ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ АДЕНОМИОЗА
PHARMACEUTICAL COMPOSITION FOR ADENOMYOSIS TREATMENT AND PREVENTION

Изобретение относится к области медицины и гинекологии и касается препаратов для лечения гиперпластических процессов репродуктивной системы.
Многие заболевания, в основе которых лежат нарушения процессов клеточного деления, имеют общие закономерности развития и общие лекарственные мишени (Киселев В.И., Ляшенко А.А. (2005). Молекулярные механизмы регуляции гиперпластических процессов, Москва). Этот факт осознан сравнительно недавно, что привело к созданию нового направления в разработке новых лекарственных препаратов с таргетным механизмом действия. Под этим термином понимаются лекарственные средства, целенаправленно действующие на отдельные молекулярные мишени патологического процесса (Сидорова И.С., Унанян А.Л., Коган Е.А. (2007). Клинико-морфологические варианты развития аденомиоза и концепция таргетной терапии. Врач, 9, 1-4). В настоящее время можно считать доказанным, что максимальный клинический эффект достигается при одновременном лекарственном воздействии на максимальное число патогенетических звеньев. В связи с этим активно разрабатываются различные фармацевтические композиции, состоящие из фармакологически активных веществ, действующих на различные молекулярные мишени.
Наиболее наглядным примером заболеваний с нарушениями в регуляции клеточного деления являются злокачественные заболевания кроветворной системы и такие распространенные заболевания органов репродуктивной системы как миома, аденомиоз и мастопатии. Описаны многочисленные подходы к таргетной терапии этих заболеваний.
В последние годы стало ясно, что метаболизм эстрогенов играет исключительно важную роль в инициации канцерогенеза в органах женской репродуктивно системы.
Установлено, что эстрадиол может превращаться в две формы - 2-ОНЕ1 и 16α-ОНЕ1, образование которых катализируется разными изоферментами цитохрома Р450, при этом данные формы обладают абсолютно противоположными биологическими эффектами. 2-ОНЕ1 не влияет на пролиферацию клеток, в то время как 16α-ОНЕ1, наоборот, стимулирует рост клеток и является агонистом эстрогена. Изучение функций этих двух метаболитов позволило выявить однозначную связь между уровнем 16α-ОНЕ1 и риском развития опухолей в эстрогензависимых тканях. В то же время при повышении уровня 2-ОНЕ1 наблюдалась тенденция к гибели опухолевых клеток и профилактике их дальнейшего образования.
Многочисленные эксперименты in vivo доказали необходимость в поддержании такого баланса между этими метаболитами, при котором концентрация 2-ОНЕ1 должна превышать 16α-ОНЕ1, как минимум, в два и более раз. Отношение 2-ОНЕ1 к 16α-ОНЕ1 (2/16α) является биомаркером, надежным диагностическим критерием при определении риска и прогноза развития эстроген-зависимых опухолей.
Исследователи давно обратили внимание на тот факт, что так называемые эстрогензависимые опухоли развиваются преимущественно у женщин в постменопаузальный период. На первый взгляд это парадоксальное наблюдение. Почему резкое снижение содержания эстрогенов в организме является стимулом к развитию гормонозависимых опухолей? В настоящее время этот факт получает научное объяснение. На фоне снижения синтеза эстрогенов в яичниках происходит усиление образования эстрогенов жировой тканью (фигура 1 - Схема синтеза метаболитов эстрогенов в постменопаузе).
Кроме того, некоторые органы самостоятельно синтезируют недостающие эстрогены. В частности, при РМЖ в опухолевой ткани обнаруживаются эстрогены, причем их количество в 4-6 раз превышает концентрацию гормонов в сыворотке крови. Другое важное наблюдение состоит в том, что при общем дефиците эстрогенов организм перестраивается на синтез метаболитов эстрадиола, обладающих более сильным действием. Одним из таких метаболитов является 16α-ОНЕ1, который способен действовать в очень низких концентрациях. Ученые склоняются к мысли, что именно это производное эстрадиола является пусковым механизмом развития опухолевых процессов в гормон-чувствительных тканях.
В настоящее время считается доказанным, что для поддержания нормального гормонального баланса как у пре-, так и у постменопаузальных женщин необходимо, чтобы концентрация 2-ОНЕ1 превышала концентрацию 16α-ОНЕ1, как минимум, в два раза.
Таким образом, соотношение между метаболитами 2/16α и его вариации являются важным показателем, свидетельствующим о неблагоприятном фоне, в основе которого высокая вероятность формирования стойкого комплекса метаболита (16α-OHE1)+ER, индуцирующего длительный пролиферативный импульс. Показано, что препараты на основе индол-3-карбинола способны изменять это соотношение в лучшую сторону.
В частности, доказана эффективность применения двух препаратов - Индинол и Эпигаллат, в основе которых лежат химические соединения растительного происхождения индол-3-карбинол и эпигаллокатехин-3-галлат, соответственно при лечении миомы и эндометриоза (Сидорова И.С.и др. (2008). Возможности применения препаратов Индинол и Эпигаллат при сочетании миомы матки и аденомиоза, газета "Медицинский Вестник", № 24-25 от 8 августа 2008 года). Данный источник может быть выбран в качестве ближайшего аналога-прототипа.
Эта комбинация веществ обладает уникальным спектром биологических активностей. В частности, их сочетание индуцирует апоптотическую гибель клеток с аномально высокой пролиферативной активностью и клеток, вступивших на путь опухолевой трансформации (RU 2276993. Фармацевтическая композиция для лечения и профилактики пролиферативных заболеваний).
Другое важное свойство комбинации индол-3-карбинола и эпигаллокатехин-3-галлата - это сенсибилизация опухолевых клеток к действию химиотерапевтических препаратов (RU 2328282. Фармацевтическая композиция для профилактики образования метастазов и повышения чувствительности (сенсибилизации) опухолей к химиотерапевтическим препаратам).
Однако индол-3-карбинол претерпевает многочисленные превращения, в частности, кислая среда желудка способствует образованию различных производных, окончательная биологическая активность которых до настоящего времени не определена (Anderton M., Manson M. et al. (2004). Pharmakokinetics and tissue disposition of indole-3-carbinol and its acid condensation products after oral administration to mice, Clinical Cancer research, 10, 5233-5241). Этот процесс плохо предсказуем и протекает очень индивидуально у каждого пациента. Возможно, именно этим объясняется выраженный разброс в клинической эффективности препаратов на основе индол-3-карбинола при лечении заболеваний гормон-чувствительных органов. Как установлено в клинических исследованиях при аденомиозе и дисплазиях шейки матки примерно в 50% случаев наблюдался выраженный эффект при назначении препаратов, тогда как у части пациентов с аналогичной патологией положительная динамика не отмечалась несмотря на длительный прием препаратов (Сидорова И.С., Унанян А.Л., Карасева Н.В. (2008). Возможности применения Индинола и Эпигаллата при сочетании миомы матки и аденомиоза, Фарматека, 11,1-6).
Задачей настоящего изобретения является разработка более эффективной комбинации без указанных недостатков для лечения аденомиоза, в том числе аденомиоза, сочетающегося с диффузно-кистозной мастопатией.
Указанная задача решается комбинированием 3,3'-дииндолилметана и эпигаллокатехин-3-галлата.
3,3' - дииндолилметан (DIM) является одним из производных индол-3-карбинола, образующимся при его олигомеризации. Это соединение обладает практическими всеми биологическими эффектами, присущими индол-3-карбинолу, в том числе и способностью позитивно влиять на изменения в соотношении метаболитов эстрогенов (Michnovicz J.J. and Bradlow H.L. (1991). Altered estrogen metabolism and excretion in humans following consumption of indole-3-carbinol. Nutr. Cancer, 16, 59-66; Aggarwal B.B., Ichikava H. (2005) Molecular targets and anticancer potential of indole-3-carbinol and its derivatives. Cell Cycle, 4(9), 1201-1215).
Эпигаллокатехин-3-галлат - один из представителей катехинов, который обладает сильнейшей антиоксидантной активностью, сопоставимой с а-токоферолом, а также противовоспалительным, антипролиферативным и антиангиогенным действием.
Объектом изобретения является пероральная фармацевтическая композиция, содержащая в качестве действующих веществ 3,3'-дииндолилметан и эпигаллокатехин-3-галлат в количестве от 0,1 до 0,8 г на единичную дозу каждого. Композиция может содержать фармацевтически приемлемые носители, такие как микрокристаллическая целлюлоза, поливинилпирролидон, полиэтиленгликоль, фармацевтический крахмал или любой другой разрешенный Фармакопеей носитель.
Предпочтительно композиция выполнена в форме капсулы или таблетки.
Изобретение может быть проиллюстрировано следующими примерами:
Пример 1
Предлагаемое средство
Состав на одну таблетку в г.:
3,3'-Дииндолилметан
0.1
Эпигаллокатехин-3-галлат
0.3
лактоза
0.2
коллидон 30
0.10
крахмал
0.206
целлюлоза микрокристаллическая
0.150
лимонная кислота
0.003
стеариновая кислота
0.001
Пример 2
Предлагаемое средство
Состав на одну капсулу в г.:
3,3'-Дииндолилметан
0.3
Эпигаллокатехин-3-галлат
0.4
лактоза
0.5
крахмал
0.30
стеарат магния
0.02
Пример 3
Изучение клинической эффективности фармацевтической композиции
Проводилось лечение диффузно-кистозных мастопатий в сочетании с аденомиозом на ограниченном контингенте больных различными комбинациями EGCG и DIM. Исследования проводились в соответствии с нормами и правилами, принятыми для проведения клинических испытаний, согласно национальным требованиям GCP. В исследовании участвовали пациентки с разной степенью и формами мастопатий, контрольные значения были получены на этих же больных до приема препарата. У всех пациенток перед началом исследований было проведено определение соотношения метаболитов в моче. В исследование были взяты пациентки, у которых соотношение 2-ОНЕ1/16α-ОНЕ1 было не более 1. Больные были разделены на группы в соответствии с тем, какой тип фармацевтической композиции компонентов им был предложен. Оценка пролиферативной активности смеси компонентов мониторировалась визуально (сцинтиография) с применением радиоактивных изотопов, разрешенных для использования с диагностическими целями, а также количественно (% накопления радиоизотопов в ткани). Статистическая обработка данных проводилась с применением t-критерия, уровень значимости был выбран р<0,05. Оценивались антипролиферативная активность следующих композиций:
1. - EGCG (200 мг 2 раза в день) в комбинации с I3C (200 мг в день),
2. - EGCG+DIM (200 мг: 100 мг) по 2 капсуле 2 раза в день,
3. - EGCG+DIM (400 мг: 200 мг) по 1 капсуле 2 раза в день.
В ходе исследований были получены достоверные данные о большей клинической эффективности комбинации EGCG+DIM по сравнению EGCG в комбинации I3C. Оптимальная ежедневная дозировка составляла 0,8-1.2 г EGCG и 0,4-0,6 г DIM соответственно. В данном исследовании убедительно продемонстрировано, что положительная динамика у больных с диагнозом «мастопатия» достоверно коррелирует с восстановлением соотношения между метаболитами 2/16а (см. таблицу 1).
Таблица 1
Динамика соотношения метаболитов 2-ОНЕ1 и 16α-ОНЕ1 в группе пациенток (n=80), получивших в течение 6 месяцев лечение комбинацией препаратов EGCG+I3C и комбинацией препаратов EGCG+DIM
Группа пациенток (n=80)
Средний уровень метаболитов
Соотношение метаболитов 2-ОНЕ1 и 16α-ОНЕ1 (до лечения)
Соотношение метаболитов после лечения комбинацией EGCG+I3C (n=40)
Соотношение метаболитов после лечения комбинацией EGCG+DIM (n=40)
2-ОНЕ1, нг/мл
16α-ОНЕ1, нг/мл
Диффузно-кистозная мастопатия
6,78
6,84
0,99
60 (% пациенток с соотношением больше 2)
85 (% пациенток с соотношением больше 2)
Пример 4
Изучение клинической эффективности фармацевтической композиции при лечении аденомиоза на фоне коррекции уровня содержания метаболитов эстрогенов
Для сравнительного исследования были отобраны две группы женщин в возрасте 45-60 лет с диагнозом аденомиоз, у которых соотношение между метаболитами 2/16α примерно равнялось 1. Данное соотношение рассматривается как небрагоприятный гормональный фон, способствующий развитию патологии и возможных онкологических осложнений. Одна группа получала препарат в капсулах, содержащих 100 мг индол-3-карбинола и 200 мг эпигаллокатехин-3-галлата (по 2 капсулы 2 раза в день), другая группа - препарат, содержащий 100 мг дииндолилметана и 200 мг эпигаллокатехин-3-галлата (по 2 капсулы 2 раза в день). Курс лечения продолжался в течение 6 месяцев, срок наблюдений - 9 месяцев. По завершении курса у больных оценивали размер матки и соотношение метаболитов эстрогенов в моче. Результаты исследований приведены в таблицах 2а и 2б.
Таблица 2а
Динамика объема матки в группе пациенток (n=45), получивших индол-3-карбинол и эпигаллокатехин-3-галлат в зависимости от варианта строения матки
Время исследования
Аденомиоз (n=22)
Аденомиоз в сочетании с пролиферирующей миомой (n=23)
Уменьшение объема матки в процентах к исходному объему
Уменьшение объема матки в процентах к исходному объему
Исходно
100
100
Через 1 месяц
94,2
90,0
Через 2 месяца
86,4
82,3
Через 3 месяца
82,2
80,1
Через 4 месяца
78,1
75,2
Через 5 месяцев
73,4
68,6
Через 6 месяцев
68,8
62,4
Через 9 месяцев
62,6
58,4
Таблица 2б
Динамика объема матки в группе пациенток (n=45), получивших дииндолилметан и эпигаллокатехин-3-галлат в зависимости от варианта строения матки
Время исследования
Аденомиоз (n=22)
Аденомиоз в сочетании с пролиферирующей миомой (n=23)
Уменьшение объема матки в процентах к исходному объему
Уменьшение объема матки в процентах к исходному объему
Исходно
100
100
Через 1 месяц
90,4
87,2
Через 2 месяца
82,4
75,6
Через 3 месяца
78,2
60,4
Через 4 месяца
70,0
52,2
Через 5 месяцев
61,4
46,3
Через 6 месяцев
50,0
40,0
Через 9 месяцев
42,0
37,0
Как следует из представленных данных, комбинация дииндолилметана и эпигаллокатехин-3-галлата приводит к существенному уменьшению объемов матки по сравнению с комбинацией индол-3-карбинола и эпигаллокатехин-3-галлата, что является критерием эффективности данной комбинации при лечении аденомиоза. Дополнительно пациентке проводили ультрозвуковое обследование. В обеих группах пациенток, получающих назначенное лечение, были пациентки, у которых даже при длительном приеме указанных комбинаций не наблюдалась позитивная динамика в клинической картине. В первой группе число таких больных составило 42%, тогда как во второй группе их было 12%. Измерение соотношения метаболитов в моче у женщин этих двух категорий показало, что у них не наблюдалось существенного изменения данного параметра. Тогда как у всех женщин из обеих групп с выраженной положительной динамикой в клинической картине отмечалось изменение соотношения между метаболитами 2/16α, которое приближалось к 2, что является нормальным показателем. Данное исследование позволило прийти к заключению, что комбинация дииндолилметана и эпигаллокатехин-3-галлата является более эффективной при лечение аденомиоза, и, вероятно, это обусловлено более эффективным восстановлением соотношения между метаболитами 2/16α.