ИММУНОКОНЪЮГАТ И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ

1. Способ получения нового иммуноконъюгата, включающий:
(a) получение производного атразина и меркаптопропионовой кислоты (гаптена) известным способом;
(b) хемосорбирование коллоидных частицы золота размером примерно 20 нм на восстановленный белок-носитель через его тиоловые группы, чтобы получить комплекс золото - белок;
(c) смешивание комплекса, полученного на этапе (b), с гаптеном вместе с дициклогексилкарбодиимидом (DCC) и N-гидроксисукцинимидиловым эфиром (NHS), растворенными в растворителе диметилформамиде (ДМФ);
(d) инкубирование смеси, полученной на стадии (c), с последующим центрифугированием для удаления осадка мочевины и получения желаемого иммуноконъюгата.
2. Способ по п.1, в котором использующиеся частицы коллоидного золота получены кипячением раствора хлорида золота в присутствии тринатрий-цитрата.
3. Способ по п.1, в котором раствор восстановленного белка-носителя образован инкубированием яичного альбумина с меркаптоэтиламином в течение ночи при примерно 4°C, чтобы разорвать дисульфидные связи белка.
4. Способ по п.1, в котором используемый гаптен ковалентно связан с указанным конъюгатом белок - золото через группы лизина.
5. Способ по п.1, в котором смесь на стадии (d), полученную на стадии (1c), подвергают инкубированию в течение примерно 4 ч при комнатной температуре с последующим центрифугированием в течение примерно 5 мин со скоростью примерно 10000 об/мин с получением нового иммуноконъюгата.
6. Новый иммуноконъюгат, полученный способом по пп.1-5.
7. Новый иммуноконъюгат по п.6, в котором указанный иммуноконъюгат содержит золото, белок гаптен в отношении, варьирующемся в диапазоне 1:25:0,48-1:26:0,5.
8. Новый иммуноконъюгат по п.6, в котором использующийся гаптен является производным атразина и меркаптопропионовой кислоты.
9. Новый иммуноконъюгат по п.6, в котором использующийся белок является яичным альбумином, имеющим средний радиус молекулы примерно 5 нм.
10. Новый иммуноконъюгат по п.6, в котором число белковых молекул на частицу золота варьируется в диапазоне 25-26, считая, что белок покрывает примерно 50% площади поверхности.
11. Новый иммуноконъюгат по п.6, в котором число молекул гаптена на молекулу белка-носителя варьируется в диапазоне 12-13, принимая, что молярное соотношение гаптен:белок составляет 1:50.
12. Новый иммуноконъюгат по п.6, в котором размер указанного коллоидного золота составляет примерно 20 нм.
12
13. Новый иммуноконъюгат по п.6, в котором число частиц коллоидного золота на 1 мл равно примерно 5·10.
2
14. Новый иммуноконъюгат по п.6, в котором доступная площадь поверхности на частицах коллоидного золота размером 20 нм составляет 1256 нм.
15. Набор для быстрого обнаружения пестицидов в пробе воды, содержащий, по меньшей мере, одну тестовую линию, контрольную линию, иммобилизованную в зоне обнаружения, находящейся на подложке или в подложке, и иммуноконъюгат.
16. Набор по п.15, в котором использующаяся тестовая линия является антителом к атразину.
17. Набор по п.15, в котором использующаяся контрольная линия является антителом к яичному альбумину.
18. Набор по п.15, в котором указанный набор содержит, кроме того, сканирующий рефлектометр.
19. Набор по п.15, в котором использующаяся подложка является нитроцеллюлозой.
20. Набор по п.15, в котором использующийся пестицид является атразином.
21. Набор по п.15, в котором обнаружение основано на конкурентном связывании специфичных к атразину антител с иммуноконъюгатом и пробой атразина.
22. Способ обнаружения и измерения пестицидов в пробе, включающий контактирование набора по п.15 с пробой и обнаружение и/или измерение уровня пестицидов.
23. Способ по п.22, в котором контактирование пробы с набором по п.15 приводит к окрашиванию тестовой линии.
24. Способ по п.22, в котором возникшая окраска является бордовой.
25. Способ по п.22, в котором окраска обнаруживается визуально, указывая на присутствие и количество пестицида.
26. Способ по п.22, в котором калибровочная кривая в форме наглядного представления получена с использованием стандартных растворов атразина (от 0 до 5000 ppb).