Иммунофенотипическая характеристика опухолевых клеток в костном мозге при лимфоме/лейкозе Беркитта: возможности дифференциальной диагностики с острым лимфобластным лейкозом

Иммунофенотипическая характеристика опухолевых клеток в костном мозге при лимфоме/лейкозе Беркитта: возможности дифференциальной диагностики с острым

лимфобластным лейкозом

И.А. Дёмина1, Т.Ю. Вержбицкая2, 3, С.А. Кашпор1, С.А. Плясунова1, М.Э. Дубровина1, Л.Г. Фечина2,3, Н.В. Мякова1, Е.В. Самочатова1, А.А. Масчан1, А.М. Попов1

1ФГБУ«Национальный научно-практический центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева»

Минздрава России; Россия, 117997Москва, ул. Саморы Машела, 1;

2ГБУЗ Свердловской области «Областная детская клиническая больница № 1»;

Россия, 620149 Екатеринбург, ул. Серафимы Дерябиной, 32;

3ГАУЗ Свердловской области «Институт медицинских клеточных технологий»;

Россия, 620026 Екатеринбург, ул. Карла Маркса, 22, корп. А

Контакты: Александр Михайлович Попов uralcytometry@gmail.com

Иммунофенотипирование бластов в костном мозге (КМ) является одним из основных методов дифференциальной диагностики лимфомы/лейкоза Беркитта (ЛБ) и острого лимфобластного лейкоза из В-линейных предшественников (ВП-ОЛЛ). Однако определение поверхностной экспрессии тяжелых и легких цепей иммуноглобулинов может быть затрудне-но. Поэтому целью исследования стало формирование дополнительных иммунофенотипических критериев дифференциальной диагностики ЛБ и ВП-ОЛЛ. Проведено ретроспективное сравнение данных иммунофенотипирования клеток КМ пациентов с верифицированными диагнозами ЛБ и ВП-ОЛЛ. Исследуемую группу составил 21 пациент с ЛБ с наличием бластов в КМ, а группу сравнения — 84 ребенка с ВП-ОЛЛ. Был определен ряд особенностей иммунофенотипа ЛБ, который может помочь при оценке результатов проточной цитометрии КМ при дифференциальной диагностике В-клеточных лейкозов. Было показано, что по экспрессии различных поверхностных маркеров ЛБ существенно отличается от ВП-ОЛЛ, поэтому даже при неоднозначном или негативном результате определения экспрессии поверхностного иммуноглобулина Мдифференциальная диагностика этих двух нозологий возможна при комплексной оценке иммунофенотипа. В частности, при ЛБ для опухолевых клеток характерно отсутствие экспрессии миелоидных маркеров и CD34. При обнаружении бластных клеток с таким фенотипом необходимо обратить пристальное внимание на долю CD20-позитивных клеток, которая достоверно выше при ЛБ, чем при ВП-ОЛЛ. Полученный алгоритм анализа данных при использовании порогового уровня в 87 % CD20-позитивных бластов позволил в исследованной нами выборке абсолютно точно отделить все случаи ЛБ от ВП-ОЛЛ.

Ключевые слова: лимфома/лейкоз Беркитта, острый лимфобластный лейкоз, проточная цитометрия

cv

es

N

DOI: 10.17650/1818-8346-2017-12-1-55-61

Immunophenotypic features of bone marrow tumor cell in Burkitt lymphoma/leukemia: B-lineage acute lymphoblastic

leukemia diagnostics opportunities

I.A. Demina1, T.Yu. Verzhbitskaya2,3, S.A. Kashpor1, S.A. Plyasunova1, M.E. Dubrovina1, L.G. Fechina2'3, N.V. Myakova1, E.V. Samochatova1, A.A. Maschan1, A.M. Popov1

'National Scientific and Practical Center of Pediatric Hematology, Oncology and Immunnology named after Dmitry Rogachev, Ministry of Health of Russia; 1 Samory Mashela St., Moscow 117997, Russia;

2Sverdlovsk Regional Clinical Children's Hospital No 1; 32 Serafimy Deryabinoy St., Ekaterinburg 620149, Russia;

3Institute of Medical Cell Technologies; 22A Karla Marksа St., Ekaterinburg 620026, Russia

Bone marrow tumor blasts immunophenotyping is an essential part of Burkitt lymphoma/leukemia (BL) and B-cell precursor acute lymphoblastic leukemia (BCP-ALL) differential diagnostics. Nevertheless immunoglobulin heavy and light chains detection on the cell surface could meet several biological and methodological pitfals. Thus the aim of the present study was development of additional BL immunophenotypic criteria. Leukemic blasts antigen profile in 21 BL cases and 84 children with BCP-ALL was compared in a retrospective way. Antigen expression patterns in BL and BCP-ALL were significantly different. It was shown that even in cases with weak immunoglobulin M expression these two tumor types could be distinguished well by complex immunophenotype analysis. In present study all cases of CD34-negative B-lineage ALL without myeloid coexpression and with high CD20-positive cells proportion belonged to BL.

Key words: Burkitt lymphoma/leukemia, acute lymphoblastic leukemia, flow cytometry

cv

ев

N

Введение

Лимфома/лейкоз Беркитта (ЛБ) — злокачественная, агрессивно протекающая лимфома из зрелых В-клеток, которая выявляется примерно в 2,5 % случаев всех неходжкинских лимфом (НХЛ) [1]. У детей ЛБ составляет около 30—50 % всех лимфом [2]. Чаще всего опухоль, не ограничиваясь локализацией в лимфатических узлах, поражает костный мозг (КМ), надпочечники, челюсть, яичники, почки, поджелудочную железу, кишечник, желудок. Специфическое поражение КМ наблюдается в 25—35 % случаев. Менее чем в 5 % случаев единственной локализацией ЛБ является КМ [3]. Ключевым молекулярным механизмом ЛБ выступает гиперэкспрессия протоонкогена с-Мус. Наиболее часто к этому приводит транслокация 1(8;14)(д24;д32) с участием в качестве партнера гена ^И, которая встречается приблизительно в 80 % случаев [4]. Описаны и другие транслокации: 1(2;8)(р12;д24) и 1(8;22)(д24;д11), а также случаи активации с-Мус в результате соматической мутации [5—7].

В настоящее время диагностика ЛБ основана на комплексе данных молекулярно-генетических, патоморфологических, цитологических, иммуноци-тохимических и иммунофенотипических исследований, которые должны проводиться в как можно более сжатые сроки с момента госпитализации пациента. При вовлечении в процесс КМ критически важно разграничить ЛБ не только с другими типами НХЛ, но и провести дифференциальную диагностику с острым лимфобластным лейкозом (ОЛЛ) из В-ли-нейных предшественников (ВП-ОЛЛ). Относительно быстрая верификация ЛБ чрезвычайно важна не только из-за очень высокой скорости прогрессирования заболевания, но и из-за риска стремительного возникновения жизнеугрожающих осложнений при вовлечении центральной нервной системы [8]. Однако весь комплекс указанных методов доступен далеко не во всех клинических лабораториях. Кроме того, они относительно дороги, качество их выполнения зависит от квалификации специалистов и они могут иметь ряд технических ограничений. Использование же только части необходимых методик может быть причиной постановки неправильного диагноза и выбора ошибочной тактики лечения, что, учитывая агрессивность заболевания, часто приводит к гибели пациента.

Цитологическое исследование мазков КМ и им-мунофенотипирование опухолевых клеток методом проточной цитометрии позволяют получить результат существенно быстрее, чем молекулярно-генетическое и патоморфологическое исследования, поэтому являются крайне важной частью диагностики ЛБ. При этом цитоморфологический вариант бластов Ь3, наиболее характерный для ЛБ, не является строго специфичным признаком [9]. Изолированное исследование иммунофенотипа клеток КМ при всей своей эффективности также не может гарантировать абсолютно точную постановку диагноза.

При типировании ОЛЛ согласно критериям классификации Европейской группы по иммунологической характеристике лейкозов (European Group for the Immunological Characterization of Leukemias, EGIL) [10] наиболее частым при ЛБ является BIV-вариант, так называемый зрелый В-клеточный ОЛЛ, основной признак которого — поверхностная экспрессия ц-цепи молекулы иммуноглобулина и (или) одной из легких цепей. Однако описаны случаи ЛБ, не экспрессирующих иммуноглобулин М (IgM) [11]. Кроме того, слабая экспрессия IgM иногда определяется на поверхности части бластных клеток при ВП-ОЛЛ. Наконец, цитометрическое выявление тяжелых и легких цепей иммуноглобулинов может быть затруднено вследствие различных технических нюансов. При этом проточная цитометрия остается одним из самых быстрых, точных и доступных методов исследования. Таким образом, существует необходимость формирования дополнительных критериев оценки иммунофенотипа клеток КМ для более точной дифференциальной диагностики ЛБ и ВП-ОЛЛ.

Цель исследования — формирование дополнительных иммунофенотипических критериев дифференциальной диагностики ЛБ и ВП-ОЛЛ.

Материалы и методы

Проведено ретроспективное сравнение данных им-мунофенотипирования клеток КМ пациентов с верифицированными диагнозами ЛБ и ВП-ОЛЛ. Всего в исследование было включено 105 пациентов (55 мальчиков и 50 девочек) в возрасте от 1 года до 16 лет из Центра детской онкологии и гематологии ГБУЗ Свердловской области «Областная детская клиническая больница № 1» (Екатеринбург) и ФГБУ «Национальный научно-практический центр детской гематологии, онкологии и иммунологии им. Дмитрия Рогачева» Минздрава России (Москва).

Исследуемую группу составил 21 пациент с ЛБ с наличием бластов в КМ. Диагноз ЛБ был подтвержден патоморфологическим, цитогенетическим и молекуляр-но-генетическим исследованиями. В группу сравнения были включены 84 ребенка с ВП-ОЛЛ: согласно критериям группы по классификации EGIL [10] у 5 детей был диагностирован BI-вариант, у 78 — BII, а у 1 — BIII.

Иммунофенотипирование опухолевых клеток в КМ производили методом 6-8-цветной проточной цитометрии на приборах FACS Canto II (Becton Dickinson & Co (BD), США). Настройка проточных цито-метров проводилась с использованием калибровочной системы CompBeads (BD). Мониторинг стабильности работы приборов осуществлялся с помощью частиц Cytometer Setup and Tracking (BD). Использовались моноклональные антитела (МКАТ), меченные флуо-ресцеинизотиоцианатом (FITC), R-фикоэритрином (PE), перидининхлорофилл-протеином (PerCP), ал-лофикоцианином (АРС), тандемными конъюгатами: PE с цианином 7 (Cy7), PerCP с цианином 5.5 (Cy5.5) и APC с Су7, а также с красителями BV421 и BV510. Для иммунофенотипирования применяли МКАТ

к следующим антигенам: CD45, CD19, CD3, CD10, CD34, CD13, CD33, CD117, CD15, CD58, CD38, CD20, CD22, CD79a, CD7, CD5, NG2, IgM, к, 1, TdT, MPO. Окрашивание первично-меченными МКАТ выполняли согласно инструкции производителя.

Результаты иммунофенотипирования оценивали с помощью программного обеспечения FACS Diva 6.1 (BD) и Kaluza 1.5а (Beckman Coulter, США). Анализировали не менее 10 тыс. ядросодержащих клеток. Опухолевые клетки выделяли на точечных графиках по экспрессии CD45, значениям параметра бокового светорассеяния и экспрессии линейно-ассоциированного маркера CD19. Популяция клеток считалась позитивной, если более 20 % клеток экспрессировали исследуемый антиген на мембране или более 10 % внутриклеточно [10]. В качестве негативного контроля использовали сохранившиеся в образце нормальные клетки.

Группы сравнивали качественно по количеству позитивных пациентов, а также количественно как по доле позитивных по каждому антигену клеток, так и по экспрессии антигенов, выраженной в виде средней интенсивности флуоресценции. Значения

параметра бокового светорассеяния также сравнивали по интенсивности свечения.

Для статистической обработки результатов применяли программы XLSTAT-2016 и Statistica 7.0. Для сравнения количественных показателей в 2 группах применялся критерий Манна—Уитни, для качественных показателей — критерий х2. Для уточнения пороговых уровней относительного содержания позитивных по каждому антигену клеток, позволяющих наиболее четко дифференцировать ЛБ и ВП-ОЛЛ, применялся метод характеристических кривых (receiver operator characteristic, ROC-кривых) [12, 13]. Для каждого маркера в отдельности и для различных их комбинаций рассчитывали диагностическую чувствительность, специфичность, прогностическую ценность положительного и отрицательного результатов, а также общую диагностическую эффективность теста для диагностики ЛБ [14].

Результаты

В целом по профилю экспрессии антигенов пациенты с ЛБ существенно отличались от пациентов с ВП-ОЛЛ (табл. 1). Кроме очевидных различий в экспрес-

су

CS

N

Таблица 1. Экспрессия антигенов опухолевыми клетками при лимфоме/лейкозе Беркитта

Table 1. Antigen expression in tumor cells in Burkitt's lymphoma/leukemia

*Myelo - миелоидные маркеры (CD13/CD33/CD117/CD15). *Myelo - myeloid markers (CD13/CD33/CD117/CD15).

Примечание. Внутриклеточная экспрессия антигенов отмечена буквой i. Note: Subscript "i" denotes intracellular antigen expression.

Antigens BL ВП-ОЛЛ BCP-ALL P

Число позитивных пациентов / общее число обследованных пациентов

Number of positive patients / Total number of tested patients

n/N, абс n/N, % n/N, абс n/N, %

CD10 21/21 100 80/84 95,2 0,579

CD19 21/21 100 84/84 100 0,999

CD20 21/21 100 32/84 38,1 0,006

CD22 16/17 94,1 65/66 98,4 0,873

CD34 0/21 0 62/84 73,8 <0,0001

CD45 21/21 100 66/84 78,6 0,033

CD58 0/7 0 76/81 93,8 <0,0001

CD38 16/16 100 40/42 95,2 0,934

IgM 21/21 100 0/84 0 <0,0001

к 6 /18 33,3 0/84 0 <0,0001

I 11/18 61,1 0/84 0 <0,0001

iCD79a 21/21 100 84/84 100 0,464

NG2 0/21 0 2/84 2,4 0,875

Myelo* 0/21 0 47/84 56 0,003

cv

ев

N

сии поверхностных и цитоплазматических легких и тяжелых цепей IgM, число пациентов, позитивных по экспрессии CD20, CD45, CD34, CD58 и миелоид-ных антигенов, также было неодинаковым. У 47 (56 %) пациентов с ВП-ОЛЛ детектировали коэкспрессию хотя бы одного из миелоидных маркеров на бластных клетках, в то время как у всех пациентов с ЛБ миело-идные маркеры не были выявлены. У всех пациентов с ЛБ также отсутствовала экспрессия CD34 и CD58, при этом экспрессировались CD10, CD38, CD20 и CD45 и по экспрессии каждого из антигенов опухолевая популяция при ЛБ была гомогенна во всех случаях. Несмотря на отсутствие достоверных различий по количеству CD10-позитивных клеток между исследуемой группой и группой сравнения, интенсивность экспрессии данного антигена при ЛБ и ВП-ОЛЛ существенно различалась (рис. 1). Кроме того, опухолевые клетки отличались и по значению параметра бокового светорассеяния, косвенно отражающего степень развитости внутриклеточных структур (рис. 2). Типичные примеры расположения опухолевых клеток при ЛБ и ВП-ОЛЛ на точечных графиках представлены на рис. 3.

При оценке параметров диагностической эффективности для каждого отдельного маркера было

выявлено, что с наибольшей точностью случаи исследуемой группы и группы сравнения могли быть разделены по наличию на мембране CD58 (табл. 2). Однако относительно небольшое количество пациентов с ЛБ, обследованных на предмет экспрессии данного антигена (п = 7), не позволяет сделать однозначные выводы о ценности его как одиночного маркера различия ЛБ и ВП-ОЛЛ. Остальные антигены, хоть и имели высокую диагностическую чувствительность, тем не менее за счет низкой специфичности не обладали высокой диагностической эффективностью.

Для разработки алгоритма цитометрической диагностики ЛБ из общей группы (исследуемая группа плюс группа сравнения) пошагово исключали случаи с иммунофенотипическими признаками ВП-ОЛЛ. Так, на первом этапе было учтено отсутствие случаев ЛБ с коэкспрессией миелоидных антигенов. Среди оставшихся 37 пациентов с ВП-ОЛЛ 27 были CD34-позитивны, в то время как данный маркер ни в одном случае не был обнаружен при ЛБ. Поэтому в дальнейшем исследуемая группа сравнивалась с пациентами с ВП-ОЛЛ, не экспрессирую-щими миелоидные антигены и CD34. Наиболее точное разделение между этими случаями ВП-ОЛЛ

50000

а

о

5000

500

50

50000

40000

и и

30000

20000

10000

ЛБ / BL

ВП-ОЛЛ / BP-ALL

ЛБ / BL

ВП-ОЛЛ / BP-ALL

Рис. 1. Различия экспрессии CD10

Fig. 1. Differences in CD10 expression

Рис. 2. Различия величины бокового светорассеяния

-100 0 0 1 000 1 04 1 05 -100 0 0 1 000 1 04 1 05

0 1 03 1 04 1 05

Рис. 3. Пример типичного расположения на точечных графиках опухолевых клеток при лимфоме/лейкозе Беркитта (показано красным) и остром лимфобластном лейкозе из В-линейных предшественников (показано фиолетовым). Результаты иммунофенотипирования 2 пациентов объединены в один массив данных. Как при двухмерном (а), так и при многомерном (б) анализе видно существенное различие иммунофенотипов опухолевых бластов. Нормальные клетки костного мозга показаны серым

Fig. 3. An example of typical distribution of tumor cells on scatter point plots for Burkitt's lymphoma/leukemia (red) and В-cell precursor acute lymphoblastic leukemia (purple). Results of immunophenotyping of 2 patients were combined into a single data set. Both two-dimensional (a) and multidimensional (б) analyses show significant differences between immunophenotypes of tumor blasts. Normal bone marrow cells are shown in grey

cv

CS

N

Таблица 2. Параметры диагностической информативности определения экспрессии отдельных антигенов для дифференциальной диагностики лимфомы/лейкоза Беркитта и острого лимфобластного лейкоза

Table 2. Parameters of diagnostic information value for determination of antigen expression for Burkitt's lymphoma/leukemia and acute lymphoblastic leukemia differential diagnosis

ДЧ Сп ПЦПР ПЦОР ДЭТ

Antigens DS Sp PVPR PVNR DET

CD20 1,00 0,62 0,40 1,00 0,70

CD34 0,95 0,74 0,48 0,98 0,78

CD38 1,00 0,05 0,29 1,00 0,31

CD45 1,00 0,21 0,24 1,00 0,37

CD58 1,00 0,94 0,58 1,00 0,93

Муе1о 1,00 0,56 0,36 1,00 0,65

Сокращения: myelo — миелоидные маркеры (CD13/CD33/CD117/CD15), ДЧ — диагностическая чувствительность, Сп — специфичность, ПЦПР и ПЦОР — прогностическая ценность положительного и отрицательного результатов соответственно, ДЭТ — диагностическая эффективность теста.

Abbreviations: myelo — myeloid markers (CD13/CD33/CD117/CD15), DS — diagnostic sensitivity, Sp — specificity, PVPR and PVNR — prognostic value ofpositive and negative result respectively, DET — diagnostic effectiveness of the test.

и пациентами с ЛБ было достигнуто при использовании порогового значения в 87 % СБ20-позитивных клеток, определенного с помощью ЯОС-анализа (рис. 4). Таким образом, в исследованной выборке случаев ВП-ОЛЛ и ЛБ все пациенты, не имевшие экспрессии миелоидных антигенов и СБ34, а также имевшие высокую долю СБ20-позитивных бластов, принадлежали к исследуемой группе. Для этого алгоритма в данной группе значения всех параметров диагностической эффективности составили 100 %.

Обсуждение

В условиях относительно долгого получения результатов патоморфологического и молекулярно-гене-тического исследований своевременное и достоверное цитометрическое определение типа гемопоэтической опухоли может играть ключевую роль в выборе тактики лечения и успехе проводимой терапии. ЛБ иммуно-фенотипически характеризуется экспрессией пан-В-клеточных антигенов, СБ10, а также экспрессией поверхностного ^М с рестрикцией по одной из легких

cv

es

N

1

0,9 0,8

1 0,7

*<,л

I 0,6

t 0,5 о

! 0,4

ш

m 0,3

ь и m

^ 0,2 0,1 0

0 0,1 0,2 0,3 0,4 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1

1-Специфичность / 1-Specificity

Рис. 4. ROC-кривая (красная линия) определения возможности разделения пациентов с лимфомой/лейкозом Беркитта (n = 21) и случаев острого лимфобластного лейкоза из В-линейньа предшественников без экспрессии миелоидных антигенов и CD34 (n = 10) по доле CD20-пози-тивных клеток (пояснения даны в тексте).

Сокращения: ППК — площадь под кривой, ПУ — пороговый уровень, обладающий наилучшим разделением

цепей. Однако определение экспрессии ^М зачастую вызывает затруднения из-за недостаточно качественных реагентов и отсутствия опыта персонала. Кроме того, в литературе описаны случаи аберрантной экспрессии или полного отсутствия этих маркеров [10], что существенно осложняет дифференциальную диагностику. При этом важное значение приобретает формирование дополнительных критериев оценки данных проточной цитометрии при иммунофенотипировании образцов КМ. При выявлении патогномоничных для ЛБ особенностей иммунофенотипа бластов становится возможным более прицельное определение характерных для ЛБ молекулярно-генетических нарушений.

В результате проведенного нами ретроспективного исследования был определен ряд особенностей имму-нофенотипа ЛБ, который может помочь при оценке результатов проточной цитометрии КМ при диффе-

ренциальной диагностике В-клеточных лейкозов. Было показано, что по экспрессии различных поверхностных маркеров ЛБ существенно отличается от ВП-ОЛЛ, поэтому даже при неоднозначном или негативном результате определения экспрессии поверхностного ^М дифференциальная диагностика этих двух нозо-логий возможна при комплексной оценке иммунофе-нотипа. В частности, при ЛБ для опухолевых клеток характерно отсутствие экспрессии миелоидных маркеров и CD34. При обнаружении бластных клеток с таким фенотипом необходимо обратить пристальное внимание на долю CD20-позитивных клеток, которая достоверно выше при ЛБ, чем при ВП-ОЛЛ. Приведенный алгоритм анализа данных при использовании порогового уровня в 87 % CD20-позитивных бластов позволил в исследованной нами выборке абсолютно точно отделить все случаи ЛБ от ВП-ОЛЛ. Отдельного внимания заслуживает маркер CD58, выявляющийся на различных клетках кроветворной и некроветворной природы. Многократно было показано, что данный антиген экспрессируется в большинстве случаев ВП-ОЛЛ. Однако данные по его экспрессии при ЛБ редки [15—17]. Как и в работе М. УеИгош и соавт. [15], нами было показано, что он отсутствовал во всех случаях ЛБ. При этом при ВП-ОЛЛ его экспрессия чаще всего была высока и отсутствовала только в 5 % случаев. Однако экспрессию CD58 определяли только у 7 пациентов с ЛБ, что недостаточно для проведения полноценного статистического анализа. Следует, однако, признать, что для окончательного формирования критериев диагностики поражения КМ при ЛБ по имму-нофенотипу опухолевых клеток необходимо проведение более крупных исследований.

Заключение

Таким образом, нами был выявлен ряд особенностей иммунофенотипа опухолевых бластов при ЛБ. Анализируя данные проточной цитометрии комплекс -но, можно с высокой точностью дифференцировать данную опухоль от случаев В-линейного ОЛЛ. В свою очередь, это позволяет проводить более прицельные патоморфологические и генетические исследования для верификации диагноза ЛБ. В нашем исследовании все случаи В-линейного ОЛЛ при отсутствии экспрессии миелоидных маркеров и CD34, а также высокой (более 87 %) доле CD20-позитивных клеток относились к пациентам с ЛБ.

ЛИТЕРАТУРА / REFERENCES

1. Kelemen K., Braziel R.M., Gatter K. et al. Immunophenotypic variations of Burkitt lymphoma. Am J Clin Pathol 2010; 134:127-38. DOI: 10.1309/AJCP93LJPTRQPDKR.

2. Клинические рекомендации по диагностике и лечению лимфомы Беркитта. II Конгресс гематологов России, 2014. [Clinical recommendations for the diagnosis and treatment of Burkitt's

lymphoma. II Hematology Congress in Russia, 2014. (In Russ.)]. 3. Martinez A., Ponzoni M., Agostinelli C. et al. International Extranodal Lymphoma Study Group. Primary bone marrow

lymphoma: an uncommon extranodal presentation of aggressive non-Hodgkin lymphomas. Am J Surg Pathol 2012;36(2):296-304. DOI: 10.1097/PAS.0b013e31823ea106.

4. Dalla-Favera R., Bregni M., Erikson J. et al. Human c-myc onc gene is located on the region of chromosome 8 that

is translocated in Burkitt lymphoma cells. Proc Natl Acad Sci USA 1982; 79(24):7824-7. PMID: 6961453.

5. Schmitz R., Young R.M., Ceribelli M. et al. Burkitt lymphoma pathogenesis and therapeutic targets from structural and functional genomics. Nature 2012;490(7418):116-20.

DOI: 10.1038/nature11378.

6. Love C., Sun Z., Jima D. et al. The genetic landscape of mutations in Burkitt lymphoma. Nat Genet 2012;44(12):1321-5.

DOI: 10.1038/ng.2468.

7. Richter J., Schlesner M., Hoffmann S.

et al. Recurrent mutation of the ID3 gene in Burkitt lymphoma identified by integrated genome, exome and transcriptome sequencing. Nat Genet 2012;44(12):1316-20. DOI: 10.1038/ng.2469.

8. McGowan P., Nelles N., Wimmer J. et al. Chang Differentiating between Burkitt lymphoma and CD10+ diffuse large

B-cell lymphoma: the role of commonly used flow cytometry cell markers and the application of a multiparameter scoring system. Am J Clin Pathol 2012;137(4):665-70. DOI: 10.1309/AJCP3FEPX5BEEKGX. 9. Coche D., Bergues B., Harrivel V., Guillaume N. Biphenotypic acute leukaemia with Burkitt-like cytology. Ann Biol Clin (Paris) 2009;67:437-40. DOI: 10.1684/abc.2009.0337.

10. Bene M., Castoldi G., Knapp W. et al. Proposals for the immunological classification of acute leukemias. European Group for the Immunological Characterization of Leukemias (EGIL). Leukemia 1995;9(10):1783-6. PMID: 7564526.

11. Kelemen K., Braziel R.M., Gatter K. et al. Immunophenotypic Variations of Burkitt Lymphoma. Am J Clin Pathol 2010;134:127-38.

DOI: 10.1309/AJCP93LJPTRQPDKR.

12. Zweig M.H., Campbell G. Receiver-operating characteristic (ROC) plots:

a fundamental evaluation tool in clinical medicine. Clin Chem 1993;31:561-77. PMID: 8472349.

13. Obuchowski N.A. ROC analysis. Am J Roentgenol 2005;184:364-72. DOI: 10.2214/ajr.184.2.01840364.

14. Weinstein S., Obuchowski N.A., Lieber M.L. Clinical evaluation of diagnostic tests.

Am J Roentgenol 2005;184:14-9. DOI: 10.2214/ajr.184.1.01840014.

15. Veltroni M., De Zen L., Sanzari M.C. et al. Expression of CD58 in normal, regenerating and leukemic bone marrow B cells: implications for the detection of minimal residual disease in acute lymphocytic leukemia. Haematologica 2003;88(11):1245-52.

PMID: 14607753.

16. Lee R.V., Braylan R.C., Rimsza L.M. A CD58 expression decrease

as nonmalignant B cells mature in bone marrow and is frequently overexpressed in adult and pediatric precursor B-cell acute lymphoblastic leukemia. Am J Clin Pathol 2005;123(1):119-24. PMID: 15762287.

17. Попов А.М., Вержбицкая Т.Ю., Цаур ГА. и др. Аберрации иммунофенотипа, применимые для мониторинга минимальной остаточной болезни методом проточной цитометрии при CD10-rna-зитивном остром лимфобластном лейкозе из В-линейных предшественников. Иммунология 2010;6:299-304. [Popov A.M., Verzhbitskaya T.Yu., Tsaur G.A. et al. Immunophenotype aberrations useful for minimal residual disease monitoring by flow cytometry

in CD10-positive B-precursor acute lymphoblastic leukemia. Immunologiya = Immunology 2010;6:299-304. (In Russ.)].

cv

CS

N