СПОСОБЫ КОМБИНИРОВАННОЙ ТЕРАПИИ С ПРИМЕНЕНИЕМ МОЛЕКУЛ, СВЯЗЫВАЮЩИХСЯ С PSL И PCRV PSEUDOMONAS

1. Выделенная связывающая молекула или ее антиген-связывающий фрагмент, которая специфически связывается с PcrV Pseudomonas, где связывающая молекула:
(a) связывается с тем же эпитопом PcrV Pseudomonas, что и антитело или его антиген-связывающий фрагмент, содержащее вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 216, и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 217;
(b) осуществляет конкурентное ингибирование связывания PcrV Pseudomonas с антителом или его антиген-связывающим фрагментом, содержащим VH-область, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 216, и VL-область, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 217; или
(c) комбинацию (а) и (b).
2. Связывающая молекула по п. 1, содержащая:
(a) CDR1 тяжелой цепи, содержащая SYAMN (SEQ ID NO: 218), или его вариант, содержащий 1, 2, 3 или 4 консервативные аминокислотные замены; CDR2 тяжелой цепи, содержащая AITISGITAYYTDSVKG (SEQ ID NO: 219), или его вариант, содержащий 1, 2, 3 или 4 консервативные аминокислотные замены; и CDR3 тяжелой цепи, содержащая EEFLPGTHYYYGMDV (SEQ ID NO: 220), или его вариант, содержащий 1, 2, 3 или 4 консервативные аминокислотные замены;
(b) CDR1 легкой цепи, содержащая RASQGIRNDLG (SEQ ID NO: 221), или его вариант, содержащий 1, 2, 3 или 4 консервативные аминокислотные замены; CDR2 легкой цепи, содержащая SASTLQS (SEQ ID NO: 222), или его вариант, содержащий 1, 2, 3 или 4 консервативные аминокислотные замены; и CDR3 легкой цепи, содержащая LQDYNYPWT (SEQ ID NO: 223), или его вариант, содержащий 1, 2, 3 или 4 консервативные аминокислотные замены; или
(с) комбинацию (а) и (b).
3. Связывающая молекула по п. 1, содержащая:
(a) вариабельную область тяжелой цепи, которая по меньшей мере на 90% идентична последовательности SEQ ID NO: 216;
(b) вариабельную область легкой цепи, которая по меньшей мере на 90% идентична последовательности SEQ ID NO: 217; или
(c) комбинацию (а) и (b).
4. Связывающая молекула по п. 1, содержащая антитело или его антиген-связывающий фрагмент.
5. Связывающая молекула или ее фрагмент по п. 4, которая представляет собой рекомбинантное антитело, моноклональное антитело, химерное антитело, гуманизированное антитело, полностью человеческое антитело, биспецифическое антитело или любую их комбинацию.
6. Связывающая молекула или ее фрагмент по п. 5, содержащие:
(a) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую SEQ ID NO: 216; и
(b) вариабельную область легкой цепи, содержащую SEQ ID NO: 217.
7. Биспецифическое антитело, содержащее связывающий домен, который связывается с Psl Pseudomonas, и связывающий домен, который связывается с PcrV Pseudomonas.
8. Биспецифическое антитело по п. 7, где
(a) домен, связывающийся с Psl, содержит scFv-фрагмент, а домен, связывающийся с PcrV, содержит интактный иммуноглобулин, или
(b) домен, связывающийся с Psl, содержит интактный иммуноглобулин, а домен, связывающийся с PcrV, содержит scFv-фрагмент.
9. Биспецифическое антитело по п. 8, где
(a) scFv слит с амино-концом VH-области интактного иммуноглобулина,
(b) scFv слит с карбокси-концом СН3-области интактного иммуноглобулина, или
(c) scFv встроен в шарнирную область интактного иммуноглобулина.
10. Биспецифическое антитело по п. 7, где домен, связывающийся с Psl,
(a) связывается с тем же эпитопом Psl Pseudomonas, что и антитело или его антиген-связывающий фрагмент, содержащее VH-область, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11, и VL-область, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12;
(b) может осуществлять конкурентное ингибирование связывания Psl Pseudomonas с антителом или его антиген-связывающим фрагментом, содержащим VH-область, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11, и VL-область, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12; или
(с) комбинацию (а) и (b).
11. Биспецифическое антитело по п. 7, где домен, связывающийся с PcrV
(a) связывается с тем же эпитопом PcrV Pseudomonas, что и антитело или его антиген-связывающий фрагмент, содержащий VH-область, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 216, и VL-область, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 217, или
(b) может осуществлять конкурентное ингибирование связывания PcrV Pseudomonas с антителом или его антиген-связывающим фрагментом, содержащим VH-область, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 216, и VL-область, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 217; или
(c) комбинацию (а) и (b).
12. Биспецифическое антитело по п. 11, где домен, связывающийся с PcrV, содержит VH-область, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 216, и VL-область, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 217.
13. Биспецифическое антитело по п. 7, где домен, связывающийся с Psl, содержит VH-область, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 11, и VL-область, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12, и где домен, связывающийся с PcrV, содержит VH-область, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 216, и VL-область, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 216.
14. Выделенная молекула полинуклеотида, содержащая последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую связывающую молекулу или ее фрагмент по п. 1, или биспецифическое антитело или его фрагмент по п. 7.
15. Композиция, содержащая связывающую молекулу или ее фрагмент по п. 1 к биспецифическому антителу или его фрагменту по п. 7, и фармацевтически приемлемый носитель.
16. Композиция по п. 15, содержащая связывающий домен, который связывается с Psl Pseudomonas, и связывающий домен, который связывается с PcrV Pseudomonas.
17. Способ профилактики или лечения инфекции, вызванной Pseudomonas, у индивида, при необходимости, включающий введение индивиду эффективного количества композиции по п. 15.
18. Набор, содержащий композицию по п. 15.