Способ повышения продуктивности дойных коров различных генотипов гена GPX-1
METHOD FOR INCREASING THE PRODUCTIVITY OF DAIRY COWS OF DIFFERENT GENOTYPES OF THE GPX-1 GENE

Изобретение относится к животноводству, в частности, к способу повышения продуктивности лактирующих коров в первый период лактации, и может быть использовано при приготовлении сбалансированных комбикормов для профилактики нарушений обмена веществ в организме, вызванных стресс-факторами, повышения молочной продуктивности, качества молока и продуктивного долголетия популяций высокопродуктивных коров голштинской породы с заданными генетическими параметрами гена глутатионпероксидаза-1 (GPX-1).
В результате многолетнего генетического улучшения молочного скота, продуктивный потенциал коров голштинской породы повысился до такой степени, что становится нереальным удовлетворить их потребность в классическом понимании и с учетом новых знаний в энергии, питательных веществах, минералах и витаминах. Это влечет за собой многие серьезные метаболические нарушения, которые на клеточном уровне приводят к окислительному стрессу различной интенсивности, повреждениям структуры и функций клеточных макромолекул ДНК и генным мутациям [Коденцова В.М., Вржесинская О.А., Мазо В.М. Витамины и окислительный стресс // Вопросы питания. - 2013. - Т. 82 - № 3. - С. 11-18], преобладанию окисления над процессами восстановления, образованию свободных радикалов, что отражается на обменных процессах и заболеваниях молочных коров [Relationship between body condition score, blood metabolites and oxidative stress in transition period and reproductive performance of dairy cows / H. Çolakoğlu, M. Yazlik, U. Kaya et al. // Journal of the Hellenic Veterinary Medical Society. - 2020. - Vol. 71(1). - P. 2041-2046. doi:https://doi.org/10.12681/jhvms.22954].
Для устранения этих метаболических нарушений на практике рекомендуют использовать как биологические, так и синтетические антиоксиданты различной химической природы, способные связывать свободные радикалы (активные формы кислорода) и замедлять окислительно-восстановительные процессы, а также противостоять инфекциям.
Для активизации собственной антиоксидантной системы защиты организма, тормозя и нейтрализуя на различных стадиях продукты свободно-радикального окисления, направленного на снижение отрицательного воздействия техногенных стрессов, повышения адаптагенных свойств и продуктивных показателей предлагается использование в рационах лактирующих коров биологические и синтетические антиоксиданты. В работе [Влияние антиоксидантов на продуктивность и качество молока при изменении условий содержания лактирующих коров / Н.Н. Ляушкина // Вестник ОрелГАУ. - 2011. - № 4(11). - С. 51-52] подкожное введение 2,5%-го раствора антиоксиданта Эмицидина в дозе 3,0 мл на 1 голову в сутки в течение 5 дней при переводе коров с зимне-стойлового на летне-лагерное содержание позволило установить повышение молочной продуктивности и качества молока при минимальном адаптационном периоде. Кроме того, время восстановления каждой коровы от действия стрессов зависело от ее генетически обусловленных особенностей. Недостатком описанного решения является технологии ввода препаратов в организм - подкожная инъекция, что может служить дополнительным стресс-фактором и увеличивает трудоемкость способа. Инъекции препаратов в течение 5-ти дней или один раз в месяц могут дать положительные результаты только в популяциях животных со средним генетическим потенциалом.
Описано повышение продуктивности лактирующих коров за счет корректировки липидного и минерального обмена, направленного на оптимизацию рубцового пищеварения, поддержания высокого уровня метаболизма в организме, а также способствующее полному раскрытию генетического потенциала, профилактике ацидоза и кетоза и продлению продуктивного долголетия коров [RU2722509 C1, 01.06.2020] при введении в рацион лактирующих коров и первотелок энергетической кормовой добавки, в состав которой входит антиоксидант - бис((3,5-ди-трет-бутил-4-гидроксифенил)пропил)-фосфонат. Кормовая добавка включает в себя также активированный цеолит, полученный в трехконтурном сушильном барабане при начальной температуре 1000°С и конечной 150-200°С, и майонез с истекающим сроком годности при соотношении компонентов, мас.%: цеолит активированный - 50-60, антиоксидант - 0,1 и майонез - 39,9-49,9. Недостатком изобретения является сложность в технологии освобождения майонеза из тары (ведра, тюбики), а также короткий гарантийный срок хранения и использования готовой продукции.
Основными микрокомпонентами в рационе сельскохозяйственных животных, улучшающими биохимические функции и антиоксидантный статус, являются селен и витамин Е, альфа- и бета-каротиноиды.
Например, известно влияние на повышение молочной продуктивности и качества молока коров альтернативных природным источникам каротиноидов витаминных антиоксидантных препаратов на основе бета-каротина - «Липовитам-бета», «Карток», «Карсел» [Влияние использования в рационах коров препарата с высокой биодоступностыо бета-каротина на продуктивность и технологические свойства молока / С.П. Лифанова, В.Е. Улитько // Зоотехнология. - 2014. - №8. - С. 24-25; Влияние использования антиоксидантных β-каротинсодержащих препаратов на молочную продуктивность коров / С.П. Лифанова, В.Е. Улитько, О.А. Десятов // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. - 2015. - №4. - С. 164-167; Антиоксидантный препарат «Карток» повышает продуктивность, улучшает состав и технологические свойства молока / С.В. Тойгильдин, В.Е. Улитько, С.П. Лифанова // Мичуринкий агрономический вестник. - 2016. - №1. - С. 51-56]. Препараты такого состава, в отличие от традиционных кормовых источников каротина, не только улучшают А-витаминный статус, но и обладают антиоксидантными, иммуностимулирующими и антитоксическими свойствами против поступающих в организм экотоксикантов. Парентеральное применение коровам указанных антиоксидантных препаратов усиливает метаболические процессы в их организме, в том числе и в молочной железе, что проявляется в увеличении содержания в молоке жира, белка и СОМО и в совокупности улучшает показатель его сыропригодности. Так, описан способ повышения молочной продуктивности и качества молока коров генетически различных популяций пород молочно-мясного и молочного направления продуктивности [Антиоксидантный препарат «Карток» повышает продуктивность, улучшает состав и технологические свойства молока / С.В. Тойгильдин, В.Е. Улитько, С.П. Лифанова // Мичуринкий агрономический вестник. - 2016. - №1. - С. 51-56]. Способ заключается во введении подопытным коровам бестужевской и голштинской красно-пестрой породы в первый период лактации парантерально в дозе 15 мл ежедневно 15 дней комплексного витаминизированного препарата «Карток», состоящего из смеси 2 г/кг β-каротина, 2,25 % витамина Е (а-токоферол) с антиоксидантными, детоксикационными, иммуностимулирующими действиями, способствующего усилению метаболических процессов в их организме, в т.ч. и в молочной железе. Наибольшее увеличение молочной продуктивности достигается у коров бестужевской породы (на 9,6%) и несколько меньше у красно-пестрых голштинских особей (на 3,9%), массовая доля жира в молоке соответственно на 0,12 и 0,19 абс. % и белка на 0,05 и 0,09 абс. %. К недостаткам решения, описанного в указанном источнике, можно отнести то, что научно-хозяйственные опыты проводились на двух популяциях пород раздельно методом мини-стада и сравнивать полученные результаты между собой методически некорректно; также использование препарата путем ежедневных инъекций является технологически трудоемким и физически стрессовым.
Селен является жизненно важным микроэлементом, который улучшает здоровье и фертильность сельскохозяйственных животных, а также влияет на качество конечного продукта. Его функции чрезвычайно важны и разнообразны. Селен является кофактором ферментов антиоксидантной системы, входит в состав селенопротеинов, участвующих в регуляции различных физиологических процессов, которые протекают в организме [Ingrid J. Pikering et al., 2000; А.Ф. Блинохватов и др., 2001; M.N. О Grady et al., 2001], гипоселенемия приводит к нарушению метаболизма, снижению естественной резистентности и иммунобиологической реактивности организма. Добавка селена в рацион крупного рогатого скота увеличивает доставку селена в молоко и молозиво, улучшает здоровье телят и выживаемость после отъема, улучшает иммунную систему, уменьшает проблемы воспроизводства, улучшает плодовитость, снижает тяжесть клинических признаков мастита и уменьшает количество соматических клеток в молоке.
Известен способ [RU 2145479 С1, 20.02.2000], который способствует снижению затрат кормов на образование молока, повышает удой молока как натуральной, так и 4%-ной жирности, на 1,28-1,3 кг или на 10,9%. Способ состоит во введении в рацион коров в период лактации премикса, состав которого включает минеральные компоненты и витамины при следующих их соотношении, мг/кг сухого вещества основного рациона: янтарную кислоту - 0,45; фолиевую кислоту - 2,60; селен - 0,79; цинк - 6,50; медь - 3,24; кобальт - 0,78; йод - 0,52; марганец - 5,35; магний - 6,11 и витамин D - 6,5-7,0 тыс. М.Е. Недостаток данного изобретения состоит в том, что норма ввода токсичного неорганического селена в составе рациона дойных коров слишком завышена и составляет 0,79 мг в расчете на 1 к.ед. или на 1 кг сухого вещества. По современным рекомендациям кормления лактирующих коров, норма селена, даже органического, не превышает 0,5 мг/кг сухого вещества рациона. Концентрация таких макро- и микроэлементов как Mg, Zn, Mn, Cu и Витамина D в составе продукта сильно занижены, что характеризует данный премикс как неэффективный. Кроме того, из комплекса биологически активных веществ невозможно отдельно выделить роль селена в обменных процессах организма и его продуктивное действие.
3
Описано [RU2515136 C1, 10.05.2014], что скармливание заявленного в данном источнике премикса для лактирующих коров позволяет повысить молочную продуктивность, улучшить качественные показатели молока, снизить затраты корма на производство единицы продукции. Состав премикса включает витамины, микроэлементы, в т.ч. селен в неорганической форме - селенит натрия, аминокислоты, адсорбент микотоксинов Токсфин, пробиотик и комплекс антиоксидантов в виде Луктанокса (основными активными веществами являются пропилгаллат и этоксиквин, которые, взаимодополняя друг друга, предназначены для остановки процессов окисления жиров), и наполнителя - рыжикового жмыха при следующем соотношении компонентов: витамин A 92 тыс. М.Е.; D - 70 тыс. М.Е.; Е - 76 мг; медь сернокислая пятиводная - 69 мг; цинк сернокислый семиводный - 1074 мг; марганец сернокислый пятиводный - 767 мг; кобальт хлористый шестиводный - 15 мг; калий йодистый - 22 мг; селенит натрия - 3 мг; монохлоргидрат L-лизина - 6360 мг; DL-метионин - 2920 мг; Токсфин - 500 мг; Бацелл - 5000 мг; Луктанокс - 45 мг; рыжиковый жмых - до 1000 г. Недостатком данной кормовой добавки является низкое содержание в составе витаминов, особенно витамина Е, и микроэлементов, а концентрация чистого неорганического селена составляет лишь 0,27 мг/гол. в сутки. Микроэлементы представлены в виде пяти-и семиводных соединений, которые гигроскопичны и обладают высокими реакционными свойствами, приводящими к разрушению биологически активных компонентов и стабильности премикса, что в конечном итоге не позволяет профилактировать нарушений обмена веществ и реализовать генетический потенциал животного.
В статье [Взаимосвязь молочной продуктивности коров с гематологическими показателями под влиянием антиоксидантов «Е-селена» и «Бутофана» / К.И. Романов // Вестник РГАТУ. - 2018. - № 1 (37). - С. 121-125] при внутримышечной инъекции комплекса антиоксидантных препаратов «Е-селена» и «Бутофана» в дозе по 10 мл на 1 голову в сутки в течение 5-ти месяцев выявлена прямая зависимость между величиной удоя и содержанием морфологических и биохимических показателей крови, т.е. улучшение процессов гемопоэза. Недостатком описанного решения является технологии ввода препаратов в организм - внутримышечная инъекция, что может служить дополнительным стресс-фактором и увеличивает трудоемкость способа.

50
Неорганическая форма селена (селенат или селенит натрия, входящий в состав, например, комплексного витаминно-микроэлементного препарата Е-селен) имеет низкую биодоступность, а также токсичность (LД=10), абсорбция в организме составляет не более 20-30% от примененного количества [Георгиевский В.И., Аненков П.Н., Самохин В.Т. / Минеральное питание животных // 1979. - С. 102-104], вследствие этого органические формы селена в качестве добавок к кормам более предпочтительны.
50
В качестве источника селена при кормлении сельскохозяйственных животных, в том числе в составе ряда комплексных кормовых добавок, широко применяется диацетофенонилселенид (ДАФС 25), LД которого значительно выше, чем у неорганического селена, и составляет 385. ДАФС-25 участвует в процессах тканевого дыхания и окислительного фосфорилирования, обладает антитоксическими свойствами, препятствует образованию перекисных соединений, накоплению в организме ядовитых веществ, способствует повышению активности фермента глутатионпероксидазы [Наставление по применению №13-5-2/668. Одобрено Ветфармбиосоветом Департамента ветеринарии Министерства сельского хозяйства и продовольствия РФ. Per. № ПВР 2.04.0185-96].
Так, известен способ кормления животных, в том числе кумысных кобыл [RU2229824 С1, 10.06.2004], включающий скармливание животным рационы с селеносодержащим органическим препаратом отечественного производства ДАСФ-25, предварительно смешиваемым с нутовой мукой, при этом нутовую муку берут из расчета 100 г/гол. в сутки. Показано, что у животных контрольной группы наблюдалось снижение удоя, вызванное ходом лактации, однако у кобыл, получавших селенсодержащий препарат, снижение удоя было в меньшей степени, чем у кобыл контрольной группы, из чего сделан вывод, что оптимальное содержание селена в организме кобыл способствовало более интенсивному обмену веществ, что благоприятно отразилось на процессе молокообразования; естественно увеличился синтез молока и изменились и улучшились питательная ценность и качество молока за счет обогащения селеном. Недостатком данного способа является то, что селенорганический препарат используется в рационах молочных кобыл неизвестной породы, по материалам которого невозможно установить норму ввода чистого селена на 1 гол. в сутки, уровня физиолого-биохимических процессов в организме, а также не выявлено его влияние на молочную продуктивность.
Описано [RU 2463058 C1, 10.10.2010], что введение в рацион коров весенне-летнего периода кормления минерального препарата, содержащего, мас./ч.: натрий хлористый 15,0, медь сернокислая 0,159, цинк сернокислый 2,047, кобальт сернокислый 0,0261, железо сернокислое 0,979, диаммонийфосфат 40,0, динатрийфосфат 60,0, цеойод 0,0098, ДАФС 25 0,005498, магния оксид 1,50, повышает удои молока, жирность молока, нормализует биохимический статус организма коров.
3
В [RU 2405376 C2, 10.12.2010] раскрыт способ повышения молочной продуктивности новотельных коров с использованием премикса «Стимул» в количестве 1,82 кг на 1 тонну кормовой массы (из расчета 100 г на 1 голову в сутки). Премикс включает витамины, микроэлементы, селен в виде селенсодержащего препарата ДАФС-25, калий йодистый, кормовую серу, глицин и наполнитель, в качестве которого используют тыквенно-расторопшевый жмых (1:1), а компоненты взяты в следующем соотношении: витамины А (ретинол) - 1500 тыс. МЕ; D (холикальцеферол) - 150 тыс. МЕ; Е (токоферол) - 1200 мг; марганец сернокислый пятиводный - 4090,5 мг; цинк сернокислый семиводный - 8035,2 мг; медь сернокислая пятиводная - 1144 мг; калий йодистый - 159,4 мг; кобальт хлористый шестиводный - 362,8 мг; ДАФС-25 (органический селен) - 53,34 мг; сера кормовая - 80 г; глицин - 20 г; наполнитель - тыквенно-расторопшевый жмых (1:1) - до 1000 г.
Предложены [RU2452494 C1, 10.06.2012] эффективное повышение молочной продуктивности, жирности молока, антиоксидантного статуса, иммунитета, профилактика нарушения обмена веществ у коров путем введения в рацион коров минерального препарата «ФармасольР(С)-З», содержащего, мас.ч.: натрий хлористый 20,0, медь сернокислая 0,259, цинк сернокислый 2,142, марганец сернокислый 0,206, кобальт сернокислый 0,027, железо сернокислое 0,323, дикальцийфосфат 10,0, диаммонийфосфат 40,0, динатрийфосфат 60,0, цеойод 0,0103, ДАФС 25 0,007784, магния оксид 8,0. Изобретение обеспечивает повышение удоев молока на 24,0%, жирности молока на 7,35%.
3
3
4
7
11
Описан [RU2610453 C1, 13.02.2017] способ профилактики нарушения обмена веществ высокопродуктивных и новотельных коров, позволяющий повысить их продуктивность за счет включения в рацион из расчета 100 г на голову в сутки премикса для молочных коров, содержащего витамины биокаталитического и индуктивного действия, микроэлементы, в том числе селен в виде селеносодержащего препарата ДАФС-25 и йод в виде йодосодержащего препарата Йоддар, в следующем соотношении: витамины: А (ретинол) - 500 тыс. ME, D (холекальциферол) - 150 тыс. ME, Е (токоферол) - 1200 мг, В (ниацин) - 100 г, В (холин) - 300 г, В (биотин) - 200 мг, В (левокарнитин) - 50 г; микроэлементы: марганец - 2200 мг, медь - 650 мг, цинк - 3500 мг, кобальт - 250 мг, йод в виде Йоддара-10% - 2000 мг, селен в виде ДАФС-25 - 100 мг; наполнитель (отруби) - до 1000 г. В результате скармливания предлагаемого премикса через три недели после отела содержание общего белка и альбуминовой фракции в крови коров опытной группы было выше на 6,5 и 8,7% соответственно по отношению к животным, потреблявшим стандартный премикс, уровень содержания общих липидов в крови животных опытной группы был ниже в 1,6 раза, содержание кетоновых тел - ниже на 21,3%, а глюкозы - выше на 14,8%. Повышение среднесуточных удоев за 3 месяца лактации составило 14,4%.
Общим недостатком вышеуказанных изобретений является низкая концентрация органического селена в суточной норме премикса или минеральной добавке (1,35-2,50 мг/гол.), которая не может быть высокоэффективной дозой для лактирующих коров. Кроме того, источники микроэлементов, в основном, представлены сернокислыми солями, которые гигроскопичны и обладают высокими реакционными свойствами, приводящими к снижению стабильности биологической активности веществ.
40
56
Известно, что парентеральное применение коровам антиоксидантного препарата «Карсел», содержащего 0,18% β-каротина, бета-каротин (СН) и ДАФС-25 (диацетофенонил-селенид, содержащий 25% органически-связанного селена) [Влияние использования антиоксидантных β-каротинсодержащих препаратов на молочную продуктивность коров / С.П. Лифанова, В.Е. Улитько, О.А. Десятов // Вестник Ульяновской государственной сельскохозяйственной академии. - 2015. - №4. - С. 164-167] усиливает метаболические процессы в их организме, в том числе и в молочной железе, что проявляется в увеличении содержания в молоке жира, белка и СОМО и в совокупности улучшает показатель его сыропригодности. Как уже говорилось, использование препарата путем ежедневных инъекций является технологически трудоемким и физически стрессовым.
Известны ветеринарные препараты, содержащие селен, предназначенные для восполнения дефицита селена в организме: Селенвет, Селефер, Неоселенвет, Селевет, Селекар. Недостатком также является способ введения препаратов, представляющих собой инъекционные растворы для внутримышечного и подкожного введения.
В природе селен встречается в виде соединения с аминокислотами, такими, как селенометионин, который оптимально биодоступен для животного. Он аккумулируется в плоти животного - в мышцах, молоке и пр. Специфические штаммы дрожжей способны адсорбировать минеральный селен и конвертировать его в селенообогащенные аминокислоты при соблюдении правильных условий ферментации. Селенообогащенные дрожжи являются прекрасным источником биодоступного селена для животных. Их недостатком является широкая вариабельность количества поглощенного селена, что создает трудности с точным дозированием препарата и мониторингом эффективности профилактики и лечения.
Из уровня техники известно применение кормовой добавки Сел-Плекс (Sel-Plex), производитель Оллтек (Alltech), США, представляющей собой источник органического селена (более 99% селена содержится в органической форме), вырабатываемого специальными штаммами дрожжей, которые выращиваются в контролируемых условиях на среде, обогащенной селеном и с пониженным содержанием серы, благодаря чему дрожжи используют селен вместо серы в процессе формирования клеточных компонентов, включая белки. Препарат содержит селен преимущественно в составе аминокислот селенометионина (50%) и селеноцистина (25%), а также в составе других органических соединений, общее содержание селена 1000 мг/кг, выпускают в форме порошка. Препарат повышает антиокислительный статус организма и жизнеспособность молодняка, поддерживает и увеличивает подвижность и оплодотворяющую способность спермиев, улучшает продуктивность при наличии микотоксинов в кормах. Препарат используют в производстве комбикормов и премиксов как источник Se вместо селенита натрия и других неорганических соединений этого элемента для всех видов животных. Описано, в том числе, влияние указанного препарата на повышение молочной продуктивности дойных коров.
В [RU 2522352 С2, 10.07.2014] предложен способ кормления коров для повышения биологической полноценности и качества молока, включающий введение в рацион животных с седьмого дня после родов в течение 90 дней один раз в день с комбикормом в дозе по 3 г каждого препарата на голову: селеносодержащей добавки Сел-Плекс (Sel-Plex) и цинксодержащей добавки Биоплекс Цинк (Bioplex-Zinc), что повышает общую продуктивность в среднем на 8,5%, молочный жир - на 12,3%.
Нормы скармливания Сел-Плекса в количестве 100-200 г/т корма приведены в физической массе препарата. Если их перевести на действующее вещество, то эта норма составит всего 0,1-0,2 мг/кг сухого корма. Оптимальная норма скармливания Сел-Плекса составляет 3-5 г/гол. лактирующих коров или в чистом виде суммарно (Сел-Плекс + селен с кормом) не более 0,5 мг/кг сухого вещества рациона.
Недостатком данного способа с использованием препаратов, содержащих селен и цинк, заключается в том, что он предназначен для коррекции воспроизводительных качеств и снижения соматических клеток в молоке новотельных коров. Однако рационы кормления новотельных коров в данном случае не сбалансированы по другим жизненно важным микроэлементам.
3
Известен способ коррекции элементного статуса молочных коров при использовании свежей барды [RU 2694654 С1, 16.07.2019], характеризующийся тем, что в основной рацион, включающий свежую барду, вводят добавку в количестве 300 г/гол., которая состоит из компонентов в следующем соотношении, г: кормового мела - 135, биокомплекса цинка - 2,5, биокомплекса марганца - 2,4, препарата Сел-Плекс-2300 (содержание селена в составе селеносодержащих инактивированных дрожжей Saccharomyces cerevisiae - не менее 2300 мг/кг, также содержит наполнитель - инактивированные дрожжи культуры Saccharomyces cerevisiae - до 1 кг; производитель: «Оллтек фландэрз БВБА», Бельгия) - 2,3 и отрубей пшеничных - 158,0. При равном валовом удое в начале эксперимента к 15 суткам разница составила 49,9 кг или 18,6% (Р≤0,001), к 30 - 92,1 кг или 35,9% (Р≤0,001). Оценка качественных показателей молока, полученного от опытных животных показала повышение на 30 сутки эксперимента общего белка - на 0,28%, и СОМО - на 0,3%, благодаря этому повысилась и плотность молока - на 1,96 кг/м, по сравнению с контролем. Валовой надой коров опытной группы, получавших кормовую добавку, был выше по сравнению с контролем в пересчете на 1% молоко на 242,4 кг или 22,2%. Недостатком данного изобретения является то, что коррекция минерального питания лактирующих коров, без учета их содержания в компонентах рациона, только на основе их содержания в шерстяном покрове является косвенным, а не научно-обоснованным и рекомендованным методом балансирования рационов. Более точной методикой выявления дефицита макро- и микроэлементов принято считать на основе проведения физиологических (балансовых) опытов. Кроме того, по результатам проведенного опыта невозможно выявить физиологическую роль отдельного селена в повышении молочной продуктивности коров.
Из [Использование Сел-Плекс в комплексе с витамином Е для получения молока повышенным содержанием селена / Д.В. Портнов, Ш.К. Шакиров // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2008. - Т. 195. - С. 265-269] известен способ повышения молочной продуктивности и качества молока и молочных продуктов с высокими функциональными характеристиками по содержанию Se, витамина E и аминокислот, который заключается во введении при производстве комбикорма для новотельных коров разработанных авторами данного изобретения различных лечебно-профилактических премиксов с содержанием в комплексе препаратов антиоксидантного действия - органического селена «Сел-Плекс» и витамина E, в различных дозах и соотношениях. Введение в рацион лактирующим коровам дозы указанных препаратов в количестве 1% от массы корма или из расчета 80 г/гол. в сутки способствует усилению метаболических процессов в организме, в т.ч. и в молочной железе. При комплексном введении в рационы кормления коров Сел-Плекса и витамина E в дозах соответственно 0,3 и 23,0 мг/кг и 0,6 и 23,0 мг/кг в сухом веществе (СВ) корма повышение молочной продуктивности составило 4,9 и 2,9 %; концентрация селена в сыворотке крови увеличилась на 21,5 и 30,5 %, в молоке - на 42,8 и 37,5 %; в молочных продуктах - на 18,6-58,8 %; витамина E в молоке на 53,1 и 68,7 % и в молочных продуктах - на 34,6-85,7 % по сравнению с контрольными животными, получавшими органический селен и витамин E в дозах соответственно 0,3 и 11,5 мг/кг СВ корма. Недостатками решения, описанного в указанном источнике, являются: не установлена рекомендуемая норма ввода Сел-Плекса в состав премикса, т.к. его дозы по группам коров имеют двукратную величину при различных соотношениях с витаминов E; премиксы испытывались в рационах коров татарстанского типа холмогорской породы со среднесуточным удоем 22,0-24,0 кг без учета генотипа селенозависимых генов, кодирующих активизацию антиоксидантной защиты организма.
К общим недостаткам перечисленных способов скармливания селеносодержащих препаратов в рационах лактирующих животных относится также, что заявленные кормовые добавки использовались в популяциях подопытных животных без учета их генотипа и фенотипа, в отсутствии применения методов нутригеномных исследований для понимания на молекулярно-генетическом уровне влияния применяемых антиоксидантов на здоровье и продуктивность животных через изменение экспрессии генов.
Вопрос об использовании нутригеномики как нового инструмента для изучения влияния питания на экспрессию генов, перспективах его использования для достижения более высокой продуктивности, улучшения здоровья и сохранности животных, является актуальным уже более десятилетия, применение методов нутригеномных исследований в животноводстве дает понимание на молекулярном уровне, каково влияние обычных питательных веществ рациона на здоровье и продуктивность животных через изменение экспрессии генов [Ли В. Нутригеномика - новое направление науки // Аграрные известия. - 2011. - N2(54). - С. 54-55]. Ведутся исследования полиморфизма генов-маркеров экономически важных признаков различных видов сельскохозяйственных животных с их продуктивными и другими свойствами, например, [Studying the association of polymorphic variants of LEP, TG5, CSN3, LGB genes with signs of dairy productivity of cattle / F.F. Zinnatov, F.F. Zinnatova, A.H. Volkov, et al. // International Journal of Research in Pharmaceutical Sciences. 2020. Т. 11. No2. P. 1428-1432; Характеристика быков-производителей с разными генотипами диацилглицерол-о-ацилтрансферазы по происхождению / С.В. Тюлькин, Л.Р. Загидуллин, Т.М. Ахметов, и др. // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2017. - Т. 230. - №2. - С. 155-158; Молекулярная диагностика полиморфизма генов ESR и PRLR, влияющих на репродуктивные качества свиней / И.И. Гиниятуллин, Л.А. Рахматов, Т.М. Ахметов и др. // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2016. - Т. 225. - № 1. - С. 107-108; RU2600889 C1, 27.10.2016; Юльметьева Ю.Р., Шакиров Ш.К. / Ассоциативные связи гена тиреоглобулина с продуктивным долголетием молочного скота // Молочное и мясное скотоводство. - 2020. - № 1. - С. 14-19; Гайнутдинова Э.Р., Сафина Н.Ю., Шакиров Ш.К. / Воспроизводительные качества голштинского скота с разными генотипами гена глутатионпероксидаза-1 (GPX-1) // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2020. - Т. 244. - № 4. - С. 65-68.].
Изучена и неоднократно описана тесная взаимосвязь молочной продуктивности и физико-химических показателей молока крупного рогатого скота различных пород с особенностями полиморфизма генов, несущих в себе хозяйственно полезные признаки: каппа-казеина (CSN3), бета-лактоглобулина (BLG), пролактина (PRL), соматотропина (GH), тиреоглобулина (TG5) при сбалансированном научно обоснованном кормлении [Ярлыков Н.Г. / Влияние генотипа каппа-казеина на молочную продуктивность и сыропригодность молока коров ярославской породы. // дисс. к.с-х.н. - 2010. -125 с.; Шакиров Ш.К., Крупин Е.О. / Нутригеномная зависимость продуктивности и качества молока коров // Молочное и мясное скотоводство. - № 3. - 2015. - С.2-4; Егорашина Е.В., Тамарова Р.В. / Оценка по молочной продуктивности коров разных пород с использованием генетических маркеров // Вестник АПК Верхневолжья. - №1 (37). - 2017. - с.52-58; Крупин Е.О. / Нутригеномика: раскрытие генетической обусловленной зависимости между качеством молока и продуктивностью животных. // Эффективное животноводство. - № 9 (139). - 2017. - С. 56-58; Ковалюк Н.В., Сацук В.Ф., Мачульская Е.В., Шахназарова Ю.Ю. / Перспективы использования полиморфизма гена β-казеина в селекции крупного рогатого скота молочного направления продуктивности // Молочное и мясное скотоводство. - № 5. - 2018. - С.14-16; Шевцова А.А., Климов Е.А., Ковальчук С.Н. / Обзор вариабельности генов, связанных с молочной продуктивностью крупного рогатого скота // Международный журнал прикладных и фундаментальных исследований. - 2018. - № 11-1. - С. 194-200; Бигаева А.В. Гильманов Х.Х., Тюлькин С.В. и др. / Сыропригодность молока коров с разными генотипами каппаказеина // Сыроделие и маслоделие. - 2019. - № 6. - С. 26-27; Бигаева А.В., Гильманов Х.Х., Тюлькин С.В и др. / Термоустойчивость молока коров с разными генотипами каппа-казеина // Пищевая промышленность. - 2019. - № 10. - С. 59-61; Тарасова Е.И., Нотова С.В. / Гены-маркеры продуктивных характеристик молочного скота (обзор) // Животноводство и кормопроизводство. - 2020. - Т. 103. - № 3. - С. 58-80; Сафина Н.Ю., Гайнутдинова Э.Р., Зиннатова Ф.Ф., Шакиров Ш.К., Шарафутдинов Г.С. // Влияние комплексных генотипов генов каппа-казеин (CSN3) и 0 бета-лактоглобулин (LGB) на молочную продуктивность голштинского скота // Аграрный научный журнал. - 2020. - № 5. - С. 64-67].
Значительно меньше изучена связь молочной продуктивности и качества молока крупного рогатого скота с полиморфизмом других генов [Сафина Н.Ю. / Характеристика биологической эффективности и полноценности молочной продуктивности голштинских коров-первотелок с разными генотипами лептина (LEP) // Вестник Курской государственной сельскохозяйственной академии. - 2018. - № 4. - С.131-133; Сафина Н.Ю., Юльметьева Ю.Р., Зиннатова Ф.Ф., Шакиров Ш.К., Ахметов Т.М., Гайнутдинова Э.Р. / Характеристика молочной продуктивности и качественного состава молока голштинского скота с разными генотипами гена лактоферрин (LTF) // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2018. - Т. 236. - № 4. - С.164-169; Сафина Н.Ю., Гилемханов И.Ю., Зиннатова Ф.Ф., Шакиров Ш.К. // Характеристика молочной продуктивности коров-первотелок с разными генотипами соматотропина (GH) // Вестник Казанского государственного аграрного университета. - 2019. - Т. 14. - № 3 (54). - С.58-61; Сафина Н.Ю., Шакиров Ш.К., Фаттахова З.Ф., Гайнутдинова Э.Р. / Биохимические показатели липидного обмена и качественный состав молока коров с разными генотипами Стеарил-КоА Десатуразы (SCD1) // Ветеринария, Зоотехния и биотехнология. - 2020. - № 3. - С. 94-100; Сафина Н.Ю., Шакиров Ш.К., Гайнутдинова Э.Р., Фаттахова З.Ф. / Полиморфизм гена параоксоназа-1 (PON1) и его ассоциации с хозяйственно-полезными признаками голштинского скота // Вестник Казанского государственного аграрного университета. - 2020. - Т. 15. - № 3 (59). - С. 43-48].
Активность процессов окислительного стресса разрушается системой антиоксидантной защиты организма, одним из главных факторов которой является селенозависимый фермент глутатионпероксидаза-1 (GPX-1), участвующий в этом процессе [Influence of management and genetic merit for milk yield on the oxidative status of plasma in heifers / N. Wullepit, K. Raes, B. Beerda, R.F. Veerkamp, D. Fremaut, S. De Smet // Livestock Science. - 2009. - № 123. - P. 276-282. doi 10.1016/j.livsci.2008.11.013]. Установлено, что наивысший уровень его концентрации в крови дойных коров достигается в начале лактации [Selenium concentration and glutathione peroxidase (GSH-Px) activity in serum of cows at different stages of lactation / B. Pilarczyk, D. Jankowiak, A. Tomza-Marciniak, R. Pilarczyk, P. Sablik, R. Drozd, A. Tylkowska, M. Skólmowska // Biological Trace Element Research. - 2012. - № 147. - P. 91-96. doi 10.1007/s12011-011-9271-y]. При этом восстановительная способность антиоксидантной системы высокопродуктивных новотельных коров может оказаться недостаточной, особенно при дефиците селена в рационе. Поэтому в период интенсивной лактации необходимо уделять особое внимание удовлетворению потребности коров в селене и других кормовых компонентах, таких, как цинк, витамины, которые прямо или косвенно усиливают антиоксидантные системы, метаболизм ДНК [Nutrition and the developing brain: nutrient priorities and measurement / M.K. Georgieff // The American Journal of Clinical Nutrition. - 2007. - № 85. - P. 614-620].
В настоящее время доказано, что селен способен влиять на экспрессию генов, то есть «включать» (активировать) или «выключать» (дезактивировать) 154 гена и влиять на метаболический профиль организма. Причем влияние селена на экспрессию генов определяется его концентрацией, а также зависит от формы элемента, т.е. селенит натрия и органический селен действуют по-разному [Революционная наука нутригеномика / В. Фисинин, П. Сурай, Т. Папазян // Птицеводство. - 2006. -№ 6. - С. 21-23]. В ранее опубликованной нашей работе [Эффективность применения в рационах высокопродуктивных коров различных форм и доз селена / Д.В. Портнов, Ш.К. Шакиров // Материалы Всероссийской научно-практической конференции «Научное обеспечение животноводства и кормопроизводства». - Саранск. - 2008. - С. 86-88] было установлено влияние различных доз органической и неорганической формы селена в рационах коров на концентрацию селена в крови, молоке и молочных продуктах, метаболический профиль организма и его продуктивное действие. Другими авторами [Nutrigenetics, Nutrigenomics, and Selenium / L.R. Ferguson, N. Karunasinghe // Frontiers in Genetics. - 2011. - Vol 2 (15). - P. 1-10. doi: 10.3389/fgene.2011.00015. eCollection 2011] также доказано, что селен на разных уровнях глубоко влияет на экспрессию генов и метаболический профиль организма.
Фермент глутатионпероксидаза-1 (GPX-1) достаточно активно изучается в питании человека с точки зрения мощного инструмента в области нутригеномики для оценки воздействия статуса селена на экспрессию генов, их влияние на метаболизм и физиологические реакции организма. Однако аналогичных исследований и разработок технологий по применению в кормлении высокопродуктивных коров различных генотипов гена GPX-1 в доступной отечественной и зарубежной литературе нами не обнаружено.
В связи с вышесказанным актуальным является изыскание новых способов, снижающих свободно-радикальное окисление, способствующих активации эндогенной антиоксидантной системы защиты организма, нормализации физиологи-биохимического статуса и реализации генетического потенциала продуктивности у высокопродуктивных коров в стрессогенных условиях промышленного животноводства с учетом нового научно-практического подхода в вопросах нутригеномики.
Таким образом технологической проблемой, на решение которой направлено изобретение, является расширение арсенала способов повышения молочной продуктивности и качества молока высокопродуктивных коров в первый период лактации, оптимизирующих физиолого-биохимические процессы в организме, повышающих антиоксидантную защиту организма, снижающих риск окислительного стресса за счет активизации адаптационных механизмов, регулирующих метаболические процессы липидного и белкового обмена в организме, что способствует профилактике и оптимизации нарушений обмена веществ у высокопродуктивных коров и влияет на повышение молочной продуктивности и качества молока.
Технический результат заключается в активации экспрессии эндогенного фермента (гена) глутатионпероксидаза-1, селективно повышающей его антиоксидантную роль в организме коров голштинской породы, что приводит как к предупреждению возникновения нарушений обмена веществ в организме животных, вызываемого антиоксидантным стрессом, так и к корректировке и оптимизации обмена веществ, и обеспечивает высокую молочную продуктивность и качество молока высокопродуктивных коров в первый период лактации.
Техническая проблема решается, и указанный технический результат достигается заявляемым способом повышения молочной продуктивности дойных коров, включающим генотипирование коров голштинской породы по локусу гена GPX-1, идентификацию животных с генотипами СС, ТС и ТТ, и введение в рационы кормления животных преимущественно с генотипами CC и TC, у которых значительно сильнее проявляется экспрессия гена GPX-1, кодирующего молочную продуктивность и качество молока, кормовой антиоксидантной добавки - препарата Сел-Плекс. Указанную антиоксидантную добавку в рационах кормления животных вводят дополнительно в дозе 5 г/гол. в сутки, что соответствует 0,21 мг/кг сухого вещества, таким образом суммарная доза селена с учетом кормового фона и неорганического селена, содержащегося в составе премикса, составляет 0,42 мг/кг сухого вещества рациона в целом. Это согласуется со спецификацией на продукцию фирмы ALLTECH Inc. (код продукции 09.1041.067.175.) от 3 марта 2010 г., где максимальный уровень общего селена составляет 0,5 мг/кг (добавки Сел-Плекса + селен в окружающей среде) в конечном сухом корме при влажности 12%. Добавку используют в течение первого периода лактации, которое по технологии доения длится до 100 дней.
Коммерческий препарат Сел-Плекс производства фирмы ALLTECH Inc. представляет собой однородный серо-коричневый порошок, полученный микробиологическим путем из дрожжевой культуры Saccharomyces cerevisiae (1026). Препарат содержит селен в составе аминокислот: селенометионина (50%), селеноцистина (15%), селеноцистеина (15%), селеноцистатиона (10%) и метилселеноцистеина (10%). Общее содержание селена в этом препарате составляет минимум 1000 мг/кг. Продукт безопасен. Используется в качестве кормовой добавки в рационах сельскохозяйственных животных и соответствует ТУ СТО 45867334-003-2011.
Предлагаемая доза селена 0,42 мг/кг сухого вещества рациона установлена, как оптимальная, по результатам ранее проведенных нами многолетних исследований [Портнов Д.В. Влияние селенсодержащих препаратов на физиологическое состояние, обмен веществ и продуктивность коров : автореф. дис. канд. биол. наук : 03.00.13 / Портнов Денис Владимирович // Казань, 2009. - 20 с.; Эффективность применения в рационах высокопродуктивных коров различных форм и доз селена / Д.В. Портнов, Ш.К. Шакиров // Материалы Всероссийской научно-практической конференции «Научное обеспечение животноводства и кормопроизводства». - Саранск. - 2008. - С. 86-88].
Заявителем не выявлено в предшествующем уровне техники влияние препарата Сел-Плекс на достижение указанного технического результата - селективную активацию экспрессии гена GPX-1, значительно сильнее проявляющуюся у высокопродуктивных коров с генотипами CC и TC в первый период лактации, повышающую его антиоксидантную роль в организме, оптимизирующую обмен веществ, повышающую молочную продуктивность и качество молока, что достигается заявляемым способом. Вышесказанное обеспечивает, на взгляд заявителя, предлагаемому техническому решению соответствие установленным законодательством критериям «новизна» и «изобретательский уровень». Способ может широко использоваться в молочном скотоводстве, потому соответствует критерию «промышленная применимость».
Способ осуществляют следующим образом.
Научно-хозяйственный опыт по выявлению влияния скармливания селеносодержащего препарата Сел-Плекс в разрезе различных генотипов гена GPX-1 на обменные процессы в организме, молочную продуктивность и качественный состав молока был проведен 2019-2020 гг. в СХПК «Племенной завод им. Ленина» Атнинского района Республики Татарстан на 100 дойных коровах голштинской породы (год включения в реестр допущенных к использованию селекционных достижений - 1993, оригинатор/патентообладатель ОАО «Головной центр по воспроизводству сельскохозяйственных животных» (142143, Московская область, Подольский р-н, п. Быково), требования по породе составляют: удой - 5500 кг молока за 305 дней лактации, жир - 3,6%, белок - 3,0% [данные из информационно-аналитической системы «СЕЛЭКС. Молочный скот w.6.1.0.0.» (АРМ Плинор, Россия)]; возраст 3-4 года (2-3 полные лактации).
2
Осуществляют идентификацию генотипов по локусу гена GPX-1. Полиморфизм гена GPX-1 выявляли по методу ПЦР-ПДРФ с применением следующих олигонуклеотидных праймеров (СибЭнзим, Россия): 1) F: 5' - GAAAAGTGCGAGGTGAATGG -3'; 2) R: 5' - GCTGTGGTCTGGGAAAGG -3' [Singh, S. Molecular and Biochemical Evaluation of Indian Draft Breeds of Cattle (Bos indicus) / S. Singh, S. Sharma, J.S. Arora [et al.] // Biochem Genet. - 2011. - № 49. - P. 242-250. DOI:10.1007/s10528- 010-9402-8]. Амплификацию проводили в оптимальных температурно-временных режимах на аппаратах «T-100 Thermal Cycler» и «My Cycler» (Bio-Rad, США). Генотипы животных по локусу гена GPX-1 определяли путем электрофоретического анализа длин рестрикционных фрагментов после обработки ПЦРпродуктов эндонуклеазой Bsc4 I (Bacillus schlegelii 4), BSA и буфера W (СибЭнзим, Россия) в течение 16 часов при 55°C [Сафина, Н.Ю. ДНК-тестирование полиморфизма гена GPX-1 крупного рогатого скота / Н.Ю. Сафина, Ш.К. Шакиров, Э.Р. Гайнутдинова, З.Ф. Фаттахова // Молочное и мясное скотоводство. - 2020. - № 7. - С. 37-39. DOI 10.33943/MMS.2020.75.68.009]. Выявленный полиморфизм визуализирован и документирован в системе «Gel&Doc» (Bio-Rad, США). Частоту встречаемости аллельных вариантов и генотипов рассчитывают согласно методическим рекомендациям [Merkureva E.K., Shangin-Berezovskiy G.N. Genetika s osnovami biometrii. [Genetics with the basics of biometrics]. - M.: Kolos, - 1983. P.400]. Значимость вариабельности между ожидаемым и наблюдаемым распределением генотипов гена GPX-1 тестировали методом хи-квадрат Пирсона (χ) и на соответствие закону Харди-Вайнберга генетического равновесия в популяции.
В изученной популяции были идентифицированы коровы с генотипами СС (17 голов), ТС (65 голов) и ТТ (18 голов).
Из животных в соответствии с установленными генотипами формируют группы-аналоги по возрасту, живой массе, продолжительности лактации и уровню продуктивности [Овсянников, А.И. Основы опытного дела в животноводстве / А. И. Овсянников. - Москва: Колос, 1976. - 303 с.] - опытные и контрольные, всего 6 групп (с генотипом CC: контрольная группа 8 голов, опытная - 9 голов, с генотипом TC: контрольная группа 33 головы, опытная - 32 головы, с генотипом TT контрольная группа - 9 голов, опытная - 9 голов), и проводят исследования ассоциаций с хозяйственно-полезными признаками крупного рогатого скота.
В контрольных группах дойные коровы получали сбалансированный основной рацион (ОР) без испытуемого препарата Сел-Плекс. При этом общий уровень селена составил 0,21 мг/кг сухого вещества рациона за счет введения в составе премикса селенита натрия. Подопытные коровы опытных групп получали в составе комбикорма дополнительно к основному рациону, имеющему уровень селена 0,21 мг/кг сухого вещества рациона, селеноорганический препарат Сел-Плекс в дозе 5 г/гол., который смешивали с монокормом основного рациона до суммарного уровня селена 0,42 мг/кг сухого вещества рациона. Суточную дозу препарата Сел-Плекс скармливают за 2 раза - в утреннее и вечернее кормление.
Опыт проводят 60 дней, за период опыта рационы коров подготавливают и скармливают в виде полноценных кормосмесей (монокорма), которые имели одинаковую поедаемость. Кормовые рационы, их питательная ценность соответствовали нормам ВИЖа [Нормы и рационы кормления сельскохозяйственных животных. Справочное пособие. 3-е издание переработанное и дополненное / Под ред. А.П. Калашникова, В.И. Фисинина, В.В. Щеглова, Н.И. Клейменова. - Москва. - 2003. - 456 с.] и представлены в таблице 1.
Биохимические исследования сыворотки крови, отобранной из хвостовой вены в утренние часы до кормления, проводят на фоне скармливания препарата через 30 дней после начала опыта на полуавтоматическом биохимическом анализаторе «SINNOVA BS-3000M» (Китай) с использованием готового набора реагентов (ООО «Диакон-Вет», Россия) в соответствии с инструкцией производителя.
Динамику молочной продуктивности отслеживают ежедневно (суточный удой, кг) автоматически с помощью доильной системы DelPro, а качественного состава молока - ежедекадно (контрольные дойки, анализ по 10 показателям).

Анализ качественного состава молока проводят на оборудовании CombiFoss™ 7, MilkoScan™ 7 RM, Fossomatic™ 7. Для измерения используют молоко, отобранное во время контрольных доек, содержащее консервант Broad Spectrum Microtabs II.
Уровень достоверности различий определяют с использованием критерия t-Стьюдента.
Результаты проведенных за период опыта биохимических исследований сыворотки крови, по которым можно судить о степени метаболизма и прогнозируемом уровне молочной продуктивности животных, свидетельствуют о том, что полученные данные у коров различных групп находились в основном в пределах физиологических норм (Табл. 2).
Однако при сравнении показателей прослеживаются различия, как по группам, так и по генотипам животных. Так, если уровень общего белка в сыворотке крови коров контрольной и опытной групп в разрезе различных генотипов существенно не отличался и составил соответственно 86,3-87,4 г/л и 89,0-90,0 г/л, то альбуминовая фракция за этот период была максимальной в крови коров опытной группы с генотипом CC и составила 43,9 г/л или выше на 10,3% по сравнению с контрольным значением. У коров с генотипами TC и TT прирост этих показателей составил соответственно на 4,0 и 5,6%.
Во всех опытных группах коров за период опыта наблюдалось снижение в сыворотке крови мочевины на 0,43-0,70 ммоль/л или на 3,0-8,7% по сравнению с контролем, что свидетельствует об усилении использования протеина рациона, особенно у животных с генотипом CC. Снижение уровня мочевины в крови и молоке животных опытной группы с генотипом CC свидетельствует об усилении синтетической деятельности микроорганизмов, утилизирующих небелковый азот в рубце, что подтверждается повышением общего белка и альбуминовой фракции.
Общеизвестно, что содержание холистерола и триглицеридов в крови характеризуют интенсивность липидного обмена в организме. Исследованиями установлено, что уровень холистерола и триглицеридов в крови коров с генотипами CC и TC за период опыта был стабилен, тогда как у животных опытной группы с генотипом TT уровень холистерола снизился на 6,5%, а триглицеридов - повысился на 45,8% соответственно по сравнению с контролем. В то же время выявлено повышение в крови активности фермента липазы у коров опытных групп с генотипами CC и TC на 12,7 и 17,6% соответственно, что коррелирует с содержанием массовой доли жира в молоке у этих коров, при снижении этого фермента на 7,6% у коров опытной группы с генотипом TT по сравнению с контролем.
Концентрация глюкозы в крови коров во всех группах соответствовала физиологической норме и составила в пределах 2,20-2,70 ммоль/л. Однако в крови коров опытных групп с генотипами CC и TC происходило повышение ее концентрации на 14,1 и 8,0 % соответственно по сравнению с контрольными животными, а для коров опытной группы с генотипом TT наблюдалось снижение на 3%. Подтверждением этого процесса является существенное повышение (24,1%) активности амилолитического фермента амилазы в крови коров с генотипом CC.
Что касается активности ферментов аминотрансфераз в крови, то у коров опытных групп с генотипами TC и TT происходило снижение уровня АсАТ на 4,9 и 8,7%, и, наоборот, повышение АлАТ на 17,3 и 10,8% соответственно по сравнению с популяциями контрольных животных, при относительной стабильности показателей у коров с генотипом CC.
Повышение активности щелочной фосфатазы наблюдалось только в крови коров с генотипами CC и TT соответственно на 12,0 и 33,3% от контрольных значений.
Содержание таких макроэлементов в крови, как кальций и фосфор, у коров разных генотипов гена GPX-1 существенно не изменилось, хотя и наблюдалось повышение у коров опытных групп по кальцию на 7,1-8,1% и фосфору на 5,8-11,3% по сравнению с контролем.
По результатам контрольных доек за период опыта молочная продуктивность, за исключением коров опытной группы с генотипом СС гена GPX-1, существенно не изменилась (Табл. 3).
Так, если у коров опытной группы с генотипом CC среднесуточный удой повысился на 2,36 кг (7,6%), то с генотипами TC и TT на 0,68 кг (2,3%) и 0,05 кг (0,2%) соответственно. Однако, в пересчете на базисную жирность молока (3,4%) эти показатели возросли на 9,1%, 7,3 и 0,7%, в пользу коров с генотипами CC и TC. При этом затраты обменной энергии, ЧЭЛ и сырого протеина на единицу продукции снизились у коров опытных групп с генотипом CC на 8,3-8,4%, с генотипом TC - на 6,8-6,9% по сравнению с животными других групп.
Исследованиями качественных показателей молока в период проведения опыта установлено повышение массовой доли жира в молоке коров опытных групп с генотипами CC и TC, соответственно на 0,08 и 0,18 абс. % по сравнению с контролем (Табл. 4).
По содержанию массовой доли белка в молоке выявлено увеличение этого показателя у опытных коров с генотипами CC на 0,09 абс. % и TT на 0,04 абс. %.
Изменения в содержании массовой доли жира и белка в молоке коров разных генотипов гена GPX-1 отразились на суммарном выходе молочного жира и белка в сутки в целом. Максимальный выход жира и белка был установлен у коров опытной группы с генотипом CC и составил 2359,8 г, что превышает контрольный уровень на 210,9 г или 9,8%. У коров опытной группы с генотипом TC эта разница составила по сравнению с контролем 93,5 г или 4,5%.
В ходе исследований физико-химических свойств молока коров различных групп и генотипов гена GPX-1 не установлено статистически значимой разницы по показателям уровня pH, содержания лактозы и СОМО (Табл. 5).
За период опыта происходило незначительное повышение сухого вещества в молоке коров опытных групп на 0,09%, 0,11 и 0,05 %, по сравнению с контрольными значениями.
Что касается уровня мочевины в молоке, то этот показатель во всех группах с разными генотипами гена GPX-1 незначительно превышал нормативные показатели. Это, по-видимому, объясняется чрезмерной насыщенностью рационов кормовым протеином. Однако в молоке коров опытной группы с генотипом СС уровень мочевины имел тенденцию к снижению на 3,9% по сравнению с контрольными животными, что свидетельствует об эффективности использования кормового протеина.
Концентрация кетоновых тел (bHB и ацетон) в молоке подопытных животных была относительно стабильной и соответствовала физиологическим нормам. В то же время у коров всех опытных групп происходило снижение уровня ацетона в молоке животных с генотипом CC на 3,3%, TC - на 17,0%, TT - на 8,9% по сравнению с контролем. Что касается уровня соматических клеток в молоке, то эти показатели во всех опытных группах независимо от генотипа снизились на 14,0-31,0%. Это, по-видимому, объясняется только технологическими факторами.
Приведенные данные свидетельствуют о том, что введение препарата Сел-Плекс детализировано нормализует физиолого-биохимические процессы в организме, повышает молочную продуктивность и качество молока дойных коров голштинской породы в разрезе различных генотипов гена GPX-1 и позволяет рекомендовать использовать его в рационах высокопродуктивных коров с высоким генетическим потенциалом, особенно для коров с генотипами ТС и СС, у которых значительнее раскрывается генетический потенциал при введении в рацион препарата Сел-Плекс.
Заявляемый способ может широко использоваться в современном молочном скотоводстве, на предприятиях, производящих продукцию на специальных комбикормах, обогащенных биологическими или синтетическими антиоксидантами.