ЗАМЕЩЕННЫЕ ГАММА-ЛАКТАМЫ В КАЧЕСТВЕ ТЕРАПЕВТИЧЕСКИХ АГЕНТОВ
SUBSTITUTED GAMMA-LACTAMES AS THERAPEUTIC AGENTS

Перекрестная ссылка
Данная заявка испрашивает приоритет по предварительной заявке США, серийный номер 61/047501, поданной 24 апреля 2007 года, которая полностью включена в данную заявку посредством ссылки.
Описание уровня техники
Глазные гипотензивные агенты полезны при лечении ряда различных глазных гипертензивных состояний, таких как эпизоды глазной гипертензии после операции и после лазерной трабекулотомии, глаукома, а также в качестве дооперационных вспомогательных средств.
Глаукома представляет собой заболевание глаза, характеризующееся повышенным внутриглазным давлением. На основании этиологии глаукома классифицирована как первичная или вторичная. Например, первичная глаукома у взрослых (врожденная глаукома) может быть либо открытоугольной, либо острой или хронической закрытоугольной. Вторичная глаукома является результатом прежде существующих глазных заболеваний, таких как увеит, внутриглазная опухоль или обширная катаракта.
Причины, лежащие в основе первичной глаукомы, до сих пор неизвестны. Повышенное внутриглазное давление является следствием обструкции оттока внутриглазной жидкости. При хронической открытоугольной глаукоме передняя камера и ее анатомические структуры выглядят нормально, но дренаж внутриглазной жидкости затруднен. При острой или хронической закрытоугольной глаукоме передняя камера является неглубокой, угол передней камеры сужен, и радужная оболочка может загораживать трабекулярную сеть на входе в шлеммов канал. Расширение зрачка может проталкивать корень радужной оболочки прямо против угла и может приводить к блокированию зрачка и, таким образом, провоцировать острый приступ. Глаза с узкими углами передней камеры предрасположены к приступам острой закрытоугольной глаукомы различной степени тяжести.
Вторичная глаукома вызвана каким-либо препятствием тока внутриглазной жидкости из задней камеры в переднюю камеру, а затем в шлеммов канал. Воспалительное заболевание переднего сегмента может предотвращать выход влаги, вызывая полную заднюю синехию в бомбированной радужной оболочке, и может закупоривать дренажный канал экссудатами. Другими распространенными причинами являются внутриглазные опухоли, обширные катаракты, центральная венозная окклюзия сетчатки, травма глаза, операционные процедуры и внутриглазное кровотечение.
Рассматривая все типы вместе, глаукома встречается примерно у 2% всех людей в возрасте старше 40 лет и может быть бессимптомной в течение нескольких лет, после чего прогрессирует до быстрой потери зрения. В случаях, когда операция не показана, местные антагонисты β-адренорецептора традиционно являются лекарствами выбора для лечения глаукомы.
Некоторые эйкозаноиды и их производные в настоящее время имеются в продаже для применения при лечении глаукомы. Эйкозаноиды и их производные включают различные биологически значимые соединения, такие как простагландины и их производные. Простагландины могут быть описаны как производные простаноевой кислоты, которая имеет приведенную ниже структурную формулу:
1
1
2
2
2
2
Известны различные типы простагландинов в зависимости от структуры и заместителей, которые несет алициклическое кольцо каркаса простаноевой кислоты. Дальнейшая классификация основана на числе ненасыщенных связей в боковой цепи, указанном цифровыми нижними индексами после общего типа простагландина [например, простагландин E(PGE), простагландин Е(PGE)], и на конфигурации заместителей на алициклическом кольце, указанной α или β [например, простагландин Fα(PGFβ)].
2
Считают, что селективные агонисты простагландина ЕР2 имеют несколько медицинских применений. Например, в патенте США №6437146 заявлено применение селективных агонистов простагландина EP "для лечения или предупреждения воспаления и боли в суставе и мышце (например, ревматоидного артрита, ревматоидного спондилоартрита, остеоартрита, подагрического артрита, ювенильного артрита и т.д.), воспалительного состояния кожи (например, солнечного ожога, ожогов, экземы, дерматита и т.д.), воспалительного состояния глаза (например, конъюнктивита и т.д.), легочного расстройства, в которое вовлечено воспаление (например, астмы, бронхита, болезни голубятников, аллергического альвеолита у сельскохозяйственных работников и т.д.), состояния желудочно-кишечного тракта, связанного с воспалением (например, афтозной язвы, болезни Крона, атрофического гастрита, вариолоформного гастрита, неспецифического язвенного колита, целиакии, регионарного илеита, синдрома раздраженной кишки и т.д.), гингивита, воспаления, боли и опухания после операции или повреждения, пирексии, боли и других состояний, связанных с воспалением, аллергического заболевания, системной красной волчанки, склеродермы, полимиозита, тендинита, бурсита, узлового периартериита, ревматической лихорадки, синдрома Шегрена, болезни Бехчета, тиреоидита, диабета типа I, диабетического осложнения (диабетической микроангиопатии, диабетической ретинопатии, диабетической нефропатии и т.д.), нефротического синдрома, апластической анемии, тяжелой миастении, увеита, контактного дерматита, псориаза, болезни Кавасаки, саркоидоза, болезни Ходжкина, болезни Альцгеймера, дисфункции почек (нефрита, нефритического синдрома и т.д.), дисфункции печени (гепатита, цирроза и т.д.), желудочно-кишечной дисфункции (диареи, воспалительного кишечного заболевания и т.д.) шока, костного заболевания, характеризующегося аномальным метаболизмом кости, такого как остеопороз (в частности, постменопаузального остеопороза), гиперкальциемии, гиперпаратиреоза, болезни Педжета, остеолиза, гиперкальциемии злокачественности с метастазами или без метастазов костей, ревматоидного артрита, периодонтита, остеоартрита, остеалгии, остеопении, раковой кахексии, калькулеза, литиаза (в частности, уролитиаза), солидной карциномы, мезангиального пролиферативного гломерулонефрита, отека (например, сердечного отека, мозгового отека и т.д.), гипертензии, такой как злокачественная гипертензия или тому подобное, предменструального напряжения, мочевого конкремента, олигурии, например, вызванной острой или хронической недостаточностью, гиперфосфатурии или тому подобного".
В патенте США №6710072 заявлено применение агонистов ЕР2 для лечения или предупреждения "остеопороза, констипации, почечных расстройств, половой дисфункции, облысения, диабета, рака, а также при расстройстве регуляции иммунитета… различных патофизиологических заболеваний, включая острый инфаркт миокарда, сосудистый тромбоз, гипертензию, легочную гипертензию, ишемическую болезнь сердца, застойную сердечную недостаточность и стенокардию".
Краткое описание изобретения
Здесь раскрыты соединения, полезные при лечении глаукомы, воспалительного кишечного заболевания, при стимуляции роста волос и стимуляции превращения пушкового волоса в длинные волосы. Сами соединения описаны ниже.
Подробное описание изобретения
Одно воплощение составляет соединение формулы:
где Y представляет собой  или ;
или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения облысения у млекопитающего.
Другое воплощение составляет композиция, содержащая указанное соединение, его соль и/или пролекарство, которая является офтальмологически приемлемой.
Также рассмотрено применение данного соединения при лечении и/или предупреждении и/или при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения любого заболевания и/или состояния, упомянутого в данной заявке, которое связано с активностью простагландина ЕР2.
Другое воплощение составляет соединение формулы:
где Y представляет собой  или ;
или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения облысения у млекопитающего.
Другое воплощение составляет композиция, содержащая указанное соединение, его соль и/или пролекарство, которая является офтальмологически приемлемой.
Также рассмотрено применение данного соединения при лечении и/или предупреждении и/или при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения любого заболевания и/или состояния, упомянутого в данной заявке, которое связано с активностью простагландина ЕР2.
Другое воплощение составляет соединение формулы:
где Y представляет собой  или ;
или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения облысения у млекопитающего.
Другое воплощение составляет композиция, содержащая указанное соединение, его соль и/или пролекарство, которая является офтальмологически приемлемой.
Также рассмотрено применение данного соединения при лечении и/или предупреждении и/или при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения любого заболевания и/или состояния, упомянутого в данной заявке, которое связано с активностью простагландина ЕР2.
Другое воплощение составляет соединение в соответствии с формулой:
где Y представляет собой  или
;
или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения облысения у млекопитающего.
Другое воплощение составляет композиция, содержащая указанное соединение, его соль и/или пролекарство, которая является офтальмологически приемлемой.
Также рассмотрено применение данного соединения при лечении и/или предупреждении и/или при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения любого заболевания и/или состояния, упомянутого в данной заявке, которое связано с активностью простагландина ЕР2.
Другое воплощение составляет соединение в соответствии с формулой:
где Y представляет собой  или ;
или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения облысения у млекопитающего.
Другое воплощение составляет композиция, содержащая указанное соединение, его соль и/или пролекарство, которая является офтальмологически приемлемой.
Также рассмотрено применение данного соединения при лечении и/или предупреждении и/или при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения любого заболевания и/или состояния, упомянутого в данной заявке, которое связано с активностью простагландина ЕР2.
Другое воплощение составляет соединение формулы:
где Y представляет собой  или ;
или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения облысения у млекопитающего.
Другое воплощение составляет композиция, содержащая указанное соединение, его соль и/или пролекарство, которая является офтальмологически приемлемой.
Также рассмотрено применение данного соединения при лечении и/или предупреждении и/или при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения любого заболевания и/или состояния, упомянутого в данной заявке, которое связано с активностью простагландина ЕР2.
Другое воплощение составляет соединение формулы ОН:
где Y представляет собой  или
,
или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего,
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения облысения у млекопитающего.
Другое воплощение составляет композиция, содержащая указанное соединение, его соль и/или пролекарство, которая является офтальмологически приемлемой.
Также рассмотрено применение данного соединения при лечении и/или предупреждении и/или при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения любого заболевания и/или состояния, упомянутого в данной заявке, которое связано с активностью простагландина ЕР2.
Другое воплощение составляет соединение формулы ОН:
где Y представляет собой  или ;
или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения облысения у млекопитающего.
Другое воплощение составляет композиция, содержащая указанное соединение, его соль и/или пролекарство, которая является офтальмологически приемлемой.
Также рассмотрено применение данного соединения при лечении и/или предупреждении и/или при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения любого заболевания и/или состояния, упомянутого в данной заявке, которое связано с активностью простагландина ЕР2.
Другое воплощение составляет соединение формулы:
где Y представляет собой  или ;
или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения облысения у млекопитающего.
Другое воплощение составляет композиция, содержащая указанное соединение, его соль и/или пролекарство, которая является офтальмологически приемлемой.
Также рассмотрено применение данного соединения при лечении и/или предупреждении и/или при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения любого заболевания и/или состояния, упомянутого в данной заявке, которое связано с активностью простагландина ЕР2.
Другое воплощение составляет соединение формулы ОН:
где Y представляет  собой или ;
или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения облысения у млекопитающего.
Другое воплощение составляет композиция, содержащая указанное соединение, его соль и/или пролекарство, которая является офтальмологически приемлемой.
Также рассмотрено применение данного соединения при лечении и/или предупреждении и/или при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения любого заболевания и/или состояния, упомянутого в данной заявке, которое связано с активностью простагландина ЕР2.
Другое воплощение составляет соединение формулы:
где Y представляет  собой или ;
или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения облысения у млекопитающего.
Другое воплощение составляет композиция, содержащая указанное соединение, его соль и/или пролекарство, которая является офтальмологически приемлемой.
Также рассмотрено применение данного соединения при лечении и/или предупреждении и/или при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения любого заболевания и/или состояния, упомянутого в данной заявке, которое связано с активностью простагландина ЕР2.
Другое воплощение составляет соединение формулы:
где Y представляет  собой или ;
или его фармацевтически приемлемая соль или пролекарство.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения глаукомы и/или глазной гипертензии у млекопитающего.
В другом воплощении указанное соединение, его соль и/или пролекарство применяют при получении лекарственного средства для лечения облысения у млекопитающего.
Другое воплощение составляет композиция, содержащая указанное соединение, его соль и/или пролекарство, которая является офтальмологически приемлемой.
Также рассмотрено применение данного соединения при лечении и/или предупреждении и/или при получении лекарственного средства для лечения и/или предупреждения любого заболевания и/или состояния, упомянутого в данной заявке, которое связано с активностью простагландина ЕР2.
Соединения, раскрытые в данной заявке, полезны для предупреждения или лечения глаукомы или глазной гипертензии у млекопитающих или для получения лекарственного средства для глаукомы или глазной гипертензии. Они также полезны для лечения заболеваний, раскрытых на уровне техники как поддающиеся лечению агонистом простагландина ЕР2, таких как перечислены выше.
"Фармацевтически приемлемой солью" является любая соль, которая сохраняет активность исходного соединения и не оказывает каких-либо дополнительных вредных или нежелательных эффектов на субъекта, которому ее вводят, и в ситуации, в которой ее вводят, по сравнению с исходным соединением. Фармацевтически приемлемая соль также относится к любой соли, которая может образоваться in vivo в результате введения кислоты, другой соли или пролекарства, которое преобразуется в кислоту или соль.
Фармацевтически приемлемые соли кислотных функциональных групп могут быть образованы из органических или неорганических оснований. Соль может содержать одно- или поливалентный ион. Особый интерес представляют неорганические ионы лития, натрия, калия, кальция и магния. Органические соли могут быть получены с аминами, в частности соли аммония, такие как моно-, ди- и триалкиламины или этаноламины. Соли могут быть также образованы с кофеином, трометамином и подобными молекулами. Соляная кислота или другая фармацевтически приемлемая кислота может образовать соль с соединением, которое включает основную группу, такую как амин или пиридиновое кольцо.
1-6
"Пролекарством" является соединение, которое преобразуется в терапевтически активное соединение после введения, и этот термин в данной заявке следует интерпретировать столь же широко, как, в целом, понимают в данной области техники. Хотя это не предназначено для ограничения объема изобретения, преобразование может осуществляться посредством гидролиза сложноэфирной группы или какой-либо другой биологически лабильной группы. Как правило, но не обязательно, пролекарство неактивно или менее активно, чем терапевтически активное соединение, в которое оно преобразуется. Конкретно рассмотрены сложноэфирные пролекарства соединений, раскрытых в данной заявке. Сложный эфир может быть образован из карбоновой кислоты С1 (то есть концевой карбоновой кислоты природного простагландина), либо сложный эфир может быть образован из карбоново-кислотной функциональной группы на другой части молекулы, как, например, на фенильном кольце. Хотя это не предназначено для ограничения, сложный эфир может представлять собой алкиловый эфир, арильный эфир или гетероарильный эфир. Термин алкил имеет значение, общепринято понимаемое специалистами в данной области техники, и относится к нормальным, разветвленным или циклическим алкильным группировкам. В частности, полезны C алкиловые эфиры, где алкильная часть эфира имеет от 1 до 6 атомов углерода и включает, но не ограничена ими, метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, изобутил, трет-бутил, изомеры пентила, изомеры гексила, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и их комбинации, имеющие 1-6 атомов углерода, и т.д.
Метаболит в широком смысле определяют как соединение, которое образовано in vivo из раскрытого соединения.
Специалисты в данной области техники хорошо понимают, что для введения или получения лекарственных средств соединения, раскрытые в данной заявке, можно смешивать с фармацевтически приемлемыми эксципиентами, которые сами по себе хорошо известны в данной области техники. Конкретно, если лекарственное средство нужно вводить системно, его можно готовить в виде порошка, пилюли, таблетки или тому подобного, или в виде раствора, эмульсии, суспензии, аэрозоля, сиропа или эликсира, пригодного для перорального или парентерального введения или ингаляции.
Для твердых лекарственных форм или лекарственных средств нетоксичные твердые наполнители включают, но не ограничены ими, фармацевтические категории маннита, лактозы, крахмала, стеарата магния, натриевой соли сахарина, полиалкиленгликолей, талька, целлюлозы, глюкозы, сахарозы и карбоната магния. Твердые лекарственные формы могут быть непокрытыми либо они могут быть покрыты с помощью известных методик для замедления разрыхления и всасывания в желудочно-кишечном трасте, и посредством этого обеспечивать пролонгированное действие в течение более длительного периода. Например, можно использовать вещество, замедляющее период, такое как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат. Они могут быть также покрыты с помощью методики, описанной в патентах США №№4256108; 4166452 и 4265874, с образованием осмотических терапевтических таблеток для регулируемого высвобождения. Жидкие фармацевтически вводимые лекарственные формы могут, например, включать раствор или суспензию одного или более чем одного настоящего полезного соединения и возможные фармацевтические адъюванты в носителе, такие как, например, вода, физиологический раствор, водная декстроза, глицерин, этанол и тому подобное, с получением, таким образом, раствора или суспензии. Если желательно, фармацевтическая композиция для введения может также содержать минорные количества нетоксичных вспомогательных веществ, таких как увлажняющие или эмульгирующие агенты, рН буферные агенты и тому подобное. Типичными примерами таких вспомогательных агентов являются ацетат натрия, сорбитанмонолаурат, триэтаноламин, триэтаноламина олеат и т.д. Актуальные способы получения таких лекарственных форм известны или должны быть очевидны специалистам в данной области техники; см., например, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 16th Edition, 1980. Композиция препарата для введения в любом случае содержит количество одного или более чем одного из настоящих пригодных соединений, эффективных для получения желаемого терапевтического эффекта.
Парентеральное введение, как правило, характеризуется инъекцией: либо подкожной, либо внутримышечной, либо внутривенной. Инъекционные препараты можно готовить в общепринятых формах либо в виде жидких растворов или суспензий, либо в виде твердых форм, пригодных для растворения или суспендирования в жидкости перед инъекцией, либо в виде эмульсий. Пригодными эксципиентами являются, например, вода, физиологический раствор, декстроза, глицерин, этанол и тому подобное. Кроме того, если желательно, инъекционные фармацевтические композиции для введения могут также содержать минорные количества нетоксичных вспомогательных веществ, таких как увлажняющие или эмульгирующие агенты, рН буферные агенты и тому подобное.
Вводимое количество настоящего полезного соединения или соединений, конечно, зависит от желаемого терапевтического эффекта или эффектов, от конкретного млекопитающего, подлежащего лечению, от тяжести и природы состояния млекопитающего, от способа введения, от эффективности и фармакодинамики конкретного применяемого соединения или соединений, и от мнения лечащего врача. Терапевтически эффективная дозировка настоящего полезного соединения или соединений предпочтительно находится в диапазоне от примерно 0,5 или примерно 1 до примерно 100 мг/кг/сутки.
Жидкость, которая является офтальмологически приемлемой, готовят таким образом, чтобы ее можно было вводить местным путем в глаз. Комфорт должен быть максимальным, насколько возможно, хотя иногда из соображений приготовления препарата (например, стабильности лекарственного средства) может быть необходим менее чем оптимальный комфорт. В случае когда комфорт не может быть увеличен до максимума, жидкость следует готовить таким образом, чтобы эта жидкость была переносима для пациента для местного глазного применения. Кроме того, офтальмологически приемлемая жидкость должна либо быть упакована для однократного применения либо содержать консервант для предупреждения заражения в течение многократных применений.
Для глазного применения растворы или лекарственные средства часто готовят с использованием физиологического солевого раствора в качестве основного наполнителя. Глазные растворы предпочтительно следует поддерживать при комфортабельной рН подходящей буферной системой. Препараты могут также содержать общепринятые, фармацевтически приемлемые консерванты, стабилизаторы и сурфактанты.
Консерванты, которые можно использовать в фармацевтических композициях по настоящему изобретению, включают, но не ограничены ими, бензалкония хлорид, хлорбутанол, тимеросал, ацетат фенилртути и нитрат фенилртути. Полезным сурфактантом является, например, Твин 80. Подобным образом в глазных препаратах по настоящему изобретению можно использовать различные полезные наполнители. Эти наполнители включают, но не ограничены ими, поливиниловый спирт, повидон, гидроксипропилметилцеллюлозу, полоксамеры, карбоксиметилцеллюлозу, гидроксиэтилцеллюлозу и дистиллированную воду.
При необходимости или для удобства можно добавлять регуляторы тоничности. Они включают, но не ограничены ими, соли, в частности хлорид натрия, хлорид калия, маннит и глицерин, или любой другой пригодный офтальмологически приемлемый регулятор тоничности.
Различные буферы и средства для регулирования рН можно использовать в такой степени, чтобы полученный в результате препарат был офтальмологически приемлемым. Соответственно буферы включают ацетатные буферы, цитратные буферы, фосфатные буферы и боратные буферы. Кислоты или основания можно использовать для регулирования рН этих препаратов по необходимости.
Подобным образом офтальмологически приемлемый антиоксидант для применения в настоящем изобретении включает, но не ограничен ими, метабисульфит натрия, тиосульфат натрия, ацетилцистеин, бутилированный гидроксианизол и бутилированный гидрокситолуол.
Другими эксципиентами, которые можно включать в офтальмологические препараты, являются хелатирующие агенты. Полезным хелатирующим агентом является эдетат динатрия, хотя другие хелатирующие агенты можно также использовать вместо него или в сочетании с ним.
Ингредиенты обычно используют в приведенных ниже количествах:
Ингредиент
Количество (масс. %/об.%)
активный ингредиент
примерно 0,001-5
консервант
0-0,10
наполнитель
0-40
регулятор тоничности
1-10
буфер
0,01-10
регулятор рН
q.s.pH 4,5-7,5
антиоксидант
при необходимости
сурфактант
при необходимости
дистиллированная вода
при необходимости до 100%
Применения для стимуляции роста волос
В одном воплощении соединения, раскрытые в данной заявке, могут быть полезны при лечении облысения и/или потери волос. Алопеция (облысение) представляет собой недостаток либо нормальных либо аномальных волос и, прежде всего, является косметической проблемой у людей. Она представляет собой недостаток длинных волос, широкого диаметра, окрашенных волос, которые видны редко. Однако у так называемого лысого человека хотя имеется заметное отсутствие длинных волос, кожа содержит пушковые волосы, которые представляют собой тонкие бесцветные волосы, для определения присутствия которых может требоваться микроскопическое исследование. Эти пушковые волосы являются предшественниками длинных волос.
Соединения, описанные в данной заявке, можно применять для стимуляции, такой как преобразование роста пушковых волос в рост в качестве длинных волос, а также увеличение скорости роста длинных волос. Польза соединений, описанных в данной заявке, для стимуляции роста волос была открыта, как описано ниже.
В ходе лечения пациентов, страдающих глаукомой, лечение может быть пригодным только в одном глазу. В ходе ежедневной практики было обнаружено, что у пациента, который получил лечение биматопростом, аналогом простагландина, развивались ресницы, которые были длиннее, гуще и толще в обработанном глазу, чем в необработанном глазу. При исследовании было обнаружено очень резкое отличие. Ресницы были длиннее и выглядели толще и гуще в обработанном глазу. Внешний вид ресниц на веках обработанных глаз казался бы достаточно привлекательным, если бы он представлял собой двустороннее явление. В результате асимметричной природы длинные ресницы на одной стороне можно было бы рассматривать как причиняющие беспокойство с косметической точки зрения. В результате этого асимметрического явления было проведено системное исследование. Вскоре стало понятно, что этот измененный внешний вид был не отдельной находкой. Сравнение век пациентов, которые получали биматопрост только в один глаз, выявило малозаметные изменения в ресницах и прилежащих волосах стороны, обработанной биматопростом, у нескольких пациентов. Определенные различия можно было идентифицировать до варьирующих степеней в ресницах и прилежащих волосах всех пациентов, которые получали это лекарственное средство, на односторонней основе в течение более 6 месяцев.
Изменения в ресницах были очевидными при обширном исследовании у нескольких пациентов, как только внимание было сфокусировано на этом предмете. У пациентов со светлыми волосами и ресницами различия были легко видны только с помощью большого увеличения и осветительных способностей биомикроскопа, представляющего собой щелевую лампу. В ходе дополнительного обследования глаукомы внимание, как правило, было сфокусировано на самом глазу. В результате высокого оптического увеличения, необходимого для наблюдения только одного глаза одновременно, глаз виден при достаточно большом оптическом увеличении, чтобы ресницы находились не в фокусе. При этих больших оптических увеличениях какая-либо асимметрия ресниц между глазами, вероятно, незаметна без тщательного систематического сравнения ресниц и прилежащих волос век двух глаз.
Наблюдаемые параметры, приводящие к заключению, что более сильный рост волос происходил в зоне обработки после введения аналога простагландина, были множественными. Они включали увеличенную длину ресниц, увеличенное число ресниц вдоль обычной линии ресниц, увеличенную густоту и блеск ресниц, увеличение дополнительных, подобных ресницам, длинных волос в переходных зонах, прилежащих к зонам нормального роста ресниц, увеличение дополнительных, подобных ресницам, длинных волос в медиальной и латеральной кантальной зоне, увеличенную пигментацию ресниц, увеличенное число, увеличенную длину, а также увеличенный блеск и густоту тонких волос на коже прилежащего века, и, наконец, увеличенный перпендикулярный наклон ресниц и подобных ресницам длинных волос. Заключение о том, что рост волос стимулируется аналогами простагландина, такими как биматопрост, таким образом, подтвердило несвидетельство различия по единственному параметру, но оно основано на множественных параметрах внешнего вида волос в обработанной зоне против контрольной у многих субъектов.
Соединения, описанные в данной заявке, являются аналогами простагландина и, следовательно, обладают сходными активностями с биматопростом, содержат структурные подобия и, следовательно, ожидают, что они стимулируют рост волос и стимулируют преобразование пушковых волос в длинные волосы. В одном воплощении соединения, описанные в данной заявке, и их пролекарства можно применять для стимуляции роста волос. Как используют в данной заявке, рост волос включает волосы, связанные с волосистой частью кожи головы, брови, веки, бороду и другие зоны кожи животных.
В одном воплощении соединение смешивают с дерматологически совместимым наполнителем или носителем. Наполнитель, который можно использовать для получения композиций, как описано в данной заявке, может включать, например, водные растворы, такие как, например, физиологические солевые растворы, масляные растворы или мази. Наполнитель, кроме того, может содержать дерматологически совместимые консерванты, такие как, например, бензалкония хлорид, сурфактанты, такие как, например, полисорбат 80, липосомы или полимеры, например метил целлюлозу, поливиниловый спирт, поливинилпирролидон и гиалуроновую кислоту; их можно использовать для повышения вязкости. Кроме того, также возможно включать растворимые или нерастворимые вставки лекарственных средств, когда нужно вводить лекарственное средство.
В одном воплощении можно готовить дерматологические композиции для местного лечения для стимуляции роста волос, которые содержат эффективное для стимуляции роста волос количество одного или более чем одного соединения, как определено выше, и дерматологически совместимый носитель. Эффективные количества активных соединений могут быть определены обычным специалистом в данной области техники, но они будут варьировать в зависимости от применяемого соединения, частоты применения и желаемого результата. Соединение будет, как правило, находиться в интервале от примерно 0,0000001 до примерно 50 масс.% дерматологической композиции. Предпочтительно соединение будет находиться в интервале от примерно 0,001 до примерно 50 масс.% суммарной дерматологической композиции, более предпочтительно от примерно 0,1 до примерно 30 масс.% композиции.
В одном воплощении применение настоящих соединений для стимуляции роста волос находит примененияеу видов млекопитающих, включая как людей, так и животных. У людей соединения, описанные в данной заявке, можно наносить, например, на волосистую часть кожи головы, бороду лица, голову, лобковую зону, верхнюю губу, брови и веки. У животного, разводимого для получения шкурки, например норки, соединения, описанные в данной заявке, можно наносить на всю поверхность тела для улучшения всей шкурки по коммерческим соображениям. Этот способ можно также использовать из косметических соображений у животных, например нанесение на кожу собак и кошек, имеющих проплешины вследствие чесотки или других заболеваний, вызывающих какую-либо степень алопеции.
Фармацевтические композиции, рассматриваемые для стимуляции роста волос, включают фармацевтические композиции, пригодные для местного и локального действия. Термин "местный", как используют в данной заявке, относится к применению соединения, как описано в данной заявке, включенного в подходящий фармацевтический носитель, и наносят в месте утонченных волос или облысения для проявления локального действия. Соответственно, такие местные композиции включают те фармацевтические формы, в которых соединение применяют наружно путем прямого контакта с кожей, подлежащей обработке. Общепринятые фармацевтические формы для этой цели включают твердые мази, жидкие мази, кремы, шампуни, лосьоны, пасты, желе, спреи, аэрозоли и тому подобное, и их можно применять в пластырях или пропитанных повязках в зависимости от части тела, подлежащей обработке. Термин "твердая мазь" охватывает препараты (включая кремы), имеющие масляные, водорастворимые основы и основы эмульсионного типа, например вазелин, ланолин, полиэтиленгликоли, а также их смеси.
Обычно соединения можно наносить повторно в течение пролонгированного периода времени местным путем на часть тела, подлежащей обработке, например веки, брови, кожу или волосистую часть головы. Предпочтительная схема дозирования будет, как правило, включать регулярное, такое как ежесуточное введение в течение периода лечения по меньшей мере один месяц, более предпочтительно по меньшей мере три месяца, и наиболее предпочтительно по меньшей мере шесть месяцев.
Для местного применения на веках или бровях препараты активных соединений можно готовить в водных растворах, кремах, мазях или маслах, проявляющих физиологически приемлемую осмолярность, путем добавления фармацевтически приемлемых буферов и солей. Такие препараты в  зависимости от фармацевта могут содержать или не содержать консерванты, такие как бензалкония хлорид, хлоргексидин, хлорбутанол, парагидроксибензойные кислоты и соли фенилртути, такие как нитрат, хлорид, ацетат и борат, или антиоксиданты, а также добавки, такие как ЭДТА, сорбит, борная кислота и тому подобное, в качестве добавок. Кроме того, в частности, водные растворы могут содержать агенты, повышающие вязкость, такие как полисахариды, например метилцеллюлоза, мукополисахариды, например гиалуроновая кислота и хондроитинсульфат, или полиспирт, например поливиниловый спирт.Можно также использовать различные гели и матрицы, замедляющие высвобождение, а также растворимые и нерастворимые глазные вставки, например, на основе веществ, образующих гели in situ. В зависимости от действительного препарата и применяемого соединения можно применять различные количества лекарственного средства и различные схемы дозировки. Типично ежесуточное количество соединения для обработки века может составлять от примерно 0,1 нг до примерно 100 мг на веко.
Для местного применения на коже и волосистой части головы препарат соединения можно предпочтительно готовить, используя твердые мази, кремы, жидкие мази или пластыри в качестве носителя активного ингредиента. Эти препараты также могут содержать или не содержать консерванты в зависимости от фармацевта и природы применения. Такие консерванты включают упомянутые выше, а также метил-, пропил- или бутилпарагидроксибензойную кислоту, бетаин, хлоргексидин, бензалкония хлорид и тому подобное. Можно также использовать различные матрицы для доставки замедленного высвобождения. Обычно доза, которую нужно наносить на волосистую часть головы, находится в диапазоне от примерно 0,1 нг до примерно 100 мг в сутки, более предпочтительно от примерно 1 нг до примерно 10 мг в сутки и наиболее предпочтительно от примерно 10 нг до примерно 1 мг в сутки в зависимости от соединения и от препарата. Для достижения суточного количества лекарственного средства в зависимости от препарата соединение можно вводить один раз или несколько раз в сутки с антиоксидантами или без них.
Для местного применения используют кремы, твердые мази, гели, растворы или суспензии и т.д., содержащие соединение, раскрытое в данной заявке. Местные препараты могут, как правило, состоять из фармацевтического носителя, сорастворителя, эмульгатора, усилителя проницаемости, системы консервантов и смягчающего вещества.
Актуальная доза активных соединений по настоящему изобретению зависит от конкретного соединения и от состояния, подлежащего лечению; выбор подходящей дозы находится в пределах компетенции специалиста в данной области техники.
Соединения, раскрытые в данной заявке, также полезны в комбинации с другими лекарственными средствами, полезными для лечения глаукомы или других состояний.
Примеры:
Пример 1
Стадия 1. Арилирование 1 с получением 2
2
3
2
3
2
2
Раствор амида 1 (3,30 г, 14,4 ммоль) в 1,4-диоксане (25 мл) добавляли к смеси 4,5-бис(трисренилсросфино)-9,9-диметилксантена (Xantphos, 600 мг, 1,04 ммоль), Pa(dba) (317 мг, 0,35 ммоль) и CsCO (6,46 г, 19,8 ммоль). Добавляли 1-бром-4-трел-7-бутилбензол (2,40 мл, 13,8 ммоль), и реакционную смесь продували азотом. Смесь нагревали с обратным холодильником в течение 19 ч затем охлаждали до кт (комнатной температуры). Затем реакционную смесь фильтровали через целлит, промывая CHCl, и фильтрат концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (10%→20% EtOAc/гексан, градиент) получили 3,53 г (71%) желаемого продукта 2.
Стадия 2. Удаление защиты 2 с получением 3
3
2
4
HF-пиридин (5 мл) добавляли к раствору силилового эфира 2 (3,53 г, 9,76 ммоль) в MeCN (20 мл) в пластиковой бутылке. Реакционную смесь перемешивали при кт в течение 5 ч, затем гасили насыщенным водным NaHCO (250 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (3×100 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (150 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 2,14 г (89%) желаемого продукта 3.
Стадия 3. Алкилирование 3 с получением эфира 4
2
4
Гидрид натрия (11 мг, 0,46 ммоль) добавляли к раствору спирта 3 (100 мг, 0,40 ммоль) в ТГФ (3 мл) при 0°С в атмосфере азота. После 1 ч при 0°С добавляли метил-5-бромвалерат (67 мкл, 0,47 ммоль), и реакционной смеси давали нагреться до кт. После 3 ч анализ ТСХ (тонкослойная хроматография) показал большую часть оставшегося исходного спирта, и добавляли другую порцию бромида (67 мкл, 0,47 ммоль). После суммарного времени реакции 22 ч реакционную смесь гасили 1 н. HCI и экстрагировали EtOAc (3×25 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (40% EtOAc/гексан → EtOAc, градиент) получили 19 мг (13%) желаемого эфира.
Стадия 4. Омыление с получением 4
2
2
2
4
Водный гидроксид лития (1 н., 0,5 мл) добавляли к раствору эфира со стадии 3 выше (12,3 мг, 0,034 ммоль) в ТГФ (0,7 мл). После 2,5 ч при кт реакционную смесь подкисляли 0,25 М HCl (5 мл), затем экстрагировали CHCl (3×7 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 10,2 мг (86%) соединения 4.
Стадия 5. Соединения 8а и 8b
2
2
2
2
2
2
2
4
3
2
2
Триэтиламин и этилхлорформиат последовательно добавляли к раствору соединения 4 в CHCl при комнатной температуре. Через 2,5 ч добавляли триэтиламин и этиленгликоль. После перемешивания в течение ночи при комнатной температуре реакционную смесь распределяли между HO и CHCl. Фазы разделяли, и водную фазу экстрагировали CHCl (2х). Объединенную органическую фазу промывали 1 н. HCI, затем высушивали (MgSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (10% СНОН/CHCl) получили соединение 8а.
2
2
2
2
2
2
2
4
3
2
2
Триэтиламин и этилхлорформиат последовательно добавляли к раствору соединения 4 в CHCl при комнатной температуре. Через 2,5 ч добавляли триэтиламин и 4-(2-гидроксиэтил)-морфин. После перемешивания в течение ночи при комнатной температуре реакционную смесь распределяли между HO и CHCl. Фазы разделяли, и водную фазу экстрагировали CHCl (2х). Объединенную органическую фазу промывали 1 н. HCl, затем высушивали (MgSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (10% СНОН/CHCl) получили соединение 8b.
Пример 2
Стадия 1. Алкилирование 3 с получением эфира 5
3
2
4
Гидрид калия (23,4 мг, 0,58 ммоль) и 18-краун-б (167 мг, 0,63 ммоль) последовательно добавляли к раствору спирта 3 (130 мг, 0,53 ммоль) в ТГФ (3 мл) при 0°С. После 1 ч при 0°С раствор метил-3-(хлорметил)бензоата (полученного из соответствующего хлорангидрида, пиридина и метанола: см. J. Org. Chem. 1988, 53, 2548-2552; 116 мг, 0,63 ммоль) в ТГФ (1,5 мл) добавляли через канюлю, и реакционной смеси давали нагреться до кт. Через 22,5 ч реакционную смесь гасили 0,1 н. HCl (10 мл) и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные экстракты промывали насыщенным водным NaHCO (15 мл) и солевым раствором (15 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (30%→50% EtOAc/гексан, градиент) получили 66 мг (32%) желаемого эфира.
Стадия 2. Омыление с получением   5
2
2
2
4
2
2
2
2
Водный гидроксид лития (1 н., 0,4 мл) добавляли к раствору эфира со стадии 1 выше (33,5 мг, 0,085 ммоль) в ТГФ (0,75 мл). После 3,5 ч при кт реакционную смесь подкисляли 0,25 М HCl (5 мл), затем экстрагировали CHCl (3×10 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (2% MeOH/CHCl) с последующей препаративной тонкослойной хроматографией (10% MeOH/CHCl) получили 6,6 мг (20%) соединения 5.
Стадия 3. Соединения 9а и 9b
Соединения 9а и 9b получают из соединения 5 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 3
Стадия 1. Алкилирование 3 с получением эфира 6
2
4
Гидрид калия (27 мг, 0,67 ммоль) и 18-краун-6 (193 мг, 0,73 ммоль) последовательно добавляли к раствору спирта 3 (150 мг, 0,61 ммоль) в ТГФ (4 мл) при 0°C. После 1 ч при 0°С раствор этил-5-хлорметилфуран-2-карбоксилата (имеющегося в продаже от Aldrich Chemical Company, 138 мг, 0,73 ммоль) в ТГФ (1 мл) добавляли через канюлю, и реакционной смеси давали нагреться до кт. Через 18,5 ч реакционную смесь гасили 0,25 н. HCl (10 мл) и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (20 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (20%→50% EtOAc/Гексан, градиент) получили 78 мг (32%) желаемого эфира.
Стадия 2. Омыление с получением   6
2
2
2
4
Водный гидроксид лития (1 н., 0,5 мл) добавляли к раствору эфира со стадии 1 выше (66,7 мг, 0,17 ммоль) в ТГФ (0,5 мл). После 3 ч при кт реакционную смесь подкисляли 1 н. HCl (2 мл), затем экстрагировали CHCl (3×10 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 54,4 мг (88%) соединения 6.
Стадия 3. Соединения 10а и 10b
Соединения 10а и 10b получают из соединения 6 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 4
Стадия 1. Алкилирование 3 с получением эфира 7
2
4
Гидрид калия (25,2 мг, 0,63 ммоль) и 18-краун-6 (181 мг, 0,68 ммоль) последовательно добавляли к раствору спирта 3 (140 мг, 0,57 ммоль) в ТГФ (4 мл) при 0°С. После 1,5 ч при 0°С раствор метил-5-хлорметилтиофен-2-карбоксилата (полученного в соответствии с методиками, описанными в WO 2004/037808; 130 мг, 0,68 ммоль) в ТГФ (1,5 мл) добавляли через канюлю, и реакционной смеси давали нагреться до кт. Через 20 ч реакционную смесь гасили 0,25 н. HCl (15 мл) и экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (30 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (20%→50% EtOAc/Гексан, градиент) получили 40,7 мг (18%) желаемого эфира.
Стадия 2. Омыление с получением   7
2
2
2
4
Водный гидроксид лития (1 н., 0,4 мл) добавляли к раствору эфира со стадии 1 выше (37 мг, 0,092 ммоль) в ТГФ (0,75 мл). После 18 ч при кт реакционную смесь подкисляли 1 н. HCl (7 мл), затем экстрагировали CHCl (3×10 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 22,3 мг (62%) соединения 7.
Стадия 3. Соединения 11а и 11b
Соединения 11а и 11b получают из соединения 7 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 5
Стадия 1. Окисление 3 с получением альдегида 12
2
2
2
2
2
2
2
2
Молекулярные сита (4Å, 300 мг), 4-метилморфолина N-оксид (427 мг, 3,64 ммоль) и тетрапропиламмония перрутенат (250 мг, 0,71 ммоль) последовательно добавляли к раствору спирта 3 (600 мг, 2,43 ммоль) в CHCl (15 мл) при кт. Через 23 ч реакционную смесь фильтровали через целлит, промывая CHCl (10 мл). Фильтрат концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (CHCl → 10% EtOAc/CHCl, градиент) получили 92 мг (15%) желаемого альдегида 12.
Стадия 2. Реакция Виттига 12 с получением 13
4
2
4
2
2
Бис(триметилсилил)амид калия (0,5 М в PhMe, 1,92 мл, 0,96 ммоль) добавляли к раствору альдегида 12 (86 мг, 0,35 ммоль) в ТГФ (2 мл) при кт. После 15 мин при кт реакционную смесь охлаждали до -55°С в течение 10 мин, после чего добавляли раствор 5-карбоксипентилтрифенилфосфония бромида (207 мг, 0,45 ммоль) через канюлю. После 10 мин при -55°С реакционной смеси давали нагреться до кт. После 18 ч при кт реакционную смесь гасили насыщенным водным NHCl (15 мл) и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (20 мл), высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка препаративной тонкослойной хроматографией (5% МеОН/CHCl) получили 10,5 мг (9%) желаемого алкена 13.
Стадия 3. Гидрогенизация 13 с получением 14
Палладий на углероде (10 масс.%, 2 мг) добавляли к раствору алкена 13 (5,8 мг, 0,017 ммоль) в МеОН (1 мл). Устанавливали атмосферу водорода путем откачивания воздуха и повторного заполнения водородом (3х), и реакционную смесь перемешивали под баллоном водорода в течение 18 ч. Реакционную смесь фильтровали через целлит, промывая МеОН, и фильтрат концентрировали в вакууме с получением 4,1 мг (70%) соединения 14.
Стадия 4. Соединения 15а и 15b
Соединения 15а и 15b получают из соединения 14 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 6
Стадия 1. Арилирование 1 с получением 17
2
3
2
3
3
2
Раствор амида 1 (2,89 г, 12,60 ммоль) в 1,4-диоксане (20 мл), а затем раствор 1-(4-метоксибензилоксиметил)-4-бромбензола (16: синтез см. в патенте США №7091231, включенный посредством ссылки; 3,88 г, 12,63 ммоль) последовательно добавляли к смеси Xantphos (877 мг, 1,52 ммоль), Pd(dba) (463 мг, 0,51 ммоль) и CsCO (3,2 г, 9,82 ммоль) через канюлю. Реакционную смесь продували азотом, а затем нагревали с обратным холодильником в течение 22 ч. Реакционной смеси давали охладиться до кт, затем фильтровали через целлит, промывая CHCl, и фильтрат концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (5%→25% EtOAc/Гексан, градиент) получили 1,70 g (30%) желаемого продукта 17.
Стадия 2. Удаление защиты 17 с получением 18
3
2
4
2
2
HF-пиридин (5 мл) добавляли к раствору силилового эфира 17 (1,38 г, 3,03 ммоль) в MeCN (15 мл) в пластиковой бутылке при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 3 ч, затем гасили насыщенным водным NaHCO (250 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (3×100 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (100 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (1%→3% MeOH/CHCl, градиент) получили 464 мг (45%) желаемого спирта 18.
Стадия 3. Алкилирование спирта 18 с получением 19
2
4
Гидрид калия (44 мг, 1,10 ммоль) и 18-краун-6 (365 мг, 1,38 ммоль) последовательно добавляли к раствору спирта 18 (315 мг, 0,92 ммоль) в ТГФ (4 мл) при 0°С. После 1 ч при 0°С добавляли этил-5-хлорметилфуран-2-карбоксилат (0,28 мл, 1,82 ммоль), и реакционной смеси давали нагреться до кт. Через 22 ч реакционную смесь гасили 0,5 н. HCl (20 мл) и экстрагировали EtOAc (3×25 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (50 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (20% EtOAc/Гексан → EtOAc, градиент) получили 148 мг (32%) желаемого продукта 19.
Стадия 4. Окислительное удаление защиты 19 с получением 20 и 21
2
2
3
2
4
2
2
2
2
2
2
2,3-Дихлор-5,6-дициано-1,4-бензохинон (DDQ, 82 мг, 0,36 ммоль) добавляли к смеси 19 (143 мг, 0,29 ммоль) в CHCl (4 мл) и воды (0,2 мл). Через 3 ч ТСХ показала, что исходное вещество осталось, и добавляли другую порцию DDQ (82 мг, 0,36 ммоль). Еще через 1,25 ч реакционную смесь гасили насыщенным водным NaHCO (20 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (20 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (CHCl → 3% MeOH/CHCl, градиент) получили 38 мг (35%) желаемого спирта 20 и 61 мг примеси альдегида 21. Альдегид 21 дополнительно очищали препаративной тонкослойной хроматографией (5% МеОН/CHCl) с получением 48,7 мг (45%) альдегида 21.
Стадия 5. Окисление 20 с получением 21
2
2
2
2
2
2
Молекулярные сита (4А, 3 мг), 4-метилморфолина N-оксид (12,6 мг, 0,11 ммоль) и тетрапропиламмония перрутенат (2,5 мг, 0,007 ммоль) последовательно добавляли к раствору спирта 20 (26,8 мг, 0,072 ммоль) в CHCl (1,5 мл) при кт. Через 20 мин реакционную смесь фильтровали через целлит, промывая CHCl (5 мл). Фильтрат концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка препаративной тонкослойной хроматографией (5% МеОН/CHCl получили 9,6 мг (36%) желаемого альдегида 21.
Стадия 6. Реакция Гриньяра с 21 с получением эфира 22
2
4
2
2
2
4
2
2
Пентилмагния бромид (2,0 М в EtO, 32 мкл, 0,064 ммоль) добавляли к раствору альдегида 21 (21,7 мг, 0,058 ммоль) в ТГФ (0,4 мл) при -40°С в атмосфере азота. Через 25 мин реакционную смесь гасили насыщенным водным NHCl и экстрагировали CHCl (3×7 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка препаративной тонкослойной хроматографией (5% MeOH/CHCl) получили 10,6 мг (41%) желаемого эфира.
Стадия 7. Омыление с получением 22
2
2
2
4
Водный гидроксид лития (1 н., 0,1 мл) добавляли к раствору эфира со стадии 6 выше (8,8 мг, 0,02 ммоль) в ТГФ (0,2 мл). После 1 ч при кт реакционную смесь подкисляли 0,5 н. HCl (1 мл), затем экстрагировали CHCl (3×7 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 8,2 мг (99%) соединения 22.
Стадия 8. Соединения 25а и 25b
Соединения 25а и 25b получают из соединения 22 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 7
Стадия 1. Реакция Гриньяра с 21 с получением эфира 23
4
2
2
2
4
2
2
Изопропилмагния хлорид (2,0 М в ТГФ, 31 мкл, 0,062 ммоль) добавляли к раствору альдегида 21 (20,5 мг, 0,055 ммоль) в ТГФ (0,4 мл) при -40°С в атмосфере азота. Через 35 мин реакционную смесь гасили насыщенным водным NHCl и экстрагировали CHCl (3×7 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка препаративной тонкослойной хроматографией (5% MeOH/CHCl) получили 5 мг (22%) желаемого эфира.
Стадия 2. Омыление с получением 23
2
2
2
4
Водный гидроксид лития (1 н., 0,05 мл) добавляли к раствору эфира со стадии 1 выше (3,1 мг, 0,007 ммоль) в ТГФ (0,15 мл). После 1 ч при кт реакционную смесь подкисляли 0,2 н. HCl (1 мл), затем экстрагировали CHCl (3×7 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 2,5 мг (86%) соединения 23.
Стадия 3. Соединения 26а и 26b
Соединения 26а и 26b получают из соединения 23 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 8
Стадия 1. Реакция Гриньяра с 21 с получением эфира 24
4
2
2
2
4
2
2
Бензилмагния хлорид (2,0 М в ТГФ, 14 мкл, 0,028 ммоль) добавляли к раствору альдегида 21 (9,6 мг, 0,026 ммоль) в ТГФ (0,3 мл) при -40°С в атмосфере азота. Через 45 мин реакционную смесь нагревали до 0°С. После 25 мин при 0°С реакционную смесь гасили насыщенным водным NHCl и экстрагировали CHCl (3×7 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка препаративной тонкослойной хроматографией (7% MeOH/CHCl) получили 3,3 мг (28%) желаемого эфира.
Стадия 2. Омыление с получением 24
2
1
2
4
Водный гидроксид лития (1 н., 0,05 мл) добавляли к раствору эфира со стадии 1 выше (2,4 мг, 0,005 ммоль) в ТГФ (0,15 мл). После 2,5 ч при кг реакционную смесь подкисляли 0,2 н. HCl (1 мл), затем экстрагировали CHCl (3×7 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 2,2 мг (98%) соединения 24.
Стадия 3. Соединения 27а и 27b
Соединения 27а и 27b получают из соединения 24 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 9
Стадия 1. Алкилирование 18 с получением 28
2
4
Гидрид калия (55,5 мг, 1,38 ммоль) и 18-краун-б (456 мг, 1,73 ммоль) последовательно добавляли к раствору спирта 18 (394 мг, 1,15 ммоль) в ТГФ (5 мл) при 0°С. После 1 ч при 0°С добавляли раствор метил-5-хлорметилтиофен-2-карбоксилата (439 мг, 2,30 ммоль) в ТГФ (2 мл) через канюлю, и реакционной смеси давали нагреться до кт. Через 19 ч анализ ТСХ показал оставшееся исходное вещество. Добавляли другую порцию КН (20 мг, 0,50 ммоль), и реакционную смесь нагревали при 50°С. После 2 ч при 50°С реакционную смесь охлаждали и гасили 0,5 н. НС1 (20 мл) и экстрагировали EtOAc (3×25 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (50 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (15% EtOAc/Гексан → EtOAc, градиент) получили 108 мг (19%) желаемого продукта 28.
Стадия 2. Окислительное удаление защиты 28 с получением 29 и 30
2
2
2
4
2
2
DDQ (91 мг, 0,40 ммоль) добавляли к смеси 28 (98 мг, 0,20 ммоль) в CHCl (3 мл) и воды (0,15 мл). Через 4,5 ч реакционную смесь гасили насыщенным водным NaHCOs (15 мл) и экстрагировали EtOAc (3 х 25 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (40 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка препаративной тонкослойной хроматографией (5% MeOH/CHCl) получили 14,4 мг (19%) спирта 29 и 16,2 мг (22%) альдегида 30.
Стадия 3. Реакция Гриньяра с 30 с получением эфира 31
2
4
2
2
2
4
2
2
Пентилмагния бромид (2,0 М в EtO, 22 мкл, 0,044 ммоль) добавляли к раствору альдегида 30 (11 мг, 0,029 ммоль) в ТГФ (0,2 мл) при -40°С в атмосфере азота. Через 1,5 ч реакционнуюсмесь гасили насыщенным водным NHCl и экстрагировали CHCl (3×7 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка препаративной тонкослойной хроматографией (5% MeOH/CHCl) получили 4,8 мг (37%) желаемого эфира.
Стадия 4. Омыление с получением 31
2
2
Эстеразу печени кролика (134 ед./мг, 1 мг) добавляли к раствору эфира со стадии 3 выше (3,6 мг, 0,008 ммоль) в MeCN (0,1 мл) и буфере рН 7,2 (2,5 мл). После 16,5 ч при кт реакционную смесь разбавляли MeCN (7 мл) и концентрировали в вакууме. Остаток суспендировали в CHCl и фильтровали через ватную пробку. Фильтрат концентрировали в вакууме с получением 2,0 мг (57%) соединения 31.
Стадия 5. Соединения 32а и 32b
Соединения 32а и 32b получают из соединения 31 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 10
Стадия 1. Алкилирование 18 с получением 33
2
4
Гидрид калия (16 мг, 0,39 ммоль) добавляли к раствору спирта 18 (112 мг, 0,33 ммоль) в ТГФ (1,0 мл) при 0°С. После 1 ч при 0°С последовательно добавляли 18-краун-б (114 мг, 0,43 ммоль), йодид калия (5 мг, 0,03 ммоль) и раствор метил-3-хлорметилбензоата (121 мг, 0,66 ммоль) в ТГФ (0,5 мл). Реакционной смеси давали нагреться до кт. Через 19 ч реакционную смесь гасили 0,1 н. HCI (10 мл) и экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (15 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (20% EtOAc/Гексан → EtOAc, градиент) получили 23 мг (14%) желаемого продукта 33.
Стадия 2. Окислительное удаление защиты 33 с получением 34
3
2
3
2
4
DDQ (23 мг, 0,10 ммоль) добавляли к смеси 33 (23 мг, 0,047 ммоль) в CHCl и воды (20:1, 0,25 мл). Через 3,75 ч реакционную смесь гасили насыщенным водным NaHCO (10 мл) и экстрагировали EtOAc (3х7 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (10 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка препаративной тонкослойной хроматографией (80% EtOAc/Hex) получили 13 мг (58%) альдегида 34.
Стадия 3. Реакция Гриньяра с 34 с получением эфира 35
2
4
2
2
2
4
2
2
Пентилмагния бромид (2,0 М в EtO, 50 мкл, 0,10 ммоль) добавляли к раствору альдегида 34 (12,4 мг, 0,034 ммоль) в ТГФ (0,1 мл) при -40°С в атмосфере азота. Через 1 ч реакционную смесь гасили насыщенным водным NHCl (7 мл) и экстрагировали CHCl (3×7 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка препаративной тонкослойной хроматографией (5% MeOH/CHCl) получили 8,6 мг (58%) желаемого эфира.
Стадия 4. Омыление с получением 35
2
2
Эстеразу печени кролика (134 ед./мг, 1 мг) добавляли к раствору эфира со стадии 3 выше (7,4 мг, 0,017 ммоль) в MeCN (0,1 мл) и буфере рН 7,2 (2,5 мл). После 18 ч при кт реакционную смесь разбавляли MeCN (7 мл) и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка препаративной тонкослойной хроматографией (5% MeOH/CHCl) получили 1,5 мг (21%) соединения 35.
Стадия 5. Соединения 36а и 36b
Соединения 36а и 36b получают из соединения 35 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 11
Стадия 1. Реакция Гриньяра с 30 с получением эфира 37
2
2
2
4
2
2
н-Бутилмагния хлорид (2,0 М в ТГФ, 41 мкл, 0,082 ммоль) добавляли к раствору альдегида 30 (20,2 мг, 0,054 ммоль) в ТГФ (0,1 мл) при -40°С в атмосфере азота. Через 1 ч реакционную смесь гасили насыщенным водным NI-UCI (10 мл) и экстрагировали CHCl (3×7 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка препаративной тонкослойной хроматографией (5% MeOH/CHCl) получили 12,3 мг (53%) желаемого эфира.
Стадия 2. Омыление с получением 37
2
2
Эстеразу печени кролика (134 ед./мг, 1 мг) добавляли к раствору эфира со стадии 1 выше (11,2 мг, 0,026 ммоль) в MeCN (0,1 мл) и буфере рН 7,2 (3,0 мл). После 19 ч при кт реакционную смесь разбавляли MeCN (10 мл) и концентрировали в вакууме. Остаток суспендировали в 5% МеОН/CHCl и фильтровали через ватную пробку. Фильтрат концентрировали в вакууме с получением 10,7 мг (99%) соединения 37.
Стадия 3. Соединения 41а и 41b
Соединения 41а и 41b получают из соединения 37 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 12
Стадия 1. Реакция Гриньяра с 30 с получением эфира 38
2
4
2
2
2
4
2
2
н-Гексилмагния бромид (2,0 М в EtO, 100 мкл, 0,20 ммоль) добавляли к раствору альдегида 30 (24,6 мг, 0,054 ммоль) в ТГФ (0,12 мл) при -40°С в атмосфере азота. Через 1,5 ч реакционную смесь гасили насыщенным водным NHCl (10 мл) и экстрагировали CHCl (3×7 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка препаративной тонкослойной хроматографией (5% MeOH/CHCl) получили 16,3 мг (54%) желаемого эфира.
Стадия 2. Омыление с получением 38
2
2
Эстеразу печени кролика (134 ед./мг, 1 мг) добавляли к раствору эфира со стадии 1 выше (13 мг, 0,028 ммоль) в MeCN (0,1 мл) и буфере рН 7,2 (3,0 мл). После 18 ч при кт реакционную смесь разбавляли MeCN (10 мл) и концентрировали в вакууме. Остаток суспендировали в 5% MeOH/CHCl и фильтровали через ватную пробку. Фильтрат концентрировали в вакууме с получением 11 мг (87%) соединения 38.
Стадия 3. Соединения 42а и 42b
Соединения 42а и 42b получают из соединения 38 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 13
Стадия 1. Реакция Гриньяра с 30 с получением эфира 39
4
2
2
2
4
2
2
н-Пропилмагния хлорид (2,0 М в Et20, 92 мкл, 0,18 ммоль) добавляли к раствору альдегида 30 (22,9 мг, 0,061 ммоль) в ТГФ (0,12 мл) при -40°С в атмосфере азота. Через 1,75 ч реакционную смесь гасили насыщенным водным NHCl (10 мл) и экстрагировали CHCl (3×7 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка препаративной тонкослойной хроматографией (5% МеОН/CHCl) получили 13 мг (51%) желаемого эфира.
Стадия 2. Омыление с получением 39
2
2
Эстеразу печени кролика (134 ед./мг, 1 мг) добавляли к раствору эфира со стадии 1 выше (10,8 мг, 0,026 ммоль) в MeCN (0,1 мл) и буфере рН 7,2 (3,0 мл). После 17 ч при кт реакционную смесь разбавляли MeCN (10 мл) и концентрировали в вакууме. Остаток суспендировали в 5% MeOH/CHCl и фильтровали через ватную пробку. Фильтрат концентрировали в вакууме с получением 10,4 мг (99%) соединения 39.
Стадия 3. Соединения 43а и 43b
Соединения 43а и 43b получают из соединения 39 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 14
Стадия 1. Реакция Гриньяра с 30 с получением эфира 40
2
4
2
2
2
4
2
2
Этилмагния хлорид (2,0 М в EtO, 24 мкл, 0,048 ммоль) добавляли к раствору альдегида 30 (5,8 мг, 0,016 ммоль) в ТГФ (0,1 мл) при -40°С в атмосфере азота. Через 1,25 ч реакционную смесь гасили насыщенным водным NHCl (5 мл) и экстрагировали CHCl (3×5 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка препаративной тонкослойной хроматографией (5% MeOH/CHCl) получили 2,5 мг (40%) желаемого эфира.
Стадия 2. Омыление с получением 40
2
2
Эстеразу печени кролика (134 ед./мг, 1 мг) добавляли к раствору эфира со стадии 1 выше (2,8 мг, 0,007 ммоль) в MeCN (0,1 мл) и буфере рН 7,2 (2,5 мл). После 17 ч при кт реакционную смесь разбавляли MeCN (10 мл) и концентрировали в вакууме. Остаток суспендировали в 5% MeOH/CHCl и фильтровали через ватную пробку. Фильтрат концентрировали в вакууме с получением 2,7 мг (99%) соединения 40.
Стадия 3. Соединения 44а и 44b
Соединения 44а и 44b получают из соединения 40 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 15
Стадия 1. Окисление 45 с получением альдегида 46
2
2
3
3
2
2
2
4
2
2
Периодинан десса-мартина (1,63 г, 3,83 ммоль) добавляли к раствору спирта 45 (1,43 г, 3,48 ммоль) в CHCl (12 мл) при кт в атмосфере азота. После 1 ч при кт реакционную смесь гасили насыщенным водным NaHCO и насыщенным водным NaHSO (1:1, 100 мл). Смесь экстрагировали CHCl (3×150 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (2% MeOH/CHCl ) получили 915 мг (64%) желаемого альдегида 46.
Стадия 2. Метиленирование 46 с получением алкена 47
Реагент Теббе (0,5 М в ТГФ, 4,86 мл, 2,43 ммоль) добавляли к раствору альдегида 46 (677 мг, 1,65 ммоль) в ТГФ (11 мл) при -40°С в атмосфере азота. После 1 ч при -40°С реакционную смесь гасили добавлением водного 2 н. NaOH (1,65 мл) и энергично перемешивали в течение ночи с добавлением ТГФ (15 мл). Смесь фильтровали через целлит, промывая избытком EtOAc. Фильтрат концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (30%→50% EtOAc/Hex) получили 254 мг (38%) желаемого алкена 47.
Стадия 3. Реакция обмена 47 с получением алкена 48
2
2
Бензилиден[1,3-бис(2,4,6-триметилфенил)-2-имидазолидинилиден]дихлор(трициклогексилфосфин)-рутений (катализатор Граббса, 2-го поколения, 48 мг, 0,057 ммоль) добавляли к раствору алкена 47 (230 мг, 0,56 ммоль) и метил 5-аллилтиофен-2-карбоксилата (пример получения 3, 206 мг, 1,13 ммоль) в CHCl (3,0 мл). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждали до кт и добавляли дополнительное количество катализатора (48 мг, 0,057 ммоль) и метил-5-аллилтиофен-2-карбоксилата (100 мг, 0,55 ммоль). Смесь нагревали в течение еще 18 ч с обратным холодильником, затем охлаждали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (5%→50% EtOAc/Hex, градиент) получили 100 мг (32%) желаемого алкена 48 параллельно с 130 мг (57%) исходного алкена 47.
2
2
3
2
4
Стадия 4. Окислительное удаление защиты 48 с получением 49 и 50 DDQ (58 мг, 0,26 ммоль) добавляли к смеси 48 (130 мг, 0,23 ммоль) в CHCl (3,1 мл) и воды (0,16 мл) при 0°С в атмосфере азота. Через 45 мин реакционную смесь гасили насыщенным водным NaHCO (40 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (3×30 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (25 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (50%→ 75% EtOAc/Нех, градиент) получили 28 мг неразделяемой смеси исходного вещества 48 и кетона 49 и 63 мг (62%) желаемого спирта 50.
Стадия 5. Омыление 50 с получением 51
2
2
Эстеразу печени кролика (134 ед./мг, 1 мг) добавляли к раствору эфира 50 (3,7 мг, 0,008 ммоль) в MeCN (0,2 мл) и буфере рН 7,2 (2,5 мл). После 15,5 ч при кт реакционную смесь разбавляли MeCN (8 мл) и концентрировали в вакууме. Остаток суспендировали в 10% MeOH/CHCl и фильтровали через ватную пробку. Фильтрат концентрировали в вакууме с получением 3,0 мг (84%) соединения 51.
Стадия 6. Соединения 52а и 52b
Соединения 52а и 52b получают из соединения 51 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 16
Стадия 1. Окисление 38/39 с получением 39
2
2
3
2
4
DDQ (5,5 мг, 0,024 ммоль) добавляли к смеси эфира 48 и кетона 49 (6,8 мг, 0,012 ммоль) в CHCl и воде (20:1, 0,25 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота. Через 1,5 ч реакционную смесь гасили насыщенным водным NaHCO (5 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (3×5 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (5 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка препаративной тонкослойной хроматографией (60% EtOAc/Нех) получили 1,5 мг (28%) желаемого кетона 49.
Стадия 2. Гидрогенизация 49 с получением эфира 53
Палладий на углероде (10% масс/масс, 1 мг) добавляли к раствору алкена 49 (1,5 мг, 0,0034 ммоль) в метаноле (0,5 мл). Устанавливали атмосферу водорода путем откачивания воздуха и повторного заполнения водородом (3х), и реакционную смесь перемешивали под баллоном водорода. После 2 ч при кт реакционную смесь фильтровали через целлит, промывая МеОН, и фильтрат концентрировали в вакууме с получением 1,3 мг (86%) желаемого эфира 53.
Стадия 3. Омыление 53 с получением 54
2
2
Эстеразу печени кролика (134 ед./мг, 1 мг) добавляли к раствору эфира 53 (1,3 мг, 0,0029 ммоль) в MeCN (0,1 мл) и буфере рН 7,2 (2,5 мл). После 23 ч при кт реакционную смесь разбавляли MeCN (10 мл) и концентрировали в вакууме. Остаток суспендировали в 10% MeOH/CHCl и фильтровали через ватную пробку. Фильтрат концентрировали в вакууме с получением 1,2 мг (95%) соединения 54.
Стадия 4. Соединения 55а и 55b
Соединения 55а и 55b получают из соединения 54 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 17
2
2
Эстеразу печени кролика (134 ед./мг, 1 мг) добавляли к раствору эфира 53 (0,6 мг, 0,014 ммоль) в MeCN (0,1 мл) и буфере pH 7,2 (2,5 мл). После 17 ч при кт реакционную смесь разбавляли MeCN (8 мл) и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка препаративной тонкослойной хроматографией (4% MeOH/CHCl) получили 1 мг (17%) соединения 56. Соединения 57а и 57b получают из соединения 56 в соответствии с примером 1,стадия 5.
Примеры 18
Два диастереомера (58, ~100 мг) разделяли на приборе для ВЭЖХ Waters 600, используя детектор Waters 2996 PDA и колонку Whatman Partisil 10 M20/50, 22 мм × 500 мм (кат.№4232-220, Q.A. №3TA02D80). Используя 60% EtOAc/Нех в качестве элюента и скорость тока 15 мл/мин, первый диастереомер (59, 32,8 мг выделено суммарно) элюировал при 55-60 мин, а второй диастереомер (60, 52,6 мг выделено суммарно) элюировал при 61-70 мин.
Пример 19
2
2
2
4
Водный 1 н. гидроксид лития (0,05 мл, 0,05 ммоль) добавляли к раствору диастереомера эфира, элюирующего быстрее, 59 (2,7 мг, 0,0057 ммоль) в ТГФ (0,1 мл), и смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Через 17 ч реакционную смесь охлаждали до кт, подкисляли 0,05 н. водной HCl (5 мл) и экстрагировали CHCl (3×5 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 2,5 мг (100%) соединения 61. Соединения 63а и 63b получают из соединения 61 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 20
2
2
2
4
Водный 1 н. гидроксид лития (0,05 мл, 0,05 ммоль) добавляли к раствору диастереомера эфира, элюирующего медленнее, 60 (2,8 мг, 0,0059 ммоль) в ТГФ (0,1 мл), и смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Через 23 ч реакционную смесь охлаждали до кт, подкисляли 0,05 н. водной HCl (5 мл) и экстрагировали CHCl (3×5 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 1,7 мг (67%) соединения 62. Соединения 64а и 64b получают из соединения 62 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Примеры 21
Два диастереомера (65, ~43 мг) разделяли на приборе для ВЭЖХ Waters 600, используя детектор Waters 2996 PDA и колонку Whatman Partisil 10 M20/50, 22 мм × 500 мм (кат. №4232-220, Q.A. № 3TA02D80). Используя 60% EtOAc/Нех в качестве элюента и скорость тока 15 мл/мин, первый диастереомер (66,16 мг) элюировал при 69-75 мин, а второй диастереомер (67, 19 мг) элюировал при 80-88 мин.
Пример 22
2
2
Эстеразу печени кролика (134 ед./мг, 2 мг) добавляли к раствору диастереомера эфира, элюирующего быстрее, 66 (16 мг, 0,036 ммоль) в MeCN (0,2 мл) и буфере pH 7,2 (3,0 мл). После 18 ч при кг реакционную смесь разбавляли MeCN (10 мл) и концентрировали в вакууме. Остаток разбавляли CHCl (5 мл), фильтровали через пробку из стекловолокна и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка препаративной тонкослойной хроматографией (EtOAc → 25% МеОН/EtOAc, градиент) получили 12 мг (77%) соединения 68. Соединения 70а и 70b получают из соединения 68 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 23
2
2
Эстеразу печени кролика (134 ед./мг, 2 мг) добавляли к раствору диастереомера эфира, элюирующего медленнее, 67 (19 мг, 0,043 ммоль) в MeCN (0,2 мл) и буфере рН 7,2 (3,0 мл). После 18 ч при кт реакционную смесь разбавляли MeCN (10 мл) и концентрировали в вакууме. Остаток разбавляли CHCl (5 мл), фильтровали через пробку из стекловолокна и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка препаративной тонкослойной хроматографией (EtOAc → 25% МеОН/EtOAc, градиент) получили 10,5 мг (57%) соединения 69. Соединения 71а и 71 b получают из соединения 69 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 24
Стадия 1. Арилирование 1 с получением 72
2
2
Pd2(dba)3 (550 мг, 0,60 ммоль), Xantphos (1,04 г, 180 ммоль) и CszCOs (5,87 г, 18,0 ммоль) последовательно добавляли к раствору амида 1 (3,45 г, 15,0 ммоль) в 1,4-диоксане (100 мл). Раствор 1-(1-(4-метоксибензилоксигептил)-4-бромбензола (пример получения 4, 5,30 г, 13,54 ммоль) в 1,4-диоксане (50 мл) добавляли через канюлю. Реакционную смесь продували азотом, затем нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Через 17 ч реакционную смесь охлаждали до кт и фильтровали через целлит, промывая CHCl. Фильтрат концентрировали в вакууме, и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (5% → 35% EtOAc/Гексан, градиент) с получением 5,26 г (72%) желаемого продукта 72.
Стадия 2. Удаление защиты 72 с получением 73
3
2
4
2
2
2
2
HF-пиридин (8,8 мл) добавляли к раствору силилового эфира 72 (5,26 г, 9,74 ммоль) в MeCN (50 мл) в пластиковой бутылке при 0°С. После 45 мин при 0°С реакционную смесь гасили насыщенным водным NaHCO (400 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (3×200 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (200 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (CHCl → 5% MeOH/CHCl, градиент) получили 3,9 г (94%) желаемого спирта 73 в виде бледно-желтого твердого вещества.
Стадия 3. Алкилирование 73 с получением 74
4
2
4
В круглодонную колбу загружали гидрид калия (30% масс/масс в масле, 138 мг, 1,03 ммоль). Вещество промывали гексанами (3×1 мл), затем суспендировали в ТГФ (1 мл). Смесь охлаждали до 0°С и добавляли раствор спирта 73 (339 мг, 0,80 ммоль) в ТГФ (1,5 мл) через канюлю. После 1 ч при 0°С добавляли раствор изопропил-5-хлорметилтиофен-2-карбоксилата (пример получения 2, 174 мг, 0,80 ммоль) в ТГФ (1,5 мл) через канюлю. Добавляли йодид калия (14 мг, 0,08 ммоль), и реакционной смеси давали нагреться до кт. Через 18 ч реакционную смесь гасили насыщенным водным NHCl (15 мл) и экстрагировали EtOAc (3×25 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (15 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (20%→75% EtOAc/Гексан, градиент), а затем препаративной тонкослойной хроматографией (65% EtOAc/Гексан) получили 65 мг (14%) желаемого продукта 74.
Стадия 4. Окислительное удаление защиты 74 с получением 75
2
2
3
2
4
DDQ (26 мг, 0,12 ммоль) добавляли к раствору 74 (65 мг, 0,11 ммоль) в CHCl (1,4 мл) и воде (0,07 мл) при 0°С в атмосфере азота. Через 40 мин реакционную смесь гасили насыщенным водным NaHCO (20 мл) и экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (15 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (50%→75% EtOAc/Гексан, градиент), а затем препаративной тонкослойной хроматографией (60% EtOAc/Гексан) получили 36 мг (69%) соединения 75.
Примеры 25
Два диастереомера (75, ~36 мг) разделяли на приборе для ВЭЖХ Waters 600, используя детектор Waters 2996 PDA и колонку Whatman Partisil 10 M20/50, 22 мм×500 мм (кат.№4232-220, Q.A. №3TA02D80). Используя 60% EtOAc/Нех в качестве элюента и скорость тока 15 мл/мин, первый диастереомер (76, 14,8 мг) элюировал при 50-56,5 мин, а второй диастереомер (77, 16,4 мг) элюировал при 56,5-70 мин.
Пример 26
2
4
Водный 1 н. гидроксид лития (0,05 мл, 0,05 ммоль) добавляли к раствору диастереомера эфира, элюирующего быстрее, 76 (3,5 мг, 0,0072 ммоль) в ТГФ (0,1 мл), и смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Через 18 ч реакционную смесь охлаждали до кт, разбавляли водой (2 мл), подкисляли 1,0 н. водной HCl (1 мл) и экстрагировали EtOAc (3×5 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (5 мл), высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 3,0 мг (94%) соединения 78. Соединения 80а и 80b получают из соединения 78 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 27
2
4
Водный 1 н. гидроксид лития (0,05 мл, 0,05 ммоль) добавляли к раствору диастереомера эфира, элюирующего медленнее, 77 (3,5 мг, 0,0072 ммоль) в ТГФ (0,1 мл), и смесь нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Через 18 ч реакционную смесь охлаждали до кт, разбавляли водой (2 мл), подкисляли 1,0 н. водной HCl (1 мл) и экстрагировали EtOAc (3×5 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (5 мл), высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 3,2 мг (99%) соединения 79. Соединения 81 а и 81 b получают из соединения 79 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 28
2
2
2
2
Стадия 1. Окисление 73 с получением альдегида 82 1-(3-(диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорид (EDCl, 1,43 г, 7,45 ммоль) и ДМСО (0,70 мл, 9,86 ммоль) последовательно добавляли к раствору спирта 73 (1,06 г, 2,48 ммоль) в бензоле (25 мл) при кт в атмосфере азота. После 10 мин при кт добавляли пиридиния трифторацетат (527 мг, 2,73 ммоль). После 3 ч при кт раствор декантировали от маслянистого остатка, и остаток промывали бензолом (3×15 мл). Объединенные бензольные фазы концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (CHCl → 3% MeOH/CHCl, градиент) получили 1,0 г (95%) желаемого альдегида 82.
Стадия 2. Метиленирование 82 с получением алкена 83
Реагент Теббе (0,5 М в ТГФ, 7,0 мл, 3,5 ммоль) добавляли к раствору альдегида 82 (1,0 г, 2,36 ммоль) в ТГФ (16 мл) при -40°С в атмосфере азота. После 1 ч при -40°С реакционную смесь гасили добавлением водного 2 н. NaOH (5,25 мл) и энергично перемешивали в течение ночи с добавлением ТГФ (20 мл). Смесь фильтровали через целлит, промывая избытком EtOAc. Фильтрат концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (40% EtOAc/Нех) получили 195 мг (20%) желаемого алкена 83.
Стадия 3. Реакция обмена 83 с получением алкена 84
2
2
2
2
2
2
Катализатор Граббса второго поколения (38 мг, 0,045 ммоль) добавляли к раствору алкена 83 (190 мг, 0,45 ммоль) и метил-5-аллилтиофен-2-карбоксилата (пример получения 3, 173 мг, 0,95 ммоль) в CHCl (2,4 мл). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до кт и добавляли дополнительное количество катализатора (9 мг, 0,011 ммоль) и метил-5-аллилтиофен-2-карбоксилата (165 мг, 0,91 ммоль). Смесь нагревали еще в течение 22 ч с обратным холодильником, затем охлаждали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (2 раза, первый с использованием 5%→50% EtOAc/Нех, градиента, затем второй с использованием CHCl → 3% MeOH/CHCl, градиента) получили 180 мг (69%) желаемого алкена 84.
Стадия 4. Окислительное удаление защиты 84 с получением 85
2
2
3
2
4
DDQ (78 мг, 0,34 ммоль) добавляли к смеси 84 (180 мг, 0,31 ммоль) в CHCl (4,1 мл) и воды (0,21 мл) при 0°С в атмосфере азота. После 45 мин при 0°С реакционную смесь гасили насыщенным водным NaHCO (50 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (3×50 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (50 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (50%→66% EtOAc/Нех, градиент) получили 50 мг (35%) желаемого спирта 85.
Стадия 5. Гидрогенизация 85 с получением эфира 86
Палладий на углероде (10 масс.%, 12 мг) добавляли к раствору спирта 85 (50 мг, 0,11 ммоль) в метаноле (2,3 мл). Устанавливали атмосферу водорода путем откачивания воздуха и повторного заполнения водородом (3х), и реакционную смесь перемешивали под баллоном водорода. После 20 ч при кт реакционную смесь фильтровали через целлит, промывая МеОН, и фильтрат концентрировали в вакууме с получением 50 мг (99%) желаемого эфира 86.
Стадия 6. Омыление 86 с получением 87
2
2
4
2
2
Водный 1 н. гидроксид лития (0,19 мл, 0,19 ммоль) добавляли к раствору эфира 86 (17 мг, 0,038 ммоль) в ТГФ (0,4 мл). После 18 ч при кт добавляли HO (1,0 мл), и смесь подкисляли 1 н. водной HCI (1,0 мл) и экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (10 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка препаративной тонкослойной хроматографией (15% MeOH/CHCl) получили 5,6 мг (34%) соединения 87.
Стадия 7. Соединения 88а и 88b
Соединения 88а и 88b получают из соединения 87 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 29
Два диастереомера 86 (-34 мг) разделяли на приборе для ВЭЖХ Waters 600, используя детектор Waters 2996 PDA и колонку Whatman Partisil 10 M20/50, 22 мм × 500 мм (кат.№4232-220, Q.A. №3TA02D80). Используя 55% EtOAc/Hex в качестве элюента и скорость тока 15 мл/мин, первый диастереомер (89, 10,7 мг) элюировал при 78-87,5 мин, а второй диастереомер (90, 7,0 мг) элюировал при 91-101 мин.
Пример 30
2
2
4
Водный 1 н. гидроксид лития (0,12 мл, 0,12 ммоль) добавляли к раствору диастереомера эфира, элюирующего быстрее, 89 (10,7 мг, 0,023 ммоль) в ТГФ (0,3 мл). После 66 ч при кт добавляли HO (1,0 мл), и смесь подкисляли 1 н. водной HCl (1,0 мл) и экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (5 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 10 мг (96%) соединения 91. Соединения 93а и 93b получают из соединения 91 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 31
2
2
4
Водный 1 н. гидроксид лития (0,08 мл, 0,08 ммоль) добавляли к раствору диастереомера эфира, элюирующего медленнее, 90 (7,0 мг, 0,015 ммоль) в ТГФ (0,2 мл). После 66 ч при кт добавляли HO (1,0 мл), и смесь подкисляли 1 н. водной HCl (1,0 мл) и экстрагировали EtOAc (3×8 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (5 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 6,5 мг (96%) соединения 92. Соединения 94а и 94b получают из соединения 92 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример 32
Стадия 1. Реакция Мицунобу 45 и метил-4-гидроксибензоата с получением 95
2
2
3
2
4
Диизопропилазодикарбоксилат (DIAD, 194 мкл, 1,0 ммоль) добавляли к раствору спирта 45 (200 мг, 0,49 ммоль), трифенилфосфина (191 мг, 0,73 ммоль) и метил-4-гидроксибензоата (87 мг, 0,57 ммоль) в CHCl (2,5 мл). После перемешивания в течение 18 ч при кт растворитель удаляли в потоке азота, и остаток суспендировали в EtOAc (75 мл). Смесь промывали насыщенным водным NaHCO (3×25 мл) и солевым раствором (25 мл), затем органическую фазу высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (50% EtOAc/гексан → EtOAc, градиент) получили 81 мг (31%) желаемого эфира 95.
Стадия 2. Окислительное удаление защиты 95 с получением 96
2
2
3
2
4
DDQ (37 мг, 0,16 ммоль) добавляли к смеси 95 (81 мг, 0,15 ммоль) в CHCl (2,0 мл) и воды (0,1 мл) при 0°С в атмосфере азота. После 45 мин при 0°С реакционную смесь гасили насыщенным водным NaHCO (25 мл). Смесь экстрагировали EtOAc (3×25 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (25 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (85% EtOAc/Нех → EtOAc, градиент) получили 31 мг (49%) желаемого эфира 96.
Стадия 3. Омыление 96 с получением 97
2
4
Водный 1 н. гидроксид лития (0,35 мл, 0,35 ммоль) добавляли к раствору эфира 96 (30 мг, 0,071 ммоль) в ТГФ (0,7 мл). После 20 ч при кт добавляли воду (2,0 мл), и смесь подкисляли 1 н. водной HCl (1,5 мл) и экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (10 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (EtOAc → 10% МеОН/EtOAc, градиент) получили 11,5 мг (38%) исходного эфира 96 и 8,5 мг (29%) соединения 97.
Стадия 4. Соединения 98а и 98b
Соединения 98а и 98b получают из соединения 97 в соответствии с примером 1, стадия 5.
Пример получения 1 1-(1-(4-Метоксибензилоксигексил)-4-бромбензол
Стадия 1. Присоединение Гриньяра пентила к 4-бромбензальдегиду
2
2
4
н-Пентилмагния бромид (2,0 М в ТГФ, 27 мл, 54 ммоль) добавляли к раствору 4-бромбензальдегида (5,0 г, 27 ммоль) в ТГФ (20 мл) при 0°С в атмосфере азота. Через 1 ч реакционную смесь гасили 3 н. HCl и экстрагировали EtO (3×120 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (100 мл), высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (5% EtOAc/Нех) получили 5,1 г (74%) 1-(4-бромфенил)-гексан-1-ола.
Стадия 2. Защита спирта в виде его эфира МРМ
3
2
4
Гидрид натрия (60 масс.% в масле, 0,95 г, 23,8 ммоль) добавляли к раствору спирта со стадии 1 (5,11 г, 19,9 ммоль) в ТГФ и ДМФ (2:1, 20 мл) при 0°С в атмосфере азота. После 1 ч при 0°С добавляли 4-метоксибензилхлорид (3,23 мл, 23,8 ммоль), и реакционной смеси давали нагреться до кт. Затем реакционную смесь нагревали при 80°С. Через 17 ч реакционной смеси давали охладиться до кт, гасили насыщенным водным NaHCO (100 мл) и экстрагировали EtOAc (3×100 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (100 мл), высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (2% EtOAc/Нех) получили 7,02 г (94%) соединения, указанного в заголовке.
Пример получения 2 Изопропил-5-хлорметилтиофен-2-карбоксилат
Стадия 1. Получение бис-изопропилового эфира
3
2
4
DBU (1,8-диазабициклоундек-7-ен) (31,3 мл, 209 ммоль) и 2-йодпропан (20,9 мл, 209 ммоль) добавляли к раствору тиофен-2,5-дикарбоновой кислоты (6,0 г, 34,9 ммоль) в ацетоне (60 мл) при кт в атмосфере азота. После 21 ч при кт реакционную смесь гасили насыщенным водным NaHCO (300 мл) и экстрагировали EtOAc (3×150 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (200 мл), высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 7,59 г (85%) диэфира.
Стадия 2. Восстановление до гидроксиметилового эфира
2
2
2
2
2
4
Боргидрид натрия (3,36 г, 88,8 ммоль) добавляли к раствору диэфира (7,59 г, 29,6 ммоль) в CHCl/MeOH (1:1, 100 мл) при 0°С в атмосфере азота. Ледяную баню удаляли, и реакционной смеси давали перемешиваться при кт в течение ночи. После 20,5 ч при кт реакционную смесь концентрировали в вакууме, затем добавляли водную 0,5 н. HCl (100 мл). Смесь экстрагировали CHCl (3×100 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (5%→60% EtOAc/Нех, градиент) получили 738 мг (12%) спирта.
Стадия 3. Преобразование спирта в хлорид
2
2
3
2
2
2
4
Метансульфонилхлорид (0,67 мл, 8,1 ммоль) и триэтиламин (1,7 мл, 12,2 ммоль) последовательно добавляли по каплям к раствору спирта (696 мг, 3,48 ммоль) в CHCl (4,0 мл) при 0°С в атмосфере азота. Ледяную баню удаляли, и реакционной смеси давали перемешиваться при кт в течение ночи. Через 17 ч реакционную смесь гасили насыщенным водным NaHCO (30 мл) и экстрагировали CHCl (3× 50 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (5% EtOAc/Нех) получили 664 мг (87%) соединения, указанного в заголовке.
Пример получения 3 Метил-5-аллилтиофен-2-карбоксилат
Стадия 1. Получение метилового эфира
4
2
2
2
4
Ацетилхлорид (6,9 мл, 96,6 ммоль) добавляли к раствору 5-бром-2-тиофенкарбоновой кислоты (4,0 г, 19,3 ммоль) в метаноле (30 мл) при кт. После 17 ч при кт реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 1,5 ч, чтобы довести ее до завершения. Затем реакционную смесь охлаждали до кт и концентрировали в вакууме для удаления метанола. Добавляли насыщенный водный NHCl (120 мл), и смесь экстрагировали CHCl (3×100 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 3,57 г (84%) желаемого метилового эфира в виде беловатого твердого вещества.
Стадия 2. Аллилирование бромтиофена
2
4
2
4
Изопропилмагния хлорид (2,0 М в EtO, 8,9 мл, 17,8 ммоль) добавляли к раствору бромида со стадии 1 (3,56 г, 16,1 ммоль) в ТГФ (10 мл) при -40°С в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали при -40°С в течение 1 ч, затем последовательно добавляли цианид меди (I) (144 мг, 1,61 ммоль) и аллилбромид (3,0 мл, 35,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при -40°С в течение 1 ч, затем гасили насыщенным водным NHCl (100 мл) и экстрагировали EtOAc (3×100 мл). Объединенные экстракты промывали солевым раствором (100 мл), высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (5% EtOAc/Нех) получили 2,45 г (83%) соединения, указанного в заголовке, в виде бледно-желтого масла, которое отвердевало при стоянии.
Пример получения 4 1-(1-(4-Метоксибензилоксигептил)-4-бромбензол
Стадия 1. Присоединение Гриньяра гексила к 4-бромбензальдегиду
2
2
2
4
н-Гексилмагния бромид (2,0 М в EtO, 27 мл, 54 ммоль) добавляли к раствору 4-бромбензальдегида (5,0 г, 27 ммоль) в ТГФ (20 мл) при 0°С в атмосфере азота. После 1,5 ч при 0°С реакционную смесь медленно гасили 3 н. HCl (20 мл) и концентрировали в вакууме. Остаток разбавляли водой (30 мл) и экстрагировали EtO (3×150 мл). Объединенные экстракты высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (5%→10% EtOAc/Нех) получили 5,6 г (76%) 1-(4-бромфенил)-гептан-1-ола.
Стадия 2. Защита спирта его эфиром МРМ
4
2
4
Гидрид натрия (60% масс/масс в масле, 0,991 г, 24,8 ммоль) добавляли к раствору спирта со стадии 1 (5,6 г, 20,6 ммоль) в ТГФ и ДМФ (2:1, 30 мл) при 0°С в атмосфере азота. После 5 мин при 0°С реакционной смеси давали нагреться до кт и добавляли 4-метоксибензилхлорид (3,4 мл, 25,0 ммоль). Затем реакционную смесь нагревали при 80°С. После 18 ч при 80°С реакционной смеси давали охладиться до кт, гасили насыщенным водным NHCl (50 мл) и концентрировали в вакууме. Остаток экстрагировали EtOAc (3×100 мл). Объединенные экстракты промывали водой (2×100 мл) и солевым раствором (75 мл), затем высушивали (NaSO), фильтровали и концентрировали в вакууме. В результате очистки остатка колоночной хроматографией на силикагеле (2% EtOAc/Нех) получили 7,5 г (93%) соединения, указанного в заголовке.
Примерные, не ограничивающие примеры соединений, полезных в соответствии с настоящим описанием, включают приведенные ниже соединения:
Пример композиции:
Композиция, содержащая соединение, приведенное выше, где указанная композиция представляет собой жидкость, которая является офтальмологически приемлемой.
Примеры лекарственных средств:
Применение соединения, приведенного выше, при получении лекарственного средства для лечения глаукомы или глазной гипертензии у млекопитающего.
Применение соединения, приведенного выше, при получении лекарственного средства для лечения облысения у млекопитающего.
Лекарственное средство, содержащее композицию, приведенную выше, где указанная композиция представляет собой жидкость, которая является офтальмологически приемлемой.
Пример способа:
Способ, включающий введение соединения, приведенного выше, млекопитающему для лечения глаукомы или глазной гипертензии.
Способ, включающий введение соединения, приведенного выше, млекопитающему для лечения облысения.
Пример набора:
Набор, включающий композицию, содержащую соединение, приведенное выше, контейнер и инструкции по введению указанной композиции млекопитающему для лечения глаукомы или глазной гипертензии.
Набор, включающий композицию, содержащую соединение, приведенное выше, контейнер и инструкции по введению указанной композиции млекопитающему для лечения облысения.
Для лечения глаукомы рассмотрено комбинированное лечение приведенными ниже классами лекарственных средств:
β-Блокаторы (или β-адренергические антагонисты), включающие картеолол, левобунолол, метипаранолол, тимолола полугидрат, тимолола малеат, β1-селективные антагонисты, такие как бетаксолол и тому подобное, или их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства;
Адренергические агонисты, включающие
неселективные адренергические агонисты, такие как эпинефрина борат, эпинефрина гидрохлорид и дипивефрин и тому подобное, или их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства; и
2
α-селективные адренергические агонисты, такие как апраклонидин, бримонидин и тому подобное, или их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства;
Ингибиторы карбоангидразы, включающие ацетазоламид, дихлорфенамид, метазоламид, бринозоламид, дорзоламид и тому подобное, или их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства;
Холинергические агонисты, включающие
холинергические агонисты прямого действия, такие как карбахол, пилокарпина гидрохлорид, пилокарпина нитрат, пилокарпин и тому подобное, или их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства;
ингибиторы холинэстеразы, такие как демекарий, эхотиофат, физостигмин и тому подобное, или их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства.
2+
Антагонисты глутамата и другие нейропротективные агенты, такие как блокаторы Са каналов, такие как мемантин, амантадин, римантадин, нитроглицерин, декстрофан, декстрометорфан, CGS-19755, дигидропиридины, верапамил, эмопамил, бензотиазепины, бепридил, дифенилбутилпиперидины, дифенилпиперазины, НОЕ 166 и родственные лекарственные средства, флуспирилен, элипродил, ифенпродил, СР-101606, тибалозин, 2309 ВТ и 840S, флунаризин, никардипин, нифедипин, нимодипин, барнидипин, лидофлазин, фениламина лактат, амилорид и тому подобное, или их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства;
Простамиды, такие как биматопрост или его фармацевтически приемлемые соли или пролекарства; и
Простагландины, включающие травопрост, UFO-21, клопростенол, флупростенол, 13,14-дигидроклопростенол, изопропилунопростон, латанопрост и тому подобное.
Каннабиноиды. включающие агонисты СВ1, такие как WIN-55212-2 и СР-55940 и тому подобное, или их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства.
Для лечения заболеваний, поражающих глаз, включая глаукому, эти соединения можно вводить местным путем, окологлазным путем, внутриглазным путем или любыми другими эффективными способами, известными в данной области техники.
2
2
В дополнение к лечению глаукомы считают, что селективные агонисты простагландина EP имеют несколько медицинских применений. Например, в патенте США №6437146 заявлено применение селективных агонистов простагландина ЕР "для лечения или предупреждения воспаления и боли в суставе и мышце (например, ревматоидного артрита, ревматоидного спондилоартрита, остеоартрита, подагрического артрита, ювенильного артрита и т.д.), воспалительного состояния кожи (например, солнечного ожога, ожогов, экземы, дерматита и т.д.), воспалительного состояния глаза (например, конъюнктивита и т.д.), легочного расстройства, в которое вовлечено воспаление (например, астмы, бронхита, болезни голубятников, аллергического альвеолита у сельскохозяйственных работников и т.д.), состояния желудочно-кишечного тракта, связанного с воспалением (например, афтозной язвы, болезни Крона, атрофического гастрита, вариолоформного гастрита, неспецифического язвенного колита, целиакии, регионарного илеита, синдрома раздраженной кишки и т.д.), гингивита, воспаления, боли и опухания после операции или повреждения, пирексии, боли и других состояний, связанных с воспалением, аллергического заболевания, системной красной волчанки, склеродермы, полимиозита, тендинита, бурсита, узлового периартериита, ревматической лихорадки, синдрома Шегрена, болезни Бехчета, тиреоидита, диабета типа I, диабетического осложнения (диабетической микроангиопатии, диабетической ретинопатии, диабетической нефропатии и т.д.), нефротического синдрома, апластической анемии, тяжелой миастении, увеита, контактного дерматита, псориаза, болезни Кавасаки, саркоидоза, болезни Ходжкина, болезни Альцгеймера, дисфункции почек (нефрита, нефритического синдрома и т.д.), дисфункции печени (гепатита, цирроза и т.д.), желудочно-кишечной дисфункции (диареи, воспалительного кишечного заболевания и т.д.) шока, костного заболевания, характеризующегося аномальным метаболизмом кости, такого как остеопороз (в частности, постменопаузального остеопороза), гиперкальциемии, гиперпаратиреоза, болезни Педжета, остеолиза, гиперкальциемии злокачественности с метастазами или без метастазов костей, ревматоидного артрита, периодонтита, остеоартрита, остеалгии, остеопении, раковой кахексии, калькулеза, литиаза (в частности, уролитиаза), солидной карциномы, мезангиального пролиферативного гломерулонефрита, отека (например, сердечного отека, мозгового отека и т.д.), гипертензии, такой как злокачественная гипертензия или тому подобное, предменструального напряжения, мочевого конкремента, олигурии, например, вызванной острой или хронической недостаточностью, гиперфосфатурии или тому подобного".
2
В патенте США №6710072 заявлено применение агонистов EP для лечения или предупреждения "остеопороза, констипации, почечных расстройств, половой дисфункции, облысения, диабета, рака, а также при расстройстве регуляции иммунитета…различных патофизиологических заболеваний, включая острый инфаркт миокарда, сосудистый тромбоз, гипертензию, легочную гипертензию, ишемическую болезнь сердца, застойную сердечную недостаточность и стенокардию".
Эти соединения можно также применять для лечения или предупреждения состояний, поражающих заднюю часть глаза, включающих макулопатии/дегенерации сетчатки, такие как неэкссудативная возрастная макулярная дегенерация (ВМД), экссудативная возрастная макулярная дегенерация (ВМД), хороидальная неоваскуляризация, диабетическая ретинопатия, острая макулярная нейроретинопатия, центральная серозная хориоретинопатия, кистозный макулярный отек и диабетический макулярный отек; увеит/ретинит/хороидит, такой как острая мультифокальная плакоидная пигментная эпителиопатия, болезнь Бехчета, хориоретинопатия типа "выстрел дробью", инфекции (сифилис, клещевой боррелиоз, туберкулез, токсоплазмоз), интермедиарный увеит (парс-планит), мультифокальный хороидит, синдром множественных быстро исчезающих белых пятен (MEWDS), глазной саркоидоз, задний склерит, серпингинозный хороидит, синдром субретинального фиброза и увеита, синдром Фогта-Коянаги-Харада; сосудистые заболевания/экссудативные заболевания, такие как болезнь центральной артериальной окклюзии сетчатки, центральная венозная окклюзия сетчатки, диссеминированная внутрисосудистая коагулопатия, окклюзия венозной ветви сетчатки, гипертензивные изменения глазного дна, глазной ишемический синдром, микроаневризмы артерий сетчатки, болезнь Коатса, парафовеальная телеангиэктазия, перифлебит сетчатки, папиллофлебит, центральная артериальная окклюзия сетчатки, окклюзия артериальной ветви сетчатки, каротидная артериальная болезнь (CAD), ангиит сетчатки типа "ветка в инее", серповидноклеточная ретинопатия и другие гемоглобинопатии, ангиоидные полосы сетчатки, семейная экссудативная витреоретинопатия и болезнь Илза; травматические/хирургические состояния, такие как симпатическая офтальмия, увеит в сочетании с ретинитом, отслойка сетчатки, травма, состояния, вызванные лазером, состояния, вызванные фотодинамической терапией, фотокоагуляция, недостаточная перфузия во время операции, лучевая ретинопатия и ретинопатия, обусловленная трансплантацией костного мозга; пролиферативные расстройства, такие как пролиферативная витреоретинопатия и эпиретинальные мембраны, а также пролиферативная диабетическая ретинопатия; инфекционные расстройства, такие как глазной гистоплазмоз, глазной токсокароз, синдром предполагаемого гистоплазмоза глаз (СПГГ), эндофтальмит, токсоплазмоз, заболевания сетчатки, обусловленные ВИЧ инфекцией, заболевания хороидеи, обусловленные БИЧ инфекцией, заболевания сосудистой оболочки глаза, обусловленные ВИЧ инфекцией, вирусный ретинит, острый ретинальный некроз, прогрессирующий наружный ретинальный некроз, грибковые заболевания сетчатки, глазной сифилис, глазной туберкулез, диффузный односторонний подострый нефроретинит и миаз; генетические расстройства, такие как пигментная дистрофия сетчатки, системные расстройства с сочетанными дистрофиями сетчатки, врожденная стабильная никталопия, дистрофии колбочек, дегенерация желтого пятна Штаргардта и желтопятнистая абиотрофия сетчатки, врожденная дегенерация желтого пятна, мозаичная дистрофия пигментного эпителия сетчатки, X-сцепленный ретиношизис, дистрофия сетчатки Сорсби, доброкачественная концентрическая макулопатия, кристаллическая дистрофия Биетти и эластическая псевдоксантома; разрывы сетчатки, такие как отслойка сетчатки, разрыв желтого пятна и большой разрыв сетчатки; опухоли, такие как заболевание сетчатки, обусловленное опухолями, врожденная гипертрофия пигментного эпителия сетчатки, задняя увеальная меланома, гемангиома хороидеи, остеома хороидеи, метастазы хороидеи, сочетанная гамартома сетчатки и пигментного эпителия сетчатки, ретинобластома, вазопролиферативные опухоли глазного дна, астроцитома сетчатки и внутриглазные лимфоидные опухоли; и другие разнородные заболевания, поражающие заднюю часть глаза, такие как точечная внутренняя хориопатия, острая задняя мультифокальная пигментная эпителиопатия, миопическая дегенерация сетчатки и острый ретинальный пигментный эпителиит. Предпочтительно заболевание или состояние представляет собой пигментную дистрофию сетчатки, пролиферативную витреоретинопатию (ПВР), возрастную макулярную дегенерацию (ВМД), диабетическую ретинопатию, диабетический макулярный отек, отслойку сетчатки, разрыв сетчатки, увеит или цитомегаловирусный ретинит.
Эти соединения также полезны при лечении астмы.
Обычный специалист в данной области техники понимает значение стереохимии, связанной с заштрихованными клиновидными/сплошными клиновидными структурными признаками. Например, во вводном учебнике органической химии (Francis A. Carey, Organic Chemistry, New York: McGraw-Hill Book Company 1987, p.63) указано, что "клином показана связь, выходящая из плоскости бумаги по направлению к зрителю", а заштрихованный клин, указанный как "пунктирная линия", "представляет собой связь, удаляющуюся от зрителя". Если стереохимия не изображена однозначно, подразумевают, что структура включает каждый возможный стереоизомер, как чистый, так и в любой возможной смеси.
В приведенном выше описании подробно описаны конкретные способы и композиции, которые можно использовать для практики настоящего изобретения, и они представляют собой лучший рассматриваемый способ. Однако обычному специалисту в данной области техники очевидно, что аналогично могут быть получены дополнительные соединения с желаемыми фармакологическими свойствами, и что раскрытые соединения могут быть также получены из различных исходных соединений посредством различных химических реакций. Подобным образом различные фармацевтические композиции могут быть получены и использованы, по существу, с тем же результатом. Таким образом, хотя подробности вышеизложенного могут встречаться в тексте, их не следует рассматривать как ограничивающие общий объем изобретения; скорее, объем настоящего изобретения должен определяться только установленным законом построением прилагаемой формулы изобретения.
Примеры биологической активности in vivo соединений в форме полярных эфиров и соответствующих свободных кислот:
2-Гидроксиэтиловый эфир 5-(3-{(S)-1-[4-(1-(3)-гидроксиэтил)-фенил]-5-оксо-пирролидин-2-ил}-пропил)-тиофен-2-карбоновой кислоты тестировали на нормотензивных собаках при 0,003%, в дозировке один раз в день в течение 5 дней. Максимальное снижение внутриглазного давления (ВГД) относительно начального уровня составило 4,4 мм рт.ст.(32%) к 30 ч; максимальный индекс гиперемии глазной поверхности (ГПГ) составил 0,9 к 30 ч. Это соединение также тестировали у обезьян с индуцированной лазером гипертензией с использованием однократной дневной дозы. При 0,003% максимальное снижение ВГД относительно начального уровня составило 13,4 мм рт.ст.(38%) к 24 ч.
2-Морфолин-4-ил-этиловый эфир 5-(3-{(S)-1-[4-(1-(5)-гидроксигексил)-фенил]-5-оксо-пирролидин-2-ил}-пропил)-тиофен-2-карбоновой кислоты (2) тестировали на нормотензивных собаках при 0,003%, в дозировке один раз в день в течение 5 дней. Максимальное снижение внутриглазного давления (ВГД) относительно начального уровня составило 5,9 мм рт.ст. (36%) к 52 ч; максимальный индекс гиперемии глазной поверхности (ГПГ) составил 1,1 к 50 ч. Это соединение также тестировали у обезьян с индуцированной лазером гипертензией с использованием однократной дневной дозы. При 0,003% максимальное снижение ВГД относительно начального уровня составило 20 мм рт.ст. (53%) к 24 ч.
5-(3-{(S)-1-[4-(1-(8)-Гидроксигексил)-фенил]-5-оксо-пирролидин-2-ил}-пропил)-тиофен-2-карбоновую кислоту тестировали на нормотензивных собаках при 0,003%, в дозировке один раз в день в течение 5 дней. Максимальное снижение внутриглазного давления (ВГД) относительно начального уровня составило 4.6 мм рт.ст. (24%) к 6 ч максимальный индекс гиперемии глазной поверхности (ГПГ) составил 1,3 к 74 ч. Это соединение также тестировали у обезьян с индуцированной лазером гипертензией с использованием однократной дневной дозы. При 0,003% максимальное снижение ВГД относительно начального уровня составило 3,3 мм рт.ст. (9%) к 6 ч.