СПОСОБ ХОЛОДНОЙ ВОДНОЙ ЭКСТРАКЦИИ ФЛАВОНОИДОВ ИЗ ЛЕКАРСТВЕННОГО РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ
METHOD OF COLD WATER FLAVONOID EXTRACTION FROM HERBAL CRUDE DRUG

Изобретение относится к медицине, в частности к фармакогнозии и фармации, конкретно к способу экстрагирования биологическиактивных веществ (БАВ) растительного происхождения - флавоноидов из измельченного высушенного лекарственного растительного сырья в воду.
Несмотря на то что в фармакогнозии известно множество способов экстракции из лекарственного растительного сырья (ЛРС), повышение эффективности перехода малорастворимых веществ в водные извлечения остается актуальной задачей.
Наиболее часто применяемым в фармацевтической практике приемом перевода БАВ из ЛРС в водное извлечение в данное время является метод горячего настаивания - приготовление настоев (Государственная фармакопея СССР: Вып.1/МЗ СССР. - ХI-е изд. - М.: Медицина, 1968. - 1078 с.). Экстрагирование проводится при нагревании навески сырья с водой на водяной бане, температура которой 100°С. Однако метод горячего настаивания не обеспечивает сохранности термолабильных веществ в нативной форме.
Альтернативой этому методу является метод холодного настаивания, который, тем не менее, относится лишь к корням алтея (Приказ №308 МЗ РФ «Об утверждении инструкции по изготовлению в аптеке жидких лекарственных форм» от 21.10.97). Согласно Приказу навеску сырья заливают водой комнатной температуры и экстрагируют без повышения температуры. Но этот способ нельзя считать эффективным для экстрагирования флавоноидов (табл.1).
В литературе предлагаются методы использования ультразвука (Патент РФ 2104733, B01D 11/02 «Способ экстракции из твердого растительного сырья»), что связано также с разогревом системы. Высокие температуры, как известно, интенсифицируют многие процессы, но приводят к термическому разложению БАВ, теряющих свою фармакологическую активность.
Задачей изобретения является повышение эффективности экстракции флавоноидов из лекарственного растительного сырья в воду при сохранении нативной структуры БАВ.
5
Поставленная задача решается способом холодной водной экстракции флавоноидов из лекарственного сырья при наложении электрического поля напряжением 5 В и частотой 10 Гц при перемешивании в течение 30-60 мин.
5
Практически это осуществляется следующим образом: между двумя сетчатыми электродами из нержавеющей стали (1) располагается навеска ЛРС (2), помещенная в дистиллированную воду. К внешним контактам электродов подводится напряжение от генератора (3), напряжение U=5 В, частота f=10 Гц. Раствор 5 перемешивается магнитной мешалкой (4) с целью облегчения процесса диффузии БАВ в раствор (фиг.1).
Поскольку элетропроводность дистиллированной воды практически равна нулю, то и ток (I) равен нулю, то есть в соответствии с законом Джоуля-Ленца процесс экстракции не сопровождается разогревом раствора (температура 25°С). Движущей силой экстракции в этом случае является «раскачивание» молекул БАВ, содержащихся в ЛРС, и энергия вращения диполей воды. Схема и принцип экстракции представлены на фиг.1, где буквой «Г» обозначен генератор.
Пример 1. Экстракция флавоноидов из листьев эвкалипта.
Измельченные листья массой около 1,5 г (точная навеска) экстрагируют дистиллированной водой объемом 215 мл согласно предложенному способу в течение 30 мин. Для сравнения получали также настои согласно Инструкции по применению, ГФ XI и Приказу №308. Далее определяют сумму флавоноидов спектрофотометрическим методом (прибор - Specord UV-VIS) после реакции с избытком алюминия хлорида. К 1 мл извлечения добавляют 2 мл насыщенного спиртового раствора алюминия хлорида и доводят объем в мерной колбе до 5 мл этанолом. В качестве раствора сравнения используют 1 мл извлечения, разбавленный до 5 мл этанолом. Спектры снимают через 30 мин после начала реакции. Количественное содержание флавоноидов в настоях листьев эвкалипта представлено в табл. 1.
Таблица 1
n=5; f=0,95
№ п/п
Способ приготовления
Сумма флавоноидов в пересчете на рутин (%)
Сумма флавоноидов в пересчете на лютеолин (%)
Суммарное содержание флавоноидов в настое (%)
1
По ГФ XI
-
0,018±0,02
2
Инструкция на упаковке
0,025±0,003
-
0,061±0,003
0,036±0,003
3
Приказ МЗ №308
0,022±0,002
-
0,022±0,002
4
Предлагаемый способ
0,063±0,003
0,018±0,001
0,081±0,003
На фиг.2 показаны спектры комплексов флавоноидов с алюминия хлоридом в настоях, полученных разными методами.
Аналогично методике определения суммы флавоноидов в настоях листьев эвкалипта был исследован этот показатель в настоях цветков ромашки аптечной, календулы лекарственной и травы чабреца. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин в настоях указанных ЛРС приведено в табл.2 (сравнение метода холодной экстракции с наложением электрического поля и настаивания по ГФ).
Таблица 2
№ п/п
Способ приготовления
Сумма флавоноидов в пересчете на рутин (%)
Трава чабреца
Цветки календулы лекарственной
Цветки ромашки аптечной
1
По ГФ ХI
0,026±0,002
0,86±0,03
0,062±0,002
2
Предлагаемый способ
0,043±0,002
1,33±0,04
0,072±0,002
Спектры комплексов флавоноидов с алюминия хлоридом в настоях цветков календулы представлены на фиг.2.
Анализ спектров и количественного содержания флавоноидов дает возможность сделать выводы:
1. Флавоноиды при экстракции по предлагаемому способу значительно разделены по длинам волн и четко выражены, что свидетельствует об отсутствии термического разложения молекул флавоноидов при экстракции.
2. Общее содержание флавоноидов в настоях, полученных холодной экстракцией с наложением электрического поля в случае всех видов. ЛРС превышает их содержание в настоях, приготовленных другими методами.