Способ диагностики объемных образований головного мозга
METHOD FOR DIAGNOSING VOLUMETRIC FORMATIONS OF THE BRAIN

Изобретение относится к области медицины, а именно, к лабораторным методам исследования и касается дифференциальной диагностики доброкачественных образований головного мозга и злокачественных опухолей.
Диагностика объемных образований, вследствие локализации опухоли внутри черепа, затруднена. Диагноз онкологического заболевания окончательно ставится только после гистологического заключения, то есть без гистологического или цитологического исследования диагноз неправомочен. Поэтому актуальность дифференциальной диагностики доброкачественных образований и злокачественных опухолей головного мозга на дооперационном этапе сомнений не вызывает, так как позволяет оценить прогноз течения заболевания, выбрать оптимальную тактику и метод лечения, направленные на увеличение продолжительности жизни больных и ее качество.
Известен способ диагностики доброкачественных и злокачественных глиальных опухолей (Патент РФ 2154830, МПК G01N 33/53,50, публ. 2000) путем исследования сыворотки крови больного, при котором ставят реакцию пассивной гемагглютинации с доброкачественным, анапластическим и глиобластомным эритроцитарными диагностикумами с полиантигенными препаратами тканей соответствующих глиальных новообразований. При наличии положительных результатов с доброкачественным и анапластическим диагностикумом или только с доброкачественным диагностируют доброкачественные глиальные опухоли, а при наличии положительных реакций со всеми диагностикумами - злокачественные опухоли.
Недостатком этого способа является высокая трудоемкость исследования, использование дорогостоящих реактивов и сложная интерпретация результатов.
Известен способ дифференциальной диагностики опухолей головного мозга (Патент РФ 2258932, МПК G01N 33/483, публ. 2005), включающий проведение кристаллографического исследования цереброспинальной жидкости. При концентрации белка в образцах ликвора от 0,50 г/л и выше с преобладанием на кристаллографическом рисунке кристаллов в виде угнетенных дендритов диагностируют злокачественную опухоль мозга, а при концентрации белка ниже 0,50 г/л и преобладании кристаллов в виде разветвленных дендритов - доброкачественную опухоль головного мозга.
Недостатком этого способа является то, что диагностика доброкачественной или злокачественной опухоли головного мозга только по преобладанию одного или другого вида кристаллов одной и той же соли (хлорида натрия) является недостаточно точной, т.к. выступает в качестве субъективного признака, что может повлечь серьезную ошибку в дифференциальной диагностике вида объемного образования головного мозга.
Наиболее близким является способ диагностики доброкачественных и злокачественных образований головного мозга (Шабалин В.Н., Шатохина С.Н. Морфология биологических жидкостей человека. М.: Хризостом, 2001. с. 244), включающий исследование цереброспинальной жидкости методом краевой дегидратации в поляризованном свете, выявление в пробе морфотипов в виде дендритов и чужеродных анизотропных структур.
Однако данный способ не обеспечивает достаточно высокую точность дифференциальной диагностики объемных образований головного мозга, поскольку в цереброспинальной жидкости имеются артефакты, которые могут или затушевывать признаки атипии, или их локализацию можно расценить как признак злокачественности объемного образования.
Задачей предлагаемого изобретения является устранение указанных недостатков и повышение точности диагностики за счет выявления расположения морфотипов и чужеродных анизотропных структур цереброспинальной жидкости.
Для решения поставленной задачи исследуют цереброспинальную жидкость методом краевой дегидратации в поляризованном свете и выявляют в пробе морфотипы в виде дендритов и чужеродных анизотропных структур. Перед постановкой метода краевой дегидратации цереброспинальную жидкость предварительно центрифугируют в течение 30 мин при 10000 об/мин, затем пробу надосадочной жидкости помещают в водяную баню при +42°С на 3-5 минут и дегидратируют в течение 3-5 суток. Затем микроскопируют аналитические ячейки и при выявлении в полях зрения единичных чужеродных анизотропных структур вне дендритов или выявлении мелких скоплений чужеродных анизотропных структур с включениями в дендриты и вне дендритов диагностируют доброкачественное образование головного мозга. При обнаружении плотного кольца из чужеродных анизотропных структур вокруг дендритов и с включениями в них - диагностируют злокачественную опухоль.
Такой подход к исследованию - высокоскоростное и длительное центрифугирование дает возможность осадить клетки и все деструктивные элементы в виде организованных частиц. То есть создаются условия для формирования морфотипов непосредственно из цереброспинальной жидкости, которые при переходе в твердую фазу предоставляют диагностическую информацию молекулярного уровня.
Другой новый и важный аспект исследования - это создание условий для осуществления более активной микроагрегации структур, который достигается помещением цереброспинальной жидкости в водяную баню на 3-5 минут при 42°С.
Включение в исследование указанных действий позволяет избежать влияние артефактов на формирование морфотипов и перевести на макроуровень все связующие элементы, характеризующие как физиологические структуры, так и атипичные метаболиты злокачественной опухоли. Все это позволяет значительно улучшить точность дифференциальной диагностики объемных образований.
На фиг. 1 представлен дендрит в окружении единичных чужеродных анизотропных структур (х50); на фиг. 2 показан дендрит, в центре которого имеется мелкое скопление чужеродных анизотропных структур (стрелка), такие же мелкие скопления чужеродных анизотропных структур определяются и вне дендрита (стрелки) (х200); на фиг. 3 представлено плотное кольцо из чужеродных анизотропных структур, располагающихся вокруг дендритов и входящих в их состав (х150).
Способ осуществляется следующим образом:
У пациента с объемным образованием головного мозга забирается цереброспинальная жидкость и доставляется в лабораторию, где ее центрифугируют при 10000 об/мин в течение 30 минут. Затем из надосадочного слоя забирают 0,5 мл в пробирку и помещают ее в водяную баню на 3-5 минут при 42°С. Далее наносят на поверхность предметного стекла не менее трех капель цереброспинальной жидкости по 0,02 мл, накрывают их покровными стеклами для дегидратации в течение 3-5 суток при температуре +25°С и относительной влажности 55-60%. Затем проводят микроскопию аналитических ячеек в поляризованном свете и при выявлении в полях зрения единичных чужеродных анизотропных структур (см фиг. 1, пример 1) или мелких скоплений, которые располагаются вне дендритов и входят в их состав (см фиг. 2, пример 2) диагностируют доброкачественное образование головного мозга, а при обнаружении дендритов, окруженных плотным кольцом из анизотропных структур и входящих в них (см фиг. 3, пример 3) диагностируют злокачественную опухоль.
Диагностика по предлагаемому способу показана на следующих клинических примерах.
Пример 1
Больная К., 62 лет, поступила в отделение нейрохирургии с клиническим диагнозом: объемное образование головного мозга. У больной на дооперационном этапе взяли спинномозговую жидкость и исследовали ее методом краевой дегидратации по предлагаемому способу. При этом после высокоскоростного центрифугирования пробу надосадочной жидкости помещали в водяную баню при +42°С на 5 минут, дегидратировали в течение 3 суток. При микроскопии аналитических ячеек в них определялись единичные чужеродные анизотропные структуры в виде овалов, шаров, не входящих в дендриты (Фиг. 1).
Заключение: доброкачественное образование головного мозга.
Гистологический диагноз после операции: доброкачественная опухоль головного мозга - фибриллярная астроцитома.
Пример 2
Больной С., 57 лет, находился в отделении нейрохирургии с клиническим диагнозом: объемное образование головного мозга.
У больного до операции получили спинномозговую жидкость и исследовали методом краевой дегидратации по предлагаемому способу. При этом после высокоскоростного центрифугирования пробу надосадочной жидкости помещали в водяную баню при +42°С на 3 минуты и дегидратировали в течение 4 суток. При микроскопии аналитических ячеек определялись дендриты, внутри которых и вне их выявлялись небольшие скопления мелких чужеродных анизотропных структур в виде лепестков, овалов, треугольников (Фиг. 2).
Заключение: доброкачественное образование головного мозга.
Во время проведения операции была установлена аневризма головного мозга.
Пример 3
Больной А., 66 лет, находился в отделении нейрохирургии с клиническим диагнозом: объемное образование головного мозга.
У больного до операции получили спинномозговую жидкость и исследовали методом краевой дегидратации по предлагаемому способу. При этом после высокоскоростного центрифугирования пробу надосадочной жидкости помещали в водяную баню при +42°С на 4 минуты и дегидратировали в течение 5 суток. При микроскопии аналитических ячеек выявлялись дендриты, которые были окружены плотным кольцом из чужеродных анизотропных структур и входили в дендриты (Фиг. 3).
Заключение: злокачественная опухоль головного мозга.
Гистологический диагноз после операции: злокачественная опухоль - глиобластома.
Таким образом, предлагаемый способ диагностики предоставляет наиболее четкие признаки, позволяющие дифференцировать доброкачественные образования от злокачественных опухолей на дооперационном этапе обследования пациента. Такая информация всегда востребована врачом для определения дальнейшей тактики ведения больного, оптимальных способов его лечения и профилактики возможных осложнений в процессе лечения.
Следует отметить, что изменение проницаемости гематоэнцефалического барьера при развитии объемных образований головного мозга приводит к деструкции его структур с последующим развитием иммунных реакций, направленных против антигенов мозга и опухоли, а также элиминацией мозговых и опухолеспецифических веществ в кровь и цереброспинальную жидкость. Эти структуры могут быть визуализированы при переводе цереброспинальной жидкости в твердую фазу методом краевой дегидратации. Элементы тканевых метаболитов мозга формируют специфические образования с отличительными признаками, указывающими на тяжесть конкретной патологии, вызывающую процесс деструкции.
В нейрохирургическом отделении с помощью предлагаемого способа диагностики было обследовано 44 больных с объемными образованиями головного мозга на дооперационном этапе. При исследовании морфотипов цереброспинальной жидкости больных было диагностировано 28 случаев доброкачественных образований и 16 - злокачественных опухолей. Дальнейшее комплексное обследование больных, включая гистологическое заключение, подтвердило злокачественную опухоль у всех 16 больных. Среди 28 пациентов с доброкачественными образованиями у 7 диагностирована аневризма головного мозга, а у 21 пациента -доброкачественная опухоль.
Таким образом, предлагаемый способ позволяет с высокой достоверностью дифференцировать доброкачественное или злокачественное объемное образование головного мозга на дооперационном этапе. Способ не является трудоемким, не требует дополнительного использования дорогостоящих препаратов, высокоэкономичен и может быть широко использован в нейрохирургической практике для оценки прогноза течения заболевания, выбора оптимальной тактики и метода лечения больных с объемными образованиями головного мозга, направленных на улучшение качества жизни и увеличение ее продолжительности.