СРЕДСТВО, ПОТЕНЦИРУЮЩЕЕ РАДИАЦИОННУЮ ТЕРАПИЮ
PREPARATION POTENTIATING RADIATION THERAPY

Область техники
Настоящее изобретение относится к средству, обладающему потенцирующим действием в радиационной терапии (далее в настоящем изобретении называемому потенцирующим средством для радиационной терапии), применение которого при раковом заболевании в комбинации с радиационной терапией дает возможность уменьшить дозу радиации (далее в настоящем изобретении называемую дозой облучения) и смягчить отрицательные эффекты.
Уровень техники
Общепринятым лечением рака (злокачественных опухолей) является хирургическое вмешательство, химиотерапия, иммунотерапия, термальная терапия и лучевая терапия. На III и IV стадиях развития раковых заболеваний, таких как рак желудка, рак прямой кишки, рак поджелудочной железы, рак головы и шеи, рак пищевода, рак легкого и рак молочной железы, обычно проводят радиационную терапию. Существуют трудности для проведения в течение длительного периода времени единственно радиационной терапии (в настоящее время общая клиническая доза облучения составляет от 40 до 60 грей) по причине токсического действия на кровь и отрицательного действия на пищеварительную систему (например, жажда). Таким образом, радиационная терапия дает недостаточный клинический эффект (противоопухолевое действие). В последние годы стандартным лечением для достижения выраженного противоопухолевого действия стала комбинация химиотерапевтического средства и облучения (то есть химиорадиотерапия), и комбинированное лечение раковых заболеваний считается эффективным по сравнению с применением исключительно радиационной терапии или исключительно химиотерапии (непатентный документ 1). Например, раскрыты следующие случаи применения: комбинация карбоплатина/фторурацила и облучения (непатентный документ 2) и комбинация цисплатина и облучения при лечении рака головы и шеи (непатентный документ 3); комбинация фтороурацила/цисплатина и облучения при лечении рака пищевода (непатентный документ 4); комбинация фтороурацила и облучения при лечении рака поджелудочной железы (непатентный документ 5); и комбинация цисплатина/винбластина и облучения при лечении немелкоклеточного рака легкого (непатентный документ 6). В указанных случаях значительно увеличивается время выживания по сравнению с исключительно радиационной терапией. При лечении рака прямой кишки процент рецидивов у больных, получавших химиорадиотерапию после хирургического лечения, был ниже, и отмечено более длительное время выживания по сравнению с подобными больными, не получавшими химиорадиотерапию (непатентный документ 7). Вместе с тем, современное комбинированное лечение химиотерапевтическим средством и лучевой терапией может вызывать отрицательные действия, обусловленные непосредственно химиотерапевтическим средством, и в некоторых случаях лечение необходимо прекращать. Кроме того, еще не достигнуто полностью уменьшение таких отрицательных эффектов.
Предпринимались различные попытки создания радиосенсибилизаторов, снижающих дозу облучения, для того, чтобы без влияния на терапевтический эффект облучения уменьшить его отрицательные действия. Например, известны некоторые производные нитроимидазола, обладающие радиосенсибилизирующим действием, и получены такие соединения, как мизонидазол и этанидазол. Однако указанные соединения имеют недостатки; например, применяемая для достижения сенсибилизирующего действия доза имеет чрезвычайно сильную нейротоксичность и поэтому не может использоваться на практике. При этом для лечения радиационно устойчивой опухоли лекарственное средство, потенцирующее радиационную чувствительность, предпочтительно применяют в комбинации. Однако большинство известных потенцирующих средств для радиационной терапии (радиосенсибилизаторы и подобные средства) обладают нейротоксичностью, которая препятствует совершенствованию радиосенсибилизаторов.
Непатентный документ 1
International Journal of Clinical Oncology, Vol. 9, №6 (2004): 414-490
Непатентный документ 2
et al
Calais ., J. Natl. Cancer Inst. 91 (1999): 2081-2086
Непатентный документ 3
et al
Jeremic B. ., J. Clin. Oncol. 18 (2000): 1458-1464
Непатентный документ 4
et al
Al-Sarraf M. ., J. Clin. Oncol. 15 (1997): 277-284
Непатентный документ 5
et al
Moertel C. G. ., Cancer 48 (1981): 1705-1710
Непатентный документ 6
et al
Sause W. ., Chest 117 (2000): 358-364
Непатентный документ 7
Tveit K. M. et al., Br. J. Cancer 84 (1997): 1130-1135
Раскрытие изобретения
Задачи, решаемые изобретением
Таким образом, задачей настоящего изобретения является создание потенцирующего средства для радиационной терапии, которое способно уменьшить дозу облучения и смягчить отрицательные эффекты при использовании его в комбинации с радиотерапией ракового заболевания.
Способы решения задач
В свете вышеизложенного, автором настоящего изобретения проведено широкое исследование производных урацила, представленных формулой (1), и их фармацевтически приемлемых солей в различных аспектах, и было выявлено, что комбинированное применение такого соединения и низкой дозы облучения приводит к потенцированию противоопухолевого эффекта, обусловленного облучением, и вызывает терапевтический эффект, который эквивалентен или больше, чем эффект терапии с использованием исключительно облучения в высокой дозе.
Соответственно, настоящее изобретение относится к потенцирующему средству для радиационной терапии, содержащему в качестве эффективного компонента производное урацила, представленное формулой (1):
F1
(в которой R1 представляет собой атом галогена или цианогруппу и R2 представляет собой (4-8)-членную гетероциклическую группу, имеющую от 1 до 3 атомов азота и необязательно имеющую в качестве заместителя низшую алкильную группу, иминогруппу, гидроксильную группу, гидроксиметильную группу, метансульфонилоксигруппу или аминогруппу; амидинотиогруппу, в которой атом водорода, присоединенный к атому азота, может быть замещен низшей алкильной группой; гуанидиногруппу, в которой атом водорода, присоединенный к атому азота, может быть замещен низшей алкильной группой или цианогруппой; низшую алкиламидиногруппу; или 1-пирролидинилметильную группу) или его фармацевтически приемлемую соль.
Настоящее изобретение также относится к применению производного урацила, представленного формулой (1), или его фармацевтически приемлемой соли для получения средства, потенцирующего радиационную терапию.
Настоящее изобретение также относится к способу потенцирования радиационной терапии, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту производного урацила, представленного формулой (1), или его фармацевтически приемлемой соли.
Настоящее изобретение также относится к способу лечения рака, включающему введение нуждающемуся в этом субъекту производного урацила, представленного формулой (1), или его фармацевтически приемлемой соли в сочетании с радиотерапией рака.
Эффекты изобретения
Путем применения потенцирующего средства для радиационной терапии по настоящему изобретению в сочетании с лучевой терапией можно добиться превосходного эффекта при лечении рака более низкими дозами облучения и смягчить отрицательные действия. Таким образом проводят продолжительное эффективное лечение рака.
Краткое описание фигур
Фигура 1
На фотографии показано состояние кожи в области бедра мыши из группы, подвергнутой только облучению, в тестовом примере 3 (дни 11 и 13).
Фигура 2
На фотографии показано состояние кожи в области бедра мыши из группы, подвергнутой комбинированному лечению (облучение и введение гидрохлорида 5-хлор-6-[1-(2-иминопирролидинил)метил]урацила), в тестовом примере 3 (дни 11 и 13).
Лучшие способы осуществления изобретения
Примеры атома галогена (R1) в формуле (1) включают фтор, хлор, бром и йод, предпочтительными из которых являются хлор и бром.
1
4
Примеры низшей алкильной группы, которая может служить заместителем гетероциклической группы, амидинотиогруппы, гуанидиногруппы или амидиногруппы, представленной R2, включают C-C алкильные группы с линейной или разветвленной цепью. Конкретные примеры включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил и трет-бутил, особенно предпочтительным из которых является метил.
Примеры (4-8)-членной гетероциклической группы (R2), имеющей от 1 до 3 атомов азота, включают 1-азетидинил, 1-пирролидинил, 2-пирролин-1-ил, 3-пирролин-1-ил, 1-пирролил, 1-пиразолидинил, 2-пиразолин-1-ил, 3-пиразолин-1-ил, 4-пиразолин-1-ил, 1-пиразолил, 1-имидазолидинил, 2-имидазолин-1-ил, 3-имидазолин-1-ил, 4-имидазолин-1-ил, 1-имидазолил, 1,2,3-триазол-1-ил, 1,2,4-триазол-1-ил, пиперидино, 1-пиперазил, морфолино, 1-пергидроазепинил и 1-пергидроазоцинил. Из указанных соединений предпочтительными являются 1-азетидинил, 1-пирролидинил, 1-имидазолидинил и 1-имидазолил и особенно предпочтительным является 1-пирролидинил.
Гетероциклическое кольцо может иметь один или два заместителя в своем кольце. Примеры таких заместителей включают низший алкил, имино, гидроксил, гидроксиметил, метансульфонилокси и амино. Конкретные примеры гетероциклической группы, имеющей необязательный заместитель, включают 1-азетидинил, 1-пирролидинил, 2,5-диметилпирролидин-1-ил, 2-иминопирролидин-1-ил, 3-гидроксипирролидин-1-ил, 2-гидроксиметилпирролидин-1-ил, 3-метансульфонилоксипирролидин-1-ил, 3-аминопирролидин-1-ил, 2-пирролин-1-ил, 3-пирролин-1-ил, 2-имино-3-пирролин-1-ил, 1-пирролил, 1-пиразолидинил, 2-метилпиразолидин-1-ил, 4-иминопиразолидин-1-ил, 2-пиразолин-1-ил, 3-пиразолин-1-ил, 2-метил-3-пиразолин-1-ил, 5-имино-3-пиразолин-1-ил, 4-пиразолин-1-ил, 2-метил-4-пиразолин-1-ил, 3-имино-4-пиразолин-1-ил, 1-пиразолил, 1-имидазолидинил, 3-метилимидазолидин-1-ил, 2-иминоимидазолидин-1-ил, 2-имино-3-метилимидазолидин-1-ил, 2-имино-3-этилимидазолидин-1-ил, 2-имино-3-изопропилимидазолидин-1-ил, 2-имидазолин-1-ил, 3-имидазолин-1-ил, 4-имидазолин-1-ил, 3-метил-4-имидазолин-1-ил, 2-имино-4-имидазолин-1-ил, 2-имино-3-метил-4-имидазолин-1-ил, 2-имино-3-этил-4-имидазолин-1-ил, 2-имино-3-изопропил-4-имидазолин-1-ил, 1-имидазолил, 2-метилимидазол-1-ил, 1,2,3-триазол-1-ил, 1,2,4-триазол-1-ил, пиперидино, 1-пиперазил, 4-метилпиперазин-1-ил, морфолино, 1-пергидроазепинил и 1-пергидроазоцинил. Примеры таких предпочтительных гетероциклических групп включают 1-азетидинил, 1-пирролидинил, 2-иминопирролидин-1-ил, 2-иминоимидазолидин-1-ил, 2-имино-3-метилимидазолидин-1-ил, 2-имино-3-этилимидазолидин-1-ил, 2-имино-3-изопропилимидазолидин-1-ил, 2-имидазолин-1-ил, 2-имино-3-метил-4-имидазолин-1-ил, 2-имино-3-этил-4-имидазолин-1-ил и 1-имидазолил.
Примеры амидинотиогруппы (R2), в которой атом водорода, присоединенный к атому азота, может быть замещен низшей алкильной группой, включают амидинотиогруппу, в которой от 1 до 3 атомов водорода из трех атомов водорода, присоединенных к атомам азота, могут быть замещены вышеупомянутой низшей алкильной группой. Из указанного предпочтительными являются группы амидинотио, N1-метиламидинотио и особенно предпочтительной является группа N1,N2-диметиламидинотио.
Примеры гуанидиногруппы, в которой атом водорода, присоединенный к атому азота, может быть замещен низшей алкильной группой или цианогруппой, включают гуанидиногруппу, в которой от 1 до 4 атомов водорода из четырех атомов водорода могут быть замещены вышеупомянутой низшей алкильной группой или цианогруппой. Из указанного предпочтительными являются группы 1-гуанидино, 1-метилгуанидино, 3-метилгуанидино, 2,3-диметилгуанидино и особенно предпочтительной является группа 2-циано-3-метилгуанидино.
Низшая алкиламидиногруппа представляет собой амидиногруппу, к которой присоединены одна или две указанные низшие алкильные группы. Из них предпочтительными являются метиламидино, этиламидино, диметиламидино и диэтиламидино.
Конкретные примеры предпочтительных групп, представленных R2, включают 1-азетидинил, 1-пирролидинил, 2-иминопирролидин-1-ил, 2-иминоимидазолидин-1-ил, 2-имино-3-метилимидазолидин-1-ил, 2-имино-3-этилимидазолидин-1-ил, 2-имино-3-изопропилимидазолидин-1-ил, 2-имидазолин-1-ил, 2-имино-3-метил-4-имидазолин-1-ил, 2-имино-3-этил-4-имидазолин-1-ил, 1-имидазолил, амидинотио, N1-метиламидинотио, N1,N2-диметиламидинотио, 1-гуанидино, 1-метилгуанидино, 3-метилгуанидино, 2,3-диметилгуанидино, метиламидино и 1-пирролидинилметил. Более предпочтительными группами являются 1-пирролидинил, 2-иминопирролидин-1-ил, амидинотио, 3-метилгуанидино, и особенно предпочтительными являются 1-пирролидинилметил и 2-иминопирролидин-1-ил.
В предпочтительных производных урацила, представленных формулой (1), R1 представляет собой атом хлора, атом брома или цианогруппу и R2 представляет собой 1-пирролидинильную группу, 2-иминопирролидин-1-ильную группу, амидинотиогруппу, 3-метилгуанидиногруппу или 1-пирролидинилметильную группу.
Не существует конкретных ограничений для соли производного урацила (1). Однако предпочтительными являются кислотно-аддитивные соли и/или основные соли, которые получают путем реакции с фармацевтически приемлемым кислотным или щелочным соединением. Примеры кислотно-аддитивных солей включают соли неорганической кислоты, такой как хлористоводородная кислота, серная кислота, фосфорная кислота или бромистоводородная кислота, и соли органической кислоты, такой как щавелевая кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, яблочная кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, уксусная кислота, п-толуолсульфоновая кислота или метансульфоновая кислота. Из указанного предпочтительными являются соли хлористоводородной кислоты и соли п-толуолсульфоновой кислоты. Примеры основных солей включают соли щелочных металлов или щелочноземельных металлов, таких как натрий, калий, магний или кальций, и соли аминов, таких как аммиак, метиламин, диметиламин, пиперидин, циклогексиламин или триэтиламин.
Конкретные примеры предпочтительных производных урацила (1) или их фармацевтически приемлемой соли включают 5-хлор-6-(1-пирролидинилметил)урацил, 5-бром-6-(1-пирролидинилметил)урацил, 5-циано-6-(1-пирролидинилметил)урацил, 5-хлор-6-(1-азетидинилметил)урацил, гидрохлорид 5-хлор-6-[1-(2-иминопирролидинил)метил]урацила, гидрохлорид 5-бром-6-[1-(2-иминопирролидинил)метил]урацила, 5-циано-6-[1-(2-иминопирролидинил)метил]урацил, 5-хлор-6-[1-(2-иминоимидазолидинил)метил]урацил, 5-бром-6-[1-(2-иминоимидазолидинил)метил]урацил, гидрохлорид 5-хлор-6-(1-имидазолилметил)урацила, гидрохлорид 5-хлор-6-(3-метилгуанидино)метилурацила, гидрохлорид 5-бром-6-(3-метилгуанидино)метилурацила, гидрохлорид 5-циано-6-(3-метилгуанидино)метилурацила, гидрохлорид 5-хлор-6-амидинотиометилурацила, гидрохлорид 5-бром-6-амидинотиометилурацила, гидрохлорид 5-циано-6-амидинотиометилурацила, 5-хлор-6-(2-пирролидин-1-ил-этил)урацил, 5-бром-6-(2-пирролидин-1-илэтил)урацил и 5-циано-6-(2-пирролидин-1-илэтил)урацил. Из указанного особенно предпочтительным является гидрохлорид 5-хлор-6-[1-(2-иминопирролидинил)метил]урацила, который представлен формулой 2 ниже.
F2
Соединения, представленные формулой (1), могут быть получены, например, способом, раскрытым в международной публикации WO 96/30346 (брошюра). Соединения по настоящему изобретению, представленные формулой (1), выполняющие функцию эффективного компонента, являются известными соединениями, и также известны их некоторые фармакологические действия. Более конкретно, известно ингибирование активности тимидинфосфорилазы и потенцирование противоопухолевого действия (международная публикация WO 96/30346 (брошюра)), ингибирующее действие на раковые метастазы (международная публикация WO 98/13045 (брошюра)), действие, направленное на уменьшение нарушений со стороны пищеварительного тракта, вызванных противоопухолевым средством (международная публикация WO 00/56337 (брошюра)), и действие против ВИЧ (международная публикация WO 01/34162 (брошюра)). Однако оставалось неизвестным действие соединений при лучевой терапии.
Используя введение соединения, представленного формулой (1), в сочетании с радиационной терапией, можно значительно усилить эффективность лечения рака облучением по сравнению с применением исключительно радиационной терапии. Таким образом, соединение, представленное формулой (1), является полезным средством, потенцирующим радиационную терапию. Кроме того, путем потенцирования эффекта радиационной терапии можно достигать достаточной эффективности лечения рака при более низкой дозе облучения. Таким образом, соединение, представленное формулой (1), также действует как средство, снижающее дозу облучения при лечении рака. Применяемые до настоящего времени высокие дозы радиационной терапии и обусловленные ими отрицательные эффекты, такие как токсическое действие на кровь, токсичность для пищеварительного тракта, потеря аппетита, депрессия и потеря массы тела, в некоторых случаях являются препятствием для продолжительного лечения. Однако путем применения соединения, представленного формулой (1), в сочетании с радиационной терапией может быть снижена доза облучения и уменьшены отрицательные эффекты. Соответственно, можно проводить радиационную терапию в течение более длительного периода, повышая, таким образом, эффективность лечения рака.
В дополнение к производному урацила, представленному формулой (1), или его фармацевтически приемлемой соли (A) потенцирующее средство для радиационной терапии по настоящему изобретению может дополнительно содержать α,α,α-трифтортимидин (B).
α,α,α-Трифтортимидин (далее в настоящем изобретении сокращенно обозначен ФТД (FTD)) представлен формулой (2). ФТД представляет собой производное нуклеиновой кислоты, в которой метильная группа в положении 5 тимидина замещена трифторметильной группой, и ранее ФТД синтезирован Heidelberger et al. (J. Am. Chem. Soc., 84: 3597-3598, 1962; J. Med. Chem., 7: 1-5, 1964). Также известна противоопухолевая композиция, содержащая представленное формулой (1) соединение и α,α,α-трифтортимидин (международная публикация WO 96/30346, брошюра). Однако до настоящего времени действие данной композиции при радиационной терапии неизвестно.
F3
Не существует каких-либо конкретных ограничений по количеству компонентов (A) и (B), содержащихся в потенцирующем средстве, и предпочтительно компонент (A) используют в количестве от примерно 0,1 до примерно 500 моль относительно 1 моль компонента (B), более предпочтительно от примерно 0,2 до примерно 10 моль, особенно предпочтительно примерно 0,5 моль.
Среди производных урацила в качестве компонента (A) предпочтительным является 5-хлор-6-[1-(2-иминопирролидинил)метил]урацил или его фармацевтически приемлемая соль.
Посредством применения композиции, содержащей компоненты (A) и (B), в сочетании с радиационной терапией можно значительно усилить эффективность лечения рака облучением по сравнению с применением исключительно радиационной терапии. Таким образом, данная композиция является полезным средством, потенцирующим радиационную терапию. В дополнение, поскольку происходит потенцирование эффекта радиационной терапии, достаточной эффективности лечения рака можно достичь облучением при более низкой дозе. Таким образом, данная композиция также действует в качестве средства, снижающего дозу облучения при лечении рака. Применяемые до настоящего времени высокие дозы радиационной терапии и обусловленные ими отрицательные эффекты, такие как токсическое действие на кровь, токсичность для пищеварительного тракта, потеря аппетита, депрессия и потеря массы тела, в некоторых случаях являются препятствием для продолжительного лечения. Однако посредством применения данной композиции в сочетании с радиационной терапией можно снизить дозу облучения и уменьшить отрицательные эффекты. Соответственно, можно проводить радиационную терапию в течение более длительного периода, повышая, таким образом, эффективность лечения рака.
Используемый в настоящем описании термин "потенцирующее средство для радиационной терапии" относится к лекарственному средству, которое потенцирует (усиливает) радиационную чувствительность (также называемому радиосенсибилизатором) посредством любого механизма действия.
Радиационную терапию, рассматриваемую настоящим изобретением, можно проводить согласно общепринятому в данной области техники протоколу, который известен специалистам в данной области. Например, радиационная терапия включает в себя излучение цезия, иридия, йода или кобальта. Радиационная терапия может представлять собой системное облучение (в случае острого лейкоза, злокачественной лимфомы и некоторых типов солидного рака), но предпочтительно локально сфокусирована на определенный участок (участки); то есть зоны опухоли и ткани солидного рака (брюшная полость, легкое, печень, лимфатические узлы, голова и т.д.). Обычно радиотерапию проводят в течение 2-3 минут в день по схеме от 25 до 30 облучений (на протяжении примерно 5-6 недель).
Потенцирующее средство для радиационной терапии по настоящему изобретению можно применять как вспомогательное средство с основным средством для радиотерапии злокачественной опухоли, которая обладает низкой от природы радиационной чувствительностью, или для терапии злокачественной опухоли с приобретенной в ходе радиационной терапии радиационной устойчивостью. Потенцирующее средство для радиационной терапии по настоящему изобретению усиливает радиационную чувствительность опухолевых клеток, посредством чего можно уменьшить дозу облучения при лечении. Таким образом, можно увеличивать продолжительность лечения (время экспозиции) по сравнению с продолжительностью, указанной в обычно используемых протоколах. Кроме того, могут быть уменьшены отрицательные эффекты (например, стоматит, миелопатия, радиационные язвы и радиационная пневмония), обусловленные радиационной травмой, которые неизбежно наблюдаются при радиационной терапии.
Потенцирующее средство для радиационной терапии по настоящему изобретению применяют в сочетании с радиационной терапией, конкретно, перед радиационной терапией или после нее. Кроме того, потенцирующее средство для радиационной терапии по настоящему изобретению, которое повышает эффективность радиационной терапии, как описано выше, можно применять в сочетании с другими противоопухолевыми средствами. Примеры таких противоопухолевых средств включают лекарственные средства, содержащие платину, содержащие таксан лекарственные средства, лекарственные средства на основе алкалоида барвинка, ингибиторы топоизомеразы, антиметаболиты и алкилирующие средства. Более конкретные примеры включают один или более из следующих препаратов: цисплатин, карбоплатин, оксалиплатин, паклитаксел, доцетаксел, винкристин, винбластин, винорелбин, виндесин, иринотекана гидрохлорид, топотекан, этопозид, тенипозид, доксорубицин, фторурацил, тегафур, доксифлуридин, капецитабин, гемцитабин, цитарабин, метотрексат, пеметрексед, циклофосфамид, адриамицин и митомицин. Если указанные другие противоопухолевые средства применяют в комбинации, учитывают возраст, пол, степень тяжести симптома и отрицательные эффекты для пациентов, противопоказания для смешивания и тому подобное.
Потенцирующее средство для радиационной терапии по настоящему изобретению может быть получено в виде обычно используемых фармацевтических продуктов с фармацевтически приемлемым носителем; например, с наполнителем, веществом для увеличения объема, связывающим веществом, увлажняющим веществом, дезинтегрирующим веществом, поверхностно-активным веществом, лубрикантом или эксципиентом. Если такой фармацевтический продукт вводят млекопитающему, включая человека, могут быть выбраны разные фармацевтические формы для введения в соответствии с целью лечения. Конкретные примеры включают таблетки, пилюли, порошки, жидкости, суспензии, эмульсии, гранулы, капсулы, суппозитории, инъекционные формы (жидкости, суспензии и т.д.) и мази. Примеры носителя, который можно использовать для изготовления таблеток, включают эксципиенты, такие как лактоза, сахароза, хлорид натрия, глюкоза, мочевина, крахмал, карбонат кальция, каолин, кристаллическая целлюлоза, кремниевая кислота; связывающие вещества, такие как вода, этанол, пропанол, простой сироп, раствор глюкозы, раствор крахмала, раствор желатина, карбоксиметилцеллюлоза, шеллак, винилметилцеллюлоза, фосфат калия и поливинилпирролидон; дезинтегрирующие вещества, такие как сухой крахмал, альгинат натрия, порошок агара, порошок ламинарии, гидрокарбонат натрия, карбонат кальция, эфиры полиоксиэтиленсорбитана и жирной кислоты, лаурилсульфат натрия, моноглицерид стеариновой кислоты, крахмал и лактоза; ингибиторы расщепления, такие как сахароза, стеарин, масло какао и гидрированное масло; промоторы абсорбции, такие как четвертичные аммониевые основания и лаурилсульфат натрия; увлажняющие вещества, такие как глицерин и крахмал; адсорбенты, такие как крахмал, лактоза, каолин, бентонит и коллоидная кремниевая кислота; и лубриканты, такие как очищенный тальк, соли стеариновой кислоты, порошок борной кислоты и полиэтиленгликоль. При необходимости таблетки могут быть дополнительно модифицированы с целью изготовления покрытых оболочкой таблеток, используя общепринятое покрытие; например, таблетки с сахарным покрытием, таблетки, покрытые желатиновой оболочкой, таблетки с энтеросолюбильным покрытием, таблетки с пленочным покрытием, двухслойные таблетки и многослойные таблетки. Для изготовления пилюль можно использовать, например, эксципиенты, такие как глюкоза, лактоза, крахмал, масло какао, гидрированное растительное масло, каолин и тальк; связывающие вещества, такие как порошковая камедь, порошок трагаканта, желатин и этанол; и дезинтегрирующие вещества, такие как порошок ламинарии и порошок агара. Капсулы могут быть получены стандартным способом; а именно, эффективные компоненты смешивают с вышеупомянутыми носителями и твердые желатиновые капсулы или мягкие капсулы заполняют смесью. Для получения суппозиториев можно использовать полиэтиленгликоль, масло какао, высшие спирты, высшие спиртовые сложные эфиры, желатин, полусинтетические глицериды и тому подобное. Для получения инъекционных продуктов жидкости, эмульсии и суспензии предпочтительно являются стерильными и изотоническими по отношению к крови. Для получения инъекционных продуктов можно использовать широкое разнообразие известных разбавителей. Их примеры включают воду, этиловый спирт, макроголь, пропиленгликоль, полиэтоксилированный изостеариловый спирт и эфиры полиоксиэтиленсорбитана и жирной кислоты. Для приготовления изотонического раствора в такие фармацевтические продукты можно включать достаточное количество хлорида натрия, глюкозы или глицерина. Также в указанные фармацевтические продукты можно включать общепринятое солюбилизирующее вещество, буфер, анальгезирующее вещество и тому подобное. Для изготовления мазей, таких как паста, крем и гель, в качестве разбавителя можно использовать белый вазелин, парафин, глицерин, производные целлюлозы, полиэтиленгликоль, силикон, бентонит и тому подобное. При необходимости в вышеупомянутые фармацевтические продукты можно включать красящее вещество, консервант, отдушку, ароматизатор, подслащивающее вещество и другие препараты.
Не существует каких-либо конкретных ограничений в отношении количества эффективного компонента (A) или общего количества эффективных компонентов (A) и (B), включенных в вышеупомянутые фармацевтические продукты, и это количество (количества) можно соответственно выбирать из широкого диапазона. Как правило, содержание эффективного компонента каждого фармацевтического продукта предпочтительно составляет от 1 до 70% массы.
Не существует каких-либо конкретных ограничений в отношении пути введения вышеупомянутых фармацевтических продуктов, и путь введения определяют в соответствии с фармацевтической формой продуктов, возраста больного, пола, других признаков, степени тяжести заболевания и тому подобного. Таблетки, пилюли, порошок, жидкость, суспензию, эмульсию, гранулы и капсулы вводят перорально. Жидкость для инъекции или смесь жидкости для инъекции и общепринятой заменяющей жидкости, такой как раствор глюкозы или раствор аминокислот, вводят внутривенно. Жидкость для инъекции вводят отдельно, внутриартериально, внутримышечно, внутрикожно, подкожно или интраперитонеально, в соответствии с необходимостью. Суппозитории вводят ректально. Мазь наносят на кожу, слизистую полости рта и т.д. Особенно предпочтительным из указанных путей введения является пероральное введение.
Доза каждого эффективного компонента фармацевтического продукта по настоящему изобретению может быть подходящим образом выбрана в соответствии с руководством по применению, возрастом больного, полом, другими параметрами больного, степенью тяжести заболевания и тому подобного. Обычно доза производного урацила (1) или его фармацевтически приемлемой соли составляет от примерно 0,01 до примерно 1000 мг/кг/день, предпочтительно от примерно 0,5 до примерно 100 мг/кг/день. Если в состав фармацевтического продукта входит α,α,α-трифтортимидин, его доза составляет от примерно 0,1 до примерно 100 мг/кг/день, предпочтительно от примерно 0,5 до примерно 50 мг/кг/день. При этом фармацевтический продукт по настоящему изобретению можно вводить один раз в день или разделить дозу на 2-4 приема.
Посредством применения средства по настоящему изобретению, потенцирующего радиационную терапию, в сочетании с радиотерапией может быть предложен превосходный способ лечения рака. Не существует каких-либо конкретных ограничений в отношении опухоли, для лечения которой можно применять указанный способ. Этот способ особенно подходит для лечения рака с высокой радиационной чувствительностью. В связи с этим, поскольку потенцирующее средство по настоящему изобретению может также повышать радиационную чувствительность рака с предполагаемой низкой чувствительностью, можно ожидать усиления эффекта радиационной терапии. Примеры рака-мишени включают рак головы и шеи, рак пищевода, рак желудка, рак толстой кишки/рак прямой кишки, рак печени, рак желчного пузыря/желчного протока, рак поджелудочной железы, рак легкого, рак молочной железы, рак мочевого пузыря, рак простаты, рак шейки матки, опухоль головного мозга, злокачественную лимфому, острый лейкоз, хронический лейкоз, медуллобластому, ретинобластому, нейробластому, опухоль Вильмса, болезнь Ходжкина, множественную миелому, плазмоцитому, тимому, базальноклеточный рак, плоскоклеточный рак, опухоль Эвинга, рак щитовидной железы, рак яичников, рак слюнной железы, тератому, злокачественную меланому, глиому, почечно-клеточный рак и остеосаркому. Примеры предпочтительного рака-мишени включают рак головы и шеи, рак пищевода, рак желудка, рак толстой кишки/рак прямой кишки, рак печени, рак легкого, рак поджелудочной железы и рак молочной железы. Примеры более предпочтительного рака-мишени включают рак головы и шеи, рак пищевода, рак печени, рак легкого, рак поджелудочной железы и т.д., лечение которых путем резекции затруднено. Особенно предпочтительными из указанных заболеваний являются рак легкого и рак головы и шеи.
Примеры
Далее настоящее изобретение более подробно описано путем тестовых примеров, которые не должны рассматриваться как ограничивающие объем настоящего изобретения.
Тестовый пример 1
Приготовление тестовой жидкости
(a)
Гидрохлорид 5-хлор-6-[1-(2-иминопирролидинил)метил]урацила (далее сокращенно именуемый TPI) суспендировали в 0,5% растворе (масса/объем) гидроксипропилметилцеллюлозы (далее сокращенно именуемой ГПМЦ (HPMC)), доводя концентрацию до 2,5 или 5,0 мг/мл, и суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 10 минут с помощью мешалки. Затем на суспензию воздействовали ультразвуком при охлаждении льдом в течение примерно пяти минут, получая, таким образом, жидкое лекарственное средство TPI с дозой 25 мг/кг/день или 50 мг/кг/день.
Способ радиационного (рентгеновского) облучения
(b)
С помощью рентгеновского аппарата (модель: MBR-1505R2 производства Hitachi Medical Corp.) мышей подвергали рентгеновскому облучению при следующих условиях: единичную дозу для одной мыши доводили до 2 Гр или 5 Гр путем регулирования расстояния от источника излучения до мыши. Конкретно, у каждой мыши подвергали локальному облучению область правого бедра, в которую были пересажены человеческие клетки опухолевого штамма. Во избежание системного облучения мышь помещали в свинцовую коробку таким образом, чтобы воздействию облучения подвергалась только правая лапа.
Методика теста
(c)
2
После подкожной трансплантации человеческого опухолевого штамма рака легкого (LC-11) в область спины мышей линии BALB/cA-nu и предварительного выращивания опухоли ее удаляли, затем ножницами разрезали на маленькие части (примерно 2×2 мм) в физиологическом растворе и пересаживали мышам той же линии в возрасте 5-6 недель с помощью трансплантационной иглы подкожно в область правого бедра. После указанной процедуры мышей выдерживали по меньшей мере в течение 1-2 недель для адаптации и разделяли на контрольную группу, группу, подвергаемую только облучению, группу введения только одного лекарственного средства и группу комбинированного лечения радиационной терапией и лекарственным средством, причем каждая группа состояла из 6 мышей, таким образом, значения среднего объема опухоли и стандартное отклонение (СО) были в максимальной степени выровнены между группами. Затем начинали введение лекарственного средства и облучение. Каждой мыши из групп, подвергаемых введению лекарственного средства, перорально вводили вышеупомянутую жидкость TPI путем перорального введения один раз в день дозы 0,1 мл/10 г массы тела непрерывно в течение 14 дней. Мышей из групп облучения подвергали воздействию рентгеновского излучения в дозе 2 Гр или 5 Гр посредством вышеупомянутого способа в течение примерно одного часа после введения жидкости TPI на 1 день и на 8 день испытаний. Мышам с привитым раком из контрольной группы (группа без облучения/без введения лекарственного средства) и мышам из групп, подвергнутых только облучению, перорально вводили только 0,5% жидкость ГПМЦ тем же способом непрерывно в течение 14 дней.
Объем опухоли каждой мыши из указанных выше групп, который вычисляли по уравнению 1 ниже, определяли перед началом тестового лечения и на 3 день, 5 день, 8 день (через 1 неделю после лечения), на 11 день, 15 день (после окончания введения, через 2 недели после лечения), на 18 день, 22 день (через 3 недели после лечения), на 25 день и 29 день (через 4 недели после лечения). Для каждой мыши было получено значение относительного объема опухоли (RTV) к объему опухоли на начало теста. В таблице 1 показаны результаты и среднее значение RTV и стандартное отклонение (СО) в каждой группе. Затем по уравнению 2 вычисляли среднюю скорость подавления роста опухоли (IR: %) в каждой группе относительно контрольной группы на 15 день и 22 день (после завершения периода лечения). Результаты также показаны в таблице 1.
Уравнение 1
3
2
Объем опухоли (мм)=(длинный диаметр)×(короткий диаметр)×1/2
Уравнение 2
Скорость подавления роста опухоли (% IR)=[1-(средний объем опухоли в группе лечения)/(средний объем опухоли в контрольной группе)]×100
Таблица 1
Группа
Лекарственное средство
Доза (мг/кг)
Рентген. облучение (Гр)
День 15
День 22
RTV
IR (%)
RTV
IR (%)
1
-
-
-
6,5±2,6
-
13,0±4,6
-
2
-
-
2
3,9±1,1
40,1
6,6±1,9
49,1
3
-
-
5
2,8±1,1
56,2
5,0±1,7
61,3
4
TPI
50
-
6,6±4,2
-2,9
10,8±5,8
16,7
5
TPI
25
2
2,5±0,6
61,3
4,1±0,9
68,7
6
TPI
50
2
2,4±0,6
61,6
4,7±1,3
64,1
Результаты теста
(d)
Путем рентгеновского облучения в дозе 2 Гр был достигнут противоопухолевый эффект на модели опухоли LC-11 на 15 день (40%) и 22 день (49%). Введение TPI в дозе 50 мг/кг фактически выявило отсутствие какого-либо противоопухолевого эффекта. Однако при введении TPI в дозе 25 мг/кг или 50 мг/кг в сочетании с рентгеновским облучением в дозе 2 Гр противоопухолевый эффект составлял 61,3% или 61,6% на 15 день и 68,7% или 64,1% на 22 день, указывая, что TPI значительно увеличивает противоопухолевый эффект рентгеновского облучения в дозе 2 Гр. Эти значения сопоставимы с показателями в 56% и 61%, которые были достигнуты посредством исключительно рентгеновского облучения в дозе 5 Гр. Таким образом, посредством сочетания TPI с рентгеновским облучением в низкой дозе можно достичь значительного противоопухолевого эффекта, подобного эффекту рентгеновского облучения в высокой дозе.
Тестовый пример 2
Приготовление тестовой жидкости (1)
(a)
TPI суспендировали в 0,5% растворе (масса/объем) ГПМЦ, доводя концентрацию до 1,5 или 5,0 мг/мл, и суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 10 минут с помощью мешалки. Затем на суспензию воздействовали ультразвуком при охлаждении льдом в течение примерно пяти минут, получая, таким образом, жидкое лекарственное средство TPI с дозой 15 мг/кг/день или 50 мг/кг/день.
Приготовление тестовой жидкости (2)
(b)
5-Хлор-6-аминоурацил (далее сокращенно именуемый TUPI) суспендировали в 0,5% растворе (масса/объем) ГПМЦ (HPMC), доводя концентрацию до 5,0 мг/мл, и суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 10 минут с помощью мешалки. Затем на суспензию воздействовали ультразвуком при охлаждении льдом в течение примерно пяти минут, получая, таким образом, жидкое лекарственное средство TUPI в дозе 50 мг/кг/день.
Способ радиационного (рентгеновского) облучения
(c)
С помощью рентгеновского аппарата (модель: MBR-1505R2 производства Hitachi Medical Corp.) мышей подвергали рентгеновскому облучению при следующих условиях: единичную дозу для одной мыши доводили до 2 Гр или 5 Гр путем регулирования расстояния от источника излучения до мыши. Конкретно, у каждой мыши подвергали локальному облучению область правого бедра, в которую были пересажены человеческие клетки опухолевого штамма. Во избежание системного облучения мышь помещали в свинцовую коробку таким образом, чтобы воздействию облучения подвергалась только правая лапа.
Методика теста
(d)
2
После подкожной трансплантации человеческого опухолевого штамма рака легкого (LC-11) в область спины мышей линии BALB/cA-nu и предварительного выращивания опухоли ее удаляли, затем ножницами разрезали на маленькие части (около 2×2 мм) в физиологическом растворе и пересаживали мышам той же линии в возрасте 5-6 недель с помощью трансплантационной иглы подкожно в область правого бедра. После указанной процедуры мышей выдерживали по меньшей мере в течение 1-2 недель для адаптации и разделяли на контрольную группу, группу, подвергаемую только облучению, группу введения только одного лекарственного средства и группу комбинированного лечения радиационной терапией и лекарственным средством, причем каждая группа состояла из 6 мышей, таким образом, значения среднего объема опухоли и стандартное отклонение (СО) были в максимальной степени выровнены между группами. После этого начинали введение лекарственного средства и облучение. Каждой мыши из групп, которым вводили лекарственное средство, перорально вводили вышеупомянутую жидкость TUPI путем перорального введения один раз в день дозы 0,1 мл/10 г массы тела непрерывно в течение 14 дней. Мышей из групп облучения подвергали воздействию рентгеновского излучения в дозе 2 Гр или 5 Гр посредством вышеупомянутого способа в течение примерно одного часа после введения жидкости TPI или жидкости TUPI на 1 день и на 8 день испытаний. Мышам с привитым раком из контрольной группы (группа без облучения/без введения лекарственного средства) и мышам из групп, подвергнутых только облучению, перорально вводили только 0,5% жидкость ГПМЦ тем же способом непрерывно в течение 14 дней.
Объем опухоли каждой мыши из указанных выше групп, который вычисляли по уравнению 1 из тестового примера 1, определяли перед началом тестового лечения и на 3 день, 5 день, 8 день (через 1 неделю), на 11 день, 15 день (после окончания введения, через 2 недели после лечения), на 18 день, 22 день (через 3 недели после лечения), на 25 день и 29 день (через 4 недели после лечения). Для каждой мыши было получено значение относительного объема опухоли (RTV) к объему опухоли на начало теста. В таблице 2 показаны результаты и среднее значение RTV и стандартное отклонение (СО) в каждой группе. Затем аналогичным способом из тестового примера 1 вычисляли среднюю скорость подавления роста опухоли (IR: %) относительно контрольной группы на 15 день, 22 день и 29 день (после завершения периода лечения). Результаты также показаны в таблице 2.
Таблица 2
Группа
Лекарственное средство
Доза (мг/кг)
Рентген. облучение (Гр)
День 15
День 22
День 29
RTV
IR (%)
RTV
IR (%)
RTV
IR (%)
1
-
-
-
5,0±1,5
-
8,9±1,8
-
17,8±3,8
-
2
-
-
2
3,1±0,9
38,3
4,9±1,8
45,4
9,7±3,0
45,4
3
-
-
5
2,3±0,7
54,9
3,3±0,6
63,5
4,9±1,0
72,6
4
TUPI
50
-
4,4±1,8
12,7
7,4±3,3
17,5
14,0±6,3
21,4
5
TUPI
50
2
3,2±0,8
36,6
5,3±1,7
41,2
8,8±2,5
50,2
6
TPI
50
-
4,7±1,3
5,6
8,1±2,0
9,8
14,5±4,1
18,6
7
TPI
15
2
2,9±0,8
42,1
4,2±1,8
52,8
7,4±3,2
58,4
8
TPI
50
2
2,5±1,2
50,6
3,8±2,1
56,9
5,4±1,7
69,7
Результаты теста
(е)
Путем исключительно рентгеновского облучения в дозе 2 Гр был достигнут противоопухолевый эффект на модели опухоли LC-11 на 15 день (38%), на 22 день (45%) и на 29 день (49%). При дозе 5 Гр значение IR составляло 55%, 63,5% и 72,6% соответственно. При введении только одного TUPI в дозе 50 мг/кг отсутствовал какой-либо противоопухолевый эффект на модели опухоли. Даже при введении TUPI в комбинации с рентгеновским облучением в дозе 2 Гр не наблюдали потенцирования противоопухолевого эффекта. Напротив, введение только одного TPI в дозе 50 мг/кг фактически не выявило какого-либо противоопухолевого эффекта. Однако при введении TPI в дозе 50 мг/кг в комбинации с рентгеновским облучением в дозе 2 Гр противоопухолевый эффект усиливался в зависимости от дозы. Конкретно, были получены значения IR в 50,6% на 15 день, 57% на 22 день и 70% на 29 день. Эти значения сопоставимы с показателями, достигнутыми посредством исключительно рентгеновского облучения в дозе 5 Гр.
Тестовый пример 3
Приготовление тестовой жидкости
(a)
TPI суспендировали в 0,5% растворе (масса/объем) ГПМЦ, доводя концентрацию до 10,0 мг/мл, и суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 10 минут с помощью мешалки. Затем на суспензию воздействовали ультразвуком при охлаждении льдом в течение примерно пяти минут, получая, таким образом, жидкое лекарственное средство TPI в дозе 100 мг/кг/день.
Способ радиационного (рентгеновского) облучения
(b)
С помощью рентгеновского аппарата (модель: MBR-1505R2 производства Hitachi Medical Corp.) мышей подвергали рентгеновскому облучению при следующих условиях: единичную дозу для одной мыши доводили до 20 Гр путем регулирования расстояния от источника излучения до мыши. Конкретно, у каждой мыши подвергали локальному облучению область правого бедра. Во избежание системного облучения мышь помещали в свинцовую коробку таким образом, чтобы воздействию облучения подвергалась только правая лапа.
Методика теста
(c)
Мыши BALB/cA-nu в возрасте от 6 до 8 недель были разделены на контрольную группу, группу, подвергаемую только облучению, и группу комбинированного применения облучения и лекарственного средства, причем каждая группа состояла из 6 мышей. Затем начинали введение лекарственного средства и облучение. Поскольку лекарственное средство (TPI) по существу не проявляет противоопухолевого эффекта или отрицательного действия при постоянном и пероральном введении, группу, которой вводили только одно лекарственное средство, не тестировали. Мышей из групп облучения подвергали воздействию рентгеновского излучения в дозе 10 Гр на 1 день, на 2 день и на 3 день испытания. Мышей из групп, подвергаемых комбинированному применению облучения и лекарственного средства, просто облучали в течение трех дней и вводили каждой мыши перорально жидкость TPI путем перорального ведения один раз в день дозы 0,1 мл/10 г массы тела непрерывно в течение 7 дней. Мышей из групп комбинированного применения подвергали воздействию рентгеновского облучения в дозе 10 Гр в пределах одного часа после введения жидкости TPI. Нормальным мышам из контрольной группы (группа без облучения/без введения лекарственного средства) перорально вводили только 0,5% жидкость ГПМЦ тем же способом непрерывно в течение 7 дней.
Оценка степени повреждения кожи
(d)
et al
Через 7 дней испытания проводили оценку степени повреждения кожи бедренной области каждой мыши, вызванного облучением, способом Дугласа и соавторов (Douglas B. G. .: The effect of multiple small doses of X-rays on skin reactions in the mice and a basic interpretation. Radiation Res., 66: 401-426, 1976).
Результаты тестов
(e)
В группе, подвергаемой только облучению, у всех шести мышей выявлена потеря влажности кожи и кератинизация (в степени от 1,0 до 1,5) и шелушение кожной поверхности (в степени от 2,5 до 3,0), начиная с 10 дня, и указанные симптомы ухудшались до максимальной степени на 13 день (см. фиг.1). Напротив, в группе комбинированного применения облучения и лекарственного средства (TPI) тяжелые состояния не наблюдались, хотя выявлены небольшие нарушения (обострение, набухание или кератинизация кожной поверхности) (см. фиг.2). У мышей контрольной группы не выявлено кожных нарушений.
В результате показано, что TPI усиливает противоопухолевый эффект, обеспечиваемый облучением, но не увеличивает радиационное повреждение нормальной ткани (нормальная кожа в указанном выше тесте). Кроме того, было выявлено, что TPI смягчает такое радиационное повреждение.
Тестовый пример 4
Приготовление тестовой жидкости I
(a)
α,α,α-Трифтортимидин (далее сокращенно именуемый ФТД (FTD)) и TPI суспендировали в 0,5% растворе (масса/объем) ГПМЦ, доводя концентрацию до 5,0 мг/мл и 2,65 мг/мл соответственно, и суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 10 минут. Затем на суспензию воздействовали ультразвуком при охлаждении льдом, получая, тем самым, лекарственную жидкость (сокращенно ФТД) в дозе 50 мг/кг/день. Далее в настоящем изобретении лекарственная жидкость называется TAS-102. Доза жидкости TAS-102 проявляла "отсутствие наблюдаемого уровня отрицательного эффекта" при пероральном введении указанной жидкости мыши в течение 14 дней.
Приготовление тестовой жидкости II
(b)
ФТД суспендировали в 0,5% растворе (масса/объем) ГПМЦ, доводя концентрацию до 5,0 мг/мл, и суспензию перемешивали при комнатной температуре в течение примерно 10 минут. Затем на суспензию воздействовали ультразвуком при охлаждении льдом, получая, тем самым, лекарственную жидкость ФТД в дозе 50 мг/кг/день. Доза ФТД проявляла "отсутствие наблюдаемого уровня отрицательного эффекта" при пероральном введении указанной жидкости мыши в течение 14 дней.
Способ радиационного (рентгеновского) облучения
(c)
С помощью рентгеновского аппарата (модель: MBR-1505R2 производства Hitachi Medical Corp.) мышей подвергали рентгеновскому облучению при следующих условиях: единичную дозу для одной мыши доводили до 2 Гр или 5 Гр путем регулирования расстояния от источника излучения до мыши. Конкретно, у каждой мыши подвергали локальному облучению область правого бедра, в которую были пересажены человеческие клетки опухолевого штамма. Во избежание системного облучения мышь помещали в свинцовую коробку таким образом, чтобы воздействию облучения подвергалась только правая лапа.
Методика теста
(d)
2
После подкожной трансплантации человеческого опухолевого штамма рака легкого (LC-11) в область спины мышей линии BALB/cA-nu и предварительного выращивания опухоли ее удаляли, затем ножницами разрезали на маленькие части (примерно 2×2 мм) в физиологическом растворе и пересаживали мышам той же линии в возрасте 5-6 недель с помощью трансплантационной иглы подкожно в область правого бедра. После указанной процедуры мышей выдерживали по меньшей мере в течение 1-2 недель для адаптации и разделяли на контрольную группу, группу, подвергаемую только облучению, группу введения только одного лекарственного средства и группу комбинированного лечения радиационной терапией и лекарственным средством, причем каждая группа состояла из 6 мышей, таким образом, значения среднего объема опухоли и стандартное отклонение (СО) были в максимальной степени выровнены между группами. Затем начинали введение лекарственного средства и облучение. Каждой мыши из групп, подвергаемых введению лекарственного средства, перорально вводили вышеупомянутую жидкость TAS-102 или ФТД путем перорального введения один раз в день дозы 0,1 мл/10 г массы тела непрерывно в течение 14 дней. Мышей из групп облучения подвергали воздействию рентгеновского излучения в дозе 2 Гр или 5 Гр посредством вышеупомянутого способа в течение примерно одного часа после введения жидкости TAS-102 или жидкости ФТД на 1 день и на 8 день испытаний. Мышам с привитым раком из контрольной группы (группа без облучения/без введения лекарственного средства) и мышам из групп, подвергнутых только облучению, перорально вводили только 0,5% жидкость ГПМЦ тем же способом непрерывно в течение 14 дней.
Объем опухоли каждой мыши из указанных выше групп, который вычисляли по уравнению 1 из тестового примера 1, определяли перед началом тестового лечения и на 3 день, 5 день, 8 день (через 1 неделю), на 11 день, 15 день (после окончания введения, через 2 недели после лечения), на 18 день, 22 день (через 3 недели), на 25 день и 29 день (через 4 недели). Для каждой мыши было получено значение относительного объема опухоли (RTV) к объему опухоли на начало теста. Затем, как и в тестовом примере 1, вычисляли среднюю скорость подавления роста опухоли (IR: %) в каждой группе относительно контрольной группы на 15 день, 22 день (после окончания периода лечения) и на 29 день (через 4 недели). Результаты показаны в таблице 3.
Таблица 3
Лекарственное средство
Доза (мг/кг)
Рентген. облучение (Гр)
N
IR (%)
День 15
День 22
День 29
-
-
2
6
21,2
16,3
25,7
-
-
5
6
48,9
58,6
68,6
TAS-102
50
-
6
22,9
32,3
48,7
TAS-102
50
2
6
48,7
55,5
60,9
ФТД
50
-
6
51,8
57,2
59,0
ФТД
50
2
6
35,8
48,6
58,5
Результаты теста
(е)
Посредством исключительно рентгеновского облучения в дозе 2 Гр был достигнут противоопухолевый эффект на модели опухоли LC-11 на 15 день (21%), на 22 день (16%) и на 29 день (25,7%). При введении только одного TAS-102 значения IR составляли 23% на 15 день, 32% на 22 день и 49% на 29 день. Однако при использовании TAS-102 в сочетании с рентгеновским облучением противоопухолевый эффект существенно увеличивался и были получены значения IR в 49% на 15 день, 55,5% на 22 день и 61% на 29 день. Эти значения сопоставимы с показателями, достигнутыми посредством исключительно рентгеновского облучения в дозе 5 Гр. В то же время при введении только одного ФТД были получены значения IR в 52% на 15 день, 57% на 22 день и 59% на 29 день. Вместе с тем, даже комбинированное применение рентгеновского облучения в дозе 2 Гр не вызывало усиления противоопухолевого эффекта. Таким образом, выявлено, что фармацевтический продукт TAS-102, содержащий TPI, усиливает противоопухолевый эффект, обеспечиваемый облучением.