Многопараметрический анализ иммунологических показателей, ассоциированных с тяжестью туберкулеза легких

«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017

Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya

заболевания. Формирование эффективного противотуберкулезного иммунного ответа сопряжено с формированием иммунных комплексов, содержащих исключительно IgG3. Наличие иммунных комплексов, состоящих в основном из IgE, могут способствовать прогрессирова-нию болезни.

Цель. Определение уровня и изотипа иммуноглобулинов IgG и IgE у больных туберкулезом легких.

Материалы и методы. За период с 2015-2016 гг. на базе ФГБУ «СПбНИИФ» Министерства здравоохранения РФ обследовано 50 больных туберкулезом легких с бакте-риовыделением. Комплекс диагностики включал оценку клинической симптоматики, рентгенологические и бактериологические методы. Определение иммунных комплексов, содержащих IgE, IgG3, IgG1, IgG1 + IgG3, IgG1 + IgE (с помощью метода динамического светорассеяния). Обработка материала проводилась с использованием программы Statistica 7.0. Мы применили критерий хи-квадрат (х2). Различия считались достоверными при р < 0,05.

Результаты. Иммунные комплексы определялись у всех пациентов в рассеивании 7,25±0,34%, так же как IgG1 - 4,3±0,25% и IgE - 3,48%, в 98% (49/50) были IgG3 — 3,2%±0,37%. Фракции иммуноглобулинов G и E имели место в 88,0% (44\50) IgG1 + IgG3 — 3,76% и несколько реже в 74,0% (37/50) IgG1 + E — 5,71%, тогда как имели место только в 30,0% (15/50) IgG3 + IgE — 2,09.

Заключение. Определение в одинаковом проценте случаев IgG1 и IgG3 (100%), также как IgE (100%) может свидетельствовать о полноправном запуске аллергической реакции при туберкулезе, что может объяснять появление в IgG1 + E и IgG3 + E комплексов. Полученные данные могут объяснять запуск иного механизма, нежели только инфекционный, в развитии туберкулеза.

МНОГОПАРАМЕТРИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ, АССОЦИИРОВАННЫХ С ТЯЖЕСТЬЮ ТУБЕРКУЛЕЗА ЛЕГКИХ

Никитина И.Ю.1, Пантелеев А.В.1, Ганусов В.В.2, Лядова И.В.1

1ФГБНУ «Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза», Москва, Россия 2 Университет Теннесси, Ноксвилл, Теннесси, США

Исследования в области иммунопатогенеза туберкулеза (ТБ) являются актуальными и направлены на выяснение роли различных популяций клеток врожденного и адаптивного иммунитета в развитии противотуберкулезного ответа. Изменения соотношения между различными параметрами иммунного ответа являются факторами, влияющими на течение инфекции, и могут быть использованы для оценки активности ТБ и эффектности проводимой терапии.

В связи с этим целью исследования явился многопараметрический анализ различных популяций иммунных клеток и анализ их взаимосвязи с особенностями течения ТБ.

Материалы и методы. В исследование было включено 50 больных ТБ легких. С помощью проточной цито-метрии были получены данные о 54 иммунологических показателях: Т- и B-лимфоцитах (CD4+, CD8+, CD19+), NK-клеток (CD16/56+); лимфоцитах CD4, продуцирующих различные комбинации цитокинов IFNy, TNFa и IL-2 и других. Тяжесть ТБ определяли, оценивая фор-

му легочной патологии, уровень бактериовыделения, степень распространенности и деструкции в легких и тяжесть интоксикации.

Для статистического анализа применяли корреляционный метод, кластерный анализ, множественную линейную регрессию. Точность статистических результатов подтверждали, используя метод «ресемплинга» данных и проверки статистических гипотез на 1000 псевдовыборках (метод "bootstrapping").

Результаты. Корреляционный анализ с критическим уровнем p-value = 0,006 выявил, что основными иммунологическими коррелятами клинических параметров были популяции лейкоцитов. В частности, процент лимфоцитов обратно коррелировал со всеми клиническими проявлениями ТБ, кроме формы легочной патологии. Наиболее достоверными были прямые корреляции между процентом нейтрофилов, степенью деструкции в легких и уровнем бактериовыделения (p = 2 х 10-5 и p = 0,01 соответственно). Кластерный анализ с использованием метода "bootstrapping" подтвердил, что ассоциации между популяцией нейтрофилов, степенью деструкции легочной ткани и уровнем бактериовыделения сохраняются в псевдовыборках (70 и 50% соответственно). Множественная регрессия показала, что одним из основных факторов, влияющих на изменение числа нейтрофилов в крови является степень деструкции в легких.

Заключение. Тяжесть ТБ не определяется недостаточностью «протективного» иммунного ответа лимфоцитов Th1, а возможно зависит от патологической иммуноре-активности организма, ассоциированной с повышенным содержанием популяций нейтрофилов.

Работа поддержана грантом РНФ № 15-15-00136.

ПОПУЛЯЦИИ ЛИМФОЦИТОВ Th1, Th17, Th1/Th17 ПРИ ТУБЕРКУЛЕЗЕ ЛЕГКИХ

Пантелеев А.В., Никитина И.Ю., Горелова Л.А., Космиади Г.А., Лядова И.В.

ФГБНУ«Центральный научно-исследовательский институт туберкулеза», Москва, Россия

Введение. Протекция против туберкулеза (ТБ) была первоначально ассоциирована с генерацией лимфоцитов Th1 и продукцией ими IFNy. Более поздние исследования показали вклад других популяций Т-лимфоцитов и продуцируемых ими цитокинов в контроль над микобактери-ями (Mtb), в частности — лимфоцитов Th17 и IL-17. При этом некоторые исследования поставили под вопрос роль и механизмы протективной активности лимфоцитов Th1 при ТБ, а при ряде других патологий были описаны популяции клеток, коэкспрессирующих цитокины типа 1 и IL-17, а также рецепторы, характерные для популяций Th1 и Th17. Роль и относительный вклад этих популяций в противотуберкулезный иммунный ответ и патологию при ТБ остается не до конца установленной.

Цель. Фенотипическая и функциональная характеристика лимфоцитов Th1, Th17 и Th1/Th17 и анализ количественных параметров их ответа при туберкулезе легких у людей.

Материалы и методы. В исследование были включены больные ТБ легких, проходящие лечение в ФГБНУ «ЦНИИТ», здоровые люди, находящиеся в контакте с больными ТБ, здоровые доноры, не имеющие установленных контактов с больными ТБ. Клетки крови стимулировали антигенами Mtb и с помощью проточной