Особенности свободно-радикального статуса у больных хроническим бруцеллезом на фоне лечения антиоксидантами

случаев у одного и того же лица может наблюдаться трансформация одного заболевания в другое. Но, несмотря на общность основного звена патогенеза, механизмы развития и конечный результат при ДТЗ и АИТ различаются. Многие иммунологические аспекты ДТЗ сходны с таковыми при АИТ. Изучению иммунного статуса больных с заболеваниями щитовидной железы посвящено большое число исследований, при этом факторы, которые обуславливают развитие аутоиммунного процесса у лиц со сходной генетической предрасположенностью до настоящего времени остаются неизвестными [12].

Цель исследования - сравнительное изучение иммунного статуса больных ДТЗ и АИТ в фазе тиреотоксикоза.

Материалы и методы. Обследован 51 больной с ДТЗ в возрасте и 48 больных АИТ, у которых анамнестически исключены заболевания, влияющие на показатели иммунного статуса. Диагноз устанавливали на основании жалоб, анамнеза, эхографического обследования щитовидной железы, определения уровня ТТГ, свТ3, свТ4 в сыворотке крови. Определяли рост объема щитовидной железы в процентах и степень тяжести тиреотоксикоза. Определение уровня ТТГ и тиреоидных гормонов (свТ3, свТ4) проводили методом иммуноферментного анализа с использованием наборов реагентов производства фирмы «Вектор-Бест» (г. Новосибирск, Россия).

Состояние клеточного иммунитета оценивали по экспрессии поверхностных антигенов лимфоцитов в реакции непрямой иммунофлюоресценции с использованием моноклональных антител производства ООО «Сорбент» (Москва). Характеризовались уровни СЭ3+, СЭ4+, СЭ8+, СЭ16+, СЭ19+, СЭ25, СЭ95, ИЬД-ЭЯ популяций и субпопуляций лимфоцитов. Содержание лимфоцитов, экспрессирующих дифференцировочные антигены, определяли при помощи люминесцентного микроскопа «МИКМЕД-2» («ЛОМО», СПб, Россия). Функциональную активность В-лимфоцитов оценивали по содержанию в сыворотке крови 1§Л, 1§М, 1§0, которое определяли методом радиальной иммунодиффузии в геле с помощью моноспецифических сывороток при помощи наборов реактивов ООО «Медицинская иммунология» (Москва). Число циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) определяли путем селективной преципитации ПЭГ-6000.

Таблица

Показатели иммунного статуса больных диффузным токсическим зобом

Показатель Контроль, п=1З ДТЗ, п=З1 АИТ, п=48

Лейк, х109/л З,9±1,7 З,8±1,2 6,4±1,З

Лимф, % 28,8±1,4 27,6±1,2 34,2±2,7

абс 1712±67,0 161З±87 2181±174

CD 3, % 61,7±0,66 З1,7±1,9** 46^1,3**

абс 1046±44,0 83З±3* 1014±101

CD 4, % 3З,7±0,93 34,8±1,1 46,4±1,2*#

абс 613±39,0 З62±29 1012±42

CD 8, % 23,8±0,6З 19,3±1,28* 17,7±1,2*

абс 408,0±27,0 311±21* 386±20

CD 19, % 16,6±0,4 2З,2±2,3** 22,8±1,6*

абс 284,0±21,0 401±47* 492±З3*

CD 16, % 1З,6±0,7 24,0±2,3** 23,2±1,9*

абс 267,0±18,0 389±48* З06±69**

CD 9З, % 2,З±0,2 З,6±0,3** 4,8±0,2**

абс 42,8±2,1 90,4±З,7** 104,7±7,6**

Ig A, мг/мл 2,02±0,16 З,2±0,14* 6,28±1,0**

Ig M, мг/мл 1,2З±0,07 1,31±0,1З 1,1±0,11

Ig G, мг/мл 12^0^4 18,7±0,79* 19,8±1,З7*

ЦИК, у. е. 72,4±11,2 92,2±7,4** 86,4±6,8*

Ат к ТПО, 0 30,2±1,3* 677,8±12,4**#

Ат к ТГ, 11,2±0,9 9,6±1,1 368,4±7,4**#

Различия с контрольной группой достоверны: * р<0,0З; ** р<0,01. Различия с показателями у больных ДТЗ достоверны: # р<0,0З

Результаты. Анализ полученных данных показал, что у больных с ДТЗ и АИТ в фазе гиперфункции щитовидной железы отмечались выраженные изменения как клеточного, так и гуморального звеньев иммунитета. При анализе клеточного иммунитета выявлено, что у пациентов с манифестной формой тиреотоксикоза достоверно снижено содержание Т-лимфоцитов, Т-хелперов/индукторов и Т-супрессоров. Число натуральных киллеров, В-лимфоцитов и клеток, экспрессирующих СЭ95+ было напротив достоверно повышено. Отмечалось также достоверное увеличение концентрации 1§0 и 1§Л в сыворотке крови по сравнению с аналогичными показателями у здоровых доноров. У

больных АИТ в фазе гиперфункции щитовидной железы отмечалось достоверное увеличение относительного и абсолютного содержания лимфоцитов, обладающих хелперно-индукторными свойствами, сопровождавшееся статистически значимым снижением супрессорно-цитотоксической субпопуляции Т-лимфоцитов. Относительное и абсолютное количество натуральных киллеров, а также лимфоцитов, экспрессирующих CD95+ у больных этой группы находилось на достоверно более высоком уровне, чем у здоровых пациентов. Изменения, выявленные в гуморальном звене больных АИТ, характеризовались увеличением абсолютного и относительного содержания В-лимфоцитов и сопровождались достоверным повышением содержания IgG и IgA в сыворотке крови. У больных этой группы выявлено также увеличение количества ЦИК и циркулирующих антител к основным тиреоидным антигенам.

При сравнении показателей иммунитета у больных ДТЗ и АИТ в состоянии манифестного тиреотоксикоза выявлено, что процентное содержание Т-лимфоцитов и Т-супрессоров / киллеров одинаково снижено. Относительное количество Т-хелперов / индукторов, а также уровень антител к ТПО и ТГ у лиц с АИТ выше, чем с ДТЗ. Полученные данные подтверждают утверждение большинства исследователей о ведущей роли дефицита CD8+ Т-лимфоцитов в генезе аутоиммунных заболеваний щитовидной железы [4, 5, 9]. Но, наряду с этим, выявлены определенные отличия: у больных АИТ отмечается увеличение числа Т-хелперов/индукторов. Рост уровня Т-хелперов-индукторов характерно для аутоиммунного процесса в щитовидной железе [2, 3, 5]. Натуральные киллеры, увеличение количества которых выявлено в нашем исследовании, способствуют развитию деструктивных изменений в ткани щитовидной железы [1]. О поддерживающейся активности процесса свидетельствует также увеличение числа клеток, экспрессирующих маркер готовности к апоптозу и чрезмерная активация гуморального звена иммунной системы. Все эти процессы усиливают деструкцию щитовидной железы и способствуют развитию гипотиреоза. Изменения иммунной системы при ДТЗ и АИТ требуют дифференцированного подхода к разработке методов иммунокоррекции для данной категории больных.

Литература

1. Гусова З.Р., Сизякина Л.П. // Южно-Российский медицинский журнал.- 2002.- №4.- С. 38-42.

2. Кузьменок О. и др.// Иммунология.- 2000.- №2.- С. 16.

3. Кучинская Э.А. и др. // Иммунопатология, аллергология и инфектология.- 2000.- №2.- С. 16-20.

4. Петунина Н.А., Герасимов ГА. // Проблемы эндокринологии.- 1997.- №4.- С. 30-35.

5. Рафибеков Д.С., Калинин А.П. Аутоиммунный тиреои-дит.- Бишкек: КГМА, 1996.- 158 с.

6. Davies T. F. // Bailliere’s Clin. Endocrinol. Metab.-1997.- Vol. 11.- P. 431-601.

7. Rapoport B., McLachlan S.M. // Kluwer Academic Publishers.- Boston, USA, 2000.

8. VolpeR. // Thyroid.- 1993.- Vol. 3.- P. 345-350.

9. Volpe R. // Thyoid.- 1994.- №4.- P. 373-377.

10. Weetman A.P., Mc Gregor AM. // Endocrine Rev.- 1994.-Vol. 15.- P. 788-830.

11. Weetman A.P. et al. // Q.J.M.- 1994.- Vol. 87.- P. 337.

12. Weetman A.P. // Thyroid international.- 2003.- №2.

УДК 616-022.39

ОСОБЕННОСТИ СВОБОДНО-РАДИКАЛЬНОГО СТАТУСА У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ БРУЦЕЛЛЕЗОМ НА ФОНЕ ЛЕЧЕНИЯ АНТИОКСИДАНТАМИ

Б.И. ОТАРАЕВА*, М.Р. ИВАНОВА**, Ж.Г. ПЛИЕВА*

В России бруцеллез регистрируется у всех видов домашних и некоторых диких животных. Наиболее неблагоприятные по бруцеллезной инфекции являются Сибирский, Поволжский, Северо-Кавказский регионы. В РСО - Алания в 2001г. в 3 административных территориях зарегистрировано 15 случаев бруцеллеза

***Северо-Осетинская государственная медицинская академия

** Кабардино-Балкарский государственный университет

людей (показатель на 100 тыс. населения - 12,), что в 3 раза больше, чем в 1999 г. Ежегодно на территории РФ регистрируется около 500 случаев впервые выявленного бруцеллеза.

Таблица

Показатели МДА и ЦП у больных хроническим бруцеллезом на фоне применения «аевита» и без него

Показатель n Период исслед. Xmin- Xmax x±m P Р1

Здоровые 26 3-9 5±0,2

МДА на фоне 25 I 8-13 10±0,2 <0,001 <0,001

базис-терапии 25 II 5-11 8±0,2 <0,001 <0,001

(мкмоль/л) 25 III 4-9 7±0,2 <0,001 >0,05

МДА на фоне 25 I 7-13 9±0,2 <0,001

базис-терапии + 25 II 5-9 7±0,2 <0,001

«аевит» (мкмоль/л) 25 III 5-8 7±0,2 <0,001

Здоровые 26 249-563 418±0,2

ЦП на фоне 25 I 182-373 291±9,8 <0,001 >0,05

базис-терапии 25 II 216-401 320±6,6 <0,001 <0,001

(мг/л) 25 III 224-440 376±6,0 <0,001 >0,05

ЦП на фоне 25 I 227-347 302±9,8 <0,001

базис-терапии + 25 II 291-394 351±6,6 <0,001

«аевит» (мг/л) 25 III 301-426 389±6,0 <0,001

Примечание: I - период разгара заболевания, II - период угасания клинических симптомов, III - период ранней реконвалесценции, р - достоверность различий с показателями у здоровых; р1 --достоверность различий по отношению к показателям у больных хроническим бруцеллезом, получавшим на фоне базис-терапии «аевит»

Оксидантно-антиоксидантный баланс клеток напрямую взаимосвязан с системой перекисного окисления липидов (ПОЛ). Нарушение регуляции ПОЛ клеточных мембран лежит в основе целого ряда инфекционных заболеваний. Повышение уровня ПОЛ компенсируется за счет активации антиоксидантной системы организма. Срыв антиоксидантной защиты сопровождается развитием состояния пероксидации, при котором клетки и ткани подвергаются воздействию избыточных концентраций свободных радикалов[1]. Возникающие при этом патологические процессы в итоге ведут к гибели клетки. Возникает необходимость включения в лечение препаратов с антиоксидантным действием.

Цель работы - изучение состояния перекисного окисления липидов, антиоксидантной защиты у больных хроническим бруцеллезом в условиях базисного лечения и на фоне включения в терапию антиоксиданта «аевит».

Под наблюдением находилось 25 больных хроническим бруцеллезом. Диагноз устанавливали на основании клинических и эпидемиологических данных, подтвержденных серологическими реакциями Райта, Хеддльсона, РПГА и Я - логическими показателями. При хроническом бруцеллезе заболевание характеризуется частыми рецидивами и обострениями, а также ре - и суперинфекцией, которые и определяют полиморфизм клиники. Наиболее часто в патологический процесс вовлекался локомоторный аппарат с поражением крупных суставов и поясничного отдела позвоночника (с явлениями сакроилеита). Часто больных жаловались на артралгии, отличающиеся непостоянством, летучестью, различной локализацией, сопровождались миалгиями. Имело место повышение температуры до субфебрильных цифр. Все больные отмечали потливость разной степени выраженности, преимущественно в вечернее и ночное время.

Исследование крови больных хроническим бруцеллезом проводили в трех периодах: разгара заболевания, угасания клинических симптомов и ранней реконвалесценции. В качестве контрольной группы было обследовано 26 практически здоровых доноров Республиканской станции переливания крови г. Владикавказа, соотносимая с опытной группой по полу и возрасту.

Состояние прооксидантной системы организма оценивали по малоновому диальдегиду (МДА), который является одним из конечных продуктов перекисного окисления липидов и отражает его активность. Для определения содержания МДА в крови больных была использована методика ИувЫаша с соавт. (1983) без использования сульфата железа по которой оценивали степень активации перекисного окисления липидов. Принцип метода: тиобарбитуровая кислота (ТБК) в кислой среде взаимодействует с низкомолекулярными диальдегидами (главным образом, малоновым) с образованием окрашенного комплекса, имеющего максимум светопоглощения при длине волны 535 нм.

О состоянии антиоксидантной системы крови больных хроническим бруцеллезом судили по активности церулоплазмина (ЦП). Он циркулирует в плазме и перехватывает свободные радикалы, предохраняя от их повреждающего действия липидсодержащие биоструктуры. ЦП определяли по методу Раввина [2], который основан на ферментативном окислении n-фенилендиамина церулоплазмином. Реакции останавливаются добавлением фтористого натрия. По оптической плотности образующихся окрашенных продуктов судят о концентрации ЦП. В результате установлено возрастание уровня МДА в плазме крови с максимальным значением в периоде разгара заболевания.

В периоде угасания симптомов, параллельно положительной динамике заболевания на фоне проводимой терапии отмечалось снижение показателей МДА в плазме крови. В периоде ранней реконвалесценции показатель продолжал уменьшаться, но до нормы не доходил (табл.).

Выявлено, что уровень ЦП в периоде разгара заболевания был значительно снижен, в периоде угасания клинических проявлений отмечалось некоторое его повышение. И перед выпиской больных из стационара - уровень изучаемого показателя продолжал нарастать и, в ряде случаев, приближался к норме. Более медленное нарастание отмечено у лиц с осложнениями и сопутствующей патологией (табл.). Обнаруженное снижение показателей ЦП можно расценить как угнетение антиоксидантной защиты организма и активацию процессов ПОЛ.

В условиях включения в план лечения антиоксиданта «Аевит» уровень МДА был достоверно ниже, чем у больных только на фоне базис-терапии во всех периодах заболевания. Не достоверной была разница лишь в показателях перед выпиской больных из стационара, когда снижение МДА определялось и в первой и во второй группах. Отмечались также достоверно более высокие показатели ЦП в периоде угасания клинических симптомов в группе больных, в комплексную терапию которых был добавлен «аевит», по сравнению с группой, которая не принимала этот препарат (табл.). Включение в базисное лечение больных хроническим бруцеллезом препарата «Аевит» снижает уровень липопероксидации и усиливает антиоксидантную защиту организма.

Литература

1. Зенков Н.К. и др. Окислительный стресс.- Маик: Наука / интерпериодика, 2001

2. Камышников В. С. Справочник по клинико-

биохимической диагностике.- Минск: Беларусь,2000.- 425 с.

3. Ushiama M., Michara M. // Anal. Biochem.- 1978.- №1.-P. 271-278.

УДК 615.457

МЕТОДОЛОГИЯ СОЗДАНИЯ ЛЕКАРСТВЕННЫХ ФОРМ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ СОВРЕМЕННЫХ ИНФОРМАЦИОННЫХ ТЕХНОЛОГИЙ

Е.Т.ЖИЛЯКОВА, Н. А. ШЕВЧЕНКО *

В современном мире потребность в готовых лекарственных средствах (ГЛС) удовлетворяется в основном за счет дженериче-ских (генерических) препаратов. То есть таких лекарственных форм, которые производятся на предприятиях после окончания срока патентной защиты, но соответствуют следующим требованиям оригинального (патентованного препарата): полностью воспроизводится состав дженерического лекарственного средства (ЛС); дженерическое ЛС и оригинальное ЛС должны быть биоэк-вивалентны; технология производства дженерического ЛС должна соответствовать технологии оригинального ЛС, хотя могут быть и различия, которые не должны влиять на биоэквивалентность ЛС. Все страны мира используют систему продаж и внедрений дженерических ЛС. Это объясняется экономическими затратами, которые несомненно ниже, чем при разработке оригинального ЛС. Но состояние здравоохранения таково, что постоянно возникают новые заболевания практически во всех терапевтических группах, что влечет за собой непременную разработку

* Белгородский ГУ, каф. фармации, г.Белгород, ул. Победы 85