Окислительно-востановительный гомеостаз активированных нейтрофилов и системы перекисное окисление липидов - антиоксиданты пловцов в различные периоды годичного цикла

глобулином (r= -0,89), р-глобулином (r= -0,84) и положительные связи с прямой фракцией билирубина r=0,82 и r=0,92 соответственно. Взаимосвязь показателей белкового обмена и функционального состояния печени характеризовалась отрицательными связями а2-глобулина и р-глобулина с прямой фракцией билирубина (r= -0,68, r= -0,70 соответственно), р-глобулина с ЩФ (r= -0,70). В свою очередь прямая фракция билирубина находилась в обратной пропорциональной связи с ЩФ (r= -0,78).

Полученные результаты показали, что при развитии умерено выраженного холестатического синдрома следствием выраженного дисбаланса межсистемных взаимодействий, являются дислипидемия и диспротеинемия (табл. 2). Нарушения липидного обмена по типу гипербеталипопротеинемии, гиперхолестерине-мии, и белкового обмена в виде гипербетаглобулинемии связаны с ультраструктурными изменениями гепатоцитов, обусловленными развитием холестаза при нарушении желчевыделения [5,8]. По мнению ряда исследователей развитие внутрипеченочного холестаза сопряжено с повышением интенсивности внутриклеточных окислительных процессов, разобщением процессов окислительного фосфорилирования и биологического окисления в митохондриях с последующей реструктуризацией липидной фазы мембран внутриклеточных структур гепатоцитов [7,8].

Выводы. 1. Установлена взаимосвязь метаболических нарушений при хроническом некалькулезном холецистите в фазе клинической ремиссии с изменением функционального состояния печени.

2. Выявлено однонаправленное изменение параметров белкового и липидного обмена у пациентов с хроническим некаль-кулезным холециститом при развитии умеренно выраженного цитолитического и холестатического синдрома.

3. Выявлено, что при холестатическом синдроме диспро-теинемия и дислипидемия носят более выраженный характер, чем при цитолитическом синдроме.

4. Полученные данные свидетельствуют о необходимости дифференцированных подходов к восстановительному лечению больных хроническим некалькулезным холециститом в фазе ремиссии воздействовать на функционального состояния печени с целью.

Литература

1. Иванченкова, Р.А. Гетерогенность липопротеидов низкой плотности при холестерозе желчного пузыря и желчно-каменной болезни / Иванченкова Р.А., Шарашкина Н.В. // Клинич. медицина.- 2004.- 10: С. 46-49.

2. Ильченко, А.А. Желчнокаменная болезнь / А.А. Ильченко.- М.:Анахарсис, 2004.- 200 с.

3. Копылова Т.Н. Характеристика интенсивности процессов перекисного окисления липидов и состояния антиперекисной системы защиты в печени крыс при лапаротомии и нарушении оттока желчи // Вестн. Новгород. гос. ун-та. 1999. 11: 13-18.

4. Рослый, И.М. Ферментемия - адаптивный механизм или маркер цитолиза / Рослый И.М., Абрамов С.В., Покровский В.И. // Вестн. РАМН. 2002. 8: 3-9.

5. Рывняк, В.В. Электронно- гистохимическая локализация коллагена в печени / Рывняк В.В., Гудумак В.С., Оня Е.С. // Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1996. 1: 98-100.

6. Субботина, Т.И. Ультраструктурные изменения гепато-цитов как показатель тяжести функциональных нарушений печени / Т.И. Субботина// Вестн. новых мед. технологий. 1997. 4: 1518.

7. Якубовский, С.В. Окислительная модификация белков сыворотки крови у больных острым холециститом / Якубовский С.В., Ткачев С.В. // Мед. журн.: науч.-практ. рецензируемый журн. 2008. 1: 84-86.

8. Correlation of toxic signs, ultrasonographic findings and pathological changes in cholecystitis / Shih S.C. [et al.] // Zhonghua Yi Xue Za Zhi.- 1996.- 4(58).- P. 259-263.

INTERRELATION OF METABOLIC INFRINGEMENTS AND FUNCTIONAL STATE OF LIVER AT CHRONIC NON-CALCULOUS CHOLECYSTITIS

V.V. KNYSHOVA, L.V. VEREMCHUK, A.I. SHAIKINA

Far Eastern Scientific Centre of Physiology and Pathology of Respiration,

Siberian Branch of Russian Academy of Medical Sciences, Vladivostok Branch — Research Institute of Medical Climatology and Rehabilitative Treatment, Vladivostok

The article presents the results of studying lipid and protein me-

tabolism as well as functional state of liver at 118 patients with chronic non-calculous cholecystitis in a remission phase. The relationship between the severity of metabolic disorders and functional state of liver is established. The relationship of dysproteinemia with the development of cytolytic and dyslipidemia with the development of cholestatic syndrome is demonstrated.

Key words: cholecystitis, functional state of liver, dyslipide-mia, dysproteinemia.

УДК 616-006.6-07:618.11 -006-07

ОКИСЛИТЕЛЬНО-ВОСТАНОВИТЕЛЬНЫЙ ГОМЕОСТАЗ АКТИВИРОВАННЫХ НЕЙТРОФИЛОВ И СИСТЕМЫ ПЕРЕКИСНОЕ ОКИСЛЕНИЕ ЛИПИДОВ - АНТИОКСИДАНТЫ ПЛОВЦОВ В РАЗЛИЧНЫЕ ПЕРИОДЫ ГОДИЧНОГО ЦИКЛА

Т.И. ВЕЛИЧКО*

Проведен анализ результатов изменения динамики показателей функционального состояния активированных нейтрофильных гра-нулоцитов крови и системы перекисное окисление липидов - анти-оксиданты (ПОЛ-АО) в зависимости от физической нагрузки в различные периоды подготовки пловцов.

Ключевые слова: нейтрофилы, перекисное окисление липидов, ан-тиоксиданты, периоды тренировочного цикла.

Дестабилизация гомеостаза вне зависимости от источника возмущения сопровождается изменением количества и функциональной активности нейтрофилов периферической крови, что рассматривается как один из универсальных экстренных механизмов реакции организма на нарушение постоянства внутренней среды [3]. Нейтрофилы периферической крови являются основным источником кислородных радикалов в крови. «Респираторный взрыв», сопровождающий фагоцитоз нейтрофилов, проявляется усиленной продукцией свободнорадикальных форм кислорода [6]. Это явление, с одной стороны, рассматривается как фактор неспецифической иммунной резистентности, с друй стороны приводит к усилению перекисного окисления липидов (ПОЛ).

Физическая нагрузка спортсменов разной интенсивности сопровождается специфическими изменениями в структуре метаболизма. Под действием физической нагрузки, возможно усиление интенсивности перекисных процессов, изменение защитной реакции организма и метаболической активности нейтрофилов крови. Спортивная тренировка существенно изменяется в течение годичного цикла подготовки в соответствии с задачами конкретного периода. При физической нагрузке возрастает потребление кислорода и зависит от интенсивности и длительности нагрузки, что приводит к повышению уровня свободнорадикальных процессов. Усиленное образование продуктов перекисного окисления липидов может свидетельствовать о снижении активности антиоксидантной системы (АОС). АОС необходима для ускорения процесса адаптации и предупреждения дезадаптационных расстройств, характеристика ПОЛ служит критерием оценки адаптации организма к напряженной мышечной деятельности.

Цель исследования — оценка окислительно-восстановительного гомеостаза активированных нейтрофилов и системы ПОЛ-АО в различные периоды подготовки пловцов.

Материал и методы исследования. В группу обследования входили студенты, юноши-пловцы в возрасте 18-23 года (24 человека), имеющие спортивную квалификацию (КМС, I разряд). Контрольную группу составили студенты-юноши (12 человек), того же возраста, занимающиеся физической культурой только в рамках вузовской программы.

В нейтрофилах периферической крови (Нф) цитохимически определяли уровень миелопероксидазы (МПО) [4], содержание катионных белков (КБ) [8], уровень кислой фосфатазы (КФ) [9] и щелочной фосфатазы (ЩФ) [10]. Результаты выражали в виде среднего цитохимического коэффициента (СЦК). Биохимический метод был использован для определения уровня ПОЛ-АО по содержанию малонового диальдегида (МДА) [1] и активности катала-зы [5] в плазме крови и эритроцитах. Данное исследование проводилось на базе Ульяновского Государственного Университета.

Забор крови производили утром натощак из локтевой вены по 7мл у пловцов в подготовительном, соревновательном, восстановительном и переходном периодах. В контрольной группе

* ГОУ ВПО Ульяновский государственный университет, 432000, г. Ульяновск, ул. Арх. Ливчака, 2, tivelichko@mail.ru: Naum-53@yandex.ru

пробу крови брали в зимний (проводили сравнение с подготовительным и соревновательным периодом экспериментальной группы) и летний период (сравнение с восстановительным и переходным периодом экспериментальной группы).

Статистическую обработку данных проводили с использованием критерия Стьюдента (М - выборочное среднее, т -ошибка среднего, р - достигнутый уровень значимости), достоверными считались данные при р<0,05. Для выявления взаимосвязи между компонентами бактерицидных систем Нф и уровнем МДА и каталазы в плазме крови и эритроцитах был проведен корреляционный анализ. Коэффициент корреляции Спирмена (г) рассчитывали с использованием «81а1а у.6.0.».

Результаты и их обсуждение. В результате проведенных исследований установлено, что показатели общего количества лейкоцитов, а так же абсолютного и относительного количества Нф периферической крови на различных этапах годичного цикла у пловцов различны относительно контроля и периодов годичного цикла. Это свидетельствует о формировании изменений в иммунной системе при физической нагрузке различной интенсивности.

Анализ показателей общего количества лейкоцитов свидетельствует о выраженном лейкоцитозе в соревновательном периоде, когда общее количество лейкоцитов статистически значимо превышает количество лейкоцитов в контроле (9,3±0,44 х109/л против 5,6±0,26 х109/л в контроле, р<0,001). Во все остальные периоды годичного цикла существенных различий не выявлено.

Абсолютное количество Нф периферической крови сохранилось на уровне контроля только в подготовительном периоде, во все остальные периоды годичного цикла абсолютное количество Нф статистически значимо превышало таковое в контрольной группе. Выраженное повышение было в соревновательном периоде (4,56±0,412 /л против 3,45±0,181 /л в контроле, р<0,01).

Относительное количество Нф статистически значимо повышено по сравнению с контролем в восстановительном и переходном периодах (59,13±1,134% и 67,46±2,403% против 56,33±1,034% в контроле, р<0,05, р<0,001). В соревновательном периоде относительное количество Нф статистически значимо ниже контроля (52,57±1,982% против 61,92±1,382%, р<0,001).

Существует мнение, что лейкоцитоз в период усиленных физических нагрузок развивается за счет Нф гранулоцитов [2]. Считается так же, что лейкоцитоз в это период может иметь мио-генную природу и сопровождаться нейтрофильным лейкоцитозом, степень выраженности которого будет зависеть от особенностей физической нагрузки [7]. Таким образом, наблюдаемая динамика абсолютного и относительного числа Нф у пловцов укладывается в существующее представление о нормальном функционировании этого звена неспецифического иммунитета.

МПО относится к классу окислительно-восстановительных ферментов. Определение МПО позволяет судить о кислородзави-симой бактерицидной активности Нф. При оценке функционального состояния Нф периферической крови было обнаружено волнообразное изменения уровня МПО у пловцов: резко повышенные по сравнению с контролем показатели МПО в подготовительном периоде в соревновательном резко снижались и вновь показатели возрастали в восстановительном и переходном периодах. В результате проведенных исследований установлено, что активность МПО у пловцов статистически значимо выше контроля в подготовительном и соревновательном периодах (2,01±0,132 СЦК и 1,38±0,093 СЦК против 1,13±0,122 СЦК, р<0,001 и р<0,05) и ниже контроля в восстановительном и переходном периодах (1,72±0,014 СЦК и 1,83±0,082 СЦК против 2,47±0,053 СЦК, р<0,001).

Возрастание активности МПО у пловцов в подготовительном и соревновательном периоде может отражать как фагоцитарную активность Нф, так и их неспецифическую стимуляцию, уменьшение уровня МПО в Нф периферической крови в восстановительном и переходном периоде может рассматриваться как следствие снижения способности к завершенному фагоцитозу.

МПО, как и АФК являются обязательным компонентом киллерной активности Нф. Увеличение в периферической крови количества Нф, продуцирующих АФК, инициирует «всплеск» свободно-радикальных процессов. Это может привести к дестабилизации клеточных мембран самих Нф, а значит нарушить распределение мембранных рецепторов, которые обеспечивают взаимодействие с клетками эндотелия сосудов, что не позволяет создавать полноценно функционирующий пул Нф в клетке.

Уровень КБ характеризует кислороднезависимую бактерицидную систему Нф. КБ у пловцов статистически значимо выше в подготовительном и соревновательном периоде (1,17±0,063 СЦК и 1,33±0,051 СЦК против 0,97±0,072 СЦК, р<0,05 и р<0,001), ниже в восстановительном периоде (1,41±0,042 СЦК против 1,95±0,051 СЦК, р<0,001). В переходном периоде уровень КБ Нф пловцов значимо не отличается от контрольной группы.

Выявленный синергизм действия МПО и КБ представляется важным условием антибактериальной эффективности лейкоцитов. В кислороднезависимом метаболизме Нф принимают участие и гидролитические ферменты. Уровень КФ у пловцов статистически значимо ниже контроля в подготовительном, соревновательном (1,0±0,07 СЦК и 1,08±0,051 против 1,63±0,112 СЦК, р<0,001) и переходном периоде (0,86±0,072 СЦК против 1,41±0,041 сЦк, р<0,001). В восстановительном периоде активность КФ пловцов значимо не отличается от контрольной группы.

Присутствие ЩФ необходимо для нормальной фагоцитарной функции, играет исключительно важную роль в функциональной активности Нф и следует рассматривать как надежный индикатор функционального напряжения системы Нф. Активность ЩФ у пловцов статистически выше контроля только в восстановительном периоде (1,4±0,091 СЦК против 0,95±0,052 СЦК, р<0,001), в остальные периоды показатели значимо не отличались от контроля.

Уровень ПОЛ в периферической крови, с одной стороны, возможно, определяется активностью Нф, с другой - ПОЛ - опосредованная стимуляция клиринговой программы Нф вкупе с моноцитами уменьшает вероятность контакта антигенов с лим-фоидными клетками и снижает выраженность гуморального иммунного ответа [6].

В результате проведенных исследований было установлено, что уровень МДА в плазме крови у пловцов статистически значимо ниже контроля в подготовительном периоде (2,76±0,221 мкмоль/л против 4,49±0,632 мкмоль/л, р<0,01). Во всех остальных периодах показатели статистически не значимы по отношению к контролю.

При анализе активности каталазы плазмы крови было установлено, что показатели у пловцов снижены в подготовительном периоде (0,05±0,012 ммоль/мин/л против 0,1±0,02 ммоль/мин/л, р<0,02) и повышены в соревновательном периоде (0,14±0,012 ммоль/мин/л против 0,1±0,02 ммоль/мин/л, р<0,05). В восстановительном и переходном периодах показатели статистически не значимы.

Уровень МДА в эритроцитах пловцов статистически значимо ниже контроля в подготовительном, соревновательном (283,04±44,743 мкмоль/л и 568,66±43,634 мкмоль/л против 861,81±31,091 мкмоль/л, р<0,001) и восстановительном периодах (219,15±11,762 мкмоль/л против 318,64±14,343 мкмоль/л, р<0,001) и выше в переходном периоде (412,56±28,471 мкмоль/л против 318,64±14,343 мкмоль/л, р<0,01).

Активность каталазы эритроцитов пловцов снижена в подготовительном (3,1±0,63 ммоль/мин/л против 9,9±1,69 ммоль/мин/л, р<0,001) и резко повышена в соревновательном периоде (22,2±1,87 ммоль/мин/л против 9,9±1,69 ммоль/мин/л, р<0,001). В восстановительном и переходном периодах показатели активности каталазы эритроцитов статистически не значимы.

Анализ динамики показателя системы ПОЛ-АО в эритроцитах пловцов позволил выявить выраженное разнонаправленное изменение этих показателей в соревновательном периоде, что может свидетельствовать о возможности оксидативного стресса в эритроцитах в этот период.

Анализ полученных данных продемонстрировал наличие достоверных корреляционных взаимосвязей между активностью Нф и системы ПОЛ-АО. Были установлены корреляции средней силы между МПО и МДА в плазме в подготовительном периоде (г=0,45), в эритроцитах в подготовительном (г=0,43), восстановительном (г=-0,54) и переходном периоде (г=0,45). Корреляции установлены между МПО и каталазой в плазме в соревновательном периоде (г=0,32) и в эритроцитах в соревновательном (г=0,67), восстановительном (г=-0,51) и переходном периодах (г=0,57).

Между КБ и МДА в плазме установлена корреляция средней силы в подготовительном (г=-0,58) и переходном периоде (г=0,43) и высокой силы в эритроцитах в подготовительном (г=-0,75) и восстановительном периоде (г=-0,88). Корреляция между КБ и каталазой в эритроцитах в подготовительном (г=0,52), со-

ревновательном (г=0,69) и восстановительном периоде (г=-0,60), в плазме в подготовительном (г=-0,43) и соревновательном периоде (г=0,42).

Корреляция между активностью ЩФ и МДА в плазме в подготовительном периоде (г=0,33), в эритроцитах высокой силы в переходном (г=-0,79) и средней силы в восстановительном периоде (г=-0,51). Между ЩФ и каталазой в плазме средней силы в соревновательном (г=0,38) и переходном периоде (г=0,47), в эритроцитах высокой силы в соревновательном периоде (г=0,69).

Корреляция средней силы между КФ и МДА в плазме в соревновательном периоде (г=0,44) и каталазой в плазме в подготовительном (г=0,35) и соревновательном (г=0,42), в эритроцитах в соревновательном периоде (г=0,69).

Выводы.

1. В целом, результаты проведенного исследования свидетельствуют, что у студентов-пловцов функциональное состояние Нф значимо отличается от такового у студентов того же возраста и пола занимающихся физической культурой только в рамках вузовской программы. При этом в подготовительном и соревновательном периоде у пловцов наблюдается повышение фагоцитарной активности МПО и КБ, но происходит снижение активности КФ. В восстановительном периоде при снижение фагоцитарной активности МПО и КБ возрастает уровень активности ЩФ. В переходном периоде наблюдается снижение метаболической активности МПО, КБ и КФ Нф крови.

2. Анализ динамики показателя системы ПОЛ-АО в эритроцитах пловцов позволил выявить выраженное разнонаправленное изменение этих показателей в соревновательном периоде, что может свидетельствовать о возможности оксидативного стресса в эритроцитах в этот период.

3. Окислительно-восстановительный гомеостаз активированных нейтрофилов и соотношение прооксидантной и антиок-сидантной систем в плазме и эритроцитах периферической крови у пловцов может меняться в зависимости от индивидуального состояния организма и степени интенсивности тренировочного и соревновательного процесса.

4. Результаты оценки корреляционных взаимодействий метаболической активности нейтрофильных гранулоцитов с уровнем МДА пловцов, дают основания предполагать, что МДА может отражать способность Нф к фагоцитозу, а АОС представленная каталазой, ускоряющая процесс адаптации повышает неспецифическую резистентность организма в зависимости от тренировочного периода на различных этапах годичного цикла.

Литература

1. Андреева, Л.И. Модификация метода определения перекиси липидов в тесте с тиобарбитуровой кислотой / Л.И. Андреева // Лаб.Дело.- 1988.- №11.- С. 86-89.

2. Аронов, Г.Е. Иммунологическая реактивность при различных режимах физической нагрузки. /Г.Е.Аронов, Н.И.Иванова. - Киев: Здоровье, 1987.- 88 с.

3. Бережная, Н.М. Нейтрофилы и иммунологический го-меостаз / Н.М. Бережная.- Киев: Наук.думка, 1988.-189 с.

4. Долгушин, И.И. Нейтрофилы и гомеостаз / И.И. Долгушин, О.В. Бухарин.- Екатеринбург: УрО РАН, 2001.- 280 с.

5. Карпищенко, А.И. Медицинские и лабораторные технологии и диагностика / А.И. Карпищенко.- СПб: Интермедика, 1999.- С. 27-28.

6. Маянский, А.Н. Очерки о нейтрофиле и макрофаге / А.Н. Маянский, Д.Н. Маянский.- Новосибирск: Наука, 1989.254 с.

7. Рымжанов, К.С. Показатели количества лейкоцитов и лейкоцитарной формулы у спортсменов разной квалификации и специализации до и после нагрузки в условиях предгорья / К.С. Рымжанов, Т.Л. Рудакова // Сб.науч.трудов. Душанбе, 1974.-С.178-180.

8. Шубич, М.Г. Выявление катионного белка в цитоплазме лейкоцитов с помощью бромфенолового синего / М.Г. Шубич // Цитология.- 1974.- Т.16.- №10.- С.1321-1322.

9. Шубич, М.Г. О неспецифичности цитохимического выявления кислой фосфатазы в нейтрофильных лейкоцитах / М.Г. Шубич // Лаб.Дело.- 1980.- №3.- С.150-154.

10. Шубич, М.Г. Щелочная фосфатаза лейкоцитов в норме и патологии / М.Г. Шубич.- М.: Медицина, 1980.- 224 с.

OXIDATION AND REHABILITATION HOMEOSTASIS OF ACTIVATED

NEUTROPHILS AND LIPID PEROXIDATION OF LIPIDS -ANTIOXIDANT SYSTEM PERFORMANCE AT DIFFERENT PERIODS OF SWIMMERS' ANNUAL CYCLE

T.I. VELICHKO Ulianovsk State University, Ulyanovsk, Russia

The article presents the results of functional state indices dy-namicchanges of activated neutrophil blood granulocytes and lipid peroxidation - antioxidant system in connection with the physical in different periods of swimmers' training.

Key words: neutrophils, lipid peroxidation, antioxidant, training cycle periods.