СПОСОБЫ IN VITRO ДЛЯ СОЗДАНИЯ И ПОДДЕРЖАНИЯ ЛИНИЙ РАСТИТЕЛЬНЫХ КЛЕТОК В ВИДЕ ОТДЕЛЬНЫХ КЛЕТОК В СУСПЕНЗИИ С ИНТАКТНЫМИ КЛЕТОЧНЫМИ СТЕНКАМИ И ИХ ТРАНСФОРМАЦИИ

1. Изолированная отдельная растительная клетка, содержащая интактную клеточную стенку.
2. Способ получения клетки по п.1, в котором указанный способ включает в себя культивирование растительной клетки, содержащей интактную клеточную стенку, в среде, содержащей глицерин и разделяющее средство, выбранное из группы, состоящей из фермента, расщепляющего пектин, и соединения, деполимеризующего тубулин.
3. Способ по п.2, в котором указанная среда является жидкой средой, и указанные клетки находятся в суспензии.
4. Способ по п.2, в котором указанное разделяющее средство представляет собой соединение, деполимеризующее тубулин.
5. Способ по п.4, в котором указанное соединение, деполимеризующее тубулин, выбрано из группы, состоящей из колхицина и динитроанилина.
6. Способ по п.4, в котором указанное соединение, деполимеризующее тубулин соответствует следующей формуле
где
2
2
2
2
2
2
2
3
2
2
2
3
2
3
2
2
2
2
2
2
2
2
3
2
2
2
3
2
X = COR, CHCOR, CHCHCOR, (CH)COR, OCHCOR, OCH(CH)COR, OC(CH)COR, CHOCHCOR, CHCH(COCHCH)COR или OCH(COCHCH)COR;
2
Y = CN, Cl, Br, F или NO;
1
Ar = незамещенный фенил, незамещенный пиридин, 1-3-замещенный фенил, 1-3-замещенный пиридин или замещенный галогеном или CN;
2
Ar = незамещенный фенил, незамещенный пиридин, 1-3-замещенный фенил, 1-3-замещенный пиридин или замещенный галогеном или CN; и
R = H или 1-5-углеродный неразветвленный или разветвленный сложный эфир.
7. Способ по п.4, в котором указанное соединение, деполимеризующее тубулин, представляет собой этиловый эфир 4-хлор-1,5-дифенил-1H-пиразол-3-илокси)уксусной кислоты.
8. Способ по п.4, в котором указанное соединение, деполимеризующее тубулин, представляет собой
9. Способ по п.2, в котором указанным разделяющим средством является фермент, выбранный из группы, состоящей из пектиназы и пектолиазы.
10. Клетка по п.1, где указанная изолированная отдельная клетка выбрана из группы, состоящей из клетки водорослей, клетки двудольного растения, клетки однодольного растения, сосудистой клеткой или несосудистой клеткой низшего растения.
11. Способ трансформации клетки по п.1, при этом указанный способ включает в себя получение изолированной клетки согласно способу по п.2, трансформацию указанной клетки гетерологичным полинуклеотидом и отбор трансформированной клетки.
12. Способ по п. 11, в котором на указанной стадии селекции используют селекцию без маркеров.
13. Культура клеток, выращенных из клетки по п.1, при этом указанные клетки являются равномерно экспрессирующими.
14. Клетка по п.1, где указанная клетка является трансгенной.
15. Клетка по п.1, где указанная клетка является транспластомной.
16. Способ по п.2, в котором указанный способ является высокопроизводительным способом.
17. Способ по п.11, в котором указанную стадию трансформации осуществляют, применяя способ, выбранный из группы, состоящей из способов, основанных на использовании полиэтиленгликоля, электропорации, бомбардировок и наночастиц.
18. Клетка по п.1, где указанная изолированная отдельная клетка выбрана из группы, состоящей из клетки табака, клетки моркови, клетки кукурузы и клетки дурмана.
19. Способ по п.2, в котором указанная среда выбрана из группы, состоящей из гелевой и полутвердой среды.