ПЕПТИДЫ, ПРИЕМЛЕМЫЕ ДЛЯ ПРИМЕНЕНИЯ В ПОКРЫВАЮЩИХ АГЕНТАХ, АКТИВАТОРАХ АДГЕЗИИ ИЛИ КЛЕЯХ ДЛЯ ОКСИДИРОВАННЫХ ПОВЕРХНОСТЕЙ

1. Способ количественного определения адгезионных свойств сцепленных с оксидированными поверхностями пептидов и предпочтительно додекапептидов, отличающийся тем, что:
a) раствор, содержащий пептиды, наносят на носитель с оксидированной поверхностью и дают высохнуть;
b) несвязавшиеся пептиды удаляют с носителя промывкой, и носителю дают высохнуть;
c) пептиды, связанные с носителем, окрашивают окрашивающим раствором, оставшийся окрашивающий раствор смывают, и носителю дают высохнуть;
d) связанные с носителем и окрашенные пептиды отделяют от носителя экстрагирующим раствором и жидкость, содержащую окрашенные пептиды, анализируют спектрофотометрически.
2. Способ количественного определения по п. 1, отличающийся тем, что окрашивание на стадии c) осуществляют простым неспецифическим окрашиванием пептидов, например окрашивающим раствором кумасси или за счет химического взаимодействия, например с нингидрином, которое ведет к специфическому связыванию.
3. Способ количественного определения по любому из пп. 1-3, отличающийся тем, что:
на стадии a) 2 порции по 10 мкл раствора пептида, растворенного с концентрацией 2 мг/мл в PBS, pH=7,4, производства компании «Gibco», наносят на круглую пластинку из стали HDG диаметром 2,3 см, причем первую порцию объемом 10 мкл сушат в течение приблизительно 15 мин, а затем на такое же место наносят вторую порцию объемом 10 мкл и сушат в течение 30 мин, после чего осуществляют сушку при 30°C в гибридизационном шкафу HB-1000 производства компании «UVP Laboratory Products» в присутствии 200 мл воды;
на стадии b) пластинки вносят для промывки в кристаллизатор (диаметром 19 см), содержащий 1 л PBS с pH=7,4, и в течение 10 мин при комнатной температуре несильно перемешивают встряхиванием при 60 оборотах в минуту на орбитальной мешалке «Certomat U» производства компании «B. Braun» и затем сушат при 30°C;
на стадии c) пластинки переносят в 6-луночную кювету, и на пластинку пипеткой наносят 150 мкл окрашивающего раствора кумасси, содержащего 2 г бриллиантового синего кумасси R-250, 0,5 г бриллиантового синего кумасси G-250, 50 мл метанола, 425 мл этанола, 100 мл ледяной уксусной кислоты и дистиллированную воду до 1000 мл, причем через 30 с осторожно с края кюветы прибавляют 6 мл буферного раствора PBS с pH=7,4 для смывания окрашивающего раствора, и пластинки переносят 2 раза в 6 мл PBS с pH=7,4 для удаления оставшегося окрашивающего раствора, после чего пластинки в течение короткого времени сушат при 30°C;
3
на стадии d) 20 мкл экстрагирующего раствора ДМСО/CHCOOH с объемным соотношением 9/1 наносят пипеткой на окрашенные пятна, экстрагирующему раствору дают действовать в течение 5 мин при комнатной температуре, затем жидкость повторяющимся образом наносят и удаляют отсасыванием пипеткой до полного удаления пятна с пластинки, и жидкость переносят в реакционный сосуд, после чего 2 мкл жидкости анализируют при 602 нм на спектрофотометре «Nanodrop 1000» производства компании «PeqLab» с выбором программы «UV VIS» для определения интенсивности окраски, корреляционно связанной с силой адгезии пептидов на оксидированных поверхностях.
4. Пептиды и предпочтительно додекапептиды, которые при измерении на стадии d) способа количественного определения по любому из пп. 1-3 показывают поглощение в интервале от 0,25 до 1, преимущественно от 0,4 до 1, предпочтительно от 0,5 до 1, более предпочтительно от 0,6 до 1 и наиболее предпочтительно от 0,7 до 1.
5. Додекапептиды по п. 4, аминокислотные последовательности которых соответствуют образцу последовательности, показанному в таблице 1.
6. Додекапептиды по п. 4 или 5, аминокислотные последовательности которых по меньшей мере в 8 из 12 позиций и предпочтительно по меньшей мере в 10 из 12 позиций соответствуют образцу последовательности, показанному в таблице 1.
7. Додекапептиды по любому из пп. 4 или 5, указанные в таблице 1, как пептиды 8 и 9, или в таблице 2, как пептиды 6, 7, 13 и 15.
8. Нуклеиновые кислоты, кодирующие пептиды по любому из пп. 4-7 и предпочтительно соответствующие последовательностям нуклеиновых кислот, указанных в таблице 3.
9. Векторы и предпочтительно клонирующие векторы и экспрессирующие векторы, содержащие нуклеиновые кислоты по п. 8, кодирующие пептиды и предпочтительно додекапептиды.
10. Прокариотические или эукариотические клетки, трансформированные нуклеиновыми кислотами по п. 8, кодирующими пептиды и предпочтительно додекапептиды.
11. Покрывающие агенты, лаки и лакокрасочные материалы, активаторы адгезии или клеи для оксидированных поверхностей, содержащие пептиды по любому из пп. 4-7.
12. Многослойный комбинированный материал или покрытая подложка, содержащие соединения, которые состоят полностью или частично из пептидов по любому из пп. 4-7 и внедрены в качестве активаторов адгезии по меньшей мере между двумя соседними слоями комбинированного материала или между покрытием и подложкой.
13. Применение пептидов по любому из пп. 4-7 в качестве ингредиента покрывающих агентов, лаков и лакокрасочных материалов, активаторов адгезии или клеев для оксидированных поверхностей, а также многослойных комбинированных материалов или покрытых подложек.