ВЛИЯНИЕ ПРИРОДНОГО АДАПТОГЕНА «ЛИГФОЛ» НА МОРФОЛОГИЧЕСКИЙ СОСТАВ КРОВИ КУРИНЫХ ЭМБРИОНОВ

УДК 636.52/.58.082.474

ВЛИЯНИЕ ПРИРОДНОГО АДАПТОГЕНА «ЛИГФОЛ» НА МОРФОЛОГИЧЕСКИЙ СОСТАВ КРОВИ КУРИНЫХ ЭМБРИОНОВ

Фархат Исмаилович Сулейманов, д-р вет. наук, профессор

Александр Сергеевич Мигачёв, аспирант

Марина Игоревна Челнокова, канд. биол. наук, доцент

ФГБОУ ВО «Великолукская государственная сельскохозяйственная академия», Россия, г. Великие Луки

Ранее нами установлен положительный стимуляционный эффект раствора «Лигфол» в концентрации 1,5% на рост куриных эмбрионов и развитие их иммунокомпе-тентных органов. Целью данной работы являлось изучение влияния природного адаптогена «Лигфол» на морфологический состав крови куриных эмбрионов.

Работа выполнена на эмбрионах кур яичного кросса «Хайсекс Браун». В экспериментальной группе проводили глубинную обработку («метод вакуумного подсоса») яиц по методу Ф.И. Сулейманова. В качестве адаптогена природного происхождения использовали раствор «Лигфол» в концентрации 1,5%. Яйца закладывали на 20 минут в раствор с температурой 16 °С. В контроле яйца предынкубационной обработке не подвергались. Инкубацию яиц как в контроле, так и в экспериментальной группе с первого дня проводили в автоматизированном инкубаторе И-32-1 при стабильном режиме с температурой воздуха 37,6±0,1 °С и относительной влажностью воздуха 55,0%. Образцы крови отбирали на 13-е, 15-е, 18-е и 20-е сутки инкубации. Подсчет эритроцитов и лейкоцитов проводился по классической методике с помощью камеры Горяева. Содержание гемоглобина крови оценивали с помощью гемоглобинцианидного метода Драбкина. Для подсчета лейкоцитарных индексов были подготовлены мазки крови с дальнейшим окрашиванием по Романовскому-Гимзе.

Результаты исследования показали, что предварительная обработка инкубационных яиц раствором «Лигфол» оказывает стимулирующее воздействие на морфологический состав крови в определенные сутки эмбриогенеза: повышением общего количества эритроцитов в крови эмбрионов кур на 15-е, 18-е сутки, гемоглобина - на 20-е сутки, лейкоцитов - на 18-е сутки, псевдоэозинофилов - на 18-е сутки, моноцитов - на 15-е сутки. Дополнительная стимуляция яиц адаптогеном природного происхождения может использоваться в практике инкубации яиц сельскохозяйственной птицы яичного направления и при изучении синерге-тического воздействия предынкубационной обработки яиц и переменных температур инкубации на эмбриональное развитие кур.

Ключевые слова: инкубация, эмбрионы кур, морфология крови, адаптогены. Введение

Природными веществами, которые стимулируют защитные свойства организма, адаптируют его к изменениям экологических факторов, повышают устойчивость к стрессам, являются адаптогены. Функциональная значимость адаптогенов заключается в уравновешивании внутреннего состояния организма с внешней средой. Механизм действия адаптогенов заключается в повышении

общей неспецифической устойчивости организма к негативному (вредному) воздействию факторов биологической, физической и химической природы [1]. Кровь как динамическая ткань, пронизывающая все тело организма, обеспечивает поддержание гомеостаза и быстро реагирует на любые экологические изменения, а также дает интегральную характеристику как общего состояния организма, так и отдельных его органов [2, 3, 5, 8].

Ранее нами установлен положительный стимуляционый эффект природного адаптогена «Лигфол» на рост куриных эмбрионов и развитие их иммуно-компетентных органов [6]. Поэтому целью нашей работы являлось изучение влияния природного адаптогена «Лигфол» на морфологический состав крови куриных эмбрионов.

Материал и методы

Эксперимент проведен на базе ФГБОУ ВО Великолукская ГСХА. Работа выполнена на эмбрионах кур яичного кросса «Хайсекс Браун». Яйца приобретены на птицефабрике ОАО «Верхневолжская птицефабрика» (д. Рязаново) Калининского района Тверской области.

Предынкубационная обработка яиц. В экспериментальной группе проводили глубинную обработку («метод вакуумного подсоса») яиц по методу Ф.И. Сулейманова [4]. В качестве адаптогена природного происхождения использовали раствор «Лигфол» (ООО «Лигфарм», Россия) в концентрации 1,5%. Инкубационные яйца закладывали на 20 минут в раствор с температурой 16 °С. Затем обработанные яйца подсушивали и закладывали в инкубатор. В контрольной группе яйца предынкубационной обработке не подвергались.

Инкубация яиц. Инкубацию яиц как в контроле (n=32), так и в экспериментальной группе (n=32) с первого дня проводили в автоматизированном инкубаторе И-32-1 (Минифермер, Россия) при стабильном режиме с температурой воздуха 37,6±0,1 °С и относительной влажностью воздуха 55,0%.

Гематологические исследования. Вскрытие яиц (n=6) проводили на 13-е, 15-е, 18-е, 20-е сутки инкубации. На 13-е, 15-е и 18-е сутки инкубации отбирали образцы крови из амниотической ножки желточного мешка, а на 20-е сутки инкубации - из яремной вены путем рассечения крупных сосудов шеи эмбрионов.

19 о

Подсчет эритроцитов (RBC, х10 /л) и лейкоцитов (WBC, х10 /л) проводился по классической методике с помощью камеры Горяева. Содержание гемоглобина (HGB, г/л) крови оценивали с помощью гемоглобинцианидного метода Драб-кина. Для подсчета лейкоцитарных индексов (LYM% - относительное содержание лимфоцитов; GR% - относительное содержание псевдоэозинофилов; EO% - относительное содержание эозинофилов; MON% - относительное содержание моноцитов) были подготовлены мазки крови с дальнейшим окрашиванием по Романовскому-Гимзе.

Статистический анализ. Гематологические показатели были проанализированы в программе Statistica 10.0 (Statsoft Inc, USA, 2010) с помощью Bonferroni test при уровнях значимости Р<0,001; Р<0,01; Р<0,05.

Результаты и обсуждение

В результате исследований установлено, что после предынкубационной обработки яиц раствором «Лигфол» происходит достоверно значимое увеличение числа эритроцитов крови куриных эмбрионов на 15-е и 18-е сутки по сравнению с контролем. К 20-м суткам число эритроцитов в экспериментальной и контрольной группах достоверно не различалось (таблица 1). Также отмечалось увеличение общего числа лейкоцитов при обработке яиц раствором «Лигфол» на 18-е сутки, а к 20-м суткам различий в данном показателе не выявлено. Достоверные различия в снижении гемоглобина в экспериментальной группе установлены на 15-е сутки и его повышение к периоду вылупления (20-е сутки). Наши результаты указывают на то, что более высокие значения содержания эритроцитов и лейкоцитов до 18-х суток, а также гемоглобина к 20-м суткам инкубации связаны с более высокой скоростью эмбрионального метаболизма в течение этого периода.

Таблица 1 - Влияние природного адаптогена «Лигфол» на содержание

19

эритроцитов (ЯВС, х10 /л), гемоглобина (НОВ, г/л) и лейкоцитов (WBC, х109/л) в крови у куриных эмбрионов на разные сутки эмбриогенеза

Возраст, сутки Контроль Лигфол РЛигфолхКонтроль

ЯБС

13 1,25±0,06 0,97±0,06 <0,05

15 1,05±0,04 1,32±0,04 <0,05

18 0,99±0,09 1,53±0,12 <0,001

20 1,23±0,06 1,57±0,22 >0,05

ИСБ

13 56,7±1,33 59,7±0,33 >0,05

15 84,3±0,89 59,0±0,58 <0,001

18 111,6±0,67 110,7±1,20 >0,05

20 100,3±0,33 128,0±1,15 <0,001

WBC

13 9,17±1,45 9,10±0,33 >0,05

15 10,86±0,15 12,16±1,20 >0,05

18 17,62±0,12 20,56±0,42 <0,01

20 19,03±0,35 18,90±0,19 >0,05

Примечание: здесь и в таблице 2 Рлигфол хКонтроль

(Р<0,00

уровень достоверных различий в показателях по отношению к

Р<0,01; Р<0,05) контролю.

Результаты исследования, представленные в таблице 2, показали, что предварительная обработка яиц раствором «Лигфол» влияет на некоторые лейкоцитарные индексы крови эмбрионов кур. При воздействии адаптогеном природного происхождения, в сравнении с контролем, наблюдалось снижение псевдоэозинофилов на 15-е сутки, затем их повышение на 18-е сутки и умень-

шение к 20-м суткам эмбриогенеза. В связи с тем, что псевдоэозинофилы являются первой линией защиты организма и играют важнейшую роль в формировании неспецифического иммунитета [7], можно предположить, что предынку-бационная обработка оплодотворенных яиц адаптогеном природного происхождения в последующем будет способствовать устойчивости цыплят к неблагоприятным факторам внешней среды. Предынкубационная обработка яиц не влияла на относительное содержание лимфоцитов, эозинофилов в процессе эмбриогенеза, а относительное содержание моноцитов достоверно уменьшалось на 13-е сутки, затем увеличивалось на 15-е сутки и к периоду вылупления (20-е сутки), не имело достоверных различий с контролем.

Таблица 2 - Влияние природного адаптогена «Лигфол» на лейкоцитарные индексы крови у куриных эмбрионов на разные сутки эмбриогенеза, %

Возраст, сутки Контроль Лигфол РЛигфол хКонтроль

ЬУМ%

13 95,33±1,45 90,33±2,91 >0,05

15 90,03±1,53 93,33±0,33 >0,05

18 90,67±2,03 83,33±2,03 >0,05

20 88,67±1,20 92,0±2,52 >0,05

13 5,01±1,15 6,02±2,08 >0,05

15 7,67±2,03 2,35±0,88 <0,05

18 7,33±1,20 12,67±2,73 <0,05

20 9,67±1,86 6,0±0,58 <0,05

ЕО%

13 2,00±0,75 4,02±1,53 >0,05

15 1,67±0,33 2,67±0,88 >0,05

18 2,00±0,97 2,68±0,67 >0,05

20 1,33±0,67 1,62±1,08 >0,05

МО№%

13 1,33±0,67 0,33±0,10 <0,05

15 0,67±0,07 1,71±0,67 <0,05

18 - 1,33±0,56 -

20 0,33±0,03 0,38±0,06 >0,05

Примечание: LYM% - относительное содержание лимфоцитов, %; GR% - относительное содержание псевдоэозинофилов, %; ЕО% - относительное содержание эозинофилов, %; МО№/о - относительное содержание моноцитов, %.

Выводы

На основании проведенного исследования можно заключить, что предварительная обработка инкубационных яиц адаптогеном природного происхождения оказывает стимулирующее воздействие на морфологический состав крови в определенные сутки эмбриогенеза: повышением общего количества эритроцитов в крови эмбрионов кур на 15-е, 18-е сутки, гемоглобина - на 20-е сутки, лейкоцитов - на 18-е сутки, псевдоэозинофилов - на 18-е сутки, моноцитов

- на 15-е сутки.

Дополнительная стимуляция яиц адаптогеном природного происхождения «Лигфол» может использоваться в практике инкубации яиц сельскохозяйственной птицы яичного направления продуктивности и при изучении синерге-тического воздействия предынкубационной обработки яиц и переменных температур инкубации на эмбриональное развитие кур.

Библиографический список

1. Арушанян, Э. Б. Адаптогены растительного происхождения: учеб. пособие для студентов / Э. Б. Арушанян, Э. В. Бейер. - Ставрополь : Издательство СтГМУ, 2017. - 149 с. -Текст : непосредственный.

2. Корчемкин, В. Н. Изменения органов иммунной системы и морфологического состава крови кур в онтогенезе / В. Н. Корчемкин, Ф. И. Сулейманов. - Текст : непосредственный // Известия Великолукской государственной сельскохозяйственной академии. - 2021. -№ 1(34). - С. 18-28. - ISSN 2308-8583.

3. Корчемкин, В. Н. Сравнительная характеристика клеток красной крови эмбрионов кур на 5, 10, 15, 20 сутки инкубации / В. Н. Корчемкин. - Текст : непосредственный // Актуальные проблемы науки в области АПК : материалы региональной научно-практической конференции, Великие Луки, 14 октября 2021 года. - Великие Луки : Великолукская государственная сельскохозяйственная академия, 2021. - С. 69-73. - ISBN 978-5-8047-0104-9.

4. Патент № 2403907, МПК A61K 36/00(2006.01), A61D 99/00(2006.01) Способ повышения выводимости и сохранности цыплят : № 2008121653/10 : заявл. 2008.05.28 : опубл. 2010.11.20 / Сулейманов Ф. И., Вавилова О. В., Смирнова А. В., Виноградов В. А. ; заявитель Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Великолукская государственная сельскохозяйственная академия». - 4 с. - Текст : непосредственный.

5. Стимуляция эмбрионального и постэмбрионального развития бройлеров с помощью современных отечественных иммуномодуляторов / А. В. Санин, А. В. Деева, Т. Н. Кожевникова [и др.]. - Текст : непосредственный // Российский ветеринарный журнал. - 2019. - № 2.

- С. 37-44. - ISSN 2500-4379.

6. Сулейманов, Ф. И. Морфометрические изменения органов куриных эмбрионов при использовании тканевого препарата «Лигфол» / Ф. И. Сулейманов, А. С. Мигачев. - Текст : непосредственный // Иппология и ветеринария. - 2021. - № 1(39). - С. 189-195. -ISSN 2225-1537.

7. Челнокова, М. И. Влияние лазерного излучения на выводимость и морфологический состав крови эмбрионов кур / М. И. Челнокова, А. Г. Шутенков. - Текст : непосредственный // Молочнохозяйственный вестник. - 2017. - № 2(26). - С. 72-79. - ISSN 2225-4269.

8. Morita, V. I. Hematological values and body, heart and liver weights of male and female broiler embryos of young and old breeder eggs / V. I. Morita, I. Boleli, A. C. Filho. - Text : direct // Brazilian Journal of Poultry Science. - 2009. - Volume 11. - P. 7-15. - ISSN 1516-635X.

UDC 636.52/.58.082.474

INFLUENCE OF THE «LIGFOLUM» NATURAL ADAPTOGEN ON CHICKEN EMBRYO BLOOD MORPHOLOGICAL COMPOSITION

Suleimanov Farkhat Ismailovich, Doctor of Veterinary, professor Migachiov Alexandr Sergheevich, post graduate student Chelnokova Marina Igorevna, Candidate of Biology, associate professor

State Agricultural Academy of Velikie Luki FGBOU VO, Velikie Luki, Russia

Previously, we established a positive stimulating effect of the Ligfol solution in the concentration of 1.5% on the growth of chicken embryos and the development of their immunocompetent organs. The purpose of this work was to study the effect of the «Ligfol» natural adaptogen on the chicken embryo blood morphological composition.

The work was carried out on hen embryos of the «Hysex Brown» egg cross. In the experimental group, deep processing («vacuum suction method») of eggs was carried out according to the method of F.I. Suleimanov. As an adaptogen of natural origin, a solution of «Ligfol» in the concentration of 1.5% was used. Eggs were laid for 20 minutes in a solution with a temperature of 16 °C. In the control group, the eggs were not subjected to the pre-incubation treatment. Incubation of eggs both in the control and in the experimental group was carried out from the first day in the I-32-1 automated incubator at a stable mode with an air temperature of 37.6±0.1 ° C and a relative humidity of 55.0%. Blood samples were taken on the 13th, 15th, 18th and 20th incubation days. The counting of erythrocytes and leukocytes was carried out according to the classical method using the Goryaev camera. The blood hemoglobin content was assessed using the Drabkin hemiglobin cyanide method. For the calculation of leukocyte indices, blood smears were prepared with further staining according to Romanovsky-Gimza.

The results of the research showed that pretreatment of incubation eggs with Ligfol solution had a stimulating effect on the morphological composition of blood on certain days of embryogenesis: an increase in the total number of erythrocytes in the chicken embryo blood on the 15th, 18th day, hemoglobin - on the 20th day, leukocytes - on the 18th day, pseudoeosinophils - on the 18th day, monocytes - on the 15th day. Additional stimulation of eggs with natural adaptogens can be used in the industrial practice of poultry egg incubation as well as in the study of the synergistic effect of pre-incubation eggs treatment and variable incubation temperatures on the embryonic development of chickens.

Key-words: incubation, chicken embryos, blood morphology, adaptogens.

Bibliograficheskij spisok

1. Arushanyan, E'. B. Adaptogeny' rastitel'nogo proisxozhdeniya: ucheb. posobie dlya studentov / E'. B. Arushanyan, E'. V. Bejer. - Stavropol' : Izdatel'stvo StGMU, 2017. - 149 s. - Tekst : neposredstven-

ny'j.

2. Korchemkin, V. N. Izmeneniya organov immunnoj sistemy' i morfologicheskogo sostava krovi kur v ontogeneze / V. N. Korchemkin, F. I. Sulejmanov. - Tekst : neposredstvenny'j // Izvestiya Velikolukskoj gosudarstvennoj sel'skoxozyajstvennoj akademii. - 2021. - № 1(34). - S. 18-28. - ISSN 2308-8583.

3. Korchemkin, V. N. Sravnitel'naya xarakteristika kletok krasnoj krovi e'mbrionov kur na 5, 10, 15, 20 sutki inkubacii / V. N. Korchemkin. - Tekst : neposredstvenny'j // Aktual'ny'e problemy' nauki v oblasti APK : materialy' regional'noj nauchno-prakticheskoj konferencii, Velikie Luki, 14 oktyabrya 2021 goda. - Velikie Luki : Velikolukskaya gosudarstvennaya sel' skoxozyaj stvennaya akademiya, 2021. -S. 69-73. - ISBN 978-5-8047-0104-9.

4. Patent № 2403907, MPK A61K 36/00(2006.01), A61D 99/00(2006.01) Sposob povy'sheniya vyvodimosti i soxrannosti cyplyat : № 2008121653/10 : zayavl. 2008.05.28 : opubl. 2010.11.20 / Sulejmanov F. I., Vavilova O. V., Smirnova A. V., Vinogradov V. A. ; zayavitel' Federal'noe gosudarstvennoe obra-zovatel'noe uchrezhdenie vy'sshego professional'nogo obrazovaniya «Velikolukskaya gosudarstvennaya sel'skoxozyajstvennaya akademiya». - 4 s. - Tekst : neposredstvenny'j.

5. Stimulyaciya embrionalnogo i postembrionalnogo razvitiya brojlerov s pomoshhyu sovremen-nyx otechestvenny'x immunomodulyatorov / A. V. Sanin, A. V. Deeva, T. N. Kozhevnikova [i dr.]. - Tekst : neposredstvenny'j // Rossijskij veterinarny'j zhurnal. - 2019. - № 2. - S. 37-44. - ISSN 2500-4379.

6. Sulejmanov, F. I. Morfometricheskie izmeneniya organov kurinyx embrionov pri ispoFzovanii tkanevogo preparata «Ligfol» / F. I. Sulejmanov, A. S. Migachev. - Tekst : neposredstvenny'j // Ippologiya i veterinariya. - 2021. - № 1(39). - S. 189-195. - ISSN 2225-1537.

7. Chelnokova, M. I. Vliyanie lazernogo izlucheniya na vy'vodimost' i morfologicheskij sostav krovi embrionov kur / M. I. Chelnokova, A. G. Shutenkov. - Tekst : neposredstvenny'j // Molochnoxozyajstven-ny j vestnik. - 2017. - № 2(26). - S. 72-79. - ISSN 2225-4269.

8. Morita, V. I. Hematological values and body, heart and liver weights of male and female broiler embryos of young and old breeder eggs / V. I. Morita, I. Boleli, A. C. Filho. - Text : direct // Brazilian Journal of Poultry Science. - 2009. - Volume 11. - P. 7-15. - ISSN 1516-635X.

E-mail: anatom9@yandex.ru

182112, Псковская область, г. Великие Луки, пр-т Ленина, д. 2, ФГБОУ ВО Великолукская ГСХА

Тел.: +7 (81153) 7-28-51

Ректорат, редакционная коллегия журнала «Известия ВГСХА» поздравляет профессорско-преподавательский состав академии, всех авторов, читателей журнала с Новым 2022 годом. Желаем творческих успехов, новых научных достижений, карьерного роста и всего самого лучшего в новом году!