АНТИКОАГУЛЯЦИОННОЕ ГУМИНОВОЕ СРЕДСТВО ДЛЯ УЛУЧШЕНИЯ РЕОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ КРОВИ
ANTICOAGULATION HUMIC AGENT FOR IMPROVING RHEOLOGICAL PROPERTIES OF BLOOD

Изобретение относится к области медицины и фармацевтики, а именно к гуминовым препаратам, и может использоваться для снижения вязкости крови и уменьшения вероятности образования тромбов в крови.
Гуминовые кислоты, фульвокислоты оказывают на любой живой организм мощное воздействие благодаря богатому составу. В них содержится полный набор аминокислот, макро- и микроэлементов, минералов, а также полисахариды природного происхождения, витамины, пептиды, жирные кислоты, полифенолы, кетоны, катехины и т.д. Всего около 70 полезных компонентов. Такой насыщенный состав объясняет положительные биологические эффекты гуминовой кислоты (cм. https://fb.ru/article/288472/guminovyie-kislotyi-chto-eto-takoe-i-kak-oni-vliyayut-na-organizm).
Известно влияние гумусовых кислот на вязкость крови. В частности, было установлено, что гуминовые кислоты снижают вязкость крови на 22,2% по отношению к контролю, фульвокислоты на 15,2%, а суммарный препарат на 19,6% (Романтеева Ю.В. Химико-фармацевтическая характеристика биологически активных веществ гуминового ряда. Автореферат на соиск. уч. ст. к.ф.н., Самара 2007, с. 21 https://static.freereferats.ru/_avtoreferats/01004055125.pdf).
Задачей настоящего изобретения является получение гуминового средства, содержащего широкий спектр гуминовых веществ и улучшающего реологические свойства крови, без использования химических реагентов.
Техническим результатом заявленного изобретения является получение гуминового средства, обладающего антикоагуляционной активностью, содержащего широкий спектр гуминовых веществ и не имеющего химических примесей, которое может быть использовано в области медицины и фармацевтики для снижения вязкости крови и уменьшения вероятности образования тромбов в крови.
Указанный технический результат достигается за счет того, что заявленное гуминовое средство содержит воду и гуминовые вещества, полученные из гуминосодержащего сырья, выбранного группы, включающей леонардит, лигнин, уголь, торф и/или сапропель, методом ультразвукового диспергирования при температуре 30-80°С и давлении 0,05-0,8 МПа, при этом масса гуминовых веществ составляет от 1 до 20 мас.%, а гуминовые вещества включают гуминовые и фульвокислоты и их соли, а также гидрохинон в количестве, не превышающем 3 мас.% от массы гуминовых веществ.
Также предлагается применение полученного гуминового средства для снижения вязкости крови и уменьшения вероятности образования тромбов в крови.
Для получения заявленного средства использовали предварительно измельченное сырье (леонардит, лигнин, уголь, торф, сапропель) в смеси с водой, которое помещали в ультразвуковую установку. Помещенную в ультразвуковую установку смесь гуминосодержащего сырья с водой нагревали до 30-80°С, и при достижении требуемой температуры производили обработку ультразвуком при давлении 0,05-0,8 МПа. После ультразвуковой обработки раствор охлаждали до комнатной температуры. Полученное средство разбавляли водой до содержания гуминовых веществ, составляющего от 1 до 20 мас.%.
Исследование состава полученного средства проводили методом ГХ-МС на анализаторе «Хроматэк», состоящем из газового хроматографа «Хроматэк-Кристал 5000» и жидкостного дозатора ДАЖ-2М. Для идентификации дериватов использовали автоматическую базу поиска и идентификации данных хромато-масс-спектрометрии NIST17MS Library.
Условия исследования:
Результаты исследования приведены в табл.1.
Согласно приведенным данным в состав заявленного средства, помимо гуминовых и фульвокислот, входят также фенольные производные, в частности гидрохинон, флаваноиды (хризин) и другие активные вещества. Следовательно, заявленное средство характеризуется широким спектром активных веществ.
Исследование на токсичность.
Определение показателей острой токсичности включало эксперименты на мышах. Животные распределялись по группам случайным образом методом рандомизации. В качестве критериев приемлемости рандомизации считали отсутствие внешних признаков заболеваний и гомогенность групп по массе тела (±10%). Введение препарата осуществляли внутрижелудочно в возрастающих дозах по Литчфилду-Уилкоксону. Наивысшая доза была лимитирована максимально возможным объемом введения препарата. Для исследования каждой дозы препарата использовались группы по 10 животных разного пола. Период наблюдения составлял 14 суток. При введении препарата в дозах 4000-8000 мг/кг (по гуминовой кислоте) у животных выявлено изменение реакции на взятие в руки, изменение дыхания, двигательной активности, и тонуса мускулатуры, у некоторых животных наблюдалось изменение консистенции кала. При введении препарата в дозе до 4000 мг/кг (по гуминовой кислоте) все животные выжили, при введении препарата в концентрации 6000 мг/кг (по гуминовой кислоте) погибло 5 животных из 10, а при введении препарата в дозе 8000 мг/кг (по гуминовой кислоте) погибло 8 животных из 10. Выжившие животные удовлетворительно перенесли интоксикацию и по окончании действия препарата на протяжении 14 дней наблюдения, признаков отсроченного влияния не отмечено. Признаков пролонгированной клинической интоксикации отмечено не было. Динамика массы тела опытных животных не отличалась от контроля. По окончании периода наблюдения – на 14 день, был произведен забой выживших животных с целью определения возможных патологических изменений после однократного приема препарата. Осмотр опытной и контрольных групп показал, что все животные в них были нормально упитаны, имели правильное телосложение, гладкий и блестящий волосяной покров, блестящие, обычной окраски слизистые оболочки, чистые и опрятные естественные отверстия. При макроскопическом исследовании внутренних органов каких-либо особенностей не было выявлено. Анализ величин массовых коэффициентов не выявил каких-либо достоверных отличий между группами животных, получавшими разные дозы препарата. Таким образом, полученные результаты позволяют предположить, что полученные препарат можно отнести к V классу, т.е. практически нетоксичных лекарственных веществ.
Изучение антикоагулянтной активности.
Эксперименты по изучению антикоагулянтной активности при использовании заявленного гуминового средства (ГС) проводили на 30 крысах-самцах линии Вистар массой 240-290 г.
Животные были разделены на 3 группы по 10 крыс: первая (контрольная) группа ежедневно на протяжении 4 суток получала воду очищенную; вторая группа получала внутрижелудочно препарат сравнения – варфарин в дозе 0,04 мг/кг; третья группа – заявленное ГС в дозе 10 мг/кг. Через 2 ч после последнего введения веществ под легким эфирным наркозом брали кровь из брюшной аорты крыс и исследовали показатели коагуляционного гемостаза.
Внутрижелудочное введение ГС на протяжении 10 дней в дозе 10 мг/кг привело к достоверному увеличению показателей протромбинового и тромбинового времени по сравнению с контролем (см. табл. 2), что подтверждает его антикоагуляционную и антитромботическую активность.
Таким образом заявленное гуминовое средство имеет высокую биологическую активность, которая проявляется в том, что оно достоверно замедляет время свертывания крови. Следовательно, заявленное гуминовое средство может использоваться в качестве улучшающего реологические свойства крови, в частности для снижения вязкости крови и уменьшения тромбообразования.