КЛЕТКИ НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ, ЭКСПРЕССИРУЮЩИЕ E4ORF1 АДЕНОВИРУСА, И СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ

1. Популяция сконструированных клеток нервной системы, нейральных стволовых клеток или нейральных клеток-предшественников, которые содержат последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид E4ORF1 аденовируса, или содержат полипептид E4ORF1 аденовируса.
2. Популяция по п. 1, в которой сконструированные клетки нервной системы представляют собой нервные клетки.
3. Популяция по п. 2, в которой сконструированные нервные клетки представляют собой гиппокампальные нейроны.
4. Популяция по п. 2 или 3, в которой нервные клетки экспрессируют один или несколько маркеров, выбранных из группы, состоящей из βIII тубулина, МАР2, тау, NeuN и нейрофиламента.
5. Популяция по п. 1, в которой сконструированные клетки нервной системы представляют собой глиальные клетки.
6. Популяция по п. 5, в которой глиальные клетки выбраны из группы, состоящей из астроцитов, олигодендроцитов, эпендимных клеток, радиальной глии, шванновских клеток, клеток-сателлитов и энтеральных глиальных клеток.
7. Популяция по п. 5, в которой глиальные клетки представляют собой астроциты.
8. Популяция по п. 5, в которой сконструированные глиальные клетки экспрессируют один или несколько маркеров, выбранных из группы, состоящей из глиального фибриллярного кислого белка (GFAP), нейротрофического фактора глиальных клеток (GDNF) и GLT-1.
9. Популяция по п. 5, в которой сконструированные глиальные клетки представляют собой GFAP-положительные астроциты.
10. Популяция по п. 1, в которой сконструированные клетки нервной системы представляют собой или происходят из первичных клеток нервной системы.
11. Популяция по п. 1, в которой сконструированные клетки нервной системы происходят из стволовых клеток, клеток-предшественников или ненейральных клеток.
12. Популяция по п. 1, в которой сконструированные клетки нервной системы происходят из плюрипотентных стволовых клеток.
13. Популяция по п. 12, в которой плюрипотентные стволовые клетки представляют собой эмбриональные стволовые клетки или индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (iPSC).
14. Популяция по п. 1, в которой сконструированные клетки нервной системы получены путем перепрограммирования ненейральных клеток.
15. Популяция по п. 1, в которой сконструированные клетки нервной системы получены путем трансдифференцировки из ненейральных клеток.
16. Популяция по п. 1, в которой сконструированные клетки нервной системы, нейральные стволовые клетки или нейральные клетки-предшественники представляют собой клетки млекопитающего.
17. Популяция по п. 1, в которой сконструированные клетки нервной системы, нейральные стволовые клетки или нейральные клетки-предшественники представляют собой клетки человека.
18. Популяция по п. 1, в которой сконструированные клетки нервной системы, нейральные стволовые клетки или нейральные клетки-предшественники представляют собой выделенные клетки.
19. Популяция по п. 1, причем популяция представляет собой по существу чистую популяцию сконструированных клеток нервной системы, нейральных стволовых клеток или нейральных клеток-предшественников.
20. Популяция по п. 1, в которой сконструированные клетки нервной системы, нейральные стволовые клетки или нейральные клетки-предшественники находятся in vitro.
21. Популяция по п. 1, в которой сконструированные клетки нервной системы, нейральные стволовые клетки или нейральные клетки-предшественники находятся in vivo в живом субъекте.
22. Применение популяции клеток по п. 1 в in vivo процедуре трансплантации.
23. Применение популяции клеток по п. 1 в способе лечения заболевания, нарушения или состояния, связанного с дефектом клеток нервной системы, недостаточностью клеток нервной системы или повреждением клеток нервной системы.
24. Способ лечения заболевания, нарушения или состояния, связанного с дефектом клеток нервной системы, недостаточностью клеток нервной системы или повреждением клеток нервной системы, причем способ предусматривает введение нуждающемуся в этом субъекту популяции сконструированных клеток нервной системы по п. 1.
25. Способ по п. 24, при котором заболевание, нарушение или состояние выбирают из группы, состоящей из следующего: травматическое повреждение головного мозга, повреждение спинного мозга, рассеянный склероз (MS), поствирусная острая демиелинизация, поперечный миелит, хроническая воспалительная демиелинизирующая полинейропатия (CIDP), синдром Гийена-Барре, прогрессирующая мультифокальная лейкоэнцефалопатия (PML), лейкодистрофии, адренолейкодистрофия, лейкодистрофия Краббе, метахроматическая лейкодистрофия, болезнь Александера, болезнь Канавана, синдром Коккейна и болезнь Пелицеуса-Мерцбахера.
26. Способ по п. 24, при котором заболевание, нарушение или состояние представляет собой нейродегенеративное заболевание, заболевание нейроразвития или заболевание, связанное с демиелинизацией или дисмиелинизацией нейронов.
27. Композиция, содержащая клеточную популяцию по п. 1 и раствор-носитель.
28. Терапевтическая композиция, содержащая клеточную популяция по п. 1 и раствор-носитель, подходящий для введения живому субъекту.
29. Способ получения популяции сконструированных клеток нервной системы, нейральных стволовых клеток или нейральных клеток-предшественников, причем способ предусматривает: введение молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей белок E4ORF1 аденовируса, в одну или несколько клеток нервной системы, нейральных стволовых клеток или нейральных клеток-предшественников, тем самым получая сконструированные клетки нервной системы, нейральные стволовые клетки или нейральные клетки-предшественники.
30. Способ получения популяции сконструированных клеток нервной системы, нейральных стволовых клеток или нейральных клеток-предшественников, причем способ предусматривает: (а) получение популяции сконструированных клеток нервной системы, нейральных стволовых клеток или нейральных клеток-предшественников, причем сконструированные клетки нервной системы, нейральные стволовые клетки или нейральные клетки-предшественники содержат последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид E4ORF1 аденовируса, и (b) культивирование сконструированных клеток нервной системы, нейральных стволовых клеток или нейральных клеток-предшественников.
31. Способ получения популяции сконструированных клеток нервной системы, нейральных стволовых клеток или нейральных клеток-предшественников, причем способ предусматривает: (а) получение одной или нескольких клеток нервной системы, нейральных стволовых клеток или нейральных клеток-предшественников, (b) введение молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид E4ORF1 аденовируса, в одну или несколько клеток нервной системы, нейральных стволовых клеток или нейральных клеток-предшественников для получения сконструированных клеток нервной системы, нейральных стволовых клеток или нейральных клеток-предшественников, и (с) культивирование сконструированных клеток нервной системы, нейральных стволовых клеток или нейральных клеток-предшественников.
32. Способ получения популяции сконструированных клеток нервной системы, причем способ предусматривает следующее: (а) введение молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептид E4ORF1 аденовируса, в одну или несколько стволовых клеток или клеток-предшественников с образованием сконструированных стволовых клеток или клеток-предшественников, и (b) дифференцировка сконструированных стволовых клеток или клеток-предшественников в клетки нервной системы, тем самым получая популяцию сконструированных клеток нервной системы.
33. Способ получения популяции сконструированных клеток нервной системы, причем способ предусматривает следующее: (а) получение популяции сконструированных стволовых клеток или клеток-предшественников, которые содержат последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует полипептид E4ORF1 аденовируса, и (b) дифференцировка одной или нескольких сконструированных нейральных стволовых клеток или клеток-предшественников для получения сконструированных клеток нервной системы.
34. Способ по пп. 29, 32 или 33, дополнительно предусматривающий культивирование сконструированных клеток нервной системы, нейральных стволовых клеток или нейральных клеток-предшественников.
35. Способ по пп. 29, 30, 31, 32 или 33, при котором сконструированные клетки нервной системы экспрессируют полипептид E4ORF1 аденовируса.
36. Способ по пп. 29, 30, 31, 32 или 33, при котором молекулу нуклеиновой кислоты вводят в клетки нервной системы, нейральные стволовые клетки или нейральные клетки-предшественники in vitro.
37. Способ по п. 29 или 32, при котором молекулу нуклеиновой кислоты вводят в клетки нервной системы, нейральные стволовые клетки или нейральные клетки-предшественники in vivo.
38. Способ по п. 32 или 33, при котором стволовые или клетки-предшественники представляют собой нейральные стволовые клетки или клетки-предшественники.
39. Способ по п. 32 или 33, при котором стволовые клетки представляют собой плюрипотентные стволовые клетки.
40. Способ по п. 39, при котором плюрипотентные стволовые клетки представляют собой эмбриональные стволовые клетки или индуцированные плюрипотентные стволовые клетки (iPSC).
41. Способ по пп. 29, 31 или 32, при котором стадию введения проводят с помощью трансфекции.
42. Способ по п. 41, при котором трансфекцию проводят с использованием способа, выбранного из группы, состоящей из следующего: опосредованная липосомами трансфекция, опосредованная полибреном трансфекция, опосредованная ДЭАЭ-декстраном трансфекция, электропорация, осаждение фосфатом кальция, микроинъекция и бомбардировка микрочастицами.
43. Способ по пп. 29, 31 или 32, при котором стадию введения проводят с помощью опосредованной вирусом трансдукции.
44. Способ по п. 43, при котором опосредованную вирусом трансдукцию проводят с использованием способа, выбранного из группы, состоящей из следующего: опосредованная лентивирусом трансдукция, опосредованная аденовирусом трансдукция, опосредованная ретровирусом трансдукция, опосредованная аденоассоциированным вирусом трансдукция и опосредованная вирусом герпеса трансдукция.
45. Способ сокультивирования для культивирования популяции нейронов причем способ предусматривает: культивирование популяции нейронов и популяции сконструированных глиальных клеток вместе в одном и том же сосуде для культивирования, причем сконструированные глиальные клетки содержат нуклеотидную последовательность, которая кодирует полипептид E4ORF1 аденовируса, или содержат полипептид E4ORF1 аденовируса.
46. Способ по п. 45, при котором сконструированные глиальные клетки образуют слой питающих клеток на поверхности сосуда для культивирования.
47. Способ по п. 46, при котором нейроны помещают на слой питающих клеток.
48. Способ культивирования нейронов, предусматривающий: приведение в контакт популяции нейронов с кондиционированной глиальными клетками средой, причем кондиционированную глиальными клетками среду получают из культуры сконструированных глиальных клеток, причем сконструированные глиальные клетки содержат нуклеотидную последовательность, которая кодирует полипептид E4ORF1 аденовируса, или содержат полипептид E4ORF1 аденовируса.
49. Способ культивирования нейронов, причем способ предусматривает: (а) получение популяции сконструированных глиальных клеток, причем сконструированные глиальные клетки содержат нуклеотидную последовательность, которая кодирует полипептид E4ORF1 аденовируса, или содержат полипептид E4ORF1 аденовируса, (b) культивирование сконструированных глиальных клеток в сосуде для культивирования, (с) сбор кондиционированной среды из сосуда для культивирования, (d) добавление кондиционированной среды к культуре нейронов, и (е) культивирование нейронов.
50. Кондиционированная среда культивирования клеток, полученная из культуры сконструированных глиальных клеток, причем сконструированные глиальные клетки содержат нуклеотидную последовательность, которая кодирует полипептид E4ORF1 аденовируса, или содержат полипептид E4ORF1 аденовируса.
51. In vitro модельная система гематоэнцефалического барьера, содержащая популяцию сконструированных глиальных клеток, причем сконструированные глиальные клетки содержат нуклеотидную последовательность, которая кодирует полипептид E4ORF1 аденовируса, или содержат полипептид E4ORF1 аденовируса.
52. Система по п. 51, в которой сконструированные глиальные клетки представляют собой астроциты.
53. In vitro модельная система гематоэнцефалического барьера или набор, содержащие следующее: (а) популяция сконструированных глиальных клеток, причем сконструированным глиальные клетки содержат нуклеотидную последовательность, которая кодирует полипептид E4ORF1 аденовируса, или содержат полипептид E4ORF1 аденовируса, (b) перициты и (с) эндотелиальные клетки.
54. Модель или система по п. 53, в которой сконструированные глиальные клетки представляют собой астроциты.