ВЕКТОРНАЯ СИСТЕМА НА ОСНОВЕ АДЕНОАССОЦИИРОВАННОГО ВИРУСА

1. Векторная система на основе аденоассоциированного вируса (AAV) для экспрессии белка ABCA4 человека в клетке-мишени, содержащая первый вектор AAV, содержащий первую последовательность нуклеиновой кислоты, и второй вектор AAV, содержащий вторую последовательность нуклеиновой кислоты;
где первая последовательность нуклеиновой кислоты содержит 5′-концевую часть кодирующей последовательности ABCA4 (CDS), и вторая последовательность нуклеиновой кислоты содержит 3′-концевую часть CDS ABCA4, и 5′-концевая часть и 3′-концевая часть вместе включают целую CDS ABCA4;
где первая последовательность нуклеиновой кислоты содержит последовательность смежных нуклеотидов, соответствующую нуклеотидам 105-3597 SEQ ID NO: 1;
где вторая последовательность нуклеиновой кислоты содержит последовательность смежных нуклеотидов, соответствующую нуклеотидам 3806-6926 SEQ ID NO: 1;
где каждая из первой последовательности нуклеиновой кислоты и второй последовательности нуклеиновой кислоты содержит область перекрывания последовательностей друг с другом; и
где область перекрывания последовательностей содержит по меньшей мере приблизительно 20 смежных нуклеотидов из последовательности нуклеиновой кислоты, соответствующей нуклеотидам 3598-3805 SEQ ID NO: 1.
2. Векторная система AAV по п.1, где область перекрывания последовательностей составляет от 20 до 550 нуклеотидов в длину; предпочтительно от 50 до 250 нуклеотидов в длину; предпочтительно от 175 до 225 нуклеотидов в длину; предпочтительно - от 195 до 215 нуклеотидов в длину.
3. Векторная система AAV по п.1 или 2, где область перекрывания последовательностей содержит по меньшей мере приблизительно 50 смежных нуклеотидов из последовательности нуклеиновой кислоты, соответствующей нуклеотидам 3598-3805 SEQ ID NO: 1; предпочтительно - по меньшей мере приблизительно 75 смежных нуклеотидов; предпочтительно - по меньшей мере приблизительно 100 смежных нуклеотидов; предпочтительно - по меньшей мере приблизительно 150 смежных нуклеотидов; предпочтительно - по меньшей мере приблизительно 200 смежных нуклеотидов; предпочтительно - все 208 смежных нуклеотидов.
4. Векторная система AAV по любому из пп. 1-3,
где первая последовательность нуклеиновой кислоты содержит последовательность смежных нуклеотидов, соответствующую нуклеотидам 105-3805 SEQ ID NO: 1; и
где вторая последовательность нуклеиновой кислоты содержит последовательность смежных нуклеотидов, соответствующую нуклеотидам 3598-6926 SEQ ID NO: 1.
5. Векторная система AAV по любому из пп. 1-4, где первая последовательность нуклеиновой кислоты содержит промотор GRK1, функционально связанный с 5′-концевой частью кодирующей последовательности ABCA4 (CDS).
6. Векторная система AAV по любому из пп. 1-5, где первая последовательность нуклеиновой кислоты содержит нетранслируемую область (UTR), находящуюся выше 5′-концевой части кодирующей последовательности ABCA4 (CDS).
7. Векторная система AAV по любому из пп. 1-6, где вторая последовательность нуклеиновой кислоты содержит посттранскрипционный чувствительный элемент (PRE); предпочтительно посттранскрипционный чувствительный элемент вируса гепатита сурков (WPRE).
8. Векторная система AAV по любому из пп. 1-7, где вторая последовательность нуклеиновой кислоты содержит последовательность полиаденилирования бычьего гормона роста (bGH).
9. Векторная система AAV по любому из пп. 1-8, где первый вектор AAV содержит последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 9; и где второй вектор AAV содержит последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 10.
10. Способ экспрессии белка ABCA4 человека в клетке-мишени, включающий стадии трансдукции клетки-мишени с использованием первого вектора AAV и второго вектора AAV по любому из пп. 1-9, таким образом, что функциональный белок ABCA4 экспрессируется в клетке-мишени.
11. Вектор AAV, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты, содержащую 5′-концевую часть CDS ABCA4, где 5′-концевая часть CDS ABCA4 состоит из последовательности смежных нуклеотидов, соответствующей нуклеотидам 105-3805 SEQ ID NO: 1.
12. Вектор AAV по п.11, где вектор AAV содержит последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 9.
13. Вектор AAV, содержащий последовательность нуклеиновой кислоты, содержащую 3′-концевую часть CDS ABCA4, где 3′-концевая часть CDS ABCA4 состоит из последовательности смежных нуклеотидов, соответствующей нуклеотидам 3598-6926 SEQ ID NO: 1.
14. Вектор AAV по п.13, где вектор AAV содержит последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 10.
15. Нуклеиновая кислота, содержащая первую последовательность нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-9.
16. Нуклеиновая кислота, содержащая вторую последовательность нуклеиновой кислоты по любому из пп. 1-9.
17. Нуклеиновая кислота, содержащая последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 9.
18. Нуклеиновая кислота, содержащая последовательность нуклеиновой кислоты SEQ ID NO: 10.
19. Набор, содержащий первый вектор AAV по любому из пп. 1-9 и второй вектор AAV по любому из пп. 1-9.
20. Набор, содержащий нуклеиновую кислоту по п.15 и нуклеиновую кислоту по п.16 или нуклеиновую кислоту по п.17 и нуклеиновую кислоту по п.18.
21. Фармацевтическая композиция, содержащая векторную систему AAV по любому из пп. 1-9 и фармацевтически приемлемый эксципиент.
22. Векторная система AAV по любому из пп. 1-9, набор по п.19 или 20 или фармацевтическая композиция по п.21 для применения в генной терапии.
23. Векторная система AAV по любому из пп. 1-9, набор по п.19 или 20 или фармацевтическая композиция по п.21 для применения в профилактике или лечении заболевания, отличающегося деградацией клеток сетчатки; предпочтительно для применения в профилактике или лечении болезни Штаргардта.
24. Способ профилактики или лечения заболевания, отличающегося деградацией клеток сетчатки, предпочтительно, болезни Штаргардта, включающий введение пациенту эффективного количества векторной системы AAV по любому из пп. 1-9, набора по п.19 или 20 или фармацевтической композиции по п.21.