Подострое воздействие олигоэфиров на показатели нуклеинового и белкового обмена в печени экспериментальных животных

1. Волошин Н.А. Лимфоцит - фактор морфогенеза / Н.А. Волошин // Запорожский медицинский журнал.-2005.-№5.-С. 123.

2. Волошин Н.А. Внутриутробная антигенная стимуляция как модель для изучения морфогенеза органов / Н.А. Волошин, Е.А. Григорьева, О.Г. Кущ, М.С. Щербаков, М.Б. Вовченко, А.А. Светлицкий, С.В. Чугин // Морфологические ведомости.-2006.-№1-2.-С.57-59.

3. Матвейшина Т.М. Особливост морфогенезу внутршних оргашв щура тсля внутршньоутробного впливу шактивовано! антивiрусноl вакцини / Т.М. Матвейшина, О.С.Таланова, Н.В.Гршвецька // Укр. морфолопчний альманах. - 2011. - Т.9, №3. - С.180-182.

4. Сапин М.Р. Цитоархитектоника белой пульпы селезенки у людей различного возраста / М.Р. Сапин, Е.Ф. Амбарцумян // Архив АГЭ.-1990.-т.98.-вып.12.-С.5-13.

5. Чугин С.В. Влияние внутриутробного введения антигена на формирование лимфоидной ткани паренхиматозных органов крыс в раннем постнатальном периоде / Чугин С.В., Щербаков М.С., Вовченок М.Б.// Укра'шський морфолопчних альманах. - 2010. - Т.8. - №2. - С.225-227.

6. Gomariz R.P. Postnatal development of the splenic white pulp in the Golden Hamster Mesocricetus Auratus. The Periarterial Lymfoid Sheathe (PALS) / R.P. Gomariz, L. De Cardenas, A. Zapata // Tissue and Cell.-1989.-Vol.21.-N3.-P.403-417.

7. Miller J.F. The discovery of immunological function of the thymus // Immunology Today. - 1991. - Vol.12. - N1. - P.42-44.

ОСОБЕННОСТИ ФОРМИРОВАНИЯ Т-ЗАВИСИМЫХ ЗОН СЕЛЕЗЕНКИ ПОСЛЯ ВНУТИУТРОБНОГО ДЕЙСТВИЯ АНТИГЕНОВ Апт О. А.

В работе исследованы особенности строения морфофункциональных зон белой пульпы селезёнки белых крыс в разные сроки после рождения в норме и после внутриутробной антигенной стимуляции. Установлено, что процесс становления морфофункциональных зон белой пульпы носит стадийный характер. Внутриутробное введение антигенов вызывает изменения в темпах формирования таких зон и динамике их клеточной популяции. Независимо от вида внутриутробно введенного антигена, после рождения наблюдается ускорение формирования внутренней зоны периартериальных лимфоидных муфт и стенки центральной артерии.

Ключевые слова: селезёнка, белая пульпа, периартериальная лимфоидная муфта, морфогенез, внутриутробное введение антигенов.

Стаття надшшла 15.10.2014 р.

FEATURES OF T-DEPENDENT ZONE OF SPLEEN FORMATION AFTER INTRAUTERINE ANTIGENS INJECTION Apt O.A.

We studied the structure of the Peculiarities of morphofunctional zones of white pulp of the spleen of white rats at different times after birth in normal and post-natal antigenic stimulation. It was established that the process of becoming morphofunctional zones of white pulp is phasic character. Intrauterine administration of antigens induces changes in the rate of formation of such zones and the dynamics of the cell population. Regardless of the type of antigen administered in utero, after birth observed acceleration of the formation of the inner zone of periarterial lymphoid sleeves and sides of the central artery. Keywords: spleen, white pulp, periarterial lymphoid clutch, morphogenesis, intrauterine administration of antigens.

Key words: spleen, white pulp, periarterial lymphoid sheathes, morphogenesis, intrauterine antigens injection.

Рецензент Кущ О. Г.

УДК 614.777:543.39:547.42

ПОДОСТРОЕ ВОЗДЕЙСТВИЕ ОЛИГОЭФИРОВ НА ПОКАЗАТЕЛИ НУКЛЕИНОВОГО И БЕЛКОВОГО ОБМЕНА В ПЕЧЕНИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ

Олигоэфиры Л-501-2-100, Л-1601-2-50 «Б» и Л-1601-2-50 «Р» в дозе 1/10 ЬБ50 ингибируют синтез белков и нуклеиновых кислот в печени экспериментальных животных, а при дозе 1/100 ЬБ50 усиливают обмены белков и нуклеиновых кислот на фоне значительного напряжения защитно-приспособительных реакций, направленных на усиление восстановительных синтезов и пластической функции печени.

Ключевые слова: ксенобиотики, нуклеиновый и белковый метаболизм, печень, белые крысы.

Изучение биосинтеза белков и нуклеиновых кислот при патологических состояниях и заболеваниях, а также при воздействии на организм вредных антропогенных факторов, в том числе химических, представляет значительный интерес, поскольку именно эти процессы в первую очередь характеризуют степень и глубину функциональных нарушений, определяют уровень репаративных процессов в органах и тканях [1]. Возникновение структурно-метаболических нарушений, по мнению многих авторов, сопряжено с дисфункцией белкового и нуклеинового обменов в печени - основного органа детоксикации [4, 7]. Актуальность изучения патофизиологических механизмов формирования структурно-метаболических нарушений при действии олигоэфиров на организм обусловлена необходимостью обоснования прогноза потенциальной опасности данных соединений для теплокровных животных и человека, разработки патогенетической коррекции метаболических изменений и антидотной терапии. Отсутствие в научной литературе данных о новой группе этих соединений исключает

возможность решения проблемы сохранения и укрепления здоровья населения и рабочих, занятых в производстве олигоэфиров [2, 3].

Целью работы было изучение влияния новой группы олигоэфиров на обмен белков и нуклеиновых кислот в печени белых крыс, подвергавшихся в подостром токсикологическом эксперименте воздействию ксенобиотиков, и определение прогностически значимых показателей, отражающих состояние восстановительных синтезов.

Материал и методы исследования. В работе использована новая группа олигоэфиров на основе окиси этилена и пропилена с регламентированными физико-химическими свойствами марок: Л-501-2-100 (ацетали монометилового эфира полиоксиэтиленгликоля), Л-1601-2-50 «Б» (бутилаллиловый эфир полиоксипропиленоксиэтиленгликоля) и Л-1601-2-50 «Р» (ацетали монобутилового эфира полиокси пропилен окси этилен гликоля). На основании оценки параметров острой токсичности данные соединения относятся к умеренно- и малотоксичным соединениям, не обладающими кумулятивными свойствами. Среднесмертельные дозы ЬБ50 для белых крыс были установлены на уровнях: 3,46; 3,85 и 5,17 г/кг массы животного, а коэффициенты кумуляции на уровнях: 9,8; 9,17; и 7,13, соответственно для Л-501-2-100, Л-1601-2-50 «Б» и Л-1601-2-50 «Р». Видовой и половой чувствительностью данная группа веществ не обладает [3]. Исследования предусматривали проведение подострого токсикологического эксперимента на половозрелых белых крысах линии Вистар массой 0,18-0,20 кг. В девяти опытных и одной контрольной группе находилось по 10 животных (всего N=100). В соответствии с условиями опыта, животным ежедневно утром до кормления на протяжении 45 суток вводили перорально внутрижелудочно с помощью металлического зонда водные растворы олигоэфиров из расчета 1/10, 1/100 и 1/1000 ЬБ50. Контрольной группе вводились соответствующие объемы питьевой воды. Эксперименты проводили при соблюдении требований биоэтики и принципов «Европейской конвенции о защите позвоночных животных, которые используются для экспериментальных и других научных целей» (Страсбург, 1986). По окончанию подострого опыта в печени белых крыс исследовали синтез белков и нуклеиновых кислот. В качестве предшественников синтеза белка, РНК и ДНК, соответственно, использовали 14С-гидролизат белка, 3Н-оротовую кислоту или 2-С14-глюкозу, а также 3Н-тимидин, которые вводили внутрибрюшинно в количестве 60 мк Ки, 100 мк Ки и 150 мк Ки за 24 часа до забоя животных. Забой животных осуществляли путем декапитации с предварительной анестезией тиопенталом натрия. Из печени выделяли две фракции РНК методом термического фенольного фракционирования в интервале температур 0-10оС (I фракция) и 10-65оС (II фракция) [6]. Ядра из печени белых крыс, глобулины, гистоны определяли общепринятыми биохимическими методами. Определение количества белков, РНК и ДНК, а также их удельной радиоактивности проводилось радиоизотопным методом в толуоловом сцинтилляторе на счетчике «Векман»-7800 [6]. Результаты исследования обрабатывались методами вариационной статистики с использованием 1-критерия Стьюдента-Фишера.

Результаты исследования и их обсуждение. Изучение влияния олигоэфиров на белковый и нуклеиновый обмены в печени обнаружило дисфункцию этих видов метаболизма в группах животных, токсифицированных дозами 1/10 и 1/100 ЬБ50. Воздействие дозой 1/1000 ЬБ50 не выявило существенных отличий с группой контроля. Исследования показали, что олигоэфиры в дозе 1/10 ЬБ50 (табл. 1) снижали в печени синтез суммарных белков на 63,7%; 61,76% и 76,96%, негистоновых белков - 55%; 51,12% и 59,65%, гистонов - 76,89%; 64,52% и 69,26%, I фракцию РНК (0-10оС) -40,28%; 42,42% и 41,17%, II фракцию РНК (10-65оС) - 46,84%; 48,50% и 50,68%, ДНК - 45,7%; 42,11% и 48,57%, гистонов ядерной фракции - 40,86%; 30,20% и 43,20%, глобулины ядерной фракции -38,95%; 31,25% и 37,5%, соответственно, под влиянием Л-501-2-100, Л-1601-2-50 «Б» и Л-160 -2-50 «Р» по сравнению с контролем. Эти данные свидетельствуют, что олигоэфиры в токсической дозе 1/10 ЬБ50 ингибируют процессы синтеза ДНК, РНК и белка. Динамика показателей указывает также на замедление восстановительных синтезов и возможных репаративных процессов, связанных с обновлением органов и тканей в условиях токсификации организма. Подавление синтеза нуклеиновых кислот и белков при воздействии дозой 1/10 ЬБ50 позволяет судить о срыве защитно-компенсаторных механизмов, направленных на обеспечение гомеостатической функции организма и, в частности, печени, что может проявляться в нарушении всех видов обмена веществ (белковый, углеводный, липидный, нуклеиновый, пигментный), функции желчеобразования, синтеза биологически активных субстратов, детоксикации, депонирования и др. [5].

Таблица 1

Подострое воздействие олигоэфиров на показатели нуклеинового и белкового обмена в

печени белых крыс

Показатели Группа наблюдения, М±т

Контроль Л-501-2-100 Л-1601-2-50 «Б» Л-1601-2-50 «Р»

1/10 LD50 1/100 LD50 1/10 LD50 1/100 LD50 1/10 LD50 1/100 LD50

Суммарные белки (имп/мин-мг 1286±53 467±42* 1694±46* 479±38* 1725±48* 425±23* 1864±57*

ткани)

Негистоновые белки (имп/ 1395±34 628±26* 1757±62* 682±17* 1816±77* 563±28* 1943±68*

мин- мг ткани)

Гистоны (имп/мин- мг ткани) 1054±33 349±15* 1123±76 374±26* 1094±65 324±31* 1115±59

Фракция РНК(0-10оС) 653±27 390±22* 874±35* 376±19* 946±28* 345±16* 896±32*

Фракция РНК(10-65оС) (имп/ 1326±43 705±29* 1579±64* 683±32* 1625±53* 654±25* 1678±68*

мин- мг ткани)

ДНК (имп/мин- мг ткани) 418±16 227±18* 453±22 242±14* 464±37 215±12* 472±44

Гистоны, ядерная фракция 257±13 152±6* 182±14* 164±11* 179±16* 146±7* 186±20*

Глобулины, ядерная фракция 208±8 127±7* 165±11* 143±8* 174±8* 130±6* 167±12*

Примечание:* - различия с контролем достоверные, р<0,05.

Анализ динамики оценочных показателей белкового и нуклеинового обменов в печени опытных животных, подвергавшихся воздействию дозой 1/100 LD50, обнаружил, что олигоэфиры в этой дозе активируют процессы восстановительных синтезов. Так, по сравнению с контролем, отмечалось усиление синтеза в печени суммарных белков на 31,7%; 34,13% и 44,9%; негистоновых белков - 25,9%; 30,17% и 39,28%, I фракции РНК(0-10оС) - 33,8%; 44,86% и 37,2%, II фракции РНК (10-65оС) - 19,07%; 22,54% и 26,54%, соответственно под влиянием Л-501-2-100, Л-1601-2-50 «Б» и Л-1601-2-50 «Р». Уровни гистонов и ДНК имели недостоверное повышение (р>0,05) по сравнению с контрольной группой, а гистонов и глобулинов ядерной фракции были значительно снижены: гистонов ядерной фракции на 29,2%; 30,36% и 27,63%, глобулинов ядерной фракции - 20,68%; 16,35% и 19,72%, соответственно в группах животных, токсифицированных Л-501-2-100, Л-1601-2-50 «Б» и Л-160 -2-50 «Р». Данные результаты указывают на активацию синтеза белка и нуклеиновых кислот на фоне существенного напряжения защитно-компенсаторных механизмов, направленных на усиление возможных репаративных процессов.

Следует подчеркнуть, что олигоэфиры в дозе 1/100 LD50 активируют процессы обмена белков и нуклеиновых кислот. Одним из важнейших факторов, обеспечивающих пластические реакции, является наличие нуклеозидтрифосфатов, для образования которых, в свою очередь, необходимы пентозы. По мнению многих авторов, угнетение гликолитического пути и активация пентозофосфатного цикла превращения глюкозы являются одной из компенсаторно-приспособительных реакций, итогом которой может быть образование пентоз, необходимых для синтеза нуклеозидтрифосфатов - предшественников РНК [6]. Использование в качестве меченного предшественника 2-С14-глюкозы позволило обнаружить эту метку во фракции РНК печени. При этом удельная радиоактивность РНК печени была значительно выше уровней контрольной группы животных (табл. 2). Так, суммарная фракция РНК (0-65оС) повышалась в печени опытных групп животных на 68,6%; 77,67% и 76,27%, соответственно при воздействии Л-501-2-100, Л-1601-2-50 «Б» и Л-1601-2-50 «Р».

Как известно, в пентозном цикле происходит отщепление первого углеродного атома глюкозы в виде СО2, а остальные пять атомов углерода входят в молекулу рибозы. Следовательно, радиоактивность второго атома углерода глюкозы будет в конечном итоге обнаруживаться в РНК. Из этих результатов следует, что олигоэфиры в дозе 1/100 LD50 приводят к значительному напряжению адаптационных механизмов, которые сопряжены с активацией пентозофосфатного цикла и восстановительных синтезов.

Таблица 2

Влияние олигоэфиров в дозе 1/100 LD50 на удельную радиоактивность РНК(0-65оС) печени

при использовании меченного предшественника 2-С14-глюкозы

Показатель Группа наблюдения, М±т

Контроль Л-501-2-100 Л-1601-2-50 «Б» Л-1601-2-50 «Р»

Суммарная фракция РНК(0-65оС)(имп/мин-мг ткани) 430±16 725±23* 764±18* 758±26*

Примечание:* - различия с контролем достоверные, р <0,05.

Таким образом, полученные результаты исследований свидетельствуют, что олигоэфиры марок Л-501-2-100, Л-1601-2-50 «Б» и Л-160 -2-50 «Р» в дозе 1/10 ЬБ50 ингибируют синтез белков и

85

нуклеиновых кислот в печени экспериментальных животных и приводят к срыву защитно-компенсаторных механизмов, направленных на обеспечение гомеостатической функции организма. В дозе 1/100 ЬБ5с олигоэфиры усиливают обмен белков и нуклеиновых кислот на фоне значительного напряжения защитно-приспособительных реакций, направленных на усиление восстановительных синтезов и пластической функции печени. Прогностически значимыми показателями усиления анаболической функции печени являются повышение синтеза нуклеозидтрифосфатов и переключение гликолитического пути обмена глюкозы на пентозофосфатный цикл, который обеспечивает реализацию трофотропной функции организма, обновление и репаративные процессы морфологических и структурно-метаболических единиц органов и тканей.

1. Денисов В. М. Биохимия миокарда поврежденного адреналином / В. М. Денисов, С. М. Рукавишникова, В.И. Жуков // - Харьков: «Оригинал», - 1999. - 183 с.

2.Жуков В. И. Детергенты - модуляторы радиомиметических эффектов / В. И. Жуков, В. В. Мясоедов, Ю. И. Козин [и др.] // - Белгород, - 2000. - 376 с.

3.Жуков В. И. Простые и макроци, Л. Д. Попова, О.В. Зайцева [и др.] // - Харьков: «Торнадо», - 2000. - 438 с.

4.Жуков В. И. Фториды: биологическая роль и механизм действия / В. И. Жуков, О. В. Зайцева, В.И. Пивень [и др.] // -Белгород, - 2006. - 220 с.

5.Кеннел Д. Методы исследования нуклеиновых кислот / Д. Кеннел // - М.: - 1970. - С. 138-144.

6. Попова Л. Д. Функциональная биохимия печени / Л. Д. Попова, В. В. Давыдов, В. И. Жуков [и др.]//- Харьков, - 2009. - 115 с.

7.Щербань Н. Г. Биохимические механизмы радиомиметических эффектов поверхностно-активных веществ / Н. Г. Щербань, В. И. Жуков, В. В. Мясоедов [и др.] // - Харьков: «Раритеты Украины», - 2012. - 120 с.

Ж

П1ДГОСТРА Д1Я ОЛ1ГОЕФ1Р1В НА ПОКАЗНИКИ НУКЛЕ1НОВОГО ТА Б1ЛКОВОГО ОБМ1НУ У ПЕЧ1НЦ1 ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНИХ ТВАРИН Багмут I. Ю.

Олiгоефiри Л - 501- 2 - 100, Л - 1601 - 2 - 50 «Б» та Л - 1601 - 2 - 50 «Р» дозою 1/10 LD50 шпбують синтез бшюв i нукле'шових кислот у печшщ експериментальних тварин, а при дозi 1/100 LD50 тдсилюють обмши бшюв i нукле'шових кислот на rai значно! напруги захисно-адаптацшних реакцш, що спрямоваш на тдсилення вщновних синтезiв i пластично! функцп печшки.

Ключовi слова: ксенобютики, нуклешовий i бшковий метаболiзм, печшка, бш щури.

Стаття надшшла 22.09.2014 р.

SUBACUTE IMPACT ON PERFORMANCE OLIGO-ETHERS NUCLEIC AND PROTEIN METABOLISM IN THE LIVER OF EXPERIMENTAL ANIMALS Bagmut I.Yu

Oligoethers L-501-2-100, L-1601-2-50 "B", and L -1601-2-50 "R" in dose of 1/10 LD50 inhibit proteins and nucleic acids syntheses in experimental animals liver. In 1/100 LD50 they intensify proteins and nucleic acids metabolisms against a background significant tension of defensic-adaptic reactions, directed to intensification of restoration syntheses and plastic function of liver.

Key words: xenobiotics, nucleic and protein metabolisms, liver, white rats.

Рецензент Бобирьов В. М.

УДК 615.036:615.099

ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНЕ ВИВЧЕННЯ АНТИАРИТМ1ЧНО1 ЕФЕКТИВНОСТ1 Л1КАРСЬКИХ ЗАСОБ1В В УМОВАХ ГЛ1КОЗИДНО1 1НТОКСИКАЩ1

В робой представлеш результати експериментальних дослщжень на 55 морських свинках, у яких шщшвали аритмп серця викликаш глiкозидною iнтоксикацieю та вивчали антиаритмiчну ефективнiсть лiкарських засобiв в даних умовах. Встановлено, що кардюпротекторний препарат триметазидин та мембранопротекторний засiб ритмокор проявляли антиаритмiчний (43% (р<0,05) та 67% (р<0,05)), антифiбрiляторний (57 % (р<0,01) та 50% (р<0,05)), а також кардюпротекторний (43 % (р<0,05) та 67 % (р<0,05) вщповщно) ефекти. Амiодарон володiв лише кардшротекторним ефектом -37 % (р<0,05). Комбшоване застосування амiодарону з триметазидином, як i комбiнацiя амiодарону з ритмокором засвщчили антиаритмiчну (50 % (р<0,05) та 75 % (р<0,001)), протифiбрiляторну (50 % (р<0,05) та 63 % (р<0,01)) i кардiопротекторну (50 % (р<0,05) та 75 % (р<0,001) вiдповiдно) активнiсть. Отриманi результати свщчать про доцiльнiсть застосування триметазидину i ритмокору та 1х комбшацп з амiодароном в умовах гткозидно! iнтоксикацií.

Ключов! слова: глжозидна штоксикащя, аритм11 серця, кард1опротекторн1 засоби.

Глшозидна 1нтоксикац1я зустр1чаеться у 5-20% випадюв застосування препарат1в ц1е1 групи, а летальшсть в1д не1 перевищуе 40 % [8, 9, 10, 15]. Вона може розвинутись при вщносно невисоких дозах препарапв, { часто 11 неможливо уникнути, оскшьки р1зниця м1ж терапевтичними та токсичними дозами дшталюу е досить малою. Найбшьш небезпечними ускладненнями гл1козидно1 1нтоксикацй' вважаеться дшталю^ндуковаш шлуночков1 аритмй' серця (АС), яю