АВТОМАТИЗИРОВАННЫЕ КОЛОРИМЕТРИЧЕСКИЕ СИСТЕМЫ АНАЛИЗА ПОЛИСАХАРИДОВ

1. Автоматический способ определения концентрации сахарида, включающий следующие этапы:
1) приготовление одного или более стандартных растворов сахарида,  включающее следующие этапы:
(а) перенесение части маточного рабочего раствора сахарида из контейнера, в котором содержится указанный маточный рабочий раствор сахарида, во множество емкостей для стандартного раствора сахарида;
(б) перенесение части разбавителя из контейнера, в котором содержится разбавитель, в указанное множество емкостей для стандартного раствора сахарида и
(в) перемешивание содержимого указанного множества емкостей для стандартного раствора сахарида с получением одного или более стандартных растворов сахарида;
2) приготовление одного или более разведенных опытных образцов полисахарида, включающее следующие этапы:
(а) перенесение части опытного образца полисахаридов из контейнера, который содержит указанный опытный образец полисахарида, во множество емкостей для опытного образца полисахарида;
(б) перенесение части разбавителя из указанного контейнера для разбавителя в указанное множество емкостей для опытного образца полисахарида и
(в) перемешивание содержимого указанного множества емкостей для опытного образца полисахарида с получением указанного одного или более разбавленных опытных образцов полисахарида;
3) перенесение части разбавителя из указанного контейнера для разбавителя в множество лунок многолуночного планшета;
4) перенесение части указанного одного или более стандартных растворов сахарида из каждой емкости из указанного множества емкостей для стандартного раствора сахарида во множество лунок указанного многолуночного планшета;
5) перенесение части указанного одного или более разбавленных опытных образцов полисахарида из каждой из указанных емкостей для опытного образца полисахарида во множество лунок указанного многолуночного планшета;
6) перенесение части кислотного реагента из контейнера, который содержит кислотный реагент, во все указанные лунки указанного многолуночного планшета, содержащие указанный разбавитель, указанные один или более стандартных растворов сахарида и указанные один или более разбавленных опытных образцов полисахарида;
7) перемешивание содержимого всех указанных лунок указанного многолуночного планшета, содержащих указанный разбавитель, указанные один или более стандартных растворов сахарида и указанных один или более разбавленных опытных образцов полисахарида;
8) накрывание указанного многолуночного планшета крышкой;
9) нагрев указанного многолуночного планшета;
10) охлаждение указанного многолуночного планшета;
11) встряхивание указанного многолуночного планшета и
12) измерение спектральной поглощательной способности содержимого всех указанных лунок указанного многолуночного планшета, содержащих указанный разбавитель, указанные один или более стандартных растворов сахарида и указанные один или более разбавленных опытных образцов полисахарида, причем этапы 1-12 выполняются без вмешательства человека.
2. Способ по п.1, дополнительно включающий этап перенесения части окрашивающего реагента из содержащего его контейнера во все указанные лунки указанного многолуночного планшета, содержащие указанный разбавитель, указанные один или более стандартных растворов сахарида и указанные один или более разбавленных опытных образцов полисахарида, после охлаждения указанного многолуночного планшета.
3. Способ по п.2, отличающийся тем, что указанный окрашивающий реагент содержит метагидрокси-дифенил.
4. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что указанный рабочий раствор сахарида содержит один или более сахаридов, выбранных из группы, состоящей из рамнозы, галактозы, глюкозы, галактуроновой кислоты, пировиноградной кислоты, N-ацетил D-галактозамина и N-ацетил D-маннозамина.
5. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что указанный опытный образец полисахарида содержит один или более полисахаридов бактериальной капсулы, активированный полисахарид бактериальной капсулы или конъюгат полисахарида бактериальной капсулы и белка.
135
6. Способ по п.5, отличающийся тем, что указанный полисахарид бактериальной капсулы содержит полисахарид капсулы бактерии, выбранной из группы бактерий, состоящей из N. meningitidis серогрупп Y, N. meningitidis серогруппы W, Streptococcus группы B серотипа Ia, Streptococcus группы В серотипа III, S.pneumoniae серотипа 1, S.pneumoniae серотипа 3, S.pneumoniae серотипа 4, S.pneumoniae серотипа 5, S.pneumoniae серотипа 6А, S.pneumoniae серотипа 6B, S.pneumoniae серотипа 7F, S.pneumoniae серотипа 9V, S.pneumoniae серотипа 14, S.pneumoniae серотипа 18С, S.pneumoniae серотипа 19А, S.pneumoniae серотипа 19F, S.pneumoniae серотипа 23F, и их комбинаций.
7. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный кислотный реагент включает серную кислоту и антрон.
8. Способ по п.2, отличающийся тем, что указанный кислотный реагент включает серную кислоту и тетраборат.
9. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что указанные контейнеры, которые содержат рабочий раствор сахарида, указанные приемные емкости для стандартного раствора сахарида, указанные контейнеры, которые содержат опытный образец полисахарида и указанные приемные емкости для опытных образцов полисахарида выбирают из группы, состоящей из стеклянных пробирок, пластиковых пробирок, стеклянных флаконов, пластиковых флаконов, пластиковых центрифужных пробирок, пластиковых микроцентрифужных пробирок и их комбинаций.
10. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что указанный разбавитель выбирают из группы, включающей воду для инъекций, физиологический раствор, сукцинат-забуференный раствор и их комбинаций.
11. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что указанный разбавитель представляет собой воду для инъекций.
12. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что указанное перенесение осуществляют с помощью автоматического устройства для работы с жидкостями.
13. Способ по п.12, отличающийся тем, что указанное устройство для работы с жидкостями включает одну или несколько многоканальных пипеток.
14. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что указанное перемешивание осуществляют с помощью повторяющегося пипетирования.
15. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что нагревание указанного многолуночного планшета осуществляют с помощью нагревательной пластины.
16. Автоматический способ определения концентрации сахарида, включающий следующие этапы:
1) приготовление одного или более стандартных растворов сахарида, включающее следующие этапы:
(а) перенесение части рабочего раствора сахарида, содержащего один или более сахаридов, выбранный из группы, состоящей из рамнозы, галактозы, глюкозы, галактуроновой кислоты, пировиноградной кислоты, N-ацетил-D-галактозамина и N-ацетил-D-маннозамина из контейнера, который содержит маточный рабочий раствор сахарида во множество приемных емкостей для стандартного раствора сахарида;
(б) перенесение части разбавителя из содержащего его контейнера в указанное множество приемных емкостей для стандартного раствора сахарида и
(в) перемешивание содержимого указанного множества приемных емкостей для стандартного раствора сахарида с приготовлением указанного одного или более стандартных растворов сахарида;
2) приготовление одного или более разбавленных опытных образцов полисахарида, включающее следующие этапы:
(а) перенесение части опытного образца полисахарида, содержащего полисахарид капсулы бактерии, выбранной из группы бактерий, состоящей из S.pneumonia серотипов 3, 4, 6А, 6B, 7F, 9V, 14, 18С, 19А и 23F, из контейнера, который содержит опытный образец полисахарида, во множество приемных емкостей для опытного образца полисахарида;
(б) перенесение части разбавителя из указанного контейнера для разбавителя в указанное множество приемных емкостей для опытного образца полисахарида и
(в) перемешивание содержимого указанного множества приемных емкостей для опытного образца полисахарида с приготовлением указанных одного или более разбавленных опытных образцов полисахарида;
3) перенесение части разбавителя из указанного контейнера для разбавителя в множество лунок многолуночного планшета
4) перенесение части указанных одного или более стандартных растворов сахарида из каждой из указанных приемных емкостей для стандартного раствора сахарида во множество лунок указанного многолуночного планшета;
5) перенесение части указанного одного или более разбавленных опытных образцов полисахарида из каждой из указанных приемных емкостей для разбавленного опытного образца полисахарида во множество лунок указанного многолуночного планшета;
6) перенесение части сернокислого антронового реагента из контейнера, который содержит сернокислый антроновый реагент, во все указанные лунки указанного многолуночного планшета, содержащие указанный разбавитель, указанные один или более стандартных растворов сахарида и указанные один или более разбавленных опытных образцов полисахарида;
7) перемешивание содержимого всех указанных лунок указанного многолуночного планшета, содержащих указанный разбавитель, указанные один или более стандартных растворов сахарида и указанные один или более разбавленных опытных образцов полисахарида;
8) накрывание указанного многолуночного планшета крышкой;
9) нагревание указанного многолуночного планшета;
10) охлаждение указанного многолуночного планшета;
11) встряхивание указанного многолуночного планшета и
12) измерение спектральной поглощательной способности содержимого всех указанных лунок указанного многолуночного планшета, содержащих указанный разбавитель, указанные один или более стандартных растворов сахарида и указанные один или более разведенных опытных образцов полисахарида, причем этапы 1-12 выполняются без вмешательства человека.
17. Способ по п.16, отличающийся тем, что указанный полисахарид бактериальной капсулы, выбранный из группы бактерий, состоящей из S.pneumoniae серотипов 3, 4, 6А, 6B, 7F, 9V, 14, 18С, 19А, 19F, и 23F, представляет собой активированный бактериальный капсульный полисахарид.
18. Способ по п.16, отличающийся тем, что указанный полисахарид бактериальной капсулы, выбранный из группы бактерий, состоящей из S.pneumoniae серотипов 3, 4, 6А, 6B, 7F, 9V, 14, 18С, 19А, 19F, и 23F, конъюгирован с белком-носителем.
197
19. Способ по п.18, отличающийся тем, что указанный белок-носитель представляет собой CRM.
20. Автоматический способ определения концентрации сахарида, включающий следующие этапы:
1) приготовление одного или более стандартных растворов сахарида, включающее следующие этапы:
(а) перенесение части рабочего раствора сахарида, содержащего галактуроновую кислоту, из контейнера, который содержит рабочий раствор сахарида, во множество приемных емкостей для стандартного раствора сахарида,
(б) перенесение части разбавителя из контейнера, который содержит разбавитель, в указанное множество приемных емкостей для стандартного раствора сахарида; и
(в) перемешивание содержимого указанного множества приемных емкостей для стандартного раствора сахарида с приготовлением указанного одного или более стандартных растворов сахарида;
2) приготовление одного или более разбавленных опытных образцов полисахарида, включающее следующие этапы:
(а) перенесение части опытного образца полисахарида, который содержит полисахарид бактериальной капсулы, выбранный из группы бактерий, состоящей из S.pneumoniae серотипов 1 и 5, из контейнера, который содержит опытный образец полисахарида во множество приемных емкостей для опытного образца полисахарида;
(б) перенесение части разбавителя из контейнера, который содержит разбавитель, в указанное множество приемных емкостей для опытного образца полисахарида; и
(в) перемешивание содержимого указанного множества приемных емкостей для опытного образца полисахарида с приготовлением указанных одного или более разбавленных опытных образцов полисахарида
3) перенесение части разбавителя из указанного контейнера - источника разбавителя во множество лунок многолуночного планшета;
4) перенесение части указанного одного или более стандартных растворов сахарида из каждой из указанных приемных емкостей для стандартного раствора сахарида во множество лунок указанного многолуночного планшета;
5) перенесение части указанного одного или более разбавленных опытных образцов полисахарида из каждой из указанных приемных емкостей для опытного образца полисахарида во множество лунок указанного многолуночного планшета;
6) перенесение части сернокислого тетраборатного реагента из контейнера, который содержит сернокислый тетраборатный реагент, во все указанные лунки указанного многолуночного планшета, содержащие указанный разбавитель, указанные один или более стандартных растворов сахарида и указанные один или более разбавленных опытных образцов полисахарида;
7) перемешивание содержимого всех указанных лунок указанного многолуночного планшета, содержащих указанный разбавитель, указанные один или более стандартных растворов сахарида и указанные один или более разбавленных опытных образцов полисахарида;
8) накрывание указанного многолуночного планшета крышкой;
9) нагревание указанного многолуночного планшета;
10) охлаждение указанного многолуночного планшета;
11) перенесение части окрашивающего реагента, содержащего мета-гидрокси-фенил из контейнера, который содержит окрашивающий реагент, во все указанные лунки указанного многолуночного планшета, содержащие указанный разбавитель, указанные один или более стандартных растворов сахарида и указанные один или более разбавленных опытных образцов полисахарида;
12) встряхивание указанного многолуночного планшета и
13) измерение спектральной поглощательной способности содержимого всех указанных лунок указанного многолуночного планшета, содержащих указанный разбавитель, указанные один или более стандартных растворов сахарида и указанные один или более разбавленных опытных образцов полисахарида, причем этапы 1-13 осуществляются без вмешательства человека.
21. Способ по п.20, отличающийся тем, что указанный полисахарид бактериальной капсулы, выбранный из группы бактерий, состоящей из
S.pneumoniae серотипов 1 и 5, представляет собой активированный бактериальный капсульный полисахарид.
22. Способ по п.20, отличающийся тем, что указанный полисахарид бактериальной капсулы, выбранный из группы бактерий, состоящей из
S.pneumoniae серотипов 1 и 5, конъюгирован с белком-носителем.
197
23. Способ по п.22, отличающийся тем, что указанный белок-носитель 15 представляет собой CRM.