Способ и композиция на основе генотерапевтического агента и антитела, связывающегося с клетками крови

1. Способ лечения субъекта, нуждающегося в лечении заболевания, вызванного потерей функции или активности белка, включающий:
(a) введение указанному субъекту антитела, специфически связывающегося с клетками крови;
(b) введение указанному субъекту агента, содержащего гетерологичный полинуклеотид, который кодирует белок или пептид, который обеспечивает или дополняет функцию или активность белка.
2. Способ по п. 1, в котором указанные клетки крови являются эритроцитами.
3. Способ по п. 1, в котором указанное антитело при связывании с указанными клетками индуцирует (опосредует) фагоцитоз указанных клеток клетками мононуклеарной фагоцитарной системы.
4. Способ по п. 1, в котором указанное антитело является гомологичным антителом субъекта, в том числе аллогенным, химерным, гуманизированным или аутологичным.
5. Способ по п. 1, в котором указанное антитело является гомологичным антителом субъекта, в том числе аллогенным, химерным, гуманизированным или аутологичным.
6. Способ по п. 1, в котором указанное антитело является моноклональным.
7. Способ по п. 1, в котором указанное антитело является поликлональным.
8. Способ по п. 1, в котором указанное антитело является смесью нескольких моноклональных антител.
9. Способ по п. 1, в котором указанное антитело является антителом продуктом крови.
10. Способ по п. 1, в котором указанное антитело является антителом, экспрессированным в клеточной культуре.
11. Способ по п. 1, в котором указанное антитело является анти-резус антителом.
12. Способ по п. 1, в котором доза упомянутого антитела находится в диапазоне 0,1-1 мг/кг веса субъекта.
13. Способ по п. 1, в котором доза упомянутого антитела находится в диапазоне 1-10 мг/кг веса субъекта.
14. Способ по п. 1, в котором доза упомянутого антитела находится в диапазоне 10-100 мг/кг веса субъекта.
15. Способ по п. 1, в котором указанное антитело находится в свободной молекулярной форме.
16. Способ по п. 1, в котором в субъект дополнительно вводят эритроциты.
17. Способ по п. 1, в котором в субъект дополнительно вводят продукты крови.
18. Способ по п. 1, в котором в субъект дополнительно вводят субстанцию, стимулирующую эритропоэз.
19. Способ по п. 1, в котором в субъект дополнительно вводят эритропоэтин.
20. Способ по п. 1, в котором упомянутый агент дополнительно включает в себя, по крайней мере одну из следующих наночастиц: магнитную, золотую, обладающую свойством локализованного поверхностного плазмонного резонанса, полупроводниковую, металлическую, квантовую точку.
21. Способ по п. 1, в котором упомянутый агент дополнительно включает в себя, по крайней мере один из следующих гомополимеров или гетерополимеров: линейный полиэтиленимин, разветвленный полиэтиленимин, полистирол, карбоксиметилдекстран, декстран, полипептид, полилактид гликолевую кислоту, блок-кополимер, липид, транспортный полимер, некатионный липид, катионный липид.
22. Способ по п. 1, в котором упомянутый агент дополнительно включает в себя цитостатические, цитотоксические или терапевтические соединения.
23. Способ по п. 1, в котором упомянутый агент дополнительно включает в себя метку из группы: флуоресцентную, магнитную, МРТ-контрастирующую, рентгентоконтрастирующую, люминесцентную, радиоактивную.
24. Способ по п. 1, в котором доза указанного антитела достаточна для блокировки мононуклеарной фагоцитарной системы.
25. Способ по п. 1, в котором доза указанного антитела достаточна для блокировки мононуклеарной фагоцитарной системы и увеличения времени циркуляции указанного агента.
26. Способ по п. 1, в котором доза указанного антитела достаточна для увеличения времени циркуляции указанного агента по сравнению со случаем введения агента без указанных антител.
27. Способ по п. 1, в котором этап (b) выполняется одновременно с выполнением этапа (а).
28. Способ по п. 1, в котором указанное антитело и указанный агент вводят в одной дозированной форме.
29. Способ по п. 1, в котором указанное антитело и указанный агент вводят в отдельных дозированных формах.
30. Способ по п. 1, в котором этап (b) выполняется после выполнения этапа (а).
31. Способ по п. 1, в котором этап (b) выполняется не ранее чем через 6 часов после выполнения этапа (а).
32. Способ по п. 1, в котором этап (b) выполняется в течение 3 дней после выполнения этапа (а).
33. Способ по п. 1, в котором этап (b) выполняется в течение 24 часов после выполнения этапа (а).
34. Способ по п. 1, в котором этап (b) выполняется в течение 13 часов после выполнения этапа (а).
35. Способ по п. 1, в котором указанный агент содержит лентивирусный вектор, аденовирусный вектор или вектор аденоассоциированного вируса.
36. Способ по п. 1, в котором указанный агент содержит вектор аденоассоциированного вируса, который содержит капсидный белок VP1, VP2 и/или VP3, имеющий 50% или более идентичность последовательности с капсидным белком VP1, VP2 и/или VP3, выбранным из группы, состоящей из AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10, AAV3B, AAV-2i8, RhlO, Rh74; 2 капсидных белка VP1, VP2 и/или VP3,
37. Способ по п. 1, в котором указанный агент содержит вектор аденоассоциированного вируса, который содержит капсидный белок VP1, VP2 и/или VP3, имеющий 100% идентичность последовательности с капсидным белком VP1, VP2 и/или VP3, выбранным из группы, состоящей из AAV1., AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10, AAV3B, AAV-2i8, Rh10, Rh74, 2 капсидных белка VP1, VP2 и/или VP3.
38. Способ по п. 1, дополнительно включающий определение состояния блокировки мононуклеарной фагоцитарной системы с помощью введения субъекту тестового агента и анализ концентрации тестового агента в биологическом образце спустя заданное время.
39. Способ по п. 1, дополнительно включающий определение состояния блокировки мононуклеарной фагоцитарной системы с помощью сравнения скорости выведения тестового агента до этапа (а) и эффективности выведения тестового агента после этапа (а), но до этапа (b).
40. Способ по п. 39, в котором скорость выведения тестового агента определяется посредством анализ концентрации тестового агента в биологическом образце спустя заданное время.
41. Способ по п. 1, дополнительно включающий:
до этапа (а) введение субъекту тестового агента и анализ концентрации 1 тестового агента в биологическом образце спустя заданное время,
после этапа (а) введение субъекту тестового агента и анализ концентрации 2 тестового агента в биологическом образце спустя заданное время,
сравнение концентрации 1 и концентрации 2.
42. Способ по п. 41, в котором концентрация 1 меньше концентрации 2 в 1.1-1.2 раза, 1.2-1.4 раза, 1.4-1.6, 1.6-1.8 раза, 1.8-2, 2-2.5 раза, 2.5-3, 3-5 раз, 5-10 раза, 10-20 раз, 20-30 раз.
43. Способ по пп. 38-41, в котором тестовый агент включает в себя наночастицу.
44. Способ по пп. 38-41, в котором тестовый агент включает в себя липосому.
45. Способ по пп. 38-41, в котором тестовый агент является флуоресцентно-меченным.
46. Способ по пп. 38-41, в котором тестовый агент включает в себя магнитную метку.
47. Способ по п. 1, в котором указанный субъект имеет заболевание из группы: заболевание органов (например, мозга, печени, почек, сердца); инфекционное заболевание вирусной (например, гепатит В, гепатит С, ВИЧ и т.д.), бактериальной или грибковой природы; рак; диабет типа 1 или типа 2; болезнь Альцгеймера; болезнь Паркинсона; эпилепсия; расстройство кровеносной системы (например, анемия); заболевание легких (например, муковисцидоз); нарушение свертываемости крови (например, гемофилия А или гемофилия В с ингибиторами или без них); нарушения метаболизма (например, болезни накопления гликогена); неврологическое или нейродегенеративное расстройство; дефицит лизосомной кислой липазы; дефицит аденозин-деаминазы; нарушение накопления меди или железа (например, болезнь Вильсона, болезнь Менкеса); наследственный ангионевротический отек; талассемия; болезнь Хантингтона; амиотрофический латеральный склероз (АЛС); лизосомная болезнь накопления (например, аспартилглюкозаминурия; болезнь Баттена; поздний инфантильный нейрональный цероидный липофусциноз 2-го типа; цистиноз; болезнь Фабри; болезнь Гоше I, Н, и III типов; болезнь Помпе; болезнь Тея-Сакса; СМ2-ганглиозидоз типа II (болезнь Сандхоффа); муколипидоз типа I (сиалидоз типа I и II), типа II (болезнь 1-клеток), типа III (болезнь Псевдогерлера) и типа IV; болезни накопления мукополисахаридов (болезнь Гурлера и ее разновидности; болезнь Санфилиппо типов А, В, С, D; болезнь Марото-Лами, болезнь Слая); болезнь Ниманна-Пика типов А/В, С1 и С2, болезнь Шиндлера I и II типов); болезнь Хантера; болезнь Моркио типов А и В;
48. Способ по п. 1, в котором указанный субъект имеет нарушения свертываемости крови из группы: гемофилию А; гемофилию А с ингибирующими антителами; гемофилию В; гемофилию В с ингибирующими антителами; талассемию; дефицит любого из факторов свертываемости крови: II, V, VII, VIII, IX, X, XI, XII, фактора фон Виллебранда или комбинированный дефицит FV/FVIII; дефицит гамма-карбоксилазы или дефицит эпоксидредуктазы С1 витамина К.
49. Способ по п. 1, в котором гетерологичный полинуклеотид кодирует белок, выбранный из группы, состоящей из: инсулина, глюкагона, паратиреоидного гормона (ПТГ), гормона роста (ГР), фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), фактора роста соединительной ткани (ФРСТ), фактора роста сосудистого эндотелия (ФРСЭ), фактора роста нервов (ФРН), нейротрофического фактора головного мозга (НТФГМ), эпидермального фактора роста (ЭФР), фактора высвобождения гормона роста (ФБР), ангиопоэтинов, эритропоэтина (ЭПО), ангиостатина, костного морфогенетического белка (КМБ), лютеинизирующего гормона (ЛГ), хорионического гонадотропина человека (ХГЧ), гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (ГКСФ), основного фактора роста фибробластов (оФРФ), кислотного фактора роста фибробластов (кФРФ), трансформирующего фактора роста а (ТФРа), тромбоцитарного фактора роста (ТФР), факторов роста инсулина I и II (ФРИ-I и ФРИ-II), ТФР, активинов, ингибинов, нейротрофического фактора глиальной клеточной линии (НФГЛ), нейротрофины НТ-3 и НТ4 / 5, цилиарного нейротрофного фактора (ЦНФ), нетрина-1 и нетрина-2, нейротурина, агрина, фактора роста гепатоцитов (ФРГ), эфринов, ноггина, семейства «sonic hedgehog» и тирозина гидроксилазы.
50. Способ по п. 1, в котором гетерологичный полинуклеотид кодирует белок, выбранный из группы, состоящей из: интерферонов a, b и g, фактора стволовых клеток, гуманизированных антител, IgG, IgM, IgA, IgD и IgE, химерных иммуноглобулинов, тромбопоэтина (ТП), одноцепочечных антител, интерлейкинов (с ИЛ-1 по ИЛ-36), моноцитарного хемоаттрактантного белка, химерных Т-клеточных рецепторов, одноцепочечных Т-клеточных рецепторов, лейкоз-ингибирующего фактора, гранулоцитарно-моноцитарного колониестимулирующего фактора, лиганда Fas, факторов некроза опухоли а и b, лиганда flk-2 / flt3, рецепторов Т-клеток, молекул МНС класса I и класса II, альфа-галактозидаза для лечения болезни Фабри; глюкозо-6-фосфатаза для лечения болезни накопления гликогена типа I (GSDI); GAA (кислая альфа-глюкозидаза) для лечения болезни Помпе; бета-гексозаминидаза А для лечения болезни Тея - Сакса; АТР7В (транспортирующая медь ATPase2) для лечения болезни Вильсона; бета-глюкоцереброзидаза для лечения болезни Гоше типа 1.
51. Способ по п. 1, где указанный гетерологичный полинуклеотид является антисенс-олигонуклеотидом.
52. Способ по п. 1, где указанный гетерологичный полинуклеотид является малой интерферирующей РНК.
53. Способ по п. 1, где указанный гетерологичный полинуклеотид является микроРНК.
54. Способ по п. 1, где белок, кодируемый гетерологичным полинуклеотидом, содержит нуклеазу редактирования генов.
55. Способ по п. 54, в котором нуклеаза редактирования гена содержит нуклеазу цинкового пальца (ZFN) или эффекторную нуклеазу, подобную активатору транскрипции (TALEN).
56. Способ по п. 54, в котором нуклеаза редактирования гена содержит функциональный тип II CRISPR-Cas9.
57. Способ по п. 1, в котором этап (а) и/или этап (b) выполняют два или более раз.
58. Способ по п. 1, в котором субъектом является человек.
59. Способ по п. 1, в котором лечение заболевания проводят вектором генной терапии и включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества субъекту антитела, специфически связывающегося с клетками крови.
60. Способ лечения субъекта, нуждающегося в лечении заболевания, вызванного усилением функциональной активности или экспрессией белка, включающий:
(a) введение указанному субъекту антитела, специфически связывающегося с клетками крови;
(b) введение указанному субъекту агента, содержащего гетерологичный полинуклеотид, который транскрибируется в нуклеиновую кислоту, которая ингибирует, уменьшает или уменьшает экспрессию усиления функции, активности или экспрессии указанного белка.
61. Способ по п. 60, в котором указанный гетерологичный полинуклеотид кодирует ингибирующую нуклеиновую кислоту.
62. Способ по п. 61, в котором указанную ингибирующую нуклеиновую кислоту выбирают из группы, состоящей из мРНК, антисмысловой молекулы, микроРНК, интерферирующей РНК, рибозима.
63. Способ по п. 61, в котором указанная ингибирующая нуклеиновая кислота связывается с геном, транскриптом гена или транскриптом гена, ассоциированного с заболеванием с полинуклеотидным повтором.
64. Способ по п. 60, в котором указанные клетки крови являются эритроцитами.
65. Способ по п. 60, в котором указанное антитело при связывании с указанными клетками индуцирует (опосредует) фагоцитоз указанных клеток клетками мононуклеарной фагоцитарной системы.
66. Способ по п. 60, в котором указанное антитело является гомологичным антителом субъекта, в том числе аллогенным, химерным, гуманизированным или аутологичным.
67. Способ по п. 60, в котором указанное антитело является гомологичным антителом субъекта, в том числе аллогенным, химерным, гуманизированным или аутологичным.
68. Способ по п. 60, в котором указанное антитело является моноклональным.
69. Способ по п. 60, в котором указанное антитело является поликлональным.
70. Способ по п. 60, в котором указанное антитело является смесью нескольких моноклональных антител.
71. Способ по п. 60, в котором указанное антитело является антителом продуктом крови.
72. Способ по п. 60, в котором указанное антитело является антителом, экспрессированным в клеточной культуре.
73. Способ по п. 60, в котором указанное антитело является анти-резус антителом.
74. Способ по п. 60, в котором доза упомянутого антитела находится в диапазоне 0,1-1 мг/кг веса субъекта.
75. Способ по п. 60, в котором доза упомянутого антитела находится в диапазоне 1-10 мг/кг веса субъекта.
76. Способ по п. 60, в котором доза упомянутого антитела находится в диапазоне 10-100 мг/кг веса субъекта.
77. Способ по п. 60, в котором указанное антитело находится в свободной молекулярной форме.
78. Способ по п. 60, в котором в субъект дополнительно вводят эритроциты.
79. Способ по п. 60, в котором в субъект дополнительно вводят продукты крови.
80. Способ по п. 60, в котором в субъект дополнительно вводят субстанцию, стимулирующую эритропоэз.
81. Способ по п. 60, в котором в субъект дополнительно вводят эритропоэтин.
82. Способ по п. 60, в котором упомянутый агент дополнительно включает в себя, по крайней мере одну из следующих наночастиц: магнитную, золотую, обладающую свойством локализованного поверхностного плазмонного резонаноса, полупроводниковую, металлическую, квантовую точку.
83. Способ по п. 60, в котором упомянутый агент дополнительно включает в себя, по крайней мере один из следующих гомополимеров или гетерополимеров: линейный полиэтиленимин, разветвленный полиэтиленимин, полистирол, карбоксиметилдекстран, декстран, полипептид, полилактид гликолевую кислоту, блок-кополимер, липид, транспортный полимер, некатионный липид, катионный липид.
84. Способ по п. 60, в котором упомянутый агент дополнительно включает в себя цитостатические, цитотоксические или терапевтические соединения.
85. Способ по п. 60, в котором упомянутый агент дополнительно включает в себя метку из группы: флуоресцентную, магнитную, МРТ-контрастирующую, рентгентоконтрастирующую, люминесцентную, радиоактивную.
86. Способ по п. 60, в котором доза указанного антитела достаточна для блокировки мононуклеарной фагоцитарной системы.
87. Способ по п. 60, в котором доза указанного антитела достаточна для блокировки мононуклеарной фагоцитарной системы и увеличения времени циркуляции указанного агента.
88. Способ по п. 60, в котором доза указанного антитела достаточна для увеличения времени циркуляции указанного агента по сравнению со случаем введения агента без указанных антител.
89. Способ по п. 60, в котором этап (b) выполняется одновременно с выполнением этапа (а).
90. Способ по п. 60, в котором указанное антитело и указанный агент вводят в одной дозированной форме.
91. Способ по п. 60, в котором указанное антитело и указанный агент вводят в отдельных дозированных формах.
92. Способ по п. 60, в котором этап (b) выполняется после выполнения этапа (а).
93. Способ по п. 60, в котором этап (b) выполняется не ранее чем через 6 часов после выполнения этапа (а).
94. Способ по п. 60, в котором этап (b) выполняется в течение 3 дней после выполнения этапа (а).
95. Способ по п. 60, в котором этап (b) выполняется в течение 24 часов после выполнения этапа (а).
96. Способ по п. 60, в котором этап (b) выполняется в течение 13 часов после выполнения этапа (а).
97. Способ по п. 60, в котором указанный агент содержит лентивирусный вектор, аденовирусный вектор или вектор аденоассоциированного вируса.
98. Способ по п. 60, в котором указанный агент содержит вектор аденоассоциированного вируса, который содержит капсидный белок VP1, VP2 и/или VP3, имеющий 50% или более идентичность последовательности с капсидным белком VP1, VP2 и/или VP3, выбранным из группы, состоящей из AAV1, AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10, AAV3B, AAV-218, RhlO, Rh74; 2 капсидных белка VP1, VP2 и/или VP3,
99. Способ по п. 60, в котором указанный агент содержит вектор аденоассоциированного вируса, который содержит капсидный белок VP1, VP2 и/или VP3, имеющий 100% идентичность последовательности с капсидным белком VP1, VP2 и/или VP3, выбранным из группы, состоящей из AAV1., AAV2, AAV3, AAV4, AAV5, AAV6, AAV7, AAV8, AAV9, AAV10, AAV3B, AAV-2i8, RhlO, Rh74, 2 капсидных белка VP1, VP2 и/или VP3.
100. Способ по п. 60, дополнительно включающий определение состояния блокировки мононуклеарной фагоцитарной системы с помощью введения субъекту тестового агента и анализ концентрации тестового агента в биологическом образце спустя заданное время.
101. Способ по п. 60, дополнительно включающий определение состояния блокировки мононуклеарной фагоцитарной системы с помощью сравнения скорости выведения тестового агента до этапа (а) и эффективности выведения тестового агента после этапа (а), но до этапа (b).
102. Способ по п. 101, в котором скорость выведения тестового агента определяется посредством анализ концентрации тестового агента в биологическом образце спустя заданное время.
103. Способ по п. 60, дополнительно включающий:
до этапа (а) введение субъекту тестового агента и анализ концентрации 1 тестового агента в биологическом образце спустя заданное время, после этапа (а) введение субъекту тестового агента и анализ концентрации 2 тестового агента в биологическом образце спустя заданное время,
сравнение концентрации 1 и концентрации 2.
104. Способ по п. 103, в котором концентрация 1 меньше концентрации 2 в 1.1-1.2 раза, 1.2-1.4 раза, 1.4-1.6, 1.6-1.8 раза, 1.8-2, 2-2.5 раза, 2.5-3, 3-5 раз, 5-10 раза, 10-20 раз, 20-30 раз.
105. Способ по пп. 100-104, в котором тестовый агент включает в себя наночастицу.
106. Способ по пп. 100-104, в котором тестовый агент включает в себя липосому.
107. Способ по пп. 100-104, в котором тестовый агент является флуоресцентно-меченным.
108. Способ по пп. 100-104, в котором тестовый агент включает в себя магнитную метку.