БЕЛКОВЫЙ КОМПЛЕКС ИНТЕРЛЕЙКИНА 15 И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ

1. Белковый комплекс ИЛ-15 (интерлейкин-15), состоящий из растворимого слитого белка (I) и растворимого слитого белка (II); где
растворимый слитый белок (I) представляет собой полипептид ИЛ-15 или его функциональный фрагмент; и растворимый слитый белок (II) представляет собой полипептид ИЛ-15Rα или его функциональный фрагмент;
где растворимый слитый белок (I) или растворимый слитый белок (II) имеет остаток Cys в результате мутации одной или более аминокислот, и дисульфидная связь образуется в результате спаривания соответствующих остатков Cys, присутствующих в растворимом слитом белке (II) и растворимом слитом белке (I).
2. Белковый комплекс ИЛ-15 по п. 1, где растворимый слитый белок (I) и/или растворимый слитый белок (II) ковалентно связан с фрагментом Fc или его мутантом.
3. Белковый комплекс ИЛ-15 по п. 1 или 2, где мутация аминокислоты до остатка Cys происходит в положении L45, Q48, V49, L52, Е53, С88 или Е89 на полипептиде ИЛ-15 или его функциональном фрагменте, предпочтительно в положении L52, Е53 или Е89, более предпочтительно в L52.
4. Белковый комплекс ИЛ-15 по п. 1, где последовательность растворимого слитого белка (I) представляет собой SEQ ID NO: 2.
5. Белковый комплекс ИЛ-15 по любому из пп. 1-4, где мутация аминокислоты до остатка Cys происходит в положении K34, L42, А37, G38 или S40 на полипептиде ИЛ-15Rα или его функциональном фрагменте, предпочтительно в положении А37, G38 или S40, более предпочтительно в S40.
6. Белковый комплекс ИЛ-15 по любому из пп. 1-5, где растворимый слитый белок (II) образуется путем рекомбинации полипептида ИЛ-15Rα или его функционального фрагмента и фрагмента Fc; предпочтительно полипептид ИЛ-15Rα или его функциональный фрагмент присоединен к N-концу фрагмента Fc; более предпочтительно фрагмент Fc представлен в SEQ ID NO: 9.
7. Белковый комплекс ИЛ-15 по любому из пп. 1-5, где последовательность растворимого слитого белка (II) выбрана из группы, состоящей из SEQ ID NO: 5, SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7 и SEQ ID NO: 8, предпочтительно SEQ ID NO: 5 или SEQ ID NO: 6.
8. Белковый комплекс ИЛ-15 по п. 1, выбранный из следующих комбинаций растворимого слитого белка (I) и растворимого слитого белка (II):
9. Нуклеиновая кислота, кодирующая белковый комплекс ИЛ-15 по любому из пп. 1-8.
10. ДНК-вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п. 9.
11. Клетка-хозяин, содержащая ДНК-вектор по п. 10.
12. Способ получения белкового комплекса ИЛ-15 по любому из пп. 1-8, включающий:
культивирование клетки-хозяина по п. 11 в условиях, достаточных для экспрессии белкового комплекса ИЛ-15 по любому из пп. 1-8;
экспрессию и очистку белкового комплекса ИЛ-15.
13. Фармацевтическая композиция, содержащая белковый комплекс ИЛ-15 по любому из пп. 1-8 и фармацевтически приемлемый эксципиент, разбавитель или носитель.
14. Терапевтически эффективное количество белкового комплекса ИЛ-15 по любому из пп. 1-8 или фармацевтической композиции по п. 13 для применения в лечении биологических объектов.
15. Применение белкового комплекса ИЛ-15 по любому из пп. 1-8 или фармацевтической композиции по п. 13 при получении лекарственного средства для лечения заболеваний или расстройств, опосредованных ИЛ-15.
16. Применение по п. 15, где:
заболевание или расстройство выбрано из группы, состоящей из инфекционного заболевания, рака, заболевания крови, воспалительного заболевания и аутоиммунного заболевания;
рак предпочтительно выбран из группы, состоящей из меланомы, колоректального рака, рака кожи, лимфомы, почечно-клеточной карциномы, рака печени, рака легкого, рака желудка и рака молочной железы;
инфекционное заболевание предпочтительно выбрано из группы, состоящей из инфекции вирусом натуральной оспы, ВИЧ-инфекции, бактериальной инфекции, грибковой инфекции и HBV-инфекции (вирус гепатита В);
заболевание крови предпочтительно выбрано из группы, состоящей из анемии, острого миелоидного лейкоза, миелодиспластического синдрома и Т-клеточного лейкоза из больших зернистых лимфоцитов;
аутоиммунное заболевание предпочтительно выбрано из группы, состоящей из рассеянного склероза, псориаза, ревматоидного артрита, гастрита и мукозита.
17. Применение по п. 15 или 16, где белковый комплекс ИЛ-15 или фармацевтическую композицию вводят в комбинации с низкомолекулярным ингибитором или лекарственным препаратом антитела; низкомолекулярный ингибитор предпочтительно выбран из химиотерапевтических или радиотерапевтических средств направленного действия; лекарственный препарат антитела предпочтительно выбран из моноклонального антитела, более предпочтительно выбран из антитела к CD20, PD1, PDL1, Her2, EGFR и с-МЕТ.
18. Применение белкового комплекса ИЛ-15 по любому из пп. 1-8 или фармацевтической композиции по п. 13 при получении лекарственного средства для клеточной иммунотерапии, которая представляет собой, в частности, противоопухолевую иммунотерапию DC, CIK, DC-CIK, ECIK, NK, CAS-T, BiAb-T, TCR-T и CAR-T.
19. Способ лечения или профилактики заболевания или расстройства, опосредованного ИЛ-15, включающий введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества белкового комплекса ИЛ-15 по любому из пп. 1-8 или фармацевтической композиции по п. 13, где:
заболевание или расстройство выбрано из группы, состоящей из инфекционного заболевания, рака, заболевания крови, воспалительного заболевания и аутоиммунного заболевания;
рак предпочтительно выбран из группы, состоящей из меланомы, колоректального рака, рака кожи, лимфомы, почечно-клеточной карциномы, рака печени, рака легкого, рака желудка и рака молочной железы;
инфекционное заболевание предпочтительно выбрано из группы, состоящей из инфекции вирусом натуральной оспы, ВИЧ-инфекции, бактериальной инфекции, грибковой инфекции и HBV-инфекции;
заболевание крови предпочтительно выбрано из группы, состоящей из анемии, острого миелоидного лейкоза, миелодиспластического синдрома и Т-клеточного лейкоза из больших зернистых лимфоцитов;
аутоиммунное заболевание предпочтительно выбрано из группы, состоящей из рассеянного склероза, псориаза, ревматоидного артрита, гастрита и мукозита.
20. Способ комбинированной терапии для лечения или профилактики заболевания, включающий введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества белкового комплекса ИЛ-15 по любому из пп. 1-8 или фармацевтической композиции по п. 13 в комбинации с низкомолекулярным ингибитором или лекарственным препаратом антитела, где низкомолекулярный ингибитор предпочтительно выбран из химиотерапевтического или радиотерапевтического средства направленного действия, более предпочтительно, из алкилирующего агента; лекарственный препарат антитела предпочтительно выбран из моноклонального антитела, более предпочтительно выбран из антитела к CD20, PD1, PDL1, Her2, EGFR и с-МЕТ.