СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФИБРИНОЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ МИКРООРГАНИЗМОВ У БОЛЬНЫХ С УРОГЕНИТАЛЬНЫМИ И ГНОЙНО-СЕПТИЧЕСКИМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ С ПОМОЩЬЮ ПЛАЗМЫ КРОЛИЧЬЕЙ ЦИТРАТНОЙ СУХОЙ
METHOD FOR ASSAYING MICROORGANISMS FOR FIBRINOLYTIC ACTIVITY IN PATIENTS WITH UROGENITAL AND SUPPURATIVE SEPTIC DISEASES BY MEANS OF DRY CITRATED RABBIT PLASMA

Изобретение относится к медицине, а именно к микробиологической диагностике, и может быть использовано для определения факторов патогенности микроорганизмов в диагностики инфекционных заболеваний.
Известны способы определения фибринолитической активности микроорганизмов, основанные на использовании плазмы крови человека с антикоагулянтом (2% водный раствор щавелевокислого натрия) (1).
Недостатком этих методов является необходимость забора крови человека и приготовление плазмы с добавлением антикоагулянта 2% водный раствор щавелевокислого натрия, который в настоящие время не используется в практическом здравоохранении.
Предложен способ определения фибринолитической активности выделенных микроорганизмов от больных с урогенитальными и гнойно-септическими заболеваниями, заключающийся в определении факторов патогенности микроорганизмов in vitro и в использовании в качестве основного компонента препарата лиофилизированной плазмы кроличьей цитратной, полученной из крови кролика путем смешивания с 5% раствором лимоннокислого натрия (2).
Предлагаемый способ отличается простотой и надежностью и позволяет с наибольшей точностью и доступностью определять фибринолитическую активность у выделенных микроорганизмов от больных с урогенитальными и гнойно-септическими заболеваниями.
В основу способа положено взаимодействие бактериального фибринолизина, продуцируемого микроорганизмами в питательную среду, с фибриновым сгустком, содержащимся в среде, происходит гидролитическое расщепление субстрата с растворением сгустка и просветлением жидкости. Плазма кроличья в отличие от плазмы крови человека, лишена специфических антител к возбудителям инфекционных заболеваний человека.
Способ осуществляется следующим образом.
Выделенные штаммы от больных с урогенитальными и гнойно-септическими заболеваниями после определения морфологических, тинкториальных, культуральных, биохимических, иммунологических исследований проводилось определение фибринолитической активности бактерий: стафилококков, стрептококков, энтерококков, представителей семейства энтеробактерий, коринебактерий, гарднерелл, грибов рода Кандида. Для исследования использовали 18-24 - часовые микробные культуры, на питательном бульоне Хоттингера или кровяном агаре в виде колоний.
Способ выполняется по методике, описанной В.М.Никитиным (1).
Пример: Было обследовано 204 девочки-подростка с неспецифическими воспалительными заболеваниями нижних отделов репродуктивного тракта и выделено 846 штаммов микроорганизмов. С помощью данной методики фибринолитическая активность была определена у 366 штаммов, что свидетельствует о патогенности выделенных микроорганизмов.
3
5
3
Больная Ф., 14 лет, поступила с жалобами на выделения из половых путей слизисто - гнойного характера. При бактериологическом исследовании из вагинального отделяемого были выделены: St.saprophyticus - 10, Enterococcus faecalis - 10, E.coli - 10. Данные культуры обладали в 100% случаев фибринолитической активностью. Степень фибринолитической активности микроорганизмов оценивали по 4 - плюсовой системе следующим образом: «++++» - полное растворение сгустка фибрина и просветление жидкости в пробирке (резко положительная реакция); «+++» - лизис ¾ сгустка фибрина (выраженная положительная реакция).
Предложенный способ отличается большей доступностью расходных материалов, что позволяет проводить исследования в условиях лабораторий клинической микробиологии лечебно-профилактических учреждений.
Литература
1. Никитин В.М. Справочник методов биохимической экспресс-индикации микробов. Кишинев, 1986. - 296 с.
2. Инструкция по применению плазмы кроличьей цитратной сухой, утвержденной Главным государственным санитарным врачом РФ Г.Г.Онищенко 03.08.2001 г.