БЕНЗОПРОИЗВОДНЫЕ С ШЕСТИЧЛЕННЫМ КОЛЬЦОМ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРА DPP-4 И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
BENZO-DERIVATIVES WITH SIX-MEMBERED RING AS DPP-4 INHIBITOR AND USE THEREOF

Область техники
Настоящее изобретение относится к области фармацевтической химии. В частности настоящее изобретение относится к новым бензопроизводным с шестичленным кольцом, к способу их синтеза и их применениям при получении лекарственного препарата для лечения диабета 2 типа и связанных заболеваний.
Предшествующий уровень техники
Сахарный диабет (DM) представляет собой метаболическое заболевание, характеризующееся повышенным уровнем глюкозы в крови (глюкоза в крови), данное заболевание является медленно прогрессирующим, обусловленным генетическими факторами в сочетании с факторами окружающей среды. В то время как улучшаются стандарты жизни человека, количество людей с сахарным диабетом быстро возрастает. Согласно Международной диабетической федерации в 2012 году зарегистрировано около 371 миллиона пациентов с диабетом, а число пациентов с диабетом в Китае составило 90 миллионов. Таким образом, Китай является страной с наибольшим числом пациентов в мире (Wild, S.; Roglic, G.; Green, A.; Sicree, R.; King, H. Diabetes Care. 2004, 27, 1047-1053). Приблизительно 3,8 миллиона людей умирают от диабета каждый год и диабет наряду со СПИДом является третьей причиной смерти после рака и сердечно-сосудистых заболеваний.
Согласно патогенезу диабет может быть разделен на тип 1 и тип 2. Диабет 1 типа обусловлен в основном недостаточной секрецией эндогенного инсулина, вызванной аутоиммунно-поврежденными инсулоцитами; другими словами, абсолютным недостатком инсулина. Такие пациенты нуждаются в лечении инсулином. Диабет 2 типа обусловлен пониженной секрецией инсулина или инсулинорезистентностью, вызванной нефункциональными инсулоцитами, другими словами, относительным недостатком инсулина в результате нарушения метаболизма сахаров, белков и жиров.
Клинически диабет лечат в основном посредством применения различных пероральных гипогликемических препаратов и инсулиновых добавок для замедления прогресса заболевания. Однако эти способы иногда не позволяют достичь желаемых терапевтических эффектов, и существуют побочные эффекты, вызывающие гипогликемию, сердечно-сосудистые заболевания и т.д.. Кроме того, отсутствуют защитные эффекты в отношении поврежденных инсулоцитов. Более глубокое понимание патогенеза диабета сфокусировало исследования на поиске эффективных гипогликемических средств исходя из особенностей ключевых мишеней в патогенезе.
Был показано, что дипептидилпептидаза-4 (DPP-4) является эффективной мишенью для лечения диабета 2 типа, способной быстро разрушать многие важные инкретины, такие как глюкагонподобный белок-1 (GLP-1) и глюкозозависимый инсулинотропный пептид (GIP), что приводит к неправильной секреции инсулина. Поэтому ингибиторы DPP-4 могут улучшать активность GLP-1 и GIP, обеспечивать секрецию инсулина и более низкий сахар в крови.
Клинические исследования показали, что ингибиторы DPP-4 могут понижать уровни глюкозы в крови и повышать толерантность к глюкозе, и не вызывать побочные эффекты, такие как увеличение веса и гипогликемия. В настоящее время клинически применяемыми ингибиторами DPP-4 являются ситаглиптин, саксаглиптин, вилдаглиптин, алоглиптин и линаглиптин (Havale, S.Н.; Pal, М. Bioorg. Med. Chem. 2009, 17, 1783-1802; Gupta, R.; Walunj, S.S.; Tokala, R.K.; Parsa, K.V.; Singh, S.K.; Pal, M. Curr. Drug. Targets, 2009, 10, 71-87). Рынок гипогликемических средств уже наполнен гипогликемическими лекарственными средствами, такими как ингибиторы DPP-4. Например, в 2009, продажи ситаглиптина от Merck & Co., Inc., достигли 13,1 миллиарда долларов, в которых только гипогликемические лекарственные средства занимают более 10 миллиардов долларов.
Однако все продаваемые сейчас ингибиторы DPP-4 находятся под патентной защитой, ряд новых ингибиторов DPP-4 еще находится на стадии клинического исследования. Поэтому существует насущная необходимость в области техники в развитии новых эффективных ингибиторов DPP-4 с низкой токсичностью.
Краткое описание изобретения
Целью настоящего изобретения является обеспечение соединения в качестве нового ингибитора DPP-4 с новой структурой, высокой эффективностью, низкой токсичностью, фармацевтической композиции, содержащей указанное соединение, способ получения указанного соединения и применение указанного соединения при получении лекарственного препарата для предупреждения или лечения заболеваний, связанных с DPP-4.
В первом аспекте настоящее изоберетние предлагает соединение общей формулы I, или его фармацевтически приемлемую соль или пролекарство или его оптически активный изомер или сольват:
где
2
X выбран из СН, О, S и NH;
1-6
1-6
1-6
1-6
А представляет собой незамещенное бензольное кольцо или бензольное кольцо с 1-5 заместителями, где каждый заместитель независимо выбран из галогена, циано, гидрокси, C алкила или C алкила, замещенного галогеном, предпочтительно F, более предпочтительно 1-5 F, C алкокси или С алкокси, замещенного галогеном, предпочтительно F, более предпочтительно 1-5 F;
А также может быть выбран из азотсодержащего или серосодержащего пятичленного или шестичленного насыщенного или ненасыщенного гетероцикла с 1-4 заместителями, где каждый заместитель независимо выбран из галогена, циано, группы борной кислоты;
Гетероцикл выбран из следующих структур:
1-6
1-6
1-6
1-6
R представляет собой Н, галоген, циано, гидрокси, C алкил или C алкил с 1-5 атомами F, C алкокси или C алкокси с 1-5 атомами F, n равно 1-2;
1
1-6
1-10
1-6
2-10
1-10
1-3
2
2
2
1-6
1-5
3-5
1-6
3-5
1-5
1-5
3-5
1-5
2
3
Кольцо В отсутствует или выбрано из ароматического бензольного кольца, ароматического гетероцикла, насыщенного или ненасыщенного 5-членного или 6-членного кольца, азот-, кислород- и серосодержащего пяти- или шестичленного насыщенного или ненасыщенного гетероцикла, где заместитель R независимо выбран из группы, состоящей из карбонила, галогена, циано, гидрокси, C алкила, C алкокси (предпочтительно C алкокси), С алкокси с алкенильной связью, алкинильной связью, возможно замещенного бензилокси, С алкилкарбонилокси, С алкоксиметокси, дизамещенного OCHCHO и ОСНО, СООН, С алкоксикарбонила, карбамоила, амино, NRR, С алкилкарбоксамидо, С алкиллактамной группы, C алкилсульфонамидо, С алкилсультамной группы, меркапто, С алкилмеркапто, С алкилсульфонила, С циклоалкилсульфонила, С алкилсульфинила, m равно 1-4;
2
3
2
3
1-6
R, R независимо выбраны из С алкила или R и R вместе выбраны из замещенного или незамещенного 5- или 6-членного циклоалкила или замещенной или незамещенной 5- или 6-членной группы, содержащей N, О.
В предпочтительном воплощении настоящее изобретение обеспечивает соединение общей формулы (II), или его фармацевтически приемлемую соль или пролекарство или его оптически активный изомер или сольват:
где
2
X выбран из СН, О, S и NH;
1-6
1-6
1-6
А представляет собой бензольное кольцо с 1-5 заместителями, где каждый заместитель независимо выбран из галогена, циано, гидрокси, C алкила или C алкила, замещенного галогеном, предпочтительно F, более предпочтительно 1-5 F, C алкокси, замещенного галогеном, предпочтительно F, более предпочтительно 1-5 F;
4
R независимо выбран из Н, гидроксила, F, циано;
5
1-6
1-6
1-6
1-10
1-3
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
R представляет собой галоген, циано, гидроксил, меркапто, С алкильную группу или C алкильную группу, содержащую 1-5 атомов F, С алкокси, гидроксил, C алкилкарбонилокси, С алкоксиметилокси, СООН, С алкоксикарбонил, карбамоил, цианометилкарбонил, ацетамидометилкарбонил, 2-пиррокарбонил, метоксикарбонилметил, 4-пиранилкарбонил, 4-морфолинкарбонил, 1-пиперазинкарбонил, С алкилтио или C алкилтио, содержащий 1-5 атомов F, C алкилсульфинил, С алкилсульфонил, амино, ацетиламино, метансульфонамидо, метилкарбамидо, N-пропансульфониллактамную группу, N-бутансульфониллактамную группу, 4-морфолинил, N-метилпиперазин-4-ил, пиперазинил, 3-метансульфонилпиперазинил, 3,3-дифтортетрагидропирролил, 2-аминоформилпиперидил, 3-пиразолиламино, q равно 1-4.
В предпочтительном воплощении настоящее изобретение предлагает соединение общей формулы (III), или его фармацевтически приемлемую соль или пролекарство или его оптически активный изомер или сольват;
где
X выбран из О, S и NH;
4
R независимо выбран из Н, гидроксила;
6
7
1-2
1-2
1-3
1-2
R, R независимо выбраны из галогена, циано, гидрокси, меркапто, C алкокси, C алкилкарбонилокси, C алкоксиметокси, СООН, C алкоксикарбонила, карбамоила, цианометилкарбонила, ацетамидометилкарбонила, 2-пиррокарбонила, метоксикарбонилметила, 4-пиранилкарбонила, 4-морфолинкарбонила, 1-пиперазинкарбонила, метилтио, метилсульфенила, метансульфонила, амино, ацетамидо, метансульфонамидо, метилкарбамидо, N-пропансульфониллактамной группы, N-бутансульфониллактамной группы, 4-морфолинила, N-метилпиперазин-4-ила, пиперазинила, 3-метансульфонилпиперазинила, 3,3-дифтортетрагидропирролила, 2-аминоформилпиперидила, 3-пиразолиламино;
8
9
10
R, R и R независимо выбраны из Н, Cl, F, циано.
В другом предпочтительном воплощении настоящее изобретение обеспечивает соединение, выбранное из следующей группы, или его фармацевтически приемлемую соль или пролекарство:
В других предпочтительных воплощениях настоящее изобретение обеспечивает соединение, выбранное из следующей группы, или его фармацевтически приемлемую соль или пролекарство:
Во втором аспекте настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, содержащую соединение по первому аспекту изобретения или его фармацевтически приемлемую соль или пролекарство и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
В предпочтительном воплощении фармацевтическая композиция представляет собой лекарственную форму, приемлемую для перорального введения, включая без ограничений таблетку, раствор, суспензию, капсулы, гранулы, порошок.
В третьем аспекте настоящее изобретение обеспечивает применение соединения по первому аспекту настоящего изобретения или его фармацевтически приемлемой соли, где указанное соединение или его фармацевтически приемлемая соль могут быть использованы для получения лекарственного препарата для ингибирования DPP-4, лекарственного препарата для лечения или предупреждения заболеваний, связанных с дипептидилпептидазой-4 (DPP-4), или для применения в качестве диуретического средства или для получения лекарственного препарата для лечения и предупреждения воспаления.
В предпочтительном воплощении заболевания, связанные с дипептидилпептидазой-4 (DPP-4), представляют собой диабет, нарушение толерантности к глюкозе, кишечное заболевание, язвенный колит, болезнь Крона, ожирение или метаболический синдром.
В еще одном предпочтительном воплощении диабет представляет собой инсулинонезависимый диабет 2 типа.
В четвертом аспекте настоящее изобретение обеспечивает способ получения соединения по первому аспекту настоящего изобретения, включающий следующие стадии:
и
1
где X, A, R, В и R определены, как описано выше.
Следует понимать, что в настоящем изобретении технические признаки, определенные выше и ниже (например, в примерах) могут быть скомбинированы друг с другом, таким образом образуя новое или предпочтительное техническое решение, которое не требует отдельного описания.
Способы осуществления изобретения
50
В ходе всеобъемлющих и интенсивных исследований авторы изобретения неожиданно обнаружили новые производные с шестичленным бензольным кольцом с ингибиторной активностью в отношении DPP-4, и при оценке активности на молекулярном уровне значения IC соединений по настоящему изобретению в отношении DPP-4 были на нМ уровне. Таким образом, были получены новые ингибиторы DPP-4 с новой структурой и превосходной активностью. Во время экспериментов на животных было установлено, что соединения по настоящему изобретению по сравнению с известными из уровня техники соединениями, обладающими сходной активностью, также могут оказывать полезные эффекты in vivo, такие как превосходная длительная эффективность.
Определения по группам
Термины, указанные в данном документе, определены следующим образом.
Используемый в настоящем описании термин ''алкил'' относится к алкилу с насыщенной прямой или разветвленной цепью, имеющей от 1 до 10 атомов углерода, и предпочтительно алкил включает алкил с 2-8 атомами углерода, 1-6 атомами углерода, 1-4 атомами углерода, 3-8 атомами углерода, 1-3 атомами углерода в длину. Примеры алкила включают без ограничений метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, гептил и т.п.
Алкил может быть замещен одним или более (например, 2, 3, 4 или 5) заместителями, например, замещен галогеном или галоалкилом. Например, алкил может представлять собой алкил, замещенный 1-4 атомами фтора, или алкил, замещенный фторсодержащим алкилом.
Используемый в настоящем описании термин ''алкоксил'' относится к окси, замещенному алкилом. Предпочтительно алкоксил представляет собой алкоксил с 1-6 атомами углерода в длину, более предпочтительно алкоксил с 1-4 атомами в длину. Примеры алкоксила включают без ограничений метоксил, этоксил, пропоксил и т.п.
Используемый в настоящем описании термин ''атом галогена'' или ''галоген'' означает фтор, хлор, бром и йод.
1-4
1-6
1-4
3
1-4
''Арил'' означает моноциклическую, бициклическую или трициклическую ароматическую группу с 6-14 атомами углерода, и включает фенил, нафтил, фенантрил, антрил, инденил, фторенил, тетралин, инданил и т.п. Арил необязательно может быть замещен 1-4 (например, 1, 2, 3 или 4) заместителями, выбранными из галогена, С альдегидной группы, C алкила, циано, нитро, амино, гидроксила, гидроксиметила, галоген-замещенного алкила (например, трифторметила), карбоксила, С алкоксила, этоксиформила, N(CH) и С ацила, гетероциклила или гетероарила и т.п.
1-6
Используемый в настоящем описании термин ''аралкил'' относится к алкилу, замещенному арилом, например, C алкилу, замещенному фенилом. Примеры аралкила включают без ограничений арилметил, арилэтил и т.п., например, бензил, фенэтил и т.п.
1-4
1-4
2
2
3
2
Например, арил может быть замещен 1-3 заместителями, выбранными из галогена, -ОН, С алкоксила, С алкила, -NO, -NH, -N(CH), карбоксила и этоксиформила и т.п.
Используемый в настоящем описании термин ''5- или 6-членный насыщенный или ненасыщенный гетероцикл'' включает без ограничений гетероалициклические или гетероароматические кольца, содержащие от 1 до 3 гетероатомов, выбранных из О, S и N, включая (без ограничений) фурил, тиенил, пирролил, пирролидинил, пиразолил, имидазолил, триазолил, оксазолил, пиранил, пиридил, пиримидинил, пиразинил, пиперидинил, морфолинил и т.п.
Используемый в настоящем описании термин ''гетероароматическое кольцо'' или ''гетероарил'' означает, что группа содержит 5-14 атомов кольца и 6, 10 или 14 электронов, входящих в систему кольца. Атомы, составляющие кольцо, представляют собой атомы углерода и 1-3 гетероатома необязательно выбраны из О, N, S. Пригодный гетероарил включает пиперазинил, морфолинил, пиперидинил, пирролидинил, тиенил, фурил, пиранил, пирролил, имидазолил, пиразолил, пиридил, включая без ограничений 2-пиридил, 3-пиридил и 4-пиридил, пиразинил, пиримидинил и т.п.
1-4
1-6
1-4
3
1-4
5- или 6-членный гетероцикл необязательно может быть замещен 1-5 (например, 1, 2, 3, 4 или 5) заместителями, выбранными из галогена, С альдегидной группы, C алкила с прямой или разветвленной цепью, циано, нитро, амино, гидроксила, гидроксиметила, галоген-замещенного алкила (например, трифторметил), карбоксила, С алкоксила, этоксиформила, N(СН) и С ацила.
1-4
1-6
1-4
3
1-4
Используемый в настоящем описании термин ''возможно замещенный'' означает, что группа, модифицированная данным термином может быть необязательно замещенной 1-5 (например, 1, 2, 3, 4 или 5) заместителями, выбранными из галогена, С альдегидной группы, C алкила с прямой или разветвленной цепью, циано, нитро, амино, гидроксила, гидроксиметила, галогензамещенного алкила (например, трифторметила), карбоксила, С алкоксила, этоксиформила, N(CH) и С ацила.
Бензопроизводное с шестичленным кольцом по настоящему изобретению представляет собой соединение общей формулы I, или его фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, или его оптически активный изомер или сольват:
где
2
X выбран из СН, О, S и NH;
1-6
1-6
1-6
1-6
А представляет собой незамещенное бензольное кольцо или бензольное кольцо с 1-5 заместителями, где каждый заместитель независимо выбран из галогена, циано, гидрокси, С алкила или C алкила, замещенного галогеном, предпочтительно F, более предпочтительно 1-5 F, C алкокси или C алкокси, замещенного галогеном, предпочтительно F, более предпочтительно 1-5 F;
А также может быть выбран из азотсодержащих или серосодержащих пятичленных или шестичленных насыщенных или ненасыщенных гетероциклов с 1-4 заместителями, где каждый каждый заместитель независимо выбран из галогена, циано, группы борной кислоты;
Гетероцикл выбран из следующих структур:
1-6
1-6
1-6
1-6
R представляет собой Н, галоген, циано, гидрокси, C алкила или C алкил с 1-5 атомами F, C алкокси или C алкокси с 1-5 атомами F, n равно 1-2;
1
1-6
1-10
1-6
2-10
1-10
1-3
2
2
2
1-6
1-5
3-5
1-6
3-5
1-5
1-5
3-5
1-5
2
3
Кольцо В отсутствует или выбрано из ароматического бензольного кольца, ароматического гетероцикла, насыщенного или ненасыщенного 5-членного или 6-членного кольца, азот-, кислород- и серосодержащего пяти- или шестичленного насыщенного или ненасыщенного гетероцикла, где заместитель R независимо выбран из группы, состоящей из карбонила, галогена, циано, гидрокси, C алкила, C алкокси (предпочтительно, C алкокси), С алкокси с алкенильной связью, алкинильной связью, необязательно замещенного бензилокси, С алкилкарбонилокси, C алкоксиметокси, двузамещенного OCHCHO и OCHO, СООН, C алкоксикарбонила, карбамоила, амино, NRR, C алкилкарбоксамидо, С алкиллактамной группы, С алкилсульфонамидо, С алкилсультамной группы, меркапто, С алкилмеркапто, С алкилсульфонила, С-циклоалкилсульфонила, С алкилсульфинила, m равно 1-4;
2
3
2
3
1-6
R, R независимо выбраны из С алкила или R и R вместе образуют замещенный или незамещенный 5- или 6-членный циклоалкил, или замещенную или незамещенную 5- или 6-членную гетероциклическую группу, содержащую N, О.
В одном из воплощений соединение по настоящему изобретению представляет собой соединение общей формулы (II), или его фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, или его оптически активный изомер или сольват:
где
2
X выбран из СН, О, S и NH;
1-6
1-6
1-6
1-6
А представляет собой бензольное кольцо с 1-5 заместителями, где каждый заместитель независимо выбран из галогена, циано, гидрокси, C алкила или С алкила, замещенного галогеном, предпочтительно F, более предподчтительно 1-5 F, C алкокси или C алкокси, замещенного галогеном, предпочтительно F, более предподчтительно 1-5 F;
4
R независимо выбран из Н, гидроксила, F, циано;
5
1-6
1-6
1-6
1-3
1-6
1-6
1-6
1-6
1-6
R представляет собой галоген, циано, гидроксил, меркапто, С алкильную группу или C алкильную группу, содержащую 1-5 атомов F, C алкокси, C алкоксиметилокси, гидроксил, СООН, C алкоксикарбонил, карбамоил, цианометилкарбонил, ацетамидометилкарбонил, 2-пиррокарбонил, метоксикабонилметил, 4-пиранилкарбонил, 4-морфолинкарбонил, 1-пиперазинкарбонил, C алкилтио или C алкилтио, содержащий 1-5 атомов F, C алкилсульфинил, C алкилсульфонил, амино, ацетиламино, метансульфонамидо, метилкарбамидо, N-пропансульфониллактамную группу, N-бутансульфониллактамную группу, 4-морфолинил, N-метилпиперазин-4-ил, пиперазинил, 3-метансульфонилпиперазинил, 3,3-дифтортетрагидропирролил, 2-аминоформилпиперидил, 3-пиразолиламино, q равно 1-4.
2
В общей формуле (II), химические конфигурации показаны в формулах IIa и IIb, где А и NH представляют собой трансконфигурации и два хиральных атома углерода в насыщенном шестичленном кольце помечены при помощи *:
В предпочтительном воплощении абсолютная конфигурация представляет собой IIa.
В одном из воплощений соединение по настоящему изобретению представляет собой соединение общей формулы (III) или его фармацевтически приемлемую соль или пролекарство, или его оптически активный изомер или сольват:
где
X выбран из О, S и NH;
4
R независимо выбран из Н, гидроксила;
6
7
1-2
1-2
1-3
1-2
R, R независимо выбраны из водорода, галогена, циано, гидрокси, меркапто, С алкокси, C алкилкарбонилокси, C алкоксиметокси, СООН, C алкоксикарбонила, карбамоила, цианометилкарбонила, ацетамидометилкарбонила, 2-пиррокарбонила, метоксикарбонилметила, 4-пиранилкарбонила, 4-морфолинкарбонила, 1-пиперазинкарбонила, метилтио, метилсульфинила, метансульфонила, амино, ацетамидо, метансульфонамидо, метилкарбамидо, N-пропансульфониллактамной группы, N-бутансульфониллактамной группы, 4-морфолинила, N-метилпиперазин-4-ила, пиперазинила, 3-метансульфонилпиперазинила, 3,3-дифтортетрагидропирролила, 2-аминоформилпиперидила, 3-пиразолиламино;
8
9
10
R, R и R независимо выбраны из Н, Cl, F, циано.
Общий способ получения соединений по настоящему изобретению показан ниже:
В предпочтительном воплощении соединение по настоящему изобретению показано ниже:
В других предпочтительных воплощениях настоящее изобретение дополнительно обеспечивает следующие соединения:
Все соединения содержат более одного хирального атома углерода и могут существовать в виде оптически чистых изомеров и энантиомеров, и данное изобретение охватывает все их формы.
В свете настоящего изобретения и знания предшествующего уровня техники специалистам в данной области техники будет понятно, что функциональные группы соединения по настящему изобретению могут быть дериватизированы для получения производных, которые могут быть превращены в материнское соединение in vivo.
Настоящее изобретение также относится к способу получения соединения общих формул (I) - (III), и способ получения соединения общей формулы (III) будет описан в качестве примера:
Аминосоединение (III) восстанавливают посредством обычного процесса восстановления, такого как каталитическое гидрирование в растворителе, таком как метанол и этанол; применяют катализатор, такой как никель Ренея, металлический палладий или металлическая платина и т.д.; применяют обычные условия восстановления для металла и кислоты и кислой соли; обычно применяемые металлы включают Zn, Fe; применяемые кислоты включают соляную кислоту, серную кислоту, уксусную кислоту, и кислая соль представляет собой, например хлорид аммония и т.п. Температура для реакции восстановления составляет 20~80°С.
Нитросоединение (IV) получают посредством восстановления соединения с двойной нитросвязью (V), при помощи боргидрида натрия в смешанном растворителе. Смесь представляет собой тетрагидрофосфат (ТГФ) и метанол в соотношении 20:1 ~ 1:1; и температура восстановления составляет от 20 до приблизительно 80°С.
2
Способ получения соединения с двойной нитросвязью (V) (X представляет собой S, О, NH, СН) схож с реакцией присоединения Майкла, которое получают из нитровинилбензола (VI) и соединения с альдегидной (VII) с электронобогащенной группой X в соответствующем орто-положении при от нейтральных до щелочных условиях. Основной катализатор включает органическое основание триэтиламин, диизопропилэтиламин, тривинилдиамин и металлическое основание, включая реактив Гриньяра, бутиллитий, LDA (диизопропиламид лития) и т.п. Температура реакции составляет от -80°С до приблизительно 80°С.
Нитровенилбензол (VI) получают посредством конденсации замещенных бензальдегидов и нитрометана, и используемые основания включают неорганические основания NaOH, KOH и органические основания, включающие триэтиламин, диизопропилэтиламин, тривинилдиамин.
На основании новых соединений по настоящему изобретению настоящее изобретение также предлагает фармацевтическую композицию, содержащую терапевтически эффективное количество соединения формулы I, II или III по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель или эксципиент.
Примеры фармацевтически приемлемой соли соединения по настоящему изобретению включают без ограничений соль неорганической и органической кислоты, такую как гидрохлорид, гидробромид, сульфат, цитрат, лактат, тартрат, малеат, фумарат, манделат и оксалат; и соль неорганического и органического основания, образованную при помощи основания, такую как гидроксил натрия, Трис (гидроксиметил)аминометан (Трис, амин трометамин) и N-метилглюкамин.
Для каждого субъекта необходимы свои требования, но оптимальная доза каждого активного ингредиента в фармацевтической композиции по настоящему изобретению может быть определена специалистом в данной области техники.
Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может быть получена в формах, пригодных для различных путей введения, включая без ограничений парентеральный, подкожный, внутривенный, внутримышечный, интраперитонеальный, чрескожный, буккальный, интратекальный, интракраниальный, назальный или местные пути введения, для лечения заболеваний, связанных с DPP-4. В предпочтительном воплощении соединения по настоящему изобретению получают в виде пероральных лекарственных форм. Вводимое количество является эффективным для улучшения или устранения одного или более состояний. Таким образом, для лечения конкретного заболевания эффективное количество является достаточным для улучшения или уменьшения симптомов заболевания. Такие дозы могут быть введены в виде единичной дозы или могут быть введены согласно эффективному лечению. Доза может лечить заболевание, но обычно ее вводят для улучшения симптомов заболевания. Обычно требуется повторное введение для достижения улучшения симптомов. Дозировка будет определена в зависимости от возраста пациента, здоровья и массы, сопутствующего лечения, частоты лечения и желаемых терапевтических эффектов.
Фармацевтические препараты по настоящему изобретению могут быть введены любому млекопитающему, в случае, если терапевтические эффекты могут быть достигнуты. Среди млекопитающих наиболее важным является человек.
Соединение по настоящему изобретению или его фармацевтическая композиция могут быть полезны при лечении или предупреждении заболеваний, связанных с дипептидилпептидазой-4 (DPP-4). В одном из воплощений заболевания, связанные с DPP-4, включают диабет, в частности, инсулиннезависимый диабет 2 типа, нарушение толерантности к глюкозе, кишечные заболевания, язвенный колит, болезнь Крона, ожирение или метаболический синдром. Соединения по настоящему изобретению также могут быть применены в качестве диуретического средства или для предупреждения и лечения воспаления.
Фармацевтические препараты по настоящему изобретению могут быть произведены посредством известных способов. Например, они могут быть произведены посредством обычного смешивания, гранулирования, дражировки, растворения или сублимационной сушки. В течение производства пероральных препаратов твердые эксципиенты и активные соединения могут быть скомбинированы и необязательно измельчены. При необходимости может быть добавлено приемлемое количество вспомогательного агента, и смесь гранул может быть обработана для получения ядер таблеток или драже.
Приемлемые эксципиенты (в частности наполнители) представляют собой, например, сахара, такие как лактоза или сахароза, маннит или сорбит; препараты целлюлозы или фосфаты кальция; например, трикальцийфосфат или гидрогенфосфат кальция; и связывающие вещества, такие как крахмал, включая кукурузный крахмал, пшеничный крахмал, рисовый крахмал, картофельный крахмал, желатин, трагакант, метилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, натрий карбоксиметилцеллюлозу или поливинилпирролидон. При желании могут быть добавлены разрыхлители, например, крахмалы, указанные выше, а также карбоксиметилкрахмал, поперечносшитый поливинилпирролидон, агар, альгиновая кислота или ее соль, такая как альгинат натрия. Могут быть добавлены адъюванты, в частности модификаторы вязкости и лубриканты, например, кремний, тальк, соли стеариновой кислоты, такие как стеарат магния или кальция, стеариновая кислота или полиэтиленгликоль. При необходимости кор дражже может быть покрыт приемлемыми покрытиями, устойчивыми к желудочному соку. Для этой цели могут быть применены концентрированные растворы сахаров. Такой раствор может включать аравийскую камедь, тальк, поливинилпирролидон, полиэтиленгликоль и/или диоксид титана, растворы лака и приемлемые органические растворители или их смеси. Для получения покрытий, устойчивых к желудочным сокам, может быть применен соответствующий раствор целлюлозы, например, фталат ацетата целлюлозы или фталат гидроксипропилметилцеллюлозы. Красители и пигменты могут быть добавлены к покрытию коров таблеток или дражже, например, для идентификации и характеристики лекарственных форм комбинаций активных ингредиентов.
На основании соединений по настоящему изобретению специалисты в области техники знают, что пролекарства соединений по настоящему изобретению также должны быть включены в объем настоящего изобретения. Используемый в настоящей заявке термин ''пролекарство'' обладает тем же значением, что и общеизвестное специалистам в области техники, и означает, что соединение, имеющее фармакологические активности, химически модифицировано для получения соединения, которое является неактивным или менее активным in vitro, и может высвобождать активное лекарственное средство посредством ферментативной или неферментативной конверсии in vivo, таким образом проявляя эффективность. Пролекарство само по себе не обладает биологической активностью или активностями и может быть превращено в активное вещество в процессе метаболизма in vivo, повышая таким образом биодоступность лекарственных средств, усиливая нацеливание и снижая токсичность и побочные эффекты лекарственного средства. В одном из воплощений пролекарство соединения по настоящему изобретению включает производное сложного эфира, амид и т.п., полученное посредством химической модификации соединений по настоящему изобретению.
На основании соединения по настоящему изобретению и его фармацевтической композиции настоящее изобретение также обспечивает способ лечения или предупреждения заболевания, связанного с дипептидилпептидазой-4 (DPP-4), включающее без ограничений сахарный диабет, в частности инсулиннезависимый диабет 2 типа, нарушенную толерантность к глюкозе, кишечное заболевание, язвенный колит, болезнь Крона, ожирение или метаболический синдром. Способ предусматривает введение субъекту, нуждающемуся в этом, соединения формулы I, II или III по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, или фармацевтической композиции по изобретению.
Способы введения включают без ограничений различные способы введения, хорошо известные в области техники, которые могут быть определены на основании фактического состояния пациента. Такие способы включают без ограничений парентеральный, подкожный, внутривенный, внутримышечный, интраперитонеальный, трансдермальный, пероральный, интратекальный, интракраниальный, назальный или местный пути.
Более того, настоящее изобретение включает применение соединения формулы I, II или III по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли при получении лекарственного препарата для лечения или предупреждения заболевания, связанного с дипептидил пептидазой-4 (DPP-4), которое включает без ограничений диабет, в частности инсулиннезависимый диабет 2 типа, нарушенную толерантность к глюкозе, кишечное заболевание, язвенный колит, болезнь Крона, ожирение или метаболический синдром; при получении лекарственного препарата для ингибирования DPP-4; и при получении препарата диуретического средства или лекарственного препарата для предупреждения и лечения воспаления.
Преимущества изобретения:
1. Соединение по настоящему изобретению представляет собой ингибитор DPP-4 с новой структурой;
2. Соединение по настоящему изобретению обладает превосходными ингибиторными активностями в отношении DPP-4;
3. Соединения по настоящему изобретению могут заместить существующие гипогликемические лекарственные средства и имеют превосходные перспективы индустриализации и коммерциализации и рыночной ценностью, и существенными экономическими преимуществами.
Настоящее изобретение будет проиллюстрировано в дальнейшем конкретными примерами; однако, настоящее изобретение не ограничено такими примерами. Экспериментальные методы в последующих примерах, в которых не указаны конкретные условия, осуществляли при обычных условиях или согласно инструкции производителя. Все проценты или части относятся к процентам по массе или частям по массе, если не указано иное.
Примеры
1. транс-(2RS,3RS)-3-амино-2-(2,4,5-трифторфенил)хроман-5-ол (Соединение 1)
Синтез промежуточного соединения 1-1:
Готовили раствор, содержащий 2,4,5-трифторбензальдегид (10 г, 62,46 ммоль), нитрометан (4 мл) и метанол (10 мл). Готовили раствор, содержащий метанол (60 мл), воду (30 мл), гидроксид натрия (2,5 N, 30 мл), который поддерживали при 5°С. Первый раствор добавляли по каплям ко второму раствору через 30-60 минут и температуру раствора поддерживали при 5-10°С. Сразу после добавления указанный выше раствор добавляли по каплям к смеси раствора хлорида цинка (42,6 г, 31,25 ммоль), концентрированной соляной кислоты (13 мл) и воды (17 мл) и температуру поддерживали при 0-10°С в течение добавления. Сразу после добавления реакцию проводили при комнатной температуре в течение 2-4 часов. После реакции реакционную систему фильтровали отсасыванием при пониженном давлении, и отфильтрованный материал промывали 40% раствором метанола несколько раз для получения 9,8 г продукта (выход 77%). GC-MS: 203.
1
3
H-NMR (400 MHz, CDCl): δ 7,95 (d, J=14,0 Hz, 1H), 7,65 (d, J=14,0 Hz, 1H), 7,36 (d, J=7,2 Hz, J=16,0 Hz, 1H), 7,09 (d, J=6,4 Hz, J=16,0 Hz, 1H).
Синтез промежуточного соединения 1-2:
3
AlCl (82,9 г, 600 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 1 л, растворяли в 500 мл дихлорметана и перемешивали при комнатной температуре. 2,6-диметоксибензальдегид (19,92 г, 120 ммоль) растворяли в 200 мл дихлорметана и медленно добавляли по каплям (в течение 1 ч) в вышеуказанный флакон с круглым дном. Сразу после добавления смесь перемешивали в течение 12 ч. Реакцию отслеживали посредством ТСХ (тонкослойной хроматографии), и останавливали добавлением разбавленной соляной кислоты (2 моль/л, 600 мл). Органическую фазу отделяли и водную фазу экстрагировали этилацетатом. Органические фазы комбинировали, высушивали над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Растворители удаляли in vacuo, и осадок отделяли через хроматографическую колонку (РЕ:ЕА = 9:1) для получения 12,5 г желтого твердого вещества с выходом 78,3%. GC-MS (газовая хроматография - масс-спектрометрия), 138.
1
3
H-NMR (400 MHz, CDCl): δ 10,37 (s, 1H), 7,32 (t, J=8,4 Hz, 1H), 7,26 (s, 1H), 6,41 (d, J=8,0 Hz, 1H).
Синтез промежуточного соединения 1-3:
Промежуточное соединение 1-1 (0,88 г, 4 ммоль) и промежуточное соединение 1-2 (0,5 г, 3,6 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл и растворяли при помощи добавления диоксана (15 мл). Добавляли DABCO (0,2 г, 1,8 ммоль) в атмосфере аргона. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 часов, и отслеживали посредством ТСХ до полного расходования неочищенного соединения 5. Реакцию останавливали насыщенным раствором хлорида аммония (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (3*30 мл). Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором и высушивали над безводным сульфатом натрия. Растворители удаляли in vacuo. Неочищенный продукт отделяли при помощи колоночной флэш-хроматографии (ПЭ:ЭА = 4:1) для получения 230 мг темно-желтого масла (выход 19,6%). GC-MS, 323.
1
3
H-NMR (400 MHz, CDCl): δ 10,94 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 7,70 (m, 1H), 6,46 (m, 1H), 7,21 (t, J=8,4 Hz, 1H), 6,80 (s, 1H), 6,54 (d, J=8,4 Hz, 1H), 6„32 (d, J=8,0 Hz, 1H).
Синтез промежуточного соединения 1-4:
3
4
Промежуточное соединение 1-3 (3,2 г, 10 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 500 мл, растворяли посредством добавления 220 мл ТГФ/СНОН (10:1) и перемешивали на магнитной мешалке. Боргидрид натрия (NaBH) (490 мг, 13 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 20 минут. После реакции 10 мл воды добавляли для остановки реакции. Растворители удаляли in vacuo и затем добавляли 100 мл воды. Полученную смесь экстрагировали этилацетатом, высушивали над безводным сульфатом натрия и отделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 10:1) для получения 1,4 г бледно-желтого твердого вещества (выход 43,7%).
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9,89 (s, 1H), 7,73-7,64 (m, 2H), 7,00 (t, J=8,0 Hz, 1H), 6,51 (d, J=7,6 Hz, 1H), 6,40 (t, J=8,0 Hz, 1H), 5,71 (d, J=8,0 Hz, 1H), 5,64-5,59 (m, 1H), 3,31 (dd, J=8,8 Hz, J=16,8 Hz, 1H), 3,22 (dd, J=5,6 Hz, J=16,8 Hz, 1H).
Синтез (2RS,3RS)-3-амино-2-(2,4,5-трифторфенил)хроман-5-ола (соединение 1):
Соединение 6 (325 мг, 1 ммоль) и порошок цинка (780 мг, 12 ммоль) взвешивали в 10 мл этанола. Добавляли раствор 6 Н соляной кислоты (3,2 мл) в течение 1 часа. После окончания реакции фильтрат нейтрализовали насыщенным бикарбонатом натрия до рН=8 и водную фазу экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу высушивали над безводным сульфатом натрия и отделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 2:1) для получения белого твердого порошка (выход 77,9%).
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9,50 (s, 1H), 7,61-7,53 (m, 2H), 6,88 (t, J=8,0 Hz, 1H), 6,40 (d, J=8,0 Hz, 1H), 6,26 (t, J=8,0 Hz, 1H), 4,74 (d, J=9,2 Hz, 1H), 3,23-3,17 (m, 1H), 2,93 (dd, J=5,2 Hz, J=16,4 Hz, 1H), 2,36 (dd, J=10,4 Hz, J=16,4 Hz, 1H), LCMS (M+1)+ 296,06.
2. транс-(8RS,9RS)-9-амино-8-(2,4,5-трифторфенил)-9,10-дигидропиран[2,3-f]хроман-2(8Н)-он (соединение 2)
2
Соединение 7 (117 мг, 0,6 ммоль) добавляли в трифторуксусную кислоту (1 мл), добавляли Pd(OAc) (1,68 мг, 0,0075 ммоль) и этилпропилат (117 мг, 1,8 ммоль) и перемешивали в течение 5 минут на ледяной бане. Затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 22 часов. После реакции смесь нейтрализовали 10% раствором бикарбоната натрия. Водную фазу экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу высушивали над безводным сульфатом натрия и растворители удаляли in vacuo. Полученный осадок отделяли при помощи хроматографии на колонке для получения 35 мг белого твердого порошка (выход 18,5%).
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,00 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,69-7,60 (m, 2H), 7,49 (d, J=8,4 Hz, 1H), 6,86 (d, J=8,4 Hz, 1H), 6,31 (d, J=9,2 Hz, 1H), 4,96 (d, J=9,2 Hz, 1H), 3,30 (m, 1H), 3,17 (dd, J=5,6 Hz, J=16,8 Hz, 1H), 2,65 (dd, J=10,4 Hz, J=16,8 Hz, 1H), 1,72 (m, 2H), LCMS (M+1)+ 348,18.
3. (8R,9S)-9-амино-4-метил-8-(2,4,5-трифторфенил)-9,10-дигидропиран[2,3-f]-хроман-2(8Н)-он (соединение 3)
3
2
2
Соединение 7 (1,7 г, 5,26 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 100 мл и растворяли в 50 мл 60% раствора серной кислоты. Добавляли этилацетоацетат (2,55 г, 23,67 ммоль) и затем полученную смесь перемешивали при 55°С в течение 24 часов. После окончания реакции добавляли 40 мл смеси лед-вода, нейтрализовали насыщенным бикарбонатом натрия, экстрагировали этилацетатом и отделяли при помощи колоночной хроматографии (СНОН:CHCl = 1:8) с получением 1,02 г белого порошка с выходом 54%.
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,68-7,59 (m, 2H), 7,55 (d, J=8,8 Hz, 1H), 6,88 (d, J=8,8 Hz, 1H), 6,23 (8, 1H), 4,96 (d, J=9,2 Hz, 1H), 3,39-3,34 (m, 1H), 3,17 (dd, J=5,6 Hz, J=16,8 Hz, 1H), 2,67 (dd, J=10,0 Hz, J=16,8 Hz, 1H), LCMS (M+1)+ 362,04.
Соединение 3 получали посредством расщепления на хиральной колонке.
4. транс-(2RS,3RS)-3-амино-2-(2,4,5-трифторфенил)-хроман-6-ол (соединение 4)
Синтез промежуточного соединения 4-1:
2,5-дигидроксибензальдегид (1,08 г, 10 ммоль), промежуточное соединение 1-1 (6,09 г, 30 ммоль), ДАБЦО (1,4-диазабицикло[2,2,2]октан) (0,56 г, 5 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 25 мл и перемешивали в атмосфере аргона при 60°С в течение ночи с получением 2,4 г красного твердого вещества с выходом 74%.
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9,14 (s, 1Н), 7,72-7,65 (m, 2Н), 7,76-6,74 (m, 2Н), 6,61-6,60 (m, 2H), 5,66 (d, J=7,6 Hz, 1H), 5,63-5,58 (m, 1H), 3,51 (dd, J=8,4 Hz, J=12,4 Hz, 1H), 3,3 (d, J=5,6 Hz, 1H).
Синтез промежуточного соединения 4-2:
3
4-1 (167 мг, 0,5 ммоль) взвешивали во флакон с круглым дном объемом 25 мл, растворяли в 27,5 мл ТГФ/СНОН (10:1), и перемешивали при комнатной температуре. Боргидрид натрия добавляли отдельными порциями в течение 20 мин. После завершения реакции для остановки реакции добавляли 0,1 мл воды, растворитель удаляли при пониженном давлении и добавляли 2 мл насыщенного раствора хлорида аммония, экстрагировали этилацетатом и отделяли посредством колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 5:1) для получения 50 мг красного твердого вещества с выходом 31%.
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9,14 (s, 1H), 7,72-7,65 (m, 2H), 7,76-6,74 (m, 2H), 6,61-6,60 (m, 2H), 5,66 (d, J=7,6 Hz, 1H), 5,63-5,58 (m, 1H), 3,51 (dd, J=8,4 Hz, J=12,4 Hz, 1H), 3,3 (d, J=5,6 Hz, 1H).
Синтез (2RS,3RS)-3-амино-2-(2,4,5-трифторфенил)-хроман-6-ола (соединение 4):
4-2 (975 мг, 3 ммоль) и порошок Zn (2,34 г, 36 ммоль) взвешивали в 11 мл этаноле и 11 мл 6 н. раствора HCl добавляли при перемешивании. Реакцию проводили в течение 1 ч, и затем реакционный раствор нейтрализовали при помощи насыщенного раствора бикарбоната натрия, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo и разделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 1:1) для получения 439 мг продукта с выходом 49,6%.
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9,50 (s, 1H), 7,61-7,53 (m, 2H), 6,88 (t, J=8,0 Hz, 1H), 6,40 (d, J=8,0 Hz, 1H), 6,26 (t, J=8,0 Hz, 1H), 4,74 (d, J=9,2 Hz, 1H), 3,23-3,17 (m, 1H), 2,93 (dd, J=5,2 Hz, J=16,4 Hz, 1H), 2,36 (dd, J=10,4 Hz, J=16,4 Hz, 1H), LCMS (M+1)+ 296,11.
5. (2S,3R)-9-метокси-3-(2,4,5-трифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амин (соединение 5)
Синтез промежуточного соединения 5-1:
3
+
Соединение 2,7-диметоксинафтален (870 мг, 4,62 ммоль) взвешивали в 2 мл ДМФ. Добавляли POCl (796 мг, 5,2 ммоль) и перемешивали в течение ночи при 60°С до образования коричневого раствора. После завершения реакции добавляли 20 мл ледяной воды и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали и осадок рекристаллизовали в метаноле для получения 690 мг серых кристаллов (выход 75,5%). LC-MS: 217,10 (М+1).
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,76 (s, 1H), 8,69 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,22 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,87 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,40 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,12 (d, J=9,2 Hz, J=1,6 Hz 1H), 4,04 (s, 3H), 3,88 (s, 3H).
Синтез промежуточного соединения 5-2:
3
+
-
2,7-диметокси-1-нафтальдегид (6,0 г, 27,9 ммоль) взвешивали в 45 мл сухого дихлорметана. AlCl (11,1 г, 83,4 ммоль) добавляли по частям и перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. После завершения реакции реакционный раствор наливали в 150 мл солевого раствора и экстрагировли этилацетатом (2*150 мл). Органическую фазу промывали солевым раствором два раза (2*150 мл), высушивали над безводным сульфатом натрия и высушивали в вакууме до сухости до твердых веществ, которые рекристаллизуют в этаноле до получения 3,2 г бледно-желтых кристаллов (выход 61,3%). LC-MS: 203,05 (М+1), 201,05 (М-1).
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11,93 (s, 1Н), 10,81 (s, 1Н), 8,46 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,04 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,79 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,09-7,04 (m, 2H), 3,89 (s, 3H), 4,04 (s, 3H), 3,88 (s, 3H).
Синтез промежуточного соединения 5-3:
+
Соединение 7-метокси-2-гидрокси-1-нафтальдегид (101 мг, 0,5 ммоль), промежуточное соединение 1-1 (506 мг, 2,5 ммоль, 5 экв), ДАБЦО (56 мг, 0,5 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл. Смесь нагревали до 80°С в атмосфере аргона и перемешивали в течение ночи. После завершения реакции добавляли 20 мл метиленхлорида и непосредственно получали 51 мг бледно-желтого твердого вещества при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 6:1) с выходом 26,4%. LC-MS: 388,10 (М+1).
1
3
H-NMR (400 MHz, CDCl): δ 8,82 (s, 1Н), 7,78 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,69 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,34 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,12 (dd, J=2,4 Hz, J=8,8 Hz, 1H), 7,07-6,99 (m, 2H), 6,98 (s, 1H), 6,90 (d, J=9,2 Hz, 1H), 4,04 (s, 3H).
Синтез промежуточного соединения 5-4:
3
Соединение 5-3 (38,7 мг, 0,1 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 10 мл, и 5,5 мл смеси ТГФ/СНОН (10:1) добавляли для растворения соединения. Добавляли боргидрид натрия (10 мг, 0,26 ммоль) и перемешивали на магнитной мешалке при комнатной температуре в течение 20 минут. После завершения реакции для остановки реакции добавляли небольшое количество воды. Растворитель удаляли in vacuo и добавляли 10 мл насыщенного хлорида аммония, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия с получением 20 мг почти белого твердого вещества с выходом 51,4%.
1
3
H-NMR (400 MHz, CDCl): δ 7,73 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,66 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,31-7,25 (m, 1H), 7,10 (dd, J=2,4 Hz, J=8,8 Hz, 1H), 7,05-6,98 (m, 3H), 5,75 (d, J=8,4 Hz, 1H), 5,31-5,26 (m, 1H), 3,94 (s, 3H), 3,85 (dd, J=8,4 Hz, J=16,4 Hz, 1H), 3,55 (d, J=6,0 Hz, J=16,4 Hz, 1H).
Синтез (2S,3R)-9-метокси-3-(2,4,5-трифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амина (соединение 5):
+
Промежуточное соединение 5-4 (233,4 мг, 0,6 ммоль), порошок Zn (468 мг, 7,2 ммоль) взвешивали в 3,4 мл этанола и добавляли 6 н. раствор HCl (2 мл) при перемешивании. Реакцию проводили при 50°С в течение 1 ч. Затем реакционный раствор нейтрализовали насыщенным раствором бикарбоната натрия, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo и осадок отделяли посредством колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 1:1) для получения 49 мг продукта с выходом 22,8%. Соединение 5 получали посредством расщепления на хиральной колонке. LC-MS: 360.10 (М+1).
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,91-7,84 (m, 1H), 7,80 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,68 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,64-7,62 (m, 1H), 7,17 (dd, J=4,0 Hz, J=1,6 Hz, 1H), 7,07 (dd, J=2,4 Hz, J=6,4 Hz, 1H), 6,95 (d, J=8,8 Hz, 1H), 5,48 (d, J=9,6 Hz, 1H), 5,08-5,01 (m, 1H), 3,77 (dd, J=16,4 Hz, J=10,8 Hz, 1H), 3,55 (d, J=5,6 Hz, J=16,4 Hz, 1H).
6. (2S,3R)-8-метокси-3-(2,4,5-трифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амина (соединение 6)
Синтез промежуточного соединения 6-1:
2,6-дигидроксинафтален (5 г, 31,2 ммоль) и дибензоформамидин (8,7 г, 44,35 ммоль) взвешивали и перемешивали при атмосфере аргона в течение 5 ч при 130°С. Реакцию отслеживали при помощи ТСХ, и затем охлаждали до комнатной температуре, добавляли 30 мл ацетона. Осадки фильтровали и высушивали до получения красного порошка. 5,5 г твердого красного порошка получали с выходом 70%.
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 15,37 (d, J=3,2 Hz, 1H), 8,46 (d, J=2,0 Hz, 1H), 9,60 (d, J=2,8 Hz, 1H), 9,53 (s, 1H), 8,37 (d, J=10,0 Hz, 1H), 7,78 (d, J=7,2 Hz, 1H), 7,59 (d, J=7,6 Hz, 2H), 7,49 (t, J=7,6 Hz, J=8,0 Hz, 2H), 7,31 (t, J=7,6 Hz, J=7,2 Hz, 1H), 7,11 (m, 2H), 6,98 (d, J=10,2 Hz, 1H).
Вышеуказанное соединение (6 г, 22,8 ммоль) взвешивали в 5 мл воды и 4 мл концентрированной серной кислоты. Добавляли 80 мл эфира и перемешивали при комнатной температуре в течение 4 дней. Верхний слой эфира отделяли и экстрагировали эфиром несколько раз. Органические фазы комбинировали, и растворитель удаляли in vacuo до получения желтого твердого вещества с выходом 35%.
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,76 (s, 1Н), 8,78 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,94 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,19-7,13 (m, 3H).
Синтез промежуточного соединения 6-2:
2
3
+
2,6-дигидрокси-1-нафтальдегид (564 мг, 3 ммоль) и KCO (1,34 г, 9 ммоль) взвешивали в 6 мл ДМФ и перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли метилйодид (1,28 г, 9 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. После завершения реакции для остановки реакции добавляли тиосульфат натрия и экстрагировали этилацетатом. Растворители удаляли in vacuo, и полученный осадок рекристаллизовали в этаноле для получения 430 мг твердого вещества с выходом 66,4%. LC-MS: 217.10 (М+1).
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,74 (s, 1Н), 9,02 (d, J=9,2 Hz, 1H), 8,23 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,58 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,31 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 4,03 (s, 3H), 3,86 (s, 3H).
Синтез промежуточного соединения 6-3:
3
+
-
2,6-диметокси-1-нафтальдегид (11,3 г, 0,1597 моль) взвешивали в 250 мл сухого метиленхлорида. AlCl (21,3 г, 0,1597 моль) добавляли по частям и перемешивали при 40°С в течение 36 ч. После завершения реакции реакционный раствор вливали в солевой раствор и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу промывали при помощи насыщенного солевого раствора два раза, высушивали над безводным сульфатом натрия, выпаривали до сухости in vacuo для получения твердого вещества. Твердое вещество рекристаллизовали в этаноле до получения бледно-желтого твердого вещества. LC-MS: 203.10 (М+1), 201.10 (М-1).
1
6
1
2
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 10,78 (s, 1Н), 8,86 (d, J=9,2, 1H), 8,04 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,35 (d, J=2,8 Hz, 1H), 7,28 (dd, J=9,2 Hz, J=2,8 Hz, 1H), 7,22 (d, J=8,8, 1H), 3,86 (s, 3H).
Синтез промежуточного соединения 6-4:
+
7-метокси-2-гидрокси-1-нафтальдегид (101 мг, 0,5 ммоль), соединение 1-1 (506 мг, 2,5 ммоль, 1,5 экв), ДАБЦО (56 мг, 0,5 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл. Соответствующее количество ДХМ добавляли и перемешивали при 70°С в течение ночи. После завершения реакции реакционную смесь очищали посредством колоночной хроматографии (дихлорметан : петролейный эфир = 1:2) для получения продукта в виде красного твердого вещества. LC-MS: 388.10 (М+1).
1
3
H-NMR (400 MHz, CDCl): δ 8,82 (s, 1Н), 8,01 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,77 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,34 (dd, J=9,2 Hz, J=2,4 Hz, 1H), 7,12 (dd, J=2,8 Hz, 1H), 7,05-7,00 (m, 2H), 6,97 (s, 1H), 3,93 (s, 3H).
Синтез промежуточного соединения 6-5:
3
Соединение 42 (500 мг, 1,292 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 250 мл, и 55 мл смеси ТГФ/СНОН (10:1) добавляли во флакон для растворения твердого вещества. Боргидрид натрия (100 мг, 2,642 ммоль) добавляли по частям. Осушающую трубку устанавливали в горло бутылки, и реакцию проводили в течение 20 мин при комнатной температуре и нормальном давлении. После завершения реакции для остановки реакции к реакционному раствору добавляли воду, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo, и непосредственно применяли на следующем этапе.
Синтез
(2S,3R)-8-метокси-3-(2,4,5-трифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амина (соединение 6):
+
Полученное вышеуказанное соединение растворяли в 100 мл этанола, добавляли порошок Zn (835 мг, 12,85 ммоль), добавляли 6 мл 6 Н раствора HCl, и реакцию проводили при 50°С в течение 2 часов. Реакционный раствор нейтрализовали при помощи насыщенного раствора бикарбоната натрия, экстрагировали этилацетатом, высушивали над безводным сульфатом натрия, выпаривали до сухости и отделяли посредством колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 2:1) для получения белого продукта 6-6 (175 мг, 37,8%). Соединение 6 получали посредством расщепления при помощи ВЭЖХ хиральной колонки. LC-MS (М+1): 360,15.
1
6
1
2
1
2
1
2
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 7,76 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,70-7,57 (m, 3H), 7,30 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,21 (dd, J=9,0 Hz, J=2,4 Hz, 1H), 7,04 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,89 (d, J=8,8 Hz, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,44-3,38 (m, 1H), 3,34 (dd, J=16,2 Hz, J=5,6 Hz, 1H), 2,86 (dd, J=17,2 Hz, J=10,0 Hz, 1H), 1,76 (s, 2H).
7. (2S,3R)-8-бром-3-(2,4,5-трифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амин (соединение 7)
Синтез промежуточного соединения 7-1:
4
-
TiCl (7,97 г, 42 ммоль) и 1,1-дихлорметиловый эфир (2,53 г, 22 ммоль) взвешивали в 20 мл дихлорметана и перемешивали при 0°С в течение 15 мин. 6-бром-2-гидроксинафтален (4,46 г, 20 ммоль) взвешивали в 60 мл дихлорметана и добавляли по каплям к вышеуказанному реакционному раствору и перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. После завершения реакции добавляли 200 мл 1 н. соляной кислоты и экстрагировали дихлорметаном. Органическую фазу промывали водой и высушивали до получения непосредственно 3,4 г продукта с выходом 67,7%. LC-MS: 250,95 (М-1).
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11,91 (s, 1Н), 10,77 (s, 1H), 8,93 (d, J=8,8 Hz, 1H), 8,17 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,11 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,73 (dd, J=8,8 Hz, J=2,0 Hz, 1H), 7,31 (d, J=8,8 Hz, 1H).
Синтез промежуточного соединения 7-2:
+
-
Соединение 6-бром-2-гидрокси-1-нафтальдегид (40 мг, 0,16 ммоль), соединение 1-1 (162,4 мг, 0,8 ммоль), ДАБЦО (9 мг, 0,08 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 10 мл и нагревали при 60°С в атмосфере аргона и перемешивали в течение ночи. После завершения реакции добавляли 10 мл метиленхлорида и полученную смесь разделяли посредством колоночной хроматографии для получения 28 мг бледно-желтого твердого вещества с выходом 40%. LC-MS: 437,95 (М+1), 436.05 (М-1).
1
1
2
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9,00 (s, 1Н), 8,37 (d, J=9,2 Hz, 1H), 8,23 (d, J=1,6 Hz, 1H), 8,03 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,80 (dd, J=9,2 Hz, J=1,6 Hz, 1H), 7,76-7,69 (m, 1H), 7,65-7,59 (m, 1H), 7,21 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,03 (s, 1H).
Синтез промежуточного соединения 7-3:
3
7-2 (217 мг, 0,5 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл и растворяли посредством добавления ТГФ:СНОН = (10:1,11 мл). Боргидрид натрия (76 мг, 2 ммоль) медленно добавляли при перемешивании на магнитной мешалке и перемешивали при комнатной температуре в течение 20 мин. После завершения реакции небольшое количество воды добавляли для остановки реакции, и растворитель высушивали при пониженном давлении. Добавляли 10 мл воды и экстрагировали этилацетатом (10 мл * 3). Органические фазы комбинировали и напрямую разделяли посредством колоночной хроматографии для получения 60 мг бледно-желтого твердого вещества с выходом 27,5%.
1
3
H-NMR (400 MHz, CDCl): δ 7,99 (s, 1H), 7,67-7,64 (m, 3H), 7,28-7,22 (m, 1H), 7,16 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,06-7,00 (m, 1H), 5,78 (d, J=7,6 Hz, 1H), 5,31-5,26 (m, 1H), 3,90 (dd, J=8,4 Hz, J=16,8 Hz, 1H), 3,59 (dd, J=6,0 Hz, J=16,8 Hz, 1H).
Синтез (2S,3R)-8-бром-3-(2,4,5-трифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амина (соединение 7):
+
7-3 (44 мг, 0,1 ммоль) и порошок цинка (78 мг, 1,2 ммоль) взвешивали в 6 мл этанола, для их растворения добавляли несколько капель ДМФ по каплям. 6 н. раствор соляной кислоты (1,5 мл) добавляли при комнатной темпераутре при перемешивании и нагревали до 50°С для реакции в течение ночи. После завершения реакции реакционную смесь нейтрализовали насыщенным раствором бикарбоната натрия, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Растворитель выпаривали in vacuo и осадок разделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 1:1) для получения 17 мг продукта с выходом 41,5%. Соединение 7 получали при помощи хирального расщепления. LC-MS: 408,05 (М+1).
1
3
H-NMR (400 MHz, CDCl): δ 7,94 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,67 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,59-7,56 (m, 2H), 7,38-7,32 (m, 1H), 7,12 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,05-6,98 (m, 1H), 5,03 (d, J=8,0 Hz, 1H), 3,44-3,36 (m, 2H), 2,96-2,88 (m, 1H), 1,45 (s, 2H).
8. транс-(2RS,3RS)-9-бром-3-(2,4,5-трифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амин (соединение 8)
Синтез промежуточного соединения 8-1:
4
+
-
TiCl (797 мг, 4,2 ммоль) и 1,1-дихлорметиловый эфир (253 мг, 2,2 ммоль) взвешивали в 2 мл дихлорметана и перемешивали при 0°С в течение 15 мин. 7-бром-2-гидроксинафтален (446 мг, 2 ммоль) взвешивали в 6 мл метиленхлорида, добавляли по каплям к вышеуказанному реакционному раствору и перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. После завершения реакции добавляли 20 мл 1 н. раствора соляной кислоты, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводынм сульфатом натрия для получения непосредственно 440 мг продукта с выходом 87,6%. LC-MS: 253,00 (М+1), 251,00 (M-1).
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11,94 (s, 1Н), 10,74 (s, 1H), 8,93 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,14 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,85 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,73 (dd, J=8,8 Hz, J=2,0 Hz, 1H), 7,29 (d, J=9,2 Hz, 1H).
Синтез промежуточного соединения 8-2:
+
Соединение 7-бром-2-гидрокси-1-нафтальдегид (300 мг, 1,2 ммоль), соединение 1-1 (1,22 мг, 6 ммоль), ДАБЦО (134,4 мг, 1,2 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 25 мл, нагревали до 70°С в атмосфере аргона и перемешивали в течение ночи. После завершения реакции добавляли 50 мл метиленхлорида и смесь непосредственно разделяли при помощи колоночной хроматографии для получения 212 мг бледно-желтого твердого вещества с выходом 40,6%. LC-MS: 438,00 (М+1).
1
3
H-NMR (400 MHz, CDCl): δ 8,77 (s, 1Н), 8,25 (m, 1Н), 7,83 (d, J=8,8 Hz, 1H, 7,76 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,57 (dd, J=6,0 Hz, J=8,8 Hz, 1H), 7,07-6,99 (m, 4H).
Синтез промежуточного соединения 8-3:
3
8-2 (261 мг, 0,6 ммоль) взвешивали в 50 мл реакционном флаконе и растворяли за счет добавления ТГФ:СНОН (10:1, 22 мл). Боргидрид натрия (45,6 мг, 1,2 ммоль) медленно добавляли при перемешивании на магнитной мешалке при комнатной температуре в течение 20 мин. После завершения реакции небольшое количество воды добавляли для остановки реакции, растворитель выпаривали до сухости при пониженном давлении, добавляли 10 мл воды и экстрагировали этилацетатом (10 мл * 3). Органические фазы комбинировали и непосредственно разделяли при помощи колоночной хроматографии для получения 65 мг бледно-желтого твердого вещества с выходом 24,8%.
1
3
H-NMR (400 MHz, CDCl): δ 7,92 (s, 1H), 7,72-7,68 (m, 2H), 7,52 (dd, J=1,6, J=8,8, 1H), 7,15 (d, J=8,8, 1H), 7,06-6,95 (m, 2H), 5,80 (d, J=7,2 Hz, 1H), 5,31-5,26 (m, 1H), 3,87 (dd, J=16,4 Hz, J=8,0 Hz, 1H), 3,54 (dd, J=5,6 Hz, J=16,4 Hz, 1H).
Синтез соединения - 8:
+
8-2 (44 мг, 0,1 ммоль) и порошок цинка (78 мг, 1,2 ммоль) взвешивали в 6 мл этанола и несколько капель ДМФ добавляли по каплям для их растворения. 1,5 мл 6 н. раствора соляной кислоты добавляли при комнатной температуре при перемешивании и нагревали до 50°С для реакции в течение ночи. После завершения реакции реакционную смесь нейтрализовали насыщенным раствором бикарбоната натрия, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Растворитель выпаривали до сухости и отделяли при помощи хроматографии (ПЭ:ЭА = 1:1) для получения 20 мг продукта с выходом 48,8%. LC-MS (М+1): 408,00.
1
3
H-NMR (400 MHz, CDCl): δ 8,00 (s, 1H), 7,84 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,76 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,71-7,59 (m, 2H), 7,52 (d, J=8,8 Hz, J=2,0 Hz, 1H), 7,13 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,96 (d, J=9,2 Hz, 1H), 3,49-3,43 (m, 1H), 3,36 (m, 1H), 2,86 (d, J=10,0 Hz, J=10,8 Hz, 1H), 1,45 (s, 2H).
9. транс-(2RS,3RS)-8-циано-3-(2,4,5-трифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амин (соединение 9)
Синтез промежуточного соединения 9-1:
4
-
TiCl (398,5 мг, 2,1 ммоль) и 1,1-дихлорметиловый эфир (126,5 мг, 1,1 ммоль) взвешивали в 2 мл дихлорметана и перемешивали при 0°С в течение 15 мин. 6-циано-2-нафтол (169 мг, 1 ммоль) взвешивали в 6 мл метиленхлорида, добавляли по каплям к вышеуказанному реакционному раствору и перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. После завершения реакции добавляли 20 мл 1 н. раствора соляной кислоты и экстрагировали метиленхлоридом. Органическую фазу промывали водой и высушивали непосредственно для получения продукта 350 мг с выходом 75,4%. LC-MS: 196,05 (М-1).
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12,22 (s, 1H), 10,76 (s, 1H), 9,11 (d, J=9,2 Hz, 1H), 8,50 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,22 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,88 (dd, J=9,2 Hz, J=2,4 Hz, 1H), 7,39 (d, J=9,2 Hz, 1H).
Синтез промежуточного соединения 9-2:
-
Соединение 6-циано-2-гидрокси-1-нафтальдегид (197 мг, 1 ммоль), соединение 1-1 (609 мг, 3 ммоль), ДАБЦО (112 мг, 1 ммоль) взвешивали, нагревали посредством микроволновой печи до 11°С и перемешивали в течение 25 мин. После завершения реакции добавляли 10 мл метиленхлорида и смесь непосредственно разделяли при помощи колоночной хроматографии для получения 102 мг бледножелтого твердого вещества с выходом 26,7%. LC-MS: 381,05 (М-1).
1
3
H-NMR (400 MHz, CDCl): δ 8,80 (s, 1H), 8,19 (m, 2Н), 7,93 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,82 (dd, J=9,2 Hz, J=1,6 Hz, 1H), 7,19 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,09-7,00 (m, 3H).
Синтез промежуточного соединения 9-3:
3
9-2 (176 мг, 0,5 ммоль) взвешивали в 50 мл реакционном флаконе и растворяли за счет добавления ТГФ:СНОН (10:1, 22 мл). Медленно добавляли боргидрид натрия (76 мг, 2 ммоль) при помощи перемешивания на магнитной мешалке при комнатной температуре в течение 20 мин. После завершения реакции добавляли небольшое количество воды для остановки реакции, растворитель выпаривали до сухости при пониженном давлении, добавляли 10 мл воды и экстрагировали этилацетатом (10 мл * 3). Органические фазы комбинировали и непосредственно разделяли при помощи колоночной хроматографии для получения 57 мг бледно-желтого твердого вещества с выходом 32,2%.
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,57 (d, J=1,6 Hz, 1H), 8,09 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,98 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,87 (d, J=8,8 Hz, J=1,6 Hz, 1H), 7,80-7,70 (m, 2H), 7,36 (s, J=9,2 Hz, 1H), 5,96 (d, J=8,0 Hz, 1H), 5,85 (dd, J=6,8 Hz, J=14,8 Hz, 1H), 3,85 (d, J=7,2 Hz, 2H).
Синтез соединения 9:
+
9-3 (38,4 мг, 0,1 ммоль) и порошок цинка (78 мг, 1,2 ммоль) взвешивали в 10 мл этанола, и перемешивали при комнатной температуре. Добавляли 1,5 мл 6 н. раствора соляной кислоты и нагревали до 50°С для реакции в течение ночи. После завершения реакции реакционную смесь нейтрализовали насыщенным раствором бикарбоната натрия, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Растворитель выпаривали до сухости и разделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 1:1) для получения 17 мг продукта с выходом 48%. LC-MS (М+1): 355.10.
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,50 (d, J=1,6 Hz, 1H), 8,00 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,88 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,81 (d, J=8,8 Hz, J=1,6 Hz, 1H), 7,72-7,59 (m, 2H), 7,25 (d, J=8,8 Hz, 1H), 5,00 (d, J=9,2 Hz, 1H), 3,45-3,36 (m, 2H), 2,90 (d, J=8,8 Hz, J=16 Hz, 1H).
10. транс-(2RS,3RS)-8-гидроксиформил-3-(2,4,5-трифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амин (соединение 10)
3
+
Соединение 9 (35,4 мг, 0,1 ммоль) взвешивали в 45% растворе серной кислоты (1,8 мл) и перемешивали с обратным холодильником в течение ночи. После завершения реакции смесь нейтрализовали насыщенным раствором бикарбоната натрия, экстрагировали этилацетатом и разделяли при помощи колоночной хроматографии (ДХМ:СНОН = 10:1) для получения 8 мг белого порошка с выходом 22%. LC-MS (М+1): 374,10
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,49 (d, J=1,6 Hz, 1H), 8,13 (dd, J=8,8 Hz, J=1,6 Hz, 1H), 7,87 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,79 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,49-7,43 (m, 1H), 7,32-7,25 (m, 1H), 7,15 (d, J=8,8 Hz, 1H), 5,17 (d, J=8,4 Hz, 1H), 4,6 (s, 1H), 3,64 (m, 1H), 3,44 (dd, J=8,8 Hz, J=16,4 Hz, J=5,6 Hz, 1H, 3,05 (dd, J=16,4 Hz, J=9,2 Hz, 1H).
11. транс-(2RS,3RS)-9-циано-3-(2,4,5-трифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амин (соединение 11)
Синтез промежуточного соединения 11-1:
7-бром-2-нафтол (2,22 г, 10 ммоль), CuCN (1,08 г, 12 ммоль) взвешивали и растворяли в 3 мл ДМФ. В атмосфере аргона смесь нагревали до 160°С в течение 3 часов. Реакцию отслеживали до завершения и охлаждали до комнатной температуры. Добавляли 20 мл воды и экстрагировали этилацетатом. Рекристаллизацию проводили в системе этанол-вода для получения 1,4 г коричневого порошка с выходом 83%.
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,18 (s, 1H), 8,35 (s, 1H), 7,97 (d, J=8,0 Hz, 1H),, 7,91 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,52 (dd, J=8,4 Hz, J=1,6 Hz, 1H), 7,29-7,27 (m, 2H)
Синтез промежуточного соединения 11-2:
4
-
TiCl (3,99 мг, 21 ммоль) и 1,1-дихлорметиловый эфир (1,265 мг, 11 ммоль) взвешивали в 20 мл дихлорметана и перемешивали при 0°С в течение 15 мин. 7-циано-2-нафтол (1,69 мг, 10 ммоль) взвешивали в 40 мл метиленхлорида, добавляли по каплям к вышеуказанному реакционному раствору и перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. После завершения реакции добавляли 20 мл 1 н. раствора соляной кислоты и экстрагировали метиленхлоридом. Органическую фазу промывали водой и высушивали для непосредственного получения 500 мг продукта с выходом 25,3%. LC-MS: 196,10 (М-1).
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12,11 (s, 1H), 10,77 (s, 1H), 8,25 (d, J=9,2 Hz, 1H), 8,22 (d, J=8,8 Hz, 1H), 8,10 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,74 (dd, J=8,4 Hz, J=1,6 Hz, 1H), 7,45 (d, J=9,2 Hz, 1H)
Синтез промежуточного соединения 11-3:
+
-
Соединение 7-циано-2-гидрокси-1-нафтальдегида (197 мг, 1 ммоль), 1-1 (609 мг, 3 ммоль), ДАБЦО (112 мг, 1 ммоль) взвешивали и нагревали при помощи микроволновой печи до 11°С и перемешивали в течение 25 мин. После завершения реакции добавляли 10 мл метиленхлорида и смесь непосредственно разделяли при помощи колоночной хроматографии для получения 112 мг бледно-желтого твердого вещества с выходом 29,3%. LC-MS: 383,15 (М+1), 381,00 (М-1).
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9,21 (s, 1H), 9,11 (s, 1H), 8,16 (d, J=9,2 Hz, 1H), 8,12 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,81 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,76-7,71 (m, 1H), 7,69-7,61 (m, 1H), 7,35 (d, J=8,8 Hz, 1H), 6,99 (s, 1H), 7,06 (s, 3H).
Синтез промежуточного соединения 11-4:
3
11-3 (176 мг, 0,5 ммоль) взвешивали в 50 мл реакционном флаконе и растворяли за счет добавления ТГФ:СНОН (10:1, 22 мл). Медленно добавляли боргидрид натрия (76 мг, 2 ммоль) при помощи перемешивания на магнитной мешалке при комнатной температуре в течение 20 мин. После завершения реакции добавляли небольшое количество воды для остановки реакции, растворитель выпаривали до сухости при пониженном давлении, добавляли 10 мл воды и экстрагировали этилацетатом (10 мл * 3). Органические фазы комбинировали и непосредственно разделяли при помощи колоночной хроматографии для получения 57 мг бледно-желтого твердого вещества с выходом 32,2%.
Синтез соединения-11:
+
11-4 (38,4 мг, 0,1 ммоль) и порошок цинка (78 мг, 1,2 ммоль) взвешивали в 10 мл этанола и перемешивали при комнатной температуре. Добавляли 1,5 мл 6 н. раствора соляной кислоты и нагревали до 50°С для реакции в течение ночи. После завершения реакции реакционную смесь нейтрализовали насыщенным раствором бикарбоната натрия, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Растворитель выпаривали до сухости и разделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 1:1) для получения 17 мг продукта с выходом 48%. LC-MS (М+1): 355,10.
12. (2S,3R)-8,9-диметокси-3-(2,4,5-трифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амин (соединение 12)
Синтез промежуточного соединения 12-1:
+
-
1,1-дихлорметиловый эфир (0,62 г, 0,0054 моль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 250 мл и растворяли в соответствующем количестве дихлорметана. Тетрахлорид титана (2,0 г, 0,0102 моль) добавляли при 0°С, и перемешивали при 0°С в течение 15 мин. 6,7-диметокси-2-нафтол (1 г, 0,0049 моль) взвешивали и растворяли в соответствующем количестве метиленхлорида и добавляли по каплям к вышеуказанному раствору. Раствор изменял цвет с бледножелтого на красный. После добавления раствор оставляли реагировать при комнатной тепературе. После завершения реакции раствор вливали в 50 мл 1 н. раствора соляной кислоты, перемешивали комнатной температуре в течение 1 ч, и экстрагировали этилацетом. Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости и разделяли при помощи колоночной хроматографии, таким образом, получали продукт. LC-MS: 233,10 (М+1), 231,10 (М-1).
1
3
H-NMR (400 MHz, CDCl): δ 12,85 (s, 1Н), 10,75 (s, 1Н), 7,82 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,10 (s, 1H), 6,99 (d, J=8,8, 1H), 4,05 (s, 3H), 3,99 (s, 3H)
Синтез промежуточное соединение 12-2:
+
6,7-диметокси-2-циано-1-нафтальдегид (200 мг, 0,8618 ммоль). Соединение 1-1 (875 мг, 4,3103 ммоль), ДАБЦО (97 мг, 0,8661 ммоль) взвешивали в трубке давления, гомогенно перемешивали и сильно прессовали. В условиях микроволнового облучения реакцию проводили при 120°С в течение 30 мин. После завершения реакции твердые вещества растворяли в метиленхлориде и разделяли при помощи колоночной хроматографии (ДХМ:ПЭ = 1:2) для получения продукта. LC-MS: 418,10 (М+1).
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9,12 (s, 1H), 7,85 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,75-7,68 (m, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,53-7,46 (m, 1H), 7,34 (s, 1H), 6,95 (s, 1H), 6,94 (d, J=8,4 Hz, 1H), 4,04 (s, 3H), 3,87 (s, 3H).
Синтез промежуточного соединения 12-3:
3
Соединение 47 (50 мг, 0,1200 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл, и 5 мл смеси ТГФ/СНОН (10:1) добавляли во флакон для растворения твердого вещества. Добавляли по частям боргидрид натрия (10 мг, 0,2642 ммоль). Сушильную трубку устанавливали в горловину флакона и реакцию проводили в течение 20 мин при комнатной температуре и нормальном давлении. После завершения реакции в реакционный раствор для остановки реакции добавляли воду, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo, и непосредственно применяли на следующем этапе.
Синтез промежуточного соединения 12-4:
+
Полученное вышеуказанное соединение растворяли в 50 мл этанола. Порошок Zn (8,35 мг, 1,285 ммоль) и 2 мл 6 н. раствора HCl добавляли и оставляли реагировать при 50°С в течение 2 ч. Реакционный раствор нейтрализовали насыщенным солевым раствором, экстрагировали этилацетатом, высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости и разделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 2:1) для получения белого продукта LC-MS (М+1): 390,15.
1
6
1
2
1
2
Н NMR (500 MHz, DMSO-d): δ 7,70-7,57 (m, 2Н), 7,55 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,10 (s, 1H), 6,90 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,87 (d, J=9,2 Hz, 1H), 3,92 (s, 3H), 3,86 (s, 3H), 3,44-3,38 (m, 1H), 3,32 (dd, J=15,0 Hz, J=5,6 Hz, 1H), 2,82 (dd, J=16,4 Hz, J=10,0 Hz, 1H), 1,62 (s, 2H).
Соединение 12: Соединение, полученное из соединения 12-4 транс-конфигурации посредством расщепления на хиральной колонке.
13. транс-(2RS,3RS)-9-(4-(метансульфонил)фенил)-3-(2,4,5-трифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амин (соединение 13)
Синтез промежуточного соединения 13-1:
3
2
3
+
8-2 (300 мг, 0,69 ммоль), 4-метансульфонилфенилборной кислоты (276 мг, 1,38 ммоль) растворяли в толуоле (2,8 мл). К раствору добавляли 5% тетрафенилфенилфосфин палладия (39,9 мг). В течение 15 мин барботировали аргоном. Реакцию проводили при 80°С в течение 1 ч в атмосфере аргона. Раствор NaHCO (2 М, 1,4 мл) и этанол (1,4 мл) добавляли при помощи шприца и реакцию проводили в течение следующих 24 часов. После завершения реакции к раствору добавляли соответствующее количество воды и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу несколько раз промывали водой и насыщенным водным раствором NaCl и высушивали над безводным NaCO. 274 мг продукта получали при помощи колоночной хроматографии (петролейный эфир : этилацетат = 2:1) с выходом 77,7%. LC-MS: 512,10 (М+1).
1
6
1
2
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 9,30 (s, 1H), 8,75 (s, 1H), 8,25 (d, J=8,8 Hz, 2H), 8,09 (d, J=8,8 Hz, 2H), 8,06 (d, J=8,4 Hz, 2H), 7,90 (dd, J=8,0 Hz, J=1,2 Hz, 1H), 7,73-7,67 (m, 1H), 7,71-7,54 (m, 1H), 7,19 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,03 (s, 1H), 3,30 (s, 3H)
Синтез промежуточного соединения 13-2:
Соединение 7 (250 мг, 0,4892 ммоль) растворяли в 3 мл безводного метанола и добавляли 30 мл безводного тетрагидрофурана. Боргидрид натрия добавляли по частям (74 мг, 1,955 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 20 минут. После завершения реакции растворитель выпаривали до сухости и осадок непосредственно применяли при следующей реакции.
Синтез соединения 13:
3
2
4
+
Соединение 8 (250 мг, 0,5175 ммоль) растворяли в 5 мл этанола и к раствору добавляли 12 мл 6 н. соляной кислоты и порошка цинка (406,1 мг, 6,210 ммоль). Реакцию проводили при нагревании при 55°С в течение ночи до получения прозрачного реакцинного раствора. После завершения реакции добавляли насыщенный NaHCO к раствору, и раствор нейтрализовали, эктрагировали этилацетатом, промывали насыщенным солевым раствором и высушивали над безводным NaSO. Осадок очищали посредством колоночной хроматографии на этилацетат : петролейный эфир = 1:2 для получения продукта. LC-MS (М+1): 484,20.
1
6
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 8,15 (s, 1Н), 8,11 (d, J=8,8 Hz, 2H), 8,05 (d, J=8,4 Hz, 2H), 8,01 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,08-7,77 (m, 2H), 7,72-7,65 (m, 1H), 7,63-7,58 (m, 1H), 7,15 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,98 (d, J=8,8 Hz, 1H), 3,58-3,46 (m, 1H), 3,26 (s, 3H), 3,01-2,95 (m, 1H)
14. (2S,3R)-9-(3-(метансульфонил)фенил)-3-(2,4,5-трифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо-[f]-хроман-2-амин-(соединение 14)
Синтез промежуточного соединения 14-1:
3
2
3
+
8-2 (500 мг, 1,15 ммоль), 3-метансульфонилфенилборную кислоту (459,8 мг, 2,30 ммоль) растворяли в толуоле (4,6 мл). К раствору добавляли 5% тетрафенилфенилфосфинпалладия (66,4 мг). Барботировали аргоном в течение 15 мин. Реакцию проводили при 80°С в течение 1 ч в атмосфере аргона. Добавляли раствор NaHCO (2 М, 2,3 мл) и этанол (2,3 мл) при помощи шприца и реакцию проводили в течение других 24 ч. После завершения реакции к раствору добавляли соответствующее количество воды и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу промывали несколько раз водой и насыщенным водным раствором NaCl, и высушивали над безводным NaCO. Продукт получали при помощи колоночной хроматографии (петролейный эфир : этилацетат = 2:1). LC-MS: 512,10 (М+1).
1
6
1
2
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 9,30 (s, 1Н), 8,73 (s, 1Н), 8,46 (s, 1Н), 8,34 (d, J=8,80 Hz, 1H), 8,09 (d, J=9,2 Hz, 1H), 8,07 (d, J=8,8 Hz, 1H), 8,01 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,92 (dd, J=8,0 Hz, J=1,6 Hz, 1H), 7,84 (t, J=8,0 Hz, 1H), 7,77-7,67 (m, 1H), 7,63-7,57 (m, 1H), 7,19 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,03 (s, 1H), 3,36 (s, 3H)
Синтез промежуточного соединения 14-2:
2
3
14-1 (250 мг, 0,4892 ммоль) растворяли в 3 мл безводного метанола и добавляли 30 мл безводного тетрагидрофурана. Боргидрид натрия (74 мг, 1,955 ммоль) добавляли по частям и перемешивали в течение приблизительно 20 мин. После завершения реакции для остановки реакции добавляли воду, растворитель выпаривали до сухости и осадок экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу высушивали над NaCO, выпаривали до сухости и непосредственно применяли в следующей реакции.
Синтез соединения 14:
3
2
4
+
14-2 (250 мг, 0,5175 ммоль) растворяли в 5 мл этанола, к раствору добавляли 12 мл 6 Н соляной кислоты и порошок цинка (406,1 мг, 6,210 ммоль). Реакцию проводили при нагревании при 55°С в течение ночи до получения прозрачного реакционного раствора. После завершения реакции к раствору добавляли насыщенный NaHCO и раствор нейтрализовали, экстрагировали этилацетатом, промывали насыщенным солевым раствором и высушивали над безводным NaSO. Осадок очищали при помощи колоночной хроматографии на этилацетат : петролейный эфир = 1:2 до получения белого продукта. LC-MS: 484,10 (М+1).
1
6
1
2
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 8,32 (s, 1Н), 8,21 (d, J=7,6 Hz, 1H), 8,14 (s, 1H), 8,02 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,98 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,83-7,78 (m, 3H), 7,73-7,69 (m, 1H), 7,67-7,61 (m, 1H), 7,14 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,97 (d, J=9,2 Hz, 1H), 3,58-3,52 (m, 1H), 3,50-3,44 (m, 1H), 3,35 (s, 3H), 2,98 (dd, J=16,2 Hz, J=10,0 Hz, 1H)
Соединение 14 получали из продукта транс-конфигурации посредством расщепления на хиральной колонке.
15. транс-(2RS,3RS)-3-(2,4,5-трифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амин (соединение 15)
Синтез промежуточного соединения 15-1:
+
Соединение 2-гидрокси-1-нафтальдегид (6 г, 34,87 ммоль), соединение 1-1 (6,37 г, 31,32 ммоль), ДАБЦО (3,9 г, 34,87 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 250 мл. 100 мл этилацетата добавляли и нагревали до 70°С с перемешиванием в течение ночи в атмосфере аргона. После завершения реакции этилацетат выпаривали до сухости и приемлемое количество дихлорметана добавляли для растворения осадка. 1,5 г твердого вещества красного цвета получали при помощи колоночной хроматографии с выходом 13%. LC-MS: 358,10 (М+1).
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9,02 (s, 1Н), 8,40 (d, J=8,4 Hz, 1H), 8,05 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,94 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,75-7,64 (m, 2H), 7,64-7,57 (m, 1H), 7,53 (t, J=8,0 Hz, 1H), 7,16 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,03 (s, 1H).
Синтез промежуточного соединения 15-2:
3
15-1 (1,2 г, 3,4 ммоль) взвешивали в реакционном флаконе объемом 100 мл и растворяли посредством добавления ТГФ/СНОН (10:1, 55 мл). Боргидрид натрия (0,38 г, 10,1 ммоль) медленно добавляли с перемешиванием на магнитной мешалке при комнатной температуре в течение 20 мин. После завершения реакции для остановки реакции добавляли небольшое количество воды, растворитель выпаривали до сухости при пониженном давлении и 10 мл воды добавляли и экстрагировали этилацетатом (10 мл * 3). Органические фазы комбинировали и высушивали над безводным сульфатом натрия. Растворитель выпаривали до сухости и осадок непосредственно применяли на следующем этапе.
Синтез соединения 15:
3
2
4
+
Вышеуказанный полученный неочищенный продукт 15-2 растворяли в 10 мл этанола, и к раствору добавляли 6 мл 6 н. соляной кислоты и порошок цинка (1,10 г, 1,70 ммоль). Реакцию проводили при комнатной температуре и нормальном давлении в течение ночи до получения прозрачного реакционного раствора. После завершения реакции к раствору добавляли насыщенный NaHCO и раствор нейтрализовали, экстрагировали этилацетатом, промывали насыщенным солевым раствором и высушивали над безводным NaSO. Осадок очищали при помощи колоночной хроматографии на этилацетат : петролейный эфир = 1:2 для получения 920 мг белого продукта с двухэтапным выходом 84%. LC-MS: 330,10 (М+1).
1
6
1
2
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): 7,87 (d, J=3,6 Hz, 1H), 7,85 (d, J=4,0 Hz, 1H), 7,72 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,70-7,59 (m, 2H), 7,55 (t, J=7,6 Hz, 1H), 7,40 (t, J=7,6 Hz, 1H), 7,09 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,93 (d, J=9,2 Hz, 1H), 3,45-3,34 (m, 2H), 2,88 (dd, J=15,8 Hz, J=9,2 Hz, 1H), 1,69 (s, 2H).
16. N-((2S,3R)-2-амино-3-(2,4,5-трифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-8)-метансульфонамид (соединение 16)
Синтез промежуточного соединения 16-1:
+
+
Соединение 6-метокси-2-нафтиламин (7 г, 0,04044 моль), триэтиламин (6 г, 0,06067 моль) взвешивали в 100 мл реакционном флаконе. 15 мл метиленхлорида добавляли в реакционный флакон и оставляли реагировать при 0°С в течение 15 мин. Метансульфонилхлорид (7 г, 0,06067 моль) добавляли по каплям и оставляли реагировать при 0°С в течение 30 мин. Реакцию отслеживали посредством ТСХ, и после завершения реакции добавляли соответствующее количество водного гидроксида натрия, экстрагировали этилацетатом, промывали насыщенным солевым раствором и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости и 5,6 г твердого вещества пурпурного цвета получали при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 2:1) с выходом 55,2%. LC-MS: 252,10 (М+1), 250,10 (М-1).
1
6
1
2
1
2
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 9,78 (s, 1H), 7,79 (d, J=12,0 Hz, 1H), 7,77 (d, J=12,0 Hz, 1H), 7,63 (d, J=1,6 Hz, 1H), 7,35 (dd, J=8,8 Hz, J=2,0 Hz, 1H), 7,29 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,15 (dd, J=8,8 Hz, J=2,4 Hz, 1H), 3,86 (s, 3H), 3,00 (s, 3H).
Синтез промежуточного соединения 16-2:
+
+
1,1-дихлорметиловый эфир (1,374 г, 0,0118 моль) взвешивали в круглодонной колбе объемом 250 мл и растворяли посредством добавления 30 мл дихлорметана. TiCl4 (2,2 мл, 0,0199 моль) добавляли к раствору и перемешивали при 0°С в течение 15 мин. Соединение 16-1 (2 г, 0,0080 моль) взвешивали в соответствующем количестве метиленхлорида и добавляли по каплям к вышеуказанному реакционному раствору. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 36 ч. После завершения реакции добавляли соответствующее количество 1 н. раствора соляной кислоты, экстрагировали этилацетатом, высушивали над безводным сульфатом натрия и разделяли посредством колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 2:1) для получения 1,515 г белого твердого вещества с выходом 68,2%. LC-MS: 280,10 (М+1), 278,05 (М-1)
1
6
1
2
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 10,74 (s, 1H), 9,98 (s, 1H), 9,06 (d, J=9,2, 1H), 8,25 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,72 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,59 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,50 (dd, J=9,2 Hz, J=2,0 Hz, 1H), 4,05 (s, 3H), 3,06 (s, 3H).
Синтез промежуточного соединения 16-3:
3
+
-
Соединения 16-2 (1,5 г, 0,0054 моль) взвешивали в 250 мл реакционном флаконе и в реакционный флакон добавляли соответствующее количество сухого метиленхлорида до полного растворения субстрата. AlCl (4,869 г, 0,03652 ммоль) добавляли по частям. Осушающую трубку устанавливали в горловину сосуда и реакцию проводили в течение 36 ч при комнатной температуре и нормальном давлении. После завершения реакции к реакционному раствору добавляли приемлемое количесвто воды, перемешивали в течение определенного времени, экстрагировали этилацетатом, промывали солевым раствором и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo, и 1,021 г твердого вещества оранжевого цвета получали при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 1:1) с выходом 71,6%. LC-MS: 266,10 (М+1), 264,00 (М-1).
1
6
1
2
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 11,83 (s, 1Н), 10,78 (s, 1Н), 9,91 (s, 1Н), 8,93 (d, J=9,2 Hz, 1H), 8,09 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,68 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,48 (dd, J=9,2 Hz, J=2,4 Hz, 1H), 7,24 (d, J=8,8 Hz, 1H), 3,04 (s, 1H).
Синтез промежуточного соединения 16-4:
-
Соединение 2-гидрокси-6-метансульфонамидо-1-нафтальдегид (900 мг, 3,3957 ммоль), соединение 1-1 (1,032 г, 5,0936 ммоль), ДАБЦО (380 мг, 3,3957 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл. Добавляли соответствующее количество ЭА и перемешивали при 70°С в течение ночи. После завершения реакции получали 850 мг твердого вещества темно-красного цвета посредством колоночной хроматографии (дихлорметан : петролейный эфир = 2:1) с выходом 52,7%. LC-MS: 449,00 (М-1).
1
6
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 10,03 (s, 1H), 8,99 (s, 1H), 8,39 (d, J=9,2 Hz, 1Н), 7,99 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,76-7,68 (m, 2H), 7,63-7,54 (m, 2H), 7,14 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,00 (s, 1H), 3,07 (s, 1H).
Синтез промежуточного соединения 16-5:
3
16-4 (800 мг, 1,777 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 250 мл и ТГФ/СНОН (10:1, 55 мл) добавляли для растворения твердого вещества. В раствор по частям добавляли боргидрид натрия (673 мг, 17,77 ммоль). Осушающую трубку устанавливали в горловину бутылки и реакцию проводили в течение 20 минут при комнатной температуре и нормальном давлении. Цвет реакционного раствора изменялся с темно красного на бледно желтый. После завершения реакции к реакционному раствору добавляли воду для остановки реакции, эктсрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo, и непосредственно применяли на следующем этапе.
Синтез соединения 16:
3
2
4
+
Полученное вышеуказанное соединение растворяли в 40 мл этанола и к раствору добавляли порошок цинка (1150 мг, 17,692 ммоль) и 10 мл 6 н. HCl. Реакцию проводили при комнатной температуре и нормальном давлении в течение 2-3 часов. Затем реакционный раствор нейтрализовали насыщенным водным NaHCO, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным NaSO. Раствор выпаривали до сухости и разделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 1:2) для получения 170 мг белого продукта с двухэтапным выходом 22,7%. LC-MS: 423,10 (М+1).
1
6
1
2
1
2
1
2
Н NMR (500 MHz, DMSO-d): δ 7,84 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,69-7,62 (m, 3Н), 7,62-7,58 (m, 1H), 7,44 (dd, J=9,0 Hz, J=2,0 Hz, 1H), 7,08 (d, J=9,0 Hz, 1H), 4,92 (d, J=9,0 Hz, 1H), 3,44-3,40 (m, 1H), 3,34 (dd, J=16,3 Hz, J=6,0 Hz, 1H), 3,01 (s, 3H), 2,86 (dd, J=16,3 Hz, J=10,5 Hz, 1H).
Соединение 16 получали из продукта транс-конфигурации посредством расщепления на хиральной колонке.
17. (2S,3R)-8-метансульфонил-3-(2,4,5-трифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амин (соединение 17)
Синтез промежуточного соединения 17-1:
1,1-дихлорметиловый эфир (4,8 г, 0,04224 моль) взвешивали в 500 мл круглодонной колбе и растворяли посредством добавления 30 мл дихлорметана. TiCl4 (14 г, 0,07040 моль) добавляли в раствор и перемешивали при 0°С в течение 15 мин. 6-метокси-2-метансульфонилнафтален (4 г, 0,01693 моль) взвешивали в соответствующем количестве метиленхлорида и добавляли по каплям к вышеуказанному реакционному раствору. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 36 ч. Реакцию отслеживали посредством ТСХ и после завершения реакции добавляли соответствующее количество 1 н. раствора соляной кислоты для подведения рН меньше 7, экстрагировали дихлорметаном, промывали насыщенным солевым раствором, высушивали над безводным сульфатом натрия и разделяли посредством колоночной хроматографии или рекристализации для получения 3,275 г продукта в виде белого твердого вещества (частично красноватого) с выходом 73,5%.
Синтез промежуточного соединения 17-2:
3
2-метокси-6-метансульфонилнафтален-1-нафтальдегид (3,2 г, 0,01211 моль) добавляли в 250 мл сухого дихлорметана; AlCl (18,2529 г, 0,1369 моль) добавляли по частям, и смесь перемешивали при комнатной температуре и нормальном давлении в течение 36 ч. После завершения реакции реакционный растовор вливали в солевой раствор и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором два раза, высушивали над безводным сульфатом натрия, высушивали in vacuo для получения твердых веществ, которые разделяли посредством колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 3:1) для получения 1,250 г белого твердого вещества с выходом 41,25%.
Синтез промежуточного соединения 17-3:
Соединение 6-метансульфонилнафтален-1-формил-2-нафтол (1,250 г, 0,0062 моль), соединение 1-1 (1,851 г, 0,0074 ммоль), ДАБЦО (652 мг, 6,2 ммоль) взвешивали в 50 мл круглодонной колбе. Соответствующее количество ЭА добавляли для растворения твердого вещества и нагревали до появления конденсации. После завершения реакции 0,5 г твердого вещества красного цвета получали при помощи колоночной хроматографии (ДХМ:ПЭ = 1:1) с выходом 18,6%.
Синтез промежуточного соединения 17-4:
3
Соединение (0,5 г, 0,0012 моль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 250 мл и ТГФ/СНОН (10: 1, 150 мл) добавляли для растворения твердого вещества. Боргидрид натрия (459 мг, 0,0121 ммоль) добавляли к раствору по частям. Осушающую трубку устанавливали в горловину флакона, и цвет реакционного раствора быстро менялся со светло-оранжевого до бледно-желтого. Реакцию проводили в течение 20 мин при комнатной температуре и нормальном давлении. После завершения реакции к реакционному раствору добавляли воду для остановки реакции, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo, и непосредственно применяли на следующем этапе.
Синтез соединения 17:
3
2
4
Полученное вышеуказанное соединение растворяли в 30 мл этанола и к раствору добавляли порошок цинка (1,388 г, 21,353 ммоль) и 6 мл 6 н. HCl. Реакцию проводили при комнатной температуре и нормальном давлении в течение 2-3 ч. Реакцию отслеживали при помощи ТСХ и после завершения реакции реакционный раствор нейтрализовали насыщенным водным NaHCO, экстрагировали дихлорметаном, промывали до сухости и разделяли при помощи колоночной хроматографии и высушивали над безводным NaSO. Раствор выпаривали до сухости и разделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 1:1) для получения 450 мг белого продукта (неочищенный продукт).
Соединение 17 получали из продукта транс-конфигурации посредством расщепления на хиральной колонке.
1
6
1
2
1
2
1
2
Н NMR (500 MHz, DMSO-d): δ 8,52 (d, J=2,0 Hz, 1H), 8,08 (d, J=9,0 Hz, 1H), 8,01 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,97 (dd, J=8,5 Hz, J=2,0 Hz, 1H), 7,72-7,67 (m, 1H), 7,66-7,60 (m, 1H), 7,26 (d, J=9,0 Hz, 1H), 4,99 (d, J=9,5 Hz, 1H), 3,47-3,43 (m, 1H), 3,42 (dd, J=17,5 Hz, J=5,5 Hz, 1H), 3,26 (s, 3H), 2,93 (dd, J=15,8 Hz, J=10,0 Hz, 1H), 1,74 (s, 2H).
18. транс-(2RS,3RS)-8-морфолин-3-(2,4,5-трифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амин (соединение 18)
Синтез промежуточного соединения 18-1:
+
1,1-дихлорметиловый эфир (3,65 г, 0,0318 моль) взвешивали в 500 мл круглодонной колбе и растворяли посредством добавления 30 мл дихлорметана. TiCl4 (5,8 мл, 0,0530 моль) добавляли к раствору и перемешивали при 0°С в течение 15 мин. 6-бром-2-метоксинафтален (5 г, 0,0212 моль) взвешивали в соответствующем количестве метиленхлорида и добавляли по каплям к вышеуказанному реакционному раствору. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 36 ч. После завершения реакции соответствующее количество 1 н. раствора соляной кислоты, экстрагировали посредством этилацетата, высушивали над безводным сульфатом натрия и разделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 4:1) для получения 3,145 г бледно-желтого продукта с выходом 56,2%. LC-MS: 265,00 (М+1).
1
3
1
2
H-NMR (400 MHz, CDCl): δ 10,83 (s, 1Н), 9,15 (d, J=9,2, 1Н), 7,92 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,89 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,64 (dd, J=9,2 Hz, J=2,0 Hz, 1H), 7,29 (d, J=9,2 Hz, 1H), 4,04 (s, 3H).
Синтез промежуточного соединения 18-2:
+
6-бром-2-метокси-1-нафтальдегид 18-1 (3,145 г, 0,0119 моль), этиленгликоль (4,437 г, 0,0715 молль), п-толуолсульфоновую кислоту (123 мг, 0,0007 моль) добавляли в 100 мл реакционный флакон. Соответствующее количество толуола добавляли в бутылку, и устанавливали отделитель вооды. Реакцию проводили при 150°С в условиях обратного холодильника в течение ночи. После завершения реакции к раствору добавляли водный NaOH для подведения рН больше 7, экстрагировали этилацетатом, промывали при помощи насыщенного солевого раствора, высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости и разделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 6:1) для получения 2,275 г бледно желтого твердого вещества с выходом 67%. LC-MS: 309,05 (М+1).
Синтез промежуточного соединения 18-3:
Соединение 18-2 (2,28 г, 0,0074 моль), Xantphos (0,214 г, 0,0004 моль), ацетат палладия (0,083 г, 0,0004 моль), карбонат цезия (4,824 г, 0,0148 моль) взвешивали в 100 мл двугорлой колбе. Аргон применяли для вакуумирования флакона. При аспирации добавляли 10 мл толуола при помощи шприца и инъецировали морфолин (0,967 г, 0,0111 моль). Аспирацию продолжали и применяли аргон для вакуумирования флакона в течение 30 мин. В атмосфере аргона реакцию проводили при 80°С в течение ночи. Реакцию мониторирвали посредством ТСХ. После завершения реакции добавляли соответствующее количество воды, экстрагировали этилацетатом, промывали насыщенным солевым раствором, высушивали над безводным сульфатом натрия и разделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 2:1) для получения бледно-желтого твердого вещества, которое может быть непосредственно применено на следующем этапе.
Синтез промежуточного соединения 18-4:
+
Соединение 27-3 взвешивали в реакционном флаконе, добавляли соответствующее количество этанола и в реакционный раствор добавляли соответствующее количество 1 н. соляной килсоты. Реакционную смесь нагревали до появления конденсата при 60°С в течение 2-3 ч. После завершения реакции добавляли соответствующее количесвто водного NaOH, и бледно-желтое твердое вещество выпадало в осадок. Твердое вещество фильтровали отсасыванием и фильтрационный осадок разделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 2:1) для получения 1,6 г светло-желтого твердого вещества с двухэтапным выходом 80%. LC-MS: 272.20 (М+1).
1
3
1
2
H-NMR (400 MHz, CDCl): δ 10,85 (s, 1Н), 9,18 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,92 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,38 (dd, J=9,6 Hz, J=2,4 Hz, 1H), 7,24 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,05 (d, J=2,4 Hz, 1H), 4,02 (s, 3H), 3,91 (t, J=4,8 Hz, 4H), 3,24 (t, J=4,8 Hz, 4H).
Синтез промежуточного соединения 18-5:
3
+
-
2-метокси-6-морфолин-1-нафтален-формальдегид 18-4 (1,6 г, 0,0059 моль) взвешивали в 250 мл реакционном флаконе и добавляли соответствующее количество сухого метиленхлорида в реакционный флакон до полного растворения субстрата. AlCl (4,869 г, 0,03652 ммоль) добавляли в реакционный раствор по частям. Осушающую трубку устанавливали в горловину флакона и реакцию проводили в течение 36 ч при комнатной температуре и нормальном давлении. После завершения реакции приемлемое количество воды добавляли в реакционный раствор, перемешивали в течение определенного времени, экстрагировали этилацетатом, промывали насыщенным солевым раствором и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo, и 720 мг бледно-желтого твердого вещества получали при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 1:1) с выходом 47%. LC-MS: 258.10 (М+1), 256,15 (М-1).
1
6
1
2
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 11,66 (s, 1Н), 10,77 (s, 1Н), 8,80 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,98 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,47 (dd, J=9,6 Hz, J=2,4 Hz, 1H), 7,22 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,16 (d, J=9,2 Hz, 1H), 3,79 (t, J=4,4 Hz, 4H), 3,18 (t, J=4,4 Hz, 4H).
Синтез промежуточного соединения 18-6:
+
Соединение 2-гидрокси-6-морфолин-1-нафтальдегид (720 мг, 2,800 ммоль), соединение 1-1 (568 мг, 2,798 ммоль), ДАБЦО (313 мг, 2,795 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл. Добавляли соответствующее количество ЭА и перемешивали при 70°С в течение ночи. После завершения реакции 350 мг твердого вещества темно красного цвета получали при помощи колоночной хроматографии (дихлорметан : петролейный эфир = 1:1) с выходом 28,3%. LC-MS: 443,10 (М+1).
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,96 (s, 1H), 8,26 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,86 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,74-7,67 (m, 1H), 7,57-7,50 (m, 2H), 7,23 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,05 (d, J=9,2 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 3,80 (t, J=4,4 Hz, 4H), 3,22 (t, J=4,4 Hz, 4H).
Синтез промежуточного соединения 18-7:
3
Соединение 18-6 (350 мг, 0,7917 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 250 мл и ТГФ/СНОН (10: 1, 33 мл) добавляли для растворения твердого вещества. Боргидрид натрия (200 мг, 5,284 ммоль) добавляли в раствор по частям. Осушающую трубку устанавливали в горловину флакона и реакцию проводили в течение 20 мин при комнатной температуре и нормальном давлении. Цвет реакционного раствора изменялся с темно красного на бледножелтый. После завершения реакции к реакционному раствору добавляли воду для остановки реакции, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo, и непосредственно применяли на следующем этапе.
Синтез соединения 18:
3
2
4
Полученное вышеуказанное соединение растворяли в 30 мл этанола и к раствору добавляли порошок цинка (835 мг, 12,85 ммоль) и 6 мл 6 н. HCl. Реакцию проводили при комнатной температуре и нормальном давлении в течение 2-3 ч. Затем реакционный раствор нейтрализовали насыщенным водным NaHCO, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным NaSO. Раствор выпаривали до сухости и разделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 1:2) для получения 80 мг бледно-желтого продукта с двухэтапным выходом 26,7%.
1
6
1
2
1
2
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 7,72 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,70-7,58 (m, 2H), 7,55 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,40 (dd, J=9,2 Hz, J=2,0 Hz, 1H), 7,19 (d, J=2,0 Hz, 1H), 6,99 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,87 (d, J=9,2 Hz, 1H), 3,79 (t, J=4,4 Hz, 4H), 3,43-3,39 (m, 2H), 3,18 (t, J=4,4 Hz, 4H), 2,83 (dd, J=16,4 Hz, J=10,0 Hz, 1H), 1,74 (s, 2H).
19. (2S,3R)-9-метокси-8-метансульфонил-3-(2,4,5-трифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо [f]-хроман-2-амин (соединение 19)
Синтез промежуточного соединения 19-1:
1,1-дихлорметиловый эфир (4,8 г, 0,04224 моль) взвешивали в 500 мл круглодонной колбе, и растворяли посредством добавления 30 мл дихлорметана. TiCl4 (14 г, 0,07040 моль) добавляли к раствору и перемешивали при 0°С в течение 15 мин. 2,7-метокси-6-метансульфонилнафтален (4 г, 0,01693 моль) взвешивали в соответствующем количестве метиленхлорида и добавляли по каплям к вышеуказанному реакционному раствору. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 36 ч. Реакцию отслеживали посредством ТСХ и после завершения реакции добавляли соответствующее количество 1 н. раствора соляной кислоты для подведения рН меньше 7, экстрагировали при помощи дихлорметана, промывали насыщенным солевым раствором, высушивали над безводным сульфатом натрия и разделяли посредстовм колоночной хроматографии или рекристаллизации для получения 3,275 г продукта в виде белого твердого вещества (частично красноватое) с выходом 73,5%.
Синтез промежуточного соединения 19-2:
3
Соединение 9-1 (3,2 г, 0,01211 моль) добапвляли в 250 мл сухого дихлорметана; AlCl (18,2529 г, 0,1369 моль) добавляли по частям, и смесь перемешивали при комнатной температуре и нормальном давлении в течение 36 ч. После завершения реакции реакционный раствор вливали в солевой раствор и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором два раза, высушивали над безводным сульфатом натрия, высушивали in vacuo для получения твердых веществ, которые разделяли посредством колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 3:1) для получения 1,250 г белого твердого вещества с выходом 41,25%.
Синтез промежуточного соединения 19-3:
Соединение 19-2 (1,250 г, 0,0062 моль), соединение 1-1 (1,851 г, 0,0074 ммоль), ДАБЦО (652 мг, 6,2 ммоль) взвешивали в 50 мл круглодонной колбе. Соответствующее количество ЭА добавляли для растворения твердого вещества и нагревали до появления конденсации. После завершения реакции, 0,5 г твердого вещества красного цвета получали посредством колоночной хроматографии (ДХМ:ПЭ = 1:1) с выходом 18,6%.
Синтез промежуточного соединения 19-4:
3
Соединение 19-3 (0,5 г, 0,0012 моль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 250 мл и ТГФ/СНОН (10:1,150 мл) добавляли для растворения твердого вещества. Боргидрид натрия (459 мг, 0,0121 ммоль) добавляли к раствору по частям. Осушающую трубку устанавливали в горловину флакона и цвет реакционного раствора быстро изменялся со светло оранжевого на бледно желтый. Реакцию проводили в течение 20 мин при комнатной температуре и нормальном давлении. После завершения реакции к реакционному раствору добавляли воду для остановки реакции, экстрагировали этилацетатом, и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo для получения твердого вещества белого цвета, которое может быть непосредственно применено на следующем этапе.
Синтез соединения 19:
3
2
4
Полученное вышеуказанное соединение растворяли в 30 мл этанола и к раствору добавляли порошок цинка (1,388 г, 21,353 ммоль) и 6 мл 6 н. HCl. Реакцию проводили при комнатной температуре и нормальном давлении в течение 2-3 ч. Реакцию мониторировлаи посредством ТСХ и после завершения реакции реакционный раствор нейтрализовали насыщенным водным NaHCO, экстрагировали дихлорметаном, промывали насыщенным солевым раствором и высушивали над безводным NaSO. Раствор выпаривали до сухости и разделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 1:1) для получения 450 мг белого продукта (неочищенный продукт).
Соединение 19 получали из продукта транс-конфигурации при помощи расщепления на хиральной колонке.
1
6
1
2
1
2
Н NMR (500 MHz, DMSO-d): δ 8,41 (s, 1Н), 7,92 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,72-7,67 (m, 1H), 7,65-7,60 (m, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,05 (d, J=9,0 Hz, 1H), 4,97 (d, J=9,0 Hz, 1H), 4,08 (s, 3H), 3,46-3,42 (m, 1H), 3,39 (dd, J=16,3 Hz, J=5,0 Hz, 1H), 3,30 (s, 3H), 2,86 (dd, J=16,0 Hz, J=9,5 Hz, 1H), 1,67 (s, 2H).
20. N-((2RS,3RS)-2-амино-9-метокси-3-(2,4,5-трифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-8)-метансульфонамид (соединение 20)
Синтез промежуточного соединения 20-1:
+
+
Соединение 2-бром-3,6-диметоксинафтален (3 г, 0,0113 моль), N,N'-диметилэтилендиамин (0,509 г, 0,00565 моль), йодид меди (0,215 г, 0,0011 моль), фосфат калия (4,68 г, 0,03384 моль), метансульфонамид (1,61 г, 0,0169 моль) взвешивали в 250 мл двухгорлой колбе. Аргон прмименяли для вакуумирования флакона. При аспирации, 95 мл ацетонитрила добавляли при помощи шприца. Аспирацию продолжали и пргон применяли для ваккумирования флакона в течение 30 мин. В атмосфере аргона реакцию проводили при 80°С в течение 36 ч. Реакцию отслеживали посредством ТСХ. После завершения реакции для остановки реакции добавляли воду, экстрагировлаи этилацетатом, промывали насыщенным солевым раствором и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости и рахделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 3:1) для получения 1,89 г белого твердого вещества с выходом 59,6%. LC-MS: 282,10 (М+1), 280,05 (М-1).
1
3
H-NMR (400 MHz, CDCl): δ 7,86 (s, 1Н), 7,65 (d, J=9,6 Hz, 1H), 7,09 (s, 1H), 7,05 (s, 1H), 7,04 (d, J=3,2 Hz, 1H), 6,94 (s, 1H), 3,98 (s, 3H), 3,90 (s, 3H), 2,97 (s, 3H).
Синтез промежуточного соединения 20-2:
4
+
+
1,1-дихлорметиловый эфир (1,10 г, 0,0096 моль) взвешивали в 100 мл круглодонной колбе, и растворяли за счет добавления 15 мл дихлорметана. TiCl (3,02 г, 0,0159 моль) добавляли в раствор и перемешивали при 0°С в течение 15 мин. N-(3,6-диметоксинафтален-2-)метансульфонамид 62 (1,79 г, 0,0064 моль) взвешивали в соответствующем количестве метиленхлорида и добавляли по каплям к вышеуказанному реакционному раствору. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакцию отслеживали посредством ТСХ и после завершения реакции соответствующее количество 1 н. раствора соляной кислоты добавляли для подведения рН до 5-6, экстрагировали дихлорметаном, промывали насыщенным солевым раствором, высушивали над безводным сульфатом натрия и разделяли посредством колоночной хроматографии для получения 1,5 г оранжевого продукта с выходом 76,1%. LC-MS: 310,10 (М+1), 308,10 (М-1).
1
6
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 10,75 (s, 1Н), 9,15 (s, 1Н), 8,76 (s, 1Н), 8,22 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,41 (d, J=9,2 Hz, 1H), 4,04 (s, 3H), 3,95 (s, 3H), 3,04 (s, 3H).
Синтез промежуточного соединения 20-3:
3
+
-
Безводный AlCl (4 г, 0,0299 моль) взвешивали в 250 мл круглодонной колбе. В условиях осложнения 60 мл ДХМ добавляли во флакон. Затем твердое вещество растворяли N-(5-формил-3,6-диметоксинафтален-2-)метансульфонамид 20-2 (1,85 г, 0,0060 моль) добавляли во флакон при комнатной температуре и нормальном атмосферном давлении. Реакцию проводили в условиях нормальной температуры и атмосферного давления. Реакцию отслеживали посредством ТСХ и после завершения реакции к реакционному раствору добавляли 1 н. HCl, экстрагировали ЭА, и разделяли при помощи колоночной хроматографии для получения 1,3 г белого твердого вещества с выходом 73%. LC-MS: 296.10 (М+1), 294,10 (М-1).
1
6
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 12,03 (s, 1Н), 10,81 (s, 1Н), 9,11 (s, 1Н), 8,65 (s, 1Н), 8,11 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,15 (d, J=8,8 Hz, 1H), 3,92 (s, 3H), 3,50 (s, 3H).
Синтез промежуточного соединения 20-4:
+
-
N-(5-формил-3-диметокси-6-гидроксинафтален-2-)метансульфонамид 20-3 (1 г, 0,0034 моль), (E)-1-(2,4,5-трифторфенил)-2-нитроолефин 1-1 (688 мг, 0,0034 моль), ДАБЦО (88 мг, 0,007 ммоль) добавляли в 100 мл круглодонной колбе. 35 мл ЭА добавляли и реакцию проводили при 90°С в течение ночи. Реакцию отслеживали при помощи ТСХ. После завершения реакции реакционную смесь разделяли посредством колоночной хроматографии (ПЭ:ДХМ = 1:3) для получения 420 мг твердого вещества красного цвета с выходом 25,8%. LC-MS: 481,15 (М+1), 479,10 (М-1).
1
H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9,18 (s, 1Н), 9,16 (s, 1Н), 7,95 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,83 (s, 1H), 7,89 (s, 1H), 7,75-7,68 (m, 1H), 7,56-7,49 (m, 1H), 6,99 (s, 1H), 6,98 (d, J=9,6 Hz, 1H), 4,11 (s, 3H), 3,06 (s, 3H).
Синтез промежуточного соединения 20-5:
3
N-[2-(2,4,5-трифторфенил)-3-нитро-6-метокси-2Н-бензо[f]-хроман-7-]метансульфонамид 65 (420 мг, 0,8749 ммоль взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 100 мл и ТГФ/СНОН (10:1, 35 мл) добавляли для растворения твердого вещества. Боргидрид натрия (132 мг, 3,4996 ммоль) добавляли к раствору по частям, и цвет реакционного раствора быстро изменялся с оранжевого на бледно желтый. Осушающую трубку устанавливали в горловину бутылки и реакцию проводили в течение 20 мин при комнатной температуре и при нормальном давлении. После завершения реакции к реакционному раствору добавляли воду для остановки реакции, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo, и непосредственно применяли на следующем этапе.
Синтез соединения 20:
3
2
4
Полученный вышеуказанный неочищенный N-[2-(2,4,5-трифторфенил)-3-нитро-6-метокси-3,4-дигидро-2H-бензо[f]-хроман-7-]метансульфонамид 66 растворяли в 20 мл этанола, и к раствору добавляли порошок цинка (2,6 г, 0,040 моль) и 2,6 мл 6 н. HCl. Реакцию проводили при комнатной температуре и нормальном давлении в течение 2-3 ч. Реакцию отслеживали посредством ТСХ и после завершения реакции реакционный раствор нейтрализовали насыщенным водным NaHCO, экстрагировали этилацетатом, промывали насыщенным солевым раствором и высушивали над безводным NaSO. Раствор выпаривали до сухости и разделяли посредством колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 1:2).
21. (2S,3R)-2-амино-9-метокси-3-(2,4,5-трифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-8-нитрил (соединение 21)
Синтез промежуточного соединения 21-1:
1,1-дихлорметиловый эфир (4,8 г, 0,04224 моль) взвешивали в 500 мл круглодонной колбе, и растворяли посредством добавления 30 мл дихлорметана. TiCl4 (14 г, 0,07040 моль) добавляли к раствору и перемешивали при 0°С в течение 15 мин. 3,6-диметоксинафталонитрил (4 г, 0,02816 моль) взвешивали в соответствующем количестве метиленхлорида и добавляли по каплям к вышеуказанной реакции. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 36 ч. Реакцию отслеживали посредством ТСХ и после завершения реакции добавляли соответствующее количество 1 н. раствора соляной кислоты для подведения рН меньше 7, экстрагировали дихлорметаном, промывали насыщенным солевым раствором, высушивали над безводным сульфатом натрия и разделяли посредством колоночной хроматографии или рекристаллизовали для получения 4,275 г белого продукта с выходом 94,5%.
1
6
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 10,71 (s, 1H), 8,77 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,29 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,55 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,10 (s, 3H), 3,98 (s, 3H).
Синтез промежуточного соединения 21-2:
3
6-циано-2,7-диметокси-1-нафталенформальдегид 21-1 (3,3 г, 0,01369 моль) взвешивали в 250 мл реакционном флаконе и добавляли 150 мл сухого дихлорметана. AlCl (18,2529 г, 0,1369 моль) добавляли по частям и смесь перемешивали при комнатной температуре и нормальном давлении в течение 36 ч. После завершения реакции реакционный раствор вливали в солевой раствор и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором два раза, высушивали над безводным сульфатом натрия, высушивали in vacuo для получения твердого вещества, которое разделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 3:1) для получения 1,250 г бледно-красного твердого вещества с выходом 40,2%.
1
6
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 12,14 (s, 1H), 10,68 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,35 (s, 1H), 8,03 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,11 (d, J=9,2 Hz, 1H), 3,93 (s, 3H).
Синтез промежуточного соединения 21-3:
Соединение 6-циано-2-гидрокси-7-метокси-1-нафтальдегид 21-2 (1,250 г, 0,0055 моль), (Е)-1-(2,4,5-трифторфенил)-2-нитроолефин 1-1 (1,341 г, 0,0066 моль), ДАБЦО (616 мг, 5,5 ммоль) взвешивали в 50 мл круглодонной колбе. Соответствующее количество ЭА добавляли для растворения твердого вещества и реакцию проводили при 90°С в течение ночи. После завершения реакции 1 г твердого вещества оранжево-желтого цвета получали посредством колоночной хроматографии (ДХМ:ПЭ = 1:1) с выходом 44,1%.
1
6
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 9,18 (s, 1Н), 8,48 (s, 1Н), 8,03 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,92 (s, 1H), 7,76-7,70 (m, 1H), 7,62-7,55 (m, 1H), 7,10 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,04 (s, 1H), 4,16 (s, 1H).
Синтез промежуточного соедиения 21-4:
3
2-(2,4,5-трифтофенил)-3-нитро-6-метокси-3Н-бензо[f]хроман-7-нитрил 21-3 (2,2 г, 0,0053 моль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 250 мл и ТГФ/СНОН (10:1, 150 мл) добавляли для растворения твердого вещества. Боргидрид натрия (606 мг, 0,0160 ммоль) добавляли к раствору по частям. Цвет реакционного раствора быстро менялся со светло-оранжевого до бледно-желтого. Осушающую трубку устанавливали в горловину флакона. Реакцию проводили в течение 20 мин при комнатной температуре и нормальном давлении. После завершения реакции к реакционному раствору добавляли воду для остановки реакции, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo для получения белого твердого вещества, которое может быть непосредственно применено на следующем этапе.
Синтез соединения 21:
3
2
4
Неочищенный 2-(2,4,5-трифторфенил)-3-нитро-6-метокси-3,4-дигидро-2H-бензо[f]хроман-7-нитрил 59 полученный посредством вышеуказанного способа 1, растворяли в 80 мл этанола, и к раствору добавляли порошок цинка (3,45 г, 0,053 моль) и 16 мл 6 н. HCl. Реакцию проводили при комнатной температуре и нормальном давлении в течение 2-3 ч. Реакцию мониторировлаи посредством ТСХ, и после завершения реакции реакционный раствор нейтрализовали насыщенным водным NaHCO, эктсрагировали этилацетатом, промывали насыщенным солевым раствором и высушивали над безводным NaSO. Раствор выпаривали до сухости и разделяли посредством колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 1:1) для получения 670 мг белого продукта с выходом 32,7%.
Соединение 21 получали из продукта транс-конфигурации посредством расщепления на хиральной колонке. LCMS (М+1)+, 384,21.
1
6
1
2
1
2
Н NMR (500 MHz, DMSO-d): δ 8,41 (s, 1Н), 7,75 (d, J=9,0 Hz, 1Н), 7,69-7,65 (m, 1Н), 7,64-7,58 (m, 1Н), 7,25 (s, 1Н), 7,04 (d, J=9,0 Hz, 1H), 4,96 (d, J=9,0 Hz, 1H), 4,03 (s, 3H), 3,44-3,39 (m, 1H), 3,35 (dd, J=16,5 Hz, J=5,5 Hz, 1H), 2,82 (dd, J=16,5 Hz, J=10,0 Hz, 1H), 1,72 (s, 2H).
22. транс-(2RS,3RS)-9-метокси-3-(2-фторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амин (соединение 22)
Синтез промежуточного соединения 22-1:
2-фторбензальдегид (7,747 г, 62,46 ммоль), нитрометан (4 мл), метанол (10 мл) готовили в растворе; и метанол (60 мл), воду (30 мл), NaOH (2,5 Н, 30 мл) готовили в растворе. Температуру поддерживали при 5°С. Исходный раствор добавляли по каплям в последний раствор в течение приблизительно 30-60 мин, и температуру раствора поддерживали при 5-10°С. После добавления вышеуказанный раствор добавляли по каплям к смешанному раствору хлорида цинка (42,6 г, 31,25 ммоль), концентрированной соляной кислоты (13 мл) и воды (17 мл), и температуру в течение добавления поддерживали при 0-10°С. После добавления реакцию проводили при комнатной температуре в течение 2-4 ч. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали отсасыванием при пониженном давлении, и фильтровальный осадок промывали 40% раствором метанола несколько раз для получения 8,1 г бледно-желтого продукта с выходом 77,7%. GC-MS: 167.
1
3
H-NMR (400 MHz, CDCl): δ 8,06 (d, J=14,0, 1H), 7,74 (d, J=14,0, 1H), 7,54 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,49 (t, J=6,8 Hz, 1H), 7,25 (t, J=6,8 Hz, 1H), 7,19 (t, J=9,6 Hz, 1H).
Синтез промежуточного соедиения 22-2:
7-метокси-2-гидрокси-1-нафтальдегид 5-2 (4.85 г, 24,003 ммоль), соединение 22-1 (6 г, 35,928 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл, добавляли 20 мл этилацетата и твердое вещество растворяли посредством нагревания. Затем добавляли ДАБЦО (27 г, 24,107 ммоль) и нагревали до появления конденсата при 80°С в течение 12 ч, и цвет раствора возвращался к оранжевому. Реакционную смесь фильтровали отсасыванием и промывали этилацетатом для получения 2,38 г продукта с выходом 28%.
1
6
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 9,18 (s, 1Н), 7,92 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,81 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7, 78 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,44 (m, 1H), 7,36 (t, J=3,6 Hz, 1H), 7,32 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,11 (m, 1H), 7,03 (s, 1H), 6,94 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,02 (s, 3H), 2,88 (s, 1H).
Синтез промежуточного соединения 22-3:
3
Соединение 6 (2,38 г, 6,779 моль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл, и ТГФ/СНОН (10:1, 20 мл) добавляли для растворения твердого вещества. Боргидрид натрия (317 мг, 11,391 ммоль) добавляли к раствору по частям. Осушающую трубку устанавливали в горловину флакона. Реакцию проводили в течение 20 мин прикомнатной температуре и нормальном давлении до получения прозрачного реакционного раствора. После завершения реакции к реакционному раствору добавляли воду для остановки реакции, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo, и осадок непосредственно применяли на следующем этапе.
Синтез соединения 22:
+
Вышеуказанное полученное соединение растворяли в 50 мл этанола и к раствору добавляли порошок цинка (4,53 г, 69,692 ммоль) и 8 мл 6 н. HCl. Реакцию проводили при 50°С в течение 2 ч. Порошок цинка фильтровали через диатомит. Растворитель выпаривали до сухости. Полученный осадок растворяли в насыщенном водном гидроксиде натрия, экстрагировали дихлорметаном и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости и разделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 2:1) для получения 150 мг белого продукта. LC-MS: 324,15 (М+1).
1
6
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 7,76 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,63 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,54 (t, J=7,6 Hz, 1H), 7,45 (m, 1H), 7,30 (d, J=2,4 Hz, 1H), 7,26 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,13 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,05 (m, 1H), 6,93 (d, J=8,8 Hz, 1H), 5,01 (d, J=8,8 Hz, 1H), 3,90 (s, 3H), 2,85 (m, 1H), 1,79 (d, J=3,2 Hz, 2H).
23. транс-(2RS,3RS)-9-метокси-3-(4-фторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амин (соединение 23)
Синтез промежуточного соединения 23-1:
4-фторбензальдегид (7,747 г, 62,46 ммоль), нитрометан (4 мл), метанол (10 мл) получали в растворе; и метанол (60 мл), воду (30 мл), NaOH (2,5 Н, 30 мл) получали в растворе. Температуру поддерживали при 5°С. Исходный раствор добавляли по каплям в последний раствор в течение приблизительно 30-60 мин, и температуру раствора поддерживали при 5-10°С. После добавления вышеуказанный раствор добавляли по каплям к смешанному раствору хлорида цинка (42,6 г, 31,25 ммоль), концентрированной соляной кислоты (13 мл) и воды (17 мл), и температуру в течение добавления поддерживали при 0-10°С. После добавления реакцию проводили при комнатной температуре в течение 2-4 ч. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали отсасыванием при пониженном давлении и фильтровальный осадок промывали 40% раствором метанола несколько раз для получения 8,1 г продукта с выходом 77,7%. GC-MS: 167.
1
6
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 8,23 (d, J=13,6, 1H), 8,16 (d, J=13,6, 1H), 7,96 (m, 2H), 7,35 (t, J=8,8 Hz, 2H).
Синтез промежуточного соединения 23-2:
7-метокси-2-гидрокси-1-нафтальдегид (4,85 г, 24,003 ммоль), соединение 5-2 (6 г, 35,928 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл, 20 мл этилацетата добавляли, и твердое вещество растворяли посредством нагревания. Затем ДАБЦО (27 г, 24,107 ммоль) добавляли и нагревали до появления конденсата при 80°С в течение 12 ч и цвет раствора возвращался к оранжевому. Реакционную смесь фильтровали отсасыванием и промывали этилацетатом для получения 2,38 г продукта с выходом 28%.
1
6
1
2
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 9,12 (s, 1Н), 7,93 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,81 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,51 (m, 2H), 7,19 (t, J=8,4 Hz, 2H), 7,12 (dd, J=9,2 Hz, J=2,0 Hz, 1H), 6,98 (d, J=8,8 Hz, 1H), 6,80 (s, 1H), 4,01 (s, 3H).
Синтез промежуточного соединения 23-3:
3
Соединение 23-2 (2,38 г, 6,779 моль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл и ТГФ/СНОН (10: 1, 20 мл) добавляли для растворения твердого вещества. Боргидрид натрия (317 мг, 11,391 ммоль) добавляли к раствору по частям. Осушающую трубку устанавливали в горловину флакона. Реакцию проводили в течение 20 мин при комнатной температуре и нормальном давлении до получения прозрачного реакционного раствора. После завершения реакции к реакционному раствору добавляли воду для остановки реакции, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo, и осадок непосредственно применяли на следующем этапе.
Синтез соединения 23:
+
Полученное вышеуказанное соединение растворяли в 50 мл этанола, и к раствору добавляли порошок цинка (4,53 г, 69,692 ммоль) и 8 мл 6 н. HCl. Реакцию проводили при 50°С в течение 2 ч. Порошок цинка фильтровали через диатомит. Раствор выпаривали до сухости. Полученный осадок растворяли в насыщенном водном гидроксиде натрия, экстрагировали дихлорметаном и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости и разделяли посредством колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 2:1) для получения 150 мг белого продукта. LC-MS: 324,15 (М+1).
1
6
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 7,75 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,63 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,52 (m, 2H), 7,25 (t, J=8,8 Hz, 2H), 7,11 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,04 (m, 1H), 6,94 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,71 (d, J=8,8 Hz, 1H), 3,90 (s, 3H), 2,78 (m, 1H), 1,54 (s, 2H).
24. транс-(2RS,3RS)-9-метокси-3-(2,4-дифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амин (соединение 24)
Синтез промежуточного соединения 24-1:
2,4-дифторбензальдегид (8,871 г, 62,46 ммоль), нитрометан (4 мл), метанол (10 мл) получали в растворе; и метанол (60 мл), воду (30 мл), NaOH (2,5 Н, 30 мл) получали в растворе. Температуру поддерживали при 5°С. Исходный раствор добавляли по каплям в последний раствор в течение приблизительно 30-60 мин, и температуру раствора поддерживали при 5-10°С. После добавления вышеуказанный раствор добавляли по каплям к смешанному растовру хлорида цинка (42,6 г, 31,25 ммоль), концентрированной соляной кислоты (13 мл) и воды (17 мл), и температуру в течение реакции поддерживали при 0-10°С. После добавления реакцию проводили при комнатной температуре в течение 2-4 ч. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали отсасыванием при пониженном давлении, и фильтровальный осадок промывали 40% раствором метанола несколько раз для получения 8,1 г продукта с выходом 77,7%. GC-MS: 185.
1
6
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 8,14 (d, J=13,6, 1H), 8,09 (d, J=4,8, 1H), 8,06 (d, J=2,8 Hz, 1H), 7,49 (m, 1H), 7,25 (t, J=6,8 Hz, 1H), 7,28 (m, 1H).
Синтез промежуточного соединения 24-2:
7-метокси-2-гидрокси-1-нафтальдегид (2,7 г, 13,362 ммоль), соединение 5-2 (3,7 г, 19,997 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл, добавляли 20 мл этилацетата, и твердое вещество растворяли посредством нагревания. Затем добавляли ДАБЦО (1,5 г, 13,393 ммоль) и нагревали до появления конденсата при 80°С в течение 12 ч, и цвет раствора возвращался к оранжевому. Реакционную смесь фильтровали отсасыванием и промывали этилацетатом для получения 1,5 г продукта с выходом 30,4%.
1
6
1
2
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 9,17 (s, 1Н), 7,93 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,82 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,77 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,40 (m, 2H), 7,13 (dd, J=8,8 Hz, J=2,4 Hz, 1H), 6,99 (s, 1H), 6,94 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,02 (s, 3H), 2,81 (s, 1H).
Синтез промежуточного соединения 24-3:
3
Соединение 24-2 (2,50 г, 6,779 моль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл и ТГФ/СНОН (10:1, 20 мл) добавляли для растворения твердого вещества. Боргидрид натрия (317 мг, 11,391 ммоль) добавляли в раствор по частям. Осушающую трубку устанавливали в горловину флакона. Реакцию проводили в течение 20 мин при комнатной температуре и нормальном давлении до получения прозрачного реакционного раствора. После завершения реакции к реакционному раствору добавляли воду для остановки реакции, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo, и осадок непосредственно применяли в следующей реакции.
Синтез соединения 24:
+
Полученное вышеуказанное соединение растворяли в 50 мл этанола, и к раствору добавляли порошок цинка (4,53 г, 69,692 ммоль) и 8 мл 6 н. HCl. Реакцию проводили при 50°С в течение 2 ч. Порошок цинка фильтровали через диатомит. Растворитель выпаривали до сухости. Полученный осадок растворяли в насыщенном водном гидроксиде натрия, экстрагировали дихлорметаном и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости и разделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 2:1) для получения 160 мг белого продукта. LC-MS: 342.20 (М+1).
1
6
1
2
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 7,78 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,65 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,60 (t, J=6,8 Hz, 1H), 7,32 (m, 1H), 7,17 (m, 1H), 7,11 (s, 1H), 7,05 (dd, J=8,8 Hz, J=2,4 Hz, 1H), 6,93 (d, J=8,8 Hz, 1H), 5,04 (d, J=8,8 Hz, 1H), 3,91 (s, 3H), 2,90 (m, 1H).
25. транс-(2RS,3RS)-9-метокси-3-(2,5-дифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амин (соединение 25)
Синтез промежуточного соединения 25-1:
2,4-дифторбензальдегид (8,871 г, 62,46 ммоль), нитрометан (4 мл), метанол (10 мл) получали в растворе; и метанол (60 мл), воду (30 мл), NaOH (2,5 Н, 30 мл) получали в растворе. Температуру поддерживали при 5°С. Исходный раствор добавляли по каплям в последний растовр в течение приблизительно 30-60 мин, и температуру раствора поддерживали при 5-10°С. После добавления вышеуказанный растовр добавляли по каплям к смешанному растовру хлорида цинка (42,6 г, 31,25 ммоль), концентрированной соляной кислоты (13 мл) и воды (17 мл), и температуру в течение добавления поддерживали при 0-10°С. После добавления реакцию проводили при комнатной температуре в течение 2-4 ч. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали отсасыванием при пониженном давлении, и фильтровальный осадок промывали 40% раствором метанола несколько раз для получения 8,1 г продукта с выходом 77,7%. GC-MS: 185.
1
6
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 8,21 (d, J=13,6, 1Н), 8,04 (d, J=13,6, 1H), 7,92 (m, 1H), 7,47 (m, 2H).
Синтез промежуточного соединения 25-2:
7-метокси-2-гидрокси-1-нафтальдегид (2,7 г, 13,362 ммоль), соединение 5-2 (3,7 г, 19,997 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 500 мл, добавляли 20 мл этилацетата, и твердое вещество растворяли посредством нагревания. Затем, добавляли ДАБЦО (1,5 г, 13,393 ммоль) и нагревали до появления конденсата при 80°С в течение 12 ч, и цвет раствора возвращался к оранжевому. Реакционную смесь фильтровали отсасыванием и промывали этилацетатом для получения 1,5 г продукта с выходом 30,4%.
1
6
1
2
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 9,17 (s, 1Н), 7,93 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,82 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7, 77 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,40 (m, 2H), 7,13 (dd, J=9,2 Hz, J=2,4 Hz, 1H), 6,99 (s, 1H), 6,94 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,02 (s, 3H), 2,78 (s, 1H).
Синтез промежуточного соединения 25-3:
3
Соединение 25-2 (2,50 г, 6,779 моль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл и ТГФ/СНОН (10: 1, 20 мл) добавляли для растворения твердого вещества. Боргидрид натрия (317 мг, 11,391 ммоль) добавляли к раствору по частям. Осушающую трубку устанавливали в горловину флакона. Реакцию проводили в течение 20 мин при комнатной температуре и нормальном давлении до получения прозрачного реакционного раствора. После завершения реакции к реакционному раствору добавляли воду для остановки реакции, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo, и осадок непосредственно применяли в следующей реакции.
Синтез соединения 25:
+
Полученное вышеуказанное соединение растворяли в 50 мл этанола, и к раствору добавляли порошок цинка (4,53 г, 69,692 ммоль) и 8 мл 6 н. HCl. Реакцию проводили при 50°С в течение 2 ч. Порошок цинка фильтровали через диатомит. Растворитель выпаривали до сухости. Полученный осадок растворяли в насыщенном водном гидроксиде натрия, экстрагировали дихлорметаном и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости и разделяли посредством колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 2:1) для получения 170 мг белого продукта. LC-MS: 342,20 (М+1).
1
6
1
2
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 7,68 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,56 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,30 (m, 1H), 7,23 (m, 2H), 7,04 (s, 1H), 6,97 (dd, J=8,8 Hz, J=2,4 Hz, 1H), 6,85 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,89 (d, J=8,8 Hz, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,21 (m, 1H), 2,76 (m, 1H).
26. транс-(2RS,3RS)-9-метокси-3-(2-хлорфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амин (соединение 26)
Синтез промежуточного соединения 26-1:
2-хлорбензальдегид (8,744 г, 62,46 ммоль), нитрометан (4 мл), метанол (10 мл) получали в растворе; и метанол (60 мл), воду (30 мл), NaOH (2,5 Н, 30 мл) получали в растворе. Температуру поддверживали при 5°С. Исходный раствор добавляли по каплям в последний раствор в течение приблизительно 30-60 мин, и температуру раствора поддерживали при 5-10°С. После добавления вышеуказанный растовр добавляли по каплям к смешанному раствору хлорида цинка (42,6 г, 31,25 ммоль), концентрированной соляной кислоты (13 мл) и воды (17 мл), и температуру в течение добавления поддерживали при 0-10°С. После добавления реакцию проводили при комнатной температуре в течение 2-4 ч. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали отсасыванием при пониженном давлении и фильтровальный осадок промывали 40% раствором метанола несколько раз для получения 8,1 г продукта с выходом 77,7%. GC-MS: 183.
Синтез промежуточного соединения 26-2:
7-метокси-2-гидрокси-1-нафтальдегид (2,7 г, 13,362 ммоль), соединение 5-2 (3,7 г, 19,997 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл, добавляли 20 мл этилацетата, и твердые вещества растворяли посредством нагревания. Затем добавляли ДАБЦО (1,5 г, 13,393 ммоль) и нагревали до появления конденсата при 80°С в течение 12 ч, и цвет раствора возвращался к оранжевому. Реакционную смесь фильтровали отсасыванием и промывали этилацетатом для получения 1,5 г продукта с выходом 30,6%.
1
6
1
2
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 9,21 (s, 1H), 7,91 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,81 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7, 62 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,39 (m, 2H), 7,24 (t, J=7,6 Hz, 1H), 7,13 (dd, J=8,8 Hz, J=2,0 Hz, 1H), 7,08 (s, 1H), 6,90 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,03 (s, 3H), 2,83 (s, 1H).
Синтез промежуточного соединения 26-3:
3
Соединение 26-2 (2,49 г, 6,779 моль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл и ТГФ/СНОН (10: 1, 20 мл) добавляли для растворения твердого вещества. Боргидрид натрия (317 мг, 11,391 ммоль) добавляли к раствору по частям. Осушающую трубку устанавливали в горловину флакона. Реакцию проводили в течение 20 мин при комнатной температуре и нормальном давлении до получения прозрачного реакционного раствора. После завершения реакции к реакционному раствору добавляли воду для остановки реакции, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo, и осадок непосредственно применяли в следующей реакции.
Синтез соединения 26:
+
Полученное вышеуказанное соединение растворяли в 50 мл этанола и к раствору добавляли порошок цинка (4,53 г, 69,692 ммоль) и 8 мл 6 н. HCl. Реакцию проводили при 50°С в течение 2 ч. Порошок цинка фильтровали через диатомит. Растворитель выпаривали до сухости. Полученный осадок растворяли в насыщенном водном гидроксиде натрия, экстрагировали дихлорметаном и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости и разделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 2:1) для получения 170 мг белого продукта. LC-MS: 340,10 (М+1).
1
6
1
2
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 7,68 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,55 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,46 (m, 2H), 7,33 (t, J=4,0 Hz, 2H), 7,04 (s, 1H), 6,96 (dd, J=8,8 Hz, J=1,6 Hz, 1H), 6,85 (d, J=8,8 Hz, 1H), 5,09 (d, J=8,4 Hz, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,17 (m, 2H), 2,80 (m, 1H).
27. транс-(2RS,3RS)-9-метокси-3-(2,4-дихлорфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амин (соединение 27)
Синтез промежуточного соединения 27-1:
2,4-дихлорбензальдегид (10,866 г, 62,46 ммоль), нитрометан (4 мл), метанол (10 мл) получали в растворе; и метанол (60 мл), воду (30 мл), NaOH (2,5 Н, 30 мл) получали в растворе. Температуру поддерживали при 5°С. Исходный раствор добавляли по каплям к последнему раствору в течение приблизительно 30-60 мин, и температуру раствора поддерживали при 5-10°С. После добавления вышеуказанный раствор добавляли по каплям к смешанному раствору хлорида цинка (42,6 г, 31,25 ммоль), концентрированной соляной кислоты (13 мл) и воды (17 мл), и температуру в течение добавления поддерживали при 0-10°С. После добавления реакцию проводили при комнатной температуре в течение 2-4 ч. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали отсасыванием при пониженном давлении и фильтровальный осадок промывали 40% раствором метанола несколько раз для получения 8,1 г продукта с выходом 77,7%. GC-MS: 217.
1
6
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 8,31 (d, J=13,6, 1H), 8,18 (d, J=8,4, 1H), 8,07 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,84 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,58 (m, 1H).
Синтез промежуточного соединения 27-2:
7-метокси-2-гидрокси-1-нафтальдегид (4,0 г, 19,802 ммоль), соединение 5-2 (6,5 г, 29,954 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл, добавляли 20 мл этилацетата и твердое вещество растворяли посредством нагревания. Затем ДАБЦО (2,2 г, 19,802 ммоль) добавляли и нагревали до появления конденсата при 80°С в течение 12 ч и цвет раствора возвращался к оранжевому. Реакционную смесь фильтровали отсасыванием и промывали этилацетатом для получения 3,0 г продукта с выходом 37,8%.
Синтез промежуточного соединения 27-3
3
Соединение 27-2 (2,72 г, 6,779 моль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл и ТГФ/СНОН (10: 1, 20 мл) добавляли для растворения твердого вещества. Боргидрид натрия (317 мг, 11,391 ммоль) добавляли к раствору по частям. Осушающую трубку устанавливали в горловину флакона, реакцию проводили в течение 20 мин при комнатной температуре и нормальном давлении, до получения прозрачного реакционного растовра. После завершения реакции к реакционному раствору добавляли воду для остановки реакции, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo, и осадок непоредственно применяли в следующей реакции.
Синтез соединения 27:
+
Полученное вышеуказанное соединение растворяли в 50 мл этанола и к раствору добавляли порошок цинка (4,53 г, 69,692 ммоль) и 8 мл 6 н. HCl. Реакцию проводили при 50°С в течение 2 ч. Порошок цинка фильтровали через диатомит. Растворитель выпаривали до сухости. Полученный осадок растоворяли в насыщенном водном гидроксиде натрия, экстрагировали дихлорметаном и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости и разделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 2:1) для получения 170 мг белого продукта. LC-MS: 374,15 (М+1).
1
6
1
2
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 7,77 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,70 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,64 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,59 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,51 (m, 1H), 7,12 (d, J=2,0 Hz, 1H), 7,05 (dd, J=8,8 Hz, J=2,4 Hz, 1H), 6,92 (d, J=8,8 Hz, 1H), 5,13 (d, J=8,8 Hz, 1H), 3,90 (s, 3H), 3,015 (s, 2H), 2,88 (m, 1H).
28. транс-(2RS,3RS)-8,9-диметокси-3-(2,4-дифторфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амин (соединение 28)
Синтез промежуточного соединения 28-1:
6,7-диметокси-2-гидрокси-1-нафтальдегид (200 мг, 0,862 ммоль), соединение 2 (319 мг, 1,724 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл, добавляли 20 мл этилацетата и твердое вещество растворяли при помощи нагревания. Затем ДАБЦО (97 мг, 0,862 ммоль) добавляли и нагревали до появления конденсата при 80°С в течение 12 ч, и цвет раствора возвращался к оранжевому. Реакционную смесь фильтровали отсасыванием и промывали этилацетатом для получения 150 мг продукта с выходом 44%.
Синтез промежуточного соединения 28-2:
3
Соединение 8 (48 мг, 0,120 моль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл и ТГФ/СНОН (10: 1, 5 мл) добавляли для растворения твердого вещества. Боргидрид натрия (9,08 мг, 0,240 ммоль) добавляли к раствору по частям. Осушающую трубку устанавливали в горловину флакона. Реакцию проводили в течение 20 мин при комнатной температуре и нормальном давлении до получения прозрачного реакционного раствора. После завершения реакции к реакционному раствору добавляли воду для остановки реакции, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo, и осадок непосредственно применяли в следующей реакции.
Синтез соединения 28:
+
Вышеуказанное полученное соединение растворяли в 50 мл этанола и к раствору добавляли порошок цинка (78 мг, 1,2 ммоль) и 2 мл 6 н. HCl. Реакцию проводили при 50°С в течение 2 ч. Реакционный раствор нейтрализовали насыщенным водным бикарбонатом натрия, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости и разделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 2:1) для получения 15 мг белого продукта. LC-MS: 272,20 (М+1).
1
6
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 7,59 (m, 2H), 7,31 (m, 2H), 7,16 (m, 1H), 7,10 (s, 1H), 6,89 (d, J=8,8 Hz, 1H), 4,90 (d, J=8,8 Hz, 1H), 3,92 (s, 3H), 3,86 (s, 3H), 3,43 (d, J=5,6 Hz, 1H), 3,29 (d, J=5,2 Hz, 1H), 2,83 (q, J=9,6 Hz, 1H).
29. транс-(2RS,3RS)-8,9-диметокси-3-фенил-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амин (соединение 29)
Синтез промежуточного соединения 29-1:
Бензальдегид (6,620 г, 62,46 ммоль), нитрометан (4 мл), метанол (10 мл) готовили в растворе; и метанол (60 мл), воду (30 мл), NaOH (2,5 Н, 30 мл) готовили в растворе. Температуру поддерживали при 5°С. Исходный раствор добавляли по каплям в последний раствор в течение приблизительно 30-60 мин, и температуру раствора поддерживали при 5-10°С. После добавления вышеуказанный раствор по каплям добавляли к смешанному раствору хлорида цинка (42,6 г, 31,25 ммоль), концентрированной соляной кислоты (13 мл) и воды (17 мл), и температуру в течение добавления поддерживали при 0-10°С. После добавления реакцию проводили при комнатной температуре в течение 2-4 ч. После завершения реакции реакционную смесь фильтровали отсасыванием при пониженном давлении и фильтровальный осадок промывали 40% раствором этанола несколько раз для получения 6,8 г продукта с выходом 73%. GC-MS: 149.
1
6
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 8,19 (q, J=13,6 Hz, 2H), 7,87 (d, J=7,2 Hz, 2H), 7,56-7,47 (m, 3H).
Синтез промежуточного соединения 29-2:
6,7-диметокси-2-гидрокси-1-нафтальдегид (200 мг, 0,862 ммоль), соединение 2 (257 мг, 1,724 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл, добавляли 20 мл этилацетата и твердое вещество растворяли посредством нагревания. Затем ДАБЦО (97 мг, 0,862 ммоль) добавляли и нагревали до появления конденсата при 80°С в течение 12 ч и цвет раствора возвращался к оранжевому. Реакционную смесь фильтровали отсасыванием и прмывали этилацетатом для получения 150 мг продукта с выходом 44%.
Синтез промежуточного соединения 29-3:
3
Соединение 8 (43,57 мг, 0,120 моль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл и ТГФ/СНОН (10: 1, 5 мл) добавляли для растворения твердого вещества. Боргидрид натрия (9,08 мг, 0,240 ммоль) добавляли к раствору по частям. Осушающую трубку устанавливали в горловину флакона. Реакцию проводили в течение 20 мин при комнатной температуре, экстрагировали этилацетатом, и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo, и осадок непосредственно применяли в следующей реакции.
Синтез соединения 29:
Вышеуказанное полученное соединение растворяли в 50 мл этанола и к раствору добавляли порошок цинка (78 мг, 1,2 ммоль) и 2 мл 6 н. HCl. Реакцию проводили при 50°С в течение 2 ч. Реакционный раствор нейтрализовали насыщенным водным бикарбонатом натрия, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости и разделяли при помощи клоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 4:1) для получения 14 мг белого продукта.
30. транс-(2RS,3RS)-8,9-диметокси-3-(2,4-дихлорфенил)-2,3-дигидро-1Н-бензо[f]-хроман-2-амин (соединение 30)
Синтез промежуточного соединения 30-1:
6,7-диметокси-2-гидрокси-1-нафтальдегид (200 мг, 0,862 ммоль), соединение 12-1 (374 мг, 1,724 ммоль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл, добавляли 20 мл этилацетата и твердое вещество растворяли посредством нагревания. Затем ДАБЦО (97 мг, 0,862 ммоль) добавляли и нагревали до появления конденсата при 80°С в течение 12 ч и цвет раствора возвращался к оранжевому. Реакционную смесь фильтровали отсасыванием и промывали этилацетатом для получения 150 мг продукта с выходом 44%.
Синтез промежуточного соединения 30-2:
3
Соединение 30-1 (52 мг, 0,120 моль) взвешивали во флаконе с круглым дном объемом 50 мл и ТГФ/СНОН (10: 1, 5 мл) добавляли для растворения твердого вещества. Боргидрид натрия (9,08 мг, 0,240 ммоль) добавляли к раствору по частям. Осушающую трубку устанавливали в горловину флакона. Реакцию проводили в течение 20 мин при комнатной температуре и нормальном давлении до получения прозрачного реакционного раствора. После завершения реакции к реакционному раствору добавляли воду для остановки реакции, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости in vacuo, и осадок непосредственно применяли в следующей реакции.
Синтез соединения 30:
+
Вышеуказанное полученное соединение ратсворяли в 50 мл этанола и к раствору добавляли порошок цинка (78 мг, 1,2 ммоль) и 2 мл 6 н. HCl. Реакцию проводили при 50°С в течение 2 ч. Реакционный раствор нейтрализовали водным бикарбонатом натрия, экстрагировали этилацетатом и высушивали над безводным сульфатом натрия. Раствор выпаривали до сухости и разделяли при помощи колоночной хроматографии (ПЭ:ЭА = 4:1) для получения 16 мг белого продукта. LC-MS: 404.05 (М+1).
1
6
H-NMR (400 MHz, DMSO-d): δ 7,69 (s, 1H), 7,59 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,57 (d, J=9,2 Hz, 1H), 7,50 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,10 (s, 1H), 6,90 (d, J=8,8 Hz, 1H), 5,09 (d, J=8,8 Hz, 1H), 3,91 (s, 3H), 3,86 (s, 3H), 3,47 (q, J=7,6 Hz, 1H), 3,27 (q, J=7,2 Hz, 1H), 2,87 (q, J=9,2 Hz, 1H).
Пример 31. DPP-4 ингибиторная активность соединений по изобретению
Авторы изобретения протестировали ингибиторную активность соединений по настоящему изобертению в отношениии DPP-4 при помощи следующего эксперимента на ферментативном уровне:
Оценка активности на ферментативном уровне:
Наименование: DPP-4 (дипептидилпептидаза 4); Иное название: CD26; ADABP; ADCP2; DPPIV; ТР103; Полное название: дипептидилпептидаза 4 (CD26, аденозиндеаминаза комплексообразующий белок.
Метод скрининга:
Наименование метода: оценка активности DPP-4, флуоресценция.
Оборудование: микропланшетный ридер Envision (PerkinElmer, USA).
Материал: DPP-4 человека, которая в данном эксперименте была получена посредством применения бакуловирусной экспрессионной системы в клетках насекомых. Субстрат представлял собой Gly-Pro-AMC.
Процесс:
DPP-4 может специфично гидролизовать субстрат, Gly-Pro-AMC для получения продукта, АМС, который при возбуждении УФ-светом при 355 нм, может испускать свет при 460 нм. Линейное изменение значений флуоресценции динамически измеряли при длине волны 460 нм на единицу времени, таким образом, вычисляя активность DPP-4. MERK-0431 применяли в качестве контрольного соединения в эксперименте.
Обработка образца:
Образец растворяли в ДМСО и хранили при низкой температуре и концентрацию ДМСО в конечной системе контролировали внутри диапазона, который не оказывал влияния на детекцию активности.
Обработка данных и описание результатов:
50
50
Для предварительного скрининга единственную концентрацию, например, 20 мкг/мл выбирали для тестирования активностей образца. Для образца, проявляющего активности при определенном условии, таком как скорость ингибирования свыше 50%, тестировали дозозависимую активность, т.е. IC/EC, которую получают за счет нелинейного изображения активности образца vs концентрации образца. Для вычисления применяли программное обеспечение Graphpad Prism 4, и модель, примененная для изображения, представляла собой сигмоидальный дозозависимый эффект (изменяемый наклон). Для большинства скрининговых моделей ингибитора, низ и верх экспериментальной кривой устанавливали как 0 и 100. Обычно, для каждого образца делали повторные лунки (n больше или равно 2), и результаты приведены в виде стандартного отклонения (СО) или ошибки среднего (ОС).
50
Данные активности показали, что ингибиторные IC значения соединений по настоящему изобретению в отношении DPP-4 составляют приблизительно нМ уровень, который составляет приблизительно 50 нМ и сравним с таковыми контрольных соединений, и некоторые из них могут даже достигать уровней менее 10 нМ (см. следующую таблицу).
50
Данные активности: ингибиторные IC значения соединений в отношении DPP-4
Таким образом, оценка активности на ферментативном уровне показала, что активности соединений по настоящему изобретению сравнимы или даже превосходят таковые существующих лекарственных средств.
Все документы, указанные в настоящем изобретении, включены в данный документ посредством ссылки, как если бы каждый документ был отдельно указанн. Кроме того, следует понимать, что специалисты в области техники могут производить различные изменения или модификации настоящего изобретения после прочтения руководтсва по настоящему изобретению, и такие эквиваленты также входят в объем прилагаемой формулы изобретения.