АГЕНТЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ЭКСПРЕССИРУЮЩИХ КЛАУДИН РАКОВЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

1. Связывающий агент, содержащий по меньшей мере два связывающих домена, где первый связывающий домен связывается с клаудином (CLDN), а второй связывающий домен связывается с CD3, где связывающий агент содержит вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина (VH) со специфичностью в отношении антигена клаудина (VH(CLDN)), вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина (VL) со специфичностью в отношении антигена клаудина (VL(CLDN)), вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина (VH) со специфичностью в отношении CD3 (VH(CD3)) и вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина (VL) со специфичностью в отношении CD3 (VL(CD3)), где
(i) CLDN представляет собой CLDN6, и указанный VH(CLDN) содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных SEQ ID NO: 20, 22, 24 и 26, или ее фрагмент, или вариант указанной аминокислотной последовательности, или фрагмент, и VL(CLDN) содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных SEQ ID NO: 21, 23, 25 и 27-29 или ее фрагмент, или вариант указанной аминокислотной последовательности, или фрагмент, и
(ii) VH(CD3) содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных SEQ ID NO: 30, 32, 34 и 36, или ее фрагмент, или вариант указанной аминокислотной последовательности, или фрагмент, и VL(CD3) содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из аминокислотных последовательностей, представленных SEQ ID NO: 31, 33, 35 и 37, или ее фрагмент, или вариант указанной аминокислотной последовательности, или фрагмент.
2. Связывающий агент по п. 1, где связывающий домен представляет собой биспецифическую молекулу.
3. Связывающий агент по п. 2, где биспецифическая молекула представляет собой биспецифическое антитело.
4. Связывающий агент по п. 3, где биспецифическое антитело представляет собой биспецифическое одноцепочечное антитело.
5. Связывающий агент по любому из пп. 1-4, где связывание указанного связывающего агента с CD3 на Т-клетках приводит к пролиферации и/или активации указанных Т-клеток, при этом указанные активированные Т-клетки предпочтительно высвобождают цитотоксические факторы, например, перфорины и гранзимы, и инициируют цитолизис и апоптоз раковых клеток.
6. Связывающий агент по любому из пп. 1-5, где связывающий агент находится в формате полноразмерного антитела, фрагмента антитела, диатела, которое содержит вариабельный домен тяжелой цепи, соединенный с вариабельным доменом легкой цепи на одной и той же полипептидной цепи таким образом, что два домена не образуют пару.
7. Связывающий агент по п. 6, где диатело содержит две полипептидные цепи, при этом один полипептид содержит VH(CLDN) и VL(CD3), и другая полипептидная цепь содержит VH(CD3) и VL(CLDN).
8. Связывающий агент по любому из пп. 1-6, где связывающий агент находится в формате биспецифического одноцепочечного антитела, которое состоит из двух молекул scFv, соединенных посредством линкерного пептида.
9. Связывающий агент по п. 8, где вариабельные области тяжелой цепи (VH) и соответствующие вариабельные области легкой цепи (VL) расположены в направлении от N-конца до С-конца в порядке VH(CLDN)-VL(CLDN)-VH(CD3)-VL(CD3), VH(CD3)-VL(CD3)-VH(CLDN)-VL(CLDN) или VH(CD3)-VL(CD3)-VL(CLDN)-VH(CLDN).
3
2
10. Связывающий агент по п. 9, где указанные вариабельные области тяжелой цепи (VH) и соответствующие вариабельные области легкой цепи (VL) соединены посредством длинного пептидного линкера, предпочтительно пептидного линкера, содержащего аминокислотную последовательность (GGGGS) или VE(GGGGS)GGVD.
11. Связывающий агент по п. 9 или 10, где указанные две единицы VH-VL или VL-VH scFv соединены посредством короткого пептидного линкера, предпочтительно пептидного линкера, содержащего аминокислотную последовательность SGGGGS или GGGGS.
12. Связывающий агент по любому из пп. 1-11, где указанный связывающий агент содержит аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 42, 43, 44 и 45, или ее фрагмент или вариант.
13. Связывающий агент по любому из пп. 1-12, где связывающий агент содержит N-концевой сигнал секреции и/или С-концевую эпитопную гистидиновую метку, предпочтительно эпитопную метку, содержащую шесть гистидиновых остатков.
14. Рекомбинантная нуклеиновая кислота, которая кодирует связывающий агент по любому из пп. 1-13.
15. Рекомбинантная нуклеиновая кислота по п. 14, которая находится в форме вектора или в форме РНК.
16. Клетка-хозяин, содержащая рекомбинантную нуклеиновую кислоту по п. 14 или 15.
17. Применение связывающего агента по любому из пп. 1-13, рекомбинантной нуклеиновой кислоты по п. 14 или 15 или клетки-хозяина по п. 16 для изготовления композиции для лечения или предупреждения рака, характеризующегося раковыми клетками, экспрессирующими CLDN6.
18. Фармацевтическая композиция, содержащая связывающий агент по любому из пп. 1-13, рекомбинантную нуклеиновую кислоту по п. 14 или 15, или клетку-хозяина по п. 16.
19. Способ лечения или предупреждения ракового заболевания, включающий введение пациенту фармацевтической композиции по п. 18.
20. Применение по п. 17 или способ по п. 19, в которых указанный рак выбран из группы, состоящей из рака мочевого пузыря; рака яичника, в частности, аденокарциномы яичника и теракарциномы яичника; рака легкого, включая мелкоклеточный рак легкого (SCLC) и немелкоклеточный рак легкого (NSCLC), в частности, плоскоклеточный рак легкого и аденокарциному; рака желудка; рака молочной железы; рака печени; рака поджелудочной железы; рака кожи, в частности, базальноклеточной карциномы и плоскоклеточной карциномы; злокачественной меланомы; рака головы и шеи, в частности, злокачественной плеоморфной аденомы; саркомы, в частности, синовиальной саркомы и карциносаркомы; рака желчного протока; рака мочевого пузыря, в частности переходно-клеточной карциномы и папиллярного рака; рака почки, в частности, плоскоклеточного рака, включая светлоклеточный рак почки и папиллярную карциному почки; рака толстой кишки; рака тонкой кишки, включая рак подвздошной кишки, в частности аденокарциномы тонкой кишки и аденокарциномы подвздошной кишки; эмбриональной карциномы яичка; плацентарной хориокарциномы; рака шейки матки; рака яичка, в частности, семиномы яичка, тератомы яичка и эмбрионального рака яичка; рака матки; герминомы, такой как тератокарцинома или эмбриональная карцинома, в частности, эмбрионально-клеточной опухоли яичка и их метастатических форм.