Способы получения индуцированных клеток гладких мышц

1. Способ in vitro или ex vivo получения индуцированных клеток гладких мышц (iSMC), включающий стадии:
(а) получения от субъекта клеток, происходящих из скелетных мышц;
(б) трансдифференцировки клеток, происходящих из скелетных мышц, путем культивирования данных клеток в среде, содержащей TGF-бета (трансформирующий ростовой фактор-бета), в частности TGFb1, TGFb2 и/или TGFb3, более предпочтительно TGFb1 и/или TGFb3, наиболее предпочтительно TGFb1, и гепарин, с получением iSMC.
2. Способ по п. 1, где iSMC, полученные на стадии (б), являются некомпетентными в отношении слияния и/или характеризуются положительной экспрессией aSMA (актин-альфа гладких мышц), CD49a и CD146.
3. Способ по п. 1 или 2, где клетки, происходящие из скелетных мышц, представляют собой миогенные клетки-предшественники (МРС), характеризующиеся положительной экспрессией CD56 и десмина и отрицательной экспрессией CD34;
или где клетки, происходящие из скелетных мышц, представляют собой мезенхимальные стромальные клетки (MSC), характеризующиеся положительной экспрессией CD105, CD73 и отрицательной экспрессией CD34 и CD56.
4. Способ по любому из пп. 1-3, где iSMC, полученные из МРС на стадии (б), характеризуются положительной экспрессией aSMA, CD49a, десмина, CD56 и CD146 и отрицательной экспрессией CD34;
и где iSMC, полученные из MSC на стадии (б), характеризуются положительной экспрессией aSMA, CD49a и CD146 и отрицательной экспрессией CD56.
6
5. Способ по любому из пп. 1-4, где после стадии (а) выполняют стадию (a1), включающую пролиферацию клеток, происходящих из скелетных мышц, предпочтительно с получением 20-40×10 клеток.
6. Способ по любому из пп. 1-5, где стадию (б) проводят в течение одних-шести суток.
7. Индуцированные клетки гладких мышц (iSMC), полученные способом по любому из пп. 1-6.
8. Индуцированные клетки гладких мышц (iSMC), полученные из МРС, характеризующиеся положительной экспрессией aSMA, десмина, CD56, CD49a и CD146 и отрицательной экспрессией CD34.
9. Индуцированные клетки гладких мышц (iSMC), полученные из MSC, характеризующиеся положительной экспрессией aSMA, CD49a и CD146 и отрицательной экспрессией CD56.
10. Индуцированные клетки гладких мышц (iSMC) по любому из пп. 7-9, где iSMC экспрессируют функциональные кальциевые и/или калиевые каналы.
11. Индуцированные клетки гладких мышц (iSMC) по любому из пп. 7-10 для применения в способе лечения заболевания или расстройства у субъекта.
12. Индуцированные клетки гладких мышц для применения по п. 11, где заболевание или расстройство представляет собой дефекты гладких мышц, предпочтительно выбранные из группы, состоящей из анального недержания, недержания мочи, рефлюксной болезни, гастропареза, гиперактивного и малоактивного мочевого пузыря.
13. Применение индуцированных клеток гладких мышц по п. 11 или 12, где дефект гладких мышц представляет собой дефект мышцы сфинктера.
14. Индуцированные клетки гладких мышц по любому из пп. 7-10 для применения в инжиниринге тканей или клеточной терапии.
15. Применение клеток, происходящих из скелетных мышц, для получения индуцированных клеток гладких мышц.
16. Применение происходящих из скелетных мышц клеток по п. 15, где клетки, происходящие из скелетных мышц, представляют собой миогенные клетки-предшественники (МРС), характеризующиеся положительной экспрессией CD56 и десмина и отрицательной экспрессией CD34; или где клетки, происходящие из скелетных мышц, представляют собой мезенхимальные стромальные клетки (MSC), характеризующиеся положительной экспрессией CD105, CD73, CD90 и отрицательной экспрессией CD34 и CD56.