ЛЕЧЕНИЕ ГНОЙНОГО ГИДРАДЕНИТА
TREATMENT OF PURULENT HIDRADENITIS

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ
[0001] Настоящая заявка испрашивает приоритет согласно предварительной заявке на патент США с регистрационным № 62/459841, под названием "Лечение гнойного гидраденита'', поданной 16 февраля 2017 года.
ЗАЯВЛЕНИЕ О ФИНАНСИРОВАНИИ ИССЛЕДОВАНИЯ ИЗ ФЕДЕРАЛЬНОЕО БЮДЖЕТА
[0001] Не предусмотрено.
ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0002] Настоящее изобретение в целом относится к областям медицины, дерматологии и иммунологии. Более подробно, изобретение относится к применению антител (Аb), которые специфически связываются с интерлейкином-1α (IL-1α), для лечения гнойного гидраденита.
ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
[0003] Гнойный гидраденит (HS) представляет собой хроническое изнуряющее заболевание кожи, при котором узелки, появляющиеся в участках, богатых апокринными железами, постепенно набухают, пока не разорвутся и не высвободятся через кожу. В результате наблюдается образование свищевого хода и рубцов. HS обычно лечат с помощью антибиотиков и хирургического вмешательства, однако частые рецидивы резко ухудшают качество жизни пациента.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ
[0004] В данном документе раскрыто исследование того, что средство, которое специфически нацеливается на IL-1α, является применим для лечения HS.
[0005] Соответственно, в данном документе описаны способы уменьшения выраженности симптомов HS у субъекта-человека. Эти способы могут включать стадию введения субъекту фармацевтической композиции, содержащей фармацевтически приемлемый носитель и количество средства, которое избирательно связывает IL-1α, эффективного для уменьшения количества и/или размера воспалительных очагов (например, пузырька, абсцессов или дренирование свищей), предотвращения их прогрессирования, уменьшения боли, вызванной очагами, или увеличения времени до появления новых обострений. Средство может представлять собой антитело (Аb) к IL-1α, такое как моноклональное антитело (mAb) (например, изотипа IgG 1). mAb, которое включает определяющую комплементарность область (CDR) МАВр1 или MABp1.
[0006] В другом аспекте настоящего изобретения предложен способ ослабления симптомов HS у субъекта-человека путем введения субъекту фармацевтической композиции, включающей фармацевтически приемлемый носитель и количество антител к IL-1α (или другого средства, которое специфически и/или избирательно связывает IL-1α), эффективный для уменьшения количества и/или размера воспалительных очагов (например, пузырька, абсцессов или дренирующих свищей) у субъекта на по меньшей мере приблизительно 10% (например, по меньшей мере 8, 9, 10, 15, 17, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 или 100%), если измерять любым стандартным дерматологическим тестом.
[0007] Антитело к IL-1α может представлять собой mAb, такое как IgG1. Антитело к IL-1α может представлять собой mAb, обозначенное как MABp1, или mAb, которое включает одну или несколько (CDR) MABp1. Фармацевтическая композиция может быть введена субъекту путем инъекции, инфузии, подкожно, внутривенно, внутримышечно или внутрикожно. В описанных в данном документе способах доза может составлять по меньшей мере 0,25 (например, по меньшей мере 0,2, 0,5, 0,75, 1, 2, 3, 4 или 5) мг/кг и предпочтительно в диапазоне 1-20 мг/кг (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20+/- 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8 или 0,9 мг/кг).
th
[0008] Если не указано иное, то все технические термины, использованные в данном документе, имеют то же значение, как обычно понимается специалистом в данной области техники, к которой принадлежит настоящее изобретение. Обычно подразумеваемые определения биологических терминов можно найти в Rieger et al., Glossary of Genetics: Classical and Molecular, 5th edition, Springer-Verlag: New York, 1991 и Lew in. Genes V, Oxford University Press: New York, 1994. Обычно подразумеваемые определения медицинских терминов можно найти в Stcdman's Medical Dictionary, 27 Edition, Lippineott, Williams & Wilkins, 2000.
2
[0009] Как используется в данном документе, "антитело" или "Аb" представляет собой иммуноглобулин (Ig), раствор идентичных или гетерогенных Ig или смесь Ig. "Аb" также может относиться к фрагментам и сконструированным версиям Ig, таким как Fab, Fab' и F(ab')-фрагменты; а также scFv, гетероконъюгатам Аb и аналогичным искусственным молекулам, в которых используются CDR, полученные из Ig, для придания специфичности к антигену. "Моноклональное антитело" или "mAb" представляет собой Аb, которое экспрессируется одной клональной линией В-клеток, или популяцию молекул Аb, которые содержат только один вид антигенсвязывающего участка, способного к осуществлению иммунной реакции с конкретным эпитопом конкретного антигена. "Поликлональное Аb" представляет собой смесь гетерогенных Аb. Обычно поликлональное Аb будет включать множество различных молекул Аb, которые связываются с конкретным антигеном, и при этом по меньшей мере некоторые из этих различных Аb вступают в иммунную реакцию с другим эпитопом антигена. Как используется в данном документе, поликлональное Ат может представлять собой смесь двух или более mAb.
[0010] "Антигенсвязывающая часть" Аb содержится в пределах вариабельной области Fab-части Аb и представляет собой часть Аb, которая обеспечивает специфичность антигена к Аb (т.е., как правило, трехмерный карман, образованный с помощью CDR тяжелой и легкой цепей Аb). "Fab-часть" или "Fab-область" представляет собой протеолитичеcкий фрагмент расщепленного папаином Ig, которая содержит антигенсвязывающую часть этого Ig. "Часть, отличная от Fab" представляет собой часть Аb, расположенную за пределами Fab-части, например, "Fc-часть" или "Fc-область". "Константная область" Аb представляет собой часть Аb, расположенную вне вариабельной области. Как правило, в пределах константной области содержится "эффекторная часть" Аb, которая является частью Аb, отвечающей за связывание с другими компонентами иммунной системы, обеспечивающими иммунный ответ. Так, например, участок Аb, который связывает компоненты комплемента или Fс-рецепторы (не через его антигенсвязывающую часть), является эффекторной частью этого Аb.
[0011] При ссылке на белковую молекулу, такую как Аb, "очищенная" означает отделенная от компонентов, которые в естественных условиях сопровождают такие молекулы. Обычно Аb или белок являются очищенными, в случае если они на по меньшей мере приблизительно 10% (например, 9%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%. 98%, 99%, 99.9% и 100%) по весу не содержат белки, отличные от Аb, или другие встречающиеся в природе органические молекулы, с которыми они связаны в естественных условиях. Чистоту можно измерить любым подходящим способом, например, с помощью колоночной хроматографии, электрофореза в полиакриламидном геле или HPLC-анализа. Химически синтезированный белок или другой рекомбинантный белок, полученный в клеточном типе, отличном от клеточного типа, в котором он встречается в природе, является "очищенным".
d
5
6
7
8
9
10
11
12
[0012] "Связывают", "связывает" или "вступает в реакцию с" означает, что одна молекула распознает и прилипает к конкретной второй молекуле в образце, однако фактически не распознает или не прилипает к другим молекулам в образце. Как правило, Аb, которое "специфически связывает" другую молекулу, характеризуется K по отношению к этой другой молекуле, превышающим приблизительно 10, 10, 10, 10, 10, 10, 10 или 10 литров/моль. Аb, которое "селективно связывает" первую молекулу, специфически связывает первую молекулу в первом эпитопе, однако специфически не связывает другие молекулы, которые не содержат первый эпитоп. Например, Аb, которое избирательно связывает IL-1альфа, специфически связывает эпитоп на IL-1альфа, однако специфически не связывает IL-1бета (который не содержит эпитоп).
[0013] "Терапевтически эффективное количество" представляет собой количество, которое способно обеспечивать требуемый с медицинской точки зрения эффект у получавшего лечение животного или человека (например, облегчение или предупреждение заболевания или симптома заболевания).
[0014] Хотя способы и материалы, аналогичные гаи эквивалентные описанным в данном документе, можно применять при практическом осуществлении или тестировании настоящего изобретения, - подходящие способы и материалы описаны ниже. Все патенты, патентные заявки и публикации, упомянутые в данном документе, включены в полном объеме с помощью ссылки. В случае конфликта, контрольным документом будет выступать настоящее описание, включая приведенные определения. Кроме того, определенные варианты осуществления, обсуждаемые ниже, являются лишь иллюстративными и не предназначены быть ограничивающими.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
[0015] На фигуре 1 представлен график, показывающий, что 60% пациентов, которым было назначено лечение с помощью MABp1, достигли положительного HiSCR на неделе 12 по сравнению с 10% в группе плацебо; и что соотношение шансов (OR) для положительного HiSCR при MABp1 составляло 13,50 (95% доверительные интервалы: 1,19-152,51; р=0,035).
[0016] На фигуре 2 представлен график, показывающий, что клиническая эффективность MABp1 сохранялась до недели 24 (т.е. через 12 недель после прекращения лечения), где ни один из пациентов, получавших плацебо, не имел положительной оценки в баллах по шкале HiSCR (0%) по сравнению с четырьмя из 10 пациентов (40%), получавших лечение с помощью MABp1.
[0017] На фигуре 3 представлен график, показывающий процентное изменение общего количества AN (сумма воспалительных пузырьков и абсцессов) у всех пациентов в течение первых 24 недель после начала лечения MABp1 или плацебо.
[0018] На фигуре 4 представлен график, показывающий процентное изменение общего количества AN у пациентов без предшествующего воздействия антителом к TNFα в течение первых 24 недель после начала лечения МАВр1 или плацебо.
[0019] На фигуре 5 представлен график, показывающий процентное изменение общего количества AN у пациентов после предшествующего неэффективного лечения антителом к TNFα в течение первых 24 недель после начала лечения MABp1 или плацебо.
[0020] На фигуре 6 представлен график, показывающий процентное изменение активности заболевания у пациентов без предшествующего воздействия антителом к TNFα в течение первых 24 недель после начала лечения МАВр1 или плацебо.
[0021] На фигуре 7 представлен график, показывающий процентное изменение визуальной аналоговой шкалы (VAS) у всех пациентов в течение первых 24 недель после начала лечения MABp1 или плацебо.
[0022] На фигуре 8 представлен график, показывающий среднее время новых обострений у пациентов без предшествующего воздействия антителом к TNFα в течение первых 24 недель после начала лечения МАВр1 или плацебо
[0023] На фигуре 9 представлен график, показывающий изменение глубины очага у всех пациентов через 12 недель после начала лечения MABp1 или плацебо.
[0024] На фигуре 10 представлен график, показывающий изменение глубины очага у пациентов с предшествующим неэффективным лечением антителом к TNFα через 12 недель после начала лечения MABp1 или плацебо.
[0025] На фигуре 11 представлен график, показывающий количество пациентов, характеризующихся по меньшей мере 20% снижением глубины очага у пациентов, получавших MABp1 или плацебо.
[0026] На фигуре 12 представлен график, показывающий количество пациентов, характеризующихся по меньшей мере 20% снижением глубины очага у пациентов, получавших МАВр1 или плацебо, где популяции пациентов были (i) без предшествующего воздействия антителом к TNFα и (ii) с предшествующим неэффективным лечением антителом к TNFα.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ
[0027] Настоящее изобретение охватывает композиции и способы уменьшения воспаления кожи при HS, включая уменьшение одного или нескольких симптомов дерматологической патологии у субъекта. Описанные ниже предпочтительные варианты осуществления иллюстрируют адаптацию этих композиций и способов. Тем не менее, исходя из описания этих вариантов осуществления, другие аспекты настоящего изобретения могут быть созданы и/или применены на практике на основании описания, представленного ниже.
Общая методология
th
th
th
th
[0028] В данном документе описаны способы, включая общепринятые иммунологические и молекулярно-биологические методы. Иммунологические способы (например, анализы для выявления и локализации комплексов антиген-Аb, иммунопреципитация, иммуноблоттинг и т.п.), как правило, известны из уровня техники и описаны в методологических монографиях, таких как Current Protocols in Immunology, Coligan et al, ed., John Wiley & Sons, New York. Mолекуляpно-биологические методы подробно описаны в монографиях, таких как Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 2nd ed., vol. 1-3, Sambrook et al, ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., 2001 и Current Protocols in Molecular Biology, Ausubel et al., ed., Greene Publishing and Wiley-Interscience, New York. Способы анализа Ab описаны в Handbook of Therapeutic Abs, Dubel, S., ed., Wiley-VCH, 2007. Общие способы терапевтического лечения описаны в McPhee и Papadakis, Current Medical Diagnosis and Treatment 2010, 49 Edition, McGraw-Hill Medical, 2010 и Fauci et al., Harrison's Principles of Internal Medicine, 17 Edition, McGraw-Hill Professional, 2008. Способы в дерматологии описаны в работе James et al., Andrews' Diseases of the Skin: Клиническая дерматология - Expert Consult, 11 Ed., Saunders, 2011 и Burns et al., Rook's Textbook of Dermatology, 8 Ed., Wiley-Blackwell, 2010.
Лечение
[0029] Композиции и способы, описанные в данном документе, применимы для HS у субъекта-млекопитающего путем введения субъекту фармацевтической композиции, включающей количество Аb к IL-1α, эффективное для улучшения по меньшей мере одной характеристики состояния у субъекта (например, снижения количества и/или размера пузырьков, абсцессов или дренирующих свищей или предотвращения их прогрессирования). Субъект-млекопитающее может представлять собой любое млекопитающее, страдающее HS, включая людей. Субъекты-люди могут являться лицами мужского пола, женского пола, взрослыми, детьми, пожилыми (65 и старше) и людьми с другими заболеваниями. Особенно предпочтительными субъектами являются (i) те, у кого заболевание прогрессировало или не отвечало на лечение другими противовоспалительными (например, ингибиторами TNFα) или противомикробными средствами; (ii) те, у кого HS имеется в семейном анамнезе; (iii) те, которым другие противовоспалительные (например, ингибиторы TNFα) или противомикробные средства не подходят; и (iv) те, у которых имеется более 100, 200, 300, 400, 500 или 1000 пг/мл IL-1α в гное, взятом из их очагов. Субъекты, у которых выработался ответ на человеческие антитела к иммуноглобулину человека вследствие предшествующего введения терапевтических антител, являются предпочтительными, в случае если Аb к IL-1α представляет собой истинное человеческое Аb (например, то, которое естественным образом экcпрессируется у субъекта-человека), такое как МАВр1.
Антитела и другие средства, которые нацелены на IL-1α
9
-1
10
-1
10
-1
10
-1
10
-1
10
-1
10
-1
10
-1
10
-1
10
-1
[0030] Мог бы использоваться любой подходящий тип Аb, который специфически связывает IL-1α и снижает характеристику HS у субъекта. Например, использованное Аb к IL-1α может представлять собой mAb, поликлональное Аb, смесь mAb, или фрагмент Аb, или сконструированную Аb-подобную молекулу, такую как scFv. Значение Ка Аb предпочтительно составляет по меньшей мере 1×10 М или больше (например, больше чем 9×10 M 8×10 М 7×10 М, 6×10 М, 5×10 М, 4×10 М, 3×10 М, 2×10 М или 1×10 М). В предпочтительном варианте осуществления в настоящем изобретении используется полное человеческое mAb, которое включает (i) антигенсвязывающую вариабельную область, которая проявляет очень высокую аффинность связывания (например, по меньшей мере, нано или пикомолярную) с человеческим IL-1α, и (ii) константную область. Человеческое Аb предпочтительно представляет собой IgG1, хотя оно могло бы принадлежать к другому изотипу, такому как IgM, IgA или IgE, или подклассу, такому как IgG2, IgG3 или IgG4. Одним из примеров особенно применимого mAb является MABp1, IL-1α-специфическое mAb IgG1, описанное в заявке на патент США №8034337 В2, поданной 11 октября 2011 года. Другие применимые mAb содержат по меньшей мере один, но предпочтительно все CDR из МАВр1. CDR можно определить в соответствии с известными способами, такими как описанные в Ofran et al, J. Immunol., 181:6230, 2008 и Antibody Engineering Volume 2, 2d edition, Konterman и Dubel (eds), Springer, 2010. Ab, которые специфически связывают IL-1α, и способы их изготовления более подробно описаны, например, в патенте США №9545411.
[0031] Хотя описанные выше специфичные Аb к IL-1α являются предпочтительными для использования в описанных в данном документе способах, в некоторых случаях моглт бы использоваться другие средства, которые специфически нацелены на IL-1α, если их введение приводит к улучшению характеристики HS. Эти другие средства могут включать вакцины, которые вызывают выработку Аb к IL-1α , белков или пептидов, которые связывают IL-1α, и небольшие органические молекулы, которые специфически нацелены на IL-1α. Предпочтительными являются те, которые специфически не связывают IL-1β, потому что использование таких средств, как сообщалось, ухудшает симптомы HS (например, Tekin et al., Indian J Dermatol Venereol Leprol 2017; 83:615-7) и другие сообщали, что IL-1β способствует заживлению и восстановлению (например, Bersudsky et al., Gut. 2014 Apr; 63(4):598-609).
Фармацевтические композиции и способы
[0032] Композиции на основе антител к IL-1α  (и другие средства, которые специфически нацелены на IL-1α) могут вводиться в фармацевтически приемлемых носителях (например, стерильный физиологический раствор), которые выбраны на основе метода и пути введения, а также стандартной фармацевтической практики. Перечень фармацевтически приемлемых носителей, а также фармацевтических составов, можно найти в Remington Pharmaceutical Sciences, общепринятом руководстве в данной области, и в USP/NF. К композициям могут быть добавлены другие вещества, и могут осуществляться другие стадии для стабилизации и/или сохранения композиций и/или для содействия их введению субъекту.
[0033] Например, композиции на основе Аb можно лиофилизировать (см. Draber et al, J. Immunol. Methods. 181:37, 1995 и PCT/US90/01383); растворять в растворе, содержащем ионы натрия и хлора; растворять в растворе, содержащем одно или несколько стабилизирующих средств, таких как альбумин, глюкоза, мальтоза, сахароза, сорбит, полиэтиленгликоль и глицин; фильтровать (например, с использованием фильтра 0,45 и/или 0,2 микрона); приводить в контакт с бета-пропиолактоном и/или растворять в растворе, содержащем микробицид (например, поверхностно-активное вещество, органический растворитель и смесь поверхностно-активного вещества и органического растворителя).
[0034] Композиции на основе Аb можно вводить животным или людям любым подходящим методом. Обычно такое введение будет являться парентеральным (например, внутривенным, подкожным, внутримышечным или внутрибрюшинным введением). Композиции также можно вводить непосредственно в целевой участок (например, в кожу) с помощью, например, местного применения. Другие способы доставки, например, липосомальная доставка или диффузия из устройства, пропитанного композицией, известны из уровня техники. Композицию можно вводить путем однократной болюсной инъекции, многократных инъекций или путем непрерывной инфузии (например, внутривенно или с помощью брюшинного диализа).
[0035] Терапевтически эффективное количество представляет собой количество, которое способно обеспечивать требуемый с медицинской точки зрения результат у получавшего лечение животного или человека. Эффективное количество композиций на основе антитела к IL-1α представляет собой количество, которое демонстрирует клиническую эффективность у пациентов, измеренную по улучшению одного или нескольких симптомов воспаления кожи. Как хорошо известно в медицинских областях, дозировка для любого животного или человека зависит от многих факторов, включая размер субъекта, площадь поверхности тела, возраст, конкретную композицию, подлежащую введению, пол, время и путь введения, общее состояние здоровья и другие лекарственные средства, вводимые одновременно. Предпочтительные дозы варьируют в диапазоне 1-20 мг/кг веса тела (например, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или 20+/- 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8 или 0,9 мг/кг веса тела). В некоторых случаях однократная доза эффективна при разрешении эпизода воспаления кожи. В других случаях дозы могут вводиться многократно, например, два раза в неделю, раз в неделю, раз в две недели, раз в три недели, два раза в месяц, раз в три недели, раз в месяц, раз в два месяца или по мере необходимости (если очаги повторяются).
Комбинированное лечение
[0036] Пациентам с HS, получавшим лечение средством, которое избирательно связывает IL-1α, также могут быть назначены другие средства. Например, таких пациентов можно лечить кортикостероидами, ретиноидами, резорцином, гормонами и биологическими препаратами, такими как адалимумаб или инфликсимаб. Также возможно использование проти во микробных препаратов. В частности, антибиотики или другие средства, которые нацелены на S. aureus, могут использоваться у тех пациентов, у которых имеется колонизация или инфекция S. aureus или с подозрением на наличие таковых в одном или нескольких очагах при HS. Считается, что особенно применимо использование антител, которые опсонизируют S. aureus. Предпочтительными антителами к S. aureus для данного применения являются антитела, имеющие парагоны Tab-области, которые специфически связываются с областями белка A (SpA) S. aureus и Fc-областями, которые не связывают SpA, так что они способны к опсинизации бактерий S. aureus, несмотря на экспрессию нейтрализующих антитела SpA. Они описаны в патенте США №9416172 (например, антитело, обозначенное в нем PA8-G3).
ПРИМЕРЫ
[0037] Пример 1
Двойное слепое рандомизированное плацебо-контролируемое клиническое исследование безопасности и эффективности MABp1, антитела True Human™, нацеленного на интерлейкин-1α, у пациентов с HS.
[0038] Были обследованы пациенты с HS, кроме тех, кто находится под наблюдением в настоящее время. Критериями для включения были: письменное информированное согласие, поданное пациентом; возраст 18 лет или старше; диагноз HS; HS болезни Херли II или III стадии или быстро прогрессирующий HS стадии Херли I; наличие 3 или более воспаленных пузырьков в соответствии с HS в организме; по меньшей мере одно из следующего: а) предыдущий отказ от лечения любым антителом к TNFα , с курсом лечения; b) предыдущий рецидив при лечении любым антителом к TNFα, с курсом лечения; или с) нежелание получать подкожное лечение адалимумабом.
3
[0039] Критериями исключения были: системная красная волчанка в анамнезе, ревматоидный артрит или cepoнeгативный воспалительный артрит; лечение любыми биологическими или исследовательскими средствами в течение последних 4 недель (или 5 периодов полужизни, в зависимости от того, что дольше); анамнез тяжелых аллергических или анафилактических реакций на человеческие, гуманизированные, химерные или мышиные моноклональные антитела; введение любой живой (аттенуированной) вакцины в течение последних 4 недель; в анамнезе рецидивирующий тромбоз вен или эмболия, соответствующие антикардиолипиновому синдрому; любая существующая серьезная бактериальная инфекция, а именно, пневмония, эндокардит, острый пиелонефрит и внутрибрюшная инфекция; печеночная дисфункция, определяемая с любым значением трансаминаз, γ-глутамилтранспептидазы или билирубина >2 х верхнего нормального предела; в анамнезе гематологические или солидные злокачественные опухоли, артериальная гипертензия, цирроз печени, ВИЧ-инфекция и инфекция вирусом гепатита В или С; в анамнезе эпизоды, имитирующие демиелинизирующие расстройства или обнаруженный диагноз рассеянного склероза; любое значение креатинина выше 1,5 мг/дл; потребление кортикостероидов, определяемое как ежедневное потребление преднизона или эквивалентное более 1 мг/кг в течение последних трех недель; нейтропения, определенная как <1000 нейтрофилов/мм; беременность или кормление грудью; туберкулез в анамнезе (скрытый или активный); серьезная хирургическая операция в течение 28 дней до дня 0.
[0040] Диагноз HS основывался на следующих критериях, установленных 2-й конференцией Фонда HS в Сан-Франциско: начало заболевания после полового созревания; повреждение по меньшей мере двух участков кожи, богатых апокринными железами; и анамнез периодических болезненных фурункулов без/с дренированием гноя из поврежденных участков. После того как пациент был признан подходящим для исследования, были выполнены следующие процедуры: тщательное изучение записей об анамнезе и лекарствах; тщательный медицинский осмотр; туберкулиновая проба кожи (любой диаметр меньше 5 мм считался отрицательным); рентгенограмма грудной клетки; серология вируса иммунодефицита человека (ВИЧ), вируса гепатита В (HBV) и вируса гепатита С (HCV); креатинин сыворотки и биохимия печени. В исследование были включены только пациенты с показателями в пределах нормы. Пациентам в случайном порядке назначали 1:1 для внутривенного введения либо плацебо, либо MABp1 (XBiotech США, Инк.). Рандомизационную последовательность строили с помощью независимого биостатиста. Исследуемое лекарственное средство или соответствующее плацебо вводили внутривенно с одночасовой инфузией каждые 14 дней (+/- 1 день) в течение 12 недель, т.е. в неделю 0 (исходное состояние), неделю 2, неделю 4, неделю 6, неделю 8, неделю 10 и неделю 12 - максимум семь инфузий. Доза MABp1 составляла 7,5 мг/кг.
[0041] Xilonix™ является стерильным инъекционным жидким составом из 50 мг/мл MABp1 в стабилизирующем изотоническом буфере (рН 6,4). Каждый 10 мл флакон с сывороткой содержал 6 мл препарата и был запечатан 20 мм серой бромбутиловой пробкой и откидным алюминиевым уплотнением. Продукт хранили при 2-8°С с допускаемыми отклонениями до комнатной температуры. Точная композиция лекарственного продукта показана ниже.
[0042] Продукт на основе плацебо изготавливали в соответствии с теми же процедурами и записями партий, которые использовались для изготовления лекарственного продукта на основе MABp1. Лекарственная форма в виде плацебо представляла собой буфер для стерильного изотонического состава при рН 6,2-6,5. Каждый 10 мл флакон из боросиликатного стекла типа I с сывороткой содержал 6 мл буфера для состава и был загерметизирован 20 мм пробкой из бутилкаучука Daikyo Flurotec и откидным алюминиевым уплотнением. Продукт хранили в вертикальном положении при 2-8°С с допускаемыми отклонениями до комнатной температуры. Точная композиция продукта на основе плацебо показана в таблице ниже.
[0043] XILONIX™ перед инфузией разбавляли в 100 мл флаконе с физиологическим раствором. Следующие расчеты использовались для определения объема лекарственного препарата, который подлежит разбавлению для каждого объекта исследования:
50 мг/мл лекарственного продукта, доза 7,5 мг/кг:
Объем лекарственного продукта для разбавления =
(Вес тела был округлен до ближайшего целого числа)
Пример для субъекта весом 70 кг при 7,5 мг/кг:
Vd=10,5 мл (округлено до одного десятичного знака)
[0044] Расчетный объем (Vd) извлекали из предназначенного для субъекта флакона(-ов) с использованием подходящего шприца. Такое же количество физиологического раствора, как и рассчитанного лекарственного средства, отбирали из 100 мл пакета. Затем рассчитанный объем инъецировали в 100 мл мешок IV нормального солевого раствора (0,9% NaCl), в результате чего конечный общий объем составил 100 мл. Затем лекарственный продукт перемешивали, осторожно переворачивая пакет десять раз. После заполнения рядов системы для инфузий, программировали насос для доставки на доставку 100 мл разбавленного лекарственного продукта в течение 1-часового периода (60+/- 15 минут), при этом субъекта контролировали на наличие признаков реакции на инфузию. Визиты пациентов происходили в неделю 0, в неделю 2, в неделю 4, в неделю 6, в неделю 8, в неделю 10, в неделю 12, в неделю 16, в неделю 20 и в неделю 24. При каждом визите выполняли следующие процедуры.
DQLI: индекс качества жизни дерматологических пациентов HiSCR: оценка в баллах клинического ответа на гнойный гидраденит PGA: совокупная оценка здоровья врачей VAS: визуальная аналоговая шкала
[0045] Пациентов просили дать оценку тяжести их заболевания с использованием визуальной аналоговой шкалы (VAS) в мм. Им сказали, что 0 означает отсутствие активности заболевания, а 100 - наихудшую активность заболевания, которую они когда-либо чувствовали. Пациентов просили дать один балл за их общее впечатление об их заболевании и другой балл - за физическую боль, которую они ощущают. Исследователи просили пациента указать частоту обострения его заболевания и боли, ощущаемой в поврежденных участках. Пациентам присваивали приведенный ниже показатель DLQI, и просили их заполнить ее только на неделе 0, неделе 12 и неделе 24.
Индекс качества жизни дерматологических пациентов (DQLI). Каждый вопрос оценивался от 0 (отсутствие) до 3 (интенсивная проблема).
[0046] Исследователи подсчитали следующее для каждого отдельно поврежденного участка и сфотографировали этот участок; количество свищей; количество пузырьков или абсцессов; количество шрамов; их впечатление о степени воспаления оценивалось от 0 до 3 следующим образом: 0 - отсутствует, 1 - легкое; 2 - умеренное; 3 - интенсивное; два самых больших размера каждого очага приведены в мм. На основании вышеизложенного при каждом посещении оценивали следующие два показателя: Клиническая оценка в баллах гнойного гидраденита (HiSCR) и общая оценка здоровья врачей (PGA). Согласно HiSCR пациенты разделяли на поддающихся или не поддающихся терапии. Вероятность достижения положительной оценки в баллах по шкале HiSCR начиналась со второго посещения и определялась как уменьшение количества воспалительных очагов (сумма абсцессов и воспалительных пузырьков) на ≥50%, а также отсутствие увеличения абсцессов или дренирующих свищей при HS по сравнению с начальной стадией. Согласно PGA, этот показатель классифицировали как: а) чисто, в случае если общее количество абсцессов равно 0, общее количество дренирующих свищей равно 0, общее количество воспалительных пузырьков равно 0 и общее количество не воспалительных пузырьков равно 0; b) минимально, в случае если общее количество абсцессов равно 0, общее количество дренирующих свищей равно 0, общее количество воспалительных пузырьков равно 0 и присутствуют не воспалительные пузырьки; с) легкая степень, в случае если общее количество абсцессов равно 0, общее количество дренирующих свищей равно 0, и общее количество воспалительных пузырьков составляет 1-4, или в случае если имеется один абсцесс или дренирующий свищ и отсутствует каких-либо воспалительных пузырьков; d) умеренная степень, в случае если общее количество абсцессов равно 0, общее количество дренирующих свищей равно 0, и общее количество воспалительных пузырьков составляет не более 5, или когда имеется один абсцесс или дренирующий свищ и не более одного воспалительного пузырька; е) тяжелая, в случае если общее количество абсцессов или дренирующих свищей составляет 2-5, и общее количество воспалительных пузырьков составляет 5-10; и f) очень тяжелая, в случае если имеется более 5 абсцессов или дренирующих свищей.
[0047] Активность заболевания. Определяется как суммарная оценка всех поврежденных участков у каждого пациента. Каждую область оценивали по следующей формуле: (умножение двух самых больших диаметров в каждом поврежденном участке в мм) × (степень воспаления каждого очага).
[0048] Модифицированная оценка по Sartorius. Это сумма отдельных баллов для каждого поврежденного участка с использованием данных, записанных следующим образом: а) 3 балла за анатомическую область; b) 6 баллов за каждый свищ и 1 балл за каждый узелок или абсцесс; с) 1 балл, в случае если наибольшее расстояние между двумя соответствующими очагами в каждом поврежденном участке составляет <5 см; 3 балла при 5-10 см и 9 баллов, в случае если >10 см; и d) 9 баллов, в случае если нет четкого отделения очагов от прилегающей нормальной кожи и 0 баллов, в случае если оно есть.
[0049] Эффективность MABp1 у пациентов с HS средней и тяжелой степени по шкале HiSCR оценивали по разнице в достижении положительной оценки в баллах по шкале HiSCR между группой лечения и группой сравнения с плацебо на неделе 12. Долгосрочную эффективность MABp1 у пациентов с HS от средней до тяжелой степени по положительной шкале оценки HiSCR оценивали по разнице в достижении оценки в баллах по шкале HiSCR между группой лечения и группой сравнения с плацебо на неделе 24. Анализ проводили отдельно для пациентов с предшествующим неэффективным лечением или рецидивом после адалимумаба и для пациентов без предшествующего лечения адалимумабом. Краткосрочную и долгосрочную эффективность MABp1 у пациентов с HS от средней до тяжелой степени оценивали путем сравнения всех используемых систем оценки (HiSCR, PGA, DLQI, активность заболевания, VAS для заболевания, VAS для боли и модифицированная оценка по Sartorius) во все предусмотренные исследованием визиты. Анализ также проводили отдельно для пациентов с предшествующим неэффективным лечением или рецидивом после адалимумаба и для пациентов без предшествующего лечения адалимумабом. Эффективность влияния MABp1 на время до нового обострения оценивали путем сравнения времени с новым обострением с недели 0 между двумя группами пациентов, получавших лечение. Анализ осуществляли отдельно для пациентов с предшествующим неэффективным лечением или рецидивом после адалимумаба и для пациентов без предшествующего лечения адалимумабом. Сравнения HiSCR между двумя исследовательскими группами осуществляли с помощью точного критерия Фишера. Сравнение показателей тяжести для каждого посещения проводили с помощью непараметрической статистики.
Сравнение времени с новым обострением между двумя группами осуществляли с помощью теста логарифмического ряда.
[0050] Результаты. На рисунках 1-12 показаны результаты исследования. Пациенты, получавшие лечение с помощью MABp1, достигли значительно более высокого уровня' положительных оценок в баллах по шкале HiSCR, чем группы сравнения. Лечение с помощью MABp1 ассоциировалось со значительными: увеличением положительной оценки в баллах по шкале HiSCR на неделе 24; снижением общего количества AN (более выражено у пациентов без предшествующего воздействия антителами к TNF); снижением VAS для болезни; увеличением периода времени до новых обострений у пациентов без предшествующего воздействия антителами к TNF; и значительным уменьшением при ультразвуковом исследовании общей глубины очагов на теле (более выражено у пациентов без предшествующей неэффективной терапии антителами к TNF).
[0051] Пример 2
[0052] Основные результаты спонсируемого исследователем рандомизированного исследования на стадии 2, оценивающего MABp1 как лечение гнойного гидраденита (HS), показали, что исследование достигло своего первоначального конечного результата, демонстрируя при этом значительное улучшение у пациентов с HS по сравнению с контролем после 12 недель терапии (уровень ответа 60% против 10%, соответственно (р=0.035)).
[0053] Двойное слепое плацебо-контролируемое исследование с участием 20 пациентов было разработано для оценки безопасности и эффективности MABp1, антитела True Human™, нацеленного на интерлейкин-1-альфа (IL-1α ), у пациентов с HS, не получавших терапии с помощью антитела к TNFα . Пациентов рандомизировали в соотношении 1:1 для приема либо МАВр1, либо плацебо каждые 2 недели в течение 12 недель. Пациенты в исследовании получали первичную оценку эффективности с использованием оценок Клинического ответа гнойного гидраденита (HiSCR) через 12 недель с последующей фазой для оценки времени рецидива после дополнительных 12 недель без терапии. Показатели эффективности включали определение оценок в баллах по шкале HiSCR, валидированный способ оценки эффективности у пациентов с HS, а также оценку качества жизни и ультразвуковое исследование.
[0054] Шестьдесят процентов пациентов, которым было назначено лечение с помощью MABp1, достигли положительного HiSCR на неделе 12 по сравнению с 10% в группе плацебо (фигура 1). Соотношение шансов (OR) для положительного HiSCR под MABp1 составляло 13,50 (95% доверительные интервалы: 1,19-152,51; р=0.035). Общее количество AN, которое является основным компонентом оценки в баллах по шкале HiSCR, снижалось в течение первых 12 недель лечения (фигура 3). Клиническая эффективность MABp1 поддерживалась до недели 24, т.е. через 12 недель после прекращения лечения. В данный момент времени, как показано на фигуре 2, ни один из пациентов, получавших плацебо, не имел положительной оценки в баллах по шкале HiSCR (0%) по сравнению с четырьмя из 10 пациентов (40%), получавших лечение с помощью MABp1. Лечение с помощью MABp1 также сопровождалось улучшением результатов, о которых сообщали пациенты. Уменьшение визуальной аналоговой шкалы (VAS) было обнаружено у 30% (три из 10) и у 70% (семь из 10) пациентов, которым были назначены плацебо и MABp1, соответственно. Суб-анализ показал, что оно составляло соответственно 40% (два из пяти) и 33,3% (один из трех) среди пациентов, не получавших ранее антитела к TNF, и 20% (один из пяти) и 85,7% (шесть из семи) среди пациентов, не получавших предшествующее лечение с помощью антител к TNF. Среднее время до первого обострения HS составляло семь недель в группе плацебо и 11 недель в группе MABp1. Это время существенно не различалось между группами (логарифмический ряд: 1,98, р=0.159). Однако, когда был осуществлен суб-анализ среди пациентов, не получавших ранее антитела к TNF, было обнаружено, что среднее время до нового обострения HS составляло 4 недели при лечении с помощью плацебо и 18,5 недель при лечении с помощью MABp1 (тест логарифмического ряда: 4,46; р=0.035; см. фигуру 8). Снижение активности заболевания было обнаружено у всех пациентов, которых получали лечение с помощью MABp1 и которые достигли положительного HiSCR в недели 12 и 24. Снижение по меньшей мере двух из оцененных баллов, т.е. совокупной оценки здоровья врачей (PGA), активности заболевания, модифицированной оценки по Sartorius. VAS для боли и дерматологического индекса качества жизни (DLQI) в неделю 12 было обнаружено у 40% пациентов, которым было назначено плацебо, и 80% пациентов, которым было назначено MABp1 (80%) (OR=14,50; 95% доверительные интервалы: 0,96-218,99; р=0,054). Суб-анализ показал, что оно составляло соответственно 60% (три из пяти) и 100% (три из трех) среди пациентов, не получавших ранее антитела к TNF, и 20% (один из пяти) и 71,4% (пять из семи) среди пациентов, среди пациентов, не получавших предшествующее лечение с помощью антител к TNF. Существенные изменения в переменных ультразвукового исследования кожи включали общую васкуляризацию очага и общую глубину очага, которые представляют собой сумму градации васкуляризации и сумму наибольшей глубины всех задействованных участков кожи, соответственно. Обе переменные снижались после лечения с помощью MABp1 (фигуры 9-12). Более того, 20% сокращение общей глубины очага было отобрано как минимально приемлемый уровень, что и было обнаружено у 22,2% пациентов, которым было назначено плацебо, по сравнению с 77,8% пациентов, получавших лечение с помощью MABp1 (OR=12,25; 95% доверительные интервалы 1,33-113,06; р=0.027). Выраженный эффект наблюдался среди пациентов, которые получали неэффективное предшествующее лечение с помощью антител к TNF (фигура 10). Также было отмечено значительное улучшение эластичности поврежденных участков.
[0055] Сывороточный уровень IL-1α  находился ниже нижней границы обнаружения в пробах сыворотки крови, взятых у всех пациентов как до, так и в конце слепого лечения. Перед лечением брали гной у шести пациентов, которым было назначено плацебо, и у семи пациентов, которым было назначено МАВр1. Средние значения ± SE концентрации IL-1α составляли соответственно 697,2 ± 440,4 пг/мл и 772,0 ± 221,7 пг/мл (р=0.412 по U-критерию Манна-Уитни). Лечение с помощью MABp1 сопровождалось снижением сывороточного IL-8. Снижение IL-8 более чем на 30% на неделе 12 было выбрано за минимально приемлемый пороговый уровень. OR для данной пороговой точки по MABp1 составляло 13,50 (95% доверительные интервалы: 1,19-152,51; р=0.035). Это соответствовало изменению уровней IL-8, продуцируемого в цельной крови, стимулированных термоинактивированным Staphylococcus aureus, уровень которого был значительно ниже среди пациентов, получавших лечение с помощью MABp1, чем у пациентов, получавших плацебо. Способность цельной крови продуцировать как IL-1α , так и человеческий β-дефензин (hBD)-2 были положительно ассоциированы с пациентами, получавшими плацебо. Среди тех же пациентов способность к выработке hBD-2 отрицательно коррелировала с изменением глубины очагов кожи при ультразвуковом исследовании. Эти корреляции не наблюдались среди пациентов, получавших лечение с помощью MABp1, что указывало на hВD-2-ассоциированный способ действия MABp1 при HS, опосредованный через ингибирование IL-1α .
[0056] Безопасность - в исследовании не наблюдалось побочных явлений, связанных с исследуемым лекарственным средством, или серьезных побочных явлений.
[0057] Был проведен анализ данных с использованием показателя iHS4 для всех 20 пациентов, которые были рандомизированы для получения терапии плацебо или MABp1 в двойном слепом исследовании фазы 2. По меньшей мере 30% снижение показателя iHS4 по сравнению с исходным уровнем на неделе 12 было связано со 100% чувствительностью к положительной оценке в баллах по шкале HiSCR (мера эффективности, используемая в исследовании фазы 2). Это изменение было обнаружено у одного (10%) и у четырех (40%) пациентов, которым было назначено соответственно плацебо и MABp1 (р=0,046)
[0058] Пациентам, которые первоначально были отобраны для назначения плацебо в исследовании фазы 2, было разрешено получать лечение с помощью терапии антителами к MABp1 в так называемом исследовании с открытым расширением (OLE). Семь из 10 пациентов, которые первоначально получали плацебо, получали лечение с помощью MABp1 в течение 12 недель. Основные конечные результаты, используемые в OLE, включали безопасность и оценку в баллах по шкале HiSCR в конце 12-недельного курса лечения. В конце двойного слепого исследования только один пациент (1 из 10 или 10%), получавший плацебо, достиг HiSCR. Во время OLE пять пациентов (5 из 7 или 71,4%) достигли ответа HiSCR (р=0,035). Все 24 обострения HS наблюдались во время части слепого исследования по сравнению с 1 обострением во время фазы OLE.
[0059] "Общий уровень ответа, наблюдаемый в исследовании, является на мой взгляд новаторским для лечения HS", - прокомментировал доктор Giamarellos-Bourboulis. - "Я искренне рад этим результатам и очень жду будущего применения MABp1 для лечения этого разрушительного состояния".
Другие варианты осуществления изобретения
[0060] Следует понимать, что хотя настоящее изобретение было описано в связи с его подробным описанием, вышеуказанное описание предназначено для иллюстрации, а не для ограничения объема настоящего изобретения, который определяется объемом прилагаемой формулы изобретения. Другие аспекты, преимущества и модификации находятся в рамках объема нижеследующей формулы изобретения.