АГЕНТЫ И СПОСОБЫ, ОСНОВАННЫЕ НА ПРИМЕНЕНИИ ДОМЕНА EDA ФИБРОНЕКТИНА

1. Применение полипептида, включающего аминокислотную последовательность, выбранную среди
домена EDA фибронектина (EDA), или
фрагмента указанного домена EDA, способного к связыванию TLR4, или
варианта указанного домена EDA или фрагмента, способного к связыванию TLR4 и с более чем 70% гомологичностью с любой из природных форм или фрагментов домена EDA,
в создании иммунного клеточного ответа против антиген-стимулирующего агента.
2. Применение полипептида по п.1, отличающееся тем, что фрагмент, соответствующий домену EDA, включает последовательность, выбранную из
a) аминокислот 2-91 из SEQ. ID. NO:2;
b) SEQ. ID. NO:4; и
c) фрагмента последовательностей а) и b), способного к связыванию с TLR4 экспрессирующими клетками.
3. Применение полипептида по п.1, отличающееся тем, что фрагмент, соответствующий области EDA, включает последовательность, выбранную из
a) аминокислот 2-57 из SEQ. ID. NO:6;
b) SEQ. ID. NO:8; и
c) фрагмента последовательностей а) и b), способного к связыванию с TLR4 экспрессирующими клетками.
4. Применение полипептида по п.1, отличающееся тем, что указанный иммуностимуляторный агент дополнительно включает одну или несколько рассматриваемых молекул.
5. Применение полипептида по п.1, отличающееся тем, что указанный иммуностимуляторный агент дополнительно включает одну или несколько рассматриваемых молекул, где полипептид связан с указанной рассматриваемой молекулой с получением белкового вектора.
6. Белковый вектор, отличающийся тем, что он включает полипептид, аминокислотная последовательность которого выбрана из
a) домена EDA фибронектина (EDA),
b) фрагмента указанного домена EDA, способного к связыванию TLR4, или
c) варианта указанного домена EDA или его фрагмента, способного к связыванию TLR4 и с более чем 70% гомологичностью с любой из природных форм или фрагментов указанного домена EDA;
связан с рассматриваемой молекулой, выбранной из полипептида, липопептида, олигосахарида, полисахарида, нуклеиновой кислоты, липида и химического соединения.
7. Белковый вектор по п.6, отличающийся тем, что указанная рассматриваемая молекула выбирается из антигена и эпитопа.
8. Белковый вектор по п.6, отличающийся тем, что указанная рассматриваемая молекула выбирается из вирусного антигена, бактериального антигена, и паразитарного антигена.
9. Белковый вектор по п.6, отличающийся тем, что указанная рассматриваемая молекула представляет собой вирусный антиген из вируса гепатита С.
10. Белковый вектор по п.6, отличающийся тем, что вирусный антиген гепатита С представляет собой белок NS3 или антигенный фрагмент указанного белка.
11. Белковый вектор по п.10, отличающийся тем, что указанная аминокислотная последовательность представляет собой SEQ ID NO:10.
12. Белковый вектор по п.6, отличающийся тем, что указанная рассматриваемая молекула выбирается из опухолевого антигена и опухолевой антигенной детерминанты.
13. Белковый вектор по п.6, отличающийся тем, что указанная рассматриваемая молекула представляет собой антигенную цитотоксическую Т детерминанту из яичного альбумина (OVA 257-264) или SIINFEKL.
14. Белковый вектор по п.13, отличающийся тем, что он включает аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO:2 или SEQ ID NO:6.
15. Белковый вектор по п.6, отличающийся тем, что указанная рассматриваемая молекула представляет собой аллерген.
16. Белковый вектор по п.6, отличающийся тем, что указанная рассматриваемая молекула представляет собой препарат, химически или генетически соединенный с доменом EDA.
17. Применение белкового вектора, определенного в любом из пп.6-16, для специфического нацеливания и транслокации указанной рассматриваемой молекулы в цитозоль TLR4 экспрессирующих клеток.
18. Применение белкового вектора по п.17, отличающееся тем, что указанные TLR4 экспрессирующие клетки представляют собой антиген-презентирующие клетки.
19. Применение белкового вектора по п.18, отличающееся тем, что указанные антиген-презентирующие клетки представляют собой дендритные клетки.
20. Модифицированная нуклеиновая кислота, отличающаяся тем, что она кодирует белковый вектор, определенный в любом из пп.6-16.
21. Модифицированная нуклеиновая кислота по п.20, отличающаяся тем, что она также включает оперативно связанную контрольную последовательность, регулирующую экспрессию белкового вектора.
22. Модифицированная нуклеиновая кислота по п.20, отличающаяся тем, что она включает SEQ. ID. NO:1, или SEQ. ID. NO:5.
23. Модифицированная нуклеиновая кислота по п.20, отличающаяся тем, что она включает SEQ. ID. NO:9.
24. Вектор экспрессии для генной экспрессии белкового вектора, определенного в любом из пп.6-16, отличающийся тем, что указанный вектор экспрессии включает модифицированную нуклеиновую кислоту, определенную в любом из пп.20-23.
25. Вектор экспрессии по п.24, отличающийся тем, что указанный вектор представляет собой вирусный вектор.
26. Экспрессирующая клетка-хозяина, отличающаяся тем, что она включает модифицированную нуклеиновую кислоту, определенную в любом из пп.20-23, или вектор экспрессии, определенный в п.24 или 25.
27. Экспрессирующая клетка-хозяина по п.26, отличающаяся тем, что указанная клетка-хозяин экспрессии представляет собой Escherichia coli.
28. Способ получения белкового вектора, определенного в любом из пп.6-16, отличающийся тем, что он включает культивирование клетки-хозяина экспрессии, определенной в п.26 или 27, при условиях, позволяющих производство указанного белкового вектора и его извлечение.
29. Применение модифицированной нуклеиновой кислоты, определенной в любом из пп.20-23 для получения фармацевтической композиции.
30. Применение вектора экспрессии по любому из пп.24-25 для получения фармацевтической композиции.
31. Применение экспрессирующей клетки-хозяина по любому из п.26 или 27 для получения фармацевтической композиции.
32. Применение полипептида по п.1, отличающееся тем, что указанный агент, стимулирующий иммунный клеточный ответ, представляет собой фармацевтическую композицию.
33. Применение полипептида по п.32, отличающееся тем, что указанная фармацевтическая композиция стимулирует созревание антиген-презентирующих клеток.
34. Применение полипептида по п.32, отличающееся тем, что указанная фармацевтическая композиция индуцирует эффективный иммунный ответ против рассматриваемой молекулы.
35. Применение полипептида по п.32, отличающееся тем, что указанный иммунный ответ представляет собой ответ CTL.
36. Применение полипептида по п.32, отличающееся тем, что указанная фармацевтическая композиция полезна для лечения и профилактики инфекционной болезни.
37. Применение полипептида по п.34, отличающееся тем, что указанная фармацевтическая композиция предназначена для лечения и профилактики гепатита С.
38. Применение полипептида по п.32, отличающееся тем, что указанная фармацевтическая композиция предназначена для лечения и профилактики опухолевой болезни.
39. Применение полипептида согласно по п.32, отличающееся тем, что указанная фармацевтическая композиция предназначена для лечения и профилактики аллергической болезни.
40. Фармацевтическая композиция, отличающаяся тем, что она включает по крайней мере один приемлемый фармацевтический носитель и по крайней мере один из следующих компонентов:
i) белковый вектор, определенный в любом из пп.6-16;
ii) модифицированную нуклеиновую кислоту, определенную в любом из пп.20-23;
iii) вектор экспрессии, включающий указанную модифицированную нуклеиновую кислоту, определенный в п.24 или 25; или
iv) клетку-хозяина экспрессии, также включающую указанную модифицированную нуклеиновую кислоту, определенную в п.26 или 27.
41. Фармацевтическая композиция, отличающаяся тем, что она включает количество дендритных клеток, в которой указанные дендритные клетки были инкубированы in vitro с по крайней мере одним из следующих компонентов:
i) белковым вектором, определенным в любом из пп.6-16;
ii) нуклеиновой кислотой, определенной в любом из пп.20-23; или
iii) вектором экспрессии, включающим указанную модифицированную нуклеиновую кислоту, определенным в п.24 или 25.
42. Фармацевтическая композиция по п.40, отличающаяся тем, что композиция является вакциной или иммунотерапевтической композицией.