Уровень биогенных аминов, соотношение между липопероксидацией и карбонилированием белков в крови ВИЧ-инфицированных больных с алкогольным делирием

Вестник Челябинского государственного университета. 2013. № 7 (298). Биология. Вып. 2. С. 199-201.

Ю. М. Шатрова, Т. В. Маркина, О. Б. Цейликман

УРОВЕНЬ БИОГЕННЫХ АМИНОВ,

СООТНОШЕНИЕ МЕЖДУ ЛИПОПЕРОКСИДАЦИЕЙ И КАРБОНИЛИРОВАНИЕМ БЕЛКОВ В КРОВИ ВИЧ-ИНФИЦИРОВАННЫХ БОЛЬНЫХ С АЛКОГОЛЬНЫМ ДЕЛИРИЕМ

С целью изучения особенностей свободнорадикального окисления и уровня биогенных аминов у ВИЧ-инфицированных больных при алкогольном делирии проведено обследование 56 пациентов областной наркологической больницы г. Челябинска. Выявлено: усиление цитолитического синдрома при алкогольном делирии ВИЧ-инфицированных пациентов; снижение уровня кортизола крови; усиление липопероксидации и карбонилирования белков; увеличение содержания биогенных аминов крови и экскреции катехоламинов с суточной мочой (адреналина, норадреналина); увеличение активности МАО-Б тромбоцитов.

Ключевые слова: ВИЧ-инфекция, алкогольный делирий, биогенные амины, липопероксидация, кар-бонилирование белков, МАО, глюкокортикоиды.

Введение. Алкоголизм и ВИЧ-инфекция — важнейшие медико-биологические и социальные проблемы, приводящие к росту заболеваемости и смертности среди населения планеты. По данным Федерального научно-методического Центра по профилактике и борьбе со СПИДом, на ноябрь 2012 г. Челябинская область относится к числу наиболее проблемных субъектов Российской Федерации. Отмечено, что ВИЧ-инфекция поражает преимущественно мужчин (63,8 %) с четкой тенденцией к увеличению заболеваемости среди лиц трудоспособного возраста (с 9,9 % в 2000 г. до 44,2 % в 2012 г.). Также проблемой является хроническое потребление алкоголя ВИЧ-инфицированными. Алкогольная интоксикация, в свою очередь, усиливает репликацию вирусной РНК и способствует манифестации СПИДа. Кроме того, алкоголь повреждает надежность гематоэнцефалического барьера и потенцирует инфильтрацию ВИЧ-1-инфицированных моноцитов/макрофагов в головной мозг, где они выступают в качестве вирусных резервуаров и могут заражать CD4-рецептор содержащие клетки нейроглии [1]. По данному механизму алкоголь способствует развитию нейровоспалительного процесса, проявляющегося в виде нейропатий, и потенцирует развитие типичных для алкогольного делирия психических расстройств. В настоящее время актуальным остается исследование молекулярных механизмов ВИЧ-инфекции, изучение характерных изменений клинических и биохимических параметров, эффектов этанола и других нейротропных веществ на фоне ВИЧ-инфицирования.

Целью работы явился анализ изменения статуса липопероксидации, карбонилирования белков и соотношения свободнорадикального окисления с уровнем биогенных аминов у ВИЧ-инфицированных лиц при алкогольном делирии.

Материалы и методы. Проведено обследование 56 пациентов мужского пола трудоспособного возраста П-Ш стадии алкоголизма с алкогольным делирием, включая 9 ВИЧ-инфицированных пациентов. Все больные госпитализированы в отделение неотложной наркологической помощи областной клинической наркологической больницы г. Челябинска. Критериями исключения было наличие заболеваний, способных оказать влияние на результат исследования. Результаты биохимического исследования сравнивали в 3 группах: в первую включено 11 практически здоровых лиц (К); во вторую — 46 пациентов П-Ш стадии алкоголизма с алкогольным делирием (АД); в третью — 9 ВИЧ-инфицированных пациентов П-Ш стадии алкоголизма с алкогольным делирием (АД + ВИЧ).

Содержание катехоламинов в крови и суточной моче определяли на анализаторе биожидкостей «ФЛЮ0РАТ-02-АБЛФ-Т» с предварительной адсорбцией на окиси алюминия [2; 3]. Серотонин и гистамин в крови определяли флюориметри-ческими методиками по реакции с о-фталевым диальдегидом [2; 3]. Первичные и вторичные молекулярные продукты ПОЛ в сыворотке крови оценивали спектрофотометрически по методике И. А. Волчегорского, конечные продукты — по методу Е. И. Львовской. Уровень окислительного модифицирования белков оценивали

по методу, предложенному Е. Е. Дубининой. Для определения активности МАО применяли модифицированный И. А Волчегорским метод. Для сравнения групп использовались непараметрические методы: Манна — Уитни, Колмогорова — Смирнова, Вальда — Вольфовица. Достоверными считали различияр < 0,05.

Результаты и обсуждение. В результате исследования выявлено усиление цитолитического синдрома у ВИЧ-инфицированных лиц при алкогольном делирии по сравнению с группой АД с более существенными воспалительными изменениями, о чем говорят показатели АлАТ, АсАТ, ГГТ тимоловой пробы и СОЭ. Причем состояние больных может усугубляться в результате снижения уровня глюкокортикоидов. Нами выявлено наличие отрицательной корреляции между показателями кортизола и тимоловой пробы (Rs = -0,912; Р = 0,003) у ВИЧ-инфицированных больных с алкогольным делирием. На фоне низкого содержания кортизола и усиления воспалительного процесса у данной категории больных усилилась липопероксидация и уровень карбо-нилирования белков, т. е. усугубились процессы свободнорадикального окисления, причем меж-

ду уровнем карбонилирования белков и показателями тимоловой пробы отмечена положительная корреляция (Rs = 0,809; Р = 0,015). Отметим, что тимоловая проба показывает степень снижения коллоидной устойчивости белков глобулиновой фракции, однако окислительная модификация белков альбуминовой фракции может повысить способность последних к агрегации [5]. Анализ содержания гептан-растворимых Шиффовых оснований показал отрицательные корреляционные связи с уровнем кортизола (Rs = -0,816; Р = 0,015) и с уровнем карбонилирования белков (Из = -0,801; Р = 0,018), что открывает антиоксидантные свойства белок-липидных комплексов, к которым относятся Шиффовы основания [4]. Обнаружены положительные корреляционные зависимости содержания в крови катехоламинов и некоторых продуктов свободнорадикального окисления: адреналин (И = 0,766; Р = 0,029) и норадре-налин (Rs = 0,719; Р = 0,035). Катехоламины, как известно, способны к аутоокислению с образованием цитотоксичных продуктов, чем провоцируют нарастание генерации активных форм кислорода и усиление процессов свободнорадикального окисления [4]. Интересно, что нарастание

Результаты исследования

Показатель К

АлАТ, ед./л 44,25 ± 23,55 130,55 ± 17,77 139,03 ± 26,18

АсАт, ед./л 38,40 ± 7,20* 205,70 ± 28,79* 415,078 ± 131,17*

ГГТ, ед./л 25,75 ± 0,75* 390,31 ± 81,36* 248,22 ± 104,68*

Тимоловая проба, ед. 0,30 ± 0,10 1,46 ± 0,34 5,65 ± 1,47*

СОЕ 7,4 ± 2,7 12,62 ± 1,78 22,89 ± 6,15*

Кортизол, нМ/л 265,92 ± 133,19 296,00 ± 43,79 154,01 ± 24,14*

Адреналин крови, нг/мл 2,02 ± 0,65 3,29 ± 0,64 1,45 ± 0,52

Адреналин мкг/сут. 5,47 ± 0,42* 14,76 ± 3,02* 53,44 ± 39,32*

Норадреналин крови, нг/мл 1,30 ± 0,28 2,16 ± 0,50 0,86 ± 0,28

Норадреналин, мкг/сут. 24,08 ± 2,76 72,12 ± 14,82* 203,70 ± 101,29*

ДОПА крови, нг/мл 1,40 ± 0,23 1,73 ± 0,14 1,40 ± 0,26

ДОПА мкг/сут. 65,43 ± 9,81 94,68 ± 11,57* 94,07 ± 35,27*

Серотонин, мкг/мл 0,50 ± 0,14 0,86 ± 0,065* 0,83 ± 0,16*

МАО-Б тромбоцитов, нМ/ мл/мин 3,015 ± 0,36 3,19 ± 0,37 9,8 ± 0,98*

Г истамин мкг/мл 4,82 ± 0,51 4,85 ± 0,61 5,45 ± 1,41

* прир < 0,05.

концентрации ДОФА, при увеличении давления ОН-радикала связывают с неферментативными реакциями радикальных соединений тирозина. Указанный путь образования ДОФА превалирует над классическим в количественном отношении, таким образом, ДОФА используется как один из маркеров окисления белков [7]. Установлено увеличение концентрации серотонина в плазме крови при алкогольном делирии. Взаимодействуя с ацетальдегидом, серотонин может образовывать сильный галлюциноген гармалин. Кроме того, серотонин способен усиливать экспрессию глю-ко- и минералокортикоидных рецепторов в гиппокампе, амигдале и фронтальной коре головного мозга [6], чем может затруднять компенсаторную стероид-резистентность, направленную на ограничение иммуносупрессивного действия, характерную для ВИЧ-инфицированных больных.

Выводы и заключение. Увеличение активности МАО-Б при ВИЧ-инфицировании можно рассматривать как адаптивную защитную реакцию на перегрузку симпатоадреналовой системы. Известно, что перекись водорода, образующаяся в реакциях дезаминирования катализируемых МАО, является основным источником свободных радикалов в головном мозге. Вероятно, повышение активности МАО тромбоцитов можно рассматривать как потенциальный биохимический маркер, связанный с нарушением процессов нейропластичности ткани мозга [4].

Накопленные в настоящее время данные являются начальными. Нами планируется увеличение числа обследуемых пациентов по уже отмеченным группам и включение дополнительной груп-

пы ВИЧ-инфицированных пациентов без аддик-ции, для объективизации анализа исследуемых параметров.

Список литературы

1. Kumar, S. Alcohol consumption effect on antiretroviral therapy and HIV-1 pathogenesis: role of cytochrome P450 isozymes / S. Kumar, M. Jin, A. Ande [et al.] // Expert Opinion on Drug Metabolism and Toxicology. 2012. Vol. 8, № 11. P. 1363-1375.

2. Меньшиков, В. В. Методы клинической биохимии гормонов и медиаторов : учеб. пособие. М., 1974. Ч. 2. 180 с.

3. Камышников, В. С. Справочник по биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике. М. : МЕДпресс-информ, 2009. 896 с.

4. Дубинина, Е. Е. Продукты метаболизма кислорода в функциональной активности клеток. СПб. : Мед. Пресса, 2006. 397 с.

5. Дурканаева, О. А. Амидированность и окислительные модификации белков тканей крыс и сывороточного альбумина при модельном и физиологическом старении : автореф. дис. ... канд. биол. наук. Ростов н/Д., 2012. 10 с.

6. Erdeljan, P. Glucocorticoids and serotonin alter glucocorticoid receptor (GR) but not mineralocorticoid receptor (MR) mRNA levels in fetal mouse hippocampal neurons, in vitro / P. Erdeljan, J. F. MacDonald, S. G. Matthews // Brain Reseach. Issues 1-2. March 2001. P. 130-136.

7. Davis, M. J. Stable markers of oxidant to proteins and their application in the study of human disease / M. J. Davis, S. Fu, H. Wang, R. T. Dean // Free Radic. Biol. Med. 1999. Vol. 27, № 11/12. P. 1151-1163.