Изменение уровня экспрессии CD2-рецепторов Т-лимфоцитами крови человека под действием УФ-света

ИММУНОЛОГИЯ № 1, 2012

даться совместный диабетогенный эффект, впрочем, диабетогенный эффект CTLA4 мог маскироваться эффектом системы HLA.

По мнению авторов, необходимо проведение более масштабного исследования, предполагающего изучение большего количества генетических полиморфизмов, а также использование подхода, при котором установление индивидуального риска развития СД-1 рассматривается в зависимости от наличия «функционального» генотипа HLA-DRB1 [3].

Выводы. Хотя бы один из классических маркерных гаплотипов HLA (DRB1*04-DQA1*301-DQB1*302 и DRB1*17-DQA1*501-DQB1*201) был обнаружен у 40 (80%) из 50 больных СД-1 (московская популяция, дети). У 7 из оставшихся 10 пациентов с СД-1 выявлен генотип CTLA4 49GG, ассоциированный, по литературным данным, с развитием аутоиммунных заболеваний, в том числе с СД-1. С одной стороны, полученные данные позволяют сделать предположение о независимой от системы HLA роли CTLA4 в патогенезе СД-1, с другой - подтверждают ведущую роль системы HLA в формировании генетической предрасположенности к развитию СД-1.

ЛИТЕРАТУРА

1. Алексеев Л. П., Дедов И. И., Болдырева М. Н. и др. HLA-гены - маркеры инсулинзависимого сахарного диабета, этнические аспекты // Иммунология. - 2003. - № 5. - С. 308-311.

2. Балаболкин М. И., Дедов И. И. Генетические аспекты сахарного диабета // Сахар. диабет. - 2000. - № 1. - С. 2-5.

3. Болдырева М. Н., Хаитов P. M., Дедов И. И. и др. Новый взгляд на механизм HLA-ассоциированной предрасположенности к сахарному диабету 1 типа. Теоретические и практические аспекты // Иммунология. - 2005. - № 6. - С. 324-329.

4. Дедов И. И., Шестакова М. В. Сахарный диабет. - М., 2003.

5. Сергеев И. В., Хаитов М. Р., Трофимов Д. Ю. и др. Разра-

ботка методов для проведения широкомасштабных исследований полиморфизма генов, регулирующих различные компоненты иммунного ответа // Физиол. и патол. иммун. сист.

- 2009. - Т 13, № 4. - С. 21-25.

6. Хаитов P. M., Алексеев Л. П., Дедов И. И. и др. Использование достижений в области молекулярной иммуногенетики человека в клинике сахарного диабета 1-го типа // Вестн. РАМН. - 2008. - № 10. - С. 45-51.

7. Чистяков Д. А., Дедов И. И. Локусы генетической предрасположенности к диабету 1 типа IDDM3, IDDM4, IDDM5 // Сахар. диабет. - 2000. - № 1. - C. 52-53.

8. Chistiakov D. A., Savost’anov K. V., Nosikov V. V. CTLA4 gene polymorphisms are associated with, and linked to, insulin-dependent diabetes mellitus in a Russian population // BMC Genet. -2001. - Vol. 2, N 6. - P.

9. Davies J. L., Kawaguchi Y., Bennett S. T. et al. A genome-wide search for human type 1 diabetes susceptibility genes // Nature. -1994. - Vol. 371. - P. 130-136.

10. Guja C., Marshall S., Welsh K. et al. The study of CTLA-4 and vitamin D receptor polymorphisms in the Romanian type 1 diabetes population // J. Cell. Mol. Med. - 2002. - Vol. 6, N 1. -P. 75-81.

11. Kavvoura F. K., Ioannidis J. P. CTLA-4 gene polymorphisms and susceptibility to type 1 diabetes mellitus: a HuGE review and meta-analysis // Am. J. Epidemiol. - 2005. - Vol. 16, N 1. -P. 3-16.

12. Kristiansen O. P. NON-MHC genes in type 1 diabetes. Family-based associatin studies and functional studies of disease-associated polymirphism // Dan. med. Bull. - 2005. - Vol. 52.

- P. 186-233.

13. Krokowski M., Bodalski J., Bratek A. et al. CTLA-4 gene polymorphism is associated with predisposition to IDDM in a population from central Poland // Diabet. Metab. - 1998. - Vol. 24, N 3. - P. 241-243.

14. Nerup J., PlatzP., Svejgaard A. HLA antigens in diabetes mellitus // Lancet. - 1974. - Vol. 2. - P. 864-866.

15. Vafiadis P., Bennett S. T., Todd J. A. Insulin expression in human thymus is modulated by INS VNTR alleles at the IDDM2 locus // Nature Genet. - 1997. - Vol. 15. - P. 289-292.

Поступила 30.09.11

КЛЕТОЧНАЯ ИММУНОЛОГИЯ

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2012 УДК 612.112:94.063:612.481].08

В. Г. Артюхов, О. В. Путинцева, С. М. Дубова, С. М. Костенко

ИЗМЕНЕНИЕ УРОВНЯ ЭКСПРЕССИИ CD2-PE^nTOPOB Т-ЛИМФОЦИТАМИ

крови человека под действием уф-света

Кафедра биофизики и биотехнологии ГОУ ВПО Воронежский государственный университет

С помощью методов проточной цитофлюориметрии, твердофазного иммуноферментного анализа и люминесцентной микроскопии установлено, что после суточной инкубации УФ-облученных (151-906 Дж/м2) Т-лимфоцитов значения показателей экспрессии и интенсивность кэппинга СD2-рецепторов Т-клеток соответствуют величинам контрольных образцов. Показано, что УФ-излучение в дозе 1359 Дж/м2 индуцирует уменьшение уровня экспрессии CD2-маркеров Т-лимфоцитами на фоне усиления кэппинга данных молекул. Выявленные модификации экспрессии рецепторов не сопровождаются изменениями процентного содержания УФ-облученных (151-1359 Дж/м2) CD3+СD2+-лимфоцитов после их суточной инкубации.

Ключевые слова: СD2-рецеnтор, Т-лимфоциты, уровень экспрессии, УФ-излучение, кэппинг

- 6 -

КЛЕТОЧНАЯ ИММУНОЛОГИЯ

Artyukhov VG., Putintseva O.V, Dubova S.M., Kostenko S.M.

VARIATIONS IN THE LEVEL OF EXPRESSION OF CD2-RECEPTORS BY HUMAN BLOOD T-LYMPHOCYTES UNDER THE ACTION OF UV-LIGHT

The flow cytofluorimetric technique, solid-phase immunoenzyme analysis and luminescence microscopy were used to obtain data on the intensity of expression and capping of T-cell CD2-receptors after the incubation of T-lymphocytes irradiated by UF light (151-906 J/m2) during 24-hours. It was shown that these characteristics were not significantly different from those in control cells. In addition it was demonstrated that Uv-irradiation at a dose of 1359 J/m2 induced a decrease in the intensity of expression of CD2 markers by T-lymphocytes and simultaneously increased capping of these molecules. It is concluded that the modification of receptor expression observed in the present study was not accompanied by alteration of the percentage composition of CD3+ CD2+ lymphocytes after their irradiation with the Uv-light at 151 +- 1359 J/m2 and incubation for 24 hours.

Key words: CD2-receptor, T-lymphocytes, level of expression

Согласно современным представлениям, молекулы клеточной адгезии являются одними из ключевых звеньев в регуляции межклеточных взаимодействий. На мембранах Т-лимфоцитов экспрессируются разнообразные адгезивные молекулы, в том числе и CD2-рецепторы [20, 21, 25, 27]. За счет взаимодействия CD2-маркеров Т-лимфоцитов и CD58-рецепторов антигенпредставляющих клеток на начальных этапах активационного процесса происходит формирование первоначальных ориентировочных контактов клеток, что в дальнейшем позволяет Т-лимфоцитам реагировать на более низкую концентрацию антигенов. Данная пара рецепторов, работая в комплексе с другими молекулами адгезии, опосредует успешное протекание иммунного ответа организма [6, 18, 19, 22, 28-30].

Выяснение молекулярных основ процессов, протекающих в цепи иммунологических реакции в клетках, - одна из актуальных проблем современной биологии. УФ-излучение используют в качестве тонкого и специфического инструмента для решения проблем выяснения строения и функционирования клеток и их систем [5]. Кроме того, в современной медицинской практике для лечения широкого спектра заболеваний нашел обоснованное применение метод аутотрансфузии УФ-облученной крови (АУФОК). При облучении крови УФ-светом протекающие фотопроцессы модификации поверхности иммуноцитов существенно отражаются на структурно-функциональном состоянии рецепторного аппарата и антигенного профиля клеточных мембран [3, 4, 12, 14-17]. Поэтому вопрос о первичных механизмах действия УФ-излучения на клетки иммунной системы представляется очень важным и своевременным. Его решение позволит расширить и углубить представления о путях регулирования T-лимфоцитами состояния рецепторного пула молекул адгезии их мембран.

В связи с вышеизложенным мы провели серии экспериментов с применением методов проточной цитофлюориметрии, твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА) и люминесцентной микроскопии, посвященных исследованию влияния широкого диапазона доз УФ-света (151-1359 Дж/м2) на уровень экспрессии и интенсивность процессов кэппинга CD2-рецепторов Т-клеток, а также изменение процентного содержания СD3+СD2+-лимфоцитов.

Артюхов Валерий Григорьевич - д-р биол. наук, проф., зав. каф., декан биологопочвенного ф-та, тел. 8(4732) 208-586, e-mail: avg.main.vsu.ru

Материалы и методы. Объектом исследования стали Т-лимфоциты крови 20 лиц, полученные путем центрифугирования гепаринизированной крови в градиенте плотности фиколл-урографина (р = 1,077 г/см3) [1] и последующего разделения на волокнах синтетической нейлоновой ваты [10].

Образцы Т-лимфоцитов в объеме 1 мл облучали сверху в термостатируемой (при 37 ± 10С) стеклянной кювете с помощью ртутно-кварцевой лампы типа ДРТ-400 через светофильтр УФС-1 (240-390 нм). Интенсивность облучения составляла 151 Дж/м2 в 1 мин на расстоянии 0,23 м от оси лампы до объекта. Дозы облучения клеточных суспензий 151, 453, 906 и 1359 Дж/м2.

Для определения возможности синтеза СВ2-рецепторов de novo применяли блокатор синтеза белка - циклогексимид («Sigma», США), конечная концентрация которого во взвесях клеток составила 10-5 моль/л. Инкубацию нативных и модифицированных лимфоцитов проводили в питательной среде RPMI 1640, содержащей 1% раствор L-глутамина, 5 • 10-5 моль/л p-меркаптоэтанола («Sigma», США), HEPES («Serva», Германия), 10% эмбриональную телячью сыворотку, при 370С в термостате ТС-80М в течение 24 ч в атмосфере с 5% содержанием СО2.

При оценке уровня экспрессии исследуемых маркеров с помощью ИФА использовали моноклональные антитела серии LT2 к СВ2-рецептору человека и конъюгант козьих антител к IgG, меченных пероксидазой хрена («Сорбент», Москва) [9].

Цитометрические исследования проводили на базе ГУЗ Воронежский областной центр по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями на проточном цитометре EPICS XL-MCL («Becman Coulter», США). В работе использовали следующие моноклональные антитела, меченные FITC (Fluorescein Isothiocyanate) и РЕ (Phycoerythrin), -CD2-FITC (IgG2a), CD3-PE (IgG1) и соответствующие изотопические контроли (все «Becman Coulter», США).

Локализацию CD2-маркеров на поверхности мембран Т-лимфоцитов определяли с помощью метода люминесцентной микроскопии, микроскоп МИКМЕД-2 («ЕЕС ЛЮМАМ РПО-11», Россия). В работе применяли моноклональные антитела серии LT2 к СD2-молекуле человека и F(ab')2-фрагменты овечьих антител к Ig мыши, меченных FITC («Сорбент», Москва).

Статистическую обработку результатов экспериментов проводили с помощью прикладных программ «Statistica 6.0». Достоверность различий контрольных и опытных значений сравниваемых показателей определяли с помощью t-критерия Стьюдента. При этом рассчитывали степень варьирования показателя при повторных определениях внутри опыта.

Результаты и обсуждение. Уровень экспрессии CD2-рецепторов на поверхности мембран интактных Т-лимфоцитов после 24-часовой инкубации в среднем составил 0,427 ± 0,050 отн. ед. (рис. 1). Воздействие УФ-излучения в диапазоне доз 151-906 Дж/м2 на суспензию клеток не приводило к стати-

- 7 -

ИММУНОЛОГИЯ № 1, 2012

Рис. 1. Изменение уровня экспрессии CD2-pe^nTopoB Т-лимфо-цитами крови человека в условиях воздействия УФ-света и цикло-гексимида.

1 - нативные Т-лимфоциты; 2 - Т-лимфоциты после УФ-облучения; 3 - Т-лимфоциты, модифицированные циклогексимидом.

стически достоверным изменениям экспрессии CD2-маркеров. Облучение иммуноцитов, максимальной из используемых нами доз УФ-света (1359 Дж/м2), способствовало снижению на 20,8% ИФА-сигнала, регистрируемого от CD2-мoлeкул.

Внесение в инкубационную среду интактных Т-клеток циклогексимида не оказывало влияния на экспрессию CD2-peцeптopoв (см. рис. 1). Добавление в образцы иммуноцитов блокатора синтеза белка способствовало падению экспрессии исследуемых маркеров Т-лимфоцитов, предварительно облученных УФ-светом в дозе 151-906 Дж/м2, на 21, 14 и 20% по сравнению с аналогичным показателем в соответствующих образцах клеток без ингибитора. Цикло-гексимид в суспензиях клеток, модифицированных УФ-излучением в дозе 1359 Дж/м2, не вызвал статистически достоверных изменений экспрессии CD2-

Рис. 2. Квадратичная гистограмма, отражающая распределение клеток в пробах с отрицательным изотопическим контролем.

По оси ОХ - интенсивность флюоресценции антител Neg.Ctrl.-F/TC (IgG2a); по оси OY - Neg.Ctrl.-PF(IgG1).

маркеров по сравнению с таковыми в соответствующих образцах, свободных от него.

Следовательно, одиночное воздействие УФ-света в дозе 151-906 Дж/м2 не сопровождалось изменением уровня экспрессии CD2-peцeптopoв, а в сочетании с циклогексимидом вызывало уменьшение ИФА-сигнала, регистрируемого от CD2-маpкepoв после суточной инкубации фотомодифицированных лимфоцитов. По-видимому, это свидетельствует о возможности синтеза de novo молекул исследуемых нами рецепторов фотомодифицированными Т-клетками. Одиночное воздействие на иммуноциты УФ-излучения в дозе 1359 Дж/м2 способствовало снижению экспрессии исследуемых молекул по сравнению с таковым в интактных образцах, а комплексное (с ингибитором синтеза белка) не приводило к изменениям тестируемого параметра при сравнении с соответствующими суспензиями без блокатора.

В экспериментах с использованием проточного цитофлюориметра мы регистрировали как процент клеток с иммунофенотипом CD3+CD2+, так и их среднюю интенсивность флюоресценции (СИФ), которую выражали в условных единицах (усл. ед.). СИФ CD3+CD2+-лимфoцитoв во всех пробах с отрицательным изотипическим контролем определяли в диапазоне от 0,112 и 0,196 усл. ед. для моноклональных антител, меченых как FITC, так и РЕ (рис. 2).

Выявили, что СИФ интактных CD3 CD2 лимфоцитов в среднем составляла 7,8 ± 0,3 усл. ед. (рис. 3). Облучение Т-лимфоцитов УФ-светом в дозе 151-906 Дж/м2 не приводило к статистически достоверным изменениям СИФ антител к CD2-peцeптopам по сравнению с таковыми в нативных образцах клеток. Только наибольшая из используемых нами доз УФ-света (1359 Дж/м2) оказывала депрессивное действие на исследуемый показатель, что выражалось в уменьшении его значения на 27% (5,7 ± 0,2 усл. ед.) по сравнению с таковым контрольных взвесей. Полученные результаты подтверждают тестируемые нами с помощью метода ИФА изменения в исследуемой системе.

Процент дубльпозитивных клеток в интактной суспензии равнялся 68,4 ± 2,7% и статистически достоверно не изменялся во всех фотомодифицированных образцах Т-лимфоцитов (см. рис. 3). Следовательно, колебаний процентного содержания лимфоцитов, ко-экспрессирующих CD3- и CD2-peцeптopы, в ходе наших экспериментов не наблюдали.

С целью выяснения взаимосвязи между уровнем экспрессии адгезивных рецепторов мембран Т-лимфоцитов и процессов их кэппинга в условиях воздействия УФ-излучения мы использовали метод люминесцентной микроскопии.

Согласно существующей в литературе классификации разных форм кэпов [11], мы различали кэп 1/2 (специфическая флюоресценция концентрируется на одном из полюсов клетки, занимая примерно половину клеточной поверхности) и кэп 1/4 (флюоресцирующие комплексы составляют примерно одну четверть лимфоцитарной клетки). Амебовидный тип - свечение концентрируется на поверхности клеточной мембраны в виде точки. На рис. 4 представлены типы флюоресцирующих комплексов, характерных для нативных и фотомодифицированных лимфоцитов, CD2-peцeптopoв с FITC-меченными лигандами.

- 8 -

КЛЕТОЧНАЯ ИММУНОЛОГИЯ

Рис. 3. Двухпараметрические гистограммы распределения лимфоцитов периферической крови, модифицированных УФ-светом, с использованием моноклональных антител к CD3- и СD2-молекулам, меченным РЕ и FITC.

По осям ОХ и OY - интенсивность флюоресценции от антител к CD2- и СБЗ-антигенам соответственно: а - интактные Т-лимфоциты; б - Т-лимфоциты, облученные УФ-светом в дозе 151 ДЖ/м2; в - Т-лимфоциты, облученные УФ-светом в дозе 453 Дж/м2; г - Т-лимфоциты, облученные УФ-светом в дозе 906 Дж/м2; д - Т-лимфоциты, облученные УФ-светом в дозе 1359 Дж/м2. Квадранты: D1 - CD3+CD2--лимфоциты; D2 - CD3+CD2+-лимфоциты; D3 - CD3-CD2-лимфоциты; D4 - CD3-CD2+-лимфоциты; в % указано содержание дубльпо-зитивных клеток в квадранте D2.

О количестве кэппирующих Т-лимфоцитов судили визуально, подсчитывая 200 клеток с различного рода локализацией CD2-молекул на поверхности их мембран. Под кэппирующими клетками мы понимали лимфоциты, обладающие кэп 1/2, кэп 1/4 и амебовидным типом свечения. Некэппирующие клетки имели периферический, т. е. равномерный, тип свечения флюоресцирующих комплексов на поверхности мембраны.

Популяция нативных Т-лимфоцитов характеризовалась преобладанием клеток с периферическим типом свечения (63%). При этом доля лимфоцитов, находящихся в состоянии кэппинга, составила 37%. Последовательное увеличение дозы УФ-облучения от 151 до 906 Дж/м2 не вызывало статистически достоверного изменения количества иммуноцитов с различным типом локализации CD2-антигенов на поверхности их мембран. Воздействие на Т-лимфоциты УФ-света в дозе 1359 Дж/м2 способствовало снижению содержания клеток с периферическим типом свечения и возрастанию общей доли кэппирующих лимфоцитов (59%), при этом увеличивалось количество клеток с кэп 1/4 и амебовидным типом свечения на фоне падения в 2 раза уровня иммуноцитов в состоянии кэп 1/2. Другими словами, УФ-излучение в дозе 1359 Дж/м2 способствует усилению процессов кэппинга Т-лимфоцитами исследуемых нами рецепторов.

Полученные нами данные указывают на то, что под действием УФ-света в мембранах Т-лимфоцитов в первую очередь активируются процессы, сопровождающиеся структурными перестройками лимфоцитарных мембран, результатом протекания которых является снижение уровня экспрессии рецепторных молекул, в частности CD2-маркеров (шеддинг рецепторов, интернализация в более глубокие слои гликокаликса, изменение конформации молекулы маркеров в результате прямого или опосредованного действия УФ-света на клетку). В дальнейшем в ходе суточной инкубации УФ-облученные (151-906 Дж/м2) лимфоциты, как мы предполагаем, путем запуска процессов синтеза de novo молекул адгезии нивели-

руют воздействие УФ-света, о чем свидетельствует отсутствие изменений экспрессии CD2-рецепторов Т-лимфоцитами, УФ-облученными в дозе 151-906 Дж/м2, после их длительной инкубации.

Известно, что УФ-излучение индуцирует протекание в мембранах клеток ряда фотохимических реакций, в частности ПФОЛ, при непосредственном участии АФК [2, 5, 7]. Показано, что инициаторы ПФОЛ, в том числе и гидропероксиды липидов, могут выступать в роли вторичных мессенджеров и вызывать синтез белков путем активации факторов транскрипции NF-кВ, АР-1 [8, 23, 26]. Эти факторы связываются с промоторным участком гена и запускают транскрипцию, а следовательно, и трансляцию соответствующих белков [24]. Предполагаем, что именно с ходом вышеописанных реакций в клетках связано образование новых мембранных молекул УФ-облученными Т-лимфоцитами.

Рис. 4. Типы распределения флюоресцирующих комплексов CD2-рецепторов с ТТТС-меченными лигандами, характерных для нативных и УФ-облученных лимфоцитов.

а - периферическое; б - кэп 1/2; в - кэп 1/4; г - амебовидный.

- 9 -

ИММУНОЛОГИЯ № 1, 2012

Воздействие большой дозы УФ-излучения (1359 Дж/м2), вероятно, оказывает сильное ингибирующее действие на экспрессию исследуемых молекул адгезии, что сопровождается падением их экспрессии и отсутствием синтеза de novo. В то же время под действием УФ-света в дозе 1359 Дж/м2 наблюдается усиление кэп-пинга мембранных CD2-рецепторов. Это свидетельствует об изменении структурных свойств мембраны и, по-видимому, функциональных характеристик исследуемых рецепторов, поскольку шеддинг и кэппинг - процессы, позволяющие клетке регулировать необходимую физиологическую плотность рецепторов на поверхности мембраны, а также пути и степень развития иммунной реакции организма [11, 13]. Не исключено, что за счет усиления процессов кэппинга достигается возможность концентрации CD2-рецепторов на поверхности мембраны клетки в малом объеме, т. е. в необходимом количестве, обеспечивающем нормальное развитие иммунного ответа.

Таким образом, полученные нами результаты свидетельствуют о том, что индуцированные УФ-излучением изменения экспрессии и кэппинга CD2-рецепторов мембран Т-лимфоцитов есть тесно взаимосвязанные процессы. Это необходимо учитывать при прогнозировании эффектов действия широкого диапазона доз УФ-света на процессы межклеточных взаимодействий иммуноцитов крови человека, а также оценке результатов АУФОК-терапии в клинике лечения заболеваний различной этиологии.

ЛИТЕРАТУРА

1. Антитела. Методы / Под ред. Д. Кэтти; пер. с англ. - М., 1991. - Кн. 2.

2. Артюхов В. Г., Наквасина М. А. Биологические мембраны: структурная организация, функции, модификация физикохимическими агентами. - Воронеж, 2000.

3. Артюхов В. Г., Путинцева О. В., Дмитриев Е. В. Влияние ультрафиолетового излучения на структурно-функциональное состояние Т- и В-лимфоцитов крови человека // Радиац. биол. Радиоэкол. - 2003. - № 1. - С. 82-86.

4. Артюхов B. Г., Гусинская В. В., Михилева Е. А. Изменения локализации CR1-рецепторов на поверхности нейтрофильных лейкоцитов, индуцированные УФ-светом // Иммунология. -2006. - Т 27, № 1. - С. 6-9.

5. Биофизика: Учебник для вузов / Под ред. В. Г. Артюхова. -М.; Екатеринбург, 2009.

6. Боценовский В. А., Барышников А. Ю. Молекулы клеточной адгезии // Успехи соврем. биол. - 1994. - Т. 114, № 6. - С. 741-752.

7. Владимиров Ю. А., Потапенко А. Я. Физико-химические основы фотобиологических процессов. - M., 2006.

8. Дубинина Е. Е. Роль активных форм кислорода в качестве сигнальных молекул в метаболизме тканей при состоянии окислительного стресса // Вопр. мед. химии. - 2001. - Т. 47, № 6. - С. 561-581.

9. Егоров В. А. Теория и практика иммуноферментного анализа. - M., 1991.

10. Зарецкая Ю. М. Клиническая иммуногенетика. - M., 1983.

11. Иммунология / Пол У и др. - М., 1987-1988. - Т. 1.

12. Колтаков И. А. Исследование структурно-функционального состояния Т-лимфоцитов крови человека при модификации а-интерфероном и в условиях УФ-облучения: Автореф. дис. ... канд. биол. наук. - Воронеж, 2007.

13. Локшина Л. А. Протеиназы плазматической мембраны лимфоидных клеток и их биологические функции // Биоорган. химия. - 1998. - Т. 24, № 5. - С. 323-331.

14. Оболенская К. Д., Гамова И. М., Самойлова К. А. Изменение экспрессии мембранных рецепторов иммунокомпетентных клеток крови, индуцированные различными методами фотомодификации крови // Цитология. - 1991. - Т. 33, № 9. - С. 63.

15. Оболенская К. Д. и др. Увеличение экспрессии мембранных маркеров иммунокомпетентных клеток после УФ-облучения крови в терапевтической дозе и ретрансфузии УФ-облученной крови // Цитолоия. - 1991. - Т. 33, № 9. - С. 92.

16. Путинцева О. В., Артюхов В. Г., Дмитриев Е. В. Влияние УФ-облучения В-лимфоцитов крови человека на экспрессию в них некоторых антигенов и рецепторов // Цитология.

- 2001. - Т. 43, № 4. - С. 364-365.

17. Самойлова К. А. Триггерные механизмы лечебного эффекта облучения крови УФ-лучами // Цитология. - 1991. - Т. 33, №

9. - С. 101-102.

18. Ярилин А. А. Симбиотические взаимоотношения клеток иммунной системы // Иммунология. - 2001. - № 4. - С. 16-20.

19. Ярилин А. А. Иммунный синапс как структурная основа презентации антигена // Иммунология. - 2003. - № 6. - С. 347-350.

20. ButcherЕ. С. Cellular and molecular mechanisms that direct leukocyte traffic // Am. J. Pathol. - 1990. - Vol. 136. - P. 3-11.

21. Crossin K. L. et al. Expression sequences of cell adhesion molecules // Proc. Natl Acad. Sci. USA. - 1985. - Vol. 82. - P. 69426946.

22. Dustin M. L. et al. TCR-mediated adhesion of T cell hybridomas to planar bilayers containing purified MHC class II/peptide complexes and receptor shedding during detachment // J. Immunol.

- 1996. - Vol. 157. - P. 2014-2021.

23. Janssen-Heininger Y. M. W., Poynter M. E., Baeuerle P. A. Recent advances torwards understanding redox mechanisms in the activation of nuclear factor kb // Free Radic. Biol. Med. - 2000.

- Vol. 28. - P. 1317-1327.

24. Legraund-PoelsS. et al. NF-kB: an important transcription factor in photobiology // J. Photochem. Photobiol. - 1998. - Vol. 45. -P. 1-8.

25. Osborn L. Leukocyte adhesion to endothelium in inflammation // Cell. - 1990. - Vol. 62. - P. 3-6.

26. Schulze-Osthoff K., LosM., Baeuerle P. Redox signaling by transcription factors ОТ-ЬВ and AP-1 in lymphocytes // Biochem. Pharmacol. - 1995. - Vol. 50. - P. 735-741.

27. Springer T. A. Adhesion receptors of the immune system // Nature. - 1990. - Vol. 346. - P. 425-434.

28. Van der Merwe P. A. A subtle role for CD2 in T cell antigen recognition // J. Exp. Med. - 1999. - Vol. 190, N 10. - P. 1371-1374.

29. Van der Merwe P. A. et al. Cytosceletal polarization and redistribution of cell-surface molecules during T cell antigen recognition // Semin. Immunol. - 2000. - Vol. 12. - P. 5-12.

30. Wild M. K. et al. Dependence of T cell antigen recognition on the dimensions of an accessory receptor-igand complex // J. Exp. Med. - 1999. - Vol. 190. - P. 31-41.

Поступила 30.09.11

- 10 -