Лекарственное средство на основе интерферона альфа-2b человеческого рекомбинантного безметионинового
MEDICINAL PRODUCT BASED ON INTERFERON ALFA-2B HUMAN RECOMBINANT METHIONINE-FREE

Изобретение относится к биотехнологии, фармацевтической технологии и касается лекарственных средств на основеинтерферона альфа-2b человеческого рекомбинантного безметионинового, для применения в акушерской и неонатологической практике.
Создание лекарственных препаратов узкоспециального вида для терапии ограниченной категории пациентов - беременных женщин и новорожденных детей является крайне актуальной задачей.
Известно, что лекарственных средств, специально разработанных для применения в акушерстве, неонатологии и педиатрии крайне мало. В связи с недостатком «детских» препаратов для терапии новорожденных детей приходится применять лекарственные препараты для взрослых и корректировать дозировку и схему применения в зависимости от возраста, веса пациента и тяжести состояния.
Одной из самых распространенных патологий среди населения являются острые респираторные вирусные инфекции. ОРВИ - полиэтиологичное заболевание, к настоящему времени насчитывающее более 140 различных вирусов-возбудителей (вирусы гриппа, парагриппа, аденовирусы, респираторно-синцитиальный вирус, риновирусы и другие). Все возбудители ОРВИ имеют схожую симптоматику, для постановки дифференцированного диагноза требуется проведение дополнительных исследований с использованием различных тест-систем, однако эффективность верификации возбудителя остается невысокой: в основном не превышает 30% от всех условно установленных диагнозов.
Традиционно для терапии гриппа и других ОРВИ применяются средства симптоматической терапии: жаропонижающие, деконгестанты, антигистаминные препараты. Возможности этиотропной противовирусной терапии ОРВИ в педиатрической и акушерской практике ограничены ассортиментом специфических препаратов, разрешенных к применению у детей, в том числе новорожденных и беременных женщин. Разрешенные к применению у детей с 1 года римантадин и другие ингибиторы нейраминидазы эффективны в случае приема в первые 24-48 часов после начала заболевания и только в случае инфицирования вирусом гриппа типа А. Препарат умифеновир разрешен к применению у детей с двух лет, при этом спектр его активности так же не покрывает всех возможных возбудителей ОРВИ.
Но, кроме терапии, особое значение у беременных и новорожденных имеет проблема профилактики ОРВИ. Одной из причин повышенной восприимчивости к респираторным инфекциям может быть несостоятельность реснитчатого эпителия и повреждения ресничек мерцательного эпителия слизистой оболочки верхнечелюстной пазухи. Для восстановления реснитчатого эпителия необходимо использовать вещества, обладающие ранозаживляющим и регенерирующим свойствами. Среди веществ, обладающих такой активностью, можно отметить альбумин человека, депротеинизированный диализат из крови здоровых молочных телят, гиалуроновую кислоту или ее соли - натрия гиалуронат или цинка гиалуронат, декспантенол. Данные вещества, при включении их в состав разрабатываемой фармацевтической композиции будут оказывать увлажняющее и заживляющее действие на слизистую оболочку респираторного тракта и способствовать усилению ее барьерных свойств, что в итоге приведет к снижению заболеваемости ОРВИ.
Известно, что для лечения и профилактики ОРВИ у детей и беременных женщин возможно использовать препараты интерферона альфа-2b. Возможность и эффективность местной терапии ОРВИ препаратами интерферона альфа-2b доказана. Причем, местное применение имеет перед системным ряд преимуществ: для местной терапии нужна меньшая доза интерферона альфа-2b, действующее вещество наносится непосредственно на «очаг инфекции», способ применения - на слизистую оболочку респираторного тракта удобен и комфортен для пациента и не требует наличия специальных навыков и приспособлений.
Однако, при разработке фармацевтических композиций на основе интерферона альфа-2b для применения у новорожденных детей необходимо учитывать физиологические особенности строения носоглотки ребенка (малый размер носоглотки и маленькая площадь слизистой оболочки) и обеспечить биодоступность молекулы интерферона альфа-2b. Это может быть достигнуто за счет повышение времени контакта препарата и слизистой носоглотки, увеличение скорости и полноты проникновения молекулы интерферона альфа-2b через слизистую оболочку респираторного тракта за счет использования дополнительных компонентов, усиливающих проницаемость эпителиальных клеток. Применение вязких композиций, гелей и мазей, содержащих в качестве активного (действующего) вещества интерферон альфа-2b показало их достаточную эффективность и безопасность. Использование новых вспомогательных веществ, повышающих проницаемость эпителиальных клеток, позволит повысить эффективность разрабатываемой лекарственной композиции. Однако, ключевым моментом в создании композиции для применения в акушерской практике и неонатологии будет являться использование в составе только тех компонентов, которые разрешены к применению и являются безопасными для беременных женщин и новорожденных детей.
Известен состав (RU 2302881) «Противовирусное средство на основе интерферона человеческого лейкоцитарного в виде геля» содержащее интерферон концентрированный 5000-10000 МЕ, нипагин 0,002-0,004 г, основа - остальное. Существенным недостатком данной композиции можно назвать то, что в качестве действующего вещества композиция содержит интерферон альфа, получаемый из крови человека. Препараты, получаемые из крови человека, несут высокий риск заражения инфекционными заболеваниями, поэтому их применение в последнее время ограничено. Кроме того, композиция содержит консервант - нипагин - метиловый эфир пара-гидроксибензойной кислоты - соединение из группы парабенов, которое не рекомендуется для использования у беременных женщин. В материалах исследования так же отсутствует информация об эффективности разработанного состава для лечения и профилактики ОРВИ. В качестве примера использования заявленной фармацевтической композиции приводится герпетический кератит.
Известен состав (RU 2554495) «Цитокинсодержащее лекарственное средство, обладающее противовирусным, противомикробным, иммуномодулирующим и противовоспалительным действием для профилактики и лечения инфекционных заболеваний». Показано, что заявленное лекарственное средство может применяться для лечения широкого спектра вирусных инфекций, в том числе ОРВИ и гриппа. Недостатком данной композиции является присутствие в составе соединений борной кислоты, которые запрещены к применению с 1987 года у детей до 6 месяцев и беременных женщин в связи с высоким риском развития судорожных состояний.
Известно иммунокоррегирующее средство для лечения заболеваний вирусной этиологии (RU 2411039), содержащее человеческий рекомбинантный интерферон альфа и/или/бета и/или гамма, антиоксидантный комплекс из токоферола ацетата и аскорбиновой кислоты, антивирусные, вспомогательные и формообразующие компоненты. Существенным недостатком данной композиции является присутствие в составе дополнительно к интерферону альфаи или/бета или гамма еще одного компонента, обладающего противовирусной активностью из ряда арбидол, рибавирин, фамвир, ганцикловир. Использование данных веществ, обладающих противовирусной активностьюне разрешено у новорожденных детей и ограничено у беременных и кормящих женщин.
Наиболее близким аналогом по составу к заявленному техническому решению можно считать лекарственный гель (RU 2184564) с интерфероном и витамином Е, содержащий дополнительно метионин, бензойную кислоты, лимонную кислоту, альбумин сывороточный человеческий, спирт этиловый, глицерин, натрия тетраборат, воду очищенную и натрий карбоксиметилцеллюлозу в качестве консистентно образующего компонента. Гель обладает широким спектром терапевтической активности, консистентно образующая основа обладает высокой адгезивной способностью и позволяет создавать пленку на поверхности слизистой оболочки. Существенным недостатком данного лекарственного препарата является наличие в составе спирта этилового и тетрабората натрия - компонентов, не разрешенных к применению у новорожденных детей и имеющих ограничение к применению у беременных и кормящих женщин. Отличительной особенностью прототипа является возможность применения только для лечения герпетической инфекции кожи и слизистых. Данных о предполагаемой эффективности в качестве средства лечения и профилактики ОРВИ не представлено.
Задача предлагаемого изобретения заключается в разработке нового лекарственного средства для применения у новорожденных, в том числе и недоношенных детей и беременных женщин с использованием только разрешенных у данной категории пациентов компонентов.
Техническим результатом изобретения является получение композиции, обеспечивающей комплексное воздействие на слизистую оболочку респираторного тракта, которое позволит проводить лечение и профилактику ОРВИ без риска вреда здоровью у новорожденных детей и беременных женщин, при этом композиция обладает высокой адгезивной активностью, быстро высыхает и образует пленку, что позволяет повысить эффективность лечения и облегчает использование композиции.
Для достижения технического результата разработана фармацевтическая композиция в форме геля для профилактики и лечения ОРВИ у новорожденных детей и беременных женщин, содержащая в качестве основного активного вещества интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантный безметиониновый, компонент, способствующий восстановлению реснитчатого эпителия слизистой оболочки, усилители всасывания лекарственных веществ и вспомогательные вещества (обеспечивают стабильный рН, изотоничность и сохранность свойств новой лекарственной формы в процессе хранения), гелевую основу.
Изобретение представляет собой следующее:
1. Фармацевтическая композиция в форме геля для профилактики и лечения ОРВИ, содержащая в качестве основного активного вещества интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантный безметиониновый, имеющая следующее соотношение компонентов, масс. %:
интерферон альфа-2b человеческий
рекомбинантный безметиониновый
(концентрат с активностью 4*10<sup>8</sup>МЕ/мл)
0,01-0,1
компонент, способствующий восстановлению
реснитчатого эпителия слизистой оболочки,
представляющий собой одно или несколько из следующих веществ:
альбумин человека, депротеинизированный диализат
из крови здоровых молочных телят,
гиалуроновую кислоту, натрия гиалуронат,
цинка гиалуронат, декспантенол
0,2-5,2
усилитель проницаемости лекарственных компонентов
через слизистую оболочку, представляющий собой
одно или несколько из следующих веществ:
альфа-токоферол полиэтиленгликольсукцинат,
глицерин дистиллированный, гидроксиэтилакрилаь/натрия
акрилоилдиметилтаурат сополимер
1,0-13,0
вспомогательные вещества, представляющие собой
одно или несколько из следующих веществ:
антиокислитель метионин,
корректор рН лимонной кислоты моногидрат,
изотонирующий агент натрия хлорид
0,05-0,25
гелевая основа, представляющая собой
производные целлюлозы -
натрий карбоксиметиллцеллюлозу или
гидроксиэтилцеллюлозу
1,0
вода очищенная
остальное до 100
2. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что содержит в качестве компонента, способствующего восстановлению реснитчатого эпителия только альбумин человека или депротеинизированный диализат из крови здоровых молочных телят, гиалуроновую кислоту или ее соли натрия гиалуронат или цинка гиалуронат в количестве 0,2 масс. %.
3. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что содержит смесь из компонентов, способствующих восстановлению реснитчатого эпителия - альбумин человека или депротеинизированный диализат из крови здоровых молочных телят, гиалуроновую кислоту или ее соли натрия гиалуронат или цинка гиалуронат или декспантенол в количестве 5,2 масс. %.
4. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что дополнительно в качестве консерванта содержит натрия бензоат в количестве 0,2 масс. %.
5. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что в качестве усилителя проницаемости лекарственных компонентов через слизистую оболочку содержит альфа-токоферол полиэтиленгликольсукцинат в количестве 5,5 масс. %, глицерин, дистиллированный в количестве 2 масс. %и гидроксиэтилакрилат/натрия акрилоилдиметилтаурат сополимер в количестве 1 мас. %.
Фармацевтическую композицию получают следующим образом: смешивают отдельные растворы, содержащие компоненты композиции в определенной концентрации с заранее приготовленным концентратом основы в промышленном миксере-гомогенизаторе с двумя типами перемешивающих устройств, обогреваемой рубашкой и вакуумированием. Для изготовления композиции используется вода, очищенная фармакопейного качества, соответствующая требованиям фармакопейной статьи Государственной фармакопеи РФ «Вода очищенная».
Готовят необходимые навески компонентов композиции. В емкость миксера-гомогенизатора помещают около 0,7 частей воды очищенной от общего количества воды, предназначенной для приготовления препарата. Затем дробно вносят навеску производного целлюлозы, включают коаксиальное перемешивающее устройство и перемешивают содержимое реактора, далее включают турбинную мешалку и гомогенизируют основу, при необходимости повторяя указанную процедуру несколько раз. Готовую основу пастеризуют. Далее в основу добавляют глицерин дистиллированный.
8
Из оставшегося количества воды очищенной готовят раствор других компонентов, кроме интерферона альфа-2b человеческого рекомбинантного безметионинового и компонентов, способствующих регенерации реснитчатого эпителия и усилителей всасываемости веществ через слизистую оболочку. При необходимости воду для лучшей растворимости компонентов нагревают до температуры 40-60°С. Готовый раствор охлаждают до температуры 34+2°С и добавляют оставшиеся компоненты и интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантный безметиониновый (в форме концентрированного раствора с активностью около 4*10 МЕ/мл).
В конце технологического процесса проводят тщательное смешивание компонентов препарата путем гомогенизации: проводят длительное медленное перемешивание коаксиальным перемешивающим устройством. Далее проводят вакуумирование готовой массы. Однородную гелеобразную массу без примеси пузырьков воздуха фасуют в тубы алюминиевые, тубы герметизирует путем завальцовывания свободной части и маркируют.
Сущность изобретения поясняется на следующих примерах.
Пример 1
Готовят навески компонентов композиции в следующем количестве, масс. %:
интерферон альфа-2b человеческий
рекомбинантный безметиониновый
(концентрат с активностью 4*10<sup>8</sup>МЕ/мл)
0,01
альбумин человека
0,2
глицерин дистиллированный
2,0
альфа-токоферолполиэтиленгликольсукцинат
10,0
метионин
0,1
лимонной кислоты моногидрат
0,05
натрия хлорид
0,1
гидроксиэтил акрилат/натрия
акрилоилдиметилтаурат сополимер
1,0
карбоксиметиллцеллюлоза натрия
1,0
вода очищенная
остальное до 100
В емкость миксера-гомогенизатора помещают около 0,7 частей воды очищенной от общего количества воды, предназначенной для приготовления препарата. Затем дробно вносят навеску карбоксиметиллцеллюлозы натрия, включают коаксиальное перемешивающее устройство и перемешивают содержимое реактора в течение 3 минут, далее включают турбинную мешалку и гомогенизируют основу в течение 3 минут при скорости вращения турбины 2000±500 оборотов в минуту, при необходимости повторяя указанную процедуру несколько раз. Готовую основу пастеризуют при температуре 70-80°С в течение 30-60 минут. Далее в основу добавляют глицерин дистиллированный.
8
Из оставшегося количества воды очищенной готовят раствор других компонентов, кроме интерферона альфа-2b человеческого рекомбинантного безметионинового альбумина человека. При необходимости воду для лучшей растворимости компонентов нагревают до температуры 40-60°С. Вносят навеску метионина, лимонной кислоты моногидрата, натрия хлорида. Далее вносят навеску гидроксиэтилакрилат/натрия акрилоилдиметилтаурат сополимера и навеску альфа-токоферолполиэтиленгликольсукцината. Готовый раствор охлаждают до температуры 34±2°С и добавляют альбумин человека и интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантный безметиониновый (в форме концентрированного раствора с активностью около 4*10МЕ/мл).
В конце технологического процесса проводят тщательное смешивание компонентов препарата путем гомогенизации: проводят длительное медленное перемешивание коаксиальным перемешивающим устройством со скоростью вращения до 60±5 оборотов в минуту. Далее проводят вакуумирование готовой массы при разряжении в диапазоне от -0,2 до -0,5 Бар. Вакуумирование массы проводят при поддержании температуры продукта в диапазоне 34±2°С при постоянном перемешивании на 60±5 об/мин в течение 10-20 мин. Однородную гелеобразную массу без примеси пузырьков воздуха фасуют в тубы алюминиевые, тубы герметизирует путем завальцовывания свободной части и маркируют.
Полученный гель представляет собой непрозрачную гелеобразную массу вязкой консистенции с рН от 4,5 до 6,5. Фармакологические показатели качества полученного лекарственного средства соответствуют требованиям нормативных документов для лекарственных форм для наружного и местного применения.
Пример 2
Приготовление геля осуществляют аналогично примеру 1. Для получения композиции смешивают компоненты в следующем количестве, масс. %:
интерферон альфа-2b человеческий
рекомбинантный безметиониновый
(концентрат с активностью 4*10<sup>8</sup>МЕ/мл)
0,01
альбумин человека
0,2
глицерин дистиллированный
2,0
альфа-токоферолполиэтиленгликольсукцинат
10,0
декспантенол
2,5
метионин
0,1
лимонной кислоты моногидрат
0,05
натрия хлорид
0,1
гидроксиэтилакрилат/натрия
акрилоилдиметилтаурат сополимер
1,0
карбоксиметиллцеллюлоза натрия
1,0
вода очищенная
остальное до 100
Полученный гель представляет собой непрозрачную гелеобразную массу вязкой консистенции с рН от 4,5 до 5,5. Фармакологические показатели качества полученного лекарственного средства соответствуют требованиям нормативных документов для лекарственных форм для наружного и местного применения.
Пример 3
Приготовление геля осуществляют аналогично примеру 1. Для получения композиции смешивают компоненты в следующем количестве, масс. %:
интерферон альфа-2b человеческий
рекомбинантный безметиониновый
(концентрат с активностью 4*10<sup>8</sup>МЕ/мл)
0,01
гиалуронат натрия
0,2
глицерин дистиллированный
2,0
альфа-токоферолполиэтиленгликольсукцинат
10,0
декспантенол
5,0
метионин
0,1
лимонной кислоты моногидрат
0,05
натрия хлорид
0,1
гидроксиэтилакрилат/натрия
акрилоилдиметилтаурат сополимер
1,0
карбоксиметиллцеллюлоза натрия
1,0
вода очищенная
остальное до 100
Полученный гель представляет собой непрозрачную гелеобразную массу вязкой консистенции с рН от 5,0 до 7,0. Фармакологические показатели качества полученного лекарственного средства соответствуют требованиям нормативных документов для лекарственных форм для наружного и местного применения.
Пример 4
Приготовление геля осуществляют аналогично примеру 1. Для получения композиции смешивают компоненты в следующем количестве, масс. %:
Готовят навески компонентов препарата в следующем количестве, масс. %:
(концентрат с активностью 4*10<sup>8</sup>МЕ/мл)
0,01
гиалуронат цинка
0,2
глицерин дистиллированный
2,0
альфа-токоферолполиэтиленгликольсукцинат
5,0
декспантенол
2,5
метионин
0,1
лимонной кислоты моногидрат
0,05
натрия хлорид
0,1
гидроксиэтилакрилат/натрия
акрилоилдиметилтаурат сополимер
1,0
карбоксиметиллцеллюлоза натрия
1,0
вода очищенная
остальное до 100
Полученный гель представляет собой непрозрачную гелеобразную массу вязкой консистенции с рН от 6,9 до 7,5. Фармакологические показатели качества полученного лекарственного средства соответствуют требованиям нормативных документов для лекарственных форм для наружного и местного применения.
Пример 5
Приготовление геля осуществляют аналогично примеру 1. Для получения композиции готовят навески компонентов препарата в следующем количестве, масс. %:
интерферон альфа-2b человеческий
рекомбинантный безметиониновый
(концентрат с активностью 4*10<sup>8</sup>МЕ/мл)
0,01
депротеинизированный диализат из крови
здоровых молочных телят
0,2
глицерин дистиллированный
2,0
альфа-токоферолполиэтиленгликольсукцинат
5,5
декспантенол
2,5
метионин
0,1
лимонной кислоты моногидрат
0,05
натрия хлорид
0,1
гидроксиэтил акрилат/натрия
акрилоилдиметилтаурат сополимер
1,0
карбоксиметиллцеллюлоза натрия
1,0
вода очищенная
остальное до 100
Полученный гель представляет собой непрозрачную гелеобразную массу вязкой консистенции с рН от 4,5 до 7,5. Фармакологические показатели качества полученного лекарственного средства соответствуют требованиям нормативных документов для лекарственных форм для наружного и местного применения.
Пример 6.
Приготовление геля осуществляют аналогично примеру 1. Для получения композиции смешивают компоненты в следующем количестве, масс. %:
интерферон альфа-2b человеческий
рекомбинантный безметиониновый
(концентрат с активностью 4*10<sup>8</sup>МЕ/мл)
0,01
альбумин человека
0,2
глицерин дистиллированный
2,0
альфа-токоферолполиэтиленгликольсукцинат
5,5
декспантенол
2,5
метионин
0,1
лимонной кислоты моногидрат
0,05
натрия хлорид
0,1
натрия бензоат
0,05
гидроксиэтилакрилат/натрия
акрилоилдиметилтаурат сополимер
1,0
гидроксиэтилцеллюлоза
1,0
вода очищенная
остальное до 100
Полученный гель представляет собой непрозрачную гелеобразную массу вязкой консистенции с рН от 4,5 до 5,5. Фармакологические показатели качества полученного лекарственного средства соответствуют требованиям нормативных документов для лекарственных форм для наружного и местного применения.
Пример 7.
Приготовление геля осуществляют аналогично примеру 1. Для получения композиции смешивают компоненты в следующем количестве, масс. %:
интерферон альфа-2b человеческий
рекомбинантный безметиониновый
(концентрат с активностью 4*10<sup>8</sup>МЕ/мл)
0,01
альбумин человека
0,2
глицерин дистиллированный
2,0
альфа-токоферолполиэтиленгликольсукцинат
5,5
декспантенол
5,0
метионин
0,1
лимонной кислоты моногидрат
0,05
натрия хлорид
0,1
натрия бензоат
0,05
гидроксиэтилакрилат/натрия
акрилоилдиметилтаурат сополимер
1,0
гидроксиэтилцеллюлоза
1,0
вода очищенная
остальное до 100
Полученный гель представляет собой непрозрачную гелеобразную массу вязкой консистенции с рН от 4,5 до 6,0. Фармакологические показатели качества полученного лекарственного средства соответствуют требованиям нормативных документов для лекарственных форм для наружного и местного применения.
Для сравнения фармакологических свойств заявленной композиции и прототипа были проведены лабораторные испытания по оценке адгезивной способности и скорости высыхания пленки.
Для проведения исследований отобраны образцы, полученные согласно примерам 1-7.
Оценку адгезивности заявленной композиции и наиболее близкого аналога (прототипа) проводили по методу Аюповой Г.В., Федотова А.А., Китаева В.А., Плечева Д.В. «Влияние компонентов основы на адгезионные свойства гелей с оксиметилурацилом»//Медицинский вестник Башкортостана-том 9, - №6, 2014, стр. 70-73.
Адгезию оценивали как массу, которую необходимо приложить для отрыва пластины от образца препарата и измеряли в кг. Результаты тестирования (среднее 10 измерений) представлены в Таблице 1.
По представленным данным можно сделать заключение о том, что заявленная фармацевтическая композиция имеет более высокую адгезивную активность, чем прототип. Усиленная адгезия будет повышать эффективность проводимой терапии, так как увеличится время контакта препарата со слизистой.
При анализе скорости высыхания пленки для прототипа и заявленной фармацевтической композиции были получены данные, представленные в Таблице 2.
По представленным данным видно, что заявленные фармацевтические композиции более удобны в применении, поскольку скорость высыхания пленки выше, чем у прототипа. В среднем при нанесении на слизистую у прототипа пленка образуется через 7 минут (420 секунд), у новой фармацевтической композиции через 5 минут (300 секунд).
Таким образом, заявленная фармацевтическая композиция не только расширяет терапевтический ассортимент лекарственных средств для профилактики и лечения ОРВИ для применения в неонатологии, педиатрии и акушерстве, так как содержит только разрешенные к применению у новорожденных (в том числе недоношенных детей) и беременных женщин компоненты, что расширяет возможности ее применения, но обладает высокой адгезивной способностью за счет используемого состава и более удобна в применении: быстро высыхает и образует пленку.