СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ВЫСОКООЧИЩЕННОГО РЕКОМБИНАНТНОГО ИНГИБИТОРА С1-ЭСТЕРАЗЫ ЧЕЛОВЕКА ДЛЯ МЕДИЦИНСКОГО ПРИМЕНЕНИЯ

1. Способ очистки рекомбинантного ингибитора C1-эстеразы человека, включающий вирусную инактивацию, металл-хелатную хроматографию, аффинную хроматографию и анион-обменную хроматографию, отличающийся тем, что для снижения в продукте содержания остаточных белков клетки-хозяина до уровня ниже 10 нг/мг проводят финишную гидрофобную хроматографию с использованием сорбента, содержащего фенильные группы.
2. Способ по п. 1, где для предварительной очистки продукта от белков клетки-хозяина используют аффинную хроматографию.
3. Способ по п. 1, где финишную гидрофобную хроматографию проводят после того, как достигнуто снижение содержания белков штамма-продуцента до уровня приблизительно 3000 нг/мг и менее.
4. Способ по п. 3, где финишную гидрофобную хроматографию проводят после того, как достигнуто снижение содержания ДНК до уровня приблизительно 50 пг/мг и менее.
5. Способ по п. 1, где выход мономерной формы ингибитора C1-эстеразы человека, составляет не менее 99%.
6. Способ по п. 1, где в качестве гидрофобного сорбента используется Phenyl Sepharose FF, Tosoh Butyl 650M, Capto Phenyl или иной сорбент с аналогичным принципом действия.
7. Способ по п. 1, где содержание хлористого натрия в растворе очищаемого белка, наносимого на сорбент, содержащий фенильные группы, находится в диапазоне приблизительно от 2 до 3 моль/л.
8. Способ по п. 1, где нагрузка по целевому белку на сорбент, содержащий фенильные группы, находится в диапазоне от 50 до 200 мг\мл.
9. Способ по п. 1, где предпочтительная нагрузка по целевому белку на сорбент, содержащий фенильные группы, находится в диапазоне от 50 до 100 мг\мл.
10. Способ по п. 1, где в качестве металл-хелатного сорбента при захвате целевого белка из культуральной жидкости используется IMAC Sepharose FF, EMD Chelate или иной сорбент с аналогичным принципом действия.
11. Способ по п. 1, где в качестве аффинного сорбента используется Heparin Sepharose, POROS Heparin, Heparin Hyper D или иной сорбент с аналогичным принципом действия.
12. Способ по п. 1, где для вирусной инактивации используется сольвент-детергентный метод или метод инактивации низким значением рН.
13. Способ по п. 1, где при проведении финишной гидрофобной хроматографии уровень проводимости целевого белка в образце для нанесения составляет 140-160 мСм/см, предпочтительно 145-155 мСм/см.
14. Способ по п. 1, где очищенный белок переводят в конечный буферный раствор с использованием диафильтрации.
15. Применение способа по п. 1 для получения активной фармацевтической субстанции со следующими характеристиками: содержание мономерной формы рекомбинантного ингибитора C1-эстеразы человека не менее 99,0%; содержание основной формы рекомбинантного ингибитора C1-эстеразы человека по данным обращенно-фазовой ВЭЖХ не менее 99,5%; содержание остаточных белков штамма-продуцента не более 10 нг/мг; содержание ДНК штамма-продуцента не более 5 пг/мг; специфическая активность не менее 9,0 МЕ/мг.