КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ ПРИДАНИЯ МАИСУ УСТОЙЧИВОСТИ К КУКУРУЗНОМУ ЖУКУ II

1. Способ повышения устойчивости к поеданию насекомым-вредителем у растения, предусматривающий:
(a) введение в регенерируемую растительную клетку рекомбинантной ДНК-конструкции, содержащей полинуклеотид, функционально связанный по меньшей мере с одной регуляторной последовательностью, где полинуклеотид кодирует полипептид с аминокислотной последовательностью, по меньшей мере на 80% идентичной согласно результатам способа выравнивания Clustal W по сравнению с SEQ ID NO:2, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 20, 22 и 23; и
(b) регенерацию трансгенного растения из регенерируемой растительной клетки после стадии (а), где трансгенное растение содержит в своем геноме рекомбинантную ДНК-конструкцию и проявляет повышенную устойчивость к вредителю растения по сравнению с контрольным растением, не содержащим рекомбинантную ДНК-конструкцию.
2. Способ по п. 1, дополнительно предусматривающий:
(c) получение растения-потомка, происходящего от трансгенного растения, где указанное растение-потомок содержит в своем геноме рекомбинантную ДНК-конструкцию и проявляет повышенную устойчивость к поеданию насекомым-вредителем по сравнению с контрольным растением, не содержащим рекомбинантную ДНК-конструкцию.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что насекомое-вредитель представляет собой жесткокрылое насекомое.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что насекомое-вредитель представляет собой чешуекрылое насекомое.
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанное растение представляет собой однодольное растение.
6. Способ по п. 5, отличающийся тем, что указанное однодольное растение представляет собой маис.
7. Способ идентификации варианта Crw2, который придает растениям повышенную устойчивость к поеданию насекомым-вредителем, причем способ предусматривает стадии:
a. объединения посредством шаффлинга генов одной или нескольких нуклеотидных последовательностей, кодирующих один или несколько фрагментов SEQ ID NO:2, или белок, который по меньшей мере на 70% идентичен SEQ ID NO:2, или его фрагмент;
b. трансформации подвергнутых шаффлингу последовательностей со стадии (а) в популяцию регенерируемых растительных клеток;
c. регенерации популяции трансформированных растений из популяции трансформированных регенерируемых растительных клеток со стадии (b);
d. скрининга популяции трансформированных растений со стадии (с) в отношении повышенной устойчивости к указанному насекомому-вредителю и
e. идентификации варианта из трансформированного растения, проявляющего повышенную устойчивость.
8. Способ по п. 7, отличающийся тем, что способ дополнительно предусматривает стадии:
f. введения в регенерируемую растительную клетку рекомбинантной конструкции, содержащей вариант Crw2, идентифицированный с помощью способа по п. 7;
g. регенерации трансгенного растения из регенерируемой растительной клетки после стадии (f), где трансгенное растение содержит в своем геноме рекомбинантную ДНК-конструкцию; и
h. отбора трансгенного растения из (g), где трансгенное растение содержит рекомбинантную ДНК-конструкцию и проявляет повышенную устойчивость к указанному насекомому-вредителю по сравнению с контрольным растением, не содержащим рекомбинантную ДНК-конструкцию.
9. Способ по п. 7 или 8, отличающийся тем, что насекомое-вредитель представляет собой жесткокрылое насекомое.
10. Способ по п. 7 или 8, отличающийся тем, что насекомое-вредитель представляет собой чешуекрылое насекомое.
11. Способ по п. 7 или 8, отличающийся тем, что указанное растение представляет собой однодольное растение.
12. Способ по п. 11, отличающийся тем, что указанное однодольное растение представляет собой маис.
13. Способ идентификации аллельного варианта Crw2 у растения маиса, отличающийся тем, что указанный аллельный вариант связан с повышенной устойчивостью к поеданию насекомым-вредителем, причем способ предусматривает стадии:
a. получения популяции растений маиса, где указанные растения маиса проявляют различающиеся уровни устойчивости к указанному насекомому-вредителю;
b. оценки аллельных вариаций относительно последовательности полинуклеотида, кодирующей белок, содержащий SEQ ID NO:2, или в участке генома, который регулирует экспрессию полинуклеотида, кодирующего белок;
c. установления связи аллельных вариаций с указанной устойчивостью и
d. идентификации аллельного варианта, который связан с повышенной устойчивостью к насекомому-вредителю.
14. Способ по п. 13, отличающийся тем, что насекомое-вредитель представляет собой жесткокрылое насекомое.
15. Способ по п. 13, отличающийся тем, что насекомое-вредитель представляет собой чешуекрылое насекомое.