ГЕТЕРОЦИКЛИЧЕСКИЕ СОЕДИНЕНИЯ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ В ПРОФИЛАКТИКЕ ИЛИ ЛЕЧЕНИИ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ
HETEROCYCLIC COMPOUNDS AND THEIR USE IN PREVENTION OR TREATMENT OF BACTERIAL INFECTIONS

Настоящее изобретение касается гетероциклических соединений, способа их получения, фармацевтических композиций, содержащих эти соединения, и их применения, необязательно в комбинации с другими антибактериальными средствами и/или бета-лактамными соединениями, для профилактики или лечения бактериальных инфекций. Настоящее изобретение касается также применения указанных соединений в качестве ингибиторов β-лактамазы и/или в качестве антибактериальных средств.
В литературе описана непрерывная эволюция резистентности к антибактериальным средствам, которая может привести к появлению штаммов бактерий, против которых известные антибактериальные соединения будут неэффективны.
Поэтому существует потребность в получении эффективных соединений и композиций, которые могут преодолеть резистентность бактерий к антибиотикам.
Задачей настоящего изобретения является получение гетероциклических соединений, которые можно применять в качестве антибактериальных средств и/или ингибиторов бета-лактамазы.
Задачей настоящего изобретения является также получение гетероциклических соединений, которые можно применять для профилактики или для лечения бактериальных инфекций.
Другой задачей настоящего изобретения является получение гетероциклических соединений, которые могут преодолеть резистентность бактерий к антибиотикам.
Задачей настоящего изобретения является также получение фармацевтических композиций, содержащих указанные гетероциклические соединения, необязательно в комбинации с одним или больше другими антибактериальными средствами, для профилактики или для лечения бактериальных инфекций, и которые могут преодолеть резистентность бактерий к антибиотикам.
Другие задачи станут понятны из описания настоящего изобретения.
В настоящем изобретении описано соединение, имеющее формулу (I)
(I)
где
1
1
• R представляет собой 5-членный гетероцикл, необязательно замещенный одним или больше заместителями T насыщенный, частично ненасыщенный или ароматический, содержащий по меньшей мере один атом азота, где указанный гетероцикл связан с остальной частью молекулы через атом азота, по меньшей мере один из атомов азота может быть кватернизован;
2
3
2
• R представляет собой -SOH, -CFHCOOH или -CFCOOH;
1
1
1
2
1
3
1
2
1
2
1
2
1
1
1
1
1
2
1
2
1
2
1
2
1
1
2
1
2
1
1
2
1
2
1
2
1
1
2
1
2
3
4
3
3
4
1
1
1
1
1
2
1
2
1
2
1
2
1
1
2
1
2
1
1
2
1
2
1
2
1
1
2
1
2
3
4
3
3
4
1
1
1
1
1
2
1
2
1
2
1
2
1
1
2
1
2
1
1
2
1
2
1
2
1
1
2
1
2
3
4
3
3
4
2
m
2
2
m
2
p
2
2
n
2
2
m
2
p
2
p
2
m
2
m
2
m
2
m
2
m
2
m
2
m
2
m
2
m
2
m
2
m
2
m
2
2
m
2
2
m
2
m
2
m
2
m
2
m
2
m
2
p
2
n
2
p
2
n
2
p
2
p
2
n
2
n
2
n
2
n
2
p
2
p
2
2
p
2
2
p
2
p
2
p
2
p
2
p
2
n
2
n
2
n
2
n
2
n
2
n
2
n
2
n
2
n
2
n
2
n
2
n
2
n
2
2
n
2
2
n
2
n
2
n
2
n
2
n
2
n
• T, одинаковые или разные, независимо представляют собой атом фтора; =O; -C(O)Q; -(CH)-S(O)-NQQ; -(CH)-C(=NOQ)Q; -(X)-(CH)-S(O)NQQ; -C(O)-(CH)-S(O)NQQ; -(CH)-O-(CH)-O-(CH)-NQQ; -(CH)OQ; -(CH)-CN; -(CH)-OC(O)Q; -(CH)-C(O)OQ; -(CH)-OC(O)OQ; -(CH)-OC(O)NQQ; -(CH)-C(O)NQQ; -(CH)-C(O)ONQQ; -(CH)-C(O)NQOQ; -(CH)-C(O)NQ-NQQ; -(CH)-NQC(O)Q; -(CH)-NQS(O)NQQ; -(CH)-NQS(O)Q; -(CH)-NQC(O)OQ; -(CH)-NQC(O)NQQ; -(CH)-NQQ; -(CH)-NH-C(NHQ)=NQ; -(CH)-NH-CH=NQ; -(CH)-C(NHQ)=NQ; -(X)-(CH)OQ; -(X)-(CH)-CN; -(X)-(CH)-OC(O)Q; -(X)-(CH)-C(O)OQ; -(X)-(CH)-OC(O)OQ; -(X)-(CH)-OC(O)NQQ; -(X)-(CH)-C(O)NQQ; -(X)-(CH)-C(O)ONQQ; -(X)-(CH)-C(O)NQOQ; -(X)-(CH)-C(O)NQ-NQQ; -(X)-(CH)-NQC(O)Q; -(X)-(CH)-NQS(O)NQQ; -(X)-(CH)-NQS(O)Q; -(X)-(CH)-NQC(O)OQ; -(X)-(CH)-NQC(O)NQQ; -(X)-(CH)-NQQ; -(X)-(CH)-NH-C(NHQ)=NQ; -(X)-(CH)-NH-CH=NQ; -(X)-(CH)-C(NHQ)=NQ; -C(O)-(CH)OQ; -C(O)-(CH)-CN; -C(O)-(CH)-OC(O)Q; -C(O)-(CH)-C(O)OQ; -C(O)-(CH)-OC(O)OQ; -C(O)-(CH)-OC(O)NQQ; -C(O)-(CH)-C(O)NQQ; -C(O)-(CH)-C(O)ONQQ; -C(O)-(CH)-C(O)NQOQ; -C(O)-(CH)-C(O)NQ-NQQ; -C(O)-(CH)-NQC(O)Q; -C(O)-(CH)-NQS(O)NQQ; -C(O)-(CH)-NQS(O)Q; -C(O)-(CH)-NQC(O)OQ; -C(O)-(CH)-NQC(O)NQQ; -C(O)-(CH)-NQQ; -C(O)-(CH)-NH-C(NHQ)=NQ; -C(O)-(CH)-NH-CH=NQ; -C(O)-(CH)-C(NHQ)=NQ или
1
2
2
m
2
m
1
3
1
3
1
3
1
3
2
m
3
6
2
m
3
6
2
m
3
6
2
m
3
6
2
m
1
3
1
3
1
3
2
m
3
6
2
m
3
6
2
m
3
6
2
m
3
6
T, одинаковые или разные, независимо представляют собой незамещенный или замещенный одним или больше заместителями T -(CH)-(4-, 5- или 6-членный насыщенный, частично или полностью ненасыщенный или ароматический гетероцикл); -(X)-(CH)-(4-, 5- или 6-членный насыщенный, частично или полностью ненасыщенный или ароматический гетероцикл); (C-C)-алкил; (C-C)-фторалкил; -(X)-(C-C)-алкил; -(X)-(C-C)-фторалкил; -(CH)-(C-C)-циклоалкил; -(X)-(CH)-(C-C)-циклоалкил; -(CH)-(C-C)-циклофторалкил; -(X)-(CH)-(C-C)-циклофторалкил; -C(O)-(CH)-(4-, 5- или 6-членный насыщенный, частично или полностью ненасыщенный или ароматический гетероцикл); -C(O)-(C-C)-алкил; -C(O)-(C-C)-фторалкил; -C(O)O-(C-C)-фторалкил; -C(O)-(CH)-(C-C)-циклоалкил; -C(O)-(CH)-(C-C)-циклоалкил; -C(O)-(CH)-(C-C)-циклофторалкил; -C(O)-(CH)-(C-C)-циклофторалкил;
2
2
2
• T, одинаковые или разные, независимо представляют собой -OH; -NH; -CONH;
1
2
3
3
4
3
3
4
3
3
2
r
2
r
2
r
2
n
2
r
2
n
• Q и Q, одинаковые или разные, независимо представляют собой атом водорода; -(CH)-NHQ; -(CH)-NH-C(NHQ)=NQ; -(CH)-NH-CH=NQ; (CH)-C(NHQ)=NQ; -(CH)-OQ; -(CH)-CONHQ; или
2
1
3
1
3
2
m
незамещенный или замещенный одним или больше заместителями T (C-C)-алкил; (C-C)-фторалкил; насыщенный, частично или полностью ненасыщенный или ароматический-(CH)-(4-, 5- или 6-членный гетероцикл, содержащий по меньшей мере один атом азота); или
1
2
2
Q, Q и атом азота, к которому они присоединены, вместе образуют незамещенный или замещенный одним или больше заместителями T насыщенный или частично ненасыщенный 4-, 5- или 6-членный гетероцикл, содержащий 1, 2 или 3 гетероатомов;
3
4
1
3
• Q и Q, одинаковые или разные, независимо представляют собой атом водорода или (C-C)-алкил;
• m, одинаковые или разные, независимо равны 0, 1, 2 или 3;
• n, одинаковые или разные, независимо равны 1, 2 или 3;
• p, одинаковые или разные, независимо равны 2 или 3;
2
r
• r равен 1, 2 или 3, когда (CH) напрямую связан с атомом углерода, или 2 или 3 в других случаях, предпочтительно r равен 2 или 3;
2
3
• X, одинаковые или разные, независимо представляют собой O; S; S(O); S(O) илиN(Q);
где
• любой атом углерода, присутствующий в группе, выбранной из алкила, циклоалкила, фторалкила, циклофторалкила и гетероцикла, может быть окислен с образованием C=O группы;
2
• любой атом серы, присутствующий в гетероцикле, может быть окислен с образованием S=O группы или S(O) группы;
• любой атом азота, присутствующий в гетероцикле или в группе, где он является тризамещенным и формирует третичную аминогруппу, может быть дополнительно кватернизован метильной группой;
и его рацемат, энантиомер, диастереомер, геометрический изомер или фармацевтически приемлемая соль,
за исключением следующих соединений:
В одном варианте осуществления, настоящее изобретение касается соединения, имеющего приведенную выше формулу (I), за исключением следующих соединений:
Предпочтительно, настоящее изобретение касается соединений, имеющих формулу (I), за исключением следующих соединений:
и их рацемата, энантиомера, диастереомера, геометрического изомера или фармацевтически приемлемой соли.
В одном варианте осуществления, настоящее изобретение касается соединений, имеющих формулу (I), за исключением следующих соединений:
и их рацемата, энантиомера, диастереомера, геометрического изомера или фармацевтически приемлемой соли.
Настоящее изобретение касается также соединений, имеющих формулу (I*)
(I*),
1
2
где R и R имеют такие же значения, как в случае соединений, имеющих формулу (I).
1
1
Предпочтительно, в соединениях, имеющих формулу (I) или (I*), R представляет собой гетероцикл, необязательно замещенный одним или больше заместителями T, ненасыщенный, частично насыщенный или ароматический, содержащий по меньшей мере один атом азота и необязательно один, два или три, предпочтительно один или два, других гетероатомов, выбранных из N, O или S, где указанный гетероцикл связан с остальной частью молекулы через атом азота, по меньшей мере один из атомов азота может быть кватернизован.
1
1
2
1
2
1
1
1
1
2
1
1
2
1
2
1
2
2
1
3
1
2
1
2
3
2
m
2
m
2
m
2
m
2
m
2
m
2
m
2
p
2
p
2
m
2
2
m
2
m
1
3
2
m
2
m
Предпочтительно, в соединениях, имеющих формулу (I) или (I*), T представляет собой =O, атом фтора, -(CH)-NQQ; -CN; -(CH)-C(O)NQQ; -(CH)-OQ; -(CH)-COOQ; -(CH)-C(O)NQNQQ; -(CH)-NQNQQ; -(CH)-O-(CH)-O-(CH)-NQQ; -(CH)-NQS(O)Q; незамещенный или замещенный одним или больше заместителями T -(CH)-(4-, 5- или 6-членный насыщенный, частично или полностью ненасыщенный или ароматический гетероцикл), -(X)-(CH)-(4-, 5- или 6-членный насыщенный, частично или полностью ненасыщенный или ароматический гетероцикл); (C-C)-фторалкил; -(CH)-C(NOQ)Q; -(CH)-C(O)NQOQ, где Q, Q, Q, m и n имеют указанные выше значения.
1
2
m
2
2
m
2
2
m
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
2
3
3
3
2
2
2
2
Предпочтительно, в соединениях, имеющих формулу (I) или (I*), T представляет собой =O, атом фтора, -(CH)-NH, -CN, -(CH)-C(O)NH, -(CH)-COOH, -O-(CH)NH, -C(O)NHNHC(O)Het, -NHCONH, -(CH)-O-(CH)-O(CH)NH, -NH-S(O)-NH, -Het, C(O)CH, -C(=NOH)CH, -CF, -CONHO(CH)NH, -OHet, -CH-Het, где Het представляет собой гетероцикл, насыщенный, частично ненасыщенный или ароматический, содержащий 4, 5 или 6 членов и по меньшей мере один гетероатом, выбранный из N, O или S, где m имеет указанное выше значение.
1
1
1
2
1
3
1
1
1
2
1
2
1
2
1
2
2
m
2
2
m
2
m
2
m
2
m
2
m
2
m
2
m
2
m
Предпочтительно, в соединениях, имеющих формулу (I) или (I*), T представляет собой атом фтора; =O; -C(O)Q; -(CH)-S(O)-NQQ; -(CH)-C(=NOQ)Q; -(CH)OQ; -(CH)-CN; -(CH)-C(O)OQ; -(CH)-C(O)NQQ; -(CH)-C(O)NQOQ; -(CH)-NQC(O)Q; -(CH)-NQQ; или
1
2
2
m
1
3
1
3
T, одинаковые или разные, независимо представляют собой незамещенный или замещенный одним или больше заместителями T -(CH)-(4-, 5- или 6-членный насыщенный, частично или полностью ненасыщенный или ароматический гетероцикл); (C-C)-алкил; (C-C)-фторалкил.
1
1
1
Предпочтительно, R не имеет заместителей или, когда R не является ароматическим гетероциклом, T может представлять собой =O.
1
В одном варианте осуществления, когда R не является ароматическим гетероциклом, он имеет следующую формулу:
.
1
1
В одном варианте осуществления, R представляет собой 5-членный ароматический гетероцикл, необязательно замещенный одним или больше заместителями T, содержащий по меньшей мере один атом азота, где указанный гетероцикл связан с остальной частью молекулы через атом азота, или 2-оксо-тиазол-3-ил, где по меньшей мере один из атомов азота может быть кватернизован.
1
Предпочтительно, в соединениях, имеющих формулу (I) или (I*), R выбран из:
1
1
при этом данный цикл необязательно замещен одним или больше указанными выше заместителями T, предпочтительно не имеет заместителей T.
1
В одном варианте осуществления, в соединениях, имеющих формулу (I) или (I*), R выбран из:
1
1
при этом данный цикл необязательно замещен одним или больше указанными выше заместителями T, предпочтительно не имеет заместителей T.
1
Предпочтительно, в соединениях, имеющих формулу (I) или (I*), R выбран из:
1
при этом данный цикл необязательно замещен одним или больше указанными выше заместителями T, предпочтительно не имеет заместителей.
1
В одном варианте осуществления, в соединениях, имеющих формулу (I) или (I*), R выбран из:
,
1
1
при этом данный цикл необязательно замещен одним или больше указанными выше заместителями T, предпочтительно не имеет заместителей T.
2
3
2
Предпочтительно, в соединениях, имеющих формулу (I) или (I*), R представляет собой -SOH или -CFCOOH.
2
3
В одном варианте осуществления, R представляет собой группу -SOH или одну из ее фармацевтически приемлемых солей.
1
2
Все предпочтительные варианты R и R можно комбинировать, получая варианты осуществления настоящего изобретения.
1
2
3
3
3
2
r
2
r
2
n
В одном варианте осуществления, Q и Q, одинаковые или разные, независимо представляют собой атом водорода; -(CH)-NHQ; -(CH)-OQ; -(CH)-CONHQ; или
2
1
3
2
m
незамещенный или замещенный одним или больше заместителями T (C-C)-алкил; -(CH)-(4-, 5- или 6-членный гетероцикл, содержащий по меньшей мере один атом азота, насыщенный, частично или полностью ненасыщенный или ароматический); или
1
2
2
Q, Q и атом азота, к которому они присоединены, вместе образуют незамещенный или замещенный одним или больше заместителями T насыщенный или частично ненасыщенный 4-, 5- или 6-членный гетероцикл, содержащий 1, 2 или 3 гетероатомов.
Предпочтительно, соединения, имеющие формулу (I) или (I*), выбраны из следующих:
натрия [7-оксо-3-(2-оксо-тиазол-3-ил)-1,6-диаза-бицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат
натрия [7-оксо-3-(триазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат
натрия [7-оксо-3-(триазол-2-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат
лития дифтор-(7-оксо-3-пиразол-1-ил-1,6-диаза-бицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-илокси)-ацетат
натрия [7-оксо-3-(1,2,4-триазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат
натрия [(5R)-7-оксо-3-(триазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат
В одном варианте осуществления, соединения, имеющие формулу (I) или (I*), выбраны из следующих:
натрия [3-(4-карбамоилпиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (7)
натрия [3-(4-цианопиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфат (8)
натрия [7-оксо-3-(4-метоксипиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (9)
[3-[3-(2-аминоэтил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфат (10)
натрия [3-[3-(2-гидроксиэтилкарбамоил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (11)
триэтиламмония [3-[3-(гидроксиметил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (12)
натрия [3-[3-[(2-аминотиазол-5-карбонил)амино]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (13)
натрия (7-оксо-3-(4-фторпиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфат (14)
натрия и 2,2,2-трифторацетат [3-(4-метиленаммонияпиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (15)
натрия [7-оксо-3-(4-сульфамоилпиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (16)
натрия [3-(3-карбонитрилпиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (17)
натрия [7-оксо-3-(3-фторпиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (18)
натрия [3-(3-карбамоилпиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло [3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (19)
натрия [7-оксо-3-[4-(N-морфолин)-пиразол-1-ил)]-1,6-диаза-бицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (20)
натрия [3-(4-ацетамидпиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (21)
натрия [7-оксо-3-[4-(трифторметил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (22)
натрия (7-оксо-3-(3-карбоксамид-5-метил-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфат (23)
натрия 2,2,2-трифторацетат [7-оксо-3-[4-карбоксамид,N-(2-аммонийэтокси)-пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (24)
натрия [7-оксо-3-[3-(тиазол-2-илкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (25)
натрия (7-оксо-3-(3-карбоксамид-4-фтор-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфат (26)
натрия (7-оксо-3-(3-(метоксикарбамоил)-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфат (27-1)
натрия (7-оксо-3-(5-(метоксикарбамоил)-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфат (27-2)
натрия (7-оксо-3-(3-ацетилпиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфат (28)
(7-оксо-3-(3-[(Z,E)-N-(2-аминоэтокси)-C-метил-карбонимидоил]-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) гидросульфат (29)
натрия (7-оксо-3-(3-карбоксамид-5-фтор-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфат (30)
натрия (7-оксо-3-[3-(морфолин-4-карбонил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) (31)
(7-оксо-3-[3-(4-пиперидилкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) гидросульфат (32)
триэтиламмония {[3-(N-ацетамидо)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил} сульфат (33)
натрия {7-оксо-3-[3-(тиазол-2-карбониламино)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил} сульфат (34)
натрия [7-оксо-3-[3-(метилен-2-аммониятиазол)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (35-1)
2,2,2-трифторацетат [7-оксо-3-[3-(метилен-2-аммониятиазол)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (35-2)
натрия [7-оксо-3-[3-(оксазол-2-илкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (37)
3[3-[4-(2-аминоэтилкарбамоил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфат (38)
натрия [3-[4-[(Z,E)-N-гидрокси-C-метил-карбонимидоил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (39)
натрия [3-(4-ацетилпиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (40)
[3-[4-(2-аминоэтил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфат (41)
2,2,2-трифторацетат [7-оксо-3-(4-пиперазин-4-ия-1-илпиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфат (42)
натрия [7-оксо-3-(3,4,5-тридейтериопиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (43)
натрия [7-оксо-3-(тетразол-2-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (44)
натрия [3-[3-(2-амино-2-оксо-этил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (45)
[3-[3-(2-аминоэтоксикарбамоил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфат (46)
натрия [3-[3-(2-гидроксиэтоксикарбамоил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфат (47)
натрия [3-[3-[2-(2-аммонийэтиламино)-2-оксо-этил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (48-1)
2,2,2-трифторацетат [3-[3-[2-(2-аммонийэтиламино)-2-оксо-этил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (48-2)
натрия [3-[3-(аммонийметил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (49-1)
2,2,2-трифторацетат [3-[3-(аммонийметил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфат (49-2)
натрия [3-[3-[(2-гидроксиацетил)амино]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (50)
натрия [3-[3-(3-гидроксипропаноиламино)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфат (51)
натрия [3-[3-[(2-амино-2-оксо-этокси)карбамоил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (52)
натрия [7-оксо-3-(4-тиазол-2-илтриазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (55)
натрия [3-(4-карбамоилтриазол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфат (56)
натрия [3-[4-(аммонийметил)триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (57-1)
2,2,2-трифторацетат [3-[4-(аммонийметил)триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфат (57-2)
натрия [3-[4-(диметиламино)метилтриазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (59)
[3-[4-(метиламинометил)триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфат (60)
динатрия [[3-[4-(карбоксиметил)триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (61)
[3-[4-(2-аминоэтоксикарбамоил)триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфат (63)
натрия [3-[4-(гидроксиметил)триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (64)
динатрия [3-[4-(пропаноат)триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (65)
[3-(4-(2-(метиламино)ацетамид)триазол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфат (66)
[3-(4-(2-(метиламино)этанол)триазол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфат (67)
натрия [3-[5-(2-гидроксиэтил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (68)
натрия [3-[3-[2-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (69)
натрия [3-[2-(гидроксиметил)имидазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (70)
натрия [3-[4-(гидроксиметил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (71)
[3-[3-(2-морфолиноэтилкарбамоил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфат (72)
триметиламмония [3-[2-(3-амино-3-оксо-пропил)имидазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (73)
натрия [3-[4-(2-гидроксиэтилсульфамоил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфат (74)
натрия [3-[3-[(1S)-1,2-дигидроксиэтил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (76)
[3-[3-[тиазол-5-карбонил]амино]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфат (77)
натрия [3-(2-оксазолил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил сульфат (78)
[7-оксо-3-[3-(1,2,4-тиадиазол-5-илкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфат (79)
натрия [7-оксо-3-[3-(2-пиридилкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (80)
[7-оксо-3-[3-[[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамоил]пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфат (82)
[7-оксо-3-[3-[[(3R)-пирролидин-3-ил]карбамоил]пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] гидросульфат (83)
натрия [7-оксо-3-[3-(1,3,4-тиадиазол-2-илкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (84)
натрия [7-оксо-3-[3-(пиразол-3-илкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (85).
Термин "алкил", при использовании в настоящем тексте, означает алифатическую углеводородную группу, которая может быть линейной или разветвленной, содержащую 1 - 3 атома углерода в цепи, если не указано иное. Предпочтительные алкильные группы содержат 1 или 2 атома углерода в цепи. Частные примеры алкильных групп включают (но не ограничиваются только ими) метил, этил, н-пропил, изопропил. Предпочтительно, алкильная группа представляет собой метил или этил.
Термин "фторалкил", при использовании в настоящем тексте, означает алкильную группу, замещенную по меньшей мере одним атомом фтора. Термин “алкил” имеет указанное выше значение. Частные примеры фторалкильных групп включают (но не ограничиваются только ими) трифторметил, дифторметил, фторметил.
Термин "циклоалкил" означает насыщенный моноциклический или бициклический неароматический углеводородный цикл, содержащий 3 - 6 атомов углерода, предпочтительно 3 - 4 атома углерода, который может содержать один или больше ненасыщенных элементов. Частные примеры моноциклических циклоалкильных групп включают циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил. Предпочтительно, циклоалкильная группа представляет собой циклопропил или циклобутил.
Термин “циклофторалкил” означает циклоалкильную группу, замещенную по меньшей мере одним атомом фтора. Термин “циклоалкил” имеет указанное выше значение. Частные примеры циклофторалкильных групп включают циклофторпропил, циклодифторпропил, циклофторбутил, циклодифторбутил.
Термин "гетероцикл", при использовании в настоящем тексте и если не указано иное, в отдельности или в комбинации с другим радикалом, означает моноциклический насыщенный, частично или полностью ненасыщенный или ароматический углеводородный радикал, предпочтительно 4-10-членный углеводородный радикал, содержащий по меньшей мере один гетероатом, такой как N, O, S, S(O) или S(O)2. Предпочтительно, гетероцикл представляет собой моноциклический насыщенный, частично или полностью ненасыщенный или ароматический углеводородный радикал, предпочтительно 4-6-членный углеводородный радикал, содержащий по меньшей мере один атом азота и по меньшей мере один дополнительный гетероатом, такой как N, O, S, S(O) или S(O)2. Атомы углерода в гетероцикле могут также быть окислены с образованием C(O) группы. Подходящие гетероциклы описаны также в Handbook of Chemistry and Physics, 76th Edition, CRC Press, Inc., 1995-1996, pages 2-25 - 2-26. Примеры гетероциклических групп включают (но не ограничиваются только ими) азетидинил, оксетанил, оксазолил, оксазолидинил, оксадиазолил, пирролил, пирролидинил, пиридил, тетрагидропиридинил, пиперидинил, морфолинил, пиразолил, пиримидинил, пиразинил, тетразолил, имидазолил, тиенил, тиазолил, фуранил, тиадиазолил, изотиазолил, триазолил, тетразолил, пиразолил, изоксазолил, 2-пирролидинонил, имидазол-2,4-дион, 1,2,4-оксадиазол-5-он, 1,5-дигидропирролил-2-он, пиразинон, пиридазинон, пиридон, пиримидон, диоксанил, пирролидинил, имидазолидинил, пиранил, тетрагидрофуранил, диоксаланил, тетрагидропиранил. Предпочтительно, гетероцикл содержит 1 - 4 гетероатома, выбранных из N, O или S, предпочтительно 1, 2 или 3 гетероатома.
3
2
2
2
Кроме того, некоторые соединения по настоящему изобретению могут содержать основную аминогруппу и могут поэтому образовывать цвиттерионную соль (или цвиттер-ион) с кислой группой -OSOH, -OCFHCOH или -OCFCOH, и такие внутренние цвиттерионные соли также входят в объем настоящего изобретения.
Выражение “необязательно замещенный” означает “незамещенный или замещенный химическими группами, которые перечислены дополнительно” или “незамещенные или замещенные химические группы, которые перечислены дополнительно”.
Термин "рацемат" в настоящем тексте применяется для обозначения равного количества двух отдельных энантиомеров.
Термин "энантиомер" в настоящем тексте применяется для обозначения одного из двух отдельных стереоизомеров, которые не являются совмещаемыми, но являются зеркальными отражениями друг друга.
Соединения по настоящему изобретению могут включать один или больше асимметрических атомов углерода и поэтому могут существовать в форме оптических изомеров, а также в форме их рацемических или нерацемических смесей. Соединения по настоящему изобретению могут использоваться в виде одного изомера или в виде смеси стереохимических изомерных форм. Диастереомеры, т.е. несовместимые стереохимические изомеры, можно разделить обычными способами, такими как хроматография, перегонка, кристаллизация или сублимация. Оптические изомеры (энантиомеры) можно получить с применением оптически активных исходных веществ, расщеплением рацемических смесей согласно известным способам, например, через образование диастереомерных солей при обработке оптически активной кислотой или основанием, или с применением хиральной хроматографической колонки.
При использовании в настоящем тексте, выражение "фармацевтически приемлемые соли" означает производные описанных соединений, в которых материнское соединение модифицировано путем получения их соли с кислотой или основанием. Примеры фармацевтически приемлемых солей включают (но не ограничиваются только ими) соли минеральных или органических солей с основными фрагментами, такими как амины; соли щелочных металлов или органические соли с кислотными фрагментами, такими как карбоновые кислоты или аминогидроксил-O-сульфокислоты; и т.п. Фармацевтически приемлемые соли по настоящему изобретению можно синтезировать из материнского соединения, содержащего основный или кислотный фрагмент, общеизвестными химическими методами. Кроме того, выражение "фармацевтически приемлемая соль" означает относительно нетоксичные соли соединений по настоящему изобретению с неорганическими и органическими кислотами или основаниями. Эти соли можно получить in situ во время финального выделения и очистки соединений. В частности, кислотно-аддитивные соли можно получить отдельной реакцией очищенного соединения в его очищенной форме с органической или неорганической кислотой и выделением образующейся соли. Среди примеров кислотно-аддитивных солей можно указать такие соли как гидробромид, гидрохлорид, гидроиодид, сульфамат, сульфат, бисульфат, фосфат, нитрат, ацетат, пропионат, сукцинат, оксалат, валерат, олеат, пальмитат, стеарат, лаурат, борат, бензоат, лактат, тозилат, цитрат, малеат, фумарат, тартрат, нафтилат, мезилат, глюкогептанат, глюкуронат, глутамат, лактобионат, малонат, салицилат, метиленбис-β-гидроксинафтоат, соль гензитиновой кислоты, изетионат, ди-п-толуоилтартрат, этансульфонат, бензолсульфонат, циклогексилсульфамат, хинат, лаурилсульфонат и т.п. Примеры солей с основаниями включают аммиачные соли, такие как соли с трометамином, меглумином, эполамином и т.д., соли с металлами, такие как соли натрия, калия, кальция, цинка или магния, соли с органическими основаниями, такими как дициклогексиламин, N-метил-D-глюкамин. Перечни подходящих солей можно найти в Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1985, p. 1418, P.H. Stahl, C.G. Wermuth, Handbook of Pharmaceutical salts - Properties, Selection and Use, Wiley-VCH, 2002, и S.M. Berge et al. "Pharmaceutical Salts" J. Pharm. Sci, 66: p.1-19 (1977).
2
3
11
13
14
18
19
13
15
33
34
35
36
17
18
2
Соединения по настоящему изобретению также включают изотопно-меченые соединения, в которых один или больше атомов заменены на атом, имеющий такой же атомный номер, но атомную массу, отличную от атомной массы, обычно присутствующей в природе. Примеры изотопов, подходящих для включения в описанные выше соединения, включают (но не ограничиваются только ими) H, H, C, C, C, F, F, N, N, S, S, S, S, O или O. Изотопно-меченые соединения можно применять в исследованиях распределения лекарственных средств или субстратов в тканях. Замещение на более тяжелые изотопы, такие как дейтерий (H), обеспечивает более высокую метаболическую устойчивость (например, увеличивается время полужизни in vivo или снижается необходимая доза). Изотопно-меченые соединения получают любым подходящим способом или с применением подходящего изотопно-меченого реагента вместо немеченого реагента, применяемого в других случаях.
В настоящем изобретении описаны соединения, имеющие антибактериальные свойства, и/или соединения работающие как ингибиторы β-лактамазы.
В настоящем изобретении описан также способ получения соединения по настоящему изобретению.
1
2
В настоящем изобретении описаны также частные способы, представленные на схемах в экспериментальной части, описанные в настоящем тексте для получения соединений по настоящему изобретению, где R, R представляют собой различные заместители. Эти способы можно также адаптировать для получения других соединений по настоящему изобретению. На основе описанных в настоящем тексте способов можно разработать другие способы получения соединения по настоящему изобретению.
Настоящее изобретение касается также соединений, имеющих формулу
, предпочтительно или , предпочтительно
где
1
R имеет такое же значение, как в случае соединений, имеющих формулу (I) или (I*),
2
3
Y представляет собой галоген, -B(OR) или SnR, где R представляет собой алкил, или OR соединены вместе с B с образованием цикла, содержащего, например, 5 членов; и
PG представляет собой защитную группу, например, выбранную из аллила, бензила, трет-бутилдиметилсилила (TBDMS), трет-бутоксикарбонила (Boc).
Эти соединения, в частности, представляют собой промежуточные соединения для получения соединений, имеющих формулу (I), (I*) по настоящему изобретению.
В настоящем изобретении описано также применение соединений по настоящему изобретению для борьбы с бактериями. Соединение по настоящему изобретению обычно применяют в комбинации с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом.
Выражение "фармацевтически приемлемый" используется в настоящем тексте для обозначения соединений, материалов, композиций и/или дозированных форм, которые, согласно экспертному суждению медиков, подходят для применения в контакте с тканями организма человека и животных без избыточной токсичности, раздражения, аллергической реакции или других проблем или осложнений, соразмерно разумному соотношению польза/риск.
В настоящем изобретении описана также композиция, предпочтительно фармацевтическая композиция, содержащая по меньшей мере одно соединение по настоящему изобретению в смеси с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом. Композиция по настоящему изобретению, таким образом, может содержать по меньшей мере одно соединение, выбранное из соединений, имеющих формулу (I), (I*), в смеси с фармацевтически приемлемым вспомогательным веществом.
Композиция по настоящему изобретению может дополнительно содержать по меньшей мере одно или больше антибактериальных средств, предпочтительно по меньшей мере одно из этих антибактериальных средств представляет собой бета-лактам.
Термин “бета-лактам” или “β-лактам” означает антибактериальные соединения, содержащие β-лактамный фрагмент, т.е. β-лактамную химическую группу или фрагмент.
Термин "фармацевтически приемлемый носитель" или "фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество" применяется в отношении любого вспомогательного вещества, растворителя, диспегирующей среды, замедлителя всасывания, разбавителя или адъюванта и т.д., таких как консерванты или антиоксиданты, наполнители, связующие вещества, разрыхлители, увлажняющие средства, эмульгаторы, суспендирующие средства, растворители, диспергирующие среды, покрытия, антибактериальные средства, изотонические агенты и агенты, замедляющие всасывание, и т.п., которые не дают вторичной реакции, например, аллергической реакции, у человека или животных. В типичном случае, неограничивающие примеры вспомогательных веществ включают маннит, лактозу, стеарат магния, сахарид натрия, тальк, целлюлозу, кроскармеллозу натрия, глюкозу, желатин, крахмал, лактозу, дикальция фосфат, сахарозу, каолин, карбонат магния, увлажняющие средства, эмульгаторы, солюбилизаторы, стерильную воду, физраствор, рН буферы, неионогенные поверхностно-активные вещества, лубриканты, стабилизаторы, связующие вещества и пищевые масла, такие как арахисовое масло, сезамовое масло и т.п. Кроме того, в состав можно включать различные вспомогательные вещества, широко известные в данной области техники. Фармацевтически приемлемые носители или вспомогательные вещества хорошо известны квалифицированным специалистам в данной области и включают описанные в Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company, Easton, USA, 1985), Merck Index (Merck & Company, Rahway, N.J.), Gilman et al (Eds. The pharmacological basis of therapeutics, 8th Ed., Pergamon press., 1990). За исключением случаев несовместимости общеупотребимых сред или вспомогательных веществ с действующим веществом по настоящему изобретению, их применение в составе терапевтических композиций входит в объем настоящего изобретения.
Выражение “антибактериальное средство” при использовании в настоящем тексте означает любое вещество, соединение или их комбинацию, способную подавлять, снижать или предотвращать рост бактерий, подавлять или снижать рост бактерий, подавлять или снижать способность бактерий вызывать инфекцию у субъекта, или подавлять или снижать способность бактерий размножаться или оставаться инвазионными в окружающей среде, или уменьшать неэффективность или вирулентность бактерий.
Антибактериальное средство можно подобрать из следующих семейств: аминогликозиды, бета-лактамы, глицилциклины, тетрациклины, хинолоны, фторхинолоны, гликопептиды, липопептиды, макролиды, кетолиды, линкозамиды, стрептограмины, оксазолидиноны и полимиксины (в отдельности или в смеси). Предпочтительно, дополнительное антибактериальное средство выбрано из бета-лактамного семейства, и более предпочтительно - из пенициллина, цефалоспоринов, пенемов, карбапенемов, карбапенемов и монобактама, по отдельности или в смеси.
Из числа пенициллинов, антибактериальное средство предпочтительно выбрано из группы, состоящей из амоксициллина, ампициллина, азлоциллина, мезоциллина, апалциллина, гетациллина, бакампициллина, карбенициллина, сулбенициллина, темоциллина, тикарциллина, пиперациллина, мециллинама, пивмециллинама, метициллина, циклациллина, талампициллина, аспоксициллина, оксациллина, клоксациллина, диклоксациллина, флуклоксациллина, нафциллина и пивампициллина, в отдельности или в смеси.
Из числа цефалоспоринов, антибактериальное средство предпочтительно выбрано из группы, состоящей из следующих: цефатриазин, цефазолин, цефокситин, цефалексин, цефрадин, цефтизоксим, цефацетрил, цефбуперазон, цефпрозил, цефтобипрол, цефтобипрол медокарил, цефтаролинцефтаролин фосаминил, цефалониум, цефминокс, цефоранид, цефотетан, цефтибупен, цефкапен пивоксил, цефдиторен пивоксил, цефдалоксим, цефроксадин, цефтолозан и S-649266, цефалотин, цефалоридин, цефаклор, цефадроксил, цефамандол, цефазолин, цефалексин, цефрадин, цефтизоксим, цефацетрил, цефотиам, цефотаксим, цефсулодин, цефоперазон, цефменоксим, цефметазол, цефалоглицин, цефоницид, цефодизим, цефпиром, цефтазидим, цефтриаксон, цефпирамид, цефбуперазон, цефозопран, цефепим, цефозелис, цефлупренам, цефузонам, цефпимизол, цефклидин, цефиксим, цефтибутен, цефдинир, цефподоксим аксетил, цефподоксим проксетил, цефтерам пивоксил, цефетамет пивоксил, цефкапен пивоксил, цефдиторен пивоксил, цефуроксим, цефуроксим аксетил, лоракарбеф и латамоксеф, в отдельности или в смеси.
Из числа карбапенемов, антибактериальное средство предпочтительно выбрано из группы, состоящей из имипенема, дорипенема, меропенема, биапенема, эртапенема и панипенема, в отдельности или в смеси.
Из числа монобактамов, антибактериальное средство предпочтительно выбрано из группы, состоящей из азтреонама, тигемонама, карумонама, BAL30072 и нокардицина A, в отдельности или в смеси.
Настоящее изобретение касается также композиции, содержащей по меньшей мере соединение, соответствующее формулам (I), (I*) по настоящему изобретению, и цефтазидим.
В настоящем изобретении описан также набор, содержащий:
- фармацевтическую композицию по настоящему изобретению, и
- по меньшей мере одну другую композицию, содержащую одно или больше антибактериальных средств, предпочтительно по меньшей мере одно из этих антибактериальных средств представляет собой бета-лактам.
Указанные две композиции могут каждая быть приготовлена отдельно с одним определенным фармацевтически приемлемым носителем, и могут затем быть смешаны, в особенности непосредственно перед применением.
Настоящее изобретение касается также набора, содержащего:
- фармацевтическую композицию, содержащую по меньшей мере соединение, соответствующее формулам (I) или (I*) по настоящему изобретению; и
- фармацевтическую композицию, содержащую цефтазидим.
Настоящее изобретение касается также соединения, выбранного из соединений, имеющих формулу (I) или (I*) по настоящему изобретению, для применения в качестве лекарственного средства.
Настоящее изобретение касается также соединения, выбранного из соединений, имеющих формулу (I) или (I*) по настоящему изобретению, для применения для получения лекарственного средства.
Настоящее изобретение касается также соединения, выбранного из соединений, имеющих формулу (I) или (I*) по настоящему изобретению, для применения в качестве антибактериального средства.
Настоящее изобретение касается также применения соединения, выбранного из соединений, имеющих формулу (I) или (I*) по настоящему изобретению, или применения фармацевтической композиции по настоящему изобретению для получения лекарственного средства, содержащего антибактериальное средство.
Настоящее изобретение касается также применения соединения, выбранного из соединений, имеющих формулу (I) или (I*) по настоящему изобретению, или применения фармацевтической композиции по настоящему изобретению для получения лекарственного средства, содержащего ингибитор бета-лактамазы.
Настоящее изобретение касается также применения соединения, выбранного из соединений, имеющих формулу (I) или (I*) по настоящему изобретению, или применения фармацевтической композиции по настоящему изобретению для получения лекарственного средства, содержащего антибактериальное средство и ингибитор бета-лактамазы.
Настоящее изобретение касается также применения соединения, выбранного из соединений, имеющих формулу (I) или (I*) по настоящему изобретению, или применения фармацевтической композиции по настоящему изобретению, или применения набора по настоящему изобретению для лечения или для профилактики по меньшей мере одной бактериальной инфекции.
Настоящее изобретение касается также применения соединения, выбранного из соединений, имеющих формулу (I) или (I*) по настоящему изобретению, или применения фармацевтической композиции по настоящему изобретению, или применения набора по настоящему изобретению для получения лекарственного средства, которое можно применять для лечения или профилактики по меньшей мере одной бактериальной инфекции.
Термины "профилактика", "предотвращать" и "предотвращение" при использовании в настоящем тексте означают введение соединения или композиции по настоящему изобретению в целях предотвращения бактериальной инфекции или для предотвращения возникновения связанной с ней инфекции и/или заболеваний. Термины “профилактика”, “предотвращать” и “предотвращение” включают также введение соединения или композиции по настоящему изобретению в целях предотвращения по меньшей мере одной бактериальной инфекции, путем введения пациенту, подверженного инфицированию или иным образом рискующему заразиться бактериями.
Термины "лечение" и "лечить" при использовании в настоящем тексте означают, в частности, применение соединения или композиции по настоящему изобретению пациенту, страдающему от инфекции. Термины "лечение" и "лечить" при использовании в настоящем тексте означают также введение соединения или композиции по настоящему изобретению пациенту, необязательно в комбинации с одним или больше другими антибактериальными средствами, с целью:
- ослабления или устранения бактериальной инфекции или одного или больше симптомов, связанных с бактериальной инфекцией, или
- замедления развития бактериальной инфекции или одного или больше симптомов, связанных с бактериальной инфекцией, или
- уменьшения степени тяжести бактериальной инфекции или одного или больше симптомов, связанных с бактериальной инфекцией, или
- подавления клинического проявления бактериальной инфекции, или
- подавления проявления побочных симптомов, вызванных бактериальной инфекцией.
Выражение "инфекция" или "бактериальная инфекция" при использовании в настоящем тексте включает наличие бактерий в организме субъекта или на поверхности субъекта, подавление роста которых имеет положительный эффект для субъекта. Поэтому термин "инфекция" или "бактериальная инфекция", помимо обозначения присутствия бактерий, относится также к нормальной флоре, присутствие которой является нежелательным. Термин "инфекция" включает инфекцию, вызываемую бактериями. Примерами таких бактериальных инфекций являются инфекции мочевыводящих путей, почечные инфекции (пиелонефрит), гинекологические и акушерские инфекции, инфекции дыхательных путей, острые приступы хронического бронхита, внебольничная пневмония, внутрибольничная пневмония, ИВЛ-ассоциированная пневмония, внутрибрюшинная пневмония, острое воспаление среднего уха, острый синусит, сепсис, сепсис вследствие осложнений катетеризации, шанкроид, хламидии, кожные инфекции, бактериемия.
Термин "рост" при использовании в настоящем тексте означает рост одного или больше микроорганизмов и включает репродукционную и популяционную экспансию микроорганизмов, таких как бактерии. Данный термин также включает поддержание метаболических процессов у микроорганизмов, включая процессы, которые поддерживают микроорганизмы в живом состоянии.
По настоящему изобретению, бактерии выбраны из грам-положительных бактерий или грам-отрицательных бактерий, предпочтительно грам-отрицательных бактерий. По настоящему изобретению, бактерии могут быть также выбраны из бактерий, продуцирующих "бета-лактамазу" или "β-лактамазу". Такие бактерии хорошо известны квалифицированным специалистам в данной области. Термин "бета-лактамаза" или "β-лактамаза" при использовании в настоящем тексте означает любой фермент или белок или любое другое вещество, которые способны разрушать бета-лактамный цикл. Термин "бета-лактамаза" или "β-лактамаза" включает ферменты, которые вырабатываются бактериями и обладают способностью гидролизовать, частично или полностью, бета-лактамный цикл, присутствующий в соединении, таком как антибактериальное средство.
Среди грам-положительных бактерий, бактерии по настоящему изобретению предпочтительно выбраны из видов, принадлежащих к родам Staphylococcus, Streptococcus, Staphylococcus (включая Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis), Streptococcus (включая Streptococcus pneumonia, Streptococcus agalactiae), Enterococcus (включая Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium).
Среди грам-отрицательных бактерий, бактерии по настоящему изобретению предпочтительно выбраны из видов рода Acinetobacter (включая Acinetobacter baumannii), рода Citrobacter, рода Escherichia (включая Escherichia coli), Haemophilus influenza, Morganella morganii, рода Klebsiella (включая Klebsiella pneumonia), рода Enterobacter (включая Enterobacter cloacae), Neisseria gonorrhoeae, рода Burkholderia (включая Burkholderia cepacia), рода Proteus (включая Proteus mirabilis), рода Serratia (включая Serratia marcescens), Pseudomonas aeruginosa.
Таким образом, настоящее изобретение предпочтительно касается соединения, выбранного из соединений, имеющих формулу (I) или (I*) по настоящему изобретению, или фармацевтической композиции по настоящему изобретению или набора по настоящему изобретению для применения для лечения или для профилактики бактериальной инфекции, предпочтительно вызванной бактериями, продуцирующими одну или больше бета-лактамаз. Предпочтительно, указанные бактерии выбраны из грам-положительных бактерий или грам-отрицательных бактерий, более предпочтительно из грам-отрицательных бактерий.
Настоящее изобретение касается также применения соединения, выбранного из соединений, имеющих формулу (I) или (I*) по настоящему изобретению, или фармацевтической композиции по настоящему изобретению для получения лекарственного средства для лечения или для профилактики бактериальной инфекции, предпочтительно вызванной бактериями, продуцирующими одну или больше бета-лактамаз. Предпочтительно, указанные бактерии выбраны из грам-положительных бактерий или грам-отрицательных бактерий, более предпочтительно из грам-отрицательных бактерий.
Настоящее изобретение касается также набора по настоящему изобретению, для его одновременного, раздельного или последовательного введения пациенту, нуждающемуся в его введении, для лечения или профилактики бактериальных инфекций, предпочтительно вызванных бактериями, продуцирующими одну или больше бета-лактамаз. Предпочтительно, указанные бактерии выбраны из грам-положительных бактерий или грам-отрицательных бактерий, более предпочтительно из грам-отрицательных бактерий.
Настоящее изобретение касается также соединения, выбранного из соединений, имеющих формулу (I) или (I*) по настоящему изобретению, для применения в комбинации с одним или больше дополнительными антибактериальными средствами, предпочтительно по меньшей мере одно из указанных дополнительных антибактериальных средств представляет собой бета-лактамное соединение, для лечения или для профилактики бактериальных инфекций, предпочтительно вызванных бактериями, продуцирующими одну или больше бета-лактамаз. Предпочтительно, указанные бактерии выбраны из грам-положительных бактерий или грам-отрицательных бактерий, более предпочтительно из грам-отрицательных бактерий, и соединение, выбранное из соединений, имеющих формулу (I) или (I*) по настоящему изобретению, и дополнительное антибактериальное средство вводят одновременно, раздельно или последовательно.
Настоящее изобретение касается также применения соединения, выбранного из соединений, имеющих формулу (I) или (I*) по настоящему изобретению, или фармацевтической композиции по настоящему изобретению или набора по настоящему изобретению для профилактики или для лечения бактериальных инфекций, предпочтительно бактериальной инфекции, предпочтительно вызванной бактериями, продуцирующими одну или больше бета-лактамаз. Предпочтительно, указанные бактерии выбраны из грам-положительных бактерий или грам-отрицательных бактерий, более предпочтительно из грам-отрицательных бактерий.
Настоящее изобретение касается также способа лечения или профилактики бактериальных инфекций, предпочтительно вызванных бактериями, продуцирующими одну или больше бета-лактамаз, включающего введение терапевтически эффективного количества соединения, выбранного из соединений, имеющих формулу (I) или (I*) по настоящему изобретению, или фармацевтической композиции по настоящему изобретению или набора по настоящему изобретению пациенту, нуждающемуся в этом. Предпочтительно, указанные бактерии выбраны из грам-положительных бактерий или грам-отрицательных бактерий, более предпочтительно из грам-отрицательных бактерий.
Термин "пациент" означает человека или животное, рискующих заразиться бактериями, или человека или животное, инфицированных бактериями, предпочтительно грам-положительными и грам-отрицательными бактериями, более предпочтительно грам-отрицательными бактериями. При использовании в настоящем тексте, термин "пациент" означает теплокровного человека или животное, такое как млекопитающее, предпочтительно человека или ребенка, страдающего или потенциально могущего страдать от одной или больше инфекций и патологических состояний, описанных в настоящем тексте. Выявление субъектов, нуждающихся в лечении от перечисленных в настоящем тексте заболеваний и патологических состояний, находится в рамках знаний и умений квалифицированного специалиста в данной области. Квалифицированный ветеринар или лечащий врач способны идентифицировать пациентов, нуждающихся в таком лечении, с помощью клинических тестов, физического обследования, изучения медицинской истории и наследственности, биологических и диагностических тестов.
Выражение "терапевтически эффективное количество" или "фармацевтически эффективное количество" при использовании в настоящем тексте означает количество соединения по настоящему изобретению, которое при введении пациенту, нуждающемуся в этом, является достаточным для осуществления лечения болезней, патологических состояний или нарушений, для лечения которых предназначено данное соединение. Такое количество является достаточным для достижения биологического или медицинского ответа ткани, системы или пациента, необходимого исследователю или лечащему врачу. Количество соединения по настоящему изобретению, которое составляет “терапевтически эффективное количество”, варьируется в зависимости от самого соединения и его биологической активности, композиции, которая применяется для введения, времени введения, способа введения, скорости экскреции соединения, длительности лечения, типа и степени тяжести болезни, патологического состояния или нарушения, которое подвергается лечению, лекарственных средств, применяемых в комбинации или ненамеренно вместе с соединениями по настоящему изобретению, а также от возраста, веса тела, общего состояния здоровья, пола и диеты пациента. Такое “терапевтически эффективное количество” может определить квалифицированный специалист в данной области, основываясь на общих знаниях и настоящем описании. Предпочтительно, соединение по настоящему изобретению вводят в количестве от 0.1 до 30 грамм в сутки.
Соединение по настоящему изобретению может входить в состав раствора в водном физиологическом солевом буфере для парентеранльного введения. Соединение по настоящему изобретению можно также вводить в форме однократных дозированных форм, где выражение “однократная дозированная форма” означает однократную дозу, которую можно вводить пациенту и которую легко упаковывать и обращаться с ней, при этом она остается физически и химически стабильной однократной дозированной формой, содержащей действующее вещество само по себе или в виде фармацевтически приемлемой композиции, как описано в настоящем тексте. Описанное в настоящем тексте соединение можно вводить в состав фармацевтических композиций посредством смешивания с одним или больше фармацевтически приемлемыми вспомогательными веществами. Такие композиции с однократной дозировкой можно готовить для перорального введения, в частности в форме таблеток, простых капсул или мягких гелевых капсул; или для интраназального введения, в частности в форме порошков, назальных капель или аэрозолей; или для накожного применения, например, местно в виде мазей, кремов, лосьонов, гелей или спреев, или с помощью пластырей для чрезкожного введения.
Фармацевтическую композицию можно с удобством вводить в однократной дозированной форме, и ее можно готовить любым из методов, хорошо известных в области фармацевтики, например, как описано в работе Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th ed.; Gennaro, A. R., Ed.; Lippincott Williams & Wilkins: Philadelphia, PA, 2000.
Предпочтительные препараты включают фармацевтические композиции, в которых соединение по настоящему изобретению введено в состав препаратов для перорального или парентерального введения.
В случае перорального введения, таблетки, пилюли, порошки, капсулы, пастилки и т.п. могут содержать один или больше из перечисленных далее ингредиентов или соединений сходной природы: связующее вещество, такое как микрокристаллическая целлюлоза или трагакантовая камедь; разбавитель, такой как крахмал или лактоза; разрыхлитель, такой как крахмал или производные целлюлозы; лубрикант, такой как стеарат магния; скользящее вещество, такое как коллоидный диоксид кремния; подсластитель, такой как сахароза или сахарин; или ароматизатор, такой как перечная мята или метилсалицилат. Капсулы могут иметь форму твердых капсул или мягких капсул, которые обычно изготавливают из желатина, опционально смешанного с пластификаторами, а также крахмальных капсул. Кроме того, однократные дозированные формы могут содержать различные другие материалы, которые модифицируют физическое состояние дозированной формы, например, покрытие из сахара, шеллака или растворяющихся в кишечнике веществ. Другие дозированные формы для перорального введения - сироп или эликсир - могут содержать подсластители, консерванты, красители, пигменты и ароматизаторы. Кроме того, действующие вещества могут быть включены в быстрорастворяющиеся препараты, препараты с модифицированным высвобождением или с замедленным высвобождением, при этом препараты с замедленным высвобождением предпочтительно являются бимодальными. Предпочтительные таблетки содержат лактозу, кукурузный крахмал, силикат магния, кроскармелозу натрия, повидон, стеарат магния или тальк, в любой комбинации.
Жидкие препараты для парентерального введения включают стерильные водные или неводные растворы, суспензии или эмульсии. Жидкие композиции могут также включать связующие вещества, буферные добавки, консерванты, хелатирующие агенты, подсластители, ароматизаторы и красители и т.п. Неводные растворители включают спирты, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла, такие как оливковое масло, и органические сложные эфиры, такие как этилолеат. Водные носители включают смеси спиртов и воды, буферные среды и физиологический раствор. В частности, биосовместимый биоразлагаемый лактидный полимер, лактид/гликолидный сополимер или полиоксиэтилен-полиоксипропиленовые сополимеры могут служить полезными вспомогательными веществами для контроля высвобождения действующего вещества. Носители для внутривенных препаратов могут включать жидкость и подкрепляющие питательные вещества, электролитные подкрепляющие вещества, такие как носители на основе раствора Рингера для инъекций, и т.п. Другие потенциально применимые системы для парентерального введения действующего вещества включают сополимерные этилен-винилацетатные частицы, осмотические насосы, имплантируемые инфузионные системы и липосомы.
Альтернативные способы введения включают препараты для ингаляций, которые включают такие средства, как сухой порошок, аэрозоль или капли. Они могут представлять собой водные растворы, содержащие, например, полиоксиэтилен-9-лауриловый эфир, гликохолат и деоксихолат, или масляные растворы для введения в форме назальных капель или в форме геля для интраназального применения. Препараты для буккального введения включают, например, подушечки или пастилки, и могут также включать ароматизированную основу, такую как сахароза или смола акации, и другие вспомогательные вещества, такие как гликохолат. Препараты, подходящие для ректального введения, предпочтительно выпускаются в виде дозированных суппозиториев с твердым носителем и могут включать салицилат. Препараты для наружного нанесения на кожу предпочтительно имеют форму мази, крема, лосьона, пасты, геля, спрея, аэрозоля или масла. Подходящие для применения носители включают вазелин, ланолин, полиэтиленгликоли, спирты или их комбинации.
Препараты, подходящие для чрезкожного введения, могут выпускаться в виде отдельных пластырей и могут представлять собой липофильные эмульсии или забуференные водные растворы, растворенные и/или диспергированные в полимере или адгезиве.
Примеры
Описанные далее примеры приведены исключительно в целях иллюстрации настоящего изобретения и никоим образом не ограничивают объем настоящего изобретения.
Первая часть представляет собой описание получения соединений (промежуточных продуктов и финальных соединений), а во второй части описано исследование антибактериальной активности соединений по настоящему изобретению.
Получение соединений и биологическая активность:
Использующиеся в настоящем тексте сокращения и символы включают:
ACN:
ацетонитрил
AcOH:
уксусная кислота
Bn:
бензил
Boc:
трет-бутоксикарбонил
Boc<sub>2</sub>O:
трет-бутоксикарбонил ангидрид
ушир.:
уширенный (ЯМР сигнал)
Cbz:
карбоксибензил
CbzCl:
бензил хлорформиат
КОЕ:
колониеобразующие единицы
CLSI:
Институт клинических и лабораторных стандартов
д:
дублет
DBU:
1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен
ДХМ:
дихлорметан
ДХЭ:
1,2-дихлорэтан
дд:
дублет дублетов
ддд:
дублет дублетов дублетов
ддт:
дублет дублетов триплетов
д.кв.:
дублет квадруплетов
дт:
дублет триплетов
DIAD:
диизопропил азодикарбоксилат
DIPEA:
N,N-диизопропилэтиламин
ДМА:
диметилацетамид
DMAP:
N,N-диметил-4-аминопиридин
DMCyDA:
транс-N,N’-диметилциклогексан-1,2-диамин
ДМФА:
N,N-диметилформамид
ДМСО:
диметилсульфоксид
EDC⋅HCl:
N-(3-Диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимид гидрохлорид
EtOAc:
этилацетат
Et<sub>2</sub>O:
диэтиловый эфир
ч:
часы
HATU:
1-[Бис(диметиламино)метилен]-1H-1,2,3-триазоло[4,5-b] пиридиния 3-оксид гексафторфосфат
HOBt:
1-гидроксибензотриазол гидрат
iPrOH:
изопропанол
м:
мультиплет
мин:
минуты
MeOH:
метанол
MeONa:
натрия метоксид
MIC:
минимальная подавляющая комбинация
MS:
масс-спектрометрия
MsCl:
метансульфонилхлорид
ЯМР:
спектроскопия ядерного магнитного резонанса
Nos:
нозил, нитробензолсульфонил
Pd(Ph<sub>3</sub>)<sub>4</sub>:
тетракис(трифенилфосфин)палладий(0)
PG:
защитная группа
PhSH:
тиофенол
PhSiH<sub>3</sub>:
фенилсилан
PPh<sub>3</sub>:
трифенилфосфин
м.д.:
миллионные доли
кв:
квадруплет
rt:
комнатная температура
с:
синглет
т:
триплет
тд:
триплет дублетов
TBDMSCl:
трет-Бутилдиметилсилилхлорид
TBDPSCl:
трет-Бутилдифенилхлорсилан
tBuOH:
трет-бутанол
tBuOK:
калия трет-бутоксид
TEA:
триэтиламин
Tf:
трифторметансульфонат
ТФУК:
трифторуксусная кислота
ТГФ:
тетрагидрофуран
ТСХ:
тонкослойная хроматография
Tr:
тритил (трифенилметил)
Пример 1: синтез натрия [7-оксо-3-(2-оксо-тиазол-3-ил)-1,6-диаза-бицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта (1-бензил-5-оксо-2,6-дигидропиридин-3-ил) трифторметансульфоната (1b)
+
+
-
2
В 500-миллилитровой круглодонной колбе, в атмосфере азота, tBuOK (2.7 г, 24.07 ммоль) растворяли в безводном ТГФ (180 мл) и полученный раствор охлаждали при 0°C. Этил N-бензил-N-ацетонилглицинат (1a) (синтезирован согласно по методике, описанной в литературе (J.Org.Chem. 2006, 71(21), 8256, J.Med.Chem. 2012, 55(11), 5403, WO2013/181741) (6 г, 24.07 ммоль), растворенный в безводном ТГФ (60 мл), добавляли через капельную воронку в течение 5 минут. Полученный вязкий раствор перемешивали в течение 30 минут при 0°C (LC/MS показал образование соответствующего диона m/z ([M+H] 204, [M+HO+H] 222, [M-H] 202).
2
4
При 0°C добавляли N-(5-Хлор-2-пиридил)бис(трифторметансульфонимид) (реагент Коминса) (9.7 г, 24.07 ммоль), растворенный в ТГФ (20 мл), и реакционную смесь перемешивали еще 30 минут. Реакционную смесь разбавляли диэтиловым эфиром и раствор промывали водой. Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (толуол/ацетон от 100/0 до 95/5 или циклогексан/EtOAc от 100/0 до 50/50), получая промежуточный продукт (1b), который растирали в смеси петролейного эфира и диэтилового эфира (9/1) при -78°C. После фильтрования промежуточный продукт (1b) получали в виде белого твердого вещества (5.80 г, 17.29 ммоль, 71%) и хранили в морозильнике.
+
MS m/z ([M+H]) 336.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.27 (с, 2H), 3.49 (с, 2H), 3.73 (с, 2H), 6.17 (т, J = 1.3 Гц, 1H), 7.27-7.40 (м, 5H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 1-бензил-5-иод-2,6-дигидропиридин-3-он (1c)
2
4
В 1-литровой круглодонной колбе в атмосфере азота промежуточный продукт (1b) (16.1 г, 48.02 ммоль) растворяли в ацетоне (480 мл). Добавляли безводный LiI (12.9 г, 96.03 ммоль), и полученный светло-желтый раствор перемешивали в течение 3.5 часов при 45°C. Смесь упаривали досуха при пониженном давлении. Остаток разбавляли дихлорметаном (350 мл), и выпавшие в осадок соли отфильтровывали через слой целита. Фильтрат промывали водой (2×100 мл), сушили над NaSO и упаривали в вакууме, получая промежуточный продукт (1c) (15.3 г, 15.0 г ожидаемый выход) в виде светло-желтого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 314.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.29 (ушир.с, 2H), 3.66 (ушир.с, 2H), 3.73 (ушир.с, 2H), 6.89 (т, J = 1.7 Гц, 1H), 7.29-7.37 (м, 5H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта 1-бензил-5-иод-3,6-дигидро-2H-пиридин-3-ола (1d)
4
2
2
4
В 1-литровой трехгорлой круглодонной колбе в атмосфере азота промежуточный продукт (1c) (15.3 г, 48.02 ммоль теоретически) растворяли в смеси 5/1 MeOH/ТГФ (0.16 M) и охлаждали до 0°C. Через 15 минут добавляли NaBH (2.1 г, 55.2 ммоль) маленькими порциями в течение 10 минут. Реакция завершалась за 10 минут. Растворители удаляли в вакууме при комнатной температуре до объема примерно 60 мл. Смесь затем разбавляли дихлорметаном (500 мл) и промывали смесью дробленого льда и HO (100 мл). Водный слой экстрагировали дихлорметаном (2x30 мл). Объединенные органические слои сушили над NaSO, упаривали досуха, и сырой промежуточный продукт (1d) (15.4 г, 15.1 г ожидаемый выход) получали в виде твердого вещества, которое использовали далее без дополнительной очистки.
+
MS m/z ([M+H]) 316.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 2.36 (ушир.с, 1H), 2.57 (дд, J = 12.0, 2.4 Гц, 1H), 2.86 (дд, J = 12.0, 2.4 Гц, 1H), 3.04 (д, J = 16.3 Гц, 1H), 3.43 (д, J = 16.3 Гц, 1H), 3.61 (д, J = 11.5 Гц, 1H), 3.66 (д, J = 11.5 Гц, 1H), 3.99-4.06 (м, 1H), 6.52-6.57 (м, 1H), 7.28-7.38 (м, 5H).
Стадия 4: получение промежуточного продукта N-аллилокси-N-(1-бензил-5-иод-3,6-дигидро-2H-пиридин-3-ил)-2-нитро-бензолсульфонамида (1e)
3
2
В раствор промежуточного продукта (1d) (15.4 г, 48.02 ммоль теоретически) в безводном ТГФ (400 мл) последовательно добавляли PPh (15.1 г, 57.6 ммоль), N-аллилокси-2-нитро-бензолсульфонамид (18.6 г, 72.0 ммоль) и DIAD (11.3 мл, 57.6 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 15 минут, смесь упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (петролейный эфир/EtO от 100/0 до 40/60), получая промежуточный продукт (1e) (39.0 г, 26.7 г ожидаемый выход), загрязненный избытком непрореагировавшего N-аллилокси-2-нитро-бензолсульфонамида и восстановленного DIAD. Маслянистый остаток покрывали холодным диизопропиловым эфиром, что приводило к частичному выпадению в осадок восстановленного DIAD. После отфильтровывания белого твердого вещества, промежуточный продукт (1e) (34 г) выделяли и использовали без дополнительной очистки на следующей стадии.
+
MS m/z ([M+H]) 556.
Стадия 5: получение промежуточного продукта N-аллилокси-1-бензил-5-иод-3,6-дигидро-2H-пиридин-3-амин (1f)
2
3
2
В атмосфере азота KCO (50.0 г, 360.1 ммоль) добавляли в раствор промежуточного продукта (1e) (48.02 ммоль теоретически) в ACN (400 мл) в присутствии PhSH (25.0 мл, 240.1 ммоль). После перемешивания в течение 3 часов при комнатной температуре, реакционную смесь фильтровали через целит, и осадок на фильтре промывали дихлорметаном (3×150 мл). Фильтрат упаривали, и сырую желтую суспензию (60 г) выливали в гептан (500 мл), что заставляло выпадать в осадок восстановленный DIAD. После фильтрования и упаривания фильтрата получали прозрачное желтое масло (51 г). Первая очистка методом флэш-хроматографии на силикагеле (петролейный эфир/ EtO от 100/0 до 40/60) с последующей второй очисткой (ДХМ 100%, затем ДХМ/EtOAc 15/85) дали промежуточный продукт (1f) в виде светло-желтого твердого вещества после растирания (12.2 г, 68% за 4 стадии).
+
MS m/z ([M+H]) 371.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 2.48 (дд, J = 11.7, 3.4 Гц, 1H), 2.96-3.08 (м, 2H), 3.34 (д, J = 16.5 Гц, 1H), 3.57 (ушир.с, 1H), 3.60 (д, J = 13.5 Гц, 1H), 3.65 (д, J = 13.5 Гц, 1H), 4.09-4.22 (м, 2H), 5.15-5.30 (м, 2H), 5.73 (ушир.с, 1H), 5.84-5.96 (м, 1H), 6.37-6.43 (м, 1H), 7.25-7.38 (м, 5H).
Стадия 6: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-иод-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (1g)
В 2-литровой трехгорлой круглодонной колбе, снабженной капельной воронкой и обратным холодильником, в инертной атмосфере разбавляли промежуточный продукт (1f) (12.2 г, 32.96 ммоль) безводным дихлорэтаном (350 мл). Раствор трифосгена (12.7 г, 42.84 ммоль) в ДХЭ (150 мл) добавляли при комнатной температуре в течение 5 минут, и раствор перемешивали до тех пор, пока светло-желтый раствор не превратился в белую суспензию. Реакционную смесь затем нагревали при 55°C в течение 20 минут.
2
4
2
2
3
2
4
2
Затем добавляли по каплям раствор сухого NaI (49.2 г, 329.6 ммоль) в сухом ацетоне (170 мл), желтая суспензия превращалась в коричневую, и ее нагревали при 65°C в течение 25 минут. Пиридин (66 мл, 823.9 ммоль) осторожно добавляли по каплям в течение 10 минут. Реакционную смесь перемешивали в течение 30 минут при 65°C. Смесь охлаждали до 0°C, разбавляли дихлорметаном (600 мл), фильтровали через целит и упаривали досуха в вакууме. Коричневый остаток разбавляли дихлорметаном (600 мл), фильтровали через целит и промывали 0.2M водным раствором NaHPO (2×200 мл) и 1M водным раствором NaSO (2x200 мл). Органический слой сушили над NaSO, упаривали в вакууме. Остаток (14.5 г) очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (петролейный эфир/EtO от 100/0 до 40/60), получая промежуточный продукт (1g) (7.1 г, 23.2 ммоль, 70%) в виде оранжевого масла.
+
MS m/z ([M+H]) 307.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.21 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.51-3.58 (м, 1H), 3.83-3.86 (м, 1H), 3.90 (дд, J = 18.0, 2.2 Гц, 1H), 4.07 (дд, J = 18.0, 1.4 Гц, 1H), 4.36-4.53 (м, 2H), 5.28-5.46 (м, 2H), 5.95-6.13 (м, 1H), 6.87-6.97 (м, 1H).
Стадия 7: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-(2-оксо-тиазол-3-ил)-1,6-диаза-бицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (1h).
2
3
2
4
Смесь промежуточного продукта (1g) (0.1 г, 0.33 ммоль), 3H-тиазол-2-она (0.05 г, 0.49 ммоль), N,N-диметилглицина гидрохлорида (0.007 г, 0.05 ммоль), CuI (0.006 г, 0.033 ммоль) и сухого KCO (0.137 г, 0,99 ммоль) в ДМСО (6 мл) в атмосфере аргона нагревали (80-100°C) в течение нескольких часов (1 - 18 часов). Смесь выливали в воду затем экстрагировали дихлорметаном. Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и упаривали в вакууме. Остаток очищали на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 90/10), получая промежуточный продукт (1h) (0.092 г, 0.33 ммоль, количественный выход).
+
MS m/z ([M+H]) 280.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.18 (д, J = 11.1 Гц, 1H), 3.48 (дд, J = 2.6, 10.9 Гц, 1H), 4.04 (д, J = 17.6 Гц, 1H), 4.07-4.08 (м, 1H), 4.25 (дд, J = 2.0, 17.6 Гц, 1H), 4.37-4.48 (м, 2H), 5.31-5.42 (м, 2H), 5.91-6.09 (м, 1H), 6.16 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 6.44-6.50 (м, 1H), 6.58 (д, J = 5.6 Гц, 1H).
Стадия 8: получение промежуточного продукта 6-гидрокси-3-(2-оксо-тиазол-3-ил)-1,6-диаза-бицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (1i).
3
4
2
Раствор промежуточного продукта (1h) (0.098 г, 0.35 ммоль) в безводном дихлорметане (3.5 мл) дегазировали 10 минут в атмосфере аргона. Последовательно добавляли AcOH (0.040 мл, 0.7 ммоль) и Pd(PPh) (0.203 г, 0.175 ммоль). После перемешивания 30 минут при комнатной температуре, смесь упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на обращенно-фазной колонке С-18 (HO/ACN от 99/1 до 80/20). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая промежуточный продукт (1i) (0.083 г, 0.35 ммоль, количественный выход).
+
MS m/z ([M+H]) 240.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.05 (д, J = 10.6 Гц, 1H), 3.42 (дд, J = 2.4, 10.6 Гц, 1H), 3.94 (д, J = 17.7 Гц, 1H), 4.13 (дд, J = 2.7, 5.4 Гц, 1H), 4.19 (дд, J = 1.9, 17.7 Гц, 1H), 6.11 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 6.49 (д, J = 5.3 Гц, 1H), 6.70 (д, J = 5.5 Гц, 1H).
Стадия 9: получение натрия [7-оксо-3-(2-оксо-тиазол-3-ил)-1,6-диаза-бицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 1).
В раствор промежуточного продукта (1i) (0.083 г, 0.35 ммоль) в безводном пиридине (4 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с пиридином (0.225 г, 1.42 ммоль). После перемешивания в течение 18 часов, полученную гетерогенную смесь упаривали в вакууме. Добавляли в остаток ДХМ, и твердую фазу отфильтровывали. Фильтрат очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/MeOH: от 100/0 до 80/20), получая 0.017 г твердого вещества, которое наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая пример (1) (0.0074 г, 0.02 ммоль, 6%).
-
MS m/z ([M-H]) 318.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 3.45 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.65 (дд, J = 2.6, 11.4 Гц, 1H), 4.13 (д, J = 17.8 Гц, 1H), 4.27 (дд, J = 2.1, 17.8 Гц, 1H), 4.55 (дд, J = 2.7, 5.5 Гц, 1H), 6.48 (д, J = 5.4 Гц, 1H), 6.55-6.70 (м, 1H), 6.87 (д, J = 5.4 Гц, 1H).
Пример 2: синтез натрия [7-оксо-3-(триазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1a: получение промежуточных продуктов 6-аллилокси-3-(триазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (2a) и 6-аллилокси-3-(триазол-2-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (2b)
2
3
Смесь промежуточного продукта (1g) (629 мг, 2.05 ммоль), 1H-1,2,3-триазола (237 мкл, 4.10 ммоль), дипипвалоилметана (86 мкл, 0.41 ммоль), CuI (37 мг, 0.20 ммоль) и сухого KCO (567 мг, 4.40 ммоль) в ДМСО (20 мл) в атмосфере аргона нагревали (80-100°C) в течение нескольких часов (1 - 30 часов). Смесь упаривали досуха в токе азота. Остаток очищали на силикагеле (ДХМ/EtOAc: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (2a) (243 мг, 0.982 ммоль, 48%) в виде желтого масла и промежуточный продукт (2b) (131 мг, 0.530 ммоль, 26%) в виде желтого масла.
6-аллилокси-3-(триазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-он (2a)
+
+
MS m/z ([M+H]) 248, ([2M+H]) 495.
1
3
H-ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.20 (дд, J = 11.0, 0.7 Гц, 1H), 3.58 (ддд, J = 11.0, 2.9, 1.1 Гц, 1H), 4.16 (дд, J = 5.4, 2.8 Гц, 1H), 4.30-4.55 (м, 4H), 5.30-5.41 (м, 2H), 5.95-6.08 (м, 1H), 6.64-6.68 (м, 1H), 7.72 (д, J = 1.2 Гц, 1H), 7.76 (д, J = 1.2 Гц, 1H).
13
3
C-ЯМР (75 МГц, CDCl): δ (м.д.) 134.1, 133.7, 132.5, 120.6, 120.4, 116.4, 77.3, 75.5, 56.7, 53.1, 49.8.
6-аллилокси-3-(триазол-2-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-он (2b)
+
MS m/z ([M+H]) 248.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.17 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.52-3.60 (м, 1H), 4.16 (дд, J = 5.6, 2.7 Гц, 1H), 4.26 (дд, J = 17.9, 2.0 Гц, 1H), 4.44 (кв.д, J = 12.3, 6.3 Гц, 2H), 4.63 (д, J = 17.8 Гц, 1H), 5.27-5.43 (м, 2H), 6.03 (ддт, J = 16.9, 10.3, 6.4 Гц, 1H), 6.99 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 7.69 (с, 2H).
13
3
C ЯМР (75 МГц, CDCl): δ (м.д.) 170.1, 135.6, 135.3, 132.8, 120.3, 114.2, 76.7, 60.4, 56.8, 52.7, 50.1.
Стадия 1b: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-(триазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (2a)
2
4
В 100-миллилитровой герметично закрытой колбе в инертной атмосфере разбавляли промежуточный продукт (1g) (4г, 13.07 ммоль) безводным диметилсульфоксидом (40 мл). CuI (249 мг, 1.31 ммоль) и последовательно добавляли натрия азид (1.27г, 19.60 ммоль), натрия аскорбат (259 мг, 1.31 ммоль) и DMCyDA (309 мкл, 1.96 ммоль). Зеленый раствор быстро превращался в коричневый. Смесь перемешивали при комнатной температуре 30 минут до полной конверсии исходного вещества. Затем добавляли в смесь этинилтриметилсилан (2.21 мл, 15.68 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре 30 минут до полного превращения промежуточного продукта в азид. Смесь разбавляли водой (400 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x200 мл). Объединенные органические слои сушили (NaSO) и упаривали в вакууме, получая 4.50 г коричневого масла. Это масло растворяли в безводном ТГФ (87 мл) и добавляли в раствор 3HF.TEA (2.13 мл, 13.07 ммоль), затем перемешивали 1 час при 50°C. Смесь упаривали в вакууме, и сырой остаток (6.35 г) очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (Циклогексан/EtOAc: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (2a) (1.30 г, 5.25 ммоль, 40%) в виде желтого масла, которое кристаллизовалось в виде желтого твердого вещества.
+
+
MS m/z ([M+H]) 248, ([2M+H]) 495.
1
3
H-ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.20 (дд, J = 11.0, 0.7 Гц, 1H), 3.58 (ддд, J = 11.0, 2.9, 1.1 Гц, 1H), 4.16 (дд, J = 5.4, 2.8 Гц, 1H), 4.30-4.55 (м, 4H), 5.30-5.41 (м, 2H), 5.95-6.08 (м, 1H), 6.64-6.68 (м, 1H), 7.72 (д, J = 1.2 Гц, 1H), 7.76 (д, J = 1.2 Гц, 1H).
Стадия 2: получение натрия [7-оксо-3-(триазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 2)
3
4
2
В раствор промежуточного продукта (2a) (150 мг, 0.607 ммоль) в безводном дихлорметане (6.1 мл) добавляли ледяную AcOH (69 мкл, 1.21 ммоль) и Pd(PPh) (351 мг, 0.303 ммоль). После 45 минут перемешивания при комнатной температуре, в реакционную смесь добавляли пиридин (6.1 мл) и комплекс триоксида серы с пиридином (483 мг, 3.03 ммоль). Полученную суспензию защищали от света и перемешивали в течение ночи до полного завершения реакции. Реакционную смесь упаривали, затем разбавляли дихлорметаном и фильтровали. Фильтрат упаривали в вакууме и затем очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая трифенил-(пропенил)-фосфония 7-оксо-3-(триазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (215.7 мг) в виде светло-желтой пены. Эту пену растворяли в минимальном количестве смеси HO/ACN 20/80 и наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли и упаривали (температура бани < 30°C). Соединение разбавляли в воде, фильтровали через Millipore 0.22 мкм, замораживали и лиофилизовали, получая пример (2) (96 мг, 0.310 ммоль, 51% за 3 стадии, чистота 95%) в виде бежевого аморфного твердого вещества.
-
MS m/z ([M-H]) 286.
1
2
H-ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 3.52 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.73 (дд, J = 11.5, 2.8 Гц, 1H), 4.42-4.56 (м, 2H), 4.65 (дд, J = 5.6, 2.9 Гц, 1H), 6.91-6.93 (м, 1H), 7.85 (д, J = 1.3 Гц, 1H), 8.26 (д, J = 1.3 Гц, 1H).
Пример 3: синтез натрия [7-оксо-3-(триазол-2-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение натрия [7-оксо-3-(триазол-2-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (пример 3)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 2), промежуточный продукт (2b) (180 мг, 0.725 ммоль) превращали в Пример (3) (102 мг, 0.330 ммоль, 46%), который получали в виде белого твердого вещества после лиофилизации.
+
MS m/z ([M+H]) 288.
-
MS m/z ([M-H]) 286.
1
2
H-ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 3.39 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.58-3.66 (м, 1H), 4.40 (д, J = 1.6 Гц, 2H), 4.54 (дд, J = 5.7, 2.7 Гц, 1H), 6.89 (дд, J = 5.4, 1.5 Гц, 1H), 7.81 (с, 2H).
Пример 4: синтез лития дифтор-(7-оксо-3-пиразол-1-ил-1,6-диаза-бицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-илокси)-ацетата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-пиразол-1-ил-1,6-диаза-бицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (4a).
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (0.5 г, 1.63 ммоль) превращали реакцией с 1H-пиразолом (0.169 г, 2.45 ммоль) в промежуточный продукт (4a) (0.349 г, 1.42 ммоль, 86%) после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 90/10).
+
MS m/z ([M+H]) 247.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.): 3.15 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.53 (дд, J = 2.1, 10.8 Гц, 1H), 4.10 (дд, J = 2.5, 5.5 Гц, 1H), 4.21 (дд, J = 1.9, 17.6 Гц, 1H), 4.34-4.53 (м, 3H), 5.28-5.33 (м, 1H), 5.37 (д.кв, J = 1.3, 17.2 Гц, 1H), 6.02 (ддт, J = 6.4, 10.3, 17.0 Гц, 1H), 6.32-6.37 (м, 1H), 6.46 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 7.57 (д, J = 1.5 Гц, 1H), 7.61 (д, J = 2.5 Гц, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 6-гидрокси-3-пиразол-1-ил-1,6-диаза-бицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (4b).
3
4
Раствор промежуточного продукта (4a) (0.100 г, 0.41 ммоль) в безводном дихлорметане (4 мл) дегазировали 10 минут в атмосфере аргона. Последовательно добавляли AcOH (0.047 мл, 0.81 ммоль) и Pd(PPh) (0.237 г, 0.205 ммоль). После перемешивания в течение 30 минут при комнатной температуре, осадок отфильтровывали и промывали дихлорметаном, получая 0.05 мг белого твердого вещества. Фильтрат очищали методом препаративной ТСХ на силикагеле (ДХМ/ацетон 60/40), получая еще 0.013 г. Твердые продукты объединяли, получая промежуточный продукт (4b) (0.063 г, 0.31 ммоль, 75%).
+
MS m/z ([M+H]) 207.
1
6
H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d): δ (м.д.): 3.22 (д, J = 10.7 Гц, 1H), 3.36 (дд, J = 2.0, 10.8 Гц, 1H), 4.02 (дд, J = 2.5, 5.6 Гц, 1H), 4.18 (д, J = 1.1 Гц, 2H), 6.43-6.47 (м, 1H), 6.65 (д, J = 5.0 Гц, 1H), 7.64 (д, J = 1.5 Гц, 1H), 8.18 (д, J = 2.4 Гц, 1H), 9.65 (с, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта этил дифтор-(7-оксо-3-пиразол-1-ил-1,6-диаза-бицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-илокси)-ацетата (4c).
2
4
2
Промежуточный продукт (4b) (0.154 г, 0.75 ммоль) солюбилизировали в ДМСО (7.5 мл) с DBU (0.123 мл, 0.825 ммоль) и этил бром-дифтор-ацетатом (0.250 мл, 1.94 ммоль) и перемешивали в течение 30 минут. Смесь промывали 2M раствором NaHPO и экстрагировали продукт этилацетатом. Органический слой фильтровали через слой силикагеля, затем упаривали в вакууме. Остаток растирали в EtO и фильтровали через PTFE мембрану, получая промежуточный продукт (4c) (0.155 г, 0.47 ммоль, 63%).
+
MS m/z ([M+H]) 329.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.): 1.38 (т, J = 7.2 Гц, 3H), 3.25 (д, J = 11.1 Гц, 1H), 3.66 (дд, J = 1.7, 11.1 Гц, 1H), 4.24-4.44 (м, 4H), 4.59 (дд, J = 0.9, 17.7 Гц, 1H), 6.39 (дд, J = 1.8, 2.5 Гц, 1H), 6.40-6.45 (м, 1H), 7.60 (д, J = 1.7 Гц, 1H), 7.64 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Стадия 4: получение лития дифтор-(7-оксо-3-пиразол-1-ил-1,6-диаза-бицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-илокси)-ацетата (Пример 4).
2
2
2
2
В раствор промежуточного продукта (4c) (0.143 г, 0.435 ммоль) в ТГФ (4 мл) и HO (0.4 мл) при 0°C по каплям добавляли 0.1н. раствор LiOH (4.8 мл, 0.48 ммоль). Когда мониторинг показал, что реакция полностью прошла, смесь нейтрализовывали добавлением HCl (0.1н.) (0.7 мл) при 0°C. Раствор замораживали для упаривания ТГФ в вакууме, и лиофилизовали водный раствор. Остаток растирали в EtO и фильтровали через PTFE мембрану. Затем сырой твердый продукт очищали на силикагеле (iPrOH). Фракции, содержащие целевой продукт, упаривали в вакууме. Твердый продукт растирали в EtO, и полученное твердое вещество солюбилизировали в HO для лиофилизации и получения Примера (4 (0.88 г, 0.286 ммоль, 66%).
+
MS m/z ([M+H]) 301.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO) δ (м.д.): 3.44 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.66 (ддд, J = 0.9, 2.7, 11.3 Гц, 1H), 4.38 (д, J = 1.4 Гц, 2H), 4.49 (дд, J = 2.5, 5.6 Гц, 1H), 6.48 (дд, J = 2.0, 2.6 Гц, 1H), 6.56-6.61 (м, 1H), 7.69 (д, J = 1.8 Гц, 1H), 7.92 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Пример 5: синтез натрия [7-оксо-3-(1,2,4-триазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-(1,2,4-триазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (5a)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 1a), промежуточный продукт (1g) (200 мг, 0.65 ммоль) превращали реакцией с 1,2,4-триазолом (54 мг, 0.78 ммоль) в промежуточный продукт (5a) (110 мг, 0.44 ммоль, 48%) в виде оранжевого масла после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 50/50).
+
MS m/z ([M+H]) 248.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.17 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.57 (дд, J = 10.9, 2.0 Гц, 1H), 4.14 (дд, J = 5.5, 2.6 Гц, 1H), 4.18 (дд, J = 17.6, 2.6 Гц, 1H), 4.35-4.50 (м, 3H), 5.30-5.34 (м, 1H), 5.37 (д.кв, J = 17.2, 1.4 Гц, 1H), 5.96-6.07 (м, 1H), 6.68 (д, J = 5.4 Гц, 1H), 7.97 (с, 1H), 8.26 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 6-гидрокси-3-(1,2,4-триазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (5b)
3
3
4
В инертной атмосфере добавляли PhSiH (32 мкл, 0.308 ммоль) и Pd(PPh) (7 мг, 0.006 ммоль) в раствор промежуточного продукта (5a) (51 мг, 0.154 ммоль) в безводном дихлорметане (2 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа и фильтровали. Осадок промывали дихлорметаном (2 мл), получая промежуточный продукт (5b) (26 мг, 0.125 ммоль, 81%), который использовали далее без дополнительной очистки.
+
MS m/z ([M+H]) 208.
Стадия 3: получение натрия [7-оксо-3-(1,2,4-триазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 5)
2
2
Промежуточный продукт (5b) (13 мг, 0.063 ммоль) растворяли в смеси tBuOH (0.3 мл) и HO (0.3 мл). Добавляли TEA (2.2 мкл, 0.016 ммоль) и комплекс триоксида серы с триметиламином (10 мг, 0.075 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, затем упаривали в вакууме. Реакционную смесь фильтровали, и фильтрат упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 0/100). Фракции, содержащие целевой промежуточный продукт, объединяли и упаривали в вакууме. Остаток растворяли в HO и конвертировали пропусканием через ионообменную колонку Dowex с натриевой формой сорбента (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH) в Пример (5) (5 мг, 0.016 ммоль, 26%).
-
MS m/z ([M-H]) 286.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.): 3.47 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.71 (дд, J = 11.4, 2.8 Гц, 1H), 4.33 (д, J = 17.5 Гц, 1H), 4.41 (дд, J = 17.5, 1.9 Гц, 1H), 4.61 (дд, J = 5.6, 2.8 Гц, 1H), 6.85 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 8.12 (с, 1H), 8.71 (с, 1H).
Пример 6: синтез натрия [(5R)-7-оксо-3-(триазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта (5R)-6-аллилокси-3-(триазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (6a) и (5S)-6-аллилокси-3-(триазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (6b)
2
Два энантиомера промежуточного продукта (2a) (1021 мг, 4.13 ммоль) разделяли с помощью сверхкритической жидкостной хроматографии (LUX C4 5 мкм, 250×21.2 мм, iPrOH/CO 35/65, 50 мл/мин), получая промежуточный продукт (6a) (455 мг, 1.84 ммоль, 44%, 98.9% ee, время удерживания 2.23 мин) и промежуточный продукт (6b) (482 мг, 1.95 ммоль, 47%, 97.6%ee, время удерживания 2.48 мин).
+
MS m/z ([M+H]) 248.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.20 (д, J = 11.0 Гц, 1H), 3.54-3.63 (м, 1H), 4.16 (дд, J = 5.5, 2.7 Гц, 1H), 4.34 (дд, J = 17.9, 2.0 Гц, 1H), 4.38-4.57 (м, 3H), 5.30-5.35 (м, 1H), 5.38 (д.кв, J = 17.2, 1.4 Гц, 1H), 5.95-6.10 (м, 1H), 6.62-6.70 (м, 1H), 7.73 (д, J = 1.2 Гц, 1H), 7.76 (д, J = 1.2 Гц, 1H).
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 3.49 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.71 (дд, J = 11.4, 2.8 Гц, 1H), 4.42 (дд, J = 17.7, 1.3 Гц, 1H), 4.51 (дд, J = 17.7, 1.9 Гц, 1H), 4.63 (дд, J = 5.6, 2.7 Гц, 1H), 6.90 (д, J = 5.7 Гц, 1H), 7.82 (д, J = 1.3 Гц, 1H), 8.24 (д, J = 1.3 Гц, 1H).
Препаративный метод
Колонка: Lux C4 (21.2мм×250мм, 5мкм)
2
Изократические условия 35:65 ИПС:CO
Скорость потока: 50мл/мин
Детектор: УФ 242 нм
BPR 125 BarG
Аналитический метод:
Колонка: Lux C4 (4.6мм×250мм, 5мкм)
2
Изократические условия 35:65 ИПС:CO
Скорость потока: 4 мл/мин
Детектор: 210-400 нм
BPR 125 BarG
Температура колонки 40°C
Стадия 2: получение натрия [(5R)-7-оксо-3-(триазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 6)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 2), промежуточный продукт (6a) (422 мг, 1.70 ммоль) превращали в Пример 6 (0.243 г, 0.785 ммоль, 46%) после лиофилизации.
-
MS m/z ([M-H]) 286.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 3.49 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.71 (дд, J = 11.4, 2.8 Гц, 1H), 4.42 (дд, J = 17.7, 1.3 Гц, 1H), 4.51 (дд, J = 17.7, 1.9 Гц, 1H), 4.63 (дд, J = 5.6, 2.7 Гц, 1H), 6.90 (д, J = 5.7 Гц, 1H), 7.82 (д, J = 1.3 Гц, 1H), 8.24 (д, J = 1.3 Гц, 1H).
Пример 7: синтез натрия [3-(4-карбамоилпиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-4-карбоксамида (7a)
2
3
Смесь промежуточного продукта (1g) (0.250 г, 0.817 ммоль), амида 1H-пиразол-4-карбоновой кислоты (0.182 г, 1.633 ммоль), N,N-диметилглицина гидрохлорида (0.017 г, 0.122 ммоль), CuI (0.016 г, 0.082 ммоль) и KCO (0.339 г, 2,45 ммоль) в ДМСО (8.2 мл) в атмосфере аргона нагревали при 80°C в течение 18 часов. Смесь затем разбавляли водой, и продукт экстрагировали дихлорметаном и н-BuOH. Органический слой упаривали в вакууме. Полученный сырой продукт солюбилизировали в ИПС. Нерастворимые частицы фильтровали через PTFE мембрану, и фильтрат упаривали в вакууме, получая промежуточный продукт (7a) (0.220 г, 0.760 ммоль, 93%).
+
MS m/z ([M+H]) 290.
6
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ (м.д.): 3.27 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.32-3.35 (м, 1H), 4.15 (д, J = 17.4 Гц, 1H), 4.26 (дд, J = 1.9, 17.4 Гц, 1H), 4.30 (дд, J = 2.4, 5.7 Гц, 1H), 4.39 (д, J = 6.0 Гц, 2H), 5.27 (д, J = 10.5 Гц, 1H), 5.33-5.41 (м, 1H), 5.90-6.01 (м, 1H), 6.68 (д, J = 5.4 Гц, 1H), 7.17 (с, 1H), 7.62 (с, 1H), 8.01 (с, 1H), 8.54 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-4-карбоксамида (7b)
3
4
2
Раствор промежуточного продукта (7a) (0.100 г, 0.345 ммоль) в безводном дихлорметане (5 мл) дегазировали 10 минут в атмосфере аргона. Последовательно добавляли AcOH (0.040 мл, 0.69 ммоль) и Pd(PPh) (0.090 г, 0.345 ммоль). После перемешивания в течение 30 минут при комнатной температуре, смесь упаривали. Остаток растирали в EtO и фильтровали, получая промежуточный продукт (7b) (0.558 г, 0.224 ммоль, 64%).
+
MS m/z ([M+H]) 250.
6
1H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ (м.д.): 3.22 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.34-3.38 (м, 1H), 4.05 (дд, J = 2.5, 5.5 Гц, 1H), 4.11 (д, J = 17.4 Гц, 1H), 4.21 (дд, J = 1.7, 17.4 Гц, 1H), 6.72 (д, J = 5.4 Гц, 1H), 7.17 (ушир.с, 1H), 7.63 (ушир.с, 1H), 8.00 (с, 1H), 8.54 (с, 1H), 9.72 (ушир.с, 1H).
Стадия 3: получение натрия [3-(4-карбамоилпиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 7)
2
В раствор промежуточного продукта (7b) (0.537 г, 0.215 ммоль) в безводном пиридине (2.5 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с пиридином (0.139 г, 0.872 ммоль). После перемешивания в течение 18 часов, полученную гетерогенную смесь упаривали в вакууме. ДХМ добавляли в остаток и нерастворимые частицы отфильтровывали. Фильтрат упаривали в вакууме, и продукт наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая твердое вещество, которое очищали на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: 98/2) и снова наносили на колонку Dowex в натриевой форме, получая Пример (7) (0.117 г, 0.033 ммоль, 15%).
-
MS m/z ([M-H]) 328.
1H ЯМР (400 МГц, D2O) δ (м.д.): 3.46 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.70 (дд, J = 2.5, 11.2 Гц, 1H), 4.35 (д, J = 17.6 Гц, 1H), 4.41 (дд, J = 1.6, 17.6 Гц, 1H), 4.60 (дд, J = 2.5, 5.6 Гц, 1H), 6.74 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 8.03 (с, 1H), 8.37 (с, 1H).
Пример 8: синтез натрия [3-(4-цианопиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диаза-бицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-1H-пиразол-4-карбонитрила (8a).
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (0.2 г, 0.653 ммоль) превращали реакцией с 1H-пиразол-4-карбонитрилом (0.122 г, 1.307 ммоль) в промежуточный продукт (8a) (0.177 г, 0.653 ммоль, количественный выход), содержащий около 30% 1H-пиразол-4-карбонитрила, после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (i-PrOH).
+
MS m/z ([M+H]) 272.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ (м.д.): 3.13 (д, J = 11.0 Гц, 1H), 3.54 (дд, J = 2.2, 11.0 Гц, 1H), 4.12-4.19 (м, 2H), 4.31-4.51 (м, 3H), 5.21-5.45 (м, 2H), 5.88-6.11 (м, 1H), 6.63 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 7.82 (с, 1H), 8.05 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диаза-бицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-1H-пиразол-4-карбонитрила (8b).
2
Используя методику, описанную в Примере 7 (стадия 2), промежуточный продукт (8a) (177 мг, 0.65 ммоль) превращали в промежуточный продукт (8b) (0.132 г, 0.57 ммоль, 88%), содержащий около 30% трифенилфосфиноксида, после очистки на силикагеле (ДХМ/Ацетон от 100/0 до 70/30) с последующим растиранием в EtO.
+
MS m/z ([M+H]) 232.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ (м.д.): 3.10 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.42-3.53 (м, 1H), 4.08 (дд, J = 2.6, 5.5 Гц, 1H), 4.15 (дд, J = 17.7, 1.8 Гц, 1H), 4.34 (д, J = 17.7 Гц, 1H), 6.67 (д, J = 5.4 Гц, 1H), 7.83 (с, 1H), 8.09 (с, 1H).
Стадия 3: получение натрия [3-(4-цианопиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 8).
В раствор промежуточного продукта (8b) (0.132 г, 0.57 ммоль) в безводном пиридине (5.7 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с пиридином (0.368 г, 3.31 ммоль). После перемешивания в течение 18 часов при комнатной температуре, полученную гетерогенную смесь упаривали в вакууме. Добавляли ДХМ в остаток, и твердую фазу отфильтровывали. Фильтрат очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон от 100/0 до 0/100), получая твердое вещество, которое наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая пример (8) (0.334 г, 0.010 ммоль, 17%).
-
MS m/z ([M-H]) 310.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO) δ (м.д.): 3.45 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.70 (дд, J = 2.4, 11.4 Гц, 1H), 4.33 (д, J = 17.5 Гц, 1H), 4.40 (д, J = 17.5 Гц, 1H), 4.61 (дд, J = 2.6, 5.6 Гц, 1H), 6.79 (д, J = 5.4 Гц, 1H), 8.05 (с, 1H), 8.50 (с, 1H).
Пример 9: синтез натрия [7-оксо-3-(4-метоксипиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-(4-метоксипиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (9a)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (0.26 г, 0.85 ммоль) превращали реакцией с 4-метокси-1H-пиразолом (125 мг, 1.27 ммоль) в промежуточный продукт (9a) (114 мг, 0.41 ммоль, 49%) в виде желтого твердого вещества после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100).
+
MS m/z ([M+H]) 277.
1
6
H ЯМР (300 МГц, ацетон-d) δ 3.26 (дд, J = 10.8, 0.7 Гц, 1H), 3.39-3.44 (м, 1H), 3.74 (с, 3H), 4.17 (дд, J = 17.5, 1.9 Гц, 1H), 4.24 (ддд, J = 5.6, 2.7, 0.7 Гц, 1H), 4.34 (дд, J = 0.7, 17.4 Гц, 1H), 4.37-4.41 (м, 2H), 5.20-5.25 (м, 1H), 5.32-5.39 (м, 1H), 5.93-6.07 (м, 1H), 6.40-6.44 (м, 1H), 7.34 (д, J = 0.8 Гц, 1H), 7.76 (д, J = 0.8 Гц, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 6-гидрокси-3-(4-метоксипиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (9b)
3
3
4
В инертной атмосфере последовательно добавляли PhSiH (100 мкл, 0.80 ммоль) и Pd(PPh) (18.6 мг, 0.02 ммоль) в раствор промежуточного продукта (9a) (111 мг, 0.40 ммоль) в безводном дихлорметане (3.7 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем смесь упаривали в токе аргона, и остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (9b) (142 мг, 0.60 ммоль).
+
MS m/z ([M+H]) 237.
Стадия 3: получение натрия [7-оксо-3-(4-метоксипиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 9).
2
2
2

В раствор промежуточного продукта (9b) (142 мг, 0.60 ммоль) в смеси iPrOH/HO (3.2 мл/1.2 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с триметиламином (67 мг, 0.48 ммоль) и TEA (14 мкл, 0.1 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь упаривали в токе аргона. Остаток растворяли в минимальном количестве смеси HO/ACN (1:1) и пропускали через ионообменную колонку с натриевой формой сорбента Dowex (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, лиофилизовали, и остаток затем очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/MeCN 99/1), получая пример (9) (28 мг, 0.06 ммоль, 20%) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 317
-
MS m/z ([M-H]) 315.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO) δ 3.45 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.69 (дд, J = 11.3, 2.9 Гц, 1H), 3.81 (с, 3H), 4.36 (с, 2H), 4.57 (дд, J = 5.7, 2.7 Гц, 1H), 6.49 (д, J = 5.7 Гц, 1H), 7.50 (с, 1H), 7.73 (с, 1H).
Пример 10: синтез [3-[3-(2-аминоэтил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[2-(1H-пиразол-3-ил)этил] карбамата (10a).
2
В раствор 2-(1H-пиразол-3-ил)этанамина (0.15 г, 1.35 ммоль) в ДХМ (15 мл) в атмосфере аргона добавляли BocO (0.295 г, 1.35 ммоль). Смесь перемешивали в течение 18 часов, затем промывали водой и насыщенным раствором соли. Остаток очищали на силикагеле (ДХМ/ацетон от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (10a) (0.186 г, 0.88 ммоль, 65%).
+
MS m/z ([M+H]) 212.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.43 (с, 9H), 2.88 (т, J = 6.7 Гц, 2H), 3.31-3.56 (м, 2H), 4.94 (ушир.с, 1H), 6.13 (д, J = 2.1 Гц, 1H), 7.51 (д, J = 2.1 Гц, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[2-[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-ил]этил]карбамата (10b).
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (0.207 г, 0.68 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (10a) (0.186 г, 0.88 ммоль) в промежуточный продукт (10b) (0.158 г, 0.405 ммоль, 59%) после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон от 100/0 до 90/10).
+
MS m/z ([M+H]) 390.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.44 (с, 9H), 2.78 (т, J = 6.6 Гц, 2H), 3.14 (д, J = 10.7 Гц, 1H), 3.42 (кв, J = 6.6 Гц, 2H), 3.53 (дд, J = 2.1, 10.8 Гц, 1H), 4.09 (дд, J = 2.5, 5.5 Гц, 1H), 4.16 (дд, J = 1.8, 17.5 Гц, 1H), 4.37-4.50 (м, 3H), 4.84 (ушир.с, 1H), 5.27-5.41 (м, 2H), 5.96-6.08 (м, 1H), 6.17 (д, J = 2.5 Гц, 1H), 6.42 (д, J = 5.4 Гц, 1H), 7.49 (д, J = 2.5 Гц, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[2-[1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-ил]этил]карбамата (10c).
Используя методику, описанную в Примере 8 (стадия 2), промежуточный продукт (10b) (158 мг, 0.405 ммоль) превращали в промежуточный продукт (10c) (118 мг, 0.338 ммоль, 83%) после очистки на силикагеле (ДХМ/Ацетон от 100/0 до 70/30).
+
MS m/z ([M+H]) 350.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.39 (с, 9H), 2.75 (т, J = 6.6 Гц, 2H), 3.07 (д, J = 10.7 Гц, 1H), 3.30-3.48 (м, 3H), 4.02 (дд, J = 2.6, 5.5 Гц, 1H), 4.10 (дд, J = 1.5, 17.6 Гц, 1H), 4.36 (д, J = 17.6 Гц, 1H), 5.00 (ушир.с, 1H), 6.14 (д, J = 2.5 Гц, 1H), 6.44 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 7.50 (д, J = 2.5 Гц, 1H).
Стадия 4: получение промежуточного продукта натрия [3-[3-[2-(трет-бутоксикарбониламино)этил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (10d).
Используя методику, описанную в Примере 8 (стадия 3), промежуточный продукт (10c) (118 мг, 0.338 ммоль) превращали в промежуточный продукт (10d) (57 мг, 0.126 ммоль, 37%) после очистки на силикагеле (ДХМ/MeOH от 100/0 до 90/10) и пропускания через колонку с натриевой формой сорбента Dowex.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 1.35 (ушир.с, 9H), 2.77 (т, J = 6.4 Гц, 2H), 3.34 (т, J = 6.4 Гц, 2H), 3.42 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.68 (дд, J = 2.2, 11.3 Гц, 1H), 4.33 (с, 2H), 4.56 (дд, J = 2.5, 5.6 Гц, 1H), 6.36 (д, J = 2.2 Гц, 1H), 6.54 (д, J = 4.6 Гц, 1H), 7.78 (с, 1H).
Стадия 5: получение [3-[3-(2-аминоэтил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата (Пример 10).
2
5
Промежуточный продукт (10d) (57 мг, 0.126 ммоль) солюбилизировали в ТФУК (1 мл) в инертной атмосфере при 0°C. После перемешивания в течение 15 минут, смесь сушили в токе азота. Полученный твердый остаток растирали в ACN, фильтровали через PTFE мембрану и сушили в вакууме в присутствии PO, получая Пример (10) (25.7 мг, 0.078 ммоль, 82%).
-
MS m/z ([M-H]) 328.
1
6
H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d): δ (м.д.) 2.86 (т, J = 7.2 Гц, 2H), 3.10 (т, J = 7.2 Гц, 2H), 3.23 (д, J = 11.0 Гц, 1H), 3.39 (дд, J = 2.5, 11.0 Гц, 1H), 4.21 (с, 2H), 4.35 (дд, J = 2.4, 5.6 Гц, 1H), 6.38 (д, J = 2.5 Гц, 1H), 6.61 (д, J = 5.4 Гц, 1H), 7.72 (ушир.с, 3H), 8.14 (д, J = 2.5 Гц, 1H).
Пример 11: синтез натрия [3-[3-(2-гидроксиэтилкарбамоил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-N-(2-гидроксиэтил)пиразол-3-карбоксамида (11a).
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (0.250 г, 0.817 ммоль) превращали реакцией с N-(2-гидроксиэтил)-1H-пиразол-3-карбоксамидом (0.165 г, 1.062 ммоль) в промежуточный продукт (11a) (0.272 г, 0.817 ммоль, количественный выход), который использовали далее без дополнительной очистки.
+
MS m/z ([M+H]) 334.
Стадия 2: получение промежуточного продукта 1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-N-[2-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]пиразол-3-карбоксамида (11b).
В раствор промежуточного продукта (11a) (0.272 г, 0.817 ммоль) в безводном ТГФ (8 мл) в инертной атмосфере добавляли TBDMSCl (0.185 г, 1.225 ммоль) и имидазол (0.945 г, 1.390 ммоль). После перемешивания в течение 18 часов, реакционную смесь разбавляли водой, продукт экстрагировали этилацетатом и упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 85/15), получая промежуточный продукт (11b) (0.126 г, 0.281 ммоль, 34%).
+
MS m/z ([M+H]) 448.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ (м.д.): 0.04 (с, 3H), 0.05 (с, 3H), 0.89 (с, 9H), 3.11 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.46-3.54 (м, 3H), 3.73 (т, J = 5.3 Гц, 2H), 4.07-4.17 (м, 2H), 4.33-4.46 (м, 3H), 5.25-5.37 (м, 2H), 5.93-6.03 (м, 1H), 6.48 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 6.83 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.62 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта N-[2-[трет-бутил(диметил)силил] оксиэтил]-1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-карбоксамида (11c).
3
4
3
Раствор промежуточного продукта (11b) (0.126 г, 0.281 ммоль) в безводном дихлорметане (2.9 мл) дегазировали 10 минут в атмосфере аргона. Последовательно добавляли AcOH (0.032 мл, 0.562 ммоль), Pd(PPh) (0.049 г, 0.042 ммоль) и PPh (0.074 г, 0.281 ммоль). После перемешивания в течение 30 минут при комнатной температуре, смесь упаривали в вакууме. Остаток очищали на силикагеле (ДХМ/ацетон от 100/0 до 70/30), получая промежуточный продукт (11c) (63 мг, 0.154 ммоль, 55%).
+
MS m/z ([M+H]) 408.
Стадия 4: получение промежуточного продукта натрия [3-[3-[2-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил карбамоил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфата (11d).
2
3
В раствор промежуточного продукта (11c) (63 мг, 0.155 ммоль) в смеси tBuOH/HO: 1/1 (1.7 мл) добавляли комплекс триоксида серы с триэтиламином (26 мг, 0.185 ммоль) и EtN (6 мкл, 0.039 ммоль). После перемешивания в течение 2 часов, смесь упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон от 100/0 до 0/100), получая твердое вещество, которое наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая промежуточный продукт (11d) (37 мг, 0.072 ммоль, 46%).
+
MS m/z ([M+H]) 488.
Стадия 5: получение натрия [3-[3-(2-гидроксиэтилкарбамоил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 11).
2
Промежуточный продукт (11d) солюбилизировали в ТФУК (0.037 г, 0.072 ммоль) при 0°C в инертной атмосфере. После перемешивания в течение 1 часа, смесь сушили в токе азота. Остаток растирали в EtO и затем очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (вода/ACN: 98/2). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали. Твердый остаток наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая пример (11) (15 мг, 0.029 ммоль, 40%).
-
MS m/z ([M-H]) 372.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 3.44 (д, J = 11.2 Гц, 1H), 3.51 (т, J = 5.5 Гц, 2H), 3.70 (дд, J = 2.8, 11.2 Гц, 1H), 3.74 (т, J = 5.5 Гц, 2H), 4.40 (с, 2H), 4.58 (дд, J = 2.5, 5.5 Гц, 1H), 6.72 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 6.83 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.96 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Пример 12: синтез триэтиламмония [3-[3-(гидроксиметил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 3-(трет-бутил-диметил-силанилоксиметил)-1H-пиразола (12a).
2
В раствор (1H-пиразол-3-ил)-метанола (0.150 г, 1.53 ммоль) в безводном ДМФА (8 мл) в атмосфере аргона добавляли TBDMSCl (0.345 г, 2.29 ммоль) и имидазол (0.177 г, 2.60 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. Смесь экстрагировали смесью EtOAc/EtO: 1/1 и промывали водой, получая промежуточный продукт (12a) (0.324 г, 1.53 ммоль, количественный выход), который использовали далее без дополнительной очистки.
+
MS m/z ([M+H]) 213.
Стадия 2: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-[3-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил] пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (12b).
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (0.292 г, 0.95 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (12a) (0.324 г, 1.526 ммоль) в промежуточный продукт (12b) (0.124 г, 0.317 ммоль, 33%) после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон от 100/0 до 95/5).
+
MS m/z ([M+H]) 391.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 0.08 (с, 6H), 0.90 (с, 9H), 3.13 (д, J = 10.7 Гц, 1H), 3.52 (дд, J = 2.2, 10.7 Гц, 1H), 4.08 (дд, J = 2.4, 5.5 Гц, 1H), 4.17 (дд, J = 1.8, 17.6 Гц, 1H), 4.36-4.49 (м, 3H), 4.69 (с, 2H), 5.22-5.44 (м, 2H), 5.96-6.07 (м, 1H), 6.35 (д, J = 2.5 Гц, 1H), 6.40 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 7.52 (д, J = 2.5 Гц, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта 3-[3-[[трет-бутил(диметил)силил] оксиметил]пиразол-1-ил]-6-гидрокси-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (12c).
Используя методику, описанную в Примере 11 (стадия 3), промежуточный продукт (12b) (124 мг, 0.317 ммоль) превращали в промежуточный продукт (12c) (111 мг, 0.317 ммоль, количественный выход) после очистки на силикагеле (ДХМ/Ацетон от 100/0 до 70/30).
+
MS m/z ([M+H]) 351.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ (м.д.): 0.08 (с, 6H), 0.91 (с, 9H), 3.12 (д, J = 10.7 Гц, 1H), 3.50 (дд, J = 2.3, 10.7 Гц, 1H), 4.05 (дд, J = 2.5, 5.5 Гц, 1H), 4.16 (дд, J = 1.8, 17.6 Гц, 1H), 4.39 (д, J = 17.6 Гц, 1H), 4.70 (с, 2H), 6.36 (д, J = 2.5 Гц, 1H), 6.43 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 7.54 (д, J = 2.5 Гц, 1H).
Стадия 4: получение промежуточного продукта пиридиния [3-[3-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил] пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (12d).
В раствор промежуточного продукта (12c) (0.111 г, 0.317 ммоль) в безводном пиридине (3.2 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с пиридином (0.204 г, 1.28 ммоль). После перемешивания в течение 18 часов, полученную гетерогенную смесь упаривали в вакууме. Добавляли в остаток ДХМ, и твердую фазу отфильтровывали. Фильтрат очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (12d) (0.067 г, 0.131 ммоль, 41%).
+
MS m/z ([M+H]) 431.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 0.08 (с, 6H), 0.90 (с, 9H), 3.17 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.72 (дд, J = 2.1, 10.9 Гц, 1H), 4.19 (дд, J = 1.7, 17.9 Гц, 1H), 4.43 (д, J = 17.9 Гц, 1H), 4.57 (дд, J = 2.5, 5.6 Гц, 1H), 4.67 (с, 2H), 6.34 (д, J = 2.5 Гц, 1H), 6.40 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 7.61 (д, J = 2.5 Гц, 1H), 7.96 (дд, J = 6.7, 6.7 Гц, 2H), 8.43 (ддд, J = 1.5, 6.7, 6.7 Гц, 1H), 9.02 (дд, J = 1.5, 6.7 Гц, 2H).
Стадия 5: получение триэтиламмония [3-[3-(гидроксиметил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 12).
В раствор промежуточного продукта (12d) (0.067 г, 0.131 ммоль) в безводном ACN (1.3 мл) в инертной атмосфере добавляли триэтиламина тригидрофторид (0.022 мл, 0.131 ммоль). После перемешивания в течение 140 минут при 40°C, смесь упаривали в токе азота. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон от 100/0 до 0/100), получая Пример (12) (0.031 г, 0.074 ммоль, 56%).
+
MS m/z ([M+H]) 317.
1
6
H ЯМР (400 МГц, ацетон-d): δ (м.д.) 1.32 (т, J = 7.3 Гц, 9H), 3.30 (кв.д, J = 4.8, 14.6 Гц, 6H), 3.33 (д, J = 11.0 Гц, 1H), 3.51 (дд, J = 2.1, 11.0 Гц, 1H), 4.16-4.28 (м, 2H), 4.34 (д, J = 17.6 Гц, 1H), 4.45 (дд, J = 2.5, 5.6 Гц, 1H), 4.56 (д, J = 5.6 Гц, 2H), 6.42 (д, J = 2.5 Гц, 1H), 6.56 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 7.98 (д, J = 2.5 Гц, 1H), 8.44 (ушир.с, 1H).
Пример 13: синтез натрия [3-[3-[(2-аминотиазол-5-карбонил)амино]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-(3-нитро-пиразол-1-ил)-1,6-диаза-бицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (13a).
2
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (2 г, 6.53 ммоль) превращали реакцией с 3-нитро-1H-пиразолом (0.960 г, 8.49 ммоль) в промежуточный продукт (13a) (1.42 г, 4.875 ммоль, 74%) после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон от 100/0 до 94/6) с последующим растиранием в EtO.
+
MS m/z ([M+H]) 292.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ (м.д.): 3.15 (д, J = 11.0 Гц, 1H), 3.56 (дд, J = 2.1, 11.0 Гц, 1H), 4.16 (дд, J = 2.4, 5.5 Гц, 1H), 4.24 (дд, J = 1.9, 17.7 Гц, 1H), 4.34-4.49 (м, 3H), 5.28-5.41 (м, 2H), 5.94-6.06 (м, 1H), 6.71 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 6.98 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.70 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-(3-амино-пиразол-1-ил)-1,6-диаза-бицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (13b).
В раствор промежуточного продукта (13a) (1.42 г, 4.875 ммоль) в безводном дихлорметане (48 мл) при 0°C добавляли цинк (3.19 г, 48.75 ммоль) и AcOH (2.8 мл, 48.75 ммоль). После перемешивания в течение 1 часа при 0°C, смесь фильтровали через целит и фильтрат немедленно выливали в циклогексан при 10°C. ДХМ из смеси упаривали в токе азота, и осадок отфильтровывали через PTFE мембрану, получая промежуточный продукт (13b) (1.27 г, 4.87 ммоль, количественный выход).
+
MS m/z ([M+H]) 262.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.11 (д, J = 10.7 Гц, 1H), 3.50 (дд, J = 2.2, 10.7 Гц, 1H), 3.77 (ушир.с, 2H), 4.03-4.11 (м, 2H), 4.34 (д, J = 17.8 Гц, 1H), 4.36-4.48 (м, 2H), 5.27-5.39 (м, 2H), 5.73 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 5.96-6.06 (м, 1H), 6.28 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 7.28 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[5-[[1-[6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло [3.2.1]окт-3-ен-3-ил]пиразол-3-ил]карбамоил]тиазол-2-ил]карбамата (13c).
2
В раствор промежуточного продукта (13b) (0.214 г, 0.818 ммоль) в ДМА (8 мл) в инертной атмосфере при 0°C по каплям добавляли раствор трет-бутил N-(5-хлоркарбонилтиазол-2-ил)карбамата (получен как описано в патенте WO2014102759) (0.215 г, 0.818 ммоль) в ДМА (1.5 мл). После перемешивания в течение 35 минут, смесь упаривали в токе азота. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/EtOAc от 100/0 до 0/100) и растирали в EtO, получая промежуточный продукт (13c) (0.399 г, 0.818 ммоль, количественный выход).
+
MS m/z ([M+H]) 488.
1
6
H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d): δ (м.д.) 1.50 (с, 9H), 3.27 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.30-3.36 (м, 1H), 4.16-4.29 (м, 3H), 4.39 (д, J = 6.0 Гц, 2H), 5.23-5.26 (м, 1H), 5.32-5.40 (м, 1H), 5.90-6.01 (м, 1H), 6.53 (д, J = 5.4 Гц, 1H), 6.77 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 8.08 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 8.33 (с, 1H), 11.11 (с, 1H), 11.80 (с, 1H).
Стадия 4: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-ил]-N-[2-(трет-бутоксикарбониламино) тиазол-5-карбонил]карбамата (13d) и трет-бутил N-[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-ил]-N-[2-[бис(трет-бутоксикарбонил)амино] тиазол-5-карбонил]карбамата (13e)
2
В раствор промежуточного продукта (13c) (0.030 г, 0.061 ммоль) в безводном пиридине (0.3 мл) в инертной атмосфере при 0°C добавляли BocO (0.133 г, 0.61 ммоль) и DMAP (0.008 г, 0.006 ммоль). После перемешивания в течение 1 часа, смесь упаривали в токе азота. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 90/10), получая промежуточный продукт (13d) (0.014 г, 0.024 ммоль, 39%) и промежуточный продукт (13e) (0.020 г, 0.029 ммоль, 47%).
+
MS m/z ([M+H]) 588.
Промежуточный продукт (13d)
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl) δ (м.д.): 1.45 (с, 9H), 1.56 (с, 9H), 3.10 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.49 (дд, J = 2.7, 10.7 Гц, 1H), 4.06 (дд, J = 2.4, 5.6 Гц, 1H), 4.12 (дд, J = 1.8, 17.7 Гц, 1H), 4.32 (дд, J = 1.1, 17.7 Гц, 1H), 4.33-4.49 (м, 2H), 5.26-5.39 (м, 2H), 5.93-6.08 (м, 1H), 6.40 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 6.42 (ушир.с, 1H), 7.57 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.88 (с, 1H), 11.03 (ушир.с, 1H).
Промежуточный продукт (13e)
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl) δ (м.д.): 1.45 (с, 9H), 1.47 (с, 9H), 1.53 (с, 9H), 1.56 (с, 9H), 1.59 (с, 9H), 1.61 (с, 9H), 3.10 (2д, J = 10.7 Гц, 1H), 3.47-3.54 (м, 1H), 4.04-4.16 (м, 2H), 4.28-4.49 (м, 3H), 5.27-5.40 (м, 2H), 5.93-6.08 (м, 1H), 6.36 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 6.37 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 6.42 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 6.46 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 7.55 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.60 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.81 (с, 1H),7.93 (с, 1H).
Стадия 5: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-ил]-N-[2-(трет-бутоксикарбониламино) тиазол-5-карбонил]карбамата (13f).
Используя методику, описанную в Примере 7 (стадия 2), промежуточный продукт (13d) (132 мг, 0.225 ммоль) превращали в промежуточный продукт (13f) (0.59 мг, 0.108 ммоль, 48%) после очистки на силикагеле (ДХМ/ацетон от 100/0 до 70/30).
+
MS m/z ([M+H]) 548.
Стадия 6: получение промежуточного продукта пиридиния [3-[3-[трет-бутоксикарбонил-[2-(трет-бутоксикарбониламино)тиазол-5-карбонил]амино]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло [3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (13g).
В раствор промежуточного продукта (13f) (0.224 г, 0.346 ммоль) в безводном пиридине (3.5 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с пиридином (0.223 г, 1.40 ммоль). После перемешивания в течение 16 часов, полученную гетерогенную смесь упаривали в вакууме. Добавляли в остаток ДХМ, и твердую фазу отфильтровывали. Фильтрат очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (13g) (0.141 г, 0.199 ммоль, 57%).
+
MS m/z ([M+H]) 628.
1
6
H ЯМР (400 МГц, ацетон-d) δ (м.д.): 1.45 (с, 9H), 1.54 (с, 9H), 3.31 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.48 (дд, J = 2.2, 10.8 Гц, 1H), 4.17 (дд, J = 1.8, 17.6 Гц, 1H), 4.22 (дд, J = 1.2, 17.6 Гц, 1H), 4.43 (дд, J = 2.6, 5.6 Гц, 1H), 6.53 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 6.60 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 7.79 (с, 1H), 8.15-8.20 (м, 1H), 8.68-8.73 (м, 2H), 9.06 (дд, J = 1.6, 6.8 Гц, 2H), 10.69 (ушир.с, 1H).
Стадия 7: получение натрия [3-[3-[(2-аминотиазол-5-карбонил)амино]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 13).
2
Раствор промежуточного продукта (13g) (0.064 г, 0.090 ммоль) в ТФУК (0.5 мл) в инертной атмосфере перемешивали при -14°C в течение 30 минут, затем при 0°C в течение 4 часов. Смесь упаривали в токе азота. Твердый остаток растирали в EtO и ACN, получая желтое твердое вещество, которое наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали. Твердое вещество очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (вода, затем ACN). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая пример (13) (2.7 мг, 0.006 ммоль, 6%).
-
MS m/z ([M-H]) 428.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO) δ (м.д.): 3.45 (д, J = 11.2 Гц, 1H), 3.71 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 4.36 (с, 2H), 4.58 (дд, J = 2.1, 5.7 Гц, 1H), 6.55 (д, J = 5.7 Гц, 1H), 6.62 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.73 (с, 1H), 7.79 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Пример 14: синтез натрия (7-оксо-3-(4-фторпиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-(4-фторпиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (14a)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 1a), промежуточный продукт (1g) (250 мг, 0.817 ммоль) превращали реакцией с 4-фтор-1H-пиразолом (84.4 мг, 0.980 ммоль) в промежуточный продукт (14a) (179 мг, 0.678 ммоль, 83%), имеющий вид масла после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc: от 100/0 до 50/50).
+
+
MS m/z ([M+H]) 264, ([2M+H]) 529.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.12 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.52 (ддд, J = 11.0, 2.9, 1.1 Гц, 1H), 4.09 (дд, J = 5.6, 2.8 Гц, 1H), 4.16 (дд, J = 17.7, 1.9 Гц, 1H), 4.36-4.50 (м, 3H), 5.29-5.40 (м, 2H), 5.95-6.08 (м, 1H), 6.31-6.33 (м, 1H), 7.42 (дд, J = 4.2, 0.7 Гц, 1H), 7.51 (дд, J = 4.8, 0.7 Гц, 1H).
Стадия 2: получение натрия (7-оксо-3-(4-фторпиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфата (Пример 14)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 2), промежуточный продукт (14a) (179 мг, 0.678 ммоль) превращали в Пример (14) (115 мг, 0.352 ммоль, 52%) в виде белого твердого вещества после лиофилизации.
-
MS m/z ([M-H]) 303.
1
2
H-ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 3.44 (дд, J = 11.3, 0.7 Гц, 1H), 3.69 (ддд, J = 11.3, 2.9, 1.1 Гц, 1H), 4.35 (д, J = 1.5 Гц, 2H), 4.58-4.60 (м, 1H), 6.53-6.57 (м, 1H), 7.62 (дд, J = 4.0, 0.7 Гц, 1H), 7.93 (дд, J = 4.4, 0.8 Гц, 1H).
19
2
F-ЯМР (282 МГц, DO): δ (м.д.) -174.56 (т, J = 4.2 Гц, 1F).
Пример 15: синтез натрия 2,2,2-трифторацетат [3-(4-метиленаммонияпиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[N-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-4-илметил]карбамата (15a)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 1a), промежуточный продукт (1g) (500 мг, 1.63 ммоль) превращали реакцией с трет-бутил N-(1H-пиразол-4-илметил) карбаматом (387 мг, 1.96 ммоль) в промежуточный продукт (15a) (362 мг, 0.869 ммоль, 53%) в виде желтого масла после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc: от 100/0 до 50/50).
+
MS m/z ([M+H]) 376.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl) δ 1.45 (с, 9H), 3.13 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.53 (дд, J = 10.8, 2.3 Гц, 1H), 4.07-4.21 (м, 5H), 4.38-4.46 (м, 2H), 4.74 (ушир.с, 1H), 5.28-5.40 (м, 2H), 5.95-6.08 (м, 1H), 6.40 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 7.50 (с, 1H), 7.56 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта натрия [3-[4-[(трет-бутоксикарбониламино)метил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (15b)
3
3
4
2

В инертной атмосфере добавляли PhSiH (238 мкл, 1.93 ммоль) и Pd(PPh) (45 мг, 0.039 ммоль) в раствор промежуточного продукта (15a) (362 мг, 0.869 ммоль) в безводном дихлорметане (35 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Добавляли в реакционную смесь пиридин (35 мл) и комплекс триоксида серы с пиридином (769 мг, 4.83 ммоль). Полученную суспензию защищали от света и перемешивали в течение ночи до полного завершения реакции. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении, затем разбавляли дихлорметаном и фильтровали. Фильтрат упаривали при пониженном давлении и затем очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 80/20). Фракции, содержащие целевой промежуточный продукт, объединяли и упаривали, получая коричневое твердое вещество. Это твердое вещество растворяли в минимальном количестве смеси HO/ACN и конвертировали пропусканием через ионообменную колонку Dowex с натриевой формой сорбента (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH) в промежуточный продукт (15b) (142 мг, 0.300 ммоль, 31%), имеющий вид коричневого твердого вещества.
-
MS m/z ([M-H]) 414.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO) δ 1.41 (с, 9H), 3.43 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.67 (дд, J = 11.3, 2.6 Гц, 1H), 4.12-4.15 (м, 2H), 4.32-4.36 (м, 2H), 4.55 (дд, J = 5.7, 2.6 Гц, 1H), 6.55 (д, J = 5.7 Гц, 1H), 7.62 (с, 1H), 7.84 (с, 1H).
Стадия 3: получение натрия 2,2,2-трифторацетат [3-(4-метиленаммонияпиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 15)
2
Промежуточный продукт (15b) (10 мг, 0.021 ммоль) растворяли в смеси ДХМ/ТФУК (2:1) (0.5 мл). Смесь перемешивали при 0°C в течение 30 минут. Остаток растирали в EtO и ДХМ. Твердое вещество разбавляли водой и лиофилизовали, получая Пример (15) (1.4 мг, 0.003 ммоль, 12%) в виде белого твердого вещества.
-
MS m/z ([M-H]) 314.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO) δ 3.46 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.70 (дд, J = 11.3, 2.0 Гц, 1H), 4.12-4.18 (м, 2H), 4.36-4.40 (м, 2H), 4.59 (дд, J = 5.7, 2.7 Гц, 1H), 6.66 (д, J = 5.7 Гц, 1H), 7.78 (с, 1H), 8.08 (с, 1H).
19
2
F ЯМР (367 МГц, DO) δ -75.54 (с, 3F).
Пример 16: синтез натрия [7-оксо-3-(4-сульфамоилпиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта N-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-4-сульфонамида (16a)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 1a), промежуточный продукт (1g) (400 мг, 1.31 ммоль) превращали реакцией с 1H-пиразол-4-сульфонамидом (231 мг, 1.57 ммоль) в промежуточный продукт (16a) (362 мг, 0.869 ммоль, 53%) в виде желтого масла после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 80/20).
+
MS m/z ([M+H]) 326.
-
MS m/z ([M-H]) 324.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 3.15 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.53 (дд, J = 10.9, 2.0 Гц, 1H), 4.13-4.18 (м, 2H), 4.35 (д, J = 17.4 Гц, 1H), 4.37-4.48 (м, 2H), 5.30-5.34 (м, 2H), 5.33-5.40 (м, 2H), 5.95-6.05 (м, 1H), 6.62 (д, J = 4.9 Гц, 1H), 7.85 (с, 1H), 8.10 (с, 1H).
Стадия 2: получение натрия [7-оксо-3-(4-сульфамоилпиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 16)
3
3
4
2

В инертной атмосфере добавляли PhSiH (99 мкл, 0.805 ммоль) и Pd(PPh) (19 мг, 0.016 ммоль) в раствор промежуточного продукта (16a) (131 мг, 0.403 ммоль) в безводном дихлорметане (13 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Полученную суспензию фильтровали, получая промежуточный продукт N-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-4-сульфонамид в виде коричневого твердого вещества. В инертной атмосфере полученный промежуточный продукт N-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-4-сульфонамид (31 мг, 0.109 ммоль) разбавляли безводным пиридином (4 мл). Комплекс триоксида серы с пиридином (87 мг, 0.543 ммоль) добавляли в реакционную смесь. Полученную суспензию защищали от света и перемешивали в течение ночи до полного завершения реакции. Реакционную смесь упаривали, и остаток очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 100/0 до 98/2). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли и конвертировали пропусканием через ионообменную колонку Dowex с натриевой формой сорбента (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH) в Пример (16) (1.4 мг, 0.003 ммоль, 3%) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 366.
-
MS m/z ([M-H]) 364.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO) δ 3.48 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.72 (дд, J = 11.4, 2.7 Гц, 1H), 4.37 (д, J = 17.5 Гц, 1H), 4.43 (дд, J = 17.5, 1.9 Гц, 1H), 4.63 (дд, J = 5.6, 2.7 Гц, 1H), 6.82 (д, J = 5.7 Гц, 1H), 8.05 (с, 1H), 8.51 (с, 1H).
Пример 17: синтез натрия [3-(3-карбонитрилпиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта N-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-3-карбонитрилпиразола (17a)
2
3
2
4
В инертной атмосфере промежуточный продукт (1g) (200 мг, 0.653 ммоль) разбавляли безводным диметилсульфоксидом (6.5 мл). Последовательно добавляли NH-пиразол-3-карбонитрил (122 мг, 1.31 ммоль), безводный KCO (271 мг, 1.96 ммоль), CuI (12 мг, 0.065 ммоль) и N,N-диметилглицина гидрохлорид (14 мг, 0.098 ммоль). Полученную суспензию синего цвета нагревали при 100°C. Через 18 часов смесь разбавляли водой (10 мл) и добавляли EtOAc (20 мл). Водный слой экстрагировали этилацетатом (3x20 мл), и объединенные органические слои сушили над NaSO, фильтровали и упаривали. Полученное сырое соединение очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc: от 100/0 до 50/50), получая промежуточный продукт (17a) (66 мг, 0.243 ммоль, 37%) в виде желтого масла.
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (0.2 г, 0.653 ммоль) превращали реакцией с NH-пиразол-3-карбонитрилом (122 мг, 1.31 ммоль) в промежуточный продукт (17a) (66 мг, 0.243 ммоль, 37%) в виде желтого масла после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc от 100/0 до 50/50).
+
MS m/z ([M+H]) 272.
-
MS m/z ([M-H]) 270.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 3.14 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.56 (ддд, J = 10.9, 2.7, 1.1 Гц, 1H), 4.14 (дд, J = 5.6, 2.7 Гц, 1H), 4.20 (дд, J = 17.8, 2.0 Гц, 1H), 4.38-4.49 (м, 3H), 5.32 (ддд, J = 10.3, 1.4, 1.1 Гц, 1H), 5.38 (ддд, J = 17.2, 1.4, 1.1 Гц, 1H), 5.96-6.08 (м, 1H), 6.62 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 6.75 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.70 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Стадия 2: получение натрия [3-(3-карбонитрилпиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 17)
3
4
2

В инертной атмосфере промежуточный продукт (17a) (66 мг, 0.243 ммоль) разбавляли безводным дихлорметаном (2.5 мл). Последовательно добавляли AcOH (28 мкл, 0.487 ммоль) и Pd(PPh) (141 мг, 0.122 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь упаривали и очищали на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 70/30), получая промежуточный продукт N-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-3-карбонитрилпиразол. В инертной атмосфере, полученный промежуточный продукт N-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-3-карбонитрилпиразол разбавляли безводным пиридином (2.5 мл). Комплекс триоксида серы с пиридином (194 мг, 1.21 ммоль) добавляли в реакционную смесь. Полученную суспензию защищали от света и перемешивали в течение ночи до полного завершения реакции. Реакционную смесь упаривали, затем растворяли в минимальном количестве HO (плюс немного ACN) и конвертировали пропусканием через ионообменную колонку Dowex с натриевой формой сорбента (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH) в Пример (17) (12.5 мг, 0.038 ммоль, 15%) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 312.
-
MS m/z ([M-H]) 310.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO) δ 3.47 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.71 (дд, J = 11.4, 2.8 Гц, 1H), 4.37 (д, J = 17.4 Гц, 1H), 4.42 (дд, J = 17.4, 1.4 Гц, 1H), 4.62 (дд, J = 5.7, 2.8 Гц, 1H), 6.82 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 6.97 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 8.11 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Пример 18: синтез натрия [7-оксо-3-(3-фторпиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-(3-фторпиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (18a)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (0.26 г, 0.85 ммоль) превращали реакцией с 3-фтор-1H-пиразолом (110 мг, 1.27 ммоль) в промежуточный продукт (18a) (186 мг, 0.70 ммоль, 82%) в виде желтого масла после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (петролейный эфир/ацетон: от 100/0 до 0/100).
+
MS m/z ([M+H]) 265.
1
H ЯМР (400 МГц, ацетон) δ 3.27 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.43 (ддд, J = 0.6, 2.6, 10.9 Гц, 1H), 4.17 (дд, J = 17.4, 1.8 Гц, 1H), 4.21-4.30 (м, 2H), 4.36-4.45 (м, 2H), 5.20-5.26 (м, 1H), 5.32-5.39 (м, 1H), 5.95-6.06 (м, 1H), 6.10 (дд, J = 5.8, 2.7 Гц, 1H), 6.57 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 7.91 (т, J = 2.6 Гц, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 3-(3-фторпиразол-1-ил)-6-гидрокси-1,6-диазабицикло [3.2.1]окт-3-ен-7-она (18b)
Используя методику, описанную в Примере 9 (стадия 2), промежуточный продукт (18a) (190 мг, 0.73 ммоль) превращали в промежуточный продукт (18b) (56 мг, 0.25 ммоль, 34%) после очистки на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100).
+
MS m/z ([M+H]) 225.
Стадия 3: получение натрия [7-оксо-3-(3-фторпиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 18).
2
2

В раствор промежуточного продукта (18b) (56 мг, 0.25 ммоль) в безводном пиридине (5.68 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с пиридином (193 мг, 3.27 ммоль). Полученную суспензию перемешивали в течение ночи. Смесь упаривали в токе аргона. Остаток растворяли в минимальном количестве HO/ACN (1:1) и пропускали через ионообменную колонку с натриевой формой сорбента Dowex (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, лиофилизовали, и остаток очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/MeCN 99/1), получая Пример (18) (19 мг, 0.06 ммоль, 8%) в виде белого твердого вещества.
-
MS m/z ([M-H]) 303.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO) δ 3.43 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.68 (дд, J = 11.3, 2.4 Гц, 1H), 4.26-4.36 (м, 2H), 4.56 (дд, J = 5.7, 2.7 Гц, 1H), 6.11 (дд, J = 5.7, 2.7 Гц, 1H), 6.54 (д, J = 4.6 Гц, 1H), 7.78 (т, J = 2.7 Гц, 1H).
Пример 19: синтез натрия [3-(3-карбамоилпиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло [3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-карбоксамида (19a)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (100 мг, 0.33 ммоль) превращали реакцией с 1H-пиразол-3-карбоксамидом (44 мг, 0.39 ммоль) в промежуточный продукт (19a) (30 мг, 0.10 ммоль, 31%) в виде белого твердого вещества после очистки перекристаллизацией из ацетона.
+
MS m/z ([M+H]) 290.
1
6
H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 3.25-3.36 (м, 2H), 4.16-4.35 (м, 3H), 4.39 (д, J = 6.1 Гц, 2H), 5.27(д, J = 10.6, 1H), 5.32-5.42 (м, 1H), 5.92-6.00 (м, 1H), 6.63-6.84 (м, 2H), 7.36 (с, 1H), 7.64 (с, 1H), 8.23 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-карбоксамида (19b)
3
3
4
В дегазированную суспензию промежуточного продукта (19a) (26 мг, 0.09 ммоль) в безводном дихлорметане (1 мл) добавляли PhSiH (22 мкл, 0.18 ммоль) и Pd(PPh) (4 мг, 0.0034 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов и отфильтровывали твердую фазу. Твердое вещество промывали диизопропиловым эфиром, получая чистый промежуточный продукт (19b) (19 мг, 0.076 ммоль, 86%).
1
6
H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 3.23 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.37 (дд, J = 10.8, 2.8 Гц, 1H), 4.05 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 4.18 (дд, J = 17.6, 1.9 Гц, 1H), 4.27 (д, J = 17.6 Гц, 1H), 6.69-6.86 (м, 2H), 7.36 (с, 1H), 7.63 (с, 1H), 8.23 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 9.68 (с, 1H).
Стадия 3: получение натрия [3-(3-карбамоилпиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 19)
В раствор промежуточного продукта (19b) (14 мг, 0.056 ммоль) в безводном пиридине (0.4 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с пиридином (45 мг, 0.28 ммоль). После перемешивания в течение 18 часов при комнатной температуре, полученную гетерогенную смесь упаривали в вакууме. Добавляли в остаток ТГФ и отфильтровывали твердую фазу. Твердое вещество растирали в ацетонитриле, и фильтрат затем упаривали в вакууме, получая твердое вещество, которое солюбилизировали в смеси воды и ацетонитрила и наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали. Твердое вещество затем очищали методом колоночной хроматографии на обращенно-фазном С-18 силикагеле (вода/ацетонитрил от 98/2 до 0/100), получая Пример (19) (4.1 мг, 0.011 ммоль, 20%).
-
MS m/z ([M-H]) 328.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO) δ 1.89 (с, 1H), 3.45 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.61-3.75 (м, 1H), 4.31-4.49 (м, 2H), 4.58 (дд, J = 5.7, 2.7 Гц, 1H), 6.74 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 6.85 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.99 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Пример 20: синтез натрия [7-оксо-3-[4-(N-морфолин)-пиразол-1-ил)]-1,6-диаза-бицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта трет-бутил 4-(N-морфолин)-1H-пиразол-1-карбоксилата (20a)
В перемешиваемую смесь трет-бутил 4-амино-1H-пиразол-1-карбоксилата (512 мг, 2.795 ммоль) и бис(2-бромэтилового) эфира (778 мг, 3.354 ммоль) в ДМФА (28 мл) добавляли DIPEA (1.46 мл, 8.384 ммоль), и полученный раствор перемешивали при 90°C в течение 16 часов. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом, дважды промывали водой и затем насыщенным раствором хлорида натрия, сушили над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Остаток очищали на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 80/20), получая промежуточный продукт (20a) (282 мг, 1.113 ммоль, 40%) в виде светло-коричневого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 254.
1
6
H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d): δ (м.д.) 1.55 (с, 9H), 2.93 (дд, J = 5.1, 4.2 Гц, 4H), 3.69 (дд, J = 5.1, 4.2 Гц, 4H), 7.62 (д, J = 0.7 Гц, 1H), 7.74 (д, J = 0.7 Гц, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 4-(N-морфолин)-1H-пиразола (20b)
3
2
4
В перемешиваемую смесь промежуточного продукта (20a) (282 мг, 1.113 ммоль) в ДХМ (5.6 мл) добавляли 4M HCl раствор в диоксане (2.78 мл, 11.13 ммоль), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре 1 час. Образовавшийся осадок упаривали в токе воздуха. Остаток промывали дихлорметаном, эфиром, ацетоном и затем этилацетатом, получая светло-коричневое твердое вещество (113 мг). Полученную гидрохлоридную соль пиразола разделяли между этилацетатом и насыщенным водным раствором NaHCO и перемешивали 5 минут при комнатной температуре. Органический слой затем отделяли, а водный слой экстрагировали этилацетатом три раза. Объединенные органические слои сушили над NaSO и упаривали при пониженном давлении, получая промежуточный продукт (20b) (90 мг, 0.588 ммоль, 53%) в виде светло-коричневого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 154.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 2.91-2.95 (м, 4H), 3.80-3.84 (м, 4H), 7.74 (с, 2H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-[4-(N-морфолин)-пиразол-1-ил]-1,6-диаза-бицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (20c)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 1a), промежуточный продукт (1g) (171 мг, 0.559 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (20b) (90 мг, 0.587 ммоль) в промежуточный продукт (20c) (181 мг, 0.546 ммоль, 98%), имеющий вид коричневой пены после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 70/30).
+
MS m/z ([M+H]) 332.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.): 2.88-2.93 (м, 4H), 3.11 (д, J = 10.7 Гц, 1H), 3.49 (дд, J = 10.7, 2.2 Гц, 1H), 3.78-3.82 (м, 4H), 4.06 (дд, J = 5.6, 2.4 Гц, 1H), 4.16 (дд, J = 17.6, 1.8 Гц, 1H), 4.34-4.48 (м, 3H), 5.26-5.30 (м, 1H), 5.31-5.38 (м, 1H), 5.93-6.06 (м, 1H), 6.22 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 7.09 (с, 1H), 7.28 (с, 1H).
Стадия 4: получение натрия [7-оксо-3-[4-(N-морфолин)-пиразол-1-ил)]-1,6-диаза-бицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 20)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 2), промежуточный продукт (20c) (181 мг, 0.546 ммоль) превращали в Пример (20) (40 мг, 0.102 ммоль, 19% за 3 стадии) в виде светло-коричневого твердого вещества после лиофилизации.
+
MS m/z ([M+H]) 372.
-
MS m/z ([M-H]) 370.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 2.98-3.03 (м, 4H), 3.43 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.68 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.84-3.89 (м, 4H), 4.34 (с, 2H), 4.57 (дд, J = 5.9, 2.5 Гц, 1H), 6.48 (д, J = 0.9 Гц, 1H), 7.56 (с, 1H), 7.65 (с, 1H).
Пример 21: синтез натрия [3-(4-ацетамидпиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта N-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-4-ацетамидпиразола (21a)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (121 г, 0.395 ммоль) превращали реакцией с 1H-пиразол-4-ацетамидом (99 мг, 0.791 ммоль) в промежуточный продукт (21a) (50.5 мг, 0.166 ммоль, 42%) в виде желтого масла после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 40/60).
+
MS m/z ([M+H]) 304.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 3.14 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.43 (с, 2H), 3.53 (дд, J = 10.8, 2.9 Гц, 1H), 4.10 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 4.19 (дд, J = 17.6, 1.9 Гц, 1H), 4.37-4.49 (м, 3H), 5.31 (ддд, J = 10.3, 1.5, 1.4 Гц, 1H), 5.37 (ддд, J = 17.2, 1.5, 1.4 Гц, 1H), 5.42 (ушир.с, 1H), 5.57 (ушир.с, 1H), 5.96-6.06 (м, 1H), 6.43 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 7.49 (с, 1H), 7.62 (с, 1H).
Стадия 2: получение натрия [3-(4-ацетамидпиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 21)
3
4
2
2

В инертной атмосфере промежуточный продукт (21a) (50 мг, 0.165 ммоль) разбавляли безводным дихлорметаном (1.7 мл). Последовательно добавляли AcOH (19 мкл, 0.330 ммоль) и Pd(PPh) (95 мг, 0.082 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь упаривали при пониженном давлении. Полученный сырой продукт растирали в дихлорметане и фильтровали, получая промежуточный продукт N-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-4-ацетамидпиразол. В инертной атмосфере полученный промежуточный продукт (20 мг, 0.076 ммоль) разбавляли безводным пиридином (0.8 мл). Комплекс триоксида серы с пиридином (60.5 мг, 0.380 ммоль) добавляли в реакционную смесь. Полученную суспензию защищали от света и перемешивали в течение ночи до полного завершения реакции. Реакционную смесь упаривали и затем очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 100/0 до 98/2). Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли и упаривали. Остаток растворяли в минимальном количестве HO и конвертировали пропусканием через ионообменную колонку Dowex с натриевой формой сорбента (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH) в Пример (21) (3 мг, 0.008 ммоль, 5% за 3 стадии) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 344.
-
MS m/z ([M-H]) 342.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO) δ 3.46 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.52 (с, 2H), 3.69 (дд, J = 11.3, 2.7 Гц, 1H), 4.35 (дд, J = 17.4, 1.1 Гц, 1H), 4.39 (дд, J = 17.4, 1.6 Гц, 1H), 4.58 (дд, J = 5.6, 2.7 Гц, 1H), 6.60 (д, J = 5.8 Гц, 1H), 7.64 (с, 1H), 7.90 (с, 1H).
Пример 22: синтез натрия [7-оксо-3-[4-(трифторметил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-[4-(трифторметил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (22a)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (0.26 г, 0.85 ммоль) превращали реакцией с 4-(трифторметил)-1H-пиразолом (165 мг, 1.19 ммоль) в промежуточный продукт (22a) (0.181 г, 0.58 ммоль, 68%) в виде белого твердого вещества после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (Гептан/AcOEt от 100/0 до 0/100).
+
MS m/z ([M+H]) 315.
1
H ЯМР (400 МГц, ацетон) δ 3.62 (дд, J = 11.0, 0.7 Гц, 1H), 3.46 (ддд, J = 10.9, 2.8, 1.0 Гц, 1H), 4.28 (дд, J = 17.5, 1.9 Гц, 1H), 4.31-4.43 (м, 4H), 5.22-5.26 (м, 1H), 5.34-5.39 (м, 1H), 5.96-6.06 (м, 1H), 6.83-6.86 (м, 1H), 7.95 (с, 1H), 8.56 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 6-гидрокси-3-[4-(трифторметил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (22b)
3
3
4
В инертной атмосфере в раствор промежуточного продукта (22a) (119 мг, 0.38 ммоль) в безводном дихлорметане (3.8 мл) последовательно добавляли AcOH (43 мкл, 0.76 ммоль), PPh (99 мг, 0.38 ммоль) и Pd(PPh) (66 мг, 0.06 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Затем смесь упаривали в токе аргона, и остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (22b) (105 мг, 0.38 ммоль).
+
MS m/z ([M+H]) 275.
Стадия 3: получение натрия [7-оксо-3-[4-(трифторметил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 22)
2
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 9), промежуточный продукт (22b) (100 мг, 0.36 ммоль) превращали в Пример (22) (0.181 г, 0.58 ммоль, 78%) в виде белого твердого вещества после пропускания через ионообменную колонку и очистки на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/MeCN 99/1).
+
MS m/z ([M+H]) 355.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO) δ 3.44 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.68 (дд, J = 11.4, 2.8 Гц, 1H), 4.33 (д, J = 17.5 Гц, 1H), 4.39 (дд, J = 1.2, 17.5 Гц, 1H), 4.58 (дд, J = 5.7, 2.7 Гц, 1H), 6.72 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 7.96 (с, 1H), 8.40 (с, 1H).
Пример 23: синтез натрия (7-оксо-3-(3-карбоксамид-5-метил-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-(3-карбоксамид-5-метил-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (23a)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (0.25 г, 0.817 ммоль) превращали реакцией с 5-метил-1H-пиразол-3-карбоксамидом (123 мг, 0.98 ммоль) в промежуточный продукт (23a) (95.7 мг, 0.315 ммоль, 39%), имеющий вид бежевого твердого вещества, после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 50/50) и последующего растирания в ацетоне.
+
+
MS m/z ([M+H]) 304, ([2M+H]) 607.
1
6
H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d): δ (м.д.) 2.33 (с, 3H), 3.28-3.36 (м, 2H), 4.01 (дд, J = 17.6, 2.0 Гц, 1H), 4.19 (д, J = 17.6 Гц, 1H), 4.31 (дд, J = 5.6, 2.3 Гц, 1H), 4.38-4.40 (м, 2H), 5.24-5.39 (м, 2H), 5.91-6.01 (м, 1H), 6.46 (д, J = 5.4 Гц, 1H), 6.52 (д, J = 0.9 Гц, 1H), 7.24 (с, 1H), 7.56 (с, 1H).
Стадия 2: получение натрия (7-оксо-3-(3-карбоксамид-5-метил-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфата (Пример 23)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 2), промежуточный продукт (23a) (76 мг, 0.251 ммоль) превращали в Пример (23) (58.4 мг, 0.160 ммоль, 52%) в виде белого твердого вещества после лиофилизации.
-
-
MS m/z ([M-H]) 342, ([2M-H]) 685.
1
2
H-ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 2.32 (с, 3H), 3.51 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.69 (дд, J = 11.5, 2.8 Гц, 1H), 4.12-4.29 (м, 2H), 4.61 (дд, J = 5.5, 2.6 Гц, 1H), 6.50-6.59 (м, 2H).
Пример 24: синтез натрия и 2,2,2-трифторацетата [7-оксо-3-[4-карбоксамид,N-(2-аммонийэтокси)-пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта трет-бутил [4-карбоксамид, N-(2-аминоэтокси)-пиразол] карбамата (24a)
2
В инертной атмосфере NH-пиразол-4-карбоновую кислоту (207 мг, 1.87 ммоль) разбавляли безводным ДМФА (19 мл). Последовательно добавляли HOBt⋅HO (367 мг, 2.40 ммоль) и EDC⋅HCl (460 мг, 2.40 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. Добавляли трет-Бутил N-(2-аминоксиэтил)карбамат (325 мг, 1.87 ммоль) и DIPEA (420 мкл, 2.40 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Смесь упаривали в вакууме и очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 20/80), получая промежуточный продукт (24a) (198 мг, 0.72 ммоль, 39%) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 271.
-
MS m/z ([M-H]) 269.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 1.42 (с, 9H), 3.38-3.41 (м, 2H), 3.92-3.95 (м, 2H), 5.56 (ушир.с, 1H), 8.02 (с, 2H), 10.52 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта трет-бутил [1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)]пиразол-4-карбоксамид, N-(2-аминоэтокси)] оксибутаноата (24b)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (112 мг, 0.37 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (24a) (198 мг, 0.73 ммоль) в промежуточный продукт (24b) (83 мг, 0.18 ммоль, 49%) в виде желтого масла после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 30/70).
+
MS m/z ([M+H]) 449.
-
MS m/z ([M-H]) 447.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 1.46 (с, 9H), 3.15 (д, J = 11.2 Гц, 1H), 3.43 (дд, J = 5.7, 5.7 Гц, 2H), 3.54 (дд, J = 11.2, 2.0 Гц, 1H), 3.93 (дд, J = 4.9, 4.9 Гц, 2H), 4.13 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 4.18 (дд, J = 17.8, 1.9 Гц, 1H), 4.37-4.49 (м, 3H), 5.21 (ушир.с, 1H), 5.31 (дд, J = 10.2, 1.5 Гц, 1H), 5.37 (ддт, J = 17.2, 1.5, 1.4 Гц, 1H), 5.96-6.06 (м, 1H), 6.59 (т, J = 5.5 Гц, 1H), 7.92 (с, 1H), 8.14 (с, 1H), 10.05 (с, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта трет-бутил [1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)]пиразол-4-карбоксамид, N-(2-аминоэтокси)] оксибутаноата (24c)
3
3
4
В инертной атмосфере добавляли PhSiH (45 мкл, 0.368 ммоль) и Pd(PPh) (11 мг, 0.009 ммоль) в раствор промежуточного продукта (24b) (83 мг, 0.181 ммоль) в ДХМ (1.8 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь упаривали и затем очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 20/80). Фракции, содержащие целевой промежуточный продукт, объединяли и упаривали, получая промежуточный продукт (24c) (30 мг, 0.074 ммоль, 41%).
+
MS m/z ([M+H]) 409.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 1.41 (с, 9H), 3.09 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.27-3.41 (м, 2H), 3.46 (д, J = 8.8 Гц, 1H), 3.86-4.00 (м, 2H), 4.03-4.10 (м, 2H), 4.03-4.34 (м, 1H), 5.79 (ушир.с, 1H), 6.60 (д, J = 5.1 Гц, 1H), 7.89 (с, 1H), 8.21 (с, 1H), 10.69 (с, 1H).
Стадия 4: получение натрия и 2,2,2-трифторацетата [7-оксо-3-[4-карбоксамид,N-(2-аммонийэтокси)-пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 24)
Промежуточный продукт (24c) (30 мг, 0.074 ммоль) разбавляли в смеси вода/tBuOH (1:1) (0.74 мл). Последовательно добавляли комплекс триоксида серы с триметиламином (12 мг, 0.089 ммоль) и TEA (3 мкл, 0.043 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Полученное сырое соединение упаривали в вакууме и очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая соответствующий сульфатный промежуточный продукт в виде бесцветного масла. Полученный промежуточный продукт (10 мг, 0.020 ммоль) растворяли в смеси ДХМ/ТФУК (5:1) (0.4 мл) при 0°C, и смесь перемешивали при 0°C в течение 30 минут. Остаток растирали в эфире и ДХМ. Твердое вещество разбавляли водой и лиофилизовали, получая пример (24) (3.4 мг, 0.007 ммоль, 9% за 2 стадии).
+
MS m/z ([M+H]) 389.
-
MS m/z ([M-H]) 387.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO) δ 3.31-3.35 (м, 2H), 3.45 (д, J = 11.5 Гц, 1H), 3.69 (дд, J = 11.5, 2.1 Гц, 1H), 4.22-4.26 (м, 2H), 4.34 (д, J = 17.6 Гц, 1H), 4.40 (дд, J = 17.6, 1.8 Гц, 1H), 4.60 (дд, J = 5.7, 2.6 Гц, 1H), 6.75 (д, J = 5.7 Гц, 1H), 8.00 (с, 1H), 8.37 (с, 1H).
19
2
F ЯМР (367 МГц, DO) δ -75.56 (с, 3F).
Пример 25: синтез натрия [7-оксо-3-[3-(тиазол-2-илкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта N-тиазол-2-ил-1H-пиразол-3-карбоксамида (25a)
В инертной атмосфере 1H-пиразол-3-карбоновую кислоту (245 мг, 2.19 ммоль) и DMAP (668 мг, 5.46 ммоль) разбавляли в безводном ДМФА (10 мл). Добавляли порциями EDC⋅HCl (1.05 г, 5.46 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. Прикапывали смесь 2-аминотиазола (219 мг, 2.19 ммоль) в ДМФА (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционную смесь упаривали и растирали в дихлорметане, получая промежуточный продукт (25a) (168 мг, 0.865 ммоль, 39%) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H])195.
-
MS m/z ([M-H])193.
1
6
H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 6.98 (ушир.с, 1H), 7.26 (д, J = 3.6 Гц, 1H), 7.53 (д, J = 3.6 Гц, 1H), 7.91 (ушир.с, 1H), 12.02 (ушир.с, 1H), 13.58 (ушир.с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта N-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-3-(N-тиазол-2-ил-карбоксамид)пиразола (25b)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (123 мг, 0.402 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (25a) (156 мг, 0.804 ммоль) в промежуточный продукт (25b) (71 мг, 0.191 ммоль, 48%) в виде белого твердого вещества после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100).
+
MS m/z ([M+H]) 373.
-
MS m/z ([M-H]) 371.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 3.18 (д, J = 11.0 Гц, 1H), 3.58 (ддд, J = 11.0, 2.9, 1.1 Гц, 1H), 4.16 (дд, J = 5.5, 2.6 Гц, 1H), 4.23 (дд, J = 17.6, 1.9 Гц, 1H), 4.39-4.51 (м, 3H), 5.33 (дд, J = 10.3, 1.6 Гц, 1H), 5.39 (ддд, J = 17.6, 1.6, 1.4 Гц, 1H), 5.98-6.08 (м, 1H), 6.63 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 7.02 (д, J = 3.5 Гц, 1H), 7.02 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.50 (д, J = 3.5 Гц, 1H), 7.71 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 10.04 (ушир.с, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта N-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-3-(N-тиазол-2-ил-карбоксамид)пиразола (25c)
3
4
3
В инертной атмосфере промежуточный продукт (25b) (71 мг, 0.191 ммоль) разбавляли безводным дихлорметаном (2.3 мл). Последовательно добавляли AcOH (27 мкл, 0.466 ммоль), Pd(PPh) (40 мг, 0.035 ммоль) и PPh (61 мг, 0.233 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Смесь упаривали при пониженном давлении и затем очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 30/70). Фракции, содержащие целевой промежуточный продукт, объединяли и упаривали, получая промежуточный продукт (25c) (51 мг, 0.153 ммоль, 80%) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 333.
-
MS m/z ([M-H]) 331.
1
6
H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 3.24 (д, J = 11.0 Гц, 1H), 3.38 (дд, J = 11.0, 2.6 Гц, 1H), 4.07 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 4.22 (дд, J = 17.7, 2.0 Гц, 1H), 4.37 (дд, J = 17.7, 1.0 Гц, 1H), 6.91 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 7.09 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.28 (д, J = 3.6 Гц, 1H), 7.55 (д, J = 3.6 Гц, 1H), 8.37 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 9.70 (с, 1H), 12.36 (с, 1H).
Стадия 4: получение натрия [7-оксо-3-[3-(тиазол-2-илкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 25)
2

Промежуточный продукт (25c) (45.5 мг, 0.137 ммоль) разбавляли в смеси вода/tBuOH (1:1) (1.4 мл). Последовательно добавляли комплекс триоксида серы с триметиламином (23 мг, 0.164 ммоль) и TEA (5 мкл, 0.034 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Полученное сырое соединение упаривали в вакууме и очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 100/0 до 80/20). Фракции, содержащие целевой промежуточный продукт, объединяли и упаривали, получая белое твердое вещество. Полученное твердое вещество растворяли в минимальном количестве воды и конвертировали пропусканием через ионообменную колонку Dowex с натриевой формой сорбента (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH) в Пример (25) (25 мг, 0.056 ммоль, 41%) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 413.
-
MS m/z ([M-H]) 411.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO) δ 3.44 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.71 (дд, J = 11.4, 2.6 Гц, 1H), 4.36 (дд, J = 17.6, 1.6 Гц, 1H), 4.42 (д, J = 17.6 Гц, 1H), 4.60 (дд, J = 5.7, 2.6 Гц, 1H), 6.66 (д, J = 5.7 Гц, 1H), 6.90 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.17 (д, J = 3.6 Гц, 1H), 7.43 (д, J = 3.6 Гц, 1H), 7.85 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Пример 26: синтез натрия (7-оксо-3-(3-карбоксамид-4-фтор-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-(3-карбоксамид-4-фтор-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (26a)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (220 мг, 0.719 ммоль) превращали реакцией с 3-карбоксамид-4-фтор-1H-пиразолом (111 мг, 0.862 ммоль) в промежуточный продукт (26a) (63 мг, 0.206 ммоль, 29%) в виде белого твердого вещества после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 50/50) с последующим растиранием в ацетоне.
+
+
MS m/z ([M+H]) 308, ([2M+H]) 615.
1
6
H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d): δ (м.д.) 3.24-3.35 (м, 2H), 4.17-4.40 (м, 5H), 5.25-5.40 (м, 2H), 5.91-6.01 (м, 1H), 6.71-6.73 (м, 1H), 7.49 (ушир.с, 1H), 7.66 (ушир.с, 1H), 8.50 (д, J = 4.4 Гц, 1H).
19
6
F-ЯМР (282 МГц, ДМСО-d): δ (м.д.) -169.53 (д, J = 4.4 Гц, 1F).
Стадия 2: получение натрия (7-оксо-3-(3-карбоксамид-4-фтор-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфата (Пример 26)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 2), промежуточный продукт (26a) (63 мг, 0.203 ммоль) превращали в Пример (26) (20.6 мг, 0.056 ммоль, 27%) в виде белого твердого вещества после лиофилизации.
+
MS m/z ([M+H]) 348.
-
-
MS m/z ([M-H]) 346, ([2M-H]) 693.
1
2
H-ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 3.42 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.66-3.71 (м, 1H), 4.35-4.39 (м, 2H), 4.59 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 6.66-6.68 (м, 1H), 7.99 (д, J = 4.4 Гц, 1H).
19
2
F-ЯМР (282 МГц, DO): δ (м.д.) -168.25 (д, J = 4.6 Гц, 1F).
Пример 27: синтез натрия (7-оксо-3-(3-(метоксикарбамоил)-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфата и натрия (7-оксо-3-(5-(метоксикарбамоил)-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта N-метокси-1H-пиразол-3-карбоксамида (27a)
⋅
2
2
В инертной атмосфере 1H-пиразол-3-карбоновую кислоту (250 мг, 2.23 ммоль) разбавляли безводным ДМФА (7.4 мл), и последовательно добавляли HOBtHO (444 мг, 2.90 ммоль) и EDC⋅HCl (556 мг, 2.90 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. Добавляли метоксиамина гидрохлорид (335 мг, 4.01 ммоль) и DIPEA (1.17 мл, 6.69 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Реакционную смесь упаривали в вакууме и очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/метанол: от 100/0 до 90/10), затем на C-18 обращенной фазе (HO/ACN: от 98/2 до 50/50), получая промежуточный продукт (27a) (297.5 мг, 2.11 ммоль, 94%) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 142.
-
MS m/z ([M-H]) 140.
1
6
H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d): δ (м.д.) 3.65 (с, 3H), 6.63 (т, J = 2.2 Гц, 1H), 7.82 (дд, J = 2.4, 1.4 Гц, 1H), 11.49 (с, 1H), 13.27 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-(3-(метоксикарбамоил)-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она и 6-аллилокси-3-(5-(метоксикарбамоил)-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (27b)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (250 мг, 0.817 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (27a) (127 мг, 0.898 ммоль) в неразделимую смесь региоизомеров (27b) (58 мг, 0.181 ммоль, 22%, соотношение региоизомеров: 55/45) в виде желтой смолы после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 0/100).
+
+
MS m/z ([M+H]) 320, ([2M+H]) 639.
-
MS m/z ([M-H]) 318.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.13 (д, J = 11.0 Гц, 0.45H), 3.28 (д, J = 10.8 Гц, 0.55H), 3.43-3.61 (м, 1H), 3.83 (с, 1.35H), 3.86 (с, 1.65H), 4.02-4.31 (м, 2H), 4.32-4.53 (м, 3H), 5.15-5.46 (м, 2H), 5.79-6.16 (м, 1H), 6.39 (д, J = 5.5 Гц, 0.55H), 6.52 (д, J = 5.6 Гц, 0.45H), 6.61 (д, J = 1.9 Гц, 0.55H), 6.89 (д, J = 2.6 Гц, 0.45H), 7.50 (д, J = 1.8 Гц, 0.55H), 7.65 (д, J = 2.6 Гц, 0.45H), 9.37 (ушир.с, 0.55H), 9.51 (с, 0.45H).
Стадия 3: получение натрия (7-оксо-3-(3-(метоксикарбамоил)-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфата и натрия (7-оксо-3-(5-(метоксикарбамоил)-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфата (Пример 27)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 2), промежуточные продукты (27b) (58 мг, 0.181 ммоль) превращали в Пример (36) в виде смеси региоизомеров (25.4 мг, 0.067 ммоль, 37%, соотношение региоизомеров: 56/44) в виде белого твердого вещества после лиофилизации.
-
-
MS m/z ([M-H]) 358, ([2M-H]) 717.
3
+
+
MS m/z ([M+H-SOH]) 280, ([M+H]) 360.
1
2
H-ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 3.35 (д, J = 8.6 Гц, 0.44H), 3.38 (д, J = 8.7 Гц, 0.56H), 3.59 (дт, J = 2.9, 1.6 Гц, 0.56H), 3.62 (дт, J = 2.9, 1.8 Гц, 0.44H), 3.74 (с, 1.68H), 3.76 (с, 1.32H), 4.01-4.21 (м, 1H), 4.29 (д, J = 1.5 Гц, 1H), 4.48 (дд, J = 5.5, 2.6 Гц, 0.44H), 4.51 (дд, J = 5.7, 2.6 Гц, 0.56H), 6.41 (д, J = 5.3 Гц, 0.44H), 6.63 (дт, J = 5.6, 1.3 Гц, 0.56H), 6.67 (д, J = 2.1 Гц, 0.44H), 6.72 (д, J = 2.7 Гц, 0.56H), 7.62 (д, J = 2.1 Гц, 0.44H), 7.88 (д, J = 2.7 Гц, 0.56H).
Пример 28: синтез натрия (7-оксо-3-(3-ацетилпиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-(3-ацетилпиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (28a)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 1a), промежуточный продукт (1g) (450 мг, 1.47 ммоль) превращали реакцией с 1-(1H-пиразол-3-ил)этаноном (194 мг, 1.76 ммоль) в промежуточный продукт (28a) (336 мг, 1.17 ммоль, 79%), имеющий вид масла после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 50/50).
+
+
MS m/z ([M+H]) 289, ([2M+H]) 577.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 2.55 (с, 3H), 3.16 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.54-3.58 (м, 1H), 4.11-4.17 (м, 1H), 4.22 (дд, J = 17.8, 1.9 Гц, 1H), 4.37-4.57 (м, 3H), 5.30-5.41 (м, 2H), 6.02 (дддд, J = 17.1, 10.3, 6.7, 6.1 Гц, 1H), 6.55-6.58 (м, 1H), 6.84 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.64 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Стадия 2: получение натрия (7-оксо-3-(3-ацетилпиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфата (Пример 28)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 2), промежуточный продукт (28a) (50 мг, 0.173 ммоль) превращали в Пример (28) (31.7 мг, 0.090 ммоль, 52%) в виде белого твердого вещества после лиофилизации.
-
-
MS m/z ([M-H]) 327, ([2M-H]) 655.
3
+
+
MS m/z ([M+H-SOH]) 249, ([M+H]) 329.
1
2
H-ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 2.59 (с, 3H), 3.46 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.67-3.72 (м, 1H), 4.42 (д, J = 1.5 Гц, 2H), 4.60 (дд, J = 5.7, 2.6 Гц, 1H), 6.79 (дд, J = 5.8, 1.3 Гц, 1H), 6.93 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.99 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Пример 29: синтез (7-оксо-3-(3-[(Z,E)-N-(2-аминоэтокси)-C-метил-карбонимидоил]-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) гидросульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-(3-[(Z,E)-N-[2-(трет-бутоксикарбониламино)этокси]-C-метил-карбонимидоил]-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло [3.2.1]окт-3-ен-7-она (29a)
В 50-миллилитровой колбе в инертной атмосфере промежуточный продукт (28a) (282 мг, 0.978 ммоль) и трет-бутил[2-(аминоокси)этил]карбамат (189.6 мг, 1.076 ммоль) растворяли в безводном пиридине (9.8 мл). Добавляли каплю смеси HCl 12M/MeOH 1/1, и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь упаривали в вакууме и очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (Циклогексан/EtOAc: от 100/0 до 30/70), получая промежуточный продукт (29a) (419 мг, 0.938 ммоль, 96%, Z/E: 15/85) в виде вязкой смолы.
+
+
+
MS m/z ([M+H-Boc]) 347, ([M+H-tBu]) 391, ([M+H]) 447.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.49 (с, 9H), 2.26 (с, 3H), 3.19 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.50-3.60 (м, 3H), 4.12-4.27 (м, 4H), 4.39-4.60 (м, 3H), 4.97 (ушир.с, 1H), 5.33-5.45 (м, 2H), 6.07 (дддд, J = 17.0, 10.3, 6.7, 6.0 Гц, 1H), 6.50 (дд, J = 5.5, 1.2 Гц, 1H), 6.70 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.59 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта натрия (7-оксо-3-(3-[(Z,E)-N-[2-(трет-бутоксикарбониламино)этокси]-C-метил-карбонимидоил]-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло [3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфата (29b)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 2), промежуточный продукт (29a) (441 мг, 0.988 ммоль) превращали в промежуточный продукт (29b) (129.7 мг, 0.255 ммоль, 26%, соотношение Z/E: 17/83) в виде белого твердого вещества, после лиофилизации.
-
MS m/z ([M-H]) 485.
3
+
+
+
MS m/z ([M+H-Boc-SOH]) 307, ([M+H-Boc]) 387, ([M+H]) 487.
1
2
H-ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 1.33 (с, 9H), 2.21 (с, 3H), 3.30-3.48 (м, 3H), 3.67 (д, J = 9.5 Гц, 1H), 4.18-4.22 (м, 2H), 4.36 (ушир.с, 2H), 4.55 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 6.64 (д, J = 5.7 Гц, 1H), 6.70 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.87 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Стадия 3: получение (7-оксо-3-(3-[(Z,E)-N-(2-аминоэтокси)-C-метил-карбонимидоил]-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) гидросульфата (Пример 29)
2
2

Промежуточное вещество (29b) (117 мг, 0.230 ммоль) растворяли в смеси 2.5/1 ДХМ/ТФУК (2.8 мл, 0.08M) при 0°C в инертной атмосфере. После перемешивания в течение 45 минут (конверсию исходного соединения отслеживали методом LC/MS), добавляли холодный EtO (3 мл) при 0°C. После перемешивания в течение 10 минут при 0°C, осадок отфильтровывали (Pall VWR 514-4084, 045мкм, GH polypro, NanosepMF) и промывали холодным EtO. Твердое вещество затем растирали в ACN, получая цвиттерионное соединение. Белое твердое вещество отфильтровывали и промывали ацетонитрилом. Твердое вещество растворяли в воде MilliQ и лиофилизовали, получая пример (29) (58.8 мг, 0.177 ммоль, 77%, соотношение Z/E: 14/86) в виде белого твердого вещества.
-
-
MS m/z ([M-H]) 385, ([2M-H]) 771.
3
+
+
MS m/z ([M+H-SOH]) 307, ([M+H]) 387.
1
2
H-ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 2.17 (с, 3H), 3.30-3.45 (м, 3H), 3.64 (дд, J = 11.5, 2.6 Гц, 1H), 4.26-4.43 (м, 4H), 4.52 (дд, J = 5.8, 2.6 Гц, 1H), 6.56 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 6.63 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.77 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Пример 30: синтез натрия (7-оксо-3-(3-карбоксамид-5-фтор-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 5-фтор-1H-пиразол-3-карбоксамида (30a)
3
Этил 5-фтор-1H-пиразол-3-карбоксилат (200 мг, 1.26 ммоль) растворяли в 7 M растворе NH в MeOH (3.6 мл), упаривали раствор гидроксида аммония (3.6 мл) и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель упаривали при пониженном давлении, получая промежуточный продукт (30a) (150 мг, 0.920 ммоль, 92%) в виде белого твердого вещества, которое использовали в следующей стадии без дополнительной очистки.
+
MS m/z ([M+H]) 130.
-
MS m/z ([M-H]) 128.
1
6
H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d): δ (м.д.) 6.49 (д, J = 6.2 Гц, 1H), 7.63 (с, 1H), 7.98 (с, 1H), 13.10 (ушир.с, 1H).
19
6
F-ЯМР (282 МГц, ДМСО-d): δ (м.д.) -131.06 (с, 1F).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-(3-карбоксамид-5-фтор-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (30b)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 1a), промежуточный продукт (1g) (225 мг, 0.735 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (30a) (123 мг, 0.956 ммоль) в промежуточный продукт (30b) (19 мг, 0.061 ммоль, 8%) в виде бежевого твердого вещества, после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100).
+
+
MS m/z ([M+H]) 308, ([2M+H]) 615.
-
MS m/z ([M-H]) 306.
1
H ЯМР (300 МГц, MeOD): δ (м.д.) 3.33 (м, 1H), 3.48 (д, J = 10.1 Гц, 1H), 4.04-4.53 (м, 5H), 5.25-5.45 (м, 2H), 6.03 (ддт, J = 16.7, 10.4, 6.3 Гц, 1H), 6.40 (д, J = 5.2 Гц, 1H), 6.66 (д, J = 5.5 Гц, 1H).
19
F-ЯМР (282 МГц, MeOD): δ (м.д.) -128.49 (с, 1F).
Стадия 3: получение натрия (7-оксо-3-(3-карбоксамид-5-фтор-пиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфата (Пример 30)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 2), промежуточный продукт (30b) (18 мг, 0.059 ммоль) превращали в Пример (30) (7.2 мг, 0.019 ммоль, 33%) в виде белого твердого вещества после лиофилизации.
+
+
3
MS m/z ([M+H]) 348, ([M+H-SOH]) 268.
-
-
MS m/z ([M-H]) 347, ([2M-H]) 693.
1
6
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d): δ (м.д.) 3.20-3.46 (м, 2H), 4.18 (ушир.с, 2H), 4.41 (дд, J = 5.7, 2.5 Гц, 1H), 6.50 (д, J = 5.2 Гц, 1H), 6.56-6.65 (м, 1H), 7.45 (с, 1H), 7.80 (с, 1H).
19
6
F-ЯМР (282 МГц, ДМСО-d): δ (м.д.) -126.94 (с, 1F).
Пример 31: синтез натрия (7-оксо-3-[3-(морфолин-4-карбонил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта морфолино(1H-пиразол-3-ил)метанона (31a)
Дипиразоло[3,1-a:3',1'-d]пиразин-4,9-дион (получен согласно Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2015, 25(15), 3024-3029) (300 мг, 1.59 ммоль) и морфолин (293 мкл, 3.35 ммоль) растворяли в безводном ТГФ (8 мл) и перемешивали при 80°C в течение 1ч30мин. Реакционную смесь фильтровали, и фильтрат упаривали при пониженном давлении, получая промежуточный продукт (31a) (500 мг, 2.75 ммоль, 87%) в виде бежевого твердого вещества, которое использовали в следующей стадии без дополнительной очистки.
+
MS m/z ([M+H]) 182.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.49-4.17 (м, 8H), 6.67 (д, J = 2.3 Гц, 1H), 7.59 (д, J = 2.3 Гц, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-[3-(морфолин-4-карбонил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (31b)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 1a), промежуточный продукт (1g) (250 мг, 0.817 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (31a) (192 мг, 1.062 ммоль) в промежуточный продукт (31b) (271 мг, 0.753 ммоль, 92%) в виде оранжевой смолы после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100).
+
+
MS m/z ([M+H]) 360, ([2M+H]) 719.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.14 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.49-3.61 (м, 1H), 3.68-3.80 (м, 6H), 4.02 (т, J = 4.8 Гц, 2H), 4.08-4.23 (м, 2H), 4.35-4.53 (м, 3H), 5.25-5.44 (м, 2H), 6.02 (дддд, J = 17.1, 10.3, 6.7, 6.1 Гц, 1H), 6.49 (дт, J = 5.5, 1.2 Гц, 1H), 6.80 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.63 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Стадия 3: получение натрия (7-оксо-3-[3-(морфолин-4-карбонил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфата (Пример 31)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 2), промежуточный продукт (31b) (246 мг, 0.683 ммоль) превращали в Пример (31) (173 мг, 0.409 ммоль, 60%) в виде белого твердого вещества после лиофилизации.
+
+
3
MS m/z ([M+H]) 400, ([M+H-SOH]) 320.
-
-
MS m/z ([M-H]) 398, ([2M-H]) 797.
1
2
H-ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 3.44 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.64-3.86 (м, 9H), 4.29-4.44 (м, 2H), 4.58 (дд, J = 5.7, 2.6 Гц, 1H), 6.70-6.71 (м, 2H), 7.99 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Пример 32: синтез (7-оксо-3-[3-(4-пиперидилкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) гидросульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта трет-бутил 4-(1H-пиразол-3-карбониламино)пиперидин-1-карбоксилата (32a)
Дипиразоло[3,1-a:3',1'-d]пиразин-4,9-дион (получен согласно Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2015, 25(15), 3024-3029) (250 мг, 1.33 ммоль) и трет-бутил 4-аминопиперидин-1-карбоксилат (532.2 мг, 2.66 ммоль) растворяли в безводном ТГФ (6.6 мл) и перемешивали при 80°C в течение 1ч10мин. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении и очищали на слое силикагеля (ДХМ/Ацетон: 50/50), получая промежуточный продукт (32a) (755 мг, 2.56 ммоль, 97%) в виде бежевого твердого вещества.
+
+
+
MS m/z ([M+H-Boc]) 195, ([M+H-tBu]) 239, ([M+H]) 295.
-
MS m/z ([M-H]) 293.
1
H ЯМР (300 МГц, MeOD): δ (м.д.) 1.46 (с, 9H), 1.47-1.56 (м, 2H), 1.92 (д, J = 11.4 Гц, 2H), 2.92 (ушир.с, 2H), 3.88-4.22 (м, 3H), 6.75 (с, 1H), 7.69 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-[3-[(1-трет-бутоксикарбонил-4-пиперидил)карбамоил]пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (32b)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 1a), промежуточный продукт (1g) (250 мг, 0.817 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (32a) (313 мг, 1.06 ммоль) в промежуточный продукт (32b) (289 мг, 0.611 ммоль, 75%) в виде оранжевой смолы после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100).
+
+
+
MS m/z: ([M+H-tBu]) 417, ([M+H-Boc]) 373, ([2M+H]) 945.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.46 (с, 9H), 1.46-1.48 (м, 2H), 1.97 (дд, J = 12.7, 3.7 Гц, 2H), 2.90 (т, J = 12.5 Гц, 2H), 3.14 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.55 (ддд, J = 10.8, 2.8, 1.1 Гц, 1H), 3.98-4.21 (м, 5H), 4.36-4.55 (м, 2H), 5.23-5.47 (м, 2H), 6.01 (дддд, J = 17.1, 10.3, 6.7, 6.1 Гц, 1H), 6.53 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 6.69 (д, J = 8.2 Гц, 1H), 6.87 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.61 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта натрия (7-оксо-3[3-[(1-трет-бутоксикарбонил-4-пиперидил)карбамоил]пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) сульфата (32c)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 2), промежуточный продукт (32b) (279 мг, 0.590 ммоль) превращали в промежуточный продукт (32c) (131.2 мг, 0.245 ммоль, 41%) в виде белого твердого вещества после лиофилизации.
-
MS m/z ([M-H]) 511.
3
3
+
+
MS m/z ([M+H-tBu-SOH]) 377, ([M+H-SOH]) 457
1
2
H-ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 1.34-1.48 (м, 2H), 1.42 (с, 9H), 1.89 (д, J = 12.7 Гц, 2H), 2.90 (т, J = 12.6 Гц, 2H), 3.42 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.60-3.72 (м, 1H), 3.90-4.10 (м, 3H), 4.37 (ушир.с, 2H), 4.55 (дд, J = 5.7, 2.6 Гц, 1H), 6.72 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 6.82 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.96 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Стадия 4: получение (7-оксо-3-[3-(4-пиперидилкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил) гидросульфата (Пример 32)
2
2
2
Промежуточный продукт (32c) (40 мг, 0.075 ммоль) растворяли в смеси 2.5/1 ДХМ/ТФУК (0.93 мл, 0.08M) при 0°C в инертной атмосфере. После перемешивания в течение 45 минут (конверсию исходного соединения отслеживали методом LC/MS), добавляли холодный EtO (1 мл) при 0°C. После перемешивания в течение 10 минут при 0°C, осадок отфильтровывали (Pall VWR 514-4084, 045мкм GH polypro, NanosepMF) и промывали холодным EtO. Твердое вещество затем растирали в ацетонитриле, получая цвиттерионное соединения. Белое твердое вещество отфильтровывали и промывали ацетонитрилом. Твердое вещество очищали на С-18 обращенной фазе (HO/ACN: от 98/2 до 30/70), получая после лиофилизации Пример (32) (18 мг, 0.044 ммоль, 59%) в виде белого твердого вещества.
+
+
3
MS m/z ([M+H]) 413, ([M+H-SOH]) 333.
-
MS m/z ([M-H]) 411.
1
2
H-ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 1.71-1.95 (м, 2H), 2.09-2.28 (м, 2H), 3.13 (тд, J = 12.9, 3.1 Гц, 2H), 3.40 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.44-3.56 (м, 2H), 3.60-3.73 (дд, J = 11.6, 3.7 Гц, 1H), 4.09 (м, 1H), 4.34 (д, J = 1.4 Гц, 2H), 4.55 (дд, J = 5.7, 2.5 Гц, 1H), 6.63-6.71 (д, J = 5.6 Гц 1H), 6.76 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.88 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Пример 33: синтез триэтиламмония {[3-(N-ацетамидо)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил} сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта N-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-3-(N-ацетамидо)пиразола (33a)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (200 мг, 0.653 ммоль) превращали реакцией с N-(1H-пиразол-3-ил)ацетамидом (164 мг, 1.31 ммоль) в промежуточный продукт (33a) (72 мг, 0.237 ммоль, 36%) в виде оранжевого масла, после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 50/50).
+
MS m/z ([M+H]) 304.
-
MS m/z ([M-H]) 302.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 2.10 (с, 3H), 3.10 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.47 (дд, J = 10.8, 2.2 Гц, 1H), 4.06 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 4.13 (дд, J = 17.7, 1.9 Гц, 1H), 4.34-4.44 (м, 3H), 5.27 (дд, J = 10.4, 1.1 Гц, 1H), 5.33 (ддд, J = 17.2, 1.4, 1.1 Гц, 1H), 5.92-6.02 (м, 1H), 6.28 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 6.82 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.49 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 8.90 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта N-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-3-(N-ацетамидо)пиразола (33b)
3
4
3
В инертной атмосфере разбавляли промежуточный продукт (33a) (72 мг, 0.237 ммоль) безводным дихлорметаном (2.4 мл). Последовательно добавляли AcOH (29 мкл, 0.477 ммоль), Pd(PPh) (41 мг, 0.036 ммоль) и PPh (63 мг, 0.238 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Смесь фильтровали, получая промежуточный продукт (33b) (50 мг, 0.190 ммоль, 80%) в виде не совсем белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 264.
-
MS m/z ([M-H]) 262.
1
6
H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 2.00 (с, 3H), 3.20 (д, J = 10.7 Гц, 1H), 3.34 (дд, J = 10.7, 2.9 Гц, 1H), 4.00 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 4.10 (дд, J = 17.5, 1.1 Гц, 1H), 4.15 (дд, J = 17.5, 1.6 Гц, 1H), 6.51 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 6.67 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 8.01 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 9.64 (ушир.с, 1H), 10.63 (с, 1H).
Стадия 3: получение триэтиламмония {[3-(N-ацетамидо)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил} сульфата (Пример 33)
2
Промежуточный продукт (33b) (46 мг, 0.175 ммоль) разбавляли в смеси вода/tBuOH (1:1) (1.7 мл). Последовательно добавляли комплекс триоксида серы с триметиламином (29 мг, 0.208 ммоль) и TEA (6 мкл, 0.043 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Полученное сырое соединение упаривали и очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 100/0 до 90/10), получая пример (33) (24 мг, 0.054 ммоль, 31%) в виде не совсем белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 344.
-
MS m/z ([M-H]) 342.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO) δ 1.24 (т, J = 7.3 Гц, 9H), 2.14 (с, 3H), 3.16 (кв, J = 7.3 Гц, 6H), 3.40 (д, J = 11.2 Гц, 1H), 3.65 (дд, J = 11.2, 2.5 Гц, 1H), 4.31 (м, 2H), 4.53 (дд, J = 5.7, 2.7 Гц, 1H), 6.54 (д, J = 5.7 Гц, 1H), 6.55 (д, J = 2.8 Гц, 1H), 7.79 (д, J = 2.8 Гц, 1H).
Пример 34: синтез натрия {7-оксо-3-[3-(тиазол-2-карбониламино)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил} сульфата
Стадия 1: Получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-(3-нитропиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (34a)
2
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (2.00 г, 6.53 ммоль) превращали реакцией с 3-нитро-1H-пиразолом (961 мг, 8.49 ммоль) в промежуточный продукт (34a) (1.07 г, 3.61 ммоль, 55%) в виде белого твердого вещества, после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 70/30) с последующим растиранием в EtO.
+
MS m/z ([M+H]) 292.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 3.15 (д, J = 11.0 Гц, 1H), 3.57 (дд, J = 11.0, 2.8 Гц, 1H), 4.16 (дд, J = 5.5, 2.5 Гц, 1H), 4.25 (дд, J = 17.7, 1.9 Гц, 1H), 4.38-4.49 (м, 3H), 5.33 (ддд, J = 10.3, 1.7, 0.9 Гц, 1H), 5.38 (ддд, J = 17.2, 1.7, 1.4 Гц, 1H), 5.96-6.06 (м, 1H), 6.72 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 6.99 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.69 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Стадия 2: Получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-(3-аминопиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (34b)
2
В инертной атмосфере разбавляли промежуточный продукт (34a) (1.07 г, 3.61 ммоль) и AcOH (2.1 мл, 36.84 ммоль) в ДХМ (37 мл). Раствор охлаждали при 0°C и затем добавляли порошок Zn (2.4 г, 36.84 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 1.5 часов. Смесь фильтровали, фильтрат упаривали. Остаток растирали в EtO, получая промежуточный продукт (34b) (958 мг, 2.75 ммоль, 76%).
+
MS m/z ([M+H]) 262.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 3.16 (д, J = 10.7 Гц, 1H), 3.50 (дд, J = 10.7, 2.6 Гц, 1H), 4.04-4.06 (м, 1H), 4.08 (дд, J = 12.8, 2.2 Гц, 1H), 4.30 (д, J = 17.2 Гц, 1H), 4.36-4.48 (м, 2H), 5.30 (ддд, J = 10.3, 1.6, 1.3 Гц, 1H), 5.36 (ддд, J = 17.2, 1.6, 1.4 Гц, 1H), 5.74 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 5.96-6.06 (м, 1H), 6.30 (д, J = 5.9 Гц, 1H), 7.28 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Стадия 3: Получение промежуточного продукта N-[N-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-ил]тиазол-2-карбоксамида (34c)
В инертной атмосфере разбавляли промежуточный продукт (34b) (500 мг, 1.91 ммоль) в ДМА (19 мл). Добавляли 1,3-тиазол-2-карбонилхлорид (565 мг, 3.83 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Образовавшийся осадок отфильтровывали и промывали диэтиловым эфиром, получая промежуточный продукт (34c) (386 мг, 1.01 ммоль, 53%) в виде не совсем белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 373.
-
MS m/z ([M-H]) 371.
1
6
H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 3.27 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.33 (дд, J = 10.9, 2.4 Гц, 1H), 4.19 (дд, J = 17.4, 1.2 Гц, 1H), 4.24 (дд, J = 17.4, 1.5 Гц, 1H), 4.29 (дд, J = 5.7, 2.4 Гц, 1H), 4.39 (д, J = 5.5 Гц, 2H), 5.26 (ддд, J = 10.4, 1.6, 1.4 Гц, 1H), 5.37 (ддд, J = 17.3, 1.6, 1.6 Гц, 1H), 5.91-6.01 (м, 1H), 6.57 (д, J = 5.7 Гц, 1H), 6.76 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 8.10 (д, J = 3.1 Гц, 1H), 8.12 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 8.14 (д, J = 3.1 Гц, 1H), 10.99 (ушир.с, 1H).
Стадия 4: Получение промежуточного продукта трет-бутил N-[N-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-ил]тиазол-2-карбонил карбамата (34d)
2
В инертной атмосфере разбавляли промежуточный продукт (34c) (226 мг, 0.61 ммоль) в ДХМ (6 мл). Добавляли BocO (154 мкл, 0.67 ммоль), TEA (93 мкл, 0.67 ммоль) и DMAP (7 мг, 0.06 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Полученное сырое соединение очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 70/30), получая промежуточный продукт (34d) (295 мг, 0.54 ммоль, 88%) в виде бесцветного масла.
+
MS m/z ([M+H]) 473.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 1.39 (с, 9H), 3.10 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.50 (дд, J = 10.8, 2.8 Гц, 1H), 4.07 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 4.14 (дд, J = 17.6, 1.8 Гц, 1H), 4.32 (дд, J = 17.6, 1.0 Гц, 1H), 4.38-4.48 (м, 2H), 5.30 (ддд, J = 10.3, 1.6, 1.4 Гц, 1H), 5.36 (дд, J = 17.2, 1.4 Гц, 1H), 5.96-6.06 (м, 1H), 6.41 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 6.42 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.61 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.62 (д, J = 3.1 Гц, 1H), 7.92 (д, J = 3.1 Гц, 1H).
Стадия 5: Получение натрия {7-оксо-3-[3-(тиазол-2-карбониламино)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил} сульфата (Пример 34)
3
4
2
2

В инертной атмосфере разбавляли промежуточный продукт (34d) (290 мг, 0.61 ммоль) безводным дихлорметаном (6 мл). Последовательно добавляли AcOH (70 мкл, 1.23 ммоль) и Pd(PPh) (354 мг, 0.31 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Через 2 часа добавляли в реакционную смесь безводный пиридин (6 мл) и комплекс триоксида серы с пиридином (488 мг, 3.06 ммоль). Полученную суспензию защищали от света и перемешивали в течение ночи до полного завершения реакции. Реакционную смесь упаривали и затем очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100). Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли и упаривали. Полученный промежуточный продукт (195 мг, 0.24 ммоль) растворяли в минимальном количестве смеси HO/ацетон (1:1) и конвертировали пропусканием через ионообменную колонку Dowex с натриевой формой сорбента (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли и лиофилизовали. Полученное твердое вещество растирали в воде (5 мл) и перемешивали при 0°C в течение 8 часов. Смесь фильтровали и очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 100/0 до 60/40). Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли и лиофилизовали, получая пример (34) (5 мг, 0.11 ммоль, 18% за 3 стадии) в виде желтого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 413.
-
MS m/z ([M-H]) 411.
1
6
H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 3.27 (д, J = 11.0 Гц, 1H), 3.39 (дд, J = 11.0, 2.3 Гц, 1H), 4.19-4.23 (м, 2H), 4.37 (дд, J = 5.7, 2.4 Гц, 1H), 6.60 (д, J = 5.7 Гц, 1H), 6.78 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 8.11 (д, J = 3.1 Гц, 1H), 8.14 (д, J = 3.1 Гц, 1H), 8.17 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 11.02 (ушир.с, 1H).
Пример 35: синтез натрия и 2,2,2-трифторацетата [7-оксо-3-[3-(метилен-2-аммонийтиазол) пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта N-тиазол-2-ил-1H-пиразол-3-карбоксамида (35a)
2
Дипиразоло[3,1-a:3',1'-d]пиразин-4,9-дион (получен согласно Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2015, 25(15), 3024-3029) (500 мг, 2.66 ммоль) и 2-аминотиазол (532 мг, 5.32 ммоль) разбавляли в ТГФ (5 мл). Реакционную смесь нагревали при 60°C в течение 2 часов. После охлаждения до комнатной температуры смесь фильтровали, промывали ацетонитрилом и EtO, получая промежуточный продукт (35a) (843 мг, 4.34 ммоль, 82%) в виде не совсем белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 195.
-
MS m/z ([M-H]) 193.
1
6
H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 7.00 (с, 1H), 7.26 (д, J = 3.6 Гц, 1H), 7.53 (д, J = 3.6 Гц, 1H), 7.88 (с, 1H), 12.04 (ушир.с, 1H), 13.57 (ушир.с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта N-(1H-пиразол-3-илметил)тиазол-2-амина (35b)
4
2
4
В инертной атмосфере в раствор промежуточного продукта (35a) (750 мг, 3.86 ммоль) в ТГФ (8 мл) при 0°C добавляли раствор LiAlH в ТГФ (2M, 3.9 мл, 7.72 ммоль) по каплям. Смесь кипятили 4 часа. После охлаждения до комнатной температуры, реакционную смесь охлаждали при 0°C и затем гасили водой и фильтровали. Фильтрат экстрагировали этилацетатом (5×50 мл). Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и упаривали, получая промежуточный продукт (35b) (342 мг, 1.89 ммоль, 49%) в виде не совсем белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 181.
-
MS m/z ([M-H]) 179.
1
6
H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 4.40 (м, 2H), 6.18 (д, J = 2.1 Гц, 1H), 6.61 (д, J = 3.7 Гц, 1H), 7.02 (д, J = 3.7 Гц, 1H), 7.63 (с, 1H), 7.84 (с, 1H), 12.62 (ушир.с, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-[3-[(тиазол-2-иламино) метил]пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (35c)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (420 мг, 1.37 ммоль) превращали реакцией с N-(1H-пиразол-3-илметил)тиазол-2-амином (35b) (322 мг, 1.78 ммоль) в промежуточный продукт (35c) (194 мг, 0.49 ммоль, 35%) в виде оранжевого масла, после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 0/100).
+
MS m/z ([M+H]) 359.
-
MS m/z ([M-H]) 357.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 3.14 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.53 (дд, J = 10.8, 1.9 Гц, 1H), 4.10 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 4.17 (дд, J = 17.6, 1.9 Гц, 1H), 4.37-4.54 (м, 3H), 4.50 (м, 2H), 5.31 (м, 1H), 3.37 (ддд, J = 17.2, 1.6, 1.4 Гц, 1H), 5.97-6.07 (м, 1H), 6.35 (д, J = 2.5 Гц, 1H) 6.46 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 6.54 (с, 1H), 7.14 (с, 1H), 7.55 (д, J = 2.5 Гц, 1H).
Стадия 4: получение промежуточного продукта трет-бутил {[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-ил]метиленамино}-N-тиазол-2-ил-карбамата (35d)
2
В инертной атмосфере разбавляли промежуточный продукт (35c) (166 мг, 0.46 ммоль) в ДХМ (5 мл). Добавляли BocO (117 мкл, 0.51 ммоль), TEA (71 мкл, 0.51 ммоль) и DMAP (6 мг, 0.05 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Полученное сырое соединение очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 20/80), получая промежуточный продукт (35d) (137 мг, 0.29 ммоль, 62%) в виде желтого масла.
+
MS m/z ([M+H]) 459.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 1.53 (с, 9H), 3.11 (д, J = 10.7 Гц, 1H), 3.51 (дд, J = 10.7, 1.9 Гц, 1H), 4.06 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 4.15 (дд, J = 17.6, 1.9 Гц, 1H), 4.36-4.48 (м, 3H), 5.30 (дд, J = 10.3, 1.3 Гц, 1H), 5.33-5.35 (м, 2H), 5.38 (ддд, J = 17.2, 1.6, 1.4 Гц, 1H), 6.01 (дддд, J = 17.6, 10.3, 6.7, 6.0 Гц, 1H), 6.24 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 6.37 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 6.93 (д, J = 3.7 Гц, 1H), 7.42 (д, J = 3.7 Гц, 1H), 7.48 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Стадия 5: получение промежуточного продукта натрия {3-[трет-бутоксикарбонил-N-(тиазол-2-ил)-3-аминометилпиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил} сульфата (35e)
3
4
2

В инертной атмосфере разбавляли промежуточный продукт (35d) (127 мг, 0.28 ммоль) безводным дихлорметаном (2.8 мл). Последовательно добавляли AcOH (32 мкл, 0.55 ммоль) и Pd(PPh) (160 мг, 0.14 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем добавляли в реакционную смесь безводный пиридин (2.8 мл) и комплекс триоксида серы с пиридином (220 мг, 1.38 ммоль). Полученную суспензию защищали от света и перемешивали в течение ночи до полного завершения реакции. Реакционную смесь упаривали и затем очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100). Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли и упаривали. Остаток растворяли в минимальном количестве HO/ACN (1:1) и конвертировали пропусканием через ионообменную колонку Dowex с натриевой формой сорбента (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH), получая промежуточный продукт (35e) (68 мг, 0.13 ммоль, 47%) в виде желтого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 499.
-
MS m/z ([M-H]) 497.
1
6
H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ 1.48 (с, 9H), 3.24 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.35 (дд, J = 10.9, 2.5 Гц, 1H), 4.12-4.16 (м, 2H), 4.32 (дд, J = 5.7, 2.5 Гц, 1H), 5.23 (с, 2H), 6.20 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 6.54 (д, J = 5.7 Гц, 1H), 7.24 (д, J = 3.6 Гц, 1H), 7.43 (д, J = 3.6 Гц, 1H), 8.10 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Стадия 6: получение натрия и 2,2,2-трифторацетата [7-оксо-3-[3-(метилен-2-аммонийтиазол)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 35)
2
Промежуточный продукт (35e) (57 мг, 0.11 ммоль) растворяли в смеси ДХМ/ТФУК (3:2) (2.2 мл) и перемешивали при 0°C. После 48 часов при 0°C, смесь упаривали. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 100/0 до 70/30). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли и лиофилизовали, получая пример (35) (1.7 мг, 0.003 ммоль, 3%) в виде светло-розового твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 399.
-
MS m/z ([M-H]) 397.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO) δ 3.44 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.68 (дд, J = 11.4, 2.1 Гц, 1H), 4.34-4.37 (м, 2H), 4.49-4.51 (м, 2H), 4.56 (дд, J = 5.7, 2.6 Гц, 1H), 6.45 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 6.58 (д, J = 5.7 Гц, 1H), 6.68 (д, J = 3.8 Гц, 1H), 7.07 (д, J = 3.8 Гц, 1H), 7.38 (ушир.с, 1H), 7.84 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 8.45 (ушир.с, 1H).
19
2
F ЯМР (367 МГц, DO) δ -75.55 (с, 3F).
Пример 37: синтез натрия [7-оксо-3-[3-(оксазол-2-илкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта трет-бутил N-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-карбоксилата (37a)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (500 мг, 1.63 ммоль) превращали реакцией с трет-бутил-1H-пиразол-3-карбоксилатом (550 мг, 3.27 ммоль) в промежуточный продукт (37a) (300 мг, 0.78 ммоль, 48%) в виде желтого масла, после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 50/50).
+
MS m/z ([M+H]) 347.
-
MS m/z ([M-H]) 345.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 1.58 (с, 9H), 3.13 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.53 (дд, J = 10.8, 1.8 Гц, 1H), 4.11 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 4.27 (дд, J = 17.7, 1.8 Гц, 1H), 4.37-4.49 (м, 3H), 5.31 (дт, J = 10.4, 1.6 Гц, 1H), 5.37 (ддд, J = 17.2, 1.6, 1.4 Гц, 1H), 5.96-6.06 (м, 1H), 6.58 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 6.77 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.60 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта N-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-карбоновой кислоты (37b)
Промежуточный продукт (37a) (300 мг, 0.78 ммоль) растворяли в смеси ДХМ и ТФУК (5:1) (4.3 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. Смесь упаривали и затем очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 60/40). Фракции, содержащие целевой промежуточный продукт, объединяли и упаривали, получая промежуточный продукт (37b) (162 мг, 0.53 ммоль, 68%) в виде желтого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 291.
-
MS m/z ([M-H]) 289.
1
6
H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d) δ 3.27 (д, J = 11.0 Гц, 1H), 3.34 (дд, J = 11.0, 2.6 Гц, 1H), 4.24 (м, 2H), 4.32 (дд, J = 5.6, 2.2 Гц, 1H), 4.39 (д, J = 6.3 Гц, 2H), 5.26 (дд, J = 10.4, 1.9 Гц, 1H), 5.36 (ддд, J = 17.4, 1.9, 1.6 Гц, 1H), 5.89-6.02 (м, 1H), 6.77 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 6.85 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 8.29 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 12.99 (ушир.с, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта N-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-3-(N-оксазол-2-ил-карбоксамид)пиразола (37c)
2
3
2
4
В инертной атмосфере разбавляли промежуточный продукт (37b) (300 мг, 1.03 ммоль) безводным ДМФА (10 мл). Последовательно добавляли HOBt⋅HO (206 мг, 1.34 ммоль) и EDC.HCl (258 мг, 1.34 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. Добавляли 2-аминооксазол (304 мг, 3.62 ммоль) и DIPEA (451 мкл, 2.58 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 часов. Затем смесь разбавляли водой (150 мл). Водный слой экстрагировали этилацетатом (3x150 мл). Органические слои объединяли, промывали насыщенным раствором NaHCO, сушили над NaSO, фильтровали и упаривали. Полученное сырое соединение очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 40/60), получая промежуточный продукт (37c) (182 мг, 0.42 ммоль, 41%) в виде бесцветного масла.
+
MS m/z ([M+H]) 357.
-
MS m/z ([M-H]) 355.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 3.17 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.57 (дд, J = 10.9, 1.9 Гц, 1H), 4.16 (дд, J = 5.5, 2.6 Гц, 1H), 4.23 (дд, J = 17.6, 1.9 Гц, 1H), 4.29-4.50 (м, 3H), 5.33 (дд, J = 10.3, 1.5 Гц, 1H), 5.38 (ддд, J = 17.6, 1.5, 1.4 Гц, 1H), 5.98-6.08 (м, 1H), 6.65 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 7.03 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.08 (д, J = 1.1 Гц, 1H), 7.51 (д, J = 1.1 Гц, 1H), 7.70 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 8.02 (ушир.с, 1H).
Стадия 4: получение натрия [7-оксо-3-[3-(оксазол-2-илкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (пример 37)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 2), промежуточный продукт (37c) (106 мг, 0.30 ммоль) превращали в Пример (37) (46 мг, 0.11 ммоль, 40% за три стадии) в виде светло-желтого твердого вещества, после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100) с последующей очисткой на ионообменной смоле Dowex.
+
MS m/z ([M+H]) 397.
-
MS m/z ([M-H]) 395.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO) δ 3.45 (д, J = 11.1 Гц, 1H), 3.70 (дд, J = 11.1, 1.9 Гц, 1H), 4.40-4.46 (м, 2H), 4.60 (дд, J = 5.6, 2.5 Гц, 1H), 6.77 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 6.98 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.11 (д, J = 1.1 Гц, 1H), 7.64 (д, J = 1.1 Гц, 1H), 8.03 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Пример 38: синтез 3[3-[4-(2-аминоэтилкарбамоил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[2-(1H-пиразол-4-карбониламино)этил]карбамата (38a)
1H-пиразол-4-карбоновую кислоту (50 мг, 4.46 ммоль) растворяли в ДМФА (45 мл). Добавляли трет-бутил N-(2-аминоэтил)карбамат (1.44 мл, 9.82 ммоль), HATU (1.87 г, 4.91 ммоль) и DIPEA (2.33 мл, 13.4 ммоль), и смесь перемешивали при 50°C в течение ночи. После упаривания остаток очищали на силикагеле (ДХМ/MeOH: от 100/0 до 80/20), получая промежуточный продукт (38a) (408 мг, 1.61 ммоль, 36%).
+
MS m/z ([M+H]) 255.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDOD): δ (м.д.) 1.42 (с, 9H), 3.25 (т, J = 6.1 Гц, 2H), 3.41 (т, J = 6.1 Гц, 2H), 8.04 (с, 2H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[2-[[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-4-карбонил]амино]этил]карбамата (38b)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (0.15 г, 0.49 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (38a) (0.14 г, 0.55 ммоль) в промежуточный продукт (38b) (0.138 г, 0.32 ммоль, 66%) после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 0/100).
+
MS m/z ([2M+H]) 865.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.40 (с, 9H), 3.13 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.28-3.38 (м, 2H), 3.39-3.57 (м, 3H), 4.07-4.21 (м, 2H), 4.31-4.51 (м, 3H), 5.20-5.42 (м, 3H), 5.89-6.08 (м, 1H), 6.54 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 7.35 (с, 1H), 7.85 (с, 1H), 8.07 (с, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[2-[[1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-4-карбонил]амино]этил]карбамата (38c)
3
4
В инертной атмосфере добавляли фенилсилан (68 мкл, 0.546 ммоль) и Pd(PPh) (16 мг, 0.014 ммоль) в раствор промежуточного продукта (38b) (118 мг, 0.273 ммоль) в безводном дихлорметане (2.8 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1ч30мин и упаривали. Полученный сырой продукт очищали на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (38c) (52 мг, 0.132 ммоль, 48%).
+
MS m/z ([M+H]) 393.
Стадия 4: получение промежуточного продукта натрия [3-[4-[2-(трет-бутоксикарбониламино)этилкарбамоил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (38d)
2
2
2
Промежуточный продукт (38c) (52 мг, 0.132 ммоль) растворяли в смеси tBuOH (0.7 мл) и HO (0.7 мл). Добавляли TEA (4.6 мкл, 0.032 ммоль) и комплекс триоксида серы с триметиламином (22 мг, 0.158 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, затем упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN от 98/2 до 0/100). Фракции, содержащие целевой промежуточный продукт, объединяли и упаривали в вакууме. Остаток растворяли в HO и конвертировали пропусканием через ионообменную колонку Dowex с натриевой формой сорбента (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH) в промежуточный продукт (38d) (25 мг, 0.050 ммоль, 39%).
-
MS m/z ([M-H]) 471.
Стадия 5: получение [3-[4-(2-аминоэтилкарбамоил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата (пример 38)
2
2
Промежуточный продукт (38d) (25 мг, 0.050 ммоль) растворяли в ДХМ (0.5 мл). При 0°C добавляли ТФУК (0.25 мл), и смесь перемешивали при 0°C в течение 20 минут. Добавляли EtO, получая осадок, и эфирную фазу отделяли. Остаток растирали несколько раз в ацетонитриле, и полученное твердое вещество сушили под азотом. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN от 98/2 до 0/100). Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли и упаривали в вакууме, получая пример (38) (6.1 мг, 0.016 ммоль, 34%).
+
MS m/z ([M-H]) 373.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 3.24 (т, J = 5.8 Гц, 2H), 3.45 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.66 (т, J = 5.9 Гц, 2H), 3.67-3.72 (м, 1H), 4.34 (дд, J = 17.5, 1.2 Гц, 1H), 4.40 (дд, J = 17.5, 1.8 Гц, 1H), 4.60 (дд, J = 5.7, 2.6 Гц, 1H), 6.73 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 8.01 (с, 1H), 8.35 (с, 1H).
Пример 39: синтез натрия [3-[4-[(Z,E)-N-гидрокси-C-метил-карбонимидоил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 3-(4-ацетилпиразол-1-ил)-6-аллилокси-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (39a)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 1a), промежуточный продукт (1g) (250 мг, 0.817 ммоль) превращали реакцией с 1-(1H-пиразол-4-ил)этаноном (108 мг, 0.98 ммоль) в промежуточный продукт (39a) (197 мг, 0.553 ммоль, 68%) после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc: от 100/0 до 100/0).
+
MS m/z ([M+H]) 289.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 2.46 (с, 3H), 3.17 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 3.57 (дд, J = 1.8, 10.9 Гц, 1H), 4.10-4.25 (м, 2H), 4.39-4.52 (м, 3H), 5.30-5.43 (м, 2H), 5.97-6.09 (м, 1H), 6.65 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 7.96 (с, 1H), 8.08 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-[4-[(Z,E)-N-гидрокси-C-метил-карбонимидоил]пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (39b)
В раствор промежуточного продукта (39a) (25 мг, 0.867 ммоль) в MeOH (8.7 мл) добавляли гидроксиламина гидрохлорид (90 мг, 1.302 ммоль) и пиридин (141 мкл, 1.735 ммоль). После перемешивания в течение 2 часов при комнатной температуре, смесь упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc: от 100/0 до 100/0), получая промежуточный продукт (39b) (100 мг, 0.330 ммоль, 38%) в виде желтого масла.
+
MS m/z ([M+H]) 304.
Стадия 3: получение промежуточного продукта [(Z,E)-1-[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-4-ил]этилиденамино] трет-бутилкарбоната (39c)
2
В раствор промежуточного продукта (39b) (100 мг, 0.33 ммоль) в ДХМ (3.3 мл) добавляли BocO (108 мг, 0.495 ммоль), TEA (70 мкл, 0.495 ммоль) и DMAP (40 мг, 0.33 ммоль). После перемешивания в течение 1 часа при комнатной температуре, смесь упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc: от 100/0 до 100/0), получая промежуточный продукт (39c) (110 мг, 0.273 ммоль, соотношение Z/E: 62/38, 83%) в виде бесцветного масла.
+
+
MS m/z ([M+H]) 404, ([2M+H]) 807.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.58 (с, 9H), 2.30 (с, 1.86H), 2.34 (с, 1.14H), 3.16 (д, J = 10.9 Гц, 0.62H), 3.19 (д, J = 10.9 Гц, 0.38H), 3.52-3.62 (м, 1H), 4.13-4.27 (м, 2H), 4.38-4.53 (м, 3H), 5.29-5.44 (м, 2H), 5.98-6.10 (м, 1H), 6.56 (д, J = 5.4 Гц, 0.62H), 6.64 (д, J = 5.4 Гц, 0.38H), 7.90 (с, 0.62H), 7.99 (с, 0.38H), 8.00 (с, 0.62H), 8.21 (с, 0.38H).
Стадия 4: получение промежуточного продукта трет-бутил [(Z,E)-1-[1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-4-ил]этилиденамино] карбоната (39d)
3
4
Раствор промежуточного продукта (39c) (110 мг, 0.273 ммоль) в безводном дихлорметане (2.7 мл) дегазировали 10 минут в атмосфере аргона. Последовательно добавляли фенилсилан (67 мкл, 0.546 ммоль) и Pd(PPh) (13 мг, 0.011 ммоль). После перемешивания в течение 2 часов при комнатной температуре, смесь упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 100/0), получая промежуточный продукт (39d) (31 мг, 0.062 ммоль, 22%) в виде оранжевого порошка, загрязненного трифенилфосфиноксидом.
+
MS m/z ([M+H]) 364.
Стадия 5: получение натрия [3-[4-[(Z,E)-N-гидрокси-C-метил-карбонимидоил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (пример 39)
2
2
В раствор промежуточного продукта (39d) (31 мг, 0.062 ммоль) в tBuOH (0.427 мл) и воде (0.427 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с триметиламином (14.3 мг, 0.102 ммоль) и TEA (3.0 мкл, 0.021 ммоль). После перемешивания в течение 2 часов, полученную гетерогенную смесь упаривали в вакууме. Сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: градиент от 98/2 до 0/100). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, получая 14 мг твердого вещества, которое наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли и упаривали в вакууме. Сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: градиент от 98/2 до 0/100). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая пример (39) (5.8 мг, 0.015 ммоль, соотношение Z/E 50/50, 18%) в виде белого порошка.
-
MS m/z ([M-H]) 342.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 2.12 (с, 1.5H), 2.13 (с, 1.5H), 3.39 (дд, J = 11.3, 3.9 Гц, 1H), 3.60-3.67 (м, 1H), 4.24-4.37 (м, 2H), 4.50-4.56 (м, 1H), 6.58 (д, J = 5.7 Гц, 0.5H), 6.64 (д, J = 5.7 Гц, 0.5H), 7.83 (с, 0.5H), 8.11 (с, 1H), 8.47 (с, 0.5H).
Пример 40: синтез натрия [3-(4-ацетилпиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 3-(4-ацетилпиразол-1-ил)-6-гидрокси-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (40a).
3
4
Раствор промежуточного продукта (39a) (145 мг, 0.407 ммоль) в безводном дихлорметане (4.1 мл) дегазировали 10 минут в атмосфере аргона. Последовательно добавляли AcOH (47 мкл, 0.815 ммоль) и Pd(PPh) (236 мг, 0.204 ммоль). После перемешивания в течение 2 часов при комнатной температуре, смесь упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 100/0), получая промежуточный продукт (40a) (90 мг, 0.150 ммоль, 37%) в виде желтого порошка, загрязненного трифенилфосфиноксидом.
+
MS m/z ([M+H]) 249.
1
6
H ЯМР (400 МГц, Ацетон-d): δ (м.д.) 2.42 (с, 3H), 3.31 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.47 (дд, J = 10.8, 2.8 Гц, 1H), 4.15 (дд, J = 5.5, 2.7 Гц, 1H), 4.26 (дд, J = 17.4, 1.9 Гц, 1H), 4.35 (д, J = 17.3 Гц, 1H), 6.88 (д, J = 5.4 Гц, 1H), 8.00 (с, 1H), 8.61 (с, 1H).
Стадия 2: получение натрия [3-(4-ацетилпиразол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (пример 40)
2
2
2
В раствор промежуточного продукта (40a) (85 мг, 0.20 ммоль) в tBuOH (1.01 мл) и HO (1.01 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с триметиламином (33.8 мг, 0.243 ммоль) и TEA (7.1 мкл, 0.051 ммоль). После перемешивания в течение 1 часа, полученную гетерогенную смесь упаривали в вакууме. Сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 98/2 до 0/100). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, получая 67 мг твердого вещества, которое наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая 35 мг твердого вещества, которое снова очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 98/2 до 0/100). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, получая пример (40) (22.8 мг, 0.065 ммоль, 30%) в виде белого порошка.
-
MS m/z ([M-H]) 327.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.): 2.46 (с, 3H), 3.41 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.65 (дд, J = 11.4, 2.1 Гц, 1H), 4.33 (дд, J = 7.2, 1.3 Гц, 2H), 4.55 (дд, J = 5.6, 2.5 Гц, 1H), 6.74 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 8.06 (с, 1H), 8.49 (с, 1H).
Пример 41: синтез [3-[4-(2-аминоэтил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[2-[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-4-ил]этил]карбамата (41a)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (0.25 г, 0.82 ммоль) превращали реакцией с трет-бутил N-[2-(1H-пиразол-4-ил)этил]карбаматом (0.275 г, 1.31 ммоль) в промежуточный продукт (41a) (0.208 г, 0.53 ммоль, 66%) после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 80/20).
+
MS m/z ([M+H]) 390.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3): δ (м.д.) 1.44 (с, 9H), 2.64 (т, J = 6.8 Гц, 2H), 3.14 (д, J = 10.7 Гц, 1H), 3.25-3.34 (м, 2H), 3.52 (дд, J = 10.8, 2.2 Гц, 1H), 4.09 (дд, J = 5.5, 2.5 Гц, 1H), 4.19 (дд, J = 17.6, 1.8 Гц, 1H), 4.26-4.54 (м, 3H), 4.57 (ушир.с, 1H), 5.27-5.42 (м, 2H), 5.96-6.08 (м, 1H), 6.37 (д, J = 5.4 Гц, 1H), 7.41 (с, 1H), 7.45 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[2-[1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-4-ил]этил]карбамата (41b)
3
4
В инертной атмосфере добавляли фенилсилан (123 мкл, 1.028 ммоль) и Pd(PPh) (30 мг, 0.026 ммоль) в раствор промежуточного продукта (41a) (200 мг, 0.514 ммоль) в безводном дихлорметане (3.4 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа и упаривали. Полученный сырой продукт очищали на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 80/20), получая промежуточный продукт (41b) (85 мг, 0.244 ммоль, 48%), загрязненный трифенилфосфиноксидом.
+
MS m/z ([M+H]) 350.
Стадия 3: получение натрия [3-[4-[2-(трет-бутоксикарбониламино)этил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (41c)
2
2
2
Промежуточный продукт (41b) (33 мг, 0.094 ммоль) растворяли в смеси tBuOH (0.47 мл) и HO (0.47 мл). Добавляли TEA (3.3 мкл, 0.024 ммоль) и комплекс триоксида серы с триметиламином (16 мг, 0.113 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, затем упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN от 98/2 до 0/100). Фракции, содержащие целевой промежуточный продукт, объединяли и упаривали в вакууме. Остаток растворяли в HO и конвертировали пропусканием через ионообменную колонку Dowex с натриевой формой сорбента (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH) в промежуточный продукт (41c) (18 мг, 0.040 ммоль, 43%).
-
MS m/z ([M-H]) 428.
Стадия 4: получение [3-[4-(2-аминоэтил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата (пример 41)
2
ТФУК (300 мкл) добавляли в раствор промежуточного продукта (41c) (18 мг, 0.040 ммоль) в толуоле (600 мкл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут, затем упаривали в атмосфере азота. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN от 98/2 до 0/100). Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли и упаривали в вакууме, получая пример (41) (1.6 мг, 0.005 ммоль, 13%).
-
MS m/z ([M-H]) 328.
2
1H ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 2.89 (т, J = 7.2 Гц, 2H), 3.21 (т, J = 7.2 Гц, 2H), 3.45 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.66-3.73 (м, 1H), 4.33 (д, J = 17.5 Гц, 1H), 4.39 (дд, J = 17.5, 1.8 Гц, 1H), 4.58 (дд, J = 5.7, 2.7 Гц, 1H), 6.58 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 7.65 (с, 1H), 7.89 (с, 1H).
Пример 42: синтез 2,2,2-трифторацетат [7-оксо-3-(4-пиперазин-4-ия-1-илпиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта трет-бутил 4-(1-бензилпиразол-4-ил) пиперазин-1-карбоксилата (42a)
2
3
2
2
4
В герметично закрытой колбе 1-бензил-4-иод-пиразол (7.2 г, 25.35 ммоль) растворяли в ДМСО (72 мл). Раствор дегазировали в атмосфере аргона 5 минут. Затем добавляли трет-бутил пиперазин-1-карбоксилат (5.67 г, 30.42 ммоль), S-пролин (1.17 г, 10.14 ммоль), CuI (0.965 г, 5.07 ммоль) и KCO (10.51 г, 76.05 ммоль), и смесь перемешивали при 100°C в течение ночи. Смесь выливали в HO, затем экстрагировали дихлорметаном. Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и упаривали в вакууме. Полученный сырой продукт очищали на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 80//20), получая промежуточный продукт (42a) (3.88 г, 11.34 ммоль, 45%).
+
MS m/z ([M+H]) 343.
3
1H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.46 (с, 9H), 2.86 (т, J = 5.1 Гц, 4H), 3.53 (т, J = 5.1 Гц, 4H), 5.22 (с, 2H), 6.93 (с, 1H), 7.16-7.21 (м, 2H), 7.25-7.37 (м, 4H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта трет-бутил 4-(1H-пиразол-4-ил) пиперазин-1-карбоксилата (42b)
2
4
Промежуточный продукт (42a) (0.3 г, 0.88 ммоль) растворяли в ДМСО (0.6 мл). Добавляли 1M раствор tBuOK в ТГФ (8.8 ммоль, 8.8 мл), и смесь перемешивали при пропускании кислорода 30 минут. Снова добавляли 1M раствор tBuOK в ТГФ (5 ммоль, 5 мл), и смесь перемешивали при пропускании кислорода 20 минут. Реакционную смесь гасили добавлением раствора хлорида аммония, разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и упаривали в вакууме. Полученный сырой продукт очищали на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (42b) (156 мг, 0.62 ммоль, 71%).
+
MS m/z ([M+H]) 253.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.47 (с, 9H), 2.91 (т, J = 5.2 Гц, 4H), 3.57 (т, J = 5.2 Гц, 4H), 7.25 (с, 2H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта трет-бутил 4-[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-4-ил]пиперазин-1-карбоксилата (42c)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 1a), промежуточный продукт (1g) (0.53 г, 1.74 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (42b) (0.53 г, 2.08 ммоль) в промежуточный продукт (42c) (0.5 г, 1.16 ммоль, 67%) после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 50/50).
+
MS m/z ([M+H]) 431.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.47 (с, 9H), 2.87 (т, J = 5.2 Гц, 4H), 3.13 (д, J = 10.7 Гц, 1H), 3.47-3.59 (м, 5H), 4.07 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 4.18 (дд, J = 17.6, 1.8 Гц, 1H), 4.35-4.50 (м, 3H), 5.26-5.42 (м, 2H), 5.96-6.07 (м, 1H), 6.24 (д, J = 5.1 Гц, 1H), 7.10 (ушир.с, 1H), 7.31 (ушир.с, 1H).
Стадия 4: получение промежуточного продукта трет-бутил 4-[1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-4-ил]пиперазин-1-карбоксилата (42d)
3
4
В инертной атмосфере добавляли уксусную кислоту (133 мкл, 2.32 ммоль) и Pd(PPh) (335 мг, 0.29 ммоль) в раствор промежуточного продукта (42c) (250 мг, 0.581 ммоль) в безводном дихлорметане (5.8 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1.5 часов и упаривали. Полученный сырой продукт очищали на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (42d) (180 мг, 0.461 ммоль, 80%).
+
MS m/z ([M+H]) 391.
Стадия 5: получение триметиламмония [3-[4-(4-трет-бутоксикарбонилпиперазин-1-ил) пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (42e)
2
2
Промежуточный продукт (42d) (180 мг, 0.461 ммоль) растворяли в смеси tBuOH (2.3 мл) и HO (2.3 мл). TEA (16 мкл, 0.115 ммоль) и добавляли комплекс триоксида серы с триметиламином (77 мг, 0.553 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем упаривали. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN от 98/2 до 0/100), получая промежуточный продукт (42e) (154 мг, 0.291 ммоль, 64%).
-
MS m/z ([M-H]) 469.
Стадия 6: получение 2,2,2-трифторацетат [7-оксо-3-(4-пиперазин-4-ия-1-илпиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата (пример 42)
2
2
Промежуточный продукт (42e) (130 мг, 0.245 ммоль) растворяли в ДХМ (1.2 мл). При 0°C добавляли ТФУК (0.6 мл), и смесь перемешивали при 0°C в течение 45 минут. Добавляли EtO, получая осадок, и эфирную фазу отделяли. Остаток растирали несколько раз в ацетонитриле, и полученное твердое вещество сушили в токе азота. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN от 98/2 до 0/100). Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли и упаривали в вакууме, получая пример (42) (5.4 мг, 0.012 ммоль, 5%).
-
MS m/z ([M-H]) 369.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 3.20-3.29 (м, 4H), 3.35-3.46 (м, 5H), 3.61-3.70 (м, 1H), 4.32 (с, 2H), 4.55 (дд, J = 5.7, 2.6 Гц, 1H), 6.44 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 7.52 (с, 1H), 7.62 (с, 1H).
Пример 43: синтез натрия [7-оксо-3-(3,4,5-тридейтериопиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-(3,4,5-тридейтериопиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (43a)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 1a), промежуточный продукт (1g) (200 мг, 0.65 ммоль) превращали реакцией с 3,4,5-тридейтерио-1H-пиразолом (получен как описано в Catalysis Communication, 2001, 2: 125-128) (56 мг, 0.78 ммоль) в промежуточный продукт (43a) (101 мг, 0.41 ммоль, 63%) после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 90/10).
+
MS m/z ([M+H]) 250.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.14 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.52 (дд, J = 10.8, 2.3 Гц, 1H), 4.09 (дд, J = 5.6, 2.7 Гц, 1H), 4.20 (дд, J = 17.5, 1.9 Гц, 1H), 4.35-4.50 (м, 3H), 5.27-5.31 (м, 1H), 5.32-5.39 (м, 1H), 5.94-6.06 (м, 1H), 6.45 (д, J = 5.5 Гц, 2H).
Стадия 2: получение натрия [7-оксо-3-(3,4,5-тридейтериопиразол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 43)
2
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 2), промежуточный продукт (43a) (100 мг, 0.40 ммоль) превращали в Пример (43) (43 мг, 0.14 ммоль, 35%) после очистки методом флэш-хроматографии на С18-обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN от 98/2 до ACN) с последующей лиофилизацией.
-
MS m/z ([M-H]) 288.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 3.43 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.66 (дд, J = 11.3, 2.1 Гц, 1H), 4.32-4.37 (м, 2H), 4.55 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 6.57 (д, J = 5.6 Гц, 1H).
Пример 44: синтез натрия [7-оксо-3-(тетразол-2-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 1-бензил-5-(тетразол-2-ил)-2,6-дигидропиридин-3-она (44a)
2
3
2
4
При 0°C добавляли 3 вес.% раствор тетразола в ACN (57.4 г, 32.8 ммоль) и NaCO (4.14 г, 39.42 ммоль) в раствор (1-бензил-5-оксо-2,6-дигидропиридин-3-ил) трифторметансульфоната (2.2 г, 6.57 ммоль) в ДМФА (16.4 мл). Смесь перемешивали при 0°C в течение 4 часов, затем разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и упаривали в вакууме. Полученный сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/MeOH: от 100/0 до 90/10), получая промежуточный продукт (44a) (370 мг, 1.45 ммоль, 22%).
-
MS m/z ([M-H]) 254.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.36 (ушир.с, 2H), 3.86 (с, 2H), 4.15 (ушир.с, 2H), 7.00 (т, J = 1.5 Гц, 1H), 7.28-7.42 (м, 5H), 8.66 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 1-бензил-5-(тетразол-2-ил)-3,6-дигидро-2H-пиридин-3-ола (44b)
3
4
2
2
4
2
4
Промежуточный продукт (44a) (428 мг, 1.68 ммоль) растворяли в смеси MeOH (15 мл) и ТГФ (3 мл). При 0°C добавляли безводный CeCl (163 мг, 1.68 ммоль) и NaBH (70 мг, 1.85 ммоль). Смесь перемешивали при 0°C в течение 30 минут, затем последовательно добавляли ацетон и HO. Смесь упаривали. Добавляли в остаток HO и раствор NHCl, и целевой продукт экстрагировали этилацетатом. Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и упаривали в вакууме. Полученный сырой продукт очищали на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 70/30), получая промежуточный продукт (44b) (407 мг, 1.58 ммоль, 95%).
+
MS m/z ([M+H]) 258.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 2.40 (ушир.с, 1H), 2.67 (дд, J = 11.8, 2.9 Гц, 1H), 2.96 (дд, J = 11.9, 3.2 Гц, 1H), 3.44 (д, J = 16.6 Гц, 1H), 3.72-3.88 (м, 2H), 4.03 (д, J = 16.6 Гц, 1H), 4.38 (ушир.с, 1H), 6.91 (д, J = 4.5 Гц, 1H), 7.27-7.41 (м, 5H), 8.53 (с, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта N-аллилокси-N-[1-бензил-5-(тетразол-2-ил)-3,6-дигидро-2H-пиридин-3-ил]-2-нитро-бензолсульфонамида (44c)
3
В атмосфере аргона растворяли промежуточный продукт (44b) (400 мг, 1.56 ммоль) в толуоле (16 мл), добавляли N-аллилокси-2-нитро-бензолсульфонамид (402 мг, 1.56 ммоль) и PPh (409 мг, 1.56 ммоль). При 0°C добавляли DTAD (395 мг, 1.71 ммоль) порциями в смесь, которую перемешивали при комнатной температуре в течение 4 часов. После упаривания остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 80/20), получая промежуточный продукт (44c) (714 мг, 1.44 ммоль, 92%).
+
MS m/z ([M+H]) 498.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 2.85 (ушир.с, 2H), 3.53-3.90 (м, 4H), 4.46-4.58 (м, 2H), 4.94 (ушир.с, 1H), 5.16-5.29 (м, 2H), 5.82 (ддт, J = 16.8, 10.4, 6.4 Гц, 1H), 6.48 (ушир.с, 1H), 7.27-7.38 (м, 5H), 7.49-7.84 (м, 3H), 8.09 (д, J = 7.9 Гц, 1H), 8.47 (с, 1H).
Стадия 4: получение промежуточного продукта N-аллилокси-1-бензил-5-(тетразол-2-ил)-3,6-дигидро-2H-пиридин-3-амина (44d)
2
3
При 0°C добавляли KCO (1.48 г, 10.72 ммоль) и тиофенол (732 мкл, 7.14 ммоль) в раствор промежуточного продукта (44c) (710 мг, 1.43 ммоль) в ACN (14 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3.5 часов. Сырой продукт фильтровали через целит, промывали ацетонитрилом и ДХМ. Фильтрат упаривали, и остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 70/30), получая промежуточный продукт (44d) (368 мг, 1.18 ммоль, 83%).
+
MS m/z ([M+H]) 313.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 2.58 (д, J = 11.7 Гц, 1H), 3.09 (д, J = 11.7 Гц, 1H), 3.44 (д, J = 16.5 Гц, 1H), 3.70-4.00 (м, 4H), 4.20 (д, J = 5.9 Гц, 2H), 5.14-5.33 (м, 2H), 5.75 (ушир.с, 1H), 5.92 (ддт, J = 16.5, 11.0, 5.9 Гц, 1H), 6.82 (ушир.с, 1H), 7.28-7.43 (м, 5H), 8.51 (с, 1H).
Стадия 5: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-(тетразол-2-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (44e)
2
2
3
2
4
Раствор трифосгена (455 мг, 1.53 ммоль) в ДХЭ (2 мл) добавляли в раствор промежуточного продукта (44d) (368 мг, 1.18 ммоль) в ДХЭ (12 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Добавляли раствор NaI (1.77g, 11.8 ммоль) в ацетоне (7.5 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут. Затем раствор нагревали при 55°C в течение 15 минут и добавляли пиридин (2.38 мл, 29.5 ммоль). Смесь перемешивали при 55°C в течение 2.5 часов. После охлаждения и разбавления дихлорметаном, смесь фильтровали через целит и упаривали фильтрат. Остаток растворяли в ДХМ. Органический слой промывали раствором NaSO, сушили над NaSO, фильтровали и упаривали в вакууме. Полученный сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (Толуол/Ацетон: от 100/0 до 80/20), получая промежуточный продукт (44e) (132 мг, 0.53 ммоль, 45%).
+
MS m/z ([M+H]) 249.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.20 (д, J = 11.0 Гц, 1H), 3.61 (ддд, J = 11.2, 2.9, 1.2 Гц, 1H), 4.23 (дд, J = 5.5, 2.3 Гц, 1H), 4.34 (дд, J = 18.0, 2.0 Гц, 1H), 4.38-4.52 (м, 2H), 4.65 (дд, J = 18.0, 1.2 Гц, 1H), 5.28-5.43 (м, 2H), 5.94-6.10 (м, 1H), 7.25-7.29 (м, 1H), 8.54 (с, 1H).
Стадия 6: получение натрия [7-оксо-3-(тетразол-2-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 44)
2
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 2), промежуточный продукт (44e) (130 мг, 0.52ммоль) превращали в Пример (44) (5 мг, 0.02 ммоль, 8%) после очистки методом флэш-хроматографии на С18-обращенно-фазном силикагеле(HO/ACN от 99/1 до 0/100) с последующей лиофилизацией.
-
MS m/z ([M-H]) 287.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 3.52 (д, J = 11.5 Гц, 1H), 3.75 (ддд, J = 11.5, 2.8, 1.1 Гц, 1H), 4.57 (дд, J = 3.6, 1.6 Гц, 2H), 4.70 (дд, J = 5.6, 2.7 Гц, 1H), 7.35 (дд, J = 5.6, 1.5 Гц, 1H), 8.82 (с, 1H).
Пример 45: синтез натрия [3-[3-(2-амино-2-оксо-этил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 2-(1H-пиразол-3-ил)ацетамида (45a).
Смесь метилового эфира (1H-пиразол-3-ил)-уксусной кислоты (0.50 г, 3.57 ммоль) в 7M растворе аммиака в MeOH (20 мл, 140 ммоль) нагревали при 55°C в течение 4 дней. Реакционную смесь упаривали в вакууме, получая промежуточный продукт (45a) (0.44 г, 3.52 ммоль, 98%) в виде розового порошка.
+
MS m/z ([M+H]) 126.
1
6
H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d): δ (м.д.) 3.39 (с, 2H), 6.10 (д, J = 2.0 Гц, 1H), 6.90 (с, 1H), 7.35 (с, 1H), 7.51 (с, 1H), 12.52 (ушир.с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 2-[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-ил]ацетамида (45b).
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (600 мг, 1.96 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (45a) (490 мг, 3.27 ммоль) в промежуточный продукт (45b) (200 мг, 0.66 ммоль, 34%) в качестве основного продукта (соотношение 83/16) из смеси обоих региоизомеров, после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 60/40 до 30/70).
+
MS m/z ([M+H]) 304.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.15 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.49-3.55 (м, 1H), 3.60 (с, 2H), 4.12 (дд, J = 2.6, 5.6 Гц, 1H), 4.17 (дд, J = 2.0, 17.5 Гц, 1H), 4.37-4.51 (м, 3H), 5.29-5.44 (м, 2H), 5.53 (с, 1H), 5.97-6.08 (м, 1H), 6.30 (д, J = 2.5 Гц, 1H), 6.37 (с, 1H), 6.46-6.48 (м, 1H), 7.57 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта 2-[1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-ил]ацетамида (45c).
3
3
4
В инертной атмосфере разбавляли раствор промежуточного продукта (45b) (130 мг, 0.66 ммоль) безводным дихлорметаном (18 мл). Последовательно добавляли PhSiH (326 мкл, 2.64 ммоль) и Pd(PPh) (76 мг, 0.066 ммоль). После перемешивания в течение 1 часа, добавляли ДХМ и осадок отфильтровывали, получая промежуточный продукт (45c) (70 мг, 0.26 ммоль, 63%).
-
MS m/z ([M-H]) 263.
Стадия 4: получение натрия [3-[3-(2-амино-2-оксо-этил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 45)
В раствор промежуточного продукта (45c) (70 мг, 0.26 ммоль) в безводном пиридине (3 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с пиридином (212 мг, 1.33 ммоль). После перемешивания в течение 18 часов, добавляли ДХМ в остаток, осадок отфильтровывали и промывали смесью дихлорметан/ацетон (50/50). Фильтрат упаривали, получая твердое вещество, которое наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая смесь обоих региоизомеров Примера (45) в качестве основного продукта (соотношение 91/9) (46 мг, 0.13 ммоль, 51%, белый порошок).
-
MS m/z ([M-H]) 342.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 3.35 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.56 (с, 3H), 4.26 (т, J = 1.7 Гц, 2H), 4.46 (дд, J = 5.7, 2.7 Гц, 1H), 6.32 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 6.46-6.53 (м, 1H), 7.77 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Пример 46: синтез [3-[3-(2-аминоэтоксикарбамоил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[2-(1H-пиразол-3-карбониламино)оксиэтил]карбамата (46a)
2
4
Трет-бутил N-(2-аминооксиэтил)карбамат (510 мг, 2.90 ммоль), HATU (932 мг, 2.45 ммоль) и DIPEA (1.16mL, 6.69 ммоль) добавляли в раствор 1H-пиразол-3-карбоновой кислоты (250 мг, 2.23 ммоль) в ДМФА (11 мл). Смесь перемешивали при 40°C в течение ночи. После упаривания, добавления воды и экстракции этилацетатом, органический слой сушили над NaSO, фильтровали и упаривали в вакууме, и остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 70/30), получая промежуточный продукт (46a) (575 мг, 2.13 ммоль, 95%).
+
MS m/z ([M+H]) 271.
1
6
H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d): δ (м.д.) 1.39 (с, 9H), 3.14-3.22 (м, 2H), 3.80 (т, J = 5.2 Гц, 2H), 6.66 (с, 1H), 6.82 (т, J = 5.5 Гц, 1H), 7.84 (с, 1H), 11.37 (с, 1H), 13.31 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[2-[[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-карбонил]амино]оксиэтил]карбамата (46b)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 1a), промежуточный продукт (1g) (0.30 г, 0.98 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (46a) (0.32 г, 1.17 ммоль) в промежуточный продукт (46b) (0.147 г, 0.33 ммоль, 25%) с соотношением 8/2 в пользу целевого изомера, после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 60/40).
+
MS m/z ([M+H]) 449.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.45 (с, 9H), 3.13 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.27-3.57 (м, 3H), 3.90-4.02 (м, 2H), 4.09-4.21 (м, 2H), 4.35-4.50 (м, 3H), 5.25-5.40 (м, 2H), 5.50-5.72 (м, 1H), 5.90-6.07 (м, 1H), 6.42 (д, J = 5.4 Гц, 0.2H), 6.54 (д, J = 5.5 Гц, 0.8H), 6.64 (д, J = 1.9 Гц, 0.2H), 6.88 (д, J = 2.6 Гц, 0.8H), 7.52 (ушир.с, 0.2H), 7.66 (д, J = 2.6 Гц, 0.8H), 9.71 (ушир.с, 0.8H), 10.37 (ушир.с, 0.2H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта трифенил-[(E)-проп-1-енил]фосфония [3-[3-[2-(трет-бутоксикарбониламино)этоксикарбамоил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (46c)
3
4
В инертной атмосфере добавляли уксусную кислоту (46 мкл, 0.80 ммоль) и Pd(PPh) (231 мг, 0.20 ммоль) в раствор промежуточного продукта (46b) (180 мг, 0.40 ммоль) в безводном дихлорметане (4 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, затем добавляли пиридин (4 мл) и комплекс триоксида серы с пиридином (319 мг, 2.00 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи в темноте. Смесь разбавляли дихлорметаном и фильтровали. Фильтрат упаривали, и сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (46c) (135 мг, 0.17 ммоль, 43%) с соотношением 8/2 в пользу целевого изомера.
-
MS m/z ([M-H]) 487.
Стадия 5: получение [3-[3-(2-аминоэтоксикарбамоил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата (Пример 46)
2
2
При 0°C добавляли ТФУК (0.2мл) в раствор промежуточного продукта (46c) (70 мг, 0.063 ммоль) в ДХМ (0.6 мл). Смесь перемешивали при 0°C в течение 40 минут. Добавляли EtO, получая осадок, и эфирную фазу удаляли. Остаток растирали несколько раз в ацетонитриле, и полученное твердое вещество сушили в атмосфере азота. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN от 98/2 до 0/100). Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли и упаривали в вакууме, получая пример (46) (10 мг, 0.026 ммоль, 42%).
-
MS m/z ([M-H]) 387.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 3.25-3.35 (м, 2H), 3.38-3.49 (м, 1H), 3.66 (дд, J = 11.4, 2.9 Гц, 1H), 4.05 (д, J = 17.7 Гц, 0.2H), 4.18-4.26 (м, 2.2H), 4.36 (д, J = 1.5 Гц, 1.6H), 4.49-4.61 (м, 1H), 6.51 (д, J = 5.4 Гц, 0.2H), 6.69-6.74 (м, 1H), 6.83 (д, J = 2.7 Гц, 0.8H), 7.67 (д, J = 2.0 Гц, 0.2H), 7.98 (д, J = 2.7 Гц, 0.8H).
Пример 47: синтез натрия [3-[3-(2-гидроксиэтоксикарбамоил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта O-[2-[трет-бутил(дифенил)силил] оксиэтил]гидроксиламина (47a)
DMAP (80 мг, 0.65 ммоль), имидазол (1.10 г, 16.22 ммоль) и TBDPSCl (2.2 мл, 8.44 ммоль) добавляли последовательно в раствор 2-аминооксиэтанола (500 мг, 6.49 ммоль) в ДХМ (33 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 часов. Нерастворенные частицы отфильтровывали, и фильтрат упаривали. Полученный сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/MeOH: от 100/0 до 80/20), получая промежуточный продукт (47a) (2.1 г, 6.49 ммоль, 100%).
+
MS m/z ([M+H]) 316.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.06 (с, 9H), 3.80-3.91 (м, 4H), 7.34-7.46 (м, 6H), 7.64-7.73 (м, 4H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта N-[2-[трет-бутил(дифенил)силил] оксиэтокси]-1H-пиразол-3-карбоксамида) (47b)
2
4
Промежуточный продукт (47a) (1.052 г, 3.34 ммоль), HATU (932 мг, 2.45 ммоль) и DIPEA (1.16 мл, 6.69 ммоль) последовательно добавляли в раствор 1H-пиразол-3-карбоновой кислоты (250 мг, 2.23 ммоль) в ДМФА (11мл). Смесь перемешивали при 40°C в течение ночи и затем упаривали. Остаток солюбилизировали в воде и затем экстрагировали этилацетатом. Органический слой сушили над NaSO, фильтровали и упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 70/30), получая промежуточный продукт (47b) (600 мг, 1.47 ммоль, 66%).
-
MS m/z ([M-H]) 408.
1
6
H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d): δ (м.д.) 1.00 (с, 9H), 3.87 (т, J = 5.0 Гц, 2H), 4.01 (т, J = 5.0 Гц, 2H), 6.65 (с, 1H), 7.37-7.51 (м, 6H), 7.60-7.69 (м, 4H), 7.83 (с, 1H), 11.47 (с, 1H), 13.27 (с, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта 1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-N-[2-[трет-бутил(дифенил)силил]оксиэтокси]пиразол-3-карбоксамида (47c)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 1a), промежуточный продукт (1g) (0.20 г, 0.65 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (47b) (0.32 г, 0.78 ммоль) в промежуточный продукт (47c) (0.089 г, 0.15 ммоль, 24%) с соотношением 6/4 в пользу целевого изомера, после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 50/50).
+
MS m/z ([M+H]) 588.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 1.03-1.09 (м, 9H), 2.65-2.87 (м, 2H), 3.06-3.33 (м, 1H), 3.44-3.56 (м, 1H), 3.84-3.98 (м, 2H), 3.98-4.18 (м, 3H), 4.25-4.52 (м, 3H), 5.22-5.42 (м, 2H), 5.89-6.09 (м, 1H), 6.29-6.53 (м, 1H), 6.89 (д, J = 2.6 Гц, 0.6H), 7.31-7.49 (м, 6H), 7.62 (д, J = 2.6 Гц, 0.4H), 7.64-7.72 (м, 4H), 8.83 (ушир.с, 0.4H), 9.29 (с, 0.6H).
Стадия 4: получение промежуточного продукта трифенил-[(E)-проп-1-енил]фосфония [3-[3-[2-[трет-бутил(дифенил)силил]оксиэтоксикарбамоил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (47d)
3
4
В инертной атмосфере добавляли уксусную кислоту (18 мкл, 0.30 ммоль) и Pd(PPh) (87 мг, 0.07 ммоль) в раствор промежуточного продукта (47c) (89 мг, 0.15 ммоль) в безводном дихлорметане (1.5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2.5 часов, затем добавляли пиридин (1.5 мл) и комплекс триоксида серы с пиридином (120 мг, 0.75 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи в темноте. Смесь разбавляли дихлорметаном и фильтровали. Фильтрат упаривали. Полученный сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (47d) (38 мг, 0.04 ммоль, 28%) с соотношением 6/4 в пользу целевого изомера.
-
MS m/z ([M-H]) 626.
Стадия 5: получение натрия [3-[3-(2-гидроксиэтоксикарбамоил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 47)
3
3
2
2
При 0°C добавляли 3HF.NEt (6.7 мкл, 0.041ммоль) в раствор промежуточного продукта (47d) (38 мг, 0.041 ммоль) в ТГФ (0.2 мл). Смесь перемешивали при 0°C в течение 1 часа. Добавляли еще 3HF.NEt (26.8 мкл, 0.164 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После упаривания добавляли EtO, получая осадок, который отфильтровывали. Осадок растворяли в ацетонитриле (0.2 мл). Добавляли раствор NaI (60 мг, 0.40 ммоль) в ацетонитриле (0.3мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Осадок отфильтровывали, промывали ацетонитрилом и очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN от 98/2 до 0/100). Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли и упаривали в вакууме, получая Пример (47) (7.7 мг, 0.019 ммоль, 47%) с соотношением 7/3 в пользу целевого изомера.
-
MS m/z ([M-H]) 388.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO) δ 3.38-3.47 (м, 1H), 3.59-3.72 (м, 1H), 3.78-3.85 (м, 2H), 4.03-4.41 (м, 4H), 4.50-4.59 (м, 1H), 6.44-6.85 (м, 2H), 7.68 (д, J = 2.1 Гц, 0.3H), 7.97 (д, J = 2.7 Гц, 0.7H).
Пример 48: синтез натрия и 2,2,2-трифторацетата [3-[3-[2-(2-аммонийэтиламино)-2-оксо-этил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 2-(1H-пиразол-3-ил)уксусной кислоты (48a)
Смесь метилового эфира (1H-пиразол-3-ил)-уксусной кислоты (0.85 г, 6.07 ммоль) и NaOH 6N (1.27 мл, 7.65 ммоль) разбавляли в MeOH (17 мл). После перемешивания в течение ночи, реакционную смесь упаривали в вакууме. Остаток разбавляли водой и подкисляли 37%-ной HCl до pH 1. Смесь упаривали в токе азота. Добавляли ацетонитрил, твердый осадок отфильтровывали, получая промежуточный продукт (48a) (200 мг, 6.07 ммоль, 100%).
+
MS m/z ([M+H]) 127.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 4.61 (с, 2H), 6.14 (с, 1H), 7.46 (д, J = 2.0 Гц, 1H), 8.02 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[2-[[2-(1H-пиразол-3-ил)ацетил]амино]этил]карбамата (48b)
В раствор промежуточного продукта (48a) (0.75 г, 5.79 ммоль) в безводном ДМФА (30 мл) добавляли HATU (1.7 г, 6.37 ммоль), DIPEA (6.1 мл, 34.74 ммоль) и трет-бутил N-(2-аминоэтил)карбамат (1.2 мл, 7.52 ммоль). Суспензию перемешивали 1 ночь при комнатной температуре. Остаток упаривали в вакууме и очищали на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 70/30 до 30/70), получая промежуточный продукт (XXb) (620 мг, 2.31 ммоль, 40%) в виде коричневого порошка.
+
MS m/z ([M+H]) 269.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDOD): δ (м.д.) 1.44 (с, 9H), 3.16 (т, J = 6.1 Гц, 2H), 3.26-3.30 (м, 2H), 3.58 (с, 2H), 6.26 (д, J = 2.2 Гц, 1H), 7.57 (д, J = 2.2 Гц, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[2-[[2-[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-ил]ацетил]амино]этил]карбамата (48c)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (352 мг, 1.15 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (48b) (620 мг, 2.32 ммоль) в промежуточный продукт (48c) (220 мг, 0.49 ммоль, 43%) после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 70/30 до 30/70).
+
MS m/z ([M+H]) 347.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.45 (с, 9H), 3.12-3.43 (м, 5H), 3.50-3.66 (м, 3H), 4.14-4.24 (м, 2H), 4.40-4.55 (м, 3H), 4.92 (ушир.с, 1H), 5.33-5.47 (м, 2H), 5.96-6.12 (м, 1H), 6.31 (ушир.с, 1H), 6.49 (ушир.с, 1H), 6.60 (ушир.с, 1H), 7.57 (ушир.с, 1H).
Стадия 4: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[2-[[2-[1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-ил]ацетил]амино]этил]карбамата (48d)
3
4
В инертной атмосфере разбавляли раствор промежуточного продукта (48c) (50 мг, 0.11 ммоль) безводным дихлорметаном (2.8 мл). Последовательно добавляли AcOH (13 мкл, 0.22 ммоль) и Pd(PPh) (64 мг, 0.055 ммоль). После перемешивания в течение 2 часов, остаток упаривали в вакууме и очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 70/30 до 50/50), получая промежуточный продукт (48d) (30 мг, 0.073 ммоль, 67%).
+
MS m/z ([M+H]) 407.
Стадия 5: получение промежуточного продукта натрия [3-[3-[2-[2-(трет-бутоксикарбониламино)этиламино]-2-оксо-этил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло [3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (48e)
В раствор промежуточного продукта (48d) (30 мг, 0.073 ммоль) в безводном пиридине (3 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с пиридином (58 мг, 0.365 ммоль). После перемешивания в течение 18 часов добавляли ДХМ в остаток, и твердый осадок отфильтровывали. Фильтрат упаривали, получая твердое вещество которое наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая смесь региоизомеров промежуточного продукта (48e) в качестве основного продукта (соотношение 80/20) (20 мг, 0.039 ммоль, 54%).
-
MS m/z ([M-H]) 485.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 1.33 (с, 9H), 3.13-3.18 (м, 2H), 3.23-3.30 (м, 2H), 3.41 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.57-3.68 (м, 3H), 4.32 (с, 2H), 4.53 (дд, J = 2.6, 5.7 Гц, 1H), 6.38 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 6.56 (д, J = 5.8 Гц, 1H), 7.84 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Стадия 6: получение натрия [3-[3-[2-(2-аммонийэтиламино)-2-оксо-этил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата 2,2,2-трифторацетата (Пример 48)
2
Промежуточный продукт (48e) (20 мг, 0.04 ммоль) солюбилизировали в ТФУК (350 мкл) и ДХМ (1.25 мл) при 0°C в инертной атмосфере. После перемешивания в течение 1 часа, добавляли EtO. Осадок растирали несколько раз в диэтиловом эфире, и затем в ацетонитриле, получая Пример 48 (4.7 мг, 0.011 ммоль, 30%) в виде желтого порошка.
-
MS m/z ([M-H]) 385.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 3.05-3.08 (м, 2H), 3.35-3.38 (м, 1H), 3.42-3.45 (м, 2H), 3.58-3.63 (м, 2H), 4.15-4.19 (м, 1H), 4.27-4.30 (м, 2H), 4.49 (дд, J = 5.6, 2.7 Гц, 1H), 6.34 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 6.51 (д, J = 5.7 Гц, 1H), 7.78 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Пример 49: синтез натрия и 2,2,2-трифторацетата [3-[3-(аммонийметил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-ил]метил]карбамата (49a)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (700 мг, 2.30 ммоль) превращали реакцией с трет-бутил N-(1H-пиразол-3-илметил)карбаматом (910 мг, 4.60 ммоль) в промежуточный продукт (49a) (380 мг, 1.01 ммоль, 44%) после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 80/20).
+
MS m/z ([M+H]) 376.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) δ 1.41 (с, 9H), 3.08 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.46 (дд, J = 2.8, 10.9 Гц, 1H), 4.03-4.15 (м, 2H), 4.19-4.24 (м, 2H), 4.32-4.43 (м, 3H), 5.14 (ушир.с, 1H), 5.23-5.35 (м, 2H), 5.96 (ддт, J = 6.3, 10.3, 16.8 Гц, 1H), 6.22 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 6.37 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 7.49 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[[1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-ил]метил]карбамата (49b)
3
3
4
В инертной атмосфере разбавляли раствор промежуточного продукта (49a) (50 мг, 0.11 ммоль) безводным дихлорметаном (1 мл). Последовательно добавляли PhSiH (7.4 мкл, 0.08 ммоль) и Pd(PPh) (2.4 мг, 0.002 ммоль). После перемешивания в течение 2.5 часов, остаток упаривали в вакууме и очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 70/30), получая промежуточный продукт (49b) (13 мг, 0.038 ммоль, 98%).
+
MS m/z ([M+H]) 336.
Стадия 3: получение натрия [3-[3-[(трет-бутоксикарбониламино)метил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (49c)
В раствор промежуточного продукта (49b) (13 мг, 0.04 ммоль) в безводном пиридине (0.5 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с пиридином (26 мг, 0.20 ммоль). После перемешивания в течение 18 часов, добавляли в остаток ДХМ, и твердый осадок отфильтровывали и промывали дихлорметаном. Фильтрат упаривали, получая твердое вещество, которое наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая промежуточный продукт (49c) (10 мг, 0.02 ммоль, 50%).
-
MS m/z ([M-H]) 415.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 1.38 (с, 9H), 3.40 (д, J = 11.2 Гц, 1H), 3.59-3.68 (м, 1H), 4.19 (с, 2H), 4.30 (с, 2H), 4.52 (дд, J = 2.6, 5.7 Гц, 1H), 6.35 (с, 1H), 6.52 (д, J = 5.7 Гц, 1H), 7.78 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Стадия 4: получение натрия и 2,2,2-трифторацетата [3-[3-(аммонийметил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 49)
Промежуточный продукт (49c) (10 мг, 0.02 ммоль) солюбилизировали в ТФУК (250 мкл) и ДХМ (750 мкл) при 0°C в инертной атмосфере. После перемешивания в течение 1 часа, остаток растирали несколько раз в диэтиловом эфире и ацетонитриле при 0°C, получая Пример (49) (2.5 мг, 0.0079 ммоль, 33%) в виде желтого порошка.
-
MS m/z ([M-H]) 314.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) δ 3.42-3.48 (м, 1H), 3.67-3.72 (м, 1H), 4.22 (с, 2H), 4.38 (д, J = 1.6 Гц, 2H), 4.58 (дд, J = 2.5, 5.7 Гц, 1H), 6.27 (с, 1H), 6.53 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.93 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Пример 50: синтез натрия [3-[3-[(2-гидроксиацетил)амино]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта N-[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-ил]-2-[трет-бутил(дифенил)силил]окси-ацетамида (50a)
При 0°C добавляли TEA (0.24 мл, 1.78 ммоль) и пивалоилхлорид (88 мкл, 0.71 ммоль) в раствор 2-[трет-бутил(дифенил)силил]оксиуксусной кислоты (224 мг, 0.71 ммоль) в ДХМ (6 мл). Смесь перемешивали при 0°C в течение 45 минут. Затем добавляли раствор промежуточного продукта (13b) (155 мг, 0.59 ммоль) в ДХМ (2.5 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После упаривания сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 80/20), получая промежуточный продукт (50a) (260 мг, 0.47 ммоль, 79%).
+
MS m/z ([M+H]) 558.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.14 (с, 9H), 3.14 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.50-3.58 (м, 1H), 4.07-4.19 (м, 2H), 4.21 (с, 2H), 4.36-4.53 (м, 3H), 5.30-5.43 (м, 2H), 5.95-6.10 (м, 1H), 6.43 (д, J = 5.4 Гц, 1H), 6.89 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.37-7.48 (м, 6H), 7.50 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.60-7.69 (м, 4H), 9.03 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта трифенил-[(E)-проп-1-енил]фосфония [3-[3-[[2-[трет-бутил(дифенил)силил]оксиацетил]амино]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (50b)
3
4
В инертной атмосфере добавляли уксусную кислоту (52 мкл, 0.90 ммоль) и Pd(PPh) (260 мг, 0.22 ммоль) в раствор промежуточного продукта (50a) (250 мг, 0.45 ммоль) в безводном дихлорметане (4.5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2.5 часов, затем добавляли пиридин (4.5 мл) и комплекс триоксида серы с пиридином (357 мг, 2.25 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи в темноте. Смесь разбавляли дихлорметаном, полученный осадок отфильтровывали, и фильтрат упаривали. Полученный сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (50b) (269 мг, 0.30 ммоль, 67%).
-
MS m/z ([M-H]) 596.
Стадия 3: получение триэтиламмония [3-[3-[(2-гидроксиацетил)амино]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (50c)
3
Промежуточный продукт (50b) (269 мг, 0.30 ммоль) растворяли в ацетонитриле (1.5 мл). Затем добавляли 3HF.NEt (98 мкл, 0.59 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Полученный твердый осадок отфильтровывали, получая промежуточный продукт (50c) (89 мг, 0.19 ммоль, 65%).
-
MS m/z ([M-H]) 358.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 1.26 (т, J = 7.3 Гц, 9H), 3.18 (кв, J = 7.3 Гц, 6H), 3.43 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.62-3.72 (м, 1H), 4.24 (с, 2H), 4.34 (д, J = 1.5 Гц, 2H), 4.55 (дд, J = 5.7, 2.6 Гц, 1H), 6.58 (д, J = 5.8 Гц, 1H), 6.62 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.85 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Стадия 4: получение натрия [3-[3-[(2-гидроксиацетил)амино]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 50)
Промежуточный продукт (50c) (75 мг, 0.16 ммоль) растворяли в воде и конвертировали пропусканием через ионообменную колонку Dowex с натриевой формой сорбента (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH) в Пример (50) (55 мг, 0.14 ммоль, 89%).
-
MS m/z ([M-H]) 358.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 3.43 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.61-3.73 (м, 1H), 4.24 (с, 2H), 4.34 (д, J = 1.5 Гц, 2H), 4.55 (дд, J = 5.7, 2.6 Гц, 1H), 6.53-6.61 (м, 1H), 6.61 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.84 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Пример 51: синтез натрия [3-[3-(3-гидроксипропаноиламино)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта N-[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-ил]-3-[трет-бутил(дифенил)силил]окси-пропанамида (51a)
Используя методику, описанную в Примере 50 (стадия 1), промежуточный продукт (13b) (100 мг, 0.38 ммоль) превращали реакцией с 3-[трет-бутил(дифенил)силил]оксипропановой кислотой (151 мг, 0.46 ммоль) в промежуточный продукт (51a) (130 мг, 0.23 ммоль, 50%) после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 80/20).
+
MS m/z ([M+H]) 572.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.11 (с, 9H), 2.57 (т, J = 5.6 Гц, 2H), 3.13 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.52 (дд, J = 10.7, 2.7 Гц, 1H), 3.96 (т, J = 5.6 Гц, 2H), 4.04-4.18 (м, 2H), 4.34-4.54 (м, 3H), 5.27-5.44 (м, 2H), 5.94-6.11 (м, 1H), 6.34 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 6.87 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.35-7.49 (м, 6H), 7.51 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.63-7.72 (м, 4H), 9.21 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта трифенил-[(E)-проп-1-енил]фосфония [3-[3-[3-[трет-бутил(дифенил)силил]оксипропаноиламино]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (51b)
Используя методику, описанную в Примере 50 (стадия 2), промежуточный продукт (51a) (130 мг, 0.23 ммоль) превращали в промежуточный продукт (51b) (107 мг, 0.12 ммоль, 52%) после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 0/100).
-
MS m/z ([M-H]) 610.
Стадия 3: получение трифенил-[(E)-проп-1-енил]фосфония [3-[3-(3-гидроксипропаноиламино)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (51c)
3
2
Промежуточный продукт (51b) (107 мг, 0.12 ммоль) растворяли в ацетонитриле (1.2 мл) и затем добавляли 3HF.NEt (39 мкл, 0.23 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После упаривания, сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 99/1 до 0/100), получая промежуточный продукт (51c) (40 мг, 0.059 ммоль, 51%).
-
MS m/z ([M-H]) 372.
Стадия 4: получение натрия [3-[3-(3-гидроксипропаноиламино)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 51)
Промежуточный продукт (51c) (40 мг, 0.059 ммоль) конвертировали пропусканием через ионообменную колонку Dowex с натриевой формой сорбента (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH) в Пример (51) (12 мг, 0.03 ммоль, 52%).
-
MS m/z ([M-H]) 372.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 2.66 (т, J = 6.0 Гц, 2H), 3.42 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.63-3.71 (м, 1H), 3.91 (т, J = 6.0 Гц, 2H), 4.33 (д, J = 1.5 Гц, 2H), 4.55 (дд, J = 5.7, 2.6 Гц, 1H), 6.55 (д, J = 5.7 Гц, 1H), 6.60 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.80 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Пример 52: синтез натрия [3-[3-[(2-амино-2-оксо-этокси)карбамоил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение 1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-N-(2-амино-2-оксо-этокси)пиразол-3-карбоксамида (52a)
Следуя методике, описанной в Примере 36 (стадия 4), промежуточный продукт (36c) (126 мг, 0.434 ммоль) превращали реакцией с 2-аминооксиацетамида гидрохлоридом (51 мг, 0.659 ммоль) в промежуточный продукт (52a) (70 мг, 0.193 ммоль, 44%) после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон от 100/0 до 0/100).
-
MS m/z ([M-H]) 361.
+
MS m/z ([M+H]) 363.
Стадия 2: получение N-(2-амино-2-оксо-этокси)-1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-карбоксамида (52b)
3
4
Промежуточный продукт (52a) (70 мг, 0.193 ммоль) растворяли в безводном дихлорметане (1.4 мл). Раствор дегазировали 10 минут в атмосфере аргона и последовательно добавляли AcOH (22 мкл, 0.386 ммоль) и Pd(PPh) (111 мг, 0.097 ммоль). После перемешивания в течение 45 минут при комнатной температуре, белое твердое вещество отфильтровывали, получая промежуточный продукт (52b) (40 мг, 0.122 ммоль, 28% за 2 стадии).
+
MS m/z ([M+H]) 323.
-
MS m/z ([M-H]) 321.
Стадия 3: получение натрия [3-[3-[(2-амино-2-оксо-этокси)карбамоил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 52)
В раствор промежуточного продукта (52b) (40 мг, 0.122 ммоль) в безводном пиридине (0.720 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с пиридином (98 мг, 0.613 ммоль). После перемешивания в течение 18 часов, полученную гетерогенную смесь упаривали в вакууме. Добавляли в остаток ДХМ, и смесь фильтровали для удаления солей. Такую же операцию проводили с ацетоном и ацетонитрилом. Фильтрат затем наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали и очищали методом хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (вода/ACN: 99/1), получая Пример (52) (2 мг, 0.005 ммоль, 4%).
-
MS m/z ([M-H]) 401.
+
MS m/z ([M+H]) 403.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 3.44 (д, J = 10.2 Гц, 1H), 3.65-3.72 (м, 1H), 4.39 (д, J = 1.4 Гц, 2H), 4.53 (с, 2H), 4.56-4.60 (м, 1H), 6.73-6.75 (м, 1H), 6.85 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 8.01 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Пример 55: синтез натрия [7-оксо-3-(4-тиазол-2-илтриазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-(4-тиазол-2-илтриазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (55a)
2
4
В 5-миллилитровой герметично закрытой колбе в инертной атмосфере разбавляли промежуточный продукт (1g) (250 мг, 0.82 ммоль) безводным диметилсульфоксидом (3 мл). Последовательно добавляли CuI (16 мг, 0.08 ммоль), натрия азид (80 мг, 1.22 ммоль), натрия аскорбат (16 мг, 0.08 ммоль) и DMCyDA (19 мкл, 0.12 ммоль). Зеленый раствор быстро превращался в коричневый. Смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции. Через 1 час добавляли в смесь 2-этинилтиазол (89 мкл, 0.98 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре до исчезновения промежуточного азида. Через 30 минут смесь разбавляли водой (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (3×15мл). Объединенные органические фазы сушили (NaSO) и упаривали в вакууме, получая коричневое масло, которое очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (55a) (80 мг, 0.24 ммоль, 30%) в виде коричневого твердого вещества.
+
+
MS m/z ([M+H]) 331, ([2M+H]) 661.
1
3
H-ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.22 (д, J = 11.0 Гц, 1H), 3.60 (дд, J = 11.0, 2.8 Гц, 1H), 4.19 (дд, J = 5.5, 2.6 Гц, 1H), 4.29-4.64 (м, 4H), 5.26 - 5.45 (м, 2H), 6.03 (ддт, J = 16.8, 10.3, 6.4 Гц, 1H), 6.74 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 7.40 (д, J = 3.2 Гц, 1H), 7.87 (д, J = 3.2 Гц, 1H), 8.28 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 6-гидрокси-3-(4-тиазол-2-илтриазол-1-ил)-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (55b)
Используя методику, описанную в Примере (4) (стадия 2), промежуточный продукт (55a) (80 мг, 0.24 ммоль) превращали в промежуточный продукт (55b) (32 мг, 0.11 ммоль, 45%) после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 0/100).
+
MS m/z ([M+H]) 291.
Стадия 3: получение натрия [7-оксо-3-(4-тиазол-2-илтриазол-1-ил)-1,6-диазабицикло [3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (пример 55)
Используя методику, описанную в Примере (5) (стадия 3), промежуточный продукт (55b) (32 мг, 0.11 ммоль) превращали после ионообменной хроматографии (колонка Dowex в натриевой форме) в Пример (55) (31 мг, 0.08 ммоль, 70%) в виде белого порошка.
-
MS m/z ([M-H]) 369.
1
2
H-ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 3.53 (д, J = 11.5 Гц, 1H), 3.77 (дд, J = 11.6, 2.8 Гц, 1H), 4.39-4.56 (м, 2H), 4.70 (дд, J = 5.7, 2.6 Гц, 1H), 6.95 (с, 1H), 7.59-7.69 (м, 1H), 7.77-7.82 (м, 1H), 8.40-8.48 (м, 1H).
Пример 56: синтез натрия [3-(4-карбамоилтриазол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)триазол-4-карбоксамида (56a)
2
В 5-миллилитровой герметично закрытой колбе в инертной атмосфере разбавляли промежуточный продукт (1g) (250 мг, 0.82 ммоль) безводным диметилсульфоксидом (3 мл). Последовательно добавляли CuI (16 мг, 0.08 ммоль), натрия азид (80 мг, 1.22 ммоль), натрия аскорбат (16 мг, 0.08 ммоль) и DMCyDA (19 мкл, 0.12 ммоль). Зеленый раствор быстро превращался в коричневый. Смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции. Через 45 минут добавляли пропиоламид (68 мг, 0.98 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре до исчезновения промежуточного азида. Через 1 час реакционную смесь упаривали в токе азота. Сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc: от 100/0 до 0/100) и растирали в EtO, получая промежуточный продукт (56a) (88 мг, 0.30 ммоль, 37%) в виде белого твердого вещества.
+
+
MS m/z ([M+H]) 291, ([2M+H]) 581.
1
3
H-ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.19 (д, J = 11.0 Гц, 1H), 3.54-3.63 (м, 1H), 4.19 (дд, J = 5.5, 2.6 Гц, 1H), 4.30 (дд, J = 17.8, 2.0 Гц, 1H), 4.36-4.50 (м, 2H), 4.54 (дд, J = 17.8, 1.1 Гц, 1H), 5.28-5.42 (м, 2H), 5.85-6.09 (м, 2H), 6.74-6.80 (м, 1H), 7.08 (с, 1H), 8.36 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)триазол-4-карбоксамида (56b)
3
4
2
Раствор промежуточного продукта (56a) (88 мг, 0.30 ммоль) в безводном дихлорметане (4 мл) дегазировали 10 минут в атмосфере аргона. Последовательно добавляли AcOH (35 мкл, 0.61 ммоль) и Pd(PPh) (0.18 г, 0.15 ммоль). После перемешивания в течение 2.5 часов при комнатной температуре, осадок отфильтровывали и промывали дихлорметаном, получая белое твердое вещество (45 мг). Твердое вещество очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 100/0 до 0/100). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая промежуточный продукт (56b) (25 мг, 0.10 ммоль, 33%) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 251.
Стадия 3: получение натрия [3-(4-карбамоилтриазол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфата (пример 56)
2
Используя методику, описанную в Примере (5) (стадия 3), промежуточный продукт (56b) (25 мг, 0.10 ммоль) превращали после ионообменной хроматографии (колонка Dowex в натриевой форме) и флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: 98/2) в Пример (56) (14 мг, 0.04 ммоль, 39%) в виде белого порошка.
3
+
+
MS m/z ([M+H-SOH]) 251, ([M+H]) 331.
-
MS m/z ([M-H]) 329.
1
2
H-ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 3.51 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.73 (дд, J = 11.4, 2.8 Гц, 1H), 4.43 (дд, J = 17.7, 1.3 Гц, 1H), 4.52 (дд, J = 17.7, 1.9 Гц, 1H), (м, 1H), 4.66 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 7.00 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 8.70 (с, 1H).
Пример 57: синтез натрия и 2,2,2-трифторацетата [3-[4-(аммонийметил)триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)триазол-4-ил]метил]карбамата (57a)
2
4
В 5-миллилитровой герметично закрытой колбе в инертной атмосфере разбавляли промежуточный продукт (1g) (250 мг, 0.82 ммоль) безводным диметилсульфоксидом (3 мл). Последовательно добавляли CuI (16 мг, 0.08 ммоль), натрия азид (80 мг, 1.22 ммоль), натрия аскорбат (68 мг, 0.34 ммоль), N-Boc-пропаргиламин (152 мг, 0.98 ммоль) и DMCyDA (19 мкл, 0.12 ммоль). Зеленый раствор быстро превращался в коричневый. Смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции. Через 1 час реакционную смесь разбавляли водой (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x15 мл). Органические фазы сушили (NaSO), упаривали, и сырой очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (57a) (259 мг, 0.69 ммоль, 84%) в виде желтого масла.
+
+
MS m/z ([M+H]) 377, ([2M+H]) 753.
1
3
H-ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.44 (с, 9H), 3.18 (д, J = 11.0 Гц, 1H), 3.52-3.61 (м, 1H), 4.15 (дд, J = 5.5, 2.6 Гц, 1H), 4.30 (дд, J = 17.9, 2.0 Гц, 1H), 4.36-4.55 (м, 5H), 5.11 (ушир.с, 1H), 5.28-5.43 (м, 2H), 6.01 (ддт, J = 16.9, 10.3, 6.4 Гц, 1H), 6.57-6.65 (м, 1H), 7.73 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[[1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)триазол-4-ил]метил]карбамата (57b)
Используя методику, описанную в Примере (4) (стадия 2), промежуточный продукт (57a) (259 мг, 0.69 ммоль) превращали в промежуточный продукт (57b) (104 мг, 0.31 ммоль, 45%) в виде оранжевого масла, загрязненного трифенилфосфиноксидом.
+
MS m/z ([M+H]) 337.
Стадия 3: получение натрия [3-[4-[(трет-бутоксикарбониламино)метил]триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (57c)
2
2
Промежуточный продукт (57b) (104 мг, 0.31 ммоль) растворяли в смеси tBuOH (1.5 мл) и HO (1.5 мл). TEA (11 мкл, 0.08 ммоль), добавляли комплекс триоксида серы с триметиламином (52 мг, 0.37 ммоль), и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь упаривали в вакууме и напрямую очищали методом хроматографии на обращенно-фазной колонке С-18 (HO/ACN: от 98/2 до 0/100). Фракции, содержащие целевой промежуточный продукт, объединяли и упаривали в вакууме. Остаток растворяли в воде и конвертировали пропусканием через ионообменную колонку Dowex с натриевой формой сорбента (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH) в промежуточный продукт (57c) (58 мг, 0.13 ммоль, 42%) в виде белого порошка после лиофилизации.
+
MS m/z ([M+H]) 331.
-
MS m/z ([M-H]) 329.
1
2
H-ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 1.39 (с, 9H), 3.48 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.70 (дд, J = 11.4, 2.8 Гц, 1H), 4.32 (с, 2H), 4.40 (дд, J = 17.7, 1.2 Гц, 1H), 4.48 (дд, J = 17.7, 1.9 Гц, 1H), 4.62 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 6.86 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 8.13 (с, 1H).
Стадия 4: получение натрия и 2,2,2-трифторацетата [3-[4-(аммонийметил)триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (пример 57)
2
В суспензию промежуточного продукта (57c) (46 мг, 0.11 ммоль) в безводном дихлорметане (2 мл), охлажденном до 0°C, медленно добавляли раствор ТФУК (160 мкл, 2.10 ммоль) в безводном дихлорметане (1 мл). После перемешивания в течение 1 часа при 0°C и 1 часа при комнатной температуре, смесь разбавляли эфиром (5 мл). Выпавший осадок отделяли и промывали ацетонитрилом и дихлорметаном, после чего сушили. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на обращенно-фазной колонке С-18 (HO/ACN: 99/1). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая пример (57) (4.9 мг, 0.01 ммоль, 7%) в виде белого твердого вещества.
-
MS m/z ([M-H]) 315.
1
2
H-ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 3.49 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.71 (дд, J = 11.4, 2.8 Гц, 1H), 4.33-4.55 (м, 4H), 4.63 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 6.88-6.95 (м, 1H), 8.37 (с, 1H).
19
2
F ЯМР (367 МГц, DO) δ -75.54 (с, 3F).
Пример 59: синтез натрия [3-[4-(диметиламино)метилтриазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-[4-(диметиламино) метилтриазол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (59a)
2
В 5-миллилитровой герметично закрытой колбе в инертной атмосфере разбавляли промежуточный продукт (1g) (250 мг, 0.82 ммоль) безводным диметилсульфоксидом (3 мл). Последовательно добавляли CuI (16 мг, 0.08 ммоль), натрия азид (80 мг, 1.22 ммоль), натрия аскорбат (16 мг, 0.08 ммоль), 3-диметиламино-1-пропин (105 мкл, 0.98 ммоль) и DMCyDA (19 мкл, 0.12 ммоль). Зеленый раствор быстро превращался в коричневый. Смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции. Через 1 час реакционную смесь упаривали в токе азота. Сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: градиент от 98/2 до 0/100). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, получая промежуточный продукт (59a) (196 мг, 0.64 ммоль, 79%) в виде коричневого масла.
+
MS m/z ([M+H]) 305.
-
MS m/z ([M-H]) 303.
1
3
H-ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 2.24 (с, 3H), 2.28 (с, 3H), 3.18 (дд, J = 11.0, 2.2 Гц, 1H), 3.51-3.64 (м, 3H), 4.14 (дт, J = 5.4, 2.0 Гц, 1H), 4.25-4.34 (м, 1H), 4.36-4.56 (м, 3H), 5.27-5.42 (м, 2H), 5.92-6.08 (м, 1H), 6.61 (д, J = 5.4 Гц, 1H), 7.71 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 3-[4-(диметиламино)метилтриазол-1-ил]-6-гидрокси-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (59b)
Используя методику, описанную в Примере (4) (стадия 2), промежуточный продукт (59a) (196 мг, 0.64 ммоль) превращали в промежуточный продукт (59b) (150 мг, 0.57 ммоль, 88%) в виде коричневого масла.
+
MS m/z ([M+H]) 265.
Стадия 3: получение натрия [3-[4-(диметиламино)метилтриазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (пример 59)
2
2
Промежуточный продукт (59b) (150 мг, 0.57 ммоль) растворяли в смеси tBuOH (1 мл) и HO (1 мл). Добавляли TEA (20 мкл, 0.14 ммоль) и комплекс триоксида серы с триметиламином (95 мг, 0.68 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре и упаривали в вакууме. Остаток очищали флэш-хроматографией на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 98/2 до 0/100). Фракции, содержащие целевой промежуточный продукт, объединяли и упаривали в вакууме. Остаток растворяли в воде и конвертировали пропусканием через ионообменную колонку Dowex с натриевой формой сорбента (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH) в Пример (59) (3.8 мг, 0.01 ммоль, 1.8%) в виде белого порошка после лиофилизации.
+
MS m/z ([M+H]) 345.
-
MS m/z ([M-H]) 343.
1
2
H-ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 2.83 (с, 6H), 3.48 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.70 (дд, J = 11.4, 2.8 Гц, 1H), 4.35-4.57 (м, 4H), 4.63 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 6.93 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 8.49 (с, 1H).
Пример 60: синтез [3-[4-(метиламинометил)триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] гидросульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)триазол-4-ил]аминометил]-N-метил-карбамата (60a)
2
4
В 5-миллилитровой герметично закрытой колбе в инертной атмосфере разбавляли промежуточный продукт (1g) (250 мг, 0.82 ммоль) безводным диметилсульфоксидом (3 мл). Последовательно добавляли CuI (16 мг, 0.08 ммоль), натрия азид (80 мг, 1.22 ммоль), натрия аскорбат (16 мг, 0.08 ммоль), Boc-N-метилпропаргиламин (147 мг, 0.86 ммоль) и DMCyDA (19 мкл, 0.12 ммоль). Зеленый раствор быстро превращался в коричневый. Смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции. Через 1 час реакционную смесь разбавляли водой (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x5 мл). Органические фазы сушили (NaSO) и упаривали. Сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (60a) (293 мг, 0.75 ммоль, 92%) в виде коричневого масла.
+
MS m/z ([M+H]) 391.
1
3
H-ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.44 (с, 9H), 2.88 (с, 3H), 3.17 (д, J = 11.0 Гц, 1H), 3.55 (дд, J = 11.0, 2.7 Гц, 1H), 4.05-4.19 (м, 1H), 4.29 (дд, J = 17.9, 2.0 Гц, 1H), 4.34-4.56 (м, 5H), 5.28-5.42 (м, 2H), 5.89-6.09 (м, 1H), 6.54-6.64 (м, 1H), 7.64 (ушир.с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта натрия [3-[4-[[трет-бутоксикарбонил(метил)амино]метил]триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (60b)
Используя методику, описанную в Примере (2) (стадия 2), промежуточный продукт (60a) (250 мг, 0.64 ммоль) превращали в промежуточный продукт (60b) (72 мг, 0.16 ммоль, 25%) в виде бежевого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 431.
-
MS m/z ([M-H]) 429.
1
2
H-ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 1.36 (с, 9H), 2.89 (с, 3H), 3.47 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.64-3.76 (м, 1H), 4.33-4.54 (м, 4H), 4.62 (дд, J = 5.6, 2.5 Гц, 1H), 6.85 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 8.15 (с, 1H).
Стадия 3: получение [3-[4-(метиламинометил)триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло [3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата (пример 60)
Используя методику, описанную в Примере (15) (стадия 3), промежуточный продукт (60b) (88 мг, 0.19 ммоль) превращали в Пример (60) (15 мг, 0.05 ммоль, 24%).
-
MS m/z ([M-H]) 330.
1
6
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d): δ (м.д.) 2.61 (с, 3H), 3.35 (м, 1H), 3.45 (д, J = 11.1 Гц, 1H), 4.23 (д, J = 17.8 Гц, 1H), 4.29 (с, 2H), 4.41 (дд, J = 17.5, 2.0 Гц, 1H), 4.47 (дд, J = 5.6, 2.4 Гц, 1H), 7.00 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 8.67 (с, 1H), 8.89 (ушир.с, 1H).
Пример 61: синтез динатрия [[3-[4-(карбоксиметил)триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 2-[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)триазол-4-ил]уксусной кислоты (61a)
2
4
2
В 10-миллилитровой герметично закрытой колбе в инертной атмосфере разбавляли промежуточный продукт (1g) (500 мг, 1.63 ммоль) безводным диметилсульфоксидом (6 мл). Последовательно добавляли CuI (50 мг, 0.27 ммоль), натрия азид (160 мг, 2.45 ммоль), натрия аскорбат (53 мг, 0.27 ммоль), бут-3-иновую кислоту (164 мг, 1.95 ммоль) и DMCyDA (38 мкл, 0.24 ммоль). Зеленый раствор быстро превращался в коричневый. Смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции. Через 5 часов в реакционную смесь добавляли 1н. HCl (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (5×5 мл). Объединенные органические фазы сушили (NaSO), упаривали и очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: градиент от 95/5 до 0/100). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли и лиофилизовали, получая промежуточный продукт (61a) (189 мг, 0.62 ммоль, 38%) в виде зеленого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 306.
-
MS m/z ([M-H]) 304.
1
H-ЯМР (400 МГц, MeOD): δ (м.д.) 3.32-3.39 (м, 1H), 3.44-3.55 (м, 1H), 3.64 (с, 2H), 4.28-4.48 (м, 5H), 5.24-5.46 (м, 2H), 5.93-6.13 (м, 1H), 6.83 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 8.16 (ушир.с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта пропенилтрифенилфосфония 2-[1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)триазол-4-ил]ацетата (61b)
Используя методику, описанную в Примере (4) (стадия 2), промежуточный продукт (61a) (185 мг, 0.61 ммоль) превращали в промежуточный продукт (61b) (321 мг, 0.57 ммоль, 93%) в виде коричневого масла.
+
MS m/z ([M+H]) 266.
-
-
MS m/z ([M-H]) 264, ([2M-H]) 529.
Стадия 3: получение динатрия [[3-[4-(карбоксиметил)триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ила] (пример 61)
Используя методику, описанную в Примере (5) (стадия 3), промежуточный продукт (61b) (300 мг, 0.53 ммоль) превращали в Пример (61) (26 мг, 0.07 ммоль, 13%) в виде бежевого порошка.
+
MS m/z ([M+H]) 346.
-
MS m/z ([M-H]) 344.
1
2
H-ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 3.51 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.60 (м, 2H), 3.72 (дд, J = 11.4, 2.8 Гц, 1H), 4.39-4.60 (м, 2H), 4.63 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 6.90 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 8.17 (ушир.с, 1H).
Пример 63: синтез [3-[4-(2-аминоэтоксикарбамоил)триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло [3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[2-(проп-2-иноиламино)оксиэтил]карбамата (63a)
В раствор проп-2-иновой кислоты (62 мкл, 1.00 ммоль) и EDC⋅HCl (206 мг, 1.00 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли при 0°C раствор трет-бутил N-(2-аминооксиэтил)карбамата (176 мг, 1.00 ммоль) в ДХМ (3 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь затем фильтровали для удаления твердых частиц. Фильтрат разбавляли эфиром (5 мл), фильтровали и упаривали при пониженном давлении, получая промежуточный продукт (63a) (229 мг, 1.00 ммоль, количественный выход) в виде коричневого масла, которое использовали в следующей стадии без дополнительной очистки.
+
MS m/z ([M+Na]) 251.
-
MS m/z ([M-H]) 227.
1
3
H-ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.45 (с, 9H), 2.88 (д, J = 6.4 Гц, 1H), 3.35-3.44 (м, 2H), 3.91 (т, J = 4.8 Гц, 2H), 5.09 (с, 1H), 9.51 (с, 1H).
Стадия 2: получение трет-бутил N-[2-[[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-3-ил)триазол-4-карбонил]амино]оксиэтил]карбамата (63b)
В 5-миллилитровой герметично закрытой колбе в инертной атмосфере разбавляли промежуточный продукт (1g) (250 мг, 0.82 ммоль) безводным диметилсульфоксидом (3 мл). Последовательно добавляли CuI (32 мг, 0.16 ммоль), натрия азид (80 мг, 1.22 ммоль), натрия аскорбат (32 мг, 0.16 ммоль), промежуточный продукт (63a) (229 мг, 0.98 ммоль) и DMCyDA (19 мкл, 0.12 ммоль). Зеленый раствор быстро превращался в коричневый. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа и затем упаривали в токе азота. Сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (63b) (251 мг, 0.56 ммоль, 68%) в виде коричневого твердого вещества.
+
+
MS m/z ([M+H]) 450, ([2M+H]) 899.
-
-
MS m/z ([M-H]) 448, ([2M-H]) 897.
1
6
H-ЯМР (300 МГц, ДМСО-d): δ (м.д.) 1.39 (с, 9H), 3.16-3.26 (м, 2H), 3.28-3.43 (м, 2H), 3.86 (т, J = 5.7 Гц, 2H), 4.25 (д, J = 17.6 Гц, 1H), 4.33-4.46 (м, 4H), 5.33-5.46 (м, 2H), 5.88-6.07 (м, 1H), 6.84 (т, J = 5.8 Гц, 1H), 7.06 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 9.13 (с, 1H), 11.94 (с, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[2-[[1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)триазол-4-карбонил]амино]оксиэтил]карбамата (63c)
Используя методику, описанную в Примере (4) (стадия 2), промежуточный продукт (63b) (251 мг, 0.56 ммоль) превращали в промежуточный продукт (63c) (68 мг, 0.17 ммоль, 30%) в виде желтого твердого вещества, загрязненного трифенилфосфиноксидом.
+
MS m/z ([M+H]) 410.
-
MS m/z ([M-H]) 408.
Стадия 4: получение промежуточного продукта натрия [3-[4-[2-(трет-бутоксикарбониламино)этоксикарбамоил]триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфата (63d)
Используя методику, описанную в Примере (5) (стадия 3), промежуточный продукт (63c) (76 мг, 0.19 ммоль) превращали в промежуточный продукт (63d) (11 мг, 0.02 ммоль, 11%) в виде бежевого твердого вещества.
-
MS m/z ([M-H]) 488.
Стадия 5: получение [3-[4-(2-аминоэтоксикарбамоил)триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата (пример 63)
Используя методику, описанную в Примере (15) (стадия 3), промежуточный продукт (63d) (11 мг, 0.02 ммоль) превращали в Пример (63) (1.9 мг, 0.005 ммоль, 23%) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 390.
-
MS m/z ([M-H]) 388.
1
2
H-ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 3.27-3.37 (м, 2H), 3.49 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.72 (дд, J = 11.4, 2.8 Гц, 1H), 4.17-4.27 (м, 2H), 4.37-4.58 (м, 2H), 4.64 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 6.97 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 8.57 (с, 1H).
Пример 64: синтез натрия [3-[4-(гидроксиметил)триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-[4-[[трет-бутил(диметил) силил]оксиметил]триазол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (64a)
2
4
В 5-миллилитровой герметично закрытой колбе в инертной атмосфере,разбавляли промежуточный продукт (1g) (250 мг, 0.82 ммоль) безводным диметилсульфоксидом (3 мл). Последовательно добавляли CuI (16 мг, 0.08 ммоль), натрия азид (80 мг, 1.22 ммоль), натрия аскорбат (16 мг, 0.08 ммоль), трет-бутил-диметил(2-пропинилокси)силан (192 мкл, 0.95 ммоль) и DMCyDA (19 мкл, 0.12 ммоль). Зеленый раствор быстро превращался в оранжевый. Смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции. Через 1 час 30 минут реакционную смесь разбавляли водой (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (5x5 мл). Органические фазы сушили (NaSO) и упаривали. Сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (64a) (252 мг, 0.64 ммоль, 79%) в виде желтого масла.
+
+
MS m/z ([M+H]) 392, ([2M+H]) 783.
1
3
H-ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 0.09 (с, 3H), 0.13 (с, 3H), 0.92 (с, 9H), 3.19 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.52-3.63 (м, 1H), 4.15 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 4.32 (дд, J = 17.9, 2.0 Гц, 1H), 4.36-4.58 (м, 3H), 4.84 (д, J = 0.9 Гц, 2H), 5.26-5.45 (м, 2H), 5.92-6.12 (м, 1H), 6.57-6.66 (м, 1H), 7.65 (м, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 3-[4-[[трет-бутил(диметил) силил]оксиметил]триазол-1-ил]-6-гидрокси-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (64b)
Используя методику, описанную в Примере (4) (стадия 2), промежуточный продукт (64a) (252 мг, 0.64 ммоль) превращали в промежуточный продукт (64b) (0.64 ммоль, количественный выход) в виде оранжевого масла, загрязненного трифенилфосфиноксидом, после очистки на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 0/100). Смесь использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
+
MS m/z ([M+H]) 352.
Стадия 3: получение пиридиния [3-[4-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (64c)
В раствор промежуточного продукта (64b) (0.64 ммоль) в безводном пиридине (6 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с пиридином (512 мг, 3.22 ммоль). После перемешивания в течение 1.5 часов, полученную гетерогенную смесь упаривали в вакууме. Добавляли в остаток ДХМ, и твердую фазу отфильтровывали. Фильтрат очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (64c) (110 мг, 0.22 ммоль, 33% за 2 стадии) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 432.
-
MS m/z ([M-H]) 430.
1
3
H-ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 0.09 (с, 3H), 0.11 (с, 3H), 0.91 (с, 9H), 3.15-3.25 (м, 1H), 3.78 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 4.32 (д, J = 18.0 Гц, 1H), 4.51 (д, J = 18.0 Гц, 1H), 4.65 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 4.81 (с, 2H), 6.64 (д, J = 5.4 Гц, 1H), 7.75 (с, 1H), 7.92-8.01 (м, 2H), 8.45 (ддд, J = 7.8, 7.8, 1.6 Гц, 1H), 8.99-9.06 (м, 2H).
Стадия 4: получение натрия [3-[4-(гидроксиметил)триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло [3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (пример 64)
В суспензию промежуточного продукта (64c) (110 мг, 0.22 ммоль) в безводном ТГФ (4.5 мл) медленно добавляли 3HF⋅TEA (70 мкл, 0.43 ммоль). После перемешивания в течение 2 часов при 20°C и 3 часов при 50°C, смесь упаривали досуха. Полученное масло наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая Пример (64) (72 мг, 0.21 ммоль, 99%) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 318.
-
MS m/z ([M-H]) 316.
1
2
H-ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 3.50 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.72 (ддд, J = 11.4, 2.8, 1.0 Гц, 1H), 4.44 (дд, J = 17.7, 1.3 Гц, 1H), 4.51 (дд, J = 17.7, 1.9 Гц, 1H), 4.64 (дд, J = 5.6, 2.7 Гц, 1H), 4.73 (с, 2H), 6.90 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 8.24 (с, 1H).
Пример 65: синтез динатрия [3-[4-(пропаноат)триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 3-[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)триазол-4-ил]пропановой кислоты (65a)
2
4
2
В 5-миллилитровой герметично закрытой колбе в инертной атмосфере разбавляли промежуточный продукт (1g) (250 мг, 0.82 ммоль) безводным диметилсульфоксидом (3 мл). Последовательно добавляли CuI (50 мг, 0.26 ммоль), натрия азид (80 мг, 1.22 ммоль), натрия аскорбат (50 мг, 0.25 ммоль), 4-пентиновую кислоту (92 мг, 0.94 ммоль) и DMCyDA (20 мкл, 0.12 ммоль). Зеленый раствор быстро превращался в коричневый. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. В реакционную смесь затем добавляли 1н. раствор HCl (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (5×5 мл). Органические фазы сушили (NaSO) и упаривали. Сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (65a) (137 мг, 0.43 ммоль, 52%) в виде коричневого масла.
+
+
MS m/z ([M+H]) 320, ([2M+H]) 639.
-
MS m/z ([2M-H]) 637.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 2.69 (дд, J = 7.1, 7.1 Гц, 2H), 2.96 (дд, J = 7.1, 7.1 Гц, 2H), 3.16 (д, J = 11.0 Гц, 1H), 3.45-3.53 (м, 1H), 4.15 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 4.22 (дд, J = 17.8, 1.9 Гц, 1H), 4.31-4.45 (м, 3H), 5.26 (дд, J = 10.2, 1.4 Гц, 1H), 5.29-5.37 (м, 1H), 5.94 (ддт, J = 16.9, 10.3, 6.4 Гц, 1H), 6.60 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 7.66 (с, 1H), 8.95 (ушир.с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 3-[1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)триазол-4-ил]пропановой кислоты (65b)
3
4
Раствор промежуточного продукта (65a) (137 мг, 0.43 ммоль) в безводном дихлорметане (4 мл) дегазировали 10 минут в атмосфере аргона. Последовательно добавляли AcOH (49 мкл, 0.86 ммоль) и Pd(PPh) (248 мг, 0.22 ммоль). После перемешивания в течение 1 часа при комнатной температуре, осадок отфильтровывали и промывали дихлорметаном, получая промежуточный продукт (65b) (120 мг, 0.43 ммоль, количественный выход).
+
MS m/z ([M+H]) 280.
-
-
MS m/z ([M-H]) 278, ([2M-H]) 557.
Стадия 3: получение динатрия [3-[4-(пропаноат)триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил]сульфата (пример 65)
2
2
Промежуточный продукт (65b) (0.43 ммоль) растворяли в смеси tBuOH (2 мл) и HO (2 мл). Добавляли TEA (15 мкл, 0.10 ммоль) и комплекс триоксида серы с триметиламином (72 мг, 0.52 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 19 часов, затем упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 98/2 до 0/100). Фракции, содержащие целевой промежуточный продукт, объединяли и упаривали в вакууме. Остаток растворяли в воде и конвертировали пропусканием через ионообменную колонку Dowex с натриевой формой сорбента (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH) в Пример (65) (10 мг, 0.03 ммоль, 6% за 2 стадии).
+
MS m/z ([M+H]) 360.
-
MS m/z ([M-H]) 358.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 2.64-2.79 (м, 2H), 2.91-3.09 (м, 2H), 3.46 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.62-3.82 (м, 1H), 4.21-4.48 (м, 2H), 4.48-4.64 (м, 1H), 6.77-6.86 (м, 1H), 7.99-8.16 (м, 1H).
Пример 66: синтез [3-(4-(2-(метиламино)ацетамид)триазол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло [3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта трет-бутил N-ацетамид-N-проп-2-инил-карбамата (66a)
2
2
4
В раствор трет-бутил N-(2-амино-2-оксо-этил)карбамата (300 мг, 1.72 ммоль) в ДМФА (3 мл) добавляли при 0°C 60%-ный гидрид натрия в масле (103 мг, 2.58 ммоль). Смесь перемешивали 30 минут, затем добавляли пропаргилбромид (323 мкл, 4.30 ммоль). По окончании добавления, реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Добавляли в смесь MeOH (1 мл), затем HO (10 мл). Раствор экстрагировали диэтиловым эфиром (3×10 мл). Объединенные органические фазы сушили (NaSO) и упаривали при пониженном давлении. Сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (66a) (146 мг, 0.69 ммоль, 40%) в виде желтого масла.
+
MS m/z ([M+H]) 213.
1
3
H-ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.47 (с, 9H), 2.28 (с, 1H), 3.96 (с, 2H), 4.15 (с, 2H), 5.62 (с, 1H), 6.06 (с, 1H).
Стадия 2: получение трет-бутил N-[[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)триазол-4-ил]метил]-N-ацетамидокарбамата (66b)
2
4
В 5-миллилитровой герметично закрытой колбе в инертной атмосфере разбавляли промежуточный продукт (1g) (188 мг, 0.61 ммоль) безводным диметилсульфоксидом (2.5 мл). Последовательно добавляли CuI (58 мг, 0.31 ммоль), натрия азид (60 мг, 0.92 ммоль), натрия аскорбат (58 мг, 0.31 ммоль), промежуточный продукт (66a) (150 мг, 0.71 ммоль) и DMCyDA (14 мкл, 0.09 ммоль). Зеленый раствор быстро превращался в коричневый. Смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции. Через 1 час в реакционную смесь добавляли 1н. раствор HCl (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (5x5 мл). Органические фазы сушили (NaSO), упаривали, и сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/Ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (66b) (136 мг, 0.31 ммоль, 51%) в виде коричневого масла.
+
MS m/z ([M+H]) 434.
Стадия 3: получение промежуточного продукта трет-бутил N-ацетамид-N-[[1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)триазол-4-ил]метил]карбамата (66c)
3
4
2
Раствор промежуточного продукта (66b) (136 мг, 0.31 ммоль) в безводном дихлорметане (4 мл) дегазировали 10 минут в атмосфере аргона. Последовательно добавляли AcOH (36 мкл, 0.63 ммоль) и Pd(PPh) (181 мг, 0.16 ммоль). Через 1 час реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 95/5 до 0/100), получая промежуточный продукт (66c) (38 мг, 0.10 ммоль, 30%) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 394.
-
MS m/z ([2M-H]) 785.
1
2
H-ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 1.38 (с, 9H), 3.37 (д, J = 11.1 Гц, 1H), 3.59 (дд, J = 11.1, 2.9 Гц, 1H), 3.99 (дд, J = 5.4, 2.6 Гц, 2H), 4.22-4.43 (м, 3H), 4.58 (с, 2H), 6.92 (д, J = 5.4 Гц, 1H), 8.18 (с, 1H).
Стадия 4: получение промежуточного продукта натрия [3-[4-[[(2-амино-2-оксо-этил)-трет-бутоксикарбонил-амино]метил]триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (66d)
2
2
Промежуточный продукт (66c) (38 мг, 0.10 ммоль) растворяли в смеси tBuOH (1 мл) и HO (1 мл). Добавляли TEA (3 мкл, 0.02 ммоль) и комплекс триоксида серы с триметиламином (16 мг, 0.12 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, затем упаривали в вакууме. Остаток растворяли в воде и элюировали на ионообменной колонке Dowex с натриевой формой сорбента (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли и упаривали. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 100/0 до 0/100), получая после лиофилизации промежуточный продукт (66d) (27 мг, 0.06 ммоль, 56%) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 474.
-
MS m/z ([M-H]) 472.
1
2
H-ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 1.41 (с, 9H), 3.49 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.71 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 4.00 (д, J = 15.1 Гц, 2H), 4.37-4.54 (м, 2H), 4.57-4.67 (м, 3H), 6.87 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 8.20 (с, 1H).
Стадия 5: получение [3-(4-(2-(метиламино)ацетамид)триазол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата (пример 66)
Используя методику, описанную в Примере (15) (стадия 3), промежуточный продукт (66d) (27 мг, 0.06 ммоль) превращали в Пример (66) (4.6 мг, 0.01 ммоль, 22%) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 374.
-
MS m/z ([M-H]) 372.
1
2
H-ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 3.48 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.70 (дд, J = 11.4, 2.8 Гц, 1H), 3.89 (с, 2H), 4.34-4.45 (м, 3H), 4.50 (дд, J = 17.8, 1.9 Гц, 1H), 4.62 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 6.92 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 8.41 (с, 1H).
Пример 67: синтез [3-(4-(2-(метиламино)этанол)триазол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло [3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[2-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил] карбамата (67a)
4
2
4
В раствор Boc-глицинола (520 мг, 3.22 ммоль) в ДХМ (7 мл) добавляли TBDMSCl (533 мг, 3.54 ммоль), имидазол (329 мг, 4.83 ммоль) и DMAP (59 мг, 0.48 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Добавляли в смесь насыщенный водный раствор NHCl (20 мл), и раствор экстрагировали дихлорметаном (3x20 мл). Объединенные органические фазы сушили (NaSO) и упаривали при пониженном давлении. Сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc: от 70/30 до 0/100), получая промежуточный продукт (67a) (336 мг, 1.22 ммоль, 38%) в виде желтого масла.
+
MS m/z ([M+H-Boc]) 176.
1
3
H-ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 0.06 (с, 6H), 0.89 (с, 9H), 1.45 (с, 9H), 3.23 (дд, J = 5.6, 5.2 Гц, 2H), 3.66 (дд, J = 5.6, 5.2 Гц, 2H), 4.83 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[2-[трет-бутил(диметил) силил]оксиэтил]-N-проп-2-инил-карбамата (67b)
2
2
4
В раствор промежуточного продукта (67a) (336 мг, 1.22 ммоль) в ТГФ (3 мл) добавляли при 0°C 60%-ный гидрид натрия в масле (73 мг, 1.83 ммоль). Смесь перемешивали 1.5 часа, затем добавляли пропаргилбромид (229 мкл, 3.05 ммоль). По окончании добавления, реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Добавляли в смесь MeOH (1 мл) и затем HO (10 мл). Раствор экстрагировали диэтиловым эфиром (3x10 мл). Объединенные органические фазы сушили (NaSO) и упаривали при пониженном давлении. Сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc: от 90/10 до 0/100), получая промежуточный продукт (67b) (130 мг, 0.41 ммоль, 34%) в виде желтого масла.
+
+
MS m/z ([M+H-Boc]) 214, ([M+Na]) 336.
1
3
H-ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 0.04 (с, 3H), 0.06 (с, 3H), 0.89 (с, 9H), 1.47 (с, 9H), 2.18 (с, 1H), 3.42 (дд, J = 5.9, 5.4 Гц, 2H), 3.74 (с, 2H), 4.13 (м, 2H).
Стадия 3: получение трет-бутил N-[[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)триазол-4-ил]метил]-N-[2-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]карбамата (67c)
2
4
В 5-миллилитровой герметично закрытой колбе в инертной атмосфере разбавляли промежуточный продукт (1g) (194 мг, 0.64 ммоль) безводным диметилсульфоксидом (2.5 мл). Последовательно добавляли CuI (18 мг, 0.10 ммоль), натрия азид (62 мг, 0.95 ммоль), натрия аскорбат (18 мг, 0.10 ммоль), промежуточный продукт (67b) (229 мг, 0.73 ммоль) и DMCyDA (15 мкл, 0.10 ммоль). Зеленый раствор быстро превращался в коричневый. Смесь перемешивали при комнатной температуре до завершения реакции. Через 1 час 30 минут реакционную смесь обрабатывали водой (5 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x5 мл). Органические фазы сушили (NaSO), упаривали, и сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (67c) (186 мг, 0.35 ммоль, 55%) в виде бесцветного масла.
+
MS m/z ([M+H]) 535.
1
3
H-ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 0.05 (с, 6H), 0.89 (с, 9H), 1.45 (с, 9H), 3.17 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.33-3.41 (м, 2H), 3.57 (д, J = 11.0 Гц, 1H), 3.66-3.79 (м, 2H), 4.12-4.17 (м, 1H), 4.31 (д, J = 17.8 Гц, 1H), 4.37-4.62 (м, 5H), 5.28-5.43 (м, 3H), 5.94-6.09 (м, 1H), 6.59 (д, J = 5.4 Гц, 1H).
Стадия 4: получение промежуточного продукта пропенилтрифенилфосфония [3-[4-[[трет-бутоксикарбонил-[2-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]амино]метил]триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (67d)
3
4
В раствор промежуточного продукта (67c) (186 мг, 0.35 ммоль) в безводном дихлорметане (4 мл) добавляли ледяную уксусную кислоту (40 мкл, 0.70 ммоль) и Pd(PPh) (201 мг, 0.17 ммоль). Через 1 час перемешивания при комнатной температуре, реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Добавляли пиридин (4 мл) и комплекс триоксида серы с пиридином (277 мг, 1.74 ммоль). Полученную суспензию защищали от света и перемешивали до полного завершения реакции. Через 1 час 30 минут реакционную смесь упаривали, затем разбавляли дихлорметаном и фильтровали. Фильтрат упаривали в вакууме и очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (67d) (117 мг, 0.13 ммоль, 38%) в виде желтого масла.
+
MS m/z ([M+H]) 575.
-
MS m/z ([M-H]) 573.
Стадия 5: получение промежуточного продукта [3-[4-[[2-[трет-бутил(диметил) силил]оксиэтиламино]метил]триазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата (67e)
В раствор промежуточного продукта (67d) (117 мг, 0.13 ммоль) в безводном дихлорметане (3 мл), охлажденный до 0°C, медленно добавляли раствор ТФУК (225 мкл, 2.94 ммоль) в безводном дихлорметане (2 мл). После перемешивания в течение 1 часа при 0°C, смесь разбавляли эфиром (10 мл). Раствор упаривали в токе азота. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (градиент ДХМ/Ацетон/MeOH: от 100/0/0 до 0/100/0 до 0/0/100). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли и упаривали при пониженном давлении, получая промежуточный продукт (67e) (26 мг, 0.06 ммоль, 41%) в виде бежевого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 475.
-
MS m/z ([M-H]) 473.
Стадия 6: получение [3-(4-(2-(метиламино)этанол)триазол-1-ил)-7-оксо-1,6-диазабицикло [3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата (пример 67)
2
В суспензию промежуточного продукта (67e) (26 мг, 0.06 ммоль) в безводном ТГФ (2 мл) медленно добавляли 3HF⋅TEA (9 мкл, 0.06 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Смесь упаривали, получая коричневое масло. Полученное масло наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли и упаривали. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 98/2 до 95/5). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая пример (67) (1.4 мг, 0.004 ммоль, 7%) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 361.
-
MS m/z ([M-H]) 359.
1
2
H-ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 3.16-3.26 (м, 2H), 3.48 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.70 (дд, J = 11.4, 2.8 Гц, 1H), 3.78-3.88 (м, 2H), 4.35-4.57 (м, 4H), 4.63 (дд, J = 5.6, 2.5 Гц, 1H), 6.92 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 8.42 (с, 1H).
Пример 68: синтез натрия [3-[5-(2-гидроксиэтил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло [3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата.
Стадия 1: получение промежуточного продукта трет-бутил-диметил-[2-(1H-пиразол-3-ил)этокси]силана (68a)
Смесь 2-(1H-пиразол-3-ил)этанола (400 мг, 3.57 ммоль), TBDMSCl (928 мкл, 5.35 ммоль), имидазола (389 мг, 5.71 ммоль) и DMAP (480 мг, 3.93 ммоль) в ДМФА (17.8 мл) в атмосфере аргона нагревали при 50°C в течение 1 часа. Смесь упаривали в вакууме, и остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc: от 100/0 до 100/0), получая промежуточный продукт (68a) (744 мг, 3.29 ммоль, 92 %) в виде бесцветного масла.
+
MS m/z ([M+H]) 227.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 0.00 (с, 6H), 0.85 (с, 9H), 2.82 (т, J = 6.0 Гц, 2H), 3.82 (т, J = 6.0 Гц, 2H), 6.03 (д, J = 1.9 Гц, 1H), 7.42 (д, J = 1.9 Гц, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-[5-[2-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (68b) и 6-аллилокси-3-[3-[2-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (68c)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (400 мг, 1.31 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (68a) (355 мг, 1.57 ммоль) в промежуточные продукты (68b) (42 мг, 0.105 ммоль, 8%) в виде оранжевого масла и (68c) (130 мг, 0.32 ммоль, 25%) в виде желтого порошка, после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc, затем ДХМ/Ацетон).
Промежуточный продукт 68b
+
MS m/z ([M+H]) 405.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 0.00 (д, J = 3.1 Гц, 6H), 0.84 (с, 9H), 2.88 (т, J = 6.4 Гц, 2H), 3.20 (д, J = 10.6 Гц, 1H), 3.44-3.51 (м, 1H), 3.75-3.90 (м, 2H), 4.05 (дд, J = 5.5, 2.5 Гц, 1H), 4.11 (дд, J = 17.8, 1.1 Гц, 1H), 4.21 (дд, J = 17.8, 1.9 Гц, 1H), 4.34-4.50 (м, 2H), 5.23-5.38 (м, 2H), 6.00 (дддд, J = 17.1, 10.3, 6.6, 6.0 Гц, 1H), 6.16 (д, J = 1.6 Гц, 1H), 6.26-6.33 (м, 1H), 7.45 (д, J = 1.8 Гц, 1H).
Промежуточный продукт 68c
+
MS m/z ([M+H]) 405.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 0.00 (с, 6H), 0.85 (с, 9H), 2.80 (т, J = 6.9 Гц, 2H), 3.11 (д, J = 10.7 Гц, 1H), 3.46-3.52 (м, 1H), 3.80 (т, J = 6.9 Гц, 2H), 4.05 (дд, J = 5.6, 2.5 Гц, 1H), 4.13 (дд, J = 17.5, 1.9 Гц, 1H), 4.32-4.49 (м, 3H), 5.23-5.39 (м, 2H), 6.00 (дддд, J = 17.0, 10.3, 6.7, 6.0 Гц, 1H), 6.18 (д, J = 2.5 Гц, 1H), 6.35-6.40 (м, 1H), 7.44 (д, J = 2.5 Гц, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта 3-[5-[2-[трет-бутил(диметил) силил]оксиэтил]пиразол-1-ил]-6-гидрокси-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (68d)
3
4
Раствор промежуточного продукта (68b) (42 мг, 0.093 ммоль) в безводном дихлорметане (4.1 мл) дегазировали 10 минут в атмосфере аргона. Последовательно добавляли AcOH (12 мкл, 0.208 ммоль) и Pd(PPh) (60 мг, 0.052 ммоль). После перемешивания в течение 2 часов при комнатной температуре, добавляли AcOH (6 мкл, 0.10 ммоль). После перемешивания в течение 3.5 часов при комнатной температуре, смесь упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (68d) (30 мг) в виде желтого масла, загрязненного трифенилфосфиноксидом.
+
MS m/z ([M+H]) 365.
Стадия 4: получение триметиламмония [3-[5-[2-[трет-бутил(диметил)силил] оксиэтил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (68e)
2
В раствор промежуточного продукта (68d) (30 мг) в смеси tBuOH (0.412 мл) и HO (0.412 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с триметиламином (14 мг, 0.099 ммоль) и TEA (2.9 мкл, 0.021 ммоль). После перемешивания в течение 1 часа при комнатной температуре, добавляли комплекс триоксида серы с триметиламином (7 мг, 0.045 ммоль). После перемешивания в течение 16 часов при комнатной температуре, смесь упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (68e) (15 мг, 0.026 ммоль, 28 % за 2 стадии) в виде белого порошка.
+
MS m/z ([M+H]) 445.
-
MS m/z ([M-H]) 443.
Стадия 5: получение натрия [3-[5-(2-гидроксиэтил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло [3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (пример 68)
В суспензию промежуточного продукта (68e) (15 мг, 0.030 ммоль) в безводном ацетонитриле (0.3 мл) медленно добавляли 3HF.TEA (4.9 мкл, 0.030 ммоль). После перемешивания в течение 7 часов при 40°C, смесь упаривали, получая желтый порошок. Полученный порошок наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая Пример (68) (7.5 мг, 0.021 ммоль, 75 %) в виде белого твердого вещества.
-
MS m/z ([M-H]) 329.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 2.94 (т, J = 6.3 Гц, 2H), 3.52 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.66-3.73 (м, 1H), 3.83 (тд, J = 6.3, 1.7 Гц, 2H), 4.04 (д, J = 17.9 Гц, 1H), 4.23 (дд, J = 17.9, 2.1 Гц, 1H), 4.60 (дд, J = 5.5, 2.6 Гц, 1H), 6.35 (д, J = 2.0 Гц, 1H), 6.49-6.59 (м, 1H), 7.61 (д, J = 2.0 Гц, 1H).
Пример 69: синтез натрия [3-[3-[2-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 3-[3-[2-[трет-бутил(диметил)силил] оксиэтил]пиразол-1-ил]-6-гидрокси-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (69a)
3
4
Раствор промежуточного продукта (68c) (125 мг, 0.309 ммоль) в безводном дихлорметане (3.1 мл) дегазировали 10 минут в атмосфере аргона. Последовательно добавляли AcOH (0.036 мл, 0.618 ммоль) и Pd(PPh) (179 мг, 0.154 ммоль). После перемешивания в течение 1 часа при комнатной температуре, смесь упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (69a) (51 мг) в виде бесцветного масла, загрязненного трифенилфосфиноксидом.
+
MS m/z ([M]) 365.
Стадия 2: получение триметиламмония [3-[3-[2-[трет-бутил(диметил)силил] оксиэтил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (69b)
2
В раствор промежуточного продукта (69a) (76 мг) в tBuOH (1.05 мл) и HO (1.05 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с триметиламином (35 мг, 0.251 ммоль) и триэтиламин (7.3 мкл, 0.052 ммоль). После перемешивания в течение 1 часа при комнатной температуре, добавляли комплекс триоксида серы с триметиламином (16 мг, 0.0115 ммоль). После перемешивания в течение 16 часов при комнатной температуре, смесь упаривали в вакууме, и остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая триметиламмония [3-[3-[2-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфат (69b) (39 мг, 0.077 ммоль, 25 % за 2 стадии) в виде белого порошка.
-
MS m/z ([M-H]) 443.
Стадия 3: получение натрия [3-[3-[2-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (пример 69)
2
В суспензию промежуточного продукта (69b) (39 мг, 0.077 ммоль) в безводном ACN (0.775 мл) медленно добавляли 3HF.TEA (12.6 мкл, 0.078 ммоль). После перемешивания в течение 2.5 часов при 40°C, добавляли 3HF.TEA (12.6 мкл, 0.078 ммоль). После перемешивания в течение 4.5 часов при 40°C, добавляли 3HF.TEA (12.6 мкл, 0.078 ммоль). После перемешивания в течение 8 часов при 40°C и 16 часов при комнатной температуре, смесь упаривали, получая желтый порошок. Полученный порошок наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая белое твердое вещество, которое дважды очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 98/2 до 95/5). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая пример (69) (3 мг, 0.0085 ммоль, 11%) в виде бежевого порошка.
-
MS m/z ([M-H]) 329.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 2.85 (т, J = 6.5 Гц, 2H), 3.43 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.67 (дд, J = 11.3, 2.4 Гц, 1H), 3.83 (т, J = 6.5 Гц, 2H), 4.33 (с, 2H), 4.55 (дд, J = 5.7, 2.6 Гц, 1H), 6.37 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 6.54 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 7.80 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Пример 70: синтез натрия [3-[2-(гидроксиметил)имидазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта трет-бутил-(1H-имидазол-2-илметокси)-диметил-силана (70a)
Смесь 1H-имидазол-2-илметанола (30 мг, 3.06 ммоль), TBDMSCl (795 мкл, 4.59 ммоль), имидазола (0,333 г, 4.89 ммоль) и DMAP (411 мг, 3.366 ммоль) в ДМФА (15.3 мл) перемешивали в атмосфере аргона в течение 4.5 часов при комнатной температуре и нагревали при 40°C в течение 1 часа до полной конверсии исходного соединения. Смесь упаривали в вакууме и остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 50/50), получая промежуточный продукт (70a) (592 мг, 2.45 ммоль, 80 %) в виде бесцветного масла.
+
MS m/z ([M+H]) 213.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 0.11 (с, 6H), 0.93 (с, 9H), 4.82 (с, 2H), 7.01 (с, 2H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-[2-[[трет-бутил(диметил) силил]оксиметил]имидазол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (70b)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 1a), промежуточный продукт (1g) (300 мг, 0.98 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (70a) (0.32 г, 0.78 ммоль) в промежуточный продукт (70b) (239 мг, 0.50 ммоль, 51 %) в виде желтого масла после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc: от 100/0 до 50/50).
+
MS m/z ([M+H]) 391.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 0.00 (д, J = 2.3 Гц, 6H), 0.80 (с, 9H), 3.10 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.46 (ддд, J = 10.9, 2.8, 1.2 Гц, 1H), 3.92-4.09 (м, 3H), 4.27-4.45 (м, 2H), 4.50-4.68 (м, 2H), 5.20-5.36 (м, 2H), 5.94 (дддд, J = 17.1, 10.3, 6.7, 6.0 Гц, 1H), 6.55 (дд, J = 5.7, 1.4 Гц, 1H), 6.81 (д, J = 1.4 Гц, 1H), 6.91 (д, J = 1.4 Гц, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта аллил(трифенил)фосфония [3-[2-[[трет-бутил(диметил)силил]оксиметил]имидазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (70c)
3
4
Раствор промежуточного продукта (70b) (120 мг, 0.252 ммоль) в безводном дихлорметане (2.52 мл) дегазировали 10 минут в атмосфере аргона. Последовательно добавляли AcOH (29 мкл, 0.504 ммоль) и Pd(PPh) (146 мг, 0.126 ммоль). Через 1.5 часа перемешивания при комнатной температуре, добавляли в реакционную смесь пиридин (2.52 мл) и комплекс триоксида серы с пиридином (200 мг, 1.26 ммоль). Полученную суспензию защищали от света и перемешивали в течение ночи до полного завершения реакции. Реакционную смесь упаривали, разбавляли дихлорметаном и фильтровали. Фильтрат упаривали в вакууме и затем очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (70c) (78 мг, 0.106 ммоль, 42 %) в виде желтого порошка.
+
MS m/z ([M+H]) 431.
Стадия 4: получение натрия [3-[2-(гидроксиметил)имидазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (пример 70)
2
В суспензию промежуточного продукта (70c) (78 мг, 0.107 ммоль) в безводном ACN (1.06 мл) медленно добавляли 3HF.TEA (17.4 мкл, 0.107 ммоль). После перемешивания в течение 7 часов при 40°C и 17 часов при комнатной температуре, смесь упаривали, получая желтое масло. Сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 98/2 до 0/100). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, получая 27 мг твердого вещества которое наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая пример (70) (5.8 мг, 0.017 ммоль, 16 %) в виде белого твердого вещества.
-
MS m/z ([M-H]) 315.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 3.50 (д, J = 11.6 Гц, 1H), 3.70 (дд, J = 11.6, 2.8 Гц, 1H), 4.02 (дд, J = 18.0, 1.1 Гц, 1H), 4.27 (дд, J = 17.9, 2.2 Гц, 1H), 4.61 (дд, J = 5.4, 2.6 Гц, 1H), 4.81 (с, 2H), 6.80 (д, J = 5.4 Гц, 1H), 7.37 (д, J = 2.0 Гц, 1H), 7.43 (д, J = 2.0 Гц, 1H).
Пример 71: синтез натрия [3-[4-(гидроксиметил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-[4-[[трет-бутил(диметил) силил]оксиметил]пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (71a)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (230 мг, 0.751 ммоль) превращали реакцией с трет-бутил-диметил-(1H-пиразол-4-илметокси)силаном (получен по методике, описанной в WO 2010/108902) (239 мг, 1.113 ммоль) в промежуточный продукт (71a) (209 мг, 0.535 ммоль, 71%) после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 95/5).
+
MS m/z ([M+H]) 391.
1
3
H-ЯМР (300 МГц, CDCl): δ (м.д.) 0.07 (с, 6H), 0.90 (с, 9H), 3.13 (д, J = 10.7 Гц, 1H), 3.52 (дд, J = 10.4, 2.3 Гц, 1H), 4.08 (дд, J = 2.4, 5.5 Гц, 1H), 4.18 (дд, J = 1.8, 17.6 Гц, 1H), 4.40-4.48 (м, 3H), 4.60 (с, 2H), 5.30-5.40 (м, 2H), 5.96-6.08 (м, 1H), 6.40 (д, J = 5.4 Гц, 1H), 7.48 (с, 1H), 7.52 (с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 3-[4-[[трет-бутил(диметил)силил] оксиметил]пиразол-1-ил]-6-гидрокси-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (71b)
3
4
Промежуточный продукт (71a) (140 мг, 0.358 ммоль) растворяли в безводном дихлорметане (2.6 мл). Раствор дегазировали 10 минут в атмосфере аргона и последовательно добавляли AcOH (41 мкл, 0.717 ммоль) и Pd(PPh) (207 мг, 0.179 ммоль). После перемешивания в течение 1 часа при комнатной температуре, смесь упаривали. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (71b) (55 мг, 0.158 ммоль, 44%).
+
MS m/z ([M+H]) 351.
Стадия 3: получение промежуточного продукта пиридин-1-ия [3-[4-[[трет-бутил (диметил)силил]оксиметил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (71c)
В раствор промежуточного продукта (71b) (55 мг, 0.157 ммоль) в безводном пиридин (0.920 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с пиридином (125 мг, 0.783 ммоль). После перемешивания в течение 18 часов при комнатной температуре, полученную гетерогенную смесь упаривали в вакууме. ДХМ добавляли в остаток и твердую фазу отфильтровывали. Фильтрат очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (71c) (62 мг, 0.122 ммоль, 77%).
+
MS m/z ([M+H]) 431.
-
MS m/z ([M-H]) 429.
Стадия 4: получение промежуточного продукта триэтиламмония [3-[4-(гидроксиметил) пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (71d)
2
В раствор промежуточного продукта (71c) (60 мг, 0.118 ммоль) в ацетонитриле (1.2 мл) в инертной атмосфере добавляли триэтиламина тригидрофторид (19 мкл, 0.118 ммоль). После перемешивания в течение 2.5 часов при 40°C, смесь упаривали в вакууме и очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 98/2 до 0/100), получая промежуточный продукт (71d) (49 мг, 0.117 ммоль, количественный выход) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 317.
-
MS m/z ([M-H]) 315.
Стадия 5: получение натрия [3-[4-(гидроксиметил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 71)
2

Промежуточный продукт (71d) (49 мг, 0.117 ммоль) растворяли в минимальном количестве HO и нескольких каплях ACN и наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали. MeOH добавляли в остаток и твердую фазу отфильтровывали. Фильтрат упаривали в вакууме, получая Пример (71) (22 мг, 0.066 ммоль, 56%).
+
MS m/z ([M+H]) 317.
-
MS m/z ([M-H]) 315.
1
2
H-ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 3.44 (д, J = 11.1 Гц, 1H), 3.65-3.70 (м, 1H), 4.35-4.36 (м, 2H), 4.54-4.57 (м, 3H), 6.56-6.63 (м, 1H), 7.69 (с, 1H), 7.95-7.85 (м, 1H).
Пример 72: синтез [3-[3-(2-морфолиноэтилкарбамоил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта N-(2-морфолиноэтил)-1H-пиразол-3-карбоксамида (72a)
Смесь дипиразоло[3,1-a:3',1'-d]пиразин-4,9-диона (получен согласно Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2015, 25(15), 3024-3029)) (30 мг, 0.159 ммоль), 2-морфолиноэтанамина (42 мг, 0.319 ммоль) в ТГФ (0.32 мл) нагревали при 80°C в течение 18 часов. Смесь упаривали в вакууме, получая промежуточный продукт (72a) (70 мг, 0.313 ммоль, 98 %) в виде коричневого масла.
+
MS m/z ([M+H]) 225.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 2.48 (с, 4H), 2.58 (т, J = 6.1 Гц, 2H), 3.52 (кв, J = 5.9 Гц, 2H), 3.60-3.77 (м, 4H), 6.74 (д, J = 2.4 Гц, 1H), 7.51 (д, J = 2.4 Гц, 1H), 7.69 (ушир.с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-N-(2-морфолиноэтил)пиразол-3-карбоксамида (72b)
Используя методику, описанную в Примере 2 (стадия 1a), промежуточный продукт (1g) (168 мг, 0.55 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (72a) (185 мг, 0.824 ммоль) в промежуточный продукт (72b) (217 мг, 0.54 ммоль, 99 %) в виде желтого масла, после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 100/0).
+
MS m/z ([M+H]) 403.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 2.50-2.63 (м, 4H), 2.60-2.69 (м, 2H), 3.18 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.50-3.63 (м, 3H), 3.78 (кв, J = 4.5 Гц, 4H), 4.13-4.26 (м, 2H), 4.36-4.59 (м, 3H), 5.31-5.48 (м, 2H), 6.04 (ддт, J = 17.0, 10.3, 6.5 Гц, 1H), 6.55 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 6.90 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.67 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта 1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-N-(2-морфолиноэтил)пиразол-3-карбоксамида (72c)
3
4
2
Раствор промежуточного продукта (72b) (149 мг, 0.296 ммоль) в безводном дихлорметане (2.9 мл) дегазировали 10 минут в атмосфере аргона. Последовательно добавляли AcOH (34 мкл, 0.59 ммоль) и Pd(PPh) (172 мг, 0.148 ммоль). После перемешивания в течение 1.5 часов при комнатной температуре, смесь упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 98/2 до 0/100), получая промежуточный продукт (72c) (46 мг, 0.127 ммоль, 43 %) в виде желтого порошка.
+
MS m/z ([M+H]) 363.
Стадия 4: получение [3-[3-(2-морфолиноэтилкарбамоил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата (пример 72)
2
2
В раствор промежуточного продукта (72c) (28 мг, 0.077 ммоль) в tBuOH (0.39 мл) и HO (0.39 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с триметиламином (12.9 мг, 0.093 ммоль) и TEA (2.7 мкл, 0.019 ммоль). После перемешивания в течение 23 часов, полученную гетерогенную смесь упаривали в вакууме. Сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 98/2 до 0/100). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, получая пример (72) (14 мг, 0.031 ммоль, 41 %) в виде белого порошка.
+
MS m/z ([M+H]) 443.
-
MS m/z ([M-H]) 441.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 3.11-3.29 (м, 6H), 3.44 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.63-3.77 (м, 2H), 3.84-3.96 (м, 5H), 4.39 (ушир.с, 2H), 4.58 (дд, J = 5.7, 2.6 Гц, 1H), 6.73 (д, J = 6.0 Гц, 1H), 6.83 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.97 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Пример 73: синтез триметиламмония [3-[2-(3-амино-3-оксо-пропил)имидазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 3-(1H-имидазол-2-ил)пропенамида (73a)
Смешивали этил 3-(1H-имидазол-2-ил)пропаноат (0.50 г, 2.826 ммоль), 30%-ный водный раствор аммиака (2 мл) и 7M раствор аммиака в метаноле (2 мл). После 42 часов перемешивания при комнатной температуре, реакционную смесь фильтровали. Фильтрат упаривали в вакууме, получая промежуточный продукт (73a) (0.318 г, 2.28 ммоль, 81%) в виде белого порошка.
+
MS m/z ([M+H]) 140.
1
6
H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d): δ (м.д.) 2.41-2.49 (м, 2H), 2.75-2.83 (м, 2H), 6.70-6.95 (м, 3H), 7.37 (ушир.с, 1H), 11.65 (ушир.с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 3-[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)имидазол-2-ил]пропенамида (73b)
2
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (400 мг, 1.31 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (73a) (218 мг, 1.57 ммоль) в промежуточный продукт (73b) (261 мг, 0.823 ммоль, 63 %) в виде зеленого масла, после очистки методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 98/2 до 0/100).
+
MS m/z ([M+H]) 318.
1
6
H ЯМР (300 МГц, ДМСО-d): δ (м.д.) 2.42-2.61 (м, 2H), 2.70-2.90 (м, 2H), 3.27-3.43 (м, 3H), 3.81 (д, J = 17.5 Гц, 1H), 4.03 (д, J = 18.3 Гц, 1H), 4.31 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 4.40 (дт, J = 6.0, 1.3 Гц, 1H), 5.23-5.44 (м, 2H), 5.89-6.06 (м, 1H), 6.44 (д, J = 5.4 Гц, 1H), 6.79 (ушир.с, 2H), 7.15 (ушир.с, 1H), 7.32 (ушир.с, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта 3-[1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)имидазол-2-ил]пропенамида (73c)
3
4
2
Раствор промежуточного продукта (73b) (60 мг, 0.189 ммоль) в безводном дихлорметане (1.89 мл) дегазировали 10 минут в атмосфере аргона. Последовательно добавляли AcOH (22 мкл, 0.378 ммоль) и Pd(PPh) (109 мг, 0.095 ммоль). После 2.5 часов перемешивания при комнатной температуре, смесь упаривали. Сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на С18-обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 98/2 до 0/100). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая промежуточный продукт (73c) (70 мг) в виде желтого порошка с трифенилфосфиноксидом.
+
MS m/z ([M+H]) 278.
Стадия 4: получение триметиламмония [3-[2-(3-амино-3-оксо-пропил)имидазол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (пример 73)
2
2
2
В раствор промежуточного продукта (73c) (70 мг, 0.25 ммоль) в tBuOH (1.26 мл) и HO (1.26 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с триметиламином (42.2 мг, 0.303 ммоль) и TEA (8.9 мкл, 0.063 ммоль). После перемешивания в течение 2ч.20мин., полученную гетерогенную смесь упаривали в вакууме. Сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 98/2 до 0/100). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли и снова очищали методом флэш-хроматографии на Обращенно-фазном С-18 силикагеле (HO/ACN: от 99/1 до 95/5), получая пример (73) (4 мг, 0.0055 ммоль, 2%) в виде белого порошка, загрязненного комплексом триоксида серы с триметиламином.
+
MS m/z ([M+H]) 358.
-
MS m/z ([M-H]) 356.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 2.69-2.82 (м, 2H), 3.15 (тд, J = 7.1, 3.1 Гц, 2H), 3.23 (с, 9H), 3.55 (д, J = 11.6 Гц, 1H), 3.72 (дд, J = 11.5, 2.6 Гц, 1H), 3.99 (д, J = 18.6 Гц, 1H), 4.28 (дд, J = 18.1, 2.2 Гц, 1H), 4.64 (дд, J = 5.4, 2.6 Гц, 1H), 6.83 (д, J = 5.2 Гц, 1H), 7.30-7.32 (м, 1H), 7.35 (д, J = 2.0 Гц, 1H).
Пример 74: синтез натрия [3-[4-(2-гидроксиэтилсульфамоил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта N-(2-гидроксиэтил)-2-(метоксиметил) пиразол-3-сульфонамида (74a)
В раствор 2-аминоэтанола (223 мг, 3.652 ммоль) в безводном дихлорметане (36.5 мл) в инертной атмосфере добавляли 2-(метоксиметил)пиразол-3-сульфонилхлорид (1.0 г, 4.747 ммоль) и TEA (1.02 мл, 7.304 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа и упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/MeOH: от 95/5 до 0/100), получая промежуточный продукт (74a) (0.733 г, 3.116 ммоль, 85%).
+
MS m/z ([M+H]) 236.
-
MS m/z ([M-H]) 234.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 2.6-2.66 (м, 1H), 3.29-3.33 (м, 2H), 3.36 (с, 3H), 3.69-3.74 (м, 2H), 5.33 (ушир.с, 1H), 5.44 (с, 2H), 6.80 (д, J = 2.4 Гц, 1H), 7.65 (д, J = 2.4 Гц, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта N-(2-гидроксиэтил)-1H-пиразол-3-сульфонамида (74b)
В раствор промежуточного продукта (74a) (0.673 г, 2.86 ммоль) в 4н. растворе HCl в диоксане (28.6 мл) в инертной атмосфере добавляли 4н. раствор HCl (8 мл). Смесь нагревали 4 часа при 50°C. Полученную гетерогенную смесь упаривали в вакууме и очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 95/5), получая промежуточный продукт (74b) (310 мг, 1.62 ммоль, 56%).
+
MS m/z ([M+H]) 192.
-
MS m/z ([M-H]) 191.
1
H ЯМР (300 МГц, MeOD): δ (м.д.) 3.09 (т, J = 6.0 Гц, 2H), 3.57 (т, J = 6.0 Гц, 2H), 6.71 (д, J = 2.4 Гц, 1H), 7.79 (д, J = 2.4 Гц, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта N-[2-[трет-бутил(диметил)силил] оксиэтил]-1H-пиразол-3-сульфонамида (74c)
2
4
В раствор промежуточного продукта (74b) (0.264 г, 1.381 ммоль) в безводном ДМФА в инертной атмосфере добавляли TBDMSCl (312 мг, 0.207 ммоль), имидазол (160 мг, 0.235 ммоль) и DMAP (169 мг, 1.381 ммоль). После перемешивания в течение 1.5 часов при комнатной температуре, полученную гетерогенную смесь разбавляли этилацетатом и диэтиловым эфиром. Органический слой промывали водой, сушили над NaSO, фильтровали и упаривали в вакууме. Смесь упаривали, получая промежуточный продукт (74c) (374 мг, 1.224 ммоль, 88%).
+
MS m/z ([M+H]) 306.
-
MS m/z ([M-H]) 304.
Стадия 4: получение промежуточного продукта 1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-N-[2-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтил]пиразол-4-сульфонамида (74d)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (266 мг, 0.868 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (74c) (371 мг, 1.273 ммоль) в промежуточный продукт (74d) (96 мг, 0.198 ммоль, 23%) после очистки методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 70/30).
+
MS m/z ([M+H]) 484.
-
MS m/z ([M-H]) 482.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 0.05 (с, 6H), 0.08 (с, 9H), 3.13 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.20 (кв, J = 5.6 Гц, 2H), 3.55 (дд, J = 10.6, 2.4 Гц, 1H), 3.69-3.74 (м, 2H), 4.13 (дд, J = 5.5, 2.5 Гц, 1H), 4.16-4.25 (м, 1H), 4.38-4.50 (м, 3H), 4.99 (т, J = 5.9 Гц, 1H), 5.31-5.41 (м, 2H), 5.97-6.07 (м, 1H), 6.61 (д, J = 5.3 Гц, 1H), 6.78 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.61 (д, J = 2.6 Гц, 1H).
Стадия 5: получение промежуточного продукта трифенил-[(E)-проп-1-енил]фосфония [3-[4-[2-[трет-бутил(диметил)силил]оксиэтилсульфамоил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (74e)
3
4
Промежуточный продукт (74d) (100 мг, 0.207 ммоль) растворяли в безводном дихлорметане (1.5 мл). Добавляли AcOH (2 мкл, 0.414 ммоль) и Pd(PPh) (120 мг, 0.103 ммоль) и перемешивали в течение 45 минут при комнатной температуре. Добавляли пиридин (1.2 мл) и комплекс триоксида серы с пиридином (165 мг, 1.036 ммоль) и перемешивали в течение 18 часов. Полученную гетерогенную смесь упаривали в вакууме, ДХМ добавляли в остаток и соли отфильтровывали. Фильтрат очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (74e) (49 мг, 0.059 ммоль, 28% за 2 стадии).
+
MS m/z ([M+H]) 524.
-
MS m/z ([M-H]) 522.
Стадия 6: получение натрия [3-[4-(2-гидроксиэтилсульфамоил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 74)
2

В раствор промежуточного продукта (74e) (49 мг, 0.059 ммоль) в ацетонитриле (590 мкл) в инертной атмосфере добавляли 3HF.TEA (10 мкл, 0.059 ммоль). После перемешивания в течение 18 часов при комнатной температуре, смесь упаривали в вакууме. Сырой продукт растворяли в смеси 8/2 HO/ACN и наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали. MeOH добавляли в остаток и твердую фазу отфильтровывали. Фильтрат упаривали в вакууме, получая пример (74) (22 мг, 0.050 ммоль, 85%).
+
MS m/z ([M+H]) 410.
-
MS m/z ([M-H]) 408.
1
2
H ЯМР (400МГц, DO): δ (м.д.) 3.12 (т, J = 5.4 Гц, 2H), 3.42 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.59 (т, J = 5.4 Гц, 2H), 3.67 (дд, J = 11.4, 2.2 Гц, 1H), 4.36 (д, J = 3.5 Гц, 2H), 4.58 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 6.77 (д, J = 5.0 Гц, 1H), 6.85 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 8.06 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Пример 76: синтез натрия [3-[3-[(1S)-1,2-дигидроксиэтил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта (E)-3-(диметиламино)-1-[(4R)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил]проп-2-ен-1-она (76a)
2
4
1-[(4R)-2,2-Диметил-1,3-диоксолан-4-ил]этанон (получен по методике, описанной в Organic Letters, 1999, 1(7), 1067) (1.27 г, 8.64 ммоль) в N,N-диметилформамида диметилацетале (9.6 мл) нагревали при 100°C в течение 23 часов. Реакционную смесь выливали в воду (50 мл) и смесь экстрагировали дихлорметаном (4x20 мл). Объединенные органические слои сушили над NaSO, и растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 50/50), получая промежуточный продукт (76a) (3.31 г, 6.32 ммоль, 73%) в виде оранжевого масла, загрязненного ДМФА.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.43 (с, 3H), 1.50 (с, 3H), 2.89 (с, 3H), 2.97 (с, 3H), 3.99 (дд, J = 8.4, 6.4 Гц, 1H), 4.27 (дд, J = 8.4, 7.5 Гц, 1H), 4.48 (дд, J = 7.5, 6.4 Гц, 1H), 5.49 (д, J = 12.7 Гц, 1H), 7.70 (д, J = 12.7 Гц, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 3-[(4S)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил]-1H-пиразола (76b)
Смесь промежуточного продукта (76a) (3.31 г, 6.32 ммоль) и 50%-ного водного раствора гидразин гидрата (1.23 мл, 12.6 ммоль) растворяли в этаноле (63 мл). После перемешивания в течение 1 часа при 90°C, смесь упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc: 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (76b) (832 мг, 4.45 ммоль, 70%) в виде желтого масла.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.40 (ушир.с, 3H), 1.43 (ушир.с, 3H), 3.92 (дд, J = 8.2, 7.2 Гц, 1H), 4.25 (дд, J = 8.2, 6.3 Гц, 1H), 5.16 (дд, J = 7.2, 6.3 Гц, 1H), 6.27 (д, J = 2.3 Гц, 1H), 7.48 (д, J = 2.3 Гц, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-[3-[(4S)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил]пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (76c)
Используя методику, описанную в Примере 1 (стадия 7), промежуточный продукт (1g) (250 мг, 0.82 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (76b) (165 мг, 0.98 ммоль) в промежуточный продукт (76c) (163 мг, 0.36 ммоль, 44%) в виде коричневого масла после очистки методом хроматографии на силикагеле (циклогексан/EtOAc: от 100/0 до 0/100).
+
MS m/z ([M+H]) 347.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.46 (с, 3H), 1.50 (с, 3H), 3.15 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.54 (ддд, J = 10.8, 3.1, 1.0 Гц, 1H), 3.99 (дд, J = 8.4, 7.2 Гц, 1H), 4.10 (дд, J = 5.6, 2.7 Гц, 1H), 4.14-4.22 (м, 1H), 4.27-4.36 (м, 1H), 4.38-4.52 (м, 3H), 5.14 (т, J = 6.8 Гц, 1H), 5.30-5.42 (м, 2H), 5.97-6.11 (м, 1H), 6.40-6.43 (м, 1H), 6.43-6.48 (м, 1H), 7.54-7.59 (м, 1H).
Стадия 4: получение промежуточного продукта 6-гидрокси-3-[3-[(4S)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил]пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (76d)
3
4
3
4
Раствор промежуточного продукта (76c) (163 мг, 0.36 ммоль) в безводном дихлорметане (3.6 мл) дегазировали 10 минут в атмосфере аргона. AcOH (41 мкл, 0.72 ммоль) и Pd(PPh) (210 мг, 0.18 ммоль) последовательно добавляли. После перемешивания в течение 1.5 часов при комнатной температуре, последовательно добавляли AcOH (10 мкл, 0.17 ммоль) и Pd(PPh) (50 мг, 0.04 ммоль). После перемешивания в течение еще 2 часов при комнатной температуре, смесь упаривали в вакууме. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (76d) (95 мг) в виде желтого масла, загрязненного трифенилфосфиноксидом.
+
MS m/z ([M+H]) 307.
Стадия 5: получение промежуточного продукта триметиламмония [3-[3-[(4S)-2,2-диметил-1,3-диоксолан-4-ил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (76e)
В раствор промежуточного продукта (76d) (95 мг) в смеси tBuOH (1.1 мл) и воды (1.1 мл) в инертной атмосфере добавляли комплекс триоксида серы с триметиламином (36 мг, 0.26 ммоль) и триэтиламин (8 мкл, 0.05 ммоль). После перемешивания в течение 16 часов, полученную гетерогенную смесь упаривали в вакууме. Сырой продукт очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (вода/ACN: от 98/2 до 0/100), получая промежуточный продукт (76e) (46 мг, 0.10 ммоль, 28% за 2 стадии) в виде коричневого порошка.
+
MS m/z ([M+H]) 387/307.
-
MS m/z ([M-H]) 385.
Стадия 6: получение натрия [3-[3-[(1S)-1,2-дигидроксиэтил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (пример 76)
2
2
Промежуточный продукт (76e) (46 мг, 0.10 ммоль) растворяли в смеси ДХМ/ТФУК (3:1) (260 мкл) при 0°C в инертной атмосфере. После перемешивания в течение 1 часа 15 минут, добавляли холодный EtO (3 мл) при 0°C. После перемешивания в течение 10 минут при 0°C, осадок отфильтровывали и промывали холодным EtO и холодным ACN. Фильтрат упаривали в вакууме. Полученное твердое вещество наносили на колонку Dowex в натриевой форме (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая белое твердое вещество, которое очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (вода/ACN: от 99/1 до 95/5), получая пример (76) (0.5 мг, 0.0001 ммоль, 1%) в виде белого порошка загрязненного (1S)-1-(1H-пиразол-3-ил)этан-1,2-диолом.
+
MS m/z ([M+H]) 347.
-
MS m/z ([M-H]) 345.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 3.39 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.63 (дд, J = 11.4, 2.7 Гц, 1H), 3.70-3.82 (м, 2H), 4.29-4.33 (м, 2H), 4.51 (дд, J = 5.7, 2.7 Гц, 1H), 4.74-4.86 (м, 1H), 6.44 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 6.55 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 7.82 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Пример 77: синтез [3-[3-[тиазол-5-карбонил]амино]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 5-тиазолкарбонилхлорида(77a)
В запаянную пробирку помещали тиазолкарбоновую кислоту (400 мг, 3.10 ммоль) в тионилхлориде (2.3 мл) и нагревали при 80°C в течение 5 часов. Смесь затем упаривали при пониженном давлении (дважды упаривали совместно с толуолом), получая промежуточный продукт (77a) (422 мг, 2.87 ммоль, 92%) в виде желтого твердого вещества, которое использовали далее без дополнительной очистки.
Стадия 2: получение промежуточного продукта 5-[[N-[6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил]пиразол-3-ил]карбамоил]тиазол-2-ила (77b)
В раствор промежуточного продукта (13b) (100 мг, 0.38 ммоль) в ДМА (1 мл) в инертной атмосфере при 0°C по каплям добавляли раствор промежуточного продукта (77a) (84 мг, 0.57 ммоль) в ДМА (0.9 мл). После перемешивания в течение 45 минут при комнатной температуре, реакцию гасили водой (20 мл) и перемешивали при 0°C в течение 10 минут. Образовавшийся осадок фильтровали, дважды промывали водой и затем пентаном, сушили при пониженном давлении, получая промежуточный продукт (77b) (87 мг, 0.23 ммоль, 61%) в виде не совсем белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 373.
1
6
H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d) δ (м.д.): 3.28 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.33 (дд, J = 10.8, 2.1 Гц, 1H), 4.21-4.25 (м, 2H), 4.29 (дд, J = 5.6, 2.4 Гц, 1H), 4.37-4.41 (м, 2H), 5.27 (дд, J = 10.4, 1.6 Гц, 1H), 5.37 (дд, J = 17.3, 1.6 Гц, 1H), 5.91-6.01 (м, 1H), 6.55 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 6.79 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 8.11 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 8.79 (с, 1H), 9.29 (с, 1H), 11.43 (ушир.с, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта трет-бутил N-[5-[[N-[6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил]пиразол-3-ил]карбамоил]тиазол-2-ил] карбамата (77c)
2
3
В раствор промежуточного продукта (77b) (72 мг, 0.19 ммоль) в ДХМ (1.9 мл) в инертной атмосфере при комнатной температуре последовательно добавляли BocO (63 мг, 0.29 ммоль), EtN (41мкл, 0.29 ммоль) и DMAP (24 мг, 0.19 ммоль). После перемешивания при комнатной температуре в течение 4 часов, смесь упаривали досуха. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/EtOAc: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (77c) (63 мг, 0.13 ммоль, 64%) в виде оранжевого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 473.
1
3
H ЯМР (300 МГц, CDCl) δ (м.д.): 1.45 (с, 9H), 3.10 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.51 (дд, J = 10.8, 1.8 Гц, 1H), 4.08 (дд, J = 5.6, 2.5 Гц, 1H), 4.11 (дд, J = 17.8, 1.8 Гц, 1H), 4.32 (дд, J = 17.8, 1.1 Гц, 1H), 4.36-4.48 (м, 2H), 5.31 (дд, J = 10.3, 1.5 Гц, 1H), 5.36 (дд, J = 17.2, 1.5 Гц, 1H), 5.96-6.06 (м, 1H), 6.37 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 6.44 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 7.60 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 8.23 (д, J = 0.7 Гц, 1H), 8.91 (д, J = 0.7 Гц, 1H).
Стадия 4: получение промежуточного продукта трифенил(аллил)фосфония [3-[3-[трет-бутоксикарбонил-[тиазол-5-карбонил]амино]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил] сульфата (77d)
Используя методику, описанную в Примере (2) (стадия 2), промежуточный продукт (77c) (63 мг, 0.13 ммоль) превращали в промежуточный продукт (77d) (9 мг, 0.011 ммоль, 98%) в виде белого твердого вещества после очистки на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100).
+
MS m/z ([M+H]) 513/433.
-
MS m/z ([M-H]) 511.
Стадия 5: получение [3-[3-[тиазол-5-карбонил]амино]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата (Пример 77)
2
2
Раствор промежуточного продукта (77d) (9 мг, 0.011 ммоль) в смеси ДХМ/ТФУК (3:1) (0.6 мл) в инертной атмосфере при 0°C перемешивали в течение 1 часа, затем добавляли EtO (1 мл) и продолжали перешивать при 0°C 5 минут. Растворители удаляли и добавляли в остаток EtO (1 мл), и продолжали перешивать при комнатной температуре 5 минут. Эту последовательность действий повторяли два раза с диэтиловым эфиром (1 мл) и затем два раза с ACN (1 мл), получая пример (77) (0.5 мг, 0.001 ммоль, 1%) в виде белого твердого вещества после очистки методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (ACN/вода: от 2/98 до 30/70).
+
MS m/z ([M+H]) 413.
1
2
H ЯМР (300 МГц, DO) δ (м.д.): 2.94 (д, J = 12.8 Гц, 1H), 3.25 (д, J = 12.8, 1.8 Гц, 1H), 3.47 (д, J = 11.2 Гц, 1H), 3.72 (дд, J = 11.2, 1.8 Гц, 1H), 4.60 (дд, J = 5.7, 2.6 Гц, 1H), 6.64 (д, J = 5.7 Гц, 1H), 6.73 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.90 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 8.55 (с, 1H), 9.22 (с, 1H).
Пример 78: синтез натрия [3-(2-оксазолил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта (E)-3-(диметиламино)-1-(2-оксазолил)-проп-2-ен-1-она (78a)
2
4
В инертной атмосфере разбавляли 1-(оксазол-2-ил)этанон (500 мг, 4.50 ммоль) диметилацеталем N,N-диметилформамида (0.74 мл, 5.60 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 100°C в течение 16 часов. Смесь затем разбавляли водой (5 мл) и добавляли ДХМ (5 мл). Водный слой экстрагировали дихлорметаном (5×5 мл), объединенные органические слои сушили над NaSO, фильтровали и упаривали, получая промежуточный продукт (78a) (656 мг, 3.95 ммоль, 88%) в виде оранжевого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 167.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 2.96 (с, 3H), 3.18 (с, 3H), 6.01 (д, J = 10.3 Гц, 1H), 7.23 (д, J = 0.7 Гц, 1H), 7.74 (д, J = 0.7 Гц, 1H), 7.93 (д, J = 10.3 Гц, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 3-(2-оксазолил)-1H-пиразола (78b)
В колбе, снабженной обратным холодильником, промежуточный продукт (78a) (656 мг, 3.95 ммоль) солюбилизировали в EtOH (39 мл). Добавляли гидразин (0.76 мл, 7.77 ммоль), и смесь нагревали при 90°C. Через 1 час реакционную смесь упаривали. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 20/80), получая промежуточный продукт (78b) (374 мг, 2.77 ммоль, 70%) в виде желтого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 136.
-
MS m/z ([M-H]) 134.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 6.92 (д, J = 2.3 Гц, 1H), 7.31 (д, J = 0.8 Гц, 1H), 7.75 (д, J = 0.8 Гц, 1H), 7.85 (д, J = 2.3 Гц, 1H), 8.22 (ушир.с, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта 6-аллилокси-3-[3-(2-оксазолил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-7-она (78c)
2
3
2
4
В инертной атмосфере промежуточный продукт (1g) (200 мг, 0.653 ммоль) разбавляли безводным диметилсульфоксидом (6.5 мл). Последовательно добавляли промежуточный продукт (78b) (106 мг, 0.784 ммоль), безводный KCO (271 мг, 1.96 ммоль), CuI (12 мг, 0.065 ммоль) и N,N-диметилглицина гидрохлорид (14 мг, 0.098 ммоль). Полученную суспензию синего цвета нагревали при 100°C. Через 18 часов смесь разбавляли водой (20 мл) и добавляли EtOAc (20 мл). Водный слой экстрагировали этилацетатом (5x20 мл), объединенные органические слои промывали водой и сушили над NaSO, фильтровали и упаривали. Полученное сырое соединение очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 50/50), получая промежуточный продукт (78c) (55 мг, 0.176 ммоль, 25%) в виде желтого масла.
+
MS m/z ([M+H]) 314.
-
MS m/z ([M-H]) 312.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 3.16 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 3.56 (д, J = 10.8 Гц, 1H), 4.13 (дд, J = 5.5/2.5 Гц, 1H), 4.30 (дд, J = 17.8/2.5 Гц, 1H), 4.38-4.50 (м, 2H), 4.51 (д, J = 17.8 Гц, 1H), 5.31 (ддд, J = 10.3/1.7/1.0 Гц, 1H), 5.38 (ддд, J = 17.2/1.7/1.4 Гц, 1H), 5.97-6.07 (м, 1H), 6.62 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 6.94 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.24 (с, 1H), 7.68 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.73 (с, 1H).
Стадия 4: получение натрия [3-(2-оксазолил)пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1] окт-3-ен-6-ил сульфата (Пример 78)
3
4
2

В инертной атмосфере промежуточный продукт (78c) (49 мг, 0.156 ммоль) разбавляли безводным дихлорметаном (1.6 мл). Последовательно добавляли AcOH (18 мкл, 0.316 ммоль) и Pd(PPh) (91 мг, 0.078 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем добавляли в реакционную смесь безводный пиридин (1.6 мл) и комплекс триоксида серы с пиридином (125 мг, 0.782 ммоль). Полученную суспензию защищали от света и перемешивали в течение ночи до полного завершения реакции. Реакционную смесь упаривали и растирали в дихлорметане, затем фильтровали. Фильтрат упаривали и очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100). Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли и упаривали. Остаток растворяли в минимальном количестве HO/ACN (2:1) и конвертировали пропусканием через ионообменную колонку Dowex с натриевой формой сорбента (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH), получая пример (78) (18 мг, 0.043 ммоль, 36%) в виде не совсем белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 354/274.
-
MS m/z ([M-H]) 352.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO) δ 3.50 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.74 (дд, J = 11.3/2.6 Гц, 1H), 4.42-4.48 (м, 2H), 4.64 (дд, J = 5.6/2.6 Гц, 1H), 6.78 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 6.97 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.33 (т, J = 0.9 Гц, 1H), 7.97 (д, J = 0.9 Гц, 1H), 8.04 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Пример 79: синтез [7-оксо-3-[3-(1,2,4-тиадиазол-5-илкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта 1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-N-(1,2,4-тиадиазол-5-ил)пиразол-3-карбоксамида (79a)
3
2
4
В инертной атмосфере промежуточный продукт (36c) (150 мг, 0.52 ммоль) разбавляли в безводном ДМФА (3 мл). Последовательно добавляли HATU (198 мг, 0.52 ммоль), DIPEA (91 мкл, 0.52 ммоль) и 1,2,4-тиадиазол-5-амин (53 мг, 0.52 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Затем смесь разбавляли водой. Водный слой экстрагировали этилацетатом. Органические слои объединяли, промывали насыщенным раствором NaHCO, сушили над NaSO, фильтровали и упаривали. Полученное сырое соединение очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 60/40), получая промежуточный продукт (79a) (194 мг, 0.71 ммоль, количественный выход) в виде бесцветного масла.
+
MS m/z ([M+H]) 374.
-
MS m/z ([M-H]) 372.
1
3
H-ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 3.18 (д, J = 11.0 Гц, 1H), 3.59 (дд, J = 2.1, 11.0 Гц, 1H), 4.18 (дд, J = 2.6, 5.5 Гц, 1H), 4.23 (дд, J = 1.9, 17.6 Гц, 1H), 4.40-4.50 (м, 3H), 5.30-5.42 (м, 2H), 5.98-6.08 (м, 1H), 6.67 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 6.68 (ушир.с, 1H), 7.07 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.76 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 8.37 (с, 1H).
Стадия 2: получение [7-оксо-3-[3-(1,2,4-тиадиазол-5-илкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата (Пример 79)
3
4
В раствор промежуточного продукта (79a)(130 мг, 0.35 ммоль) в безводном дихлорметане (3 мл) добавляли ледяную AcOH (40 мкл, 0.70 ммоль) и Pd(PPh) (203 мг, 0.18 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, затем добавляли пиридин (3 мл) и комплекс триоксида серы с пиридином (280 мг, 1.75 ммоль). Полученную суспензию защищали от света и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь упаривали, разбавляли дихлорметаном и фильтровали. Фильтрат упаривали в вакууме и затем очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100). Твердое вещество растирали в ацетонитриле, получая пример (79) (14 мг, 0.03 ммоль, 10% за две стадии) в виде бежевого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 414.
-
MS m/z ([M-H]) 412.
1
2
H-ЯМР (300 МГц, DO): δ (м.д.) 3.50 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.75 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 4.46 (м, 2H), 4.66 (дд, J = 2.4, 5.6 Гц, 1H), 6.81 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 7.07 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 8.05 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 8.41 (с, 1H).
Пример 80: синтез натрия [7-оксо-3-[3-(2-пиридилкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта N-(2-пиридил)-1H-пиразол-3-карбоксамида (80a)
Дикетопиперазин (200 мг, 1.06 ммоль) и 2-аминопиридин (300 мг, 3.19 ммоль) разбавляли в ТГФ (2 мл). Реакционную смесь нагревали при 70°C в течение 4 часов. После охлаждения до комнатной температуры, смесь фильтровали, промывали ацетонитрилом и диэтиловым эфиром, получая промежуточный продукт (80a) (129 мг, 0.62 ммоль, 29%) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 189.
-
MS m/z ([M-H]) 187.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 7.03 (д, J = 2.4 Гц, 1H), 7.16 (ддд, J = 7.4/4.4/1.0 Гц, 1H), 7.70 (д, J = 2.4 Гц, 1H), 7.86 (ддд, J = 8.5/7.4/1.9 Гц, 1H), 8.37 (д, J = 4.4 Гц, 1H), 8.53 (д, J = 8.5 Гц, 1H), 10.10 (ушир.с, 1H).
Стадия 2: получение промежуточного продукта 1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-N-(2-пиридил)пиразол-3-карбоксамида (80b)
2
3
2
4
В инертной атмосфере, промежуточный продукт (1g) (150 мг, 0.49 ммоль) разбавляли безводным диметилсульфоксидом (4.9 мл). Последовательно добавляли промежуточный продукт (80a) (111 мг, 0.59 ммоль), безводный KCO (203 мг, 1.47 ммоль), CuI (9 мг, 0.05 ммоль) и N,N-диметилглицина гидрохлорид (10 мг, 0.07 ммоль). Полученную суспензию синего цвета нагревали при 100°C. Через 18 часов смесь разбавляли водой (20 мл) и добавляли EtOAc (20 мл). Водный слой экстрагировали этилацетатом (4x20 мл), и объединенные органические слои сушили над NaSO, фильтровали и упаривали. Полученное сырое соединение очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 50/50), получая промежуточный продукт (80b) (79 мг, 0.19 ммоль, 40%) в виде желтого масла.
+
MS m/z ([M+H]) 367.
-
MS m/z ([M-H]) 365.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 3.17 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.57 (дд, J = 10.9/1.7 Гц, 1H), 4.14 (дд, J = 5.6/2.6 Гц, 1H), 4.24 (дд, J = 17.6/1.9 Гц, 1H), 4.39-4.51 (м, 2H), 4.50 (д, J = 17.6 Гц, 1H), 5.32 (ддд, J = 10.3/1.7/1.0 Гц, 1H), 5.38 (ддд, J = 17.2/1.7/1.4 Гц, 1H), 5.98-6.08 (м, 1H), 6.63 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 6.99 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.06 (ддд, J = 7.4/4.8/1.1 Гц, 1H), 7.67 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.74 (ддд, J = 8.9/7.4/1.7 Гц, 1H), 8.32-8.34 (м, 2H), 9.21 (ушир.с, 1H).
Стадия 3: получение натрия [7-оксо-3-[3-(2-пиридилкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 80)
3
4
2

В инертной атмосфере, промежуточный продукт (80b) (79 мг, 0.19 ммоль) разбавляли безводным дихлорметаном (2.2 мл). Последовательно добавляли AcOH (25 мкл, 0.43 ммоль) и Pd(PPh) (125 мг, 0.11 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем добавляли в реакционную смесь безводный пиридин (2.2 мл) и комплекс триоксида серы с пиридином (2 мг, 1.08 ммоль). Полученную суспензию защищали от света и перемешивали в течение ночи до полного завершения реакции. Реакционную смесь упаривали и растирали в дихлорметане, затем фильтровали. Фильтрат упаривали и затем очищали методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100). Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли и упаривали. Остаток растворяли в минимальном количестве смеси HO/ACN (1:1) и конвертировали пропусканием через ионообменную колонку Dowex с натриевой формой сорбента (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH), получая пример (80) (8 мг, 0.02 ммоль, 8%) в виде желтого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 407/327.
-
MS m/z ([M-H]) 405.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO) δ 3.49 (д, J = 11.3 Гц, 1H), 3.74 (дд, J = 11.3/2.6 Гц, 1H), 4.44 (дд, J = 18.1/1.4 Гц, 1H), 4.49 (д, J = 18.1 Гц, 1H), 4.64 (дд, J = 5.7/2.6 Гц, 1H), 6.77 (д, J = 5.7 Гц, 1H), 6.97 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.24-7.30 (м, 1H), 7.88-7.91 (м, 2H), 8.00 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 8.34 (д, J = 5.1 Гц, 1H).
Пример 82: синтез [7-оксо-3-[3-[[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамоил]пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта трет-бутил (3S)-3-(1H-пиразол-3-карбониламино)пирролидин-1-карбоксилата (82a)
Смесь дипиразоло[3,1-a:3',1'-d]пиразин-4,9-диона (200 мг, 1.06 ммоль) и (S)-1-Boc-3-аминопирролидина (396 мг, 2.12 ммоль) в ТГФ (10 мл) нагревали при 80°C в течение 1 часа. Смесь упаривали в вакууме, получая промежуточный продукт (82a), который использовали далее без дополнительной очистки.
-
MS m/z ([M-H]) 279.
Стадия 2: получение промежуточного продукта трет-бутил (3S)-3-[[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-карбонил]амино]пирролидин-1-карбоксилата (82b)
Используя методику, описанную в Примере (2) (стадия 1a), промежуточный продукт (1g) (200 мг, 0.65 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (82a) (192 мг, 0.69 ммоль) в промежуточный продукт (82b) (190 мг, 0.41 ммоль, 63%) после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон от 100/0 до 60/40).
+
+
MS m/z ([M+H-tBu]) 403, ([M+H-Boc]) 359.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 1.47 (с, 9H), 1.87-2.05 (м, 1H), 2.19-2.31 (м, 1H), 3.15 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.19-3.37 (м, 1H), 3.39-3.61 (м, 3H), 3.66-3.79 (м, 1H), 4.04-4.22 (м, 2H), 4.33-4.55 (м, 3H), 4.56-4.68 (м, 1H), 5.23-5.46 (м, 2H), 5.93-6.11 (м, 1H), 6.56 (м, 1H), 6.83 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 6.88 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.62 (ушир.с, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта натрия [3-[3-[[(3S)-1-трет-бутоксикарбонилпирролидин-3-ил]карбамоил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (82c)
Используя методику, описанную в Примере (2) (стадия 2), промежуточный продукт (82b) (190 мг, 0.41 ммоль) превращали в промежуточный продукт (82c) (103 мг, 0.20 ммоль, 48% за 3 стадии) в виде белого твердого вещества.
-
MS m/z ([M]) 497.
Стадия 4: получение [7-оксо-3-[3-[[(3S)-пирролидин-3-ил]карбамоил]пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата (Пример 82)
2
В раствор промежуточного продукта (82c) (50 мг, 0.10 ммоль) в ДХМ (1 мл) при 0°C добавляли ТФУК (0.5 мл). Смесь выдерживали при 0°C в течение 1 часа. Добавляли EtO и осадок отфильтровывали. Твердое вещество растирали в ACN, затем фильтровали. Полученное твердое вещество очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (вода/ACN: от 98/2 до 0/100), получая пример (82) (8 мг, 0.02 ммоль, 21%) в виде смеси диастереоизомеров.
+
MS m/z ([M+H]) 399.
-
MS m/z ([M-H]) 397.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO) δ (м.д.) 2.14-2.28 (м, 1H), 2.39-2.53 (м, 1H), 3.38-3.53 (м, 3H), 3.55-3.76 (м, 3H), 4.40 (с, 2H), 4.61 (дд, J = 5.7, 2.6 Гц, 1H), 4.64-4.73 (м, 1H), 6.74 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 6.84 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 7.94 и 7.95 (д, J = 2.7 Гц, 1H).
Пример 83: синтез [7-оксо-3-[3-[[(3R)-пирролидин-3-ил]карбамоил]пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата
Стадия 1: получение промежуточного продукта трет-бутил (3R)-3-(1H-пиразол-3-карбониламино)пирролидин-1-карбоксилата (83a)
Смесь дипиразоло[3,1-a:3',1'-d]пиразин-4,9-диона (200 мг, 1.06 ммоль) и (R)-1-Boc-3-аминопирролидина (396 мг, 2.12 ммоль) в ТГФ (10 мл) нагревали при 80°C в течение 1 часа. Смесь упаривали в вакууме, получая промежуточный продукт (83a), который использовали далее без дополнительной очистки.
-
MS m/z ([M-H]) 279.
Стадия 2: получение промежуточного продукта трет-бутил (3R)-3-[[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-карбонил]амино]пирролидин-1-карбоксилата (83b)
Используя методику, описанную в Примере (2) (стадия 1a), промежуточный продукт (1g) (200 мг, 0.65 ммоль) превращали реакцией с промежуточным продуктом (83a) (192 мг, 0.69 ммоль) в промежуточный продукт (83b) (198 мг, 0.43 ммоль, 66%) после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон от 100/0 до 60/40).
+
+
MS m/z ([M+H-tBu]) 403, ([M+H-Boc]) 359.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl) δ 1.47 (с, 9H), 1.87-2.05 (м, 1H), 2.19-2.31 (м, 1H), 3.15 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.19-3.37 (м, 1H), 3.39-3.61 (м, 3H), 3.66-3.79 (м, 1H), 4.04-4.22 (м, 2H), 4.33-4.55 (м, 3H), 4.56-4.68 (м, 1H), 5.23-5.46 (м, 2H), 5.93-6.11 (м, 1H), 6.56 (м, 1H), 6.83 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 6.88 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.62 (ушир.с, 1H).
Стадия 3: получение промежуточного продукта натрия [3-[3-[[(3R)-1-трет-бутоксикарбонилпирролидин-3-ил]карбамоил]пиразол-1-ил]-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (83c)
Используя методику, описанную в Примере (2) (стадия 2), промежуточный продукт (83b) (198 мг, 0.43 ммоль) превращали в промежуточный продукт (83c) (98 мг, 0.19 ммоль, 43% за 3 стадии) в виде белого твердого вещества.
-
MS m/z ([M]) 497.
Стадия 4: получение [7-оксо-3-[3-[[(3R)-пирролидин-3-ил]карбамоил]пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] гидросульфата (Пример 83)
Следуя методике, описанной в Примере (82) (стадия 4), промежуточный продукт (83c) (80 мг, 0.15 ммоль) превращали в Пример (83) (26 мг, 0.07 ммоль, 42%) в виде смеси диастереомеров.
+
MS m/z ([M+H]) 399.
-
MS m/z ([M-H]) 397.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO) δ (м.д.) 2.10-2.29 (м, 1H), 2.35-2.57 (м, 1H), 3.34-3.54 (м, 3H), 3.56-3.76 (м, 3H), 4.37 (с, 2H), 4.59 (дд, J = 5.7, 2.6 Гц, 1H), 4.62-4.71 (м, 1H), 6.70 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 6.79 и 6.80 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.89 и 7.90 (д, J = 2.6, 1H).
Пример 84: синтез натрия [7-оксо-3-[3-(1,3,4-тиадиазол-2-илкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: Получение 1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-N-(1,3,4-тиадиазол-2-ил)пиразол-3-карбоксамида (84a)
Следуя методике, описанной в Примере (79) (стадия 1), промежуточный продукт (36c) (80 мг, 0.28 ммоль) превращали реакцией с 1,3,4-тиадиазол-2-амином (28 мг, 0.28 ммоль) в промежуточный продукт (84a) (8 мг, 0.02 ммоль, 8%) после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100) и растирания в ДХМ.
+
MS m/z ([M+H]) 374.
-
MS m/z ([M-H]) 372.
1
H ЯМР (400 МГц, MeOD): δ (м.д.) 3.33-3.35 (м, 1H), 3.52-3.54 (м, 1H), 4.32 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 4.36 (дд, J = 2.1, 17.6 Гц, 1H), 4.42-4.46 (м, 2H), 4.49 (д, J = 17.6 Гц, 1H), 5.28-5.42 (м, 2H), 6.01-6.08 (м, 1H), 6.83 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 7.05 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 8.15 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 9.09 (с, 1H).
Стадия 2: Получение 1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)-N-(1,3,4-тиадиазол-2-ил)пиразол-3-карбоксамида (84b)
3
4
2
В инертной атмосфере, в суспензию промежуточного продукта (84a) (8.1 мг, 0.02 ммоль) в безводном дихлорметане (155 мкл) последовательно добавляли AcOH (3 мкл, 0.04 ммоль) и Pd(PPh) (13 мг, 0.01 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Добавляли EtO в полученную суспензию, и осадок отфильтровывали, получая промежуточный продукт (84b) (5 мг, 0.016 ммоль, 71%) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 334.
-
MS m/z ([M-H]) 332.
1
6
H ЯМР (400 МГц, ДМСО-d): δ (м.д.) 3.25 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.35-3.40 (м, 1H), 4.09 (дд, J = 5.5, 2.5 Гц, 1H), 4.23 (дд, J = 17.6, 1.9 Гц, 1H), 4.38 (д, J = 17.6 Гц, 1H), 6.93 (ушир.с, 1H), 7.11 (ушир.с, 1H), 8.39 (с, 1H), 9.19 (ушир.с, 1H), 11.93 (ушир.с, 1H), 12.87 (ушир.с, 1H).
Стадия 3: Получение натрия [7-оксо-3-[3-(1,3,4-тиадиазол-2-илкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 84)
2
3
3
3

В раствор промежуточного продукта (84b) (5 мг, 0.016 ммоль) в смеси tBuOH/HO (1:1) (160 мкл) добавляли NMeSO (3 мг, 0.018 ммоль) и EtN (0.5 мкл, 0.004 ммоль). Полученную суспензию защищали от света и перемешивали в течение 45 минут при комнатной температуре. Смесь упаривали в вакууме и затем очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (вода/ACN: от 95/5 до 0/100). Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли, замораживали и лиофилизовали. Остаток растворяли в смеси вода/ACN (9:1) и конвертировали пропусканием через ионообменную колонку Dowex с натриевой формой сорбента (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали, получая пример (84) (4 мг, 0.009 ммоль, 69% за 2 стадии) в виде не совсем белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 414.
-
MS m/z ([M-H]) 412.
1
2
H ЯМР (400 МГц, DO): δ (м.д.) 3.50 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.75 (дд, J = 11.4, 2.4 Гц, 1H), 4.46 (м, 2H), 4.65 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 6.78 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 7.04 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 8.01 (д, J = 2.7 Гц, 1H), 9.12 (с, 1H).
Пример 85: синтез натрия [7-оксо-3-[3-(пиразол-3-илкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата
Стадия 1: получение трет-бутил 3-[[1-(6-аллилокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-карбонил]амино]пиразол-1-карбоксилата (85a)
Следуя методике, описанной в Примере (79) (стадия 1), промежуточный продукт (36c) (130 мг, 0.45 ммоль) превращали реакцией с трет-бутил 3-аминопиразол-1-карбоксилатом (82 мг, 0.45 ммоль) в промежуточный продукт (85a) (117 мг, 0.26 ммоль, 57%) после очистки методом флэш-хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100).
+
MS m/z ([M+H]) 456.
-
MS m/z ([M-H]) 454.
1
3
H ЯМР (400 МГц, CDCl): δ (м.д.) 1.66 (с, 9H), 3.18 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.57 (дд, J = 10.9, 2.1 Гц, 1H), 4.15 (дд, J = 5.5, 2.5 Гц, 1H), 4.22 (дд, J = 17.6, 1.9 Гц, 1H), 4.39-4.52 (м, 3H), 5.30-5.43 (м, 2H), 5.98-6.09 (м, 1H), 6.60 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 6.97 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.07 (д, J = 2.9 Гц, 1H), 7.67 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 8.01 (д, J = 2.9 Гц, 1H), 9.31 (с, 1H).
Стадия 2: получение трет-бутил 3-[[1-(6-гидрокси-7-оксо-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-3-ил)пиразол-3-карбонил]амино]пиразол-1-карбоксилата (85b)
3
4
В инертной атмосфере в раствор промежуточного продукта (85a) (115 мг, 0.25 ммоль) в безводном дихлорметане (1.8 мл) последовательно добавляли AcOH (29 мкл, 0.51 ммоль) и Pd(PPh) (146 мг, 0.13 ммоль). После перемешивания в течение 1 часа, смесь упаривали в вакууме, и остаток очищали методом хроматографии на силикагеле (ДХМ/ацетон: от 100/0 до 0/100), получая промежуточный продукт (85b) (105 мг, 0.25 ммоль, количественный выход) в виде бледно-желтого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 416.
-
MS m/z ([M-H]) 414.
1
H ЯМР (400 МГц, MeOD): δ (м.д.) 1.65 (с, 9H), 3.30 (д, J = 10.9 Гц, 1H), 3.53 (дд, J = 10.9, 2.4 Гц, 1H), 4.13 (дд, J = 5.5, 2.6 Гц, 1H), 4.33 (дд, J = 17.7, 2.0 Гц, 1H), 4.45 (дд, J = 17.7, 1.1 Гц, 1H), 6.85 (д, J = 5.5 Гц, 1H), 6.96 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 7.00 (д, J = 2.9 Гц, 1H), 8.12 (д, J = 2.6 Гц, 1H), 8.15 (д, J = 2.9 Гц, 1H).
Стадия 3: получение натрия [7-оксо-3-[3-(пиразол-3-илкарбамоил)пиразол-1-ил]-1,6-диазабицикло[3.2.1]окт-3-ен-6-ил] сульфата (Пример 85)
2
3
3
2
2
.

В раствор промежуточного продукта (85b) (102 мг, 0.25 ммоль) в смеси t-BuOH/HO (1:1) (1.2 мл) добавляли NMeSO (41 мг, 0.30 ммоль) и TEA (9 мкл, 0.06 ммоль). Полученную суспензию защищали от света и перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре. Смесь упаривали в вакууме и затем очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (вода/ACN: от 95/5 до 0/100). Фракции, содержащие целевой продукт, объединяли, замораживали и лиофилизовали. Остаток растворяли в смеси HO/ACN (9:1) и конвертировали пропусканием через ионообменную колонку Dowex с натриевой формой сорбента (Dowex 50WX8 протонная форма, хранившаяся с 2н. водным раствором NaOH и промытая водой до нейтрального значения pH). Фракции, содержащие целевое соединение, объединяли, замораживали и лиофилизовали. Остаток очищали методом флэш-хроматографии на С-18 обращенно-фазном силикагеле (HO/ACN: от 98/2 до 0/100). Фракции, содержащие целевой промежуточный продукт, упаривали в вакууме, получая пример (85) (10 мг, 0.02 ммоль, 6% за 2 стадии) в виде белого твердого вещества.
+
MS m/z ([M+H]) 396.
-
MS m/z ([M-H]) 394.
1
2
H-ЯМР (400 МГц, DO) δ (м.д.) 3.51 (д, J = 11.4 Гц, 1H), 3.74 (дд, J = 11.4, 2.4 Гц, 1H), 4.48-4.51 (м, 2H), 4.65 (дд, J = 5.6, 2.6 Гц, 1H), 6.55-6.60 (м, 1H), 6.83 (д, J = 5.6 Гц, 1H), 7.02 (д, J = 2.7 Гц, 0.6H), 7.06 (д, J = 2.7 Гц, 0.4H), 7.73-7.78 (м, 1H), 8.09 (д, J = 2.7 Гц, 0.6H), 8.19 (д, J = 2.7 Гц, 0.4H).
Пример 86: Биологическая активность
50
Метод 1: Ингибирование β-лактамазы, определение IC (таблицы 1 и 2)
50
Мониторинг ферментативной активности проводили посредством спектрофотометрической оценки гидролиза нитроцефина (NCF - TOKU-E, N005) при 485 нм, при комнатной температуре в буфере A: 100 мМ фосфат pH 7, 2% глицерин и 0.1 мг/мл альбумин бычьей сыворотки (Sigma, B4287). Ферменты клонировали в E. coli экспрессирующем векторе, экспрессировали и очищали по классическим методикам. В прозрачный полистирольный планшет (Corning, 3628) добавляли в каждую лунку 5 мкл ДМСО или разбавления ингибитора в ДМСО и 80 мкл фермента в буфере A. Планшеты немедленно считывали при 485 нм в спектрофотометре для считывания микропланшетов (BioTek, PowerWave HT), получая фоновые значения. После 30 минут преинкубирования при комнатной температуре, добавляли в каждую лунку 15 мкл NCF (финальная концентрация 200 мкМ). Финальные концентрации ферментов составляли 0.1 нМ (TEM-1), 0.075 нМ (SHV-1), 0.4 нМ (CTX-M-15), 1 нМ (KPC-2), 0.2 нМ (P99 AmpC), 0.2 нМ (CMY-37), 0.4 нМ (AmpC P. aeruginosa), 0.2 нМ (OXA-1), 1.2 нМ (OXA-11), 0.4 нМ (OXA-15) и 0.3 нМ (OXA-48). После 20 минут инкубирования при комнатной температуре, планшеты снова считывали при 485 нм. Ферментативную активность вычисляли путем вычитания фонового значения из финального сигнала, и переводили в величину ингибирования фермента, используя значения для лунок, не подвергавшихся ингибированию. Кривые IC приводили к классическим равновесным моделям Лэнгмюра с угловым коэффициентам Хилла с помощью XLFIT (IDBS).
50
Таблица 1: IC (мкМ) для ингибирования β-лактамазы
IC<sub>50</sub> β-лактамаза (мкМ)
(A)
(C)
TEM-1
SHV-1
CTX-M-15
KPC-2
AmpC (P99)
Пример 1
0.00025
0.0015
0.00055
0.013
0.030
Пример 2
0.00056
0.0040
0.00067
0.0047
0.010
Пример 3
0.00073
0.0097
0.0021
0.012
0.016
Пример 4
0.00081
0.0060
0.00066
0.077
0.27
Пример 5
0.00080
0.0044
0.00066
0.0030
0.016
Пример 6
0.00036
0.0019
0.00058
0.0021
0.0087
Пример 7
0.00072
0.0047
0.0027
0.012
0.021
Пример 8
0.00035
0.0025
0.00078
0.0033
0.0076
Пример 9
0.00041
0.0019
0.00050
0.022
0.015
Пример 10
0.00030
0.0032
0.0011
0.050
0.022
Пример 11
0.0012
0.0076
0.0014
0.012
0.027
Пример 12
0.00041
0.0021
0.00053
0.026
0.015
Пример 13
0.00065
0.0032
0.00062
0.0025
0.0026
Пример 14
0.00087
0.0040
0.0018
0.017
0.017
Пример 15
0.00079
0.0065
0.0015
0.12
0.080
Пример 16
0.00056
0.0034
0.0014
0.0046
0.013
Пример 17
0.00023
0.0010
0.00076
0.0037
0.030
Пример 18
0.00043
0.0028
0.00065
0.013
0.024
Пример 19
0.00038
0.0018
0.00090
0.0062
0.019
Пример 20
0.0013
0.0051
0.0030
0.12
0.23
Пример 21
0.0061
0.024
0.0037
0.27
0.23
Пример 22
0.00021
0.0011
0.00055
0.0030
0.017
Пример 23
0.00019
0.00036
0.0010
0.0057
0.038
Пример 24
0.00037
0.0024
0.00075
0.0052
0.012
Пример 25
0.00029
0.0012
0.00043
0.0025
0.0094
Пример 26
0.00023
0.0012
0.00072
0.0032
0.014
Пример 27
0.0011
0.0048
0.0012
0.010
0.033
Пример 28
0.00037
0.0022
0.00050
0.0048
0.010
Пример 29
0.00021
0.0011
0.00055
0.0087
0.025
Пример 30
0.00033
0.0027
0.0010
0.0053
0.028
Пример 31
0.0013
0.0044
0.00062
0.011
0.015
Пример 32
0.0011
0.0082
0.0010
0.0069
0.029
Пример 33
0.00067
0.0017
0.00072
0.011
0.0071
Пример 34
0.0010
0.0031
0.00092
0.0085
0.010
Пример 35
0.00073
0.0032
0.00050
0.013
0.012
Пример 37
0.00050
0.0032
0.00046
0.0029
0.0097
Пример 38
0.00043
0.0025
0.00070
0.0075
0.034
Пример 39
0.00021
0.0013
0.00056
0.0041
0.0095
Пример 40
0.00035
0.0018
0.00091
0.0034
0.0075
Пример 41
0.00058
0.0045
0.00091
0.057
0.036
Пример 42
0.00031
0.0015
0.00047
0.076
0.086
Пример 43
0.00085
0.0036
0.00087
0.029
0.012
Пример 44
0.00048
0.0033
0.00086
0.0073
0.013
Пример 45
0.0014
0.0045
0.0013
0.047
0.032
Пример 46
0.00089
0.0040
0.00070
0.011
0.025
Пример 47
0.0015
0.0091
0.0011
0.012
0.032
Пример 48
0.0014
0.0053
0.0024
0.13
0.11
Пример 49
0.0012
0.0085
0.0026
0.18
0.16
Пример 50
0.0012
0.0056
0.00059
0.012
0.012
Пример 51
0.00030
0.0019
0.00028
0.018
0.017
Пример 52
0.0019
0.0091
0.00067
0.011
0.016
Пример 55
0.00014
0.00061
0.00041
0.00082
0.0063
Пример 56
0.00017
0.0010
0.00044
0.0024
0.012
Пример 57
0.00037
0.0026
0.00075
0.011
0.021
Пример 59
0.00069
0.0025
0.00055
0.012
0.034
Пример 60
0.00035
0.0020
0.00073
0.014
0.027
Пример 61
0.0017
0.0061
0.0018
0.017
0.020
Пример 63
0.00086
0.0069
0.00053
0.0047
0.019
Пример 64
0.00052
0.0029
0.0010
0.0070
0.013
Пример 65
0.00027
0.0028
0.00096
0.0060
0.011
Пример 66
0.00036
0.0031
0.00054
0.0061
0.014
Пример 67
0.0012
0.0084
0.0013
0.020
0.038
Пример 68
0.00073
0.0028
0.0071
0.30
0.17
Пример 69
0.00061
0.0023
0.00095
0.032
0.018
Пример 70
0.00063
0.0023
0.0035
0.051
0.094
Пример 71
0.0014
0.0096
0.00078
0.042
0.019
Пример 72
0.00091
0.0067
0.00057
0.0070
0.043
Пример 73
0.0019
0.0098
0.0044
0.078
0.092
Пример 74
0.00034
0.0022
0.0011
0.0030
0.0095
Пример 76
0.0018
0.0073
0.0021
0.073
0.029
Пример 77
0.0011
0.0052
0.0015
0.011
0.011
Пример 78
0.00037
0.0015
0.00046
0.0027
0.014
Пример 79
0.00036
0.00098
0.00046
0.0044
0.014
Пример 80
0.00027
0.0014
0.00029
0.0026
0.0079
Пример 82
0.00058
0.0049
0.00089
0.010
0.032
Пример 83
0.00027
0.0038
0.00064
0.0079
0.024
Пример 84
0.00078
0.0027
0.0010
0.0085
0.025
Пример 85
0.00035
0.0016
0.00059
0.0034
0.011
50
Таблица 2: IC (мкМ) для ингибирования β-лактамазы (продолжение)
IC<sub>50</sub> β-лактамаза (мкМ)
(C)
(D)
CMY-37
AmpC (PAE)
OXA-1
OXA-11
OXA-15
OXA-48
Пример 1
0.033
0.12
0.12
0.092
0.092
0.0019
Пример 2
0.031
0.15
0.058
0.040
0.040
0.00059
Пример 3
0.024
0.059
0.20
0.085
0.19
0.0016
Пример 4
0.15
0.098
1.1
0.040
0.12
0.0051
Пример 5
0.036
0.14
0.049
0.014
0.027
0.00045
Пример 6
0.020
0.11
0.031
0.021
0.021
0.00038
Пример 7
0.022
0.40
0.25
0.093
0.055
0.0078
Пример 8
0.016
0.14
0.10
0.020
0.0053
0.0035
Пример 9
0.0093
0.029
0.41
0.31
0.055
0.0070
Пример 10
0.018
0.16
0.27
0.067
0.18
0.014
Пример 11
0.053
0.43
0.095
0.021
0.078
0.0077
Пример 12
0.014
0.052
0.20
0.070
0.19
0.012
Пример 13
0.0011
0.0087
0.027
0.0040
0.011
0.0019
Пример 14
0.010
0.021
0.082
0.034
0.052
0.0086
Пример 15
0.076
0.36
0.70
0.27
0.049
0.018
Пример 16
0.021
0.18
0.10
0.65
0.042
0.012
Пример 17
0.087
0.28
0.10
0.063
0.030
0.0058
Пример 18
0.018
0.043
0.096
0.046
0.078
0.0082
Пример 19
0.041
0.17
0.11
0.027
0.061
0.0052
Пример 20
0.14
0.91
6.2
7.1
0.14
0.068
Пример 21
0.099
0.32
2.1
1.4
0.29
0.045
Пример 22
0.012
0.078
0.18
0.22
0.0091
0.0046
Пример 23
0.054
0.22
1.5
1.1
0.76
0.11
Пример 24
0.016
0.16
0.076
0.095
0.048
0.0046
Пример 25
0.0092
0.13
0.037
0.0042
0.012
0.0017
Пример 26
0.036
0.13
0.033
0.0098
0.013
0.0078
Пример 27
0.028
0.35
0.13
0.069
0.11
0.0061
Пример 28
0.037
0.20
0.064
0.029
0.030
0.0038
Пример 29
0.035
0.19
0.15
0.031
0.051
0.0030
Пример 30
0.099
0.37
0.35
0.029
0.17
0.036
Пример 31
0.028
0.21
0.064
0.033
0.088
0.0030
Пример 32
0.059
0.21
0.079
0.027
0.039
0.0015
Пример 33
0.0032
0.032
0.068
0.0084
0.044
0.0031
Пример 34
0.0062
0.056
0.13
0.013
0.034
0.0094
Пример 35
0.0081
0.052
0.13
0.054
0.079
0.0060
Пример 37
0.015
0.20
0.073
0.021
0.032
0.0025
Пример 38
0.038
0.21
0.18
0.050
0.017
0.0032
Пример 39
0.0081
0.082
0.15
0.073
0.0085
0.0018
Пример 40
0.0083
0.26
0.15
0.095
0.0086
0.0063
Пример 41
0.021
0.088
0.75
0.18
0.040
0.0089
Пример 42
0.059
0.18
1.6
0.85
0.034
0.0091
Пример 43
0.0064
0.0094
0.098
0.039
0.14
0.0060
Пример 44
0.026
0.15
0.036
0.020
0.032
0.00029
Пример 45
0.019
0.066
0.30
0.092
0.31
0.018
Пример 46
0.016
0.16
0.14
0.049
0.17
0.0039
Пример 47
0.032
0.48
0.20
0.10
0.16
0.0067
Пример 48
0.080
0.31
0.94
0.20
0.51
0.036
Пример 49
0.15
1.3
0.67
0.38
0.51
0.046
Пример 50
0.0059
0.067
0.079
0.011
0.060
0.0057
Пример 51
0.0063
0.078
0.097
0.012
0.076
0.0038
Пример 52
0.0088
0.11
0.31
0.13
0.26
0.0075
Пример 55
0.035
0.23
0.026
0.025
0.0034
0.00027
Пример 56
0.038
0.29
0.030
0.037
0.0090
0.00048
Пример 57
0.031
0.55
0.066
0.17
0.0064
0.0011
Пример 59
0.072
0.59
0.21
0.17
0.0066
0.0012
Пример 60
0.068
0.33
0.13
0.13
0.0081
0.0012
Пример 61
0.041
1.1
0.11
0.36
0.019
0.00091
Пример 63
0.055
0.53
0.052
0.11
0.041
0.00097
Пример 64
0.043
0.37
0.086
0.096
0.0087
0.00070
Пример 65
0.013
0.49
0.053
0.27
0.0067
0.00080
Пример 66
0.026
0.25
0.087
0.14
0.0075
0.00064
Пример 67
0.10
0.72
0.27
0.25
0.018
0.0016
Пример 68
0.13
0.43
1.2
3.9
4.1
0.049
Пример 69
0.014
0.057
0.31
0.12
0.23
0.014
Пример 70
0.12
0.60
0.092
0.17
0.030
0.0062
Пример 71
0.010
0.047
0.45
0.26
0.055
0.012
Пример 72
0.086
0.54
0.10
0.036
0.043
0.0025
Пример 73
0.086
0.25
0.044
0.087
0.27
0.0037
Пример 74
0.025
0.11
0.022
0.020
0.048
0.0029
Пример 76
0.028
0.21
0.86
0.26
0.61
0.050
Пример 77
0.0071
0.058
0.14
0.016
0.046
0.0078
Пример 78
0.029
0.25
0.064
0.0065
0.024
0.0030
Пример 79
0.0086
0.095
0.065
0.019
0.046
0.0047
Пример 80
0.012
0.15
0.030
0.0055
0.011
0.00086
Пример 82
0.061
0.27
0.11
0.022
0.047
0.0032
Пример 83
0.063
0.23
0.037
0.024
0.032
0.0032
Пример 84
0.020
0.16
0.15
0.022
0.098
0.0072
Пример 85
0.014
0.13
0.022
0.0075
0.016
0.0017
Метод 2: MIC (минимальная подавляющая концентрация) соединений и синергия с цефтазидимом против бактериальных изолятов (таблицы 3, 4, 5 и 6)
5
Соединения по настоящему изобретению оценивали против генотипированных линий бактерий, в отдельности или в комбинации с β-лактамом цефтазидимом (CAZ). В этих анализах, MIC указанных соединений или цефтазидима в фиксированных концентрациях указанных соединений определяли методом микроразбавлений бульона согласно Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI - M7-A7). Вкратце, растворы соединений по настоящему изобретению в отдельности готовили в ДМСО и капельно наносили (2 мкл каждое) на стерильные полистирольные планшеты (Corning, 3788). Разбавления соединений и цефтазидима готовили в ДМСО и капельно наносили (1 мкл каждое) на стерильные полистирольные планшеты (Corning, 3788). Суспензии бактерий, находящихся в фазе логарифмического роста, доводили до финальной плотности 5×10 КОЕ/мл в бульоне Мюллера-Хинтона со стандартизованным содержанием катионов (Бектон-Дикинсон) и добавляли в каждую лунку (98 мкл). Микропланшеты инкубировали 16-20 часов при 35°C на воздухе. Значение MIC для соединений определяли при наименьшей концентрации указанных соединений, которая предотвращала рост бактерий по визуальной оценке. Значение MIC цефтазидима при каждой концентрации соединения определяли как наименьшую концентрацию цефтазидима, которая предотвращала рост бактерий по визуальной оценке.
Таблица 3: Виды бактерий, использовавшиеся в определении MIC
Линии
Механизм устойчивости
E. cloacae
260508
TEM-1, CTX-M-15
E. coli
UFR61O
TEM-1, KPC-2
K. pneumoniae
BAA-1898
TEM-1, SHV-11, SHV-12, KPC-2
K. pneumoniae
160143
TEM-1, SHV-1, CTX-M-15, KPC-2, OXA-1
K. pneumoniae
UFR68
TEM-1, SHV-11, CTX-M-15, KPC-3
E. cloacae
P99
AmpC
E. cloacae
UFR85
TEM-1, CTX-M-15, AmpC
E. cloacae
UFR70
TEM-1, CTX-M-15, CMY-2, OXA-1, Porin loss
K. pneumoniae
UFR77
CMY-2
E. coli
UFR74
SHV-1, DHA-1
E. coli
UFR18
CTX-M-15, OXA-204
E. coli
131119
TEM-1, OXA-48
K. oxytoca
UFR21
TEM-1, CTX-M-15, OXA-48
K. pneumoniae
UFR24
TEM-1, SHV-2, SHV-11, OXA-1, OXA-48, OXA-47
K. pneumoniae
6299
TEM-1, SHV-11, OXA-163
E. coli
RGN238
OXA-1
K. pneumoniae
200047
TEM-1, SHV-32, CTX-M-15, OXA-1
E. coli
190317
TEM-1, SHV-12, CTX-M-15, OXA-1
E. coli
UFR32
TEM-1, VEB-1, OXA-10
E. coli
UFR39
CTX-M-15, NDM-1
E. coli
UFR41
TEM-1, CTX-M-15, CMY-2, OXA-1, NDM-4
E. cloacae
UFR51
SHV-12, IMP-8
P. aeruginosa
CIP107051
TEM-24
Таблица 4: Значения MIC для соединений
Линии
Значения MIC для соединений по настоящему изобретению (мкг/мл)
Пример 1
Пример 2
Пример 3
Пример 4
Пример 5
Пример 6
260508
4
2
4
8
4
1
UFR61O
16
4
8
16
8
2
BAA-1898
8
2
8
16
4
2
160143
4
2
4
4
2
1
UFR68
8
4
8
16
4
1
P99
4
1
8
16
4
1
UFR85
4
1
4
16
4
1
UFR70
4
1
4
8
2
0.5
UFR77
8
2
4
8
4
1
UFR74
16
2
8
8
4
1
UFR18
2
1
2
8
2
0.5
131119
2
1
1
4
2
0.5
UFR21
8
2
8
>32
4
1
UFR24
16
4
8
32
2
1
6299
32
4
16
16
4
2
RGN238
8
2
2
8
2
1
200047
8
2
4
4
2
1
190317
2
1
2
4
1
0.5
UFR32
4
1
2
8
2
0.5
UFR39
2
1
8
8
2
1
UFR41
4
2
16
8
4
2
UFR51
4
2
2
8
4
1
CIP107051
>32
>32
>32
>32
>32
32
Таблица 5: Значения MIC для комбинаций цефтазидим/соединение
Линия
MIC для CAZ (мг/л)
Значение MIC для комбинации CAZ и соединений по настоящему изобретению при 4 мкг/мл
Пример 1
Пример 2
Пример 3
Пример 4
Пример 5*
Пример 6
260508
128
<0.25
<0.25
<0.25
≤0.25
<0.25
<0.25
UFR61O
128
≤0.25
<0.25
≤0.25
<0.25
<0.25
<0.25
BAA-1898
256
≤0.25
<0.25
0.5
0.5
<0.25
<0.25
160143
128
≤0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
UFR68
>128
<0.25
<0.25
0.5
4
<0.25
<0.25
P99
128
<0.25
<0.25
≤0.25
≤0.25
<0.25
<0.25
UFR85
128
<0.25
<0.25
<0.25
1
<0.25
<0.25
UFR70
>128
≤0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
UFR77
64
≤0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
UFR74
64
≤0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
UFR18
>128
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
131119
0.5
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
UFR21
128
0.5
<0.25
0.5
4
<0.25
<0.25
UFR24
>128
0.5
≤0.25
≤0.25
0.5
<0.25
<0.25
6299
256
≤0.25
<0.25
<0.25
≤0.25
<0.25
<0.25
RGN238
0.5
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
200047
128
≤0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
190317
128
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
UFR32
>128
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
UFR39
>1024
<0.25
<0.25
>128
<0.25
<0.25
<0.25
UFR41
>128
0.5
<0.25
>128
<0.25
<0.25
<0.25
UFR51
>128
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
CIP107051
256
8
4
4
4
4
4
*MIC для комбинации CAZ и соединения при 8 мкг/мл
Таблица 6: Значения MIC для соединений и комбинаций цефтазидим/соединение
Значение MIC для соединений по настоящему изобретению (мкг/мл)
Значение MIC для комбинации CAZ и соединений по настоящему изобретению при 4 мкг/мл
Линии
190317
6299
BAA-1898
P99
CIP107051
190317
6299
BAA-1898
P99
CIP107051
Нет
128
256
256
128
256
Пример 7
16
>32
>32
>32
>32
0.25
0.5
32
2
4
Пример 8
8
>32
>32
>32
>32
0.25
0.5
0.5
2
8
Пример 9
>32
>32
>32
>32
>32
0.5
4
16
4
8
Пример 10
1
>32
16
8
32
<0.25
≤0.25
≤0.25
≤0.25
2
Пример 11
16
>32
>32
32
>32
≤0.25
1
32
4
16
Пример 12
1
16
8
4
>32
<0.25
≤0.25
≤0.25
≤0.25
4
Пример 13
32
>32
>32
>32
>32
0.5
4
16
4
4
Пример 14
4
16
8
16
>32
<0.25
≤0.25
1
0.5
4
Пример 15
2
>32
>32
8
16
<0.25
0.25
≤0.25
≤0.25
2
Пример 16
8
>32
32
32
>32
≤0.25
0.5
8
1
4
Пример 17
4
>32
16
16
>32
<0.25
0.25
0.25
1
8
Пример 18
1
4
8
8
>32
<0.25
≤0.25
≤0.25
<0.25
4
Пример 19
4
16
16
8
>32
<0.25
≤0.25
≤0.25
≤0.25
4
Пример 20
>32
>32
>32
>32
>32
128
>128
>128
>128
>128
Пример 21
16
>32
>32
>32
>32
0.25
4
64
16
4
Пример 22
>32
>32
>32
>32
>32
1
16
8
32
8
Пример 23
>32
>32
>32
>32
>32
0.5
4
4
8
16
Пример 24
2
>32
>32
16
>32
<0.25
0.25
1
0.25
4
Пример 25
>32
>32
>32
>32
>32
1
32
16
64
16
Пример 26
4
16
16
16
>32
<0.25
≤0.25
0.5
1
4
Пример 27
8
32
32
16
>32
0.25
0.5
16
2
16
Пример 28
16
>32
>32
>32
>32
≤0.25
1
1
2
8
Пример 29
8
>32
32
32
>32
<0.25
0.5
1
1
4
Пример 30
32
>32
>32
>32
>32
0.25
1
2
8
16
Пример 31
>32
>32
>32
>32
>32
0.5
4
64
16
32
Пример 32
8
32
16
16
>32
≤0.25
0.5
0.5
0.5
4
Пример 33
8
32
32
16
>32
≤0.25
0.25
16
1
8
Пример 34
>32
>32
>32
>32
>32
1
64
128
64
32
Пример 35
16
>32
>32
>32
>32
0.5
32
32
32
16
Пример 37
8
>32
>32
>32
>32
≤0.25
2
2
8
8
Пример 38
4
>32
>32
16
32
<0.25
≤0.25
≤0.25
0.25
8
Пример 39
>32
>32
>32
>32
>32
1
16
128
16
8
Пример 40
32
>32
>32
>32
>32
0.25
2
8
4
8
Пример 41
2
>32
>32
4
32
<0.25
≤0.25
≤0.25
<0.25
2
Пример 42
4
>32
>32
16
>32
≤0.25
1
8
0.5
4
Пример 43
1
8
8
4
>32
<0.25
≤0.25
≤0.25
<0.25
4
Пример 44
1
4
4
4
>32
<0.25
<0.25
<0.25
<0.25
8
Пример 45
4
>32
32
16
>32
<0.25
≤0.25
8
0.25
4
Пример 46
2
>32
16
16
>32
<0.25
≤0.25
0.25
≤0.25
4
Пример 47
8
32
32
32
>32
≤0.25
0.5
8
2
16
Пример 48
4
>32
>32
32
>32
<0.25
0.25
4
0.5
4
Пример 49
2
>32
>32
16
>32
<0.25
≤0.25
≤0.25
≤0.25
4
Пример 50
8
16
32
16
>32
<0.25
≤0.25
8
0.5
4
Пример 51
8
16
32
16
>32
≤0.25
0.5
32
1
8
Пример 52
8
16
32
16
>32
≤0.25
0.5
16
2
16
Пример 55
>32
>32
>32
>32
>32
0.25
4
1
8
8
Пример 56
4
32
32
8
>32
<0.25
≤0.25
≤0.25
≤0.25
8
Пример 57
0.5
>32
16
1
16
<0.25
≤0.25
≤0.25
<0.25
4
Пример 59
1
>32
>32
2
>32
<0.25
≤0.25
≤0.25
<0.25
8
Пример 60
0.5
>32
>32
1
32
<0.25
≤0.25
≤0.25
<0.25
8
Пример 61
32
32
>32
32
>32
0.5
4
64
8
4
Пример 63
8
>32
32
16
>32
≤0.25
0.25
≤0.25
1
8
Пример 64
2
32
8
4
>32
<0.25
≤0.25
≤0.25
<0.25
8
Пример 65
32
32
32
32
>32
0.5
2
64
8
8
Пример 66
4
32
16
8
>32
≤0.25
≤0.25
≤0.25
≤0.25
8
Пример 67
2
>32
>32
4
>32
<0.25
0.25
≤0.25
≤0.25
8
Пример 68
>32
>32
>32
>32
>32
1
>128
32
16
16
Пример 69
4
32
32
32
>32
≤0.25
1
64
1
8
Пример 70
32
>32
32
>32
>32
0.5
1
2
4
8
Пример 71
4
32
16
16
>32
<0.25
≤0.25
0.5
0.25
2
Пример 72
>32
>32
>32
>32
>32
0.5
8
32
16
32
Пример 73
>32
>32
>32
>32
>32
0.5
4
1
4
8
Пример 74
8
16
16
16
>32
≤0.25
≤0.25
0.25
0.5
8
Пример 76
8
>32
>32
32
>32
0.25
0.5
128
2
16
Пример 77
>32
>32
>32
>32
>32
2
128
128
64
64
Пример 78
>32
>32
>32
>32
>32
0.5
2
16
8
8
Пример 79
>32
>32
>32
>32
>32
1
64
64
128
16
Пример 80
>32
>32
>32
>32
>32
0.5
16
32
64
16
Пример 82
2
32
32
4
>32
<0.25
≤0.25
≤0.25
≤0.25
4
Пример 83
2
32
8
8
>32
<0.25
≤0.25
≤0.25
≤0.25
4
Пример 84
>32
>32
>32
>32
>32
1
32
128
128
32
Пример 85
32
>32
>32
>32
>32
0.5
4
16
16
16
Схема 2
Схема 3
1
2
В настоящем изобретении описаны также частные способы, представленные на схемах в экспериментальной части, описанные в настоящем тексте для получения соединений по настоящему изобретению, где R, R представляют собой различные заместители. Эти способы можно также адаптировать для получения других соединений по настоящему изобретению. На основе описанных в настоящем тексте способов можно разработать другие способы получения соединения по настоящему изобретению.
Настоящее изобретение касается также соединений, имеющих формулу
, предпочтительно или , предпочтительно