Способ прогноза отсутствия регресса фиброза печени у больных хроническим гепатитом С
METHOD FOR PREDICTING THE ABSENCE OF REGRESS OF HEPATIC FIBROSIS IN THE PATIENTS WITH CHRONIC HEPATITIS C

Изобретение относится к медицине, а именно к области диагностики инфекционных болезней и сопутствующих им патологических состояний организма, и может быть использовано для прогнозирования отсутствия регресса фиброза печени у больных хроническим гепатитом С у больных без отягощенного преморбидного фона после терапии препаратами прямого противовирусного действия.
Известно, что наиболее частой причиной развития хронических диффузных заболеваний печени с развитием фиброза печени является ее поражение вирусом гепатита С. По данным отчета Всемирной организации здравоохранения в 2019 году 71 миллион человек в мире живут с хроническим вирусом гепатита C (ХГС), при этом подавляющее большинство этих людей не имеют доступа к необходимому обследованию и лечению [Информационный бюллетень ВОЗ, 2019 г. www.who.int/ru/news-room/fact-sheets/detail/hepatitis-c].
Хронический гепатит С (ХГС) сопровождается неуклонным прогрессированием заболевания и формированием фиброза печени различной выраженности. Определить критерии прогрессирования фиброза печени у больных ХГС - сложная и чрезвычайно актуальная задача, решение которой определяет выбор адекватной тактики ведения больного.
К настоящему времени известны различные способы прогнозирования течения хронического гепатита С и диагностики стадий фиброза печени, основанные на разных методах исследования, которые обладают рядом существенных недостатков.
Выраженность индекса фиброза измеряется по шкале METAVIR (Poynard Т., Bedossa P., Opolon P., Natural history of liver fibrosis progression in patients with chronic hepatitis C, The OBSVIRC, METAVIR, CLINIVIR and DOSVIRC groups, Lancet. 1997; 349 (9055): 825-832). Согласно этой шкале выделяют 5 стадий фиброза (F 0, F 1, F 2, F 3 и F 4), где F 0 соответствует отсутствию фиброза, a F 4 - циррозу печени.
Известен способ мониторинга фиброзного процесса в печени у больных хроническим гепатитом Он заключается в определении 2 раза в год уровней цитокинов сыворотки крови, на основе которых  рассчитывают интегральный показатель цитокинового профиля (ИПЦП). Далее при исходной стадии F0 рост ИПЦП выше  8 свидетельствует о дебюте фиброзных изменений в печени (переход на стадию F1). При исходной стадии F1 падение ИПЦП ниже - 10 свидетельствует о переходе на стадию F2; при исходной стадии F2 рост ИПЦП выше - 3 свидетельствует о прогрессировании до стадии F3, а при исходной стадии F3 падение ИПЦП ниже - 3 свидетельствует о развитии цирроза печени. (RU 2557926, опубл. 2015).
Известен также способ диагностики стадии фиброза печени у пациентов с хроническим гепатитом С, который заключается в определении в крови количество тромбоцитов, фактора некроза опухоли альфа и альбумина, а далее рассчитывают по формуле индекс фиброза печени: ИФ=3,79-0,0056•ТР+0,0855•ФНО-α-0,0352•альбумин. При значении индекса фиброза в интервале от 0 до 0,5 определяют отсутствие фиброза (стадия F0), индекс фиброза в интервале от 0,6 до 2,5 соответствует умеренной стадии фиброза (F1-2), а значение индекса фиброза более 2,5 указывает на выраженный фиброз (F3-4). (RU 2592371, опубл. 2016)
В качестве ближайшего аналога выбран cпособ прогнозирования динамики фиброза печени у пациентов с хроническим гепатитом С, не ответивших на лечение пегилированными интерферонами и рибавирином. (RU 2623151, опубл. 2017). Согласно известному способу определяют групповую принадлежность крови у пациентов с ХГС С, генотипом 1, в сочетании с исследованием полиморфизма гена IL28B, при этом в 100% случаев отмечалось прогрессирование фиброза печени у пациентов с группой крови Аβ (II) и одно- или двухнуклеотидной заменой цитозина на тимин (С>Т) в локусе rs 12979860 и одно- или двухнуклеотидной заменой тимина на гуанин (T>G) в локусе rs 8099917 гена IL28B. Способ направлен на отбор пациентов для безинтерфероновой терапии с целью исключения отрицательной динамики фиброза печени у данной категории пациентов.
Недостатком способа согласно ближайшему аналогу является прогноз только в отношении больных ХГС с 1 генотипом и только с целью определения тактики терапии интерферонсодержащими схемами. Известный способ позволяет прогнозировать только благополучный исход лечения.
В целом все известные способы не указывают на динамику стадии фиброза печени у больных ХГС после противовирусной терапии препаратами прямого действия на фоне устойчивого вирусологического ответа (УВО) и не позволяют определить прогноз отсутствия регресса фиброза печени.
Задачей заявляемого изобретения является разработка способа прогнозирования отсутствия регресса фиброза печени у больных ХГС без проморбидного фона после терапии препаратами прямого противовирусного действия с целью определения тактики лечения и усиления антифибротической патогенетической терапии.
Предложенный способ предусматривает исследование Т-клеточного иммунитета методом проточной цитофлюорометрии до и после противовирусной терапии с определением показателей CD19+, CD56+, Т-лимфоцитов и Т-хелперов, экспресcирующих рецепторы к гамма (CD45+CD4+CD119+, CD4+CD119+) с высоким диагностическим коэффициентом информативности Кульбака. Снижение относительного уровня CD19+ менее 11%, CD56+ менее 6% при нарастании количества CD4+CD119+ более 85% и CD45+CD4+CD119+ более 38% прогнозируют отсутствие регресса фиброза печени.
Технический результат заключается в возможности проведения быстрой, доступной, точной и достоверной оценки результата терапии противовирусными препаратами, предпочтительно прямого противовирусного действия (ПППД) при 100% устойчивом вирусологическом ответе (УВО) по регрессу фиброза печени у больных ХГС без отягощенного преморбидного фона, а именно прогноза отсутствия регресса фиброза печени на фоне УВО, что обеспечивает своевременный выбор оптимальной тактики ведения пациентов после противовирусной терапии, направленный на усиление антифибротической патогенетической терапии.
Технический результат достигается за счет осуществления предложенного способа прогнозирования отсутствия регресса фиброза печени после успешной противовирусной терапии ХГС путем иммунологического исследования крови пациента перед началом и после терапии ПППД с целью определения иммунологических показателей крови пациента с высоким коэффициентом информативности Кульбака. Выявление снижения относительного уровня клеток CD19+ менее 11% и клеток CD56+ менее 6%, а также повышения количества клеток CD4+CD119+ более 85% и клеток CD45+CD4+CD119+ более 38% позволяет прогнозировать отсутствие регресса фиброза печени. Согласно варианту предложенного способа используется динамика параметров Т-клеточного иммунитета с высоким коэффициентом информативности Кульбака до и после терапии ПППД.
Существенная роль иммунной системы в хронизации вирусного гепатита С и в процессе фиброгенеза остается непререкаемой. Прогрессирующие течение ХГС неуклонно приводит к формированию фиброза печени (ФП), а затем и цирроза печени. Механизм развития ФП вытекает из многогранности морфологической реакции печени на повреждение. Фиброгенез – универсальный процесс прогрессирования хронических заболеваний печени, не зависящий от этиологических факторов, связанный с заменой паренхиматозных клеток соединительной тканью. (Сторожаков Г.И., Ивкова А.Н., Патогенетические аспекты фиброгенеза при хронических заболеваниях печени, Клинические перспективы гастроэнтерологии, гепатологии, 2009, №2., С. 3–10).
Непосредственными факторами управления фиброгенезом являются универсальные, а в ряде случаев специфические цитокины, регулирующие воспалительный ответ на повреждение гепатоцитов, а прогрессирование ФП при ХГС тесно связано с развитием иммунного воспаления в печени. Основное значение в противовирусной защите при ХГС имеют Т-хелперы 1-го типа (Th1), которые стимулируют цитотоксическую активность CD8-лимфоцитов и макрофагов и усиливают экспрессию антигенов первого класса гистосовместимости на клетках-мишенях и усиливают продукцию интерферонов. От состояния иммунной системы, включая рецепторы к интерферонам, зависит способность организма пациента сопротивляться инфицированию вирусами. Вместе с тем полученные ранее результаты исследований взаимосвязи показателей клеточного иммунитета, экспрессии рецепторов ИФН разных типов на клетках периферической крови и степенью фиброза крайне противоречивы.
Настоящее изобретение позволяет повысить достоверность прогнозирования динамики фиброза печени при ХГС у пациентов без отягощенного преморбидного фона, а именно отсутствие регресса фиброза печени после противовирусной терапии ПППД на фоне УВО и своевременно выбрать оптимальную тактику ведения пациента с ХГС с целью предотвращения усугубления патологического состояния печени и возникновения цирроза печени.
Раннее прогнозирование фиброзных изменений позволяет своевременно начать лечение, направленное на уменьшение темпов прогрессирования фиброза и предотвращение развития цирроза и рака печени. При выраженном фиброзе печени лечение не столь эффективно и может потребоваться продление сроков терапии и увеличение доз препаратов. Кроме того, на фоне проводимой терапии существует возможность обратного развития фиброза печени (Ismail М.Н., Pinzani М., Reversal of Liver Fibrosis, Saudi J. Gastroenterology, 2009; 15 (1): 72-79).
При разработке предлагаемого способа проведен анализ клинико-иммунологических показателей у 40 больных ХГС на фоне противовирусной терапии препаратами прямого противовирусного действия согласно последним протоколам (EASL 2019). Средний возраст пациентов составил 48,3±2,3г. Из 40 больных ХГС мужчин – 23 (57,5%) и женщин 17 (42,2%), с генотипом 1 - 27 человек (67,5%), с «не 1 генотипом» – 13 пациентов (32,5%). По длительности инфицирования: от 3 до 5 лет инфицирования – 8 человек (20%) , от 6 до 10 лет – 17 больных (42,5%) и свыше 10 лет инфицирования – 15 пациентов (37,5%). Высокая вирусная нагрузка определялась у 7 пациентов (7,5%), а низкая ВН у 33 больных (82,5%). Всем обследованным проводилась фиброэластометрия печени на аппарате «Фиброскан 502» (Echosens, Франция). В группе было 18 пациентов (46%) на стадии ФП F 0-1, 11 больных (28%) с F-2, и с продвинутым фиброзом F-3-4 – 10 (26%)  пациентов.
У всех 40 больных ХГС (100%) с 4-й недели отмечалась полная биохимическая ремиссия, сохраняющаяся весь период терапии, а также в 100% случаев УВО. В группе наблюдения УВО у 38 больных был зарегистрирован с 4-й недели, а у 2 пациентов с 3 генотипом – только с 8-й недели ПВТ. В катамнезе через 3 и 6 месяцев после окончания лечения у всех пациентов РНК HCV ультрачувствительным ПЦР-методом не определялась.
Контрольную группу составили 30 здоровых лиц, у которых отсутствовали какие-либо жалобы и клинико-лабораторные отклонения на момент обследования.
Критериями включения в исследования являлись: подтвержденный диагноз хронического вирусного гепатита С (маркеры HCV-инфекции методом ИФА и наличие РНК HCV методом ПЦР); возраст пациентов от 18 до 80 лет; отсутствие других гепатитов; наличие информированного согласия на участие в исследовании.
Критериями исключения стали: возраст младше 18 и старше 80 лет; наличие косуперинфекции, обострения сопутствующих заболеваний в момент исследования; наличие тяжелых сопутствующих заболеваний, таких как: ВИЧ-инфекция, туберкулез, сахарный диабет, ожирение 2-ой степени и выше, неалкогольная жировая болезнь печени (НЖБП), бронхиальная астма, заболевания щитовидной железы; злоупотребление алкоголем и употребление внутривенных наркотических веществ последние 6 месяцев до начала исследования.
Диагноз подтверждали определением маркеров ХГС методом ИФА: а-HCV-IgM, IgG при помощи диагностических тест-систем «Вектор Бест» (Россия). РНК HCV в сыворотке крови определяли методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием тест-системы «АмплиСенс HCV-Монитор-FL» ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора (Россия).
Исследование субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови проводили методом проточной цитофлюорометрии на цитометре EPICS XL («Beckman Coulter», США). Помимо стандартной панели, необходимой для определения количества основных субпопуляций лимфоцитов, были разработаны дополнительные панели окрашивания для определения числа циркулирующих лимфоцитов, экспрессирующих цепь 2 рецептора ИФН-α/β и α-цепи рецептора ИФН-γ (CD118+, CD119+ - лимфоциты), а также популяции клеток CD45+CD4+CD119+.
Динамика количества циркулирующих лимфоцитов, экспрессирующих цепь 2 рецептора ИФН-α/β (CD118+) имеет тенденцию к снижению после ПВТ исходно повышенных показателей без статистической достоверности, а уровень CD119+-лимфоцитов достоверно нарастал у больных на стадии  F3 (p˂0,01).  Наиболее выраженная динамика регистрировались в отклонениях CD45+CD4+CD119+ и CD4+CD119+, которые достоверно нарастали после терапии при F 0-3 (p˂0,05), при этом регресс стадии ФП после ПВТ отмечался именно в группе с выраженной динамикой иммунологических параметров.
Получены информативные диагностические коэффициенты для пациентов с различными отклонениями иммунного статуса и установлено, что повышение уровня CD118+, CD4+CD119+ высокоинформативны на всех стадиях фиброза печени. У пациентов с F4 получены значимые информативные диагностические коэффициенты и коэффициент Кульбака для повышенного уровня CD118+ (J=15,8), CD119+ (J=8,2) и СD45+CD4+CD119+ (J=30,4), а также для сниженного уровня CD19+ (J=2,7) и CD56+ (J=10,0).
Устойчивый вирусологический ответ и биохимическая ремиссия наблюдались в 100% случаев. В сроки 6 и 12 месяцев после окончания противовирусного лечения были проведены повторные исследования расширенного иммунного статуса и фиброэластометрия. Всем обследованным проводилась фиброэластометрия печени на аппарате «Фиброскан 502» (Echosens, Франция). Стадия фиброза определялась по шкале МЕТАВИР. Оценка динамики регресса стадии фиброза печени выявила снижение количества больных на стадии F4 с 14% до 6%, регресс разных стадий фиброза печени по данным эластичности печени в кПа отмечался у 28 больных, без динамики оставались 12 пациентов.
С учетом высокой противовирусной эффективности, хорошей переносимости безинтерфероновых схем терапии ХГС, но незначительной динамики по регрессу стадии фиброза печени, было необходимо оценить динамику значимых иммунологических показателей после проведенной ПВТ.
Целый ряд иммунологических показателей, характеризующих адаптивный иммунный ответ, подвергался достоверным сдвигам на разных стадиях фиброза печени, в связи с чем, возникла необходимость их дополнительного анализа на пригодность использования в качестве иммунологических критериев стадий фиброзного процесса.
С этой целью проводилось определение диагностических коэффициентов (ДК) и коэффициента информативности Кульбака (J) для выявления значимости отклонений иммунограммы у больных ХГС в зависимости от стадии фиброза печени. (Таблицы 1, 2). Этот метод позволяет определить информативную значимость повышения и снижения иммунологических показателей.
В ходе исследования было проведено вычисление диагностических коэффициентов с использованием статистического последовательного анализа Вальда, информативность каждого из диагностических коэффициентов рассчитывалась по формуле Кульбака:
J=ДК х 1/2х (Р1-Р2),
где J - информативность диагностического коэффициента, ДК – диагностический коэффициент, Р1 и Р2 – вероятности проявления данного признака в основной и контрольной группе.
Информативным считаются признаки при J>0,5. Умеренная информативность при J от 0,5 до 2, выраженная при коэффициенте от 2,1 до 10 и сильная - более 10,1. Высокий коэффициент информативности Кульбака составляет от 2 до 10 или более 10.
Значимые изменения в иммунном статусе в динамике на фоне терапии у больных ХГС выявлены по степени активности ЦТЛ, ИРИ и по отклонениям уровня Т-лимфоцитов, экспрессирующих рецепторы α-, γ-интерферонов. Были выявлены достоверное повышение уровней CD119+ и CD45+ и CD4+, экспрессирующих CD119+ после терапии у больных F-4 по сравнению с пациентам на стадии F-3.
У пациентов ХГС после ПВТ неблагоприятным прогностическим иммунологическим критерием прогрессирования фиброза печени является: снижение относительного уровня CD19+ менее 11% и CD56+ менее 6% при нарастании CD4+CD119+ более 85%  и  CD45+CD4+CD119+ более 38%.
Примеры:
Клинический пример №1
. Больная В.Т.Н., 35лет. Жалоб активно не предъявляла. Анамнез настоящего заболевания: маркеры НСV- инфекции впервые выявлены в 2012 г. при обследовании по беременности. При обследовании: ПЦР качественный анализ положительный, определен генотип 1b, эластография печени (F2 по Metavir), отмечалось стойкое повышение трансаминаз при контрольных обследованиях с 2012 г. в поликлинике по месту жительства. ПВТ не получала.
Эпидемиологический анамнез: гемотрансфузии отрицает, оперативное лечение отрицает. Употребление инъекционных наркотиков отрицает, постоянный половой партнер - муж, муж и дети 2 (с 2012 г.) здоровы. Лечение зубов периодически по месту жительства в течение жизни.
При осмотре: кожа чистая, обычной окраски. Язык влажный, чистый. Живот мягкий, при пальпации безболезненный. Печень пальпируется под реберной дугой. Селезенка не пальпируется. Со стороны систем органов дыхания и кровообращения патологических изменений не выявлено.
6
При обследовании: AHCV сумм положительны. РНК ВГС – обнаружена от 26.03.19, 1b генотип, количество ВГС – 1,7×10 МЕ/мл.
Результаты исследования анализов крови пациента приведены в Таблице 3.
УЗИ органов брюшной полости: Увеличение и диффузные изменения паренхимы печени. Диффузные изменения паренхимы поджелудочной железы.
Эластография печени от 16.03.2019: эластичность печени 9,9 кПа, что может соответствовать F2 по Метавир.
Заключение: Хронический вирусный гепатит С (РНК HCV+), генотип 1b, в стадии репликации вируса.  Фиброз печени стадия F2 по Metavir.
Назначено в амбулаторном порядке проведение противовирусной терапии препаратами прямого противовирусного действия (софосбувир 400 мг/сут+ ледипасвир 60 мг/сут), сроком на 12 недель.
После лечения: РНК ВГС – не обнаружена. Эластография печени от 20.07.2019 показала эластичность печени 5,7 кПа, что может соответствовать F0-1 по Метавир.
Выявлена нормализация  дисбаланса показателей иммунного статуса по уровню CD19+ и Т- лимфоцитов, продуцирующих интерферон гамма и нормализация степени угнетения ИФН-статуса со 2 степени до 1 степени после ПВТ ПППД, а именно, повышение относительного уровня клеток CD19+ и клеток CD56+, снижение уровня CD CD4+CD119+ и CD45+CD4+CD119+, что подтверждает возможность рассматривать такую динамику на фоне терапии ПППД  как благоприятный прогноз регресса фиброза печени.
Клинический пример №2
. Больная А.Л.С., 72 года. Жалобы на общую слабость, дискомфорт в правом подреберье, бессонницу.
Анамнез настоящего заболевания: Маркеры НСV- инфекции впервые выявлены в 2000 г. при плановой госпитализации в кардиологическое отделение.
Эпидемиологический анамнез: гемотрансфузию отрицает, оперативное лечение в 1994 г. Употребление инъекционных наркотиков отрицает. Лечение зубов периодически по месту жительства в течение жизни.
При осмотре: кожа чистая, обычной окраски. Язык влажный, обложен белым налетом. Живот мягкий, при пальпации безболезненный. Печень пальпируется ниже края реберной дугой на 1,5 см., при пальпации дискомфорт. Селезенка не пальпируется.
6
При обследовании: AHCV сумм положительны. РНК ВГС – обнаружена от 08,2017, 2 генотип, количество ВГС – 2,6×10 МЕ/мл.
Результаты исследования анализов крови пациента приведены в Таблице 4.
УЗИ органов брюшной полости: Увеличение и диффузные изменения паренхимы печени. Воротная вена до 11 мм, Селезеночная вена до 5 мм. Диффузные изменения паренхимы поджелудочной железы.
Эластография печени от 08.04.2019: эластичность печени 13,6 кПа, что может соответствовать F-4 по Метавир.
Заключение: Хронический вирусный гепатит С (РНК HCV+), генотип 2, в стадии репликации вируса. Фиброз печени стадия F-4 по Metavir.
Назначено в амбулаторном порядке проведение противовирусной терапии препаратами прямого противовирусного действия (софосбувир 400 мг/сут+ ледипасвир 60 мг/сут), сроком на 12 недель.
обнаружено
После лечения: РНК ВГС – не обнаружена. Эластография печени от 12.08.2019 эластичность печени 12,7 кПа, что может соответствовать F-4 по Метавир. При исследовании иммунного статуса  снижение уровня CD19+ и CD56+, значимое повышение CD4+CD119+ и CD45+CD4+CD119. Эти показатели Т-клеточного иммунитета у больного ХГС без отягощенного преборбидного фона после ПВТ ПППВТ имели снижение относительного уровня CD19+ менее 11%, CD56+ менее 6%, повышения количества CD4+CD119+ более 85% и CD45+CD4+CD119+ более 38 %, что подтверждает неблагоприятное течение ХГС и прогнозирует отсутствие регресса фиброза печени после противовирусной терапии и диктует необходимость усиления антифибротической патогенетической терапии.
Клинический пример №3.
Больной  Д.С.А, 47 лет. Жалобы на быструю утомляемость, дискомфорт в правом подреберье при физической нагрузке и употреблении жирной пищи.
Анамнез настоящего заболевания: Маркеры НСV- инфекции впервые выявлены более 7лет назад при сдачи крови как донор (травма родственника)
Эпидемиологический анамнез: гемотрансфузии, оперативное лечение отрицает. Употребление инъекционных наркотиков отрицает. Лечение зубов периодически по месту жительства в течение жизни, протезирование 9 лет назад.
При осмотре: кожа  и  слизистые чистые, физиологической окраски. Язык влажный, обложен на корне. Живот мягкий, при пальпации безболезненный. Печень пальпируется +2 см, безболезненна при пальпации. Селезенка не пальпируется.
При обследовании:  A-HCV суммарные –обнаружены(  + ) положительные.
Результаты исследования анализов крови пациента приведены в Таблице 5.
РНК ВГС – обнаружена от 19.03.14, 1b генотип;  повт. анализ ПЦР РНК ВГС  от 17.04.2019г количественный метод  –2,9×107 МЕ/мл обнаружено ВГС.
УЗИ органов брюшной полости: Увеличение и диффузные изменения паренхимы печени. Эластография печени от 04.2019: эластичность печени 10,2 кПа, что может соответствовать  F-3 по Метавир.
Заключение: Хронический вирусный гепатит С (РНК HCV+), генотип 1в, в стадии репликации вируса.  Фиброз печени стадия F-3 по Metavir.
Проведена противовирусная терапия в течение 12 недель ПППД.  Отмечается на фоне терапии и после лечения стойкий вирусологический ответ с 4 недели ПВТ.  ПЦР ВГС РНК не обнаружено ультрачувствительным методом в последующие точки контроля: 20.05.19;  21.06.19;  22.07.19;  25.11.2019г.
Жалоб активных нет после терапии.
Повторная эластография печени от 11.2019: эластичность печени 9,3 кПа, что соответствует F3 по Метавир и указывает на отсутствие регресса печени, что подтверждается после терапии ПППД анализом иммунного статуса с нарастанием CD4+CD119+  до 91% ,  CD45+CD4+CD119+ до 42%  при снижение количества  CD 19+ до 10% и CD56+ до 4%. Полученные результаты подтверждают неблагоприятное течение ХГС и прогнозируют отсутствие регресса фиброза печени после противовирусной терапии.
После терапии ПППД иммунологические показатели, соответствующие   снижению относительного уровня CD19+ менее 11%, CD56+ менее 6%, при повышении количества CD4+CD119+ более 85% и CD45+CD4+CD119+ более 38 % прогнозируют отсутствие регресса фиброза печени у больных ХГС без преморбидного фона.
Исходя из приведенных данных, представляется возможным использовать указанные иммунологические показатели, главным образом снижение относительного уровня CD19+ менее 11%, CD56+ менее 6% при нарастании количества CD4+CD119+ более 85% и CD45+CD4+CD119+ более 38%, как прогностические критерии отсутствия регресса фиброза печени у больных ХГС без обогащенного преморбидного фона при терапии ПППД для последующего выбора тактики ведения пациента.
Заявленное решение обеспечивает своевременный выбор оптимальной тактики ведения пациентов на усиление антифибротической патогенетической терапии в случае прогнозирования отсутствия регресса фиброза печени на фоне УВО после успешной противовирусной терапии.
Таблица 3. Результаты исследования анализов крови пациента из клинического примера 1.
Общий анализ крови
Дата
Эритроциты(*10<sup>12</sup>/л)
Гемоглобин(г/л)
Лейкоциты(*10<sup>9</sup>/л)
Тромбоциты(*10<sup>9</sup>/л)
CОЭ(мм/час)
26.03.19
4,92
148
6,2
165
9
Биохимический анализ крови
Дата
Б.общ(мкмоль/л
Об.белок(г/л)
АЛТ(ед/л)
АСТ(ед/л)
ЩФ(ед/л)
ГГТ(ед/л)
20.07.19
8,7
80,1
107,26
60,73
113,09
29,4
<b>CD3+</b>
<b>CD4+</b>
<b>ИРИ</b>
<b>CD19+</b>
<b>CD16+</b>
<b>CD56+</b>
<b>CD38+</b>
<b>CD118+</b>
<b>CD119+</b>
<b>CD45+CD4+CD119+</b>
<b>CD4+CD119+</b>
72
50
2,12
11
4
4
26
90
91
41
91
76
51
2,4
12,8
8
5
27
92
85
35
87
нормы значимыхим. показателей
14
12
6
36
76
81
32
78
Таблица 4. Результаты исследования анализов крови пациента из клинического примера 2.
Общий анализ крови
Дата
Эритроциты(*10<sup>12</sup>/л)
Гемоглобин(г/л)
Лейкоциты(*10<sup>9</sup>/л)
Тромбоциты(*10<sup>9</sup>/л)
CОЭ(мм/час)
10.03.19
4,5
106
2,8
112
9
Биохимический анализ крови
Дата
Б.общ(мкмоль/л)
Об.белок(г/л)
АЛТ(ед/л)
АСТ(ед/л)
ЩФ(ед/л)
ГГТ(ед/л)
01.08.2019
7,7
83
30
28
110
25
<b>CD3+</b>
<b>CD4+</b>
<b>ИРИ</b>
<b>CD19+</b>
<b>CD16+</b>
<b>CD56+</b>
<b>CD38+</b>
<b>CD118+</b>
<b>CD119+</b>
<b>CD45+CD4+CD119+</b>
<b>CD4+CD119+</b>
78
53
2,52
10
6
3
12
89
96
39
86
76
50
2,49
9
8
2
11
91
99
43
87
нормы значимыхим. показателей
14
12
6
36
76
81
32
78
Таблица 5. Результаты исследования анализов крови пациента из клинического примера 3.
Общий анализ крови
Дата
Эритроциты(*10<sup>12</sup>/л)
Гемоглобин(г/л)
Лейкоциты(*10<sup>9</sup>/л)
Тромбоциты(*10<sup>9</sup>/л)
CОЭ(мм/час)
17.04.19
5,3
151
6,4
251
9
Биохимический анализ крови
Дата
Бил.общ(мкмоль/л)
Об.белок(г/л)
АЛТ(ед/л)
АСТ(ед/л)
ЩФ(ед/л)
ГГТ(ед/л)
17.04.19
7,9
71
54
41
59
39
<b>CD3+</b>
<b>CD4+</b>
<b>ИРИ</b>
<b>CD19+</b>
<b>CD16+</b>
<b>CD56+</b>
<b>CD38+</b>
<b>CD118+</b>
<b>CD119+</b>
<b>CD45+CD4+</b><b>CD119+</b>
<b>CD4+CD119+</b>
71
44
2,4
12
10
5
26
87
88
35
94
70
39
2,21
10
11
4
18
89
91
42
91
нормы значимыхим. показателей
14
12
6
36
76
81
32
78
Формула изобретения
1. Способ прогноза отсутствия регресса фиброза печени у больных хроническим гепатитом С без отягощенного преморбидного фона после противовирусной терапии путем проведения иммунологического исследования показателей Т-клеточного иммунитета с высоким коэффициентом информативности Кульбака, где при определении снижения уровней клеток CD19+ менее 11%  и  CD56+ менее 6% в сочетании с повышением количества CD4+CD119+ более 85% и уровня клеток CD45+CD4+CD119+ более 38% прогнозируют отсутствие регресса фиброза печени.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что проводят иммунологическое исследование крови в динамике до и после терапии препаратами прямого противовирусного действия  и определяют выбор последующей тактики ведения пациента на фоне устойчивого вирусологического ответа.
Реферат
Изобретение относится к медицине, а именно к области диагностики инфекционных болезней и сопутствующих им патологических состояний организма, и может быть использовано для прогнозирования отсутствия регресса фиброза печени у больных хроническим гепатитом С у больных без отягощенного преморбидного фона после терапии препаратами прямого противовирусного действия. Предложенный способ предусматривает исследование Т-клеточного иммунитета методом проточной цитофлюорометрии до и после противовирусной терапии с определением иммунологических показателей с высоким диагностическим коэффициентом информативности Кульбака. Снижение относительного уровня CD19+ менее 11%, CD56+ менее 6% при нарастании количества CD4+CD119+ более 85% и CD45+CD4+CD119+ более 38% прогнозируют отсутствие регресса фиброза печени. Способ обеспечивает возможность прогнозирования отсутствия регресса фиброза печени на фоне устойчивого вирусологического ответа и выбора последующей тактики ведения пациента после противовирусной терапии препаратами прямого противовирусного действия (ПППД).