НОВАЯ ЛИЗОФОСФОЛИПИД-АЦИЛТРАНСФЕРАЗА

1. Нуклеиновая кислота, представляющая собой любую, выбранную из (а)-(е):
(a) нуклеиновая кислота, которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, состоящий из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением одной или более аминокислот в аминокислотной последовательности, показанной в SEQ ID NO:2 или 7, и обладающий активностью лизофосфолипид-ацилтрансферазы;
(b) нуклеиновая кислота, которая гибридизуется в жестких условиях с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, состоящей из SEQ ID NO:1 или 6, и которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, обладающий активностью лизофосфолипид-ацилтрансферазы;
(c) нуклеиновая кислота, которая содержит нуклеотидную последовательность, обладающую 80% или более идентичностью с нуклеотидной последовательностью, состоящей из SEQ ID NO:1 или 6, и кодирующую белок, обладающий активностью лизофосфолипид-ацилтрансферазы;
(d) нуклеиновая кислота, которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, состоящий из аминокислотной последовательности, обладающей идентичностью 80% или более с аминокислотной последовательностью, состоящей из SEQ ID NO:2 или 7, и обладающий активностью лизофосфолипид-ацилтрансферазы; и
(e) нуклеиновая кислота, которая гибридизуется в жестких условиях с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, кодирующей белок, состоящий из аминокислотной последовательности, показанной в SEQ ID NO:2 или 7, и которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, обладающий активностью лизофосфолипид-ацилтрансферазы.
2. Нуклеиновая кислота по п.1, которая представляет собой любую, выбранную из (а)-(е):
(a) нуклеиновая кислота, которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, состоящий из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением аминокислот 1-50 в аминокислотной последовательности, показанной в SEQ ID NO:2 или 7, и обладающий активностью лизофосфолипид-ацилтрансферазы;
(b) нуклеиновая кислота, которая гибридизуется в условиях 2×SSC при 50°С с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, состоящей из SEQ ID NO:1 или 6, и которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, обладающий активностью лизофосфолипид-ацилтрансферазы;
(c) нуклеиновая кислота, которая содержит нуклеотидную последовательность, обладающую 90% или более идентичностью с нуклеотидной последовательностью, состоящей из SEQ ID NO:1 или 6, и кодирующую белок, обладающий активностью лизофосфолипид-ацилтрансферазы;
(d) нуклеиновая кислота, которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, состоящий из аминокислотной последовательности, обладающей идентичностью 90% или более с аминокислотной последовательностью, состоящей из SEQ ID NO:2 или 7, и обладающий активностью лизофосфолипид-ацилтрансферазы; и
(е) нуклеиновая кислота, которая гибридизуется в условиях 2×SSC при 50°С с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, кодирующей белок, состоящий из аминокислотной последовательности, показанной в SEQ ID NO:2 или 7, и которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, обладающий активностью лизофосфолипид-ацилтрансферазы.
3. Нуклеиновая кислота, представляющая собой любую, выбранную из (а)-(е):
(a) нуклеиновая кислота, которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, состоящий из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением одной или более аминокислот в аминокислотной последовательности, показанной в SEQ ID NO:2 или 7, и обладающий активностью увеличения количественного соотношения арахидоновой кислоты в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, трансформированном рекомбинантным вектором, содержащим нуклеиновая кислота, по сравнению с количественным соотношением в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, который не был трансформирован вектором;
(b) нуклеиновая кислота, которая гибридизуется в жестких условиях с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, состоящей из SEQ ID NO:1 или 6, и которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, обладающий активностью увеличения количественного соотношения арахидоновой кислоты в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, трансформированном рекомбинантным вектором, содержащим нуклеиновая кислота, по сравнению с количественным соотношением в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, который не был трансформирован вектором;
(c) нуклеиновая кислота, которая содержит нуклеотидную последовательность, обладающую 80% или более идентичностью с нуклеотидной последовательностью, состоящей из SEQ ID NO:1 или 6, и кодирующую белок, обладающий активностью увеличения количественного соотношения арахидоновой кислоты в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, трансформированном рекомбинантным вектором, содержащим нуклеиновая кислота, по сравнению с количественным соотношением в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, который не был трансформирован вектором;
(d) нуклеиновая кислота, которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, состоящий из аминокислотной последовательности, обладающей идентичностью 80% или более с аминокислотной последовательностью, состоящей из SEQ ID NO:2 или 7, и обладающий активностью увеличения количественного соотношения арахидоновой кислоты в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, трансформированном рекомбинантным вектором, содержащим нуклеиновую кислоту, по сравнению с количественным соотношением в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, который не был трансформирован вектором; и
(е) нуклеиновая кислота, которая гибридизуется в жестких условиях с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, кодирующей белок, состоящий из аминокислотной последовательности, показанной в SEQ ID NO:2 или 7, и которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, обладающий активностью увеличения количественного соотношения арахидоновой кислоты в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, трансформированном рекомбинантным вектором, содержащим нуклеиновую кислоту, по сравнению с количественным соотношением в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, который не был трансформирован вектором.
4. Нуклеиновая кислота по п.3, которая представляет собой любую, выбранную из (а)-(е):
(а) нуклеиновая кислота, которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, состоящий из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением аминокислот 1-50 в аминокислотной последовательности, показанной в SEQ ID NO:2 или 7, и обладающий активностью увеличения количественного соотношения арахидоновой кислоты в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, трансформированном рекомбинантным вектором, содержащим нуклеиновая кислота, по сравнению с количественным соотношением в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, который не был трансформирован вектором;
(b) нуклеиновая кислота, которая гибридизуется в условиях 2×SSC при 50°С с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, состоящей из SEQ ID NO:1 или 6, и которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, обладающий активностью увеличения количественного соотношения арахидоновой кислоты в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, трансформированном рекомбинантным вектором, содержащим нуклеиновую кислоту, по сравнению с количественным соотношением в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, который не был трансформирован вектором;
(c) нуклеиновая кислота, которая содержит нуклеотидную последовательность, обладающую 90% или более идентичностью с нуклеотидной последовательностью, состоящей из SEQ ID NO:1 или 6, и кодирующую белок, обладающий активностью увеличения количественного соотношения арахидоновой кислоты в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, трансформированном рекомбинантным вектором, содержащим нуклеиновую кислоту, по сравнению с количественным соотношением в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, который не был трансформирован вектором;
(d) нуклеиновая кислота, которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, состоящий из аминокислотной последовательности, обладающей идентичностью 90% или более с аминокислотной последовательностью, состоящей из SEQ ID NO:2 или 7, и обладающий активностью увеличения количественного соотношения арахидоновой кислоты в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, трансформированном рекомбинантным вектором, содержащим нуклеиновую кислоту, по сравнению с количественным соотношением в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, который не был трансформирован вектором; и
(е) нуклеиновая кислота, которая гибридизуется в условиях 2×SSC при 50°С с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, кодирующей белок, состоящий из аминокислотной последовательности, показанной в SEQ ID NO:2 или 7, и которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, обладающий активностью увеличения количественного соотношения арахидоновой кислоты в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, трансформированном рекомбинантным вектором, содержащим нуклеиновую кислоту, по сравнению с количественным соотношением в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, который не был трансформирован вектором.
5. Нуклеиновая кислота по любому из пп.1-4, где кодируемый белок принадлежит семейству мембранно-связанных O-ацилтрансфераз.
6. Нуклеиновая кислота, выбранная из группы, состоящей из (a)-(d):
(а) нуклеиновая кислота, которая содержит нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO:1 или 6, или ее частичную последовательность;
(b) нуклеиновая кислота, которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, состоящий из аминокислотной последовательности, показанной в SEQ ID NO:2 или 7, или ее частичной последовательности;
(c) нуклеиновая кислота, которая содержит нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO:4 или 9, или ее частичную последовательность; и
(d) нуклеиновая кислота, которая содержит нуклеотидную последовательность, показанную в SEQ ID NO:5 или 10, или ее частичную последовательность.
7. Белок, представляющий собой любой, выбранный из (а) или (b):
(a) белок, состоящий из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением одной или более аминокислот в аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2 или 7, и обладающий активностью лизофосфолипид-ацилтрансферазы; или
(b) белок, состоящий из аминокислотной последовательности, обладающей идентичностью 80% или более с аминокислотной последовательностью, состоящей из SEQ ID NO:2 или 7, и обладающий активностью лизофосфолипид-ацилтрансферазы.
8. Белок по п.7, который представляет собой (а) или (b):
(а) белок, состоящий из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением аминокислот 1-50 в аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2 или 7, и обладающий активностью лизофосфолипид-ацилтрансферазы; или
(b) белок, состоящий из аминокислотной последовательности, обладающей идентичностью 90% или более с аминокислотной последовательностью, состоящей из SEQ ID NO:2 или 7, и обладающий активностью лизофосфолипид-ацилтрансферазы.
9. Белок, представляющий собой (а) или (b):
(a) белок, состоящий из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением одной или более аминокислот в аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2 или 7, и обладающий активностью увеличения количественного соотношения арахидоновой кислоты в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, трансформированном рекомбинантным вектором, содержащим нуклеиновая кислота, кодирующую аминокислотную последовательность, по сравнению с количественным соотношением в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, который не был трансформирован вектором; или
(b) белок, состоящий из аминокислотной последовательности, обладающей идентичностью 80% или более с аминокислотной последовательностью, состоящей из SEQ ID NO:2 или 7, и обладающий активностью увеличения количественного соотношения арахидоновой кислоты в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, трансформированном рекомбинантным вектором, содержащим нуклеиновая кислота, кодирующую аминокислотную последовательность, по сравнению с количественным соотношением в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, который не был трансформирован вектором.
10. Белок по п.9, который соответствует нижеследующим пунктам (а) или (b):
(a) белок, состоящий из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением аминокислот 1-50 в аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2 или 7, и обладающий активностью увеличения количественного соотношения арахидоновой кислоты в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, трансформированном рекомбинантным вектором, содержащим нуклеиновая кислота, кодирующую аминокислотную последовательность, по сравнению с количественным соотношением в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, который не был трансформирован вектором; или
(b) белок, состоящий из аминокислотной последовательности, обладающей идентичностью 90% или более с аминокислотной последовательностью, состоящей из SEQ ID NO:2 или 7, и обладающий активностью увеличения количественного соотношения арахидоновой кислоты в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, трансформированном рекомбинантным вектором, содержащим нуклеиновая кислота, кодирующую аминокислотную последовательность, по сравнению с количественным соотношением в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, который не был трансформирован вектором.
11. Белок по любому из пп.7-10, который принадлежит семейству мембранно-связанных O-ацилтрансфераз.
12. Белок, состоящий из аминокислотной последовательности, показанной в SEQ ID NO:2 или 7.
13. Рекомбинантный вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по любому из пп.1-6.
14. Клетка, трансформированная рекомбинантным вектором по п.13.
15. Композиция жирных кислот, полученная культивированием трансформированной клетки по п.14, где количественное соотношение арахидоновой кислоты в композиционном соотношении жирных кислот в указанной композиции жирных кислот выше, чем количественное соотношение арахидоновой кислоты в композиции жирных кислот, полученной культивированием нетрансформированного хозяина.
16. Способ получения композиции жирных кислот, включающий сбор композиции жирных кислот по п.15 из культур трансформированной клетки по п.14.
17. Пищевой продукт, содержащий композицию жирных кислот по п.15.
18. Способ применения рекомбинантного вектора по п.13 для повышения количественного соотношения арахидоновой кислоты в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, трансформированном вектором, по сравнению с количественным соотношением в композиционном соотношении жирных кислот в хозяине, который не был трансформирован вектором.
19. Нуклеиновая кислота, представляющая собой любую, выбранную из (а)-(е):
(а) нуклеиновая кислота, которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, состоящий из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением одной или более аминокислот в аминокислотной последовательности, показанной в SEQ ID NO:2 или 7, и участвующий в преобразовании из 18:3(n-6)-PL в 18:3(n-6)-СоА и/или преобразовании из DGLA-СоА в DGLA-PL;
(b) нуклеиновая кислота, которая гибридизуется в жестких условиях с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, состоящей из SEQ ID NO:1 или 6, и которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, участвующий в преобразовании из 18:3(n-6)-PL в 18:3(n-6)-CoA и/или преобразовании из DGLA-CoA в DGLA-PL;
(c) нуклеиновая кислота, которая содержит нуклеотидную последовательность, обладающую 80% или более идентичностью с нуклеотидной последовательностью, состоящей из SEQ ID NO:1 или 6, и кодирующую белок, участвующий в преобразовании из 18:3(n-6)-PL в 18:3(n-6)-CoA и/или преобразовании из DGLA-CoA в DGLA-PL;
(d) нуклеиновая кислота, которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, состоящий из аминокислотной последовательности, обладающей идентичностью 80% или более с аминокислотной последовательностью, состоящей из SEQ ID NO:2 или 7, и участвующий в преобразовании из 18:3(n-6)-PL в 18:3(n-6)-CoA и/или преобразовании из DGLA-CoA в DGLA-PL; и
(e) нуклеиновая кислота, которая гибридизуется в жестких условиях с нуклеиновой кислотой, состоящей из нуклеотидной последовательности, комплементарной нуклеотидной последовательности, кодирующей белок, состоящий из аминокислотной последовательности, показанной в SEQ ID NO:2 или 7, и которая содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую белок, участвующий в преобразовании из 18:3(n-6)-PL в 18:3(n-6)-CoA и/или преобразовании из DGLA-CoA в DGLA-PL.
20. Белок, представляющий собой (а) или (b):
(a) белок, состоящий из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением одной или более аминокислот в аминокислотной последовательности SEQ ID NO:2 или 7, и участвующий в преобразовании из 18:3(n-6)-PL в 18:3(n-6)-CoA и/или преобразовании из DGLA-CoA в DGLA-PL; или
(b) белок, состоящий из аминокислотной последовательности, обладающей идентичностью 80% или более с аминокислотной последовательностью, состоящей из SEQ ID NO:2 или 7, и участвующий в преобразовании из 18:3(n-6)-PL в 18:3(n-6)-CoA и/или преобразовании из DGLA-CoA в DGLA-PL.