ПОЛИПЕПТИДЫ ТРАНСПОЗАЗЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

1. Способ обеспечения иммунного ответа у человека, нуждающегося в этом, включающий:
(a) трансфекцию иммунной клетки
(i) нуклеиновой кислотой, кодирующей рекомбинантный полипептид, имеющий активность транспозазы, где указанный полипептид содержит аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 90% идентичную последовательности SEQ ID NO: 1, где полипептид содержит:
(i) Арг в положении, соответствующем позиции 14;
(ii) Ала в положении, соответствующем позиции 33;
(iii) Гис в положении, соответствующем позиции 115;
(iv) Арг в положении, соответствующем позиции 136;
(v) Асп в положении, соответствующем позиции 214;
(vi) Ала в положении, соответствующем позиции 215;
(vii) Вал в положении, соответствующем позиции 216;
(viii) Глн в положении, соответствующем позиции 217;
(ix) Гис в положении, соответствующем позиции 243;
(x) Гис в положении, соответствующем позиции 253; и
(xi) Арг в положении, соответствующем позиции 255; и
(ii) ДНК, кодирующей CAR или TCR, фланкированные повторами транспозонов; и
(b) введение терапевтически эффективного количества трансфицированных иммунных клеток, экспрессирующих CAR или TCR, субъекту для обеспечения T-клеточного ответа.
2. Способ по п. 1, где полипептид содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентичная последовательности SEQ ID NO: 1.
3. Способ по п. 1, где полипептид содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентична последовательности SEQ ID NO: 1.
4. Способ по п. 1, где полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1.
5. Способ по п. 1, где полипептид содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентичная последовательности SEQ ID NO: 3.
6. Способ по п. 1, где полипептид содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 95% идентичная последовательности SEQ ID NO: 3.
7. Способ по п. 1, где полипептид содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3.
8. Способ по п. 1, где CAR специфичен к опухолевому антигену.
9. Способ по п. 8, где опухолевый антиген представляет собой CD19, CD20, карциноэмбриональный антиген, альфа-фетопротеин, CA-125, 5T4, MUC-1, эпителиальный опухолевый антиген, ассоциированный с меланомой антиген, мутированный p53, мутатнтный ras, HER2/Neu, ERBB2, белок связывания фолата, гликопротеин оболочки HIV-1 gp120, гликопротеин оболочки HIV-1 gp41, GD2, CD123, CD23,CD30 , CD56, c-Met, мезотелин, GD3, HERV-K, IL-11Ralpha, цепь каппа, цепь лямбда, CSPG4, ERBB2, EGFRvIII или VEGFR2.
10. Способ по п. 1, дополнительно включающий трансфекцию иммунных клеток нуклеиновой кислотой, кодирующей связанный с мембраной цитокин.
11. Способ по п. 10, где связанный с мембраной цитокин представляет собой связанный с мембраной IL-15.
12. Способ по п. 1, где иммунной клеткой является клетка естественный киллер (NK), T-клетка, предшественник NK клетки или предшественник T-клетки.
13. Способ по п. 1, где нуклеиновой кислотой является мРНК.
14. Способ лечения человека, имеющего рак, включающий:
(a) трансфекцию иммунной клетки
(i) нуклеиновой кислотой, кодирующей рекомбинантный полипептид, имеющий активность транспозазы, где указанный полипептид содержит аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 90% идентичную последовательности SEQ ID NO: 1, где полипептид содержит:
(i) Арг в положении, соответствующем позиции 14;
(ii) Ала в положении, соответствующем позиции 33;
(iii) Гис в положении, соответствующем позиции 115;
(iv) Арг в положении, соответствующем позиции 136;
(v) Асп в положении, соответствующем позиции 214;
(vi) Ала в положении, соответствующем позиции 215;
(vii) Вал в положении, соответствующем позиции 216;
(viii) Глн в положении, соответствующем позиции 217;
(ix) Гис в положении, соответствующем позиции 243;
(x) Гис в положении, соответствующем позиции 253; и
(xi) Арг в положении, соответствующем позиции 255; и
(ii) ДНК, кодирующей CAR или TCR, фланкированные повторами транспозонов; и
(b) введение терапевтически эффективного количества трансфицированных иммунных клеток, экспрессирующих CAR или TCR, субъекту, таким образом обеспечивая противоопухолевый ответ для уменьшения или устранения опухолей у субъекта.
15. Способ по п. 14, где рак представляет собой мочевого пузыря, крови, кости, костного мозга, мозга, молочной железы, толстой кишки, пищевода, желудочно-кишечного тракта, десен, головы, почек, печени, легких, носоглотки, шеи, яичника, предстательной железы, кожи, желудка, яичка, языка или матки.
16. Способ по п. 14, где рак представляет собой лимфому, лейкемию, неходжкинскую лимфому, острый лимфобластный лейкоз, хронический лимфобластный лейкоз, хронический лимфоцитарный лейкоз или связанное с В-клетками аутоиммунное заболевание.
17. Способ по п. 14, дополнительно включающий трансфекцию иммунных клеток нуклеиновой кислотой, кодирующей связанный с мембраной цитокин.
18. Способ по п. 17, где связанный с мембраной цитокин представляет собой связанный с мембраной IL-15.
19. Способ по п. 14, где иммунной клеткой является клетка естественный киллер (NK), T-клетка, предшественник NK клетки или предшественник T-клетки.