СПОСОБЫ УЛУЧШЕННОЙ ИММУНОТЕРАПИИ

1. Способ адоптивной нейроиммунотерапии в отношении нуждающегося в этом индивидуума, включающий:
a. обеспечение первой иммунной клетки;
b. приведение указанной первой иммунной клетки в контакт по меньшей мере с одной молекулой, выбранной из нейромедиатора или его аналога, нейропептида или его аналога и модулятора потенциалзависимого ионного канала;
c. измерение по меньшей мере одного из:
i. уровня экспрессии или функционального уровня белка программируемой гибели клеток 1 (PD-1) в указанной первой иммунной клетке;
ii. пролиферации указанной первой иммунной клетки в отдельности в культуре;
iii. пролиферации указанной первой иммунной клетки в совместной культуре со злокачественной клеткой; и
iv. гибели злокачественных клеток в совместной культуре с указанной первой иммунной клеткой;
d. обеспечение второй иммунной клетки, происхождение которой является таким же, что и у указанной первой иммунной клетки;
e. приведение указанной второй иммунной клетки в контакт с указанной по меньшей мере одной молекулой, где указанная по меньшей мере одна молекула снижает экспрессию или функцию PD-1 в указанной первой иммунной клетке, повышает пролиферацию указанной первой иммунной клетки в отдельности или в совместной культуре, повышает гибель злокачественных клеток в совместной культуре с указанной первой иммунной клеткой или приводит к комбинации этих действий; и
f. введение указанному индивидууму указанной приведенной в контакт второй иммунной клетки;
таким образом, осуществление адоптивной нейроиммунотерапии в отношении указанного нуждающегося в этом индивидуума.
2. Способ по п.1, где указанный индивидуум страдает заболеванием, состоянием, повреждением или раной, включающим или, как предполагают, включающим субоптимальное количество T-клеток, субоптимальную активность T-клеток или и то, и другое, где указанное заболевание, состояние, повреждение или рана выбрано из группы, состоящей из: злокачественного новообразования, инфекционного заболевания, генетического иммунодефицита, приобретенного иммунодефицита, дегенеративного заболевания, аутоиммунного заболевания, метаболического заболевания, генетического заболевания, неврологического или психоневрологического заболевания и состояния после трансплантации органа, которому сопутствует иммунодефицитное состояние.
3. Способ по п.1 или 2, где
указанные первые и вторые иммунные клетки являются иммунными клетками, экспрессирующими PD-1; или
указанная иммунная клетка является T-клеткой;
указанные первые и вторые иммунные клетки получают из указанного пациента; или
указанные первые и вторые иммунные клетки получают из здорового донора; или
указанную первую иммунную клетку по изобретению предварительно не активируют до указанного приведения в контакт; или
указанная первая иммунная клетка по изобретению представляет собой множество иммунных клеток, дополнительно включающий выбор субпопуляции иммунных клеток из указанных первых иммунных клеток по изобретению, где указанная субпопуляция иммунных клеток выбрана из группы, содержащей: эффекторные T-клетки, T-хелперы, цитотоксические T-клетки, регуляторные T-клетки, супрессорные T-клетки, T-клетки с функцией естественных киллеров, воспалительные T-клетки, T-клетки памяти, гамма-дельта-T-клетки, инфильтрирующие ткань/орган T-клетки, инфильтрирующие опухоль T-клетки, репаративные T-клетки и прорегенеративные T-клетки, ассоциированные со слизистой T-клетки, репаративные T-клетки, прорегенеративные T-клетки, активированные T-клетки и инактивированные T-клетки; или
любой их комбинации.
4. Способ по любому из пп.1-3, дополнительно включающий культивирование указанных иммунных клеток в средах для иммунных клеток, содержащих плазму или сыворотку человека, где указанная экспансия включает стимуляцию указанных иммунных клеток, и способ дополнительно включает культивирование в течение периода времени, достаточного для доведения по меньшей мере 50% указанных иммунных клеток по изобретению до состояния покоя, где указанное дополнительное культивирование осуществляют в течение от 1 до 7 дней, и где указанная стимуляция включает инкубацию указанной иммунной клетки с по меньшей мере одним из CD3, CD28, митогена, фактора роста и цитокина или любой их комбинации.
5. Способ по любому из пп.1-4, где указанная первая иммунная клетка представляет собой множество иммунных клеток, и указанные первые иммунные клетки делятся, и их культивируют, раздельно; и их приводят в контакт с по меньшей мере одной молекулой; и выбирают указанную по меньшей мере одну молекулу, приводящую к наибольшему повышению пролиферации указанной первой иммунной клетки в отдельности или в совместной культуре, или повышению гибели злокачественных клеток в совместной культуре, или наибольшему снижению экспрессии или функции PD-1 в указанной первой иммунной клетке, или указанная вторая иммунная клетка представляет собой множество иммунных клеток, и указанные вторые иммунные клетки делятся, и их приводят в контакт с указанной по меньшей мере одной молекулой и вводят указанному индивидууму последовательно.
6. Способ по любому из пп.1-5, где
(a) указанный нейромедиатор или его аналог выбран из: дофамина, глутамата, агониста рецептора дофамина, агониста рецептора глутамат/AMPA/NMDA, антагониста рецептора глутамата/AMPA/NMDA и антагониста рецептора дофамина;
(b) указанный нейропептид или его аналог выбран из GnRH-I, GnRH-II, пептида, родственного гену кальцитонина (CGRP), соматостатина, нейропептида Y (NPY), агониста рецептора GnRH-I, антагониста рецептора GnRH-I, агониста рецептора GnRH-II, антагониста рецептора GnRH-II, агониста рецептора CGRP, антагониста рецептора CGRP, агониста рецептора соматостатина, антагониста рецептора соматостатина, агониста рецептора NPY и антагониста рецептора NPY; и
(c) указанный модулятор потенциалзависимого ионного канала выбран из группы, состоящей из модулятора потенциалзависимого натриевого канала, кальциевого канала, калиевого канала (Kv) и хлорного канала.
7. Способ по п.6, где:
(a) указанный агонист рецептора дофамина выбран из
(1) агониста рецептора дофамина D1/5, выбранного из дофамина, фенолдопама, корлопама, A77636 и SKF38393;
(2) агониста рецептора дофамина D2, где указанный агонист рецептора дофамина D2 является суманиролом,
(3) агониста рецептора дофамина D3, выбранного из PD 128907 и 7-OH-DPAT; и
(4) агониста рецептора дофамина D4, выбранного из PD 168077 и A412997;
(b) указанный антагонист рецептора дофамина выбран из:
(1) антагониста рецептора дофамина D1/, где указанный антагонист рецептора дофамина D1/5 является SCH 39166;
(2) антагонист рецептора дофамина D2, где указанный антагонист рецептора дофамина D2 является L-741626;
(3) антагонист рецептора дофамина D3, где указанный антагонист рецептора дофамина D3 является NGB 2904; и
(4) антагонист рецептора дофамина D4, где указанный антагонист рецептора дофамина D4 является L-741742;
(c) указанный агонист рецептора глутамата/AMPA/NMDA выбран из глутамата, AMPA и NMDA;
(d) указанный антагонист рецептора глутамата/AMPA/NMDA выбран из CNQX и MK801; и
(e) указанный потенциалзависимый калиевый канал является Kv1.1, и где указанный модулятор потенциалзависимого ионного канала является блокатором потенциалзависимого ионного канала Kv1.1, выбранным из дендротоксина K (DTX-K) и блокирующего антитела против Kv1.1.
8. Способ по любому из пп.1-7, где
указанное введение включает выбор и введение субпопуляции указанных вторых приведенных в контакт иммунных клеток; или
6
9
указанное введение указанной приведенной в контакт второй иммунной клетки включает введение от 2×10 до 10 иммунных клеток; указанное введение включает повторное введение приведенных в контакт иммунных клеток; или
указанное введение включает непрерывное введение; или
указанные вводимые клетки выполняют по меньшей мере одну из следующих функций в организме индивидуума:
a. уничтожают вызывающие заболевание клетки;
b. уничтожают организм-возбудитель инфекции;
c. приводят к излечению указанного заболевания или состояния;
d. улучшают состояние индивидуума;
e. восстанавливают ткань или орган;
f. замещают поврежденные клетки или ткань;
g. компенсируют потерю или дефицит;
h. предотвращают развитие указанного заболевания или состояния; и
i. приводят к регенерации ткани или органа;
или любую их комбинацию.
9. Способ по любому из пп.1-8, где указанную первую иммунную клетку замораживают в средах для замораживания, содержащих плазму или сыворотку человека, и размораживают перед стадией b.
10. Способ выбора индивидуума, подходящего для нейроиммунотерапии, включающий:
a. обеспечение иммунной клетки от указанного индивидуума;
b. приведение указанной иммунной клетки в контакт по меньшей мере с одной молекулой, выбранной из нейромедиатора или его аналога, нейропептида или его аналога и модулятора потенциалзависимого ионного канала;
c. измерение по меньшей мере одного из:
i. экспрессии белка программируемой гибели клеток 1 (PD-1) на указанной иммунной клетке;
ii. пролиферации указанной иммунной клетки в отдельности в культуре;
iii. пролиферации указанной иммунной клетки в совместной культуре со злокачественной клеткой; и
iv. гибели злокачественных клеток в совместной культуре с указанной иммунной клеткой;
где по меньшей мере одно из снижения экспрессии или функции PD-1, повышения пролиферации в отдельности или в совместной культуре, повышения гибели злокачественных клеток и их комбинация свидетельствует о том, что указанный индивидуум подходит для нейроиммунотерапии.
11. Способ выбора комбинации молекул для улучшения терапевтического потенциала иммунных клеток, включающий:
a. обеспечение иммунной клетки;
b. приведение указанной первой иммунной клетки в контакт по меньшей мере с двумя молекулами, выбранными из нейромедиатора или его аналога, нейропептида или его аналога или модулятора потенциалзависимого ионного канала;
c. измерение по меньшей мере одного из:
i. экспрессии или активности PD-1 на указанной иммунной клетке;
ii. пролиферации указанной иммунной клетки в совместной культуре со злокачественной клеткой; и
iii. гибели злокачественных клеток в совместной культуре с указанной иммунной клеткой;
iv. пролиферации указанной иммунной клетки в отдельности в культуре;
v. экспрессии дзета-цепи CD3 в указанной иммунной клетке;
vi. миграции указанных иммунных клеток
vii. адгезии указанных иммунных клеток;
viii. хоминга указанных иммунных клеток;
ix. проникающей способности указанных иммунных клеток
x. секреции цитокинов указанными иммунными клетками;
xi. секреции терапевтических белков указанными иммунными клетками; и
xii. уровней экспрессии и функциональных уровней белков и генов, участвующих в указанных выше процессах;
где по меньшей мере одно из снижения экспрессии или активности PD-1, повышения пролиферации иммунной клетки в отдельности или в совместной культуре, повышения гибели злокачественных клеток, повышения экспрессии дзета-цепи, повышения миграции, повышения секреции цитокинов, повышения адгезии, повышения хоминга, повышения секреции по меньшей мере одного терапевтического белка, снижения экспрессии или функции по меньшей мере одного белка или гена, участвующего в процессе i, или повышения экспрессии или функции по меньшей мере одного белка или гена, участвующего в процессах ii-xi, свидетельствует о том, что указанные по меньшей мере две молекулы улучшают терапевтический потенциал указанной иммунной клетки; где иммунотерапевтический потенциал указанной иммунной клетки является потенциалом указанной клетки для лечения заболевания, состояния, раны или повреждения, включающего или, как предполагают, включающего субоптимальное количество T-клеток, субоптимальную активность T-клеток или и то, и другое.
12. Способ снижения экспрессии PD-1, включающий введение по меньшей мере одной молекулы, выбранной из нейромедиатора или его аналога, нейропептида или его аналога или модулятора потенциалзависимого ионного канала.
13. Способ усиления функции иммунных клеток, включающий:
a. обеспечение иммунной клетки; и
b. приведение указанной иммунной клетки в контакт по меньшей мере с двумя молекулами, выбранными из нейромедиатора или его аналога, нейропептида или его аналога и модулятора потенциалзависимого ионного канала.
14. Способ по п.12 или 13, где:
(a) указанный нейромедиатор или его аналог выбран из: дофамина, глутамата, агониста рецептора дофамина, агониста рецептора глутамата/AMPA/NMDA, антагониста рецептора глутамата/AMPA/NMDA и антагониста рецептора дофамина;
(b) указанный нейропептид или его аналог выбран из GnRH-I, GnRH-II, CGRP, соматостатина, нейропептида Y (NPY), агониста рецептора GnRH-I, антагониста рецептора GnRH-I, агониста рецептора GnRH-II, антагониста рецептора GnRH-II, агониста рецептора CGRP, антагониста рецептора CGRP, агониста рецептора соматостатина, антагониста рецептора соматостатина, агониста рецептора NPY и антагониста рецептора NPY; и
(c) указанный модулятор потенциалзависимого ионного канала выбран из группы, состоящей из модулятора потенциалзависимого натриевого канала, кальциевого канала, калиевого канала (Kv) и хлорного канала.
15. Способ по п.14, где
(a) указанный агонист рецептора дофамина выбран из:
(1) агониста рецептора дофамина D1/5, выбранного из дофамина, фенолдопама, корлопама, A77636 и SKF38393;
(2) агониста рецептора дофамина D2, где указанный агонист рецептора дофамина D2 является суманиролом;
(3) агониста рецептора дофамина D3, выбранного из PD 128907 и 7-OH-DPAT; и
(4) агониста рецептора дофамина D4, выбранного из PD 168077 и A412997;
(b) указанный антагонист рецептора дофамина выбран из:
(1) антагониста рецептора дофамина D1/5, где указанный антагонист рецептора дофамина D1/5 является SCH 39166;
(2) антагониста рецептора дофамина D2, где указанный антагонист рецептора дофамина D2 является L-741626;
(3) антагониста рецептора дофамина D3, где указанный антагонист рецептора дофамина D3 является NGB 2904; и
(4) антагониста рецептора дофамина D4, где указанный антагонист рецептора дофамина D4 является L-741742;
(c) указанный агонист рецептора глутамата/AMPA/NMDA выбран из глутамата, AMPA и NMDA;
(d) указанный антагонист рецептора глутамата/AMPA/NMDA выбран из CNQX и MK801; и
(e) указанный потенциалзависимый калиевый канал является Kv1.1, и где указанный модулятор потенциалзависимого ионного канала является блокатором потенциалзависимого ионного канала Kv1.1, выбранным из дендротоксина K (DTX-K) и блокирующего антитела против Kv1.1.