СХЕМЫ ПРИМЕНЕНИЯ ИММУНОКОНЪЮГАТА АНТИ-FOLR1
ANTI-FOLR1 IMMUNOCONJUGATE DOSING REGIMENS

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
[001] Область изобретения, в общем, относится к способам введения иммуноконъюгатов анти-FOLR1 для лечения заболеваний, таких как рак. В способах предлагаются схемы введения, которые минимизируют нежелательные побочные эффекты.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[002] Рак представляет собой одну из ведущих причин смертности в развитом мире, причем только в Соединенных Штатах рак диагностируют у более чем одного миллиона людей, с 500000 смертельных случаев ежегодно. Согласно общим оценкам, более чем у 1 из 3 человек возникнет некоторая форма рака на протяжении их жизни. Существует более 200 различных видов рака, четыре из которых - рак молочной железы, рак легких, рак ободочной и прямой кишки и рак предстательной железы - составляют более половины всех новых случаев (Jemal et al., 2003, Cancer J. Clin. 53:5-26).
[003] Рецептор фолиевой кислоты 1 (FOLR1), также известный как рецептор фолиевой кислоты-альфа или связывающийся с фолиевой кислотой белок - это N-гликозилированный белок, экспрессирующийся на плазматической мембране клеток. FOLR1 обладает высокой аффинностью в отношении фолиевой кислоты и некоторых восстановленных производных фолиевой кислоты. FOLR1 опосредует доставку физиологического фолата, 5-метилтетрагидрофолата, во внутреннее пространство клеток.
[004] FOLR1 чрезмерно экспрессируется при подавляющем большинстве видов рака яичника, а также при многих видах рака матки, эндометрия, поджелудочной железы, почки, легкого и молочной железы, в то время как экспрессия FOLR1 в нормальных тканях ограничена верхушечной мембраной эпителиальных клеток в проксимальных почечных трубочках, альвеолярных пневмоцитах легкого, мочевом пузыре, яичках, хориоидном сплетении и щитовидной железе (Weitman SD, et al., Cancer Res 52: 3396-3401 (1992); Antony AC, Annu Rev Nutr 16: 501-521 (1996); Kalli KR, et al Gynecol Oncol 108: 619-626 (2008)). Такой характер экспрессии FOLR1 делает его желательной мишенью для FOLR1-нацеленной терапии рака.
[005] Поскольку рак яичника обычно бессимптомный до поздней стадии, его часто диагностируют на поздней стадии с плохим прогнозом в случае лечения доступными на сегодняшний день методиками, обычно химиотерапевтическими лекарственными средствами после хирургического иссечения (von Gruenigen V et al., Cancer 112: 2221-2227 (2008); Ayhan A et al., Am J Obstet Gynecol 196: 81 e81-86 (2007); Harry VN et al., Obstet Gynecol Surv 64: 548-560 (2009)). Таким образом, существует очевидная неудовлетворенная медицинская потребность в более эффективной терапии рака яичника.
[006] Антитела все шире признают многообещающим средством лечения таких видов рака. Кроме того, иммуноконъюгаты, которые содержат антитело, конъюгированное с другим соединением, например, цитотоксином, также изучают как потенциальную терапию. В частности, иммуноконъюгаты, содержащие майтанзиноиды, которые представляют собой противогрибковые и противоопухолевые агенты растительного происхождения продемонстрировали определенную благоприятную активность. О выделении трех петлевых макролидов из этанольных экстрактов Maytenus ovatus и Maytenus buchananii впервые сообщили S.М. Kupchan и др. и они представляют собой объект изобретения согласно патенту США №3896111, наряду с демонстрацией их антилейкемических эффектов на мышиных моделях в интервале дозы мкг/кг. Однако, майтанзиноиды обладают неприемлемой токсичностью, вызывая как центральную, так и периферические невропатии и побочные эффекты: особенно тошноту, рвоту, диарею, повышение показателей печеночных проб и, реже, слабость и летаргию. Такая общая токсичность снижается до некоторой степени при конъюгации майтанзиноидов с антителами, поскольку конъюгат антитела обладает токсичностью, на несколько порядков ниже в отношении антиген-отрицательных клеток, по сравнению с антиген-положительными клетками. Однако по-прежнему существует необходимость в определении конкретных схем введения иммуноконъюгатов анти-FOLR1, терапевтически эффективных для человека, но позволяющих избежать побочных эффектов.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[007] В данном документе предложены способы введения иммуноконъюгата анти-FOLR1 в терапевтически эффективной схеме введения, которая минимизирует нежелательные побочные эффекты. Как описано более подробно ниже, введение той же самой дозы иммуноконъюгата анти-FOLR1 разным пациентам приводит к существенной вариации фармакокинетики иммуноконъюгата (например, Cmax и AUC). Авторы настоящего изобретения обнаружили, а эксперименты, представленные в данном документе, демонстрируют, что офтальмологическая токсичность коррелирует с высоким Cmax и высокой начальной величиной AUC. Однако высокая Cmax и начальная величина AUC не требуются для достижения эффективности. Соответственно, в данном документе описаны способы лечения пациента с раком, включающие введение пациенту эффективной дозы иммуноконъюгата, который связывается с FOLR1, причем иммуноконъюгат вводят в дозе от около 3,0 мг/кг до около 7,0 мг/кг, при этом кг массы тела проводят к идеальной массе тела (TBW), сухой массе тела (LBW), или скорректированной идеальной массе тела (ADJ или AIBW). Аббревиатуры "ADJ" и "AIBW" могут быть использованы взаимозаменяемо для обозначения скорректированной идеальной массы тела. В некоторых вариантах реализации изобретения килограммы приводят к AIBW (ADJ). Также в данном документе описаны способы лечения пациента с раком, включающие введение пациенту эффективной дозы иммуноконъюгата, который связывается с FOLR1, причем иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом (например, в 1, 8, и 15 дни четырехнедельного режима). Также в данном документе описаны способы лечения пациента с раком, включающие введение пациенту эффективной дозы иммуноконъюгата, который связывается с FOLR1, причем иммуноконъюгат вводят в дозе от около 1,0 мг/кг до около 7,0 мг/кг, при этом кг массы тела приводят к IBW, LBW, или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом (например, в 1, 8, и 15 дни четырехнедельного режима). Способы, описанные в данном документе, могут привести к снижению токсичности, например, офтальмологической токсичности.
0-24
0-24
0-24
[008] Кроме того, описанные в данном документе способы лечения пациента с раком, включающие введение пациенту эффективной дозы иммуноконъюгата, который связывается с FOLR1, отличающиеся тем, что Cmax и начальная величина AUC, которые приводят к интоксикации, не превышены. Например, в некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает Cmax около 90-160 мкг/мл и в некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает Cmax около 110-160 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC не более чем 2785 ч»мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC не более чем 2741 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC не более чем 2700 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает Cmax не более чем 160 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает Cmax не более чем 150 мкг/мл.
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
[009] В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC около 1000-3500 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC около 1000-3000 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC около 1000-2785 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC около 1000-2741 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC около 1000-2700 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC около 1000-2500 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC не более чем 1500-3500 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC не более чем 1500-3000 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC не более чем 1500-2785 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC не более чем 1500-2741 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC не более чем 1500-2700 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC около 1500-2500 ч⋅мкг/мл.
[0010] В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает Cmax 110-160 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает Cmax 110-150 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает Cmax 110-140 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает Cmax 120-160 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает Cmax около 120-150 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает Cmax около 120-140 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает Cmax 90-160 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает Cmax около 90-150 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает Cmax около 90-140 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает Cmax 100-160 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает Cmax около 100-150 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает Cmax около 100-140 мкг/мл.
[0011] Иммуноконъюгат анти-FOLR1 может содержать заряженный линкер. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 содержит антитело huMov19, линкер сульфо-SPDB и майтанзиноид DM4.
[0012] В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат содержит антитело или его антигенсвязывающий фрагмент, который конкурентно ингибирует связывание с FOLR1 антитела с последовательностями SEQ ID NO: 3 и SEQ ID NO: 5. В некоторых вариантах реализации изобретения антитело или его фрагмент содержит CDR huMov19 (т.е., SEQ ID NO: 6-10 и 12 или SEQ ID NO: 6-9, 11 и 12). В некоторых вариантах реализации изобретения антитело или его антигенсвязывающий фрагмент содержат вариабельный участок последовательности huMOV19 (т.е., SEQ ID NO: 3 и 5). В некоторых вариантах реализации изобретения антитела или фрагменты не содержат шесть CDR мышиного Mov19 (т.е., SEQ ID NO: 6-9, 16 и 12). В некоторых вариантах реализации изобретения антитело представляет собой huMov19. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат содержит майтанзиноид. В некоторых вариантах реализации изобретения майтанзиноид представляет собой DM4. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат содержит линкер, который представляет собой сульфо-SPDB. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат представляет собой IMGN853 (huMov19-сульфо-SPDB-DM4).
[0013] В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе от около 1 до около 7,0 мг/кг, причем килограммы массы тела приводят к IBW, LBW, BSA, или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 1,0 мг/кг, причем килограммы массы тела приводят к IBW, LBW, BSA, или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 1,1 мг/кг, причем килограммы массы тела приводят к IBW, LBW, BSA, или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 1,5 мг/кг, причем килограммы массы тела приводят к IBW, LBW, BSA, или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 1,8 мг/кг, причем килограммы массы тела приводят к IBW, LBW, BSA, или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 2,0 мг/кг, причем килограммы массы тела приводят к IBW, LBW, BSA, или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 2,5 мг/кг, причем килограммы массы тела приводят к IBW, LBW, BSA, или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 2,8 мг/кг, причем килограммы массы тела приводят к IBW, LBW, BSA, или AIBW (ADJ.) В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLRl (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 3,0 мг/кг, причем килограммы массы тела приводят к IBW, LBW, BSA, или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 3,3 мг/кг, причем килограммы массы тела приводят к IBW, LBW, BSA, или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 3,75 мг/кг, причем килограммы массы тела приводят к IBW, LBW, BSA, или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 4,0 мг/кг, причем килограммы массы тела приводят к IBW, LBW, BSA, или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 4,1 мг/кг, причем килограммы массы тела приводят к IBW, LBW, BSA, или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, пиМоу19-сульфо-8РБВ-ОМ4) вводят в дозе около 4,2 мг/кг, причем килограммы массы тела приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 5,0 мг/кг, причем килограммы массы тела приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 5,5 мг/кг, причем килограммы массы тела приводят к IBW, LBW, BSA, или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 5,6 мг/кг, причем килограммы массы тела приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 6,0 мг/кг, причем килограммы массы тела приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 6,5 мг/кг, причем килограммы массы тела приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 7,0 мг/кг, причем килограммы массы тела приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения килограммы массы тела приводят к AIBW (ADJ).
[0014] Согласно способам, описанным в данном документе, связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) можно вводить около 1 раза в 4 недели. В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят около 1 раза в 3 недели. В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят около 1 раза в 2 недели. В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят около 1 раза в неделю.
[0015] В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат вводят в дозе около от около 1 до 7 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат вводят в дозе от около 1,5 мг/кг до около 6,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат вводят в дозе около 1,5, 2,0, 2,5, 3, 3,75, 4,0, 4,1, 4,2, 5,0, 5,5 и 6,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат вводят в дозе около 1,1, 1,8, 2,5, 3,3, и 4,2 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 вводят в дозе около 1,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 вводят в дозе около 1,1 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 вводят в дозе около 1,5 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 вводят в дозе около 1,8 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 вводят в дозе около 2,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 вводят в дозе около 2,5 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 вводят в дозе около 2,8 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 вводят в дозе около 3,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 вводят в дозе около 3,3 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 вводят в дозе около 3,75 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 вводят в дозе около 4,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 вводят в дозе около 4,1 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 вводят в дозе около 4,2 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 вводят в дозе около 5,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 вводят в дозе около 5,5 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 вводят в дозе около 5,6 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 вводят в дозе около 6,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 вводят в дозе около 6,5 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 вводят в дозе около 7,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом.
[0016] В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе от около 1 до 7 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе от около 1,5 мг/кг до около 6 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 1 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводятвдозе около 1,1 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 1,5 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA, или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 1,8 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 2 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 2,5 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 2,8 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 3 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 3,3 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 3,75 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 (например, huMovl9--сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 4 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 4,1 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 4,2 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 5 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 5,5 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 5,6 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 6 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 6,5 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят в дозе около 7 мг/кг, причем килограммы приводят к IBW, LBW, BSA или AIBW (ADJ), и при этом иммуноконъюгат вводят один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения килограммы приводят к AIBW (ADJ).
[0017] В некоторых вариантах реализации изобретения связывающиеся агенты анти-FOLR1 вводили для получения AUC, полученные в примерах 1-6, и представленных на фигурах 1-2 и 7-12.
[0018] В некоторых вариантах реализации изобретения связывающиеся агенты анти-FOLR1 вводили для получения Cmax, полученные в примерах 1-6, и показаны на фигурах 1-6 и 9-12.
[0019] В некоторых вариантах реализации изобретения связывающийся агент анти-FOLR1 (например, huMov19-сульфо-SPDB-DM4) вводят внутривенно.
[0020] Способы, описанные в данном документе, могут быть применены для лечения рака. В некоторых вариантах реализации изобретения рак выбран из группы, состоящей из рака яичника, мозга, молочной железы, матки, эндометрия, поджелудочной железы, почки (например, почечно-клеточная карцинома) и легкого (например, немелкоклеточный рак легкого или бронхиолоальвеолярной карциномы (ВАС)). В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак яичника или рак легкого. В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой эпителиальный рак яичника.
[0021] В некоторых вариантах реализации изобретения рак экспрессирует полипептид FOLR1 или нуклеиновую кислоту. В некоторых вариантах реализации изобретения раку свойственен повышенный уровень экспрессии полипептида FOLR1, по данным измерения иммуногистохимическим методом (IHC). Например, в некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак, который экспрессирует полипептид FOLR1 на уровне 1 гетеро или выше по данным IHC. В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак, который экспрессирует полипептид FOLR1 на уровне 1 гомо или выше по данным IHC. В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак, который экспрессирует полипептид FOLR1 на уровне 2 гетеро или выше по данным IHC. В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак, который экспрессирует полипептид FOLR1 на уровне 2 гомо или выше по данным IHC. В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак, который экспрессирует полипептид FOLR1 на уровне 3 гетеро или выше по данным IHC. В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак, который экспрессирует полипептид FOLR1 на уровне 3 гомо или выше по данным IHC. В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак легкого, который экспрессирует полипептид FOLR1 на уровне 2 гетеро или выше по данным IHC. В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак легкого, который экспрессирует полипептид FOLR1 на уровне 3 гетеро или выше по данным IHC. В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой эпителиальный рак яичника (например, резистентный к платине или рецидивирующий или рефрактерный), который экспрессирует полипептид FOLR1 на уровне 2 гетеро или выше. В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой эпителиальный рак яичника (например, резистентный к платине или рецидивирующий или рефрактерный), который экспрессирует полипептид FOLR1 на уровне 3 гетеро или выше. В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак эндометрия, который экспрессирует полипептид FOLR1 на уровне 1 гетеро или выше. В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак эндометрия, который экспрессирует полипептид FOLR1 на уровне 2 гетеро или выше.
[0022] В некоторых вариантах реализации изобретения способы дополнительно включают введение пациенту стероида. Стероид можно вводить в качестве предварительного лечения, т.е. до введения связывающегося агента анти-FOLR1. Стероид может представлять собой дексаметазон.
[0023] Способы, описанные в данном документе, могут приводить к уменьшению размера опухоли. Способы, описанные в данном документе, могут приводить к снижению уровней СА125 у пациентов с раком яичника. В одном примере, уровни СА125 измеряют в образце, полученном от пациента с раком яичника до лечения, а затем один раз или более после лечения, причем снижение уровня СА125 во времени указывает на терапевтическую эффективность. Способы, описанные в данном документе, могут приводить к увеличению промежутка времени между сеансами лечения рака. Способы, описанные в данном документе, могут приводить к увеличению продолжительности периода без прогрессирования (PFS). Способы, описанные в данном документе, могут приводить к увеличению периода ремиссии (DFS). Способы, описанные в данном документе, могут приводить к увеличению общей продолжительности жизни (OS). Способы, описанные в данном документе, могут приводить к увеличению частоты полного ответа (CR). Способы, описанные в данном документе, могут приводить к увеличению частоты частичного ответа (PR). Способы, описанные в данном документе, могут приводить к стабильному заболеванию (SD). Способы, описанные в данном документе, могут приводить к более выраженному снижению скорости прогрессирования заболевания (PD). Способы, описанные в данном документе, могут приводить к уменьшению времени до прогрессирования заболевания (ТТР).
[0024] В частности, схемы применения, представленные в данном документе, обеспечивают оптимальный баланс между эффективностью (например, PR) и пониженной токсичностью, как продемонстрировано, например, в примерах 1-4 и фигурах 1-7.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ/ ФИГУР
[0025] На фигурах 1А и Б представлены фармакокинетические данные, полученные в результате введения IMGN853 (от 0,15 мг/кг до 7,0 мг/кг), как описано в примере 1. На фигуре 1Б приводятся итоговые фармакокинетические данные, включающие данные из фиг. 1А и дополнительные данные, полученные от дополнительных пациентов.
0-24
0-168
[0026] На фигурах 2А-В показаны реакции и возникновение офтальмологической токсичности у пациентов с различными значениями Cmax и AUC и AUC.
[0027] На фигуре 3 показан диапазон значений Cmax, измеренных при различных дозах.
[0028] На фигуре 4 показана зависимость Cmax от массы тела пациента.
0-24
[0029] На фигуре 5 показана дисперсия в Cmax и AUC, связанная с альтернативными подходами дозирования.
[0030] На фигуре 6 показана прогнозируемая зависимость Cmax от массы тела с применением альтернативных подходов дозирования.
0-24
[0031] На фигуре 7 приведен график значений AUC наблюдаемых у 24 пациентов, получающих 3,3, 5 или 7 мг/кг IMGN853 на основе общей массы тела (фактической). Эти значения сравнивали с прогнозируемыми значениями в случае если все пациенты получали лечение 5 мг/кг в пересчете на общую массу тела (TBW 5 мг/кг) и прогнозируемыми значениями, если всем пациентам вводили дозы в 5, 5,4 или 6 мг/кг исходя из скорректированного значения идеальной массы тела (ADJ 5, 5,4 или 6). Фактические данные о 7 больных, которых лечили в дозах по 5 мг/кг на скорректированную идеальную массу тела (фактически 5 ADJ) тоже показаны. Процент пациентов, которые имеют или будут иметь прогнозируемые значения AUC выше порога офтальмологической токсичности, приведен в таблице ниже графика.
0-24
0-24
0-24
[0032] На фигуре 8 показаны значения AUC для всех пациентов в диапазоне 3,3-7,0 мг/кг. Группу TBW использовали для расчета прогнозируемых значений AUC в указанных дозах. Фактические данные AUC пациентов для указанных доз также отображены, включая данные группы пациентов дозированных в 5,0 и 6,0 скорректированной идеальной массы тела (AIBW).
[0033] На фигуре 9 показаны противоопухолевая активность, прогнозируемая концентрация в плазме крови и другие фармакокинетические параметры IMGN853 у мышей, получавших разовые дозы в 2,8 мг/кг, 5,6 мг/кг или 8,5 мг/кг иммуноконъюгата.
[0034] На фигуре 10 показаны противоопухолевая активность, прогнозируемая концентрация в плазме крови и другие фармакокинетические параметры IMGN853 у мышей, получавших разовые дозы в 8,5 мг/кг, три суточные дозы в 2,8 мг/кг, или три дозы в 2,8 мг/кг каждые три дня.
[0035] На фигуре 11 показаны противоопухолевая активность, прогнозируемая концентрация в плазме крови и другие фармакокинетические параметры IMGN853 у мышей, получавших разовые дозы в 5,6 мг/кг или 1,4 мг/кг ежедневно в течение трех дней.
[0036] На фигуре 12 показаны противоопухолевая активность, прогнозируемая концентрация в плазме крови и другие фармакокинетические параметры IMGN853 у мышей, получавших разовые дозы в 8,5 мг/кг или 2,8 мг/кг еженедельно в течение трех недель.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0037] В настоящем изобретении предлагаются новые схемы введения для иммуноконъюгатов, связывающихся с FOLR1.
I. Определения
[0038] Чтобы облегчить понимание настоящего изобретения, ниже определен ряд терминов и выражений.
[0039] Термины "человеческий рецептор фолата 1", "FOLR1" или "рецептор фолата альфа (FR-a)", как используется в данном документе, обозначают любой нативный FOLR1 человека, если не указано иное. Таким образом, все эти термины могут обозначать белок или последовательность нуклеиновой кислоты, как указано в данном документе. Термин «FOLR1» включает «полноразмерный» непроцессированный FOLR1, а также любую форму FOLR1, которая является результатом процессинга в пределах клетки. Кроме того, термин включает варианты FOLR1 природного происхождения, например, сплайсинг-варианты, аллельные варианты и изоформы. Полипептиды FOLR1, описанные в данном документе, могут быть выделены из множества источников, таких как различные виды тканей человека или другого источника, или получены рекомбинантными или синтетическими способами. Примеры последовательностей FOLR1 включают, без ограничений, NCBI с инвентаризационными номерами Р15328, NP_001092242.1, ААХ29268.1, AAX37119.1, NP_057937.1 и NP 057936.1.
[0040] Термин «антитело» обозначает молекулу иммуноглобулина, которая распознает и специфично связывается с мишенью, такой как белок, полипептид, пептид, углевод, полинуклеотид, липид или комбинации вышеуказанных веществ по меньшей мере через один сайт распознавания антигена в пределах вариабельного участка молекулы иммуноглобулина. Как используется в данном документе, термин «антитело» включает интактные поликлональные антитела, интактные моноклональные антитела, фрагменты антител (такие как фрагменты Fab, Fab', F(ab')2 и Fv), одноцепочечные мутанты Fv (scFv), полиспецифичные антитела, такие как антитела с двойной специфичностью, генерируемые по меньшей мере из двух интактных антител, химерные антитела, гуманизированные антитела, человеческие антитела, химерные белки, содержащие часть антитела, распознающую антиген, и любую другую модифицированную молекулу иммуноглобулина, содержащую сайт распознавания антигена, до тех пор, пока антитела демонстрируют желательную биологическую активность. Антитело может относиться к любому из пяти основных классов иммуноглобулинов: IgA, IgD, IgE, IgG и IgM, или их подклассов (изотипов) (например, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2), на базе идентичности их константных доменов тяжелой цепи, обозначенных как альфа, дельта, ипсилон, гамма и мю, соответственно. Различные классы иммуноглобулинов содержат различные и хорошо известные структуры субъединиц и трехмерные конфигурации. Антитела могут быть неконъюгированными или конъюгированными с другими молекулами, такими как токсины, радиоизотопы и т.п.
[0041] «Блокирующее» антитело или антитело - «антагонист» представляет собой такое, которое ингибирует или снижает биологическую активность антигена, с которым оно связывается, такого как FOLR1. В некоторых вариантах реализации изобретения блокирующие антитела или антитела-антагонисты в существенной мере или полностью ингибируют биологическую активность антигена. Биологическая активность может быть уменьшена на 10%, 20%, 30%, 50%, 70%, 80%, 90%, 95% или даже на 100%.
[0042] Термин «антитело анти-FOLR1» или «антитело, которое связывается с FOLR1» обозначает антитело, которое способно связываться с FOLR1 с достаточной аффинностью, таким образом, что антитело пригодно в качестве диагностического и/или терапевтического агента для нацеливания на FOLR1. Степень связывания антитела анти-FOLR1 с посторонним не-FOLR1 белком может составлять менее чем около 10% от связывания антитела с FOLR1 по данным, например, радиоиммуноанализа (RIA). В некоторых вариантах реализации изобретения константа диссоциации (Kd) антитела, которое связывается с FOLR1, составляет ≤1 мкМ, ≤100 нМ, ≤10 нМ, ≤1 нМ или ≤0,1 нМ.
[0043] Термин «фрагмент антитела» обозначает часть интактного антитела и обозначает распознающие антиген вариабельные участки интактного антитела. Примеры фрагментов антитела включают, но не ограничиваясь этим, фрагменты Fab, Fab', F(ab')2 и Fv, линейные антитела, одноцепочечные антитела и полиспецифичные антитела, образованные из фрагментов антител.
[0044] «Моноклональное антитело» обозначает однородную популяцию антител, принимающую участие в высокоспецифичном распознавании и связывании единого антигенного детерминанта или эпитопа. В противоположность этому, поликлональные антитела обычно включают различные антитела, направленные против различных антигенных детерминант. Термин «моноклональное антитело» включает как интактные, так и полноразмерные моноклональные антитела, а также фрагменты антител (такие как Fab, Fab', F(ab')2, Fv), одноцепочечные (scFv) мутанты, химерные белки, содержащие часть антитела, и любую другую модифицированную молекулу иммуноглобулина, содержащую сайт распознавания антигена. Кроме того, «моноклональное антитело» обозначает такие антитела, полученные любым количеством способов, в том числе, но не ограничиваясь этим, с применением гибридомы, фаговой селекции, рекомбинантной экспрессии и трансгенных животных.
[0045] Термин «гуманизированное антитело» обозначает формы нечеловеческих (например, мышиных) антител, которые являются специфическими цепями иммуноглобулина, химерными иммуноглобулинами или их фрагментами, содержащими минимальные нечеловеческие (например, мышиные) последовательности. Обычно, гуманизированные антитела представляют собой человеческие иммуноглобулины, в которых остатки участка определения комплементарности (CDR) заменены остатками CDR нечеловеческих видов (например, мыши, крысы, кролика, хомяка), обладающими желательной специфичностью, аффинностью и валентностью (Jones et al., 1986, Nature, 321:522-525; Riechmann et al., 1988, Nature, 332:323-327; Verhoeyen et al., 1988, Science, 239:1534-1536). В некоторых случаях остатки Fv каркасного участка (FR) человеческого иммуноглобулина заменены соответствующими остатками антитела вида, не являющегося человеком, которые обладают желательной специфичностью, аффинностью и валентностью. Гуманизированное антитело может быть модифицировано заменой дополнительных остатков в каркасном участке Fv и/или в пределах модифицированных нечеловеческих остатков, с целью уточнения и оптимизации специфичности, аффинности и/или валентности антитела. В общем, гуманизированное антитело содержит в существенной мере все из по меньшей мере одного, и обычно двух или трех вариабельных доменов, содержащих все или в существенной мере все участки CDR, которые соответствуют нечеловеческому иммуноглобулину, тогда как все или в существенной мере все участки FR происходят из консенсусной последовательности человеческого иммуноглобулина. Гуманизированное антитело может содержать по меньшей мере часть константного участка иммуноглобулина или домена (Fc), обычно из человеческого иммуноглобулина. Примеры способов, применяемых для образования гуманизированных антител, описаны в патенте США 5225539. В некоторых вариантах реализации изобретения «гуманизированное антитело» представляет собой антитело с модифицированной поверхностью.
[0046] «Вариабельный участок» антитела обозначает вариабельный участок легкой цепи антитела или вариабельный участок тяжелой цепи антитела, отдельно или в комбинации. Каждый вариабельный участок тяжелой и легкой цепи состоит из четырех каркасных участков (FR), соединенных тремя участками определения комплементарности (CDR), также известными как гипервариабельные участки. CDR в каждой цепи удерживаются вместе в непосредственной близости к FR и, вместе с CDR из другой цепи, принимают участие в образовании антигенсвязывающего сайта антител. Существует по меньшей мере два метода определения CDR: (1) подход, основанный на межвидовой изменчивости последовательностей (т.е., Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, (5th ed., 1991, National Institutes of Health, Bethesda Md.)); и (2) подход, основанный на кристаллографических исследованиях комплексов антигена-антитела ((Al-lazikani et al (1997) J. Molec. Biol. 273:927-948)). Кроме того, комбинации этих двух подходов иногда применяются в данной области техники для определения CDR.
[0047] Система нумерации Kabat, в общем, применяется при указании остатка в вариабельном домене (приблизительно остатки 1-107 легкой цепи и остатки 1-113 тяжелой цепи) (например, Kabat et al., Sequences of Immunological Interest. 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991)).
[0048] Нумерация положений аминокислот согласно Kabat обозначает систему нумерации, применяемую для вариабельных доменов тяжелой цепи или вариабельных доменов легкой цепи при компиляции антител в Kabat и др., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md. (1991). С применением данной системы нумерации, фактическая линейная последовательность аминокислот может содержать меньше или больше аминокислот, что соответствует укорачиванию или вставке в FR или CDR вариабельного домена. Например, вариабельный домен тяжелой цепи может содержать вставку одной аминокислоты (остаток 52а согласно Kabat) после остатка 52 Н2 и вставленные остатки (например остатки 82а, 82b и 82 с и т.д согласно Kabat) после остатка 82 FR тяжелой цепи. Нумерация остатков согласно Kabat может быть определена для конкретного антитела путем выравнивания в участках гомологии последовательности антитела со «стандартной», пронумерованной по Kabat последовательностью. Вместо этого, Chothia ссылается на расположение структурных петель (Chothia and Lesk J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)). Конец петли Chothia CDR-H1, при нумерации согласно конвенции нумерации по Kabat варьирует от Н32 до Н34, в зависимости от длины петли (это происходит вследствие того, что схема нумерации Kabat размещает вставки в Н35А и Н35В; если 35А и 35В отсутствуют, петля заканчивается на 32; если присутствует только 35А, петля заканчивается на 33; если присутствуют 35А и 35В, петля заканчивается на 34). Гипервариабельные участки AbM представляют компромисс между CDR Kabat и структурными петлями Chothia, и используются программным обеспечением для моделирования антител AbM от Oxford Molecular.
[0049] Термин «человеческое антитело» обозначает антитело, продуцированное человеком, или антитело, содержащее последовательность аминокислот, соответствующую антителу, продуцированному человеком, полученное с применением любой технологии, известной в данной области техники. Данное определение человеческого антитела включает интактные или полноразмерные антитела, их фрагменты и/или антитела, содержащие по меньшей мере один человеческий полипептид тяжелой и/или легкой цепи, например, такие как антитело, содержащее полипептиды мышиной легкой цепи и человеческой тяжелой цепи.
[0050] Термин «химерные антитела» обозначает антитела, в которых последовательность аминокислот молекулы иммуноглобулина происходит от двух или более видов. Обычно, вариабельный участок как легкой, так и тяжелой цепей соответствует вариабельному участку антител, полученных от одного вида млекопитающих (например мыши, крысы, кролика и т.д.) с желательной специфичностью, аффинностью и валентностью, в то время как константные участки гомологичны последовательностям антител, полученных от другого вида (обычно человека), чтобы избежать иммунной реакции у указанного вида.
[0051] Термины «эпитоп» или «антигенная детерминанта» используются равнозначно в данном документе и обозначают часть антигена, которую конкретное антитело может распознавать и специфично связываться с ней. Если антиген является полипептидом, эпитопы могут быть образованы как смежными аминокислотами, так и несмежными аминокислотами, которые сближены в результате третичного свертывания белка. Эпитопы, образованные смежными аминокислотами, обычно сохраняются при денатурации белка, тогда как эпитопы, образованные при третичном свертывании, обычно утрачиваются при денатурации белка. Эпитоп обычно содержит по меньшей мере 3, и чаще по меньшей мере 5 или 8-10 аминокислот в уникальной пространственной конформации.
[0052] «Аффинность связывания» в общем обозначает силу общей суммы нековалентных взаимодействий между одним сайтом связывания молекулы (например, антитела) и ее партнера по связыванию (например, антигена). Если не указано иное, как используется в данном документе, «аффинность связывания» обозначает внутреннюю аффинность связывания, которая отображает взаимодействие 1:1 между членами пары связывания (например, антителом и антигеном). Аффинность молекулы X в отношении ее партнера Y в общем может быть представлена константой диссоциации (Kd). Аффинность может быть измерена общими способами, известными в данной области техники, в том числе описанными в данном документе. Антитела с низкой аффинностью, в общем, медленно связываются с антигеном и демонстрируют тенденцию легко диссоциироваться, тогда как антитела с высокой аффинностью, в общем, связываются с антигеном быстрее и демонстрируют тенденцию к более длительному связыванию. Множество способов измерения аффинности связывания известных в данной области техники, и любой из них может применяться для целей настоящего изобретения. Конкретные иллюстративные варианты реализации изобретения описаны ниже.
[0053] «Или лучше», как используется в данном документе со ссылкой на аффинность связывания, обозначает более прочное связывание между молекулой и ее партнером по связыванию. «Или лучше», как используется в данном документе, обозначает более прочное связывание, представленное меньшим численным значением Kd. Например, в случае антитела, которое обладает аффинностью в отношении антигена «0,6 нМ или лучше», аффинность антитела в отношении антигена составляет <0,6 нМ, т.е. 0,59 нМ, 0,58 нМ, 0,57 нМ и т.п., или любое значение менее 0,6 нМ.
[0054] «Специфично связывается», в общем, означает, что антитело связывается с эпитопом посредством своего домена связывания с антигеном, и что связывание влечет за собой некоторую комплементарность между доменом связывания с антигеном и эпитопом. Согласно данному определению, антитело указано как «специфично связывающееся» с эпитопом, если оно связывается с таким эпитопом посредством своего домена связывания с антигеном более легко, чем оно связывалось бы со случайным, неродственным эпитопом. Термин «специфичность» используется в данном документе для указания на относительную аффинность, с которой определенное антитело связывается с определенным эпитопом. Например, антитело «А» может рассматриваться как обладающее более высокой специфичностью в отношении заданного эпитопа, чем антитело «В» или может быть указано, что антитело «А» связывается с эпитопом «С» с более высокой специфичностью, чем с родственным эпитопом «D».
[0055] Под «предпочтительным связыванием» подразумевается, что антитело специфично связывается с эпитопом, более легко, чем оно связывалось бы с родственным, подобным, гомологичным или аналогичным эпитопом. Таким образом, антитело, которое «предпочтительно связывается» с заданным эпитопом, будет с большей вероятностью связываться с таким эпитопом, чем с родственным эпитопом, даже если такое антитело может перекрестно реагировать с родственным эпитопом.
[0056] Антитело обозначается как «конкурентно ингибирующее» связывание референтного антитела с заданным эпитопом, если оно предпочтительно связывается с таким эпитопом до такой степени, что оно блокирует, до некоторой степени, связывание референтного антитела с эпитопом. Конкурентное ингибирование можно определить любым способом, известным в данной области техники, например, конкурентным анализом ELISA. Антитело может быть обозначено как конкурентно ингибирующее связывание референтного антитела с заданным эпитопом по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 60% или по меньшей мере на 50%.
[0057] Фраза «в существенной мере подобный» или «в существенной мере такой же», как используется в данном документе, обозначает достаточно высокую степень сходства между двумя численными значениями (в общем случае, одно связанное с антителом по изобретению, а другое связано с референтным антителом/компаратором), таким образом, что специалист в данной области техники рассматривал бы разницу между двумя значениями как небольшую или не имеющую биологической и/или статистической значимости в контексте биологической характеристики, измеренной по указанным значениям (например, значения Kd). Разница между указанными двумя значениями может составлять менее чем около 50%, менее чем около 40%, менее чем около 30%, менее чем около 20% или менее чем около 10% как функция значения для референтного антитела/компаратора.
[0058] «Выделенный» полипептид, антитело, полинуклеотид, вектор, клетка или композиция представляет собой полипептид, антитело, полинуклеотид, вектор, клетку или композицию, который находится в форме, не найденной в природе. Выделенные полипептиды, антитела, полинуклеотиды, векторы, клетки или композиции включают очищенные до такой степени, что они больше не существуют в форме, в которой они найдены в природе. В некоторых вариантах реализации изобретения выделенное антитело, полинуклеотид, вектор, клетка или композиция является в существенной мере чистым.
[0059] Как используется в данном документе, «в существенной мере чистый» обозначает материал, который является по меньшей мере на 50% чистым (т.е., свободным от загрязняющих веществ), по меньшей мере на 90% чистым, по меньшей мере на 95% чистым, по меньшей мере на 98% чистым или по меньшей мере на 99% чистым.
[0060] Термин «иммуноконъюгат» или «конъюгат», как используется в данном документе, обозначает соединение или его производное, которое связано с агентом связывания с клеткой (т.е., антителом против FOLR1 или его фрагментом) и определяется общей формулой: C-L-A, где С = цитотоксин, L = линкер, и А = антитело анти-FOLR1 или фрагмент антитела. Кроме того, иммуноконъюгаты могут быть определены общей формулой в обратном порядке: A-L-C.
[0061] Термин «IMGN853» обозначает иммуноконъюгат, описанный в данном документе, который содержит антитело huMov19, линкер сульфоSPDB и майтанзиноид DM4. Антитело huMov19 содержит вариабельную тяжелую цепь с последовательностью аминокислот SEQ ID NO: 3 и вариабельную легкую цепь с последовательностью аминокислот SEQ ID NO: 5.
[0062] «Линкер» представляет собой любой химический фрагмент, который способен связывать соединение, обычно лекарственное средство, такое как майтанзиноид, с агентом связывания с клеткой, таким как антитело анти-FOLR1 или его фрагмент, в стабильной, ковалентной форме. Линкеры могут быть чувствительными или могут быть в существенной мере устойчивыми к индуцированному кислотой расщеплению, индуцированному светом расщеплению, индуцированному пептидазой расщеплению, индуцированному эстеразой расщеплению и расщеплению дисульфидной связи, в условиях, в которых соединение или антитело остается активным. Подходящие линкеры хорошо известны в данной области техники и включают, например, дисульфидные группы, тиоэфирные группы, кислото-лабильные группы, фотолабильные группы, пептидазо-лабильные группы и эстеразо-лабильные группы. Кроме того, линкеры включают заряженные линкеры и их гидрофильные формы, как описано в данном документе и известные в данной области техники.
[0063] Термины «рак» и «раковый» обозначают или описывают физиологическое состояние у млекопитающих, при котором популяция клеток характеризуется неупорядоченным клеточным ростом. Примеры рака включают, но не ограничиваясь этим, карциному, лимфому, бластому, саркому и лейкоз. Более конкретные примеры таких видов рака включают плоскоклеточный рак, мелкоклеточный рак легкого, немелкоклеточный рак легкого, аденокарциному легкого, плоскоклеточную карциному легкого, рак брюшины, гепатоцеллюлярный рак, рак желудочно-кишечного тракта, рак поджелудочной железы, глиобластому, рак шейки матки, рак яичника, рак печени, рак мочевого пузыря, гепатому, рак молочной железы, рак ободочной кишки, рак ободочной и прямой кишки, карциному эндометрия или матки, карциному слюнной железы, рак почки, рак печени, рак предстательной железы, рак вульвы, рак щитовидной железы, карциному печени и различные виды рака головы и шеи. Рак может представлять собой рак, который экспрессирует FOLR1.
[0064] «Опухоль» и «новообразование» обозначают любую массу ткани, которая является результатом чрезмерного роста или пролиферации клеток, доброкачественную (нераковую) или злокачественную (раковую), включая предраковые поражения.
[0065] Термины «раковая клетка» «опухолевая клетка» и их грамматические эквиваленты обозначают общую популяцию клеток, происходящих от опухоли или предракового поражения, включая как нетуморогенные клетки, которые составляют основную часть популяции клеток опухоли, так и туморогенные стволовые клетки (раковые стволовые клетки). Как использовано в данном документе, термин «опухолевая клетка» будет модифицирован термином «нетуморогенная» со ссылкой исключительно на те клетки опухоли, которые не обладают способностью к обновлению и дифференциации, чтобы отличать такие опухолевые клетки от раковых стволовых клеток.
[0066] Термин «субъект» обозначает любое животное (например, млекопитающее), в том числе, но не ограничиваясь этим, человека, нечеловеческих приматов, грызунов и т.п., который предназначен быть реципиентом конкретной схемы лечения. Обычно, термины «субъект» и «пациент» используются равнозначно в данном документе со ссылкой на субъекта-человека.
[0067] Термин "идеальная масса тела" (IBW) обозначает величину показателя, не имеющего прямого отношения к общей массе тела. IBW представляет собой оценку массы с коррекцией по росту, полу, и дополнительно по телосложению. IBW может быть вычислена, например, по формулам IBW = 0,9Н-88 (для мужчин) и IBW = 0,9Н-92 (для женщин), где Н = высота в см.
2
2
2
2
[0068] Термин "сухая масса тела" (LBW) обозначает величину показателя, которая учитывает относительную жировую массу тела (% ЖМТ). LBW равна общей массе тела минус произведение отн. ЖМТ и массы. LBW может быть вычислена, например, по формулам LBW = 1,10 × массу в кг - 128([массу в кг]/[100 × рост в метрах]) (для мужчин) и LBW = 1,07 × масса в кг - 148([массу в кг]/[100 × рост в метрах]) (для женщин).
[0069] Термин "скорректированная идеальная масса тела" (AIBW) или "скорректированная идеальная масса" (ADJ) обозначает величину показателя, который учитывает пол, общую массу тела и рост.AIBW и ADJ используются как взаимозаменяемые показатели. AIBW (ADJ) может быть вычислена, например, по формуле ADJ=IBW + 0,4(масса в кг - IBW).
[0070] IBW, LBW и AIBW (ADJ) более подробно обсуждаются у Green и Duffull, British Journal of Clinical Pharmacology 58: 119-133 (2004), которая включена в данный документ в полном объеме посредством ссылки.
[0071] Введение «в комбинации с» одним или несколькими дополнительными терапевтическими агентами включает одновременное (конкурентное) и последовательное введение в любом порядке.
[0072] Термин «фармацевтический состав» обозначает препарат, который находится в форме, дающей возможность проявления биологической активности активного ингредиента эффективным способом и не содержащей дополнительных компонентов, которые были бы неприемлемо токсичны для субъекта, которому вводят указанный состав. Состав может быть стерильным.
[0073] «Эффективное количество» антитела или иммуноконъюгата, как описано в данном документе, представляет собой количество, достаточное для достижения конкретно заявленной цели. «Эффективное количество» может быть определено эмпирическим и шаблонным способом, относительно заявленной цели.
[0074] Термин «терапевтически эффективное количество» обозначает количество антитела или другого лекарственного средства, эффективное с точки зрения «лечения» заболевания или расстройства у субъекта или млекопитающего. В случае рака, терапевтически эффективное количество лекарственного средства может уменьшать количество раковых клеток; уменьшать размер опухоли; подавлять (т.е., до некоторой степени замедлять, и в некотором варианте реализации изобретения останавливать) инфильтрацию раковых клеток в периферические органы; подавлять (т.е., до некоторой степени замедлять, и в определенном варианте реализации изобретения останавливать) метастазирование опухоли; подавлять, до некоторой степени, рост опухоли; облегчать, до некоторой степени, один или несколько симптомов, связанных с раком; и/или приводить к благоприятному ответу, такому как увеличение продолжительности периода без прогрессирования (PFS), периода ремиссии (DFS) или общей продолжительности жизни (OS), частоты полного ответа (CR), частичного ответа (PR), или, в некоторых случаях, стабильное заболевание (SD), снижение скорости прогрессирования заболевания (PD), уменьшение времени до прогрессирования заболевания (ТТР), снижение уровня СА125 в случае рака яичника, или любая их комбинация.
[0075] См. определение «лечение» в данном документе. До той степени, до которой лекарственное средство может предупредить рост и/или вызвать гибель существующих раковых клеток, оно может быть цитостатическим и/или цитотоксическим. В некоторых вариантах реализации изобретения идентификация повышенных уровней FOLR1 позволяет введение уменьшенных количеств FOLR1-нацеливающего терапевтического средства, чтобы достичь такого же терапевтического эффекта, который наблюдается при более высоких дозах. «Профилактически эффективное количество» обозначает эффективное количество, при таких дозах и в течение таких необходимых периодов времени, чтобы достичь желаемого профилактического результата. Обычно, но не обязательно, поскольку профилактическая доза применяется у субъектов до начала или на более ранней стадии заболевания, профилактически эффективное количество будет меньше, чем терапевтически эффективное количество.
[0076] Термин «отвечать благоприятно», в общем, обозначает индукцию благоприятного состояния у субъекта. Относительно лечения рака, термин обозначает обеспечение терапевтического эффекта у субъекта. Положительный терапевтический эффект при раке может быть измерен множеством путей (см., W.A. Weber, J. Nucl. Med. 50:1S-10S (2009)). Например, подавление роста опухоли, экспрессия молекулярного маркера, экспрессия сывороточного маркера и технологии молекулярной визуализации - все могут применяться для оценки терапевтической эффективности противоракового терапевтического средства. Относительно ингибирования роста опухоли, согласно стандартам NCI, Т/С≤42% представляет собой минимальный уровень противоопухолевой активности. Т/С<10% рассматривается как высокий уровень противоопухолевой активности, где Т/С (%) = Медианный объем опухоли, которую лечили / Медианный объем контрольной опухоли × 100. Благоприятный ответ может быть оценен, например, по увеличению продолжительности периода без прогрессирования (PFS), периода ремиссии (DFS) или общей продолжительности жизни (OS), частоты полного ответа (CR), частичного ответа (PR), или, в некоторых случаях, стабильному заболеванию (SD), снижению скорости прогрессирования заболевания (PD), уменьшению времени до прогрессирования заболевания (ТТР), снижению уровня СА125 в случае рака яичника, или любой их комбинации.
[0077] PFS, DFS и OS могут быть измерены согласно стандартам, установленным Национальным Институтом Рака и Управления США по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов по одобрению новых лекарственных средств. См. Johnson et al., (2003) J. Clin. Oncol. 21(7): 1404-1411.
[0078] «Период без прогрессирования» (PFS) обозначает период времени от регистрации до прогрессирования заболевания или смерти. PFS в общем измеряется с применением способа Kaplan-Meier и Критериев оценки ответа в стандартах для солидных опухолей (RECIST) 1.1. В общем, период без прогрессирования обозначает ситуацию, в которой пациент остается живым, без усугубления рака.
[0079] «Период до прогрессирования опухоли» (ТТР) определен как период времени от регистрации до прогрессирования заболевания. ТТР в общем измеряется с применением критериев RECIST 1.1.
[0080] «Полный ответ» или «полная ремиссия» или «CR» указывает на исчезновение всех признаков опухоли или рака в ответ на лечение. Это не всегда означает, что рак излечен.
[0081] «Частичный ответ» или «PR» обозначает уменьшение размера или
объема одной или нескольких опухолей или очагов поражения, или распространенности рака в организме в ответ на лечение.
[0082] «Стабильное заболевание» обозначает заболевание без прогрессирования или рецидива. При стабильном заболевании не наблюдается ни достаточного уменьшения опухоли для квалификации его как частичного ответа, ни достаточного увеличения опухоли для квалификации его как прогрессирующего заболевания.
[0083] «Прогрессирующее заболевание» обозначает появление новых очагов поражения или опухолей и/или недвусмысленного прогрессирования существующих нецелевых очагов поражения. Кроме того, прогрессирующее заболевание может обозначать рост опухоли более чем на 20 процентов с момента начала лечения, в результате увеличения массы или распространения опухоли.
[0084] «Период ремиссии» (DFS) обозначает промежуток времени в ходе и после лечения, в течение которого заболевание у пациента отсутствует.
[0085] «Общая продолжительность жизни» (OS) обозначает время от регистрации пациента до смерти или даты, когда пациента в последний раз видели живым. OS включает продление ожидаемой продолжительности жизни по сравнению с не проходившими или не получавшими лечения индивидуумами или пациентами. Общая продолжительность жизни обозначает ситуацию, при которой пациент остается живым на протяжении определенного периода времени, такого как один год, пять лет и т.п., например, от момента постановки диагноза или лечения.
[0086] «Снижение уровней СА125» может быть оценено согласно директивам Международной интергруппы гинекологического рака (GCIG). Например, уровни СА125 могут быть измерены до лечения для установления исходного уровня СА125. Уровни СА125 могут быть измерены один или несколько раз в ходе или после лечения, и снижение уровней СА125 во времени, по сравнению с исходным уровнем, считается снижением уровней СА125.
[0087] Такие термины, как «терапия» или «лечение» или «лечить» или «облегчение» или «облегчать» обозначают терапевтические меры, которые излечивают, замедляют, уменьшают симптомы и/или останавливают прогресс диагностированного патологического состояния или болезни. Таким образом, нуждающиеся в лечении включают тех, кому уже поставлен диагноз, или тех, у кого подозревается наличие болезни. В некоторых вариантах реализации изобретения субъект успешно «лечится» от рака в соответствии со способами по настоящему изобретению, если пациент демонстрирует одно или несколько из следующего: уменьшение количества или полное отсутствие раковых клеток; уменьшение размера опухоли; подавление или отсутствие инфильтрации раковых клетки в периферические органы, включая, например, распространение рака в мягкую ткань и кость; подавление или отсутствие метастазов опухоли; подавление или отсутствие роста опухоли; облегчение одного или нескольких симптомов, связанных с конкретным видом рака; уменьшение заболеваемости и смертности; улучшение качества жизни; уменьшение тумор огенности, частоты туморогенности или потенциала туморогенности опухоли; уменьшение количества или встречаемости раковых стволовых клеток в опухоли; дифференциация туморогенных клеток до нетуморогенного состояния; увеличение продолжительности периода без прогрессирования (PFS), периода ремиссии (DFS) или общей продолжительности жизни (OS), частоты полного ответа (CR), частичного ответа (PR), стабильное заболевание (SD), снижение скорости прогрессирования заболевания (PD), уменьшение времени до прогрессирования заболевания (ТТР), снижение уровня СА125 в случае рака яичника, или любую их комбинацию.
[0088] Профилактические или превентивные меры обозначают терапевтические меры, которые предупреждают и/или замедляют развитие целевого патологического состояния или расстройства. Таким образом, нуждающиеся в профилактических или превентивных мерах включают тех, кто склонен к возникновению расстройства, и тех, у кого расстройство должно быть предупреждено.
[0089] Термины «предварительная обработка» и «предварительное лечение» обозначают терапевтические меры, которые осуществляются до введения терапевтического средства анти-FOLR1. Например, как описано более подробно в данном документе, профилактическое средство, такое как стероид, может быть введено в пределах около недели, около пяти дней, около трех дней, около двух дней или около одного дня или за 24 часа до введения терапевтического средства анти-FOLR1. Профилактическое средство может также вводиться до введения терапевтического средства анти-FOLR1 в тот же день, что и терапевтическое средство против FOLR1.
[0090] Термин "максимальная концентрация (Смах) относится к максимальной концентрации препарата в крови, который измеряется после приема дозы препарата.
0-∞
0-24
0-168
[0091] Термин "площадь под фармакокинетической кривой" (AUC) относится к общему количество препарата в крови после приема дозы препарата. AUC может быть определена в течение определенного периода времени. Таким образом, например, AUC относится к общему количеству препарата в кровотоке в течение бесконечного периода времени после приема дозы препарата. Еще в одном примере AUC относится к общему количеству препарата в кровотоке в течение 24 часов после приема дозы препарата. Еще в одном примере AUC относится к общему количеству препарата в кровотоке в течение 168 часов (или 1 недели) после приема дозы препарата.
ss
[0092] "Кажущийся объем распределения в равновесном состоянии" (V) обозначает соотношение общего количества лекарственного вещества в организме к концентрации препарата в плазме, или "кажущийся" объем необходимый для включения всего объема препарата, если препарат на весь организм в той же концентрации, что и в плазме.
[0093] «Химиотерапевтический агент» представляет собой химическое соединение, пригодное для лечения рака, независимо от механизма действия. Химиотерапевтические агенты включают, например, антагонисты CD20, такие как Ритуксимаб и циклофосфамид, доксорубицин, винкристин, преднизон, флударабин, этопозид, метотрексат, леналидомид, хлорамбуцил, бентамустин и/или модифицированные версии таких химиотерапевтических средств.
[0094] Термины «полипептид», «пептид» и «белок» используются в данном документе равнозначно для обозначения аминокислотных полимеров любой длины. Полимер может быть линейным или разветвленным, он может содержать модифицированные аминокислоты, и он может прерываться аминокислотами. Термины также включают аминокислотный полимер, который модифицирован природным или искусственным образом; например, образованием дисульфидной связи, гликозилированием, липидированием, ацетилированием, фосфорилированием или любой другой манипуляцией или модификацией, такой как конъюгация с компонентом метки. Кроме того, в пределах определения находятся, например, полипептиды, содержащие один или несколько аналогов аминокислот (в том числе, например, неприродные аминокислоты и т.п.), а также другие модификации, известные в данной области техники. Необходимо понимать, что, поскольку полипептиды по данному изобретению базируются на антителах, в некоторых вариантах реализации изобретения полипептиды могут существовать, как одинарные цепи или связанные цепи.
[0095] Термины «идентичный» или процент «идентичности» в контексте двух или нескольких нуклеиновых кислот или полипептидов, обозначают две или больше последовательностей или субпоследовательностей, одинаковые или содержащие указанный процент нуклеотидов или остатков аминокислот, которые являются одинаковыми при сравнении и выравнивании (при необходимости, с введением гэпов) для максимального соответствия, не принимая во внимание никаких консервативных замен аминокислот как часть идентичности последовательностей. Процент идентичности может быть измерен с применением программного обеспечения для сравнения последовательностей или алгоритмов или при помощи визуальной проверки. В данной области техники известны различные алгоритмы и программное обеспечение, которые могут применять, чтобы достичь выравнивания последовательностей аминокислот или нуклеотидов. Одним из таких неограничивающих примеров алгоритма выравнивания последовательностей является алгоритм, описанный в Karlin et al., 1990, Proc. Natl. Acad. Sci., 87:2264-2268, модифицированный в Karlin et al., 1993, Proc. Natl. Acad. Sci., 90:5873-5877, и встроенный в программы NBLAST и XBLAST (Altschul et al., 1991, Nucleic Acids Res., 25:3389-3402). В некоторых вариантах реализации изобретения могут применять Gapped BLAST, как описано в Altschul et al., 1997, Nucleic Acids Res. 25:3389-3402. BLAST-2, WU-BLAST-2 (Altschul et al., 1996, Methods in Enzymology, 266:460-480), ALIGN, ALIGN-2 (Genentech, Южный Сан-Франциско, Калифорния) или Megalign (DNASTAR) представляют собой дополнительное, общедоступное программное обеспечение, которое могут применять для выравнивания последовательностей. В некоторых вариантах реализации изобретения процент идентичности между двумя нуклеотидными последовательностями определяют с применением программы GAP в программном обеспечении GCG (например, с использованием матрицы NWSgapdna. CMP, штрафа за открытие гэпа 40, 50, 60, 70 или 90 и штрафа за продолжение гэпа 1, 2, 3, 4, 5 или 6). В некоторых альтернативных вариантах реализации изобретения программу GAP в пакете программ GCG, в которую встроен алгоритм Needleman и Wunsch (J. Mol. Biol. (48):444-453 (1970)) могут применять для определения процента идентичности между двумя последовательностями аминокислот (например, с использованием матрицы Blossum 62 или матрицы РАМ250, штраф за открытие гэпа 16, 14, 12, 10, 8, 6 или 4 и штраф за продолжение гэпа 1, 2, 3, 4, 5). В качестве альтернативы, в некоторых вариантах реализации изобретения процент идентичности между последовательностями нуклеотидов или аминокислот определяют с применением алгоритма Myers и Miller (CABIOS, 4:11-17 (1989)). Например, процент идентичности может быть определен с применением программы ALIGN (версия 2.0), с использованием РАМ 120 с таблицей остатков, штрафа за продление гэпа 12 и штрафа за открытие гэпа 4. Подходящие параметры для максимального выравнивания конкретным программным обеспечением для выравнивания могут быть определены специалистом в данной области техники. В некоторых вариантах реализации изобретения применяются параметры, используемые по умолчанию программным обеспечением для выравнивания. В некоторых вариантах реализации изобретения процент идентичности «X» первой последовательности аминокислот второй последовательности аминокислот вычисляют как 100 × (Y/Z), где Y представляет собой количество остатков аминокислот, квалифицированных как идентичные совпадения при выравнивании первой и второй последовательностей (при выравнивании с визуальной проверкой или конкретной программой для выравнивания последовательностей), и Z представляет собой общее количество остатков во второй последовательности. Если длина первой последовательности больше, чем второй последовательности, процент идентичности первой последовательности второй последовательности будет длиннее, чем процент идентичности второй последовательности первой последовательности.
[0096] В качестве неограничивающего примера, наличие у любого конкретного полинуклеотида определенного процента идентичности последовательности (например, по меньшей мере на 80% идентичный, по меньшей мере на 85% идентичный, по меньшей мере на 90% идентичный, и в некоторых вариантах реализации изобретения по меньшей мере на 95%, 96%, 97%, 98% или 99% идентичный) референтной последовательности может, в некоторых вариантах реализации изобретения, быть определена с применением программы Bestfit (Wisconsin Sequence Analysis Package, Версия 8 для Unix, Genetics Computer Group, University Research Park, 575 Science Drive, Мэдисон, Висконсин 53711). В Bestfit применяется алгоритм локальной гомологии Smith и Waterman, Advances in Applied Mathematics 2: 482 489 (1981), для поиска наилучшего сегмента гомологии двух последовательностей. При применении Bestfit или любой другой программы для выравнивания последовательностей с целью определения, будет ли конкретная последовательность, например, на 95% идентична референтной последовательности согласно настоящему изобретению, параметры устанавливают таким образом, что процент идентичности вычисляют для полноразмерной референтной нуклеотидной последовательности, и что будут разрешены гэпы в гомологии до 5% от общего количества нуклеотидов в референтной последовательности.
[0097] В некоторых вариантах реализации изобретения две нуклеиновых кислоты или полипептида по изобретению в существенной мере идентичны, если они содержат по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, и в некоторых вариантах реализации изобретения по меньшей мере 95%, 96%, 97%, 98%, 99% идентичных нуклеотидов или остатков аминокислоты, при сравнении и выравнивании для максимального соответствия, по данным измерения с применением алгоритма сравнения последовательностей или визуальной проверки. Идентичность может присутствовать на участке последовательностей длиной по меньшей мере около 10, около 20, около 40-60 остатков, или любого целочисленного значения между ними, и может присутствовать на участке длиннее 60-80 остатков, например, по меньшей мере около 90-100 остатков, и в некоторых вариантах реализации изобретения, последовательности являются в существенной мере идентичными по всей длине сравниваемых последовательностей, например, таких как кодирующий участок нуклеотидной последовательности.
[0098] «Консервативная замена аминокислоты» представляет собой такую, при которой остаток одной аминокислоты заменяют остатком другой аминокислоты со сходной боковой цепью. Семейства остатков аминокислот со сходными боковыми цепями определены в данной области техники, включая основные боковые цепи (например, лизин, аргинин, гистидин), кислотные боковые цепи (например, аспарагиновая кислота, глютаминовая кислота), незаряженные полярные боковые цепи (например, глицин, аспарагин, глютамин, серии, треонин, тирозин, цистеин), неполярные боковые цепи (например, аланин, валин, лейцин, изолейцин, пролин, фенилаланин, метионин, триптофан), бета-разветвленные боковые цепи (например, треонин, валин, изолейцин) и ароматические боковые цепи (например, тирозин, фенилаланин, триптофан, гистидин). Например, замена фенилаланина тирозином представляет собой консервативную замену. В некоторых вариантах реализации изобретения, консервативные замены в последовательностях полипептидов и антител по изобретению не отменяют связывания полипептида или антитела, содержащего последовательность аминокислот, с антигеном(ами), т.е., FOLR1, с которым связывается полипептид или антитело. Способы идентификации консервативных замен нуклеотидов и аминокислот, которые не отменяют связывания с антигеном, хорошо известны в данной области техники (см., например, Brummell et al., Biochem. 32: 1180-1 187 (1993); Kobayashi et al. Protein Eng. 12(10):879-884 (1999); и Burks et al. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94:.412-417 (1997)).
[0099] Как использовано в данном документе и формуле изобретения, слова в единственном числе означают также и множественное число, если из контекста, очевидно, не следует иное.
[00100] Необходимо понимать, что во всех случаях, когда варианты реализации изобретения описаны в данном документе с помощью выражения «содержащий (включающий)», также предлагаются другие аналогичные варианты реализации изобретения, описанные в терминах «состоящий из» и/или «по существу состоящий из».
[00101] Термин «и/или», как используется в данном документе в таких фразах как «А и/или В», включает «А и В», «А или В» и «А» и «В». Кроме того, термин «и/или», как используется в таких фразах как «А, В и/или С» включает каждый из следующих вариантов: А, В и С; А, В или С; А или С; А или В; В или С; А и С; А и В; В и С; (только) А; (только) В; и (только) С.
II. FOLR1-связывающиеся агенты
[00102] В способах, описанных в данном документе, предлагаются способы введения агентов (например, антител или его фрагменты связывания с антигеном или полипептидов), которые специфично связываются с FOLR1 («FOLR1-связывающиеся агенты»). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающиеся агенты представляют собой антитела, иммуноконъюгаты или полипептиды. Последовательности аминокислот и нуклеотидов FOLR1 человека известны в данной области техники, а также приведены в данном документе как представленные SEQ ID NO: 1 и SEQ ID NO: 2. Таким образом, в некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающиеся агенты могут связываться с эпитопом найденных в пределах SEQ ID NO: 1.
[00103] Примеры терапевтически эффективных антител анти-FOLR1 могут быть найдены в публикации заявки США №2012/0009181, которая включена в данный документ посредством ссылки. Пример терапевтически эффективного антитела анти-FOLR1 представляет собой huMov19 (М9346А). Полипептиды SEQ ID NO: 3-5 содержат вариабельный домен тяжелой цепи huMov19 (М9346А) и вариабельный домен легкой цепи версии 1.00, вариабельный домен легкой цепи версии 1.60 huMov19, соответственно. В некоторых вариантах реализации изобретения антитело huMov19 анти-FOLR1 содержит вариабельный домен тяжелой цепи представленной в SEQ ID NO: 3 и вариабельный домен легкой цепи представленной в SEQ ID NO: 5 (версия 1.60 huMov19). В некоторых вариантах реализации изобретения антитело huMov19 (М9346А) кодируется плазмидами, депонированными 7 апреля 2010 года согласно условиям Будапештского договора в Американской коллекции типовых культур (АТСС), находящейся по адресу 10801 Университетский Бульвар, Манассас, Вирджиния 20110, под инвентарными номерами РТА-10772 и РТА-10773 или 10774. Примеры иммуноконъюгатов FOLR1, пригодных для терапевтических способов по настоящему изобретению, приведены ниже.
[00104] В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающиеся агенты представляют собой гуманизированные антитела или их фрагменты связывания с антигеном. В некоторых вариантах реализации изобретения гуманизированное антитело или фрагмент представляет собой антитело с модифицированной поверхностью или его фрагмент связывания с антигеном. В других вариантах реализации изобретения агент связывания с FOLR1 представляет собой полностью человеческое антитело или его фрагмент связывания с антигеном.
[00105] В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты вызывают один или несколько из следующих эффектов: индуцируют стабильное заболевание, подавляют пролиферацию опухолевых клеток, снижают туморогенность опухоли, уменьшают частоту встречаемости раковых стволовых клеток в опухоли, подавляют рост опухоли, увеличивают выживаемость, инициируют гибель клеток опухоли, дифференцируют туморогенные клетки до нетуморогенного состояния или предупреждают метастазирование опухолевых клеток.
[00106] В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающий агент является антителом, которое обладает свойством вызывать антителозависимую клеточную цитотоксичность (ADCC).
[00107] В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты способны уменьшать объем опухоли. Способность FOLR1-связывающего агента уменьшать объем опухоли можно оценить, например, путем измерения значения %Т/С, которое представляет собой медианный объем опухоли у субъектов, которых лечат, деленный на медианный объем опухоли у контрольных субъектов. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгаты или других агенты, которые специфично связываются с FOLR1 человека, инициируют гибель клеток посредством цитотоксического агента. Например, в некоторых вариантах реализации изобретения антитело к человеческому антителу FOLR1 конъюгировано с майтанзиноидом, который активизируется в клетках опухоли, экспрессирующих белок FOLR1, посредством интернализации. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты способны подавлять рост опухоли. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты способны подавлять рост опухоли in vivo (например, на мышиной модели ксенотрансплантата и/или у человека с раком).
[00108] FOLR1-связывающиеся молекулы могут быть антителами или фрагментами связывания с антигеном, специфично связывающимися с FOLR1, которые содержат CDR huMov19 (М9346А), содержащий до четырех (т.е. 0, 1, 2, 3 или 4) консервативных замен аминокислот на CDR, например, где антитела или фрагменты не содержат шести CDR мышиного Mov19 (т.е., SEQ ID NO: 6-9, 16 и 12). Полипептиды могут содержать одну из индивидуальных вариабельных легких цепей или вариабельных тяжелых цепей, описанных в данном документе. Антитела и полипептиды могут содержать как вариабельную легкую цепь, так и вариабельную тяжелую цепь.
[00109] В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающаяся молекула представляет собой антитело или фрагмент связывания с антигеном, содержащий последовательности SEQ ID NO: 6-10 и последовательность SEQ ID NO: 12. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающаяся молекула представляет собой антитело или фрагмент связывания с антигеном, содержащий последовательности SEQ ID NO: 6-9 и последовательности SEQ ID NO: 11 и 12.
[00110] Дополнительно предложены полипептиды, которые включают полипептид, обладающий по меньшей мере около 90% идентичностью последовательностей с SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 5. В некоторых вариантах реализации изобретения полипептид включает полипептид, обладающий по меньшей мере около 95%, по меньшей мере около 96%, по меньшей мере около 97%, по меньшей мере около 98% или по меньшей мере около 99% идентичностью последовательностей с SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 5. Таким образом, в некоторых вариантах реализации изобретения полипептид включает (а) полипептид, обладающий по меньшей мере около 95% идентичностью последовательностей с SEQ ID NO: 3, и/или (b) полипептид, обладающий по меньшей мере около 95% идентичностью последовательностей с SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 5. В некоторых вариантах реализации изобретения полипептид включает (а) полипептид, содержащий последовательность аминокислот SEQ ID NO: 3; и/или (b) полипептид, содержащий последовательность аминокислот SEQ ID NO: 4 или SEQ ID NO: 5. В некоторых вариантах реализации изобретения полипептид представляет собой антитело и/или полипептид, специфично связывающийся с FOLR1. В некоторых вариантах реализации изобретения полипептид представляет собой мышиное, химерное или гуманизированное антитело, которое специфично связывается с FOLR1. В некоторых вариантах реализации изобретения полипептид, обладающий определенным процентом идентичности последовательностей с SEQ ID №: 3, SEQ ID №: 4 или SEQ ID №: 5 отличается от SEQ ID №: 3, SEQ ID №: 4 или SEQ ID №: 5 только консервативными заменами аминокислот.
[00111] Полипептиды могут содержать одну из индивидуальных легких цепей или тяжелых цепей, описанных в данном документе. Антитела и полипептиды могут содержать как легкую цепь, так и тяжелую цепь.
[00112] Моноклональные антитела могут быть получены с применением способов гибридомы, таких как описаны Kohler и Milstein (1975) Nature 256:495. В случае применения способа гибридомы, мышь, хомяка или другое подходящее животное-хозяина иммунизируют, как изложено выше, чтобы вызвать выработку лимфоцитами антител, которые будут специфично связываться с иммунизирующим антигеном. Лимфоциты могут быть иммунизированы in vitro. После иммунизации, лимфоциты выделяют и осуществляют слияние с подходящей линией клеток миеломы с применением, например, полиэтиленгликоля, чтобы получить клетки гибридомы, которые в дальнейшем могут быть отделены от неслитых лимфоцитов и клеток миеломы. Гибридомы, которые продуцируют моноклональные антитела, специфично направленные против выбранного антигена, что определяется иммунопреципитацией, иммуноблоттингом или анализом связывания in vitro (например, радиоиммуноанализом (RIA); твердофазным иммуноферментным анализом (ELISA)), далее можно разводить в культуре in vitro с применением стандартных методов (Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, Academic Press, 1986) или in vivo как асцитные опухоли у животного. В дальнейшем моноклональные антитела могут быть очищены из питательной среды или асцитной жидкости, как описано для поликлональных антител выше.
[00113] В качестве альтернативы, моноклональные антитела могут быть получены с применением методов рекомбинации ДНК, как описано в патенте США 4816567. Полинуклеотиды, кодирующие моноклональное антитело, выделяют из зрелых В-клеток или клеток гибридомы, например, с помощью ОТ-ПЦР с применением олигонуклеотидных праймеров, которые специфично амплифицируют гены, кодирующие тяжелые и легкие цепи антитела, и их последовательность определяют с помощью обычных методик. Выделенные полинуклеотиды, кодирующие тяжелые и легкие цепи, далее клонируют в подходящие векторы экспрессии таким образом, что после трансфекции клеток-хозяев, таких как клетки Е. coli, обезьяньи клетки COS, клетки яичника китайского хомяка (СНО) или клетки миеломы, которые сами по себе не вырабатывают иммуноглобулинового белка, моноклональные антитела генерируются клетками-хозяевами. Кроме того, рекомбинантные моноклональные антитела или их фрагменты от желательных видов могут быть выделены из библиотек дисплея фага, экспрессирующих CDR желательных видов, как было описано (McCafferty et al., 1990, Nature, 348:552-554; Clackson et al., 1991, Nature, 352:624-628; и Marks et al., 1991, J. Mol. Biol., 222:581-597).
[00114] Полинуклеотид(ы), кодирующий(е) моноклональное антитело, может быть дополнительно модифицирован множеством различных способов с применением технологии рекомбинантной ДНК для создания альтернативных антител. В некоторых вариантах реализации изобретения константные домены легких и тяжелых цепей, например, мышиного моноклонального антитела, могут быть заменены 1) для таких участков, например, человеческого антитела, чтобы создать химерное антитело или 2) для неиммуноглобулинового полипептида, чтобы создать химерное антитело. В некоторых вариантах реализации изобретения константные участки укорачивают или удаляют, чтобы создать желательный фрагмент моноклонального антитела. Можно применять сайт-направленный мутагенез или мутагенез с высокой плотностью вариабельного участка, чтобы оптимизировать специфичность, аффинность и т.п. моноклонального антитела.
[00115] В некоторых вариантах реализации изобретения моноклональное антитело против человеческого FOLR1 представляет собой гуманизированное антитело. В некоторых вариантах реализации изобретения гуманизированное антитело представляет собой антитело с модифицированной поверхностью. В некоторых вариантах реализации изобретения такие антитела применяются терапевтически, с целью снижения антигенности и ответов в форме НАМА (человеческое анти-мышиное антитело) при введении субъекту-человеку. Гуманизированные антитела могут быть получены с применением различных методов, известных в данной области техники. В некоторых альтернативных вариантах реализации изобретения антитело к FOLR1 представляет собой человеческое антитело.
[00116] Человеческие антитела могут быть непосредственно получены с применением различных методов, известных в данной области техники. Могут быть получены иммортализованные В-лимфоциты человека, иммунизированные in vitro или выделенные от иммунизированного индивидуума, которые вырабатывают антитело, направленное против антигена-мишени (см., например, Cole et al., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p. 77 (1985); Boemer et al., 1991, J. Immunol., 147 (1):86-95; и патент США 5750373). Кроме того, человеческое антитело может быть выбрано из библиотеки фага, где такая библиотека фага экспрессирует человеческие антитела, как описано, например, в Vaughan и др., 1996, Nat. Biotech., 14:309-314, Sheets и др., 1998, Proc. Nat'l. Acad. Sci., 95:6157-6162, Hoogenboom and Winter, 1991, J. Mol. Biol., 227:381, nMarks et al., 1991, J. Mol. Biol., 222:581). Дополнительно, способы создания и применения фаговых библиотек антител описаны в патентах США №5969108, 6172197, 5885793, 6521404; 6544731; 6555313; 6582915; 6593081; 6300064; 6653068; 6706484; и 7264963; и Rothe и др., 2007, J. Mol. Bio., doi: 10.1016/j.jmb.2007.12.018 (каждый из которых включен посредством ссылки в полном объеме). Стратегии дозревания аффинности и стратегии перетасовок цепей (Marks et al., 1992, Bio/Technology 10:779-783, включена посредством ссылки в полном объеме) известны в данной области техники и могут применяться для создания человеческих антител с высокой аффинностью.
[00117] Гуманизированные антитела могут быть получены у трансгенных мышей, несущих локус иммуноглобулина человека, которые способны после иммунизации вырабатывать полный спектр человеческих антител в отсутствие выработки эндогенного иммуноглобулина. Данный подход описан в патентах США 5545807; 5545806; 5569825; 5625126; 5633425; и 5661016.
[00118] Настоящее изобретение также включает антитела с двойной специфичностью, которые специфично распознают FOLR1. Антитела с двойной специфичностью представляет собой антитела, которые способны специфично распознавать и связываться по меньшей мере с двумя различными эпитопами. Различные эпитопы могут находиться в пределах одной и той же молекулы (например, одного и того же FOLR1) или на различных молекулах, таким образом, что оба из них, например, антитела могут специфично распознавать и связываться с FOLR1, а также, например, с 1) эффекторной молекулой на лейкоците, такой как рецептор Т-клеток (например CD3) или рецептор Fc (например CD64, CD32 или CD 16) или 2) цитотоксическим агентом, как подробно описано ниже.
[00119] Полипептиды по настоящему изобретению могут быть рекомбинантными полипептидами, природными полипептидами или синтетическими полипептидами, содержащими антитело анти-FOLR1 человека или его фрагмент.
[00120] Полипептиды и аналоги могут быть дополнительно модифицированы таким образом, чтобы содержать дополнительные химические фрагменты, в норме не являющиеся частью белка. Такие образующие производные фрагменты могут улучшить растворимость, биологический период полувыведения или абсорбцию белка. Кроме того, фрагменты могут уменьшить или исключить любые желательные побочные эффекты белков и т.п.Обзор таких фрагментов можно найти в REMINGTON'S PHARMACEUTICAL SCIENCES, 20th ed., Mack Publishing Co., Easton, PA (2000).
[00121] Способы известные в данной области техники для очистки антител и других белков, дополнительно включают, например, описанные в публикациях патентов США №2008/0312425, 2008/0177048 и 2009/0187005, каждая из которых, таким образом, включена в данный документ посредством ссылки в полном объеме.
III. Иммуноконъюгаты
[00122] Способы введения конъюгатов, содержащих антитела анти-FOLR1, фрагменты антител и их функциональные эквиваленты, как описано в данном документе, связанные или конъюгированные с лекарственным средством или пролекарством (также обозначенные в данном документе как иммуноконъюгаты) также описаны в данном документе. Подходящие лекарственные средства или пролекарства известны в данной области техники. Лекарственные средства или пролекарства могут быть цитотоксическими агентами. Цитотоксический агент, применяемый в цитотоксическом конъюгате по настоящему изобретению, может представлять собой любое соединение, которое приводит к гибели клетки или индуцирует гибель клетки или каким-либо способом уменьшает жизнеспособность клетки, и включает, например, майтанзиноиды и аналоги майтанзиноидов. Другие подходящие цитотоксические агенты представляют собой, например, бензодиазепины, таксолы, аналоги СС-1065 и СС-1065, дуокармицины и аналоги дуокармицина, энедиины, такие как калихеамицины, доластатин и аналоги доластатина, майтанзиноиды и ауристатины, производные томаймицина, производные лептомицина, метотрексат, цисплатин, карбоплатин, даунорубицин, доксорубицин, винкристин, винбластин, мелфалан, митомицин С, хлорамбуцил и морфолинодоксорубицин.
[00123] Такие конъюгаты можно получить с применением линкерной группы для соединения лекарственного средства или пролекарства с антителом или функциональным эквивалентом. Подходящие линкерные группы хорошо известны в данной области техники и включают, например, дисульфидные группы, тиоэфирные группы, кислото-лабильные группы, фотолабильные группы, пептидазо-лабильные группы и эстеразо-лабильные группы.
[00124] Лекарственное средство или пролекарство может, например, быть соединено с антителом анти-FOLR1 или его фрагментом посредством дисульфидной связи. Линкерная молекула или поперечно-сшивающий агент содержит реакционноспособную химическую группу, которая может реагировать с антителом анти-FOLR1 или его фрагментом. Реакционноспособные химические группы для реакции с агентом связывания с клеткой могут быть N-сукцинимидильными эфирами и N-сульфосукцинимидильными эфирами. Дополнительно линкерная молекула содержит реакционноспособную химическую группу, которая может быть дитиопиридильной группой и может реагировать с лекарственным средством с образованием дисульфидной связи. Линкерные молекулы включают, например, N-сукцинимидил-3-(2-пиридилтио)пропионат (SPDP) (см., например, Carlsson et al., Biochem. J., 173: 723-737 (1978)), N-сукцинимидил-4-(2-пиридилтио)-бутаноат (SPDB) (см., например, патент США №4563304), N-сукцинимидил-4-(2-пиридилтио)-2-сульфобутаноат (сульфо-SPDB) (см. Публикацию США №20090274713), N-сукцинимидил-4-(2-пиридилтио)-пентаноат (SPP) (см., например, регистрационный номер CAS 341498-08-6), 2-иминотиолан или ацетилянтарный ангидрид. Например, антитело или агент связывания с клеткой могут быть модифицированы с помощью поперечно-сшивающих реагентов, и полученное таким образом антитело или агент связывания с клеткой, содержащие свободные или защищенные тиольные группы, в дальнейшем вводят в реакцию с дисульфид- или тиол-содержащим майтанзиноидом для получения конъюгата. Конъюгат может быть очищен хроматографией, включая, но не ограничиваясь этим, ВЭЖХ, эксклюзионной, адсорбционной, ионообменной и аффинным захватом, диализом или фильтрацией с тангенциальным потоком.
2
2
n=1-14
[00125] В другом аспекте настоящего изобретения антитело анти-FOLR1 связано с цитотоксическим лекарственным средством посредством дисульфидной связи и полиэтиленгликолевого спейсера для увеличения активности, растворимости или эффективности иммуноконъюгата. Такие расщепляемые гидрофильные линкеры описаны в WO 2009/0134976. Дополнительное преимущество такого дизайна линкера состоит в желательном высоком соотношении мономера и минимальной агрегации конъюгата антитело-лекарственное средство. В данном аспекте конкретно включены конъюгаты агентов связывания с клеткой и лекарственных средств, соединенных посредством дисульфидной группы (-S-S-), несущей полиэтиленгликолевые спейсеры ((СНСНО)) с узким интервалом нагрузки лекарственным средством 2-8, которые описаны как демонстрирующие высокую биологическую активность в отношении раковых клеток и обладающие желательными биохимическими свойствами высокого выхода конъюгата и высокого соотношения мономера с минимальной агрегацией белка.
[00126] Дополнительно можно получить конъюгат антитела-майтанзиноида с нерасщепляемыми линкерами. Такие сшивающие агенты описаны в данной области техники (см. Публикацию США №20050169933) и включают, но не ограничиваясь этим, N-сукцинимидил-4-(малеинимидометил)-циклогексанкарбоксилат (SMCC). В некоторых вариантах реализации изобретения антитело модифицируют с помощью поперечно-сшивающих реагентов, таких как сукцинимидил-4-(N-малеинимидометил)-циклогексан-1-карбоксилат (SMCC), сульфо-SMCC, малеинимидобензоил-N-гидроксисукцинимидный эфир (MBS), сульфо-MBS или сукцинимидил-йодацетат, как описано в литературе, чтобы ввести 1-10 реакционноспособных групп (Yoshitake et al., Eur. J. Biochem., 101:395-399 (1979); Hashida et al., J. Applied Biochem., 56-63 (1984); и Liu et al., Biochem., 18:690-697 (1979)). Далее модифицированное антитело вводят в реакцию с тиол-содержащим производным майтанзиноида, чтобы получить конъюгат. Конъюгат может быть очищен гель-фильтрацией сквозь колонку Sephadex G25 или диализом или фильтрацией с тангенциальным потоком. Модифицированные антитела обрабатывают тиол-содержащим майтанзиноидом (1-2 молярных эквивалента/малеинимидогруппу) и конъюгат антитела-майтанзиноида очищают гель-фильтрацией сквозь колонку Sephadex G-25, хроматографией на керамической гидроксиапатитной колонке, диализом или фильтрацией с тангенциальным потоком или комбинацией таких способов. Обычно, в среднем с антителом связано 1-10 майтанзиноидов. Один из способов состоит в модификации антител сукцинимидил-4-(N-малеинимидометил)-циклогексан-1-карбоксилатом (SMCC), чтобы ввести малеинимидогруппы, с последующим введением модифицированного антитела в реакцию с тиол-содержащим майтанзиноидом, чтобы получить тиоэфир-связанный конъюгат. Вновь образуются конъюгаты, содержащие 1-10 молекул лекарственного средства на антитело. Конъюгаты майтанзиноидов и антител, фрагментов антител и другие белки получают таким же образом.
1
2
2
n
p
[00127] В другом аспекте изобретения, антитело анти- FOLR1 связано с лекарственным средством посредством нерасщепляемой связи через промежуточный ПЭГ спейсер. Подходящие поперечно-сшивающие реагенты, содержащие гидрофильные цепи ПЭГ, которые образуют линкеры между лекарственным средством и антителом анти-FOLR1 или фрагментом также хорошо известны в данной области техники или коммерчески доступны (например от Quanta Biodesign, Пауэлл, Огайо). Кроме того, подходящие ПЭГ-содержащие сшивающие агенты могут быть синтезированы собственно из коммерчески доступных ПЭГ с применением стандартных методов химического синтеза, известных специалисту в данной области техники. Лекарственные средства могут быть ведены в реакцию с ПЭГ-содержащими бифункциональными сшивающими агентами, с получением соединений следующей формулы, Z-X-(-CH-CH-O-)-Y-D, способами, подробно описанными в публикации патента США 20090274713 и WO 2009/0134976, которые в дальнейшем могут быть введены в реакцию с агентом связывания с клеткой для получения конъюгата. В качестве альтернативы, связывание с клеткой может быть модифицировано с помощью бифункционального ПЭГ-сшивающего агента, чтобы ввести группу, способную реагировать с тиолом (такую как малеинимид или галогенацетамид), которую в дальнейшем можно обработать тиол-содержащим майтанзиноидом, чтобы получить конъюгат. В другом способе связывание с клеткой может быть модифицировано с помощью бифункционального ПЭГ-сшивающего агента, чтобы ввести тиольный фрагмент, который в дальнейшем можно обработать майтанзиноидом, способным реагировать с тиолом (таким как майтанзиноид, несущий малеинимид или галогенацетамид), чтобы получить конъюгат.
[00128] Примеры подходящих ПЭГ-содержащих линкеров включают линкеры, содержащие фрагмент N-сукцинимидильного эфира или N-сульфосукцинимидильного эфира для реакции с антителом анти-FOLR1 или его фрагментом, а также фрагмент на основе малеинимидо- или галогенацетила для реакции с соединением. ПЭГ спейсер может быть введен в любой сшивающий агент, известный в данной области техники, способами, описанными в данном документе.
[00129] В некоторых вариантах реализации изобретения линкер представляет собой линкер, содержащий по меньшей мере одну заряженную группу, как описано, например, в Публикации патента США №2012/0282282, содержание которой включено в данный документ посредством ссылки в полном объеме. В некоторых вариантах реализации изобретения заряженные или про-заряженные сшивающие агенты представляют собой агенты, содержащие сульфонатные, фосфатные, карбоксильные или четвертичные аминные заместители, которые существенно увеличивают растворимость модифицированного агента связывания с клеткой и конъюгатов агента связывания с клеткой-лекарственного средства, особенно для конъюгатов моноклонального антитела-лекарственного средства с 2-20 связанными молекулами лекарственного средства/антитела. Конъюгаты получают на основе линкеров, содержащих прозаряженный фрагмент, который дает один или несколько заряженных фрагментов после метаболизации конъюгата в клетке. В некоторых вариантах реализации изобретения линкер выбран из группы, состоящей из: N-сукцинимидил 4-(2-пиридилтио)-2-сульфопентаноата (сульфо-SPP) и N-сукцинимидил-4-(2-пиридилтио)-2-сульфобутаноата (сульфо-SPDB).
[00130] Многие из линкеров, описанных в данном документе, подробно описаны в публикациях патентов США №2005/0169933, 2009/0274713 и 2012/0282282, и в WO 2009/0134976; содержание которых включено в данный документ в полном объеме посредством ссылки.
[00131] Настоящее изобретение включает аспекты, в которых от около 2 до около 8 молекул лекарственного средства («нагрузка лекарственным средством»), например, майтанзиноида, связаны с антителом анти-FOLR1 или его фрагментом. «Нагрузка лекарственным средством», как используется в данном документе, обозначает количество молекул лекарственного средства (например, майтанзиноида), которые могут быть присоединены к агенту связывания с клеткой (например, антителу анти-FOLR1 или его фрагменту). В одном аспекте количество молекул лекарственного средства, которые могут быть присоединены к агенту связывания с клеткой, может в среднем составлять от около 2 до около 8 (например, 1,9, 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 2,6, 2,7, 2,8, 2,9, 3,0, 3,1, 3,2, 3,3, 3,4, 3,5, 3,6, 3,7, 3,8, 3,9, 4,0, 4,1, 4,2, 4,3, 4,4, 4,5, 4,6, 4,7, 4,8, 4,9, 5,0, 5,1, 5,2, 5,3, 5,4, 5,5, 5,6, 5,7, 5,8, 5,9, 6,0, 6,1, 6,2, 6,3, 6,4, 6,5, 6,6, 6,7, 6,8, 6,9, 7,0, 7,1, 7,2, 7,3, 7,4, 7,5, 7,6, 7,7, 7,8, 7,9, 8,0, 8,1). Можно применять N2'-дезацетил-N2'-(3-меркапто-1-оксопропил)-майтанзин (DM1) и N2'-дезацетил-N2'-(4-меркапто-4-метил-1-оксопентил)-майтанзин (DM4).
[00132] Таким образом, в одном аспекте иммуноконъюгат содержит 1 майтанзиноид на антитело. В другом аспекте иммуноконъюгат содержит 2 майтанзиноида на антитело. В другом аспекте иммуноконъюгат содержит 3 майтанзиноидов на антитело. В другом аспекте иммуноконъюгат содержит 4 майтанзиноидов на антитело. В другом аспекте иммуноконъюгат содержит 5 майтанзиноидов на антитело. В другом аспекте иммуноконъюгат содержит 6 майтанзиноидов на антитело. В другом аспекте иммуноконъюгат содержит 7 майтанзиноидов на антитело. В другом аспекте иммуноконъюгат содержит 8 майтанзиноидов на антитело.
[00133] В одном аспекте иммуноконъюгат содержит от около 1 до около 8 майтанзиноидов на антитело. В другом аспекте иммуноконъюгат содержит от около 2 до около 7 майтанзиноидов на антитело. В другом аспекте иммуноконъюгат содержит от около 2 до около 6 майтанзиноидов на антитело. В другом аспекте иммуноконъюгат содержит от около 2 до около 5 майтанзиноидов на антитело. В другом аспекте иммуноконъюгат содержит от около 3 до около 5 майтанзиноидов на антитело. В другом аспекте иммуноконъюгат содержит от около 3 до около 4 майтанзиноидов на антитело.
[00134] В одном аспекте композиция, содержащая иммуноконъюгаты, содержит в среднем от около 2 до около 8 (например, 1,9, 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 2,6, 2,7, 2,8, 2,9, 3,0, 3,1, 3,2, 3,3, 3,4, 3,5, 3,6, 3,7, 3,8, 3,9, 4,0, 4,1, 4,2, 4,3, 4,4, 4,5, 4,6, 4,7, 4,8, 4,9, 5,0, 5,1, 5,2, 5,3, 5,4, 5,5, 5,6, 5,7, 5,8, 5,9, 6,0, 6,1, 6,2, 6,3, 6,4, 6,5, 6,6, 6,7, 6,8, 6,9, 7,0, 7,1, 7,2, 7,3, 7,4, 7,5, 7,6, 7,7, 7,8, 7,9, 8,0, 8,1) присоединенных молекул лекарственного средства (например, майтанзиноидов) на антитело. В одном аспекте композиция, содержащая иммуноконъюгаты, содержит в среднем от около 1 до около 8 молекул лекарственного средства (например, майтанзиноидов) на антитело. В одном аспекте композиция, содержащая иммуноконъюгаты, содержит в среднем от около 2 до около 7 молекул лекарственного средства (например, майтанзиноидов) на антитело. В одном аспекте, композиция, содержащая иммуноконъюгаты, содержит в среднем от около 2 до около 6 молекул лекарственного средства (например, майтанзиноидов) на антитело. В одном аспекте, композиция, содержащая иммуноконъюгаты, содержит в среднем от около 2 до около 5 молекул лекарственного средства (например, майтанзиноидов) на антитело. В одном аспекте, композиция, содержащая иммуноконъюгаты, содержит в среднем от около 3 до около 5 молекул лекарственного средства (например, майтанзиноидов) на антитело. В одном аспекте, композиция, содержащая иммуноконъюгаты, содержит в среднем от около 3 до около 4 молекул лекарственного средства (например, майтанзиноидов) на антитело.
[00135] В одном аспекте композиция, содержащая иммуноконъюгаты, содержит в среднем около 2±0,5, около 3±0,5, около 4±0,5, около 5±0,5, около 6±0,5, около 7±0,5 или около 8±0,5 присоединенных молекул лекарственного средства (например, майтанзиноидов) на антитело. В одном аспекте композиция, содержащая иммуноконъюгаты, содержит в среднем от около 3,5±0,5 молекул лекарственного средства (например, майтанзиноидов) на антитело.
[00136] Антитело анти-FOLR1 или его фрагмент могут быть модифицированы введением в реакцию бифункционального поперечно-сшивающего реагента с антителом анти-FOLR1 или его фрагментом, обеспечивая, таким образом, ковалентное присоединение молекулы линкера к антителу анти-FOLR1 или его фрагменту. Как использовано в данном документе, «бифункциональный поперечно-сшивающий реагент» представляет собой любой химический фрагмент, который ковалентно связывает агент связывания с клеткой и лекарственное средство, такое как лекарственные средства, описанные в данном документе. В другом способе часть линкерного фрагмента обеспечивается лекарственным средством. В таком случае, лекарственное средство содержит линкерный фрагмент, который является частью большей молекулы линкера, применяемой для соединения агента связывания с клеткой с лекарственным средством. Например, для получения майтанзиноида DM1, боковую цепь в гидроксильной группе С-3 майтанзина модифицируют таким образом, чтобы она содержала свободную сульфгидрильную группу (SH). Данная тиолированная форма майтанзина может быть введена в реакцию с модифицированным агентом связывания клетки с получением конъюгата. Таким образом, происходит сборка конечного линкера из двух компонентов, один из которых предоставляет поперечно-сшивающий реагент, в то время как другой предоставляется боковой цепью DM1.
[00137] Кроме того, молекулы лекарственного средства могут быть связаны с молекулами антитела с помощью промежуточной молекулы носителя, такого как альбумин сыворотки.
[00138] Как использовано в данном документе, выражение «связанный с агентом связывания клетки» или «связанный с антителом анти-FOLR1 или фрагментом» обозначает молекулу конъюгата, содержащую по меньшей мере одно производное лекарственного средства, связанное с агентом связывания клетки антителом анти-FOLR1 или фрагментом через подходящую линкерную группу, или его прекурсор. Приведенные в качестве примера линкерные группы представляют собой SPDB или сульфо-SPDB.
[00139] В некоторых вариантах реализации изобретения цитотоксические агенты, применяемые в соответствии с настоящим изобретением, представляют собой майтанзиноиды и аналоги майтанзиноидов. Примеры подходящих майтанзиноидов включают эфиры майтанзинола и аналогов майтанзинола. Включены любые лекарственные средства, которые подавляют образование микротрубочек и которые в высокой степени токсичны для клеток млекопитающих, как майтанзинол и аналоги майтанзинола.
[00140] Примеры подходящих эфиров майтанзинола включают содержащие модифицированное ароматическое кольцо и содержащие модификации в других положениях. Такие подходящие майтанзиноиды описаны в патентах США №4424219; 4256746; 4294757; 4307016; 4313946; 4315929; 4331598; 4361650; 4362663; 4364866; 4450254; 4322348; 4371533; 5208020; 5416064; 5475092; 5585499; 5846545; 6333410; 7276497 и 7473796.
2'
2'
[00141] В некотором варианте реализации изобретения в иммуноконъюгатах по изобретению применяют тиол-содержащий майтанзиноид (DM1), формально названный N-дезацетил-N-(3-меркапто-1-оксопропил)-майтанзином, в качестве цитотоксического агента. DM1 представлен следующей структурной формулой (I):
2'
2'
[00142] В другом варианте реализации изобретения в конъюгатах по настоящему изобретению применяют тиол-содержащий майтанзиноид, N-дезацетил-N (4-метил-4-меркапто-1-оксопентил)-майтанзин (например, DM4), в качестве цитотоксического агента. DM4 представлен следующей структурной формулой (II):
2'
2'
[00143] Другой майтанзиноид, содержащий боковую цепь, которая содержит стерически затрудненную тиольную связь, представляет собой N-дезацетил-N-(4-меркапто-1-оксопентил)-майтанзин (названный DM3), представленный следующей структурной формулой (III):
[00144] Каждый из майтанзиноидов, описанных в патентах США №5208020 и 7276497, дополнительно может применяться в конъюгате по настоящему изобретению. С учетом этого, полное описание 5208020 и 7276697 включено в данный документ посредством ссылки.
[00145] Много положений на майтанзиноид ах могут служить положением химической связи с линкерным фрагментом. Например, положение С-3, содержащее гидроксильную группу, положение С-14, модифицированное гидроксиметилом, положение С-15, модифицированное гидрокси, и положение С-20, содержащее гидроксигруппу, должны быть полезны. В некоторых вариантах реализации изобретения положение С-3 служит положением химической связи с линкерным фрагментом, и в некоторых конкретных вариантах реализации изобретения положение С-3 майтанзиноида служит положением химической связи с линкерным фрагментом.
[00146] Структурное представление некоторых конъюгатов приведено ниже:
[00147] Кроме того, в настоящее изобретение включены любые стереоизомеры и их смеси для любых соединений или конъюгатов, представленных любой из структур выше.
[00148] Несколько описаний получения таких конъюгатов антитела-майтанзиноида приведены в патентах США №6333410, 6441163, 6716821 и 7368565, каждый из которых включен в данный документ в полном объеме.
[00149] В общем, раствор антитела в водном буфере может быть инкубирован с молярным избытком майтанзиноидов, содержащих дисульфидный фрагмент, который несет реакционноспособную группу. Реакционную смесь можно погасить добавлением избытка амина (такого как этаноламин, таурин и т.п.). Далее конъюгат майтанзиноида-антитела может быть очищен гель-фильтрацией.
[00150] Количество молекул майтанзиноида, связанных с молекулой антитела, может быть определено спектрофотометрическим определением соотношения оптической плотности на длине волны 252 нм и 280 нм. Среднее количество молекул майтанзиноида/антитело может составлять, например, 1-10 или 2-5. Среднее количество молекул майтанзиноида/антитело может составлять, например, от около 3 до около 4. Среднее количество молекул майтанзиноида/антитело может составлять около 3,5.
[00151] Конъюгаты антител с майтанзиноидом или другими лекарственными средствами могут быть оценены на предмет их способности подавлять пролиферацию различных нежелательных клеточных линий in vitro. Например, клеточные линии, такие как линия клеток лимфомы человека Daudi и клеточная линия лимфомы человека Ramos могут с легкостью быть применены для оценки цитотоксичности таких соединений. Клетки, подлежащие оценке, могут быть подвергнуты воздействию соединений на протяжении 4-5 дней, и фракции выживших клеток измерены в ходе прямых анализов известными способами. Далее значения IC50 могут быть вычислены на основе результатов анализа.
[00152] Иммуноконъюгаты могут, согласно некоторым вариантам реализации изобретения, описанным в данном документе, поглощаются клетками. Таким образом, иммуноконъюгат может оказывать терапевтическое воздействие, если он захвачен или и поглощен FOLR1-экспрессирующей клеткой. В некоторых конкретных вариантах реализации изобретения иммуноконъюгат содержит антитело, фрагмент антитела или полипептид, соединенный с цитотоксическим агентом расщепляемым линкером, причем цитотоксический агент отщепляется от антитела, фрагмента антитела или полипептида после поглощения FOLR1-экспрессирующей клеткой.
[00153] В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгаты способны уменьшать объем опухоли. Например, в некоторых вариантах реализации изобретения лечение иммуноконъюгатом приводит к значению %Т/С, которое составляет менее чем около 50%, менее чем около 45%, менее чем около 40%, менее чем около 35%, менее чем около 30%, менее чем около 25%, менее чем около 20%, менее чем около 15%, менее чем около 10% или менее чем около 5%. В некоторых конкретных вариантах реализации изобретения иммуноконъюгаты могут уменьшать размер опухоли на модели ксенотрансплантата KB, OVCAR-3, IGROV-1 и/или OV-90. В некоторых вариантах реализации изобретения иммуноконъюгаты способны подавлять метастазы.
III. Способы введения FOLR1-связывающих агентов
[00154] FOLR1-связывающие агенты (в том числе антитела, иммуноконъюгаты и полипептиды) по изобретению пригодны для различных сфер применения, в том числе, но не ограничиваясь этим, терапевтических способов лечения, таких как лечение рака. В некоторых вариантах реализации изобретения агенты пригодны для подавления роста опухоли, индукции дифференциации, подавления метастазов, уменьшения объема опухоли и/или уменьшения туморигенности опухоли. Способы применения могут представлять собой способы in vivo.
[00155] Согласно способам, описанным в данном документе, FOLR1-связывающие агенты можно вводить в конкретных дозах. Например, FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) можно вводить в дозе от около 0,15 мг/кг до около 7 мг/кг, при этом кг массы тела приводят к идеальной массе тела (IBW), сухой массе тела (LBW), или скорректированной идеальной массе тела (ADJ или AIBW). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1 -связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят в дозе от около 3,0 мг/кг до около 6,0 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят в дозе от около 3,3 мг/кг до около 6,0 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1 -связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 0,15 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 0,5 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1 -связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 1,0 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1 -связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 1,1 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 1,5 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 1,8 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1 -связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 2,0 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 2,5 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 2,8 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 3,0 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 3,3 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 3,75 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 4,2 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 4,5 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1 -связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 4,8 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1 -связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 5,0 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 5,5 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 5,6 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1 -связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,0 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,1 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,2 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,3 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,4 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,5 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1 -связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,6 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,7 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,8 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,9 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 7,0 мг/кг, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения килограммы массы тела приводят к AIBW (ADJ).
[00156] Кроме того, FOLR1-связывающие агенты можно вводить в конкретном диапазоне доз. Например, FOLR1-связывающие агенты можно вводить от около четырех раз в неделю до около 1 раза в четыре недели. Таким образом, в некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты вводят 1 раз в три недели. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты вводят около 1 раза в две с половиной недели. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты вводят около 1 раза в две недели. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты вводят около 1 раза в десять дней. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты вводят около 1 раза в неделю.
[00157] FOLR1-связывающие агенты можно вводить в цикле длительностью около 3 недель (т.е. около 21 дня). Например, FOLR1-связывающие агенты можно вводить дважды в течение около 3 недель. Таким образом, в некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты можно вводить в дни около 1 и 8 21-дневного цикла. В других вариантах реализации изобретения FOLR1 -связывающие агенты можно вводить три раза в течение около 3 недель. Таким образом, в некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1 -связывающие агенты можно вводить в дни около 1, 8 и 15 21-дневного цикла.
[00158] FOLR1-связывающие агенты можно вводить в цикле длительностью около 4 недель (т.е. около 28 дней). Например, FOLR1-связывающие агенты можно вводить три раза на протяжении около 4 недель. Таким образом, в некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты можно вводить в дни около 1, 8 и 15 28-дневного цикла.
[00159] Согласно способам, описанным в данном документе, FOLR1-связывающие агенты можно вводить в конкретных дозах. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) могут вводить в дозе от около 0,15 мг/кг до около 7 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят в дозе от около 3,0 мг/кг до около 6,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят в дозе от около 3,3 мг/кг до около 6,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 0,15 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 0,5 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 1,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 1,1 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 1,5 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 1,8 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 2,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 2,5 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 2,8 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 3,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 3,3 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 3,75 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 4,2 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 4,5 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 4,8 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 5,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 5,5 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 5,6 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,1 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,2 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,3 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,4 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,5 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,6 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,7 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,8 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,9 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 7,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом.
[00160] В соответствии с описанными в данном документе способами, FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) можно вводить в дозе от около 0,15 мг/кг до около 7 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом кг массы тела приводят к идеальной массе тела (IBW), сухой массе тела (LBW), или скорректированной идеальной массе тела (ADJ или AIBW). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят в дозе от около 3,0 мг/кг до около 6,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят в дозе от около 3,3 мг/кг до около 6,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1 -связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят в дозе около 0,15 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 0,5 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 1,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 1,1 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 1,5 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 1,8 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 2,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 2,5 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 2,8 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 3,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 3,3 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 3,75 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 4,2 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 4,5 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 4,8 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 5,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 5,5 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 5,6 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,1 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,2 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,3 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,4 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,5 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,6 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,7 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,8 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 6,9 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты (например, EVIGN853) вводят около 7,0 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом, при этом килограммы массы тела приводят к IBW, LBW или AIBW (ADJ). В некоторых вариантах реализации изобретения килограммы массы тела приводят к AIBW (ADJ).
[00161] В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1 -связывающие агенты можно вводить в дозе, которая приводит к конкретной Cmax. Например, в некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты вводят в дозе, которая приводит к Cmax от около 110 до около 160 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты вводят в дозе, которая приводит к Cmax от около 110 до около 150 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты вводят в дозе, которая приводит к Cmax от около 110 до около 140 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1 -связывающие агенты вводят в дозе, которая приводит к Cmax от около 120 до около 160 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты вводят в дозе, которая приводит к Cmax от около 120 до около 150 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты вводят в дозе, которая приводит к Cmax от около 120 до около 140 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты вводят в дозе, которая приводит к Cmax от около 90 до около 160 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты вводят в дозе, которая приводит к Cmax от около 90 до около 150 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты вводят в дозе, которая приводит к Cmax от около 90 до около 140 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты вводят в дозе, которая приводит к Cmax от около 100 до около 160 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты вводят в дозе, которая приводит к Cmax от около 100 до около 150 мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты вводят в дозе, которая приводит к Cmax от около 100 до около 140 мкг/мл.
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
[00162] В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты можно вводить в дозе, которая приводит к конкретной AUC. Например, в некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты можно вводить в дозе, которая приводит к AUC не более чем 2785 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты можно вводить в дозе, которая приводит к AUC не более чем 2741 ч»мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающие агенты можно вводить в дозе, которая приводит к AUC не более чем 2700 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC около 1000-3500 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC около 1000-3000 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC около 1000-2785 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC около 1000-2741 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC около 1000-2700 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC около 1000-2500 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC не более чем 1500-3500 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC не более чем 1500-3000 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC не более чем 1500-2785 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC не более чем 1500-2741 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC не более чем 1500-2700 ч⋅мкг/мл. В некоторых вариантах реализации изобретения введение обеспечивает AUC около 1500-2500 ч⋅мкг/мл.
[00163] В определенных вариантах реализации изобретения заболевание, которое лечат FOLR1-связывающим агентом или антагонистом (например, антителом анти-FOLR1), представляет собой рак. В определенных вариантах реализации изобретения рак характеризуется экспрессирующими FOLR1 клетками, с которыми связывается FOLR1-связывающий агент (например, антитело). В определенных вариантах реализации изобретения опухоль чрезмерно экспрессирует человеческий FOLR1.
[00164] В настоящем изобретении предлагаются способы лечения рака, включающие введение терапевтически эффективного количества FOLR1-связывающего агента субъекту (например, субъекту, нуждающемуся в лечении). Виды рака, которые можно лечить способами, включенными в настоящее изобретение, включают, но не ограничиваясь этим, новообразования, опухоли, метастазы или любое заболевание или расстройство, характеризующееся неконтролируемым ростом клеток. Рак может быть первичным или метастатическим раком. Конкретные примеры видов рака, которые можно лечить способами, включенными в настоящее изобретение, включают, но не ограничиваясь этим, рак яичника, рак легкого, рак ободочной и прямой кишки, рак поджелудочной железы, рак печени, рак молочной железы, рак мозга, рак почки, рак предстательной железы, рак желудочно-кишечного тракта, меланому, рак шейки матки, рак мочевого пузыря, глиобластому и рак головы и шеи. В определенных вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак яичника. В определенных вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак эндометрия. В определенных вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак легкого. В определенных вариантах реализации изобретения рак представляет собой мелкоклеточный рак легкого. В определенных вариантах реализации изобретения немелкоклеточный рак легкого представляет собой аденокарциному легкого.
[00165] В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак, который экспрессирует FOLR1 (полипептид или нуклеиновую кислоту). В некоторых вариантах реализации изобретения FOLR1-связывающийся агент вводят пациенту с повышенным уровнем экспрессии FOLR1, например, как описано в опубликованной заявке США №2012/0282175 или Международной опубликованной заявке WO 2012/135675, обе из которых включены в данный документ посредством ссылки в полном объеме. Таким образом, в некоторых вариантах реализации изобретения экспрессию FOLR1 измеряют иммуногистохимически (IHC) с получением баллов интенсивности окрашивания и/или баллов однородности окрашивания в сравнении с контролем (например, откалиброванным контролем), демонстрирующим определенное количество баллов (например, балл интенсивности 3 присваивают исследуемому образцу, если интенсивность сравнима с уровнем 3 откалиброванного контроля, или интенсивность 2 присваивают исследуемому образцу, если интенсивность сравнима с уровнем 2 откалиброванного контроля). Однородность окрашивания, которая является неоднородным или однородным, также указывает на повышенную экспрессию FOLR1. Баллы интенсивности окрашивания и однородности окрашивания могут применяться отдельно или в комбинации (например, 2 гомо, 2 гетеро, 3 гомо, 3 гетеро и т.п.). В другом примере, повышение экспрессии FOLR1 может быть определено обнаружением увеличения по меньшей мере в 2 раза, по меньшей мере в 3 раза или по меньшей мере в 5 раз) относительно контрольных значений (например, уровня экспрессии в ткани или клетке субъекта, у которого рак отсутствует или присутствует рак, при котором значения FOLR1 не повышаются).
[00166] В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак, который экспрессирует FOLR1 на уровне 1 гетеро или выше по данным IHC. В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак, который экспрессирует FOLR1 на уровне 2 гетеро или выше по данным IHC. В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак, который экспрессирует FOLR1 на уровне 3 гетеро или выше по данным IHC. В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак легкого, который экспрессирует FOLR1 на уровне 2 гетеро или выше по данным IHC. В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак легкого, который экспрессирует FOLR1 на уровне 3 гетеро или выше по данным IHC. В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак яичника, который экспрессирует FOLR1 на уровне 2 гетеро или выше по данным IHC. В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак яичника, который экспрессирует FOLR1 на уровне 3 гетеро или выше по данным IHC. В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак эндометрия, который экспрессирует FOLR1 на уровне 1 гетеро или выше по данным IHC. В некоторых вариантах реализации изобретения рак представляет собой рак эндометрия, который экспрессирует FOLR1 на уровне 2 гетеро или выше по данным IHC.
[00167] В некоторых вариантах реализации изобретения способ подавления роста опухоли включает введение субъекту терапевтически эффективного количества FOLR1-связывающего агента. В некоторых вариантах реализации изобретения субъект является человеком. В некоторых вариантах реализации изобретения у субъекта присутствует опухоль или опухоль удалена.
[00168] Кроме того, в настоящем изобретении предлагается способ уменьшения туморогенности опухоли у субъекта, включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества FOLR1-связывающего агента. В некоторых вариантах реализации изобретения опухоль содержит раковые стволовые клетки. В некоторых вариантах реализации изобретения частоту встречаемости раковых стволовых клеток в опухоли уменьшают путем введения агента.
[00169] В настоящем изобретении дополнительно предлагаются фармацевтические композиции, содержащие один или несколько FOLR1-связывающих агентов, описанных в данном документе. В некоторых вариантах реализации изобретения фармацевтические композиции дополнительно содержат фармацевтически приемлемый носитель. Такие фармацевтические композиции находят применение для подавления роста опухоли и лечения рака у пациентов - людей.
[00170] В некоторых вариантах реализации изобретения составы готовят для хранения и применения, объединяя очищенное антитело или агент по настоящему изобретению с фармацевтически приемлемым носителем (например, носитель, вспомогательное вещество) (Remington, The Science and Practice of Pharmacy 20th Edition Mack Publishing, 2000). Подходящие фармацевтически приемлемые носители включают, но не ограничиваясь этим, нетоксичные буферные вещества, такие как фосфат, цитрат и другие органические кислоты; соли, такие как натрия хлорид; антиоксиданты, включая аскорбиновую кислоту и метионин; консерванты (например, октадецилдиметилбензил аммония хлорид; гексаметония хлорид; бензалкония хлорид; бензалкония хлорид; фенол, бутиловый или бензиловый спирт; алкилпарабены, такие как метил- или пропилпарабен; катехол; резорцинол; циклогексанол; 3-пентанол; и м-крезол); низкомолекулярные полипептиды (например, менее чем около 10 остатков аминокислот); белки, такие как альбумин сыворотки, желатин или иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, такие как поливинилпирролидон; аминокислоты, такие как глицин, глутамин, аспарагин, гистидин, аргинин или лизин; углеводы, такие как моносахариды, дисахариды, глюкоза, манноза или декстрины; хелатные агенты, такие как ЭДТА; сахара, такие как сахароза, маннит, трегалоза или сорбит; солеобразующие противоионы, такие как натрий; комплексы металлов (например, комплексы Zn-белка); и неионные поверхностно-активные вещества, такие как Tween или полиэтиленгликоль (ПЭГ).
[00171] Фармацевтические композиции, описанные в данном документе, можно вводить любым количеством способов, для местного или системного лечения. Применение может быть местным (например, на слизистые оболочки, включая вагинальное и ректальное введение), например, трансдермальные пластыри, мази, лосьоны, кремы, гели, капли, суппозитории, спреи, жидкости и порошки; ингаляционный (например, ингаляцией или инсуффляцией порошков или аэрозолей, в том числе, с помощью небулайзера; интратрахеально, интраназально, эпидермально и трансдермально); пероральным; или парентеральным, включая внутривенную, внутриартериальную, подкожную, внутрибрюшинную или внутримышечную инъекцию или инфузию; или интракраниальным (например, интратекальным или внутрижелудочковым) введением. В некоторых конкретных вариантах реализации изобретения введение производят внутривенно.
[00172] Антитело или иммуноконъюгат может быть объединено в фармацевтическом комбинированном составе или схеме введения, в форме комбинированной терапии, со вторым соединением. В некоторых вариантах реализации изобретения второе соединение представляет собой стероид. В некоторых вариантах реализации изобретения способы включают введение стероида и иммуноконъюгата, что приводит к уменьшению головных болей по сравнению с введением только иммуноконъюгата.
[00173] Стероид можно вводить одновременно с иммуноконъюгатом, до введения иммуноконъюгата и/или после введения иммуноконъюгата. В некоторых вариантах реализации изобретения стероид вводят в пределах около недели, около пяти дней, около трех дней, около двух дней или около одного дня или за 24 часа до введения иммуноконъюгата. В некоторых вариантах реализации изобретения стероид вводят в пределах одного дня от введения иммуноконъюгата. В некоторых вариантах реализации изобретения стероид вводят несколько раз. В некоторых вариантах реализации изобретения стероид вводят от около одного дня до введения иммуноконъюгата и в тот же день, что и иммуноконъюгат. Стероид можно вводить любым количеством способов, включая, например, местное применение, ингаляционное, пероральное, парентеральное или интракраниальное введение. В некоторых вариантах реализации изобретения введение осуществляют перорально. В некоторых вариантах реализации изобретения введение осуществляют внутривенно. В некоторых вариантах реализации изобретения введение осуществляют как перорально, так и внутривенно.
[00174] Дополнительно, антитело или иммуноконъюгат может быть объединено в фармацевтическом комбинированном составе или схеме введения, в форме комбинированной терапии, с анальгетиком или другими терапевтическими средствами, которые предупреждают или лечат головные боли. Например, ацетаминофин и/или дефенгидрамин можно вводить в дополнение к введению антитела или иммуноконъюгата. Анальгетик можно вводить одновременно или после введения иммуноконъюгата, и это может быть осуществлено любым подходящим способом введения. В некоторых вариантах реализации изобретения болеутоляющее средство вводят перорально.
[00175] В некоторых вариантах реализации изобретения способы включают введение первого соединения, которое является антителом или иммуноконъюгатом, второго соединения, которое является стероидом, и третьего соединения, которое является анальгетиком. В некоторых вариантах реализации изобретения способы включают введение первого соединения, которое представляет собой IMGN388, второго соединения, которое представляет собой дексаметазон, и третьего соединения, которое представляет собой ацетаминофин и/или дифенгидрамин.
[00176] Антитело или иммуноконъюгат может быть объединено в фармацевтическом комбинированном составе или схеме введения, в форме комбинированной терапии, со вторым соединением, обладающим противораковыми свойствами. Второе соединение в фармацевтическом комбинированном составе или схеме введения может обладать дополняющей активностью к ADC комбинации таким образом, что они не оказывают неблагоприятного воздействия друг на друга. Дополнительно предложены фармацевтические композиции, содержащие FOLR1-связывающий агент и второй противораковый агент.
[00177]
***
[00178] Варианты реализации изобретения в соответствии с данным документом могут быть дополнительно определены со ссылкой на следующие неограничивающие примеры, в которых подробно описано получение некоторых антител по настоящему изобретению и способов применения антител по настоящему изобретению. Для специалистов в данной области техники будет очевидным, что множество модификаций материалов и способов может быть осуществлено без выхода за рамки объема настоящего изобретения.
Примеры
[00179] Необходимо понимать, что примеры и варианты реализации изобретения, описанные в данном документе, предназначены только для иллюстративных целей, и что различные модификации или изменения в свете этого будут предложены специалистами в данной области техники, и их следует рассматривать как находящиеся в пределах объема настоящего изобретения.
Пример 1
Испытание дозы IMGN853 у пациентов-людей с раком.
[00180] EVIGN853 представляет собой конъюгат антитела-лекарственного средства (ADC), содержащий связывающееся с рецептором фолиевой кислоты 1 (FOLR1) антитело и высокоактивный майтанзиноид, DM4. EVIGN853 ранее был описан в Международных опубликованных заявках WO 2011/106528, WO 2012/135675 и WO 2012/138749, и опубликованных заявках США №2012/0009181, 2012/0282175 и 2012/0282282, каждая из которых включена в данный документ посредством ссылки в полном объеме. FMGN853 представляет собой huMov19-sSPDB-DM4, причем антитело huMov19 содержит вариабельную тяжелую цепь с последовательностью аминокислот SEQ Ш №: 3 и вариабельную легкую цепь с последовательностью аминокислот SEQ ID NO: 5. Белок FOLR1 экспрессируется с повышенными уровнями на многих солидных опухолях, особенно эпителиальном раке яичника (ЕОС), раке эндометрия, немелкоклеточном раке легкого (NSCLC) и светлоклеточном раке почки.
[00181] Было инициировано исследование для определения максимальной переносимой дозы (MTD) и рекомендованных доз фазы 2 (RP2D), а также оценки безопасности, фармакокинетики (PK), фармакодинамики (PD) и эффективности FMGN853. Исследование включало два компонента: компонент ускоренного титрования дозы, в соответствии с которым иммуноконъюгат EVIGN853 вводили пациентам с любым видом FOLR1-экспрессирующих рефрактерных солидных опухолей, включая эпителиальный рак яичника (ЕОС) и другие FOLR1-экспрессирующие солидные опухоли, а также компонент терапии препаратом в дозе, достигнутой во время фазы повышения дозы препарата до максимально переносимой.
[00182] В части исследования, касающейся ускоренного титрования, EVIGN853 вводили внутривенно (IV) в 1-й день каждого 21-дневного цикла (3 недели). Двадцать девять пациентов были включены в исследование для получения семи уровней доз, варьирующих от 0,15 до 7,0 мг/кг EVIGN85 в ускоренной части клинического исследования лекарственных препаратов и надежных данных, доступных в настоящее время для 23 пациентов. Отсутствуют исследования нежелательных эффектов, связанных с лекарственными средствами любой степени у первых 4 групп пациентов. Нежелательные явления, связанные с EVIGN853 в дозе 5,0 мг/кг, были от легких до умеренных. В дозах по 5,0 и 7,0 мг/кг у4из10иу5из5 пациентов, соответственно, отмечена офтальмологическая токсичность.
[00183] Площадь под фармакокинетической кривой лекарственного средства был измерена у 23 пациентов, и найдено, что, в общем, она увеличивается линейно, с периодом полувыведения при дозах ≥ 2,0 мг/кг около 5 дней. Один пациент с серозным раком эндометрия также имел СА125 ответ и неподтвержденный частичный ответ на 5 мг/кг. У трех пациентов с раком яичника зарегистрирован подтвержденный ответ СА125 (по одному при дозах в 7 мг/кг, 5 мг/кг и один на 3,3 мг/кг). Пациенты, получавшие EVIGN853 в дозах, превышающих или равных 5,0 мг/кг, получали дексаметазон, 10 мг в/в (или эквивалент подобного стероида), за 30-60 минут до введения иммуноконъюгата анти-FOLR1 (например, IMGN853).
[00184] Фармакокинетические (РК) параметры приведены для Цикла 1 (только первый цикл введения для каждого пациента) испытания IMGN853 Фазы 1 (Фигуры 1А и Б). Показано, что клиренс IMGN853 быстрый при низких дозах (CL = 1,1 мл/час/кг) с периодом полувыведения около 35,4 часов или 1,5 дня. Клиренс снижается (CL = 0,4 мл/час/кг) при более высоких дозах, и при дозах ≥ 2,0 мг/кг период полувыведения возрастает до около 4 дней или около 5 дней. Показано, что площадь под фармакокинетической кривой (AUC) и Cmax при более высоких дозах, в общем, также возрастают.
[00185] Для дозы 7,0 мг/кг, у всех 5 пациентов возникла офтальмологическая токсичность. У одного пациента зарегистрирован дозолимитирующий точечный кератит 3 степени и помутнение зрения 2 степени, которые рассматриваются как определенно связанные с исследуемым лечением. Дополнительно, зарегистрировано помутнение зрения 3 степени, 2 степени и 1 степени, по 1 пациенту для каждого; все случаи рассматриваются как возможно или определенно связанные с лечением IMGN853. В результате, считалось, что максимальная переносимая доза при такой схеме введения (т.е., 1 раз в три недели) превышена на уровне дозы 7,0 мг/кг, и для всех пациентов, которые получали дозу в 7,0 мг/кг, доза была снижена до предыдущего уровня (5,0 мг/кг) и 7 других пациентов оценивали при дозе в 5 мг/кг. Вместе с 3-мя пациентами, которых лечили ранее, 10 пациентов получали лечение в дозе 5 мг/кг. В общей сложности из 10 пациентов с уровнем дозы в 5 мг/кг, 3 имели нечеткое зрение, включая 1 пациента с 3 степенью помутнения зрения, и у 2 больных отмечали изменения роговицы. Другие сопутствующие нежелательные явления 3 степени включали повышенную щелочную фосфатазу и 3 степень гипофосфатемии. Другие пациенты включены в исследование дозы на уровне в 3,3 мг/кг, чтобы дополнительно подтвердить профиль безопасности, наблюдаемый у 3 пациентов, которым первоначально назначили эту дозы. Анализ безопасности других 6 пациентов, у которых в настоящее время продолжается лечение в дозах 3,3 мг/кг, a IMGN853 хорошо переносится. На сегодняшний день у трех из девяти пациентов, прошедших лечение в дозах в 3,3 мг/кг было отмечены нежелательные явления, связанные с IMGN853, включая 2 степень периферической невропатии (1 пациент), 2 степень тошноты, утомления и повышения ACT (1 пациент), и 1 пациент со 2 степенью рвоты.
[00186] Как только будет определена MTD, исследование перейдет в фазу терапии препаратом в дозе, достигнутой во время фазы повышения дозы препарата до максимально переносимой. В трех группах терапии препаратом в дозе, достигнутой во время фазы повышения дозы препарата до максимально переносимой, будут оценены пациенты с FOLR1-белок положительным (1) резистентным к платине эпителиальным раком яичника; (2) рецидивирующим или рефрактерным эпителиальным раком яичника, и (3) рецидивирующим или рефрактерным немелкоклеточным раком легкого (NSCLC). Группы 2 и 3 будут включать оценку IMGN853 PD путем биопсии опухоли перед и после введения дозы и/или визуализации FLT-PET, соответственно. IMGN853 будут вводить в дозе по меньшей мере 3,3 мг/кг и, возможно, будут включены дозы 5,0 мг/кг, или даже такая высокая доза, как 6,0 мг/кг или даже 7,0 мг/кг. Изначально IMGN853 следует вводить со скоростью 1 мг/мин; через 30 минут скорость может быть увеличена до 3 мг/мин, при условии хорошей переносимости. В случае хорошей переносимости, через 30 минут введения со скоростью 3 мг/мин, скорость может быть увеличена до 5 мг/мин. Последующие инфузии можно проводить с переносимой скоростью.
[00187] Для всех доз IMGN853 на уровне 3,3 мг/кг или выше, будет включено профилактическое лечение стероидом с использованием протоколов, описанных в примере 2 (например, требуется включить лечение стероидом в дозе 10 мг дексаметазона в/в (или эквивалент подобного стероида) за 30-60 минут до введения IMGN853, и рекомендуется профилактическое введение дифенгидрамина HCl и ацетаминофена до введения IMGN853). Циклы повторяют до тех пор, пока (i) заболевание пациента не ухудшится, (ii) у пациента не возникнет неприемлемая токсичность, (iii) пациент не отзовет свое согласие, (iv) у пациента не возникнет сопутствующее заболевание, которое помешает дальнейшему проведению исследуемого лечения, или (v) участие пациента в исследовании не будет прекращено из-за несоблюдения предписаний врача или по административным причинам.
[00188] Ответ оценивают, используя критерии RECIST и Международной интергруппы гинекологического рака (GCIG) (в зависимости от конкретного случая).
Пример 2
Профилактика инфузионной реакции на IMGN853 на основе стероида
[00189] Для того, чтобы уменьшить вероятность инфузионной реакции, может применяться любой из следующих протоколов профилактики на основе стероида.
[00190] (1) Пациенты получают дексаметазон, 10 мг в/в (или эквивалент подобного стероида), за 30-60 минут до введения иммуноконъюгата анти-FOLR1 (например, FMGN853).
[00191] (2) Пациенты получают дексаметазон, 10 мг в/в (или эквивалент подобного стероида) и дифенгидрамина НС1 (25-50 мг в/в или п/о), с ацетаминофеном (325-650 мг в/в или п/о) или без него, за 30-60 минут до введения иммуноконъюгата против FOLR1 (например, FMGN853). Данный профилактический протокол рекомендован и остается на усмотрение каждого исследователя.
[00192] (3) Пациенты получают 8 мг (или эквивалент подобного стероида) дексаметазона перорально 2 раза в сутки за день до введения иммуноконъюгата анти-FOLR1 (например, IMGN853). В день введения иммуноконъюгата анти-FOLR1 (например, FMGN853), за 30-60 минут до введения иммуноконъюгата анти-FOLR1 (например, FMGN853) пациенты получают дексаметазон, 10 мг в/в (или эквивалент подобного стероида), дифенгидрамина HCl (25-50 мг в/в или п/в), с ацетаминофеном (325-650 мг в/в или п/о) или без него.
(4) Стероиды (например, дексаметазон) вводят перорально в пределах 24 часов до инфузии.
Пример 3
Связь между площадью под фармакокинетической кривой (AUC) IMGN853 и офтальмологической токсичностью
[00193] Для каждого пациента, которого лечили IMGN853 по протоколу, описанному в примерах 1 и 2, концентрацию IMGN853 в плазме измеряли в различные моменты времени по каждому циклу, в начале и в конце инфузии и продолжали измерять в течение 21 дня. Анализ фармакокинетических параметров (РК) выявил очевидную связь между Cmax и возникновением офтальмологической токсичности, которая характеризуется отложениями в роговице и потерей остроты зрения. Статистически значимая корреляция наблюдалась также на начальных уровнях воздействия, измеряемые площадью под кривой в течение первых 24 часов (AUC 0-24). (См. фигуры 2А-2 В).
0-24
[00194] В группах от 3,3 до 7,0 мг/кг, офтальмологическую токсичность наблюдали у 9 из 10 пациентов со значениями Cmax на уровне или выше 147,7 мкг/мл, отмеченные пунктирной линией на фигуре 2А. Пациентов со значениями Cmax ниже 147,7 мкг/мл с обнаруженной офтальмологической токсичностью не было. У всех (9/9) пациентов с AUC на уровне или выше 2785 ч*мкг/мл, отмеченных пунктирной линией на фигуре 2Б, обнаружена офтальмологическая токсичность, в то время, как ни один пациент ниже пунктирной линии не имел офтальмологической токсичности. Наличие эффекта наблюдали при дозах ≥ 3,3 мг/кг и не коррелировал с сообщениями об офтальмологической токсичности. Наименьшее значение Cmax у пациентов у которых отмечали эффект был 91,25 мкг/мл.
0-24
0-24
[00195] У 24 пациентов, которых лечили либо 3,3 мг/кг, 5,0 мг/кг, или 7,0 мг/кг IMGN853, показатели Cmax выше порогового значения коррелирует с (обратимой) офтальмологической токсичностью при применении точного критерия Фишера, р = 0,00004. Значения AUC выше порогового уровня 2,741 ч*мкг/мл также коррелирует с (обратимой) офтальмологической токсичностью при применении точного критерия Фишера, р = 0,00001. На основании этих результатов и расчетов с использованием номинального времени и значений концентраций, было установлено, что у пациентов, имеющих Cmax более чем около 150 мк/мл или значения AUC более чем 2785 ч*мкг/мл, наиболее вероятно повышение частоты офтальмологической токсичности, и пациенты у которых отмечали эффект имели уровень Cmax по меньшей мере около 90 мкг/мг. Были разработаны стратегии модификации схем применения препарата в целях уменьшения видимой изменчивости в пределах каждого уровня дозы и достижения уровня Смах с оптимальной эффективностью и минимальной токсичностью для любой массы пациента.
Пример 4
Альтернативные способы применения IMGN853
0-24
0-24
[00196] Как описано выше в примере 3, корреляцию между значениями Смах более 150 мкг/мл или значениями AUC более 2785 ч*мкг / мл и частотой возникновения офтальмологической токсичности наблюдали по всем уровням доз. Кроме того, первоначальный анализ фармакокинетических параметров показал, что хотя Смах возрастает пропорционально дозе IMGN853, существует значительная вариация Смах, AUC и объема распределения в пределах допустимых доз (фигура 3).
[00197] Изменения Cmax особенно заметны в группе с 5 мг/кг, где РК анализировали у 10 больных. Не было никаких явных изменений Cmax у одного и того же пациента по всем циклам, и время инфузии были похожи между пациентами и не были связаны с изменением Cmax. Анализ коварианты показал корреляцию между массой и Cmax. (фигура 4).
ss
[00198] Объем распределения (V) представляет собой показатель объема плазмы крови для биологических препаратов и который не увеличивается линейно с массой. Когда значения Смах нормировали по Vss, разброс был уменьшен. Эти данные позволяют предположить, что, исследуя другие альтернативные способы применения, за исключением подходов основанных на общей массе тела, можно производить более равномерное дозирование по всей группе. С этой целью, значения Смах были определены с помощью альтернативных расчетов дозировки для всех пациентов, которых лечили по группам в дозах 3,3 (n=3), 5,0 (n=10) и 7 мг/кг (n=5). Рассчитанные значения Смах приводили к дозе в 5 мг/кг и сравнивали со значениями Смах, полученными от дозировок по общей массе тела (TBW). Площадь поверхности тела (BSA) была также рассмотрена, однако, значения Смах, основанные на дозировании по BSA, снизились, а изменчивость была затронута в минимальной степени и все еще наблюдали положительную корреляцию между весом и Смах, хотя и в меньшей степени. Также оценивали еще три альтернативные формулы: (1) идеальная масса тела (IBW), сухая масса тела (LBW), и скорректированная масса тела (ADJ). Формула для каждого IBW, LBW, ADJ и BSA приводится ниже:
Идеальная масса тела (IBW)
IBW (муж.) = 0,9Н-88
IBW (жен.) = 0,9Н-92
(где Н = рост в см)
Сухая масса тела (LBW)
2
2
Мужчины = 1,10 × масса в кг - 128([масса в кг]/[100 × рост в метрах])
2
2
Женщины = 1,07 × масса в кг - 148([масса в кг]/[100 × рост в метрах])
Скорректированная идеальная масса тела (AIBW или ADJ)
IBW + 0,4(фактическая масса в кг - IBW)
Площадь поверхности тела (BSA) - Формула Мостеллера
2
1/2
BSA (м) = (рост (см) × масса(кг) / 3600)
Площадь поверхности тела (BSA) - формула Бойда
2
0,3
(0,285-(0,0188×log(г)
BSA (м) = (0,0003207 × рост(см) × масса(г))]
[00199] Средние значения Смах составили 93,06, 82,72, 110,77 и 137,46 мкг/мл для IBW, LBW, AIBW (ADJ) и TBW, соответственно. Кроме того, все три альтернативных показателя уменьшали стандартное отклонение в Смах (21,7, 20,5, 22,9 против 33,7 мкг/мл для TBW). (См. фигура 5).
[00200] Как уже говорилось выше, была выявлена положительная корреляция TBW и Cmax. На графике показано, что корреляционный анализ выявил отрицательную корреляционную связь IBW и LBW с массой. Дозирование по массе тела AIBW (ADJ) имела меньшую зависимость от массы тела (см. фигура 6) похожую на BSA, но с меньшей вариабельностью РК.
[00201] Дозирование по IBW, LBW или AIBW (ADJ) приводит к наименьшей зависимости от массы по сравнению с дозированием по TBW. Основываясь на текущих данных, дозирование по массе IBW (ADJ) приводит к меньшей дисперсии Cmax.
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
0-24
[00202] Значения AUC наблюдали у 24 пациентов, которые получали 3,3, 5 или 7 мг/кг FMGN853 на основе общей массы тела (см. фигура 7 "фактическая TBW"). Кроме того, значения AUC наблюдали у 7 пациентов, которые получали 5 мг/кг FMGN853 в пересчете на скорректированную идеальную массу тела (см. фигура 7 "5 фактическая ADJ"). Эти фактические значения, полученные от 24 пациентов, сравнивали с прогнозируемыми значениями, которые были получены с тех же пациентов, если бы они получали лечение в 5 мг/кг в пересчете на общую массу тела (фиг.7 "TBW 5 мг/кг") или если бы они получали лечение в 5, 5,4 или 6 мг/кг в пересчете на скорректированную идеальную массу тела (фигура 7 "ADJ 5 мг/кг," "ADJ 5,4 мг/кг," и "ADJ 6 мг/кг.") Как показано в таблице на фигуре 7, введение 5 мг/кг IMGN853 в пересчете на AIBW (ADJ) минимизирует количество пациентов, которые, по прогнозам, превысят пороговый уровень AUC 2741 ч*мкг/мл, связанный с офтальмологической токсичностью. Кроме того, только 14% из 7 пациентов, которые получали 5 мг/кг IMGN853 в пересчете на AIBW (ADJ), достигли величины AUC выше 2741 ч*мкг/мл, тогда как 38% пациентов, которые получали 3,3, 5 или 7 мг/кг IMGN853 в пересчете на TBW, превысили этот уровень. Анализ AUC определил, что применение номинального времени и значений концентрации сводит к величине 2785 ч*мкг/мл. Когда производят пересчет, используя реальное время, происходит незначительное изменение величины AUC и пороговое значение составляет 2741 ч*мкг/мл.
0-24
[00203] Пациенты затем получали лечение либо 5 мг/кг в пересчете на скорректированную идеальную массу тела, 6 мг/кг в пересчете на скорректированную идеальную массу тела, 5 мг/кг в пересчете на общую массу тела или 7 мг/кг в пересчете на общую массу тела. На фигуре 8 ("Фактический") показаны наблюдаемые у этих пациентов значения AUC, и эти значения сравнивали с прогнозируемыми значениями ("прогнозируемые"), которые были бы получены, если бы все эти пациенты прошли лечение с 5 мг/кг в пересчете на скорректированную идеальную массу тела,6 мг/кг в пересчете на скорректированную идеальную массу тела, 5 мг/кг в пересчете на общую массу тела или 7 мг/кг в пересчете на общую массу тела. Дозировка в пересчете на скорректированную идеальную массу тела уменьшила вариабельность на начальных уровнях воздействия и снизила офтальмологические неблагоприятные явления как показано ниже в таблице 2. В частности, только один пациент, который получал 5 мг/кг в пересчете на скорректированную идеальную массу тела, столкнулся с нарушениями зрения 1 степени и три пациента, которые получали 6 мг/кг в пересчете на скорректированную идеальную массу тела, столкнулись с офтальмологической токсичностью 1-2 степени. Напротив, дозы в 5 мг/кг или более в пересчете на общую массу тела были связаны с большим количеством пациентов, имеющих офтальмологические нежелательные явления и офтальмологические побочные эффекты 3 степени.
1
Побочные явления 4 степени.
2
Один пациент сообщил о нарушениях зрения.
3
2-ая степень помутнения зрения и точечный кератит у 1 пациента; 2-ая степень ретинопатии у одного пациента; и 1-ая степень помутнения зрения и плавающие "мушки" у 1 пациента.
Пример 5
Альтернативный режим введения IMGN853
[00204] Была разработана популяционная фармакокинетическая модель, основанная на максимальных и минимальных значениях (производные максимума и минимума) профилей концентрация-время IMGN853 со схемой дозирования каждые 3 недели (с возрастающей дозой). Фармакокинетика IMGN853, как указано выше, по-видимому, линейна в диапазоне исследуемых доз.
[00205] Эта модель была применена для моделирования стационарной концентрации IMGN853 в следующих подходящих схем применения:
От 1 до 2,5 мг/кг каждую неделю (10 уровней доз с шагом в 0,15 мг/кг) От 2 до 5 мг/кг один раз в две недели (10 уровней доз с шагом в 0,3 мг/кг) От 1 до 2,5 мг/кг один раз в неделю в течение четырех недель, а затем по одному разу в две недели в течение четырех недель (10 уровней доз с шагом в 0,15 мг/кг)
От 1 до 2,5 мг/кг один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом (10 уровней доз с шагом в 0,15 мг/кг)
[00206] Схема применения один раз в неделю в течение четырех недель, а затем по одному разу в две недели в течение четырех недель привела с течением времени к наименьшему накоплению (т.е., индекс накопления составил 1), в то время как схема применения препарата один раз в неделю привела к наибольшему накоплению (т.е., индекс накопления составил 1,97). Один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом в целом позволило увеличить площадь под фармакокинетической кривой до ~3 раз, ограничивая Cmax ниже уровня при котором наблюдается офтальмологическая токсичность (таблица 3).
Таблица 3
max
max
[00207] Популяционную фармакокинетическую модель также применяли для моделирования гипотетической совокупности из 500 пациентов с помощью метода Монте-Карло. Описательные статистические данные были получены для того, чтобы определить режимы дозирования у доли испытуемых с C<150 мкг/мл для оптимизации профиля безопасности FMGN853. В схеме применения препарата один раз в неделю в течение трех недель в соответствии с четырехнедельным режимом дозы в 1,5, 2,0 и 2,5 мг/кг привели в 99%, 95% и 90% членов выборки к C<150 мкг/мл, соответственно.
Пример 6
Противоопухолевая активность in vivo и прогнозируемая фармакокинетика многократного введения FMGN853
0-∞
1/2)
1/2
1/2
[00208] Концентрацию интактного конъюгата FMGN853 в плазме крови, вводимого внутривенно в дозе 10 мг/кг самкам CD-1 мышей, определяли методом иммуноферментного анализа в различные контрольные моменты времени после инъекции. Фармакокинетические (PK) анализы проводили с применением стандартных алгоритмов модельно-независимым фармакокинетическим методом с помощью программы (201) WinNonlin, Профессиональная версия 6.1 (Pharsight, Маунтин-Вью, Калифорния). Определяли максимальную концентрацию (Cmax), общую площадь под кривой концентрация-время (AUC), конечный элиминационный период полувыведения (t, системный клиренс (CL) и объем распределения в равновесном состоянии (Vss). Значения константы скорости первого порядка, для определения периода полувыведения (t) конъюгата, оценивали с применением данных о концентрации с 1 по 28 день после введения. Значения константы скорости первого порядка, для определения периода полувыведения (t) антитела, оценивали с применением данных о концентрации с 1 по 28 день после введения. На основании результатов измерения, полученных при дозе в 10 мг/кг, фармакокинетические модели создавали в WinNonlin с применением различных доз как в одно- так и многодозовых режимах введения. Полученные параметры были оценены в сравнении с противоопухолевой активностью IMGN853 при различных дозах и режимах введения в NCI-H2110 (немелкоклеточный рак легкого, НМРЛ) ксенотрансплантатах у самок мышей с тяжелым комбинированным иммунодефицитом.
0-540
[00209] Когда IMGN853 вводили в виде однократной инъекции, то наблюдали дозазависимую противоопухолевую активность у NCI-H2110 модели. Все дозы (2,8, 5,6 и 8,5 мг/кг) проявляли высокую активность при значениях Т/С<10%, но с увеличенной дозой IMGN853 повышалось число полных регрессий опухоли (CR). Прогнозируемые фармакокинетические параметры плазмы крови также показали дозазависимое увеличение Cmax (максимальная сывороточная концентрация), Cavg (средняя сывороточная концентрация) и площади под фармакокинетической кривой (AUC ч). Таким образом, показан прогнозируемый, основанный на РК параметрах плазмы крови, и дозозависимый характер интенсивности действия одноразовых доз IMGN853, как изображено на фигуре 9.
[00210] В отличие от активности одноразовой дозы, многодозные режимы введения IMGN853 показали, что активность не зависит от Cmax (фигура 10). Введение IMGN853 в 2,8 мг/кг × 3 ежедневно или каждые 3 дня по режиму (общая доза составила
8.4 мг/кг) имела подобную активность с однократным введением препарата IMGN853 в
8.5 мг/кг. Интересно, что общая площадь под фармакокинетической кривой (AUC) и средняя сывороточная концентрация (Cavg) конъюгата были сопоставимы среди исследуемых групп, в то время как Cmax была самой высокой в группе, в которой применяли единоразово 8,5 мг/кг. Активность наблюдаемая при многоразовых терапевтических воздействиях свидетельствует о том, что этот метод дозирования имеет большую активность, так как там были животные оставшиеся к концу исследования без опухолей, по сравнению с отсутствием животных без опухолей в группе с однократным введением препарата.
[00211] Дополнительно величины доз IMGN853 и режимы применения оценивали по активности против NCI-H2110 ксенотрансплантатов, по результатам, последовательно демонстрируя, что многодозовые режимы введения равноценны или более активны по своему воздействию нежели однократный прием препарата IMGN853.
0-540
Прогнозируемая средняя сывороточная концентрация препарата IMGN853, вводимого однократно в 5,6 мг/кг IMGN853, была сравнима с ежедневным приемом препарата в 1,4 мг/кг в течение 3 дней. Несмотря на наличие более низкой суммарной дозы (4,2 мг/кг), Cmax и площади под фармакокинетической кривой (AUC) введение препарата в дозе 1,4 мг/кг в течение 3 дней было сопоставимо с противоопухолевой активностью in vivo (фигура 11). Эти результаты позволяют предположить, что поддержание определенной минимальной концентрации в плазме крови является критическим для активности препарата.
[00212] При еженедельном режиме введения IMGN853, согласованном с общей дозой к одной высокой дозе IMGN853, была обнаружена сопоставимая in vivo активность (фигура 12). Снова, поддержание средней концентрации в плазме крови выше минимального порога, необходимого для активности препарата при однократном введении IMGN853 (8,5 мг/кг) в результате чего чуть выше Cavg и AUC, но сопоставимые с общей активностью. Ключевое отличие прогнозируемых фармакокинетических параметров с однократным терапевтическим воздействием по сравнению с многодозовым режимом применения представляет собой резкое снижение Смах. Смах при еженедельном режиме применения препарата, по прогнозам, составит почти на 60% ниже, чем Смах при однократном терапевтическом воздействии IMGN853. Поскольку нет никакой очевидной пользы от достижения более высокого Cmax, избегание более высоких концентраций в плазме крови может быть полезно для снижения токсичности.
****
[00213] Необходимо понимать, что раздел «Подробное описание сущности изобретения» и разделы «Сущность изобретения» и «Реферат» предназначены для интерпретации формулы изобретения. В разделах «Сущность изобретения» и «Реферат» сформулированы один или несколько, но не все, приведенные в качестве примера варианты реализации настоящего изобретения, предусмотренные изобретателем(ями), и таким образом, они не предназначены для ограничения настоящего изобретения и приложенной формулы изобретения каким-либо способом.
[00214] Настоящее изобретение описано выше с помощью функциональных конструктивных блоков, иллюстрирующих выполнение указанных функций и их взаимоотношения. Границы этих функциональных конструктивных блоков в данном определены произвольно для удобства описания. Другие границы могут быть определены, до тех пор, пока надлежащим образом выполняются указанные функции и соблюдаются их взаимоотношения.
[00215] Вышеизложенное описание конкретных вариантов будет настолько полно раскрывать общую природу изобретения, что другие смогут, применяя знание обычного специалиста в пределах данной области техники, легко модифицировать и/или адаптировать для различных видов применения такие конкретные варианты, без ненужного экспериментирования, не выходя за рамки объема настоящего изобретения. Таким образом, такая адаптация и модификации находятся в пределах объема изобретения и диапазона эквивалентов раскрытых вариантов реализации изобретения, основываясь на изложении и указаниях, представленных в данном документе. Необходимо понимать, что фразеология или терминология в данном документе применяется с целью описания, но не ограничения, таким образом, что терминологию или фразеологию данного документа квалифицированный специалист должен интерпретировать в свете изложения и указаний.
[00216] Объем и контекст настоящего изобретения не должны быть ограничены никаким из вышеописанных приведенных в качестве примера вариантов реализации изобретения, но должны быть определены только в соответствии со следующей формулой изобретения и ее эквивалентами.