АТТЕНУИРОВАННЫЕ ШТАММЫ Mycoplasma gallisepticum

1. Живая аттенуированная бактерия Mycoplasma gallisepticum, которая проявляет пониженную экспрессию белка, имеющего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
2. Бактерия по п.1, где указанная бактерия проявляет по меньшей мере на 25% меньшую экспрессию указанного белка относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
3. Бактерия по п.2, где указанная бактерия проявляет по меньшей мере на 50% меньшую экспрессию указанного белка относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
4. Бактерия по п.3, где указанная бактерия проявляет по меньшей мере на 75% меньшую экспрессию указанного белка относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
5. Бактерия по п.1, где указанная бактерия дополнительно проявляет пониженную экспрессию пируватдегидрогеназы относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
6. Бактерия по п.1, где указанная бактерия дополнительно проявляет пониженную экспрессию фосфопируватгидратазы относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
7. Бактерия по п.1, где указанная бактерия дополнительно проявляет пониженную экспрессию 2-дезоксирибозо-5-фосфатальдолазы относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
8. Бактерия по п.1, где указанная бактерия дополнительно проявляет пониженную экспрессию рибосомального белка L35 относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
9. Бактерия по п.1, где указанная бактерия дополнительно проявляет пониженную экспрессию пируватдегидрогеназы, фосфопируватгидратазы, 2-дезоксирибозо-5-фосфатальдолазы и рибосомального белка L35 относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
10. Вакцинная композиция, содержащая:
(а) живую аттенуированную бактерию Mycoplasma gallisepticum, которая проявляет пониженную экспрессию белка, имеющего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа, и
(б) фармацевтически приемлемый носитель.
11. Вакцинная композиция по п.10, где указанная бактерия проявляет по меньшей мере на 25% меньшую экспрессию указанного белка относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
12. Вакцинная композиция по п.11, где указанная бактерия проявляет по меньшей мере на 50% меньшую экспрессию указанного белка относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
13. Вакцинная композиция по п.12, где указанная бактерия проявляет по меньшей мере на 75% меньшую экспрессию указанного белка относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
14. Вакцинная композиция по п.10, где указанная бактерия дополнительно проявляет пониженную экспрессию пируватдегидрогеназы относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
15. Вакцинная композиция по п.10, где указанная бактерия дополнительно проявляет пониженную экспрессию фосфопируватгидратазы относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
16. Вакцинная композиция по п.10, где указанная бактерия дополнительно проявляет пониженную экспрессию 2-дезоксирибозо-5-фосфатальдолазы относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
17. Вакцинная композиция по п.10, где указанная бактерия дополнительно проявляет пониженную экспрессию рибосомального белка L35 относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
18. Вакцинная композиция по п.10, где указанная бактерия дополнительно проявляет пониженную экспрессию пируватдегидрогеназы, фосфопируватгидратазы, 2-дезоксирибозо-5-фосфатальдолазы и рибосомального белка L35 относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
19. Способ вакцинации животного против инфекции Mycoplasma gallisepticum, включающий введение животному иммунологически эффективного количества вакцинной композиции, причем указанная вакцинная композиция содержит живую аттенуированную бактерию Mycoplasma gallisepticum, имеющую пониженную экспрессию белка, имеющего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
20. Способ по п.19, где указанная бактерия проявляет по меньшей мере на 25% меньшую экспрессию указанного белка относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
21. Способ по п.20, где указанная бактерия проявляет по меньшей мере на 50% меньшую экспрессию указанного белка относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
22. Способ по п.21, где указанная бактерия проявляет по меньшей мере на 75% меньшую экспрессию указанного белка относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
23. Способ по п.19, где указанная бактерия дополнительно проявляет пониженную экспрессию пируватдегидрогеназы относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
24. Способ по п.19, где указанная бактерия дополнительно проявляет пониженную экспрессию фосфопируватгидратазы относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
25. Способ по п.19, где указанная бактерия дополнительно проявляет пониженную экспрессию 2-дезоксирибозо-5-фосфатальдолазы относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
26. Способ по п.19, где указанная бактерия дополнительно проявляет пониженную экспрессию рибосомального белка L35 относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
27. Способ по п.19, где указанная бактерия дополнительно проявляет пониженную экспрессию пируватдегидрогеназы, фосфопируватгидратазы, 2-дезоксирибозо-5-фосфатальдолазы и рибосомального белка L35 относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа.
28. Способ идентификации аттенуированных клонов Mycoplasma gallisepticum, включающий:
(а) помещение исходной популяции бактерий Mycoplasma gallisepticum в аттенуирующие условия, создание посредством этого предположительно аттенуированной бактериальной популяции, и
(б) анализ отдельных клонов указанной предположительно аттенуированной бактериальной популяции в отношении пониженной экспрессии белка, имеющего аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа, и
(в) тестирование клонов, идентифицированных в (б) как имеющих пониженную экспрессию указанного белка, в отношении вирулентности,
где клон Mycoplasma gallisepticum, который проявляет пониженную экспрессию указанного белка и пониженную вирулентность относительно Mycoplasma gallisepticum дикого типа, представляет собой аттенуированный клон Mycoplasma gallisepticum.
29. Способ по п.28, где указанные аттенуирующие условия в (а) включают пассирование указанной исходной популяции бактерий Mycoplasma gallisepticum по меньшей мере 2 раза in vitro.
30. Способ по п.29, где указанные аттенуирующие условия в (а) включают пассирование указанной исходной популяции бактерий Mycoplasma gallisepticum по меньшей мере 5 раз in vitro.
31. Способ по п.30, где указанные аттенуирующие условия в (а) включают пассирование указанной исходной популяции бактерий Mycoplasma gallisepticum по меньшей мере 10 раз in vitro.
32. Способ по п.28, где указанные аттенуирующие условия в (а) включают трансформацию указанной исходной популяции Mycoplasma gallisepticum транспозоном, который случайным образом встраивается в геном Mycoplasma gallisepticum.
33. Способ по п.28, где указанные аттенуирующие условия в (а) включают воздействие на указанную исходную популяцию Mycoplasma gallisepticum химическим мутагеном или ультрафиолетовым излучением.
34. Способ по п.28, где указанные отдельные клоны указанной предположительно аттенуированной бактериальной популяции анализируют в (б) в отношении пониженной экспрессии указанного белка посредством полимеразной цепной реакции с обратной транскриптазой (RT-PCR).
35. Способ по п.28, где указанные отдельные клоны указанной предположительно аттенуированной бактериальной популяции анализируют в (б) в отношении пониженной экспрессии указанного белка посредством вестерн-блоттинга.
36. Способ по п.28, где указанные клоны, идентифицированные в (б), тестируют в отношении вирулентности в (в) путем введения одного или более чем одного из указанных клонов животному, восприимчивому к заражению Mycoplasma gallisepticum, и сравнения клинических симптомов, наблюдаемых у указанных животных после введения указанного одного или более чем одного клона, с клиническими симптомами контрольных животных, которым не вводили указанные клоны.
37. Живая аттенуированная бактерия Mycoplasma gallisepticum, депонированная в Американской коллекции типовых культур (АТСС) с регистрационным номером РТА-8485.
38. Способ по п.19, где указанную вакцинную композицию вводят указанному животному прямой инъекцией, распылением или с питьевой водой.