ВНУТРИКЛЕТОЧНАЯ ДОСТАВКА БИОМОЛЕКУЛ ДЛЯ ИНДУКЦИИ ТОЛЕРАНТНОСТИ

1. Способ индукции толерантности к антигену у индивидуума, включающий:
a. пропускание клеточной суспензии, содержащей иммунную клетку, через сужение, причем указанное сужение деформирует клетку, вызывая нарушение в клетке, так что антиген, соприкасающийся с клеткой, проникает в иммунную клетку, и
b. введение индивидууму иммунной клетки, причем иммунная клетка является толерогенной (индуцирующей иммунологическую толерантность) иммунной клеткой, и причем представление указанного антигена индуцирует толерантность к антигену.
2. Способ индукции толерантности к антигену у индивидуума, включающий:
a. пропускание клеточной суспензии, содержащей иммунную клетку, через сужение, причем указанное сужение деформирует клетку, вызывая нарушение в клетке, так что антиген и толерогенный фактор, соприкасающиеся с клеткой, проникают в иммунную клетку, тем самым образуя толерогенную иммунную клетку, содержащую антиген; и
b. введение индивидууму толерогенной иммунной клетки, причем представление указанного антигена индуцирует толерантность к антигену.
3. Способ подавления иммунного ответа на антиген у индивидуума, включающий:
a. пропускание клеточной суспензии, содержащей иммунную клетку, через сужение, причем указанное сужение деформирует клетку, вызывая нарушение в клетке, так что антиген, соприкасающийся с клеткой, проникает в иммунную клетку; и
b. введение индивидууму иммунной клетки, причем иммунная клетка является толерогенной иммунной клеткой, и причем представление указанного антигена подавляет иммунный ответ на антиген.
4. Способ подавления иммунного ответа на антиген у индивидуума, включающий:
a. пропускание клеточной суспензии, содержащей иммунную клетку, через сужение, причем указанное сужение деформирует клетку, вызывая нарушение в клетке, так что антиген и толерогенный фактор, соприкасающиеся с клеткой, проникают в иммунную клетку, тем самым образуя иммуносупрессорную (вызывающую иммуносупрессию) иммунную клетку, содержащую антиген; и
b. введение индивидууму иммуносупрессорной иммунной клетки, причем представление указанного антигена подавляет иммунный ответ на антиген.
5. Способ индукции толерантности к антигену у индивидуума, включающий введение индивидууму толерогенной иммунной клетки, содержащей антиген, причем представление указанного антигена индуцирует толерантность к антигену, и причем антиген был введен в толерогенную иммунную клетку путем пропускания толерогенной иммунной клетки или ее предшественника через сужение, причем указанное сужение деформировало клетку, тем самым вызвав нарушение в клетке, так что антиген проник в толерогенную иммунную клетку или ее предшественника.
6. Способ индукции толерантности к антигену у индивидуума, включающий введение индивидууму толерогенной иммунной клетки, содержащей антиген и толерогенный фактор, причем представление указанного антигена индуцирует толерантность к антигену, и причем антиген и толерогенный фактор были введены в толерогенную иммунную клетку путем пропускания толерогенной иммунной клетки или ее предшественника через сужение, причем указанное сужение деформировало клетку, тем самым вызвав нарушение в клетке, так что антиген и толерогенный фактор проникли в толерогенную иммунную клетку или ее предшественника.
7. Способ подавления иммунного ответа на антиген у индивидуума, включающий введение индивидууму иммуносупрессорной иммунной клетки, содержащей антиген, причем представление указанного антигена подавляет иммунный ответ на антиген, и причем антиген был введен в иммуносупрессорную иммунную клетку путем пропускания иммуносупрессорной иммунной клетки или ее предшественника через сужение, причем указанное сужение деформировало клетку, тем самым вызвав нарушение в клетке, так что антиген проник в иммуносупрессорную иммунную клетку или ее предшественника.
8. Способ подавления иммунного ответа на антиген у индивидуума, включающий введение индивидууму иммуносупрессорной иммунной клетки, содержащей антиген и толерогенный фактор, причем представление антигена подавляет иммунный ответ на антиген, и причем антиген и толерогенный фактор были введены в иммуносупрессорную иммунную клетку путем пропускания иммуносупрессорной иммунной клетки или ее предшественника через сужение, причем указанное сужение деформировало клетку, тем самым вызвав нарушение в клетке, так что антиген и толерогенный фактор проникли в иммуносупрессорную иммунную клетку или ее предшественника.
9. Способ образования толерогенной иммунной клетки, включающий пропускание клеточной суспензии, содержащей иммунную клетку, через сужение, причем указанное сужение деформирует клетку, тем самым вызывая нарушение в клетке, так что толерогенный фактор, соприкасающийся с клеткой, проникает в иммунную клетку, тем самым образуя толерогенную иммунную клетку.
10. Способ образования иммуносупрессорной иммунной клетки, включающий пропускание клеточной суспензии, содержащей иммунную клетку, через сужение, причем указанное сужение деформирует клетку, тем самым вызывая нарушение в клетке, так что толерогенный фактор, соприкасающийся с клеткой, проникает в иммунную клетку, тем самым образуя иммуносупрессорную иммунную клетку.
11. Способ по п. 9 или 10, в котором указанное сужение деформирует клетку, тем самым вызывая нарушение в клетке, так что в иммунную клетку проникают толерогенный фактор и антиген, соприкасающиеся с клеткой.
12. Способ по п. 9 или 10, в котором иммунную клетку дополнительно пропускают через второе сужение, и в котором указанное второе сужение деформирует клетку, тем самым вызывая нарушение в клетке, так что антиген, соприкасающийся с клеткой, проникает в иммунную клетку.
13. Способ по любому из пп. 9-12, в котором иммунной клеткой является антигенпредставляющая клетка.
14. Способ образования толерогенной антигенпредставляющей клетки, содержащей антиген, в котором толерогенную антигенпредставляющую клетку пропускают через сужение, и в котором указанное сужение деформирует клетку, вызывая нарушение в клетке, так что антиген, соприкасающийся с клеткой, проникает в антигенпредставляющую клетку.
15. Способ образования иммуносупрессорной антигенпредставляющей клетки, содержащей антиген, в котором иммуносупрессорную антигенпредставляющую клетку пропускают через сужение, причем указанное сужение деформирует клетку, вызывая нарушение в клетки, так что антиген, соприкасающийся с клеткой, проникает в антигенпредставляющую клетку.
16. Способ доставки толерогенного фактора, который создает толерогенный фенотип, в иммунную клетку, при этом способ включает пропускание клеточной суспензии, содержащей иммунную клетку, через сужение, причем указанное сужение деформирует иммунную клетку, вызывая нарушение в клетке, так что толерогенный фактор может проникать в клетку, и приведение в соприкосновение указанной клеточной суспензии с толерогенным фактором, причем толерогенный фактор ингибирует экспрессию и/или активность иммуностимулирующего агента, усиливает экспрессию и/или активность иммуносупрессорной молекулы, ингибирует экспрессию и/или активность молекулы воспаления и/или усиливает экспрессию и/или активность противовоспалительной молекулы.
17. Способ доставки антигена в толерогенную иммунную клетку, включающий пропускание клеточной суспензии, содержащей толерогенную иммунную клетку, через сужение, причем указанное сужение деформирует толерогенную иммунную клетку, вызывая нарушение в клетке, так что антиген может проникать в клетку, и приведение в соприкосновение указанной клеточной суспензии с антигеном.
18. Способ доставки в иммунную клетку толерогенного фактора, который создает иммуносупрессорный фенотип, при этом способ включает пропускание клеточной суспензии, содержащей иммунную клетку, через сужение, причем указанное сужение деформирует иммунную клетку, вызывая нарушение в клетке, так что толерогенный фактор может проникать в клетку, и приведение в соприкосновение указанной клеточной суспензии с толерогенным фактором, причем толерогенный фактор ингибирует экспрессию и/или активность иммуностимулирующего агента, усиливает экспрессию и/или активность иммуносупрессорной молекулы, ингибирует экспрессию и/или активность молекулы воспаления и/или усиливает экспрессию и/или активность противовоспалительной молекулы.
19. Способ доставки антигена в иммуносупрессорную иммунную клетку, включающий пропускание клеточной суспензии, содержащей иммуносупрессорную иммунную клетку, через сужение, причем указанное сужение деформирует иммуносупрессорную иммунную клетку, вызывая нарушение в клетке, так что антиген может проникать в клетку, и приведение в соприкосновение указанной клеточной суспензии с антигеном.
20. Способ подавления иммунного ответа на антиген у индивидуума, включающий:
a. пропускание первой клеточной суспензии, содержащей первую иммунную клетку, через сужение, причем указанное сужение деформирует клетку, вызывая нарушение в клетке, так что антиген, соприкасающийся с клеткой, проникает в иммунную клетку,
b. пропускание второй клеточной суспензии, содержащей вторую иммунную клетку, через сужение, причем указанное сужение деформирует клетку, вызывая нарушение в клетке, так что в иммунную клетку проникает толерогенный фактор, соприкасающийся с клеткой, тем самым образуя иммуносупрессорную иммунную клетку; и
c. введение индивидууму первой иммунной клетки и второй иммунной клетки, причем представление указанного антигена подавляет иммунный ответ на антиген.
21. Способ по п. 20, в котором представление указанного антигена указанной первой или второй иммунной клеткой подавляет иммунный ответ на антиген.
22. Способ по п. 20, в котором вторая иммунная клетка придает иммуносупрессорный фенотип первой иммунной клетке, тем самым образуя иммуносупрессорную первую иммунную клетку, и в котором представление указанного антигена указанной иммуносупрессорной первой иммунной клеткой подавляет иммунный ответ на антиген.
23. Способ индукции толерантности к антигену у индивидуума, включающий:
a. пропускание первой клеточной суспензии, содержащей первую иммунную клетку, через сужение, причем указанное сужение деформирует клетку, вызывая нарушение в клетке, так что антиген, соприкасающийся с клеткой, проникает в иммунную клетку,
b. пропускание второй клеточной суспензии, содержащей вторую иммунную клетку, через сужение, причем указанное сужение деформирует клетку, вызывая нарушение в клетке, так что толерогенный фактор, соприкасающийся с клеткой, проникает в иммунную клетку, тем самым образуя толерогенную иммунную клетку; и
c. введение индивидууму первой иммунной клетки и второй иммунной клетки, причем представление указанного антигена подавляет иммунный ответ на антиген.
24. Способ по п. 23, в котором представление указанного антигена указанной первой или второй иммунной клеткой индуцирует толерантность к антигену.
25. Способ по п. 23, в котором вторая иммунная клетка придает толерогенный фенотип первой иммунном клетке, тем самым образуя толерогенную первую иммунную клетку, и в котором представление указанного антигена указанной толерогенной первой иммунной клеткой индуцирует толерантность к антигену.
26. Способ по любому из пп. 20-25, в котором первая иммунная клетка и вторая иммунная клетка вводятся индивидууму одновременно.
27. Способ по любому из пп. 20-25, в котором первая иммунная клетка и вторая иммунная клетка вводятся индивидууму последовательно.
28. Способ по любому из пп. 1, 2, 5, 6, 9, 11-14, 16, 17 и 23-27, в котором толерогенная иммунная клетка или ее предшественник не приводились в соприкосновение с адъювантом.
29. Способ по любому из пп. 3, 4, 7, 8, 10-13, 15, 18-22, 26 и 27, в котором иммуносупрессорная иммунная клетка или ее предшественник не приводились в соприкосновение с адъювантом.
30. Способ по п. 28 или 29, в котором адъювант выбирают из группы, состоящей из лигандов для TLR3 и RLR, лигандов для TLR4, лигандов для TLR5, лигандов для TLR7/8, лигандов для TLR9, лигандов для NOD2, квасцов, эмульсий типа «вода-в-масле», rhIL-2, анти-CD40, CD40L, IL-12 и циклических динуклеотидов.
31. Способ по любому из пп. 1, 2, 5, 6, 9, 11-14, 16, 17 и 23-28, в котором толерогенная иммунная клетка заключает в себе уменьшенную способность обеспечивать один или более костимулирующих сигналов по сравнению с нетолерогенным предшественником толерогенной иммунной клетки.
32. Способ по любому из пп. 3, 4, 7, 8, 10-13, 15, 18-22, 26, 27 и 29, в котором иммуносупрессорная иммунная клетка заключает в себе уменьшенную способность обеспечивать один или более костимулирующих сигналов по сравнению с неиммуносупрессорным предшественником иммуносупрессорной иммунной клетки.
33. Способ по п. 31 или 32, в котором один или более костимулирующих сигналов опосредуются молекулой, выбираемой из группы, состоящей из CD40, CD80, CD86, CD54, CD83, CD79 и лиганда для ICOS.
34. Способ по любому из пп. 1, 2, 5, 6, 9, 11-14, 16, 17, 23-28 и 31, в котором толерогенная иммунная клетка заключает в себе уменьшенную способность обеспечить один или более сигналов воспаления по сравнению с нетолерогенным предшественником толерогенной иммунной клетки.
35. Способ по любому из пп. 3, 4, 7, 8, 10-13, 15, 18-22, 26, 27, 29 и 32, в котором иммуносупрессорная иммунная клетка заключает в себе уменьшенную способность обеспечивать один или более сигналов воспаления по сравнению с неиммуносупрессорным предшественником иммуносупрессорной иммунной клетки.
36. Способ по п. 34 или 35, в котором один или более сигналов воспаления опосредуются молекулой, выбираемой из группы, состоящей из интерлейкина-1 (IL-1), IL-12, IL-18, фактора некроза опухоли (TNF), интерферона гамма (IFN-гамма), гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (GM-CSF), NF-κB, регуляторного фактора интерферона (IRF) и молекулы, связанной с путем передачи сигналов JAK-STAT.
37. Способ по любому из пп. 2, 4, 6, 8-11, 16, 18, 20 и 23, в котором толерогенный фактор ингибирует экспрессию и/или активность иммуностимулирующего агента, усиливает экспрессию и/или активность иммуносупрессорной молекулы, ингибирует экспрессию и/или активность молекулы воспаления и/или усиливает экспрессию и/или активность противовоспалительной молекулы.
38. Способ по любому из пп. 1, 2, 5, 6, 11-14, 17, 23-28 и 31, в котором антиген представляется толерогенной иммунной клеткой.
39. Способ по любому из пп. 3, 4, 7, 8, 11-13, 15, 19-22, 26, 27, 29 и 32, в котором антиген представляется иммуносупрессорной иммунной клеткой.
40. Способ по любому из пп. 2, 6, 9, 11-13, 16, 23-28 и 31, в котором индуцируется толерантность к по крайней мере одному другому антигену.
41. Способ по любому из пп. 4, 8, 10-13, 18, 20-22, 26, 27, 29 и 32, в котором подавляется иммунный ответ против по крайней мере одного другого антигена.
42. Способ по любому из пп. 1-8, 11, 12, 14, 15, 17, 19 и 20-25, в котором по крайней мере один дополнительный антиген вводится в клетку.
43. Способ по любому из пп. 2, 4, 6, 8, 9-11, 16, 18, 20 и 23, в котором по крайней мере один дополнительный толерогенный фактор вводится в клетку.
44. Способ подавления иммунного ответа у индивидуума, включающий:
a. пропускание клеточной суспензии, содержащей иммунную клетку, через сужение, причем указанное сужение деформирует клетку, вызывая нарушение в клетке, так что соединение, кодирующее нефункциональный цитокин-связывающий белок, соприкасающееся с клеткой, проникает в иммунную клетку; и
b. введение индивидууму иммунной клетки, причем указанный нефункциональный цитокин-связывающий белок экспрессируется, и причем указанный нефункциональный цитокин-связывающий белок связывается со свободными цитокинами воспаления.
45. Способ по п. 44, в котором нефункциональный цитокин-связывающий белок включает нефункциональный рецептор цитокина.
46. Способ по п. 45, в котором у нефункционального цитокин-связывающего белка отсутствуют цитоплазматические сигнальные домены.
47. Способ по п. 44, в котором нефункциональный цитокин-связывающий белок содержит протеолитический центр, который расщепляет цитокин-мишень.
48. Способ по п. 44, в котором нефункциональный цитокин-связывающий белок включает антитело против цитокина.
49. Способ по п. 44, в котором нефункциональный цитокин-связывающий белок включает рецептор содержащих антитело против цитокина В-клеток.
50. Способ по любому из пп. 1-7 и 20-44, в котором иммунная клетка относится к индивидууму.
51. Способ по любому из пп. 1-7 и 20-44, в котором иммунная клетка принадлежит другому индивидууму.
52. Способ по любому из пп. 1-51, в котором сужение содержится внутри микрофлюидного канала.
53. Способ по любому из пп. 1-51, в котором сужение представляет собой пору или содержится внутри поры.
54. Способ по п. 53, в котором пора содержится внутри поверхности.
55. Способ по п. 54, в котором поверхность представляет собой фильтр.
56. Способ по п. 54, в котором поверхность представляет собой мембрану.
57. Способ по любому из пп. 1-56, в котором размер сужения зависит от диаметра иммунной клетки.
58. Способ по любому из пп. 1-57, в котором размер сужения составляет приблизительно 20%, приблизительно 30%, приблизительно 40%, приблизительно 50%, приблизительно 60%, приблизительно 70%, приблизительно 80%, приблизительно 90% или приблизительно 99% от диаметра клетки.
59. Способ по любому из пп. 1-58, в котором канал содержит сужение длиной, составляющей приблизительно 10 мкм, и шириной, составляющей приблизительно 4 мкм.
60. Способ по любому из пп. 1-59, в котором размер поры составляет приблизительно 0,4 мкм, приблизительно 3 мкм, приблизительно 4 мкм, приблизительно 5 мкм, приблизительно 8 мкм, приблизительно 10 мкм, приблизительно 12 мкм или приблизительно 14 мкм.
ο
ο
61. Способ по любому из пп. 1-60, который осуществляют при температуре от приблизительно -5С до приблизительно 45С.
62. Способ по любому из пп. 1-4, 9, 10 и 16-61, в котором клеточная суспензия включает смешанную популяцию клеток.
63. Способ по п. 62, в котором клеточная суспензия представляет собой цельную кровь.
64. Способ по п. 62, в котором клеточная суспензия включает мононуклеарные клетки периферической крови.
65. Способ по любому из пп. 1-4, 9, 10 и 16-61, в котором клеточная суспензия включает очищенную популяцию клеток.
66. Способ по любому из пп. 1-4, 9, 10 и 16-65, в котором клеточная суспензия включает клетки млекопитающих.
67. Способ по любому из пп. 1-4, 9, 10 и 16-66, в котором клеточная суспензия включает клетки обезьян, мышей, собак, кошек, лошадей, крыс, овец, коз, свиней или кроликов.
68. Способ по любому из пп. 1-4, 9, 10 и 16-66, в котором клеточная суспензия включает клетки человека.
69. Способ по любому из пп. 1-4, 9, 10 и 16-65, в котором клеточная суспензия включает клетки, не являющиеся клетками млекопитающих.
70. Способ по любому из пп. 1-4, 9, 10, 16-65 и 69, в котором клеточная суспензия включает бактериальные, дрожжевые клетки, клетки кур, лягушек, насекомых, рыб или нематод.
71. Способ по любому из пп. 1-13 и 16-68, в котором иммунная клетка представляет собой клетку млекопитающего.
72. Способ по любому из пп. 1-13, 16-68 и 71, в котором иммунная клетка представляет собой клетку обезьяны, мыши, собаки, кошки, лошади, крысы, овцы, козы, свиньи или кролика.
73. Способ по любому из пп. 1-13, 16-68 и 71, в котором иммунная клетка представляет собой клетку человека.
74. Способ по любому из пп. 1-13 и 16-73, в котором иммунная клетка представляет собой Т-клетку, В-клетку, дендритную клетку, моноцит, макрофаг, NK-клетку, врожденную лимфоидную клетку, нейтрофил, базофил, эозинофил, клетку-супрессор миелоидного происхождения или тучную клетку.
75. Способ по любому из пп. 14, 15 и 50-74, в котором антигенпредставляющей клеткой является клетка млекопитающего.
76. Способ по любому из пп. 14, 15 и 50-75, в котором антигенпредставляющей клеткой является клетка обезьяны, мыши, собаки, кошки, лошади, крысы, овцы, козы, свиньи или кролика.
77. Способ по любому из пп. 14, 15 и 50-75, в котором антигенпредставляющей клеткой является клетка человека.
78. Способ по любому из пп. 14, 15 и 50-77, в котором антигенпредставляющей клеткой является Т-клетка, В-клетка, дендритная клетка, моноцит, макрофаг, NK-клетка, врожденная лимфоидная клетка, нейтрофил, базофил, эозинофил, клетка-супрессор миелоидного происхождения или тучная клетка.
79. Способ по любому из пп. 1-15, 20-43 и 50-78, в котором антиген представляет собой чужеродный антиген.
80. Способ по любому из пп. 1-15, 20-43 и 50-78, в котором антигеном является аутоантиген.
81. Способ по любому из пп. 1-15, 20-43 и 50-78, в котором антиген представляет собой трансплантационный антиген аллотрансплантата.
82. Способ по любому из пп. 1-15, 20-43 и 50-78, в котором антиген представляет собой белок или полипептид.
83. Способ по любому из пп. 1-15, 20-43 и 50-78, в котором антиген представляет собой лизат.
84. Способ по любому из пп. 1-15, 20-43 и 50-83, в котором антиген представляет собой модифицированный антиген.
85. Способ по п. 84, в котором модифицированный антиген включает антиген, слитый с терапевтическим средством.
86. Способ по п. 84, в котором модифицированный антиген включает антиген, слитый с нацеливающим пептидом.
87. Способ по любому из пп. 1-4, 9, 10 и 16-86, в котором указанная клеточная суспензия соприкасается с антигеном до, одновременно или после прохождения через сужение.
88. Способ по любому из пп. 1-43 и 50-87, в котором толерогенный фактор ингибирует активность костимулирующей молекулы.
89. Способ по любому из пп. 1-43 и 50-88, в котором толерогенный фактор уменьшает экспрессию костимулирующей молекулы.
90. Способ по любому из пп. 1-43 и 50-89, в котором толерогенный фактор удаляет нуклеиновую кислоту, которая модулирует экспрессию костимулирующей молекулы.
91. Способ по любому из пп. 1-43 и 50-88, в котором толерогенный фактор ингибирует костимулирующую молекулу.
92. Способ по любому из пп. 1-43 и 50-91, в котором толерогенный фактор увеличивает активность регулятора транскрипции, который подавляет экспрессию костимулирующей молекулы.
93. Способ по любому из пп. 1-43 и 50-91, в котором толерогенный фактор увеличивает активность ингибитора белка, который подавляет экспрессию костимулирующей молекулы.
94. Способ по любому из пп. 1-43 и 50-88, в котором толерогенный фактор включает нуклеиновую кислоту, кодирующую супрессор костимулирующей молекулы.
95. Способ по любому из пп. 88-94, в котором костимулирующая молекула представляет собой CD80 или CD86.
96. Способ по любому из пп. 1-43 и 50-95, в котором толерогенный фактор усиливает активность иммуносупрессорного фактора.
97. Способ по п. 96, в котором иммуносупрессорным фактором является коингибирующая молекула, регулятор транскрипции или иммуносупрессорная молекула.
98. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87, 96 и 97, в котором толерогенный фактор усиливает активность коингибирующей молекулы.
99. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87 и 96-98, в котором толерогенный фактор увеличивает экспрессию коингибирующей молекулы.
100. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87 и 96-99, в котором толерогенный фактор кодирует коингибирующую молекулу.
101. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87 и 96-100, в котором толерогенный фактор увеличивает активность коингибирующей молекулы.
102. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87 и 96-98, в котором толерогенный фактор увеличивает активность регулятора транскрипции, который усиливает экспрессию коингибирующей молекулы.
103. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87, 96-98 и 102, в котором толерогенный фактор увеличивает активность полипептида, который увеличивает экспрессию коингибирующей молекулы.
104. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87, 96-98 и 102, в котором толерогенный фактор включает нуклеиновую кислоту, кодирующую энхансер коингибирующей молекулы.
105. Способ по любому из пп. 97-104, в котором коингибирующая молекула представляет собой PD-L1, PD-L2 или CTLA-4.
106. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87, 96 и 97, в котором толерогенный фактор усиливает активность иммуносупрессорной молекулы.
107. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87, 96, 97 и 106, в котором толерогенный фактор увеличивает экспрессию иммуносупрессорной молекулы.
108. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87, 96, 97 и 106, в котором толерогенный фактор кодирует иммуносупрессорную молекулу.
109. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87, 96, 97 и 106, в котором толерогенный фактор увеличивает активность иммуносупрессорной молекулы.
110. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87, 96, 97 и 106, в котором толерогенный фактор увеличивает активность регулятора транскрипции, который усиливает экспрессию иммуносупрессорной молекулы.
111. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87, 96, 97 и 106, в котором толерогенный фактор увеличивает активность полипептида, который усиливает экспрессию иммуносупрессорной молекулы.
112. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87, 96, 97 и 106, в котором толерогенный фактор включает нуклеиновую кислоту, кодирующую энхансер иммуносупрессорной молекулы.
113. Способ по любому из пп. 97 и 106, в котором иммуносупрессорная молекула представляет собой ARG1, NO, NOS2, IDO, IL-4, IL-10, IL-13, IL-35, IFNα или TGFβ.
114. Способ по любому из пп. 1-43 и 50-87, в котором толерогенный фактор ингибирует активность молекулы воспаления.
115. Способ по п. 114, в котором молекулой воспаления является фактор транскрипции при воспалении.
116. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87, 114 и 115, в котором толерогенный фактор ингибирует фактор транскрипции при воспалении.
117. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87 и 114-116, в котором толерогенный фактор уменьшает экспрессию фактора транскрипции при воспалении.
118. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87 и 114-116, в котором толерогенный фактор удаляет нуклеиновую кислоту, кодирующую фактор транскрипции при воспалении.
119. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87 и 114-116, в котором толерогенный фактор увеличивает активность регулятора транскрипции, который подавляет экспрессию фактора транскрипции при воспалении.
120. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87 и 114-116, в котором толерогенный фактор увеличивает активность ингибитора белка, который подавляет экспрессию фактора транскрипции при воспалении.
121. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87 и 114-116, в котором толерогенный фактор включает нуклеиновую кислоту, кодирующую супрессор фактора транскрипции при воспалении.
122. Способ по любому из пп. 115-121, в котором фактором транскрипции при воспалении является NF-κB, регуляторный фактор интерферона или молекула, связанная с путем передачи сигналов JAK-STAT.
123. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87 и 114-116, в котором толерогенный фактор снижает продукцию и/или секрецию одного или более цитокинов воспаления.
124. Способ по п. 123, в котором один или более цитокинов воспаления выбирают из группы, состоящей из интерлейкина-1 (IL-1), IL-12 и IL-18, фактора некроза опухоли альфа (TNF-α), интерферона гамма (IFN-γ) и гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (GM-CSF).
125. Способ по любому из пп. 1-43, 50-87 и 114-116, в котором толерогенный фактор увеличивает продукцию и/или секрецию одного или более противовоспалительных цитокинов.
126. Способ по п. 125, в котором один или более противовоспалительных цитокинов выбирают из группы, состоящей из IL-4, IL-10, IL-13, IL-35, IFN-α и трансформирующего фактора роста бета (TGFβ).
127. Способ по любому из пп. 1-43 и 50-87, в котором толерогенный фактор кодирует модифицированный TCR, содержащий цитоплазматический сигнальный домен, который запускает продукцию иммуносупрессорных цитокинов при связывании с антигеном.
128. Способ по любому из пп. 1-43 и 50-87, в котором толерогенный фактор кодирует химерный рецептор антигена, содержащий цитоплазматические сигнальные домены, которые запускают продукцию иммуносупрессорных цитокинов при связывании с антигеном.
129. Способ по любому из пп. 1-43 и 50-128, в котором толерогенный фактор включает нуклеиновую кислоту.
130. Способ по любому из пп. 1-43 и 50-129, в котором толерогенный фактор включает нуклеиновую кислоту, кодирующую короткую интерферирующую РНК (siRNA), мРНК, микроРНК (miRNA), длинную некодирующую РНК (lncRNA), тРНК или короткую шпилечную РНК (shRNA).
131. Способ по любому из пп. 1-43 и 50-130, в котором толерогенным фактором является плазмида.
132. Способ по любому из пп. 1-43 и 50-128, в котором толерогенный фактор включает комплекс белок-нуклеиновая кислота.
133. Способ по любому из пп. 1-43, 50-128 и 132, в котором толерогенный фактор включает полипептид Cas9 и направляющую РНК или донорную ДНК.
134. Способ по любому из пп. 1-43 и 50-129, в котором толерогенный фактор включает нуклеиновую кислоту, кодирующую полипептид Cas9, и направляющую РНК или донорную ДНК.
135. Способ по любому из пп. 1-43 и 50-128, в котором толерогенный фактор включает полипептид.
136. Способ по любому из пп. 1-43, 50-128 и 135, в котором полипептид представляет собой нуклеазу, белок TALEN, нуклеазу c цинковыми пальцами, мегануклеазу или рекомбиназу CRE.
137. Способ по любому из пп. 1-43, 50-128 и 135, в котором полипептид представляет собой фермент транспозазу или интегразу.
138. Способ по любому из пп. 1-43, 50-128 и 135, в котором полипептидом является антитело.
139. Способ по любому из пп. 1-43, 50-128 и 135, в котором полипептидом является фактор транскрипции.
140. Способ по любому из пп. 1-43 и 50-128, в котором толерогенный фактор представляет собой небольшую молекулу.
141. Способ по любому из пп. 1-43 и 50-128, в котором толерогенный фактор представляет собой наночастицу.
142. Способ по любому из пп. 1-43 и 50-141, в котором указанная клеточная суспензия соприкасается с толерогенным фактором до, одновременно или после прохождения через сужение.
143. Способ по любому из пп. 3, 4, 7, 8 и 10-142, в котором иммунный ответ подавляется на по крайней мере приблизительно 10%, приблизительно 15%, приблизительно 20%, приблизительно 25%, приблизительно 30%, приблизительно 40%, приблизительно 50%, приблизительно 60%, приблизительно 70%, приблизительно 75%, приблизительно 80%, приблизительно 90% или приблизительно 100%.
144. Способ по любому из пп. 3, 4, 7, 8 и 10-143, в котором подавленный иммунный ответ включает снижение продукции и/или секреции одного или более цитокинов воспаления.
145. Способ по п. 144, в котором один или более цитокинов воспаления выбирают из группы, состоящей из интерлейкина-1 (IL-1), IL-12 и IL-18, фактора некроза опухоли альфа (TNF-α), интерферона гамма (IFN-γ) и гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (GM-CSF).
146. Способ по любому из пп. 3, 4, 7, 8 и 10-143, в котором подавленный иммунный ответ включает увеличение продукции и/или секреции одного или более противовоспалительных цитокинов.
147. Способ по п. 146, в котором один или более противовоспалительных цитокинов выбирают из группы, состоящей из IL-4, IL-10, IL-13, IL-35, IFN-α и трансформирующего фактора роста бета (TGFβ).
148. Способ по любому из пп. 3, 4, 7, 8 и 10-143, в котором подавленный иммунный ответ включает уменьшенный Т-клеточный ответ.
149. Способ по п. 148, в котором уменьшенный Т-клеточный ответ включает снижение активации Т-клеток.
150. Способ по любому из пп. 148-149, в котором уменьшенный Т-клеточный ответ включает снижение выживаемости Т-клеток.
151. Способ по любому из пп. 148-150, в котором уменьшенный Т-клеточный ответ включает снижение пролиферации Т-клеток.
152. Способ по любому из пп. 148-151, в котором уменьшенный Т-клеточный ответ включает снижение функциональности Т-клеток.
153. Способ по любому из пп. 3, 4, 7, 8 и 10-152, в котором подавленный иммунный ответ включает усиленный Treg ответ.
154. Способ по любому из пп. 3, 4, 7, 8 и 10-153, в котором подавленный иммунный ответ включает уменьшенный В-клеточный ответ.
155. Способ по п. 154, в котором уменьшенный В-клеточный ответ включает снижение продукции антител.
156. Способ по любому из пп. 3, 4, 7, 8 и 10-155, в котором подавленный иммунный ответ включает снижение продукции цитокинов.
157. Способ по любому из пп. 3, 4, 7, 8 и 10-156, в котором подавленный иммунный ответ включает уменьшенную аутоиммунную реакцию.
158. Способ по п. 157, где уменьшенная аутоиммунная реакция включает уменьшенную аутоиммунную реакцию против антигена, связанного с диабетом I типа, ревматоидным артритом, псориазом, рассеянным склерозом, болезнью Крона или язвенным колитом.
159. Способ по любому из пп. 3, 4, 7, 8 и 10-157, в котором подавленный иммунный ответ включает уменьшенную аллергическую реакцию.
160. Способ по любому из пп. 1-15, 20-43, 50-78, 79 и 82, в котором антиген представляет собой пищевой аллерген.
161. Способ по любому из пп. 3, 4, 7, 8 и 10-157, в котором подавленный иммунный ответ включает уменьшенную аллергическую реакцию на пищевой аллерген.
162. Способ по любому из пп. 1-15, 20-43 и 50-78, в котором антиген представляет собой антиген, связанный с трансплантированной тканью.
163. Способ по любому из пп. 3, 4, 7, 8 и 10-162, в котором подавленный иммунный ответ включает уменьшенный иммунный ответ против трансплантированной ткани.
164. Способ по любому из пп. 1-15, 20-43 и 50-78, в котором антиген связан с вирусом.
165. Способ по любому из пп. 3, 4, 7, 8 и 10-164, в котором подавленный иммунный ответ включает уменьшенный патогенный иммунный ответ против вируса.
166. Способ по любому из пп. 3, 4, 7, 8 и 10-165, в котором подавленный иммунный ответ включает уменьшенный иммунный ответ против терапевтического средства.
167. Способ по п. 166, где терапевтическое средство представляет собой фактор свертывания крови.
168. Способ по п. 167, где фактор свертывания крови представляет собой фактор VIII и фактор IX.
169. Способ по п. 166, где терапевтическое средство представляет собой гормон.
170. Способ по п. 169, где терапевтический гормон представляет собой инсулин, гормон роста человека или фолликулостимулирующий гормон.
171. Способ по любому из пп. 3, 4, 7, 8 и 10-170, в котором подавленный иммунный ответ включает уменьшенный иммунный ответ против терапевтического носителя.
172. Способ по п. 171, где терапевтический носитель представляет собой вирус.
173. Способ по п. 164, 165 или 172, где вирус представляет собой одно или более из аденовируса, аденоассоциированного вируса, бакуловируса, вируса герпеса или ретровируса.
174. Способ по п. 173, где вирус представляет собой аденоассоциированный вирус.
175. Способ по любому из пп. 1, 2, 5, 6, 23-43 и 50-142, в котором толерантность включает снижение продукции и/или секреции одного или более цитокинов воспаления.
176. Способ по п. 175, в котором один или более цитокинов воспаления выбирают из группы, состоящей из интерлейкина-1 (IL-1), IL-12 и IL-18, фактора некроза опухоли альфа (TNF-α), интерферона гамма (IFN-γ) и гранулоцитарно-макрофагального колониестимулирующего фактора (GM-CSF).
177. Способ по любому из пп. 1, 2, 5, 6, 23-43 и 50-142, в котором толерантность включает увеличение продукции и/или секреции одного или более противовоспалительных цитокинов.
178. Способ по п. 177, в котором один или более противовоспалительных цитокинов выбирают из группы, состоящей из IL-4, IL-10, IL-13, IL-35, IFN-α и трансформирующего фактора роста бета (TGFβ).
179. Способ по любому из пп. 1, 2, 5, 6, 23-43 и 50-142, в котором толерантность включает уменьшенный Т-клеточный ответ.
180. Способ по п. 179, в котором уменьшенный Т-клеточный ответ включает снижение активации Т-клеток.
181. Способ по любому из пп. 179-180, в котором уменьшенный Т-клеточный ответ включает снижение выживаемости Т-клеток.
182. Способ по любому из пп. 179-181, в котором уменьшенный Т-клеточный ответ включает снижение пролиферации Т-клеток.
183. Способ по любому из пп. 179-182, в котором уменьшенный Т-клеточный ответ включает снижение функциональности Т-клеток.
184. Способ по любому из пп. 179-183, в котором уменьшенный Т-клеточный ответ включает изменение фенотипа Т-клеток.
185. Способ по любому из пп. 1, 2, 5, 6, 23-43, 50-142 и 179-184, в котором толерантность включает некостимулированную активацию Т-клетки.
186. Способ по любому из пп. 1, 2, 5, 6, 23-43, 50-142 и 179-185, в котором толерантность включает усиленный Treg ответ.
187. Способ по любому из пп. 1, 2, 5, 6, 23-43, 50-142 и 179-186, в котором толерантность включает уменьшенный В-клеточный ответ.
188. Способ по п. 187, в котором уменьшенный В-клеточный ответ включает снижение продукции антител.
189. Способ по любому из пп. 1, 2, 5, 6, 23-43, 50-142 и 179-188, в котором толерантность включает снижение продукции цитокинов.
190. Способ по любому из пп. 1, 2, 5, 6, 23-43, 50-142 и 179-189, в котором толерантность включает уменьшенную аутоиммунную реакцию.
191. Способ по п. 190, где уменьшенная аутоиммунная реакция включает индуцированную толерантность против антигена, связанного с диабетом I типа, ревматоидным артритом, псориазом, рассеянным склерозом, болезнью Крона или язвенным колитом.
192. Способ по любому из пп. 1, 2, 5, 6, 23-43, 50-142 и 179-191, в котором толерантность включает уменьшенную аллергическую реакцию.
193. Способ по п. 192, в котором толерантность включает уменьшенную аллергическую реакцию на пищевой аллерген.
194. Способ по любому из пп. 1, 2, 5, 6, 23-43, 50-142 и 179-193, в котором толерантность включает уменьшенный иммунный ответ против трансплантированной ткани.
195. Способ по любому из пп. 1, 2, 5, 6, 23-43, 50-142 и 179-194, в котором толерантность включает уменьшенный патогенный иммунный ответ против вируса.
196. Способ по любому из пп. 1, 2, 5, 6, 23-43, 50-142 и 179-195, в котором толерантность включает уменьшенный иммунный ответа против терапевтического средства.
197. Способ по п. 196, где терапевтическое средство представляет собой фактор свертывания крови.
198. Способ по п. 197, где фактор свертывания крови представляет собой фактор VIII и фактор IX.
199. Способ по п. 196, где терапевтическое средство представляет собой гормон.
200. Способ по п. 199, где терапевтический гормон представляет собой инсулин, гормон роста человека или фолликулостимулирующий гормон.
201. Способ по любому из пп. 1, 2, 5, 6, 23-43, 50-142 и 179-200, в котором толерантность включает уменьшенный иммунный ответ против терапевтического носителя.
202. Способ по п. 201, где терапевтический носитель представляет собой вирус.
203. Способ по п. 195 или 202, где вирус представляет собой одно или более из аденовируса, аденоассоциированного вируса, бакуловируса, вируса герпеса или ретровируса.
204. Способ по п. 203, где вирус представляет собой аденоассоциированный вирус.
205. Способ по любому из пп. 1-204, который повторяют по крайней мере 1, 2, 3, 4, 5 или 6 раз.
206. Способ по п. 205, в котором продолжительность времени между любыми двумя повторениями способа составляет по крайней мере 1 день, 1 неделю, 1 месяц, 2 месяца, 3 месяца, 4 месяца, 5 месяцев, 6 месяцев или 1 год.
207. Система, содержащая сужение, иммунную клетку, антиген и/или толерогенный фактор, для применения в способах по любому из пп. 1-43 и 50-206.
208. Система, содержащая сужение, иммунную клетку и соединение, кодирующее нефункциональный цитокин-связывающий белок, для применения в способах по любому из пп. 44-207.