БЕЗОПАСНЫЕ И ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ГУМАНИЗИРОВАННЫЕ АНТИТЕЛА

1. Способ контролирования курса лечения амилоидоза, такого как болезнь Альцгеймера, у пациента, включающий определение степени активации p38 MAP-киназы в глиальных макрофагах пациента.
2. Способ по п.1, в котором лечение амилоида осуществляют с помощью антитела против бета-амилоида.
3. Способ проверки нейропротективной активности агента, включающий
a. инкубацию глиальных макрофагов с нейротоксичными олигомерами Aβ1-42 и антителом против бета-амилоида и
b. измерение поглощения бета-амилоида глиальными макрофагами.
4. Способ проверки безопасности агента, включающий
a. инкубацию глиальных макрофагов с нейротоксичными олигомерами Aβ1-42 и антителом против бета-амилоида и
b. измерение активации р38 МАР-киназы в глиальных макрофагах.
5. Способ по п.3 или 4, в котором агентом является антитело против бета-амилоида.
d
6. Способ лечения амилоидоза, такого как болезнь Альцгеймера, включающий введение нуждающемуся в этом пациенту безопасного и функционального количества гуманизированного, не относящегося к изотипу IgG1 антитела против бета-амилоида, причем безопасное и функциональное количество приводит к активации р38 МАР-киназы в глиальных макрофагах пациента на уровне, который выше уровня активации p38 MAP-киназы в отсутствие гуманизированного, не относящегося к изотипу IgG1 антитела против бета-амилоида, но ниже уровня активации p38 MAP-киназы в присутствии той же концентрации антитела против бета-амилоида изотипа IgG1, которое связывается с бета-амилоидом с той же K, что и гуманизированное, не относящееся к изотипу IgG1 антитело против бета-амилоида.
7. Способ по п.5, в котором активация р38 МАР-киназы в глиальных макрофагах пациента на 5%-15%, 10%-20%, 15%-25%, 20%-30%, 35%-45%, 40%-50% или 45%-55% выше активации p38 MAP-киназы в глиальных макрофагах пациента в отсутствие гуманизированного, не относящегося к изотипу IgG1 антитела против бета-амилоида.
d
8. Способ лечения амилоидоза, такого как болезнь Альцгеймера, включающий введение нуждающемуся в этом пациенту гуманизированного, не относящегося к изотипу IgG1 антитела против бета-амилоида по схеме введения доз, причем указанная схема введения доз приводит к активации р38 МАР-киназы в глиальных макрофагах пациента на уровне, который выше уровня активации p38 MAP-киназы в отсутствие гуманизированного, не относящегося к изотипу IgG1 антитела против бета-амилоида, но ниже уровня активации p38 MAP-киназы в присутствии той же концентрации антитела против бета-амилоида изотипа IgG1, которое связывается с бета-амилоидом с той же K, что и гуманизированное, не относящееся к изотипу IgG1 антитело против бета-амилоида.
9. Способ по п.8, в котором активация р38 МАР-киназы в глиальных макрофагах пациента на 5%-15%, 10%-20%, 15%-25%, 20%-30%, 35%-45%, 40%-50% или 45%-55% выше активации p38 MAP-киназы в глиальных макрофагах пациента в отсутствие гуманизированного, не относящегося к изотипу IgG1 антитела против бета-амилоида.
10. Способ создания безопасного и функционального гуманизированного антитела против бета-амилоида, включающий замену константной области в не относящемся к изотипу IgG4 антителе, имеющем аминокислотную последовательность вариабельной области, которая функционально связывается с бета-амилоидом, константной областью, происходящей из антитела изотипа IgG4.
11. Способ проверки нейропротективной активности антитела против бета-амилоида, который включает
a. получение смешанной культуры эмбриональных клеток коры головного мозга,
b. инкубацию культуры клеток с нейротоксичными олигомерами Aβ1-42 и антителом против бета-амилоида и
c. измерение степени выживания нейронов.
12. Способ по п.6, в котором степень выживания нейронов определяют по метаболизму, определяемому по окислению МТТ в митохондриях.
13. Способ по п.11, в котором степень выживания нейронов определяют по выработке АТФ.
14. Способ по любому из пп.2-4, 6, 8 и 10, в котором антитело против бета-амилоида включает
a. CDR1 вариабельной области легкой цепи, имеющий аминокислотную последовательность CDR1 вариабельной области легкой цепи антитела против бета-амилоида, включенного в список в таблице 2;
b. CDR2 вариабельной области легкой цепи, имеющий аминокислотную последовательность CDR2 вариабельной области легкой цепи антитела против бета-амилоида, включенного в список в таблице 2; и
c. CDR3 вариабельной области легкой цепи, имеющий аминокислотную последовательность CDR3 вариабельной области легкой цепи антитела против бета-амилоида, включенного в список в таблице 2.
15. Способ по любому из пп.2-4, 6, 8 и 10, в котором антитело против бета-амилоида включает
a. CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, имеющий аминокислотную последовательность CDR1 вариабельной области тяжелой цепи антитела против бета-амилоида, включенного в список в таблице 2;
b. CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, имеющий аминокислотную последовательность CDR2 вариабельной области тяжелой цепи антитела против бета-амилоида, включенного в список в таблице 2; и
c. CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, имеющий аминокислотную последовательность CDR3 вариабельной области тяжелой цепи антитела против бета-амилоида, включенного в список в таблице 2.
16. Способ по п.14, в котором все из CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельной области легкой цепи и CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи происходят от одного и того же антитела против бета-амилоида, включенного в список в таблице 2.
17. Гуманизированное антитело против бета-амилоида, имеющее i) аминокислотную последовательность вариабельной области, которая связывается с бета-амилоидом, происходящую из не относящегося к изотипу IgG4 гуманизированного антитела, и ii) аминокислотную последовательность константной области, происходящую из антитела изотипа IgG4.
18. Гуманизированное антитело против бета-амилоида по п.17, в случае которого не относящееся к изотипу IgG4 гуманизированное антитело выбирают из группы, состоящей из антител против бета-амилоида, включенных в список в таблице 2.
19. Гуманизированное антитело против бета-амилоида, имеющее i) аминокислотную последовательность вариабельной области, которая связывается с бета-амилоидом, происходящую из относящегося к изотипу IgG1 гуманизированного антитела, и ii) аминокислотную последовательность константной области, происходящую из антитела изотипа IgG4.
20. Фармацевтическая композиция, включающая безопасное и функциональное количество гуманизированного антитела по п.17 или 19 и фармацевтически приемлемый носитель.
21. Антитело по п.17 или 19, которое включает
a. CDR1 вариабельной области легкой цепи, имеющий аминокислотную последовательность CDR1 вариабельной области легкой цепи антитела против бета-амилоида, включенного в список в таблице 2;
b. CDR2 вариабельной области легкой цепи, имеющий аминокислотную последовательность CDR2 вариабельной области легкой цепи антитела против бета-амилоида, включенного в список в таблице 2; и
c. CDR3 вариабельной области легкой цепи, имеющий аминокислотную последовательность CDR3 вариабельной области легкой цепи антитела против бета-амилоида, включенного в список в таблице 2.
22. Антитело по п.17 или 19, которое включает
a. CDR1 вариабельной области тяжелой цепи, имеющий аминокислотную последовательность CDR1 вариабельной области тяжелой цепи антитела против бета-амилоида, включенного в список в таблице 2;
b. CDR2 вариабельной области тяжелой цепи, имеющий аминокислотную последовательность CDR2 вариабельной области тяжелой цепи антитела против бета-амилоида, включенного в список в таблице 2; и
c. CDR3 вариабельной области тяжелой цепи, имеющий аминокислотную последовательность CDR3 вариабельной области тяжелой цепи антитела против бета-амилоида, включенного в список в таблице 2.
23. Антитело по п.21, в котором все из CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельной области легкой цепи и CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи происходят от одного и того же антитела против бета-амилоида, включенного в список в таблице 2.
24. Гуманизированное антитело против бета-амилоида, имеющее i) аминокислотную последовательность вариабельной области, которая связывается с бета-амилоидом, происходящую из относящегося к изотипу IgG1 гуманизированного антитела, и ii) аминокислотную последовательность константной области, происходящую из не относящегося к изотипу IgG1 антитела.
25. Способ увеличения безопасности не относящегося к изотипу IgG4 антитела против бета-амилоида, включающий замену константной области указанного, не относящегося к изотипу IgG4 антитела константной областью, происходящей из антитела изотипа IgG4.
26. Способ увеличения безопасности не относящегося к изотипу IgG4 антитела против бета-амилоида, включающий замену константной области указанного, не относящегося к изотипу IgG4 антитела константной областью, происходящей из не относящегося к изотипу IgG1 антитела.
27. Способ увеличения безопасности не относящегося к изотипу IgG4 антитела против бета-амилоида по п.25 или 26, в котором указанным, не относящимся к изотипу IgG4 антителом является антитело изотипа IgG1.
28. Антитело по п.15, в котором все из CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельной области легкой цепи и CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи происходят от одного и того же антитела против бета-амилоида, включенного в список в таблице 2.
29. Антитело по п.22, в котором все из CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельной области легкой цепи и CDR1, CDR2 и CDR3 вариабельной области тяжелой цепи происходят от одного и того же антитела против бета-амилоида, включенного в список в таблице 2.