СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ 3-МЕТОКСИГИДРОКСИБЕНЗОЛА В БИОЛОГИЧЕСКОМ МАТЕРИАЛЕ
METHOD OF DETERMINING 3-METHOXYHYDROXYBENZENE IN BIOLOGICAL MATERIAL

Изобретение относится к биологии и токсикологической химии, а именно к способам определения 3-метоксигидроксибензола в биологическом материале, и может быть использовано в практике санэпидстанций, химико-токсикологических, экспертно-криминалистических и ветеринарных лабораторий. Способ относится к числу массовых.
Известен способ определения фенольных соединений, в том числе 3-метоксигидроксибензола, в биологическом материале (сухом растительном сырье), состоящий в том, что биологический объект измельчают, неоднократно (четырежды), каждый раз в течение получаса, обрабатывают 70%-ным этанолом в условиях нагревания при 60-70°C с обратным холодильником, отдельные извлечения отделяют, объединяют, фильтруют, растворитель из фильтрата испаряют при температуре 50°C до получения сухого остатка, остаток растворяют в 70%-ном этаноле, образующийся раствор фильтруют и проводят определение хромато-масс-спектрометрическим методом с применением капиллярной колонки длиной 30 м и внутренним диаметром 0,25 мм с неподвижной фазой (5%-фенил)-метилполисилоксан, используя газ-носитель гелий, подаваемый со скоростью 1 мл/мин, и масс-селективный детектор, начальная температура термостата колонки составляет 50°C, данная температура выдерживается в течение 1 минуты, в дальнейшем температура программируется от 50°C до 280°C со скоростью 5°C в минуту, температура испарителя составляет 250°C [Грибок Н.А., Спиридович Е.В., Решетников В.Н, Власова Т.М., Сенькевич Г.Г., Курченко В.П. Содержание вторичных метаболитов у Colchicum autumnale L. в условиях Беларуси // Труды Белорусского государственного университета. - 2010. - Т.4.- Вып.2. - С.1-9].
Способ характеризуется недостаточно высокой чувствительностью.
Известен способ определения 3-метоксигидроксибензола в биологическом материале (тканях печени и почек), который заключается в том, что биологический объект двукратно по 45 минут обрабатывают этилацетатом при массовом соотношении этилацетата и биоматериала при каждом настаивании 2:1, этилацетатные извлечения объединяют, растворитель из объединенного этилацетатного извлечения испаряют, остаток растворяют в ацетоне, полученный раствор наносят на хроматографическую пластину типа «Сорбфил» с люминесцентным индикатором, хроматографируют в присутствии вещества-свидетеля, используя подвижную фазу бензол-дихлорэтан в соотношении 8:2 по объему, хроматограммы проявляют в УФ-свете, анализируемое вещество элюируют из сорбента этанолом и измеряют оптическую плотность этанольного элюата при длине волны 277,7 нм на фоне раствора, полученного в контрольном опыте [Асташкина А.П., Шорманов В.К., Гришечко О.И. Определение 3-метоксигидроксибензола в биологических объектах методом электронной спектрофотометрии // Биомедицинская инженерия и биотехнология: Сборник материалов V Всероссийской научно-практической конференции с международным участием. - Курск, 2012. - С.61-63].
Способ характеризуется относительно низкой чувствительностью.
Наиболее близким является способ определения 3-метоксигидроксибензола в биологическом материале, заключающийся в том, что биологический объект неоднократно (дважды) по 45 минут обрабатывают алкилацетатом, в качестве которого используется этилацетат, отдельные извлечения объединяют, растворитель из объединенного алкилацетатного извлечения испаряют, остаток растворяют в смеси растворителей гексан-диоксан-пропанол-2, взятых в соотношении 20:5:1 по объему, хроматографируют в макроколонке силикагеля L 40/100 мкм с использованием подвижной фазы гексан-диоксан-пропанол-2 в соотношении 20:5:1 по объему, фракции элюата, содержащие анализируемое вещество, объединяют, элюент испаряют в токе воздуха при температуре 18-22°C, затем в токе азота до полного удаления растворителя, остаток растворяют в дихлорметане и проводят определение хромато-масс-спектрометрическим методом с применением капиллярной колонки длиной 25 м и внутренним диаметром 0,2 мм с неподвижной фазой (5%-фенил)-метилполисилоксан, используя газ-носитель гелий, подаваемый со скоростью 0,6 мл/мин, и масс-селективный детектор, работающий в режиме электронного удара, начальная температура термостата колонки составляет 70°C, данная температура выдерживается в течение 3 минут, в дальнейшем температура программируется от 70°C до 290°C со скоростью 20°C в минуту, температура инжектора составляет 250°C, температура интерфейса детектора - 300°C, регистрируют интенсивность сигнала, обусловленного заряженными частицами, образующимися при бомбардировке анализируемого вещества, вышедшего из капиллярной колонки и попавшего в источник ионов, ионизирующим пучком электронов с энергией 70 эВ, регистрируют масс-спектр по полному ионному току и вычисляют количество 3-метоксигидроксибензола исходя из площади хроматографического пика, полученного регистрацией сигнала по характеристическому молекулярному иону 124 m/Z (Асташкина А.П., Шорманов В.К., Останин М.А., Гришечко О.И., Елизарова М.К. Распределение метоксипроизводных гидроксибензола в организме теплокровных животных // Фармация. - 2013. - Т.62, №5. - С.5-8).
Способ характеризуется недостаточно высокой чувствительностью определения.
Техническим результатом настоящего изобретения является повышение чувствительности определения.
Технический результат достигается тем, что биологический объект неоднократно (трижды) по 45 минут обрабатывают алкилацетатом, в качестве которого используется метилацетат, отдельные извлечения объединяют, растворитель из объединенного алкилацетатного извлечения испаряют, остаток неоднократно обрабатывают ацетоном, ацетоновые извлечения объединяют, упаривают в токе воздуха при температуре 18-22°C, затем в токе азота до полного удаления растворителя, остаток растворяют в эфире, полученный раствор разбавляют гексаном в соотношении 1:1 по объему, экстрагируют буферным раствором с pH 12-13, водно-щелочное извлечение отделяют, подкисляют до pH 2-3, насыщают сульфатом натрия, экстрагируют диэтиловым эфиром, эфирное извлечение отделяют, обезвоживают, упаривают в токе воздуха при 18-22°C, а затем в токе азота до полного удаления растворителя, остаток растворяют в смеси растворителей гексан-диоксан-пропанол-2, взятых в соотношении 20:5:1 по объему, хроматографируют в макроколонке силикагеля L 40/100 мкм с использованием подвижной фазы гексан-диоксан-пропанол-2 в соотношении 20:5:1 по объему, фракции элюата, содержащие анализируемое вещество, объединяют, элюент испаряют в токе воздуха при температуре 18-22°С, затем в токе азота до полного удаления растворителя, остаток растворяют в дихлорметане и проводят определение хромато-масс-спектрометрическим методом с применением капиллярной колонки длиной 25 м и внутренним диаметром 0,2 мм с неподвижной фазой (5%-фенил)-метилполисилоксан, используя газ-носитель гелий, подаваемый со скоростью 0,6 мл/мин, и масс-селективный детектор, работающий в режиме электронного удара, начальная температура термостата колонки составляет 70°C, данная температура выдерживается в течение 3 минут, в дальнейшем температура программируется от 70°C до 290°C со скоростью 20°C в минуту, температура инжектора составляет 250°C, температура интерфейса детектора - 300°C, регистрируют интенсивность сигнала, обусловленного заряженными частицами, образующимися при бомбардировке анализируемого вещества, вышедшего из капиллярной колонки и попавшего в источник ионов, ионизирующим пучком электронов с энергией 70 эВ, регистрируют масс-спектр по полному ионному току и вычисляют количество 3-метоксигидроксибензола исходя из площади хроматографического пика, полученного регистрацией сигнала по характеристическому молекулярному иону 124 m/Z.
Способ осуществляется следующим образом: биологический материал, содержащий 3-метоксигидроксибензол, неоднократно (трижды) по 45 минут обрабатывают алкилацетатом, в качестве которого используется метилацетат, отдельные извлечения объединяют, растворитель из объединенного алкилацетатного извлечения испаряют, остаток неоднократно обрабатывают ацетоном, ацетоновые извлечения объединяют, упаривают в токе воздуха при температуре 18-22°C, затем в токе азота до полного удаления растворителя, остаток растворяют в эфире, полученный раствор разбавляют гексаном в соотношении 1:1 по объему, экстрагируют буферным раствором с pH 12-13, водно-щелочное извлечение отделяют, подкисляют до pH 2-3, насыщают сульфатом натрия, экстрагируют диэтиловым эфиром, эфирное извлечение отделяют, обезвоживают, упаривают в токе воздуха при 18-22°C, а затем в токе азота до полного удаления растворителя, остаток растворяют в смеси растворителей гексан-диоксан-пропанол-2, взятых в соотношении 20:5:1 по объему, хроматографируют в макроколонке силикагеля L 40/100 мкм с использованием подвижной фазы гексан-диоксан-пропанол-2 в соотношении 20:5:1 по объему, фракции элюата, содержащие анализируемое вещество, объединяют, элюент испаряют в токе воздуха при температуре 18-22°C, затем в токе азота до полного удаления растворителя, остаток растворяют в дихлорметане и проводят определение хромато-масс-спектрометрическим методом с применением капиллярной колонки длиной 25 м и внутренним диаметром 0,2 мм с неподвижной фазой (5%-фенил)-метилполисилоксан, используя газ-носитель гелий, подаваемый со скоростью 0,6 мл/мин, и масс-селективный детектор, работающий в режиме электронного удара, начальная температура термостата колонки составляет 70°C, данная температура выдерживается в течение 3 минут, в дальнейшем температура программируется от 70°C до 290°C со скоростью 20°C в минуту, температура инжектора составляет 250°C, температура интерфейса детектора - 300°C, регистрируют интенсивность сигнала, обусловленного заряженными частицами, образующимися при бомбардировке анализируемого вещества, вышедшего из капиллярной колонки и попавшего в источник ионов, ионизирующим пучком электронов с энергией 70 эВ, регистрируют масс-спектр по полному ионному току и вычисляют количество 3-метоксигидроксибензола исходя из площади хроматографического пика, полученного регистрацией сигнала по характеристическому молекулярному иону 124 m/Z.
Способ иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1
Определение 3-метоксигидроксибензола в ткани печени
К 10 г ткани печени прибавляют 10 мг 3-метоксигидроксибензола, тщательно перемешивают биологическую ткань с веществом и оставляют на 1,5 часа при температуре 18-22°C.
По истечении указанного времени биологический объект неоднократно (трижды) по 45 минут при перемешивании обрабатывают алкилацетатом, в качестве которого используется метилацетат, порциями по 20 мл каждая.
Отдельные алкилацетатные извлечения отделяют от твердых частиц биологического материала, объединяют, растворитель из объединенного алкилацетатного извлечения испаряют в токе воздуха при 18-22°C, остаток неоднократно (трижды) по 3 минуты обрабатывают порциями ацетона по 15 мл каждая при энергичном перемешивании, ацетоновые извлечения отделяют, объединяют, встряхивают с 7 г безводного сульфата натрия, фильтруют через стеклянный фильтр диаметром 4 см со слоем безводного сульфата натрия толщиной 1-1,5 см, сульфат натрия и фильтр дополнительно промывают 20 мл ацетона, фильтрат и промывную жидкость объединяют, упаривают в токе воздуха при 18-22°C до объема 0,5-1,0 мл, а затем в токе азота до полного удаления растворителя, остаток растворяют в 10 мл диэтилового эфира, полученный раствор разбавляют гексаном в соотношении 1:1 по объему, прибавляя 10 мл данного растворителя, экстрагируют дважды порциями буферного раствора с pH 12-13 по 20 мл каждая. Отдельные водно-щелочные извлечения отделяют, объединяют, объединенное водно-щелочное извлечение подкисляют 24%-ным раствором хлороводородной кислоты до pH 2-3, насыщают сульфатом натрия и экстрагируют дважды порциями диэтилового эфира по 50 мл каждая. Эфирные извлечения отделяют, объединяют, обезвоживают, пропуская через стеклянный фильтр диаметром 4 см со слоем безводного сульфата натрия толщиной 1-1,5 см, фильтр дополнительно промывают 20 мл диэтилового эфира. Отдельные фильтраты объединяют, упаривают в токе воздуха при 18-22°C до объема 0,5-1,0 мл, а затем в токе азота до полного удаления растворителя. Остаток растворяют в 2-3 мл смеси растворителей гексан-диоксан-пропанол-2, взятых в соотношении 20:5:1 по объему, и вносят в хроматографическую макроколонку размерами 490×11 мм, заполненную 10 г силикагеля L 40/100 мкм. Хроматографируют, используя подвижную фазу гексан-диоксан-пропанол-2 в соотношении 20:5:1 по объему.
Элюат собирают отдельными фракциями по 2 мл каждая. Фракции элюата с 7 по 16 включительно, содержащие анализируемое вещество, объединяют, элюент испаряют при 18-22°C в токе воздуха до объема 0,5-1 мл, а затем - в токе азота до полного удаления растворителя. Остаток растворяют в 10 мл дихлорметана (раствор А). 2,0 мл раствора А вносят в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят дихлорметаном до метки (раствор Б).
4 мкл раствора Б вводят в хромато-масс-спектрометр.
Проводят определение хромато-масс-спектрометрическим методом, используя газовый хроматограф фирмы Agilent Technologies (США) модели 6850 Network GC System с квадрупольным масс-селективным детектором модели 5973 Network этой же фирмы.
Хроматографирование осуществляют в капиллярной колонке DB-5 MS EVIDEX длиной 25 м, внутренним диаметром 0,2 мм с неподвижной фазой толщиной 0,33 мкм, представляющей собой (5%-фенил)-метилполисилоксан.
Начальная температура термостата колонки составляет 70°C, данная температура выдерживается в течение 3 минут, в дальнейшем температура программируется от 70°C до 290°C со скоростью 20°C в минуту, конечная температура колонки выдерживается в течение 10 минут, температура инжектора составляет 250°C, температура квадруполя - 150°C, температура источника ионов - 230°C, температура интерфейса детектора - 300°C, регистрируют интенсивность сигнала, обусловленного заряженными частицами, образующимися при бомбардировке анализируемого вещества, вышедшего из капиллярной колонки и попавшего в источник ионов, ионизирующим пучком электронов с энергией 70 эВ.
В качестве газа-носителя используется гелий. Подача газа-носителя производится со скоростью 0,6 мл/мин. Режим с делением потока 1:2. Масс-селективный детектор работает в режиме электронного удара (70 эВ). Регистрация масс-спектра проводится с задержкой 3,5 минуты. Диапазон сканирования составляет 40-500 m/z.
В масс-спектре данного соединения, снятому по полному ионному току, обнаруживаются сигналы ряда характеристических заряженных частиц с массовыми числами 40, 53, 63, 66, 69, 81, 94, 124. Наиболее интенсивной является частица с массовым числом 124, интенсивность которой принимается за 100%.
Регистрируя сигнал по характеристическому молекулярному иону 124 m/Z, получают хроматограмму анализируемого вещества. Пик на хроматограмме с временем удерживания 8,69 минут соответствует 3-метоксигидроксибензолу. 3-метоксигидроксибензол идентифицируют по сочетанию времени удерживания в неподвижной фазе колонки и специфического набора сигналов характеристических заряженных частиц в его масс-спектре. Количество 3-метоксигидроксибензола вычисляют по площади хроматографического пика, используя уравнение градуировочного графика, и пересчитывают на навеску анализируемого вещества, внесенную в биологический материал.
Построение градуировочного графика
В ряд мерных колб вместимостью 25 мл вносят 0,25, 0,5, 1,0, 2,0, 5,0 10,0 и 20,0 мл 0,05% раствора 3-метоксигидроксибензола в дихлорметане и доводят объем содержимого каждой колбы до метки дихлорметаном.
4 мкл каждого из полученных растворов вводят в испаритель газожидкостного хроматографа.
Проводят определение хромато-масс-спектрометрическим методом, используя газовый хроматограф фирмы Agilent Technologies (США) модели 6850 Network GC System с квадрупольным масс-селективным детектором модели 5973 Network этой же фирмы.
Хроматографирование осуществляют в капиллярной колонке DB-5 MS EVIDEX длиной 25 м, внутренним диаметром 0,2 мм с неподвижной фазой толщиной 0,33 мкм, представляющей собой (5%-фенил)-метилполисилоксан.
Начальная температура термостата колонки составляет 70°C, данная температура выдерживается в течение 3 минут, в дальнейшем температура программируется от 70°C до 290°C со скоростью 20°C в минуту, конечная температура колонки выдерживается в течение 10 минут, температура инжектора составляет 250°C, температура квадруполя - 150°C, температура источника ионов - 230°C, температура интерфейса детектора - 300°C, регистрируют интенсивность сигнала, обусловленного заряженными частицами, образующимися при бомбардировке анализируемого вещества, вышедшего из капиллярной колонки и попавшего в источник ионов, ионизирующим пучком электронов с энергией 70 эВ.
В качестве газа-носителя используется гелий. Подача газа-носителя производится со скоростью 0,6 мл/мин. Режим с делением потока 1:2. Масс-селективный детектор работает в режиме электронного удара (70 эВ). Регистрация масс-спектра проводится с задержкой 3,5 минуты. Диапазон сканирования составляет 40-500 m/z.
-8
Регистрируя сигнал по характеристическому молекулярному иону 124 m/Z, получают хроматограмму анализируемого вещества и вычисляют площадь хроматографического пика, соответствующего 3-метоксигидроксибензолу. По результатам измерений на хромато-масс-спектрометре строят график зависимости площади пика от концентрации определяемого вещества. График линеен в интервале концентраций 1·10 г.
Методом наименьших квадратов рассчитывают уравнение градуировочного графика, которое в данном случае имеет вид:
S=22229·С-1204,
где S - площадь хроматографического пика; С - концентрация определяемого вещества в хроматографируемой пробе, нг.
Результаты количественного определения 3-метоксигидроксибензола в ткани печени представлены в таблице 1.
Пример 2
Определение 3-метоксигидроксибензола в ткани легких
К 10 г ткани легких прибавляют 10 мг 3-метоксигидроксибензола, тщательно перемешивают биологическую ткань с веществом и оставляют на 1,5 часа при температуре 18-22°C.
По истечении указанного времени биологический объект неоднократно (трижды) по 45 минут при перемешивании обрабатывают алкилацетатом, в качестве которого используется метилацетат, порциями по 20 мл каждая.
Отдельные алкилацетатные извлечения отделяют от твердых частиц биологического материала, объединяют, растворитель из объединенного алкилацетатного извлечения испаряют в токе воздуха при 18-22°C, остаток неоднократно (трижды) по 3 минуты обрабатывают порциями ацетона по 15 мл каждая при энергичном перемешивании, ацетоновые извлечения отделяют, объединяют, встряхивают с 7 г безводного сульфата натрия, фильтруют через стеклянный фильтр диаметром 4 см со слоем безводного сульфата натрия толщиной 1-1,5 см, сульфат натрия и фильтр дополнительно промывают 20 мл ацетона, фильтрат и промывную жидкость объединяют, упаривают в токе воздуха при 18-22°C до объема 0,5-1,0 мл, а затем в токе азота до полного удаления растворителя, остаток растворяют в 10 мл диэтилового эфира, полученный раствор разбавляют гексаном в соотношении 1:1 по объему, прибавляя 10 мл данного растворителя, экстрагируют дважды порциями буферного раствора с pH 12-13 по 20 мл каждая. Отдельные водно-щелочные извлечения отделяют, объединяют, объединенное водно-щелочное извлечение подкисляют 24%-ным раствором хлороводородной кислоты до pH 2-3, насыщают сульфатом натрия и экстрагируют дважды порциями диэтилового эфира по 50 мл каждая. Эфирные извлечения отделяют, объединяют, обезвоживают, пропуская через стеклянный фильтр диаметром 4 см со слоем безводного сульфата натрия толщиной 1-1,5 см, фильтр дополнительно промывают 20 мл диэтилового эфира. Отдельные фильтраты объединяют, упаривают в токе воздуха при 18-22°C до объема 0,5-1,0 мл, а затем в токе азота до полного удаления растворителя. Остаток растворяют в 2-3 мл смеси растворителей гексан-диоксан-пропанол-2, взятых в соотношении 20:5:1 по объему, и вносят в хроматографическую макроколонку размерами 490×1 мм, заполненную 10 г силикагеля L 40/100 мкм. Хроматографируют, используя подвижную фазу гексан-диоксан-пропанол-2 в соотношении 20:5:1 по объему.
Элюат собирают отдельными фракциями по 2 мл каждая. Фракции элюата с 7 по 16 включительно, содержащие анализируемое вещество, объединяют, элюент испаряют при 18-22°C в токе воздуха до объема 0,5-1 мл, а затем - в токе азота до полного удаления растворителя. Остаток растворяют в 10 мл дихлорметана (раствор А). 2,0 мл раствора A вносят в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят дихлорметаном до метки (раствор Б).
4 мкл раствора Б вводят в хромато-масс-спектрометр.
Проводят определение хромато-масс-спектрометрическим методом, используя газовый хроматограф фирмы Agilent Technologies (США) модели 6850 Network GC System с квадрупольным масс-селективным детектором модели 5973 Network этой же фирмы.
Хроматографирование осуществляют в капиллярной колонке DB-5 MS EVIDEX длиной 25 м, внутренним диаметром 0,2 мм с неподвижной фазой толщиной 0,33 мкм, представляющей собой (5%-фенил)-метилполисилоксан.
Начальная температура термостата колонки составляет 70°C, данная температура выдерживается в течение 3 минут, в дальнейшем температура программируется от 70°C до 290°C со скоростью 20°C в минуту, конечная температура колонки выдерживается в течение 10 минут, температура инжектора составляет 250°C, температура квадруполя - 150°C, температура источника ионов - 230°C, температура интерфейса детектора - 300°C, регистрируют интенсивность сигнала, обусловленного заряженными частицами, образующимися при бомбардировке анализируемого вещества, вышедшего из капиллярной колонки и попавшего в источник ионов, ионизирующим пучком электронов с энергией 70 эВ.
В качестве газа-носителя используется гелий. Подача газа-носителя производится со скоростью 0,6 мл/мин. Режим с делением потока 1:2. Масс-селективный детектор работает в режиме электронного удара (70 эВ). Регистрация масс-спектра проводится с задержкой 3,5 минуты. Диапазон сканирования составляет 40-500 m/z.
В масс-спектре данного соединения, снятому по полному ионному току, обнаруживаются сигналы ряда характеристических заряженных частиц с массовыми числами 40, 53, 63, 66, 69, 81, 94, 124. Наиболее интенсивной является частица с массовым числом 124, интенсивность которой принимается за 100%.
Регистрируя сигнал по характеристическому молекулярному иону 124 m/Z, получают хроматограмму анализируемого вещества. Пик на хроматограмме с временем удерживания 8,69 минут соответствует 3-метоксигидроксибензолу. 3-метоксигидроксибензол идентифицируют по сочетанию времени удерживания в неподвижной фазе колонки и специфического набора сигналов характеристических заряженных частиц в его масс-спектре. Количество 3-метоксигидроксибензола вычисляют по площади хроматографического пика, используя уравнение градуировочного графика, и пересчитывают на навеску анализируемого вещества, внесенную в биологический материал.
Построение градуировочного графика
Построение градуировочного графика и его уравнение приводятся в примере 1.
Результаты количественного определения 3-метоксигидроксибензола в ткани легких представлены в таблице 2.
Предлагаемый способ по сравнению с прототипом в 2 раза повышает чувствительность определения в биологическом материале и увеличивает степень извлечения приблизительно на 7%.
Сравнительные характеристики предлагаемого и известного способов представлены в таблице 3.
Таблица 1
Результаты определения 3-метоксигидроксибензола в ткани печени (n=5; Р=0,95)
№
Внесено3-метоксигидроксибензола, мг в 10 г ткани печени
Найдено
Метрологические характеристики, %
площадь пика на хроматограмме, усл. ед.
мг в хроматографируемой пробе
мг в пересчете на навеску, внесенную в биоматериал
% от внесенной в биоматериал навески
1
10,0
3137531
1,4120·10<sup>-4</sup>
8,825
88,25
<maths num="1"><math display="block"><mrow><mover accent="true"><mi>х</mi><mo stretchy="true">¯</mo></mover><mo>=</mo><mn>90,68</mn></mrow></math><img file="00000001.tif" he="7" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" /></maths>
2
10,0
3017272
1,3579·10<sup>-4</sup>
8,487
84,87
S=4,24
3
10,0
3238228
1,4573·10<sup>-4</sup>
9,108
91,08
<maths num="2"><math display="block"><mrow><msub><mtext>S</mtext><mrow><mover accent="true"><mtext>x</mtext><mo stretchy="true">¯</mo></mover></mrow></msub><mo>=</mo><mtext>1</mtext><mtext>,91</mtext></mrow></math><img file="00000002.tif" he="7" wi="18" img-content="undefined" img-format="tif" /></maths>
4
10,0
3326700
1,4971·10<sup>-4</sup>
93,57
93,57
<maths num="3"><math display="block"><mrow><mi>Δ</mi><mover accent="true"><mtext>x</mtext><mo stretchy="true">¯</mo></mover><mtext> </mtext><mo>=</mo><mtext>5</mtext><mtext>,30</mtext></mrow></math><img file="00000003.tif" he="7" wi="20" img-content="undefined" img-format="tif" /></maths>
5
10,0
3400278
1,5302·10<sup>-4</sup>
9,564
95,64
ε=5,85
Таблица 2
Результаты определения 3-метоксигидроксибензола в ткани легких (n=5; P=0,95)
№
Внесено 3-метоксигидроксибензола, мг в 10 г ткани легких
Найдено
Метрологические характеристики, %
площадь пика на хроматограмме, усл. ед.
мг в хроматографируемой пробе
мг в пересчете на навеску, внесенную в биоматериал
% от внесенной в биоматериал навески
1
10,0
3251343
1,4632·10<sup>-4</sup>
9,145
91,45
<maths num="4"><math display="block"><mrow><mover accent="true"><mi>х</mi><mo stretchy="true">¯</mo></mover><mo>=</mo><mn>91,41</mn></mrow></math><img file="00000004.tif" he="7" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" /></maths>
2
10,0
3138865
1,4126·10<sup>-4</sup>
8,829
88,29
S=3,96
3
10,0
3420951
1,5395·10<sup>-4</sup>
9,622
96,22
<maths num="5"><math display="block"><mrow><msub><mtext>S</mtext><mrow><mover accent="true"><mtext>x</mtext><mo stretchy="true">¯</mo></mover></mrow></msub><mo>=</mo><mtext>1</mtext><mtext>,77</mtext></mrow></math><img file="00000005.tif" he="7" wi="19" img-content="undefined" img-format="tif" /></maths>
4
10,0
3353819
1,5093·10<sup>-4</sup>
9,433
94,33
<maths num="6"><math display="block"><mrow><mi>Δ</mi><mover accent="true"><mtext>x</mtext><mo stretchy="true">¯</mo></mover><mtext> </mtext><mo>=</mo><mtext>4</mtext><mtext>,93</mtext></mrow></math><img file="00000006.tif" he="7" wi="20" img-content="undefined" img-format="tif" /></maths>
5
10,0
3085293
1,3885·10<sup>-4</sup>
8,678
86,78
ε=5,39
Таблица 3
Сравнительная характеристика предлагаемого и известного способов (на примере определения 3-метоксигидроксибензола в ткани печени)
Показатели
Предлагаемый способ
Известный способ
Чувствительность (открываемый минимум) в 100 г биоматериала
8,0·10<sup>-6</sup> г
1,6·10<sup>-5</sup> г
Степень извлечения из биологического материала
83,05%
90,68%