АРГИНИНОВАЯ ПРОМЫВКА ДЛЯ ОЧИСТКИ БЕЛКОВ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ АФФИННОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

1. Способ выделения продукта, включающий:
обеспечение загрузочной жидкости, содержащей продукт и одну или более примесей;
осуществление контакта загрузочной жидкости со средой, причем среда способна связывать продукт в условиях, подходящих для связывания продукта, с получением связанной среды;
осуществление контакта связанной среды с одним или более промывочными растворами, пропускаемыми через связанную среду, причем по меньшей мере один промывочный раствор содержит аргинин, и при этом концентрация аргинина не равна 1 М, с получением промытой среды;
осуществление контакта промытой среды с раствором для элюирования в условиях, подходящих для элюирования продукта, и
сбор элюата, содержащего продукт.
2. Способ выделения продукта, включающий:
обеспечение загрузочной жидкости, содержащей продукт и одну или более примесей;
осуществление контакта загрузочной жидкости со средой, причем среда обладает способностью связывать продукт в условиях, подходящих для связывания продукта, с получением связанной среды;
осуществление контакта связанной среды с одним или более промывочными растворами, пропускаемыми через связанную среду, где по меньшей мере один промывочный раствор содержит аргинин, при этом концентрация аргинина составляет от приблизительно 0,1 М до приблизительно 0,9 М, с получением промытой среды;
осуществление контакта промытой среды с раствором для элюирования в условиях, подходящих для элюирования продукта, и
сбор элюата, содержащего продукт.
3. Способ выделения продукта, включающий:
обеспечение загрузочной жидкости, содержащей продукт и одну или более примесей;
осуществление контакта загрузочной жидкости со средой, причем среда обладает способностью связывать продукт в условиях, подходящих для связывания продукта, с получением связанной среды;
осуществление контакта связанной среды с одним или более промывочными растворами, пропускаемыми через связанную среду, причем по меньшей мере один промывочный раствор содержит аргинин, при этом концентрация аргинина составляет от приблизительно 1,1 М до приблизительно 2,0 М, с получением промытой среды;
осуществление контакта промытой среды с раствором для элюирования в условиях, подходящих для элюирования продукта, и
сбор элюата, содержащего продукт.
4. Способ выделения продукта, включающий:
обеспечение загрузочной жидкости, содержащей продукт и одну или более примесей;
осуществление контакта загрузочной жидкости со средой, причем среда обладает способностью связывать продукт в условиях, подходящих для связывания продукта, с получением связанной среды;
осуществление контакта связанной среды с одним или более промывочными растворами, пропускаемыми через связанную среду, причем по меньшей мере один промывочный раствор включает производное аргинина, с получением промытой среды;
осуществление контакта промытой среды с раствором для элюирования в условиях, подходящих для элюирования продукта, и
сбор элюата, содержащего продукт.
5. Способ по любому из пп.1-4, в котором продукт представляет собой белок.
6. Способ по любому из пп.1-4, в котором продукт представляет собой антитело.
7. Способ по п.6, в котором антитело специфично к GDF-8.
8. Способ по п.6, в котором антитело специфично к IL-13.
9. Способ по п.6, в котором антитело специфично к IL-22.
10. Способ по п.6, в котором антитело специфично к RAGE.
11. Способ по п.6, в котором антитело специфично к А-бета.
12. Способ по любому из пп.1-4, в котором продукт представляет собой антиген-связывающий фрагмент.
13. Способ по любому из пп.1-4, в котором продукт представляет собой рекомбинантный белок, содержащий иммуноглобулин.
14. Способ по любому из пп.1-4, в котором продукт представляет собой рекомбинантный белок, Fc-содержащий белок, иммуноконъюгат, цитокин, гормон или терапевтический фермент.
15. Способ по любому из пп.1-4, в котором среда представляет собой хроматографическую колонку с белком А.
16. Способ по любому из пп.1-4, где среда представляет собой хроматографическую колонку с белком G.
17. Способ по п.4, в котором концентрация производного аргинина в промывочном растворе составляет от приблизительно 0,1 М до приблизительно 2,0 М.
18. Способ по п.1, в котором концентрация аргинина в промывочном растворе составляет от приблизительно 0,1 М до приблизительно 0,9 М.
19. Способ по п.1, в котором концентрация аргинина в промывочном растворе составляет от приблизительно 1,1 М до приблизительно 2,0 М.
20. Способ по п.1, в котором концентрация аргинина в промывочном растворе составляет от приблизительно 0,5 М.
21. Способ по п.4, в котором производное аргинина представляет собой ацетиларгинин, агматин, аргининовую кислоту, N-альфа-бутироил-L-аргинин или N-альфа-пивалоил-аргинин.
22. Способ по любому из пп.1-4, 7-11 или 17-21, в котором рН промывочного раствора составляет от приблизительно 4,5 до приблизительно 8,0.
23. Способ по любому из пп.1-4, 7-11 или 17-21, в котором рН промывочного раствора выше 4,5 и ниже приблизительно 8,0.
24. Способ по любому из пп.1-4, 7-11 или 17-21, в котором рН промывочного раствора приблизительно составляет 7,5.
25. Способ по любому из пп.1-4, 7-11 или 17-21, в котором указанные одна или несколько примесей представляют собой клетки-хозяина, нуклеиновую кислоту, вариант продукта, эндотоксин, Белок А или Белок G.
26. Способ по любому из пп.1-4, 7-11 или 17-21, в котором указанные одна или несколько примесей представляют собой вирус или его фрагмент.
27. Способ по любому из пп.1-4, 7-11 или 17-21, в котором раствор для элюирования содержит по меньшей мере один компонент из следующих: хлорид натрия, аргинин или его производное, глицин, HEPES и уксусная кислота.
28. Способ по любому из пп.1-4, 7-11 или 17-21, в котором раствор для элюирования имеет рН от приблизительно 2 до приблизительно 4.
29. Способ по любому из пп.1-4, 7-11 или 17-21, в котором элюат содержит выделенный продукт, и чистота выделенного продукта увеличена по сравнению с соответствующим способом, в котором в промывочном растворе содержится менее 0,1 М аргинина или производного аргинина.
30. Способ по любому из пп.1-4, 7-11 или 17-21, в котором элюат содержит выделенный продукт, причем отношение продукта к по меньшей мере одной примеси увеличено по сравнению с соответствующим способом, в котором промывочный раствор не содержит детектируемого количества аргинина или производного аргинина.
31. Способ по любому из пп.1-4, 7-11 или 17-21, в котором элюат содержит продукт, причем отношение продукта к белку клетки-хозяина увеличено по сравнению с соответствующим способом, в котором промывочный раствор содержит менее 0,1 М аргинина или производного аргинина.
32. Способ по любому из пп.1-4, 7-11 или 17-21, в котором элюат содержит продукт, причем отношение продукта к белку клетки-хозяина увеличено по сравнению с соответствующим способом, в котором промывочный раствор не содержит детектируемого количества аргинина или производного аргинина.
33. Способ по любому из пп.1-4, 7-11 или 17-21, в котором мутность элюата снижена по сравнению с соответствующим способом, в котором промывочный раствор содержит менее 0,1 М аргинина или производного аргинина.
34. Способ по любому из пп.1-4, 7-11 или 17-21, в котором мутность элюата снижена по сравнению с соответствующим способом, в котором промывочный раствор не содержит детектируемого количества аргинина или производного аргинина.
35. Способ по любому из пп.1-4, 7-11 или 17-21, в котором продукт в элюате подвергают дополнительной очистке и/или изготавливают для терапевтического применения.
36. Продукт, приготовленный способом по любому из пп.1-35.
37. Способ по любому из пп.1-4, 7-11 или 17-21, в котором на этапе (а) по меньшей мере одна примесь связана с продуктом и на этапе (с) осуществление контакта связанной среды с одним или несколькими промывочными растворами, пропускаемыми через связанную среду, обеспечивает удаление по меньшей мере одной из вышеупомянутых примесей, связанных с продуктом.
38. Способ для выделения антитела, включающий:
обеспечение загрузочной жидкости, содержащей антитело и одну или более примесей;
осуществление контакта загрузочной жидкости со средой, содержащей белок А, или средой, содержащей белок G, причем среда обладает способностью связывать антитело в условиях, подходящих для связывания антитела, с получением связанной среды;
осуществление контакта связанной среды с одним или более промывочными растворами, причем по меньшей мере один промывочный раствор содержит аргинин, и при этом концентрация аргинина не равна 1 М, с получением промытой среды;
осуществление контакта промытой среды с раствором для элюирования в условиях, подходящих для элюирования антитела, и
сбор элюата, содержащего антитело,
причем отношение антитела к белку клетки-хозяина в элюате увеличено, и мутность элюат снижена по сравнению с элюатом, полученным в соответствующем способе, в котором в промывочный раствор не содержит детектируемого количества аргинина или производного аргинина.
39. Способ по п.38, в котором на этапе (с) рН промывочного раствора составляет от приблизительно 4,5 до приблизительно 8,0.
40. Способ по п.38, в котором концентрация аргинина или производного аргинина в промывочном растворе составляет от приблизительно 0,1 М до приблизительно 0,9 М.
41. Способ по п.38, в котором концентрация аргинина или производного аргинина в промывочном растворе составляет от приблизительно 1,1 М до приблизительно 2,0 М.
42. Способ по п.38, в котором концентрация аргинина или производного аргинина в промывочном растворе составляет приблизительно 0,5 М.
43. Способ снижения мутности элюата, содержащего продукт, включающий:
обеспечение загрузочной жидкости, содержащей продукт и одну или более примесей;
осуществление контакта загрузочной жидкости со средой, причем среда обладает способностью связывать продукт в условиях, подходящих для связывания продукта, с получением связанной среды;
осуществление контакта связанной среды с одним или более промывочных растворов, причем по меньшей мере один промывочный раствор содержит аргинин, и при этом концентрация аргинина не равна 1 М, с получением промытой среды;
осуществление контакта промытой среды с раствором для элюирования в условиях, подходящих для элюирования продукта, с получением элюата, содержащего продукт, и
нейтрализацию элюата,
при этом элюат имеет мутность, сниженную по сравнению с соответствующим способом, в котором в промывочный раствор не содержит детектируемого количества аргинина или производного аргинина.
44. Способ по п.43, в котором рН нейтрализованного элюата составляет от приблизительно 6,5 до приблизительно 8,2.
45. Способ по п.43 или 44, в котором на этапе (с) промывочный раствор содержит производное аргинина в концентрации от приблизительно 0,1 М до приблизительно 2,0 М.
46. Способ по п.43 или 44, в котором на этапе (с) промывочный раствор содержит аргинин или производное аргинина в концентрации от приблизительно 0,1 М до приблизительно 0,9 М.
47. Способ по п.43 или 44, в котором на этапе (с) промывочный раствор содержит аргинин или производное аргинина в концентрации от приблизительно 1,1 М до приблизительно 2,0 М.
48. Способ по п.43 или 44, в котором на этапе (с) промывочный раствор содержит аргинин или производное аргинина в концентрации приблизительно 0,5 М.
49. Способ по любому из пп.43 или 44, в котором рН промывочного раствора составляет от приблизительно 4,5 до приблизительно 8,0.
50. Способ по любому из пп.п.43 или п.44, отличающийся тем, что способ не включает предварительную анионную адсорбционную фильтрацию.
51. Способ снижения мутности и уменьшения количества примесей в элюате, содержащем продукт, включающий:
обеспечение загрузочной жидкости, содержащей продукт и одну или более примесей;
осуществление контакта загрузочной жидкости со средой, причем среда обладает способностью связывать продукт в условиях, подходящих для связывания продукта, с получением связанной среды;
осуществление контакта связанной среды с одним или более промывочными растворами, пропускаемыми через связанную среду, причем по меньшей мере один промывочный раствор содержит аргинин или производное аргинина, и при этом концентрация аргинина не равна 1 М, с получением промытой среды;
осуществление контакта промытой среды с раствором для элюирования в условиях, подходящих для элюирования продукта, с получением элюата, содержащего продукт, и
нейтрализация элюата,
при этом отношение продукта к по меньшей мере одной примеси в элюате увеличено, и элюат имеет мутность, сниженную по сравнению с соответствующим способом, в котором промывочный раствор не содержит детектируемого количества аргинина или производного аргинина.
52. Способ по п.51, в котором на этапе (с) концентрация производного аргинина в промывочном растворе составляет от приблизительно 0,1 М до приблизительно 2,0 М.
53. Способ по п.51, в котором на этапе (с) концентрация аргинина или производного аргинина в промывочном растворе составляет от приблизительно 0,1 М до приблизительно 0,9 М.
54. Способ по п.51, в котором на этапе (с) концентрация аргинина или производного аргинина в промывочном растворе составляет от приблизительно 1,1 М до приблизительно 2,0 М.
55. Способ по п.51, в котором на этапе (с) концентрация аргинина или производного аргинина в промывочном растворе составляет приблизительно 0,5 М.
56. Способ по любому из пп.51-55, в котором рН промывочного раствора составляет от приблизительно 4,5 до приблизительно 8,0.
57. Способ по любому из пп.51-55, отличающийся тем, что способ не включает предварительную анионную адсорбционную фильтрацию.
58. Способ выделения продукта, включающий:
обеспечение загрузочной жидкости, содержащей продукт и одну или более примесей;
осуществление контакта загрузочной жидкости со средой, причем среда обладает способностью связывать продукт в условиях, подходящих для связывания продукта, с получением связанной среды;
осуществление контакта связанной среды с одним или более промывочными растворами, пропускаемыми через связанную среду, причем по меньшей мере один промывочный раствор содержит аргинин, и при этом концентрация аргинина или производного аргинина выше 1,0 М, с получением промытой среды;
осуществление контакта промытой среды с раствором для элюирования в условиях, подходящих для элюирования продукта, и
сбор элюата, содержащего продукт.
59. Способ выделения продукта, включающий:
обеспечение загрузочной жидкости, содержащей продукт и одну или более примесей;
осуществление контакта загрузочной жидкости со средой, где среда обладает способностью связывать продукт в условиях, подходящих для связывания продукта, с получением связанной среды;
осуществление контакта связанной среды с одним или более промывочными растворами, пропускаемыми через связанную среду, причем по меньшей мере один промывочный раствор содержит аргинин, и при этом концентрация аргинина или производного аргинина менее 1,0 М, с получением промытой среды;
осуществление контакта промытой среды с раствором для элюирования в условиях, подходящих для элюирования продукта, и
сбор элюата, содержащего продукт.
60. Способ по любому из пп.37-44, 51-55 или 58 и 59, где продукт в элюате подвергается дальнейшей очистке и/или рекомендуется для терапевтического использования.