СПОСОБ ПРОВЕДЕНИЯ НАРКОЗА У МЫШЕЙ BALB/C NUDE ПРИ ОПЕРАТИВНЫХ ВМЕШАТЕЛЬСТВАХ
METHOD OF ANESTHESIA IN BALB/C NUDE MICE IN SURGICAL INTERVENTIONS

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной онкологии, и касается способа проведения наркоза у мышей Balb/c Nude при оперативных вмешательствах.
Эксперименты на животных, контролируемые Правилами надлежащей лабораторной практики и пунктами Хельсинской декларации, являются важной составляющей биомедицинского исследования, без которой невозможно понимание природы и патофизиологии многих заболеваний и развитие стратегий соответствующей терапии (см. Use of Laboratory Animals in Biomedical and Behavioral Research // National Academy of Sciences. - P. 1-2). При использовании мелких грызунов (мышей и крыс) в эксперименте, проведение адекватной анестезии и применение анальгетиков для облегчения боли во время восстановления животного необходимы для минимизации болевого шока, являющегося причиной гибели животных во время хирургических вмешательств (см. Andersen M.L., Winter L.M.F. Animal models in biological and biomedical research - experimental and ethical concerns // An. Acad. Bras. Scienc. - 2017). Выбор анестезии определяется ключевыми факторами: порода, возраст, пол, вес, тип и продолжительность хирургических манипуляций (см. J.G. Vandenbergh Use of House Mice in Biomedical Research // ILAR journal. - 2000.). Несоблюдение указанных пунктов приводит к тяжелым последствиям, вызывая изъязвления на слизистых оболочках, расширение вен нижней трети пищевода, селезенки, кишечника, почек, образование тромбов в крупных сосудах брюшной полости (см. А.В. Смирнова, Л.Д. Лагутина, И.Е. Трубицына, О.С. Васнев, О.Б. Янова Особенности проведения анестезии у крыс при полостных операциях // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. - 2012. - №5. - С. 62-65). Совершенствование дозировки препаратов, применяемых при анестезии, и выбор в пользу сочетанного наркоза позволят снизить риски мучительной гибели животных и свести к минимуму послеоперационные осложнения.
Известен способ проведения наркоза у экспериментальных животных с помощью препаратов на основе Трибромэианола (R.E. Meyer, R.E. Fish А review of tribromoethanol anesthesia for production of genetically engineered mice and rats // Lab Animal. - 2005. - №34. - P. 47-52). Данный способ обеспечивает миорелаксацию и адекватную анестезию в течение 15-30 минут. Недостатком данного метода является возникновение очагов некротизации мышечной ткани. Кроме того, передозировка препарата вызывает перитонит и мучительную гибель грызунов, что противоречит международным правилам проведения оперативных вмешательств у животных.
Известен способ наркотизации мышей диэтиловым эфиром с помощью пропитанного ватного тампона путем проведения ингаляции для обеспечения длительной анестезии (K. Otto, A. Thaden The Laboratory Mouse // Chapter 5.4 - Anaesthesia, Analgesia and Euthanasia. - 2012. - P. 739-759). Главным недостатком данного способа является высокая токсичность и канцерогенность диэтилового эфира для человека.
Известен способ инъекционной анестезии, предполагающий пероральное, внутривенное и внутримышечное введение барбитуратов (Тиопентал, Пентобарбитал) (S. Gargiulo Mice Anesthesia, Analgesia, and Care, Part I: Anesthetic Considerations in Preclinical Research // ILAR journal. - 2012). Данный способ обеспечивает необходимую для проведения длительных операций глубину наркоза, так как используемые препараты являются производными γ-аминомасляной кислоты, которые ингибируют действие норадреналина и глутамата. Однако, при использовании данного способа возникают многочисленные повреждения тканей печени из-за высокой гепатотоксичности, приводящей к страданиям лабораторных животных и последующей гибели. Еще одним недостатком является недоступность Тиопентала и Пентобарбитала в связи с ограниченным оборотом препаратов барбитурового ряда по всему миру.
Известен способ проведения наркоза у крыс путем премедикации Ксилазином (Interchemie werken «De Adelaar» B.V, Нидерланды) в дозе 0,05 мл/кг массы тела внутримышечно и введения препарата «Золетил 50» (Virbac, Франция) в дозе 0,5 мг/кг массы тела через 10 минут после премедикации (Пат. №2466753 РФ. Способ проведения наркоза у крыс при многоэтапном эксперименте при моделировании эндометриоза. / Адамян Л.В. Опубл. 03.06.2011 г.). Описанный способ обеспечивает миорелаксацию, седацию и диссоциативную анестезию, так как Ксилазина гидрохлорид является антагонистом центральных альфа-2-адренорецепторов, а Тилетамина гидрохлорид является конкурентным антагонистом, ингибирующим связь N-метил-D-аспартатного рецептора, обеспечивающего передачу сигналов между нейронами спинного и головного мозга, с глутаматом (Д.В. Кадомцев, Е.А. Пасечникова, В.Г. Голубев Золетил-ксилазиновый наркоз в экспериментах у крыс // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. - 2015). Недостатком данного способа является возникновение послеоперационных судорог и повышенной саливации из-за многочисленных повреждений коры поясной извилины и ретроспленальной коры у крыс, приводящих к мучительной гибели животных.
Техническим результатом предлагаемого изобретения является разработка способа проведения наркоза у мышей Balb/c Nude при оперативных вмешательствах, обеспечивающего оптимальную глубину наркоза и минимальное токсическое действие на организм мышей.
Технический результат изобретения достигается тем, что осуществляют проведение наркоза у мышей Balb/c Nude при оперативных вмешательствах, включающий проведение премедикации ксилазином внутримышечно, анестезию при помощи препарата «Золетил 100», который вводится внутримышечно, отличающийся тем, что препарат ксилазина концентрацией 20 мг/мл вводят в дозе 1,5 мл/кг, через 15 минут после премедикации вводят препарат «Золетил 100» в виде водного раствора концентрацией 22,57 мг/мл в дозе 67,5 мг/кг массы тела мышей Balb/c Nude.
Способ осуществляют следующим образом.
Премедикацию осуществляют при помощи ксилазина концентрацией 20 мг/мл, который вводится внутримышечно в дозе 1,5 мл/кг. Через 15 минут после премедикации вводят препарат «Золетил 100» внутримышечно в виде водного раствора концентрацией 22,57 мг/мл в дозе 67,5 мг/кг массы тела мышей Balb/c Nude.
Данным способом был проведен наркоз 210 мышам линии Balb/c Nude.
Пример.
Самцу мыши линии Balb/c Nude весом 22 г ввели внутримышечно ксилазин (препарат Ксила) в дозе 0,03 мл. Через 15 минут ввели препарат «Золетил 100» внутримышечно в виде водного раствора концентрацией 22,57 мг/мл в дозе 0,07 мл (1,485 мг сухого препарата «Золетил 100»).
Технико-экономическая эффективность данного способа заключается в том, что он позволяет обеспечить гуманное обращение с мышами Balb/c Nude при оперативных вмешательствах благодаря применению наркоза на основе двух препаратов: ксилазина и «Золетила 100».