Фармакогностическое исследование корней и корневищ Patrinia intermedia

K.S. OMAROVA, SH.M. KAIYRGALI, K.K. ALDANGANOVA, F.ZH. KOBEYEVA, G.S. ESIRCEPOVA, N.B. TURDALIN

City rheumatology center Almaty Kazakh national medical University named after S. D. Asfendiyarov

EXPERIENCE WITH RITUXIMAB IN THE TREATMENT OF GRANULOMATOSIS WITH POLYANGIITIS

Resume: In Kazakhstan yet patients with the granulomatosis with polyangiitis (GP) have no sufficient experience of use rituximab (RM), in this regard all observations in which used this drug in real clinical practice are of special interest. Objective - to estimate efficiency of RM at the patients with a granulomatosis with a polyangiitis who didn't reach low activity or remission under the influence of standard illness - the modifying therapy and not receiving early drugs from group of biological agents.

Subjects and methods. Under observation there was a patient with the authentic diagnosis of GP. At the time of including in a research the patient had a high activity of a disease, a lesion of lungs in the form of a diffuse alveolitis, an infiltration and increase of a renal failure. Due to the lack of positive effect from a combination pulse therapy glucocorticosteroids (GKS): Methypredum (3000 mg) and Cyclophosphanum (a cooperative dose 1,8g), it is decided to add to treatment genetically engineered basic therapy. Rituksimab (mabter) of 1000 mg in combination with a mofetil mikofenolaty 1 g a day was choice drug in this situation. The patient received 4 infusions of RM.

Results. It is shown that RM possesses a high therapeutic effectiveness and good tolerance. As a result of 4 infusions of RM and a mofetil of a mikofenolat are noted essential decrease of the activity of GP. Positive dynamics of clinical indicators was combined with decrease of level of markers of an immune inflammation.

Keywords: granulomatosis with polyangiitis, genetically engineered biological agents, rituximab.

З.Б. САКИПОВА, С.К. ЖЕТЕРОВА, А.Б.МАЙЛИНА

Казахский Национальный Медицинский университет

имени С.Д. Асфендиярова

ФАРМАКОГНОСТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ КОРНЕЙ И КОРНЕВИЩ

PATRINIA INTERMEDIA

УДК 615.1.361.814.3:581.43/.44

Изучены морфолого-анатомические признаки корней и корневищ Патринии средней (P. intermedia (Horn.) Roem. Et Shult), собранных на территории Алматинской области, в Саркандском районе. Микроскопическое исследование растительного сырья выявил анатомо-гистологические особенности растения. Корни на поперечном сечении имеют строение, присуще вторичным корням. Продольный срез корней и корневищ имеют сосуды лестничные, сетчатые и точечные. Флоэмная паренхима и паренхима вторичной коры содержат многочисленные крахмальные зерна и редкие крупные друзы кальция оксалата. Гистохимический анализ показал присутствие крахмала, сапонинов и дубильных веществ.

Ключевые слова: P. Intermedia, корни и корневища, фармакогностический анализ, микроскопия

Введение: В современной медицинской практике более 40% лекарственных средств производятся из фитосубстанций. Растения являются источником различных групп биологически активных веществ для получения лекарственных средств. По данным ВОЗ (2011), более 80% населения планеты для лечения предпочитают лекарственные средства природного растительного происхождения. Согласно результатам центра исследования общественного мнения Германии, более половины опрошенных респондентов предпочитают лечиться препаратами натурального происхождения [1,2]. Современный растительный мир Казахстана уникален и разнообразен: он насчитывает около 6000 видов высших растений, не считая более 500 видов интродуцированных, культивируемых, и случайно завезенных видов растений. Среди них особое место занимает представитель семейства Валериановых,

рода Патриния, в частности Патриния средняя (P. intermedia Hornem Roem. Et Shult), распространение которого приурочено к горным системам Тянь-Шаня, Джунгарского Алатау, Тарбагатая и Алтая. Патриния средняя (P. intermedia Hornem. Roem. Et Shult, Валериана каменная) - многолетнее травянистое растение 25 - 30 см высотой. Корень стержневой, многоглавый. Стебли покрыты волосками или голые. Стеблевые листья сидячие, прикорневые и листья бесплодных побегов черешковые, все листья дважды перисто-рассеченные, реже прикорневые листья зубчатые или перисто-разрезанные. Чашечка незаметная, венчик желтый, плод продолговатый, прицветник при плоде яйцевидный или почти округлый. Цветет в мае - июле, плоды созревают в июле - сентябре.

По литературным источникам на территории Республики Казахстан нашли распространение два

вида: патриния сибирская - Р. sibirica (L.) Juss и патриния средняя - P. intermedia (Horn.) Roem. Et Shult [3]. В химическом отношении, например Патриния сибирская содержит

алкалоиды, сапонины, дубильные вещества,

флавоноиды, эфирное и жирные масла [4]. В Казахском Национальном Медицинском

университете им. С.Д. Асфендиярова, на фармацевтическом факультете совместно с Санкт-Петербургской государственной химико-

фармацевтической академией и Национальным медицинским университетом Люблина (Польша) ведутся полномасштабные исследования растения P. Intermedia (Horn.) Roem. Et Shult, из рода Патриния, семейства Валериановых, как потенциального источника биологически активных веществ для создания лекарственного препарата. Цель исследования - морфолого-анатомическое изучение корней и корневищ P. intermedia (Horn.) Roem. Et Shult в рамках фармакогностического анализа.

Методы исследования.

Материалом нашего исследования послужили корни и корневища P. intermedia (Horn.) Roem. Et Shult. Сбор и заготовку сырья осуществляли в соответствии с инструкцией, разработанной на основе Надлежащей практикой сбора лекарственных растений (GACP), в осенний период 2015 г., на территории Алматинской области, в Саркандском районе [5]. За основу методики приготовления и анализа микропрепаратов была взята фармакопейная статья «Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственного растительного сырья» [6].

Для изучения использовалось фиксированные материалы растительное сырье. Исследования срезов корней и корневищ данного растения осуществляли с помощью микроскопа «Микромед - 1» Rating: 85V to 265V 50/60Hz, Halogen Lamp: 6V 20W; Delay-action Fuse: 1A (увеличение х40, х100). Анатомические препараты готовили от руки и с помощью микротома МРТУ 64-1-1629-64 с замораживающим устройством ТОС-2, срезы заключали в глицерин. Толщина анатомических срезов 10-15 мкм. Микрофотографии сделаны с помощью цифровой камеры (видеоокуляр) для микроскопа, серия DCM 800. Основные результаты.

При рассмотрении микропрепаратов поперечного среза корня P. Intermedia наблюдалось вторичное строение. В центре корня двулучевая первичная ксилема. Имеются два широких первичных сердцевинных луча, состоящих из тонкостенных паренхимных клеток. Между ними два «веерообразных» участка вторичной ксилемы (древесина), состоящей из сосудов, располагающие в 1-2 ряда и чередующие с широкими вторичными сердцевинными лучами (состоящих из тонкостенных паренхимных клеток) (рисунок 1, д). Далее - кольцо камбия. Флоэма состоит из проводящих элементов и флоэмной паренхимы. Механические элементы во флоэме отсутствуют. На периферии многослойная пробка темно-коричневого цвета, состоящая из таблитчатых клеток с утолщенными клеточными оболочками, которые пропитаны суберином (рисунок 2).

Корневище, в отличие от корня, в поперечном срезе имеет сердцевину. Строение непучковое. Отсутствуют механические элементы в корневище, за счет чего флоэма имеет «смятые» очертания.

Рисунок 1 - фрагмент поперечного среза корня: а - пробка, б -первичная ксилема, в - вторичная ксилема, г - камбий,

д - «веерообразный» участок вторичной ксилемы;

При рассмотрении продольного среза корня и корневища P. Intermedia (давленый препарат) наблюдаются сосуды лестничные, сетчатые и точечные. За счет «объемных» сердцевинных лучей при рассмотрении продольного среза наблюдается характерная картина: сосуды чередуются с

паренхимой, расходясь и сливаясь между собой (рисунок 3). Флоэмная паренхима и паренхима вторичной коры содержат многочисленные крахмальные зерна и редкие крупные друзы кальция оксалата (рисунок 4).

Рисунок 3 - фрагмент продольного среза: а - клетки

Для обнаружения диагностических признаков в тканях корней и корневищ растения использовали гистохимические реакции:

1. Реакция на одревесневшие элементы (древесны сосуды, механическая ткань и т.д.). Флороглюцин окрасил одревесневшие клетки в красный цвет.

2. Реакция на эфирные и жирные масла, смолы, содержимое млечников и секреторных ходов. В результате проведенной реакции с Суданом III

;имы, б - лестничные, сетчатые и точечные сосуды;

характерного оранжевого окрашивания не наблюдалось.

3.Реакция на крахмал. Раствор Люголя дал сине-фиолетовое окрашивание, что свидетельствует о наличии крахмала.

4.Реакция на дубильные вещества. При смачивании 1% раствором железоаммониевых квасцов (ЖАК) наблюдалось черно-синее окрашивание.

Рисунок 4 - фрагмент корня: а - крахмальные зерна, б - крупные друзы кальция оксалата

Выводы.

Таким образом, в результате проведенного микроскопического исследования корней и корневищ Патринии средней (P. intermedia (Horn.) Roem. Et Shult) выявлены следующие анатомо-гистологические особенности:

• Корни на поперечном сечении имеют строение, присуще вторичным корням;

• Продольный срез корней и корневищ имеют сосуды лестничные, сетчатые и точечные;

• Флоэмная паренхима и паренхима вторичной коры содержат многочисленные крахмальные зерна и редкие крупные друзы кальция оксалата;

• Гистохимический анализ показал присутствие крахмала, сапонинов и дубильных веществ.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1 Григорян Э.Р., Парфейников С.А. РАЗВИТИЕ ВОЗ В ОБЛАСТИ НАРОДНОЙ МЕДИЦИНЫ // Современные проблемы науки и образования. - 2014. - № 2. - С. 18-29.

2 Русский медицинский журнал. - 2006. - Т. 14. - № 9. - 567 с.

3 Н.В. Павлов «Флора Казахстана» VIII. - Алма-Ата: 1965. - 245 с.

4 Иванов В.М. Изучение и использование лекарственных растительных ресурсов СССР // Всесоюз. Науч. Фармацевт. Конф. - М.: 1964. - С. 328 - 331.

5 Руководящие принципы ВОЗ по надлежащей практике культивирования и сбора лекарственных растений // Всемирная организация здравоохранения. - Женева: 2003. - С. 17-24

6 Государственная Фармакопея Республики Казахстан, «Жибекжолы». - Алматы: 2008. - 563 с.

З.Б. САКИПОВА, С.К. ЖЕТЕРОВА, А.Б.МАЙЛИНА

С.Ж. Асфендияров атындагы К,азац ¥лттыц МедицинаyHueepcumemi

PATRINIA INTERMEDIAHblH, ТАМЫРЛАРЫ МЕН KYPEH, ТАМЫРЛАРЫН ФАРМАКОГНОСТИКАЛЬЩ ЗЕРТТЕУ

Тушн: Алматы облысы, Сар;анд ауданынын, аумагында жиналган орта Патриниянын, (P. Intermedia (Horn.) Roem. Et Shult) тамырлары жэне курен, тамырларынын, морфологияльщ-анатомиялык; белгiлерi зерттелдь бамдж шиюзатынын, анатомиялы; жэне гистологиялы; ерекшелжтерш микроскопиялы; зерттеу айкындады. Тамырынын, келденен, кимасынын, курылымы екшшшк тамырга тэн екендт аны;талды. Курен, тамыры мен тамырларынын бойлы; кимасы баспалда;, тор жэне нуктелж кубырлар болып табылады. Флоэмды; паренхима жэне орта кыртысынын, паренхимасында кептеген крахмал TYЙiршiктерi мен кальций оксалатынын, сирек iрi кристалдары бар. Гистохимиялы; талдау- крахмал, сапонина жэне илж заттардын, барлыгын керсеттi. ТYЙiндi сездер: П. Intermedia, тамырлар жэне ^рен, тамырлар, фармакогностикалы; талдау, микроскопия

Z.B. SAKIPOVA, S.K. ZHETEROVA, A.B. MAILINA

Kazakh National Medical University named after S.D. Asfendiyarov Almaty, Republic of Kazakhstan

PHARMACOGNOSTIC STUDY OF THE ROOTS AND RHIZOMES OF PATRINIA INTERMEDIA

Resume: Morphological and anatomical features of the roots and rhizomes of P. intermedia (Horn.) Roem. Et Shult was studied, which were collected on the territory of Almaty region, in the area of Sarkand. Microscopic examination of vegetable raw materials found anatomical and histological features of the plant. The roots are in the cross-sectional structure inherent in secondary roots. Longitudinal section of roots and rhizomes are the vessels of the ladder, mesh and point. Phloem parenchyma and parenchyma of the secondary bark contain numerous starch grains and a few large druses calcium oxalate. Histochemical analysis showed the presence of starch, saponins and tannins. Keywords: P. Intermedia, roots and rhizomes, pharmacognostic study, microscopy

Н.З. АХТАЕВА1, Э.Н. КАПСАЛЯМОВА2, Ж. М¥ХАМЕТКДН2 А.Е. АБИШЕВА2, А.Н. ТОЦТАСЫНОВА2

1Эл-Фараби атындагы Цазац ¥лттыцymeepcumemi 2С.Ж. Асфендияров атындагы Цазац ¥лттыцмедицинаyHueepcumemi

КЭД1МП АДРАСПАН (PEGANUM HARMALA L.) ЖАПЫРАFЫ МЕН САБАFЫН

МИКРОСКОПИЯЛЬЩ ТАЛДАУ

УДК 615.322:615.076

Бул мацалада кэдiмгi адыраспан еамдтнщ кептiрiлген шиюзатын микроскопиялыц талдауыныц негiзiнде анатомиялык диагностикалыц белгiлерi аныцталды, 6i3 оныц кемегiмен кэдiмгi адыраспан турте дифференциалды диагностика жyргiзе аламыз. Алгаш рет нацты сипатталды.

Tyurndi свздер: кэдiмгi адыраспан, микроскопия, анатомиялык жэне морфологиялыц белгыер

Юркпе:Кдзак;стан эр TYрлi аурулар турш емдеуге ;олданылатын кен, спектiрлi эсерге ие дэршк еамдж шиюзатына бай, солардын, бiрi адыраспан. Адыраспанда алкалоид, гармалин, гармин жэне аз мелшерде гармалол, пеганин сынды биологиялы; белсендi заттардын, комплекс бар. Бул комплекс ;абыну ауруын басатын, зэр айдайтын тер шыгаратын, ревматикалы; артритт емдейтш эсер керсетедь Кептеген зерттеулер журпзшгешмен де адыраспан (Peganum harmala) шебшен дэршердщ TYрлерi елiмiзде аз ендiрiледi. Сонды;тан, адыраспан шебшен тшмдшп жогары жэне ;ымбат емес дэршк ;алыптар эзiрлеу заманауи фармацевтика гылымынын, езект мэселелершщ бiрi болып саналады.

Кэдiмгi адыраспан (Peganum harmala) - Zygophyllaceae ту;ымдасына жататын кеп жылды; еамджтер туысы, терен тамырлы есiмдiк. Сабыгы мен ГYлiнде уы болады. Ерекше KYШтi сасы; иiстi, дэрiлiк еамдж. Биiктiгi 30-80 см аралыгында, б1ра; кебiнде 30 см тендрегшде еседь Тау беткейлерiнде, жол бойында, жазы; далаларда кектейдi. Жаз-KYЗ мезгiлдерiнде жем^тейдь Он^с™ Еуропа, Батыс жэне Орталы; Азия, СолтYCтiк Африка мен Мексикада 6 TYрi кездеседi. Каза;станнын, шел-шелейтп, сортацды жерлерiнде, эсiресе Шу, 1ле, Сырдария, Сарысу езендерi бойындагы та;ырланган жайылымдарда бiр TYрi - кэдiмгi адраспан. (Р. harmala) еседi. Сабагы бута;ты, салалы тамыры 10 м терецджке дейiн кетедi. ГYлi а;, сары TYCтi жэне ол 1-3-тен топталып саба; басында орналасады. Мамыр - шiлдеде ГYЛдейдi. Жемiсi - кеп ту;ымды ;ауаша;. Ту;ымы уса; бозгылт не ;ара TYCтi болады.

Жумыс мацсаты: Zygophyllaceae тукымдасына жататын кэдiмri адыраспан (Peganum harmala) шиюзатын анатомиялык зерттеу. Материалдар мен эдктемелер. Алга койган максатка жету ушш жэне диагностикалык белгiлерiн аныктау ушш Peganum harmala L. жапырактарына анатомиялык; зерттеу журпзу карастырылды. Кэдiмгi адыраспаннын, жерYCтi бeлiгiне анатомиялык зерттеу журпзу ушш шиюзат генеративтi фазада жинап алынды. Препараттарды дайындау Yшiн кеп^ршген шикiзат колданылды. Жапырак кесектерi мен белжтерш хлоралгидрат-су (1:1) ерiтiндiсiнде 5-10 мин агарганша кайнатып, артынан зерттеу нысандарын зат эйнекте бiр тамшы глицеринмен араластырып, инемен екiге белдж. Шикiзат бeлiгiн инемен алдык, егер жапырак жука болса жэне алганда жиналып калса, жапырак бeлiктерiн зат эйнек устше суга салып, оны инемен эйнекке шыгарып TYзейдi. Егер жапырактын, екi жагын да карау керек болса, зат эйнектщ устшде жапырак бeлiгiн екiге бeлiп, бiр бeлiгiн абайлап аударып, бiршшшiн, жанына орналастырамыз. Тыгыз жапырактарды караган кезде иненщ ушымен немесе кескiш пышакпен бeлшектейдi. Дайын препараттар мен кесiндiлердi хлоралгидрат ерiтiндiсiнде карайды. Нысанды жабын эйнекпен жауып, екi жагын да микроскоп астында караймыз, алдымен аз улкенджпен (х100), артынан улкен (х400) улгайтуды колданып, МС-300 (MICROS, Austria) микроскобынын, кeмегiмен дэрiлiк eсiмдiк шиюзатын микроскопиялык жэне микрохимиялык зерттеу техникасы (Фармакопея Республики Казахстан,