Лимфоидная ткань тонкой кишки мышей при действии иммуномодулятора спленина

Результаты и их обсуждение

У мышей контрольной группы на продольно (вдоль кишки) ориентированных срезах лимфоидная ткань в слизистой оболочке представлена, в основном, диффузно рассеянными клетками лимфоидного ряда. Редко встречаются небольшие скопления лимфоидных клеток в виде предузелков [11]. Собственная пластинка слизистой оболочки подвздошной кишки контрольных мышей содержит большое количество желез. Между ними содержатся цепочки лимфоидных клеток (по 3-5 клеток в поле зрения), ориентированных вдоль тонкокишечных желез.

Клеточный состав диффузной лимфоидной ткани собственной пластинки

слизистой оболочки у контрольных мышей довольно разнообразен. Большая часть лимфоцитов, среди всех лимфоидных клеток, относится к средним лимфоцитам (43,0%). Малых лимфоцитов почти в 3 раза меньше (15,1%), чем средних лимфоцитов. Среди молодых форм клеток преобладают большие лимфоциты, которых в 8,4 раза больше, чем бластных форм клеток (табл. 1). В собственной пластинке слизистой оболочки подвздошной кишки у контрольных мышей встречаются только зрелые формы плазматических клеток (10,3%), а также видны деструктивно измененные и разрушенные клетки (12,8%).

Таблица 1

Клеточный состав (в %) диффузной лимфоидной ткани собственной пластинки слизистой оболочки тонкой кишки мышей в контроле и эксперименте

1 группа 2 группа 3 группа

Клетки Контроль После введения аза-тиоприна После введения азатиоприна и АФС-2

Ретикулярные 10,30±0,86 26,30±2,34* 16,00±1,32* ** 7,50±0,68* **

Бласты 0,90±0,09 5,10±0,42* 2,00±0,31* ** 5,90±0,61* **

Большие лимфоциты 7,60±0,66 0,90±0,14* 8,70±0,64** 9,60±0,74*

Средние лимфоциты 43,00±4,40 11,80±1,22* 25,30±2,32* ** 13,80±1,26*

Малые лимфоциты 15,10±1,42 17,50±1,83 10,70±1,15* ** 15,50±1,48**

Незрелые плазматические - - 4,00±0,33 2,10±0,19**

Зрелые плазматические 10,30±0,97 - 6,00±0,42* 14,90±1,52* **

Зрелые нейтрофилы - 2,80±0,19 - -

Макрофаги - - 2,90±0,28 5,90±0,58**

1 группа 2 группа 3 группа

Митотически делящиеся - - 0,40±0,03 0,90±0,08**

Деструктивно измененные 12,80±0,95 27,10±2,59* 14,00±1,23** 13,90± 1,15

Фиброциты - 8,50±0,52 10,00±0,13** 10,00±0,82

- достоверные различия с контролем, Р < 0,05.

- достоверные различия с предыдущей экспериментальной группой,

Введение мышам азатиоприна в течение 5 суток приводит к выраженным изменениям в цитоархитектонике диффузной лимфоидной ткани собственной пластинки слизистой оболочки подвздошной кишки. Прежде всего, обращает на себя внимание усиление деструктивных процессов в лимфоидной ткани. Содержание деструктивно измененных и разрушенных клеток увеличивается после действия азатиоприна в 2,1 раза, по сравнению с контролем (табл. 1). При этом общее содержание лимфоцитов снижается от 67,6% в контроле до 35,3% в опыте. Выявлена значительная перестройка клеточного состава в стенках подвздошной кишки. В собственной пластинке слизистой оболочки подвздошной кишки отмечается значительное нарушение процессов созревания молодых форм клеток: число больших лимфоцитов уменьшается после действия азатиоприна в 8,4 раза, средних лимфоцитов - в 3,5 раза, в сравнении с контролем. Плазматические клетки практически полностью исчезают. Число ретикулярных клеток увеличивается в 2,5 раза, и появляются фиброциты (8,5%), которые не обнаруживались в контроле. Видимо, после введения азатиоприна, вследствие

деструкции и снижения общего содержания лимфоидных клеток, происходит обнажение стромальных элементов собственной пластинки слизистой оболочки. Кроме того, в слизистой оболочке

Р < 0,05.

появляются нейтрофилы (2,8%).

Изучение влияния АФС-2 (3-я

группа мышей) на клеточный состав диффузной лимфоидной ткани собственной пластинки слизистой оболочки подвздошной кишки мышей проводили на 4-е и 8-е сутки после окончания 7-суточного ее введения. На 4-е сутки после введения АФС-2 в собственной пластинке слизистой оболочки подвздошной кишки в 2 раза уменьшается число деструктивно измененных и разрушенных клеток, по сравнению со 2-й группой и почти достигает контрольных показателей. В 1,3 раза увеличивается общее содержание лимфоцитов (от 35,3% до 46,7%), однако число различных популяций лимфоцитов изменяется в разной степени. Так, доля средних и больших лимфоцитов возрастает, по сравнению с показателями после действия азатиоприна, в 2,5 и 9 раз соответственно. Число бластных форм и малых лимфоцитов, наоборот, уменьшается в 2,5 и 1,6 раза соответственно (табл. 1). Следует отметить, что процентное содержание малых и средних лимфоцитов на 4-е сутки после действия АФС-2 еще остается в 1,5 и 1,7 раза соответственно ниже, чем в контроле. Важным показателем действия АФС-2 на лимфоидную ткань собственной пластинки слизистой оболочки кишки является стимуляция репродуктивной функции лимфоидных клеток. После введения АФС-2 появляются клетки с картинами митозов

(0,4%), которые отсутствовали в контроле и после действия азатиоприна. Выявлены также макрофаги (2,9%). В диффузной лимфоидной ткани собственной пластинки слизистой оболочки кишки через четверо суток после действия АФС-2 появляются также плазматические клетки (10,0%), среди которых зрелых форм клеток в 1,5 раза больше, чем незрелых форм (табл. 1). Однако содержание зрелых (антителпродуци-рующих) клеток на 4-е сутки опыта остается все еще в 1,7 раза меньше, чем в контроле. Наряду с этим в диффузной лимфоидной ткани собственной пластинки слизистой оболочки снижено относительное число ретикулярных клеток (в 1,6 раза), по сравнению со 2-й группой мышей, но несколько увеличивается содержание фиброцитов, что свидетельствует о повреждающем действии предшествующего введения аза-тиоприна на лимфоидную ткань кишки. Аналогичные морфологические изменения отмечены также другими авторами при различных повреждениях и воспалительных процессах в лимфоидных органах [3, 12].

На 8-е сутки после действия АФС-2 отмечается дальнейшая перестройка в кооперации лимфоидных клеток в собственной пластинке слизистой оболочки подвздошной кишки у опытных мышей. Число малых лимфоцитов достигает контрольных значений (табл. 1). Увеличивается число молодых форм клеток до 15,5% (в контроле - 8,5%, после введения азатиоприна - 6,0%). Резко активизируются процессы созревания плазматических клеток. Содержание их ан-тителпродуцирующих (зрелых) форм возросло в 2,5 раза, по сравнению с показателями на 4-е сутки опыта, и в 1,5 раза, по сравнению с контролем.

Деструктивные процессы в лимфоидной ткани собственной пластинки слизистой оболочки кишки на 8-е сутки опыта остаются практически на том же

уровне, что и на 4-е сутки эксперимента. Однако резко повышается макрофа-гальная реакция, при которой относительное число макрофагов увеличивается в 2 раза, по сравнению с 4 сутками опыта.

Таким образом, выявленные изменения в цитоархитектонике диффузной лимфоидной ткани собственной пластинки слизистой оболочки подвздошной кишки подтверждают имеющиеся в литературе данные об иммунодепрес-сивном действии азатиоприна [5, 14, 17]. В наших исследованиях азатиоприн приводил к резкому усилению деструктивных процессов лимфоидных клеток, в результате которых их число вдвое снижалось. Действие азатиоприна сопровождалось также подавлением диф-ференцировки и созревания плазматических клеток, что может свидетельствовать о снижении в этом опыте гуморального иммунитета в организме.

После введения мышам АФС-2 на фоне действия введенного ранее азати-оприна уже через 4 суток и, особенно, на 8 сутки опыта в лимфоидной ткани слизистой оболочки видны процессы стабилизации, иммуномодулирующее действие АФС-2. В диффузной лимфоидной ткани собственной пластинки слизистой оболочки кишки усиливается бласттрансформация и созревание клеток лимфоидного ряда, что приводит к восстановлению их числа до контрольного уровня (за исключением средних лимфоцитов). Появляются клетки с картинами митозов и макрофаги, которые отсутствовали в контроле. Изменение количественного и качественного состава в соотношении лимфоидных клеток свидетельствует о повышении уровня лимфоцитопоэза после действия АФС-2. По сравнению с азатиоприном, АФС-2 снижает деструктивные процессы в лимфоидной ткани собственной пластинки слизистой оболочки подвздошной кишки до контрольного

уровня. Резкое повышение числа плазматических клеток в лимфоидной ткани органа свидетельствует об усилении местного гуморального иммунитета после введения AФС-2.

Выводы

1. В результате действия цитостатика азатиоприна на диффузную лимфоидную ткань собственной пластинки слизистой оболочки подвздошной кишки мышей выявлено резкое усиление деструктивных процессов лимфоидных клеток, уменьшение числа всех видов лимфоцитов, исчезновение плазматических клеток.

2. На 4-е и 8-е сутки после введения мышам активной фракции селезенки ^ФС-2) отмечается повышение репродуктивной функции лимфоидных клеток, что подтверждается увеличением числа бластных форм и больших лимфоцитов, а также появлением митотически делящихся клеток, макрофагов и особенно плазматических клеток.

3. После введения AФС-2 вдвое снижается деструкция клеток, по сравнению с действием азатиоприна.

4. Полученные количественные дан-

ные характеризуют положительное (иммуномодулирующее) действие

активной фракции селезенки на клеточный состав лимфоидной ткани подвздошной кишки.

ЛИТЕРАТУРА

1. Баренбойм A. М. Влияние спленина на уровень протромбина в крови I AM. Баренбойм, С.Г. Гасанов II Физиология.

- 1986. - Т. 22, №3. - С.4І7-4І9.

2. Влияние спленина и левамизола на иммунобиологическую реактивность больных с легочной патологией I О.М. Ганджа, Г.И. Лысенко, A.Q Кишко и др. II Тез. Докл. Всесоюз. Конф. - Киев, 1981. - С. І75-І77.

3. Вылков И.Н. Патология лимфатических узлов I И.Н. Вылков. - София: Медицина и физкультура, І980. - 245 с.

4. Ганджа О.М. Применение спленина в клинической практике: (Обзор литературы) I О.М. Ганджа, Г.И. Лысенко, A.C Кишко II Врачеб. дело. - 1983. -№6. - С. 9-І3.

5. Григоренко Д. Е. Состояние тимуса при воздействии иммунодепрессанта азати-оприна и его коррекция растительными лекарственными средствами I Д. Е. Гри-горенко, Л.М. Ерофеева, В.Б. Хобракова II Материалы VI Всерос. конф. по патологии клетки (Москва, 2S-30 ноября 2000 г). - М., 2000. - С. 39-40.

6. Дранник Г. М. Иммунотропные препараты I Г.М. Дранник. - Киев, І994. - №6.

- С. 9-І3.

7. Новиков Д.К. Оценка иммунного статуса I Д.К. Новиков, В.И. Новикова. - Москва; Витебск, І996. - 28і с.

S. Петров Р.В. Иммунология и иммуногенетика I Р.В. Петров. - М.: Медицина, І976. - 336 с.

9. Разделение и физико-химическая характеристика некоторых компонентов Т-активина (фракция AФС-6) I В.Я. Aрион, Ю.Н. Бреусов, И.В. Санина, Ю. A. Барышков II Коррекция нарушений иммунитета в клинике и эксперименте. - М., 1985. - С. І3-І6.

10. Региональные особенности иммунного статуса и аллергических заболеваний населения России I Р.В. Петров, Р.М. Хаитов, И.В. Орадовская, A3. Богова II Региональные проблемы здоровья населения России I Под общ. ред. В. Д. Белякова. - М., І993. - С. І75-І85.

11. Сапин М. Р. Иммунная система человека I М.Р. Сапин, Л.Е. Этинген. - М.: Медицина, І996. - 304 с.

12. Серов В.В. Соединительная ткань I В.В. Серов, AÆ. Шехтер. - М.: Медицина, 1981. - 3І2 с.

13. Стефанов С.Б. Морфометрическая сетка случайного шага как средство ускоренного измерения элементов I С. Б. Стефанов II Цитология. - І974. - №6. - С. 8993.

14. Сухой экстракт пятилистника кустарникового - перспективное иммуномодулирующее средство I В.Б. Хобракова, Д.Е. Григоренко, Л.М. Ерофеева, С. Д. Жамсаранова II VIII Рос. нац. конгр. «Человек и лекарство»: Тез. докл. (Мо-

сква, 2-6 апреля 2001 г.) - М., 2001. - С. 632-633.

15. Хаитов Р.М. Основные представления об иммунотропных лекарственных средствах / Р.М. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. - 1996. - №6. - С. 4-9.

16. Хаитов Р.М. Современные иммуномодуляторы: основные принципы: Обзор / Р.М. Хаитов, Б.В. Пинегин // Иммунология. - 2000. - №5. - С. 4-7.

17. Элективное выявление эпителиальной ткани тимуса мышей после введения иммунодепрессантов / Л.В. Белецкая, Д.Л. Беляев, И.Ю. Мудренко и др. //

Физиология, морфология и патология тимуса: Сб. науч. тр. / Под ред. чл.-корр. АМН СССР проф. В.В. Серова. -М., 1986. - С. 19-22.

18. Bienenstock J. A review of mucosal immunology / J. Bienenstock, A.D. Befus // Immunology. - 1980. - V.41. - P. 249270.

19. Craig S.W. Peyer’s patches: an enriched source of precusors for IgA producing immunocyte in the rabbit / S.W. Craig, J.J. Cebra // J. Exptl. Med. - 1971. - V.134, N1. - P. 188-200.

THE INFLUENCE OF IMMUNOMODULATOR SPLENIN ON THE LYMPHOID TISSUE OF

SMALL INTESTINE AT MICE

M.R. Sapin, D.E. Grigorenko, D.G. Beldueva, S.D. Gamsaranova, L.M. Erofeeva

The influence of active spleen fraction (AFS) on diffusive lymphoid tissue of lamina propria of ileum intestine at mice were studied on the background of azatioprin supression. It was established the appearance of cells with mitoses pictures, the increase of number of young form of cells, the plasmatic cells and macrofages, the reduction of destructure of cells in lamina propria under the influence of AFS on mice after 4 and 8 days. That demonstrated the intensification of functional activity of the diffusive lymphoid tissue in the wall of intestine under the influence of AFS.