ПРОИЗВОДСТВО РЕКОМБИНАНТНЫХ КОЛЛАГЕНОПОДОБНЫХ БЕЛКОВ

1. Дрожжевая клетка для производства рекомбинантного коллагеноподобного белка, в предпочтительном варианте выполнения изобретения - рекомбинантного белка биссуса двустворчатых моллюсков, причем указанная дрожжевая клетка подвержена трансформации с использованием следующих элементов:
a) первого вектора экспрессии, который кодирует указанный коллагеноподобный белок; и
b) второго вектора экспрессии, содержащего нуклеиновую кислоту, кодирующую пролил-4-гидроксилазу (Р4Н),
причем рекомбинантный коллагеноподобный белок является рекомбинантным белком биссуса двухстворчатых моллюсков, содержащим или состоящим из одного или более фрагментов коллагенового домена, фланкированного доменом эластина двустворчатых моллюсков или фибрина шелка двустворчатых моллюсков.
2. Дрожжевая клетка по п.1, в которой последовательность Р4Н соединена с сигнальной последовательностью для эффективной транспортировки указанной последовательности в эндоплазматическую сеть указанной дрожжевой клетки.
3. Дрожжевая клетка по п.2, в которой сигнальная последовательность представляет собой фактор спаривания альфа 1 (ФСА) S.cerevisiae (SEQ ID NO 10).
4. Дрожжевая клетка по одному или более пп.1-3, причем дрожжевая клетка в предпочтительном варианте выполнения изобретения является клеткой S. cerevisiae, Schizosaccharomyces pombe, Pichia pastoris, Candida albicans или Hansenula polymorpha.
5. Дрожжевая клетка по п.1, в которой первый вектор экспрессии дополнительно содержит один или более регуляторных элементов.
6. Дрожжевая клетка по п.5, в которой регуляторные элементы включают в себя промотор, выбранный из конститутивных или индуцируемых промоторов.
7. Дрожжевая клетка по п.6, в которой промотор выбран из GPD, GAL4, CUP1, МЕТ25, GAL1 или GAL1-10.
8. Дрожжевая клетка по п.1, в которой векторы экспрессии являются плазмидами.
9. Дрожжевая клетка по п.1, фрагменты которой являются производными Mytilus sp., в предпочтительном варианте выполнения изобретения М.edulis, M.galloprovincialis, М.californians, или Geukeria demissa.
10. Дрожжевая клетка по п.9, причем рекомбинантный белок биссуса двустворчатых моллюсков содержит или состоит из одного или более фрагментов preColP и/или preColD или их вариантов.
11. Дрожжевая клетка по п.1, причем рекомбинантный белок содержит или состоит из аминокислотной последовательности SEQ ID NO 3 и/или 4 или их вариантов.
12. Дрожжевая клетка по п.1, причем в рекомбинантном белке сигнальная последовательность соответствующей аминокислотной последовательности заменена сигнальной последовательностью, характерной для дрожжей, в предпочтительном варианте выполнения изобретения - фактором спаривания альфа 1 (ФСА) S.cerevisiae.
13. Дрожжевая клетка по п.1, в которой Р4Н представляет собой Р4Н человека или двустворчатого моллюска.
14. Набор частей или система коэкспрессии, предназначенная для применения в производстве белков, содержащих рекомбинантный коллаген, причем указанная система содержит следующие составляющие:
a) первый вектор экспрессии, определенный в одном или более пунктах из пп.1-13; и
b) второй вектор экспрессии, определенный в одном или более пунктах из пп.1-13;
15. Способ производства рекомбинантного белка биссуса двустворчатых моллюсков, содержащий этапы, на которых:
a) обеспечивают дрожжевую клетку;
b) трансформируют указанную дрожжевую клетку посредством первого и второго вектора экспрессии, определенных в одном или более пунктах из пп.1-13, или посредством системы коэкспрессии по п.14;
c) осуществляют экспрессию рекомбинантного коллагеноподобного белка, в предпочтительном варианте выполнения изобретения рекомбинантного белка биссуса двустворчатых моллюсков, из указанной дрожжевой клетки в подходящих условиях; и
d) извлекают указанный рекомбинантный белок.
16. Способ производства нитей из рекомбинантного белка биссуса двустворчатых моллюсков, содержащий этапы, на которых:
a) обеспечивают рекомбинантный белок согласно способу производства по п.15; и
b) прядут (путем электропрядения) или формуют указанный белок в нити посредством подходящего способа.
17. Белок, полученный способом по п.15 или нить, полученную способом по п.16.
18. Применение белков/нитей по п.17 в области биотехнологии и/или медицины.
19. Применение белков/нитей по п.17 в производстве систем ушивания или покрытия ран.
20. Применение по п.19 для производства хирургических материалов.
21. Применение по п.20, причем хирургический материал предназначен для применения в нейрохирургии или офтальмологической хирургии.
22. Применение белков/нитей по п.17 для производства материалов для протезирования, в предпочтительном варианте выполнения изобретения материалов искусственных хрящей или сухожилий.
23. Системы ушивания или покрытия ран, хирургические материалы, материалы для протезирования, в предпочтительном варианте выполнения изобретения материалы искусственных хрящей или сухожилий, которые можно получить путем применения белков/нитей по п.17.
24. Косметические изделия, средства доставки лекарств, ткани, текстильные изделия, бумажная продукция, продукция из кожи, автомобильные детали или авиационные детали, в состав которых входят белки/нити по п.17.