Способ модификации дрожжей Schizosaccharomyces pombe с помощью Cre-lox системы бактериофага Р1, трансформант, полученный таким способом

1. Способ модификации дрожжей S. pombe, включающий трансформацию в клетку гена, кодирующего Cre-рекомбиназу, под контролем индуцибельного промотора совместно с маркерным геном, интеграцию экспрессионной кассеты, содержащей фрагмент ДНК и маркерный ген, фланкированный loxP-сайтами, выщепление маркерного гена по loxP-сайтам за счет индукции синтеза Cre-рекомбиназы, отличающийся тем, что при трансформации ген, кодирующий Cre-рекомбиназу, совместно с маркерным геном интегрируют в состав хромосомы, при этом маркерный ген фланкирован loxP-сайтами, а после трансформации до интеграции кассеты дополнительно осуществляют выщепление маркерного гена по loxP-сайтам.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве индуцибельного промотора используют природный nmt 1 промотор.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что для интеграции гена, кодирующего Cre-рекомбиназу, и интеграции фрагмента ДНК используют один и тот же маркерный ген.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что интегрируемый фрагмент ДНК экспрессируют в S. pombe.
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что интеграцию кассеты и выщепление маркерного гена по loxP-сайтам проводят многократно.
6. Трансформант дрожжей S. pombe, полученный способом по п. 1, в котором инактивирован или делетирован один или несколько генов алкогольдегидрогеназ, а в хромосому интегрированы один или несколько генов лактатдегидрогеназ.
7. Трансформант по п. 6, в котором инактивирован ген алкогольдегидрогеназы adh1, а в хромосому интегрирована одна или несколько копий гена лактатдегидрогеназы ldh Lactobacillus plantarum.
8. Трансформант по п. 6, в котором инактивирован ген алкогольдегидрогеназы adh1, а в хромосому интегрирована одна или несколько копий гена лактатдегидрогеназы ldh Lactobacillus plantarum и одна или несколько копий гена лактатдегидрогеназы ldh Lactobacillus acidophilus.
9. Трансформант по п. 6, в котором инактивирован ген алкогольдегидрогеназы adh1, а в хромосому интегрирована одна или несколько копий гена лактатдегидрогеназы ldh Lactobacillus plantarum и одна или несколько копий гена лактатдегидрогеназы ldh Lactobacillus amylovorus.
10. Штамм Schizosaccharomyces pombe ВКПМ Y-4224 - продуцент молочной кислоты.
11. Штамм Schizosaccharomyces pombe ВКПМ Y-4248 - продуцент молочной кислоты.
12. Штамм Schizosaccharomyces pombe ВКПМ Y-4249 - продуцент молочной кислоты.
13. Штамм Schizosaccharomyces pombe ВКПМ Y-4250 - продуцент молочной кислоты.
14. Способ микробиологического синтеза молочной кислоты, включающий культивирование дрожжей Schizosaccharomyces pombe в питательной среде, отличающийся тем, что для культивирования используют трансформант по п. 6