МИКРООРГАНИЗМ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ЯНТАРНОЙ КИСЛОТЫ

1. Выделенный генетически модифицированный микроорганизм для получения органической карбоновой кислоты глиоксилатного и/или цитратного цикла, особенно органической дикарбоновой кислоты, преимущественно янтарной кислоты, отличающийся от дикого типа тем, что
a) гены idh1 и idp1 делегированы или инактивированы, и/или
b) гены sdh2 и sdh1 делегированы или инактивированы, и/или
c) ген PDC2 делетирован или инактивирован или находится под контролем промотора, который может быть репрессирован или индуцирован путем воздействия на микроорганизм вещества-индуктора, и\или
d) один или более генов из группы, состоящей из ICL1, MLS1, ACS1 и MDH3, замещены или дополнены соответствующим чужеродным геном или соответствующими чужеродными генами из Крэбтри-отрицательного организма.
2. Микроорганизм по п.1, в котором в дополнение к генам idh1 и idp1 один из генов idp2 или idp3, или оба эти гена делегированы или инактивированы.
3. Микроорганизм по п.1, в котором в дополнение к генам sdh2 и sdh1 один из генов uga2 или agx1, или оба эти гена делегированы или инактивированы.
4. Микроорганизм по п.1, в котором промотор, предшествующий гену PDC2, представляет собой индуцируемый промотор, например, CUP1.
5. Микроорганизм по п.1, в котором промотор, предшествующий гену PDC2, представляет собой репрессируемый промотор, например, тетрациклин-регулируемый промотор tetO.
6. Микроорганизм по п.1, в котором чужеродный ген происходит из Крэбтри-отрицательного организма из группы, состоящей из Escherichia coli, Anaerobiospirillum, Actinobacillus, Mannheimia, Rhyzopus Corynebacterium, Schizosaccharomyces, Wickerhamia, Debayomyces, Hansenula, Hanseniaspora, Pichia, Kloeckera, Candida, Ogataea, Kuraishia, Komagataella, Yarrowia, Metschnikowia, Williopsis, Nakazawaea, Kluyveromyces, Cryptococcus, Torulaspora, Bullera, Rhodotorula, Willopsis, Kloeckera, Trichosporon, Yamadazmya и Sporobolomyces.
7. Микроорганизм по п.1, в котором чужеродный ген находится под контролем конститутивного активного промотора, например, промотора ADH1.
8. Микроорганизм по одному из пп.1-7, где микроорганизмом являются дрожжи, предпочтительно выбранные из группы, состоящей из Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces, Saccharomycecopsis, Saccharomycodes, Schizosaccharomyces, Wickerhamia, Debayomyces, Hansenula, Hanseniaspora, Pichia, Kloeckera, Candida, Zygosaccharomyces, Ogataea, Kuraishia, Komagataella, Yarrowia, Metschnikowia, Williopsis, Nakazawaea, Kluyveromyces, Cryptococcus, Torulaspora, Bullera, Rhodotorula, Willopsis, Kloeckera и Sporobolomyces.
9. Способ получения микроорганизма по одному из пп.1-8, в котором
a) гены idh1 и idp1 делегированы или инактивированы, и/или
b) гены sdh2 и sdh1 делегированы или инактивированы, и/или
c) ген PDC2 делетирован, или инактивирован, или находится под контролем промотора, который может быть репрессирован или индуцирован путем воздействия на микроорганизм вещества-индуктора, и\или
d) один или более генов из группы, состоящей из ICL1, MLS1, ACS1 и MDH3, замещены или дополнены соответствующим чужеродным геном или соответствующими чужеродными генами из Крэбтри-отрицательного организма.
10. Способ получения органической карбоновой кислоты глиоксилатного и/или цитратного цикла, особенно органической дикарбоновой кислоты, преимущественно янтарной кислоты, содержащий следующие стадии:
A) на стадии роста микроорганизм по одному из пп.1-8 предпочтительно при аэробных условиях культивируется и размножается при необходимости при добавлении вещества-индуктора для индукции индуцируемого промотора и/или глутамата,
B) затем микроорганизм культивируется в ходе фазы продуцирования предпочтительно при анаэробных условиях при необходимости при добавлении вещества-индуктора для репрессии репрессируемого промотора,
C) вслед за стадией В) или в ходе стадии В) карбоновую кислоту выделяют из супернатанта культуры и при необходимости очищают.
11. Способ по п.10, где стадия А) проводится до достижения плотности клеток по меньшей мере 100 г сухой клеточной массы/л, предпочтительно по меньшей мере 120 г сухой клеточной массы/л, особенно предпочтительно по меньшей мере 140 г сухой клеточной массы/л.
12. Способ по п.10, где стадия В) проводится до достижения концентрации карбоновой кислоты по меньшей мере 0,4 моль/л, предпочтительно по меньшей мере 0,8 моль/л, особенно предпочтительно по меньшей мере 1,0 моль/л.
13. Способ по п.10, где стадия А) проводится при температуре от 20 до 35°С, предпочтительно от 28 до 30°С, и продолжается в течение от 1 до 1000 ч, предпочтительно от 2 до 500 ч, особенно предпочтительно от 2 до 200 ч.
14. Способ по одному из пп.10-13, где стадия В) проводится при температуре от 15 до 40°С, предпочтительно от 20 до 35°С, и продолжается в течение от 1 до 1000 ч, предпочтительно от 2 до 500 ч, особенно предпочтительно от 2 до 200 ч.