Исследование различных видов твердых фаз в качестве исходных материалов при синтезе гидрозольных препаратов

Вятский медицинский вестник, №1, 2005

которых адсорбированы по определенной технологии биоспецифические лиганды - комплексный туберкулезный (ППД) антиген, либо парвовирусный антиген. Использовали также сыворотку «минус» - донорскую и сыворотку «плюс» от больного с верифицированным диагнозом «туберкулез», а также сыворотки птиц с верифицированным диагнозом. Раститровку сывороток проводили в растворах различных солей. Методы: разведение сывороток в ряде лунок поли-стирольного стрипа, в последнюю (контрольную) лунку сыворотку не вносят. На предметное стекло наносили 1:1 соответствующую сыворотку и гидрозоль. Отмечали результат. Для регистрации которого использовали фильтровальную бумагу и нетканый материал. Также для дополнительной проверки работы гидрозоля использовали панель сывороток: серия плюс и минус сывороток от больных с верифицированным диагнозом. Результаты: были получены типичные результаты «плюс» и «минус», т. е. гидрозоль четко дифференцировал сыворотку (+) и (-). В случае положительного результата реакции-наблюдали хлопья и зерна агглютинанта в каплях; в случае отрицательного результа-та-отсутствие агглютинации. Время реакции - от 30 секунд, до 2 минут, что, по-видимому, определялось используемым раствором для разведения. Результаты реакции на нетканом материале и на фильтровальной бумаге: при положительной реакции - плотный, компактный комплекс с четкой границей, диаметром 2-4 мм; отрицательная реакция -распределение частиц реагирующих веществ без четкой границы. Опытным путем выявлен оптимальный раствор для разведения сывороток - 0,25% KCL. Выводы: Т. о. препарат гексоцианоферрата железа дифференцирует сыворотки (+) и (-). Чувствительность метода составляет 90%, специфичность - 90%. Данный метод - бесприборное тестирование биологического материала, позволяет проводить диагностику за короткий промежуток времени и без использования дорогостоящих и дефицитных материалов. Способ фиксации результатов на фильтровальной бумаге и на нетканом материале позволяет хранить результаты реакции длительное время и использовать при необходимости сравнить какие - либо результаты и для демонстрации. В ближайшее время предполагается проведение работ по адсорбции специфических антител на поверхности гидрозолей с тестируемым гидрозолем в объектах внешней среды.

ИССЛЕДОВАНИЕ ОБЪЕКТИВИЗАЦИИ СТЕПЕНИ СТРУКТУРИРОВАНИЯ ВОДЫ Навалихин А.А., Пленкина Л., Смагина Е. Кировская государственная медицинская академия, кафедра общей и биоорганической химии Научный руководитель - асс. О. В. Журавлева Зав. кафедрой - д.т.н., проф. А.Г. Мешандин

В настоящее время большой научный и практический интерес представляет изучение степени структурной упорядоченности либо неупорядоченности воды как базового объекта изопатических и гомеопатических препаратов. Целью настоящей работы явилось исследование возможностей объективизации степени структурирования воды. Материалы и методы. Использовали дистиллированную воду и различные добавки-электролиты: NaCl, KCl, MnCl2, CuSO4 и неэлектролит - глюкозу. Осуществляли потенцирование воды вышеупомянутыми добавками с использованием классических методов гомеопатии в аспекте получения биологически активных препаратов в децизмальных разведениях. Далее в полученных препаратах растворяли сульфат меди; каплю раствора помещали на предметное стекло и высушивали в условиях естественной конвективной сушки. После высушивания препараты микроскопировали в световом микроскопе и оценивали форму, размер и иные параметры кристаллов. В результате показано изменение форм, размеров и типа кристаллизации в зависимости от вида предшествующего потенцирования воды электролитами, либо не электролитами.

О ВОЗМОЖНОСТИ ЭКСПРЕССНОЙ СЕРОДИАГНОСТИКИ СИФИЛИСА ПРИ ПОМОЩИ РЕАКЦИИ ГИДРОЗОЛЬНОЙ ГЛЮТИНАЦИИ Окатьева Н.В.

Кировская государственная медицинская академия, кафедра общей и биоорганической химии. Научный руководитель - д.т.н., проф. А.Г. Мешандин Зав. кафедрой - д.т.н., проф. А.Г. Мешандин

В последние годы, заболевания передающиеся половым путем (зппп), в частности сифилис представляет одну из наиболее серьезных проблем для здоровья миллионов людей. По данным ВОЗ, в течении года в мире выявляется около 330 мл. новых случаев наиболее распространенных зппп, из них на долю сифилиса приходится 12 мл. В этих условиях особую актуальность приобретает эффективная экспресс диагностика данного заболевания. На фоне широкого разнообразия методов лабораторной диагностики справедливо повышаются требования к чувствительности, высокоспецифичности и простоты выполнения метода. Особая роль при этом должна отводится массовому профилактическому скринингу населения, в особенности групп риска (мед. персонал), с целью выявления инфекции на ранних стадиях. Целью настоящей работы явилось создание диагностикума, отвечающим на вышеперечисленные требования и проведение сравнительного анализа для определения его диагностической ценности. Материалы и методы. В исследовании были использованы: набор для определения ассоцеированных с сифилисом реагиновых антител «Люис-тест», включающий кардиолипиновый антиген (КЛ), положительный контрольный образец - сыворотка крови человека, содержащая специфические антитела, антиген генноинженер-ный, полученный от дрожжевых грибов, на основе внедрения в геном фрагмента ДНК Trepanema pallidym, производство молекулярной биологии РАМН, образцы берлинской лазури синтезированные на базе кафедре общей и биоорганической химии КГМА. Проводили ковалентное связывание антигенов ассо-цеированных с Trepanema pallidym на поверхности берлинской лазури. Для определения специфических антител применяли реакцию гидрозольной агглютинации на стекле с сыворотками различных титров. Буфером служили растворы NaCl и KCl различных концентраций. Результаты анализа считали положительными если на поверхности стекла с используемым образцом визуализировались агрегаты частиц различной величины, с четкими просветлениями жидкости между ними в течение 1 минуты. При отрицательном результате на поверхности стекла с образцов видна мутная жидкость с равномерно распределенными частицами.

ИССЛЕДОВАНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ВИДОВ ТВЕРДЫХ ФАЗ В КАЧЕСТВЕ ИСХОДНЫХ МАТЕРИАЛОВ ПРИ СИНТЕЗЕ ГИДРОЗОЛЬНЫХ ПРЕПАРАТОВ Орлова О.Ю, Попов Д.В.

Кировская государственная медицинская академия, кафедра общей и биоорганической химии Научный руководитель - д. т. н., проф. А.Г. Мешандин Зав. кафедрой - д. т. н., проф. А.Г. Мешандин

Проблема создания экспрессных безприборных диагностических препаратов постоянно сталкивается с задачей выбора вида материала для твердой фазы коллоидного раствора, либо достаточно устойчивой суспензии. Целью представляемой работы являлось изучение различных видов твердых фаз, используемых в последующем синтезе иммунохимических диагностических препаратов. Материалы и методы. Используем образцы оксида железа(Ре203), оксида меди (CuO) и гексациа-ноферрата железа^е^Ре^^бЬ). В качестве биолигандов применяли модельный антиген - человеческии противокорье-вой иммуноглобулин, а также реальные антигены - туберкулезные и дифтерийные антигены. Синтезировали гидрозоли с вышеуказанными объектами и осуществляли полный комплекс исследований их иммунно-химической активности. В результате комплексной оценки, что наиболее оптимальными материалами для твердой фазы гидрозоля является гексацианофер-рат железа в виде коллоидного раствора. Этот препарат рекомендуется для последующего широкого изучения и внедрения в практическое здравоохранение.

ПРИМЕНЕНИЕ БИФИДО- И ЛАКТОСОДЕРЖАЩИХ КИСЛОМОЛОЧНЫХ ПРОДУКТОВ ПРИ НАРУШЕНИИ ЭНДОМИКРОБИОЦЕНОЗА У ДЕТЕЙ Перевалова Ю.В.

Кировская государственная медицинская академия, кафедра биохимии

Научные руководители - д.м.н., проф. П.И. Цапок, к.м.н., доц. Е.П. Колеватых

Зав. кафедрой - д.м.н., проф. П.И. Цапок

Проблема микроэкологии кишечника весьма актуальна, поскольку любое изменение в системе микрофлора-микроорганизм сопровождается серьезными нарушениями жизненно важных функций организма. При этом пробиотики находят широкое применение для лечения этих заболеваний, однако многие механизмы метаболических сдвигов остаются неизвестными и требуют дальнейшего изучения (Ю.В. Перевалова и др., 2004; П.И. Цапок и др., 2004). Целью данного исследования было изучить состояние кишечной микрофлоры и применить для лечения нарушенного эндомикробиоце-ноза бифидо- и лактосодержащие кисломолочные продукты. Обследовано 60 человек в возрасте от 12 до 17 лет. 30 человек с угревой сыпью составили 1-ю группу и 30 человек здоровых (2-я группа). Методы исследования: бактериологический анализ слизистых носа, зева, кишечника, кожи согласно общепринятым методам; иммунологический анализ (определение бактерицидной активности кожи) по методу Клемпар-ской. Результаты. Установлено нарушение микробиоценоза кишечника, которое было выражено в большей степени в 1 группе (72,2%) по сравнению с 45,6% (2-я группа). Аллергические реакции по типу гиперчувствительности замедленного типа с аллергеном Staphylococcus aureus выявлены у 31 подростка (51,6%) обследованных обеих групп. Полученные данные согласуются с результатами исследований других авторов, которые показали значительную распространенность дисбиотических сдвигов кишечной микрофлоры даже у здоровых детей раннего возраста, в том числе находившихся на грудном вскармливании. Эффективность лечения отмечали в группе, где применяли комплексную терапию: бактериофаги комбинированные + пробиотики (бифидо- и лактосодержащие) + метрогил-желе (местно) + антигистаминные + диета + личная гигиена. Применение бифидосодержащих кисломолочных продуктов в составе комплексной терапии способствовало нормализации микрофлоры кишечника, улучшению общего состояния, более быстрому выздоровлению детей. Вывод. Применение бифидо- и лактосодержащих кисломолочных продуктов способствует нормализации микрофлоры кишечника при нарушении эндомикробиоценоза у детей.

ВЛИЯНИЕ УГЛЕВОДНОГО ИСТОЧНИКА НА БИОХИМИЧЕСКИЕ И АНТАГОНИСТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА БИФИДОБАКТЕРИЙ Перевалова Ю.В.

Кировская государственная медицинская академия Научные руководители - д.м.н., проф. Цапок П.И., к.м.н., доц. Е.П. Колеватых

Зав. кафедрой - д.м.н., проф. П. И. Цапок

Целью данного исследования являлась оценка влияния различных сахаров на рост, биохимическую активность, выживаемость бифидобактерий при культивировании и хранении. Материалы и методы. Использовали музейные культуры би-фидобактерий: B. bifidum 1, B. bifidum 791, B. longum 379. Применяли гидролизатно-молочную и среду Блаурокка. В качестве углеводных добавок вносили глюкозу, лактозу, лак-тит и гидролизат ферментированных отрубей. Вносимая посевная доза бифидобактерий составляла 5%. Контролем служила исходная питательная среда (без внесения углеводного компонента). Концентрацию жизнеспособных клеток определяли общепринятыми методами. Биохимическую активность оценивали в тест-наборах для анаэробных бактерий. Антагонистическую активность выявляли по методу отсроченного антагонизма. Выживаемость определяли по концентрации жизнеспособных клеток на 5-й, 10-й, 15-й, 20-й, 25-й, 30-й день. Результаты. Добавление к питательной среде лактита в концентрации 1-2% привело к увеличению титра

бифидобактерий (на 2 порядка по сравнению с контролем), повышению выживаемости культуры при хранении, усилению антагонистических свойств. Максимальная выживаемость бактерий была обнаружена при внесении 2% лактита. Глюкоза и лактоза в концентрации 1-2% вызывали увеличение концентрации бифидобактерий (1 порядок по сравнению с контролем), но не к повышению биохимической и антагонистической активности и выживаемости культуры при хранении. Добавление гидролизата ферментированных отрубей вызвало повышение титра бифидобактерий (2 порядка по сравнению с контролем), выживаемости культуры при хранении, сохранение биологической активности. Выводы. Углеводный компонент влияет на биохимические и антагонистические свойства бифидобактерий. Использование лактита и гидролизата ферментированных отрубей позволяет получить культуру бифидобактерий с высокой биохимической и антагонистической активностью, способную сохранять активность при хранении.

ОСОБЕННОСТИ СОСТОЯНИЯ ПРОЦЕССОВ ЛИПОПЕРОКСИДАЦИИ И АНТИОКСИДАНТНОЙ ЗАЩИТЫ ПРИ ВЫПОЛНЕНИИ ДОЗИРОВАННОЙ ФИЗИЧЕСКОЙ НАГРУЗКИ У ЛИЦ С РАЗЛИЧНЫМ УРОВНЕМ АДАПТАЦИОННОГО ПОТЕНЦИАЛА Пестова Е.Е., Родыгин А.М., Дуркин А.С. Кировская государственная медицинская академия, Вятское нОу «Вектор», кафедра биохимии Научный руководитель - к.м.н. А.В. Еликов Зав. кафедрой - д.м.н., проф. П.И. Цапок

Интенсивная мышечная деятельность требует повышенного поступления энергетических субстратов и кислорода. Аэробное окисление в митохондриях неизбежно сопровождается образованием повышенного количества активных форм кислорода, запускающих процессы липопероксидации (ЛПО), ведущих к повреждению клеточных мембран, что в свою очередь приводит к ферментемии и усилению катаболических процессов. Целью нашей работы было изучить состояние ЛПО и антиоксидантной защиты у лиц с различным уровнем адаптационного потенциала (АП). Объектом исследования служили 30 разноадаптированных студентов-добровольцев, мужчин в возрасте от 18 до 25 лет. Величину адаптационного потенциала (АП) определяли по методике Р.М. Баевского и др. (1987). Физическая нагрузка дозировалась в виде велоэр-гометрии. В зависимости от уровня АП испытуемые делились на 2 группы: 1-я - удовлетворительная адаптация, 2-я - напряжение механизмов адаптации. Забор крови проводили из локтевой вены до и после физической нагрузки. В сыворотке крови определяли основные показатели, характеризующие процессы ЛПО (интенсивность хемилюминесценции (ХЛ) за 30 и 60 секунд, содержание малонового диальдегида (МДА)), а также активность ферментов-антиоксидантов - каталазы и церулоплазмина. Установлено, что после физической нагрузки содержание МДА в сыворотке крови у лиц 1-ой группы стало на 45,5% ниже, чем в покое, тогда как у лиц 2-ой группы данный показатель практически не изменился. Противоположные по направленности сдвиги наблюдали при изучении ХЛ за 30 и 60 секунд. Существенное снижение активности каталазы и церулоплазмина после физической нагрузки отмечены у испытуемых 2-ой группы, без достоверных изменений в 1-ой. Полученные данные подтверждают необходимость включения природных антиоксидантов в комплексную терапию при реабилитации лиц с острым физическим перенапряжением.

ВЛИЯНИЕ МЕТРОНИДАЗОЛА НА ПОДВИЖНОСТЬ ПРИПОВЕРХНОСТНОЙ ВОДЫ КЛЕТОК И ЛИПОСОМ Попыхова Э.Б.

Саратовский Государственный Университет, кафедра биохимии и биофизики

Научный руководитель - проф. П.Е. Кузнецов Зав. кафедрой - доц. Г. В. Мельников

Синтетический противобактериальный препарат метрони-дазол (МЗ) в клинической практике используется для лечения анаэробных инфекций. Также имеются данные о протекторном действии МЗ на клетки теплокровных (применя-