Влияние полиморфизма генов SLCO1B1 иmdr1 на фармакокинетику и фармакодинамику аторвастатина у пациентов с первичной гиперхолестеринемией. Результаты пилотного фармакогенетического исследования

ВЛИЯНИЕ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНОВ SLCO1B1 И MDR1 НА ФАРМАКОКИНЕТИКУ И ФАРМАКОДИНАМИКУ АТОРВАСТАТИНА У ПАЦИЕНТОВ С ПЕРВИЧНОЙ ГИПЕРХОЛЕСТЕРИНЕМИЕЙ. РЕЗУЛЬТАТЫ ПИЛОТНОГО ФАРМАКОГЕНЕТИЧЕСКОГО ИССЛЕДОВАНИЯ

А.В. Семенов, Д.А. Сычев, В.Г. Кукес

Кафедра клинической фармакологии и пропедевтики внутренних болезней,

Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова

Влияние полиморфизма генов SLCO1B1 и MDR1 на фармакокинетику и фармакодинамику аторвастатина у пациентов с первичной гиперхолестеринемией. Результаты пилотного фармакогенетического исследования

А.В. Семенов, Д.А. Сычев, В.Г Кукес

Кафедра клинической фармакологии и пропедевтики внутренних болезней, Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова

Цель. Оценить влияние полиморфизма генов SLCO1 В1 и MDR1 на фармакокинетику и фармакодинамику аторвастатина у пациентов с первичной гиперхолестеринемией.

Материал и методы. В исследовании принял участие 21 пациент (9 мужчин и 14женщин; средний возраст 57 лет; все - европеоидной расы) с первичной гиперхолестеринемией (по критериям NCEP) с концентрацией общего холестерина крови более 5,9 ммоль/л после 4-недельной гиполипидемической диеты. Для оценки фармакокинетики в первый день лечения пациентам назначался аторвастатин в дозе 80 мг с забором проб крови до (0) и после приема препарата. Проведен скрининг на наличие полиморфизма генов MDR1 и SLCO1 В1 с помощью полимеразной цепной реакции.

Результаты. Выявлена меньшая эффективность лечения у носителей генотипа SLCO1 В1 .с521СС по сравнению с другими генотипами, тогда как полиморфизм гена MDR1 существенно не влиял на эффективность лечения. Не было выявлено связи между генотипом и частотой развития нежелательных лекарственных реакций.

Заключение. Носительство полиморфных аллелей генов, кодирующих белки-транспортеры лекарственных средств ( в первую очередь ОАТР-С) может существенно изменять фармакокинетические параметры (АиС) аторвастатина и индивидуальный ответ на лечение. Ключевые слова: полиморфизм генов белков-транспортеров, аторвастатин, фармакогенетика, гиперхолестеринемия.

РФК 2008;2:47-50

Effect of genes SLCO1B1 and MDR1 polymorphism on atorvastatin pharmacokinetics and pharmacodynamics in patients with primary hypercholesterolemia: results of pilot pharmacogenetics study

A.V. Semenov, D.A. Sichev, V.G. Kukes

Department of clinical pharmacology and internal medicine propaedeutics, Moscow Medical Academy named after I.M.Sechenov

Aim. To study effects of genes SLCO1 B1 and MDR1 polymorphism on atorvastatin pharmacokinetics and pharmacodynamics in patients with primary hypercholesterolemia.

Material and methods. 21 patients (9 men and 1 4 women; 57 y.o. in average, all were Caucasians) with primary hypercholesterolemia (NCEP criteria) were involved in the study. All patients had total cholesterol plasma level >5.9 mmol/l after 4-week course of lipid-lowering diet. Atorvastatin (80 mg once daily in the first treatment day) was given to patients for pharmacokinetics estimation. Blood samples for analysis were taken before and after drug administration. Genes SLCO1 B1 and MDR1 polymorphism screening was made by polymerase chain reaction.

Results. Treatment efficacy in patients with SLCO1 B1.c521CC genotype was less than this in patients with other genotypes. Genes MDR1 polymorphism have no influence on treatment efficacy. There is no correlation between genotype and drug adverse effects rate.

Conclusion. Polymorphism of genes responsible for protein-transporters (first of all OATP-C) can significantly determine drug pharmacokinetic and individual response on atorvastatin therapy.

Keywords: protein-transporter genes polymorphism, atorvastatin, pharmacogenetics, hypercholesterolemia.

Rational Pharmacother. Card. 2008;2:47-50

Аторвастатин является одним из лучших и наиболее широко применяемых гиполипидемических лекарственных средств (ЛС) с положительным влиянием на прогноз у больных гиперхолестеринемией, ишемической болезнью сердца (ИБС) и цереброваскулярной болезнью [1]. Полученные в последние годы данные позволяют говорить о положительном влиянии аторвастатина и на прогноз у больных острым коронарным синдромом (ОКС) при назначении его после стабилизации состояния пациента [2, 3] на течение хронической сердечной недостаточности (ХСН) [4] и пароксизмальной формы мерцательной аритмии (фибрилляции пред-

сердий) [5]. Также выявлен протективный эффект аторвастатина у больных с хроническими заболеваниями почек и хронической обструктивной болезнью легких (ХОБЛ). Терапия аторвастатином хорошо переносится: побочные эффекты (диспепсия, повышение активности трансаминаз, миалгия) наблюдаются реже, чем при приеме других статинов. Отмена препарата, связанная с побочными эффектами, была необходима лишь у 3% пациентов, участвовавших в различных исследованиях аторвастатина (среди получавших плацебо - у 1%, другие статины - у 4%) [6]. Однако не у всех больных применение аторвастатина оказывается одинаково эф-

фективным и безопасным. Индивидуальные различия в фармакологическом ответе могут быть обусловлены различными причинами (пол, возраст, совместно применяемые ЛС, сопутствующие заболевания). По мнению большинства авторов, до 50% всех «неблагоприятных» ответов на ЛС (неэффективность или развитие нежелательных лекарственных реакций) связано с генетическими факторами [7]. Фармакокинетика и фармакодинамика аторвастатина зависят от различных белков (ферментов, молекул-переносчиков, рецепторов и т.д.). Различные мутации генов, кодирующих эти белки, могут приводить к изменению фармакокинетики и/или фармакодинамики аторвастатина, что сказывается на фармакологическом ответе. Такие мутации, передаваясь из поколения в поколение, могут распространяться в популяции. Существование различных аллельных вариантов одного и того же гена в популяции носит название генетического полиморфизма.

Гены, полиморфизмы которых могут влиять на фармакологический ответ пациента на аторвастатин, могут быть разделены на три группы: гены белков, ответственных за фармакокинетику аторвастатина; гены белков, ответственных за механизм действия аторвастатина; гены белков, участвующих в патогенезе атеросклероза.

Аторвастатин попадает в гепатоциты из крови портальной вены с помощью транспортера органических анионов ОАТР-С (ОАТР- 1В1), где метаболизируется под действием цитохромов CYP3A4 и СУР3А5 с образованием лактонового метаболита и п-гидроксиаторва-статина. Носительство аллельного варианта A290G (замена аденилового нуклеотида на гуаниловый) гена СУР3А4 приводит к снижению экспрессии данного фермента, следствием чего является повышение концентрации активного аторвастатина в плазме [8].

Функция гликопротеина Р заключается в выведении аторвастатина из энтероцитов в просвет кишечника и

Рисунок 1. Участие гликопротеина-P и ОАТР-С в фармакокинетике аторвастатина

из гепатоцитов в желчь (Рис. 1). Среди полиморфизмов гена MDR1, кодирующего гликопротеин-Р, наибольшее клиническое значение имеет аллельный вариант С3435Т (замена цитидилового нуклеотида нати-мидиловый). У носителей этого аллельного варианта (как гетерозигот, так и гомозигот) наблюдается снижение экспрессии гена MDR1, что может приводить к снижению количества гликопротеина-Р в печени, кишечнике, почках и т.д. Данные некоторых исследований позволяют предположить, что полиморфизм гена MDR1 существенно не влияет на эффективность аторвастатина [9, 10], хотя этот вопрос остается открытым.

Иначе дело обстоит с полиморфизмами гена SLCO1B1. У носителей аллельного варианта SLCO1B1 *15 (.с521Т) наблюдается снижение активности ОАТР-С, а следовательно - угнетение поступления аторвастатина из крови портальной вены в гепатоциты. При этом отмечается снижение содержания аторвастатина в ге-патоцитах и повышение его концентрации в плазме. Следовательно, у этой категории пациентов можно ожидать снижения гиполипидемического действия [1 1].

Hermann и соавт. [1 2] показали, что у пациентов с аторвастатин-индуцированной миопатией концентрация аторвастатина в плазме не изменяется по сравнению с контролем, однако концентрация его метаболитов (аторвастатин-лактона и п-гидроксиаторвастатина) в несколько раз выше. При этом между группами не было отмечено различий в частоте носительства полиморфизмов генов SLCO1B1, MDR1 и CYP3A5. Отсюда можно предположить, что токсичные метаболиты образуются по другому пути [возможно, с участием CYP2C8, белка множественной лекарственной резистентности II (MRP2) или УДФ-глюкоронозилтрансфе-разы (UGT 1A1 и 1А2], а активность ферментов SLCO1B1 и MDR1 в большей степени отвечает за клиническую эффективность аторвастатина [1 2].

Исследования, в которых бы изучалась связь между полиморфизмами генов ферментов биотрансформации, белков-транспортеров и числом сердечно-со-судистыхсобытий на фонетерапии аторвастатином, до настоящего времени отсутствуют

Цель исследования - выявить влияние полиморфизмов генов SLCO1B1 и MDR1 на фармакокинетику и фармакодинамику аторвастатина у пациентов с первичной гиперхолестеринемией.

Материал и методы

В исследовании принял участие 21 пациент (9 мужчин и 14 женщин, средний возраст 57 лет; все - европеоидной расы) с первичной гиперхолестеринемией (по критериям NCEP) и концентрацией общего холестерина более 5,9 ммоль/л после 4-недельной ги-полипидемической диеты. В исследование не включались пациенты с гипертриглицеридемией, гипоти-

Кровь

Метаболиты

Энтероцит

Гепатоцит

Обозначения: А-аторвастатин; P-gp- гликопротеин-Р; ОАТР-С - транспортер органических анионов С; CYP3A4, 3A5 - изоферменты цитохрома Р450 3А4 и 3А5.

A

реозом и сахарным диабетом. За неделю до начала приема аторвастатина (Тулип, LEK, Словения) оценивался исходный уровень общего холестерина, триглицеридов, холестерина липопротеидов низкой и высокой плотности, активность аланиновой и аспарагиновой трансаминаз (АСТ и АЛТ). Повторная оценка указанных показателей проводилась после 3-х мес приема аторвастатина в дозе 10 мг в сутки. Для оценки фармакокинетики в первый день лечения пациентам назначался аторвастатин в дозе 80 мг с забором проб крови до приема препарата (0) и через 0,3, 0,6, 1, 1,5,2, 3, 4, 6, 8, 12, 16, 25, 37 и 49 ч после его приема.

Плазму отделяли с помощью центрифугирования. Методом жидкостной хроматографии исследовали концентрацию аторвастатина в плазме. Площадь под кривой концентрация-время (AUC) вычисляли трапецеидальным методом.

Для генетического анализа из форменных элементов венозной крови была получена ДНК и с помощью полимеразной цепной реакции проведен скрининг на наличие полиморфизмов генов MDR1 и SLCO1 B1.

Статистическую значимость различий показателей до и на фоне терапии оценивали с помощью парного критерия Вилкоксона, а в разных группах (в зависимости от генотипа) - с помощью критерия Манна-Уитни.

ммоль/л

9

p=0.04

]- до лечения СИ -после лечения

Рисунок 3. Концентрация общего холестерина (ммоль/л) на фоне лечения аторвастатином в зависимости от генотипа SLCO1B1

Результаты и обсуждение

Генотип Б^С01В1 .с521СС выявлен у 14,3% пациентов (п=3), .с521ТТ - у 47,6% (п=10),.с521ТС-у 38,1 % (п=8). Для полиморфизма MDR1 частота выявления аллели 3435ССсоставила 28,6% (п=6),3435ТТ - 19% (п=4) и3435СТ- 52,4% (п=11). Площадь под кривой концентрация-время (АиС) у носителей генотипа Б^С01 В1 .с521СС была на 144% (р<0,05) больше по сравнению с носителями генотипов .с521ТТ и .с521ТС (рис. 2).

Стах в двух группах существенно не различались.

Таблица 1. Содержание общего холестерина и холестерина ЛПНП (ммоль/л) до и после лечения аторвастатином в зависимости от генотипа БЬСО1В1

8-

0

Параметр Генотип SLCO1B1

.с521ТТ .с521ТС .с521СС

Общий ХС До лечения 7,7±1,0 7,5±1,1 7,6±1,5

После лечения 4,2±0,9 4,1±1,0 4,9±1,1

Д% 45,5% 45,3% 35,5%*

ХСЛПНП До лечения 6,18±1,1 6,06±1,3 6,12±1,9

После лечения 3,6±0,8 3,5±0,9 3,9±1,1

д% 42% 41,8% 35,9%*

Примечание: * - p=0,04

нг/мл

часы

ммоль/л

7

6

4

0

p=0.04

- до лечения СИ- после лечения

Рисунок 2. «Фармакокинетические кривые» (график отно- Рисунок 4 К°нцентрация холестерина .ЛПНП (ммоль/л) ыа

шения концентрация-время) аторвастатина фоне лечения аторвастатином в зависимости от

после однократного приема в дозе 80 мгу но- геыошгш ^с°1В1

сителей различных генотипов SLCO1B1

Полиморфизм генов SLCO1B1 и MDR1 и эффективность аторвастатина Таблица 2. Активность АСТ, АЛТ и КФК до и после лечения аторвастатином в зависимости от генотипа SLCO1B1 и MDR1

Параметр Генотип SLCO1B1 Генотип MDR1

.с521ТТ ,с521ТС .с521СС 3435ТТ 3435ТС 3435СС

АСТ, МЕ/л До лечения 34±10 36±11 33±9 31±10 32±10 34±10

После лечения 28±15 25±12 30±9 34±15 33±14 29±13

АЛТ, МЕ/л До лечения 24±12 23±13 25±15 25±12 22±12 25±14

После лечения 28±9 29±9 30±11 26±9 25±10 28±14

КФК, МЕ/л До лечения 103±31 105±22 104±30 109±35 106±29 107±31

После лечения 119±25 120±24 122±28 125±30 121 ±29 130±25

Эффективность терапии была ниже в группе носителей генотипа .с521СС, чем у носителей генотипов .с521ТТ и .с521ТС. Снижение концентрации общего холестерина и холестерина липопротеидов низкой плотности на фоне лечения было менее выражено в группе носителей генотипа .с521СС (р<0,05) по сравнению с носителями генотипа .с521ТТ, тогда как разницы между носителями генотипов .с521ТТ и .с521ТС не обнаружено (рис. 3 и 4, табл. 1).

Нами также было изучено влияние полиморфизма MDR1 на фармакокинетику и эффективность аторвастатина. Изучаемые показатели существенно не различались между носителями разных аллелей этого гена. Однако в группе носителей генотипа .3435СС выявлено некоторое повышение концентрации аторвастатина в плазме. В этой же группе обнаружена тенденция к менее выраженному ответу на лечение, однако различия были статистически недостоверными.

Переносимость терапии была хорошей: ни одному больному не потребовалось отмены препарата в свя-

Литература

1. Baigent C., Keech A., Kearney P.M. et al. Efficacy and safety of cholesterol-lowering treatment: prospective meta-analysis of data from 90,056 participants in 14 randomized trials of statins. Lancet 2005; 366: 1267-78.

2. Macin S.M., Perna E.R., Farias E.F. et al. Atorvastatin has an important acute anti-inflammatory effect in patients with acute coronary syndrome: results of a randomized, double-blind, placebo-controlled study. Am Heart J 2005;149(3):451 -7.

3. Kinlay S., Schwartz G.G., Olsson A.G. et al. Myocardial Ischemia Reduction with Aggressive Cholesterol Lowering (MIRACL) Study Investigators. Effect of atorvastatin on risk of recurrent cardiovascular events after an acute coronary syndrome associated with high soluble CD40 ligand in the Myocardial Ischemia Reduction with Aggressive Cholesterol Lowering (MIRACL) Study. Circulation 2004;1 1 0(4):386-91.

4. Horwich T, MacLellan W.R., Fonarow G. Statin therapy is associated with improved survival in ischemic and non-ischemic heart failure. J Am Coll Cardiol 2004; 43(4):642-8.

5. Young-Xu Y, Jabbour S., Goldberg R. et al. Usefulness of statin drugs in protecting against atrial fibrillation in patients with coronary artery disease. Am J Cardiol 2003;92:1 379-83.

6. Newman C.B., Palmer G., Silbershatz H., Szarek M. Safety of atorvastatin derived from analysis of 44 completed trials in 9,41 6 patients. Am J Cardiol 2003;92(6):670-6.

зи с его побочным действием. Измерения активности АСТ, АЛТ и КФК на фоне терапии не выявили достоверных различий между группами (табл. 2).

Как видно, полиморфизмы SLCO1B1 и MDR1 не влияли на динамику АСТ, АЛТ и КФК на фоне применения аторвастатина.

Заключение

Носительство полиморфных аллелей генов, кодирующих белки-транспортеры лекарственных средств, в первую очередь ОАТР-С, может существенно изменять фармакокинетические параметры (AUC) аторвастатина и индивидуальный ответ на лечение. Носительство генотипа SLC01B1 .с521СС ассоциировано с достоверно меньшей эффективностью по сравнению с носителями генотипов .с521ТТ и .с521ТС. Не выявлено достоверного влияния полиморфизмов генов SLC01B1 и MDR1 на частоту развития нежелательных лекарственных реакций.

7. Kajinami K., Takekoshi N., Brousseau M.E., Schaefer E.J. Pharmacogenetics of HMG-CoA reductase inhibitors: exploring the potential for genotype-based individualization of coronary heart disease management. Atherosclerosis 2004;1 77(2): 21 9-34.

8. Kajinami K., Brousseau M.E., Ordovas J.M., Schaefer E.J. CYP3A4 genotypes and plasma lipoprotein levels before and after treatment with atorvastatin in primary hypercholesterolemia. Am J Cardiol 2004;93(1 ):1 04-

7.

9. Kajinami K., Brousseau M.E., Ordovas J.M., Schaefer E.J. Polymorphisms in the MDR1 gene influence the response to atorvastatin treatment in a gender-specific manner. Am J Cardiol 2004;93:1 046-50.

1 0. Rodrigues A.C., Rebecchi I.M.M., Bertolami M.C. et al. High baseline serum total and LDL cholesterol levels are associated with MDR1 hap-lotypes in Brazilian hypercholesterolemic individuals of European descent. Braz J Med Biol Res 2005;38(9):1389-97.

11. Kameyama Y, Yamashita K., Kobayashi K., Hosokawa M., Chiba K. Functional characterization of SLCO1 B1 (OATP-C) variants, SLCO1 B1 *5, SLCO1B1 *15 and SLCO1 B1*1 5+C1007G, by using transient expression systems of HeLa and HEK293 cells. Pharmacogenet Genomics 2 005; 1 5(7):51 3-22.

1 2. Hermann M., Bogsrud M.P, Molden E. et al. Exposure of atorvastatin is unchanged but lactone and acid metabolites are increased severalfold in patients with atorvastatin-induced myopathy. Clin Pharmacol Ther 2006;79(6):532-9.