Функционирование надпочечниковой, тиреоидной и гонадной систем регуляции на этапах экспериментального метастазирования в печень

XXI РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ КОНГРЕСС

ТЕЗИСЫ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОНКОЛОГИЯ

лимфатических узлов выявлены структурные признаки активации пролиферации клеток плазматического ряда (увеличивалось число иммунобластов, незрелых плазматических клеток). По сравнению с 18 сутками опухолевой инвазии площадь паракортикальной (Т-зависимой) зоны уменьшается на 11%, а площадь мозговых синусов увеличивается на 23,4%, наблюдался выраженный лимфостаз. Заключение.

— Структурные преобразования в тимусе при экспериментальном канцерогенезе простаты свидетельствуют о его акцидентальной инволюции, что может являться следствием выраженной антигенной стимуляции, и, по данным литературы, результатом иммуносупрессивного действия ростового фактора эндотелия сосудов (VEGF).

— В динамике роста экспериментальной опухоли простаты структурная дезорганизация и инволюция тимуса, сопровождается параллельными зависимыми структурными преобразования в регионарных к опухоли лимфатических узлах (уменьшение размеров Т-зависимой зоны, мозговых синусов, изменении соотношения количества зрелых и незрелых лимфоидных клеток).

Влияние гипоксии и эстрогенов на экспрессию BRCA1 и рецептора эстрогенов а

Е.А. Шестакова', А.М. Щербаков', К.Е. Галеева', Н. О. Вих-лянцева', Т.А. Богуш'

Место работы:' ФГБУ «РОНЦ им. Н. Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Российская Федерация e-mail: elenaanshestakova@mail.ru

Цель. изучение влияния гипоксии, эстрогенов и антиэстрогенов на экспрессию BRCA1, ключевого регулятора репарации ДНК, в клетках гормонозависимого рака молочной железы (РМЖ).

Материалы и методы. Клетки РМЖ линии MCF7 культивировали в среде DMEM с 10% сыворотки телят. Для моделирования условий гипоксии клетки инкубировали 24 ч в атмосфере с содержанием 1 % О2. Инкубацию с 17|3-эстра-диолом (Е2, 10 нМ) и/или тамоксифеном (Там, 5 мкМ) проводили в течение 24 ч в среде без стероидов. Иммуно-флуоресцентный анализ экспрессии BRCA1 и рецептора эстрогенов а (РЭа) проводили с использованием проточной цитофлуориметрии и первичных антител к BRCA1 (SD118) и РЭа (SP-1). Анализ экспрессии маркеров проводили методом Колмогорова-Смирнова с помощью программы FlowJo: уровень — количество (%) специфически флуоресцирующих клеток относительно показателя в контроле (инкубация с вторичными антителами);интенсивность — отношение специфической флуоресценции клеток в опыте к контролю; индекс — произведение уровня и интенсивности экспрессии маркера, деленное на 100.

Результаты. В условиях гипоксии наблюдалась тенденция к уменьшению интенсивности и индекса экспрессии BRCA1 по сравнению с контрольными клетками (уменьшение в 1,3 и 1,4 раза, соответственно). При инкубации клеток с Е2, Там или их комбинации не выявлено существенных изменений уровня, интенсивности и индекса экспрессии BRCA1 по сравнению с контролем. Напротив, показатели экспрессии РЭа в этих условиях значительно уменьшились. При инкубации с Е2 интенсивность и индекс экспрессии РЭа снизились в 3,9 и 4,3 раза, соответственно. При воздействии Там оба показателя снизились в 1,6 раза, а инкубация с Е2 и Там привела к уменьшению интенсивности и индекса экспрессии РЭа в 2,9 и 3,1 раза, соответственно.

Заключение. Полученные данные демонстрируют, что короткая инкубация клеток рака молочной железы линии MCF7 в условиях гипоксии ведет к уменьшению экспрессии BRCA1, что говорит о влиянии гипоксии на процессы репарации ДНК в опухолевых клетках молочной железы. Запланированное увеличение продолжительности гипоксии позволит установить роль BRCA1 в нестабильности генома опухолевых клеток при недостатке кислорода и в регуляции чувствительности опухолей с гипоксическими регионами к химиотерапии. Продемонстрировано воздействие эстрогенов и антиэстрогена тамоксифена на экспрессию РЭа, при этом экспрессия BRCA1 не регулируется гормонами. Гранты РФФИ № 15-04-06991 -а и № 15-04-02172.

Функционирование надпочечниковой, тиреоидной и гонадной систем регуляции на этапах экспериментального метастазирования в печень

И.В. Каплиева', Е.М. Франциянц', Л.К. Трепитаки', Н.Д. Черярина'

Место работы: 'Федеральное государственное бюджетное учреждение «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Министерства здравоохранения Российской Федерации. e-mail: kaplirina@yandex.ru

Цель. По изменению уровней гормонов в крови и динамике весовых показателей органов изучить морфо-функциональ-ную активность трех основных систем регуляции организма: гипоталамо-гипофизарно -надпочечниковой (ГГНС), — тиреоидной (ГГТС) и -гонадной (ГГГС) на этапах метастазирования в печень.

Материалы и методы. Работа выполнена на 43 белых крысах-самцах. Через 1, 2, 5, 7 недель от момента введения клеток саркомы 45 (С45) в дислоцированную под кожу селезенку определяли вес органов; в крови методом РИА исследовали уровни ФСГ, ЛГ, ТТГ, АКТГ, кортизола, альдостерона, тироксина и трийодтиронина (Т3); методом ИФА — эстрона, эстра-диола, свободного тестостерона.

Результаты. На этапе, предшествующем появлению опухоли в селезенке, изменялось функционирование ГГНС: низкие весовые показатели надпочечников сочетались с гипокортизолемией (снижение в 2,3 раза). ГГТС работала в гиперактивном режиме (высокий сывороточный уровень тиреоидных гормонов). Уровень эстрона в крови увеличивался постепенно и ко 2 неделе становился в 6,6 раз больше контроля. Свободный тестостерон, напротив, резко возрастал на 1 неделе (в 122 раза) и несколько снижался на 2 неделе (в 10,4 раза).

При этом весовой коэффициент простаты уменьшался в 1,6 раза. В период, предшествующий появлению метастазов в печени при наличии сформированной опухоли в селезенке, на фоне гиперальдостеронемии (в 3,2 раза) и увеличения весовых показателей надпочечников (в 1,5 раза), уровень кор-тизола в крови возрастал до контрольных значений. Нарастание сывороточного ТТГ (в 5,0 раз) сочеталось с уменьшением веса щитовидной железы (в 1,4 раза) и ослаблением ее гиперфункции. В крови уменьшались уровни эстрона — в 4,8 раза, эстрадиола — в 1,3 раза.

Повторно возрастала концентрация свободного тестостерона (в 3,9 раза) и редуцировался ФСГ (в 3,4 раза). В период сформированных метастазов в печени уровни кортизола и альдостерона в крови уменьшались (в 1,8 раза) на фоне снижения веса надпочечников. Пятикратное увеличение

Злокачественные опухоли

www.malignanttumours.org

Том / Vol. 7 № 3 S 1 /2017

Malignant Tumours

www.malignanttumours.org

XXI РОССИЙСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ КОНГРЕСС

ТЕЗИСЫ

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ОНКОЛОГИЯ

уровня ЛГ в крови сочеталось с уменьшением веса семенников (в 1,7 раза), гипотестостеронемией (в 9,7 раза) и гипер-эстрадиолемией (в 2,3 раза). Резко снижался сывороточный уровень Т3 (в 4,6 раза).

Заключение. В основе развития онкопатологии с метастази-рованием в печень лежит нарастающая активация и перенапряжение основных регуляторных систем организма: ГГНС, ГГТС, ГГГС, приводящая, в конечном итоге, к истощению надпочечников, семенников и формированию «low T3» синдрома. Ключевые слова: метастазирование в печень, гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковая система, гипоталамо-гипофи-зарно-тиреоидная система, гипоталамо-гипофизарно-гонад-ная система, крысы, саркома 45

Модификация злокачественным процессом метаболизма стероидов на этапах метастатического поражения печени в эксперименте

И. В.Каплиева',Е. М. Франциянц',Л. К. Трепитаки', Н. Д. Черя-рина', Ю. А. Погорелова'

Место работы: 'Федеральное государственное бюджетное учреждение «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Министерства здравоохранения Российской Федерации e-mail: kaplirina@yandex.ru

Цель. Изучить особенности стероидного метаболизма в метастазах (МТС) печени, надпочечниках и крови на этапах метастазирования и выявить диагностические признаки метастазирования.

Материалы и методы. 43 белым крысам-самцам саркому 45 перевивали интралиенально. Исследовали уровни эстрона, эстрадиола, св. тестостерона, 17ОНР, холестерина, кортизола, альдостерона, ДГЭАс и АКТГ стандартными методиками ИФА или РИА. Результаты. На начальных этапах эксперимента в надпочечниках уменьшалась концентрация кортизола (в 1,7 раза), 17ОНР (в 3,0 раза) и ДГЭАс (в 1,3 раза).

В период, предшествующий появлению МТС в печени, в надпочечниках увеличивался синтез альдостерона (в 1,4 раза), кортизола (в 2,8 раза) и восстанавливался уровень ДГЭАс. В период сформированных МТС печени в надпочечниках резко уменьшался уровень кортизола (в 22,2 раза) и увеличивалось содержание альдостерона (в 1,2 раза); в параметаста-тической зоне печени редуцировался кортизол (в 1,7 раза); в МТС — накапливались эстрон (в 8,3 раза) и 17ОНР (в 7,9 раза); в МТС и тканях, их окружающих увеличивалось содержания ДГЭАс (в 1,6 раза) и уменьшалось количество св. тестостерона (более чем в 3,0 раза).

Отличительными признаками МТС в печени, которые сочетались с МТС в легких, были: сохранение высокого уровня кор-тизола в надпочечниках; умеренное накопление кортизола в параметастатической зоне печени (в 1,4 раза); значительное увеличение содержание эстрона (в 18,1 раза) и 17ОНР (в 13,7 раза) в МТС; меньшая (в 1,8 раза) степень снижения уровня св. тестостерона в МТС и тканях, его окружающих. Гипоэстрадиолемия (в 1,3 раза) и гипертестостеронемия (в 3,9 раза) — диагностические критерии скорого метаста-зирования в печень. Гиперэстрадиолемия на фоне редукции высокого уровня св. тестостерона — признаки сформированных МТС в печени.

Гипокортизолемия (в 1,8 раза), гипохолестеринемия (в 1,2 раза) и уменьшение соотношения эстрадиол/свободный тестостерон (в 2,9 раза) в крови — критерии сформирован-

ных МТС в печени. Гиперкортизолемия (в 1,6 раза), гиперхо-лестеринемия (в 1,4 раза) и сохранение контрольных цифр соотношения эстрадиол/свободный тестостерон — признаки сформированных МТС печени, сочетающихся с отдаленными МТС в легких.

Заключение. Патогенетическим механизмом метастази-рования в печень у самцов крыс является модификация стероидогенеза, приводящая к накоплению эстрона в МТС и разнонаправленным сдвигам кортизола в параметастатиче-ской зоне и крови в зависимости от наличия или отсутствия отдаленных МТС.

Ключевые слова: метастазы в печень, стероиды, диагностика, крысы

Развитие остеолитических метастазов рака молочной железы связано с кининовой системой и ингибиторами плазмы крови

Л. С. Козлова', О. И. Кит', Е. М. Франциянц', Л. Н. Ващенко', А.А. Барашев', М.И. Верескунова', Л.Я. Розенко' Место работы: 'Федеральное государственное бюджетное учреждение «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт» Министерства здравоохранения Российской Федерации e-mail: super.gormon@ya.ru

Возникновение костных метастазов связано с особенностями костной ткани: хорошим кровоснабжением, постоянными процессами костеобразования и остеолизиса. Механизм развития остеолитических метастазов малоизучен, обязательным их компонентом является вялотекущее воспаление как результат резорбции костной ткани. Цель. изучение калликреин-кининовой системы (ККС), трип-синовых протеиназ и универсальных ингибиторов плазмы крови при солитарных остеолитических метастазах рака молочной железы.

Методы. Исследована цитратная плазма крови 33 больных 38—72 лет с солитарными остеолитическими метастазами (рT3-4NхM1) и 32 доноров (N): до операции (фон), после операции (1 и 7 сутки) и в отдаленный период (1 и 6 месяцев после выписки). Статистика: программа Statistica 10.0. Результаты. До лечения активность калликреина (K) была резко повышена относительно N, при сниженном уровне пре-калликреина (ПК), без выраженной динамики в течение всего наблюдения. Активность кининразрушающего фермента кар-боксипептидазы N была в 2,7 раза ниже N, в 1 сутки продолжала снижаться, в дальнейшем — достоверно повышалась, не достигая нормы. Это способствовало более длительному существованию брадикинина в циркуляции, а также проявлению биологических свойств его и К. Общая активность трипсиноподобных протеиназ (ОТП) плазмы крови больных до лечения превышала N в 3,4 раза и сохранялась на высоком уровне в течение всего периода наблюдения. Активность а2-макроглобулина (а2М) до лечения была снижена в 2,0 раза, относительно N, после операции сохранялась низкой с постепенным повышением к концу наблюдения. До лечения а1-протеиназный ингибитор (а1ПИ) был ниже N в 1,9 раза и сохранялся пониженным в течение всего периода наблюдения.

Выводы. 1. При развитии остеолитических метастазов рака различной локализации длительная активация ККС приводит к истощению ПК в плазме крови, сохранению высокой активности калликреина, при снижении активности кининразруша-ющего фермента и универсальных ингибиторов а2М и а!ПИ.

Злокачественные опухоли

www.malignanttumours.org

Том / Vol. 7 № 3 S 1 /2017

Malignant Tumours

www.malignanttumours.org