Изучение иммунореактивности при хронических воспалительных процессах в пародонте

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ

кой терапии в группе ТЛТ происходило повышение среднего значения показателей метаболизма оксида азота (8,14 ± 0,34 мкмоль/л). В группе без ТЛТ такого повышения не происходило. При выписке в группе с ТЛТ наблюдалось достоверное (р < 0,05) повышение среднего значения показателей стабильных продуктов метаболизма оксида азота в плазме крови больных (7,55 ± 0,32 мкмоль/л), по сравнению с показателями больных группы без ТЛТ (6,13 ± 0,12 мкмоль/л). Определяемая достоверная разница значений показателей ЭД у больных групп с ТЛТ и без ТЛТ при выписке характеризует, на наш взгляд, различия базального уровня продукции оксида азота у больных обеих групп, который опосредован стабильной активностью эндотелиальной NO-синтазы и определяет клиническое течение заболевания.

Генез повышения содержания оксида азота в крови через 1 час после ТЛТ требует уточнения. Известно, что проведение ТЛТ закономерно сопровождается активацией оксидативного стресса, который является ингибитором функции эндотелия. Вероятно, повышение содержания оксида азота опосредуется рядом других механизмов, определяющих активацию NO-синтазы. Одним из таких факторов можно рассматривать непосредственное влияние экзогенного тканевого активатора плазминогена альтеп-лазы на функцию эндотелия.

Важность определения содержания стабильных метаболитов оксида азота в крови больных инфарктом миокарда можно иллюстрировать клинической ситуацией, наблюдаемой нами, когда у одного пациента с клиникой кардиогенного шока цифры стабильных продуктов метаболизма оксида азота оказались очень высокими — более 20 мкМ/л, тогда как средние значения в группе больных ИМ составили 7,3 мкМ/л. Ранее в экспериментальных работах [8] постулировалась ведущая роль гиперактивации индуцибельной NO-синтазы в генезе различных видов шока. Мы можем предполагать аналогичную схему патогенеза постреперфузионных коллаптоид-ных реакций и кардиогенного шока в остром периоде ИМ.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Выявленные нами и в ранее проводимых исследованиях благоприятные эффекты тромболитичес-кой терапии в отношении клинического течения ИМ могут быть опосредованы оптимизацией эндотелиальной функции. Представленные результаты позволяют расценивать показатели содержания стабильных продуктов метаболизма оксида азота не только как предиктор тяжести заболевания, но и как критерий эффективности проводимого лечения.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Оганов, Р.Г. Проблемы сердечно-сосудистых заболеваний в Российской Федерации и возможности их решения /Оганов Р.Г., Масленникова Г.Я. //Рос. кард. журн. - 2000. - № 4. - С. 7-11.

2. Бувальцев, В.И. Дисфункция эндотелия как новая концепция профилактики и лечения сердечно-сосудистых заболеваний /Бувальцев В.И. //Междун. мед. журн. - 2001. - № 3.

3. Taylor, A.L. Endotelial dysfunction and nitric oxide enhancing therapy: a new approach to the treatment of heart failure /Taylor A.L. //Cong. Heart Fail. - 2004. - V. 10(5). - P. 237-242.

4. Гомазков, О.А. Пептиды в кардиологии. Биохимия. Физиология. Патология. Информация. Анализ. /Гомазков О.А. - М., 2000. -C. 109-117.

5. Drexler, H. Nitric oxide and coronary endothelial dysfunction in humans /Drexler H. //Rev. Card. Res. - 1999. - V. 43. - P. 527-579.

6. Moncada, S. The discovery of nitric oxide as the endogenous nitrova-sodilatator /Moncada S., Palmer R.M., Higgs E.A. //Hypert. - 1988. -V. 4. - P. 365-372.

7. Ивашкин, В.Т. Клиническое значение оксида азота и белков теплового шока /Ивашкин В.Т., Драпкина О.М. - М., 2001. - C. 46-54.

8. Lundberg, J.O. Generation From Nitrite and Its Role in Vascular Control /Lundberg J.O., Weitzberg E.N. //Ateroscl. Thromb. Vasc. Biol. -2005. - P. 915-920.

9. Dzau, V.J. Endothelium and grouth factors in vascular remodelling of hypertension /Dzau V.J., Gibbons G.H. //Hypet. - 1991. -V. 18. -P. 115-121.

10. Клиническое значение эндотелиальной дисфункции при остром коронарном синдроме без подъема сегмента ST у лиц в возрасте до 55 лет /Омельяненко М.Г., Суховей Н.А., Назаров С.Б., Плеханов В.Г. //Рос. кард. журн. - 2003. - № 4(42). - C. 36-40.

Киселева Е.А.

Кемеровская государственная медицинская академия,

г. Кемерово

ИЗУЧЕНИЕ ИММУНОРЕАКТИВНОСТИ ПРИ ХРОНИЧЕСКИХ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ПРОЦЕССАХ В ПАРОДОНТЕ

Многим хроническим заболеваниям предшествует неявно выраженная неполноценность иммунной системы. При формировании хронических воспалительных процессов на слизистых оболочках, наиболее выраженные морфологические изменения, в том числе со стороны иммунокомпе-тентных клеток, регистрируются в месте локализации патологического процесса. Тем не менее, и на системном уровне регистрируются реакции со сто-

роны клеточного и гуморального звеньев иммунной системы. Несмотря на обилие данных, касающихся проблемы хронического воспаления в пародонте, до сих пор нет единого мнения о направленности и глубине иммунных нарушений при хроническом катаральном гингивите.

Большинство авторов характеризуют функциональное состояние иммунной системы при вышеуказанных патологических ситуациях как вторичный

. И № 4 2005 77

в Кузбассе * *

иммунодефицит (ВИД). По определению В.С. Ши-ринского, ВИД представляет собой клинико-иммуно-логический синдром, основу которого составляют количественные и функциональные нарушения различных популяций и субпопуляций клеток моноцитар-но-макрофагальной системы, неспецифических факторов защиты, ассоциированных с развитием инфекционных, аутоиммунных, аллергических и опухолевых заболеваний. Изменение количественных показателей иммунокомпетентных клеток при ВИД варьирует в пределах нормы реакции.

Цель исследования — определение реакций иммунной системы при хроническом катаральном гингивите.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

Для оценки иммунного статуса исследовали количество субпопуляций лимфоцитов в лимфоцито-токсическом тесте на основе использования монок-лональных антител и последующим анализом образцов на проточном лазерном цитофлюориметре с программой для анализа данных.

Содержание иммуноглобулинов А, М, G в сыворотке крови определяли по методу радиальной им-мунодиффузии по Манчини, концентрацию циркулирующих иммунных комплексов — с помощью метода селективной преципитации в ПЭГ-6000.

Состояние местного иммунитета ротовой полости оценивали по содержанию в смешанной слюне SIgA, IgA, IgG, активности слюнного лизоцима. Диагностика секректорного иммуноглобулина А (SIgA) в слюне осуществлял&ь с помощью наборов реагентов SIgA-ИФА-БЕСТ-стрип для количественного определения SIgA в биологических жидкостях человека твердофазным методом иммуноферментного анализа.

Определение иммуноглобулина A (IgA) и иммуноглобулина G (IgG) в слюне производили с использованием диагностических моноспецифических сывороток против IgA и IgG человека по методике радиальной иммунодиффузии Манчини.

Активность лизоцима определяли в смешанной слюне фононефелометрическим методом В.Г. Доро-фейчук (1968). В основе метода лежит свойство ли-зоцима лизировать мукополисахариды клеточных стенок эталонного штамма Micrococcus lysodeikticus.

Определяли коэффициент сбалансированности факторов местного иммунитета полости рта (Ксб), который является интегрированным математическим показателем состояния местного иммунитета полости рта, на основании функциональных связей слюнного лизоцима с иммуноглобулинами (Н.И. Толмачева, 1987) [1].

Объектом исследования были 60 пациентов в возрасте 17-30 лет с хроническим катаральным гингивитом. Диагностическими критериями служили местные клинические проявления, анамнестические данные и результаты иммунологического обследования.

В качестве контрольной была сформирована группа соматически здоровых доноров-добровольцев в количестве 30 человек без признаков патологичес-

ких процессов в пародонте. Представители этой группы обследовались в периоде, по крайней мере, 1 месяца, свободного от инфекций, проявлений аллергии, проведения прививок и применения иммуномо-дуляторов.

По половозрастному составу контрольная группа доноров соответствовала группам пациентов с хроническим катаральным гингивитом. Все исследования проводились в утренние часы натощак. Группы наблюдения формировались по обращаемости пациентов на кафедру терапевтической стоматологии КемГМА.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Наряду с оценкой характера изменений в системе местного иммунитета ротовой полости при хроническом катаральном гингивите, мы провели анализ показателей системного иммунитета с целью выяснения сопряженности и направленности этих изменений.

Субпопуляционный состав лимфоцитов оценивали с использованием моноклональных антител в лим-фотоксическом тесте. Состояние Т-звена иммунной системы оценивали количественно путем определения CD3, CD4, CD8-клеток; В-звено оценивали по содержанию CD72-лимфоцитов и сывороточных иммуноглобулинов А, G, М. Учитывали также содержание циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) в сыворотке крови. Состояние клеточного звена неспецифической резистентности оценивали по содержанию CD16-клеток (ОТК-клетки).

По результатам исследования оценка количественного состава субпопуляций Т-лимфоцитов у пациентов с хроническим катаральным гингивитом показала, что количество CD3-клеток (Т-общие) достоверно не отличалась от показателей контрольной группы, наблюдалась лишь тенденция к снижению. На фоне указанных изменений выявлено достоверное увеличение процентного содержания CD8-клеток (ци-тотоксические/супрессорные лимфоциты, Р < 0,05). Процент CD16-клеток (ОТК-клетки) у пациентов с хроническим катаральным гингивитом также был снижен (Р < 0,05).

Таким образом, при хроническом катаральном гингивите, наряду с расстройствами функционирования ИСС, отмечаются признаки иммунологической недостаточности со стороны клеточного звена системного иммунитета, которые в совокупности с клиническими признаками хронического воспалительного процесса в пародонте позволяют диагностировать эти изменения как ВИД.

Среди изученных нами параметров наибольшие нарушения проявились на уровне CD16-клеток, осуществляющих неспецифическую защиту от микроорганизмов и обеспечивающих в целом иммунобиологический надзор за постоянством клеточного состава организма.

Количество CD72-клеток (В-лимфоциты), ЦИК, IgG, ^М, ^А у пациентов с хроническим катаральным гингивитом в наших исследованиях достоверно не отличалось от уровня нормальных значений

7Я № 4 2005 ^Упеащина

* ° в Кузбассе

О^Аедици

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ

у здоровых доноров, тем не менее, просматривалась тенденция к снижению показателей иммуноглобулинов А и М, а иммуноглобулин G имел тенденцию (Р < 0,05) к увеличению, но в допустимых пределах нормы. Так как указанные отклонения от показателей, характеризующих состояние В-звена иммунной системы, укладываются в пределы значений географической нормы, можно лишь говорить о незначительной стимуляции специфического гуморального иммунного ответа при хроническом катаральном гингивите, которая, возможно, связана с активацией условно-патогенной микрофлоры на фоне ослабления защитных механизмов ИСС.

В целом, полученные результаты согласуются с мнением большинства авторов, исследовавших состояние иммунной системы в условиях сформировавшегося ВИД, о том, что изменения в ее функционировании в наибольшей степени затрагивают систему неспецифической резистентности и Т-клеточ-ное звено, а В-звено реагирует на изменение антигенного гомеостаза в меньшей степени.

Значение количественного содержания в смешанной слюне SIgA (0,38 ± 0,09) достоверно ниже, чем в группе здоровых (0,63 ± 0,15). А количество сывороточных иммуноглобулинов А (0,32 ± 0,03) и G (0,67 ± 0,03), активность лизоцима (19,33 ± 2,64) достоверно увеличены, по сравнению с контролем. Ксб (9,2 ± 0,17) интерпретируется как неблагоприятное состояние местного иммунитета полости рта.

Несомненно, что состояние местных барьеров определяется уровнем пролиферации и дифференци-ровки иммунокомпетентных клеток в центральных органах иммуногенеза. Не подлежит сомнению и тот факт, что особенности функционирования ИСС во многом определяют направление развития патологических процессов в острое или хроническое воспаление.

Что является первичным в патогенезе хронического воспаления, локальное нарушение на уровне ИСС или малые аномалии на системном уровне, вопрос достаточно сложный и до сих пор бурно обсуждаемый, как с иммунологических позиций, так и с позиций общей патологии, с учетом функционирования других гомеостатических систем организма [2].

С использованием многофакторного дисперсионного анализа нами были построены факторные модели для контрольной группы и группы больных с хроническим катаральным гингивитом.

Анализ показателей специфического иммунитета и неспецифической резистентности с учетом всех исследованных параметров показал, что в практически здоровом состоянии ведущая роль в поддержании постоянства структуры (внутренней среды организма) принадлежит клеточным факторам системного иммунитета.

Именно эти показатели вошли в состав первого по значимости фактора. Сила их влияния соответствует значению объяснимой дисперсии, равному 5,17. На втором по значимости месте — фактор, в состав которого вошли лизоцим слюны и общее количество лейкоцитов крови ^Р = 3,61). На третьем мес-

те — секреторный блок, состоящий из IgG слюны, SIgA слюны ^Р = 3,48).

Внешнесекреторные иммунологические показатели оказались в составе четвертого и пятого по уровням значимости факторов, однако отсутствие в их составе факторов, имеющих наибольшие значения объяснимой дисперсии, свидетельствуют о том, что в состоянии практического здоровья человека ИСС, в частности, один из ее подотделов местный иммунитет ротовой полости, функционирует без признаков активации. Результатом анализа стало выделение в патогенезе хронического катарального гингивита нескольких ведущих факторов.

Сила их влияния убывает по мере возрастания порядкового номера. На первом по значимости месте — фактор, включающий в себя SIgA слюны и общее количество лейкоцитов крови ^Р = 2,47). В состав второго фактора вошли абсолютное количество лейкоцитов крови, лимфоцитов, Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов ^Р = 2,10). Сила влияния остальных факторов значительно меньше предыдущих (В-лимфоциты и ^А крови VP = 1,44).

Таким образом, в группе пациентов с хроническим катаральным гингивитом, в отличие от факторной модели, построенной для здоровых лиц, клеточные факторы системного иммунитета оказались в составе второго по значимости фактора.

По результатам корреляционного анализа, в группе здоровых доноров выявлялены только положительные связи, число их было незначительным. Связи внутри блока секреторных показателей отсутствовали. Между системами общего и местного иммунитета определялись следующие корреляционные зависимости: между слюнным лизоцимом и количеством нейтрофилов (г = 0,58), между SIgA и абсолютным количеством Т-лимфоцитов (г = 0,80).

Оценивая структуру корреляционной сети в группе больных с хроническим катаральным гингивитом, мы отметили, что она имела гораздо более сложное строение, чем в группе контроля. Связи определялись как внутри блоков системного и местного иммунитета, так и между ними; при этом значительная часть коэффициентов корреляции имела отрицательные знаки. Внутри внешнесекреторного блока выявлены только положительные корреляционные зависимости. Значение коэффициентов парной корреляции варьировали от 0,40 до 0,61.

Были выявлены корреляционные связи между лизоцимом и SigA, между слюнными иммуноглобулинами IgG, IgA, ^М, SIgA. Межсистемные взаимоотношения характеризовались наличием корреляционных связей между SIgA и абсолютным количеством Т-лим-фоцитов, между IgG слюны и IgG сыворотки крови.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, при наличии хронического катарального гингивита ИСС полости рта работает в режиме функционального напряжения. Подтверждением данного заключения являются результаты корреляционного анализа, при котором выявлено усиление внутрисистемных взаимодействий.

ОЛ^ищт

. и № 4 2005 7д

в Кузбассе *

Значимая роль показателей ИСС в поддержании иммунного гомеостаза при хроническом катаральном гингивите подтверждается результатами как многофакторного, так и корреляционного анализов. Полученные результаты позволяют предположить, что нарушение синтеза и снижение секреции SIgA является определяющим иммунологическим фактором при хроническом катаральном гингивите.

Повышенный уровень лизоцимной активности смешанной слюны, увеличение количественного содер-

жания сывороточных ^А, IgG являются компенсаторной реакцией, позволяющей локализовать участок воспаления и, тем самым, предотвратить нарушение иммунореактивности на уровне целого организма.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Олейник, И.И. Микробиология и иммунология полости рта /И.И. Олейник //Биология полости рта. - М., 1998. - С. 40-56.

2. Беляков, И.Н. Иммунная система слизистых /И.Н. Беляков //Иммунология. - 1997. - № 4. - С. 7-12.

Киселева Е.А.

Кемеровская государственная медицинская академия,

г. Кемерово

РОЛЬ ИММУНОРЕАБИЛИТАЦИИ В СТОМАТОЛОГИИ ПРИ ХРОНИЧЕСКИХ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ

Результаты исследования иммунного статуса оправдывают поиск и назначение препаратов, кор-регирующих иммунологическую реактивность, что продиктовано прогрессивно увеличивающимся количеством пациентов с хроническими воспалительными стоматологическими заболеваниями, очень устойчивыми к традиционным воздействиям [1].

Цель исследования — повышение эффективности лечения и профилактики хронического катарального гингивита путем применения иммунотерапии ликопидом в комплексе с традиционной местной противовоспалительной терапией.

МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ

Для оценки иммунного статуса исследовали количество субпопуляций лимфоцитов в лимфоцито-токсическом тесте на основе использования монок-лональных антител с последующим анализом образцов на проточном лазерном цитофлюориметре с программой для анализа данных. Содержание иммуноглобулинов А, М, G в сыворотке крови определяли по методу радиальной иммунодиффузии по Манчи-ни, концентрацию циркулирующих иммунных комплексов — с помощью метода селективной преципитации в ПЭГ-6000.

Состояние местного иммунитета ротовой полости оценивали по содержанию в смешанной слюне SIgA, ^А, IgG, активности слюнного лизоцима. Диагностика секректорного иммуноглобулина А ^^А) в слюне осуществлялась с помощью наборов реагентов SIgA-ИФА-БЕСТ-стрип для количественного определения SIgА в биологических жидкостях человека твердофазным методом иммуноферментного анализа. Определение иммуноглобулина А (^А) и иммуноглобулина G (IgG) в слюне производили с использованием диагностических моноспецифических сывороток против ^А и IgG человека по методике радиальной иммунодиффузии Манчини.

Активность лизоцима определяли в смешанной слюне фононефелометрическим методом В.Г. Дорофей-чук (1968). В основе метода лежит свойство лизоци-

ма лизировать мукополисахариды клеточных стенок эталонного штамма Micrococcus lysodeikticus [2]. Определяли коэффициент сбалансированности факторов местного иммунитета полости рта (Ксб), который является интегрированным математическим показателем состояния местного иммунитета полости рта на основании функциональных связей слюнного лизоцима с иммуноглобулинами (Н.И. Толмачева, 1987) [3].

У 60 человек диагностировали хронический катаральный гингивит по методике, включающей сбор жалоб, анамнеза жизни, заболевания пародонта, осмотра внешнего и полости рта. Для объективной диагностической оценки состояния тканей пародонта применялись специальные индексы и пробы, для оценки иммунного статуса — лабораторное исследование крови и смешанной слюны. Все обследованные разделены на две группы наблюдения в зависимости от проводимых лечебных мероприятий. Группа 1 — комплексная местная противовоспалительная терапия. Группа 2 — комплекс местного лечения и иммунокоррекции. В качестве контрольной была сформирована группа практически здоровых доноров-добровольцев в количестве 30 человек без признаков патологических процессов в пародонте.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

При иммунологическом исследовании крови оценка количественного состава субпопуляций Т-лимфо-цитов у пациентов с хроническим катаральным гингивитом в 1 группе показала, что количество CD3-клеток (Т-общие) достоверно не отличалась от показателей контрольной группы и не имела достоверных различий показателей до и после лечебного воздействия, тенденция к снижению сохранялась. На фоне указанных изменений выявлено достоверное увеличение процентного содержания CD8-клеток (ци-тотоксические/супрессорные лимфоциты, Р < 0,05) до лечения, отсутствовало достоверное различие показателей до и после лечения, последнее не было достоверно приближено к значениям данного показателя у здоровых лиц (Р >0,05).

о0 № 4 2005 ^Упешимна

ои в Кузбасс

О^Аедици