ПРИМЕНЕНИЕ МОЛОЧНОКИСЛЫХ БАКТЕРИЙ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ИЛИ ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ ПО МЕНЬШЕЙ МЕРЕ ОДНОГО СОСТОЯНИЯ ИЗ ЧИСЛА ПОСЛЕРОДОВОЙ ДЕПРЕССИИ И ПОСЛЕРОДОВОЙ ТРЕВОЖНОСТИ
USE OF LACTIC ACID BACTERIA FOR TREATMENT OR PREVENTION OF AT LEAST ONE CONDITION OF POSTNATAL DEPRESSION AND POSTNATAL ANXIETY

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
[0001] Настоящее изобретение относится к применению пробиотических бактерий и, в частности, применению штамма молочнокислых бактерий для лечения и/или предупреждения по меньшей мере одного состояния из числа послеродовой депрессии (PND) и послеродовой тревожности (PNA). Также предусмотрены способы применения бактерий и композиции, содержащие бактерии.
ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
[0002] Большая депрессия во время беременности и после родов встречается у 10-15% женщин в Новой Зеландии, на уровне, сравнимом с другими западными странами (1). Послеродовая депрессия (PND) связана с устойчивой депрессией и даже, в нескольких случаях ежегодно, смертью в результате самоубийства (2). Это расстройство может повлиять на способность матери заботиться о своем новом ребенке и испытывать привязанность к нему, а также на качество ее жизни и повседневную деятельность (3). Кроме того, материнская депрессия может оказывать длительное воздействие на когнитивные, социально-эмоциональные и медицинские показатели у детей (4, 5). Необходимы безопасные и эффективные средства терапии для предупреждения и лечения PND (6).
[0003] Все чаще появляется литература, связывающая здоровье микробиоты в кишечнике с химическими процессами и поведением мозга посредством множества двунаправленных путей, включая иммунную систему, гипофизарную надпочечниковую ось (ось HPA) и обширную сеть афферентных и эфферентных нервов, связывающих кишечник с центральной нервной системой, что дает основание предполагать, что пробиотическое усиление кишечной микробиоты может улучшить показатели настроения (7).
[0004] Доклинические исследования показали, что фенотип тревожности у мышей может быть изменен при трансплантации фекальных масс и что изменения в микробиоте сопровождаются изменениями в химических процессах мозга (8). Кроме того, было показано, что пробиотическое лечение оказывает положительное влияние на тревожноподобное и депрессивноподобное поведение в исследованиях на животных (9, 10) с помощью опосредующих механизмов, включая экспрессию рецептора GABA в определенных местах центральной нервной системы (9), оси HPA (10) и блуждающего нерва, который передает информацию из среды кишечного просвета в CNS (11). Клинические испытания пробиотического лечения дали неоднозначные результаты, и недавний систематический обзор испытаний на людях привел к выводу, что доказательства о положительном влиянии пробиотиков на настроение могут быть не такими убедительными, как заявлялось в некоторых недавних нарративных исследованиях. Они дают основания предполагать, что необходимы дополнительные рандомизированные контролируемые испытания (RCT) (12).
[0005] Современное лечение или предупреждение PND и послеродовой тревожности обычно основаны на фармакологии и психотерапии. Однако многие женщины обеспокоены отсутствием убедительных доказательств, подтверждающих безопасность лекарственных средств от депрессии, которые попадают в грудное молоко. Кроме того, у некоторых женщин существуют предрассудки, связанные с обращением за психологическим лечением.
[0006] Антидепрессанты часто являются одной из первых линий терапии против PND и послеродовой тревожности. Обычно назначаются традиционные антидепрессанты, такие как трициклические антидепрессанты и избирательные ингибиторы обратного захвата серотонина (SSRI). Однако существует много проблем, ассоциированных с применением этих традиционных антидепрессантов для PND. Во-первых, эти традиционные антидепрессанты обычно облегчают состояние PND не более чем у приблизительно 80% пациентов, принимающих их. Во-вторых, даже в случае успеха этим традиционным антидепрессантам обычно требуется до 8 недель для достижения эффективности. В-третьих, мать может ожидать испытывание типичных побочных эффектов, связанных с трициклическими антидепрессантами и SSRI. Побочные эффекты, связанные с применением трициклических антидепрессантов, включают сухость во рту, сухость в носу, нечеткость зрения, снижение моторики и секреции желудочно-кишечного тракта. Применение антидепрессантов также может приводить к сонливости, раздражительности и плохому кормлению у кормящих матерей. В-четвертых, в редких случаях лечение антидепрессантами может привести к ухудшению PND или симптомов послеродовой тревожности или развитию мании или психоза. Хотя психотерапия может быть столь же эффективной, как антидепрессанты при лечении PND и послеродовой тревожности, вмешательства, как правило, доступны в течение ограниченных периодов времени (например, от 10 до 20 недель), требуют специализированных поставщиков услуг, которые могут быть недоступны во всех областях, и долгосрочные преимущества остаются неясными (22).
[0007] Таким образом, остается потребность в способах и композициях, пригодных для лечения и/или предупреждения PND и PNA, и, в частности, в способах и композициях для лечения или предупреждения PND и PNA, которые не зависят от рецептурного лекарственного средства и/или консультирования. Способы и композиции для предупреждения или снижения тяжести PND и PNA также необходимы.
[0008] Задачей настоящего изобретения является поиск какого-либо пути к достижению одного или нескольких из этих желаемых результатов или по меньшей мере предоставление общественности применимого выбора.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Lactobacillus rhamnosus
[0009] В первом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения или предупреждения по меньшей мере одного состояния из числа послеродовой депрессии (PND) и послеродовой тревожности (PNA) у субъекта, включающий введение  HN001, номер депонирования в AGAL NM97/09514, датированный 18 августа 1997 г., субъекту, нуждающемуся в этом.
L. rhamnosus
[0010] В одном варианте осуществления  HN001 вводят в форме композиции с физиологически приемлемым разбавителем, вспомогательным средством, носителем или вспомогательным веществом.
[0011] В одном варианте осуществления HN001 является единственной введенной пробиотической бактерией.
[0012] В одном варианте осуществления HN001 вводят с одним или несколькими пребиотиками.
[0013] В одном варианте осуществления указанные физиологически приемлемые разбавитель, вспомогательное средство, носитель или вспомогательное вещество представляют собой пищевой продукт. В одном варианте осуществления пищевой продукт представляет собой кисломолочный продукт, йогурт, сыр, молочный напиток или молочный порошок.
[0014] Альтернативно, композиция представляет собой фармацевтическую композицию, а указанные вспомогательное вещество или разбавитель представляют собой фармацевтически приемлемые разбавитель, вспомогательное средство, носитель или вспомогательное вещество.
Lactobacillus rhamnosus
[0015] В другом аспекте настоящее изобретение предусматривает способ лечения или предупреждения возникновения одного или нескольких рисков, связанных с по меньшей мере одним из PND или PNA, где риску подвержен младенец, рожденный или который должен родиться у субъекта, при этом способ включает введение  HN001, номер депонирования в AGAL NM97/09514, датированный 18 августа 1997 г., нуждающемуся в этом субъекту.
[0016] В одном варианте осуществления композиция представляет собой смесь для беременных и кормящих или добавку для беременных и кормящих.
[0017] Композиция может представлять собой смесь, например, смесь для беременных и кормящих, диетический продукт и их гипоаллергенные варианты осуществления.
L. rhamnosus
[0018] В предпочтительных вариантах осуществления способ включает введение субъекту композиции, содержащей  HN001. Предпочтительно композиция представляет собой добавку, молочную смесь, диетический продукт или пищевой продукт.
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[0019] В некоторых вариантах осуществления  HN001 находится в репродуктивно жизнеспособной форме, предпочтительно в репродуктивно жизнеспособной форме и количестве. В других вариантах осуществления  HN001 является убитым, лизированным, фракционированным или ослабленным.
L. rhamnosus
[0020] Настоящее изобретение дополнительно предусматривает  HN001 для лечения или предупреждения по меньше мере одного из PND или PNA или для лечения или предупреждения возникновения одного или нескольких рисков, связанных с по меньшей мере одним из PND или PNA, или одного или нескольких их последствий.
L. rhamnosus
[0021] Настоящее изобретение дополнительно предусматривает  HN001 для изготовления композиции для лечения или предупреждения по меньшей мере одного из PND или PNA, или для лечения или предупреждения возникновения одного или нескольких рисков, связанных с по меньшей мере одним из PND или PNA, или одного или нескольких их последствий. Композиция может представлять собой композицию, такую как описанная в данном документе, включая, например, пищевой продукт или лекарственный препарат.
L. rhamnosus
[0022] Понятно, что в настоящем изобретении также рассматривается применение  HN001 в изготовлении композиции по настоящему изобретению, например, композиции для лечения или предупреждения по меньшей мере одного из PND или PNA у субъекта.
[0023] В одном варианте осуществления композиция подходит для перорального введения. В других вариантах осуществления композиция подходит для парентерального введения. В вариантах осуществления, касающихся предупреждения возникновения одного или нескольких рисков, связанных с по меньшей мере одним из PND или PNA, или одного или нескольких их последствий у субъекта-плода, композиция подходит для перорального введения беременной матери во время гестации.
[0024] В различных вариантах осуществления способ представляет собой способ лечения или предупреждения по меньшей мере одного из PND или PNA у субъекта, имеющего повышенный риск по меньшей мере одного из PND или PNA. В одном варианте осуществления способ представляет собой способ лечения или предупреждения по меньшей мере одного из PND или PNA у субъекта, который ранее страдал от по меньшей мере одного из PND или PNA.
[0025] В дополнительном варианте осуществления субъект страдал, испытал, у него имеется или имелось одно или несколько из предродовой депрессии или тревожности, депрессии в личном или семейном анамнезе, от умеренной до тяжелой степени тяжести предменструальных симптомов, послеродовой подавленности, психологической травмы, связанной с родами, физической травмы, связанной с родами, предшествующего мертворождения или невынашивания, курения сигарет, низкой самооценки, стресса в результате ухода за ребенком или жизненных условий, низкой социальной поддержки, плохих семейных взаимоотношений или одинокого семейного положения и низкого социально-экономического статуса.
[0026] В одном варианте осуществления способ представляет собой способ предупреждения рецидива по меньшей мере одного из PND или PNA у субъекта, который ранее страдал от по меньшей мере одного из PND или PNA, при этом способ включает введение эффективного количества HN001 или его производного субъекту, нуждающемуся в этом.
[0027] В одном варианте осуществления способ включает начало введения HN001 после первого триместра беременности. В одном варианте осуществления введение HN001 начинают от 14 до 16 недели гестации.
[0028] Можно также сказать, что настоящее изобретение в широком смысле состоит из частей, элементов и признаков, упомянутых или указанных в описании заявки, по отдельности или вместе, и любых или всех комбинаций любых двух или более указанных частей, элементов или признаков, и где в данном документе упоминаются конкретные целые числа, которые имеют известные эквиваленты в области техники, к которой относится настоящее изобретение, такие известные эквиваленты считаются включенными в данный документ, как если бы они были изложены отдельно.
[0029] Термин “содержащий”, используемый в данном описании, означает “состоящий по меньшей мере частично из”. При интерпретации каждого утверждения в настоящем описании, которое включает термин “содержащий”, также могут присутствовать отличные от него признаки или признаки, предшествующие этому термину. Связанные термины, такие как “содержат” и “содержит”, должны интерпретироваться аналогичным образом.
[0030] В настоящем описании, где была сделана ссылка на патентные описания, другие внешние документы или другие источники информации, это обычно делается с целью обеспечения контекста для обсуждения особенностей настоящего изобретения. Если конкретно не указано иное, ссылка на такие внешние документы не должна рассматриваться как признание того, что такие документы или такие источники информации в любой юрисдикции являются предшествующим уровнем техники или образуют часть общих знаний в данной области техники.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ
[0031] На фигуре 1 показано число удовлетворяющих критериям субъектов, набранных и распределенных в исследовании PIP, описанном в разделе “Примеры”. * Женщины не завершили анкету для психологических показателей по различным причинам, включая осложнения при беременности, плохое здоровье матери, преждевременные роды, отказ и отсутствие возможности связаться.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
L. rhamnosus
[0032] В настоящем изобретении впервые признаны полезные эффекты введения молочнокислых бактерий HN001 в отношении частоты и степени тяжести по меньшей мере одного из PND или PNA.
Lactobacillus rhamnosus
[0033] Соответственно, в первом аспекте настоящее изобретение предусматривает способ лечения или предупреждения по меньшей мере одного из PND или PNA у субъекта, включающий введение  HN001, номер депонирования в AGAL NM97/09514, датированный 18 августа 1997 г., или его производного субъекту, нуждающемуся в этом.
Lactobacillus rhamnosus
[0034] В дополнительном аспекте изобретение также предусматривает способ лечения или предупреждения возникновения одного или нескольких рисков, связанных с по меньшей мере одним из PND или PNA, или одного или нескольких их последствий у субъекта, при этом способ включает введение  HN001 или его производного субъекту, нуждающемуся в этом.
[0035] В предпочтительном варианте осуществления способ обеспечивает лечение или предупреждение как PND, так и PNA, или связанных с ними рисков или их последствий.
[0036] Симптомы, ассоциированные с по меньшей мере одним из PND у субъекта включают, например, без ограничения: грусть, безнадежность, эпизоды плаксивости, низкую самооценку, раздражительность, чувство вины, чувство подавленности, изменения в характере сна, изменения в привычках питания, неспособность к возможности утешения, истощение, опустошенность, неспособность испытывать удовольствие от действий, которые обычно считаются приятными, социальное отчуждение, низкий уровень энергии или отсутствие энергии, быстрое приобретение чувства расстроенности, чувство неполноценности при осуществлении заботы о ребенке, снижение сексуального влечения, периодическую или частую тревожность, нарушение нормальной эмоциональной связи матери и младенца.
[0037] Симптомы, ассоциированные с по меньшей мере одним из PNA у субъекта, включают, например, без ограничения: чувства страха и беспокойства, которые начинают доминировать над мышлением, ощущение раздражения, ощущение беспокойства, ощущение напряжения, ощущение нахождения “на грани”, учащенное сердцебиение/сильно учащенное сердцебиение, панические атаки, повторяющиеся тревожные мысли, чувство отсутствия контроля, чувство, что что-то неправильно делается, чувство, что произойдет что-то ужасное, бессонница, избегание ситуаций по причине страха, что случится что-то плохое.
[0038] Риски, связанные с по меньшей мере одним из PND или PNA, или их последствия у субъекта, представляющего собой плод, новорожденного, младенца, ребенка или взрослого (в частности, у субъектов, у которых родная мать страдала от по меньшей мере одного из PND или PNA), включают, например, без ограничения: более высокие показатели частоты эмоциональных проблем, поведенческих проблем, психиатрических диагнозов (таких как оппозиционно-вызывающее расстройство и расстройство поведения) и гиперактивность.
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[0039] Хотя рассматриваются различные пути и способы введения, в настоящее время предпочтительным является пероральное введение  HN001, например, в композиции, подходящей для перорального введения. Конечно, будет понятно, что в определенных обстоятельствах могут быть применены или являются предпочтительными другие пути и способы введения. Например, парентеральный путь можно применять в случае композиции, содержащей убитую или ослабленную  HN001 или его производное.
[0040] Термин “пероральное введение” включает пероральное, трансбуккальное, энтеральное и внутрижелудочное введение.
[0041] Термин “парентеральное введение” включает без ограничения местное (включая введение в отношении любой дермальной, эпидермальной или слизистой поверхности), подкожное, внутривенное, внутрибрюшинное и внутримышечное введение.
[0042] “Субъектом” является животное, предпочтительно млекопитающее, более предпочтительно млекопитающее, представляющее собой животное-компаньона, или человек. Предпочтительные животные-компаньоны включают кошек, собак и лошадей. В одном варианте осуществления человек является взрослым, предпочтительно взрослой женщиной, более предпочтительно беременной взрослой женщиной.
[0043] В дополнительном варианте осуществления субъект намерен кормить грудью своего ребенка после рождения. В дополнительном варианте осуществления субъект в настоящее время кормит грудью своего ребенка.
[0044] В одном варианте осуществления отец нерожденного или рожденного ребенка имеет в анамнезе по меньшей мере одно из астмы, сенной лихорадки, экземы. В дополнительном варианте осуществления по меньшей мере одно из астмы, сенной лихорадки и экземы требовало лечения лекарственными препаратами.
[0045] Термин “лечить” и его производные должны интерпретироваться в своем самом широком возможном контексте. Термин не должен подразумевать, что субъект подвергается лечению до полного выздоровления. Соответственно, “лечить” в широком смысле включает облегчение и/или предупреждение возникновения по меньшей мере одного из симптомов конкретного состояния или его тяжести.
[0046] В одном варианте осуществления лечение или предупреждениеPND приводит к баллу менее 13, предпочтительно менее 12, более предпочтительно менее 11, более предпочтительно менее 10, более предпочтительно менее 9, более предпочтительно менее 8, более предпочтительно менее 7, более предпочтительно менее 6, более предпочтительно менее 5, более предпочтительно менее 4, более предпочтительно менее 3, более предпочтительно менее 2, более предпочтительно менее 1 в скрининговой анкете согласно Эдинбургской шкале послеродовой депрессии (EPDS), широко применяемой для оценки риска послеродовой депрессии (14).
[0047] В дополнительном варианте осуществления лечение или предупреждение PND приводит к баллу менее 15, предпочтительно менее 14, более предпочтительно менее 13, более предпочтительно менее 12, более предпочтительно менее 11, более предпочтительно менее 10, более предпочтительно менее 9, более предпочтительно менее 8, более предпочтительно менее 7, более предпочтительно менее 6, более предпочтительно менее 5, более предпочтительно менее 4, более предпочтительно менее 3, более предпочтительно менее 2, более предпочтительно менее 1 в опроснике состояния и свойства тревожности версии с 6 пунктами (STAI6) со шкалой из 6 пунктов, утвержденном в качестве широко применяемой скрининговой анкеты для оценки риска возникновения тревожности (15).
[0048] Опросник состояния и свойства тревожности версии с 6 пунктами (STAI6): STAI6 является короткой оценочной шкалой с 6 пунктами, утвержденной в качестве скрининговой анкеты в отношении тревожности на основе более длинного опросника состояния и свойства тревожности (15). Максимально допустимый уровень показателей >15 применяли в качестве показателя клинически значимых уровней тревожности.
[0049] Будет понятно, что лечение включает профилактическое лечение, такое как, например, профилактическое лечение субъекта, такого как субъект, имеющий ожидаемый или установленный повышенный риск по меньшей мере одного из PND или PNA, и/или субъект, который пытается забеременеть или недавно забеременел, или профилактическое лечение одного или нескольких рисков, связанных с по меньшей мере одним из PND или PNA, или одного или нескольких их последствий у субъекта-плода путем опосредованного введения композиции по настоящему изобретению с помощью введения композиции матери субъекта-плода.
[0050] В другом примере профилактическое лечение одного или нескольких рисков, связанных с по меньшей мере одним из PND или PNA, или одного или нескольких их последствий относится к субъекту, который представляет собой новорожденного, младенца или ребенка, путем опосредованного введения композиции по настоящему изобретению с помощью введения композиции кормящей матери субъекта.
[0051] Дополнительно будет понятно, что лечение включает терапевтическое лечение, такое как, например, лечение по меньшей мере одного из PND и PNA или одного или нескольких симптомов или рисков, связанных с по меньшей мере одним из PND и PNA, включая, например, лечение субъекта, который представляет собой новорожденного, младенца или ребенка, путем опосредованного введения композиции по настоящему изобретению с помощью введения композиции матери субъекта.
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[0052] Соответственно, настоящее изобретение предусматривает способ лечения или предупреждения по меньшей мере одного из PND и PNA у субъекта-беременной, при этом способ включает введение  HN001 или композиции, содержащей  HN001, субъекту-беременной.
[0053] В некоторых вариантах осуществления субъекту-беременной 35 лет или больше.
[0054] В определенных вариантах осуществления у субъекта-беременной в анамнезе имеется по меньшей мере одно из PND и PNA.
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[0055] В определенных вариантах осуществления  HN001 или композицию, содержащую  HN001, вводят в течение периода от 14-16 недели гестации до родов.
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[0056] В определенных вариантах осуществления  HN001 или композицию, содержащую  HN001, вводят в течение периода от 14-16 недели гестации до 6 месяцев после родов.
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[0057] Соответственно, настоящее изобретение предусматривает способ предупреждения возникновения одного или нескольких рисков, связанных с по меньшей мере одним из PND или PNA, или одного или нескольких их последствий у субъекта-плода, при этом способ включает введение  HN001 или композиции, содержащей  HN001, матери субъекта.
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[0058] Также предусмотрен способ лечения или предупреждения возникновения одного или нескольких рисков, связанных с по меньшей мере одним из PND или PNA, или одного или нескольких их последствий у субъекта, который представляет собой новорожденного, младенца или ребенка, при этом способ включает введение  HN001 или композиции, содержащей  HN001, матери субъекта.
L. rhamnosus
[0059] Также рассматривается способ лечения одного или нескольких рисков, связанных с по меньшей мере одним из PND или PNA, или одного или нескольких их последствий у субъекта, который представляет собой младенца или ребенка, включающий введение композиции, состоящей или по существу состоящей из  HN001.
[0060] В определенных вариантах осуществления считается, что младенец или ребенок подвержены риску возникновения одного или нескольких рисков, связанных с по меньшей мере одним из PND или PNA, или одного или нескольких их последствий вследствие предшествующей встречаемости по меньшей мере одного из PND или PNA у младенца или матери ребенка.
Lactobacillus rhamnosus
1  HN001
Lactobacillus rhamnosus
L. rhamnosus
[0061] Как описано в международной заявке согласно PCT PCT/NZ98/00122 (опубликованной как WO 99/10476 и полностью включенной в данном документе), лиофилизированная культура  HN001 была депонирована в Аналитических лабораториях правительства Австралии (AGAL), Региональной лаборатории Нового Южного Уэльса, 1 Suakin Street, Pymble, NSW 2073, Australia, 18 августа 1997 г., и ей был присвоен номер депонирования NM97/09514. Этот депозитарий, признанный в Будапештском договоре, теперь больше не называется AGAL, а вместо этого называется Национальным институтом измерений Австралии (NMIA). Последовательность генома  HN001 доступна в Genebank под номером доступа: NZ_ABWJ00000000.
1.1 Морфологические свойства
L. rhamnosus
[0062] Морфологические свойства  HN001 описаны ниже.
[0063] Короткие или средние палочки с концами квадратной формы в цепочках, обычно 0,7×1,1×2,0-4,0 мкм, при выращивании в бульоне MRS.
[0064] Грамположительные, неподвижные, не образующие спор каталазоотрицательные факультативные анаэробные палочки с оптимальной температурой роста 37±1°C и оптимальным значением pH 6,0-6,5. Это факультативно гетероферментативные бактерии, и из глюкозы не вырабатывается газ.
1.2 Ферментативные свойства
L. rhamnosus
[0065] Набор для ферментации сахара API 50 CH применяли для определения характера ферментации углеводов  HN001 с получением оценки в баллах 5757177 (на основании баллов 22 основных сахаров - см. PCT/NZ98/00122).
1.3 Дальнейшая характеристика
L. rhamnosus
in vitro
L. rhamnosus
[0066] Штамм  HN001 может быть дополнительно охарактеризован с помощью функциональных признаков, раскрытых в PCT/NZ98/00122, включая его способность прилипать к эпителиальным клеткам кишечника человека, а также с помощью показателей улучшения в отношении функции фагоцитов, ответов антител, активности естественных клеток-киллеров и в пролиферации лимфоцитов, вызванной диетическим потреблением или в модельных системах . Будет понятно, что специалистам в данной области техники известен и доступен широкий спектр способов, которые можно применять для подтверждения идентичности  HN001, где иллюстративные способы включают ДНК-фингерпринтинг, геномный анализ, секвенирование и родственные геномные и протеомные методы.
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[0067] Как описано в данном документе, в определенных вариантах осуществления настоящего изобретения используют живой  HN001. В других вариантах осуществления используют производное  HN001.
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[0068] Применяемый в данном документе термин “производное” и его грамматические эквиваленты при использовании в отношении бактерий (включая применение в отношении конкретного штамма бактерий, такого как  HN001) подразумевает мутанты и гомологи или полученные из бактерий убитые или ослабленные бактерии, такие как без ограничения убитые нагреванием, лизированные, фракционированные, убитые под давлением, облученные и обработанные УФ или светом бактерии, а также материал, полученный из бактерий, включая без ограничения композиции на основе бактериальных клеточных стенок, лизаты бактериальных клеток, лиофилизированные бактерии, пробиотические факторы из бактерий и т. п., где производное сохраняет пробиотическую активность. Способы получения таких производных, например, без ограничения одного или нескольких мутантов  HN001 или одного или нескольких пробиотических факторов, и особенно производных, подходящих для введения субъекту (например, в композиции), хорошо известны в данной области техники.
L. rhamnosus
L. rhamnosus
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[0069] Будет понятно, что способы, подходящие для идентификации  HN001, такие как описанные выше, аналогичным образом подходят для идентификации производных  HN001, включая, например, мутанты или гомологи  HN001 или, например, пробиотические факторы из  HN001.
[0070] Термин “пробиотический фактор” относится к бактериальной молекуле, отвечающей за опосредующую пробиотическую активность, включая без ограничения бактериальные ДНК-мотивы, поверхностные белки, небольшие органические кислоты, полисахариды или компоненты клеточной стенки, такие как липотейхоевые кислоты и пептидогликан, или смесь любых двух или более из них. Хотя, как отмечено выше, эти молекулы не были четко идентифицированы, и без ограничения какой-либо теорией такие молекулы будут присутствовать, если присутствует пробиотический организм.
et al.
et al.
et al.
[0071] Термин “пробиотическая активность” относится к способности определенных микроорганизмов стимулировать иммунную систему. Измерение типа и уровня активности пробиотического микроорганизма известно специалистам в данной области техники; см., например, Mercenier  (2004), Leyer  (2004) или Cummings  (2004). Например, пробиотическую активность можно оценивать с помощью анализа секреции цитокинов РВМС.
[0072] Ссылка на сохранение пробиотической активности предназначена для обозначения того, что производное пробиотического микроорганизма, такое как мутант или гомолог пробиотического микроорганизма или ослабленный или убитый пробиотический микроорганизм, все еще обладает полезной пробиотической активностью, или что композиция, содержащая пробиотический микроорганизм или его производное, способна поддерживать сохранение полезной пробиотической активности. В то время как бактериальные молекулы, отвечающие за опосредующую пробиотическую активность, не были четко идентифицированы, молекулы, которые были предложены в качестве возможных кандидатов, включают бактериальные ДНК-мотивы, поверхностные белки, небольшие органические кислоты, полисахариды и компоненты клеточной стенки, такие как липотейхоевые кислоты и пептидогликан. Было высказано предположение, что они взаимодействуют с компонентами иммунной системы хозяина, обеспечивая иммуномодулирующий эффект. Предпочтительно сохранившаяся активность составляет по меньшей мере приблизительно 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 99 или 100% от активности необработанного (т. е. живого или неослабленного) контроля, и применимые диапазоны могут быть выбраны между любыми из этих значений (например, от приблизительно 35 до приблизительно 100%, от приблизительно 50 до приблизительно 100%, от приблизительно 60 до приблизительно 100%, от приблизительно 70 до приблизительно 100%, от приблизительно 80 до приблизительно 100% и от приблизительно 90 до приблизительно 100%).
L. rhamnosus
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[0073] С применением традиционных технологий твердофазной и жидкой ферментации, хорошо известных в данной области техники,  HN001 можно выращивать в достаточных количествах, чтобы обеспечить применение, предусмотренное в данном документе. Например,  HN001 можно получать в массе для составления с применением методик питательной пленки или выращивания в погруженной культуре, например, в условиях, описанных в WO99/10476. Вкратце, рост обеспечивается в аэробных условиях при любой температуре, достаточной для роста организма. Например, для  HN001 температурный диапазон от 30 до 40°C, предпочтительно 37°C, является предпочтительным. Значение рН среды для выращивания является слабокислым, предпочтительно от приблизительно 6,0 до 6,5. Время инкубирования является достаточным для достижения изолятом стационарной фазы роста.
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[0074] Клетки  HN001 можно собирать с применением способов, хорошо известных в данной области техники, например, с помощью традиционных методик фильтрации или осаждения (например, центрифугирования), или собирать в сухом виде с применением циклонной установки. Клетки  HN001 можно использовать немедленно или хранить, предпочтительно лиофилизированными или охлажденными при температуре от -20° до 6°С, предпочтительно -4°С, в течение необходимого периода с применением стандартных методик.
2 Композиции
[0075] Композиция, применяемая в данном документе, может быть составлена в виде пищевого продукта, напитка, пищевой добавки, добавки к напитку, диетической добавки, питательного продукта, продукта лечебного питания, продукта для энтерального или парентерального кормления, заменителя пищи, космецевтического, нутрицевтического или фармацевтического препарата. Соответствующий состав может быть получен специалистом в данной области техники в отношении данного навыка и идеи настоящего описания.
[0076] В одном варианте осуществления композиции, применяемые в данном документе, включают любой пищевой потребительский продукт, который способен переносить бактерии или производное бактерий. Примеры подходящих пищевых потребительских продуктов включают порошки, жидкости, кондитерские продукты, включая шоколад, виды желе, виды мороженого, восстановленные фруктовые продукты, энергетические батончики, пищевые концентраты, батончики мюсли, спреды, соусы, соусы для макания, молочные продукты, включая йогурты и сыры, напитки, включая напитки на молочной и немолочной основе (такие как молочные напитки и йогуртовые напитки), виды сухого молока, спортивные добавки, включая спортивные добавки на молочной и немолочной основе, пищевые добавки, такие как протеиновые посыпки, продукты, представляющие собой биологически активную добавку, включая таблетки для ежедневного употребления, смеси и йогурты для докорма после отъема от груди и смеси, такие как смеси для беременных и кормящих, в форме порошка или жидкости, включая гипоаллергенные варианты осуществления таких композиций. В данном варианте осуществления предпочтительная композиция, применимая в данном документе, может представлять собой смесь для беременных и кормящих в форме порошка или жидкости. Подходящие нутрицевтические композиции, применимые в данном документе, могут быть предусмотрены в аналогичных формах.
[0077] Примеры смесей, таких как смесь для беременных и кормящих, в форме порошка или жидкости, включают следующее. Следует понимать, что следующие составы являются только ориентировочными и допустимы вариации в соответствии с известными принципами составления таких продуктов. Например, можно дополнить с помощью немолочных источников белка перечисленные молочные белки. В равной степени могут быть предусмотрены гипоаллергенные варианты осуществления этих продуктов, в которых источник белка полностью или частично гидролизован. Такие гидролизаты известны в данной области техники. Один пример смеси для беременных и кормящих, применимой в данном документе, содержит (вес/вес):
30-60% лактозы,
15-35% растительных масел,
0-40% сухого обезжиренного молока,
0-40% сывороточного белка, такого как WPC или WPI, предпочтительно 80% WPC (WPC80),
L. rhamnosus
0,001-50% HN001.
[0078] Другой пример смеси для беременных и кормящих, применимой в данном документе, содержит (вес/вес):
40-60% лактозы,
20-30% растительных масел,
10-15% сухого обезжиренного молока,
6-8% сывороточного белка, предпочтительно WPC80,
L. rhamnosus
0,001-10% HN001.
[0079] Другой пример смеси для беременных и кормящих в данном документе содержит (вес/вес):
40-60% лактозы,
20-30% растительных масел,
10-15% сухого обезжиренного молока,
6-8% сывороточного белка, предпочтительно WPC80,
L. rhamnosus
0,001-5% HN001.
[0080] Другой пример смеси для беременных и кормящих, применимой в данном документе, содержит (вес/вес):
40-60% лактозы,
20-30% растительных масел,
10-15% сухого обезжиренного молока,
6-8% сывороточного белка, предпочтительно WPC80,
L. rhamnosus
0,001-2% HN001.
[0081] Любая из этих смесей может также содержать от 0,1 до 4% вес/вес, предпочтительно от 2 до 4% вес/вес одного или нескольких витаминных премиксов, минерального премикса, лецитина, одного или нескольких антиоксидантов, одного или нескольких стабилизаторов или одного или нескольких нуклеотидов или комбинации любых двух или более из них. В некоторых вариантах осуществления эти детские смеси первого уровня могут быть составлены для обеспечения от 2700 до 3000 кДж/л.
L. rhamnosus
[0082] Примеры пищевых потребительских продуктов по настоящему изобретению, таких как напитки на молочной основе (такие как молочные напитки и йогуртовые напитки), как правило, будут содержать и могут состоять из источника белка (такого как источник молочного белка), источника липидов, источника углеводов в дополнение к  HN001 или его производному. Также могут быть включены ароматизаторы, красители и другие добавки, носители или вспомогательные вещества, которые хорошо известны специалистам в данной области техники.
L. rhamnosus
[0083] Дополнительным примером пищевого потребительского продукта, пригодного для применения в настоящем изобретении, является система доставки Unistraw™ (Unistraw International Limited, Австралия), описанная в международной заявке согласно PCT PCT/AU2007/000265 (опубликованной как WO 2007/098564) и международной заявке согласно PCT PCT/AU2007/001698 (опубликованной как WO 2008/055296), каждая из которых включена в данном документе в своей полноте. Специалистам в данной области техники будет понятно, что  HN001 и его производные, необязательно вместе с одним или несколькими дополнительными пробиотическими факторами или пробиотическими средствами, могут быть нанесены на субстрат (например, водорастворимую гранулу) для применения в таких системах доставки.
[0084] В альтернативных вариантах осуществления композиции, применимые в данном документе, могут быть составлены для обеспечения введения субъекту любым выбранным путем, включая без ограничения пероральное или парентеральное (включая местное, подкожное, внутримышечное и внутривенное) введение.
[0085] Например, нутрицевтическая композиция для применения согласно настоящему изобретению может представлять собой биологически активную добавку (например, капсулу, минипакет или таблетку) или пищевой продукт (например, молоко, сок, безалкогольный напиток, травяной чай в пакетиках или кондитерское изделие). Композиция также может включать другие питательные вещества, такие как белок, углевод, витамины, минералы или аминокислоты. Композиция может быть в форме, подходящей для перорального применения, такой как таблетка, твердая или мягкая капсула, водная или масляная суспензия или сироп; или в форме, подходящей для парентерального применения, такой как водный раствор пропиленгликоля или забуференный водный раствор. Количество активного ингредиента в нутрицевтической композиции в значительной степени зависит от конкретной потребности субъекта. Количество также варьируется, как известно специалистам в данной области техники, в зависимости от пути введения и возможного совместного применения других пробиотических факторов или пробиотических средств.
[0086] Будет понятно, что в определенных вариантах осуществления композиции по настоящему изобретению могут быть составлены так, чтобы иметь необходимую калорийность, например, чтобы доставлять необходимое количество энергии или необходимый процент ежедневного рекомендуемого потребления энергии. Например, пищевой потребительский продукт может быть составлен с обеспечением от приблизительно 200 до приблизительно 2000 кДж на порцию, или от приблизительно 500 кДж до приблизительно 2000 кДж на порцию, или от приблизительно 1000 до приблизительно 2000 кДж на порцию.
[0087] Таким образом, фармацевтическая композиция, применимая в соответствии с настоящим изобретением, может быть составлена с подходящим фармацевтически приемлемым носителем (включая вспомогательные вещества, разбавители, вспомогательные средства и их комбинации), выбранным с учетом предполагаемого пути введения и стандартной фармацевтической практики. Например, композицию, применимую согласно настоящему изобретению, можно вводить перорально в виде порошка, жидкости, таблетки или капсулы или местно в виде мази, крема или лосьона. Подходящие составы могут содержать при необходимости дополнительные средства, включая эмульгирующие, антиоксидантные, ароматизирующие или окрашивающие средства, и могут быть адаптированы для немедленного, отсроченного, модифицированного, замедленного, импульсного или контролируемого высвобождения.
[0088] Термин “фармацевтически приемлемый носитель” предназначен для обозначения носителя, включая без ограничения вспомогательное вещество, разбавитель или вспомогательное средство, фармацевтически приемлемый носитель включает растворитель, дисперсионную среду, покрытие, антибактериальное и противогрибковое средство, а также изотоническое и замедляющее всасывание средство или их комбинацию, которые можно вводить субъекту в качестве компонента композиции, описанной в данном документе, который не снижает активность композиции и не токсичен при введении в дозах, достаточных для доставки эффективного количества соединения или композиции, применимой в данном документе. Составы можно вводить перорально, назально или парентерально (включая местно, внутримышечно, внутрибрюшинно, подкожно и внутривенно).
[0089] В некоторых вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению (такая как, например, нутрицевтическая или фармацевтическая композиция по настоящему изобретению, может быть предусмотрена в виде капсулы. Капсулы могут содержать любые стандартные фармацевтически приемлемые вещества, такие как желатин или целлюлоза. Таблетки могут быть составлены в соответствии с традиционными процедурами путем прессования смесей активных ингредиентов с твердым носителем и смазывающим средством. Примеры твердых носителей включают крахмал и сахарный бентонит. Активные ингредиенты также можно вводить в форме таблетки с твердой оболочкой или капсулы, содержащей связующее средство, например, лактозу или маннит, обычный наполнитель и таблетирующее средство. Фармацевтические композиции также можно вводить парентеральным путем. Примеры парентеральных лекарственных форм включают водные растворы, изотонический солевой раствор или 5% раствор глюкозы активного средства или другие хорошо известные фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества. Циклодекстрины или другие солюбилизирующие средства, хорошо известные специалистам в данной области техники, можно применять в качестве вспомогательных веществ для доставки терапевтического средства.
L. rhamnosus
[0090] В определенных вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению содержит живую  HN001. Способы получения таких композиций хорошо известны в данной области техники, и один из таких способов приведен в качестве примера в данном документе в примерах.
L. rhamnosus
[0091] В других вариантах осуществления композиция по настоящему изобретению содержит одно или несколько производных  HN001. Опять же, способы получения таких композиций хорошо известны в данной области техники и могут предусматривать стандартные микробиологические и фармацевтические практики.
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[0092] Будет понятно, что в такие композиции может быть включен широкий спектр добавок или носителей, например, для улучшения или сохранения жизнеспособности бактерий или для повышения терапевтической эффективности  HN001 или одного или нескольких производных  HN001. Например, можно включать добавки, такие как поверхностно-активные вещества, смачиватели, увлажнители, клейкие вещества, диспергирующие средства, стабилизаторы, пенетранты и так называемые стрессовые добавки для улучшения энергии, роста, репликации и выживаемости бактериальных клеток (такие как хлорид калия, глицерин, хлорид натрия и глюкоза), а также криопротекторы, такие как мальтодекстрин. Добавки могут также включать композиции, которые способствуют поддержанию жизнеспособности микроорганизмов при длительном хранении, например, нерафинированное кукурузное масло, или “инвертные” эмульсии, содержащие смесь масел и восков снаружи и воду, альгинат натрия и бактерии внутри.
L. rhamnosus
[0093] В определенных вариантах осуществления  HN001 находится в репродуктивно жизнеспособной форме и количестве.
L. rhamnosus
[0094] Композиция может содержать источник углеводов, такой как дисахарид, включая, например, сахарозу, фруктозу, глюкозу или декстрозу. Предпочтительно источником углеводов является источник, который может быть аэробно или анаэробно использован  HN001.
L. rhamnosus
[0095] В таких вариантах осуществления композиция предпочтительно способна поддерживать репродуктивную жизнеспособность  HN001 в течение периода более чем приблизительно двух недель, предпочтительно более чем приблизительно одного месяца, приблизительно двух месяцев, приблизительно трех месяцев, приблизительно четырех месяцев, приблизительно пяти месяцев, более предпочтительно более чем приблизительно шести месяцев, наиболее предпочтительно от по меньшей мере приблизительно 2 лет до приблизительно 3 лет или больше.
L. rhamnosus
[0096] В определенных вариантах осуществления композиция для лечения или предупреждения по меньшей мере одного из PND или PNA, или одного или нескольких факторов риска, связанных с по меньшей мере одним из PND или PNA, или одного или нескольких их последствий содержит пробиотик, предусматривающий  HN001, и пребиотик, например, фруктоолигосахариды, галактоолигосахариды, олигосахариды человеческого грудного молока и их комбинации.
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[0097] В другом варианте осуществления способ лечения и предупреждения по меньшей мере одного из PND или PNA, или одного или нескольких факторов риска, связанных с по меньшей мере одним из PND или PNA, или одного или нескольких их последствий у субъекта включает введение индивидууму эффективного количества композиции, содержащей  HN001 и пребиотик, например, фруктоолигосахариды, галактоолигосахариды, олигосахариды человеческого грудного молока и их комбинации. В некоторых вариантах осуществления композиция для перорального применения составлена для обеспечения введения достаточного количества  HN001 для образования популяции в желудочно-кишечном тракте субъекта при приеме внутрь. Образовавшаяся популяция может быть временной или постоянной популяцией.
L. rhamnosus
[0098] Теоретически одной колониеобразующей единицы (КОЕ) должно быть достаточно для образования популяции  HN001 у субъекта, но в действительных ситуациях для осуществления этого необходимо минимальное количество единиц. Следовательно, для терапевтических механизмов, которые зависят от жизнеспособной живой популяции пробиотических бактерий, количество единиц, введенных субъекту, будет влиять на терапевтическую эффективность.
9
9
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[0099] Как представлено в данном документе в примерах, заявители определили, что уровень дозы 6×10 КОЕ  HN001 в день является достаточным (но может и не быть необходимым) для образования популяции в желудочно-кишечном тракте субъектов-людей. Соответственно, в одном примере композиция, составленная для введения, будет достаточной для обеспечения по меньшей мере приблизительно 6×10 КОЕ  HN001 в день.
L. rhamnosus
L. rhamnosus
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[00100] Способы определения наличия популяции кишечной флоры, такой как  HN001, в желудочно-кишечном тракте субъекта хорошо известны в данной области техники, и примеры таких способов представлены в данном документе. В некоторых вариантах осуществления наличие популяции  HN001 можно определить непосредственно, например, путем анализирования одного или нескольких образцов, полученных от субъекта, и определения наличия или количества  HN001 в указанном образце. В других вариантах осуществления наличие популяции  HN001 можно определить косвенно, например, путем наблюдения уменьшения симптомов по меньшей мере одного из PND и PNA или снижения количества другой кишечной флоры в образце, полученном от субъекта. Комбинации таких способов также предусмотрены.
in vitro
in vivo
in vivo
[00101] Эффективность композиции, применимой согласно настоящему изобретению, может быть оценена как , так и . См., например, примеры ниже. Вкратце, композицию можно исследовать в отношении ее способности обеспечивать предупреждение или лечение по меньшей мере одного из PND и PNA. В случае исследований  композицию можно скармливать или инъецировать животной модели (например, мыши) или вводить субъектам-людям (включая беременных женщин), а затем оценивать ее эффекты в отношении частоты и тяжести по меньшей мере одного из PND и PNA и связанных состояний. На основании результатов можно определить соответствующий диапазон доз и путь введения.
L. rhamnosus
L. rhamnosus
L. rhamnosus
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[00102] Способы расчета подходящей дозы могут зависеть от природы активного средства в композиции. Например, если композиция содержит живую  HN001, доза может быть рассчитана с учетом количества присутствующих живых бактерий. Например, как описано в данном документе в примерах, дозу можно установить исходя из количества колониеобразующих единиц (КОЕ), которое подлежит введению в день. В примерах, где композиция содержит одно или несколько производных  HN001, дозу можно рассчитать исходя из количества или концентрации присутствующего производного HN001. Например, для композиции, содержащей клеточный лизат  HN001, дозу можно рассчитать исходя из концентрации клеточного лизата  HN001, присутствующего в композиции.
6
12
6
11
6
10
6
9
6
8
6
7
6
7
6
8
6
8
6
8
6
8
6
8
6
7
6
7
6
7
6
7
6
7
6
7
6
7
6
7
6
7
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[00103] В качестве общего примера рассматривается введение от приблизительно 1×10 КОЕ до приблизительно 1×10 КОЕ  HN001 на кг массы тела в день, предпочтительно от приблизительно 1×10 КОЕ до приблизительно 1×10 КОЕ/кг/день, от приблизительно 1×10 КОЕ до приблизительно 1×10 КОЕ/кг/день, от приблизительно 1×10 КОЕ до приблизительно 1×10 КОЕ/кг/день, от приблизительно 1×10 КОЕ до приблизительно 1×10 КОЕ/кг/день, от приблизительно 1×10 КОЕ до приблизительно 5×10 КОЕ/кг/день или от приблизительно 1×10 КОЕ до приблизительно 1×10 КОЕ/кг/день. Предпочтительно рассматривается введение от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 5×10 КОЕ на кг массы тела  HN001 в день, предпочтительно от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 4×10 КОЕ/кг/день, от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 3×10 КОЕ/кг/день, от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 2×10 КОЕ/кг/день, от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 1×10 КОЕ/кг/день, от приблизительно 5×10 КОЕ до от приблизительно 9×10 КОЕ/кг/день, от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 8×10 КОЕ/кг/день, от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 7×10 КОЕ/кг/день, от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 6×10 КОЕ/кг/день, от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 5×10 КОЕ/кг/день, от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 4×10 КОЕ/кг/день, от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 3×10 КОЕ/кг/день, от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 2×10 КОЕ/кг/день или от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 1×10 КОЕ/кг/день.
6
13
6
12
6
11
6
10
6
9
6
8
6
7
6
7
7
10
7
10
7
10
7
10
7
10
7
9
7
9
7
9
7
9
7
9
7
9
7
9
7
9
7
9
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[00104] В определенных вариантах осуществления периодическая доза не должна варьироваться в зависимости от массы тела или других характеристик субъекта. В таких примерах рассматривается введение от приблизительно 1×10 КОЕ до приблизительно 1×10 КОЕ  HN001 в день, предпочтительно от приблизительно 1×10 КОЕ до приблизительно 1×10 КОЕ/день, от приблизительно 1×10 КОЕ до приблизительно 1×10 КОЕ/день, от приблизительно 1×10 КОЕ до приблизительно 1×10 КОЕ/день, от приблизительно 1×10 КОЕ до приблизительно 1×10 КОЕ/день, от приблизительно 1×10 КОЕ до приблизительно 1×10 КОЕ/день, от приблизительно 1×10 КОЕ до приблизительно 5×10 КОЕ/день или от приблизительно 1×10 КОЕ до приблизительно 1×10 КОЕ/день. Предпочтительно рассматривается введение от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 5×10 КОЕ на кг массы тела  HN001 в день, предпочтительно от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 4×10 КОЕ/день, от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 3×10 КОЕ/день, приблизительно от 5×10 КОЕ до приблизительно 2×10 КОЕ/день, приблизительно от 5×10 КОЕ до приблизительно 1×10 КОЕ/день, от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 9×10 КОЕ/день, от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 8×10 КОЕ/день, от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 7×10 КОЕ/день, от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 6×10 КОЕ/день, от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 5×10 КОЕ/день, от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 4×10 КОЕ/день, от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 3×10 КОЕ/день, от приблизительно 5×10 КОЕ до приблизительно 2×10 КОЕ/день или от приблизительно 5 х 10 КОЕ до приблизительно 1×10 КОЕ/день.
L. rhamnosus
9
[00105] Например, как представлено в данном документе в примерах, эффективная доза лиофилизированной  HN001 была определена как 6×10 КОЕ в день.
L. rhamnosus
L. rhamnosus
L. rhamnosus
L. rhamnosus
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[00106] Будет понятно, что композиция предпочтительно составлена таким образом, чтобы обеспечить введение эффективной дозы  HN001 или одного или нескольких ее производных. Доза введенной композиции, период введения и общая схема введения могут различаться между субъектами в зависимости от таких переменных, как тяжесть симптомов у субъекта, тип расстройства, подлежащего лечению, выбранный способ введения и возраст, пол и/или общее состояние здоровья субъекта. Более того, как описано выше, соответствующая доза может зависеть от природы активного средства в композиции и характера состава. Например, если композиция содержит живую  HN001, доза может быть рассчитана с учетом количества присутствующих живых бактерий. Например, как описано в данном документе в примерах, дозу можно установить исходя из количества колониеобразующих единиц (КОЕ), которое подлежит введению в день. В примерах, где композиция содержит одно или несколько производных  HN001, доза может быть рассчитана исходя из количества или концентрации производного  HN001, которое подлежит введению в день. Например, для композиции, содержащей клеточный лизат  HN001, дозу можно рассчитать исходя из концентрации клеточного лизата  HN001, присутствующего в композиции.
L. rhamnosus
[00107] Будет понятно, что предпочтительные композиции составлены для обеспечения эффективной дозы в удобной форме и количестве. В определенных вариантах осуществления, таких как без ограничения те, где периодическая доза не должна варьироваться в зависимости от массы тела или других характеристик субъекта, композиция может быть составлена для стандартной дозы. Понятно, что введение может включать однократную ежедневную дозу или введение ряда отдельных разделенных доз, что может быть подходящим. Например, как представлено в данном документе в примерах, эффективная доза  HN001 может быть составлена в капсуле для перорального введения.
[00108] Однако в качестве общего примера авторы изобретения предполагают введение от приблизительно 1 мг до приблизительно 1000 мг на кг массы тела композиции, применимой в данном документе, в день, предпочтительно от приблизительно 50 до приблизительно 500 мг на кг в день, альтернативно от приблизительно 150 до приблизительно 410 мг/кг/день или от приблизительно 110 до приблизительно 310 мг/кг/день. В одном варианте осуществления авторы изобретения предполагают введение от приблизительно 0,05 мг до приблизительно 250 мг на кг массы тела композиции, применимой в данном документе.
L. rhamnosus
L. rhamnosus
L. rhamnosus
5
9
6
8
[00109] Примеры детской смеси первого уровня, детской смеси второго уровня или детской смеси третьего уровня представлены в данном документе. Композиции, такие как эти, могут быть составлены таким образом, чтобы концентрация  HN001, присутствующей в композиции, была таковой, чтобы эффективная доза могла быть получена с применением легко измеряемого количества композиции. Например, в определенных вариантах осуществления, таких как, например, где композиция представляет собой детскую смесь первого уровня,  HN001 предусмотрен в концентрации, достаточной для обеспечения эффективной дозы в количестве смеси, которое может легко отмерить родитель или попечитель при приготовлении смеси для введения, таким образом как, например, с помощью мерной ложки или тому подобного, что обычно предоставлено в детских смесях первого уровня. Иллюстративные неограничивающие концентрации  HN001 для применения в таких композициях включают от приблизительно 5×10 КОЕ на грамм смеси до приблизительно 10 КОЕ на грамм смеси или от приблизительно 10 КОЕ на грамм смеси до приблизительно 10 КОЕ на грамм смеси.
L. rhamnosus
[00110] В одном варианте осуществления композиция, применимая в данном документе, содержит, по существу состоит или состоит из по меньшей мере приблизительно 0,1, 0,2, 0,5, 1, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 99, 99,5, 99,8 или 99,9% по весу HN001 или его производного, и применимые диапазоны могут быть выбраны из любого из этих вышеуказанных значений (например, от приблизительно 0,1 до приблизительно 50%, от приблизительно 0,2 до приблизительно 50%, от приблизительно 0,5 до приблизительно 50%, от приблизительно 1 до приблизительно 50%, от приблизительно 5 до приблизительно 50%, от приблизительно 10 до приблизительно 50%, от приблизительно 15 до приблизительно 50%, от приблизительно 20 до приблизительно 50%, от приблизительно 25 до приблизительно 50%, от приблизительно 30 до приблизительно 50%, от приблизительно 35 до приблизительно 50%, от приблизительно 40 до приблизительно 50%, от приблизительно 45 до приблизительно 50%, от приблизительно 0,1 до приблизительно 60%, от приблизительно 0,2 до приблизительно 60%, от приблизительно 0,5 до приблизительно 60%, от приблизительно 1 до приблизительно 60%, от приблизительно 5 до приблизительно 60%, от приблизительно 10 до приблизительно 60, от приблизительно 15 до приблизительно 60%, от приблизительно 20 до приблизительно 60%, от приблизительно 25 до приблизительно 60%, от приблизительно 30 до приблизительно 60%, от приблизительно 35 до приблизительно 60%, от приблизительно 40 до приблизительно 60%, от приблизительно 45 до приблизительно 60%, от приблизительно 0,1 до приблизительно 70%, от приблизительно 0,2 до приблизительно 70%, от приблизительно 0,5 до приблизительно 70%, от приблизительно 1 до приблизительно 70%, от приблизительно 5 до приблизительно 70%, от приблизительно 10 до приблизительно 70%, от приблизительно 15 до приблизительно 70%, от приблизительно 20 до приблизительно 70%, от приблизительно 25 до приблизительно 70%, от приблизительно 30 до приблизительно 70%, от приблизительно 35 до приблизительно 70%, от приблизительно 40 до приблизительно 70%, от приблизительно 45 до приблизительно 70%, от приблизительно 0,1 до приблизительно 80%, от приблизительно 0,2 до приблизительно 80%, от приблизительно 0,5 до приблизительно 80%, от приблизительно 1 до приблизительно 80%, от приблизительно 5 до приблизительно 80%, от приблизительно 10 до приблизительно 80%, от приблизительно 15 до приблизительно 80%, от приблизительно 20 до приблизительно 80%, от приблизительно 25 до приблизительно 80%, от приблизительно 30 до приблизительно 80%, от приблизительно 35 до приблизительно 80%, от приблизительно 40 до приблизительно 80%, от приблизительно 45 до приблизительно 80%, от приблизительно 0,1 до приблизительно 90%, от приблизительно 0,2 до приблизительно 90%, от приблизительно 0,5 до приблизительно 90%, от приблизительно 1 до приблизительно 90%, от приблизительно 5 до приблизительно 90%, от приблизительно 10 до приблизительно 90%, от приблизительно 15 до приблизительно 90%, от приблизительно 20 до приблизительно 90%, от приблизительно 25 до приблизительно 90%, от приблизительно 30 до приблизительно 90%, от приблизительно 35 до приблизительно 90%, от приблизительно 40 до приблизительно 90%, от приблизительно 45 до приблизительно 90%, от приблизительно 0,1 до приблизительно 99%, от приблизительно 0,2 до приблизительно 99%, от приблизительно 0,5 до приблизительно 99%, от приблизительно 1 до приблизительно 99%, от приблизительно 5 до приблизительно 99%, от приблизительно 10 до приблизительно 99%, от приблизительно 15 до приблизительно 99%, от приблизительно 20 до приблизительно 99%, от приблизительно 25 до приблизительно 99%, от приблизительно 30 до приблизительно 99%, от приблизительно 35 до приблизительно 99%, от приблизительно 40 до приблизительно 99% и от приблизительно 45 до приблизительно 99%).
L. rhamnosus
[00111] В одном варианте осуществления композиция, применимая в настоящем документе, содержит, по существу состоит или состоит из по меньшей мере приблизительно 0,001, 0,01, 0,05, 0,1, 0,15, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 , 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18 или 19 граммов  HN001 или его производного, и применяемые диапазоны могут быть выбраны между любыми из этих вышеупомянутых значений (например, от приблизительно 0,01 до приблизительно 1 грамма, от приблизительно 0,01 до приблизительно 10 граммов, от приблизительно 0,01 до приблизительно 19 граммов, от приблизительно 0,1 до приблизительно 1 грамма, от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 граммов, от приблизительно 0,1 до приблизительно 19 граммов, от приблизительно 1 до приблизительно 5 граммов, от приблизительно 1 до приблизительно 10 граммов, от приблизительно 1 до приблизительно 19 граммов, от приблизительно 5 до приблизительно 10 граммов и от приблизительно 5 до приблизительно 19 граммов).
L. rhamnosus
[00112] В одном варианте осуществления композиция, применимая в данном документе, содержащая  HN001 или его производное, дополнительно содержит приблизительно 0,1, 0,5, 1, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 97, 99 или 99,9% по весу свежего цельного молока или производного молока, и применяемые диапазоны могут быть выбраны между любыми из этих вышеупомянутых значений (например, от приблизительно 0,1 до приблизительно 50%, от приблизительно 0,2 до приблизительно 50%, от приблизительно 0,5 до приблизительно 50%, от приблизительно 1 до приблизительно 50%, от приблизительно 5 до приблизительно 50%, от приблизительно 10 до приблизительно 50%, от приблизительно 15 до приблизительно 50%, от приблизительно 20 до приблизительно 50%, от приблизительно 25 до приблизительно 50%, от приблизительно 30 до приблизительно 50%, от приблизительно 35 до приблизительно 50%, от приблизительно 40 до приблизительно 50% и от приблизительно 45 до приблизительно 50%). Производное молока предпочтительно выбрано из рекомбинированного, сухого или свежего обезжиренного молока, рекомбинированного или восстановленного цельного или обезжиренного сухого молока, концентрата обезжиренного молока, ультраконцентрата обезжиренного молока, концентрированного молока, ультраконцентрата ультрафильтрованного молока, концентрата молочного белка (MPC), изолята молочного белка (MPI), концентрата молочного белка с пониженным содержанием кальция (MPC), молока с низким содержанием жира, концентрат молочного белка с низким содержанием жира (MPC), казеина, казеината, молочного жира, сливок, сливочного масла, топленого масла, безводного молочного жира (AMF), пахты, плазмы масла, бета-плазмы, твердых фракций молочного жира, мягких фракций молочного жира, фракций сфинголипидов, фракций глобулярных мембран молочного жира, фракций липидов глобулярных мембран молочного жира, фракций фосфолипидов, сложных липидных фракций, молозива, фракции молозива, концентрата белка молозива (CPC), сыворотки молозива, фракции иммуноглобулина из молозива, сыворотки (включая сладкую сыворотку, сыворотку из молочной кислоты, сыворотку из минеральной кислоты или восстановленный порошок сыворотки), изолята белка молочной сыворотки (WPI), концентрата белка молочной сыворотки (WPC), композиции, полученной из любого потока обработки молока или молозива, композиции, полученной из ультраконцентрата или пермеата, полученного ультрафильтрацией или микрофильтрацией любого потока обработки молока или молозива, композиции, полученной из проскока или адсорбированной фракции, полученной с помощью хроматографического (включая без ограничения ионную и гель-проникающую хроматографию) разделения любого потока обработки молока или молозива, экстрактов любого из этих производных молока, включая экстракты, полученные многостадийным фракционированием, дифференциальной кристаллизацией, фракционированием растворителем, сверхкритическим фракционированием, приблизительнокритическим фракционированием, дистилляцией, центробежным фракционированием или фракционированием с помощью модификатора (например, мыла или эмульгаторов), гидролизатов любого из этих производных, фракций гидролизатов и любой комбинации любых двух или более из этих производных, включая комбинации гидролизованных и/или негидролизованных фракций. Следует понимать, что источником этих производных может быть молоко или молозиво или их комбинация.
L. rhamnosus
[00113] Понятно, что концентрация  HN001 или одного или нескольких ее производных в композиции, составленной для введения, может быть меньше, чем концентрация в композиции, составленной, например, для распределения или хранения, и что концентрация композиции, составленной для хранения и последующего составления композиции, подходящей для введения, должна быть достаточной, чтобы также обеспечивать достаточную концентрацию указанной композиции для введения таким образом, чтобы ее можно было вводить в терапевтически эффективной дозе.
[00114] Композиции, применимые в данном документе, можно применять отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими терапевтическими средствами. Терапевтическое средство может представлять собой пищевой продукт, напиток, пищевую добавку, добавку к напитку, пищевой компонент, питьевой компонент, биологически активную добавку, питательный продукт, продукт лечебного питания, нутрицевтик, лекарственный препарат или фармацевтическое средство. Терапевтическое средство может представлять собой пробиотическое средство или пробиотический фактор и предпочтительно является эффективным для лечения, предупреждения или ослабления по меньшей мере одного из PND и PNA, или одного или нескольких симптомов по меньшей мере одного из PND и PNA, или одного или нескольких факторов риска, связанных с по меньшей мере одним из PND и PNA, или их последствий.
[00115] При применении в комбинации с другим терапевтическим средством введение композиции, применимой в данном документе, и другого терапевтического средства может быть одновременным или последовательным. Одновременное введение включает введение однократной лекарственной формы, которая содержит все компоненты, или введение отдельных лекарственных форм по существу в одно и то же время. Последовательное введение включает введение в соответствии с различными графиками, предпочтительно таким образом, чтобы имело место частичное перекрывание периодов, в течение которых предоставляются композиция, применимая в данном документе, и другое терапевтическое средство.
L. rhamnosus
[00116] Подходящие средства, с которыми композиции, применимые в данном документе, можно вводить отдельно, одновременно или последовательно, включают одно или несколько пробиотических средств, одно или несколько пребиотических средств, один или несколько фосфолипидов, один или несколько ганглиозидов, другие подходящие средства, известные в данной области техники, и их комбинации. Применимые пребиотики включают галактоолигосахариды (GOS), короткоцепочечные GOS, длинноцепочечные GOS, фруктоолигосахариды (FOS), олигосахариды человеческого грудного молока (HMO), короткоцепочечные FOS, длинноцепочечные FOS, инулин, галактаны, фруктаны, лактулозу и любые смеси любых двух или более из них. Некоторые пребиотики рассматриваются Boehm G and Moro G (Structural and Functional Aspects of Prebiotics Used in Infant Nutrition, J. Nutr. (2008) 138(9):1818S-1828S), включенной в данный документ посредством ссылки. Другие применымые средства могут включать пищевые волокна, такие как полностью или частично нерастворимые или неперевариваемые пищевые волокна. Соответственно, в одном варианте осуществления  HN001 или его производное можно вводить отдельно, одновременно или последовательно с одним или несколькими средствами, выбранными из одного или нескольких пробиотиков, одного или нескольких пребиотиков, одного или нескольких источников пищевых волокон, одного или нескольких галактоолигосахаридов, одного или нескольких короткоцепочечных галактоолигосахаридов, одного или нескольких длинноцепочечных галактоолигосахаридов, одного или нескольких фруктоолигосахаридов, одного или нескольких короткоцепочечных галактоолигосахаридов, одного или нескольких длинноцепочечных галактоолигосахаридов, одного или нескольких олигосахаридов человеческого грудного молока, инулина, одного или нескольких галактанов, одного или нескольких фруктанов, лактулозы или любой смеси любых двух или более из них.
[00117] В одном варианте осуществления композиция, применимая в данном документе, включает молочные компоненты, такие как белок молочной сыворотки, фракции белка молочной сыворотки (включая кислотные или основные фракции белка молочной сыворотки или их комбинацию), гликомакропептид, лактоферрин, железо-лактоферрин, функциональный вариант лактоферрина, функциональный фрагмент лактоферрина, витамин D или кальций или их комбинации, или вводится одновременно или последовательно с ними. Применимые композиции, содержащие молочный компонент, включают композиции, такие как пищевой продукт, напиток, пищевая добавка, добавка к напитку, биологически активная добавка, питательный продукт, продукт лечебного питания или нутрицевтик. Молочные фракции, обогащенные этими компонентами, также можно применять. Применимые лактоферрины, фрагменты и композиции описаны в международных патентных заявках WO 03/082921 и WO 2007/043900, обе из которых полностью включены в настоящее описание посредством ссылки.
[00118] Следует понимать, что перечисленные выше дополнительные терапевтические средства (как на основе пищевого продукта, так и фармацевтические средства) также можно применять в способе согласно настоящему изобретению, где их вводят отдельно, одновременно или последовательно с композицией, применимой в данном документе.
[00119] В одном варианте осуществления композиция, применимая в данном документе, дополнительно содержит фармацевтически приемлемый носитель. В другом варианте осуществления композиция представляет собой или составлена в виде пищевого продукта, напитка, пищевой добавки, добавки к напитку, биологически активной добавки, питательного продукта, продукта лечебного питания, продукта для энтерального питания, продукта для парентерального питания, заменителя пищи, космецевтического, нутрицевтического, лекарственного препарата или фармацевтического препарата. В одном варианте осуществления композиция находится в форме таблетки, капсуловидной таблетки, пилюли, твердой или мягкой капсулы или пастилки. В одном варианте осуществления композиция находится в форме крахмальной капсулы, порошка, дозируемого порошка, гранул, суспензии, эликсира, жидкости или любой другой формы, которая может быть добавлена в пищевой продукт или напиток, включая, например, воду, молоко или фруктовый сок. В одном варианте осуществления композиция дополнительно содержит один или несколько компонентов (таких как антиоксиданты), которые предотвращают или уменьшают деградацию композиции во время хранения или после введения. Эти композиции могут включать любой пищевой потребительский продукт, который способен переносить бактерии или бактериальные производные, в том числе убитые нагреванием, убитые под давлением, лизированные, обработанные УФ или светом, облученные, фракционированные или иным образом убитые или ослабленные бактерии. Примеры подходящих пищевых потребительских продуктов включают водные продукты, хлебобулочные изделия, кондитерские продукты, включая шоколад, желе, виды мороженого, восстановленные фруктовые продукты, энергетические батончики, пищевые концентраты, батончики мюсли, спреды, соусы, соусы для макания, молочные продукты, включая йогурты и сыры, напитки, включая напитки на молочной и немолочной основе, молоко, сухое молоко, спортивные добавки, включая спортивные добавки на молочной и немолочной основе, фруктовые соки, пищевые добавки, такие как протеиновые посыпки, продукты, представляющие собой биологически активную добавку, включая таблетки для ежедневного употребления, смеси и йогурты для докорма после отъема от груди и смеси, такие как детская смесь первого уровня, детская смесь второго уровня или детская смесь третьего уровня, в форме порошка или жидкости. Подходящие нутрицевтические композиции, применимые в данном документе, могут быть предусмотрены в аналогичных формах.
[00120] Понятно, что различные композиции по настоящему изобретению могут быть составлены с целью введения конкретной группе субъектов. Например, состав композиции, подходящей для введения беременной матери (например, для непрямого введения субъекту, представляющему собой плод, или субъекту, представляющему собой новорожденного на грудном вскармливании, младенца или ребенка), может отличаться от состава композиции, которая подлежит непосредственному введению субъекту. Следует понимать, что состав композиции, подлежащей профилактическому введению, может отличаться от состава композиции, составленной для введения, когда присутствует по меньшей мере одно из PND и PNA или один или несколько симптомов по меньшей мере одного из PND и PNA.
Lactobacillus rhamnosus
Lactobacillus acidophilus
Lactobacillus acidophilus
Lactobacillus reuteri
Lactobacillus reuteri
Bifidobacteria lactis
Bifidobacteria lactis
Bifidobacteria lactis
L. rhamnosus
[00121] В одном варианте осуществления композиция для профилактического применения может дополнительно содержать пробиотическое средство, такое как  GG,  (например,  (LAVRI-A1),  (например,  ATCC 55730) или  (например, штамм  HN019 или штамм  BB12) или комбинация любых двух или более из них, или  HN001 можно применять в комбинации с ним.
Lactobacillus rhamnosus
Lactobacillus acidophilus
Lactobacillus acidophilus
Lactobacillus reuteri
Lactobacillus reuteri
Bifidobacteria lactis
Bifidobacteria lactis
Bifidobacteria lactis
L. rhamnosus
[00122] В одном варианте осуществления композиции для профилактического введения и, в частности, для профилактического непрямого введения, могут дополнительно содержать пробиотическое средство, такое как  GG,  (например,  (LAVRI-A1),  (например,  ATCC 55730) или  (например, штамм  HN019 или штамм  BB12) или комбинация любых двух или более из них, или  HN001 можно применять в комбинации с ним.
[00123] Будет понятно, что термин “профилактический” и грамматические эквиваленты при использовании в данном документе подразумевают лечение, применение, введение и т. п. до того, как станут явными по меньшей мере одно из PND и PNA или симптомы по меньшей мере одного из PND и PNA.
Lactobacillus rhamnosus
Lactobacillus acidophilus
Lactobacillus acidophilus
Lactobacillus reuteri
Lactobacillus reuteri
Bifidobacteria lactis
Bifidobacteria lactis
Bifidobacteria lactis
L. rhamnosus
[00124] В вариантах осуществления для применения при лечении субъекта, у которого имеется по меньшей мере одно из PND и PNA или один или несколько симптомов по меньшей мере одного из PND и PNA, композиция может дополнительно содержать пробиотическое средство, такое как  GG,  (например,  (LAVRI-A1),  (например,  ATCC 55730) или  (например, штамм  HN019 или штамм  BB12) или комбинация любых двух или более из них, или  HN001 можно применять в комбинации с ним.
[00125] При использовании в данном документе термин “терапевтический” и грамматические эквиваленты предполагают лечение, пути применения или введение, где присутствуют по меньшей мере одно из PND и PNA или их симптомы.
[00126] Предполагается, что ссылка на диапазон чисел, раскрытых в данном документе (например, от 1 до 10), также включает в себя ссылку на все рациональные числа в пределах этого диапазона (например, 1, 1,1, 2, 3, 3,9, 4, 5, 6, 6,5, 7, 8, 9 и 10), а также любой диапазон рациональных чисел в пределах этого диапазона (например, от 2 до 8, от 1,5 до 5,5 и от 3,1 до 4,7), и, следовательно, все поддиапазоны всех диапазонов, явно раскрытых в данном документе, тем самым явно раскрыты. Это только примеры того, что конкретно подразумевается, и все возможные комбинации числовых значений между перечисленными наименьшим значением и наибольшим значением должны рассматриваться как явно указанные в настоящей заявке аналогичным образом.
3 Послеродовая депрессия (PND)
[00127] Послеродовая депрессия (PND), также называемая постнатальной депрессией (PPD), представляет собой тип клинической депрессии , которая может поражать матерей (и отцов) после рождения ребенка. В то время как многие женщины испытывают самокупирующиеся симптомы в легкой форме в постнатальный период, следует заподозрить послеродовую депрессию, в случае если симптомы тяжелые и продолжались более двух недель.
Начало проявления и продолжительность
[00128] PND обычно начинается в период от двух недель до месяца после родов и может длиться несколько месяцев или даже год.
Симптомы
[00129] Симптомы PND у матерей могут включать грусть, безнадежность, эпизоды плаксивости, низкую самооценку, раздражительность, чувство вины, чувство подавленности, изменения в характере сна, изменения в привычках питания, неспособность к возможности утешения, истощение, опустошенность, неспособность испытывать удовольствие от действий, которые обычно считаются приятными, социальное отчуждение, низкий уровень энергии или отсутствие энергии, быстрое приобретение чувства расстроенности, чувство неполноценности при осуществлении заботы о ребенке, снижение сексуального влечения, периодическую или частую тревожность, нарушение нормальной эмоциональной связи матери и младенца.
Неблагоприятные исходы в отношении младенцев
[00130] PND также может привести к неблагоприятным исходам для ребенка. Ребенок может страдать от нарушения нормальной эмоциональной связи матери и младенца. PND может привести к тому, что матери будут не в состоянии заботиться о ребенке. Установлено, что у детей матерей с PND наблюдаются более высокие показатели частоты эмоциональных проблем, поведенческих проблем, психиатрических диагнозов (таких как оппозиционно-вызывающее расстройство и и расстройство поведения) и гиперактивности.
Причины
[00131] Причина PND не совсем понятна. Гормональные изменения, генетика и важные жизненные события предлагались в качестве потенциальных причин. Доказательства свидетельствуют о том, что могут играть роль гормональные изменения. Гормоны, которые были изучены, включают эстроген, прогестерон, тиреоидный гормон, тестостерон, кортикотропин-рилизинг-гормон, и кортизол.
Факторы риска
[00132] Факторы, которые, как предполагается, повышают риск PND, включают предродовую депрессию или тревожность, депрессию в личном или семейном анамнезе, предменструальные симптомы от умеренной до тяжелой степени тяжести, послеродовую подавленность, психологическую травму, связанную с родами, физическую травму, связанную с родами, предшествующее мертворождение или выкидыш, предпочтение кормления смесью грудному вскармливанию, курение сигарет, низкую самооценку, стресс в результате ухода за ребенком или жизненных условий, низкую социальную поддержку, плохие семейные взаимоотношения или одинокое семейное положение, низкий социально-экономический статус, проблемы, связанные с темпераментом младенца, и колики.
4 Послеродовая тревожность (PNA)
[00133] Также очень распространенным является переживание послеродовой тревожности и послеродовой депрессииодновременно. Фактически, в 50% случаев эти два состояния встречаются совместно.
Начало проявления и продолжительность
[00134] Как и PND, PNA обычно начинается в период от двух недель до месяца после родов и может длиться несколько месяцев или даже год.
[00135] Симптомы послеродовой тревожности у матери включают чувства страха и беспокойства, которые начинают доминировать над мышлением, ощущение раздражения, ощущение беспокойства, ощущение напряжения, ощущение нахождения “на грани”, учащенное сердцебиение/сильно учащенное сердцебиение, панические атаки, повторяющиеся тревожные мысли, чувство отсутствия контроля, чувство, что что-то неправильно делается, чувство, что произойдет что-то ужасное, бессонница, избегание ситуаций по причине страха, что случится что-то плохое.
[00136] Послеродовая тревожность может охватывать генерализованное тревожное расстройство (GAD), обсессивно-компульсивное расстройство (OCD), паническое расстройство, социальную фобию, специфическую фобию и посттравматическое стрессовое расстройство (PTSD), например, связанное с травматическими родами.
[00137] Различные аспекты настоящего изобретения теперь будут проиллюстрированы неограничивающими способами посредством ссылки на следующие примеры.
ПРИМЕР
Lactobacillus rhamnosus
[00138] Целью данного исследования было оценить влияние  HN001, назначенного во время беременности и в послеродовый период, на симптомы материнской депрессии и тревожности в послеродовый период.
Материалы и способы
[00139] Беременные женщины в Окленде и Веллингтоне, Новая Зеландия, были привлечены к исследованию с помощью медицинских работников и информации об исследовании, помещенной в пакеты для беременных. Женщины считались удовлетворяющими критериям включения, если они были на сроке гестации менее 16 недель, были англоговорящими, намеревались кормить грудью и при условии, что у них или у биологического отца будущего ребенка имелась в анамнезе астма, сенная лихорадка или экзема, требующие лечения лекарственными препаратами. Женщины исключались из исследования, если они их возраст составлял менее 16 лет, планировали выехать вне исследовательских центров в течение срока исследования, имели в анамнезе иммунологические расстройства или лечение лекарственными препаратами, болезнь сердечного клапана, нуждались в оплодотворении in-vitro, имели серьезные аномалии развития плода, применяли пробиотические напитки или добавки, участвовали в другом рандомизированном контролируемом исследовании (RCT), отказывали на уведомление от своих клинических опекунов, переносили терапию с помощью адреналина при аллергии на коровье молоко, имели в анамнезе пересадку органов или ВИЧ, применяли продолжительную антибактериальную терапию в течение по меньшей мере 3 месяцев, переживали выкидыш между скринингом и включением в исследование или иным образом считались неподходящими. Женщины, удовлетворяющие критериям, были включены в исследование на сроке гестации 14-16 недель, при этом срок гестации был основан на самом раннем сканировании в первом триместре и, в случае если это было недоступно, на дате последнего менструального периода.
Схема исследования
9
[00140] Участвующих женщин рандомизировали для получения капсулы, содержащие либо HN001 (6X10 колониеобразующих единиц (КОЕ)), либо плацебо (полученный из кукурузы мальтодекстрин, идентичный пробиотику по виду и запаху) для ежедневного приема в период от момента включения на протяжении всей беременности и до шести месяцев после рождения, если все еще продолжали кормить грудью. Порошок HN001 был изготовлен Fonterra Co-operative Group Ltd с применением асептического ферментирования, концентрирования и лиофилизации, как описано ранее(8). Порошок плацебо, полученный из кукурузы мальтодекстрин, был изготовлен компанией Grain Processing Corp., Орегон, США. Женщин проинструктировали хранить капсулы в холодильнике и не принимать их в течение 10 минут после употребления горячей пищи или жидкости.
[00141] Fonterra сохраняла образцы капсул при 4°С, которые тестировались ежемесячно, чтобы удостовериться в жизнеспособности содержимого с течением времени. Жизнеспособность содержимого отобранных неиспользованных капсул, которые вернули с исследования, проверяли один раз в три месяца. Потеря жизнеспособности составляла менее 0,1 log и находилась в пределах уровня погрешности способа подсчета.
[00142] Рандомизацию капсул осуществлял специалист по статистике из Fonterra, который не имел контактов с исследователями или участниками исследования. Рандомизацию стратифицировал исследовательский центр, и ее проводили блоками по 20 в соответствии с компьютерным графиком рандомизации и коэффициентом распределения 1:1. Исследовательский персонал проводил скрининг и включал участников, предоставив участникам, удовлетворяющим критериям исследования, следующий по очереди контейнер с последовательно пронумерованными капсулами. Все исследователи, сотрудники лаборатории и участники не были осведомлены о результатах распределения.
2
[00143] Собранная информация на исходном уровне включала возраст, этническую принадлежность, количество родов в анамнезе, перенесенный синдром поликистозных яичников (PCOS), индекс массы тела (ИМТ) (масса (кг)/рост (м)), окружность талии, применение антибиотиков во время беременности, но до включения в исследование и наличие сахарного диабета 2 типа у участника или его родственников первой степени родства. Среди женщин с наличием предыдущих беременностей более 20 недель авторы изобретения также собирали анамнез о предшествующем GDM и массе предыдущих детей при рождении.
Сбор данных
[00144] Матери были опрошены на исходном уровне (14-16 недель гестации), чтобы собрать информацию о характеристиках и анкетные данные матерей. Когда детям исполнялось 6 месяцев и 12 месяцев, матерей посещали и приглашали заполнить анкету об их психологическом состоянии на момент, когда их ребенку было 1-2 месяца. Если дети были старше 12 месяцев в момент заполнения анкеты, матерям отправляли анкету по почте или предлагали заполнить ее онлайн посредством безопасной ссылки. Матери и исследователи по-прежнему не были осведомлены о порядке назначения лечения участникам на всех последующих этапах исследования.
Исходы
[00145] Эдинбургская шкала послеродовой депрессии (EPDS). EPDS представляет собой скрининговую анкету из 10 пунктов, широко применяемую для оценки настроения матери (14). В целях анализа применяли стандартное пороговое значение >12 для выявления матерей с более высоким риском послеродовой депрессии.
[00146] Опросник состояния и свойства тревожности версии с 6 пунктами (STAI6): STAI6 является короткой оценочной шкалой с 6 пунктами, утвержденной в качестве скрининговой анкеты в отношении тревожности на основе более длинного опросника состояния и свойства тревожности (15). Максимально допустимый уровень показателей >15 применяли в качестве показателя клинически значимых уровней тревожности.
[00147] Как для EPDS, так и для STAI6 вопросы изменяли, чтобы применять прошедшее время, поскольку матерей просили вспомнить события, когда их ребенку было 1-2 месяца, и отвечать на вопросы, основываясь на том, как они себя чувствовали в то время.
[00148] Младенческие колики: Младенческие колики оценивали при опросе в 6-месяцев, когда матерей спрашивали, обращались ли они к медицинскому работнику по причине того, что у их ребенка были колики в какой-либо момент времени от рождения до возраста шести месяцев.
Размер выборки и статистический анализ
[00149] При размере выборки 200 в каждой группе и уровнем отсева 13% исследование имело 79% статистическую мощность с выявлением снижения показателя EPDS на 26% при уровне достоверности 5%.
[00150] Статистический анализ проводили в SAS 9.4 с применением обобщенной линейной модели для непрерывных результатов и логистической регрессии для категориальных результатов. Мультивариантный анализ взаимосвязи между введением пробиотических добавок и баллами послеродовой депрессии и тревожности с поправкой на время с момента рождения, в которое были заполнены анкеты, и наличие младенческих колик.
Этика
[00151] Исследование получило одобрение Новозеландского межрегионального комитета по этике (MEC/11/09/77).
Результаты
Респонденты
[00152] На фигуре 1 показано число удовлетворяющих критериям исследования, набранных и распределенных в исследовании PIP. Из 423 рандомизированных женщин 382 (90,3%) заполнилиданные в отношении психологических критериев результата. Из 382 участников данного исследования 11 заполнили анкеты при посещении в возрасте младенца 6 месяцев, 112 заполнили их при посещении в возрасте младенца 12-месяцев, а остальные 259 заполнили данные в отношении параметров онлайн при медианном значении возраста ребенка 2,1 года (IQR 1,8-2,4). В общей сложности 195 из ответивших женщин состояли в пробиотической группе и 187 состояли в группе плацебо.
[00153] Баллы депрессии и тревожности имели тенденцию к повышению с увеличением интервала между моментов 1-2 месяца после родов и временем заполнения анкеты (балл депрессии увеличивался на 0,85 в год, р=0,065; балл тревожности увеличивался на 0,66 в год, р=0,060). Младенческие колики значимо ассоциировались с более высокими показателями депрессии (мультивариантный показатель р<0,0001) и тревожности (мультивариантный показатель р<0,0001), но значимо не ассоциировались с группой, получавшей пробиотические добавки (р=0,456).
Пробиотическое лечение и психологические исходы
[00154] В таблице 1 показано среднее и стандартное отклонение баллов депрессии и тревожности в группах, получавших пробиотическое лечение и плацебо. Матери в группе пробиотического лечения сообщали о значительно более низких баллах депрессии (р=0,035) и баллах тревожности (р=0,014), чем в группе плацебо. После учета наличия младенческих колик и момента времени после рождения, когда анкеты были заполнены, введение пробиотических добавок оставалось значимо ассоциированным со снижением баллов депрессии (р=0,037) и тревожности (р=0,014).
Таблица 1. Баллы депрессии и тревожности в группах с пробиотического лечения и плацебо
<b>Среднее значение</b>
<b>Стандартное отклонение</b>
<b>Унивариантный показатель</b><b>Значение P</b>
<b>Мультивариантный показатель</b><b>Значение P</b>
<b>Баллы депрессии*</b>
HN001
N=194
7,7
5,4
0,035
0,037
Плацебо
N=187
9,0
6,0
<b>Баллы тревожности*</b>
HN001
N=192
12,0
4,0
0,014
0,014
Плацебо
N=187
13,0
4,3
*У трех участников были неполные данные по тревожности в STAI6, а у одного были неполные данные по депрессии в EPDS, поэтому баллы не могли быть рассчитаны.
[00155] В таблице 2 показано число женщин в группах пробиотического лечения и плацебо, которые сообщали о баллах депрессии или тревожности, превышающих пороговое значение. Число женщин, сообщавших о баллах депрессии, превышающих пороговое значение, значимо не отличалось между группами пробиотического лечения и плацебо (унивариантный показатель р=0,086, мультивариантный показатель р=0,106). Однако женщины в группе пробиотического лечения имели значимо меньшую вероятность превышения порогового значения баллов тревожности, чем в группе плацебо (р=0,001), эта связь оставалась статистически значимой после учета младенческих колик и момента времени с рождения при заполнении анкеты (р=0,002).
Таблица 2. Число и процент участников, имевших баллы на уровне или выше предельного значения в отношении депрессии и тревожности в группах с пробиотиками и плацебо.
<b>HN001</b><b>N (%)</b>
<b>Плацебо</b><b>N (%)</b>
<b>Унивариантный показатель</b><b>Значение P</b>
<b>Мультивариантный показатель</b><b>Значение P</b>
<b>Балл депрессии*</b>
С депрессией
32 (16,5)
44 (23,5)
0,086
0,106
Без депрессии
162 (83,5)
143 (76,5)
<b>Балл тревожности*</b>
С тревожностью
30 (15,6)
55 (29,4)
0,001
0,002
Без тревожности
162 (84,4)
132 (70,6)
*У трех участников были неполные данные по тревожности в STAI6, а у одного были неполные данные по депрессии в EPDS, поэтому баллы не могли быть рассчитаны.
Обсуждение
[00156] В этом исследовании продемонстрировано значительно более низкая распространенность симптомов депрессии и тревожности после родов у женщин, получавших пробиотическую добавку HN001 во время и после беременности, чем у тех, кому давали плацебо. Более того, число женщин, продемонстрировавших клинически значимые уровни тревожности при скрининге, было значительно ниже в группе с пробиотиком. Насколько авторам настоящего изобретения известно, это первое двойное слепое RCT пробиотиков, в котором оценили PND и тревожность. Кроме того, размер выборки у авторов изобретения был значительно больше, чем у многих ранее заявленных RCT пробиотиков по настроению и поведению. В систематическом обзоре клинических испытаний пробиотиков средний размер выборки в рассмотренных исследованиях составлял 60 (12).
Lactobacillus casei
[00157] Полученные данные о том, что у женщин, получавших пробиотические добавки, имелось меньше симптомов послеродовой тревожности и депрессии, согласуются с двумя предыдущими клиническими исследованиями влияния пробиотиков на настроение в разных популяциях. В RCT из 40 человек с большим депрессивным расстройством, подвергнутых лечению с помощью комбинации трех пробиотиков или плацебо, также обнаружено значительное уменьшение симптомов депрессии по шкале описания депрессий Бека (BDI) в группе лечения (16). Также сообщалось об уменьшении симптомов тревожности в выборке из 39 субъектов с хронической усталостью, рандомизированных для получения  или плацебо, но в том же исследовании не было обнаружено уменьшения симптомов депрессии согласно BDI в группе лечения (17). Но не во всех исследованиях продемонстрировано значимое положительное влияние пробиотического лечения в отношении настроения (12). Разнородность исследуемых популяций, в том числе популяций с шизофренией (18), курильщиков (19) и пациентов с синдромом раздраженного кишечника (20), диапазон применяемых пробиотических штаммов, малый размер выборки и различные показатели настроения затрудняют, если не делают невозможным, проведение любого метаанализа этих исследований.
[00158] В настоящем исследовании младенческие колики были ассоциированны с более высокими баллами депрессии и тревожности. В литературе было высказано предположение, что применение пробиотических добавок может улучшить настроение матери путем уменьшения младенческих колик. В одном исследовании сообщалось, что прямое применение пробиотических добавок у младенцев уменьшало младенческие колики, и это, в свою очередь, ассоциировалось с более низкими уровнями материнской депрессии (21). В то время как младенцы в настоящем исследовании, вероятно, подвергались воздействию некоторых пробиотиков косвенно либо внутриутробно, либо через грудное молоко, им непосредственно не вводили пробиотик, кроме того, авторы обнаружили, что показатель младенческих колик не различался между группами с пробиотиками и плацебо, и мультивариантный анализ показал, что применением пробиотических добавок и отсутствие младенческих колик независимо ассоциировались с более низкими баллами послеродовой депрессии и тревожности.
[00159] Распространенность депрессии и тревожности через 1-2 месяца после родов в настоящем исследовании была выше, чем 10-15%, заявляемые обычно. Это может быть связано с тем, что матери в настоящем исследовании заполняли анкету ретроспективно. Возможно, когда матери вспоминают, как они чувствовали себя через 1-2 месяца после родов, они понимают, насколько утомительным может быть уход за новорожденным младенцем. В исследованиях касательно распространенности PND в ранний момент времени женщины могут с меньшей вероятностью оценивать себя как находящиеся в состоянии депрессии или тревожности, поскольку они ожидают, что будут чувствовать себя истощенными.
L. rhamnosus
L. rhamnosus
[00160] В заключение, в этом исследовании предоставлены доказательства того, что применение пробиотических добавок с применением  HN001 во время беременности и после родов снижает распространенность симптомов PND и тревожности после родов. Не все пробиотические штаммы обладают одинаковым эффектом на здоровье, и возможно, что результаты, полученные с применением  HN001, не будут распространяться на другие пробиотические штаммы. При воспроизведении в других исследованиях этот пробиотик можно применять для предупреждения или лечения депрессии и тревожности после родов.
Заключение
L. rhamnosus
[00161] Матери в данной когорте, которые получали пробиотик  HN001, имели значимо более низкие баллы депрессии и тревожности в послеродовом периоде.
ПРОМЫШЛЕННАЯ ПРИМЕНИМОСТЬ
Lactobacillus rhamnosus
[00162] Настоящее изобретение относится к применению пробиотических бактерий, в частности,  HN001 или ее производных, и, в частности, к лечению или предупреждению по меньшей мере одного из PND и PNA. Также предусмотрены способы применения бактерий и композиции, содержащие бактерии.
ССЫЛКИ
Aust N Z J Psychiatry
1. Abbott MW, Williams MM (2006): Postnatal depressive symptoms among Pacific mothers in Auckland: prevalence and risk factors.  40: 230-8.
2. PMMRC (2014): Eighth annual report of the Perinatal and Maternal Mortality Review Committee: Reporting mortality 2012. Wellington: Health Quality & Safety Commission.
Arch Women’s Ment Health
3. Da Costa D, Dritsa M, Rippen N, Lowensteyn , & Khalife S (2006): Health-related quality of life in postpartum depressed women.  9: 95-102.
Harvard Rev Psychiatry
4. Tronick E, Reck C (2009): Infants of depressed mothers.  17:147-56.
Arch Women’s Ment Halth
5. Grace SL, Evindar A, & Stewart DE (2003): The effect of postpartum depression on child cognitive development and behavior: a review and critical analysis of the literature.  6: 263-274.
J Psychiatr Pract
6. Battle CL, Salisbury AL, Schofield CA, Ortiz-Hernandez S (2013): Perinatal antidepressant use: understanding women's preferences and concerns  19: 443-53.
Genome Med
7. Dinan TG, Cryan JF (2016): Mood by microbes: towards clinical translation.  6:36-38.
Curr Opin Microbiol
8. Collins SM, Kassam Z, Bercik P (2013): The adoptive transfer of behavioral phenotype via the intestinal microbiota: experimental evidence and clinical implications.  16: 240-5.
et al.
PNAS
9. Bravo JA, Forsythe P, Chew MV, Escaravage E, Savignac HM, Dinan TG,  (2011): Ingestion of Lactobacillus strain regulates emotional behaviour and central GABA receptor expression in a mouse via the vagus nerve.  108: 16050-16059.
Bifidobacterium Infantis
Neuroscience
10. Desbonnet L, Garrett L, Clarke G, Kiely B, Cryan JF, Dinan TG (2010): Effect of the probiotic  in the maternal separation model of depression.  170: 1179-1188.
Ann Gastroenterol
11. Carabotti M, Scirocco A, Maselli MA, Severi C (2015): The gut-brain axis: interactions between enteric microbiota, central and enteric nervous systems.  28: 203-209.
Nutr Rev
12. Romijn AR, & Rucklidge, JJ (2015): Systematic review of evidence to support the theory of psychobiotics.  73: 675-693.
BMC Pregnancy Childbirth
13. Barthow C, Wickens K, Stanley T, Mitchell EA, Maude R, Abels P, et al. (2016): The Probiotics in Pregnancy Study (PIP Study): rationale and design of a double-blind randomised controlled trial to improve maternal health during pregnancy and prevent infant eczema and allergy.  16:133.
14. Cox JL, Holden J M & Sagovsky R (1987): Detection of postnatal depression. Development of the 10-item Edinburgh Postnatal Depression Scale. Br J Psychiatry 150: 782 -786.
Marteau TM, Bekker H (1992): The development of a six-item short-form of the state scale of the Spielberger State-Trait Anxiety Inventory (STAI). Br J Clin Psychol 31: 301-6.
15.
Nutrition
16. Akkasheh G, Kashani-Poor Z, Tajabadi-Ebrahimi M, Jafari P, Akbari H, Taghizadeh M, et al. (2016): Clinical and metabolic response to probiotic administration in patients with major depressive disorder: A randomized, double-blind, placebo-controlled trial. 32: 315-320.
et al.
Gut Pathog
17. Rao AV, Bested AC, Beaulne TM, Katzman MA, Iorio C, Beradi JM,  (2009): A randomized, double-blind, placebo-controlled pilot study of a probiotic in emotional symptoms of chronic fatigue syndrome. . 1: 1-6.
et al.
Prim Care Companion CNS Disord
18. Dickerson FB, Stallings C, Origoni A, Katsafanas E, Savage CL, Schweinfurth LA,  (2014): Effects of probiotic supplementation on schizophrenia symptoms and association with gastrointestinal functioning: A randomised, placebo-controlled trial.  16. pii: PCC.13m01579.
et al.
Br J Nutr
19. Reale M, Boscolo P, Bellante V, Tarantelli C, Di Nicola M, Forcella L,  (2012): Daily intake of Lactobacillus casei Shirota increases natural killer cell activity in smokers.  108: 308-314.
World J Gastroenterol
20. Dapoigny M, Piche T, Ducrote P, Lundard B, Cardot J, Bernalier-Donadille A (2012): Efficacy and safety profile of LCR35 complete freeze-dried culture in irritable bowel syndrome: a randomized double-blind study.  18: 2067-2075.
Lactobacillus reuteri
Antonie van Leeuwenhoek
21. Mi G, Zhao L, Qiao D, Kang W, Tang M, & Xu J (2015): Effectiveness of  in infantile colic and colicky induced maternal depression: A prospective single blind randomized trial.  107: 154-155.
22. Craig M, and Howard, L (2009) Postnatal depression, BMJ Clin Evid, опубликовано оналайн 26 января 2009 г.