Способ оценки надежности гемостаза после травмы печени у мелких лабораторных животных
METHOD FOR ASSESSING RELIABILITY OF HEMOSTASIS AFTER LIVER INJURY IN SMALL LABORATORY ANIMALS

Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной хирургии, и предназначено для оценки надежности гемостаза с помощью гидропрессии после травмы печени у мелких лабораторных животных. Травма печени после больших и сверхбольших резекций, а также травма III-V степени по классификации Е. Moore после дорожно-транспортных происшествий и падения с высоты часто сочетается с посттравматической коагулопатией и, как следствие, высокой летальностью. Разработка новых способов гемостаза при тяжелой травме печени, их экспериментальная апробация является актуальной и требует надежного инструмента оценки его качества, роль которого может выполнить предложенный нами вариант метода гидропрессии.
Известный наиболее близкий способ оценки качества гемостаза в ране печени.
1. Устройство для исследования герметичности культи печени после оперативного вмешательства в эксперименте / Краснова А.В., Анюров С.А., Катанов Е.С. / Патент на полезную модель RU 153972U / Опубл. 10.08.2015. Бюл. №22.
http://www1.fips.ru/wps/portal/IPS_Ru#1480750247635
Способ с использованием представленного выше устройства подразумевает введение пункционной иглы в культю общего желчного протока печени лабораторной крысы и нагнетание в него под давлением жидкости, окрашенной бриллиантовым зеленым, с фиксацией давления манометром устройства, при котором происходит истечение жидкости с красителем из раны культи печени после оперативного вмешательства в эксперименте.
Таким образом, по сути, выполняется оценка качества герметичности системы желчных протоков после операционной травмы, а не качество гемостаза в ране. Общим с предложенной нами методикой можно считать использование устройства подобной конструкции. Отличается же наша методика тем, что выполняется прямая оценки качества гемостаза в ране печени за счет повышения гидростатического давления в венозной воротной системе печени, поставляющей 70% объема крови в печень, а не в системе желчных протоков.
Техническая задача: разработать способ оценки надежности гемостаза после травмы печени у мелких лабораторных животных.
Поставленная задача решается следующим способом и иллюстрирована на фиг. 1-6. После моделирования тяжелой травмы печени (1) у мелкого лабораторного животного, например крысы линии Wistar, выполняется тот или иной гемостатический прием (наложение швов, использование гемостатического агента или устройства, применение тампонады), по прошествии не менее 40-60 минут, выполняется перевязка викриловой нитью 3-0 воротной вены (2) и печеночной артерии на уровне слияния селезеночной и брыжеечных вен, перевязка нижней полой вены (3) ниже диафрагмы между почечной и печеночными венами, а также перевязка нижней полой вены над диафрагмой (4) после вскрытия грудной полости, благодаря чему достигается сосудистая изоляция поврежденной печени и снижается риск тромбоза в системе печеночных и воротной вены за счет сохранения оттока крови из печени до момента перевязки нижней полой вены в грудной полости. Вторым этапом выполняется катетеризация выше места перевязки воротной вены катетером (5) из полиуретана или фторэтиленпропилена 24G и его фиксация викриловой нитью 3-0 на сосуде и к передней брюшной стенке. К катетеру подключается устройство, включающее три трубки (6) из медицинского поливинилхлорида, подсоединенные между собой одним концом через пластиковый тройник (7), а другим концом: первая трубка с трехкомпонетным шприцем объемом 20 мл (8), вторая - с манометром (9), третья - с катетером (5). Трубка, соединенная с катетером, до тройника заполняется 30 мл 0,9% раствором натрия хлорида, подкрашенного 0,5 мл бриллиантового зеленого красителя. После подключения устройства к катетеру выполняется компрессия воздуха шприцем на уровне 40 мм рт.ст., давление передается на столб жидкости в трубке, подсоединенной к катетеру, которая начинает поступать и заполнять воротную систему печени. За счет сосудистой изоляции печени по мере заполнения воротной системы начинает расти гидростатическое давление, которое передается через столб жидкости на воздух в трубках описанного выше устройства, давление воздуха фиксируется манометром. По достижении критического давления в воротной венозной системе возникает выдавливание тромбов из поврежденных сосудов и истечение подкрашенной жидкости в плоскости раны печени. Исследователь по манометру определяет критическое давление срыва тромбов и, сравнивая его с контрольными значениями или со значениями других опытных групп, выносит суждение о качестве гемостаза при том или ином способе его достижения. По уровню критического давления срыва тромба можно прогнозировать перспективы рецидива кровотечения как из в венозного, так и артериального сосуда. Обязательным условием является однотипность и стандартизация травмы печени, а также отсутствие активных манипуляций в ране перед выполнением гидропрессии во избежание механического срыва тромба. Заполнение сосудистого венозного русла печени должно быть плавным, без рывков.
Пример
В условиях ксилазин (5-10 мг/кг внутримышечно) и тилетамин/золазепам (20-40 мг/кг внутримышечно) анестезии выполнена постановка катетера из фторэтиленпропилена 24G в левую сонную артерию и его фиксация викриловой нитью 3-0 у 2 самцов крысы линии Wistar массой 350 г. Осуществлен забор крови в объеме 4 мл в течение 3 мин, что составило 20% ОЦК. Ножницами выполнена лапаротомия, рассечена левая доля печени на протяжении 3,5 см, что можно считать тяжелой травмой печени по классификации J.M Сох and J.E. Kalns 2010 года https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2890397/. У первой крысы не выполнялись какие-либо гемостатические приемы, гемостаз самопроизвольный, у второй крысы на рану печени наложен гемостатический шов Кузнецова-Пенского. Через 45 минут выполнена перевязка воротной вены, печеночной артерии на уровне слияния селезеночной и брыжеечных вен, нижней полой вены между печеночными и почечной венами, нижней полой вены выше диафрагмы. Поставлен катетер из фторэтиленпропилена 24G в воротную вену выше места перевязки. Осуществлена гидропрессия описанным устройством с 30 мл изотонического раствора натрия хлорида, подкрашенного бриллиантовым зеленым красителем. После введения 20 мл раствора при давлении 40 мм рт.ст, отмечено медленное повышение давления до критического, когда произошел срыв тромба в ране печени и обильное истечение жидкости с красителем. В первом случае критическое давление составило 60 мм рт.ст., во втором - 170 мм рт.ст. Таким образом, наглядно продемонстрирована способность предложенной нами методики оценивать надежность гемостаза в ране печени у мелких лабораторных животных в эксперименте.
Технический результат: разработан способ оценки надежности гемостаза после травмы печени у мелких лабораторных животных.