UDP-ЗАВИСИМАЯ ГЛИКОЗИЛТРАНСФЕРАЗА ДЛЯ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОГО ПРОДУЦИРОВАНИЯ РЕБАУДИОЗИДОВ

1. Генетически модифицированная клетка-хозяин, содержащая гетерологичную нуклеиновую кислоту, кодирующую UDP-гликозилтрансферазу, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую идентичность последовательности с SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11 не менее 80%, 85%, 90% или 95%.
2. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 1, которая способна преобразовывать RebA в RebD с эффективностью, превышающей 90%, 95%, 96% или 97%.
3. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 1, в которой UDP-гликозилтрансфераза содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11.
4. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, в которой UDP-гликозилтрансфераза способна к бета 1,2-гликозилированию С2' позиции 19-O глюкозы стевиолового гликозида.
5. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где UDP-гликозилтрансфераза кодируется гетерологичной нуклеиновой кислотой, где гетерологичная нуклеиновая кислота содержит нуклеотидную последовательность, имеющую идентичность последовательности с SEQ ID NO: 13, по меньшей мере, 80%, 85%, 90% или 95%.
6. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, в которой UDP-гликозилтрансфераза кодируется гетерологичной нуклеиновой кислотой, имеющей последовательность SEQ ID NO: 13.
7. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, которая способна преобразовывать RebA в RebD с эффективностью более 90%, 95%, 96% или 97%, и где UDP-гликозилтрансфераза содержит аминокислотную последовательность, имеющую идентичность последовательности с SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11 не менее 95%.
8. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где UDP-гликозилтрансфераза представляет собой полипептид, имеющий функциональный домен с идентичностью последовательности функционального домена SEQ ID. NO: 1 или SEQ ID NO: 11 не менее 80%, 85%, 90% или 95%.
9. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 8, в которой функциональный домен представляет собой акцепторный домен сахара.
10. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 9, где акцепторный домен сахара расположен на N-конце UDP-гликозилтрансферазы.
11. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где UDP-гликозилтрансфераза содержит акцепторный домен сахара SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11.
12. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где UDP-гликозилтрансфераза содержит акцепторный домен сахара, где аминокислотная последовательность акцепторного домена сахара имеет идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью акцепторного домена сахара SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11 по меньшей мере, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99%.
13. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 12, где UDP-гликозилтрансфераза содержит:
(a) аминокислотную последовательность loop1 SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, последовательность SEQ ID NO: 28 или вариантную аминокислотную последовательность loop1, в позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует местоположению loop1 в SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11 соответственно;
(b) аминокислотную последовательность lоор2 SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, или вариантную аминокислотную последовательность lоор2, в позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует местоположению loop 2 в SEQ ID NO: 1, или SEQ ID NO: 11 соответственно;
(c) аминокислотную последовательность lоор3_1 SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, или вариантную аминокислотную последовательность lоор3_1, в позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует местоположению loop 3_1 в SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11 соответственно;
(d) аминокислотную последовательность lоор2_2 SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, или вариантную аминокислотную последовательность lоор3_2 в позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует местоположению lоор3_2 в SEQ ID NO: 1, или SEQ ID NO: 11 соответственно;
(e) аминокислотную последовательность lоор4_1 SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, или вариантную аминокислотную последовательность lоор4_1, в позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует местоположению lоор4_1 в SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11 соответственно;
(f) аминокислотную последовательность lоор4_2 SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11 в позиции, которая соответствует местоположению lоор4_2 в SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, соответственно; или
(g) любаую комбинацию от (а) до (f).
14. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 13, в которой любая из вариантной аминокислотной последовательности loop1, вариантной аминокислотной последовательности lоор2, вариантной аминокислотной последовательности lоор3_1, вариантной аминокислотной последовательности loop 3_2, и вариантной аминокислотной последовательности lоор4_1, получена из соответствующих им позиций петли другой UDP-гликозилтрансферазы, отличной от SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, где другая UDP-гликозилтрансфераза содержит аминокислотную последовательность, имеющую идентичность последовательности с SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11 не менее 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% или 95%.
15. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 14, где другая UDP-гликозилтрансфераза способна к бета-1,2-гликозилированию С'2 позиции 19-О-глюкозы стевиолового гликозида.
16. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 15, в которой другой UDP-гликозилтрансферазой является Os_UGT_91C1.
17. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где UDP-гликозилтрансфераза содержит:
(a) акцепторный домен сахара другой UDP-гликозилтрансферазы, содержащей аминокислотную последовательность, имеющую идентичность последовательности не менее 61%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% или 95% по отношению к последовательности акцепторного домена сахара SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11; и
(b) аминокислотную последовательность lоор4_1 SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11 в местоположении другой UDP-гликозилтрансферазы, которое соответствует расположению lоор4_1 в SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, соответственно.
18. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, в которой UDP-гликозилтрансфераза содержит последовательность SEQ ID NO: 22 в качестве акцепторного домена сахара.
19. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, в которой UDP-гликозилтрансфераза содержит аминокислотную последовательность, имеющую идентичность последовательности с SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, по меньшей мере, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90% или 95%, и имеет аминокислотную последовательность lоор4_1 последовательности SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11 в позиции, которая соответствует местоположению lоор4_1 SEQ ID NO: 1, или SEQ ID NO: 11 соответственно.
20. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где UDP-гликозилтрансфераза содержит последовательность SEQ ID NO: 25.
21. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где UDP-гликозилтрансфераза содержит один или несколько из следующих аминокислотных остатков:
(a) валин в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, который соответствует аминокислотной позиции 11 в SEQ ID NO: 11;
(b) изолейцин в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, который соответствует аминокислотной позиции 12 в SEQ ID NO: 11;
(c) пролин в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует аминокислотной позиции 55 в SEQ ID NO: 11;
(d) глутаминовая кислота в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует аминокислотной позиции 90 в SEQ ID NO: 11;
(e) серии в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует аминокислотной позиции 203 в SEQ ID NO: 11;
(f) глутаминовая кислота в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует аминокислотной позиции 223 в SEQ ID NO: 11; или
(g) валин в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует аминокислотной позиции 413 в SEQ ID NO: 11,
где позиции аминокислот UDP-гликозилтрансферазы, которые соответствуют позициям аминокислот SEQ ID NO: 11, определяются выравниванием последовательности.
22. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где UDP-гликозилтрансфераза содержит аминокислотную последовательность, имеющую SEQ ID NO: 24.
23. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где UDP-гликозилтрансфераза содержит донорный домен сахара, где донорный домен сахара содержит аминокислотную последовательность, имеющую идентичность последовательности с аминокислотной последовательностью домена донора сахара SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, по меньшей мере, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99%.
24. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где донорный домен сахара расположен на С-конце UDP-гликозилтрансферазы.
25. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где UDP-гликозилтрансфераза содержит аминокислотную последовательность, имеющую идентичность последовательности с SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11, по меньшей мере, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% или 99%.
26. Генетически модифицированная клетка-хозяин, содержащая гетерологичную нуклеиновую кислоту, кодирующую UDP-гликозилтрансферазу, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую идентичность последовательности с SEQ ID NO: 2 не менее 80%, 85%, 90% или 95%.
27. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 26, которая способна преобразовывать RebA в RebD с эффективностью более 50%.
28. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 26 или 27, где UDP-гликозилтрансфераза представляет собой полипептид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 2.
29. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из пп. 26-28, в которой UDP-гликозилтрансфераза представляет собой полипептид, содержащий функциональный домен с идентичностью последовательности функционального домена SEQ ID NO: 2 не менее 80%, 85%, 90% или 95%.
30. Генетически модифицированная клетка-хозяин, содержащая гетерологичную нуклеиновую кислоту, кодирующую UDP-гликозилтрансферазу, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую идентичность последовательности с SEQ ID NO: 5 не менее 80%, 85%, 90% или 95%.
31. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 30, которая способна преобразовывать RebA в RebD с эффективностью более 40%.
32. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 30 или 31, где UDP-гликозилтрансфераза содержит аминокислотную последовательность, имеющую последовательность SEQ ID NO: 5.
33. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из пп. 30-32, где UDP-гликозилтрансфераза содержит полипептид, имеющий функциональный домен с идентичностью последовательности функционального домена SEQ. ID NO: 5 не менее 80%, 85%, 90% или 95%.
34. Генетически модифицированная клетка-хозяин, содержащая гетерологичную нуклеиновую кислоту, кодирующую UDP-гликозилтрансферазу, содержащую аминокислотную последовательность, имеющую идентичность последовательности с SEQ ID NO:6 не менее 85%, 90% или 95%.
35. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 34, которая способна преобразовывать RebA в RebD с эффективностью более 85% или 90%.
36. Генетически модифицированная клетка-хозяин по п. 34 или 35, где UDP-гликозилтрансфераза представляет собой полипептид, имеющий последовательность SEQ ID NO: 6.
37. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из пп. 34-36, в которой UDP-гликозилтрансфераза содержит полипептид, имеющий функциональный домен с идентичностью последовательности функционального домена SEQ ID NO: 6 не менее 80%, 85%, 90% или 95%.
38. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из пп. 29, 33 и 37, в которой функциональный домен представляет собой акцепторный домен сахара.
39. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, способная продуцировать RebD.
40. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, способная продуцировать RebM.
41. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, которая способна продуцировать в RebM и RebM2 в соотношении не менее 10:1, 100:1 или 1000:1.
42. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где генетически модифицированная клетка-хозяин продуцирует необнаружимый уровень RebM2.
43. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где генетически модифицированная клетка-хозяин способна преобразовывать стевиозид в RebE.
44. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где генетически модифицированная клетка-хозяин дополнительно содержит одну или несколько гетерологичных нуклеиновых кислот, кодирующих один или несколько ферментов пути для получения стевиола.
45. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где генетически модифицированная клетка-хозяин дополнительно содержит одну или несколько гетерологичных нуклеиновых кислот, кодирующих один или несколько ферментов пути для получения стевиолового гликозида.
46. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где генетически модифицированная клетка-хозяин дополнительно содержит одну или несколько гетерологичных нуклеиновых кислот, кодирующих один или несколько ферментов пути для получения RebA.
47. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где генетически модифицированная клетка-хозяин дополнительно содержит одну или несколько гетерологичных нуклеиновых кислот, кодирующих один или несколько ферментов пути для получения RebM.
48. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где генетически модифицированная клетка-хозяин дополнительно содержит одну или несколько гетерологичных нуклеиновых кислот, кодирующих один или несколько ферментов пути для получения RebE.
49. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где один или несколько ферментов пути включают геранилгеранил-дифосфат синтазу.
50. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где один или несколько ферментов пути включают копалил-дифосфат-синтазу.
51. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где один или несколько ферментов пути включают энт-каурен-синтазу.
52. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где один или несколько ферментов пути содержат кауреноксидазу.
53. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где один или несколько ферментов пути включают гидроксилазу кауреновой кислоты.
54. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где один или несколько ферментов пути включают цитохром Р450-редуктазу.
55. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где один или несколько ферментов пути включают уридин-5'-дифосфо гликозилтрансферазу.
56. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, в которой один или несколько ферментов пути включают UGT74G1, UGT76G1, UGT85C2, и UGT91D.
57. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где один или несколько ферментов пути включают геранилгеранил-дифосфатсинтазу, копалил-дифосфат-синтазу, энт-каурен-синтазу, кауреноксидазу, гидроксилазу кауреновой кислоты, цитохром Р450 редуктазу, UGT74G1, UGT76G1, UGT85C2 и UGT91D.
58. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где один или несколько ферментов пути включают бифункциональную копалил-дифосфат-синтазу и кауренсинтазу.
59. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где одна или несколько гетерологичных нуклеиновых кислот, кодирующих один или несколько ферментов пути, находятся под контролем одного регулятора транскрипции.
60. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где одна или несколько гетерологичных нуклеиновых кислот, кодирующих один или несколько ферментов пути, находятся под контролем множества гетерологичных регуляторов транскрипции.
61. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, в которой клетка выбрана из группы, состоящей из бактериальной клетки, грибковой клетки, клетки водорослей, клетки насекомого, и клетки растения.
62. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где клетка представляет собой дрожжевую клетку.
63. Генетически модифицированная клетка-хозяин по любому из предшествующих пунктов, где дрожжи представляют собой Saccharomyces cerevisiae.
64. Способ производства RebD:
(a) культивирование популяции генетически модифицированных клеток-хозяев по любому из предшествующих пунктов в среде с источником углерода в условиях, подходящих для получения RebD; и
(b) извлечение указанного соединения RebD из среды.
65. Способ производства RebM:
(a) культивирование популяции генетически модифицированных клеток-хозяев по любому из предшествующих пунктов в среде с источником углерода в условиях, подходящих для получения RebM; и
(b) извлечение указанного соединения RebM из среды.
66. Способ производства RebD:
(a) контактирование RebA с глюкозой и UDP-гликозилтрансферазой по любому из предшествующих пунктов, способных преобразовывать RebA в RebD, в условиях, подходящих для образования RebD; и
(b) извлечение указанного соединения RebD из среды.
67. Способ производства RebM:
(а) контактирование в условиях, подходящих для образования RebM, субстрата с глюкозой или UDP-сахаром и:
(i) UDP-гликозилтрансферазой по любому из предшествующих пунктов, способной преобразовывать RebA в RebD; и
(ii) UDP-гликозилтрансферазой, способной преобразовывать RebD в RebM.
68. Способ получения RebD, включающий преобразование RebA в RebD с использованием любой из UDP-гликозилтрансферазы по любому из предшествующих пунктов, способной преобразовывать RebA в RebD.
69. Способ получения RebM, включающий:
(a) преобразование RebA в RebD с использованием любой из UDP-гликозилтрансферазы по любому из предшествующих пунктов, способной преобразовывать RebA в RebD; и
(b) преобразование RebD в RebM с использованием UDP-гликозилтрансферазы, способной преобразовывать RebD в RebM.
70. Ферментационная композиция, содержащая:
(a) генетически модифицированную клетку-хозяина, содержащую:
(i) гетерологичную нуклеиновую кислоту, кодирующую UDP-гликозилтрансферазу по любому из предшествующих пунктов, способную преобразовывать RebA в RebD; и
(b) стевиоловые гликозиды, полученные из генетически модифицированной клетки-хозяина.
71. Ферментационная композиция, произведенная генетически модифицированными клетками-хозяевами по любому из предшествующих пунктов, включающая стевиоловые гликозиды, где стевиоловые гликозиды включают RebA, RebD и RebM при соотношении RebA:RebD:RebM по меньшей мере 1:7:50.
72. Ферментационная композиция по п. 71, в которой стевиоловые гликозиды включают RebA, RebD и RebM при соотношении RebA:RebD:RebM, по меньшей мере, от 1:7:50 до 1:100:1000.
73. Ферментационная композиция по п. 71, в которой стевиоловые гликозиды включают RebA, RebD и RebM при соотношении RebA:RebD:RebM по меньшей мере от 1:7:50 до 1:200:2000.
74. Ферментационная композиция, произведенная генетически модифицированными клетками-хозяевами по любому из предшествующих пунктов, включающая стевиоловые гликозиды, где стевиоловые гликозиды включают RebD и RebM при соотношении RebD: RebM, по меньшей мере, 7:50.
75. Ферментационная композиция по п. 74, в которой стевиоловые гликозиды включают RebD и RebM при соотношении RebD:RebM по меньшей мере от 7:50 до 7:100.
76. Ферментационная композиция по п. 74, в которой стевиоловые гликозиды включают RebD и RebM при соотношении RebD:RebM по меньшей мере чем от 7:50 до 7:200.
77. Ферментационная композиция, произведенная генетически модифицированными клетками-хозяевами по любому из предшествующих пунктов, содержащая стевиоловые гликозиды, где стевиоловые гликозиды включают RebA и RebM при соотношении RebA: RebM, по меньшей мере, 1:50.
78. Ферментационная композиция по п. 77, в которой стевиоловые гликозиды включают RebA и RebM при соотношении RebA: RebM, по меньшей мере, от 1:50 до 1:1000.
79. Ферментационная композиция по п. 77, в которой стевиоловые гликозиды включают RebA и RebM при соотношении RebA: RebM, по меньшей мере, от 1:50 до 1:2000.
80. Не встречающаяся в природе UDP-гликозилтрансфераза, имеющая по меньшей мере 80%, 85%о, 90%, 95% идентичность последовательности с SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11.
81. He встречающаяся в природе UDP-гликозилтрансфераза, способная преобразовывать RebA в RebD с эффективностью более 90%, 95%, 96% или 97% in vivo.
82. Не встречающаяся в природе UDP-гликозилтрансфераза, где UDP-гликозилтрансфераза:
(a) содержит аминокислотную последовательность lоор4_1, имеющую SEQ ID NO:22 в позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует местоположению lоор4_1 SEQ ID NO: 1 или SEQ ID NO: 11; и
(b) способна к бета-1,2-гликозилированию С2' позиции 19-О-глюкозы стевиолового гликозида.
83. Не встречающаяся в природе UDP-гликозилтрансфераза по любому из пп. 80-82, где UDP-гликозилтрансфераза содержит один или несколько следующих аминокислотных остатков;
(a) валин в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, который соответствует аминокислотной позиции 11 SEQ ID NO: 11;
(b) изолейцин в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, который соответствует аминокислотной позиции 12 SEQ ID NO: 11;
(c) пролин в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, который соответствует аминокислотной позиции 55 SEQ ID NO: 11;
(d) глутаминовая кислота в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует аминокислотной позиции 90 SEQ ID NO: 11;
(e) серии в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, который соответствует аминокислотной позиции 203 SEQ ID NO: 11;
(f) глутаминовая кислота в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, которая соответствует аминокислотной позиции 223 SEQ ID NO: 11; или
(g) валин в аминокислотной позиции UDP-гликозилтрансферазы, который соответствует аминокислотной позиции 413 SEQ ID NO: 11,
где положения аминокислот UDP-гликозилтрансферазы, которые соответствуют положениям аминокислот SEQ ID NO:11, определяются выравниванием последовательности.
84. Не встречающаяся в природе нуклеиновая кислота, кодирующая не встречающуюся в природе UDP-гликозилтрансферазу по любому из пп. 80-82.
85. Подсластитель, содержащий RebM, полученный способом
(a) культивирования популяции генетически модифицированных клеток-хозяев по любому из предшествующих пунктов в среде с источником углерода в условиях, подходящих для получения RebM; и
(b) извлечения указанного соединения RebM из среды.
86. Композиция подсластителя, содержащая, по меньшей мере, одно другое вещество и RebM, полученные способом
(a) культивирования популяции генетически модифицированных клеток-хозяев по любому из предшествующих пунктов в среде с источником углерода в условиях, подходящих для получения RebM; и
(b) извлечения указанного соединения RebM из среды.
87. Подслащенная композиция, содержащая RebM, полученная способом
(a) культивирования популяции генетически модифицированных клеток-хозяев по любому из предшествующих пунктов в среде с источником углерода в условиях, подходящих для получения RebM; и
(b) извлечения указанного соединения RebM из среды.
88. Способ получения композиции подсластителя, включающий объединение по меньшей мере одного другого вещества с RebM, полученного способом
(a) культивирования популяции генетически модифицированных клеток-хозяев по любому из предшествующих пунктов в среде с источником углерода в условиях, подходящих для получения RebM; и
(b) извлечения указанного соединения RebM из среды.
89. Способ изготовления подслащенной композиции, включающий объединение по меньшей мере одной подслащенной композиции с RebM, полученной способом
(a) культивирования популяции генетически модифицированных клеток-хозяев по любому из предшествующих пунктов в среде с источником углерода в условиях, подходящих для получения RebM; и
(b) извлечения указанного соединения RebM из среды.