ХИМЕРНЫЕ АНТИГЕННЫЕ РЕЦЕПТОРЫ, НАЦЕЛЕННЫЕ НА АНТИГЕН СОЗРЕВАНИЯ В-КЛЕТОК, И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ

∧
∧
1. Способ лечения множественной миеломы у субъекта, включающий введение указанному субъекту по меньшей мере одной дозы аллогенных Т-клеток с химерными антигенными рецепторами (CAR), содержащих CAR к ВСМА человека (ВСМА CAR-T-клетки), при этом указанная по меньшей мере одна доза составляет от примерно 7 × 106 клеток/доза до примерно 480 × 106 клеток/доза.
∧
∧
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что масса тела субъекта составляет ≥50 кг, и указанный способ включает введение по меньшей мере одной дозы ВСМА CAR-Т-клеток, при этом указанная доза находится в диапазоне от примерно 20 × 106 клеток/доза до примерно 480 × 106 клеток/доза.
∧
∧
∧
∧
∧
3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что указанная по меньшей мере одна доза составляет примерно 20 × 106 клеток/доза, примерно 40 × 106 клеток/доза, примерно 120 × 106 клеток/доза, примерно 360 × 106 клеток/доза или примерно 480 × 106 клеток/доза.
∧
∧
∧
∧
∧
∧
∧
∧
4. Способ по п. 2, отличающийся тем, что указанная по меньшей мере одна доза составляет от примерно 20 × 106 клеток/доза до примерно 40 × 106 клеток/доза, от примерно 40 × 106 клеток/доза до примерно 120 × 106 клеток/доза, от примерно 120 × 106 клеток/доза до примерно 360 × 106 клеток/доза или от примерно 360 × 106 клеток/доза до примерно 480 × 106 клеток/доза.
∧
∧
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что масса тела субъекта составляет <50 кг, и указанный способ включает введение по меньшей мере одной дозы ВСМА CAR-Т-клеток, при этом указанная доза находится в диапазоне от примерно 7 × 106 клеток/доза до примерно 360 × 106 клеток/доза.
∧
∧
∧
∧
∧
∧
6. Способ по п. 5, отличающийся тем, что указанная по меньшей мере одна доза составляет примерно 7 × 106 клеток/доза, примерно 14 × 106 клеток/доза, примерно 20 × 106 клеток/доза, примерно 80 × 106 клеток/доза, примерно 240 × 106 клеток/доза или примерно 360 × 106 клеток/доза.
∧
∧
∧
∧
∧
∧
∧
∧
∧
7. Способ по п. 5, отличающийся тем, что указанная по меньшей мере одна доза составляет от примерно 7 × 106 или 14 × 106 клеток/доза до примерно 20 × 106 клеток/доза, от примерно 20 × 106 клеток/доза до примерно 80 × 106 клеток/доза, от примерно 80 × 106 клеток/доза до примерно 240 × 106 клеток/доза или от примерно 240 × 106 клеток/доза до примерно 360 × 106 клеток/доза.
∧
∧
8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что масса тела субъекта составляет >50 кг, и указанный способ включает введение по меньшей мере одной дозы ВСМА CAR-Т-клеток, при этом указанная доза находится в диапазоне от примерно 20 × 106 клеток/доза до примерно 480 × 106 клеток/доза.
∧
∧
∧
∧
∧
∧
9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что указанная по меньшей мере одна доза составляет примерно 20 × 106 клеток/доза, примерно 40 × 106 клеток/доза, примерно 160 × 106 клеток/доза, примерно 240 × 106 клеток/доза, примерно 320 × 106 клеток/доза или примерно 480 × 106 клеток/доза.
∧
∧
∧
∧
∧
∧
∧
∧
∧
∧
∧
∧
10. Способ по п. 8, отличающийся тем, что указанная по меньшей мере одна доза составляет от примерно 20 × 106 клеток/доза до примерно 40 × 106 клеток/доза, от примерно 40 × 106 клеток/доза до примерно 160 × 106 клеток/доза, от примерно 160 × 106 клеток/доза до примерно 240 × 106 клеток/доза, от примерно 240 × 106 клеток/доза до примерно 320 × 106 клеток/доза, от примерно 160 × 106 клеток/доза до примерно 320 × 106 клеток/доза или от примерно 320 × 106 клеток/доза до примерно 480 × 106 клеток/доза.
∧
∧
11. Способ по п. 1, отличающийся тем, что масса тела субъекта составляет ≤50 кг, и указанный способ включает введение по меньшей мере одной дозы ВСМА CAR-Т-клеток, при этом указанная доза находится в диапазоне от примерно 14 × 106 клеток/доза до примерно 320 × 106 клеток/доза.
∧
∧
∧
∧
∧
∧
12. Способ по п. 11, отличающийся тем, что указанная по меньшей мере одна доза составляет примерно 14 × 106 клеток/доза, примерно 20 × 106 клеток/доза, примерно 80 × 106 клеток/доза, примерно 160 × 106 клеток/доза, примерно 200 × 106 клеток/доза или примерно 320 × 106 клеток/доза.
∧
∧
∧
∧
∧
∧
∧
∧
∧
∧
∧
∧
13. Способ по п. 12, отличающийся тем, что указанная по меньшей мере одна доза составляет от примерно 14 × 106 клеток/доза до примерно 20 × 106 клеток/доза, от примерно 20 × 106 клеток/доза до примерно 80 × 106 клеток/доза, от примерно 80 × 106 клеток/доза до примерно 200 × 106 клеток/доза, от примерно 80 × 106 клеток/доза до примерно 160 × 106 клеток/доза, от примерно 160 × 106 клеток/доза до примерно 200 × 106 клеток/доза или от примерно 200 × 106 клеток/доза до примерно 320 × 106 клеток/доза.
14. Способ по любому из пп. 1-13, отличающийся тем, что множественная миелома представляет собой рефрактерную множественную миелому.
15. Способ по любому из пп. 1-14, отличающийся тем, что множественная миелома представляет собой рецидивирующую множественную миелому.
16. Способ по любому из пп. 1-13, отличающийся тем, что множественная миелома представляет собой рефрактерную и рецидивирующую множественную миелому.
17. Способ по любому из пп. 1-13, отличающийся тем, что субъект не получал никакой предшествующей терапии множественной миеломы.
18. Способ по любому из пп. 1-13, отличающийся тем, что субъект получил по меньшей мере один, два или три вида предшествующей терапии множественной миеломы.
19. Способ по любому из пп. 1-18, отличающийся тем, что ВСМА CAR-T-клетки содержат CAR, содержащий внеклеточный связывающий домен, содержащий одноцепочечный Fv-фрагмент (scFv), при этом указанный scFv содержит вариабельную область тяжелой цепи (VH) и вариабельную область легкой цепи (VL), причем указанная VH-область содержит определяющий комплементарность участок-1 VH (CDR1 VH), определяющий комплементарность участок-2 VH (CDR2 VH) и определяющий комплементарность участок-3 VH (CDR3 VH), и указанная VL-область содержит определяющий комплементарность участок-1 VL (CDR1 VL), определяющий комплементарность участок-2 VL (CDR2 VL) и определяющий комплементарность участок-3 VL (CDR3 VL), где:
(a) CDR1 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 150, 151 или 152; CDR2 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 153 или 154; CDR3 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 155; CDR1 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 209; CDR2 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 221; и CDR3 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 222;
(b) CDR1 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 150, 151 или 152; CDR2 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 187 или 188; CDR3 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 155; CDR1 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 249; CDR2 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 221; и CDR3 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 225;
(c) CDR1 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 150, 151 или 152; CDR2 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 165 или 166; CDR3 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 155; CDR1 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 226; CDR2 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 221; и CDR3 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 227;
(d) CDR1 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 151, 156 или 157; CDR2 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 159 или 162; CDR3 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 161; CDR1 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 251; CDR2 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 252; и CDR3 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 253;
(e) CDR1 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 151, 156 или 157; CDR2 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 190 или 191; CDR3 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 161; CDR1 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 262; CDR2 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 252; и CDR3 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 263;
(f) CDR1 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 150, 151 или 152; CDR2 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 154 или 169; CDR3 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 155; CDR1 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 271; CDR2 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 221; и CDR3 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 272;
(g) CDR1 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 129, 130 или 131; CDR2 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 139 или 140; CDR3 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 134; CDR1 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 217; CDR2 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 210; и CDR3 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 216;
(h) CDR1 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 151, 156 или 157; CDR2 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 158 или 159; CDR3 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 155; CDR1 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 209; CDR2 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 221; и CDR3 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 225; или
(i) CDR1 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 129, 130 или 131; CDR2 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 132 или 133; CDR3 VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 137; CDR1 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 377; CDR2 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 210; и CDR3 VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 214.
20. Способ по п. 19, отличающийся тем, что VH-область содержит CDR1 VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 150, 151 или 152; CDR2 VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 153 или 154; и CDR3 VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 155; и VL-область содержит CDR1 VL, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 209; CDR2 VL, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 221; и CDR3 VL, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 222.
21. Способ по п. 19, отличающийся тем, что VH-область содержит CDR1 VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 151, 156 или 157; CDR2 VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 158 или 159; и CDR3 VH, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 155; и VL-область содержит CDR1 VL, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 209; CDR2 VL, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 221; и CDR3 VL, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 225.
22. Способ по любому из пп. 1-18, отличающийся тем, что ВСМА CAR-T-клетки содержат CAR, содержащий внеклеточный связывающий домен, содержащий одноцепочечный Fv-фрагмент (scFv), при этом указанный scFv содержит VH-область и VL-область, причем комбинация VH- и VL-областей выбрана из комбинаций, представленных в Таблице 1.
23. Способ по любому из пп. 1-18, отличающийся тем, что ВСМА CAR-T-клетки содержат CAR, содержащий внеклеточный лигандсвязывающий домен, первый транс мембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, при этом указанный внеклеточный домен содержит scFv, содержащий вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность, представленную в SEQ ID NO: 33, 72, 39, 76, 83, 92, 25, 112 или 8 в Таблице 1; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность, представленную в SEQ ID NO: 34, 73, 40, 77, 84, 93, 18, 38 или 80 в Таблице 1, указанный первый трансмембранный домен содержит трансмембранный домен цепи CD8α, и указанный внутриклеточный сигнальный домен содержит сигнальный домен CD3ζ и/или сигнальный домен 4-1 ВВ.
24. Способ по п. 23, отличающийся тем, что VH содержит SEQ ID NO: 33, и VL содержит SEQ ID NO: 34.
25. Способ по п. 23, отличающийся тем, что VH содержит SEQ ID NO: 112, и VL содержит SEQ ID NO: 38.
26. Способ по любому из пп. 1-18, отличающийся тем, что ВСМА CAR-T-клетки содержат CAR, содержащий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 344.
27. Способ по п. 26, отличающийся тем, что CAR дополнительно содержит эпитоп CD20.
28. Способ по п. 27, отличающийся тем, что указанный эпитоп CD20 содержит аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 397 или SEQ ID NO: 398.
29. Способ по любому из пп. 1-18, отличающийся тем, что ВСМА CAR-T-клетки содержат CAR, содержащий сигнальный пептид CD8α, имеющий последовательность SEQ ID NO: 318; VH-область, имеющую последовательность SEQ ID NO: 112; линкер GS, имеющий последовательность SEQ ID NO: 333; VL-область, имеющую последовательность SEQ ID NO: 38; шарнирную область CD8α, имеющую последовательность SEQ ID NO: 320; транс мембранный домен CD8α, имеющий последовательность SEQ ID NO: 322; внутриклеточный сигнальный домен 4-1ВВ, имеющий последовательность SEQ ID NO: 323; и внутриклеточный сигнальный домен CD3ζ, имеющий последовательность SEQ ID NO: 324.
30. Способ по любому из пп. 1-18, отличающийся тем, что ВСМА CAR-T-клетки содержат CAR, содержащий сигнальный пептид CD8α, имеющий последовательность SEQ ID NO: 318; VH-область, имеющую последовательность SEQ ID NO: 112; линкер GS, имеющий последовательность SEQ ID NO: 333; VL-область, имеющую последовательность SEQ ID NO: 38; эпитоп CD20, имеющий последовательность SEQ ID NO: 398; шарнирную область CD8α, имеющую последовательность SEQ ID NO: 320; трансмембранный домен CD8α, имеющий последовательность SEQ ID NO: 322; внутриклеточный сигнальный домен 4-1ВВ, имеющий последовательность SEQ ID NO: 323; и внутриклеточный сигнальный домен CD3ζ, имеющий последовательность SEQ ID NO: 324.
31. Способ по любому из пп. 1-18, отличающийся тем, что ВСМА CAR-T-клетки содержат CAR, содержащий сигнальный пептид CD8α, имеющий последовательность SEQ ID NO: 318; VH-область, имеющую последовательность SEQ ID NO: 33; линкер GS, имеющий последовательность SEQ ID NO: 333; VL-область, имеющую последовательность SEQ ID NO: 34; шарнирную область CD8α, имеющую последовательность SEQ ID NO: 320; транс мембранный домен CD8α, имеющий последовательность SEQ ID NO: 322; внутриклеточный сигнальный домен 4-1ВВ, имеющий последовательность SEQ ID NO: 323; и внутриклеточный сигнальный домен CD3ζ, имеющий последовательность SEQ ID NO: 324.
32. Способ по любому из пп. 1-18, отличающийся тем, что ВСМА CAR-T-клетки содержат CAR, содержащий сигнальный пептид CD8a, имеющий последовательность SEQ ID NO: 318; VH-область, имеющую последовательность SEQ ID NO: 33; линкер GS, имеющий последовательность SEQ ID NO: 333; VL-область, имеющую последовательность SEQ ID NO: 34; эпитоп CD20, имеющий последовательность SEQ ID NO: 398; шарнирную область CD8α, имеющую последовательность SEQ ID NO: 320; трансмембранный домен CD8α, имеющий последовательность SEQ ID NO: 322; внутриклеточный сигнальный домен 4-1ВВ, имеющий последовательность SEQ ID NO: 323; и внутриклеточный сигнальный домен CD3ζ, имеющий последовательность SEQ ID NO: 324.
33. Способ по любому из пп. 1-32, отличающийся тем, что CAR-T-клетки дефицитны по CD52.
34. Способ по любому из пп. 1-30, отличающийся тем, что CAR-T-клетки дефицитны по TCRα и/или TCRβ.
-
+/-
35. Способ по любому из пп. 1-34, отличающийся тем, что генотип указанных клеток представляет собой TCRαβ и CD52.
36. Способ по любому из пп. 1-32, отличающийся тем, что CAR-T-клетки не экспрессируют «защитный выключатель».
37. Способ по любому из пп. 1-32, отличающийся тем, что CAR-T-клетки экспрессируют эпитоп для ритуксимаба.
38. Способ по любому из пп. 1-37, отличающийся тем, что субъект получает первый режим лимфодеплеции перед введением по меньшей мере одной дозы.
39. Способ по п. 38, отличающийся тем, что указанный первый режим лимфодеплеции включает введение флударабина и циклофосфамида.
40. Способ по п. 38, отличающийся тем, что указаныный первый режим лимфодеплеции включает введение флударабина, циклофосфамида и антитела к CD52.
41. Способ по п. 38, отличающийся тем, что указанный первый режим лимфодеплеции включает введение антитела к CD52.
42. Способ по п. 38, отличающийся тем, что указанный первый режим лимфодеплеции включает введение только антитела к CD52.
2
2
43. Способ по п. 38, отличающийся тем, что флударабин вводят в дозе примерно 30 мг/м/день; циклофосфамид вводят в дозе примерно 300 мг/м/день; и антитело к CD52 вводят в дозе от примерно 10 до примерно 13 мг/день.
2
2
44. Способ по п. 40, отличающийся тем, что флударабин вводят в дозе примерно 30 мг/м/день; циклофосфамид вводят в дозе примерно 300 мг/м/день; и антитело к CD52 вводят в дозе от примерно 13 до примерно 30 мг/день, от примерно 13 до 20 мг/день, от примерно 13 до 30 мг/день или от примерно 20 до 30 мг/день.
45. Способ по п. 44, отличающийся тем, что антитело к CD52 вводят в дозе примерно 13 мг/день, примерно 20 мг/день или примерно 30 мг/день.
46. Способ по любому из пп. 38-45, отличающийся тем, что указанный первый режим лимфодеплеции начинают примерно за 1-15 дней до введения указанной по меньшей мере одной дозы.
47. Способ по любому из пп. 38-46, отличающийся тем, что указанный первый режим лимфодеплеции применяют на протяжении 1, 2, 3, 4 или 5 дней.
48. Способ по любому из пп. 36-47, отличающийся тем, что указанный первый режим лимфодеплеции применяют за 5 дней до введения указанной по меньшей мере одной дозы на протяжении 3 дней.
49. Способ по любому из пп. 1-48, отличающийся тем, что субъект получает последующую дозу CAR-T-клеток.
∧
50. Состав, содержащий ВСМА CAR-T-клетки, при этом указанные клетки представлены в растворе, содержащем 5% диметилсульфоксид, при этом дозировка указанного состава составляет 14 × 106 клеток/мл, причем генотип клеток представляет собой BCMA-CAR+_TCR--αβ-_CD52+/-, и ВСМА CAR-T-клетки содержат CAR, содержащий внеклеточный лигандсвязывающий домен, два ритуксимаб-связывающих домена, первый трансмембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, при этом указанный внеклеточный домен содержит scFv, содержащий вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность, представленную в SEQ ID NO: 33, 72, 39, 76, 83, 92, 25, 112 или 8 в Таблице 1; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность, представленную в SEQ ID NO: 34, 73, 40, 77, 84, 93, 18, 38 или 80 в Таблице 1, указанный первый транс мембранный домен содержит транс мембранный домен цепи CD8α, и указанный внутриклеточный сигнальный домен содержит сигнальный домен CD3ζ и/или сигнальный домен 4-1ВВ.
∧
51. Состав, содержащий ВСМА CAR-T-клетки, при этом указанные клетки представлены в смеси CryoStor Basal Solution и CryoStor CS10 в соотношении 1:1, с получением 5% конечной концентрации диметилсульфоксида, при этом дозировка состава составляет 14 × 106 клеток/мл, причем генотип клеток представляет собой ВСМА-CAR+_TCRαβ-_CD52+/-, и ВСМА CAR-T-клетки содержат CAR, содержащий внеклеточный лигандсвязывающий домен, два ритуксимаб-связывающих домена, первый транс мембранный домен и внутриклеточный сигнальный домен, при этом указанный внеклеточный домен содержит scFv, содержащий вариабельную область тяжелой цепи (VH), содержащую последовательность, представленную в SEQ ID NO: 33, 72, 39, 76, 83, 92, 25, 112 или 8 в Таблице 1; и вариабельную область легкой цепи (VL), содержащую последовательность, представленную в SEQ ID NO: 34, 73, 40, 77, 84, 93, 18, 38 или 80 в Таблице 1, указанный первый трансмембранный домен содержит трансмембранный домен цепи CD8α, и указанный внутриклеточный сигнальный домен содержит сигнальный домен CD3ζ и/или сигнальный домен 4-1ВВ.