СПОСОБЫ И КОМПОЗИЦИИ С УМЕНЬШЕННОЙ ОПАЛЕСЦЕНЦИЕЙ

1. Способ уменьшения опалесценции препарата антитела, включающий модифицирование отношения ионной силы к концентрации антитела в препарате антитела таким образом, что опалесцирующий вид препарата антитела уменьшается, причем до модифицирования ионной силы препарат антитела характеризуется опалесценцией, превышающей примерно 2 единицы стандарта Европейской фармакопеи при фармацевтически эффективной концентрации примерно 100 мг/мл.
2. Способ уменьшения образования высокомолекулярной фракции в препарате антитела, включающий модифицирование отношения ионной силы к концентрации антитела в препарате антитела таким образом, что количество высокомолекулярной фракции в белковом препарате снижается.
3. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что препарат антитела содержит антитело человека, гуманизированное, химерное, антитело с привитыми CDR-областями или полученное in vitro антитело, или его антигенсвязывающий фрагмент.
4. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что препарат антитела содержит константную область тяжелой цепи IgG1 или IgG4.
5. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что препарат антитела содержит антитело к GDF8.
6. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что указанное антитело в препарате антитела имеет отрицательный второй вириальный коэффициент при концентрации соли в диапазоне от примерно 50 до 200 мМ.
-3
-4
2
7. Способ по п.6, отличающийся тем, что второй вириальный коэффициент антитела составляет примерно от -1 до -10·10 или примерно от -1 до -10·10 моль-мг/г в препарате антитела, который содержит 100 мМ хлорида натрия.
8. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что указанное антитело в препарате антитела имеет положительный вириальный коэффициент при концентрации соли в диапазоне примерно от 50 до 200 мМ.
-4
-3
2
9. Способ по п.8, отличающийся тем, что второй вириальный коэффициент антитела составляет примерно от 1 до 10·10 или примерно от 1 до 10·10 моль-мг/г в препарате антитела, который содержит 100 мМ хлорида натрия.
10. Способ по любому из пп.1-2, 7 или 9, отличающийся тем, что антитело присутствует в концентрации примерно от 5 до 300 мг/мл в указанном препарате антитела, до и/или после применения указанного способа.
11. Способ по любому из пп.1-2, 7 или 9, отличающийся тем, что ионную силу препарата антитела уменьшают путем уменьшения концентрации соли, присутствующей в препарате.
12. Способ по п.11, отличающийся тем, что ионную силу препарата антитела уменьшают путем уменьшения концентрации соли, присутствующей в препарате, при этом соль, содержащуюся в препарате, выбирают из группы, включающей хлорид натрия, хлорид кальция, хлорид магния и фосфат натрия.
13. Способ по п.11, отличающийся тем, что ионную силу препарата антитела снижают путем уменьшения концентрации соли, присутствующей в препарате, при этом, концентрацию соли уменьшают по меньшей мере примерно в два, три, пять, десять или сто раз по сравнению с концентрацией в опалесцирующем препарате.
2
4
2
2
14. Способ по п.11, отличающийся тем, что ионную силу препарата антитела модифицируют путем замены первой соли второй солью, при этом указанная первая соль представляет собой NaCl, а вторую соль выбирают из группы, включающей NaHPO, MgCl, и CaCl.
2
4
2
2
15. Способ по п.11, отличающийся тем, что ионную силу препарата антитела модифицируют путем замены первой соли второй солью, при этом указанная первая соль представляет собой NaHPO, а вторую соль выбирают из группы, включающей MgCl и CaCl.
16. Способ по любому из пп.1-2, 7 или 9, отличающийся тем, что ионную силу препарата антитела модифицируют посредством ультрафильтрации или диализа.
17. Способ по любому из пп.1-2, 7 или 9, дополнительно включающий:
оценку опалесценции препарата антитела, или
определение концентрации соли в препарате антитела, при этом ионную силу препарата антитела модифицируют посредством процесса, включающего один или более способов: применение одного или более способов фильтрации или снижение концентрации соли на одной или более стадиях в процессе очистки антитела.
18. Способ по п.17, отличающийся тем, что процесс очистки антитела включает одну или более операцию, выбранную из центрифугирования, фильтрации, хроматографии, лиофилизации или восстановления влагосодержания.
19. Способ по любому из пп.1-2, 7 или 9, дополнительно включающий оценку опалесценции препарата антитела.
20. Способ по п.19, отличающийся тем, что опалесценцию препарата антитела обнаруживают путем оценки мутности раствора, оценки изменения второго вириального коэффициента или оценки изменения образования высокомолекулярной фракции.
21. Способ по п.20, отличающийся тем, что опалесценцию уменьшают до примерно 2 или 1 единицы стандарта Европейской фармакопеи или меньше.
-3
-4
22. Способ по п.20, отличающийся тем, что второй вириальный коэффициент изменяется примерно от -1 до -10·10 до примерно от -1 до -10·10.
23. Способ по п.20, отличающийся тем, что количество высокомолекулярной фракции уменьшают примерно в два, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь, девять, десять, пятьдесят или сто раз.
24. Способ уменьшения образования высокомолекулярной фракции в препарате антитела, который включает модифицирование отношения ионной силы к концентрации антитела в указанном препарате антитела таким образом, что образование высокомолекулярной фракции в белковом препарате уменьшается, при этом антитело в препарате имеет отрицательный вириальный коэффициент в 100 мМ растворе хлорида натрия.
25. Способ улучшения эффективности процесса очистки препарата антитела, который включает:
(возможно) оценку, образует ли белковый препарат опалесцирующий раствор при одном или более значении концентрации соли;
модифицирование отношения ионной силы к концентрации антитела в препарате таким образом, что количество высокомолекулярной фракции в препарате антитела уменьшается, вследствие чего улучшается эффективность процесса очистки препарата антитела,
при этом ионную силу раствора модифицируют одним или более из следующих способов: применением одного или более способов фильтрации, заменой соли, применяемой в белковом препарате, на более слабый индуктор опалесценции, или уменьшением ионной силы на одной или более стадиях процесса очистки.
26. Способ улучшения производства антитела, который включает:
получение первого раствора антитела, и
оценку уровня опалесценции или присутствия высокомолекулярной фракции в первом растворе антитела;
при этом: (а) если уровень опалесценции или высокомолекулярной фракции равен предварительно определенному уровню или меньше его, то выбирают вышеуказанный первый раствор антитела для применения в продукте антитела, или (b) если уровень опалесценции или высокомолекулярной фракции больше, чем предварительно определенный уровень, то выбирают второй раствор антитела, имеющий вторую ионную силу.
27. Способ по п.26, дополнительно включающий повторение стадии оценки до тех пор, пока уровень опалесценции в растворе не станет равным предварительно определенному уровню или меньше, чем он.
28. Способ по п.26 или 27, отличающийся тем, что раствор антитела получают способом очистки белка, выбранным из одного или более из: элюирования антитела из матрицы, восстановления диализированного раствора или другого фильтрата, солюбилизации сухого препарата или способа хроматографии.
29. Способ по п.28, отличающийся тем, что указанный раствор антитела получают способом хроматографии, и указанный способ хроматографии выбирают из группы, включающей: хроматографию на белке А, аффинную хроматографию, гидрофобную хроматографию, аффинную хроматографию с иммобилизированным металлом, эксклюзионную хроматографию, диафильтрацию, ультрафильтрацию, фильтрацию для удаления вирусов, анионообменную хроматографию, хроматографии на колонке с гидроксиапатитом и катионобменную хроматографию.
30. Способ по любому из пп.26-27 или 29, отличающийся тем, что предварительно установленный уровень мутности раствора антитела имеет величину примерно 2.
31. Способ определения предрасположенности препарата антитела к опалесцирующему виду, который включает:
(возможно) идентификацию антитела как имеющего склонность к аутоагрегации;
обеспечение одной или более пробы препарата антитела, и
определение образования высокомолекулярной фракции при увеличении концентрации соли в одной или более пробах, отличающийся тем, что увеличение образования высокомолекулярной фракции при увеличении концентрации соли указывает на повышенную предрасположенность антитела в указанном препарате к опалесцирующему виду.
32. Способ оценки опалесценции пробы антитела, который включает:
обеспечение пробы антитела;
определение мутности или присутствия высокомолекулярной фракции при одной или более концентрациях соли, и
обеспечение данных об уровне опалесценции в пробе антитела как функции мутности или присутствия высокомолекулярной фракции при одной или более концентрациях соли.
33. Препарат антитела, полученный способом по любому из пп.1, 2, 25 или 26.
34. Фармацевтически приемлемый препарат антитела, содержащий антитело при концентрации по меньшей мере примерно 50 мг/мл при менее чем примерно 50 мМ NaCl.