Трансплантация аллогенных клеток костного мозга для коррекции нарушений при пародонтозе на генетических мышах линии brsunt

Трансплантация аллогенных клеток костного мозга для коррекции нарушений при пародонтозе на генетических мышах линии ЕДОЗиЫТ

О. И. Степанова, О. В. Баранова

Научный центр биомедицинских технологии РАМН, Москва Контактная информация: Степанова Ольга Ивановна, тел.: (495) 561-5264

Изучен клиническими и морфологическими методами положительный терапевтический эффект клеток костного мозга на коррекцию патогенетических нарушений пародонтоза у генетических мышей линии ВИЗНЫХ

Ключевые слова: пародонтоз, мыши ВК$иМТ, клетки костного мозга, трансплантация.

Заболевания пародонта - одна из наиболее распространенных и сложных патологий челюстно-лицевой области. По данным Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), функциональные расстройства зубочелюстной системы, обусловленные потерей зубов от заболеваний пародонта, развиваются в 5 раз чаще, чем при осложнениях кариеса [2]. Рост заболеваемости пародонтоза свидетельствует о том, что современная медикаментозная терапия не способна надежно препятствовать возникновению и прогрессированию основных симптомов проявлений пародонтоза. Поэтому разработка новых подходов к лечению пародонтоза остается актуальной проблемой современной медицины.

Целью нашего исследования явилось изучение возможности коррекции патогенетических нарушений пародонтоза с помощью трансплантации аллогенных

клеток костного мозга на экспериментальной генетической модели.

Материалы и методы

Для коррекции основных клинических и морфологических признаков пародонтоза использовали модель генетических мышей линии BRSUNT - опытная группа (п=30). Эти мыши склонны к ожирению, страдают от желудочных поражений. Заболевание зубов и околозубного пространства (Periodontal disease) наблюдаются у 100% животных fl, 3, 4]. Контрольную группу составили мыши той же линии BRSUNT(n=30) без введения клеток костного мозга (ККМ). В опытной и контрольной группах использовали мышей в возрасте б месяцев после рождения. Для коррекции нарушений пародонтоза у опытных мышей использовали аллогенные клетки (гемопоэтиче-ской и стромалъной фракций) костного

мозга (1-СМ) от здоровых доноров мышей линии С57В1Л0. Трансплантацию аллогенных ККМ проводили шестикратно, сначала вводили трехкратно с интервалом в 5 дней в количестве 600-750 тыс. гемопоэтических клеток костного мозга (ГПККМ) мононуклеарной фракции, культивированных в течение 5 суток; затем трехкратно (с интервалом в 7 дней) в количестве 120-150 тыс. культивированных мультипотентных мезенхимальных стромальных (фибробластоподобных) ККМ (ММСК КМ). Введение ККМ проводили внутрибрюшинно, возраст доноров соответствовал возрасту реципиентов, сроки наблюдений составили 1, 3 и 6 месяцев. В динамике проводили клинические и гистологические исследования ротовой полости больных животных.

Результаты исследования и обсуждение

После введения аллогенных ККМ у мышей ВВ.51ЖТ наблюдали клиническое и функциональное состояние ротовой полости. У мышей опытной группы слизистая оболочка рта розового цвета, не кровоточит, плотно прилегает к зубам. Десневые сосочки, образуя четкую фестончатость, занимают межзубные промежутки в области шеек зубов. Десна плотная, пародонтальные карманы отсутствуют, а зубы плотно прилегают друг к другу (рис.1, а, в, г, д). Более выраженные положительные клинические результаты были получены через 3 месяца после введения ККМ, что было подтверждено нами гистологически. Позитивная динамика коррекции пародонтоза также сохраня-

Рис.1. Клиническое состояние зубов и околозубного пространства у мышей БИБиИТ после введения культивированных аллогенных клеток костного мозга (ККМ):

а норма; б - контроль без ККМ; в, г, д - опыт после введения ККМ

Трансплантация аллогенных клеток костного мозга для коррекции нарушений при пародонтозе на генетических мышах линии В(?311МТ

Рис. 2. Образование зубнодесневого кармана у контрольных мышей ВК81ЖТ без введения ККМ в разном возрасте; окраска гематоксилин и эозин:

а - в возрасте 6 мес. после рождения, ув. 200; б - в возрасте 9 мес. после рождения, ув. 200

лась у животных и через 6 месяцев после введения клеток.

Гистологически у контрольных мышей ВИБиКТ без ККМ в области костной ткани зубной лунки отмечаются дистрофические процессы в виде умеренно-выраженной прогрессирующей гладкой резорбции костной ткани (рис. 2). Отмечается умеренно выраженное истончение костных пластинок межальвеолярных перегородок, расширение костномозговых пространств, так называемое широкопетлистое строение костной ткани, ретракция десны с формированием патологического зубнодесневого кармана с расшатыванием зубов (клинически), без признаков воспаления (рис. 1, а). Также отмечалось углубление дна десневой борозды. Более выражен процесс в области резцов. Поражения твердых тка-

ней зуба в виде эрозии эмали и клиновидных дефектов не отмечалось.

При введении культивированных аллогенных стволовых и прогенитор-ных ККМ у опытных мышей ВН51ЖТ отмечались явления эпидермизации десны в области десневой борозды, дно которой у ряда особей определялось на уровне эмалево-цементного соединения, что соответствовало норме, отмечались признаки очагового ороговения что также соответствовало норме (рис. 3). Отмечалось сужение

эпителия,

Рис. 3. Опытные мыши ВКЬиМТ после введения ККМ; окраска гематоксилин и эозин.

а, б, в - явления эпидермизации десны в области десневой борозды через 1 мес. после введения ККМ, а, б - ув. 200; в - ув. 400; г - через 3 мес. после введения ККМ, ув. 400

костномозговых пространств с частич-ным замещением зубнодесневого канала пролиферирующими клетками эпителия, уменьшение признаков резорбции костной ткани, возможно связанное с активацией остеобластической функции кости.

Выводы

Мыши линии В1151ЖТ являются адекватной экспериментальной генетической моделью пародонтоза, так как воспроизводят функциональные и структурные изменения заболевания в челюстно-лицевой области.

Выявлено, что выраженность терапевтического эффекта клеток костного

Список литературы

1. Бландова 3. К., Душкин В. А., Мала-шенко А .М., Шмидт Е. Ф. Линии лабораторных животных для медико-биологических исследований. М: Наука, 1983.

2. Данилевский Н. Ф., Магид Е. А., Мухин Н. А., Миликевич В. 10. Заболевания па родонта. М: Медицина, 1993.

мозга у мышей с пародонтозом повышается: при использовании культивированных клеток; от кратности введения клеток костного мозга гемопоэтических и стромальных фракций, а сроки проявления терапевтического эффекта зависят от способа введения клеток.

Выраженные позитивные эффекты клеточной терапии у животных с пародонтозом на клинические и морфологические проявления заболевания зубов и околозубного пространства связаны с длительными сроками сохранения жизнеспособности и функциональной активности клеток костного мозга в организме после трансплантации.

3. Каркищенко II. II. Основы биомоделирования. М: ВПК, 2004.

4. Staats J. Standardized nomenclature for inbred strains of mice: sixth Listing // Cancer Res. 1976. Vol.36. P. 4333-4377.

The bone marrow cells transplantation for parodontosis correction

with genetic mice BRSUNT

O. I. Stepanova, O. V. Baranova

Studies of genetic regulation processes involved inxenobiotic metabolizing enzymes and drug transporters are of great intThe evident therapeutic effect of bone marrow cells transplantation for periodontal disease correction was investigated with clinic and morphological methods of analysis. During the experiment the genetic mice BRSUNT were used.

Key words: parodontosis, mice BRSUNT, bone marrow cells, transplantation