6
ЗАМЕЩЕННЫЕ 2-АЛКИЛСУЛЬФАНИЛ-3-СУЛЬФОНИЛ-ПИРАЗОЛО[1,5-а]-ПИРИМИДИНЫ, АНТАГОНИСТЫ СЕРОТОНИНОВЫХ 5-HT РЕЦЕПТОРОВ, СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ
6
SUBSTITUTED 2-ALKYLSULFANYL-3-SULFONYL-PYRAZOLO[1,5-a]PYRIMIDINES, SEROTONIN 5-HT RECEPTOR ANTAGONISTS, METHODS OF PRODUCING AND USING SAID COMPOUNDS

6
6
Изобретение относится к новым замещенным 2-алкилсульфанил-3-арилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидинам, антагонистам серотониновых 5-НТ рецепторов, лекарственным началам и фармацевтическим композициям, содержащим лекарственные начала в виде указанных соединений, а также к способу лечения и предупреждения развития различных заболеваний центральной нервной системы (ЦНС), когнитивных и нейродегенеративных заболеваний. В основе фармакологического эффекта новых лекарственных начал лежит их способность взаимодействовать с серотониновыми 5-НТ рецепторами, играющими важную роль для лечения заболеваний ЦНС, в частности болезни Альцгеймера (БА), болезни Паркинсона, болезни Гантингтона, шизофрении, других нейродегенеративных заболеваний, когнитивных расстройств и ожирения.
6
6
6
6
6
6
6
6
6
6
6
6
6
Использование эффективных и селективных антагонистов серотониновых 5-НТ рецепторов для лечения заболеваний ЦНС, в частности шизофрении, БА и других нейродегенеративных заболеваний и когнитивных расстройств, является перспективным направлением для получения новых лекарств [Holenz J., Pauwels P.J., Diaz J.L., Merce R., Codony X., Buschmann H. Medicinal chemistry strategies to 5-НТ receptor ligands as potential cognitive enhancers and antiobesity agents. Drug Disc. Today. 2006; 11:283-299]. Эти рецепторы у млекопитающих находятся исключительно в центральной нервной системе, причем главным образом в участках головного мозга, ответственных за обучение и память [Ge'rard С., Martres M.-P., Lefe'vre К., Miquel M.-C., Verge' D., Lanfumey L., Doucet E., Hamon M., El Mestikawy S. Immuno-localisation ofserotonin 5-НТ receptor-like material in the rat central nervous system. Brain Research. 1997; 746:207-219]. Кроме того, показано [Dawson L.A., Nguyen H.Q., Li P. The 5-HT(6) receptor antagonist SB-271046 selectively enhances excitatory neurotransmission in the rat frontal cortex and hippocampus. Neuropsychopharmacology. 2001; 25:662-668], что 5-НТ рецепторы являются модуляторами нескольких нейромедиаторных систем, включая холинэргическую, норадренэргическую, глутаматэргическую и допаминэргическую. Учитывая фундаментальную роль этих систем в нормальных когнитивных процессах, а также их дисфункцию при нейродегенерации, становится очевидной исключительная роль 5-НТ рецепторов в формировании нормальной или «патологической» памяти. В большом числе современных работ показано, что блокирование 5-НТ рецепторов приводит к значительному усилению консолидации памяти в различных животных моделях обучения-запоминания-воспроизведения [Foley A.G., Murphy K.J., Hirst W.D., Gallagher H.C-, Hagan J.J., Upton N., Walsh F.S., Regan C.M. The 5-HT(6) receptor antagonist SB-271046 reverses scopolamine-disrupted consolidation of a passive avoidance task and ameliorates spatial task deficits in aged rats. Neuropsychopharmacology. 2004; 29:93-100. Riemer С., Borroni E., Levet-Trafit В., Martin J.R., Poli S., Porter R.H., Bos M. Influence of the 5-HT receptor on acetylcholine release in the cortex: pharmacological characterization of 4-(2-bromo-6-pyrrolidin-l-ylpyridine-4-sulfonyl)phenylamine, a potent and selective 5-НТ receptor antagonist. J. Med. Chem. 2003; 46:1273-1276. King M.V., Woolley M.L., Topham I.A., Sleight A.J., Marsden C.A., Fone K.C. 5-НТ receptor antagonists reverse delay-dependent deficits in novel object discrimination by enhancing consolidation e an effect sensitive to NMDA receptor antagonism. Neuropharmacology 2004; 47:195-204]. Также показано значительное улучшение когнитивных функций у старых крыс в модели водного лабиринта Моррисона при воздействии антагонистом 5-НТ рецепторов [Foley A.G., Murphy K.J., Hirst W.D., Gallagher H.C., Hagan J.J., Upton N.. Walsh F.S., Regan C.M. The 5-HT(6) receptor antagonist SB-271046 reverses scopolamine-disrupted consolidation of a passive avoidance task and ameliorates spatial task deficits in aged rats. Neuropsychopharmacology. 2004; 29:93-100]. В последнее время достигнуто не только более глубокое понимание роли 5-НТ рецепторов в когнитивных процессах, но более четкое формирование представлений о возможных фармакофорных свойствах их антагонистов [Holenz J., Pauwels P.J., Diaz J.L., Merce R., Codony X., Buschmann H. Medicinal chemistry strategies to 5-НТ receptor ligands as potential cognitive enhancers and antiobesity agents. Drug Disc. Today. 2006; 11:283-299]. Это привело к созданию высокоаффинных селективных лигандов («молекулярных инструментов»), а затем и клинических кандидатов. В настоящее время ряд антагонистов 5-НТ рецепторов находится на разных стадиях клинических испытаний как лекарственные кандидаты для лечения БА, болезни Гантингтона, шизофрении (антипсихотики) и других нейродегенеративных и когнитивных заболеваний (таблица 1) [http://integrity.prous.com].
Таблица 1
Антагонисты 5-НТ<sub>6</sub> рецепторов как лекарственные кандидаты
Лекарство
Клиническая фаза испытаний
Разработчик
Терапевтическая группа
Dimebon<sub>TM</sub>
Фаза III
Medivation (USA)
Лечение болезни Альцгеймера
SGS-518
Фаза II
Lilly, Saegis
Лечение когнитивных заболеваний
SB-742457
Фаза II
GlaxoSmithKline
Лечение болезни Альцгеймера; Антипсихотик
Dimebon*
Фаза I/IIa
Medivation (USA)
Лечение болезни Гантингтона
Dimebon*
Фаза II
(Россия)
Шизофрения
PRX-07034
Фаза I
Epix Pharm.
Лечение избыточного веса; Антипсихотик; Лечение когнитивных заболеваний
SB-737050A
Фаза II
GlaxoSmithKline
Антипсихотик
BVT-74316
Фаза I
Biovitrum
Лечение избыточного веса
SAM-315
Фаза I
Wyeth Pharm.
Лечение болезни Альцгеймера
SYN-114
Фаза I
Roche, Synosis Ther.
Лечение когнитивных заболеваний
BGC-20-761
Предклиника
BTG (London)
Антипсихотик; Лечение когнитивных заболеваний
FMPO
Предклиника
Lilly
Антипсихотик
Dimebon<sup>TM</sup>
Предклиника
(Россия)
Лечение инсульта
6
6
6
6
6
Еще одним привлекательным свойством антагонистов 5-НТ рецепторов является их способность подавлять аппетит, что может привести к созданию на их основе принципиально новых средств для понижения избыточного веса и ожирения [Vicker S.P., Dourish С.Т. Serotonin receptor ligands and the treatment of obesity. Curr. Opin. Investig. Drugs. 2004; 5:377-388]. Этот эффект подтвержден во многих исследованиях [Holenz J., Pauwels P.J., Diaz J.L., Merce R., Codony X., Buschmann H. Medicinal chemistry strategies to 5-НТ receptor ligands as potential cognitive enhancers and antiobesity agents. Drug Disc. Today. 2006; 11:283-299. Davies S.L. Drug discovery targets: 5-НТ receptor. Drug Future. 2005; 30:479-495], его механизм основан на подавлении антагонистами 5-НТ рецепторов сигналинга гамма-аминомасляной кислоты и увеличении выброса альфа-меланоцит-стимулирующего гормона, что в конечном итоге приводит к уменьшению потребности в пище [Woolley M.L. 5-ht6 receptors. Curr. Drug Targets CNS Neurol. Disord. 2004; 3:59-79]. В настоящее время два антагониста 5-НТ рецепторов находятся на первой стадии клинических испытаний как лекарственные кандидаты для лечения избыточного веса (таблица 1) [http://integrity.prous.com].
6
В этой связи поиск селективных и эффективных антагонистов серотониновых 5-НТ рецепторов представляется оригинальным и перспективным подходом к созданию новых лекарственных средств для лечения широкого круга заболеваний ЦНС, в том числе неврологических и нейродегенеративных заболеваний и когнитивных расстройств.
2с
6
В литературе имеется значительное число публикаций, посвященных различным биологически активным сульфонилпроизводным азагетероциклов, в том числе лигандам серотониновых рецепторов. Так, например, известны замещенные 1-(2-аминоэтил)-4-арилсульфонил-пиразолы общей формулы А1, как лиганды серотониновых 5-НТ рецепторов [WO 2003057674 А1] и 7-амино-3-сульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидины А2, как антагонисты серотониновых 5-НТ рецепторов [ЕР 941994 А1, 1999]
1
2
3
4
А1: Ar=алкил, арил; R и R=Н, ОН, алкил, алкокси; R и R=Н, алкил, арил.
1
2
3
4
5
4
5
А2: Ar=арил, гетероциклил; R=Н, алкил, алкилтио; R=Н, алкил, галоген; R=Н, алкил, гидроксиалкил; R и R=Н; NRR=пиперазинил.
6
С целью разработки новых высокоэффективных лекарственных средств авторами данного изобретения выполнены широкие исследования в ряду замещенных 2-алкилсульфанил-3-арилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидинов, в результате чего найдены новые лекарственные начала, представляющие собой антагонисты 5-НТ рецепторов.
Ниже приведены определения терминов, которые использованы в описании этого изобретения:
«Агонисты» означают лиганды, которые, связываясь с рецепторами данного типа, активно способствуют передаче этими рецепторами свойственного им специфического сигнала и тем самым вызывают биологический ответ клетки.
«Азагетероцикл» означает ароматическую или неароматическую моноциклическую или полициклическую систему, содержащую в цикле, по крайней мере, один атом азота. Азагетероцикл может иметь один или более «заместителей циклической» системы.
k
k+1
k
k+1
k
k+1
k
k+1
2
k
k+1
k
k+1
k
k+1
k
k+1
k
k+1
a
a
a
a
a
a
a
a
a
a
a
a
a
a
a
a
a
a
«Алкил» означает алифатическую углеводородную линейную или разветвленную группу с 1-12 атомами углерода в цепи. Разветвленная означает, что алкильная цепь имеет один или несколько «низших алкильных» заместителей. Алкил может иметь один или несколько одинаковых или различных заместителей («алкильных заместителей»), включая галоген, алкенилокси, циклоалкил, арил, гетероарил, гетероциклил, ароил, циано, гидрокси, алкокси, карбокси, алкинилокси, аралкокси, арилокси, арилоксикарбонил, алкилтио, гетероарилтио, аралкилтио, арилсульфонил, алкилсульфонил, гетероаралкилокси, аннелированный гетероарилциклоалкенил, аннелированный гетероарилциклоалкил, аннелированный гетероарилгетероцикленил, аннелированный гетероарилгетероциклил, аннелированный арилциклоалкенил, аннелированный арилциклоалкил, аннелированный арилгетероцикленил, аннелированный арилгетероциклил, алкоксикарбонил, аралкоксикарбонил, гетероаралкилоксикарбонил или R R N-, R R NС(=O)-, R R NC(=S)-, R R NSO-, где R  и R  независимо друг от друга представляют собой «заместители аминогруппы», значение которых определено в данном разделе, например, атом водорода, алкил, арил, аралкил, гетероаралкил, гетероциклил или гетероарил, или R  и R  вместе с атомом N, с которым они связаны, образуют через R  и R  4-7-членный гетероциклил или гетероцикленил. Предпочтительными алкильными группами являются метил, трифторметил, этил, пропил, циклопропилметил, циклопентилметил, этил, н-пропил, изо-пропил, н-бутил, трет-бутил, н-пентил, 3-пентил, метоксиэтил, карбоксиметил, метоксикарбонилметил, этоксикарбонилметил, бензилоксикарбонилметил, метоксикарбонилметил и пиридилметилоксикарбонилметил. Предпочтительными «алкильными заместителями» являются циклоалкил, арил, гетероарил, гетероциклил, гидрокси, алкокси, алкоксикарбонил, аралкокси, арилокси, алкилтио, гетероарилтио, аралкилтио, алкилсульфонил, арилсульфонил, алкоксикарбонил, аралкоксикарбонил, гетероаралкилоксикарбонил или R R N-, R R NC(=O)-, аннелированный арилгетероцикленил, аннелированный арилгетероциклил.
n
2n+1
n
2n+1
n
2n+1
«Алкиламино» означает CHNH- или (CH)(CH)N-группу, в которой алкил определен в данном разделе. Предпочтительными алкиламиногруппами являются метиламино, этиламино, н-пропиламино, изо-пропиламино и н-бутиламино.
n
2n+1
«Алкилокси» означает CHO-группу, в которой алкил определен в данном разделе. Предпочтительными алкилокси группами являются метилокси, этилокси, н-пропилокси, изо-пропилокси и н-бутилокси.
n
2n+1
«Алкилоксикарбонил» означает -C(O)OCH-группу, в которой алкил определен в данном разделе.
«Алкилсульфанил» означает алкил-S-группу, в которой алкил определен в данном разделе. Предпочтительными алкилсульфанил группами являются метилсульфанил, этилсульфанил, н-пропилсульфанил, изо-пропилсульфанил и н-бутилсульфанил.
6
7
6
7
6
7
«Аминогруппа» означает -NRR группу, в которой R и R представляют собой необязательно одинаковые атом водорода, необязательно замещенный низший алкил или R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют необязательно замещенный азагетероциклил.
6
7
6
7
6
7
«Аминокарбонил» означает -CONRR группу, в которой R и R представляют собой необязательно одинаковые атом водорода, необязательно замещенный низший алкил или R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют необязательно замещенный азагетероциклил.
«Анксиолитик» или «Транквилизатор» означает лекарственное средство, предназначенное для лечения тревожных расстройств.
«Антагонисты» означают лиганды, которые связываются с рецепторами определенного типа и не вызывают активного клеточного ответа. Антагонисты препятствуют связыванию агонистов с рецепторами и тем самым блокируют передачу специфического рецепторного сигнала.
«Антидепрессант» означает лекарственное средство, предназначенное для лечения депрессии.
«Антипсихотик» означает лекарственное средство, предназначенное для лечения психотических заболеваний.
«Арил» означает ароматическую моноциклическую или полициклическую систему, включающую от 6 до 14 атомов углерода, преимуществено от 6 до 10 атомов углерода. Арил может содержать один или более «заместителей циклической системы», которые могут быть одинаковыми или разными. Представителями арильных групп являются фенил или нафтил, замещенный фенил или замещенный нафтил. Арил может быть аннелирован с неароматической циклической системой или гетероциклом.
2
«Арилсульфонил» означает арил-SO- группу, в которой значение арил определено в данном разделе.
«Галоген» означает фтор, хлор, бром и йод. Предпочтительными являются фтор, хлор и бром.
«Гидрат» означает сольват, в котором вода является молекулой или молекулами растворителя.
«Депрессия» означает большую депрессию; эпизодическую, хроническую и рецидивирующую формы большой депрессии; дистимическое расстройство (дистимию); циклотимию; аффективные расстройства; синдром сезонного аффективного расстройства; биполярные расстройства, включая биполярные расстройства I и II типа; а также другие депрессивные расстройства и состояния. Термин депрессия означает также депрессивные состояния, сопровождающие болезнь Альцгеймера, васкулярную деменцию; расстройства настроения, индуцированные алкоголем и веществами; шизоаффективные расстройства депрессивного типа; расстройства адаптации. Кроме того, депрессия включает депрессивные состояния онкологических больных; при болезни Паркинсона; депрессию после инфаркта миокарда; депрессию бесплодных женщин; педиатрическую депрессию; послеродовую депрессию; а также другие депрессивные состояния, сопровождающие соматические, невралогические и прочие заболевания.
«Заместитель» означает химический радикал, который присоединяется к скэффолду (фрагменту), например, «заместитель алкильный», «заместитель аминогруппы», «заместитель карбамоильный», «заместитель циклической системы», значение которых определено в данном разделе.
k
k+1
k
k+1
k
k+1
k
k+1
2
k
k+1
k
k+1
a
a
a
a
a
a
a
a
a
a
a
a
«Заместитель циклической системы» означает заместитель, присоединенный к ароматической или неароматической циклической системе, включая водород, алкилалкенил, алкинил, арил, гетероарил, аралкил, гетероаралкил, гидрокси, гидроксиалкил, амино, аминоалкил, алкокси, арилокси, ацил, ароил, галоген, нитро, циано, карбокси, алкоксикарбонил, арилоксикарбонил, аралкоксикарбонил, алкилоксиалкил, арилоксиалкил, гетероциклилоксиалкил, арилалкилоксиалкил, гетероциклилалкилоксиалкил, алкилсульфонил, арилсульфонил, гетероциклил-сульфонил, алкилсульфинил, арилсульфинил, гетероциклилсульфинил, алкилтио, арилтио, гетероциклилтио, алкилсульфонилалкил, арилсульфонилалкил, гетероциклилсульфонилалкил, алкилсульфинилалкил, арилсульфинилалкил, гетероциклилсульфинилалкил, алкилтиоалкил, арилтиоалкил, гетероциклилтиоалкил, арилалкилсульфонилалкил, гетероциклилалкилсульфонилалкил, арилалкилтиоалкил, гетероциклилалкилтиоалкил, циклоалкил, циклоалкенил, гетероциклил, гетероцикленил, амидино,  представляют собой независимо друг от друга «заместители аминогруппы», значение которых определено в данном разделе, например, водород, необязательно замещенный алкил, необязательно замещенный арил, необязательно замещенный аралкил или необязательно замещенный гетероаралкил, или заместитель R R N-, в котором R  может быть ацил или ароил, а значение R  определено выше, или «заместителем циклической системы» является R R NC(=O)- или R R NSO-, в котором R  и R  вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют через R  и R  4-7- членный гетероциклил или гетероцикленил.
2
«Карбоксил» означает группу -COH.
«Когнитивные расстройства или нарушения когнитивных функций (cognitive disorder)» означают нарушение (ослабление) умственных возможностей, включающих внимание, память, мышление, познание, обучение, речевые, мыслительные, исполнительные и творческие способности, ориентацию во времени и пространстве, в частности, когнитивные расстройства, связанные с болезнями Альцгеймера, Паркинсона и Хантингтона; старческое слабоумие; возрастные расстройства памяти (age-associated memory impairment, AAMI); дисметаболические энцефалопатии; психогенные нарушения памяти; амнезия; амнестические расстройства; транзиторная глобальная амнезия; диссоциативная амнезия; васкулярная деменция; легкие (или умеренные) когнитивные нарушения (mild cognitive impairment, MCI); синдром нарушения внимания с гиперактивностью (attention deficit hyperactivity disorder, AD/HD); когнитивные нарушения, сопровождающие психотические заболевания, эпилепсию, делирий, аутизм, психозы, синдром Дауна, биполярные расстройства и депрессию; СПИД-ассоциированная деменция; деменция при гипотиреоидизме; деменция, индуцированная алкоголем, веществами, вызывающими зависимость, и нейротоксинами; деменция, сопровождающая нейродегенеративные заболевания, например, мозжечковую дегенерацию и амиотрофический латеральный склероз; когнитивные расстройства, развивающиеся при инсульте, инфекционных и онкологических заболеваниях головного мозга, а также при черепно-мозговых травмах; нарушения когнитивных функций, ассоциированные с аутоиммунными и эндокринными заболеваниями; и прочие когнитивные расстройства.
«Лекарственное начало» (лекарственная субстанция, лекарственное вещество, drug-substance) означает физиологически активное вещество синтетического или иного (биотехнологического, растительного, животного, микробного и прочего) происхождения, обладающее фармакологической активностью и являющееся активным началом фармацевтической композиции, используемой для производства и изготовления лекарственного средства (препарата).
«Лекарственное средство (препарат)» - вещество (или смесь веществ в виде фармацевтической композиции) в виде таблеток, капсул, инъекций, мазей и др. готовых форм, предназначенное для восстановления, исправления или изменения физиологических функций у человека и животных, а также для лечения и профилактики болезней, диагностики, анестезии, контрацепции, косметологии и прочего.
«Лиганды» (от латинского ligo - связывать) представляют собой химические вещества (малая молекула, неорганический ион, пептид, белок и прочее), способные взаимодействовать с рецепторами, которые трансформируют это взаимодействие в специфический сигнал.
«Нейродегенеративное заболевание (НЗ)» означает специфическое состояние и заболевание, характеризующиеся повреждением и первичной гибелью популяций нервных клеток в определенных областях центральной нервной системы. Нейродегенеративные заболевания включают, но не ограничивают, болезни Альцгеймера и Паркинсона; болезнь (хорею) Хантингтона; рассеянный склероз; мозжечковую дегенерацию; амиотрофический латеральный склероз; деменцию с тельцами Леви; спинальную мускульную атрофию; периферическую нейропатию; губчатый энцефалит («коровье бешенство», Creutzfeld-Jakob Disease); СПИД-ассоциированную деменцию; мультиинфарктную деменцию; лобно-височную деменцию; лейкоэнцефалопатию (болезнь исчезновения белого вещества); хронические нейродегенеративные заболевания; инсульт; ишемическое, реперфузионное и гипоксическое повреждение мозга; эпилепсия; церебральная ишемия; глаукома; черепно-мозговая травма; синдром Дауна; энцефаломиелит; менингит; энцефалит; нейробластома; шизофрения; депрессия. Кроме того, нейродегенеративные заболевания включают патологические состояния и расстройства, развивающиеся при гипоксии, злоупотреблении веществами, вызывающими зависимость, при воздействии нейротоксинов, инфекционных и онкологических заболеваниях головного мозга, а также нейрональные повреждения, ассоциированные с аутоиммунными и эндокринными заболеваниями; и прочие нейродегенеративные процессы.
«Низший алкил» означает линейный или разветвленный алкил с 1-4 атомами углерода.
«Ноотропы» или «ноотропики», они же нейрометаболические стимуляторы - вещества, принимаемые для улучшения умственных способностей.
«Психические расстройства» (психические заболевания) - это болезни или болезненные состояния, связанные с нарушением и/или расстройством психики. Психические расстройства включают аффективные расстройства (биполярные аффективные расстройства, большая депрессия, гипомания, малая депрессия, маниакальный синдром, синдром Котара, циклотимия, шизоаффективное расстройство и др.); интеллектуально-мнестические расстройства, мании (гипомания, графомания, клептомания, магазиномания, мания преследования, мономания, порнографомания, эротомания и др.); расстройство множественной личности, аменцию, белую горячку, бред, бредовый синдром, галлюцинаторный синдром, галлюцинации, галлюциноз, гомицидоманию, делирий, иллюзию, кверулянтство, клиническую ликантропию, макропсию, манихейский бред, микропсию, наркоманию, нервную анорексию, онейроидный синдром, пароноид, паранойю, парафрению, псевдогаллюцинации, психоз, синдром Котара, шизоаффективное расстройство, шизотипическое расстройство, шизофрению, шизофреноподобное расстройство, шизофреноморфное расстройство, синдром Шребера, Даниэль Пауля; фобии (агарофобию, арахнофобию, аутофобию, верминофобию, гидрозофобию, гидрофобию, демофобию, зоофобию, канцерофобию, клаустрофобию, климакофобию, ксенофобию, мизофобию, радиофобию, светобоязнь, сколицефобию, скотофобию, социофобию, тетрафобию, трискаидефобию, эротофобию); алкогольные психозы, алкогольный палимпсест, аллотриофагию, афазию, графоманию, диссоциативные фуги, диссоциативные расстройства, дисфории, интернет-зависимости, ипохондрию, истерию, копрофемию, манию преследования, меланхолию, мизантропию, обсессию, панические атаки, синдром Аспергера, синдром Капгра, синдром Мюнхгаузена, синдром Ретта, синдром Фреголи, синдром дефицита внимания и гиперактивности, синдром навязчивых состояний, синдром последствий хронической наркотизации, синдром психического автоматизма, синдром раннего детского аутизма, сумашествие, тафофилию, тревожные состояния, синдром Хикикомори, эротографоманию и др.
«Психотические заболевания» это все виды шизофрении; шизофреноподобные заболевания; шизотипические расстройства; шизоаффективные расстройства, включая биполярный и депрессивный типы; бредовые расстройства, включая бред отношения, преследования, величия, ревности, эротомании, а также ипохондрический, соматический, смешанный и недифференцируемый бред; кратковременные психотические расстройства; индуцированные психотические расстройства; индуцированные веществами психотические расстройства; а также другие психотические расстройства.
«Рецепторы» (от латинского recipere - получать, узнавать) представляют собой биологические макромолекулы, расположенные на цитоплазматической мембране клетки или внутриклеточно, способные специфически взаимодействовать с ограниченным набором физиологически активных веществ (лигандов) и трансформировать сигнал об этом взаимодействии в определенный клеточный ответ.
«Терапевтический коктейль» представляет одновременно администрируемую комбинацию двух и более лекарственных препаратов, обладающих различным механизмом фармакологического действия и направленных на различные биомишени, участвующие в патогенезе заболевания.
«Тревожные расстройства» (anxiety) означает генерализованную (неконкретную) тревогу; острое неконтролируемое беспокойство; паническое заболевание; фобии, например, агорафобию (сильная боязнь людных мест) или социальную фобию (сильную боязнь унижения перед другими людьми) или любую конкретную фобию (сильную боязнь конкретных предметов, животных или ситуаций, в виде боязни высоты, медицинских процедур, лифтов, открытого пространства и т.п.); навязчивые состояния (обсессивно-компульсивное расстройство); посттравматическое стрессовое расстройство и острое стрессовое расстройство. Кроме того, к тревожным расстройствам относятся тревожные состояния, индуцированные алкоголем или веществами; тревога при расстройствах адаптации; а также смешанные формы тревожных расстройств и депрессии.
«Шизофрения» означает все известные типы, формы и варианты заболевания, в том числе: простую, гебефреническую, параноидную, гипертоксическую (фебрильную), кататоническую, шизоаффективную, остаточную или недифференцируемую шизофрению и/или формы шизофрении, определенные в классификации Американской Психиатрической Ассоциации {American Psychiatric Association; in: Diagnostic and Statistical Manual of Menial Disorders, IV Edition, Washington D.C. 2000) или в Международной классификации (International Statistical Classification of Diseases and Related Health Problems') или любые другие известные формы
«Фармацевтическая композиция» обозначает композицию, включающую в себя соединение формулы I и, по крайней мере, один из компонентов, выбранных из группы, состоящей из фармацевтически приемлемых и фармакологически совместимых наполнителей, растворителей, разбавителей, носителей, вспомогательных, распределяющих и воспринимающих средств, средств доставки, таких как консерванты, стабилизаторы, наполнители, измельчители, увлажнители, эмульгаторы, суспендирующие агенты, загустители, подсластители, отдушки, ароматизаторы, антибактериальные агенты, фунгициды, лубриканты, регуляторы пролонгированной доставки, выбор и соотношение которых зависит от природы и способа назначения и дозировки. Примерами суспендирующих агентов являются этоксилированный изостеариловый спирт, полиоксиэтилен, сорбитол и сорбитовый эфир, микрокристаллическая целлюлоза, метагидроксид алюминия, бентонит, агар-агар и трагакант, а также смеси этих веществ. Защита от действия микроорганизмов может быть обеспечена с помощью разнообразных антибактериальных и противогрибковых агентов, например, таких как, парабены, хлорбутанол, сорбиновая кислота и подобные им соединения. Композиция может включать также изотонические агенты, например, сахара, хлористый натрий и им подобные. Пролонгированное действие композиции может быть обеспечено с помощью агентов, замедляющих абсорбцию активного начала, например, моностеарат алюминия и желатин. Примерами подходящих носителей, растворителей, разбавителей и средств доставки являются вода, этанол, полиспирты, а также их смеси, растительные масла (такие, как оливковое масло) и инъекционные органические сложные эфиры (такие, как этилолеат). Примерами наполнителей являются лактоза, молочный сахар, цитрат натрия, карбонат кальция, фосфат кальция и им подобные. Примерами измельчителей и распределяющих средств являются крахмал, алгиновая кислота и ее соли, силикаты. Примерами лубрикантов являются стеарат магния, лаурилсульфат натрия, тальк, а также полиэтиленгликоль с высоким молекулярным весом. Фармацевтическая композиция для перорального, сублингвального, трансдермального, внутримышечного, внутривенного, подкожного, местного или ректального введения активного начала, одного или в комбинации с другим активным началом, может быть введена животным и людям в стандартной форме введения, в виде смеси с традиционными фармацевтическими носителями. Пригодные стандартные формы введения включают пероральные формы, такие как таблетки, желатиновые капсулы, пилюли, порошки, гранулы, жевательные резинки и пероральные растворы или суспензии, сублингвальные и трансбуккальные формы введения, аэрозоли, имплантаты, местные, трансдермальные, подкожные, внутримышечные, внутривенные, интраназальные или внутриглазные формы введения и ректальные формы введения. Фармацевтические композиции, как правило, получают с помощью стандартных процедур, предусматривающих смешение активного соединения с жидким или тонко измельченным твердым носителем.
«Фармацевтически приемлемая соль» означает относительно нетоксичные органические и неорганические соли кислот и оснований, заявленных в настоящем изобретении. Эти соли могут быть получены in situ в процессе синтеза, выделения или очистки соединений или приготовлены специально. В частности, соли оснований могут быть получены специально, исходя из очищенного свободного основания заявленного соединения и подходящей органической или неорганической кислоты. Примерами полученных таким образом солей являются гидрохлориды, гидробромиды, сульфаты, бисульфаты, фосфаты, нитраты, ацетаты, оксалаты, валериаты, олеаты, пальмитаты, стеараты, лаураты, бораты, бензоаты, лактаты, тозилаты, цитраты, малеаты, фумараты, сукцинаты, тартраты, мезилаты, малонаты, салицилаты, пропионаты, этансульфонаты, бензолсульфонаты, сульфаматы и им подобные. (Подробное описание свойств таких солей дано в Berge S.M., et al., "Pharmaceutical Salts" J. Pharm. Sci. 1977, 66: 1-19). Соли заявленных кислот также могут быть специально получены реакцией очищенной кислоты с подходящим основанием, при этом могут быть синтезированы соли металлов и аминов. К металлическим относятся соли натрия, калия, кальция, бария, цинка, магния, лития и алюминия, наиболее желательными из которых являются соли натрия и калия. Подходящими неорганическими основаниями, из которых могут быть получены соли металлов, являются гидроксид, карбонат, бикарбонат и гидрид натрия, гидроксид и бикарбонат калия, поташ, гидроксид лития, гидроксид кальция, гидроксид магния, гидроксид цинка. В качестве органических оснований, из которых могут быть получены соли заявленных кислот, выбраны амины и аминокислоты, обладающие достаточной основностью, чтобы образовать устойчивую соль, и пригодные для использования в медицинских целях (в частности, они должны обладать низкой токсичностью). К таким аминам относятся аммиак, метиламин, диметиламин, триметиламин, этиламин, диэтиламин, триэтиламин, бензиламин, дибензиламин, дициклогексиламин, пиперазин, этилпиперидин, трис(гидроксиметил)аминометан и подобные им. Кроме того, для солеобразования могут быть использованы гидроокиси тетраалкиламмония, например, такие как, холин, тетраметиламмоний, тетраэтиламмоний и им подобные. В качестве аминокислот могут быть использованы основные аминокислоты - лизин, орнитин и аргинин.
Предметом настоящего изобретения являются новые замещенные 2-алкилсульфанил-3-арилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидины общей формулы 1 и их фармацевтически приемлемые соли и/или гидраты,
где
1
3
2
1
3
2
n
R и R независимо друг от друга представляют собой необязательно одинаковые С-Салкил, а R представляет собой группу -(СН)X или
1
3
2
1
3
2
n
1
3
R и R независимо друг от друга представляют собой разные заместители, выбранные из C-С алкила или группы -(CH)X, a R представляет собой атом водорода или С-С алкил;
4
1
3
R представляет собой С-С алкил;
i
1
3
5
R  представляет собой атом водорода, один или два одинаковых или разных атома галогена, C-С алкил;
i представляет собой число 0, 1 или 2;
n представляет собой число 0, 1, 2 или 3;
2
1
3
2
n
6
7
6
7
3
6
7
X представляет собой карбоксил COH, С-С алкилоксикарбонил, аминокарбонил CONRR или аминогруппу NRR; исключая соединения, в которых R представляет собой группу -(СН)X, где Х представляет собой аминогруппу NRR и n равно 0;
6
7
6
7
1
5
1
3
R и R представляют собой необязательно одинаковые атом водорода, необязательно замещенный С-С алкил или R и R вместе с атомом азота, с которым они связаны, образуют необязательно замещенный 6-членный азагетероциклил, содержащий 1-2 атома азота в цикле, где заместитель выбирается из C-С алкила.
Предпочтительными замещенными 2-алкилсульфанил-3-арилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидинами общей формулы 1 являются эфиры общей формулы 1.1, 1.2 или 1.3,
i
5
где n и R  имеют вышеуказанное значение.
Предпочтительными замещенными 2-алкилсульфанил-3-арилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидинами общей формулы 1 являются кислоты общей формулы 1.4, 1.5 или 1.6,
i
5
где n и R  имеют вышеуказанное значение.
Предпочтительными замещенными 2-алкилсульфанил-3-арилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидинами общей формулы 1 являются амиды общей формулы 1.7, 1.8 или 1.9,
i
5
6
7
где n, R , R и R имеют вышеуказанное значение.
Предпочтительными замещенными 2-алкилсульфанил-3-арилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидинами общей формулы 1 являются амины общей формулы 1.10, 1.11 или 1.12,
6
7
где n,  R и R имеют вышеуказанное значение.
Более предпочтительными аминами общей формулы 1.10, 1.11 и 1.12 являются 6-амино-5,7-диметил-2-метилсульфанил-3-фенилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.10(1), 6-аминометил-5,7-диметил-2-метилсульфанил-3-фенилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.10(2), 6-(2-аминоэтил)-5,7-диметил-2-метилсульфанил-3-фенилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.10(3), 6-(3-аминопропил)-5,7-диметил-2-метилсульфанил-3-фенилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.10(4), 6-аминометил-5,7-диметил-2-метилсульфанил-3-(3-хлорфенилсульфонил)-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.10(5), 6-аминометил-5,7-диметил-2-метилсульфанил-3-(3-фторфенилсульфонил)-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.10(6), 6-аминометил-5,7-диметил-2-метилсульфанил-3-(4-фтор-3-хлорфенилсульфонил)-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.10(7), 6-(2-аминоэтил)-5,7-диметил-2-метилсульфанил-3-(3-хлорфенилсульфонил)-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.10(8), 6-(2-аминоэтил)-5,7-диметил-2-метилсульфанил-3-(3-фторфенилсульфонил)-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.10(9), 5,7-диметил-6-диметиламинометил-2-метилсульфанил-3-фенилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.10(10), 5,7-диметил-6-диметиламинометил-2-метилсульфанил-3-(3-хлорфенилсульфонил)-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.10(11), 5,7-диметил-6-диметиламинометил-2-метилсульфанил-3-(3-фторфенилсульфонил)-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.10(12), 5,7-диметил-6-диметиламинометил-2-метилсульфанил-3-(4-фтор-3-хлорфенилсульфонил)-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.10(13), 5,7-диметил-6-(2-диметиламиноэтил)-2-метилсульфанил-3-фенилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.10(14), 5,7-диметил-6-(2-диметиламиноэтил)-2-метилсульфанил-3-(3-хлорфенилсульфонил)-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.10(15), 5,7-диметил-6-(2-диметиламиноэтил)-2-метилсульфанил-3-(3-фторфенилсульфонил)-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.10(16), 5,7-диметил-6-(2-диметиламино-этил)-2-метилсульфанил-3-(4-фтор-3-хлорфенилсульфонил)-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.10(17), 5-аминометил-7-метил-2-метилсульфанил-3-фенилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.11(1), 5-(2-аминоэтил)-7-метил-2-метилсульфанил-3-фенилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.11(2), 5-диметиламинометил-7-метил-2-метилсульфанил-3-фенилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.11(3), 5-диметиламинометил-7-метил-2-метилсульфанил-3-(4-фтор-3-хлор-фенилсульфонил)-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.11(4), 5-(2-диметиламиноэтил)-7-метил-2-метилсульфанил-3-фенилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.11(5), 7-аминометил-5-метил-2-метилсульфанил-3-фенилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.12(1), 7-(2-аминоэтил)-5-метил-2-метилсульфанил-3-фенилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.12(2), 7-диметиламинометил-5-метил-2-метилсульфанил-3-фенилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.12(3), 7-диметиламинометил-5-метил-2-метилсульфанил-3-(4-фтор-3-хлор-фенилсульфонил)-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.12(4), 7-(2-диметиламиноэтил)-5-метил-2-метилсульфанил-3-фенилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидин 1.12(5) и их фармацевтически приемлемые соли и/или гидраты,
Предметом настоящего изобретения является способ получения эфиров общей формулы 1.1 взаимодействием 3-амино-4-сульфонил-2Н-пиразолов общей формулы 2 с соответствующими β-дикарбонильными соединениями общей формулы 3 по схеме, представленной ниже.
1
3
4
5
i
в которых n, R, R, R и R  имеют вышеуказанное значение.
Предметом настоящего изобретения является также способ получения эфиров общей формулы 1.2, 1.3 взаимодействием 3-амино-4-сульфонил-2Н-пиразолов общей формулы 2 с соответствующими β-дикарбонильными соединениями общей формулы 4 с последующим выделением и очисткой или разделением продуктов реакции по схеме, представленной ниже.
1
3
4
5
i
в которых n, R, R, R и R  имеют вышеуказанное значение.
Предметом настоящего изобретения является также способ получения кислот общей формулы 1, 1.4, 1.5, 1.6 гидролизом соответствующих эфиров общей формулы 1, 1.1, 1.2, 1.3.
Предметом настоящего изобретения является также способ получения амидов общей формулы 1.7, 1.8, 1.9 взаимодействием соответствующих кислот общей формулы 1.4, 1.5, 1.6 или их производных с аминами общей формулы 5,
6
7
в которой R и R имеют вышеуказанное значение.
Предметом настоящего изобретения является также способ получения амидов общей формулы 1.7 взаимодействием 3-амино-4-сульфонил-2Н-пиразолов общей формулы 2 с соответствующими β-дикарбонильными соединениями общей формулы 6,
1
3
4
5
6
7
i
в которой n, R, R, R, R  R и R имеют вышеуказанное значение.
Предметом настоящего изобретения является также способ получения амидов общей формулы 1.8, 1.9 взаимодействием 3-амино-4-сульфонил-2Н-пиразолов общей формулы 2 с соответствующими β-дикарбонильными соединениями общей формулы 7 с последующим выделением и очисткой или разделением продуктов реакции по схеме, представленной ниже.
1
3
4
5
6
7
i
в которых n, R, R, R, R , R и R имеют вышеуказанное значение.
Предметом настоящего изобретения является также способ получения аминов общей формулы 1.10, 1.11, 1.12 и их фармацевтически приемлемых солей и/или гидратов последовательным превращением кислот общей формулы 1.4, 1.5, 1.6 в соответствующие ацилазиды общей формулы 1.13, 1.14, 1.15 под действием азида натрия, термическим разложением полученных азидов в изоцианаты общей формулы 1.16, 1.17, 1.18 и гидролизом последних в амины общей формулы 1.10, 1.11, 1.12 соответственно, по схемам, представленным ниже.
1
3
4
5
i
в которых n, R, R, R и R  имеют вышеуказанное значение.
6
7
Предметом настоящего изобретения является также способ получения аминов общей формулы 1.10, 1.11, 1.12 восстановительным алкилированием аминов 1.10, 1.11, 1.12, в которых R и R представляют собой атом водорода, карбонильными соединениями общей формулы 8,
8
9
8
9
1
3
5
7
где R и R представляют собой необязательно одинаковые атом водорода, необязательно замещенный C-С алкил или R и R вместе с атомом углерода, с которым они связаны, образуют необязательно замещенный C-C циклоалкилен или гетероциклен, включающий один гетероатом и 4-6 атомов углерода.
6
Предметом настоящего изобретения являются также 2-алкилсульфанил-3-арилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидины общей формулы 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 1.10, 1.11, 1.12 и их фармацевтически приемлемые соли и/или гидраты, обладающие свойствами антагонистов серотониновых 5-НТ рецепторов.
6
Более предпочтительными 2-алкилсульфанил-3-арилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидинами в качестве антагонистов серотониновых 5-НТ рецепторов являются амины с 1.10(1) по 1.10(17) и их фармацевтически приемлемые соли и/или гидраты.
6
Предметом настоящего изобретения являются также 2-алкилсульфанил-3-арилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидины общей формулы 1 и соединения 1.10(1) по 1.10(17), с 1.11(1) по 1.11(5), с 1.12(1) по 1.12(5) и их фармацевтически приемлемые соли и/или гидраты в качестве «молекулярных инструментов» для изучения молекулярного механизма взаимодействия с серотониновыми 5-НТ рецепторами.
Предметом настоящего изобретения являются также 2-алкилсульфанил-3-арилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидины общей формулы 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 1.10, 1.11, 1.12 и их фармацевтически приемлемые соли и/или гидраты, в качестве лекарственного начала для фармацевтических композиций и лекарственных средств.
Более предпочтительными соединениями в качестве лекарственного начала являются соединения 1.10(1)-1.10(17), 1.11(1)-1.11(5), 1.12(1)-1.12(5) и их фармацевтически приемлемые соли и/или гидраты.
Предметом данного изобретения является также фармацевтическая композиция для лечения и предупреждения развития состояний и заболеваний ЦНС людей и теплокровных животных, содержащая фармацевтически эффективное количество нового лекарственного начала, представляющего собой, по крайней мере, одно из соединений общей формулы 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 1.10, 1.11. 1.12 и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат или, по крайней мере, одно из соединений 1.10(1)-1.10(17), 1.11(1)-1.11(5), 1.12(1)-1.12(5) и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат.
Фармацевтическая композиция может включать фармацевтически приемлемые эксципиенты. Под фармацевтически приемлемыми эксципиентами подразумеваются применяемые в сфере фармацевтики разбавители, вспомогательные агенты и/или носители. Фармацевтическая композиция наряду с лекарственным началом по настоящему изобретению может включать и другие активные ингредиенты, при условии, что они не вызывают нежелательных эффектов, например, аллергических реакций.
При необходимости использования фармацевтических композиций по настоящему изобретению в клинической практике они могут смешиваться для изготовления различных форм, при этом они могут включать в свой состав традиционные фармацевтические носители; например, пероральные формы (такие как таблетки, желатиновые капсулы, пилюли, растворы или суспензии); формы для инъекций (такие как растворы или суспензии для инъекций, или сухой порошок для инъекций, который требует лишь добавления воды для инъекций перед использованием); местные формы (такие как, мази или растворы).
Носители, используемые в фармацевтических композициях по настоящему изобретению, представляют собой носители, которые применяются в сфере фармацевтики для получения распространенных форм, в том числе: в пероральных формах используются связующие вещества, смазывающие агенты, дезинтеграторы, растворители, разбавители, стабилизаторы, суспендирующие агенты, бесцветные агенты, корригенты вкуса; в формах для инъекций используются антисептические агенты, солюбилизаторы, стабилизаторы; в местных формах используются основы, разбавители, смазывающие агенты, антисептические агенты.
Предметом данного изобретения является также способ получения новой фармацевтической композиции смешением с инертным наполнителем и/или растворителем лекарственного начала, представляющего собой, по крайней мере, одно из соединений общей формулы 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5. 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 1.10, 1.11, 1.12 и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат или, по крайней мере, одно из соединений формулы с 1.10(1) по 1.10(17), с 1.11(1) по 1.11(5), с 1.12(1) по 1.12(5) и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат.
6
Предметом данного изобретения является лекарственное средство в форме таблеток, капсул или инъекций, помещенных в фармацевтически приемлемую упаковку, для профилактики и лечения заболеваний центральной нервной системы, патогенез которых связан с 5-НТ рецепторами, включающее фармацевтически эффективное количество лекарственного начала, представляющего собой, по крайней мере, одно из соединений общей формулы 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 1.10, 1.11, 1.12 и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат или, по крайней мере, одно из соединений формулы с 1.10(1) по 1.10(17), с 1.11(1) по 1.11(5), с 1.12(1) по 1.12(5) и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат, или фармацевтической композиции, содержащей это лекарственное начало.
Более предпочтительным является лекарственное средство в форме таблеток, капсул или инъекций, помещенных в фармацевтически приемлемую упаковку, для профилактики и лечения когнитивных расстройств и нейродегенеративных заболеваний, включающее фармацевтически эффективное количество нового лекарственного начала.
Более предпочтительным является лекарственное средство в форме таблеток, капсул или инъекций, помещенных в фармацевтически приемлемую упаковку, для профилактики и лечения болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, болезни Гантингтона, включающее фармацевтически эффективное количество лекарственного начала, представляющего собой, по крайней мере, один антагонист общей формулы 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 1.10, 1.11, 1.12 и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат или, по крайней мере, один антагонист формулы с 1.10(1) по 1.10(17), с 1.11(1) по 1.11(5), с 1.12(1) по 1.12(5) и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат, или фармацевтической композиции, содержащей новое лекарственное начало.
Предметом данного изобретения является также лекарственное средство в форме таблеток, капсул или инъекций, помещенных в фармацевтически приемлемую упаковку, для профилактики и лечения психических расстройств и шизофрении, включающее фармацевтически эффективное количество лекарственного начала, представляющего собой, по крайней мере, одно из соединений общей формулы 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 1.10, 1.11, 1.12 и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат, или, по крайней мере, одно из соединений формулы с 1.10(1) по 1.10(17), с 1.11(1) по 1.11(5), с 1.12(1) по 1.12(5) и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат, или фармацевтической композиции, содержащей новое лекарственное начало.
Более предпочтительным является лекарственное средство (анксиолитик или транквилизатор) для профилактики и лечения тревожных расстройств, включающее фармацевтически эффективное количество лекарственного начала, представляющего собой, по крайней мере, одно из соединений общей формулы 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 1.10, 1.11, 1.12 и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат, или, по крайней мере одно из соединений формулы с 1.10(1) по 1.10(17), с 1.11(1) по 1.11(5), с 1.12(1) по 1.12(5) и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат, или фармацевтической композиции, содержащей новое лекарственное начало.
Более предпочтительным является лекарственное средство (ноотропик) для профилактики и лечения гиперкинетических расстройств, в частности для улучшения умственных способностей, включающее фармацевтически эффективное количество лекарственного начала, представляющего собой, по крайней мере, одно из соединений общей формулы 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 1.10, 1.11, 1.12 и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат, или, по крайней мере, одно из соединений формулы с 1.10(1) по 1.10(17), с 1.11(1) по 1.11(5), с 1.12(1) по 1.12(5) и его фармацевтически приемлемаую соль и/или гидрат, или фармацевтической композиции, содержащей новое лекарственное начало.
Предметом данного изобретения является также лекарственное средство в форме таблеток, капсул или инъекций, помещенных в фармацевтически приемлемую упаковку, для профилактики и лечения ожирения, включающее фармацевтически эффективное количество лекарственного начала, представляющего собой, по крайней мере, одно из соединений общей формулы 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 1.10, 1.11, 1.12 и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат, или, по крайней мере, одно из соединений формулы с 1.10(1) по 1.10(17), с 1.11(1) по 1.11(5), с 1.12(1) по 1.12(5) и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат, или фармацевтической композиции, содержащей новое лекарственное начало.
6
Предметом данного изобретения является также терапевтический коктейль для профилактики и лечения различных заболеваний, патогенез которых связан с 5-НТ рецепторами у животных и людей, включающий лекарственное средство в форме таблеток, капсул или инъекций, помещенных в фармацевтически приемлемую упаковку, включающее фармацевтически эффективное количество лекарственного начала, представляющего собой, по крайней мере, одно из соединений общей формулы 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 1.10, 1.11, 1.12 и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат, или, по крайней мере одно из соединений формулы с 1.10(1) по 1.10(17), с 1.11(1) по 1.11(5), с 1.12(1) по 1.12(5) и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат, или фармацевтической композиции, содержащей новое лекарственное начало.
Предметом данного изобретения является также терапевтический коктейль для профилактики и лечения неврологических расстройств, нейродегенеративных и когнитивных заболеваний у животных и людей, в том числе для профилактики и лечения болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, болезни Гантингтона, психических расстройств и шизофрении, гипоксии-ишемии, гипогликемии, судорожных состояний, мозговых травм, латиризма, бокового амиотрофического склероза, ожирения и инсульта, включающие фармацевтически эффективное количество лекарственного начала, представляющего собой, по крайней мере, один антагонист общей формулы 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 1.10, 1.11, 1.12 и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат, или, по крайней мере, один антагонист формулы с 1.10(1) по 1.10(17), с 1.11(1) по 1.11(5), с 1.12(1) по 1.12(5) и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат, или фармацевтической композиции, содержащей новое лекарственное начало, или новое лекарственное средство, включающее фармацевтически эффективное количество лекарственного начала, представляющего собой, по крайней мере один антагонист общей формулы 1, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 1.10, 1.11, 1.12 и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат, или, по крайней мере, один антагонист формулы с 1.10(1) по 1.10(17), с 1.11(1) по 1.11(5), с 1.12(1) по 1.12(5) и его фармацевтически приемлемую соль и/или гидрат, или фармацевтической композиции, содержащей новое лекарственное начало.
Терапевтические коктейли для профилактики и лечения неврологических расстройств, нейродегенеративных и когнитивных заболеваний у животных и людей, в том числе для профилактики и лечения болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, болезни. Гантингтона, психических расстройств и шизофрении, гипоксии-ишемии, гипогликемии, судорожных состояний, мозговых травм, латиризма, бокового амиотрофического склероза, ожирения и инсульта, наряду с лекарственными средствами по данному изобретению, могут включать другие лекарственные средства, такие как: нестероидные противовоспалительные препараты (Ортофен, Индометацин, Ибупрофен и т.п.); ингибиторы ацетилхолинэстеразы (Такрин, Амиридин, Физостигмин, Арисепт, Phenserine и т.п.); эстрогены (например, Эстрадиол); антагонисты NMDA-рецепторов (например, Мемантин, Neramexane); ноотропные препараты (например, Пирацетам, Фенибут и т.п.); модуляторы АМРА рецепторов (например, Ampalex); антагонисты каннабиноидных рецепторов СВ-1 (например, Rimonabant); ингибиторы моноаминооксидазы МАО-В и/или МАО-А (например, Rasagiline); антиамилоидогенные препараты (например, Tramiprosate); вещества, понижающие нейротоксичность бета-амилоида (например, Индол-3-пропионовая кислота); ингибиторы гамма- и/или бета-Секретазы; агонисты мускариновых рецепторов M1 (например, Cevimeline); хелаторы металлов (например, Clioquinol); антагонисты ГАМК(В) рецепторов (например, CGP-36742); моноклональные антитела (например, Bapineuzumab); антиоксиданты; нейротрофические агенты (например, Церебролизин); антидепрессанты (например, Имипрамин, Сертралин и т.п.) и прочие.
Терапевтический коктейль для понижения избыточного веса и лечения ожирения наряду с лекарственными средствами по данному изобретению включает другие лекарственные средства, такие как анорексические препараты (например, Фепранон, Дезопимон, Мазиндол), гормональные препараты (например. Тиреоидин), гиполипидимические средства, такие как фибраты (например, Фенофибрат), статины (например, Ловастатин, Симвастатин, Правастатин и Пробукол), а также гипогликемические препараты (сульфонилмочевины - например, Бутамид, Глибенкламид; бигуаниды - например, Буформин, Метморфин) и препараты с другим механизмом действия, такие как антагонисты каннабиноидных СВ-1 рецепторов (Rimonabant), ингибиторы обратного захвата норэпинефрина и серотонина (Sibutramine), ингибиторы ферментов синтеза жирных кислот (Orlistat) и прочие, наряду с антиоксидантами, пищевыми добавками и т.д.
6
В соответствии с данным изобретением способ профилактики и лечения различных заболеваний, патогенез которых связан с 5-НТ рецепторами у животных и людей, заключается во введении фармацевтически эффективного количества нового лекарственного начала, фармацевтически эффективного количества новой фармацевтической композиции, фармацевтически эффективного количества нового лекарственного средства или фармацевтически эффективного количества нового терапевтического коктейля.
Лекарственные средства могут вводиться перорально или парентерально (например, внутривенно, подкожно, внутрибрюшинно или местно). Клиническая дозировка активного начала, фармацевтической композиции или лекарственного средства у пациентов может корректироваться в зависимости от терапевтической эффективности и биодоступности активных ингредиентов в организме, скорости их обмена и выведения из организма, а также в зависимости от возраста, пола и стадии заболевания пациента, при этом суточная доза у взрослых обычно составляет 10~500 мг, предпочтительно - 50~300 мг. Поэтому во время приготовления фармацевтических композиций по настоящему изобретению в виде единиц дозировки необходимо учитывать вышеназванную эффективную дозировку, при этом каждая единица дозировки препарата должна содержать 10~500 мг, предпочтительно - 50~300 мг. В соответствии с указаниями врача или фармацевта данные препараты могут приниматься несколько раз в течение определенных промежутков времени (предпочтительно - от одного до шести раз).
Представленные ниже примеры демонстрируют, но не ограничивают данное изобретение.
Пример 1. Общий способ получения 2-алкилсульфанил-3-арилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидинов общей формулы 1.1, 1.2, 1.3, 1,7, 1.8 и 1.9. Перемешивают 0.005 моль аминопиразола 2 и 0.0055 моль соответствующего дикарбонильного соединения 3, 4, 6 или 7 в 5 мл уксусной кислоты или другого подходящего растворителя в течение 4-12 часов. Выпавший осадок фильтруют, промывают метанолом и водой. В случае необходимости продукт подвергают перекристаллизации из подходящего растворителя, или хроматографической очистке, или хроматографическому разделению. В таблице 2 представлены некоторые примеры новых 2-алкилсульфанил-3-арилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидинов общей формулы 1.1, 1.2, 1.3, 1,7, 1.8 и 1.9 и данные их LC MS анализов и спектров ЯМР.
Пример 2. Общий способ получения 2-алкилсульфанил-3-арилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидинов общей формулы 1.4, 1.5 и 1.6. К 2.0 ммоль эфира общей формулы 1.1, 1.2 или 1.3 в 50 мл этанола прибавляют раствор 4.0 ммоль (263 мг) 85% КОН в 20 мл воды и перемешивают полученную смесь при комнатной температуре 6-18 ч. Полноту протекания реакции контролируют методом LC MS. Из реакционной массы отгоняют этанол в вакууме, остаток разбавляют водой до объема 200 мл. Полученный раствор подкисляют соляной кислотой до рН 4-5. Образовавшийся белый осадок отфильтровывают, промывают водой и сушат на воздухе. В таблице 2 представлены некоторые примеры новых 2-алкилсульфанил-3-арилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидинов общей формулы 1.4, 1.5 и 1.6 и данные их LC MS анализов и спектров ЯМР.
Пример 3. Общий способ получения 2-алкилсульфанил-3-арилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидинов общей формулы 1,7, 1.8 и 1.9. К раствору 0,902 ммоль кислоты общей формулы 1.4, 1.5, 1.6 в 5 мл диметилформамида добавляют 259 мг карбодиимидазола (0,992 ммоль). Реакционную массу перемешивают при температуре 75°С в течение 1 часа, добавляют 0,992 ммоль амина общей формулы 5 и выдерживают в течение ночи при температуре 75°С. Полноту протекания реакции контролируют методом LC MS. После завершения реакции реакционную массу выливают в 5% раствор карбоната натрия. Продукт экстрагируют дихлорметаном. Экстракт сушат безводным сульфатом натрия, упаривают в вакууме. Получают амиды общей формулы 1,7, 1.8 и 1.9, которые без дополнительной очистки используют для получения солей. В таблице 2 представлены некоторые примеры новых 2-алкилсульфанил-3-арилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидинов общей формулы 1.7, 1.8 и 1.9 и данные их LC MS анализов и спектров ЯМР.
Пример 4. Общий способ получения 2-алкилсульфанил-3-арилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидинов общей формулы 1.10, 1.11, 1.12.
А. К смеси 1,0 ммоль соответствующей кислоты общей формулы 1.4, 1.5, 1.6 в 10 мл ацетона по каплям добавляют последовательно раствор 139 мкл (101 мг, 1,18 ммоль) триэтиламина в 1 мл ацетона и раствор 109 мкл (123 мг, 1,29 ммоль) этоксикарбонилхлорида в 1 мл ацетона. Полученную смесь перемешивают при 0°С 30 мин, затем добавляют по каплям раствор 109 мг (1,53 ммоль) азида натрия в 0,35 мл воды и перемешивают при 0°С в течение часа. Полученную реакционную массу выливают в 30 мл ледяной воды. Продукт экстрагируют охлажденным до 0°С дихлорметаном, растворитель упаривают в вакууме до объема 2-3 мл при комнатной температуре. Полученный раствор ацилазида общей формулы 1.13, 1.14, 1.15 разбавляют диоксаном до объема 5 мл. Этот раствор добавляют по каплям в 20 мл кипящего диоксана. После добавления азида реакционную массу кипятят в течение 1 часа. Полученный раствор изоцианата общей формулы 1.16, 1.17, 1.18 охлаждают до 70°С, добавляют 5 мл 20% водного раствора соляной кислоты, перемешивают при температуре 80°С в течение 3 ч до завершения гидролиза изоцианата (контроль методом LC MS). Продукт общей формулы 1.10, 1.11, 1.12 выпадает в виде гидрохлорида после охлаждения реакционной массы.
6
7
Б. К раствору 1 ммоль соответствующего амина общей формулы 1.10, 1.11, 1.12, в которых R и R представляют собой атом водорода, в 10 мл дихлорэтана добавляют 3 ммоль карбонильного соединения общей формулы 8 и 2,5 ммоль триацетоксиборгидрида натрия. Смесь перемешивают 3 ч при комнатной температуре. Контроль реакции осуществляют по LC MS. Для доведения реакции до конца добавляют еще 3 ммоль карбонильного соединения общей формулы 8 и 2,5 ммоль триацетоксиборгидрида натрия и перемешивают 12 ч. Смесь разбавляют водой и экстрагируют дихлорметаном, промывают 10% раствором поташа, сушат сульфатом натрия и упаривают.Продукт общей формулы 1.10, 1.11, 1.12 выделяют методом колоночной хроматографии на силикагеле (система гексан:этилацетат:триэтиламин = 30:10:1). Гидрохлорид получают добавлением избытка раствора HCl в диоксане к раствору амина в ацетоне, при необходимости высаживают эфиром.
В таблице 2 представлены некоторые примеры новых 2-алкилсульфанил-3-арилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидинов общей формулы 1.10, 1.11, 1.12 и их солей и данные их LC MS анализов и спектров ЯМР.
Таблица 2
Антагонисты серотониновых 5-НТ<sub>6</sub> рецепторов - 2-алкилсульфанил-3-арилсульфонил-пиразоло[1,5-а]пиримидины общей формулы 1
№
Формула
Мол. вес
LCMS m/z (M+1)
Спектр ЯМР
1.1(1)
<img file="00000053.tif" he="50" wi="39" img-content="undefined" img-format="tif" />
406.51
407
1.1(2)
<img file="00000054.tif" he="42" wi="47" img-content="undefined" img-format="tif" />
447.58
448
1.1(3)
<img file="00000055.tif" he="45" wi="40" img-content="undefined" img-format="tif" />
433.55
434
1.1(4)
<img file="00000056.tif" he="47" wi="45" img-content="undefined" img-format="tif" />
461.61
462
1.1(5)
<img file="00000057.tif" he="42" wi="46" img-content="undefined" img-format="tif" />
433.55
434
1.2(1)
<img file="00000058.tif" he="39" wi="47" img-content="undefined" img-format="tif" />
374.44
375
<sup>1</sup>Н ЯМР (CDCl<sub>3</sub>, 400 МГц) δ 8,29 (м, 2Н). 7,47-7,57 (м, 4Н), 4,07 (с, 3Н), 2,82 (д, J=0,4 Гц, 3Н), 2,66 (с, 3Н).
1.3(1)
<img file="00000059.tif" he="41" wi="38" img-content="undefined" img-format="tif" />
374.44
375
<sup>1</sup>Н ЯМР (CDCl<sub>3</sub>, 400 МГц) δ 8,01 (м, 2Н), 7,57-7,67 (м, 4Н), 3,97 (с, 3Н), 2,66 (с, 3Н), 2,56 (с, 3Н).
1.4(1)
<img file="00000060.tif" he="42" wi="41" img-content="undefined" img-format="tif" />
378.45
379
1.4(2)
<img file="00000061.tif" he="46" wi="45" img-content="undefined" img-format="tif" />
388.45
389
1.5(1)
<img file="00000062.tif" he="39" wi="42" img-content="undefined" img-format="tif" />
333.35
334
1.6(1)
<img file="00000063.tif" he="34" wi="47" img-content="undefined" img-format="tif" />
333.35
334
1.7(1)·HCl
<img file="00000064.tif" he="39" wi="54" img-content="undefined" img-format="tif" />
526.12
490
1.7(2)·HCl
<img file="00000065.tif" he="43" wi="56" img-content="undefined" img-format="tif" />
524.11
488
1.8(1)·HCl
<img file="00000066.tif" he="37" wi="53" img-content="undefined" img-format="tif" />
484.04
448
1.9(1)·HCl
<img file="00000067.tif" he="44" wi="48" img-content="undefined" img-format="tif" />
484.04
448
1.10(1)
<img file="00000068.tif" he="29" wi="42" img-content="undefined" img-format="tif" />
348.45
349
1.10(2)·HCl
<img file="00000069.tif" he="39" wi="38" img-content="undefined" img-format="tif" />
398.94
363
<sup>1</sup>Н ЯМР (ДМСО-D<sub>6</sub>, 400 МГц) δ 8,15 (с, 3Н), 8,02 (м, 2Н). 7,60 (м, 3Н), 4,23 (с, 2Н),. 2,82 (с, 3Н), 2,72 (с, 3Н), 2,60 (с, 3Н).
1.10(2)·CH<sub>3</sub>SO<sub>3</sub>H
<img file="00000070.tif" he="39" wi="43" img-content="undefined" img-format="tif" />
458.59
363
1.10(3)·HCl
<img file="00000071.tif" he="42" wi="42" img-content="undefined" img-format="tif" />
412.96
377
1.10(4)·HCl
<img file="00000072.tif" he="47" wi="42" img-content="undefined" img-format="tif" />
426.99
391
1.10(5)·HCl
<img file="00000073.tif" he="42" wi="38" img-content="undefined" img-format="tif" />
433.38
397
1.10(6)·HCl
<img file="00000074.tif" he="42" wi="38" img-content="undefined" img-format="tif" />
416.93
381
1.10(7)·HCl
<img file="00000075.tif" he="45" wi="38" img-content="undefined" img-format="tif" />
451.37
415
1.10(8)·HCl
<img file="00000076.tif" he="45" wi="42" img-content="undefined" img-format="tif" />
447.41
411
1.10(9)·HCl
<img file="00000077.tif" he="45" wi="42" img-content="undefined" img-format="tif" />
430.95
395
1.10(10)·HCl
<img file="00000078.tif" he="42" wi="42" img-content="undefined" img-format="tif" />
426.99
391
1.10(11)·HCl
<img file="00000079.tif" he="45" wi="42" img-content="undefined" img-format="tif" />
461.43
425
1.10(12)·HCl
<img file="00000080.tif" he="45" wi="42" img-content="undefined" img-format="tif" />
444.98
409
1.10(13)·HCl
<img file="00000081.tif" he="47" wi="42" img-content="undefined" img-format="tif" />
479.43
443
1.10(14)·HCl
<img file="00000082.tif" he="42" wi="42" img-content="undefined" img-format="tif" />
441.02
405
1.10(15)·HCl
<img file="00000083.tif" he="38" wi="51" img-content="undefined" img-format="tif" />
475.46
440
1.10(16)·HCl
<img file="00000084.tif" he="42" wi="40" img-content="undefined" img-format="tif" />
459.01
423
1.10(17)·HCl
<img file="00000085.tif" he="47" wi="42" img-content="undefined" img-format="tif" />
493.45
457
1.10(18)·HCl
<img file="00000086.tif" he="42" wi="39" img-content="undefined" img-format="tif" />
441.02
405
1.11(1)·HCl
<img file="00000087.tif" he="34" wi="41" img-content="undefined" img-format="tif" />
394.91
349
1.11(2)·HCl
<img file="00000088.tif" he="39" wi="41" img-content="undefined" img-format="tif" />
398.94
363
1.11(3)·HCl
<img file="00000089.tif" he="39" wi="42" img-content="undefined" img-format="tif" />
412.96
377
1.11(4)·HCl
<img file="00000090.tif" he="39" wi="45" img-content="undefined" img-format="tif" />
465.40
429
1.11(5)·HCl
<img file="00000091.tif" he="42" wi="42" img-content="undefined" img-format="tif" />
426.99
391
1.12(1)·HCl
<img file="00000092.tif" he="34" wi="45" img-content="undefined" img-format="tif" />
394.91
349
1.12(2)·HCl
<img file="00000093.tif" he="34" wi="50" img-content="undefined" img-format="tif" />
398.94
363
1.12(3)·HCl
<img file="00000094.tif" he="34" wi="50" img-content="undefined" img-format="tif" />
412.96
377
1.12(4)·HCl
<img file="00000095.tif" he="34" wi="54" img-content="undefined" img-format="tif" />
465.40
429
1.12(5)·HCl
<img file="00000096.tif" he="30" wi="48" img-content="undefined" img-format="tif" />
426.99
391
6
6
6
Пример 5. Определение антагонистической активности соединений общей формулы 1 по отношению к 5-НТ рецепторам. Вещества общей формулы 1 были испытаны на их способность препятствовать активации 5-НТ рецепторов серотонином. Использовали клетки НЕК 293 (клетки почки человеческого эмбриона) с искусственно экспрессированным рецептором 5-НТ, активация которого серотонином приводит к повышению концентрации внутриклеточного цАМФ. Содержание внутриклеточного цАМФ определяли с помощью реагентного набора LANCE cAMP (PerkinElmer) по методике, описанной производителем набора [http://las.perkinelmer.com/content/Manuals/MAN_LANCEcAMP384KitUser.pdf].
Эффективность соединений оценивали по их способности снижать содержание внутриклеточного цАМФ, индуцированного серотонином.
6
6
50
50
Установлено, что процент ингибирования серотониновых 5-НТ рецепторов в условиях функционального эссея 1 µМ соединениями общей формулы 1, как правило, колеблется в пределах 95-107%, а их активность к серотониновым 5-НТ рецепторам в условиях функционального эссея колеблется в пределах от IC=5 nM до IC=500 nM.
Пример 6. Получение лекарственного средства в форме таблеток. Смешивают 1600 мг крахмала, 1600 мг измельченной лактозы, 400 мг талька и 1000 мг соединения 1.10(2)·HCl и спрессовывают в брусок. Полученный брусок измельчают в гранулы и просеивают через сита, собирая гранулы размером 14-16 меш. Полученные гранулы таблетируют в подходящую форму таблетки весом 560 мг каждая.
Пример 7. Получение лекарственного средства в форме капсул. Тщательно смешивают соединение 1.10(2)·HCl с порошком лактозы в соотношении 2:1. Полученную порошкообразную смесь упаковывают по 300 мг в желатиновые капсулы подходящего размера.
Пример 8. Получение лекарственного средства в форме инъекционных композиций для внутримышечных, внутрибрюшинных или подкожных инъекций. Смешивают 500 мг соединения 1.10(2)·HCl с 300 мг хлорбутанола, 2 мл пропиленгликоля и 100 мл инъекционной воды. Полученный раствор фильтруют и помещают по 1 мл в ампулы, которые запаивают.
Пример 9. Анти-амнестическая активность (ноотропное действие) соединений общей формулы 1.
9.1. Улучшение памяти, нарушенной скополамином.
9.1.1. Ноотропное действие соединений общей формулы 1 в тесте «Пассивное избегание в челночной камере». Эксперименты проводились на взрослых самцах мышей линии BALB/c массой 20-25 г или самцах крыс линии Вистар массой 200-250 г.
В опыте использовалась челночная камера (Ugo Basile, Италия), которая состояла из двух отсеков. Все стенки одного из отсеков были непрозрачными, а второй отсек имел прозрачную крышку. Отсеки соединялись отверстием, которое закрывалось автоматической вертикальной дверцей. Пол темного отсека состоял из поперечных металлических прутьев, на которые могли подаваться импульсы постоянного тока.
В первый день опыта за 30 минут до обучения животным внутрибрюшинно вводили скополамин, который вызывает нарушение памяти. Животным опытной группы дополнительно вводили соединение общей формулы 1, например, соединение 1.10(2)·HCl, в дозах 0,2 мг/кг. Животные контрольной группы получали инъекцию физиологического раствора. В каждой группе использовалось 8 животных.
Животных помещали в светлый отсек и регистрировали латентный период первого захода в темную камеру. При этом дверцу между камерами закрывали, и животное в течение 3 секунд получало наказание током 0,6 мА. После этого животное возвращали в жилую клетку. Через 24 часа животное вновь помещали в светлый отсек челночной камеры и регистрировали латентный период первого захода в темную камеру, общее время пребывания в светлой камере и число заходов в темную камеру. Продолжительность наблюдения составляла 5 минут.
Животные контрольной группы, получившие наказание в темном отсеке, демонстрировали успешную обучаемость, которая выражалась в увеличении латентного периода захода в темный отсек, длительности пребывания в светлом отсеке и уменьшении числа заходов в темную камеру по сравнению с животными из группы, не получавшей наказания. Скополамин вызывал так называемую антероградную амнезию, которая характеризуется нарушением фиксации в долгосрочной памяти новых событий. Это выражалось в виде статистически значимого увеличения латентного периода захода в темный отсек, уменьшения времени пребывания в светлом отсеке и увеличения числа заходов в темный отсек камеры.
Результаты эксперимента показали, что в тесте пассивного избегания, соединения общей формулы 1, в том числе соединение 1.10(2)·HCl обладали способностью уменьшать амнезию (улучшать память), вызванную скополамином.
9.1.2. Ноотропное действие соединений общей формулы 1 в тесте «Распознавание новых объектов».
Эксперимент проводили на взрослых самцах мышей линии SHK. В эксперименте использовали крестообразный плексигласовый лабиринт, который состоял из 4-х тупиковых боковых камер (пронумерованных 1, 2, 3, 4), соединявшихся между собой через пятую центральную камеру. Мышь помещали в центральную камеру и позволяли исследовать лабиринт. Пол очищался после каждого животного. Порядок посещения камер и время визитов регистрировались наблюдателем. Тест заканчивался, когда происходило 13 заходов в тупики. Критерием захода считалось наличие всех четырех лап животного внутри камеры.
Во время обучения животное помещали в лабиринт, в котором в каждой из четырех боковых камер находились по одной одинаковой чашке. Во время теста (спустя 1 час после обучения) две противоположно стоящие чашки были заменены колбами, и животному было позволено исследовать лабиринт. В периоды обучения и тестирования регистрировали время, проведенное животным в каждой боковой камере. Рассчитывали индекс распознавания новых объектов как отношение времени, проведенного в боковых камерах с новыми объектами, к общему времени пребывания в боковых камерах. Появление нового объекта увеличивает время, проведенное животным в камере, по сравнению с фазой обучения (так называемый эффект распознавания новых объектов). Под действием скополамина в дозе 1 мг/кг, введенного внутрибрюшинно за 30 минут до начала обучения, распознавание новых объектов нарушалось, и индекс распознавания снижался.
Однако это влияние скополамина удавалось предотвратить внутрибрюшинным введением соединений общей формулы 1 в дозах 0,05 мг/кг и 0,2 мг/кг за 60 мин до начала обучения. Из полученных результатов следует, что соединения общей формулы 1, например, соединение 1.10(2)·HCl, предупреждают нарушение памяти, вызванное скополамином.
9.2. Улучшение памяти, нарушенной МК-801.
Ноотропное действие соединений общей формулы 1 в тесте «Пассивное избегание в челночной камере».
Эксперимент проводили так же, как описано в примере 9.1.1. В первый день опыта за 30 минут до обучения животным внутрибрюшинно вводили МК-801 (0,1 мг/кг), вызывающий амнезию. Предварительное введение МК-801 значительно снижает эффект обучения, то есть вызывает антероградную амнезию. Параллельно независимым группам мышей до обучения внутрибрюшинно вводили МК-801 в сочетании с исследуемыми соединениями общей формулы 1, например, соединение 1.10(2)·HCl.
Полученные результаты свидетельствуют о способности соединения 1.10(2)·HCl оказывать ноотропное действие.
Пример 10. Анксиолитическая активность соединений общей формулы 1 в тесте «Поведение мышей в приподнятом крестообразном лабиринте». В эксперименте использовали самцов мышей линии BALB/c массой приблизительно 25 г. Животных содержали в клетках (по 5-7 мышей на клетку), обеспечивая свободный доступ к корму и воде. Ни одно из животных не было до этого знакомо с экспериментальной установкой. Каждая экспериментальная группа включала 8 животных.
Использованный метод был ранее описан Листером (Lister R.G. The use of a plus-maze to measure anxiety in the mouse. Psychopharmacology, 1987; 92:180-185). Плексигласовая установка состояла из двух открытых рукавов размером 30×5 см и двух закрытых рукавов размером 30×5×15 см. Боковые рукава были закрыты прозрачным плексигласом и соединялись с центральной площадкой размером 5×5 см. Открытые рукава, центральная платформа и пол были выполнены из черного плексигласа. Аппарат был смонтирован на металлическом основании, которое располагалось над уровнем пола на высоте 38,5 см.
Каждую мышь помещали в центр лабиринта головой к открытому рукаву. На протяжении 5 минут регистрировали число заходов в открытые и закрытые рукава и время, проведенное животными в открытых и закрытых рукавах. Критерием захода считали нахождение всех четырех лап животного в рукаве. Рассчитывали индекс предпочтения как отношение времени, проведенного животным в открытых рукавах, а также числа заходов в открытые рукава, к общему времени пребывания в открытых и закрытых рукавах или, соответственно, к общему числу заходов в рукава обоих типов. Число фекальных болюсов, оставленных мышью, рассматривалось как дополнительный параметр, характеризующий состояние тревоги. В норме животные избегают открытые рукава (индекс их предпочтения составляет 0,2-0,3). Вещества с анксиолитической активностью (транквилизирующей активностью) увеличивают этот показатель до 0,5-0,6 и более, а также уменьшают число дефекаций, не изменяя общую двигательную активность (общее число заходов в рукава).
Животным вводили внутрибрюшинно плацебо, буспирон (5 мг/кг, за 30 минут до обучения), лоразепам (0,05 мг/кг, за 60 минут до обучения) или одно из тестируемых соединений общей формулы 1, например, соединение 1.10(2)·HCl, в дозе 0,05 мг/кг и 0,2 мг/кг. Буспирон и лоразепам вводили в максимальной эффективной дозе, при которой еще не наблюдалось побочного седативного действия, которое выражалось в виде общего снижения исследовательской активности (число визитов в рукава за время теста).
Полученные результаты показали, что соединения общей формулы 1, в том числе соединение 1.10(2)·HCl, проявляют выраженную анксиолитическую активность в тесте приподнятого крестообразного лабиринта, сравнимую со стандартами (Буспирон и Лоразепам),
Пример 11. Антипсихотическая активность соединений общей формулы 1 в тесте «Препульсное торможение вздрагивания у мышей». В экспериментах использовали мышей линии SHK массой 24-30 г. Эксперименты проводили в светлое время суточного цикла животных. Апоморфина гидрохлорид и галоперидол были получены от компании Сигма Кемикалз, США. Апоморфина гидрохлорид растворяли в 0,1% растворе аскорбиновой кислоты, приготовленном на стерилизованной воде, и вводили подкожно за 15 минут до теста. Галоперидол растворяли в стерилизованной воде с использованием эмульгатора Твин 80 и вводили внутрибрюшинно за 60 минут до теста. Соединения общей формулы 1 растворяли в стерилизованной воде и вводили подкожно в дозе 1 мг/кг за 60 минут до теста. Объем вводимой жидкости составлял 10 мл/кг. Контрольным животным вводили 0,1% раствор аскорбиновой кислоты, приготовленный на стерилизованной воде с Твином 80.
Аппарат состоял из камеры, выполненной из прозрачного плексигласа (производитель - компания Коламбус Инструментс, США), размещенной на платформе, которая находилась внутри звукоизолирующего кабинета. В 2 см от платформы находилась высокочастотная звуковая колонка, через которую передавались звуковые стимулы. При вздрагивании животного возникали колебания платформы, которые улавливались аналоговым преобразователем и регистрировались компьютером. Уровень фонового шума составлял 65 дБ. Животные получали по 4 предъявления одиночного тестирующего («пульсового») стимула длительностью 50 мс и громкостью 105 дБ или предваряющего («пре-пульсового») стимула длительностью 20 мс громкостью 85 дБ, за которым через 30 мс следовал пульсовой стимул длительностью 50 мс громкостью 105 дБ. Интервал между повторными предъявлениями пульсового или пре-пульсового в сочетании с пульсовым стимулов составлял 10 с. Ослабление вздрагивания в ответ на пульсовой стимул при наличии пре-пульсового стимула рассчитывали в процентах по отношению к амплитуде вздрагивания в ответ на изолированный пульсовой стимул. Введение апоморфина, который используется в экспериментах на животных для моделирования психото-подобных состояний, вызывало уменьшение препульсного торможения вздрагивания, что отражает снижение способности ЦНС фильтровать сенсорные стимулы.
Результаты эксперимента показывают, что галоперидол (1 мг/кг) и изучавшиеся соединения общей формулы 1, в том числе соединение 1.10(2)·HCl (1 мг/кг), предупреждали нарушение препульсного торможения вздрагивания, при введении апоморфина.
Пример 12. Антидепрессантная активность соединений общей формулы 1.
12.1. Поведение мышей в тесте «Вынужденное плавание Порсолта». В тесте Порсолта и др. (1977, 1978) в качестве модели изучения антидепрессантной активности было предложено выражение отчаяния в поведении. То есть, поведение мыши или крысы в закрытом бассейне, из которого животное не может выбраться, характеризует степень его отчаяния, которая может быть снижена за счет приема антидепрессантов.
В эксперименте использовались самцы мышей линии Balb/C массой 20-30 г. Животных на 15 мин помещали в резервуар (высота 300 мм, диаметр 480 мм), наполненный на 70% водой при 25°С. Через 3-5 мин активность плавания начинала снижаться и чередоваться фазами движения и неподвижности. Животное считалось неподвижным, если оно не двигалось в течение 1,5 сек. Данные последних 5 мин использовались для анализа. В тесте использовалось автоматизированное распознавание движений с помощью видеосистемы и программы Any-maze.
Результаты эксперимента показали, что соединения общей формулы 1, например, соединение 1.10(2)·HCl, вводимые внутрибрюшинно в дозе 0,5 мг/кг на протяжении 4 дней, снижают степень отчаяния, т.е. проявляют антидепрессантную активность.
12.2. Поведение мышей в тесте «Подвешивание за хвост».
Тест подвешивания за хвост был описан Steri et al. (1985) как удобный способ изучения потенциальных антидепрессантов. Предполагается, что вынужденная неподвижность грызунов может служить моделью для исследования депрессивных расстройств у людей. Клинически эффективные антидепрессанты снижают неподвижность, которая наступает у мышей после безрезультатных попыток освободиться, когда их хвост зафиксирован.
В эксперименте использовались самцы мышей линии Balb/C массой 20-30 г. Животных подвешивали липкой лентой за хвост на штативе над горизонтальной поверхностью примерно на высоте 40 см и в течение 3 минут регистрировали общую продолжительность эпизодов полной неподвижности. Животное считалось неподвижным, если оно не совершало никаких движений в течение 1,5 сек. В тесте использовалось автоматизированное распознавание движений с помощью видеосистемы и программы Any-maze. Изучаемые соединения общей формулы 1 вводили внутрибрюшинно в дозе 0,5 мг/кг в течение 4 дней. Препараты сравнения (флуоксетин, дезипрамин) вводили внутрибрюшинно за 15 минут до начала теста.
В данном тесте соединения общей формулы 1, в том числе соединение 1.10(2)·HCl, проявляют антидепрессантную активность, сравнимую с препаратами сравнения Флуоксетин и Дезипрамин.