АНТИБАКТЕРИАЛЬНАЯ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ КЛОТРИМАЗОЛА И СПОСОБ ЕЕ ИЗГОТОВЛЕНИЯ
ANTIBACTERIAL PHARMACEUTICAL COMPOSITION OF CLOTRIMAZOLE AND METHOD FOR MAKING IT

Изобретение относится к области медицины, в частности к фармацевтической промышленности, и описывает антибактериальную фармацевтическую композицию, выполненную в виде крема для наружного применения, включающую клотримазол.
Проблема грибковых инфекций кожи является чрезвычайно актуальной, что связано с высокой распространенностью данного заболевания. По различным данным микозами страдает каждый четвертый житель планеты, а среди пожилых людей - каждый второй. Микозы стоп и онихомикозы составляют примерно 22% от общей обращаемости к дерматологу [Качук М.В. Современная наружная терапия микозов гладкой кожи / Качук М.В., Музыченко А.П. // Медицинская панорама. - 2010. - №3. - С.68-70].
Грибы, помимо поражения кожи и ее придатков, могут стать причиной микотической сенсибилизации, вызывая аллергические реакции и заболевания, такие как микотическая экзема, аллергический васкулит, бронхиальная астма [Лещенко В.М. Грибковые инфекции кожи. Современные антимикотики в дерматологии [Электронный ресурс] // Consilium medicum. Т.6. - №3. - 2004. Режим доступа: http://www.medarena.ru/preparats].
Самыми распространенными грибковыми инфекциями являются дерматофитии, вызываемые патогенными грибами родов: Trichophyton, Microsporum, Epidermophyton, которые имеют выраженное сродство к кератину и роговым структурам, и кандидоз, вызываемый дрожжеподобными грибами рода Candida. Характерной особенностью грибковых инфекций является безусловная патогенность возбудителей. Как правило, поражение локализуется на гладкой коже, слизистых оболочках и ногтевых пластинах [Сергеев Ю.В., Материалы VIII Всероссийского съезда дерматовенерологов, Москва (2001), Степанова Ж.В., Дерма, №2, 20-21 (2001)].
Противогрибковые препараты, или антимикотики, представляют собой достаточно обширный класс разнообразных химических соединений. Для лечения заболеваний, вызываемых патогенными грибами, в настоящее время используется ряд лекарственных средств, различных по происхождению (природные или синтетические), механизму действия, показаниям к применению (местные или системные инфекции) и способам назначения (наружно, перорально, парентерально).
Клотримазол (канестен) - один из наиболее широко применяемых препаратов из всей группы имидазольных антимикотиков. Впервые появившись в 1969 г., клотримазол до сих пор пользуется популярностью среди дерматологов и их пациентов при лечении поверхностных форм дерматомикозов. Этому способствуют высокая клиническая эффективность и безопасность препарата, а также разнообразие выпускаемых лекарственных форм. Препарат проявляет высокую эффективность при поражении кожи и слизистых дрожжеподобными грибами рода Candida и обладает широким спектром противогрибковой активности, однако используется только местно [Лещенко В.М. Грибковые инфекции кожи. Современные антимикотики в дерматологии [Электронный ресурс] // Consilium medicum. Т.6. - №3. - 2004. Режим доступа: http://www.medarena.ru/preparats; Регистр лекарственных средств России. РЛС. Энциклопедия лекарств. - 15 вып./ гл. ред. Г.Л. Вышковский. - М.: «РЛС. 2007», 2008. - С.440-441]. На современном этапе развития медицины местный антимикотик клотримазол является достаточно хорошо изученным, высокоэффективным средством с благоприятным профилем безопасности и широко применяется в дерматологической практике.
Клотримазол является противогрибковым средством из группы производных имидазола. Действие клотримазола связано с нарушением синтеза эргостерина, являющегося составной частью клеточной мембраны грибов. Его отсутствие вызывает значительные изменения строения и свойств оболочки. Повышенная проницаемость оболочки ведет к лизису грибковой клетки, что ведет к дополнительному накоплению внутри клетки 14 L метилстеролов, являющихся предшественниками в синтезе эргостерола. Кроме того, клотримазол подавляет активность пероксидаз (в том числе митохондриальных), что дополнительно облегчает накопление в грибковой клетке перекиси водорода, по всей вероятности соучаствуя в ее разрушении. In vitro клотримазол имеет широкий спектр действия, охватывающий почти все патогенные грибы, являющиеся причиной инфекции у людей, а именно: дерматофиты (Epidermophyton floccosum, Microsporum sp., Trichophyton sp.), дрожжевые и плесневые грибы (Candida sp., Cryptococcus neoformans, Torulosis sp., Aspergillus sp., Cladosporium sp., Madurella sp., Rhodotorula, Malassezia furfur и другие), диморфические грибы (Blastomyces dermatitidis, Coccidioides immitis, Histoplasma capsulatum), возбудители эритразмы, анаэробные бактерии (Bacteroides), возбудители разноцветного лишая (Pityriasis versicolor), трихомонады, включая Trichomonas vaginalis. Кроме антимикотического спектр действия клотримазола охватывает актиномицеты из семейства Nocardia, грамположительные бактерии Staphylococcus spp., Streptococcus spp, Corynebacterium minutissimum и грамотрицательные бактерии Bacteroides, Gardnerella vaginalis, Haemophilus vaginalis, Gardnerella vaginalis. В малых концентрациях клотримазол действует фунгистатически, в больших - фунгицидно.
Клотримазол применяется как в виде монопрепаратов, так и в виде комбинированных лекарственных средств. В виде монопрепаратов клотримазол присутствует на фармацевтическом рынке РФ в форме: кремов для наружного применения, мазей для наружного применения, порошков для наружного применения, растворов для наружного применения, спреев для наружного применения, таблеток вагинальных, суппозиториев вагинальных, гелей вагинальных. Клотримазол выпускается в комбинации с: беклометазоном (кремы для наружного применения), беклометазоном и гентамицином (кремы для наружного применения и мази для наружного применения), метронидазолом (гели вагинальные).
Из уровня техники известны следующие, зарегистрированные в РФ, лекарственные монопрепараты клотримазола в форме кремов для наружного применения:
- Кандизол (рег. номер П N015544/02 от 30.09.2009) производства Микро Лабе Лимитед, Индия;
- Кандид (рег. номер П N008874/02 от 12.09.2011) производства Гленмарк Фармасьютикалз Лтд., Индия;
- Клотримазол (рег. номер П N011890/01 от 22.07.2011) производства К.О. Хиперион С.А, Румыния;
- Амиклон (рег. номер Р N002339/01-2003 от 17.06.2008) производства ОАО «Нижфарм», Россия;
- Канизон (рег. номер П N011804/04 от 15.12.2008) производства Аджио Фармацевтикалз Лтд, Индия;
- Клотримазол (рег. номер П N011413/02 от 10.06.2010) производства ГлаксоСмитКляйн Фармасьютикалз С.А., Польша;
- Кандибене (рег. номер П N015523/03 от 03.03.2009) производства Ратиофарм ГмбХ, Германия.
Одним из наиболее эффективных и широко представленных на рынке РФ лекарственным препаратом является Клотримазол крем для наружного применения 1% (ГлаксоСмитКляйн Фармасьютикалз С.А., Польша). Данный препарат содержит 1% клотримазола и выпускается в алюминиевых тубах по 20 г.
Препарат Клотримазол крем для наружного применения 1% содержит следующие компоненты, % в 100 г:
Действующее вещество
клотримазол
1,0
Вспомогательные вещества
спирт бензиловый
спирт цетостеариловый
эвтанол G (2-октилододсканол)
99,0
полисорбат 60
спан 60 (сорбитан стеарат)
олброт синтетический (спермацет синтетический)
вода очищенная
Целью настоящего изобретения является расширение перечня лекарственных средств и разработка отечественного препарата фармацевтически эквивалентного (содержащего одно и то же количество одного и того же действующего вещества (одних и тех же действующих веществ) в одних и тех же лекарственных формах, которые соответствуют требованиям одних и тех же или сопоставимых стандартов) препарату Клотримазол крем для наружного применения 1% (ГлаксоСмитКляйн Фармасьютикалз С.А., Польша).
Лекарственный препарат является по существу аналогичным оригинальному препарату (генериком), если он удовлетворяет критериям одного и того же количественного и качественного состава в отношении активных субстанций, одной и той же лекарственной формы и является биоэквивалентным [Фармацевтический сектор: основы законодательства в Европейском Союзе / Авторы-составители: Н.А. Ляпунов, В.А. Усенко, А.Л. Спасокукоцкий, Е.П. Безуглая. - К.: «Морион», 2002. - С.7-65]. Препарат Клотримазол крем для наружного применения 1% является препаратом местного действия. Для препаратов местного действия, предназначенных для накожного и других путей введения, которые действуют без всасывания в системный кровоток, определение биоэквивалентности на основании биодоступности неприемлемо [CPMP/EWG/QWP/1401/98. Note for guidance on the investigation of bioavailability and bioequivalence. - London: CPMP/EMEA, 26 July 2001]. В этом случае требуются альтернативные методы; в данном случае необходимы сравнительные микробиологические исследования in vitro специфического антифунгального действия или клинические испытания. Для этого могут быть также пригодны сравнительные исследования безвредности на экспериментальных животных.
Необходимо было, чтобы разрабатываемый препарат был терапевтически эквивалентен препарату Клотримазол крем для наружного применения 1% или превосходил его по эффективности при одинаковом уровне безопасности. Лекарственный препарат является терапевтически эквивалентным другому препарату, если он содержит ту же активную субстанцию или ее терапевтически активную часть и клинически проявляет такую же эффективность и безопасность, как и препарат, эффективность и безопасность которого установлены [Руководство 42-7.1:2005 Руководства по клиническим испытаниям. Лекарственные средства. Исследования биодоступности и биоэквивалентности / В. Мальцев, Н. Ляпунов, В. Чумак и др. - К.: МЗ Украины, Морион. - 2005. - 18 с.].
Задачей настоящего изобретения является разработка лекарственного препарата Клотримазол крем для наружного применения 1% (далее «разрабатываемый препарат»), который имел бы показатели качества и свойства (включая эффективность и безвредность), сопоставимые с таковыми препарата-аналога Клотримазол крем для наружного применения 1% (ГлаксоСмитКляйн Фармасьютикалз С.А., Польша). При этом можно будет прогнозировать, что разработанный препарат будет терапевтически эквивалентен референтному препарату.
В процессе разработки состава лекарственного препарата авторы настоящего изобретения пытались решить следующие технологические задачи:
1) подбор эффективного состава и количества комплексообразователя, который потенцирует противогрибковое действие клотримазола;
2) подбор состава основы, обеспечивающего оптимальную кремообразную консистенцию препарата;
3) подбор эффективного состава и количества антимикробных консервантов.
В качестве комплексообразователя, потенцирующего противогрибковое действие клотримазола, авторы настоящего изобретения использовали динатрия эдетат. Ранее были проведены исследования по влиянию концентрации данного комплексообразователя на степень выраженности антифунгального действия клотримазола [Жемерова К.Г. Розробка та стандартизiя складу i мiкробiологiчних методик контролю якостi комбiнованого крему антимiкробноï дiï. - Дисс.… канд. фармац. наук. - Харьков, 2006. - 148 с.].
Исследования проводили методом диффузии в агар в модификации колодцев по отношению к штаммам плесневых (A. niger АТСС 16404) и дрожжевых (С. albicans АТСС 885-653) грибов.
Установлено статистически достоверное увеличение диаметра зон задержки роста при увеличении концентрации динатрия эдетата. Увеличение антифунгальной активности наиболее выражено при увеличении концентрации динатрия эдетата от 0% до 1%, при котором диаметр зон задержки роста С. albicans увеличился в среднем на 5,9 мм, а A. niger - в среднем на 6,2 мм. При увеличении концентрации динатрия эдетата от 1% до 1,5% существенных изменений диаметра зон задержки роста не наблюдалось.
В состав разрабатываемого препарата динатрия эдетат введен в оптимальной концентрации 0,75%.
При подборе состава основы наиболее важной задачей было изучение влияния вспомогательных веществ на реологические свойства кремов и сохранение их физической стабильности в процессе дозирования и во время хранения.
В разрабатываемом препарате в качестве загустителей (фактор консистенции) использовали полиэтиленоксид 1500 (макрогол 1500) в концентрации 20,0%, полиэтиленоксид 4000 (макрогол 4000) в концентрации 5,0%, а также полоксамер 338.
Для выбора оптимальной концентрации полоксамера 338 в составе разрабатываемого препарата были приготовлены образцы кремов, концентрация полоксамера 338 в которых составляла 1,0%, 2,5%, 5,0% и 10,0%. Составы указанных образцов препарата приведены в таблице 1, на Фиг.1 представлены реограммы этих образцов, а на Фиг.2 - зависимость структурной вязкости образцов препарата от концентрации полоксамера 338.
Как видно из данных, представленных на Фиг.1, кремы имеют неньютоновский тип течения, пластические и тиксотропные свойства. Эти свойства характеризуют образование коагуляционной структуры, оказывающей стабилизирующее действие на дисперсные системы.
Как видно из данных, представленных на Фиг.2, с увеличением концентрации полоксамера 338 от 1% до 10% структурная вязкость значительно возрастает. При концентрации полоксамера 338 10% имеет место резкое повышение тиксотропных свойств (Фиг.1). Такое изменение реопараметров приводит к ухудшению экструзии крема из туб, особенно при пониженных температурах.
Поскольку образцы кремов обладают тиксотропными свойствами, о чем свидетельствуют петли гистерезиса на реограммах (Фиг.1), представляло интерес, исследовать влияние приложенного напряжения сдвига на структурную вязкость.
-1
В таблице 2 представлены данные о разрушении и восстановлении коагуляционной структуры кремов с различной концентрацией полоксамера при градиенте напряжения сдвига 27 с.
Как видно из данных, представленных в таблице 2, при приложении к образцам кремов напряжения сдвига происходит уменьшение структурной вязкости, что свидетельствует о разрушении коагуляционной структуры. Перемешивание в течение 5 мин привело к уменьшению структурной вязкости образцов кремов, содержащих 1,0%, 2,5%, 5,0% и 10,0% примерно на 43%, 47%, 33% и 57% соответственно. После прекращения перемешивания структурная вязкость медленно возрастает, однако первоначального значения структурная вязкость не достигает. Это свидетельствует о необратимом разрушении коагуляционной структуры под воздействием напряжения сдвига.
Наиболее полно восстанавливается образец крема, содержащий 1% полоксамера 338 (до 90,65% первоначальной вязкости), образцы крема, содержащие 2,5% и 5,0% полоксамера 338 восстанавливаются на 75% и 83% от первоначальной вязкости соответственно. Менее всего восстанавливается образец, содержащий полоксамер 338 в концентрации 10%. Через 24 часа восстановления его структурная вязкость составляет всего лишь 50% от начальных значений.
На основании проведенных исследований была выбрана концентрация полоксамера 338 5,0%, при которой обеспечиваются надлежащие реопараметры крема, а также достаточно полное восстановление его структурной вязкости после разрушения в цилиндре реовискозиметра.
Таким образом, в составе разрабатываемого препарата в качестве факторов консистенции (загустителей) использовали макрогол 1500 в концентрации 20,00%, макрогол 4000 в концентрации 5,00% и полоксамер 338 в концентрации 5,00%.
В таблице 3 представлены данные о структурной вязкости и физической стабильности кремов, содержащих полоксамер 338 (5%), макрогола 4000 (5%) и макрогола 1500 (20%), при различном соотношении гидрофильных неводных растворителей (ГНР): пропиленгликоля и макрогола 400. Представлены данные, полученные после приготовления кремов, после разрушения структуры помощью перемешивания, а также данные, характеризующие восстановление структуры через 1, 2 и 24 часа.
Данные, представленные в таблице 3, свидетельствуют, что с увеличением содержания макрогола 400 структурная вязкость кремов возрастает, однако восстановление структуры крема после разрушения более полно происходит при уменьшении концентрации макрогола 400 от 70% до 14%. Исходя из полученных данных, было выбрано соотношение пропиленгликоль - макрогол 400 1:1.
Для дальнейшей оптимизации свойств кремовой основы (физическая стабильность, экструзия из туб) в состав кремовой основы включены эмульгаторы макрогола 20 цетостеариловый эфир и цетостеариловый спирт в суммарной концентрации 5%. На фиг.3 представлена зависимость структурой вязкости кремов от соотношения этих эмульгаторов. При увеличении концентрации макрогола 20 цетостеарилового спирта от 0% до 2,5% структурная вязкость кремов увеличивается, при дальнейшем увеличении концентрации этого эмульгатора - понижается.
На основании полученных результатов в состав препарата введены эмульгаторы макрогола 20 цетостеариловый эфир и цетостеариловый спирт в концентрации 2,5% каждый.
При подборе эффективного состава и количества антимикробных консервантов, авторами настоящего изобретения были проведены сравнительные исследования специфической антимикробной активности разрабатываемого препарата и препарата Клотримазол крем для наружного применения 1% (ГлаксоСмитКляйн Фармасьютикалз С.А., Польша). Специфическая антимикробная активность была изучена в опытах in vitro методом диффузии в агар.
Принимая во внимание этиологическую структуру заболеваний, при которых будет применяться препарат, критерием оценки его специфической антимикробной активности явилось подтверждение ингибирующего действия в отношении грамположительных кокков и грибов. Выбор тест-микроорганизмов для проведения исследований проводили с учетом этиологической структуры заболеваний, при которых применяется препарат, и спектра действия основного антимикробного компонента - клотримазола.
В качестве тест-микроорганизмов были выбраны:
- грамположительные кокки: стафилококки, энтерококки;
- дрожжевые грибы;
- плесневые грибы.
7
Для определения антибактериального действия препаратов использовали агар Мюллера-Хинтона, для определения антифунгального действия использовали Сабуро-декстрозный агар. Плотную питательную среду расплавляли, охлаждали до температуры около 45°C и инокулировали суспензиями тест-микроорганизмов. Микробная нагрузка составляла около 1×10 КОЕ/мл расплавленной питательной среды. По 20 мл инокулированной микроорганизмами среды выливали в чашки Петри, и оставляли до затвердевания среды. В слое питательного агара готовили лунки с помощью стерильного пробойника диаметром 8 мм.
Исследуемый и референтный препараты при помощи шприца вносили по 0,1 мл в лунки, подготовленные в плотной питательной среде. После внесения препаратов чашки Петри выдерживали при комнатной температуре в течение одного часа, а затем помещали в термостат и инкубировали в течение 18-48 часов при температуре около 35°C. После окончания инкубации измеряли диаметр зоны отсутствия роста вокруг лунок с препаратом. Каждый образец испытывали в шести повторностях.
Результаты изучения антимикробной активности разрабатываемого препарата и референтного препарата Клотримазол крем для наружного применения 1% методом диффузии в агар (таблица 4) показали, что исследуемые препараты проявили выраженное антимикробное действие в отношении бактерий и грибов.
Вместе с тем, авторы настоящего изобретения неожиданным образом обнаружили, что разрабатываемый препарат по степени выраженности антибактериального и антифунгального действия значительно превосходит референтный препарат. По эффективности антимикробного консервирующего действия разработанный препарат превосходит требования критерия А Европейской Фармакопеи 7.0 (5.1.3) и ГФ РФ XII издания (статья 34).
Так, и исследуемый, и референтный препараты проявили выраженное антифунгальное действие в отношении дрожжеподобных и плесневых грибов. Наибольшая степень выраженности антифунгального эффекта наблюдалась в отношении плесневого гриба рода Aspergillus, диаметры зон задержки роста тест-штамма Aspergillus fumigates ВКПГf-59/B-770 для исследуемого препарата составили 47,63±0,31 мм, для референтного препарата - 17,50±0,22 мм.
Из дрожжеподобных грибов наибольшую чувствительность к исследуемым препаратам проявил тест-штамм Candida tropicalis ВКПГу-547/Y-1003, диаметры зон задержки роста для этого тест-микроорганизма составили 45,93±0,15 мм и 36,00±0,15 мм для исследуемого и референтного препарата соответственно. В отношении остальных представителей рода Candida действие препаратов было чуть менее выражено, диаметры зон задержки роста тест-штаммов Candida utilis ЛИА-01, Candida albicans АТСС 885-653, Candida parapsilosis ВКПГу-488/10 и Candida pseudotropicalis ВКПГу-601/33 для исследуемого препарата составили 41,20±0,21 мм, 39,45±0,58 мм, 39,22±0,34 мм и 32,62±0,78 мм соответственно, для препарата сравнения диаметры зон задержки роста вышеперечисленных тест-штаммов составили 31,55±1,63 мм, 27,43±0,20 мм, 34,95±0,46 мм и 23,57±1,06 мм соответственно.
В отношении криптококка активность исследуемых препаратов также была высокой, диаметры зон задержки роста тест-микроорганизма Cryptococcus neoformans ВКПГу-881/BKMY-753 составили 40,87±0,17 мм и 23,22±0,13 мм для исследуемого и референтного препаратов соответственно.
Из всех тест-штаммов бактерий, использованных в экспериментальных исследованиях, наиболее чувствительным к действию исследуемых препаратов был коагулазонегативный сапрофитный стафилококк, диаметры зон задержки роста тест-микроорганизма S. saprophyticus АТСС 15305 составили 26,92±0,18 мм и 11,25±0,14 мм для исследуемого и референтного препаратов соответственно.
Препараты проявили активность в отношении эталонного и клинического штаммов золотистого стафилококка, диаметры зон задержки роста эталонного штамма S. aureus АТСС 6538 P и клинического штаммов S. aureus 1925 составили соответственно 24,13±0,07 мм и 22,88±0,19 мм для исследуемого препарата и 13,17±0,10 мм и 11,97±0,17 мм соответственно для референтного препарата.
Клинический штамм коагулазонегативного эпидермального стафилококка S. epidermidis MB также был чувствителен к действию исследуемых препаратов, диаметры его зон задержки роста составили для исследуемого препарата 21,52±0,12 мм, для препарата сравнения -13,23±0,08 мм.
На том же уровне была активность препаратов в отношении энтерококка, диаметры зон задержки роста E. faecalis №4163 составили 21,27±0,13 мм и 11,15±0,12 мм для исследуемого и референтного препаратов соответственно.
Таким образом, в результате проведенных исследований в опытах in vitro методом диффузии в агар установлено, что разрабатываемый препарат обладает выраженным антимикробным действием в отношении дрожжеподобных и плесневых грибов и грамположительных кокков. По спектру антимикробного действия сравниваемые препараты эквивалентны. По степени выраженности антимикробного эффекта разрабатываемый препарат превосходит референтный препарат. В отношении всех тест-микроорганизмов, использованных в экспериментальных исследованиях, активность разрабатываемого препарата достоверно выше, чем активность референтного препарата, разница в диаметрах зон задержки роста большинства тест-штаммов бактерий и всех тест-штаммов дрожжеподобных и плесневых грибов превышает 5 мм, что позволяет делать вывод о наличии существенных отличий в степени проявления антимикробного действия.
Указанная антибактериальная фармацевтическая композиция, выполненная в виде крема для наружного применения, наиболее предпочтительно, но необязательно содержит следующие компоненты в масс. (г/100г):
Действующее вещество:
0,5-2
Клотримазол (в пересчете на 100% сухое вещество)
0,5-2
Вспомогательные вещества:
99,50-98,00
Динатрия эдетат
0,5-1,0
Вода очищенная
3,0-6,0
Полоксамер 338
3,0-7,0
Пропиленгликоль
20,0-35,0
Макрогол 4000
3,0-7,0
Макрогол 1500
15,0-25,0
Цетостеариловый спирт
1,0-3,5
Макрогола 20 цетостеариловый эфир
1,0-3,5
Макрогол 400
10-53
Из предшествующего уровня техники подобного состава антибактериальной фармацевтической композиции выявить не удалось. При этом данный состав веществ обеспечивает следующее функциональное назначение: клотримазол - действующее вещество антимикотического действия; динатрия эдетат - комплексообразователь, потенцирующий противогрибковое действие клотримазола; вода очищенная - растворитель; полоксамер 338 - фактор консистенции, осмотически активный компонент; макрогол 4000 - фактор консистенции, осмотически активный компонент; макрогол 1500 - фактор консистенции, осмотически активный компонент; цетостеариловый спирт - эмульгатор II рода; макрогола 20 цетостеариловый эфир - эмульгатор I рода; пропиленгликоль - гидрофильный неводный растворитель, осмотически активный компонент; макрогол 400 - гидрофильный неводный растворитель, осмотически активный компонент.
Конкретный вариант рецептуры заявленного состава представлен в таблице 5.
Также авторами изобретения разработан способ (технология) изготовления указанной антибактериальной фармацевтической композиции. Технология изготовления препарата разработана с учетом свойств компонентов, входящих в его состав, и свойств крема как дисперсной системы.
Способ производства указанного состава предпочтительно, но необязательно, осуществляют следующим образом:
- Готовят раствор натрия эдетата. В емкость загружают воду очищенную и динатрия эдетат. Смесь нагревают до температуры 65-70°C, перемешивая до полного растворения динатрия эдетата. Полученный раствор охлаждают при перемешивании до температуры 35-40°C.
- Готовят основу крема. В реактор-гомогенизатор загружают предварительно отвешенные пропиленгликоль, макрогол 400, макрогол 1500, макрогол 4000, полоксамер 338, цетостеариловый спирт, макрогола 20 цетостеариловый эфир. Нагревают компоненты основы крема до температуры 60-65°C при перемешивании скребково-лопастной мешалкой до полного растворения/расплавления компонентов основы крема. Полученную основу охлаждают до температуры 50-55°C при перемешивании.
- Растворяют клотримазол в основе крема. В реактор-гомогенизатор с основой крема загружают предварительно отвешенный клотримазол и перемешивают массу при температуре 50-55°C до полного растворения клотримазола.
- Вводят раствор динатрия эдетата в основу крема. В реактор-гомогенизатор с раствором клотримазола в основе крема количественно переносят раствор динатрия эдетата с начальной стадии процесса. В реакторе-гомогенизаторе создают вакуум и перемешивают содержимое при температуре 38-40°C до получения однородной массы.
- Охлаждают и дегазируют готовый крем. Полученный крем охлаждают при перемешивании под вакуумом до температуры 25-27°C, затем дозируют в тубы.
Таблица 1
Составы образцов кремов для выбора концентрации полоксамера 338
Компоненты
Содержание, г/100 г
Клотримазол (в пересчете на 100% безводное вещество)
1,00
Динатрия эдетат
0,75
Вода очищенная
4,50
Полоксамер 338
1,00
2,50
5,00
10,00
Макрогол 4000
5,00
Макрогол 1500
20,00
Цетостеариловый спирт
2,50
Макрогола 20 цетостеариловый эфир
2,50
Пропиленгликоль
29,45
Макрогол 400
33,30
31,80
29,30
24,30
Таблица 2
Разрушение и восстановление коагуляционной структуры образцов крема (разрушение в цилиндре реовискозиметра при Dr=27 с<sup>-1</sup>; восстановление без перемешивания)
Время
Структурная вязкость (Па·с) образцов при содержании полоксамера 338:
1,0%
2,5%
5,0%
10,0%
Разрушение
0 мин
10,70 (100%)
10,70 (100%)
16,41 (100%)
53,11 (100%)
1 мин
9,10 (85,05%)
7,14 (66,73%)
12,67 (77,21%)
30,10 (56,67%)
2 мин
7,03 (65,70%)
6,42 (60,00%)
11,95 (72,82%)
28,30 (53,29%)
3 мин
6,67 (62,34%)
6,07 (56,73%)
11,60 (70,69%)
26,50 (49,90%)
4 мин
6,49 (60,65%)
5,89 (55,05%)
11,24 (68,49%)
24,80 (46,70%)
5 мин
6,14 (57,38%)
5,71 (53,36%)
11,06 (67,40%)
23,01 (43,33%)
Восстановление
1 час
6,60 (61,68%)
6,42 (60,00%)
11,24 (68,49%)
23,01 (43,33%)
2 часа
7,14 (66,73%)
6,96 (65,05%)
11,42 (69,59%)
24,79 (46,68%)
24 часа
9,70 (90,65%)
8,03 (75,05%)
13,67 (83,30%)
26,56 (50,01%)
Таблица 3
Структурная вязкость кремов
Концентрация ГНР, % масс.
η, Па·с
Исходно
После разрушения в течение 5 мин
η, Па·с (восстановление, %)
ПГ
Макрогол 400
1 час
2 час
24 часа
70
0
12,7
4,9 (38,6)
4,8 (37,8)
4,8 (37,8)
4,8 (37,8)
56
14
21,2
11,7 (55,2)
11,7 (55,2)
12,3 (58,0)
12,9 (60,8)
42
28
23,4
12,7 (54,3)
12,8 (54,7)
12,8 (54,7)
13,2 (56,4)
35
35
27,6
12,7 (46,0)
13,5 (48,9)
13,8 (50,0)
14,5 (52,4)
28
42
28,7
12,7 (44,3)
13,8 (48,1)
13,8 (48,1)
14,8 (51,6)
14
56
34,0
12,7 (37,4)
13,8 (40,6)
14,8 (43,5)
14,8 (43,5)
0
70
34,0
12,7 (37,4)
13,8 (40,6)
14,8 (43,5)
14,8 (43,5)
Таблица 4
Антимикробная активность препаратов (по данным метода диффузии в агар)
Тест-микроорганизм
Диаметр зон задержки роста (мм)
Клотримазол-Атолл крем для наружного применения 1%
Клотримазол крем для наружного применения 1%
Candida albicans АТСС 885-653
39,45±0,58*
27,43±0,20
Candida tropicalis ВКПГу-547/Y-1003
45,93±0,15*
36,00±0,15
Candida pseudotropicalis ВКПГу-601/33
32,62±0,78*
23,57±1,06
Candida parapsilosis ВКПГу-488/10
39,22±0,34*
34,95±0,46
Candida utilis ЛИА-01
41,20±0,21*
31,5581,63
Cryptococcus neoformans ВКПГу-881/BKMY-753
40,87±0,17*
23,22±0,13
Aspergillus fumigatus ВКПГf-59/B-770
47,63±0,31*
17,50±0,22
Staphylococcus aureus ATCC 6538P
24,13±0,07*
13,17±0,10
Staphylococcus aureus 1925
22,88±0,19*
11,97±0,17
Staphylococcus saprophyticus ATCC 15305
26,92±0,18*
11,25±0,14
Staphylococcus epidermidis MB
21,52±0,12*
13,23±0,08
Enterococcus faecalis №4163
21,27±0,13*
11,15±0,12
* - P<0,05
Таблица 5
Конкретный вариант рецептуры
Компоненты
Содержание, г/100 г
Действующее вещество:
1,0
Клотримазол (в пересчете на 100% сухое вещество)
1,0
Вспомогательные вещества:
99,0
Динатрия эдетат
0,75
Вода очищенная
4,5
Полоксамер 338
5,00
Пропиленгликоль
29,45
Макрогол 4000
5,00
Макрогол 1500
20,00
Цетостеариловый спирт
2,50
Макрогола 20 цетостеариловый эфир
2,50
Макрогол 400
29,30