МОНИТОРИНГ СМЕСЕЙ ФЕРМЕНТОВ

1. Способ одновременного обнаружения присутствия или отсутствия, по меньшей мере, двух ферментов в пробе, который включает стадии:
(1) воздействие пробы на первый субстрат для первого фермента, причем указанный первый субстрат мечен первым флуорофором, и второй субстрат для второго фермента, причем второй субстрат мечен вторым флуорофором, способствующее взаимодействию первого и второго ферментов, присутствующих в пробе, в случае присутствия, с соответствующими первым и вторым меченными флуорофором субстратами с целью образования соответствующих фрагментов первого и второго меченных флуорофором субстратов;
(11) обнаружение присутствия указанных фрагментов меченных флуорофором субстратов.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что для обнаружения уровней, по меньшей мере, двух содержащихся в воздухе ферментов включает этапы:
(1) до воздействия пробы на субстраты получение первой пробы атмосферного воздуха; и
(11) улавливание любых частиц ферментов, которые присутствуют в первой пробе.
3. Способ по п.2, отличающийся тем, что дополнительно включает смешение уловленных частиц ферментов с жидкостью для образования пробы.
4. Способ по п.3, отличающийся тем, что жидкость является водным буфером.
5. Способ по п.4, отличающийся тем, что дополнительно включает перемещение пробы из зоны, в которой первая проба смешана с данной жидкостью, в зону реакции, в которой проба воздействует на субстраты.
6. Способ по пп.1-5, отличающийся тем, что стадия воздействия пробы на субстраты протекает за период времени, достаточный, чтобы обеспечить взаимодействие первого и/или второго фермента с соответствующим субстратом для образования фрагментов меченного флуорофором субстрата.
7. Способ по п.1, отличающийся тем, что стадия обнаружения включает обнаружение сигнала, эмитированного фрагментом первого и/или второго меченного флуорофором субстрата.
8. Способ по п.1, отличающийся тем, что первым и/или вторым субстратом являются белок или полипептид.
9. Способ по п.8, отличающийся тем, что белок или полипептид выбирают из группы, состоящей из желатина, свиного триоглобулина, коллагена, иммуноглобулина или их производных и альбумина бычьей сыворотки.
10. Способ по п.1, отличающийся тем, что, по меньшей мере, один из субстратов переносят на носитель.
11. Способ по п.10, отличающийся тем, что носителем является твердофазный носитель.
12. Способ по п.10, отличающийся тем, что носитель изготовлен или включает стеклянные, золь гель шарики, целлюлозные волокна или частицы окиси кремнезема.
13. Способ по пп.10-12, отличающийся тем, что носитель является магнитизируемым.
14. Способ по п.1, отличающийся тем, что первый и/или второй фермент выбран из группы ферментов, состоящей из протеазы, целлюлозы, липазы, α-амилазы или коллагеназы.
15. Способ по п.14, отличающийся тем, что протеазу выбирают из группы, состоящей из фермента типа субтилизина, трипсина, эсперазы или алкалазы.
16. Способ по п.1, отличающийся тем, что первый и/или второй флуорофор выбирают из флуорисцеина и их производных, родамина, Texas Red и люцефирина желтого.
17. Способ по п.1, отличающийся тем, что проба извлечена из первой пробы воздуха.
18. Способ по п.1, отличающийся тем, что один или оба из первого и второго субстрата являются субстратами для протеазы.
19. Способ по п.1, который включает в начале воздействие пробы на один из первого или второго субстратов и последовательное воздействие пробы на другой из первого или второго субстратов.
20. Способ по п.18 или по 19, отличающийся тем, что, по меньшей мере, одним из ферментов, подлежащих мониторингу, является протеаза, и, по меньшей мере, одним из первого субстрата и второго субстрата является субстрат для протеазы.
21. Способ по п.20, отличающийся тем, что фермент является ферментом типа субтилизина, и субстрат является α-амилазой.
22. Способ по п.1, который включает воздействие пробы на первый субстрат и второй субстрат одновременно.
23. Сосуд для одновременного обнаружения присутствия, по меньшей мере, двух ферментов в пробе, который включает первый субстрат для первого фермента, причем указанный первый субстрат мечен первым флуорофором, и второй субстрат для второго фермента, причем второй субстрат мечен вторым флуорофором.
24. Сосуд по п.23, в котором, по меньшей мере, один из первого или второго субстратов нанесен на носитель.
25. Сосуд по п.23 или 24, отличающийся тем, что носителем является твердофазный носитель, включающий стеклянные или золь гель шарики, частицы кремнезема или волокна целлюлозы.
26. Сосуд по п.25, отличающийся тем, что содержит гетерогенную смесь первого субстрата и второго субстрата.
27. Сосуд по п.26, отличающийся тем, что содержит, по меньшей мере, один слой, который в основном состоит из первого субстрата, и, по меньшей мере, один слой, который в основном состоит из второго субстрата.
28. Аппарат для одновременного обнаружения, по меньшей мере, двух ферментов в пробе, который включает сосуд, включающий первый субстрат для первого фермента, причем указанный субстрат мечен первым флуорофором, и второй субстрат для второго фермента, причем второй субстрат мечен вторым флуорофором, и средства обнаружения флуоресцентных фрагментов субстрата.
29. Аппарат по п.28, отличающийся тем, что первый и второй субстраты расположены слоями внутри сосуда.
30. Аппарат по п.29, отличающийся тем, что один из первого субстрата и второго субстрата является субстратом для фермента протеазы, который установлен внизу потока от других субстратов.
31. Аппарат для одновременного обнаружения, по меньшей мере, двух ферментов в пробе, который включает первый сосуд, который включает первый субстрат для первого фермента, причем указанный субстрат мечен первым флуорофором, и указанный первый сосуд соединен со вторым сосудом, который включает второй субстрат для второго фермента, причем указанный субстрат мечен вторым флуорофором, и средства обнаружения флуоресцентных фрагментов субстрата.
32. Аппарат по п.31, отличающийся тем, что один из первого субстрата или второго субстрата является субстратом для фермента протеазы и расположен в сосуде внизу потока и прилегает к средствам обнаружения.