2-(1-(2-(2-ХЛОР-10Н-ФЕНОТИАЗИН-10-ИЛ)-2-ОКСОЭТИЛ)-5-МЕТИЛ-1Н-1,2,4-ТРИАЗОЛ-3-ИЛ)ФЕНОЛ, ОБЛАДАЮЩИЙ ГИПОТЕНЗИВНЫМ И АНТИАРИТМИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ
2-(1-(2-(2-CHLORO-10H-PHENOTHIAZIN-10-YL)-2-OXOETHYL)-5-METHYL-1H-1,2,4-TRIAZOL-3-YL)PHENOL, HAVING HYPOTENSIVE AND ANTIARRHYTHMIC ACTIVITY

Изобретение относится к новым производным в ряду фенотиазина, а именно к 2-(1-(2-(2-хлор-10H-фенотиазин-10-ил)-2-оксоэтил)-5-метил-1H-1,2,4-триазол-3-ил)фенолу формула I:
обладающим гипотензивным и антиаритмическим действиями при внутрибрюшинном введении вещества.
Большинство лекарственных веществ фенотиазинового ряда обладают нейролептическим, противогистаминным (дипразин), холинолитическим (динезин), седативным, противорвотным (тиэтилперазин), антиаритмическим (этмозин, этацизин) и коронарорасширяющим действием (нонахлазин) [1].
Известно, что производные фенотиазина проявляют высокую антиокислительную, антирадикальную, нейропротекторную и противоопухолевую активности [2], [3].
Наиболее близкими по структуре к соединению I является гидрохлорид 2-хлор-10-(3-диэтиламинопропионил)-фенотиазина (хлорацизин) II [4], обладающий коронарорасширяющим действием.
Техническим результатом изобретения является новое соединение в ряду фенотиазина, проявляющее гипотензивное и антиаритмическое действие, более эффективное, чем у известного антиаритмического препарата - этацизина.
Технический результат изобретения достигается соединением I - 2-(1-(2-(2-хлор-10H-фенотиазин-10-ил)-2-оксоэтил)-5-метил-1H-1,2,4-триазол-3-ил)фенолом, обладающим гипотензивным и антиаритмическим действием. В таблице 1 показано влияние соединения I и этацизина на уровень МЛЖД, ЧСС, + dP/dt, - dP/dt, dp/dt/PI, dp/dt/PD, КДД у нормотензивных бодрствующих крыс в процентах к исходному уровню в дозе 1 мг/кг, где p<0,05 по сравнению с исходными данными (по t - критерию Стьюдента для независимых рядов), n - количество животных в опыте. В таблице 2 и 3 приведена острая токсичность I и таблеток этацизина по 0,5 г соответственно (D - показатель разницы между количеством двух соседних доз, Z - показатель разницы между количеством погибших животных при использовании двух соседних доз).
Первая стадия синтеза вещества I заключается во взаимодействии перхлорта 2-метил-4-оксо-1,3-бензоксазиния III с гидразин-гидратом при нагревании в уксусной кислоте с образованием продукта IV. Реакция происходит путем рециклизации по ANRORC механизму [5] с первоначальной атакой аминогруппой второго положения оксазинового цикла.
Дальнейшее кипячение триазола IV в ацетоне в присутствии поташа с 2-хлор-10-(хлорацетил)-10H-фенотиазином V приводит к веществу I - вторая стадия:
Ниже приведены методики синтеза предлагаемого соединения.
Стадия 1. 2-(3-Метил-1H-1,2,4-триазол-5-ил)фенол IV. Получен при нагревании перхлората 2-метил-4-оксо-1,3-бензоксазиния с гидразин-гидратом в ледяной уксусной кислоте [5].
Стадия 2. 2-{1-[2-(2-Хлор-10H-фенотиазин-10-ил)-2-оксоэтил]-5-метил-1H-1,2,4-триазол-3-ил} фенол I. К раствору 1.75 г (10 ммоль) триазола IV в 15 мл ацетона прибавляют 5.52 г (40 ммоль) прокаленного поташа, кипятят 15 мин, охлаждают и прибавляют 3.1 г (10 ммоль) 2-хлор-10-(хлорацетил)-10H-фенотиазина V. Реакционную смесь кипятят 1.5 ч, разбавляют водой. Выделившийся бесцветный осадок отфильтровывают (3.59 г, 83%). Т. пл. 188-190°С.
Найдено, %: С 63,80; Н 3,40; Cl 8,50; N 12,60; S 7,10.
23
17
4
CHClNOS.
Вычислено, %: С 63,82; Н 3,93; Cl 8,21; N 12,95; S 7,40.
-1
ИК-спектр (вазелин, масло), см: 1710 (С=O); 1600 (С=С).
1
6
3
ушир
2
Спектр Н ЯМР (ацетон-d, J/Гц), δ, м.д: 2.50 (3Н, с, СН); 5.45 (2Н, Д, N-CH, J=5.3); 6.81-7.96 (11Н, м, аром. Н); 10.95(1Н, с, O-Н).
13
2
3
6
3
2
ap
ap
ap
ар
ap
ap
ap
ap
ap
ap
ap
ap
ap
ap
ap
триаз
триаз
ap
Спектр С ЯМР (ДМСО-d, J/Гц), δ, м.д: 11.24 (1C, к, СН, J=130.4), 50.38 (1C, т, СН, J=143.6), 113.74 (1C, т, C, J=7.02), 116.70 (1C, м, C), 119.21 (1C, м, C), 126.05 (1С, д, J=6.9), 126.81 (1C, м, C), 126.96 (2C, д, C, J=4.5), 127.46 (1C, м, C), 127.76 (2C, м, C), 128.17 (1C, д, C, J=8.4), 129.14 (1C, м, C), 130.65 (1C, д, C, J=5.0), 131.22 (1C, д, C, J=6.6), 131.85 (1C, д, C, J=8.9), 136.65 (1C, д, C, J=9.0), 138.34 (1C, с, C), 153.75 (1C, м, С, J=7.2 Гц, J=2.7), 156.09 т (1C, т, С=O, J=7.6), 158.35 (1C, д, С, J=4.5), 164.61 (1C, т, C, J=4.8).
50
Все скрининговые исследования проводились согласно Руководству по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ с определением LD [6].
Эксперименты проведены в соответствии со статьей 11-й Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации (1964), "Международными рекомендациями по проведению медико-биологических исследований с использованием животных" (1985) и Правилами лабораторной практики в Российской Федерации (приказ МЗ РФ №267 от 19.06.2003 г.).
Эксперимент начали с изучения влияния исследуемого соединения в разных дозах на кардиогемодинамику лабораторных животных: на артериальное давление и работу сердца нормотензивных бодрствующих крыс (В.П.Фисенко. // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М., 2004. - С.220-224).
50
50
50
50
Острую токсичность исследовали [определяли среднюю летальную (смертельную) дозу - LD] в опытах на мышах при внутрибрюшинном введении вещества предварительно суспендированного с твин-80, определяли средние летальные дозы (LD) [7], [8], [9]. Рассчитывали острую токсичность, соблюдая рекомендации государственного фармакологического комитета по изучению общетоксического действия биологически активных веществ [10]. В качестве препаратов сравнения с сопоставляемым соединением I был взят этацизин. Вещество I, как и этацизин, оказывает мягкий гипотензивный эффект, существенно не влияя на частоту сердечных сокращений (ЧСС) бодрствующих нормотензивных белых беспородных крыс. Выявлено, что в дозе 1 мг/кг (1/3000 от LD) изученное соединение I достоверно увеличивает скорость расслабления сердечной мышцы, показатель сократимости увеличивается, конечно - диастолическое давление достоверно уменьшается (табл.1). Препарат сравнения этацизин в дозе 0,002 мг/кг (1/3000 от LD) практически не влияет на показатели центральной гемодинамики: достоверно увеличивает показатель - dP/dt - скорость расслабления миокарда только на 5, 10, 15 мин; повышает показатель КДД, достоверно увеличивает показатель +dP/dt только на 45 и 60 мин эксперимента; не влияет на показатели dp/dt/PI - контрактильный индекс Верагута (КИВ) и dp/dt/PD - модифицированный индекс Верагута (табл.1).
Сопоставление результатов проведенных исследований по острой токсичности свидетельствует о том, что согласно табуляции классов токсичности [10], [11], [12] вещество I может быть отнесено по Hodge и Sterner и классификации К.К.Сидорова к 5 классу токсичности и является практически нетоксичным соединением, и это позволило обосновать целесообразность дальнейшего изучения его биологической активности (табл.2). Действительно, исходя из формулы:
,
100
50
(где n - количество животных в опыте, равное 12, LD - минимальная доза изучаемого вещества, которая приводит к 100% гибели всей группы животных), для таблеток этацизина по 0,5 г (50 мг) , следовательно, LD=55 мг/кг (табл.3). Для вещества I
Таким образом, результаты изучения кардиотропной активности показали, что вещество I обладает существенным преимуществом по сравнению с препаратом сравнения этацизином и после проведения клинических испытаний в медицинских учреждениях может быть использовано в качестве лекарственного средства, обладающего гипотензивным и антиаритмическим действием.
Источники информации
1. Большая медицинская энциклопедия [В 30-ти Т. АМН СССР]. Гл. ред. Б.В.Петровский. - 3-е изд. - М.: Советская энциклопедия. - Т.5. 1985, 560 с., М.Д.Машковский. // Лекарственные средства: пособие для врачей. М., 2005. С.356-367.
2. К. Fukuzumi, N. Ikeda, М. Egawa, J. Am. Oil Chem. Soc., 1976, No 53, pp.623.
3. S. Nagy, G. Argyclan, J. Molnar, М. Kawase, N. Motohashi, Anticancer Res., 1996, No 16, pp.1916.
4. М.Д.Машковский. // Лекарственные средства. М., 1972, с.368-369.
5. Г.Н.Дорофеенко, Ю.И.Рябухин, С.Б.Булгаревич, В.В.Межерицкий, О.Ю.Рябухина. // ЖОрХ, 1977, т.13, №11, с.2459-2460.
6. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. // Под ред. Фисенко В.П. и др.- М.: ИАА «Ремедиум», 2004. - С.220-224.
7. М.П.Беленький. // Элементы количественной оценки фармакологического эффекта. Л., 1963, с.149.
8. Методические рекомендации по изучению общетоксического действия фармакологических средств. Утв. 25.12.97. // Вести, фармакоп.комитета. - 1998. - №1. - С.27-32.
9. И.В.Саноцкий. // Методы определения токсичности и опасности химических веществ. М., 1970, с.343.
10. К.К.Сидоров, К.К. Методы определения острой токсичности и опасности химических веществ. (Токсикология). / К.К.Сидоров. - М.: Медицина, 1970, 171 с.
11. Измеров Н.Ф. Параметры токсикометрии промышленных ядов при однократном воздействии. / Н.Ф.Измеров, И.В.Саноцкий, К.К.Сидоров. - М.: Медицина, 1977. - 197 с.
12. Hodge H.C., Sterner L.H., Am. industr. Hyg, Ass. Quart., 1943, 10, 4, 93.
Таблица 1
Влияние I и этацизина на уровень МЛЖД, ЧСС, +dP/dt, -dP/dt, dp/dt/PI, dp/dt/PD, КДД у нормотензивных бодрствующих крыс в процентах к исходному уровню в дозе 1 мг/кг (М± m, n=6, Δ%)
Вещество
Исходное МЛЖД, мм рт.ст.
Через 5 мин
Через 10 мин
Через 15 мин
Через 30 мин
Через 45 мин
Через 60 мин
Через 90 мин
Этацизин
120,6±12,1
-2,4±2,3
-0,3±1,5
-1,5±2,2
-0,1±2,1
1,0±1,0
0,0±1,2
1,6±1,1
I
144,1±8,4
-2,2±2,4
-4,6±2,7
-5,5±2,8
-7,8±4,2
-9,3±4,2*
-7,9±2,7*
-5,8±1,6*
Исходное ЧСС, уд./мин
Этацизин
376,4±18,9
-1,8±1,1
-0,6±0,8
-0,3±0,8
-0,2±0,4
-0,4±0,5
-1,0±0,5
-0,2±0,7
I
408,3±11,1
1,3±1,4
-2,8±5,6
-4,8±6,1
-0,5±7,4
-3,3±6,6
0,8±5,1
2,5±4,7
Исходное +dP/dt, мм рт.ст./сек
Этацизин
9776,2±2475,4
2,2±5,9
7,8±5,6
5,9±6,0
7,8±5,2
10,5±3,5*
9,0±4,4*
2,2±7,2
I
10872/7±1118,8
-4,5±6,3
-5,4±6,9
-9,5±6,9
-12,2±8,б
-11,5±7,5
-4,9±3,8
-3,5±1,7
Исходное -dP/dt, мм рт.ст./сек
Этацизин
-6560,5d±1468,4
10,6±2,2*
8,3±1,9*
9,6±2,4*
7,3±3,5
5,3±3,8
7,0±3,3
5,7±2,6
I
-7962,4±1031,7
9,1±3,3*
10,5±3,7*
12,1±3,9*
21,1±4,8*
21,0±8,3*
17,8±7,6*
13,4±4,6*
Продолжение таблицы 1
Исходное dp/dt/PI, 1/с
Этацизин
209,4±25,2
-0,6±0,8
-1,1±1,9
-2,2±1,3
-1,7±1,8
0,8±2,4
0,2±1,7
1,3±1,9
I
169,7±14,8
-2,6±3,9
3,3±5,4
0,3±4,6
4,1±5,2
4,1±7,0
8,3±3,1*
11,7±5,7
Исходное dp/dt/PD, 1/с
Этацизин
229,6±20,9
-0,1±0,7
1,9±0,9
-0,1±0,9
0,7±1,4
-1,2±1,4
-0,6±1,7
-0,6=1,4
I
204,6±16,4
-3,4±4,3
-2,8±5,9
-4,0±6,8
-1,3±8,5
-5,2±1,4
-3,0±6,4
-0,2±4,7
Исходное КДД мм рт.ст.
Этацизин
8,6±2,1
16,8±16,9
17,2±17,2
10,3±1,4
12,4±10,4
-1,8±5,6
6,9±2,5*
12,9±3,9*
I
10,6±2,3
20,7±32,1
3,2±25,2
2,7±19,7
-16,3±20,9
-44,1±12,1*
-45,2±13,0*
-8,2±32,1
Таблица 2
Определение острой токсичности соединения I
Результат
Доза мг/кг
10
100
500
1000
3100
Количество животных
12
12
12
12
12
Выжило
12
12
12
12
12
Погибло
0
0
0
0
0
D
-
90
400
500
2000
Z
-
0
0
0
0
DZ
-
0
0
0
0
Таблица 3
Определение острой токсичности таблеток этацизина по 0,5 г (50 мг)
Результат
Доза, мг/кг
60
55
50
45
40
Количество животных
12
12
12
12
12
Выжило
0
6
8
11
12
Погибло
12
6
4
1
0
D
-
5
5
5
5
Z
-
6
2
3
1
DZ
-
30
10
15
5