Состояние метаболизма лимфоцитов крови и концентрация некоторых гормонов фетоплацентарного комплекса у беременных женщин

рефлекторным типом дисфункции мочевого пузыря:

Эфф V = 411,93 - 0,48 (УФМ) + 0,40 ( УПП), где: УФМ — средняя объемная скорость тока мочи по данным урофлоуметрии; Vnn — объем мочевого пузыря при первом позыве.

Коэффициент множественной детерминации равен: R2=0,51, p = 0,049.

Видно, что у мальчиков старшей возрастной группы средний эффективный объем определяется и согласован только с изменениями нижнего отдела мочевой системы, показателями, характеризующими в первую очередь сократительную функцию мочевого пузыря и его накопительную. У здоровых же мальчиков изменения среднего эффективного объема определяют показатели, характеризующие как накопительную функцию мочевого пузыря, так и функцию почек.

Уравнение множественной регрессии для расчета среднего эффективного объема мочевого пузыря у девочек 12-15 лет с гипорефлекторным типом дисфункции мочевого пузыря: Эфф V = 442,97 + 0,97 (Max V) — 0,29 (Ост. V), где: Max V — максимальный объем мочевого пузыря; Ост. V — количество остаточной мочи в мочевом пузыре.

Коэффициент множественной детерминации составил: R2=0,82, p < 0,001.

У девочек в старший возрастной период изменения в первую очередь накопительной функции детрузора определяют параметры среднего эффективного объема мочевого пузыря. А у здоровых девочек изменения среднего эффективного объема согласованы с показателями, характеризующими функцию детрузора и функции канальцев левой почки. Следовательно, у детей с гипорефлек-торным типом в старший возрастной период изменения среднего эффективного объема корреспон-

дируются с изменениями показателей, характеризующих функцию только нижних отделов мочевой системы.

Таким образом, исследование взаимосвязи показателей, определяющих изменения среднего эффективного объема мочевого пузыря от других показателей у детей с гипорефлекторным типом дисфункции мочевого пузыря выявили, что во все возрастные периоды изменение среднего эффективного объема напрямую определено состоянием в первую очередь нижних мочевых путей, а именно изменением показателей, характеризующих сократительную и накопительную функцию детрузора. Данная зависимость определена как для мальчиков, так девочек. У девочек младшей возрастной группы и мальчиков средней возрастной группы изменение показателей, характеризующих состояние как верхних, так и нижних путей, определяют изменения среднего эффективного объема. У мальчиков младшей и средней возрастных групп изменение показателей, характеризующих накопительную функцию мочевого пузыря, определяют изменения среднего эффективного объема, в то время как в старшей возрастной группе, нарушение сократительной функцию определяет эти изменения. У девочек во все возрастные периоды изменения среднего эффективного объема мочевого пузыря согласуются с изменения основных функций детрузора (накопительной и сократительной).

Полученные данные проведенного многофакторного регрессионного анализа позволили по новому взглянуть на биологическую сущность взаимоотношения нижних и верхних отделов мочевой системы у детей с гипорефлекторным типом дисфункции мочевого пузыря, а так же прогнозировать изменения как физических, так и биологических параметров относительно друг друга.

THE MORPHO-FUNCTIONAL CHARACTERISTIC OF URIC SYSTEM IN CHILDREN WITH HYPOREFLEXUS TYPE OF DYSFUNCTION OF A BLADDER

N.N. Martynovich, V.V. Malyshev, J.V. Vasiljev

There have been conducted the urodynamic researches in patients with hyporeflexus type of dysfunction of a bladder. On the basis of multifactorial regressive analysis change of parameter of average effective volume of bladder is shown depending on the parameters describing morpho-functional condition of both lower and upper departments of uric system. The biological essence of formation of hyporeflexus such as dysfunction of bladder as pathological process is determined.

ЛИТЕРАТУРА

1. Вишневский Е.Л., Лоран О.Б., Вишневский А.Е. Клиническая оценка расстройств мочеиспускания. — М.: ТЕР-РА 2001. - 95 с. 2 Гланц С. Медико-биологическая статистика. — М.:

Практика, 1999. — 459 с. 3. Джавад-Заде М.Д., Державин В.М., Вишневский Е.Л. Нейрогенные дисфункции мочевого пузыря. — М.: Медицина, 1989. — 384 с.

4. Кириллов В.И., Теблоева Л. Т., Богданова H.A. Уродина-мические расстройства — причина нефропатий детского возраста: Матер. III Российского конгресса «Современные технологии в педиатрии и детской хирургии» (Москва, 26-28 октября 2004). — М., 2004. — С.234-240.

5. Пытелъ Ю.А., Борисов В.В., Симонов В.А. Физиология человека. Мочевые пути. — М.: Высшая школа, 1992. — 287 с.

© НОВИКОВА Л.А., ТИТОВА Н.М., САВЧЕНКО A.A. -

СОСТОЯНИЕ МЕТАБОЛИЗМА ЛИМФОЦИТОВ КРОВИ И КОНЦЕНТРАЦИЯ НЕКОТОРЫХ ГОРМОНОВ ФЕТОПЛАЦЕНТАРНОГО КОМПЛЕКСА У БЕРЕМЕННЫ1Х ЖЕНЩИН

Л.А.Новикова, Н.М. Титова, A.A. Савченко

Резюме. У беременных женщин в зависимости от срока беременности исследованы особенности уровней активности метаболических ферментов в лимфоцитах крови и концентрация некоторых гормонов фетоплацентарного комплекса (ФПК). При исследовании уровней активности НАД- и НАДФ-зависимых дегидрогеназ лимфоцитов крови обнаружены выраженные особенности интенсивности различных метаболических процессов в первый, второй и третий триместр беременности. Установлено, что гормоны ФПК оказывают влияние на метаболизм лимфоцитов крови. Предполагается, что установленные особенности метаболизма лимфоцитов у беременных женщин определяются регуляторными и обменными процессами всего организма, которые специфичны для каждого триместра беременности.

Ключевые слова. Активность ферментов, метаболизм, лимфоциты, беременные женщины.

Изменения в системе иммунологической реактивности женщин, индуцированные развитием плода, представляют собой целую группу различных по своей направленности биологических механизмов, обеспечивающих защиту ребенка от факторов окружающей среды, а также активацию естественных генетически детерминированных процессов его развития [3,8,12]. В процессе участвуют как генетические факторы, так и приобретенная специфика некоторых иммунорегуля-торных механизмов. Так, иммуносупрессивной активностью обладают некоторые гормоны (эстроген, прогестерон, кортикостероиды, хорионический гонадотро-пин), кроме того супрессию связывают с некоторыми негормональными факторами (а-глобулинами, кислыми гликопротеинами, специфичными для беременности р-глобулинами, а-макроглобулинами и др.) [1,4]. Механизмы иммуносупрессивного действия на материнский организм совершенствуются по мере развития плода. Наиболее активный иммунодепрессивный эффект со стороны плода оказывают сами лимфоидные клетки [6,11,12].

Одним из наиболее информативных методов оценки функционального состояния лимфоцитов является исследование внутриклеточного метаболизма [7,9,10].С одной стороны, выявление и уточнение внутриклеточных метаболических процессов позволяет с большой уверенностью оценить функциональные изменения лимфоцитов при различных ситуациях, в том числе и при адаптации организма к развивающейся беременности. С другой стороны, доказано, что обменные процессы на субклеточном уровне в значительной мере отражают изменения метаболизма всего организма [5].

Целью исследования явилось изучение особенностей уровней активности метаболических ферментов в лимфоцитах крови и содержания гормонов фетопла-центарного комплекса у беременных женщин.

Материалы и методы

Всего обследовано 82 беременные женщины в возрасте 24-28 лет. Из них 9 женщин были обследованы в 1 триместр, 69 — во 2 и 4 — в 3. В качестве контроля обследованы 49 здоровых небеременных женщин того же возрастного диапазона.

Определение активности НАД(Ф)-зависимых де-гидрогеназ в лимфоцитах крови проводили биолюминесцентным методом [7]. Данным методом определялась активность следующих ферментов: глюкозо-6-фос-фатдегидрогеназы (Г6ФДГ, КФ 1.1.1.49), малик-фермента (НАДФМДГ, КФ 1.1.1.40), НАД- и НАДН-зави-симой реакции лактатдегидрогеназы (ЛДГ и НАДН-ЛДГ, КФ 1.1.1.27), НАД- и НАДН-зависимой реакции

малатдегидрогеназы (МДГ и НДЦН-МДГ, КФ 1.1.1.37), НАДФ- и НАДФН-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАДФ-ГДГ и НАДФН-ГДГ, КФ 1.4.1.4), НАД- и НАДН-зависимой глутаматдегидрогеназы (НАД-ГДГ и НАДН-ГДГ, КФ 1.4.1.2), НАД- и НАДФ-зависимых изоцитратдегидрогеназ (НАД-ИЦДГ, КФ 1.1.1.41 и НАДФ-И11ДГ, КФ 1.1.1.42, соответственно) и глутати-онредуктазы (ГР, КФ 1.6.4.2). Активность дегидрогеназ в лимфоцитах крови выражали в ферментативных единицах (1 Е=1 мкмоль/мин [2]) на 104 клеток.

Определение концентрации гормонов в сыворотке крови беременных женщин проводили методом имму-ноферментного анализа с помощью наборов фирмы «АлкорБио» (Санкт-Петербург). Данным методом определяли концентрацию а-фетопротеина (АФП) и хо-рионического гонадотропина (ХГ).

Для всех полученных данных определяли среднее арифметическое значение (М) и ошибку средней арифметической (m). Проверку гипотезы о статистической достоверности активности дегидрогеназ лимфоцитов крови у беременных и небеременных женщин проводили с помощью критерия Манна-Уитни. Исследование силы взаимосвязей между исследуемыми параметрами осуществляли методом ранговой корреляции по Спирмену. Статистическую обработку результатов осуществляли с помощью пакета прикладных программ Statistica 6.0 (StatSoft, Inc.).

Результаты и обсуждение

При исследовании уровней активности НАД- и НАДФ-зависимых дегидрогеназ в лимфоцитах крови в зависимости от триместра беременности обнаружено, что активность МДГ статистически достоверно повышается только в иммунокомпетентных клетках в период 2 триместра беременности (рис. 1.А). Динамически в лимфоцитах крови беременных женщин изменяется активность НАДФМДГ: в период 1 триместра — повышается более чем в 10 раз, в период 2 триместра активность данного фермента снижается до уровня - в 1,9 раза ниже контрольного, но при 3 триместре — вновь повышается (рис. 1.Б). У беременных на 1 триместре в лимфоцитах крови значительно снижена активность НАД-ФИТТДГ которая повышается в период 2 триместра, не достигая контрольного диапазона, и снижается в период 3 триместра практически до уровня, соответствующего выявленному в период 1 триместра (рис. 1.В). Также, в период 1 триместра снижается активности НАДН-ЛДГ, в период 2 — повышается, оставаясь в 1,9 раза ниже контрольного уровня (рис. 1.Г). На данном диапазоне активность НАДН-ЛДГ и сохраняется в период 3 триместра беременности. Уровни активности НАДН-МДГ

и НАДН-ГДГ в лимфоцитах в зависимости от триместра беременности изменяются практически синхронно (рис. 1 Д и Е). Так, в период 1 триместра уровни активности данных ферментов повышаются. В период 2 триместра — снижаются, оставаясь статистически выше контрольных диапазонов, сохраняясь на данных уров-

зона в период 2 триместра. В период 2 триместра беременности в лимфоцитах крови снижается активность Г3ФДГ (3,17±0,45 мкЕ; в контроле - 4,88±0,85 мкЕ; Р<0,01) и НАДГДГ (41,90±4,74 мкЕ; в контроле -60,27±5,84 мкЕ; Р<0,01), но при повышении уровня ГР (30,20±4,63 мкЕ; в контроле - 12,87±1,67 мкЕ; Р<0,05).

Примечание: 1 — контроль; 2 — 1 триместр; 3 — 2 триместр; 4 — 3 триместр.

Рис. 1. Активность НАД- и НАДФ-зависимых дегвдрогеназ в лимфоцитах крови у беременных женщин.

нях в период 3 триместра беременности. Кроме того, только в период 1 триместра снижается активность Г6ФДГ (1,55±0,43 мкЕ; в контроле - 9,01±1,50 мкЕ; Р<0,01), которая в дальнейшем восстанавливается до контрольного уровня, а также повышается уровень НАДФГДГ (69,43±17,61 мкЕ; в контроле - 34,47±4,22 мкЕ; Р<0,05), понижающийся до контрольного диапа-

Уровни активности ЛДГ, НАДИЦЦГ и НАДФН-ГДГ в лимфоцитах крови в зависимости от триместра беременности не изменяются.

Исследование данных ферментов, которые занимают ключевые позиции в метаболизме иммунокомпетен-тных клеток, позволяет оценить интенсивность отдельных метаболических путей или циклов и реактивность

метаболических процессов в целом. Так, уже в период 1 триместра у беременных женщин в лимфоцитах крови выявляется снижение активности ключевой и инициализирующей реакции пентозофосфатного цикла (Г6ФДГ), что определяет понижение уровня продуктов цикла и, как следствие, - ингибирование ряда реакций макромолекулярного синтеза [2]. Пентозофосфатный цикл является основным конкурентом гликолиза за субстрат. Однако, сниженная в этот период беременности активность анаэробной реакции ЛДГ отражает ингиби-рование процесса анаэробного окисления глюкозы и позволяет предположить, что в лимфоцитах крови у беременных в период 1 триместра понижена интенсивность транспорта глюкозы через цитоплазматическую мембрану.

Лимфоциты являются клетками, где энергетические реакции определяются интенсивностью как анаэробных, так и аэробных процессов. При этом, цикл три-карбоновых кислот не только определяет интенсивность дыхательной цепи митохондрий (за счет наработки восстановленных эквивалентов), но и является связующим звеном между белковым, углеводным и липид-ным обмена. Анализ уровней митохондриальных дегид-рогеназ в лимфоцитах крови позволяет предположить, что интенсивность субстратного потока по циклу Креб-са не изменяется (сохранены на уровне контрольного диапазона активности НАДИЦДГ и МДГ). Причем, сохранение интенсивности субстратного потока по циклу Кребса сопровождается разнонаправленным изменением активности вспомогательных дегидрогеназных реакций (снижается активность НАДФИЦДГ и повышается активность НАДФГДГ), увеличением уровня шунтирующей реакции НАДФМДГ и активацией оттока субстратов с цикла на реакции аминокислотного обмена через НАДН-ГДГ и ключевой реакцией малат-аспартатного водородного шунта — НАДН-МДГ.

Метаболические процессы цитоплазматического компартмента лимфоцитов крови у беременных в период 2 триместра характеризуются сохранением сниженной интенсивности гликолиза и восстановлением активности ключевой и инициирующей реакцией пен-тозофосфатного цикла. Повышение активности ГР отражает активацию глутатион-зависимой антиоксидан-тной системы [2]. В то же время, при исследовании уровней активности ферментов митохондриального компартмента обнаружено повышение активности МДГ — одной из дегидрогеназ цикла трикарбоновых кислот, что при повышенном уровне ключевой реакции малат-аспартатного шунта позволяет предположить увеличение интенсивности аэробных процессов. Причем, данный феномен проявляется на фоне ингибиро-вания шунтирующей реакции НАДФМДГ и вспомогательной реакции НАДФИЦДГ, а также при повышенном уровне оттока субстратов с лимонного цикла через НАДН-ГДГ. В период 3 триместра в лимфоцитах крови у беременных женщин также сохраняется снижение интенсивности анаэробного окисления глюкозы, в то время как состояние активности исследуемых фермен-

тов митохондриального компартмента отражает нормализацию активности дегидрогеназ цикла трикарбоно-вых кислот.

В развитии и поддержании беременности важнейшая роль принадлежит фетоплацентарному комплексу (ФПК), который синтезирует целый ряд местных и гуморальных регуляторов, в том числе и гормональной природы. Со 2 триместра плацента и плод синтезируют все гормоны, необходимые для нормального их развития. Из белковых гормонов наиболее важным является ХГ и белок плода — АФП. Установлено, что у беременных женщин во 2 триместре концентрация АФП составляет 50,25±2,57 МЕ/мл, а уровень ХГ - 53240,74±402,11 МЕ/мл. С помощью корреляционного анализа обнаружено, что у беременных во 2 триместре сывороточная концентрация АФП взаимосвязана с уровнями активности следующих метаболических ферментов лимфоцитов крови: с Г6ФДГ (г=0,35, Р<0,005), ЛДГ (г=0,31, Р<0,05), НДЦФМДГ (1=0,45, Р<0,001), ГР (1=0,41, Р<0,01), НАДФН-ГДГ (1=0,35, Р<0,01) и НАДГДГ (г= -0,28, Р<0,05). Концентрация ХГ также взаимосвязана с активностью Г6ФДГ (г=0,22, Р<0,1), ЛДГ (г=0,29, Р<0,05), НАДФМДГ (г=0,36, Р<0,01), НАДИЦДГ (г=0,26, Р<0,05), ГР (1=0,27, Р<0,05) и НАДФГДГ (г= -0,26, Р<0,05). Следовательно, положительное влияние гормонов ФПК во второй триместр беременности приводит к усилению активности ферментов цикла трикар-боновых кислот, что в свою очередь способствует усилению аэробного дыхания в лимфоцитах беременных. Отрицательные корреляционные связи АФП с НАДГДГ и ХГ с НАДФГДГ свидетельствуют о понижении активности данных ферментов, что приводит к снижению анаболизма аминокислот в клетке.

Таким образом, установлены зависимые от срока беременности особенности интенсивности метаболических процессов в иммунокомпетентных клетках крови у женщин. Так, у беременных женщин в 1 триместр в лимфоцитах крови снижается интенсивность анаэробного окисления глюкозы и активация анаболических процессов в реакциях липидного и аминокислотного обмена. Во второй триместр беременности перераспределение метаболических потоков происходит таким образом, что увеличивается активность ферментов цикла трикарбоновых кислот. Активности ферментов в третий триместр сопоставимы с таковыми в первый триместр беременности. Независимо от срока беременности в иммунокомпетентных клетках повышена активность ГР. Анализ корреляционных связей между метаболическими ферментами лимфоцитов крови беременных женщин и некоторых гормонов фетоплацентарно-го комплекса сыворотки крови беременных свидетельствует о влиянии гормонов на активность ферментов. Можно предположить, что установленные особенности метаболизма лимфоцитов беременных женщин определяются регуляторными и обменными процессами всего организма, которые специфичны для каждого триместра беременности.

THE STATE OF BLOOD LYMPHOCYTE METABOLISM AND SOME FETOPLACENTARY COMPLEX HORMONES IN PREGNANT WOMEN

L.A. Novikova, N.M. Titova, A.A. Savchenko

(Medical Research Institute for Northern Problems — Siberian Division of Russian Academy of Medical Sciences,

Krasnoyarsk State University, Krasnoyarsk)

In pregnant women on term of pregnancy features of metabolic enzymes activities in blood lymphocytes and concentration of some fetoplacentary complex (FPC) hormones are investigated. In research of NAD- and NADP-dependent dehydrogenase activities in blood lymphocytes the expressed features of various metabolic processes intensity in the first, second and third trimester of pregnancy are found out. It is established, that FPC hormones influence a blood lymphocyte metabolism. It is supposed, that the established features of a lymphocyte metabolism in pregnant women are determined by regulatory and exchange processes of the whole organism which are specific for each trimester of pregnancy.

ЛИТЕРАТУРА

1. Анастасъева В.Г. Морфофункциональные нарушения фетоплацентарного комплекса при плацентарной недостаточности (современные методы диагностики и лечения). — Новосибирск, 1997. — 502 с.

2 Березов Т. Т., Коровкин Б. Ф. Биологическая химия. — М.: Медицина, 1998. — 704 с.

3. Захарова Т.Г., Гончарова Г.Н., Филиппов О. С., Захаров Т.Н. Роль социопатий в репродуктивном здоровье жен-шин Красноярского края // Вестник перинатологии, акушерства и гинекологии. — 2001. — Вып.8. — С.182-189.

4. Ишпахтин Ю.И. Клинические проблемы акушерско-гинекологической патологии. — Владивосток: ВГМУ, 1997. — 220 с.

5. Нарциссов Р.П. Анализ изображения клетки — следующий этап развития клинической цитохимии в педиатрии // Педиатрия. — 1998. — № 4. — С.101-105.

6. Плескановская С.А., Ахматова З.М. Иммунологические аспекты гестационного периода // Вопросы охраны материнства и детства. — 1990. — J№ 9. — С.57-61.

7. Савченко A.A., Сунцова Л.Н. Высокочувствительное оп-

ределение активности дегидрогеназ в лимфоцитах периферической крови биолюминесцентным методом // Лаб. дело. — 1989. — № 11. — С.23-25.

8. Саччи И., Савельева И. С. Вопросы планирования семьи

— неотъемлемый компонент улучшения репродуктивного здоровья женщин. Интегрированный подход проекта «Мать и дитя» // Гинекология. — 2003. — Т. 5, J№ 4.

— С.136.

9. Bortell R., Moss J., McKenna R. C. Nicotinamide adenine dinucleotide (nad) and its metabolites inhibit T lymphocyte proliferation: role of cell surface nad glycohydrolase and pyrophosphatase activities // J. Immunol. — 2001. — Vol. 167, J№ 4. — P.2049-2059.

10. Otton R, Mendonca J.R., Curi R. Diabetes causes marked changes in lymphocyte metabolism // J. Endocrinol. — 2002.

— Vol. 174, J№ 1. — P.55-61.

11. Parham P. NK cells and trophoblasts: partners in pregnancy // J. Exp. Med. — 2004. — Vol. 200, J№ 8. — P.951-955.

12. Wang Z, Dong M., Chu H., He J. Increased serum levels of neopterin and soluble interleukin-2 receptor in intrahepatic cholestasis of pregnancy // Acta Obstet. Gynecol. Scand. — 2004. — Vol. 83, J№ 11. — P.1067-1070.

© ПЕТРОВА С.Е. -

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРЕПАРАТОВ СЕЛЕНА В ТЕРАПИИ САХАРНОГО

ДИАБЕТА 1 ТИПА

С.Е.Петрова

(Читинская государственная медицинская академия, ректор - д.м.н., проф. А.В.Говорин, кафедра госпитальной

педиатрии, зав. - к.м.н. ТАФедосеева)

Резюме. Включение в стандартную терапию сахарного диабета препаратов селена усиливает выраженность положительных сдвигов в липидном обмене.

Ключевые слова. Сахарный диабет, перекисное окисление липидов, селен, глутатион.

В последние годы в патогенезе все большего количества заболеваний находят повреждения в системе пе-рекисное окисление липидов - антиоксидантная защита (ПОЛ - АОЗ) [4]. В этот скорбный перечень входят атеросклероз, панкреатит, ревматоидный артрит, язвенный колит и еще около ста недугов [13]. С каждым днем этот список пополняется. В конце 80-х - середине 90-х годов прошлого столетия стали появляться сообщения о взаимоотношениях свободно радикальных процессов и сахарного диабета. В 1996 году GWang et а1. [14] отмечали, что при данной эндокринной патологии наблюдается накопление различных продуктов ПОЛ, позднее А.А.Нелаева и др. [9] зарегистрировали зависимость клинических особенностей болезни от выраженности активации перекисного окисления и снижения антирадикальной защиты. М.Н.Балаболкин, Е.М.Клебанова

[3] в своей статье настойчиво обращали внимание читателя на важную роль окислительного стресса в патогенезе сахарного диабета и его осложнений, а в 2003 году МАФлеров и др. [12] отмечали стимулирование окислительной деструкции белков плазмы крови в этих условиях.

Отсюда вполне естественно использование в коррекции данного страдания различных антиоксидантов [6]. С этой целью рекомендованы витамины Е, А, С, липоевая кислота [3,12,5]. Логично и применение в этой ситуации препаратов селена. В Забайкалье показания к их введению возрастают, так как данный регион эндемичен по дефициту Se.

Целью исследования была оценка эффективности действия «Неоселена» на течение сахарного диабета 1 типа (СД).