Стволовые опухолевые клетки: 20 лет позади

ОБЗОРЫ

стволовые опухолевые клетки: 20 лет позади

Р.Н. Мингалеева, Р.Р. Мифтахова, А.А. Ризванов

Казанский (Приволжский) федеральный университет, Казань, Россия

Cancer stem cells: 20 years behind

R.N. Mingaleeva, R.R. Miftakhova, A.A. Rizvanov Kazan (Volga region) Federal University, Kazan, Russia

Биология стволовых опухолевых клеток (СОК) была предметом исследований и дискуссий последние 20 лет . Исключительная пластичность данных клеток и комплексность подконтрольных им процессов вдохновляют на создание новых методов выделения и направленной «терапии» СОК . Данный обзор является попыткой обобщения последних данных и тенденций в области СОК, обсуждения потенциала и сложностей новых методов исследования .

Ключевые слова: опухоль, стволовые опухолевые клетки, маркеры стволовых клеток, сигнальные пути, противоопухолевая терапия

The biology of cancer stem cells (CSC) has been investigated and debated for past 20 years . Owning to their exceptional plasticity and the complexity of controlled processes CsC inspire the development of new research techniques for cell isolation and targeted therapy . This review is an attempt to summarize recent data and trends in the field of cancer stem cells and discuss potential and weaknesses of new research techniques

Keywords: tumor, cancer stem cells, cancer stem cell markers, cancer signalling pathways, cancer therapy

Введение

Всего лишь декаду назад ученые с опаской использовали термин «стволовые опухолевые клетки» (СОК), тактично заменяя его термином опухолевые клетки, подобные стволовым (англ . cancer stem-like cells). В 2006 г . на съезде Американской Ассоциации Исследований Рака (AACR) СОК были определены как клетки, способные к самообновлению и созданию гетерогенной популяции клеток, формирующей опухоль [1].

Все больше данных свидетельствуют о том, что именно СОК ответственны за процесс метастазиро-вания опухоли [2], развитие резистентности к существующей химиотерапии [3], рецидив заболевания [4]. Также эта популяция клеток принимает участие в подавлении иммунного ответа [5], угнетении соматических стволовых клеток [6] и создании защитных ниш, поддерживающих СОК как в активно про-лиферирующем, так и в латентном состояниях [7]. Интенсивные исследования последних десятилетий помогли накопить данные о внутри- и межклеточных взаимодействиях и защитных механизмах СОК, новых подходах «таргетной» терапии, направленной на СОК В данном обзоре представлены основные достижения в исследовании этой популяции клеток, рассмотрены успехи в противоопухолевой терапии

Происхождение СОК

Эра СОК началась в 1994 г . , когда Т . Lapidot с со-авт . (1994) показали, что острый миелоидный лейкоз может быть инициирован у иммунодефицитных мышей пересадкой небольшого числа CD34+/CD38-клеток [8]. Дальнейшие несколько лет ознаменовались поиском маркеров для сортировки стволовых клеток . В связи с разным микроокружением и тканевой принадлежностью опухолевых клеток использование одного CD-маркера оказалось невозможным, в связи с чем возникла необходимость создания

e-mail: rimma . mingaleeva@gmail . com

панели маркеров для сортировки СОК из клеток различных тканей . Схожесть маркеров СОК и соматических стволовых клеток (СК), а также открытие роли эпителиально-мезенхимальных переходов (ЭМП) в онкологии, привели к формированию двух моделей возникновения неопластических клеток

Сторонники иерархической модели утверждают, что в некоторых типах рака повторный рост опухоли может запустить только популяция СОК, составляющая 0,0001—0,1% опухолевых клеток [9]. Они могут самообновляться, имеют потенциал к диффе-ренцировке, располагаются в специализированных нишах . На основании этого можно предположить, что предшественниками СОК могут быть соматические СК [10].

Согласно стохастической модели, любая клетка с повышенной экспрессией онкогенов и (или) со сниженной регуляцией генов-супрессоров может дать начало опухоли Со временем такие клетки приобретают дополнительные генетические изменения, в результате которых опухоль становится более агрессивной [11]. Было показано, что предшественниками СОК могут быть дифференцированные клетки опухоли, которые приобрели свойства ство-ловости Предполагают, что дедифференцировка опухолевых в СОК-подобные клетки происходит при ЭМП — обычно высоко консервативном процессе, реализуемом в эмбриогенезе В результате ЭМП прикрепленные эпителиальные клетки приобретают большую мобильность, способность к инвазии и самообновлению [12]. Показано, что при эктопической экспрессии генов транскрипционных факторов Twist и Snail, которые запускают ЭМП, иммортализован-ные эпителиальные клетки молочной железы человека приобретают свойства стволовых клеток [13]. Активация TGFp, Wnt, RasMAPK-сигнальных путей также приводит к индукции ЭМП и к дедифференци-ровке клеток [12]. ЭМП используется клетками для приобретения резистентности к лекарствам [14].

Относительно недавно появилась и третья модель возникновения неопластических клеток — модель «ИньЯнь», согласно которой в опухоли, наряду с активно пролиферирующей популяцией клеток (Янь), существует популяция СОК (Инь) и эти два типа клеток могут взаимопревращаться при определенных условиях [15].

Маркеры СОК

В большинстве своем СОК экспрессируют гены тех же отличительных поверхностных маркеров, что и соматические СК аналогичной ткани . Среди них можно выделить белки с адгезивными свойствами CD44, CD133, CD15, CD166 и EpCAM; активаторы сигнальных путей CD24, CD90; рецепторы цитоки-нов CD117, CXCR4 (табл . ). Наличие поверхностных маркеров само по себе не является надежным признаком принадлежности клетки к популяции СОК Профиль поверхностных маркеров может меняться под действием эпигенетического сайленсинга, мутаций [16], противоопухолевых агентов [17]. Эти отличия могут быть как между разными пациентами, так и в пределах одной опухоли. Ситуация осложняется тем, что клетки некоторых злокачественных опухолей несут на своей поверхности маркеры СОК, но не обладают способностью восстановления опухоли в экспериментах с ксенотрансплантантами [18]. Возможна и обратная ситуация: опухольобразующей активностью обладают не только клетки, несущие известный поверхностный маркер, но и клетки, по нему негативные (например, CD133-клетки опухолей мозга) [19].

Поскольку фенотип СОК может варьировать, все больше исследователей склоняются к поиску специфичных маркеров среди белков, определяющих состояние стволовости этих клеток Кандидатами могут быть белки семейства ALDH, ABC-транспортеры, Bmi-1, факторы транскрипции Nanog, Sox-2, Oct-4, Lin-28 (табл . ) .

Ферменты семейства ALDH (англ . aldehyde dehydrogenase) отвечают за окисление внутриклеточных альдегидов и гидролиз эфиров Кроме того, эти ферменты участвуют в превращении ретинола в ретиноевую кислоту, которая проникает в ядро и инициирует транскрипцию генов, приводя при этом к дифференцировке, задержке клеточного цикла

или апоптозу [20]. Впервые использование ALDH1 в качестве маркера СОК было показано на примере острого миелоидного лейкоза, когда ALDH-позитивные клетки оказались способными давать рост новой опухоли при ксенотрансплантации Эти же клетки несли на своей поверхности белок CD34+, описанный ранее как маркер СОК лейкозов Позже была показана высокая активность ALDH в стволовых клетках опухолей молочной железы, печени, толстой кишки, мозга, головы и шеи, легких, поджелудочной железы, простаты, мочевого пузыря, щитовидной железы, шейки матки, меланомы [18, 20]. Неблагоприятный прогноз заболевания связывают с высоким уровнем экспрессии гена aldhl [21].

Одним из механизмов защиты стволовой клетки от токсинов является экспрессия генов АВС-транспортеров (ATPbinding cassette transporters) . Эти гены гиперэкспрессируются в стволовых клетках многих опухолей [22], с чем связывают повышенную лекарственную устойчивость клеток опухолей [23]. Для обогащения популяции СОК клетки инкубируют с красителем, к примеру, Hoechst 33342 . СОК способны вывести краситель наружу за счет повышенной экспрессии генов транспортеров, тогда как в остальных клетках краситель остается

Транскрипционный фактор Sox-2 (SRY (sex determining region Y)-box 2) является одним из белков, благодаря которым поддерживается недифференцированное состояние эмбриональных стволовых клеток [24]. Он необходим для получения индуцированных плюрипотентных стволовых клеток В опухоли его экспрессия повышается либо вследствие генетической дупликации [25], либо за счет регуляции на уровне транскрипции [26] Подавление синтеза белка Sox-2 посредством микроРНК приводит к снижению пролиферации [24], инвазии и миграции клеток, опухоли после ксенотрансплан-тации образуются с меньшей эффективностью [26]. S . Boumahdi с соавт . (2014) показали, что среди вы-сокоинвазивных клеток плоскоклеточного рака кожи именно популяция, экспрессирующая ген sox-2, обладает способностью инициировать опухоль при серийных трансплантациях . Удаление пула этих клеток из опухолевой массы первичной доброкачественной, а также злокачественной опухоли приводит к регрессии новообразования [27]. Sox-2 сам по себе не трансформирует клетки, но в кооперации с другими

Таблица. Маркеры стволовых опухолевых клеток в разных типах опухолей

Тип опухоли Поверхностные маркеры Другие маркеры

Рак яичников CD44+, CD117+, CD133+ [52] ALDH1, Lin-28, Oct-4 [53, 54]

Рак предстательной железы CD44+, a2pihigh, CD133+ [55] Oct-4, Sox-2 [31, 56]

Рак легких CD133+ [57] ALDH1, Oct-4, Nanog [32, 58, 59]

Рак молочной железы CD24+, CD29+, ESA+, CD44+, CD133+, ALDH-1high [60, 61] ALDH1, Oct-4 [62, 63]

Рак поджелудочной железы CD44+, CD24+, ESA+ [64] Oct-4, Nanog, Sox-2 [65, 66]

Рак толстой кишки CD44+, EpCAM+, CD166+, CD133+ [67, 68] ALDH1 [69]

Лейкозы CD34+CD38CD71CD90- HLA-DR- CD117-CD123+[70] ALDH1 [71]

белками, к примеру Stat-3 [28], может вызывать онкотрансформацию .

В опухолевых клетках зачастую происходит ко-экспрессия генов sox-2 и pouf5f1 [29]. Транскрипционный фактор Oct-4 (octamer-binding transcription factor 4) кодируется геном pouf5f1 и является ключевым регулятором самообновления и плюрипотент-ности эмбриональных стволовых клеток . Нарушенная экспрессия этого гена приводит либо к неправильному росту ткани, либо к образованию опухоли [30]. Популяции опухолевых клеток, устойчивых к ряду терапевтических препаратов (например, к доцетак-селу) гиперэкспрессирует pouf5f1 [31]. Такие клетки приобретают способность восстанавливать опухоль после ксенотрансплантации [31], которая теряется при доставке в клетку микроРНК, ингибирующих Oct-4 [32]. S . M . Kumar с соавт . (2012) показали, что в присутствии белка Oct-4 запускается процесс дедифференцировки клеток меланомы, которые приобретают фенотип СОК [30]. При эктопической доставке Oct-4 и его мишени, белка Nanog, происходит стимуляция ЭМП [32]. Показана корреляция прогрессии заболевания с высокой экспрессией генов pouf5f1 и sox-2 в опухоли [29].

Сигнальные пути

В опухолевых клетках, в том числе и в стволовых, часто активируются антиапоптотические сигналы и пути приобретения резистентности к лекарствам Также в них нарушается регуляция таких важных сигнальных путей как Wnt, Notch и Hedgehog, последние из которых участвуют в регуляции самообновления, пролиферации и дифференцировки стволовых клеток . Notch-путь также важен для взаимодействия клеток в нише СОК, показано его участие в ЭМП [33] Нарушенная регуляция этого сигнального пути приводит к повышению мобильности и метастазиро-ванию СОК

Во многих типах опухолей (например, при раке шейки матки, почки, органов головы и шеи) наблюдается измененная экспрессия генов Notch, их лигандов и мишеней [33]

Многие маркеры стволовых клеток являются прямыми мишенями Wnt-сигнального пути (например, LGR5/GPR49, CD44, CD24, CD133, гены ABC-транспортеров, EpCAM) [34]. Результатом гиперактивации этого пути является онкотрансформация Показано, что конститутивная гиперэкспрессия гена ß-катенина, а также отсутствие в клетке функционального белка APC (adenomatous polyposis coli) приводит к развитию рака ободочной и прямой кишки . Повышенное содержание ß-катенина выявлено в ядрах СОК лейкозов, в отсутствии этого белка клетки теряют способность формировать опухоль [35]. Неканонические Wnt-пути также задействованы в образовании и прогрессии опухоли [35]. Показана взаимосвязь ЭМП и Wnt-сигнального пути: в присутствии Wnt-1 повышается экспрессия гена twist в клетках рака молочной железы, что способствует ЭМП [34].

Hedgehog — важный сигнальный путь, который регулирует нормальное эмбриональное развитие, но не активен во взрослых тканях и органах Показана гиперактивация этого пути в результате генетических и эпигенетических изменений в таких опухолях, как медуллобластома, глиобластома, при раке молочной железы, яичников, легких, желудка, предстательной

железы [36]. На клетках хронического миелолейко-за показано, что в отсутствии белка Smo, важного компонента Hedgehog-пути, снижается популяция стволовых клеток лейкемии, а продолжительность жизни мышей увеличивается [37]. При активации этого пути лигандами Sonic Hedgehog популяция СОК начинает самообновляться и мигрировать . При подавлении функции Smo происходит терминальная дифференцировка и потеря способности к клоно-генному росту [38]. Под влиянием сигнального пути Hedgehog клетки подвергаются ЭМП, становятся более мобильными и инвазивными, а когда эти клетки достигают участка инвазии, то под действием этого сигнального пути наблюдается клоногенный рост и самообновление этих клеток [38].

СОК и противоопухолевая терапия

Результаты эффективности потенциальных препаратов in vitro часто не воспроизводятся на моделях in vivo . В онкологии одной из причин такого расхождения является присутствие в опухоли СОК [39, 40]. Действие большинства противоопухолевых препаратов направлено на элиминацию активно пролиферирую-щих трансформированных клеток [41] и неэффективно в борьбе с СОК [42]. Поиск препаратов, специфично атакующих СОК, осложнен схожестью маркеров раковых и нормальных стволовых клеток, трудоемкостью выделения СОК и быстрой спонтанной диф-ференцировкой стволовых клеток in vitro Несмотря на это, существует ряд успешных методов для поиска препаратов, специфичных к СОК

К первому можно отнести скрининг библиотек существующих препаратов на СОК или стволовых клетках, максимально приближенных к опухолевым В 2009 г . P . B . Gupta с соавт . протестировали эффективность приблизительно 16000 препаратов и биоактивных молекул на популяции стволовых (CD44high/CD24low) иммортализированных клеток молочной железы, подвергшихся ЭМТ [43]. Только 32 препарата показали селективную активность против трансформированных клеток и не воздействовали на контрольные СК молочной железы . Из этих препаратов только один — Салиномицин — был эффективен по отношению к СОК с повышенной резистентностью к химиотерапии . По данным исследования, его эффект на СОК в 100 раз выше, чем у применяемого в настоящее время препарата паклитаксела . В схожем исследовании DECA-14 и рапамецин были идентифицированы из 51 препаратов как препараты, направленные против СОК нейробластомы [44].

Вторым методом, точнее группой методов, является воздействие на сигнальные пути, поверхностные маркеры или нишу, специфичные для СОК . Антитела к CD133, коньюгированные с цитотоксичным препаратом (monomethyl auristatin F), эффективно поражали CD133-положительные СК гепатоцеллюлярной карциномы HepB3 in vitro и in vivo [45]. Антитела к CD44 также снижали количество стволовых клеток, воздействуя при этом на клетки ниши СОК острого миелоидного лейкоза [46].

Многообещающим методом является использование онколитических вирусов для борьбы с СОК Онколитическими вирусами, используемыми в онкологии, являются непатогенные вирусы, способные инфицировать опухолевые клетки, не поражая при этом здоровые клетки человека Такой онкотропизм

достигается за счет многочисленных генетических манипуляций [47]. В клинических исследованиях средняя продолжительность жизни 115 пациентов, получивших инъекцию химерного аденовируса CGTG102, кодирующего гранулоцитарномакрофа-гальный колониестимулирующий фактор (ГМ-КСФ), выросла со 111 дней при однократной инъекции до 277 дней при серии из нескольких введений [48]. При этом у пациентов наблюдалась активация противоопухолевого иммунитета . Специфичный к гену теломеразы онколитический аденовирус 0BP-301 оказался эффективным в лечении CD133 + -COK рака желудка [49]. Стоит отметить, что химиорези-стентные СОК, находившиеся в G0/G1 фазах клеточного цикла, после воздействия вируса перешли из латентного состояния в активное и приобрели чувствительность к химиотерапии

В последние годы особый интерес привлекала иммунотерапия Сейчас этот термин объединяет под собой создание противораковых вакцин, использование специфичных к опухоли цитотоксичных Т-лимфоцитов, блокировку иммунных «чекпоинтов» и другие методы активации иммунной системы пациентов [50]. Исследование J . N . Kochenderfer с соавт . (2010) с использованием Т-клеток, экспрес-сирующих ген химерного антигенного рецептора (англ . chimeric antigen receptor, CAR), распознающего CD19, зародило еще одно направление в им-муннотерапии [51]. На модели мышиной синген-ной лимфомы было показано, что анти-CD19-CAR Т-лимфоциты способны полностью ликвидировать клетки лимфомы

Заключение

Открытие СОК добавило сложности в наши представления об организации опухолей. Участие этой популяции клеток во многих процессах, их активация на определенных стадиях развития онкологического

ЛИТЕРАТУРА:

1. Clarke M . F ., Dick J . F ., Dirks P . B . et al . Cancer stem cells-perspectives on current status and future directions: AACR Workshop on cancer stem cells . Cancer Res . 2006; 66(19): 9339-44 .

2 . Shiozawa Y ., Nie B ., Pienta K . J . et al . Cancer stem cells and their role in metastasis . Pharmacology & Therapeutics 2013; 138(2): 285-93 .

3 . Rosen J . M . , Jordan C . T . The increasing complexity of the cancer stem cell paradigm . Science 2009; 324(5935): 1670-73 .

4 . Van Rhenen A., Feller N . , Kelder A. et al . High stem cell frequency in acute myeloid leukemia at diagnosis predicts high minimal residual disease and poor survival . Clin . Cancer Res . 2005; 11(18): 6520-6527

5 . Di Tomaso T ., Mazzoleni S ., Wang E . et al . Immunobiological characterization of cancer stem cells isolated from glioblastoma patients . Clin . Cancer Res . 2010; 16(3): 800-13 .

6 Shiozawa Y , Pedersen E , Havens A M et al Human prostate cancer metastases target the hematopoietic stem cell niche to establish footholds in mouse bone marrow . J . Clin . Invest . 2011; 121(4): 1298-312 .

7 Borovski T , De Sousa E , Melo F et al Cancer stem cell niche: the place to be . Cancer Res . 2011; 71(3): 634-9 .

8 . Lapidot T ., Sirard C ., Vormoor J . et al . A cell initiating human acute myeloid leukaemia after transplantation into SCID mice Nature 1994; 367(6464): 645-8 .

9 . Quintana E . , Shackleton M ., Sabel M . S . et al . Efficient tumour formation by single human melanoma cells . Nature 2008; 456(7222): 593-598

10 . Лисяный Н . И ., Лисяный А . Н . Стволовые опухолевые клетки злокачественных глиальных опухолей мозга . Онкология 2010; 12(3): 229-36 .

11 Tirino V , Desiderio V , Paino F et al Cancer stem cells in solid tumors: an overview and new approaches for their isolation and characterization . FASEB J 2013; 27(1): 13-24 .

заболевания, гетерогенность и пластичность, связанные с разным происхождением, микроокружением и другими условиями представляет эти клетки как «депо» заболевания .

Множество исследовательских групп сфокусировано на поиске препаратов против этих клеток На данный момент все СОК-направленные препараты находятся на стадии доклинических и клинических исследований . И, несмотря на время, которое ушло на получение первых положительных результатов (в случае с иммунотерапией от первых клинических исследований до первых успешных из них прошло почти 20 лет) неизвестно, когда СОК-направленная терапия войдет в стандартные протоколы лечения пациентов с онкологическими заболеваниями . Хотя на сегодняшний день создана достаточная теоретическая и практическая база для успешного анализа СОК, поиск препаратов представляет собой кропотливый труд и, за редким исключением, найденный препарат эффективен только по отношению к одному виду опухоли Обладая исключительной пластичностью и многочисленными механизмами адаптации СОК бросают вызов современной науке и, возможно, только новые, наиболее неординарные подходы помогут нам одержать победу

Благодарности

Работа выполнена в рамках государственной программы повышения конкурентоспособности Казанского (Приволжского) федерального университета среди ведущих мировых научно-образовательных центров и субсидии, выделенной Казанскому федеральному университету для выполнения государственного задания в сфере научной деятельности. Ризванов А.А. поддержан грантом Президента Российской Федерации для государственной поддержки молодых российских ученых докторов наук МД-433.2013.4.

12 . Scheel C ., Eaton E . N ., Li S . H . et al . Paracrine and autocrine signals induce and maintain mesenchymal and stem cell states in the breast . Cell 2011; 145(6): 926-40 .

13 . Mani S A ., Guo W ., Liao M . J . et al . The epithelial-mesenchymal transition generates cells with properties of stem cells . Cell 2008; 133(4): 704-15 .

14 . Shang Y. , Cai X ., Fan D . Roles of epithelial-mesenchymal transition in cancer drug resistance . Curr . Cancer Drug Targ . 2013; 13(9): 915-29 .

15 . Zhou J ., Zhang Y . Cancer stem cells: models, mechanisms and implications for improved treatment . Cell Cycle 2008; 7(10): 1360-70 .

16 . Fabian A . , Vereb G ., Szollosi J . The hitchhikers guide to cancer stem cell theory: markers, pathways and therapy . Cytometry A 2013; 83(1): 62-71.

17 . Keysar S . B ., Jimeno A., More than markers: biological significance of cancer stem cell-defining molecules Mol Cancer Ther 2010; 9(9): 2450-7 .

18 Medema J P , Cancer stem cells: the challenges ahead Nat Cell Biol . 2013; 15(4): 338-44.

19 Magee J A , Piskounova E , Morrison S J Cancer stem cells: impact, heterogeneity, and uncertainty . Cancer Cell 2012; 21(3): 283-96

20 Marcato P , Dean C A , Giacomantonio C A et al Aldehyde dehydrogenase: its role as a cancer stem cell marker comes down to the specific isoform . Cell Cycle 2011; 10(9): 1378-84 .

21 Chumsri S , Shah P Radiation resistance of cancer stem cells as an obstacle in cancer therapy . Mol . Cell Pharmacol . 2013; 5(1): 39-49

22 Lou H , Dean M , Targeted therapy for cancer stem cells: the patched pathway and ABC transporters . Oncogene 2007; 26(9): 1357-60 .

23 Szakacs G , Annereau J P , Lababidi S et al Predicting drug sensitivity and resistance: profiling ABC transporter genes in cancer cells . Cancer Cell 2004; 6(2): 129-37 .

24 . Liu K ., Lin B ., Zhao M . et al . The multiple roles for Sox2 in stem cell maintenance and tumorigenesis . Cell Signal 2013; 25(5): 1264-71.

25 . Bass A.J ., Watanabe H . , Mermel C . H . et al . SOX2 is an amplified lineage-survival oncogene in lung and esophageal squamous cell carcinomas . Nat . Genet . 2009; 41(11): 1238-42 .

26 . Basu-Roy U ., Seo E ., Ramanathapuram L . et al . Sox2 maintains self renewal of tumor-initiating cells in osteosarcomas . Oncogene 2012; 31(18): 2270-82 .

27 . Boumahdi S ., Driessens G ., Lapouge G . et al . SOX2 controls tumour initiation and cancer stem-cell functions in squamous-cell carcinoma . Nature 2014; 511(7508): 246-50 .

28 . Liu K ., Jiang M ., Lu Y . et al . Sox2 cooperates with inflammation-mediated Stat3 activation in the malignant transformation of foregut basal progenitor cells . Cell Stem Cell 2013; 12(3): 304-15 .

29 . Schoenhals M ., Kassambara A ., De Vos J . et al . Embryonic stem cell markers expression in cancers . Biochem . Biophys . Res . Commun . 2009; 383(2): 157-62 .

30 . Kumar S . M ., Liu S ., Lu H . et al . Acquired cancer stem cell phenotypes through Oct4-mediated dedifferentiation . Oncogene 2012; 31(47): 4898-911.

31. Linn D . E ., Yang X ., Sun F . et al . A role for OCT4 in tumor initiation of drug-resistant prostate cancer cells . Genes & Cancer 2010; 1(9): 908 -16 .

32 . Chiou S . H . , Wang M . L ., Chou Y. T. et al . Coexpression of Oct4 and Nanog enhances malignancy in lung adenocarcinoma by inducing cancer stem cell-like properties and epithelial-mesenchymal transdifferentiation . Cancer Res . 2010; 70(24): 10433-44.

33 . Espinoza I ., Pochampally R ., Xing F. et al . Notch signaling: targeting cancer stem cells and epithelial-to-mesenchymal transition . Onco Targets Ther. 2013; 6: 1249-59 .

34 . Kim Y . , Kahn M . The role of the wnt signaling pathway in cancer stem cells: prospects for drug development Res Repor Biochem . 2014; 4: 1-12 .

35 . Anastas J . N ., Moon R .T. WNT signalling pathways as therapeutic targets in cancer . Nat . Rev . Cancer 2013; 13(1): 11-26 .

36 . Coni S ., Infante P ., Gulino A . Control of stem cells and cancer stem cells by Hedgehog signaling: pharmacologic clues from pathway dissection . Biotech . Pharmacol . 2013; 85(5): 623-8 .

37 . Zhao C ., Chen A ., Jamieson C . H . et al . Hedgehog signalling is essential for maintenance of cancer stem cells in myeloid leukaemia . Nature 2009; 458(7239): 776-9 .

38 . Merchant A .A ., Matsui W ., Targeting Hedgehog — a cancer stem cell pathway . Clin . Cancer Res . 2010; 16(12): 3130-40 .

39 . Blatt N . L., Mingaleeva R . N ., Khaiboullina S . F. et al . In vivo screening models of anticancer drugs . Life Sci . J . 2013; 10(4): 1892-900 .

40 . Мингалеева Р . Н ., Соловьева В . В ., Блатт Н .Л . и др . Применение культур клеток и тканей для скрининга противоопухолевых препаратов in vitro . Клеточная трансплантология и тканевая инженерия 2013; 8(2): 20-8 .

41. Blatt N . L ., Mingaleeva R . N ., Solovieva V .V . et al . Application of cell and tissue culture systems for anticancer drug screening . WASJ 2013; 23(3): 315-25 .

42 . Reya T ., Morrison S . J ., Clarke M . F . et al . Stem cells, cancer, and cancer stem cells . Nature 2001; 414(6859): 105-11.

43 . Gupta P . B ., Onder T.T., Jiang G . et al . Identification of selective inhibitors of cancer stem cells by high-throughput screening . Cell 2009; 138(4): 645-59 .

44 . Smith K . M ., Datti A ., Fujitani M . et al . Selective targeting of neuroblastomatumour-initiating cells by compounds identifiedin stem cell-based small molecule screens . EMBO Mol . Med . 2010; 2(9): 371-84 .

45 . Smith L . M ., Nesterova A. , Ryan M . C . et al . CD133/prominin-1 is a potential therapeutic target for antibody-drug conjugates in hepatocellular and gastric cancers . Br. J . Cancer 2008; 99(1): 100-9 .

46 . Jin L . , Hope K . J ., Zhai Q . et al . Targeting of CD44 eradicates human acute myeloid leukemic stem cells . Nat . Med . 2006; 12(10): 1167-74 .

47 . Pol J ., Bloy N . , Obrist F . et al . Trial watch: oncolytic viruses for cancer therapy . Oncoimmunology 2014; 3: e28694 .

48 . Kanerva A., Nokisalmi P ., Diaconu I . et al . Antiviral and antitumor T-cell immunity in patients treated with GM-CSF—coding oncolytic adenovirus . Clin . Cancer Res . 2013; 19(10): 2734-44.

49 . Yano S ., Tazawa H ., Hashimoto Y . A genetically engineered oncolytic adenovirus decoys and lethally traps quiescent cancer stem-like cells in S/G2/M phases . Clin . Cancer Res . 2013; 19(23): 6495-505

50 . Kono K ., Current status of cancer immunotherapy . J . Stem Cells Regen . Med . 2014; 10(1): 8-13 .

51. Kochenderfer J . N ., Yu Z ., Frasheri D . et al . Adoptive transfer of syngeneic T-cells transduced with a chimeric antigen receptor that recognizes murine CD19 can eradicate lymphoma and normal B cells . Blood 2010; 116(19): 3875-86 .

52 . Ponnusamy M . P ., Batra S . K . Ovarian cancer: emerging concept on cancer stem cells . J . Ovarian . Res . 2008; 1: 4 .

53 . Ma W ., Ma J ., Xu J . et al . Lin28 regulates BMP4 and functions with Oct4 to affect ovarian tumor microenvironment . Cell Cycle 2013; 12(1): 88-97 .

54 . Penumatsa K ., Edassery S . L ., Barua A. et al . Differential expression of aldehyde dehydrogenase 1a1 (ALDH1) in normal ovary and serous ovarian tumors . J . Ovarian . Res . 2010; 3(28): 28 .

55 . Collins A . T ., Berry P .A ., Hyde C . et al . Prospective identification of tumorigenic prostate cancer stem cells . Cancer Res . 2005; 65(23): 10946-51.

56 . Rybak A. P ., Tang D ., SOX2 plays a critical role in EGFR-mediated self-renewal of human prostate cancer stem-like cells . Cell Signal 2013; 25(12): 2734-42 .

57 . Eramo A . , Lotti F . , Sette G . et al . Identification and expansion of the tumorigenic lung cancer stem cell population . Cell Death Differ. 2007; 15(3): 504-14.

58 . Jiang F ., Qiu Q ., Khanna A . et al . Aldehyde dehydrogenase 1 is a tumor stem cell-associated marker in lung cancer . Mol . Cancer Res . 2009; 7(3): 330-8

59 . Ucar D ., Cogle C . R ., Zucali J . R . et al . Aldehyde dehydrogenase activity as a functional marker for lung cancer . Chem . Biol . Interact . 2009; 178(1-3): 48-55 .

60 . Chen K ., Huang Y . -H ., Chen J . -l . Understanding and targeting cancer stem cells: therapeutic implications and challenges . Acta Pharmacol . Sin . 2013; 34(6): 732-40 .

61. Klonisch T . , Wiechec E . , Hombach-Klonisch S . et al . Cancer stem cell markers in common cancers - therapeutic implications . Trends Mol . Med . 2008; 14(10): 450-60 .

62 . Ginestier C ., Hur M . H ., Charafe-Jauffret E . et al . ALDH1 is a marker of normal and malignant human mammary stem cells and a predictor of poor clinical outcome . Cell Stem Cell 2007; 1(5): 555-67 .

63 . Liu C . G ., Lu Y . , Wang B . B . et al . Clinical implications of stem cell gene Oct-4 expression in breast cancer . Ann Surg . 2011; 253(6): 1165-71

64 . Lee C .J ., Dosch J ., Simeone D . M . Pancreatic cancer stem cells . J . Clin . Oncol . 2008 . 26(17): 2806-12 .

65 . Herreros-Villanueva M ., Zhang J . S ., Koenig, A . et al . SOX2 promotes dedifferentiation and imparts stem cell-like features to pancreatic cancer cells . Oncogenesis 2013; 2: e61.

66 . Lu Y ., Zhu H ., Shan H . et al . Knockdown of Oct4 and Nanog expression inhibits the stemness of pancreatic cancer cells . Cancer Lett . 2013; 340(1): 113-23 .

67 . Dalerba P ., Dylla S .J ., Park I . K . et al . Phenotypic characterization of human colorectal cancer stem cells . PNAS USA 2007; 104(24): 10158-63 .

68 . O'Brien C .A ., Pollett A ., Gallinger S . A human colon cancer cell capable of initiating tumour growth in immunodeficient mice . Nature 2007; 445(7123): 106-10 .

69 . Huang E . H ., Hynes M . F ., Zhang T . et al . Aldehyde dehydrogenase 1 is a marker for normal and malignant human colonic stem cells (SC) and tracks SC overpopulation during colon tumorigenesis . Cancer Res . 2009; 69(8): 3382-9 .

70 . Guzman M . L ., Jordan C .T. Considerations for targeting malignant stem cells in leukemia . Cancer Control . 2004; 11(2): 97-104 .

71. Zhou W ., Yang Y ., Gu Z . et al . ALDH1 activity identifies tumor-initiating cells and links to chromosomal instability signatures in multiple myeloma . Leukemia 2014; 28(5): 1155-8 .

Поступила: 10.01.2015