Продукция интерлейкина-1 бета и фактора некроза опухоли альфа in vivo и in vitro у ликвидаторов последствий аварии на Чернобыльской АЭС с сердечно-сосудистой патологией

Медицинская иммунология 2000, Т. 2, № 1, стр 53-58 © 2000, СПб РО РААКИ

Оригинальные статьи

ПРОДУКЦИЯ ИНТЕРЛЕЙКИНА-1 БЕТА И ФАКТОРА НЕКРОЗА ОПУХОЛИ АЛЬФА IN VIVO И IN VITRO У ЛИКВИДАТОРОВ ПОСЛЕДСТВИЙ АВАРИИ НА ЧЕРНОБЫЛЬСКОЙ АЭС С СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТОЙ ПАТОЛОГИЕЙ

Сысоев К.А., Калинина Н.М., Бахтин М.Ю., Никифоров А.М.

НИО клинической иммунологии, информационно-аналитический отдел Всероссийского центра экстренной и радиационной медицины МЧС России, Санкт-Петербург

Резюме. В течение последних лет убедительно показано, что IL-ip и TNF-a — эндогенные иммуномедиаторы — участвуют не только в иммунном ответе и воспалении, но и в формировании сердечно-сосудистой патологии — атеросклероза, гипертонической болезни, инфаркта миокарда. Одно из ведущих мест по частоте встречаемости у лиц, принимавших участие в мероприятиях по ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС ликвидаторов занимает патология сердечно-сосудистой системы (ишемическая болезнь сердца и гипертоническая болезнь). В связи с вышеизложенным представлялось актуальным исследовать роль нарушений в цитокиновом звене иммунитета в формировании ишемической болезни сердца (ИБС) и гипертонической болезни (ГБ) у ликвидаторов. Уровень продукции цитокинов был изучен у 33 пациентов, принимавших непосредственное участие в мероприятиях по ликвидации аварии на ЧАЭС, основным диагнозом у которых являлись ИБС И ГБ (I группа). Исследование продукции интерлейкина-1 в и фактора некроза опухоли a in vivo и in vitro было проведено также у пациентов с аналогичной патологией без воздействия комплекса факторов радиационной аварии в анамнезе (II группа) и в контрольной группе лиц аналогичного возраста без патологии ССС (доноры; III группа). Уровень спонтанной продукции in vitro IL-ip был повышен у пациентов обеих групп, что говорит о его роли в формировании сердечно-сосудистой патологии. Были выявлены статистически достоверные отличия в продукции TNF-a in vivo у ликвидаторов по сравнению с пациентами II группы, что свидетельствует о ведущей роли этого цитокина в формировании патологии ССС в группе участников ликвидации аварии на Чернобыльской АЭС.

Ключевые слова: интерлейкин ip, фактор некроза опухоли а, ишемическая болезнь сердца, гипертоническая болезнь, ликвидаторы аварии на Чернобыльской АЭС.

Syssoev K.A., Kalinina N.M., Bakhtin M.Yu., Nikiforov A.M.

PRODUCTION OF INTERLEUKIN-1 BETA AND TUMOR NECROSIS FACTOR ALPHA IN VIVO & IN VITRO AMONG CHERNOBYL ACCIDENT CLEANUP WORKERS WITH CARDIAC PATHOLOGY

Abstract. Recently it has been shown that IL-ip and TNF-a - the immune system mediators - contribute not only to the immune response mechanisms and inflammatory process but also to the development of the cardiac pathology - atherosclerosis, ischemic heart disease, myocardial infarction. Chernobyl cleanup workers (CCW) rank first in terms of cardiac pathology (ischemic heart disease and essential hypertension).

According to the data mentioned above it was very important to investigate the role of cytokine production abnormalities in the development of ischemic heart disease

Адрес для переписки: Сысоев Кирилл Александрович, к.м.н., НИИ клеточного и гуморального иммунитета ВЦЭРМ МЧС России 194044, Санкт-Петербург, ул.Лебедева 4/2, тел. (812)248-87-26, факс (812) 541-88-05, e-mail: medicine@arcem.spb.ru.

Введение

Интерлейкин ip (IL-ip) и фактор некроза опухоли a (TNF-a) - эндогенные иммуномедиаторы — обеспечивают взаимодействие лимфоцитов с макрофагами и другими клетками организма, обладают свойствами стимулировать воспалительные реакции [22]. Они оказывают влияние на собственную продукцию (аутокринная регуляция) и на клетки-мишени иммунной системы, вызывая продукцию других цитокинов, дифференцировку и пролиферацию лимфоцитов [22].

IL-ip и TNF-a, являясь плейотропными факторами, оказывают кроме этого воздействие на клетки-мишени других органов и систем [22]. В последнее время активно изучается роль IL-ip и TNF-a в патогенезе ишемической болезни сердца и гипертонической болезни. G.N.Dalekos и соавт. [6] показали, что у больных эссенциальной гипертензией был повышен уровень IL-ip, отмечена положительная корреляция между уровнем IL-ip и уровнем артериального давления у этой же группы лиц. При этом авторы [6] подчеркивают, что у этих пациентов отсутствовала активация клеточного иммунитета. Возможным объяснением связи повышенного уровня IL-ip и увеличением артериального давления, по мнению G.N.Dalekos и соавт. [6], может служить то, что данный цитокин стимулирует пролиферацию гладкомышечных клеток сосудистой стенки. Другим возможным механизмом действия IL-ip на уровень артериального давления является его стимулирующее воздействие на продукцию гормонов и медиаторов гипоталамо-гипофизарно-адреналовой системы [7]. В экспериментальных исследованиях показано, что митогенная активность IL-i для фибробластов и миоцитов сосудистой стенки осуществляется через PDGF-AA - тромбоцитарный ростовой фактор [28]. При исследованиии in vitro [28] выявлено, что при добавлении IL-i в культуру васкулярных миоцитов увеличивалась экспрессия рецепторов ангиотензина I типа.

Известно, что IL-ip и TNF-a оказывают супрес-сирующее влияние на сократительную способность миокарда [i7, ii], однако механизмы супрессии остаются невыясненными [3]. Одним из возможных объяснений этого воздействия принято считать индукцию провоспалительными цитокинами активных форм кислорода, в свою очередь подавляющих сократительную способность миокарда [3]. Свободные радикалы в организме образуются в результате различных причин и в том числе при синтезе простаглан-динов, который индуцируется IL-ip и TNF-a [22].

Развитие оксидативного стресса приводит в последующему к апоптозу кардиомиоцитов [9]. Так, в клетках эндотелия, в которых под действием TNF-a увеличивается продукция оксида азота, индуцируется оксидативный стресс и апоптоз [9]. TNF-a способствует увеличению продукции индуцируемой

NO-синтазы (iNOS) - фермента, обеспечивающего синтез оксида азота - метаболита, участвующего в сигнальной трансдукции кардиомиоцитов [28]. Оксид азота вызывает также апоптоз кардиомиоцитов [22]. Кроме этого активация продукции оксида азота способствует снижению сократительной способности кардиомиоцитов [22].

Авторами [i0, 30] отмечена корреляция между концентрацией TNF-a и выраженностью клинических и гемодинамических нарушений при хронической сердечной недостаточности. R.A.Kelly и T.W.Smith [20] подтверждают в своей работе, что цитокины (IL -ip, TNF-a) могут способствовать снижению сократительной способности миокарда.

С другой стороны в литературе, посвященной влиянию ионизирующей радиации на систему иммунитета, имеется достаточное число работ, подтверждающих стимуляцию продукции IL-ip и TNF-a под воздействием облучения [4,i3,i9]. Так, при облучении культуры фибробластов было показано, что продукция TNF-a возрастает [i3]. При исследованиях in vitro обнаружилось, что радиация стимулирует экспрессию генов цитокинов [i9]; низкие дозы радиации стимулируют продукцию TNF-a астроцитами и клетками микроглии [4]. В работах R.Neta и соавторов [24,25] показано, что первично продукция IL-ip и TNF-a обеспечивает радиопротективный эффект.

В связи с вышеизложенным была исследована продукция цитокинов (IL-ip и TNF-a) у ликвидаторов последствий аварии на ЧАЭС с сердечно-сосудистой патологией в сравнении с пациентами с аналогичной патологией, не подвергавшихся воздействию ионизирующей радиации.

Материалы и методы

Характеристика обследуемых групп

Через i3 лет после аварии были обследованы 33 ликвидатора последствий аварии на Чернобыльской АЭС (ЛПА), профессиональная деятельность которых в i986 году была связана с непосредственным участием в мероприятиях по ликвидации последствий аварии на ЧАЭС (строители, дорожные рабочие, техники, вертолетчики и т.п.) в возрасте от 36 до 57 лет, страдающие ишемической болезнью сердца (ИБС) и гипертонической болезнью I-II стадии (ГБ) — I группа. Суммарная доза радиационного облучения (согласно официальным документам) составила от 5 до 42 БЭР. В качестве группы сравнения были обследованы i8 пациентов-мужчин с такой же патологией, не имеющих радиационного воздействия в анамнезе (ГС; II группа).

В качестве контрольной группы (n=i5) были обследованы условно здоровые лица мужского пола и аналогичного возраста без патологии ССС (доноры крови; III группа).

Подготовка образцов крови для изучения продукции цитокинов

Получение сыворотки крови проводилось стандартным методом [34].

Индукция синтеза IL-1Q и TNF-a

Свежую гепаринизированную кровь (20 МЕ/мл) тщательно перемешивали. Смешивали 0,6 мл крови и 2,4 мл среды Игла с добавлением 2мМ глутамина и 80 мкг/мл гентамицина, таким образом кровь разводили в 5 раз.

Для приготовления рабочего раствора продигио-зана, ЛПС-содержащего препарата, используемого в качестве индуктора IL-ip и TNF-a, смешивали 2,4 мл среды Игла и 800 мкл 0,005% раствора продигио-зана, при этом в 100 мкл полученного раствора содержалось i,0 мкг продигиозана.

Подготовленные образцы периферической (100 мкл) культивировали в присутствии рабочего раствора продигиозана (индуцированная продукция цитокинов) или без него (добавляя эквивалентное количество — 100 мкл среды).

Культивирование проводили в СО2 - инкубаторе в течение 24 часов, после чего осторожно отбирали супернатанты и исследовали на наличие цитокинов.

Уровень продукции цитокинов in vivo и in vitro определялся с использованием метода иммунохими-ческого анализа с помощью коммерческих тест-систем фирм “Протеиновый контур” и “Цитокин” (С.Пе-тербург). Чувствительность тест-систем для определения IL-ip и TNF-a составила 20 пг/мл.

Результаты

При изучении продукции цитокинов у ликвидаторов и пациентов II группы отмечено достоверное повышение спонтанной продукции IL-ip МНПК в сравнении с донорами крови. Данные изучения представлены в таблице i.

Индуцированная продукция IL-ip МНПК и уровень этого цитокина в сыворотке крови не различа-

Таблица1. ПОКАЗАТЕЛИ ПРОДУКЦИИ IL-1 ß IN VIVO И IN VITRO

IL-1 ß

продукция МНПК в сыворотке

Группы спонтанная индуцированная крови

I (ЛПА) n=33 967±214* ** 3570±530 < 20

II (ГС) n=18 1080±136** 3270±277 < 20

III (Доноры крови) n=15 493±192 2910±234 < 20

* - достоверные различия (p<0,05) со II группой **- достоверные различия (p<0,05) с III группой

5,9

Рис.1. Индексы стимуляции IL-1 ß в различных группах

лись в сравниваемых группах. Индекс стимуляции (отношение индуцированной продукции к спонтанной) в обеих группах пациентов был снижен по сравнению с контролем (I группе — 3,7, во II группе — 3,0, в III группе — 5,9 (рис. 1), что указывает на нарушение функциональной активности МНПК. IL-1 ß не был выявлен в сыворотке крови обследованных.

Была изучена спонтанная и индуцированная продукция TNF-a МНПК периферической крови и содержание цитокина в сыворотке крови пациентов сравниваемых групп и группе контроля. Данные исследования представлены в таблице 2.

Как видно из таблицы 2, спонтанная продукция TNF-a была максимальной в группе ЛПА, несколько ниже во II группе. Показатели в I и II группе достоверно превышали показатели в группе доноров. Обращает на себя внимание достоверно сниженная индуцированная продукция TNF -a в группе ЛПА по сравнению с III группой. Снижение возможности клеток периферической крови в группе ЛПА и II группе продуцировать TNF-a в ответ на антигенный стимул нашли свое отражение в индексе стимуляции. ИС TNF-a у здоровых лиц составил 6,4, в ГС -3.2, в группе ЛПА - 1,8 (рис. 2).

Таблица 2. ПОКАЗАТЕЛИ ПРОДУКЦИИ TNF-а IN VIVO И IN VITRO

TNF-a

продукция МНПК в сыворотке

Группы спонтанная индуцированная крови

I (ЛПА) n=33 170±18*** 310±45** 120±33***

II (ГС) n=18 130±26 429±87** 33±15

III (Доноры крови) n=15 105±59 672±37 34±15

* - достоверные различия (p<0,05) со II группой **- достоверные различия (p<0,05) с III группой

Как видно из рисунка, нарушение продукции TNF-a в ответ на антигенную стимуляцию было наиболее выражено в группе ЛПА.

Особенностью обследованной группы ЛПА явилось достоверное повышение уровня TNF-a в сыворотке крови по сравнению со II и III группой (120±33, 33±15 и 34±15 соответственно).

Обсуждение

Как известно из литературы спектр действия IL-1Р и TNF-a во многом сходен [8]. Кроме вышеперечисленных данных по воздействию цитокинов на сократительную способность миокарда, показано, что IL-1 Р и TNF-a вызывают активацию эндотелиальных клеток, меняя свойства эндотелия с антикоагулянтных на прокоагулянтные, индуцируют продукцию тромбоцитактивирующего фактора, участвуют в подавлении целого ряда антикоагулян-тных механизмов, индуцируя в том числе продукцию ингибитора рассасывания тромбов, усиливают адгезию нейтрофилов и тромбоцитов, увеличивают проницаемость капилляров, способствуя выходу нейт-рофилов, лимфоцитов, моноцитов в ткань [22]. Все вышеперечисленные эффекты IL-1 Р и TNF-a вызывают изменение реологии крови, что также способствует прогрессированию ИБС и ГБ.

Повышение спонтанной продукции и снижение индекса стимуляции при исследовании продукции IL-1 Р и TNF-a МНПК в I и II группах по сравнению со здоровыми лицами говорит о длительной активации синтеза IL-1P и TNF-a и о снижении функциональных резервов клеток у пациентов сравниваемых групп в связи с этим отвечать повышением продукции IL-1 Р и TNF-a на антигенный стимул (ЛПС-содержащий индуктор).

Поскольку продукция цитокинов исследовалась in vivo и in vitro, представлялось необходимым изучить корреляционные взаимоотношения между спонтанной продукцией (in vitro) и содержанием

Рис. 2. Индекс стимуляции TNF-a в различных группах

TNF-a в сыворотке крови (in vivo) у пациентов сравниваемых групп. Как в группе ЛПА, так и в ГС наблюдались достоверные прямые корреляции между спонтанной продукцией и уровнем циркулирующего TNF-a в периферической крови (г=0,77; р<0,001 и г=0,61; р<0,05 соответственно).

В то же время данные, полученные при изучении IL-1Р в сыворотке периферической крови лиц I и II групп, свидетельствует о том, что активация МНПК, отражением которой является повышение спонтанной продукции IL-ip, не приводит к значительному увеличению циркулирующего IL-ip в сыворотке крови. Отсутствие выявляемых количеств IL-ip в сыворотке периферической крови в группах пациентов можно объяснить наличием растворимых форм рецептора IL-ip [7] и/или наличием антител к IL-ip [8].

При изучении корреляционных взаимоотношений между продукцией IL-ip и TNF-a в сравниваемых группах пациентов выявились различия. Так, в группе ликвидаторов не было выявлено статистически достоверных корреляций между IL-ip и TNF-a в спонтанной, индуцированной продукциях и содержанием этих цитокинов в сыворотке крови. В противоположность этому в группе сравнения наблюдались прямые умеренные и сильные достоверные корреляции между содержанием IL-ip в сыворотке крови и спонтанной продукцией TNF-a (г=0,64; р<0,01), между индуцированной продукцией IL-ip и TNF-a (г=0,55; р<0,05) и содержанием в сыворотке крови этих цитокинов (г=0,96; р<0,001).

Возможным объяснением этой диссоциации в продукции IL-ip и TNF-a у ликвидаторов может быть более выраженная продукция рецепторного антагониста IL-1, который, конкурируя за связывание с рецептором IL-1 I типа, ингибирует паракрин-ную активацию МНПК [8].

Циркулирование TNF-a в периферической крови ликвидаторов может быть следствием как нарушения связывания цитокина со своим рецептором, так и формированием тримеров TNF-a, плохо выводящихся из циркуляции [31]. Таким образом, при оценке продукции TNF-a, играющего важную роль в формировании сердечно-сосудистой патологии, выявлены различные изменения в I и II группе: при одинаковой спонтанной продукции у ЛПА отмечается достоверно более высокий уровень циркулирующего цитокина в периферической крови.

Приведенные данные об особенностях продукции IL-1 Р и TNF-a в сравниваемых группах свидетельствуют об их разной роли в формировании заболеваний ССС у ликвидаторов и в ГС. В обеих группах пациентов выявляемая гиперпродукция IL-1 Р оказывает влияние на формирование патологии. Представляется, что избыточная продукция IL-1 Р МНПК при их контакте с клетками-мишенями (кардиоми-оциты, васкулярные миоциты, эндотелиальные клет-

ки, фибробласты), проявляется его активирующей способностью по отношению к клеткам-мишеням. Патогенный эффект циркулирующего в периферической крови TNF -a у ликвидаторов связан прежде всего с его участием в оксидативном стрессе и процессах апоптоза кардиомиоцитов.

Известно, что TNF-a индуцирует апоптоз кардиомиоцитов [9], а IL-1 ß защищает их от апоптоза [6]. В группе пациентов без экстремальных воздействий КФРА в анамнезе (ГС) повреждающее действие TNF-a на кардиомиоциты (исходя из приведенных корреляционных исследований) может компенсироваться на начальном этапе IL-1 ß, оказывающем по отношению к процессам апоптоза протективное действие на клетки-мишени.

По данным литературы при длительном действии IL-1ß способен оказывать повреждающее действие на клетки-мишени ССС, в частности на клетки интимы сосудистой стенки [30]. Повреждение интимы сосуда сопровождается активацией клеток эндотелия сосудистой стенки, что проявляется экспрессией на них молекул адгезии (ICAM-I, ICAM-II, VCAM-I). При взаимодействии МНПК с эндотелием сосудистой стенки происходит связывание эксп-рессированнных на поверхности МНПК интегрино-вых рецепторов (CD11a, CD11b, CD18, CD44) с молекулами адгезии эндотелиальных клеток. Их контакт приводит к синтезу и выходу в межклеточное пространство IL-1ß, связывание которого с рецептором IL-1 I типа на поверхности васкулярных миоцитов стимулирует их пролиферацию и тем самым приводит дальнейшему увеличению сосудистого тонуса [28]. Кроме этого, IL-1ß увеличивает на поверхности васкулярных миоцитов экспрессию рецепторов ангиотензина I типа, что способствует повышению сосудистого тонуса и увеличению артериального давления [27]. Стимулируя продукцию тромбоцит-активирующего фактора, индуцируя продукцию ингибитора лизиса тромбов, продукцию медиаторов вазодилятации (NO, PGE2), вызывая краевое стояние тромбоцитов, IL-1ß способствует дилятации сосудов, активирует процессы тромбооб-разования [2]. IL-1ß способен также оказывать подавляющее действие на сократительную способность кардиомиоцитов [19].

Отсутствие статистически достоверных корреляций между продукцией IL-1ß и TNF-a, выявленное в группе ЛПА, свидетельствует о независимом друг от друга действии каждого из перечисленных цито-кинов на клетки-мишени ССС у пациентов этой группы.

Таким образом, можно предположить, что наблюдаемая разобщенность в продукции провоспалитель-ных цитокинов (IL-1 ß и TNF-a), участвующих в патогенезе ИБС и ГБ, клетками периферической крови in vivo и in vitro, характеризующая пациентов-лик-видаторов и отсутствующая в группе сравнения, вно-

сит вклад в особенности патогенеза и клинического течения ИБС и ГБ в этой группе.

Список литературы

1. Arend, W.P. Interleukin-1 receptor antagonist // Adv. Immunol. - 1993. - № 54. - P.164-171.

2. Beyaert R. and Fiers W. Tumor necrosis factor and lymphotoxin. In “Cytokines” (eds. A.Mire-Sluis and R. Thorpe) - 1998. - Chapter 24. - P.335-360.

3. Chandrasekar B., Colston J.T., Freeman G.L. Induction of proinflammatory cytokines and antioxidant enzyme gene expression following brief myocardial ischemia // Clin. and Exp. Immunol- 1997. - Vol.108. - P.346-351.

4. Chiang C.S., McBride W.H. Radiation enhances tumor necrosis factor alpha production by murine brain cells // Brain Res. - 1991. - Vol.566. - P.265-269.

5. Colucci W.S. Molecular and cellular mechanisms of myocardial failure // Am. J.Cardiol. - 1997. -Vol.80(11A). - P.15L-25L.

6. Dalekos G.N., Elisaf M., Bairaktari E. Increased serum levels of interleukin-1 beta in the systemic circulation o patients with essential hypertension: additional risk factor for atherogenesis in hypertensive patients? // J. Lab. Clin. Med. - 1997. - Vol.129. - N3. -P.300-308.

7. Dinarello C.A. The biological properties of interleukin-1 // Eur. Cytokine Netw. - 1994. - Vol.5, N.6. - P.517-531.

8. Dinarello C.A. Biological basis for IL-1 in disease // Blood. - 1996. - Vol. 87. - P.2095-2098.

9. Ferrari R., Agnoletti L., Comini L. Oxidative stress during myocardial ischemia and heart failure // Eur. Heart J. - 1998. - Vol.19, Spl.B. - P.B2-B11.

10. Ferrari R., Bachetti T., Confortini R. et al. Tumor necrosis factor soluble receptors in patients with various degrees of congestive heart failure // Circulation. - 1995.

- Vol.88. - P.55-61.

11. Finkel M.S., Oddis C.V., Jacob T.D. Negative ionotropic effects of cytokines on the heart mediated by nitric oxide // Science. - 1992. - Vol.257. - P.387-389.

12. Grooten J., Goossens V., Vanhaesebroeck B., Fiers W. Cell membrane permeabilization and cellular collapse, followed by loss of dehydrogenase activity: early events in tumour necrosis factor cytotoxity // Cytokine. - 1993. - Vol.5. - P.546-555.

13. Hallahan D.E., Spriggs D.R., Beckett M.A. TNF-a production after exposure of radiation // Proc. Nat. Acad. of Sience USA. - 1989. - Vol. 86. - P.10104.

14. Hasdai D., Scheinowitz M., Leubovitz E. Increased serum concentrations of interleukin-1p in patients with coronary artery disease // Heart. - 1996. -Vol.76. - P.24-28.

15. Hefti M.A., Harder B.A., Eppenberger H.M., Schaub M.C. Signaling pathways in cardiac myocyte hypertrophy // J. Mol. Cell. Cardiol. - 1997. - Vol.29. -P.2873-2892.

16. Higuchi M., Higashi N., Taki H., and Osawa T. Cytolytic mechanisms of activated macrophages. Tumor necrosis factor and L-arginine-dependent mechanisms act syneergistically as the major cytolytic mechanisms of activated macrophages // J. Immunol. - 1990. -Vol.144. - P.1425-1431.

17. Hosenpud J.D., Campbell S.M., Mendelson D.J. Interleukin-1-induced myocardial depression in an isolated beating heart preparation // J. Heart Transplant. - 1989. - Vol.8. - P.460-464.

18. Iademarco M.F., Barks J.L., Dean D.C. Regulation of vascular cell adhesion molecule-1 expression by IL-4 and TNF-a in culthured endothelian cells // J. Clin. Invest. - 1995. - Vol.95. -P.264-271.

19. Ishihara H., Tsuneoka K., Dimchev A.B. Irradiation stimulates expression of cytokine genes // Radiat.Res. - 1993. - Vol.333. - P.321-326.

20. Kelly R.A., Smith T.W. Cytokines and cardiac contractile function // Circulation. - 1997. - Vol.95, N4.

- P.778-781.

21. Komajda M., Pousset F., Isnard R., Lechat P. The role of neurohormonal system in heart failure // Heart.

- 1998. - Vol.79, Spl.2. - P.S17-S23.

22. Mire-Sluis A. and Thorpe R. Cytokines // Academic Press - 1998.

23. Narula J., Haider N., Virmani R. et al. Apoptosis in myocytes in end-stage heart failure // N. Engl. J. Med.

- 1996. - Vol.335. - P.1182-1189.

24. Neta R., Oppenheim J.J., Schreiber R.D. Role of cytokines (IL-1, TNF and TGFß) in natural and lipopolisaccharide-enhanced radioresistence // J.Exp. Med. - 1991. - Vol.173. - P.1177-1182.

25. Neta R., Douches S.D., Oppenheim J.J. Interleukin-1 is a radioprotector // J.Immunol. - 1986.

- Vol.136. - P.2483.

26. Oppenheim J.J. and Gery I. From lymphodrek to interleukin 1 (IL-1) // Immunol. Today. - 1993. -Vol. 14. - P.232-237.

27. Packer M. Is tumor necrosis factor an important neurohormonal mechanism in chronic heart failure? // Circulation. - 1995. - Vol.95. - P.1879-1882.

28. Raines E.W., Dower S.K., Ross R. Interleukin-1 mitogenic activity for fibroblasts and smooth muscle cells is due to PDGF-AA // Science. - 1989. - Vol.243. -P.393-396.

29. Sasamura H., Nakazato Y., Hayashida T. Regulation of vascular type 1 angiotesin receptors by cytokines // Hypertension. - 1997. - Vol.30. - P.35-41.

30. Testa M., Yeh M., Lee P. Circulating levels of cytokines and their endogenous modulators in patients with mild to severe congestive heart failure due to coronary artery disease of hypertension // J. Am. Coll. Cardiol. - 1996. - Vol.28. - P.964-971.

31. Thaik C.M., Calderone A., Takahashi N., Colucci W.S. Interleukin-1p modulates the growth and phenotype of neonatal rat cardiac myocytes // J. Clin. Invest. - 1995. - Vol.96. - P.1093-1099.

32. Tracey K.J., Cerami A. The role of cachectin/ tumor necrosis factor in AIDS // Cancer Cells. - 1989. -Vol.1. - P.62-63.

33. Ulich T.R., Shin S.S., Castillo J. Haematologic effects of TNF // 51st Forum in Immunology “TNF in pathology: old facts and new questions”. - 1993. - P.347-354.

34. Лефковитц И., Пернис Б. Методы исследования в иммунологии. — М.: Мир, 1981.— 485 с.

поступила в редакцию 02.02.2000 принята к печати 07.03.2000