Анализ реакции аутбредных мышей стока CFW на регулярные инъекции сублетальных доз хлорида ртути

РЕГУЛЯЦИЯ ИММУНИТЕТА

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2012

УДК 616-092:612.017.1]-02:546.49’131]-092.9

М. С. Красильщикова, В. Н. Манских*, А. С. Арефьева, О. В. Зацепина АНАЛИЗ РЕАКЦИИ АУТБРЕДНЫХ МЫШЕЙ СТОКА CFW НА РЕГУЛЯРНЫЕ

инъекции сублетальных доз хлорида ртути

ФГБУН Институт биоорганической химии им. М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова РАН

Одной из основных моделей системных аутоиммунных патологий человека является аутоиммунно-подобный процесс, индуцируемый у мышей инбредных линий (например, линии SJL/J) регулярными воздействиями сублетальных доз хлорида ртути (HgCl2). Реакции, развиваемые животными в этих условиях, включают образование аутоантител к ядрышку, увеличение продукции суммарных иммуноглобулинов (прежде всего иммуноглобулинов подкласса IgG1) и отложение иммунных комплексов в почках. Однако вопрос об особой генетической предрасположенности инбредных мышей к воздействию HgCl2 до сих пор остается открытым. В настоящей работе мы проанализировали способность HgCl2 индуцировать проявление основных признаков аутоиммунных реакций у мышей аутбредного стока CFW. Полученные результаты показали, что после 6 нед подкожных инъекций HgCl2 в стандартной дозе 1,6 мг/кг у всех мышей отмечаются появление аутоантител к ядрышку в высоких титрах, отложение иммунных комплексов в почках и усиление продукции IgG1 и IgE. Полученные данные позволяют заключить, что аутбредные мыши стока CFW воспроизводят основные признаки аутоиммунно-подобного процесса, индуцированного HgCl2 у мышей инбредных линий, и могут быть использованы в качестве их альтернативы.

Ключевые слова: аутоиммунитет, антиядрышковые аутоантитела, хлорид ртути, аутбредные мыши M.S. Krasil schikova, V.N.Manskih, A.S. Arefeva, O.V Zatsepina

the analysis of the reaction of autbreding mice flow cfw on regular injections of sublethal doses of mercury chloride

one of the basic models of systemic autoimmune pathologies man is autoimmune-like process, induced in mice inbred lines (for example, line SJL/J) regular impacts sublethal doses of mercury chloride. Reactions, developed by animals in these conditions, include the formation of autoantibodies to nucleolus, increases the production of total immunoglobulin (first of all, immunoglobulins IgG1 subclass) and deposition of immune complexes in the kidneys. However, the question about the special genetic predisposition of inbred mice to the effects of HgCl2 still remains open. In this work we have analyzed the ability to HgCl2 induce manifestation of the main features of autoimmune reactions in mice autbreding flow CFW. The obtained results showed that after six weeks of subcutaneous injection HgCl2 in a standard dose of 1.6 mg/ kg for all mice noted the emergence of autoantibodies to nucleolus in high credits, deposits of immune complexes in the kidneys and the strengthening of the products IgG1 and IgE. The data obtained allow to conclude that autbreding mouse flow CFW reproduce the main features autoimmune-like process, induced chloride of mercury in mice inbred lines, and can be used as alternatives.

Keywords: autoimmunity, antinuclear autoantibodies, mercuric chloride, autbreding mouse

До недавнего времени считалось, что возникновение системной аутоиммунной патологии в ответ на регулярные инъекции сублетальных доз хлорида ртути (HgC2) в решающей степени связано с генетической предрасположенностью мышей определенных инбредных линий, получивших название "чувствительные". Такие животные имеют гаплотипы H-2s или H-2q и проявляют все основные признаки аутоиммунного процесса, включая образование аутоантител к ядерным (ядрышковым) антигенам, повышенный уровень сывороточных IgG1 и IgE и отложение иммунных комплексов в почках [1, 9, 15]. Однако впоследствии было установлено, что мыши аутбредных стоков NMRI, ICR и Black Swiss [8], CFW и CD-1 [6] при введении HgC2 воспроизводят основной признак системной аутоиммунной патологии, присущий «чувствительным» линиям инбредных мышей, - образование антиядрышковых аутоантител. Однако вопрос о том, проявляются ли у аутбредных мышей другие признаки аутоиммунного процесса (т.е. возрастание титра общих сывороточных иммуноглобулинов и отложение иммунных депозитов в почках), до настоящего времени не обсуждался.

В нашей работе мы проанализировали способность

Красильщикова Марина Сергеевна - канд. биол. наук; тел./ факс +7(495)727-38-61, e-mail: msk@ibch.ru

HgC2 вызывать образование антиядрышковых аутоантител класса IgG1 и отложение иммунных комплексов в почках и влиять на содержание иммуноглобулинов классов IgG1 и IgE у мышей аутбредного стока CFW. Результаты работы говорят о том, что реакция мышей CFW на регулярные инъекции HgCl2 в целом соответствует ответу инбредных мышей линии SJL/J. Они также свидетельствуют в пользу того, что мышей стока CFW можно использовать в качестве лабораторной модели для изучения системных аутоиммунных патологий.

Материалы и методы. Эксперимент проводили на самках мышей аутбредного стока CFW 7-8-недельного возраста, полученных из питомника ФИБХ РАН.

Подопытным животным (12 голов) дважды в неделю подкожно (п/к) инъецировали 40 мкг HgCl2 (1,6 мг на 1 кг массы) («Sigma", США) в 0,1 мл стерильного 0,9 % раствора NaCl в течение 6 нед. Контрольным животным (12 голов) дважды в неделю п/к вводили 0,1 мл 0,9 % раствора NaCl.

Забор крови и получение сывороток производили до начала введения HgCl2 и через 6 нед после введения HgCl2, как описано ранее [3].

Титр антиядрышковых аутоантител определяли на коммерческих препаратах клеток HEp-2 («Bio-Rad Laboratories", США) в реакции непрямой иммунофлюоресценции [5]. В качестве вторых антител использовали ко-

- 95 -

ИММУНОЛОГИЯ № 2, 2013

Т аблица 1

Титр аутоантител к ядрышку и концентрация иммуноглобулинов подкласса IgG1 и класса IgE в сыворотке крови мышей стока CFW до начала эксперимента и через 6 нед инъекций 0,9% NaCl

Группа До начала эксперимента После окончания эксперимента

животных ААтЯ IgG1, мкг/мл IgE, мкг/мл титр ААтЯ класса IgGp мкг/мл IgG1, мкг/мл IgE, мкг/мл

NaCl (контроль) 0 916±554 Н.а. 0 1396± 776 4,1 ± 2,5

HgCl2 (опыт) 0 938 ± 434 Н.а. 10 545 ± 3236* 7136±597* 15,8 ± 4*

Примечание. ААтЯ - аутоантитела к ядрышку; Н.а. - не анализировались; * - p = 0,05 по сравнению с показателями в контрольной группе (непараметрический метод Манна-Уитни). Здесь и в табл. 2, 3 данные представлены как средние значения ± 0,95 доверительный интервал.

зьи антитела к мышиным IgG1, конъюгированные с ФИТЦ ("SouthernBiothech", США). Титром аутоантител считали такое разведение сывороток, при котором они переставали выявлять аутоантиген(ы) [15].

В конце эксперимента животных подвергали эвтаназии в СО2-камере и проводили аутопсию. Для гистологического анализа левую почку и кусочки селезенки фиксировали в 10% формалине на 0,1 М фосфатном буфере PBS (140

мМ NaCl; 2,7 мМ KCl; 1,5 мМ KH2PO4; 8,1 мМ Na2HPO4; рН 7,2-7,4) и заливали в парафин по общепринятой методике. Срезы толщиной 4 мкм окрашивали гематоксилином и эозином (для изучения общей морфологии), в ШИК-реакции по Мак-Манусу (для выявления веществ углеводной природы) или метиловым зеленым и пиронином по методу Унны-Паппенгейма-Браше (для одновременного окрашивания ДНК и РНК соответственно). Морфологи-

Рис. 1. Иммуноцитохимическое окрашивание клеток HEp-2 сыворотками аутоиммунной (а, в, д) и контрольной (б, г, е) мышей через 6 нед после инъекций 1,6 мг/кг HgCl2.

а - сыворотка окрашивает ядрышки и перихромосомный материал в митозе (стрелки), что соответствует локализации белка ядрышка фибрилларина; б - сыворотка не выявляет каких-либо антигенов; в, г - клетки в фазовом контрасте; д, е - окрашивание клеток красителем на хроматин ДАПИ. Масштабная линия - 20 мкм.

- 96 -

РЕГУЛЯЦИЯ ИММУНИТЕТА

Таблица 2

Количество герминальных центров в селезенках мышей стока CFW контрольной (инъекции 0,9% NaCl) и опытной (инъекции 1,6 мг/кг HgCl2) групп в конце 6-недельного эксперимента

Количество Отношение

Группа животных герминальных центров количества островков

на срезах селезенки в поле зрения микроскопа, % плазматических клеток к количеству лимфоидных фолликулов

NaCl (контроль) 2,25 ± 0,51 -

HgCl2 (опыт) 48,9 ± 16,4* 0,139 ± 0,078*

Примечание. Здесь и в табл. 3: * - p = 0,05 между показателями в опытной и контрольной группах по непараметрическому методу Манна-Уитни.

ческие изменения в почках интерпретировали согласно рекомендациям, изложенным в руководствах [16, 20, 26]. На препаратах, окрашенных гематоксилином и эозином, подсчитывали количество фолликулов, имеющих светлые центры, а на срезах, окрашенных по Браше, определяли отношение плазмоцитарных островков (содержавших не менее 10 плазмоцитов) к количеству фолликулов белой пульпы. Результаты (М ± SD) обрабатывали методами непараметрической статистики.

Для иммуногистохимического анализа правую почку выделяли, замораживали при -20°C и изготавливали криосрезы толщиной 5 мкм на криотоме MICROM HM 525 ("Thermo Scientific", Германия). Замороженные срезы фиксировали ацетоном, предварительно охлажденным до -20°C , и инкубировали с антителами к суммарным иммуноглобулинам мыши, конъюгированными с ФИТЦ (ИМТЕК, Россия).

Препараты изучали в микроскоп Axiovert 200 ("Carl Zeiss", Германия), используя объектив PlanNeoFluar х40/ ЧА (численная апертура) 0,75, и фотографировали с помощью монохромной 13-битной камеры CoolSnapcf ("Roper Scientific", США). Обработку изображений производили с помощью программы Adobe Photoshop, версия 10.0. Титром иммунных комплексов считали максимальное разведение вторичных антител, при котором они переставали выявлять иммунные комплексы на срезах почек.

результаты. Сыворотки подопытных мышей до начала введения HgCl2 и сыворотки контрольных мышей, инъецированных физиологическим раствором, не окрашивали ядрышки и иные структуры на препаратах клеток HEp2, что говорит об отсутствии аутоантител в крови этих животных (рис. 1, а-в).

Сыворотки мышей, инъецированных HgCl2 в течение 6

Рис. 2. Гистограммы, иллюстрирующие концентрацию иммуноглобулина подкласса IgG2 (а) и класса IgE (б) в сыворотках мышей после 6 нед введения 1,6 мг/кг HgCl2 по сравнению с контролем. Вертикальная ось - концентрация иммуноглобулинов в сыворотке крови (в мкг/мл). Косая штриховка - контрольные мыши, перекрестная штриховка - мыши, инъецированные HgCl2. Планки погрешностей отображают 0,95% доверительный интервал.

1 - NaCl, 2 - HgCl2.

Таблица 3

Титр иммунных отложений в почках мышей стока CFW контрольной (инъекции 0,9% NaCl) и опытной (инъекции 1,6 мг/кг HgCl2) групп в конце 6-недельного эксперимента

Группа Количество Титр иммунных отложений

животных животных клубочки сосуды

NaCl (контроль) 12 1700 ± 249 0

HgCl2 (опыт) 12 6083±2018* 4750± 1868*

нед, специфически маркировали ядрышки (рис.1, г-е), что свидетельствует о наличии в крови аутоантител к ядрышковому антигену, ранее охарактеризованному нами как фи-брилларин [6]. Титр аутоантител к фибрилларину класса IgG1 у подопытных животных был достаточно высок - 10 545 ± 3236 (табл. 1).

В ходе иммуноферментного анализа обнаружили, что после 6 нед введения HgCl2 у мышей в крови уровень общих сывороточных иммуноглобулинов класса IgG1 был в 5 раз выше (р = 0,0078), а уровень общих сывороточных иммуноглобулинов класса IgE - в 3 раза выше (р = 0,0004), чем у мышей контрольной группы (см. табл. 1, рис. 2, а, б).

При гистологическом анализе селезенок установили, что в фолликулах белой пульпы контрольных животных практически не наблюдалось герминальных центров. Они были выявлены только в 2,25 ± 0,51% лимфоидных фолликулов у 4 животных (табл. 2). Напротив, у животных, получавших инъекции HgCl2, герминальные центры встречались у 48,9 ± 16,4% (р = 0) лимфоидных фолликулов у всех животных и выглядели более крупными (см. табл. 2, рис. 3). Кроме того, у животных опытной группы соотношение количество островков плазматических клеток/количество лимфоидных фолликулов было выше (0,139 ± 0,078; р = 0), в то время как у контрольных животных островки плазматических клеток и лимфоидные фолликулы не выявлялись, т.е. оба показателя были практически равны нулю (см. табл. 2). Описанные морфологические изменения в селезенке животных опытной группы соответствуют активации продуктивной фазы Тх2-зависимого иммуногенеза [10, 21], результатом которого является усиление продукции антител класса IgG.

Результаты иммуногистохимического анализа, проведенный на криосрезах органов, показали, что иммунные отложения выявлялись в почечных тельцах и стенках кровеносных сосудов аутоиммунных животных в виде отдельных гранул, которые в местах наибольшего скопления сливались и выглядели как ярко флюоресцирующие пятна (рис. 4, а, б, рис. 5, а, б). При изучении препаратов в эпифлюоресцентный микроскоп обнаружили, что иммунные отложения, локализующиеся в области почечных телец, отчетливо повторяли форму клеток, входящих в состав клубочков (см. рис. 4, а, б). В почечных тельцах контрольных животных иммунные отложения практически не выявлялись, а их титр (1:1700) был в 3,5 раза ниже, чем у аутоиммунных мышей (р = 0,0005) (табл. 3). У всех подопытных животных иммунные отложения обнаружили также в стенках кровеносных сосудов (рис. 5, а-г, см. табл.3).

Однако при сравнительном патогистологическом исследовании почек контрольных и подопытных животных не обнаружили у животных опытной группы изменений в клубочках, свидетельствующих о наличии признаков гломерулонефрита.

Обс уждение. Настоящая работа представляет собой продолжение начатого нами исследования способности мышей аутбредного стока CFW воспроизводить характерные признаки аутоиммунного процесса при длительном воздействии регулярных субтоксичных доз HgCl2 в условиях, индуцирующих развитие аутоиммунно-подобного процесса у мышей инбредных линий. Особое внимание было уделено анализу выработки общих сывороточных иммуноглобулинов

- 97 -

ИММУНОЛОГИЯ № 2, 2013

Рис. 3. Срезы селезенки контрольной (а) и опытной (б) групп мышей стока CFW7. Окрашивание метиловым зеленым и пиронином (по Унны-Паппенгейму-Браше). Стрелками указаны герминативные центры в белой пульпе. Масштабная линия - 200 мкм.

подклассов IgG1 и IgE, отложений иммунных комплексов в почках, а также гистоиммунохимическому и патоморфологическому анализу состояния почек. В современной литературе гистологическим признакам развития аутоиммунноподобного процесса у животных внимания практически не уделяется.

Мыши стока CFW, как и большинство мышей других аут-бредных стоков, происходят от нескольких мышей Swiss, завезенных в США в 1926 г. [12], так что генетическую вариабельность мышей стока CFW можно сравнивать с таковой в популяциях диких мышей [13, 24].

Результаты, полученные нами в настоящей работе и ра-

Рис. 4. Выявление иммунных комплексов в почечных тельцах мышей с помощью иммуногистохимического анализа. Хорошо видны отложения иммуноглобулинов в почечном тельце мыши после 6 нед инъекции HgCl2 (а, б) и практически полное отсутствие таковых у контрольных животных, инъецированных в течение того же времени NaCl (в, г).

а, в - окрашивание почечной ткани антителами к суммарным иммуноглобулинам мыши; б, г - фазовый контраст. Масштабная линия - 50 мкм.

- 98 -

РЕГУЛЯЦИЯ ИММУНИТЕТА

Рис. 5. Выявление иммунных комплексов в кровеносных сосудах аутбредных мышей с помощью иммуногистохимического анализа. Хорошо видны отложения иммуноглобулинов в стенке сосуда мыши после 6 нед инъекций HgCl2 (а, б) и отсутствие отложений у контрольных животных, инъецированных в течение того же времени NaCl (в, г).

а, в - окрашивание почечной ткани антителами к суммарным иммуноглобулинам мыши, б, г - фазовый контраст. Масштабная линия - 50 мкм.

нее [6], находятся в хорошем соответствии с данными M. Abedi-Valugerdi и соавт., которые на мышах нескольких аутбредных стоков (ICR, NMRI, Black Swiss, CFW) описали способность животных реагировать на введение HgCl2 образованием антиядрышковых аутоантител [8]. В совокупности эти наблюдения свидетельствуют в пользу гипотезы о том, что способность возникновения аутоиммунной реакции в большей степени зависит от свойств (биологических, биохимических и иммунохимических) неблагоприятных факторов окружающей среды, включая тяжелые металлы и ртуть, чем от генетических характеристик индивидуумов. В пользу этой гипотезы говорит также тот факт, что у 40% работников золотодобывающих производств, где до сих пор применяются тяжелые металлы, уровень антиядрышковых аутоантител повышен [27, 28].

В связи с данными, изложенными выше, мы полагаем, что влияние различных неблагоприятных факторов на человеческую популяцию, а также скрининг иммуносупрессорных препаратов корректнее оценивать не на инбредных (линейных), а на аутбредных (нелинейных) мышах. Это позволит исключить влияние определенных генетических характеристик, присущих мышам инбредных линий, на предрасположенность к аутоиммунным реакциям и ограничить тем самым влияние генотипа на спектр фенотипических проявлений. Подобный подход используют, в частности, при

изучении токсикологических эффектов потенциально опасных реагентов [2].

Инбредные, генетически однородные, мыши могут быть особенно полезны при изучении механизмов, приводящих к развитию аутоиммунных реакций, и для выявления генов, ответственных за развитие аутоиммунитета.

Доза HgCl2, равная 1,6 мг/кг, соответствует примерно 30-кратному превышению безопасной для человека максимальной недельной дозы ртути; по данным ВОЗ, 5 мкг/кг [22]. Ее использование в настоящей работе приводит к образованию антиядрышковых аутоантител в высоких титрах, 5-кратному повышению уровня общих сывороточных IgG1 и 3-кратному повышению содержания IgE, а также к отложению иммунных комплексов в сосудах и клубочках почек. Несмотря на наличие иммунных комплексов в почках, при гистологическом исследовании почек не выявили патологических изменений, которые бы позволяли с уверенностью говорить о развитии у животных поражений по типу гломерулонефрита или мембранозной иммунокомплексной гломерулопатии, часто сопровождающих системные аутоиммунные патологии у человека. Мы полагаем, что для развития этих патологий требуются более длительные сроки (более 6 нед с начала эксперимента). Проверка этого предположения может стать предметом будущих исследований.

Работа частично финансировалась Министерством образования и науки РФ (ГК 14.740.11.0116).

- 99 -

ИММУНОЛОГИЯ № 2, 2013

ЛИТЕРАТУРА

1. Арефьева А. С., Дыбан П. А., Красильщикова М. С. и др. Локализация и особенности состава иммунных отложений в почках мышей, развивающих аутоиммунный процесс под действием HgCl2 // Цитология. - 2010. - Т 52, № 6. - С. 477-486.

2. Гуськова Т. А. Токсикология лекарственных средств. - 2-е изд. - М., 2008.

3. Красильщикова М. С., Аблаева Ю. В., Сперанский А. И., Зацепина О. В. Индукция аутоиммуноподобного процесса с помощью регулярных инъекций хлорида ртути мышам линии SJL // Докл. РАН. - 2006. - Т 409, № 1. - С. 129-132.

4. Красильщикова М. С., Зацепина О. В. Тяжелые металлы как индукторы аутоиммунных процессов у человека и лабораторных животных // Науч.-практ. ревматол. - 2007. - № 3. - С. 54-63.

5. Красильщикова М. С., Дейгин В. И., Зацепина О. В. Способность циклоспорина A предотвращать образование аутоантител к фибрилларину у мышей // Иммунология. - 2008. - №

3. - С. 166-170.

6. Красильщикова М. С., Камаева А. Г., Зацепина О. В. Хлорид ртути вызывает образование антиядрышковых аутоантител у аут-бредных мышей // Иммунология. - 2010. - № 4. - С. 195-199.

7. Красильщикова М. С., Леонов В. П., Зацепина О. В., Дейгин В. И. Исследование иммуносупрессорных свойств Тимоде-прессина в экспериментальной модели аутоиммунных заболеваний // Иммунология. - 2009. - № 5. - С. 290-294.

8. Abedi-Valugerdi M. Mercury and silver induce B cell activation and anti-nucleolar autroantibody production in outbred mouse stocks: are cnvironmental factors more important than the susceptibility genes in connection with autoimmunity? // Clin. Exp. Immunol. - 2009. - Vol. 155, N 1. - P. 117-124.

9. Abedi-Valugerdi M., Moller G. Contribution of H-2 and non-H-2 genes in the control of mercury-induced autoimmunity // Int. Immunol. - 2000. - Vol. 12, N 10. - P. 1425-1430.

10. Allen C. D., Okada T., Cyster J. G. Germinal-center organization and cellular dynamics // Immunity. - 2007. - Vol. 27. - P. 190-202.

11. Arnett F., Reveille J., Goldstein R. et al. Autoantibodies to fibril-larin in systemic sclerosis (scleroderma). An immunogenetic, serologic, and clinical analysis // Arthr. and Rheum. - 1996. - Vol. 39, N 7. - P. 1151-1160.

12. Chia R., Achilli F., FestingM., Fisher E. The origins and uses of mouse outbred stocks // Nature Genet. - 2005. - Vol. 37, N 11. -P. 1181-1186.

13. Cui S., Chesson C., Hope R. Genetic variation within and between strains of outbred Swiss mice // Lab. Anim. - 1993. - Vol. 27, N 2. - P. 116-123.

14. Goldman M., DruetP., Gleichmann E. TH2 cells in systemic autoimmunity: insights from allogeneic diseases and chemically-induced autoimmunity // Immunol. Today. - 1991. - Vol. 12, N 7. - P. 223-227.

15. Hansson M., Abedi-Valugerdi M. Xenobiotic metal-induced autoimmunity: mercury and silver differentially induce antinucleolar autoantibody production in susceptible H-2s, H-2q and H-2f mice // Clin. Exp. Immunol. - 2003. - Vol. 131. - P. 405-414.

16. Hard G. C., Alden C. L., Bruner R. H. G. et al. Non-proliferative lesions of the kidney and lower urinary tract in the rat, URG-1 // Guides for Toxicologic Pathology, STP, ARP/AFIP. - Washington, 1999. - P.39-39 .

17. Hemdan N. Y., Emmrich F., Faber S. et al. Alterations of TH1/ TH2 reactivity by heavy metals: possible consequences include induction of autoimmune diseases // Ann. N. Y Acad. Sci. -2007. - Vol. 1109. - P. 129-137.

18. Hultman P., Bell L. J., Enestrom S., Pollard K. M. Murine susceptibility to mercury. I. Autoantibody profiles and systemic immune deposits in inbred, congenic, andintra-H-2 recombinant strains // Clin. Immunol. Immunopathol. - 1992. - Vol. 65, N

2. - P. 98-109.

19. Hultman P., Bell L. J., Enestrom S., Pollard K. M. Murine susceptibility to mercury. II. autoantibody profiles and renal immune deposits in hybrid, backcross, and H-2d congenic mice // Clin. Immunol. Immunopathol. - 1993. - Vol. 68, N 1. - P. 9-20.

20. Jennette J. C., Olson J. L., Schwartz M. M., Silva F. G. Hepin-stall’s Pathology of the Kidney. - 6th Ed. - Philadelphia, 2007.

21. MacLennan I. C. M. Germinal Centers // Annu. Rev. Immunol. -1994. - Vol. 12. - P. 117-139.

22. Puklova V., Krskova A., Cerna M. et al. The mercury burden of the Czech population: An integrated approach // Int. J. Hyg. Environ. Hlth. - 2010. - Vol. 213. - P. 243-251.

23. Reuter R., Tessars G., Vohr H. W. et al. Mercuric chloride induces autoantibodies against U3 small nuclear ribonucleoprotein in susceptible mice // Proc. Natl Acad. Sci. U S A. - 1989. - Vol. 86, N 1. - P. 237-241.

24. RiceM. C., O’Brien S. J. Genetic variance of laboratory outbred Swiss mice // Nature. - 1980. - Vol. 283, N 5743. - P. 157-161.

25. Roether S., Rabbani H., MellstedtH., Abedi-Valugerdi M. Spontaneous downregulation of antibody/autoantibody synthesis in susceptible mice upon chronic exposure to mercuric chloride is not owing to a general immunosuppression // Scand. J. Immunol.

- 2002. - Vol. 55. - P. 493-502.

26. Seely J. C. Kidney // Pathology of the Mouse: Reference and Atlas // Eds R. R. Maranpot et al. - Vienna, III, 1999. - P. .

27. SilbergeldE., Silva I., Nyland J. Mercury and autoimmunity: implications for occupational and environmental health // Toxicol. Appl. Pharmacol. - 2005. - Vol. 207, N 2. - P. 282-292.

28. Silva I., Nyland J., Gorman A. et al. Mercury exposure, malaria, and serum antinuclear/antinucleolar antibodies in amazon populations in Brazil: a cross-sectional study // Environ. Hlth. - 2004.

- Vol. 3, N 1. - P. 1-11.

29. Shoenfeld Y., Cervera R., Gershwin M. E. Diagnostic Criteria in Autoimmune Diseases. - Totowa, 2008.

30. Tchounwou P B., Newsome C., Glass K. et al. Environmental toxicology and health effects associated with dinitrotoluene exposure // Rev. Environ. Hlth. - 2003. - Vol. 18, N 3. - P. 203-229.

31. Thorsby E., Lie B. A. HLA associated genetic predisposition to autoimmune diseases: Genes involved and possible mechanisms // Transplant. Immunol. - 2005. - Vol. 14, N 3-4. - P. 175-182.

Поступила 27.02.12

ИЗДАТЕЛЬСТВО «МЕДИЦИНА» ПРЕДЛАГАЕТ ВАШЕМУ ВНИМАНИЮ КНИГИ:

основы ИММУНОЛОГИИ А.А. Ярилин

Учебник, 1999 ISBN 5-225-02755-5

В учебнике отражены новейшие достижения иммунологии. Описаны структура и организация иммунной системы, факторы естественного иммунитета, молекулярные и клеточные основы адаптивного иммунитета, иммунный ответ. Большое внимание уделено патологии иммунной системы.

По вопросам приобретения книг обращаться в отдел реализации ОАО «Издательство Медицина»

тел.: 8(499)264 95 98 моб. тел.: 8(963)681 56 72 e-mail: strashko.mila@yandex.ru www.medlit.ru

- 100 -