СПОСОБ ПРОГНОЗИРОВАНИЯ БЕСПЛОДИЯ У ЖЕНЩИН С ГИПОТАЛАМИЧЕСКИМ СИНДРОМОМ
METHOD FOR INFERTILITY PREDICTION IN FEMALES WITH HYPOTHALAMIC SYNDROME

Изобретение относится к клинической медицине, в частности к специальности акушерство и гинекология, и касается поиска новых возможностей прогнозирования бесплодия у женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом и индексом массы тела больше или равно 30.
В настоящее время одним из главных факторов, ведущих к снижению рождаемости, является ухудшение репродуктивного здоровья женщин. Бесплодие представляет собой важнейшую медико-социальную проблему не только в России, но и в странах Европы и Америки. В последние годы наблюдается неуклонный рост нейроэндокринной патологии. До 18-25% женщин репродуктивного возраста страдают гипоталамическим синдромом. В большинстве случаев, без лечения, гипоталамический синдром трансформируется в нейроэндокринный синдром, на фоне которого у 25-72% женщин развивается бесплодие (Кулаков В.И., Прилепская В.Н., Радзинский В.Е. // Руководство по амбулаторно-поликлинической помощи в акушерстве и гинекологии. М.: ГЭОТАР-Медиа, - 2007. - С. 849-855). В связи с этим, необходим поиск новых методов прогнозирования нарушений репродуктивной функции при гипоталамическом синдроме у женщин.
Известен «Способ прогнозирования развития репродуктивных нарушений» (Патент РФ №2495431, опубликован 10.10.2013 г), отличающийся тем, что у женщин исследуется цервикальное отделяемое на десятый день менструального цикла, в качестве параметров определяют уровни интерлейкина 1 бета и интерферона гамма одновременно. При содержании интерлейкина 1 бета больше 38,8±3,8 пг/мл и одновременном содержании интерферона гамма больше 8,1±0,5 пг/мл прогнозируют формирование репродуктивных нарушений.
Недостатком способа является то, что исследование проводится у женщин, имеющих инфекции, передающиеся половым путем, что уже подразумевает наличие воспалительного процесса на уровне цервикального канала, а для характеристики локального иммунитета при воспалительном процессе использованы интерлейкин 1 бета и интерферон гамма, подчеркивающие инфекционную природу нарушений репродуктивной функции.
Известен способ прогнозирования репродуктивной функции у девочек с гипоталамическим синдромом пубертатного периода (Патент РФ №2438136, опубликован 27.12.2011 г.). Сущность способа заключается в том, что до и после лечения в менструальной крови определяют уровень гликоделина. При значении гликоделина 11,12 нг/мл и более после лечения патогенетическую терапию оценивают как эффективную.
Недостатком способа является то, что маркер, используемый для прогнозирования, является маркером белковообразовательной функции эндометрия и не отражает состояние клеточного иммунитета в эндометрии. Кроме того, исследование проводится в менструальной крови.
Известен способ прогнозирования репродуктивных нарушений у женщин с избыточной массой тела и ожирением (Патент РФ №2617491, опубликован 25.04.2017 г). Сущность предлагаемого способа заключается в том, что раннее прогнозирование достигается за счет определения активности NF-kB в аспирате из полости матки, при неблагоприятном прогнозе на беременность - NF-kB>6,86 пг/мл.
Недостатком данного способа является то, что определяются модулирующие процессы апоптоза, ангиогенеза, дифференцировки и пролиферации на уровне эндометрия, но не отражает состояние клеточного иммунитета.
Известен способ прогнозирования наступления беременности у женщин с трубно-перитонеальным бесплодием в программе экстракорпорального оплодотворения /Патент РФ 2523401 Опубликован 20.07.2014 г/
Сущность способа заключается в том, что перед программой ЭКО у пациентки в лютеиновую фазу цикла проводят биопсию эндометрия и определяют относительное содержание CD95+макрофагов в лейкоцитарном инфильтрате эндометрия. При значении относительного содержания CD95+макрофагов, равном 48,8% или более, прогнозируют наступление беременности, а при значении менее 48,8% - отсутствие наступления беременности.
Недостатком данного способа является то, что определяются только CD95+макрофаги в биоптате эндометрия и в программе ЭКО, без возможности естесственного наступления беременности. Отсутствует комплексная оценка состояния иммунитета на системном и локальном уровнях.
Известны способы прогнозирования и механизмы развития бесплодия у женщин: Кулаков В.И., Прилепская В.Н., Радзинский В.Е. // Руководство по амбулаторно-поликлинической помощи в акушерстве и гинекологии. М.: ГЭОТАР-Медиа, - 2007. - С. 849-855/ Крутова В.А., Б.Г. Ермошенко A.M. Чулкова, Возможности прогнозирования развития женского бесплодия // Кубанский научный медицинский вестник - 2009 - №9(114) - С. 73-80/. Жуковец И.В., Лещенко О.Я., Аталян А.В. Основные механизмы первичного бесплодия у женщин репродуктивного возраста с гипоталамической дисфункцией в пубертатном периоде Acta Biomedica scietifica - 2017, - Том 2, - № 5, Часть 1. - С. 15-19/;
Недостатком этих исследований является то, что они не отражают со стояние иммунных реакций на системном уровне и локальном уровнях в организме женщин при репродуктивных нарушениях.
Известен способ прогнозирования репродуктивных нарушений у женщин репродуктивного возраста с дисфункцией гипоталамуса /Патент РФ №2617247, опубликован 24.04.2017/. Сущность метода заключается в том, что раннее прогнозирование достигается за счет одновременного оценивания про- и противовоспалительных цитокинов (TNF-α и IL-10) в аспирате из полости матки. При неблагоприятном прогнозе на беременность TNF-α>20,2 пг/мл, IL-10<4,78 пг/мл, при неблагоприятном прогнозе на вынашивание беременности при TNF-α>18,9-20,1 пг/мл, IL-10<6,06-4,79 пг/мл.
Недостатком данного способа является определение одного про- и одного противовоспалительных интерлейкинов на локальном уровне, на 21 день менструального цикла, что не позволяет провести комплексную оценку всех звеньев иммунитета, как на локальном, так и на системном уровне и своевременно (с началом менструального цикла) провести лечебно-профилактические мероприятия до этапа планирования беременности.
Известно, что нормальное развитие и функционирование репродуктивной системы осуществляются при тесном взаимодействии иммунной и эндокринной систем. Нарушения иммунной системы сопряжены с дисфункцией репродуктивного процесса. Клетки иммунной системы участвуют в регуляции фолликулогенеза, овуляции, в формировании и регрессе желтого тела. При нарушении продукции эстрогенов в организме женщины регистрируется повышение количества CD8-лимфоцитов и низкий CD4/CD8 Роль иммунных факторов в функционировании репродуктивной системы женщин / Н.О. Мотовилова, И.Ю. Коган, Арег А. Тотолян // Уральский медицинский журнал. - 2010. - №4. - С. 117-121). Имеются сведения о том, что эстрадиол и прогестерон регулируют активность цитолитических Т-клеток (CD3, CD8), снижение которой отмечается в течение секреторной фазы. Было доказано, что иммунные клетки присутствуют повсюду в репродуктивносм тракте, а количество макрофагов, В- и Т-клеток, находящихся в эндометрии меняется в течение менструального цикла (Гадиева Ф.Г. Взаимосвязь иммунной и эндокринной систем у женщин репродуктивного возраста // Акушерство и гинекология - 2001. - №1. - С. 11-13).
Предлагаемое изобретение направлено на более раннее прогнозирование бесплодия у женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом.
+
-
+
+
+
+
-
+
-
+
+
+
+
+
-
9
+
+
9
+
+
9
-
+
9
-
+
+
9
+
+
+
-
9
+
+
9
+
+
9
-
+
9
-
+
+
9
+
+
+
-
9
+
+
9
+
+
9
-
+
9
-
-
+
9
+
-
+
-
9
+
+
9
+
+
9
-
+
9
-
-
+
9
+
+
Технический результат достигается тем, что в периферической крови и аспирате из полости матки у женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом и индексом массы тела больше или равном 30 определяют показатели субпопуляций лимфоцитов CD3CD19, CD3CD4, CD3CD8, CD3CD19, CD3CD(1656) и иммунорегуляторный индекс - CD4/CD8 в зависимости от дня менструального цикла, а именно на 5 и 21 день, и при показателях субпопуляций лимфоцитов на 5-й день менструального цикла в периферической крови CD3CD19 от 1,08 до 1,19×10/л, CD3CD4 от 0,51 до 0,55×10/л, CD3CD8 от 0,35 до 0,40×10/л, CD3CD19 от 0,38 до 0,47×10/л, CD3CD(1656) от 0,37 до 0,43×10/л иммунорегуляторный индекс - CD4/CD8 - 1,45-1,37, на 21 день менструального цикла в периферической крови CD3CD19 от 1,20 до 1,51×10/л, CD3CD4 от 0,56 до 0,65×10/л, CD3CD8 от 0,41 до 0,45×10/л, CD3CD19 от 0,38 до 0,46×10/л, CD3CD(1656) от 0,38 до 0,44×10/л иммунорегуляторный индекс - CD4/CD8 - 1,36-1,22, в аспирате эндометрия на 5 день менструального цикла CD3CD19 от 1,1 до 1,22×10/л, CD3CD4 от 0,54 до 0,58×10/л, CD3CD8 от 0,36 до 0,42×10/л, CD3CD19 от 0,40 до 0,49×10/л, CD3CD(1656) от 0,45 до 0,54×10/л, иммунорегуляторный индекс - CD4/CD8 - 1,59-1,21, на 21 день менструального цикла в аспирате эндометрия CD3CD19 от 1,22 до 1,53×10/л, CD3CD4 от 0,54 до 0,57×10/л, CD3CD8 от 0,43 до 0,47×10/л, CD3CD19 от 0,49 до 0,55×10/л, CD3CD(1656) от 0,39 до 0,46×10/л иммунорегуляторный индекс - CD4/CD8 - 1,34-1,42 прогнозируют бесплодие у женщин с гипоталамическим синдромом.
+
+
+
+
+
+
Для оценки клеточного звена иммунитета на системном уровне проводится определение субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови CD3, CD4, CD8, CD16, CD19, CD56. Для этого осуществляли забор крови из вены с помощью одноразового шприца в 2 пробирки объемом 10 мл в сухую стерильную и в стерильную пробирку, содержащую гепарин в конечной концентрации 25 ЕД в 1 мл крови на 5-й и 21-й день менструального цикла. Периферическую кровь из вены для брали натощак от 8 до 10 часов утра. В течение 1,5 часа при температуре 37С биологический материал доставляли в лабораторию.
Цельную кровь окрашивали 30 мин. в темноте с помощью моноклональных антител CD3, CD4, CD8, CD(16+56), CD19, меченых флюорохромами FITC, РЕ и PerCP/Cy5 (Becton Dickinson, DAKO) для выявления иммунокомпетентных клеток. Дтя определения целевых популяций клеток были использованы следующие сочетания моноклональных антител.
1) Периферическая кровь:
• TgG1/IgG2a/CD45 - для контроля неспецифического связывания лимфоцитов с античеловеческими антителами и выделения лимфоцитов;
-
+
+
-
• CD3/CD19/CD45 - для определения относительного содержания В-лимфоцитов [CD3CD19] и Т-лимоцитов [CD3CD19];
+
+
• CD3/CD4/CD45 - для определения относительного количества Т-хелперов [CD3CD4];
+
+
• CD3/CD8/CD45 - для определения относительного количества цитсггоксических Т-лимфоцитов [CD3CD8];
-
+
• CD3/CD(16+56)/CD45 - для определения относительного количества натуральных киллеров [CD3CD(16+56)].
После окрашивания образцов периферической крови производили лизис эритроцитов с использованием гипотонического лизирующего раствора (DAKO Easy Lyse). Для этого в каждую пробирку вносилось по 700 мкл готового раствора, тщательно перемешивали и инкубировали 10-12 мин. в темноте при комнатной температуре. Затем окрашенные мононуклеарные клетки отмывали от лизированных эритроцитов и несвязавшихся антител двумя последовательными центрифугированиями с раствором Хенкса в течение 5 мин. при 300 г (1000 об./мин.). Результаты учитывали на проточном цитофлюориметре ««Epics» фирмы «Beckman Coulter» (США), используя стандартные протоколы. Кроме того, вычисляли иммунорегуляторный индекс (IRI, CD4+/CD8+). Исследования проводили в течение 6 часов после взятия крови.
Оценка состояния местного клеточного иммунитета пациенткам с гипоталамическим синдромом и индексом массы тела больше или равном 30 осуществлялась в ткани эндометрия с последующим иммуногистохимическим исследованием. Ткань эндометрия получали на 5 и 21 день менструального цикла методом аспирационной биопсии с использованием Pipel (C.C.D., Франция). До 3 мл полученной ткани помещали в пробирку с 100 ЕД гепарина натрия в фосфатно-солевом буфере (ФСБ). Аспират последовательно механически измельчали и гомогенизировали путем пропускания через шприцы с уменьшающимся объемом с иглами меньшего диаметра. Затем из полученного гомогената эндометрия выделялась фракция мононуклеаров: гомогенат аккуратно наслаивался на 2 мл Ficoll-Paque, Amersham, (1,077 г/л), а затем центрифугировался 40 мин. при 450 г (1500 об./мин.). После центрифугирования в градиенте плотности опалесцирующее кольцо мононуклеаров аккуратно с помощью дозатора переносили в сухую чистую пробирку и дополнительно промывали ФСБ (центрифугирование 15 мин. при 450 г (1500 об./мин.). Мононуклеары эндометрия окрашивали 30 мин. в темноте с помощью моноклональных антител CD3, CD4, CD8, CD(16+56), CD19, CD45, меченых флюорохромами FITC, РЕ и PerCP/Cy5 (Becton Dickinson, DAKO) для выявления иммунокомпетентных клеток. Для определения целевых популяций клеток были использованы следующие сочетания моноклональных антител:
2) Аспират эндометрия:
- IgG1/IgG2a/CD45 - для контроля неспецифического связывания лимфоцитов с античеловеческими антителами и выделения лимфоцитов;
+
+
- CD3/CD4/CD45 - для определения относительного количества Т-хелперов [CD3CD4];
+
+
- CD3/CD8/CD45 - для определения относительного количества цитотоксических Т-лимфоцитов [CD3CD8];
-
+
+
-
• CD3/CD19/CD45 - для определения относительного содержания В-лимфоцитов [CD3CD19] и Т-лимоцитов [CD3CD19];
+
+
-
+
+
-
-
+
- CD3/CD(1656)/CD45. - для определения относительного количества натуральных киллеров [CD3CD(1656)], [CD3CD(1656)];
+
+
Результаты учитывали на проточном цитофлюориметре «Epics» фирмы «Beckman Coulter». (США), используя стандартные протоколы. Кроме того, вычисляли иммунорегуляторный индекс (IRI, CD4/CD8).
Этот способ позволяет прогнозировать бесплодие до планирования беременности и своевременно провести коррекцию выявленных нарушений. Также предложенный способ обеспечивает возможность скринингового обследования пациенток с гипоталамическим синдромом и индексом массы тела равном 30 и более, а именно прогнозировать репродуктивные нарушения, своевременно проводить коррекцию, что позволит оценить риск, ускорить реализацию генеративной функции и уменьшить материальные затраты на терапию.
Новыми признаками заявленного способа являются:
- прогнозирование бесплодия до планирования беременности;
- оценка субпопуляционного состава лимфоцитов в эндометрии (местный уровень) и периферической крови (системный уровень) одновременно;
- определение клеточного звена иммунитета на системном и местном уровнях путем определения субпопуляционного состава лимфоцитов проводится на 5 и 21 день цикла;
- определение клеточного звена иммунитета на системном и местном уровнях путем определения субпопуляционного состава лимфоцитов проводится у пациенток с гипоталамическим синдромом и индексом массы тела больше или равно 30;
- в качестве биологического материала используется венозная кровь (системный уровень регуляции иммунитета) и ткань эндометрия (местный уровень регуляции иммунитета).
+
+
+
+
+
+
В основе предложенного способа находится новое направление, полученное путем лабораторного исследования изменения содержания показателей клеточного иммунитета на системном и местном уровнях, а именно определение субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови CD3, CD4, CD8, CD16, CD19, CD56 у женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом индексом массы тела больше или равно 30 на 5 и 21 день менструального цикла по сравнению с женщинами репродуктивного возраста не имевшими нарушений в гипоталамо-гипофизарной системе (условно здоровыми).
+
-
+
+
+
+
-
+
-
+
+
+
-
+
+
+
+
-
+
-
-
+
-
-
+
+
+
+
+
Впервые обнаружено, что у женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом в периферической крови, на 5-й день менструального цикла, отмечается повышение субпопуляций лимфоцитов CD3CD19, CD3CD4, CD3CD8, CD3CD19, CD3CD(1656) в периферической крови на 5-й и 21-й день цикла, причем увеличение показателей происходит к 21 дню менструального цикла. Кроме того, с увеличением веса пациенток возрастают и концентрации субпопуляций указанных лимфоцитов в крови. В эндометрии тенденция к увеличению субпопуляций лимфоцитов CD3CD19, CD3CD4, CD3CD8, CD3CD19, CD3CD(1656). В наибольшей степени увеличиваются NK-клетки (CD3CD(1656) в эндометрии, незначительно уменьшаются CD3CD4, на фоне повышения CD3CD8.
Исследование проведено у 64 женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом и 30 условно здоровых женщин с 2010 г по 2017 г на базе женской консультации и женской консультации №1 ГБУЗ АО «Городская поликлиника №8 им. Н.И. Пирогова».
+
-
+
+
-
+
-
-
+
-
-
+
При оценке уровней провоспалительных цитокинов на 5-й день менструального цикла в периферической крови и аспирате эндометрия отмечается достоверное повышение CD3CD19 по отношению к контролю (р<0,05), также CD3CD4 (p<0,01), CD3CD19 (р<0,01), CD3CD(1656) (р<0,05). Уровень CD3CD(1656) в эндометрии достоверно повышался по отношению к контролю (р<0,05). Описанная тенденция отражена в таблице 1, 2, 3 и рис., где:
Фиг. 1 Динамика субпопуляции лимфоцитов в периферической крови при гипоталамическом синдроме у женщин на 5-й день менструального цикла;
Фиг. 2 Динамика субпопуляции лимфоцитов в периферической крови при гипоталамическом синдроме у женщин на 21-й день менструального цикла;
Фиг. 3 Динамика субпопуляции лимфоцитов в аспирате из полости матки при гипоталамическом синдроме у женщин на 5-й день менструального цикла
Фиг. 4 Динамика субпопуляции лимфоцитов в аспирате из полости матки при гипоталамическом синдроме у женщин на 21-й день менструального цикла
Примеры из практики:
Пример 1.
Пациентка К., 25 лет,
Жалобы на момент обследования: на нерегулярные менструации, отсутствие беременности в течение 3-х лет при регулярной половой жизни без контрацепции,
В анамнезе: менструации с 12 лет, по 4-6 дней, через 30-35 дней, с 15 лет - через 50-65 дней, нерегулярные. В репродуктивном возрасте к врачу акшеру-гинекологу не обращалась. В пубертатном периоде обращалась в ГБУЗ АО «Детская городская поликлиника №1» к детскому гинекологу. После обследования выставлен диагноз: Дисфункции гипоталамуса пубертатного периода. Вторичная олигоменорея.
2
+
-
9
+
+
9
+
+
9
-
+
9
-
+
9
+
+
+
-
9
+
+
9
+
+
9
-
+
9
-
+
+
9
+
+
+
-
9
+
+
9
+
+
9
-
+
9
-
-
+
9
+
+
+
-
9
+
+
9
+
+
9
-
+
9
-
-
+
9
+
+
Половая жизнь с 19 лет в браке, без контрацепции. Беременности не было. Объективно: ИМТ 33,5 кг/м, стрии перламутрового цвета в области бедер и ягодиц, молочных желез. Клинический диагноз: Вторичная олигоменорея. Ожирение 1 ст. Осложненный гинекологический анамнез (дисфункция гипоталамуса в пубертатном периоде). Проведено обследование на 5-й день менструального цикла в периферической крови: CD3CD19 - 1,15×10/л, CD3CD4 - 0,53×10/л, CD3CD8 - 0,37×10/л, CD3CD19 - 0,41×10/л, CD3CD(1656) - 0,39×10/л иммунорегуляторный индекс - CD4/CD8 - 1,43, на 21 день менструального цикла: CD3CD19 - 1,44×10/л, CD3CD4 - 0,58×10/л, CD3CD8 - 0,43×10/л, CD3CD19 - 0,42×10/л, CD3CD(1656) - 0,43×10/л иммунорегуляторный индекс - CD4/CD8 - 1,34. В эндометрии на 5 день менструального цикла содержание субпопуляций лимфоцитов составило: CD3CD19 - 1,19×10/л, CD3CD4 - 0,55×10/л, CD3CD8 - 0,39×10/л, CD3CD19 - 0,45×10/л, CD3CD(1656) - 0,49×10/л, иммунорегуляторный индекс - CD4/CD8 - 1,41, на 21 день менструального цикла, CD3CD19 - 1,42×10/л, CD3CD4 - 0,56×10/л, CD3CD8 - 0,45×10/л, CD3CD19 - 0,52×10/л, CD3CD(1656) 0,42×10/л иммунорегуляторный индекс - CD4/CD8 - 1,33 прогнозируют бесплодие.
После обследования пациентке была проведена патогенетическая терапия в течение 5 месяцев с рекомендациями по использованию барьерных методов контрацепции, Через 7 месяцев после лечения наступила беременность. Завершилась рождением доношенного ребенка.
Пример 2.
Пациентка С., 23 лет.
Жалобы на момент обследования: не предъявляет.
В анамнезе: менструации с 11 лет, по 5-7 дней, через 55-80 дней, нерегулярные. По поводу нарушений менструального цикла получала комбинированные оральные контрацептивы в течение 3-х лет. Половая жизнь с 20 лет. До приема комбинированных оральных контрацептивов от беременности не предохранялась. Беременность не наступала. В пубертатном периоде обращалась в ГБУЗ АО «Детская городская поликлиника №1» к детскому гинекологу. После обследования выставлен диагноз: Дисфункции гипоталамуса пубертатного периода. Первичная олигоменорея.
2
Объективно: ИМТ - 34,7 кг/м, стрии перламутрового цвета в области бедер и ягодиц, молочных желез. Клинический диагноз: Первичная олигоменорея. Осложненный гинекологический анамнез (дисфункция гипоталамуса в пубертатном периоде).
+
-
9
+
+
9
+
+
9
-
+
9
-
+
+
9
+
+
+
-
9
+
+
9
+
+
9
-
+
9
-
+
+
9
+
+
+
-
9
+
+
9
+
+
9
-
+
9
-
-
+
9
+
+
+
-
9
+
+
9
+
+
9
-
+
9
-
-
+
9
+
+
Пациентке рекомендована отмена комбинированных оральных контрацептивов. Через 2 месяца, после отмены комбинированных оральных контрацептивов проведено обследование. Содержание субпопуляций лимфоцитов в периферической крови на 5-й день менструального цикла составило: CD3CD19 - 1,16×10/л, CD3CD4 - 0,54×10/л, CD3CD8 - 0,38×10/л, CD3CD19 - 0,42×10/л, CD3CD(1656) - 0,40×10/л иммунорегуляторный индекс - CD4/CD8 - 1,42, на 21 день менструального цикла: CD3CD19 - 1,45×10/л, CD3CD4 - 0,57×10/л, CD3CD8 - 0,43×10/л, CD3CD19 - 0,42×10/л, CD3CD(1656) - 0,44×10/л иммунорегуляторный индекс - CD4/CD8 - 1,32. В эндометрии на 5 день менструального цикла содержание субпопуляций лимфоцитов составило: CD3CD19 - 1,18×10/л, CD3CD4 - 0,55×10/л, CD3CD8 - 0,39×10/л, CD3CD19 - 0,44×10/л, CD3CD(1656) - 0,47×10/л, иммунорегуляторный индекс - CD4/CD8 - 1,41, на 21 день менструального цикла, CD3CD19 - 1,43×10/л, CD3CD4 - 0,57×10/л, CD3CD8 - 0,45×10/л, CD3CD19 - 0,50×10/л, CD3CD(1656) от 0,45×10/л иммунорегуляторный индекс - CD4/CD8 - 1,35 прогнозируют бесплодие.
После обследования назначена патогенетическая терапия на 6 месяцев. Через месяц после лечения наступила беременность. Завершилась рождением доношенного ребенка.
Предлагаемым способом достигается раннее прогнозирование бесплодия, т.е. до планирования беременности, что своевременно позволяет проводить коррекцию выявленных нарушений и оценить риск и ускорить реализацию генеративной функции и сократить денежные средства на терапию.