СПОСОБ ПОВЫШЕНИЯ КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКОЙ ЭФФЕКТИВНОСТИ ТЕРАПИИ ХРОНИЧЕСКОГО АДЕНОИДИТА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ОЗОНИРОВАННОГО МАСЛА
METHOD OF INCREASING CLINICAL EFFECTIVENESS OF IMMUNE THERAPY OF CHRONIC ADENOIDITIS USING OZONIZED OIL

Изобретение относится к медицине, а именно к оториноларингологии, иммунологии, и может быть использовано с целью разработки методов терапии хронического аденоидита, позволяющих нормализовать клиническую картину и корректировать дисфункции факторов колонизационной резистентности поверхности глоточной миндалины у пациентов с хроническим аденоидитом.
Хронический аденоидит и методы его терапии - важная проблема современного здравоохранения, поскольку патология лимфоглоточного кольца занимает одно из первых мест в структуре ЛОР-заболеваний у взрослых и детей [Борзов Е.В. Аденоиды и аденоидиты у детей / Е.В. Борзов. В кн.: Богомильского М.Р., Чистяковой В.Р., ред. Болезни уха, горла, носа в детском возрасте. Национальное руководство. М.: ГЭОТАР-Медиа. - 2008. - С. 323-35]. Кроме того, хронический аденоидит - воспалительное полиэтиологическое заболевание, при котором регистрируется ослабление антигенспецифического иммунного ответа, что проявляется частыми рецидивами и длительным течением [Маккаев Х.М. Клинико-патогенетические основы и эффективность сочетанной терапии хронического аденотонзиллита у детей. Дис. … д-ра мед. наук. Москва, 2003]. Особое место в патогенезе данного заболевания отводится нарушениям функционирования глоточной миндалины, которая располагается в так называемой «стратегической зоне» и регулирует антимикробную защиту макроорганизма, вследствие чего хронический аденоидит представляет собой общемедицинскую проблему, поскольку может вызывать назофарингеальную обструкцию, быть источником хронической инфекции, стать триггерным фактором аутовоспалительной патологии, способствовать развитию патологии среднего уха, околоносовых пазух, вызывать нарушения голосообразования и речи, а также приводить к заболеваниям нижних дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта, нервно-психическим расстройствам, нарушению и задержке развития у детей [Карпова Е.П. Хронический аденоидит у детей: пособие для врачей / Е.П. Карпова, Д.А. Тулупов. М. - 2009. - 52 с.]. Актуальность проблемы определяется также функциональной ролью глоточной миндалины, включающей информационную, регуляторную функцию на местном уровне, участием мукозаассоциированной лифоидной ткани миндалин (MALT) в обеспечении специфической и неспецифической защиты организма и факторов колонизационной резистентности носоглотки [Brandtzaeg P. Potential of nasopharynx-associated lymphoid tissue for vaccine responses in airways / P. Brandtzaeg // American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. - 2011. - Vol. 183, - №12. - P. 1595-1604]. Рядом авторов дисфункции факторов колонизационной резистентности глоточной миндалины и снижение функциональной активности эффекторов врожденного иммунитета рассматривается как одна из возможных причин прогрессирования и хронизации воспалительной патологии аденоидных вегетаций [Быкова В.П. Новые аргументы в поддержку органосохраняющего направления при лечении аденоидов у детей. Детская оториноларингология. - 2013; 2: 18-22], приводящих к депрессии адаптивного иммунитета, повышению риска возникновения и неблагоприятных последствий инфекционной и вирусной патологии.
Изучение механизмов иммунопатогенеза хронического аденоидита, методов его лечения, при клинических нарушениях и дисфункциях факторов колонизационной резистентности глоточной миндалины является актуальной проблемой современной фундаментальной медицинской науки и предпосылкой для создания средств патогенетической коррекции возникающих нарушений [Щетинин С.А. Патология глоточной миндалины - современное состояние вопроса, проблемы и возможные пути решения / С.А. Щетинин, К.С. Зырянова // Вестник Челябинской областной клинической больницы. 2012; 4 (19): 26-8].
Широко распространенное хирургическое лечение хронического аденоидита заключается в удалении ткани глоточной миндалины и выполняется различными способами и методами [Козлов B.C. Аденоиды / B.C. Козлов, В.В. Шиленкова, В.А. Карпов. М.: Полиграфист и издатель. – 2010. - С. 85-99, 172 с.]. Однако проведение аденотомии на высоте иммунологической функции глоточной миндалины или в раннем детском возрасте представляется достаточно серьезным вмешательством в физиологические процессы формирования как местного, так и системного иммунитета, ввиду нарушения естественного процесса созревания и диссеминации генерированных глоточной миндалиной специфически реагирующих клонов, создавая, тем самым, предпосылки для развития местного иммунодефицита [Быкова В.П. Аденоиды и аденоидиты в физиологии и патологии детского возраста / В.П. Быкова, О.А. Бруевич, О.В. Паюшина // Архив патологий. - 2007; 4: 50-55]. Также по литературным данным рецидивы аденоидных вегетаций после аденотомии составляют 45-51%, особенно у детей лимфатического типа конституции [Цветков Э.А. Аденотонзиллиты и их осложнения у детей. Лимфоэпителиальное глоточное кольцо в норме и патологии / Э.А. Цветков. - Спб.: ЭЛБИ. - 2003. - С. 7-83]. Существующий спектр консервативного лечения разнообразен и обусловлен отсутствием длительного эффекта. Кроме того, ряд трудностей консервативной терапии хронического аденоидита обусловлен труднодоступностью глоточной миндалины, близостью важных анатомических структур, сложностью доставки лекарств и проведение санационных мероприятий.
На сегодняшний день существуют ряд способов консервативного лечения хронического аденоидита в детском возрасте. Наиболее ранним является метод перемещения по Проэтцу [Богатищев В.И. О консервативном лечении детей, страдающих синуситами и аденоидами // Журн. ушн., нос. и горл. бол. - 1983. - №3. - С. 35-38. http://www.findpatent.ru/patent/230/2307686.html© FindPatent.ru - патентный поиск, 2012-20153], модифицированный Цыглином А.А. и соавт. [Цыглин А.А. Иммунокоррекция ринитов в сочетании с хроническим аденоидитом / Цыглин А.А., Филиппов Л.Ф., Коценко Т.М. // Всероссийский симпозиум "Проблемы иммунологии в ЛОР". - СПб. - 1994. - С. 45. http://www.findpatent.ru/patent/230/2307686.html, режим доступа 24.07.2015© FindPatent.ru - патентный поиск, 2012-2015]. Данный метод предусматривает закапывание и последующее промывание полости носа и носоглотки методом перемещения различных лекарственных средств. Причем ребенок должен принимать активное участие в процедуре. Недостатком этого способа является отсутствие стойкого лечебного эффекта, большой объем медикаментозного лечения, возможные аллергические реакции на вводимые препараты, негативное отношение детей к проводимым манипуляциям.
Таким образом, поиск неинвазивных методов лечения, влияющих на нормализацию клинической картины и факторов колонизационной резистентности глоточной миндалины при хронических аденоидитах является актуальной и востребованной в клинических условиях проблемой современной медицины. В этом отношении интерес вызывает действие физиотерапевтических факторов, в частности ряда физических методов воздействия на биологические объекты. Ранее исследованиями О.А. Гизингер с соавторами была показана иммуномодулирущая роль физиотерапевтических факторов в комплексной терапии инфекционно воспалительных заболеваний слизистых [Гизингер О.А. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на нейтрофилы и факторы мукозального иммунитета. Дис. … д-ра биол. наук. Челябинск, 2010.; Гизингер О.А. Роль физиотерапевтических воздействий в коррекции дисфункций факторов противоинфекционной защиты организма (Обзор литературы) / О.А. Гизингер, Т.А. Зиганшина, И.В. Семенова // Вестник новых медицинских технологий. – 2011. - Т. 18. - №4. - С. 9-13].
2
Механизм озонотерапии состоит во взаимодействии молекул озона с мембраной иммунокомпетентых клеток и (или) эритроцитов в местах двойных связей ненасыщенных жирных кислот, входящих в состав фосфолипидов клеточных мембран с формированием так называемых озонидов-пероксидов. Эти вещества запускают работу антиоксидантной системы. Сдвиг окислительно-восстановительного равновесия организма, происходящий в результате действия озона, приводит к накоплению окисленного глутатиона и, следовательно, к активации глюкозофосфатного шунта: повышению уровня глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, накоплению восстановленного НАДФ-H, что восстанавливает работу глутатионовой системы, способствует восстановлению окисленных антиоксидантов и усиливает кислородзависимую бактерицидность фагоцитов.
2
На сегодняшний момент для повышения эффективности терапии хронического аденоидита предложен ряд способов, в частности комбинированный способ лечения хронического аденоидита у детей: «Методика применения инфракрасного лазерного излучения при лечении аденоидов и хронических тонзиллитов у детей и ее эффективность» [Патент RU 2307686, МПК A61N 5/067, А61К 31/14, Методика применения инфракрасного лазерного излучения при лечении аденоидов и хронических тонзиллитов у детей и ее эффективность; - заявл. 20.11.2004. CN 1739666 А, опубл.: 01.03.2006, О.А. Свистуненко], включающий проведение эндоскопического орошения глоточной миндалины 10 мл 0,01% раствором мирамистина, разведенным дистиллированной водой в соотношении 1:2 с одномоментным отсасыванием промывной жидкости и дополнительным воздействием расфокусированным когерентным монохроматическим красным светом лазера мощностью 10 мВт/см путем введения световода в каждую половину носа до носоглотки на 5 минут, по одной процедуре в день в течение 5-7 дней.
Недостатками представленного способа являются: травматичность проведения лечения из-за дискомфорта введения одновременно жесткого эндоскопа и электроотсоса, а затем световода в носоглотку ребенка в течение 5-7 минут; влияние катионного детергента-мирамистина, который усиливает клеточный цитолиз эпителиоцитов, повышает гиперчувствительность слизистых оболочек, угнетает мукоцилиарный клиренс, что ведет к сухости и жжению слизистой. Отсутствие постоянной интенсивности, свойственной монохроматичным лазерным системам, не дает возможности использования излучения меньшей интенсивности, а стимулирующие результаты лазеротерапии не всегда эффективны при наличии воспалительного процесса, когда в терапии предпочтительнее получить модулирующий и антиоксидантный эффекты.
2
Одним из способов лечения аденоидита является «Способ лечения хронического аденоидита и тонзиллита у детей» [Патент RU №2391108, МПК А61К 33/14 (2006.01), A61N 5/073 (2006.01), А61К 36/00 (2006.01), А61Р 11/00 (2006.01), А61Р 11/04 (2006.01). Способ лечения хронического аденоидита и тонзиллита у детей. Рос. Федерация; - заявл. 03.02.2009; опубл. 10.06.2010. Терскова Наталья Викторовна (RU), Вахрушев Сергей Геннадьевич (RU)], заключающийся в том, что для лечения хронических аденоидита и тонзиллита у детей проводят одновременно санацию и иммунокоррекцию. Санацию проводят 0,9% раствором хлорида натрия при температуре 37-40°C ежедневно по одной процедуре в течение 7-10 дней. Затем дополнительно проводят светотерапию воздействием на переносицу и/или левую и правую стороны шеи некогерентным поляризованным светом с длиной волны 400-2000 нм плотностью потока световой энергии в минуту 2,4 Дж/см степенью поляризации на выходе 95-98% по 5-10 минут ежедневно в течение 7-10 дней. Иммунокоррекцию проводят препаратом тонзилотрен сублингвально за 30-60 минут до еды ежедневно 3 раза через 6-8 часов в течение 7-10 дней. Способ позволяет повысить эффективность местной и общей иммунизации, улучшить результаты лечения хронических аденоидита и тонзиллита у детей, сократить межрецидивный период. Недостатками метода являются противопоказания к проведению физиотерапевтических, сопровождающихся облучением светом с длиной волны 400-2000 нм и противопоказания к применению препарата тонзилотрен, такие как повышенная чувствительность к хрому или другим компонентам препарата; недостаточность лактазы, непереносимость лактозы, глюкозо-галактозная мальабсорбция; детский возраст до 3 лет, гипертиреоз.
Близким техническим решением является способ лечения хронического тонзиллита, включающий санацию небных миндалин активированным настоем чистотела со смазыванием путем точечной аппликации поверхности небных миндалин раствором препарата «Витагмал» 1 раз в день, на курс 10 процедур с последующим проведением иммунокоррегирующей терапии биологически активной добавкой к пище «Витагмал» однократно сублингвально под язык по 10-12 капель за 40-60 минут до еды в первой половине дня ежедневно в течение 14 дней [Патент РФ 2240132, М. кл. А61К 35/78, 2003 г.]. Недостатками известного способа являются форма выпуска препарата «Витагмал» в виде водно-спиртового раствора, что ограничивает его применение у детей внутрь, а также аппликационно в неразбавленном виде на слизистые оболочки. Эффективность биологически активной добавки «Витагмал», назначаемой пациентам длительное время, требует больших экономических затрат и, вводимая перорально, не имеет достаточной доказательной базы как эффективное средство терапии хроничесого аденоидита.
Начиная с 90-х годов прошлого века Bocci. с соавторами представили доказательную базу о нормализующем влиянии озонотерапии на моноцитарно-макрофагальное звено и раскрыли механизм, согласно которому биологические эффекты связаны с активацией макрофагальной защиты, обусловлены действием озона как мощного индуктора интерферонов-альфа и гамма, фактора некроза опухоли, интерлейкинов семейства 1 и ряда провоспалительных цитокинов, стимулирующего пролиферацию тимоцитов и активирующего Т-киллеры и В-лимфоциты моноцитами и макрофагами [Bocci V. A reasonable approach for the treatment of HIV infection in the early phase with ozonetherapy (autohaemotherapy). How inflammatorycytokines may have a therapeutic role // Mediators of inflammation. - 1994. - T. 3. - № 5. - C. 315-321].
В Российской Федерации использование озонированного масла в качестве средства патогенетической терапии, стимулятора репаративных процессов, модулятора клеточных реакций подтверждено рядом исследовательских работ, в частности Т.М. Бархоткиной [Бархоткина Т.М. Озоновые технологии в ЛОР-практике: показания и противопоказания / Т.М. Бархоткина // Материалы к конференции: Озон, активные формы кислорода и методы интенсивной терапии в медицине. М. - 2009. - С. 75-76] и Щербатюк Т.Г. [Щербатюк Т.Г. Современное состояние и перспективы применения озона в медицине / Т.Г. Щербатюк // Физиологический журнал. - 2007. - №5. - С. 21-29].
Использование озонированного масла на слизистую оболочку для скорейшей репарации послеожогового рубцового стеноза пищевода подтверждено патентом «Способ профилактики послеожогового рубцового стеноза пищевода» [Патент RU №2246312, МПК А61К 35/78, А61Р 17/02. Способ профилактики послеожогового рубцового стеноза пищевода. Рос. Федерация; - заявл. 17.02.2003; опубл. 20.09.2004. Ю.А. Пархисенко, Д.П. Трофимов, В.В. Булыгин, Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко], заключающегося в приеме озонированного растительного масла по 1 чайной ложке 4 раза в день за 20-30 минут до еды. Автор, используя методы доказательной медицины, аргументировано рекомендует использовать озонированное масло с целью профилактики послеожогового стеноза пищевода. Анализ метода терапии, предложенного в патенте, дает возможность использовать озонированное растительное масло для лечения и репарации воспалительных процессов глоточной миндалины.
3
Одним из способов ускорения заживления эрозированной поверхности с использованием озонированной смеси является способ, предложенный в патенте «Способ лечения трофических язв» [Патент RU №2170093, С2, МНК: А61К 33/00, А61К 33/14, А61Н 9/00, А61Н 33/14. Способ лечения трофических язв. Рос. Федерация; - заявл. 20.11.1996; опубл. 10.07.2001. С.Н. Горбунов, Л.В. Горбунова, Ф.И. Ромашов. Патентообладатель: Нижегородская государственная медцинская академия], где озон-кислородную смесь в объеме 40-60 см с концентрацией озона 2000 мкг/л используют одновременно в качестве средства системной и топической терапии. После окончания процедуры на поверхность трофической язвы накладывают повязку с антисептиком. Недостатком метода является трудоемкость и длительность процедуры как для пациента так и для выполняющего процедуру медицинского работника, что потребует дополнительных экономических затрат: после наложения повязки с кислород-озоновой смесью пораженную конечность помещают в изолятор на 50-60 минут с подачей кислород-озоновой смеси, в течение 5-15 минут создают давление 2,5 кПа и в следующие 5-15 минут создают разрежение 2,5 кПа, за сеанс осуществляют 4-5 циклов в изоляторе. Недостатком метода также является обязательное дополнительное использование антисептика, большинство из которых влияют на цитолиз эпителиоцитов и могут задерживать эпителизацию, а длительное применение антисептиков может способствовать формированию антибиотикорезистентности к микроорганизмам в очаге поражения.
Одним из способов усиления процессов эпителизации с использованием озонированного растительного масла является способ, представленный в заявке на изобретение «Способ лечения ран в I фазе раневого процесса» [Заявка на изобретение RU №20061 16865, А, МНК: A61N 7/00, А61К 33/08, А61К 36/00, А61Р 17/02. Способ лечения ран в I фазе раневого процесса; - заявл. 16.05.2007; Г.Э. Карапетян, Ю.С. Винник, С.В. Якимов, А.Г. Сычёв, А.В. Салмина. Заявитель: ГОУ ВПО «Красноярская государственная медицинская академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию RU], при котором озонированное масло с концентрацией озона 8-10 мг/л ежедневно в течение 7-10 дней до окончания эпителизации в течение 60-90 секунд с кавитирующим излучением 26,5 кГц наносится на поверхность раны. Недостатками метода, во-первых, является неточная концентрация озона (интервал от 8 до 10 мг/л), что является серьезным недостатком для выбора оптимальных параметров метода терапии и стандартизации проведения методики. Авторами также не предоставлены доказательства того, что кавитационные воздействия не изменяют концентрацию озона в озонированном масле, что является одним из главных недостатков предлагаемого метода терапии.
Наиболее близким техническим решением, взятым нами за прототип, стал способ, предложенный В.Г. Поздеевым с соавторами «Способ лечения острого и хронического среднего отита» [Патент RU №2040235 C1, МНК A61F 11/00 Способ лечения острого и хронического среднего отита. Рос. Федерация; - заявл. 31.08.1992; опубл. 25.07.1995; В.Г. Поздеев, Г.А. Синегуб, Н.А. Калинина, Г.И. Суколин, А.Б. Яковлев. Патентообладатели: В.Г. Поздеев, Г.А. Синегуб, Н.А. Калинина, Г.И. Суколин, А.Б. Яковлев]. Способ обеспечивает повышение качества терапевтических мероприятий при патологии ЛОР-органов, а именно остром и хроническом среднем отите, путем введения в полость среднего уха в течение 6-8 суток озонированного растительного масла.
В основу нашего изобретения положена задача, заключающаяся в создании способа повышения клинико-иммунологической эффективности терапии хронического аденоидита с использованием озонированного оливкового масла, проявляющим ранозаживляющие, противомикробные, антиоксидантные и иммуномодулирующие эффекты.
Задачей предлагаемого изобретения является устранение недостатков ранее предложенных способов патогенетической терапии, повышение эффективности лечения аденоидита и его переносимости у детей, уменьшение количества требуемых лекарственных препаратов, увеличение периода между рецидивами аденоидита за счет более эффективной санации и активизации факторов колонизационной резистентности глоточной миндалины.
Указанная техническая задача решается за счет внедрения в практику результатов исследования, проведенного с 2013 по 2014 год на базе детской городской клинической больницы №1 города Челябинска (гл. врач Ч.Ю. Ведом) клинико-иммунологического исследования 78 детей в возрасте от 3 до 8 лет с хроническим рецидивирующим аденоидитом в анамнезе. До начала исследования от родителей данных детей или их законных представителей было получено письменное информированное согласие на участие в исследовании в соответствии с основами законодательства РФ «Об охране здоровья граждан, правил проведения клинической практики в РФ» (приказ МЗ РФ №266 от 19.07.03 г.; приказ Росздравнадзора №2325-Пр/06 от 17.10.06 г.). Из исследования были исключены дети с показаниями к назначению системной антибактериальной терапии, с гнойными заболеваниями носа и околоносовых пазух, с клинически значимыми изменениями архитектоники носа, гипертрофией аденоидных вегетаций 3, дети с несанированной полостью рта, острым и хроническим средним отитом, с соматическими заболеваниями в стадии декомпенсации, ВИЧ-инфицированные дети. Для проведения исследования были сформированы 3 группы. Группа 1 состояла из 35 детей (13 мальчиков и 22 девочки) получали орошение полости носа физиологическим раствором хлорида натрия в качестве монотерапии 2 раза в день в течение 10 дней; группа 2 - включала 43 ребенка (17 мальчиков и 26 девочек), которые получали комплексную терапию с использованием озонированного масла; группа 3 - из 12 условно здоровых детей без воспалительной патологии лимфоглоточного кольца Пирогова-Вальдейера и с санированной полостью рта. Озонирование рафинированного оливкового масла для озонотерапии проводилось на медицинском озонаторе "Медозонс БМ" (сертификат соответствия № РОСС RU.AH74.H07406) при следующим режиме: 100 мл масла барботировали в течение 20 минут при концентрации озона в кислородной смеси 10 мг/л. Пациентам из группы 2 на первом этапе проводилось орошение носа изотоническим раствором хлорида натрия, затем при помощи капельной пластиковой пипетки с удлиненным тонким кончиком под контролем эндоскопа озонированное масло наносили на поверхность глоточной миндалины дважды в день в течение 10 дней.
-2
-3
-5
-6
Всем детям до начала лечения проводилось клиническое обследование, сбор анамнеза жизни и заболевания. Забор слюны для исследования цитокинов в количестве 1 мл осуществлялся утром, натощак, предварительно прополоскав рот кипяченой теплой водой. Смыв содержимого с поверхности глоточной миндалины для изучения факторов врожденного иммунитета осуществлялся тонким тупфером под контролем эндоскопа. Субъективная оценка жалоб давалась родителями пациентов или их законными представителями на основании 10-балльной визуально-аналоговой шкалы (ВАШ), где 0 баллов - отсутствие симптома, 10 - максимальное его проявление. Всем детям проводилось эндоскопическое исследование носа и носоглотки интраназально с помощью жесткого эндоскопа «Азимут» с диаметром рабочего тубуса 2,7 мм, с 0° и 30° оптикой по стандартной методике. При выполнении эндоскопии оценивали структуру, степень гипертрофии, наличие или отсутствие слизистого/слизисто-гнойного отделяемого на поверхности глоточной миндалины. При контрольном осмотре через 30 дней от начала терапевтических мероприятий проводился: повторный сбор жалоб с использованием ВАШ для каждой жалобы, инструментальный и эндоскопический осмотр, забор слюны и смыва с поверхности глоточной миндалины. Концентрацию секреторного иммуноглобулина A (slgA), содержание интерлейкина 6 определяли в слюне методом твердофазного ИФА с помощью тест систем «IgA секреторный-ИФА-БЕСТ», «Интерлейкин-6-ИФА-БЕСТ» (Россия). Оптическую плотность конечного продукта ферментативной реакции определяли с помощью иммуноферментного анализатора Stat Fax 2100 (Awareness Tech.Inc., USA) при длине волны 492 нм. Способность нейтрофилов к фагоцитозу проводили на модели поглощения частиц латекса (ВНИИСК; Россия). Исследование внутриклеточного кислородзависимого метаболизма проводили, используя НСТ-тест. Параллельно определяли способность нейтрофилов отвечать повышением метаболической активности на стимуляцию частицами латекса. Был рассчитан функциональный резерв нейтрофилов (ФРН) как соотношение между коэффициентами интенсивности реакции НСТ-индуцированного и НСТ-спонтанного тестов. Число лизосом в цитоплазме фагоцитов исследовали прижизненным окрашиванием акридиновым оранжевым, путем 0,2 мл взвеси нейтрофилов в физиологическом растворе с 0,02 мл раствора акридинового оранжевого в концентрации 2 мкг/мл. Бактериологическое обследование материала с поверхности глоточной миндалины, забранного под контролем эндоскопа, проводилось с определением вида микробов и чувствительности бактериальных штаммов к антибиотикам стандартным диско-диффузным методом трижды в сроки клинического мониторинга. В качестве дифференциально-диагностических сред для стафилококков и коринебактерий был использован кровяной, солевой агар, среда ДИФ. Диагностическим считался титр 103 КОЕ/мл и выше. Посев проводился из разведения 10-10-10-10. Идентификация микроорганизмов проводилась на тест-системах Lachema (Брно, Чешская республика), Micro-La-test, STREPTOtest. Учет результатов проводился на бактериологическом анализаторе iEMS (Labsystems, Финляндия). Наличие кандидозной инфекции подтверждалось результатами микологического исследования с посевом отделяемого на селективные среды: среду Сабуро, сусло-агар с последующей видовой идентификацией грибов рода Candida, для чего материал засевали на две пробирки с твердой средой Сабуро, в которую добавляли антибиотик левомицетин для угнетения сопутствующей бактериальной флоры. Рост культур Candida начинался на 2-й день в виде выпуклых сметанообразных, блестящих и гладких колоний. При микроскопическом исследовании культуры определялись округлые и овальные почкующиеся клетки и нити псевдомицелия. Статистический анализ данных проводился при помощи пакета статистических программ STATISTICA 12.5 (StatSoft, 2014), статистически достоверными считались значения р<0,05.
Анализ клинических проявлений у пациентов с хроническим аденоидитом до начала лечения выявил следующее: жалобы на затруднение носового дыхания у 65 детей, кашель, преимущественно в утренние часы у 63 детей, храп у 59 детей, гнусавость у 58. При первичном осмотре не выявлено статистически достоверного различия между основными симптомами заболевания по данным визуально-аналоговой шкалы (ВАШ) (р>0,05) у пациентов основной и контрольной групп. При контрольном осмотре детей из обеих групп изменение на предъявляемые жалобы в группах 1 и 2 произошло неравномерно. У детей из группы с ирригационным лечение в виде монотерапии достоверно улучшилось носовое дыхание с 7,6±0,5 баллов до 5,7±0,3 и утренний кашель с 8,2±0,6 до 5,8±0,5 по шкале ВАШ (р<0,05), храп и закрытая гнусавость уменьшились с 6,3±0,4 до 5,3±0,5 и с 5,3±0,5 до 4,6±0,4 соответственно, однако достоверность не была выявлена (р>0,05). В исследуемой группе с использованием озонированного масла достоверно уменьшились все жалобы (р<0,05): затруднение носового дыхания с 7,3±0,5 баллов до 3,4±0,4, утренний кашель с 7,9±0,6 до 3,2±0,2, храп 6,1±0,4 до 3,6±0,3, закрытая гнусавость с 5,7±0,5 до 3,9±0,3.
При эндоскопии носоглотки у детей обеих групп была выявлена гипертрофия аденоидов: 1 степени – у 11 детей (у 6 из них была проведена аденотомия), 2 степени – у 67 ребенка. У 70 детей было обнаружено отделяемое на глоточной миндалине, из них преимущественно слизистого характера отмечено у 39 детей, гнойного у 31 ребенка. При контрольном эндоскопическом осмотре отмечено уменьшение количества детей с аденоидами 2 степени: у 2 детей из группы 1 и 4 детей из группы 2, однако достоверность не была получена (р>0,05). В обеих группах уменьшилось количество детей с отделяемым на аденоидных вегетациях (р<0,05): в группе 1 с 31 (89%) до 19 (54%) детей, в группе 2 с 39 (91%) до 10 (23%) человек. Однако в группе пациентов, получавших ирригационное лечение в виде мототерапии, слизистое отделяемое на аденоидных вегетациях сократилось с 17 (49%) до 11 (31%) человек, с гнойным отделяемым с 14 (40%) до 8 (23%) человек. В группе детей, дополнительно получавших озонированное масло, слизистое отделяемое на глоточной миндалине сократилось с 22 (51%) до 7 (16%) человек, гнойное отделяемое с 17 (40%) до 3 (7%) человек. Важным индикатором воспалительного процесса, происходящего на слизистых оболочках, является содержание нейтрофилов. У здоровых оно невелико и сопоставимо с содержанием в периферической крови здоровых людей, но с появлением хронического воспалительного процесса увеличивается. Поскольку лейкоциты на миндалине представлены, в основном, нейтрофилами, которые наряду с другими иммунокомпетентными клетками обеспечивают иммунный надзор, играют важную роль в защите лимфоглоточного кольца от инфекции [Гизингер О.А. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на нейтрофилы и факторы мукозального иммунитета. Дис. … д-ра биол. наук. Челябинск, 2010] и являются компонентом неспецифического звена иммунной системы, нами была подробно изучена их функциональная активность. Так, в смывах с миндалины у больных с хроническим аденоидитом после лечения с применением озонированного масла, достоверно уменьшилось общее число лейкоцитов (р<0,05). После лечения по стандартной схеме также отмечено достоверное уменьшение, однако степень нормализации содержания лейкоцитов в смывах с миндалины была менее выраженной (р<0,05). После использования озонированного масла существенно уменьшилось число жизнеспособных лейкоцитов как по сравнению с уровнем до начала терапии, так и с показателями пациентов, пролеченных по стандартной схеме. При изучении фагоцитарной активности и активности нейтрофилов в НСТ-тесте по их способности поглощать микросферы латекса и восстанавливать нитросиний тетразолий, было установлено снижение изучаемых показателей до лечения и восстановление после проведенной терапии с использованием озонированного масла (табл. 1).
Таким образом, применение озонированного оливкового масла в терапии хронического аденоидита приводит к полному или частичному восстановлению количественного и качественного состава, их поглотительной способности и кислородзависимого метаболизма нейтрофилов поверхности глоточной миндалины.
Анализ содержания slgA в слюне у детей сравниваемых групп показал увеличение исследуемого иммуноглобулина у детей с хроническим аденоидитом в среднем в 1,5-2,5 раза по отношению к показателям детей из группы 3, где он составил 464±12,6 мкг/л (р<0,05), что, по нашему мнению, может быть связано активной продукцией антител в ответ на антигеннную стимуляцию лимфоидных структур глоточной миндалины под влиянием патобионтов, усиливающуюся при воспалительном процессе и не исключает ситуации гиперактивации иммунокомпетентных клеток, функционирующих на пределе своих возможностей. После лечения тенденция к нормализации уровня sIgA в слюне выявлялась только в группе с использованием ирригационной терапии в сочетании с озонированным маслом (р<0,05). Содержание IL-6, повышенное у детей с хроническим аденоидитом (3,78±0,18 пг/мл), в процессе комплексной терапии нормализовалось только у детей из группы 2 (р<0,05). По нашему мнению, восстановление содержания IL-6 связано с купированием воспалительного процесса. В группе детей, пролеченных с использованием ирригационной терапией (группа 1), содержание IL-6 достоверно не изменилось (р 0,05). Таким образом, проведенное исследование указывает на наличие положительной клинической динамики и иммуномодулирующего действия озонированного масла по уровням нейтрофилов на поверхности глоточной миндалины, содержания IL-6, sIgA, что позволяет рекомендовать его в комплексной терапии для лечения детей с хроническим аденоидитом.
5
6
4
Поскольку резидентная микрофлора является одним из важнейших факторов колонизационной резистентности, то микробиологическое исследование поверхности глоточной миндалины проводилось у 100% детей всех сравниваемых групп, включенных в исследование. Наиболее часто встречаемыми патобионтами хронического рецидивирующего аденоидита были: S. aureus, S. pneumoniae, H. influenzae, реже S. β-haemolyticus, М. catarrhalis, К. pneumoniae, Candida spp. В 87% случаев были выявлены ассоциации резидентной флоры из S.  в количестве 10-10 КОЕ/мл и S. epidermidis в количестве 10 КОЕ/мл с патогенной микрофлорой. У детей, получавших терапию озонированным оливковым маслом, через 30 дней от начала лечения регистрировалось значительное уменьшение штаммов патогенной микрофлоры, отмечена полная санация от Н.influenzae и М. catarrhalis на фоне скудного роста остальных патобионтов при неизменном уровне резидентной микрофлоры. В группе сравнения (дети, пролеченные без использования озонированного растительного масла) отмечено незначительное уменьшение (р≥0,05) патогенной микрофлоры по окончании курса элиминационной терапии, однако положительная динамика в снижении количества патобионтов отсутствовала и контаминация патогенными штаммами через 30 дней от начала лечения практически вернулась к исходному количеству (табл. 2).
Таким образом, способ повышения клинико-иммунологической эффективности терапии хронического аденоидита с использованием озонированного оливкового масла способствует повышению активности фагоцитов поверхности глоточной миндалины по их способности захватывать частицы латекса и генерации активных форм кислорода, выраженной в повышении активности фагоцитоза нейтрофилов на 89%, интенсивности фагоцитоза нейтрофилов на 45%, усилении активности спонтанного HCT-теста на 61%, усилении интенсивности спонтанного HCT-теста на 54%, увеличении интенсивности индуцированного HCT-теста на 95%, снижении активности индуцированного HCT-теста на 51%, увеличении функционального резерва нейтрофилов, рассчитанного по показателям активности HCT-теста нейтрофилов с поверхности глоточной миндалины, на 98%, снижении лизосомальной активности нейтрофилов с поверхности глоточной миндалины на 51%, увеличении содержания секреторного иммуноглобулина А на 18%.
Применение способа повышения клинико-иммунологической эффективности терапии хронического аденоидита с использованием озонированного оливкового масла позволяет расширить знания о иммунопатогенезе данного заболевания и предложить способ терапии и коррекции дисфункций факторов колонизационной резистентности поверхности глоточной миндалины.
Предлагаемый способ отличается от существующих тем, что используя комплексную клинико-иммунологическую оценку действия озонированного растительного масла, приобретается возможность более качественно, без использования дорогостоящих и имеющих побочные эффекты препаратов провести оценку иммунопатогенеза хронического аденоидита, выявить клинические и иммунологические нарушения при данном заболевании и предложить метод терапии, показавший высокую клинико-иммунологическую эффективность. Ввиду корректности метода, простоты выполнения манипуляций и дешевизны лабораторных иммунологических методов исследования указанный способ терапии доступен в практике врача оториноларинголога амбулаторных, стационарных, санаторно-курортных учреждений медико-биологических центров, занимающихся изучением и решением соответствующей проблемы.
Заявляемый способ может найти широкое применение в терапии заболеваний ЛОР-органов, иммунологии для разработки методов патогенетической терапии хронического аденоидита и коррекции факторов колонизационной резистентности поверхности глоточной миндалины, что свидетельствует о его соответствии критерию "промышленная применимость"
Литература
1. Бархоткина Т.М. Озоновые технологии в ЛОР-практике: показания и противопоказания / Т.М. Бархоткина // Материалы к конференции: Озон, активные формы кислорода и методы интенсивной терапии в медицине. М. - 2009. - С. 75-76.
2. Богатищев В.И. О консервативном лечении детей, страдающих синуситами и аденоидами // Журн. ушн., нос. и горл. бол. - 1983. - №3. - С. 35-38. http://www.findpatent.ru/patent/230/2307686.html© FindPatent.ru - патентный поиск, 2012-20153.
3. Борзов Е.В. Аденоиды и аденоидиты у детей / Е.В. Борзов. В кн.: Богомильского М.Р., Чистяковой В.Р., ред. Болезни уха, горла, носа в детском возрасте. Национальное руководство. М.: ГЭОТАР-Медиа. - 2008. - С. 323-35.
4. Быкова В.П. Аденоиды и аденоидиты в физиологии и патологии детского возраста / В.П. Быкова, О.А. Бруевич, О.В. Паюшина // Архив патологий. 2007; 4: 50-55.
5. Быкова В.П. Новые аргументы в поддержку органосохраняющего направления при лечении аденоидов у детей. Детская оториноларингология. 2013; 2: 18-22.
6. Гизингер О.А. Влияние низкоинтенсивного лазерного излучения на нейтрофилы и факторы мукозального иммунитета. Дис. … д-ра биол. наук. Челябинск, 2010.
7. Карпова Е.П. Хронический аденоидит у детей: пособие для врачей / Е.П. Карпова, Д.А. Тулупов. М. – 2009. - 52 с.
8. Козлов B.C. Аденоиды / B.C. Козлов, В.В. Шиленкова, В.А. Карпов // М.: Полиграфист и издатель. - 2010. - С. 85-99, 172 с.
9. Маккаев Х.М. Клинико-патогенетические основы и эффективность сочетанной терапии хронического аденотонзиллита у детей. Дис. … д-ра мед. наук. Москва, 2003.
10. Цветков Э.А. Аденотонзиллиты и их осложнения у детей. Лимфоэпителиальное глоточное кольцо в норме и патологии / Э.А. Цветков. - Спб.: ЭЛБИ. - 2003. - С. 7-83.
11. Цыглин А.А. Иммунокоррекция ринитов в сочетании с хроническим аденоидитом / Цыглин А.А., Филиппов Л.Ф., Коценко Т.М.// Всероссийский симпозиум "Проблемы иммунологии в ЛОР". - СПб. - 1994. - С. 45. http://www.findpatent.ru/patent/230/2307686.html, режим доступа 24.07.2015© FindPatent.ru - патентный поиск, 2012-2015.
12. Щербатюк Т.Г. Современное состояние и перспективы применения озона в медицине / Т.Г. Щербатюк // Физиологический журнал. - 2007. - №5. - С. 21-29.
13. Щетинин С.А. Патология глоточной миндалины - современное состояние вопроса, проблемы и возможные пути решения / С.А. Щетинин, К.С. Зырянова. Вестник Челябинской областной клинической больницы. 2012; 4 (19): 26-8.
14. Brandtzaeg P. Potential of nasopharynx-associated lymphoid tissue for vaccine responses in airways / P. Brandtzaeg // American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. - 2011. - Vol. 183, №12. - P. 1595-1604.
15. Bocci V. A reasonable approach for the treatment of HIV infection in the early phase with ozonetherapy (autohaemotherapy). How 'inflammatory' cytokines may have a therapeutic role // Mediators of inflammation. 1994. - T. 3. - №5. - C. 315-321.