Морфофункциональная характеристика моноцитов периферической крови и их предшественников у потомства самок крыс с аутоиммунным поражением печени

Клиническая и экспериментальная медицина

УДК 612.112.95 DOI: 10.14529/hsm160107

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МОНОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ И ИХ ПРЕДШЕСТВЕННИКОВ У ПОТОМСТВА САМОК КРЫС С АУТОИММУННЫМ ПОРАЖЕНИЕМ ПЕЧЕНИ

1 2 Г.В. Брюхин', Т.М. Комарова2

1 Южно-Уральский государственный медицинский университет, г. Челябинск

2 Челябинский государственный университет, г. Челябинск

Цель. Исследование влияния экспериментального поражения печени матери аутоиммунного генеза на морфофункциональные особенности становления моноцитов в костном мозге потомства. Материалы и методы. Объектом исследования явились белые лабораторные половозрелые самки крыс «Вистар» с экспериментальным поражением печени и их потомство на 30-е и 60-е сутки постнатального развития, разделенные на две группы: контрольную и опытную. Хроническое аутоиммунное поражение печени моделировалось с помощью вакцины БЦЖ путем подкожной иммунизации с чередованием внутрибрюшинного введения печеночного антигена с интервалом в три дня. Результаты. Выявлено снижение абсолютного количества клеток на всех стадиях развития в экспериментальной группе животных по сравнению с контролем. Кроме этого, обнаружено уменьшение числа ШИК-позитивных клеток, активности кислой фосфатазы и содержания альфа-глицерофосфатдегидрогеназы в клетках моноцитарно-го ростка костного мозга и моноцитах периферической крови опытных групп исследуемых животных. Заключение. При экспериментальном поражении гепатобилиарной системы аутоиммунного генеза матери рождается потомство с нарушением моноцито-поэза, проявляющееся функциональной незрелостью моноцитов.

Ключевые слова: эксперимент, патология печени, потомство, костный мозг, моноциты.

Актуальность настоящего исследования определяется необходимостью воспроизводства полноценного поколения. В последние годы отмечен рост числа бесплодных браков и рождение детей с различными патологиями. Наряду со многими причинами нарушения внутриутробного развития плода ведущая роль принадлежит экстрагенитальной патологии со стороны материнского организма, приводящая к ухудшению условий антенатального развития и, как следствие, перинатальной патологии плода. Заболевания гепатобилиар-ной системы как проявление экстрагениталь-ной патологии матери во время беременности осложняют течение самой беременности и увеличивают вероятность прогностически неблагоприятного исхода для потомства. Многочисленные экспериментальные и клинические исследования, проведенные сотрудника-

ми нашей кафедры, указывают на нарушения становления систем жизнеобеспечения у потомства матерей с хронической патологией гепатобилиарной системы, в том числе репродуктивной [6, 14, 16], иммунной [19], макро-фагальной [1], эндокринной [11, 17], пищеварительной [15] и др. Большинство фундаментальных процессов, находящихся в основе индивидуального развития, в настоящее время изучены недостаточно. В частности, под пристальным вниманием российских и зарубежных ученых находятся вопросы становления одной из важнейших систем человеческого организма - системы крови. Ранее сотрудниками кафедры гистологии, эмбриологии и цитологии ЮУГМУ в условиях эксперимента было установлено, что у самок крыс с хроническим поражением гепатобилиарной системы рождается потомство с нарушениями

морфофункционального состояния моноцитов костного мозга и периферической крови [4, 5]. Неоспоримым фактом является положение о том, что резистентность любого живого организма во многом определяется состоянием ряда систем жизнеобеспечения, в том числе системы неспецифической защиты, основными агентами которой являются макрофаги [10]. Кроме того, данные клетки во многом определяют характер и интенсивность иммунологической реактивности организма [10]. Нарушение дифференцировки клеток моно-цитарного ростка ведет к снижению и потере неспецифической резистентности организма.

Исходя из вышеизложенного, целью настоящего исследования явился анализ роли хронического поражения печени в нарушении морфофункционального становления клеток моноцитарного ростка костного мозга и моноцитов периферической крови у потомства.

Материалы и методы. Экспериментальное исследование было проведено на белых лабораторных крысах «Вистар» и их потомстве в различные периоды постнатального онтогенеза - на 30-й и 60-й день. Сроки проведения эксперимента были выбраны с учетом общепринятого подразделения возрастных периодов у крыс [13]. Работа с экспериментальными животными проводилась в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием животных», утвержденными приказом МЗ СССР № 755 от 12.08.77. Исследования проводились с учетом суточных колебаний. Животные исследуемых групп содержались в виварии в одинаковых условиях. Все животные были разделены на 2 группы. В первую группу выделено потомство от ин-тактных крыс (контрольная группа - К)-42 животных из 12 пометов, во вторую группу (опытная группа О) включены были крысята от самок крыс с экспериментальным поражением печени - 38 животных из 10 пометов. Для достижения поставленной цели исследования у подопытных животных моделировалось аутоиммунное поражение печени с помощью вакцины БЦЖ, путем подкожной иммунизации, с чередованием внутрибрюшин-ного введения печеночного антигена с интервалом в три дня.

В качестве объекта исследования изучались клетки моноцитарного ростка: монобла-сты, промоноциты, моноциты костного мозга и моноциты периферической крови. Выделение клеток костного мозга проводили по об-

щепринятой методике [11]. Красный костный мозг получали из отпрепарированной от мышц бедренной кости забитого животного с отсеченными эпифизами путем выдавливания. Из полученного костного мозга изготавливали мазки. Моноциты периферической крови выделяли с помощью метода, основанного на седиментации их в одноступенчатом градиенте плотности фиколл-урографина (плотностью 1,077 г/см3) [20]. Метод получения монослоя клеток основан на способности мононуклеаров адгезироваться на чистой стеклянной поверхности [22]. Исследования проводили в мазках и в монослое клеток [9].

Количественный состав клеток производили в камере Горяева. Функциональное состояние клеток оценивали с помощью цитохимических методов исследования.

В мазках изучалась способность клеток к накоплению гликогена. С этой целью проводилась ШИК-реакция по Мак-Манусу, основанная на способности йодной кислоты окислять спиртовые группы, что при взаимодействии с реактивом Шиффа (фуксин - сернистая кислота) приводит к образованию кислотно-стойкого красителя красно-фиолетового цвета. ШИК-положительные вещества окрашиваются в красный цвет различных оттенков. Нейтральные мукополисахариды, содержащие гексозу - пурпурно-красные, гликоген - темно-красный [3].

Количество накопленного клетками гликогена визуально оценивали полуколичественным методом с вычислением среднего цитохимического коэффициента по формуле Астальди и Верга (1957).

Активность кислой фосфатазы изучали с помощью реакции азосочетания. Альфа-глицерофосфатдегидрогеназу определяли по методу [8]. В результате реакции места размещения фермента выявляются по восстановлению тетразолия до формазанов, окрашенных в фиолетовый цвет.

Полученные цифровые данные обрабатывали на компьютере с использованием программы SPSS Statistics 17,0 (Statsoft, Inc.) Учитывая небольшую выборку животных, достоверность полученных результатов определяли при помощи непараметрического метода -критерия Манна-Уитни.

Результаты собственных исследований. Проводилось определение содержания клеток моноцитарного ростка костного мозга и моноцитов периферической крови. Полученные результаты отражены в табл. 1.

Таблица 1 Table 1

Содержание клеток моноцитарного ростка костного мозга и моноцитов периферической крови у потомства самок крыс с аутоиммунным поражением печени в различные сроки постнатального онтогенеза

Count of bone marrow monocyte lineage and peripheral blood monocytes in progeny of female rats with autoimmune liver injury at different stages of postnatal ontogenesis

Группа Group Монобласты Monoblasts Промоноциты Promonocytes Моноциты КМ Bone marrow monocyte Моноциты ПК Peripheral blood monocytes

30-й день Day 30 60-й день Day 60 30-й день Day 30 60-й день Day 60 30-й день Day 30 60-й день Day 60 30-й день Day 30 60-й день Day 60

Контроль Control 0,72

Опыт Experimental 0,47

Примечание: * - 95 % ДИ. Note: * - 95 % confidence interval.

В результате проведенного исследования у подопытных крысят на 30-й день постна-тального развития было выявлена тенденция к уменьшению содержания в 1 мл взвеси клеток как незрелых клеток моноцитарного ростка -монобластов и промоноцитов, так и зрелых форм - моноцитов, что может указывать на возможное нарушение процессов дифферен-цировки моноцитов в костном мозге.

Подобная динамика наблюдается и в отношении моноцитов периферической крови -изменение содержания в 1 мл моноцитов периферической крови в опытной группе на 30-й день постнатального развития по сравнению с контролем. На 60-й день развития у крысят матерей опытной группы наблюдалось достоверное изменение количества всех клеток мо-ноцитарного ростка - монобластов и промо-ноцитов по сравнению с контролем соответственно. В отношении зрелых форм наблюдается снижение количества моноцитов опытной группы по сравнению с контрольными животными. В то же время можно отметить уменьшение количества клеток моноци-тарного ростка - монобластов и промоноци-тов у 60-дневных крысят по сравнению с 30-дневными в опытной группе животных, соответственно. В группе контрольных животных на 60-й день постнатального развития происходит закономерное увеличение содержания в 1 мл и клеток моноцитарного ростка, и зрелых форм моноцитов костного мозга и периферической крови, в сравнении с 30-дневным сроком. Обращает на себя внимание факт существенного различия количества моноцитов в

костном мозге и моноцитов периферической крови. Наблюдается заметное уменьшение содержания в 1 мл моноцитов периферической крови в опытных группах 30-дневных и 60-дневных крысят, тогда как в контрольных группах мы видим закономерное увеличение количества моноцитов периферической крови 30-дневных и 60-дневных крысят, в сравнении с количеством в 1 мл моноцитов костного мозга тех же сроков соответственно.

Снижение количества моноцитов периферической крови опытных групп может быть вызвано либо нарушением процессов моноци-топоэза в костном мозге, либо массовой миграцией моноцитов в очаг воспаления в тканях.

В ходе изучения количественного соотношения клеток моноцитарного ростка костного мозга мы выявили тенденцию к снижению абсолютного количества клеток на всех стадиях развития в экспериментальной группе животных по сравнению с контролем, что связано с нарушением процесса моноцитопо-эза в красном костном мозге вследствие негативного влияния хронического поражения печени матери на гемопоэз потомства.

В следующей серии исследований была проведена оценка способности моноцитов различных стадий дифференцировки к накоплению гранул гликогена. Результаты исследования монобластов, промоноцитов моноцитов костного мозга представлены в табл. 2.

Из таблицы видно, что количество ШИК-позитивных незрелых клеток моноцитарного ростка костного мозга - монобластов и про-моноцитов снижено в опытной группе по

сравнению с контролем, соответственно на 30-й день постнатального развития.

Подобная закономерность наблюдается и в группе опыта и контроля на 60-й день развития. Такая же картина выявлена в отношении зрелых форм моноцитов периферической крови экспериментальных животных в сравнении с контрольной группой.

Обращает на себя внимание факт незначительного увеличения количества ШИК-позитивных клеток незрелых форм моноци-тарного ростка - монобластов и промоноци-тов на 60-й день постнатального развития в опытной группе по сравнению с 30-дневным сроком соответственно. Тогда как в контрольной группе животных, на этих же сроках, отмечается более интенсивное увеличение количества ШИК-позитивных незрелых клеток моноцитарного ростка костного мозга. В отношении зрелых форм моноцитов костного мозга и периферической крови картина будет выглядеть иначе. Здесь мы четко прослеживаем тенденцию увеличения количества ШИК - позитивных клеток моноцитов костного мозга и периферической крови на сроке 60 суток по сравнению с 30-дневным сроком как в опытной, так и в контрольной группах животных. Можно отметить, что разница между контролем и опытом по мере повышения степени дифференцировки клеток увеличивается, что можно объяснить тем обстоятельством, что чем более зрелым становится моноцит, тем сильнее у него способность к запасанию питательных веществ, в частности, гликогена [2]. Что является необходимым ус-

ловием для выполнения основных функций моноцита, в том числе фагоцитарной и кил-линговой [18].

Реализация защитных воспалительных функций полиморфноядерных лейкоцитов обусловлена мобилизацией внутриклеточных гранул. Экзоцитоз гранул крайне важен, так как именно он ответственен за появление лейкоцитов в очаге воспаления с развитием последующих защитных реакций. Одним из маркеров первичных (азурофильных) гранул служит кислая фосфатаза. Этот фермент вовлечен в регуляцию биологических процессов на разных уровнях. С его действием связано начало и осуществление многих биохимических процессов.

Учитывая, что кислая фосфатаза является маркером лизосомального аппарата, следующим этапом работы было изучение влияния патологии матери на активность кислой фос-фатазы в моноцитарных клетках потомства. Исследование показало угнетение данного показателя в опытной группе по сравнению с контролем.

Обращает на себя внимание наименьшая активность кислой фосфатазы в незрелых клетках моноцитарного ростка - монобластах, во всех исследуемых группах животных. По мере созревания моноцитов этот показатель увеличивается, достигая наибольших значений в зрелых формах исследуемых клеток периферической крови. Причем, на сроке 60 суток активность кислой фосфатазы выше, чем у 30-дневного потомства во всех рассматриваемых группах животных.

Таблица 2 Table 2

Группа Group Монобласты Monoblasts Промоноциты Promonocytes Моноциты КМ Bone marrow monocyte Моноциты ПК Peripheral blood monocytes

30-й день Day 30 60-й день Day 60 30-й день Day 30 60-й день Day 60 30-й день Day 30 60-й день Day 60 30-й день Day 30 60-й день Day 60

Контроль Control 2,23

Опыт Experimental 1,99*

Примечание: * - 95 % ДИ. Note: * - 95 % confidence interval.

Содержание ШИК-позитивных клеток моноцитарного ростка костного мозга и моноцитов периферической крови у потомства самок крыс с аутоиммунным поражением печени в различные сроки постнатального онтогенеза, %

Count of PAS positive cells of bone marrow monocyte lineage and peripheral blood monocytes in progeny of female rats with autoimmune liver injury at different stages of postnatal ontogenesis, %

В результате проведенных исследований получены результаты, свидетельствующие о снижении активности кислой фосфатазы в незрелых клетках моноцитарного ростка костного мозга и моноцитах периферической крови потомства матерей с патологией гепа-

Полученные нами данные находят подтверждение в ряде научных работ. При моделированных патологиях печени: токсической, аутоиммунной и холестатическом гепатите [3] происходит снижение киллинговой активности макрофагов, вероятно всего, обусловленное снижением активности кислой фос-фатазы.

Кислая фосфатаза, в качестве маркера ли-зосом, отражает уровень дифференцировки и функциональной активности клетки [21]. Поэтому по снижению активности лизосомаль-ного гидролитического фермента в исследуемых нами клетках опытных групп можно судить об их функциональной неполноценности. Кроме того, секреция лизосомальных ферментов напрямую связана с состоянием стабильности клеточной мембраны: при лаби-лизации лизосомальных мембран происходит повышение выхода ферментов, при стабилизации - снижение [23]. Таким образом, повышенная активность, в данном случае, кислой фосфатазы в цитоплазме клеток подопытных животных наводит на мысль о нестабильности клеточных и лизосомальных мембран, что

доказанно имеет место при высокой сенсибилизации организма [12].

В последние годы широкое применение получил метод выявления митохондриальных дисфункций по активности митохондриаль-ных ферментов в лейкоцитах крови, отра-

организма. В рамках этого проводится оценка активности, в том числе и митохондриального окислительно-восстановительного фермента -альфа-глицерофосфатдегидрогеназы, принимающего участие в гликолитическом пути расщепления углеводов. Уровень активности данного фермента напрямую зависит от эффективности митохондриального аппарата, а значит отражает степень обеспеченности клеток энергоемкими соединениями [12].

В ходе исследования нами было выявлено увеличение содержания а-ГФДГ в процессе постнатального развития в моноцитах периферической крови на рассматриваемых сроках экспериментальных групп. При анализе проводимого исследования обнаружена следующая закономерность - цитохимический коэффициент а-ГФДГ в опытной группе животных выше по сравнению с контролем.

Полученные нами результаты нашли подтверждение в работах ряда авторов, показавших аналогичную закономерность при моделировании хронического холестатического, аутоиммунного и токсического поражения гепатобилиарной системы [3].

тобилиарной системы.

жающие полисистемные изменения всего

Интенсивность цитохимической реакции на кислую фосфатазу в клетках моноцитарного ростка костного мозга и моноцитов периферической крови у потомства самок крыс с аутоиммунным поражением печени в различные сроки постнатального онтогенеза, %

Intensity of acid phosphatase cytochemical reaction in cells of bone marrow monocyte lineage and peripheral blood monocytes in progeny of female rats with autoimmune liver injury at different stages of postnatal ontogenesis, %

Таблица 3 Table 3

Содержание а - ГФДГ в моноцитах периферической крови у потомства самок крыс

с аутоиммунным поражением печени в различные сроки постнатального онтогенеза, %

Content of а-GPDH in peripheral blood monocytes in progeny of female rats with autoimmune liver injury at different stages of postnatal ontogenesis, %

Группа Group Сроки Stages

30 день Day 30 60 день Day 60

Контроль Control 0,89

Опыт Experimental 1,15(1,09-1,21)* 1,29(1,23-1,35)*

Примечание: * - 95 % ДИ. Note: * - 95 % confidence interval.

Обнаруженные изменения могут быть объяснены нарушением гликолитического пути расщепления углеводов в моноцитарных клетках у потомства матерей с хронической патологией печени, что, неизбежно ведет к нарушению углеводного обмена [7, 21].

Заключение. Таким образом, результаты проведенных исследований наглядно демонстрируют, что при моделировании хронического аутоиммунного гепатита у потомства самок крыс происходит системное нарушение процессов жизнеобеспечения [3], сопровождающееся, в том числе, угнетением костномозгового кроветворения. Это проявляется в нарушении дифференцировки и созревания клеток моноцитарного ростка костного мозга, уменьшением числа моноцитарных клеток на различных стадиях костномозгового развития, что обуславливает снижение числа моноцитов в периферической крови. Изменение численного состава моноцитов протекает на фоне снижения их функционального состояния, на что указывает снижение содержания гликогена, а также уменьшение интенсивности гистохимической реакции на кислую фосфатазу и а-ГФДГ. В целом полученные результаты позволяют считать, что у самок крыс с хроническим экспериментальным аутоиммунным поражением печени рождается потомство со сниженной резистентностью.

Литература

1. Барышева, С.В. Характеристика фагоцитарной активности перитонеальных и альвеолярных макрофагов при эксперименталь-

ном О-галактозаминовом поражении печени / С.В. Барышева, Г.В. Брюхин, А.А. Федосов // Морфология. - 2008. - Т. 133, № 2. - С. 17.

2. Бернет, Ф.М. Клеточная иммунология / Ф.М. Бернет. - М. : Мир, 1971. - 720 с.

3. Брюхин, Г.В. Влияние иммолизационно-го стресса на бактерицидную активность мононуклеарных фагоцитов у потомства животных с хроническим холестатическим поражением печени различной этиологии / Г.В. Брюхин, А.Ю. Грачев // Рос. вестник пе-ринатологии и педиатрии. - 1994. - Т. 39, № 2. - С. 35.

4. Брюхин, Г.В. Сравнительный анализ субпопуляционного состава тимоцитов и Т-лимфоцитов периферической крови потомства самок крыс с хроническим экспериментальным поражением печени различного ге-неза / Г.В. Брюхин // Иммунология. - 2004. -№ 2. - С. 83-86.

5. Брюхин, Г. В. Роль экспериментального поражения печени матери в развитии физиологической незрелости потомства /Г.В. Брюхин, М.Л. Сизоненко // Бюл. экперим. биол. и мед. - 2012. - Т. 154, № 11. - С. 544-547.

6. Вторушина, Е.В. Характеристика инкреторной функции яичников потомства самок крыс с хроническим экспериментальным поражением печени различной этиологии / Е.В. Вторушина, Г.В. Брюхин // Проблемы репродукции. - 2008. - № 1. - С. 6-9.

7. Коржевский, Д.Э. Основы гистологической техники /Д.Э. Коржевский, А.В. Гиля-ров. - М. : Спецлит, 2010. - 94 с.

8. Лабораторные животные. Разведение, содержание, использование в эксперименте / И.П. Западнюк, В.И. Западнюк, Е.А. Захария, Б.В. Западнюк. - 3-е изд. перераб., доп. - Киев: Вища шк., 1983. - 383 с.

9. Луговская, С.А. Структура и функции моноцитов и макрофагов (обзор литературы) / С. А. Луговская // Клинич. лаборатор. диагностика. - 1997. - № 9. - С. 10-16.

10. Мазуров, Д. В. Оценка внутриклеточного киллинга стафилококка фагоцитами периферической крови с помощью проточной цитометрии / Д. В. Мазуров, С. В. Дамбаева, Б.В. Пинегин // Иммунология. - 2000. - № 2. -С. 57-59.

11. Маянский, А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский. -Новосибирск: Наука: Сибир. отд-ние, 1989. -341 с.

12. Николина, О.В. Морфофункциональ-ное становление щитовидной железы самок крыс с хроническим поражением печени в раннем постнатальном периоде / О.В. Нико-лина Г.В. Брюхин // К 100-летию со дня рождения профессора В.Г. Елисеева: сб. - М., 1999. - С. 134-135.

13. От здоровой клетки к здоровому организму (Современные подходы к оценке и коррекции состояния ряда энергообеспе-чивающих систем организма в норме и патологии) / Т.Д. Измайлова, С.В. Петричук,

B.М. Шищенко, И. В. Писарева // Лечащий врач. - 2005. - № 4. - С. 66-69.

14. Романов, Б. К. Лекарственная регуляция активности лизосомальных ферментов / Б.К. Романов // Рос. мед.-биол. вестник им. акад. И.П. Павлова. - 2003. - № 1-2. -

C. 75-82.

15. Серышева, О.Ю. Морфофункциональ-ная характеристика эпителия крипт двенадцатиперстной кишки у потомства самок крыс с экспериментальным поражением печени / О.Ю. Серышева, Г.В. Брюхин //Морфология. - 2013. - Т. 144, № 4. - С. 36-40.

16. Сизоненко, М.Л. Влияние хронической патологии печени матери на эндокринную функцию мужских половых желез потомства / М.Л. Сизоненко, Г.В. Брюхин // Проблемы репродукции. - 2008. - № 2. - С. 45-47.

17. Солянникова, Д. Р. Характеристика парафолликулярных клеток щитовидной железы потомства самок крыс с хроническим экспериментальным поражением печени в различные сроки постнатального онтогенеза /

Д.Р. Солянникова, Г.В. Брюхин //Морфология. -2013. - Т. 143, № 2. - С. 47-50.

18. Строение и функции лейкоцитов. Гра-нулоциты: рук. по гематологии / О.Э. Виноградова, О.К. Гаврилов, Г.И. Козинец, Н.Б. Черняк. - М.: Медицина, 1985. - 288 с.

19. Федосов, А.А. Характер популяцион-ных изменений лимфоцитов периферической крови при экспериментальном поражении гепатобилиарной системы различной этиологии / А.А. Федосов, С.В. Барышева // Актуальные проблемы патофизиологии: сб. - СПб., 2001. - С. 55-57.

20. Фримель, Г. Иммунологические методы: пер. с нем. / Г. Фримель. - М.: Медицина, 1987. - 472 с.

21. Фролова, О.Е. Морфофункциональная характеристика моноцитов. Значение исследования нуклеолярного аппарата (обзор литературы) / О.Е. Фролова // Клинич. лабора-тор. диагностика. - 1998. - № 10. - С. 3-8.

22. Хейфец, Л.Б. Разделение форменных элементов крови человека градиенте плотности верографин-фиколл /Л.Б. Хейфец, В.А. Аба-лакина // Лаборатор. дело. - 1973. - № 10. -С. 579-581.

23. Чередеев, А.Н. Количественная и функциональная оценка Т- и В-систем иммунитета у человека / А.Н. Чередеев // Общие вопросы патологии. Итоги науки и техники. - М.: ВИНИТИ, 1976. - Т. 4. - С. 124-160.

24. Шехтман, М.М. Руководство по экс-трагенитальной патологии у беременных / М.М. Шехтман. - 5-е изд. - М. : Триада-Х, 2011. - 896 с.

Брюхин Геннадий Васильевич, доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой гистологии, эмбриологии и цитологии, Южно-Уральский государственный медицинский университет, г. Челябинск, BGenVas@mail.ru.

Комарова Татьяна Михайловна, аспирант кафедры микробиологии, иммунологии и общей биологии, Челябинский государственный университет, г. Челябинск, t-komm@mail.ru.

Поступила в редакцию 12 декабря 2015 г.

DOI: 10.14529/hsm160107

MORPHOFUNCTIONAL CHARACTERISITCS

OF PERIFERAL BLOOD MONOCYTES AND THEIR PROGENITORS

IN PROGENY OF FEMALE RATS WITH AUTOIMMUNE LIVER INJURY

G.V. Bryukhin1, BGenVas@mail.ru, T.M. Komarova2, t-komm@mail.ru

1 South Ural State Medical University, Russian Federation,

2 Chelyabinsk State University, Russian Federation

Aim. To study how experimental autoimmune liver injury in mother influences morpho-functional features of monocyte development in the bone marrow of progeny. Materials and methods. The subjects of study were female Wistar rats with experimental liver injury and their progeny on days 30 and 60 of postnatal development divided into two groups: control and experimental. Chronic autoimmune liver injury was modeled using BCG vaccine via subcutaneous immunization with periodic intraperitoneal administration of liver antigen each three days. Results. The study showed that absolute cell count at all stages of development in the experimental group of animals decreased in comparison with the control group. Besides, the decrease was observed in PAS positive cell number, acid phosphatase activity and level of alpha-glycerophosphate dehydrogenase in monocyte series of the bone marrow and in peripheral blood monocytes of the groups of animals under observation. Conclusion. Mothers with experimental autoimmune hepatobiliary disorder give birth to progeny with disturbance expressed in functional immaturity of monocytes.

Keywords: experiment, liver injury, progeny, bone marrow, monocytes.

References

1. Barysheva S.V., Bryukhin G.V., Fedosov A.A. [Characteristics of the Phagocytic Activity of Peritoneal Macrophages and Alveolar in Experimental D-Galaktozaminovom Liver Disease]. Morfologiya [Morphology], 2008, vol. 133, no. 2, pp. 17-20.

2. Bernet F.M. Kletochnaya immunologiya [Cellular Immunology]. Moscow, World Publ., 1971. 720 p.

3. Bryukhin G.V., Grachev A.Yu. [Immolizatsionnogo Effect of Stress on the Bactericidal Activity of Mononuclear Phagocytes in the Offspring of Animals with Chronic Cholestatic Liver Disease of Various Etiologies]. Rossiyskiy vestnikperinatologii i pediatrii [Russian Gazette Perinatology and Pediatrics], 1994, vol. 39, no. 2, pp. 35-40.

4. Bryukhin G.V. [Comparative Analysis of the Subpopulation Composition of Thymocytes and T Lymphocytes in Peripheral Blood of the Offspring of Female Rats with Experimental Chronic Liver Disease of Various Origins]. Immunologiya [Immunology], 2004, no. 2, pp. 83-86.

5. Bryukhin G.V., Sizonenko M.L. [The Role of Experimental Liver Injury the Mother in the Development of Physiological Immaturity Offspring]. Byulleten' eksperimental'noy biologii i meditsiny [Bulletin of Experimental Biology and Medicine], 2012, vol. 154, no. 11, pp. 544-547.

6. Vtorushina E.V., Bryukhin G.V. [Characteristics of Endocrine Ovarian Function Offspring of Female Rats with Experimental Chronic Liver Disease of Various Etiologies]. Problemy reproduktsii [Problems of Reproduction], 2008, no. 1, pp. 6-9.

7. Korzhevskiy D.E., Gilyarov A.V. Osnovy gistologicheskoy tekhniki [Basics of Histologic Techniques]. Moscow, SpetsLit Publ., 2010. 94 p.

8. Zapadnyuk I.P., Zapadnyuk V.I., Zakhariya E.A., Zapadnyuk B.V. Laboratornye zhivotnye. Raz-vedenie, soderzhanie, ispol'zovanie v eksperimente [Laboratory Animals. Breeding, Maintenance, Used in the Experiment]. Kiev, High School Publ., 1983. 383 p.

9. Lugovskaya S.A. [Structure and Function of Monocytes and Macrophages

10. Mazurov D.V., Dambaeva S.V., Pinegin B.V. [Evaluation of Intracellular Killing of Staphylo-

coccus Phagocytes of Peripheral Blood by Flow Cytometry], Immunologiya [Immunology], 2000, no. 2, pp. 57-59.

11. Mayanskiy A.N., Mayanskiy D.N. Ocherki o neytrofile i makrofage [Essays on Neutrophils and Macrophages]. Novosibirsk, Science Siberian Branch Publ., 1989. 341 p.

12. Nikolina O.V., Bryukhin G.V. [Morfofunktcionalnoe Formation of the Thyroid Gland of Female Rats with Chronic Liver Disease in the Early Postnatal Period]. K 100-letiyu so dnya rozhdeniya professora V.G. Eliseeva: sbornik [Collection of the 100th Anniversary of the Birth of Professor V.G. Yeliseyev], 1999, pp. 134-135.

13. Izmaylova T.D., Petrichuk S.V., Shishchenko V.M., Pisareva I.V. [From a Healthy Cell to a Healthy Body

14. Romanov B.K. [Drug Regulation of the Activity of Lysosomal Enzymes]. Rossiyskiy mediko-biologicheskiy vestnik imeni akademika I.P. Pavlova [Russian Biomedical Gazette Named After Academician I.P. Pavlova], 2003, no. 1-2, pp. 75-82.

15. Serysheva O.Yu., Bryukhin G.V. [Morphofunctional Characteristic of the Crypt Epithelium of the Duodenum in the Offspring of Female Rats with Experimental Liver]. Morfologiya [Morphology], 2013, vol. 144, no. 4, pp. 36-40.

16. Sizonenko M.L., Bryukhin G.V. [Effect of Chronic Liver Disease in the Mother's Endocrine Function of Male Gonads Offspring]. Problemy reproduktsii [Problems of Reproduction], 2008, no. 2, pp. 45-47.

17. Solyannikova D.R., Bryukhin G.V. [Feature Parafollicular Thyroid Cells the Offspring of Female Rats with Experimental Chronic Liver Disease in Different Periods of Postnatal Ontogenesis]. Morfologiya [Morphology], 2013, vol. 143, no. 2, pp. 47-50.

18. Vinogradova O.E., Kozinets G.I., Chernyak N.B. Stroenie i funktsii leykotsitov. Granulotsity. Rukovodstvo po gematologii [Structure and Function of Leukocyte. Granulocytes. Guide to Hematology]. Moscow, Medicine Publ., 1985. 288 p.

19. Fedosov A.A., Barysheva S.V. [The Nature of Population Changes of Peripheral Blood Lymphocytes in Experimental Lesions of the Hepatobiliary System of Different Etiology]. Aktual'nye problemy patofiziologii [Actual Problems of Pathophysiology], 2001, pp. 55-57.

20. Frimel' G. Immunologicheskie metody [Immunological Methods], Translated from the German. Moscow, Medicine Publ., 1987. 472 p.

21. Frolova O.E. [Morphofunctional Characteristic of Monocytes. The Value of the Study Nucleolar Apparatus

22. Kheyfets L.B., Abalakina V.A. [Separation of the Formed Elements of Human Blood by Density Gradient Ficoll-Verografin]. Laboratornoe Delo [Laboratory Work], 1973, no. 10, pp. 579-581.

23. Cheredeev A.N. [Quantitative and Functional Evaluation of T and B Immune Systems in Humans]. Obshchie voprosy patologii. Itogi nauki i tekhniki [General Questions Pathology. The Results of Science and Technology], 1976, vol. 4, pp. 124-160.

24. Shekhtman M.M. Rukovodstvo po ektragenital'noy patologii u beremennykh [Guide Ektrageni-talnoy Pathology in Pregnant]. Moscow, Triada-X Publ., 2011. 896 p.

Received 12 December 2015

ОБРАЗЕЦ ЦИТИРОВАНИЯ

FOR CITATION

Брюхин, Г.В. Морфофункциональная характеристика моноцитов периферической крови и их предшественников у потомства самок крыс с аутоиммунным поражением печени / Г.В. Брюхин, Т.М. Комарова // Человек. Спорт. Медицина. - 2016. - Т. 1, № 1. -С. 42-50. БО!: 10.14529/hsm160107

Bryukhin G.V., Komarova T.M. Morphofunctional Characterises of Periferal Blood Monocytes and Their Progenitors in Progeny of Female Rats with Autoimmune Liver Injury. Human. Sport. Medicine, 2016, vol. 1, no. 1, pp. 42-50. (in Russ.) DOI: 10.14529/hsm160107