ХИМЕРНЫЕ АНТИГЕННЫЕ РЕЦЕПТОРЫ С МУТИРОВАННЫМИ КОСТИМУЛЯТОРНЫМИ ДОМЕНАМИ CD28

1. Полипептид химерного антигенного рецептора (CAR), включающий лигандсвязывающий домен, трансмембранный домен, внутриклеточный сигнальный домен и костимуляторный сигнальный участок, причем костимуляторный сигнальный участок включает мутированную форму цитоплазматического домена CD28, который повышает слияние CAR Т-клеток.
2. Полипептид по п. 1, отличающийся тем, что костимуляторный сигнальный участок включает цитоплазматический домен CD28 с истощенным субдоменом YMNM или с нулевой мутацией в субдомене YMNM.
3. Полипептид по п. 1 или 2, отличающийся тем, что костимуляторный сигнальный участок включает цитоплазматический домен CD28 с истощенным субдоменом PRRP или имеющий нулевую мутацию в субдомене PRRP.
4. Полипептид по любому из пп. 1-3, отличающийся тем, что костимуляторный сигнальный участок включает цитоплазматический домен CD28 с истощенным субдоменом PYAP или имеющий нулевую мутацию в субдомене PYAP.
5. Полипептид любому из пп. 1-4, отличающийся тем, что полипептид CAR определен следующей формулой:
SP-TAA-HG-TM-CSR-ISD; или
SP-ТАА-HG-TM-ISD-CSR,
где «SP» представляет собой сигнальный пептид; в которой «ТАА» представляет собой опухольассоциированный антигенсвязывающий участок;
«HG» представляет собой необязательный шарнирный домен;
«ТМ» представляет собой трансмембранный домен;
«CSR» представляет собой костимуляторный сигнальный домен;
«ISD» представляет собой внутриклеточный сигнальный домен, и
«-» представляет собой бивалентный линкер.
6. Полипептид по любому из пп. 1-5, отличающийся тем, что внутриклеточный сигнальный домен включает CD3-zeta (CD3ζ сигнальный домен).
7. Полипептид по любому из пп. 1-6, отличающийся тем, что мутированная форма цитоплазматического домена CD28 снижает «истощение» CAR Т-клеток.
8. Единичная последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая рекомбинантный полипептид по любому из пп. 1-7.
9. Вектор, включающий единичную последовательность нуклеиновой кислоты по п. 8.
10. Клетка, включающая вектор по п. 9.
11. Клетка по п. 10, отличающаяся тем, что эта клетка выбрана из группы, состоящей из αβТ-клеток, γδТ-клеток, клеток естественных киллеров (NK), естественных киллеров Т-клеток (NKT), В-клеток, естественных лимфоидных клеток (ILC), клеток киллеров, индуцированных цитокином (CIK), цитотоксических Т-лимфоцитов (CTL), клеток киллеров, активированных лимфокинами (LAK), регуляторных Т-клеток или любой их комбинации.
12. Клетка по п. 11, отличающаяся тем, что клетка демонстрирует противоопухолевый иммунитет, когда антигенсвязывающий домен CAR связывается с ТАА.
13. Способ обеспечения противоопухолевого иммунитета у субъекта с ТАА-экспрессирующими опухолями, причем способ включает введение субъекту эффективного количества иммунных клеток с эффекторной функцией, генетически модифицированных для экспрессии CAR полипептида по любому из пп. 1-7, таким образом обеспечивая противоопухолевый иммунитет у млекопитающих.
14. Способ по п. 13, отличающийся тем, что иммунная клетка с эффекторной функцией выбрана из группы, состоящей из Т-клеток, клеток естественных киллеров (NK), цитотоксических Т-лимфоцитов (CTL) и регуляторных Т-клеток.
15. Способ по пп. 13 или 14, отличающийся тем, что дополнительно включает применение у субъекта ингибитора контрольных точек иммунного ответа.
16. Способ по п. 15, отличающийся тем, что ингибитор контрольных точек иммунного ответа содержит антитело против PD-1, антитело против PD-L1, антитело против CTLA-4 или их комбинацию.