АНАЛИЗ ЦИРКУЛИРУЮЩИХ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК

1. Способ предсказания эффективности терапии больного антагонистом ИФР-1Р, включающий стадии: a) получения биологического образца от больного; b) подготовки образца, где биологический образец смешивают с лигандом, который специфически взаимодействует с опухолевыми клетками для значительного исключения других компонентов образца; c) контактирования образца, по меньшей мере, с одним реагентом, который специфически связывается с эпителиальными клетками; d) контактирования образца с агентом, обладающим связывающей аффинностью к рецепторам инсулиноподобного ростового фактора (ИФР-1Р) на клетках; и e) анализа образца для определения присутствия опухолевых клеток, экспрессирующих ИФР-1Р, причем присутствие в образце опухолевых клеток, экспрессирующих ИФР-1Р, служит прогностическим фактором эффективности терапии больного антагонистом ИФР-1Р.
2. Способ по п. 1, дополнительно включающий стадию определения количества опухолевых клеток, экспрессирующих ИФР-1Р.
3. Способ по п. 1, где лиганд, который специфически взаимодействует с опухолевыми клетками, соединяют с первой выявляемой меткой, реагент, который специфически связывается с эпителиальными клетками, соединяют со второй выявляемой меткой, и агент, обладающий связывающей аффинностью к ИФР-1Р, соединяют с третьей выявляемой меткой, причем первая, вторая и третья выявляемые метки различаются, и где, по меньшей мере, один реагент специфически связывается с цитокератином.
4. Способ по п. 1, где лиганд специфически связывается с молекулой адгезии эпителиальных клеток на опухолевой клетке.
5. Способ по п. 1, дополнительно включающий стадию добавления к образцу специфичного для клетки красителя для возможности исключения из анализа остаточных безъядерных клеток и клеточных обломков.
6. Способ по п. 1, где образец на стадии е) анализируют с помощью, по меньшей мере, одного способа, выбранного из группы, состоящей из мультипараметрической проточной цитометрии, иммунофлуоресцентной микроскопии, лазерной сканирующей цитометрии, анализа изображений на основе яркого поля, капиллярной волюмометрии, спектрального анализа изображений, клеточного анализа вручную, CELLSPOTTER анализа и автоматического анализа клеток.
7. Способ по п. 1, где образец представляет собой иммуномагнитный образец, включающий биологический образец, смешанный с магнитными частицами, соединенными с лигандом, и дополнительно включающий стадию воздействия магнитного поля на иммуномагнитный образец, так что иммуномагнитный образец становится обогащенным суспензией опухолевых клеток.
8. Способ по п. 7, где магнитные частицы являются коллоидными.
9. Способ мониторинга эффективности терапии больного антагонистом ИФР-1Р, включающий стадии: a) получения первого биологического образца от больного; b) подготовки первого образца, где первый биологический образец смешивают с лигандом, который специфически взаимодействует с опухолевыми клетками, для существенного исключения других компонентов образца; c) контактирования первого образца, по меньшей мере, с одним реагентом, который специфически связывается с эпителиальными клетками; d) контактирования первого образца с агентом, обладающим связывающей аффинностью к рецепторам инсулиноподобного ростового фактора (ИФР-1Р) на клетках; e) анализа первого образца для определения присутствия и количества опухолевых клеток, экспрессирующих ИФР-1Р; f) введения больному в виде терапии антагониста ИФР-1Р; g) получения второго биологического образца от больного после введения в виде терапии антагониста ИФР-1Р; h) подготовки второй пробы из второго биологического образца, где второй биологический образец смешивают с лигандом, который специфически взаимодействует с опухолевыми клетками, и осуществления стадий c)-e) с вторым образцом; и i) сравнения количества опухолевых клеток, экспрессирующих ИФР-1Р, в первом образце с количеством опухолевых клеток, экспрессирующих ИФР-1Р, во втором образце, причем их меньшее количество во втором образце служит показателем эффективности терапии больного антагонистом ИФР-1Р.
10. Способ по п. 9, где лиганд специфически связывается с молекулой адгезии эпителиальных клеток на опухолевой клетке.
11. Способ по п. 9, где лиганд, который специфически взаимодействует с опухолевыми клетками, соединяют с первой выявляемой меткой, реагент, который специфически связывается с эпителиальными клетками, соединяют со второй выявляемой меткой, и агент, обладающий связывающей аффинностью к ИФР-1Р, соединяют с третьей выявляемой меткой, причем первая, вторая и третья выявляемые метки различаются.
12. Способ по п. 9, где первый образец на стадии е) и второй образец на стадии h) анализируют с помощью, по меньшей мере, одного способа, выбранного из группы, состоящей из мультипараметрической проточной цитометрии, иммунофлуоресцентной микроскопии, лазерной сканирующей цитометрии, анализа изображений на основе яркого поля, капиллярной волюмометрии, спектрального анализа изображений, клеточного анализа вручную, CELLSPOTTER анализа и автоматического анализа клеток.
13. Способ по п. 9, где образец представляет собой иммуномагнитный образец, включающий биологический образец, смешанный с магнитными частицами, соединенными с лигандом, и дополнительно включающий стадию воздействия магнитного поля на иммуномагнитный образец, так что иммуномагнитный образец становится обогащенным суспензией опухолевых клеток.
14. Способ по п. 13, где магнитные частицы являются коллоидными.
15. Способ по п. 1 или 9, где терапия антагонистом ИФР-1Р включает антитело против ИФР-1Р.
16. Тестирующий набор для скрининга образца больного на присутствие циркулирующих опухолевых клеток, экспрессирующих ИФР-1Р, включающий: a) покрытые магнитные наночастицы, включающие вещество магнитной основы, покрывающее вещество на основе белка, и антитело, которое специфически связывается с отличительной детерминантой опухолевых клеток, причем антитело прямо или непрямо соединено с указанной основой покрывающего вещества; b) специфичный для клеток краситель для исключения из анализа компонентов образца, отличных от опухолевых клеток; и c) по меньшей мере, один меченый для выявления агент, обладающий связывающей афинностью к ИФР-1Р.
17. Тестирующий набор по п. 16, дополнительно содержащий устройство для анализа циркулирующих опухолевых клеток, экспрессирующих ИФР-1Р.