2
СПОСОБ СНИЖЕНИЯ УРОВНЯ α АНТИПЛАЗМИНА У НОВОРОЖДЕННЫХ ПОРОСЯТ С АНЕМИЕЙ
2
METHOD OF α ANTIPLASMIN LEVEL REDUCTION IN NEWBORN PIGLETS WITH ANAEMIA

Изобретение относится к биологии и ветеринарии, а именно к гематологии.
2
Аналогов предлагаемого способа нормализации уровня α антиплазмина у новорожденных поросят с анемией не существует.
Имеются сведения о применении при анемии у поросят ферроглюкина (Внутренние незаразные болезни сельскохозяйственных животных./Под ред. В.М.Данилевского. М.: Агропромиздат, 1991, 576 с.).
В качестве эффективных стимуляторов жизнедеятельности растущего организма в современной ветеринарии применяются полизон - фосфорнокислая соль 2-амино-4-метилтио-(S-оксо-S-амино)-масляной кислоты, представляет собой слабо растворимый в воде порошок от белого до кремового цвета (Овчинников А. и др. Полизон - стимулятор роста // Птицеводство, 2006. - №12. - с.14-15.) и крезацин - производное ароксиалкилкарбоновых кислот. Он представляет собой белый кристаллический порошок, хорошо растворимый в воде, со слабым специфическим запахом, сладковато-горьковатого вкуса. Он проявляет эффективное стимулирующее действие на живые организмы, повышая выживаемость человека и животных в неблагоприятных и экстремальных условиях, стимулируя или нормализуя жизненные процессы (Байматов В.Н., Латыпов М.М. Влияние крезацина на состояние птицы. Ветеринария, 2006, №11, с.49-51).
2
Однако никогда ранее лечебный комплекс, состоящий из ферроглюкина, полизона и крезацина, не применялся у новорожденных поросят с анемией с целью нормализации уровня α антиплазмина.
2
Целью изобретения является повышение эффективности коррекции уровня α антиплазмина у новорожденных поросят с анемией.
2
Сущность заявляемого способа заключается в том, что для оптимизации уровня α антиплазмина новорожденным поросятам с анемией назначаются ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 дней, полизон 4 мг/кг и крезацин 4 мг/кг, включенных в схему выпаивания на 10 суток.
2
2
Способ позволяет нормализовать уровень α антиплазмина у новорожденных поросят с анемией через 3 дня после завершения лечения, переводя его на уровень, близкий к таковому для здоровых поросят. При соблюдении рекомендаций заявляемого способа возможно поддержание в последующем активности уровня α антиплазмина в оптимальном состоянии, что позволит у новорожденных поросят существенно снизить риск тромботических осложнений, оздоровить стадо, увеличить привесы, снизить падеж и повысить качество и объем получаемой мясной продукции.
Заявляемый способ осуществляется следующим образом.
2
Для диагностики у новорожденных поросят с анемией нарушения уровня α антиплазмина проводится его оценка по следующей методике.
2
2
2
2
α-антиплазмин (α-АП) является наиболее важным ингибитором фибринолиза, в присутствии которого происходит быстрое формирование необратимого, лишенного активности комплекса "плазмин-α-АП". Метод основан на определении способности α-АП исследуемого образца плазмы инактивировать добавляемый в плазму очищенный плазмин. Содержание остаточного плазмина определяется по степени гидролиза хромогенного субстрата, специфичного по отношению к этому ферменту.
2
образец
избыток
2
остаток
α-АП+плазмин=[α-АП-плазмин]+плазмин
2
4
Используются реактивы: 1. Плазмин свиньи, лиофилизированный. Разводится в буфере до концентрации 0,1 СТА Е/мл. 2. Хромогенный субстрат D-Norvalylcyclohexylalanil-lysil-p-nitroanilide. Разводится в дистиллированной воде до концентрации 3 ммоль/л. 3. Раствор буфера: KHPO (100 ммоль/л), NaCl 9 г/л, глицерин (250 г/л), pH 7,5.
2
2
Для выполнения исследования необходима также стандартная или контрольная нормальная плазма с известным содержанием α-АП или пулированная (взятая не менее чем от 10 здоровых поросят), активность α-АП, в которой принимается за 100%.
Применяется следующее оборудование: спектрофотометр с термостатируемой кюветой. Температура реакции +37°C. Используемая длина волны 405 нм. Ширина оптического пути кюветы - 1 см.
Материалом для исследования служит цитратная бедная тромбоцитами плазма.
Предварительно все смешиваемые реагенты подогреваются до +37°C. Ход определения приводится в таблице.
Схема определения уровня α<sub>2</sub> антиплазмина у обследуемого
Последовательность операций
Исследуемый образец
Контроль(плазмин)
1. Внести в кювету или пробирку:
исследуемую плазму
20 мкл (0,02 мл)
-
физиологический (0,15 М) раствор хлорида натрия
-
20 мкл (0,02 мл)
раствор плазмина
1,0 мл
1,0 мл
2. Перемешать и инкубировать при +37°C в течение 1 мин
3. Добавить хромогенный субстрат и включить секундомер
0,1 мл
0,1 мл
В течение 30 сек учитывают показатели поглощения и одновременно включают секундомер. Спустя 60 и 120 сек повторно определяют показатели поглощения.
2
Вычисляют скорость изменения поглощения за 1 мин (Δ А/мин), которая пропорциональна активности α-АП. Для этого рассчитывают разницу поглощения при 405 нм между 0 и 60 секундами инкубации, а также между 60 и 120 секундами. Определяют среднюю величину из двух показателей Δ А/мин.
плазмин
контроль
2
п
Каждая серия анализов требует не менее одного значения для раствора плазмина (Δ А/мин) и одного референтного значения, определяемого с использованием контрольной нормальной плазмы (Δ А/мин) с известным значением α-АП. Эти значения используют для вычисления внутрилабораторного коэффициента пересчета (K):
2
Содержание α-АП в исследуемом образце плазмы в виде % от нормы в дальнейшем вычисляется по формуле:
2
образец
п
плазмин
образец
α-АП(% от нормы)=К×(Δ А/мин-Δ А/мин)
2
В норме, уровень α-АП в плазме крови составляет 80-120%.
2
Снижение активности α-АП может быть определено при активации фибринолиза, его повышение сопряжено с риском тромбоза.
2
При диагностике у новорожденных поросят с анемией повышения α-АП необходимо назначение лечения согласно заявленному способу.
Пример 1. У новорожденного поросенка с анемией №19 была взята кровь и исследована по изложенной выше схеме.
12
У данного поросенка отмечалось нарушение эритропоэза с признаками снижения уровня содержания железа в его организме, сопровождаясь изменением показателей крови. Так, количество гемоглобина у него составляло 82,0 г/л, эритроцитов 4,10×10/л, сидероцитов 1,1% при уровне железа в сыворотке 13,6 мкмоль/л с повышением общей железосвязывающей способности сыворотки крови до 68,9 мкмоль/л.
2
При обследовании у поросенка была выявлена повышенная активность α-АП (147%). Животному был назначен ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 дней.
12
2
Через 3 дня после окончания лечения у поросенка нормализовалась красная кровь. Так, количество гемоглобина у него возросло до 118,0 г/л, эритроцитов - до 5,06×10/л, сидероцитов до 7,3% при увеличении железа в сыворотке до 22,6 мкмоль/л и снижении общей железосвязывающей способности сыворотки крови до 39,8 мкмоль/л. Однако у поросенка было достигнуто неполное снижение активности α-АП (128%), не достигшее нормальных значений.
2
2
Наблюдение за поросенком в последующем зарегистрировало слабую положительную динамику α-АП - через 1 месяц после окончания лечения α-АП составил 123%.
Пример 2. У новорожденного поросенка с анемией №20 была взята кровь и исследована по изложенной выше схеме.
12
У данного поросенка отмечалось нарушение эритропоэза с признаками снижения уровня содержания железа в его организме, сопровождаясь изменением показателей крови. Так, количество гемоглобина у него составляло 82,0 г/л, эритроцитов 4,08×10/л, сидероцитов 0,9% при уровне железа в сыворотке 12,2 мкмоль/л с повышением общей железосвязывающей способности сыворотки крови до 68,2 мкмоль/л.
2
При обследовании у поросенка была выявлена повышенная активность α-АП (145%). Животному был назначен ферроглюкин по 150 мг (2 мл) внутримышечно, двоекратно с интервалом 10 дней, полизон 4 мг/кг и крезацин 4 мг/кг, включенных в схему выпаивания на 10 суток.
Через 3 дня после окончания лечения у поросенка нормализовалась красная кровь.
12
Так, количество гемоглобина у него возросло до 122,8 г/л, эритроцитов - до 5,36×10/л, сидероцитов до 8,7% при увеличении железа в сыворотке до 28,9 мкмоль/л и снижении общей железосвязывающей способности сыворотки крови до 33,9 мкмоль/л.
2
У поросенка была достигнута полная нормализация активности α-АП (88%).
2
Наблюдение за поросенком в последующем не зарегистрировало отрицательной динамики α-АП.
2
Использование предлагаемого способа оптимизации активности α-АП в ветеринарии поможет избежать сосудистых нарушений у новорожденных поросят с анемией, оздоровить стадо, снизить падеж, увеличить привесы, повысить качество и объем получаемой мясной продукции и получать в последующем от этих поросят здоровое потомство.