КОМПОЗИЦИЯ НА ОСНОВЕ ANTHOSTEMA SENEGALENSE ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В КАЧЕСТВЕ ЛЕКАРСТВЕННОГО СРЕДСТВА ПРОТИВ СПИДа
ANTHOSTEMA SENEGALENSE-BASED COMPOSITION FOR USE AS ANTI-AIDS DRUG

Anthostema-senegalense
Настоящее изобретение относится к использованию  в приготовлении лекарственного средства для лечения инфекции, вызванной вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), СПИДа (синдром приобретенного иммунодефицита) и сопутствующих клинических проявлений.
Синдром приобретенного иммунодефицита, более известный под аббревиатурой СПИД, является заболеванием, которое приводит к появлению ряда симптомов после разрушения клеток иммунной системы под действием ретровируса, называемого вирусом иммунодефицита человека или ВИЧ, в настоящее время известны два его типа: ВИЧ-1 и ВИЧ-2. СПИД является последней стадией инфицирования этим вирусом, которая в большинстве случаев приводит к гибели людей, инфицированных оппортунистическими заболеваниями.
Передача вируса СПИДа происходит половым путем, через кровь или от матери к ребенку (через плаценту или во время родов и/или грудного вскармливания). Вирусные частицы ВИЧ, присутствующие в жидкостях организма, инфицируют клетки иммунной системы, в частности Т4-лимфоциты, которые имеют подходящие рецепторы (белки CD4).
В результате первичной инфекции у пациента наступает бессимптомная фаза, которая может длиться около десяти лет, в течение которой у пациента не проявляются симптомы заболевания, но в течение которой его Т4-лимфоциты и его макрофаги постепенно разрушаются под влиянием ВИЧ. На этой стадии человек имеет антитела, направленные против вируса: его называют ВИЧ-положительным.
Если иммунная система человека слишком слабая, появляются симптомы СПИДа. Вспыхивают оппортунистические заболевания, такие как, например, туберкулез, пневмония или пневмоцистоз, но также герпес, или виды рака (саркома Капоши, лимфомы, etc.), что может привести к смерти пациента.
Инфекция, вызванная вирусом ВИЧ, является эпидемическим заболеванием, которое распространилось с конца 1970-х годов и в настоящее время поражает всю планету, как развитые страны, так и развивающиеся страны, что делает это заболевание глобальной проблемой охраны здоровья. По оценкам Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) от декабря 2012 года, более 34 миллионов человек будут инфицированы вирусом ВИЧ во всем мире, среди которых 3,3 миллиона детей в возрасте до 15 лет. Только на Африку к югу от Сахары будет приходиться 69% случаев. Там будет насчитываться примерно 2,5 миллиона новых случаев инфицирования ежегодно, и в 2011 году было зарегистрировано 1,7 миллиона смертельных исходов.
В настоящее время вылечить СПИД не представляется возможным, и профилактика, главным образом использование презерватива, остается наилучшим вариантом для борьбы с вирусом ВИЧ, поскольку в настоящее время не существует вакцины, позволяющей обеспечить защиту от этого вируса.
Тем не менее, имеются лечебные схемы, которые позволяют замедлить развитие заболевания до стадии СПИДа. Эти лечебные схемы состоят в принятии одной или, предпочтительно, нескольких противовирусных молекул в комбинации для более высокой эффективности. Как правило, рекомендуется тройная терапия, которая объединяет три антивирусные молекулы, и она считается наиболее эффективными для сдерживания действия вируса и остановки его распространения в организме.
Эти лечебные схемы, которые должны продолжаться на протяжении всей жизни пациентов, очень дорогостоящие и поэтому очень редко могут использоваться в развивающихся странах, поскольку население не может нести такое финансовое бремя. В этих странах, а именно в Африке и в Азии, где вирус широко распространен, подавляющее большинство пациентов в настоящее время не получают какого-либо эффективного лечения. Сейчас, при отсутствии лечения, почти у всех ВИЧ-инфицированных пациентов развивается СПИД, который затем приводит к смерти.
Кроме того, даже в тех странах, где назначается тройная терапия, последняя не эффективна для всех пациентов. Действительно, существует значительная часть пациентов, для которых этот вид лечения остается неэффективным (вирусологическое ускользание), даже совершенно неэффективным (терапевтические неудачи).
Кроме того, даже если эти лечебные схемы эффективны, они имеют значительные побочные эффекты, а также определенную токсичность, что снижает качество жизни пациентов. Некоторые пациенты, которые больше не могут выдерживать эти побочные эффекты, прекращают лечение, тогда как лечение необходимо выполнять очень последовательно, чтобы избежать образования вирусоустойчивости.
Наконец, молекулы, используемые в тройной терапии, часто бывают хрупкими молекулами, которые требуют строгих условий сохранности, что особенно проблематично в жарких и/или влажных странах, а именно в Африке и Азии.
В развивающихся странах, а именно в Африке, было бы особенно интересно в связи со всеми этими причинами иметь эффективную и гораздо более дешевую лечебную схему, созданную на базе местных растений и в форме, которая не вызывает проблем сохранности.
Это и является целью данного изобретения, а именно обеспечение эффективного лекарственного средства, которое дает меньше побочных эффектов, и стоимость которых остается низкой по сравнению со стоимостью тройной терапии, рекомендуемой в настоящее время в случае инфицирования, вызванного ВИЧ.
Это лекарственное средство может быть также предоставлено в развитых странах в качестве дополнения к текущей тройной терапии для обеспечения более высокой эффективности или для лечения нежелательных побочных эффектов, или для их замены по экономическим причинам, чтобы ограничить побочные эффекты, или в тех случаях, когда традиционные лечебные схемы неэффективны.
Anthostema senegalense
Для решения этой технической проблемы в настоящем изобретении предлагается фармацевтическая композиция на основе  для применения в качестве лекарственного средства при лечении инфекции, вызванной вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), СПИДа и сопутствующих клинических проявлений.
Данная фармацевтическая композиция может быть использована в качестве антиретровирусного лекарственного средства против вируса ВИЧ типа 1 или типа 2.
Преимущественно, композиция в соответствии с изобретением имеет мало или не имеет побочных эффектов и намного дешевле, чем обычные лекарственные средства против СПИДа. Таким образом, она гораздо лучше принимается пациентами для регулярного длительного лечения.
Более того, эффект композиции усиливается за счет других компонентов, присутствующих в растении, которые смешиваются с активным ингредиентом при приготовлении терапевтической композиции. Все в совокупности, таким образом, обладает улучшенным эффектом по сравнению с активным ингредиентом в отдельности.
Кроме того, и как это часто бывает с натуральными экстрактами из не химически модифицированных растений, активный ингредиент фармацевтической композиции по настоящему изобретению имеет очень мало рисков передозировки.
Другие отличительные признаки и преимущества настоящего изобретения будут очевидны из нижеследующего подробного описания.
Anthostema senegalense
является цветковым растением из семейства молочайных.
Это лесное дерево, которое может достигать 30 м в высоту, с чередующимися гладкими, простыми, кожистыми листьями, клиновидными у основания, с желобчатым черешком и опадающими листовидными образованиями, с овально-копьевидными жесткими листьями, достигающими до 15 см в длину и 5-6 см в ширину, клиновидными у основания, заостренными на вершине, перистожильными, с 10-20 парами боковых жилок. Латекс белый, цветы представляют собой бокальчики, сгруппированные в маленькие от коротко стебельковых до, почти не имеющей ножки пазушных верхоцветников. Растение имеет соцветия в виде сложного зонтика, несущего на каждой ветви обертку из прицветников, охватывающую многочисленные мужские цветки и один женский цветок. Плоды представляют собой сильно рассеченные трехдольчатые капсулы, содержащие три серо-желтовато-серые овальные семени покрытые коричневыми пятнами примерно 15 мм в длину и 20-25 мм в ширину.
Anthostema senegalense
растет в лесополосах вдоль рек. Этот вид является эндемическим в Западной Африке, где его можно найти в лесных галереях в Гвинее, Мали, Кот-д'Ивуаре, Либерии, Сенегале, Буркина-Фасо, Гамбии, Гвинее-Бисау, Сьерра-Леоне, Бенине и Нигерии. Это растение редкое и находится под угрозой исчезновения в некоторых странах, таких, как Кот-д'Ивуар, из-за нарушения его природного места обитания.
Anthostema senegalense
Для получения фармацевтической композиции в соответствии с настоящим изобретением предпочтительно используется кора стебля , предпочтительно после сушки с целью удаления из нее латекса.
Anthostema senegalense
Несмотря на то, что это менее выгодно, другие части растения  также могут альтернативно использоваться для приготовления композиции, используемой в соответствии с настоящим изобретением, такие как, например, листья или латекс растения, хотя они более токсичны.
Anthostema senegalense
Anthostema senegalense
Фармацевтическая композиция, используемая в соответствии с изобретением, предпочтительно, содержит растительный экстракт . Этот растительный экстракт, предпочтительно, представляет собой растительный раствор или жидкий растительный экстракт и, например, в зависимости от его концентрации, матричную настойку, лекарственную настойку или жидкий экстракт .
Anthostema senegalense
Этот растительный экстракт  представляет собой полярный экстракт, например, водный, спиртовой или водно-спиртовой; или неполярный экстракт.
Растительный экстракт получают любым подходящим способом, а именно экстракцией, предпочтительно водной, спиртовой или водно-спиртовой экстракцией, вымачиванием, настаиванием, отвариванием, перколяцией, расщеплениемвыщелачиванием или тому подобным.
Полярный растительный экстракт, например, может быть получен с помощью экстракции метанолом или этанолом.
2
2
3
3
2
5
Неполярный растительный экстракт, например, может быть получен с помощью экстракции дихлорметаном (CHCl), хлороформом (CHCl) или этилацетатом (СНСООСН).
Еще один полярный растительный экстракт, например, может быть получен с помощью перколяции метанолом через выжимки, полученные в результате экстракции дихлорметаном.
Anthostema senegalense
В соответствии с предпочтительным вариантом осуществления настоящего изобретения жидкий растительный экстракт получают из коры стебля  с помощью водно-спиртовой экстракции по методике перколяции при перемешивании. Содержание спирта составляет предпочтительно от 30 до 70°.
Anthostema senegalense
Anthostema senegalense
В качестве примера, матричную настойку из  готовили с содержанием этилового спирта примерно 70 об. %. от сухой коры  путем исчерпывающей холодной перколяции с последующей концентрацией в вакууме при помощи роторного испарителя.
infusettes
Anthostema senegalense
Композиция, используемая в соответствии с изобретением, может быть в виде различных галеновых, предпочтительно, пероральных, форм. Она может быть, например, в виде пакетиков с травами для настаивания (), содержащих, например, около 5 граммов крупномолотой коры стебля .
Композиция также может быть в форме таблеток, предпочтительно, диспергируемых в полости рта таблеток, в виде мягких капсул, гранул, капсул, порошка, ампул, сиропа, вытяжки, жидкого экстракта или в виде любой другой подходящей галеновой формы, предпочтительно, для приема внутрь, которую могут представить себе специалисты в данной области.
Предпочтительно, композиция, предназначенная для применения в соответствии с изобретением, составлена в форме микросфер, также именуемых сфероидами, предпочтительно, сгруппированных в капсулы в количестве, соответствующем, предпочтительно, единичной дозе, например, суточной дозе.
Таким образом, выгода представлена многими преимуществами такой галеновой формы, а именно с медицинской точки зрения - быстрое высвобождение и высокая биодоступность активных ингредиентов, а на практическом уровне - простота использования для пациентов и форма с очень низкой ломкостью и очень высокой стабильностью при длительном хранении, даже в сложных условиях хранения.
Такие микросферы могут изготавливаться различными способами.
Anthostema senegalense
Первый способ заключается, например, в получении периферийного слоя, содержащего растительный экстракт , вокруг нейтрального ядра, образованного, например, из смеси сахара и крахмала или из сахарного кристалла, из маннитола или сорбитола.
Anthostema senegalense
Слой, содержащий растительный экстракт , может, преимущественно, быть получен путем нанесения покрытия, пропитки, распыления или разбрызгивания, причем активный ингредиент для этой цели предпочтительно смешивается со связующим агентом или связующим веществом.
В соответствии с вторым предпочтительным способом, микросферы или сфероиды могут быть образованы экструзией и сфероидизацией.
Anthostema senegalense
С этой целью растительный экстракт  сначала смешивается с поглощающим и адсорбирующим веществом, предпочтительно, таким как природный или синтетический полимер, обладающий пластическими свойствами, совместимыми с экструзией и сфероидизации в последующей части способа.
К ним относятся, например, микрокристаллическая целлюлоза, тонкодисперсная целлюлоза, слабозамещенный гидроксипропилированный целлюлозный полимер, крахмал, модифицированный крахмал, полисахариды или любое другое подходящее вещество или смесь.
Если смесь слишком сухая, может также добавляться водная или неводная увлажняющая жидкость до получения гомогенной и тягучей пасты, которую можно подвергать обработке на следующих этапах способа.
Увлажняющая жидкость также служит в качестве средства для переноса и осаждения активного ингредиента на ядро поглощающего и адсорбирующего материала в микрополостях полимера.
Способ изготовления затем заключается в экструзии влажной массы через фильеру с калиброванными отверстиями. Таким образом получают компактные нити, имеющие, в основном, цилиндрическую форму и определенное поперечное сечение, которые называются «экструдатами».
Эти «экструдаты» затем помещаются в цилиндрический аппарат, именуемый «сфероидизатор», содержащий в нижней части шлицевой диск, вращающийся с переменной и регулируемой скоростью. Под действием центробежной силы, создаваемой при вращении вращающегося диска, «экструдаты» равномерно фрагментируются, а затем превращаются в сферы за счет эффекта прокатывания-связывания. Таким образом получаются желаемые сфероиды.
Эти два способа могут также содержать, по меньшей мере, этап сушки и/или этап калибровки.
Сушка может производиться под воздействием небольшого нагрева, например, при температуре от 30 до 40°С или простого контакта с открытым воздухом в течение достаточного периода времени.
И, наконец, полученные сфероиды могут необязательно покрываться по периферии наружной пленкой для обеспечения их защиты, например, от внешней влаги, тепла, агрессивных условий организма или замедленного эффекта.
Anthostema senegalense
Помимо растительного экстракта , композиция, предназначенная для применения в соответствии с настоящим изобретением, может дополнительно содержать один или несколько других подходящих соединений или вспомогательных веществ, например, выбранных из экстрактов из одного или нескольких других растений, витаминов, минералов, микроэлементов, ароматических веществ, связующих агентов, связующих соединений, скользящих соединений, смазывающих веществ, поверхностно-активных веществ, сахаров, лактозы, сорбитола, маннитола, крахмалов или модифицированных крахмалов, мальтодекстринов, карбонатов, цитратов, желатина, поливинилпирролидона, полисахаридов, производных целлюлозы, сшитой натрий-карбоксиметилцеллюлозы, микрокристаллической целлюлозы, мелкодисперсной целлюлозы, слабозамещенных гидроксипропилированных целлюлозных полимеров или любое другое подходящее соединение.
Anthostema senegalense
Композиция также может содержать одно или несколько соединений, повышающих эффективность , обеспечивая его защиту или способствуя его быстрому высвобождению.
Anthostema senegalense
Композиция может также содержать, в комбинации, одно или несколько других известных антивирусных или антиретровирусных веществ, а именно одно или несколько из веществ, которые используются в рамках традиционных лечебных схем борьбы со СПИДом (тройная терапия или тому подобное). Композиция в соответствии с настоящим изобретением может, таким образом, содержать, например, помимо , зидовудин или азидотимидин (AZT) для усиления анти-ВИЧ активности.
Следующие примеры позволяют лучше проиллюстрировать изобретение:
Пример 1:
Anthostema senegalense
Сфероиды получали с помощью способа экструзии и сфероидизации, описанного выше, начиная с гидро-спиртового экстракта коры стебля , полученного в соответствии с Европейской Фармакопеей, с содержанием этанола 70 об. % и сухим остатком примерно 10%. Эти сфероиды были объединены в 350 мг капсулы.
На 350 мг капсулу:
• Экстракт <i>Anthostema senegalense</i>
350 мл сухого остатка, эквивалентного 35 мг
• Микро-целлюлоза
q.s. [в достаточном количестве]
Полученные сфероиды были объединены в 350 мг капсулы, соответствующие единичной дозе композиции, для предпочтительной дозировки по три капсулы в день.
Пример 2:
Поскольку принимать витамины и минералы полезно для улучшения общего состояния здоровья людей с ослабленным иммунитетом, были подготовлены сфероиды, содержащие смесь витаминов и селена в дополнение к растительному экстракту.
Anthostema senegalense
Сфероиды были приготовлены, как указано выше, из описанного водно-спиртового экстракта из коры стебля .
Перед экструзией и сфероидизацией к этому экстракту, тем не менее, были добавлены витамины и селен в следующих соотношениях:
На 2,1 кг экстракта:
• витамин РР:
70 г
• витамин В1:
8 г
• витамин В2:
8 г
• витамин В6:
8 г
• селен:
48 г
Полученные сфероиды были объединены в 350 мг капсулы.
Anthostema senegalense
Для демонстрации анти-ВИЧ свойств композиции, предназначенной для применения в соответствии с настоящим изобретением, авторами настоящего изобретения было проведено два исследования: серия тестов in vitro и клинические испытания, которые позволили сделать вывод о том, что композиция на основе  была эффективна. Результаты этих исследований приведены ниже.
Тесты in vitro:
Anthostema senegalense
Anthostema senegalense
Неполярный экстракт и полярный экстракт  получали с помощью экстракции дихлорметаном и метанолом, соответственно, из высушенной коры стебля .
50
B
Эффективность этих экстрактов против вируса ВИЧ испытали in vitro путем измерения средней ингибирующей концентрации (IC) этих веществ на вирусе ВИЧ типа 1 (штамм III) и вирусе типа 2 (штамм ROD). В каждом случае также измеряли их индекс селективности.
Для использования в качестве контроля также были испытаны в тех же условиях для сравнения три известные антиретровирусные молекулы, используемые в лечении ВИЧ-инфекции: невирапин, дидезоксицитидин и дидезоксиинозин.
Полученные результаты изложены в таблице ниже:
Anthostema senegalense
Было установлено, что полярные и неполярные экстракты  вызывают in vitro значительное торможение каждого из обоих протестированных типов ВИЧ (ВИЧ-1 и ВИЧ-2) с удовлетворительным индексом селективности.
Неполярный экстракт обладает очень выраженной ингибиторной активностью против ВИЧ-1, сравнимой с дидезоксицитидином и лучше, чем у дидезоксиинозина. Эта активность еще лучше против ВИЧ-2, для которого она значительно лучше, чем у невирапина, дидезоксицитидина и дидезоксиинозина.
Полярные экстракт обладает выраженной ингибирующей активностью против ВИЧ-1, несколько хуже, чем у невирапина и дидезоксицитидина, но несколько лучше, чем у дидезоксиинозина, и очень выраженной против ВИЧ-2, для которого она сравнима с дидезоксицитидином и значительно лучше, чем у невирапина и дидеоксиинозина.
Клинические испытания:
Anthostema senegalense
Anthostema senegalense
Anthostema senegalense
Шесть «ранее не подверженный экспериментам х» ВИЧ-положительных пациентов, то есть, пациентов, которые никогда не принимали антиретровирусную терапию против ВИЧ, получали терапию в течение нескольких месяцев с использованием водного экстракта  (пациент 5) или водно-спиртового экстракта  (пациенты 2, 3 и 4) или, также пакетиков с травами, содержащих высушенную кору стебля  (пациенты 1 и 6).
Anthostema senegalense
Водный экстракт готовили путем вываривания в течение 15 минут 500 г высушенной и измельченной коры  в 1 л воды с последующим фильтрованием. Пациентам, которых лечили водным экстрактом, ежедневно давали полстакана (примерно 10 сантилитров) этого отвара.
Anthostema senegalense
Водно-спиртовой экстракт получали при комнатной температуре с помощью перколяции 1 кг высушенной и измельченной коры , а затем концентрацией полученного экстракта до получения одного литра жидкого водно-спиртового экстракта. Пациентам, которых лечили водно-спиртовым экстрактом, давали ежедневно одну чайную ложку (т.е. примерно 5 мл) этого жидкого экстракта.
Anthostema senegalense
В отношении пакетиков для трав: в каждый пакетик помещали 5 г высушенной и измельченной коры . Пациенты, которых лечили с помощью таких пакетиков, каждый день принимали по одному пакетику.
3
Количество клеток CD4 у этих пациентов, соответствующее количеству клеток CD4 на мм крови и отражающее количество Т4-лимфоцитов пациента, измеряли ежемесячно на протяжении всего исследования.
Полученные результаты изложены в следующей таблице:
Было установлено, что лечение с помощью композиции, применяемой в соответствии с настоящим изобретением, позволило улучшить количество CD4 клеток у пяти из шести пациентов после от четырех до семи месяцев наблюдения. Соотношение их клеток CD4/CD8 также было улучшено.
Кроме того, у этих пациентов было отмечено улучшение и даже исчезновение некоторых клинических проявлений инфекции, вызванной ВИЧ:
Композиция в соответствии с изобретением, таким образом, позволяла лечить:
- Хроническую диарею у трех пациентов;
- Дерматоз у двух пациентов;
- Кожную аллергию у четырех пациентов.
Исчезновение этих клинических проявлений инфекции, вызванной ВИЧ, за счет приема композиции, применяемой в соответствии с настоящим изобретением, позволило значительно улучшить качество жизни этих пациентов.
Таким образом, в дополнение к снижению инфицирования вирусом ВИЧ, что приводит к увеличению количества клеток CD4, также наблюдалось улучшение общего состояния здоровья пациентов, связанное с исчезновением клинических проявлений, связанных с инфекцией, вызванной вирусом ВИЧ.
Anthostema senegalense
Candida albicans
Авторами настоящего изобретения также замечено, что композиция на основе , применяемая в соответствии с настоящим изобретением, также обладает противогрибковыми свойствами, а именно против грибка ,, отвечающего за кандидоз, который является заболеванием, часто встречающимся у пациентов, инфицированных вирусом ВИЧ.
Anthostema senegalense
50
Биологические исследования in vitro, таким образом, позволили продемонстрировать, что полярный метаноловый экстракт из коры стебля  обладает значительной активностью по отношению к Candida albicans со средней ингибирующей концентрацией (IC), равной 29,71 мг/мл, таким образом, придавая композиции в соответствии с изобретением терапевтический потенциал, представляющий интерес, для лечения кандидоза.
Anthostema senegalense
Следует еще раз отметить, что композиция на основе , применяемая в соответствии с изобретением, также дополнительно с успехом позволяет лечить клинические проявления, ассоциированные с инфекцией, вызванной вирусом ВИЧ.
Данная композиция предлагает эффективную и гораздо более дешевую альтернативу нынешней тройной терапии для лечения инфекции, вызванной вирусом ВИЧ, СПИДа и сопутствующих клинических проявлений.
Как указано выше, композиция может быть дополнительно представлена в галеновой форме, которая не вызывает никаких проблем обеспечения сохранности.
По всем этим причинам композиция, применяемая в соответствии с изобретением, по-видимому, является весьма перспективным терапевтическим решением для развивающихся стран.
Безусловно, данное изобретение не ограничивается предпочтительными вариантами осуществления, описанными выше, поскольку специалисты в данной области могут вносить различные модификации и предполагать другие варианты без отклонения ни за пределы объема, ни за рамки настоящего изобретения, определяемые патентной формулой.