Роль морфофункционального статуса тромбоцитов в первом триместре беременности, осложненной инсулинозависимым сахарным диабетом

РОЛЬ МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОГО СТАТУСА ТРОМБОЦИТОВ В ПЕРВОМ ТРИМЕСТРЕ БЕРЕМЕННОСТИ, ОСЛОЖНЕННОЙ ИНСУЛИНОЗАВИСИМЫМ САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ

И.А. Буренкова, И.М. Ордиянц, И.А. Василенко, М.А. Сармосян, Н.М. Старцева

Кафедра акушерства и гинекологии с курсом перинатологии Российский университет дружбы народов ул. Миклухо-Маклая, 8, Медицинский факультет, Москва, Россия, 117198

Изучены морфометрические и морфофункциональные характеристики тромбоцитов в первом триместре беременности, осложненной инсулинозависимым сахарным диабетом различной степени тяжести в стадии компенсации. Отмечена корреляция морфофункционального статуса тромбоцитов со степенью компенсации диабета. Во всех случаях отмечено увеличение размерных параметров и активационного статуса клеток, что сопутствует их адгезии, агрегации и предрасполагает к развитию тромбо-генных осложнений. Выявленные особенности являются значимым фактором для ранних сроков гестации, когда происходит становление маточно-плацентарного кровотока.

Ключевые слова: тромбоциты, сахарный диабет.

Сахарный диабет и беременность являются неблагоприятным сочетанием как для матери, так и для плода и отягощают течение друг друга [2; 5; 9]. Несмотря на достижения последнего десятилетия в области акушерской диабе-тологии, уровень ранних репродуктивных потерь у данного контингента беременных, перинатальная заболеваемость и смертность остаются высокими.

Течение беременности на фоне инсулинозависимого сахарного диабета, начиная с ранних сроков, сопровождается рядом особенностей, которые находятся в прямой зависимости от степени тяжести, длительности заболевания и компенсации углеводного обмена [1; 3; 4]. Как известно, диабет во время беременности характеризуется лабильностью течения, создаются условия для декомпенсации углеводного обмена и добиться целевых значений гликемии достаточно сложно. Она достигается лишь в 40-60% случаев [7]. В условиях возникающей инсулиновой недостаточности, гипергликемии и окислительного стресса тромбоцитарное звено гемостаза вовлекается в процесс прогрессирования диабетических микроангиопатий, происходит избыточное гликозилирование белков тромбоцитов, нарушение их клеточных функций, что способствует нарушению микроциркуляции. Развивающаяся на этом фоне гипоксия вызывает локальное повреждение эндотелия сосудов,

как следствие, - нарушение гемостаза и активация агрегационной способности эритроцитов и тромбоцитов. Кроме того, адгезии и агрегации тромбоцитов способствует изменение формы клеток [6; 8].

Цель исследования. Оценить адаптационную активность, структурные особенности и прогностическую ценность определения морфофункционального статуса тромбоцитов периферической крови у беременных с инсулино-зависимым сахарным диабетом в первом триместре.

Материал и методы исследования. Обследовано 26 беременных с ин-сулинозависимым сахарным диабетом в сроке 5-12 нед. (основная группа). Контрольную группу составили 30 беременных без экстрагенитальной патологии, с нормальным тестом толерантности к глюкозе и физиологическим течением первого триместра.

Оценку морфофункционального состояния тромбоцитов периферической крови производили с помощью компьютерного фазово-интерференци-онного микроскопа «Цитоскан» (Россия) с использованием технологии витальной компьютерной фазометрии биообъектов, представляющей совокупность способов пробоподготовки, компьютерной системы анализа изображений, алгоритмов измерений и идентификации фазовых портретов клеток, методов статистической обработки данных. При исследовании тромбоцитов использовали венозную кровь, заготавливаемую в пробирки из ареактивного пластика («Vacutaner», Германия) с антикоагулянтом (ЭДТА).

Статистическую обработку полученных данных проводили на компьютере с использованием стандартной программы STATISTICA for Windows, Release 6,0.

Результаты исследования. Группы обследованных беременных были сопоставимы по возрасту, менархе, паритету. Средний возраст обследованных женщин с инсулинозависимым сахарным диабетом составил 26,3 ± 1,16 лет. У 14 (53,9%) из них отмечалось среднетяжелое течение сахарного диабета, у 9 (34,6%) - тяжелое, у 3 (11,5%) - легкое, при этом 15 (57,7%) беременных находились в стадии субкомпенсации и 11 (42,3%) - в декомпенсации. Средний стаж инсулинозависимого сахарного диабета составил 11,3 ± 6,4 лет. В случае легкого течения - 1,3 ± 0,58 лет, при средней степени тяжести -10,4 ± 1,51 лет и тяжелом течении - 16,1 ± 1,21 лет. Осложнения сахарного диабета (диабетическая ретинопатия, нефропатия, полинейропатия) отмечались у 21 (80,8%) беременной.

Первым этапом исследования морфофункциональной активности тромбоцитов был анализ популяционного состава клеток. На основании данных литературы и полученной нами базы данных фазово-интерференционных изображений тромбоцитов выделяется 4 морфологических типа тромбоцитов, характеризующих степень их активации [8].

Подавляющее большинство тромбоцитов в норме представлено плоскими, округлыми клетками с гладкой или складчатой поверхностью - «гладкие» и

«рифленые» дискоциты, соответствующие I типу клеток - тромбоциты «покоя». Ко II морфологическому типу тромбоцитов относятся дискоидные клетки округлой, неправильной формы с гладкой или складчатой поверхностью и 1-3 короткими (меньше диаметра клетки) широкими отростками-псевдоподиями, являющимися выростами поверхностной мембраны - тромбоцит с низким уровнем функциональной активности. Клетки, имеющие около 25 длинных (больше диаметра клетки) отростков-«антенн», представляют III тип и отличаются большим многообразием форм: от плоских дисков до клеток неправильной формы - высоко активированные тромбоциты. Тромбоциты неправильной формы с неровной бугристой поверхностью, большим количеством отростков различной длины и многочисленными вакуолями относятся к IV морфологическому типу - дегенеративно-измененным клеткам - функционально неполноценным тромбоцитам, практически исчерпавшим свои биологические функции.

В основной группе обследованных беременных получено следующее распределение тромбоцитов по морфологическим типам: I тип - 28,8%, II тип - 35,9%, III тип - 26,3%, IV тип - 9%, в отличие от группы контроля, где процент клеток «покоя» увеличивался до 48%, что в 1,6 раза больше; процент активированных клеток уменьшался: II тип - 28%, что в 1,3 раза меньше, III тип - 16%, что в 1,6 раза меньше; процент дегенеративных клеток IV типа значимо не отличался - 8%.

Степень тяжести сахарного диабета, стаж заболевания, а также уровень компенсации углеводного обмена отражают выраженность сосудистых нарушений, в связи с чем представляло интерес сравнить, имеются ли значимые различия в функциональном статусе тромбоцитов в зависимости от степени тяжести и стадии компенсации (табл. 1).

Таблица 1

Распределение морфофункциональных типов тромбоцитов в зависимости от степени тяжести и стадии компенсации сахарного диабета

Характеристика СД Типы тромбоцитов, %

I II III IV

Средняя степень тяжести 28,9 ± 3,31 36,3 ± 2,68 26,4 ± 2,45 8,4 ± 1,35

Тяжелое течение 28,5 ± 5,35 34,7 ± 8,34 26,0 ± 4,71 10,8 ± 9,77

Стадия субкомпенсации 31,9 ± 10,6 39,6 ± 2,52* 24,2 ± 1,90 4,3 ± 1,08*

Стадия декомпенсации 23,2 ± 3,14 29,0 ± 5,76* 30,2 ± 4,63 17,6 ± 5,82*

Примечание: * - р < 0,05- различия между стадиями субкомпенсации и декомпенсации.

Как видно из представленного сравнительного анализа, степень тяжести сахарного диабета значимо не отражается на соотношении морфофункцио-нальных типов клеток, в отличие от стадии компенсации: при декомпенса-

ции наблюдалась отчетливая тенденция к снижению клеток «покоя» I типа и повышению активационного статуса тромбоцитов со сдвигом в сторону высокоактивированных форм. Процент же патологических дегенеративно-измененных клеток IV типа в 4 раза превосходил случаи субкомпенсации.

На втором этапе исследования с помощью метода витальной компьютерной фазометрии получены основные оптико-метрические параметры тромбоцитов - диаметр, периметр, высота, объем и площадь (табл. 2).

Таблица 2

Средние морфометрические показатели фазово-интерференционных портретов тромбоцитов периферической крови женщин с инсулинозависимым сахарным диабетом и физиологической беременностью в I триместре

Группа сравнения п Размерные показатеJ об ш фазово-интерференционных разов клеток

В

Основная 26 3,4 ± 0,13* 11,5 ± 0,74* 1,25 ± 0,04* 7,32 ± 0,57* 2,76 ± 0,14*

Контрольная 30 2,9 ± 0,9 8,9 ± 4,1 1,0 ± 0,4 5,1 ± 3,8 1,7 ± 1,3

Примечание: * - р < 0,05 - достоверность различий по сравнению с контролем.

Как видно из представленных данных, в группе беременных с инсули-нозависимым сахарным диабетом все размерные параметры клеток достоверно отличаются от группы женщин с физиологическим течением беременности и увеличены в 1,2-1,6 раза, причем при декомпенсации диабета это соотношение выражено больше, чем в стадии субкомпенсации.

Обсуждение. Полученные данные о морфофункциональном статусе тромбоцитов периферической крови методом витальной компьютерной фа-зометрии с учетом степени тяжести и стадии компенсации сахарного диабета дополняют ранее известные факты и согласуются с патофизиологическими процессами, протекающими во время беременности на фоне инсулиноза-висимого сахарного диабета.

Увеличение морфометрических показателей фазово-интерференцион-ных портретов клеток связано с появлением высокого процента активированных форм тромбоцитов с измененной формой, что, в свою очередь, сопутствует их адгезии, агрегации и предрасполагает к развитию тромбоген-ных осложнений. Особенно изменения выражены при декомпенсации диабета как отражение срыва адаптационных механизмов.

Выявленные особенности являются значимым фактором именно для ранних сроков гестации, когда происходит становление маточно-плацентар-ного кровотока. Ранняя недостаточность формирующегося маточно-плацен-тарного комплекса является предиктором развития хронической фетопла-

центарной недостаточности и других гестационных осложнений, выявляемых только во II и III триместрах беременности.

Динамическая витальная морфометрия тромбоцитов позволяет своевременно диагностировать срыв адаптационных механизмов, начать проведение корригирующей терапии и контролировать ее эффективность.

Исследование морфофункционального статуса тромбоцитов также может быть рекомендовано на этапах предгравидарной подготовки у женщин с сахарным диабетом.

ЛИТЕРАТУРА

[1] Демидова И.Ю., Арбатская Н.Ю., Мельникова Е.П. Актуальные проблемы компенсации сахарного диабета при беременности // Сахарный диабет. - 2009. - № 4. -С.32-38.

[2] Доброхотова Ю.Э., Джобана З.М., Алиева Д.П., Степаняк А.В // Материалы Первого регионарного научного форума «Мать и дитя». - Казань, 2007. - С. 41.

[3] Есаян Р.М., Григорян О.Р., Пекарева Е.В. Роль компенсации углеводного обмена у беременных с сахарным диабетом I типа в развитии перинатальных осложнений // 2009. - № 4. - С. 23-28.

[4] Малютина Е.С., Степаненко Т.А., Ермаков В.Д., Павлова Т.В. Проблема плацентарной недостаточности при сахарном диабете у матери // Фундаментальные исследования. - 2007. - № 12.

[5] Лака Г.П., Захарова Т.Г. Сахарный диабет и беременность. - Ростов-н/Д, 2007.

[6] Яковлева Н.М. Клинико-патогенетические закономерности нарушений структурно-функциональных свойств эритроцитов и тромбоцитов при микрососудистых осложнениях сахарного диабета I типа: Автореф. дисс. ... к.м.н. - М., 2007. - 22 с.

[7] Kauffman R.P. The diabetes in Pregnancy Dilemma: Leading Change with Proven Solutions // J. Am. Med. Assoc. - 2006. - Vol. 296. - P. 1530-1531.

[8] Peerschke E.I., Yin W., Ghebrehiwet B. Platelet mediated complement activation // Adv. Exp. Med. Biol. - 2008. - Vol. 632. - P. 81-91.

[9] Strevens H., Ussing D., Landin-Olsson M. Insulin glarvin treatment seems to be safe also during pregnancy // International J. of Gynecol. and Obstet. - 2009. - Vol. 107; Supp. 2. - S. 519.

THE ROLE OF MORPHOFUNCTIONAL STATUS OF THROMBOCYTES IN THE FIRST TRIMESTER OF PREGNANCY WITH INSUIN-DEPENDENT DIABETES MELLITUS

I.A. Burenkova, I.M. Ordiyants, I.A. Vasilenko, M.A. Sarmosyan, N.M. Statseva

Department of obstetrics, gynecology and reproductive medicine Peoples' Friendship University of Russia Mikluho-Maklaya Str., 8, Medical Faculty, Moscow, Russia, 117198

The morphometric and morphofunctional characteristics of thrombocytes were investigated in the first trimester of pregnancy with insulin-dependent Diabetes Mellitus of different

stages and severity of condition. The correlation was pointed between morphofunctional status of thrombocytes and stage of compensation of Diabetes Mellitus. In all cases it was found that the increase of size and activation of cells leads to their adhesion and aggregation and contributes to development of thrombogenic complications. The revealed features are the significant factor for early terms of gestation when an uteroplacental blood flow is forming.

Key words: platelets, diabetes mellitus.