Способ нормализации эмоционально-психического состояния домашних животных
METHOD OF NORMALIZATION OF EMOTIONAL-MENTAL STATE OF DOMESTIC ANIMALS

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано для нормализации жизнеспособности, преимущественно, эмоционально-психического состояния домашних животных (в том числе и сельскохозяйственных животных), нарушения которого влияют на функции нервной системы.
Проблемы стресса и адаптации у животных являются актуальными и привлекают внимание большого количества исследователей (Севрюков А.В., 2016; Гаращенко С.В., 2003; Галицкая М.С., 2003; Lamb М., 2000).
Формирование у животных эволюционно выработанных ответных реакций обеспечивает их приспособление и жизнедеятельность в конкретных условиях окружающей среды. В современных условиях обитания адаптационные механизмы животных подвергаются большому напряжению. Это связано с увеличением технизации, увеличением психоэмоционального напряжения, появлением новых повреждающих факторов. Болевой, иммобилизационный и кормовой стресс-факторы являются одними из самых тяжелых и часто встречающихся, которым подвергаются домашние животные, в частности собаки (Галицкая М.С., 2003; Капай Н.А. с соавт., 2015).
Из уровня техники известны антистрессовые и противотревожные ветеринарные препараты для профилактики и лечения стресса, гипервозбудимости и коррекции нарушений поведения, например, «Стреснил (Stresnil)»; «Адаптил (D.A.P.)»; препараты из растительного сырья «Кот Баюн»; «Фитэкс»; гомеопатический препарат «Фоспасим», основанный на вытяжках из различных лекарственных растений, (http://www.veterinarka.ru/vetmedicaments/fospasim.html). Однако данные препараты эффективны не во всех случаях применения, могут сопровождаться выраженным седативным эффектом или изменением реакции на некоторые диагностические тесты и вызывать аллергические реакции при индивидуальной чувствительности и непереносимости компонентов.
Технический результат, на получение которого направлено изобретение, заключается в создании эффективного способа нормализации эмоционально-психического состояния домашних животных путем использования нетоксичного лекарственного средства, влияющего на функции нервной системы, нарушениями которых являются, в частности, агрессия, или анорексия, коллапс и кома, или апатия, или аритмия, или беспокойство, или бессонница, или быстрая утомляемость, или вокализация, или депрессия, или деструктивное поведение, замедление или усиление перистальтики кишечника, или игнорирование общения с хозяином, или извращенный аппетит, или клонические судороги и припадки, в том числе эпилептические, или мечение, или нарушение циркадных ритмов, или низкая и однообразная активность или обсессивно-компульсивное расстройство, или ослабление мышечного тонуса, или повышенная активность, или повышенная возбудимость, или прятанье, или пугливость, или расстройства поведения, или сезонные флуктуации, или снижение продуктивности и репродуктивной функции, или снижении и потеря аппетита, или соматические заболевания, или стереотипия, в том числе локомоторная, или стресс, или ступор, или тахикардия, или тетания, или угнетение, или функциональные повреждения центральной нервной системы, или чувство тревоги.
Кроме того, заявленное техническое решение расширяет арсенал нетоксичных средств, предназначенных для лечения заболеваний и расстройств нервной системы домашних животных, в том числе, нормализующих эмоционально-психическое состояние и улучшающих ориентировочные реакции и обучение.
Решение поставленной задачи с достижением заявленного технического результата обеспечивается тем, что в способе нормализации эмоционально-психического состояния домашних животных, влияющего на функции нервной системы, согласно изобретению, в организм животных вводят лекарственное средство, содержащее действующую субстанцию в виде активированной - потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100, активность которой обусловлена процессом последовательного многократного разведения матричного - исходного раствора антител к мозгоспецифическому белку S-100 в водно-спиртовом растворителе в сочетании с промежуточным внешним механическим воздействием - встряхиванием каждого разведения.
При этом лекарственное средство выполнено в форме порошка и содержит эффективное количество нейтрального носителя - гранул моногидрата лактозы, насыщенного (пропитанного до насыщения) действующей субстанцией в виде водно-спиртового раствора активированной - потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100, полученной в процессе последовательного многократного разведения исходного матричного раствора с концентрацией антител к мозгоспецифическому белку S-100, равной 0,5÷5,0 мг/мл, в водно-спиртовом растворителе в сочетании с промежуточным внешним механическим воздействием - встряхиванием каждого разведения.
Предпочтительно, в организм животных вводят водный раствор порошка лекарственного средства, содержащего эффективное количество нейтрального носителя - гранул моногидрата лактозы, насыщенного (пропитанного до насыщения) действующей субстанцией в виде водно-спиртового раствора активированной - потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100, полученной в процессе последовательного многократного разведения исходного матричного раствора с концентрацией антител к мозгоспецифическому белку S-100, равной 0,5÷5,0 мг/мл, в водно - спиртовом растворителе в сочетании с промежуточным внешним механическим воздействием - встряхиванием каждого разведения.
При этом лекарственное средство содержит смесь различных разведений действующей субстанцией в виде водно-спиртового раствора активированной - потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100, полученной в процессе последовательного многократного разведения исходного матричного раствора с концентрацией антител к мозгоспецифическому белку S-100, равной 0,5÷5,0 мг/мл, в сочетании с промежуточным внешним механическим воздействием - встряхиванием каждого разведения.
Предпочтительно, лекарственное средство содержит смесь различных сотенных разведений действующей субстанции, приготовленных по гомеопатической технологии, преимущественно, С30, С50 и С200.
Экспериментально полученные данные, оценивающие степень агрессии животных по шкале RASS (Ричмондекая шкала возбуждения - седации), подтверждают, что заявленное лекарственное средство на основе активированной - потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100 оказывает антипсихотическое, антиневротическое, нейропротекторное и ноотропное действие, что обеспечивает снижение агрессивности, пугливости и, соответственно, стойкое и статистически значимое улучшение эмоционально-психического состояния животных. При этом в силу отсутствия токсичных молекул в действующей субстанции из-за высокой степени разведения исходного матричного раствора антител к мозгоспецифическому белку S-100, обеспечивается практически полное отсутствие побочных эффектов и безопасность заявленного способа улучшение эмоционально-психического состояния домашних животных.
Для приготовления активированной - потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют моноклональные или, преимущественно, поликлональные антитела, которые могут быть получены по известным технологиям - методикам, описанным, например, в книге: Иммунологические методы, под ред. Г. Фримеля, М., «Медицина», 1987, с. 9-33; или, например, в статье Laffly Е., Sodoyer R. Hum. Antibodies. Monoclonal and recombinant antibodies, 30 years after. - 2005 - Vol. 14. - N 1-2. P. 33-55.
Моноклональные антитела получают, преимущественно, с помощью гибридомной технологии. Причем начальная стадия процесса включает иммунизацию, основанную на принципах, уже разработанных при приготовлении поликлональных антисывороток. Дальнейшие этапы работы предусматривают получение гибридных клеток, продуцирующих клоны одинаковых по специфичности антител. Их выделение в индивидуальном виде проводится теми же методами, что и в случае поликлональных антисывороток.
Поликлональные антитела могут быть получены активной иммунизацией животных. Для этого по специально разработанной схеме животным делают серию инъекций требуемым в соответствии с изобретением антигеном - мозгоспецифическим белком S-100. В результате проведения такой процедуры получают моноспецифическую антисыворотку с высоким содержанием антител, которую и используют для получения активированной - потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100, предпочтительно, по гомеопатической технологии. При необходимости проводят очистку антител, присутствующих в антисыворотке, например, методом аффинной хроматографии, путем применения фракционирования солевым осаждением или ионообменной хроматографии.
Для получения поликлональных антител к мозгоспецифическому белку S-100 используют мозгоспецифический белок S-100, физико-химические свойства которого описаны в статье М.В. Старостина, С.М. Свиридов, Нейроспецифический белок S-100, Успехи современной биологии, 1977 г., т. 5, с. 170-178; книге М.Б. Штарк, Мозгоспецифические белки /антигены/ и функции нейрона, М., "Медицина", 1985 г.; с. 12-14, выделенный из ткани головного мозга быка по следующей методике:
- замороженную в жидком азоте ткань растирают в порошок на специальной мельнице;
- экстракцию белков проводят в соотношении 1:3 (вес/объем) в экстрагирующем буфере при гомогенизации;
- гомогенат прогревают в течение 10 мин при 60°С и охлаждают до 4°С на ледяной бане;
- термолабильные белки удаляют центрифугированием;
- проводят ступенчатое фракционирование сульфатом аммония с последующим удалением выпадающих в осадок примесных белков;
- содержащую белок S-100 фракцию осаждают 100% насыщенным сульфатом аммония при снижении рН до 4,0 и собирают центрифугированием;
- осадок растворяют в минимальном объеме буфера, содержащего ЭДТА и меркаптоэтанол, диализируют против деионизованной воды и лиофильно высушивают;
- фракционирование кислых белков продолжают хроматографией на ионообменных носителях - ДЭАЭ целлюлозе ДЕ-52 и затем ДЭАЭ-сефадексе А-50;
- собранные и отдиализованные фракции, содержащие белок S-100, разделяют по молекулярному весу гель-фильтрацией на сефадексе G-100;
- очищенный белок S-100 диализируют и лиофильно высушивают.
Молекулярный вес очищенного мозгоспецифического белка S-100 составляет - 21000 д.
Благодаря высокому содержанию аспарагиновой и глутаминовой кислот мозгоспецифический белок S-100 является сильнокислым и занимает крайнее анодное положение при электрофорезе в прерывистой буферной системе в полиакриламидном геле, что облегчает его идентификацию.
Для получения мозгоспецифической антисыворотки к выделенному мозгоспецифическому белку S-100 готовят смесь очищенного белка S-100 (антигена) в комплексе с метилированным бычьим сывороточным альбумином в качестве носителя с полным адъювантом Фрейнда, которую вводят подкожно лабораторному животному - кролику в область спины в количестве 1-2 мл. На 8-й, 15-й день проводят повторную иммунизацию. Забор крови производят (например, из вены уха) на 26-й и 28-й день.
Полученная антисыворотка имеет титр 1:500-1:1000, образует единственную полосу преципитации с экстрактом из нервной ткани, но не реагирует с экстрактами гетерологичных органов и формирует единственный пик преципитации как с чистым белком S-100, так и с экстрактом нервной ткани, что свидетельствует о моноспецифичности полученной антисыворотки.
Выделение антител из антисыворотки производят методом аффинной хроматографии на колонке с антигеном, путем связывания антител к мозгоспецифическому белку S-100 с антигеном (мозгоспецифическим белком S-100), прикрепленным к нерастворимому матриксу колонки, с последующим элюированием антител концентрированными растворами соли.
Полученный буферный раствор поликлональных кроличьих антител к мозгоспецифическому белку S-100, очищенных на антигене с концентрацией 0,5÷5,0 мг/мл, предпочтительно 2,0÷3,0 мг/мл, используют в качестве исходного матричного (первичного) раствора для последующего приготовления активированной - потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100, предпочтительно, по гомеопатичебской технологии.
Активированную-потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 готовят путем равномерного уменьшения концентрации упомянутого выше исходного матричного раствора антител к мозгоспецифическому белку S-100, в результате последовательного разведения 1 части каждого подвергаемого разведению раствора, начиная с матричного, в 9 частях (для десятичного разведения D по гомеопатической шкале) или в 99 частях (для сотенного разведения С) или в 999 частях (для тысячного разведения М) нейтрального растворителя в сочетании с многократным встряхиванием (потенцированием, или "динамизацией") каждого полученного разведения и использованием одной или отдельных емкостей для каждого последующего разведения до получения требуемой потенции - кратности разведения по гомеопатическому методу (см., например, В. Швабе "Гомеопатические лекарственные средства", М., 1967 г., с. 14-29 или Г. Келлер, Гомеопатия, М: Медицина, 2000, ч. 1, с. 37-40; RU 2500426; US 7,229,648; US 4,311,897,). Причем первое гомеопатическое разведение производят на нейтральном растворителе, предпочтительно, на 10÷15% водном растворе этилового спирта или дистиллированной воде, следующие разведения на 20÷30% водном растворе этилового спирта и конечные (последние два - три) разведения производят на 30÷75% водном растворе этилового спирта или дистиллированной воде.
Например, для приготовления 12-го сотенного разведения С12 одну часть матричного раствора разводят в 99 частях нейтрального растворителя (10÷15% водном растворе этилового спирта или дистиллированной воде) и многократно (10 и более раз), предпочтительно, вертикально встряхивают - потенцируют, получая 1-е сотенное С1 разведение. Из 1-го сотенного С1 разведения приготовляют 2-ое сотенное разведение С2 на 20÷30% водном растворе этилового спирта. Данную операцию повторяют 10 раз, получая 11-е сотенное разведение СП. 12-е сотенное разведение С12 приготовляют на 30÷75% водном растворе этилового спирта (или дистиллированной воде).
12
Таким образом, 12-е сотенное разведение С12 представляет собой раствор, полученный разбавлением последовательно 12 раз в разных емкостях 1- ой части исходного матричного раствора в 99-ти частях нейтрального растворителя, т.е. раствор, полученный разведением матричного раствора в 100 раз. Аналогичные операции с соответствующей кратностью разведения проводят для получения других разведений, например, С30, С200.
12
30
200
Для получения действующей субстанции лекарственного средства в виде смеси различных, преимущественно сотенных, разведений антител к мозгоспецифическому белку S-100 каждое разведение (например, С12, С30, С200) приготовляют раздельно по описанной выше технологии до разведения на 3 меньше, чем конечное (соответственно, до получения С9, С27, С197), и затем вносят в соответствии с составом смеси в одну емкость по одной части каждого компонента и смешивают с требуемым количеством растворителя (соответственно, с 97 частями для сотенных разведений). Далее полученную смесь разведений последовательно дважды разводят в соотношении 1 к 100, потенцируя механическим воздействием - встряхиванием полученный раствор после каждого разведения. При этом получают активированную - потенцированную форму антител к мозгоспецифическому белку S-100 в сверхмалой дозе, полученной разведением матричного раствора в 100, 100, 100 раз, эквивалентной смеси сотенных разведений С12, С30, С200.
Получения твердой формы заявленного лекарственного средства в виде порошка производят, предпочтительно, орошением в установке кипящего слоя (например, типа «Huttlin Pilotlab» производства компании Huttlin GmbH) до насыщения вводимых в псевдоожиженный - кипящий слой гранул нейтрального вещества - моногидрата лактозы с размером частиц 150 -г- 300 мкм водно-спиртовым раствором, содержащим смесь различных сотенных разведений С12, С30, С200 активированной потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100, преимущественно, в соотношении 1 кг раствора на 5÷10 кг лактозы (1:5÷1:10) с одновременной сушкой в потоке подаваемого под решетку нагретого воздуха при температуре 35÷40°С.
Пример 1.
Эмоционально-психическое состояние собак на практике оценивают по адаптированным методикам диагностики эмоциональной сферы, применяемым у человека (Барканова О.В., 2009), а также по шкалам оценки качества седации (Орехова Е.А., Саввина И.А., 2014).
Исследование эффективности заявленного способа улучшения эмоционально-психического состояния домашних животных путем введения в организм лекарственного средства, содержащего действующую субстанцию в виде активированной - потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100, проводилось ветеринарными специалистами на базе «Лесного приюта» (Истринский район Московской области) на 20 диких, агрессивных, не социализированных собак, с различными видами фобий и страхов, подвергавшихся воздействию стрессорных факторов в течение жизни, беспородных половозрелых собаках, 10 самцах и 10 самках, в возрасте от 1 до 9 лет, массой от 13 до 35 кг, которые содержались в приюте в одинаковых условиях. Перед формированием групп у всех животных было определено эмоционально-психическое состояние по адаптированной шкале RASS (Richmond Agitation Sedation Scale) (Капай с соавт., 2015) (Таблица 1). Данная шкала оценки возбуждения - седации применяется в медицинской практике для описания степени агрессии пациента или уровня глубины седации. Собаки были рандомизированы на две группы - группа 1 (плацебо) и 2 (Анотен) - так, чтобы средние исходные значения баллов эмоционально-психического состояния по шкале RASS не отличались. Исследование проводили слепым методом - экспериментальные препараты поставлялись исследователю в зашифрованном виде, расшифровку проводили после получения результатов.
12
30
200
В процессе исследования ежедневно один раз в день на протяжении 14 дней 5,0 грамм порошка лекарственного средства (ЛС) в виде гранул моногидрата лактозы, насыщенных водно-спиртовым раствором активированной - потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100 в сверхмалой дозе, полученной в процессе последовательного многократного разведения исходного матричного раствора антител с концентрацией 2,5 мг/мл в 100, 100, 100 раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С200, и 5,0 грамм порошка нейтрального носителя - гранул моногидрата лактозы (плацебо) растворяли в 20 мл воды и вводили животным перорально с помощью шприца.
Через 1 час после введения у собак оценивали общие клинические показатели, а также отмечали отношение животного к осмотру (позволяет себя осмотреть: а) полностью; б) частично; в) не позволяет себя осмотреть) и проявление агрессии по отношению к персоналу. Психологическое состояние животного определяли по адаптированной для животных шкале RASS (Таблица 1).
После проведения исследования оценивали изменения эмоционально-психического состояния собак в течение курса применения препаратов ЛС и плацебо с отнесением к категории А, В или С. Результаты приведены в Таблица 2.
В соответствии с требованиями современной доказательной медицины, для всех данных в обеих группах были рассчитаны элементы описательной статистики: среднее и стандартная ошибка среднего. Различия между группами оценивали по методу ординальной логистической регрессии с использованием как частотного (классического), так и байесовского подходов. Оба подхода выявили схожие результаты. Сравнение балльной характеристики состояния животных по окончании приема препаратов проводили с помощью метода ординальной логистической регрессии и точного критерия Фишера.
Результаты исследования:
Общее клиническое состояние всех животных во время приема препаратов характеризовалось как удовлетворительное в течение всего периода наблюдения и не различалось между группами. Изучение динамики эмоционально-психического состояния собак по адаптированной для шкале RASS в баллах, приведенное на Фиг. 1 (данные представлены в виде M±SEM), показало, что в обеих группах в первые 4 дня исследования состояние собак было стабильным. Начиная с 5-го дня, балл по шкале RASS в обеих группах начал снижаться. Однако в опытной группе, получавшей ЛС, такое снижение было более выраженным. И уже к 7-му дню разница между группами достигла статистической значимости и сохранялась до конца исследования (Фиг. 1). К 14-му дню балл по шкале RASS в опытной группе ЛС был ниже, чем в группе плацебо, на 30%.
Полученные данные подтверждают, что препарат ЛС имеет выраженную эффективность в отношении улучшения эмоционально-психического состояния у собак по сравнению с плацебо.
По истечении 14-дневного курсового применения экспериментальных препаратов с помощью оценочной шкалы, представленной в Таблице 2, определяли эмоционально-психическое состояние собак после курсового применения ЛС и плацебо (число собак с соответствующими оценками) (Фиг. 2.).
Результаты анализа показали, что оценку А имели собаки только в группе, получавшей ЛС: у трех собак отмечали значительное улучшение эмоционально-психического состояния, проявляющееся в повышении степени контактности, понимания человека, послушания ему, значительным снижением уровня агрессии и страха, уменьшения напряженности. Оценка В встречалась преимущественно в группе собак, получавших плацебо. Эмоционально-психическое состояние животных с оценкой В улучшилось незначительно и характеризовалось временными или постоянными слабо выраженными признаками адаптации, социализации и отсутствия агрессии.
Таким образом, экспериментально показано, что использование заявленного лекарственного средства, содержащего действующую субстанцию в виде активированной - потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100 обеспечивает эффективное улучшения эмоционально-психического состояния животных.
При этом прием заявленного лекарственного средства не оказывает влияния на общее клиническое состояние животных и не вызывает побочных эффектов, что говорит о его хорошей переносимости, нетоксичности и безопасности.
После 14-дневного исследования было продолжено наблюдение за собаками обеих групп в течение 3-х дней для исключения синдрома отмены. Ежедневное обследование животных показало отсутствие изменений общего клинического состояния, а также стабильное эмоционально-психическое состояние, которое установилось к 14-му дню исследования. Так, в первой группе температура у собак в течение трех дней после отмены введения препаратов была в пределах 38,48±0,12 - 38,71±0,12°С, частота сердечных сокращений - 85,0±3,4 - 89,0±4,7 ударов в минуту, частота дыхания - 23,5±1,5 - 24,6±1,2 дыхательных движений в минуту. Во второй группе показатели статистически не отличались от первой и составляли, соответственно, 38,41±0,11 - 38,52±0,09°С, 88,2±2,9 - 92,2±4,0 ударов в минуту и 23,2±0,9 - 24,6±1,3 дыхательных движений в минуту. Таким образом, полученные данные позволяют судить об отсутствии синдрома отмены у животных после окончания приема препарата в течение 14 дней.
Пример 2
Исследование эффективности заявленного способа улучшения эмоционально-психического состояния домашних животных путем введения в организм лекарственного средства, содержащее действующую субстанцию в виде активированной - потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100, проводилось на диких, агрессивных, не социализированных кошках.
В исследовании были использованы 32 кошки обоего пола, от 1 до 7 лет, стерилизованные, массой тела от 3 до 7 кг. Все животные находились в условиях «Лесного приюта» (Истринский район Московской области). Кошки содержались в боксах от одной до восьми особей в зависимости от уровня социализации и площади бокса. Для кормления животных использовали сухой корм премиум-класса. Поение животных осуществляли питьевой водой в постоянном доступе. Все процедуры с животными на протяжении исследования осуществлялись ветеринарным врачом приюта.
Перед проведением исследования у всех животных определили эмоционально-психическое состояние по шкале CSS, после чего распределили их в 2 группы по 16 животных в группе (9 самок, 7 самцов в каждой) таким образом, чтобы выборки были одинаковые, т.е. отсутствовали статистически значимые различия в исходном эмоционально-психическом состоянии животных по шкале Кесслера-Тёрнера Cat-Stress-Score (CSS) (Vinkea С.М. и др., 2014; Ellis J.J. и др., 2014).
12
30
200
В процессе исследования ежедневно один раз в день на протяжении 14 дней 5,0 грамм порошка лекарственного средства (ЛС) в виде гранул моногидрата лактозы, насыщенных водно-спиртовым раствором активированной - потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100 в сверхмалой дозе, полученной в процессе последовательного многократного разведения исходного матричного раствора антител с концентрацией 2,5 мг/мл в 100, 100, 100 раз, эквивалентной смеси сотенных гомеопатических разведений С12, С30, С200, и 5,0 грамм порошка нейтрального носителя - гранул моногидрата лактозы (плацебо) растворяли в 5-10 мл воды и вводили животным перорально с помощью шприца.
Во время исследования ежедневно через 1 час после введения препаратов у кошек обеих групп определяли показатели общего клинического состояния, отношение к осмотру, проявление агрессии при осмотре, а также определяли эмоционально-психическое состояние животных по шкале CSS по характеристикам позы и поведения.
По окончании исследования была проведена интегральная оценка эмоционально-психического состояния кошек по шкале CSS, результаты которой приведены в Таблице 3.
Анализ данных проводился с использованием программы RStudio и языка R версии 3.3.2 в соответствии с требованиями современной доказательной медицины: были рассчитаны элементы описательной статистики (среднее и стандартная ошибка среднего); различия между группами по эмоционально-психическому состоянию, по шкале CSS и балльным характеристикам по окончании приема оценивались с использованием метода ординальной логистической регрессии; сравнение балльной характеристики состояния животных по окончании приема препаратов проводили с помощью метода ординальной логистической регрессии и точного критерия Фишера.
Результаты исследования.
У всех животных в обеих группах общий вид, состояние кожи и шерсти, видимых слизистых оболочек и поверхностных лимфоузлов, аппетит, жажда, стул и мочеиспускание были в норме на протяжении всего исследования.
Таким образом, препарат ЛС не оказывает влияния на общее клиническое состояние животных, что говорит о его хорошей переносимости и безопасности.
Отношение к осмотру у животных в обеих группах в начале исследования было одинаковым, провести полноценный осмотр позволяли только по шесть кошек из каждой группы. В течение исследования у трех кошек из группы плацебо и у четырех кошек из группы препарата ЛС изменилось отношение к осмотру, животные стали спокойнее.
Агрессия при осмотре в группе плацебо в начале исследования была выражена у шести кошек, при этом в ходе исследования у одной кошки она снизилась. В группе препарата ЛС агрессия при осмотре в начале исследования была выражена у пяти кошек, при этом у двух животных в течение исследования проявления агрессии сократились.
В группе препарата ЛС поведение у кошек было менее агрессивным, а отношение к осмотру стало более спокойным и лояльным.
Результаты изучения эмоционально-психического состояния по шкале CSS у кошек представлены на Фиг. 3 (данные представлены в виде M±SEM).. В процессе исследования значения данного показателя в обеих группах постепенно снижались, что, возможно, было частично связано с привыканием кошек к человеку и к ежедневным осмотрам. Однако в группе препарата ЛС снижение среднего балла происходило более выраженно, и к 13-му дню межгрупповое различие достигло статистической значимости, что связано с приемом животными препарата ЛС.
К концу исследования в группе препарата ЛС средний балл по шкале CSS фиксировали на отметке 3,9 (снижение на 0,7 балла по сравнению с исходным уровнем), что свидетельствует о снижении напряженности и выраженности стресса у кошек. В группе плацебо средний балл к концу исследования составил 4,3 (на 0,5 балла ниже исходного значения), что характеризует состояние кошек как очень напряженное, с ярко выраженными признаками стресса. Таким образом, представленные данные доказывают, что заявленный препарат ЛС обладает выраженным анксиолитическим, антистрессовым эффектом.
После окончания курса приема экспериментальных образцов все кошки были субъективно оценены в баллах по интегральной шкале в соответствии с изменениями их эмоционально-психического состояния за весь период наблюдения (Фиг. 4).
В группе плацебо явное улучшение эмоционально-психического состояния произошло только у 4 животных.
В группе препарата ЛС у 6-и кошек состояние характеризовалось значительным улучшением эмоционального фона, проявляющимся в повышении контактности, отсутствии страха и агрессии к человеку, уменьшении напряженности.
Таким образом, экспериментально показано, что использование заявленного лекарственного средства, содержащего действующую субстанцию в виде активированной - потенцированной формы антител к мозгоспецифическому белку S-100 обеспечивает эффективное улучшение эмоционально-психического состояния животных.
При этом прием заявленного лекарственного средства не оказывает влияния на общее клиническое состояние животных и не вызывает побочных эффектов, что говорит о его хорошей переносимости, нетоксичности и безопасности.