АНТИТЕЛА К GDF8 И ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Антагонист, специфичный в отношении фактора роста и дифференцировки 8 (GDF8), где указанный антагонист представляет собой антитело против GDF8 или антигенсвязывающий белок, который специфически связывается с GDF8 и не связывается специфически с ВМР11, и где указанные антитело или антигенсвязывающий белок выбраны из группы, состоящей из поликлонального антитела; моноклонального антитела; моноспецифического антитела; полиспецифического антитела; гуманизированного антитела; тетрамерного антитела; тетравалентного антитела; полиспецифического антитела; одноцепочечного антитела; домен-специфического антитела; однодоменного антитела; антитела с делетированным доменом; слитого белка; слитого белка ScFc; одноцепочечного антитела; химерного антитела; синтетического антитела; рекомбинантного антитела; гибридного антитела; мутантного антитела; CDR-привитых антител; фрагмента антитела, содержащего Fab; F(ab')2; Fab'-фрагмента; Fv-фрагмента; одноцепочечного Fv-фрагмента (ScFv); Fd-фрагмента; фрагмента dAb; антигенсвязывающего белка, содержащего диатела; пептида CDR3; пептида, ограниченного FR3-CDR3-FR4; нанотела; бивалентного нанотела; малых модульных иммунофармацевтических средств (SMIP); вариабельного домена IgNAR акулы и миниантитела.
2. Антагонист по п.1, где антитело или антигенсвязывающий белок содержит по меньшей мере одну область, определяющую комплементарность (CDR), содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:19, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:20, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:21, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:22, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:23, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:24, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:25, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:26, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:27, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:28, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:29, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:30.
3. Антагонист по п.2, где антитело или антигенсвязывающий белок содержит тяжелую цепь, и где указанная тяжелая цепь содержит первую, вторую и третью область, определяющую комплементарность,
где первая область, определяющая комплементарность, содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:19 и аминокислотной последовательности SEQ ID NO:25,
где вторая область, определяющая комплементарность, содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:20 и аминокислотной последовательности SEQ ID NO:26,
и где третья область, определяющая комплементарность, содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:21 и аминокислотной последовательности SEQ ID NO:27.
4. Антагонист по п.1, где антитело или антигенсвязывающий белок содержит тяжелую цепь, которая содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:14 и аминокислотной последовательности SEQ ID NO:18.
5. Антагонист по п.2, где антитело или антигенсвязывающий белок содержит легкую цепь, и где указанная легкая цепь содержит первую, вторую и третью область, определяющую комплементарность,
где первая область, определяющая комплементарность, содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:22 и аминокислотной последовательности SEQ ID NO:28,
где вторая область, определяющая комплементарность, содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:23 и аминокислотной последовательности SEQ ID NO:29,
и где третья область, определяющая комплементарность, содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:24 и аминокислотной последовательности SEQ ID NO:30.
6. Антагонист по п.1, где антитело или антигенсвязывающий белок содержит легкую цепь, которая содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:16 и аминокислотной последовательности SEQ ID NO:17.
7. Антагонист по п.1, где антитело или антигенсвязывающий белок содержит легкую цепь, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, и где антитело дополнительно содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14.
8. Антагонист по п.1, где антитело или антигенсвязывающий белок содержит легкую цепь, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, и где антитело дополнительно содержит тяжелую цепь, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18.
9. Полинуклеотид, который кодирует аминокислоты, включающие антагонист GDF8 по любому из пп.1-8.
10. Клетка-хозяин, содержащая полинуклеотид по п.9, функциональным образом связанный с регуляторной последовательностью.
11. Вектор, содержащий полинуклеотид по п.9.
12. Клетка-хозяин, содержащая вектор по п.11.
13. Способ получения антагониста GDF8, включающий культивирование клетки-хозяина, содержащей полинуклеотид по п.12, и выделение антагониста GDF8, экспрессируемого указанной клеткой-хозяином.
14. Выделенный антагонист GDF8, полученный способом по п.13.
15. Анализ для определения присутствия GDF8 в образце от субъекта, включающий следующие стадии:
(а) объединение:
(1) образца;
(2) реагента для захвата, который специфически связывает GDF8;
(3) реагента для детекции, который специфически связывает GDF8; и
(б) детекцию того, происходит или нет специфическое связывание между реагентом для захвата и GDF8,
где детекция специфического связывания указывает на присутствие GDF8 в образце.
16. Анализ по п.15, дополнительно включающий объединение образца с кислым буфером перед объединением на стадии (а).
17. Анализ по п.16, где рН кислого буфера составляет от примерно рН 1,0 до рН 6,0.
18. Анализ по п.16, где рН кислого буфера составляет примерно рН 2,5.
19. Анализ по п.15, где реагент для захвата выбран из группы, состоящей из антитела против GDF8 или антигенсвязывающего белка, GDF8-связывающего белка и GDF8-связывающего домена.
20. Анализ по п.19, где реагент для захвата представляет собой антитело против GDF8 или антигенсвязывающий белок и выбран из группы, состоящей из RK35 и RK22.
21. Анализ по п.20, где реагент для захвата представляет собой RK35.
22. Анализ по п.20, где реагент для захвата представляет собой RK22.
23. Анализ по п.15, где реагент для детекции выбран из группы, состоящей из антитела против GDF8 или антигенсвязывающего белка, GDF8-связывающего белка и GDF8-связывающего домена.
24. Анализ по п.23, где реагент для детекции представляет собой антитело против GDF8 или антигенсвязывающий белок и выбран из группы, состоящей из RK35 и RK22.
25. Анализ по п.24, где реагент для детекции представляет собой RK35.
26. Анализ по п.24, где реагент для детекции представляет собой RK22.
27. Анализ для количественного определения GDF8 в образце от субъекта, включающий следующие стадии:
(а) объединение:
(1) образца;
(2) реагента для захвата, который специфически связывает GDF8;
(3) реагента для детекции, который специфически связывает GDF8; и
(б) детекцию того, происходит или нет специфическое связывание между реагентом для захвата и GDF8, и
(в) количественное определение уровня GDF8;
где детекцию специфического связывания, которое указывает на присутствие GDF8 в образце, можно выполнить количественно.
28. Анализ по п.27, дополнительно включающий объединение образца с кислым буфером перед объединением на стадии (а).
29. Анализ по п.28, где рН кислого буфера составляет от примерно рН 1,0 до рН 6,0.
30. Анализ по п.28, где рН кислого буфера составляет примерно рН 2,5.
31. Фармацевтическая композиция, содержащая фармацевтически приемлемый носитель и антагонист GDF8, где указанный антагонист представляет собой антитело против GDF8 или антигенсвязывающий белок, который специфически связывается с GDF8 и не связывается специфически с ВМР11.
32. Фармацевтическая композиция по п.31, где антитело против GDF8 или антигенсвязывающий белок, который специфически связывается с GDF8 и не связывается специфически с ВМР11, содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, и где антитело дополнительно содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14.
33. Фармацевтическая композиция по п.31, где антитело против GDF8 или антигенсвязывающий белок, который специфически связывается с GDF8 и не связывается специфически с ВМР11, содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18, и где антитело дополнительно содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17.
34. Фармацевтическая композиция по п.31, где антитело против GDF8, которое специфически связывается с GDF8 и не связывается специфически с ВМР11, содержит по меньшей мере одну область, определяющую комплементарность (CDR), содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:19, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:20, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:21, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:22, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:23, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:24, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:25, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:26, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:27, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:28, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:29, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:30.
35. Способ лечения GDF8-ассоциированного расстройства у пациента-млекопитающего, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества антагониста, специфичного в отношении GDF8, который имеет небольшую токсичность или не токсичен.
36. Способ по п.35, где антагонисты GDF8 представляют собой антитело против GDF8 или антигенсвязывающий белок, который специфически связывается с GDF8 и не связывается специфически с ВМР11.
37. Способ по п.36, где антагонист GDF8, представляющий собой антитело против GDF8 или антигенсвязывающий белок, который специфически связывается с GDF8 и не связывается специфически с ВМР11, содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, и где антитело дополнительно содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14.
38. Способ по п.36, где антагонист GDF8, представляющий собой антитело против GDF8 или антигенсвязывающий белок, который специфически связывается с GDF8 и не связывается специфически с ВМР11, содержит легкую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18, и где антитело дополнительно содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17.
39. Способ по п.36, где антитело против GDF8 или антигенсвязывающий белок, который специфически связывается с GDF8 и не связывается специфически с ВМР11, содержит по меньшей мере одну область, определяющую комплементарность (CDR), содержащую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотной последовательности SEQ ID NO:19, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:20, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:21, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:22, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:23, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:24, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:25, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:26, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:27, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:28, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:29, аминокислотной последовательности SEQ ID NO:30.
40. Способ диагностики, прогнозирования или определения того, страдает ли субъект GDF8-ассоциированным расстройством, включающий стадии:
(а) получения первого образца от субъекта;
(б) объединения первого образца с антагонистом, как определено в п.9;
(в) определения присутствия GDF8 в первом образце;
(г) количественного определения уровня GDF8 в первом образце;
(д) получения второго образца от субъекта, не страдающего GDF8-ассоциированным расстройством;
(е) объединения второго образца с антагонистом;
(ж) определения уровня GDF8 во втором образце;
(з) количественного определения уровня GDF8 во втором образце и
(и) сравнения уровней GDF8 в первом и во втором образцах,
где увеличение, снижение или сходство уровня GDF8 в первом образце по сравнению со вторым образцом показывает, страдает ли субъект GDF8-ассоциированным расстройством.
41. Применение фармацевтической композиции в изготовлении лекарственного средства для лечения GDF8-ассоциированного расстройства у пациента-млекопитающего, где указанная фармацевтическая композиция содержит фармацевтически приемлемый носитель и антагонист GDF8, где антагонист GDF8 представляет собой антитело против GDF8 или антигенсвязывающий белок, который специфически связывается с GDF8 и не связывается специфически с ВМР11.
42. Набор для определения присутствия или количественного определения GDF8 в образце от субъекта, содержащий реагент для захвата, который специфически связывается с GDF8, и реагент для детекции, который специфически связывается с GDF8, где детекция специфического связывания GDF8 с реагентами для захвата и для детекции указывает на присутствие GDF8 в образце.
43. Набор по п.42, который дополнительно содержит кислый буфер.
44. Антитело, специфичное в отношении фактора роста и дифференцировки 8 (GDF8), где антитело против GDF8 или антигенсвязывающий белок специфически связывается с GDF8 и не связывается специфически с ВМР11, и где антитело или антигенсвязывающий белок выбраны из группы, состоящей из поликлонального антитела; моноклонального антитела; моноспецифического антитела; полиспецифического антитела; гуманизированного антитела; тетрамерного антитела; тетравалентного антитела; полиспецифического антитела; одноцепочечного антитела; домен-специфического антитела; однодоменного антитела; антитела с делетированным доменом; слитого белка; слитого белка ScFc; одноцепочечного антитела; химерного антитела; синтетического антитела; рекомбинантного антитела; гибридного антитела; мутантного антитела; CDR-привитых антител; фрагмента антитела, содержащего Fab; F(ab')2; Fab'-фрагмента; Fv-фрагмента; одноцепочечного Fv-фрагмента (ScFv); Fd-фрагмента; фрагмента dAb; антигенсвязывающего белка, содержащего диатела; пептида CDR3; пептида, ограниченного FR3-CDR3-FR4; нанотела; бивалентного нанотела; малых модульных иммунофармацевтических средств (SMIP); вариабельного домена IgNAR акулы и миниантитела.
45. Антитело по п.44, где антитело или антигенсвязывающий белок представляют собой моноклональное антитело.
46. Антитело по п.45, где антитело или антигенсвязывающий белок содержит легкую цепь, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:16, и где антитело дополнительно содержит тяжелую цепь, содержащую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:14.
47. Антитело по п.44, где антитело или антигенсвязывающий белок представляет собой гуманизированное антитело.
48. Антитело по п.47, где антитело или антигенсвязывающий белок содержит легкую цепь, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:17, и где антитело дополнительно содержит тяжелую цепь, которая содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:18.