Способ прогнозирования прогрессирования хронической сердечной недостаточности у пациенток с раком молочной железы после химиотерапии антрациклинами
METHOD FOR PREDICTING THE PROGRESSION OF CHRONIC HEART FAILURE IN PATIENTS WITH BREAST CANCER AFTER ANTHRACYCLINE CHEMOTHERAPY

Изобретение относится к медицине и может быть использовано в кардиологии, онкологии и реабилитологии для оценки прогноза прогрессирования хронической сердечной недостаточности (ХСН) после химиотерапии антрациклинами, и, следовательно, снижения риска исключительно высокой преждевременной смертности у пациенток с прогрессирующей ХСН после химиотерапии рака молочной железы.
Сердечная недостаточность является серьезным осложнением после лечения рака молочной железы из-за кардиотоксического действия противоопухолевых препаратов, особенно таких, как антрациклины [1]. Хроническая сердечная недостаточность после химиотерапии антрациклинами часто резистентна к терапии, а летальность у таких пациенток достигает 79% [2, 3]. В последние годы было установлено, что антрациклины ингибируют связывание гетеродимера фактора, индуцируемого гипоксией 1 альфа /нуклеарного транслокатора арилуглеводородного рецептора с энхансером гена-мишени и снижают клеточный ответ на гипоксию [4]. Фактор, индуцируемый гипоксией 1 альфа, является универсальным регулятором экспрессии генов, индуцируемых гипоксией, и может активироваться окислительным стрессом, воспалением и фиброзом [5-8]. Показано, что применение антрациклинов вызывает значительные изменения в экспрессии генов, контролирующих как структуру митохондрий, так и их метаболизм [9]. Препараты данной группы накапливаются преимущественно в митохондриях кардиомиоцитов, сильно влияя как на структуру, так и на активность этих органелл, что приводит к повышенной продукции активных форм кислорода [10]. Опосредованная антрациклинами продукция этих реактивных частиц, в свою очередь, потенциально может привести к дисбалансу фактора, индуцируемого гипоксией 1 альфа, и, как следствие, прогрессированию сердечной дисфункции, вызванной антрациклинами.
Известен способ прогнозирования развития антрациклин-индуцированной кардиотоксичности у пациенток с раком молочной железы в течение 12 месяцев после химиотерапии антрациклинами, сущность которого заключается в определении посредством метода фенолхлороформной экстракции с последующим типированием аллелей и определением полиморфного локуса 5A/6A гена матриксной металлопротеиназы-3 (rs3025058) [11]. Однако с помощью данного способа у пациенток с раком молочной железы прогнозируется непосредственно риск развития антрациклин-индуцированной кардиотоксичности, но не характер течения уже развившейся ХСН.
В проанализированной патентной и научной медицинской литературе адекватного прототипа не обнаружено.
Задача изобретения - создание способа, позволяющего повысить качество прогноза прогрессирования хронической сердечной недостаточности после химиотерапии антрациклинами у пациенток с раком молочной железы в течение 24 месяцев наблюдения по определению генотипа полиморфного локуса 1772С>T фактора, индуцируемого гипоксией 1 альфа (rs11549465).
Поставленная задача решается путем выделения ДНК из буккального эпителия посредством метода фенолхлороформной экстракции с последующим типированием аллелей и определением полиморфного локуса 1772С>T гена фактора, индуцируемого гипоксией 1 альфа (rs11549465), у женщин с раком молочной железы сразу после установления диагноза хронической сердечной недостаточности после химиотерапии антрациклинами. При выявлении у носителей генотипа C/T полиморфного локуса 1772С>T гена фактора, индуцируемого гипоксией 1 альфа (rs11549465), прогнозируют высокий риск прогрессирования ХСН в течение 24 месяцев наблюдения.
Новым в предлагаемом способе является то, что для прогнозирования риска прогрессирования ХСН после химиотерапии антрациклинами определяют генотип полиморфного локуса 1772С>T гена фактора, индуцируемого гипоксией 1 альфа (rs11549465).
Предложенный способ прогнозирования риска прогрессирования ХСН после химиотерапии антрациклинами основан на том, что ген фактора, индуцируемого гипоксией 1 альфа (rs11549465), активирует экспрессию генов, непосредственно регулирующих работу органелл кардиомиоцитов - митохондрий и пероксисом, с развитием последующей их дисфункции, приводящей к прогрессированию сердечной недостаточности. Данный механизм потенцируется повышенным образованием активных форм кислорода при лечении антрациклинами, который в свою очередь приводит к дисбалансу фактора, индуцируемого гипоксией 1 альфа, и последующей активации генов [6].
Преимуществом предлагаемого изобретения является то, что способ позволяет:
- оценить персональный риск прогрессирования ХСН после химиотерапии антрациклинами в течение 24 месяцев наблюдения после установления диагноза ХСН и назначить соответствующую патогенетическую профилактическую терапию, направленную на ингибирование процессов гипоксии миокарда;
- снизить большие финансовые затраты, связанные с неоднократным использованием дорогостоящего визуализирующего кардиальную дисфункцию метода - ЭХОКГ для оценки прогрессирования ХСН;
- определить приоритетную группу больных с ХСН после химиотреапии антрациклинами в течение 24 месяцев после установления диагноза для диспансерного наблюдения и оптимизации эффективных целевых профилактических мероприятий, направленных на профилактику прогрессирования ХСН.
Существенные признаки проявили в заявляемой совокупности новые свойства, явным образом не вытекающие из уровня техники в данной области и не очевидные для специалиста. Идентичной совокупности признаков в проанализированной литературе не обнаружено. Предлагаемое изобретение может быть использовано в здравоохранении.
Исходя из вышеизложенного, следует считать изобретение соответствующим условиям патентоспособности “Новизна”, “Изобретательский уровень”, “Промышленная применимость”.
Изобретение будет понятно из следующего описания.
Способ осуществляется следующим образом:
После установления диагноза ХСН после химиотерапии антрациклинами, у пациенток с раком молочной железы выделяют ДНК из клеток буккального эпителия, используя метод фенол-хлороформной экстракции [11]. Пробирки с клиническими образцами (буккальный эпителий) центрифугируют на 14 тыс. оборотов/мин. 15 минут. Осадок ресуспендируют в 300 мкл раствора №1 (100 мМ Tris HCl pH = 8,0; 10 мМ ЕДТА, 100мМ NaCl). Добавляют 50 мкл раствора №2 (10% додецил сульфат натрия (SDS)) и 10 мкл протеиназы К (10 мг/мл). Хорошо перемешивают и инкубируют 1 час при 55оС. Добавляют 200 мкл фенола, уравновешенного ТЕ и 200 мкл хлороформа. Интенсивно перемешивают и центрифугируют 10 мин на максимальной скорости (14 т.о./мин). Верхнюю фазу переносят в чистую пробирку, не трогая нижнюю и интерфазу. Добавляют 400 мкл хлороформа. Перемешивают и центрифугируют 5 мин на максимальной скорости (14 т.о./мин). Верхнюю фазу переносят в чистую пробирку. Добавляют 10 мкл ЛПААГ, 40 мкл 3М AcNa pH5.4, 800 мкл EtOH, тщательно перемешивают и инкубируют ночь на -200С. Центрифугируют 15 мин на максимальной скорости (14 т.о./мин). Супернатант удаляют, к осадку добавляют 400 мкл 75% EtOH. Инкубируют 10 мин при комнатной температуре. Отбирают супернатант, следя за тем, чтобы осадок остался в пробирке. Сушат пробирки с открытыми крышками в термостате для микропробирок при 370С в течение 15 мин. К осадку добавляют 100 мкл дистиллированной воды и прогревают при 650С 10 минут.
Для анализа аллельных вариантов гена фактора, индуцируемого гипоксией 1 альфа (rs11549465), методом аллель-специфичной амплификация в режиме Real-time с использованием красителя SYBR Green I для индукции флюоресценции используют две пары праймеров. Один из праймеров в паре является общим, два других отличаются 3'-концевым нуклеотидом. Таким образом, что один из праймеров комплементарен последовательности ДНК дикого типа, другой - последовательности, содержащей однонуклеотидную замену. Каждый образец амплифицируют с использованием обеих пар праймеров. При полной комплементарности матрицы и праймера реакция амплификации будет идти с бóльшей эффективностью, чем в случае наличия неспаренного нуклеотида на 3'-конце праймера. Детекция результатов полимеразной цепной реакции проводится в режиме реального времени. Для этого в реакционную смесь добавляют флуоресцентный краситель SYBR Green I. SYBR Green I представляет собой интеркалирующий краситель, который флюоресцирует приблизительно в 200 раз интенсивнее, если связан с двуцепочечной молекулой ДНК. Продуктом ПЦР является двуцепочечный ДНК-фрагмент. Таким образом, интенсивность флюоресцентного сигнала будет прямо пропорционально количеству образующегося продукта.
Статистическая обработка результатов проводилась с использованием пакета прикладных программ STATISTICA v. 13.3. Количественные переменные определяли в виде медианы (Ме), а также 25-й и 75-й квартилей (25Q и 75Q). Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез в данном исследовании принимался равным 0,05. Описание качественных данных проводилось путем построения таблиц сопряженности с указанием абсолютных и относительных частот встречаемости признаков. Силу ассоциаций генотипических характеристик изученных генов с риском развития неблагоприятного исхода оценивали по значениям показателя отношения шансов (odds ratio, OR) и его 95% доверительного интервала (95% ДИ, C.I.). Вычисление показателя относительного риска неблагоприятного течения ХСН проводилось на основании расчета показателя соотношения шансов (odds ratio - OR) по формуле: OR=(a+0,5)(d+0,5)/(b+0,5)(c+0,5), где a - частота генотипа в выборке больных, b - частота генотипа в контрольной выборке, c=(1-а) - сумма частот остальных генотипов в выборке больных, d=(1-b) - сумма частот остальных генотипов в контрольной выборке. Параметр 0,5 в представленной формуле используется в том случаев, когда одно из чисел a, b, c, d равняется нулю или оказывается меньше трех. Величина OR=1 указывала на отсутствие ассоциаций, при OR>1 имело место положительная ассоциация генотипа с заболеванием («фактор риска»).
Всего обследовано 114 пациенток с раком молочной железы, получавших антрациклины в качестве химиотерапевтического лечения, у которых через 12 месяцев после окончания курса химиотерапии развилась ХСН. Ни у одной из пациенток, участвующих в данном исследовании, до начала химиотерапии не было диагностировано патологии со стороны сердечно-сосудистой системы. Отсутствие кардиологической патологии было подтверждено данными анамнеза, ЭКГ, ЭхоКГ.
На каждого больного заполнялась специально разработанная клиническая карта. Все пациенты давали свое письменное информированное согласие для участия в исследовании. Состояние больных оценивали исходно и в динамике через 24 месяца после установления диагноза ХСН, индуцированной антрациклинами. Оценивали в динамике показатели ЭхоКГ - конечный диастолический размер (КДР), конечный систолический размер (КСР), фракция выброса ЛЖ (ФВ ЛЖ). Критериями прогрессирования ХСН считали: появление или ухудшение симптомов/признаков ХСН и/или госпитализация в связи с декомпенсацией ХСН, требующая внутривенного введения диуретиков; абсолютное снижение ФВ ЛЖ более чем на 10%; или снижение функционального класса ХСН по NYHA на 1 или более классов.
Через 24 месяца после включения в исследование пациентки ретроспективно были разделены на две группы: больные с прогрессированием ХСН (группа 1, n=54) и женщины с благоприятным течением патологии (группа 2, n=60).
По основным клинико-демографическим и эхокардиографическим характеристикам группы были сопоставимы (таблица 1). Проведенный анализ ЭхоКГ-параметров у пациенток через 24 месяцев наблюдения в сравнении с исходными данными после установления диагноза ХСН показал явное различие КСР и КДР, а также достоверное снижение фракции выброса левого желудочка в группе женщин с прогрессированием ХСН после химиотерапии. При этом уровни натрийуретического пептида у больных первой группы через 24 месяца после установления диагноза ХСН возросли на 23,3% (р=0,001), а дистанция теста 6-минутной ходьбы снизилась на 10% (р=0,014), что соответствовало прогрессированию хронической сердечной недостаточности.
Таблица 1
Характеристика пациентов в зависимости от характера течения ХСН после химиотерапии антрациклинами на момент включения в исследования и в динамике через 24 месяца наблюдения в зависимости от характера течения ХСН
Параметр
группа 1, n=54Неблагоприятное течение ХСН
группа 2, n=60Благоприятное течение ХСН
p-value
Возраст, годы
48 (46; 50)
50 (46; 53)
0,067
Кумулятивная доза доксорубицина, мг/м<sup>2</sup>
360 (300; 360)
360 (300; 360)
0,645
ФК ХСН (NYHA), n (%)I ФКII ФКIII ФК
22 (40,7)27 (50,0)5 (9,3)
33 (55,0)23 (38,3)4 (6,7)
0,1870,0810,898
Тест 6-минутной ходьбы, м
412 (364; 466)
429 (356; 470)
0,617
NT-proBNP, пг/мл
316,6 (260,1; 377,7)
324,65 (263,05; 378,15)
0,832
ФВ ЛЖ, %
исходно
50,0 (48; 51)
50,0 (47; 53)
0,699
через 24 мес.
44,0 (42,0; 49,5)
54,0 (51; 55)
<0,001
КДР, мм
исходно
50 (48; 51,0)
48,0 (45,5; 50,5)
0,079
через 24 мес.
51,0 (48,0; 52,0)
47,0 (45,0; 49,0)
<0,001
КСР, мм
исходно
36 (34; 38)
36 (33; 38,5)
0,889
через 24 мес.
37 (36; 39)
34,0 (32,0; 36,0)
<0,001
ТШХ, м
исходно
412 (364; 466)
429 (356; 470)
0,617
через 24 мес.
371 (350,5; 423)
436 (400; 460)
<0,001
NT-proBNP, пг/мл
исходно
316,6 (260,1; 377,7)
324,65 (263,05; 378,15)
0,832
через 24 мес.
412,0 (247,6; 525,7)
205,0 (182,8; 258,0)
<0,001
Примечание. ХСН - хроническая сердечная недостаточность, АС - схема полихимиотерапии (доксорубицин + циклофосфамид), ТАС - схема полихимиотерапии (доксорубицин + циклофосфамид + доцетаксел), ФК - функциональный класс, РМЖ - рак молочной железы, ФВЛЖ - фракция выброса левого желудочка, КДР - конечный диастолический размер, КСР - конечный систолический размер, ТШХ - тест 6-минутной ходьбы, NT-proBNP - предшественник мозгового натрийуретического пептида.
Распределение частот встречаемости генотипов полиморфного локуса 1772С>T гена фактора, индуцируемого гипоксией 1 альфа (rs11549465), в группах соответствовало ожидаемому при равновесии Харди-Вайнберга. Результаты исследования гена фактора, индуцируемого гипоксией 1 альфа (rs11549465), в группе контроля и в группе больных представлены в таблице 2. Установлено, что у женщин с прогрессированием ХСН после химиотерапии антрациклинами частота встречаемости генотипа C/T статистически значимо превышала таковую в группе женщин с без прогрессирования данной патологии через 24 месяца проспективного наблюдения - 68,5% и 23,3% (р=0,009).
Таблица 2
Частоты встречаемости генотипов гена фактора, индуцируемого гипоксией 1 альфа (rs11549465), в исследованных группах (n, %)
Ген
Генотип
Группа 1(n=54)
Группа 2(n=60)
Отношение шансов
р-value
HIF1α (1772С>T, rs11549465)
C/C
15 (27,8)
42 (70,0)
2,52
0,001
C/T
37 (68,5)
14 (23,3)
2,93
0,009
T/T
2 (3,7)
4 (6,7)
1,81
0,246
Примечание. HIF1α - фактор, индуцируемый гипоксией 1 альфа.
При анализе данных установлено, что наличие генотипа C/T полиморфного локуса 1772С>T гена фактора, индуцируемого гипоксией 1 альфа (rs11549465) (ОШ=2,93; р=0,009) было связано с неблагоприятным течением ХСН после химиотреапии антрациклинами. Это обосновывает целесообразность пользования гена фактора, индуцируемого гипоксией 1 альфа (rs11549465), в качестве неинвазивного маркера высокого риска прогрессирование данной патологии.
Способ прогнозирования высокого риска прогрессирования хронической сердечной недостаточности после химиотерапии антрациклинами иллюстрируется следующими клиническими примерами, свидетельствующими о том, что определение генотипа полиморфного локуса 1772С>T гена фактора, индуцируемого гипоксией 1 альфа (rs11549465) обеспечивает объективную оценку риска прогрессирования патологического процесса в миокарде после терапии антрациклинами.
ПРИМЕР 1: Пациентка Г., 48 лет
2
2
2
2
По поводу рака молочной железы 12 месяцев назад проведена терапия доксорубицином 60 мг/м (каждые 3 недели до достижения суммарной дозы 360 мг/м) и циклофосфамидом 600 мг/м (каждые 3 недели до достижения суммарной дозы 3600 мг/м ). Через 12 месяцев после окончания курса полихиомиотерапии зарегистрировано снижение фракции выброса левого желудочка с 64% до 54%, появилась одышка при умеренной физической нагрузке (ходьба до 250-300 метров, подъем на 2-3 этаж). При объективном исследовании: кожные покровы бледные, чистые, обычной окраски, влажности. Язык влажный, чистый. АД - 120/70, ЧСС - 72 в минуту, тоны сердца ясные, ритмичные. Дыхание везикулярное, проводится по всем отделам, хрипов нет. Живот не увеличен, при пальпации мягкий, безболезненный, перистальтика выслушивается. Печень, селезенка не увеличены. Периферических отёков нет. Мочеиспускание свободное.
Пациентке впервые выставлен диагноз хронической сердечной недостаточности после химиотреапии антрациклинами, ФК II (по NYHA). Назначена терапия в виде ингибитора ангиотензинпревращающего фермента, бета-блокатора.
При генотипировании выявлен генотип C/T полиморфного локуса 1772С>T гена фактора, индуцируемого гипоксией 1 альфа (rs11549465).
Через 24 мес. после установления диагноза и назначения терапии состояние больной клинически ухудшилось: толерантность к нагрузке снизилась, появилась слабость, одышка при умеренной физической нагрузке. При объективном исследовании: кожные покровы бледные, чистые, обычной окраски, влажности, умеренный цианоз губ. Язык влажный, чистый. АД 110/70 мм рт.ст., тоны сердца приглушенные, ритмичные 82 уд/мин. Дыхание везикулярное, ослаблено в нижних отделах, частота дыхания 20 в минуту. Живот не увеличен, при пальпации мягкий, безболезненный, перистальтика выслушивается. Отеки на уровне нижней трети голени. Мочеиспускание свободное. По данным теста 6-мин. ходьбы зарегистрировано снижение ФК со II до III (по NYHA). По данным Эхо-КГ: ФВ ЛЖ уменьшилась на 9,3%, увеличились КСР и КСР ЛЖ (таблица 3). В терапии добавлены петлевые диуретики.
Таблица 3
Основные клинико-инструментальные характеристики пациентки Г.:
Показатели
исходно
через 24 мес.
ФК ХСН (по NYHA)
II
III
КДР ЛЖ (мм)
46
51
КСР ЛЖ (мм)
27
35
ФВ ЛЖ (%)
54
49
NT-proBNP (пг/мл)
298,1
369,7
тест 6-минутной ходьбы (м)
447
357
Примечание. Здесь и ниже в таблице: КДР - конечный диастолический размер, КСР - конечный систолический размер, ФВ ЛЖ - фракция выброса левого желудочка, NT-proBNP - предшественник мозгового натрийуретического пептида.
Таким образом, у пациентки с впервые установленным диагнозом хронической сердечной недостаточности, индуцированной антрациклинами, и генотипом C/T полиморфизма rs11549465 гена HIF1α, диагностировано прогрессирование сердечной недостаточности, выражающееся в снижении ФВ ЛЖ, дилатации полости ЛЖ и клиническими признаками ухудшения ХСН.
Пример 2: Пациентка М., 49 лет
2
2
По поводу рака молочной железы 12 месяцев назад проведена терапия доксорубицином 60 мг/м (каждые 3 недели до достижения суммарной дозы 360 мг/м2) и циклофосфамидом 600 мг/м (каждые 3 недели до достижения суммарной дозы 3600 мг/м 2). Через 12 месяцев после окончания курса полихиомиотерапии зарегистрировано снижение фракции выброса левого желудочка с 59% до 44%, появилась одышка при умеренной физической нагрузке (ходьба до 350 метров, подъем на 3 этаж), повышенная утомляемость. При объективном исследовании: кожные покровы бледные, чистые, обычной окраски, влажности. Язык влажный, чистый. АД - 120/80, ЧСС - 74 в минуту, тоны сердца ясные, ритмичные. Дыхание везикулярное, проводится по всем отделам, хрипов нет. Живот не увеличен, при пальпации мягкий, безболезненный, перистальтика выслушивается. Печень, селезенка не увеличены. Периферических отёков нет. Мочеиспускание свободное.
Пациентке впервые выставлен диагноз хронической сердечной недостаточности после химиотреапии антрациклинами, ФК II (по NYHA). Назначена терапия в виде ингибитора ангиотензинпревращающего фермента, бета-блокатора.
При генотипировании выявлен генотип С/С полиморфного локуса 1772С>T гена фактора, индуцируемого гипоксией 1 альфа (rs11549465).
Через 24 мес. после установления диагноза и назначения терапии состояние больной клинически стабильное, субъективно без ухудшения. Толерантность к нагрузке улучшилась. При объективном исследовании: кожные покровы бледные, чистые, обычной окраски, влажности. Язык влажный, чистый. АД - 110/60 мм рт.ст., тоны сердца приглушенные, ритмичные, 71 уд/мин. Дыхание везикулярное, проводится по всем отделам, хрипы не выслушиваются, частота дыхания 15 в минуту. Живот не увеличен, при пальпации мягкий, безболезненный, перистальтика выслушивается. Печень по краю реберной дуги, размеры по Курлову 10-9-8 см. Отеков нет. Мочеиспускание свободное.
По данным Эхо-КГ: по сравнению с исходным периодом ФВ ЛЖ, КСР и КСР ЛЖ, толщина ЗСЛЖ и МЖП отрицательной динамики не претерпевали (таблица 4).
Таблица 4
Основные клинико-инструментальные характеристики пациентки М.:
Показатели
исходно
через 24 мес.
ФК ХСН (по NYHA)
II
I
КДР ЛЖ (мм)
52
49
КСР ЛЖ (мм)
39
37
ФВ ЛЖ (%)
44
50
NT-proBNP (пг/мл)
450,8
198,8
тест 6-минутной ходьбы (м)
457
545
Таким образом, у пациентки с впервые установленным диагнозом хронической сердечной недостаточности после химиотерапии антрациклинами, и генотипом C/C полиморфного локуса 1772С>T гена фактора, индуцируемого гипоксией 1 альфа (rs11549465), симптомов и признаков прогрессирования сердечной недостаточности не установлено.
Предлагаемый способ апробирован на 114 пациентках и позволяет прогнозировать высокий риск прогрессирования ХСН после химиотерапии антрациклинами. Это дает возможность выделить приоритетную группу пациенток с раком молочной железы после химиотерапии антрациклинами, у которых был впервые установлен диагноз хронической сердечной недостаточности, для диспансерного наблюдения с организацией эффективных целевых мероприятий, направленных на профилактику неуклонного прогрессирования хронической сердечной недостаточности и снижением ФВ ЛЖ с целью предотвращения у этих пациенток исключительно высокой преждевременной смертности.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1. Chan BYH, Roczkowsky A, Cho WJ, et al. MMP inhibitors attenuate doxorubicin cardiotoxicity by preventing intracellular and extracellular matrix remodelling. Cardiovasc Res. 2021;117(1):188-200. doi: 10.1093/cvr/cvaa017. PMID: 31995179; PMCID: PMC7797218
2. Lipshultz SE, Alvarez JA, Scully RE. Anthracycline associated cardiotoxicity in survivors of childhood cancer. Heart. 2008; 94:525-33. http://dx.doi.org/10.1136/hrt.2007.136093;
3. Felker GM, Thompson RE, Hare JM, et al. Underlying causes and long-term survival in patients with initially unexplained cardiomyopathy. N Engl J Med. 2000; 342: 1077-84. doi: 10.1056/NEJM200004133421502
4. Tanaka T, Yamaguchi J, Shoji K, Nangaku M. Anthracycline inhibits recruitment of hypoxia-inducible transcription factors and suppresses tumor cell migration and cardiac angiogenic response in the host. J Biol Chem. 2012;287(42):34866-34882. doi:10.1074/jbc.M112.374587
5. Sato M, Hirose K, Ichise K, et al. Not Only Hypoxia- but Radiation-Induced Epithelial-Mesenchymal Transition Is Modulated by Hypoxia-Inducible Factor 1 in A549 Lung Cancer Cells. Folia Biol (Praha). 2021;67(2):62-69.
6. Packer M. Mutual Antagonism of Hypoxia-Inducible Factor Isoforms in Cardiac, Vascular, and Renal Disorders. JACC Basic Transl Sci. 2020 Sep 28;5(9):961-968. doi:10.1016/j.jacbts.2020.05.006.
7. Krishnan J, Suter M, Windak R, et al. Activation of a HIF1alpha-PPARgamma axis underlies the integration of glycolytic and lipid anabolic pathways in pathologic cardiac hypertrophy. Cell Metab 2009;9:512-24. doi: 10.1016/j.cmet.2009.05.005.
8. Pan Y, Mansfield KD, Bertozzi CC, et al. Multiple factors affecting cellular redox status and energy metabolism modulate hypoxia-inducible factor prolyl hydroxylase activity in vivo and in vitro. Mol Cell Biol 2007;27:912-25. doi: 10.1128/MCB.01223-06.
9. Zhang S, Liu X, Bawa-Khalfe T, et al. Identification of the molecular basis of doxorubicin-induced cardiotoxicity. Nat Med. 2012; 18(11):1639-42. doi: 10.1038/nm.2919.
10. Chen Y, Jungsuwadee P, Vore M, Butterfield DA, St Clair DK. Collateral damage in cancer chemotherapy: oxidative stress in nontargeted tissues. Mol Interv. 2007 Jun; 7(3):147-56. DOI: 10.1124/mi.7.3.6.
11. Способ прогнозирования антрициклин-индуцированной кардиотоксичности у женщин с раком молочной железы [Текст]: пат 2714683 Рос. Федерация: МПК G01N 33/50 (2006.01) / Тепляков А.Т., Гракова Е.В., Шилов С.Н., Березикова Е.Н., Попова А.А., Неупокоева М.Н., Копьева К.В.; заявитель и патентообладатель Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) (RU). - 2019131209, заявл. 01.10.2019; опубл 19.02.2020 Бюл. № 5. - 14 с.