Изыскание бактерицидных средств для санации объектов ветнадзора

The field studies of our novel system showed positive results. The results of serological tests for brucellosis and survey of post-vaccination immune response in cows immunized with the alive dry antigen of the R-1096 strain showed that all the tested animals were brucellosis-negative at agglutination test and CFT (compliment fixation test) with the single brucellosis antigen. At CFT with R-antigen the immune response was 99.26 %. The average titer was 41.0±15.5. The laboratory and field studies showed high preventive and anti-epizootic efficacy of the alive dry antigen from inagglutinated B.abortus R-1096 strain on the background of using the vaccine from B.abortus 82 strain for prevention and elimination of brucellosis in cattle herds. It allows maintaining the cattle farms as brucellosis-negative without postvaccine seropositivity in cows.

KEYWORDS: brucellosis cattle, system of anti-brucellosis special measures, improvement, alive dry antigen from inagglutinated B. abortus R-1096 strain.

References

1. Avilov, V.M. Aktualnya problema profilaktiki osobo opasnyh infetsiy givotnyh [The current problem of prevention of particularly hazardous animal infections] / V.M.Avilov, V.ASedov // Veterinaria. - 1994. - Vol.6.

- P.3-6.

2. Salmakov, K.M. Brutsellyoz krupnogo rogatogo skota [Cattle brucellosis] / K.M.Salmakov // Veterinarny vrach. - 2000. - Vol.1. - P.41-46.

3. Fomin, A.M. Effektivnost novoy sistemy spetsialnyh protivobrutsellyoznyh meropriyatiy [The efficiency of novel system of anti-brucellosis special measures] / A.M.Fomin, K.M.Salmakov // Veterinarny vrach. - 2001.

- №1(5). - P.23-26.

4. Novitsky, A.A. Etapy razrabotki nauchno-obosnovannoy sistemy ozdorovleniya strany ot brutsellyoza krupnogo rogatogo skota [The steps to develop scientifically valid system of cattle brucellosis prevention in the country] / A.A.Novitsky, T.G.Popova // Proceedings from the Int. sci. and pract. conf. dedicated to the 90th anniversary All-Russian Institute for animal tuberculosis and brucellosis research, Omsk, Nov.22-25, 2011. - Omsk, 2011. - P. 77-81.

5. Comparative study of the immunobiological properties of live brucellosis vaccines / K.M.Salmakov [et al.] // Vaccine. - 2010. - № 5. - P. 35-40.

6. A live vaccine from Brucella abortus strain 82 for control of cattle brucellosis in the Russian Federation / A.V.Ivanov, K.M.Salmakov, S.C.Olsen, G. E.Plumb // Animal Health Res. Rev. - 2011. - № 12 (1). - P. 113-121.

7. Fomin, A.M. Spetsialniye ozdorovitelniye meropriyatiya pri brutsellyoze krupnogo rogatogo skota [Special preventive measures at cattle brucellosis] /A.M.Fomin, K.M.Salmakov // Theses of scientific and practical conference. Yekaterinburg, 31.05.-01.06.2012. Yekaterinburg: Ural research veterinary Institute -Ural State agricultural academy. - 2012. - P.247-248.

УДК 619.614.31.48

ИЗЫСКАНИЕ БАКТЕРИЦИДНЫХ СРЕДСТВ ДЛЯ САНАЦИИ ОБЪЕКТОВ ВЕТНАДЗОРА

С.Ш.Кабардиев - доктор ветеринарных наук, профессор, директор; М.С.Сайпуллаев - доктор ветеринарных наук, гл.научный сотрудник; К.А.Карпущенко - кандидат ветеринарных наук, вед. научный сотрудник; А.З.Алиев - кандидат технических наук, ст.научный сотрудник; Т.Б.Мирзоева - научный сотрудник; А.У.Койчуев - научный сотрудник.

ФГБНУ«Прикаспийский зональный научно исследовательский ветеринарный институт», г.Махачкала (367950, ул. Дахадаева, 88, тел. +7(8722) 67-94-65, 69-14-34,

е-таИ: аИаИеч. 1987@mail.ru).

Цель работы состоит в том, чтобы из различных бактерицидных веществ создать композиции и изучить их бактерицидную и дезинфекционную активность методом серийных разведений, как на

НА ЕТЕРМНЛРНЫЙ

Врач

шероховатых, так и на гладких тест-поверхностях, а также разработать технологию и режимы их применения в лабораторных условиях. Для этого были созданы две композиции - № 1 и № 2, основными действующими веществами в которых является тетраметилендиэтилентетрамин и алкилдиметил-бензиламмоний хлорид. В качестве синергистов в состав композиции №1 входила винная, а в состав композиции №2 - сульфосалициловая кислота. При сравнительном изучении было установлено, что растворы композиции № 1 обеззараживали кишечную палочку за 30 минут в разведении 1:376,5, а за 24 ч в разведении 1:2834,7. Эти же показатели у растворов композиции №2 соответственно были 1:192,8 и 1:1466,3. В отношении золотистого стафилококка, растворы этих композиций обеззараживали тест-поверхности соответственно в разведении №1 1:192,8 и 1:2024,8, №2 1:137,2 и 1:1466,3. Сравнительное изучение дезинфекционной активности растворов композиций № 1 и 2 на тест поверхностях показало, что обе композиции обеззараживают кишечную палочку с белковой зашитой на гладких поверхностях 0,5%, а на шероховатых 2,0% концентрацией при экспозиции 1 и 3 часа, из расчета 0,25-0,3 л/м2. В то же время обеззараживание золотистого стафилококка происходило на гладких 1,0%, а на шероховатых2,0% концентрацией также за 1 и 3 ч экспозиции, из расчета 0,5л/м2.

КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: испытания, тест-культуры, бактерицидность, обеззараживание, дезинфекция, растворы, тест-поверхности, разведения.

В системе ветеринарно-санитарных мероприятий, направленных на профилактику инфекционных заболеваний, а в случае их возникновения и ликвидацию, дезинфекция занимает одно из важных мест [1, 4, 5]. Основное назначение дезинфекции - разорвать эпизоотическую цепь путем воздействия на ее важнейшее звено- фактор передачи возбудителя болезни от источника инфекции к восприимчивому организму [2, 3, 7].

За последние 20-30 лет в России зарегистрировано большое количество дезинфицирующих средств, которые обладают широким спектром антибактериального действия. Однако не все эти средства полностью удовлетворяют потребности животноводства и отвечают современным требованиям, предъявляемым к дезинфектантам [1, 4, 6].

Особенности условий применения дезинфицирующих средств при обеззараживании различных объектов ветеринарного надзора, характер самих объектов и материалов, подлежащих дезинфекции, обуславливают ряд специфических требований, предъявляемых к дезинфицирующим средствам [5, 6, 2].

Современные дезинфицирующие средства, применяемые в ветеринарной практике должны не только надежно обеззараживать объекты, но химические вещества, входящие в состав препарата, не должны иметь неприятного запаха, и портить предметы, должны хорошо растворяться в воде, обладать антикоррозионными кумулятивными свойствами, а также быть дешевыми.

Анализируя литературные данные можно сделать вывод, что за рубежом и в нашей стране для дезинфекции объектов ветнадзора используют различные отходы химической промышленности, альдегиды ПАВ, ЧАС и другие. Предпо-

чтение отдается композиционным препаратам, содержащим несколько действующих веществ, когда за счет достижения синергизма компонентов в них повышается антимикробная и вирули-цидная активность дезинфектантов.

Учитывая положение дел с дезинфицирующими средствами в стране нами перед лабораторией ветеринарной санитарии Прикаспийского зонального НИВИ была поставлена задача изыскать и разработать новое поколение бактерицидных препаратов, которые за счет синергизма веществ, входящих в состав будет способствовать повышению эффективности, снижения себестоимости и безопасности препаратов.

Цель нашей работы состоит в том, чтобы из различных бактерицидных веществ создать различные композиции и изучить их бактерицидную и дезинфекционную активность методом серийных разведений и на шероховатых и гладких тест-поверхностях и разработать технологию и режимы их применения в лабораторных условиях.

Материалы и методы. Были созданы две композиции (препарата) с активнодействующи-ми веществами тетрометилендиэтилентетромин и дидецидиметиламмоний хлорид, а в качестве синергистов в состав входили винная и сульфо-салициловая кислота.

Первая композиция: тетраметилендиэтилен-тетромин + винная кислота + дидецилдимети-ламмоний хлорид;

Вторая композиция - тетраметилендиэтилен-тетромин+сульфосалициловая кислота и диде-цилдиметиламмоний хлорид.

В качестве тест-микроорганизмов использовали музейные культуры кишечной палочки (шт. 1257) и, золотистого стафилококка (шт. 209Р).

Лабораторные исследования проведены на тест-поверхностях из бетона, дерева (шероховатые), кафель и метал (гладкие). Для белковой защиты тест поверхностей использовали сыворотку крови лошади.

Бактерицидную активность растворов указанных композиций изучали методом серийных разведений согласно методике.

Для приготовления серийных разведений испытуемых композиций установили ряд из 15 стерильных колб емкостью 50 мл. В первую колбу вносили 10 мл основного разведения (1:50), во все остальные по 10 мл стерильной дистиллированной воды. Затем во вторую вносим 25 мл основного раствора (1:50) и после тщательного перемешивания с имеющейся там водой берут 25 мл раствора и переносят в следующую и т.д. из последней в ряду колбы 25 мл отливаем.

Из таблицы видно, что растворы композиций №1 обеззараживают кишечную палочку за 30 мин в разведении 1:376,5, а № 2 в разведении 1:192,8.

Значительно усиливается обеззараживающая активность при экспозиции 24 ч соответ-

При разработке режимов дезинфекции кон-таминированных тест-поверхностей растворами указанных композиций использовали метод орошения, при норме расхода 0,25-0,3л/м2 для гладких и 0,5л/м2 для дезинфекции шероховатых поверхностей. Для установления режимов дезинфекции брали 0,5; 1,0; 2,0% растворы при экспозиции 1 и 3 часа. Все исследования выполняли в трехкратной повторности.

Изучение бактерицидной и дезинфекционной активности растворов композиций проводили в соответствии с методикой « О порядке испытания новых дезинфицирующих средств для ветеринарной практики» (1987).

Результаты исследований. В таблице 1 приведены результаты изучения бактерицидной активности растворов композиций 1 и 2 в отношении кишечной палочки

ственно 1:2834,7 и 1:1466,3, что указывает на длительный обеззараживающий эффект данных композиций.

В таблице 2 приведены показатели бактерицидной активности растворов композиций № 1 и 2 в отношении золотистого стафилококка.

Таблица 1

Показатели бактерицидной активности растворов композиций № 1 и 2 в отношении кишечной палочки

№ 1 № 2

Разведение Экспозиция

30 24 30 24

1: 50 - - - -

1: 70 - - - -

1: 98 - - - -

1: 1372 - - - -

1: 192,8 - - - -

1: 268,8 - - + -

1: 376,5 - - + -

1: 527,1 + - + -

1: 737,9 + - + -

1: 1033,1 + - + -

1: 1466,3 + - + -

1: 2024,8 + - + +

1:28347 + - + +

1: 3698,0 + + + +

1: 5566,0 + + + +

контроль + + + +

Примечание: (-) - рост отсутствует, (+) - рост культуры.

Таблица 2

Показатели бактерицидной активности растворов композиций № 1 и 2 в отношении золотистого стафилококка

Разведение № 1 № 2

Экспозиция

30 24 30 24

1: 50 - - - -

1: 70 - - - -

1: 98 - - - -

1 137,2 - - - -

1 192,8 - - + -

1 268,8 + - + -

1:376,5 + - + -

1: 527,1 + - + -

1: 737,9 + - + -

1: 1033,1 + - + -

1: 1466,3 + - + -

1: 2024,8 + - + +

1: 2834,7 + + + +

1:3698,0 + + + +

1:5566,0 + + + +

контроль + + + +

Примечание ( - ) - рост отсутствует, (+) - отмечен рост.

Из таблицы видно, что растворы композиций №1 обеззараживают золотистый стафилокок при экспозиции 30 мин в разведении 1:192,8, а № 2 в разведении 1:137,2.

В то же время обеззараживающий эффект растворов композиций №1 и 2 усиливается при экспозиции 24 часа соответственно до разведений 1:2024,8 и 1:1466,3.

Анализируя полученные данные можно сделать вывод, что растворы композиции № 1 бактерицидная активность за 30 мин. и 24 ч выше, чем растворы композиции № 2.

В таблице 3 приведены результаты изучения дезинфекционной активности растворов композиций № 1 и 2 в отношении кишечной палочки.

Таблица 3

Тест-поверхности

Композиция Экспозиция, ч бетон дерево кафель металл

Концентрация, %

0,5 1,0 2,0 0,5 1,0 2,0 0,5 1,0 2,0 0,5 1,0 2,0

1 1 + + + + + - - - - - - -

3 + + - + + - - - - - - -

2 1 3 + + + + + + + + + - - - - - - -

контроль 3 + + + + + + + + + + + +

Примечание: (-) рост отсутствует, (+) отмечен рост

Дезинфекционная активность растворов композиций в отношении кишечной палочки

на тест-поверхностях

Из таблицы видно, что 0,5% растворы композиции № 1 и 2 обеззараживают кишечную палочку на гладких (кафель, металл) поверхностях в то же время на бетонных поверхностях растворы композиций обеззараживают кишечную палочку за 3 часа в 2,0%

концентрации, а на деревянных за 1 час также в 2% концентрации.

В таблице 4 приведены показатели изучения дезинфекционной активности растворов композиций №1 и 2 в отношении золотистого стафилококка.

Таблица 4

Показатели дезинфекционной активности растворов композиций №1 и 2 в отношении золотистого стафилококка

Тест-поверхности

Композиция Экспозиция, ч бетон дерево кафель металл

Концентрация, %

0,5 1,0 2,0 0,5 1,0 2,0 0,5 1,0 2,0 0,5 1,0 2,0

1 1 + + + + + + + - - + - -

3 + + - + + - + - - + - -

2 1 3 + + + + + + + + + + + + - - + + - -

контроль дист. вода с тест-культурой + + + + + + + + + + + +

Примечание: (-) рост отсутствует, (+) отмечен рост

Из таблицы видно, что растворы композиции №1 и 2 обеззараживают золотистый стафилококк на гладких тест-поверхностях 1,0 % раствором за 1и 3 часа из расчета 0,25-0,3л/м2, на шероховатых 2,0% раствором за 3 часа из расчета 0,5 л/м2.

Таким образом, дезинфекционная активность растворов композиций №1 и 2 в первую очередь зависит от вида поверхности, а во вторую очередь зависит от вида микроорганизмов.

Литература

Заключение. Изучение бактерицидной и дезинфекционной активности растворов композиций № 1 и 2 показало их высокую обеззараживающую эффективность, особенно при экспозиции 24 часа. В сравнительном изучении дезинфекционной активности в отношении кишечной палочки (шт.1257) и золотистого стафилококка (шт.209Р) растворов обоих композиций на тест поверхностях, полученные результаты были аналогичными.

1. Смирнов, А.М. Достижения в области ветеринарно-санитарной науки / А.М.Смирнов, В.И.До-рожкин. Н.К.Гуненкова // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. - 2015. - № 3 (15). - С. 6-8.

2. Сайпуллаев, М.С. Дезинфекционная эффективность растворов препарата «Миксамин» / М.С. Сайпуллаев // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. - 2015. - № 2 (14). - С. 37-40.

3. Попов, Н.И. Новые отечественные дезинфицирующие препараты для ветеринарно-санитарной обработки транспортных средств, используемых для перевозки животноводческих грузов / Н.И.Попов, С.А.Мичко, М.П.Бутко // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. - 2015. - № 2 (14). - С. 32-36.

4. Поляков, А.А. Ветеринарная санитария / А.А.Поляков. - М.: Колос, 1979. - С. 54-74.

5. Койчуев, А.У. Производственное испытание препарата «Биодез-экстра ДВУ» / А.У.Койчуев // Проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. - 2015. - № 2 (14). - С. 28-30.

6. Ступина, А.Н. Бактерицидная активность растворов препарата «Аминоцид» / А.Н.Ступина // Проблемы ветеринарной санитарии гигиены и экологии. - 2013. - № 1 (9). - С. 34-38.

7. Шеблия, В.Я. Справочник по ветеринарной санитарии / В.Я.Шеблия. - М.: Урожай, 1986. - 192 с.

8. О порядке испытания новыхдезинфицирующих средствдля ветеринарной практики:методическое указание. - М.: Наука, 1987. - 53 с.

ЕТЕРМНЛРНЫЙ

Врач

THE INVESTIGATION OF BACTERICIDAL AGENTS FOR SANITATION OF VETERINARY FACILITIES

Kabardiev S.Sh. - Doctor of Veterinary Medicine, professor; Saypullaev M.S. - Doctor of Veterinary Medicine; Karpuschenko K.A. - Candidate of Veterinary Sciences; Aliev A.Z. -Candidate of Technical Sciences; Mirzoyeva T.B. - researcher; KoychuevA.U. - researcher.

Caspian Zonal Scientific Research Veterinary Institute, Makhachkala (tel.+7 (8722) 67-94-65, 69-14-34, e-mail: alialiev.1987@mail.ru).

The aim of the work was to develop compositions and study their bactericidal and disinfection capacity using various test surfaces both smooth and rough ones and to determine modes and concentrations for laboratory use. The main active agent in both compositions is tetrametilendietilen tetramine and alkyldimethylbenzylammonium chloride. To enhance the antibacterial activity tartaric acid was added into the first composition and sulfosalicylic acid was added into the second one. A comparative study showed that solutions of the first composition decontaminated E. coli bacteria at 30 minutes at dilution of 1:376.5, and at 24 hours at a dilution of 1:2834.7. For the solutions the second composition the parameters were 1: 192.8 and 1:1466.3 accordingly. Regarding S. aureus, the solutions of these compositions decontaminated the test surfaces accordingly: for the first composition the dilution was 1: 1 and 192.8: 2024.8, and for the second composition - 1: 1 and 137.2: 1466.3 accordingly. A comparative study of disinfection activity of the first and second compositions on test surfaces showed that the both compositions disinfected E. coli with protein protection on smooth surfaces at 0.5% concentration and on rough surfaces at concentration of 2.0% at exposure time of 1 and 3 hours accordingly at the dosage rate of 0.25-0.3 l/m2. At the same time the disinfection rate of Staphylococcus aureus was at concentration of 1.0% for smooth surfaces and 2.0% concentration for rough surfaces with exposure time of 1 and 3 hours accordingly and exposure dosage rate of 0.5 l/m2.

KEYWORDS: test, test culture, antibacterial, decontamination, disinfection solutions, the TEN-surface breeding.

References

1. Smirnov, A.M. Dostizheniya v oblasti veterinarno- sanitarnoy nauki [The achievements in Veterinary and Sanitation sciences] / A.M.Smirnov, V.I.Dorozhkin, N.K.Gunenkova // Problemy veterinarnoy sanitarii, gigiyeny i ekologii. - 2015. - Vol. №3 (15). - P. 6-8.

2. Saypullaev, M.S. Disinfektsionnaya effektivnost rastvorov preparata «Miksamin» [Disinfection efficiency of «Miksamin» drug solutions] // Problemy veterinarnoy sanitarii, gigiyeny i ekologii. - 2015. - Vol. 2 (14). - P. 37-40.

3. Popov, N.I. Noviye otechestvenniye dezinfetsiruyuschiye preparaty dlya veterinarno-sanitarnoy obrabotki transportnyh sredstv, ispolzuyemyh dlya perevozki zhivotnovodcheskih gruzov [New domestic disinfectants for veterinary and sanitation treatment of vehicles used for transportation of livestock cargo] / N.I.Popov, S.A.Michkov, M.P.Butko // Problemy veterinarnoy sanitarii, gigiyeny i ekologii - 2015. - Vol. 2 (14). - P. 32-36.

4. Polyakov, A.A. Veterinarnaya sanitariya [Veterinary sanitation] / A.A.Polyakov. - Moscow: Kolos, 1979. - P.54-74.

5. Koychuev, A.U. Proizvodstvenniye ispytaniya preparata»Biodez Extra-DVU» [Field trial of «Biodez ExtraDVU» drug] // Problemy veterinarnoy sanitarii, gigiyeny i ekologii - 2015. - Vol. 2 (14). - P. 28-30.

6. Stupina A.N. Bakteritsidnaya aktivnost rastvorov preparata «Aminotsid» [Bactericidal activity of «Aminotsid» drug solutions] // Problemy veterinarnoy sanitarii, gigiyeny i ekologii - 2013. - Vol. 1 (9). - P. 34-38.

7. Shebliya, V.Ya. Spravochnik po veterinarnoy sanitarii [A handbook on Veterinary Sanitation]/ V.Ya. Shebliya. - Moscow: Urozhay, 1986. - 192 p.

8. O poryadke ispytaniya novyh dezinfetsiruyuschih sredstv dlya veterinarnoy praktiki: metodicheskoye ukazaniye [On the order of testing new disinfectants for veterinary practice: methodical instructions]. -Moscow: Nauka, 1987. - 53 p.