Изучение биохимических критериев токсического поражения печени

Mikulyak N.I., Magdeyev R.R., Minnigaleeva S.D., Mikulyak A.I., Kinzirskaya Y.A., Petrushova O.P.

THE STUDY OF THE BIOCHEMICAL CRITERIA FOR LIVER TOXICITY

Department of Physiology, Medical Institute of Penza State University, Penza

The summary. The main part of cholesterol esters is concentrated in the lysosomes of the liver. We have found changes in the ratio of cholesterol esters and free cholesterol in the homogenate liver. These data indicate a dysfunction of the lysosomes in the liver of mice that received CCU

Key words: cholesterol esters, liver homogenates, toxic hepatopathy.

Микуляк Н.И., Магдеев Р.Р., Миннигалеева С.Д., Микуляк А.И., Кинзирская

Ю.А., Петрушова О.П.

ИЗУЧЕНИЕ БИОХИМИЧЕСКИХ КРИТЕРИЕВ ТОКСИЧЕСКОГО ПОРАЖЕНИЯ ПЕЧЕНИ

ФГБОУ ВПО «Пензенский государственный университет», кафедра Физиологии

человека, г. Пенза

Аннотация. Поскольку основная часть эфиров холестерина сосредоточена в лизосо-мах, то выявленные нами изменения в соотношении эфиров холестерина и свободного холестерина в гомогенате печени, могут служить доказательством нарушения функционирования лизосом печени мышей, получавших CCU.

Ключевые слова: эфиры холестерина, гомогенат печени, токсическая гепатопатия

Известно, что CCЦ интенсифицирует перекисное окисление липидов (ПОЛ), и механизм разрушения мембран связан с накоплением первичных и вторичных продуктов ПОЛ на фоне угнетения антиокислительной защиты клеток, их лабилизирующим воздействием на лизосомы с освобождением фосфоли-пазы А [4,5]. Тетрахлорметан (^Ц) и продукты его метаболической активации, являясь мембранотропными ядами, способны вызывать деструкцию арахи-доновой кислоты, и этот биохимический показатель расценивается авторами как

один из основных маркеров токсического поражения печени [1,2,3].

Схема постановки экспериментов по отработке экспериментальной модели токсической гепатопатии представлена в таблице 1. Экспериментальные животные рандомизированы в каждом отдельном опыте на число групп в зависимости от поставленных задач. В экспериментальные группы входило по 6-10 особей. Продолжительность опыта составила 24 дня.

—---------- —

~ 184 ~

Издание зарегистрировано в Федеральной службе по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор). Свидетельство о регистрации СМИ ПИ № ФС77-49390 Журнал представлен в НАУЧНОЙ ЭЛЕКТРОННОЙ БИБЛИОТЕКЕ - головном исполнителе проекта по созданию Российского индекса научного цитирования (РИНЦ).

Таблица 1. Схема экспериментов по моделированию токсической гепатопатии у мышей-самцов линии С57В1/6

Экспериментальные группы Условное обозначение Схема моделирования

I - интактный контроль (ИК);

II - токсическая гепатопа-тия (ТГП); 0,2 мл 2,5% масляного раствора ССІ4 вводили внутриже-лудочно, 2 раза в неделю, в течение 2-х недель

III - LLC (LLC); 1х106 опухолевых клеток КЬС внутримышечно

IV - LLC + токсическая гепа-топатия (LLC+ТГП) 0,2 мл 2,5% масляного р-ра ССІ4 в/ж, 2 раза в неделю, в течение 2-х недель, 1х106 клеток КЬС в/м, через 24 часа после второго введения ССІ4.

Биохимические исследования, выполненные на 24 сутки эксперимента при отработке модели токсического поражения печени, позволили выявить значительные нарушения обмена липидов.

При интоксикации мышей ССЦ в гомогенате печени наблюдалось на фоне снижения свободного холестерина (СХС) (II

Таблица 2. Показатели обмена холестерина (ХС) в печени мышей после воздействия тетрахлорметана

и IV группы) увеличение эфиров холестерина (ЭХС), что приводило к увеличению коэффициента эстерификации в 2,6 раза для II группы и 1,6 раз для IV группы по сравнению с контролем (табл. 2).

Группы живот- Содержание липидных компонентов, мг/г ткани

ных Общий ХС Свободный ХС Эфиры ХС ЭХС/СХС

I - ИК 247±0,10 1,62±0,16 0,85±0,12 0,52±0,09

II - ТГ 2,32±0,10 0,98±0,11* 1,34±0,18* 1,37±0,11***

III - LLC 2,51±0,30 1,37±0,36 1,14±0,31 0,83±0,12

IV - LLC+ТГ 1,15±0,30** 0,61±0,09*** 0,53±0,05 0,87±0,12*

Примечание: *- P<0,05; ** - Р<0,01; *** - P<0,001

Сама опухоль КЬС (III группа) не оказывала существенного влияния на содержание общего и свободного холестерина, а также эфиров холестерина в печени мышей С57ВІ/6.

Поскольку основная часть эфиров холестерина сосредоточена в лизосомах, то выявленные нами изменения в соотношении эфиров холестерина и свободного холестерина в гомогенате печени,

могут служить доказательством нарушения функционирования лизосом печени мышей, получавших ССЦ.

Состав основных жирных кислот суммарной фракции липидов печени представлен четырьмя доминирующими кислотами - пальмитиновой, стеариновой, олеиновой и арахидоновой. При определении содержания отдельных кис-

~ 185 ~

Издание зарегистрировано в Федеральной службе по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор). Свидетельство о регистрации СМИ ПИ № ФС77-49390 Журнал представлен в НАУЧНОЙ ЭЛЕКТРОННОЙ БИБЛИОТЕКЕ - головном исполнителе проекта по созданию Российского индекса научного цитирования (РИНЦ).

лот отмечалось снижение уровня нена- нарастания количества насыщенных сыщенных кислот (олеиновой и арахидо- жирных кислот (табл. 3). новой) во II, III и IV группах на фоне

Таблица 3. Жирнокислотный состав липидов печени мышей, получавших ССІ4 (% от суммы жирных кислот)________________________________________________

Группы животных Жирные кислоты

Пальмитино- вая Стеарино- вая Олеиновая Арахидоновая

I - ИК 27,1±0,3 13,9±0,1 44,6±1,2 14,4±0,1

II - ТГ 30,9±0,7*** 12,8±2,1 47,8±3,6 8,4±0,7***

III - LLC 34,0±0,1*** 13,6±0,3 45,7±4,7 6,6±0,1***

IV - LLC+ТГ 34 9±0 7*** 17,7±0,8*** 40,0±1,0* 7,4±1,0***

Примечание: *- Р<0,05; ** - Р<0,01;

Представленные в таблице данные согласуются с результатами других авторов, показавших, что ССЦ и продукты его метаболической активации, являясь мембранотропными ядами, способны вызывать деструкцию арахидоновой кислоты, и этот биохимический показатель расценивается авторами как один из основных маркеров токсического поражения печени.

Таким образом, выполненный нами раздел исследований показал, что введение ССЬ4 мышам С57В1/6 приводило к нарушению генеза липидов, которые выражались в снижении уровня свободного холестерина (СХС) (II и IV группы), увеличении эфиров холестерина (ЭХС) и как следствие этого, приводило к увеличению коэффициента эстерификации. Нами также выявлено снижение уровня ненасыщенных жирных кислот (олеиновой и арахидоновой) во II, III и IV группах на фоне нарастания количества насыщенных жирных кислот, а также уменьшение относительного содержания фосфатидилхолина у мышей II и IV опытных групп по сравнению с интакт-ным контролем, с одновременным повышением уровня фосфатидилэтаноламина

*** - Р<0,001

в печени животных ЬЬС, получавших СС14.

ЛИТЕРАТУРА

1. Дятловицкая, Э. В. Сфинголипиды и злокачественный рост / Э. В. Дятловицкая // Биохимия. - 1995. - Т.60. - №6. - С. 843-849

2. Ветошкина, Т. В. Механизмы гепатоток-сического действия противоопухолевого препарата вепезида / Т. В. Ветошкина, Т. Ю. Дубовская, Е. А. Темина // Эксперим. и клин. фармакология. - 1998. - Т.61. - № 1. - С. 5456.

3. Кинзирская Ю. А. Гепатотоксическое действие лекарственных препаратов некоторых фармакологических групп / Ю. А. Кинзирская, Т. А. Богуш, Н. В. Остапчук [и др.] // Клин. медицина. - 2003. - №10. - С. 11-16.

4. Микуляк, Н.И. Клинико-патогенетические особенности синдрома печеночно-клеточной недостаточности при цитостатической болезни/ Н.И. Микуляк, А.И. Микуляк, Р.Е.Дементьева, С.А.Гольдхаур// IX международный конгресс «Здоровье и образование XXI веке». «Инновационные технологии в биологии и медицине» - 2009. - С. 232-233.

5. Микуляк, Н.И. Цитостатическая болезнь и перекисное окисление липидов/ Н.И.Микуляк, А.И.Микуляк, С.А.Гольдхаур// Вестник РУДН. - 2009. - Серия «Медицина». - №6. - С. 762-765.

—---------- —

~ 186 ~

Издание зарегистрировано в Федеральной службе по надзору в сфере связи, информационных технологий и массовых коммуникаций (Роскомнадзор). Свидетельство о регистрации СМИ ПИ № ФС77-49390 Журнал представлен в НАУЧНОЙ ЭЛЕКТРОННОЙ БИБЛИОТЕКЕ - головном исполнителе проекта по созданию Российского индекса научного цитирования (РИНЦ).