Микровязкость и липидный спектр мембраны мононуклеарных лейкоцитов крови у больных туберкулезом легких

цитов и структурную организацию паренхимы печени при вакцинном гранулематозном воспалении препаратов // Пробл. туберкулёза. — 2002. — № 5. — С.46-48.

21. Панина O.A., Куприна Н.П. Фармакотерапевтическая эффективность серозных менингитов у детей с применением циклоферона // Применение циклоферона в педиатрической практике: Сб. статей / Под ред. М.Г. Романцова, В.В. Ботвиньевой. — СПб.: Тактик-Студио, 2005. — С.23-30.

22. Перельман М.И., Хомяков Ю.Н., Киселёв В.И. и др. Молекулярная медицина и лечение туберкулёза // Пробл. туберкулёза. — 2001. — № 2. — С.5-7.

23. Перельман М.И, Корякин В.А, Богадельникова И.В. Фтизиатрия. — М.: ОАО «Издательство Медицина», 2004. — 519 с.

24. Рабухин А.Е. Туберкулёз органов дыхания у взрослых.

— М.: Медицина, 197б. — 328 с.

25. Разумный Р.В. Эффективность циклоферона у больных хроническим обструктивным заболеванием лёгких, сочетанным с гипертонической болезнью // Циклоферон в клинической пульмонологии: Пособие для врачей. — СПб.: Тактик-Студио, 2005. — С.54-63.

26. Романцов М.Г., Коваленко А.Л. Характеристика циклоферона, иммуномодулятора с полифункциональной активностью // Циклоферон в клинической пульмонологии: Пособие для врачей. — СПб.: Тактик-Студио, 2005. — С.9-14.

27. Селье Г. Стресс без дистресса. — М.: Прогресс, 1982. -121 с.

28. Сельков С.А., Павлов О.В., Коваленко А.Л. Эффективность таблетированной (кишечнорастворимой) формы циклоферона в терапии герпетической инфекции // Лечащий врач. — 2000. — № 1. — С.56-59.

29. Старостенко Е. В. Патогенетическая терапия при тубер -кулёзе лёгких // Пробл. туберкулёза. — 1989. — № 5. — С.22-26.

30. Тихомирова О.В. Патогенетическая терапия дизентерии Флекснера // Применение циклоферона в педиатрической практике: Сб. статейJ Под ред. М.Г. Романцова, В.В. Ботвиньевой. — СПб.: Тактик-Студио, 2005. — С.53-56.

31. Туберкулёз / Под ред. А.Г. Хоменко. — М.: Медицина, 1996. — 494 с.

32. Туберкулёз (патогенез, защита, контроль) / Под ред. Б.Р

Блума. — М.: Медицина, 2002. — 678 с.

33. Циклоферон в клинической практике: Методич. рекомендации для врачей / Под ред. В.А. Исакова. — СПб.: Интермедика, 2003. — 56 с.

34. Шилова М.В. Туберкулёз в Росси в конце XX века // Пробл. туберкулёза. — 2001. — № 4. — С.8-13.

35. Шишкина Т. А., Куприна Н.П. Коррекция микробиоценоза у часто болеющих детей // Применение циклофе-рона в педиатрической практике: Сб. статей / Под ред. М.Г. Романцова, В.В. Ботвиньевой. — СПб.: Тактик-Студио, 2005. — С.8-16.

36. Diesselhoff den Dulk М. Crofton R., Van Furth R. Origin and kinetics of Kupffer cell during an acute inflammatory response // Immunology. — 1979. — Vol. 24. — Р7-14.

37. Filippova T.P., Vasiljeva L.S., Kochkin A.V. The interconnection between condition of stress-realizing systems of organism and nature of course of pulmonary tuberculosis //The eleventh international symposium of the Japan — Russia medical exchange. — Niigata, 2004. — P.389.

38. Goren М.В., Brennan P.J. Mycobacterial lipids: chemistry and biologic activities // G.P. Youmans (ed), Tuberculosis.

— Philadelphia: Saunders Co, 1979. — P.69-i93.

39. Goren M.B. Immunoreactive substances of mycobacteria // Am. Rev. Respir. Dis. — 1982. — Vol. 125 (Part 2). — P.50-69.

40. Goren M.B. Polyanionic agents do not inhibit bhagosome-lysosome fusion in cultured macrophages // J. Leukocyte Biol. — 1987. — Vol. 41. — P. 122-129.

41. Jacques P.J. The endocytic uptake of macromolecules // Pathobiology of cell membranes. — 1975. — Vol. 1. — Р.255-282.

42. Polansky J., Solar E., Toubiana R.F., et al. A carbon-13 nuclear magnetic resonance spectral analysis of cord-factors and related substances // Nouv. J. Chim. — 1977. — Vol. 2. -P.317-320.

43. Prome J.C., Lacave C., Ahibo-Coffy A., Savagnac A. separation et etude structurale des especes moleculaires de mono-mycolates et de dimycolates de a-D-trehalose presents chez Mycobacterium phlei // Eur. J. Biochem. — 1976. — Vol. 63.

44. Strain S.M., Toubiana R., Ribi E., Parker R. Separation of the mixture of trehalose 6,6 — dimycolates comprising the mycobacterial glycolipid fraction// Biochem. Biophys. Kes. Commun. — 1977. —Vol. 77. — P449-456.

ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

© ЕСИМОВА И.Е., НОВИЦКИИ В.В., УРАЗОВА О.И., СТРЕЛИС А.К., ВОРОНКОВА О.В., ХАСАНОВАР.Р. - 2006

МИКРОВЯЗКОСТЬ И ЛИПИДНЫЙ СПЕКТР МЕМБРАНЫ МОНОНУКЛЕАРНЫХ ЛЕЙКОЦИТОВ КРОВИ У БОЛЬНЫХ ТУБЕРКУЛЕЗОМ ЛЕГКИХ

И.Е. Есимова, В.В. Новицкий, О.И. Уразова, А.К. Стрелис, О.В. Воронкова, P.P. Хасанова

Резюме. Изучены показатели флуоресцентного зондирования и липидный спектр мембран моноцитов и лимфоцитов крови у больных лекарственно-чувствительным (ЛЧТЛ) и лекарственно-устойчивым (ЛУТЛ) инфильтративным туберкулезом легких до лечения. Установлено, что течение ЛЧТЛ и ЛУТЛ сопровождается увеличением коэффициентов эксимеризации пирена и снижением процента индуктивно-резонансного переноса энергии в мембранах клеток. При этом липидный спектр мембран иммунощтов у больных ЛЧТЛ и ЛУТЛ характеризуется сниженным количеством жирных кислот, сфингомиелина и фосфатидилхолина при повышенном содержании фосфатидилинозитола и фосфа-тидилэтаноламина. Также при ЛУТЛ отмечено снижение количества эфиров холестерина и увеличение содержания свободного холестерина и холестерин-фосфолипидного соотношения в мембране мононуклеаров.

Ключевые слова. Туберкулез, моноциты, лимфоциты, мембрана, микровязкость, липиды.

К числу инфекционных заболеваний, угрожающих чески во всем мире. Развитие туберкулезного процесса

человечеству, относится туберкулез, имеющий в насто- зависит не только от изменения биологических свойств,

ящее время глобальное распространение и остающий- нарастающей вирулентности и длительности персис-

ся серьезной медико-социальной проблемой практи- тенции возбудителя, но и от реактивности макроорга-

низма и состояния его защитных сил [7,9].

Функциональная активность иммунной системы оценивается с позиций структуры, метаболизма и функций мононуклеарных лейкоцитов — клеток, обеспечивающих защиту организма от туберкулезной инфекции [8]. К настоящему времени установлено, что цитоплазматическая мембрана играет ключевую роль в детерминации нормального функционирования как отдельных клеточных органелл, так и клетки в целом, и является одной из наиболее чувствительных к повреждающему воздействию клеточных структур [3]. Неопровержимым считается тот факт, что нормальное функционирование плазматической мембраны определяется ее микровяз-костными свойствами, отражающими как структуру, так и диффузионные особенности липидной составляющей мембраны, легко реагирующей на метаболические изменения и внешние воздействия [1,5,13].

Вместе с тем сведения, касающиеся характера и механизмов структурных нарушений плазматической мембраны мононуклеаров крови при туберкулезе легких, носят фрагментарный, несистематизированный характер и не позволяют однозначно оценить направленность патологических изменений мембраны клеток на фоне развития туберкулезного процесса.

В связи с этим целью настоящего исследования явилось изучение микровязкостных свойств и липидного спектра плазматической мембраны мононуклеарных клеток крови при лекарственно-чувствительном и лекарственно-устойчивом вариантах туберкулеза легких.

Материалы и методы

В ходе работы было обследовано 20 больных ( 15 мужчин и 5 женщин) в возрасте 20-55 лет, страдающих лекарственно-чувствительным и лекарственно-устойчивым ин-фильтративным туберкулезом легких (ТЛ). Диагноз ТЛ устанавливали на основании данных микроскопии мокроты и рентгенологического исследования легких. Для определения лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза использовали метод абсолютных концентраций. Больные были обследованы до начала лечения.

В группу контроля вошли 14 практических здоровых доноров (9 мужчин и 5 женщин), сопоставимого с больными ТЛ возраста.

Материалом исследования служила периферическая кровь, взятая утром натощак из локтевой вены.

Выделение лимфоцитов и моноцитов крови проводили на градиенте плотности фиколл-урографина 1,077 и 1,083 г/см3 соответственно [4]. Исследование микровязкости плазматических мембран осуществляли с помощью флуоресцентного зондирования зондом пирен на спектро-флуориметре «Hitachi-MPF-4». Рассчитывали коэффициенты эксимеризации пирена I4,„,37ü и I47ü/390 при длинах волн возбуждающего света 285 и 340 им, а также процент индуктивно-резонансного переноса энергии с триптофана на пирен (R, %). Плазматические мембраны мононуклеаров крови получали путем разделения суспензии разрушенных клеток в двухфазной системе декстран Т-500/ПЭГ-6000 [10]. Разделение основных классов фосфолипидов (ФЛ) и нейтральных липидов проводили с помощью тонкослойной хроматографии (ТСХ) на пластинках для ТСХ «SORBFIL» (Россия). Хроматограммы проявляли с помощью 5% раствора фосфорномолибденовой кислоты с последующим элюированием каждой фракции [6]. Идентификацию фракций липидов осуществляли с использованием соответствующих стандартов (фирма «Sigma», США). Для характеристики структуры плазматической мембраны мо-нонуклеарных лейкоцитов определяли отношение содержания свободного холестерина к общему количеству фосфолипидов.

Статистический анализ полученных данных осуществляли с помощью программы Statistica for Windows Version 6.0 («StatSoft Inc.», США). Проверку нормальности выборок проводили с помощью оценок коэффициентов асимметрии и эксцесса, а также критериев Хи-квадрат и Кол-

могорова-Смирнова. При нормальном распределении переменных проверку гипотезы о равенстве выборочных средних выполняли с использованием ^критерия Стью-дента. В случае отсутствия согласия данных с нормальным распределением для оценки различий применяли и-кри-терий Манна-Уитни. Различия считали достоверными при уровне р<0,05.

Результаты и обсуждение

Проведенное нами исследование показало, что в мембранах лимфоцитов и моноцитов периферической крови у больных инфильтративным ТЛ до начала лечения не зависимо от лекарственной чувствительности возбудителя имеет место увеличение (по сравнению с нормой) коэффициентов эксимеризации пирена (I 370 и 1470/390) при длинах возбуждающего света 285 и 340 нм, наиболее выраженное при лекарственно-устойчивом варианте туберкулезного процесса (табл. 1). Установлено, что величина эксимеризации пирена обратно пропорциональна вязкости липидной фазы. Следовательно, обнаруженное нами достоверное увеличение изученных показателей указывает на повышение текучести как интегрального липидного бислоя, оцениваемого при ^=340 нм, так и анулярной фракции мембранных липидов (при ^=285 нм).

Известно, что в плазматической мембране коэффициенты эксимеризации пирена при его возбуждении светом с длинами волн 340 и 285 нм имеют существенные различия, указывающие на более высокую вязкость липидной фазы, располагающейся вблизи белков, по сравнению с остальной массой липидов [2]. Однако в ходе наших исследований степень эксимеризации пирена при ^=285 нм была выше аналогичной при ^=340 нм, что позволяет судить о более выраженных нарушениях липидной фазы мембраны в области белок-липид -ных контактов, и, в свою очередь, объясняет значимое снижение (по сравнению с контролем) процента индуктивно-резонансного переноса энергии с триптофана на пирен в лимфоцитах и моноцитах у больных с обоими вариантами инфильтративного туберкулеза (табл. 1).

Микровязкостные свойства плазматической мембраны во многом зависят от ее липидного спектра. При обследовании больных с лекарственно-устойчивым ТЛ до начала лечения в липидном составе мембран моно-нуклеаров крови отмечалось достоверное увеличение содержания холестерина (на 23%) и снижение (на 14%) количества его эфиров по сравнению с аналогичными показателями у здоровых доноров и больных с лекарственно-чувствительным вариантом туберкулезного процесса, при котором данные показатели не претерпевали выраженных изменений по сравнению с нормой. При этом процентное содержание жирных кислот достоверно снижалось сравнительно с контролем независимо от лекарственной чувствительности возбудителя (рис. 1).

Фосфолипидный спектр плазматической мембраны мононуклеаров крови у больных лекарственно-чувствительным и лекарственно-устойчивым ТЛ характеризовался сниженным содержанием сфингомиелина (СФМ) и фосфатидилхолина (ФХ), повышенным количеством фосфатидилинозитола (ФИ) и фосфатидилэтанолами-на (ФЭА) и неизменным уровнем фосфатидилсерина (ФС) относительно аналогичных показателей у здоровых доноров. Также при устойчивом варианте ТЛ отмечалось увеличение холестерин-фосфолипидного соот-

Таблица 1

Показатели флуоресцентного зондирования мембраны мононуклеарных клеток крови у здоровых доноров и у больных инфильтративным туберкулезом легких, X + 111

Показатели Здоровые доноры (контроль) Вольные лекарственночувствительным ТЛ Вольные лекарственноустойчивым ТЛ

лимфоциты моноциты лимфоциты моноциты лимфоциты моноциты

147и/1з7о (усл.ед.), Х=285 1,829+0,055 1,894+0,064 р,<0,001 3,651+0,298 р,<0,001 р2<0,05 3,533+0,294 р,<0,001 р2<0,05 4,407+0,165 р1<0,001 4,371+0,170

Ї470/І390 (усл.ед.), Х=285 1,526+0,046 1,610+0,055 р1<0,001 2,639+0,159 р,<0,001 р2<0,05 2,664+0,202 р,<0,001 р2<0,05 3,215+0,210 р1<0,001 3,495+0,143

І470/І370 (усл.ед.), Х=340 1,706+0,036 1,664+0,023 р1<0,001 3,351+0,260 р,<0,001 р2<0,01 3,368+0,274 р,<0,001 р2<0,01 4,718+0,192 р1<0,001 4,710+0,198

І470/І390 (усл.ед.), Х=340 1,411+0,020 1,419+0,020 р1<0,001 2,612+0,131 р,<0,001 р2<0,01 2,699+0,220 р,<0,001 р2<0,01 3,435+0,243 р1<0,001 3,691+0,199

Я (%), Х=285 80,1 + 1,5 83,3+1,6 р1<0,001 58,8+1,9 р,<0,001 59,6+2,1 р,<0,001 59,8+2,4 р1<0,001 57,1+4,1

Примечание. р — уровень статистической значимости различий по сравнению с показателями у здоровых доноров; р2 — у (зольных лекарственно-чувствительным туберкулезом легких.

ношения (ХС/ФЛ) (рис. 1).

Как известно, ФХ и СФМ содержат в своём составе остатки насыщенных жирных кислот, уменьшение содержания которых приводит к снижению жёсткости плазматической мембраны, а, следовательно, к уменьшению микоовязкости её липидной сЬазы. В ФЭА со-

держится большое количество легкоокисляемых поли-ненасыщенных жирных кислот, в первую очередь подвергающихся процессам перекисного окисления. Значительное увеличение их содержания в фосфолипидах свидетельствует о повышении жидкостных свойств мембраны. Поскольку присутствие ненасыщенных свя-

зей в жирных кислотах ведёт к появлению изгибов в цепях, это затрудняет их взаимодействие и создаёт пред-посытки к переходу в жидкое состояние. Повышение жидкостных свойств липидного бислоя способствует погружению рецепторов в мембрану и понижению эффективности их взаимодействия с лигандом.

Подобные изменения в фосфоли-пидном составе мембран иммуноцитов при лекарственно-чувствительном ТЛ согласуются с результатами флуоресцентного зондирования, подтверждая увеличение текучести мембран моно-нуклеарных клеток крови. Однако повышенное содержание холестерина в мембране клеток при лекарственно-устойчивом варианте туберкулезного процесса свидетельствует об обратном. Столь противоречивые данные можно объяснить с позиции перераспределения ХС в плазматической мембране клеток с образованием холестерин-на-сыщенных и холестерин-истощенных участков. Так, І. СаШеЫ с соавт. [11] обнаружил, что ХС абсолютно необходим для поглощения микобактерий туберкулеза (МВТ) фагоцитарными клетками и образует определённого рода кластеры в комплексе с гликопротеинами, облегчая проникновение МВТ через плазматическую мембрану внутрь клетки. Накопленный в местах внедрения МВТ и истощённый в другой (большей) части плазматической мембраны ХС специфически активирует поглощение МВТ, а также опосредует фагосомальную сборку покрывающего триптофан-аспарагин-содержащего белка (ТАСО), который предотвращает деградацию МВТ в

%

250

ЛФЛ СФМ ФИ ФХ ФС ФЭА ХС ЖК ЭХС ХС/ФЛ

здоровые донеры

3 больные лекарственно-чувствительным инфильтративным ТЛ П больные лекарственно-устойчивым инфильтративным ТЛ

Примечание. ЛФЛ — лизофосфолипиды, СФМ — сфингомиелин, ФИ — фос-

$атидилинозитол, ФС — фосфатидилсерин, ФХ — фосфатидилхолин, ФЭА — осфатидилэтаноламин, ХС — холестерин, ЭХС — эфиры холестерина, ЖК — жирные кислоты, ХС/ФЛ — холестерин-фосфолипидное соотношение.

Рис.1. Отдельные фракции липидов и холестерин-фосфолипидное отношение в мембране мононуклеарных клеток крови у (больных инфильтративным туберкулезом легких (в % от контрольных значений).

фаголизосомах. Таким образом, входящие через обогащённые ХС мембранные домены клеток-хозяина МБТ могут обеспечить себе последующую выживаемость в покрытых ТАСО фагосомах [11,12]. На основании этого можно полагать, что выявленные нами структурные нарушения плазматической мембраны мононуклеаров крови у больных ТЛ являются скорее предрасполагающим фактором, нежели следствием микобактериальной инвазии и не являются специфичными только для мо-ноцитарных клеток крови, на что указывает однонаправленность изменений показателей флуоресцентного зондирования в лимфоцитах и моноцитах.

Таким образом, полученные данные позволяют заключить, что в плазматической мембране лимфоцитов и моноцитов периферической крови у больных лекар-

ственно-чувствительным и лекарственно-резистентным инфильтративным ТЛ до лечения отмечаются сходные изменения липидного бислоя, характеризующиеся возрастанием коэффициентов эксимеризации пире-на, снижением процента индуктивно-резонансного переноса энергии, а также существенными изменениями в липидном составе (снижение содержания сфингоми-елина, фосфатидилхолина и повышение количества фосфатидилэтаноламина, фосфатидилинозитола). При этом лекарственно-резистентный ТЛ сопровождается увеличением фракции свободного холестерина и холе-стерин-фосфолипидного соотношения в мембране мононуклеарных лейкоцитов. Данного рода нарушения могут послужить причиной изменений функциональной способности клеток и формирования иммунодефицита.

Исследование выполнено при финансовой поддержке Совета по грантам Президента Российской Федерации для поддержки ведущих школ Российской Федерации РИ-112/001/158 и молодых ученых № МД-3880.2005.7.

MICROVISCOSITY AND LIPIDE SPECTRUM OF MEMBRANE OF BLOOD MONONUCLEAR LEUKOCYTES IN PATIENTS WITH PULMONARY TUBERCULOSIS

I.E. Esimova, V.V. Novitskij, O.I. Urazova, A.K. Strelis, O.V. Voronkova, R.R. Hasanova

Parameters of fluorescent intubation and lipide spectrum of membranes of monocytes and lymphocytes of blood in patients with drug-sensitive and drug-resistant pulmonary tuberculosis before treatment are investigated. It was determined, a drug-sensitive and drug-resistant tuberculosis is accompanied by increase of coefficients of formation of excimers pyrene and by decrease of percent of inductive-resonant transmission of energy in membranes of cells. The membrane lipide spectrum of immunocytes in patients with drug-sensitive and drug-resistant pulmonary tuberculosis is characterized by the reduced content of fatty acids, sphingomyelin and phosphatidylcholine, by boosted amount of phosphatidylinositol and phosphatidylethanolamine. Also decrease of contents of aethers of cholesterol, augmentation of the content of loose cholesterol and a cholesterol/phospholipid ratio in membrane of mononuclear leukocytes is marked at drug-resistant tuberculosis.

ЛИТЕРАТУРА

1. Болдырев A.A. Введение в биомембранологию. — М.: Изд-во МГУ. 1990. — 208 с.

2. Владимиров Ю.А., Добрецов Г.Е. Флуоресцентные зонды в исследовании биологических мембран. — М.: Наука, 1980. — 320 с.

3. Владимиров Ю.А. Роль нарушений липидного слоя мембран в развитии патологических процессов // Патологическая физиология и экспериментальная терапия. — 1989. — №4. — С.7-19.

4. Гольдберг Е.Д., Дыгай А. М., Шахов В. П. Методы культуры ткани в гематологии. — Томск: Изд-во Томского унта, 1992. — 272 с.

5. Добрецов Г.Е. Флуоресцентные зонды в исследовании клеток, мембран и липопротеинов. — М.: Наука, 1989.

— 277 с.

6. Жухоров Л. С., Голованов С.А. Метод количественного определения липидов в лимфоцитах и нейтрофилах периферической крови // Лабораторное дело. — 1984. —

7. Маянский А.Н. Туберкулез // Иммунология. — 2001. — № 2. — С.53-63.

8. Салина Т.Ю., ХудзикЛ.Б. Иммунопатогенетические механизмы в течение туберкулезной инфекции // Проблемы туберкулеза. — 2001. — №8. — С.32-34.

9. Самойлова А.Г., Марьяндышев А.О. Лекарственная устойчивость микобактерий туберкулёза — актуальная проблема фтизиатрии // Проблемы туберкулёза и болезней лёгких. — 2005. — №7. — С.3-9.

10. Финдлей Дж.Б, Эванс У.Г. Биологические мембраны. Методы. — М.: Мир. — 1990. — 424 с.

11. Catfleld J., Pieters J. Essential role for cholesterol in entry of mycobacteria into macrophages // Science. — 2000. — Vol. 288, № 5471. — P1647-1650.

12. Cholesterol interactions with phospholipids in membranes / H. Ohvo-Rekila B. Ramstedt, P. Leppimaki, J. P. Slotte // Prog. Lipid Res. — 2002. — Vol. 41, №1. — P. 66-97.

13. Dumas D., Muller S., Gouin F., et al. Membrane fluidity and oxygen diffusion in cholesrol-enriched erythrocyte membrane // Arch. Biochem. Biophys. — 1997. — Vol. 341, № 1. — P. 34-39.

© САДЫКОВА B.C., КОВАЛЕВА Г.К., ЧИЖМОТРЯ H., ГАВРИЛОВА А.Г., ГРОМОВЫХТ.И., НОВИЦКИЙИ.А. - 2006

АНТИМИКРОБНАЯ АКТИВНОСТЬ ГРИБОВ РОДА TRICHODERMA И TRAMETES В ОТНОШЕНИИ УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫХ МИКРООРГАНИЗМОВ РОДА STAPHYLOCOCCUS

В.С. Садыкова1, Г.К. Ковалева', Н. Чижмотря2, А.Г. Гаврилова, Т.И. Громовым1, И.А. Новицкий2

Резюме. Изучена антимикробная активность микромицетов рода Trichoderma и базидиомицета Trametes versicolor в отношении ряда штаммов условно-патогенных микроорганизмов рода Staphylococcus, выделенных из организма больных людей. Показано, что штаммы грибов обладают бактериостатическим, а для ряда штаммов видов бактерицидным действием, что позволяет рекомендовать штаммы МГ-97 и B-18-C как потенциальные продуценты новых активных антибиотиков для лечения заболеваний, вызываемых стафилококками.

Ключевые слова. Бактерицидная активность, метаболитыы, грибы/, условно-патогенные микроорганизмыы.