ПОЛИНУКЛЕОТИД И СПОСОБ БОРЬБЫ С НАШЕСТВИЕМ НАСЕКОМЫХ

1. Изолированный полинуклеотид, где полинуклеотид содержит полинуклеотидную последовательность, выбранную из:
(а) полинуклеотидной последовательности, показанной в SEQ ID NO: 1; или
(b) полинуклеотидной последовательности, по меньшей мере, из 15 последовательных нуклеотидов из SEQ ID NO: 1, где, когда жесткокрылое насекомое-вредитель поглощает двухцепочечную РНК, содержащую, по меньшей мере, одну цепь, комплементарную полинуклеотидной последовательности, рост жесткокрылого насекомого-вредителя ингибируется; или
(c) полинуклеотидной последовательности, по меньшей мере, из 17 последовательных нуклеотидов из SEQ ID NO: 1, где, когда жесткокрылое насекомое-вредитель поглощает двухцепочечную РНК, содержащую, по меньшей мере, одну цепь, комплементарную полинуклеотидной последовательности, рост жесткокрылого насекомого-вредителя ингибируется; или
(d) полинуклеотидной последовательности, по меньшей мере, из 19 последовательных нуклеотидов из SEQ ID NO: 1, где, когда жесткокрылое насекомое-вредитель поглощает двухцепочечную РНК, содержащую, по меньшей мере, одну цепь, комплементарную полинуклеотидной последовательности, рост жесткокрылого насекомого-вредителя ингибируется; или
(e) полинуклеотидной последовательности, по меньшей мере, из 21 последовательного нуклеотида из SEQ ID NO: 1, где, когда жесткокрылое насекомое-вредитель поглощает двухцепочечную РНК, содержащую, по меньшей мере, одну цепь, комплементарную полинуклеотидной последовательности, рост жесткокрылого насекомого-вредителя ингибируется; или
(f) любой из полинуклеотидных последовательностей, показанных в SEQ ID NO: от 3 до 20; или
(g) полинуклеотидной последовательности, которая гибридизуется с полинуклеотидной последовательностью, определенной в любом из пунктов от (а) до (f), при жестких условиях;
предпочтительно, где жесткокрылое насекомое-вредитель представляет собой Monolepta hieroglyphica.
2. Полинуклеотид по п. 1, где полинуклеотид дополнительно содержит последовательность, комплементарную полинуклеотидной последовательности, определенной в любом из пунктов от (а) до (f) по п. 1.
3. Полинуклеотид по п. 1 или 2, где полинуклеотид дополнительно содержит спейсерную последовательность, предпочтительно, где спейсерная последовательность представляет собой SEQ ID NO:23.
4. Экспрессионная кассета или рекомбинантный вектор, содержащие полинуклеотид по любому из пп. 1-3.
5. Применение полинуклеотида по любому из пп. 1-3 для вмешательства в экспрессию целевой последовательности жесткокрылого насекомого-вредителя или ингибирования роста a жесткокрылого насекомого-вредителя.
6. Интерферирующая рибонуклеиновая кислота, характеризующаяся тем, что после того, как интерферирующая рибонуклеиновая кислота поглощается жесткокрылым насекомым-вредителем, она подавляет экспрессию, по меньшей мере, одного гена-мишени у жесткокрылого насекомого-вредителя, где интерферирующая рибонуклеиновая кислота содержит, по меньшей мере, один элемент сайленсинга, где элемент сайленсинга представляет собой двухцепочечную область РНК, содержащую соединенные комплементарные цепи, где одна цепь из области двухцепочечной РНК содержит нуклеотидную последовательность или состоит из нуклеотидной последовательности, которая, по меньшей мере, частично комплементарна целевой последовательности в гене-мишени, и ген-мишень содержит полинуклеотидную последовательность по любому из пп. 1-3.
7. Интерферирующая рибонуклеиновая кислота по п. 6, где интерферирующая рибонуклеиновая кислота содержит, по меньшей мере, два элемента сайленсинга, и каждый из элементов сайленсинга содержит нуклеотидную последовательность или состоит из нуклеотидной последовательности, которая, по меньшей мере, частично комплементарна целевой последовательности в гене-мишени, предпочтительно, где каждый из элементов сайленсинга содержит отличающуюся нуклеотидную последовательность или состоит из отличающейся нуклеотидной последовательности, которая, по меньшей мере, частично комплементарна другой целевой последовательности в гене-мишени, предпочтительно, где другая целевая последовательность происходит исключительно из гена-мишени или происходит из дополнительного гена-мишени, отличного от гена-мишени, предпочтительно, где дополнительный ген-мишень, отличающийся от гена-мишени, получен от того же жесткокрылого насекомого-вредителя или от другого жесткокрылого насекомого-вредителя, предпочтительно, где жесткокрылое насекомое-вредитель представляет собой Monolepta hieroglyphica.
8. Интерферирующая рибонуклеиновая кислота по п. 6 или 7, где интерферирующая рибонуклеиновая кислота дополнительно содержит спейсерную последовательность, предпочтительно, где спейсерная последовательность представляет собой SEQ ID NO:23.
9. Композиция для борьбы с нашествием жесткокрылых насекомых-вредителей, содержащая, по меньшей мере, одну из интерферирующих рибонуклеиновых кислот по любому из пп. 6-8 или клетку-хозяина, которая экспрессирует или способна экспрессировать интерферирующую рибонуклеиновую кислоту, и, по меньшей мере, один подходящий носитель, эксципиент или разбавитель, предпочтительно, где клетка-хозяин представляет собой бактериальную клетку.
10. Композиция для борьбы с нашествием жесткокрылых насекомых-вредителей по п.9, где композиция представляет собой твердое вещество, жидкость или гель, предпочтительно, где композиция представляет собой инсектицидный спрей.
11. Композиция для борьбы с нашествием жесткокрылых насекомых-вредителей по п. 9 или 10, где композиция дополнительно содержит, по меньшей мере, один инсектицид, и инсектицид представляет собой химический инсектицид, специфический белок клубней картофеля, инсектицидный белок Bacillus thuringiensis, инсектицидный белок Xenorhabdus ehlersii, инсектицидный белок Photorhabdus luminescens, инсектицидный белок Bacillus laterosporus или инсектицидный белок Bacillus sphaericus.
12. Применение композиции для борьбы с нашествием жесткокрылых насекомых-вредителей по любому из пп. 9-11 для профилактики нашествия и/или борьбы с нашествием жесткокрылых насекомых-вредителей, предпочтительно, где жесткокрылое насекомое-вредитель представляет собой Monolepta hieroglyphica.
13. Способ для борьбы с нашествием жесткокрылых насекомых-вредителей, включающий контактирование жесткокрылого насекомого-вредителя с эффективным количеством, по меньшей мере, одной из интерферирующих рибонуклеиновых кислот по любому из пп. 6-8.
14. Способ повышения устойчивости растения к жесткокрылому насекомому-вредителю, получения растения для борьбы с жесткокрылым насекомым-вредителем, защиты растения от повреждения, вызываемого жесткокрылым насекомым-вредителем, включающий введение в растение полинуклеотида по любому из пп. 1-3 или экспрессионной кассеты или рекомбинантного вектора по п. 4, или конструкции, содержащей интерферирующую рибонуклеиновую кислоту по любому из пп. 6-8.
15. Способ по п. 13 или 14, где растение представляет собой сою, пшеницу, ячмень, кукурузу, табак, рис, рапс, хлопок или подсолнечник.