Лечение дисплазий шейки матки методом фотодинамической терапии

32

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

Материалы и методы. Работа проведена на 110 мышах-самцах F1 (CBA/Lac*C57BL/6). Биосинтез NO определяли по концентрации в опухолях продуктов окисления NO — нитратов (НА) и нитритов (НИ) и по их выделению с мочой спектрофотометрическим методом. iNOS выявляли в парафиновых микросрезах тканей иммуногистохимиче-ским методом с использованием поликлональных кроличьих антител к iNOS (Santa Cruz Biotechnology). Статистическую обработку данных проводили с использованием критерия Стьюдента.

Результаты. Максимальную суммарную концентрацию НИ и НА (3,6 ± 0,46) х 10-5 моль/кг в опухолях КЛ регистрировали на 7-е сутки, с последующим ее снижением в процессе роста опухолей. В пересчете на NO средняя концентрация НИ + НА в опухолях КЛ изменялась в пределах от 3,3 до 17 мкмоль. Максимальное выделение метаболитов (3,78 ± 1,83) х 10-6 моль/кг м. т. ж. с мочой у мышей определялось на 14-е сутки. Способность пери-тонеальных макрофагов продуцировать НИ явно снижалась на 14-е и 21-е сутки роста КЛ, что может отражать угнетение их функциональной активности. Экспрессия iNOS выявлялась на участках, расположенных ближе к периферии опухолей и в клетках стромы на всех контролируемых сроках. В метастазах легких иммуноокраши-вание было слабое, что может свидетельствовать о селекционном отборе мигрирующих в легкие опухолевых клеток с низкой активностью iNOS. Изучение действия донора NO — натрия нитропруссида (доза 120 мкг/кг, 16 введений) на рост КЛ выявило слабое (на 27—39 %, p < 0,01) торможение роста опухоли у мышей. Таким образом, концентрация NO на участках с экспрессией iNOS может быть выше средних показателей (от 3,3 до 17 мкмоль). При концентрации > 1 мкмоль, NO и его активные формы могут проявлять противоопухолевое действие, а низкие (< 100 nM) или средние (от 100 до 500 nM) концентрации могут стимулировать пролиферацию, а также инвазиро-вание опухолевых клеток.

Заключение. Выявлена гетерогенность экспрессии iNOS, способствующая неоднородности концентраций NO в опухолях КЛ и разнонаправленным эффектам NO в отношении опухолей. Можно предположить, что эффективность селективных ингибиторов iNOS у мышей с КЛ может иметь ограничения, в то же время изучение NO-доноров представляется перспективным.

В.А. Дуванский12, В.И. Елисеенко1, Е.Ф. Шин1 ВЛИЯНИЕ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ НА РЕПАРАТИВНЫЕ ПРОЦЕССЫ ЯЗВ ВЕНОЗНОГО ГЕНЕЗА

1ФГБУ«ГНЦЛМ ФМБА», Москва, Россия; 2РУДН, Москва, Россия

Цель исследования — изучить влияние фотодинамической терапии (ФДТ) с фотосенсибилизатором (ФС) «Фотосенс» на раневой процесс венозных язв.

Материалы и методы. Проведен анализ результатов лечения 93 пациентов. Применяли ФДТ с апликационным ФС «Фотосенс» и красным светом газоразрядной лампы (длина волны — 600—700 нм) АТО-1 при плотности энергии 42 Дж/см2.

Результаты. При традиционном лечении средние сроки очищения язвенной поверхности от гнойно-некротических масс составили 7,7 ± 0,5 сут, появление грануляций отмечено на 19,0 ± 0,9 сут, а заживление (эпителизация на 50 %) — на 27,3 ± 1,0 сут. В группе, где применяли ФДТ, эти сроки составляли 3,8 ± 0,8; 10,7 ± 0,6; 20,5 ± 1,2 сут. После проведения ФДТ уровень микробной обсемененно-сти снижался в 100 раз, в 50 % случаев из раны исчезали грамположительные бактерии — стафилококки; грамотри-цательные бактерии не исчезали ни в одном случае. Через

I сут после лечения количество микробных тел на 1 см2 увеличивался в среднем в 10 раз, состав микробной флоры не менялся. Под воздействием ФДТ течение раневого процесса интенсифицируется, что проявляется: на 3-5-е сутки очищением язвенной поверхности от гнойно-некротического экссудата; 10-14-е сутки увеличением количества макрофагов, пролиферацией фибробластов; 14-е сутки созреванием грануляционной ткани с вертикальными сосудами; 21-е сутки отмечается преобразование грануляционной ткани в фиброзно-рубцовую.

Заключение. Действие ФДТ на раневой процесс выражается в прямом бактерицидном воздействии, индукции фагоцитоза бактерий нейтрофилами и макрофагами, разрушении дистрофически измененных нейтрофилов, стимуляции пролиферации фибробластов.

Р.А. Дуванский1, Е.Ф. Странадко1, М.И. Ковалев2, В.А. Дуванский13

ЛЕЧЕНИЕ ДИСПЛАЗИЙ ШЕЙКИ МАТКИ МЕТОДОМ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ

1ФГБУ«ГНЦ ЛМ ФМБА», Москва, Россия;

2ГБОУВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава

России, Москва, Россия;

3РУДН, Москва, Россия

Цель исследования — изучить эффективность лечения пациенток с дисплазией шейки матки фотодинамической терапией (ФДТ) с фотосенсибилизаторами (ФС) хлорино-вого ряда.

Материалы и методы. Проанализированы результаты лечения 92 пациенток с дисплазией шейки матки различной степени тяжести: легкая (CIN I) — 30 (32,6 %) пациенток, умеренная (CIN II) — 43 (46,7 %) пациентки и тяжелая (CIN III) — 19 (20,7 %) обследованных. Лечили: диатермоэлек-троконизация (ДЭК) — 21 пациентка (CIN II — 12, с CIN III — 9); радиолечение — 17 пациенток (CIN I — 11, CIN

II — 6); ФДТ с применением ФС «Фотодитазин» — 18 пациенток (CIN I — 9, CIN II — 9); ФДТ с применением ФС «Радахлорин» — 36 пациенток (10 — с CIN I, в 16 — с CIN II, в 10 наблюдениях — с CIN III); экстирпация матки сделана 1 пациентке в возрасте 50 лет с дисплазией тяжелой степени (с интрацервикальным поражением).

Результаты. Эффективность при использовании ДЭК (95 %), радиолечения — 94 % и ФДТ с «Радахлорином» — 94 % и более низкий — при применении ФДТ с «Фотоди-тазином» — 89 %. Сравнительная оценка послеоперационных осложнений свидетельствует о высокой частоте осложнений при ДЭК (9,5 %), в 1,5 раза реже при радиолечении (5,9 %), при ФДТ (2,8-5,6 %) они представлены зудом кожных покровов, не требующих медикаментозного

Спецвыпуск / том 16 / 2017

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

33

лечения. При дисплазии шейки матки эффективность использованных методов лечения существенно не различалась и составила 89—95 %.

Заключение. ФДТ эффективно при лечении дисплазии шейки матки, не сочетающейся с рубцовой деформацией ткани шейки матки, и является методом выбора у нерожавших женщин.

Е.А. Дудко1, А.А. Арефьева2, С.А. Калюжный1, О.М. Рябинина1, И.А. Мамичев1, А.Н. Гришанина1, Е.А. Богуш1, С.Д. Коломийцев1, Н.О. Вихлянцева1, Т.А. Богуш1

ЭПИТЕЛИАЛЬНО-МЕЗЕНХИМАЛЬНЫЙ ПЕРЕХОД В СЕРОЗНОМ РАКЕ ЯИЧНИКОВ

1ФГБУ«РОНЦ им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия;

2МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия

Введение. Серозный рак яичников (РЯ) является одним из наиболее распространенных онкологических заболеваний, в патогенез которого вовлечен процесс эпители-ально-мезенхимального перехода (ЭМП),

ассоциированный с инвазивным ростом и метастазирова-нием. Эпителиальные клетки при этом приобретают свойства мезенхимальных клеток (пластичная форма, подвижность) и экспрессируют специфический для них маркер — виментин (Вим).

Цель исследования. Изучить уровень экспрессии Вим в ткани РЯ и оценить корреляцию маркера метастатического потенциала опухоли с эффективностью 1-й линии химиотерапии (ХТ) препаратами платины и таксанами.

Материалы и методы. Проведен иммунофлуоресцент-ный анализ с использованием проточной цитофлуориме-трии уровня ЭМП в ткани серозного РЯ 56 пациенткам по содержанию эпителиальных клеток, коэкспрессирую-щих характерный для них белок — цитокератин и мезен-химальный маркер — Вим (ЦК/Вим — двойное окрашивание). Для оценки корреляции экспрессии ERCC1 с эффективностью 1-й линии ХТ с включением препаратов платины и таксанов образцы опухолей были разделены на 3 группы в соответствии с клиническими данными относительно продолжительности безрецидивного периода после окончания лечения: до 6 мес — резистентные опухоли (n = 6); 6—12 мес — условно чувствительные (n = 12); более 12 мес (n = 22) — чувствительные. Оценка проведена с использованием статистического пакета STATISTICA методом U-критерия Манна-Уитни. В группы с низким и высоким уровнем экспрессии Вим включены опухоли с показателем ниже и выше медианы в целом по исследованной группе пациенток (41 %).

Результаты. В резистентной группе низкий и высокий уровень ЦК/Вим выявлен в 8 и 92 % случаев, в условно чувствительной — в 54 и 46 %, а в чувствительной — в 32 и 68 % случаев соответственно. Средний уровень и медиана экспрессии ЦК/Вим составили в резистентной группе — 52,2 ± 12,8 и 50,0 %; в условно чувствительной — 40,0 ± 19,5 и 37 %; в чувствительной — 39,1 ± 15,8 и 36,0 %. Статистически значимые различия показателей экспрессии ЦК/Вим в опухоли выявлены между резистентной и чувствительной группами (р = 0,007).

Заключение. Уровень экспрессии в ткани РЯ клеток, экспрессирующих ЦК/Вим, является клинически значимым показателем, который с высокой степенью достоверности прогнозирует эффективность 1-й линии ХТ препаратами платины и таксанами.

Поддержано РФФИ (№№ 15-04-06991-а,

16-34-01049-мол-а), а также грантом Президента РФ МК-7709.2016.7.

Е.А. Дудко1, Т.А. Богуш1, А.А. Башарина2, О.М. Рябинина1,

B. Т. Заркуа1, Ю.Б. Дьякова1, А.С. Тюляндина1,

C.А. Тюляндин1

КОЛИЧЕСТВЕННАЯ ОЦЕНКА КОЭКСПРЕССИИ ЭСТРОГЕНОВЫХ РЕЦЕПТОРОВ а И ß В КЛЕТКАХ СЕРОЗНОГО РАКА ЯИЧНИКОВ

1ФГБУ«РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия;

2МГУим. М.В. Ломоносова, Москва, Россия

Введение. В последние годы возродился интерес к гормональной терапии рака яичников (РЯ), однако в отличие от рака молочной железы мишень антиэстрогенов до настоящего времени точно не установлена. Ранее мы показали, что в ткани РЯ коэкспрессируется 2 типа ЭР — ЭР и ЭРр. Возможность их коэкспрессии в одной и той же клетке остается невыясненной, хотя это принципиально важно для дальнейшего выяснения клинической значимости ЭРа и ЭРр в прогнозе эффективности гормональной терапии РЯ.

Цель исследования — оценить частоту и уровень экспрессии ЭРа и ЭРр в ткани РЯ и ответить на вопрос: возможна ли коэкспрессия ЭРа и ЭРр в одной и той же клетке?

Материалы и методы. Исследование проведено на 54 образцах серозного РЯ с использованием иммунофлуорес-центного анализа и проточной цитофлуориметрии. В работе использованы первичные и вторичные антитела фирмы Abcam: для ЭРа — клон SP1 и для ЭРр — клон 14C8 и ab98729. Для оценки частоты и уровня коэкспрессии в опухоли ЭРа и ЭРр проведена окраска антителами к ЭР или к ЭРр разных аликвот суспензии клеток из одного и того же образца опухоли (одиночное окрашивание). Для выявления коэкспрессии ЭРа и ЭРр в одной и той же клетке проведено последовательное окрашивание антителами к ЭРа и ЭРр одной и той же аликвоты суспензии клеток (двойное окрашивание). Количественную оценку специфически окрашенных клеток проводили в программе FlowJo 10.0.8. Градации уровня ЭРа и ЭРр: низкий — 15— 39 % клеток экспрессируют рецептор; высокий — 40 % и более.

Результаты. В целом по группе исследованных опухолей экспрессия ЭРа выявлена в 75 % случаях со средним значением уровня маркера и стандартным отклонением 33,7 ± 13,5 %. ЭРр выявлены во всех исследованных образцах опухолей со средним значением уровня маркера 42,7 ± 9,9 %. Частота выявления опухолей с высоким уровнем экспрессии ЭРр более чем в 2 раза превышала показатель для ЭРа (62 vs 26 %), а с низкой экспрессией маркера была приблизительно в 2 раза ниже (38 vs 74 %). Оценка возможности коэкспрессии ЭРа и ЭРр в одной и той же опухоле-

Спецвыпуск/ том 16 / 2017

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ