ФЛУОРЕСЦЕНТНЫЕ БЕЛКИ И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Выделенный флуоресцентный белок или полипептид, который:
(a) излучает свет в зеленом диапазоне спектра при возбуждении на длине волны в диапазоне λ 396-490 нм;
(b) имеет аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 80%, предпочтительно, по меньшей мере на 90%, более предпочтительно, по меньшей мере на 95% идентична SEQ ID NO:1;
(c) при выравнивании его последовательности с последовательностью SEQ ID NO:1, имеет одну из множества нижеследующих аминокислотных замен (положения остатков соответствуют положениям в последовательности SEQ ID NO:1):
viii) S103K
ix) S103K, T159K и F173E
х) S94T, S103K, T159K и F173E
xi) S103K, R150E
xii) S103K, F173E
xiii) S94T, S103K, R150K, S171N и K206R
xiv) S94T, S103K, R150I, S171N и K206R.
2. Фрагмент белка или полипептида по п.1, где указанный фрагмент является водорастворимым, сохраняет способность излучать свет в зеленом диапазоне спектра после возбуждения светом в диапазоне длин волн λ 394-490 нм и имеет по меньшей мере одну из указанных замен по п.1.
3. Белок или полипептид по п.1, выбранный из группы, состоящей из последовательностей SEQ ID NO:2-8.
4. Антитело, обладающее способностью специфически распознавать флуоресцентный белок, полипептид или его фрагмент по пп.1-3, или связываться с ними.
5. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая белок или полипептид или его фрагмент по пп.1-3.
6. Молекула нуклеиновой кислоты по п.5, выбранная из последовательностей SEQ ID NO:11-17 или комплементарной им цепи, или последовательности, гибридизующейся с ними в жестких условиях.
7. Молекула нуклеиновой кислоты по п.5 или 6, в которой встречаемость кодонов была оптимизирована на экспрессию в клетках млекопитающих.
8. Экспрессионный вектор, несущий молекулу нуклеиновой кислоты по пп.5-6.
9. Прокариотическая или эукариотическая клетка-хозяин, содержащая молекулу нуклеиновой кислоты по пп.5-6 или экспрессионный вектор по п.8.
10. Способ детектирования флуоресценции в клетке, включающий:
(a) получение клетки, экспрессирующей флуоресцентный белок, полипептид или его фрагмент по пп.1-3;
(b) облучение клеток светом в диапазоне возбуждения на длине волны λ 460-490 нм;
(c) детектирование флуоресценции.
11. Применение флуоресцентного белка или его полипептида или фрагмента по пп.1-3 в качестве внутриклеточного флуоресцентного маркера.
12. Применение по п.11 в целях мечения, определения локализации или детектирования биологической молекулы, или соединения в клетке или клеточной органелле.
13. Применение флуоресцентного белка или его полипептида, или фрагмента по пп.1-3 для разработки клеточного или бесклеточного анализа.
14. Применение по п.13, где указанный анализ осуществляют в крупномасштабном формате.
15. Набор, используемый в биологическом анализе и содержащий флуоресцентный белок, полипептид или его фрагмент по пп.1-3 и/или антитело по п.4, и/или молекулу нуклеиновой кислоты по пп.5-7, и/или экспрессионный вектор по п.8, упакованные в соответствующий контейнер.