ПОЛИМОРФИЗМ ЛОКУСА CSN2 В ГРУППЕ СКОТА ДЖЕРСЕЙСКОЙ ПОРОДЫ

Выводы. В результате исследования выявлена связь между ЧЧ генотипом голштинских быков-производителей и некоторыми показателями хозяйственно-ценных признаков, а именно индексом фертильности дочерей и индексом стельности дочерей.

Список литературы

1. Ковалюк Н. В. и др. Выявление возможных причин и последствий распространения отдельных аллельных вариантов локуса BoLA-DRB3 в группах голштинского и айрширского скота // Генетика. 2010. Т. 46. №. 3. С. 429-432.

2. Ковалюк Н. В., Сацук В. Ф., Волчен-ко А. Е. Изменчивость гена BoLA-DRB3 у крупного рогатого скота молочного направления продуктивности и его влия-

ние на параметры жизнеспособности // Генетика. 2012. Т. 48. №. 8. С. 962-962.

3. Brujeni G. N., Ghorbanpour R., Es-mailnejad A. Association of BoLA-DRB3. 2 alleles with BLV infection profiles (persistent lymphocytosis/lymphosarcoma) and lymphocyte subsets in Iranian Holstein cattle // Biochemical genetics. 2016. V. 54. №. 2. P. 194-207.

4. Juliarena M. A. et al. Hot topic: Bovine leukemia virus (BLV)-infected cows with low proviral load are not a source of infection for BLV-free cattle // Journal of dairy science. 2016. V. 99. №. 6. P. 4586-4589.

5. Murakami H. et al. Variations in the viral genome and biological properties of bovine leukemia virus wild-type strains // Virus research. 2018. V. 253. P. 103-111.

D01:10.34617/wc15-0m10 УДК 636.224.082.2

ПОЛИМОРФИЗМ ЛОКУСА CSN2 В ГРУППЕ СКОТА ДЖЕРСЕЙСКОЙ ПОРОДЫ

Ковалюк Наталья Викторовна, д-р биол. наук Якушева Людмила Ивановна, канд. биол. наук Шахназарова Юлия Юрьевна

ФГБНУ «Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии» г. Краснодар, Российская Федерация

А2 молоко становится всё более популярным в разных странах мира. С использованием методов ПЦР/ПДРФ нами установлена частота встречаемости ценного в хозяйственном отношении генотипа А2А2 в группе скота джерсейской породы, принадлежащей одному из российских хозяйств. Частота встречаемости желательного генотипа А2А2 в группе скота джерсейской породы составила 0,60, аллель А2 встречается с частотой 0,76. В сравнении с крупным рогатым скотом голштинской и айрширской пород, у джерсейского скота наблюдается значительно более высокая частота встречаемости генотипа А2А2 (в среднем она выше на 35-40 %).

Ключевые слова: локус CSN2; полиморфизм; джерсейская порода

CSN2 LOCUS POLYMORPHISM IN THE CATTLE OF THE JERSEY BREED

Kovalyuk Natalia Viktorovna, Dr. Biol. Sci. Yakusheva Lyudmila Ivanovna, PhD Biol. Sci.

Shakhnazarova Yulia Yurievna

Krasnodar Research Centre for Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Krasnodar, Russian Federation

A2 milk is getting more and more popular in different countries of the world. Using PCR / RFLP methods, we have established the frequency of occurrence of the economically valuable A2A2 genotype in a group of Jersey cattle belonging to one of the Russian farms. The frequency of occurrence of the desired A2A2 genotype in the cattle of the Jersey breed was 0.60, the A2 allele was found with a frequency of 0.76. Compared with cattle of Holstein and Ayrshire breeds, Jersey cattle have a significantly higher frequency of occurrence of the A2A2 genotype (on average, it is 35-40 % higher). Key words: CSN2 locus; polymorphism; Jersey breed

В последние годы А2 молоко становится всё более популярным в разных странах мира благодаря исследованиям, указывающим на потенциальную пользу для здоровья этого вида молока. Исследования, проведенные в девятнадцати странах (Великобритания, Финляндия, Ирландия, Швеция, Дания, Франция, Германия, Исландия, Норвегия, Австрия, Швейцария, США, Япония, Израиль, Австралия, Новая Зеландия, Венгрия, Венесуэла и Канада) показали, что существует связь между потреблением р-казеина А1 и различными заболеваниями [2].

При расщеплении ферментами ЖКТ молока, содержащего фракцию ^-казеина А1 (полученного от коров с иными от А2А2 генотипами), образуется пептид казоформин 7 (ВСМ7) в значительно большем количестве, чем при соответствующем расщеплении молока, содержащего фракцию ^-казеина А2 (полученного от коров с генотипом А2А2).

Более высокий уровень опиоидного пептида ВСМ7 связан с более высокими показателями заболеваемости ишемиче-ской болезнью сердца, неврологическими расстройствами, такими как аутизм и шизофрения. ВСМ-7 - возможная причина неожиданного синдрома младенческой смерти [3]. Вероятно опиоидный пептид ВСМ-7 имеет более высокое сродство по сравнению с иными метаболитами к ряду рецепторов мозговой ткани, иммунных клеток и клеток кишечника и запускает реакции воспаления, особенно у детей и людей с нарушениями функции пищеварения [4].

В исследовании СЫа et а1. (2017), приведены доказательства того, что молочный белок А1 р-казеина коров является одной из причин диабета типа 1 у людей с генетическими факторами риска [5].

При изучении патологической симптоматики после потребления молока А2 и А1 группой взрослых людей с непереносимостью молока (п=600) установлены значительные различия для симптомов вздутия живота, боли в животе, частоты стула и консистенции стула (все Р<0,0001) в пользу употребления молока А2 [6]. Похожие результаты получены в другом исследовании [7]. Показано, что А1-подобные типы бета-казеина вызывают воспалительную реакцию в кишечнике через активацию пути ^2, чего нельзя сказать о типах А2 [1].

Молоко А2 в рецептуре смесей для питания детей раннего возраста, значительно снижает концентрацию ВСМ7 в единице объема продукции [8]. Молоко А2 получают от коров - носителей генотипа А2А2 по локусу бета-казеина ^N2).

Стадо, где все животные имеют генотип А2А2, можно получить только путем отбора животных с помощью однократного генетического тестирования и последующего скрещивания коров с генотипом А2А2 с быками такого же генотипа.

Для джерсейской породы, согласно литературным данным, характерна относительно низкая частота встречаемости нежелательного аллеля А1. Так частота аллеля А1 в Гернзейской, Браун Швицкой, Джерсейской, Голштинской, Айрширской и красных датских породах крупного ро-

гатого скота составляет около 4-2 %, 3430 %, 50-37 %, 56-47 %, 60-51 % и 77 %, соответственно [1].

Цель проведенных исследований -установить частоту встречаемости ценного в хозяйственном отношении генотипа А2А2 в группе скота джерсейской породы, принадлежащей одному из российских хозяйств.

Методика исследований. Исследования проводились на базе лабораторий биотехнологии ФГБНУ КНЦЗВ и молеку-лярно-генетической экспертизы ООО НПО «Юг-Плем». Объектом исследования являлись образцы крови 250 телок джерсейской породы ООО «Аргоальянс Инвест».

Для выделения ДНК из образцов использовались наборы реагентов Diatom Prep 100 (ООО «Лаборатория Изоген», г. Москва). Для постановки ПЦР реакции использовали наборы реагентов Gene Pak PCR Core (ООО Лаборатория «Изоген», г. Москва) и праймеры следующей последовательности:

5'AGG GAT GTT TTG TGG GAG GCT CTT3' 5'ATA AAA TCC ACC CCT TTG CCC AGA 3'

Для проведения ПДРФ анализа нами использована эндонуклеаза BstDEI (№ Е227, НПО «СибЭнзим).

Визуализацию фрагментов рестрикции проводили в 2,5 % агарозном геле (рис.1).

В DBODDGEQES

Рисунок 1 - Электрофореграмма продуктов гидролиза амплификатов участка гена CSN2 эндонуклеазой рестрикции BstDEI 4, 5,8, 9,10 - генотип А1А2 6,7 - генотип А1А1 1,2,3 - генотип А2А2 11 - маркер молекулярного веса

Для подсчета частот генотипов использовали формулу:

Р(А) = (2М+^)/2п, где N1 - число гомозигот по исследуемому аллелю, а N2 - число гетерозигот, п - объем выборки.

Результаты исследований и их обсуждение. По методике, описанной выше, нами были генотипированы по ло-кусу CSN2 250 голов телок джерсейской

породы. Телки получены от завезенных ООО «Аргоальянс Инвест» нетелей.

Таблица 1 породы

Выводы. Таким образом, частота встречаемости желательного генотипа А2А2 в группе скота джерсейской породы составила 0,60, аллель А2 встречается с частотой 0,76, А1 - 0,24. В сравнении с крупным рогатым скотом голштинской и айрширской пород, у джерсейского скота наблюдается значительно более высокая частота встречаемости генотипа А2А2 (в среднем на 35-40 %).

Список литературы

1. Haq M.R., Kapila R., Sharma R., Saliganti V., Kapila S. Comparative evaluation of cow p-casein variants (A1/A2) consumption on Th2-mediated inflammatory response in mouse gut // Eur J Nutr. - 2014.- Jun;53(4).-Р. 1039-1049. doi: 10.1007/s00394-013-0606-7

2. Parashar A., Saini R. K. A1 milk and its controversy-a review // International Journal of Bioassays.- 2015. - № 4.12.- P: 46114619.

3. Kaminski S., Cieslinska A., Kostyra E. Polymorphism of bovine beta-casein and its potential effect on human health // J Appl Genet 48:189-98, 2007.-

DOI: 10.1007/BF03195213

4. Parashar A., Saini R. K. A1 milk and its controversy-a review // International Journal of Bioassays.- 2015. - № 4.- P: 4611-4619

Частоты встречаемости CSN2 генотипов в изученной группе скота представлены в таблице 1.

5. Chia J.S.J., McRae J.L., Kukuljan S., Woodford K., Elliott R.B., Swinburn B., Dwyer K.M. A1 beta-casein milk protein and other environmental pre-disposing factors for type 1 diabetes // Nutr Diabetes - 2017. - Pubmed reference: 28504710.

DOI: 10.1038/nutd.2017.16

6. He M., Sun J., Jiang Z.Q., Yang Y.X. Effects of cow's milk beta-casein variants on symptoms of milk intolerance in Chinese adults: a multicentre, randomised controlled study // Nutr J 16:72 - 2017. -DOI: 10.1186/s12937-017-0275-0

7. Woodford Ho. S., Kukuljan K., Pal S. Comparative effects of A1 versus A2 beta-casein on gastrointestinal measures: a blinded randomised cross-over pilot study // Eur J Clin Nutr 68:994-1000, 2014. Pubmed reference: 24986816.

DOI: 10.1038/ejcn.2014.127

8. Duarte-Vázquez M.Á., García-Ugalde C., Villegas-Gutiérrez L.M., García-Almendárez B.E., Rosado J.L. Production of Cow's Milk Free from Beta-Casein A1and Its Application in the Manufacturing of Specialized Foods for Early Infant Nutrition // Foods 6:- 2017. Pubmed reference: 28704923.

DOI: 10.3390/foods6070050

- Частоты встречаемости CSN2 генотипов в группе телок джерсейской

Частоты встречаемости CSN2 генотипов в группе телок джерсейской породы

А1А1 А1А2 А2А2

0,08 0,32 0,60