КОМПОЗИЦИИ КЛЕТОК, СОДЕРЖАЩИХ ХИМЕРНЫЕ РЕЦЕПТОРЫ АУТОАНТИТЕЛА ПРОТИВ МЫШЦЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ КИНАЗЫ, И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

1. Полинуклеотид, кодирующий химерный рецептор аутоантитела (CAAR), где полинуклеотид кодирует внеклеточный домен, содержащий аутоантиген мышцеспецифической киназы (MuSK) или его фрагмент, и, необязательно, трансмембранный домен, внутриклеточный домен костимулирующей молекулы и/или сигнальный домен.
2. Полинуклеотид по п. 1, где аутоантиген MuSK или его фрагмент кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты, содержащей последовательность нуклеиновой кислоты, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 3, 6, 26 и 29.
3. Полинуклеотид по п. 1, где аутоантиген MuSK или его фрагмент кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты, которая по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 65%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 81%, по меньшей мере на 82%, по меньшей мере на 83%, по меньшей мере на 84%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 86%, по меньшей мере на 87%, по меньшей мере на 88%, по меньшей мере на 89%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентична последовательности нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 3, 6, 26 и 29.
4. Полинуклеотид по п. 1, где аутоантиген MuSK или его фрагмент содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 11 и 23.
5. Полинуклеотид по п. 1, где аутоантиген MuSK или его фрагмент содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 65%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 81%, по меньшей мере на 82%, по меньшей мере на 83%, по меньшей мере на 84%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 86%, по меньшей мере на 87%, по меньшей мере на 88%, по меньшей мере на 89%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентична аминокислотной последовательности, выбранной из группа, состоящая из SEQ ID NO: 11 и 23.
6. Полинуклеотид по любому из пп. 1-5, где трансмембранный домен содержит трансмембранный домен CD8 альфа.
7. Полинуклеотид по п. 6, где трансмембранный домен CD8 альфа кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты, содержащей SEQ ID NO: 5 или 18.
8. Полинуклеотид по п. 6, где трансмембранный домен CD8 альфа содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13.
9. Полинуклеотид по любому из пп. 1-8, где внутриклеточный домен костимулирующей молекулы включает внутриклеточный домен 4-1BB.
10. Полинуклеотид по п. 9, где внутриклеточный домен 4-1BB кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты, содержащей SEQ ID NO: 7 или 19.
11. Полинуклеотид по п. 9, где внутриклеточный домен 4-1BB содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14.
12. Полинуклеотид по любому из пп. 1-11, где сигнальный домен содержит сигнальный домен CD3 дзета.
13. Полинуклеотид по п. 12, где сигнальный домен CD3 дзета кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты, содержащей SEQ ID NO: 8 или 20.
14. Полинуклеотид по п. 12, где сигнальный домен CD3 дзета содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15.
15. Полинуклеотид по любому из пп. 1-14, где CAAR кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, 16, 21, 24, 25 и 28.
16. Полинуклеотид по любому из пп. 1-14, где CAAR содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 9, 22, 27 и 30.
17. Полинуклеотид по любому из пп. 1-5, где CAAR содержит внеклеточный домен, включающий аутоантиген мышцеспецифической киназы (MuSK) или его фрагмент, трансмембранный домен иммуноглобулин-подобного рецептора клеток-киллеров (KIR) и цитоплазматический домен KIR.
18. Вектор, содержащий полинуклеотид по любому из пп. 1-17.
19. Вектор по п. 18, где вектор представляет собой лентивирусный вектор.
20. Вектор по п. 19, где вектор представляет собой РНК-вектор.
21. Вектор по любому из пп. 18-20, где вектор содержит индуцибельный промотор, функционально присоединенный к полинуклеотиду, кодирующему CAAR.
22. Химерный рецептор аутоантитела (CAAR), содержащий внеклеточный домен, включающий аутоантиген мышцеспецифической киназы (MuSK) или его фрагмент.
23. Химерный рецептор аутоантитела (CAAR), содержащий внеклеточный домен, включающий аутоантиген мышцеспецифической киназы (MuSK) или его фрагмент, трансмембранный домен, внутриклеточный домен костимулирующей молекулы и/или сигнальный домен.
24. CAAR по п. 22 или 23, где аутоантиген MuSK или его фрагмент кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 3, 6, 26 и 29.
25. CAAR по п. 22 или 23, где аутоантиген MuSK или его фрагмент кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты, которая по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 65%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 81%, по меньшей мере на 82%, по меньшей мере на 83%, по меньшей мере на 84%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 86%, по меньшей мере на 87%, по меньшей мере на 88%, по меньшей мере на 89%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентична последовательности нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 3, 6, 26 и 29.
26. CAAR по п. 22 или 23, где аутоантиген MuSK или его фрагмент содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 11 и 23.
27. CAAR по п. 22 или 23, где аутоантиген MuSK или его фрагмент содержит аминокислотную последовательность, которая по меньшей мере на 60%, по меньшей мере на 65%, по меньшей мере на 70%, по меньшей мере на 75%, по меньшей мере на 80%, по меньшей мере на 81%, по меньшей мере на 82%, по меньшей мере на 83%, по меньшей мере на 84%, по меньшей мере на 85%, по меньшей мере на 86%, по меньшей мере на 87%, по меньшей мере на 88%, по меньшей мере на 89%, по меньшей мере на 90%, по меньшей мере на 91%, по меньшей мере на 92%, по меньшей мере на 93%, по меньшей мере на 94%, по меньшей мере на 95%, по меньшей мере на 96%, по меньшей мере на 97%, по меньшей мере на 98% или по меньшей мере на 99% идентична аминокислотой последовательности, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 11 и 23.
28. CAAR по любому из пп. 23-27, где трансмембранный домен включает трансмембранный домен CD8 альфа.
29. CAAR по п. 28, где трансмембранный домен CD8 альфа кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты, содержащей SEQ ID NO: 5 или 18.
30. CAAR по п. 28, где трансмембранный домен CD8 альфа включает аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 13.
31. CAAR по любому из пп. 23-30, где внутриклеточный домен костимулирующей молекулы включает внутриклеточный домен 4-1BB.
32. CAAR по п. 31, где внутриклеточный домен 4-1BB кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты, содержащей SEQ ID NO: 7 или 19.
33. CAAR по п. 31, где внутриклеточный домен 4-1BB содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 14.
34. CAAR по любому из пп. 23-33, где сигнальный домен содержит сигнальный домен CD3 дзета.
35. CAAR по п. 34, где сигнальный домен CD3 дзета кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты, содержащей SEQ ID NO: 8 или 20.
36. CAAR по п. 34, где сигнальный домен CD3 дзета содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15.
37. CAAR по любому из пп. 23-36, где CAAR кодируется последовательностью нуклеиновой кислоты, выбранной из группы, состоящей из SEQ ID NO: 1, 16, 21, 24, 25 и 28.
38. CAAR по любому из пп. 23-36, где CAAR содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 9, 22, 27 и 30.
39. CAAR по любому из пп. 23-38, где CAAR содержит внеклеточный домен, включающий внеклеточный домен, содержащий аутоантиген мышцеспецифической киназы (MuSK) или его фрагмент, трансмембранный домен KIR и цитоплазматический домен KIR.
40. Генетически модифицированная клетка, содержащая CAAR по любому из пп. 22-39.
41. Клетка по п. 40, где клетка экспрессирует CAAR и обладает высокой аффинностью к BCR аутоантител на В-клетках.
42. Клетка по п. 40 или 41, где клетка экспрессирует CAAR и индуцирует уничтожение В-клеток, экспрессирующих аутоантитела, или В-клеток, которые могут созревать в антитело-секретирующие клетки.
43. Клетка по любому из пп. 40-42, где клетка экспрессирует CAAR и имеет ограниченную токсичность по отношению к здоровым клеткам.
44. Клетка по любому из пп. 40-43, где клетка выбрана из группы, состоящей из хелперной Т-клетки, цитотоксической Т-клетки, Т-клетки памяти, регуляторной Т-клетки, гамма-дельта-Т-клетки, природной клетки-киллера, индуцированной цитокином клетки-киллера, ее клеточной линии, стволовой Т-клетки памяти, Т-клетки, происходящей от плюрипотентной стволовой клетки, и другой эффекторной клетки.
45. Генетически модифицированная клетка, содержащая (а) химерный рецептор аутоантитела по п. 39 и (b) DAP12.
46. Клетка по любому из пп. 40-45, где клетка содержит полинуклеотид, кодирующий CAAR, функционально присоединенный к индуцибельному промотору.
47. Фармацевтическая композиция, содержащая полинуклеотид по любому из пп. 1-17, CAAR по любому из пп. 22-39 или клетку по любому из пп. 40-46 и фармацевтически приемлемый наполнитель.
48. Способ лечения опосредованного аутоантителами заболевания нервно-мышечного соединения (НМС) у индивидуума, где указанный способ включает: введение индивидууму эффективного количества генетически модифицированных клеток, содержащих полинуклеотид, кодирующий химерный рецептор аутоантитела (CAAR), где полинуклеотид кодирует внеклеточный домен, содержащий аутоантиген мышцеспецифической киназы (MuSK) или его фрагмент, и необязательно, трансмембранный домен, внутриклеточный домен костимулирующей молекулы и/или сигнальный домен, и тем самым лечение опосредуемого аутоантителами заболевания НМС у индивидуума.
49. Способ профилактики или снижения повреждения нервно-мышечного соединения (НМС) у индивидуума с риском развития опосредуемого аутоантителами заболевания НМС или индивидуума, страдающего этим заболеванием, где указанный способ включает: введение индивидууму эффективного количества генетически модифицированных клеток, содержащих полинуклеотид, кодирующий химерный рецептор аутоантитела (CAAR), где полинуклеотид кодирует внеклеточный домен, содержащий аутоантиген мышцеспецифической киназы (MuSK) или его фрагмент, и необязательно, трансмембранный домен, внутриклеточный домен костимулирующей молекулы и/или сигнальный домен, и тем самым профилактику или ослабление повреждения НМС у индивидуума.
50. Способ лечения аутоантител-опосредованного заболевания нервно-мышечного соединения (НМС) у индивидуума, где указанный способ включает: введение индивидууму эффективного количества генетически модифицированных клеток, содержащих: (а) полинуклеотид, кодирующий химерный рецептор аутоантитела (CAAR), где полинуклеотид кодирует внеклеточный домен, содержащий аутоантиген MuSK или его фрагмент, трансмембранный домен иммуноглобулин-подобного рецептора клеток-киллеров (KIR) и цитоплазматический домен KIR; и (b) полинуклеотид, кодирующий DAP12, и тем самым, лечение опосредуемого аутоантителами заболевания НМС у индивидуума.
51. Способ профилактики или снижения повреждения нервно-мышечного соединения (НМС) у индивидуума с риском развития опосредуемого аутоантителами заболевания НМС или индивидуума, страдающего этим заболеванием, где указанный способ включает: введение индивидууму эффективного количества генетически модифицированных клеток, содержащих: (а) полинуклеотид, кодирующий химерный рецептор аутоантитела (CAAR), где полинуклеотид кодирует внеклеточный домен, содержащий аутоантиген MuSK или его фрагмент, трансмембранный домен иммуноглобулин-подобного рецептора клеток-киллеров (KIR) и цитоплазматический домен KIR; и (b) полинуклеотид, кодирующий DAP12, и тем самым, лечение опосредуемого аутоантителами заболевания НМС у индивидуума.
52. Способ по любому из пп. 48 и 51, где полинуклеотид представляет собой полинуклеотид по любому из пп. 1-17.
53. Способ по любому из пп. 48 и 51, где CAAR представляет собой CAAR по любому из пп. 22-39.
54. Способ по любому из пп. 48-53, где опосредуемое аутоантителами заболевание НМС представляет собой тяжелую миастению (ТМ).
55. Способ по любому из пп. 48-54, где индивидуумом является человек.
56. Способ по любому из пп. 48-55, где модифицированная клетка нацелена на В-клетки.
57. Способ по любому из пп. 48-56, где модифицированная клетка представляет собой Т-клетку.