Субпопуляционный состав лимфоцитов периферической крови беременных женщин с гестозом

СУБПОПУЛЯЦИОННЫЙ СОСТАВ ЛИМФОЦИТОВ ПЕРИФЕРИЧЕСКОЙ КРОВИ БЕРЕМЕННЫХ ЖЕНЩИН С ГЕСТОЗОМ

НИИ акушерства и гинекологии им. Д. О. Отта РАМН,

Санкт-Петербург

© Д. И. Соколов, А. В. Селютин, М. В. Лесничия, О. Н. Аржанова, С. А. Сельков

Одним из возможных механизмов возникновения гестоза считается нарушения иммунной адаптации в системе мать-плод. Целью настоящего исследования было комплексное сравнительное изучение субпопуляционного состава мононуклеаров периферической крови здоровых беременных и беременных с гестозом. Установлено, что у здоровых беременных процентное содержание СИ4+ Т-лимфоцитов хелперов было достоверно выше процентного содержания СИ8+ ци-тотоксических лимфоцитов. Процентное содержание СБ4+ лимфоцитов и СБ8+ лимфоцитов у беременных женщин с гестозом и здоровых беременных находилось на одинаковом уровне. При исследовании имелось достоверное снижение соотношения СОЗ+\СВ4+ лимфоцитов к СБЗ+\СБ8+ лимфоцитам у беременных с гестозом по сравнению с субпопуляциями здоровых беременных. Кроме того, у беременных женщин с гестозом количество СИ4+ лимфоцитов было достоверно ниже, а количество СИ8+ лимфоцитов было достоверно выше, чем у здоровых беременных. Установлено, что у беременных с гестозом количество активированных Т-лимфоцитов СБЗ+\НЬА-ОК+, натуральных киллеров СВ1б+\СВ5б+ и ]\КТ-лимфоцитов СВЗ+\СБ16+\СБ56+ было достоверно выше по сравнению со здоровыми беременными. Общее количество СИЗ+ лимфоцитов, а также количество С019+ В-лимфоцитов и незрелых СБ4+\СБ8+ Т-лимфоцитов у беременных с гестозом не отличалось от такового у здоровых беременных женщин. Полученные данные свидетельствуют о преимущественной активации цитотоксических лимфоцитов у беременных с гестозом.

Ключевые слова: гестоз; Т-лимфоциты; естественные киллеры

Введение

Одним из наиболее тяжелых осложнений беременности продолжает оставаться гестоз, занимающий ведущее место в структуре материнской и перинатальной смертности. Клиническими проявлениями гестоза является развитие одного или сочетание нескольких симптомов из триады Цангемейстера начиная с 20-й недели беременности: возникновение гипертензии, протеинурии и задержки жидкости в организме женщины. Одним из возможных механизмов возникновения данной патологии считается нарушения иммунной адаптации в системе мать-плод, в результате которой нарушаются процессы нормального взаимодействия децидуальных лейкоцитов и клеток цитотрофобласта с последующей активацией цитотоксических реакций. Эти процессы, возможно, являются инициаторами основных патофизиологических механизмов гестоза. В результате происходит нарушение инвазии спиральных артерий в миомет-рий, гипоксия и ишемия плацентарной ткани, нарушается целостность эндотелия материнских и плодовых сосудов, вовлеченных в плацентарное кровообращение [4, 6, 9].

Инвазия трофобласта, нормальное развитие и функционирование плаценты находится под контролем клеток иммунной системы. Лимфоциты в человеческом организме подразделяют на несколько субпопуляций: В-лимфоциты с фенотипом СБ19+, Т-хелперы (ТЫлимфоциты) с фенотипом С03+\С04+, цитотоксические Т-лимфоциты с фенотипом С03+\С08+, натуральные киллеры (МК-клетки) с фенотипом С016+\С056+, МКТ-лимфоциты с фенотипом С03+\С016+\СВ56+. ТЫлимфоциты подразделяют на ТЫ-лимфоциты и ТЪ2-лимфоциты, в зависимости от типа секретируемых цитокинов. ТЫ-лимфоциты контролируют реакции клеточного иммунного ответа, продуцируя 1Ь-2, Т№а и ^N7. Эти цитокины активируют С08+ цитотоксические лимфоциты и!ЫК-клетки, осуществляющие цитотоксические реакции и участвующие в противоопухолевом и противовирусном иммунном ответах. ТЬ2-лимфоциты контролируют реакции гуморального иммунного ответа за счет секреции 1Ь-4, 1Ь-10 и 1Ь-13. Эти цитокины активируют В-лимфоциты, осуществляющие синтез и секрецию антител, участвующих в антибактериальном иммунном ответе. Указанные субпопуляции лимфоцитов обладают антагонистическим взаимодействием. ТЫ-лимфоциты через секрецию ^N7 усиливают пролиферацию и активируют другие ТЫ-лимфоциты, одновременно подавляя ТЬ2-лимфоциты. ТЬ2-лимфоциты через секрецию 1Ь-4 и 1Ь-10 усиливают

пролиферацию и активируют другие ТЬ2-лим-фоциты, одновременно подавляя Thl-лимфоциты. Таким образом, в организме существует баланс между Thl- и ТЬ2-лимфоцитами, которые контролируют различные иммунные реакции. NK-клетки участвуют в первичной воспалительной реакции, играя определенную роль в инициации иммунного ответа. Они получают сигнал активации от макрофагов, секретирую-щих IL-12, в ответ на который активируются и секретируют IFNy, инициирующий активацию макрофагов, Thl-лимфоцитов и цитотоксичес-ких Т-лимфоцитов.

Регуляция нормального развития и функционирования плаценты находится в общем контексте иммунологических взаимоотношений материнского организма и плода в соответствии с концепцией переключения Thl-ответа на ТЬ2-ответ при физиологической беременности. При этом в норме смещение баланса в сторону ТЬ2-опосредованного гуморального иммунного ответа обеспечивает нормальное развитие плода и толерантность иммунной системы матери по отношению к семиаллогенному трансплантату, каковым является плод. При гестозе происходит смещение ТЫ\ТЬ2-баланса в сторону Thl лимфоцитов [19], что может вызывать чрезмерную активацию цитотоксических лимфоцитов и натуральных киллеров и, в конечном итоге, может приводить к отторжению плода [12].

В литературе имеются сведения о содержании различных субпопуляций мононуклеаров периферической крови у здоровых беременных и женщин с гестозом. В частности, обнаружено, что в крови пациенток с гестозом увеличивается содержание натуральных киллеров и цитотоксических лимфоцитов [1, 5]. Указанные сведения носят противоречивый характер, поскольку исследователи, как правило, описывают несколько субпопуляций лимфоцитов периферической крови, пользуясь при этом различными панелями антител [13, 15].

Целью настоящего исследования было комплексное сравнительное изучение субпопуляци-онного состава мононуклеаров периферической крови здоровых беременных и беременных с гестозом.

Материал и методы

Обследованы 80 женщин во время и вне беременности. В первую группу вошли 25 беременных с гестозом различной степени тяжести в III триместре беременности без признаков угрожающего прерывания беременности на момент исследования. Вторую группу составили 25 беременных при сроке 32-39 недель с физио-

логическим течением беременности. В третью (контрольную) группу включены 30 здоровых небеременных женщин без признаков воспалительных изменений. Диагноз гестоза у женщин первой группы установлен на основании ведущих клинических симптомов различной степени выраженности — наличие протеинурии, отеков, гипертензии (повышение систолического давления от 135 мм рт. ст. и выше, диастолического давления от 85 мм. рт. ст. и выше). Степень тяжести гестоза оценивалась по балльной системе по классификации Г. М. Савельевой (до 7 баллов— легкая степень тяжести; 8-11 баллов — средняя; 12 баллов и более — тяжелая).

Возраст женщин I и II группы колебался от 18 до 37 лет и в среднем составил 31,6 ± 4,2 года. Критериями исключения для беременных I и

II групп считались: сахарный диабет на инсу-линотерапии, многоводие, маловодие, урогенитальная инфекция, острая инфекция или обострение хронической, гипертоническая болезнь и органические заболевания системы кровообращения. Все женщины наблюдались и проходили обследование на отделении физиологии и патологии беременности НИИ акушерства и гинекологии им. Д. О. Отта РАМН.

Группы беременных были сопоставимы по возрасту, паритету родов и акушерскому анамнезу. При анализе экстрагенитальной патологии у беременных с гестозом достоверно чаще по сравнению со II группой встречались заболевания органов дыхания (36,0 ± 9,6 % и 12,0±6,5% соответственно, р < 0,05), нейроциркуляторная дистония по гипертоническому типу (32,0 ± 9,3 % и 8,0 ± 5,4 %; р < 0,05) и варикозная болезнь нижних конечностей (44,0±9,9%; 16,0± 7,3 %; р<0,05). У беременных I группы достоверно чаще встречались заболевания мочевыделительной системы (64,0 ± 9,6 %; 32,0 ± 9,3 %; р < 0,05), в основном за счет хронического пиелонефрита и мочекаменной болезни (24,0 ± 8,0 %; 4,0 ± 3,9 %; р < 0,05). Также достоверно чаще у беременных с гестозом были обнаружены эндокринопатии (48,0 ± 10,0 %; 20,0 ± 8,0 %; р < 0,05) за счет ожирения 1-11 степени (встречалось только среди пациенток с гестозом в 32,0 ± 9,3 % случаев), заболеваний щитовидной железы (48,0 ± 10,0 %;

20.0 ± 8,0 %; р < 0,05) и гиперандрогений (толь-ков1 группе женщин в 12,0 ± 6,5 % случаев).

При анализе частоты и характера гинекологических заболеваний у обследованных женщин было выявлено, что примерно 2/3 женщин с гестозом лечились от хронического воспаления придатков (64,0 ± 9,6 %, по сравнению со II группой —

24.0 ± 8,0 %; р < 0,01) и урогенитальной инфекции

(64,0 ± 9,6 %; 32,0 ± 9,3 % соответственно в группе сравнения; р < 0,05). Доброкачественные заболевания шейки матки (эктопии и лейкоплакии шейки матки) встречались у 40,0 ± 9,8 % женщин I группы, что было достоверно чаще по сравнению с беременными II группы (24,0 ± 8,5 %; р < 0,05). Первичное и вторичное бесплодие в анамнезе (32,0 ± 9,3 %), недостаточность функции яичников (32,0 ± 9,3 %) и синдром поликистозных яичников (8,0 ± 5,4 %), седловидная форма матки, двурогая матка и неполная перегородка матки (составляет

12 ± 6,5 % аномалий развития матки) встречались только у беременных I группы. Наружный генитальный эндометриоз (32,0 ± 9,3 %; 4,0 ± 3,9 %; р < 0,05 в соответствующих группах) и миома матки (28,0 ± 9,0 %; 4,0 ± 3,9 %; р < 0,05) в анамнезе были диагностированы у беременных с гестозом в 7 раз чаще, чем у женщин II группы.

Изучение особенностей течения настоящей беременности показало, что у 52,0 ± 10,0 % женщин в I группе беременность протекала с признаками угрозы прерывания на ранних сроках (во II группе — 16,0 ± 7,3 %; достоверность при сравнении р < 0,05), и у 7 из них (28,0 ± 9,0 %) с признаками повторной угрозы выкидыша при сроке до 28 недель беременности (в группе сравнения только у одной женщины). Обращала на себя внимание высокая частота развития геста-ционного пиелонефрита (36,0 ± 9,6 %) и кольпита и/или урогенитальной инфекции (32,0 ± 9,3 %) у беременных I группы. Хроническая плацентарная недостаточность и гипотрофия плода (28,0 ± 9,0 %) были отмечены только у беременных I группы. В родах основными осложнениями у женщин было несвоевременное излитие околоплодных вод — у 48,0 ± 10,0 % и 20,0 ± 8,0 % у женщин I и II групп соответственно (р < 0,05). Дискоординированная родовая деятельность у пациенток с гестозом была достоверно чаще (24,0 ± 8,5%),чемвгруппесравнения(4,0 ± 3,9 %; р < 0,05). Начавшаяся гипоксия плода и кровотечения в послеродовом периоде также встречались чаще у женщин I группы — 32,0 ± 9,3 % и

8,0 ± 5,4 % соответственно (р < 0,05).

В I группе 23 женщины были родоразрешены в срок (92 %), двое родов были преждевременными и закончились оперативным родоразреше-нием при сроке беременности 33-35 недель, при этом во время беременности у этих женщин была диагностирована хроническая плацентарная недостаточность, которая подтвердилась при патоморфологическом исследовании. Показанием к досрочному прерыванию в данном случае были нарастающие симптомы гестоза. В группе сравнения все роды были срочными. Средний срок родов составил 38,7 ± 0,5 недель. Средняя мас-

са доношенных новорожденных в I и II группе составила 3287,5 ± 798,5 г. С оценкой по шкале Апгар 7-8 баллов родилось 47 детей, с оценкой 6-7 баллов 3 новорожденных.

Несмотря на некоторые различия при сравнении соматической, гинекологической патологии и осложнений беременности и родов у женщин I и II группы, представленные данные были сопоставимы и не могли оказать существенного влияния на особенности активации клеточного ответа, количества цитотоксических лимфоцитов и NK-клеток, что, соответственно, не могло привести к ложным результатам по изменению состава мононуклеаров периферической крови.

Для изучения субпопуляционного состава мононуклеаров периферической крови здоровых беременных и беременных с гестозом мы использовали стандартный набор для цитофлу-ориметрического определения субпопуляций лимфоцитов периферической крови IMKPlus фирмы Beckton Dickinson (США). Этот набор позволяет определить процентное и абсолютное соотношение следующих субпопуляций лимфоцитов периферической крови: CD3+ (общее количество лимфоцитов), CD19+ (количество В-лимфоцитов), CD4+ (количество Т-хелперов), CD8+ (количество цитотоксических лимфоцитов, или Т-киллеров), CD4+\CD8+ (количество незрелых Т-лимфоцитов), CD3+YHLA-DR+ (количество активированных Т-лимфоцитов), CD16+\CD56+ (количество натуральных киллеров), CD3+\CD16+\CD56+ (количество NKT-лимфоцитов). Забор крови у пациентов проводили в пробирки с гепарином, после чего окраску антителами проводили в соответствии с рекомендациями производителя набора. Учет проводили на проточном цитофлуориметре FACScan (Beckton Dickinson, США).

Для статистического анализа полученных данных использовали компьютерную программу Statistica v6.0 (М — среднее арифметическое, m — ошибка среднего, р — коэффициент Стьюдента).

Результаты

Результаты работы представлены в таблице. Процентное соотношение субпопуляций лимфоцитов периферической крови у небеременных женщин в среднем соответствовало нормам, предоставленным производителем набора антител IMKPlus (Beckton Dickinson, США), указанным в таблице. Процентное соотношение субпопуляций лимфоцитов периферической крови у здоровых беременных женщин контрольной группы и у женщин с гестозом также было нормальным. Обнаружено, что у здоровых

беременных содержание СБ4+ Т-лимфоцитов хелперов (50,4 ± 2,2) было достоверно выше содержания СБ8+ цитотоксических лимфоцитов (35,5 ± 1,6, р < 0,001). Процентное содержание СБ4+ лимфоцитов (42,7 ± 2,7) и СБ8+ лимфоцитов (42,1 ± 2,4) у беременных женщин с гес-тозом и здоровых беременных находилось на одинаковом уровне. При исследовании было показано достоверное снижение соотношения С03+\С04+ лимфоцитов к С03+\С08+ лимфоцитам у беременных с гестозом по сравнению со здоровыми беременными. Кроме того, у беременных женщин с гестозом количество СБ4+ лимфоцитов было достоверно ниже, а количество СБ8+ лимфоцитов было достоверно выше, чем у здоровых беременных. Нами установлено, что у беременных с гестозом количество активированных Т-лимфоцитов СОЗ+\НЬА-ВЯ+, натуральных киллеров С016+\С056+ и МКТ-лим-фоцитов С03+\С016+\СВ56+ было достоверно выше по сравнению со здоровыми беременными. Общее количество СОЗ+ лимфоцитов, а также количество СБ19+ В-лимфоцитов и незрелых С04+\С08+ Т-лимфоцитов у беременных с гестозом не отличалось от такового у здоровых беременных женщин.

Таким образом, полученные нами данные соответствуют литературным данным об активации ТЫ-лимфоцитов и цитотоксическо-го иммунного ответа, контролируемого этими лимфоцитами, при гестозе [19]. У обследованных нами беременных женщин с гестозом про-

изошел сдвиг в сторону повышения содержания СБ8+ цитотоксических лимфоцитов, увеличилось количество СОЗ+\НЬА-ВЯ+ активированных Т-лимфоцитов, количество С016+\С056+ натуральных киллеров и С03+\С016+\СВ56+ МКТ-лимфоцитов.

Обсуждение

В организме беременной женщины фетоплацентарный комплекс является своего рода аллотрансплантатом и служит уникальным примером взаимной иммунологической терпимости между аллотканью плода и материнскими тканями. Процесс образования и прикрепления плаценты находится под иммуногенетическим контролем. В организме человека происходит отторжение трансплантатов, если существует различие между донором и реципиентом относительно основного комплекса генов гистосовместимости (МНС I класса). В организме беременной женщины существует физиологический механизм, обеспечивающий сохранение плода, несмотря на его полуаллогенную природу. Показано, что НЬА-в, неклассический главный антиген гистосовместимости I класса, продуцируемый только в клетках межворсинчатого трофобласта, может защищать трофобласт в условиях недостаточной иммунной толерантности матери к плоду и тем самым способствовать его инвазии цитотрофобласта и формированию плаценты. Инвазия клеток цитотрофобласта сопровождается активацией лимфоцитов ТЫ-типа, ко-

Таблица

Соотношение субпопуляций мононуклеаров периферической крови у небеременных, здоровых беременных женщин и у беременных женщин, больных гестозом

Маркеры, экспрессируемые на мононуклеарах периферической крови Процент клеток с указанным фенотипом у:

здоровых небеременных женщин в соответствии с данными производителя; указаны минимальное и максимальное значение здоровых беременных женщин

СОЗ+ 62,8-85,0 81,1 ± 1,8 77,1 ± 2,8

СБ19+ 7,1-23,3 8,6 ± 0,7 7,2 ± 0,8

СБ4+ 31,4-56,7 50,4 ± 2,2 42,7 ± 2,7 *

СБ8+ 18,9-47,9 35,5 ±1,7 42,06 ± 2,4 *

С04+\С08+ 0,0-3,2 *** 1,8±0,6 2,5 ± 0,9

СОЗ+\НЬА-ОК+ 3,6-25,9 3,93 ± 0,6 8,00 ±1,7 *

С016+\С056+ 6,7-33,5 10,47 ±1,0 17,6 ± 2,9 *

С03+\С016+С056+ 3,1_8,1 *** 1,11 ± 0,1 6,29 ± 0,9 **

Отношение СВЗ+\СБ4+ к С03+\С08+ 0,6-3,0 1,49 ± 0,1 1,11 ± 0,1 *

* — достоверность р < 0,05; ** — достоверность р < 0,001;*** — указанные цифры приведены по данным собственных наблюдений

торые, секретируя цитокины, в частности ^N7, индуцируют экспрессию НЬА-в на поверхности клеток цитотрофобласта. В результате молекулы НЬА-в обеспечивают переключение ТЫ-ответа на ТЬ2-ответ, что предотвращает эм-бриотоксические эффекты на протяжении всей беременности (рис.). Цитокин 1Ь-10, секретиру-емый ТЬ2-лимфоцитами, усиливает экспрессию НЬА-в клетками трофобласта, способствуя тем самым ингибированию цитотоксических эффектов СБ8+ лимфоцитов и натуральных киллеров [11]. Более того, молекулы НЬА-в напрямую подавляют цитотоксические эффекты СБ8+ лимфоцитов иМК-клеток [10, 14].

Антигены плода, попадая в кровоток матери, могут активировать цитотоксические лимфоциты и 1ЫК-клетки. При этом может нарушаться достигнутый сдвиг в сторону ТЬ2-ответа, в результате чего активируются ТЫ-лимфоциты. Об этом свидетельствует обнаруженное нами повышенное содержание активированных Т-лимфоцитов с фенотипом СВ4+\НЬА-ВЯ+ в крови беременных с гестозом. ТЫ-лимфоциты осуществляют активацию СБ8+ лимфоцитов, инициирующих цитотоксические и эмбриотоксические реакции, о чем свидетельствует обнаруженное нами повышение содержания цитотоксических Т-лим-фоцитов с фенотипом С03+\С08+ в крови беременных с гестозом. Возможно, сдвиг баланса в сторону ТЫ-контролируемого иммунного ответа может быть вызван либо нарушением экспрессии молекул НЬА-в клетками трофобласта,

либо чрезмерной активацией цитотоксических лимфоцитов вследствие повышенной проницаемости сосудов плаценты для антигенов плода.

Повышенное содержание натуральных киллеров в крови беременных с гестозом также свидетельствует о возможном увеличении их цито-токсической активности. В норме МК-клетки матки продуцируют №N7, необходимый для ремоделирования сосудов при беременности, однако усиление цитотоксичности МК-клеток может оказаться разрушительным для плода. Поэтому при нормальной беременности 1ЫК-клетки матки экспрессируют К1Я2ВЬ4-рецепторы, которые связываются с молекулами НЬА-О, обеспечивая одновременное подавление цитотоксичности при активации продукции ^N7 [7]. Известно, что за счет продукции ^N7 МК-клетки способны активировать плацентарные макрофаги, оказывающие влияние на все клетки плаценты и контролирующие ее нормальное развитие и функционирование. В свою очередь, макрофаги способны секретировать 1Ь-12, приводящий к активации МК-клеток, запуская, таким образом, ранний воспалительный ответ. Данное предположение подтверждается тем, что при гестозе обнаружены чрезмерно высокие коцентрации 1Ь-12 в сыворотке крови и в ткани плаценты, сопровождающиеся увеличением количества активированных МК-клеток в периферической крови [1, 3] и усилением их адгезии к эндотелиальным клеткам [8]. Таким образом, активация плацентарных макрофагов, повышение секре-

Рис. Переключение ТЫ-иммунного ответа на ТЬ2-ответ

ции этими клетками 1Ь-12, а также снижение продукции 1Ь-10 вследствие перключения на ТЫ-ответ и снижение экспрессии НЬА-в клетками трофобласта может инициировать цито-токсическую активность материнских МК-кле-ток и СБ8+ лимфоцитов. С другой стороны, в последнее время появляются сведения о первичном активирующем влиянии трофобласта на МК-клетки матери, в том числе децидуальные МК-клетки, которые в результате секреции ^N7 переключают ТЬ2-ответ на ТЫ-ответ, запуская тем самым цитотоксические реакции с участием СБ8+ лимфоцитов [5, 16-18].

Отдельно необходимо отметить обнаруженное нами существенное (в шесть раз) повышение количества МКТ-лимфоцитов с фенотипом С03+\С016+\СВ56+ у беременных с гестозом. Клетки МКТ фенотипически и функционально гетерогенны: одни экспрессируют 1Ь-18Я и продуцируют ^N7, другие не экспрессируют 1Ь-18Я и продуцируют 1Ь-4. Направляя иммунный ответ в сторону ТЫ или ТЬ2, МКТ регулируют развитие условий для аутоиммунной патологии. При таких патологиях повышается количество МКТ-клеток с усиленной продукцией ^N7 и 1Ь-4. Одна из субпопуляций МКТ-клеток — 1МКТ — экспрессирует рецепторы для 1Ь-12, отвечая на активацию этим цитокином секрецией ^N7 и 1Ь-4, которые для них являются ауток-ринными регуляторами. Кроме продукции цито-кинов МКТ выполняют эффекторные функции. Врезультате активации цитокином 1Ь-12 эти клетки проявляют цитолитическую активность в отношении опухолевых и вирусинфициро-ванных клеток. В противоопухолевом иммунитете 1МКТ активируют и КК, и СБ8+ цитотоксические лимфоциты, а в состоянии активации самостоятельно выполняют функции клеток-эффекторов [2]. Таким образом, увеличение МКТ-клеток в периферической крови беременных с гестозом свидетельствует об их активной роли в сдвиге баланса ТЫ\ТЬ2-ответа в сторону ТЫ-ответа. Возможно, именно эти клетки являются инициаторами активации цитотоксических лимфоцитов и МК-клеток, запуская цитотоксические реакции против плода.

Заключение

Полученные данные свидетельствуют о преимущественной активации цитотоксических лимфоцитов у беременных с гестозом по сравнению со здоровыми беременными. Предложенный вариант определения субпопуляций лимфоцитов периферической крови может быть использован для диагностики предрасположенности к гесто-зу, начиная с первого триместра беременности.

Данный метод также может позволить вести мониторинг проводимой терапии гестоза.

Работа поддержана грантами Президента РФ № НШ-5268.2006.7 и МК-1355.2007.7.

Литература

1. Диагностические маркеры степени тяжести поздних гес-тозов беременных / Кравцова Е. И., Колесникова Н. В., Ермошенко Б. Г., Чудилова Г. А. [и др.] //TERRA MEDICA nova. — 2004. —Т. 3,№1. — С. 4-10.

2. Фрейдлин И. С. Клетки иммунной системы / Фрейдлин И. С., Тотолян А. А. — СПб.: Наука, 2001. — Т.З. — 456 с.

3. Aberrant uterine natural killer (NK)-cell expression and altered placental and serum levels of the NK-cell promoting cytokine interleukin-12 in pre-eclampsia / BachmayerN., Rafik Hamad R., Liszka L., Bremme K. [etal.] // Am. J. Reprod. Immunol. — 2006. — Vol. 56, N 5-6. — P. 292-301.

4. Activation of endothelial cells in preeclampsia: increased neutrophil-endothelial adhesion correlates with up-regulation of adhesion molecule P-selectin in human umbilical vein endothelial cells isolated from preeclampsia / Wang Y., Adair C. D., Coe L., Weeks J. W. [et al.] // J. Soc. Gynecol. Investig. — 1998. — Vol. 5. — P. 237-243.

5. Changes in systemic type 1 and type 2 immunity in normal pregnancy and pre-eclampsia may be mediated by natural killer cells / Borzychowski А. М., Croy B. A., ChanW. L., Redman C. W. [et al.] // Eur. J Immunol. — 2005. — Vol. 35. — P. 3054-3063.

6. DaveyD.A. The classification and definition of the hypertensive disorders of pregnancy / Davey D. A., MacGillivray I. //Am. J Obstet. Gynecol. — 1988. — Vol. 158. — P. 892-898.

7. Effects of gamma-irradiation on the free radical and antioxidant contents in nine aromatic herbs and spices / Calucci L., Pinzino C., Zandomeneghi М., Capocchi A. [et al.] // J. Agric. Food Chem. — 2003. — Vol. 51, N 4. — P. 927-934.

8. Effect of sera on the adhesion of natural killer cells to the endothelium in severe pre-eclampsia / Wei J., Satomi М., Negishi Y., Matsumura Y. [et al.] // J. Obstet. Gynaecol. Res. — 2006. — Vol. 32, N5. — P. 443-448.

9. Evidence of endothelial activation and endothelial activators in cord blood of infants of preeclamptic women / Davidge S. Т., Signorella A. P., Lykins D. L., Gilmour С. H. [et al.] // Am. J. Obstet. Gynecol. — 1996. — Vol. 175. — P. 1301-1306.

10. HLA-G1 co-expression boosts the HLA class l-mediated NK lysis inhibition / Riteau B., Menier C., Khalil-Daher I., Martinozzi S. [et al.] // Int. Immunol. — 2001. — Vol. 13. — P. 193-201.

11.IL-10 selectively induces HLA-G expression in human trophoblasts and monocytes / Moreau P., Adrian-Cabestre F., Menier C., Guiard V. [et al.] // Int. Immunol. — 1999. — Vol. 11. — P. 803-811.

12. Inflammatory changes in preeclampsia: current understanding of the maternal innate and adaptive immune response / Visser N., van Rijn В. B., Rijkers G. Т., Franx A. [et al.] //Obstet. Gynecol. Surv. — 2007,— Vol.62, N3. — P. 191-201.

13. Lymphocyte subset distribution and cytokine secretion in third trimester decidua in normal pregnancy and preeclampsia/ Wilczynski J. R., Tchorzewski H., BanasikM., Glowacka E. [et al.] II Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol. — 2003.— Vol. 109, N1. — P. 8-15.

14. Menier C. MICA triggering signal for NK cell tumor lysis is counteracted by HLA-G1-mediated inhibitory signal / Menier C., Riteau B., Carosella E. D., Rouas-Freiss N. // Int. J. Cancer.-2002.-Vol. 100. — P.63-70.

15. Neonates born to pre-eclamptic mothers have a higher percentage of natural killer cells (CD3-/CD56+16+) in umbilical cord blood than those without pre-eclampsia / Bujold E., ChaiworapongsaT., Romero R., Gervasi М. T [et al.] //J. Matern. Fetal. Neonatal. Med. — 2003. — Vol. 14,N5. — P. 289-290.

16. Sargent I. L. Immunoregulation in normal pregnancy and preeclampsia: an overview / Sargent I. L., BorzychowskiA. М., Redman C. W. // Reprod. Biomed. Online. — 2006.— Vol. 13. — P. 680-686.

17. Sargent I. L. NK cells and human pregnancy-an inflammatory view / Sargent I. L, Borzychowski A. М., Redman C. W. // Trends Immunol. — 2006. — Vol. 27. — P. 399-404.

18. Tabiasco J. Human decidual NK cells: unique phenotype and functional properties / Tabiasco J., Rabot М., Aguerre-Girr М., El Costa H. [et al.] II Placenta. -— 2006. — Vol. 27, Suppl. A. — P. 34-39.

19. TH1/TH2 paradigm in pregnancy: paradigm lost? Cytokines in pregnancy/early abortion: reexamining the TH1/TH2 paradigm/ Chaouat G., Ledee-Bataille N., DubanchetS., ZourbasS. [et al.] // Int. Arch. Allergy Immunol. — 2004. — Vol. 134. — P. 93-119.

Статья представлена Э. К. Айламазяном НИИ акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта РАМН,

Санкт-Петербург

SUBPOPULATION PROFILE OF PERIPHERAL BLOOD LYMPHOCYTES IN NORMALAND PREECLAMPSIA PREGNANCY

Sokolov D. I., Seljutin A. V., Lesnichija M. V.,

Arzhanova O. N., Selkov S. A.

Summary: One of the potential mechanisms responsible for preeclampsia development is considered to be the immune disorders in maternal and fetoplacental unit adaptation. The aim of the present study was to define changes in subpopulation profile of peripheral mononuclear cells in normal and preeclampsia pregnant women. It was found that the significant enlargement of the amount of CD4+ T - helpers was above the quantity of CD8+ cytotoxic T lymphocytes in patients with normal pregnancy. However, there were no comparative differences of CD4+ and CD8+ lymphocytes level in both groups. Besides, we had observed the significant decrease in correlation of CD3+\CD4+ lymphocytes level and CD3+\CD8+ lymphocytes level in preeclampsia patients compared to subpopulation profile in healthy pregnancy women. The amount of CD4+ lymphocytes had been significantly lower in preeclampsia women than in normal pregnant, whereas CD8+ lymphocytes level had significantly enhanced. It was established that the quantity of the activated T lymphocytes CD3+\HLA-DR+, EK CD16+\CD56+ and NK CD3+\CD16+\CD56+ T lymphocytes was significantly higher in preeclampsia patients than in healthy pregnancy women. The total amount of CD3+ lymphocytes as well as the amount of CD19+ B lymphocytes and immature CD4+\CD8+ T lymphocytes had no significant differences in patients with preeclampsia and patients with normal pregnancy. Our data demonstrates the primary activation of cytotoxic lymphocytes in preeclampsia pregnancy.

Key words: preeclampsia pregnancy; placenta; natural killers; T-lymphocytes