Морфофункциональное состояние поджелудочной железы и уровень общего белка в сыворотке крови крыс при введении полиоксидония

2. Лочкарев, В.А. Повышение эффективности лечения при бронхопневмонии у телят / В.А. Лочкарев // Ветеринария. -2000.- №11. - С.38.

3. Порфирьев, И. А. Профилактика неспецифической бронхопневмонии у телят / И.А. порфирьев // Ветеринария. - 2007. -№1. - С.42-46.

4. Кубаков, Р.З. Терапия респираторных болезней телят / Р.З. Кубаков, М. Л. Шакуров, А. З. Равилов // Ветеринария. -1987. - №3. - С.50-52.

5. Федюк, В.И. Лечение и профилактика респираторных болезней телят / В.И. Федюк, А. С. Лысухо // Ветеринария. -1997. - №8.-С.20-23.

ЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИМЕНЕНИЕ АНТИБИОТИКОВ ПРИ БРОНХОПНЕМОНИИ ТЕЛЯТ

Альдяков А.В., Назаров С.Д.

Резюме.

Для изучения влияния, препаратов тилозин 50, тетрациклина гидрохлорид и бициллин 3 на животных с поражениями легочного тракта и носовой полости были использованы телята, у которых после микроскопических и бактериологических исследованиях проб смывов из носовых полостей выделена условно патогенная микрофлора. В диагнозе были рассмотрены клинические и эпизоотологические данные. Телята, получавшие антибиотики с профилактической целью, если и заболевали, то в легкой форме, без обезвоживания организма и потери массы тела, у них сохранялся аппетит, не нарушалось резко общее состояние. Эффективность, простота и удобство применения препаратов тилозина 50 и тетрациклина гидрохлорид и бициллин 3, отсутствие необходимого дополнительного лечения, снижение затрат труда и средств на лечение телят явилось основанием хорошей оценки антибиотиков ветеринарными специалистами и работниками животноводства.

EFFICIENCY APPLICATION OF ANTIBIOTICS IN BRONCHOPHEMONY OF CALVES

Aldyakov AV, Nazarov S.D.

Summary

To study the effect, preparations of tylosin 50, tetracycline hydrochloride and bicillin 3 on animals with lesions of the pulmonary tract and nasal cavity, calves were used in which, after microscopic and bacteriological studies of samples of washings from nasal cavities, a conditionally pathogenic microflora was identified. The diagnosis examined clinical and epizootic data. Calves, who received antibiotics for preventive purposes, if they were ill, they retained an appetite in a mild form, without dehydration and loss of body weight, the general condition was not violated. Efficacy, simplicity and convenience of the use of tylosin 50 and tetracycline hydrochloride and bicillin 3, lack of the necessary additional treatment, reduction of labor costs and funds for the treatment of calves, was the basis for a good assessment of antibiotics by veterinarians and livestock workers.

УДК 619:591.147.7/.111:615-092:569.323.4

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ И УРОВЕНЬ ОБЩЕГО БЕЛКА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ КРЫС ПРИ ВВЕДЕНИИ

ПОЛИОКСИДОНИЯ

Бектемирова М.Р. - аспирант ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана»

Ключевые слова: морфология, поджелудочная железа, крысы, полиоксидоний, сыворотка крови

Key words: morphology, pancreas, rats, polyoxidonium, blood serum

Поджелудочная железа у крыс рас- на с желудком, с краниальным и нисходя-

положена в брыжейке тонкой кишки, связа- щим отделами двенадцатиперстной кишки.

12

Орган имеет характерное строение, так как состоит из отдельных маленьких гроздевидных долек поджелудочной железы, связанных рыхлой соединительной тканью в одно древовидно разветвляющееся образование. Поджелудочная железа белой крысы, как и поджелудочная железа у человека, имеет три основные части - головка (дуоденальная часть), тело (пилорическая часть) и хвост (желудочно-селезеночная часть)[8].

В структурном плане железа состоит из двух частей, различных в морфофунк-циональном отношении - экзокринной и эндокринной, причем первый компонент железы значительно преобладает в дольках [2]. Особенностью строения поджелудочной железы крысы является наличие двух очень тонких выводных протока, которые впадают либо в желчный проток, либо непосредственно в двенадцатиперстную кишку [3, 6].

Иммуномодулятор полиоксидоний обладает комплексным действием на организм, оказывая влияние не только на состояние иммунитета, но и обладает также еще антиоксидантным и детоксицирующим действием. Препарат способен повышать низкие показатели иммунитета, понижать высокие и не оказывать влияния на то, что находится в пределах нормы [5]. Полиокси-доний нивелирует побочные эффекты антибиотиков, восстанавливает иммунитет [7, 9]. На сегодняшний день влияние полиок-сидония на поджелудочную железу изучено в недостаточной степени, особенно это относится к применению этого препарата животным в малых и сверхмалых дозах. Использование различных биологических активных веществ в малых и сверхмалых дозах является перспективным направлением, которое разрабатывается учеными на современном этапе развития науки [1,10]. Поэтому целью нашего исследования являлось изучение морфофункционального состояния поджелудочной железы и уровень общего белка в сыворотке крови у крыс после внутримышечного введения им полиок-сидония в различных дозах.

Были поставлены следующие задачи:

1) Определить уровень общего белка в сыворотке крови у контрольных и подопытных крыс после внутримышечного введения терапевтической (0,1 мг/мл массы тела), малой 1(1х10-6 мг/мл), малой П(1*10" 9 мг/мл) и сверхмалой (1*10"14 мг/мл) доз полоксидония;

2) Изучить микроструктуру и провести морфометрию отдельных структур поджелудочной железы после введения крысам полиоксидония в терапевтической (0,1 мг/мл массы тела), малой I (1*10_6 мг/мл), малой П(1х10-9 мг/мл) и сверхмалой (1х10-14 мг/мл) дозах на фоне контроля.

Материал и методы исследований. Экспериментальные исследования проводились на самцах беспородных белых крыс массой 180-200г. Работа проводилась в соответствии с требованием «Правил проведения работ с использованием экспериментальных животных (1977)». По принципу аналогов было сформировано 5 группы животных по 5 особей в каждой из них. Первая группа животных была контрольной, 2 - 5-е группы - подопытные. Крысам подопытных групп внутримышечно с внутренней поверхности бедра вводили полиок-сидоний в различных дозах. Контрольным животным вводили 1 мл бидистиллирован-ной воды. Во 2-й подопытной группе препарат вводили в терапевтической дозе (0,1 мг/кг массы тела), отраженной в инструкции по применению. В 3 и 4-й подопытных группах препарат вводился в малых дозах соответственно 1*10"6 и 1*10"9 мг/мл, в 5-й - в сверхмалой дозе 1*10"14 мг/мл. Продолжительность опыта составляла 25 суток и включала 5 серий инъекций препарата и бидистиллированной воды последовательно через каждые 5 суток. Контрольных и подопытных животных из опыта выводили в соответствии с требованиями Европейской конвенции по защите экспериментальных животных 86/609/ЕЕС путем обескровливания под эфирным наркозом. Взятие крови у животных для исследования осуществляли из наружной яремной вены. В сыворотке крови биуретовой реакцией определяли уровень общего белка. Материалом для гистологического исследования служили взятые после убоя кусочки поджелудочной железы, которые фиксировали в 10% - ном растворе нейтрального формалина по Бек-керу. Уплотнение материала, заливку в парафин и изготовление срезов проводили по общепринятой методике [4]. Парафиновые срезы готовили на санном микротоме толщиной 5-8 мкм, окрашивали гематоксилином и эозином, азур П и эозином. Морфо-метрические исследования гистоструктур органа проводили при помощи окуляр-микрометра МОВ-1-1,5х в 10 участках препарата. Измеряли наибольший и наименьший диаметры поперечного среза ацинуса,

наибольший и наименьший размеры панкреатических островков, подсчитывали количество панкреацитов, образующих стенку ацинуса, измеряли высоту панкреацитов и диаметр их ядра. Статистическую обработку полученных в опыте цифровых данных проводили методом вариационной статистики с помощью программного обеспечения «Microsoft Excel-2003». Для каждой величины определяли среднее арифметическое значение (М), среднестатистическую ошибку средней величины (±m) и достоверность разницы между средними арифметическими двух вариационных рядов по критерию достоверности Стьюдента. Полученные различия в цифровых данных считали статистически значимыми при р<0,05.

Результаты исследований. При изучении влияния водных растворов поли-оксидония в терапевтической ив 1х10-6 , Ш0 , 1х10"14 мг/мл дозах на организм лабораторных крыс выявили увеличение содержания общего белка в сыворотке крови. Повышение уровня общего белка в сыворотке крови у крыс, которым вводили терапевтическую дозу, составило 7,8 %, а в других группах 9,3% (1х10-6 мг/мл), 8,9% (1х10"9 мг/мл) и 15,6% (1х10"14 мг/мл). Повышение уровня общего белка в сыворотке крови после введения полиоксидония свидетельствует о нормализации клеточного метаболизма, повышении интенсивности анаболических процессов и снижении процессов протеолиза.

Поджелудочная железа у контрольных белых крыс снаружи была покрыта капсулой из плотной неоформленной соединительной ткани, от которой внутрь железы отходили соединительнотканные тяжи, разделяющие паренхиму на дольки разного размера. Междольковая соединительная ткань имела слабо выраженный волокнистый компонент, местами была истончена и отёчна, вследствие этого дольчатость в таких участках была плохо выражена. В междольковых прослойках соединительной ткани выявлялись кровеносные сосуды, нервные волокна и выводные протоки. Кровеносные сосуды характеризовались плазматическим пропитыванием стенок, а просвет венозных сосудов был заполнен форменными элементами крови, в отдельных сосудах полнокровие было резко выраженным. У некоторых крыс на срезах железы в артериях и венах, проходящих в междоль-ковой соединительной ткани, форменные элементы крови не выявлялись, либо

наблюдались в незначительном количестве. Междольковый выводной проток был образован однослойным призматическим эпителием и собственной пластинкой из соединительной ткани. В просвете выводного протока содержалось секретируемое вещество в незначительном количестве. Для контрольных крыс было характерным наличие в основном средних по размеру долек, в которых значительно преобладала экзокринная часть в виде ацинусов и протоков разного диаметра. Наибольший диаметр поперечного среза ацинуса составлял 53,67±2,44 мкм, наименьший - 39,67±2,05 мкм. У контрольных крыс стенка ацинусов была образована в среднем 9,17±0,52 пан-креацитами. Клетки имели более широкое основание, а в области апикального полюса происходило сужение панкреацитов. В апикальной части клеток и в просвете концевых секреторных просветов отмечалось незначительное количество гранул секрета. Ядро в панкреацитах располагалось ближе к базальному полюсу, было округлой формы и содержало 1-2 ядрышка. Хроматин ядра распределялся по всей площади, но значительная его часть прилегала к карио-лемме. В отдельных ацинусах в просвете выявляли центроацинозные клетки уплощенной формы, но располагались они иногда и у стенки концевого секреторного отдела. Панкреациты, образующие стенку концевого секреторного отдела, имели высоту 13,83±0,34 мкм, а диаметр их ядра составлял 5,12±0,20 мкм. Границы между отдельными панкреацитами в ацинусах просматривались с трудом, а в отдельных участках срезов нами наблюдалась деструкция концевых секреторных отделов. В паренхиме долек среди концевых секреторных отделов и клеток панкреатических островков выявлялись умеренно кровенапол-ненные гемокапилляры. Кроме того, среди концевых секреторных отделов экзокрин-ной части долек наряду с более мелкими вставочными выводными протоками, стенка которых была выстлана плоским эпителием, наблюдались и более крупные -межацинозные и внутридольковые выводные протоки, стенка которых была сформирована кубическим эпителием. В дольках выявлялись 1 -2 не очень крупных панкреатических островка, в отдельных дольках эти эндокринные структуры не наблюдались. Наибольший размер панкреатического островка составлял 84,83±3,95 мкм, наименьший - 73,33±3,59 мкм. Среди инсулоцитов

преобладали В-клетки, которые занимали центральную область островков. Чаще всего В-инсулоциты имели полигональную либо призматическую форму клеток, округлое насыщенное гетерохроматином ядро, в котором в большинстве случаев наблюдалось одно интенсивно окрашивающееся ядрышко. А-клетки чаще всего располагались на периферии островков, но отдельные из них выявлялись и в центральной части островков среди В-клеток. А-инсулоциты имели округлую форму и крупное, более бледно окрашивающееся, ядро, чем в В-клетках.

При исследовании гистопрепаратов поджелудочной железы подопытных крыс во 2-5-й группах междольковая соединительная ткань имела более четкий рисунок волокнистого строения, дольки были несколько увеличены, без скоплений жировых клеток, что свидетельствует о нормализации структурного оформления железы. После применения полиоксидония в различных дозах (терапевтическая, малые и сверхмалая) нами отмечалась нормализация строения оболочек сосудов, признаков плазматического пропитывания стенок междольковых артерий и вен не выявляли. Междольковые вены были слабо кровена-полнены. Под влиянием полиоксидония отмечалась нормализация структурной организации ацинусов, которая характеризовалась более четко оформленной границей между ацинусами.

При применении крысам полиокси-дония в терапевтической дозе поджелудочная железа, по сравнению с контролем, характеризовалась увеличением количества панкреацитов, образующих стенку концевого секреторного отдела и их численность составляла 11,20±0,47 клеток. Высота пан-креацитов равнялась 19,06±0,29 мкм, а диаметр их ядра - 7,60±0,34 мкм. Увеличение значений этих метрических показателей, по сравнению с таковыми у контрольных животных, обладали достоверностью (р<0,05). Возрастание размеров концевых секреторных отделов, которое сопровождалось как повышением количества панкреацитов, формирующих их стенку, так и собственных размеров этих клеток, может свидетельствовать об активации митотического процесса в клетках и усилении обменных процессов в панкреоцитах ацинуса. Наибольший диаметр ацинуса составлял 71,42±2,29 мкм, а наименьший - 66,76±2,23 мкм, что являлось более высокими значени-

ями метрических показателей этих структур у подопытных крыс, по сравнению с контрольными (р<0,05). Эндокринная часть долек поджелудочной железы у подопытных крыс, по сравнению с таковой у контрольных животных, в количественном отношении изменялась мало, так как в дольках по-прежнему выявлялись 1 -2 панкреатических островка. Основные изменения этих структур железы были связаны с изменением их размера, так как панкреатические островки у подопытных крыс при применении полиоксидония в терапевтической дозе становились значительно крупнее, чем в контроле, инсулоциты в островках располагались более плотно, очень часто крупные панкреатические островки в дольке наблюдались вблизи друг от друга. Наибольший размер панкреатического островка в дольках составлял 151,60±18,83мкм, наименьший -108,40±14,65 мкм, а изменения их размеров, по сравнению с таковыми у контрольных крыс, обладали статистической достоверностью (р<0,05).

При применении крысам полиокси-дония в малой I дозе (1*10~6 мг/мл) в поджелудочной железе так же отмечалось увеличение всех значений исследуемых показателей, по сравнению с контролем. В поджелудочной железе отмечалось увеличение количества панкреацитов, образующих стенку концевого секреторного отдела и их количество составляло 10,80±0,42 клеток, высота панкреацитов равнялась 17,94±0,22 мкм, а диаметр их ядра - 6,66±0,18 мкм. Изменения значений этих метрических показателей ацинусов, панкреацитов и их ядра, по сравнению с таковыми у контрольных животных, обладали достоверностью (р<0,05) Наибольший диаметр ацинуса составлял 67,20±2,16 мкм, а наименьший -63,00±2,26 мкм, что являлось более высокими значениями метрических показателей этих структур у подопытных крыс, по сравнению с контрольными (р<0,05). Эндокринная часть долек поджелудочной железы у подопытных крыс, по сравнению с таковой у контрольных животных, почти не изменялась. Изменения этих структур железы были связаны с изменением их размера, так как панкреатические островки у подопытных крыс при применении полиокси-дония в этой дозе становились намного крупнее, чем в контроле, инсулоциты в островках располагались более плотно и зачастую рядом друг с другом. Наибольший

размер панкреатического островка в дольках составлял 144,40±19,58 мкм, наименьший - 105,80±17,97 мкм, а изменения размеров панкреатических островков, по сравнению с таковыми у контрольных крыс, обладали статистической достоверностью (р<0,05).

При применении крысам полиокси-дония в малой П дозе (1*10~9 мг/мл) в поджелудочной железе так же отмечалось увеличение значений всех показателей, по сравнению с контролем, но значения этих показателей были ниже, чем после применения терапевтической и малой (1*10~6 мг/мл) доз. Поджелудочная железа характеризовалась примерно равным количеством панкреацитов в ацинусах, в сравнении с контролем, а их численность в стенке ацинуса составляла 9,80±0,42 клеток (р>0,05). Высота панкреацитов осталась почти на неизменном уровне по сравнению 3-й группой и равнялась 17,78±0,33 мкм, диаметр ядра панкреацитов (6,22±0,14 мкм) стал немного меньше, по сравнению с таковым в клетках у крыс 2-3-й групп, но по сравнению с этим параметром у контрольных крыс, его изменения обладали статистической достоверностью (р<0,05). Наибольший диаметр ацинуса составлял 61,00±2,98 мкм и его величина, по сравнению с контролем, не возрастала (р>0,05). Что касается наименьшего диаметра ацину-са (55,18±0,85 мкм), то его размер уступал по величине таковому у крыс 2-3 групп. Эндокринная часть долек поджелудочной железы у подопытных крыс, по сравнению с таковой у контрольных животных, хотя и изменялись не сильно, но возрастание ее размеров все-таки обладало статистической достоверностью (р<0,05). Панкреатические островки ненамного становились крупнее, чем в контроле. Наибольший размер панкреатического островка в дольках составлял 101,40±3,62 мкм, наименьший - 86,80±3,4 мкм.

После применения крысам полиок-сидония в сверхмалой дозе (1*10~14 мг/мл) в поджелудочной железе, по сравнению с контролем, также возрастали значения всех исследованных показателей. В стенке аци-нусов поджелудочной железы выявлялось большее количество панкреацитов

(11,40±0,27 клеток), также как и их высота (18,52±0,21 мкм) и диаметр ядра (6,80±0,14 мкм), значения которых также превышали их величину у контрольных животных (р<0,05). Наибольший диаметр ацинуса со-

ставлял 72,78±2,08 мкм, а его значение было самым высоким среди подопытных и контрольной группы крыс. Наименьший диаметр ацинуса составлял 58,92±1,33 мкм. Эндокринная часть долек поджелудочной железы у подопытных крыс 5-й группы, по сравнению с таковой у контрольных животных, заметно изменялась, так как панкреатические островки становились крупнее, чем в контроле, а их наибольший размер составлял 127,60±15,89, наименьший -109,80±13,69 мкм (р<0,05).

Заключение. После проведенного исследования было выяснено, что под влиянием полиоксидония в дольках поджелудочной железы у подопытных крыс отмечаются изменения, связанные с нормализацией структурной организации ацинусов, междольковой соединительной ткани с оформлением волокнистого компонента ткани и исчезновением отечности оболочек кровеносных сосудов, выявляемых в меж-дольковой соединительной ткани.

Также отмечается снижение интенсивности проявления деструкции концевых секреторных отделов в дольках, при этом наблюдается увеличение численности пан-креацитов в дольках и их высоты, что можно расценивать как усиление митотического процесса в ацинусах и активизацию секреторного процесса в них.

В эндокринной части долек железы отмечается уплотнение расположения ин-сулоцитов в панкреатических островках и уменьшение участков, заполненных прослойками рыхлой соединительной ткани, а кроме того, повышаются размеры самих островков, по сравнению с таковыми у контрольных животных, они становятся более крупными, что может быть свидетельством возрастания в целом количества эндокринных клеток в железе, а, следовательно, как мы полагаем, и усиления гормоногенеза.

Под влиянием всех примененных доз полиоксидония, введенных крысам внутримышечно, в сыворотке крови отмечается повышение уровня общего белка от 7,8 до 15,6%, по сравнению с контролем.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Бурлакова, Е.Б. Действие сверхмалых доз биологически активных веществ и низкоинтенсивных физических факторов / Е.Б. Бурлакова, А.А. Конрадов, Е.Л. Мальцева // Химическая физика. -2003. - Т. 22. - №2. - С. 390-424.

2. Жарков, В.П. Структурные факторы регенерации поджелудочной железы / В.П. Жарков, А.А. Должиков, В.Н. Ярыгин // Морфология. - 1996. - Т.109. - N2. - С. 52.

3. Колесник, Ю.М. Изменения эндокринной части поджелудочной железы белых лабораторных крыс при сахарном диабете, адаптации и их сочетании // Морфология. - 1996. - Т. 109. - N1. - С. 91 - 94.

4. Константинова, И.С. Основы цитологии, общей гистологии и эмбриологии животных: учебное пособие / И.С. Константинова, Э.Н. Булатова, В.И. Усенко. -СПб.: Лань, 2015. - С. 16-84.

5. Лусс, Л.В. Полиоксидоний в общеклинической практике / Л.В. Лусс // Аллергия, астма и клиническая иммунология. - 2000. - №1. - С.21-41.

6. Морфофункциональная характеристика поджелудочной железы крыс при хроническом стрессе / О.В. Николаева [и др.] // Експериментальна i клшчна меди-

цина. - Харьков, 2013. - N2(59). - С. 23 -27.

7. Некрасов, А.В. Полиоксидоний: основы синтеза и свойства / А.В. Некрасов // Иммунология. - 2002. - Т. 23. -№6. - С. 329-333.

8. Петренко, В.М. Форма и топография поджелудочной железы у крысы / В.М. Петренко // Успехи современного естествознания. - 2012. - N 2. - С. 35-39.

9. Пинегин, Б.В. Иммуномоду-лятор полиоксидоний: механизмы действия и аспекты клинического применения / Б.В. Пинегин, А.В. Некрасов, Р.М. Хаитов // Цитокины и воспаление. - 2004. - N 3. - С. 41-47.

10. Сазанов, Л.А. Действие сверхмалых доз (10-18 - 10-14) биологически активных веществ: общие закономерности, особенности и возможные механизмы / Л.А. Сазанов, С.В. Зайцев // Биохимия. - 1992. -Т. 57 (10). - С. 1443-1459.

МОРФОФУНКЦИОНАЛЬНОЕ СОСТОЯНИЕ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ И УРОВЕНЬ ОБЩЕГО БЕЛКА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ КРЫС ПРИ ВВЕДЕНИИ

ПОЛИОКСИДОНИЯ

Бектемирова М.Р.

Резюме

В статье отражены результаты применения крысам полиоксидония в различных дозах (терапевтической, малых и сверхмалой). Полиоксидоний оказывает разнообразное влияние на поджелудочную железу животных, а также уровень общего белка в сыворотке крови в зависимости от примененной дозы. Данный препарат оказывает нормализующее влияние на микроструктуру экзо- и эндокринной частей долек железы, а также структурную организацию меж-дольковой соединительной ткани и кровеносных сосудов, проходящих в ней. При этом в сыворотке крови подопытных крыс возрастает уровень общего белка.

MORPHOFUNCTIONAL STATE OF THE PANCREAS AND THE LEVEL OF THE GENERAL PROTEIN IN THE BLOOD SERUM RATS AT INTRODUCTION OF POLYOXIDONY

Bektemirova M.R.

Summary

The results of application of polyoxidonium rats in various doses (therapeutic, small and super-small) are reflected in the article. Polyoxidonium has a variety of effects on the pancreas of animals, as well as the level of total protein in the serum, depending on the dose applied. This drug has a normalizing effect on the microstructure of the exo- and endocrine parts of the lobule of the gland, as well as the structural organization of the interlobular connective tissue and blood vessels passing through it. In this case, in the blood serum of the experimental rats, the level of the total protein increases.