Способ прогнозирования лимфогенного метастазирования при злокачественных опухолях из оболочек периферических нервов
METHOD FOR PREDICTING LYMPHANGITIC METASTASIS IN MALIGNANT TUMORS FROM PERIPHERAL NERVE TUNICS

Изобретение относится к области медицины, конкретно, к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования лимфогенного метастазирования при злокачественных опухолях из оболочек периферических нервов.
Известно, что саркомы мягких тканей встречаются у взрослого населения достаточно редко, такие опухоли составляют около 1% всех злокачественных новообразований. В детском возрасте показатель частоты встречаемости значимо выше, у детей мягкотканые опухоли занимают 5-е место в структуре онкологической заболеваемости и смертности. К числу злокачественных новообразований из мягких тканей относятся опухоли из жировой, хрящевой и мышечной тканей, опухоли из стенок кровеносных и лимфатических сосудов, а также злокачественные опухоли из оболочек периферических нервов и др. К сожалению, на сегодняшний день при подобных новообразованиях отсутствуют четкие прогностические критерии оценки течения заболевания. К основным морфологическим факторам прогноза и прогрессирования процесса относятся следующие показатели: степень дифференцировки опухоли, количество митозов, площадь некрозов, локализация и размер первичной опухоли, возраст пациентов, степень злокачественности (G), наличие в краях резекции остаточной опухоли или радикальность характера оперативного лечения, чувствительность опухоли к лучевой и химиотерапии, а также наличие в лимфатических узлах метастатического поражения [1, 2, 3, 4, 5]. Возможность прогнозирования в клинике такой формы прогрессии заболевания как лимфогенное метастазирование является важным критерием оценки и, возможно, коррекции лечения у таких пациентов.
Наиболее близким к настоящему способу является способ оценки степени злокачественности (G) сарком мягких тканей (ВОЗ, 2013; Система FNCLCC - French Federation Nationale des Centres de Lutte Contre leCancer) [6, 7]. Суть данного способа основывается на определении и морфологической оценке в ткани опухоли трех показателей: дифференцировка опухоли, митотическая активность и некроз опухолевой ткани. При данном способе проводят морфологическое исследование ткани новообразования на светооптическом уровне. Дифференцировку опухоли оценивают следующим образом. Саркомы, ткань которых напоминает типичный аналог мягких тканей взрослого человека, оценивают в 1 балл. Саркомы с признаками слабого сходства с типичными аналогами мягких тканей взрослого организма оценивают в 2 балла. Эмбриональные, недифференцированные саркомы и саркомы неясного генеза при определении дифференцировки оценивают в 3 балла. Митотическую активность определяют по числу фигур атипических митозов в 10 полях зрения при увеличении микроскопа ×400. Если в опухоли насчитывают до 9 фигур атипических митозов показатель оценивают в 1 балл, при наличии в опухоли от 10 до 19 фигур митозов - в 2 балла, если в ткани новообразования насчитывают 20 и более фигур митозов, то показатель оценивают как 3 балла. Некроз опухолевой ткани определяют следующим образом: при отсутствии некрозов показатель оценивают в 0 баллов. Случаи, при которых некроз опухоли занимает менее 50% площади опухоли, оценивают в 1 балл, при некрозах опухоли, занимающих более 50% площади ткани новообразования, данный показатель оценивают как 2 балла. Далее суммируют полученные баллы и определяют степень злокачественности опухоли: если сумма трех морфологических показателей составляет 2-3 балла, определяют I степень злокачественности (low-grade), при сумме баллов от 4 до 5 определяют II степень злокачественности, если сумма баллов составляет от 6 до 8 баллов - определяют III степень злокачественности (high grade). Согласно данным литературы, опухоли мягких тканей I степени злокачественности (G1) являются высоко дифференцированными, при них редко регистрируются лимфогенные метастазы, они имеют более благоприятный прогноз. Наоборот, опухоли III степени злокачественности (G3) являются низкодифференцированными, часто метастазируют и характеризуются плохим прогнозом [6, 7].
Недостатком выше описанного способа является то, что отсутствуют конкретные числовые показатели, позволяющие оценивать риск лимфогенного метастазирования у пациентов со злокачественными опухолями из оболочек периферических нервов персонифицировано.
Новая техническая задача - разработка способа прогнозирования лимфогенного метастазирования, имеющего высокую степень достоверности, точности и информативности, в результате применения которого будут получены достоверные числовые показатели, характеризующие вероятность риска лимфогенных метастазов при злокачественных опухолях из оболочек периферических нервов, что, в целом, отражает прогноз течения болезни и может определять исход злокачественного процесса.
Новый технический результат-повышение точности и информативности способа.
s
Для достижения нового технического результата в способе прогнозирования лимфогенного метастазирования при злокачественных опухолях из оболочек периферических нервов, включающем определение и морфологическую оценку на светооптическом уровне в ткани опухоли показателей дифференцировки опухоли, митотической активности и некроза опухолевой ткани, причем, макроскопическому исследованию подвергают ткни первичной опухоли, ткани линий резекции и всех удаленных во время операции лимфатических узлов и морфологическое исследование препаратов ткани первичной опухоли на светооптическом уровне, отличающийся тем, что оценивают наличие фигур атипических митозов в клетках опухоли, для этого в 10 полях зрения, выбранных случайным образом, при увеличении объектива микроскопа ×400 считают количество фигур атипических митозов, при отсутствии митозов данный признак оценивают в 1 балл, при наличии единичных митозов до 5 митозов в 10 полях зрения признак оценивают в 2 балла, при наличии более 5 фигур атипических митозов признак оценивают в 3 балла, далее, в ткани опухоли проводят морфологическую оценку спонтанных некрозов с определением площади спонтанных некрозов в первичной опухоли в пределах гистологического препарата при увеличении объектива микроскопа ×100, при отсутствии спонтанных некрозов в ткани опухоли признак оценивают в 1 балл, если зона некроза занимает менее 10% площади опухоли в пределах гистологического среза, признак оценивают в 2 балла, в случаях, когда площадь спонтанных некрозов в ткани опухоли занимает от 10 до 50% площади - признак оценивают в 3 балла, если более 50% - в 4 балла, после гистологического исследования ткани первичной опухоли проводят иммуногистохимическое исследование с использованием антител к SMA и белку S100 (Dako) по стандартной методике согласно протоколам, далее, оценивают экспрессию указанных маркеров в препаратах опухоли, при наличии негативной экспрессии маркера SMA признак оценивают в 1 балл, при умеренной позитивной экспрессии - признак оценивают в 2 балла, при слабо выраженной позитивной экспрессии - признак оценивают в 3 балла, при наличии негативной экспрессии маркера S100 признак оценивают в 1 балл, при умеренной позитивной экспрессии - признак оценивают в 2 балла, при слабо выраженной позитивной экспрессии - признак оценивают в 3 балла, кроме того, в каждом случае в ткани опухоли проводят иммуногистохимическое исследование широкого спектра цитокератинов, при этом в каждом случае проводят изучение 11 маркеров с испрользованием антител: Pan-Cytokeratin (5/6/8/18) (Clone 5D3, Novocastra), Cytokeratin AE1/AE3 (Clone AE1/AE3, Dako), Cytokeratin 5 (Clone XM26, Novocastra), Cytokeratin 5/6 (Clone D5/16 B4, Dako), Cytokeratin 7 (Clone OV-TL 12/30, Novocastra), Cytokeratin 8 (Clone TS1, Novocastra), Cytokeratin 14 (Clone LL002, Novocastra), Cytokeratin 19 (Clone b170, Novocastra), Cytokeratin 20 (Clone K 20.08, Novocastra), Cytokeratin HMW (betta Clone 34Е12, Dako), Cytokeratin 8/18 (Clone 5D3, Dako), экспрессию каждого маркера оценивают как негативную или позитивную, при негативной экспрессии всех выше перечисленных маркеров данный признак оценивают в 1 балл, при наличии позитивной экспрессии хотя бы одного из 11 цитокератинов значение уравнения регрессии перечисленных маркеров в опухолевой ткани - признак оценивают в 2 балла, далее, рассчитывают значение уравнения регрессии Y по формуле:
1
2
3
4
5
Y=-590+188⋅Х+12,7⋅Х+64,7⋅Х-36,2⋅Х-31,9⋅Х,где
(-590) - значение коэффициента регрессии свободного члена;
1
X - наличие фигур атипических митозов в опухоли в 10 полях зрения (1 - атипические митозы отсутствуют, 2 - наличие до 5 атипических митозов в 10 полях зрения, 3 - наличие более 5 атипических митозов в 10 полях зрения),
(188) - значение коэффициента регрессии этого признака;
2
Х - распространенность спонтанных некрозов (1 - некрозы отсутствуют, 2 - зона некроза занимает менее 10% площади опухоли, 3 - зона некроза занимает 10-50% площади опухоли, 4 - более 50% площади опухоли),
(12,7) - значение коэффициента регрессии этого признака;
3
Х - экспрессия маркера SMA (1 - негативная, 2 - умеренно позитивная, 3 - слабо позитивная),
(64,7) - значение коэффициента регрессии этого признака;
4
Х - экспрессия маркера S100 (1 - негативная, 2 - умеренно позитивная, 3 - слабо позитивная),
(-36,2) - значение коэффициента регрессии этого признака;
5
Х - экспрессия цитокератинов (1 - негативная экспрессия всех цитокератинов, 2 - позитивная экспрессия хотя бы 1 из 11 цитокератинов);
(-31,9) - значение коэффициента регрессии этого признака.
Вероятность риска лимфогенного метастазирования Р определяют по формуле:
Y
Y
Р=e/(1+e), где
е - математическая константа, равная 2,72
и при Р≥50% определяют высокий, а при Р<50% - низкий риск лимфогенного метастазирования.
Способ осуществляют следующим образом.
Макроскопической оценке подвергают ткань первичной опухоли, линии резекции и все удаленные во время операции лимфатические узлы. Материал фиксируют в 10-12% растворе нейтрального формалина. Проводку материала и изготовление гистологических препаратов осуществляют по стандартной методике. Препараты окрашивают гематоксилином и эозином. Гистологический тип опухоли устанавливают на основании международной классификации опухолей мягких тканей и костей (ВОЗ, 2013), способ предназначен только для злокачественной опухоли из оболочек периферических нервов.
s
Проводят морфологическое исследование препаратов первичной опухоли на светооптическом уровне. При исследовании опухолевой ткани оценивают наличие фигур атипических митозов в клетках опухоли, при этом в 10 полях зрения, выбранных случайным образом, при увеличении объектива микроскопа ×400 считают количество атипических митозов. При отсутствии митозов данный признак оценивают в 1 балл, при наличии единичных митозов (до 5 митозов в 10 полях зрения) признак оценивают в 2 балла, при наличии более 5 фигур атипических митозов признак оценивают в 3 балла. Далее в ткани опухоли проводят морфологическую оценку спонтанных некрозов. Распространенность (площадь) спонтанных некрозов в первичной опухоли в пределах гистологического препарата определяют при увеличении объектива микроскопа ×100. При отсутствии спонтанных некрозов в ткани опухоли данный признак оценивают в 1 балл, если зона некроза занимает менее 10% площади опухоли в пределах гистологического среза, то признак оценивают в 2 балла, в случаях, когда площадь спонтанных некрозов в ткани опухоли занимает от 10 до 50% площади - признак оценивают в 3 балла, если более 50% - в 4 балла. После гистологического исследования ткани первичной опухоли проводят иммуногистохимическое исследование. Для иммуногистохимического исследования используют антитела к SMA и белку S100 (Dako). Иммуногистохимическое исследование проводят по стандартной методике согласно протоколу. Далее оценивают экспрессию указанных маркеров в препаратах опухоли. При наличии негативной экспрессии маркера SMA признак оценивают в 1 балл, при умеренной позитивной экспрессии - признак оценивают в 2 балла, при слабо выраженной позитивной экспрессии - признак оценивают как 3. При наличии негативной экспрессии маркера S100 признак оценивают в 1 балл, при умеренной позитивной экспрессии - признак оценивают в 2 балла, при слабо выраженной позитивной экспрессии - признак оценивают в 3 балла. Кроме того, в каждом случае в ткани опухоли проводят иммуногистохимическое исследование широкого спектра цитокератинов (в каждом случае проводят изучение 11 маркеров), в частности, используют следующие антитела: Pan-Cytokeratin (5/6/8/18) (Clone 5D3, Novocastra), Cytokeratin AE1/AE3 (Clone AE1/AE3, Dako), Cytokeratin 5 (Clone XM26, Novocastra), Cytokeratin 5/6 (Clone D5/16 B4, Dako), Cytokeratin 7 (Clone OV-TL 12/30, Novocastra), Cytokeratin 8 (Clone TS1, Novocastra), Cytokeratin 14 (Clone LL002, Novocastra), Cytokeratin 19 (Clone b170, Novocastra), Cytokeratin 20 (Clone K 20.08, Novocastra), Cytokeratin HMW (betta Clone 34E12, Dako), Cytokeratin 8/18 (Clone 5D3, Dako). Экспрессию каждого маркера оценивают как негативную или позитивную. При негативной экспрессии всех выше перечисленных маркеров данный признак оценивают в 1 балл, при наличии позитивной экспрессии хотя бы одного из 11 вышеперечисленных маркеров в опухолевой ткани - признак оценивают в 2 балла.
Рассчитывают значение уравнения регрессии Y по формуле:
1
2
3
4
5
Y=-590+1881⋅X+12,7⋅Х+64,7⋅Х-36,2⋅Х-31,9⋅Х, где
(-590) - значение коэффициента регрессии свободного члена;
1
X - наличие атипических митозов в опухоли в 10 полях зрения (1 - атипические митозы отсутствуют, 2 - наличие до 5 атипических митозов в 10 полях зрения, 3 - наличие более 5 атипических митозов в 10 полях зрения),
(188) - значение коэффициента регрессии этого признака;
2
Х - распространенность спонтанных некрозов (1 - некрозы отсутствуют, 2 - зона некроза занимает менее 10% площади опухоли, 3 - зона некроза занимает 10-50% площади опухоли, 4 - более 50% площади опухоли),
(12,7) - значение коэффициента регрессии этого признака;
3
Х - экспрессия маркера SMA (1 - негативная, 2 - умеренно позитивная, 3 - слабо позитивная),
(64,7) - значение коэффициента регрессии этого признака;
4
Х - экспрессия маркера S100 (1 - негативная, 2 - умеренно позитивная, 3 - слабо позитивная),
(- 36,2) - значение коэффициента регрессии этого признака;
5
Х - экспрессия цитокератинов (1 - негативная экспрессия всех цитокератинов, 2 - позитивная экспрессия хотя бы 1 из 11 цитокератинов);
(-31,9) - значение коэффициента регрессии этого признака.
Y
Y
Вероятность риска лимфогенного метастазирования при злокачественных опухолях из оболочек периферических нервов Р определяют по формуле: Р=e/(1+e), где
е - математическая константа, равная 2,72.
И при Р≥50% определяют высокий, а при Р<50% - низкий риск лимфогенного метастазирования.
Сущность предлагаемого способа иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. Пациент Г., 60 лет, гистологический тип новообразования - злокачественная опухоль из оболочек периферических нервов. При гистологическом исследовании ткани опухоли в 10 случайным образом выбранных полях зрения были обнаружены более 10 атипических митозов (3), спонтанные некрозы опухоли в пределах гистологического среза не определялись (1). При иммуногистохимическом исследовании в ткани опухоли экспрессия маркера SMA была негативной (1), экспрессия маркера S100 - умеренно позитивная (2), отмечалась негативная экспрессия всех цитокератинов (1).
1
2
3
4
5
Вероятность риска лимфогенного метастазирования при злокачественных опухолях из оболочек периферических нервов оценивалась по формуле: Y=-590+188⋅X+12,7⋅Х+64,7⋅Х-36,2⋅X-31,9⋅Х=-590+188⋅3+12,7⋅1+64,7⋅1-36,2⋅2-31,9⋅1=-590+537,1=-52,9
Y
Y
-52,9
-52,9
Вероятность риска лимфогенного метастазирования определялась по формуле: Р=e/(1+e)=2,72/(1+2,72)=0,1/1,1=0,09. Вероятность риска лимфогенного метастазирования у пациента составила 9%. При исследовании лимфатических узлов метастазов обнаружено не было.
Пример 2. Пациент Ц., 59 лет, гистологический тип новообразования - злокачественная опухоль из оболочек периферических нервов. При гистологическом исследовании ткани опухоли в 10 случайным образом выбранных полях зрения были обнаружены более 10 атипических митозов (3), площадь спонтанных некрозов в опухоли составляла от 10 до 50% (3). При иммуногистохимическом исследовании в ткани опухоли экспрессия маркера SMA была умеренно позитивной (2), экспрессия маркера S100 - также умеренно позитивная (2), отмечалась негативная экспрессия всех цитокератинов (1).
2
3
4
5
Вероятность риска лимфогенного метастазирования при злокачественных опухолях из оболочек периферических нервов оценивалась по формуле: Y=-590+188⋅Х1+12,7⋅Х+64,7⋅Х-36,2⋅Х-31,9⋅Х=-590+188⋅3+12,7⋅3+64,7⋅2-36,2⋅2-31,9⋅1=-590+627,2=37,2
Y
Y
37,2
37,2
Вероятность риска лимфогенного метастазирования определялась по формуле: Р=e/(1+e)=2,72/(1+2,72)=1,5/2,5=0,6. Вероятность риска лимфогенного метастазирования у пациента составила 60%. При исследовании лимфатических узлов в них были выявлены метастазы.
Предлагаемый способ основан на анализе данных морфологического и иммуногистохимического исследования операционного материала.
Изучался операционный материал от 93 пациентов со злокачественными опухолями из оболочек периферических нервов различной локализации. Средний возраст больных в данной группе составил 45,8±18,2 лет, среди пациентов было 43 женщины и 50 мужчин. Всем пациентам проводилась неоадъювантная химиотерапия по схеме MAID. Операция выполнялась в объеме радикального удаления первичной опухоли и лимфатических узлов.
Макроскопической оценке подвергалась ткань первичной опухоли, линии резекции и все удаленные во время операции лимфатические узлы. Материал фиксировался в 10-12% растворе нейтрального формалина. Проводку материала и изготовление гистологических препаратов осуществляли по стандартной методике. Препараты окрашивали гематоксилином и эозином. Гистологический тип опухоли устанавливали на основании международной классификации опухолей мягких тканей и костей (ВОЗ, 2013), способ предназначен только для злокачественной опухоли из оболочек периферических нервов.
s
Проводили морфологическое исследование препаратов первичной опухоли на светооптическом уровне. При исследовании опухолевой ткани оценивали наличие фигур атипических митозов в клетках опухоли, при этом в 10 полях зрения, выбранных случайным образом, при увеличении объектива микроскопа ×400 считали количество атипических митозов. При отсутствии митозов данный признак оценивали в 1 балл, при наличии единичных митозов (до 5 митозов в 10 полях зрения) признак оценивали в 2, балла при наличии более 5 фигур атипических митозов признак оценивали в 3 балла. Далее в ткани опухоли проводили морфологическую оценку спонтанных некрозов. Распространенность (площадь) спонтанных некрозов в первичной опухоли в пределах гистологического препарата определяли при увеличении объектива микроскопа ×100. При отсутствии спонтанных некрозов в ткани опухоли данный признак оценивали в 1балл, если зона некроза занимала менее 10% площади опухоли в пределах гистологического среза, то признак оценивали в 2 балла, в случаях, когда площадь спонтанных некрозов в ткани опухоли занимала от 10 до 50% площади - признак оценивали в 3 балла, если более 50% - как 4 балла. После гистологического исследования ткани первичной опухоли проводили иммуногистохимическое исследование. Для иммуногистохимического исследования использовали антитела к SMA и белку S100 (Dako). Иммуногистохимическое исследование проводили по стандартной методике согласно протоколам. Далее оценивали экспрессию указанных маркеров в препаратах опухоли. При наличии негативной экспрессии маркера SMA признак оценивали в 1 балл, при умеренной позитивной экспрессии - признак оценивали в 2 балла, при слабо выраженной позитивной экспрессии - признак оценивали в 3 балла. При наличии негативной экспрессии маркера S100 признак оценивали в 1балл, при умеренной позитивной экспрессии - признак оценивали в 2 балла, при слабо выраженной позитивной экспрессии - в 3 балла. Кроме того, в каждом случае в ткани опухоли проводили иммуногистохимическое исследование широкого спектра цитокератинов (в каждом случае проводят изучение 11 маркеров), в частности, использовали следующие антитела: Pan-Cytokeratin (5/6/8/18) (Clone 5D3, Novocastra), Cytokeratin AE1/AE3 (Clone AE1/AE3, Dako), Cytokeratin 5 (Clone XM26, Novocastra), Cytokeratin 5/6 (Clone D5/16 B4, Dako), Cytokeratin 7 (Clone OV-TL 12/30, Novocastra), Cytokeratin 8 (Clone TS1, Novocastra), Cytokeratin 14 (Clone LL002, Novocastra), Cytokeratin 19 (Clone b170, Novocastra), Cytokeratin 20 (Clone K 20.08, Novocastra), Cytokeratin HMW (betta Clone 34E12, Dako), Cytokeratin 8/18 (Clone 5D3, Dako). Экспрессию каждого маркера оценивали как негативную или позитивную. При негативной экспрессии всех выше перечисленных маркеров данный признак оценивали в 1 балл, при наличии позитивной экспрессии хотя бы одного из 11 вышеперечисленных маркеров в опухолевой ткани - признак оценивали в 2 балла.
Рассчитывают значение уравнения регрессии Y по формуле:
1
2
3
4
5
Y=-590+188⋅X+12,7⋅Х+64,7⋅Х-36,2⋅X-31,9⋅Х, где
(-590) - значение коэффициента регрессии свободного члена;
1
X - наличие атипических митозов в опухоли в 10 полях зрения (1 - атипические митозы отсутствуют, 2 - наличие до 5 атипических митозов в 10 полях зрения, 3 - наличие более 5 атипических митозов в 10 полях зрения),
(188) - значение коэффициента регрессии этого признака;
2
Х - распространенность спонтанных некрозов (1 - некрозы отсутствуют, 2 - зона некроза менее 10% площади опухоли, 3 - зона некроза 10 - 50% площади опухоли, 4 - более 50% площади опухоли),
(12,7) - значение коэффициента регрессии этого признака;
3
Х - экспрессия маркера SMA (1 - негативная, 2 - умеренно позитивная, 3 - слабо позитивная),
(64,7) - значение коэффициента регрессии этого признака;
4
Х - экспрессия маркера S100 (1 - негативная, 2 - умеренно позитивная, 3 - слабо позитивная),
(-36,2) - значение коэффициента регрессии этого признака;
5
Х - экспрессия цитокератинов (1 - негативная экспрессия всех цитокератинов, 2 - позитивная экспрессия хотя бы 1 из 11 цитокератинов);
(-31,9) - значение коэффициента регрессии этого признака.
Вероятность риска лимфогенного метастазирования при злокачественных опухолях из оболочек периферических нервов Р определяли по формуле:
Y
Y
Р=e/(1+e), где
e - математическая константа, равная 2,72.
При вероятности Р≥50% определяли высокий риск лимфогенного метастазирования, при вероятности Р<50% - низкий риск лимфогенного метастазирования.
2
Степень достоверности модели χ=698,43; р=0,0000. Чувствительность составила 100%, специфичность 100%.
Таким образом, предлагаемый способ позволяет с высокой точностью и информативностью при наличии конкретных числовых показателей прогнозировать вероятность лимфогенного метастазирования у пациентов со злокачественными опухолями из оболочек периферических нервов, что позволяет оптимизировать тактику ведения таких больных в плане коррекции объема лечения и последующего послеоперационного наблюдения.
Источники информации принятые во внимание при составлении описания:
1. Шелехова К.В. Изменения в классификации ВОЗ опухолей мягких тканей // Архив патологии. - 2015 г. - №1. - С. 48-54.
2. Мацко Д.Е. Современные представления о морфологической классификации сарком мягких тканей и их практическое значение // Практическая онкология. - 2013 г. - Т. 14, №2. - С. 77-86.
3. Jones N.B., Iwenofu Н., Scharschmidt Т., Kraybill W. Prognostic factors and staging for soft tissue sarcomas: An Update // Surgical Oncology clinics. - 2012. - V. 12, Issue 2. - P. 187-200.
4. Fletcher C.D.M., Unni K.K., Mertens F. World Health Organization. Classification of Tumours. Pathology and Genetics of Tumours of Soft Tissue and Bone. - Lyon: IARC Press, 2002.
5. AeRang Kim, Douglas R. Stewart, Karlyne M. Reilly, David Viskochil, Markku M. Miettinen, and Brigitte C. Widemann Malignant Peripheral Nerve Sheath Tumors State of the Science: Leveraging Clinical and Biological Insights into Effective Therapies // Sarcoma. Volume 2017, Article ID 7429697, 10 pages, https://doi.org/10.1155/2017/7429697.
6. Феденко A.A., Горбунова B.A. Саркомы мягких тканей // Поволжский онкологический вестник. - 2012 г. - №2. - С. 4-13.
7. Феденко А. А., Бохян А.Ю., Горбунова В.А., Махсон А.Н., Тепляков В.В. Практические рекомендации по лекарственному лечению сарком мягких тканей // Злокачественные опухоли. - 2016 г. - №4. Спецвыпуск 2. - С. 200-210.