2
КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ СНИЖЕНИЯ УРОВНЯ HS В ФЕРМЕНТИРОВАННЫХ НАПИТКАХ

2
1. Способ снижения уровня HS в среде брожения, включающий контакт среды брожения с клеткой дрожжей, включающей полинуклеотид, кодирующий полипептид MET10, который не катализирует превращение сульфита в сульфид, в котором аминокислота в положении 662 полипептида МЕТ10 не является треонином.
2. Способ по п.1, в котором полинуклеотид кодирует полипептид МЕТ10 с последовательностью SEQ ID NO:3, где X в положении 662 не является треонином.
3. Способ по п.1, в котором полинуклеотид кодирует полипептид МЕТ10 с последовательностью SEQ ID NO:3, где X в положении 662 представляет собой лизин.
4. Способ по п.1, в котором полинуклеотид демонстрирует, по меньшей мере, 95% идентичности последовательности с последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO:1.
2
5. Способ по п.1, в котором образуется продукт брожения, не содержащий HS в детектируемых количествах, и где продукт брожения выбирают из группы, состоящей из вина, пива и шампанского.
6. Способ по п.1, в котором клетка дрожжей является клеткой Saccharomyces cerevisiae.
7. Способ по п.6, в котором клетка дрожжей является винным штаммом дрожжей, выбираемым из группы, состоящей из Prise de Mousse, Premier Cuveé, French Red, Montachet, Lallemand K1, Bordeaux, UCD522, UCD940, Ba25, Ba126, Ba137, Ba220, Bb23, Bb25, Ba30, Bb32, Bb19 и Bb22.
8. Способ по п.1, в котором среду брожения выбирают из группы, состоящей из муста и сусла.
9. Способ по п.1, в котором среда брожения представляет собой виноградный муст.
10. Экспрессионный вектор, включающий полинуклеотид, кодирующий полипептид МЕТ10, который не катализирует превращение сульфита в сульфид, в котором аминокислота в положении 662 полипептида МЕТ10 не является треонином, и в котором полинуклеотид функционально связан с экспрессионной контролирующей последовательностью.
11. Экспрессионный вектор по п.10, в котором полинуклеотид кодирует полипептид МЕТ10 с последовательностью SEQ ID NO:3, где X в положении 662 не является треонином.
12. Экспрессионный вектор по п.10, в котором полинуклеотид кодирует полипептид МЕТ10 с последовательностью SEQ ID NO:3, в котором X в положении 662 представляет собой лизин.
13. Экспрессионный вектор по п.10, в котором полинуклеотид демонстрирует, по меньшей мере, 95% идентичности последовательности с последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO:1.
14. Клетка хозяина, включающая экспрессионный вектор по п.10.
15. Клетка хозяина по п.14, в которой клетка является клеткой дрожжей.
16. Клетка хозяина по п.14, в которой клетка является клеткой Saccharomyces cerevisiae.
17. Улучшенная клетка дрожжей, которая не продуцирует сероводород, включающая экзогенный полинуклеотид, кодирующий полипептид МЕТ10, который не катализирует превращение сульфита в сульфид, в котором аминокислота в положении 662 полипептида МЕТ10 не является треонином, где родительская клетка улучшенной клетки дрожжей продуцирует сероводород.
18. Клетка дрожжей по п.17, в которой полинуклеотид кодирует полипептид МЕТ10 с последовательностью SEQ ID NO:3, где X в положении 662 не является треонином.
19. Клетка дрожжей по п.17, в которой полинуклеотид кодирует полипептид МЕТ10 с последовательностью SEQ ID NO:3, где X в положении 662 представляет собой лизин.
20. Клетка дрожжей по п.17, в которой полинуклеотид демонстрирует, по меньшей мере, 95% идентичности последовательности с последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO:1.
21. Клетка дрожжей по п.17, в которой клетка дрожжей является клеткой Saccharomyces cerevisiae.
22. Клетка дрожжей по п.21, в которой клетка дрожжей является винным штаммом дрожжей, выбираемым из группы, состоящей из Prise de Mousse, Premier Cuveé, French Red, Montachet, Lallemand K1, Bordeaux, UCD522, UCD940, Ba25, Ba126, Ba137, Ba220, Bb23, Bb25, Ba30, Bb32, Bb19 и Bb22.
23. Культура улучшенных клеток дрожжей, которая продуцирует сероводород на сниженном уровне, включающая популяцию клеток дрожжей, клеток дрожжей, включающих экзогенный полинуклеотид, кодирующий полипептид МЕТ10, который не катализирует превращение сульфита в сульфид, где аминокислота в положении 662 полипептида МЕТ10 не является треонином, где культура улучшенных клеток дрожжей продуцирует сероводород на более низком уровне по сравнению с культурой родительских клеток.
24. Культура клеток дрожжей по п.23, в которой культура не продуцирует сероводород на детектируемом уровне.
25. Культура клеток дрожжей по п.23, в которой полинуклеотид кодирует полипептид МЕТ10 с последовательностью SEQ ID NO:3, где X в положении 662 не является треонином.
26. Культура клеток дрожжей по п.23, в которой полинуклеотид кодирует полипептид МЕТ10 с последовательностью SEQ ID NO:3, где X в положении 662 представляет собой лизин.
27. Культура клеток дрожжей по п.23, в которой полинуклеотид демонстрирует, по меньшей мере, 95% идентичности последовательности с последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO:1.
28. Культура клеток дрожжей по п.23, в которой популяция клеток дрожжей включает клетки Saccharomyces cerevisiae.
29. Культура клеток дрожжей по п.23, в которой популяция клеток дрожжей представляет собой винный штамм дрожжей, выбираемый из группы, состоящей из Prise de Mousse, Premier Cuveé, French Red, Montachet, Lallemand K1, Bordeaux, UCD522, UCD940, Ba25, Ba126, Ba137, Ba220, Bb23, Bb25, Ba30, Bb32, Bb19 и Bb22.
30. Способ получения улучшенной клетки дрожжей, которая продуцирует сероводород на сниженном уровне, включающий замену эндогенного полинуклеотида, кодирующего сульфид-активный полипептид МЕТ10, на полинуклеотид, кодирующий сульфид-неактивный полипептид МЕТ10, с помощью введения в родительскую клетку дрожжей полинуклеотида, кодирующего сульфид-неактивный полипептид МЕТ10, который не катализирует превращение сульфита в сульфид, где аминокислота в положении 662 сульфид-неактивного полипептида МЕТ10 не является треонином, где родительская клетка улучшенной клетки дрожжей продуцирует сероводород.
31. Способ по п.30, в котором полинуклеотид, кодирующий сульфид-неактивный полипептид МЕТ10, вводят рекомбинантным способом.
32. Способ по п.30, в котором полинуклеотид, кодирующий сульфид-неактивный полипептид МЕТ10, вводят с помощью возвратного скрещивания.
33. Способ по п.30, в котором улучшенная клетка дрожжей не продуцирует сероводород на детектируемом уровне.
34. Способ по п.30, в котором полинуклеотид кодирует полипептид МЕТ10 с последовательностью SEQ ID NO:3, где X в положении 662 не является треонином.
35. Способ по п.30, в котором полинуклеотид кодирует полипептид МЕТ10 с последовательностью SEQ ID NO:3, где X в положении 662 представляет собой лизин.
36. Способ по п.30, в котором полинуклеотид включает SEQ ID NO:1.
37. Изолированный полинуклеотид, способный отличать последовательности, представленные в SEQ ID NO:1, или последовательности, комплементарные им, и нуклеиновая кислота, кодирующая МЕТ10 дикого типа.
38. Экспрессионный вектор, включающий полинуклеотид по п.37, функционально связанный с экспрессионной контролирующей последовательностью.
39. Клетка хозяина, включающая экспрессионный вектор по п.38.
40. Клетка хозяина по п.39, в которой клетка является клеткой Saccharomyces cerevisiae.