СПОСОБЫ ВЫСВОБОЖДЕНИЯ СПОРОЦИСТ ИЗ ООЦИСТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ РЕГУЛИРУЕМЫХ УСИЛИЙ СДВИГА

1. Способ высвобождения спороцист из ооцист, включающий:
получение раствора, содержащего суспендированные в нем ооцисты;
воздействие на раствор регулируемых усилий сдвига, достаточных для разрыва стенок ооцист и высвобождения из них жизнеспособных спороцист; и
извлечение высвобождаемых жизнеспособных спороцист из раствора.
2. Способ по п.1, где воздействие на раствор регулируемых усилий сдвига, достаточных для разрыва стенок ооцист и высвобождения из них спороцист, включает пропускание раствора под давлением через камеру процессора Microfluidizer один раз или более.
3. Способ по п.1, где раствор содержит водный раствор.
4. Способ по п.3, где водный раствор является раствором, выбранным из группы, состоящей из: сбалансированного солевого раствора Хенкса (HBSS), фосфатно-солевого буферного раствора (PBS), среды RPMI и среды DMEM.
5
-1
6
-1
5. Способ по п.1, где величина усилия сдвига, используемого для высвобождения спороцист из ооцист E. maxima, находится в интервале от примерно 3,00·10 с в мин до примерно 1,50·10 с в мин.
6
-1
6
-1
6. Способ по п.1, величина усилия сдвига, используемого для высвобождения спороцист из ооцист Е tenella или E. acervulina, находится в интервале от примерно 1,00·10 с в мин до примерно 3,00·10 с в мин.
7. Способ по п.2, где раствор, пропускаемый через камеру процессора Microfluidizer, находится под давлением от примерно 1000 фунтов на кв. дюйм (6,9 МПа) до примерно 6000 фунтов на кв. дюйм (41,4 МПа).
8. Способ по п.7, где камера процессора Microfluidizer имеет диаметр от примерно 75 микрон до примерно 400 микрон, и где раствор имеет скорость потока от примерно 100 мл до примерно 2000 мл.
9. Способ по п.1, где камера процессора Microfluidizer имеет Z-образную конфигурацию.
10. Способ по п.1, где камера процессора Microfluidizer имеет Y-образную конфигурацию.
11. Способ по п.1, где процессор Microfluidizer содержит несколько камер, и способ дополнительно включает выбор камеры, имеющей диаметр, который, по существу, равен или больше диаметра ооцист, и пропускание раствора под давлением через выбранную камеру.
12. Способ по п.1, где процессор Microfluidizer содержит несколько камер последовательно, причем каждая камера имеет соответствующий отличный диаметр, и способ дополнительно включает выбор камеры, имеющей диаметр, который, по существу, равен или больше диаметра ооцист, и пропускание раствора под давлением через выбранную камеру.
13. Способ по п.1, включающий термическую обработку ооцист для ослабления их стенок перед воздействием на раствор регулируемых усилий сдвига.
14. Способ по п.1, включающий химическую обработку ооцист для ослабления их стенок перед воздействием на раствор регулируемых усилий сдвига.
15. Способ по п.1, включающий ферментативную обработку ооцист для ослабления их стенок перед воздействием на раствор регулируемых усилий сдвига.
16. Способ по п.1, включающий использование комбинации термической, химической или ферментной обработки ооцист для ослабления их стенок перед воздействием на раствор регулируемых усилий сдвига.
17. Способ по п.1, дополнительно включающий криоконсервирование извлеченных спороцист.
18. Способ по п.1, дополнительно включающий получение вакцины и/или диагностический анализ с использованием извлеченных спороцист.
19. Способ по п.1, дополнительно включающий эксцистирование спорозоитов из извлеченных спороцист.
20. Способ по п.19, дополнительно включающий получение вакцины с использованием эксцистированных спорозоитов.
21. Способ по п.1, дополнительно включающий определение процентного содержания спороцист, высвобождаемых из ооцист.
22. Способ по п.1, дополнительно включающий определение процентного содержания высвобождаемых спороцист, которые являются жизнеспособными.
23. Способ по п.1, где ооцисты представляют собой ооцисты Eimeria.
24. Способ по п.23, где ооцисты Eimeria выбраны из группы, состоящей из ооцист Е. maxima, ооцист E. mitis, ооцист E. tenella, ооцист E. acervulina, ооцист E. brunetti, ооцист Е. necatrix, ооцист Е. ргаесох, ооцист E. mivati и любой их комбинации.
25. Способ по п.23, где ооцисты Eimeria выбраны из группы, состоящей из ооцист E. meleagrimitis, ооцист Е. adenoeides, ооцист E. gallopavonis, ооцист E. dispersa, ооцист Е. innocua и ооцист E. subrotunda и любой их комбинации.
26. Способ по п.23, где ооцисты Eimeria выбраны из группы, состоящей из ооцист E. zuernii, Е. bovis ооцист и любой их комбинации.
27. Способ по п.23, где ооцисты Eimeria выбраны из группы, состоящей из ооцист Е. ahsata, ооцист E. bakuensis, ооцист E. crandallis, ооцист E. faurei, ооцист E. granulosa, ооцист E. intricata, ооцист E. marsica, ооцист E. ovinoidalis, ооцист E. pallida, ооцист E. parva, ооцист E. weybridgensis и любой их комбинации.
28. Способ по п.23, где ооцисты Eimeria выбраны из группы, состоящей из ооцист E. intestinalis, ооцист E. Vejdovskyi, ооцист E. piriformis, ооцист E. coecicola, ооцист E. irresidua, ооцист E. flavescens, ооцист E. exigua, ооцист E. magna, ооцист E. perforans, ооцист E. media, ооцист E. stiedai и любой их комбинации.
29. Способ высвобождения спорозоитов из ооцист, включающий:
получение раствора, содержащего суспендированные в нем ооцисты;
воздействие на раствор регулируемых усилий сдвига, достаточных для разрыва стенок ооцист и высвобождения из них жизнеспособных спорозоитов; и
извлечение высвобождаемых жизнеспособных спорозоитов из раствора.
30. Способ по п.29, где воздействие на раствор регулируемых усилий сдвига, достаточных для разрыва стенок ооцист и высвобождения из них спорозоитов, включает пропускание раствора под давлением через камеру процессора Microfluidizer один раз или более.
31. Способ по п.29, где раствор содержит водный раствор.
32. Способ по п.29, включающий обработку ооцист для ослабления их стенок перед воздействием на раствор регулируемых усилий сдвига.
33. Способ по п.29, дополнительно включающий криоконсервирование извлеченных спорозоитов.
34. Способ по п.29, дополнительно включающий получение вакцины и/или диагностический анализ с использованием извлеченных спорозоитов.