СПОСОБ РАННЕЙ ДИАГНОСТИКИ ДИСБИОЗА ВЛАГАЛИЩА
METHOD FOR EARLY DIAGNOSIS OF VAGINAL DYSBIOSIS

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может использоваться при диагностике дисбиоза влагалища.
Несмотря на многочисленные способы диагностики дисбиотических изменений во влагалище, до сих пор не предложено персонифицированных диагностических критериев, позволяющих выявить причину замещения естественной флоры влагалища на патологическую.
Известен метод диагностики бактериального вагиноза и неспецифического вагинита, при котором анализируют цифровые изображения кристаллограмм фаций влагалищной жидкости, полученных в стандартных условиях, оценивая выраженность зон кристаллизации, и при обнаружении папоротникообразных кристаллов диагностируют бактериальный вагиноз, а при отсутствии четкой зональности, наличии диффузно-распределенных сферовидных кристаллов с концентрацией в центральной зоне определяют неспецифический вагинит. Использование способа позволяет выявить инфекционный процесс в ранние сроки, дифференцировать бактериальный вагиноз и неспецифический вагинит [1].
Недостатком этого метода является сложность технологии процесса диагностики и высокая стоимость исследования.
Известен метод диагностики бактериального вагиноза, при котором определяется бактериальная обсемененность эпителиоцита, количества лейкоцитов и ключевых клеток, проводится посев отделяемого влагалища и соскобного материала из серийных разведений на питательные среды с определением количества лактобацилл, условно-патогенной факультативно-анаэробной и облигатно-анаэробной микрофлоры, определяется в смыве из влагалища концентрации IgA, sIgA, IgM и свободного секреторного компонента. Сравниваются полученные данные с критериями, установленными для нормоценоза влагалища, промежуточного типа микробиоценоза влагалища, дисбиоза влагалища, бактериального вагинита и делается вывод о состоянии микробиоценоза влагалища [2].
Недостатком данного метода является его многокомпонентность, сложность исполнения методологии.
Известен метод диагностики бактериального вагиноза, при котором определяют количественный и качественный составы короткоцепочечных жирных кислот (КЖК) во влагалищном содержимом. Суммарное количество КЖК на уровне 0,08-0,16 мг/г при содержании уксусной кислоты на уровне 69-83%, пропионовой кислоты на уровне 10-18% и масляной кислоты на уровне 7,0-13,0% в профиле уксусной, пропионовой и масляной кислот, содержании изомеров КЖК на уровне 9,9-14,9% от общего уровня содержания кислот свидетельствует о нормальном состоянии микрофлоры влагалища. По изменениям качественного и количественного составов КЖК относительно нормы определяют характер изменения микрофлоры влагалища. На основании полученных результатов для лечения заболеваний, сопровождающихся нарушениями микрофлоры влагалища, выбирают антибактериальные препараты и/или пробиотики. Способ позволяет повысить точность верификации анаэробно-аэробных популяций микроорганизмов, что дает возможность своевременного выбора наиболее эффективной схемы лечения [3].
Недостатком данного метода является его низкая информативность, не позволяющая определить раннюю стадию дисбиотических изменений вагинальной жидкости и, как следствие, невозможность ранней коррекции этих нарушений, а также сложность методики и высокая стоимость исследования.
Данный способ принят за прототип.
Целью изобретения является повышение эффективности диагностики бактериального вагиноза с учетом состава метаболомных маркеров вагинальной жидкости и подбора персонифицированной терапии для каждой пациентки на этапе доклинических проявлений дисбиоза влагалища.
Эта цель достигается тем, что производится смыв содержимого верхней трети влагалища физиологическим раствором и исследуется методом газовой хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием на состав моносахаридов и при содержании во влагалищной жидкости глюкопиранозы 0,1543-0,3850 мг/мл, D-глюкозы 0,1232-0,6818 мг/мл, D-галактопиранозы 0,0723-0,2571 мг/мл, D-маннопиранозы 0,2432-0,4186 мг/мл диагностируется дисбиоз влагалища на этапе доклинических проявлений у женщин репродуктивного возраста.
3
Берется 10 мл вагинального смыва, подвергается высушиванию при температуре 30 градусов по Цельсию в течение 24 часов для получения сухого навеска, затем 35 г сухого навеска разводится в 1 мл пиридина, добавляется 0,9 мл HDSM и 0,1 мл ТФУ кислоты, полученная смесь подвергается ГХ-МС анализу на аппарате Agilent 7890 А, колонке HP-5MS (30 м × 0,25 мм × 0.25 мкм) при программировании 120°C - 5 мин, 10°C/мин до 130°C - 0 мин, 3°C/мин до 210°C - 0 мин, 15°C/мин до 240°C - 0 мин, 3°C/мин до 265°C - 0 мин, 15°C/мин до 295°C - 5 мин, время анализа - 50 мин, скорость газа-носителя (гелия) - 1 см/мин, диапазон сканирования 45.0-350.0, определяются моносахариды при норме и патологии.
При наличии в вагинальной жидкости глюкопиранозы 0,1543-0,3850 мг/мл, D-глюкозы 0,1232-0,6818 мг/мл, D-галактопиранозы 0,0723-0,2571 мг/мл, D-маннопиранозы 0,2432-0,4186 мг/мл, что соответствует дисбиозу влагалища при отсутствии его клинических проявлений, назначается курс восстановительной терапии в виде влагалищных инсталляций пребиотика для поддержания естественной аутентичной биофлоры влагалища.
Сравнение предлагаемого способа диагностики бактериального вагиноза показывает его высокую диагностическую значимость при выявлении изменений вагинальной флоры, что позволяет своевременно начать лечебные мероприятия по восстановлению биотопа влагалища, избежать применения токсичных лекарственных средств и сократить длительность курса лечения.
Кроме того, сравнение эффективности предложенного способа и определения количественного и качественного составов короткоцепочечных жирных кислот (КЖК) во влагалищном содержимом показало явное преимущество первого.
Экономические затраты при анализе смывов влагалищной жидкости с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии на содержание сахаридов составили 596 рублей за исследование, в то же время стоимость количественного и качественного составов короткоцепочечных жирных кислот (КЖК) во влагалищном содержимом составила 1300 рублей.
Предложенный способ возможно и целесообразно использовать в женских консультациях и гинекологических стационарных отделениях.
ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ
1. Способ дифференциальной диагностики бактериального вагиноза и неспецифического вагинита. Патент РФ №2351931.
2. Способ определения микрофлоры влагалища и способ лечения заболеваний, сопровождающихся нарушениями микрофлоры влагалища. Патент РФ №2270447.
3. Способ оценки микробиоценоза влагалища. Патент РФ №2249821.