УСТРОЙСТВО, СПОСОБ И НАБОР ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ РАЗЛИЧНЫХ МАРКЕРОВ В РАЗНЫХ КЛЕТОЧНЫХ ИЛИ МОЛЕКУЛЯРНЫХ ОБРАЗЦАХ И ИХ КОЛИЧЕСТВЕННОЙ ОЦЕНКИ

1. Устройство для выявления различных маркеров в различных типах клеток и молекул и для количественного определения указанных маркеров, содержащее микропланшеты или микрополоски с лунками, и палочки, имеющие иммуносорбентные элементы, выступающие на равном расстоянии, соответствующем положению лунок в стандартных микропланшетах или микрополосках, характеризующееся тем, что
указанные лунки имеют увеличенную длину, достаточную для помещения в них 3 или 4 или 6 указанных иммуносорбентных выступающих элементов, каждая из указанных лунок захватывает разные типы клеток или молекул, содержащиеся в пробе, и экспонирующие маркеры, подлежащие выявлению, так как указанные маркеры иммобилизованы на твердой фазе;
что в каждой группе из 3, 4, или 6 указанных иммуносорбентных выступающих элементов, предназначенных для погружения в каждую удлиненную лунку, каждый элемент покрыт одним из тех маркеров, которые требуется выявить в пробе;
указанные лунки содержат лиганды в жидкой фазе, когда указанные иммуносорбентные выступающие элементы погружаются в них: каждый из этих лигандов способен связываться как с маркерами различных типов клеток или молекул пробы, которые, если есть в пробе, уже были иммобилизованы в указанных лунках, так и с одним из маркеров, покрывающих указанные иммуносорбентные элементы, выступающие из палочки.
2. Способ выявления различных маркеров в различных типах клеток и молекул, и количественного определения маркеров с помощью устройства, описанного в предыдущем п. 1, характеризующийся тем, что включает следующие этапы:
а) различные типы клеток и молекул из пробы иммобилизуют в специально предназначенных лунках микропланшетов или микрополосок удлиненной формы, имеющих такую длину, чтобы вместить 3, или 4, или 6 иммуносорбирующих элементов, выступающих из палочки на равных расстояниях;
б) каждый из указанных маркеров, которые следует выявить в пробе, иммобилизован на одном из указанных иммуносорбентных элементов, выступающих из палочки;
в) указанные иммуносорбентные элементы, выступающие из палочки, погружают в удлиненные лунки, заполненные жидкой фазой с лигандом для маркеров, которые надо определить, и, соответственно, указанный лиганд взаимодействует как с различными типами клеток и молекул из пробы, иммобилизованными в указанных лунках, так и с маркерами, покрывающими иммуносорбентные элементы, выступающие из палочки;
г) указанные лиганды связываются с иммуносорбирующими элементами в количестве, обратно пропорциональном количеству маркеров каждого типа клеток или молекул, иммобилизованных в соответствующей удлиненной лунке, и они одновременно количественно определяются в иммуноферментном анализе;
д) одну палочку, или несколько палочек, имеющих иммуносорбирующие элементы, погружают в контейнер, содержащий конъюгат;
е) далее каждый отдельный элемент опускают в отдельные лунки стандартных микропланшетов или микрополосок, содержащие хромогенный субстрат;
ж) наконец, в каждой из этих лунок проводится спектрофотометрический учет реакции.
3. Набор для выявления различных маркеров в различных типах клеток и молекул и для количественного определения маркеров, для чего применяется устройство и способ по п. 1 или 2, характеризующийся тем, что он содержит:
- микрополоски с 3 продолговатыми лунками, каждая из которых имеет длину, подходящую для помещения в нее 4-х сенсибилизированных элементов, выступающих из палочки; первая удлиненная лунка покрыта антителами анти-CD4 для иммобилизации кооперирующих Т-лимфоцитов, присутствующих в пробе крови, тогда как вторая лунка покрыта антителами анти-CD8 для иммобилизации цитолитических T-лимфоцитов, присутствующих в этой же пробе крови; третья удлиненная лунка ничем не покрыта и служит отрицательным контролем, поскольку она заранее заполнена буферным раствором;
- флаконы, содержащие стандартизованную смесь микобактериальных антигенов или гаптенов, предназначенную для диагностики инфекции, и способную специфически связывать маркеры, которые надо определить, в пробе лимфоцитов;
- устройства, имеющие 12 выступающих элементов, каждый из которых покрыт одним из маркеров, которые следует определять для каждого типа лимфоцитов, сенсибилизированных микобактериальной инфекцией;
- непокрытые стандартные 96-луночные планшеты, содержащие 8 рядов лунок, маркированных буквами А, В, С, D, Е, F, G и Н, в каждом из которых по 12 лунок, или контейнеры в виде пробирок или ванночек, содержащие конъюгат и отмывающий раствор;
- непокрытые стандартные 96-луночные планшеты, содержащие 8 рядов лунок, маркированных буквами А, В, С, D, Е, F, G и Н, в каждом из которых по 12 лунок, содержащие хромогенный субстрат;
- кусочки фильтровальной бумаги.