СПОСОБ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ, БЛАГОПРИЯТСТВУЮЩИЙ ПРОДУЦИРОВАНИЮ К-ВИТАМИНА МОЛОЧНОКИСЛЫМИ БАКТЕРИЯМИ, И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ В ПРОИЗВОДСТВЕ ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ

1. Способ увеличения количества витамина K2, полученного культивированием, по меньшей мере, одного штамма молочнокислых бактерий, продуцирующих витамин K2, в котором указанный штамм культивируют в условиях покоящихся клеток и который включает, по меньшей мере,
(а) первичное культивирование указанного штамма в условиях поддержания дыхания на пригодной для получения первичной или предкультуры среде, содержащей, по меньшей мере, один порфирин в конечной концентрации, по меньшей мере, около 0,5 мкг/мл;
8
11
(б) инокуляцию пригодной для данной цели культуральной среды, содержащей жир, живыми бактериальными клетками в количестве примерно от 10 КОЕ/мл до 10КОЕ/мл, и
(в) ферментацию инокулированной, как описано выше, среды в течение примерно от 4 ч до 48 ч при температуре примерно от 4°C до 50°C таким образом, что в конце стадии (в) количество витамина K2, продуцированное культурой покоящихся клеток, превышает на коэффициент равный, по меньшей мере, примерно 1,2, количество витамина K2, полученное при культивировании указанного штамма в стандартных условиях ферментации.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанная пригодная для данной цели культуральная среда содержит, по меньшей мере, около 0,5% жира.
3. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что указанная пригодная для данной цели культуральная среда представляет собой обычное молоко или молоко с повышенной буферной способностью.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанную предкультуру инкубируют при температуре примерно от 4°C до 40°C.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что снабжение кислородом указанной предкультуры осуществляют путем перемешивания или аэрации.
6. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанная предкультура сохраняется в течение, по меньшей мере, около 8 ч.
7. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный штамм молочнокислых бактерий, продуцирующих витамин K2, выбирают из родов Lactococcus, Leuconostoc, Enterococcus и Propionibacterium.
8. Способ по п.7, отличающийся тем, что указанный штамм молочнокислых бактерий выбирают из видов Lactococcus lactis, Leuconostoc lactis, Leuconostoc pseudomesenteroides, Leuconostoc mesenteroides, Leuconostoc dextranicum, Enterococcus faecium и Propionibacterium sp.
9. Способ по п.8, отличающийся тем, что указанный штамм молочнокислых бактерий выбирают из следующих природных вариантов Lactococcus lactis subsp. cremoris, продуцирующих витамин K2: - I-3557, зарегистрированного в Национальной коллекции культур микроорганизмов (Франция) (France's Collection Nationale de Culture des Microorganismes) (CNCM, Pasteur Institute, 25, rue du Docteur Roux, 75724 Paris cedex 15, France) 20/01/2006; - I-3558, зарегистрированного в CNCM (Pasteur Institute, 25, rue du Docteur Roux, 75724 Paris cedex 15, France) 20/01/2006; и - I-3626, зарегистрированного в CNCM (Pasteur Institute, 25, rue du Docteur Roux, 75724 Paris cedex 15, France) 19/06/2006.
10. Обогащенная биомасса, полученная путем культивирования, по меньшей мере, одного штамма молочнокислых бактерий, продуцирующих витамин K2, в условиях покоящихся клеток согласно способу по любому из предшествующих пп.1-9.
11. Применение биомассы по п.10 для производства пищевого продукта, обогащенного витамином K2.
12. Способ продуцирования витамина K2, включающий, по меньшей мере,
(а) осуществление способа по любому из предшествующих пп.1-9 и
(б) извлечение продуцированного таким способом витамина K2.
13. Способ производства пищевого продукта, обогащенного витамином K2, который включает, по меньшей мере,
(а) продуцирование витамина K2 согласно способу по п.12;
(б) добавление витамина K2, продуцированного таким способом, в указанный пищевой продукт или в его полуфабрикат и
(в) получение указанного пищевого продукта, обогащенного витамином K2.
14. Способ производства пищевого продукта, обогащенного витамином K2, который включает, по меньшей мере,
(а) культивирование, по меньшей мере, одного штамма молочнокислых бактерий, продуцирующих витамин K2, в условиях покоящихся клеток согласно способу по любому из предшествующих пп.1-9;
(б) добавление биомассы, полученной из культуры на стадии (а), в указанный пищевой продукт или в его полуфабрикат и
(в) получение указанного пищевого продукта, обогащенного витамином K2.
15. Способ обогащения пищевого продукта витамином K2, включающий, по меньшей мере,
(а) добавление биомассы по п.10 в указанный пищевой продукт или в его полуфабрикат и
(б) получение указанного пищевого продукта, обогащенного витамином K2.
16. Пищевой продукт, обогащенный витамином K2, полученный способом по любому из предшествующих пп.13-15.
17. Пищевой продукт, обогащенный витамином K2, содержащий биомассу по п.10.
18. Пищевой продукт по п.16 или 17, отличающийся тем, что он представляет собой ферментированный продукт и/или свежий молочный продукт.
19. Применение не в лечебных целях пищевого продукта по любому из предшествующих пп.16-18 для повышения прочности костей у потребителя.