СПОСОБ КОМПЛЕКСНОЙ СЕРОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ РИККЕТСИОЗОВ И КОКСИЕЛЛЕЗА И МУЛЬТИПЛЕКСНАЯ ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ТЕСТ-СИСТЕМА ДЛЯ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ЭТОГО

1. Способ комплексной серологической диагностики риккетсиозов и коксиеллеза, основанный на использовании метода дот-анализа (дот-блота) и/или лайн-блоттинга, предусматривающий
разведение полученного для исследования образца сыворотки или плазмы крови человека 1:20-1:100,
инкубирование его в течение определенного времени при температуре 20-42°C для взаимодействия с антигенами риккетсий и коксиелл Бернета или их рекомбинантными или синтетическими аналогами, раздельно иммобилизованными на иммуносорбенте, твердой фазой которого является нитроцеллюлозная мембрана с диаметром пор 0.2-0.45 мкм,
промывание стрипа иммуносорбента,
инкубирование в течение определенного времени при температуре 20-42°C для взаимодействия с конъюгатом(ами) антител к классам или субклассам (изотипам) иммуноглобулинов человека с ферментативной или флуоресцентной метками,
промывание стрипа иммуносорбента,
после чего проводят колориметрическую с использованием субстратно-хромогенного раствора или флуоресцентную детекцию образовавшегося комплекса антиген-антитело на наличие специфических антител к антигенам, раздельно иммобилизованным на иммуносорбенте.
2. Мультиплексная тест-система для осуществления колориметрической детекции способа по п. 1, включающая
иммуносорбент с раздельно иммобилизованными на нитроцеллюлозной мембране в виде слотов (дот-блот) или линейно (лайн-блот) антигенами риккетсий и/или коксиелл Бернета и внутренними контрольными слотами или линиями для проверки валидности тест-системы;
конъюгат(ы) антител к классам или субклассам (изотипам) иммуноглобулинов человека с ферментативной меткой;
вспомогательные растворы: раствор для промывания иммуносорбента, раствор для разведения образцов и конъюгата(ов);
субстратно-хромогенный раствор;
дополнительно положительный и отрицательный контрольные образцы сывороток или плазмы крови человека, соответственно содержащих и не содержащих антитела к иммобилизованным антигенам;
инструкцию по применению.
3. Мультиплексная тест-система для осуществления флуоресцентной детекции способа по п. 1, включающая
иммуносорбент с раздельно иммобилизованными на нитроцеллюлозной мембране в виде спотов (дот-блот) или линейно (лайн-блот) антигенами риккетсий и/или коксиелл Бернета и внутренними контрольными слотами или линиями для проверки валидности тест-системы;
конъюгат(ы) антител к классам или субклассам (изотипам) иммуноглобулинов человека с флуоресцентной меткой;
вспомогательные растворы: раствор для промывания иммуносорбента, раствор для разведения образцов и конъюгата(ов);
дополнительно положительный и отрицательный контрольные образцы сывороток или плазмы крови человека, соответственно содержащих и не содержащих антитела к иммобилизованным антигенам;
инструкцию по применению.
4. Иммуносорбент по пп. 2 и 3 приготовлен на нитроцеллюлозной мембране с диаметром пор 0.2-0.45 мкм в виде стрипа с раздельно иммобилизованными антигенами риккетсий и/или коксиелл Бернета и внутренними контрольными спотами/линиями, причем положительный контроль теста может быть представлен антителами к иммуноглобулину G (IgG) человека и/или антителами к иммуноглобулину М (IgM) человека и/или IgG человека и/или IgM человека.
5. Иммобилизованные антигены риккетсий и коксиелл Бернета в составе иммуносорбента по п. 4 могут быть представлены специально приготовленными, очищенными корпускулярными и/или растворимыми и/или цельнорастворимыми и/или рекомбинантными антигенами и/или их синтетическими аналогами.
6. Иммобилизованные антигены по п. 5 представлены антигенами коксиелл Бернета в I и II фазовом состоянии и антигенами риккетсий из группы сыпного тифа и/или группы клещевой пятнистой лихорадки и/или предковой группы и/или антигенами других представителей рода Rickettsia, патогенных для человека, и/или Orientia tsutsugamushi.