ВЫРАЩЕННЫЕ В ПРИКРЕПЛЕННОЙ К СУБСТРАТУ КУЛЬТУРЕ КЛЕТКИ ИЗ ТКАНИ ПЛАЦЕНТЫ И ИХ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПРИ ЛЕЧЕНИИ

1. Способ культивирования выращенных в прикрепленной к субстрату культуре клеток из плаценты или жировой ткани, где способ включает культивирование выращенных в прикрепленной к субстрату культуре клеток из плаценты или жировой ткани в трехмерных (3D) условиях культивирования, которые обеспечивают возможность размножения клеток, причем указанные условия включают перфузию, где указанная перфузия регулируется в соответствии с концентрацией глюкозы культуральной среды.
2. Способ по п.1, где указанная культуральная среда меняется при указанной концентрации глюкозы примерно 550 мг/л.
3. Способ по п.1, где указанные 3D условия культивирования включают одно из:
(i) культивирования указанной популяции выращенных в прикрепленной к субстрату культуре клеток в биореакторе, имеющем цилиндрический уплотненный слой, и культуральная среда течет через уплотненный слой;
(ii) культивирования указанной популяции выращенных в прикрепленной к субстрату культуре клеток в фазе роста, поддерживая рабочий объем, по меньшей мере, на уровне примерно 1500 мл;
6
(iii) высевания клеток в концентрации высевания, по меньшей мере, примерно 0,1×10 клеток/мл; или
(iv) культивирования указанной популяции выращенных в прикрепленной к субстрату культуре клеток в биореакторе, имеющем носитель с массой, по меньшей мере, 30 г.
4. Способ по п.1, где указанные 3D условия культивирования
(a) включают 3D биореактор; и/или
(b) включают материал прикрепления, выбранный из группы, состоящей из стекла, пластика, полиэфира и полипропилена, полистирола, декстрана и коллагена; и/или
(c) осуществляются в течение, по меньшей мере, 3 дней.
5. Способ по п.1, где указанное культивирование указанных клеток осуществляется до тех пор, пока, по меньшей мере, 10% указанных клеток пролиферируют.
6. Популяция клеток, полученных по любому из пп.1-5.
7. Популяция клеток по п.6, где, по меньшей мере, 10% указанных выращенных в прикрепленной к субстрату культуре клеток находятся на пролиферативной фазе.
8. Популяция клеток по п.6, где указанные выращенные в прикрепленной к субстрату культуре клетки способны подавлять иммунную реакцию.
9. Популяция клеток по п.6, где указанные выращенные в прикрепленной к субстрату культуре клетки содержат:
(a) положительный маркер экспрессии, выбранный из группы, состоящей из CD73, CD90, CD29, CD105 и D7-fib; и/или
(b) отрицательный маркер экспрессии, выбранный из группы, состоящей из CD11b, CD34, HLA-DR, CD14, CD19, CD45, CD31, CD200 и KDR.
10. Популяция клеток по п.6, где указанные выращенные в прикрепленной к субстрату культуре клетки имеют профиль экспрессии генов, по существу, как описано в настоящей заявке.
11. Популяция клеток по п.6, где указанные выращенные в прикрепленной к субстрату культуре клетки:
(a) меньше склонны к остеогенной линии дифференциации, по сравнению с выращенными в прикрепленной к субстрату культуре клетками из костного мозга, которым предоставлена возможность дифференциации в таких же условиях; или
(b) меньше склонны к адипогенной линии дифференциации, по сравнению с выращенными в прикрепленной к субстрату культуре клетками из костного мозга, которым предоставлена возможность дифференциации в таких же условиях.
12. Популяция клеток, имеющая профиль экспрессии генов, по существу, как описано в настоящей заявке в таблице 2.
13. Популяция клеток по любому из пп.1-12 для применения с целью лечения состояния, на которое может оказать благоприятное воздействие трансплантация клеток или органов.
14. Популяция клеток по п.13, где состояние выбрано из группы, состоящей из ишемии, заболеваний периферических артерий (PAD), критической ишемии конечностей (CLI), ишемии нижних конечностей, ишемических сосудистых заболеваний, сосудистых заболеваний почек, ишемической болезни сердца, ишемии миокарда, коронарной болезни сердца (CAD), атеросклеротических сердечнососудистых заболеваний, поражения основного ствола левой коронарной артерии, артериального окклюзионного поражения, периферической ишемии, заболеваний периферических сосудов, артериосклероза, ишемических заболеваний мозга, инсульта, церебральной ишемии, церебральных сосудистых заболеваний, ретинопатии, восстановления сетчатки, расстройства тканевой перестройки, синдрома фон Гиппеля-Линдау, наследственной геморрагической телеангиэктазии, ишемических сосудистых заболеваний, болезни Бюргера, ишемического почечного заболевания, ишемии плаценты, расстройств, связанных с репродукцией, болезни трансплантат против хозяина, трансплантации солидных органов, трансплантации гематопоэтических стволовых клеток, сахарного диабета, повреждения соединительной ткани, злокачественных новообразований, предраковых заболеваний, злокачественного поражения костей, остеосаркомы, костных метастазов, переломов костей, ожоговых ран, дефекта суставной хрящевой ткани, заживления ран, глубоких ран, задержки заживления ран, задержки заживления язв, подхрящевой костной кисты, остеопороза, остеоартрита, дегенерации кости, повреждения хрящевой ткани, дефекта суставной хрящевой ткани, травм сухожилий, аутоиммунных заболеваний и воспалительных заболеваний.
15. Популяция клеток по п.13, где состояние выбрано из группы, состоящей из воспалительного кишечного заболевания (IBD) и болезни Крона.
16. Выращенные в прикрепленной к субстрату культуре клетки по пп.1-12 для индукции толерантности и/или иммуносуппрессии у нуждающегося в них индивида.