МЕТОДЫ ПРЕДСКАЗАНИЯ, ОБНАРУЖЕНИЯ И УМЕНЬШЕНИЯ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ ИНТЕРФЕРЕНЦИИ БЕЛКОВ В СПОСОБАХ АНАЛИЗА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ОДИНОЧНЫХ ВАРИАБЕЛЬНЫХ ДОМЕНОВ ИММУНОГЛОБУЛИНОВ

1. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина для использования в терапии, где одиночный вариабельный домен иммуноглобулина модифицирован на С-конце своей последовательности путем (i) введения одной или более аминокислотных замен, добавлений или делений в С-концевой области, содержащей С-концевую последовательность VTVSS (SEQ ID NO:33) и в аминокислотных остатках в положениях 11, 13, 14, 15, 82, 82a, 82b, 83, 84, 107 и 108; и (ii) добавление к С-концу последовательности 1-10 аминокислотных остатков, каждый из которых независимо выбран из любой природной аминокислоты.
2. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина по п. 1, который был модифицирован на С-конце своей последовательности путем (i) введения одной или более аминокислотных замен в С-концевой области, содержащей С-концевую последовательность VTVSS (SEQ ID NO:33) и в аминокислотных остатках в положениях 11, 13, 14, 15, 82, 82a, 82b, 83, 84, 107 и 108; и (ii) добавления к С-концевой последовательности 1-10 аминокислотных остатков, каждый из которых независимо выбран из любой природной аминокислоты.
3. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина по п.1, который был модифицирован на С-конце своей последовательности путем (i) введения одной или более аминокислотных замен, добавлений или делений в С-концевой области, содержащей С-концевую последовательность VTVSS (SEQ ID NO:33), и в аминокислотных остатках в положениях 11, 13, 14, 15, 82, 82a, 82b, 83, 84, 107 и 108; и (ii) добавления к С-концевой последовательности 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотных остатков, каждый из которых независимо выбран из любой природной аминокислоты.
4. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина по п.1, который был модифицирован на С-конце своей последовательности путем (i) введения одной или более аминокислотных замен в С-концевой области, содержащей С-концевую последовательность VTVSS (SEQ ID NO:33) и в аминокислотные остатки в положениях 11, 13, 14, 15, 82, 82a, 82b, 83, 84, 107 и 108; и (ii) добавления к С-концевой последовательности 1, 2, 3, 4 или 5 аминокислотных остатков, каждый из которых независимо выбран из любой природной аминокислоты.
5. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина по любому из предшествующих пунктов, где указанные природные аминокислоты независимо выбраны из аланина, глицина, валина, лейцина или изолейцина.
6. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина по любому из пп. 1-4, который имеет последовательность VTVSS(X)n на своем C-конце, где
- n=1, 2 или 3, где каждый X=Ala или Gly; или
- n=1, 2 или 3, где каждый X=Ala; или
- n=1, 2 или 3, где каждый X=Gly; или
- n=2 или 3, где по меньшей мере один X=Ala или Gly ; или
- n=2 или 3, где все кроме одного X=Ala или Gly.
7. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина по любому из пп. 1-4, который имеет последовательность VTVSS(X)n на своем С-конце, где:
- X является Ala и n равен 1, 2 или 3; или
- X является Gly и n равен 2 или 3.
8. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина по любому из пп. 1-4, который имеет последовательность VTVSS(X)n на своем С-конце, где X является Ala и n равен 1
9. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина по любому из пп. 1-4, у которого была модифицирована С-концевая часть его последовательности путем введения аминокислотной замены в положении 11.
10. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина по любому из пп. 1-4, у которого была модифицирована С-концевая часть его последовательности путем введения остатка серина (S) или валина(V) в положение 11.
11. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина для использования в терапии, где одиночный вариабельный домен иммуноглобулина содержит остаток серина (S) или валина (V) в положении 11 и имеет последовательность VTVSS(X)n на своем С-конце, где n=1-10 и X представляет собой аминокислотный остаток, который независимо выбран из природных аминокислот.
12. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина по п. 11, где n=1, 2, 3, 4 или 5.
13. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина по любому из пп. 11 и 12, где каждый X независимо выбран из аланина, глицина, валина, лейцина или изолейцина.
14. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина по п.11, где
a) n=1, 2 или 3, где каждый X=Ala или Gly; или
b) n=1, 2 или 3, где каждый X=Ala; или
c) n=1, 2 или 3, где каждый X=Gly; или
d) n=2 или 3, где по меньшей мере один X=Ala или Gly; или
e) n=2 или 3, где все кроме одного X=Ala или Gly.
15. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина по п.14, где
a) X является Ala и n равен 1, 2 или 3; или
b) X является Gly и n равен 2 или 3.
16. Одиночный вариабельный домен по п. 15, где X является Ala и n равен 1.
17. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина по п.1 или 11, который имеет значительно сниженную склонность, как, например, по меньшей мере статистически значимо сниженную склонность, к порождению белковой интерференции, по сравнению с тем же ISV, но без модификаций.
18. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина по п.1 или 11 который имеет, в анализе, описанном в примере 3, значительно меньшую склонность к связыванию с поликлональным антителом, описанным в примере 2, по сравнению с тем же ISV, но без модификаций.
19. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина по п. или 11, который имеет, в анализе, описанном в примере 5, значительно меньшую склонность к связыванию с поликлональным антителом, описанным в примере 2, по сравнению с тем же ISV, но без модификаций.
20. Одиночный вариабельный домен иммуноглобулина по п.1 или 11, который является гуманизированным VHH или камелизированным VH, как например камелизированным VH человека.
21. Полипептид для использования в терапии, где полипептид содержит ISV согласно любому из пп. 1-8 на своем C-конце.
22. Полипептид согласно п. 21, который является бивалентной, мультивалентной, биспецифической, мультиспецифической, бипаратопной или мультипаратопной ISV конструкцией.
23. Основанное на ISV биологическое лекарственное средство для использования в терапии, содержащее один или более ISV и дополнительно содержащее один или несколько других терапевтических агентов и/или один или несколько иных агентов, которые влияют на фармакокинетические или фармакодинамические свойства биологического лекарственного средства, основанного на ISV, который содержит ISV согласно любому из пп. 1-8 на своем C-конце.
24. Основанное на ISV биологическое лекарственное средство по п. 23, где один или несколько других агентов влияют на период полужизни основанного на ISV биологического лекарственного средства.
25. Основанное на ISV биологическое лекарственное средство по п.23, где один или несколько других агентов увеличивают период полужизни основанного на ISV биологического лекарственного средства.
26. Основанное на ISV биологическое лекарственное средство по любому из пп. 23-25, где один или несколько других агентов содержат ISV, связывающий сывороточный альбумин.
27. Применение одиночного вариабельного домена иммуноглобулина по любому из пп. 1-8, в терапевтическом методе.
28. Применение полипептида согласно п. 21 или 22, в терапевтическом методе.
29. Применение основанного на ISV биологического лекарственного средства по любому из пп. 23-26, в терапевтическом методе.
30. Фармацевтическая композиция, которая содержит одиночный вариабельный домен иммуноглобулина по любому из пп. 1-8 или 15, полипептид по п. 21 или 22, или основанное на ISV биологическое лекарственное средство по любому из пп. 23-26, и по меньшей мере один подходящий носитель, разбавитель или эксципиент.
31. Основанное на ISV биологическое лекарственное средство, такое как белок или полипептид, для использования в терапии, где это биологическое лекарственное средство содержит по меньшей мере один одиночный вариабельный домен иммуноглобулина(ISV) на своем C-конце, где указанный ISV модифицирован посредством (i) введения одной или более аминокислотных замен в аминокислотные остатки в положениях 11, 13, 14, 15, 82, 82a, 82b, 83, 84, 107 и 108 или в С-концевой последовательности VTVSS (SEQ ID NO:33); и путем (ii) добавления к С-концевой последовательности 1-5 аминокислотных остатков, каждый из которых независимо выбран из любой природной аминокислоты, так что указанный ISV имеет значительно сниженную склонность к порождению белковой интерференции, по сравнению с тем же ISV, но без модификаций.