Фармакотоксикология эроксимаста и его эффективность при мастите коров

Фармакотоксикология эроксимаста и его эффективность при мастите коров

Е.Э. Кириллова, Всероссийский НИВИ патологии, фармакологии и терапии

В настоящее время общая заболеваемость коров маститами по отношению к общему поголовью составляет 40—60%. На фоне нарушения технологии доения (травматическое воздействие на ткани вымени) активизируются возбудители мастита, которыми являются, как правило, банальная кокковая микрофлора (стрепто-, стафилло-кокки) и энтеробактерии (кишечная палочка) [1, 2 и др.]. Огромный экономический ущерб, причиняемый животноводческим хозяйствам вследствие развития заболеваний молочной железы у продуктивных коров, вызывает необходимость поиска путей и методов совершенствования и изыскания новых эффективных средств в их профилактике и лечении мастопатологий.

Борьба с условно-патогенной и патогенной микрофлорой преимущественно ведется с использованием антимикробных химиотерапевтических средств, позволяющих значительно снизить заболеваемость. Но из-за длительного и бессистемного их применения в практике у микроорганизмов развивается колонизационная резистентность, что снижает терапевтический эффект применяемого препарата [3 и др.].

Поэтому эффективным путем преодоления формирования устойчивости к лекарственным препаратам является чередование лекарственных средств с разными механизмами антимикробного действия (ротационные препараты) или создание комплексных препаратов путем комбинирования нескольких лекарственных веществ.

Одно из перспективных лекарственных средств этой группы — новый антимикробный комбинированный препарат эроксимаст, в состав которого входят эритромицин и окситетрациклин.

Изучение антимикробной активности эроксимаста методом серийных разведений в жидкой питательной среде показало, что его минимальная бактериостатическая концентрация составляет 9,75 мкг/мл, а минимальная бактерицидная концентрация — 19,5 мкг/мл. Следовательно, эроксимаст обладал высокой антимикробной активностью. Наиболее выраженное действие он проявлял в отношении кокковой микрофлоры: стрептококков и стафилококков.

Изучение токсичности эроксимаста проводилось на белых крысах и белых мышах. При испытании токсических доз препарата изучались симптомокомплекс острого экспериментального отравления эроксимастом и патологоанатомические изменения в органах и тканях животных.

Опыты выполняли в двух повторностях для каждого вида животных. В основу подбора доз и определения параметров токсичности эроксимаста был положен принцип нахождения скользящих величин, вызывающих необходимый эффект: появление симптомов токсикоза или гибели особей в группах.

На первом этапе испытаний определяли недействующую и абсолютно смертельную дозы. На втором этапе токсические дозы испытывали с интервалами в возрастающем по силе действия порядке, начиная с недействующей дозы, и доводили величину до 100%-ной гибели особей.

Учитывая, что о силе действия на организм лабораторных животных препарата можно судить по среднему результату, среднюю дозу эффекта — LD50 — определяли аналитическим способом Спирмена-Кербера (Лакин Г. Ф., 1990), величины LD16 и LD84 находили графически на основании пробитов и доз в мг/кг массы тела животных, показатель ошибки средней дозы эффекта — SLD50 — аналитически и графически.

В опыте использовались белые мыши и белые крысы обоего пола с массой тела у мышей — 19— 23 г., у крыс — 180—200 г. Перед началом опытов животных выдерживали на карантине в течение 14 дней, а перед введением препарата не кормили в течение 8 часов.

Для определения острой токсичности эрокси-маста были сформированы по восемь опытных групп белых мышей и белых крыс и по одной контрольной группе (по 6 животных в каждой). Животным опытных групп вводили эроксимаст в дозах 5,0; 6,0; 7,0; 8,0; 9,0; 10,0; 11,0 и 12,0 мл/кг массы тела, что соответствовало 200; 240; 280; 320; 360; 400; 440 и 480 мг/кг массы тела по АДВ. Перед введением препарат подогревали до 36°С. За животными проводили ежедневное клиническое наблюдение в течение 14 дней, учитывая внешний вид, поведение, поедаемость корма и прием воды, ритм и частоту сердцебиения, количество дыхательных движений и глубину дыхания. Особое внимание уделяли развитию признаков токсикоза, оценивали их тяжесть, продолжительность, время выздоровления или гибели животных.

Клинические симптомы острого отравления белых мышей и белых крыс сопровождались непродолжительным периодом возбуждения с усилением двигательной активности у большинства особей, мыши издавали при этом писк. Белые крысы были настолько возбуждены в этот период, что у них отмечалась агрессивность. За непродолжительным периодом возбуждения развивалось резко выраженное угнетение, наступало

состояние глубокого сна, переходящее затем в кому. Животные не реагировали на световой и тактильный раздражители, не принимали корм. Больные крысы и мыши пили воду, у них отмечалась резко выраженная жажда. К моменту гибели животных наблюдались учащенное дыхание и сердцебиение. Дыхание часто становилось поверхностным, прерывистым. Развивалась си-нюшность кожи и слизистых оболочек. Смерть, как правило, наступала в состоянии глубокого угнетения.

Паталогоанатомические изменения острого отравления лабораторных животных (крыс и мышей) характеризовались гемодинамическими расстройствами, повсеместным застоем венозной крови в подкожной клетчатке и внутренних органах. Желудок при вскрытии — пуст, слизистая — гиперемирована, в подслизистой дна его — мелкоточечные едва заметные кровоизлияния. Слизистая оболочка тонкого отдела кишечника гипере-мирована, с наличием в ней мелкоточечных кровоизлияний. В просвете тонкого отдела кишечника у отдельных крыс и мышей отмечалось скопление значительного количества слизи. Печень, почки полнокровны, незначительно увеличены, окраска неравномерная с фиолетовым оттенком. У большинства трупов легкие гиперемированы с наличием отечной жидкости. Сердце растянуто, предсердия заполнены темно-вишневого цвета кровью. Под эпикардом, особенно в области ушек, множественные кровоизлияния.

Расчет LD50 эроксимаста провели биометрически по формуле:

^(а + бМм-л),

50 200

где Е — знак суммирования стоящих после него величин;

а и б — величины смежных величин испытуемых доз препарата;

м и п — частоты смертельных исходов в %;

200 — постоянный коэффициент.

На основании результатов первичных токси-кометрических исследований были получены следующие данные для исчисления величины LD50 эроксимаста при подкожном введении белым мышам и белым крысам (табл. 1).

Величины LD16 и LD84 эроксимаста для белых мышей и белых крыс определили графически на основании соответствующих пробитов и доз в мл/кг массы тела, показатель ошибки средней дозы эффекта — SLD50 — аналитически и графически (табл. 2).

2. Параметры острой токсичности эроксимаста для лабораторных животных при подкожном введении, мл/кг

Вид животных Параметры токсичности Показатель ошибки 8ЬБ50

ЬБ16 ЬБ50 Ь084 Г 1 0 о

Белые мыши 6,75

Белые крысы 6,95

Изучение влияния эроксимаста на организм и молочную железу 3-х клинически здоровых коров симментальской породы показало, что интрацис-тернальное введение препарата, подогретого до 38°С, в количестве 10 мл в левую переднюю четверть вымени после предварительного выдаивания молока и обработки сосков 70%-ным этиловым спиртом не вызвало в течение опыта изменений со стороны общего состояния организма животных (температура, частота пульса, количество дыхательных движений, сердечных толчков, сокраще-

1. LD50 эроксимаста при подкожном введении белым мышам и белым крысам

Вид и группы лабораторных животных Доза препарата мл/кг мг/кг по АДВ Количество животных % гибели Соответствующие пробиты

выживших погибших

Белые мыши

1 5,0 (200) 6 - - 3,27

2 6,0 (240) 5 1 16,6 4,03

3 7,0 (280) 5 1 16,6 4,03

4 8,0 (320) 4 2 33,3 4,47

5 9,0 (360) 3 3 50,0 5,00

6 10,0 (400) 3 3 50,0 5,00

7 11,0 (440) 1 5 83,3 5,97

8 12,0 (480) - 6 100,0 6,73

Белые крысы

1 5,0 (200) 6 - - 3,27

2 6,0 (240) 5 1 16,6 4,03

3 7,0 (280) 5 1 16,6 4,03

4 8,0 (320) 4 2 33,3 4,47

5 9,0 (360) 3 3 50,0 5,00

6 10,0 (400) 2 4 66,6 5,43

7 11,0 (440) 1 5 83,3 5,97

8 12,0 (480) - 6 100,0 6,73

3. Показатели количества соматических клеток и рH в молоке

Время исследования Четверть вымени Количество соматических клеток, млн./мл рн

До введения опытная 0,3i8±0,070 6,65±0,05

контрольная 0,324±0,054 6,64±0,04

Через 6 часов опытная 0,873±0,i75 6,67±0,04

контрольная 0,672±0,i47 6,67±0,03

Через 24 часа опытная i,3i7±0,207 6,66±0,05

контрольная 0,730±0,i74 6,65±0,03

Через 48 часов опытная 0,627±0,085 6,64±0,03

контрольная 0,423±0,068 6,65±0,04

Через 72 часа опытная 0,402±0,077 6,65±0,04

контрольная 0,32i±0,06i 6,64±0,03

Через 96 часов опытная 0,3i2±0,068 6,66±0,03

контрольная 0,3i8±0,07i 6,65±0,02

Через 120 часов опытная 0,302±0,038 6,63±0,03

контрольная 0,297±0,03i 6,64±0,04

ний рубца). Реакция секретов вымени опытных четвертей с 2%-ным раствором мастидина в течение 6-48 часов была сомнительной + или слабоположительной ++ (табл. 3).

Из таблицы следует, что количество соматических клеток увеличилось к 24 часу как в секрете опытных (с 0,318 до 1,317 млн./мл), так и контрольных четвертей вымени (с 0,324 до 0,730 млн./мл) и снизилось до физиологической нормы в опытных долях к 72 часу, а в контрольных — к 48 часу.

Следовательно, эроксимаст при интрацистер-нальном введении клинически здоровым лакти-рующим коровам вызывал лишь незначительное, быстро проходящее раздражение тканей вымени, а согласно данным В.В. Гацуры (1974), вещества, вызывающие слабую ответную реакцию организма, относятся к группе средств, переносимых животными, и могут быть рекомендованы в качестве лекарственных препаратов.

Определение остаточных количеств эритромицина и окситетрациклина гидрохлорида в молоке, крови и моче проводилось на четырех коровах симментальской породы в лактационный период. Tрем коровам опытной группы внутрицистерналь-но вводили эроксимаст по 10 мл на одно введение один раз в сутки с интервалом 24 часа в течение 5 дней. Одна корова служила контролем, ей препарат не вводился.

У коров опытной и контрольной групп брали молоко, кровь и мочу для определения остаточных количеств эритромицина и окситетрациклина гидрохлорида через 1, 3, 5, 7 и 9 суток после последнего введения эроксимаста. Определение содержания эритромицина и окситетрациклина гидрохлорида проводили микробиологическим методом диффузии в соответствии с «Методическими указаниями по определению остаточных количеств антибиотиков в продуктах животноводства» № 3049-84 от 29.06.84.

Установлено, что через 7 суток после длительного внутрицистернального введения эроксима-ста в исследуемых биологических жидкостях (мо-

локе, крови и моче) активнодействующие вещества эритромицин и окситетрациклина гидрохлорид не обнаруживаются.

Лечебная эффективность эроксимаста была изучена на 412 коровах, больных субклинической, серозной, катаральной и гнойно-катаральной формами мастита. Препарат эроксимаст применяли интрацистернально, предварительно подогрев до 36—39°С в дозе 5—10 мл. Перед введением препарата из больной четверти выдаивали секрет, а конец соска дезинфицировали 70%-ным этиловым спиртом. Лечение проводили 1 раз в сутки в течение 3—4 дней. Эроксимаст вводили 38 коровам, больным субклиническим маститом, в 50 долю, 30 коровам при серозном мастите в 41 долю, 26 коровам при катаральном мастите в 36 долей и 23 коровам, больным гнойно-катаральным маститом, в 29 долей. В качестве препарата сравнения использовали ма-стисан Б, который вводили 26 коровам (37 долей), больным субклиническим маститом, 24 коровам (31 доля) — при серозном мастите, 21 корове (26 долей) — при катаральном мастите и 23 коровам (27 долей) — при гнойно-катаральном мастите.

Установлено, что применение эроксимаста коровам при субклиническом мастите способствовало выздоровлению 94,7% больных, при серозном — 85,7%, при катаральном—76,9% и гнойно-катаральном мастите — 69,5%, тогда как при лечении масти-саном Б — 80,8; 66,6; 66,7 и 52,2% соответственно. Эти данные свидетельствуют о высоком терапевтическом эффекте эроксимаста при мастите у коров.

Литература

1 Мамедов, A.T. Субклинический мастит коров и профилактика / A.T. Мамедов, М.К. Aбдуллаев // Aктуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных: мат. междунар. конф., посвящ. 35-летию BHИBИП-Фи^ Воронеж, 2005. С. 120—126.

2 Париков, B.A. Эффективные отечественные препараты для профилактики и терапии мастита у коров / B.A. Париков, H.T. Климов, H.B. Притыкин и др. // Aктуальные проблемы болезней органов размножения и молочной железы у животных: мат. междунар. конф., посвящ. 35-летию BHИBИП-Фи^ Воронеж, 2005. С. 375—378.

3 ^мченко, М.И. Предупреждение желудочно-кишечных болезней новорожденных телят / М.И. ^мченко // Ветеринария. 1986. № 10. С. 10.