Качественное и количественное исследование мази с маслом из семян винограда

ЭКСПЕРИМЕНТАЛДЫ ЖЭНЕ КЛИНИКАЛЫК ЗЕРТТЕУЛЕР ^ —

УДК 615.454.1.

А.Б. САГИНБАЗАРОВА

КАЧЕСТВЕННОЕ И КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ МАЗИ С МАСЛОМ ИЗ СЕМЯН ВИНОГРАДА

Западно-Казахстанский государственный медицинский университет имени Марата Оспанова, Актобе

Аннотация. Представлены результаты исследований биологически активных веществ в мази следующего состава: масло семян винограда, экстракт ромашки, масло мятное на основе (эмульгатор Т-2, вазелин вода, аэросил). Подлинность препарата определяли по содержанию метола и дубильных веществ. Были исследованы размер частиц в мази, однородность мази, рН водного извлечения. В мази с маслом семян винограда количественно определяли содержание жирных кислот методом газожидкостной хроматографии и дубильных веществ, методом комплексонометрического титрования, их содержание в препарате должно быть соответственно не менее 15% и не менее 2%.

В результате проведенного эксперимента количественное содержание жирных кислот в препарате составило 15,79%, количество дубильных веществ, соответственно, составило 2,21%, рН водного извлечения составил 6,19. Разработана методика анализа мази с маслом семян винограда, определены показатели качества препарата.

Ключевые слова: мазь с маслом семян винограда, качественный и количественный анализ, фитопрепараты, масляные экстракты, биофлаваноиды

Актуальность. Высокая биологическая ценность масла винограда определяется комплексом биологически активных веществ, среди которых важнейшими являются биофлавоноиды, группа витаминов. [1,2]. Исследования показали, что полифенольные соединения винограда оказывают разносторонние биологические эффекты. В растительных и животных тканях флавоноиды, совместно с аскорбиновой кислотой, участвуют в энзиматических процессах окисления и восстановления. Флавоноиды обладают противовоспалительными (антиинфекционным, противоаллергическим), антиоксидантным эффектами, нормализуют и поддерживают состояние тканевого гомеостаза и, соответственно, реактивность клеток [3]. Флавоноиды увеличивают упругость кровеносных сосудов, укрепляя их стенки, и нормализуют нарушенную проницаемость капилляров, способствуют накоплению витамина С в печени и надпочечниках [4]. Кроме того, в состав виноградного масла входят жирные кислоты, цитокинины, аукины и рутины [5,6].

Изучение масляных экстрактов из отечественных растений актуально для создания фитопрепаратов, содержащих комплекс биологически активных веществ, которые обуславливают широкий спектр фармакологических свойств [7,8].

Комплексной переработкой семян винограда, произрастающего в Южно-Казахстанской области Республики Казахстан, были выделены биологически активные вещества (масло, экстракт сухой, сорбент), проведены исследования по разработке и исследованию лекарственных препаратов на их основе. Из семян винограда выделены масло, экстракт сухой, и из шрота-активированный уголь. На основе выделенных биологически активных веществ разработаны лекарственные препараты: из масла - мазь, из экстракта сухого - таблетки, капсулы [9].

Цель исследования: проведение качественного и количественного анализа мази с маслом винограда.

Материалы и методы: Была изучена мазь с маслом семян винограда состава: масло семян винограда, экстракт ромашки, масло мятное на основе (эмульгатор Т-2: вазелин: вода, аэросил). Полученная мазь представляет собой однородную густую пластичную массу буроватого цвета.

Для оценки качества мази с маслом семян винограда были выбраны показатели качества: подлинность, однородность, размер частиц, рН водного извлечения, количественное содержание действующих веществ.

Качественный анализ препарата.

Подлинность определяли по содержанию ментола и дубильных веществ, проводили качественные реакции на вышеназванные вещества. С этой целью из мази проводили извлечение действующих веществ спиртом этиловым.

1,0 г препарата растворяли в 10 мл 50% раствора спирта этилового, тщательно перемешивали стеклянной палочкой при нагревании на водяной бане с температурой 40-45°С в течение 10-15 мин. Смесь фильтровали через слой ваты.

2,0 мл полученного фильтрата помещали в пробирку и упаривали на водяной бане до исчезновения запаха спирта этилового. Охлаждали до комнатной температуры. Прибавляли к полученному раствору 1 мл серной кислоты концентрированной и 1 мл 1% раствора ванилина в серной кислоте концентрированной, наблюдалось желтое

18

Батыс Цазацстан медицина журналы №4 (40) 2013 ж.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ И КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ^--—

окрашивание, которое перешло в малиново-красное (ментол).

К 3,0 мл оставшегося фильтрата прибавили 3 капли раствора железа хлорида (III), затем прибавили 1 мл серной кислоты разведенной (1:5), появилась зеленоватая окраска (дубильные вещества).

Размер частиц в мази определяли по статье Государственной фармакопеи Республики Казахстан. Том.1, 2.9.21 [10]. Размер частиц не превысил допустимых норм, не более 100 мкм.

При исследовании однородности мази по методике ГФ РК, т.1, с.529. ни в одном из четырех пятен не было обнаружено видимых частиц. Мазь однородная, соответствует требованиям.

Одним из показателей качества мази является рН водного извлечения мази. Изменение рН в процессе хранения указывает на нестабильность препарата. Поэтому нами было проведено определение рН водного извлечения исследуемой мази потенциометрическим методом по ГФ РК т.1, 2.2.3.

К 1,0 г препарата помещенного в колбу вместимостью 100 мл с притертой пробкой, прибавили 30 мл воды очищенной, закрыли пробкой и встряхивали на механическом встряхивателе в течение 15 минут. Содержимое колбы отфильтровали и измерили рН фильтрата потенциометрически.

Количественное определение проводили по содержанию жирных кислот и дубильных веществ в препарате.

Для определения жирных кислот в мази с маслом семян винограда нами был использован метод газожидкостной хроматографии по методике ГФ РК, т.1, 2.2.28.

Количественное определение дубильных веществ в мази проводили методом комплексонометрического титрования [11].

Около 2,0 г (точная навеска) мази помещали в стеклянный стаканчик вместимостью 100 мл и проводили трижды экстракцию 30% раствором этилового спирта, периодически перемешивали стеклянной палочкой. Первые две экстракции проводили с 30% раствором этилового спирта по 30 мл в течение 10 мин при слабом нагревании на водяной бане (температура воды не более 25-30°С), третью экстракцию проводили 30 мл 30% раствора этилового спирта в течение 5 мин при комнатной температуре. Экстракты сливали в мерную колбу вместимостью 100 мл, фильтруя их через тонкий слой ваты, доводили объем раствора в колбе тем же растворителем до метки и перемешивали (полученный раствор должен быть прозрачным).

К 10,0 мл полученного раствора, помещенного в пробирку для центрифугирования, прибавили 10 мл реактива осаждения. Смесь выдерживали 30 мин и центрифугировали в течение 30 мин со скоростью 3000 об/мин. Надосадочную жидкость сливали, к осадку в пробирке прибавляли 25 мл 0,025% раствора гидроксида аммония и центрифугировали при тех же условиях в течение 15 мин.

Надосадочную жидкость слили, осадок растворили в 3 мл 30% раствора кислоты уксусной. Затем количественно с помощью 80-100 мл воды перенесли в колбу вместимостью 250 мл, прибавили 25 мл 5% раствора гидрокарбоната натрия и титровали 0,01 М раствором эдетата натрия до желтого окрашивания, добавив индикатор (0,5 мл ксиленолового оранжевого).

Содержание дубильных веществ (Х), в пересчете на танин препарате, в процентах вычисляли по формуле:

VK0.0013100100 " M10

где^ - объем 0,01 М раствора эдетата натрия, израсходованного на титрование, в миллиметрах;

K - поправочный коэффициент к молярности 0,01 М эдетата натрия;

m - масса навески препарата, в граммах;

0,0013 - количество танина, соответствующего 1 мл 0,01 М раствора эдетата натрия, в граммах.

Результаты исследований представлены в таблице 1.

Таблица 1. Показатели качества мази

Показатели Нормы отклонений

Подлинность положительная соответствует

Однородность однородная соответствует

Размер частиц не более 100 мкм соответствует

рН водного извлечения от 4.5 до 7.0 6,19±0,20

Количественное содержание в мази, в % - жирных кислот - дубильных веществ

Должно быть не менее 15,0 Должно быть не менее 2,0 15,79±0,70 2,21±0,12

Медицинский журнал Западного Казахстана №4 (40) 2013 г.

19

ЭКCПЕPИMЕНTАЛДЫ ЖЭНЕ КЛИНИКАЛЫК ЗЕPTTЕУЛЕP

Выводы:

1. Разработана методика качественного анализа мази с маслом семян винограда, определены показатели качества: внешний вид, подлинность, размер частиц, однородность, рН.

2. Количественное определение жирных кислот в препарате проводили методом газожидкостной хроматографии и дубильных веществ методом комплексонометрического титрования.

3. Значения основных показателей качества исследуемой мази соответствуют требованиям ГФ РК. Полученные данные могут быть использованы при разработке нормативного документа, регламентирующего качество мази.

Список литературы:

1. Пирниязов A^., Aбдулладжанова Н.Г., Mавлянов СМ и др. Полифенолы косточек Vitis vinifera //ХПС. -2003.- №4. - С. 281-285.

2. Edeas M.A., Lindenbaum A. Protective effects of various flavonoids compaunds on HIV infection. In: XXVeme congres mondial de la vigne et du vin. Paris, 2000.-Р 57-61.

3. Блахей A.^, Шутый Л.П. Фенольные соединения растительного происхождения. - M.: Mир, 1997.

4. Romer J.L. Lund I wine containing phytoestrogen // Nature Medicine. - 1997.- №.3. - Р. 1195-1196

5. Л.1.Власик, Л.В.Сергеева. До бiологiчноi дм олш, отриманих iз насiння гарбуза та кюточек винограду. // Mатерiали науковоi конференцй «Наволишне середовище i здоро,я». - Чернiвцi: 4My, 1993. - С.71

6. Седнеханов M.^ Экстрагирование масла из семян винограда разных сортов //Виноделие и виноградарство. - 2003.- №1.- С. 36-37

7. Сагиндыкова БА, Aнарбаева RM., Сагинбазарова Ab., Исабекова Д.С., Омирбаева A.E. Исследование возможности разработки технологии новых лекарственных средств на основе косточек винограда // Mатериалы III съезда врачей и провизоров Республики Казахстан (г. Aстана, 18-19 октября 2007), Т. II.- Aстана.- 2007.- С .311-313

S. Изтлеуов MX, Изтлеуов E.M., Aйталиев С.Е. Стресс-лимитирующие свойства фитопрепарата «Солодки масло» // Mедицинский журнал Западного Казахстана. - 2012.- №3 (35).- С. 50

9. Сагиндыкова БА, Aнарбаева РМ, Сагинбазарова Ab., Омирбаева A.E. Разработка технологии комплексной переработки семян винограда // Mатериалы 14 Российского конгресса «Человек и лекарство». Сборник материалов Конгресса (тезисы докладов). Mосква.-Aпрель, 2007 г.- С.872.

10. Государственная фармакопея Республики Казахстан. Т.1. - Длматы: «Жибек жолы», 2008. - 592 с.

11. Сагиндыкова БА, Aнарбаева РМ, Исабекова Д.С. Определение содержания биологически активных веществ в сухом экстракте виноградных косточек // Фармацевтический бюллетень.- 2007.-№ 7-8 С. 26-27

А.Б. САГЫНБАЗАРОВА

ЖYЗIМ ДЭНДЕР1 МАЙЫ КОСЫЛГАН ЖАГАР МАЙДЫИ САПАЛЫК ЖЭНЕ САНДЬЩ ЗЕРТТЕЛУ1

Марат Оспанов атындагы Батыс Казахстан мемлекеттiк медицина университетi, А^тебе

Курамында жYзiм дэндерi майы, тYЙмеда^ сыгындысы, жалбыз майы бар (эмульгатор Т-2: вазелин: су, аэросил) непзЫде жасалган жагар майдагы биологиялыщ белсендi заттарды зерттеудщ ^орытындысы усынылды. Препараттьщ дэлдiгi ментол мен иiлiк заттар ^урамы бойынша аны^талды. Жагар майда белшектер мвлшерi, бiртектiлiк жэне су сыгындысы рН зерттелдi. ЖYзiм дэндерi майы ^осылган жагар май ^урамындагы майлы ^ыш^ылдарды газды суйы^тъщ хроматография эдiсiмен жэне иiлiк заттарды комплексонометриялыщ титрлеу эдiсiмен сандыщ ^урамы аны^талды, олардыц препараттагы ^урамы сэйкесiнше 15% кем емес жэне 2% кем емес болуы тиютк

0ткiзiлген тэжiрибе ^орытындысы бойынша препаратта майлы ^ыш^ылдар 15,79% ^урады, иiлiк заттар саны 2,21% ^урады, су сыгындысы рН 6,19 керсетп. Курамында жYзiм дэндерi майы жасалынган жагар май талдау методикасы ендiрiлдi, препараттыц сапалыщ керсеткш аны^талды.

Нег/'зг/ свздер: жYзiм дэндер/' косылган жагармай, сапалы; жэне санды; талдау, фитопрепараттар, майлы экстракттар, биофлавоноидтар.

TYЙIН

20

Батые Цазацстан медицина журналы №4 (40) 2013 ж.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ И КЛИНИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

SUMMARY

A.B. SAGINBAZAROVA STUDY OF OINTMENT WITH OIL FROM SEEDS OF GRAPE

Marat Ospanov West Kazakhstan State Medical University, Aktobe

The results of studies of biologically active substances in the ointment of the following composition is presented: grape seed oil, extract of chamomile, peppermint oil on the base (emulsifier T-2: Vaseline: water, aerosil). The authenticity of the drug was determined by the content menthol and tannins. Particle size in the ointment were investigated, ointment homogeneity, pH of the water extract. In ointment with grape seed oil is determined quality of fatty acid content by method gas-liquid chromatography and tannins and method complexometric titration, the content of the preparation must be suitably at least 15% and not less than 2%.

As a result of this experiment quantitative fatty acid content in the preparation was 15.79%, the amount of tannins was accordingly 2.21%, pH of the water extract was 6.19. The method of analysis ointments with oil grape seed quality indicators identified drug.

Key words: ointment with grape seed oil, qualitative and quantitative analysis, phytopreparations, oil extracts, bioflavonoids.

УДК: 611.316.1/5 - 013.

Н.А. ГЕВКАЛЮК1, К.Н. КОСЕНКО2

ОБРАЗОВАНИЕ ВСТАВОЧНЫХ ОТДЕЛОВ И ПОПЕРЕЧНОИСЧЕРЧЕННЫХ ПРОТОКОВ В ХОДЕ ЭМБРИОГЕНЕЗА СЛЮННЫХ ЖЕЛЕЗ ЧЕЛОВЕКА

ГВУЗ «Тернопольский государственный медицинский университет имени И.Я. Горбачевского»1, ГУ «Институт стоматологии Академии медицинских наук Украины»2, Украина, г Тернополь, г.Одесса

Аннотация. Проведенные комплексные морфологические исследования эмбриогенеза слюнных желез показали, что третий этап характеризуется появлением вставочных отделов на фоне неоангиогенеза, образованием поперечноисчерченных протоков. Данные электронной микроскопии, а также иммуногистохимическая реакция на эндотелин с маркером СД-28 свидетельствуют, что цилиндрические клетки, выстелающие просвет исчерченных протоков слюнных желез, принадлежат к APUD-системе и выполняют роль нейрогуморальных трансмиттеров.

Ключевые слова: слюнные железы, эмбриогенез, вставочный отдел, поперечноисчерченный проток, неоангиогенез.

Введение. В последние годы в специальной литературе всего мира важное место занимает изучение структуры и функций слюнных желез, их регенераторных и адаптивных потенций, изменений в процессе развития соматических заболеваний, нарушений при инфекционных заболеваниях, в том числе респираторных вирусных инфекциях [1,3,4,10,11]. В связи с основными процессами морфогенеза, онтогенетических преобразований клеточных популяций исследование способов морфологического выражения прямих и возвратных влияний развивающихся органов один на другого, выявление их коадаптаций на основании оценки структурной организации является одной из актуальных задач морфологии [2,5,6].

Цель исследования: провести комплексное морфологическое исследование развития слюнных желез в ходе третьего этапа эмбриогенеза.

Материалы и методы исследования. Взятые образцы материала фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина. Изготовляли парафиновые и эпоксидные блоки, из которых получали тонкие срезы. Из эпоксидных блоков получали полутонкие срезы, которые окрашивались толуидиновым синим. На парафиновых срезах проводили общее гистологическое окрашивание гематоксилин-эозином, гистологические окрашивания ШИК-альциановым синим и ШИК-альциановым синим+ по Бергману, электронномикроскопическое исследование, иммуногистохимические исследования на маркеры VEGF, СД-28.

Результаты исследования. Известно, что первым механическим барьером для проникновения возбудителей инфекционных заболеваний и антигенов является слизистая оболочка полости рта, постоянное увлажнение которой слюной способствует поддержанию барьерных свойств эпителия [2.с: 38,6.с:27]. В настоящее время доказана

Медицинский журнал Западного Казахстана №4 (40) 2013 г.

21