ФАРМАЦЕВТИЧЕСКИЕ КОМПОЗИЦИИ, СОДЕРЖАЩИЕ АНТИПСИХОТИЧЕСКОЕ ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО И ИНГИБИТОР VMAT2, И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS CONTAINING AN ANTIPSYCHOTIC DRUG AND A VMAT2 INHIBITOR, AND THEIR USE

Уровень техники
Техническая область
В настоящей заявке представлены способы лечения шизофрении, шизоаффективного расстройства, биполярного расстройства, большого депрессивного расстройства и других состояний, которые обычно лечат антипсихотическими лекарственным средством, посредством введения нуждающемуся в этом субъекту фармацевтической композиции, содержащей антипсихотическое лекарственное соединение и ингибитор VMAT2 (vesicular monoamine transporter 2, везикулярный моноаминный переносчик 2).
Описание предшествующего уровня техники
BMC Biol.
Шизофрения встречается приблизительно у 1% взрослого населения и снижает вероятную продолжительность жизни в среднем на 20-25 лет, оказывая влияние на самообслуживание и состояние здоровья, а также влияя на количество суицидов. В настоящее время этиологические механизмы, лежащие в основе шизофрении, мало изучены. Шизофрению диагностируют по клинической оценке на основании характерных симптомов психоза, дезорганизации и так называемых «негативных» симптомов (представляющих собой снижение эмоциональных реакций, бедность речи и недостаток воли/мотивации); продолжительности заболевания; нарушенных функций; и исключения других заболеваний, таких как аутизм и биполярное расстройство. Чтобы определить, страдает ли психически больной пациент шизофренией, практикующим врачам необходимо обладать клинической интуицией и быть знакомым с диагностическими руководствами DSM-IV (Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders, Руководство по диагностике и статистическому учету психических расстройств, 4 издание) или ICD-10 (International Classification of Diseases, Международная классификация болезней, 10 пересмотра) (см., напр., Corvin, 2011; 9: 77).
Терапия антипсихотическими лекарственными средствами является основой лечения шизофрении. Эти антипсихотические лекарственные средства, также известные как нейролептики, как правило, вызывают уменьшение «позитивных» симптомов шизофрении, а именно психоза, нарушения мышления и дезорганизованного поведения. Антипсихотики, как правило, обладают меньшим эффектом в отношении когнитивной деятельности и «негативных» симптомов заболевания, включающих отсутствие мотивации и эмоций, социальное отчуждение, отсутствие интереса к повседневным делам и сниженную способность планировать или выполнять действия.
,
Антипсихотики первого поколения или «типичные» антипсихотики применяют для лечения шизофрении и других психических расстройств на протяжении более чем 50 лет. Первым выпущенным на рынок антипсихотиком был хлорпромазин; другие типичные антипсихотики включают флуфеназин, галоперидол, локсапин, молиндон, перфеназин, пимозид, сульпирид, тиоридазин и трифторперазин. Все эти типичные антипсихотики обладают первичной эффективностью за счет антагонистического действия на D2-дофаминовые рецепторы и могут вызывать двигательные расстройства, включая паркинсонизм (тремор, оцепенелость, брадикинезия и неустойчивость походки), а также дистонию, дискинезию (напр. позднюю дискинезию) и акатизию.
Были разработаны антипсихотики второго поколения или «атипичные» антипсихотики; эти лекарственные средства обладают пониженным риском индукции поздней дискинезии и связанных двигательных расстройств при длительном применении. Такие лекарственные средства включают арипипразол, азенапин, клозапин, илоперидон, оланзапин, палиперидон, кветиапин, рисперидон и зипразидон. Все эти атипичные антипсихотики обладают первичной эффективностью за счет антагонистического действия на D2-дофаминовые рецепторы, а также оказывают дополнительное действие на другие нейромедиаторы. Эти атипичные антипсихотики ассоциированы с метаболическими побочными эффектами, достаточно выраженными, чтобы оказывать влияние на ожидаемую продолжительность жизни. Такие побочные эффекты включают способность индуцировать увеличение веса, а также связанные метаболические нарушения, такие как гипертриглицеридемия и гипергликемия. Клозапин представляется наиболее эффективным средством при лечении тяжелых психических заболеваний, но он обладает дополнительными серьезными медицинскими побочными эффектами, включая значительную частоту развития агранулоцитоза, что требует частого наблюдения за количеством лейкоцитов пациента, что включено в требования по применению этого лекарственного средства.
В дополнение к лечению шизофрении и шизоаффективного расстройства определенные антипсихотические лекарственные средства были одобрены для лечения биполярного расстройства, большого депрессивного расстройства и расстройств аутического спектра. Использование вне зарегистрированных показаний является преимущественным, особенно в случае атипичных антипсихотических средств, которые применяют для лечения различных состояний, включая тревожность, синдром дефицита внимания с гиперактивностью, слабоумие, депрессию, бессонницу, обсессивно-компульсивное расстройство личности (ОКР), посттравматическое стрессовое расстройство, злоупотребление психоактивными веществами и синдром Туретта.
Поскольку побочные эффекты, связанные с введением антипсихотических лекарственных средств, могут оказывать существенное влияние на здоровье и благополучие пациента, существует необходимость в альтернативных способах лечения.
Краткое содержание изобретения
Вкратце, настоящее раскрытие относится к изобретению, заключающемуся в том, что комбинация антипсихотического лекарственного средства и ингибитора VMAT2 демонстрирует терапевтическую синергию и улучшает терапевтический индекс антипсихотического лекарственного средства при лечении нейропсихиатрических нарушений, таких как шизофрения, шизоаффективное расстройство, биполярное расстройство, большое депрессивное расстройство и другие состояния, которые обычно лечат антипсихотическими лекарственными средствами. В настоящей заявке представлены новые способы лечения заболеваний у пациентов, которые в настоящее время получают антипсихотики, и фармацевтические композиции, применимые для лечения нейропсихиатрических нарушений, таких как шизофрения. Более конкретно, описанные в настоящей заявке способы включают введение антипсихотика в комбинации с ингибитором VMAT2. Настоящее раскрытие представляет следующие варианты осуществления настоящего изобретения.
6
6
В одном варианте осуществления настоящего изобретения представлен способ лечения нейропсихиатрического нарушения у субъекта, включающий введение субъекту (a) антипсихотического лекарственного средства и (b) ингибитора VMAT2, где терапевтически эффективное количество вводимого субъекту антипсихотического лекарственного средства меньше терапевтически эффективного количества антипсихотического лекарственного средства при введении в отсутствие ингибитора VMAT2. В определенных вариантах осуществления настоящего изобретения нейропсихиатрическое нарушение является шизофренией, шизоаффективным расстройством, биполярным расстройством, большим депрессивным расстройством или аутизмом. В конкретных вариантах осуществления настоящего изобретения антипсихотическое лекарственное средство и ингибитор VMAT2 вводят одновременно. В других определенных вариантах осуществления настоящего изобретения антипсихотическое лекарственное средство и ингибитор VMAT2 составляют в форме одной фармацевтической композиции. В другом конкретном варианте осуществления настоящего изобретения антипсихотическое лекарственное средство составляют в форме первой фармацевтической композиции, а ингибитор VMAT2 составляют в форме второй фармацевтической композиции. В определенных вариантах осуществления настоящего изобретения антипсихотическое лекарственное средство является типичным антипсихотическим лекарственным средством. В более конкретном варианте осуществления настоящего изобретения типичное антипсихотическое лекарственное средство является флуфеназином, галоперидолом, локсапином, молиндоном, перфеназином, пимозидом, сульпиридом, тиоридазином или трифторперазином. В другом варианте осуществления настоящего изобретения антипсихотическое лекарственное средство является атипичным антипсихотическим лекарственным средством. В конкретном варианте осуществления настоящего изобретения атипичное антипсихотическое лекарственное средство является арипипразолом, азенапином, клозапином, илоперидоном, оланзапином, палиперидоном, кветиапином, рисперидоном или зипразидоном. В частном варианте осуществления настоящего изобретения терапевтически эффективное количество антипсихотического лекарственного средства на 10-90% меньше терапевтически эффективного количества антипсихотического лекарственного средства при введении в отсутствие ингибитора VMAT2. В одном варианте осуществления настоящего изобретения терапевтически эффективное количество антипсихотического лекарственного средства по меньшей мере на 25% меньше терапевтически эффективного количества антипсихотического лекарственного средства при введении в отсутствие ингибитора VMAT2. В одном варианте осуществления настоящего изобретения терапевтически эффективное количество антипсихотического лекарственного средства по меньшей мере на 50% меньше терапевтически эффективного количества антипсихотического лекарственного средства при введении в отсутствие ингибитора VMAT2. В частном варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является тетрабеназином (3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-он). В другом конкретном варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является (2R,3R,11bR)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-олом (R,R,R DHTBZ) и его предшественниками. В другом конкретном варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является сложным эфиром (S)-2-амино-3-метил-масляной кислоты и (2R,3R,11bR)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ила. В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является дейтерированным тетрабеназином, в частности, 3-изобутил-9,10-d-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-оном (d-TBZ). В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанолом или его предшественником.
6
6
В одном варианте осуществления настоящего изобретения представлен фармацевтический препарат для применения в лечении нейропсихиатрического нарушения, при этом препарат содержит антипсихотическое лекарственное средство и ингибитор VMAT2, где препарат содержит количество антипсихотического лекарственного средства, являющееся субтерапевтическим количеством при применении в отсутствие ингибитора VMAT2. В частном варианте осуществления настоящего изобретения нейропсихиатрическое нарушение является шизофренией, шизоаффективным расстройством, биполярным расстройством, большим депрессивным расстройством или аутизмом. В определенном варианте осуществления настоящего изобретения антипсихотическое лекарственное средство является типичным антипсихотическим лекарственным средством. В определенном конкретном варианте осуществления настоящего изобретения типичное антипсихотическое лекарственное средство является флуфеназином, галоперидолом, локсапином, молиндоном, перфеназином, пимозидом, сульпиридом, тиоридазином или трифторперазином. В другом частном варианте осуществления настоящего изобретения антипсихотическое лекарственное средство является атипичным антипсихотическим лекарственным средством. В более конкретном варианте осуществления настоящего изобретения атипичное антипсихотическое лекарственное средство является арипипразолом, азенапином, клозапином, илоперидоном, оланзапином, палиперидоном, кветиапином, рисперидоном или зипразидоном. В другом варианте осуществления настоящего изобретения антипсихотическое лекарственное средство составляют в форме первой фармацевтической композиции, а ингибитор VMAT2 составляют в форме второй фармацевтической композиции. В частном варианте осуществления настоящего изобретения терапевтически эффективное количество антипсихотического лекарственного средства на 10-90% меньше терапевтически эффективного количества антипсихотического лекарственного средства при введении в отсутствие ингибитора VMAT2. В другом конкретном варианте осуществления настоящего изобретения терапевтически эффективное количество антипсихотического лекарственного средства по меньшей мере на 25% меньше терапевтически эффективного количества антипсихотического лекарственного средства при введении в отсутствие ингибитора VMAT2. В другом конкретном варианте осуществления настоящего изобретения терапевтически эффективное количество антипсихотического лекарственного средства по меньшей мере на 50% меньше терапевтически эффективного количества антипсихотического лекарственного средства при введении в отсутствие ингибитора VMAT2. В одном частном варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является тетрабеназином (3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-он). В другом частном варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является (2R,3R,11bR)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-олом (R,R,R DHTBZ) или его предшественником. В другом определенном варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является сложным эфиром (S)-2-амино-3-метил-масляной кислоты и (2R,3R,11bR)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ила. В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является дейтерированным тетрабеназином, в частности, 3-изобутил-9,10-d-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-оном (d-TBZ). В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанолом или его предшественником.
6
6
Также в настоящей заявке в другом варианте осуществления настоящего изобретения представлен способ повышения эффективности антипсихотического лекарственного средства, включающий введение субъекту комбинации (a) антипсихотического лекарственного средства и (b) ингибитора VMAT2. В одном варианте осуществления настоящего изобретения увеличение эффективности антипсихотического лекарственного средства включает снижение количества антипсихотического лекарственного средства, которое является терапевтически эффективным. В частном варианте осуществления настоящего изобретения терапевтически эффективное количество антипсихотического лекарственного средства на 10-90% меньше терапевтически эффективного количества антипсихотического лекарственного средства при введении в отсутствие ингибитора VMAT2. В конкретном варианте осуществления настоящего изобретения количество антипсихотического лекарственного средства, которое является терапевтически эффективным, по меньшей мере на 25% меньше количества антипсихотического лекарственного средства, которое является терапевтически эффективным при введении антипсихотического лекарственного средства в отсутствие ингибитора VMAT2. В другом конкретном варианте осуществления настоящего изобретения количество антипсихотического лекарственного средства, которое является терапевтически эффективным, по меньшей мере на 50% меньше количества антипсихотического лекарственного средства, которое является терапевтически эффективным при введении антипсихотического лекарственного средства в отсутствие ингибитора VMAT2. В одном варианте осуществления настоящего изобретения антипсихотическое лекарственное средство является типичным антипсихотическим лекарственным средством. В конкретном варианте осуществления настоящего изобретения типичное антипсихотическое лекарственное средство является флуфеназином, галоперидолом, локсапином, молиндоном, перфеназином, пимозидом, сульпиридом, тиоридазином или трифторперазином. В другом варианте осуществления настоящего изобретения антипсихотическое лекарственное средство является атипичным антипсихотическим лекарственным средством. В более конкретном варианте осуществления настоящего изобретения атипичное антипсихотическое лекарственное средство является арипипразолом, азенапином, клозапином, илоперидоном, оланзапином, палиперидоном, кветиапином, рисперидоном или зипразидоном. В другом конкретном варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является тетрабеназином (3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-он). В другом конкретном варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является (2R,3R,11bR)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-олом (R,R,R DHTBZ) или его предшественником. В другом частном варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является сложным эфиром (S)-2-амино-3-метил-масляной кислоты и (2R,3R,11bR)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ила. В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является дейтерированным тетрабеназином, в частности, 3-изобутил-9,10-d-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-оном (d-TBZ). В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанолом или его предшественником.
6
6
В другом варианте осуществления настоящего изобретения представлен фармацевтический препарат, содержащий антипсихотическое лекарственное средство и ингибитор VMAT2, где препарат является эффективным для лечения нейропсихиатрического нарушения и где количество антипсихотического лекарственного средства является субтерапевтическим по сравнению с терапевтическим количеством антипсихотического лекарственного средства при применении в отсутствие ингибитора VMAT2. В другом варианте осуществления настоящего изобретения представлен фармацевтический препарат, содержащий синергически эффективные количества антипсихотического лекарственного средства и ингибитора VMAT2. В частных вариантах применения препаратов антипсихотическое лекарственное средство является типичным антипсихотическим лекарственным средством. В конкретных вариантах осуществления настоящего изобретения типичное антипсихотическое лекарственное средство является флуфеназином, галоперидолом, локсапином, молиндоном, перфеназином, пимозидом, сульпиридом, тиоридазином или трифторперазином. В других частных вариантах осуществления настоящего изобретения антипсихотическое лекарственное средство является атипичным антипсихотическим лекарственным средством. В более конкретных вариантах осуществления настоящего изобретения атипичное антипсихотическое лекарственное средство является арипипразолом, азенапином, клозапином, илоперидоном, оланзапином, палиперидоном, кветиапином, рисперидоном или зипразидоном. В более конкретных вариантах осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является тетрабеназином (3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-он). В других частных вариантах осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является (2R,3R,11bR)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-олом (R,R,R DHTBZ) или его предшественником. В других частных вариантах осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является сложным эфиром (S)-2-амино-3-метил-масляной кислоты и (2R,3R,11bR)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ила. В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является дейтерированным тетрабеназином, в частности, 3-изобутил-9,10-d-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-оном (d-TBZ). В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанолом или его предшественником. В других определенных вариантах применения препаратов антипсихотическое лекарственное средство и ингибитор VMAT2 составляют в форме одной фармацевтической композиции с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым эксципиентом. В других частных вариантах осуществления настоящего изобретения антипсихотическое лекарственное средство составляют в форме первой фармацевтической композиции с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым эксципиентом, а ингибитор VMAT2 составляют в форме второй фармацевтической композиции с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым эксципиентом. В определенных вариантах осуществления настоящего изобретения нейропсихиатрическое нарушение является шизофренией, шизоаффективным расстройством, биполярным расстройством, большим депрессивным расстройством или аутизмом.
Эти и другие аспекты настоящего изобретения станут очевидны при ссылке на следующее подробное описание изобретения. Для этого в настоящей заявке приведены различные ссылки, описывающие более подробно определенную информацию, касающуюся предшествующего уровня техники, процедур, соединений и/или композиций, каждая из которых включена в настоящую заявку в полном объеме посредством ссылки.
Терминам, не определенным конкретно в настоящей заявке, следует приписывать те значения, которые им дали бы специалисты в данной области техники в свете данного раскрытия и контекста. Однако, как применяют в настоящем описании изобретения, если иное не определено, термины имеют указанное значение.
На протяжении настоящего описания изобретения ссылка на «один вариант осуществления настоящего изобретения» или на «вариант осуществления настоящего изобретения» обозначает, что конкретное свойство, структура или характеристика, описанные в связи с вариантом осуществления настоящего изобретения включены по меньшей мере в один вариант осуществления настоящего изобретения. Таким образом, фразы «в одном варианте осуществления настоящего изобретения» или «во варианте осуществления настоящего изобретения» в разных местах на протяжении данного описания изобретения не обязательно относятся к одному и тому же варианту осуществления настоящего изобретения. Более того, конкретные свойства, структуры или характеристики можно комбинировать любым подходящим способом в одном или нескольких вариантах осуществления настоящего изобретения.
Также, как применяют в настоящем описании изобретения и в прилагаемой формуле изобретения, формы единственного числа включают ссылки на множественное число, если иное четко не определено. Таким образом, например, ссылка на «не являющееся человеком животное» может относится к одному или к нескольким не являющимся человеком животным или ко множеству таких животных, а ссылка на «клетку» включает ссылку на одну или несколько клеток и их эквивалентов (напр., на множество клеток), известных специалистам в данной области техники, и т.д. При описании стадий способа или при указаний стадий способа в формуле изобретения стадии описывают как следующие в определенном порядке, описание первой стадии, происходящей (или проводимой) «перед» (т.е. раньше) второй стадии, имеет такое же значение, как переформулированное описание второй стадии, происходящей (или проводимой) «после» первой стадии. Термин «приблизительно» при указании числа или числового интервала обозначает ссылку на приблизительное значение числа или числового интервала в пределах разброса между экспериментами (или в пределах статистической ошибки эксперимента); таким образом, числа и числовые интервалы могут варьировать в пределах от 1 до 15% от заявленного числа или числового интервала. Также следует отметить, что термин «или», как правило, употребляют в значении, включающей «и/или», если иное четко не определено контекстом. Термин «по меньшей мере один», например, при ссылке на по меньшей мере одно соединение или на по меньшей мере одну композицию, имеет то же значение и понимание, что и термин «один или несколько».
Краткое описание чертежей
Фигура 1 показывает количество реакций бегства в модели условной реакции избегания как индикатора антипсихотической активности. Вводили инертный носитель, рисперидон (0,1 мг/кг) однократно, R,R,R DHTBZ однократно (0,15 мг/кг) и комбинацию рисперидона (0,1 мг/кг) и R,R,R DHTBZ (0,15 мг/кг) и измеряли количество реакций бегства.
50
Фигура 2 показывает снижение ED(effective dose 50, 50% эффективная доза) (реакцию бегства) антипсихотического средства рисперидона при введении в комбинации с ингибитором VMAT2 R,R,R DHTBZ (0,15 мг/кг) в крысиной модели.
Фигура 3 показывает реакцию избегания в модели условной реакции избегания как индикатор антипсихотической активности. Вводили инертный носитель, оланзапин однократно (0,6 мг/кг), R,R,R DHTBZ однократно и комбинацию оланзапина (0,6 мг/кг) и R,R,R DHTBZ (0,15 мг/кг) и измеряли количество реакций бегства.
50
Фигура 4 иллюстрирует снижение ED(реакцию бегства) антипсихотического средства оланзапина при введении в комбинации с ингибитором VMAT2 R,R,R DHTBZ (0,15 мг/кг) в крысиной модели.
Фигура 5 показывает количество реакций бегства в модели условной реакции избегания как индикатора антипсихотической активности. Вводили инертный носитель, рисперидон (0,1 мг/кг) однократно, Соединение 5-1 однократно (0,3 мг/кг) и комбинацию рисперидона (0,1 мг/кг) и Соединения 5-1 (0,3 мг/кг) (Соед. 5-1) и измеряли количество реакций бегства.
50
Фигура 6 показывает снижение ED(реакцию бегства) антипсихотического средства рисперидона при введении в комбинации с ингибитором VMAT2 Соединением 5-1 (0,3 мг/кг) в крысиной модели.
Фигура 7 показывает реакцию избегания в модели условной реакции избегания как индикатор антипсихотической активности. Вводили инертный носитель, оланзапин однократно (0,6 мг/кг), Соединение 5-1 (0,3 мг/кг) (Соед. 5-1) однократно и комбинацию оланзапина (0,6 мг/кг) и Соединения 5-1 (0,3 мг/кг) и измеряли количество реакций бегства.
50
Фигура 8 иллюстрирует снижение ED(реакцию бегства) антипсихотического средства оланзапина при введении в комбинации с ингибитором VMAT2 Соединением 5-1 (0,3 мг/кг) в крысиной модели.
Подробное описание изобретения
Основным недостатком лечения шизофрении и других состояний, которые обычно лечат антипсихотическими лекарственными средствами (также называемыми нейролептиками) является развитие поздней дискинезии в результате проведения терапии антипсихотическими лекарственными средствами. Типичные антипсихотические лекарственные средства (также называемые антипсихотиками первого поколения) имеют высокую частоту развития экстрапирамидных побочных эффектов, включающих позднюю дискинезию. Антипсихотические лекарственные средства второго поколения (также называемые атипичными антипсихотиками) имеют меньшую вероятность индукции поздней дискинезии, но обладают другими побочными эффектами, такими как увеличение веса и метаболические нарушения. Недавние исследования по сравнению эффективности типичных и атипичных антипсихотиков показывают, что эффективность лечения психоза мало отличается, даже несмотря на гораздо более широкое применение атипичных антипсихотиков второго поколения по сравнению с применением типичных антипсихотиков в настоящее время.
Как раскрыто в настоящей заявке, неожиданно при введении ингибитора VMAT2 с антипсихотическим лекарственным средством можно снизить количество вводимого антипсихотика по сравнению с количеством антипсихотика, обычно вводимым субъекту, благодаря синергическому действию комбинации антипсихотика и ингибитора VMAT2. Введение этой комбинации приводит к развитию более сильной антипсихотической активности, чем наблюдается при введении одного антипсихотического лекарственного средства в той же дозе. Такое снижение дозы может уменьшить риск развития поздней дискинезии, ассоциированной с антипсихотическим лекарственным средством, особенно в случае введения типичного антипсихотика снижение вводимой дозы атипичного антипсихотического агента посредством комбинации атипичного агента с ингибитором VMAT2 может уменьшить или снизить вероятность возникновения, уменьшить или сократить время до начала и/или уменьшить или снизить степень тяжесть метаболических побочных эффектов (напр., увеличения веса), часто наблюдаемых для этих агентов. У пациентов, у которых развилась поздняя дискинезия, снижение дозы антипсихотического лекарственного средства в присутствии сильного ингибитора VMAT2 может быть полезным для лечения поздней дискинезии на фоне поддержания антипсихотической эффективности, соответствующей антипсихотической эффективности, наблюдаемой при введении более высокой дозы антипсихотического средства в индивидуальном виде.
Способы, применения и композиции, описанные в настоящей заявке, могут быть полезны для широкого спектра терапевтических применений и могут применяться для лечения ряда нейропсихиатрических состояний у субъекта (т.е. у пациента, индивида). Например, такие состояния включают нейропсихиатрические состояния (напр., шизофрению, шизоаффективное расстройство, биполярное расстройство, большое депрессивное расстройство, маниакально-депрессивное расстройство, депрессию с психопатическими чертами, бредовое расстройство и другие психиатрические состояния, симптомы галлюцинаций и бреда) и позднюю дискинезию. В частном варианте осуществления настоящего изобретения в настоящей заявке представлены способы лечения нейропсихиатрического состояния (например, шизофрении или шизоаффективного расстройства). Также представлены фармацевтические композиции, применимые для лечения упомянутых выше нейропсихиатрических состояний, включая шизофрению или шизоаффективное расстройство. В других определенных вариантах осуществления настоящего изобретения фармацевтические композиции применимы для лечения нейропсихиатрического состояния и поздней дискинезии.
Антипсихотические лекарственные средства и ингибиторы VMAT2
Первым выпущенным на рынок антипсихотиком в 1952 г. был хлорпромазин. За этим типичным антипсихотиком последовали и другие типичные антипсихотики, включая флуфеназин, галоперидол, локсапин, молиндон, перфеназин, пимозид, сульпирид, тиоридазин и трифторперазин, например. Все эти типичные антипсихотики обладают первичной эффективностью за счет антагонистического действия на D2-дофаминовые рецепторы и могут вызывать двигательные расстройства, включая паркинсонизм (тремор, оцепенелость, брадикинезия и неустойчивость походки), а также дистонию, дискинезию и акатизию.
,
Dialogues Clin Neurosci.
В исследованиях больших когорт было показано, что поздняя дискинезия встречается по меньшей мере у каждого пятого, а возможно, по меньшей мере у каждого третьего пациента, получающего длительное лечение антипсихотиками первого поколения. Новые случаи (заболеваемость) поздней дискинезией выявляют приблизительно у 3-5% пациентов в год лечения, и эта частота увеличивается вплоть до пяти раз у пожилых пациентов (см., напр. Lencz et al.,  2009 December; 11(4): 405).
Поздняя дискинезия является хроническим нарушением нервной системы, характеризующимся непроизвольными движениями, чаще всего с участием рта, языка, мышц лица и в меньшей степени тела и конечностей. Большинство случаев поздней дискинезии вызваны длительным применением антипсихотических лекарственных средств. Состояние может длиться месяцами, годами или может быть постоянным. Дополнительно к физическому дискомфорту и социальной стигмации наличие поздней дискинезии ассоциировано с пониженным качеством жизни, усиленной психопатологией и повышенным уровнем смертности. Этиология поздней дискинезии неизвестна, но предположительно, антипсихотические лекарственные средства вызывают позднюю дискинезию, будучи антагонистами дофамина.
Были разработаны атипичные антипсихотики второго поколения, и считается, что эти лекарственные средства обладают меньшим риском индукции поздней дискинезии и связанных двигательных расстройств при длительном применении. Частота развития поздней дискинезии при применении таких лекарственных средств почти на 80% ниже, чем при применении типичных нейролептиков. Однако атипичные антипсихотики имеют побочные эффекты, включающие увеличение веса и связанные метаболические нарушения, такие гипертриглицеридемия и гипергликемия. Примеры атипичных антипсихотических лекарственных средств включают арипипразол, азенапин, клозапин, илоперидон, оланзапин, палиперидон, кветиапин, рисперидон и зипразидон. Все эти атипичные антипсихотики обладают первичной эффективностью за счет антагонистического действия на D2-дофаминовые рецепторы, а также оказывают дополнительное действие на другие нейромедиаторы.
.,
Am. J. Psychiatry
В Таблице 1 перечислены примеры типичных антипсихотиков и указаны диапазоны рекомендуемой начальной, целевой и максимальной суточной дозы для взятого в качестве стандарта случая взрослого мужчины с шизофренией умеренной симптоматики. В Таблице 2 перечислены примеры атипичных антипсихотиков и указаны диапазоны рекомендуемой начальной, целевой и максимальной суточной дозы для взятого в качестве стандарта случая взрослого мужчины с шизофренией умеренной симптоматики (см., напр Gardner et al.,  2010: 167:686-693).
Таблица 1:
Рекомендуемая пероральная дозировка типичных антипсихотиков (мг)
<b>Типичный антипсихотик</b>
<b>Начальная доза</b>
<b>Целевая доза</b>
<b>Максимальная доза</b>
Флуфеназин
3
5-15
20
Галоперидол
3
5-10
20
Локсапин
17,5
20-100
200
Молиндон
22,5
50-188
225
Перфеназин
8
12-24
42
Пимозид
2
4-6
10
Сульпирид
100
300-600
1000
Тиоридазин
88
200-500
800
Трифторперазин
5
10-20
35
Талица 2
: Рекомендуемая пероральная дозировка атипичных антипсихотиков (мг)
<b>Атипичный антипсихотик</b>
<b>Начальная доза</b>
<b>Целевая доза</b>
<b>Максимальная доза</b>
Арипипразол
10
15-30
30
Азенапин *
10
10-20
20
Клозапин
25
200-500
800
Илоперидон*
2
12-24
24
Оланзапин
5
10-20
30
Палиперидон
3
6-9
12
Кветиапин
100
400-800
1000
Рисперидон
2
4-6
8,5
Зипразидон
40
120-160
200
* Дозировка указана в соответствии с инструкцией по применению лекарственного препарата
Для применения в способах и композициях, описанных в настоящей заявке, антипсихотическое лекарственное средство (или его физиологически приемлемая соль) может быть типичным антипсихотическим лекарственным средством (т.е. антипсихотическим лекарственным средством первого поколения). Типичное антипсихотическое лекарственное средство может быть любым из флуфеназина, галоперидола, локсапина, молиндона, перфеназина, пимозида, сульпирида, тиоридазина или трифторперазина. В других вариантах осуществления настоящего изобретения антипсихотическое лекарственное средство (или его физиологически приемлемая соль) может быть атипичным антипсихотическим лекарственным средством (т.е. антипсихотическим лекарственным средством второго поколения). Атипичное антипсихотическое лекарственное средство может быть любым из арипипразола, азенапина, клозапина, илоперидона, оланзапина, палиперидона, кветиапина, рисперидона или зипразидона.
Единственной возможностью предотвращения поздней дискинезии является избегание применения антипсихотических лекарственных средств. Когда необходимо применять антипсихотическое лекарственное средство, как, например, при лечении шизофрении, предпочтительно применять наименьшую возможную дозу антипсихотического лекарственного средства в течение наименьшего возможного периода времени. Однако в настоящее время не существует никаких возможностей для многих пациентов с шизофренией, у которых развилась поздняя дискинезия и которые должны продолжать получать лечение антипсихотическими лекарственными средствами. Лечение таких пациентов с поздней дискинезией включает изменение или ограничение применяемой антипсихотической терапии. Например, лекарственное средство первого поколения можно заменить лекарственным средством второго поколения с меньшим риском индукции поздней дискинезии. Переход на пониженную дозу агента, вызывающего позднюю дискинезию, также может способствовать уменьшению симптомов. Однако поменять лекарственное средство или понизить дозу антипсихотика первого поколения необходимо так, чтобы не вызвать у субъекта обострения первопричинного заболевания шизофрении.
6
6
Как описано в настоящей заявке, введение антипсихотического лекарственного средства в комбинации с ингибитором VMAT2 оказывает такое синергическое действие, что требуется введение меньшего количества антипсихотического лекарственного средства для получения такой же эффективности, как при введении лекарственного средства в индивидуальном виде. Ингибиторы VMAT2 (и их физиологически приемлемые соли) могут уменьшить поставку моноаминов в центральную нервную систему за счет ингибирования изоформы 2 везикулярного моноаминного переносчика (VMAT2, vesicular monoamine transporter 2). Примеры ингибиторов VMAT2 и моноаминных деплеторов, которые можно применять в способах, описанных в настоящей заявке, включают, например, тетрабеназин (3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-он, TBZ). TBZ одобрен для лечения хореи, ассоциированной с болезнью Гентингтона. Также было описано применение тетрабеназина для лечения поздней дискинезии и ряда гиперкинетических двигательных расстройств. После введения тетрабеназин быстро метаболизируется до дигидротетрабеназина (3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ола, DHTBZ), при этом R,R,R-стереоизомер DHTBZ считается наиболее активным метаболитом. В определенных вариантах осуществления настоящего изобретения описанные в настоящей заявке способы лечения нейропсихиатрического нарушения включают введение антипсихотического лекарственного средства и (2R,3R,11bR)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ола (также называемого в настоящей заявке R,R,R-DHTBZ) или его предшественника. Другие ингибиторы VMAT2, которые можно применять в способах и композициях, описанных в настоящей заявке, включают аналоги и метаболиты TBZ, резерпин, лобелин и аналоги, и соединения, описанные в патентах США № 8039627; 8357697; и 8524733. В одном варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является сложным эфиром (S)-2-амино-3-метил-масляной кислоты и (2R,3R,11bR)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ила (см. патент США № 8039627). В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является (2R,3R,11bR)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-олом (R,R,R DHTBZ). В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанолом (также называемым в настоящей заявке Соединением 5-1) или его предшественником (напр., пролекарственной формой Соединения 5-1). В другом варианте осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 является тетрабеназином или дейтерированным тетрабеназином. Дейтерированный тетрабеназин включает 3-изобутил-9,10-d-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-он (d-TBZ). Как описано в настоящей заявке, любой из ингибиторов VMAT2 можно комбинировать с фармацевтически приемлемым эксципиентом, носителем и/или растворителем для образования фармацевтической композиции.
J. Neurochem.
Mol. Pharmacol.
Biobehav. Rev.
Охарактеризованную активность ингибитора VMAT2 можно легко определить с помощью in vitro способов и животных моделей, описанных в данной области техники и в настоящей заявке (см., напр., Teng, et al.,  71, 258-65, 1998; Near, (1986), Near, (1986),  30: 252-57). Способность антипсихотического лекарственного средства оказывать желаемое терапевтическое действие можно определить с помощью животных моделей in vivo, таких как описанные в настоящей заявке; такие модели известны специалистам в данной области техники. Было показано, что тестирование в модели условной реакции избегания является эффективной и надежной доклинической моделью для оценки антипсихотической активности соединений. Во многих исследованиях было показано, что типичные и атипичные антипсихотические лекарственные средства селективно подавляют условную реакцию избегания, что делает исследование идеальным для поиска и характеристики антипсихотических соединений (см., напр., Wadenberg et al.,  1999, 23:851-62).
Специалисты в данной области техники признают, что такие исследования и техники следует проводить с применением надлежащих отрицательных контролей (напр., только с инертным носителем, только с растворителем и пр.) и надлежащих положительных контролей. Условия конкретного in vitro исследования включают температуру, буферы (включая соли, катионы, среду) и другие компоненты, которые поддерживают целостность тестируемого агента и реактивов, применяемых в исследовании, и которые известны специалистам в данной области техники и/или которые можно легко определить. Определение эффективности антипсихотического лекарственного средства в животной модели обычно проводят, применяя один или несколько статистических анализов, известных специалистам в данной области техники. В качестве примеров, можно применять такие статистические анализы, как двухфакторный дисперсионный анализ (ANOVA), точный критерий Фишера и/или критерий Бонферрони, для определения статистической значимости различий между группами животных.
Описанные в настоящей заявке соединения включают все их полиморфные формы, пролекарственные формы, изомеры (включая оптические, геометрические и таутомерные), соли, сольваты и изотопы. Что касается стереоизомеров, антипсихотики и ингибиторы VMAT2 могут иметь хиральные центры и могут существовать в виде рацематов, рацемических смесей и индивидуальных энантиомеров или диастереомеров. Все эти изомерные формы, включая их смеси включены в настоящую заявку. Если иное не оговорено, на протяжении настоящего описания изобретения и в прилагаемой формуле изобретения приведенная химическая формула или название включает таутомеры и все стерео-, оптические и геометрические изомеры (напр., энантиомеры, диастереомеры, E/Z изомеры и пр.) и их рацематы, а также смеси с разным соотношением отдельных энантиомеров, смеси диастереомеров или смеси любых описанных выше форм при условии существования таких изомеров и энантиомеров, а также их соли, включая их фармацевтически приемлемые соли и сольваты, такие как, например, гидраты, включая сольваты свободных соединений или сольваты соли соединения.
J. Pharm. Sci.,
Как применяют в настоящей заявке, фармацевтически (или физиологически) приемлемые соли относятся к производным описанных соединений, где исходное соединение модифицировано до кислых или основных солей. Примеры фармацевтически приемлемых солей включают, но не ограничиваются солями неорганических или органических кислот основных остатков, таких как амины; щелочными или органическими солями кислотных остатков, таких как карбоновые кислоты; и подобным. Например, такие соли включают ацетаты, аскорбаты, бензолсульфонаты, бензоаты, бензилаты, бикарбонаты, битартраты, бромиды/гидробромиды, Ca-эдетаты/эдетаты, камсилаты, карбонаты, хлориды/гидрохлориды, цитраты, эдизилаты, этандисульфонаты, эстолаты, эзилаты, фумараты, глюцептаты, глюконаты, глутаматы, гликолаты, гликолиларснилаты, гексилрезорцинаты, гидрабамины, гидроксималеаты, гидроксинафтоаты, йодиды, изотионаты, лактаты, лактобионаты, малаты, малеаты, манделаты, метансульфонаты, мезилаты, метилбромиды, метилнитраты, метилсульфаты, мукаты, напсилаты, нитраты, оксалаты, памоаты, пантотенаты, фенилацетаты, фосфаты/дифосфаты, полигалактуронаты, пропионаты, салицилаты, стеараты, основные ацетаты, сукцинаты, сульфамиды, сульфаты, таннаты, тартраты, теоклаты, толуолсульфонаты, триэтийодиды, соли аммония, бензатины, хлорпрокаины, холины, диэтаноламины, этилендиамины, меглюмины и прокаины. Другие фармацевтически приемлемые соли могут быть образованы катионами металлов, таких как алюминий, кальций, литий, магний, калий, натрий, цинк и подобные. (см. также, напр., Pharmaceutical Salts, Birge, S.M. et al.,  (1977), 66, 1-19).
in vivo
in vivo
Дополнительно также включены пролекарственные формы, относящиеся к соединениям, описанным в настоящей заявке. Пролекарственные формы представляют собой любые ковалентно связанные носители, которые высвобождают соединение  при введении такой пролекарственной формы пациенту. Пролекарственные формы, как правило, получают посредством модификации функциональных групп таким образом, что такая модификация отщепляется либо посредством стандартной процедуры, либо , высвобождая исходное соединение. Пролекарственные формы включают, например, соединения, как описанные в настоящей заявке, где гидроксильная, амино- или кислотная группы связаны с любой группой, которая при введении субъекту отщепляется с образованием гидроксильной, амино- или кислотной групп. Таким образом, репрезентативные примеры пролекарственных форм включают (но не ограничиваются) ацетатные, формиатные или бензоатные производные спиртовых функциональных групп или аминогрупп соединения. Также в случае карбоновой кислоты ( COOH) можно получать сложные эфиры, такие как сложные метиловые эфиры, сложные этиловые эфиры и подобные.
Описанные в настоящей заявке соединения могут существовать в виде целого спектра твердых состояний, варьирующего от полностью аморфного до полностью кристаллического. Более того, некоторые кристаллические формы соединений могут существовать в виде полиморфных форм. Дополнительно, некоторые соединения также могут образовывать сольваты с водой или с другими органическими растворителями. Термин «сольват» применяют в настоящей заявке для описания молекулярного комплекса, содержащего соединение и одну или несколько фармацевтически приемлемых молекул растворителя.
2
3
11
13
14
36
18
123
125
13
15
35
1
Описанные в настоящей заявке соединения в определенных вариантах осуществления настоящего изобретения являются фармацевтически приемлемыми мечеными изотопами соединениями, где один или несколько атомов заменены атомами с тем же атомным числом, но с другой атомной массой. Примеры включают H (дейтерий) и H (тритий) для водорода, C, C и C для углерода, Cl для хлора, F для фтора, I и I для йода, N и N для азота и S для серы. Примеры также включают замену дейтерия H, где дейтерий селективно добавляют к молекуле для изменения метаболизма лекарственного средства, что вызывает улучшение какого-то свойства, такое как улучшение времени полужизни.
Способы лечения, фармацевтические препараты и композиции
В настоящей заявке представлены способы лечения любых нарушений, которые в настоящее время лечат антипсихотиками, включая приведенные в качестве неограничивающих примеров шизофрению, шизоаффективное расстройство, биполярное расстройство, большое депрессивное расстройство и аутизм, маниакально-депрессивное расстройство, депрессию с психопатическими чертами, бредовое расстройство и другие психиатрические состояния, симптомы галлюцинаций и бреда. В настоящей заявке представлены способы лечения этих заболеваний посредством введения нуждающемуся в этом субъекту антипсихотического лекарственного средства первого поколения (т.е. типичных) или второго поколения (т.е. атипичных) (напр., соединения) в комбинации с ингибитором VMAT2. В определенных вариантах осуществления настоящего изобретения, когда у субъекта развивается двигательное расстройство (напр., поздняя дискинезия) или появляется по меньшей мере один симптом двигательного расстройства, для лечения двигательного расстройства (напр., поздней дискинезии) применимы способы, включающие введение ингибитора VMAT2 в комбинации с антипсихотиком. Ингибитор VMAT2 может предотвратить (т.е. понизить вероятность возникновения), замедлить прогрессию, отсрочить или оказать лечебное действие на состояние или заболевание, такое как двигательное расстройство.
Как раскрыто в настоящей заявке, неожиданно оказалось, что при введении антипсихотического лекарственного средства в комбинации с ингибитором VMAT2 для лечения нейропсихиатрического нарушения (напр., шизофрении, шизоаффективного расстройства, биполярного расстройства, большого депрессивного расстройства и аутизма, маниакально-депрессивного расстройства, депрессии с психопатическими чертами, бредового расстройства и других психиатрических состояний, симптомов галлюцинаций и бреда), доза применяемого в этих способах антипсихотика ниже (т.е. снижена, уменьшена, меньше), чем описанный до настоящего времени диапазон доз лекарственного средства в индивидуальном виде, необходимый для эффективного лечения этих нарушений. В определенных вариантах осуществления настоящего изобретения та доза антипсихотического лекарственного средства, которую применяют при введении в комбинации с ингибитором VMAT2, не будет эффективно лечить психиатрическое нарушение, если вводить одно антипсихотическое лекарственное средство (т.е. если вводить его в отсутствие ингибитора VMAT2). Иными словами, комбинация ингибитора VMAT2 и антипсихотического лекарственного средства оказывает синергическое действие при лечении заболевания. При применении в комбинации с ингибитором VMAT2, антипсихотическое лекарственное средство можно применять в такой дозе, которая при введении в индивидуальном виде обладала бы низкой эффективностью или не обладала бы эффективностью при лечении нейропсихиатрического нарушения, то есть доза антипсихотического лекарственного средства была субтерапевтической дозой. Иными словами, комбинирование ингибитора VMAT2 с субтерапевтической дозой антипсихотического лекарственного средства повышает эффективность антипсихотического лекарственного средства. В качестве примера, лечение нейропсихиатрического нарушения или его симптомов может существенно облегчить тревожность и возбуждение, если они являются одними из симптомов заболевания.
Снижение дозы антипсихотического лекарственного средства оказывает благоприятное действие на снижение интенсивности или на предотвращение (т.е. снижение вероятности или риска возникновения) одного или нескольких побочных эффектов антипсихотического лекарственного средства. В одном варианте осуществления настоящего изобретения, таком как вариант с применением типичного антипсихотического лекарственного средства для лечения заболевания, можно понизить вероятность возникновения поздней дискинезии и других поздних двигательных расстройств; можно понизить или степень тяжести или интенсивность двигательного расстройства; или можно уменьшить (т.е. понизить, сократить) частоту возникновения двигательного расстройства (или его симптома. В другом варианте осуществления настоящего изобретения, таком как вариант с применением атипичного лекарственного средства в комбинации с ингибитором VMAT2 для лечения нейропсихиатрического нарушения или его симптомов, можно понизить вероятность возникновения или степень тяжести метаболических нарушений, таких как увеличение веса, непереносимость глюкозы и риск развития атеросклеротического сердечно-сосудистого заболевания. В других вариантах осуществления настоящего изобретения побочные эффекты, которые можно снизить посредством введения нуждающемуся в этом субъекту антипсихотика (либо атипичного, либо типичного антипсихотика), комбинированного с ингибитором VMAT, включают один или несколько из следующих побочных эффектов: седации, сухости во рту, половой дисфункции и сердечных аритмий.
.,
Как понимают специалисты в медицинской области техники, термины «лечить» и «лечение» обозначаются медицинский контроль заболевания, нарушения или состояния субъекта (т.е. пациента) (см., напр Stedmanʹs Medical Dictionary). Термины «лечение» и «проведение лечения» охватывают как превентивное, т.е. профилактическое, или терапевтическое, т.е. излечивающее и/или паллиативное лечение. Таким образом, термины «лечение» и «проведение лечения» включают терапевтическое лечение пациентов с уже развившимся состоянием, в частности, в активной форме. Терапевтическое лечение может быть симптоматическим лечением, проводимым с целью облегчения конкретных указанных симптомов, или лечением причины, проводимым с целью обратить или частично обратить указанные состояния или остановить или замедлить прогрессию заболевания. Таким образом, композиции и способы, описанные в настоящей заявке, можно применять, например, в качестве терапевтического лечения на протяжении определенного периода времени, а также для длительной терапии. Дополнительно, термины «лечение» и «проведение лечения» включают профилактическое лечение, т.е. лечение пациентов с риском развития вышеупомянутого состояния, снижающее таким образом этот риск.
Субъект, нуждающийся в композициях и способах, описанных в настоящей заявке, включает субъекта, у которого специалистом в с медицинской и психиатрической области техники было диагностировано нейропсихиатрическое нарушение (напр., шизофрения, шизоаффективное расстройство, биполярное расстройство, большое депрессивное расстройство или аутизм). Субъект (или пациент), подлежащий лечению, может быть млекопитающим, включая человека или не относящегося к человеку примата. Млекопитающее может быть домашним животным, таким как кошка или собака.
Терапевтическое и/или профилактическое преимущество включает, например, улучшенный клинический исход, как терапевтическое лечение, так и профилактические или превентивные меры, где целью является предотвращение или замедление, или задержка (уменьшение) нежелательного физиологического изменения или нарушения, или предотвращение или замедление, или задержка (уменьшение) степени распространения или тяжести такого нарушения. Как обсуждают в настоящей заявке, благоприятные или желаемые клинические результаты лечения субъекта включают, но не ограничиваются смягчением, уменьшением или ослаблением симптомов, которые развиваются как результат заболевания или которые ассоциированы с заболеванием, состоянием или нарушением, подлежащим лечению; снижением частоты возникновения симптомов; улучшенным качеством жизни; более длительным периодом без заболевания (т.е. снижением вероятности или склонности к появлению у субъекта симптомов, на основании которых диагностируют заболевание); уменьшением распространения заболевания; стабилизацией (т.е. отсутствием ухудшения) течения заболевания; отсрочкой или замедлением прогрессии заболевания; уменьшением или смягчением течения заболевания; и ремиссией (частичной или полной), детектируемой или не детектируемой; и/или общим уровнем выживания. «Лечение» также обозначает более длительное выживание по сравнению с ожидаемым выживанием субъекта в отсутствие лечения. Нуждающиеся в лечении субъекты включают субъектов, у которых было диагностировано состояние или заболевание, а также субъектов, предрасположенных или имеющих риск развития заболевания, состояния или нарушения (напр., шизофрении или шизоаффективного расстройства, поздней дискинезии или других состояний или нарушений, описанных в настоящей заявке), и субъектов, у которых необходимо предотвратить заболевание, состояние или нарушение (т.е. снизить вероятность возникновения заболевания, нарушения или состояния).
«Терапевтически эффективное количество», как правило, обозначает количество лекарственного средства, такого как антипсихотическое лекарственное средство и ингибитор VMAT2, которое (i) лечит или предотвращает конкретное заболевание или состояние, (ii) ослабляет, смягчает или снимает один или несколько симптомов конкретного заболевания или состояния, или (iii) предотвращает или откладывает начало развития одного или нескольких симптомов конкретного заболевания или состояния, описанного в настоящей заявке. Оптимальные дозы, как правило, можно определить, применяя экспериментальные модели и/или клинические исследования. Оптимальная доза может зависеть от массы тела, веса или объема крови субъекта. Как правило, диапазон доз соединения, являющегося ингибитором VMAT2, для суточного применения обычно составляет от 5,0 до 150 мг в день, а в некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения - от 10 до 100 мг в день. Доза ингибитора VMAT2, включенного в композицию или препарат, также содержащий антипсихотик, достаточна для лечения двигательного расстройства, такого как поздняя дискинезия (т.е. доза является терапевтически эффективной дозой для лечения, предотвращения (т.е. снижения вероятности возникновения), замедления прогрессии или отсрочки развития двигательного расстройства).
И антипсихотик, и ингибитор VMAT2 вводят в такое время и с такой частотой, которые подходят для лечения нейропсихиатрического нарушения, а ингибитор VMAT2 вводят подходящим способом в такое время и с такой частотой, которые подходят для лечения или предотвращения двигательного расстройства. Ингибитор VMAT2 можно вводить 1, 2 или 3 раза в день. Антипсихотическое лекарственное средство можно вводить 1, 2 или 3 раза в день независимо от ингибитора VMAT2 или вместе с ингибитором VMAT2. В других вариантах осуществления настоящего изобретения антипсихотик вводят каждую неделю, каждые две недели (приблизительно 2 раза в месяц), каждые три недели, каждые четыре недели (приблизительно один раз в месяц), каждые 6 недель или каждые 8 недель.
Суточный диапазон пероральных доз типичных и атипичных антипсихотиков при введении в индивидуальном виде (т.е. в отсутствие ингибитора VMAT2) взрослому субъекту мужского пола с шизофренией приведен в Таблицах 1 и 2, в инструкции по применению лекарственного средства или в данной области техники. Эти рекомендуемые дозы иногда увеличивают или уменьшают в разных популяциях пациентов, таких как популяции женщин, пожилых людей, детей и подростков, и при лечении заболеваний, отличных от шизофрении. Специалисты в медицинской/психиатрической области техники признают, что дозу типичного антипсихотика или атипичного антипсихотика, предоставляющая терапевтическое преимущество субъекту, можно корректировать по сравнению с количествами, указанными в Таблицах 1 и 2, в зависимости от пола, состояния здоровья, возраста, наличия других медицинских или психиатрических состояний или заболеваний, способа введения и формы вводимого лекарственного средства, и от других факторов, известных специалистам в данной области техники. Как описано в настоящей заявке, дозу антипсихотического лекарственного средства, вводимую субъекту, можно существенно уменьшить по сравнению с количествами, указанными в Таблицах 1 и 2, и с описанием в данной области техники, при введении антипсихотического лекарственного средства в комбинации с ингибитором VMAT2. Уменьшение дозы антипсихотического лекарственного средства, необходимой для достижения антипсихотического терапевтического эффекта, при введении лекарственного средства в комбинации с ингибитором VMAT2, (т.е. субтерапевтической дозы антипсихотического лекарственного средства) можно скорректировать так, чтобы доза подходила конкретному субъекту (напр., в соответствии с полом, состоянием здоровья, возрастом, наличием других медицинских или психиатрических состояний или заболеваний, способом введения и формой вводимого лекарственного средства, и другими факторами, известными специалистам в данной области техники). В частных вариантах осуществления настоящего изобретения доза антипсихотического лекарственного средства, применяемого в комбинации с ингибитором VMAT2, может быть по меньшей мере приблизительно на 10% меньше, по меньшей мере приблизительно на 20% меньше, по меньшей мере приблизительно на 25% меньше, по меньшей мере приблизительно на 30% меньше, по меньшей мере приблизительно на 35% меньше, по меньшей мере приблизительно на 40% меньше, по меньшей мере приблизительно на 45% меньше, по меньшей мере приблизительно на 50% меньше, по меньшей мере приблизительно на 55% меньше, по меньшей мере приблизительно на 60% меньше, по меньшей мере приблизительно на 65% меньше, по меньшей мере приблизительно на 70% меньше, по меньшей мере приблизительно на 75% меньше, по меньшей мере приблизительно на 80% меньше, по меньшей мере приблизительно на 85% меньше или по меньшей мере приблизительно на 90% меньше, чем при применении в индивидуальном виде. В других определенных вариантах осуществления настоящего изобретения доза антипсихотического лекарственного средства при применении в комбинации с ингибитором VMAT2 может быть на 10-90% меньше, 10-20% меньше, на 10-25% меньше, на 20-30% меньше, на 25%-30% меньше, на 25%-40% меньше, на 25%-50% меньше, на 25%-60% меньше, на 25%-75% меньше, на 25%-80% меньше, на 30-40% меньше, на 30-60% меньше, на 40-50% меньше, на 40-60% меньше, на 50-60% меньше, на 50-75% меньше, на 60-70% меньше, на 60-75% меньше, на 70%-80% меньше или на 80-90% меньше, чем при применении антипсихотического лекарственного средства в индивидуальном виде. Как описано в настоящей заявке, примеры типичных (т.е. первого поколения) антипсихотических лекарственных средств включают флуфеназин, галоперидол, локсапин, молиндон, перфеназин, пимозид, сульпирид, тиоридазин и трифторперазин. Примеры атипичных (т.е. второго поколения) антипсихотических лекарственных средств включают арипипразол, азенапин, клозапин, илоперидон, оланзапин, палиперидон, кветиапин, рисперидон и зипразидон.
Обычно предпочтительно применять минимальную дозу, достаточную для обеспечения эффективности терапии и минимизирующую токсичность. Обычно субъектов можно контролировать на предмет терапевтической эффективности, проводя клиническую оценку и психиатрическую оценку и применяя исследования, подходящие для состояния, которое является объектом лечения или предотвращения; такие исследования известны специалистам в данной области техники и описаны в настоящей заявке. Уровень соединения, которое вводят субъекту, можно контролировать, определяя уровень соединения в биологической жидкости, например, в крови, во фракции крови (напр., в сыворотке) и/или в моче, и/или в других биологических образцах субъекта. Для измерения уровня соединения на протяжении курса лечения можно использовать любой способ, применяемый на практике в данной области техники для детектирования соединения.
Доза композиции, содержащей антипсихотик и ингибитор VMAT2, описанные в настоящей заявке, для лечения шизофрении или шизоаффективного расстройства или связанного заболевания или нарушения, поздней дискинезии или других состояний или нарушений, описанных в настоящей заявке, может зависеть от состояния субъекта, то есть от стадии заболевания, степени тяжести симптомов, вызванных заболеванием, от общего состояния здоровья, а также от возраста, пола и веса, и от других факторов, известных специалистам в медицинской и психиатрической областях техники. Аналогично можно определить дозу каждого соединения в соответствии с параметрами, известными специалистам в данной области техники и описанными в настоящей заявке.
Описанные в настоящей заявке фармацевтические композиции, содержащие по меньшей мере одно из антипсихотических лекарственных средств, и описанные в настоящей заявке фармацевтические композиции, содержащие по меньшей мере одно из ингибирующих VMAT2 соединений, описанных в настоящей заявке, можно вводить нуждающемуся в этому субъекту любым из нескольких способов, которые эффективно доставляют эффективное количество каждого соединения. Такие способы введения включают, например, пероральный, парентеральный, энтеральный, ректальный, интраназальный, буккальный, подъязычный, внутримышечный и трансдермальный. Композиции, вводимые этими и другими способами введения, описаны более подробно в настоящей заявке. Антипсихотик и ингибитор VMAT2, если их не составляют в форме одной композиции, можно вводить одним и тем же или разными способами.
В определенных вариантах осуществления настоящего изобретения ингибитор VMAT2 (или его физиологически или фармацевтически приемлемая соль) и антипсихотическое лекарственное средство (или его физиологически или фармацевтически приемлемая соль) составляют в форме единой композиции. В других вариантах осуществления настоящего изобретения фармацевтический препарат, указанный в настоящей заявке, содержит фармацевтическую композицию, содержащую антипсихотическое лекарственное средство, и фармацевтическую композицию, содержащую ингибитор, которые для удобства могут называться в настоящей заявке первой фармацевтической композицией и второй фармацевтической композицией. Фармацевтические композиции препарата можно вводить субъекту одновременно или последовательно в любом порядке для обеспечения желаемого терапевтического эффекта (эффектов). Как указано, ссылка на «первую фармацевтическую композицию» и «вторую фармацевтическую композицию» приведена только для удобства и не предназначена для описания очередности введения.
Каждый фармацевтический препарат и каждая фармацевтическая композиция может также содержать по меньшей мере один физиологически (или фармацевтически) приемлемый или подходящий эксципиент. Любой физиологически или фармацевтически подходящий эксципиент или носитель (т.е. нетоксичный материал, не мешающий активности активного ингредиента (ингредиентов)), известный специалистам в данной области техники для применения в фармацевтических композициях, можно применять в композициях и препаратах, описанных в настоящей заявке. Примеры эксципиентов включают растворители и носители, которые поддерживают стабильность и целостность соответствующего соединения.
et al
Remington: The Science and Practice of Pharmacy
th
st
Фармацевтически приемлемые эксципиенты хорошо известны в фармацевтической области техники и описаны, например, в Rowe ., Handbook of Pharmaceutical Excipients: A Comprehensive Guide to Uses, Properties, and Safety, 5 Ed., 2006, и в (Gennaro, 21 Ed. Mack Pub. Co., Easton, PA (2005)). Примеры фармацевтически приемлемых эксципиентов включают стерильный солевой раствор и фосфатно-буферный раствор при физиологическом значении pH. В фармацевтической композиции можно применять консерванты, стабилизаторы, красители, буферы и подобное. Дополнительно также можно применять антиоксиданты и суспендирующие агенты.
Фармацевтические композиции могут быть в форме раствора. Раствор может содержать солевой раствор или стерильную воду и, при желании, может включать антиоксиданты, буферы, бактериостатические агенты и другие распространенные добавки. Альтернативно, фармацевтические композиции могут быть в твердой форме, такой как порошок, таблетки, пилюли или подобное. Композицию, содержащую любые из соединений, описанных в настоящей заявке, можно составлять в форме для замедленного высвобождения. Такие композиции обычно можно получить, применяя хорошо известную технологию, и вводить, например, перорально, ректально или посредством подкожной имплантации или имплантации в другое заданное место. Формы с замедленным высвобождением могут содержать соединение, диспергированное в матриксе носителя и/или содержащееся в резервуаре, окруженном контролирующей скорость высвобождения мембраной. Эксципиенты для применения в таких формах являются биосовместимыми и также могут быть биодеградируемыми; предпочтительно, чтобы форма обеспечивал относительно постоянный уровень высвобождения активного компонента. Количество активного соединения, содержащееся в форме с замедленным высвобождением, зависит от места имплантации, от скорости и ожидаемой продолжительности высвобождения и от природы состояния, подлежащего лечению или предотвращению.
Для пероральных форм по меньшей мере одно из соединений, описанных в настоящей заявке, можно применять в индивидуальном виде или в комбинации с подходящими добавками для получения таблеток, порошков, гранул или капсул, например, с диспергирующими или поверхностно активными агентами; с традиционными добавками, такими как лактоза, маннит, кукурузный крахмал или картофельный крахмал; со связывающими агентами; с дезинтеграторами; с лубрикантами; и, по желанию, с растворителями, буферными агентами, увлажняющими агентами, консервантами, красителями и ароматизаторами. Соединения можно составлять в форме с буферным агентом для обеспечения защиты соединения от низкого pH в среде желудка и/или с кишечнорастворимым покрытием. Соединение, включенное в композиции, можно составлять в форме для пероральной доставки с ароматизатором, напр., в жидкой, твердой или полутвердой форме, и/или с кишечнорастворимым покрытием. Пероральные формы можно выпускать в виде желатиновых капсул, которые могут содержать активное соединение наряду с порошкообразными носителями, таким как лактоза, крахмал, производные целлюлозы, стеарат магния, стеариновая кислота и подобные. Схожие носители и растворители можно применять для получения прессованных таблеток.
Антипсихотики, как правило, вводят в виде пероральных композиций, которые вводят один или два раза в день. Также на рынке представлены быстро рассасывающиеся защечные таблетки и однодозовые инъекции. Лекарственное средство длительного действия обладает сильными преимуществами по сравнению с лекарственным средством для каждодневного приема в отношении улучшенной способности пациенты следовать схеме лечения, что снижает уровни госпитализации и рецидива. Внутримышечные инъекции лекарственного средства замедленного всасывания, обычно обеспечивающие поддержание эффективности в течение 2-4 недель, доступны для арипипразола, флуфеназина, галоперидола, оланзапина, палиперидона и рисперидона. В качестве не ограничивающего примера, антипсихотическое лекарственное средство можно вводить в соответствии со способами, описанными в настоящей заявке, по одноразовой или двухразовой ежедневной схеме (или чаще, при желании), как правило, с приемом одной пилюли за один раз. В определенных конкретных вариантах осуществления настоящего изобретения антипсихотическое лекарственное средство и ингибитор VMAT2 составляют в форме одной таблетки или пилюли для перорального введения. В других вариантах осуществления настоящего изобретения каждый из ингибитора VMAT2 и антипсихотического лекарственного средства по-отдельности составляют в форме разных пилюль или таблеток.
Также представлены наборы, содержащие однократную или многократную дозы каждого из ингибитора VMAT2 и антипсихотического лекарственного средства. Не ограничивающий пример такого набора включает блистерную упаковку. В другом варианте осуществления настоящего изобретения антипсихотик можно вводить в виде внутримышечной инъекции лекарственного средства замедленного всасывания, а ингибитор VMAT2 можно вводить по отдельному ежедневному графику.
В других вариантах осуществления настоящего изобретения препарат или композиция, содержащая антипсихотическое лекарственное средство и ингибитор VMAT2, также содержит один или несколько дополнительных терапевтических агентов, в частности, терапевтических агентов, подходящих для лечения и/или предотвращения нейропсихиатрических состояний и заболеваний, описанных в настоящей заявке. Субъектов с нейропсихиатрическим нарушением, таким как депрессия или биполярное расстройство, лечат с помощью множества терапевтических лекарственных средств, чтобы контролировать симптомы заболевания. Дополнительные терапевтические агенты, которые могут подходить для комбинирования с антипсихотическим лекарственным средством и с ингибитором VMAT2, включают, например, одно или несколько лекарственных средств, применимых для лечения депрессии, биполярного расстройства или других заболеваний. Соответственно, в определенных вариантах осуществления настоящего изобретения представлен фармацевтический препарат, содержащий антипсихотическое лекарственное средство или его фармацевтически приемлемую соль и ингибитор VMAT2 или его фармацевтически приемлемую соль, и один или несколько дополнительных терапевтических агентов, при желании, вместе с одним или несколькими фармацевтически приемлемыми эксципиентами, носителями и/или растворителями.
Следующие примеры приведены в иллюстративных, неограничивающих целях.
ПРИМЕРЫ
ПРИМЕР 1
R,R,R
Исследование антипсихотической активности рисперидона,-DHTBZ и их комбинации в условной реакции избегания
.,
Biobehav. Rev.
Было показано, что исследование условной реакции избегания представляет собой эффективную и надежную доклиническую модель для оценки антипсихотической активности соединений. В модели условной реакции избегания в челночной камере с двумя отсеками крыс тренируют отвечать на условный стимул (звуковой), применяя отрицательное подкрепление. Если животное не переходит в другой отсек после подачи звукового сигнала, на пол отсека, где располагается животное, подают небольшой электрический ток. Крыса учится избегать электроболевого раздражения лап, перемещаясь в другой отсек с началом подачи звукового сигнала, что называется условной реакцией избегания. Переход в другой отсек во время подачи электрического тока называется реакцией бегства. Если крыса не переходит в другой отсек, даже при подаче электрического тока, это считается не состоявшимся бегством. Многочисленные исследования показали, что типичные и атипичные антипсихотические лекарственные средства селективно подавляют условную реакцию избегания, что делает ее идеальным тестом для скрининга потенциальных антипсихотических лекарственных средств (см., напр Wadenberg et al., 1999. 23: 851-62).
Крыс тренировали каждый день на протяжении 3-4 недель. Во время тренировки крыс помещали в челночную камеру с двумя отсеками для исследования условной реакции избегания и делали 20 подходов за тренировку. Подход состоял из 10-секундных предъявлений 80 дБ белого шума с последующей подачей 0,6 мА электрического тока к разным участкам пола камеры в случайном порядке продолжительностью до 20 сек. Интервал между подходами составлял 20-60 сек. Крыса обучалась избегать электроболевого раздражения лап, переходя из одного отсека в другой при предъявлении условного сигнала (условная реакция избегания). Крысу считали достаточно натренированной, если она избегала электроболевого раздражения при подаче условного стимула по меньшей мере в 19 из 20 подходов. Крыс, не удовлетворяющих этому критерию, не применяли.
В день исследования натренированным животным давали освоиться в помещении для исследования в течение 30 минут перед началом теста. Затем им вводили дозу соединения и помещали в челночную камеру с двумя отсеками для проведения исследования условной реакции избегания. Во время исследования проводили 20 подходов для каждой крысы. При каждом подходе подавали условный сигнал (10-секундное предъявление 80 дБ белого шума), а затем подавали электрический ток к полу (0,6 мА электрический ток подавали к разным участкам пола камеры в случайном порядке продолжительностью до 20 сек). Если животное при предъявлении условного сигнала переходило в другой отсек, это считали условной реакцией избегания. Если животное переходило в другой отсек при подаче электрического тока, это считали реакцией бегства. Если животное не переходило в другой отсек при подаче электрического тока, это считали не состоявшимся бегством. Антипсихотическая эффективность проявляется как увеличение количества реакций бегства. Данные анализировали с помощью дисперсионного анализа (ANOVA) и последующих апостериорных сравнений с помощью критерия Бонферрони в соответствующих случаях. Эффект считали достоверным при p<0,05. Выпадающие значения, которые определяли, как отклоняющиеся от среднего в большую или меньшую сторону на две величины стандартного отклонения, выявляли и исключали из всех видов анализа. Результаты представлены как среднее±стандартная ошибка среднего для количества реакций бегства.
Животные:
в данном исследовании применяли самцов крыс Wistar от Harlan (Indianapolis, IN). При получении крысам присваивали уникальные индивидуальные номера, содержали их в группах по 3 крысы в клетке, в поликарбонатных клетках с микронным изолирующим верхним фильтром. Всех крыс осматривали, вынимали и взвешивали перед началом исследования, чтобы проверить их состояние здоровья и пригодность. Крыс держали при 12/12-часовом светотемновом цикле, свет зажигали в 6:00 утра. Комнатную температуру поддерживали между 20 и 23°C, а относительную влажность поддерживали около 50%. На протяжении всего исследования крысы имели свободный доступ к пище и воде. Для каждого исследования крыс случайным образом распределяли по экспериментальным группам. Каждая экспериментальная группа включала 10 животных на момент проведения исследования.
Тестируемые соединения:
рисперидон (0,03, 0,1, 0,3 и 1 мг/кг) растворяли в 10% ДМСО (диметилсульфоксиде) и вводили внутрибрюшинно за 30 мин до проведения исследования объемную дозу 1 мл/кг. (2R,3R,11bR)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ол (называемый в настоящей заявке R,R,R-DHTBZ) (0,15 мг/кг) растворяли в стерильной воде и вводили перорально за 30 мин до проведения исследования объемную дозу 1 мл/кг сразу после введения рисперидона или его инертного носителя. Группе получавших инертный носитель вводили 10% ДМСО (внутрибрюшинно за 30 мин до проведения исследования 1 мл/кг), а затем сразу вводили стерильную воду (перорально 1 мл/кг).
Результаты:
рисперидон (0,1 мг/кг) или R,R,R-DHTBZ (0,15 мг/кг), введенные в индивидуальном виде, не увеличивали количество реакций бегства по сравнению с инертным носителем. Комбинация рисперидона (0,1 мг/кг) и R,R,R-DHTBZ (0,15 мг/кг) в дозах, которые не демонстрировали эффективность при введении в индивидуальном виде, существенно увеличивала количество реакций бегства по сравнению с инертным носителем. Это наблюдение дает веские основания предполагать существование синергического эффекта в отношении антипсихотической активности при введении комбинации рисперидона и R,R,R-DHTBZ.
Дополнительно, добавление R,R,R-DHTBZ (0,15 мг/кг) к рисперидону снижало количество рисперидона, необходимое для достижения антипсихотического эффекта. При введении в индивидуальном виде проявления антипсихотической эффективности в модели условной реакции избегания необходима была доза рисперидона равная 0,3 мг/кг. Добавление R,R,R-DHTBZ (0,15 мг/кг) к рисперидону привело к появлению антипсихотической активности при значительно меньших дозах рисперидона (0,03 и 0,1 мг/кг). Это наблюдение дает веские основания предполагать существование синергического эффекта комбинации в отношении антипсихотической активности.
Фигура 1 показывает график, отражающий статистически достоверное выраженное увеличение количества реакций бегства в исследовании условной реакции избегания для комбинации антипсихотического средства рисперидон (0,1 мг/кг) в комбинации с ингибитором VMAT2 R,R,R-DHTBZ (0,15 мг/кг). Рисперидон (0,1 мг/кг) и R,R,R-DHTBZ (0,15 мг/кг), вводимые по отдельности в тех же дозах, что и при введении в комбинации, не вызывали изменений, отличающихся от результатов, полученных с применением инертного носителя. Эти наблюдения дают веские основания предполагать, что антипсихотическая активность обусловлена синергическим действием комбинации.
50
50
Фигура 2 показывает сдвиг значения ED для рисперидона (0,03, 0,1, 0,3 и 1,0 мг/кг), вводимого крысам в комбинации с R,R,R-DHTBZ (0,15 мг/кг), по сравнению с рисперидоном (0,03, 0,1, 0,3 и 1,0 мг/кг), вводимым в индивидуальном виде. Значение ED рисперидона, рассчитанное по аппроксимирующей кривой как доза соединения, необходимая для развития 50% максимального ответа на соединение, снизилась приблизительно в 6 раз по сравнению со значением равным 0,14 мг/кг при введении рисперидона в индивидуальном виде до значения 0,024 мг/кг при введении рисперидона в комбинации с ингибитором VMAT2 R,R,R-DHTBZ (0,15 мг/кг). Это 6-кратное уменьшение соответствует 83% снижению дозы рисперидона. R,R,R DHTBZ (0,15 мг/кг) был похож на инертный носитель и не проявлял никакой антипсихотической активности при введении в индивидуальном виде. Эти наблюдения дают веские основания предполагать, что антипсихотическая активность обусловлена синергическим действием комбинации.
ПРИМЕР 2
R,R,R
Исследование антипсихотической активности оланзапина,-DHTBZ и их комбинации в условной реакции избегания
R,R,R
Применяли протокол из Примера 1 с атипичным антипсихотиком оланзапином и -DHTBZ.
Тестируемые соединения:
Оланзапин (0,3, 0,6, 1 и 3 мг/кг) растворяли в 10% ДМСО и вводили внутрибрюшинно за 30 мин до проведения исследования объемную дозу 1 мл/кг.
R,R,R
-DHTBZ (0,15 мг/кг) растворяли в стерильной воде и вводили перорально за 30 мин до проведения исследования объемную дозу 1 мл/кг сразу после введения оланзапина или его инертного носителя. Для группы получавших инертный носитель применяли 10% ДМСО (внутрибрюшинно за 30 мин до проведения исследования 1 мл/кг), а затем сразу вводили стерильную воду (перорально 1 мл/кг).
Результаты:
оланзапин (0,6 мг/кг) или R,R,R-DHTBZ (0,15 мг/кг), введенные в индивидуальном виде, не увеличивали количество реакций бегства по сравнению с инертным носителем. Комбинация оланзапина (0,6 мг/кг) и R,R,R-DHTBZ (0,15 мг/кг) в дозах, которые не демонстрировали эффективность при введении в индивидуальном виде, существенно увеличивала количество реакций бегства по сравнению с инертным носителем. Это наблюдение дает веские основания предполагать существование синергического эффекта комбинации в отношении антипсихотической активности.
Дополнительно, добавление R,R,R-DHTBZ (0,15 мг/кг) к оланзапину снижало количество оланзапина, необходимое для достижения антипсихотического эффекта. При введении в индивидуальном виде проявления антипсихотической эффективности в модели условной реакции избегания необходима была доза оланзапина равная 1 мг/кг. Добавление R,R,R-DHTBZ (0,15 мг/кг) к оланзапину привело к развитию антипсихотической активности при значительно меньших дозах оланзапина (0,6 мг/кг). Это наблюдение дает веские основания предполагать существование синергического эффекта комбинации в отношении антипсихотической активности.
Фигура 3 показывает график, отражающий статистически достоверное выраженное увеличение количества реакций бегства в исследовании условной реакции избегания для комбинации антипсихотического средства оланзапина (0,6 мг/кг) в комбинации с ингибитором VMAT2 R,R,R-DHTBZ (0,15 мг/кг). Оланзапин (0,6 мг/кг) и R,R,R-DHTBZ (0,15 мг/кг), вводимые по отдельности в тех же дозах, что и при введении в комбинации, не вызывали изменений, отличающихся от результатов, полученных с применением инертного носителя. Эти наблюдения дают веские основания предполагать, что антипсихотическая активность обусловлена синергическим действием комбинации.
50
50
Фигура 4 показывает сдвиг значения ED для оланзапина (0,3, 0,6, 1,0 и 3,0 мг/кг), вводимого крысам в комбинации с R,R,R-DHTBZ (0,15 мг/кг), по сравнению с оланзапином (0,3, 0,6, 1,0 и 3,0 мг/кг), вводимым в индивидуальном виде. Значение ED оланзапина, рассчитанное по аппроксимирующей кривой как доза соединения, необходимая для развития 50% максимального ответа на соединение, снизилась приблизительно в 2 раза по сравнению со значением равным 1,2 мг/кг при введении оланзапина в индивидуальном виде до значения 0,51 мг/кг при введении оланзапина в комбинации с ингибитором VMAT2 R,R,R-DHTBZ (0,15 мг/кг). Это 2-кратное уменьшение соответствует 50% снижению дозы оланзапина. Эти наблюдения дают веские основания предполагать, что антипсихотическая активность обусловлена синергическим действием комбинации.
ПРИМЕР 3
Исследование антипсихотической активности рисперидона, Соединения 5-1 и их комбинации в условной реакции избегания
Применяли протокол из Примера 1 с атипичным антипсихотиком рисперидоном и Соединением 5-1 (см. синтез Соединения 5-1 в Примере 5).
Тестируемые соединения:
рисперидон (0,1, 0,3 и 1 мг/кг) растворяли в 10% ДМСО и вводили внутрибрюшинно за 30 мин до проведения исследования объемную дозу 1 мл/кг. Соединение 5-1 (0,3 мг/кг) растворяли в стерильной воде и вводили перорально за 60 мин до проведения исследования объемную дозу 1 мл/кг, т.е. за 30 мин до введения рисперидона или его инертного носителя. Группе получавших инертный носитель вводили стерильную воду (перорально 1 мл/кг), а через 30 мин вводили 10% ДМСО (внутрибрюшинно за 30 мин до проведения обработки, 1 мл/кг).
Результаты:
рисперидон (0,1 мг/кг) или Соединение 5-1 (0,3 мг/кг), введенные в индивидуальном виде, не увеличивали количество реакций бегства по сравнению с инертным носителем. Комбинация рисперидона (0,1 мг/кг) и Соединения 5-1 (0,3 мг/кг) в дозах, которые не демонстрировали эффективность при введении в индивидуальном виде, существенно увеличивала количество реакций бегства по сравнению с инертным носителем. Это наблюдение дает веские основания предполагать существование синергического действия на антипсихотическую активность при введении комбинации рисперидона и Соединения 5-1.
Дополнительно, добавление Соединение 5-1 (0,3 мг/кг) к рисперидону снижало количество рисперидона, необходимое для достижения антипсихотического эффекта. При введении в индивидуальном виде проявления антипсихотической эффективности в модели условной реакции избегания необходима была доза рисперидона равная 0,3 мг/кг. Добавление Соединения 5-1 (0,3 мг/кг) к рисперидону привело к развитию антипсихотической активности при значительно меньших дозах рисперидона (0,1 мг/кг). Это наблюдение дает веские основания предполагать существование синергического эффекта комбинации в отношении антипсихотической активности.
Фигура 5 показывает график, отражающий статистически достоверное выраженное увеличение количества реакций бегства в исследовании условной реакции избегания для комбинации антипсихотического средства рисперидон (0,1 мг/кг) в комбинации с ингибитором VMAT2 Соединением 5-1 (0,3 мг/кг). Рисперидон (0,1 мг/кг) и Соединение 5-1 (0,3 мг/кг), вводимые по отдельности в тех же дозах, что и при введении в комбинации, не вызывали изменений, отличающихся от результатов, полученных с применением инертного носителя. Эти наблюдения дают веские основания предполагать, что антипсихотическая активность обусловлена синергическим действием комбинации.
Фигура 6 показывает сдвиг дозы рисперидона (0,1 мг/кг), вводимого крысам в комбинации с Соединением 5-1 (0,3 мг/кг), по сравнению с рисперидоном (0,1, 0,3 и 1,0 мг/кг), вводимым в индивидуальном виде. Доза рисперидона, рассчитанная по аппроксимирующей кривой как доза соединения, необходимая для развития 8 реакций бегства, снизилась приблизительно в 7 раз по сравнению со значением равным 0,26 мг/кг при введении рисперидона в индивидуальном виде до значения 0,038 мг/кг при введении рисперидона в комбинации с ингибитором VMAT2 Соединением 5-1 (0,3 мг/кг). Это 7-кратное уменьшение соответствует 86% снижению дозы рисперидона. Соединение 5-1 (0,3 мг/кг) было похоже на инертный носитель и не проявляло никакой антипсихотической активности при введении в индивидуальном виде. Эти наблюдения дают веские основания предполагать, что антипсихотическая активность обусловлена синергическим действием комбинации.
ПРИМЕР 4
Исследование антипсихотической активности оланзапина, Соединения 5-1 и их комбинации в условной реакции избегания
Применяли протокол, описанный в Примерах 1 и 2, с атипичным антипсихотиком оланзапином и Соединением 5-1 (см. Пример 5).
Тестируемые соединения:
оланзапин (0,6, 1 и 3 мг/кг) растворяли в 10% ДМСО и вводили внутрибрюшинно за 30 мин до проведения исследования объемную дозу 1 мл/кг. Соединение 5-1 (0,3 мг/кг) растворяли в стерильной воде и вводили перорально за 60 мин до проведения исследования объемную дозу 1 мл/кг, т.е. за 30 мин до введения оланзапина или его инертного носителя. Группе получавших инертный носитель вводили стерильную воду (перорально 1 мл/кг), а через 30 мин вводили 10% ДМСО (внутрибрюшинно за 30 мин до проведения обработки, 1 мл/кг).
Результаты:
оланзапин (0,6 мг/кг) или Соединение 5-1 (0,3 мг/кг), введенные в индивидуальном виде, не увеличивали количество реакций бегства по сравнению с инертным носителем. Комбинация оланзапина (0,6 мг/кг) и Соединения 5-1 (0,3 мг/кг) в дозах, которые не демонстрировали эффективность при введении в индивидуальном виде, существенно увеличивала количество реакций бегства по сравнению с инертным носителем. Это наблюдение дает веские основания предполагать существование синергического эффекта в отношении антипсихотической активности при введении комбинации оланзапина и Соединения 5-1.
Дополнительно, комбинирование Соединения 5-1 (0,3 мг/кг) с оланзапином снижало количество оланзапина, необходимое для достижения антипсихотического эффекта. При введении в индивидуальном виде для проявления антипсихотической эффективности в модели условной реакции избегания необходима была доза оланзапина равная 1 мг/кг. Добавление Соединения 5-1 (0,3 мг/кг) к оланзапину привело к развитию антипсихотической активности при значительно меньших дозах оланзапина (0,6 мг/кг). Это наблюдение дает веские основания предполагать существование синергического эффекта комбинации в отношении антипсихотической активности.
Фигура 7 показывает график, отражающий статистически достоверное выраженное увеличение количества реакций бегства в исследовании условной реакции избегания для комбинации антипсихотического средства оланзапин (0,6 мг/кг) в комбинации с ингибитором VMAT2 Соединением 5-1 (0,3 мг/кг). Оланзапин (0,6 мг/кг) и Соединение 5-1 (0,3 мг/кг), вводимые по отдельности в тех же дозах, что и при введении в комбинации, не вызывали изменений, отличающихся от результатов, полученных с применением инертного носителя. Эти наблюдения дают веские основания предполагать, что антипсихотическая активность обусловлена синергическим действием комбинации.
Фигура 8 показывает сдвиг значения дозы оланзапина (0,6 мг/кг), вводимого крысам в комбинации с Соединением 5-1 (0,3 мг/кг), по сравнению с оланзапином (0,6, 1 и 3 мг/кг), вводимым в индивидуальном виде. Доза оланзапина, рассчитанная по аппроксимирующей кривой как доза соединения, необходимая для развития 5 реакций бегства, снизилась приблизительно в 7 раз по сравнению со значением равным 0,93 мг/кг при введении оланзапина в индивидуальном виде до значения 0,18 мг/кг при введении оланзапина в комбинации с ингибитором VMAT2 Соединением 5-1 (0,3 мг/кг). Это 5-кратное уменьшение соответствует 80% снижению дозы оланзапина. Соединение 5-1 (0,3 мг/кг) было похоже на инертный носитель и не проявляло никакой антипсихотической активности при введении в индивидуальном виде. Эти наблюдения дают веские основания предполагать, что антипсихотическая активность обусловлена синергическим действием комбинации.
ПРИМЕР 5
[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол
Стадия 5A:
(3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-карбонитрил
5a
5a
5a
5a
5a
2
4
+
В трехгорлую круглодонную колбу объемом 3 л вносили ДМСО (1,1 л) и TOSMIC (п-толилсульфонилметилизоцианид) (104 г, 532,5 ммоль, 1,3 экв.). К этой смеси добавляли сразу всю порцию трет-бутоксида калия (KO-t-Bu) (119,5 г, 1,065 моль) при комнатной температуре (22°C). Наблюдался экзотермический эффект, и температура смеси повысилась до 39°C. Затем к реакционной смеси медленно на протяжении 25 минут добавляли суспензию тетрабеназина (130 г, 410 ммоль) в ДМСО (500 мл) (наблюдался небольшой экзотермический эффект). К этой смеси добавляли EtOH (10,5 мл) и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение 3 ч. Анализ смеси с помощью жидкостной хроматографии с масс-спектрометрией выявил наличие  и исходного материала в соотношении ~4:1. Смесь выливали в холодную воду (9 л). Затем смесь экстрагировали EtAOc (4 л). Водный слой экстрагировали EtOAc (2 л). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (2 л), высушивали над NaSO и концентрировали. Остаток растворяли в ацетоне (200 мл) и наносили на силикагелевую колонку (2 кг силикагеля, заполненного гексанами). Колонку элюировали сначала гексанами (2,5 л), затем 5-20% ацетоном в гексанах. Фракции, содержащие  и другие примеси, объединяли и концентрировали с образованием оранжевого масла (72 г), которое растворяли в ацетоне (100 мл) и наносили на силикагелевую колонку (1 кг силикагеля, заполненного гексанами). Колонку элюировали сначала гексанами (1 л), затем 5% ацетоном в гексанах (2 л), 10% ацетоном в гексанах (2 л), 15% ацетоном в гексанах (2 л) и 20% ацетоном в гексанах (2 л). Фракции с чистотой >90% объединяли и концентрировали с образованием (3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-карбонитрила  в виде твердого вещества оранжевого цвета(61 г, масса/заряд 329,2 [MH]). Фракции, содержащие смесь  и исходного материала, собирали и концентрировали с образованием 48 г материала, который растворяли в ДМСО (50 мл) и добавляли к смеси TOSMIC (25 г) и KO-t-Bu (28,7 г) в ДМСО (250 мл), как показано выше. Остаток растворяли в ацетоне (10 мл) и наносили на силикагелевую колонку (600 г силикагеля, заполненного гексанами). Колонку элюировали сначала гексанами (800 мл), затем 5-20% ацетоном в гексанах. Фракции, содержащие продукт, объединяли и концентрировали с образованием оранжевого твердого  (33 г).
Стадия 5B:
(3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-карбоновая кислота
5a
5b
).
2
4
+
В реактор под давлением объемом 1 галлон вносили суспензию  (94 г, 286 ммоль) в метаноле (940 мл) и NaOH (343 г, 8,6 моль) в воде (940 мл). Эту смесь перемешивали при 120°C (внутренняя температура) в течение 67 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и переносили в круглодонную колбу. Смесь концентрировали в роторном вакуумном испарителе до ~1 л. Затем доводили pH смеси до 7 с помощью 6N HCl при охлаждении. Смесь экстрагировали ДХМ (дихлорметаном) (2×3 л и 1×2 л). Объединенные органические слои высушивали над NaSO и концентрировали с образованием темного остатка (88 г). Темный остаток собирали ацетонитрилом (500 мл) и перемешивали в течение 30 мин. смесь фильтровали и твердый остаток промывали ацетонитрилом (50 мл). Твердый остаток высушивали в вакууме в течение 2 часов с образованием светло-коричневого твердого вещества (42 г, 49%). Этот твердый остаток объединяли с фильтратом и концентрировали до получения остатка. Остаток растворяли в ДХМ (150 мл) и наносили на силикагелевую колонку, наполненную ДХМ. Колонку элюировали 0-25% метанолом в ДХМ. Фракции, содержащие продукт, объединяли и концентрировали с образованием (3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-карбоновой кислоты  в виде светло-коричневого твердого вещества (71 г, выход 71%, чистота 92%, масса/заряд 348,2 [MH]
Стадия 5C:
[(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанол
5b
(5-1)
2
4
+
В круглодонную колбу объемом 3 л вносили  (73,5 г, 211,5 ммоль) и ТГФ (тетрагидрофуран) (1,48 л). Эту смесь перемешивали и охлаждали до 10°C (внутренняя температура). К этой смеси медленно добавляли 1 М алюмогидрид лития в ТГФ (423 мл, 423 ммоль) в течение 20 мин, поддерживая температуру ниже 20°C. Охлаждающую баню удаляли и смесь нагревали до комнатной температуры. Смесь нагревали до 55°C и перемешивали в течение 30 мин. Смесь охлаждали до комнатной температуры, а затем до 10°C. Медленно добавляли EtOAc (30 мл), чтобы блокировать непрореагировавший алюмогидрид лития, а затем добавляли этанол (30 мл). Затем к смеси добавляли воду (150 мл). Затем смесь концентрировали для удаления большинства органических растворителей. Затем смесь разводили водой (700 мл) и ДХМ (1 л). Суспензию фильтровали через подложку из целита. Осадок на фильтре промывали ДХМ (2×500 мл). Объединенные фильтраты помещали в делительную воронку и разделяли слои. Водный слой экстрагировали ДХМ (1 л). Объединенные органические слои высушивали над NaSO и концентрировали с образованием темного остатка. Проводили хроматографию остатка на силикагелевой колонке, применяя 0-10% метанол в ДХМ в качестве элюента. Фракции, содержащие продукт, объединяли и концентрировали с образованием пенистого оранжевого остатка. К этому остатку добавляли гексаны (100 мл) и концентрировали при пониженном давлении при 45°C в течение 2 ч с образованием [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанола (также называемого в настоящей заявке Соединением 5-1) в виде светло-коричневого твердого остатка (51 г, 72%, 95% чистота ВЭЖХ при 220 нм, масса/заряд 334,2 [MH]). Этот материал можно далее очистить посредством хроматографии на силикагеле, применяя 0-10% метанол в ДХМ или этилацетат в качестве элюента.
Стадия 5D: соль [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанола и HCl
5-1
5-1 HCl)
+
В круглодонную колбу объемом 2 л вносили  (43 г, 129 ммоль) и диэтиловый эфир (860 мл). Эту смесь перемешивали и охлаждали до 15 °C (внутренняя температура). К этой смеси медленно добавляли 2 M HCl в диэтиловом эфире (97 мл, 193 ммоль) в течение 15 мин. Образовывался белый преципитат. Охлаждающую баню удаляли и смесь нагревали до комнатной температуры. Затем смесь перемешивали в течение 45 мин. Смесь фильтровали и осадок на фильтре промывали диэтиловым эфиром (100 мл), МТБЭ (метил-трет-бутиловым эфиром) (100 мл), а затем гексанами (100мл). Затем твердый остаток высушивали в вакуумном сушильном шкафу при 40°C в течение 18 ч. Соль [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанола и HCl ( выделяли в виде беловатого твердого остатка (44,7 г, выход 94%, масса/заряд 334,2 [MH]).
ПРИМЕР 6
Способы определения ингибирующей VMAT2 активности соединения
Ниже приведены примеры техник определения способности соединения ингибировать VMAT2.
.,
Mol. Pharmacol
J. Neurochem
.,
Peptides
3
Процедура представляет собой адаптированную процедуру, описанную ранее (см., напр Near, (1986), . 30: 252-57; Teng, et al., . 71, 258-65, 1998). Гомогенаты тромбоцитов человека или переднего мозга крыс Sprague-Dawley получали посредством гомогенизации, а затем промывали центрифугированием, как описано ранее (см., напрHoare et al., (2003)  24:1881-97). В общем объеме 0,2 мл в 96-луночных планшетах с низким связыванием (Corning #3605) проводили конкурентное связывание Соединения 5-1 и R,R,R-DHTBZ против 6 нМ H-дигидротетрабеназина (American Radiolabeled Chemicals, Kd 2,6 нМ) на гомогенате переднего мозга крыс (100 мкг мембранного белка в лунке) или на гомогенате тромбоцитов человека (50 мкг мембранного белка в лунке) и связывающем VMAT2 буфере (фосфатно-солевой буфер Дульбекко, 1 мМ ЭДТА, pH 7,4). После инкубации при 25°C в течение 2 часов связавшийся радиоактивно меченый лиганд собирали с помощью высокоскоростного фильтрования на стекловолоконных фильтрах GF/B с помощью прибора Unifilter-96 Harvester (PerkinElmer). Пластины фильтра предварительно обрабатывали в течение 10 минут 0,1% полиэтиленимином и после сбора пластины фильтра промывали 800 мкл связывающего VMAT2 буфера. Количество связавшегося радиоактивно меченого лиганда определяли с помощью сцинтилляционных измерений, применяя Topcount NXT (PerkinElmer). Результаты исследования конкурентного связывания представлены ниже в Таблице 3 и в Таблице 4.
Таблица 3
. Аффинность к VMAT2 из переднего мозга крыс по данным исследований конкурентного связывания
Соединение
pKi (n)
Ki (нМ)
Соединение 5-1
8,6 ± 0,1 (2)
2,6
R,R,R-DHTBZ
8,7 ± 0,2 (6)
1,9
Таблица 4.
Аффинность к VMAT2 из тромбоцитов человека по данным исследований конкурентного связывания
Соединение
pKi (n)
Ki (нМ)
Соединение 5-1
8,3 ± 0,1 (2)
5,2
R,R,R-DHTBZ
8,6 ± 0,3 (3)
2,6
J. Neurochem
Ниже представлена другая техника, которую можно применять в обычной практике для определения способности соединения ингибировать VMAT2. Следующая процедура является адаптацией описанного ранее способа (см. Teng, et al., . 71, 258-65, 1998).
2
2
2
Поучение стриарных везикул крысы: полосатые тела из трех крыс объединяют и гомогенизируют в 0,32 M сахарозе. Гомогенат затем центрифугируют при 2000×g в течение 10 мин при 4°C, а образующийся в результате супернатант центрифугируют при 10000×g в течение 30 мин при 4°C. Образующийся в результате осадок, содержащий обогащенную синаптосомную фракцию (2 мл), подвергают осмотическому шоку, добавляя 7 мл дистиллированной HO, и впоследствии гомогенизируют суспензию. Осмолярность восстанавливают, добавляя 0,9 мл 0,25 M HEPES и 0,9 мл буфера 1,0 M дикалиевой соли нейтральной L-(+)-винной кислоты (pH 7,5), а затем центрифугируя в течение 20 мин (20000×g при 4°C). Затем супернатант центрифугировали в течение 60 мин (55000×g при 4°C), а образующийся в результате супернатант центрифугировали в течение 45 мин (100000×g при 4°C). Образующийся в результате осадок ресуспендировали в 25 мМ HEPES, 100 мМ дикалиевой соли L-(+)- винной кислоты, 5 мМ MgCl, 10 мМ NaCl, 0,05 мМ ЭГТА, pH 7,5 до концентрации белка равной 1-2 мг/мл и хранили при -80°C до 3 недель без детектируемой потери связывающей активности. Непосредственно перед применением конечный осадок ресуспендировали в связывающем буфере (25 мМ HEPES, 100 мМ дикалиевой соли L-(+)- винной кислоты, 5 мМ MgCl, 10 мМ NaCl, 0,05 мМ ЭГТА, 0,1 мМ ЭДТА, 1,7 мМ аскорбиновой кислоты, pH 7,4).
3
-6
-12
3
Связывание [H]-дигидротетрабеназина (DHTBZ): аликвоты суспензии везикул (0,16 мл, 15 мкг белка/мл) инкубируют с конкурирующими соединениями (в интервале от 10 до 10 М) и 2 нM [H]- дигидротетрабеназином (HTBZ; специфичная активность: 20 Ки/ммоль, American Radiolabeled Chemicals, Inc.) в течение 1 ч при комнатной температуре в общем объеме 0,5 мл. реакцию останавливают с помощью высокоскоростной фильтрации образцов через фильтры Whatman GF/F с помощью прибора для сбора клеток Brandel cell harvester. Неспецифичное связывание определяют с помощью 20 мкМ тетрабеназина (TBZ). Фильтры предварительно погружают на 2 ч в ледяной полиэтиленимин (0,5%). После трехкратной промывки фильтров ледяным буфером фильтры помещают в сцинтилляционные флаконы с 10 мл сцинтилляционной смеси. Связанную радиоактивность определяют с помощью сцинтилляционной спектрометрии.
Различные описанные в настоящей заявке варианты осуществления изобретения можно комбинировать с образованием других вариантов осуществления настоящего изобретения. В настоящей заявке описаны следующие примеры вариантов осуществления настоящего изобретения.
Вариант осуществления настоящего изобретения 1. Способ лечения нейропсихиатрического нарушения у субъекта, включающий введение субъекту (a) антипсихотического лекарственного средства и (b) ингибитора VMAT2, где терапевтически эффективное количество антипсихотического лекарственного средства, вводимое субъекту, меньше терапевтически эффективного количества антипсихотического лекарственного средства при введении в отсутствии ингибитора VMAT2.
Вариант осуществления настоящего изобретения 2. Способ по варианту осуществления настоящего изобретения 1, где нейропсихиатрическое нарушение является шизофренией, шизоаффективным расстройством, биполярным расстройством, большим депрессивным расстройством или аутизмом.
Вариант осуществления настоящего изобретения 3. Способ по варианту осуществления настоящего изобретения 1 или по варианту осуществления настоящего изобретения 2, где антипсихотическое лекарственное средство и ингибитор VMAT2 вводят совместно.
Вариант осуществления настоящего изобретения 4. Способ по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 1-3, где антипсихотическое лекарственное средство и ингибитор VMAT2 составляют в форме одной фармацевтической композиции.
Вариант осуществления настоящего изобретения 5. Способ по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 1-3, где антипсихотическое лекарственное средство составляют в форме первой фармацевтической композиции, а ингибитор VMAT2 составляют в форме второй фармацевтической композиции.
Вариант осуществления настоящего изобретения 6. Способ по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 1-5, где антипсихотическое лекарственное средство является типичным антипсихотическим лекарственным средством.
Вариант осуществления настоящего изобретения 7. Способ по варианту осуществления настоящего изобретения 6, где типичное антипсихотическое лекарственное средство является флуфеназином, галоперидолом, локсапином, молиндоном, перфеназином, пимозидом, сульпиридом, тиоридазином или трифторперазином.
Вариант осуществления настоящего изобретения 8. Способ по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 1-5, где антипсихотическое лекарственное средство является атипичным антипсихотическим лекарственным средством.
Вариант осуществления настоящего изобретения 9. Способ по варианту осуществления настоящего изобретения 8, где атипичное антипсихотическое лекарственное средство является арипипразолом, азенапином, клозапином, илоперидоном, оланзапином, палиперидоном, кветиапином, рисперидоном или зипразидоном.
Вариант осуществления настоящего изобретения 10. Способ по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 1-9, где терапевтически эффективное количество антипсихотического лекарственного средства на 10-90% меньше терапевтически эффективного количества антипсихотического лекарственного средства при введении в отсутствие ингибитора VMAT2.
Вариант осуществления настоящего изобретения 11. Способ по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 1-9, где терапевтически эффективное количество антипсихотического лекарственного средства по меньшей мере на 25% меньше терапевтически эффективного количества антипсихотического лекарственного средства при введении в отсутствие ингибитора VMAT2.
Вариант осуществления настоящего изобретения 12. Способ по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 1-9, где терапевтически эффективное количество антипсихотического лекарственного средства по меньшей мере на 50% меньше терапевтически эффективного количества антипсихотического лекарственного средства при введении в отсутствие ингибитора VMAT2.
Вариант осуществления настоящего изобретения 13. Способ по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 1-12, где ингибитор VMAT2 является тетрабеназином (3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-оном).
Вариант осуществления настоящего изобретения 14. Способ по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 1-12, где ингибитор VMAT2 является (2R,3R,11bR)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-олом (R,R,R DHTBZ), или его предшественником.
Вариант осуществления настоящего изобретения 15. Способ по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 1-12, где ингибитор VMAT2 является сложным эфиром (S)-2-амино-3-метил-масляной кислоты и (2R,3R,11bR)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ила.
Вариант осуществления настоящего изобретения 16. Способ по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 1-12, где ингибитор VMAT2 является [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанолом или его предшественником.
6
6
Вариант осуществления настоящего изобретения 17. Способ по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 1-12, где ингибитор VMAT2 является 3-изобутил-9,10-d-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-оном (d-TBZ).
Вариант осуществления настоящего изобретения 18. Фармацевтический препарат для применения в лечении нейропсихиатрического нарушения, при этом указанный препарат содержит антипсихотическое лекарственное средство и ингибитор VMAT2, где препарат содержит такое количество антипсихотического лекарственного средства, которое является субтерапевтическим количеством при применении в отсутствие ингибитора VMAT2.
Вариант осуществления настоящего изобретения 19. Фармацевтический препарат по варианту осуществления настоящего изобретения 18, где нейропсихиатрическое нарушение является шизофренией, шизоаффективным расстройством, биполярным расстройством, большим депрессивным расстройством или аутизмом.
Вариант осуществления настоящего изобретения 20. Фармацевтический препарат по варианту осуществления настоящего изобретения 18 или по варианту осуществления настоящего изобретения 19, где антипсихотическое лекарственное средство является типичным антипсихотическим лекарственным средством.
Вариант осуществления настоящего изобретения 21. Фармацевтический препарат по варианту осуществления настоящего изобретения 20, где типичное антипсихотическое лекарственное средство является флуфеназином, галоперидолом, локсапином, молиндоном, перфеназином, пимозидом, сульпиридом, тиоридазином или трифторперазином.
Вариант осуществления настоящего изобретения 22. Фармацевтический препарат по варианту осуществления настоящего изобретения 18 или по варианту осуществления настоящего изобретения 19, где антипсихотическое лекарственное средство является атипичным антипсихотическим лекарственным средством.
Вариант осуществления настоящего изобретения 23. Фармацевтический препарат по варианту осуществления настоящего изобретения 22, где атипичное антипсихотическое лекарственное средство является арипипразолом, азенапином, клозапином, илоперидоном, оланзапином, палиперидоном, кветиапином, рисперидоном или зипразидоном.
Вариант осуществления настоящего изобретения 24. Фармацевтический препарат по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 18-23, где антипсихотическое лекарственное средство составляют в форме первой фармацевтической композиции, а ингибитор VMAT2 составляют в форме второй фармацевтической композиции.
Вариант осуществления настоящего изобретения 25. Фармацевтический препарат по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 18-24, где терапевтически эффективное количество антипсихотического лекарственного средства на 10-90% меньше терапевтически эффективного количества антипсихотического лекарственного средства при введении в отсутствие ингибитора VMAT2.
Вариант осуществления настоящего изобретения 26. Фармацевтический препарат по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 18-24, где терапевтически эффективное количество антипсихотического лекарственного средства по меньшей мере на 25% меньше терапевтически эффективного количества антипсихотического лекарственного средства при введении в отсутствие ингибитора VMAT2.
Вариант осуществления настоящего изобретения 27. Фармацевтический препарат по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 18-24, где терапевтически эффективное количество антипсихотического лекарственного средства по меньшей мере на 50% меньше терапевтически эффективного количества антипсихотического лекарственного средства при введении в отсутствие ингибитора VMAT2.
Вариант осуществления настоящего изобретения 28. Фармацевтический препарат по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 18-27, где ингибитор VMAT2 является тетрабеназином (3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-оном).
Вариант осуществления настоящего изобретения 29. Фармацевтический препарат по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 18-27, где ингибитор VMAT2 является (2R,3R,11bR)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-олом (R,R,R DHTBZ), или его предшественником.
Вариант осуществления настоящего изобретения 30. Фармацевтический препарат по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 18-27, где ингибитор VMAT2 является сложным эфиром (S)-2-амино-3-метил-масляной кислоты и (2R,3R,11bR)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ила.
Вариант осуществления настоящего изобретения 31. Фармацевтический препарат по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 18-27, где ингибитор VMAT2 является [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанолом или его предшественником.
6
6
Вариант осуществления настоящего изобретения 32. Фармацевтический препарат по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 18-27, где ингибитор VMAT2 является 3-изобутил-9,10-d-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-оном (d-TBZ).
Вариант осуществления настоящего изобретения 33. Способ повышения эффективности антипсихотического лекарственного средства, включающий введение субъекту комбинации (a) антипсихотического лекарственного средства и (b) ингибитора VMAT2.
Вариант осуществления настоящего изобретения 34. Способ по варианту осуществления настоящего изобретения 33, где повышение эффективности антипсихотического лекарственного средства включает уменьшение количества антипсихотика, являющегося терапевтически эффективным.
Вариант осуществления настоящего изобретения 35. Способ по варианту осуществления настоящего изобретения 33, где количество антипсихотического лекарственного средства, являющееся терапевтически эффективным, на 10-90% меньше количества антипсихотического лекарственного средства, являющегося терапевтически эффективным при введении в отсутствие ингибитора VMAT2.
Вариант осуществления настоящего изобретения 36. Способ по варианту осуществления настоящего изобретения 33, где количество антипсихотического лекарственного средства, являющееся терапевтически эффективным, по меньшей мере на 25% меньше количества антипсихотического лекарственного средства, являющегося терапевтически эффективным при введении антипсихотического лекарственного средства в отсутствие ингибитора.
Вариант осуществления настоящего изобретения 37. Способ по варианту осуществления настоящего изобретения 33, где количество антипсихотического лекарственного средства, являющееся терапевтически эффективным, по меньшей мере на 50% меньше количества антипсихотического лекарственного средства, являющегося терапевтически эффективным при введении антипсихотического лекарственного средства в отсутствие ингибитора.
Вариант осуществления настоящего изобретения 38. Способ по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 33-37, где антипсихотическое лекарственное средство является типичным антипсихотическим лекарственным средством.
Вариант осуществления настоящего изобретения 39. Способ по варианту осуществления настоящего изобретения 38, где типичное антипсихотическое лекарственное средство является флуфеназином, галоперидолом, локсапином, молиндоном, перфеназином, пимозидом, сульпиридом, тиоридазином или трифторперазином.
Вариант осуществления настоящего изобретения 40. Способ по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 33-37, где антипсихотическое лекарственное средство является атипичным антипсихотическим лекарственным средством.
Вариант осуществления настоящего изобретения 41. Способ по варианту осуществления настоящего изобретения 40, где атипичное антипсихотическое лекарственное средство является арипипразолом, азенапином, клозапином, илоперидоном, оланзапином, палиперидоном, кветиапином, рисперидоном или зипразидоном.
Вариант осуществления настоящего изобретения 42. Способ по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 33-41, где ингибитор VMAT2 является тетрабеназином (3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-оном).
Вариант осуществления настоящего изобретения 43. Способ по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 33-41, где ингибитор VMAT2 является (2R,3R,11bR)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-олом (R,R,R DHTBZ), или его предшественником.
Вариант осуществления настоящего изобретения 44. Способ по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 33-41, где ингибитор VMAT2 является сложным эфиром (S)-2-амино-3-метил-масляной кислоты и (2R,3R,11bR)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ила.
Вариант осуществления настоящего изобретения 45. Способ по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 33-41, где ингибитор VMAT2 является [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанолом или его предшественником.
6
6
Вариант осуществления настоящего изобретения 46. Способ по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 33-41, где ингибитор VMAT2 является 3-изобутил-9,10-d-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-оном (d-TBZ).
Вариант осуществления настоящего изобретения 47. Фармацевтический препарат, содержащий антипсихотическое лекарственное средство и ингибитор VMAT2, где препарат эффективен в лечении нейропсихиатрического нарушения и где количество антипсихотического лекарственного средства является субтерапевтическим по сравнению с терапевтическим количеством антипсихотического лекарственного средства при применении в индивидуальном виде для лечения нейропсихиатрического нарушения в отсутствие ингибитора VMAT2.
Вариант осуществления настоящего изобретения 48. Фармацевтический препарат, содержащий синергически эффективные количества антипсихотического лекарственного средства и ингибитора VMAT2.
Вариант осуществления настоящего изобретения 49. Фармацевтический препарат по варианту осуществления настоящего изобретения 47 или по варианту осуществления настоящего изобретения 48, где антипсихотическое лекарственное средство является типичным антипсихотическим лекарственным средством.
Вариант осуществления настоящего изобретения 50. Фармацевтическая композиция по варианту осуществления настоящего изобретения 49, где типичное антипсихотическое лекарственное средство является флуфеназином, галоперидолом, локсапином, молиндоном, перфеназином, пимозидом, сульпиридом, тиоридазином или трифторперазином.
Вариант осуществления настоящего изобретения 51. Фармацевтический препарат по варианту осуществления настоящего изобретения 47 или по варианту осуществления настоящего изобретения 48, где антипсихотическое лекарственное средство является атипичным антипсихотическим лекарственным средством.
Вариант осуществления настоящего изобретения 52. Фармацевтическая композиция по варианту осуществления настоящего изобретения 51, где атипичное антипсихотическое лекарственное средство является арипипразолом, азенапином, клозапином, илоперидоном, оланзапином, палиперидоном, кветиапином, рисперидоном или зипразидоном.
Вариант осуществления настоящего изобретения 53. Фармацевтический препарат по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 47-52, где ингибитор VMAT2 является тетрабеназином (3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-оном).
Вариант осуществления настоящего изобретения 54. Фармацевтический препарат по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 47-52, где ингибитор VMAT2 является (2R,3R,11bR)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-олом (R,R,R DHTBZ), или его предшественником.
Вариант осуществления настоящего изобретения 55. Фармацевтический препарат по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 47-52, где ингибитор VMAT2 является сложным эфиром (S)-2-амино-3-метил-масляной кислоты и (2R,3R,11bR)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ила.
Вариант осуществления настоящего изобретения 56. Фармацевтический препарат по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 47-52, где ингибитор VMAT2 является [(2R,3S,11bR)-9,10-диметокси-3-(2-метилпропил)-1H,2H,3H,4H,6H,7H,11bH-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-ил]метанолом или его предшественником.
6
6
Вариант осуществления настоящего изобретения 57. Фармацевтический препарат по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 47-52, где ингибитор VMAT2 является 3-изобутил-9,10-d-диметокси-1,3,4,6,7,11b-гексагидро-2H-пиридо[2,1-a]изохинолин-2-оном (d-TBZ).
Вариант осуществления настоящего изобретения 58. Фармацевтический препарат по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 47-57, где антипсихотическое лекарственное средство и ингибитор VMAT2 составляют в форме одной фармацевтической композиции по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым эксципиентом.
Вариант осуществления настоящего изобретения 59. Фармацевтический препарат по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 47-58, где антипсихотическое лекарственное средство составляют в форме первой фармацевтической композиции по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым эксципиентом, а ингибитор VMAT2 составляют в форме второй фармацевтической композиции по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым эксципиентом.
Вариант осуществления настоящего изобретения 60. Фармацевтическая композиция по любому из вариантов осуществления настоящего изобретения 47-59, где нейропсихиатрическое нарушение является шизофренией, шизоаффективным расстройством, биполярным расстройством, большим депрессивным расстройством или аутизмом.
Все патенты США, публикации патентных заявок США, заявки на патент США, иностранные патенты, иностранные публикации патентных заявок и непатентные публикации, упомянутые в этом описании изобретения и/или перечисленные в Информационном листке заявки, включены в настоящую заявку в полном объеме посредством ссылки. Заявка на патент США № 61/937223, поданная 7 февраля 2014 г., включена включены в настоящую заявку в полном объеме. Аспекты вариантов осуществления настоящего изобретения можно модифицировать, при необходимости, для включения сущности разных патентов, заявок и публикаций с образованием других вариантов осуществления настоящего изобретения.
Эти и другие изменения можно вносить в варианты осуществления настоящего изобретения в свете приведенного выше подробного описания изобретения. Хотя конкретные варианты осуществления настоящего изобретения описаны в настоящей заявке в иллюстративных целях, можно вносить различные модификации без отступления от сути и объема настоящего изобретения. Как правило, в следующей формуле изобретения применяемые термины предназначены не для ограничения формулы изобретения конкретными вариантами осуществления настоящего изобретения, раскрытыми в описании изобретения и в формуле изобретения, а предназначены для включения всех возможных вариантов осуществления настоящего изобретения наряду с полным объемом эквивалентов, к которым относится настоящая формула изобретения. Соответственно, формула изобретения не ограничена настоящим раскрытием.