ИСКУССТВЕННАЯ РЕКОМБИНАНТНАЯ ХРОМОСОМА И ЕЕ ПРИМЕНЕНИЕ

1. Способ получения клетки трансгенной мыши, включающей по меньшей мере одну искусственную рекомбинантную хромосому, включающий:
i) подготовку человеческой клетки, содержащей первую сконструированную хромосому человека, которая включает ген человеческого иммуноглобулина (ген Ig), расположенный между первой последовательностью распознавания рекомбиназы (первой RRS) и второй последовательностью распознавания рекомбиназы (второй RRS),
при этом первая RRS и вторая RRS расположены между центромерой человека и теломерой человека первой сконструированной хромосомы человека соответственно;
ii) обработку подготовленной человеческой клетки для получения первой человеческой микроклетки, содержащей первую сконструированную хромосому человека;
iii) подготовку мышиной клетки, содержащей вторую сконструированную хромосому мыши, которая включает ген мышиного Ig, расположенный между третьей последовательностью распознавания рекомбиназы (третьей RRS) и четвертой последовательностью распознавания рекомбиназы (четвертой RRS),
при этом третья RRS и четвертая RRS расположены между центромерой мыши и теломерой мыши второй сконструированной хромосомы мыши соответственно, и
при этом первая RRS способна соединяться с третьей RRS, а вторая RRS способна соединяться с четвертой RRS;
iv) приведение мышиной клетки в контакт с первой человеческой микроклеткой для получения слитой клетки, содержащей первую сконструированную хромосому человека и вторую сконструированную хромосому мыши; и
v) применение сайт-специфической рекомбиназы (SSR) к слитой клетке вызывает межхромосомный обмен между геном человеческого Ig из первой сконструированной хромосомы человека и геном мышиного Ig из второй сконструированной хромосомы мыши в слитой клетке, так что продуцируется клетка трансгенной мыши, которая содержит третью сконструированную рекомбинантную хромосому,
при этом третья сконструированная рекомбинантная хромосома содержит центромеру мыши, теломеру мыши и ген человеческого Ig, который расположен между центромерой мыши и теломерой мыши,
при этом третья сконструированная рекомбинантная хромосома не содержит ген мышиного Ig.
2. Способ по п.1, в котором первая RRS выбрана из loxP и варианта loxP, и
в котором третья RRS выбрана из loxP и варианта loxP.
3. Способ по п.1 или 2, в котором вторая RRS выбрана из loxP и варианта loxP, и
в котором четвертая RRS выбрана из loxP варианта loxP.
4. Способ по п.2 или 3, в котором SSR представляет собой Cre-рекомбиназу.
5. Способ по п.1, в котором первая RRS выбрана из FRT, attP, attB, ITR и их вариантов, и
в котором третья RRS выбрана из FRT, attP, attB, ITR и их вариантов.
6. Способ по п.1 или 5, в котором вторая RRS выбрана из FRT, attP, attB, ITR и их вариантов, и
в котором четвертая RRS выбрана из FRT, attP, attB, ITR и их вариантов.
7. Способ по п.5 или 6, в котором SSR выбрана из флиппазы (FLP), интегразы и транспозазы.
8. Способ по любому из пп.1-7, в котором клетка трансгенной мыши, содержащая третью сконструированную рекомбинантную хромосому, может претерпевать митоз или мейоз.
9. Способ по любому из пп.1-8, в котором клетка трансгенной мыши, содержащая третью сконструированную рекомбинантную хромосому, настроена для экспрессии гена человеческого Ig.
10. Способ получения трансгенной мыши с использованием клетки трансгенной мыши, включающей по меньшей мере одну искусственную рекомбинантную хромосому, включающий:
i) подготовку человеческой клетки, содержащей первую сконструированную хромосому человека, которая включает ген человеческого иммуноглобулина (ген Ig), расположенный между первой последовательностью распознавания рекомбиназы (первой RRS) и второй последовательностью распознавания рекомбиназы (второй RRS),
при этом первая RRS и вторая RRS расположены между центромерой человека и теломерой человека первой сконструированной хромосомы человека соответственно;
ii) обработку подготовленной человеческой клетки для получения первой человеческой микроклетки, содержащей первую сконструированную хромосому человека;
iii) подготовку мышиной клетки, содержащей вторую сконструированную хромосому мыши, которая включает ген мышиного Ig, расположенный между третьей последовательностью распознавания рекомбиназы (третьей RRS) и четвертой последовательностью распознавания рекомбиназы (четвертой RRS),
при этом третья RRS и четвертая RRS расположены между центромерой мыши и теломерой мыши второй сконструированной хромосомы мыши соответственно, и
при этом первая RRS способна соединяться с третьей RRS, и вторая RRS способна соединяться с четвертой RRS;
iv) приведение мышиной клетки в контакт с первой человеческой микроклеткой с получением слитой клетки, содержащей первую сконструированную хромосому человека и вторую сконструированную хромосому мыши;
v) применение сайт-специфической рекомбиназы (SSR) к слитой клетке вызывает межхромосомный обмен между геном человеческого Ig первой сконструированной хромосомы человека и геном мышиного Ig второй сконструированной мышиной хромосомы в слитой клетке, так что продуцируется трансгенная клетка мыши, содержащая третью сконструированную рекомбинантную хромосому,
при этом третья сконструированная рекомбинантная хромосома содержит центромеру мыши, теломеру мыши и ген человеческого Ig, который расположен между центромерой мыши и теломерой мыши,
при этом третья сконструированная рекомбинантная хромосома не содержит ген мышиного Ig; и
vi) имплантацию химерной бластоцисты, содержащей третью сконструированную рекомбинантную хромосому, в матку суррогатной матери для получения потомства,
где химерную бластоцисту получают путем инъекции трансгенной мышиной клетки, включающей третью сконструированную рекомбинантную хромосому, в бластоцисту.