Влияние биоинсектицидов на основе Bacillus thuringiensis на пигментный комплекс и активность оксидаз в листьях картофеля

БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ

УДК 581.1:579.6

А. В. Крыжко, Л. Н. Кузнецова

Влияние биоинсектицидов на основе Bacillus thuringiensis

на пигментный комплекс и активность оксидаз в листьях картофеля

ФГБУН «Научно-исследовательский институт сельского хозяйства Крыма», г. Симферополь, Россия

Аннотация. Применение биоинсектицидов на основе энтомопатогенных бактерий B. thuringiensis в системе защиты картофеля от вредителей обусловливает интерес к изучению влияния данных бактерий на физиологическое состояние растений. В литературе высказывается предположение о том, что как ß-экзотоксин (водорастворимый термостабильный токсин нуклеотидной природы), так и S-эндотоксин (параспоральные белковые кристаллы) могут влиять на процессы роста и развития растений. Целью данной работы являлось изучение влияния биоинсектицидов на физиологическое состояние растений. В задачи исследования входила оценка влияния биоинсектицидов на пигментный комплекс листьев картофеля и активности оксидаз-пероксидазы и полифенолоксидазы. Материалом для исследований послужили биоинсектициды на основе энтомопатогенных штаммов 0371 и 836 (ВТ 0371 и ВТ 836). Влияние энтомопатогенов сравнивалось с действием химического инсектицида Биская, действующим веществом которого является неоникотиноид тиаклоприд. Исследования проводили на растениях картофеля сорта Невский. Содержание хлорофиллов определяли спектрофотометрически в общей спиртовой

КРЫЖКО Анастасия Владимировна - к. с.-х. н., в. н. с. лаборатории энтомопатогенных микроорганизмов, ФГБУН «Научно-исследовательский институт сельского хозяйства Крыма».

E-mail: solanum@ukr.net

KRYZHKO Anastasiia Vladimirovna - Ph.D. (Agriculture), Research Institute of Agriculture of Crimea, Leading Researcher Laboratory of entomopathogenic microorganisms.

КУЗНЕЦОВА Людмила Николаевна - к. б. н., с. н. с., в. н. с. лаборатории энтомопатогенных микроорганизмов, ФГБУН «Научно-исследовательский институт сельского хозяйства Крыма».

E-mail: kyz_lydmila@mail.ru

KUZNETSOVA Lyudmila Nikolaevna - Ph.D. (Biology), Research Institute of Agriculture of Crimea, Leading Researcher Laboratory of entomopathogenic microorganisms.

вытяжке, активность пероксидазы и полифенолоксидазы - по методу А. Н. Бояркина, используя в качестве субстрата соответственно бензидин и парафенилендиамин. Отмечено влияние штаммов бактерий в зависимости от состава продуцируемых ими токсинов на динамику содержания хлорофилла в листьях. Обработка картофеля ВТ 836, который содержит ¿-эндотоксин и не содержит ^-экзотоксин, не оказывает негативного действия на ассимилирующий аппарат растений. Обработка же растений ВТ 0371, содержащим ^-экзотоксин, уменьшает количество хлорофиллов в фазах всходов, бутонизации и цветения. Негативное действие на фотосинтетический аппарат растений картофеля оказывает и действующее вещество химического инсектицида Биская, что также проявляется в уменьшении содержания хлорофилла. При обработке растений картофеля вне зависимости от наличия того или иного токсина влияние биоинсектицидов на активность оксидаз ограничивается несущественным и кратковременным повышением активности полифенолоксидазы в листьях (максимально до 22%), что свидетельствует о способности растений сохранять окислительный обмен на стабильном уровне. В отличие от химического инсектицида Биская, обработка растений картофеля биоинсектицидами на основе штаммов B. thuringiensis 0371 и 836 способствует увеличению устойчивости таких растений к неблагоприятным условиям внешней среды. Умеренная фитоимунная реакция растений картофеля на обработку бактериальными препаратами, не содержащими Р-экзотоксин, свидетельствует о их способности сохранять окислительный обмен на стабильном уровне и обеспечивать увеличение адаптационных возможностей растительного организма, что наряду с преимущественными экологическими характеристиками биопрепаратов обуславливает актуальность и перспективность их применения.

Ключевые слова: Bacillus thuringiensis, энтомопатоген, биоинсектицид, ^-экзотоксин, инсектицид Биская, хлорофилл, пероксидаза, полифенолоксидаза, активность фермента, картофель.

DOI 10.25587/SVFU.2018.66.16113

A. V. Kryzhko, L. N. Kuznetsova

Effect of Bioinsecticides Based on Bacillus thuringiensis on the Pigment Complex and the Activity of Oxidases in Potato Leaves

Institute of Agriculture of Crimea, Simferopol, Russia

Abstract. Using the bioinsecticides based on entomopathogenic bacteria B. thuringiensis in the system of potato protection from the pests causes interest in the study of the effect of these bacteria on the plants physiological condition. The literature suggests that both ^-exotoxin (water-soluble thermostable toxin) and ¿-endotoxin (parasporal protein crystals) can influence the processes of plant growth and development. The aim of this work was to study the effect of bioinsecticides on plants physiological condition. Investigation of pigment complex and the activity of oxidases in potato leaves was the object of the work. Bioinsecticides based on entomopathogenic strains 0371 and 836 (ВТ 0371 and ВТ 836) were used as a material of the research. The effect of entomopathogens was compared with the action of the chemical insecticide Biskaya. The active substance of Biskaya is a neonicotinoid thiacloprid. The studies were carried out on Nevsky variety potato plants. Chlorophyll content was determined spectrophotometrically in the total alcohol extract. The activity of peroxidase and polyphenoloxidase was determined by the method of A.N. Boyarkin, using benzidine and paraphenylenediamine as a substrate accordingly. It was noted the influence of bacterial strains on the dynamics of the total chlorophyll content in the leaves. This process depending on the composition of the toxins, produced by B. thuringiensis. Potato treatment by BT 836, which contains ¿-endotoxin and doesn't contain P-exotoxin, doesn't have a negative effect on the assimilating complex of plants. The treatment of plants by ВТ 0371, containing ^-exotoxin, reduces the amount of chlorophylls in the phases of germination, budding and flowering. The active substance of chemical insecticide Biskaya also has a negative effect on the photosynthetic complex

of potato plants. It is also showed in a decrease of chlorophyll content. When processing the potato plants, regardless of the presence of a toxin, the effect of bioinsecticides on the activity of oxidases is limited with the insignificant and short-term increase of polyphenoloxidase activity in the leaves (up to 22%), which indicates the ability of plants to maintain oxidative exchange at a stable level. In contrast to the chemical insecticide Biskaya, the treatment of potato plants with bioinsecticides based on strains B. thuringiensis 0371 and 836 increases the resistance of such plants to adverse environmental conditions. Moderate phytoimmune reaction of potato plants on the treatment with bacterial preparations which do not contain P-exotoxin, indicates their ability to maintain the oxidative metabolism at a stable level and provide an increase of the plant adaptive capacity. This fact with the predominant environmental characteristics of bioinsecticides, determines the relevance of their application.

Keywords: Bacillus thuringiensis, entomopathogen, bioinsecticide, ^-exotoxin, insecticide Biskaya, chlorophyll, peroxidase, polyphenoloxidase, enzyme activity, potato.

Введение

Применение биоинсектицидов на основе энтомопатогенных бактерий B. thuringiensis в защите картофеля от вредителей обусловливает интерес к изучению влияния данных бактерий на физиологическое состояние растений. Известно, что р-экзотоксин (водорастворимый термостабильный токсин нуклеотидной природы) и 5-эндотоксин (параспоральные белковые кристаллы), продуцируемые B. thuringiensis, могут влиять на растения как мощные биологические раздражители, факторы, мобилизуя фитоиммунитет и процессы роста [1]. Установлен также факт существования у бактерий B. thuringiensis subsp. kurstaki и subsp. dendrolimus так называемого экзогенного метаболита, имеющего как и экзотоксин адениннуклеотидную природу. ув-экзотоксин и экзогенный метаболит в дозах, присутствующих в биопрепаратах, воздействуя на генетический аппарат растения, вызывают негативное действие на проростки растений гороха (Pisum sativum L.), проявляющееся в нарушении состояния пигментных систем, биосинтеза хлорофилла, морфобиометрических показателей растений [2]. Однако применение штамма B. thuringiensis GDB-1 в качестве фиторемедианта на почвах с повышенным содержанием тяжелых металлов способствовало увеличению содержания хлорофиллов [3]. Изменения степени соотношения активности окислительных систем имеют приспособительные значения и могут рассматриваться как необходимые условия проявления устойчивости растений [4]. Такие изменения могут быть связаны с колебанием условий внешней среды, заражением инфекционными агентами, механическими повреждениями, которые, в свою очередь, оказывают влияние на функционирование ферментных систем растения, включая нарушения в жизнедеятельности клеток и целого организма. Взаимодействие ферментов пероксидазы и полифенолоксидазы в растениях обеспечивает нормальный ход окислительных процессов при различных видах негативных влияний на растение. Пероксидаза и полифенолоксидаза способны влиять на баланс фитогормонов и, следовательно, участвовать в регуляции ростовых процесов [5]. Активация таких ферментов может являться результатом новообразования дополнительных количеств белков, обладающих каталитической активностью [6]. Лабильность пероксидазы и полифенолоксидазы позволяет использовать их как маркеры для более полной характеристики защитных механизмов растений [7, 8].

Как изменения условий внешней среды можно рассматривать и применение биологических инсектицидов в технологиях защиты растений от вредителей. Известно, что в результате обработки растений биопрепаратами на основе B. thuringiensis споры и токсины бактерий могут сохраняться в агробиоценозах неделями, месяцами и годами как компонент естественной микрофлоры [9]. На верхней стороне листа энтомопатогенные компоненты наблюдаются в течение 1-5 дней, а на нижней, которая защищена от света, до 7-10 дней [10].

Наличие спор и токсинов на листьях в той или иной степени может влиять на физиологические процессы, происходящие в тонопласте растительной клетки. Одним из показателей данного процесса может быть пероксидаза, которая в основном локализуется в клетках оболочки эпидермиса, в замыкающих клетках устьица и проводящей ткани. Можно ожидать, что пероксидаза отреагирует на изменения внешних условий в первые 5-13 суток [11]. Известно, что устойчивым сортам растений свойственна высокая пероксидазная активность. Динамика активности данного фермента коррелирует с развитием устойчивости растений к абиотическим и биотическим стрессам [12].

Важную роль в реакциях растений на неблагоприятные природные условия играет и полифенолоксидаза. В стрессовых условиях (при облучении, механическом повреждении, воздействии низких температур, изменениях химического состава внешней среды) увеличивается активность фенолоксидаз, что приводит к образованиям защитных барьеров механической или химической природы [13].

Таким образом, целью наших исследований было изучение влияния биоинсектицидов на физиологическое состояние растения, а именно их устойчивость к неблагоприятным условиям внешней среды. В задачи исследования входила оценка влияния биоинсектицидов на основе штаммов B. thuringiensis на пигментный аппарат растений картофеля, а также на активность оксидаз - пероксидазы и полифенолоксидазы.

Материал и методы

Материалом для исследований послужили биоинсектициды на основе энтомопатоген-ных штаммов B. thuringiensis 0371 и 836 (в дальнейшем - ВТ 0371 и ВТ 836). Штаммы выделены из насекомых природных популяций в лаборатории энтомопатогенных микроорганизмов ФГБУН «НИИСХ Крыма». Штамм B. thuringiensis 0371 продуцирует ¿-эндотоксин и ув-экзотоксин, штамм B. thuringiensis 836 продуцирует ¿-эндотоксин, но не продуцирует ^-экзотоксин. Для культивирования штаммов была подобрана питательная среда, позволяющая получить и сохранять в течение 3 месяцев титр спор на уровне 2,0-2,5 млрд/см3. Влияние биоинсектицидов ВТ 0371 и ВТ 836 сравнивалось с действием химического инсектицида Биская, действующим веществом которого является неоникотиноид тиаклоприд. Исследования проводили на растениях картофеля сорта Невский.

Для изучения последствий обработки картофеля на динамику накопления пигментов фотосинтезирующего комплекса растения картофеля обрабатывали в фазе всходов. Для изучения активности пероксидазы и полифенолоксидазы листья с обработанных растений отбирали для анализа через каждые 2 суток в течение 12 суток. В качестве контроля использовали растения, обработанные водой.

Содержание зеленых пигментов определяли спектрофотометрически при длине волн 665 и 649 (хлорофиллы а и В) в общей спиртовой вытяжке. Концентрацию пигментов рассчитывали по формулам Wintermans и De Mots для 96%-го этанола. Результаты определения пигментов определяли в пересчете на единицу сырой массы листа [10].

Активность пероксидазы определяли по методу А. Н. Бояркина, используя в качестве субстрата бензидин. Данные рассчитывали в относительных единицах на 1 мг белка или 1 г сырой ткани. Аналогичным методом определяли полифенолоксидазу, применяя в качестве субстрата парафенилендиамин [14].

Достоверность разницы между опытными и контрольными вариантами оценивали по критерию Стьюдента.

Результаты исследования

Влияние инсектицидов на пигментный комплекс листьев картофеля

В полевых опытах на растениях картофеля сорта Невский показано, что на фазе всходов при применении ВТ 0371, который содержит ^-экзотоксин, отмечено снижение содержания суммы хлорофиллов на 18,1% (табл.). Соотношение хлорофилл а/хлорофилл

Таблица

Влияние инсектицидов на содержание хлорофилла в листьях картофеля, мг/г сырого вещества

Вариант опыта Фазы развития Хл а Хл в Хл а+ Хл в Хл а/ Хл в

Всходы 0,62±0,005 0,32±0,022 0,94±0,025 1,95

Контроль Бутонизации 0,64±0,039 0,34±0,020 0,97±0,011 1,88

Цветения 0,57±0,033 0,31±0,013 0,81±0,060 1,77

Созревания 0,29±0,025 0,11±0,008 0,41±0,034 2,47

Всходы 0,51±0,023 0,26±0,054 0,77±0,076 2,07

ВТ 0371 Бутонизации 0,49±0,015 0,24±0,020 0,74±0,034 1,99

Цветения 0,41±0,045 0,18±0,034 0,60±0,080 2,28

Созревания 0,40±0,043 0,16±0,030 0,57±0,073 2,48

Всходы 0,65±0,021 0,34±0,009 0,99±0,030 1,89

ВТ 836 Бутонизации 0,53±0,006 0,28±0,017 0,82±0,022 1,92

Цветения 0,48±0,011 0,25±0,034 0,73±0,043 1,91

Созревания 0,43±0,034 0,15±0,007 0,59±0,027 2,75

Всходы 0,50±0,036 0,26±0,029 0,77±0,060 1,88

Биская Бутонизации 0,47±0,004 0,22±0,015 0,69±0,011 2,16

Цветения 0,31±0,020 0,20±0,011 0,51±0,031 1,55

Созревания 0,40±0,008 0,16±0,004 0,56±0,012 2,48

в составляло 2,07 против 1,95 в контроле, что свидетельствует об уменьшении в нем доли хлорофилла в. При обработке растений ВТ 836, который не содержит ув-экзотоксин, негативного влияния на содержание суммы хлорофиллов не наблюдали. Соотношение хлорофилл а/хлорофилл в незначительно отличается от контрольного - 1,89 против 1,95. В варианте с обработкой растений картофеля химическим инсектицидом Биская наблюдали снижение содержания суммы хлорофиллов на 18,0%. Соотношение хлорофилл а/хлорофилл в составляет 1,88 против 1,95 в контроле, что свидетельствует об уменьшении в нем доли хлорофилла а.

В фазе бутонизации при обработке ВТ 0371 наблюдали процесс снижения содержания суммы хлорофиллов на 23,7%. Соотношение же хлорофилл а/хлорофилл в незначительно отличалось от контрольного - 1,99 против 1,88. При обработке растений ВТ 836 снижение содержания суммы хлорофиллов не превышало 15,5%. Соотношение хлорофилл а/хлорофилл в также незначительно отличалось от контрольного - 1,92 против 1,88.

В варианте с обработкой растений картофеля Биская наблюдали интенсивное угнетение содержания суммы хлорофиллов на 51,5%. Соотношение хлорофилл а/хлорофилл в существенно отличается от контрольного - 2,16 против 1,88, что свидетельствует об уменьшении в нем доли хлорофилла в.

В фазе цветения при применении ВТ 0371 снижение содержания суммы хлорофиллов отмечено на уровне 25,9%. Соотношение хлорофилл а/хлорофилл в составляло 2,28 против 1,77 в контроле, что свидетельствует об уменьшении в нем доли хлорофилла в. Существенного воздействия ВТ 836 на исследуемый показатель отмечено не было. В варианте с обработкой растений картофеля Биская наблюдали снижение содержания суммы хлорофиллов на 37,0%. Соотношение хлорофилл а/хлорофилл в в данном варианте составляло 1,55 против 1,77 в контроле, что свидетельствует об уменьшении в нем доли хлорофилла а.

В фазе созревания при обработке растений биоинсектицидами ВТ и Биская наблюдали увеличение содержания суммы хлорофиллов на 39,0 и 43,9 и 36,6% соответственно.

1,4

2 сутки 4 сутки 6 сутки 8 сутки 10 сутки 12 сутки

Контроль Е38Т 0371  ВТ 836 ИБиская

Рис. 1. Влияние инсектицидов на активность пероксидазы в листьях картофеля

Соотношение хлорофилл а/хлорофилл в составило 2,47 в контроле против 2,48; 2,75 и 24,0 соответственно, что свидетельствует об уменьшении в нем доли хлорофилла а.

Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что биоинсектициды на основе B. thuringiensis в зависимости от продуцируемых штаммами-продуцентами токсинов различаются по влиянию на фотосинтезирующий комплекс растений картофеля. Так, при обработке растений биоинсектицидом на основе ВТ 0371, который содержит ¿-эндотоксин и ув-экзотоксин, выявлен факт уменьшения содержания хлорофилла в в фазах всходов и бутонизации. Уменьшение концентрации хлорофилла в свидетельствует о том, что ^-экзотоксин подавляет деятельность светособирающего комплекса, который передает энергию света на реакционный центр [11]. Обработка же растений ВТ 836, который содержит ¿-эндотоксин и не содержит ^-экзотоксин, не оказывает негативного влияния на ассимилирующий аппарат растений картофеля.

Химический инсектицид Биская также оказывает негативное действие на фотосинтетический аппарат растений, но оно направлено на уменьшение содержания хлорофилла а, который непосредственно составляет реакционный центр фотосистемы. Угнетение содержания хлорофиллов уже на фазе всходов (на 18,1% к контролю) может свидетельствовать и о нарушении баланса между количеством поглощенной пигментами световой энергии и эффективностью ее использования в фотосинтетических реакциях [15].

Влияние инсектицидов на активность оксидаз в листьях картофеля

Исследования, направленные на определение влияния ВТ 0371 и ВТ 836 в сравнении с химическим инсектицидом Биская на активность ферментов пероксидазы и полифенолоксидазы, показали следующие закономерности.

При изучении динамики активности пероксидазы (рис. 1), анализы, проведенные через 2 суток после обработки растений, показали уменьшение активности пероксидазы в вариантах с ВТ 0371, ВТ 836 и Биская на 25,7 и 37,8 и 32,4 % соответственно. На 4-е, 6-е и 10-е сутки ни в одном из вариантов опыта существенных колебаний активности пероксидазы отмечено не было. Только в варианте обработки растений картофеля ВТ 836 на 8-е сутки наблюдалось снижение активности исследуемого фермента на 40,0%, а на 12-е сутки повышение активности на 39,8%.

Увеличение активности пероксидазы в листьях, обработанных биоинсектицидами, в первые дни возможно объяснить фитоиммунологическим ответом растительных клеток на контакт с чужеродным микробным агентом. По мнению отдельных исследователей [11], пероксидаза активизируется при многих изменениях и нарушениях метаболизма

0,12

—

й

2 сутки 4 сутки б сутки 8 сутки 10 сутки 12 сутки

О Контроль ЕВТ 0371  ВТ 836 Й Биская

Рис. 2. Влияние инсектицидов на активность полифенолоксидазы в листьях картофеля

растений, а некоторые изоэнзимы в ответ на стресс синтезируются de novo, хотя нет достаточно полного объяснения механизма регуляции синтеза ферментов и проявления их свойств при стрессовом и патологическом влиянии.

Следовательно, умеренное повышение активности пероксидазы в листьях растений после обработки биоинсектицидами на основе B. thuringiensis может свидетельствовать о фитоиммунологическом ответе клеток на контакт с микробным агентом, который растения не воспринимают как существенный стресс-фактор. Напротив, известно, что такие незначительные повышения пероксидазы в листьях картофеля стимулируют фитоимунные процессы и рост, повышая комплексную устойчивость растений, способствуют повышению урожайности [16].

При изучении полифенолоксидазы (рис. 2) анализы, проведенные через 2 и 4 суток после обработки растений ВТ 0371 и ВТ 836, показали снижение динамики активности фермента в листьях. Через 2 суток уменьшение активности полифенолоксидазы составляло 25,00% и 10,14%, а на 4-е сутки - 15,00% и 7,50% соответственно. Обработка растений Биская существенного влияния на активность фермента не оказывала.

На 6-е, 8-е и 10-е сутки ни в одном из исследуемых вариантов существенных колебаний активности данного фермента в образцах листьев отмечено не было. Исключение составляли варианты с обработкой растений ВТ 836 на 6-е и 10-е сутки, в которых наблюдали увеличение активности полифенолоксидазы на 22,22 и 7,89%, и вариант с обработкой картофеля Биская на 8-е сутки, где отмечали увеличение активности фермента на 30,88%.

На 12-е сутки опыта во всех вариантах колебание активности полифенолоксидазы было незначительным и не превышало14,3%.

Таким образом, влияние биоинсектицидов на основе B. thuringiensis при обработке растений картофеля ограничивается несущественным и кратковременным повышением активности полифенолоксидазы в листьях.

Заключение

В результате исследований проведена оценка влияния биоинсектицидов на основе штаммов B. thuringiensis в зависимости от состава продуцируемых ими токсинов на пигментный аппарат растений картофеля. Установлено, хотя и незначительное (до 39%), снижение содержания хлорофиллов в листьях в фазах всходов, бутонизации и цветения при обработке растений биоинсектицидом, содержащим ¿-эндотоксин и ув-экзотоксин

(ВТ 0371). Не оказывает негативного влияния на фотосинтетический аппарат биоинсектицид, не содержащий ¿^-экзотоксин ( ВТ 836).

Негативное действие на фотосинтетический аппарат растений оказывает и действующее вещество химического инсектицида Биская, проявляющееся в уменьшении содержания хлорофилла на всех фазах развития растений.

Установлено также, что при обработке растений картофеля вне зависимости от наличия того или иного токсина, влияние биоинсектицидов на активность оксидаз ограничивается несущественным и кратковременным повышением активности полифенолоксидазы в листьях (максимально до 22%), что свидетельствует о способности растений сохранять окислительный обмен на стабильном уровне.

В отличие от химического инсектицида Биская обработка растений картофеля биоинсектицидами на основе штаммов B. thuringiensis 0371 и 836 способствует увеличению устойчивости таких растений к неблагоприятным условиям внешней среды. А это, в свою очередь, позволяет обеспечить надежные пути ведения экологически безопасного сельского хозяйства и в значительной мере решать актуальные экологические проблемы.

Л и т е р а т у р а

1. Симонова А. А., Терехин Д. А., Терехина Л. Д., Каменек Л. К Стимулирующее действие дельта-эндотоксина Bacillus thuringiensis kurstaki штамм Z-52 на ювенильные растения. Материалы II Международной научно-практической конференции «Постгеномная эра в биологии и проблемы», (Казань, 15-16 сентября 2008 г.). - Казань, 2008. - C. 119-120.

2. Воронина О. Е. Экологические аспекты производства и применения энтомоцидных препаратов. Тезисы докладов Всероссийской конференции «Научные аспекты экологических проблем России», посященной 90-летию со дня рождения академика А. Л. Яншина, (Москва, 13-16 июня, 2001). - Спб, 2001. - С. 277.

3. Babu A.G., Kim J.D., Oh B.T. Enhancement of heavy metal phytoremediation by Alnus firma with endophytic Bacillus thuringiensis GDB-1 // Journal of hazardous materials. - 2013. - V 250. - P. 477-483.

4. Taheri, P., Kakooee T. Reactive oxygen species accumulation and homeostasis are involved in plant immunity to an opportunistic fungal pathogen // Journal of Plant Physiology. - V.216. - 2017. - P. 152-163.

5. Давидянц Э. С. Влияние обработки семян тритерпеновыми гликозидами на активность пероксидазы, ИУК-оксидазы и полифенолоксидазы в проростках пшеницы // Химия растительного сырья. - 2013. - № 4. - С. 225-231

6. Poiatti, V. A., Dalmas F. R., L. V. Astarita Defense mechanisms of Solanum tuberosum L. in response to attack by plant-pathogenic bacteria // Biological Research. - V. 42 . - № 2. - 2009. - P. 205-215.

7. Graskova, I. A., Epova K. Y., Kusnetsova E. V., Kolesnichenko A. V., Voinikov V. K. The role of peroxidases weakly bound to the cell walls in potato resistance to ring rot infection // Dokladybiological sciences proceedlings of the Academy of Sciences of the USSR, Biological sciences sections. - V. 423. - 2008.

- P. 425-427.

8. Красова Н. Г. Адаптивный потенциал сортов яблони // Садоводство и винградорство. - 2015.

- № 3. - С. 38-45.

9. Reardon R. C., Haissig K. Efficacy and field persistence of Bacillus thuringiensis after ground application to balsam fir and white spruce in Wisconsin // The Canadian Entomologist. - 1984. - Vol.116. - P. 153-158.

10. Drehval, O. A., Hordiienko A. S., Cherevach N. V., Kurdysh I. K., Vinnikov A. I. Use of bentonite in production of granular bioinsecticide on the basis of Bacillus thuringiensis// Mikrobiolohichnyi zhurnal

- V. 70. - № 1. - 2008. - P. 31-36.

11. Андреева В. А. Фермент пероксидаза: Участие в защитном механизме растений. - М.: Наука, 1988. - 128 с.

12. Минаева О. М., Апенышева М. В., Акимова Е. Е., Блинова П. А., Куровский А. В. Влияние бактеризации семян пшеницы на активность оксидаз в растениях при фитопатогенной нагрузке // Достижения науки и техники АПК. - 2015. - Т. 29. - № 6. - С. 53-56.

13. Chasov A. V., Beckett R. P., Minibayeva F. V. Activity of Redox Enzymes in the Thallus of

Anthoceros natalensis // Biochemistry. - V. 80. - № 9. - 2015. - P. 1157-1168.

14. Гавриленко В. Ф., Ладыгина М. Е., Хандобина Л. М. Большой практикум по физиологии растений. Фотосинтез. Дыгхание. - М.: Высш. школа, 1975. - 392 с.

15. Lichtenthaler H. K. Chlorophylls and carotenoides-pigments of photosyhthetic biomembrans // Methods in ensymology. - 1987. - V.148. - P. 350-382.

16. Graskova I. A., Kuznetsova E. V., Zhivetiev M. A., Chekurov V. M., Voinikov V. K. Effect of coniferous extract on potato plants // Journal of Stress Physiology & Biochemistry. - V. 5. № 1-2. - 2009. - P. 38-44.

R e f e r e n c e s

1. Simonova A. A., Terekhin D. A., Terekhina L. D., Kamenek L. K Stimuliruyushchee dejstvie del'ta-ehndotoksina Bacillus thuringiensis kurstaki shtamm Z-52 na yuvenil'nye rasteniya. Materialy II Mezhdunarodnoj nauchno-prakticheskoj konferencii «Postgenomnaya ehra v biologii i problemy», (Kazan', 15-16 sentyabrya 2008 g.). - Kazan', 2008. - C. 119-120.

2. Voronina O. E. EHkologicheskie aspekty proizvodstva i primeneniya ehntomocidnyh preparatov. Tezisy dokladov Vserossijskoj konferencii «Nauchnye aspekty ehkologicheskih problem Rossii», posyashchennоj 90-letiyu so dnya rozhdeniya akademika A. L. YAnshina, (Moskva, 13-16 iyunya, 2001). - Spb, 2001. - S. 277.

3. Babu A.G., Kim J.D., Oh B.T. Enhancement of heavy metal phytoremediation by Alnus firma with endophytic Bacillus thuringiensis GDB-1 // Journal of hazardous materials. - 2013. - V 250. - P. 477-483.

4. Taheri, P., Kakooee T. Reactive oxygen species accumulation and homeostasis are involved in plant immunity to an opportunistic fungal pathogen // Journal of Plant Physiology. - V.216. - 2017. - P. 152-163.

5. Davidyanc EH. S. Vliyanie obrabotki semyan triterpenovymi glikozidami na aktivnost' peroksidazy, IUK-oksidazy i polifenoloksidazy v prorostkah pshenicy // Himiya rastitel'nogo syr'ya. - 2013. - № 4.

- S. 225-231

6. Poiatti, V. A., Dalmas F. R., L. V. Astarita Defense mechanisms of Solanum tuberosum L. in response to attack by plant-pathogenic bacteria // Biological Research. - V. 42 . - № 2. - 2009. - P. 205-215.

7. Graskova, I. A., Epova K. Y., Kusnetsova E. V., Kolesnichenko A. V., Voinikov V. K. The role of peroxidases weakly bound to the cell walls in potato resistance to ring rot infection // Dokladybiological sciences proceedlings of the Academy of Sciences of the USSR, Biological sciences sections. - V. 423. - 2008.

- P. 425-427.

8. Krasova N. G. Adaptivnyj potencial sortov yabloni // Sadovodstvo i vingradorstvo. - 2015. - № 3.

- S. 38-45.

9. Reardon R. C., Haissig K. Efficacy and field persistence of Bacillus thuringiensis after ground application to balsam fir and white spruce in Wisconsin // The Canadian Entomologist. - 1984. - Vol.116.

- P. 153-158.

10. Drehval, O. A., Hordiienko A. S., Cherevach N. V., Kurdysh I. K., Vinnikov A. I. Use of bentonite in production of granular bioinsecticide on the basis of Bacillus thuringiensis// Mikrobiolohichnyi zhurnal - V. 70. - № 1. - 2008. - P. 31-36.

11. Andreeva V. A. Ferment peroksidaza: Uchastie v zashchitnom mekhanizme rastenij. - M.: Nauka, 1988. - 128 s.

12. Minaeva O. M., Apenysheva M. V., Akimova E. E., Blinova P. A., Kurovskij A. V. Vliyanie bakterizacii semyan pshenicy na aktivnost' oksidaz v rasteniyah pri fitopatogennoj nagruzke // Dostizheniya nauki i tekhniki APK. - 2015. - T. 29. - № 6. - S. 53-56.

13. Chasov A. V., Beckett R. P., Minibayeva F. V. Activity of Redox Enzymes in the Thallus of Anthoceros natalensis // Biochemistry. - V. 80. - № 9. - 2015. - P. 1157-1168.

14. Gavrilenko V. F., Ladygina M. E., Handobina L. M. Bol'shoj praktikum po fiziologii rastenij. Fotosintez. Dyhanie. - M.: Vyssh. shkola, 1975. - 392 s.

15. Lichtenthaler H. K. Chlorophylls and carotenoides-pigments of photosyhthetic biomembrans // Methods in ensymology. - 1987. - V.148. - P. 350-382.

16. Graskova I. A., Kuznetsova E. V., Zhivetiev M. A., Chekurov V. M., Voinikov V. K. Effect of coniferous extract on potato plants // Journal of Stress Physiology & Biochemistry. - V. 5. № 1-2. - 2009.

- P. 38-44.