Клинические аспекты применения хемилюминесцентного анализа

биология. Радиоэкология. - 1998. - Т.38, Л»!. -С.121-125.

21.Чибрикин В.М., Самовичев Н.Г., Кашинская И.В., Удальцова П.В. Динамика социальных процессов и геомагнитная активность. I. Периодическая составляющая вариаций числа зарегистрированных преступлений в Москве // Биофизика. - 1995. -

Т.40, Х»5. - С. 1050-1053.

22. Чибрикин В.М., Кашинская И.В., Удальцова П.В. Динамика преступности в Москве за 14 лет// Атлас временных вариаций природных, антропогенных и социальных процессов. 4.2. Циклическая динамика в природе и обществе. - М.: Научный мир, 1998. -С.364-366.

23. Чижевский A.JT. Космический пульс жизни. - М.: Мысль, 1995. - 767 с.

24. Ортель С. Космофизические корреляции творческой активности в истории культуры // Биофизика. -1998. - Т.43, Х»4. - С.736-741.

25. Alania M.V., Gil A., Wieliczuk R. Statistical analysis of influence of solar and geomagnetic activities on car accident events // Adv. Space Res. - 2001. - Vol.28, N.4. - P.673-678.

26. Alonso Y. Geophysical variables and behavior: LXXII. Barometric pressure, lunar cycle, and traffic accidents // Percept. Mot. Skills. - 1993. - Vol.77. -P.371 -376.

27. Kay R.W. Geomagnetic storms: association with incidence of depression as measured by hospital admission // Br. J. Psychiatry. - 1994. - Vol.164, N.3. -P. 403-409.

28. Mottaghy F.M., Krause B.J., Kemna L.J. et al. Modulation of the neuronal circuitry subserving working memory in healthy human subjects by repetitive tran-scranial magnetic stimulation // Neurosci. Lett. -2000. - Vol.280, N.3. - P.167-170.

29. O'Connor R.P., Persinger M.A. Geophysical variables and behavior: LXXXII. A strong association between sudden infant death syndrome and increments of global geomagnetic activity - possible support for the melatonin hypothesis//Percept. Mot. Skills. - 1997. -Vol.84, N.2.-P.395-402.

30. O'Connor R.P., Persinger M.A. Geophysical variables and behavior: LXXXV. Sudden infant death, bands of geomagnetic activity, and pel (0,2 to 5 IIz) geomagnetic micropulsations // Percept. Mot. Skills. - 1999. -Vol.88, N.2. - P.391-397.

31. Oliviero A., Di Lazzaro V., Piazza O. Et al. Cerebral blood flow and metabolic changes produced by repetitive magnetic brain stimulation // J. Neurol. - 1999. -Vol.246^ N. 12. -P.] I 64-1 168.

32. Persinger M.A. Geophysical variables and behavior: LXXIX. Overt limbic seizures are associated with concurrent and premidscotophase geomagnetic activ-

ity: synchronization by prenocturnal feeding // Percept. Mot. Skills. - 1995. - Vol.81, N.I. - P.83-93.

33. Persinger M.A. Wars and increased solar-geomagnetic activity: aggression or change in intraspecies dominance? //Percept. Mot. Skills. - 1999. - Vol.88, N.2. -Pt.2. - P. I 35 I -1 355.

34. Persinger M.A., St. Pierre L.S., Koren S.A. Geophysical variables and behavior: XCI. Ambulatory behavior in rats following prenatal exposures to complex magnetic fields designed to interact with genetic espres-sion // Percept. Mot. Skills. - 2001. - Vol.92, N.I. -P.183-192.

35. Persinger M.A., O'Connor R.P. Geophysical variables and behavior: CHI. Days with sudden infant deaths and cardiac arrythmias in adults share with PCI geomagnetic pulsations: implications for pursuing mechanism // Percept. Mot. Skills. - 2001. - Vol.92, N.3. -Pt.l. -P.653-654.

36. Persinger M.A. Geophysical variables and behavior: XCVIII. Ambient geomagnetic activity and experiences of "memories": interactions with sex and implications for receptive psi experiences // Percept. Mot. Skills. - 2002. - Vol.94, N.3. - Pt.2. - P.1271-1282.

37. Raps A., Stoupel E., Shimshoni M. Geophysical variables and behavior: LXIX. Solar activity and admission of psychiatric patients // Percept. Mot. Skills. -1992. - Vol.74, N.2. - P.449-450.

38. Schnabel R., Bedlo M., May T.W. Is geomagnetic activity a risk factor for sudden unexplained death in epilepsies? // Neurology. - 2000. - Vol.54, N.4. - P.903-908.

39. Schnabel R., Bedlo M., Burmester L. Is sudden unexplained death in adult epileptic patients associated with geomagnetic disturbances at the day of death or

- the 4 days before? // Neurosci. Lett. - 2002. -Vol.329, N.3. -P.26 I .

40. Stoupel E., Abramson E., Sulkes J. Et al. Relationship between suicide and myocardial infarction with regard to changing physical environmental conditions //Int. J. Biometeorol. -’ 1995. - Vol.38, N.4. - P. I 99-203

41. Stoupel E., Petrauskiene J., Kalediene R. et al. Clinical cosmobiology: the Lithuanian study 1990-1992 // Int. J. Biometeorol. - 1995. - Vol.38, N.4. - P.204-208.

42. Stoupel E., Domarkiene S., Radishauskas R., Abramson E. Sudden cardiac death and geomagnetic activity: links to age, gender and agony time // J. Basic Clin. Physiol. Pharmacol. - 2002. - Vol.13, N.I. -P. 11-21."

43. St. Pierre L., Persinger M.A. Geophysical variables

and behavior: LXXXIV. Quantitative increases in

group aggression in male epileptic rats during increases in geomagnetic activity // Percept. Mot. Skills. - 1998. - Vol.86, N.3. - P. 1392-1 394.

© ВИННИК Ю.С., САВЧЕНКО А.А., ТЕПЛЯКОВА О.В., ЯКИМОВ С.В., ТЕПЛЯКОВ Е.Ю. -

КЛИНИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ПРИМЕНЕНИЯ ХЕМИЛЮМИНЕСЦЕНТНОГО АНАЛИЗА

Ю.С. Buhh.uk, А. А. Савченко, О.В. Теплякова, С.В. Якимов, Е.Ю. Тепляков.

Резюме. В обзоре представлены возможности современных методик хемилюминесценции в диагностике предпатологических состояний, прогнозировании тяжести течения заболевания, контроле безопасности и эффективности проведения окислительной терапии. Основными дос-

тоинствами хемилюминесцентного анализа являются простота, высокая чувствительность, экспрессность.

Ключевые слова: хемилюминесценция, клинические аспекты.

История изучения хемидюминесценции (ХЛ) биологических объектов насчитывает около пяти десятилетий с тех пор, как итальянские астрономы Л. Колли и У. Фаччини обнаружили свечение неиигментированных тканей растений [28]. Если в первых работах интерес к ХЛ был связан, в основном, с поисками принципиальных доказательств образования возбужденных и свободнорадикальных состояний в темновых биологических реакциях, то сейчас ХЛ является но существу обычным лабораторным методом, широко используемым в клинике [5,8,30]. Успехи в этой области во многом связаны с совершенствованием техники регистрации слабых световых потоков, позволяющей улавливать излучение отдельных клеток и получать микроскопическое изображение свечения [10,19].

На сегодняшний день химические и физические явления, лежащие в основе превращения энергии биохимических реакций в световое излучение, практически расшифрованы [6,31,38]. Хе-мнлюмннесцентная реакция включает следующие основные стадии: восстановление одного из участников реакции и окисление второго, приводящее к накоплению химической энергии в системе; перенос электрона на один из более высоких энергетических уровней и образование продукта реакции в электронно-возбужденном состоянии; высвечивание фотона при переходе молекулы из электронно-возбужденного в основное состояние (люминесценция) [33]. Разнообразие реальных механизмов хемилюминесцентных реакций определяется природой и энергетикой отдельных стадий, структурой реагентов, большим числом промежуточных и конечных продуктов [34].

Сверхслабое свечение или собственное излучение клеток и тканей практически всегда сопровождает процессы жизнедеятельности и может быть обусловлено тремя типами реакций: реакциями активных форм кислорода (АФК), реакциями ценного (иерекисного) окисления липидов, реакциями с участием оксида азота [25,39].

Главным источником АФК в организме человека и животных служат клетки-фагоциты: грану-лоцнты, моноциты крови и тканевые макрофаги [18]. Непосредственной причиной собственной хемшноминесценции активированных фагоцитов считают образование синглетного кислорода в реакциях между кислородными радикалами, перекисью водорода и гииохлоритом [38].

Одной из основных составляющих собственной (неактивированной) хемшноминесценции животных клеток и тканей является свечение, сопровождающее ценное окисление липидов в мембранных структурах клеток и лииоиротеинах крови [13,15]. В реакции взаимодействия двух радикалов лииоиероксида образуются молекулы кето-на и кислорода в электронно-возбужденном со-

стоянии, которые затем переходят в основное состояние, испуская квант света (фотон) [6]. Увеличение продукции радикалов в системе сопровождается ростом интенсивности ХЛ. Вещества-антиоксиданты, реагирующие со свободными радикалами и тормозящие ценное окисление, одновременно подавляют хемилюминесценцию [13]. При этом подавление собственной хемилюминесцен-ции тканей и клеток антиоксидантами, например токоферолом, указывает на то, что это свечение обусловлено реакциями ценного окисления липидов. С другой стороны, изучая влияние различных природных и синтетических соединений на кинетику ХЛ, можно получать представление о способности этих веществ препятствовать повреждающему действию свободных радикалов [12,14, 17].

Оксид азота выделяется многими типами клеток и является одним из основных регуляторов внутриклеточных процессов. Участие реакций нитроксида в собственной хемшноминесценции тканей животных было показано в опытах Джулио Терренса и сотрудников (1994), которые изучали свечение иерфузируемого легкого. Авторы регистрировали существенное снижение свечения при введении в иерфузат нитро-Ь-аргинина, ингибитора МО-синтазы. Установлено, что источником ХЛ является реакция иероксинитрита - токсичного продукта взаимодействия окиси азота и суиер-окснда, - с белком [25]. Природа процессов, определяющих собственное свечение ткани, может меняться при изменении ее состояния. В опытах того же автора было показано, что у животных с пневмонией ингибитор МО-синтазы слабо влиял на свечение органа, в то время как суиероксид-днсмутаза и ловушки липидных радикалов вызывали существенное уменьшение интенсивности свечения. Это позволило предположить, что при воспалении на первый план выходят реакции, связанные с активацией клеток-фагоцитов и образованием ими активных форм кислорода, а затем -липидных перекисей, тогда как в норме за свечение ответственны реакции окиси азота.

Собственная хемилюминесценция, сопровождающая биохимические реакции в клетках и тканях, отличается низкой интенсивностью, что явилось основным препятствием на пути к широкому ее использованию в аналитических целях [8,10]. Значительное распространение получило измерение хемшноминесценции в присутствии активаторов (индукторов). Химическими активаторами (зондами ХЛ) называют соединения, вступающие в реакции с активными формами кислорода или органическими свободными радикалами, в ходе которых образуются молекулы продуктов в возбужденном электронном состоянии [6]. Наблюдаемое при этом свечение связано с переходом молекул в основное состояние, что приводит к

высвечиванию фотонов. Известными представителями группы химических активаторов являются люминол и люцигенин.

Физические активаторы не вступают в химические реакции и не влияют на ход реакций, сопровождающихся свечением, но, тем не менее, многократно усиливают интенсивность хемилю-минесценции [5]. К ним относятся некоторые лю-минесцирующие соединения, усиливающие ХЛ при ценном окислении липидов, в том числе родамин Ж, ализариновый красный, конго красный, фуксин кислый, метиленовый голубой, акридиновый оранжевый, некоторые иорфирины и редкоземельные металлы. Поиск веществ-активаторов, не оказывающих влияния на ход реакций нере-кисного окисления, но многократно увеличивающих интенсивность свечения, продолжается в настоящее время [27].

В широкой клинической практике хемилюми-несцентный анализ используется в трех основных вариантах: ХЛ сыворотки крови и других биологических жидкостей, клеточная ХЛ и хемилюми-несцентный иммунный анализ [6].

Индуцированная ХЛ сыворотки крови, но мнению большинства исследователей, является наиболее чувствительным и объективным методом изучения процесса иерекисного окисления липидов [12,14]. Реакции ценного окисления отличаются большой сложностью и включают в себя целый ряд быстронротекающих стадий. Основные участники реакций, свободные радикалы, обычными методами химического анализа определены быть не могут из-за своей крайне высокой реакционной способности и неустойчивости в биохимических системах. Поэтом) регистрация интенсивности свечения в режиме реального времени представляет собой ценную информацию для анализа механизма реакций иерекисного окисления липидов [39].

Уровень ХЛ сыворотки крови является отражением подвижного равновесия, объективным интегральным показателем соотношения интенсивности ПОЛ и активности биологических анти-оксндантных систем организма. Регистрация ХЛ тканей и биологических жидкостей лежит в основе многообразия методов выявления ранних стадий нарушения защитно-ирисиособительных реакций организма, диагностики состояния иредбо-лезни, определения прогноза и тяжести заболевания, выбора этиоиатогенетического воздействия и контроля состояния больного [14,15,29].

Концентрация свободных радикалов в исследуемом объекте определяется но значению максимальной интенсивности сигнала (I тах) и све-тосуммы (Б). Антиоксидантный потенциал пробы коррелирует со скоростью падения кривой хеми-люминесценции (1§ а) и коэффициентом К, определяемым но соотношению I тах/Б [12]. При острых воспалительных процессах наблюдается увеличение I тах и Б, при этом степень увеличения пропорциональна тяжести воспалительного процесса [8]. Снижение значений указанных показа-

телей более чем в два раза регистрируется при наличии злокачественных новообразований [10].

Анализ кинетики хемилюминесцентных реакций различных биологических жидкостей (сыворотки крови, мочи, ликвора, слюны, раневого, плеврального и перитонеального экссудата) позволяет осуществлять дифференциальную диагностику несиецифического воспаления и онкологического процесса, функционального и органического поражения [3,4,22]. Так, определение интенсивности ХЛ сыворотки крови лежит в основе эксиресс-метода дифференциальной диагностики приступа абдоминальной формы периодической болезни и заболеваний, протекающих с картиной «острого живота», и позволяет уменьшить частоту необоснованных хирургических вмешательств [2].

Существенный интерес представляет изучение влияния на ХЛ разнообразных внешних агентов, обладающих как про-, так и антиоксидантным действием. В клинической практике способность антиоксидантов подавлять люцигенинзависимую хемилюминесценцию используется для оценки их количественного содержания в биологическом материале [24]. С другой стороны, анализ интенсивности ХЛ является адекватным критерием эффективности и безопасности антиоксидантной и окислительной терапии. Исследование ХЛ сыворотки крови позволило подтвердить, в частности, эффективность озонотераиии в компенсации свободнорадикального окисления [10,12,14]. Ю.К. Новиковым отмечена нормализация показателей ХЛ у больных атонической формой бронхиальной астмы при включении в комплекс лечения препаратов интала и рутина, обладающих антиоксидантным воздействием [17].

По мнению Е.В. Иванишкиной и соавт., наиболее информативным хемилюминесцентным показателем контроля эффективности микроволновой резонансной терапии в лечении язвенной болезни является суммарная антиоксидантная активность сыворотки крови [11]. Изучение динамики ХЛ раневого экссудата у больных с длительно незаживающими ранами и трофическими язвами нижних конечностей позволяет прогнозировать скорость процесса репарации и оценить эффективность влияния различных средств местного лечения [4,22].

Под термином "клеточная хемилюминесцен-ция" понимают все виды свечения, сопровождающие химические реакции в живых клетках, в том числе биолюминесценцию - свечение, обусловленное определенными ферментативными реакциями и видимое простым глазом; "митогенети-ческое излучение" - свечение в ультрафиолетовой области спектра, оказывающее воздействие на другие клетки; а также все виды "сверхслабого свечения" [38]. Широкое применение в клинической практике нашел метод оценки иерекисной резистентности эритроцитов, основанный на регистрации индуцированной ХЛ эритроцитов и отражающий интенсивность ПОЛ на мембране клеток [39].

В последнее время, однако, термин "клеточная XJI" чаще употребляется в более узком смысле: так называют свечение, сопровождающее продукцию активных форм кислорода клетками-фагоцитами. В основе этого типа клеточной XJ1 лежит образование суиероксидного анион-радикала в результате одноэлектронного восстановления молекулярного кислорода ферментной системой НАДФН-оксидазой [6]. Дальнейшие превращения этого первичного радикала сопровождаются хе-милюминесценцией. Высокая чувствительность данного метода, абсолютная безвредность ио сравнению с радиоиммунологическим анализом, а также большой научный интерес к деятельности клеток-фагоцитов привели к тому, что число публикаций но данному вопросу ежегодно исчисляется тысячами, а сфера применения метода постоянно растет [1,20,26]. XJI анализ позволяет исследовать механизмы активации фагоцитов (иоли-морфноядерных лейкоцитов, тканевых макрофагов), оценить иммунореактивность организма иод влиянием иммунодеирессивных и стимулирующих воздействий, выявить недостаточность оисо-нических факторов сыворотки, в том числе индуцирующихся при активации альтернативного пути комплемента, специфических антител [23,36].

В качестве объектов фагоцитоза при изучении стимулированной XJ1 используют различные не-оисонизированные и оисонизированные частицы (латекс, зимозан, бактерии), иммунные комплексы, ионофоры, промоторы опухолей, фрагменты С5-комионента комплемента, арахидоновую кислоту и другие [9,35]. Функциональный ответ лейкоцитов на воздействие стимулов in vitro является специфическим в зависимости от вводимого антигена и метаболического состояния клеток, что позволяет с одной стороны установить возбудителя при ряде инфекционных заболеваний, с другой - оценить величину метаболического резерва лейкоцитов [4,20].

Метод регистрации XJ1 клеток крови позволяет проводить изучение и отбор иммуномодулирующих фармакологических препаратов на основании сравнения люминолзависимой стимулированной хемилюминесценции до и после введения в пробу с лейкоцитарной взвесью исследуемых препаратов [16,32,35,36].

Хемилюминесцентный тест является высокочувствительным и безопасным методом диагно-

стики непереносимости лекарственных средств. В случае непереносимости инкубация цельной крови с раствором этих препаратов в терапевтических концентрациях сопровождается достоверным снижением генерации активных форм кислорода нейтрофилами, стимулированными несиецифиче-скими активаторами [21]. Снижение люминолзависимой хемилюминесценции цельной крови при непереносимости лекарственного препарата отмечается независимо от химических свойств н принадлежности медикаментов к фармакологическим группам [23,37]. Одним из широко известных вариантов хемилюминесцентного анализа является методика "Гемокод", позволяющая выявлять индивидуальную непереносимость пищевых продуктов in vitro.

Возможности хемилюминометрии значительно расширились после разработки ее модификаций, основанных на хемилюминесцентном иммунном анализе [7]. Для определения содержания в средах организма антигенов, антител и биологически активных веществ используется связывание одного из реагентов с хемилюминесцентной меткой, изменяющей энергетическое состояние во время иммунологической реакции антиген-антитело.

Хемилюминесцентной меткой чаще всего служат низкомолекулярные соединения, ио химической структуре близкие люминолу и люцигени-ну, такие как изолюминол, сукцинилированный люминол, эфиры акридиния и другие [39]. Присоединение метки производится либо к антигену, т.е. низкомолекулярному соединению (хемилюминесцентный иммунный анализ), либо к антителу на этот антиген (иммунохемилюминометриче-ский анализ). Оба метода направлены на эксиресс-оиределение биологически активных низкомолекулярных соединений (гормонов, антител, лимфо-кинов и др.) в сверхнизких концентрациях [8].

Таким образом, анализ данных литературы демонстрирует большие возможности применения хемилюминесцентного анализа в клинико-биохимических лабораториях для целей медицинской диагностики. К перспективам использования метода можно отнести расширение круга изучаемых заболеваний, уточнение патогенеза болезней и прогнозирование их исхода, динамическое наблюдение за эффективностью терапии, определение новых направлений лечебно-ирофилактичес-кого воздействия.

THE CLINICAL ASPECTS OF APPLICATION OF CHEMILUMINESCENCE METHODS IN MEDICINE

Yu.S. Vinnik, A.A. Savchenko, O.V. Teplyakova, S.V. Yakimov, E.Yu. Teplyakov

The possibilities of up date methods of chemiluminescent analysis in diagnosis of a disease, prognosis of different pathologic conditions, control safety and efficacy of oxygen therapy are discussed. The main advantage of bioluminescence methods is its high sensitiveness and specificity along with its simplicity.

Литература

1. Абдрахманова Л.М., Фархутдинов У.Р., Фархутди-нов P.P. Особенное!и экспрессии активных форм кислорода клочками крови у больных хроническим бронхитом // Тер. архив. - 2001. - №3. - С.21.

Арутюнян В.М., Григорян Э.Г., Закарян АЛ-:., Акопян Г.С. Дифференциальная диагностика приступа абдоминальной формы периодической болезни и хирургических заболеваний, протекающих с картиной "острого живота", с помощью спонтанной хс-

милюминссцснции сыворотки крови 11 Клин, медицина. - 1997. -№ 1 . - С. 16-20.

3. Белых В.В., Окладников Г.И., Каменская В.В. и др. Кинетика нсрскисной хсмилюминссцснции цереброспинальной жидкосіи // Лаб. дело. - 1992. -№1. -С.55-58.

4. Болгов В.Ф., Мирошин С.И. Состояние функциональной активности нейтрофильных лейкоцитов в раневом отделяемом на фоне озонотсрании // Озон в биологии и медицине. Матер. II Вссрос. науч.-нракт. конф. - Н.Новгород, 1995. - С.13.

5. Васильев Р Ф. Биохсмилюмимссцсмция. - М.: Высшая школа, 1983. - С.95.

6. Владимиров Ю.А., Потапенко А.Я. Физико-хими-чсскис основы фотобиологичсских процессов. -М.: Высшая школа, 1989. - 167 с.

7. Власенко Н.Б., Гаврилова И.М. Научные основы и нсрснсктивы применения в иммунохимичсских методах анализа хсми- и биолюмимссцсмтмых реакций // Журн. Всссоюз. хим. о-ва им. Д.И. Мсндс-лсссва. - 1989. -№1. - С.24-29.

8. Гитсльзон И.И., Сандалова Т.П. Перспективы применения биолюминссцснт пых методов в медицине // Врачебное дело. - 1990. - Х;:9. - С.31-34.

9. Дорохина Н А., Савченко А.А., Чссноков А.Б. Использование специфических антигенных препаратов в качестве индукторов дыхательного взрыва лейкоцитов крови при хсмилюминссцснт ном анализе // Иммунология. - 2001. - №1. - С.39-43

10. Нрмолин С.В., Родичсв Б.С., Кузьмина И.И Био-хсмилюминомстр БХЛ-06 - система контроля окислительных лечебных технологий Озон з биологии и медицине. Матер. II Вссрос на\ч-нракт. конф. - Н.Новгород, 1995. - С.63-64.

11. Иванишкина И.В., Подонригорова В.Г . Каневский А.С., Азизова О.А. Значение хсмилюмимсс-цемтмых тестов в оценке эффективности лечения язвенной болезни микроволновой резонансной терапией // Клин, медицина. - 2000. - ХїЗ. - С 39-41.

12. Конторшикова К Н., Бархоткина Т.М.. Щербань Н.Г. Состояние системы ПОЛ-АОС у лиц с нсйроссн-сорной тугоухостью но данным БХЛ Местное и парентеральное использование озонотсрании в медицине. Матер. I междунар науч.-нракт. конф. -Харьков, 2001. - С.124-125.

13. Косоланов В.А., Островский О.В., Спасов А.А. Влияние антиоксидант мых средств на процессы хсмилюминссцснции // Свободные радикалы, антиоксиданты и болезни человека. Росс. нац. науч.-нракт. конф. Сб. трудов. - Смоленск, 2001. - С.40-

41.

14. Кошелева И.В., Иванов О.Л., Обухов Ю.В., Куликов А.Г. Оценка эффективности озонотсрании при экземе но показателям свободно-радикального окисления // Озон и методы эфферентной терапии в медицине. Матер. IV Вссрос. конф. - Н.Новгород, 2000. -С2 1 .

15. Кузьмина И.И., Псрстягин С.П., Сашснков В.А. и др. Роль свободно-радикального окисления в патогенезе ожоговой болезни, методы контроля и коррекции // Озон и методы эфферентной терапии в медицине. Матер. III Вссрос. конф. - Н.Новгород, 1998. -С.23-24.

16. Насонов И.Л., Цветкова И.С., Тов Н.Л. Селективные ингибиторы циклооксигсназы-2: новые пер-

спективы лечения заболеваний человека // Терапевтический архив. - 1998. -Х;: 5. - С.8-14.

17. Новиков Ю.К. Свободнорадикальнос окисление и антирадикальная защита у больных бронхиальной астмой // Клин, медицина. - 2002. - №3. - С.12-17.

18. Павленко Р. А., Куденко Ю.А. Хсмилюминссцснт -ный метод определения окислительной активности нейтрофилов в процессе фагоцитоза // Лаб. дело. -1988. -№ 1 . -С.35-37.

19. Пичугин А.В., Бутаков А.А., Щсльцина Т.Л., Пинс-гин Б.В. Сравнение результатов определения функциональной активности фагоцитирующих клеток методом люминолзависимой хсмилюминссцснции на приборе хсмилюминомстр-3603 (Москва) и 1251 LUMINOMHTHR ( L К В, Швеция) // Иммунология. - 1993. - №3. - С.59-62.

20. Рсзайкина А.В., Куршакова Т.С., Колисва М.М., Федоров С.М. Хсмилюминссцснт ный анализ функционального состояния клеточного и гуморального звеньев системы нейтрофилыюго фагоцитоза при рецидивирующей вирусной инфекции Herpes simplex 11 Иммунология. - 1995. - J%3. -С.21-23.

21. Рсшстова Н.В., Дидковский Н.А., Литвиненко Н.Н. Хсмилюминссцснт ный способ диагностики непереносимости лекарственных средств // Клиническая лаб. диагностика. - 1997. - J%5. - С.83-84.

22. Ромм А.Р., ІІІсрстнсв, М.П., Волков, В.В., Владимиров Ю.А. Дсйст вис лазерного излучения на нс-рскисную хсмилюминссцснцию раневого экссудата // Бюлл. экснсрим. биол. и мед. - 1986. -J%10. -С.426-428.

23. Смолкина Т.В., Иорданова А.И., Юдин С.М., Никитин А.В. Влияние нсфлоксацина на люминолза-висимую хсмилюминссцснцию и адгезию лейкоцитов // Антибиотики и химиотерапия. - 1995. -J%2. -С.32-35.

24. Чсрсмисина З.П., Суслова Т.Б., Коркина Л.Г. Хсмилюминссцснт нос определение активности су-нсроксиддисмутазы // Клин. лаб. диагностика.

1 994.-№1 . -С22-23.

25. ІІІсрстнсв М.II. Роль нарушения барьерной и матричной функции липидного слоя биологических мембран в патологии // Вопросы хсмилюминссцснции. - 1990. -№ 1 . -С. 1 9-20.

26. Эберт Л.Я., Марачсв С.И., Чукичсв А.В. и др. Модификация метода изучения функциональной активности моноцитов //Лаб. дело. - 1983. - J%2. -С.23-24.

27. Ярош О.Г. Активация хсмилюминссцснции сыворотки крови различными люминофорами // Клин, медицина. - 2002. - J%3. - С.23.

28. Colli L., Facchini U. Nuovo cimento. - 1954. -№1. -P.150-153.

29. Czech W., Barbisch М., Tenscher K. et al. Chemotac-tic 5-oxo-eicosatetraenoic acids induce oxygen radical production, Ca2+-mobilization, and actin reorganization in human eosinophils via a pertussis toxin-sensitive G-protein // J. Invest. Dermatol. - 1997. -Vol.108,N.I. - P.108-1 12.

30. De Sole P., Lippa S., Luttaru G.P. et al. Luminescent

assays: perspectives in endocrinology and clinical

chemistry. - New York: Raven Press, 1982. - 268 p.

31. Heberer М., During М., Hrnst M. et al. Analytical applications of bioluminescence and chemiiuminescen-ce. - New York: Acad. Press, 1984. - 360 p.

32. Neumuller J., Tohidast-Akrad M. Comparative in vitro investigations of the influence of mofebutazone, phenylbutazone and diclofenac on phagocytosis and respiratory burst of human peripheral blood leucocytes // Arzneimittel-Forschung. - 1994. - Vol.44, N.5. -P.636-641.

33. Nkamura Runic, Nomoto Keiko // Free Radic. Biol. Med. - 1990. -Suppl.l. - P.321.

34. O'Kane D.L. // J. Bioluminescence and Chemi-luminescene. - 1997. - N.I. - P.30.

35. Olinescu R., Ilertoghe J., Savoiu D. e.a. Steroid hormones may modulate the chemiluminescence emission produced by polymorphonuclear leukocytes // Romanian J. of Internal Medicine. - 1994. - Vol. 32, N.I. -P.37-46.

36. Olinescu R., Radu D., Pintea G., Militaru M. Evaluation of the therapeutic efficiency of voltarene by using the in vitro chemiluminescence emitted by leukocytes polymorphonuclear // Romanian J. of Internal Medicine. - 1991. -N.3-4. - P. 199-204.

37. Phillips T.R., Yang W.C., Schultz R.D. The effects of glucocorticosteroids on the chemiluminescence response of bovine phagocytic cells // Veterinary Immunology and Innunopharmacology. - 1987. - N.3. -P.245-256.

38. Sanville C.Y., Capone J.J., Brennan P.C. Cellular

chemiluminescence. - Boca Raton: CRC Press. -

I 987.-258 p.

39. Vladimirov Yu.A., Sherstnev M P. Biophysical chemiluminescent analysis // Physicochemical Aspects of Medicine Rewiews. Soviet Medical Reviews. Section B. - Harwood Academic Publishers GMBH. -1991.-Vol.2.-P. 1-44.

© БЫКОВ Ю.Н., ЛЕОНТЬЕВА Ю.М., ЧЕРНЫХ М.А. -

КЛИНИЧЕСКИЕ, ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ, ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ В ДИАГНОСТИКЕ ДЕБЮТА РАССЕЯННОГО СКЛЕРОЗА

Ю.Н. Быков, Ю.М. Леонтьева, М.А. Черных.

Резюме. В настоящем обзоре представлены современные данные о начальных проявлениях рассеянного склероза, являющего хроническим, инвалидизирующим заболеванием нервной системы. Освещены существующие методы диагностики при рассеянном склерозе. Особое

внимание уделено нейроофтальмологическим Ключевые слова: рассеянный склероз, дебют,

Рассеянный склероз (РС) - хроническое, прогрессирующее заболевание центральной нервной системы, которое проявляется рассеянной неврологической симптоматикой и имеющее ремитирующее течение на ранних стадиях (в типичных случаях) [3,4]. Это заболевание дебютирует преимущественно в молодом возрасте. Патоморфология заключается в демиелинизации белого вещества головного и сиинного мозга [3,4,5,14,19,20].

Распространенность РС растет во многих странах мира, что, но мнению многих авторов, связано не только с удлинением жизни больных, но также и с истинным увеличением заболеваемости [6,24]. Принято выделять три зоны, различающиеся но показателю распространенности РС. Зона высокого риска (Северная и Центральная Европа, Канада, ряд областей США и России, юг Австралии и Новой Зеландии) - распространенность более 50 случаев на 100000 населения. Зона среднего риска (Западная, Восточная и Южная Европа, большинство областей США и России, Индия, Северная и Центральная часть Австралии, юг Африки, некоторые области ближнего Востока и Южной Америки) - распространенность от 10 до 50 случаев на 100000 населения. Зона низкого риска (большинство регионов Азии, Африки и Южной Америки) - распространенность менее 10 случаев на 100000 населения [3,4]. Если раньше существовали четкие эпидемиологические характеристики: высокая частота среди лиц европейской расы, высокая частота встречаемости РС в северных регионах, возраст при дебюте заболе-

исследованиям. методы диагностики.

вания от 18 до 45 лет, большая частота встречаемости среди женщин, изменение риска РС при смене зон проживания, - то сейчас увеличивается частота случаев РС с клиническим дебютом в детском возрасте и у лиц старше 45 лет, отмечается тенденция к повышению частоты РС во многих популяциях [9,16,18].

Несмотря на многочисленные многолетние исследования, причина возникновения РС остается неизвестной. Наиболее распространенной в настоящее время является теория мультифактори-альной этиологии, то есть сочетание внешних и генетических факторов [3,4,14,23]. Исследования но методу генетического скрининга доказали мультигенность заболевания. Наиболее связанными с РС оказались определенные локусы на 3, 5, 6, 10, 18, 19-й хромосомах. Среди внешних факторов отдельное место занимают инфекционные агенты, которые обладают как непосредственным цитоиатическим действием, так и индуцируют развитие аутоиммунных реакций на антигены миелина [3,4,14]. Кроме инфекции обсуждается участие и других внешних факторов: хронические интоксикации, особенности питания, ухудшение экологической обстановки, хронический психоэмоциональный стресс [14].

Выявление изменений структуры мозга при магнитно-резонансной томографии (МРТ) и их анализ с учетом клинической картины и данных дополнительных инструментальных и лабораторных исследований становится важным инструментом в диагностике вариантов РС [15]. МРТ голов-