ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ И ПРОФИЛАКТИКИ ЖЕЛЕЗОДЕФИЦИТНЫХ СОСТОЯНИЙ У ЖИВОТНЫХ
PREPARATION FOR TREATING AND PREVENTING IRON-DEFICIENT CONDITIONS IN ANIMALS

Изобретение относится к области ветеринарной медицины и касается средств для лечения и профилактики заболеваний животных, вызванных недостатком в их организме железа, преимущественно алиментарной анемии, вторичных анемий, а также для повышения сохранности и продуктивности сельскохозяйственных и плотоядных животных.
В настоящее время в России и в странах постсоветского пространства наиболее распространенными заболеваниями молодняка различных видов животных являются железодефицитная анемия или алиментарная гипохромная микроцитарная анемия.
Алиментарная анемия (физиологическая анемия, железодефицитная анемия) - заболевание, характеризующееся расстройством деятельности кроветворных органов у молодых животных. Данное заболевание встречается повсеместно, преимущественно в осенне-зимний и ранневесенний периоды, главным образом, у поросят в возрасте от 5 до 35 дней и реже у молодняка других видов животных. У заболевших животных отмечают уменьшение образования эритроцитов, низкое содержание гемоглобина, снижение устойчивости к другим заболеваниям, что наносит существенный экономический ущерб свиноводству. В большинстве хозяйств падеж достигает 10÷15% (1).
12
Анемия развивается в результате недостаточности в рационе или при нарушении усвоения организмом ряда веществ, которые обеспечивают нормальное функционирование органов кроветворения. К таким важнейшим веществам относятся: железо, цинк, кобальт, селен и витамин B. Анемия вторичного характера может развиваться в результате инвазионных и инфекционных заболеваний или при кровопотерях.
Основной причиной алиментарной анемии является дефицит железа. Железо является незаменимым металлом, необходимым для жизнедеятельности организма. Биологическая роль железа в организме состоит в том, что этот важнейший элемент входит в состав гемоглобина, ряда железосодержащих белков и ферментов, участвующих в тканевом окислении (каталаза, пероксидаза), а также в состав цитохромов, где данный элемент способствует перемещению электронов в дыхательной цепи.
++
Известно, что 60÷72% всего железа в организме находится в составе гемоглобина, в самой молекуле которого содержится 0,34% железа. В молекуле гемоглобина имеется 4 кольца гема, в каждом из которых порфирин связан с одним атомом двухвалентного железа Fe.
Дефицит железа приводит к снижению поступления его в костный мозг, в результате чего нарушается синтез гемоглобина и, следовательно, уменьшается содержание гемоглобина в эритроцитах. Одновременно уменьшается и количество эритроцитов. При развитии железодефицитной анемии происходит нарушение некоторых внутриклеточных функций из-за снижения содержания железосодержащих белков и ферментов, а также нарушения их активности.
Как правило, в кормах железо присутствует в составе различных соединений на достаточно высоком уровне, но это железо практически недоступно для организма новорожденных поросят по причине резкого снижения в их организме уровня гемоглобина в первые часы после рождения.
Из-за дефицита экзогенного биодоступного железа в организме нарушается процесс биосинтеза молекул гемоглобина, формирование эритроцитов, синтез белков плазмы крови. Это приводит к дисбалансу всех окислительно-восстановительных процессов, понижению сопротивляемости организма поросят к вторичным заболеваниям, и в итоге к выбраковке и гибели молодняка. Поэтому анемию предложено рассматривать как общепатологический процесс, сопровождающийся нарушением деятельности многих органов и систем организма животных.
Для гемопоэза особую роль играет также группа микроэлементов гемостимулирующего действия: цинк, кобальт и селен. При введении их в ничтожных количествах они оказывают стимулирующее и биокаталическое воздействие на процессы кроветворения (2).
Для лечения и профилактики алиментарной анемии используют железосодержащие препараты как для внутримышечного введения, так и для приема внутрь.
Практически все известные железосодержащие препараты для приема внутрь плохо переносятся, вызывая диспепсию. При этом выраженность диареи тем сильнее, чем больше останется в кишечнике не всосавшегося железа. В связи с этим оказывается невозможным провести курс лечения до конца и достигнуть желаемых результатов.
Инъекционные препараты представляют собой в основном смеси железа с лигандами различного происхождения: многоатомные спирты (сорбит), декстран, декстрин и т.п., которые вводят животным преимущественно с добавлением различных наборов солей микроэлементов.
Известен препарат «Ферроглюкин» для лечения и профилактики алиментарной анемии, содержащий смесь железа с низкомолекулярным декстраном и воды в эффективном соотношении (3).
Известен препарат «Фербитол» для лечения и профилактики железодефицитных состояний, содержащий смесь железа с сорбитом, лимонной кислоты, декстрина в качестве стабилизатора и воды в эффективном соотношении (4).
Известен препарат для лечения и профилактики анемии, содержащий смесь железа с гидразингидратом и воды в эффективном соотношении (5).
Известен препарат для лечения и профилактики анемии, содержащий смесь железа с крахмалом и воды в эффективном соотношении (6).
Известен препарат для лечения и профилактики алиментарной анемии, содержащий комплексное соединение железа с полимерным лигандом и воду. В качестве полимерного лиганда используют соединения, полученные при взаимодействии оксикарбоновой кислоты, многоатомного спирта и эпоксисоединения, или продукты, полученные при взаимодействии сахарозы, многоатомного спирта и эпоксисоединения в эффективном соотношении (7).
Известен препарат «Микроанемин» для лечения и профилактики алиментарной анемии, содержащий смесь железа с низкомолекулярным декстраном, меди и кобальта в следующих количествах, мг:
Железо
45,0÷78,0
Медь
0,05÷0,50
Кобальт
0,05÷0,50
Декстран
1000,0 (8).
Известен препарат «Биофер» для профилактики алиментарной анемии, содержащий жидкий экстракт алоэ и водный раствор ферроглюкина в эффективном соотношении (9).
Известен препарат «Ферокс» для профилактики алиментарной анемии, представляющий собой раствор Хенкса, обогащенный катионным железом в концентрации 1,0±0,15% (10).
Известен препарат для профилактики алиментарной анемии поросят, содержащий смесь железа с низкомолекулярным декстраном, меди, кобальта и селена при следующем соотношении компонентов, мг:
Железо
15,0÷18,7
Медь
149,0÷179,0
Кобальт
134,0÷167,0
Селен
5,5÷6,8
Декстран
до 100,0 мл (11).
1
2
6
Известен препарат «Suiferrovit» для лечения и профилактики алиментарной анемии, содержащий смесь инактивированной нормальной сыворотки крови свиней, железа с низкомолекулярным декстраном, кобальта, меди, кальция, витаминов B, B, B, РР и воды в эффективном соотношении (12).
Известен препарат «Ursoferran-100» для лечения и профилактики алиментарной анемии, содержащий в качестве действующего вещества комплекс железо (III) - декстран гептоновой кислоты и фенол в качестве консерванта в эффективном соотношении (13).
Известен препарат «Биоферринит» для лечения и профилактики железодефицитных состояний у животных, содержащий смесь коллоидного железа (III) с глюконовой кислотой в качестве лиганда, набора микроэлементов и воды, при этом в 1000,0 мг раствора препарата имеется: Fe(III) 50 мг, Cu(II) 0,16 мг, Zn(II) 0,1 мг, Co(II) 0,12 мг, Se(IV) 0,00015 мг и NaCl 0,9 мг (14).
1
Известен противоанемический и ростстимулирующий препарат для животных «Гемовит-плюс», содержащий комплекс железа, марганца, меди, цинка, кобальта, селена и йода с динатриевой или дикалиевой солью этилендиамин-N,N-диянтарной кислоты и воду при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Динатриевая или дикалиевая
соль этилендиамин-N,N<sup>1</sup>-
диянтарной кислоты
15,0÷25,0
Железо (III)
0,6÷5,0
Марганец (II)
0,5÷2,0
Медь (II)
0,05÷0,25
Цинк (II)
0,1÷1,5
Кобальт (II)
0,005÷0,05
Селен (IV)
0,01÷0,03
Йод (I)
0,01÷0,05
Вода
до 100,0,
при этом в качестве источника железа (III) и микроэлементов используют их неорганические соли, такие как сульфаты или хлориды, а в качестве источника селена (IV) - селенистокислый натрий или селенистую кислоту, а в качестве источника йода (I) - йодид калия или натрия (15).
1
Известен противоанемический и ростстимулирующий препарат для животных, содержащий комплекс железа, марганца, меди, кобальта, цинка, селена и йода с динатриевой или дикалиевой солью этилендиамин-N,N-диянтарной кислоты и воду при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Динатриевая или дикалиевая
соль этилендиамин -N,N<sup>1</sup>-
диянтарной кислоты
15,0÷25,0
Железо (III)
1,5÷5,5
Марганец (II)
0,25÷3,0
Медь (II)
0,12÷0,55
Кобальт (II)
0,05÷0,3
Цинк (II)
0,05÷1,5
Селен (IV)
0,03÷0,06
Йод (I)
0,01÷0,08
Вода
до 100,0,
при этом в качестве источника йода (I) он содержит йодистый натрий и/или йодистый калий (16).
Известен противоанемический и ростстимулирующий препарат, содержащий хелатный комплекс железа, марганца, цинка, меди, кобальта, селена и йода с тринатриевой или дикалиевой солью метионинянтарной (α-амино-γ-метилтиомасляной-N-янтарной) кислоты и воду при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Тринатриевая соль
метионинянтарной кислоты
15,0÷40,0
Железо (III)
1,0÷5,5
Марганец (II)
0,25÷3,0
Медь (II)
0,1÷0,55
Цинк (II)
0,1÷0,55
Кобальт (II)
0,02÷0,3
Селен (IV)
0,02÷0,06
Йод (I)
0,01÷0,08
Вода
до 100,0 (17).
1
Известен противоанемический и ростстимулирующий препарат для животных, содержащий комплекс железа, марганца, меди, кобальта, селена, цинка и йода с динатриевой или дикалиевой солью этилендиамин-N,N-диянтарной кислоты и воду при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Динатриевая или дикалиевая
соль этилендиамин-N,N<sup>1</sup>-
диянтарной кислоты
15,0÷25,0
Железо (III)
1,5÷5,5
Марганец (II)
0,25÷3,0
Медь (II)
0,12÷0,55
Кобальт (II)
от более 0,05 до 0,3
Цинк (II)
0,05÷1,5
Селен (IV)
от более 0,03 до 0,06
Йод (I)
0,01÷0,08
Вода
до 100,0,
при этом в качестве источника йода (I) он содержит йодистый натрий и/или йодистый калий (18).
1
Известен противоанемический и ростстимулирующий препарат для животных, содержащий комплекс железа, марганца, меди, цинка, кобальта, селена и йода с динатриевой или дикалиевой солью этилендиамин-N,N-диянтарной кислоты, набор витаминов и воду при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Динатриевая или дикалиевая
соль этилендиамин-N,N<sup>1</sup>-
диянтарной кислоты
15,0-35,0
Железо (III)
0,6÷4,0
Марганец (II)
0,5÷2,5
Медь (II)
0,05÷0,25
Цинк (II)
0,3÷2,5
Кобальт (II)
0,005÷0,05
Селен (IV)
0,01÷0,03
Йод (I)
0,03÷0,08
Витамины:
А
0,006÷1,2
Д<sub>3</sub>
0,00006÷0,0015
Е
0,1÷3,5
B<sub>1</sub>
0,005÷0,2
B<sub>2</sub>
0,01÷0,25
B<sub>3</sub>
0,02÷0,3
B<sub>4</sub>
5,5÷20,0
B<sub>5</sub>
0,04÷1,4
B<sub>6</sub>
0,005÷0,12
Вода
до 100,0,-
при этом в качестве источника железа (III) и микроэлементов используют их неорганические соли, такие как сульфаты или хлориды, а в качестве источника селена (IV) - селенистокислый натрий или селенистую кислоту, а в качестве источника йода (I) - йодид калия или натрия (19).
Известно лекарственное средство для лечения железодефицитных анемий, содержащее фербитол и желатин при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Фербитол
80,0÷99,0
Желатин
1,0÷20,0 (20).
1
Известна композиция для профилактики и лечения анемии сельскохозяйственных животных и птицы, содержащая смесь комплексонатов железа, меди, цинка, кобальта, натрия и кальция с этилендиамин-N,N-диянтарной кислотой при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Комплексонат меди
с этилендиамин-N,N<sup>1</sup>-
диянтарной кислотой
0,45÷0,60
Комплексонат цинка
с этилендиамин-N,N<sup>1</sup>-
диянтарной кислотой
1,40÷1,45
Комплексонат кобальта
с этилендиамин-N,N<sup>1</sup>-
диянтарной кислотой
0,075÷0,08
Комплексонат натрия
с этилендиамин-N,N<sup>1</sup>-
диянтарной кислотой
42,0÷44,0
Комплексонат кальция
с этилендиамин-N,N<sup>1</sup>-
диянтарной кислотой
12,0-13,0
Комплексонат железа
с этилендиамин-N,N<sup>1</sup>-
диянтарной кислотой
до 100,0 (21).
Известен препарат для профилактики и лечения анемии, коррекции нарушений обмена веществ у сельскохозяйственных животных, содержащий смесь железа с крахмалом в качестве лиганда, сульфата меди, сернокислого марганца, гидролизата казеина панкреатического и воды при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Железо
3,0÷3,5
Крахмал
16,0÷18,0
Меди сульфат
0,005÷0,006
Марганец сернокислый
0,005÷0,006
Гидролизат казеина
Панкреатический
1,2÷1,5
Вода
до 100,0 (22).
1
Известен противоанемический и ростстимулирующий препарат для животных, содержащий хелатный комплекс железа, марганца, цинка, меди, кобальта, селена и йода с динатриевой или дикалиевой солью этилендиамин-N,N-диянтарной кислоты и воду при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Динатриевая или дикалиевая
соль этилендиамин-N,N<sup>1</sup>-
диянтарной кислоты
25,1÷57,5
Железо (III)
0,5÷5,5
Марганец (II)
0,25÷4,9
Цинк (II)
0,05÷2,0
Медь (II)
0,10÷0,55
Кобальт (II)
0,05÷0,3
Йод (I)
0,01÷0,08
Селен (IV)
0,01÷0,06
Вода
до 100,0 (23).
Известно железосодержащее средство для профилактики и лечения анемии у животных, содержащее железодекстран и сорбитол при следующем соотношении компонентов, мас.%:
Железодекстран
78,0÷90,0
Сорбитол
10,0÷22,0 (24).
Недостатки известных препаратов состоят в их ограниченной терапевтической и профилактической эффективности и токсичности, обусловленных присутствием в их составе значительного количества несвязанного железа, размерной неоднородностью частиц железосодержащих комплексов и изменением их дисперсности (образование агломератов) и стабильности при хранении, что приводит к неполному всасыванию железа в результате недостатка или нарушения выработки биологически активных веществ - гемостимуляторов в организме больных животных.
3
Известен также препарат «Тритон Х-100» (полиэтиленгликоля моно (тетраметилбутанол) фениловый эфир), химическая формула С14Н220 (С2Н40) с n=9÷10, молекулярная масса ~ 625 г/моль, вязкая жидкость, плотность 1,07 г/см, используемый преимущественно в биохимических и вирусологических лабораториях в качестве детергента при выделении и очистке различных биопрепаратов (25÷48).
Недостатки вышеуказанных препаратов для лечения и профилактики железодефицитных состояний у животных частично устранены в препарате для лечения и профилактики железодефицитных состояний у животных, содержащем смесь коллоидного железа (III) с полиоксиэтиленлауриновым спиртом в качестве лиганда, микроэлементов меди (II), цинка (II), кобальта (II), селена (IV) и воды при следующем соотношении компонентов, мг:
Коллоидное железо (III)
50,0÷60,0
Полиоксиэтиленлауриновый спирт
0,1÷0,3
Медь (II)
0,1÷0,3
Цинк (II)
0,1÷0,3
Кобальт (II)
0,1÷0,3
Селен (IV)
0,001÷0,005
Вода
до 1000,0,
при этом препарат может дополнительно содержать глюкозу в количестве 30,0÷50,0 мг и поливиниловый спирт в количестве 0,2÷0,6 мг (49).
Указанный препарат взят заявителем в качестве прототипа.
Недостатки препарата-прототипа состоят в его незначительной токсичности и высокой себестоимости.
Задача, на решение которой направлено настоящее изобретение, заключается в расширении арсенала препаратов для лечения и профилактики железодефицитных состояний у животных, обладающих высокой терапевтической и профилактической эффективностью, низкой токсичностью и себестоимостью.
Указанная задача решена созданием препарата для лечения и профилактики железодефицитных состояний у животных, охарактеризованного следующей совокупностью признаков. Предлагаемый препарат (авторское наименование «Комплигем») содержит смесь коллоидного железа (III) с лигандом, набора микроэлементов и воды, причем в качестве лиганда он содержит препарат Тритон Х-100 (полиэтиленгликоля моно (тетраметилбутанол) фениловый эфир), а в качестве микроэлементов цинк, кобальт и селен при следующем соотношении ингредиентов, мг:
Коллоидное железо (III)
35,0÷45,0
Тритон Х-100
0,2÷0,6
Цинк (II)
0,1÷0,3
Кобальт (II)
0,05÷0,15
Селен (IV)
0,02÷0,04
Вода
до 1000,0.
В качестве источника железа (III) и микроэлементов используют их неорганические соли, такие как хлориды, а в качестве источника селена - селенистокислый натрий или селенистую кислоту.
При необходимости для улучшения всасывания железа в организме животного предлагаемый препарат может содержать дополнительно глюкозу предпочтительно в количестве 30,0÷50,0 мг.
При необходимости для создания в организме животного депо предлагаемого препарата он может содержать дополнительно поливиниловый спирт предпочтительно в количестве 0,2÷0,6 мг.
Предлагаемое изобретение включает следующую совокупность существенных признаков, обеспечивающих получение технического результата во всех случаях, на которые испрашивается правовая охрана.
1. Препарат для лечения и профилактики железодефицитных состояний у животных.
2. Коллоидное железо (III) в количестве 35,0÷45,0 мг.
3. Тритон Х-100 в качестве лиганда в количестве 0,2÷0,6 мг.
4. Цинк (II) в количестве 0,1÷0,3 мг.
5. Кобальт (II) в количестве 0,05÷0,15 мг.
6. Селен (IV) в количестве 0,02÷0,04 мг.
7. Вода в количестве до 1000,0 мг.
Признаками изобретения, характеризующими предлагаемый препарат и совпадающими с признаками прототипа, в том числе родовое понятие, отражающее назначение, являются:
1. Препарат для лечения и профилактики железодефицитных состояний у животных.
2. Коллоидное железо (III).
3. Лиганд.
4. Цинк.
5. Кобальт.
6. Селен.
7. Вода.
По сравнению с препаратом-прототипом существенным отличительным признаком предлагаемого изобретения является то, что в качестве лиганда оно содержит Тритон Х-100.
Предлагаемое изобретение содержит такие другие отличительные признаки, выражающие конкретные формы выполнения или особые условия его использования.
1. Препарат содержит в качестве источника коллоидного железа (III) и микроэлементов их неорганические соли, такие как хлориды, а в качестве источника селена - селенистокислый натрий или селенистую кислоту.
2. Препарат содержит дополнительно глюкозу предпочтительно в количестве 30,0÷50,0 мг.
3. Препарат содержит дополнительно поливиниловый спирт предпочтительно в количестве 0,2÷0,6 мг.
Предлагаемое изобретение расширяет арсенал препаратов для лечения и профилактики железодефицитных состояний у животных, обладает высокой терапевтической и профилактической эффективностью за счет снижения токсичности, хорошей переносимости, сохранении дисперсности и стабильности железосодержащего комплекса при хранении, а также более низкой себестоимостью при изготовлении. Себестоимость изготовления препарата «Комплигем» в два раза ниже себестоимости изготовления препарата-прототипа.
Достижение технического результата от использования предлагаемого изобретения объясняется тем, что авторами настоящего изобретения обнаружено новое свойство Тритона Х-100 в заявленном диапазоне концентраций в составе препарата «Комплигем» - стабилизировать коллоидное железо (III) с приданием ему фармакологических свойств и агрегативно устойчивой формы суспензии железосодержащего комплекса при длительном хранении.
В результате взаимодействия частиц коллоидного железа (III) с Тритоном Х-100 между ними возникают прочные физико-химические связи, приводящие к образованию на частицах коллоидного железа (III) поверхности, обладающей гидрофильными свойствами, что придает частицам комплекса фармакологические свойства. Степень гидрофилизации частиц коллоидного железа (III) оценивали по теплоте взаимодействия исходных ингредиентов.
Обработка коллоидного железа (III) Тритоном Х-100 в заявленном диапазоне концентраций позволяет получить железосодержащий комплекс однородным по размеру и поддерживать его в дисперсном и стабильном состоянии длительное время. Полученное соединение выдерживает кипячение, а также неоднократное замораживание до -20°C с последующим оттаиванием.
Кроме того, присутствие в предлагаемом препарате глюкозы в заявляемой концентрации улучшает всасывание железа в организме животного.
Присутствие в предлагаемом препарате поливинилового спирта в заявляемой концентрации позволяет создать в организме животного депо препарата после его введения. Адсорбируясь на частицах железосодержащего комплекса, молекулы поливинилового спирта образуют вокруг частиц комплекса сольвантные оболочки и превращают суспензию комплекса в кинематически устойчивую форму, что приводит к образованию депо препарата при введении его в организм животного. Препарат депонируется в печени и кровеносных органах. Депонирование препарата обеспечивает лучшее распределение действующего вещества в организме животного, пролонгирование его действия, не вызывает неблагоприятной реакции его тканей и сокращает сроки лечения больных животных. Препарат усиливает окислительно-восстановительные реакции и процессы кроветворения, способствует повышению синтеза гемоглобина, миоглобина, увеличивает проницаемость клеточных мембран, активизирует водно-солевой обмен, а также действие микроэлементзависимых (селен, железо, кобальт и цинк) ферментов.
Кроме того, препарат «Комплигем» не содержит ионов меди, так как медь и цинк в сумме предположительно вызывают заболевание Альцгеймера (50,51).
Эффективность предлагаемого препарата пояснена примерами его использования, что не ограничивает объем изобретения.
Пример 1.
3
2
4
3
2
3
3
Железо хлорное (FeCl *6HO) в количестве 15,5÷16,0 кг растворяют в 30 л дистиллированной воды. Полученный раствор фильтруют и переносят в реактор. При постоянной работе мешалки в реактор подают тонкой струйкой насыщенный раствор карбоната аммония [NН(CO)] со средней скоростью 100 см/мин в объеме 22÷25 дм для установления рН реакционной смеси в интервале значений 6,8÷7,2. В процессе внесения в реактор насыщенного раствора карбоната аммония в интервале значений рН 3,3÷3,8 образуется гель коллоидного железа, который разбивается интенсивным перемешиванием и добавлением насыщенного раствора карбоната аммония.
4
2
2
3
Полученный раствор коллоидного железа подвергают ультрафильтрации с одновременным диализом водопроводной водой для освобождения раствора коллоидного железа от хлористого аммония (NHCl) и углекислого газа (СO), образующегося в результате реакции железа хлорного с карбонатом аммония. Окончание диализа определяют по отсутствию ионов хлора в воде, выходящей из ультрафильтрационного аппарата в реакции с азотнокислым серебром (АgNO). По окончании диализа рН раствора коллоидного железа устанавливают в пределах 9,0÷9,2 добавлением 10% раствора гидроокиси натрия (NaOH) и при постоянном перемешивании реакционную смесь оставляют на 8÷10 часов. После этого реакционную смесь нейтрализуют добавлением лимонной кислоты до рН 6,5÷6,8 и подогревают до 80÷85°С, не выключая мешалку. В это время цвет реакционной смеси меняется от красно-бурого до темно-красного (черного) опалесцирующего с образованием в растворе черного конуса, что свидетельствует о получении коллоидного железа. Для получения железосодержащего комплекса в горячий раствор коллоидного железа вносят смесь из Тритона Х-100, глюкозы и поливинилового спирта с таким расчетом, чтобы конечная концентрация Тритона Х-100, глюкозы и поливинилового спирта в 1000,0 мг препарата составляла 0,2÷0,6 мг; 30,0÷50,0 мг и 0,2÷0,6 мг соответственно. В результате взаимодействия частиц коллоидного железа с Тритоном Х-100 в заявляемой концентрации между ними возникают прочные физико-химические связи, приводящие к сохранению дисперсности и стабильности железосодержащего комплекса при хранении и образованию на частицах коллоидного железа поверхности, обладающей гидрофильными свойствами, что придает частицам полученного комплекса фармакологические свойства.
Глюкозу в заявляемом диапазоне концентраций используют в препарате для улучшения всасывания железа в организме животного.
Поливиниловый спирт в заявляемом диапазоне концентраций используют для создания в организме животного депо предлагаемого препарата после его введения.
Содержание коллоидного железа в 1000,0 мг препарата должно составлять 35,0÷45,0 мг. В случае, если концентрация коллоидного железа отличается от вышеуказанной, раствор концентрируют или разбавляют на ультрафильтрационной установке.
2
2
2
2
3
++
++
++
После этого раствор охлаждают до 60°С, фильтруют через ионообменную смолу, измеряют объем полученного комплекса и добавляют к нему набор микроэлементов в виде их солей: ZnCl, CoCl*6HO и NаSeO - с таким расчетом, чтобы содержание ионов Zn и Со в 1000,0 мг препарата составляло 0,1÷0,3 мг и 0,05÷0,15 мг соответственно, a Se в пределах 0,02÷0,04 мг. При этом каждую соль растворяют отдельно в 0,5 л дистиллированной воды, раствор доводят до кипения и кипящий раствор вносят тонкой струйкой в раствор железосодержащего комплекса при интенсивном перемешивании. Препарат получают в виде водного раствора, представляющего собой жидкость темно-коричневого цвета с рН 6,5÷7,5.
Оптимальная рецептура предлагаемого препарата приведена в таблице 1.
Полученный препарат подвергают контролю на специфическую активность, а также клинико-биологическим и лечебно-профилактическим испытаниям на лабораторных и сельскохозяйственных животных, а также на плотоядных.
Прошедший контроль препарат «Комплигем» применяют для лечения и профилактики заболеваний животных, вызванных недостатком в их организме железа, преимущественно алиментарной анемии, вторичных анемий, а также для повышения сохранности и продуктивности сельскохозяйственных и плотоядных животных. Препарат вводят животным внутримышечно в область шеи или бедра один раз в сутки.
С профилактической целью препарат вводят животным однократно в следующих дозах:
- коровам за 20÷40 дней до отела - 500÷1000 мг на 40 кг живой массы;
- телятам 1÷2-дневного возраста - 2000÷4000 мг;
- супоросным свиньям за 20÷25 дней до опороса - 3000÷5000 мг;
- поросятам 2÷4-дневного возраста - 1000÷2000 мг в зависимости от веса;
- собакам и пушным зверям - 500 мг на 10 кг живой массы;
- кошкам и кроликам - 100 мг на 1 кг живой массы.
С лечебной целью - в тех же дозах двукратно с интервалом 10÷14 суток.
Для сравнительной проверки эффективности препарата «Комплигем» и препарата-прототипа изготовили по 3 серии указанных препаратов, по одной для различных концентраций ингредиентов препаратов.
Пример 2.
Испытания по определению биодоступности коллоидного железа из препарата «Комплигем», полученного так, как описано в примере 1, и содержащего, мг:
Коллоидное железо (III)
40,0
Тритон Х-100
0,4
Цинк (II)
0,2
Кобальт (II)
0,1
Селен (IV)
0,03
Вода
до 1000,0,
проведены в сравнении с препаратом-прототипом на самцах белых беспородных крыс весом 150÷200 г. Для проведения опыта были сформированы три группы животных по 10 голов в каждой. В первую и вторую группы были отобраны животные с железодефицитной анемией, а в третью группу - нормальные крысы в качестве контроля. Животным первой и второй групп вводили подкожно препарат «Комплигем» и препарат-прототип соответственно в дозах 200 мг. Через 2, 4 и 6 часов после введения препаратов у животных брали кровь и определяли содержание железа в сыворотке крови. Установлено, что у животных с дефицитом железа содержание железа в сыворотке крови, взятой через 4 часа после введения препаратов, было одинаковым.
Пример 3.
Проведены испытания препарата «Комплигем», изготовленного так, как описано в примере 1, и содержащего, мг:
Коллоидное железо (III)
40,0
Тритон Х-100
0,4
Цинк (II)
0,2
Кобальт (II)
0,1
Селен (IV)
0,03
Вода
до 1000,0,
на острую токсичность.
50
Испытание проводилось по ГФК1, вып.2, 1987, с.182 на здоровых белых мышах обоего пола массой 19÷21 г. Каждую серию препарата испытывали на 5 мышах, тест-дозы разводили в 2 раза водой для инъекций и вводили мышам внутрибрюшинно в количестве 200 мг. Наблюдение за животными вели 48 часов. В конце опыта мыши подвергались вскрытию, при этом не было обнаружено каких-либо специфических патологий. Гибели животных также не наблюдалось ни в одной группе. Проведенные исследования показали, что основные параметры острой токсичности - минимальная смертельная доза и ЛД не были достигнуты на лабораторных животных, несмотря на использование доз, предельно возможных для выбранных путей введения - 200 мг.
Таким образом, препарат «Комплигем» является нетоксичным для этого вида животных.
Пример 4.
Проведены испытания препарата «Комплигем», изготовленного так, как описано в примере 1, и содержащего, мг:
Коллоидное железо (III)
40,0
Тритон Х-100
0,4
Цинк (II)
0,2
Кобальт (II)
0,1
Селен (IV)
0,03
Вода
до 1000,0,
на субхроническую токсичность на базе питомника УВД г.Владимира на 24 собаках породы Восточно-европейская овчарка массой 40÷50 кг, находившихся в одинаковых условиях кормления и содержания. Подопытных животных по принципу аналогов разделили на 3 группы по 8 голов в каждой и взяли кровь для гематологического исследования. Препарат «Комплигем» вводили внутримышечно трехкратно с интервалом в 10 дней в следующих дозах:
1 группа - 6000 мг (трехкратная терапевтическая доза);
2 группа - 2000 мг (терапевтическая доза);
3 группа - контрольная группа (по 2000 мг физиологического раствора).
В течение всего опыта вели наблюдение за клиническим состоянием собак. Через сутки после последнего введения препарата была взята кровь для проведения исследований (количество эритроцитов, лейкоцитов, гемоглобина, лейкоцитарная формула). В процессе опыта гибели животных и кожно-раздражающего (аллергического) действия на организм животных не было отмечено. Результаты клинико-биологических исследований представлены в таблице 2.
Согласно данным таблицы 2 установлено, что при трехкратном введении увеличенной в 3 раза терапевтической дозы (6000 мг) препарата (1 группа животных) и терапевтической дозы (2000 мг) препарата (2 группа животных) все клинико-биологические показатели крови у опытных животных находились в пределах физиологической нормы и не отличались от аналогичных показателей контрольной группы животных.
Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что длительное применение препарата «Комплигем» не оказывает токсического воздействия и не вызывает функциональных изменений в организме собак. Анализ полученных результатов свидетельствует о безвредности препарата для животных.
Пример 5.
Проведены исследования препарата «Комплигем», изготовленного так, как описано в примере 1, и содержащего, мг:
Коллоидное железо (III)
40,0
Тритон Х-100
0,4
Цинк (II)
0,2
Кобальт (II)
0,1
Селен (IV)
0,03
Вода
до 1000,0,
3
3
на кумулятивное действие на 120 головах белых крыс массой 120÷160 г, которым вводили препарат в течение 3 месяцев в дозе 500 мг с интервалом 14 дней. Контрольным животным вводили 0,5 смизотонического раствора хлористого натрия. После окончания опыта животных декапитировали, собирали кровь и извлекали почки и печень. На каждую экспозицию использовали по 10 крыс. Брали определенные навески ткани печени и почек, а также сыворотки крови, помещали в бюксы, высушивали при 105°С до постоянной массы и проводили озоление в присутствии азотной кислоты. Сырую золу прокаливали при 500°С и после охлаждения растворяли в 0,1N НNO, фильтровали и определяли содержание элементарного железа в тканях с помощью атомно-абсорбционной спектроскопии. Результаты исследований по определению содержания элементарного железа в сыворотке крови, печени и почках представлены в таблице 3.
Согласно данным таблицы 3 после введения в течение 3 месяцев крысам препарата «Комплигем» происходило существенное увеличение содержания железа в сыворотке крови, почках и печени по сранению с контролем. Это свидетельствует о том, что происходило усвоение организмом коллоидного железа из препарата и включение его сывороточные белки и гемоглобин, а также депонирование железа в клетках печени. Содержание элементарного железа в этих органах и тканях опытных животных находилось в пределах физиологической нормы. Таким образом, при длительном введении животным препарата «Комплигем» не происходило кумулятивного накопления железа ни в печени, ни в почках, а также в сыворотке крови за исследуемый период времени.
Пример 6.
Проведены исследования препарата «Комплигем», изготовленного так, как описано в примере 1, и содержащего, мг:
Коллоидное железо (III)
40,0
Тритон Х-100
0,4
Цинк (II)
0,2
Кобальт (II)
0,1
Селен (IV)
0,03
Вода
до 1000,0,
на мутагенное действие на белых крысах-самцах весом 210÷230 г. Из животных формировали группы по 6÷10 голов в каждой. Препарат «Комплигем» вводили самцам белых крыс внутримышечно по 200 мг трехкратно в течение месяца. Самцов подсаживали к самкам на 7÷10 сутки после введения препарата с целью их оплодотворения. Беременных животных вскрывали на 17÷19 день беременности, подсчитывали у них количество желтых тел беременности, число живых и погибших эмбрионов. У каждой самки определялись общеэмбриональная, доимплантационная и постимплантационная смертность. Для анателофазного анализа использовался костный мозг бедренных костей крыс-самцов, который извлекался сразу после декапитации животного. Анализ анателофаз проводился на препаратах костного мозга, окрашенных ацетокармином. Учитывались хромосомные и хроматидные мосты, одиночные и парные фрагменты, слипания. От каждого животного анализировалось не менее 300 клеток. Подсчитывался процент хромосомных перестроек и митотический индекс. Результаты цитогенетического анализа клеток мозга на стадиях метафазы и анафазы представлены в таблице 4.
Согласно данным таблицы 4 количество хромосомных аббераций у животных, подвергавшихся воздействию препарата «Комплигем» как в условиях однократного, так и повторного эксперимента достоверно не отличалось от контроля и не выходило за границы спонтанного уровня мутаций для данного вида животных.
Мутагенное действие препарата «Комплигем» после месячного воздействия представлены в таблице 5.
Исследование половых клеток животных, подвергавшихся воздействию «Комплигема» на всех стадиях развития сперматогенеза показало отсутствие повышенной гибели плодов до и после имплантации.
Метафазный анализ клеток костного мозга белых крыс после применения препарата «Комплигем» представлен в таблице 6.
Проведенные исследования показали, что однократное и многократное применение препарата «Комплигем» не вызывает мутагенных перестроек в организме животных.
Пример 7.
Проведены исследования препарата «Комплигем», изготовленного так, как описано в примере 1, и содержащего, мг:
Коллоидное железо (III)
40,0
Тритон Х-100
0,4
Цинк (II)
0,2
Кобальт (II)
0,1
Селен (IV)
0,03
Вода
до 1000,0,
3
на фармакокинетическое действие на 36 крысах массой 120÷200 г. Животных разделили на две группы. Первой группе животных вводили препарат «Комплигем» в дозе 200 мг/голова. Животным второй группы вводили физиологический раствор в том же количестве. Через 0,5; 1,0; 2,0; 3,0; 5,0 и 24,0 ч животных декапитировали, собирали кровь и извлекали почки и печень. Определенные навески ткани печени и почек, а также сыворотки крови помещали в бюксы, высушивали при 105°С до постоянной массы и проводили озоление в присутствии азотной кислоты. Сырую золу прокаливали при 500°С и после охлаждения растворяли в 0.1N НNO, фильтровали и определяли содержание элементарного железа в тканях с помощью атомно-абсорбционной спектроскопии. На каждую экспозицию использовали по 2÷3 крысы. Данные по содержанию элементарного железа в крови и печени представлены в таблице 7.
Результаты исследований, представленные в таблице 7, показывают, что после введения крысам препарата «Комплигем» происходило некоторое увеличение содержания железа в сыворотке крови и печени спустя 30÷60 минут. Это свидетельствует о том, что происходило усвоение организмом крыс коллоидного железа из препарата и включение его сывороточные белки, а также депонирование железа в клетках печени.
Пример 8.
Проведены сравнительные испытания эффективности 1-й серии препарата «Комплигем», изготовленного так, как описано в примере 1, и содержащего, мг:
Коллоидное железо (III)
35,0
Тритон Х-100
0,2
Цинк (II)
0,1
Кобальт (II)
0,05
Селен (IV)
0,02
Вода
до 1000,0,
и 1-й серии препарата-прототипа при профилактике алиментарной анемии поросят и их влиянии на энергию роста и развитие животных.
Объемные дозы и сроки введения внутримышечно обоих препаратов животным в данном опыте были выбраны одинаковыми.
Для проведения исследований были сформированы три группы поросят по 5 голов в каждой из одного помета. Опыты проводились в трехкратной повторности. Первой группе поросят 3-дневного возраста вводили в заушную область тела по 1500 мг препарата «Комплигем». Второй группе животных инъецировали таким же образом по 1500 мг препарата-прототипа. Третья группа служила контролем. Повторные инъекции противоанемических препаратов проводили через 10 дней.
Исследование крови проводили на 3, 10, 21 и 28 дни жизни животных. Наиболее тяжелое течение анемии наблюдалось в контрольной группе в 3-недельном возрасте. В таблице 8 представлены гематологические показатели поросят этого возраста. Интенсивность роста определяли по живой массе поросят при их отъеме на 28 день.
Согласно данным таблицы 8 препарат «Комплигем» не уступает препарату-прототипу по своему противоанемическому действию для поросят.
Таким образом, препарат «Комплигем» обладает достаточно высокой эффективностью при профилактике алиментарной анемии у поросят.
Пример 9.
Проведены сравнительные испытания эффективности 1-й серии препарата «Комплигем», изготовленного так, как описано в примере 1, и содержащего, мг:
Коллоидное железо (III)
35,0
Тритон Х-100
0,2
Цинк (II)
0,1
Кобальт (II)
0,05
Селен (IV)
0,02
Вода
до 1000,0,
и 1-й серии препарата-прототипа при профилактике алиментарной анемии на 60 поросятах-сосунах в условиях свинокомплекса ЗАО «Владимирский» Владимирской области. Из поросят сформировали 2 группы. Первой группе животных в возрасте 4 дней вводили внутримышечно препарат «Комплигем» в дозе 2000 мг, а второй группе поросят того же возраста вводили внутримышечно препарат-прототип в дозе 2000 мг. Через 14 дней инъекции повторили. Результаты исследований представлены в таблице 9.
Результаты исследований, приведенные в таблице 9, свидетельствуют о том, что двукратное введение поросятам противоанемических средств привели к повышению уровня гемоглобина, количества эритроцитов, гематокрита, общего белка в сыворотке крови животных обеих групп.
Внутримышечное введение противоанемических средств способствовало также увеличению сохранности и среднесуточного прироста живой массы у поросят обеих групп.
Пример 10.
Проведены сравнительные испытания эффективности 2-й серии препарата «Комплигем», изготовленного так, как описано в примере 1, и содержащего, мг:
Коллоидное железо (III)
40,0
Тритон Х-100
0,4
Цинк (II)
0,2
Кобальт (II)
0,1
Селен (IV)
0,03
Вода
до 1000,0,
и 2-й серии препарата-прототипа на противоанемическую активность на щенках в клинике «Артемида» г.Владимира. Для проведения исследований были сформированы две группы животных по 5 голов в каждой 5-дневного возраста из одного помета. Животным вводили препарат «Комплигем» и препарат-прототип в дозе 500 мг каждый внутримышечно на 3 день жизни, а затем по 500 мг спустя 10 дней.
Сравнительную эффективность препаратов определяли по гематологическим показателям.
Результаты исследований представлены в таблице 10.
Согласно данным таблицы 10 при использовании обоих железосодержащих препаратов происходит улучшение гематологических показателей крови у щенков. По истечении 30-дневного срока у щенков обеих групп взяли кровь для определения гемоглобина. В результате обнаружилось увеличение содержания гемоглобина в крови животных, что свидетельствует о противоанемическом действии препаратов.
Пример 11.
Проведены испытания лечебно-профилактических свойств 2-й серии препарата «Комплигем», изготовленного так, как описано в примере 1, и содержащего, мг:
Коллоидное железо (III)
40,0
Тритон Х-100
0,4
Цинк (II)
0,2
Кобальт (II)
0,1
Селен (IV)
0,03
Вода
до 1000,0,
в условиях СПК «Коммунар» Суздальского района Владимирской области.
В процессе испытаний было задействовано 496 голов свиней различных половозрастных групп (поросята в возрасте 0÷4 месяца, супоросные свиноматки в возрасте 2-4 лет).
Изучение терапевтического и профилактического эффекта от применения препарата «Комплигем» проводили при различных нарушениях обмена веществ в организме животных: отечная болезнь поросят, задержка роста и развития молодняка, нарушение репродукции животных. Кроме того, изучали влияние обработки препаратом беременных свиноматок (за 2÷4 недели до опороса) на жизнеспособность получаемого от них приплода.
Диагноз на заболевание ставили комиссионно: на основании клинических признаков и данных лабораторных исследований. О терапевтической эффективности препарата «Комплигем» судили по исчезновению клинических симптомов болезни, отставания животных в росте и развитии, увеличению привесов и лабораторным данным.
Профилактическую эффективность препарата учитывали по процентному соотношению заболевших и не заболевших животных в группах, которым вводили или не вводили препарат «Комплигем».
Препарат «Комплигем» применяли в соответствии с разработанной инструкцией.
Препарат «Комплигем» вводили внутримышечно в область шеи или бедра.
С профилактической целью препарат вводили однократно в следующих дозах: супоросным свиньям за 20÷25 дней до опороса в дозе 3000÷5000 мг, поросятам 2÷4-дневного возраста в дозе 1000÷2000 мг в зависимости от веса животных.
С лечебной целью препарат вводили в тех же дозах двукратно с интервалом 10÷14 сут.
В результате проведенных исследований установлено, что после 2 инъекций препарата с интервалом 10÷14 дней все клинические симптомы авитаминозов у поросят исчезли, а сами животные быстрее набирали вес и догоняли своих сверстников в росте и развитии.
Результаты исследований приведены в таблице 11.
Данные таблицы 11 свидетельствуют о том, что комплексное лечение отечной, беломышечной болезни, а также авитаминозов поросят препаратом «Комплигем» (1÷2 введения) вместе с другими средствами приводит к выздоровлению 89÷97% животных, а однократное его применение за 1÷2 недели до отъема поросят позволяет сократить частоту возникновения отечной болезни на 89÷97%.
При однократном введении препарата «Комплигем» супоросным свиноматкам за 2÷3 недели до опороса получали более жизнеспособный молодняк. Смертность среди новорожденных сокращалась в 2,5÷3 раза по сравнению с необработанными животными. Кроме того, подопытные поросята имели при рождении средний вес на 100÷120 г больше, чем животные в контрольных группах.
В результате введения «Комплигема» новорожденным поросятам 2÷4-дневного возраста в дозе 1000÷2000 мг для профилактики авитаминозов признаки заболевания не проявились ни у одного животного в течение 3 месяцев наблюдения.
Одновременное применение препарата «Комплигем» с различного рода обработками поросят (вакцинации, дегельминтизации и т.д.) позволяло им легче переносить процедуры, избавить их от стресса и повысить иммунный статус организма.
На основании полученных данных следует заключить, что применение препарат «Комплигем» в свиноводстве позволяет резко снизить заболеваемость молодняка вторичными анемиями, а также различными болезнями, вызванными нарушением обменных процессов и ослаблением иммунного статуса организма животных: авитаминозы, отечная болезнь, беломышечная болезнь, отставание в росте и развитии и т.д. Кроме того, витаминизация супоросных свиноматок за 2÷3 недели до опороса позволяет получить более жизнеспособных поросят.
Пример 12.
Проведены испытания эффективности 3-й серии препарата «Комплигем», изготовленного так, как описано в примере 1, и содержащего, мг:
Коллоидное железо (III)
45,0
Тритон Х-100
0,6
Цинк (II)
0,3
Кобальт (II)
0,15
Селен (IV)
0,04
Вода
до 1000,0,
в условиях СПК имени Дзержинского Гаврилово-Посадского района Ивановской области в профилактике болезней с недостатком макро- и микроэлементов, а также повышения жизнеспособности организма молодняка крупного рогатого скота (КРС).
Всего в опыте было использовано 16 голов телят в возрасте 1÷2 дня. Из них сформировали две группы телят по 8 голов в каждой, одна опытная, другая контрольная. Животных отбирали по принципу аналогов: возраст 1÷2 дня, порода черно-пестрая, масса 35÷40 кг.
Телятам опытной группы вводили препарат «Комплигем» внутримышечно в область бедра в дозе 3000 мг однократно.
Телятам контрольной группы препараты для профилактики болезней с недостатком макро- и микроэлементов не вводили.
Во время проведения исследований осуществляли клинический осмотр телят, отмечали основные физиологические показатели (температура, пульс, дыхание). Было отмечено, что телята опытной группы после введения препарата «Комплигем» были более подвижными, активно реагировали на внешние раздражители, аппетит был более выражен, чем у телят контрольной группы. У телят контрольной группы признаков угнетения или нарушения физиологических функций не наблюдали.
По окончании эксперимента у всех телят снова были взяты пробы крови для анализа. Результаты исследований представлены в таблице 12.
Согласно данным таблицы 12 у телят контрольной группы уровень гемоглобина, эритроцитов, а также некоторых биохимических показателей несколько ниже, чем у телят опытной группы, что отрицательно сказывается на жизненно важных функциях организма новорожденных животных и приводит к снижению приростов, а в дальнейшем - недополучение продукции.
Таким образом, применение препарата «Комплигем» активизирует физиологические функции организма животных, препятствует развитию микроэлементозов в организме, а также усиливает процессы кроветворения, что способствует повышению синтеза гемоглобина и уровня эритроцитов в крови.
Пример 13.
Проведены сравнительные испытания лечебно-профилактических свойств 3-й серии препарата «Комплигем», изготовленного так, как описано в примере 1, и содержащего, мг:
Коллоидное железо (III)
45,0
Тритон Х-100
0,6
Цинк (II)
0,3
Кобальт (II)
0,15
Селен (IV)
0,04
Вода
до 1000,0,
и 3-й серии препарата-прототипа в условиях подсобного хозяйства ФГУСП учреждения 081/9 Минюста РФ.
Для проведения эксперимента сформировали 2 группы подсосных поросят 2÷3-дневного возраста. Все поросята находились в одинаковых условиях содержания. До начала опыта всех животных взвесили. Вес поросят находился в пределах 1,0÷1,2 кг.
Поросятам 1-й группы (контроль) в количестве 12 голов с целью профилактики железодефицитной анемии вводили препарат-прототип в область бедра внутримышечно в дозе 2000 мг согласно наставлению о применении.
Поросятам 2-й группы (опытная) в количестве 8 голов вводили препарат «Комплигем» внутримышечно однократно в дозе 1000 мг.
После введения препарата «Комплигем» у поросят 2-й группы не отмечалось болезненности, покраснения на месте введения препарата, все поросята активно передвигались по станку, признаков угнетения не отмечалось, аппетит сохранен.
После введения препарата-прототипа у 2 поросят 1-й группы отмечалось незначительное покраснение на месте введения препарата, при надавливании на эту область выражена болезненность. У остальных поросят аналогичных признаков не отмечалось.
За животными ежедневно в течение 12 дней вели клиническое наблюдение. Поросята обеих групп были подвижными, аппетит сохранен, физиологические функции не нарушены.
По окончании эксперимента было проведено контрольное взвешивание поросят. У поросят опытной группы привес за истекший период времени составил 106÷118 г на голову, в то время как привес поросят контрольной группы составил 85÷100 г.
Таким образом, препарат «Комплигем» показал высокую эффективность в профилактике железодефицитной анемии у поросят и повышении привеса молодняка животных, что имеет большое значение для сохранности и обеспечения жизнедеятельности молодняка сельскохозяйственных животных в условиях производства.
Источники информации
1. Йонаускас Л.Д. Профилактика алиментарной анемии поросят-сосунов при помощи железосодержащих препаратов, добавляемых в корма. Автореф. дис.… канд. вет. наук., - М., 1980 г.
2. Карпуть И.М. Гематологический атлас сельскохозяйственных животных. - Минск, Ураджай, 1986 г.
3. Регламент производства ферроглюкина (с содержанием железа 75 мг/мл). - Минский завод медпрепаратов, 1968 г., 20 с.
4. Авт. свид. СССР №306847, А61К 25/02, 21.06.1971 г.
5. Авт. свид. СССР №355955, А61К 25/02, 23.10.1972 г.
6. Авт. свид. СССР №683745, А61К 33/26, 05.09.1979 г.
7. Авт. свид. СССР №730276, А61К 33/26, 39/00; 25.04.1980 г.
8. Авт. свид. СССР №1328956, А61К 33/26, 1984 г.
9. Наставление по применению «Биофера» в ветеринарной медицине. Утверждено ГУВ МСХиП Республики Беларусь 17.02.1995 г.
10. Заявка №92006855/15 на выдачу патента РФ на изобретение, А61К 33/26, 27.02.1995 г.
11. Авт. свид. СССР №1797196, А61К 33/04, 10.02.1996 г.
12. Указатель лекарственных препаратов по их фармакологическому действию и применению. Варшава, Центр научной информации «Польфа», 1987. - С.139.
13. Общая и клиническая ветеринарная рецептура: Справочник / Под ред. проф. В.Н.Жуленко. - М.: Колос, 1998. - С.203.
14. Ветеринарные препараты в России: Справочник / И.Ф.Кленова, Н.А.Яременко. - М.: Сельхозиздат, 2000. - С.296-297.
15. Пат. РФ №2203657; А61К 31/295, 31/00; А61Р 7/00; 10.05.2003 г.
16. Пат. РФ №2234317; А61К 31/295, А61Р 7/06; 20.08.2004 г.
17. Пат. РФ №2252020; А61К 31/194, 33/24, 31/295; А61Р 7/06; 20.05.2005 г.
18. Пат. РФ №2263504; А61К 31/295; А61Р 7/06; 10.11.2005 г.
19. Заявка №2005102760/15 на выдачу патента РФ на изобретение, А61К 33/24, 31/194; А61Р 7/06; 20.07.2006 г.
20. Пат. РФ №2280457; А61К 33/26, 35/32; А61Р 7/06; 27.07.2006 г.
21. Пат. РФ №2282441; А61К 31/295, 31/30, 31/315; А61Р 7/06; 27.08.2006 г.
22. Пат. РФ №2302873; А61К 35/37, 33/34, 33/32, 33/26, 31/718; А61Р 1/00; 20.07.2007 г.
23. Пат. РФ №2309739; А61К 31/295, 31/00; А61Р 7/00; 10.11.2007 г.
24. Пат. РФ №2338516; А61К 31/047, 31/721; А61Р 7/06; 20.11.2008 г.
25. БМЭ, М., изд-во «Сов. энциклопедия», 1977, т.7, 176-177.
26. Пат. РФ №2062111, А61К 39/02, 20.06.1996 г.
27. Пат. РФ №2077589, С12Р 19/30, 20.04.1997 г.
28. Пат. РФ №2105977, G01N 33/48, 27.02.1998 г.
29. Пат. РФ №2122211; G01N 33/569, А61К 39/12, 39/187; 20.11.1998 г.
30. Пат. РФ №2159251; С07К 14/705, 14/72; G01N 30/00; 20.11.2000 г.
31. Пат. РФ №2175445; G01N 33/48, 33/573, 33/84; 27.10.2001 г.
32. Пат. РФ №2180120; G01N 33/84, 33/577, 33/552; 27.02.2002 г.
33. Пат. РФ №2193204; G01N 33/569, 33/536; 20.11.2002 г.
34. Пат. РФ №2193770; G01N 27/12, 30/00; 27.11.2002 г.
35. Пат. РФ №2208785; G01N 33/14; C12G 1/00; 20.07.2003 г.
36. Пат. РФ №2214591; G01N 30/00, 33/02; 20.10.2003 г.
37. Пат. РФ №2216743; G01N 33/571; А61К 39/005; 20.11.2003 г.
38. Пат. РФ №2225614; G01N 33/53; 10.03.2004 г.
39. Пат. РФ №2232818; С12Р 19/34; С07Н 21/04; 20.07.2004 г.
40. Пат. РФ №2237719; С12Р 19/04; А61К 39/02, 39/39; G01N 33/53; 10.10.2004 г.
41. Пат. РФ №2237893; G01N 30/00, 31/00; С07С 205/06; 10.10.2004 г.
42. Пат. РФ №2315299; G01N 33/18, 33/14, 27/447; 20.01.2008 г.
43. Пат. РФ №2325171; А61К 35/16, 38/17; 27.05.2008 г.
44. Пат. РФ №2346051; C12Q 1/00; G01N 27/00; 10.02.2009 г.
45. Пат. РФ №2367449; А61К 35/16, 38/17; 20.09.2009 г.
46. Пат. РФ №2371477, C12N 5/00, 27.10.2009 г.
47. http://www.liquid-phase.ru.
48. http://hghltd.yandex.net.
49. Пат. РФ №2257213; А61К 33/26; А61Р 3/02, 7/06; 27.07.2005 г. (прототип).
50. NewScientist.com news service 12 August 03 http://www.newscientist.com/news/news.jsp?id=ns99994045 по материалам Proceedings of the National Academy of Sciences (DOI:10.1073/pnas. 1832769100).
51. New Scientist print edition, 3 August 2002.
Таблица 1
Оптимальные составы препарата «Комплигем» для лечения и профилактики железодефицитных состояний животных
Наименование ингредиентов
Рецептура, мг
Минимум
Средний
Максимум
Коллоидное железо
35,0
40,0
45,0
Тритон Х-100
0,2
0,4
0,6
Глюкоза
30,0
40,0
50,0
Поливиниловый спирт
0,2
0,4
0,6
Цинк
0,1
0,2
0,3
Кобальт
0,05
0,1
0,15
Селен
0,02
0,03
0,04
Вода
до 1000,0
до 1000,0
до 1000,0
Таблица 2
Гематологические показания крови собак при применении препарата «Комплигем» (n=3)
Показатели
Группа
1
2
3
Доза «Комплигема»
6 см<sup>3</sup>
2 см<sup>3</sup>
Контроль
Гемоглобин (г%)
11,9-13,2
11,2-13,6
10,5-11,3
Эритроциты (млн/мм)
7,4-8,8
7,6-8,9
7,0-8,7
Лейкоциты (тыс/мм)
9,1-10,2
9,0-10,5
8,9-10,0
Лейкоцитарная формула
Базофилы
1
1
0
Эозинофилы
4
3
5
Н. сегментоядерные
55
61
60
Лимфоциты
32
33
29
Моноциты
2
2
1
Альбумины (%)
40,2-42,3
40,0-41,8
41,2-42,9
Альфа-глобулины (%)
17,9-18,1
17,4-18,2
18,0-19,0
Бета-глобулины (%)
20,3-22,1
21,0-23,0
21,0-22,9
Гамма-глобулины (%)
17,2-19,2
17,0-18,5
16,9-18,1
Мочевина (ммоль/л)
4,4
4,0
4,0
Таблица 3
Накопление железа в сыворотке крови, печени и почках у крыс после введения препарата «Комплигем» (n=3)
Группы животных
Содержание железа, мкг %
Содержание гемоглобина, г %
Печень
Почки
Сыворотка крови
Контроль
263,0±12,1
193,0±10,1
169,0±7,9
16,0±0,3
Опыт
353,0±1,2
213,0±21,2
235,0±11,0
17,6±0,3
Таблица 4
Цитогенетический анализ клеток костного мозга животных, подвергавшихся воздействию препарата «Комплигем» в условиях однократного и повторных введений (n=3)
Однократный опыт
Проанализ метафаз
Одиночные фрагменты
Парные фрагменты
Всего ХА
Контроль
450
2,6±0,9
0,26±0,1
2,9±0,9
Опыт
350
2,5±0,9 Р>0,05
0,28±0,2
2,8±0,9
Месячный опыт
Проанализ метафаз
Всего ХА
Слипаний
Отставаний
Митотический индекс
Контроль
1500
5,0±0,10
0,2±0,02
0,18±0,06
1,88±0,19
Опыт
1500
5,06±0,8
0,5±0,27 Р>0,05
0,34±0,15
1,86±0,11
Таблица 5
Результаты определения ДЛМ в половых клетках крыс самцов, подвергавшихся воздействию препарата «Комплигем» (n=3)
Группа
Количество
Гибель плодов в %
самок
ЖТБ
живые
мертвые
До имплант. М±m
После имплант. М±m
Общая M±m
Контроль
30
13,41
11,65
1,00
6,97±3,42
9,63±1,23
17,75±2,44
Комплигем
33
13,78
12,23
0,67
7,85±1,30
5,43±0,85
13,96±1,60
Таблица 6
Анализ клеток костного мозга белых крыс под воздействием препарата «Комплигем» (п=3)
Группа
Кол-во метафаз
Кол-во одиночных фрагментов
Кол-во парных фрагментов
Гены
Всего ХА
Опыт
547
1,64±0,43 Р>0,05
0,6±0,34 Р>0,05
3,1±0,6 Р>0,05
0,4±0,31
Контроль
489
2,5±0,37
0,7±0,50
2,5±0,3
0,4±0,1
Таблица 7
Содержание железа в сыворотке крови и печени у крыс при введении препарата «Комплигем» (n=3)
Группы животных
Время взятия проб, час
Содержание железа, мкг%
Содержание гемоглобина, г%
печень
сыворотка крови
Контроль
224±0,12
153±0,10
16,0±0,3
Опыт
0,5 час1,0 час2,0 час3,0 час5,0 час24,0 час
250±0,10261±0,11271±0,10280±0,10289±0,12300±0,11
170±0,11178±0,12188±0,10196±0,09190±0,12200±0,11
16,1±0,316,2±0,416,4±0,417,0±0,517,2±0,417,6±0,3
Таблица 8
Влияние противоанемических препаратов на гематологические показатели поросят и их живую массу (n=3)
Группы
Гемоглобин, г%
Кол-во эритроцитов, млн/мм<sup>3</sup>
Показатель гематокрита, %
Средняя живая масса, кг
Комплигем
10,08±0,46
6,98±0,52
31,9±0,37
6,88
10,05±0,56
6,82±0,60
32,0±0,45
6,00
Контроль
7,2±0,38
3,82±0,42
26,0±0,52
5,62
Таблица 9
Сравнительная эффективность препарата «Комплигем» и препарата-прототипа по гематологическим показателям, сохранности и среднесуточным приростам живой массы поросят к 30-дневному возрасту (n=3)
Показатель
Препарат
Комплигем
Препарат-прототип
Гемоглобин, г %
11,08±0,52
11,05±0,49
Гематокрит
41,80±1,10
40,80±0,75
Эритроциты, млн/мкл
7,30±0,60
7,16±0,51
Общий белок, г %
6,05±0,35
6,00±0,23
Сохранность
0,95
0,90
Масса при отъеме, кг
7,24±0,34
6,98±0,33
Таблица 10
Гематологические показатели крови у щенят (n=3)
Группы
Возраст в днях
5
20
40
Гемоглобин, г %
Комплигем
9,8±0,21
11,7±0,19
13,5±0,23
Препарат-прототип
9,9±0,17
12,6±0,25
13,4±0,16
Эритроциты, млн/мм<sup>3</sup>
Комплигем
6,32±0,22
7,50±0,18
8,65±0,22
Препарат-прототип
6,25±0,19
7,46±0,27
8,77±0,15
Гематокрит, %
Комплигем
40,4±0,80
44,2±0,90
45,6±0,93
Препарат-прототип
39,6±0,78
43,4±0,85
43,8±0,77
Таблица 11
Лечебно-профилактическая эффективность препарата «Комплигем» при заболеваниях свиней
Заболевание
Возраст животных
Кол-во голов
Курс лечения, дни
Эффективность, %
Примечание
Нарушение роста и развития плода (авитаминоз)
0÷3 мес.
98
10÷14
100
В комплексе с другими мероприятиями
Отечная болезнь
2,5÷3 мес.
41
10÷14
89,4÷97,3
Беломышечная болезнь
1÷2 мес.
112
10÷14
95,6÷97,2
Профилактика вторичных анемий
2÷4 день
249
однократно
100
-
Таблица 12
Результаты проверки эффективности применения препарата «Комплигем» для профилактики болезней дефицита макро- и микроэлементов, а также повышения жизнеспособности молодняка КРС
Группы
Наименование показателей
Эритроциты, млн/мкл
Лейкоциты, тыс/мкл
Белок, г/%
Са, мг/%
Р, мг/%
Каротин, мкг/%
Опытная
7,0±0,5
5,0±0,4
7,5±0,3
10,3±0,2
5,5±0,1
350±10
Контрольная
6,4±0,4
5,2±0,3
7,4±0,4
10,5±0,1
5,3±0,2
325±25