СОСТАВ ПОЛИЭПИТОПНОГО БЕЛКА ДЛЯ ИНДУКЦИИ ИММУННОГО ОТВЕТА ПРОТИВ ВИРУСА ЯЩУРА

1. Полиэпитопные вакцинные белки против вируса ящура, состоящие из двух или более фрагментов белков вируса ящура, соединенных линкерными аминокислотными последовательностями, предпочтительно глицин-богатыми линкерными последовательностями, при этом предпочтительным вариантом вакцинных белков являются белки с общей формулой VP4(X1-X2)-GRL-VP1(X3-X4)-GRL-VP1(X5-X6)-GRL-2C(X7-X8)-GRL-3D(X9-X10)-GRL-3D(X11-X12), где GRL обозначает глицин-богатый линкер, Xn-Xm - целые числа, отражающие номера аминокислотных остатков соответствующего белка вируса ящура, VP4, VP1, 2С, 3D - названия белков вируса ящура.
2. Полиэпитопные вакцинные белки по п.1, где GRL состоит из последовательности четырех аминокислотных остатков глицина и двух серина или последовательности четырех аминокислотных остатков глицина, двух серина, глутаминовой кислоты и фенилаланина.
3. Полиэпитопные вакцинные белки по п.1 или 2, где аминокислотный состав индивидуальных фрагментов и числа X1-X12 индивидуальны и определяются, исходя из множественного выравнивания известных белковых последовательностей вируса ящура и белковой последовательности вируса ящура, для которого создается субъединичная вакцина на основе полиэпитопного белка, по принципу, описанному в данном изобретении.
4. Полиэпитопные вакцинные белки по п.3 против вируса ящура подтипа О/Тайвань/99 (аминокислотная последовательность Генбанка CAD62369), где числа Х1-Х2, Х3-Х4, Х5-Х6, Х7-Х8, Х9-Х10 и Х11-Х12 равны 222-241, 859-883, 924-937, 1175-1183, 1863-1977 и 2283-2322 соответственно.
5. Полиэпитопные вакцинные белки по п.3, несущие на N- или С-конце аминокислотные последовательности, применимые для аффинной очистки белка, в том числе последовательности из шести остатков гистидина или хитин-связывающий домен.
6. Полиэпитопный вакцинный белок по п.5 для вируса ящура серотипа О/Тайвань/99, имеющий формулу 6H-VP4(X1-X2)-4G2S-VP1(X3-X4)-4G2S-VP1(X5-X6)-4G2SEF-2C(X7-X8)-4G2S-3D(X9-X10)-4G2S-3D(X11-X12), где 6Н - последовательность шести аминокислотных остатков гистидина, 4G2S - последовательность глицин-богатого линкера из четырех аминокислотных остатков глицина и двух серина, 4G2SEF - последовательность глицин-богатого линкера из четырех аминокислотных остатков глицина, двух серина, глутаминовой кислоты и фенилаланина.
7. Нуклеотидная последовательность, кодирующая полипетиды по любому из пп.1-6.
8. Нуклеотидная последовательность по п.7, кодирующая шесть аминокислотных остатков гистидинов, В-клеточные эпитопы вируса ящура: VP4 (222-241), VP1 (859-883) и (924-937) и Т-клеточных эпитопы: 2С (1175-1183), 3D (1863-1977) и (2283-2322), разделенные «гибкими» глицин-богатыми линкерами G4S2.
9. Рекомбинантная плазмида, содержащая нуклеотидную последовательность по п.7, обеспечивающая синтез гибридного полиэпитопного вакцинного белка для вируса ящура в клетках прокариот или эукариот.
10. Рекомбинантная плазмида по п.9, обеспечивающая синтез гибридного полиэпитопного вакцинного белка для вируса ящура в растениях или клетках растений.
11. Рекомбинантная плазмида по п.9, обеспечивающая синтез гибридного полиэпитопного вакцинного белка для вируса ящура в дрожжах.
12. Рекомбинантная плазмида по п.9, обеспечивающая синтез гибридного полиэпитопного вакцинного белка для вируса ящура в животных клетках.
13. Рекомбинантная плазмида по п.9, обеспечивающая синтез гибридного полиэпитопного вакцинного белка для вируса ящура в бактериях.
14. Состав раствора сольвента для вакцины против вируса ящура на основе полиэпитопного белка по любому из пп.1-5 для иммунизации, представляющий собой водный раствор, содержащий буфер и денатурирующий агент, при этом предпочтительным денатурирующим агентом является мочевина.
15. Состав раствора сольвента по п.14, содержащий в качестве буфера 10 мМ трис(гидроксиметил)аминометан - соляная кислота (Трис-HCl) рН 8,0 и в качестве денатурирующего агента 4 М мочевину.