АНТИГЕНСВЯЗЫВАЮЩИЕ МОЛЕКУЛЫ, ИМЕЮЩИЕ МОДИФИЦИРОВАННЫЕ FC-УЧАСТКИ И ИЗМЕНЕННОЕ СВЯЗЫВАНИЕ С FC-РЕЦЕПТОРАМИ

1. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула, включающая Fc-участок, причем указанный Fc-участок имеет измененную олигосахаридную структуру в результате указанной гликоинженерии и имеет модификацию по меньшей мере одной аминокислоты, и причем указанная антигенсвязывающая молекула проявляет повышенный уровень связывания с человеческим рецептором FcγRIII по сравнению с антигенсвязывающей молекулой, у которой отсутствует указанная модификация.
2. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.1, причем указанная антигенсвязывающая молекула не проявляет повышенного уровня связывания с человеческим рецептором FcγRII.
3. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.2, причем указанный человеческий рецептор FcγRII представляет собой человеческий рецептор FcγRIIa.
4. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.2, причем указанный человеческий рецептор FcγRII представляет собой человеческий рецептор FcγRIIb.
5. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.1, причем указанный рецептор FcγRIII является гликозилированным.
6. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.5, причем указанный гликозилированный рецептор включает N-связанные олигосахариды в положении Asn162.
7. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.1, причем указанный рецептор FcγRIII представляет собой FcγRIIIa.
8. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.1, причем указанный рецептор FcγRIII представляет собой FcγRIIIb.
9. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.7, причем указанный рецептор FcγRIIIa имеет остаток валина в положении 158.
10. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.7, причем указанный рецептор FcγRIIIa имеет остаток фенилаланина в положении 158.
11. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.5, причем указанная модификация в существенной мере не повышает уровень связывания с негликозилированным рецептором FcγRIII по сравнению с антигенсвязывающей молекулой с отсутствием указанной модификации.
12. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.1, в которой указанный Fc-участок включает замену одной или более аминокислот 239, 241, 243, 260, 262, 263, 264, 265, 268, 290, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301, 302 или 303.
13. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.12, в которой указанный Fc-участок включает дополнительную замену одной или более аминокислот 239, 241, 243, 260, 262, 263, 264, 265, 268, 290, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301, 302 или 303.
14. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.1, в которой указанный Fc-участок включает замену одной или более аминокислот 239, 243, 260 или 268.
15. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по любому из пп.11-14, в которой указанные замены замещают остаток природной аминокислоты остатком аминокислоты, который взаимодействует с углеводом, присоединенным к Asn162 рецептора FcγRIII.
16. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.15, в которой указанный остаток аминокислоты, который взаимодействует с углеводом, присоединенным к Asn162 рецептора FcγRIII, выбран из группы, состоящей из: Trp, His, Tyr, Glu, Arg, Asp, Phe, Asn и Gln.
17. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.14, в которой указанная замена одной или более аминокислот выбрана из группы, состоящей из: Ser239Asp, Ser239Glu, Ser239Trp, Phe243His, Phe243Glu, Thr260His, His268Asp или His268Glu.
18. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.17, в которой указанная замена по более чем одной аминокислоте выбрана из замен, перечисленных в табл.5.
19. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.12, в которой указанная замена выбрана из замены, приведенной в табл.2.
20. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.1, причем указанная антигенсвязывающая молекула связывается с указанным рецептором FcγRIII с аффинностью, повышенной по меньшей мере на 10% по сравнению с той же антигенсвязывающей молекулой, у которой отсутствует указанная модификация.
21. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.1, в которой указанный Fc-участок представляет собой Fc-участок человеческого IgG.
22. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.1, причем указанная антигенсвязывающая молекула представляет собой антитело или фрагмент антитела, включающий Fc-участок.
23. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.22, причем указанное антитело или фрагмент антитела является химерным.
24. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.22, причем указанное антитело или фрагмент антитела является гуманизированным.
25. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.1, причем указанная антигенсвязывающая молекула проявляет повышенную эффекторную функцию.
26. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.25, в которой указанная повышенная эффекторная функция представляет собой повышенную антителозависимую клеточную цитотоксичность или повышенную комплементзависимую цитотоксичность.
27. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.1, в которой указанная измененная олигосахаридная структура включает уменьшенное число остатков фукозы по сравнению с негликоинженерной антигенсвязывающей молекулой.
28. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.27, в которой по меньшей мере 20% олигосахаридов на Fc-участке являются нефукозилированными.
29. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.27, в которой по меньшей мере 50% олигосахаридов на Fc-участке являются нефукозилированными.
30. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.27, в которой по меньшей мере 70% олигосахаридов на Fc-участке являются нефукозилированными.
31. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.27, в которой по меньшей мере 80% олигосахаридов на Fc-участке являются нефукозилированными.
32. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.1, в которой указанная измененная олигосахаридная структура включает повышенное количество диолигосахаридов по сравнению с негликоинженерной антигенсвязывающей молекулой.
33. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.32, в которой большинство указанных диолигосахаридов имеют гибридный тип.
34. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.32, в которой большинство указанных диолигосахаридов имеют комплексный тип.
35. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.1, в которой указанная измененная олигосахаридная структура включает повышенное количество гибридных олигосахаридов по сравнению с негликоинженерной антигенсвязывающей молекулой.
36. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.1, в которой указанная измененная олигосахаридная структура включает повышенное количество комплексных олигосахаридов по сравнению с негликоинженерной антигенсвязывающей молекулой.
37. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.1, в которой указанная измененная олигосахаридная структура включает повышение соотношения остатков GlcNAc и остатков фукозы по сравнению с негликоинженерной антигенсвязывающей молекулой.
38. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.1, в которой указанная антигенсвязывающая молекула избирательно связывает антиген, выбранный из группы, включающей человеческий антиген CD20, человеческий антиген EGFR, человеческий антиген MCSP, человеческий антиген MUC-1, человеческий антиген СЕА, человеческий антиген HER2 и человеческий антиген TAG-72.
39. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула, включающая Fc-участок, причем указанный Fc-участок имеет измененную в результате гликоинженерии олигосахаридную структуру и имеет модификацию по меньшей мере одной аминокислоты и причем указанная антигенсвязывающая молекула проявляет повышенную специфичность к человеческому рецептору FcγRIII по сравнению с антигенсвязывающей молекулы, в которой отсутствует указанная модификация.
40. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.39, причем указанная антигенсвязывающая молекула не проявляет повышенного уровня связывания с человеческим рецептором FcγRII.
41. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.40, причем указанный человеческий рецептор FcγRII представляет собой человеческий рецептор FcγRIIa.
42. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.40, причем указанный человеческий рецептор FcγRII представляет собой человеческий рецептор FcγRIIb.
43. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.39, причем указанный рецептор FcγRIII является гликозилированным.
44. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.43, причем указанный гликозилированный рецептор включает N-связанные олигосахариды в положении Asnl62.
45. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.39, причем указанный рецептор FcγRIII представляет собой FcγRIIIa.
46. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.39, причем указанный рецептор FcγRIII представляет собой FcγRIIIb.
47. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.45, причем указанный рецептор FcγRIIIa имеет остаток валина в положении 158.
48. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.45, причем указанный рецептор FcγRIIIa имеет остаток фенилаланина в положении 158.
49. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.43, в которой указанная модификация в существенной мере не повышает уровень связывания с негликозилированным рецептором FcγRIII по сравнению с антигенсвязывающей молекулой, у которой отсутствует указанная модификация.
50. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.39, в которой указанный Fc-участок включает замену одной или более аминокислот 239, 241, 243, 260, 262, 263, 264, 265, 268, 290, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301, 302 или 303.
51. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.50, в которой указанный Fc-участок включает дополнительную замену одной или более аминокислот 239, 241, 243, 260, 262, 263, 264, 265, 268, 290, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301, 302 или 303.
52. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.39, в которой указанный Fc-участок включает замену одной или более аминокислот 239, 243, 260 или 268.
53. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по любому из пп.50-52, в которой указанная замена замещает природный остаток аминокислоты остатком аминокислоты, который взаимодействует с углеводом, присоединенным к Asnl62 рецептора FcγRIII.
54. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.53, в которой указанный остаток аминокислоты, который взаимодействует с углеводом, присоединенным к Asnl62 рецептора FcγRIII, выбран из группы, состоящей из: Trp, His, Tyr, Glu, Arg, Asp, Phe, Asn и Gln.
55. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.52, в которой указанная замена одной или более аминокислот выбрана из группы, состоящей из: Ser239Asp, Ser239Glu, Ser239Trp, Phe243His, Phe243Glu, Thr260His, His268Asp или His268Glu.
56. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.55, в которой указанная замена более чем одной аминокислоты выбрана из замен, перечисленных в табл.5.
57. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.50, в которой указанная замена представляет собой замену, приведенную в табл.2.
58. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.39, причем указанная антигенсвязывающая молекула связывается с указанным рецептором FcγRIII со специфичностью, повышенной по меньшей мере на 10% по сравнению с антигенсвязывающей молекулой, у которой отсутствует указанная модификация.
59. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.39, причем указанный Fc-участок представляет собой Fc-участок IgG человека.
60. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.39, причем указанная антигенсвязывающая молекула представляет собой антитело или фрагмент антитела, включающий Fc-участок.
61. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.60, причем указанное антитело или фрагмент антитела является химерным.
62. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.60, причем указанное антитело или фрагмент антитела является гуманизированным.
63. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.39, причем указанная антигенсвязывающая молекула проявляет повышенную эффекторную функцию.
64. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.63, причем указанная эффекторная функция представляет собой повышенную антителозависимую клеточную цитотоксичность или повышенную комплементзависимую цитотоксичность.
65. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.39, в которой указанная измененная олигосахаридная структура включает уменьшенное количество остатков фукозы по сравнению негликоинженерной антигенсвязывающей молекулой.
66. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.65, в которой по меньшей мере 20% олигосахаридов на Fc-участке являются нефукозилированными.
67. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.65, в которой по меньшей мере 50% олигосахаридов на Fc-участке являются нефукозилированными.
68. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.65, в которой по меньшей мере 70% олигосахаридов на Fc-участке являются нефукозилированными.
69. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.65, в которой по меньшей мере 80% олигосахаридов на Fc-участке являются нефукозилированными.
70. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.39, причем указанная измененная олигосахаридная структура включает повышенное количество диолигосахаридов по сравнению с негликоинженерной антигенсвязывающей молекулой.
71. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.70, в которой большинство указанных диолигосахаридов представляют собой гибридный тип.
72. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.70, в которой большинство указанных диолигосахаридов представляют собой комплексный тип.
73. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.39, в которой указанная измененная олигосахаридная структура включает повышенное количество гибридных олигосахаридов по сравнению с негликоинженерной антигенсвязывающей молекулой.
74. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.39, в которой указанная измененная олигосахаридная структура включает повышенное количество комплексных олигосахаридов по сравнению с негликоинженерной антигенсвязывающей молекулой.
75. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.39, в которой указанная измененная олигосахаридная структура включает повышение соотношения остатков GlcNAc и остатков фукозы по сравнению с негликоинженерной антигенсвязывающей молекулой.
76. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.39, причем указанная антигенсвязывающая молекула избирательно связывает антиген, выбранный из группы, включающей антиген CD20 человека, антиген EGFR человека, антиген MCSP человека, антиген MUC-1 человека, антиген СЕА человека, антиген HER2 человека и антиген TAG-72 человека.
77. Полинуклеотид, кодирующий полипептид, включающий Fc-участок антитела или фрагмент Fc-участка антитела, причем указанный Fc-участок или его фрагмент имеет модификацию по меньшей мере одной аминокислоты, и причем указанный полипептид проявляет повышенный уровень связывания с гликозилированным человеческим рецептором FcγRIII по сравнению с тем же полипептидом, у которого отсутствует указанная модификация.
78. Полинуклеотид по п.77, причем указанный полипептид представляет собой тяжелую цепь антитела.
79. Полинуклеотид по п.77, причем указанный полипептид представляет собой слитый белок.
80. Полипептид, кодируемый полинуклеотидом по п.77.
81. Полипептид по п.80, причем указанный полипептид представляет собой тяжелую цепь антитела.
82. Полипептид по п.80, причем указанный полипептид представляет собой слитый белок.
83. Антигенсвязывающая молекула, включающая полипептид по любому из пп.80-82.
84. Вектор, включающий полинуклеотид по любому из пп.77-79.
85. Клетка-хозяин, полученная в результате гликоинженерии и включающая вектор по п.84.
86. Способ получения гликоинженерной антигенсвязывающей молекулы, включающей Fc-участок, причем указанный Fc-участок имеет измененную в результате гликоинженерии олигосахаридную структуру и имеет модификацию по меньшей мере одной аминокислоты, и причем указанная антигенсвязывающая молекула проявляет повышенный уровень связывания с человеческим рецептором FcγRIII по сравнению с антигенсвязывающей молекулой, у которой отсутствует указанная модификация, который заключается в:
(а) культивировании клетки-хозяина, полученной в результате гликоинженерии, по п.85 в условиях, создающих возможность экспрессии указанного полинуклеотида, и
(б) выделении указанной гликоинженерной антигенсвязывающей молекулы из культуральной жидкости.
87. Способ получения гликоинженерной антигенсвязывающей молекулы, включающей Fc-участок, причем указанный Fc-участок имеет измененную в результате гликоинженерии олигосахаридную структуру как результат данной гликоинженерии и имеет модификацию по меньшей мере одной аминокислоты, и причем указанная антигенсвязывающая молекула проявляет повышенную специфичность к человеческому рецептору FcγRIII по сравнению с антигенсвязывающей молекулой, у которой отсутствует указанная модификация, который заключается в:
(а) культивировании клетки-хозяина, полученной в результате гликоинженерии, по п.85 в условиях, создающих возможность экспрессии указанного полинуклеотида, и
(б) выделении указанной гликоинженерной антигенсвязывающей молекулы из культуральной жидкости.
88. Гликоинженерная антигенсвязывающая молекула по п.22 или 60, причем указанное антитело или фрагмент антитела является полностью человеческим.
89. Полинуклеотид, кодирующий полипептид, включающий Fc-участок антитела или фрагмент Fc-участка антитела, причем указанный Fc-участок или его фрагмент имеет модификацию по меньшей мере одной аминокислоты, и причем указанный полипептид представляет собой антигенсвязывающую молекулу по любому из пп.1-76.
90. Применение антигенсвязывающей молекулы по любому из пп.1-76, 83 или 88 для получения лекарственного препарата для лечения или профилактики рака.
91. Применение по п.90, в котором указанная форма рака выбрана из группы, включающей рак молочной железы, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, рак кожи, рак поджелудочной железы, рак легкого, рак яичников, рак толстой кишки, рак простаты, рак почки и рак головного мозга.
92. Применение антигенсвязывающей молекулы по любому из пп.1-76, 83 или 88 для получения лекарственного препарата для лечения или профилактики предракового состояния или поражения.
93. Применение по п.92, причем указанное предраковое состояние или поражение выбрано из группы, включающей лейкоплакию полости рта, старческий кератоз (лучевой кератоз), предраковые полипы толстой или прямой кишки, эпителиальную дисплазию желудка, аденоматозную дисплазию, синдром наследственного неполипозного рака толстой кишки (HNPCC), эзофагит Баррета, дисплазию мочевого пузыря и предраковые состояния шейки матки.
94. Применение по п.90, причем указанную антигенсвязывающую молекулу используют в терапевтически эффективном количестве от приблизительно 1,0 мг/кг до приблизительно 15 мг/кг.
95. Применение по п.90, причем указанное терапевтически эффективное количество составляет от приблизительно 1,5 мг/кг до приблизительно 12 мг/кг.
96. Применение по п.90, причем указанное терапевтически эффективное количество составляет от приблизительно 1,5 мг/кг до приблизительно 4,5 мг/кг.
97. Применение по п.90, причем указанное терапевтически эффективное количество составляет от приблизительно 4,5 мг/кг до приблизительно 12 мг/кг.
98. Применение по п.90, причем указанное терапевтически эффективное количество составляет приблизительно 1,5 мг/кг.
99. Применение по п.90, причем указанное терапевтически эффективное количество составляет приблизительно 4,5 мг/кг.
100. Применение по п.90, причем указанное терапевтически эффективное количество составляет приблизительно 12 мг/кг.
101. Фармацевтическая композиция, включающая антигенсвязывающую молекулу по любому из пп.1-76, 83 или 88 и фармацевтически приемлемый носитель.
102. Способ лечения или профилактики рака, заключающийся во введении терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по п.101 нуждающемуся в этом пациенту.
103. Способ по п.102, в котором указанная форма рака выбрана из группы, включающей рак молочной железы, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, рак кожи, рак поджелудочной железы, рак легкого, рак яичников, рак толстой кишки, рак простаты, рак почки и рак головного мозга.
104. Способ лечения или профилактики предракового состояния или поражения, заключающийся во введении терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции по п.101 нуждающемуся в этом пациенту.
105. Способ по п.104, в котором указанное предраковое состояние или поражение выбрано из группы, включающей лейкоплакию полости рта, старческий кератоз (лучевой кератоз), предраковые полипы толстой или прямой кишки, эпителиальная дисплазия желудка, аденоматозная дисплазия, синдром наследственного неполипозного рака толстой кишки (HNPCC), эзофагит Баррета, дисплазия мочевого пузыря и предраковые состояния шейки матки.
106. Антигенсвязывающая молекула по любому из пп.1, 39 или 83, предназначенная для применения для лечения или профилактики рака.
107. Антигенсвязывающая молекула по п.106, причем указанная форма рака выбрана из группы, включающей рак молочной железы, рак мочевого пузыря, рак головы и шеи, рак кожи, рак поджелудочной железы, рак легкого, рак яичников, рак толстой кишки, рак простаты, рак почки и рак головного мозга.
108. Антигенсвязывающая молекула по любому из пп.1, 39 или 83, предназначенная для применения для лечения или профилактики предракового состояния или поражения.
109. Антигенсвязывающая молекула по п.108, причем указанное предраковое состояние или поражение выбрано из группы, включающей лейкоплакию полости рта, старческий кератоз (лучевой кератоз), предраковые полипы толстой или прямой кишки, эпителиальная дисплазия желудка, аденоматозная дисплазия, синдром наследственного неполипозного рака толстой кишки (HNPCC), эзофагит Баррета, дисплазия мочевого пузыря и предраковые состояния шейки матки.
110. Антигенсвязывающая молекула по пп.1, 39 или 83, предназначенная для применения в терапии.
111. Применение по п.92, при котором указанная антигенсвязывающая молекула используется в терапевтически эффективном количестве, которое составляет от приблизительно 1,0 мг/кг до приблизительно 15 мг/кг.
112. Применение по п.92, причем указанное терапевтически эффективное количество составляет от приблизительно 1,5 мг/кг до приблизительно 12 мг/кг.
113. Применение по п.92, причем указанное терапевтически эффективное количество составляет от приблизительно 1,5 мг/кг до приблизительно 4,5 мг/кг.
114. Применение по п.92, причем указанное терапевтически эффективное количество составляет от приблизительно 4,5 мг/кг до приблизительно 12 мг/кг.
115. Применение по п.92, причем указанное терапевтически эффективное количество составляет приблизительно 1,5 мг/кг.
116. Применение по п.92, причем указанное терапевтически эффективное количество составляет приблизительно 4,5 мг/кг.
117. Применение по п.92, причем указанное терапевтически эффективное количество составляет приблизительно 12 мг/кг.