ТВЕРДЫЕ ПОРОШКОВЫЕ КОМПОЗИЦИИ, СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ, ПРЕПАРАТЫ И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
SOLID POWDER COMPOSITIONS, THEIR PRODUCTION METHOD, PREPARATIONS AND THEIR USE

Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к твердым порошковым композициям, включающим экстракт бергамота и фосфолипиды.
Изобретение также относится к способу получения указанных композиций в форме порошкообразного твердого вещества. Кроме того, изобретение относится к фармацевтическим, нутрицевтическим и косметическим препаратам, включающим указанные композиции, а также к применению указанных композиций и препаратов.
Предпосылки создания изобретения
Флавоноиды являются важным семейством полифенольных соединений, встречающихся в природе во фруктах и овощах.
Положительный эффект флавоноидов при профилактике и облегчении метаболического синдрома и лечении сопутствующих патологий, таких как сердечно-сосудистые заболевания, гиперлипидемия и диабет 2 типа, был подтвержден несколькими исследованиями (Galleano M. et al. “Flavonoids and metabolic syndrome”, Ann. NY Acad. Sci. (2012); 1259: 87-94).
Effect of Citrus Flavonoids, Naringin and Naringenin on Metabolic Syndrome and Their Mechanisms of Action
“Citrus flavonoids in lipid metabolism
“Effect of citrus flavonoids on lipid metabolism and glucose-regulating enzyme mRNA levels in type-2 diabetic mice”
Цитрусовые являются важным источником флавоноидов. Наиболее важные флавоноиды цитрусовых включают диосметин, диосмин, гесперидин, нарингин, неогесперидин, нобилетин, кверцетин, рутин и флавон тангеритин. Потенциальные положительные эффекты флавоноидов цитрусовых в лечении дисметаболических синдромов, в нормализации дислипидемий и в лечении диабета 2 типа документально подтверждены (Ashraful Alam M. et al. “”, Adv. Nutr. (2014), vol. 5: 404-417; Assini et al. ”, Curr. Opin. Lipidol. (2013), vol. 24(1): 34-40; Un Ju Jung et al., , Int. J. Biochem. Cell. Biol. (2006), vol. 38(7), 1134-145).
Hypolipemic and hypoglycaemic activity bergamot polyphenols: From animal models to human studies
Среди цитрусовых плодов бергамот представляет собой важный источник специфических флаванон-7-O-гликозидов, таких как нарингин, неогесперидин, брутелидин и мелитидин, которых нет ни в каких других цитрусовых плодах, которые продемонстрировали потенциальную пользу для здоровья в клинических испытаниях (Mollace V., et al. “”, Fitoterapia (2011), 3: 309-316).
Недавно Lombardo et al. (US 8741362 B2) разработали водно-спиртовой экстракт плодов бергамота со специфической полифенольной композицией, который оказался эффективным для снижения холестерина, уровней глюкозы в крови и лечения метаболического синдрома.
Что касается всех других флавоноидов, флаванон-7-O-гликозиды экстрактов плодов бергамота характеризуются плохой пероральной биодоступностью; следовательно, необходимы высокие пероральные дозы экстрактов плодов бергамота для получения значительной пользы для здоровья.
Поэтому все еще существует необходимость найти альтернативные производные экстракта плодов бергамота, обладающие улучшенной пероральной биодоступностью.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится к способу получения твердых порошковых композиций, включающему следующие стадии:
a) диспергирование водно-спиртового экстракта плодов бергамота в по меньшей мере одном полярном органическом растворителе и поддерживание при перемешивании до получения раствора или дисперсии; необязательно применение нагревания; при этом экстракт содержит флавоноиды неоэриоцитрин, нарингин и неогесперидин;
b) по меньшей мере одного фосфолипида к раствору/дисперсии экстракта плодов бергамота и поддержание смеси при перемешивании; где массовое отношение между по меньшей мере одним фосфолипидом и флавоноидами экстракта варьируется от 6 до 30; необязательно применение нагревания;
c) затем удаление органического растворителя с получением твердой порошковой композиции.
Citrus aurantium
bergamia
Изобретение также относится к твердым порошковым композициям, включающим водно-спиртовой экстракт плодов бергамота ( var. ) и по меньшей мере один фосфолипид, получаемым способом по изобретению, а также к фармацевтическим, нутрицевтическим и косметическим препаратам, включающим указанные композиции.
Порошковые композиции по изобретению и препараты, содержащие указанные композиции, полезны для профилактики и/или лечения метаболических синдромов, дислипидемий и диабета 2 типа.
Подробное описание изобретения
Citrus aurantium
bergamia
Настоящее изобретение относится к твердым порошковым композициям, включающим водно-спиртовой экстракт плодов бергамота ( var. ) и по меньшей мере один фосфолипид, которые можно получить способом по изобретению.
Водно-спиртовой экстракт плодов бергамота характеризуется присутствием трех основных флаванон-7-O-гликозидов: неоэриоцитрина, нарингина и неогесперидина, которые являются основными компонентами, ответственными за биологическую активность экстракта.
Неожиданно было обнаружено, что композиции по настоящему изобретению характеризуются улучшенной пероральной биодоступностью активных ингредиентов (флавоноидов) экстракта плодов бергамота и, в частности, флаванон-7-O-гликозидов, в частности нарингина и неогесперидина, которые были проанализированы в образцах плазмы фармакокинетического исследования на крысах.
Фосфолипид может быть выбран из группы, включающей лецитины из сои, подсолнечника или яйца, фосфатидилхолина, фосфатидилсерина, фосфатидилэтаноламина, где ацильные группы, которые являются одинаковыми или отличными друг от друга, в основном происходят из пальмитиновой, стеариновой, олеиновой, линолевой и линоленовой кислот; или их комбинации. Предпочтительно фосфолипид представляет собой лецитин.
Массовое отношение по меньшей мере одного фосфолипида к флаванон-7-O-гликозидам экстракта плодов бергамота (неоэриоцитрин, нарингин и неогесперидин) находится в диапазоне от 6 до 30, предпочтительно от 6 до 20, более предпочтительно от 6 до 12.
Благодаря этому отношению достигается улучшенная пероральная биодоступность активных ингредиентов (флавоноидов) экстракта плодов бергамота.
Твердые порошковые композиции также могут включать дополнительное поверхностно-активное вещество, отличное от лецитина, со значением ГЛБ, равным или больше 12. Это дополнительное поверхностно-активное вещество усиливает солюбилизацию экстракта плодов бергамота в органическом растворителе в процессе изготовления и максимизирует взаимодействие экстракта с фосфолипидами. Кроме того, дополнительное поверхностно-активное вещество улучшает смачиваемость и быстрое диспергирование твердой порошковой дисперсии в жидкостях кишечника и способствует более быстрой и более высокой абсорбции, следовательно, более высокой биодоступности активного ингредиента экстракта плодов бергамота.
Дополнительное поверхностно-активное вещество может быть выбрано из группы, включающей сложные эфиры сахарозы, полисорбаты, полиоксиэтиленовые производные касторового масла, полиоксиэтиленстеараты, D-α-токоферил-полиэтиленгликоль сукцинат или их комбинации. Сложные эфиры сахарозы и D-α-токоферил-полиэтиленгликоль сукцинат являются предпочтительными.
Дополнительные ингредиенты также могут быть добавлены к твердой порошковой дисперсии с целью улучшения ее физических и технологических характеристик, обеспечивая более легкое включение в традиционные лекарственные формы, такие как таблетки и капсулы.
Эти дополнительные ингредиенты могут включать растворимые и нерастворимые наполнители, такие как порошок целлюлозы, микрокристаллическая целлюлоза, карбонат кальция, фосфат кальция, маннит, мальтодекстрины, сорбит, ксилит, фруктоза, изомальт, инулин; связующие, такие как метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, гидроксипропилцеллюлоза, природные смолы; глиданты и смазывающие вещества, такие как диоксид кремния, тальк, стеариновая кислота, стеарат магния.
Настоящее изобретение также относится к способу изготовления для получения твердых порошковых композиций, включающих водно-спиртовой экстракт плодов бергамота и по меньшей мере один фосфолипид.
Способ изготовления для получения твердой порошковой композиции в соответствии с настоящим изобретением включает следующие стадии:
а) водно-спиртовой экстракт плодов бергамота диспергируют по меньшей мере в одном подходящем органическом растворителе и поддерживают при перемешивании до получения раствора или дисперсии; необязательно применяют нагревание, если требуется;
b) по меньшей мере один фосфолипид затем добавляют к раствору/дисперсии экстракта плодов бергамота и смесь поддерживают при перемешивании; необязательно применяют нагревание;
c) органический растворитель затем удаляют c получением композиции в форме порошкообразного твердого вещества.
Подходящий органический растворитель представляет собой полярный органический растворитель, который приводит к полной или по меньшей мере существенной солюбилизации экстракта, такой как полярный протонный растворитель или полярный апротонный растворитель.
1
8
1
8
1
8
Предпочтительно полярный протонный растворитель представляет собой линейный или разветвленный С-С алкиловый спирт, а полярный апротонный растворитель представляет собой линейный или разветвленный С-С алкиловый эфир или С-С диалкилкетон.
Полная или частичная солюбилизация фосфолипидов в выбранном органическом растворителе также является желательной.
Органический растворитель может быть выбран из группы, включающей этиловый спирт, этилацетат, ацетон, изобутиловый спирт, изопропиловый спирт и их комбинации. Этиловый спирт и этилацетат являются предпочтительными.
Нагревание необязательно применяют для облегчения растворения, не вызывая какого-либо разложения активных ингредиентов.
После стадии b) можно добавить дополнительное поверхностно-активное вещество и/или дополнительные ингредиенты к полученному раствору (или дисперсии), который поддерживают при перемешивании в течение подходящего периода времени для облегчения взаимодействия различных ингредиентов.
Растворитель можно удалить в вакууме. Также для удаления органического растворителя можно использовать альтернативный способ сушки, такой как распылительная сушка и сублимационная сушка.
Полученную порошковую композицию обычно затем калибруют и в конечном итоге измельчают для получения желаемого распределения частиц по размерам.
Настоящее изобретение также относится к фармацевтическим, нутрицевтическим и косметическим препаратам, включающим композицию по изобретению и по меньшей мере один физиологически приемлемый эксципиент и/или носитель.
Предпочтительно препараты предназначены для перорального или местного применения.
Физиологически приемлемыми эксципиентами и/или носителями могут быть, например, разрыхлитель, смазывающее вещество, связующее, покрывающий агент, краситель, усилитель абсорбции, солюбилизирующий агент, стабилизатор, отдушка, подсластитель, антисептик, консервант, антиоксидант и т.п.
Примерами лекарственных форм композиций по изобретению могут быть, например, таблетки, жевательные таблетки, твердые желатиновые капсулы, порошок для восстановления, экстемпоральные или готовые к применению суспензии.
Твердые порошковые композиции по изобретению и содержащие их препараты могут использоваться отдельно или в комбинации с другими растительными экстрактами для профилактики и/или лечения дисметаболических синдромов, дислипидемий и диабета 2 типа.
Улучшенная биодоступность активных ингредиентов (флавоноидов) водно-спиртового экстракта плодов бергамота позволяет значительно снизить суточную дозировку и улучшить фармакологическое действие экстракта плодов бергамота.
Твердую порошковую композицию испытывали в фармакокинетическом исследовании in vivo на крысах по сравнению с водно-спиртовым экстрактом плодов бергамота. Результаты исследования, представленные в примерах, ясно показывают повышение биодоступности активных ингредиентов экстракта плодов бергамота при введении в виде композиций по изобретению.
Также было осуществлено предварительное клиническое исследование на добровольцах для оценки такого эффекта композиции по изобретению, как снижение уровня холестерина, по сравнению с водно-спиртовым экстрактом плодов бергамота.
Следующие примеры дополнительно описывают изобретение.
Примеры
Пример 1 -
Получение композиции водно-спиртового экстракта плодов бергамота в твердой порошкообразной форме на основе лецитина.
350 г водно-спиртового экстракта плодов бергамота, 420 г подсолнечного лецитина и 70 г мальтодекстрина суспендируют в 8500 мл этилового спирта в реакторе. Суспензию нагревают при 70°C в течение 2 часов при перемешивании.
Растворитель затем удаляют в вакууме (около 200 мбар) при 70°C до получения мягкой массы.
Сушку завершают в печи в вакууме при 50°C в течение около 12 часов до получения сухой массы.
Сухую массу калибруют через 2 мм сито и смешивают с 2% диоксида кремния с получением свободнотекучего порошка.
Пример 2 -
Получение композиции водно-спиртового экстракта плодов бергамота в твердой порошкообразной форме на основе лецитина, содержащей дополнительное поверхностно-активное вещество.
500 г водно-спиртового экстракта плодов бергамота, 700 г подсолнечного лецитина и 50 г монопальмитата сахарозы солюбилизируют в около 10 л этилацетата в реакторе.
100 г микрокристаллической целлюлозы добавляют к полученному раствору и суспензию нагревают при 70°C в течение 2 часов при перемешивании.
Растворитель затем удаляют в вакууме (около 200 мбар) при 70°C до получения мягкой массы.
Сушку завершают в печи в вакууме при 50°C в течение около 12 часов до получения сухой массы.
Сухую массу калибруют через 2 мм сито и смешивают с 2% диоксида кремния и 1% талька с получением свободнотекучего порошка.
Пример 3 -
Фармакокинетическое исследование на крысах
Концентрацию в плазме нарингина и неогесперидина определяли у крыс после перорального введения однократной дозы композиции, полученной в примере 1, и сравнивали с концентрацией в плазме, получаемой при введении водно-спиртового экстракта плодов бергамота. Для фармакокинетических экспериментов использовали самцов крыс Sprague-Dawley с массой тела около 300 г. Разовую дозу 500 мг/кг водно-спиртового экстракта плодов бергамота и разовую дозу 500 мг/кг композиции, полученной в примере 1, что соответствует примерно 200 мг/кг водно-спиртового экстракта плодов бергамота, вводили в виде водной суспензии через желудочный зонд. Образцы крови собирали через 1 и 2 часа после введения. Плазму получали из образцов крови центрифугированием при 2000 об/мин в течение 10 минут при 4°С в присутствии EDTA. После подходящей процедуры экстракции образцы анализировали при помощи ВЭЖХ, снабженной флуоресцентным детектором, для определения концентрации нарингина и неогесперидина.
Результаты анализов сведены в следующую таблицу 1:
Таблица 1
<b>Нарингин (ч./млн.)</b>
<b>Неогесперидин (ч./млн.)</b>
Водно-спиртовой экстракт плодов бергамота
Композиция Примера 1
Водно-спиртовой экстракт плодов бергамота
Композиция Примера 1
Крыса 1(1 час)
0,2029
1,4409
0,2728
1,5621
Крыса 2(1 час)
0,2286
1,545
0,2751
1,1917
Крыса 3(1 час)
0,2186
1,7878
0,3201
1,543
Крыса 1(2 часа)
0,1089
1,9046
0,1648
3,5433
Крыса 2(2 часа)
0,1029
2,334
0,1447
3,0571
Крыса 3(2 часа)
0,1067
2,0516
0,1417
3,2322
Пример 4 -
Препараты, содержащие композицию, полученную в примере 1 (таблетки)
Композиция, полученная в Примере 1
500,0 мг
Микрокристаллическая целлюлоза
150,0 мг
Дикальцийфосфат, безводный
104,0 мг
Натрий кроскармелоза
30,0 мг
Диоксид кремния
8,0 мг
Стеарат магния
8,0 мг
1,0 кг композиции, полученной в примере 1, 0,3 кг микрокристаллической целлюлозы (прямого прессования), 0,208 кг безводного дикальцийфосфата (прямого прессования) и 0,06 кг натрий кроскармеллозы смешивали в V-смесителе в течение 10 минут. К порошковой смеси добавляли 16 г диоксида кремния и 16 г стеарата магния и перемешивали еще в течение 2 минут. Полученную смесь прессовали в таблетировочной машине с одним пуансоном, снабженной круглым вогнутым пуансоном диаметром 11 мм.
Пример 5 -
Препараты, содержащие композицию, полученную в примере 2 (твердые желатиновые капсулы размера 0)
Композиция, полученная в примере 2
350,0 мг
Диоксид кремния
5,0 мг
Стеарат магния
5,0 мг
2,0 кг композиции, полученной в примере 2, смешивали с 28,5 г диоксида кремния и 28,5 г стеарата магния в V-смесителе в течение 2 минут. Этой смесью заполняли твердые желатиновые капсулы размера 0.
Пример 6 -
Клиническое исследование
Также осуществляли пилотное клиническое исследование на добровольцах для оценки эффекта композиции по изобретению на снижение уровня холестерина.
Десять (10) пациентов принимали 2 твердые желатиновые капсулы по 500 мг, одну утром и одну вечером (всего 1000 мг ежедневно) в течение 30 дней подряд. Основной целью исследования была оценка клинической активности, направленной на снижение сердечно-сосудистого риска у пациентов с дислипидемией, ассоциированной или нет с гипергликемией, путем измерения модуляции общего холестерина (tChol), липопротеинов низкой плотности (LDL), триглицеридов (TG), липопротеинов высокой плотности (HDL) и глюкозы в крови до и после 30-дневного лечения. Также оценивали безопасность.
Критерии включения: подписанное информированное согласие; возраст от 30 до 90 лет; диагноз сахарного диабета II типа; уровень глюкозы в крови натощак ≥110 мг/дл; изолированная гиперхолестеринемия (холестерин, связанный с липопротеином низкой плотности cLDL ≥130 мг/дл), с или без гипертриглицеридемии (>175 мг/дл); средний риск сердечно-сосудистых заболеваний, измеренный в соответствии с “European Guidelines on Cardiovascular disease prevention on clinical practice” (2012). Все сопутствующие лечения должны начинаться по меньшей мере за 3 месяца до начала исследования и поддерживаться в постоянном режиме в течение всего периода исследования.
Критерии исключения: пациенты с явным заболеванием печени, тяжелыми желудочно-кишечными расстройствами, хронической почечной недостаточностью, гиперкальциемией, миопатией, неконтролируемым диабетом, ишемической болезнью миокарда, присутствием сердечной недостаточности NYHA класса III и IV, злоупотреблением алкоголем, психиатрическими расстройствами и глубокой депрессией, ВИЧ или серьезными инфекциями или новообразованиями, терапия статинами, стабилизированная к 4 месяцам.
Пациентов посещали каждые 7 дней в течение исследования и контролировали соблюдение ими режима лечения. Измеряли уровни в сыворотке аспартатаминотрансферазы, аланинаминотрансферазы, креатина, чтобы контролировать возможные побочные эффекты,
Введение 1000 мг ежедневно в течение 30 дней подряд приводило к сильному снижению общего холестерина, LDL, TG, уровня глюкозы в крови натощак и значительному повышению HDL у большинства пациентов. Результаты представлены в таблице 2.
Начальные средние значения 277 мг/дл tChol, 184 мг/дл LDL и 255 мг/дл TG снижались до 195, 113 и 164 мг/дл, соответственно, после лечения.
Кроме того, наблюдалось также снижение уровня глюкозы в крови натощак.
Таблица 2
мг/дл
tChol
Тригл.
LDL
HDL
Gly
до
после
до
после
до
после
до
после
до
после
Среднее значение
277
195
255
164
184
113
41
50
111
101
SD
15
11
24
11
15
10
2
15
8
3