САЙТ-СПЕЦИФИЧЕСКАЯ КОНЪЮГАЦИЯ АНТИТЕЛО-ЛЕКАРСТВЕННОЕ СРЕДСТВО ПОСРЕДСТВОМ ГЛИКОИНЖЕНЕРИИ

1. Связывающий полипептид, содержащий по меньшей мере один модифицированный гликан, содержащий по меньшей мере одну группу формулы (IV):
-Gal-Sia-C(H)=N-Q-CON-X
Формула (IV),
где:
A) Q представляет собой NH или O;
B) CON представляет собой соединительную группу; и
C) X представляет собой эффекторную группу (например, группу лекарственного средства или нацеливающую группу);
D) Gal представляет собой компонент, происходящий из галактозы;
E) Sia представляет собой компонент, происходящий из сиаловой кислоты; и
где Sia присутствует или отсутствует.
2. Связывающий полипептид по п. 1, где модифицированный гликан представляет собой двухантенный гликан.
3. Связывающий полипептид по п. 1 или 2, где двухантенный гликан является фукозилированным или нефукозилированным.
4. Связывающий полипептид по любому из предшествующих пунктов, где указанный модифицированный гликан содержит по меньшей мере две группы формулы (IV), где Sia присутствует только на одной из двух групп.
5. Связывающий полипептид по любому из пп. 1-3, где указанный модифицированный гликан содержит по меньшей мере две группы формулы (IV), где Sia присутствует на обеих из двух групп.
6. Связывающий полипептид по любому из предшествующих пунктов, где модифицированный гликан является N-связанным со связывающим полипептидом.
7. Связывающий полипептид по любому из предшествующих пунктов, где связывающий полипептид содержит домен Fc.
8. Связывающий полипептид по п. 7, где модифицированный гликан является N-связанным со связывающим полипептидом через остаток аспарагина в положении аминокислоты 297 домена Fc, в соответствии с нумерацией EU.
9. Связывающий полипептид по п. 8, где модифицированный гликан является N-связанным со связывающим полипептидом через остаток аспарагина в положении аминокислоты 298 домена Fc, в соответствии с нумерацией EU.
10. Связывающий полипептид по любому из предшествующих пунктов, где домен Fc является человеческим.
11. Связывающий полипептид по любому из предшествующих пунктов, где связывающий полипептид содержит домен CH1.
12. Связывающий полипептид по п. 11, где модифицированный гликан является N-связанным со связывающим полипептидом через остаток аспарагина в положении аминокислоты 114 домена CH1, в соответствии с нумерацией Kabat.
13. Связывающий полипептид по любому из предшествующих пунктов, где эффекторная группа представляет собой цитотоксин.
14. Связывающий полипептид по п. 13, где цитотоксин выбран из группы, состоящей из цитотоксинов, перечисленных в таблице 1.
15. Связывающий полипептид по любому из пп. 1-13, где эффекторная группа представляет собой средство для детекции.
16. Связывающий полипептид по любому из пп. 1-13, где эффекторная группа представляет собой нацеливающую группу.
17. Связывающий полипептид по п. 16, где нацеливающая группа представляет собой углевод или гликопептид.
18. Связывающий полипептид по п. 16, где нацеливающая группа представляет собой гликан.
19. Связывающий полипептид по любому из предшествующих пунктов, где соединительная группа содержит pH-чувствительный линкер, дисульфидный линкер, фермент-чувствительный линкер или другую отщепляемую линкерную группу.
20. Связывающий полипептид по любому из предшествующих пунктов, где соединительная группа содержит линкерную группу, выбранную из группы линкерных групп, показанных в таблице 2 или 14.
21. Связывающий полипептид по любому из предшествующих пунктов, представляющий собой антитело или иммуноадгезин.
22. Композиция, содержащая связывающий полипептид по любому из предшествующих пунктов и фармацевтически приемлемый носитель или наполнитель.
23. Композиция по п. 22, где соотношение терапевтической или диагностической эффекторной группы к связывающему полипептиду составляет менее 4.
24. Композиция по п. 23, где соотношение терапевтической или диагностической эффекторной группы к связывающему полипептиду составляет приблизительно 2.
25. Способ лечения нуждающегося в этом пациента, включающий введение эффективного количества композиции по п. 24.
26. Выделенный полинуклеотид, кодирующий связывающий полипептид по любому из пп. 1-21.
27. Вектор, содержащий полинуклеотид по п. 26.
28. Клетка-хозяин, содержащая полинуклеотид или вектор по п. 26 или 27.
29. Способ получения связывающего полипептида по любому из предшествующих пунктов, где способ включает реакцию эффекторной группы формулы (I):
2
NH-Q-CON-X
Формула (I),
где:
A) Q представляет собой NH или O;
B) CON представляет собой соединительную группу; и
C) X представляет собой эффекторную группу,
с измененным связывающим полипептидом, содержащим окисленный гликан.
30. Способ по п. 29, где измененный связывающий полипептид, содержащий окисленный гликан, получают посредством реакции связывающего полипептида, содержащего гликан, с умеренно окисляющим средством.
31. Способ по п. 30, где умеренно окисляющее средство представляет собой периодат натрия.
32. Способ по п. 31, где применяют менее чем 1 мМ периодат натрия.
33. Способ по п. 30, где окисляющее средство представляет собой оксидазу галактозы.
34. Способ по любому из пп. 29-33, где связывающий полипептид, содержащий гликан, содержит один или два концевых остатка сиаловой кислоты.
35. Способ по п. 34, где концевые остатки сиаловой кислоты вводят посредством обработки связывающего полипептида с помощью сиалилтрансферазы или комбинации сиалилтрансферазы и галактозилтрансферазы.