       60
gctggccgca gggcgaccac caagaagcgc gctcagcgtg cgacgtcaaa cgtattcgcc      120
atgttcgatc aggctcagat tcaagaattc aaggaggcat tcaacatgat cgaccagaac      180
agggacggct tcgtggataa ggaagacctc catgacatgc tcgcttccct aggtaagaac      240
ccctcagacg agtatctcga ggggatgatg aacgaggcgc ctggtcccat caacttcaca      300
atgttcctca ccctcttcgg tgagcggctt cagggaactg atccggagga ggttatcaag      360
aacgcatttg ggtgttttga cgaagacaac aacggattca tcaacgagga aagactgcgc      420
gagctgctca cctccatggg ggacaggttc actgatgaag acgtggacga aatgtaccga      480
gaggccccca tcaagaacgg catgttcgac tacatcgaat tcactcggat cctcaagcac      540
ggagccaaag acaaagacga gcagtgacct atcaaatcct cgtcaacctc ccttcagtaa      600
tttgaaacca atccatcaaa ttttgtttaa aactcttact taaaatccga tcatctacgt      660
cactttgcca ccaatcggta ttattttttg agccgttcct acataaatcg aattaatttt      720
atacctacga atcatattgt tggaaatttc tctcttgtac ttatactttc tgttatttcc      780
taatttttct aactaaccaa gttagtcgtt agtttttatt cattccttta taaattatta      840
gttatccatt tttaatcatc ttgaagttat ttgtttttcg agtggtagaa tatttataca      900
ttttccaata tataatggtt tattcattct taaaaaacga aaaaaaagaa aaaaaaaaaa      960
aaaa                                                                   964
<210>  147
<211>  5872
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  147
gatcttacct gcctgaacga ggcgtccgtt cttcacaaca tcaaggacag atattactcc       60
ggattgattt atacgtattc gggactcttc tgcgtggtgg tcaaccctta caagaaactg      120
ccaatctaca cagagagaat catggagaaa tacaaaggcg tcaaaagaca cgacctccct      180
ccacacgtat tcgccatcac agacacagct taccgttcta tgctgcaaga tagggaagat      240
caatcgatac tctgcaccgg cgaatcgggt gcggggaaaa ccgaaaacac gaaaaaagta      300
atccagtact tggcctacgt tgcagcctcg aaacccaaat cttccgcatc cccacatacg      360
gcccagagtc aagctctgat cattggagaa ctcgaacaac agctgcttca agctaaccca      420
attttggaag cattcggaaa cgccaagact gttaaaaacg ataattcttc tcgattcggt      480
aaattcattc gtatcaattt cgacgcatca ggctacatcg caggagccaa catagaaacg      540
tatcttctag agaaatctag ggccatcaga caagcgaaag atgagcgaac gttccacatc      600
ttttaccaac ttctggccgg agcatctgca gaacaaagaa aggagttcat cctcgaagat      660
ccgaaaaact accctttcct cagcagcggg atggtgtctg tgcctggagt tgacgatggt      720
gttgatttcc aagcaactat cgcctccatg tccatcatgg gcatgaccaa cgacgatctt      780
tccgctctct tccgcatcgt cagtgccgtc atgctgttcg gcagcatgca gttcaagcag      840
gagcgaaaca gcgaccaggc gacgctccca gacaacactg tagcgcaaaa aatcgcccac      900
ctccttggtc tctcaatcac agagatgacc aaagcgttcc tcaggcctag aatcaaagta      960
ggacgggatt tcgtcaccaa ggctcaaact aaggaacaag ttgagttcgc agtggaagcc     1020
atttcgaaag cctgctacga acgtatgttc cgatggctcg tcaacagaat caaccgctcc     1080
ctggatcgta ccaaaaggca gggagcatct ttcattggta ttcttgatat ggctggtttc     1140
gaaatctttg agatcaactc cttcgagcag ctttgtatca attacaccaa tgagaaactt     1200
caacaactct tcaaccacac catgttcatt ttggagcaag aggagtacca gagagaaggt     1260
attgaatgga agttcatcga cttcggactt gatcttcagc cgaccattga tctcattgat     1320
aagccaatgg gagtcatggc tctcctggat gaagaatgtt ggttccccaa agccactgac     1380
aagaccttcg ttgagaagct ggtcggtgct cacagcgttc accccaaatt catcaaaact     1440
gatttccgtg gagtcgccga ctttgctgtc gtccattatg ccggaaaagt cgattattcg     1500
gcggcgcagt ggctgatgaa gaacatggac cctctgaacg aaaacgtcgt gcagctcctc     1560
cagaactcgc aagatccgtt cgtcatccac atctggaagg acgcagagat cgtcggcatg     1620
gctcaccaag ctctcagcga cactcagttt ggagctcgta ccaggaaggg tatgttccga     1680
accgtgtctc aactctacaa agaccagctg tccaaactca tgatcacact tcgcaacacg     1740
aaccccaact tcgtccgttg catcctcccc aaccacgaga agagagctgg caagatcgat     1800
gctcctttgg tgctggatca gctcagatgc aacggtgtgt tggaaggcat cagaatttgc     1860
agacaaggtt tcccgaatag aatcccattc caggaattcc ggcaaagata cgagctctta     1920
actcccaatg tcatccccaa agggttcatg gacggtaaaa aggcttgcga gaagatgatc     1980
aacgctctcg aactggaccc taatctctac agagttggtc agtccaagat attcttcaga     2040
gctggagtct tagctcatct agaagaagag cgcgactata agattactga tctgatagcc     2100
aatttccggg ctttctgtag gggatatctt gcccgaagga actaccaaaa gcgtcttcag     2160
cagctcaacg ccattcgtat tatccagcga aattgctcag cttacttgaa gttgaggaac     2220
tggcaatggt ggcggctgta caccaaggtc aaacctctgc ttgaagtgac gaaacaagaa     2280
gagaagctga cgcaaaagga agacgaactg aagcaggtcc gcgagaaact ggacaaccag     2340
gtgaggtcca aggaagagta tgaaaagagg cttcaggacg ctttggagga gaaagctgct     2400
ctggcagagc aacttcaggc agaagtagag ctgtgtgcgg aagccgaaga aatgagagcc     2460
aggctcgctg tgaggaagca agaactagag gaaattctcc acgatctaga agccagaata     2520
gaggaagaag agcaacgaaa cacggtcctc atcaacgaaa agaagaagtt gaccctcaac     2580
atcgccgacc tcgaagaaca actggaagag gaagaaggag ctcgacagaa actccaactc     2640
gaaaaagtcc agatcgaagc tcggctgaag aaaatggaag aggacctcgc tctggccgaa     2700
gacaccaaca ccaaagtcgt aaaggagaag aaagtgttgg aagagagggc tagtgacttg     2760
gcccagaccc tcgctgagga agaagaaaaa gctaaacacc tcgcgaagct caagaccaag     2820
cacgagacga cgatagcgga attggaagag aggttgctca aagacaatca gcagaggcag     2880
gaaatggata ggaacaagag gaagatcgaa tcagaggtga atgatttgaa agaacaaatt     2940
aacgagaaga aggtccaagt agaggagctt cagttgcaac tcgggaagag ggaagaggaa     3000
atcgctcaag ctctgatgag aattgacgag gaaggagcag gcaaagctca gactcaaaag     3060
gctctcaggg aattggagtc tcagctggct gagctacaag aggatctaga ggctgaaaag     3120
gccgctcgcg ccaaggccga aaagcagaag cgcgacctca acgaagaact cgagtccctc     3180
aagaatgaac ttcttgactc actggacacg acagcagctc aacaggaatt gaggaccaag     3240
agagaacacg aactggcaac gctcaagaaa acattagaag aggaaacgca cattcacgaa     3300
gtatctctca ccgaaatgag gcacaaacac actcaagaag tcgctgcact caacgaacag     3360
ttggagcaac tcaaaaaggc caaatctgca ctcgaaaaat cgaaagcaca acttgaaggg     3420
gaagctgctg agctcgccaa cgaactggaa acagcaggaa cgagcaaggg cgagagtgaa     3480
aggaaacgga agcaggccga atcgtctctg caggagctct cgtcgcgact cttggaaatg     3540
gagagaacca aagccgagct ccaagagagg gtccagaaac tgtctgcaga agccgactct     3600
gtcaatcagc agttggaagc agcggaactg aaagcatcag cagccctcaa ggcatctggt     3660
accttggaga ctcagctcca ggaggcgcaa gtgctcctgg aagaggaaac tcggcagaag     3720
ctgtcgttga ccaccaaact gaaaggcctc gaaagcgaaa gagatgctct caaagagcaa     3780
ctctacgaag aggacgaggg taggaagaac ctagaaaaac agatggcgat actcaatcaa     3840
caagtagctg aaagcaagaa gaagtctgaa gaagaaacgg aaaaaataac tgaactcgaa     3900
gaaagtcgca aaaaattgct caaagacata gaaattcttc aaaggcaagt cgaagaactt     3960
caagttacca acgacaaatt agagaaaggc aagaagaagc tgcagtcaga actggaagac     4020
ctcaccatcg acctggagtc tcagagaaca aaggtggtcg agctcgagaa gaaacaaaga     4080
aatttcgaca aagttttggc cgaagaaaaa gcgttgtcgc aacaaatcac gcacgagagg     4140
gatgcggctg aaagagaagc ccgtgaaaag gaaactagag tactgtcgct gacgcgagaa     4200
ctcgatgaat tcatggagaa aatcgaggaa ctggagagaa gcaaacggca actccaggct     4260
gaactagacg agctggtcaa caaccaaggc accaccgaca aaagcgtgca cgaattggaa     4320
agggcgaaac gagttctgga gtcacaactt gcagagcaga aagcacaaaa tgaagagctt     4380
gaagatgaac tccaaatgac ggaagacgcc aaattgaggc tcgaagtcaa catgcaagct     4440
ctgagagctc aattcgaaag agatctacag ggcaaagaag agtcgggaga agaaaagagg     4500
agaggattgc tgaaacagct gagggacatt gaggctgaac ttgaagacga gagaaaacaa     4560
aggaccgctg ctgttgcctc tagaaagaag attgaagcgg atttcaaaga tgtagaacag     4620
caactggaaa tgcacactaa ggtaaaggaa gatcttcaga agcaactgaa gaaatgccag     4680
gtccaactga aggacgcaat cagagacgcg gaagaggctc ggctcggtcg ggaagagctg     4740
caggctgccg ctaaagaggc cgaaaggaag tggaagggtt tggaaacgga gctcattcaa     4800
gtgcaagagg atttgatggc gagcgaaagg cagcggcggg cagcggaagc cgaaagggat     4860
gaagtcgttg aagaagccaa caagaatgtc aagagcttat cgaatcttct cgacgaaaag     4920
aagaggctcg aagcccaatg ctcaggcctg gaagaggaac tcgaagaaga acttagcaac     4980
aatgaggccc tccaagacaa agcgagaaaa gcacaactca gcgttgagca acttaatgca     5040
gaacttgctg ccgaacggag taatgtgcag aaacttgagg gaacgagatt gtcgatggaa     5100
aggcaaaaca aggaactgaa ggccaaactg aacgaactgg aaacgttaca acgcaacaag     5160
ttcaaggcca atgcgtctct ggaggctaag attaccaatc ttgaagagca actggaaaat     5220
gaagccaagg aaaagctact tctccagaaa ggcaacagga agctcgacaa gaaaatcaaa     5280
gacctcctcg ttcaattgga ggatgaaagg aggcatgccg accagtataa agaacaagtc     5340
gagaagatca acgtcagggt gaagacgcta aagcgaactt tggacgacgc cgaagaagaa     5400
atgagtaggg agaagaccca gaagaggaaa gcacttcgcg aattggaaga cctcagggag     5460
aactacgatt ccctactccg agagaacgat aacctcaaaa acaaactcag gcggggcggc     5520
ggtatttccg ggatctcgag caggctcgga ggctccaagc gaggttccat ccccggagag     5580
gattcccagg gtctcaacaa caccacagac gaatcagtcg atggtgacga tatctcgaat     5640
ccttaaacgc tacttggatt taccagccag catccaactt tccactgaag acgtctccca     5700
taaacgttga aagagacccg tcgaggaaga aaaaaaggct ctttaagaaa aactattctg     5760
cctttttcaa aactttgtac ttaaaagtac tttcgcttaa caatgaaaga agaataaaaa     5820
tgtaaagttt tcatttatac aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aa             5872
<210>  148
<211>  325
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  148
aagaagatcc tggaggagat cattgcggag gtcgacgctg atggctctgg acaacttgaa       60
tttgaggagt tcgtagcctt ggctgccggt ttcctgacag aagatgagac acaagatgct      120
gaggccatgc agcaagaact gagggaggcc ttcaggctct acgacaagga agggaacggt      180
tacattacca ctgacgtctt gagggaaatc ctgaaggaac tcgacgacaa aatcacctcc      240
caagaacttg acatgatgat tgctgaaatt gattctgacg gttccggaac tgttgacttc      300
gacgagttca tggagatgat gaccg                                            325
<210>  149
<211>  428
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  149
aattatcccc atcatgacca tcgcgttgaa cgctttcgac cgggatcact cgggttccat       60
cccgacggac atggtggccg acatcctcag actcatgggt caacccttca acaagaagat      120
tctcgatgaa ctcatcgaag aagttgacgc tgacaaatcg ggaaggctgg agtttgaaga      180
gttcatcacg ttggcagcca agttcattgt tgaggaagac gatgaagcca tgcagaaaga      240
gctgcgagaa gccttccgtc tctacgacaa agaaggtaat ggctacatcc cgacctcctg      300
cctcaaagaa atccttcatg aattggacga gcagctgacc aacgaggagc tggacatgat      360
catcgaggag atcgactctg acggatccgg aactgtcgac ttcgacgagt tcatggagat      420
gatgaccg                                                               428
<210>  150
<211>  538
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  150
gcttctttta caaatcgcac cacgccgact taattcattc ccggagggtt taaattttat       60
cgaagcagca tggtgcggat gaatgtgctg agcgatgctc tgaaaagcat caacaatgct      120
gagaagaggg gcaaaaggca ggtgctcctg aggccttgtt ccaaagtcat cattaaattc      180
cttacagtga tgatgaagaa aggttatatc ggcgaattcg aaatagtaga tgatcacaga      240
tctggtaaaa tcgtcgtcaa cctcaacggc agattgaaca aatgtggagt tatatcgccc      300
agattcgacg tacccatcac acaaatcgaa aaatggacga acaacctcct gccttcccga      360
cagttcggtt atgtcgtact caccactagt ggagggatca tggatcacga agaagccagg      420
cgaaaacatc ttgggggtaa aatattaggg tttttctttt aataaaaaaa gacgagatgt      480
aaattaataa aactctttta cgtttcgcta aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaa        538
<210>  151
<211>  405
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  151
ccacgccgac ttaattcatt cccggagggt ttaaatttta tcgaagcagc atggtgcgga       60
tgaatgtgct gagcgatgct ctgaaaagca tcaacaatgc tgagaagagg ggcaaaaggc      120
aggtgctcct gaggccttgt tccaaagtca tcattaaatt ccttacagtg atgatgaaga      180
aaggttatat cggcgaattc gaaatagtag atgatcacag atctggtaaa atcgtcgtca      240
acctcaacgg cagattgaac aaatgtggag ttatatcgcc cagattcgac gtacccatca      300
cacaaatcga aaaatggacg aacaacctcc tgccttcccg acagttcggt tatgtcgtac      360
tcaccactag tggagggatc atggatcacg aagaagccag gcgaa                      405
<210>  152
<211>  470
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  152
tgtcgatggc ggtcttaaca tcccccattc caccaagagg ttccctgggt acgacagtga       60
gtctaaggaa ttcaacgctg aggtccacag gaagcacatt ttcggcattc acgtcgctga      120
ctacatgcgt cagctggctg aagaggatga cgatgcttac aagaagcagt tctcgcagta      180
tgtcaagaac ggagtcactg ctgacagcat tgaaagtatc tacaagaagg ctcacgaagc      240
aatccgagct gatccaactc gcaaaccact tgagaagaag gaagtcaaga agaagaggtg      300
gaaccgcgcc aagctttcct tgtctgaaag gaagaacacc atcaaccaaa agaaggcaac      360
ttatctcaag aaagtggaag ctggagaaat cgaataagtt tttatattcc tgacattacc      420
cattaaaggt ttcgttttaa cctaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa                 470
<210>  153
<211>  387
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  153
tgtcgatggc ggtcttaaca tcccccattc caccaagagg ttccctgggt acgacagtga       60
gtctaaggaa ttcaacgctg aggtccacag gaagcacatt ttcggcattc acgtcgctga      120
ctacatgcgt cagctggctg aagaggatga cgatgcttac aagaagcagt tctcgcagta      180
tgtcaagaac ggagtcactg ctgacagcat tgaaagtatc tacaagaagg ctcacgaagc      240
aatccgagct gatccaactc gcaaaccact tgagaagaag gaagtcaaga agaagaggtg      300
gaaccgcgcc aagctttcct tgtctgaaag gaagaacacc atcaaccaaa agaaggcaac      360
ttatctcaag aaagtggaag ctggaga                                          387
<210>  154
<211>  745
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  154
gtcctacgtg tttccggaaa aacgtgcatt tcgcgtaccc ctcgtggtga tccgttttca       60
tagaaataat ccaaaatggc tcccaagggg aataatatga ttcccaatgg ccatttccac      120
aaggattggc agaggttcat caaaacctgg ttcaaccagc ctgcccgcaa gttgaggagg      180
agaaacaaga ggttggagaa ggcccaacgg ctcgcgcccc gccccgcggg acctcttcgc      240
cccgctgtca gatgtcccac cgtcaggtac cacaccaagc tacgacctgg acgtggcttc      300
accttggaag aaatcaagag agccggtctg tgcaaaggat tcgcgatgtc catcggaatc      360
gctgtcgacc ccagaagaag gaataaatcc atcgagtccc tccaactcaa tgtacagaga      420
ctcaaggagt acagggctaa gcttatcctc ttcccacaca agaatgccaa gaaactgaag      480
aagggagaag ctactgagga agagaggaag gtggccaccc aacagcccct gccagttatg      540
cccatcaagc aaccagtcat caaattcaag gctcgcgtca ttacagacga tgagaagaaa      600
tactctgcct tcaccgccct ccgcaaggga cgagcagacc aaaggttggt cggtatccgt      660
gctaagcgcg caaaggaagc cgcagaaaac gccgaagacc cctctaaagc tcctaaaaaa      720
aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaa                                            745
<210>  155
<211>  527
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  155
aacgtgcatt tcgcgtaccc ctcgtggtga tccgttttca tagaaataat ccaaaatggc       60
tcccaagggg aataatatga ttcccaatgg ccatttccac aaggattggc agaggttcat      120
caaaacctgg ttcaaccagc ctgcccgcaa gttgaggagg agaaacaaga ggttggagaa      180
ggcccaacgg ctcgcgcccc gccccgcggg acctcttcgc cccgctgtca gatgtcccac      240
cgtcaggtac cacaccaagc tacgacctgg acgtggcttc accttggaag aaatcaagag      300
agccggtctg tgcaaaggat tcgcgatgtc catcggaatc gctgtcgacc ccagaagaag      360
gaataaatcc atcgagtccc tccaactcaa tgtacagaga ctcaaggagt acagggctaa      420
gcttatcctc ttcccacaca agaatgccaa gaaactgaag aagggagaag ctactgagga      480
agagaggaag gtggccaccc aacagcccct gccagttatg cccatca                    527
<210>  156
<211>  576
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  156
gccttattga acgtggtcga cagaaaactc ggtttctgag ctcatctcaa catggatatc       60
gaagaaccgg ccgcggcccc tacggagccc tcggacgtca acaccgccct tcaagaggtc      120
ctcaaggccg cccttcaaca cggagtcgtc gtccacggta tccacgagtc cgccaaggcc      180
ctcgacaaga ggcaagcttt gttgtgcgtc ctcgctgaga actgcgacga gccgatgtac      240
aagaagctgg tacaagccct ctgctcagag caccacatcc ccctcgtcaa agtagattcc      300
aataagaaac tcggcgaatg gacgggcctt tgcaagatcg acaagaccgg caaatctagg      360
aaaatcgtcg gctgctcttg tgtcgtcatc aaggactggg gtgaggacac gccccacttg      420
gacctcctca aggactacat cagggacgtc ttctaagaag tttctcctca atttcctttt      480
tataatgatt taacaactga gaattaataa taaaaatgtt aaattaaaca aaaaaatctc      540
aaaactgtaa aaaaaaagaa gaaaaaaaaa aaaaaa                                576
<210>  157
<211>  442
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  157
ccttattgaa cgtggtcgac agaaaactcg gtttctgagc tcatctcaac atggatatcg       60
aagaaccggc cgcggcccct acggagccct cggacgtcaa caccgccctt caagaggtcc      120
tcaaggccgc ccttcaacac ggagtcgtcg tccacggtat ccacgagtcc gccaaggccc      180
tcgacaagag gcaagctttg ttgtgcgtcc tcgctgagaa ctgcgacgag ccgatgtaca      240
agaagctggt acaagccctc tgctcagagc accacatccc cctcgtcaaa gtagattcca      300
ataagaaact cggcgaatgg acgggccttt gcaagatcga caagaccggc aaatctagga      360
aaatcgtcgg ctgctcttgt gtcgtcatca aggactgggg tgaggacacg ccccacttgg      420
acctcctcaa ggactacatc ag                                               442
<210>  158
<211>  601
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  158
ctttcatttg tatagtacgg acgggtagtt tagttgtgtc ggttcatcgt aattcatcgg       60
ctgaatcatg aagatgaata aattggtcac ttcctcgagg aggaagaaca ggaagaggca      120
cttcaccgcc ccatcccaca tccgtagaaa gttgatgtcg gcaccactgt ccaaagaact      180
taggcagaag tacaacgtcc gaactatgcc tgtgaggaag gacgatgaag tccaggttgt      240
acgaggacac tacaaaggcc aacaggttgg caaagtcctc caggtgtaca ggaagaagtt      300
cattatttac attgagcgga tccaaagaga aaaagccaat ggtgccagcg tttacgttgg      360
cattcacccc tcaaagtgtg tgatcgtcaa attgaaggtc gacaaggata ggaaagaaat      420
ccttgacaga agatccaaag gacgtgactt ggcacttggc aaggacaagg gcaaatacac      480
cgaagacagt acgactgcta tggacacgtc ttaaattaat ttggtttatt tggttcctta      540
actccgttct tctttaataa tgactttttt aaagcaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa      600
a                                                                      601
<210>  159
<211>  448
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  159
gtacggacgg gtagtttagt tgtgtcggtt catcgtaatt catcggctga atcatgaaga       60
tgaataaatt ggtcacttcc tcgaggagga agaacaggaa gaggcacttc accgccccat      120
cccacatccg tagaaagttg atgtcggcac cactgtccaa agaacttagg cagaagtaca      180
acgtccgaac tatgcctgtg aggaaggacg atgaagtcca ggttgtacga ggacactaca      240
aaggccaaca ggttggcaaa gtcctccagg tgtacaggaa gaagttcatt atttacattg      300
agcggatcca aagagaaaaa gccaatggtg ccagcgttta cgttggcatt cacccctcaa      360
agtgtgtgat cgtcaaattg aaggtcgaca aggataggaa agaaatcctt gacagaagat      420
ccaaaggacg tgacttggca cttggcaa                                         448
<210>  160
<211>  456
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  160
ggctgttgtc ggctggtcat atcccgtttt ccacgtggtg tgtcgagtta tttttcttgt       60
aaattcgcat ttaaaatcgg atttataacc gaaattcatt atggaaaagc cagtagtttt      120
ggcccgtgtc atcaaaatcc tcggacgtac cggctcacag ggccaatgta cgcaagtgaa      180
ggtggagttc attggtgagc agaaccgaca gatcatcagg aacgtgaaag gaccagttag      240
agaaggcgac atcctcacac tcctagagtc tgaaagagaa gcgagaagac tgaggtagtg      300
ggaggtggcg atgcgttacg ttattttact tcattcaaca tttgaaaaaa accatcttcg      360
tgacaaaaaa catcttcacg caactatttg tattacctat gtttcgtaaa taaagtaacc      420
tcgttactta aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaa                                456
<210>  161
<211>  321
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  161
ctgttgtcgg ctggtcatat cccgttttcc acgtggtgtg tcgagttatt tttcttgtaa       60
attcgcattt aaaatcggat ttataaccga aattcattat ggaaaagcca gtagttttgg      120
cccgtgtcat caaaatcctc ggacgtaccg gctcacaggg ccaatgtacg caagtgaagg      180
tggagttcat tggtgagcag aaccgacaga tcatcaggaa cgtgaaagga ccagttagag      240
aaggcgacat cctcacactc ctagagtctg aaagagaagc gagaagactg aggtagtggg      300
aggtggcgat gcgttacgtt a                                                321
<210>  162
<211>  865
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  162
aatcccggat tcatcgtttt attgaattgt ttttcgaagt ttctggtatt atcgttaaat       60
tagtctgtta agccctcatc cgtgatttgg caagttgttg attgttctat tttccttttt      120
ccagaaaatg gggagacgtc cagcgaggtg ttatcggtac tgtaaaaaca agccataccc      180
ccaaatcccg gttctgtcgt ggtgtccccg accccaagat caggatcttc gatctgggaa      240
agaagaaggc ccgcgtggaa gacttccccc tctgcgttca cctcgtctcc gatgagtacg      300
agcagctgtc ctccgaagcc ctcgaggcag gacgtatctg ctgcaacaag tacctcgtca      360
agaactgcgg caaggaccag ttccacatca ggatgaggct ccaccccttc cacgtcatta      420
ggatcaacaa aatgttatcg tgcgctggag ctgataggct ccagacaggg atgagaggag      480
cgttcggaaa gccgcaagga accgtcgctc gcgtccgcat cggtcagccc atcatgagcg      540
tccgctcgtc cgacaggtac aaggccgccg tcatcaaggc tctgaggaga gccaaattca      600
agttccctgg tcgccagaag atctacgttt ccaagaaatg gggcttcacc aagttcgacc      660
gcgaagagta cgagggcctt aggaacgaca acaaactagc gaatgacggc tgcaacgtca      720
aattgaggcc ggatcacgga cctttgcagg cgtggaggaa ggctcagctt gacatcgctg      780
ctggcctcta aattactttc caatggtttt ataaatcaac aaataaaact cgttttatgt      840
aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaa                                            865
<210>  163
<211>  792
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  163
ggttcctttc tcagattttg actttgccgt gttgtctctc ccaattttcc aaaatgggga       60
gacgtccagc gaggtgttat cggtactgta aaaacaagcc ataccccaaa tcccggttct      120
gtcgtggtgt ccccgacccc aagatcagga tcttcgatct gggaaagaag aaggcccgcg      180
tggaagactt ccccctctgc gttcacctcg tctccgatga gtacgagcag ctgtcctccg      240
aagccctcga ggcaggacgt atctgctgca acaagtacct cgtcaagaac tgcggcaagg      300
accagttcca catcaggatg aggctccacc ccttccacgt cattaggatc aacaaaatgt      360
tatcgtgcgc tggagctgat aggctccaga cagggatgag aggagcattc ggaaagccgc      420
aaggaaccgt cgctcgcgtc cgcatcggtc agcccatcat gagcgtccgc tcgtccgaca      480
ggtacaaggc cgccgtcatc gaggctctga ggagagccaa attcaagttc cctggtcgcc      540
agaagatcta cgtttccaag aaatggggct tcaccaagtt cgaccgcgaa gagtacgagg      600
gccttaggaa cgacaacaaa ctagcgaatg gcggctgcaa cgtcaaattg aggccggatc      660
acggaccttt gcaggcgtgg aggaaggctc agcttgacat cgctgctggc ctctaaatta      720
ctttccaatg gttttataaa tcaacaaata aaactcgttt tatctaaaaa aaaaaaaaaa      780
aaaaaaaaaa aa                                                          792
<210>  164
<211>  645
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  164
agccctcatc cgtgatttgg caagttgttg attgttctat tttccttttt ccagaaaatg       60
gggagacgtc cagcgaggtg ttatcggtac tgtaaaaaca agccataccc ccaaatcccg      120
gttctgtcgt ggtgtccccg accccaagat caggatcttc gatctgggaa agaagaaggc      180
ccgcgtggaa gacttccccc tctgcgttca cctcgtctcc gatgagtacg agcagctgtc      240
ctccgaagcc ctcgaggcag gacgtatctg ctgcaacaag tacctcgtca agaactgcgg      300
caaggaccag ttccacatca ggatgaggct ccaccccttc cacgtcatta ggatcaacaa      360
aatgttatcg tgcgctggag ctgataggct ccagacaggg atgagaggag cgttcggaaa      420
gccgcaagga accgtcgctc gcgtccgcat cggtcagccc atcatgagcg tccgctcgtc      480
cgacaggtac aaggccgccg tcatcaaggc tctgaggaga gccaaattca agttccctgg      540
tcgccagaag atctacgttt ccaagaaatg gggcttcacc aagttcgacc gcgaagagta      600
cgagggcctt aggaacgaca acaaactagc gaatgacggc tgcaa                      645
<210>  165
<211>  619
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  165
gctttaccga ttccgttctt gtttagtcca cgtttctctg ctcattcgtg cagattttaa       60
aacatgacca actccaaagg ttatcgtcgc ggaacgaggg atctcttctc gaggcccttc      120
cgtcaccatg gtgtcatccc actctcaacg tacatgaaag tataccgagt aggagacatc      180
gtatctatca aaggtaatgg agcagtgcaa aaaggtatgc cccacaaagt ttaccacggc      240
aagaccggac gagtctacaa tgttacacct cgcgcccttg gtgttattgt caacaagagg      300
gttcgtggaa aaatccttcc caagaggatc aacatcagga ttgaacacgt caaccacagt      360
aaatgcagag aagatttctt gaagcgagtg cgagaaaatg aaaggctccg caaattcgcc      420
aaagaaactg gcaccagggt tgaactcaaa agacagcctg ctcagccacg ccctgcacac      480
tttgtacaag ctaaagaagt cccagagctg ctggccccca taccttacga gttcatcgct      540
taaaaaattt tcaattccat cttaacttta tatatttgaa taaaattgtg ttctcaaaaa      600
aaaaaaaaaa aaaaaaaaa                                                   619
<210>  166
<211>  461
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  166
acgtttctct gctcattcgt gcagatttta aaacatgacc aactccaaag gttatcgtcg       60
cggaacgagg gatctcttct cgaggccctt ccgtcaccat ggtgtcatcc cactctcaac      120
gtacatgaaa gtataccgag taggagacat cgtatctatc aaaggtaatg gagcagtgca      180
aaaaggtatg ccccacaaag tttaccacgg caagaccgga cgagtctaca atgttacacc      240
tcgcgccctt ggtgttattg tcaacaagag ggttcgtgga aaaatccttc ccaagaggat      300
caacatcagg attgaacacg tcaaccacag taaatgcaga gaagatttct tgaagcgagt      360
gcgagaaaat gaaaggctcc gcaaattcgc caaagaaact ggcaccaggg ttgaactcaa      420
aagacagcct gctcagccac gccctgcaca ctttgtacaa g                          461
<210>  167
<211>  481
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  167
caacgtacat gaaagtatac cgagtaggag acatcgtatc tatcaaaggt aatggagcag       60
tgcaaaaagg tatgccccac aaagtttacc acggcaagac cggacgagtc tataatgtta      120
cacctcgcgc ccttggtgtt attgtcaaca agagggttcg tggaaaaatc cttcccaaga      180
ggatcaacat caggattgaa cacgtcaacc acagtaaatg cagagaagat ttcttgaagc      240
gagtgcgaga aaatgagagg ctccgcaaat tcgccaaaga aactggcacc agggttgaac      300
tcaaaagaca gcctgctcag ccacgccctg cacactttgt acaagctaaa gaagtcccag      360
agctgctggc ccccatacct tacgagttca tcgcttaaac aattttcaat tccatcttaa      420
ctttatatat ttgaataaaa ttgtgttccc taaaaaaaaa aaaaaaaaaa aaaaaaaaaa      480
a                                                                      481
<210>  168
<211>  747
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  168
gcataaatat atagggcgat tgatttagcg gccgcgaatt cgcccttaag cagtggtatc       60
aacgcagagg gggggtcttc tctcccggtt ttcttcttgc ccgaatcgtc catcctgatg      120
ttggggtcac tgtcaccacg accatacccc aatttggggt atggcttggt tgtcccctac      180
ccataaatcc tgattggaca tctccccatt atgaaagact gcgagaaaca cccctgcccc      240
cggctttaaa cccacggcta aggggggatt cgcgggcggc aaatttcatt cggcccatag      300
tgagtcgtat tacaattcac tgggcgtcct ttttacacct tcggaccggg aaaaacctgg      360
cggttaccca aaatccgtta tttgccacat ccccctttac tccactgggt tatataacaa      420
agaggcccct tccaatgtcc tttcccaaaa gtgcgcagcc ctatactaat ggcctttaaa      480
ggaaccccta ttaaaaaaaa aacccttaac cacaggttgg tgatgtaacc aaggaaaata      540
atgaacacac cgggccaaag aaggtgatac ccctggtctt ggcgaccgcc tgtcaaatct      600
tcctcccgga acgaaacccg tagtggcatc gaggaataac cttgcgcatc atagactcca      660
aatggccact gtggccgctc tcgattcatg gaagaaatga gatgacccct accccgcgca      720
aaaggattca gaaccaatac cagaatc                                          747
<210>  169
<211>  1052
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<220>
<221>  иной_признак
<222>  (662)..(665)
<223>  n представляет собой a, c, g или t
<400>  169
ggttttcttc ttgcccgaat cgtccatcct gatgttgggg tcactgtcac cacgaccata       60
ccccaatttg gggtatggct tggttgtccc ctacccataa atcctgattg gacatctccc      120
cattatgaaa gactgcgaga aacacccctg cccccggctt taaacccacg gctaaggggg      180
gattcgcggg cggcaaattt cattcggccc atagtgagtc gtattacaat tcactgggcg      240
tcctttttac accttcggac cgggaaaaac ctggcggtta cccaaaatcc gttatttgcc      300
acatccccct ttactccact gggttatata acaaagaggc cccttccaat gtcctttccc      360
aaaagtgcgc agccctatac taatggcctt taaaggaacc cctattaaaa aaaaaaccct      420
taaccacagg ttggtgatgt aaccaaggaa aataatgaac acaccgggcc aaagaaggtg      480
atacccctgg tcttggcgac cgcctgtcaa atcttcctcc cggaacgaaa cccgtagtgg      540
catcgaggaa taaccttgcg catcatagac tccaaatggc cactgtggcc gctctcgatt      600
catggaagaa atgagatgac ccctaccccg cgcaaaagga ttcagaacca ataccagaat      660
cnnnntagca aaacggctat ttcccggttc tttgtcggat tcttttgcca gggccatgcc      720
ttttcccgga atggaaggcg ggctgtttga gaaacgcatt aaatgggatt agtccattca      780
taggccaccc aaggaaacca ctttaatttc gggttggtag gttgagagaa atggtgaggg      840
gtaacaattt tacaccggga accgtttatg cccagaatta ccccagcttc gaattaaccc      900
cccctaaagg ggatagttcc gccgggttaa aagaaattcg ccttaaacca gtgttttaaa      960
gcaggagaca gaagtgtttc tcgcaagctt tcaaaatggg gagatgtcca atcaggattt     1020
atgggtaggg tacaaccaag ccgaacccca aa                                   1052
<210>  170
<211>  555
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  170
tagcaaaacg gctatttccc ggttctttgt cggattcttt tgccagggcc atgccttttc       60
ccggaatgga aggcgggctg tttgagaaac gcattaaatg ggattagtcc attcataggc      120
cacccaagga aaccacttta atttcgggtt ggtaggttga gagaaatggt gaggggtaac      180
aattttacac cgggaaccgt ttatgcccag aattacccca gcttcgaatt aaccccccct      240
aaaggggata gttccgccgg gttaaaagaa attcgcctta aaccagtgtt ttaaagcagg      300
agacagaagt gtttctcgca agctttcaaa atggggagat gtccaatcag gatttatggg      360
tagggtacaa ccaagccgaa ccccaaatcc ctgttctgtc gtggtgacag tgaccccaag      420
atctggatgt tcgttttggg aaagaagaaa accgggaggg accacttcct cctctgcgtt      480
gataccactg cttaagggcg aattcgttta aacctgcagg actagtccct tagtgagggt      540
aatctagcag cccac                                                       555
<210>  171
<211>  1052
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<220>
<221>  иной_признак
<222>  (662)..(665)
<223>  n представляет собой a, c, g или t
<400>  171
ggttttcttc ttgcccgaat cgtccatcct gatgttgggg tcactgtcac cacgaccata       60
ccccaatttg gggtatggct tggttgtccc ctacccataa atcctgattg gacatctccc      120
cattatgaaa gactgcgaga aacacccctg cccccggctt taaacccacg gctaaggggg      180
gattcgcggg cggcaaattt cattcggccc atagtgagtc gtattacaat tcactgggcg      240
tcctttttac accttcggac cgggaaaaac ctggcggtta cccaaaatcc gttatttgcc      300
acatccccct ttactccact gggttatata acaaagaggc cccttccaat gtcctttccc      360
aaaagtgcgc agccctatac taatggcctt taaaggaacc cctattaaaa aaaaaaccct      420
taaccacagg ttggtgatgt aaccaaggaa aataatgaac acaccgggcc aaagaaggtg      480
atacccctgg tcttggcgac cgcctgtcaa atcttcctcc cggaacgaaa cccgtagtgg      540
catcgaggaa taaccttgcg catcatagac tccaaatggc cactgtggcc gctctcgatt      600
catggaagaa atgagatgac ccctaccccg cgcaaaagga ttcagaacca ataccagaat      660
cnnnntagca aaacggctat ttcccggttc tttgtcggat tcttttgcca gggccatgcc      720
ttttcccgga atggaaggcg ggctgtttga gaaacgcatt aaatgggatt agtccattca      780
taggccaccc aaggaaacca ctttaatttc gggttggtag gttgagagaa atggtgaggg      840
gtaacaattt tacaccggga accgtttatg cccagaatta ccccagcttc gaattaaccc      900
cccctaaagg ggatagttcc gccgggttaa aagaaattcg ccttaaacca gtgttttaaa      960
gcaggagaca gaagtgtttc tcgcaagctt tcaaaatggg gagatgtcca atcaggattt     1020
atgggtaggg tacaaccaag ccgaacccca aa                                   1052
<210>  172
<211>  1175
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  172
ctcagcgaga tccctaagac aacgcctgcc acgtgggaga atatcggaca cgcctcccca       60
gagtgcggaa aggggaacgg cgttccgtat cggtcaaggt gcaagcttcg gaaccggagg      120
acgaccgttg caaggtgcaa ggggcaggta tcttgtattt tcattgtgcg tgtcgacatc      180
taccaaactg agacttggag ttcgatattt tgacgatggg gccgggggcc ggaggcaaaa      240
cgacaaacac aggcaccgtg accgtgttcc ggtccctggc ctgcgttgcc ttacgttcac      300
atcttgttct tgcgctttct ctggttttac gataacccta ctacgagttt agtagagccg      360
atcccgtagc cgaagccaaa gcccaagcgc tccgtatccg agaacgcgga agagcacgaa      420
ctccccaaac ccctccgccc ctcccccgcg cgtatccgaa acacaaatgc agcgggcagt      480
acaggttttg gaaggggacg cgggcagtga gcgcaatgca agtaaatgtg attagctcat      540
ggctacgcag ccctgctttt tcagtttcgg ttcggatcgt tagggggtgt gggattggga      600
gcggattcaa tctggacagg aaacagctat gaccaaggtc acgccaagct ctgaattaac      660
cctcaggaaa gggactagtc cggcaggttg aaacgaactc gcccctaagc agtggtatca      720
gagcacagtg gttttttttt tttgtttttt ttcgtagaaa aaaatatgta ttaagtcaat      780
taattaaatc attggttttc tggcttcaca acaggtggca cgtgctgtgc tcggagaaat      840
ttatgaacta tgttctgttc ttcaatgagg aaagatgaga tgatccattc tcagacacat      900
tcagacagag gacaccaccg taagccctat ccacagtctg tccacgtaag gggatcgtgt      960
ccccttccat gggcagagca gggagagggc cgtaagcttg ttcttgcgtc atcaacatgt     1020
gggggtaatg ttggtcatag cgatgttcgg tacacaagag aaccacctgg tgtaatcatt     1080
acagcacagc aatactctgt gttttgtaag ataacaaaaa aggtacttaa gacgctgaac     1140
cattttctac gatcggaaaa caaaaaaaaa gaaaa                                1175
<210>  173
<211>  1023
<212>  ДНК
<213>  Lygus hesperus
<400>  173
tcagcgagat ccctaagaca acgcctgcca cgtgggagaa tatcggacac gcctccccag       60
agtgcggaaa ggggaacggc gttccgtatc ggtcaaggtg caagcttcgg aaccggagga      120
cgaccgttgc aaggtgcaag gggcaggtat cttgtatttt cattgtgcgt gtcgacatct      180
accaaactga gacttggagt tcgatatttt gacgatgggg ccgggggccg gaggcaaaac      240
gacaaacaca ggcaccgtga ccgtgttccg gtccctggcc tgcgttgcct tacgttcaca      300
tcttgttctt gcgctttctc tggttttacg ataaccctac tacgagttta gtagagccga      360
tcccgtagcc gaagccaaag cccaagcgct ccgtatccga gaacgcggaa gagcacgaac      420
tccccaaacc cctccgcccc tcccccgcgc gtatccgaaa cacaaatgca gcgggcagta      480
caggttttgg aaggggacgc gggcagtgag cgcaatgcaa gtaaatgtga ttagctcatg      540
gctacgcagc cctgcttttt cagtttcggt tcggatcgtt agggggtgtg ggattgggag      600
cggattcaat ctggacagga aacagctatg accaaggtca cgccaagctc tgaattaacc      660
ctcaggaaag ggactagtcc ggcaggttga aacgaactcg cccctaagca gtggtatcag      720
agcacagtgg tttttttttt ttgttttttt tcgtagaaaa aaatatgtat taagtcaatt      780
aattaaatca ttggttttct ggcttcacaa caggtggcac gtgctgtgct cggagaaatt      840
tatgaactat gttctgttct tcaatgagga aagatgagat gatccattct cagacacatt      900
cagacagagg acaccaccgt aagccctatc cacagtctgt ccacgtaagg ggatcgtgtc      960
cccttccatg ggcagagcag ggagagggcc gtaagcttgt tcttgcgtca tcaacatgtg     1020
ggg                                                                   1023
<210>  174
<211>  454
<212>  ДНК
<213>  leptinotarsa decemlineata
<400>  174
ccaagaaggc caagaagggg tttatgaccc ctgagaggaa gaagaaactt aggttattgc       60
tgagaaagaa agcagcagaa gaactgaaaa aagaacaaga acgcaaagct gccgaaagga      120
gacgtattat tgaagagaga tgcggaaaac caaaactcat tgatgaggca aatgaagagc      180
aggtgaggaa ctattgcaag ttatatcacg gtagaatagc taaactggag gaccagaaat      240
ttgatttgga ataccttgtc aaaaagaaag acatggagat cgccgaattg aacagtcaag      300
tcaacgacct caggggtaaa ttcgtcaaac ccactctcaa gaaagtatcc aaatacgaga      360
acaaatttgc taaactccaa aagaaagcag cagaattcaa tttccgtaat caactgaaag      420
ttgtaaagaa gaaggagttc accctggagg agga                                  454
<210>  175
<211>  431
<212>  ДНК
<213>  leptinotarsa decemlineata
<400>  175
ggtttatgac ccctgagagg aagaagaaac ttaggttatt gctgagaaag aaagcagcag       60
aagaactgaa aaaagaacaa gaacgcaaag ctgccgaaag gagacgtatt attgaagaga      120
gatgcggaaa accaaaactc attgatgagg caaatgaaga gcaggtgagg aactattgca      180
agttatatca cggtagaata gctaaactgg aggaccagaa atttgatttg gaataccttg      240
tcaaaaagaa agacatggag atcgccgaat tgaacagtca agtcaacgac ctcaggggta      300
aattcgtcaa acccactctc aagaaagtat ccaaatacga gaacaaattt gctaaactcc      360
aaaagaaagc agcagaattc aatttccgta atcaactgaa agttgtaaag aagaaggagt      420
tcaccctgga g                                                           431
<210>  176
<211>  888
<212>  ДНК
<213>  leptinotarsa decemlineata
<400>  176
agcagtggta tcaacgcaga gtacgcgggg acatcgagga gaagaggcaa cgcctcgaag       60
aggctgaaaa gaaacgccag gccatgatgc aggccctcaa ggaccagaac aagaacaagg      120
ggcccaactt caccatcacc aagagggatg cttcatctaa cctttctgcc gctcagttgg      180
aacgcaacaa gaccaaggag caactcgagg aagagaagaa aatttccctt tccatccgca      240
tcaagccctt ggtcgttgat ggtctgggcg tagataaact ccgtctgaaa gcacaagaac      300
tttgggaatg catcgtcaag ttggagactg aaaagtacga cttggaagag aggcagaaac      360
gtcaagacta cgatctcaaa gagctgaaag aaagacagaa acaacagctg agacacaaag      420
ccttgaagaa gggtctagac ccagaagccc taaccggcaa atacccgcct aaaatccaag      480
tagcctccaa atatgaacgt cgtgttgaca cgaggtcgta tggagacaaa aagaagctat      540
tcgaaggggg attagaagaa atcattaaag agaccaatga aaagagctgg aaagagaaat      600
ttggacagtt cgattccaga caaaaggcaa gacttcccaa gtggttcggt gaacgtcctg      660
gcaaaaaacc tggagatccc gaaactccag aaggcgagga ggagggcaaa caagtcattg      720
atgaggatga cgacctcaag gagcctgtaa tcgaagctga aattgaagaa gaggaggaag      780
aagaggaagt cgaggtcgat gaagaagaag aggatgacga agaagaagaa gaagaagagt      840
gaatgccaaa ggcagaagat aatcatgaaa tcaacattag ataacgtc                   888
<210>  177
<211>  404
<212>  ДНК
<213>  leptinotarsa decemlineata
<400>  177
caaggaccag aacaagaaca aggggcccaa cttcaccatc accaagaggg atgcttcatc       60
taacctttct gccgctcagt tggaacgcaa caagaccaag gagcaactcg aggaagagaa      120
gaaaatttcc ctttccatcc gcatcaagcc cttggtcgtt gatggtctgg gcgtagataa      180
actccgtctg aaagcacaag aactttggga atgcatcgtc aagttggaga ctgaaaagta      240
cgacttggaa gagaggcaga aacgtcaaga ctacgatctc aaagagctga aagaaagaca      300
gaaacaacag ctgagacaca aagccttgaa gaagggtcta gacccagaag ccctaaccgg      360
caaatacccg cctaaaatcc aagtagcctc caaatatgaa cgtc                       404
<210>  178
<211>  1155
<212>  ДНК
<213>  leptinotarsa decemlineata
<400>  178
gctcttcaga atgaacttga agaatctcgt acactgttgg aacaagctga ccgtgcccgt       60
cgccaagcag aacaagaatt gggagatgct cacgaacaat tgaatgatct tggtgcacag      120
aatggttctc tgtctgccgc caagaggaaa ctggaaactg aactccaaac tctccattcc      180
gatcttgatg aacttctcaa tgaagccaag aactctgagg agaaggctaa gaaagccatg      240
gtcgatgcag ctcgtcttgc agatgaactg agagcagaac aagatcatgc acaaactcag      300
gagaaacttc gtaaagcctt agaatcacaa atcaaggacc ttcaagttcg tctcgacgag      360
gctgaagcta acgccctcaa aggaggtaag aaagcaatcg ctaaacttga acaacgcgtc      420
agggaattgg agaatgagtt agatggtgaa caaagacgac acgccgatgc tcaaaagaat      480
ttgagaaagt ccgaacgtcg catcaaggag ctcagcctcc aagctgaaga agaccgtaag      540
aaccacgaaa aaatgcaaga cttagtcgac aaacttcaac agaaaatcaa gacccacaag      600
aggcaaatag aagaagctga agaaatagcg gctctcaatt tggccaaatt ccgtaaagca      660
caacaggaat tggaagaagc agaagagcgt gcagaccttg ctgaacaagc aattgtcaaa      720
ttccgtacca agggacgttc tggatcagca gctaggggag ccagccctgc gcctcagcga      780
cagcgtccca cattcggaat gggagattca cttggaggtg ccttccctcc aaggttcgat      840
cttgcacccg actttgaatg aatctgacat tgtgttataa gtgtaaggtg aacattctat      900
cgcagtgtaa atatcatccc aatgcgaatc aattctacat tcagtttaag tcattctatc      960
tctcaaaata ataatagtgt catccattct cactatcaaa tcaagacaag agatgatgat     1020
cagagaacac gtatcacatc tacagcaaac cctcagtcct cggcatctct gataatattt     1080
tcaattatcg agattgatga tatcgggtgt tgaatgctga tgaatagaag gcgccctatg     1140
gaaataagag agaag                                                      1155
<210>  179
<211>  523
<212>  ДНК
<213>  leptinotarsa decemlineata
<400>  179
gaatctcgta cactgttgga acaagctgac cgtgcccgtc gccaagcaga acaagaattg       60
ggagatgctc acgaacaatt gaatgatctt ggtgcacaga atggttctct gtctgccgcc      120
aagaggaaac tggaaactga actccaaact ctccattccg atcttgatga acttctcaat      180
gaagccaaga actctgagga gaaggctaag aaagccatgg tcgatgcagc tcgtcttgca      240
gatgaactga gagcagaaca agatcatgca caaactcagg agaaacttcg taaagcctta      300
gaatcacaaa tcaaggacct tcaagttcgt ctcgacgagg ctgaagctaa cgccctcaaa      360
ggaggtaaga aagcaatcgc taaacttgaa caacgcgtca gggaattgga gaatgagtta      420
gatggtgaac aaagacgaca cgccgatgct caaaagaatt tgagaaagtc cgaacgtcgc      480
atcaaggagc tcagcctcca agctgaagaa gaccgtaaga acc                        523
<210>  180
<211>  865
<212>  ДНК
<213>  nilaparvata lugens
<400>  180
ctaggagtat ctcctacgta attcggtgct tgagccaact gcagctactc acttttttcc       60
aggttcagtg gtagggacgc aaacacagct aaaatggcgg acgatgaggc aaagaaggca      120
aagcaggcgg aaatcgaccg caagagagcc gaggtccgca agcggatgga ggaagcctcc      180
aaggccaaga aggccaagaa aggtttcatg acgcctgaca gaaagaagaa gctcaggttg      240
ttgctgagga aaaaggctgc tgaggaattg aagaaggaac aggagaggaa agccgcggaa      300
aggagaagga tcatcgagga gaggtgtggc aaggctgttg atctcgatga cggaagtgaa      360
gagaaagtca aggcaacttt aaaaacctat cacgacagaa ttggaaaatt ggaggatgaa      420
aaatttgacc tggaatatat tgtaaaaaag aaagacttcg agatcgctga cctcaacagc      480
caggtgaatg acctccgtgg taaatttgtc aagccaacct tgaaaaaagt ctccaaatat      540
gagaacaaat tcgccaagct ccagaagaaa gcagctgaat tcaatttcag aaatcagctc      600
aaagttgtca agaagaagga attcaccttg gaagaagaag acaaggagcc gaagaaatcg      660
gagaaagccg aatggcagaa gaaatgaact cacatcacct cttcataata ttgtcccaca      720
cttctacaac cttcatcaaa taacttttat tcgagtaaac ttactgttac taacaaaatt      780
acaaaaccaa actcttatca tcaacgtagg caatgtgctc aacttatttc ttaaacatat      840
tgtccagcta tttattgaaa ttaaa                                            865
<210>  181
<211>  269
<212>  ДНК
<213>  nilaparvata lugens
<400>  181
aagaagaagc tcaggttgtt gctgaggaaa aaggctgctg aggaattgaa gaaggaacag       60
gagaggaaag ccgcggaaag gagaaggatc atcgaggaga ggtgtggcaa ggctgttgat      120
ctcgatgacg gaagtgaaga gaaagtcaag gcaactttaa aaacctatca cgacagaatt      180
ggaaaattgg aggatgaaaa atttgacctg gaatatattg taaaaaagaa agacttcgag      240
atcgctgacc tcaacagcca ggtgaatga                                        269
<210>  182
<211>  553
<212>  ДНК
<213>  nilaparvata lugens
<400>  182
aatgatggcg gctctcaagg accagagcaa atcgaaagga cccaacttca ccgtaaacaa       60
gaaaacagac ttgaacatga cgtcagctca aatggaaagg aacaagacta aggagcagct      120
ggaggaggag aagaagatct ctctgtcgtt ccgcatcaag ccgttggcca tcgagaacat      180
gagcatcaac gcactgcgcg ccaaggccca ggaactgtgg gactgcatcg tcaagctcga      240
aactgagaag tacgatctgg aggaacgcca gaagaggcag gactacgatc tcaaagaatt      300
gaaagaaaga caaaagcaac agctgaggca taaagccctc aaaaaaggtc tagaccctga      360
ggctctcaca ggaaagtacc caccaaaaat ccaagttgcc tccaaatatg aaagacgtgt      420
agatacaagg tcatacgacg acaagaagaa gctcttcgaa ggtggctggg acacattaac      480
atcagaaacc aatgagaaaa tatggaagag cagaaacgat cagttttcaa atcgtagcaa      540
ggctaaactg cca                                                         553
<210>  183
<211>  470
<212>  ДНК
<213>  nilaparvata lugens
<400>  183
atgatggcgg ctctcaagga ccagagcaaa tcgaaaggac ccaacttcac cgtaaacaag       60
aaaacagact tgaacatgac gtcagctcaa atggaaagga acaagactaa ggagcagctg      120
gaggaggaga agaagatctc tctgtcgttc cgcatcaagc cgttggccat cgagaacatg      180
agcatcaacg cactgcgcgc caaggcccag gaactgtggg actgcatcgt caagctcgaa      240
actgagaagt acgatctgga ggaacgccag aagaggcagg actacgatct caaagaattg      300
aaagaaagac aaaagcaaca gctgaggcat aaagccctca aaaaaggtct agaccctgag      360
gctctcacag gaaagtaccc accaaaaatc caagttgcct ccaaatatga aagacgtgta      420
gatacaaggt catacgacga caagaagaag ctcttcgaag gtggctggga                 470
<210>  184
<211>  367
<212>  ДНК
<213>  nilaparvata lugens
<400>  184
tgccttcgac cgtgaaaggt ctggaagtat cccaacagac atggtcgccg acatcctcag       60
gctcatggga cagcctttca acaagaagat cctcgacgaa ctcattgagg aagttgatgc      120
tgacaaatct ggccgtcttg agtttgacga attcgtgact ctggccgcca aattcattgt      180
tgaggaagac gatgaggcaa tgcagaagga attgaaggaa gctttcagat tatacgacaa      240
ggaaggtaac ggctacatcc ccacatcatg tctgaaggaa atcttaaggg aacttgacga      300
tcagctgaca aacgaggaac tcaacatgat gattgatgag atcgactctg acggatcagg      360
aactgtt                                                                367
<210>  185
<211>  204
<212>  ДНК
<213>  nilaparvata lugens
<400>  185
acatcctcag gctcatggga cagcctttca acaagaagat cctcgacgaa cttattgagg       60
aggttgatgc tgacaagtct ggccgtctag agtttgacga attcgtgact ctggccgcca      120
aattcattgt tgaggaagac gatgaggcaa tgcagaagga attgaaggaa gctttcagat      180
tatacgacaa ggaaggtaac ggct                                             204
<210>  186
<211>  221
<212>  ДНК
<213>  nilaparvata lugens
<400>  186
cgtaaaaact ctgaccggca agaccatcac cttggaagtg gagccttccg ataccattga       60
aaacgtgaag gccaagatcc aagacaagga gggaattcct cccgaccagc agagacttat      120
cttcgctgga aagcaactgg aggatggcag aaccctgtcc gactacaaca tccaaaaaga      180
atctacactc cacttggttc tcagacttcg tggtggaact a                          221
<210>  187
<211>  221
<212>  ДНК
<213>  nilaparvata lugens
<400>  187
cgtaaaaact ctgaccggca agaccatcac cttggaagtg gagccttccg ataccattga       60
aaacgtgaag gccaagatcc aagacaagga gggaattcct cccgaccagc agagacttat      120
cttcgctgga aagcaactgg aggatggcag aaccctgtcc gactacaaca tccaaaaaga      180
atctacactc cacttggttc tcagacttcg tggtggaact a                          221
<210>  188
<211>  759
<212>  ДНК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  188
atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa       60
gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc      120
ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag      180
aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa      240
ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg      300
aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa      360
gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa      420
ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg      480
gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa      540
gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa      600
ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc      660
gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata      720
ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca                             759
<210>  189
<211>  759
<212>  ДНК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  189
atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa       60
gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc      120
ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag      180
aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa      240
ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg      300
aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa      360
gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa      420
ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg      480
gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa      540
gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa      600
ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc      660
gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata      720
ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca                             759
<210>  190
<211>  759
<212>  ДНК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  190
atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa       60
gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc      120
ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag      180
aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa      240
ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg      300
aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa      360
gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa      420
ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg      480
gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa      540
gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa      600
ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc      660
gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata      720
ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca                             759
<210>  191
<211>  759
<212>  ДНК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  191
atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa       60
gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc      120
ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag      180
aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa      240
ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg      300
aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa      360
gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa      420
ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg      480
gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa      540
gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa      600
ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc      660
gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata      720
ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca                             759
<210>  192
<211>  759
<212>  ДНК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  192
atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa       60
gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc      120
ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag      180
aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa      240
ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg      300
aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa      360
gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa      420
ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg      480
gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa      540
gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa      600
ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc      660
gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata      720
ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca                             759
<210>  193
<211>  759
<212>  ДНК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  193
atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa       60
gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc      120
ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag      180
aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa      240
ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg      300
aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa      360
gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa      420
ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg      480
gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa      540
gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa      600
ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc      660
gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata      720
ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca                             759
<210>  194
<211>  759
<212>  ДНК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  194
atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa       60
gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc      120
ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag      180
aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa      240
ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg      300
aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa      360
gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa      420
ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg      480
gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa      540
gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa      600
ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc      660
gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata      720
ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca                             759
<210>  195
<211>  759
<212>  ДНК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  195
atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa       60
gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc      120
ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag      180
aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa      240
ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg      300
aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa      360
gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa      420
ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg      480
gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa      540
gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa      600
ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc      660
gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata      720
ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca                             759
<210>  196
<211>  759
<212>  ДНК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  196
atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa       60
gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc      120
ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag      180
aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa      240
ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg      300
aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa      360
gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa      420
ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg      480
gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa      540
gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa      600
ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc      660
gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata      720
ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca                             759
<210>  197
<211>  759
<212>  ДНК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  197
atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa       60
gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc      120
ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag      180
aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa      240
ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg      300
aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa      360
gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa      420
ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg      480
gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa      540
gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa      600
ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc      660
gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata      720
ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca                             759
<210>  198
<211>  759
<212>  ДНК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  198
atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa       60
gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc      120
ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag      180
aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa      240
ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg      300
aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa      360
gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa      420
ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg      480
gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa      540
gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa      600
ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc      660
gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata      720
ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca                             759
<210>  199
<211>  759
<212>  ДНК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  199
atggccgacg atgaagctaa gaaagcaaaa caggcggaaa tcgaccgcaa gagggccgaa       60
gtgcgcaagc gtatggaaga ggcgtccaag gccaagaagg ccaagaaggg tttcatgacc      120
ccagacagaa agaagaaact ccgtctgttg ttgaaaaaaa aggcggccga agagttgaag      180
aaagaacaag aacgcaaagc tgccgaacga aggcggatca tcgaagagcg gtgcggacaa      240
ccgaagaaca tcgacgacgc cggcgaagag gagcttgcgg aaatctgcga agaactatgg      300
aaacgggttt acaccgtaga gggcataaaa tttgacttgg aaagggatat caggatgaaa      360
gttttcgaga tcagcgaatt gaacagccaa gtcaatgact tacgaggaaa attcgtcaaa      420
ccaacattga agaaggtttc caaatacgaa aacaaattcg caaaactcca aaagaaagcg      480
gcggagttca acttcagaaa ccaactgaaa gtagtgaaga aaaaggagtt caccttggaa      540
gaagaagaca aagagaaaaa acccgattgg tccaaaaagg gagacgaaaa gaagggcgaa      600
ggagaagacg gcgacggtac cgaagacgaa aagaccgacg acggtttgac caccgaaggc      660
gaatcggtcg cgggcgatct aacggacgcg acggaagacg cgcagagcga caacgagata      720
ctcgaaccag aacccgtggt tgaacccgaa ccagaacca                             759
<210>  200
<211>  541
<212>  ДНК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  200
cggtaatgcg atgcggtaag aagaaggtat ggttggatcc aaacgaaata aatgaaattg       60
ccaacaccaa ttccagacaa aatattcgta agttgatcaa agatggtttg atcattaaaa      120
agccagtagc tgtacactct agggctcgtg cacgtaaaaa tgcagatgcc agaagaaaag      180
gtcgtcattg tggttttggt aaaaggaagg gtactgctaa tgctcgaaca cctcaaaaag      240
acctttgggt gaaaagaatg cgagtattaa ggcggttgct taaaaaatac cgtgaagcaa      300
agaaaattga caaccatctt taccatcagt tatacatgaa ggctaagggt aatgttttca      360
agaacaaacg tgtattgatg gagttcatcc acaaaaagaa ggcagagaag gcccgtgcca      420
agatgttgag tgatcaagct gaagctagac gtcaaaaggt taaggaagct aggaaacgta      480
aagaagcaag atttttacaa aataggaagg aacttttggc tgcatacgcc cgagaagatg      540
a                                                                      541
<210>  201
<211>  541
<212>  ДНК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  201
cggtaatgcg atgcggtaag aagaaggtat ggttggatcc aaacgaaata aatgaaattg       60
ccaacaccaa ttccagacaa aatattcgta agttgatcaa agatggtttg atcattaaaa      120
agccagtagc tgtacactct agggctcgtg cacgtaaaaa tgcagatgcc agaagaaaag      180
gtcgtcattg tggttttggt aaaaggaagg gtactgctaa tgctcgaaca cctcaaaaag      240
acctttgggt gaaaagaatg cgagtattaa ggcggttgct taaaaaatac cgtgaagcaa      300
agaaaattga caaccatctt taccatcagt tatacatgaa ggctaagggt aatgttttca      360
agaacaaacg tgtattgatg gagttcatcc acaaaaagaa ggcagagaag gcccgtgcca      420
agatgttgag tgatcaagct gaagctagac gtcaaaaggt taaggaagct aggaaacgta      480
aagaagcaag atttttacaa aataggaagg aacttttggc tgcatacgcc cgagaagatg      540
a                                                                      541
<210>  202
<211>  823
<212>  ДНК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  202
gttgtagtcg gaaagggtac gtccgtcttc aagttgtttt ccggcaaaga tcaaacgttg       60
ttggtctggt gggatacctt ctttgtcttg gatcttggct tttacatttt caatggaatc      120
agatgattcc acctccaatg taatggtctt tccagtgagg gtctttacaa agatttgcat      180
accaccacgg agacgcaaca ctaagtgaag ggtagattct ttctggatgt tgtagtcaga      240
aagtgtgcgt ccgtcttcaa gttgctttcc ggcaaagatc aaacgttgtt ggtcaggtgg      300
aataccttct ttgtcttgga tcttagcttt tacattttca atggaatctg atgactcaac      360
ttccaatgta atggtctttc cagtgagggt ctttacaaag atttgcatac caccacggag      420
acgcaacact aagtgaaggg tagattcttt ctggatgttg tagtcggaaa gggtacgtcc      480
gtcttcaagt tgctttccgg caaagatcaa acgttgttgg tctggtggga taccttcttt      540
gtcttggatc ttggctttta cattttcaat ggaatcagat gattccacct ccaatgtaat      600
ggtctttcca gtgagggtct ttacaaagat ttgcatacca ccacggagac gcaacactaa      660
gtgaagggta gattctttct ggatgttgta gtcggaaagg gtacgtccgt cttcaagttg      720
ctttccagca aagatcaaac gttgctggtc tggtgggata ccttccttgt cttggatctt      780
ggccttaaca ttttcaatgg aatctgatga ctcaacttcc aaa                        823
<210>  203
<211>  823
<212>  ДНК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  203
gttgtagtcg gaaagggtac gtccgtcttc aagttgtttt ccggcaaaga tcaaacgttg       60
ttggtctggt gggatacctt ctttgtcttg gatcttggct tttacatttt caatggaatc      120
agatgattcc acctccaatg taatggtctt tccagtgagg gtctttacaa agatttgcat      180
accaccacgg agacgcaaca ctaagtgaag ggtagattct ttctggatgt tgtagtcaga      240
aagtgtgcgt ccgtcttcaa gttgctttcc ggcaaagatc aaacgttgtt ggtcaggtgg      300
aataccttct ttgtcttgga tcttagcttt tacattttca atggaatctg atgactcaac      360
ttccaatgta atggtctttc cagtgagggt ctttacaaag atttgcatac caccacggag      420
acgcaacact aagtgaaggg tagattcttt ctggatgttg tagtcggaaa gggtacgtcc      480
gtcttcaagt tgctttccgg caaagatcaa acgttgttgg tctggtggga taccttcttt      540
gtcttggatc ttggctttta cattttcaat ggaatcagat gattccacct ccaatgtaat      600
ggtctttcca gtgagggtct ttacaaagat ttgcatacca ccacggagac gcaacactaa      660
gtgaagggta gattctttct ggatgttgta gtcggaaagg gtacgtccgt cttcaagttg      720
ctttccagca aagatcaaac gttgctggtc tggtgggata ccttccttgt cttggatctt      780
ggccttaaca ttttcaatgg aatctgatga ctcaacttcc aaa                        823
<210>  204
<211>  172
<212>  ДНК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  204
aagacttgct tcatcctact gcaattgaag aacgcaggaa acacaaatta aagcgccttg       60
ttcaacaccc aaactctttt ttcatggatg tcaaatgccc tggatgttat aaaattacaa      120
ctgtattcag tcacgctcag agtgtagtta tatgtaccgg atgttccaca at              172
<210>  205
<211>  172
<212>  ДНК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  205
aagacttgct tcatcctact gcaattgaag aacgcaggaa acacaaatta aagcgccttg       60
ttcaacaccc aaactctttt ttcatggatg tcaaatgccc tggatgttat aaaattacaa      120
ctgtattcag tcacgctcag agtgtagtta tatgtaccgg atgttccaca at              172
<210>  206
<211>  25
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  206
cgaaccatct gggaagcttg gaatg                                             25
<210>  207
<211>  25
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  207
gcagctggag gaagagaaac gtatc                                             25
<210>  208
<211>  47
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  208
gcgtaatacg actcactata ggcgaaccat ctgggaagct tggaatg                     47
<210>  209
<211>  46
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  209
gcgtaatacg actcactata ggcagctgga ggaagagaaa cgtatc                      46
<210>  210
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  210
agttcgagaa caccaggaag                                                   20
<210>  211
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  211
cctgacacgt tgttccagct tg                                                22
<210>  212
<211>  45
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  212
gcgtaatacg actcactata ggaggagttc gagaacacca ggaag                       45
<210>  213
<211>  44
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  213
gcgtaatacg actcactata ggcctgacac gttgttccag cttg                        44
<210>  214
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  214
gcaggcgatg aagatggaga                                                   20
<210>  215
<211>  24
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  215
ccacctcttt ctgcaacttc ttga                                              24
<210>  216
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  216
gcgtaatacg actcactata gggcaggcga tgaagatgga ga                          42
<210>  217
<211>  46
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  217
gcgtaatacg actcactata ggccacctct ttctgcaact tcttga                      46
<210>  218
<211>  25
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  218
cagaatccca cagaatctga cgtga                                             25
<210>  219
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  219
gcaagtggcg aagctcagct                                                   20
<210>  220
<211>  47
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  220
gcgtaatacg actcactata ggcagaatcc cacagaatct gacgtga                     47
<210>  221
<211>  41
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  221
gcgtaatacg actcactata ggcaagtggc gaagctcagc t                           41
<210>  222
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  222
cgtgtttgcc atgttcgatc a                                                 21
<210>  223
<211>  23
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  223
ggtacatttc gtccacgtct tca                                               23
<210>  224
<211>  43
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  224
gcgtaatacg actcactata ggcgtgtttg ccatgttcga tca                         43
<210>  225
<211>  43
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  225
gcgtaatacg actcactata ggtacatttc gtccacgtct tca                         43
<210>  226
<211>  23
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  226
gacttgatct tcagccgacc att                                               23
<210>  227
<211>  23
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  227
ccattgccag ttcctcaact tca                                               23
<210>  228
<211>  44
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  228
gcgtaatacg actcactata ggacttgatc ttcagccgac catt                        44
<210>  229
<211>  45
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  229
gcgtaatacg actcactata ggccattgcc agttcctcaa cttca                       45
<210>  230
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  230
cgcaatgatc tcctccagga t                                                 21
<210>  231
<211>  24
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  231
ggtcatcatc tccatgaact cgtc                                              24
<210>  232
<211>  43
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  232
gcgtaatacg actcactata ggcgcaatga tctcctccag gat                         43
<210>  233
<211>  45
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  233
gcgtaatacg actcactata gggtcatcat ctccatgaac tcgtc                       45
<210>  234
<211>  26
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  234
cgtcactaat cggactggtc taacag                                            26
<210>  235
<211>  24
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  235
ggtcatcatc tccatgaact cgtc                                              24
<210>  236
<211>  48
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  236
gcgtaatacg actcactata ggcgtcacta atcggactgg tctaacag                    48
<210>  237
<211>  45
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  237
gcgtaatacg actcactata gggtcatcat ctccatgaac tcgtc                       45
<210>  238
<211>  23
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  238
ggtgaaggag ggtgcctgct cag                                               23
<210>  239
<211>  25
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  239
cagggtgaat agaacgaggt actcg                                             25
<210>  240
<211>  40
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  240
aatacgactc actatagggc gctatgaaat tccaagcaca                             40
<210>  241
<211>  47
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  241
gcgtaatacg actcactata ggcagggtga atagaacgag gtactcg                     47
<210>  242
<211>  29
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  242
ctcaacgaag gtcttgtcag tggctttgg                                         29
<210>  243
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  243
ttcgcctggc ttcttcgtga                                                   20
<210>  244
<211>  44
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  244
gcgtaatacg actcactata ggccacgccg acttaattca ttcc                        44
<210>  245
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  245
gcgtaatacg actcactata ggttcgcctg gcttcttcgt ga                          42
<210>  246
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  246
tgtcgatggc ggtcttaaca tc                                                22
<210>  247
<211>  24
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  247
tctccagctt ccactttctt gaga                                              24
<210>  248
<211>  44
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  248
gcgtaatacg actcactata ggtgtcgatg gcggtcttaa catc                        44
<210>  249
<211>  46
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  249
gcgtaatacg actcactata ggtctccagc ttccactttc ttgaga                      46
<210>  250
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  250
aacgtgcatt tcgcgtaccc                                                   20
<210>  251
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  251
tgatgggcat aactggcagg                                                   20
<210>  252
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  252
gcgtaatacg actcactata ggaacgtgca tttcgcgtac cc                          42
<210>  253
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  253
gcgtaatacg actcactata ggtgatgggc ataactggca gg                          42
<210>  254
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  254
ccttattgaa cgtggtcgac ag                                                22
<210>  255
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  255
ctgatgtagt ccttgaggag                                                   20
<210>  256
<211>  44
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  256
gcgtaatacg actcactata ggccttattg aacgtggtcg acag                        44
<210>  257
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  257
gcgtaatacg actcactata ggctgatgta gtccttgagg ag                          42
<210>  258
<211>  26
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  258
gtacggacgg gtagtttagt tgtgtc                                            26
<210>  259
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  259
ttgccaagtg ccaagtcacg                                                   20
<210>  260
<211>  48
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  260
gcgtaatacg actcactata gggtacggac gggtagttta gttgtgtc                    48
<210>  261
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  261
gcgtaatacg actcactata ggttgccaag tgccaagtca cg                          42
<210>  262
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  262
ctgttgtcgg ctggtcatat cc                                                22
<210>  263
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  263
taacgtaacg catcgccacc                                                   20
<210>  264
<211>  44
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  264
gcgtaatacg actcactata ggctgttgtc ggctggtcat atcc                        44
<210>  265
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  265
gcgtaatacg actcactata ggtaacgtaa cgcatcgcca cc                          42
<210>  266
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  266
agccctcatc cgtgatttgg                                                   20
<210>  267
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  267
gatccggcct caatttgacg                                                   20
<210>  268
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  268
gcgtaatacg actcactata ggagccctca tccgtgattt gg                          42
<210>  269
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  269
gcgtaatacg actcactata gggatccggc ctcaatttga cg                          42
<210>  270
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  270
acgtttctct gctcattcgt gc                                                22
<210>  271
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  271
cttgtacaaa gtgtgcaggg                                                   20
<210>  272
<211>  44
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  272
gcgtaatacg actcactata ggacgtttct ctgctcattc gtgc                        44
<210>  273
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  273
gcgtaatacg actcactata ggcttgtaca aagtgtgcag gg                          42
<210>  274
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  274
ggttttcttc ttgcccgaat cg                                                22
<210>  275
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  275
tttggggttc ggcttggttg                                                   20
<210>  276
<211>  44
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  276
gcgtaatacg actcactata ggggttttct tcttgcccga atcg                        44
<210>  277
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  277
gcgtaatacg actcactata ggtttggggt tcggcttggt tg                          42
<210>  278
<211>  23
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  278
tcagcgagat ccctaagaca acg                                               23
<210>  279
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  279
ccccacatgt tgatgacgca                                                   20
<210>  280
<211>  45
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  280
gcgtaatacg actcactata ggtcagcgag atccctaaga caacg                       45
<210>  281
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  281
gcgtaatacg actcactata ggccccacat gttgatgacg ca                          42
<210>  282
<211>  23
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  282
ggtttatgac ccctgagagg aag                                               23
<210>  283
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  283
ctccagggtg aactccttct tc                                                22
<210>  284
<211>  43
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  284
gcgtaatacg actcactata ggtttatgac ccctgagagg aag                         43
<210>  285
<211>  44
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  285
gcgtaatacg actcactata ggctccaggg tgaactcctt cttc                        44
<210>  286
<211>  24
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  286
caaggaccag aacaagaaca aggg                                              24
<210>  287
<211>  26
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  287
gacgttcata tttggaggct acttgg                                            26
<210>  288
<211>  46
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  288
gcgtaatacg actcactata ggcaaggacc agaacaagaa caaggg                      46
<210>  289
<211>  47
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  289
gcgtaatacg actcactata ggacgttcat atttggaggc tacttgg                     47
<210>  290
<211>  25
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  290
aatctcgtac actgttggaa caagc                                             25
<210>  291
<211>  25
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  291
ggttcttacg gtcttcttca gcttg                                             25
<210>  292
<211>  47
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  292
gcgtaatacg actcactata ggaatctcgt acactgttgg aacaagc                     47
<210>  293
<211>  45
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  293
gcgtaatacg actcactata ggttcttacg gtcttcttca gcttg                       45
<210>  294
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  294
aagaagaagc tcaggttgtt gc                                                22
<210>  295
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  295
tcattcacct ggctgttgag                                                   20
<210>  296
<211>  44
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  296
gcgtaatacg actcactata ggaagaagaa gctcaggttg ttgc                        44
<210>  297
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  297
gcgtaatacg actcactata ggtcattcac ctggctgttg ag                          42
<210>  298
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  298
acatcctcag gctcatggga                                                   20
<210>  299
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  299
agccgttacc ttccttgtcg                                                   20
<210>  300
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  300
gcgtaatacg actcactata ggacatcctc aggctcatgg ga                          42
<210>  301
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  301
gcgtaatacg actcactata ggagccgtta ccttccttgt cg                          42
<210>  302
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  302
acatcctcag gctcatggga                                                   20
<210>  303
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  303
agccgttacc ttccttgtcg                                                   20
<210>  304
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  304
gcgtaatacg actcactata ggacatcctc aggctcatgg ga                          42
<210>  305
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  305
gcgtaatacg actcactata ggagccgtta ccttccttgt cg                          42
<210>  306
<211>  24
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  306
cgtaaaaact ctgaccggca agac                                              24
<210>  307
<211>  26
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  307
tagttccacc acgaagtctg agaacc                                            26
<210>  308
<211>  46
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  308
gcgtaatacg actcactata ggcgtaaaaa ctctgaccgg caagac                      46
<210>  309
<211>  48
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  309
gcgtaatacg actcactata ggtagttcca ccacgaagtc tgagaacc                    48
<210>  310
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  310
atggccgacg atgaagctaa g                                                 21
<210>  311
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  311
tggttgtggt tctggttcgg                                                   20
<210>  312
<211>  43
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  312
gcgtaatacg actcactata ggatggccga cgatgaagct aag                         43
<210>  313
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  313
gcgtaatacg actcactata ggtggttctg gttcgggttc aa                          42
<210>  314
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  314
cggtaatgcg atgcggtaag                                                   20
<210>  315
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  315
tcatcttctc gggcgtatgc                                                   20
<210>  316
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  316
gcgtaatacg actcactata ggcggtaatg cgatgcggta ag                          42
<210>  317
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  317
gcgtaatacg actcactata ggtcatcttc tcgggcgtat gc                          42
<210>  318
<211>  25
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  318
tttggaagtt gagtcatcag attcc                                             25
<210>  319
<211>  24
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  319
gttgtagtcg gaaagggtac gtcc                                              24
<210>  320
<211>  47
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  320
gcgtaatacg actcactata ggtttggaag ttgagtcatc agattcc                     47
<210>  321
<211>  46
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  321
gcgtaatacg actcactata gggttgtagt cggaaagggt acgtcc                      46
<210>  322
<211>  23
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  322
aagacttgct tcatcctact gca                                               23
<210>  323
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  323
attgtggaac atccggtaca                                                   20
<210>  324
<211>  45
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  324
gcgtaatacg actcactata ggaagacttg cttcatccta ctgca                       45
<210>  325
<211>  42
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  325
gcgtaatacg actcactata ggattgtgga acatccggta ca                          42
<210>  326
<211>  424
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  326
Met Ile Pro Pro Thr Ser Arg Pro Gln Val Thr Val Tyr Ser Asp Lys
1               5                   10                  15
Asn Glu Ala Thr Gly Thr Leu Leu Asn Leu Pro Ala Val Phe Asn Ala
20                  25                  30
Pro Ile Arg Pro Asp Val Val Asn Phe Val His Gln Asn Val Ala Lys
35                  40                  45
Asn His Arg Gln Pro Tyr Cys Val Ser Ala Gln Ala Gly His Gln Thr
50                  55                  60
Ser Ala Glu Ser Trp Gly Thr Gly Arg Ala Val Ala Arg Ile Pro Arg
65                  70                  75                  80
Val Arg Gly Gly Gly Thr His Arg Ser Gly Gln Gly Ala Phe Gly Asn
85                  90                  95
Met Cys Arg Gly Gly Arg Met Phe Ala Pro Thr Arg Pro Trp Arg Arg
100                 105                 110
Trp His Arg Lys Ile Asn Val Asn Gln Lys Arg Tyr Ala Val Val Ser
115                 120                 125
Ala Ile Ala Ala Ser Gly Val Pro Ala Leu Val Met Ser Lys Gly His
130                 135                 140
Met Val Gln Ser Val Pro Glu Phe Pro Leu Val Val Ser Asp Lys Val
145                 150                 155                 160
Gln Glu Tyr Thr Lys Thr Lys Gln Ala Val Ile Phe Leu His Arg Ile
165                 170                 175
Lys Ala Trp Gln Asp Ile Gln Lys Val Tyr Lys Ser Lys Arg Phe Arg
180                 185                 190
Ala Gly Lys Gly Lys Met Arg Asn Arg Arg Arg Ile Gln Arg Arg Gly
195                 200                 205
Pro Leu Ile Ile Tyr Asp Gln Asp Gln Gly Leu Asn Arg Ala Phe Arg
210                 215                 220
Asn Ile Pro Gly Val Asp Leu Ile Glu Val Ser Arg Leu Asn Leu Leu
225                 230                 235                 240
Lys Leu Ala Pro Gly Gly His Ile Gly Arg Phe Val Ile Trp Thr Gln
245                 250                 255
Ser Ala Phe Glu Lys Leu Asp Ala Leu Tyr Gly Thr Trp Lys Lys Lys
260                 265                 270
Ser Thr Leu Lys Ala Gly Tyr Asn Leu Pro Met Pro Lys Met Ala Asn
275                 280                 285
Thr Asp Leu Ser Arg Leu Phe Lys Ala Pro Glu Ile Lys Ala Val Leu
290                 295                 300
Arg Asn Pro Lys Lys Thr Ile Val Arg Arg Val Arg Lys Leu Asn Pro
305                 310                 315                 320
Leu Arg Asn Thr Arg Ala Met Leu Arg Leu Asn Pro Tyr Ala Ala Val
325                 330                 335
Leu Lys Arg Lys Ala Ile Leu Asp Gln Arg Lys Leu Lys Leu Gln Lys
340                 345                 350
Leu Val Glu Ala Ala Lys Lys Gly Asp Thr Lys Leu Ser Pro Arg Val
355                 360                 365
Glu Arg His Leu Lys Met Ile Glu Arg Arg Lys Ala Leu Ile Lys Lys
370                 375                 380
Ala Lys Ala Ala Lys Pro Lys Lys Pro Lys Thr Ala Lys Lys Pro Lys
385                 390                 395                 400
Thr Ala Glu Lys Ala Pro Ala Pro Ala Lys Lys Ala Ala Ala Pro Lys
405                 410                 415
Lys Ala Thr Thr Pro Ala Lys Lys
420
<210>  327
<211>  242
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  327
Met Ala Asn Ala Lys Pro Ile Ser Lys Lys Lys Lys Phe Val Ser Asp
1               5                   10                  15
Gly Val Phe Lys Ala Glu Leu Asn Glu Phe Leu Thr Arg Glu Leu Ala
20                  25                  30
Glu Glu Gly Tyr Ser Gly Val Glu Val Arg Val Thr Pro Asn Lys Thr
35                  40                  45
Glu Ile Ile Ile Met Ala Thr Arg Thr Gln Ser Val Leu Gly Asp Lys
50                  55                  60
Gly Arg Arg Ile Arg Glu Leu Thr Ser Val Val Gln Lys Arg Phe Asn
65                  70                  75                  80
Phe Lys Pro Gln Thr Leu Asp Leu Tyr Ala Glu Lys Val Ala Thr Arg
85                  90                  95
Gly Leu Cys Ala Ile Ala Gln Ala Glu Ser Leu Arg Tyr Lys Leu Ile
100                 105                 110
Gly Gly Leu Ala Val Arg Gly Ala Cys Tyr Gly Val Leu Arg Phe Ile
115                 120                 125
Met Glu Asn Gly Ala Lys Gly Cys Glu Val Val Val Ser Gly Lys Leu
130                 135                 140
Arg Gly Gln Arg Ala Lys Ser Met Lys Phe Val Asp Gly Leu Met Ile
145                 150                 155                 160
His Ser Gly Asp Pro Cys Asn Glu Tyr Val Asp Thr Ala Thr Arg His
165                 170                 175
Val Leu Leu Arg Gln Gly Val Leu Gly Ile Lys Val Lys Ile Met Leu
180                 185                 190
Pro Trp Asp Val Thr Gly Lys Asn Gly Pro Lys Asn Pro Leu Pro Asp
195                 200                 205
His Val Ser Val Leu Leu Pro Lys Glu Glu Leu Pro Asn Leu Ala Val
210                 215                 220
Ser Val Pro Gly Ser Asp Ile Lys Pro Lys Pro Glu Val Pro Ala Pro
225                 230                 235                 240
Ala Leu
<210>  328
<211>  262
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  328
Met Ala Val Gly Lys Asn Lys Gly Leu Ser Lys Gly Gly Lys Lys Gly
1               5                   10                  15
Val Lys Lys Lys Val Val Asp Pro Phe Thr Arg Lys Asp Trp Tyr Asp
20                  25                  30
Val Lys Ala Pro Ser Met Phe Lys Lys Arg Gln Val Gly Lys Thr Leu
35                  40                  45
Val Asn Arg Thr Gln Gly Thr Lys Ile Ala Ser Glu Gly Leu Lys Gly
50                  55                  60
Arg Val Phe Glu Val Ser Leu Ala Asp Ile Gln Glu Asp Thr Asp Ala
65                  70                  75                  80
Glu Arg Ser Phe Arg Lys Phe Arg Leu Ile Ala Glu Asp Val Gln Ala
85                  90                  95
Arg Asn Val Leu Thr Asn Phe His Gly Met Asp Leu Thr Thr Asp Lys
100                 105                 110
Leu Arg Ser Met Val Lys Lys Trp Gln Thr Leu Ile Glu Ala Asn Val
115                 120                 125
Asp Val Lys Thr Thr Asp Gly Tyr Leu Leu Arg Val Phe Cys Ile Gly
130                 135                 140
Phe Thr Asn Lys Asp Gln Leu Ser Gln Arg Lys Thr Cys Tyr Ala Gln
145                 150                 155                 160
His Asn Gln Val Arg Glu Ile Arg Lys Lys Met Val Lys Asn Ile Ser
165                 170                 175
Asp Ser Ile Ser Ser Cys Asp Leu Arg Ser Val Val Asn Lys Leu Ile
180                 185                 190
Pro Asp Ser Ile Ala Lys Asp Ile Glu Lys Asn Cys Gln Gly Ile Tyr
195                 200                 205
Pro Leu His Asp Val Tyr Ile Arg Lys Val Lys Val Leu Lys Lys Pro
210                 215                 220
Arg Phe Glu Leu Ser Lys Leu Leu Glu Leu His Val Asp Gly Lys Gly
225                 230                 235                 240
Ile Asp Glu Pro Gly Ala Lys Val Thr Arg Thr Asp Ala Tyr Glu Pro
245                 250                 255
Pro Val Gln Glu Ser Val
260
<210>  329
<211>  152
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  329
Met Ser Leu Met Leu Pro Glu Lys Phe Gln His Ile Leu Arg Ile Met
1               5                   10                  15
Gly Thr Asn Ile Asp Gly Lys Arg Lys Val Met Phe Ala Met Thr Ala
20                  25                  30
Ile Lys Gly Val Gly Arg Arg Tyr Ala Asn Ile Val Leu Lys Lys Ala
35                  40                  45
Asp Val Asn Leu Asp Lys Arg Ala Gly Glu Cys Ser Glu Glu Glu Val
50                  55                  60
Glu Lys Ile Val Thr Ile Met Gln Asn Pro Arg Gln Tyr Lys Ile Pro
65                  70                  75                  80
Asn Trp Phe Leu Asn Arg Gln Lys Asp Thr Val Glu Gly Lys Tyr Ser
85                  90                  95
Gln Leu Thr Ser Ser Leu Leu Asp Ser Lys Leu Arg Asp Asp Leu Glu
100                 105                 110
Arg Leu Lys Lys Ile Arg Ala His Arg Gly Met Arg His Tyr Trp Gly
115                 120                 125
Leu Arg Val Arg Gly Gln His Thr Lys Thr Thr Gly Arg Arg Gly Arg
130                 135                 140
Thr Val Gly Val Ser Lys Lys Lys
145                 150
<210>  330
<211>  381
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  330
Met Ser Asp Glu Glu Tyr Ser Glu Ser Glu Glu Glu Thr Gln Pro Glu
1               5                   10                  15
Pro Gln Lys Lys Pro Glu Ala Glu Gly Gly Gly Asp Pro Glu Phe Val
20                  25                  30
Lys Arg Lys Glu Ala Gln Thr Ser Ala Leu Asp Glu Gln Leu Lys Asp
35                  40                  45
Tyr Ile Ala Glu Trp Arg Lys Gln Arg Ala Arg Glu Glu Glu Asp Leu
50                  55                  60
Lys Lys Leu Lys Glu Lys Gln Ala Lys Arg Lys Val Ala Arg Ala Glu
65                  70                  75                  80
Glu Glu Lys Arg Leu Ala Glu Lys Lys Lys Gln Glu Glu Glu Arg Arg
85                  90                  95
Val Arg Glu Ala Glu Glu Lys Lys Gln Arg Glu Ile Glu Glu Lys Arg
100                 105                 110
Arg Arg Leu Glu Glu Ala Glu Lys Lys Arg Gln Ala Met Met Ala Ala
115                 120                 125
Leu Lys Asp Gln Ser Lys Thr Lys Gly Pro Asn Phe Val Val Asn Lys
130                 135                 140
Lys Ala Glu Thr Leu Gly Met Ser Ser Ala Gln Ile Glu Arg Asn Lys
145                 150                 155                 160
Thr Lys Glu Gln Leu Glu Glu Glu Lys Arg Ile Ser Leu Ser Ile Arg
165                 170                 175
Leu Lys Pro Leu Ala Ile Glu Asn Met Ser Ile Asp Arg Leu Arg Ile
180                 185                 190
Lys Ala Gln Glu Leu Trp Glu Ala Ile Val Lys Leu Glu Thr Glu Lys
195                 200                 205
Tyr Asp Leu Glu Glu Arg Gln Lys Arg Gln Asp Tyr Asp Leu Lys Glu
210                 215                 220
Leu Lys Glu Arg Gln Lys Gln Gln Leu Arg His Lys Ala Leu Lys Lys
225                 230                 235                 240
Gly Leu Asp Pro Glu Ala Leu Thr Gly Lys Tyr Pro Pro Lys Ile Gln
245                 250                 255
Val Ala Ser Lys Tyr Glu Arg Arg Val Asp Thr Arg Ser Tyr Asp Asp
260                 265                 270
Lys Lys Lys Leu Phe Glu Gly Gly Ile Leu Glu Arg Tyr Lys Glu Leu
275                 280                 285
Ile Glu Lys Val Trp Thr Glu Lys Val Asp Gln Phe Gly Ser Arg Ala
290                 295                 300
His Ser Lys Leu Pro Arg Trp Phe Gly Glu Arg Pro Gly Lys Lys Lys
305                 310                 315                 320
Asp Ala Pro Glu Ser Pro Glu Glu Glu Glu Val Lys Val Glu Asp Glu
325                 330                 335
Pro Glu Ala Glu Pro Ser Phe Met Leu Asp Glu Glu Glu Glu Glu Ala
340                 345                 350
Glu Glu Glu Glu Ala Glu Glu Glu Glu Glu Ala Glu Glu Glu Glu Glu
355                 360                 365
Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu
370                 375                 380
<210>  331
<211>  1689
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  331
Ser Gly Lys Leu Ala Gly Ala Asp Ile Glu Thr Tyr Leu Leu Glu Lys
1               5                   10                  15
Ala Arg Val Ile Ser Gln Gln Thr Leu Glu Arg Ser Tyr His Ile Phe
20                  25                  30
Tyr Gln Met Met Ser Gly Ala Val Lys Gly Val Lys Glu Met Cys Leu
35                  40                  45
Leu Val Asp Asp Ile Tyr Thr Tyr Asn Phe Ile Ser Gln Gly Lys Val
50                  55                  60
Ser Ile Ala Gly Val Asp Asp Gly Glu Glu Met Val Leu Thr Asp Gln
65                  70                  75                  80
Ala Phe Asp Ile Leu Gly Phe Thr Lys Gln Glu Lys Glu Asp Ile Tyr
85                  90                  95
Lys Ile Thr Ala Ala Val Ile His Met Gly Thr Met Lys Phe Lys Gln
100                 105                 110
Arg Gly Arg Glu Glu Gln Ala Glu Ala Asp Gly Thr Glu Glu Gly Gly
115                 120                 125
Lys Val Gly Val Leu Leu Gly Ile Asp Gly Asp Asp Leu Tyr Lys Asn
130                 135                 140
Met Cys Lys Pro Arg Ile Lys Val Gly Thr Glu Phe Val Thr Gln Gly
145                 150                 155                 160
Lys Asn Val Asn Gln Val Ser Tyr Ser Leu Gly Ala Met Ser Lys Gly
165                 170                 175
Met Phe Asp Arg Leu Phe Lys Phe Leu Val Lys Lys Cys Asn Glu Thr
180                 185                 190
Leu Asp Thr Lys Gln Lys Arg Gln His Phe Ile Gly Val Leu Asp Ile
195                 200                 205
Ala Gly Phe Glu Ile Phe Asp Phe Asn Gly Phe Glu Gln Leu Cys Ile
210                 215                 220
Asn Phe Thr Asn Glu Lys Leu Gln Gln Phe Phe Asn His His Met Phe
225                 230                 235                 240
Val Leu Glu Gln Glu Glu Tyr Lys Arg Glu Gly Ile Asn Trp Ala Phe
245                 250                 255
Ile Asp Phe Gly Met Asp Leu Leu Ala Cys Ile Glu Leu Ile Glu Lys
260                 265                 270
Pro Met Gly Ile Leu Ser Ile Leu Glu Glu Glu Ser Met Phe Pro Lys
275                 280                 285
Ala Thr Asp Lys Thr Phe Glu Asp Lys Leu Ile Thr Asn His Leu Gly
290                 295                 300
Lys Ser Pro Asn Phe Arg Lys Pro Ala Val Pro Lys Pro Gly Gln Gln
305                 310                 315                 320
Ala Gly His Phe Ala Ile Ala His Tyr Ala Gly Cys Val Ser Tyr Asn
325                 330                 335
Ile Thr Gly Trp Leu Glu Lys Asn Lys Asp Pro Leu Asn Asp Thr Val
340                 345                 350
Val Asp Gln Tyr Lys Lys Gly Thr Asn Lys Leu Leu Cys Glu Ile Phe
355                 360                 365
Ala Asp His Pro Gly Gln Ser Gly Ala Pro Gly Gly Asp Ala Gly Gly
370                 375                 380
Lys Gly Gly Arg Gly Lys Lys Gly Gly Gly Phe Ala Thr Val Ser Ser
385                 390                 395                 400
Ser Tyr Lys Glu Gln Leu Asn Asn Leu Met Thr Thr Leu Lys Ser Thr
405                 410                 415
Gln Pro His Phe Val Arg Cys Ile Ile Pro Asn Glu Leu Lys Gln Pro
420                 425                 430
Gly Val Ile Asp Ser His Leu Val Met His Gln Leu Thr Cys Asn Gly
435                 440                 445
Val Leu Glu Gly Ile Arg Ile Cys Arg Lys Gly Phe Pro Asn Arg Met
450                 455                 460
Asn Tyr Pro Asp Phe Lys Leu Arg Tyr Lys Ile Leu Asn Pro Ala Ala
465                 470                 475                 480
Val Asp Arg Glu Ser Asp Ile Leu Lys Ala Ala Gly Leu Val Leu Glu
485                 490                 495
Ser Thr Gly Leu Asp Pro Asp Met Tyr Arg Leu Gly His Thr Lys Val
500                 505                 510
Phe Phe Arg Ala Gly Val Leu Gly Gln Leu Glu Glu Leu Arg Asp Asp
515                 520                 525
Arg Leu Ser Lys Ile Ile Gly Trp Met Gln Ala Phe Met Arg Gly Tyr
530                 535                 540
Leu Val Arg Lys Glu Tyr Lys Lys Leu Gln Glu Gln Arg Leu Ala Leu
545                 550                 555                 560
Gln Val Val Gln Arg Asn Leu Arg Arg Tyr Leu Gln Leu Arg Thr Trp
565                 570                 575
Pro Trp Trp Lys Met Trp Ser Arg Val Lys Pro Leu Leu Asn Val Ala
580                 585                 590
Asn Val Glu Glu Glu Met Arg Lys Leu Glu Glu Leu Val Ala Glu Thr
595                 600                 605
Gln Ala Ala Leu Glu Lys Glu Glu Lys Leu Arg Lys Glu Ala Glu Ala
610                 615                 620
Leu Asn Ala Lys Leu Leu Gln Glu Lys Thr Asp Leu Leu Arg Asn Leu
625                 630                 635                 640
Glu Gly Glu Lys Gly Ser Ile Ser Gly Ile Gln Glu Arg Cys Ala Lys
645                 650                 655
Leu Gln Ala Gln Lys Ala Asp Leu Glu Ser Gln Leu Met Asp Thr Gln
660                 665                 670
Glu Arg Leu Gln Asn Glu Glu Asp Ala Arg Asn Gln Leu Phe Gln Gln
675                 680                 685
Lys Lys Lys Leu Glu Gln Glu Ala Ala Ala Leu Lys Lys Asp Ile Glu
690                 695                 700
Asp Leu Glu Leu Ser Asn Gln Lys Thr Asp Gln Asp Lys Ala Ser Lys
705                 710                 715                 720
Glu His Gln Ile Arg Asn Leu Asn Asp Glu Ile Ala His Gln Asp Asp
725                 730                 735
Leu Ile Asn Lys Leu Asn Lys Glu Lys Lys Ile Gln Ser Glu Leu Asn
740                 745                 750
Gln Lys Thr Ala Glu Glu Leu Gln Ala Ala Glu Asp Lys Ile Asn His
755                 760                 765
Leu Thr Lys Val Lys Val Lys Leu Glu Gln Thr Leu Asp Glu Leu Glu
770                 775                 780
Asp Thr Leu Glu Arg Glu Lys Lys Leu Arg Gly Asp Val Glu Lys Ala
785                 790                 795                 800
Lys Arg Lys Thr Glu Gly Asp Leu Lys Leu Thr Gln Glu Ala Val Ala
805                 810                 815
Asp Leu Glu Arg Asn Lys Lys Glu Leu Glu Gln Thr Ile Gln Arg Lys
820                 825                 830
Asp Lys Glu Ile Ala Ser Leu Thr Ala Lys Leu Glu Asp Glu Gln Ser
835                 840                 845
Ile Val Asn Lys Thr Gly Lys Gln Ile Lys Glu Leu Gln Ser Arg Ile
850                 855                 860
Glu Glu Leu Glu Glu Glu Val Glu Ala Glu Arg Gln Ala Arg Gly Lys
865                 870                 875                 880
Ala Glu Lys Gln Arg Ala Asp Leu Ala Arg Glu Leu Glu Glu Leu Gly
885                 890                 895
Glu Arg Leu Glu Glu Ala Gly Gly Ala Thr Ser Ala Gln Ile Glu Leu
900                 905                 910
Asn Lys Lys Arg Glu Ala Glu Met Ser Lys Leu Arg Arg Asp Leu Glu
915                 920                 925
Glu Ala Asn Ile Gln His Glu Gly Thr Leu Ala Asn Leu Arg Lys Lys
930                 935                 940
His Asn Asp Ala Val Ser Glu Met Gly Asp Gln Ile Asp Gln Leu Asn
945                 950                 955                 960
Lys Leu Lys Thr Lys Val Glu Lys Glu Lys Ser Gln Tyr Leu Gly Glu
965                 970                 975
Leu Asn Asp Val Arg Ala Ser Ile Asp His Leu Thr Asn Glu Lys Ala
980                 985                 990
Ala Thr Glu Lys Val Ala Lys Gln  Leu Gln His Gln Ile  Asn Glu Val
995                 1000                 1005
Gln Gly  Lys Leu Asp Glu Ala  Asn Arg Thr Leu Asn  Asp Phe Asp
1010                 1015                 1020
Ala Ala  Lys Lys Lys Leu Ser  Ile Glu Asn Ser Asp  Leu Leu Arg
1025                 1030                 1035
Gln Leu  Glu Glu Ala Glu Ser  Gln Val Ser Gln Leu  Ser Lys Ile
1040                 1045                 1050
Lys Ile  Ser Leu Thr Thr Gln  Leu Glu Asp Thr Lys  Arg Leu Ala
1055                 1060                 1065
Asp Glu  Glu Ala Arg Glu Arg  Ala Thr Leu Leu Gly  Lys Phe Arg
1070                 1075                 1080
Asn Leu  Glu His Asp Leu Asp  Asn Leu Arg Glu Gln  Val Glu Glu
1085                 1090                 1095
Glu Ala  Glu Ala Lys Ala Asp  Ile Gln Arg Gln Leu  Ser Lys Ala
1100                 1105                 1110
Asn Ala  Glu Ala Gln Leu Trp  Arg Ser Lys Tyr Glu  Ser Glu Gly
1115                 1120                 1125
Val Ala  Arg Ala Glu Glu Leu  Glu Glu Ala Lys Arg  Lys Leu Gln
1130                 1135                 1140
Ala Arg  Leu Ala Glu Ala Glu  Glu Thr Ile Glu Ser  Leu Asn Gln
1145                 1150                 1155
Lys Val  Ile Ala Leu Glu Lys  Thr Lys Gln Arg Leu  Ala Thr Glu
1160                 1165                 1170
Val Glu  Asp Leu Gln Leu Glu  Val Asp Arg Ala Asn  Ala Ile Ala
1175                 1180                 1185
Asn Ala  Ala Glu Lys Lys Ala  Lys Ala Ile Asp Lys  Ile Ile Gly
1190                 1195                 1200
Glu Trp  Lys Leu Lys Val Asp  Asp Leu Ala Ala Glu  Leu Asp Ala
1205                 1210                 1215
Ser Gln  Lys Glu Cys Arg Asn  Tyr Ser Thr Glu Leu  Phe Arg Leu
1220                 1225                 1230
Lys Gly  Ala Tyr Glu Glu Gly  Gln Glu Gln Leu Glu  Ala Val Arg
1235                 1240                 1245
Arg Glu  Asn Lys Asn Leu Ala  Asp Glu Val Lys Asp  Leu Leu Asp
1250                 1255                 1260
Gln Ile  Gly Glu Gly Gly Arg  Asn Ile His Glu Ile  Glu Lys Gln
1265                 1270                 1275
Arg Lys  Arg Leu Glu Val Glu  Lys Asp Glu Leu Gln  Ala Ala Leu
1280                 1285                 1290
Glu Glu  Ala Glu Ala Ala Leu  Glu Gln Glu Glu Asn  Lys Val Leu
1295                 1300                 1305
Arg Ala  Gln Leu Glu Leu Ser  Gln Val Arg Gln Glu  Ile Asp Arg
1310                 1315                 1320
Arg Ile  Gln Glu Lys Glu Glu  Glu Phe Glu Asn Thr  Arg Lys Asn
1325                 1330                 1335
His Gln  Arg Ala Leu Asp Ser  Met Gln Ala Ser Leu  Glu Ala Glu
1340                 1345                 1350
Ala Lys  Gly Lys Ala Glu Ala  Leu Arg Met Lys Lys  Lys Leu Glu
1355                 1360                 1365
Ala Asp  Ile Asn Glu Leu Glu  Ile Ala Leu Asp His  Ala Asn Lys
1370                 1375                 1380
Ala Asn  Ala Glu Ala Gln Lys  Thr Ile Lys Lys Tyr  Gln Gln Gln
1385                 1390                 1395
Leu Lys  Asp Val Gln Thr Ala  Leu Glu Glu Glu Gln  Arg Ala Arg
1400                 1405                 1410
Asp Asp  Ala Arg Glu Gln Leu  Gly Ile Ala Glu Arg  Arg Ala Asn
1415                 1420                 1425
Ala Leu  Gly Asn Glu Leu Glu  Glu Ser Arg Thr Leu  Leu Glu Gln
1430                 1435                 1440
Ala Asp  Arg Gly Arg Arg Gln  Ala Glu Gln Glu Leu  Gly Asp Ala
1445                 1450                 1455
His Glu  Gln Ile Asn Glu Leu  Ala Ala Gln Ala Thr  Ser Ala Ser
1460                 1465                 1470
Ala Ala  Lys Arg Lys Leu Glu  Gly Glu Leu Gln Thr  Leu His Ala
1475                 1480                 1485
Asp Leu  Asp Glu Leu Leu Asn  Glu Ala Lys Asn Ser  Glu Glu Lys
1490                 1495                 1500
Ala Lys  Lys Ala Met Val Asp  Ala Ala Arg Leu Ala  Asp Glu Leu
1505                 1510                 1515
Arg Ala  Glu Gln Asp His Ala  Gln Thr Gln Glu Lys  Leu Arg Lys
1520                 1525                 1530
Ala Leu  Glu Thr Gln Ile Lys  Glu Leu Gln Val Arg  Leu Asp Glu
1535                 1540                 1545
Ala Glu  Asn Asn Ala Leu Lys  Gly Gly Lys Lys Ala  Ile Ala Lys
1550                 1555                 1560
Leu Glu  Gln Arg Val Arg Glu  Leu Glu Asn Glu Leu  Asp Gly Glu
1565                 1570                 1575
Gln Arg  Arg His Ala Asp Ala  Gln Lys Asn Leu Arg  Lys Ser Glu
1580                 1585                 1590
Arg Arg  Ile Lys Glu Leu Ser  Phe Gln Ser Asp Glu  Asp Arg Lys
1595                 1600                 1605
Asn His  Glu Arg Met Gln Asp  Leu Val Asp Lys Leu  Gln Gln Lys
1610                 1615                 1620
Ile Lys  Thr Tyr Lys Arg Gln  Ile Glu Glu Ala Glu  Glu Ile Ala
1625                 1630                 1635
Ala Leu  Asn Leu Ala Lys Phe  Arg Lys Ala Gln Gln  Glu Leu Glu
1640                 1645                 1650
Glu Ala  Glu Glu Arg Ala Asp  Leu Ala Glu Gln Ala  Val Ser Lys
1655                 1660                 1665
Phe Arg  Thr Lys Gly Gly Arg  Ala Gly Ser Ala Ala  Arg Ala Met
1670                 1675                 1680
Ser Pro  Val Gly Gln Lys
1685
<210>  332
<211>  256
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  332
Asp Ala Ile Lys Lys Lys Met Gln Ala Met Lys Met Glu Lys Asp Thr
1               5                   10                  15
Ala Met Asp Lys Ala Asp Thr Cys Glu Gly Gln Ala Lys Asp Ala Asn
20                  25                  30
Thr Arg Ala Asp Lys Ile Leu Glu Asp Val Arg Asp Leu Gln Lys Lys
35                  40                  45
Leu Asn Gln Val Glu Ser Asp Leu Glu Arg Thr Lys Arg Glu Leu Glu
50                  55                  60
Thr Lys Thr Thr Glu Leu Glu Glu Lys Glu Lys Ala Asn Thr Asn Ala
65                  70                  75                  80
Glu Ser Glu Val Ala Ser Leu Asn Arg Lys Val Gln Met Val Glu Glu
85                  90                  95
Asp Leu Glu Arg Ser Glu Glu Arg Ser Gly Thr Ala Gln Gln Lys Leu
100                 105                 110
Ser Glu Ala Ser His Ala Ala Asp Glu Ala Ser Arg Met Cys Lys Val
115                 120                 125
Leu Glu Asn Arg Ser Gln Gln Asp Glu Glu Arg Met Asp Gln Leu Thr
130                 135                 140
Asn Gln Leu Lys Glu Ala Arg Leu Leu Ala Glu Asp Ala Asp Gly Lys
145                 150                 155                 160
Ser Asp Glu Val Ser Arg Lys Leu Ala Phe Val Glu Asp Glu Leu Glu
165                 170                 175
Val Ala Glu Asp Arg Val Lys Ser Gly Asp Ser Lys Ile Met Glu Leu
180                 185                 190
Glu Glu Glu Leu Lys Val Val Gly Asn Ser Leu Lys Ser Leu Glu Val
195                 200                 205
Ser Glu Glu Lys Ala Asn Gln Arg Val Glu Glu Tyr Lys Arg Gln Ile
210                 215                 220
Lys Gln Leu Thr Val Lys Leu Lys Glu Ala Glu Ala Arg Ala Glu Phe
225                 230                 235                 240
Ala Glu Lys Thr Val Lys Lys Leu Gln Lys Glu Val Asp Arg Leu Glu
245                 250                 255
<210>  333
<211>  85
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  333
Arg Ala Leu Gly Gln Asn Pro Thr Glu Ser Asp Val Lys Lys Phe Thr
1               5                   10                  15
His Gln His Lys Pro Asp Glu Arg Ile Ser Phe Glu Val Phe Leu Pro
20                  25                  30
Ile Tyr Gln Ala Ile Ser Lys Gly Arg Thr Ser Asp Thr Ala Glu Asp
35                  40                  45
Phe Ile Glu Gly Leu Arg His Phe Asp Lys Asp Gly Asn Gly Phe Ile
50                  55                  60
Ser Thr Ala Glu Leu Arg His Leu Leu Thr Thr Leu Gly Glu Lys Leu
65                  70                  75                  80
Thr Asp Asp Glu Val
85
<210>  334
<211>  174
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  334
Met Ser Ser Arg Lys Thr Ala Gly Arg Arg Ala Thr Thr Lys Lys Arg
1               5                   10                  15
Ala Gln Arg Ala Thr Ser Asn Val Phe Ala Met Phe Asp Gln Ala Gln
20                  25                  30
Ile Gln Glu Phe Lys Glu Ala Phe Asn Met Ile Asp Gln Asn Arg Asp
35                  40                  45
Gly Phe Val Asp Lys Glu Asp Leu His Asp Met Leu Ala Ser Leu Gly
50                  55                  60
Lys Asn Pro Ser Asp Glu Tyr Leu Glu Gly Met Met Asn Glu Ala Pro
65                  70                  75                  80
Gly Pro Ile Asn Phe Thr Met Phe Leu Thr Leu Phe Gly Glu Arg Leu
85                  90                  95
Gln Gly Thr Asp Pro Glu Glu Val Ile Lys Asn Ala Phe Gly Cys Phe
100                 105                 110
Asp Glu Asp Asn Asn Gly Phe Ile Asn Glu Glu Arg Leu Arg Glu Leu
115                 120                 125
Leu Thr Ser Met Gly Asp Arg Phe Thr Asp Glu Asp Val Asp Glu Met
130                 135                 140
Tyr Arg Glu Ala Pro Ile Lys Asn Gly Met Phe Asp Tyr Ile Glu Phe
145                 150                 155                 160
Thr Arg Ile Leu Lys His Gly Ala Lys Asp Lys Asp Glu Gln
165                 170
<210>  335
<211>  1881
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  335
Asp Leu Thr Cys Leu Asn Glu Ala Ser Val Leu His Asn Ile Lys Asp
1               5                   10                  15
Arg Tyr Tyr Ser Gly Leu Ile Tyr Thr Tyr Ser Gly Leu Phe Cys Val
20                  25                  30
Val Val Asn Pro Tyr Lys Lys Leu Pro Ile Tyr Thr Glu Arg Ile Met
35                  40                  45
Glu Lys Tyr Lys Gly Val Lys Arg His Asp Leu Pro Pro His Val Phe
50                  55                  60
Ala Ile Thr Asp Thr Ala Tyr Arg Ser Met Leu Gln Asp Arg Glu Asp
65                  70                  75                  80
Gln Ser Ile Leu Cys Thr Gly Glu Ser Gly Ala Gly Lys Thr Glu Asn
85                  90                  95
Thr Lys Lys Val Ile Gln Tyr Leu Ala Tyr Val Ala Ala Ser Lys Pro
100                 105                 110
Lys Ser Ser Ala Ser Pro His Thr Ala Gln Ser Gln Ala Leu Ile Ile
115                 120                 125
Gly Glu Leu Glu Gln Gln Leu Leu Gln Ala Asn Pro Ile Leu Glu Ala
130                 135                 140
Phe Gly Asn Ala Lys Thr Val Lys Asn Asp Asn Ser Ser Arg Phe Gly
145                 150                 155                 160
Lys Phe Ile Arg Ile Asn Phe Asp Ala Ser Gly Tyr Ile Ala Gly Ala
165                 170                 175
Asn Ile Glu Thr Tyr Leu Leu Glu Lys Ser Arg Ala Ile Arg Gln Ala
180                 185                 190
Lys Asp Glu Arg Thr Phe His Ile Phe Tyr Gln Leu Leu Ala Gly Ala
195                 200                 205
Ser Ala Glu Gln Arg Lys Glu Phe Ile Leu Glu Asp Pro Lys Asn Tyr
210                 215                 220
Pro Phe Leu Ser Ser Gly Met Val Ser Val Pro Gly Val Asp Asp Gly
225                 230                 235                 240
Val Asp Phe Gln Ala Thr Ile Ala Ser Met Ser Ile Met Gly Met Thr
245                 250                 255
Asn Asp Asp Leu Ser Ala Leu Phe Arg Ile Val Ser Ala Val Met Leu
260                 265                 270
Phe Gly Ser Met Gln Phe Lys Gln Glu Arg Asn Ser Asp Gln Ala Thr
275                 280                 285
Leu Pro Asp Asn Thr Val Ala Gln Lys Ile Ala His Leu Leu Gly Leu
290                 295                 300
Ser Ile Thr Glu Met Thr Lys Ala Phe Leu Arg Pro Arg Ile Lys Val
305                 310                 315                 320
Gly Arg Asp Phe Val Thr Lys Ala Gln Thr Lys Glu Gln Val Glu Phe
325                 330                 335
Ala Val Glu Ala Ile Ser Lys Ala Cys Tyr Glu Arg Met Phe Arg Trp
340                 345                 350
Leu Val Asn Arg Ile Asn Arg Ser Leu Asp Arg Thr Lys Arg Gln Gly
355                 360                 365
Ala Ser Phe Ile Gly Ile Leu Asp Met Ala Gly Phe Glu Ile Phe Glu
370                 375                 380
Ile Asn Ser Phe Glu Gln Leu Cys Ile Asn Tyr Thr Asn Glu Lys Leu
385                 390                 395                 400
Gln Gln Leu Phe Asn His Thr Met Phe Ile Leu Glu Gln Glu Glu Tyr
405                 410                 415
Gln Arg Glu Gly Ile Glu Trp Lys Phe Ile Asp Phe Gly Leu Asp Leu
420                 425                 430
Gln Pro Thr Ile Asp Leu Ile Asp Lys Pro Met Gly Val Met Ala Leu
435                 440                 445
Leu Asp Glu Glu Cys Trp Phe Pro Lys Ala Thr Asp Lys Thr Phe Val
450                 455                 460
Glu Lys Leu Val Gly Ala His Ser Val His Pro Lys Phe Ile Lys Thr
465                 470                 475                 480
Asp Phe Arg Gly Val Ala Asp Phe Ala Val Val His Tyr Ala Gly Lys
485                 490                 495
Val Asp Tyr Ser Ala Ala Gln Trp Leu Met Lys Asn Met Asp Pro Leu
500                 505                 510
Asn Glu Asn Val Val Gln Leu Leu Gln Asn Ser Gln Asp Pro Phe Val
515                 520                 525
Ile His Ile Trp Lys Asp Ala Glu Ile Val Gly Met Ala His Gln Ala
530                 535                 540
Leu Ser Asp Thr Gln Phe Gly Ala Arg Thr Arg Lys Gly Met Phe Arg
545                 550                 555                 560
Thr Val Ser Gln Leu Tyr Lys Asp Gln Leu Ser Lys Leu Met Ile Thr
565                 570                 575
Leu Arg Asn Thr Asn Pro Asn Phe Val Arg Cys Ile Leu Pro Asn His
580                 585                 590
Glu Lys Arg Ala Gly Lys Ile Asp Ala Pro Leu Val Leu Asp Gln Leu
595                 600                 605
Arg Cys Asn Gly Val Leu Glu Gly Ile Arg Ile Cys Arg Gln Gly Phe
610                 615                 620
Pro Asn Arg Ile Pro Phe Gln Glu Phe Arg Gln Arg Tyr Glu Leu Leu
625                 630                 635                 640
Thr Pro Asn Val Ile Pro Lys Gly Phe Met Asp Gly Lys Lys Ala Cys
645                 650                 655
Glu Lys Met Ile Asn Ala Leu Glu Leu Asp Pro Asn Leu Tyr Arg Val
660                 665                 670
Gly Gln Ser Lys Ile Phe Phe Arg Ala Gly Val Leu Ala His Leu Glu
675                 680                 685
Glu Glu Arg Asp Tyr Lys Ile Thr Asp Leu Ile Ala Asn Phe Arg Ala
690                 695                 700
Phe Cys Arg Gly Tyr Leu Ala Arg Arg Asn Tyr Gln Lys Arg Leu Gln
705                 710                 715                 720
Gln Leu Asn Ala Ile Arg Ile Ile Gln Arg Asn Cys Ser Ala Tyr Leu
725                 730                 735
Lys Leu Arg Asn Trp Gln Trp Trp Arg Leu Tyr Thr Lys Val Lys Pro
740                 745                 750
Leu Leu Glu Val Thr Lys Gln Glu Glu Lys Leu Thr Gln Lys Glu Asp
755                 760                 765
Glu Leu Lys Gln Val Arg Glu Lys Leu Asp Asn Gln Val Arg Ser Lys
770                 775                 780
Glu Glu Tyr Glu Lys Arg Leu Gln Asp Ala Leu Glu Glu Lys Ala Ala
785                 790                 795                 800
Leu Ala Glu Gln Leu Gln Ala Glu Val Glu Leu Cys Ala Glu Ala Glu
805                 810                 815
Glu Met Arg Ala Arg Leu Ala Val Arg Lys Gln Glu Leu Glu Glu Ile
820                 825                 830
Leu His Asp Leu Glu Ala Arg Ile Glu Glu Glu Glu Gln Arg Asn Thr
835                 840                 845
Val Leu Ile Asn Glu Lys Lys Lys Leu Thr Leu Asn Ile Ala Asp Leu
850                 855                 860
Glu Glu Gln Leu Glu Glu Glu Glu Gly Ala Arg Gln Lys Leu Gln Leu
865                 870                 875                 880
Glu Lys Val Gln Ile Glu Ala Arg Leu Lys Lys Met Glu Glu Asp Leu
885                 890                 895
Ala Leu Ala Glu Asp Thr Asn Thr Lys Val Val Lys Glu Lys Lys Val
900                 905                 910
Leu Glu Glu Arg Ala Ser Asp Leu Ala Gln Thr Leu Ala Glu Glu Glu
915                 920                 925
Glu Lys Ala Lys His Leu Ala Lys Leu Lys Thr Lys His Glu Thr Thr
930                 935                 940
Ile Ala Glu Leu Glu Glu Arg Leu Leu Lys Asp Asn Gln Gln Arg Gln
945                 950                 955                 960
Glu Met Asp Arg Asn Lys Arg Lys Ile Glu Ser Glu Val Asn Asp Leu
965                 970                 975
Lys Glu Gln Ile Asn Glu Lys Lys Val Gln Val Glu Glu Leu Gln Leu
980                 985                 990
Gln Leu Gly Lys Arg Glu Glu Glu  Ile Ala Gln Ala Leu  Met Arg Ile
995                 1000                 1005
Asp Glu  Glu Gly Ala Gly Lys  Ala Gln Thr Gln Lys  Ala Leu Arg
1010                 1015                 1020
Glu Leu  Glu Ser Gln Leu Ala  Glu Leu Gln Glu Asp  Leu Glu Ala
1025                 1030                 1035
Glu Lys  Ala Ala Arg Ala Lys  Ala Glu Lys Gln Lys  Arg Asp Leu
1040                 1045                 1050
Asn Glu  Glu Leu Glu Ser Leu  Lys Asn Glu Leu Leu  Asp Ser Leu
1055                 1060                 1065
Asp Thr  Thr Ala Ala Gln Gln  Glu Leu Arg Thr Lys  Arg Glu His
1070                 1075                 1080
Glu Leu  Ala Thr Leu Lys Lys  Thr Leu Glu Glu Glu  Thr His Ile
1085                 1090                 1095
His Glu  Val Ser Leu Thr Glu  Met Arg His Lys His  Thr Gln Glu
1100                 1105                 1110
Val Ala  Ala Leu Asn Glu Gln  Leu Glu Gln Leu Lys  Lys Ala Lys
1115                 1120                 1125
Ser Ala  Leu Glu Lys Ser Lys  Ala Gln Leu Glu Gly  Glu Ala Ala
1130                 1135                 1140
Glu Leu  Ala Asn Glu Leu Glu  Thr Ala Gly Thr Ser  Lys Gly Glu
1145                 1150                 1155
Ser Glu  Arg Lys Arg Lys Gln  Ala Glu Ser Ser Leu  Gln Glu Leu
1160                 1165                 1170
Ser Ser  Arg Leu Leu Glu Met  Glu Arg Thr Lys Ala  Glu Leu Gln
1175                 1180                 1185
Glu Arg  Val Gln Lys Leu Ser  Ala Glu Ala Asp Ser  Val Asn Gln
1190                 1195                 1200
Gln Leu  Glu Ala Ala Glu Leu  Lys Ala Ser Ala Ala  Leu Lys Ala
1205                 1210                 1215
Ser Gly  Thr Leu Glu Thr Gln  Leu Gln Glu Ala Gln  Val Leu Leu
1220                 1225                 1230
Glu Glu  Glu Thr Arg Gln Lys  Leu Ser Leu Thr Thr  Lys Leu Lys
1235                 1240                 1245
Gly Leu  Glu Ser Glu Arg Asp  Ala Leu Lys Glu Gln  Leu Tyr Glu
1250                 1255                 1260
Glu Asp  Glu Gly Arg Lys Asn  Leu Glu Lys Gln Met  Ala Ile Leu
1265                 1270                 1275
Asn Gln  Gln Val Ala Glu Ser  Lys Lys Lys Ser Glu  Glu Glu Thr
1280                 1285                 1290
Glu Lys  Ile Thr Glu Leu Glu  Glu Ser Arg Lys Lys  Leu Leu Lys
1295                 1300                 1305
Asp Ile  Glu Ile Leu Gln Arg  Gln Val Glu Glu Leu  Gln Val Thr
1310                 1315                 1320
Asn Asp  Lys Leu Glu Lys Gly  Lys Lys Lys Leu Gln  Ser Glu Leu
1325                 1330                 1335
Glu Asp  Leu Thr Ile Asp Leu  Glu Ser Gln Arg Thr  Lys Val Val
1340                 1345                 1350
Glu Leu  Glu Lys Lys Gln Arg  Asn Phe Asp Lys Val  Leu Ala Glu
1355                 1360                 1365
Glu Lys  Ala Leu Ser Gln Gln  Ile Thr His Glu Arg  Asp Ala Ala
1370                 1375                 1380
Glu Arg  Glu Ala Arg Glu Lys  Glu Thr Arg Val Leu  Ser Leu Thr
1385                 1390                 1395
Arg Glu  Leu Asp Glu Phe Met  Glu Lys Ile Glu Glu  Leu Glu Arg
1400                 1405                 1410
Ser Lys  Arg Gln Leu Gln Ala  Glu Leu Asp Glu Leu  Val Asn Asn
1415                 1420                 1425
Gln Gly  Thr Thr Asp Lys Ser  Val His Glu Leu Glu  Arg Ala Lys
1430                 1435                 1440
Arg Val  Leu Glu Ser Gln Leu  Ala Glu Gln Lys Ala  Gln Asn Glu
1445                 1450                 1455
Glu Leu  Glu Asp Glu Leu Gln  Met Thr Glu Asp Ala  Lys Leu Arg
1460                 1465                 1470
Leu Glu  Val Asn Met Gln Ala  Leu Arg Ala Gln Phe  Glu Arg Asp
1475                 1480                 1485
Leu Gln  Gly Lys Glu Glu Ser  Gly Glu Glu Lys Arg  Arg Gly Leu
1490                 1495                 1500
Leu Lys  Gln Leu Arg Asp Ile  Glu Ala Glu Leu Glu  Asp Glu Arg
1505                 1510                 1515
Lys Gln  Arg Thr Ala Ala Val  Ala Ser Arg Lys Lys  Ile Glu Ala
1520                 1525                 1530
Asp Phe  Lys Asp Val Glu Gln  Gln Leu Glu Met His  Thr Lys Val
1535                 1540                 1545
Lys Glu  Asp Leu Gln Lys Gln  Leu Lys Lys Cys Gln  Val Gln Leu
1550                 1555                 1560
Lys Asp  Ala Ile Arg Asp Ala  Glu Glu Ala Arg Leu  Gly Arg Glu
1565                 1570                 1575
Glu Leu  Gln Ala Ala Ala Lys  Glu Ala Glu Arg Lys  Trp Lys Gly
1580                 1585                 1590
Leu Glu  Thr Glu Leu Ile Gln  Val Gln Glu Asp Leu  Met Ala Ser
1595                 1600                 1605
Glu Arg  Gln Arg Arg Ala Ala  Glu Ala Glu Arg Asp  Glu Val Val
1610                 1615                 1620
Glu Glu  Ala Asn Lys Asn Val  Lys Ser Leu Ser Asn  Leu Leu Asp
1625                 1630                 1635
Glu Lys  Lys Arg Leu Glu Ala  Gln Cys Ser Gly Leu  Glu Glu Glu
1640                 1645                 1650
Leu Glu  Glu Glu Leu Ser Asn  Asn Glu Ala Leu Gln  Asp Lys Ala
1655                 1660                 1665
Arg Lys  Ala Gln Leu Ser Val  Glu Gln Leu Asn Ala  Glu Leu Ala
1670                 1675                 1680
Ala Glu  Arg Ser Asn Val Gln  Lys Leu Glu Gly Thr  Arg Leu Ser
1685                 1690                 1695
Met Glu  Arg Gln Asn Lys Glu  Leu Lys Ala Lys Leu  Asn Glu Leu
1700                 1705                 1710
Glu Thr  Leu Gln Arg Asn Lys  Phe Lys Ala Asn Ala  Ser Leu Glu
1715                 1720                 1725
Ala Lys  Ile Thr Asn Leu Glu  Glu Gln Leu Glu Asn  Glu Ala Lys
1730                 1735                 1740
Glu Lys  Leu Leu Leu Gln Lys  Gly Asn Arg Lys Leu  Asp Lys Lys
1745                 1750                 1755
Ile Lys  Asp Leu Leu Val Gln  Leu Glu Asp Glu Arg  Arg His Ala
1760                 1765                 1770
Asp Gln  Tyr Lys Glu Gln Val  Glu Lys Ile Asn Val  Arg Val Lys
1775                 1780                 1785
Thr Leu  Lys Arg Thr Leu Asp  Asp Ala Glu Glu Glu  Met Ser Arg
1790                 1795                 1800
Glu Lys  Thr Gln Lys Arg Lys  Ala Leu Arg Glu Leu  Glu Asp Leu
1805                 1810                 1815
Arg Glu  Asn Tyr Asp Ser Leu  Leu Arg Glu Asn Asp  Asn Leu Lys
1820                 1825                 1830
Asn Lys  Leu Arg Arg Gly Gly  Gly Ile Ser Gly Ile  Ser Ser Arg
1835                 1840                 1845
Leu Gly  Gly Ser Lys Arg Gly  Ser Ile Pro Gly Glu  Asp Ser Gln
1850                 1855                 1860
Gly Leu  Asn Asn Thr Thr Asp  Glu Ser Val Asp Gly  Asp Asp Ile
1865                 1870                 1875
Ser Asn  Pro
1880
<210>  336
<211>  108
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  336
Lys Lys Ile Leu Glu Glu Ile Ile Ala Glu Val Asp Ala Asp Gly Ser
1               5                   10                  15
Gly Gln Leu Glu Phe Glu Glu Phe Val Ala Leu Ala Ala Gly Phe Leu
20                  25                  30
Thr Glu Asp Glu Thr Gln Asp Ala Glu Ala Met Gln Gln Glu Leu Arg
35                  40                  45
Glu Ala Phe Arg Leu Tyr Asp Lys Glu Gly Asn Gly Tyr Ile Thr Thr
50                  55                  60
Asp Val Leu Arg Glu Ile Leu Lys Glu Leu Asp Asp Lys Ile Thr Ser
65                  70                  75                  80
Gln Glu Leu Asp Met Met Ile Ala Glu Ile Asp Ser Asp Gly Ser Gly
85                  90                  95
Thr Val Asp Phe Asp Glu Phe Met Glu Met Met Thr
100                 105
<210>  337
<211>  141
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  337
Ile Pro Ile Met Thr Ile Ala Leu Asn Ala Phe Asp Arg Asp His Ser
1               5                   10                  15
Gly Ser Ile Pro Thr Asp Met Val Ala Asp Ile Leu Arg Leu Met Gly
20                  25                  30
Gln Pro Phe Asn Lys Lys Ile Leu Asp Glu Leu Ile Glu Glu Val Asp
35                  40                  45
Ala Asp Lys Ser Gly Arg Leu Glu Phe Glu Glu Phe Ile Thr Leu Ala
50                  55                  60
Ala Lys Phe Ile Val Glu Glu Asp Asp Glu Ala Met Gln Lys Glu Leu
65                  70                  75                  80
Arg Glu Ala Phe Arg Leu Tyr Asp Lys Glu Gly Asn Gly Tyr Ile Pro
85                  90                  95
Thr Ser Cys Leu Lys Glu Ile Leu His Glu Leu Asp Glu Gln Leu Thr
100                 105                 110
Asn Glu Glu Leu Asp Met Ile Ile Glu Glu Ile Asp Ser Asp Gly Ser
115                 120                 125
Gly Thr Val Asp Phe Asp Glu Phe Met Glu Met Met Thr
130                 135                 140
<210>  338
<211>  58
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  338
Trp Val Lys Glu Gly Ala Cys Ser Glu Gln Ser Ser Arg Met Thr Ala
1               5                   10                  15
Met Asp Asn Ala Ser Lys Asn Ala Ala Glu Met Ile Asp Lys Leu Thr
20                  25                  30
Leu Thr Phe Asn Arg Thr Arg Gln Ala Val Ile Thr Arg Glu Leu Ile
35                  40                  45
Glu Ile Ile Ser Gly Ala Ser Ala Leu Glu
50                  55
<210>  339
<211>  130
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  339
Met Val Arg Met Asn Val Leu Ser Asp Ala Leu Lys Ser Ile Asn Asn
1               5                   10                  15
Ala Glu Lys Arg Gly Lys Arg Gln Val Leu Leu Arg Pro Cys Ser Lys
20                  25                  30
Val Ile Ile Lys Phe Leu Thr Val Met Met Lys Lys Gly Tyr Ile Gly
35                  40                  45
Glu Phe Glu Ile Val Asp Asp His Arg Ser Gly Lys Ile Val Val Asn
50                  55                  60
Leu Asn Gly Arg Leu Asn Lys Cys Gly Val Ile Ser Pro Arg Phe Asp
65                  70                  75                  80
Val Pro Ile Thr Gln Ile Glu Lys Trp Thr Asn Asn Leu Leu Pro Ser
85                  90                  95
Arg Gln Phe Gly Tyr Val Val Leu Thr Thr Ser Gly Gly Ile Met Asp
100                 105                 110
His Glu Glu Ala Arg Arg Lys His Leu Gly Gly Lys Ile Leu Gly Phe
115                 120                 125
Phe Phe
130
<210>  340
<211>  131
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  340
Val Asp Gly Gly Leu Asn Ile Pro His Ser Thr Lys Arg Phe Pro Gly
1               5                   10                  15
Tyr Asp Ser Glu Ser Lys Glu Phe Asn Ala Glu Val His Arg Lys His
20                  25                  30
Ile Phe Gly Ile His Val Ala Asp Tyr Met Arg Gln Leu Ala Glu Glu
35                  40                  45
Asp Asp Asp Ala Tyr Lys Lys Gln Phe Ser Gln Tyr Val Lys Asn Gly
50                  55                  60
Val Thr Ala Asp Ser Ile Glu Ser Ile Tyr Lys Lys Ala His Glu Ala
65                  70                  75                  80
Ile Arg Ala Asp Pro Thr Arg Lys Pro Leu Glu Lys Lys Glu Val Lys
85                  90                  95
Lys Lys Arg Trp Asn Arg Ala Lys Leu Ser Leu Ser Glu Arg Lys Asn
100                 105                 110
Thr Ile Asn Gln Lys Lys Ala Thr Tyr Leu Lys Lys Val Glu Ala Gly
115                 120                 125
Glu Ile Glu
130
<210>  341
<211>  214
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  341
Met Ala Pro Lys Gly Asn Asn Met Ile Pro Asn Gly His Phe His Lys
1               5                   10                  15
Asp Trp Gln Arg Phe Ile Lys Thr Trp Phe Asn Gln Pro Ala Arg Lys
20                  25                  30
Leu Arg Arg Arg Asn Lys Arg Leu Glu Lys Ala Gln Arg Leu Ala Pro
35                  40                  45
Arg Pro Ala Gly Pro Leu Arg Pro Ala Val Arg Cys Pro Thr Val Arg
50                  55                  60
Tyr His Thr Lys Leu Arg Pro Gly Arg Gly Phe Thr Leu Glu Glu Ile
65                  70                  75                  80
Lys Arg Ala Gly Leu Cys Lys Gly Phe Ala Met Ser Ile Gly Ile Ala
85                  90                  95
Val Asp Pro Arg Arg Arg Asn Lys Ser Ile Glu Ser Leu Gln Leu Asn
100                 105                 110
Val Gln Arg Leu Lys Glu Tyr Arg Ala Lys Leu Ile Leu Phe Pro His
115                 120                 125
Lys Asn Ala Lys Lys Leu Lys Lys Gly Glu Ala Thr Glu Glu Glu Arg
130                 135                 140
Lys Val Ala Thr Gln Gln Pro Leu Pro Val Met Pro Ile Lys Gln Pro
145                 150                 155                 160
Val Ile Lys Phe Lys Ala Arg Val Ile Thr Asp Asp Glu Lys Lys Tyr
165                 170                 175
Ser Ala Phe Thr Ala Leu Arg Lys Gly Arg Ala Asp Gln Arg Leu Val
180                 185                 190
Gly Ile Arg Ala Lys Arg Ala Lys Glu Ala Ala Glu Asn Ala Glu Asp
195                 200                 205
Pro Ser Lys Ala Pro Lys
210
<210>  342
<211>  134
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  342
Met Asp Ile Glu Glu Pro Ala Ala Ala Pro Thr Glu Pro Ser Asp Val
1               5                   10                  15
Asn Thr Ala Leu Gln Glu Val Leu Lys Ala Ala Leu Gln His Gly Val
20                  25                  30
Val Val His Gly Ile His Glu Ser Ala Lys Ala Leu Asp Lys Arg Gln
35                  40                  45
Ala Leu Leu Cys Val Leu Ala Glu Asn Cys Asp Glu Pro Met Tyr Lys
50                  55                  60
Lys Leu Val Gln Ala Leu Cys Ser Glu His His Ile Pro Leu Val Lys
65                  70                  75                  80
Val Asp Ser Asn Lys Lys Leu Gly Glu Trp Thr Gly Leu Cys Lys Ile
85                  90                  95
Asp Lys Thr Gly Lys Ser Arg Lys Ile Val Gly Cys Ser Cys Val Val
100                 105                 110
Ile Lys Asp Trp Gly Glu Asp Thr Pro His Leu Asp Leu Leu Lys Asp
115                 120                 125
Tyr Ile Arg Asp Val Phe
130
<210>  343
<211>  148
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  343
Met Lys Met Asn Lys Leu Val Thr Ser Ser Arg Arg Lys Asn Arg Lys
1               5                   10                  15
Arg His Phe Thr Ala Pro Ser His Ile Arg Arg Lys Leu Met Ser Ala
20                  25                  30
Pro Leu Ser Lys Glu Leu Arg Gln Lys Tyr Asn Val Arg Thr Met Pro
35                  40                  45
Val Arg Lys Asp Asp Glu Val Gln Val Val Arg Gly His Tyr Lys Gly
50                  55                  60
Gln Gln Val Gly Lys Val Leu Gln Val Tyr Arg Lys Lys Phe Ile Ile
65                  70                  75                  80
Tyr Ile Glu Arg Ile Gln Arg Glu Lys Ala Asn Gly Ala Ser Val Tyr
85                  90                  95
Val Gly Ile His Pro Ser Lys Cys Val Ile Val Lys Leu Lys Val Asp
100                 105                 110
Lys Asp Arg Lys Glu Ile Leu Asp Arg Arg Ser Lys Gly Arg Asp Leu
115                 120                 125
Ala Leu Gly Lys Asp Lys Gly Lys Tyr Thr Glu Asp Ser Thr Thr Ala
130                 135                 140
Met Asp Thr Ser
145
<210>  344
<211>  65
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  344
Met Glu Lys Pro Val Val Leu Ala Arg Val Ile Lys Ile Leu Gly Arg
1               5                   10                  15
Thr Gly Ser Gln Gly Gln Cys Thr Gln Val Lys Val Glu Phe Ile Gly
20                  25                  30
Glu Gln Asn Arg Gln Ile Ile Arg Asn Val Lys Gly Pro Val Arg Glu
35                  40                  45
Gly Asp Ile Leu Thr Leu Leu Glu Ser Glu Arg Glu Ala Arg Arg Leu
50                  55                  60
Arg
65
<210>  345
<211>  229
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  345
Leu Phe Tyr Phe Pro Phe Ser Arg Lys Trp Gly Asp Val Gln Arg Gly
1               5                   10                  15
Val Ile Gly Thr Val Lys Thr Ser His Thr Pro Lys Ser Arg Phe Cys
20                  25                  30
Arg Gly Val Pro Asp Pro Lys Ile Arg Ile Phe Asp Leu Gly Lys Lys
35                  40                  45
Lys Ala Arg Val Glu Asp Phe Pro Leu Cys Val His Leu Val Ser Asp
50                  55                  60
Glu Tyr Glu Gln Leu Ser Ser Glu Ala Leu Glu Ala Gly Arg Ile Cys
65                  70                  75                  80
Cys Asn Lys Tyr Leu Val Lys Asn Cys Gly Lys Asp Gln Phe His Ile
85                  90                  95
Arg Met Arg Leu His Pro Phe His Val Ile Arg Ile Asn Lys Met Leu
100                 105                 110
Ser Cys Ala Gly Ala Asp Arg Leu Gln Thr Gly Met Arg Gly Ala Phe
115                 120                 125
Gly Lys Pro Gln Gly Thr Val Ala Arg Val Arg Ile Gly Gln Pro Ile
130                 135                 140
Met Ser Val Arg Ser Ser Asp Arg Tyr Lys Ala Ala Val Ile Lys Ala
145                 150                 155                 160
Leu Arg Arg Ala Lys Phe Lys Phe Pro Gly Arg Gln Lys Ile Tyr Val
165                 170                 175
Ser Lys Lys Trp Gly Phe Thr Lys Phe Asp Arg Glu Glu Tyr Glu Gly
180                 185                 190
Leu Arg Asn Asp Asn Lys Leu Ala Asn Asp Gly Cys Asn Val Lys Leu
195                 200                 205
Arg Pro Asp His Gly Pro Leu Gln Ala Trp Arg Lys Ala Gln Leu Asp
210                 215                 220
Ile Ala Ala Gly Leu
225
<210>  346
<211>  220
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  346
Met Gly Arg Arg Pro Ala Arg Cys Tyr Arg Tyr Cys Lys Asn Lys Pro
1               5                   10                  15
Tyr Pro Lys Ser Arg Phe Cys Arg Gly Val Pro Asp Pro Lys Ile Arg
20                  25                  30
Ile Phe Asp Leu Gly Lys Lys Lys Ala Arg Val Glu Asp Phe Pro Leu
35                  40                  45
Cys Val His Leu Val Ser Asp Glu Tyr Glu Gln Leu Ser Ser Glu Ala
50                  55                  60
Leu Glu Ala Gly Arg Ile Cys Cys Asn Lys Tyr Leu Val Lys Asn Cys
65                  70                  75                  80
Gly Lys Asp Gln Phe His Ile Arg Met Arg Leu His Pro Phe His Val
85                  90                  95
Ile Arg Ile Asn Lys Met Leu Ser Cys Ala Gly Ala Asp Arg Leu Gln
100                 105                 110
Thr Gly Met Arg Gly Ala Phe Gly Lys Pro Gln Gly Thr Val Ala Arg
115                 120                 125
Val Arg Ile Gly Gln Pro Ile Met Ser Val Arg Ser Ser Asp Arg Tyr
130                 135                 140
Lys Ala Ala Val Ile Glu Ala Leu Arg Arg Ala Lys Phe Lys Phe Pro
145                 150                 155                 160
Gly Arg Gln Lys Ile Tyr Val Ser Lys Lys Trp Gly Phe Thr Lys Phe
165                 170                 175
Asp Arg Glu Glu Tyr Glu Gly Leu Arg Asn Asp Asn Lys Leu Ala Asn
180                 185                 190
Gly Gly Cys Asn Val Lys Leu Arg Pro Asp His Gly Pro Leu Gln Ala
195                 200                 205
Trp Arg Lys Ala Gln Leu Asp Ile Ala Ala Gly Leu
210                 215                 220
<210>  347
<211>  159
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  347
Met Thr Asn Ser Lys Gly Tyr Arg Arg Gly Thr Arg Asp Leu Phe Ser
1               5                   10                  15
Arg Pro Phe Arg His His Gly Val Ile Pro Leu Ser Thr Tyr Met Lys
20                  25                  30
Val Tyr Arg Val Gly Asp Ile Val Ser Ile Lys Gly Asn Gly Ala Val
35                  40                  45
Gln Lys Gly Met Pro His Lys Val Tyr His Gly Lys Thr Gly Arg Val
50                  55                  60
Tyr Asn Val Thr Pro Arg Ala Leu Gly Val Ile Val Asn Lys Arg Val
65                  70                  75                  80
Arg Gly Lys Ile Leu Pro Lys Arg Ile Asn Ile Arg Ile Glu His Val
85                  90                  95
Asn His Ser Lys Cys Arg Glu Asp Phe Leu Lys Arg Val Arg Glu Asn
100                 105                 110
Glu Arg Leu Arg Lys Phe Ala Lys Glu Thr Gly Thr Arg Val Glu Leu
115                 120                 125
Lys Arg Gln Pro Ala Gln Pro Arg Pro Ala His Phe Val Gln Ala Lys
130                 135                 140
Glu Val Pro Glu Leu Leu Ala Pro Ile Pro Tyr Glu Phe Ile Ala
145                 150                 155
<210>  348
<211>  131
<212>  БЕЛОК
<213>  Lygus hesperus
<400>  348
Thr Tyr Met Lys Val Tyr Arg Val Gly Asp Ile Val Ser Ile Lys Gly
1               5                   10                  15
Asn Gly Ala Val Gln Lys Gly Met Pro His Lys Val Tyr His Gly Lys
20                  25                  30
Thr Gly Arg Val Tyr Asn Val Thr Pro Arg Ala Leu Gly Val Ile Val
35                  40                  45
Asn Lys Arg Val Arg Gly Lys Ile Leu Pro Lys Arg Ile Asn Ile Arg
50                  55                  60
Ile Glu His Val Asn His Ser Lys Cys Arg Glu Asp Phe Leu Lys Arg
65                  70                  75                  80
Val Arg Glu Asn Glu Arg Leu Arg Lys Phe Ala Lys Glu Thr Gly Thr
85                  90                  95
Arg Val Glu Leu Lys Arg Gln Pro Ala Gln Pro Arg Pro Ala His Phe
100                 105                 110
Val Gln Ala Lys Glu Val Pro Glu Leu Leu Ala Pro Ile Pro Tyr Glu
115                 120                 125
Phe Ile Ala
130
<210>  349
<211>  150
<212>  БЕЛОК
<213>  leptinotarsa decemlineata
<400>  349
Lys Lys Ala Lys Lys Gly Phe Met Thr Pro Glu Arg Lys Lys Lys Leu
1               5                   10                  15
Arg Leu Leu Leu Arg Lys Lys Ala Ala Glu Glu Leu Lys Lys Glu Gln
20                  25                  30
Glu Arg Lys Ala Ala Glu Arg Arg Arg Ile Ile Glu Glu Arg Cys Gly
35                  40                  45
Lys Pro Lys Leu Ile Asp Glu Ala Asn Glu Glu Gln Val Arg Asn Tyr
50                  55                  60
Cys Lys Leu Tyr His Gly Arg Ile Ala Lys Leu Glu Asp Gln Lys Phe
65                  70                  75                  80
Asp Leu Glu Tyr Leu Val Lys Lys Lys Asp Met Glu Ile Ala Glu Leu
85                  90                  95
Asn Ser Gln Val Asn Asp Leu Arg Gly Lys Phe Val Lys Pro Thr Leu
100                 105                 110
Lys Lys Val Ser Lys Tyr Glu Asn Lys Phe Ala Lys Leu Gln Lys Lys
115                 120                 125
Ala Ala Glu Phe Asn Phe Arg Asn Gln Leu Lys Val Val Lys Lys Lys
130                 135                 140
Glu Phe Thr Leu Glu Glu
145                 150
<210>  350
<211>  279
<212>  БЕЛОК
<213>  leptinotarsa decemlineata
<400>  350
Gln Trp Tyr Gln Arg Arg Val Arg Gly Asp Ile Glu Glu Lys Arg Gln
1               5                   10                  15
Arg Leu Glu Glu Ala Glu Lys Lys Arg Gln Ala Met Met Gln Ala Leu
20                  25                  30
Lys Asp Gln Asn Lys Asn Lys Gly Pro Asn Phe Thr Ile Thr Lys Arg
35                  40                  45
Asp Ala Ser Ser Asn Leu Ser Ala Ala Gln Leu Glu Arg Asn Lys Thr
50                  55                  60
Lys Glu Gln Leu Glu Glu Glu Lys Lys Ile Ser Leu Ser Ile Arg Ile
65                  70                  75                  80
Lys Pro Leu Val Val Asp Gly Leu Gly Val Asp Lys Leu Arg Leu Lys
85                  90                  95
Ala Gln Glu Leu Trp Glu Cys Ile Val Lys Leu Glu Thr Glu Lys Tyr
100                 105                 110
Asp Leu Glu Glu Arg Gln Lys Arg Gln Asp Tyr Asp Leu Lys Glu Leu
115                 120                 125
Lys Glu Arg Gln Lys Gln Gln Leu Arg His Lys Ala Leu Lys Lys Gly
130                 135                 140
Leu Asp Pro Glu Ala Leu Thr Gly Lys Tyr Pro Pro Lys Ile Gln Val
145                 150                 155                 160
Ala Ser Lys Tyr Glu Arg Arg Val Asp Thr Arg Ser Tyr Gly Asp Lys
165                 170                 175
Lys Lys Leu Phe Glu Gly Gly Leu Glu Glu Ile Ile Lys Glu Thr Asn
180                 185                 190
Glu Lys Ser Trp Lys Glu Lys Phe Gly Gln Phe Asp Ser Arg Gln Lys
195                 200                 205
Ala Arg Leu Pro Lys Trp Phe Gly Glu Arg Pro Gly Lys Lys Pro Gly
210                 215                 220
Asp Pro Glu Thr Pro Glu Gly Glu Glu Glu Gly Lys Gln Val Ile Asp
225                 230                 235                 240
Glu Asp Asp Asp Leu Lys Glu Pro Val Ile Glu Ala Glu Ile Glu Glu
245                 250                 255
Glu Glu Glu Glu Glu Glu Val Glu Val Asp Glu Glu Glu Glu Asp Asp
260                 265                 270
Glu Glu Glu Glu Glu Glu Glu
275
<210>  351
<211>  286
<212>  БЕЛОК
<213>  leptinotarsa decemlineata
<400>  351
Ala Leu Gln Asn Glu Leu Glu Glu Ser Arg Thr Leu Leu Glu Gln Ala
1               5                   10                  15
Asp Arg Ala Arg Arg Gln Ala Glu Gln Glu Leu Gly Asp Ala His Glu
20                  25                  30
Gln Leu Asn Asp Leu Gly Ala Gln Asn Gly Ser Leu Ser Ala Ala Lys
35                  40                  45
Arg Lys Leu Glu Thr Glu Leu Gln Thr Leu His Ser Asp Leu Asp Glu
50                  55                  60
Leu Leu Asn Glu Ala Lys Asn Ser Glu Glu Lys Ala Lys Lys Ala Met
65                  70                  75                  80
Val Asp Ala Ala Arg Leu Ala Asp Glu Leu Arg Ala Glu Gln Asp His
85                  90                  95
Ala Gln Thr Gln Glu Lys Leu Arg Lys Ala Leu Glu Ser Gln Ile Lys
100                 105                 110
Asp Leu Gln Val Arg Leu Asp Glu Ala Glu Ala Asn Ala Leu Lys Gly
115                 120                 125
Gly Lys Lys Ala Ile Ala Lys Leu Glu Gln Arg Val Arg Glu Leu Glu
130                 135                 140
Asn Glu Leu Asp Gly Glu Gln Arg Arg His Ala Asp Ala Gln Lys Asn
145                 150                 155                 160
Leu Arg Lys Ser Glu Arg Arg Ile Lys Glu Leu Ser Leu Gln Ala Glu
165                 170                 175
Glu Asp Arg Lys Asn His Glu Lys Met Gln Asp Leu Val Asp Lys Leu
180                 185                 190
Gln Gln Lys Ile Lys Thr His Lys Arg Gln Ile Glu Glu Ala Glu Glu
195                 200                 205
Ile Ala Ala Leu Asn Leu Ala Lys Phe Arg Lys Ala Gln Gln Glu Leu
210                 215                 220
Glu Glu Ala Glu Glu Arg Ala Asp Leu Ala Glu Gln Ala Ile Val Lys
225                 230                 235                 240
Phe Arg Thr Lys Gly Arg Ser Gly Ser Ala Ala Arg Gly Ala Ser Pro
245                 250                 255
Ala Pro Gln Arg Gln Arg Pro Thr Phe Gly Met Gly Asp Ser Leu Gly
260                 265                 270
Gly Ala Phe Pro Pro Arg Phe Asp Leu Ala Pro Asp Phe Glu
275                 280                 285
<210>  352
<211>  197
<212>  БЕЛОК
<213>  nilaparvata lugens
<400>  352
Met Ala Asp Asp Glu Ala Lys Lys Ala Lys Gln Ala Glu Ile Asp Arg
1               5                   10                  15
Lys Arg Ala Glu Val Arg Lys Arg Met Glu Glu Ala Ser Lys Ala Lys
20                  25                  30
Lys Ala Lys Lys Gly Phe Met Thr Pro Asp Arg Lys Lys Lys Leu Arg
35                  40                  45
Leu Leu Leu Arg Lys Lys Ala Ala Glu Glu Leu Lys Lys Glu Gln Glu
50                  55                  60
Arg Lys Ala Ala Glu Arg Arg Arg Ile Ile Glu Glu Arg Cys Gly Lys
65                  70                  75                  80
Ala Val Asp Leu Asp Asp Gly Ser Glu Glu Lys Val Lys Ala Thr Leu
85                  90                  95
Lys Thr Tyr His Asp Arg Ile Gly Lys Leu Glu Asp Glu Lys Phe Asp
100                 105                 110
Leu Glu Tyr Ile Val Lys Lys Lys Asp Phe Glu Ile Ala Asp Leu Asn
115                 120                 125
Ser Gln Val Asn Asp Leu Arg Gly Lys Phe Val Lys Pro Thr Leu Lys
130                 135                 140
Lys Val Ser Lys Tyr Glu Asn Lys Phe Ala Lys Leu Gln Lys Lys Ala
145                 150                 155                 160
Ala Glu Phe Asn Phe Arg Asn Gln Leu Lys Val Val Lys Lys Lys Glu
165                 170                 175
Phe Thr Leu Glu Glu Glu Asp Lys Glu Pro Lys Lys Ser Glu Lys Ala
180                 185                 190
Glu Trp Gln Lys Lys
195
<210>  353
<211>  184
<212>  БЕЛОК
<213>  nilaparvata lugens
<400>  353
Met Met Ala Ala Leu Lys Asp Gln Ser Lys Ser Lys Gly Pro Asn Phe
1               5                   10                  15
Thr Val Asn Lys Lys Thr Asp Leu Asn Met Thr Ser Ala Gln Met Glu
20                  25                  30
Arg Asn Lys Thr Lys Glu Gln Leu Glu Glu Glu Lys Lys Ile Ser Leu
35                  40                  45
Ser Phe Arg Ile Lys Pro Leu Ala Ile Glu Asn Met Ser Ile Asn Ala
50                  55                  60
Leu Arg Ala Lys Ala Gln Glu Leu Trp Asp Cys Ile Val Lys Leu Glu
65                  70                  75                  80
Thr Glu Lys Tyr Asp Leu Glu Glu Arg Gln Lys Arg Gln Asp Tyr Asp
85                  90                  95
Leu Lys Glu Leu Lys Glu Arg Gln Lys Gln Gln Leu Arg His Lys Ala
100                 105                 110
Leu Lys Lys Gly Leu Asp Pro Glu Ala Leu Thr Gly Lys Tyr Pro Pro
115                 120                 125
Lys Ile Gln Val Ala Ser Lys Tyr Glu Arg Arg Val Asp Thr Arg Ser
130                 135                 140
Tyr Asp Asp Lys Lys Lys Leu Phe Glu Gly Gly Trp Asp Thr Leu Thr
145                 150                 155                 160
Ser Glu Thr Asn Glu Lys Ile Trp Lys Ser Arg Asn Asp Gln Phe Ser
165                 170                 175
Asn Arg Ser Lys Ala Lys Leu Pro
180
<210>  354
<211>  122
<212>  БЕЛОК
<213>  nilaparvata lugens
<400>  354
Ala Phe Asp Arg Glu Arg Ser Gly Ser Ile Pro Thr Asp Met Val Ala
1               5                   10                  15
Asp Ile Leu Arg Leu Met Gly Gln Pro Phe Asn Lys Lys Ile Leu Asp
20                  25                  30
Glu Leu Ile Glu Glu Val Asp Ala Asp Lys Ser Gly Arg Leu Glu Phe
35                  40                  45
Asp Glu Phe Val Thr Leu Ala Ala Lys Phe Ile Val Glu Glu Asp Asp
50                  55                  60
Glu Ala Met Gln Lys Glu Leu Lys Glu Ala Phe Arg Leu Tyr Asp Lys
65                  70                  75                  80
Glu Gly Asn Gly Tyr Ile Pro Thr Ser Cys Leu Lys Glu Ile Leu Arg
85                  90                  95
Glu Leu Asp Asp Gln Leu Thr Asn Glu Glu Leu Asn Met Met Ile Asp
100                 105                 110
Glu Ile Asp Ser Asp Gly Ser Gly Thr Val
115                 120
<210>  355
<211>  73
<212>  БЕЛОК
<213>  nilaparvata lugens
<400>  355
Val Lys Thr Leu Thr Gly Lys Thr Ile Thr Leu Glu Val Glu Pro Ser
1               5                   10                  15
Asp Thr Ile Glu Asn Val Lys Ala Lys Ile Gln Asp Lys Glu Gly Ile
20                  25                  30
Pro Pro Asp Gln Gln Arg Leu Ile Phe Ala Gly Lys Gln Leu Glu Asp
35                  40                  45
Gly Arg Thr Leu Ser Asp Tyr Asn Ile Gln Lys Glu Ser Thr Leu His
50                  55                  60
Leu Val Leu Arg Leu Arg Gly Gly Thr
65                  70
<210>  356
<211>  253
<212>  БЕЛОК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  356
Met Ala Asp Asp Glu Ala Lys Lys Ala Lys Gln Ala Glu Ile Asp Arg
1               5                   10                  15
Lys Arg Ala Glu Val Arg Lys Arg Met Glu Glu Ala Ser Lys Ala Lys
20                  25                  30
Lys Ala Lys Lys Gly Phe Met Thr Pro Asp Arg Lys Lys Lys Leu Arg
35                  40                  45
Leu Leu Leu Lys Lys Lys Ala Ala Glu Glu Leu Lys Lys Glu Gln Glu
50                  55                  60
Arg Lys Ala Ala Glu Arg Arg Arg Ile Ile Glu Glu Arg Cys Gly Gln
65                  70                  75                  80
Pro Lys Asn Ile Asp Asp Ala Gly Glu Glu Glu Leu Ala Glu Ile Cys
85                  90                  95
Glu Glu Leu Trp Lys Arg Val Tyr Thr Val Glu Gly Ile Lys Phe Asp
100                 105                 110
Leu Glu Arg Asp Ile Arg Met Lys Val Phe Glu Ile Ser Glu Leu Asn
115                 120                 125
Ser Gln Val Asn Asp Leu Arg Gly Lys Phe Val Lys Pro Thr Leu Lys
130                 135                 140
Lys Val Ser Lys Tyr Glu Asn Lys Phe Ala Lys Leu Gln Lys Lys Ala
145                 150                 155                 160
Ala Glu Phe Asn Phe Arg Asn Gln Leu Lys Val Val Lys Lys Lys Glu
165                 170                 175
Phe Thr Leu Glu Glu Glu Asp Lys Glu Lys Lys Pro Asp Trp Ser Lys
180                 185                 190
Lys Gly Asp Glu Lys Lys Gly Glu Gly Glu Asp Gly Asp Gly Thr Glu
195                 200                 205
Asp Glu Lys Thr Asp Asp Gly Leu Thr Thr Glu Gly Glu Ser Val Ala
210                 215                 220
Gly Asp Leu Thr Asp Ala Thr Glu Asp Ala Gln Ser Asp Asn Glu Ile
225                 230                 235                 240
Leu Glu Pro Glu Pro Val Val Glu Pro Glu Pro Glu Pro
245                 250
<210>  357
<211>  179
<212>  БЕЛОК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  357
Val Met Arg Cys Gly Lys Lys Lys Val Trp Leu Asp Pro Asn Glu Ile
1               5                   10                  15
Asn Glu Ile Ala Asn Thr Asn Ser Arg Gln Asn Ile Arg Lys Leu Ile
20                  25                  30
Lys Asp Gly Leu Ile Ile Lys Lys Pro Val Ala Val His Ser Arg Ala
35                  40                  45
Arg Ala Arg Lys Asn Ala Asp Ala Arg Arg Lys Gly Arg His Cys Gly
50                  55                  60
Phe Gly Lys Arg Lys Gly Thr Ala Asn Ala Arg Thr Pro Gln Lys Asp
65                  70                  75                  80
Leu Trp Val Lys Arg Met Arg Val Leu Arg Arg Leu Leu Lys Lys Tyr
85                  90                  95
Arg Glu Ala Lys Lys Ile Asp Asn His Leu Tyr His Gln Leu Tyr Met
100                 105                 110
Lys Ala Lys Gly Asn Val Phe Lys Asn Lys Arg Val Leu Met Glu Phe
115                 120                 125
Ile His Lys Lys Lys Ala Glu Lys Ala Arg Ala Lys Met Leu Ser Asp
130                 135                 140
Gln Ala Glu Ala Arg Arg Gln Lys Val Lys Glu Ala Arg Lys Arg Lys
145                 150                 155                 160
Glu Ala Arg Phe Leu Gln Asn Arg Lys Glu Leu Leu Ala Ala Tyr Ala
165                 170                 175
Arg Glu Asp
<210>  358
<211>  275
<212>  БЕЛОК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  358
Gly Leu Glu Val Glu Ser Ser Asp Ser Ile Glu Asn Val Lys Ala Lys
1               5                   10                  15
Ile Gln Asp Lys Glu Gly Ile Pro Pro Asp Gln Gln Arg Leu Ile Phe
20                  25                  30
Ala Gly Lys Gln Leu Glu Asp Gly Arg Thr Leu Ser Asp Tyr Asn Ile
35                  40                  45
Gln Lys Glu Ser Thr Leu His Leu Val Leu Arg Leu Arg Gly Gly Met
50                  55                  60
Gln Ile Phe Val Lys Thr Leu Thr Gly Lys Thr Ile Thr Leu Glu Val
65                  70                  75                  80
Glu Ser Ser Asp Ser Ile Glu Asn Val Lys Ala Lys Ile Gln Asp Lys
85                  90                  95
Glu Gly Ile Pro Pro Asp Gln Gln Arg Leu Ile Phe Ala Gly Lys Gln
100                 105                 110
Leu Glu Asp Gly Arg Thr Leu Ser Asp Tyr Asn Ile Gln Lys Glu Ser
115                 120                 125
Thr Leu His Leu Val Leu Arg Leu Arg Gly Gly Met Gln Ile Phe Val
130                 135                 140
Lys Thr Leu Thr Gly Lys Thr Ile Thr Leu Glu Val Glu Ser Ser Asp
145                 150                 155                 160
Ser Ile Glu Asn Val Lys Ala Lys Ile Gln Asp Lys Glu Gly Ile Pro
165                 170                 175
Pro Asp Gln Gln Arg Leu Ile Phe Ala Gly Lys Gln Leu Glu Asp Gly
180                 185                 190
Arg Thr Leu Ser Asp Tyr Asn Ile Gln Lys Glu Ser Thr Leu His Leu
195                 200                 205
Val Leu Arg Leu Arg Gly Gly Met Gln Ile Phe Val Lys Thr Leu Thr
210                 215                 220
Gly Lys Thr Ile Thr Leu Glu Val Glu Ser Ser Asp Ser Ile Glu Asn
225                 230                 235                 240
Val Lys Ala Lys Ile Gln Asp Lys Glu Gly Ile Pro Pro Asp Gln Gln
245                 250                 255
Arg Leu Ile Phe Ala Gly Lys Gln Leu Glu Asp Gly Arg Thr Leu Ser
260                 265                 270
Asp Tyr Asn
275
<210>  359
<211>  56
<212>  БЕЛОК
<213>  Acyrthosiphon pisum
<400>  359
Asp Leu Leu His Pro Thr Ala Ile Glu Glu Arg Arg Lys His Lys Leu
1               5                   10                  15
Lys Arg Leu Val Gln His Pro Asn Ser Phe Phe Met Asp Val Lys Cys
20                  25                  30
Pro Gly Cys Tyr Lys Ile Thr Thr Val Phe Ser His Ala Gln Ser Val
35                  40                  45
Val Ile Cys Thr Gly Cys Ser Thr
50                  55
<210>  360
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  360
atcatgcagg cgtacgcccg                                                   20
<210>  361
<211>  19
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  361
cggagggggc gagatcact                                                    19
<210>  362
<211>  62
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Ампликон
<400>  362
atcatgcagg cgtacgcccg agaagacgag gctgccgtca aaaagtgatc tcgccccctc       60
cg                                                                      62
<210>  363
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  363
tgtgttggct actggtggct ac                                                22
<210>  364
<211>  25
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  364
tcggatggaa ctggacaaat tcaag                                             25
<210>  365
<211>  137
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Ампликон
<400>  365
tgtgttggct actggtggct acggcagagc ttacttttca tgcacttcag ctcacacttg       60
cacgggagat ggccaagcaa tggtttcacg agctgggctt cccaacgaag atcttgaatt      120
tgtccagttc catccga                                                     137
<210>  366
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  366
gcaacccgtg ttctccaaag c                                                 21
<210>  367
<211>  28
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  367
tcaactcgta ttctcgtact ttcaaacc                                          28
<210>  368
<211>  146
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Ампликон
<400>  368
gcaacccgtg ttctccaaag ccagatacac tgtgcgatcc ttcggtatca ggcgtaacga       60
aaaaatcgcc gttcactgca ctgtcagggg cgccaaagca gaggaaattc tggagcgtgg      120
tttgaaagta cgagaatacg agttga                                           146
<210>  369
<211>  21
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  369
atggccgacg atgaagctaa g                                                 21
<210>  370
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  370
tggttctggt tcgggttcaa                                                   20
<210>  371
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  371
cggtaatgcg atgcggtaag                                                   20
<210>  372
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  372
tcatcttctc gggcgtatgc                                                   20
<210>  373
<211>  25
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  373
tttggaagtt gagtcatcag attcc                                             25
<210>  374
<211>  24
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  374
gttgtagtcg gaaagggtac gtcc                                              24
<210>  375
<211>  20
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  375
attgtggaac atccggtaca                                                   20
<210>  376
<211>  23
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  376
aagacttgct tcatcctact gca                                               23
<210>  377
<211>  28
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<220>
<221>  иной_признак
<222>  (20)..(20)
<223>  n представляет собой a, c, g или t
<400>  377
ccaagaaggc caagaagggn ttyatgac                                          28
<210>  378
<211>  29
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  378
tcctcctcca gggtgaactc yttyttytt                                         29
<210>  379
<211>  26
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<220>
<221>  иной_признак
<222>  (21)..(21)
<223>  n представляет собой a, c, g или t
<220>
<221>  иной_признак
<222>  (24)..(24)
<223>  n представляет собой a, c, g или t
<400>  379
gccaagaagg gcttcatgac nccnga                                            26
<210>  380
<211>  27
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  380
gaagttgaac tcggcggcyt tyttytg                                           27
<210>  381
<211>  26
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<220>
<221>  иной_признак
<222>  (24)..(24)
<223>  n представляет собой a, c, g или t
<400>  381
ctggaggagg ccgagaaraa rmgnca                                            26
<210>  382
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<220>
<221>  иной_признак
<222>  (14)..(14)
<223>  n представляет собой a, c, g или t
<400>  382
tgccgggccg ctcnccraac ca                                                22
<210>  383
<211>  28
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<220>
<221>  иной_признак
<222>  (20)..(20)
<223>  n представляет собой a, c, g или t
<220>
<221>  иной_признак
<222>  (23)..(23)
<223>  n представляет собой a, c, g или t
<400>  383
agatcgccat cctgaggaan gcnttyra                                          28
<210>  384
<211>  31
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  384
cggtcatcat ctccatgaac tcrtcraart c                                      31
<210>  385
<211>  170
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Интрон
<400>  385
tctagaaggt aagtgtacac actacatttt catgaacatt attgcgaccg ttgagattct       60
cattgtttgg tgattgatta tctaaagtag aagcatgaat agatataaca taaactagta      120
actaatgggt tagttatggg tatacttcat gcttttctct caggctcgag                 170
<210>  386
<211>  521
<212>  ДНК
<213>  leptinotarsa decemlineata
<400>  386
tcgatttttc atttttcttt tattatttgg agtgggcctg ttgtggtcgt tatcaaaatg       60
ggtaaaataa tgaaatctgg taaagtcgta ttggtccttg gaggccgata cgctggaaga      120
aaggcagtag tcataaaaaa ttacgatgat gggacgtcag ataaacaata tggacatgcc      180
gtggtggctg gaatcgatag gtaccctaga aaaatccaca aacgtatggg caaaggaaaa      240
atgcacaaga ggtccaaaat caagcccttc cttaaggtgc tcaactataa ccatttgatg      300
cctacaagat attcagtgga tttgacttcg gacttgaaag tggcgcccaa agacctcaag      360
gatccagtga agaggaagaa gattaggttc caaaccagag ttaaattcga agagagatac      420
aagcaaggaa aacacaaatg gtttttccag aaattgaggt tctagattct ataaatttaa      480
ccattttgta atccacccac ctttttgttc aaataaattg t                          521
<210>  387
<211>  475
<212>  ДНК
<213>  leptinotarsa decemlineata
<400>  387
tatcgcgaaa aatatacaac ttacaaaatg aggaacacgt atgagttgag ccctaaagaa       60
gcagcaaatt tcactcgtcg aaatttagca gatactcttc gaagcaggag tccatatcat      120
gttaatcttc tcttggctgg atatgacaag aaagacgggg ctcagttgta ttacatggat      180
tatctagcgt ctgttgctag tgttgattac gctgcccatg gatacggagg atatttctcc      240
ctttccataa tggatcgcaa ttatttgaaa accctgtcga aagatcaagg atacgaactt      300
ctgaaggaat gtgttaaaga agttcaaaag agacttgcta taaatttacc aaatttcaaa      360
gttcaggtta ttgataaaga tggtattaag gatatgccta atataacttc aaaaggtttg      420
aattgattaa gcaacttcag tttcagattt ttttctaaat aaacatttaa agtgt           475
<210>  388
<211>  467
<212>  ДНК
<213>  leptinotarsa decemlineata
<400>  388
gcggggactg gatacatctc taaaacacag aaaaatgaaa ttcttcaagt caggaatata       60
ttctgttgta tttttggcaa ttatattttc tttggtcact gaggaagtgg aaggtcgaag      120
gactatttta agagggcgta aaacactgac gagaacctat tttcgtgaca atgcagtccc      180
agcatacgtc atagtgatac tcgttggaat aggagaaatc attttgggag ctatcctgta      240
tgttataatg aggaaaacga taatagattt tcctttatca gggagttacg cagtggcccc      300
tactcaagaa gcataaatcc cattgaaatt gtgactgttt actttctttg gaaaaatgtg      360
tataataaat acaattcatt tataatattt atatttggaa cttaaaatac ttacaaaatt      420
accatttaca tgatcaaata actaataaag ttctgtctca attataa                    467
<210>  389
<211>  906
<212>  ДНК
<213>  leptinotarsa decemlineata
<400>  389
ggattggaag taaaaatata caattcatgc tgtagctgta gtgtaaaaac tgaactgaaa       60
gccataaaat aaagaccttg caagaaacat gtccaagatt aatgaggtgt ctaatttgta      120
caaacaactg aaatcagaat ggaacacatc caatccaaat ttaagcaaat gtgaaaagct      180
tttgtcagat ttgaagcttg agctaacaca cttaatgttc cttccaactt caaacgccac      240
tgcttcaaaa caagaacttc ttctggcaag agatgttctg gaaattgggg tacaatggag      300
tatagctgca aatgatatac ctgcctttga aagatacatg gcacagttga aatgttatta      360
tttcgattat aagaatcaac ttcccgaatc ttctttcaaa tatcagttac tgggtctgaa      420
tttactattt ttgttatcac aaaatagagt ggcagagttc cacacagaat tagaattgtt      480
gcctgctgac cacattcaga atgatgtata catcaggcac cctccatcta ttgaacagta      540
ccttatggaa ggaagttata ataagatatt tctggcaaag ggaaatgtcc cagcaacaaa      600
ttacaatttt tttatggata tacttctaga tactatcaga ggggagattg cagattgtct      660
agagaaagca tatgaaaaaa tatcaattaa agatgttgct aggatgctat acttgggcag      720
tgaagaatcg gccaaggcct ttgtaacaaa gagtaagaca tggaaattag aaaaggacaa      780
cttctttcac ttcacgcccg aggttaaaaa gacacatgag ccaattctat ccaaagaatt      840
ggcacaacaa gctattgaat atgcaaaaga actggaaatg attgtttaaa gtaataaagt      900
ttttca                                                                 906
<210>  390
<211>  135
<212>  БЕЛОК
<213>  leptinotarsa decemlineata
<400>  390
Met Gly Lys Ile Met Lys Ser Gly Lys Val Val Leu Val Leu Gly Gly
1               5                   10                  15
Arg Tyr Ala Gly Arg Lys Ala Val Val Ile Lys Asn Tyr Asp Asp Gly
20                  25                  30
Thr Ser Asp Lys Gln Tyr Gly His Ala Val Val Ala Gly Ile Asp Arg
35                  40                  45
Tyr Pro Arg Lys Ile His Lys Arg Met Gly Lys Gly Lys Met His Lys
50                  55                  60
Arg Ser Lys Ile Lys Pro Phe Leu Lys Val Leu Asn Tyr Asn His Leu
65                  70                  75                  80
Met Pro Thr Arg Tyr Ser Val Asp Leu Thr Ser Asp Leu Lys Val Ala
85                  90                  95
Pro Lys Asp Leu Lys Asp Pro Val Lys Arg Lys Lys Ile Arg Phe Gln
100                 105                 110
Thr Arg Val Lys Phe Glu Glu Arg Tyr Lys Gln Gly Lys His Lys Trp
115                 120                 125
Phe Phe Gln Lys Leu Arg Phe
130                 135
<210>  391
<211>  141
<212>  БЕЛОК
<213>  leptinotarsa decemlineata
<400>  391
Tyr Arg Glu Lys Tyr Thr Thr Tyr Lys Met Arg Asn Thr Tyr Glu Leu
1               5                   10                  15
Ser Pro Lys Glu Ala Ala Asn Phe Thr Arg Arg Asn Leu Ala Asp Thr
20                  25                  30
Leu Arg Ser Arg Ser Pro Tyr His Val Asn Leu Leu Leu Ala Gly Tyr
35                  40                  45
Asp Lys Lys Asp Gly Ala Gln Leu Tyr Tyr Met Asp Tyr Leu Ala Ser
50                  55                  60
Val Ala Ser Val Asp Tyr Ala Ala His Gly Tyr Gly Gly Tyr Phe Ser
65                  70                  75                  80
Leu Ser Ile Met Asp Arg Asn Tyr Leu Lys Thr Leu Ser Lys Asp Gln
85                  90                  95
Gly Tyr Glu Leu Leu Lys Glu Cys Val Lys Glu Val Gln Lys Arg Leu
100                 105                 110
Ala Ile Asn Leu Pro Asn Phe Lys Val Gln Val Ile Asp Lys Asp Gly
115                 120                 125
Ile Lys Asp Met Pro Asn Ile Thr Ser Lys Gly Leu Asn
130                 135                 140
<210>  392
<211>  104
<212>  БЕЛОК
<213>  leptinotarsa decemlineata
<400>  392
Arg Gly Leu Asp Thr Ser Leu Lys His Arg Lys Met Lys Phe Phe Lys
1               5                   10                  15
Ser Gly Ile Tyr Ser Val Val Phe Leu Ala Ile Ile Phe Ser Leu Val
20                  25                  30
Thr Glu Glu Val Glu Gly Arg Arg Thr Ile Leu Arg Gly Arg Lys Thr
35                  40                  45
Leu Thr Arg Thr Tyr Phe Arg Asp Asn Ala Val Pro Ala Tyr Val Ile
50                  55                  60
Val Ile Leu Val Gly Ile Gly Glu Ile Ile Leu Gly Ala Ile Leu Tyr
65                  70                  75                  80
Val Ile Met Arg Lys Thr Ile Ile Asp Phe Pro Leu Ser Gly Ser Tyr
85                  90                  95
Ala Val Ala Pro Thr Gln Glu Ala
100
<210>  393
<211>  266
<212>  БЕЛОК
<213>  leptinotarsa decemlineata
<400>  393
Met Ser Lys Ile Asn Glu Val Ser Asn Leu Tyr Lys Gln Leu Lys Ser
1               5                   10                  15
Glu Trp Asn Thr Ser Asn Pro Asn Leu Ser Lys Cys Glu Lys Leu Leu
20                  25                  30
Ser Asp Leu Lys Leu Glu Leu Thr His Leu Met Phe Leu Pro Thr Ser
35                  40                  45
Asn Ala Thr Ala Ser Lys Gln Glu Leu Leu Leu Ala Arg Asp Val Leu
50                  55                  60
Glu Ile Gly Val Gln Trp Ser Ile Ala Ala Asn Asp Ile Pro Ala Phe
65                  70                  75                  80
Glu Arg Tyr Met Ala Gln Leu Lys Cys Tyr Tyr Phe Asp Tyr Lys Asn
85                  90                  95
Gln Leu Pro Glu Ser Ser Phe Lys Tyr Gln Leu Leu Gly Leu Asn Leu
100                 105                 110
Leu Phe Leu Leu Ser Gln Asn Arg Val Ala Glu Phe His Thr Glu Leu
115                 120                 125
Glu Leu Leu Pro Ala Asp His Ile Gln Asn Asp Val Tyr Ile Arg His
130                 135                 140
Pro Pro Ser Ile Glu Gln Tyr Leu Met Glu Gly Ser Tyr Asn Lys Ile
145                 150                 155                 160
Phe Leu Ala Lys Gly Asn Val Pro Ala Thr Asn Tyr Asn Phe Phe Met
165                 170                 175
Asp Ile Leu Leu Asp Thr Ile Arg Gly Glu Ile Ala Asp Cys Leu Glu
180                 185                 190
Lys Ala Tyr Glu Lys Ile Ser Ile Lys Asp Val Ala Arg Met Leu Tyr
195                 200                 205
Leu Gly Ser Glu Glu Ser Ala Lys Ala Phe Val Thr Lys Ser Lys Thr
210                 215                 220
Trp Lys Leu Glu Lys Asp Asn Phe Phe His Phe Thr Pro Glu Val Lys
225                 230                 235                 240
Lys Thr His Glu Pro Ile Leu Ser Lys Glu Leu Ala Gln Gln Ala Ile
245                 250                 255
Glu Tyr Ala Lys Glu Leu Glu Met Ile Val
260                 265
<210>  394
<211>  750
<212>  ДНК
<213>  Leptinotarsa decemlineata
<400>  394
cgcccagcag tggtatcaac gcagagtacg cgggagacat tcaagtcttg tgatagtgca       60
ggcacggcag ttcaaataaa ctggtgcctt caatttattt atatatttat acttttttac      120
tagaaaccaa atactaacca atcaacatgt gtgacgaaga ggttgccgca ttagtcgtag      180
acaatggatc tggtatgtgc aaagctggat ttgctgggga tgatgccccc cgtgcagttt      240
tcccatccat tgttggtcgt ccaagacatc aaggagttat ggtaggaatg ggccaaaagg      300
actcgtatgt aggagatgaa gcccaaagca aaagaggtat ccttaccttg aaatacccca      360
ttgaacacgg tattgtcaca aactgggatg atatggagaa aatctggcac cataccttct      420
acaatgaact tcgagttgcc cccgaagagc accctgtttt gttgacagag gcaccattga      480
accccaaagc caacagggag aagatgaccc agatcatgtt tgaaaccttc aatacccccg      540
ccatgtacgt cgccatccaa gctgtattgt ctctgtatgc ttctggtcgt acaactggta      600
ttgtgctgga ttctggagat ggtgtttctc acacagtacc aatctatgaa ggttatgccc      660
ttcctcatgc catccttcgt ttggacttgg ctggtagaga cttgactgat taccttatga      720
aaattctgac tgaacgtggt tactctttca                                       750
<210>  395
<211>  204
<212>  БЕЛОК
<213>  Leptinotarsa decemlineata
<400>  395
Pro Ile Asn Met Cys Asp Glu Glu Val Ala Ala Leu Val Val Asp Asn
1               5                   10                  15
Gly Ser Gly Met Cys Lys Ala Gly Phe Ala Gly Asp Asp Ala Pro Arg
20                  25                  30
Ala Val Phe Pro Ser Ile Val Gly Arg Pro Arg His Gln Gly Val Met
35                  40                  45
Val Gly Met Gly Gln Lys Asp Ser Tyr Val Gly Asp Glu Ala Gln Ser
50                  55                  60
Lys Arg Gly Ile Leu Thr Leu Lys Tyr Pro Ile Glu His Gly Ile Val
65                  70                  75                  80
Thr Asn Trp Asp Asp Met Glu Lys Ile Trp His His Thr Phe Tyr Asn
85                  90                  95
Glu Leu Arg Val Ala Pro Glu Glu His Pro Val Leu Leu Thr Glu Ala
100                 105                 110
Pro Leu Asn Pro Lys Ala Asn Arg Glu Lys Met Thr Gln Ile Met Phe
115                 120                 125
Glu Thr Phe Asn Thr Pro Ala Met Tyr Val Ala Ile Gln Ala Val Leu
130                 135                 140
Ser Leu Tyr Ala Ser Gly Arg Thr Thr Gly Ile Val Leu Asp Ser Gly
145                 150                 155                 160
Asp Gly Val Ser His Thr Val Pro Ile Tyr Glu Gly Tyr Ala Leu Pro
165                 170                 175
His Ala Ile Leu Arg Leu Asp Leu Ala Gly Arg Asp Leu Thr Asp Tyr
180                 185                 190
Leu Met Lys Ile Leu Thr Glu Arg Gly Tyr Ser Phe
195                 200
<210>  396
<211>  44
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  396
gcgtaatacg actcactata ggatgtgtga cgaagaggtt gccg                        44
<210>  397
<211>  24
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  397
gtcaacaaaa cagggtgctc ttcg                                              24
<210>  398
<211>  22
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  398
atgtgtgacg aagaggttgc cg                                                22
<210>  399
<211>  46
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Праймер
<400>  399
gcgtaatacg actcactata gggtcaacaa aacagggtgc tcttcg                      46
<210>  400
<211>  320
<212>  ДНК
<213>  Leptinotarsa decemlineata
<400>  400
atgtgtgacg aagaggttgc cgcattagtc gtagacaatg gatctggtat gtgcaaagct       60
ggatttgctg gggatgatgc cccccgtgca gttttcccat ccattgttgg tcgtccaaga      120
catcaaggag ttatggtagg aatgggccaa aaggactcgt atgtaggaga tgaagcccaa      180
agcaaaagag gtatccttac cttgaaatac cccattgaac acggtattgt cacaaactgg      240
gatgatatgg agaaaatctg gcaccatacc ttctacaatg aacttcgagt tgcccccgaa      300
gagcaccctg ttttgttgac                                                  320
<210>  401
<211>  1152
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Шпилька
<400>  401
tgacgacctt gagttggttt ctgaagttga actcggcagc cttcttctgg agcttggcga       60
atttgttttc gtacttggaa acctttttca aggtaggttt gacgaattta ccacggaggt      120
cgttgacctg gctgttgagg tcggcgatct caaggtcacg tctctccact tcgaattcga      180
tgtcaatttt actcctctcc agagcgtcaa ttcgcttatg gtagtctgtg cagagtttct      240
tcaaggttgc ttcattggcg ttgtcgacgt cggcaatttg cccgcagcgc tcctcaatcg      300
ttcgcctcct ctcagctgct ttgcgttcct gctccttctt cagttcctca gcggcttttt      360
tcctcagcag gagtcggagt ttcttcttcc tttccggggt catgaaaccc ttcttggctt      420
tcttcgcctt agaggcttcc tccatcctct tgcgcacttc agcgcgcttc ctctcgattt      480
cggcctgttt gtctagaagg taagtgtaca cactacattt tcatgaacat tattgcgacc      540
gttgagattc tcattgtttg gtgattgatt atctaaagta gaagcatgaa tagatataac      600
ataaactagt aactaatggg ttagttatgg gtatacttca tgcttttctc tcaggctcga      660
gcaaacaggc cgaaatcgag aggaagcgcg ctgaagtgcg caagaggatg gaggaagcct      720
ctaaggcgaa gaaagccaag aagggtttca tgaccccgga aaggaagaag aaactccgac      780
tcctgctgag gaaaaaagcc gctgaggaac tgaagaagga gcaggaacgc aaagcagctg      840
agaggaggcg aacgattgag gagcgctgcg ggcaaattgc cgacgtcgac aacgccaatg      900
aagcaacctt gaagaaactc tgcacagact accataagcg aattgacgct ctggagagga      960
gtaaaattga catcgaattc gaagtggaga gacgtgacct tgagatcgcc gacctcaaca     1020
gccaggtcaa cgacctccgt ggtaaattcg tcaaacctac cttgaaaaag gtttccaagt     1080
acgaaaacaa attcgccaag ctccagaaga aggctgccga gttcaacttc agaaaccaac     1140
tcaaggtcgt ca                                                         1152
<210>  402
<211>  1192
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Шпилька
<400>  402
ctcttgcttc ttggtggcga tcctctcctc gcgcctcttc ttcgcctcct tgaccttgag       60
acgtctcgcc tctgcctggt ccttcaacat ctttgatctc gccttttcag ccttcttctt      120
gtgaatgaag tccatcagta ccctcttgtt tttgaagacg ttacctttgg ctttcatgta      180
aaggtcgtgg tacatttgcc tatcgatctt cttggcttct ctgtattttt taaggagccg      240
tcgcaggact ctcattctgt tgacccacag gaccttcaca ggcattctgg cgttggcggt      300
acccttcctc ttaccgaagc cacagtgacg acccttccgt ctggcttctg tgtttttacg      360
gacgcgggct ctggagtgga cagccacagg ctttttgatg atcaaaccat ccttgatcag      420
cttacggatg ttttgcctag agttggtgtt ggcgatttcg ttgatttcat tagggtccaa      480
ccacactttc ttcttgccgc atctcatcac ctctagaagg taagtgtaca cactacattt      540
tcatgaacat tattgcgacc gttgagattc tcattgtttg gtgattgatt atctaaagta      600
gaagcatgaa tagatataac ataaactagt aactaatggg ttagttatgg gtatacttca      660
tgcttttctc tcaggctcga gggtgatgag atgcggcaag aagaaagtgt ggttggaccc      720
taatgaaatc aacgaaatcg ccaacaccaa ctctaggcaa aacatccgta agctgatcaa      780
ggatggtttg atcatcaaaa agcctgtggc tgtccactcc agagcccgcg tccgtaaaaa      840
cacagaagcc agacggaagg gtcgtcactg tggcttcggt aagaggaagg gtaccgccaa      900
cgccagaatg cctgtgaagg tcctgtgggt caacagaatg agagtcctgc gacggctcct      960
taaaaaatac agagaagcca agaagatcga taggcaaatg taccacgacc tttacatgaa     1020
agccaaaggt aacgtcttca aaaacaagag ggtactgatg gacttcattc acaagaagaa     1080
ggctgaaaag gcgagatcaa agatgttgaa ggaccaggca gaggcgagac gtctcaaggt     1140
caaggaggcg aagaagaggc gcgaggagag gatcgccacc aagaagcaag ag             1192
<210>  403
<211>  792
<212>  ДНК
<213>  Искусственная
<220>
<223>  Шпилька
<400>  403
actctgtctg gcttttggct gtgacgcaca gttcatagag ataaccttca cccgaatatg       60
ccttgcgagg tcgcaaaatc ggcgaaattc catacctgtt caccgacgac ggcgctggat      120
caattccaca gttttcgcga tccagactga atgcccacag gccgtcgagt tttttgattt      180
cagatacgta cacttttccc ggcaataaca tacggcgtga catcggcttc aaatggcgta      240
tagccgccct gatgctccat cacactttgc cgtaatgagt gaccgcatcg aaacgcagca      300
cgatacgctg gtctagaagg taagtgtaca cactacattt tcatgaacat tattgcgacc      360
gttgagattc tcattgtttg gtgattgatt atctaaagta gaagcatgaa tagatataac      420
ataaactagt aactaatggg ttagttatgg gtatacttca tgcttttctc tcaggctcga      480
gccagcgtat cgtgctgcgt ttcgatgcgg tcactcatta cggcaaagtg tgatggagca      540
tcagggcggc tatacgccat ttgaagccga tgtcacgccg tatgttattg ccgggaaaag      600
tgtacgtatc tgaaatcaaa aaactcgacg gcctgtgggc attcagtctg gatcgcgaaa      660
actgtggaat tgatccagcg ccgtcgtcgg tgaacaggta tggaatttcg ccgattttgc      720
gacctcgcaa ggcatattcg ggtgaaggtt atctctatga actgtgcgtc acagccaaaa      780
gccagacaga gt                                                          792
<210>  404
<211>  839
<212>  ДНК
<213>  leptinotarsa decemlineata
<400>  404
cagtcagcac cgagtccttg ttgactgctc acattttcca tcgtttctac cagaacaaca       60
gcaacaactt tcatcatggc ggacgacgag gaaaagagga ggaaacaagc ggaaattgaa      120
cgcaagaggg ctgaggtcag ggctcgcatg gaagaggcct ccaaggccaa aaaagccaag      180
aaaggtttca tgacccctga gaggaagaag aaacttaggt tattgctgag aaagaaagca      240
gcagaagaac tgaaaaaaga acaagaacgc aaagctgccg aaaggcgtat tattgaagag      300
agatgcggaa aaccaaaact cattgatgag gcaaatgaag agcaggtgag gaactattgc      360
aagttatatc acggtagaat agctaaactg gaggaccaga aatttgattt ggaatacctt      420
gtcaaaaaga aagacatgga gatcgccgaa ttgaacagtc aagtcaacga cctcaggggt      480
aaattcgtca aacccactct caagaaagta tccaaatacg agaacaaatt tgctaaactc      540
caaaagaaag cagcagaatt caatttccgt aatcaactga aagttgtaaa gaagaaggag      600
ttcaccctgg aggaggaaga caaagaaaag aagcccgatt ggtcgaagaa gggagacgaa      660
aagaaggtac aagaagtgga agcatgatct gtccctacaa tttaatattt cccttcgtcc      720
gtggaaattt tacaacttaa gatatattta ttttattcgc ttcttatgag actatgaaag      780
tgatgtctgc atgtatatta ttcgttttat gtatgtatta aaaaaagaac ttgattgaa       839
<210>  405
<211>  203
<212>  БЕЛОК
<213>  leptinotarsa decemlineata
<400>  405
Met Ala Asp Asp Glu Glu Lys Arg Arg Lys Gln Ala Glu Ile Glu Arg
1               5                   10                  15
Lys Arg Ala Glu Val Arg Ala Arg Met Glu Glu Ala Ser Lys Ala Lys
20                  25                  30
Lys Ala Lys Lys Gly Phe Met Thr Pro Glu Arg Lys Lys Lys Leu Arg
35                  40                  45
Leu Leu Leu Arg Lys Lys Ala Ala Glu Glu Leu Lys Lys Glu Gln Glu
50                  55                  60
Arg Lys Ala Ala Glu Arg Arg Ile Ile Glu Glu Arg Cys Gly Lys Pro
65                  70                  75                  80
Lys Leu Ile Asp Glu Ala Asn Glu Glu Gln Val Arg Asn Tyr Cys Lys
85                  90                  95
Leu Tyr His Gly Arg Ile Ala Lys Leu Glu Asp Gln Lys Phe Asp Leu
100                 105                 110
Glu Tyr Leu Val Lys Lys Lys Asp Met Glu Ile Ala Glu Leu Asn Ser
115                 120                 125
Gln Val Asn Asp Leu Arg Gly Lys Phe Val Lys Pro Thr Leu Lys Lys
130                 135                 140
Val Ser Lys Tyr Glu Asn Lys Phe Ala Lys Leu Gln Lys Lys Ala Ala
145                 150                 155                 160
Glu Phe Asn Phe Arg Asn Gln Leu Lys Val Val Lys Lys Lys Glu Phe
165                 170                 175
Thr Leu Glu Glu Glu Asp Lys Glu Lys Lys Pro Asp Trp Ser Lys Lys
180                 185                 190
Gly Asp Glu Lys Lys Val Gln Glu Val Glu Ala
195                 200
<---