Блок устойчивости к гербицидам, кодирующий его ген, и их применение

1. Ген устойчивости к гербицидам, содержащий
(а) нуклеотидную последовательность, приведенную в SEQ ID NO: 1; или
(б) нуклеотидную последовательность, способную гибридизоваться с нуклеотидной последовательностью, как она определена в (а), в жестких условиях и кодирующую белок, обладающий активностью арилоксиалканоатдиоксигеназы.
2. Экспрессионная кассета, содержащая регуляторную последовательность и указанный ген устойчивости к гербицидам по п. 1.
3. Рекомбинантный вектор, содержащий указанный ген устойчивости к гербицидам по п. 1 или указанную экспрессионную кассету по п. 2.
4. Способ продуцирования белка устойчивости к гербицидам, включающий следующие стадии:
получение клеток трансгенного организма-хозяина, содержащих указанный ген устойчивости к гербицидам по п. 1 или экспрессионную кассету по п. 2;
культивирование клеток трансгенного организма-хозяина в условиях, обеспечивающих продуцирование белка устойчивости к гербицидам;
выделение указанного белка устойчивости к гербицидам.
5. Способ по п. 4, отличающийся тем, что трансгенный организм-хозяин включает растения, животных, бактерии, дрожжи, бакуловирус, нематоду или водоросли.
6. Способ по п. 5, отличающийся тем, что растение выбрано из группы, состоящей из сои, хлопка, кукурузы, риса, пшеницы, свеклы или сахарного тростника.
7. Способ расширения целевого спектра гербицидов, включающий совместную экспрессию в растении белка устойчивости к гербицидам, состоящего из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 2 или белка устойчивости к гербицидам, кодируемого экспрессионной кассетой по п. 2, с по меньшей мере второй нуклеотидной последовательностью, кодирующей белок, отличающийся от белка устойчивости к гербицидам, состоящего из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 2, кодируемого экспрессионной кассетой по п. 2.
8. Способ по п. 7, отличающийся тем, что указанная вторая нуклеотидная последовательность кодирует белок устойчивости к глифосату, белок устойчивости к глюфосинату аммония, диоксигеназу 4-гидроксифенилпировиноградной кислоты, ацетолактатсинтазу, белок цитохрома или протопорфириногеноксидазу.
9. Способ отбора трансформированных растительных клеток, включающий стадии трансформирования совокупности растительных клеток нуклеотидной последовательностью, кодирующей белок устойчивости к гербицидам, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 2, геном устойчивости к гербицидам по п. 1 или экспрессионной кассетой по п. 2 и культивирования указанных клеток при концентрации гербицида, позволяющей расти трансформированным клеткам, экспрессирующим указанную нуклеотидную последовательность, кодирующую указанный белок устойчивости к гербицидам, ген устойчивости к гербицидам или экспрессионную кассету, но вызывающей гибель нетрансформированных клеток или ингибирующей рост нетрансформированных клеток, где гербицид представляет собой фенокси-ауксин.
10. Способ контроля сорняков, включающий стадию внесения эффективного количества одного или более гербицидов на поле, на котором выращивают растения, содержащие нуклеотидную последовательность, кодирующую белок устойчивости к гербицидам, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 2, ген устойчивости к гербицидам по п. 1, экспрессионную кассету по п. 2 или рекомбинантный вектор по п. 3, где гербицид представляет собой фенокси-ауксин.
11. Способ защиты растений от повреждения, вызываемого гербицидами, включающий стадию введения в растения нуклеотидной последовательности, кодирующей белок устойчивости к гербицидам, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 2, гена устойчивости к гербицидам по п. 1, экспрессионной кассеты по п. 2 или рекомбинантного вектора по п. 3 так, чтобы обеспечить продуцирование полученными растениями указанного белка устойчивости к гербицидам в количестве, достаточном для их защиты от повреждения, вызываемого гербицидами, где гербицид представляет собой фенокси-ауксин.
12. Способ по п. 11, отличающийся тем, что указанное растение выбрано из группы, состоящей из сои, хлопка, кукурузы, риса, пшеницы, свеклы или сахарного тростника.
13. Способ контроля устойчивых к глифосату сорняков на поле, на котором выращивают устойчивые к глифосату растения, включающий стадию внесения эффективного количества одного или более гербицидов на поле, на котором выращивают устойчивые к глифосату растения, где указанные устойчивые к глифосату растения содержат нуклеотидную последовательность, кодирующую белок устойчивости к гербицидам, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 2, ген устойчивости к гербицидам по п. 1, экспрессионную кассету по п. 2 или рекомбинантный вектор по п. 3.
14. Способ по п. 13, отличающийся тем, что указанный гербицид по меньшей мере содержит фенокси-ауксин и глифосат.
15. Способ по п. 13 или 14, отличающийся тем, что указанные устойчивые к глифосату растения являются однодольными или двудольными.
16. Способ придания сельскохозяйственным культурам устойчивости к гербициду 2,4-D (2,4-дихлорфеноксиуксусная кислота), включающий стадию введения в указанные сельскохозяйственные культуры нуклеотидной последовательности, кодирующей белок устойчивости к гербицидам, состоящий из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 2, гена устойчивости к гербицидам по п. 1, или экспрессионной кассеты по п. 2 или рекомбинантного вектора по п. 3.
17. Способ по п. 16, отличающийся тем, что указанная сельскохозяйственная культура выбрана из группы, состоящей из сои, хлопка, кукурузы, риса, пшеницы, свеклы и сахарного тростника.
18. Применение белка устойчивости к гербицидам, обеспечивающего устойчивость к фенокси-ауксиновым гербицидам, отличающееся тем, что указанный белок устойчивости к гербицидам содержит:
(а) белок, состоящий из аминокислотной последовательности, представленной в SEQ ID NO: 2; или
(б) белок, обладающий активностью арилоксиалканоатдиоксигеназы, представляющий собой аминокислотную последовательность в (а), с заменой, и/или делецией и/или добавлением в нее одной или более аминокислот.
19. Применение по п. 18, отличающееся тем, что указанное применение используют для расширения целевого спектра гербицидов, отбора трансформированных растительных клеток, контроля сорняков, защиты растений от повреждения, вызываемого фенокси-ауксиновыми гербицидами, или придания растениям устойчивости к фенокси-ауксиновым гербицидам.
20. Применение по п. 19, отличающееся тем, что указанное применение для расширения целевого спектра гербицидов включает способ по п. 7 или 8.
21. Применение по п. 19, отличающееся тем, что указанное применение для отбора трансформированных растительных клеток включает способ по п. 9.
22. Применение по п. 19, отличающееся тем, что указанное применение для контроля сорняков включает способ по п. 10, 13, 14 или 15.
23. Применение по п. 19, отличающееся тем, что указанное применение для защиты растений от повреждения, вызываемого гербицидами, включает способ по п. 11 или 12.
24. Применение по п. 19, отличающееся тем, что указанное применение для придания растениям устойчивости к гербицидам включает способ по п. 16 или 17.