Влияние предуктала на развитие и течение экспериментальной острой почечной недостаточности

Это может сопровождаться увеличением концентрации энергозависимого кальция в цитоплазме, ингибированием активности дыхательных ферментов и как следствие — повреждением ци-тоскелета с последующим нарушением межклеточных контактов и связей в базальной мембране.

Необходимо отметить, что снижение активности ЩФ в апикальных отделах клеток эпителия и проксимальных, и дистальных канальцев приводит к транзиторной блокаде реабсорбции белка.

Таким образом, нефротоксический эффект яда гадюки обыкновенной проявляется не только нарушением функции, но и значительными изменениями структурных компонентов почечных канальцев.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Обнаруженные структурно-функциональные изменения почек экспериментальных животных указывают на наличие нефротоксического действия яда гадюки обыкновенной, которое может проявляться как прямым воздействием на ферментные системы митохондрий и цитоплазмы, так и опосредованно в связи с нарушениями микроциркуляции.

Установленный факт нефротоксического воздействия необходимо учитывать при выборе препаратов для лечения отравлений ядом гадюки.

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК

1. Бабаханян Р.В., Ливанов Г.И., Сосюкин А.Е. Отравления ядами гадюк (клиника, диагностика и лечение): Метод, реком,— СПб., 1999. —15 с.

2. Баркаган З.С., Перфильев П.П. Ядовитые змеи и их яды. — Барнаул: Алтайск. кн. изд-во, 1967. —С. 38—44.

3. Большая медицинская энциклопедия / Б.В. Петровский и др.—М.: Сов. энциклопедия, 1978. —Т. 8. —С. 447—453.

4. Вредные химические вещества. Природные органические соединения. / В.А. Филов и др.— СПб.: Изд-во СПХФА.1998. -Т. 8. -С. 270-272.

5. Маркова И.В., Афанасьев В.В., Цыбулькин Э.К. Клиническая токсикология детей и подростков. —СПб.: Интермедика, 1999. —Т. 2. —С. 282—286.

6. Орлов Б.Н., Гелашвили Д.Б., Ибрагимов А.К. Ядовитые животные и растения СССР. —М.: Высш. школа, 1990. — С. 107—109.

7. Султанов М.Н. Укусы ядовитых животных. —М.: Медицина, 1977. —С. 63—78.

Поступила в редакцию 28.10.99 г.

© А.И. Гоженко. А.С. Федорук, 2000 УДК 616.61-008.64-092.9-085

А.И. Гоженко, А.С. Федорук

ВЛИЯНИЕ ПРЕДУКТАЛА НА РАЗВИТИЕ И ТЕЧЕНИЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ОСТРОЙ ПОЧЕЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ

A.I. Gozhenko, A.S.Fedoruk

THE EFFECT OF PREDUCTAL ON THE DEVELOPMENT AND COURSE OF EXPERIMENTAL ACUTE RENAL FAILURE

Кафедра патологической физиологии Одесского государственного медицинского университета, Украина

РЕФЕРАТ

В опытах на 44 самцах белых крыс показано, что введение сулемы 5 мг/кг приводит через 24 ч к возникновению олигурической стадии острой почечной недостаточности. Внутри-брюшинное введение крысам 5 мг/кг предуктала, как профилактически (одновременно с введением сулемы), так и с целью лечебного воздействия (через 12 и 24 ч после введения сулемы) оказывает отчетливое позитивное влияние на функцию почек, что выражается в восстановлении скорости клубочковой фильтрации, снижении уровня креатининемии, благоприятном эффекте на процессы канальцевого транспорта.

Ключевые слова: острая почечная недостаточность, сулема, предуктал, креатинин, клу-бочковая фильтрация, канальцевый транспорт.

ABSTRACT

Experiments in 44 male albino rats have shown that administration of bichloride of mercury in a dose of 5 mg/kg results in the oliguric state of acute renal failure in 24 hours. The intraperitoneal administration of 5 mg/kg of Preductal (possessing an antioxidant and antiischemic action) to rats both for prophylactic purposes (simultaneously with the administration of bichloride of mercury) and for obtaining a therapeutic effect (in 12 and 24 hours after the administration of bichloride of mercury) gives a marked positive effect on the renal function expressed as a restoration of the glomerular filtration rate, decreased level of creatininemia and a favorable effect on the tubular transport processes. Key words: acute renal failure, bichloride of mercury, Preductal, creatinine, glomerular filtration, tubular transport.

ВВЕДЕНИЕ

Известно, что при токсических нефропатиях происходят значительные нарушения метаболизма паренхимы почек, причем, особенно существенно нарушаются процессы окислительного фосфорилирования в корковом веществе почек, что обусловлено значительным повреждением на уровне митохондрий [1—3, 5]. Энергетический дефицит в почечном эпителии является ведущим патогенетическим механизмом нарушения энергозависимого транспорта в эпителии почечных канальцев [2,4, 7]. Это предполагает возможность коррекции нарушенных процессов канальцевой реабсорбции и секреции путем восстановления энергетического обмена в почках с помощью веществ, нормализующих, в первую очередь, окислительный метаболизм.

В последние годы в терапевтическую практику, преимущественно в кардиологию, входит новый фармакологический препарат триметазидин

(предуктал), в основе механизма действия которого находится способность восстанавливать пул энергетических фосфатов и, следовательно, существенно влиять на энергетический обмен в тканях [6, 8]. Это позволило предположить, что предуктал может оказаться эффективным при повреждении почек, в которых важная роль отводится нарушениям энергетического метаболизма.

Цель и задачи исследования заключались в проведении анализа профилактического и терапевтического влияния предуктала на течение экспериментальной сулемовой острой почечной недостаточности (ОПН) путем изучения функционального состояния почек белых крыс-самцов в условиях индуцированного водного диуреза.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

Эксперименты проведены на 44 самцах белых крыс массой 0,12—0,15 кг. Экспериментальную сулемовую ОПН вызывали подкожным введени-

ем дихлористой ртути в дозе 5 мг/кг массы тела [5]. Предуктал (фирма Servier, Франция) вводили внутрибрюшинно в дозе 5 мг/кг, предварительно растворив в воде для инъекций.

Исследования во всех группах проводили через 24 ч после введения сулемы (1-я группа), что соответствует олигурической стадии ОПН Во 2-й группе предуктал вводили однократно, одновременно с сулемой; в 3-й группе — предуктал вводили дважды (через 12 и 24 ч) после введения сулемы. Контролем служили крысы, которым вместо раствора предуктала вводили воду для инъекций. Функциональное состояние почек изучали в условиях водного диуреза (введение зондом в желудок подогретой до 37 °С водопроводной воды в количестве 5% массы крысы с последующим сбором мочи за 2 ч). Концентрацию креатинина в моче определяли по Фолину [Бер-хин Е.Б., Иванов Ю.И., 1972], в плазме крови — по Попперу в модификации А.К. Мерзона (1970);

содержание белка в моче — количественным сульфосалициловым методом А.И. Михеевой, И. А. Богодаровой (1969); концентрацию натрия, калия в моче и плазме крови — методом фотометрии пламени на ФПЛ-1; титруемые кислоты и аммиак — титрометрически. Показатели деятельности почек рассчитывали по формулам Ю.В. Наточина(1974) и А.И. Гоженко (1991).

Абсолютные величины показателей деятельности почек стандартизованы приведением к 0,1 кг массы тела животного или к 100 мкл клубоч-кового фильтрата. Полученные данные статистически обработаны на РС1ВМ-586 по программе "Statgraphics" (США). В таблицах степень достоверности указана только для статистически значимой разницы изучаемых показателей (р — не бол ее 0,05).

РЕЗУЛЬТАТЫ

Подкожное введение хлорида ртути приводит к токсической нефропатии с нарушением

Таблица 1

Функция почек крыс через 24 ч после введения сулемы и предуктала в_условиях водного диуреза

Изучаемые показатели Контроль

Диурез, мл/2 ч 3,84 ± 0,39 2,43 ± 0,22 3,54 ± 0,23 4,03 ± 0,50

р <0,01 Р, <0,01 Р, <0,01

Относительный диурез, % 76,79 t 7,94 48,62 ± 4,32 70,86 ± 4,68 80,61 ± 10,05

р <0,01 Р, <0,01 Р, <0,01

Концентрация креатинина в 0,68 ± 0,05 1,48 ± 0,09 1,31 ± 0,04 1,16 ± 0,08

моче, ммоль/л р <0,001 р <0,001 р <0,001

Р,<0,05

Концентрация креатинина 70,86 ± 8,45 318,56 ± 60,07 251,44 ± 25,43 85,38 ± 10,35

плазмы, мкмоль/л р <0,001 р <0,001 Р, <0,01

Р, <0,01

Концентрационный индекс 10,57 + 1,65 5,74 ± 0,90 5,66 ± 0,61 15,52 ± 2,78

креатинина, ед. р <0,05 р<0,05 Р,<0,01

Р2 <0,05

Экскреция креатинина, 2,63 ± 0,36 3,48 ± 0,20 4,65 ± 0,39 4,58 ± 0,57

мкмоль/2 ч р <0,05 р <0,01 р <0,01

P, <0,02

Скорость клубочковой 333,79 ± 66,66 115,38 ±19,83 175,02 ± 20,42 474,02 ± 55,29

фильтрации, мкп/мин р <0,01 р<0,01 р, <0,001

р,<0,01 Р2 <0,01

Реабсорбция воды, % 88,99 ± 1,72 78,76 ± 3,31 80,58 ± 2,15 92,21 ± 1,18

р <0,05 Р, <0,01

р2 <0,001

Концентрация белка в моче, 0,03 ± 0,002 0,26 ± 0,01 0,25 ± 0,03 0,15 ±0,02

ммоль/л р <0,001 р <0,001 р <0,001

р, <0,001

Р2 <0,01

Экскреция белка, мг/2 ч 0,13 ±0,02 0,63 ± 0,06 0,86 ± 0,08 0,56 ± 0,05

р <0,001 р <0,001 р <0,001

Р, <0,05 Р2<0,01

Экскреция белка, мг/100 мкл 0,04 ± 0,006 0,65 ± 0,09 0,63 ±0,15 0,13 ± 0,02

клубочкового фильтрата р <0,001 р <0,01 р <0,05

р, <0,001

р2 <0,001

Примечание. Здесь и в табл. 2, 3: р- степень достоверности различий в сравнении с контролем; р( - с 1 -й группой; р - со 2-й группой; п- число наблюдений.

функции почек и развитием олигурической стадии синдрома ОПН (табл. 1). Выявлено выраженное уменьшение диуреза (как абсолютного, так и относительного), обусловленного значительным снижением скорости клубочковой фильтрации, что вызывает развитие ретенцион-ной азотемии (концентрация креатинина плазмы возрастает в 5 раз). Наряду с этим выявлены значительные нарушения функционирования ка-нальцевого аппарата почек — уменьшение ка-нальцевой реабсорбции воды с одновременным достоверным увеличением экскреции белка, особенно стандартизованного по уровню клубочковой фильтрации.

Значительные изменения наблюдали и со стороны ионорегулирующей функции почек (табл. 2). Зафиксировано существенное достоверное увеличение концентрации и экскреции натрия, особенно стандартизованной. Это повышение проходило на фоне резкого снижения фильтрационного заряда натрия, а также вследствие значительного уменьшения его как абсолютной, так и относительной реабсорбции и повышения клиренса, что приводило к гипонатриемии. Концентрация и экскреция калия также возрастали, но соотношение натрия и калия в моче значительно повышалось, что указывает на преимущественное нарушение транспорта натрия.

Таблица 2

Ионорегулирующая функция почек у крыс через 24 ч после введения сулемы и предуктала в условиях водного диуреза

Изучаемые показатели Контроль

Концентрация натрия в моче, 0,48 ± 0,09 10,88 ± 2,92 1,80 ± 0,39 14,25 ± 1,43

ммоль/л р <0,001 р <0,01 р <0,001

р, <0,01 рг <0,01

Экскреция натрия, мкмоль/2 ч 1,86 ± 0,46 23,36 ± 4,54 5,75 ± 0,96 56,39 ± 9,54

р <0,001 р <0,001 р<0,001

Р, <0,01 Р, <0,01

рг <0,001

Экскреция натрия, мкмоль/100 0,58+0,10 28,38±6,31 4,61 ±1,14 13,07±3,13

мкп кпубочкового фильтрата р <0,01 р <0,01 р <0,001

Р, <0,01 р, <0,05

Р2 <0,05

Концентрация натрия в плазме, 143,57+1,96 111,94+ 2,94 129,17± 0,83 126,25±1,05

ммоль/л р <0,001 р <0,01 р <0,01

р, <0,001 р, <0,001

Фильтрационный заряд натрия, 48,17 ±9,74 13,23 ± 2,44 22,74 ± 3,93 59,95 ± 7,08

мкмоль/мин р <0,001 р <0,01 р, <0,001

р, <0,05 Рг <0,01

Экскретируемая фракция 0,016±0,004 0,19 ±0,04 0,05 ± 0,008 0,47± 0,08

натрия, мкмоль/мин р <0,001 р <0,01 р <0,001

Р, <0,01 Р, <0,01

р, <0,001

Абсолютная реабсорбция 48,15 ±9,73 13,04 ± 2,46 22,69 ± 3,93 59,48 ± 7,09

натрия, мкмоль/мин р <0,001 р <0,01 р, <0,001

Р, <0,01 р2 <0,01

Относительная реабсорбция 99,97 ± 0,004 97,81 ± 0,55 99,70 ± 0,07 99,09 ± 0,21

натрия, % р <0,01 р <0 ,01 р <0,01

Р, <0,01 р,<0,01

Рг <0,05

Клиренс натрия, мл/2 ч 0,01 ± 0,003 0,21 + 0,04 0,05 ± 0,007 0,45 ± 0,07

р <0,01 р <0,01 р <0,001

р, <0,001 Р,<0,01

р? <0,001

Концентрационный индекс 0,003 ± 0,001 0,099+0,026 0,014+ 0,003 0,11 ± 0,01

натрия, ед. р <0,01 р <0,05 р <0,01

р<0,01 Р2 <0,05

Концентрация калия в моче, 5,64 ± 0,60 23,33 ± 3,59 15,72 ± 1,87 11,56 ± 1,18

ммоль/л р <0,001 р<0,01 р <0,05

Р, <0,01

Экскреция калия с мочой, 21,82 ±3,40 53,39 ± 6,22 54,69 ± 7,21 45,49 ± 6,43

мкмоль/2 ч р <0,001 р <0,01 р <0,01

Соотношение концентрации 0,08 ± 0,009 0,51 ±0,14 0,11 ±0,02 1,37± 0,23

натрия и калия мочи, ед. р <0,001 р, <0,01 р <0,001

р, <0,01

Р2 <0,001

Изменения со стороны кислотовыделитель-ной функции характеризовались увеличением экскреции титруемых кислот и аммиака.

Вышеописанные изменения свидетельствуют

0 том, что олигурическая стадия ОПН после введения сулемы возникает вследствие как снижения скорости клубочковой фильтрации, так и нарушения канальцевого транспорта воды и электролитов.

Введение предуктала одновременно с сулемой оказывает существенное влияния на течение ОПН у крыс 2-й группы. Так, в частности, практически нормализуется диурез, как абсолютный, так и относительный (табл. 1), возрастают концентрация и экскреция креатинина, достоверно (на 50 %) увеличивается скорость клубочковой фильтрации, по сравнению с величинами в 1-й группе. Концентрация белка в моче не изменяется, но экскреция даже возрастает за счет увеличения диуреза. При изучении ионорегулирующей функции почек установлено, что выделение калия остается на том же уровне, что и у животных

1 -й группы. В то же время, канальцевые процессы транспорта натрия в почках претерпевают существенные позитивные изменения. Концентрация и экскреция натрия с мочой достоверно снижаются в сравнении с животными 1-й группы, что, по-видимому, является одной из причин увеличения концентрации натрия плазмы, сравнительно с сулемовой ОПН (см. табл. 2). Несмотря на увеличение фильтрационной фракции натрия, нормализацию общего количества транспортируемого натрия обеспечивало повышение реабсорбируе-мой фракции натрия за счет достоверного увеличения интенсивности его реабсорбции, судя по данным относительной реабсорбции. В итоге, экскретируемая фракция и, особенно стандартизованная экскреция натрия, в значительной мере нормализовались.

Введение предуктала дает положительный эффект и на кислотовыделительную деятельность почек с достоверным уменьшением стандартизованной экскреции аммиака и нормализацией выделения титруемых кислот (табл. 3).

Еще более значительные эффекты, свидетельствующие о нормализации функции почек, выявлены при двукратном введении предуктала, через 12 и 24 ч после введения сулемы. При этом диурез возрастает ещё в большей мере и в абсолютных и относительных величинах не отличается от контроля (см. табл. 1). Увеличены концентрация и экскреция креатинина, хотя и недостоверно, нарастает скорость клубочковой фильтрации. Как следствие этого полностью нормализуется уровень креатинина в плазме крови. Нарастание диуреза закономерно обусловлено повышением скорости клубочковой фильтрации, так как реабсорбция воды даже достоверно увеличена в сравнении с контрольной группой. Снижается протеинурия, судя по концентрации и экскреции белка, особенно стандартизованной по клубочковой фильтрации.

Также более эффективно двукратное введение предуктала нормализовало ионорегулиру-ющую функцию почек. Выявлены уменьшение концентрации и тенденция к снижению экскреции калия. Вместе с тем, экскреция натрия даже возрастала, в основном за счет увеличения его фильтрационного заряда, так как его абсолютная реабсорбция значительно повышалась (см. табл. 2).

При изучении кислотовыделительной функции почек установлено увеличение выделения титруемых кислот, что обусловлено, по-видимому, нарастанием клубочковой фильтрации, так как стандартизованная экскреция титруемых кислот и аммиака, напротив, достоверно падала, как при сравнении с 1 -й, так и со 2-й группой (см. табл. 3).

Таблица 3

Кислотовыделительная функция почек крыс через 24 ч после введения сулемы и предуктала

в условиях водного диуреза

Изучаемые показатели Контроль

Экскреция титруемых кислот, 45,32±5,43 49,53±5,81 60,55±4,51 90,43±18,08

мкмоль/2 ч Р, <0,05

Рг<0,05

Экскреция титруемых кислот 15,47±2,59 49,50+7,50 42,12±6,78 21,09±3,94

мкмоль/100 мкл клубочкового р <0,001 Р, <0,01

фильтрата Р2 <0,05

Экскреция аммиака, мкмоль/2 ч 68,67±9,83 77,78±6,77 78,11 ±8,88 139,87±30,16

Р, <0,05

Рг <0,05

Экскреция аммиака мкмоль/ 24,05±4,83 81,07±10,63 53,59±8,71 32,29±6,09

100 мкл клубочкового фильтрата р <0,001 р<0,01 Р, <0,01

р, <0,01 рг <0,05

Аммонийный коэффициент, ед. 1,51 ±0,08 1,63 ± 0,08 1,28 ±0,11 1,63 ± 0,23