КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ ГИБРИДИЗАЦИИ

1. Способ гибридизации нуклеиново-кислотных последовательностей, включающий:
- получение первой нуклеиново-кислотной последовательности в цитологическом или гистологическом образце,
- получение второй нуклеиново-кислотной последовательности,
- получение композиции для гибридизации, содержащей по меньшей мере один полярный апротонный растворитель в количестве, эффективном для денатурации двунитевых нуклеотидных последовательностей, и
- объединение первой и второй нуклеиново-кислотной последовательности и композиции для гибридизации в течение по меньшей мере периода времени, достаточного для гибридизации первой и второй нуклеиново-кислотных последовательностей,
где полярный апротонный растворитель не является диметилсульфоксидом (ДМСО).
2. Способ по п.1, где указанная композиция для гибридизации содержит вторую нуклеиново-кислотную последовательность.
3. Способ по п.1, где полярный апротонный растворитель определен согласно любому из пп.6-16.
4. Способ по п.1, где стадии денатурации и гибридизации проходят по отдельности.
5. Способ по любому из пп.1-4, где стадия гибридизации занимает менее 8 ч, менее 1 ч, менее 30 мин, менее 15 мин или менее 5 мин.
6. Композиция для гибридизации, содержащая по меньшей мере одну нуклеиново-кислотную последовательность, примерно от 1% до 95% (об/об) по меньшей мере одного полярного апротонного растворителя, имеющего циклическую основную структуру, в количестве, эффективном для денатурации двунитевых нуклеотидных последовательностей, и раствор для гибридизации, где полярный апротонный растворитель не является диметилсульфоксидом (ДМСО).
7. Композиция для гибридизации по п.6, где полярный апротонный растворитель является нетоксичным.
8. Композиция для гибридизации по п.6, при условии, что композиция содержит менее 10% формамида, предпочтительно не содержит формамид.
9. Композиция для гибридизации по п.6, где полярный апротонный растворитель имеет лактоновую, сульфоновую, сульфитную, нитрильную и/или карбонатную функциональную группу.
1/2
1/2
1/2
1/2
1/2
1/2
10. Композиция для гибридизации по п.6, где полярный апротонный растворитель имеет параметр дисперсионной растворимости в интервале от 17,7 МПа до 22,0 МПа, параметр полярной растворимости в интервале от 13 МПадо 23 МПа и параметр растворимости за счет водородных связей в интервале от 3 МПа до 13 МПа.
11. Композиция для гибридизации по п.6, где полярный апротонный растворитель выбран из группы, состоящей из:
, , ,
1
где Х представляет собой О и R представляет собой алкилдиил, и
где Х является необязательным и, если присутствует, выбран из О или S;
где Z является необязательным и, если присутствует, выбран из О или S;
где А и В независимо представляют собой О или N или S или часть алкилдиила или первичного амина;
где R представляет собой алкилдиил; и где Y представляет собой О или S или С.
12. Композиция для гибридизации по п.6, где полярный апротонный растворитель выбран из группы, состоящей из:
, , ,  и .
13. Композиция для гибридизации по п.6, дополнительно содержащая по меньшей мере один дополнительный компонент, выбранный из группы, состоящей из: буферных агентов, солей, катализаторов, хелатирующих агентов, детергентов и блокирующих агентов.
14. Композиция для гибридизации по п.13, где катализатор представляет собой декстрансульфат, и соли представляют собой хлорид натрия и/или фосфатный буфер.
15. Композиция для гибридизации по п.14, где декстрансульфат присутствует в концентрации от 10% до 30%, хлорид натрия присутствует в концентрации от 300 мМ до 600 мМ и/или фосфатный буфер присутствует в концентрации от 5 мМ до 20 мМ.
16. Композиция для гибридизации по п.6, содержащая 15% по меньшей мере одного полярного апротонного растворителя, 20% декстрансульфата, 600 мМ хлорида натрия, 10 мМ цитратного буфера рН 6,2.
17. Применение композиции для гибридизации по любому из пп.6-16 в гибридизационных анализах.