Полиморфизм системы HLA в дифференциальной диагностике актуальной детской урологической патологии

Полиморфизм системы HLA в дифференциальной диагностике ...

453

М. П. Разин, Г. А. Зайцева, М. А. Батуров, В. И. Лапшин, С. Ю. Кузнецов

Полиморфизм системы HLA в дифференциальной диагностике актуальной детской урологической патологии

ГБОУ ВПО «Кировская государственная медицинская академия»

Минздрава России

В последнее время отмечается заметное увеличение удельного в еса врожденных заболеваний в педиатрии и стойкий рост патологии мочевыделительной системы у детей, что придает высокую актуальность вопросам изучения этиопатогенеза, диагностики, дифференциальной диагностики и лечения этой патологии [1, 2, 4].

Под нашим наблюдением находилось 134 ребенка от 5 до 15 лет с различными врожденными обструктивными уропатия-ми (ВОУ): синдром Фрелея у 1,5% больных, пиелоэктазия -у 22,8%, врожденный гидронефроз 2-3 степени - у 68,4%, врожденный пузырно-мочеточниковый рефлюкс - у 4,4%, врожденный обструктивный уретерогидронефроз - у 2,9%. У 117 детей (87,3%) течение основной патологии осложнялось наслоением вторичного пиелонефрита. Нами изучались особенности распределения антигенов HLA, их фенотипических и гаплотипических комбинаций. Идентификацию локусов HLA-A, HLA-B, HLA-C проводили в двухступенчатом микролимфоцитотоксическом тесте, локуса HLA-DR и локуса HLA-DQ - с помощью полимеразной цепной реакции с набором специфических праймеров. При этом в локусе HLA-A определяли 15 специфичностей, в локусе HLA-B -28, в локусе HLA-C - 4, в локусе HLA-DR - 14 и в локусе HLA-DQ -12 специфичностей. Частоту встречаемости изучавшихся антигенов определяли как % индивидов, несущих антиген, к общему числу обследованных в группе. Частоту фенотипических сочетаний антигенов находили отдельно для локусов HLA-A и HLA-B, частоту гаплотипических сочетаний антигенов рассчитывали по формуле Mattiuz P. Для установления существенности различий

454

Вопросы клинической и экспериментальной медицины

в характере распределения антигенов в сравниваемых группах определяли критерий согласия (Х2) с поправкой на непрерывность вариаций; Х2 переводили в коэффициент достоверности различий (Р). Для определения степени ассоциации различных форм ВОУ с иммуногенетическими параметрами по формуле Sweigaard A. вычисляли критерий относительного риска (RR), который обнаруживает, как часто данное заболевание или состояние развивается у лиц, имеющих определенный HLA-антиген, по сравнению с теми, у кого его нет. Принято считать, что при RR > 2,0 существует положительная ассоциация признака с заболеванием. Чтобы количественно охарактеризовать силу такой связи, вычисляли величину этиологической фракции (EF). Контрольную группу в этих исследованиях составили 253 здоровых ребенка той же популяционной группы.

У больных с ВОУ [5] констатировалось наличие положительной ассоциативной связи заболевания с антигеном В8 (19,9% против 10,5% в контроле; Х2=4,3; Р<0,05; RR=2,1; EF=0,14) и с межлокусными комбинациями антигенов A2-B17 (5,15% против 0,2% в контроле, RR=8,49) и A3-B13 (3,4% против 0,9% в контроле, RR=3,1).

В течении ВОУ, в выраженности клинических проявлений заболевания наблюдается явная зависимость от осложненности основной патологии вторичным инфекционным процессом [6]. Поэтому представлялось важным выяснить, можно ли прогнозировать присоединение вторичной инфекции? С этой целью мы провели типирование в группе детей с ВОУ, осложненными пиелонефритом. Выяснилось, что у этих больных отмечалась достоверная положительная ассоциация заболевания с наличием в фенотипе межлокусной комбинации антигенов A11-B27 (0,85% против 0,01% в контроле, RR=2,7).

В ходе исследования нами была предпринята попытка выяснить, имеются ли особенности в представительстве иммуногенетических маркеров в зависимости от нозологической формы патологии. С этой целью была проанализирована группа детей, больных самой распространенной ВОУ - врожденным гидронефрозом [3]. Было обнаружено, что у них достоверно чаще встречается антиген B8 (21,5% против 10,5% в контроле; Х2 =4,8; Р<0,05; RR=2,32; EF=0,1) и антиген DRB1*17(3) (31,6% против 14,6% в контроле; Х2 =6,4; Р<0,05; RR=2,7; EF=0,15), а также фенотипическая комбинация B8-35 (5,4% против 0,65%; Х2 =3,86; Р<0,05; RR=6,32). Кроме того, у больных этой группы отмечена положительная ассоциативная связь с гаплотипическими сочетаниями A1-B27 (4,3% против 1,9% в контроле; RR=2,05), A2-B17

Полиморфизм системы HLA в дифференциальной диагностике ...

455

(3,2% против 0,2% в контроле; RR=5,5), A2-B35 (11,8% против 1% в контроле, RR=9,22).

Нас интересовало, имеются ли отличия в полиморфизме антигенов HLA у больных пиелоэктазией, которая долгое время ассоциировалась некоторыми исследователями с первой степенью развития гидронефроза. В ходе обследования детей с этим состоянием была выявлена достоверная положительная ассоциативная связь с носительством HLA-антигена В-8 (30,3% против 10,5% в контроле, Х2 =8,4; Р<0,01; RR=4,07; EF=0,075) и гаплоти-пических комбинаций A2-B17 (12,9% против 0,2% в контроле, RR=21,9) и A1-B5 (3,23% против 0,5% в контроле, RR=3,83).

Наличие определенных иммуногенетических детерминантов у детей с различными формами ВОУ определяет возможность использования методов HLA-типирования для дифференциальной диагностики врожденных обструкций со схожими заболеваниями и состояниями, для определения риска прогрессирования гидронефротической трансформации и риска осложнения течения обструктивной патологии вторичным инфекционным процессом.

Список литературы

1. Состояние иммунологической реактивности при обструктивном пиелонефрите, вызванном врожденным гидронефрозом / В. Н. Галкин, М. П. Разин, О. Г. Сизова [и др.] // Пермский медицинский журнал. - 2000. - Т. XVII, № 1. - С. 7-9.

2. Иммунные нарушения при врожденном гидронефрозе, осложненном обструктивным пиелонефритом / Я. Ю. Иллек, Г. А. Зайцева, М. П. Разин, В. Н. Галкин [и др.] // Урология. - 2001. -№ 2. - С .42-45.

3. Иммуногенетика врожденного гидронефроза / М. П. Разин, Я. Ю. Иллек, Г. А. Зайцева [и др.] // Детская хирургия. - 2003. - № 1. - С. 20-22.

4. Сухих, Н. К. Опыт оперативного лечения гидронефротической трансформации у новорожденных / Н. К. Сухих, М. П. Разин // Детская хирургия. - 2004. - № 4. - С. 46-47.

5. Разин, М. П.Иммуногенетика врожденных обструктивных уропатий у детей / М. П. Разин, Г. А. Зайцева, Я. Ю. Иллек // Урология. - 2007. - № 2. - С. 71-76.

6. Immunogenetic markers of predisposition and resistance to the obstructive pyelonephritis at children / M. P. Razin, I. V. Zykova, A. P. Razin, V. A. Makhneva // European journal of natural history. -2009. - № 5. - Р. 50-51.