Изучение сорбционной активности потенциальных средств профилактики микотоксикозов в отношении афлатоксинов

УДК 619:615.9:661.183.2 DOI 10.33632/1998-698Х.2020-2-51-58

ИЗУЧЕНИЕ СОРБЦИОННОЙ АКТИВНОСТИ ПОТЕНЦИАЛЬНЫХ СРЕДСТВ ПРОФИЛАКТИКИ МИКОТОКСИКОЗОВ В ОТНОШЕНИИ АФЛАТОКСИНОВ

Тарасова Е.Ю. - кандидат биологических наук, Семенов Э.И. - кандидат биологических наук, Матросова Л.Е. - доктор биологических наук, Мишина Н.Н. - кандидат биологических наук,

Мухарлямова А.З. - ведущий инженер

ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности»

Естественное присутствие микотоксинов в кормах и пищевых продуктах является серьезной проблемой во всем мире, которая может вызвать необратимые последствия со здоровьем людей и животных. Среди различных микотоксинов афлатоксины, представляющие собой низкомолекулярные соединения и продуцируемые Aspergillus flavus и Aspergillus parasiticus, считаются сильнейшими тератогенами, мутагенами и канцерогенами. В связи с этим проблема получения и поиска новых энтеросорбентов, также как и разработка новых сорбционных технологий, является очень актуальной. Поэтому идет постоянный поиск средств, не нарушающих гомеостаз и способных выводить из организма продукты нарушенного метаболизма, жизнедеятельности патогенных микроорганизмов и токсических соединений, полученных из внешней среды. Изучение адсорбционной способности бентонитов Биклянского и Тарн-Варского месторождений, нанотрубокгаллуазита, коммерческих препаратов (Полисорба ВП и Микосорба) in vitro в отношении афлатоксина В1 показало, что именно галлуазит обладает наилучшими показателями сорбции (94,7%)и, в перспективе, может быть использован для борьбы с афлатоксикозами животных, птиц, а по пищевой цепочке и человека. При повышении рН среды с 2 до 8 у всех изучаемых адсорбентов наблюдалась десорбция афлатоксина В1с наименьшими показателями у галлуазита на уровне 0,3±0,1 и наибольшими у Микосорба на уровне 6,7±0,9% соответственно. Адсорбция нанотрубками афлатоксина В доставила 83,9±1,5%. При одновременном внесении в пробирки афлатоксинов В1 и В2 показатели сорбции у нанотрубокгаллуазита снижались на 3,9; 11,8; 4,0% в кислой, нейтральной, щелочной среде с учетом десорбции в отношении афлатоксина В1 и 9,3; 2,3; 10,5% соответственно в отношении афлатоксина В2. Полученные данные делают нанотрубкигаллуазита очень интересными для дальнейших исследований в отношении других микотоксинов и их комбинаций, а также его всестороннего изучения в качестве средства, снижающего токсическую нагрузку на организм сельскохозяйственных животных и птицы.

Ключевые слова: микотоксикоз, афлатоксин Вь афлатоксин В2, адсорбция, десорбция, энтеросорбент, бентонит, галлуазит, хроматограмма, нанотрубки.

Рост Aspergillus flavus и Aspergillus parasiticus в кормах при определенных условиях (относительная влажность воздуха 8090%, влажность субстрата - 18%, температура 27-30°С) обычно сопровождается выработкой многих токсичных вторичных метаболитов, таких как афлатоксины В1, В2, G1 и G2 [12]. Среди этих метаболитов афлатоксин В1является наиболее опасным и распространенным микотоксином, обладающим гепато-токсичным, канцерогенным и мутагенным действием [9, 13]. Присутствие афлатоксина В1

в рационе домашней птицы снижает выводимость, привесы цыплят, скорость роста, качество мяса и яиц, а также ухудшает коэффициент конверсии корма, повышает смертность и восприимчивость птиц к болезням, что негативно сказывается на получаемой производителем прибыли. Афлатоксины переходят из кормов для птицы и сельскохозяйственных животных в яйца, мясо, молоко и т.д., что представляет угрозу для здоровья конечных потребителей - людей [11]. Афлатоксин В1 является третьей по значимости причиной рака

печени, особенно в странах Африки и в развивающихся странах Азии, и классифицируется Международным агенством по изучению рака, как канцероген первой группы с высоким риском развития гепатоцел-люлярной карциномы [7, 15].

В Российской Федерации от 40 до 100% кормов контаминировано грибами рода Aspergillus, из них до 20% обладают токсичностью. Сотрудники лаборатории микотоксинов ФГБНУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» обнаруживали афлатоксины Bb B2, GbG2 в кукурузе и ржи, выращенных в Республике Татарстан, а также в завезенном из других регионов страны зерне [4]. При мониторинге кормов для сельскохозяйственных животных, отобранных в Рязанской области, выявили, что большая часть образцов (95,98%) была благополучной по содержанию афлатоксинов, но 6,42% образцов были контаминированы афлатоксином B1 в концентрациях от 0,0006 до 0,033 мг/кг. В 3,21% образцов концентрация афлатоксина Blпревышала предельно-допустимую концентрацию для взрослых животных в 1,65 раза, а для молодняка в 3,3 раза [5]. Исследования 77 образцов кормов, поступивших из семи районов Калужской области, выявили зараженность грибами родов Aspergillus spp., афлаток-син Bi обнаруживался в концентрации до 0,033, что не превышает ПДК для взрослых животных, но превышает ПДК для молодняка [1]. Для минимизации последствий, а так же с целью профилактики возникновения афлаток-сикоза ветеринарные специалисты используют энтеросорбенты различной природы, неорганические, органические или их комбинации. Применение наноразмерных трубчатых глинистых минералов в качестве материалов для новых, передовых биомедицинских исследований вызывает во всем мире большой интерес.

Одним из перспективных, на наш взгляд, в отношении микотоксинов адсорбентом может стать природный наноматериал -галлуазит. Он химически подобен каолиниту за исключением того, что имеет высокое содержание гидратной воды, приводящей к изменению морфологии канальцев [10]. Ранее нами [6] изучена сорбирующая способность галлуазита в отношении Т-2 токсина invitro.

Галлуазит представляет собой полиморф каолинита, в котором листы сворачиваются, образуя пустые цилиндры. Типичные галлуазитовые нанотрубки имеют внутренний диаметр в диапазоне от 20 до 100 нм. Показано

также, что галлуазит обладает высокой адсорбционной способностью как для катион-ных, так и для анионных красителей [18]. Нанотрубки галлуазита используют для загрузки и хранения веществ различной природы с целью их дальнейшего пролонгированного высвобождения. Внутреннюю полость нанотрубки, имеющую положительный заряд, можно заполнять отрицательно заряженными молекулами ферментов, лекарственных препаратов и т.д. [14, 16]. Таким образом, нанотруб-кигаллуазита открывают огромные возможности для создания кормовых добавок широкого и разнопланового действия, в которых связывание токсинов не будет являться единственным эффектом.

В зарубежной литературе имеется небольшое количество сообщений о применении нанотрубок галлуазита в качестве адсорбентов у животных. Они сводятся к успешному применению модифицированных стеарилдиме-тилбензиламмоний хлоридом нанотрубок свиноматкам с целью снижения негативных последствий, контаминированных зеараленоном кормов. Показано, что модифицированные таким образом нанотрубкигаллуазита минимизировали большинство токсических эффектов, вызванных зеараленоном, оказали положительное влияние на показатели роста, количество и диаметры мышечных волокон у поросят при отъеме [8]. Ранее ZhangY. etal. [17] также было показано, что модифицированные галлу-азитовые нанотрубки предотвращали большинство изменений в репродуктивной функции у свиноматок и в развитии поросят, вызванных зеараленоном.

Данные по изучению адсорбции мико-токсинов природным материалом галлуазитом в российской печати отсутствуют, поэтому целью наших исследований являлось изучение адсорбционной способности нанотрубок гал-луазита in vitro в отношении афлатоксинов В1 и В2, а также их совместном внесении, в сравнении с алюмосиликатными глинами другого строения (бентониты Биклянского и Тарн-Вар-ского месторождений), а также с коммерческими препаратами неорганической и органической природы.

Материал и методы. Адсорбционную способность энтеросорбентов в отношении афлатоксинов В] и В2 in vitro определяли по методике, описанной Крюковым В.С. и соавт. (1992) с изменениями Тремасова М.Я. и соавт. (2005). Для этого в ряд пробирок с содержа-

нием 5 мл водно-солевого раствора вносили 10 мкл метанольного раствора афлатоксина В1 или В2 с концентрацией 1 мкг/мкл и исследуемые сорбенты в количестве 10 мг, контролем служила пробирка без добавления сорбента. Далее проводили экспозицию при постоянном встряхивании в течение 30 минут, при температуре 37°С и рН среды 7,0 и 2,0 (моделирование pH в желудке), затем раствор фильтровали, из фильтрата токсин переэкстрагировали в хлороформ трижды по 20 мл, хлороформенные экстракты объединяли и выпаривали досуха на ротационном испарителе. Для определения десорбции к осадкам, содержащим комплекс

(афлатоксин+сорбент), добавляли 5 мл раствора, в котором создавали щелочную среду рН=8,0 (моделирование pH в кишечнике). Качественное и количественное определение остаточных количеств афлатоксина в сухом остатке проводили методом тонкослойной хроматографии с подтверждением ВЭЖХ. В работе использовали жидкостной хроматограф Agilent 1100Infinity с диодно-матричным и флуоресцентным детектором. Хроматографи-ческое разделение осуществляли на колонке с обращенной фазой Reprosil ODS-AC 18 250*4мм. Подвижная фаза представляла собой трехкомпонентную смесь (ацетонитрил - метанол - деонизированная вода) в соотношениях 40:50:10 v/v. Объем впрыска поддерживали на уровне 20 мкл. Температура термостата колонки 30 °С. Проведено изучение показателей сорбции у таких неорганических адсорбентов, как алюмосиликатные глины месторождения которых находятся на территории Российской Федерации (бентониты Биклянский и Тарн-

Варский), нанотрубок галлуазита (Sigma-Aldrich), высокочистого, высокодисперсного кремнезема Полисорб ВП (Полисорб ООО, Россия) в сравнении с широко рекламируемым органическим адсорбентом Микосорб (Alltech, США).

Так как уровень рН у моногастричных и жвачных животных в желудочно-кишечном тракте значительно изменяется при переходе от проксимального к дистальному участку, важно, чтобы вещество, адсорбирующее мико-токсины, могло удерживать их как в кислой среде желудка, так и в щелочной среде кишечника. Поэтому наше исследование включало в себя два этапа, что позволило проанализировать прочность комплекса микоток-син+адсорбент, сначала измерив количество связанного микотоксина при рН 2 (моделирование условий желудка), а затем определив отделение токсина от адсорбента во втором растворе при рН 8 (моделирование условий кишечника). Эффективность определяли сравнением начального связывания («непрочное связывание») с последующей десорбцией («прочное связывание»).

Данные усреднены и скомпилированы по результатам нескольких опытов, проведённых в разное время. Статистическую обработку результатов осуществляли с использованием стандартного пакета программ Microsoft Excel.

Результаты исследований. Сорбци-онная активность энтеросорбентов по отношению к афлатоксину В^ кислой (рН 2) среде представлена на хроматограммах (рис. 1).

Рисунок 1 - Хроматограмма выхода афлатоксина В1 при рН2 и внесении адсорбента (А -бентонит Биклянский; Б - бентонит Тарн-Варский; В - нанотрубки галлуазита; Г - Полисорб ВП; Д -Микосорб).

Показано, что адсорбция афлатоксина В^ентонитами Биклянского и Тарн-Варского месторождений составила 5,32±0,15 и 8,75±0,11 мкг, нанотрубка мигаллуазита -9,52±0,21, Полисорбом ВП - 8,10±0,19; Мико-сорбом - 7,9±0,14 мкг соответственно. Таким образом, все исследуемые образцы обладают адсорбционной активностью по отношению к афлатоксину Bj in vitro с максимальными показателями на уровне 95,2% у галлуазита, что на 17,02% выше, чем у органического препарата сравнения Микосорба. Адсорбция в нейтральной среде (рН 7) показана на рис. 2. Установлено, что наименьшей адсорбционной активностью при рН 7 обладает бентонит Биклянского месторождения, при этом показатели сорбции у бентонита Тарн-Варского месторождения, галлуазита, Полисорба ВП и Микосорба были выше на

35,67; 38,68; 13,18; 15,19% соответственно. Адсорбционная активность усиливалась в нейтральной среде на 16,6 и 7,2% у бентонитов Биклянского и Тарн-Варского месторождений. Что объясняется тем, что значительная часть ёмкости катионного обмена бентонитов обусловлена изоморфными замещениями в решётке и поэтому не зависит от рН, но на боковых гранях бентонитовых частиц присутствуют гидроксильные группы, которые могут быть источником, зависящим от рН и кислотности [2].

Вследствие кристаллохимических особенностей строения глинистых минералов при изменении рН раствора происходит перезарядка торцевых участков глинистых частиц, поэтому адсорбционное равновесие в щелочной среде достигается быстрее, чем в кислой среде [3].

Рисунок 2 - Сравнительная характеристика сорбционной активности энтеросорбентов по отношению к афлатоксину Bi в нейтральной

При повышении рН среды с 2 до 8 у всех изучаемых адсорбентов наблюдалась десорбция афлатоксина В1 с наименьшими показателями у галлуазита на уровне 0,3±0,1 и наибольшими у Микосорба на уровне

6,7±0,9% соответственно (рис. 3). Десорбция для бентонитов Биклянского и Тарн-Варского месторождений составила 0,06 и 0,07 мкг, для Полисорба ВП - 0,12 мкг афлатоксина В1.

Рисунок 3 - Хроматограмма выхода афлатоксина В1 при рН8 (А - нанотрубки галлуазита; Б -Микосорб).

Показатели истинной сорбции, которую мы определяли сравнением начального связывания («непрочное связывание») с по-

следующей десорбцией («прочное связывание») представлены в таблице 1.

Таблица 1 - «Истинная сорбция» энтеросорбентов по отношению к афлатоксинуВ1

Название адсорбента Адсорбция при рН2, % «Истинная сорбция»,%

Бентонит Биклянский 53,2±1,2 52,1±0,6

Бентонит Тарн-Варский 87,5±2,3 86,7±2,7

Галлуазит 95,2±0,7 94,7±0,8

Полисорб ВП 81,0±0,9 79,5±1,1

Микосорб 79,0±1,7 72,3±0,5

Из таблицы видно, что «истинная сорбция» коммерческих энтеросорбентов неорганической (Полисорб ВП) и органической природы (Микосорб) находится в одном диапазоне и составляет 72,3-79,5%. Максимальная адсорбция афлатоксина В1 отмечалась у галлу-азита, в связи с этим провели дальнейшее изучение нанотрубок в отношении афлатоксина В2. Установлено, что сорбция афлатоксина В2 в кислой среде снижалась на 8,9%, в

нейтральной среде на 9,5%, десорбция увеличивалась с 0,3 до 2,4%, показатели «истинной сорбции» снижались на 10,8% соответственно относительно адсорбции нанотрубками галлу-азита афлатоксина В1. Так как на практике корма редко контаминируются только одним микотоксином, проведен опыт по изучению адсорбции афлатоксинов В1 и В2 при одновременном внесении в пробирки с изучаемым адсорбентом галлуазитом (рис. 4).

Рисунок 4 - Показатели адсорбционной способности нанотрубок галлуазита в отношении группы афлатоксинов В1 и В2

Показано, что показатели сорбции у временном внесении суммы афлатоксинов на

нанотрубок галлуазита снижались при одно- 3,9; 11,8; 4,0% в кислой, нейтральной, щелоч-

ЖУРНАЛ ДЛЯ ПРОФЕССИОНАЛОВ ОТ ПРОФЕССИОНАЛОВ

ной среде с учетом десорбции в отношении афлатоксина В! и 9,3; 2,3; 10,5% соответсвенно в отношении афлатоксина В2.

Заключение. Галлуазит представляет собой тип алюмосиликатной глины с полой нанотрубчатой структурой и набором характеристик, которые делают его дешевым, доступным, долговечным, механически прочным и биосовместимым. Показано, что именно гал-луазит обладает наилучшими показателями сорбции (94,7%).

При повышении рН среды у всех изучаемых адсорбентов наблюдалась десорбция афлатоксина В1 с наименьшими показателями у галлуазита на уровне 0,3±0,1 и наибольшими у Микосорба на уровне 6,7±0,9% соответственно. Адсорбция нано-

трубками афлатоксина В2 составила 83,9±1,5%. При одновременном внесении в пробирки афлатоксинов В1 и В2 показатели сорбции у нанотрубок галлуазита снижались в пределах 3,9 - 11,8%.

Исследование показало, что в перспективе нанотрубки галлуазита можно рассматривать в качестве мощного инструмента для ослабления или предотвращения неблагоприятного воздействия афлатоксинов на животных, а также конечного потребителя - человека. В дальнейшем адсорбционную активность галлуазита in vitro необходимо подтвердить в опытах на лабораторных и сельскохозяйственных животных, т.к. в настоящее время нет моделей, полностью имитирующих условия желудочно-кишечного тракта.

Литература

1. Валиев, А.Р. Микотоксикологический анализ кормов из Калужской области / А.Р. Валиев, Н.Н. Мишина, Р.М. Потехина, С.А. Танасева, Л.А. Авакумова, А.И. Никитин, Э.И. Семенов // Материалы четвертого съезда микологов России: Современная микология в России. - 2017. - Т.7. - С. 191-192.

2. Оразова, С.С. Эффективность использования природных сорбентов восточного Казахстана в очистке воды от ионов тяжелых металлов (Cu2+) / С.С. Оразова, В.М. Белов, В.В. Евстигнеев // Известия Томского политехнического университета. - 2007. - Т. 311. - №2. - С. 150-152.

3. Соколов, В.Н. Глинистые породы и их свойства / В.Н. Соколов // Соросовский образовательный журнал. - 2000. - Т. 6. - №9. - С. 59-65.

4. Танасева, С.А. Афлатоксикоз свиней: эффективная схема лечения / С.А. Танасева, Л.Е. Матросова, Э.И. Семенов // Свиноводство. - №4. - 2016. - С. 51-53.

5. Танасева, С.А. Мониторинг афлатоксинов в кормах из Рязанской области / С.А. Танасева, В.И. Босяков // Материалы научно-практической конференции, посвященной 90-летию со дня рождения профессора В.А. Киршина: «Актуальные проблемы ветеринарной медицины». - Казань. -2018. - С. 191-193.

6. Тарасова, Е.Ю. Поиск эффективных адсорбентов Т-2 токсина / Е.Ю. Тарасова, Э.И. Семенов, А.Р. Валиев, Л.Е. Матросова // Вестник Марийского государственного университета серия «Сельскохозяйственные науки. Экономические науки». - 2019. - Т.5. - №3. - С.322-329.

7. De Ruyck, K. Dietary mycotoxins, co-exposure, and carcinogenesis in humans: Short review / K. De Ruyck; M. De Boevre; I. Huybrechts; S. De Saeger // Mutat. Res. Rev. - 2015. - №766. - Р. 32-41.

8. Gao, R. Modified halloysite nanotubes reduce the toxic effects of zearalenone in gestating sows on growth and muscle development of their offsprings / R. Gao, Q. Meng, M. Li et al. // Journal of Animal Science and Biotechnology. - 2016. - V. 29. - P. 7-14.

9. Hussain, Z. Residues of aflatoxin B1 in broiler meat: Effect of age and dietary aflatoxin B1 levels / Z. Hussain, M.Z. Khan, A. Khan, I. Javed, M.K. Saleemi, S. Mahmood, M.R. Asi // Food Chem. Toxicol. -2010. - №48. -Р. 3304-3307.

10. Ismail, H. The effect of halloysite nanotubes as a novel nanofiller on curing behavior, mechanical and microstructural properties of ethylene propylene diene monomer (EPDM) nanocomposites / H. Ismail, P. Pasbakhsh, M.N. Ahmad Fauzi, A. Abu Bakar // PolymPlast Technol. - 2009. - V. 48. - P. 313-323.

11. Khlangwiset, P. Aflatoxins and growth impairment: A review / P. Khlangwiset, G.S. Shephard, F. Wu // Crit. Rev. Toxicol. - 2011. - №41. - Р. 740-755.

12. Pitt, J.I. A concise history of mycotoxin research / J.I. Pitt, J.D. Miller // J. Agric. FoodChem. -2017. - №65. - Р. 7021-7033.

13. Semenov, E.I. Joint effect of the mycotoxins T-2 toxin, deoxynivalenol and zearalenone on the weaner pigs against a background of the infection load / E.I. Semenov, M.Y. Tremasov, L.E. Matrosova,

E.Y. Tarasova, M.A. Kryuchkova, S.Y. Smolentsev, V.P. Korosteleva // Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences. - 2016. - V.7. - P. 1860-1868.

14. Vergano, V. Halloysite clay nanotubes for resveratrol delivery to cancer cells / V. Vergano, Y. Lvov, S. Leporatti // Macromol Biosci. - 2012. - V.12. - P. 1265-1271.

15. Wu, F. Public health impacts of foodborne mycotoxins / F. Wu, J.D. Groopman, J.J. Pestka // Rev Food Sci. Technol. - 2014. - №5. - P. 351-372.

16. Zhai, R. Immobilization of enzyme biocatalyst on natural halloysite nanotubes / R. Zhai, B. Zhang, L. Liu, Y. Xie, H. Zhang, J. Liu // Catalysis Commun. - 2010. - V.12. - P. 259-263.

17. Zhang, Y. Use of modified halloysite nanotubes in the feed reduces the toxic effects of zearalenone on sow reproduction and piglet development / Y. Zhang, R. Gao, M. Liu et al. // Theriogenology. - 2015. - V. 83. - P.932-941.

18. Zhao, Y. Halloysitenanotubule clay for efficient water purification / Y. Zhao, E. Abdullayev, A. Vasiliev et al. // Journal of Colloid and Interface Science. - 2013. - V. 406. - P. 121-129.

STUDY OF SORPTION ACTIVITY OF POTENTIAL MEANS OF PREVENTION OF MYCOTOXICOSIS AGAINST AFLATOXINS

Tarasova E.Yu. - Candidate of Biological Sciences, Semenov E.I. - Candidate of Biological Sciences, Matrosova L.E. - Doctor of Biological Sciences, Mishina N.N. -Candidate of Biological Sciences,

Mukharlyamova A.Z. - Lead Engineer

FSBSI «Federal Center for Toxicology, radiation and biological safety»

The natural presence of mycotoxins in feed and food is a serious problem worldwide that can cause irreversible health problems in humans and animals. Among the various mycotoxins, aflatoxins, which are low molecular weight compounds produced by Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus, are considered the strongest teratogens, mutagens and carcinogens. In this regard, the problem of obtaining and searching for new enterosorbents, as well as the development of new sorption technologies, is very urgent. Therefore, there is a constant search for drugs that do not violate homeostasis and are able to remove from the body products of impaired metabolism, the vital activity of pathogenic microorganisms and toxic compounds obtained from the external environment. In vitro study of the adsorption capacity of bentonites of Biklyansk and Tarn-Varfields, halloysite nanotubes, commercial preparations (Polysorb VP and Mikosorb) with aflatoxin B1 showed that halloysite has the best sorption rates (94.7%) and, in the future, may be used to fight aflatoxicosis of animals, birds, and in the food chain and humans. With an increase in the pH of the medium from 2 to 8, the desorption of aflatoxin B1 was observed in all studied adsorbents with the lowest values for halloysite at the level of 0.3 ± 0.1 and the highest for Mikosorb at the level of 6.7 ± 0.9%, respectively. The adsorption of aflatoxin B2 by nanotubes was 83.9 ± 1.5%. With the simultaneous introduction of aflatoxins B1 and B2 into test tubes, thesorption parametersof halloysite nanotubes decreased by 3.9; 11.8; 4.0% in an acidic, neutral, alkaline environment, taking into account the desorption for aflatoxin B1 and 9.3; 2.3; 10.5%, respectively, with respect to aflatoxin B2. The data obtained make halloysite nanotubes very interesting for further studies in relation to other mycotoxins and their combinations, as well as its comprehensive study as a means of reducing the toxic load on the body of farm animals and birds.

Keywords: mycotoxicosis, aflatoxin B1, aflatoxin B2, adsorption, desorption, enterosorbent, bentonite, halloysite, chromatogram, nanotubes.

References

1. Valiev, A.R. Mycotoxicological analysis of feed from the Kaluga region / A.R. Valiev, N.N. Mishina, R.M. Potekhina, S.A. Tanaseva, L.A. Avakumova, A.I. Nikitin, E.I. Semenov // Materials of the Fourth Congress of Mycologists of Russia: Modern Mycology in Russia. - 2017. - T.7. - P. 191-192.

2. Orazova, S. S. Effectiveness of using natural sorbents of eastern Kazakhstan in water purification from heavy metal ions (Cu2 +) / S.S. Orazova, V.M. Belov, V.V. Evstigneev // Bulletin of the Tomsk Polytechnic University. - 2007. - T. 311. - No. 2. - P. 150-152.

3. Sokolov, V.N. Clay rocks and their properties / V.N. Sokolov // Soros Educational Journal. - 2000. - T. 6. - No.9. - P. 59-65.

4. Tanaseva, S.A. Pig aflatoxicosis: an effective treatment regimen / S.A. Tanaseva, L.E. Matrosova, E.I. Semenov // Pig production. - No. 4. - 2016 .- P. 51-53.

5. Tanaseva, S.A. Monitoring aflatoxins in feed from the Ryazan region / S.A. Tanaseva, V.I. Bosyakov // Materials of the scientific-practical conference dedicated to the 90th birthday of Professor V.A. Kirshina: "Actual problems of veterinary medicine." - Kazan. - 2018 .- P. 191-193.

6. Tarasova, E.Yu. Search for effective T-2 toxin adsorbents / E.Yu. Tarasova, E.I. Semenov, A.R. Valiev, L.E. Matrosova // Bulletin of the Mari State University series. - 2019 .- T.5. - No. 3. - P. 322-329.

7. De Ruyck, K. Dietary mycotoxins, co-exposure, and carcinogenesis in humans: Short review. / K. De Ruyck; M. De Boevre; I. Huybrechts; S. De Saeger // Mutat. Res. Rev. - 2015. - No. 766. - P. 32-41.

8. Gao, R. Modified halloysite nanotubes reduce the toxic effects of zearalenone in gestating sows on growth and muscle development of their offsprings / R. Gao, Q. Meng, M. Li et al. // Journal of Animal Science and Biotechnology. - 2016. - V. 29. - P. 7-14.

9. Hussain, Z. Residues of aflatoxin B1 in broiler meat: Effect of age and dietary aflatoxin B1 levels / Z. Hussain, M.Z. Khan, A. Khan, I. Javed, M.K. Saleemi, S. Mahmood, M.R. Asi // Food Chem. Toxicol. -2010. - No. 48. - P. 3304-3307.

10. Ismail, H. The effect of halloysite nanotubes as a novel nanofiller on curing behavior, mechanical and microstructural properties of ethylene propylene diene monomer (EPDM) nanocomposites / H. Ismail, P. Pasbakhsh, M.N. Ahmad Fauzi, A. Abu Bakar // PolymPlast Technol. - 2009. - V. 48. - P. 313-323.

11. Khlangwiset, P. Aflatoxins and growth impairment: A review / P. Khlangwiset, G.S. Shephard, F. Wu // Crit. Rev. Toxicol. - 2011. - No. 41. - P. 740-755.

12. Pitt, J.I. A concise history of mycotoxin research / J.I. Pitt, J.D. Miller // J. Agric. FoodChem. - 2017. - No. 65. - P. 7021-7033.

13. Semenov, E.I. Joint effect of the mycotoxins T-2 toxin, deoxynivalenol and zearalenone on the weaner pigs against a background of the infection load / E.I. Semenov, M.Y. Tremasov, L.E. Matrosova, E.Y. Tarasova, M.A. Kryuchkova, S.Y. Smolentsev, V.P. Korosteleva // Research Journal of Pharmaceutical, Biological and Chemical Sciences. - 2016. - V.7. - P. 1860-1868.

14. Vergano, V. Halloysite clay nanotubes for resveratrol delivery to cancer cells / V. Vergano, Y. Lvov, S. Leporatti // Macromol Biosci. - 2012. - V.12. - P. 1265-1271.

15. Wu, F. Public health impacts of foodborne mycotoxins / F. Wu, J.D. Groopman, J.J. Pestka // Rev Food Sci. Technol. - 2014. - No. 5. - P. 351-372.

16. Zhai, R. Immobilization of enzyme biocatalyst on natural halloysite nanotubes / R. Zhai, B. Zhang, L. Liu, Y. Xie, H. Zhang, J. Liu // Catalysis Commun. - 2010. - V.12. - P. 259-263.

17. Zhang, Y. Use of modified halloysite nanotubes in the feed reduces the toxic effects of zearalenone on sow reproduction and piglet development / Y. Zhang, R. Gao, M. Liu et al. // Theriogenology. - 2015. - V. 83. - P.932-941.

18. Zhao, Y. Halloysitenanotubule clay for efficient water purification / Y. Zhao, E. Abdullayev, A. Vasiliev et al. // Journal of Colloid and Interface Science. - 2013. - V. 406. - P. 121-129.