ФАРМАЦЕВТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ ДЛЯ НАРУЖНОГО И МЕСТНОГО ПРИМЕНЕНИЯ, ОБЛАДАЮЩАЯ АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫМ И НЕКРОЛИТИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ
ANTIBACTERIAL AND NECROLYTIC EXTERNAL AND LOCAL PHARMACEUTICAL COMPOSITION

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, а именно к фармакологическим препаратам, применяемым при лечении гнойных ран и ожогов, гнойно-воспалительных заболеваний кожи и др., для ускорения и улучшения условий заживления.
Известны комплексы бактериолитических ферментов, лизирующие грамположительные микроорганизмы, устойчивые к антибиотикам (патенты RU 1549227, C12N 9/00, 1984.10.04; RU 2193063, C12N 9/00, 2000.11.29).
Комплекс бактериолитических ферментов (патент RU 1549227), используемый в медицине под названием лизоамидаза, а ветеринарии - лизомаст (патент RU 2064299, A61K 35/74, 1993.12.13), включает три бактериолитических фермента, иммобилизованных на полисахариде, что повышает их стабильность. Полисахарид обеспечивает длительное (в течение нескольких лет) сохранение высокой активности входящих в него ферментов, а также иммуностимулирующие свойства лизоамидазы.
На основе данного комплекса разработан фармакологический препарат, обладающий антибактериальным и некролитическим действием, выпускаемый в виде лиофилизированного порошка, упакованного в 10 мл флаконы по 50 ПЕ, 100 ПЕ с герметично укупоренными резиновыми пробками. При этом в комплект поставки входит растворитель в ампулах по 5 мл из расчета 1 ампула на 50 ПЕ (фармакопейные статьи ФС 42-3329-96 и ФС 42-3332-96). Препарат применяется в жидком виде в фосфатном буферном растворе с концентрацией 5 ПЕ (50 ЛЕ) в 1 мл; 10 ПЕ (100 ЛЕ) в 1 мл; 25 ПЕ (250 ЛЕ) в 1 мл.
Бактериолитические ферменты, входящие в активный комплекс препарата, разрушают клетки грамположительных патогенных микроорганизмов, таких как стафилококки и стрептококки, в том числе имеющих множественную резистентность к антибиотикам: радиоустойчивые микрококки, менингококки, гонококки, грамположительные бациллы. Благодаря наличию в комплексе протеазы и ферментов, обладающих одновременно и протеолитической активностью, препарат хорошо очищает раны от некротических масс. Фрагменты разрушенных клеток обладают иммуностимулирующим действием.
Клинические исследования препарата показали, что лизоамидаза при лечении гнойных ран мягких тканей ускоряет по сравнению с другими традиционными и нетрадиционными средствами течение раневого процесса. Быстрее снижается содержание микрофлоры, быстрее нормализуется цитограмма, быстрее идет отторжение некротических масс, быстрее происходит грануляция и даже эпителизация тканей. Сроки лечения больных с гнойными ранами мягких тканей сокращались во многих случаях в 2 раза. Лизоамидаза стимулирует репаративные процессы, оказывая, помимо некролитического и бактериолитического действий, влияние на течение 2-й фазы воспаления, причем не только за счет сокращения 1-й фазы, что характерно для всех ферментных препаратов, используемых для лечения в подобных случаях, но и за счет стимулирующего влияния на клетки грануляционной ткани, воздействуя непосредственно на клетки пролиферата.
Однако указанные комплексы бактерио- и протеолитических ферментов оказывают слабое действие или не действуют на грамотрицательную микрофлору, так как поверхностные структуры грамотрицательных бактерий являются барьером на пути литического действия лизоамидазы, и поэтому процесс лизиса либо удлиняется, либо не происходит вовсе.
Применение известного препарата в виде жидких растворов обладает рядом недостатков, а именно: препарат плохо фиксируется и удерживается на раневой поверхности, что приводит к повышенному расходу активного вещества при лечении; требует предварительного разведения в буферном растворе и специальных мер по предотвращению быстрого высыхания, что не удобно при лечебном процессе. Все это снижает приверженность (мотивацию) пациента к лечению.
Известен препарат для лизиса клеток грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов, содержащий комплекс бактерио- и протеолитических ферментов - лизоамидазу с полимиксином В (патент RU 2139348) и буферный раствор при следующем соотношении компонентов, мкг/мл (%): лизоамидаза 1000-3000 (0,1-0,3), полимиксин В 20-50 (0,002-0,005), буферный раствор - остальное.
В известном препарате вместе с лизоамидазой использована целевая добавка - полимиксин В. Этот антибиотик дезорганизует клеточную мембрану грамотрицательных микроорганизмов, что приводит к гибели их клеток. Это вещество электростатически связывается вместо двухвалентных катионов с отрицательно заряженными мембранами многих грамотрицательных бактерий. Гидрофобная жирно-кислотная цепочка полимиксина входит в гидрофобную область мембраны, резко повышая ее проницаемость, что обуславливает нарушение целостности мембраны.
Недостатком данного препарата является то, что при длительном применении полимиксина совместно с комплексом бактерио- и протеолитических ферментов может наступить резистентность микроорганизмов к действию данного антибиотика.
Применение известного препарата в виде жидких растворов обладает рядом недостатков, а именно: препарат плохо фиксируется и удерживается на раневой поверхности, что приводит к повышенному расходу активного вещества при лечении; требует предварительного разведения в буферном растворе и специальных мер по предотвращению быстрого высыхания, что неудобно в лечебном процессе. Все это снижает приверженность пациента к лечению.
Недостатками данного препарата является также то, что он не обладает местным анестезирующим действием, не улучшает микроциркуляцию при воспалительном процессе, не обладает антиоксидантным действием.
Задачей предлагаемого изобретения является создание фармакологического препарата на основе комплекса бактериолитических и протеолитических ферментов в виде мягкой лекарственной формы.
Технический результат, который может быть получен при использовании предлагаемого изобретения: расширение области применения, повышение терапевтической активности; улучшение удобства использования; снижение расхода активного вещества; получение анестезирующего эффекта; дополнительное стимулирование репаративных процессов; улучшение микроциркуляции, снижение вторичного некроза тканей в окружности раны, связанного с избыточным свободнорадикальным окислением.
Для решения поставленной задачи в настоящем изобретении предлагается фармакологический препарат для местного применения в виде мягкой лекарственной формы, состоящий из активного комплекса бактериолитических и протеолитических ферментов, например лизоамидазы (далее «активный комплекс»), а также совместимых с активным комплексом целевых добавок и основы, обеспечивающей мягкую лекарственную форму препарата, при следующем соотношении компонентов (мас. %):
активный комплекс
0,100-5,000
целевая добавка
0,002-12,000
основа
остальное
В качестве целевой добавки может быть использовано вещество, нарушающее структуру мембран грамотрицательных микроорганизмов. В этом случае препарат содержит указанные компоненты при их следующем соотношении (мас.%):
активный комплексвещество, нарушающее структуру
0,100-5,0
мембран грамотрицательных микроорганизмов
0,002-2,0
основа
остальное
В качестве вещества, нарушающего структуру мембран грамотрицательных микроорганизмов, могут быть использованы, например, трилон Б или этилдиаминтетрауксусная кислота или их смесь.
Предлагаемый фармакологический препарат, содержащий активный комплекс, целевую добавку в виде вещества, нарушающего структуру грамотрицательных микроорганизмов, и основу, кроме того, дополнительно содержит в качестве целевой добавки местно-анестезирующее вещество при следующем соотношении компонентов (мас.%):
активный комплексвещество, нарушающее структуру
0,1-5,0
мембран грамотрицательных микроорганизмов,
0,002-2,0
местно-анестезирующее вещество
0,5-5,0
основа
остальное
Местно-анестезирующим веществом является, например, хиноксикаин, тримекаин, пиромекаин, лидокаин, анестезин, дибукаин или их смеси.
Предлагаемый фармакологический препарат, содержащий активный комплекс, основу и целевую добавку в виде вещества, нарушающего структуру мембран грамотрицательных микроорганизмов, в качестве целевой добавки дополнительно содержит стимулятор репаративных процессов при следующем соотношении компонентов (мас.%):
активный комплексвещество, нарушающее структуру
0,1-5,0
мембран грамотрицательных микроорганизмов
0,002-2,0
стимулятор репаративных процессов
0,5-5,0
основа
остальное
Предлагаемый фармакологический препарат, содержащий активный комплекс, основу и целевые добавки в виде вещества, нарушающего структуру мембран грамотрицательных микроорганизмов, и местно-анестезирующее вещество, дополнительно содержит в качестве целевой добавки стимулятор репаративных процессов при следующем соотношении компонентов (мас.%):
активный комплексвещество, нарушающее структуру
0,1-5,0
мембран грамотрицательных микроорганизмов
0,002-2,0
местно-анестезирующее вещество
0,5-5,0
стимулятор репаративных процессов
0,5-5,0
основа
остальное
При этом стимулятором репаративных процессов может быть, например, метилурацил, ацемин, этаден, кальция пантотенат, солкосерил, трекрезан или их смесь.
В соответствии с предлагаемым изобретением мягкими лекарственными формами на основе комплекса бактериолитических и протеолитических ферментов, типа лизоамидаза, являются мазеобразные мягкие лекарственные формы: мази, гели, кремы, а также формируемые мягкие лекарственные формы - суппозитории и желатиновые капсулы для ректального применения.
В качестве гидрофильной основы в препарате, содержащем активный комплекс бактерио- и протеолитических ферментов, предлагается физиологически приемлемая смесь гиперосмолярных веществ.
Предложены следующие основы в виде смесей гиперосмолярных веществ для мазеобразных мягких лекарственных форм - мазей, кремов, гелей, и для формируемых мягких лекарственных форм - желатиновых или других капсул для ректального применения:
Основа №1 (мас.%):
проксанол-268 или полиэтиленоксид-1500
16,0-24,0
1,2-пропиленгликоль
46,0-50,0
полиэтиленоксид ПЭО-400
остальное
Основа №2 (мас.%):
проксанол-268 или полиэтиленоксид-1500
16,0-40,0
1,2-пропиленгликоль
20,0-50,0
полиэтиленоксид ПЭО-400
15,0-30,0
фосфатный буферный раствор или очищенная вода
остальное
Основа №3 (мас.%):
проксанол-268 или полиэтиленоксид-1500
16,0-40,0
1,2-пропиленгликоль
20,0-50,0
полиэтиленоксид ПЭО-400
15,0-30,0
димексид
0,5-3,0
фосфатный буферный раствор или очищенная вода
остальное
Основа №4 (мас.%):
полиэтиленоксид-1500 или проксанол-268
16,0-24,0
полиэтиленоксид ПЭО-400
остальное
Основа №5 (мас.%):
полиэтиленоксид-1500 или проксанол-268
16,0-40,0
полиэтиленоксид ПЭО-400
30,0-80,0
фосфатный буферный раствор или очищенная вода
остальное
Основа №6 (мас.%):
полиэтиленоксид-1500 или проксанол-268
16,0-40,0
полиэтиленоксид ПЭО-400
30,0-80,0
димексид
0,5-3,0
фосфатный буферный раствор или очищенная вода
остальное
Основа №7 (мас.%):
вазелин
15,0-25,0
глицерин
10,0-20,0
1,2-пропиленгликоль
10,0-20,0
эмульгатор №1
5,0-15,0
фосфатный буферный раствор
10,0-15,0
вода очищенная
остальное
Основа №8 (мас.%):
полиэтиленоксид ПЭО-1500 или проксанол-268 гиалуроновая килота
30,0-80,0
или гиалуронат натрия
0,01-3,0
фосфатный буферный раствор или очищенная вода
остальное
Основа №9 (мас.%):
полиэтиленоксид ПЭО-1500 или проксанол-268
20,0-50,0
полиэтиленоксид ПЭО-400
30,0-10,0
гиалуроновая кислота или гиалуронат натрия
0,01-3,0
фосфатный буферный раствор или очищенная вода
остальное
Основа №10 (мас.%):
полиэтиленоксид ПЭО-1500 или проксанол-268
20,0-35,0
полиэтиленоксид ПЭО-400
5,0-30,0
1,2-пропиленгликоль
10,0-40,0
гиалуроновая кислота или гиалуронат натрия
0,01-3,0
фосфатный буферный раствор или очищенная вода
остальное
Кроме того, предложены основы в виде смесей гиперосмолярных веществ для формируемых мягких лекарственных форм - суппозиториев:
Основа №11 (мас.%):
проксанол-268 или полиэтиленоксид-1500
70,0-90,0
1,2-пропиленгликоль
5,0-20,0
полиэтиленоксид ПЭО-400
остальное
Основа №12 (мас.%):
проксанол-268 или полиэтиленоксид-1500
70,0-90,0
1,2-пропиленгликоль
5,0-10,0
полиэтиленоксид ПЭО-400
5,0-10,0
фосфатный буферный раствор или очищенная вода
остальное
Основа №13 (мас.%):
проксанол-268 или полиэтиленоксид-1500
70,0-90,0
1,2-пропиленгликоль
5,0-10,0
полиэтиленоксид ПЭО-400
4,0-8,0
димексид
0,5-3,0
фосфатный буферный раствор или очищенная вода
остальное
Основа №14 (мас.%):
проксанол-268 или полиэтиленоксид-1500
70,0-90,0
полиэтиленоксид ПЭО-400
остальное
Основа №15, (мас.%):
проксанол-268 или поиэтиленоксид-1500
70,0-90,0
полиэтиленоксид ПЭО-400
5,0-25,0
фосфатный буферный раствор или очищенная вода
остальное
Основа №16 (мас.%):
проксанол-268 или полиэтиленоксид-1500
70,0-90,0
полиэтиленоксид ПЭО-400
5,0-25,0
димексид
0,5-3,0
фосфатный буферный раствор или очищенная вода
остальное
В качестве вещества, нарушающего структуру мембран грамотрицательных микроорганизмов, в предлагаемом решении использованы этилендиаминтетрауксусная кислота (ЭДТА), ее динатриевая соль (трилон Б) или их смесь.
ЭДТА снижает резистентность бактерий к антибиотикам и другим антибактериальным веществам, особенно для которых ионы кальция и магния являются антагонистами проявления их антимикробного действия, например полимиксинов и аминогликозидов. Поэтому ЭДТА можно применять совместно с полимиксинами в предлагаемом препарате, например полимиксином В, для снижения резистентности микроорганизмов к ним. При длительном контакте раствора ЭДТА с различными видами микроорганизмов в клетках последних происходит разрушение нуклеиновых кислот, что ведет к их лизису. Кроме влияния на клеточную мембрану и метаболизм бактерий, ЭДТА индуцирует потерю плазмид у штаммов-трансдуктантов стафилококка, а также препятствует генетическому переносу R-плазмид у стафилококков, что ингибирует трансдукцию устойчивости, например, к эритромицину в 200 раз.
Трилон Б оказывает выраженное повреждающее действие на микробную клетку, так как является хелатообразующим веществом, связывающим ионы двухвалентных металлов, что обуславливает потерю мембраной липополисахаридного комплекса. В результате этого клеточная стенка становится хрупкой, увеличивается ее проницаемость для различных веществ, в том числе антимикробного действия. Трилон Б проявляет бактериостатическое действие по отношению к штаммам грамотрицательных и грамположительных гноеродных бактерий: стафилококку и палочке сине-зеленого гноя в концентрации 0,075%; протею и кишечной палочке 0,15% («Теория и практика местного лечения гнойных ран». / Под ред. проф. Б.М.Доценко. Киев, «Здоровье», 1995 г.). Трилон Б обладает консервирующим действием для лекарственных препаратов.
В предложенном препарате трилон Б используется с комплексом бактериолитических и протеолитических ферментов для лечения ран с поливалентной микрофлорой, в состав которой входят грамположительные и грамотрицательные микроорганизмы.
Поскольку механизмы действия полимиксина В, ЭДТА и трилона Б на грамотрицательные микроорганизмы различны, то для усиления лизиса грамотрицательных микроорганизмов целесообразно совместное применение этих веществ в одном лекарственном средстве, например, в виде комплексов: полимиксин В (0,001-0,005%) и ЭДТА (0,001-0,02%); ЭДТА (0,001-0,02%) и трилон Б (0,002-0,08%); полимиксин В (0,001-0,005%), ЭДТА (0,001-0,02%) и трилон Б (0,002-0,08%).
Совместное применение комплекса бактериолитических и протеолитических ферментов с веществом, нарушающим структуру мембран микроорганизмов, в виде монокомпонента или в виде смеси компонентов, значительно усиливает антибактериальное действие предложенного препарата.
Нарушение микроциркуляций является одним из основных факторов патогенеза воспалительного процесса. Она включает в себя не только ток крови по артериолам, капиллярам и венулам, но и транскапиллярный обмен, обеспечивающий необходимый для жизни тканевый гомеостаз. Расстройства микроцикуляции делятся на внутрисосудистые изменения, нарушения самих сосудов и внесосудистые изменения. Лечебный спектр препаратов, применяемых с целью улучшения процессов микроциркуляции в тканях раны, в значительной мере может быть реализован за счет их антигистаминного, противовоспалительного и дегидратирующего действия.
Применение трилона Б в предложенном препарате обеспечивает улучшение микроциркуляции в тканях раны, поскольку трилон Б снижает активность гистамина. Кроме того, применение гиперосмолярной основы, совместимой с комплексом бактерио- и протеолитических ферментов, также улучшает микроциркуляцию в тканях раны за счет ее дегидратирующего действия. При этом применяемая основа, состоящая из гиперосмолярных веществ, обладает косвенным противовоспалительным действием за счет абсорбции жидкости и снижения отека тканей раны.
Вторичный некроз тканей в окружности раны частично связан с избыточным свободнорадикальным окислением.
Поскольку трилон Б является водорастворимым антиоксидантом, то применение его в предложенном препарате уменьшает вторичный некроз тканей в окружности раны.
Одной из главных задач местного лечения ран и ожогов является проблема подавления болевого синдрома.
Для решения этой задачи в предложенном препарате в качестве целевой добавки применено местно-анестезирующее вещество, в качестве которого могут быть использованы хиноксикаин (производное хинолина), обладающий бактериальной и антиоксидантной активностью; лидокаин; тримекаин, сохраняющий свою активность в кислой среде, которой характеризуется гнойная рана; пиромекаин; анестезин; дибукаин.
Лидокаин, тримекаин и пиромекаин наиболее перспективны в составе предлагаемого препарата на гидрофильной основе.
Для предлагаемого препарата на жировой основе должны использоваться, например, анестезин (бензокаин) и дибукаин.
Для обеспечения дополнительного стимулирования процессов репарации в ране предложенный препарат на основе комплекса бактерио- и протеолитических ферментов содержит вещество ранозаживляющего действия: метилурацил, ацемин, этаден, кальция пантотенат, солкосерил, трекрезан или их смесь.
Метилурацил, являясь производным пиримидина, обладает анаболической и антикатаболической активностью. Вещество не оказывает местного раздражающего действия; ускоряет процессы клеточной регенерации, сокращая сроки заживления ран; стимулирует клеточные и гуморальные факторы защиты; оказывает противовоспалительное действие; стимулирует эритро- и лейкопоэз.
Ацемин ускоряет регенерацию тканей и процессы эпителизации. Применяется для лечения длительно незаживающих ран и ожогов.
Этаден стимулирует репаративные процессы в эпителиальной и кроветворной тканях, активируя метаболизм нуклеиновых кислот. Показан для лечения термических и лучевых поражений кожи, слизистой оболочки прямой кишки, длительно незаживающих гранулирующих ран и т.д.
Кальция пантотенат является перспективным ранозаживляющим средством. Применяется для лечения ожогов и вяло заживающих ран.
Солкосерил - экстракт крови крупного рогатого скота, освобожденный от протеинов и не обладающий антигенной активностью. Вещество ускоряет рост грануляций и эпителизацию ран, улучшает обменные процессы в тканях.
Трекрезан - триэтаноламмониевая соль 2-метилфеноксиуксусной кислоты. Стимулирует пролиферативно-репаративные процессы, что делает перспективным его применение в хирургической практике для ускорения заживления гнойно-некротических повреждений и послеоперационных ран (М.Г.Воронков, М.М.Расулов. «Трекрезан - родоначальник нового класса адаптогенов и иммуномодуляторов (обзор)». Химико-фармацевтический журнал, 2007 г., том 41, №1, стр.3-7).
С микробиологической точки зрения в связи с наличием внешних полисахаридных оболочек и гидрофильных капсул у грамотрицательных и грамположительных бактерий, которые препятствуют проникновению в микробные клетки гидрофобных антибактериальных веществ, гидрофильные основы предпочтительнее, так как служат проводниками лекарственных средств в микробную клетку.
Гидрофильные основы, которые могут быть применены с комплексом бактериолитических и протеолитических ферментов, например лизоамидазой, в предлагаемом препарате разделены на две группы:
- водорастворимые основы, которые, как правило, содержат воду очищенную, гидрофильные неводные растворители: полиэтиленоксид, например, ПЭО-400, 1,2-пропиленгликоль, глицерин, этилцеллозольв, димексид;
- и водорастворимые полимеры: полиэтиленоксид, например ПЭО-1500, проксанол, например, проксанол-268;
- водосмываемые основы, которые кроме водорастворимых полимеров и гидрофильных неводных растворителей содержат липофильные вещества: высшие жирные спирты, вазелин, вазелиновое масло, ланолин, воски (эти основы, как правило, представляют эмульсии типа масло/вода и требуют присутствия эмульгатора типа масло/вода).
Основы с гиперосмолярными свойствами играют важную роль при местной терапии гнойных ран. Они обеспечивают отток гнойного экссудата из раны, оказывают противовоспалительное действие за счет абсорбции жидкости и снижения отека тканей раны, а также предохраняют ткани от гипергидратации. Часто они способствуют усилению действия антибактериальных веществ.
К веществам, обладающим высокими гиперосмолярными свойствами, относятся полиэтиленоксиды - водорастворимые продукты полимеризации окиси этилена, которые являются физиологически индифферентными соединениями. В этот класс веществ входят гидрофильные неводные растворители (полиэтиленоксид, например, ПЭО-400; 1,2-пропиленгликоль; глицерин; этилцеллозольв; димексид) и полимеры (полиэтиленоксид, например ПЭО-1500; проксанол-268). Они легко наносятся на раневую поверхность и равномерно по ней распределяются, улучшая контакт мази с тканями и содержимым раны, хорошо смешиваются с раневым экссудатом и сохраняют при этом свою однородность, малотоксичны и не оказывают раздражающего действия на ткани, не нарушают их физиологических функций.
В гнойной ране ПЭО разной молекулярной массы ведут себя по-разному. Так, молекулы ПЭО-1500 стабильно сохраняют первичную локализацию: они остаются в полости раны и активно связывают воспалительный экссудат, отдавая его в повязку, с которой жидкость испаряется. Освободившиеся молекулы ПЭО-1500 вновь присоединяют к себе воду, и процесс повторяется. Более мелкие молекулы ПЭО-400 обладают способностью проникать вглубь тканей и уже через 2 часа определяются в дне и стенках раны. Образуя комплексы с антибактериальными веществами, ПЭО-400 проводит их в ткани раны, где локализуются микробы.
Способность полиэтиленоксидов обеспечивать антимикробному препарату внутритканевое действие принципиально отличает эту мазевую основу от жировых основ или растворов антибиотиков (антисептиков), противомикробное действие которых ограничивается только поверхностью раны, хотя именно глубинная микрофлора определяет выраженность и направленность течения гнойного процесса.
Основное свойство ПЭО состоит в том, что они обладают выраженным дегидратирующим (влагопоглощающим) действием на ткани. Благодаря высокой способности гидратироваться, эти полимеры активно абсорбируют раневой экссудат, а вместе с ним и микробные токсины, продукты распада тканей, а также различные биологически активные вещества - лизосомальные ферменты и другие медиаторы воспалительного процесса, прерывая тем самым его прогрессирующее течение. Принципиальное значение имеет тот факт, что в гнойной ране дегидратирующее действие ПЭО распространяется не только на ткани, образующие дно и стенки раневой полости, но и на содержащиеся в ране микробные клетки.
Обезвоживание микробных клеток ведет к существенному снижению их биологической активности и, в том числе, устойчивости к действию тех или иных лекарственных средств. Поэтому в присутствии ПЭО в десятки раз повышается антимикробное действие антибиотиков. Имеет также значение то, что растворение антибиотиков, сульфаниламидов и других веществ в ПЭО приводит к повышению их дисперсности с увеличением терапевтической активности, чему также способствует более быстрое высвобождение из основы антимикробных веществ.
ПЭО является активным проводником лекарственных средств через кожный барьер. Важно то, что эта пенетрирующая без повреждения клеток способность ПЭО усиливается в условиях воспаления.
Гидрофильные основы на полиэтиленоксидах способны растворяться в секретах слизистых оболочек, полностью высвобождать лекарственные вещества, не раздражать слизистую, имеют большой срок годности, высокую физиологическую индифферентность, что способствует их применению в мазеобразных и формируемых мягких лекарственных формах.
Важным медико-биологическим требованием, предъявляемым к мазевым мягким лекарственным формам, является способность смачивать раневую поверхность и растекаться по ней, что обусловлено поверхностно-активными свойствами растворителей, полимеров, поверхностно-активных веществ и основы в целом. Наиболее выраженную поверхностную активность имеют спирты и этилцеллозольв, которые непригодны для включения в состав основы в больших концентрациях.
Из гликолей предпочтительно применение 1,2-пропиленгликоля и ПЭО-400 по сравнению с глицерином, обладающим слабыми поверхностно-активными свойствами.
В Государственном реестре лекарственных средств зарегистрировано 5 полиэтиленоксидов (ПЭО) с различной молекулярной массой: ПЭО-400, ПЭО-1000, ПЭО-1500, ПЭО-2000 и ПЭО-4000.
При смешивании растворителя ПЭО-400 с полимером ПЭО-1500 последний выступает в роли загустителя, который в зависимости от количества в общей массе обеспечивает требуемую консистенцию создаваемой лекарственной формы. Кроме того, ПЭО-1500 является осмотически активным веществом, поглощающим гнойный экссудат за счет связывания молекул воды с гидроксильными и простыми эфирными группами. Данная основа рекомендована для мазевых лекарственных форм, применяемых при местном лечении ран в I фазе раневого процесса.
Проксанол-268 - блоксополимер окисей пропилена и этилена. Проксанол-268 как осмотически активное вещество обеспечивает более равномерный характер абсорбции и обладает более длительным периодом осмотического действия. Общая масса абсорбируемой воды растворами проксанола-268 за 24 часа существенно превосходит таковую в случае применения ПЭО-1500. Это связано с более высокой массой проксанола-268 (в 8,7 раза больше, чем у ПЭО-1500).
Кинетика абсорбции воды растворителями и полимерами зависит от их молекулярной массы, концентрации и строения молекул. Так ПЭО-400 абсорбирует больше воды, чем 1,2-полиэтиленгликоль, и обладает более длительным периодом осмотического действия. Сорбционная активность 1,2-пропиленгликоля сохраняется в течение 4-6 часов. Это обусловлено как более низкой его молекулярной массой по сравнению с ПЭО-400, так и более низким гидрофильно-липофильным балансом (ГЛБ), который для пропиленгликоля составляет 9,38. Величина ГЛБ тем больше, чем большей гидрофильностью обладает вещество. Поэтому, чем выше ГЛБ и молекулярная масса, тем сильнее и длительнее будет проявляться осмотическое действие вещества при данной концентрации.
Значения ГЛБ для некоторых веществ: 1,2-пропиленгликоль 9,375, глицерин 11,275, этилцеллозольв 8,3, ПЭО-400 12,49, ПЭО-1500 20,74.
1,2-Пропиленгликоль, ПЭО-400, ПЭО-1500, проксанол-268 могут быть консервантами в разрабатываемых мягких лекарственных формах.
Димексид - 30% раствор диметилсульфоксида (ДМСО) применяется как противовоспалительный препарат для наружного применения, инактивирующий гидроксильные радикалы и улучшающий течение метаболических процессов в очаге воспаления. Оказывает также местно-анестезирующее, анальгезирующее и противомикробное действие; обладает умеренной фибринолитической активностью. Проникает через кожу, слизистые, оболочку микробных клеток (повышает их чувствительность к антибиотикам) и другие биологические мембраны, не повреждая их, и может проводить разнообразные лекарственные средства в глубину раны. К отрицательным характеристикам димексида следует отнести то, что он быстро сохнет.
Гиалуроновая кислота - полисахарид из семейства глюкозаминогликанов, обладает способностью связывать в 1000 раз больше воды, чем весит сама. Гиалуроновая кислота имеет самую высокую гигроскопичность по сравнению с другими увлажняющими агентами, такими как глицерин и сорбитол. При этом поглощенная вода удерживается внутри геля и не испаряется даже при понижении относительной влажности окружающего воздуха. В силу своей высокой гидрофильности гиалуроновая кислота образует с водой высоковязкие гели, которые увлажняют кожу и слизистые оболочки. Гиалуроновая кислота нетоксична. В составе гелей гиалуроновая кислота оказывает антимикробное, ранозаживляющее и противовосполительное действие, способствует регенерации эпителия, предотвращает образование грануляционных тканей, спаек, рубцов, нормализирует кровообращение, не вызывает клинических осложнений.
Гиалуроновая кислота положительно влияет на течение местных воспалительных процессов, связывает микрофлору, а также продукты ее распада и жизнедеятельности, обладает выраженным противовоспалительным действием и местно-анестезирующим эффектом. В то же время гиалуроновая кислота осуществляет и механическую защиту ран, так как образует тонкую пленку, которая препятствует проникновению в рану факторов внешней среды - болезнетворных агентов. Гели на основе гиалуроновой кислоты используют для лечения местных и общих гнойно-воспалительных процессов, термических и химических ожогов, трофических язв при хронической венозной недостаточности, лучевых поражений кожи, трещин, ссадин, а также для лечения длительно незаживающих ран различной этиологии (патент RU №2195262, A61K 9/06, 2002.12.27).
Гиалуронат натрия - натриевая соль гиалуроновой кислоты, хорошо растворима в воде с образованием вязкого бесцветного геля с pH 6,0-7,5 (0,1% раствор). По своей активности гиалуронат натрия полный аналог гиалуроновой кислоты, способствует регенерации тканей без образования шрамов, обладает способностью стимулировать клеточную миграцию и пролиферацию. Используется в концентрациях, начиная от 0,01
до 0,5%.
Полиэтиленоксидная основа мазей обладает рядом недостатков, к которым следует отнести опасность повреждения клеточных мембран, избыточной дегидратации клеток ткани, осмотического шока, ведущего к их гибели.
Исследования показали, что использование гидрофильных растворителей и полимеров в отдельности негативно влияет на клетки ткани. Причем цитотоксическое действие оказывают проникающие, полупроникающие и полностью проникающие гидрофильные вещества. При сочетании растворителей и полимеров ситуация резко меняется. Клетки сохраняют жизнеспособность при разведениях на 1-3 порядка более низких. При этом при сравнении влияния на клетки выяснено, что вместо ПЭО-1500 в основах предпочтительнее использовать проксанол-268. Введение в основу около 5% легкопроникающего димексида вызывает значительное ухудшение жизнеспособности клеток ткани.
Для устранения этих недостатков разработаны основы, оказывающие наиболее мягкое цитотоксическое действие на клетки ткани. К таким основам относятся: 1) смесь 1,2-пропиленгликоля, ПЭО-400 и проксанола-268 в соотношениях 48:32:20; 2) ПЭО-400 и проксанола-268 в соотношении 8:2; 3) ПЭО-400 и ПЭО-1500 в соотношении 8:2 (основы указаны по степени повышения цитотоксического действия на клетки ткани).
Соотношение между 1,2-пропиленгликолем и ПЭО-400 в гидрофильной основе считается важным биофармацевтическим фактором, который не только влияет на высвобождение лекарственных веществ через полупроницаемую мембрану и осмотические свойства, но и от которого зависят зоны задержки роста бактерий. Преобладание в дисперсной среде основы ПЭО-400 (более 50%) отрицательно сказывается на антибактериальных свойствах мази.
Основы с проксанолом-268 пенетрируют под струп лучше, чем основы с ПЭО-1500. Это объясняется лучшей способностью к смачиванию раневой поверхности и растеканию по ней проксанола-268, у которого поверхностно-активные свойства выше, чем у ПЭО-1500.
Результаты проведенных исследований позволили обосновать составы гидрофильных основ, обладающих выраженным осмотическим действием, но не повреждающих ткани. С этих позиций перспективными являются основы, состоящие из проксанола-268, ПЭО-400 и 1,2-пропиленгликоля, к которым можно добавлять воду («Теория и практика местного лечения гнойных ран». / Под ред. проф. Б.М.Доценко. Киев, «Здоровье», 1995 г., с.256-257).
Состав растворителей позволяет регулировать температуру плавления мазевых основ, а также реологические свойства мазей.
Вышеприведенный анализ известных свойств гиперосмолярных веществ и их сочетаний для мягких лекарственных форм позволил разработать указанные выше составы основ с гиперосмолярными свойствами для предлагаемого фармакологического препарата, содержащего комплекс бактериолитических и протеолитических ферментов.
Вид лекарственной формы предлагаемого фармакологического препарата зависит от молекулярной массы используемых гиперосмолярных веществ, их соотношения в составе смеси, а также количественного соотношения гиперосмолярной основы с другими компонентами фармакологического препарата. Исходя из этих количественных соотношений, лекарственная форма предлагаемого фармакологического препарата может быть жидкостью, гелем, кремом, мазью или суппозиторием.
Наиболее предпочтительной для внешнего применения является мазевая форма, так как она хорошо фиксируется и удерживается на раневой поверхности, дольше обладает терапевтической активностью, дешевле в изготовлении, удобна в использовании, что усиливает мотивацию больного к лечению.
С использованием комплекса бактериолитических и протеолитических ферментов, вещества, нарушающего структуру мембран грамотрицательных микроорганизмов, местно-анестезирующего вещества и стимулятора репаративных процессов, а также указанных выше основ для мягких лекарственных форм предложены композиции гидрофильных мазей, гидрофильных кремов, гидрофильных гелей, которые также могут быть использованы для изготовления желатиновых или других капсул для ректального применения, суппозиториев.
Гидрофильные мази являются гиперосмолярными, вследствие чего при применении могут абсорбировать значительное количество экссудата.
Гидрофильные кремы приготовлены на основе эмульсии вода/масло или вода/масло/вода, стабилизированной подходящими эмульгаторами. К ним также относятся коллоидные дисперсные системы, состоящие из диспергированных в воде или смешенных водно-гликолевых растворителей высших жирных спиртов или кислот, стабилизированные гидрофильными поверхностно-активными веществами. Кремы представляют собой двух- или многофазные дисперсные системы, дисперсионная среда которых при установленной температуре хранения, как правило, имеет ньютоновский тип течения и низкие значения реологических параметров.
Гидрофильные гели (гидрогели) приготовлены на основах, состоящих из воды, гидрофильного смешенного или неводного растворителя (глицерин, 1,2-пропиленгликоль, полиэтиленоксид ПЭО-400) и гидрофильного гелеобразователя (карбомеры, производные целлюлозы, трагакант, гиалуронат натрия, гиалуроновая кислота и др.). Гели представляют собой одно-, двух- или многофазные дисперсные системы с жидкой дисперсной средой, реологические свойства которых обусловлены присутствием гелеобразователей в сравнительно небольших концентрациях. В этой лекарственной форме гелеобразователи дополнительно могут играть роль стабилизаторов дисперсных систем: суспензий или эмульсий.
Гидрофильные суппозитории, приготовленные на вышеуказанных основах, легко растворяются в кишечнике, равномерно распределяя по слизистой лекарственные вещества, оказывающие на организм как местное, так и резорбтивное действие.
Желатиновые капсулы для ректального применения более перспективны по сравнению с суппозиториями с технологической, биофармацевтической и экономической точки зрения. Желатиновая оболочка предохраняет лекарственные вещества от воздействия факторов внешней среды и имеет преимущества перед суппозиториями, так как в ней могут капсулироваться вещества в виде мази, линимента, крема, геля, эмульсии, суспензии и др.
Высвобождение лекарственного вещества происходит быстрее и легче, чем у суппозиториев, так как под влиянием слабощелочной среды (pH 7,3-7,6) содержимого прямой кишки желатиновые оболочки набухают, и в таком состоянии даже слабая перистальтика стенки прямой кишки достаточна для ее разрыва и высвобождения содержимого. Количество лекарственного вещества в капсуле, оказывающее необходимый терапевтический эффект, составляет двойную дозу суппозиториев.
Таким образом, производство ректальных средств в желатиновой оболочке позволяет экономить дорогостоящие биологически активные ингредиенты и уменьшить себестоимость препаратов. Ректальные желатиновые капсулы с предлагаемым фармакологическим препаратом отвечают всем требованиям к идеальным суппозиториям и могут применяться в медицине для лечения проктологических заболеваний.
Комплекс бактериолитических и протеолитических ферментов, типа лизоамидаза, в предлагаемом фармакологическом препарате лизирует грамположительные микроорганизмы, в том числе устойчивые к антибиотикам, а также за счет своей протеолитической активности очищает раны от некротических масс, оказывая при этом иммуностимулирующее действие. Кроме этого, лизоамидаза стимулирует репаративные процессы за счет стимулирующего влияния на клетки грануляционной ткани.
Применение в предлагаемом препарате вещества широкого спектра действия, нарушающего структуру мембран грамотрицательных микроорганизмов, обеспечивает лизис грамотрицательных микроорганизмов. При этом, как варианты, предложено вещество как в виде монокомпонента, так и в виде смеси компонентов, каждый из которых имеет свой механизм лизиса грамотрицательных микроорганизмов, что значительно усиливает гибель их клеток.
Совместное применение комплекса бактериолитических и протеолитических ферментов с веществом, нарушающим структуру мембран микроорганизмов, в виде монокомпонента или в виде смеси компонентов значительно усиливает антибактериальное действие предложенного препарата. Кроме того, вещество широкого спектра действия - трилон Б - обеспечивает улучшение микроциркуляции в тканях раны за счет снижения активности гистамина, а также, являясь водорастворимым антиоксидантом, уменьшает вторичный некроз тканей в окружности раны.
Применение в предлагаемом препарате местно-анестезирующего вещества как монокомпонента, так и в виде смеси компонентов, значительно подавляет болевой синдром при лечении ран и ожогов. При этом применение местно-анестезирующего вещества, обладающего антибактериальной и антиоксидантной активностью, например, хиноксикаина, усиливает лечебное действие предложенного фармакологического препарата.
Для обеспечения дополнительного стимулирования процессов репарации в ране в предложенном фармакологическом средстве применено как в виде монокомпонента, так и смеси компонентов с разным механизмом и спектром действия, вещество, стимулирующее репаративные процессы в ране.
Использование гидрофильной основы, состоящей из смеси полиэтиленоксидов и проксанола, в предлагаемом фармакологическом препарате обеспечивает быструю доставку активных веществ как к микробным клеткам, так и к клеткам ткани, что повышает терапевтическую активность предложенного препарата. Кроме того, дегидратирование гидрофильной основой клеток грамположительных и грамотрицательных микроорганизмов снижает их сопротивляемость разрушающему воздействию комплекса бактерио- и протеолитических ферментов, а также веществу, нарушающему структуру мембран клеток. Это также повышает терапевтическую активность предлагаемого препарата.
Применение гиперосмолярной основы дополнительно улучшает микроциркуляцию в тканях раны за счет ее дегидратирующего действия, а также оказывает дополнительное противовоспалительное действие за счет абсорбции жидкости и снижения отека тканей раны. Гиперосмолярная основа обеспечивает отток гнойного экссудата из раны и предохраняет ткани от гипергидратации. Она легко наносится на раневую поверхность, хорошо на ней удерживается, равномерно по ней распределяется, улучшая контакт мази с тканями и содержимым раны, хорошо проникает под струп, хорошо смешивается с раневым экссудатом, сохраняя при этом свою однородность, малотоксична и не оказывает раздражающего действия на ткани, не нарушает их физиологических функций.
Растворение активных веществ в полиэтиленоксидной основе повышает их дисперсность и способность к более быстрому высвобождению из основы, что также увеличивает терапевтическую активность предлагаемого препарата. Данная основа является проводником активных веществ через кожный барьер, при этом такая пенетрирующая без повреждения клеток способность усиливается в условиях воспаления. Гидрофильная основа на полиэтиленоксидах способна растворяться в секретах слизистых оболочек, полностью высвобождая лекарственные вещества, не раздражая при этом слизистую, имеет большой срок годности и высокую физиологическую индифферентность.
Реализация предлагаемого изобретения иллюстрируется следующими примерами, но не ограничивается ими.
Пример 1. Мазь №1.
В 100 г мази содержится, г:
лизоамидаза
1,00
трилон Б
0,02
основа №1:
проксанол-268
19,80
1,2-пропиленгликоль
47,51
полиэтиленоксид ПЭО-400
31,67
Пример 2. Мазь №2.
В 100 г мази содержится, г:
лизоамидаза
2,00
трилон Б
0,01
ЭДТА
0,01
полимиксин В
0,002
тримекаин
2,00
этаден
4,00
основа №2:
проксанол-268
30,00
1,2-пропиленгликоль
30,00
полиэтиленоксид ПЭО-400
20,00
фосфатный буферный раствор
(0,01 М),pH 8,0
11,978
Пример 3. Мазь №3.
В 100 г мази содержится, г:
лизоамидаза
2,00
трилон Б
0,01
ЭДТА
0,01
хиноксикаин
1,00
метилурацил
3,00
ацемин
1,00
основа №3:
проксанол-268
30,00
1,2-пропиленгликоль
30,00
полиэтиленоксид ПЭО-400
20,00
димексид
2,00
фосфатный буферный раствор
(0,01 М), pH 8,0
10,98
Пример 4. Мазь №4.
В 100 г мази содержится, г:
лизоамидаза
1,00
трилон Б
0,02
метилурацил
4,00
основа №4:
проксанол-268
19,00
полиэтиленоксид ПЭО-400
75,98
Пример 5. Мазь №5.
В 100 г мази содержится, г:
лизоамидаза
1,00
ЭДТА
0,04
пиромекаин
2,00
основа №5:
проксанол-268
20,00
полиэтиленоксид ПЭО-400фосфатный буферный раствор
70,00
(0,01 М), pH 8,0
7,96
Пример 6. Мазь №6.
В 100 г мази содержится, г:
лизоамидаза
4,00
трилон Б
0,08
тримекаин
3,00
основа №6:
проксанол-268
25,00
полиэтиленоксид ПЭО-400
50,00
димексид
3,00
фосфатный буферный раствор
(0,01 М), pH 8,0
14,92
Пример 7. Крем.
В 100 г крема содержится, г:
лизоамидаза
2,00
трилон Б
0,05
основа №7:
вазелин
22,00
глицерин
17,00
1,2-пропиленгликоль
12,00
эмульгатор №1
10,00
фосфатный буферный раствор
(0,01М), pH 8,0
14,00
вода очищенная
22,95
Пример 8. Гель.
В 100 г геля содержится, г:
лизоамидаза
1,00
трилон Б
0,02
основа №8
полиэтиленоксид ПЭО-1500
50,00
гиалуроновая кислота
0,50
очищенная вода
48,48
Пример 9. Гель.
В 100 г геля содержится, г:
лизоамидаза
1,00
трилон Б
0,04
основа №9
проксанол-268
40,00
полиэтиленоксид ПЭО-400
30,00
гиалуронат натрия
0,30
фосфатный буферный раствор
(0,01 М), pH 8,0
28,66
Пример 10. Гель.
В 100 г геля содержится, г:
лизоамидаза
2,00
трилон Б
0,04
тримекаин
4,00
метилурацил
2,00
основа №10:
проксанол-268
40,00
полиэтиленоксид ПЭО-400
15,00
1,2-пропиленгликоль
10,00
гиалуронат натрия
0,50
очищенная вода
26,46
Пример 11. Смесь для приготовления суппозиториев.
В 100 г смеси для приготовления суппозиториев содержится, г:
лизоамидаза
1,00
трилон Б
0,04
тримекаин
4,00
этаден
4,00
основа №11:
проксанол-268
72,00
1,2 пропиленгликоль
15,00
полиэтиленоксид-400
3,96
Из данной смеси изготовлено 300 шт. ректальных суппозиториев в форме «сигары» диаметром 10 мм, длиной 32 мм, весом 2,7 г. Растворимость суппозиториев на гидрофильной основе составляет не более 1 часа при температуре (37±1)°С, что соответствует требованиям ГФ XI (ст. Суппозитории, стр.151-153).
Пример 12. Смесь для приготовления суппозиториев.
В 100 г смеси для приготовления суппозиториев содержится, г:
лизоамидаза
1,00
трилон Б
0,04
тримекаин
4,00
этаден
4,00
основа №12:
проксанол-268
73,00
1,2 пропиленгликоль
5,00
полиэтиленоксид-400
5,00
фосфатный буферный раствор
(0,01 М), pH 8,0
7,96
Из данной смеси изготовлено 300 шт. ректальных суппозиториев в форме «сигары» диаметром 10 мм, длиной 32 мм, весом 2,9 г. Растворимость суппозиториев на гидрофильной основе составляет не более 1 часа при температуре (37±1)°С, что соответствует требованиям ГФ XI (ст. Суппозитории, стр.151-153).
Пример 13. Смесь для приготовления суппозиториев.
В 100 г смеси для приготовления суппозиториев содержится, г:
лизоамидаза
2,00
трилон Б
0,04
тримекаин
4,00
этаден
4,00
основа №13:
проксанол-268
71,00
1,2 пропиленгликоль
4,50
полиэтиленоксид-400
5,50
димексид
2,00
фосфатный буферный раствор
(0,01 М), pH 8,0
6,96
Из данной смеси изготовлено 300 шт. ректальных суппозиториев в форме «сигары» диаметром 10 мм, длиной 32 мм, весом 2,5 г. Растворимость суппозиториев на гидрофильной основе составляет не более 1 часа при температуре (37±1)°С, что соответствует требованиям ГФ XI (ст. Суппозитории, стр.151-153).
Пример 14. Желатиновые капсулы.
Мазью из примера 2 заполнено 500 шт. желатиновых капсул №00, объемом 0,95 мл. Распадаемость полученных капсул менее 20 мин, что отвечает требованиям ГФ XI (ст.Капсулы, стр.143).
Бактериолитическая активность лизоамидазы на полиэтиленоксидной основе в условиях хранения при температуре +4÷+8°С (в герметичной посуде) снижается не более, чем на 10% в течение 1 года.
На базе предложенного решения может быть создан ряд новых лекарственных препаратов в виде мягких лекарственных форм, таких как мазевые и формируемые, содержащих комплекс бактериолитических и протеолитических ферментов, типа лизоамидаза.
Предлагаемый препарат на основе комплекса бактериолитических и протеолитических ферментов, основы и вещества, нарушающего структуру мембран грамотрицательных микроорганизмов, лизирует как грамположительные, так и грамотрицательные микроорганизмы, в том числе резистентные к антибиотикам; имеет высокую терапевтическую активность; улучшает удобство использования; снижает расход активного вещества; дает анестезирующий эффект; дополнительно стимулирует репаративные процессы в ране; улучшает микроциркуляцию; снижает вторичный некроз тканей в окружности раны, связанный с избыточным свободнорадикальным окислением. Кроме того, предлагаемый препарат может использоваться ректально.
Проведенный поиск информации не выявил идентичных и сходных технических решений.
Вышеуказанная совокупность признаков предлагаемого фармакологического препарата (состав препарата, его лекарственная форма и количественные соотношения компонентов) ранее не была известна, что говорит о новизне предложенного решения. Совокупность существенных признаков заявляемого фармакологического препарата для наружного применения на основе комплекса бактериолитических и протеолитических ферментов не следует явным образом из изученного уровня техники, имеет существенные отличия от рассмотренных аналогов. До сих пор аналогичного решения не было предложено, хотя препарат лизоамидаза известен с 1989 г. (ВФС 42-1916-89 на лизоамидазу, введенная в действие в сентябре 1989 г.).
Поэтому заявитель считает, что заявляемый фармакологический препарат для местного применения на основе комплекса бактериолитических и протеолитических ферментов имеет изобретательский уровень.
Заявляемый фармакологический препарат может быть рекомендован при лечении гнойных ран и ожогов, гнойно-воспалительных заболеваний кожи, маститов и эндометритов, проктологических заболеваний и др.
Предлагаемый фармакологический препарат для местного применения на основе комплекса бактериолитических и протеолитических ферментов может быть использован для промышленного серийного выпуска мазеобразных мягких форм, таких как мази, кремы, гели, а также для промышленного выпуска формируемых мягких лекарственных форм - суппозиториев и желатиновых капсул для ректального применения.