ВАКЦИНА ПРОТИВ МИКОПЛАЗМЫ И PRRSV
MYCOPLASMA AND PRRSV VACCINE

Mycoplasma hyopneumoniae
Настоящее изобретение относится к использованию иммуногенной дозы иммуногенного материала  и иммуногенной дозы живого аттенуированного вируса PRRS для получения вакцины и к вакцинному набору, содержащему такую вакцину.
Mycoplasma hyopneumoniae
Микоплазменная пневмония свиней, вызванная бактериальным патогеном, является широко распространенным хроническим респираторным заболеванием у свиней. Особенно восприимчивыми к этому несмертельному заболеванию являются поросята. Энзоотическая пневмония представляет собой хроническое заболевание, которое приводит к низкому усвоению корма и задержке роста. Заболевание является высококонтагиозным, и заражение, как правило, происходит через непосредственный контакт с инфицированным отделяемым дыхательных путей, например, в форме инфицированных капель при кашле/чихании.
Последствием этого заболевания, вызывающим наибольшее количество проблем, является то, что оно провоцирует все виды вторичных инфекций дыхательной системы.
Полагают, что, например, в США инфицировано 99% всех свиноводческих ферм. Ежегодные убытки оценивают в сумму от 100 до 300 миллионов долларов.
Другим очень часто встречаемым заболеванием органов дыхания у свиней является заболевание, широко известное как репродуктивно-респираторный синдром свиней (PRRS) и как эпидемический аборт и респираторный синдром свиней (PEARS). В настоящее время заболевание во всем мире обозначают как PRRS. Патология не ограничивается только заболеванием дыхательных путей, но также приводит к выкидышам. Другими симптомами, обычно или эпизодически наблюдаемыми при данном заболевании, являются: расстройство пищеварения, анорексия, синюшность дистальных участков тела, особенно ушей.
В настоящее время известно, что возбудителем заболевания является небольшой оболочечный РНК-содержащий вирус. У беременных самок PRRS вызывает лихорадку, депрессию, а у свиноматок и подсвинок - снижение аппетита. Затруднения воспроизведения будут касаться и влиять преимущественно на самок на поздних сроках беременности.
У поросят PRRS преимущественно влияет на дыхательную систему. Наблюдается патологически учащенное дыхание или «притупление звука». Во многих случаях приходится считать, что усугубляется тяжесть осложнений, вызванных другими бактериальными и вирусными патогенами, с убытками из-за падежа и вытекающими затратами на лечение. Это может приводить к низкой продуктивности, с появлением свиней, которым необходимы дополнительные недели для завершения периода откорма.
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Помимо часто наблюдаемых заболеваний, вызванных  и вирусом PRRS, в настоящее время все чаще и чаще встречаемым является экономически значимое расстройство дыхания у свиней. Это расстройство характеризуется замедленным ростом, сниженной эффективностью кормления, летаргией, анорексией, лихорадкой, кашлем и одышкой. В настоящее время это расстройство широко известно как респираторный симптомокомплекс у свиней (PRDC), а двумя наиболее распространенными патогенами, выделенными от свиней, страдающих PRDC, являются  и вирус PRRS. По всей видимости, заболевание вызывается каким-то сочетанным действием двух патогенов.
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Свиноводческое производство использует доступные в настоящее время эффективные вакцины против инфицирования  и инфицирования вирусом PRRS. А поскольку к инфицированию , а также инфицированию вирусом PRRS особенно восприимчивы молодые поросята, наиболее эффективным оказалось бы вакцинирование против обоих заболеваний одновременно на раннем сроке развития.
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Тем не менее, с течением времени стало понятно, что этот способ не подходит. В настоящее время установлено, что эффективность вакцин против  существенно снижается при инфицировании или вакцинации свиней вирусом PRRS. Этот эффект наблюдается, если инфицирование или вакцинация вирусом PRRS происходит во время вакцинации или даже через 1-2 недели после вакцинации вакциной против . Этот эффект наблюдается даже с авирулентными вакцинными штаммами вируса PRRS (Pig International 30: 9-12 (2000), Thacker, E.L. et al., J. Clin. Microbiol. 37: 620-627 (1999), Thacker, E.L. et al., Vaccine 18: 1244-1252 (2000)).
Mycoplasma hyopneumoniae
Кроме того, было показано, что PRRS-инфекция индуцирует очень быстрое начало инфекционного заболевания, вызванного .
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Более того, инфицирование  увеличивает продолжительность и усиливает тяжесть вирусных инфекций в целом, таких как PRRS (Thacker, E.L. et al., Vaccine 18: 1244-1252 (2000)) и свиной грипп (Thacker, E.L. et al., J. Cl. Microbiol. 39: 2525-2530 (2001)). Это является дополнительной причиной вакцинации против вирусных инфекций, таких как PRRS и свиной грипп, как можно быстрее с момента рождения, но, во всяком случае, до заражения .
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Таким образом, по вышеуказанным причинам существует значительное предпочтение для первой вакцинации вакциной против PRRS-вируса, вместо применения как вакцинации PRRS-вирусом, так и вакцинации . Вследствие этого, тем не менее, вакцинацию  необходимо отложить, пока живой аттенуированный вакцинный штамм PRRS не удалится из тела. Это означает, что ее необходимо отложить, по меньшей мере, на две-три недели, а предпочтительно на более длительный срок, прежде чем первую вакцину (примирование) против  можно будет ввести безопасно, и даже на четыре недели, а предпочтительно на более длительный срок, прежде чем сделать вторую вакцинацию (ревакцинацию) вакциной против . Другим следствием является то, что поросята останутся незащищенными против инфицирования  в течение, по меньшей мере, четырех недель после PRRS-вакцинации.
Однако в настоящее время не существует способов избежать этих нежелательных последствий.
Целью настоящего изобретения является решение вышеуказанной проблемы.
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Неожиданно было обнаружено, что если поросят сначала вакцинируют , с последующей вторичной вакцинацией и  и живым аттенуированным вирусом PRRS, у них быстро развивается отличный иммунитет как против инфицирования вирусом PRRS, так и инфицирования  и, что даже более неожиданно, без существенных негативных реакций.
Mycoplasma hyopneumoniae
Этот новый подход имеет огромное преимущество перед способом, предпочитаемым в настоящее время, которое заключается в том, что за очень короткий срок с момента рождения поросята могут быть полностью защищены как против инфицирования , так и инфицирования PRRS.
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Очевидно, что при сочетанном введении иммуногенной дозы иммуногенного материала  и иммуногенной дозы живого аттенуированного вируса PRRS свиньям, которых первоначально подвергли вакцинированию , представленные проблемы отпадают.
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Иммуногенный материал  может представлять собой, например, бактерин или может представлять собой иммуногенную субъединицу. В равной мере он может быть живым рекомбинантным векторным вирусом или отличным от  бактериальным вектором, способным экспрессировать генетический материал, кодирующий иммуногенную субъединицу .
В данной области под иммуногенной дозой понимается количество иммуногенного материала, которое возможно в сочетании с адъювантом, достаточное для стимуляции иммунного ответа у мишенного животного.
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Таким образом, первый вариант осуществления настоящего изобретения относится к использованию иммуногенной дозы иммуногенного материала  и иммуногенной дозы живого аттенуированного вируса PRRS для получения вакцины, используемой при сочетанном введении вакцины против  и вакцины против PRRSV свиньям, примированным .
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
С экономической точки зрения бактерины  эффективны, просты в получении, безопасны и недороги. Поэтому большинство коммерчески доступных вакцин против  основываются на бактеринах.
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Таким образом, предпочтительная форма этого варианта осуществления относится к использованию иммуногенной дозы бактерина  и иммуногенной дозы живого аттенуированного вируса PRRS для производства вакцины, используемой при сочетанном введении вакцины против  и вакцины против PRRSV свиньям, примированным .
Выражение «бактерин» в данной области относится к инактивированным бактериям. Такая инактивация может быть достигнута, например, средствами химической обработки, такими как, например, обработка формалином, тепловая обработка, обработка французским прессом и облучение.
Живой аттенуированный вирус PRRS представляет собой вирус PRRS, который является непатогенным для мишенного животного или у которого наблюдается существенное снижение вирулентности по сравнению с вирусом дикого типа.
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Несмотря на предпочтение иммуногенный материал  и живой аттенуированный вирус PRRS вакцины, используемой при сочетанном введении, необязательно вводить в смешанной форме, т.е. смешанными вместе. Причина этого заключается в том, что способ введения каждого активного компонента может быть разным, в зависимости, например, от состава компонентов, стойлового содержания свиней и управления сельским хозяйством. Иммуногенный материал  (также обозначаемый как компонент ) может быть введен, например, орально, интраназально или инъекционными способами. Живой аттенуированный вирус PRRS (также обозначаемый как компонент PRRSV) может, например, ввиду высокой эффективности, вводиться интрадермальной аппликацией, а необязательно внутримышечно. Поэтому в зависимости, например, от условий на ферме и от инструкций производителя вакцины, может быть удачно, что способ введения  и PRRSV-компонентов вакцины различается. Понятно, что в таких случаях введение  и PRRSV-компонентов неизбежно происходит в несколько различные моменты времени. Преимущества настоящего изобретения, тем не менее, могут быть получены только в том случае, если  и PRRSV-компоненты вакцины, используемой при сочетанном введении, вводятся за относительно короткий промежуток времени, например менее чем за 24 часа, предпочтительно, менее чем за 8 часов. В практических целях интервал фактически должен быть предпочтительно даже меньше: менее 4 часов, менее 2 часов, менее одного часа, менее 30 минут, менее 15 минут, менее 10 минут, менее 5 минут или менее 2 минут в указанном порядке выполнения.
Mycoplasma hyopneumoniae
Таким образом, полагают, что сочетанное введение должно быть введением  и PRRSV-компонентов за относительно короткий интервал времени: менее чем за 24 часа, менее чем за 8 часов, менее чем за 4 часа, менее чем за 2 часа, менее чем за один час, менее чем за 30 минут, менее чем за 15 минут, менее чем за 10 минут, менее чем за 5 минут или менее чем за 2 минуты в указанном порядке выполнения.
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Предпочтительный вариант осуществления изобретения относится к использованию иммуногенной дозы иммуногенного материала  и иммуногенной дозы живого аттенуированного вируса PRRS для производства вакцины с целью использования при сочетанном введении вакцины против  и вакцины против PRRSV свиньям, примированным , где вакцина, используемая при сочетанном введении, содержит компонент PRRSV и компонент  в смешанной форме.
Между европейскими и северо-американскими штаммами вируса PRRS были обнаружены значительные различия как в антигенной, так и в генотипической структуре. В данной области хорошо известны характеристики европейских штаммов вируса PRRS и то, чем они отличаются от северо-американских штаммов. Различия между европейскими и северо-американскими штаммами вируса PRRS описаны, между прочим, в статье Meng, X.-J. et al., Arch. Virol. 140: 745-755 (1995), в статье Suarez, P. et al., Virus Research 42: 159-165 (1996) и в статье Allende, R. et al., J. Gen Virol. 80: 307-315 (1999). В последние годы стало понятно, что перекрестный иммунитет между европейскими и северо-американскими штаммами вируса PRRS недостаточен или даже не существует.
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Поэтому другая предпочтительная форма этого варианта осуществления настоящего изобретения относится к использованию иммуногенной дозы иммуногенного материала  и иммуногенной дозы живого аттенуированного вируса PRRS для производства вакцины, используемой при сочетанном введении вакцины против  и вакцины против PRRSV свиньям, примированным , где живой аттенуированный вирус PRRS представляет собой европейский штамм. Это особенно предпочтительно для контроля и уменьшения в Европе числа случаев респираторного симптомокомплекса у свиней.
Mycoplasma hyopneumoniae
В другой предпочтительной форме этого варианта осуществления при производстве вакцины для использования при сочетанном введении вакцины против  и вакцины против PRRSV добавляют один или несколько антигенов, полученных из других патогенных организмов или вирусов свиней, или генетическую информацию, кодирующую такие антигены.
Escherichia coli, Erysipelo rhusiopathiae, Lawsonia intracellularis, Bordetella bronchiseptica, Salmonella cholerasuis, Haemophilus parasuis, Pasteurella multocida, Streptococcus suis, Brachyspira hyodysenteriae
Actinobacillus pleuropneumoniae
Такие организмы и вирусы предпочтительно отбирают из следующей группы: вирус псевдобешенства, вирус гриппа свиней, парвовирус свиней, вирус трансмиссивного гастроэнтерита, ротавирус, и.
Mycoplasma hyopneumoniae
Не требует доказательств, что по существу бактерии и вирусы этой группы в принципе также можно добавлять к вакцине против , используемой для примирования, при условии, что они не препятствуют положительным эффектам использования по изобретению.
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Другой вариант осуществления настоящего изобретения относится к вакцинному набору, содержащему вакцину для использования при сочетанном введении в форме, в которой компонент  находится в одном контейнере, предпочтительно в суспензии, а компонент PRRSV находится во втором контейнере, предпочтительно в высушенной замораживанием форме. Преимуществом такого набора является следующее: компонент  может быть аспирирован из первого контейнера шприцем с иглой и затем добавлен во второй контейнер для растворения высушенного замораживанием компонента PRRSV. После чего эта смесь была бы готова для сочетанного введения.
Mycoplasma hyopneumoniae
Альтернативно, вакцинный набор содержит вакцину для использования при сочетанном введении, в которой компонент PRRSV и компонент находятся в одном контейнере. Такой контейнер может представлять собой, например, ампулу с вакциной. Если указанные компоненты находятся в одном контейнере, уже нет необходимости их смешивать. Перед применением они могут быть, например, отделены барьером, например, мембраной. В момент введения игла шприца для введения может проколоть мембрану, после чего компоненты будут смешаны. Их можно затем использовать в виде смеси, наполнив шприц, и вводить как смесь. Компоненты также могут быть представлены в виде отдельных высушенных замораживанием осадков или высушенных замораживанием масс в одном и том же пузырьке. Добавление разбавителя индуцировало бы затем смешивание компонентов перед введением.
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Поэтому другая форма этого варианта осуществления относится к вакцинному набору, который содержит вакцину для использования при сочетанном введении иммуногенного материала  и живого аттенуированного вируса PRRS по изобретению, где компонент  и компонент PRRSV находятся в одном единственном контейнере.
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Свиньями, примированными , являются свиньи, которых вакцинировали вакциной против  до сочетанного введения вакцины против  и PRRSV. В результате первичной вакцинации свиней создается первичный иммунный ответ на . Для развития такого иммунного ответа требуется некоторое время. Однако, чтобы увеличить эффективность вакцины, используемой при сочетанном введении  и вируса PRRS, необходимо наличие адекватной первичной реакции против . Поэтому предпочтительно, чтобы вакцина, используемая при сочетанном введении  и вируса PRRS, вводилась бы через 7 или более дней после первичной вакцинации свиньи.
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Сочетанное введение вакцины против  и PRRSV было бы предпочтительно проводить в течение 35 дней после примирования, более предпочтительно в течение 14-35 дней после примирования: пока вакцина, используемая при сочетанном введении  (ревакцинация) и вируса PRRS, не введена, свиньи полностью не защищены ни против инфицирования , ни против инфицирования вирусом PRRS. Таким образом, предпочтительно, чтобы введение вакцины, используемой при сочетанном введении, осуществляли между 7 и 35 днями после примирования , более предпочтительно между 14 и 35 днями, даже более предпочтительно между 21 и 28 днями после примирования .
Mycoplasma hyopneumoniae
Не требует доказательств, что для примирования вакцинируемых свиней несомненно подходит большинство вакцин против .
Микоплазменные вакцины описаны, например, в РСТ-заявке WO 91/18627, патенте США US 5338543 и европейском патенте ЕР 550477.
Mycoplasma hyopneumoniae
Такие вакцины, главным образом бактерины, также являются коммерчески легкодоступными у различных производителей. Примерами коммерчески доступных вакцин против  являются Porcilis M Hyo, ProSystem M (Porcilis M) (Intervet Int. B.V.), ProSystem BPM, (Porcilis BPM) (Intervet Int. B.V.), RespiSure (Pfizer), Stellamune (Pfizer), Suvaxyne M.hyo (Fort Dodge), Hyoresp (Merial) и M+Pac (Schering-Plough).
Mycoplasma hyopneumoniae
Для компонента , который используется в производстве вакцины, используемой при сочетанном введении по изобретению, подходит то же самое. Можно без проблем использовать микоплазменные вакцины, описанные, например, в РСТ-заявке WO 91/18627, патенте США US 5338543 и европейском патенте ЕР 550477. По существу также подходят и коммерчески доступные микоплазменные вакцины, такие как описанные выше.
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
В отношении PRRSV-компонента вакцины для использования в производстве вакцины, используемой при сочетанном введении по изобретению, можно без проблем использовать живые аттенуированные вакцины против PRRS, описанные между прочим в европейских патентах ЕР 676467, ЕР 835930, патентах США US 5510258 и US 5587164. По существу, также можно эффективно использовать коммерчески доступные вакцины против PRRS, такие как доступные, например в Intervet Int. B.V., например PorcilisPRRS. Поэтому специалист не испытывал бы никаких проблем ни в выборе компонента  и компонента живого аттенуированного PRRS, которые образуют основные компоненты, необходимые для производства вакцины, используемой при сочетанном введении по изобректению, ни в выборе вакцины против  для примирования.
Mycoplasma hyopneumoniae
Специалист знал бы, как вводить вакцины. Как дозировка, так и способы введения вакцины против  и живой аттенуированной вакцины против PRRS, очевидно, следуют из инструкций, даваемых производителем в случае использования компонентов коммерческой вакцины или, в случае некоммерческой вакцины, из способов, например, описанных в любом из вышеупомянутых патентов.
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Просто в качестве примера: если специалист выбирает в качестве вакцины против  Porcilis M Hyo и PorcilisPRRS в качестве вакцины против PRRS, то было бы предпочтительно примирование дозой 2 мл провести в возрасте 5-9 дней жизни, а введение вакцины, используемой при сочетанном введении вакцины против  и живой аттенуированной вакцины против PRRSV по изобретению, предпочтительно было бы осуществить в возрасте 23-30 дней жизни.
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Другой вариант осуществления настоящего изобретения, таким образом, относится к способу вакцинации свиней против инфицирования вирусом PRRS и , где данный способ содержит этапы введения первичной вакцинации (примирование) вакциной против , с последующей сочетанной вакцинацией иммуногенным материалом  и живым аттенуированным вирусом PRRS. Сочетанная вакцинация, таким образом, действует по отношению к иммуногенному материалу  как вторичная вакцинация (ревакцинация).
Mycoplasma hyopneumoniae
Mycoplasma hyopneumoniae
Положительный эффект вакцины, используемой при сочетанном введении вакцины против  и PRRSV, на примированных вакциной против  свиней иллюстрируется (но не ограничивается) примерами, представленными ниже.
Примеры
Пример 1
M. hyopneumoniae
Эффективность одновременного использования бактерина  (Porcilis M Hyo) и модифицированной живой вакцины против PRRS (PorcilisPRRS) была протестирована в эксперименте вакцинация-контрольное заражение на поросятах SPF согласно следующему графику проведения эксперимента:
группа
N
1<sup>я</sup> вакцинация в возрасте 1 неделя
2<sup>я</sup> вакцинация в возрасте 4 недели
Контрольное заражение
1
12
M.hyo
M.hyo + PRRS
<i>M. hyopneumoniae</i> в возрасте 6 недель
2
12
M.hyo
M.hyo
3
12
-
-
4
7
M.hyo
M.hyo + PRRS
PRRSV в возрасте 8 недель
5
6
-
PRRS
6
6
-
-
M. hyopneumoniae
M. hyopneumoniae
Вакцину против  вводили в виде внутримышечной дозы объемом 2 мл и лиофилизированный вакцинный штамм PRRS после восстановления либо в разбавителе (Diluvac Forte, Intervet Int. B.V., Wim de Korverstraat 35, Boxmeer, the Netherlands) (группа 5), либо в вакцине против (группы 1 и 4) также вводили в виде внутримышечной дозы объемом 2 мл. Во время эксперимента несколько поросят умерли по причинам, не связанным с вакцинацией или контрольным заражением.
M. hyopneumoniae
M. hyopneumoniae
M. hyopneumoniae
8,5
Контрольное заражение осуществляли интратрахеальной инокуляцией поросят культурой пересеянного небольшое число раз полевого изолята  в количестве 10 CCU за два последовательных дня. Через три недели после контрольного заражения трупы свиней вскрывали и оценивали консолидированные поражения легких согласно Goodwin & Whittlestone (British Vet. Journ. 129: 456-464 (1973)). Уменьшение поражений легких, специфичных для , оказалось статистически значимым для обеих групп 1 и 2 по сравнению с контролями. Различие между группами 1 и 2 не было статистически значимым (р=0,83, U-критерий Манна-Уитни).
группа
N
1<sup>я</sup> вакцинация в возрасте 1 неделя
2<sup>я</sup> вакцинация в возрасте 4 недели
Оценка поражения
<i>M. hyopneumoniae</i>*
1
12
M.hyo
M.hyo + PRRS
3,7<sup>a</sup>
2
11
M.hyo
M.hyo
5,9<sup>a</sup>
3
11
-
-
13,4<sup>b</sup>
*: максимальная оценка поражения равняется 55; группы с различными верхними индексами существенно отличаются (р<0,05, U-критерий Манна-Уитни)
5
50
50
Контрольное заражение PRRSV осуществляли интраназальной инсталляцией штамма PRRSV дикого типа в количестве 10 TCID в 1 мл PBS на ноздрю. На 3, 5, 7, 10, 14 и 21 дни после контрольного заражения для титрования вируса на альвеолярных микрофагах свиней (РАМ) от всех поросят собирали образцы крови. Вкратце, монослои РАМ в 96-луночных планшетах инокулировали 10-кратными серийными разведениями образцов сыворотки в четырех повторах с последующей инкубацией при 37°С в течение 7 дней. Клетки ежедневно исследовали на наличие ЦПЭ и титр вируса выражали в виде TCID/мл согласно способу Reed и Muench. Во все дни сбора образцов титры вируса, использованного для контрольного заражения, оказались существенно ниже в вакцинированных группах 4 и 5. Уровень иммунитета в группах 4 и 5 не различался.
Пример 2
M. hyopneumoniae
M. hyopneumoniae
Эффективность одновременного использования бактерина  (Porcilis M Hyo) и модифицированной живой вакцины против PRRS (Porcilis PRRS) в отношении  также была протестирована на коммерческих поросятах:
группа
N
1<sup>я</sup> вакцинация в возрасте 1 неделя
2<sup>я</sup> вакцинация в возрасте 4 недели
Контрольное заражение
1
12
M.hyo
M.hyo + PRRS
<i>M. hyopneumoniae</i> в возрасте 6 недель
2
12
-
PRRS
3
12
M.hyo
M.hyo
4
12
-
-
M. hyopneumoniae
M. hyopneumoniae
Вакцину против  вводили в виде 2 мл внутримышечной дозы и лиофилизированный вакцинный штамм PRRS после восстановления в разбавителе (группа 2) или в вакцине против  (группа 1) также вводили в виде 2 мл внутримышечной дозы. Во время эксперимента одного поросенка из группы 2 умертвили перед вакцинацией из-за общего слабого состояния здоровья, и нескольких поросят в группах 2, 3 и 4 пришлось исключить из оценки поражения вследствие развития тяжелого плеврита.
M. hyopneumoniae
M. hyopneumoniae
M. hyopneumoniae
8,5
Контрольное заражение  осуществляли интратрахеальным заражением поросят культурой пересеянного небольшое число раз полевого изолята  в количестве 10 CCU в течение двух последовательных дней. Через три недели после заражения трупы свиней вскрывали и оценивали консолидированные поражения легких согласно Goodwin & Whittlestone. Уменьшение поражений легких, специфичных для , оказалось статистически значимым для обоих групп 1 и 3. Различие между группами 1 и 3 не было статистически значимым (р=0,13, U-критерий Манна-Уитни).
группа
N
1<sup>я</sup> вакцинация в возрасте 1 неделя
2<sup>я</sup> вакцинация в возрасте 4 недели
Оценка поражения <i>M. hyopneumoniae</i>*
1
12
M.hyo
M.hyo + PRRS
1,3<sup>а</sup>
2
9
-
PRRS
11,7<sup>b</sup>
3
11
M.hyo
M.hyo
2,4<sup>а</sup>
4
9
-
-
6,6<sup>b</sup>
*: максимальная оценка поражения составляет 55; группы, имеющие различные верхние индексы различаются значительно (р<0,05, U-критерий Манна-Уитни)