КОМПОЗИЦИИ Т-КЛЕТОК С НЕДОСТАТОЧНОСТЬЮ РЕЦЕПТОРОВ Т-КЛЕТОК

1. Способ получения выделенной Т-клетки, дефицитной по рецептору Т-клеток (TCR), включающий осуществление экспрессии в указанной Т-клетке TCR-ингибирующей молекулы (TIM), которая дестабилизирует комплекс TCR за счет снижения или блокирования экспрессии компонентов комплекса TCR, причем указанная клетка может быть дополнительно изменена так, чтобы экспрессировать химерный рецептор, направленный против опухоли.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что у указанной TCR-дефицитной Т-клетки отсутствует экспрессия на клеточной поверхности по меньшей мере одного компонента комплекса TCR.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что у указанной TCR-дефицитной Т-клетки отсутствует экспрессия на клеточной поверхности всех компонентов комплекса TCR.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанная TCR-дефицитная Т-клетка не экспрессирует функциональный TCR.
5. Способ по п. 1, дополнительно включающий экспрессию по меньшей мере одного функционального отличного от TCR рецептора в указанной TCR-дефицитной Т-клетке.
6. Способ по п. 5, отличающийся тем, что указанный по меньшей мере один функциональный отличный от TCR рецептор представляет собой химерный рецептор, содержащий лиганд-связывающий домен, присоединенный к сигнальному домену.
7. Способ по п. 6, отличающийся тем, что указанный лиганд-связывающий домен получен из NKG2D, NKG2A, NKG2C, NKG2F, LLT1, AICL, CD26, NKRP1, NKp30, NKp44, NKp46, CD244 (2B4), DNAM-1 или NKp80.
8. Способ по п. 6, отличающийся тем, что что указанный лиганд-связывающий домен получен из противоопухолевого химерного рецептора к антигену или противоопухолевого антитела.
9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что указанное противоопухолевое антитело получено из антитела против Her2neu или антитела против EGFR.
10. Способ по п. 6, отличающийся тем, что указанный сигнальный домен получен из CD3-дзета, Dap10, CD28, 41BB или CD40L.
11. Способ по п. 5, отличающийся тем, что указанный по меньшей мере один функциональный отличный от TCR рецептор связывается с MIC-A, MIC-B, Her2neu, EGFR, мезотелином, CD38, CD20, CD19, PSA, MUC1, MUC2, MUC3A, MUC3B, MUC4, MUC5AC, MUC5B, MUC6, MUC7, MUC8, MUC12, MUC13, MUC15, MUC16, MUC17, MUC19, MUC20, рецептором эстрогена, рецептором прогестерона, RON, или одним или более членами семейства ULBP/RAET1.
12. Способ по п. 11, отличающийся тем, что указанные один или более члены семейства ULBP/RAET1 включают ULBP1, ULBP2, ULBP3, ULBP4, ULBP5 и ULBP6.
13.Способ по п. 5, отличающийся тем, что указанный по меньшей мере один функциональный отличный от TCR рецептор связывается с вирусным антигеном или индуцируемым вирусом антигеном, обнаруживаемом на поверхности инфицированной клетки.
14. Способ по п. 13, отличающийся тем, что указанный вирус выбран из HCMV, HIV, EBV, HBV, HCV, вируса Эбола, хантавируса или VSV.
15. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанная Т-клетка представляет собой Т-клетку человека.
16. Способ по п. 1, дополнительно включающий экспрессию доминантного селектируемого маркера в указанной Т-клетке.
17. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанная TIM является короткой шпилечной РНК.
18. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанная TIM является белком доминантного негативного -ингибитора.
19. Способ по п. 18, отличающийся тем, что указанный белок доминантного негативного ингибитора кодирует миниген, который включает полинуклеотид, кодирующий по меньшей мере один полноразмерный или укороченный компонент TCR, который модифицирован так, чтобы он: не содержал сигнальный мотив, нарушал ассоциацию с другими компонентами TCR, нарушал связывание лиганда или включал ингибиторный сигнальный мотив.
20. Способ по п. 6, отличающийся тем, что указанный химерный рецептор содержит лиганд-связывающий домен из NKG2D и сигнальный домен из CD3-дзета.
21. Способ по п. 20, отличающийся тем, что указанный химерный рецептор представляет собой chNKG2D.
22. Способ получения банка TCR-дефицитных Т-клеток, имеющих различные гаплотипы HLA, включающий:
получение совокупности выделенных Т-клеток, обладающих конкретным гаплотипом HLA;
экспрессию TCR-ингибирующей молекулы (TIM) в указанных Т-клетках, обладающих конкретным гаплотипом HLA, которая дестабилизирует комплекс TCR за счет уменьшения или блокирования экспрессии компонентов комплекса TCR; и
объединение указанной совокупности TCR-дефицитных Т-клеток, обладающих конкретным гаплотипом HLA, с другой совокупностью TCR-дефицитных Т-клеток, обладающих другим определенным гаплотипом HLA, причем указанный банк Т-клеток содержит разные совокупности Т-клеток, каждая из которых содержит TCR-дефицитные Т-клетки конкретного типа HLA.
23. Способ по п. 22, отличающийся тем, что указанный банк Т-клеток содержит Т-клетки по меньшей мере 10 разных тканевых типов HLA.
24. Способ по п. 22, отличающийся тем, что указанный банк Т-клеток содержит Т-клетки по меньшей мере 100 разных тканевых типов HLA.
25. Способ по п. 22, отличающийся тем, что у указанных Т-клеток стабильно отсутствует экспрессия на поверхности по меньшей мере одного компонента комплекса рецептора Т-клеток.
26. Способ по п. 21, отличающийся тем, что указанной TCR-ингибирующей молекулой является одна из TIM1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 или их сочетание.
27. Способ по п. 26, отличающийся тем, что указанная TCR-ингибирующая молекула имеет последовательность, выбранную из SEQ ID №: 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100 или 101 или их фрагментов или вариантов.
28. Способ по п. 1 или 22, отличающийся тем, что указанный ингибиторный мотив содержит полипептид KIR (ингибирующий рецептор клеток-киллеров).
29. Способ по п. 1 или 22, отличающийся тем, что экспрессию TCR ингибируют при помощи белка доминантного негативного ингибитора, содержащего CD3-дзета, измененный так, что он включает ингибиторный сигнал из KIR2DL1.
30. Способ по п. 1 или 22, отличающийся тем, что экспрессию TCR инигибируют при помощи сочетания по меньшей мере двух TCR-ингибирующих молекул.
31. Способ по п. 1 или 22, отличающийся тем, что экспрессию TCR инигибируют при помощи сочетания TIM7 и TIM8.
32. Способ по любому из пп. 1 -29, отличающийся тем, что полученные при его осуществлении Т-клетки вводят пациенту.
33. Способ по п. 30, отличающийся тем, что пациент, которого лечат, страдает раком или вирусной инфекцией.