Применение метода кристаллографии для изучения влагалищной жидкости

ляционного анализа с использованием коэффициента корреляции Пирсона и бисериального коэффициента.

Результаты. Средние значения длительности отрезков ЭКГ-сигнала (табл. 1) вариабельны в двух группах - у детей с тимомегалией и у детей с неувеличенной вилочковой железой. Увеличение длительности отрезков во 2-й группе мы связали со спадом ЧСС, наблюдаемой при апоптозе дополнительных путей проведения, задействованных в раннем детском возрасте.

Сравнительный анализ внутри каждой из групп позволяет сделать вывод, что у детей с тимомегалией в первой группе можно ожидать влияние данной патологии лишь на длину отрезка Тр, а во второй на Тр и БТ. Действительно, данные таблицы 4 позволяют говорить о слабом влиянии тимомигалии на длины именно данных отрезков ЭКГ, но оно не является статистически значимым и не может быть оценена как связь. В основном, тимомегалия слабо влияет на величину длительности отрезков. Кроме длин отрезков, нами были проанализированы их вероятностные распределения на основе вычисления коэффициентов управления. При этом нами учитывался факт, установленный в проведенных ранее исследованиях о том, что предметом реализации управляющих воздействий являются не сами показателя, а их вероятностные распределения (табл. 3).

Таблица 2

Влияние тимомегалии на длительность отрезков ЭКГ -сигнала

Коэф( эициенты корреляции

Р рО ОКБ БТ Т Тр

Группа 1 0,19 0,25 0,04 0,06 0,18 0,09

Группа 2 0,06 0,01 0,16 0,24 0,09 0,24

Анализируя данные табл. 3 надо отметить удивительное постоянство среднего коэффициента управления, полученного как среднеарифметическое всех коэффициентов управления, как у детей с тимомегалией, так и без нее. В связи с этим возникает вопрос о механизмах обеспечения данного постоянства.

Таблица 3

Коэффициента управления (И) отдельными отрезками ЭКГ-сигнала

Группа 1 Группа 2

р Тимомегалия 0,6±0,1 0,7±0,10

Неувеличеный тимус 0,6±17 0,58±0,05

pQ Тимомегалия 0,69±0,13 0,72±0,11

Неувеличеный тимус 0,73±0,13 0,71±0,67

Тимомегалия 0,75±0,1 0,7±0,11

Неувеличеный тимус 0,7±0,08 0,7±0,07

ЯТ Тимомегалия 0,54±0,11 0,7±0,07

Неувеличеный тимус 0,47±0,09 0,49±0,08

Т Тимомегалия 0,44±0,06 0,38±0,1

Неувеличеный тимус 0,41±0,09 0,35±0,1

Тр Тимомегалия 0,42±0,11 0,38±0,11

Неувеличеный тимус 0,33±0,2 0,33±0,11

Среднее значение коэф. управления Тимомегалия 0,57±0,78 0,57±0,09

Неувеличеный тимус 0,54±0,15 0,53±0,06

Поэтому мы оценили вклад отдельных коэффициентов управления в общий коэффициент путем анализа корреляционных связей (табл.4). Необходимо отметить, что в подростковом возрасте имеется слабая корреляция лишь с величиной коэффициента управления отрезком QRS. В остальных случаях зарегистрирована достоверность этой взаимосвязи, что расценено нами как автономный механизм гомеостатического регулирования, направленный на поддержание постоянства общего коэффициента управления ЭКГ-сигнала. Это означает, что изменение управления одним отрезком приводит к изменению коэффициента управления другим. В раннем детском возрасте в данном механизме участвуют только отрезки pQ и Тр.

Таблица 4

Корреляции значений коэффициента управления отдельными отрезками ЭКГ-сигнала с общим коэффициентом управления

Коэффициенты корреляции

Яр К-ят Ят ЯТр

Группа 1 0,37 0,59* 0,33 0,46 0,21 0,6*

Группа 2 0,63* 0,51* 0,24 0,73* 0,66* 0,67*

* р=0,05

Это может говорить о том, что в механизмы саморегуляции наиболее рано включаются функции проведения и реполяризации клеточной мембраны. В таком случае, возникает вопрос об уча-

стии системных процессов в механизмах удержания постоянства управления ЭКГ-сигналом. Сравнение данных табл. 3 внутри групп позволяет ожидать взаимосвязь между тимомегалией и управлением отрезками р и ST во 2-й группе и Тр в 1-й, а в табл. 5 представлены данные о влиянии тимомегалии на величины коэффициентов управления длинами отрезков.

Таблица 5

Коэффициенты корреляции наличия тимомегалии в двух группах с коэффициентами управления отрезками ЭКГ-сигнала

Коэффициенты корреляции

Р РQ QRS ят Т Тр

Группа №1 0,13 0,18 0,35 0,35 0,26 0,36

Группа №2 0,67* 0,06 0,005 0,25 0,2 0,26

* р=0,0,5

Необходимо обратить внимание, что в подростковом периоде выявлены достоверно сильные связи между тимомегалией и коэффициентом управления отрезком р (табл. 5). Мы оценили данный факт, как возможность позиционных изменений предсердий при увеличении средостения. У детей раннего детского возраста (табл. 5 группа 1) можно обсуждать влияние тимомегалии в регулировании вероятностного разнообразия длин отрезков, так как имеющиеся связи носят характер слабой зависимости. Данный факт, с нашей точки зрения, исключительно важен, так как указывает на роль системный воздействий, в том числе и тимуса, при реализации вероятностных распределений длин отрезков, направленных на поддержание постоянства управления ЭКГ-сигналом. Этот механизм перестает действовать в период пубертата, когда включается местный механизм саморегуляции.

Выводы. Установлено слабое влияние тимомегалии, реализованное на уровне регулирования вероятностными распределениями длин отрезков ЭКГ в раннем детском возрасте. Установлен факт поддержания постоянства управления вероятностным разнообразием длин отрезков ЭКГ в обеих изучаемых группах. В подростковом периоде это постоянство обеспечивается автономными механизмами саморегуляции, в раннем детском возрасте -системные механизмы регуляции.

Литература

1.Кузьменко Л.Г. // Педиатрия.- 2005,- №5.- С.76-84.

2.Кузьменко Л.Г. // Лечащий врач,- 2006.- №2.- С. 14-18

3.Ваганов П.Д. // Мед. научный и учебно-метод. ж.- 2004.-www.medic-21vek.ru.

4. Фролов В.А. и др. // Болезнь как нарушение информационного процесса.-М.: Изд-во РУДН.- 2006.

5.Мартынова М.И. и др. // Синдром увеличенной вилочковой железы у детей.- М.: Изд-во РУДН.- 1993.

УДК 618.15-008.87-07

ПРИМЕНЕНИЕ МЕТОДА КРИСТАЛЛОГРАФИИ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ ВЛАГАЛИЩНОЙ ЖИДКОСТИ

А.А. ОЛИНА, Т.И. КАРПУНИНА*

Кристаллизация биологических жидкостей (БЖ) организма - генетически обусловленный процесс, связанный с наличием в них определенных органических и неорганических компонентов [3]. Изучение феноменов, происходящих при высушивании (дра-инге) БЖ считается одним из перспективных направлений современной лабораторной диагностики. Комплексный системный подход к изучению этого процесса с позиций физикохимии, кристаллографии и принципов синергетики разработан и описан В. Н. Шабалиным и С.Н. Шатохиной [5]. На основании характера дра-инга можно объективно судить о химическом составе БЖ, а также об их интегральных поверхностно-активных, сорбционных и осмоактивных свойствах. С помощью специального приема дегидратации капли БЖ получают сухую пленку (фацию), которая представляет собой фиксированный тонкий срез исследуемой жидкости. Шабалин В.Н. и Шатохина С.Н. установили, что при переходе в твердую фазу в процессе самоорганизации (дегидра-

* Каф. микробиологии Пермской ГМА им. Е.А. Вагнера

тация, замораживание) БЖ структурируются и приобретают устойчивые морфологические формы [1, 4].

Понятие «функциональная морфология» является новым в биологии и медицине. Функциональная морфология биологических жидкостей - научное направление, отличающиеся принципиальной новизной по своим теоретическим основам, методике исследования и виду получаемой информации. Основным достоинством данного направления является получение оригинальных объективных и высоко значимых клинико-диагностических данных, позволяющих выявлять патологические отклонения на самых ранних этапах и контролировать изменения в динамике заболевания. Любые, как физиологические, так и патологические процессы, протекающие в живом организме, имеют в своей основе специфические белки и другие органические молекулы, которые в процессе самоорганизации БЖ формируют «мозаичные» структуры макроуровня, доступные для визуального анализа.

Кристаллографический метод в настоящее время используется для изучения различных биологических жидкостей: слеза, слюна, моча, пот и др. В доступной литературе мы не встретили данных по исследования влагалищной жидкости (ВЖ). Разработка способов изучения вагинального секрета при различных гинекологических заболеваниях представляет в настоящее время несомненную актуальность. Существующие критерии дифференциальной диагностики неспецифических инфекционных процессов во влагалище не учитывают изменений в составе ВЖ. В то же время, постоянство состава любой биологической жидкости поддерживается сбалансированным взаимодействием систем организма, что в целом и обеспечивает гомеостаз, а при локальных процессах изменение состояния специфических секретов более достоверно отражает нарушения в патологическом очаге.

Материалы исследования. Проведено изучение кристал-лограмм влагалищной жидкости (ВЖ) 8 пациенток с нормоцено-зом, 20 - с бактериальным вагинозом. Содержимое влагалища забирали шпателем, затем центрифугировали и супернатант отбирали автоматическим дозатором, с последующим нанесением на предметное стекло. Фации ВЖ получали методом клиновидной дегидратации [6] при комнатной температуре, относительной влажности воздуха 70% и времени ее формирования 24 часа. Полученный образец фотографировали с помощью бинокулярной лупы МБС-9 и цифровой фотокамеры ОЫМРИЯ. Анализ изображений вели с применением компьютерной программы ІМАОЕ-РЯО+ (1995г.), оценивали разделение фации влагалищной жидкости на центральную, промежуточную и периферическую зоны, их ширину, однородность, расположение и форму кристаллов.

Результаты. Изображение фации ВЖ условно здоровых пациенток (рис., а) имеет разграничение на зоны. Периферическая зона узкая, с единичными аркообразными структурами. Промежуточная - прозрачная, без кристаллов. Структура центральной зоны - зернистая, имеются сфероидные глыбки кристаллов с наибольшей концентрацией в центральной части.

Рис. Кристаллограмма ВЖ: а - при нормоценозе у здоровой женщины; б -при бактериальном вагинозе

При бактериальном вагинозе (рис., б) изменение качественного и количественного состава влагалищной микрофлоры, увеличение продуктов жизнедеятельности анаэробных микроорганизмов приводит к изменениям биохимического состава ВЖ, за счет чего в фации биожидкости увеличивается периферическая зона, в ней отсутствуют аркообразные элементы, но встречаются «токсические бляшки» - маркер распада (деструкции) тканей. Вся центральная часть заполнена папоротникообразными, древовидными кристаллами, промежуточная зона выражена, неоднородна, также содержит кристаллы. В результате драинга БЖ неорганические вещества скапливаются в центре, а белковые структуры локализуются на периферии фации. Ранее проведенные исследования биохимического состава ВЖ показывают [2],

что у здоровых женщин содержание белка составляет 18 мг/л, при этом авторы отмечают, что белок имеет транссудационное происхождение и зависит от состояния слизистой оболочки влагалища. При БВ выявлено увеличение содержания общего белка до 28 мг/л. Также при БВ отмечено 30-кратное увеличение трансферрина. В результате исследования содержания иммуноглобулинов нами зарегистрировано достоверное повышение количества І§М. Увеличение содержания белковых фракций в содержимом влагалища ведет к изменению структуры кристаллограм-мы - расширению периферической зоны.

Эпителий влагалища осуществляет активную реабсорбцию электролитов из влагалищной жидкости. При БВ клетки эпителия дезинтегрированы, процессы реабсорбции нарушены, что приводит к повышению содержания Ка+ и хлоридов. Концентрация Ка+ во ВЖ здоровых женщин составляет 93,36±3,71 ммоль/л, при БВ - 179,81±3,92 ммоль/л, хлоридов - 92,38±3,38 ммоль/л и 178,56 ±4,23 ммоль/л соответственно [2]. Вероятно, такие изменения состава ВЖ приводят к формированию древовидных структур в центральной зоне фации в процессе дегидратации. Изучение влагалищного содержимого является и фундаментальным, и прикладным направлением в медицине. Во-первых, ВЖ может быть рассмотрена как интегральная среда, по составу которой прямо или косвенно можно судить о состоянии всех отделов женской репродуктивной системы. Во-вторых, находящиеся во влагалище микроорганизмы в результате жизнедеятельности продуцируют ряд метаболитов, по содержанию которых можно судить о состоянии биоценоза и прогнозировать развитие и исход воспалительных заболеваний. В-третьих, по ряду некоторых биохимических и биофизических показателей можно понять закономерности формирования патологических процессов [2].

Таким образом, кристаллографический метод может применяться для изучения ВЖ при инфекционных заболеваниях влагалища. Он является простым в исполнении, отличается высокой информативностью, относится к неинвазивным диагностическим тестам, позволяет документировать полученные результаты и проводить сравнительную оценку данных до и после лечения.

Литература

1. Карпунина Т.И. и др. // Мат-лы науч. сессии ПГМА.-Пермь, 2008.- С.48-50.

2. Кира Е.Ф. Бактериальный вагиноз.- СПб.: Нева-Люкс,

2001.

3. Плаксина Г.В. и др. // Клин. лаб. диагностика.- 1999.-№ 10.- С. 34

4. Шабалин В.Н., Шатохина С.Н. // Бюлл. эксперим. биол. и медицины.- 1996.- №10.- С. 364-371.

5. Шабалин В.Н., Шатохина С.Н. Морфология биологических жидкостей человека.- М.: Хризостом, 2001.

6. Шабалин В.Н. Формообразование кристаллических структур биологических жидкостей при различных видах патологии: Метод.реком. МЗ РФ № 96/165.- 1998.- 35 с.

УДК 616.5+616.5-006-07

ПРОГНОЗИРОВАНИЕ ЗАБОЛЕВАНИЙ КОЖИ С УЧЕТОМ ВЗАИМООТНОШЕНИЙ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ИММУНИТЕТА

С.М. КОСТЕНКО, А.В. МАЛАНЧУК, С.Н. СЕМЕНОВ*

Проблеме прогнозирования вида и тяжести течения заболеваний кожи посвящено большое количество исследований. В качестве прогностических критериев одни исследователи используют такие показатели, как половая принадлежность, возраст, группа крови, социальный статус, место жительства, сопутствующая патология. Вычисление интегральных индексов на основе этих показателей позволяет оценивать риск развития рака кожи у лиц с кожными заболеваниями с целью проведения мероприятий по профилактике и выбору схемы лечения заболевания [1]. Другие исследователи предлагают для повышения точности прогноза атопического дерматита предлагают определять элек-трокинетическую активность ядер буккальных эпителиоцитов и количество которых определяют количество колониеобразующих единиц в смывах с пораженных участков кожи [2]. Перечислен-

*ВГМА им. Н.Н. Бурденко, г. Воронеж, ул. Студенческая, 10