Регламентирующие документы и методы, используемые для оценки микробиологических показателей качества питьевой воды

Регламентирующие документы и методы, используемые для оценки микробиологических показателей качества питьевой воды

М.К.Джолочиева

Научно-производственное объединение "Профилактическая медицина", г.Бишкек

Вода - важнейшая составляющая среды обитания человека. Обеспечение населения безопасной питьевой водой, качество которой должно соответствовать установленным гигиеническим требованиям в эпидемическом отношении является первоочередной задачей для санитарно-эпидемиологического благополучия населения.

Целью настоящей работы является анализ регламентирующих документов по безопасности питьевой воды и изучение методов оценки по микробиологическим индикаторам.

Как известно, Кыргызская Республика является членом Всемирной торговой организации с 1998 года, что обусловило необходимость гармонизации нормативных правовых актов с международными стандартами. В связи, с чем был начат процесс пересмотра существующей законодательной базы и регламентирующих документов, в частности, по питьевой воде. Жогорку Кенешем КР 21.04.2011 г. был принят Закон Кыргызской Республики "Об основах технического регулирования в КР". Этот Закон является Техническим регламентом и устанавливает обязательные для применения и исполнения требования к объектам технического регулирования. Объектом Технического регламента является: питьевая вода, находящаяся в системах питьевого водоснабжения; предназначенная для употребления людьми и использования в производстве пищевых продуктов.

В настоящем Техническом регламенте представлены нормативные показатели безопасности питьевой воды как для централизованных систем (приложение 1), так и не централизованного водоснабжения (приложение 2) [2].

Закон КР Технический Регламент "О безопасности питьевой воды", в соответствии со статьей 20, вступает в силу по истечении одного года со дня официального опубликования, т.е. с 21 апреля 2012 года. До вступления в силу настоящего Закона действовали требования, установленные ранее, в соответствии с нормативными правовыми актами Кыргызской Республики:

- СанПиН 2.1.4.002-03 "Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества";

- СанПиН 2.1.4.544-96 "Требования к качеству воды нецентрализованного водоснабжения. Санитарная охрана источников";

- ГОСТ 18963-73 "Вода питьевая. Методы санитарно-бактериологического анализа";

- МУК 4.2.1018-01 "Методы санитарно-микробиологического анализа питьевой воды: Методические указания";

- МУ 2.1.4.1184-03 "Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды, расфасованной емкости. Контроль качества";

- КМС ISO 19458:2009 "Качество воды. Отбор проб для микробиологического анализа".

Нами был проведен сравнительный анализ микробиологических показателей качества питьевой воды согласно СанПиН 2.1.4.002-03, СанПиН 2.1.4.544-96 и Техническому регламенту [7, 8, 2]. Данные основных показателей безопасности питьевой воды из централизованных систем и нецентрализованного водоснабжения приведены в таблицах 1 и 2.

В техническом регламенте для микробиологической оценки качества питьевой воды из централизованных систем, отменены оп-

Таблица 1. Сравнительная характеристика микробиологических показателей качества

питьевой воды из централизованных систем

Показатели Закон Кыргызской Республики. Технический регламент «О безопасности питьевой воды» принятый Жогорку Кенешем КР 21.04.2011г. Нормативные показатели безопасности питьевой воды из централизованных систем СанПиН 2.1.4.002-03 «Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества»

Единицы измерения Нормативы ПДК Единицы измерения Нормативы ПДК

Термотолерантные колиформные бактерии отменен отменен Число бактерий в 100 мл <1> отсутствие

Общие колиформные бактерии <2> отменен отменен Число бактерий в 100 мл <1> отсутствие

Общее микробное число<2> отменен отменен Число образующих колонии бактерий в 1 мл не более 50

Колифаги <3> Число бляшко-образующих единиц (БОЕ) в 100 мл отсутствие Число бляшко-образующих единиц (БОЕ) в 100 мл отсутствие

Эшерихия коли (Esherichia coli) Число бактерий в 100 мл отсутствие X X

Энтерококки (Enterococci) Число бактерий в 100 мл отсутствие X X

ределение показателей общего микробного числа и общих колиформных бактерий и введены новые показатели Escherichia coli, Enterococci, которые ранее не регламентировались в СанПиН 2.1.4.002-03.

Данный технический регламент гармонизирован с Директивой Совета Европейского Союза (98/83/ЕС) "О качестве воды, предназначенной для употребления людьми".

В странах Европы для исследования питьевой воды, наиболее широко используют стандарты, регулирующие качество питьевой воды в соответствии с Директивой ЕС: ISO 19458 "Качество воды - отбор проб для микробиологических анализов" [10]; ISO 9308-1 "Качество воды - Определение и подсчет E.coli и колиформных бактерий" [11]; ISO 6461-2: 1993 "Качество воды - Определение и подсчет спор сульфитредуцирующих анаэробов (клостридии)" [12]; ISO 12780 "Качество воды - Определение и подсчет Pseudomonas aeroginosa" [2]; ISO 7899-2 "Качество воды -подсчет и определение кишечных энтерококков" [13]. В соответствии с требованиями Директива ЕС для анализа проб воды, применяется метод мембранных фильтров с использованием различных фильтрующих мембран.

В европейском регионе имеется Евро-

пейский комитет по Стандартизации, где утверждаются стандарты в соответствии с их уставом. Далее этот стандарт обязуются применять следующие страны: Бельгия, Дания, Германия, Финляндия, Франция, Греция, Ирландия, Исландия, Италия, Люксембург, Нидерланды, Норвегия, Австрия, Португалия, Швеция, Швейцария, Испания, Чешская Республика и Объединенное Королевство.

Качество питьевой воды должно соответствовать гигиеническим нормативам. При лабораторно-производственном контроле качества воды перед её поступлением в водопроводную сеть проводится анализ на микробиологические, химические и органолепти-ческие показатели [9].

К показателям безопасности питьевой воды относятся: микробиологические, пара-зитологические, органолептические, радиологические, обобщенные показатели, неорганические и органические вещества.

Питьевая вода должна быть безопасна в эпидемическом и радиационном отношении, безвредна по химическому составу, и иметь благоприятные органолептические свойства [7].

Безопасность питьевой воды в эпидемическом отношении определяется ее соответствием нормативам по микробиологическим

Таблица 2. Сравнительная характеристика микробиологических показателей качества питьевой воды из нецентрализованного водоснабжения

Показатели Закон Кыргызской Республики. Технический регламент «О безопасности питьевой воды» принятый Жогорку Кенешем КР 21.04.2011г. Нормативные показатели безопасности питьевой воды нецентрализованного водоснабжения СанПиН 2.1.4.544-96 «Требования к качеству воды нецентрализованного водоснабжения. Санитарная охрана источников»

Единицы измерения Нормативы ПДК Единицы измерения Нормативы ПДК

Термотолерантные колиформные бактерии Число бактерий в 100 мл отсутствие Число бактерий в 100 мл отсутствие

Общие колиформные бактерии <2> Число бактерий в 100 мл отсутствие Число бактерий в 100 мл отсутствие

Общее микробное число<2> Число образующих колонии микробов в 1 мл 100 Число образующих колонии микробов в 1 мл 100

Колифаги <3> Число бляшко-образующих единиц (БОЕ) в 100 мл отсутствие Число бляшко-образующих единиц (БОЕ) в 100 мл отсутствие

Примечание:

<1> При определении проводится трехкратное исследование по 100 мл отобранной пробы воды.

<2> Превышение норматива не допускается в 95% проб, отбираемых в точках водозабора наружной и внутренней

водопроводной сети в течении 12 месяцев, при количестве исследуемых проб не менее 100 за год.

<3> Определение проводится только в системах водоснабжения из поверхностных источников перед подачей воды в

распределительную сеть.

и паразитологическим показателям [3, 7].

При исследовании микробиологических показателей качества питьевой воды из централизованных систем каждая проба, исследуется на наличие термотолерантных колиформ-ных бактерий, общих колиформных бактерий, общего микробного числа и колифагов [9].

Контроль за качеством подаваемой воды осуществляется общепринятыми микробиологическими методами [4], опирающимися на количественные параметры.

Микробиологические исследования - наиболее чувствительные, хотя и не самые быстрые способы обнаружения загрязнения систем питьевого водоснабжения. Этот процесс направлен на поиск очень малых количеств жизнеспособных организмов. Так как питательная среда и условия инкубации, а также характер и давность взятия пробы воды способны оказать влияние на выделяемые виды и их подсчет, микробиологические исследования могут иметь разную степень точности. Это означает, что стандартизация ме-

тодов и техника лабораторных анализов очень важна, если ставится задача иметь единые критерии микробиологического качества воды для различных лабораторий и в международном масштабе.

Частные анализы на наличие организмов-индикаторов фекального загрязнения остаются наиболее надежным и конкретным способом оценки гигиенического качества воды [6].

Для микробиологического исследования воды существует: ряд методов, в частности метод мембранных фильтров, бродильный метод, титрационный метод, метод прямого посева.

Метод мембранных фильтров основан на фильтрации установленного объема воды через мембранные фильтры, выращивании посевов на дифференциальной питательной среде с лактозой и последующей идентификацией колоний по культуральным и биохимическим свойствам.

Сущность бродильного метода заключа-

ется в посеве определенных объемов анализируемой воды и подращивании при температуре 37±0,5°С в средах накопления с последующим высевом бактерий на плотную среду Эндо, дифференцировании выросших бактерий и определении наиболее вероятного числа бактерий группы кишечных палочек в 1 литре воды по таблицам.

Титрационный метод основан на накоплении бактерий после посева установленного объема воды в жидкую питательную среду, с последующим пересевом на дифференциальную плотную питательную среду с лактозой и идентификацией колоний по культу-ральным и биохимическим тестам. Титрацион-ным методом определяют количество общих и термотолерантных колиформных бактерий.

Титрационный метод может быть использован: при отсутствии материалов и оборудования, необходимых для выполнения анализа методом мембранной фильтрации; при анализе воды с большим содержанием взвешенных веществ; в случае преобладания в воде посторонней микрофлоры, препятствующей получению на фильтрах изолированных колоний общих колиформных бактерий.

Метод прямого посева основан на выращивании посевов в железо-сульфитном агаре в условиях, приближенных к анаэробным, и подсчете числа черных колоний. Этим методом определяют споры сульфитредуцирую-щих клостридий.

Для определения колифагов можно использовать титрационный метод и прямой метод.

Определение колифагов титрационным методом в питьевой воде заключается в предварительном накоплении колифагов в среде обогащения на культуре Е. coli и последующем выявлении зон лизиса (просветления) газона Е. coli на питательном агаре. Метод предназначен для проведения текущего контроля качества питьевой воды.

Определение колифагов прямым методом в питьевой воде заключается в исследовании нормируемого объема воды (100 мл) путем его прямого посева и последующего учета зон лизиса (бляшек) на газоне Е. coli в чашках Петри с питательным агаром.

Прямой метод выделения колифагов из

воды проводят параллельно с титрационным при исследованиях по эпидемическим показаниям.

Нами была изучена методика оценки качества питьевой воды по микробиологическим показателям, применяемая в бактериологической лаборатории ЦГСЭН г.Бишкек Кыргызской Республики.

Выявлено, что определение титра кишечной палочки в лаборатории, проводится согласно ГОСТ 18963-73 "Вода питьевая. Методы санитарно-бактериологического анализа". Однако исследование проб воды проводится только бродильным методом, несмотря на то, что согласно вышеуказанному стандарту выбор метода зависит от качества исследуемой воды.

При исследовании чистой, хорошо фильтрующейся воды удобнее пользоваться методом мембранных фильтров, а бродильный метод применяется при исследовании воды, содержащей коллоидные вещества и посторонние примеси, затрудняющие процесс фильтрования. Кроме того, бродильный метод включает определение наиболее вероятного числа микроорганизмов по таблицам и является менее точным, и трудоемким. Необходимо учесть, что питьевая вода в г.Бишкек является достаточно чистой, не содержит большого количества взвешенных веществ и не отличается преобладанием в воде посторонней микрофлоры, препятствующей получению на фильтрах изолированных колоний общих колиформных бактерий.

На наш взгляд бродильный метод применяется в данном случае из-за отсутствия необходимых материалов и оборудования, для выполнения анализа методом мембранной фильтрации, которым широко пользуются в странах Европы.

По данным А.Г.Бойцова и О.Н.Ластовкой (2005г) уже в течении 20 лет западные производители выпускают среды для определения термотолерантных колиформ, предлагают для анализа проб питьевой воды автоматизированные системы бактериологического контроля в потоке, направленные прежде всего на определение E.coli. Также следует отметить, что в России для определение бактерии групп кишечной палочки по глюкозе,

методические разработки рекомендуют использование среды Эндо, основанной на лактозе. К сожалению, отставание в методическом плане, сегодня не позволяет производителям воды использовать современные зарубежные наработки.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ. Проблема использования надежных методов контроля качества воды в отношении бактериального загрязнения является одной из актуальных в системе предупредительного санитарно-эпидемиологического надзора.

В основе эффективности контроля качества воды лежат обоснованность нормативной базы, наличие методов контроля, их качество и соответствующее материально-техническое обеспечение, а также регламентации взаимодействия эксплуатационных служб и контролирующих организаций с разграничением сфер влияния и ответственности [1].

Выбор метода, прежде всего зависит от качества исследуемой воды. При исследовании чистой, хорошо фильтрующейся воды удобнее пользоваться методом мембранных фильтров. При исследовании воды, содержащей коллоидные вещества и посторонние примеси, затрудняющие процесс фильтрования, используют бродильный метод.

Качество фильтрующих мембран может оказывать существенное влияние на результаты санитарно-микробиологических исследований воды при работе мембранным методом. Процедура контроля качества мембранных фильтров, обязательная для аккредитованных в области исследования воды лабораторий, регламентирована МУ 2.1.4.1057-01 "Организация внутреннего контроля качества санитарно-микробиологических исследований воды" [5].

ЛИТЕРАТУРА

1. Бойцов А.Г., Ластовка О.Н., Кашкарова Г.П., Благова О.Е. Оценка качества воды по биологическим показателям: пути совершенствования // Гигиена и санитария, 2005, №1, c.74-75.

2. Закон Кыргызской Республики. Технический регламент "О безопасности питьевой воды" принят Жогорку Кенешем КР 21.04.2011г.

3. Лакшин А.М., Катаева В.А. Общая гигиена с основами экологии человека, М.: Медицина, 2004, c.83-84.

4. Методы санитарно-микробиологического анализа питьевой воды: Метод. указания (МУК 4.2.1018-01). - М., 2001, 43 с.

5. Организация внутреннего контроля качества санитарно-мик-робиологических исследований воды: МУ 2.1.4.1057-01 -М.,2001.

6. Руководство по контролю качества питьевой воды // Всемирная организация здравоохранения, 1994, т.1, 257 с.

7. СанПиН 2.1.4.002-03 "Питьевая вода. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества" утвержден Постановлением Главного государственного санитарного врача Кыргызской Республики №9 от 20.02.2004 г. - С.1-5.

8. СанПиН 2.1.4.544-96 "Требования к качеству воды нецентрализованного водоснабжения. Санитарная охрана источников" утвержден Постановлением Главного государственного санитарного врача Кыргызской Республики №15 от 30.03.1998 г.

9. Чукулов Ж.Т., Баум Л.И. Питьевая вода Кыргызстана. Сборник статей и материалов. - Бишкек: Учкун, 2007, с.172-175.

10. ISO 19458 International standard "Качество воды - отбор проб для микробиологических анализов", First edition 2006-08-01, 20 p.

11. NF EN ISO 9308-1 European standard (French standard) "Качество воды - Определение и подсчет E.coli и колиформных бактерий", September 2000, 18 p.

12. NF EN 26461-2 ISO 6461-2 Norme europeenne (norme francaise) "Качество воды - Определение и подсчет спор сульфитредуциру-ющих анаэробов (клостридии)", Juillet 1993, 7 p.

13. NF EN 7899-2 European standard (French standard) "Качество воды - подсчет и определение кишечных энтерококков", August 2000, 15 p.

SUMMARY

Regulatory documents and methods for microbiological testing of drinking water quality

M.Dzholochieva

Scientific and Production Centre for Preventive Medicine, Bishkek

The use of reliable methods for control of water quality regarding bacterial contamination is one of important tasks of the preventive sani-tary-epidemiologic surveillance system.

This article looks at regulatory documents on the safety of drinking water. One of the regulatory parameters for the safety of drinking water is the microbiological parameter.

Comparison of microbiological indicators for the safety of drinking water was made between the Law of the Kyrgyz Republic - the Technical Regulation "On safety of drinking water" and the EU Directive (98/83/EU) "On quality of water intended for human consumption".

For microbiological studies such methods are used as membrane filter method, fermentative method, titration method, direct inoculation method.

Поступила 15.09.2012