СПОСОБЫ И ПРЕПАРАТЫ ДЛЯ ТРАНСФЕКЦИИ КЛЕТОК

1. Способ лечения инфекции ВИЧ у субъекта-человека, включающий:
(a) получение гемопоэтической клетки от субъекта;
(b) транфицирование указанной гемопоэтической клетки транскрибированной in vitro синтетической молекулой РНК, кодирующей генно-редактирующий белок, для трансляции в клетке млекопитающего, где:
(i) указанную гемопоэтическую клетку индуцируют для экспрессии генно-редактирующего белка;
(ii) указанный генно-редактирующий белок осуществляет двухцепочечный разрыв в ДНК указанной гемопоэтической клетки; и
(iii) указанный двухцепочечный разрыв понижает функцию гена, выбранного из CCR5 и CXCR4, делая указанную гемопоэтическую клетку резистентной к инфекции ВИЧ; и
(c) введение указанной резистентной к ВИЧ гемопоэтической клетки указанному субъекту, что приводит к лечению инфекции ВИЧ у данного субъекта.
2. Способ по п.1, где указанный генно-редактирующий белок содержит ДНК-связывающий домен и каталитический домен нуклеазы.
3. Способ по п.1, где указанный генно-редактирующий белок представляет собой TALEN.
4. Способ по п.1, где указанная транскрибированная in vitro синтетическая молекула РНК дополнительно содержит одно или более из следующего: 5'-кэп, 5'-кэп 1-структура и 3'-поли(A) хвост.
5. Способ по п.1, где двухцепочечный разрыв находится в пределах приблизительно 5,000,000 оснований от сайта инициации транскрипции гена CCR5 или CXCR4.
6. Способ по п.1, где указанный способ сообщает субъекту резистентность к инфекции HIV.
7. Способ по п.1, где субъект является ВИЧ-инфицированным.
8. Способ по п.1, где субъект страдает СПИДом.
9. Способ по п.1, где указанная гемопоэтическая клетка представляет собой гемопоэтическую стволовую клетку.
10. Способ по п.1, где указанная гемопоэтическая клетка представляет собой белую клетку крови.
11. Способ лечения инфекции ВИЧ у субъекта-человека, включающий:
(a) получение гемопоэтической клетки от субъекта;
(b) генное редактирование указанной гемопоэтической клетки путем транскрипции указанной гемопоэтической клетки транскрибированной in vitro синтетической молекулой РНК, кодирующей генно-редактирующий белок, где:
указанная гемопоэтическая клетка экспрессирует указанный генно-редактирующий белок, и
указанный генно-редактирующий белок содержит ДНК-связывающий домен и каталитический домен нуклеазы и осуществляет двухцепочечный разрыв в ДНК указанной гемопоэтической клетки с понижением функции гена, выбранного из CCR5 и CXCR4; и
(c) введение указанной генно-редактированной гемопоэтической клетки указанному субъекту, что приводит к лечению инфекции ВИЧ у данного субъекта.
12. Способ по п.11, где указанный генно-редактирующий белок выбран из TALEN и цинк-пальцевой нуклеазы.
13. Способ по п.11, указанная транскрибированная in vitro синтетическая молекула РНК дополнительно содержит одно или более из следующего: 5'-кэп, 5'-кэп 1-структура и 3'-поли(A) хвост.
14. Способ по п.11, где двухцепочечный разрыв находится в пределах приблизительно 5,000,000 оснований от сайта инициации транскрипции гена CCR5 или CXCR4.
15. Способ по п.11, где указанный способ сообщает субъекту резистентность к инфекции HIV.
16. Способ по п.11, где субъект является ВИЧ-инфицированным.
17. Способ по п.11, где субъект страдает СПИДом.
18. Способ по п.11, где указанная гемопоэтическая клетка представляет собой гемопоэтическую стволовую клетку.
19. Способ по п.11, где указанная гемопоэтическая клетка представляет собой белую клетку крови.
20. Терапевтическая композиция, содержащая генно-редактированную гемопоэтическую клетку, где указанная гемопоэтическая клетка включает:
транскрибированную in vitro синтетическую молекулу РНК, кодирующую генно-редактирующий белок, где указанный генно-редактирующий белок содержит ДНК-связывающий домен и каталитический домен нуклеазы и осуществляет двухцепочечный разрыв в ДНК указанной гемопоэтической клетки; и
двухцепочечный разрыв в своей ДНК, где указанный двухцепочечный разрыв осуществлен указанным генно-редактирующим белком и понижает функцию одного или более из CCR5 и CXCR4.
21. Терапевтическая композиция по п.20, где указанный генно-редактирующий белок выбран из TALEN и цинк-пальцевой нуклеазы.
22. Терапевтическая композиция по п.20, указанная транскрибированная in vitro синтетическая молекула РНК дополнительно содержит одно или более из следующего: 5'-кэп, 5'-кэп 1-структура и 3'-поли(A) хвост.
23. Терапевтическая композиция по п.20, где двухцепочечный разрыв находится в пределах приблизительно 5,000,000 оснований от сайта инициации транскрипции гена CCR5 или CXCR4.
24. Терапевтическая композиция по п.20, где указанная гемопоэтическая клетка представляет собой гемопоэтическую стволовую клетку.
25. Терапевтическая композиция по п.20, где указанная гемопоэтическая клетка представляет собой белую клетку крови.