СПОСОБ ЭКСПРЕССИИ

1. Способ получения белка посредством микроорганизма, содержащий стадии:
(a) введение экспрессионной конструкции в микроорганизма, которая содержит промотор и нуклеиновую кислоту, кодирующую белок;
(b) экспрессия белка в микроорганизме, где микроорганизм относится к виду Bacillus pumilus.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что промотор содержит последовательность нуклеиновой кислоты, которая выбирается из:
(a) последовательности нуклеиновой кислоты, идентичной последовательности нуклеиновой кислоты SEQ ID NO. 1, на по меньшей мере 80%;
(b) последовательности нуклеиновой кислоты, идентичной последовательности нуклеиновой кислоты SEQ ID NO. 2, на по меньшей мере 80%;
(c) последовательности нуклеиновой кислоты, идентичной последовательности нуклеиновой кислоты SEQ ID NO. 3, на по меньшей мере 80%;
(d) последовательности нуклеиновой кислоты, идентичной последовательности нуклеиновой кислоты SEQ ID NO. 4, на по меньшей мере 80%;
3. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что белок естественным образом не присутствует в микроорганизме.
4. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что белком является фермент, в частности кислотная целлюлаза, альфа-амилаза, альфа-ацетодекарбоксилаза, аминопептидаза, амилаза, арабаназа, бета-глюканаза, бета-глюкозидаза, бета-маннозидаза, карагиназа, карбогидраза, каталаза, целлобиоз-оксидаза, целлюлаза, химозин, эндо-1,3-бета-глюканаза, эндо-1,3(4)-бета-глюканаза, эндо-1,4-бета-ксиланаза, эндопептидаза, эстераза, эксопептидаза, G4-амилаза, глюкоамилаза, глюкозооксидаза, глюкозидаза, гликолипаза, гемицеллюлаза, лакказа, липаза, лизфосфолипаза, мальтогенная амилаза, маннаназа, нейтральная протеаза, нуклеаза, оксидаза, оксидоредуктаза, пектатлиаза, пектиназа, пектинэстераза, пентозаназа, пергидролаза, фосфолипаза, фитаза, полигалактуроназа, протеаза, протеиназа, пуллуланаза, фермент реннет, рамногалактуроназа, субтилизин, танназа, трансфераза, трансглутаминаза, ксантаназа, ксиланаза, ксилоглюканаза или их смеси, особенно предпочтительно альфа-амилаза и/или протеаза.
5. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что микроорганизмом является Bacillus pumilus DSM 14395.
6. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что микроорганизм является генетически модифицированным.
7. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что спорообразование микроорганизма ингибировано, предпочтительно в результате модификации гена spoIV (yqfD), в частности в результате делеции гена spoIV (yqfD) или его частей.
8. Микроорганизм, полученный способом, содержащим стадии:
(a) введение экспрессионной конструкции в микроорганизма, которая содержит промотор и нуклеиновую кислоту, кодирующую белок;
(b) экспрессия белка в микроорганизме,
где микроорганизм относится к виду Bacillus pumilus.
9. Микроорганизм по п. 8, отличающийся тем, что
(а) промотор содержит последовательность нуклеиновой кислоты, которая выбирается из:
(i) последовательности нуклеиновой кислоты, идентичной последовательности нуклеиновой кислоты SEQ ID NO. 1, на по меньшей мере 80%;
(ii) последовательности нуклеиновой кислоты, идентичной последовательности нуклеиновой кислоты SEQ ID NO. 2, на по меньшей мере 80%;
(iii) последовательности нуклеиновой кислоты, идентичной последовательности нуклеиновой кислоты SEQ ID NO. 3, на по меньшей мере 80%;
(iv) последовательности нуклеиновой кислоты, идентичной последовательности нуклеиновой кислоты SEQ ID NO. 4, на по меньшей мере 80%;
и/или
(b) белок естественным образом не присутствует в микроорганизме, и/или
(c) белком является фермент, в частности кислотная целлюлаза, альфа-амилаза, альфа-ацетодекарбоксилаза, аминопептидаза, амилаза, арабаназа, бета-глюканаза, бета-глюкозидаза, бета-маннозидаза, карагиназа, карбогидраза, каталаза, целлобиоз-оксидаза, целлюлаза, химозин, эндо-1,3-бета-глюканаза, эндо-1,3(4)-бета-глюканаза, эндо-1,4-бета-ксиланаза, эндопептидаза, эстераза, эксопептидаза, G4-амилаза, глюкоамилаза, глюкозооксидаза, глюкозидаза, гликолипаза, гемицеллюлаза, лакказа, липаза, лизфосфолипаза, мальтогенная амилаза, маннаназа, нейтральная протеаза, нуклеаза, оксидаза, оксидоредуктаза, пектатлиаза, пектиназа, пектинэстераза, пентозаназа, пергидролаза, фосфолипаза, фитаза, полигалактуроназа, протеаза, протеиназа, пуллуланаза, фермент реннет, рамногалактуроназа, субтилизин, танназа, трансфераза, трансглутаминаза, ксантаназа, ксиланаза, ксилоглюканаза, предпочтительно протеаза или альфа-амилаза, или их смеси,
и/или
(d) микроорганизмом является Bacillus pumilus DSM 14395, и/или
(e) спорообразование микроорганизма ингибировано, предпочтительно в результате модификации гена spoIV (yqfD), в частности в результате делеции гена spoIV (yqfD) или его частей, и/или
(f) микроорганизм является генетически модифицированным.
10. Применение микроорганизма по п. 8 или 9 для получения белка, в частности фермента.