Устройство для подготовки цитологического мазка биологических жидкостей к проведению экспресс-анализа клеточного состава

Полезная модель относится к области медицины и биологии и касается морфологического, физиологического исследования цитологических характеристик суспензий клеток трахеобронхиального секрета.
Иногда возникает необходимость исследования клеточного состава мазка биологических жидкостей в экстремальных условиях, например, в момент движения различных типов транспортных средств, включая космические аппараты, авиацию, морской флот и др. Недостатком известных экспресс-методов лабораторной диагностики является то, что они не позволяют проводить цитологическую фиксацию, окрашивание и др. мазков биологических жидкостей в момент свободного падения тел. Такая ситуация регулярно возникает, например, в космосе. Известен способ, который позволяет осуществить окрашивание мазка крови в условиях космического полета, и других ситуаций, приводящих к свободному падению тел во время движения транспортного средства /1, Боев С.Ф., Верденская Н.В., Виноградов А.Г., Гусев А.А., Иванова И.А., Козинец Г.И., Погорелов В.М., Сазонов В.В. Способ анализа клеточного состава крови по мазку. Патент RU 2184966/. На предметные стекла без мазка наноситься краситель, который потом высушивается, на него наноситься мазок крови, окрашивание клеток идет во влажной атмосфере. Недостатком известного способа является то, что он осуществляется без химической фиксации цитологического мазка, а так же то, что проводиться без отмывки цитологического препарата.
Техническая проблема, решаемая данной полезной моделью, состоит в создании устройства, позволяющего осуществить экспресс-анализ клеточного состава мазка биологических жидкостей, а именно химической фиксации, цитологического окрашивания, отмывки цитологического мазка биологической жидкости, в условиях свободного падения тел механической системы.
Сущность заявленного изобретения заключается в том, что с помощью пластикового стаканчика, в котором на 2/3 его высоты установлены два валика, пропитанных реагентом, осуществляется химическая фиксация, цитологическое окрашивание, отмывки цитологического мазка биологической жидкости путем опускания предметного стекла в узкое щелевое отверстие между поролонами, прорывая мембрану на валиках.
Полезная модель иллюстрируется чертежами, где на Фиг. 1 - Схема окрашивания цитологического мазка, на Фиг. 2 - Контакт валика поролона с предметным стеклом во время окрашивания и др. цитологического мазка; I - вид контакта валика поролона с предметным стеклом сбоку, II - вид контакта валика поролона с предметным стеклом сверху.
Устройство состоит из пластикового стаканчика 1, крышки стаканчика 2, валиков поролона 3, узкого щелевидного отверстия 4, подставки стаканчика 5, мембраны 6, предметного стекла 7.
Устройство работает следующим образом:
1. Предметное стекло с мазком любой биологической жидкости помещается в пластиковый стаканчик емкостью 50 мл без поролона, на дне которого находиться влагопоглотитель, например силикагель, стаканчик плотно закрывается крышкой, мазок высушивают на воздухе, при комнатной температуре в течение 5-24 часов.
2. Цитологический мазок любой биологической жидкости на предметном стекле после высушивания фиксируется, окрашивается, отмывается с помощью валиков поролона 3, пропитанных реагентами, которые для герметизации помещаются в пластиковый стаканчик 1 емкостью 50 мл (см. Фиг. 1.)
Примеры проводимых анализов.
А. Фиксация. Цитологический препарат помещается в стаканчик А, содержащий валики поролона 3, которые пропитаны 50% раствором формалина в глицерине. Стаканчик сверху закрывается герметичной крышкой 2. Сверху над слоем поролона, находиться мембрана 6, которая герметично закрывает содержимое стаканчика. Мембрана изготовлена из полиэтиленовой пленки. В момент помещения предметного стекла в узкое щелевидное отверстие 4 между поролонами мембрана прорывается предметным стеклом. После чего предметное стекло 7 помещается в реакционную среду, которая пропитывает поролон. Предметное стекло находиться в узком щелевидном отверстии 4, которое делит поролон на две части. Цитологическая фиксация производиться на протяжении 30 минут.
Б. Для цитологического окрашивания (емкость 50 мл.) препарат помещается в стаканчик Б с валиками поролона 3, который пропитан концентрированным раствором Романовского-Гимза на основе этилового спирта. Стаканчик сверху закрывается герметичной крышкой 2. Сверху над слоем поролона, находиться мембрана 6, которая герметично закрывает содержимое стаканчика. Мембрана изготовлена из полиэтиленовой - пленки. В момент окраски цитологического мазка мембрана прорывается предметным стеклом. После чего предметное стекло 7 помещается в реакционную среду, которая пропитывает поролон. Предметное стекло находиться в узком щелевидном отверстии 4, которое делит поролон на две части. Цитологическая окраска производиться на протяжении 5 минут.
В. Для промывки (емкость 50 мл.) препарат помещается в стаканчик В с валиками поролона 3, который пропитанный 50% водным растром глицерина. Стаканчик сверху закрывается герметичной крышкой 2. Сверху над слоем поролона, находиться мембрана 6, которая герметично закрывает содержимое стаканчика. Мембрана изготовлена из полиэтиленовой пленки. В момент промывки цитологического мазка мембрана прорывается предметным стеклом. После чего предметное стекло 7 помещаться в реакционную среду, которая пропитывает поролон. Предметное стекло находиться в узком щелевидном отверстии 4, которое делит поролон на две части. Промывка цитологического препарата производиться на протяжении 5 минут.
Г. Для повторной промывки (емкость 50 мл.) препарат помещается в стаканчик Г с валиками поролона 3, который пропитанный 50% водным раствором глицерина. Стаканчик сверху закрывается герметичной крышкой 2. Сверху над слоем поролона, находиться мембрана 6, которая герметично закрывает содержимое стаканчика. Мембрана изготовлена из полиэтиленовой пленки. В момент промывки цитологического мазка мембрана прорывается предметным стеклом. После чего предметное стекло помещается в реакционную среду, которая пропитывает поролон. Предметное стекло находиться в узком щелевидном отверстии 4, которое делит поролон на две части. Промывка цитологического препарата производиться на протяжении 5 минут.
Д. Микроскопия препарата производится путем погружения объектива в каплю глицерина.
В отличие от прототипа в заявленной полезной модели используется раствор азур-эозина на глицерине и этиловом спирте, так как производные метиленового синего обладают антисептическим действием, безопасны при введении в организм, даже в случае внутривенных инфузий.
Пример.
Под профилактическим наблюдением находились 10 человек, мужчины, в возрасте от 18 до 50 лет, практически здоровые люди. Пациентов и врачей посадили на машину медицинской помощи, после чего отправились в путь от г. Благовещенска до г. Циолковский, затем возвращались обратно в г. Благовещенск. В пути были около 6 часов. Цитологический контроль органов дыхания осуществлялся с помощью шпателя - фарингеальной ловушки /2, Кондрахина А.П., Зиновьев С.В., Целуйко С.С.и др. Устройство фарингеальной ловушки базального трахеобронхиального секрета для его использования у людей патент России 2493887/ для последующего исследования морфологических, функциональных, цитохимических, клеточных элементов, содержащихся в составе биосред базального трахеобронхиального секрета у здоровых людей. Исследование проводили в момент передвижения машины медицинской помощи. Высушивание, фиксацию, окраску, отмывку мазка с помощью заявленного способа проводили прямо в момент передвижения исследователя и пациента, с помощью предложенного устройства и описанного способа. При микроскопии трахеобронхиального секрета, полученного с помощью шпателя-фарингеальной ловушки, обнаружили клеточные маркеры воспаления в виде клеток плоского и цилиндрического эпителия, лимфоциты, макрофаги, сегментоядерные (С/Я) нейтрофильные лейкоциты, палочкоядерные (П/Я) нейтрофильные лейкоциты, эозинофильные лейкоциты, парциальный вес которых представлен в табл. №1.
В момент движения на известных транспортных средствах существенно изменяются реакции опоры врача, пациента, и устройств. Это препятствует исследованию организма.
Технический результат заявленного устройства заключается в том, что возникает возможность, в отличие от известных прототипов, фиксировать, окрасить, отмыть качественные цитологические препараты с монослоем клеток, содержащихся в минимальном количестве трахеобронхиального секрета, в экстремальных условиях в момент движения транспортного средства.