ГЕНЕТИЧЕСКИ СКОНСТРУИРОВАННЫЕ ГЕМОПОЭТИЧЕСКИЕ СТВОЛОВЫЕ КЛЕТКИ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ

1. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток, содержащая:
(i) первую группу генетически сконструированных гемопоэтических клеток, которые имеют генетическое редактирование в первом гене, кодирующем первый линиеспецифический поверхностноклеточный антиген, где первая группа генетически сконструированных гемопоэтических клеток (a) имеет пониженную или отсутствующую экспрессию первого линиеспецифического поверхностноклеточного антигена или (b) экспрессирует мутант первого линиеспецифического поверхностноклеточного антигена; и
(ii) вторую группу генетически сконструированных гемопоэтических клеток, которые имеют генетическое редактирование во втором гене, кодирующем второй линиеспецифический поверхностноклеточный антиген, где вторая группа генетически сконструированных гемопоэтических клеток (a) имеет пониженную или отсутствующую экспрессию второго линиеспецифического поверхностноклеточного антигена или (b) экспрессирует мутант второго линиеспецифического поверхностноклеточного антигена,
где первая группа генетически сконструированных гемопоэтических клеток частично пересекается со второй группой генетически сконструированных гемопоэтических клеток, и
где первый и второй линиеспецифические поверхностноклеточные антигены выбирают из группы, состоящей из:
(i) CD19 и CD33;
(ii) CD33 и CD123; и
(iii) CD33 и CLL-1.
2. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток, где одна или более клеток популяции:
(i) имеет пониженную или отсутствующую экспрессию первого линиеспецифического поверхностноклеточного антигена относительно дикого типа эквивалентной клетки ли экспрессирует мутант первого линиеспецифического поверхностноклеточного антигена, где первый линиеспецифический поверхностноклеточный антиген экспрессирован в первичном раке у субъекта; и
(ii) имеет пониженную или отсутствующую экспрессию второго линиеспецифического поверхностноклеточного антигена относительно дикого типа эквивалентной клетки или экспрессирует мутант второго линиеспецифического поверхностноклеточного антигена, где второй линиеспецифический поверхностноклеточный антиген экспрессирован в рецидивирующем раке у субъекта.
3. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по п. 2, где первым линиеспецифическим поверхностноклеточным антигеном является CD19, и вторым линиеспецифическим поверхностноклеточным антигеном является CD33.
4. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток, где одна или более клеток популяции:
(i) имеет пониженную или отсутствующую экспрессию первого линиеспецифического поверхностноклеточного антигена относительно дикого типа эквивалентной клетки, или экспрессирует мутант первого линиеспецифического поверхностноклеточного антигена, где первый линиеспецифический поверхностноклеточный антиген экспрессируется в первой субпопуляции раковых клеток у субъекта; и
(ii) имеет пониженную или отсутствующую экспрессию второго линиеспецифического поверхностноклеточного антигена относительно дикого типа эквивалентной клетки, или экспрессирует мутант второго линиеспецифического поверхностноклеточного антигена, где второй линиеспецифический поверхностноклеточный антигене экспрессирован во второй субпопуляции раковых клеток у субъекта.
5. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по п. 4, где первым линиеспецифическим поверхностноклеточным антигеном является CD33 и вторым линиеспецифическим поверхностноклеточным антигеном является CD123 или CLL-1.
6. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из предшествующих пунктов, где, по меньшей мере, 40% копий гена, кодирующего первый линиеспецифический поверхностноклеточный антиген, имеют генетическое редактирование и, по меньшей мере, 40% копий гена, кодирующего второй линиеспецифический поверхностноклеточный антиген имеет генетическое редактирование.
7. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из предшествующих пунктов, где поверхностные уровни первого линиеспецифического поверхностноклеточного антигена в популяции составляют менее чем 40% от поверхностных уровней первого линиеспецифического поверхностноклеточного антигена в эквивалентных клетках дикого типа.
8. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из предшествующих пунктов, где поверхностные уровни второго линиеспецифического поверхностноклеточного антигена в популяции составляют менее чем 40% от поверхностных уровней второго линиеспецифического поверхностноклеточного антигена в эквивалентных клетках дикого типа.
9. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из предшествующих пунктов, где одно или оба из: генетическое редактирование гена, кодирующего первый линиеспецифический поверхностноклеточный антиген содержит мутацию «сдвига рамки», и генетическое редактирование второго гена содержит мутацию «сдвига рамки».
10. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из предшествующих пунктов, которая способна расти в культуре на, по меньшей мере, 2-кратно в течение 8 дней.
11. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из предшествующих пунктов, где поверхностные уровни второго линиеспецифического поверхностноклеточного антигена в популяции составляют менее чем 50%, 40%, 30%, 20%, 10%, 5%, 2% или 1% от поверхностных уровней второго линиеспецифического поверхностноклеточного антигена в эквивалентных клетках дикого типа.
12. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из предшествующих пунктов, которая способна приживаться.
13. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из предшествующих пунктов, где гемопоэтическими клетками являются гемопоэтические стволовые клетки (HSC).
14. Популяция генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из предшествующих пунктов, где CD33 псевдоген не модифицирован в одной или более (например, по меньшей мере, 50%, 60%, 70%, 80%, 85%, 90%, 95%, 98%, 99% или всех) клетках популяции.
15. Способ поставки гемопоэтических клеток субъекту (например, субъекту, имеющему гемопоэтическое злокачественное образование), включающий:
(a) получение популяции генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из пп. 1-14; и
(b) введение популяции генетически сконструированных гемопоэтических клеток субъекту,
тем самым поставляя гемопоэтические клетки субъекту.
16. Способ лечения гемопоэтического злокачественного образования, включающий:
введение субъекту, нуждающемуся в этом, популяции генетически сконструированных гемопоэтических клеток по любому из пп. 1-14;
введение субъекту эффективного количества первого иммунотерапевтического агента, который таргетирует первый линиеспецифический поверхностноклеточный антиген, и
введение субъекту эффективного количества второго иммунотерапевтического агента, который таргетирует второй линиеспецифический поверхностноклеточный антиген.
17. Способ по п. 16, где первый иммунотерапевтический агент вводят, если субъект имеет первичный рак, и второй иммунотерапевтический агент вводят, если субъект имеет рецидив рака или рак, резистентный к первому иммунотерапевтическому агенту.
18. Способ по п. 16, где субъект имеет рак, который содержит первую субпопуляцию раковых клеток, которые экспрессируют первый линиеспецифический поверхностноклеточный антиген, и вторую субпопуляцию раковых клеток, которые экспрессируют второй линиеспецифический поверхностноклеточный антиген.
19. Способ по п. 18, где первым линиеспецифическим поверхностноклеточным антигеном является CD33, и вторым линиеспецифическим поверхностноклеточным антигеном является CD123 или CLL-1.