Антимикотическое и бактерицидное средство
ANTIMYCOTIC AND BACTERICIDAL AGENT

Изобретение относится к применению диэтоксифосфорилметангидразида формулы
в качестве антимикотического и бактерицидного средства.
Диэтоксифосфорилметангидразид формулы
известен как исходное вещество для синтеза, см. US Патент №4308263, МПК3 А61К 1/16, C07F 9/38, 1981.
Наиболее близким по технической сущности является применение дифенилфосфинилэтангидразида - гидразида дифенилфосфинилуксусной кислоты формулы
в качестве антимикотического и бактерицидного средства.
Средство на основе дифенилфосфинилэтангидразида обладает низкими антимикотической и бактерицидной активностью.
Технической проблемой является создание антимикотического и бактерицидного средства, проявляющего высокую антимикотическую и бактерицидную активность.
Техническая проблема повышение антимикотической и бактерицидной активности средства решается применением в качестве антимикотического и бактерицидного средства диэтоксифосфорилметангидразида формулы
Решение технической задачи позволяет получить значительно превосходящее антимикотическое и бактерицидное средство на основе диэтоксифосфорилметангидразида.
D
20
Диэтоксифосфорилметангидразид получают путем взаимодействия триэтилортоформиата с трихлоридом фосфора, затем из полученной реакционной массы путем перегонки выделяют O,O-диэтил(диэтоксиметил)фосфонат, который вводят во взаимодействие с N-бромсукцинимидом в среде четыреххлористого углерода при кипении, из реакционной массы перегонкой получают этилдиэтоксифосфорилметаноат, который вводят во взаимодействие с гидразином, по окончанию реакции легколетучие компоненты удаляют в вакууме. Диэтоксифосфорилметангидразид получают с выходом 97%, с показателем преломления - n 1.4245.
Характеристика веществ, используемых для получения диэтоксифосфорилметангидразида:
3
3
Трихлорид фосфора - PCl, бесцветная, дымящая во влажной среде жидкость с резким неприятным запахом. Обладает слезоточивыми свойствами. Плотность 1,574 г/см, т.кип. 76°С.
2
5
3
D
4
20
20
3
Триэтилортоформиат - СН(ОСН) - бесцветная жидкость с т.пл - 76°С, т.кип. 143°С, показатель преломления - n1.3922, плотность - d 0.8909 г/см.
Триалкилортоэфиры плохо растворимы в воде, растворимы в спирте, эфире.
O,O-диэтил(диэтоксиметил)фосфонат,
2
5
2
2
5
2
формулы (CHO)Р(O)СН(ОСН)
D
20
Бесцветная жидкость с т.кип. 95-96°С при давлении 1 мм рт.ст., показатель преломления - n 1.4245.
N-Бромсукцинимид (БСИ, NBS), формулы
Плотный белый порошок или кристаллы со слабым запахом брома.
4
20
3
Плотность - d 2,098 г/см, т.кип. 175-178°С.
Слабо растворим в воде, уксусной кислоте. Растворим в ацетоне, тетрагид-рофуране, диметилформамиде, диметилсульфоксиде, ацетонитриле. Не растворим в диэтиловом эфире, гексане, четыреххлористом углероде.
Этилдиэтоксифосфорилметаноат, формулы
2
5
2
2
5
(СН0)Р(0)СООСН
Бесцветная жидкость с т.кип. 98-101°С при давлении 2 мм рт.ст.
2
2
Гидразин - NHNH
Бесцветная, сильно гигроскопичная жидкость с неприятным запахом. Смешивается в любых соотношениях с водой, жидким аммиаком, этанолом; плохо растворяется в неполярных растворителях.
3
Плотность - 1,01 г/см, т.кип. 114°С, т.пл. 2°С.
1
13
31
Структуру диэтоксифосфорилметангидразида подтверждают данные ЯМР Н, С, Р и элементный анализ:
1
3
3
3
3
HH
2
3
HH
PH
2
2
СН
СН
ЯМР Н (400 МГц, CDC1), δ, м.д.: 0.98 т (6Н, J 7.0 Гц, ОСН), 3.86 дк (4Н, J 7.0 Гц, J 14.0 Гц, ОМе), 6.4 ушир. с (3Н, NHNH).
13
1
3
С
2
2
PC
Ме
СН
ЯМР С (100.6 МГц, CDCl), δ, м.д.: 13.2 с (ОСН), 74.1 с (ОМе), 163.0 д (С=O, J 191 Гц).
31
6
p
ЯМР Р (162 МГц, DMSO-d), δ, м.д.: 1.6.
5
13
4
Найдено, %: Р, 15.67 и 15.73; N, 14.2 и 14.35. Брутто формула CHOP. Вычислено, %: Р, 15.82; N, 14.29.
Диэтоксифосфорилметангидразид исследовали на антимикотическую и бактерицидную активность на тест-культурах условно-патогенной микрофлоры, исследования проведены на кафедре микробиологии Казанской государственной медицинской академии - филиала федерального государственного бюджетного образовательного учреждения дополнительного профессионального образования «Российская медицинская академия непрерывного профессионального образования» Министерства здравоохранения Российской Федерации.
В работе использовали музейные контрольные штаммы кафедры микробиологии: Escherichia coli - кишечная палочка, Bacillus cereus - вид грамположительных бактерий, Pseudomonas aeruginosa - синегнойная палочка - вид грамотрицательных подвижных бактерий, Staphylococcus aureus - золотистый стафилококк - патогенная бактерия, Candida albicans - дрожжеподобный гриб рода кандида.
Для оценки активности непосредственно перед исследованием готовят 1% водный раствор диэтоксифосфорилметангидразида. В качестве контроля для сравнения полученных данных использовали известные дезинфицирующие средства: «Ника-Пероксам», «Абактериал», «Слайт» и «Ника-Полицид».
8
Испытания антимикотического и бактерицидного средства: Суточные культуры микроорганизмов смывают физиологическим раствором со скошенных питательных агаров, отстандартизовывают по стандарту мутности до 0,5 по Мак Фарланду (1,5×10 КОЕ/мл). Затем в 10 мл расплавленного и остуженного до 45°С питательного агара вносят 0,4 мл отстандартизованной тест-культуры, перемешивают и выливают в стерильные чашки Петри. После застывания в зараженном питательном агаре просекают лунки и вносят в них 1%-ный водный раствор диэтоксифосфорилметангидразида. В качестве питательных сред используют среду Сабуро для дрожжеподобных грибов рода Candida и среду Мюллера-Хинтона для условно-патогенной микрофлоры. Чашки инкубируют при температуре 35°С в течение 24-48 часов. Экспозиция данного времени необходима для диффузии испытуемых веществ в толщу питательного агара, содержащего различные виды микроорганизмов. Затем оценивают величину зоны задержки роста микроорганизмов, измерение которой ведут с точностью до 0,1 мм.
В Таблице 1 приведены антимикотическая и бактерицидная активность заявленного средства, по прототипу и известных дезинфицирующих средств.
На основе данных, приведенных в Таблице 1, заявленное средство на основе диэтоксифосфорилметангидразида по антимикотической и бактерицидной активности значительно превосходит по сравнению с прототипом и известными дезинфицирующими средствами.