Оценка эффективности различных вариантов гемокарбоперфузии для лечения острой ишемии-реперфузии конечности в эксперименте

Статья

ные экспериментом сроки (45 сут.) эта стадия в полном объеме не успевает развиться. Наиболее этот процесс выражен только при компрессионном анастомозе. Заметного уменьшения размеров рубца за счет рассасывания соединительной ткани не выявлено.

При формировании компрессионного инвагинационного арефлюксного анастомоза происходит анатомическое восстановление илеоцекального отдела кишечника. Анастомоз представляет собой «хоботок» тонкой кишки, выступающий в просвет толстой. За счет восстановительных изменений слизистая оболочка сформированного клапана не отличается по строению от слизистой оболочки тонкой и толстой кишки, обладая высокой антибактериальной активностью. Малый объем соединительной ткани в зоне анастомоза, прорастание ее гладкомышечными клетками способствует формированию эластического, растяжимого соустья, не склонного к рубцовому стенозу и атрофии. Компрессионный анастомоз имеет высокую механическую прочность и биологическую непроницаемость.

Литература

1. Алиев С. А. // Вестник хирургии.- 1998.- № 6.- С. 34—39.

2. Алиев С.А. // Хирургия.- 2001.- № 8.- С. 44-50.

3. Ананьев В.С. и др. // Хирургия.- 1989.- № 5.- С. 59-66.

4. Визнер А.Ф. Свисающие арефлюксные анастомозы при операциях на толстой кишке: Автореф. дис. „.канд. мед. наук -Томск,1997.- 14 с.

5. Воробьев Г.И. и др. // Вестник хир.-1990.- №5 .- С 42-46.

6. Гришин И.Н. и др. // Актуальные проблемы проктологии: Тез. докл. науч.-практ. конф.- Красноярск, 1991.- С.73-74.

7. Пророков В.В. и др. // Хирургия.- 2001.- № 6.- С. 38-42.

8. Структурные основы адаптации и компенсации нарушенных функций / Под ред. Д.С.Саркисова.- М.: Медицина, 1987.- 448 с.

9. Сирота В.Б. Инвагинационный тонко-толстокишечный анастомоз конец в конец в хирургии рака правой половины ободочной кишки: Дис.. .канд. мед. наук.- Алма-Ата,1990.- 20 с.

10. Тимофеев Ю.М., Ананьев В.С. // Хир.- 1999.- №1.- С.39.

11. Хэм А., Кормак Д. Гистология.- М.: «Мир», 1983.- Т.4.243 с.

12. Царюк В.Ф. и др. // Акт. вопросы проктологии: Тез. докл. I съезда колопроктол. России.- Самара,2003.- С.314-315.

13. CubertafondP. et al. // Chirurgie.- 1992.- №1-2.-Р.86-91

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНО-МОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА КОМПРЕССИОННОГО ИНВАГИНАЦИОННОГО АРЕФЛЮКСНОГО ТОНКОТОЛСТОКИШЕЧНОГО АНАСТОМОЗА

Н.С. МИГАЛКИН, О.А. МОЛОКОВА, В.В. ПЛОТНИКОВ, В.В. СПИРЁВ, Ю.Б. ЧИНАРЁВ

При формировании компрессионного инвагинационного арефлюксного анастомоза происходит анатомическое восстановление илеоцекального отдела кишечника. Анастомоз представляет собой «хоботок» тонкой кишки, выступающий в просвет толстой. За счет восстановительных изменений слизистая оболочка сформированного клапана не отличается по строению от слизистой оболочки тонкой и толстой кишки, обладая высокой антибактериальной активностью. Компрессионный анастомоз имеет высокую механическую прочность и бионепроницаемость.

УДК 617.58-005.4-092.9:615.27

ОЦЕНКА ЭФФЕКТИВНОСТИ РАЗЛИЧНЫХ ВАРИАНТОВ ГЕМОКАР -БОПЕРФУЗИИ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ОСТРОЙ ИШЕМИИ-РЕПЕРФУЗИИ КОНЕЧНОСТИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

Х.И.-Х.М. ЛАЙПАНОВ*, Э.А. ПЕТРОСЯН *, В.И.СЕРГИЕНКО**

Повреждения типа ишемии-реперфузии представляют одну из наиболее серьезных проблем хирургии. Ишемия развивается при синдроме длительного сдавления, синдроме позиционного

* Кубанский государственный медицинский университет, г. Краснодар, ул.

Седина 4, тел. (861) 262-30-10 МГУ им. М.В..Ломоносова

сдавления, жгутировании конечностей (турникетный шок), восстановлении кровотока после эмбол- или тромбэктомии, реплантации конечностей, при травматическом или ятрогенном повреждения артерий, в результате временного перекрытия просвета артерий или аорты при проведении артериальной реконструктивной хирургии [2-3, 9]. В настоящее время наиболее эффективным методом лечения больных с синдромом ишемии-реперфузии конечностей являются реконструктивные хирургические операции [5, 12, 13]. Однако уровень неудовлетворительных результатов реконструктивных операций продолжает оставаться высоким, что обуславливает необходимость либо проведения повторных реконструктивных хирургических вмешательств, либо вторичных ампутаций конечностей [4]. При этом даже успешная реконструктивная операция далеко не полностью компенсирует нарушения микроциркуляторного русла [1]. Для коррекции нарушенного метаболизма при синдроме ишемии-реперфузии конечности используют различные методы, ограничивающие образование свободных радикалов и снижающие синтез вазоконстрикторов [12, 13, 15]. В последние годы для лечения системных последствий критической ишемии нижних конечностей используют эфферентные методы лечения, направленные на выведение из системного кровотока токсических и провоспалительных метаболитов, способствующих развитию полиорганной недостаточности при реперфузии [14]. Одним из таких методов является гемокарбо-перфузия. Наиболее часто для гемокарбоперфузии применяют углеродные гемосорбенты, относящиеся к классу неселективных. Одним из путей повышения эффективности гемокарбоперфузии является возможность целенаправленно влиять на физикохимические свойства сорбентов, применяя различные технологии их модификации [6, 8].

Учитывая, что одним из основных факторов развития поли-органной недостаточности при ишемии-реперфузии является активация процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ), использование сорбента с антиоксидантными и окислительными свойствами расширяет возможности операции гемокарбоперфу-зии при синдроме ишемии-реперфузии.

Цель исследования - оценка эффективности гемокарбо-перфузии при использовании сорбента модифицированного натрия гипохлоритом при ишемии - реперфузии конечности.

Рис. 1. Динамика изменения концентрации продуктов ПОЛ плазмы у животных с синдромом ишемии - реперфузии конечности, леченных гемокарбоперфузией на стандартном сорбенте СКН-1К

Рис. 2. Динамика изменения концентрации продуктов ПОЛ эритроцитов у животных с синдромом ишемии-реперфузии конечности, леченных гемо-карбоперфузией на стандартном сорбенте СКН-1К

Материал и методы. Работа выполнена на 94 половозрелых беспородных собаках - самцах, массой 15-18 кг с моделью

Х.И.-Х.М.Лайпанов, Э.А.Петросян, В.И.Сергиенко

Таблица 1

Сравнительная динамика изменения концентрации продуктов ПОЛ плазмы при развитии синдрома острой ишемии-реперфузии конечности

Исследуемые группы Продукты ПОЛ

ИДС ДК ТК ОДК МДА ШО

Интакт- ные животные Пл 4,93±0,11 3,35±0,29 1,91 ±0,11 1,83±0,07 2,89±0,03 0,84±0,05

Эр 5,48 ±0,23 4,29±0,59 3,33±0,17 3,48±0,21 11,63±0,3 6,12±0,28

Животные с 4-час. ишемией Пл 5,27 ±0,13* 4,09±0,21* 2,31 ±0,16* 2,09±0,14 2,91 ±0,06 0,79±0,11

Эр 5,96±0,34 5,01±0,64 3,71±0,32 4,09±0,34 12,50±0,3 6,15±0,09

Животные с 3-час. реперфузией Пл 11,9±0,2* ** 9,40*1,15* 6,9±2,1* ** 7,13±0,22* 9,70±0,14* 3,14±0,09*

Эр 7,45±0,59** 6,20±0,61* 4,44±0,34** 4,83±0,64* 14,06±0,3* 7,20±0,38*

Примечание: * - достоверность отличий от интактных животных

острой ишемии-реперфузии задней конечности. В соответствии с поставленными целями и задачами эксперимента все животные были распределены на 2 группы:

1. Группа сравнения - животные с моделью синдрома острой ишемии-реперфузии конечности, в лечении которых использовалась гемокарбоперфузия на стандартном сорбенте СКН-1К (п=46);

2. Опытная группа - животные, с моделью синдрома острой ишемии - реперфузии конечности, в лечении которых использовалась гемокарбоперфузия на селективном антирадикальном сорбенте СКН-1К (п=48);

В качестве контроля использованы фоновые данные экспериментальных животных в условиях фиксации и наркоза (ин-тактные животные).

Модель синдрома острой ишемии-реперфузии создавали по методу [10]. Животные вводились в хирургическую стадию наркоза посредством дробного внутривенного введения тиопен-тала натрия в дозе 20 мг/кг массы тела после премедикации

0,25% раствором дроперидола в дозе 0,2 мл/кг, 1% раствором димедрола в дозе 0,2 мл/кг, трамала - в дозе 0,2 мл/кг.

На выделенный сосудистый пучок левой задней конечности накладывали турникет проксимальнее отхождения глубокой артерии бедра до пальпаторной констатации отсутствия периферической пульсации на конечностях в дистальном направлении от места наложения турникета. Реперфузию экспериментальной конечности проводили через 4 часа посредством снятия турникета. Через 3 часа после начала реперфузии производили гемокар-боперфузию на стандартном или модифицированном сорбентах продолжительностью 1 час трижды в течение 72 часов. Гемокарбоперфузия производилась на аппарате УАГ-01, объем использованного сорбента 75 мл, скорость - 80-92 мл/мин. Подключение осуществлялось по вено-венозному контуру. Для предотвращения тромбообразования до гемокарбоперфузии внутривенно вводили гепарин в дозе 500 Ед/кг. После гемокарбоперфузии действие гепарина нейтрализовали в/в протаминсульфата из расчета 1,5 мл на 1 мг гепарина (5000 ед/мл).

Модификацию сорбента СКН-1К проводили, пропуская в проточном режиме 0,1-0,15 н раствор натрия гипохлорита через навеску с сорбентом [11]. Эффективность гемокарбоперфузии оценивали по состоянию животных и уровню пероксидации липидов плазмы и эритроцитов крови интактных животных при фиксации и наркозе, через 4 часа ишемии и 3 часа реперфузии и после последней гемокарбоперфузии. Для оценки ПОЛ определяли первичные продукты (липиды, содержащие изолированные двойные связи (ИДС) и диеновые конъюгаты (ДК)); вторичные -(триеновые конъюгаты (ТК), оксодиеновые конъюгаты (ОДК), малоновый диальдегид (МДА)) и конечные продукты ПОЛ (шиффовы основания - ШО) плазмы и эритроцитов по [7].

Результаты. В раннем послеоперационном периоде после снятия лигатуры и выхода животных из наркоза собаки были вялыми, адинамичными, заторможенными. Затем после проведения первой гемокарбоперфузии на стандартном или модифицированном сорбентах состояние животных улучшалось в обеих группах: животные пытались вставать, принимали пищу и воду. Через 72 часа в 1-й группе, леченной гемокарбоперфузией на стандартном сорбенте СКН-1К, гибель составила 32% (8 животных), а во 2-й группе на фоне модифицированного гемосорбента

СКН-1К - погибло 1 (2,8%) животное. Все выжившие животные 2-й группы были клинически здоровы, в то время как в 1-й группе после использования стандартного сорбента животные были слегка заторможены, меньше двигались и отличались плохим аппетитом.

Развитие острой 4-часовой ишемии конечности с последующей 3-часовой реперфузией ведет к росту концентрации всех продуктов ПОЛ плазмы и эритроцитов. Концентрация ИДС плазмы возрастает в 2,4 раза, ДК - в 2,8 раза, ТК - в 3,6 раза, ОДК - в 3,8 раза, МДА - в

3.3 раза, а ШО - в 3,7 раза по сравнению с интактными особями в условиях фиксации и наркоза. Повышение концентрации продуктов ПОЛ эритроцитов было менее выраженным, но достоверным: ИДС эритроцитов возрастает в

1.3 раза, ДК - в 1,4 раза, ТК - в 1,3 раза, ОДК -в 1,4 раза, МДА - в 1,2 раза, а ШО - в 1,2 раза (р<0,05) (табл. 1).

Причем динамика изменений носила двухфазный характер: вначале происходило равномерное увеличение количества продуктов ПОЛ в плазме и эритроцитах в течение 4 часов острой ишемии конечности с последующим резким ростом концентрации продуктов ПОЛ после 3-часовой реперфузии конечности. К 3-му часу реперфузии содержание продуктов ПОЛ в плазме в несколько раз превышает их содержание в эритроцитах. Этот факт свидетельствует о том, что рост содержания продуктов ПОЛ в крови скорее связан с их вымыванием из мышц ишемизированной конечности во время реперфузии, чем с интенсификацией процессов ПОЛ в мембранах форменных элементов крови. Гемокарбоперфузия на стандартном сорбенте СКН-1К приводит к существенному снижению изучаемых показателей у животных 1й группы, однако концентрация практически всех продуктов ПОЛ, как плазмы, так и эритроцитов не достигает уровня интакт-ных животных в условиях фиксации и наркоза (рис. 1, 2).

Трехкратная гемокарбоперфузия на модифицированном натрия гипохлритом сорбенте СКН-1К у животных 2-й группы сопровождается более явным спадом концентрации продуктов ПОЛ плазмы и эритроцитов. К окончанию последней гемокарбо-перфузии показатели ПОЛ плазмы и эритроцитов достоверно не отличались от показателей интактных животных (р<0,05) (рис. 3).

интактные животные  Зчаса реперфузии  ГС на модифицированном СКН-1К

10 — 8 6 1

ІІ п 11  1 1.1

ИДС ДК ТК ОДК МДА ШО

Рис. 3. Динамика изменения концентрации продуктов ПОЛ плазмы у животных с синдромом ишемии-реперфузии конечности, леченных гемо-карбоперфузией на селективном сорбенте СКН-1К

Использование для лечения синдрома острой ишемии-реперфузии конечности гемокарбоперфузии ведет к снижению концентрации всех продуктов ПОЛ плазмы и эритроцитов. При этом более выраженный эффект получен на модифицированном гемосорбенте СКН-1К, что подтверждает его высокую антиоксидантную активность и свидетельствует в пользу его применения при состояниях, сопровождающихся окислительным взрывом.

ВЕСТНИК НОВЫХ МЕДИЦИНСКИХ ТЕХНОЛОГИЙ - 2006 - Т. ХШ, № 3 - С. 31

Статья

Литература

1. Атанов Ю.П., Шамычкова А.А. // Рос. мед. ж.- 2001.-№ 5.- С. 12-16.

2. Белов Ю.В. и др. // Хирургия.- 1997.- №2.- С.45-51.

3. Буров Ю.А. и др. // Методология флоуметрии.- М., 1997.-С.81-92.

4. Дадвани С.А. и др. // Анн. хир.- 2000.- №5.- C.47-52.

5. Затевахин И.И., Говорунов Г.В., Сухарев И.И. Реконструктивная хирургия поздней реокклюзии аорты и периферических артерий.- М.: Медицина, 1993.

6. Каленюк А.А. и др. // Биотехнол.- 1999.- № 5.- С.!1-!8.

7. Камышников В.С. Справочник по клинико-

биохимической лабораторной диагностике.- Беларусь, 2000.

8. Коваленко Г.А.и др. // Коллоидный ж.- 1999.- № 6.-С.787-795.

9. Комаров А.Л.и др. // Ангиология и сосудистая хирургия.-2000.- № 2.- С.9-18 .

10. Пасечников В.Д. и др. // Рос. ж. гастроэнтерол., гепатол. и колопроктол.- 1996.- №3.- С.66-69.

11. Патент 2161987 РФ. Способ модификации углеродистых гемосорбентов / Петросян Э.А. и др.- Бюл.- 2001.- №.2.

12. Покровский А.В. и др.// Ангиология и сосудистая хирургия.- 2000.- № 2.- С.19-26.

13. Покровский А.В. и др. // Ангиология и сосудистая хирургия.- 1999.- № 4.- С.47-56.

14. Таций Ю.П. и др. // Ангиология и сосудистая хирургия.-2000.- № 3.- С.75-78.

15. Cuzzocrea S. et al // Pharmacol. Rev.- 2001.- Vol.53.-P.135-159.

THE EXPERIMENTAL EVALUATION OF EFFECTIVENESS OF A DIFFERENT TYPES OF THE HEMOCARBOPERFUSION IN TREATMENT OF ACUTE ISHEMIA-REPERDUSION OF THE EXTREMITY

KH.I.-K.M. LA’PANOV, E.A. PETROSYAN, V.I.SERGIENKO Summary

It is shown in 94 dogs, that hemocarboperfusion leads to decrease in concentration of all lipid peroxidation products of plasma and erythrocytes in animals with a syndrome of a acute ischemia-reperfusion of extremity. More expressed effect is received at the use of the modified by sodium hypochlorite sorbent SKN-1K.

Key words: hemocarboperfusion, ischemia-reperfusion

ЙЛайпанов Хаджи-ислам Хаджи-Мекерович - к.м.н., заведующий урологическим отделением краевого онкологического диспансера г. Ставрополя, автор 32 статей.

Й Петросян Эдуард Арутюнович - д.м.н., профессор, зав. кафедрой оперативной хирургии и топографической анатомии Кубанской госмедакадемии, лауреат премии Комсомола Кубани, лауреат премии Правительства РФ в области науки и техники, заслуженный изобретатель РФ, заслуженный деятель науки Кубани, автор 346 статей, 35 патентов РФ.

ЙСергиенко Валерий Иванович - д.м.н., профессор, академик РАМН, зав. курсом оперативной хирургии и топографической анатомии кафедры фундаментальной медицины МГУ им. М. В. Ломоносова, зам. руководителя федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию РФ, лауреат Государственной премии РСФСР, лауреат премии Правительства РФ в области науки и техники, автор 300 статей.

УДК: 616-001.17-092.9] :616.37

ДОЗОЗАВИСИМЫЕ ИММУННЫЕ ЭФФЕКТЫ РИБОТАНА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ОЖОГОВОЙ ТРАВМЕ

Л.Л. КВАЧАХИЯ, В.А. ЛАЗАРЕНКО, И.А. МОНОВЦОВ*

Актуальность проблемы. На сегодняшний день не оспаривается тот факт, что ожоговая травма вызывает нарушения во всех звеньях иммунитета. Наиболее выражено угнетение функ-

* Курский госмедуниверситет, 305041 г. Курск, ул. Карла Маркса, 3

ций Т-хелперов, одновременно с этим отмечается усиление активности клеток-супрессоров [1, 4, 5]. Становится очевидной необходимость иммунокоррекции при подобных патологических состояниях [2]. Арсенал средств, влияющих на функциональную активность всех звеньев иммунной системы (Т- и В-лимфоциты и фагоцитирующие клетки), ограничен. Адекватная иммунокоррекция требует поиска новых более эффективных препаратов [3]. Одним из таких препаратов является риботан.

Цель работы - изучение иммунологической реактивности животных при экспериментальной ожоговой травме при коррекции иммунных нарушений риботаном в различных дозировках.

Материалы и методы. Исследования проводились на 288 мышах линии СВА обоего пола массой 18-22 г. Животные разделены на группы, характеристика которых представлена в табл.

Таблица

Характеристика экспериментальных групп

Характеристика групп Кол-во

Н интактные животные (норма) 32

О группы с ожогом, плацебо. 64

0/р0,05 ожогом, риботан в дозе 0,05 мл/кг 64

О/Р0,25 группы с ожогом, риботан в дозе 0,25 мл/кг 64

О/Р2,5 группы с ожогом, риботан в дозе 2,5 мл/кг 64

Итого 288

Ожог наносился в области спины животного на площади 15 см2, что составляло 18-20% поверхности тела. По глубине он был 111а с участками ІІІб степени и заживал самостоятельно посредством краевой и спонтанной островковой эпителизации. Животных выводили из опыта по группам на 1, 3, 7, 10, 15, 20, 30-е сутки от начала эксперимента.

В качестве иммунотропного препарата применялся риботан - комплексный иммунокорректор природного происхождения, состоящий из смеси низкомолекулярных (0,5-1,0 кДальтон) полипептидов и низкомолекулярных фрагментов РНК. Использовалась жидкая ампулированная форма выпуска препарата, который вводили подкожно четырёхкратно с интервалом в 24 часа в дозах 0,05, 0,25 и 2,5 мл/кг. В качестве плацебо использовали 0,9% раствор хлорида натрия в том же объеме (0,5 мл).

Для индукции иммунного ответа мышам за 5 суток вводили однократно внутрибрюшинно эритроциты барана (ЭБ) в дозе 2х109 клеток на килограмм массы тела. Об иммунном ответе судили по количеству антителообразующих клеток (АОК) в селезенке, розеткообразующих клеток (РОК) и числу клеток, образующих розетки с аутологичными эритроцитами (АРОК).

Результаты. Анализ данных показал, что способность к образованию антител была снижена до 15 суток с момента травмы, а максимальная супрессия этого показателя отмечалась с 3 по 5 сутки (рис. 1.) и достигала 2,2±0,5 млн./орган. В изменении числа РОК отмечалась схожая динамика (рис. 2.), но угнетение их количества длилось до 20 суток. В способности спленоцитов к розеткообразованию с АРОК обнаружена двухфазная динамика. Уровень АРОК был ниже контрольного на 15 сут., после чего отмечался некоторый рост числа ауторозеток (до 30%), который шел до конца эксперимента (рис. 3). Введение риботана в дозе 0,05 мл/кг способствовало уменьшению супрессии числа АОК на 3-5 сутки, в остальные периоды показатели достоверно не отличались от контрольных. Применение препарата в дозах 0,25 и 2,5 мл/кг позволило достичь нормы на 10 сутки (рис. 1), а к 30 дню отмечалось увеличение числа розеток. В группах с дозировкой 2,5 мл/кг минимальная супрессия АОК отмечалась на 5 сутки и была на 25% меньше, чем у мышей, которым вводился риботан в дозе 0,25 мл/кг. В иные периоды отличий в этих группах не было.

Применение риботана в дозе 0,05 мл/кг нормализовало показатели РОК на 15 сутки, а в группах О/Р0,25 и О/Р2,5 - на 10 (рис. 2). В двух последних группах шло достоверное уменьшение супрессии числа розеток с 3 по 7 сутки, чего не было в группе О/Р0,05. Количество аутологичных розеток достигало нормы на 5 и 7 сутки при использовании риботана в дозах 2,5 и 0,25 мл/кг соответственно (рис 3). В группе О/Р0,05 этот показатель нормализовался лишь к 10 суткам. В первых двух группах увеличение продукции А-РОК также было более ранним (7 и 10 сутки соответственно), чем у всех остальных животных.