Флеботропная комбинированная фармацевтическая композиция
PHLEBOTROPHIC COMBINATION PHARMACEUTICAL COMPOSITION

Область техники
Изобретение относится к области медицины, в частности к фармацевтической промышленности, и описывает комбинированную фармацевтическую композицию для лечения хронической венозной недостаточности, включающую диосмин и троксерутин.
Уровень техники
Заболеваниями венозной системы страдают около 20% трудоспособного населения [Основы клинической флебологии / Под ред. Ю.Л. Шевченко, Ю.М. Стойко, М.И. Лыткина. - М., 2005. - 312 с.]. Хроническая венозная недостаточность (ХВН) - заболевание, возникающее вследствие затруднения оттока из вен нижних конечностей, связанное с варикозной болезнью или являющееся следствием тромбоза глубоких вен нижних конечностей. ХВН - распространенное заболевание, регистрирующееся у 10-15% взрослого населения. [Климова Е.А. Хроническая венозная недостаточность и методы ее лечения. // РМЖ. - 2009. - №12. - С. 828.]. Каждая четвертая жительница земного шара имеет признаки хронической венозной недостаточности [Очанов Р.Г., Савельев В.С., Шальнова С.А. и др. Факторы риска хронической венозной недостаточности и возможности ее медикаментозного лечения // Тер. Арх. - 2006. - №78 (4). - 68-72.].
Описано много факторов, обусловливающих развитие ХВН, основными из которых являются беременность, ожирение, длительные статические нагрузки, прием гормональных контрацептивов, ношение сдавливающей одежды, характер питания и др.
Ведущее место в патогенезе ХВН занимает «клапанная» теория. Клапанная недостаточность различных отделов венозного русла нижних конечностей приводит к появлению патологического, ретроградного потока крови, который и является основным фактором повреждения микроциркуляторного русла [Климова Е.А. Хроническая венозная недостаточность и методы ее лечения. // РМЖ. - 2009. - №12. - С. 828.].
Среди основных средств, используемых на всех стадиях ХВН, наиболее широкое распространение получили флеботропные лекарственные средства, основным фармакологическим действием которых является способность стимулировать отток из вен нижних конечностей, воздействуя на различные патогенетические звенья венозной недостаточности.
Одними из основных флебопротекторов являются биофлавоноиды, которые обеспечивают капилляропротективный эффект и снижение проницаемости сосудистой стенки [Климова Е.А. Хроническая венозная недостаточность и методы ее лечения. // РМЖ. - 2009. - №12. - С. 828.].
В клинической практике флавоноиды используют для лечения геморрагических диатезов, капилляротоксикозов, последствий лучевой болезни, маточных, геморроидальных и желудочно-кишечных кровотечений и др. Но наибольшую популярность биофлавоноиды завоевали в ангиологии, где на протяжении многих лет их успешно применяют для профилактики и лечения хронических заболеваний вен, а также осложнений этих заболеваний. Одним из наиболее известных и хорошо изученных флавоноидов с высокой флеботропной активностью является диосмин (3',5,7-тригидрокси-4'-метоксифлавон-7-рамноглюкозид). Препараты на его основе уже в течение 30-ти лет применяют для лечения хронической венозной недостаточности, лимфедемы и геморроя [Богачев В.Ю., Голованова О.В., Кузнецов А.Н., Шекоян А.О. Биофлавоноиды и их значение в ангиологии. Фокус на диосмин. // Ангиология и сосудистая хирургия: Науч.-практ. журн. - М., 1994. - 2013. - т. 19 №1. - С. 73-81.].
В фармакодинамике препарата выделяют следующие особенности:
- усиливает сосудосуживающее действие адреналина и норадреналина на венозную стенку;
- повышает венозный тонус;
- уменьшает венозный и лимфатический стаз;
- оказывает антиагрегантное действие;
- нормализует капиллярный кровоток, устраняя воспаление.
Кроме того, препарат подавляет синтез эндотелиальных молекул адгезии (ICAMj, VCAMj), тромбоксана А2 (ТхА2) и простагландина Е2 и F2 (PGE2, PGF2), благодаря чему устраняется миграция лейкоцитов в венозные капилляры и окружающие ткани, а также «прилипание» тромбоцитов и лейкоцитов к стенкам сосудов. В результате снижается проницаемость сосудистой стенки, повышается ее прочность, улучшаются реологические свойства крови. Нормализуя обмен холестерина, Диосмин предупреждают образование склеротических бляшек, а также улучшает эластичность венозных и лимфатических сосудов [Diosmin / Alternative Medicine Review. - 2004. - Vol. 9, №3. - P. 308-311.].
Также широко известным и хорошо зарекомендовавшим себя ангиопротектором является троксерутин - полусинтетический биофлавоноид бензопиронового ряда (смесь 3', 4' и 7 (β-оксиэтил) рутозидов). Троксерутин обладает Р-витаминной активностью, проявляет выраженные ангиопротекторные свойства; уменьшает сосудисто-тканевую проницаемость и ломкость капилляров, способствует нормализации микроциркуляции и трофики тканей, уменьшает застойные явления в венах и паравенозных тканях, оказывает противоотечное и противовоспалительное действие. Улучшает периферическое кровообращение, прежде всего микроциркуляцию и трофику тканей [Справочник «Компендиум 2013 - лекарственные препараты» / под ред. В.Н. Коваленко - К.: Морион, 2013. - 2360 с.].
Наиболее предпочтительной лекарственной формой при выборе препаратов для лечения ХВН, являются препараты местного действия в виде гелей, мазей и кремов. Это обусловлено их более высокой биодоступностью при применении, а так же снижением побочных эффектов и вредного воздействия и на внутренние органы как при приеме пероральных лекарственных форм. Кроме того пероральное применение флеботропных лекарственных средств при беременности является нежелательным (назначение оправданно, когда польза от их применения превосходит потенциальные негативные реакции). Так же их применение не рекомендуется при грудном вскармливании.
Особый интерес среди мягких лекарственных форм для местного применения вызывают гели на РАП основах (редкосшитые акриловые полимеры). Гели на таких основах при нанесении на кожу образуют тонкие, гладкие пленки, более полно равномерно высвобождают лекарственные вещества, обеспечивая продолжительный эффект, хорошо распространяются по кожной поверхности, оказывают охлаждающее действие, нетоксичны, не обладают раздражающим действием, хорошо удаляются водой, не загрязняют одежду.
На фармацевтическом рынке России достаточно широко представлены препараты диосмина, содержащие в своем составе как монооснование действующего вещества, так и комбинацию диосмина с различными активными фармацевтическими субстанциями.
Так, например известны следующие, зарегистрированные в РФ, лекарственные препараты:
- «Венолек» в лекарственной форме таблеток покрытых пленочной оболочкой, содержащие диосмин в дозировке 500 мг, производства ЗАО «Канонфарма продакшн» (Россия), регистрационное удостоверение № ЛСР-006551/09 от 17.08.2009;
- «Флебодиа 600» в лекарственной форме таблеток покрытых пленочной оболочкой, содержащие диосмин в дозировке 600 мг, производства Лаборатории Иннотера (Франция), регистрационное удостоверение П N016081/01 от 18.11.2009;
- «Детралекс» в лекарственной форме таблеток покрытых пленочной оболочкой, содержащие комбинацию диосмина в дозировке 450 мг и гесперидина в дозировке 50 мг, производства Лаборатории Сервье (Франция), регистрационное удостоверение П N011469/01 от 26.06.2009;
- «Флебофа» в лекарственной форме таблеток, содержащих диосмин в дозировке 600 мг, производства ООО «Атолл» (Россия), регистрационное удостоверение № ЛП-002517 от 01.07.2014, и другие.
Известные препараты диосмина (в т.ч. в виде комбинаций), представлены на отечественном рынке только в виде твердых лекарственных форм. Мягкие формы в виде гелей, мазей и кремов, из уровня техники выявить не удалось.
Также на отечественном рынке широко представлены моно и комбинированные препараты в лекарственной форме гелей, содержащих троксерутин:
- «Троксерутин Врамед» в лекарственной форме геля для наружного применения 2%, производства АО «Софарма» (Болгария), регистрационное удостоверение П N011640/01 от 26.09.2011;
- «Троксерутин Ветпром» в лекарственной форме геля для наружного применения 2%, производства «ВетПром» АД (Болгария), регистрационное удостоверение ЛС-001490 от 15.07.2011;
- «Троксевазин» в лекарственной форме геля для наружного применения 2%, производства «Балканфарма-Троян» АД (Болгария), регистрационное удостоверение П N012713/02 от 15.08.2008;
- «Троксерутин» в лекарственной форме геля для наружного применения 2%, производства ООО «Атолл» (Россия), регистрационное удостоверение ЛС-000487 от 01.03.2011;
- «Венолайф», содержащий комбинацию гепарина натрия, декспантенола и троксерутина в лекарственной форме геля для наружного применения, производства ХФК ОАО «Акрихин» (Россия), регистрационное удостоверение ЛС-001377 от 10.03.2006, и другие.
Для устранения недостатков, существующих твердых лекарственных форм, а так же для удобства их использования пациентами, авторами настоящего изобретения предложено создание комбинированного лекарственного препарата в виде геля, содержащего диосмин и троксерутин.
На отечественном рынке лекарственных препаратов, содержащих комбинацию диосмина и троксерутина, не представлены. Также в России не зарегистрированы мягкие лекарственные формы, содержащие диосмин. Из предшествующего уровня техники подобных препаратов и лекарственных форм выявить не удалось.
Задачей настоящего изобретения является расширение арсенала эффективных и удобных к применению флеботропных лекарственных средств отечественного производства.
Техническим результатом изобретения, является создание флеботропной комбинированной фармацевтической композиции в виде геля для наружного применения (препарата Диосмин + Троксерутин гель для наружного применения), содержащей терапевтически эффективное количество диосмина и троксерутина, удобной для применения и стабильной при длительном хранении.
Раскрытие изобретения
Авторами настоящего изобретения, опытным путем был подобран состав препарата Диосмин + Троксерутин гель для наружного применения, в соответствии с заявленным техническим результатом.
Исходя из цели изобретения и свойств лекарственной формы, авторами были поставлены следующие основные задачи исследования:
- разработать рациональный состав препарата с учетом свойств диосмина, троксерутина и вспомогательных веществ, при этом разработку состава осуществлять с учетом медико-биологических требований, предъявляемых к препаратам для местного лечения заболеваний вен, для чего:
- препарат должен содержать диосмин в концентрации 2% и троксерутин в концентрации 2%;
- препарат должен иметь индифферентную (не взаимодействующую с лекарственными веществами) гелевую основу, позволяющую легко и равномерно наносить препарат на поверхность тела и не оказывающего раздражающего действия на кожу.
- исследовать микробиологические характеристики препарата и установить их соответствие современным фармакопейным стандартам.
1. Разработка и обоснование рационального состава препарата Диосмин + Троксерутин гель для наружного применения.
1.1. Выбор действующих веществ и их содержания.
Действующими веществами для разрабатываемого препарата были выбраны диосмин и троксерутин. Субстанции диосмина и троксерутина описаны в Европейской Фармакопее и в Британской Фармакопее [Diosmin. - European Pharmacopoeia 8.0. - P. 2072-2073.; Diosmin. - British Pharmacopoeia 2015. - V. I. - P. 771.; Troxerutin. - European Pharmacopoeia 8.0. - P. 3488-3489.; Troxerutin. - British Pharmacopoeia 2015. - V. II. - P. 1118.], субстанция диосмина описана, также в Фармакопее США [Diosmin. - USP 36 - NF 31, V. I. - P. 1417-1418.]. Лекарственные формы диосмина и троксерутина в ведущих фармакопеях не описаны.
Для включения в состав препарата были выбраны субстанции диосмина и троксерутина, соответствующие требованиям Европейской Фармакопеи.
На фиг. 1 приведена микрофотография субстанции диосмина производства фирмы «Чэнду Хок Био-Инджиниринг Ко.Лтд» (Китай), на фиг. 2
- микрофотография субстанции троксерутина производства фирмы «Сичуан Ксиели Фармасьютикал Ко. Лтд» (Китай).
Как видно на фиг. 1, субстанция диосмина является микрокристаллической; основная масса частиц имеет размер в пределах 10 мкм и менее, в порошке отсутствуют частицы размером более 20 мкм.
Размер частиц в субстанции диосмина важен, поскольку диосмин вводится в состав препарата в виде суспензии.
Как видно на фиг. 2, основная масса частиц в субстанции троксерутина имеет размер в пределах 10 мкм и менее, в порошке отсутствуют частицы размером более 50 мкм.
Поскольку троксерутин вводится в состав препарата в виде раствора, размер частиц в субстанции троксерутина не является критическим фактором.
Диосмин введен в состав препарата в концентрации 2% в виде суспензии в пропиленгликоле.
Троксерутин введен в состав препарата в виде водного раствора в концентрации 2%.
1.2. Выбор вспомогательных веществ
Для получения технического результата, авторам настоящего изобретения необходимо было выбрать качественный и количественный состав вспомогательных веществ таким образом, чтобы получить олеогель (гидрофобный гель), в котором диосмин будет находиться в виде суспензии, а троксерутин - в виде раствора. Кроме того, необходимо было подобрать антимикробный консервант в концентрации, обеспечивающей эффективность антимикробного консервирующего действия на уровне критерия, установленного в Европейской Фармакопее. Также необходимо было подобрать состав пенетраторов, обеспечивающий надлежащую диффузию действующих веществ.
В качестве вспомогательных веществ были выбраны:
- антимикробный консервант, выбранный из числа метилпарагидроксибензоата, пропилпарагидроксибензоата, бензалкония хлорида, бензинового спирта, бензоата натрия;
- пенетратор, выбранный из числа диэтиленгликоля моноэтилового эфира;
- гелеобразователь, выбранный из числа карбомера гомополимера, типа Carbopol 934, Carbopol 980, Carbopol Ultrez 10, Carbopol Ultrez 21, и т.п.;
- нейтрализатор гелеобразователя и регулятор pH, выбранный из числа трометамола, триэтаноламина, гидроксида натрия;
- растворитель, выбранный из числа гидрофильных растворителей, типа пропиленгликоля, воды, глицерола, спирта этилового, полиэтиленгликоля и их комбинаций;
- компонент масляной фазы, выбранный из числа изопропилмиристата, изопропилпальмитата, сквалана, диметикона, симетикона;
- эмульгатор, выбранный из числа макрогола глицерол гидроксистеарата, полиоксиэтиленстеатата, макрогола цетостеарилового эфира и т.п.;
- корригент запаха, выбранный из числа левоментола, эфирных масел лаванды, нейроли, сосны и т.п.
При выборе вспомогательных веществ авторы настоящего изобретения решали следующие основные задачи:
1) подбор состава гелеобразователя таким образом, чтобы обеспечить гелеобразную консистенцию препарата;
2) подбор качественного и количественного состава пенетраторов;
3) подбор состава эмульгаторов, обеспечивающий минимальный размер частиц дисперсной фазы;
4) подбор состава масляной фазы, обеспечивающий смягчающее действие геля на кожу;
5) подбор состава корригента запаха;
6) на основании результатов микробиологических исследований подбор состава антимикробных консервантов, обеспечивающих надлежащую эффективность антимикробного консервирующего действия.
В качестве гелеобразователя в состав разрабатываемого препарата, предпочтительно, но не обязательно, может быть использован карбомер гомополимер, например типа С (Carbopol 980), который является аналогом полиакриловой кислоты [Carbomer Homopolymer. - USP 36 - NF 31, V. I. - P. 1933-1935.] и представляет собой полимер акриловой кислоты, поперечно сшитый аллиловыми эфирами пентаэритрита, с высокой молекулярной массой.
В качестве щелочного агента, при добавлении которого к дисперсии гелеобразователя (например карбомера) происходит гелеобразование, предпочтительно, но не обязательно может быть использован трометамол. Данный щелочной агент в отличие от традиционных аминных загустителей, не обладает местнораздражающим действием и не токсичен, что позволяет использовать его даже в инъекционных препаратах (например, раствор трисамина для инъекций). Трометамол предотвращает уменьшение реопараметров гелей на основе карбомеров под действием УФ-облучения. Также использование трометамола в качестве нейтрализатора карбомеров показано при содержании в гелях значительных количеств гидрофильных растворителей [Formulating Hydroalcoholic Gels with Carbopol Polymers // Lubrizol: Technical Data Sheet (TDS-255), September 3, 2009. - 7 р.]. Кроме того, выбор щелочного агента представляется критически важным т.к. его применение в составе непосредственно влияет на уровень pH, от которого в свою очередь зависит стабильность препарата и его реологические свойства.
Для разрабатываемого препарата предварительно были установлены пределы pH от 5,5 до 6,5 (взята медиана от средних нормальных значений pH кожи человека которые колеблются в пределах от 4,0 до 7,0). Поскольку реопараметры гелей на основе карбомера зависят от его концентрации и pH среды [Handbook of Pharmaceutical Excipients: Sixth Edition / Ed. by Raymond С Rowe, Paul J Sheskey and Marian E Quinn. - Washington/London: Pharmaceutical Press and American Pharmacists Association, 2009. - 917 p.], были проведены реологические исследования образцов гелей в зависимости от концентрации карбомера при постоянном pH (6,2±0,2) и от концентрации трометамола, который является коррегентом pH (при постоянной концентрации карбомера).
Результаты исследований влияния концентрации карбомера 980 на реологические свойства гелей представлены на фиг. 3-4. На фиг. 3 приведены реограммы гелей при температуре 25°С, а на фиг. 4 представлена зависимость структурной вязкости гелей от концентрации карбомера 980.
С увеличением концентрации гелеобразователя от 0,10% до 1,25% при одинаковом pH структурная вязкость гелей возрастает почти линейно (фиг. 4). При увеличении концентрации гелеобразователя от 1,25% до 1,50% структурная вязкость меняется незначительно.
При концентрации карбомера 0,10% гель имеет тип течения близкий к ньютоновскому. С увеличением концентрации карбомера возрастают значения как структурной вязкости, так и нижнего предела текучести гелей. При концентрации Carbopol 980 0,50% гель имеет пластический тип течения с маленькими нижним (Рн) и экстраполированным (Рэ) пределами текучести (фиг. 3). При увеличении концентрации Carbopol 980 (при одинаковом pH) увеличиваются нижние и экстраполированные пределы текучести гелей, а при концентрации гелеобразователя 0,75% у геля проявляются значительные тиксотропные свойства, о которых свидетельствует петля гистерезиса на реограмме (фиг. 3).
Образцы геля с концентрацией карбомера Carbopol 980 0,25% имеют низкую структурную вязкость, при которой не обеспечивается необходимое гелеобразование, структурная вязкость недостаточно высокая, вследствие чего происходит некачественная экструзия из туб: гели выливаются, а не выдавливаются.
Оптимальную консистенцию гелей карбомер обеспечивает в концентрации 0,50%. При этой концентрации гель легко выдавливается из туб, хорошо распределяется на коже, легко втирается. При концентрации карбомера 1% и выше гели хуже распределяются на коже, оставляя на ней липкую пленку после втирания.
Таким образом, для геля диосмина и троксерутина, имеющего pH (6,2±0,2), содержание карбомера Carbopol 980 должно быть в пределах от 0,45 до 0,55%, оптимально 0,50%.
Реопараметры гелевых основ и гелей на основе карбомеров зависят, в первую очередь, от pH, которое регулируется щелочным агентом. Для выбора оптимальной концентрации нейтрализатора были определены реопараметры и pH гелей диосмина и троксерутина при выбранной концентрации карбомера 0,50% в зависимости от содержания нейтрализующего агента, в представленной композиции - трометамола, и pH. На фиг. 5 представлена зависимость структурной вязкости гелей от величины pH, на фиг. 6 - от концентрации трометамола, а на фиг. 7 приведены реограммы этих гелей при температуре 25°С.
Как видно из данных, представленных на фиг. 5-6, 0,5% дисперсия карбомера имеет кислую среду (pH=3,73) и низкую структурную вязкость. Тип течения этой дисперсии близок к ньютоновскому (фиг. 7).
При добавлении трометамола происходит нейтрализация карбоксильных групп карбомера и изменяется организация его полимерных молекул [Neutralizing Carbopol and Pemulen™ Polymers in Aqueous and Hydroalcoholic Systems // Lubrizol: Technical Data Sheet (TDS-237), September 16, 2009. - 3 p.], вследствие чего повышается pH и резко увеличивается структурная вязкость гелей (фиг. 5-6). При pH=4,5 гель приобретает пластический тип течения с выраженными нижним (Рн) и экстраполированным (Рэ) пределами текучести (фиг. 7). При увеличении концентрации трометамола и повышении pH увеличивается нижний предел текучести (фиг. 7).
С увеличением концентрации трометамола pH гелей повышается. Структурная вязкость гелей с увеличением концентрации трометамола и повышением pH также возрастает, однако на графиках зависимости структурной вязкости от концентрации трометамола и pH имеются переломы, после которых структурная вязкость изменяется мало (фиг. 5-6), что связано с нейтрализацией всех карбоксильных групп в молекулах карбомера. Как видно из графиков, представленных на фиг. 5, в случае гелей, содержащих 0,5% Carbopol 980, с дальнейшим увеличением pH от 7 до 8 структурная вязкость гелей незначительно снижается.
Как видно из данных, представленных на фиг. 8, повышение pH от концентрации трометамола имеет почти линейную зависимость в пределах концентрации трометамола от 0,1% до 0,6%. Необходимые пределы pH от 5,5 до 6,5 обеспечиваются при концентрациях трометамола от 0,25% до 0,47%. Оптимальный pH 6,25 гелям, содержащим 0,50% карбомера, обеспечивает концентрация трометамола 0,425%.
В качестве дисперсной среды (растворителя) предпочтительно, но не обязательно могут быть использованы: диэтиленгликоль моноэтиловый эфир, пропиленгликоль, а также вода очищенная. Авторами настоящего изобретения в качестве примера была использована дисперсионная среда, представленная смешанным растворителем.
Вода очищенная использовалась в качестве растворителя трометамола, сорастворителя (совместно с пропиленгликолем) троксерутина и метилпарагидроксибензоата и среды для набухания карбомера в ходе технологического процесса. Пропиленгликоль использовался в качестве растворителя диосмина и сорастворителя (совместно с водой очищенной) троксерутина и метилпарагидроксибензоата, он является растворителем, который обеспечивает препарату осмотическую активность. Кроме того, водные растворы пропиленгликоля и диэтиленгликоля моноэтилового эфира, являясь пенетратором, обеспечивают надлежащую проницаемость тканей для лекарственных веществ, помогают снять воспаление на поврежденном участке кожи за счет гиперосмолярного действия.
Концентрация пропиленгликоля в составе препарата составила от 8,0% до 12,0%, оптимально 10,0%, а диэтиленгликоля моноэтилового эфира от 4% до 6%, оптимально 5%.
На фиг. 9 представлена кинетика абсорбции воды гелем с выбранным составом растворителей, характеризующая его осмотическую активность.
Как видно по данным, представленным на фиг. 9, препарат обладает умеренной осмотической активностью, вследствие чего не будет оказывать пересушивающее действие на кожу [Глава 9. Фармацевтическая разработка лекарственных препаратов / Н.А. Ляпунов, Е.П. Безуглая, Ю.М. Столпер и др. // В кн.: Аналитическая химия в создании, стандартизации и контроле качества лекарственных средств / Под ред. В.П. Георгиевского. - Том 3. Метрологическое и нормативное обеспечение создания, производства и контроля качества лекарственных средств. - Харьков: Изд-во «НТМТ», 2012. - С. 1419-1512].
В течение первого получаса гель абсорбирует около 16% воды. В дальнейшем абсорбция воды препаратом происходит менее интенсивно. К шестому часу разработанный препарат абсорбирует около 60% воды.
В качестве компонентов масляной фазы, предпочтительно, но не обязательно могут быть использованы сквалан в концентрации от 4,0% до 6,0%, оптимально 5,0%, изопропилмиристат в концентрации от 4,0 до 6,0, оптимально 5,0% и диметикон 100 в концентрации от 0,3% до 2,0%, оптимально 1,0%.
Сквалан по химической структуре близок к тритерпеновым спиртам. Он обладает смягчающим действием на кожу и отличается высокой стабильностью к окислению даже при высоких температурах [Squalane. - European Pharmacopoeia 8.4. - P. 4816-4819.].
Изопропилмиристат является смягчающим веществом (эмоллиентом), широко применяемым в мировой практике. Это вещество не окисляется в процессе хранения препарата и, следовательно, не требуют дополнительного введения антиоксидантов.
Кроме того, в состав разрабатываемого препарата включен еще один гидрофобный компонент - диметикон, который улучшает впитывание эмульгеля в кожу без белесых следов, оставляемых эмульгатором, и способствуют устранению ощущения жирности после применения препарата.
Общая концентрация масляной фазы в разрабатываемом препарате составила от 8,3% до 14%, оптимально 11%.
Для эмульгирования масляной фазы и стабилизации суспензии диосмина в состав разрабатываемого препарата было включено неионогенное ПАВ - макрогол глицерол гидроксистеарат 40.
На фиг. 10 приведены реограммы образцов гелей, содержащих Kolliphor RH 40 в различных концентрациях, на фиг. 11 - микрофотографии образцов гелей, а на фиг. 12 - зависимость структурной вязкости этих гелей от концентрации макрогол глицерол гидроксистеарата 40 (Kolliphor RH 40).
Образец геля, не содержащий эмульгатор, расслаивался непосредственно после приготовления. Увеличение концентрации Kolliphor RH 40 от 1,5% до 6,0% практически не влияет на реопараметры гелей (фиг. 10-12). Размер частиц эмульсии с увеличением концентрации эмульгатора от 1,5% до 6,0% изменяется незначительно, однако в образце геля, содержащем 4,5% Kolliphor RH 40, частицы масляной фазы имеют несколько меньший размер в сравнении с частицами масляной фазы других образцов гелей.
По результатам проведенных исследований была выбрана концентрация Kolliphor RH 40 от 3,0% до 6,0%, оптимально 4,50%.
В качестве корригента запаха, предпочтительно, но не обязательно может быть использован левоментол. Были приготовлены образцы гелей, содержащих по 0%, 0,10%, 0,25%, 0,50%, 0,75% и 1,00% левоментола. После этого была проведена органолептическая оценка каждого геля и было установлено, что включение в состав препарата от 0,25% до 0,75% левоментола обеспечивает гелю при втирании в кожу приятный запах, в ходе технологического процесса левоментол легко растворяется в масляной фазе. По результатам органолептических исследований в состав препарата был включен левоментол в концентрации от 0,25% до 0,75%, оптимально 0,50%.
В качестве антимикробного консерванта, предпочтительно, но не обязательно может быть использован метилпарагидроксибензоат в концентрации 0,2%.
В соответствии с требованиями ГФ РФ XIII издания в лекарственных средствах, применяемых местно (категория 2), логарифм снижения числа жизнеспособных клеток бактерий через 14 суток должен составлять не менее 2, с 14 до 28 суток число жизнеспособных клеток бактерий не должно увеличиваться. Число жизнеспособных клеток грибов не должно увеличиваться через 14 и 28 суток по сравнению с исходным уровнем. Данный критерий является значительно менее жестким, чем критерий, приведенный в ОФС.1.2.4.0011.15 Государственной Фармакопеи Российской Федерации (ГФ РФ XIII издания) и ЕФ 8.
В соответствии с требованиями ОФС.1.2.4.0011.15 Государственной Фармакопеи Российской Федерации (ГФ РФ XIII издания) и ЕФ 8 в лекарственных средствах для накожного применения (критерий А) логарифм снижения числа жизнеспособных клеток бактерий через 2 суток должен составлять не менее 2, через 7 суток - не менее 3, в дальнейшем число жизнеспособных клеток бактерий не должно увеличиваться. Логарифм снижения числа жизнеспособных клеток грибов через 14 суток должен составлять не менее 2, в дальнейшем число жизнеспособных клеток грибов не должно увеличиваться.
С целью обеспечения высокого качества лекарственного средства и предотвращения размножения в нем микроорганизмов в процессе хранения и использования, при оценке эффективности антимикробного консервирующего действия в исследуемом лекарственном средстве авторы настоящего изобретения руководствовались критериями, приведенными в ОФС.1.2.4.0011.15 Государственной Фармакопеи Российской Федерации (ГФ РФ XIII издания) и ЕФ 8.
Результаты экспериментальных исследований приведены в таблице 1.
Из данных, представленных в таблице 1 видно, что в инокулированных образцах наблюдается быстрая гибель или снижение числа жизнеспособных клеток тест-микроорганизмов. Логарифм снижения числа жизнеспособных клеток S. aureus в исходном высеве составил 0,86, через 2 суток - 3,08, через 7 и 14 суток - 4,56, через 28 суток жизнеспособные клетки данного тест-микроорганизма не были обнаружены. Логарифм снижения числа жизнеспособных клеток P. aeruginosa в исходном высеве составил 2,04, через 2 суток - 4,47, через 7 суток и при последующих высевах жизнеспособные клетки P. aeruginosa не были обнаружены. Логарифм снижения числа жизнеспособных клеток Е. coli в исходном высеве составил 1,69, через 2 суток и при последующих высевах жизнеспособные клетки этого тест-микроорганизма не были обнаружены. Логарифм снижения числа жизнеспособных клеток С. albicans в исходном высеве составил 0,13, через 2 суток и при последующих высевах жизнеспособные клетки С. albicans не были обнаружены. Логарифм снижения числа жизнеспособных клеток A. brasiliensis (niger) в исходном высеве составил 0,18, через 2 суток - 0,25, через 7 суток - 3,52, через 14 и 28 суток жизнеспособные клетки данного тест-микроорганизма не были обнаружены.
Такая эффективность антимикробных консервантов соответствует требованиям критерия А ЕФ 8 (5.1.3) к лекарственным средствам для накожного применения и существенно превосходит требования статьи «Определение эффективности антимикробных консервантов» ОФС.1.2.4.0011.15 Государственной Фармакопеи Российской Федерации XIII издания к лекарственным средствам категории 2.
По результатам исследований в качестве консерванта в состав препарата Диосмин + Троксерутин гель для наружного применения был введен метилпарагидроксибензоат в концентрации 0,20%.
Таким образом, авторам настоящего изобретения удалось создать флеботропную комбинированную фармацевтическую композицию в виде геля для наружного применения, содержащей диосмин в количестве 2% (2 г/100 г) и троксерутин в количестве 2% (2 г/100 г), а так же вспомогательные вещества, удобную для применения и стабильную при длительном хранении.
В таблице 2 приведено наиболее предпочтительное содержание компонентов в разработанном препарате Диосмин + Троксерутин гель для наружного применения.
В одном из воплощений реализации технического результата в качестве примера, состав разработанной флеботропной комбинированной фармацевтической композиции выглядит следующим образом:
Совместимость действующих и вспомогательных веществ была доказана методом ВЭЖХ и методом спектрофотометрии в УФ и видимой областях. На фиг. 13-15 представлены хроматограммы стандартного раствора, испытуемого раствора препарата и плацебо препарата в условиях количественного определения диосмина. На фиг. 16 представлены спектры стандартного раствора, испытуемого раствора препарата и плацебо препарата в условиях количественного определения троксерутина.
Как видно из хроматограмм, представленных на фиг. 13-15, время удерживания пика диосмина на хроматограммах испытуемого раствора совпадает с временем удерживания соответствующего пика на хроматограммах стандартного раствора. На хроматограммах раствора плацебо отсутствуют пики с временем удерживания, совпадающим с временем удерживания пика диосмина на хроматограммах испытуемого раствора и хроматограммах стандартного раствора. Методика определения количественного содержания диосмина характеризуются достаточной сходимостью и достаточной правильностью, а также соответствуют требованиям к параметрам линейной зависимости, что свидетельствует об отсутствии химического взаимодействия между диосмином, троксерутином и вспомогательными веществами.
Как видно из спектров, представленных на фиг. 16-18, ультрафиолетовый спектр поглощения раствора препарата, так же, как и ультрафиолетовый спектр поглощения стандартного раствора, в области длин волн от 300 нм до 500 нм имеет максимум при длине волны (407±2) нм. Оптическое поглощение раствора плацебо при длине волны 407 нм равно 0,005, что соответствует 0,70% от оптического поглощения стандартного раствора (0,710), полученного при той же длине волны. Методика определения количественного содержания троксерутина характеризуется достаточной сходимостью и достаточной правильностью, а также соответствует требованиям к параметрам линейной зависимости, что характеризует отсутствие химического взаимодействия между троксерутином, диосмином и вспомогательными веществами.
Таким образом, вышеуказанные результаты свидетельствуют об отсутствии химического взаимодействия между диосмином, троксерутином и вспомогательными веществами. Их химическая совместимость доказывается также данными количественного определения действующих веществ в препарате Диосмин + Троксерутин гель для наружного применения в процессе хранения. Результаты исследований стабильности показали, что между диосмином, троксерутином и вспомогательными веществами отсутствуют химические взаимодействия, которые бы не позволяли определять их качественно и количественно или приводили к выходу их количественного содержания за установленные в спецификации пределы.
Заявляемая флеботропная комбинированная фармацевтическая композиция может быть изготовлена следующим образом:
В реактор-гомогенизатор №1 загружают предварительно отвешенную часть воды и гелеобразователь, перемешивают до получения однородной дисперсии, затем в реактор-гомогенизатор №1 загружают пенетратор и перемешивают до получения однородной дисперсии, после чего в емкость №1 загружают растворитель и антимикробный консервант и перемешивают смесь до получения прозрачного раствора, далее в эту же емкость №1 загружают троксерутин, часть воды и перемешивают до полного растворения троксерутина, затем в емкость №2 загружают нейтрализатор гелеобразователя (регулятор pH) и часть воды и перемешивают до получения прозрачного раствора, после чего в реактор-гомогенизатор №2 загружают компонент масляной фазы и корригент запаха, перемешивают массу до полного растворения корригента запаха, затем в реактор-гомогенизатор №2 загружают необходимые компоненты масляной фазы и перемешивают их до получения однородного раствора. Далее в реактор-гомогенизатор №2 загружают эмульгатор и перемешивают до его полного растворения, после чего в емкость №3 загружают часть растворителя и диосмин и перемешивают смесь до образования однородной суспензии, затем в реактор-гомогенизатор №1 загружают ранее полученный раствор антимикробного консерванта и троксерутина, и перемешивают, после чего в реактор-гомогенизатор №1 загружают ранее полученную масляную фазу и перемешивают, далее в реактор-гомогенизатор №1 загружают ранее полученный раствор трометамола и перемешивают, затем в реактор-гомогенизатор №1 загружают ранее полученную суспензию диосмина и перемешивают, в завершение процесса полученный гель выгружают бункер тубонаполнительного автомата и расфасовывают в тубы.
Препарат приготовлен на основе олеогеля, причем троксерутин находится в препарате в виде раствора, а диосмин - в виде суспензии.
НО - жизнеспособные клетки тест-микроорганизмов не обнаружены (менее 5 КОЕ/г для S. aureus, P. aeruginosa, Е. coli, С. albicans и A. brasiliensis (niger));
НУ - число жизнеспособных клеток тест-микроорганизмов не увеличивается.