ЗАМЕЩЕННЫЕ 2-МЕТИЛИДЕН-5-(ФЕНИЛАМИНО)-2,3-ДИГИДРОТИОФЕН-3-ОНЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЛЕЙКОЗОВ С ТРАНСЛОКАЦИЯМИ MLL-ГЕНА И ДРУГИХ ОНКОЛОГИЧЕСКИХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
SUBSTITUTED 2-METHYLIDEN-5-(PHENYLAMINO)-2,3-DIHYDROTIOPHEN-3-ONE FOR TREATMENT OF LEUKEMIAS WITH TRANSLOCATIONS OF MLL-GENE AND OTHER ONCOLOGICAL DISEASES

Область техники
Данное изобретение относится к химии органических соединений, фармакологии и медицине и касается профилактики и терапии онкологических заболеваний, в частности, лейкозов с транслокациями MLL-гена с помощью нового класса химических соединений, обладающих повышенной эффективностью, а также повышенной селективностью и биодоступностью.
Уровень техники
Несмотря на существенный прогресс, достигнутый за последние десятилетия в лечении онкогематологических заболеваний, ряд специфических разновидностей этой группы нозологий остается трудноизлечимым. Особенно остро данная проблема стоит при лечении острых лейкозов с транслокациями MLL-гена, в первую очередь у детей младшего возраста [J Clin Oncol. 1999; 17(1): 191-6]. Примерно треть (25-35%) случаев злокачественных новообразований у детей составляют лейкемии или лейкозы [Leukemia 2007, 21: 2258-2263], из которых наиболее частой формой является острая лимфобластная лейкемия (ОЛЛ), составляющая приблизительно 80% от всех детских лейкемий [Smith MA, et al.: Cancer incidence and survival among children and adolescents: United States SEER Program 1975-1995. Bethesda, Md: National Cancer Institute, SEER Program, 1999. NIH Pub. No. 99-4649., pp 17-34]. В настоящее время в США и странах Западной Европы процент 5-летней безрецидивной выживаемости детей с ОЛЛ достигает приблизительно 80%. Однако, выживаемость детей в возрастной группе до 1 года существенно ниже. Несмотря на то, что 90-95% младенцев с ОЛЛ достигают ремиссии после первоначальной усиленной терапии, частые рецидивы болезни в течение первых 12 месяцев приводят к снижению уровня 5-летней выживаемости до 30-50%.
Одним из основных неблагоприятных прогностических признаков является наличие транслокации гена MLL (Mixed Lineage Leukemia, мультилинеарная лейкемия), обнаруживаемой в 70-80% случаев ОЛЛ у маленьких детей [http://www.medicinenet.com/script/main/art.asp?articlekey=19710]. Транслокация этого гена ассоциирована со снижением срока 5-летней безрецидивной выживаемости детей до 13-34%. MLL транслокации также обнаруживаются в случаях вторичных, ятрогенных, острых миелоидных лейкемий (ОМЛ), возникающих после лечения ингибиторами топоизомеразы-2 независимо от возраста пациентов. Следует отметить, что порядка 10% всех случаев острой миелоидной лейкемии у взрослых приходится на случаи MLL-лейкемии [ASH Education BookDecember 10, 2011 vol. 2011 no. 1: 354-360], что является плохим прогностическим признаком - средняя пятилетняя выживаемость взрослых пациентов с ОМЛ с транслокацией MLL-гена составляет всего 5-10% [J Med 1993; 329: 909-914]. Помимо ОМЛ, транслокация MLL-гена возникает также и у взрослых больных с ОЛЛ. Общая частота возникновения ОМЛ и ОЛЛ с наиболее распространенными транслокациями MLL-гена во всех возрастных группах составляет приблизительно 7200 случаев в мире ежегодно [J. Haematol. 1999, 106: 614-62].
В настоящее время в клинической практике нет одобренной регуляторами таргетной терапии, показанной при острых лейкозах с MLL-транслокацией, несмотря на проходящие клинические исследования ряда перспективных препаратов из класса эпигенетических модуляторов. Как правило, в современной клинической практике для лечения MLL-лейкозов используются агрессивная химиотерапия и трансплантация костного мозга. Несмотря на достаточно высокие показатели эффективности лечения у детей, больных ОЛЛ, безрецидивная выживаемость невелика. Особенно неблагоприятен прогноз для пациентов с MLL-транслокацией: для них безрецидивная выживаемость не превышает 40%. Кроме того, использование больших доз химиотерапевтических препаратов приводит к серьезным побочным эффектам и снижению качества жизни пациентов. Таким образом, проблема поиска альтернативной, эффективной и более безопасной терапии лейкозов с транслокациями MLL-гена стоит особенно остро.
Известно несколько типов ингибиторов бромодоменов BRD2/3/4 обладающих противоопухолевой активностью на животных моделях MLL лейкемии [Nature 2011; 478 (7370): 529-533]. Также было показано, что низкомолекулярные ингибиторы некоторых протеинкиназ, таких как GSK-3 [Nature 2008; 455: 1205-1209], FLT3 [Front Oncol 2014; 4: 263], CDK6 [Blood 2014; 124: 5-6], EPHA7 [Proc Natl Acad Sci USA. 2007; 104: 14442-14447] могут являться новыми эффективными препаратами для лечения лейкозов с MLL-транслокациями. Дополнительно была изучена роль других биомишеней в развитии и поддержании патогенеза этого типа лейкозов: HSP-90, Mcl-1, Ras, гистондеацетилазы HDAC, ДНК метилтрансфераза, EZH2 [Blood 2009; 113: 6061-6068]. Ряд ингибиторов протеинкиназ и бромодоменов BRD проходят клинические исследования для экспериментальной терапии лейкозов с MLL-транслокациями, но пока не один препарат не одобрен для применения. Следует отметь, что ингибиторы BRD и CDK6 помимо своих основных мишеней также ингибируют и другие близкородственные биомишени, и не обладают высокой избирательной цитотоксичностью по отношению к MLL-лейкозным клеточным линиям. Кроме того, ингибиторы протеинкиназ часто теряют свою противоопухолевую эффективность вследствие развития резистентности, ассоциированной с мутациями биомишени.
Для преодоления этих препятствий были разработаны новые препараты, направленно воздействующие на молекулярные мишени белкового комплекса MLL, которые критически важны для развития и поддержания этой патологии [Haematologica 2009; 94(7): 983-993]. К числу таких препаратов относятся ингибиторы гистон Н3 лизин 79 метилтрансферазы DOT1L [J Med Chem. 2013; 56(22): 8972-8983] и ингибиторы белок-белкового взаимодействия комплекса menin-MLL- [J Med Chem. 2016; 59(3): 892-913]. В настоящее время лишь ингибитор метилтрансферазы DOT1L - препарат Pinometostat (WO 2016090271) проходит клинические испытания для терапии острых лейкозов с транслокацией MLL гена, как в режиме монотерапии, так и в комбинации с другими противоопухолевыми препаратами. Ингибиторы белок-белкового взаимодействия MLL-menin [WO 2016197027] обладают высокой избирательной цитотоксичностью по отношению к злокачественным клеточным линиям с транслокацией гена MLL и также демонстрируют значительную противоопухолевую активностью на ксенографтных моделях [Cancer Cell 2015; 27: 1-14].
Для достижения селективного цитотоксического воздействия на определенный тип клеток можно использовать и другие подходы, не связанные с селективной модуляцией специфического онкогена малыми молекулами. Одним из таких подходов является использование специально сконструированных нетоксических пролекарств, которые в результате внутриклеточной метаболической активации, присущей только целевому типу клеток, высвобождают цитотоксическое лекарство внутри клетки, что приводит к их гибели и, как следствие, к противоопухолевому эффекту.
Хорошо известно, что определенные типы клеток, такие как моноцитарные клетки (моноциты), макрофаги, дендритные клетки, гепатоциты, эпителий легкого и некоторые другие экспрессируют в больших количествах фермент карбоксилэстеразу-1 (hCE1), которая гидролизует сложные эфиры определенного строения, в то время как экспрессия hCE1 в других тканях и органах, за некоторыми исключениями, ограничена [Leukemia Lymphoma 2000; 39: 257-270, Proc Natl Acad Sci USA 2004; 101: 6062-6067, Biochem Pharmacol 2005; 70: 1673-1684]. Значительная экспрессия hCE1 характерна для клеточных линий лейкозов с транслокациями MLL-гена, широко используемых в экспериментальной биологии, таких как ТНР-1, U937 и MV-411 [http://www.proteinatlas.orq/ENSG00000198848-CES1/cell]. Клеточные линии гепатоклеточной карциномы HepG2 и аденокарциномы легкого А549 также экспрессируют hCE1 [RSC Adv., 2016, 6: 4302-4309].
Таким образом, сохраняется высокая необходимость в разработке новых эффективных лекарственных средств с новым механизмом действия для терапии онкологических заболеваний, связанных со злокачественной трансформацией клеток, экспрессирующих фермент карбоксилэстеразу-1 hCE1, в частности в терапии лейкозов с транслокациями MLL-гена.
Раскрытие изобретения
Задачей настоящего изобретения является разработка и создание новых соединений эффективных для терапии онкологических заболеваний, а именно онкологических заболеваний, связанных со злокачественной трансформацией клеток, экспрессирующих фермент hCE1 (карбоксилэстераза-1), в частности, в терапии лейкозов с транслокацией MLL-гена.
Техническим результатом изобретения является разработка и получение новых химических соединений, обладающих высокой эффективностью для лечения онкологических заболеваний, а именно для лечения онкологических заболеваний, связанных со злокачественной трансформацией клеток, экспрессирующих фермент карбоксилэстеразу hCE1, а также высокой селективностью в отношении опухолевых заболеваний, связанных со злокачественной трансформацией клеток, экспрессирующих фермент карбоксилэстеразу hCE1, в частности опухолей с транслокацией MLL-гена, в частности лейкозов с транслокацией MLL-гена. Данные соединения являются перспективными для применения в терапии онкологических заболеваний, в том числе онкологических заболеваний в транслокацией MLL-гена, например лейкозов с транслокацией MLL-гена.
Указанный технический результат достигается посредством разработки и создания соединений общей формулы (I), общей формулы (II) или общей формулы (III):
,
,
,
или их стереоизомеров или энантиомеров, таутомеров, фармацевтически приемлемых солей, сольватов или гидратов, где:
1
2
1
2
1
6
3
9
2
6
2
6
3
12
5
12
R, R выбираются независимо и представляют собой -Н, замещенный или незамещенный -С-С-алкил, замещенный или незамещенный -С-С-циклоалкил, замещенный или незамещенный -С-С-алкенил, замещенный или незамещенный -С-С-алкинил, причем заместители R и R, вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, могут образовывать замещенный или незамещенный -С-С-циклоалкил, замещенный или незамещенный -С-С-циклоалкенил;
А выбирается независимо и представляет собой:
, , , ,  или ,
причем звездочкой указано место присоединения заместителей;
1
a
b
2
2
X выбирается независимо и представляет собой -О-, -S-, -S(=O)-, -S(=O)-, -C(R)-, -NR-;
2
2
n
X выбирается независимо и представляет собой незамещенную или замещенную алкиленовую цепь -(СН)-, где n принимает значения от 1 до 4;
1
c
c
Y выбирается независимо и представляет собой -С≡С- или -CR=CR-;
2
b
2
Y выбирается независимо и представляет собой -C(R)-;
a
a
1
6
1
6
3
9
3
6
R выбирается независимо и представляет собой -Н, галоген, -ОН, -CN, -C-С-алкил, -О-С-С-алкил, -С-С-циклоалкил, фенил, пяти или шестичленный гетероарил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О, 3÷12-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О, причем два заместителя R, вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, могут образовывать -С-С-циклоалкил, 3÷12-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О;
b
b
1
6
3
9
3
6
R выбирается независимо и представляет собой -Н, -C-С-алкил, -С-С-циклоалкил, 5÷10-членный-гетероарил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О, или 3÷12-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О, причем два заместителя R, вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, могут образовывать -С-С-циклоалкил;
c
1
6
R выбирается независимо и представляет собой -Н, галоген, замещенный или незамещенный -C-С-алкил;
3
1
6
3
9
6
10
R выбирается независимо и представляет собой -Н, замещенный или незамещенный -C-С-алкил, замещенный или незамещенный -С-С-циклоалкил, замещенный или незамещенный -С-С-арил, замещенный или незамещенный 5÷10-членный гетероарил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О, 3÷12-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О, или представляет собой
;
d
d'
d
d'
1
6
6
10
3
12
5
12
R, R выбираются независимо и представляют собой -Н, замещенный или незамещенный -C-С-алкил, замещенный или незамещенный -С-С-арил, замещенный или незамещенный 5÷6-членный гетероарил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и О, замещенный или незамещенный 3÷12-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О, причем два заместителя R и R, вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, могут образовывать замещенный или незамещенный -С-С-циклоалкил, замещенный или незамещенный -С-С-циклоалкенил, замещенный или незамещенный 3÷12-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О;
3
e
e
2
Y выбирается независимо и представляет собой -F, -CN, -OR, -N(R) или замещенный или незамещенный 3÷12-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О;
e
1
6
1
6
2
6
6
10
R выбирается независимо и представляет собой -Н, -С(=O)-С-С-алкил, замещенный или незамещенный -C-С-алкил, замещенный или незамещенный -С-С-алкенил, замещенный или незамещенный -С-С-арил, замещенный или незамещенный бензил, замещенный или незамещенный 5÷6-членный гетероарил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О, или замещенный или незамещенный 3÷12-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О;
3
a
b
2
X выбирается независимо и представляет собой -О-, -S-, -C(R)- или -NR-;
4
_
1
6
R выбирается независимо и представляет собой галогенированный -С-Салкил, замещенный или незамещенный 5÷6-членный гетероарил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О, или замещенный или незамещенный 3÷12-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и О;
4
a
b
2
X выбирается независимо и представляет собой -О-, -S-, -C(R) или -NR-;
5
2
n
X представлет собой незамещенную или замещенную алкиленовую цепь -(СН)-, где n принимает значения от 1÷4;
6
X выбирается независимо и представляет собой -О- или -S-;
5
1
6
2
6
6
10
R выбирается независимо и представляет собой -Н, замещенный или незамещенный -C-С-алкил, замещенный или незамещенный -С-С-алкенил, замещенный или незамещенный -С-С-арил, замещенный или незамещенный 5÷6-членный гетероарил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О, замещенный или незамещенный 3÷12-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О;
7
9
f
X, X выбираются независимо и представляют собой -N- или -CR-;
8
X выбирается независимо и представляет собой -О- или -S-;
f
b
2
2
1
6
1
6
6
10
R выбирается независимо и представляет собой -Н, галоген, -N(R), -CN, -NO, замещенный или незамещенный -С-С-алкил, замещенный или незамещенный -O-С-С-алкил, замещенный или незамещенный -С-С-арил, замещенный или незамещенный 5÷6-членный гетероарил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О, замещенный или незамещенный 3÷12-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О;
10
g
X выбирается независимо и представляет собой N или -CR-;
g
e
b
2
2
1
6
2
6
1
6
6
10
R выбирается независимо и представляет собой -Н, галоген, -CN, -NO, -OR, -N(R), замещенный или незамещенный -C-С-алкил, замещенный или незамещенный -С-С-алкинил, замещенный или незамещенный -O-C-С-алкил, замещенный или незамещенный -С-С-арил, замещенный или незамещенный -О-фенил, замещенный или незамещенный 5÷6-членный гетероарил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и О, замещенный или незамещенный 3÷12-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О;
h
b
b
2
2
1
6
6
10
R выбирается независимо и представляет собой -Н, -галоген, -CN,- NO, -OR, -N(R), замещенный или незамещенный -C-С-алкил, замещенный или незамещенный -С-С-арил, замещенный или незамещенный 5÷6-членный гетероарил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О, или замещенный или незамещенный 3÷12-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О;
6
1
6
2
6
2
6
6
10
R выбирается независимо и представляет собой -Н, замещенный или незамещенный -C-С-алкил, замещенный или незамещенный -С-С-алкенил, замещенный или незамещенный -С-С-алкинил, замещенный или незамещенный -С-С-арил, замещенный или незамещенный 5÷6-членный гетероарил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О, замещенный или незамещенный 3÷12-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О;
11
j
X выбирается независимо и представляет собой -N- или -CR-;
12
j
X выбирается независимо и представляет собой -N- или -CR-;
j
e
e
3
2
2
2
1
6
2
4-
2
4-
3
12
6
10
R выбирается независимо и представляет собой -Н, -галоген, -CN, -CF, -CHF, -NO, -OR, -N(R), замещенный или незамещенный -C-С-алкил, замещенный или незамещенный -С-Салкенил, замещенный или незамещенный -С-Салкинил, замещенный или незамещенный -С-С-циклоалкил, замещенный или незамещенный -С-С-арил, замещенный или незамещенный 5÷6-членный гетероцикл, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и О, замещенный или незамещенный 3÷10-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и О;
7
3
2
2
t
2
s
1
6
2
4
2
4
3
12
6
10
R выбирается независимо и представляет собой -F, -CN, -CF, -CHF, -(CH)O(CH), замещенный или незамещенный -C-С-алкил, замещенный или незамещенный -С-С-алкенил, замещенный или незамещенный -С-С-алкинил, замещенный или незамещенный -С-С-циклоалкил, замещенный или незамещенный -С-С-арил, 5÷6-членный гетероцикл, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О, замещенный или незамещенный 3÷12-членный гетероциклил, содержащегоий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О;
t и s принимают значения от 1 до 10;
В выбирается независимо и представляет собой:
,
причем звездочкой указано место присоединения заместителей;
k
2
3
2
2
1
6
1
6
2
4
2
4
3
12
каждый заместитель R выбирается независимо и представляет собой -Н, галоген, -CN, -NO, -CF, -CHF, CHF, замещенный или незамещенный -C-С-алкил, замещенный или незамещенный -O-C-С-алкил, замещенный или незамещенный -С-С-алкенил, замещенный или незамещенный -С-С-алкинил или замещенный или незамещенный -С-С-циклоалкил;
L
L
2
Q выбирается независимо и представляет собой -Н, -C(=O)-R или -S(=O)-R;
L
b
2
1
6
6
10
R выбирается независимо и представляет собой -N(R), замещенный или незамещенный -C-C-алкил, замещенный или незамещенный -С-С-арил, замещенный или незамещенный 5÷6-членный гетероарил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О, или замещенный или незамещенный 3÷12-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О.
Отдельный подкласс соединений, представляющих интерес, включает соединения общей формулы (Ia), общей формулы (IIa) или общей формулы (IIIa):
,
,
,
3
где R представляет собой:
,
причем звездочкой указано место присоединения заместителя;
1
2
1
2
1
6
3
9
R, R выбираются независимо и представляют собой -Н, или замещенный или незамещенный -C-C-алкил, причем заместители R и R, вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, могут образовывать замещенный или незамещенный -С-С-циклоалкил;
k
1
6
3
6
каждый заместитель R выбирается независимо и представляет собой -Н, -F, -Cl, -CN, -C-С-алкил, -С-С циклоалкил;
8
1
6
3
9
6
10
R выбирается независимо и представляет собой -Н, замещенный или незамещенный -C-С-алкил, замещенный или незамещенный -С-С-циклоалкил, замещенный или незамещенный -С-С-арил, замещенный или незамещенный 5÷6-членный гетероарил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О, замещенный или незамещенный 3÷10-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О;
9
1
6
R выбирается независимо и представляет собой -Н или замещенный или незамещенный -C-С-алкил.
Отдельный подкласс соединений, представляющих интерес, включает соединения общей формулы (Ib), общей формулы (IIb) или общей формулы (IIIb):
,
,
,
3
где R представляет собой:
,
причем звездочкой указано место присоединения заместителя;
1
2
1
2
1
6
3
12
R, R выбираются независимо и представляют собой -Н, замещенный или незамещенный -C-С-алкил, причем заместители R и R, вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, могут образовывать замещенный или незамещенный -C-C-циклоалкил;
k
1
4
каждый заместитель R выбирается независимо и представляет собой -Н, -F, -Cl, -С-С-алкил;
4
n
2
Y выбирается независимо и представляет собой -C(R)-;
n
b
b
1
6
2
R выбирается независимо и представляет собой -Н, -F, -Cl, замещенный или незамещенный -C-С-алкил, -OR, -N(R);
m, v выбираются независимо принимают значения от 1÷6;
5
n
2
2
Y выбирается независимо и представляет собой -О-, -S-, -S(=O)-, -S(=O)-, -C(R)-или заместители вида:
, , , ,  или ;
b
1
6
3
9
R выбирается независимо и представляет собой -Н, замещенный или незамещенный -C-С-алкил, замещенный или незамещенный -С-С-циклоалкил, замещенный или незамещенный 5÷6-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О, или замещенный или незамещенный 3÷9-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О.
Отдельный подкласс соединений, представляющих интерес, включает соединения общей формулы (Ic), общей формулы (IIc) или общей формулы (IIIc):
,
,
,
1
2
1
2
1
6
3
12
где R, R выбираются независимо и представляют собой -Н, замещенный или незамещенный -C-C-алкил, причем заместители R и R, вместе с атомом углерода, к которому они присоединены, могут образовывать замещенный или незамещенный -С-С-циклоалкил;
k
1
4
каждый заместитель R выбирается независимо и представляет собой -Н, -F, -Cl, -С-С-алкил;
h
2
3
1
6
3
6
R выбирается независимо и представляет собой -Н, -галоген, -CHF, -CF, замещенный или незамещенный -C-С-алкил, замещенный или незамещенный -С-С-циклоалкил;
6
1
6
R выбирается независимо и представляет собой замещенный или незамещенный -C-С-алкил;
10
g
X представляет собой -CR-;
g
b
b
2
1
4
R выбирается независимо и представляет собой Н, -Cl, -OR, -N(R), замещенный или незамещенный -С-С-алкил, замещенный или незамещенный 4÷10-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О;
b
1
6
3
9
6
R выбирается независимо и представляет собой -Н, замещенный или незамещенный -C-С-алкил, замещенный или незамещенный -С-С-циклоалкил, замещенный или незамещенный -O-С-арил,замещенный или незамещенный -5÷6-членный-гетероарил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О, или замещенный или незамещенный 4÷9-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О.
В некоторых частных вариантах воплощения изобретения соединения, представляющие интерес, могут быть выбраны из группы:
или
Данное изобретение также относится к применению соединений, являющихся предметом изобретения, для получения фармацевтической композиции для лечения и/или предотвращения онкологического заболевания. В некоторых вариантах воплощения изобретения онкологическое заболевание связано со злокачественной трансформацией клеток, экспрессирующих фермент hCE1 (карбоксилэстераза-1). В некоторых частных вариантах воплощения изобретения заболевание представляет собой лейкоз, злокачественную опухоль печени, мочевого пузыря, бронхов, легких, носоглотки, желудка, толстой кишки, поджелудочной или щитовидной железы, головы, шеи, гладкомышечной мускулатуры, уротелиальную злокачественную опухоль или карциноидную опухоль.
В некоторых частных вариантах воплощения изобретения опухоль характеризуется транслокацией MLL-гена. В некоторых частных вариантах воплощения изобретения опухоль с транслокацией MLL-гена представляет собой лейкоз.
Кроме того, изобретением предусматриваются фармацевтические композиции для лечения и/или предотвращения онкологического заболевания у субъекта, содержащих эффективное количество соединения по изобретению и, по меньшей мере, одно фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
В некоторых частных вариантах воплощения изобретения фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество представляет собой носитель, наполнитель и/или растворитель.
В некоторых частных вариантах воплощения изобретения субъект представляет собой человека или животное.
Изобретение также относится к способу лечения и/или профилактики онкологического заболевание, предусматривающего введения эффективного количества соединения по изобретению.
Изобретение также включает получение соединений общей формулы (I), общей формулы (II) или общей формулы (III).
Определения (термины)
Следующие определения применяются в данном документе, если иное не указано явно. Кроме того, если не указано иное, все вхождения функциональных групп выбираются независимо, два вхождения могут быть как одинаковыми, так и разными.
Термин «hCE1» в данном документе означает фермент карбоксилэстераза-1.
1-6
Термин «алкил» сам по себе или как часть другого заместителя, относится к насыщенным углеводородным группам с прямой или разветвленной цепью, включая углеводородные группы, имеющие указанное число атомов углерода (то есть, C-алкил подразумевает от одного до шести атомов углерода). Примеры алкилов включают метил, этил, н-пропил, изо-пропил.
Термин «алкинил» сам по себе или как часть другого заместителя относится к углеводородным группам, в которых по крайней мере одна углерод-углеродная связь является тройной связью, в то время как остальные связи могут представлять собой простые, двойные или дополнительные тройные связи, включая углеводородные группы, от 2 до 6 атомов углерода. Примеры алкинильных групп включают этинил, 1-пропинил, 2-пропинил и т.д.
Термин «алкенил» сам по себе или как часть другого заместителя относится к углеводородным группам, в которых по крайней мере одна углерод-углеродная связь является двойной связью, в то время как остальные связи могут представлять собой либо простые связи, либо дополнительные двойные связи, включая углеводородные группы, содержащие от 2 до 6 атомов углерода. Примеры алкенильных групп включают этенил, 1-пропенил, 2-пропенил, 1-бутенил, 2-бутенил, 3-бутенил, 2-метил-1-пропенил, 2-метил-2-пропенил и т.п.
Термин «галоген» сам по себе или в части другого термина относится к атому фтора, хлора, брома или йода.
Термин «циклоалкил» в настоящем документе относится к группам, имеющим от 3 до 12 атомов углерода в моно- или полициклической структуре, включая спироциклы. В качестве иллюстрации, циклоалкилы включают, но не ограничиваются, следующими радикалами: циклопропил, циклопентил, циклогексил, бицикло[2.2.2]октанил, спиро[5.5]ундеканил, которые, как и в случае других алифатических или гетероалифатических или гетероциклических заместителей, могут быть замещенными. Термин «гетероцикл», «гетероциклил» или «гетероциклический» означает в настоящем документе неароматические моно- или полициклические системы (насыщенные или частично ненасыщенные), имеющие от трех до двенадцати атомов, содержащие гетероатомы N, О или S. Гетероцикл может быть присоединен к основному фрагменту молекулы через атом азота (N-гетероциклил) либо через атом углерода. Гетероциклы также могут быть замещенными.
Термин «циклоалкенил» означает в настоящем документе частично ненасыщенный циклоалкил, содержащий от 5 до 12 атомов углерода, имеющий в своем составе от одной до двух двойных углерод-углеродных связей.
Термин «арил» в настоящем документе означает группы, содержащие ароматический цикл, имеющий от пяти до десяти атомов углерода. Примером арильных циклических групп является фенил.
Термин «гетероарил», «гетероарильный цикл» как он используется здесь, означает стабильный гетероциклический и полигетероциклический ароматический фрагмент, имеющий 5-10 атомов в цикле. Гетероарильная группа может быть замещенной или незамещенной и может состоять из одного или несколько колец. Возможные заместители включают, помимо прочего, любой из ранее упомянутых заместителей. Примерами типичных гетероарильных циклов являются пяти- и шестичленные моноциклические группы, такие как тиенил, пирролил, имидазолил, пиразолил, пиридил, пиримидинил, пиридазинил, триазинил, тетразолил и т.п.; а также полициклические гетероциклические группы, такие как бензо[b]тиенил, изобензофуранил, изоиндолил, бензимидазолил, и т.п.. Термин «гетероарил» может использоваться эквивалентно с терминами «гетероарильный цикл» или «гетероароматический».
1-3
1-3
Арильная группа или гетероарильная группа (включая гетероарильную часть гетероаралкилов или гетероаралкокси фрагментов и т.п.) могут содержать один или несколько заместителей. Примеры подходящего заместителя на ненасыщенном атоме углерода арильной или гетероарильной группы включают, но не ограничиваются, галоген (F, Cl, Br или I), C-алкил, -CN, -ОН, C-алкил и другие.
Термин «замещенный» должен обозначать, что один или более атом водорода при атоме или группе, упоминаемой как «замещенный», заменен на любую из перечисленных групп, при условии, что упоминаемый атом обладает нормальной валентностью, или что валентность замещаемого соответствующего атома группы не является избыточной, и что замещение приводит к стабильному соединению. Термин «замещенный или незамещенный» означает, что данное соединение или подструктура является либо незамещенным, либо замещенным, как определено в заявке, одним или более заместителями, как упоминается или как определено ниже.
В данном документе алкильная, алкенильная, алкинильная, алкиленовая, циклоалкильная, циклоалкенильная, гетероциклильная, арильная и гетероарильная группы, а также другие подструктуры, содержащие в своем составе по крайней мере один атом водорода, могут замещаться одним или более заместителями:
2
2
3
2
2
1
4
2
4
2
4
3
9
2
2
2
2
2
2
1
6
3
9
z
z
z
z
z
z
z
z
z
z
z
z
z
z
z
-F, -Cl, -Br, -CN, -ОН, -NO, -NH, -CF, -CHF, -CHF, -С-С-алкил, -С-С-алкенил, -C-С-алкинил, -С-С-циклоалкил, -4÷9-членный-гетероциклил, присоединенный через С или N-атомы, -фенил, -5÷6-членный-гетероарил, присоединенный через С или N-атомы, -O-R, -N(R), -NR-C(=O)-R, -NR-S(=O)-R, -S-R, -C(=O)-R, -C(=O)-OR, -C(=O)-N(R), -O-C(=O)-R, -O-C(=O)-(NR), -SO-N(R), -SO-R, в которых каждый R независимо выбран и представляет собой -Н, -C-C-алкил, -С-С-циклоалкил, -5÷6-членный гетероарил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов, независимо выбранных из N, S и/или О, или замещенный или незамещенный 4÷9-членный гетероциклил, содержащий от 1 до 4 гетероатомов.
Данное изобретение содержит только такие комбинации заместителей и производных, которые образуют стабильное или химически возможное соединение. Стабильным или химически возможным соединением называется такое соединение, стабильности которого достаточно для его синтеза и аналитического детектирования. Предпочтительные соединения данного изобретения являются достаточно стабильными и не разлагаются при температуре до 40°С в отсутствие химически активных условий, в течение, по крайней мере, одной недели.
Некоторые соединения данного изобретения могут существовать в таутомерных формах, и это изобретение включает в себя все такие таутомерные формы таких соединений, если не указано иное.
Например, соединения настоящего изобретения могут существовать в виде таутомеров А и В, находящихся в состоянии динамического равновесия. При нормальных условиях их разделение невозможно, поэтому фармакологические свойства соединений настоящего изобретения представляют собой совокупность эффектов таутомеров.
Пример таутомерных форм соединений по изобретению представляет собой:
Если не указано иначе, изображенные здесь структуры также подразумевают и все стереоизомеры, то есть R- и S- изомеры для каждого ассиметричного центра. Кроме того, отдельные стереохимические изомеры, равно как и энантиомеры и диастереомерные смеси настоящих соединений, также являются предметом данного изобретения. Таким образом, данное изобретение охватывает каждый диастереомер или энантиомер, свободный в значительной степени от других изомеров (>90%, а предпочтительно >95% мольной чистоты), так же как и смесь таких изомеров.
Конкретный оптический изомер может быть получен разделением рацемической смеси в соответствии со стандартной процедурой, например путем получения диастереоизомерных солей путем обработки оптически активной кислотой или основанием с последующим разделением смеси диастереомеров кристаллизацией с последующим выделением оптически активных оснований из этих солей. Примерами соответствующих кислот являются винная, диацетилвинная, дибензоилвинная, дитолуолвинная и камфорсульфоновая кислота. Другая методика разделения оптических изомеров заключается в использовании хиральной хроматографической колонки. Кроме того, другой метод разделения включает синтез ковалентных диастереомерных молекул путем реакции соединений изобретения с оптически чистой кислотой в активированной форме или оптически чистым изоцианатом. Полученные диастереомеры можно разделить обычными способами, например, хроматографией, дистилляцией, кристаллизаций или сублимацией, а затем гидролизовать для получения энантиомерно чистого соединения.
Оптически активные соединения данного изобретения могут быть получены с использованием оптически активных исходных материалов. Такие изомеры могут находиться в форме свободной кислоты, свободного основания, эфира или соли.
Настоящее изобретение включает все фармацевтически приемлемые изотопно меченые соединения по настоящему изобретению, в которых один или несколько атомов замещен атомами, имеющими такой же атомный номер, но атомную массу или массовое число, отличные от атомной массы или массового числа, обычно встречающихся в природе.
2
3
11
13
14
36
18
123
125
13
15
15
17
18
32
35
Примеры изотопов, подходящих для включения в соединения по изобретению, включают изотопы водорода, такие как Н и Н, углерода, такие как С, С и С, хлора, такие как Cl, фтора, такие как F, йода, такие как I и I, азота, такие как N и N, кислорода, такие как O, O и O, фософора, такие как Р, и серы, такие как S.
3
14
Некоторые изотопно меченые соединения формулы (I), соединения формулы (II) или соединения формулы (III), например, те, которые включают радиоактивный изотоп, используют в исследованиях распределения лекарственного препарата и/или субстрата в тканях. В частности, с этой целью используют радиоактивные изотопы, такие как тритий, то есть Н, и углерод-14, то есть С, ввиду легкости их введения и доступности средств их обнаружения.
2
Замещение более тяжелыми изотопами, такими как дейтерий, то есть Н, может обеспечить определенные терапевтические эффекты, обусловленные метаболической стабильностью, например, увеличением периода полувыведения in vivo или снижением норм дозирования, и, следовательно, может быть предпочтительным в некоторых случаях.
Изотопно меченые соединения по изобретению могут быть получены обычными способами, известными специалисту в данной области или способами, аналогичными описанным в прилагаемых примерах способов синтеза, при использовании соответствующих изотопно меченых реагентов вместо немеченого ранее применяемого реагента.
2
Фармацевтически приемлемые сольваты в соответствии с изобретением включают сольваты, где растворитель кристаллизации может быть изотопно замещен, например, DO, d6-ацетон, d6-ДМСО.
Термин «сольват» относится к ассоциации или комплексу из одной или нескольких молекул растворителя и соединения по изобретению. Примеры растворителей, образующих сольваты, включают, но ими не ограничиваются, воду, изопропанол, этанол, метанол, ДМСО, этилацетат, уксусную кислоту и этаноламин.
Термин «гидрат» относится к комплексу, где молекулами растворителя является вода.
Соединения настоящего изобретения могут существовать в свободной форме или, если требуется, в виде фармацевтически приемлемой соли или другого производного. Используемый здесь термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к таким солям, которые, в рамках проведенного медицинского заключения, пригодны для использования в контакте с тканями человека и животных без излишней токсичности, раздражения, аллергической реакции и т.д., и отвечают разумному соотношению пользы и риска. Фармацевтически приемлемые соли аминов, карбоновых кислот, фосфонатов и другие типы соединений хорошо известны в медицине. Соли могут быть получены in situ в процессе выделения или очистки соединений изобретения, а также могут быть получены отдельно, путем взаимодействия свободной кислоты или свободного основания соединения изобретения с подходящим основанием или кислотой, соответственно. Примером фармацевтически приемлемых, нетоксичных солей кислот могут служить соли аминогруппы, образованные неорганическими кислотами, такими как соляная, бромоводородная, фосфорная, серная и хлорная кислоты, или органическими кислотами, такими как уксусная, щавелевая, малеиновая, винная, янтарная или малоновая кислоты, или полученные другими методами, используемыми в данной области, например, с помощью ионного обмена. К другим фармацевтически приемлемым солям относятся адипинат, альгинат, аскорбат, аспартат, бензолсульфонат, бензоат, бисульфат, борат, бутират, камфорат, камфорсульфонат, цитрат, циклопентанпропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, формиат, фумарат, глюкогептонат, глицерофосфат, глюконат, гемисульфат, гептанат, гексанат, гидройодид, 2-гидрокси-этансульфонат, лактобионат, лактат, лаурат, лаурил сульфат, малат, малеат, малонат, метансульфонат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, олеат, оксалат, пальмитат, памоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, фосфат, пикрат, пивалат, пропионат, стеарат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоцианат, п-толуолсульфонат, ундеканат, валериат и подобные. Типичные соли щелочных и щелочноземельных металлов содержат натрий, литий, калий, кальций, магний и другие. Кроме того, фармацевтически приемлемые соли могут содержать, если требуется, нетоксичные катионы аммония, четвертичного аммония и амина, полученные с использованием таких противоионов, как галогениды, гидроксиды, карбоксилаты, сульфаты, фосфаты, нитраты, низшие алкил сульфонаты и арил сульфонаты.
Описание рисунков
Рисунок 1. Эффект специфического ингибитора карбоксилэстеразы-1 BNPP ((бис(4-нитрофенил)фосфата) на профиль селективности соединения по примеру 50 на панели злокачественных клеточных линий с экспрессией карбоксилэстеразы hCE1 (MV4-11, U937) и hCE1-отрицательных (CCRF-CEM, SK-Mel-103). Цитотоксичность тестируемого соединения определяли с использованием стандартного флуориметрического метода после 72 часов инкубации в отсутствии или в присутствии BNPP (100 мкмоль/л):
А) Профиль цитотоксичности соединения по примеру 50 на панели из 4-х клеточных линий: MV4-11 и U937 (hCE1-положительные), CCRF-CEM и SK-Mel-103 (hCE1-отрицательные) при инкубации с 0.3% ДМСО (контроль);
Б) Профиль цитотоксичности соединения по примеру 50 на панели из 4-х клеточных линий: MV4-11 и U937 (hCE1-положительные), CCRF-CEM и SK-Mel-103 (hCE1-отрицательные) при инкубации с 0.3% ДМСО в присутствии 100 мкмоль/л BNPP -специфического ингибитора карбоксилэстеразы hCE1.
Рисунок 2. Профиль цитотоксичности соединения по примеру 36 на панели из 4-х клеточных линий: MV4-11 и U937 (hCE1-положительные), CCRF-CEM и SK-Mel-103 (hCE1-отрицательные) при инкубации с 0.3% ДМСО (контроль).
Рисунок 3. Профиль цитотоксичности соединения по примеру 36 на панели из 4-х клеточных линий: MV4-11 и U937 (hCE1-положительные), CCRF-CEM и SK-Mel-103 (hCE1-отрицательные) после инкубации в человеческой плазме (10 мин. инкубации в человеческой плазме (hCE1-отрицательная).
Рисунок 4. Цитотоксичность соединения формулы (I) по отношению к незлокачественным макрофагам (моноцитарные клетки, экспрессирующие карбоксилэстеразу), выделенных из брюшной полости мышей.
Рисунок 5. Цитотоксичность соединения М2 формулы (III) по отношению к незлокачественным макрофагам (моноцитарные клетки, экспрессирующие карбоксилэстеразу), выделенных из брюшной полости мышей.
Рисунок 6. Противоопухолевая активность соединения по примеру 87 на модели подкожно-перевиваемого острого миелоидного лейкоза MV4-11 с транслокацией гена MLL- на самках мышей SCID (n=10) при в/б введении в дозе 100 мг/кг/день. Объем подкожной опухоли в первый день измерения принят за 100%. все объемы опухолей при последующих измерениях соотносились с этой величиной. На момент последнего измерения Т/С=61% (р=0.014). На протяжении эксперимента у животных не наблюдалось явных признаков токсичности.
Рисунок 7. Противоопухолевая активность соединения по примеру 29 на модели подкожно-перевиваемого острого миелоидного лейкоза MV4-11 с транслокацией гена MLL на самках мышей SCID (n=10) при в/б введении в дозе 80 мг/кг/день. Объем подкожной опухоли в первый день измерения принят за 100%. все объемы опухолей при последующих измерениях соотносились с этой величиной. На момент последнего измерения опухоли Т/С=41% (р<0.0001). На протяжении эксперимента у животных не наблюдалось явных признаков токсичности.
Подробное описание изобретения
Осуществление изобретения
Обзор методов получения соединений изобретения
Соединения, являющиеся предметом настоящего изобретения, могут быть получены с использованием описанных ниже синтетических методов. Перечисленные методы не являются исчерпывающими и допускают введение разумных модификаций. Указанные реакции должны проводиться с использованием подходящих растворителей и материалов. При реализации данных общих методик для синтеза конкретных веществ необходимо учитывать присутствующие в веществах функциональные группы и их влияние на протекание реакции. Для получения некоторых веществ необходимо изменить порядок стадий либо отдать предпочтение одной из нескольких альтернативных схем синтеза. Следует понимать, что эти и все приведенные в материалах заявки примеры не являются ограничивающими и приведены только для иллюстрации настоящего изобретения.
Соединения общих формул (I), (II) и (III) могут быть получены согласно общей Схеме 1.
Соединения общей формулы (I) могут быть получены в две синтетические стадии, как указано на Схеме 1. Соединения 1 могут быть получены по реакции доступных алкил 4-галогенацетоацетатов А и фенилизотиоционатов В в присутствии сильного основания, например, гидрида натрия, в подходящем апротонном растворителе, например, ТГФ с выходами 20-80%. Соединения общей формулы (I), содержащие незамещенный атом азота (Q=N-H), получаются сплавлением промежуточных соединений 1 ссоответствующими альдегидами С в присутствии каталитических количеств основных аминов, например 20% мольных этилендиамина диацетата. Соединения общей формулы (II) могут быть получены контролируемым щелочным гидролизом соединений (I) в водной среде, например, с использованием гидроксида лития в системе вода-ТГФ последующим подкислением реакционной среды. Соединения общей формулы (III) могут быть получены термическим декарбоксилированием соединений общей формулы (II) в среде подходящего растворителя, например, ДМСО. Соединения общей формулы (I) и (III), содержащие замещенный атом азота (Q = ацетил, сульфонил) могут быть получены обработкой соединений (I) и (III), при Q=Н соответствующими ацетилхлоридами или сульфохлоридами в присутствии органического основания, например, триэтиамина. Соединения общей формулы (II), содержащие замещенный атом азота (Q = ацетил, сульфонил) могут быть получены щелочным гидролизом N-замещенных соединений (I).
1
2
1
2
1
2
В некоторых воплощениях настоящего изобретения соединения формулы (I) (например, при RRCHOH= циклоалкил, втор-алкил, арил, гетероарил) могут быть получены с высокими выходами согласно Схеме 2 непосредственно из кислот (II) и соответствующих легкодоступных спиртов RRCHOH с использованием различных конденсирующих агентов, таких как CDI, EEDQ, ВОР, TBTU, HBTU, и т.д. в присутствии органического основания (например, триэтиламина или диизопропиламина) в среде подходящего органического растворителя, например, дихлорметана, ДМФ, ДМСО или ацетонитрила. Альтернативно, эфиры общей формулы (I) могут быть получены из кислот общей формулы (II) через промежуточный синтез галогенангидридов, например, хлорангидридов, с последующей их реакцией со спиртами RRCHOH в присутствии основания.
Синтез некоторых специфически-замещенных альдегидов С общей формулы АСНО описан ниже.
Синтез некоторых соединений по изобретению описан ниже.
Реактивы и синтетические методы
Все исходные реагенты и растворители были получены из коммерческих источников и использовались без дополнительной очистки. Реакции, чувствительные к присутствию влаги или кислорода проводили в атмосфере аргона или азота; безводные растворители готовили по стандартным методикам. Растворители для хроматографии имели чистоту «для ВЭЖХ» и применялись без дополнительной очистки. Протекание реакций контролировали при помощи тонкослойной хроматографии (ТСХ) с использованием пластин для тонкослойной хроматографии Merck Silica Gel 60 F-254; для проявления пластин использовали УФ, пары йода или водный раствор перманганата калия. Для препаративной колоночной флэш-хроматографии использовали силикагель Merck SilicaGel 60 (0.015-0.040 мм). Все полученные соединения, если не указано иное, имели чистоту не менее 90% по данным ВЭЖХ анализа при длине волны 254 нм.
ВЭЖХ анализ
ВЭЖХ анализ проводили на приборе Agilent 1200 в следующих условиях:
1. Колонка: Synergy Hydro-RP 250×4.6 мм, 4 мкм;
2. Скорость потока: 1 мл/мин; температура колонки 25°С;
3. Подвижная фаза (изократический режим): ацетонитрил/вода (65:35);
4. УФ детекция при длине волны 254 нм;
ВЭЖХ/МС анализ
ВЭЖХ/МС анализ проводили с использованием хроматографа Agilent 1100 с тандемным масс-спектрометром с детектором химической ионизаций при атмосферном давлении в режиме фиксации положительных и отрицательных ионов (APCI):
1. Тип колонки: Phenomenex Onyx Monolithic С18; 50×4.6 мм, 5 мкм (Part No: СНО-7643);
2. Растворитель для приготовления образцов: 50% ДМСО, 50% ацетонитрил;
3. Скорость потока: 3.75 мл/мин; температура колонки 25°С;
4. Подвижные фазы: А=0.1% раствор ТФК в ацетонитрил/вода (2.5:97.5), В=0.1% 0.1% раствор ТФК в ацетонитриле;
5. Градиент:
6. Для анализа использовались следующие детекторы:
- светодиодная матрица (DAD), в диапазоне длин волн 200-800 нм;
- масс-спектрометр: химическая ионизация при атмосферном давлении (APCI) в режиме детекции положительных и отрицательных ионов;
- испарительный детектор светорассеяния (ELSD), модель PL-ELS 2100;
7. Общее время анализа: 3 мин;
8. Объем вкола 1.7 мкл.
ЯМР
1
13
3
ЯМР спектры на ядрах Н и С регистрировали на приборе Bruker Advance 400 с операционной чистотой 400 и 100 МГц соответственно. В качестве внутренних стандартов использовали сигналы остаточного недейтерированного хлороформа (δН=7.28 м.д.), CDCl (δС=77.16 м.д.), недейтерированного ДМСО (δН=2.50 м.д.) и ДМСО-d6 (δС=39.52 м.д.).
При описании спектров использовались следующие обозначения: s = синглет, d = дублет, t = триплет, q = квартет, quint = квинтет, m = мультиплет, br = широкий.
Препаративная ВЭЖХ
Очистка соединений методом препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии проводилась на приборе Agilent 1200 HPLC Preparative instrument;
Колонка: Phenomenex Luna C18 (L1), 100×30 мм, 5 мкм;
Растворитель для растворения образцов: 50% ДМСО, 50% ацетонитрил;
Скорость потока: 30 мл/мин; температура колонки 25°С;
Время разделения смеси: 14 мин, общее время программы: 30 мин;
Подвижная фазы: 0.1% раствор муравьиной кислоты в смеси ацетонитрил/вода (35:65).
Синтез алкил 4-оксо-2-(ариламино)-4,5-дигидротиофен-3-карбоксилатов (1)
Синтез ряда алкил (циклоалкил) 4-оксо-2-(ариламино)-4,5-дигидротиофен-3-карбоксилатов общей формулы 1 был осуществлен согласно общей синтетической Схеме 1 из коммерчески доступных реагентов.
Общая методика синтеза 4-оксо-2-(ариламино)-4,5-дигидротиофен-3-карбоксилатов (1)
Раствор алкил 4-хлор(бром)ацетоацетата А (0.53 моль, 1 экв.) в ТГФ (80 мл) небольшими порциями добавили к суспензии гидрида натрия (60% суспензия в минеральном масле, 21.2 г, 0.53 моль, 1 экв.) в ТГФ (800 мл) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при этой температуре до окончания выделения водорода. К образовавшемуся бледно-желтому раствору добавили раствор соответствующего арилизотиоционата В (0.53 моль, 1 экв.) в ТГФ (80 мл). Спустя 1 минуту образовалась бледно-желтая суспензия, которую перемешивали 5 часов при комнатной температуре (к.т.), после чего вылили в холодную воду (1.5 л). Полученный осадок целевого соединения (1) отфильтровали на стеклянном фильтре, тщательно промыли водой и высушили на воздухе.
Выходы 4-оксо-2-(ариламино)-4,5-дигидротиофен-3-карбоксилатов общей формулы (1) приведены в Таблице 3.
Общий метод синтеза соединений общей формулы (I)
Смесь соединения 1 (1 ммоль, 1 экв.), соответствующего альдегида С АС(=O)Н (1.5 ммоль, 1.5 экв.) и этилендиамина диацетата (0.25 ммоль, 0.25 экв.) нагревали при 120°С при перемешивании до образования однородного расплава. Образовавшуюся реакционную смесь выдержали 8 часов при этой температуре при постоянном перемешивании (контроль протекания полноты реакции по ТСХ), после чего охладили до комнатной температуры и растворили в небольшом количестве ДХМ. Раствор целевого соединения в ДХМ нанесли на сухой силикагель и элюировали его этил ацетатом (в случае полярных соединений в качестве элюента использовали смесь ДХМ/метанол 10:1). Часть целевых соединений (I) была очищена методом препаративной ВЭЖХ.
Альтернативный метод синтеза соединений общей формулы (I) из кислот общей формулы (II) по реакции конденсации со спиртами или другими гидроксильными соединениями.
1
2
Кислоту (II) (0.5 ммоль, 1 экв.) растворили в безводном ДХМ (5 мл), затем при перемешивании в одну порцию добавили бензотриазол-1-илокси)трис(диметиламино)фосфониум гекасафторфосфат ВОР (265 мг, 0.6 ммоль, 1.2 экв.) и реакционную смесь перемешивали 10 минут при к.т.; затем к реакционной смеси последовательно добавили соответствующий спирт RRCHOH (0.75 ммоль, 1.5 экв.) и DIPEA (1.5 ммоль, 1.5 экв.). Образовавшуюся смесь перемешивали 24 часа при к.т., затем последовательно промыли насыщенными водными растворами гидрокарбоната и хлорида натрия (по 10 мл). Органический слой отделили, осушили над безводным сульфатом натрия и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе. Целевой продукт выделяли методом препаративной ВЭЖХ.
Общий метод синтеза соединений формулы (II)
К раствору эфира (I) (1 ммоль) в смеси метанола (10 мл), ТГФ (10 мл) и воды (10 мл) был добавлен моногидрат гидроксида лития (10 ммоль, 10 экв.). Реакционную смесь кипятили в течение 7 часов, после чего охладили до 0-5°С и при перемешивании по каплям добавили 2 М хлороводородную кислоту (10 ммоль). Образовавшуюся мелкую суспензию кислоты (II) отфильтровали на стеклянном фильтре, промыли небольшим количеством холодной воды и сушили на воздухе до постоянной массы.
Общий метод синтеза соединений формулы (III)
Раствор кислоты (II) (0.5 ммоль) в безводном ДМСО (4 мл) нагревали при интенсивном перемешивании в атмосфере аргона при температуре 120°С в течение 6 часов, контроль протекания реакции осуществляли посредством ТСХ. После чего реакционную смесь охладили до к.т., разбавили холодной водой (20 мл) и экстрагировали диэтиловым эфиром (3×20 мл). Объединенные органические экстракты осушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе. Целевое соединение (III) очищали методом препаративной ВЭЖХ.
Синтез 5-аминозамещенных-1,3-диметил-1Н-пиразол-4-карбальдегидов (5)
К раствору этил ацетоацетата (72 мл, 0.57 моль) в этаноле (500 мл) при к.т. в одну порцию добавили метилгидразин (30 мл, 0.57 моль). Образовавшуюся реакционную смесь кипятили при перемешивании 5 часов, после чего охладили до к.т. и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе досуха. Сухой остаток растерли с диэтиловым эфиром, отфильтровали осадок целевого пиразолона 3 на стеклянном фильтре, промыли небольшим количеством диэтилового эфира и сушили на воздухе до постоянной массы. Выход 54.5 г (85%).
Синтез 5-хлор-1,3-диметил-1Н-пиразол-4-карбальдегида (4)
3
К смеси пиразолона 3 (30 г, 0.27 моль, 1 экв.) и POCl (100 мл, 1.08 моль, 4 экв.) при интенсивном перемешивании при к.т. по каплям добавили безводный ДМФ (25 мл, 0.324 моль, 1.2 экв.). Образовавшуюся реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 7 часов, затем охладили до к.т. Реакционную смесь медленно вылили в мелко измельченный лед (2.5 кг) и позволили смеси нагреться до к.т., после чего ее проэкстрагировали этилацетатом (3×200 мл). Объединенные органические экстракты промыли насыщенным водным раствором хлорида натрия (200 мл), осушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе. Сырой продукт 4 очистили перекристаллизацией из этанола (100 мл). Выход 15.6 г (37%).
Общий метод синтеза 5-аминозамещенных-1,3-диметил-1Н-пиразол-4-карбальдегидов (5)
2
К раствору альдегида 4 (1.58 г, 10 ммоль) в н-бутаноле (15 мл) при перемешивании, при к.т. в одну порцию добавили соответствующий амин (R')NH (12 ммоль, 1.2 экв.), а затем триэтиламин (2.20 мл, 16 ммоль 1.6 экв.). Образовавшуюся реакционную смесь кипятили 2-4 часа (контроль протекания полноты реакции по ТСХ), затем охладили до к.т. и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе. К остатку добавили воду (10 мл) и проэкстрагировали этилацетатом (3×20 мл). Объединенные органические экстракты сушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением. Целевой продукт 5 был выделен методом колоночной хроматографии на силикагеле с использованием градиента смеси н-гексан/этилацетат.
Выходы 5-аминозамещенных-1,3-диметил-1Н-пиразол-4-карбальдегидов 5 приведены в Таблице 4.
* 5-(Диметиламино)-1,3-диметил-1Н-пиразол-4-карбальдегид (5b) был синтезирован в соответствии со следующей процедурой:
Альдегид 4 (3.16 г, 0.02 моль) растворили в растворе водного диметиламина (40% в/в, 30 мл). Образовавшуюся смесь нагревали при 80°С в стеклянном толстостенном реакторе в течение 7 часов. После чего реактор охладили до к.т., стравили избыточное давление, и экстрагировали реакционную смесь этилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические экстракты осушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе досуха. В остатке был получен целевой альдегид 5b в виде желтого масла, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 2.66 г (84%).
Синтез 5-алкокси-1,3-диметил-1Н-пиразол-4-карбальдегидов (6а/b)
Соответствующий спирт R''-OH (22 ммоль, 2.2 экв.) растворили в безводном ТГФ (50 мл) при к.т. и при перемешивании добавили гидрид натрия в виде 60% суспензии в вазелиновом масле (20 ммоль, 2 экв.). Через 10 минут к реакционной смеси добавили альдегид 4 (10 ммоль, 1 экв.). Образовавшуюся реакционную смесь кипятили 7 часов при перемешивании, затем охладили до к.т. и экстрагировали этилацетатом (3×10 мл). Объединенные органические экстракты осушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе. Соединение 6 было очищено методом колоночной флеш-хроматографии на силикагеле с использованием смеси этил ацетат/н-гексан (5:1) в качестве элюента.
Выходы:
6а 0.97 г (62%);
6b 1.37 г (75%).
Синтез 5-фенокси-1,3-диметил-1Н-пиразол-4-карбальдегида (7)
Смесь фенола (1.04 г, 11 ммоль, 1.1 экв.), карбоната калия (2.07 г, 15 ммоль, 1.5 экв.), альдегида 4 (1.59 г, 10 ммоль, 1 экв.) и иодида калия (0.166 г, 1 ммоль, 0.1 экв.) в безводном ацетонитриле (20 мл) кипятили при интенсивном перемешивании 8 часов (полноту протекания реакции контролировали по ТСХ), а затем охладили до к.т. Реакционную смесь разбавили холодной водой (30 мл) и проэкстрагировали этилацетатом (3×50 мл). Объединенные органические экстракты осушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе. Соединение 7 было очищено методом колоночной хроматографии на силикагеле с использованием смеси этил ацетат/н-гексан (3:1) в качестве элюента. Выход: 0.97 г (32%).
Общий метод синтеза замещенных
2-[(4-гидроксибут-2-ин-1-ил)окси]бензальдегидов (10)
Синтез 2-(проп-2-ин-1-илокси)бензальдегида (8)
К смеси салицилового альдегида (8.74 мл, 82 ммоль, 1 экв.) и карбоната калия (11.33 г, 82 ммоль) в безводном ДМФ (40 мл) при интенсивном перемешивании по каплям добавили пропаргил бромид (6.83 мл, 91 ммоль, 1.1 экв.). Реакционную смесь перемешивали при к.т. 15 часов, затем разбавили водой (200 мл) и проэкстрагировали этилацетатом (3×150 мл). Объединенные органические экстракты промыли водой, осушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе. В остатке был получен альдегид 8, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 9.59 г (73% в расчете на салициловый альдегид).
Синтез 1-(диметоксиметил)-2-(проп-2-ин-1-илокси)бензола (9а)
К охлажденной до 0°С смеси соединения 8 (9.59 г, 60 ммоль, 1 экв.), триметилортоформата (360 ммоль, 6 экв.), безводного метанола (200 мл) в атмосфере аргона добавили п-толуолсулфокислоту (3 ммоль, 0.05 экв.). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 40 минут, а затем разбавили насыщенным водным раствором карбоната калия (400 мл) и проэкстрагировали этил ацетатом (3×150 мл). Объединенные органические экстракты промыли водой, осушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе. В остатке было получено маслообразное соединение 9а, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Выход: 11.01 г (89% от теоретического).
Синтез 2-[2-(проп-2-ин-1-илокси)фенил]-1,3-диоксана (9b)
К смеси соединения 8 (5.76 г, 36 ммоль, 1.0 экв.), триэтилортоформата (98%, 6.52 г, 7.30 мл, 43 ммоль, 1.2 экв.) и 1,3-пропандиола (13.67 г, 13.00 мл, 0.180 моль, 5.0 экв.) добавили тетрабутиламмонийтрибромид (1.73 г, 4 ммоль, 0.10 экв.). Образовавшуюся гомогенную реакционную смесь перемешивали при к.т.до исчезновения следов 8 (контроль по ТСХ). После окончания реакции ее разбавили насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия (200 мл) и проэкстрагировали этилацетатом (3×150 мл). Объединенные органические экстракты промыли водой, осушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе. Целевое соединение 9b очистили методом колоночной хроматографии на силикагеле с использованием смеси н-гексан/этилацетат 5:1 в качестве элюента. Выход: 31 г (93%).
Синтез замещенных ацетиленов общей формулы (10)
b
c
К раствору альдегида 9а или 9b (48.5 ммоль, 1 экв.) в безводном ТГФ (50 мл) при температуре -78°С в течение 40 минут при интенсивном перемешивании прибавили н-бутиллитий в (2.5 М раствор в н-гексане, 21 мл, 52.5 ммоль, 1.1 экв.) и образовавшуюся смесь перемешивали дополнительно 10 минут при этой же температуре. Затем к раствору образовавшейся литиевой соли ацетилена 9а/b по каплям добавили раствор соответствующего карбонильного соединения RC(=O)R (48.5 ммоль, 1 экв.) в ТГФ, и реакционную смесь перемешивали еще 40 минут при -78°С. Затем убрали охлаждающую баню, и реакционная смесь медленно нагрелась до 5°С, после чего к ней осторожно добавили 1% раствор соляной кислоты (200 мл) и проэкстрагировали этилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические экстракты осушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе. В остатке было получено соединение 10, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Выходы соединений 10 приведены в Таблице 5.
Синтез замещенных 2-[(4-алкоксибут-2-ин-1-ил)окси]бензальдегидов общей формулы (13)
Синтез О-алкилированных ацеталей (12)
c
Защищенный спирт 11 (20 ммоль, 1 экв.) растворили в ТГФ (1М раствор) в атмосфере азота, раствор охладили до 0°С, маленькими порциями при перемешивании добавили гидрид натрия (40 ммоль, 2 экв.), перемешивали образовавшуюся суспензию в течение 30 минут при этой же температуре. Затем по каплям добавили соответствующий алкилиодид R-I и перемешивали реакционную смесь еще 30 мин, после чего медленно довели ее температуру до к.т. и перемешивали еще 12 часов. После окончания реакции, реакционную смесь разбавили ледяной водой и проэкстрагировали этилацетатом (3×100 мл). Объединенные органические экстракты осушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе. В остатке было получено маслообразное целевое соединение 12, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
Синтез О-алкилированных бензиловых спиртов (13)
Ацеталь 12 (1 экв.) добавили к водному раствору уксусной кислот (0.05 экв., 1М), образовавшуюся смесь перемешивали при к.т. 12 часов, после чего проэкстрагировали диэтиловым эфиром. Объединенные органические экстракты осушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе, получив в остатке целевое соединение 13. Выходы соединений 13 приведены в Таблице 6.
Синтез 5-(2-формилфенокси)-2-метилпент-3-ин-2-ил ацетата (16)
Синтез уксусной кислоты 4-(2-[1,3]диоксан-2-ил-фенокси)-1,1-диметил-бут-2-инил эфира (15)
Смесь соединения 14 (1.437 г, 5.2 ммоль, 1.0 экв.), уксусного ангидрида (0.908 г., 0.84 мл., 8,9 ммоль, 1.7 экв.) и 4-(диметиламино)пиридина (0.05 г., 0.4 ммоль, 0.08 экв.) в растворе 1:1 пиридин/ДХМ (20 мл) перемешивали при к.т. 24 часа. Затем реакционную смесь осторожно разбавили холодной 1N соляной кислотой (40 мл) и экстрагировали дихлорметаном (3×20 мл). Объединенные органические экстракты осушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе, получив в остатке сырой продукт 15, который очистили методом колоночной хроматографии на силикагеле, используя смесь н-гексан/этил ацетат 5:1 в качестве элюента. Выход (15): 1.26 г (75%), бесцветное масло.
Синтез 5-(2-формилфенокси)-2-метилпент-3-ин-2-ил ацетата (16)
1М HCl (7.8 мл) добавили к раствору соединения 15 (1.26 г, 3.9 ммоль) в ТГФ (40 мл) и реакционную смесь перемешивали при к.т. 16 часов, затем проэкстрагировали этил ацетатом (3×20 мл). Объединенные органические экстракты промыли насыщенным раствором хлорида натрия, осушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе. Остаток после упаривания очистили методом колоночной хроматографии на силикагеле, используя смесь н-гексан/этил ацетат 10:1 в качестве элюента, получив в итоге целевое соединение 16 в виде бесцветного масла. Выход 1.02 г (100%).
Примеры синтеза некоторых соединений общей формулы (I)
Пример 1
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-4 и альдегида 10t Выход: 290.0 мг (50%).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=580 [М+Н], 2.53 мин.
Пример 2
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и 1-(бут-2-ин-1-ил)-5-хлор-1Н-пиррол-2-карбальдегида, который был синтезирован алкилированием 5-хлор-1Н-пиррол-2-карбальдегида 1-бромбут-2-ином в присутствии гидрида натрия (1.1 экв.) в безводном ТГФ при к.т.. Выход: 86.7 мг (21%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.77 (s, 3Н), 3.76 (s, 3Н), 4.94 (d, J=2.2 Hz, 2Н), 6.33 (d, J=4.3 Hz, 1H), 6.39 (d, J=4.3 Hz, 1H), 7.38-7.46 (m, 1H), 7.49-7.53 (m, 3H), 7.56 (s, 1H), 11.18 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=413 [M+H], 2.83 мин.
Пример 3
Указанное соединение было получено согласно общей схеме синтеза (I) из соединения 1b-4 и альдегида 10s в масштабе 0.2 ммоль. Выход: 22.0 мг (19%).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=580 [М+Н], 2.59 мин.
Пример 4
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-2 и коммерчески доступного 2-(пиридин-2-илметокси)бензальдегида. Выход: 229.3 мг (50%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.28 (t, J=7.03 Hz, 3Н), 4.26 (q, J=7.01 Hz, 2H), 5.27 (s, 2H), 7.02 (t, J=7.52 Hz, 1H), 7.17 (d, J=8.19 Hz, 1H), 7.32-7.43 (m, 4H),7.44-7.53 (m, 5H), 7.87 (td, J=7.67, 1.53 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H), 8.58 (d, J=4.65 Hz, 1H), 11.27 (none, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=459 [M+H], 2.58 мин.
Пример 5
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-4 и альдегида 10r в масштабе 0.2 ммоль. Выход: 17.3 мг (15%).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=578 [М+Н], 2.65 мин.
Пример 6
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-4 и альдегида 10q в масштабе 0.2 ммоль. Выход: 9.0 мг (8%).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=564 [М+Н], 2.60 мин.
Пример 7
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-2 и альдегида 6а. Выход: 167.8 мг (42%).
1
3
Н ЯМР (400 MHz, CDCl, м.д.): 1.44 (t, J=7.1 Hz, 3H),2.23 (s, 3H), 3.63 (s, 3H),3.75 (s, 3H), 4.40 (q, J=7.1 Hz, 2H),7.27 (s, 1H), 7.31-7.41 (m, 3H), 7.45-7.48 (t, J=7.8 Hz, 2H), 7.64 (s, 1H), 11.50 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=400 [M+H], 1.49 мин.
Пример 8
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-2 и коммерчески доступного 2-(2,2,2-трифторэтокси)бензальдегида. Выход: 319.1 мг(71%).
1
3
Н ЯМР (400 MHz, CDCl, м.д.): 1.29 (t, J=7.09 Hz, 3Н), 4.26 (q, J=6.93 Hz, 2H), 4.86 (q, J=8.60 Hz, 2H), 7.11 (t, J=7.52 Hz, 1H), 7.21 (d, J=8.44 Hz, 1H), 7.34-7.55 (m, 7H), 7.86 (s, 1H), 11.26 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=450 [M+H], 1.99 мин.
Пример 9
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-2 и коммерчески доступного 2-(проп-2-ен-1-илокси)бензальдегида. Выход: 228.2 мг (56%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.45 (t, J=7.1 Hz, 3Н), 4.41 (q, J=7.1 Hz, 2H), 4.59 (d, J=5.1 Hz, 2H),5.29 (d, J=10.5 Hz, 1H), 5.43 (d, J=17.4 Hz, 1H), 5.97-6.11 (m, 1H), 6.90 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.97 (t, J=7.3 Hz, 1H), 7.39 (d, J=7.7 Hz, 4H), 7.44-7.54 (m, 3H), 8.26 (s, 1H), 11.49 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=408 [M+H], 2.17 мин.
Пример 10
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-2 и коммерчески доступного 2-(бут-3-ин-1-илокси)бензальдегида. Выход: 180.4 мг (43%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 2.66 (td, J=6.39, 2.63 Hz, 2Н), 2.88 (t, J=2.51 Hz, 1H), 3.76 (s, 3H), 4.14 (t, J=6.48 Hz, 2H), 7.01 (t, J=7.64 Hz, 1H), 7.11 (d, J=8.19 Hz, 1H), 7.33-7.55 (m, 7H), 7.83-8.01 (m, 1H), 11.23 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=420 [M+H], 1.79 мин.
Пример 11
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-2 и 2-(бут-2-ин-1-илокси)бензальдегида, который был синтезирован алкилированием салицилового альдегида 1-бромбут-2-ином (1.3 экв.) в присутствии карбоната калия в кипящем ацетонитриле. Выход: 268.5 мг (64%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.29 (t, J=7.09 Hz, 3H),1.83 (s, 3H), 4.27 (q, J=7.01 Hz, 2H), 4.84 (br. s., 2H), 7.03 (t, J=7.52 Hz, 1H), 7.13 (d, J=7.95 Hz, 1H), 7.32-7.46 (m, 3H), 7.49 (s, 4H), 7.85 (s, 1H), 11.28 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=420 [M+H], 2.04 мин.
Пример 12
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-2 и 2-[(2Е)-бут-2-ен-1-илокси]бензальдегида, который был синтезирован алкилированием салицилового альдегида (2Е)-1-бромбут-2-еном (1.3 экв.) в присутствии карбоната калия в кипящем ацетонитриле. Выход: 311.9 мг (74%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.28 (t, J=7.09 Hz, 3Н), 1.71 (d, J=6.36 Hz, 3H), 4.26 (q, J=7.17 Hz, 2H), 4.55 (d, J=5.87 Hz, 2H), 5.62-5.78 (m, 1H), 5.80-5.93 (m, 1H), 6.98 (t, J=7.46 Hz, 1H), 7.08 (d, J=8.19 Hz, 1H), 7.29-7.44 (m, 3H), 7.44-7.57 (m, 4H), 7.88 (s, 1H), 11.11-11.35 (m, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=422 [M+H], 2.91 мин.
Пример 13
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-2 и коммерчески доступного 2-(2-метоксиэтокси)бензальдегида. Выход: 140.4 мг (33%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.29 (t, J=7.09 Hz, 3Н), 3.32 (s, 3Н), 3.65-3.74 (m, 2Н), 4.15-4.19 (m, 2Н), 4.26 (q, J=7.09 Hz, 2H), 7.00 (t, J=7.52 Hz, 1H), 7.10 (d, J=8.19 Hz, 1H), 7.31-7.45 (m, 3H), 7.46-7.54 (m, 4H), S 7.91 (s, 1H), 11.26 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=426 [M+H], 1.85 мин.
Пример 14
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-4 и альдегида 10р в масштабе 0.2 ммоль. Выход: 19.8 мг (18%).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=550 [М+Н], 2.42 мин.
Пример 15
Указанное соединение было получено согласно альтернативной схеме 2 синтеза (I) из соединения М7 (Таблица 2) и изопропанола. Выход: 59.1 мг (22%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d м.д.): 1.14-1.23 (m, 2Н), 1.29 (d, J=3.4 Hz, 6Н), 1.50-1.61 (m, 2Н), 1.64-1.74 (m, 2Н), 3.56-3.69 (m, 2Н), 4.98 (br. s., 2Н), 5.08-5.18 (m, 1Н), 5.66 (s, 1Н), 7.00-7.08 (m, 1Н), 7.20 (d, J=9.3 Hz, 1Н), 7.30-7.37 (m, 2Н), 7.40-7.54 (m, 3Н), 7.58-7.67 (m, 1Н), 7.87 (s, 1Н), 11.13 (br. s., 1Н).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=538 [M+H], 1.73 мин.
Пример 16
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и коммерчески доступного 2-(пиридин-3-илметокси)бензальдегида. Выход: 173.4 мг (39%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 3.75 (s, 3Н), 5.24 (s, 2Н), 7.03 (t, J=7.52 Hz, 1Н), 7.22 (d, J=8.31 Hz, 1H), 7.32-7.54 (m, 8H), 7.85 (d, J=7.82 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H), 8.56 (d, J=4.65 Hz, 1H), 8.67 (s, 1H), 11.17 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=445 [M+H], 2.28 мин.
Пример 17
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и коммерчески доступного 2-(пиридин-4-илметокси)бензальдегида. Выход: 204.5 мг (46%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 3.31 (br. s., 3Н), 7.03 (t, J=7.5 Hz, 1H),7.22 (d, J=8.3 Hz, 1H),7.34-7.54 (m, 8H), 7.85 (d, J=7.8 Hz, 1H),7.90 (s, 1H), 8.56 (d, J=4.6 Hz, 1H), 8.67 (s, 1H), 11.17 (br. s., 1H)
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=445 [M+H], 2.28 мин.
Пример 18
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-4 и альдегида 10о в масштабе 0.2 ммоль. Выход: 24.6 мг (23%).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=536 [М+Н], 2.21 мин.
Пример 19
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и альдегида 10а. Выход: 313.3 мг (64%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.06-1.19 (m, 1Н), 1.22-1.43 (m, 6Н), 1.46-1.56 (m, 2Н), 1.61-1.73 (m, 2Н), 3.77 (s, 3Н), 4.96 (s, 2Н), 5.35 (s, 1Н), 7.04 (t, J=7.52 Hz, 1H), 7.19 (d, J=8.31 Hz, 1H), 7.33-7.45 (m, 3H), 7.45-7.55 (m, 4H), 7.86 (s, 1H), 10.97-11.41 (m, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=490 [M+H], 2.64 мин.
Пример 20
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-1 и 2-[(4-метилпент-2-ин-1-ил)окси]бензальдегида, который был синтезирован алкилированием салицилового альдегида 1-бром-4-метилпент-2-ином в присутствии карбоната калия в кипящем ацетонитриле. Выход: 203.2 мг (45%).
1
3
Н ЯМР (400 MHz, CHOD, м.д.): 3.89 (s, 3Н), 4.89 (s, 6Н), 5.50 (s, 2Н), 6.97 (t, J=7.58 Hz, 1H), 7.05 (d, J=8.31 Hz, 1H), 7.29-7.44 (m, 4H), 7.46-7.55 (m, 1H), 7.62 (td, J=7.92, 1.28 Hz, 1H), 8.18 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=452 [M+H], 1.56 мин.
Пример 21
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и коммерчески доступного 1,3,5-триметил-1Н-пиразол-4-карбальдегида. Выход: 140.4 мг (38%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 2.05 (s, 3Н), 2.13 (s, 3Н), 3.62 (s, 3Н), 3.76 (s, 3Н), 7.36-7.53 (m, 6Н), 11.14 (br.s, 1Н);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=370 [М+Н], 1.72 мин.
Пример 22
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и коммерчески доступного 5-хлор-1,3-диметил-1Н-пиразол-4-карбальдегида. Выход: 70.7 мг (13%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 2.12 (s, 3Н), 3.71 (s, 3Н), 3.76 (s, 3Н), 7.33 (s, 1Н), 7.38-7.55 (m, 5Н), 11.19 (s, 1Н);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=390 [М+Н] 1.70 мин.
Пример 23
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и 2-[(3-фторпиридин-2-ил)метокси]бензальдегида, который был синтезирован алкилированием салицилового альдегида 2-(хлорметил)-3-фторпиридином в присутствии карбоната калия в ацетонитриле. Выход: 180.4 мг (39%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 3.74 (s, 3Н), 5.33 (s, 2Н), 7.02 (t, J=7.52 Hz, 1H), 7.26 (d, J=8.19 Hz, 1H), 7.33-7.46 (m, 5H), 7.46-7.59 (m, 3H), 7.73-7.85 (m, 2H), 8.44 (d, J=4.65 Hz, 1H), 11.24(br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=463 [M+H] 2.57 мин.
Пример 24
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и 2-[(5-фторпиридин-2-ил)метокси]бензальдегида, который был синтезирован алкилированием салицилового альдегида 2-(хлорметил)-5-фторпиридином в присутствии карбоната калия в ацетонитриле. Выход: 254.4 мг (55%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 3.76 (s, 3Н), 5.26 (s, 2Н), 7.02 (t, J=7.52 Hz, 1Н), 7.17 (d, J=8.56 Hz, 1H), 7.33-7.39 (m, 2H), 7.42-7.52 (m, 5H), 7.57 (dd, J=8.62, 4.46 Hz, 1H), 7.81 (td, J=8.74, 2.93 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 8.59 (d, J=2.69 Hz, 1H), 11.18 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=463 [M+H], 2.64 мин.
Пример 25
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и 2-[(1-метил-1Н-пиразол-3-ил)метокси]бензальдегида, который был синтезирован по реакции Мицунобу из салицилового альдегида с 1-метил-1Н-пиразол-3-ил-метанолом в присутствии DIAD (диэтилазодикарбоксилата), трифенилфосфина в безводном ТГФ. Выход: 281.9 мг (63%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 3.75 (s, 3Н), 3.82 (s, 3Н), 5.08 (s, 2Н), 6.28 (d, J=2.08 Hz, 1Н), 7.00 (t, J=7.46 Hz, 1H), 7.26 (d, J=8.31 Hz, 1H), 7.30-7.55 (m, 7H), 7.67 (d, J=2.08 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 11.22 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=448 [M+H], 1.66 мин.
Пример 26
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и 2-[(6-хлорпиридин-3-ил)метокси]бензальдегида, который был синтезирован алкилированием салицилового альдегида 2-хлор-5-(хлорметил)пиридином в присутствии карбоната калия в кипящем ацетонитриле. Выход: 344.8 мг (72%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 3.75 (s, 3Н), 5.24 (s, 2Н), 7.04 (t, J=7.64 Hz, 1H), 7.20 (d, J=8.44 Hz, 1H), 7.31-7.54 (m, 7H), 7.58 (d, J=8.19 Hz, 1H),7.88 (s, 1H), 7.92 (dd, J=8.19, 2.45 Hz, 1H),8.50 (d, J=2.32 Hz, 1H), 11.23 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=480 [M+H], 1.92 мин.
Пример 27
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-1 и 2-(3-метоксипропокси)бензальдегида, который был синтезирован алкилированием салицилового альдегида 1-хлор-3-метоксипропаном в присутствии карбоната калия в кипящем ацетонитриле.
Выход: 301.6 мг (68%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.92-1.99 (m, 2Н), 3.23 (br. s., 3Н), 3.47 (t, J=6.17 Hz, 2H), 3.77 (s, 3H), 4.08 (t, J=6.24 Hz, 2H), 6.98 (t, J=7.40 Hz, 1H), 7.08 (d, J=8.31 Hz, 1H), 7.27-7.38 (m, 3H), 7.42-7.54 (m, 2H), 7.61 (t, J=8.31 Hz, 1H), 7.92 (s, 1H), 11.07 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=444 [M+H], 2.04 мин.
Пример 28
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-1 и альдегида 10а. Выход: 508.2 мг (59%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.09-1.19 (m, 1Н), 1.24-1.42 (m, 5Н), 1.45-1.53 (m, 2Н), 1.66 (d, J=9.78 Hz, 2Н), 3.78 (s, 3Н), 4.96 (s, 2Н), 5.32 (s, 1Н), 7.03 (t, J=7.64 Hz, 1H), 7.19 (d, J=8.07 Hz, 1H), 7.29-7.54 (m, 5H), 7.62 (t, J=7.95 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 11.09 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=508 [M+H], 2.01 мин.
Пример 29
Указанное соединение было получено согласно альтернативной схеме 2 синтеза (I) из соединения М7 (Таблица 2) и циклопентанола. Выход: 81.7 мг (29%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.51-1.61 (m, 4Н), 1.66-1.78 (m, 6Н), 1.84-1.93 (m, 2Н), 3.33-3.38 (m, 2Н), 3.62-3.69 (m, 2Н), 4.98 (s, 2Н), 5.28 (t, J=5.7 Hz, 1Н), 5.66 (s, 1Н), 7.05 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.20 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.31-7.37 (m, 2H), 7.38-7.52 (m, 3H), 7.62 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 11.16 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=564 [M+H], 2.75 мин.
Пример 30
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-4 и альдегида 10n в масштабе 0.2 ммоль. Выход: 35.2 мг (31%).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=534 [М+Н], 2.51 мин.
Пример 31
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и 1,3-диметил-5-фенил-1Н-пиразол-4-карбальдегида, который был синтезирован по реакции Сузуки из 5-хлор-1,3-диметил-1Н-пиразол-4-карбальдегида и фенилбороновой кислоты (2 экв.) в присутствии карбоната натрия и тетракис(трифенилфосфин)палладия (0) в качестве катализатора (5% мол.) в смеси диоксан-вода 2:1. Выход: 146.7 мг (34%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 2.19 (s, 3Н), 3.61 (s, 3Н), 3.70 (s, 3Н), 7.12 (d, J=7.70 Hz, 2Н), 7.30 (d, J=5.75 Hz, 2H), 7.39-7.52 (m, 6H), 7.61 (t, J=7.6 Hz, 1H), 11.01 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=432 [M+H], 2.47 мин.
Пример 32
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-1 и 1,3-диметил-5-(2-фенилэтинил)-1Н-пиразол-4-карбальдегида, который был синтезирован по реакции Соногошира из 5-хлор-1,3-диметил-1Н-пиразол-4-карбальдегида и фенилацетилена в присутствии триэтиламина (10 экв.), тетракис(трифенилфосфин)палладия (0) (5% мол.), иодида меди(I) (10% мол.) в 1,4-диоксане. Выход: 140.0 мг (14%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 2.22 (s, 3Н), 3.78 (s, 3Н), 3.86 (s, 3Н), 7.05 (t, J=7.63 Hz, 1H), 7.23-7.40 (m, 4H), 7.42-7.55 (m, 5H), 10.96 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=474 [M+H], 2.02 мин.
Пример 33
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и 1-(3-метоксипропил)-1Н-пиррол-2-карбальдегида, который был синтезирован алкилированием пиррол-2-карбальдегида 1-хлор-3-метоксипропаном в присутствии гидрида натрия (1.1 экв.) в безводном ТГФ.
Выход: 191.3 мг (48%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.73-1.94 (quin, J=6.33 Hz, 2Н); 3.10-3.25 (m, 5Н); 3.77 (s, 3Н); 4.12 (t, J=6.79 Hz, 2H); 6.21 (dd, J=3.61, 2.87 Hz, 1H); 6.30-6.38 (m, 1H); 7.11 (d, J=1.59 Hz, 1H); 7.39-7.46 (m, 1H); 7.46-7.59 (m, 5H); 11.17 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=399 [M+H], 1.72 мин.
Пример 34
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и альдегида 13с. Выход: 292.0 мг (63%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.31 (s, 6Н), 3.13 (s, 3Н), 3.77 (s, 3Н), 4.97 (s, 2Н),7.04 (t, J=7.52 Hz, 1Н), 7.18 (d, J=8.19 Hz, 1H), 7.39 (dd, J=18.40, 9.35 Hz, 3H), 7.46-7.56 (m, 4H), 7.86 (s, 1H), 11.25 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=464 [M+H], 1.91 мин.
Пример 35
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-1 и альдегида 13с. Выход: 192.6 мг (40%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.31 (s, 6Н), 3.13 (s, 3Н), 3.77 (s, 3Н), 4.97 (s, 2Н), 7.04 (t, J=7.52 Hz, 1Н), 7.18 (d, J=8.19 Hz, 1H), 7.30-7.53 (m, 6H),7.62 (t, J=7.40 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 11.10 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=482 [M+H], 1.98 мин.
Пример 36 (рацемическая смесь)
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-1 и альдегида 10f. Выход: 114.4 мг (23%)
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.29 (s, 3Н), 3.17-3.30 (m, 5Н), 3.80 (s, 3Н), 4.94 (s, 2Н), 5.52 (s, 1Н), 7.06 (t, J=7.47 Hz, 1Н), 7.18 (d, J=8.27 Hz, 1H), 7.33-7.39 (m, 2H), 7.39-7.57 (m, 3H), 7.64 (t, J=7.95 Hz, 1H), 7.90 (s, 1H), 11.09 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=498 [M+H], 1.85 мин.
Пример 37
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-1 и альдегида 10с. Выход: 250.4 мг (48%).
1
3
Н ЯМР (400 MHz, CDCl, м.д.): 1.48-1.57 (m, 6Н) 1.74-1.85 (m, 3Н) 1.96 (dd, J=13.63, 8.01 Hz, 3H) 3.95 (s, 3H) 4.12 (q, 1H) 4.80 (s, 2H) 6.95-7.10 (m, 4H) 7.12-7.21 (m, 2H) 7.30-7.40 (m, 2H) 8.16-8.27 (m, 1H) 11.43 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=522 [M+H], 2.72 мин.
Пример 38
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-1 и альдегида 10b. Выход: 305.3 мг (57%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 0.72 (t, 3Н), 0.94-1.02 (m, 2Н), 1.12-1,16 (m, 1Н), 1,23-1,28 (m, 2Н), 1,46-1,50 (m, 2Н), 1,71-1.74 (m, 2Н), 3.32 (s, 3Н), 3.38 (s, 2Н), 4,93-4.95 (m, 2Н), 5.4 (s,1 Н), 7.03 (t, 1Н), 7.21 (d, 1Н) 7.34-7.52 (m, 5Н), 7.61 (t, 1Н), 7.88 (s, 1Н), 11.09 (s, 1Н);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=536 [М+Н], 2.72 мин.
Пример 39
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-4 и альдегида 10g в масштабе 0.2 ммоль. Выход: 17.7 мг (17%).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=522 [М+Н], 2.15 мин.
Пример 40
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и 1-(2-метоксиэтил)-1Н-пиррол-2-карбальдегида, который был синтезирован алкилированием пиррол-2-карбальдегида 1-хлор-2-метоксиэтаном в присутствии гидрида натрия (1.1 экв.) в безводном ТГФ.
Выход: 203.8 мг (53%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 3.19 (s, 3Н); 3.44-3.61 (m, 2Н); 3.77 (s, 3Н); 4.24 (br.s, 2Н); 6.13-6.24 (m, 1Н); 6.35 (d, J=2.81 Hz, 1Н); 7.13 (br.s, 1Н); 7.43 (t, J=6.60 Hz, 1H); 7.47-7.56 (m, 4H); 7.58 (s, 1H); 11.17 (br.s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=385 [M+H], 1.90 мин.
Пример 41
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и 1-(бут-2-ин-1-ил)-1Н-пиррол-2-карбальдегида, который был синтезирован алкилированием коммерчески доступного пиррол-2-карбальдегида 1-бромбут-2-ином в присутствии гидрида натрия (1.1 экв.) в безводном ТГФ.
Выход: 219.5 мг (58%).
1
3
Н ЯМР (400 MHz, CDCl, м.д.): 9.12 (br. s., 1H); 8.26 (s, 1H) 7.55-7.30 (m, 4H) 7.14-687 (m, 2H) 4.16 (s, 2H) 3.59 (s, 2H) 3.37 (s, 3H) 2.13 (s, 3H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=379 [M+H] 1.81 мин.
Пример 42
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и 1-(3-метоксипропил)-1Н-пиразол-5-карбальдегида, который был синтезирован алкилированием 1Н-пиразол-5-карбальдегида 1-хлор-3-метоксипропаном в присутствии гидрида натрия (1.1 экв.) в безводном ТГФ.
Выход: 139.8 мг (35%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.92 (quin, J=6.11 Hz, 2Н); 3.06-3.24 (m, 5Н); 3.78 (s, 3Н); 4.30 (t, J=6.60 Hz, 2H); 6.38 (d, J=1.71 Hz, 1H); 7.41-7.48 (m, 1H); 7.48-7.56 (m, 5H); 7.39-7.46 (m, 1H); 7.58 (s, 1H); 11.31 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=400 [M+H], 1.47 мин.
Пример 43 (рацемическая смесь)
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и альдегида 13е. Выход: 257.8 мг (54%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 0.82 (d, J=6.72 Hz, 6Н), 1.73-1.86 (m, 1Н), 3.21 (s, 3Н), 3.77 (s, 3Н), 5.01 (s, 2Н), 7.03 (t, J=7.52 Hz, 1H), 7.19 (d, J=8.31 Hz, 1H), 7.37 (s, 3H), 7.46-7.57 (m, 4H), 7.87 (s, 1H), 11.25 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=478 [M+H], 2.10 мин.
Пример 44
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и альдегида 13d. Выход: 209.0 мг (48%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д): 3.20 (s, 3Н), 3.77 (s, 3Н), 4.11 (s, 2Н), 4.99 (s, 2Н), 7.04 (t, J=8.0 Hz, 1Н), 7.16 (d. J=7.6 Hz, 1H), 7.35-7.53 (m, 7H), 11.22 (br.s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=436 [M+H], 1.59 мин.
Пример 45
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и альдегида 13b. Выход: 323.1 мг (66%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.34 (s, 6Н), 3.77 (s, 3Н), 3.89 (d, J=5.38 Hz, 2Н), 4.92 (d, J=2.08 Hz, 1H), 4.97 (s, 2H), 5.02 (dd, J=10.21, 1.90 Hz, 1H), 5.13 (dd, J=17.24, 1.96 Hz, 1H), 7.05 (t, J=7.52 Hz, 1H), 7.18 (d, J=7.70 Hz, 1H), 7.36-7.41 (m, 2H), 7.46-7.54 (m, 5H), 7.86 (s, 1H), 11.26 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=490 [M+H], 2.15 мин.
Пример 46
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и альдегида 13а. Выход: 329.2 мг (61%).
1
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d6, м.д.): 1.41 (s, 6Н), 3.77 (s, 3Н), 4.39 (s, 2Н), 5.01 (s, 2Н), 7.00-7.06 (m, 1Н), 7.16-7.28 (m, 6Н), 7.35-7.52 (m, 7 Н), 7.89 (s, 1Н), 11.25 (s, 1Н).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=540 [М+Н], 2.27 мин.
Пример 47
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и альдегида 7. Выход: 188.0 мг (42%).
1
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d6, м.д.): 2.23 (s, 3Н), 3.43 (s, 3Н), 3.71 (s, 3Н), 6.61 (d, J=8.07 Hz, 2Н), 7.10 (t, J=7.34 Hz, 1H), 7.31 (dd, J=7.34, 1.59 Hz, 3H), 7.44-7.57 (m, 4H), 11.09 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=448 [M+H], 1.51 мин.
Пример 48
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и альдегида 5а. Выход: 158.6 мг (36%).
1
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d6, м.д.): 1.97 (s, 3Н), 2.81-2.99 (m, 4Н), 3.48-3.58 (m, 4Н), 3.62 (s, 3Н), 3.75 (s, 3Н), 7.41-7.52 (m, 5Н), 11.13 (s, 1Н);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=441 [М+Н], 1.41 мин.
Пример 49
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и альдегида 6b. Выход: 219.2 мг (53%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.51 (sxt, J=7.07 Hz, 2Н), 2.11 (s, 3Н), 2.51 (br. s., 3H), 3.53 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 3.78 (t, J=6.60 Hz, 2H), 7.31 (s, 1H), 7.38-7.53 (m, 5H), 11.07 (br.s, 1H).
APCI LCMS 414 [M+H], 1.760 min
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=414 [M+H]
Пример 50
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-1 и альдегида 10d. Выход: 392.3 мг (77%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.50-1.59 (m, 2Н), 1.68 (d, J=13.20 Hz, 2Н), 3.33-3.39 (m, 2Н), 3.60-3.70 (m, 2Н), 3.77 (s, 3Н), 4.98 (s, 2Н), 5.65 (s, 1Н), 7.04 (t, J=7.58 Hz, 1Н), 7.20 (d, J=8.31 Hz, 1H), 7.35 (d, J=7.70 Hz, 2H), 7.37-7.55 (m, 3H), 7.61 (t, J=7.46 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 11.09 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=510 [M+H], 1.21 мин.
Пример 51
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и альдегида 5b. Выход: 223.0 мг (56%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 2.09 (s, 3Н), 2.56 (s, 6Н), 3.63 (s, 3Н), 3.76 (s, 3Н), 7.35 (s, 1Н), 7.39-7.46 (m, 1Н), 7.48-7.55 (m, 4Н), 11.08 (s, 1Н);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=399 [М+Н], 1.62 мин.
Пример 52
Указанное соединение было получено согласно альтернативной схеме 2 синтеза (I) из соединения М7 (Таблица 2) и циклогептанола. Выход: 29.6 мг (10%).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=592 [М+Н], 2.85 мин.
Пример 53
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-1 и альдегида 10е в масштабе 10 ммоль (очищено колоночной хроматографии на силикагеле, элюент-н-нексан/этил ацетат 1:5). Выход: 4.26 г (70%).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=609 [М+Н], 2.25 мин.
Пример 54
Соединение из Примера 53 (4.26 г, 7 ммоль) растворили в безводном ДХМ (50 мл), охладили до 0°С и при интенсивном перемешивании добавили по каплям трифторуксусную кислоту (5.2 мл, 70 ммоль). Реакционную смесь перемешивали 12 часов при к.т., затем разбавили 10% водным раствором карбоната калия (200 мл), отделили органический слой, водный слой проэкстрагировали ДХМ (3×50 мл). Объединенные органические экстракты осушили над сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе, получив в итого целевое соединение (3.27 г, 92%) в виде прозрачной стеклообразной массы.
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=509 [М+Н], 0.82 мин.
Пример 55
Смесь соединения из Примера 54 (200 мг, 0.4 ммоль), гидрокарбоната натрия (4 ммоль) и 1-хлор-2-метоксиэтана (0.5 ммоль) в безводном ацетонитриле (5 мл) перемешивали 8 часов при температуре 60°С. После завершения реакции реакционную смесь охладили до к.т., разбавили водой (20 мл), проэкстрагировали этил ацетатом (3×10 мл). Объединенные органические экстракты осушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе. Остаток после упаривания очистили методом препаративной ВЭЖХ, получив в итоге целевое соединение (192.5 г, 85%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.35-1.79 (m, 4Н), 2.59-2.74 (m, 3Н), 2.79-3.27 (m, 4Н), 3.41-3.63 (m, 5Н), 3.68-3.83 (m, 3Н), 4.98 (s, 1Н), 6.99-7.65 (m, 9Н), 7.84-7.92 (m, 1Н), 11.05-(br.s, 1Н)
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=567 [М+Н], 2.59 мин.
Пример 56
К раствору соединения из Примера 54 (200 мг, 0.4 ммоль) и триэтиламина (1.2 ммоль) в безводном ацетонитриле (5 мл) при интенсивном перемешивании добавили хлорангидрид метоксиуксусной кислоты (0.4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали 30 минут при к.т., разбавили водой (20 мл), проэкстрагировали этил ацетатом (3×10 мл). Объединенные органические экстракты осушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе. Остаток после упаривания очистили методом препаративной ВЭЖХ, получив в итоге целевое соединение (171.9 г, 74%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.37-1.81 (m, 4Н), 2.46-2.56 (m, 6Н), 3.07-3.20 (m, 2Н), 3.26 (s, 3Н), 3.39-3.84 (m, 10Н), 3.99-4.10 (m, 2Н), 4.90 (s, 0.5Н), 5.00 (s, 1.5Н), 5.66-5.80 (m, 3Н), 6.92-7.57 (m, 8Н), 7.60-7.69 (m, 1Н), 7.87-8.02 (m, 1Н), 10.90-11.23 (m, 1Н);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=582 [М+Н], 1.56 мин.
Пример 57
Целевое соединение получили, как описано выше для Примера 56 с использованием метилхлорформата (0.4 ммоль) в качестве ацилирующего агента. Выход целевого соединения: 200 мг (88%).
1
3
Н ЯМР (400 MHz, CDCl, м.д.): 1.44-1.55 (m, 2Н), 1.61-1.71 (m, 2Н), 3.00-3.14 (m, 2Н), 3.46-3.61 (m, 5Н), 3.79 (s, 3Н), 4.99 (s, 2Н), 5.69 (s, 1Н), 7.05 (t, J=7.31 Hz, 1H), 7.21 (d, J=7.95 Hz, 1H), 7.31-7.58 (m, 6H), 7.58-7.67 (m, 1H), 7.89 (s, 1H), 11.11 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=567 [M+H], 1.74 мин.
Пример 58
К раствору соединения из Примера 54 (200 мг, 0.4 ммоль) в безводном ТГФ (5 мл) при интенсивном перемешивании добавили этил изоцианат (0.44 ммоль). Реакционную смесь перемешивали 2 часа при кипячении, разбавили водой (20 мл), проэкстрагировали этил ацетатом (3×10 мл). Объединенные органические экстракты осушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе. Остаток после упаривания очистили методом препаративной ВЭЖХ, получив в итоге целевое соединение (220.3 г, 95%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д): 0.98 (t, J=7.15 Hz, 3Н), 1.39-1.51 (m, 2Н), 1.57-1.68 (m, 2Н), 2.90-3.06 (m, 4Н), 3.44-3.56 (m, 4Н), 3.79 (s, 3Н), 4.99 (s, 3Н), 5.60 (s, 3Н), 6.41 (t, J=5.25 Hz, 1H), 7.05 (t, J=7.47 Hz, 1H), 7.20 (d, J=7.95 Hz, 1H), 7.30-7.57 (m, 5H), 7.64 (m, 3H), 7.89 (s, 1H), 11.11 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=580 [M+H], 1.63 мин.
Пример 59
N-ацетил глицин (47 мг, 0.4 ммоль, 1 экв.) суспендировали в безводном ДХМ (5 мл), затем при перемешивании в одну порцию добавили ВОР (212 мг, 0.48 ммоль, 1.2 экв.) и реакционную перемешивали 10 минут при к.т.; затем к реакционной смеси последовательно добавили вторичный амин-соединение из Примера 54 (200 мг, 0.4 ммоль, 1 экв.) и DIPEA (0.6 ммоль, 1.5 экв.). Образовавшуюся смесь перемешивали 24 часа при к.т., затем последовательно промыли насыщенными водными растворами гидрокарбоната и хлорида натрия (по 10 мл). Органический слой отделили, осушили над безводным сульфатом натрия и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе. Остаток после упаривания очистили методом препаративной ВЭЖХ, получив в итоге целевое соединение (170.0 мг, 70%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.42-1.78 (m, 5Н), 1.84 (s, 3Н), 3.44-3.53 (m, 1Н), 3.61-3.73 (m, 2Н), 3.78 (s, 3Н), 3.88 (t, J=5.7 Hz, 2Н), 4.98 (s, 2Н), 5.72 (br. s., 1H), 7.04 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.19 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.34 (s, 5H), 7.63 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.86-7.93 (m, 2H), 11.10 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=609 [M+H], 2.26 мин.
Пример 60
N-Boc глицин (70 мг, 0.4 ммоль, 1 экв.) суспендировали в безводном ДХМ (5 мл), затем при перемешивании в одну порцию добавили ВОР (212 мг, 0.48 ммоль, 1.2 экв.) и реакционную перемешивали 10 минут при к.т.; затем к реакционной смеси последовательно добавили вторичный амин-соединение из Примера 54 (200 мг, 0.4 ммоль, 1 экв.) и DIPEA (0.6 ммоль, 1.5 экв.). Образовавшуюся смесь перемешивали 24 часа при к.т., затем последовательно промыли насыщенными водными растворами гидрокарбоната и хлорида натрия (по 10 мл). Органический слой отделили, осушили над безводным сульфатом натрия и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе. Остаток после упаривания очистили методом флэш-хроматографии на силикагеле и упарили досуха. Маслообразный желтоватый остаток растворили в безводном ДХМ (5 мл), добавили трифторуксусную кислоту (5 ммоль) и перемешивали 12 часов при к.т. После чего реакционную смесь промыли раствором гидрокарбоната натрия (10 мл), проэкстрагировали ДХМ (3×10 мл). Объединенные органические экстракты осушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе. Остаток после упаривания очистили методом препаративной ВЭЖХ, получив в итоге целевое соединение (50.0 г, 22%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.48-1.84 (m, 6Н), 3.30 (m перекрывается с сигналом HDO, 5Н), 3.61 (s, 3Н), 3.81 (d, J=15.9 Hz, 1Н), 3.91 (d, J=16.0 Hz, 1H), 4.90 (s, 2H), 5.82 (br. s., 1H), 6.97 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.03-7.16 (m, 3H), 7.16-7.29 (m, 2H), 7.32 (d, J=7.7 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 8.14 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=566 [M+H], 2.11 мин.
Пример 61
Целевое соединение получили, как описано выше для Примера 56 с использованием хлорангидрида 3-метоксипропионовой кислоты (0.4 ммоль) в качестве ацилирующего агента. Выход целевого соединения: 128.5 мг (54%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.36-1.77 (m, 4Н) 2.99-3.14 (m, 2Н) 3.14-3.24 (m, 4Н) 3.49 (t, J=6.60 Hz, 3Н) 3.55 (s, 1Н) 3.61-3.74 (m, 2Н) 3.78 (s, 3Н) 4.98 (s, 2Н) 5.68 (s, 1Н) 6.98-7.09 (m, 1Н) 7.20 (d, J=8.07 Hz, 1Н) 7.34 (d, J=6.48 Hz, 2H) 7.46 (d, J=8.68 Hz, 2H) 7.49 (s, 1H) 7.63 (d, J=0.98 Hz, 1H) 7.88 (s, 1H) 11.10 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=595 [M+H], 2.34 мин.
Пример 62
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-3 и альдегида 10а. Выход: 208.9 мг (39%).
1
3
Н ЯМР (400 MHz, CDCl, м.д.): 1.07-1.26 (m, 4Н), 1.29 (d, J=6.24 Hz, 4Н), 1.36-1.43 (m, 2Н),1.45-1.55 (m, 2Н), 1.61-1.72 (m, 2Н), 4.95 (s, 1Н), 5.08-5.16 (m, 1Н), 5.34 (s, 1Н), 7.04 (t, J=7.95 Hz, 1Н), 7.19 (d, J=9.29 Hz, 1H), 7.29-7.36 (m, 2H), 7.37-7.51 (m, 3H), 7.61 (t, J=7.89 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 11.15 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=536 [M+H], 2.13 мин.
Пример 63
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-1 и альдегида 13d. Выход: 208.6 мг (46%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 3.20 (s, 3Н), 3.77 (s, 3Н), 4.11 (s, 2Н), 4.99 (s, 2Н), 7.04 (t, J=7.6 Hz, 1Н), 7.16 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.30-7.36 (m, 2H), 7.38-7.53 (m, 3H), 7.60 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 11.08 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=454 [M+H], 1.83 мин.
Пример 64
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-3 и альдегида 10d. Выход: 135.0 мг (26%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.10-1.24 (m, 2Н), 1.29 (dd, J=6.11, 2.69 Hz, 6Н), 1.47-1.62 (m, 2Н), 1.62-1.80 (m, 2Н), 3.64 (d, J=14.31 Hz, 2Н), 4.98 (br. s., 2H), 5.05-5.25 (m, 1H), 5.66 (d, J=2.69 Hz, 1H), 7.05 (t, J=5.87 Hz, 1H), 7.20 (d, J=8.07 Hz, 1H), 7.26-7.76 (m, 7H), 7.88 (s, 1H), 11.15 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=520 [M+H], 2.47 мин.
Пример 65
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-4 и альдегида 10u в масштабе 0.2 ммоль. Выход: 12.4 мг (11%).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=564 [М+Н], 2.02 мин.
Пример 66
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-4 и альдегида 10u в масштабе 0.2 ммоль. Выход: 10.1 мг (9%).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=564 [М+Н], 2.41 мин.
Пример 67
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-3 и альдегида 5b. Выход: 81.0 мг (19%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.28 (d, J=6.2 Hz, 6H), 2.07 (s, 3H), 2.56 (s, 6H), 3.62 (s, 3H), 5.10 (quin, J=6.3 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.36-7.42 (m, 1H), 7.46-7.51 (m, 3H), 11.11 (br. s., 1H);
APCI LCMS 427 [M+H],
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=427 [M+H], 2.59 мин.
Пример 68
Указанное соединение было получено согласно альтернативной схеме 2 синтеза (I) из соединения М7 (Таблица 2) и циклобутанола. Выход: 68.7 мг (25%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.50-1.60 (m, 2Н), 1.63-1.69 (m, 2Н),1.80 (q, J=10.4 Hz, 1Н), 2.07-2.19 (m, 2Н), 2.30-2.39 (m, 4Н), 3.34-3.41 (m, 2Н), 3.61-3.70 (m, 2Н), 4.98 (s, 2Н), 5.08 (quin, J=7.5 Hz, 1Н), 5.66 (s, 1Н), 7.05 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.20 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.28-7.37 (m, 2H), 7.38-7.53 (m, 3H), 7.62 (t, J=7.9 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 11.09 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=550 [M+H], 2.63 мин.
Пример 69
Указанное соединение было получено согласно альтернативной схеме 2 синтеза (I) из соединения М7 (Таблица 2) и циклопропанола. Выход: 58.9 мг (22%).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=552 [М+Н], 2.33 мин.
Пример 70
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-3 и альдегида 13d. Выход: 149.3 мг (31%).
1
3
Н ЯМР (400 MHz, CDCl, м.д.): 1.29 (d, 6Н), 3.20 (s, 3Н), 4.12 (s, 2Н), 4.79-5.06 (m, 2Н), 5.06-5.29 (m, 1Н), 7.04 (t, J=7.21 Hz, 1H), 7.16 (d, J=8.19 Hz, 1H), 7.32-7.46 (m, 3H), 7.46-7.54 (m, 3H), 7.85 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=482 [M+H], 2.50 мин.
Пример 71 (рацемическая смесь)
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-3 и альдегида 10f. Выход: 149.3 мг (31%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.43 (s, 6Н), 1.44 (s, 3Н), 3.24-3.53 (m, 5Н), 4.76 (s, 2Н), 5.24 (sept, J=6.2 Hz, 1Н), 7.01 (t, J=7.52 Hz, 1H), 7.05 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.29-7.44 (m, 4H), 7.44-7.63 (m, 3H), 8.21 (s, 1H), 11.53 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=508 [M+H], 2.67 мин.
Пример 72
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-3 и альдегида 13d. Выход: 194.7 мг (42%).
1
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d6, м.д.): 1.29 (d, J=6.24 Hz, 6H), 3.20 (s, 3H), 4.12 (s, 2H), 4.98 (s, 2H), 5.04-5.27 (m, 1H), 7.03 (t, J=7.46 Hz, 1H), 7.17 (d, J=8.31 Hz, 1H), 7.26-7.38 (m, 1H), 7.43 (m, 1H), 7.47 (d, J=7.21 Hz, 1H), 7.63 (t, J=7.89 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=464 [M+H], 2.90 мин.
Пример 73 (рацемическая смесь)
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-1 и альдегида 13j. Выход: 187.0 мг (37%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 11.11 (s, 1Н), 7.91 (s, 1Н), 7.34-7.66 (m, 7Н), 7.19-7.21 (d, 1Н), 7.04-7.08 (t, 1Н), 6.39-6.40 (d, 1Н), 6.30-6.31 (d, 1Н), 6.19-6.20 (d, 1Н), 5.44-5.45 (d, 1Н), 5.03 (s, 2Н), 3.80 (s, 3Н);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=506 [М+Н], 1.93 мин.
Пример 74 (рацемическая смесь)
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и альдегида 13j. Выход: 131.6 мг (27%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 11.26 (s, 1Н), 7.89 (s, 1Н), 7.62 (s, 1Н), 7.38-7.55 (m, 7Н), 7.19-7.21 (d, 1Н), 7.04-7.08 (t, 1Н), 6.38-6.40 (dd, 1Н), 6.30-6.31 (d, 1Н), 6.19-6.20 (d, 1Н), 5.44.5.46 (d, 1Н), 5.03 (s, 2Н), 3.79 (s, 3Н);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=488 [М+Н], 1.93 мин.
Пример 75 (рацемическая смесь)
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и альдегида 13k. Выход: 200.0 мг (41%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 11.26 (s, 1Н), 7.88 (s, 1Н), 7.38-7.59 (m, 9Н), 7.19-7.22 (d, 1Н), 7.06-7.08 (m, 1Н), 6.44 (s, 1H), 5.94-5.96 (d, 1Н), 5.34-5.36 (d, 1Н), 5.01 (s, 2Н), 3.79 (s, 3Н);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=488 [М+Н], 1.89 мин.
Пример 76 (рацемическая смесь)
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-1 и альдегида 13k. Выход: 101.0 мг (20%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ЦМСО-d, м.д.): 11.11 (s, 1Н), 7.90 (s, 1Н), 7.33-7.65 (m, 8Н), 7.19-7.22 (d, 1Н), 7.04-7.08 (t, 1Н), 6.44 (s, 1H), 5.95-5.96 (d, 1Н), 5.34-5.36 (d, 1Н), 5.01 (s, 2Н), 3.79 (s, 3Н);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=506 [М+Н] 1.89 мин.
Пример 77 (рацемическая смесь)
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-1 и альдегида 13l. Выход: 55.7 мг (10%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 11.11 (br. s, 1Н), 7.89 (s, 1Н), 7.61-7.63 (t, 1Н), 7.33-7.52 (m, 6Н), 7.15-7.20 (m, 2Н), 7.06-7.08 (m, 1Н), 6.83-6.86 (t, 1Н), 6.73-6.75 (d, 1Н), 6.24, (s, 1Н), 5.01 (s, 2Н), 4.17-4.20 (t, 2Н), 3.79 (s, 3Н), 2.13-2,14 (d, 2Н);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=558 [М+Н], 2.57 мин.
Пример 78
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и коммерчески доступного 2-метилтиофен-3-карбальдегида. Выход: 193.0 мг (54%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 2.34 (s, 3Н), 3.76 (s, 3Н), 7.06 (d, J=5.0 Hz, 1Н), 7.39-7.57 (m, 5Н), 7.72 (d, J=4.9 Hz, 1H), 7.77 (s, 1H), 11.16 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=358 [M+H], 1.93 мин.
Пример 79
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-1 и альдегида 5b. Выход: 245.7 мг (59%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.97 (s, 3Н), 2.08 (s, 3Н), 3.61 (s, 6Н), 3.74 (s, 3Н), 7.33-7.35 (m, 1Н), 7.40-7.50 (m, 2Н), 7.61 (t, J=7.5 Hz, 1Н), 10.83 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=417 [M+H]1.93 мин.
Пример 80 (смесь цис-/трас- изомеров)
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-1 и альдегида 10m. Выход: 177.4 мг (33%).
1
3
Н ЯМР (400 MHz, CDCl, м.д.): 1.10-1.32 (m, 2Н), 1.32-1.45 (m, 2Н), 1.45-1.56 (m, 3Н), 1.56-1.76 (m, 4Н), 1.76-2.02 (m, 2Н), 2.81 (br. s., 1Н), 3.24 (d, J=11.37 Hz, 1H), 3.38 (s, 3H), 3.95 (s, 3H), 4.81 (s, 2H), 7.01 (t, J=7.52 Hz, 1H), 7.07 (d, J=8.31 Hz, 1H), 7.21-7.27 (m, 2H), 7.34 (t, J=7.03 Hz, 2H), 7.46 (d, J=7.58 Hz, 1H), 7.55 (t, J=7.21 Hz, 1H), 8.20 (s, 1H), 11.43 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=538 [M+H], 2.24 мин.
Пример 81 (смесь цис-/трас- изомеров)
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и альдегида 10m. Выход: 197.5 мг (38%).
1
3
Н ЯМР (400 MHz, CDCl, м.д.): 1.17-1.24 (m, 1Н), 1.32-1.40 (m, 1Н), 1.46-1.54 (m, 2Н), 1.59-1.71 (m, 3Н), 1.85-1.91 (m, 1Н), 2.86 (br.s, 1Н), 3.23 (dd, J1=7.5 Hz, J2=3.9 Hz, 1Н), 3.36 (s, 3Н), 3.92 (s, 3Н), 4.79 (s, 2Н), 6.98 (t, 1Н, J=7.5 Hz), 7.05 (d, 1Н, J=7.7 Hz), 7.29-7.33 (m, 1H), 7.34-7.38 (m, 3H), 7.43-7.48 (m, 3H), 8.16 (s, 1H), 11.44 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=520 [M+H], 2.62 мин.
Пример 82
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и альдегида 16. Выход: 221.2 мг (45%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.56 (s, 6Н); 1.95 (s, 3Н); 3.78 (s, 3Н); 4.94 (s, 2Н); 7.05 (t, J=7.52 Hz, 1Н); 7.15 (d, J=8.19 Hz, 1H); 7.34-7.47 (m, 3H); 7.47-7.56 (m, 4H); 7.86 (s, 1H); 11.26 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=492 [M+H], 1.96 мин.
Пример 83
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и альдегида 5с. Выход: 103.0 мг (22%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 0.97 (d, J=6.11 Hz, 2Н), 1.07 (t, J=5.93 Hz, 2H), 1.16 (t, J=7.15 Hz, 1H), 2.00 (d, J=19.81 Hz, 2H), 2.07 (s, 3H), 2.54 (s, 6H), 3.62 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 7.33 (s, 1H), 7.37-7.45 (m, 2H), 7.47-7.51 (m, 3H), 11.05 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=469 [M+H], 2.40 мин.
Пример 84
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и альдегида 5d. Выход: 208.6 мг (46%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 2.14 (s, 3Н), 2.23 (s, 3Н), 2.30-2.32 (m, 2Н), 2.41-2.46 (m, 2Н), 2.49 (d, 2Н), 3.15 (d, J=4.8 Hz, 2H), 3.57 (s., 3H), 3.75 (s, 3H), 7.40-7.51 (m, 5H), 9.87 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=454 [M+H], 1.19 мин.
Пример 85 (рацемическая смесь)
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1с-1 и альдегида 10f. Выход: 190.2 мг (37%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.28 (s, 3Н), 3.17-3.28 (m, 5Н), 4.91 (s, 2Н), 5.50 (s, 1Н), 7.03 (t, J=7.5 Hz, 1Н), 7.15 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.33 (d, J=7.7 Hz, 1H), 7.39 (t, J=8.7 Hz, 1H), 7.43-7.54 (m, 2H), 7.61 (br. s., 1H), 7.66 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 11.25 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=515 [M+H], 2.40 мин.
Пример рац-86 (рацемическая смесь)
Указанное соединение было получено согласно альтернативной схеме 2 синтеза (I) из соединения М9 (1.45 г, 3 ммоль, Таблица 2) и циклобутанола. Выход: 306.4 мг (19%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.29 (s, 3Н), 1.57-1.70 (m, 1Н), 1.73-1.86 (m, 1Н), 2.06-2.20 (m, 2Н), 2.30-2.39 (m, 2Н), 3.17-3.31 (m, 5Н), 4.91 (s, 2Н), 5.08 (quin, J=7.5 Hz, 1Н), 5.52 (s, 1Н), 7.03 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.16 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.29-7.36 (m, 2H), 7.36-7.50 (m, 3H), 7.55-7.63 (m, 1H), 7.88 (s, 1H), 11.13 (br. s., 1H);
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=538 [M+H]+, 1.56 мин.
Пример (R)-86 (R-энантиомер)
Указанное соединение было получено разделением рац-86 методом хиральной ВЭЖХ. ЯМР и ВЭЖХ/МС спектры аналогичны рац-86.
Пример (S)-86 (S-энантиомер)
Указанное соединение было получено разделением рац-86 методом хиральной ВЭЖХ. ЯМР и ВЭЖХ/МС спектры аналогичны рац-86.
Пример рац-87 (рацемическая смесь)
Указанное соединение было получено согласно альтернативной схеме 2 синтеза (I) из соединения М9 (1.45 г, 3 ммоль, Таблица 2) и циклопентанола. Выход: 480.0 мг (29%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.28 (s, 3Н), 1.58 (d, J=2.6 Hz, 2Н), 1.74 (d, J=4.8 Hz, 4H), 1.84-1.95 (m, 2H), 3.16-3.30 (m, 5H), 4.91 (s, 2H), 5.28 (t, J=5.7 Hz, 1H), 5.52 (s, 1H), 7.04 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.16 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.30-7.37 (m, 2H), 7.37-7.52 (m, 3H), 7.63 (td, J=7.9, 1.5 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 11.17 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=552 [M+H], 1.95 мин.
Пример (R)-87 (R-энантиомер)
Указанное соединение было получено разделением рац-87 методом хиральной ВЭЖХ. ЯМР и ВЭЖХ/МС спектры аналогичны рац-87.
Пример (S)-87 (S-энантиомер)
Указанное соединение было получено разделением рац-87 методом хиральной ВЭЖХ. ЯМР и ВЭЖХ/МС спектры аналогичны рац-87.
Пример 88 (рацемическая смесь)
Указанное соединение было получено согласно альтернативной схеме 2 синтеза (I) из соединения М9 (Таблица 2) и циклогексанола. Выход: 84.8 мг (30%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.27 (br. s., 3Н), 1.33-1.51 (m, 4Н), 1.56 (q, J=8.3 Hz, 2H), 1.70-1.89 (m, 4H), 3.16-3.30 (m, 5H), 4.92 (s, 2H), 4.93-5.00 (m, 1H), 5.52 (s, 1H), 7.04 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.17 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.30-7.37 (m, 2H), 7.38-7.53 (m, 3H), 7.63 (td, J=8.0, 1.0 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 11.17 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=566 [M+H], 2.03 мин.
Пример 89 (рацемическая смесь)
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1d-1 и альдегида 10f. Выход: 134.0 мг (26%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.27 (s, 3Н) 3.18-3.25 (m, 2Н) 3.25-3.27 (m, 3Н) 3.78 (s, 3Н) 4.92 (s, 2Н) 5.50 (s, 1Н) 7.01-7.07 (m, 1Н) 7.16 (d, J=8.44 Hz, 1Н) 7.31-7.44 (m, 3Н) 7.44-7.51 (m, 1Н) 7.51-7.61 (m, 1Н) 7.89 (s, 1Н) 11.14 (s, 1Н);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=516 [М+Н], 2.61 мин.
Пример 90 (смесь цис-/-транс изомеров декагидрохинолина)
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и альдегида 5е. Выход: 172.4 мг (35%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 0.78-0.99 (m, 4Н), 1.13-1.28 (m, 5Н), 1.39-1.54 (m, 2Н), 1.64 (d, J=2.0 Hz, 3Н), 1.99 (s, 3Н), 2.79 (dd, J=11.2, 3.4 Hz, 1H), 2.91-2.94 (m, 1H), 3.58 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 7.29-7.47 (m, 5H), 7.47 (s, 1H), 11.10 (br.s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=494 [M+H], 2.32 мин.
Пример 91
Указанное соединение было получено из соединения Примера 1 согласно следующей методике: Соединение из Примера 1 (145 мг, 0.25 ммоль) растворили в ДХМ (10 мл) и при к.т. и перемешивании добавили в одну порцию мета-хлорнадбензойную кислоту (0.5 ммоль, 3 экв.). Образовавшуюся смесь перемешивали 24 часа при к.т., затем последовательно промыли насыщенными водными растворами гидрокарбоната и хлорида натрия (по 10 мл) и проэкстрагировали ДХМ (3×10 мл). Объединенные органические экстракты осушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе. Остаток после упаривания очистили методом препаративной ВЭЖХ, получив в итоге целевое соединение. Выход: 123.7 мг (81%).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=612 [М+Н], 2.15 мин.
Пример 92
Указанное соединение было получено согласно альтернативной схеме 2 синтеза (I) из соединения М7 (Таблица 2) и циклогексанола. Выход: 132.9 мг (46%).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=578 [М+Н], 2.40 мин.
Пример 93
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-4 и альдегида 10v в масштабе 0.2 ммоль. Выход: 28.4 мг (24%).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=580 [М+Н], 2.59 мин.
Пример 94
Указанное соединение было получено из соединения Примера 1 согласно следующей методике: Соединение из Примера 1 (145 мг, 0.25 ммоль) растворили в ДХМ (10 мл) и при к.т. и перемешивании добавили в одну порцию мета-хлорнадбензойную кислоту (0.25 ммоль, 1 экв.). Образовавшуюся смесь перемешивали 4 часа при к.т. (контроль конверсии исходного соединения по ТСХ), затем последовательно промыли насыщенными водными растворами гидрокарбоната и хлорида натрия (по 10 мл) и проэкстрагировали ДХМ (3×10 мл). Объединенные органические экстракты осушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и упарили под пониженным давлением на роторном испарителе. Остаток после упаривания очистили методом препаративной ВЭЖХ, получив в итоге целевое соединение. Выход: 40.2 мг (27%).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=596 [М+Н], 2.01 мин.
Пример 95
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1b-1 и 1-(бут-2-ин-1-ил)-5-хлор-1Н-пиррол-2-карбальдегида, который был синтезирован алкилированием 5-хлор-1Н-пиррол-2-карбальдегида [Journal of Organic Chemistry, 1975, 40(22): 3161-9] 1-бромбут-2-ином в присутствии гидрида натрия (1.1 экв.) в безводном ТГФ.
Выход: 220.0 мг (51%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д): 1.76 (s, 3Н), 3.77 (s, 3Н), 4.95 (d, J=2.1 Hz, 2H), 6.32 (d, J=4.2 Hz, 1H), 6.38 (d, J=4.3 Hz, 1H), 7.32-7.39 (m, 1H), 7.42-7.54 (m, 2H), 7.65 (td, J=7.9, 1.1 Hz, 1H), 11.07 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=432 [M+H], 2.76 мин.
Пример 96
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (I) из соединения 1а-1 и 2-(3-метоксипропокси)бензальдегида, который был синтезирован алкилированием салицилового альдегида 1-хлор-3-метоксипропаном в присутствии карбоната калия в кипящем ацетонитриле.
Выход: 297.9 мг (70%).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=426 [М+Н], 2.11 мин.
Пример М1
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза соединений (II) из соединения Примера 96 (297.9 мг, 0.7 ммоль). Выход: 230.4 мг (80%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.98 (t, J=6.24 Hz, 2Н), 3.25 (s, 3Н), 3.85 (s, 3Н), 3.49 (t, J=6.24 Hz, 3Н), 4.10 (t, J=6.30 Hz, 2H), 6.99 (t, J=7.46 Hz, 1H), 7.08 (d, J=8.31 Hz, 1H), 7.18-7.29 (m, 3H), 7.31-7.47 (m, 4H), 7.90 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=412 [M+H] 2.04 мин.
Пример M2
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза соединений (III) из соединения Примера М1 (230.4 мг, 0.56 ммоль). Выход: 29.0 мг (14%).
1
3
Н ЯМР (400 MHz, CDCl, м.д.): 2.07-2.13 (m, 2Н), 3.60 (t, J=5.9 Hz, 2H), 3.96 (s, 3H), 4.09-4.16 (m, 2H), 5.34-5.97 (m, 1H), 6.94-7.02 (m, 2H), 7.33 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.40 (d, J=7.9 Hz, 3H), 7.45-7.57 (m, 3H), 8.27 (s, 1H), 11.46 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=368 [M+H], 1.474 мин.
Пример М3
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (II) из соединения Примера 27. Выход: 270.6 мг (63%).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=430 [М+Н], 2.15 мин.
Пример М4
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (II) из соединения Примера 79. Выход: 314.0 мг (78%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 2.14 (s, 3Н), 2.49 (s, 6Н), 3.65 (s, 3Н), 7.35 (s, 1Н), 7.42-7.53 (m, 2Н), 7.65 (t, J=7.4 Hz, 1Н), 11.08 (br. s., 1H), 13.17 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=403 [M+H], 1.59 мин.
Пример M5
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (II) из соединения Примера 50. Выход: 277.5 мг (56%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.49-1.59 (m, 2Н), 1.61-1.76 (m, 2Н), 3.38-3.42 (m, 2Н), 3.59-3.70 (m, 2Н), 5.01 (s, 2Н), 5.65 (br. s., 1Н), 7.08 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.23 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.32-7.38 (m, 1H), 7.37-7.55 (m, 4H), 7.64 (t, J=8.1 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 11.40 (s, 1H), 12.74 (s, 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=496 [M+H], 1.68 мин.
Пример М6
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (II) из соединения Примера 63. Выход: 316.4 мг (72%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, δ м.д.): 3.20 (s, 3Н), 4.12 (s, 2Н), 4.97 (br. s., 2Н), 6.93-7.03 (m, 1Н), 7.09-7.27 (m, 5Н), 7.27-7.41 (m, 2Н), 7.65-7.82 (m, 1Н), 14.50 (br. s., 1Н);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=440 [М+Н], 2.15 мин.
Пример М7
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (II) из соединения Примера 36. Выход: 266.0 мг (55%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.28 (s, 3Н), 3.18-3.27 (m, 5Н), 4.88 (br. s., 2Н), 5.53 (br. s., 1Н), 6.82-6.98 (m, 1H), 7.01-7.23 (m, 5H), 7.30 (br. s., 2H), 7.56 (br. s., 1H);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=484 [M+H], 1.74 мин.
Пример M8
Указанное соединение было получено согласно общей схеме 1 синтеза (III) из соединения Примера М5. Выход: 27.3 мг (11%).
1
6
Н ЯМР (400 MHz, ДМСО-d, м.д.): 1.49-1.61 (m, 2Н), 1.63-1.76 (m, 2Н), 3.35-3.42 (m, 2Н), 3.60-3.71 (m, 2Н), 5.00 (s, 2Н), 5.50 (s, 1Н), 5.65 (s, 1Н), 7.03-7.15 (m, 1Н), 7.18-7.45 (m, 6Н), 7.46-7.57 (m, 1Н), 7.78 (s, 1Н), 10.52 (br. s., 1Н);
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=452 [М+Н], 2.28 мин.
Пример М9
Указанное соединение было получено из М8 (20 мг, 0.045 ммоль) по реакции с ацетилхлоридом (2 экв.) в присутствии триэтиламина (2 экв.) в ацетонитриле (200 мкл) при комнатной температуре. Продукт был выделен методом препаративной ВЭЖХ. Выход: 23.0 мг (80%).
+
ВЭЖХ/МС (APCI): m/z=494 [М+Н], 2.59 мин.
Ниже в таблицах 5 и 6 приведены структурные формулы некоторых соединений по изобретению.
Применение соединений по медицинским показаниям
Соединения, описанные в данном изобретении, могут применяться для лечения и/или профилактики онкологических заболеваний, в частности, онкологических заболеваний связанных с повышенной экспрессией фермента hCE1, в частности, для лечения лейкозов с транслокациями MLL-гена.
Способ терапевтического применения соединений
Предмет данного изобретения также включает введение субъекту, нуждающемуся в соответствующем лечении, терапевтически эффективного количества соединения общей формулы (I), соединения общей формулы (II) или соединений общей формулы (III).
Под терапевтически эффективным количеством подразумевается такое количество соединения, вводимого или доставляемого пациенту, при котором у пациента с наибольшей вероятностью проявится желаемая реакция на лечение (профилактику). Точное требуемое количество может меняться от субъекта к субъекту в зависимости от возраста, массы тела и общего состояния пациента, тяжести заболевания, методики введения препарата, комбинированного лечения с другими препаратами и т.п.
Соединение по изобретению или фармацевтическая композиция, содержащая соединение, может быть введено в организм пациента в любом количестве и любым путем введения, эффективным для лечения или профилактики заболевания.
После смешения лекарственного препарата с конкретным подходящим фармацевтически допустимым носителем в желаемой дозировке, композиции, составляющие суть изобретения, могут быть введены в организм человека или других животных перорально, парентерально, местно и т.п.
В том случае, когда соединение по изобретению используется как часть режима комбинированной терапии, доза каждого из компонентов комбинированной терапии вводится в течение требуемого периода лечения. Соединения, составляющие комбинированную терапию, могут вводиться в организм пациента как единовременно, в виде дозировки, содержащей все компоненты, так и в виде индивидуальных дозировок компонентов.
Фармацевтические композиции
Изобретение также относится с фармацевтическим композициям, которые содержат соединение общей формулы (I), общей формулы (II) или соединение общей формулы (III) (или пролекарственную форму, фармацевтически приемлемую соль, сольват, гидрат или другое фармацевтически приемлемое производное) и один или несколько фармацевтически приемлемых носителей, адъювантов, растворителей и/или наполнителей, таких, которые могут быть введены в организм пациента совместно с соединением, составляющем суть данного изобретения, и которые не разрушают фармакологической активности этого соединения, и являются нетоксичными при введении в дозах, достаточных для доставки терапевтического количества соединения.
Фармацевтические композиции, заявляемые в данном изобретении, содержат соединения данного изобретения совместно с фармацевтически приемлемыми носителями, которые могут включать в себя любые растворители, разбавители, дисперсии или суспензии, поверхностно-активные вещества, изотонические агенты, загустители и эмульгаторы, консерванты, вяжущие вещества, смазочные материалы и т.д., подходящие для конкретной формы дозирования. Материалы, которые могут служить фармацевтически приемлемыми носителями, включают, но не ограничиваются, моно- и олигосахариды, а также их производные; желатин; тальк; эксципиенты, такие как какао-масло и воск для суппозиториев; масла, такие как арахисовое, хлопковое, сафроловое, кунжутное, оливковое, кукурузное и соевое масло; гликоли, такие как пропиленгликоль; сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; агар; буферные вещества, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; альгиновая кислота; апирогенная вода; изотонический раствор, раствор Рингера; этиловый спирт и фосфатные буферные растворы. Также в составе композиции могут быть другие нетоксичные совместимые смазочные вещества, такие как лаурилсульфат натрия и стеарат магния, а также красители, разделительные жидкости, пленкообразователи, подсластители, вкусовые добавки и ароматизаторы, консерванты и антиоксиданты.
Предметом данного изобретения являются также лекарственные формы - класс фармацевтических композиций, состав которых оптимизирован для определенного пути введения в организм в терапевтически эффективной дозе, например, для введения в организм орально, местно, внутриглазным способом, пульмональным, например, в виде ингаляционного спрея, или внутрисосудистым способом, интраназально, подкожно, внутрибрюшинно, внутримышечно, а также инфузионным способом, в рекомендованных дозировках.
Лекарственные формы данного изобретения могут содержать составы, полученные методами использования липосом, методами микрокапсулирования, методами приготовления наноформ препарата, или другими методами, известными в фармацевтике.
При получении композиции, например в форме таблетки, активное начало смешивают с одним или несколькими фармацевтическими эксципиентами, такими как, например, желатин, крахмал, лактоза, стеарат магния, тальк, кремнезем, аравийская камедь, маннит, микрокристаллическая целлюлоза, гипромеллоза или аналогичные соединения.
Таблетки можно покрыть сахарозой, целлюлозным производным или другими веществами, подходящими для нанесения оболочки. Таблетки могут быть получены различными способами, такими как непосредственное сжатие, сухое или влажное гранулирование или горячее сплавление в горячем состоянии.
Фармацевтическую композицию в форме желатиновой капсулы можно получить, смешивая активное начало с растворителем и заполняя полученной смесью мягкие или твердые капсулы.
Для введения парентеральным путем используются водные суспензии, изотонические солевые растворы или стерильные растворы для инъекций, которые содержат фармакологически совместимые агенты, например пропиленгликоль или бутиленгликоль.
Характеристика биологической активности соединений
Определение цитотоксичности соединений по изобретению
Клеточные линии. Все используемые в экспериментах злокачественные клеточные линии были получены из АТСС (American Type Tissue Collection) и культивировались согласно рекомендациям производителя. Нетрансформированные мышиные макрофаги из брюшной полости были выделены с использованием описанного в литературе метода [Aging (Albany NY). 2016 Jul; 8(7): 1294-315]. Первичные фибробласты кожи человека (NDFs, normal human fibroblasts) были получены из Roswell Park Cancer Institute (Баффало, США) и культивировались согласно рекомендациям производителя. Сенесцентные клеточные линии (находящиеся в состоянии необратимого ареста клеточного цикла) SK-Mel-103 и А549 получали согласно описанным в литературе методам воздействием ионизирующей радиации (20 Грей), либо предварительной инкубацией клеток с блеомицином в течение 72 часов.
Тестируемые химические соединения
Тестируемые химические соединения готовили в виде 10 ммоль ДМСО стоков и хранили в темноте при -20°С, размораживая непосредственно перед экспериментом.
Определение цитотоксичности соединений по изобретению
2
0
6
6
0
50
Цитотоксичность соединений определяли с использованием коммерчески доступного флуоресцентного анализа alamarBlue assay (ThermoFisher Scientific, США) в соответствии с инструкциями производителя в 384-лучночных планшетах. Клетки рассеивали в лунки на планшете, инкубировали 24 часа в CO- инкубаторе при 100% влажности температуре 37°С; после чего добавили серийно-разведенные ДМСО стоки тестируемых соединений в диапазоне концентраций 0.0015-30 мкмоль/л (два повтора для каждой концентрации соединения), финальная концентрация ДМСО в среде 0.3%) и инкубировали 72 часа в описанных выше условиях. В качестве отрицательного контроля использовали культуральную среду с 0.3% ДМСО. После окончания инкубации в лунки добавили раствор резазурина (alamarBlue), измерили флуоресценцию (момент времени Т, возбуждение 530-560 нм, эмиссия 590 нм), после чего инкубировали плату еще 5-6 часов при 37°С и снова измерили флуоресценцию (момент времени Т). Вычислили разницу Т-Т. На основании полученных данных с помощь программы GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software, Inc., США) рассчитали значения полумаксимальной цитотоксичной концентрации (IC) в мкмоль/л, при которой наблюдалась гибель 50% клеток.
Из данных, приведенных в таблицах 7, 8 и 9, следует, что соединения общей формулы (I) проявляют высокую избирательную цитотоксичность лишь по отношению к злокачественным клеточным линиям человека, экспрессирующих фермент карбоксилэстеразу-1 (hCE1) и не токсичны по отношению к hCE1-отрицательным клеточным линиям. Нетоксичные сложноэфирные соединения общей формулы (I), устойчивее к действию гидролизирующих ферментов, отличных от hCE1, например, ацетилхолинэстераз, бутирилхолинэстераз и изоформ карбоксилэстеразы hCE2, hCE3, будет селективно гидролизоваться до соответствующей цитотоксичной карбоновой кислоты лишь в клетках, экспрессирующих hCE1. Карбоновые кислоты, образовавшиеся внутри hСЕ1-положительных клеток, при физиологических условиях представляют собой отрицательно заряженные частицы, что затрудняет их обратную пассивную диффузию через клеточную мембрану. Это приводит к накоплению активных лекарств-кислот во внутриклеточном пространстве и, как следствию, к увеличению фармакологического эффекта, пролонгированному действию и снижению применяемой дозы соединения общей формулы (I).
Из данных, приведенных в таблице 10, следует, что соединения общих формул (II) и (III) проявляют высокую цитотоксичность по отношению к широкому спектру злокачественных клеточным линий человека и мыши.
н/т - не тестировалось.
50
50
Из данных, приведенных в таблице 11, следует, что соединения М1 и М8 общих формул (II) и (III) соответственно проявляют высокую цитотоксичность (IC <110 нмоль/л) лишь по отношению к пролиферирующим злокачественным клеточным линиям меланомы SK-Mel-103 и аденокарциномы легкого А549, но абсолютно индифферентны (IC >10 мкмоль/л) по отношению к этим же клеточным линиям, находящимся в сенесцентном состоянии (необратимого ареста клеточного цикла). При этом неважно, каким именно способом было инициировано состояние сенесенса. Это свидетельствует о потенциально низкой токсичности соединений общих формул (II) и (III), поскольку соматические непролиферирующие клетки составляют большую часть организма взрослого человека.
Дополнительные подтверждения низкой токсичности соединений по изобретению, в частности общих формул (I) и (III), по отношению к незлокачественным клеткам (макрофагам, выделенным из брюшной полости мышей) приведены на рисунках 4 и 5. Как следует из приведенных данных, все протестированные соединения не снижают жизнеспособность нормальных макрофагов вплоть до максимальной концентрации 10 мкмоль/л.
Определение стабильности соединений в плазме
Для экспериментов использовали свежеполученную плазму от мышей линии NIH-SWISS. Человеческая плазма была получена из Bioreclamation Inc. (США).
Тестируемые соединения инкубировали в плазме в концентрации 100 мкмоль/л при 37°С.
В определенные временные промежутки из инкубационной смеси отбирали аликвоты плазмы, после чего они были разбавлены культуральной средой в 10 раз и использованы для определения цитотоксичности, как описано выше.
50
50
Как видно из представленных данных в таблице 12, соединение по примеру 50 высокотоксично по отношению к клеточным линиям с экспрессией карбоксилэстеразы-1 hCE1 (лейкозы с транслокациями MLL-гена MV4-11 и U937, IC 36-40 нмоль/л), но индифферентно по отношению к hCE1-отрицательным клеточным линиям (лимфома CCRF-CEM и меланома SK-Mel-103, IC 8.8-10 мкмоль/л). Инкубация со специфическим ингибитором карбоксилэстеразы-1 BNPP в 60-170 раз снижает цитотоксичность тестируемого соединения по отношению к hCE1-положительным клеточным линиям MV4-11 и U937, что свидетельствует о ключевой роли карбоксилэстеразы-1 в конвертации нетоксичных соединений общей формулы (I) в цитотоксические метаболиты формул (II) и (III).
На основе экспериментальных данных для соединения по примеру 36 было показано, что соединения изобретения общей формулы (I) стабильны при инкубации в человеческой плазме (низкое содержание карбоксилэстеразы-1) и сохраняют свою избирательную цитотоксичность по отношению к hCE1-положительным клеточным линиям (рисунок. 3). Для сравнения приведен профиль цитотоксичности этого же соединения, полученный при инкубации в отсутствии плазмы (рис. 2). Приведенные данные свидетельствуют о потенциально низкой токсичности соединений общей формулы (I) по отношению к тканям и органам, не экспрессирующим при инкубации.
Определение противоопухолевой активности соединений по изобретению на модели подкожного-перевиваемого ксенографта острого миелоидного лейкоза MV4-11 с транслокацией гена MLL.
Все исследования на животных проводились в Roswell Park Cancer Institute (RPCI) в соответствии протоколом, одобренным Комитетом по уходу и работе с лабораторными животными (IACUC).
В исследовании использовали самок мышей SCID, полученных из вивария RPCI (LAR RPCI). На момент начала эксперимента возраст животных составлял 9 недель. Мышей содержали по 5 животных в клетке. Животные содержались на стандартной диете для грызунов (2018S, Harlan) и свободным доступом к стерильной питьевой воде в контролируемых условиях (температура 18-26°С, влажность воздуха 30-70%, 12-часовой цикл свет-темнота). Перед началом эксперимента животных акклиматизировали в течение 3-5 дней.
Клеточная линия MV4-11
Клеточная культура острой моноцитарной лейкемии человека с t(4;11) транслокацией MLL-гена. Работу с клеточной культурой проводили в стерильных условиях, используя асептическую технику и стерильные реагенты. Клеточную культуру перед началом работ проверяли на отсутствие микоплазмы. MV4-11 культивировали в среде RPMI с добавлением фенолового красного, 10% эмбриональной телячий сыворотки, 100 единиц/мл пенициллина, 100 мкг/мл стрептомицина и 2 ммоль L-глутамина.
Инокуляция клеток
Клетки, выращенные в шести планшетах Т75, отделяли центрифугированием (1000 об/мин, 5 мин, 4°С). Осадок, содержащий клетки, дважды промывали стерильным холодным раствором D-PBS с последующим центрифугированием, как описано выше, после каждой промывки. После первой промывки клетки подсчитывали, а после последней промывки клетки ресуспендировали до конечной концентрации 10 млн. клеток/мл или 2 млн /200 мкл инъекционного объема в холодном D-PBS. Суспензию клеток хранили на льду до инъекции. Суспензию клетки инокулировали в каждый бок животным (2 млн. клеток на инъекцию, 2 инокуляции на мышь). Все манипуляции с клеточной культурой во время приготовления и перевивки проводились в стерильных условиях.
Подготовка животных
3
Когда перевитые опухоли достигли объема 50-200 мм, животных распределили по группам (n=10) таким образом, чтобы усреднить объем опухолей между группами.
Введение соединений по изобретению и контрольного раствора
Введение соединений по изобретению проводили внутрибрюшинно, один раз день в соответствии с графиками и дозами, указанными на рисунках 6 и 7. Соединение по примеру 29 вводили в дозе 80 мг/кг в смеси 10% ДМСО, 10% Cremaphor ELP и 80% физиологического раствора. Соединение по примеру 87 вводили в дозе 100 мг/кг в смеси 10% этанола, 10% Cremaphor ELP и 80% физиологического раствора, для контрольной группы использовали это же формулирование. Вводимые объемы растворов тестируемых соединений (10 мл/кг) рассчитывали на основе веса для каждого животного; растворы вводили в течение 10 секунд.
Наблюдение за животными и измерение объема опухолей
На протяжении всего эксперимента ежедневно контролировали смертность и общее состояние животных во всех группах (общий вид, двигательная активность, потеря массы тела и т.д.). Для более четкой оценки состояния и активности животных осмотр проводили при открытых клетках. Все отклонения от нормы документировались. Если при осмотре животного обнаруживали значительные признаки токсичности (например, взъерошенность, сгорбленность, низкую активность, снижение веса на 15%), то введение препарата прекращали до полного восстановления животного. Если потеря веса животного превышала 20%, то оно подвергалось эвтаназии в соответствии с правилами Roswell IACUC. Размер опухоли измеряли цифровым штангенциркулем 3 раза в неделю в двух измерениях: максимальная длина и максимальная ширина (L и W соответственно). Объем опухоли (V) рассчитывали по формуле: V=0.5×L×W×W.
Окончание исследования
3
2
Эвтаназия агонизирующих животных и животных с большими опухолями (2 см и более) осуществлялась передозировкой CO, сопровождаемая цервикальной дислокацией в соответствии с правилами Roswell IACUC
Анализ данных
опыт
контроль
На основании измеренных индивидуальных объемов опухолей рассчитывали среднее значение для каждой группы. Относительные объемы опухоли рассчитывали как объем опухоли в определенный день, разделенный на первоначальный объем. Средние объемы опухолей сравнивали между группами, используя двусторонний непарный t-тест (р<0.05 для статистически значимого результата).Подавление роста опухоли (Т/С%) рассчитывали по формуле: Т/С%=(V/V)×100%.
Для соединений настоящего изобретения общей формулы (I) была изучена противоопухолевая активность на модели подкожно-перевиваемого острого миелоидного лейкоза MV4-11 с транслокацией гена MLL-на самках мышей SCID. Кривые торможения роста опухоли приведены на рисунке 1А и Б.
Торможение роста опухоли (Т/С) для соединения по примеру 87 составило 61% (р=0.014), а для соединения по примеру 29-41% (р<0.0001). На протяжении эксперимента у животных в экспериментальных группах не наблюдалось признаков токсичности (потеря массы тела, изменение внешнего вида и поведения).
Несмотря на то, что изобретение описано со ссылкой на раскрываемые варианты воплощения, для специалистов в данной области должно быть очевидно, что конкретные подробно описанные эксперименты приведены лишь в целях иллюстрирования настоящего изобретения, и их не следует рассматривать как каким-либо образом ограничивающие объем изобретения. Должно быть понятно, что возможно осуществление различных модификаций без отступления от сути настоящего изобретения.