СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ГОДНОСТИ КОНСЕРВИРОВАННОЙ ЭРИТРОЦИТАРНОЙ МАССЫ К ТРАНСФУЗИИ
METHOD FOR DETERMINING SUITABILITY OF PRESERVED PACKED RED CELLS FOR TRANSFUSION

Изобретение относится к физико-химическим способам исследования биологического материала и может быть использовано в трансфузиологии для определения годности и/или готовности консервированной эритроцитарной массы к переливанию.
В основе патологических изменений, возникающих при анемиях тяжелой степени у больных в критических состояниях важную роль играют расстройства доставки и элиминации кислорода и углекислого газа тканями, которые, согласно литературным данным, развиваются зачастую на фоне значимых нарушений микроциркуляции, активации процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ), повышения активности факторов эндогенной интоксикации (СЭИ) и существенно влияют на результат интенсивной терапии (Акулов М.С., Максимов Г.А., Левин В.В. Стандарт проведения инфузионно-трансфузионной терапии и анестезии при геморрагическом шоке // Вестник интенсивной терапии. 2005. - №5. - С.6-8). Общепринятым методом коррекции анемии тяжелой степени в данной ситуации принято считать трансфузию эритроцитарной массы в необходимом количестве (Клигуненко Е.Н., Кравец О.В. Интенсивная терапия кровопотери. М.: МЕДпресс-информ, 2005. - 27 с).
Вместе с тем, эритроцитарная масса значительных сроков хранения, по мнению большинства авторов, содержит незначительное количество функционально и морфологически полноценных эритроцитов (Полушин Ю.С. Гемотрасфузии - анестезиолого-реаниматологический взгляд на проблему // Эфферентная терапия. 2004. - №3. - С.76-86., Гаврилин С.В., Герасимов Г.Л., Бояринцев В.В. Некоторые спорные вопросы трансфузионной терапии у раненых и пострадавших // Анестезиология и реаниматология. - 2005. - №4. С.40-42).
Переливание такой трансфузионной среды приводит лишь к дополнительному слалжированию и тромбированию микроциркуляторного русла, и ухудшению тем самым скомпрометированной основным патологическим процессом газотранспортной функции крови.
Все вышесказанное говорит об актуальности разработки способа определения годности эритроцитарной массы при планировании гемотрансфузии.
Известен способ предтрансфузионной обработки консервированной эритроцитарной массы (РФ патент №2133613, публ. 27.07.1999 г., МПК А61К 35/14). Известный способ заключается в том, что проводят перфузию эритроцитов через колонку с сорбентом, при этом во время трансфузии эритроциты общепринятых сроков хранения дополнительно облучают светом гелий-неонового лазера.
По мнению авторов предложенный ими способ предтрансфузионной обработки консервированной эритроцитарной массы позволяет значительно улучшить физико-химические свойства эритроцитов, приблизив их значения к показателям свежезаготовленной крови.
Однако известный способ не содержит конкретных критериев, которые бы говорили о готовности консервированной эритроцитарной массы к гемотрансуфузии, то есть отсутствуют критерии, которые бы отражали способность эритроцитарной массы к выполнению своей главной газотранспортной функции. Кроме того, известный способ предполагает использование специального оборудования (перфузионного насоса, комплектов кровяных магистралей), дорогостоящих гемосорбентов и обученного медицинского персонала, что значительно удорожает проведение гемотрансфузии.
За прототип предлагаемого изобретения выбран известный способ определения годности консервированной эритроцитарной массы, включающий контроль за показателями эритроцитарной массы (см. Инструкция по заготовке и консервированию донорской крови (Утв. Минздравом РФ 29.05.1995).
Известный способ заключается в том, что определяют концентрацию свободного гемоглобина в супернатанте эритроцитарной массы после центрифугирования. Повышение уровня свободного гемоглобина в эритроцитарной массе и степени гемолиза по международным стандартам не должен превышать 0,8%.
Однако недостатком известного способа является отсутствие связи измеряемого показателя с газотранспортной функцией эритроцитарной массы, а также низкая корреляционная связь измеряемых показателей с выраженностью анизоцитоза эритроцитов изучаемой эритроцитарной массы, а именно с частотой встречаемости морфологически и функционально патологических форм. Кроме этого в результате увеличения порозности эритроцитной мембраны и снижения активности ферментов, ответственных за транспорт катионов, во внеклеточной среде увеличивается концентрация калия, а натрий медленно поступает в клетку. К концу допустимого срока хранения уровень калия в плазме может увеличиваться в 3-4 раза и более, что также рассматривается как критерий допустимости трансфузии (Приказ Минздрава РФ от 25 ноября 2002 г. N363 "Об утверждении инструкции по применению компонентов крови")
Задачей предлагаемого изобретения повышение точности определения годности консервированной эритроцитарной массы к трансфузии.
Поставленная задача решается тем, что в известном способе определения годности консервированной эритроцитарной массы к трасфузии, включающем контроль за показателями эритроцитарной массы, перед трансфузией 2 мл пробы консервированной эритроцитарной массы смешивают с 2 мл озонированного 0,9% раствора натрия хлорида с концентрацией озона 2 мг/л, через 15 минут экспозиции в полученной эритроцитарной взвеси определяют концентрацию 2,3 дифосфоглицерата и при концентрации 2,3 дифосфоглицерата в эритроцитарной взвеси выше 6 мкмоль/л оценивают консервированную эритроцитарную массу годной к проведению гемотрансфузии.
Предлагаемое изобретение отвечает критериям изобретения «новизна» и «изобретательский уровень», так как в процессе проведения патентно-информационных исследований не выявлено источников патентной и научно-медицинской информации, которые бы порочили новизну предлагаемого изобретения, равно как и технических решений с существенными признаками предлагаемого способа.
Предлагаемый способ позволяет при использовании получить следующий технический эффект.
Предлагаемый способ повышает точность оценки годности и, или готовности эритроцитарной массы к гемотрансфузии, так как концентрации 2,3 дифосфоглицерата является высоко специфическим критерием характеризующим сохранность газотранспортной функции переливаемых эритроцитов. Основным преимуществом использования эритроцитарной массы с предтрансфузионным уровнем 2,3 дифосфоглицерата выше 6 мкмоль/л является повышение эффективности терапии анемии, включающей более высокую скорость и устойчивость коррекции процессов гемического газотранспорта, клинически проявляющееся в более значимом снижении сроков госпитализации пациентов в ОРиТ. Исключение из трансфузионного плана сред с предтрансфузионным уровнем 2,3 дифосфоглицерата ниже 6 мкмоль/л позволяет избежать переливания функционально индефирентных и насыщенных патологическими формами эритроцитов и их дериватов.
Способ не требует специальной подготовки больного, специального дорогостоящего оборудования и имеет сравнительно низкую себестоимость.
Способ является промышленно применимым, т.к. может быть использован в лечебных учреждениях общего профиля свидетельствует о высокой эффективности планируемой гемотрансфузии с значимым улучшением показателей доставки и потребления кислорода у больных с анемией тяжелой степени. Изобретение направлено на повышение эффективности трансфузионной терапии у больных с анемией тяжелой степени, уменьшение сроков пребывания в отделение реанимации, объема переливаемых трансфузионных сред.
Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.
2 мл пробы консервированной крови перед трансфузией смешивают с 2 мл озонированного 0,9% раствора натрия хлорида с концентрацией озона 2 мг/л. Через 15 минут экспозиции в полученной эритроцитарной взвеси определяют концентрацию 2,3 дифосфоглицерата. При концентрации 2,3 дифосфоглицерата в эритроцитарной взвеси выше 6 мкмоль/л свидетельствует о годности консервированной крови к проведению гемотрансфузии.
Пример конкретного исполнения дан в виде протоколов исследований консервированной крови.
Протокол №1. Эритроцитарная масса О (I) Rh +, хранившаяся 21 день, со сроком годности 35 суток консервированная гемоконсервантом ЦФДА -1 обработана озонированным физиологическим раствором по предлагаемой методике. В ходе исследования концентрации 2,3 - ДФГ в изучаемых эритроцитах инициированная озоном концентрация составила 6,1 мкмоль/л. Гемотрансфузия пациенту с постгеморрагической анемией тяжелой степени привела к достоверному росту показателя доставки кислорода на 14,1%.
Протокол №2. Эритроцитарная масса О (I) Rh -, хранившаяся 24 дня, со сроком годности 35 суток консервированная гемоконсервантом ЦФДА -1 обработана озонированным физиологическим раствором по предлагаемой методике. В ходе исследования концентрации 2,3 - ДФГ в изучаемых эритроцитах инициированная озоном концентрация составила 4,7 мкмоль/л. Гемотрансфузия пациенту с постгеморрагической анемией тяжелой степени не привела к достоверному росту показателя доставки кислорода и спустя 12 часов после гемотрансфузии способствовала снижению данного показателя относительно исходного уровня на 7,1%.