АНТИТЕЛО ПРОТИВ MUC1

1. Антитело, способное связываться с MUC1, содержащее:
(i) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую определяющие комплементарность области (CDR) CDR-H1, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, CDR-H2, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и CDR-H3, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3; и
(ii) вариабельную область легкой цепи, содержащую определяющие комплементарность области (CDR) CDR-L1, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, CDR-L2, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и CDR-L3, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6.
2. Антитело по п.1, где аминокислота в положении 8 SEQ ID NO: 2 выбрана из группы, состоящей из глутамина, гистидина, триптофана, тирозина, лизина и аргинина, или где CDR-H2 имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 7.
3. Антитело по п.1, где вариабельная область тяжелой цепи имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9 или аминокислотную последовательность, являющуюся по меньшей мере на 90% идентичной аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 9.
4. Антитело по любому из пп.1-3, где вариабельная область тяжелой цепи имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10 или аминокислотную последовательность, являющуюся по меньшей мере на 90% идентичной аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 10.
5. Антитело по любому из пп.1-4, где вариабельная область легкой цепи имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12 или аминокислотную последовательность, являющуюся по меньшей мере на 90% идентичной аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 12.
6. Антитело по любому из пп.1-5, где вариабельная область тяжелой цепи антитела имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, и вариабельная область легкой цепи антитела имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12.
7. Антитело по любому из пп.1-6, где антитело содержит Fc-область и, предпочтительно, является антителом IgG1-, IgG2- или IgG4-типа.
8. Антитело по любому из пп.1-7, где антитело содержит тяжелую цепь, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 15, в частности SEQ ID NO: 22, и легкую цепь, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 16.
9. Антитело по п.7 или 8, где антитело имеет профиль гликозилирования, имеющий одну или более из следующих характеристик:
(i) детектируемое количество гликанов, несущих остаток GlcNAc в точке ветвления;
(ii) относительное количество гликанов, несущих по меньшей мере один остаток галактозы, по меньшей мере 25% общего количества гликанов, соединенных с участками гликозилирования Fc антитела в композиции.
10. Антитело по любому из пп.1-9, где антитело можно получать посредством продукции в клетке млекопитающего.
11. Антитело по любому из пп.1-10, которое можно получать посредством продукции в линии клеток человека, выбранной из группы, состоящей из NM-H9D8 (DSM ACC 2806), NM-H9D8-E6 (DSM ACC 2807), NM-H9D8-E6Q12 (DSM ACC 2856) и линий клеток, полученных из них.
12. Антитело по любому из пп.1-10, где антитело можно получать посредством продукции в линии клеток CHO или линии клеток, полученной из нее.
13. Антитело по любому из пп.1-12, где антитело конкурирует за связывание с TA-MUC1 с антителом, содержащим вариабельную область тяжелой цепи, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 10, и вариабельную область легкой цепи, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 12.
14. Нуклеиновая кислота, кодирующая антитело по любому из пп.1-13.
15. Экспрессионная кассета или вектор, содержащий нуклеиновую кислоту по п.14 и промотор, функционально связанный с указанной нуклеиновой кислотой.
16. Клетка-хозяин, содержащая нуклеиновую кислоту по п.14, или экспрессионную кассету, или вектор по п.15.
17. Конъюгат, содержащий антитело по любому из пп.1-13, конъюгированное с дополнительным средством, где дополнительное средство является полипептидом или белком.
18. Конъюгат по п.17, где дополнительное средство является цитокином, иммуномодулирующим соединением, опухолеспецифическим антителом или антителом, блокирующим или активирующим иммунные контрольные точки.
19. Композиция, содержащая антитело по любому из пп.1-13, нуклеиновая кислота по п.14, экспрессионная кассета или вектор по п.15, клетка-хозяин по п.16 или конъюгат по п.17 или 18.
20. Антитело по любому из пп.1-13, конъюгат по п.17 или 18 или композиция по п.19 для применения в медицине.
21. Антитело, конъюгат или композиция по п.20 для применения в лечении злокачественного новообразования, инфекции, аутоиммунного заболевания или нарушения с иммунодефицитом.
22. Антитело, конъюгат или композиция по п.20 для применения в диагностике, детекции и/или мониторинге злокачественного новообразования, инфекции, аутоиммунного заболевания или нарушения с иммунодефицитом.
23. Антитело, конъюгат или композиция по п.21 или 22, где злокачественное новообразование отличается экспрессией TA-MUC1.
24. Антитело, конъюгат или композиция по любому из пп.21-23, где злокачественное новообразование выбрано из группы, состоящей из рака яичников, рака молочной железы, рака поджелудочной железы, рака легких, рака толстого кишечника, рака желудка, рака печени, рака почки, гемобластоза, рака эндометрия, рака щитовидной железы, лейкозов, семином, меланом, карцином, тератом, лимфом, сарком, мезотелиом, нейробластом, глиом, рака прямой кишки, рака надпочечников, рака кожи, злокачественного новообразования головного мозга, рака шейки матки, злокачественного новообразования кишечника, злокачественного новообразования кишечника, рака головы и шеи, злокачественного новообразования желудочно-кишечного тракта, злокачественного новообразования лимфоузлов, рака пищевода, колоректального рака, злокачественного новообразования уха, носа и горла (ЛОР), рака предстательной железы, рака мочевого пузыря, рака матки и их метастазов.
25. Антитело, конъюгат или композиция по любому из пп.20-24, где антитело используют в комбинации с дополнительным средством.
26. Способ повышения аффинности связывания антитела с MUC1, содержащего:
(i) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую определяющие комплементарность области (CDR) CDR-H1, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, CDR-H2, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, и CDR-H3, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3; и
(ii) вариабельную область легкой цепи, содержащую определяющие комплементарность области (CDR) CDR-L1, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, CDR-L2, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и CDR-L3, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6,
включающий стадию замены аминокислотного остатка в положении 8 CDR-H2 любым аминокислотным остатком, за исключением аспарагина, что приводит к получению CDR-H2, имеющей аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2.
27. Способ по п.26, где замены аминокислотного остатка в положении 8 CDR-H2 достигают посредством встраивания мутации в нуклеиновую кислоту, кодирующую антитело, где мутацию встраивают в кодон, кодирующий указанный аминокислотный остаток.
28. Способ получения антител с повышенной аффинностью связывания с MUC1, включающий
(a) получение нуклеиновой кислоты, кодирующей антитело, содержащее:
(i) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую определяющие комплементарность области (CDR) CDR-H1, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, CDR-H2, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 8, и CDR-H3, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3; и
(ii) вариабельную область легкой цепи, содержащую определяющие комплементарность области (CDR) CDR-L1, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, CDR-L2, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и CDR-L3, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6;
(b) встраивание мутации в указанную нуклеиновую кислоту для получения мутантной нуклеиновой кислоты, где мутацию встраивают в кодон, кодирующий аминокислотный остаток в положении 8 CDR-H2, таким образом, что указанный кодон кодирует любой аминокислотный остаток, за исключением аспарагина; и
(c) получение антитела с повышенной аффинностью связывания с MUC1 посредством экспрессии мутантной нуклеиновой кислоты в клетке-хозяине.
29. Способ по п.28, где антитело с повышенной аффинностью связывания с MUC1 содержит:
(i) вариабельную область тяжелой цепи, содержащую определяющие комплементарность области (CDR) CDR-H1, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1, CDR-H2, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2, и CDR-H3, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3; и
(ii) вариабельную область легкой цепи, содержащую определяющие комплементарность области (CDR) CDR-L1, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4, CDR-L2, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5, и CDR-L3, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 6.