СПОСОБЫ ПРИМЕНЕНИЯ АНТИТЕЛ К LGR5

1. Способ лечения связанного с геном hedgehog заболевания у индивидуума, включающий введение индивидууму эффективного количества антитела к LGR5.
2. Способ лечения связанного с геном hedgehog заболевания у индивидуума, включающий введение индивидууму эффективного количества антитела к LGR5 и эффективного количества ингибитора пути hedgehog.
3. Способ по п. 2, где соответствующие количества антитела к LGR5 и ингибитора пути hedgehog являются эффективными для увеличения периода ответа на терапию и/или отсрочки повторного проявления и/или развития устойчивости по сравнению с лечением при помощи только ингибитора пути hedgehog.
4. Способ увеличения эффективности лечения связанного с геном hedgehog заболевания, включающий применение ингибитора пути hedgehog у индивидуума, причем способ включает введение индивидууму эффективного количества антитела к LGR5 и эффективного количества ингибитора пути hedgehog.
5. Способ лечения связанного с геном hedgehog заболевания у индивидуума, причем лечение включает введение индивидууму эффективного количества антитела к LGR5 и эффективного количества ингибитора пути hedgehog, и причем лечение характеризуется повышенной эффективностью по сравнению со стандартным лечением, включающим введение эффективного количества ингибитора пути hedgehog без (при отсутствии) антитела к LGR5.
6. Способ задержки и/или предупреждения развития повторного проявления и/или устойчивости связанного с геном hedgehog заболевания к ингибитору пути hedgehog у индивидуума, включающий введение индивидууму эффективного количества антитела к LGR5 и эффективного количества ингибитора пути hedgehog.
7. Способ увеличения чувствительности к ингибитору пути hedgehog у индивидуума с заболеванием, связанным с геном hedgehog, включающий введение индивидууму эффективного количества антитела к LGR5 и эффективного количества ингибитора пути hedgehog.
8. Способ продления периода чувствительности к ингибитору пути hedgehog у индивидуума с заболеванием, связанным с геном hedgehog, включающий введение индивидууму эффективного количества антитела к LGR5 и эффективного количества ингибитора пути hedgehog.
9. Способ продления продолжительности ответа на ингибитор пути hedgehog у индивидуума с заболеванием, связанным с геном hedgehog, включающий введение индивидууму эффективного количества антитела к LGR5 и эффективного количества ингибитора пути hedgehog.
10. Способ по любому из пп. 1-9, где антитело к LGR5 является моноклональным антителом.
11. Способ по любому из пп. 1-9, где антитело к LGR5 связывает эпитоп в пределах аминокислот 22-323 из SEQ ID NO: 67 или в пределах аминокислот 22-123 из SEQ ID NO: 67 и связывается с LGR5 с аффинностью ≤5 нМ.
12. Способ по любому из пп. 1-9, где антитело к LGR5 является человеческим, гуманизированным или химерным антителом.
13. Способ по любому из пп. 1-9, где антитело к LGR5 является фрагментом антитела, который связывает LGR5 человека с SEQ ID NO: 67.
14. Способ по любому из пп. 1-9, где антитело к LGR5 содержит:
a) HVR-H1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 30, HVR-Н2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 31, и HVR-H3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 32; и
b) HVR-L1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 27, HVR-L2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 28, и HVR-L3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 29.
15. Способ по любому из пп. 1-9, где антитело к LGR5 содержит:
a) HVR-H1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 60, HVR-Н2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 61, и HVR-H3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 62; и
b) HVR-L1, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 57, HVR-L2, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 58, и HVR-L3, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 59.
16. Способ по любому из пп. 1-9, где антитело к LGR5 содержит:
a) VH-последовательность SEQ ID NO: 6 и VL-последовательность SEQ ID NO: 5;
b) VH-последовательность SEQ ID NO: 8 и VL-последовательность SEQ ID NO: 7;
c) VH-последовательность SEQ ID NO: 10 и VL-последовательность SEQ ID NO: 9;
d) VH-последовательность SEQ ID NO: 12 и VL-последовательность SEQ ID NO: 11;
e) VH-последовательность SEQ ID NO: 14 и VL-последовательность SEQ ID NO: 13;
f) VH-последовательность SEQ ID NO: 16 и VL-последовательность SEQ ID NO: 15;
g) VH-последовательность SEQ ID NO: 18 и VL-последовательность SEQ ID NO: 17;
h) VH-последовательность SEQ ID NO: 20 и VL-последовательность SEQ ID NO: 19; или
i) VH-последовательность SEQ ID NO: 26 и VL-последовательность SEQ ID NO: 25.
17. Способ по любому из пп. 1-9, где антитело к LGR5 конъюгировано с цитотоксическим средством.
18. Способ по любому из пп. 1-9, где антитело к LGR5 имеет формулу Ab-(L-D)p, где:
(a) Ab представляет собой антитело к LGR5;
(b) L представляет собой линкер;
(c) D представляет собой лекарственное средство, выбранное из майтанзиноида, ауристатина, калихеамицина, пирролобензодиазепина и производного неморубицина; и
(d) р варьирует от 1 до 8.
19. Способ по п. 18, где D представляет собой ауристатин.
E
20. Способ по п. 18, где D имеет формулу D
2
6
3
4
5
7
8
9
18
8
8
3
3
2
2
и где каждый из R и R представляет собой метил, каждый из R и R представляет собой изопропил, R представляет собой Н, R представляет собой втор-бутил, каждый R независимо выбран из СН, O-СН, ОН и Н; R представляет собой Н; и R представляет собой -С(R)-С(R)-арил.
21. Способ по п. 18, где лекарственное средство представляет собой ММАЕ.
22. Способ по п. 18, где D представляет собой пирролобензодиазепин с формулой А
где пунктирные линии указывают на необязательное наличие двойной связи между С1 и С2 или С2 и С3;
2
D
D
D
2
2
2
2
2
2
R независимо выбран из Н, ОН, =O,=СН, CN, R, OR, =CH-R, =C(R), O-SO-R, COR и COR и необязательно дополнительно выбран из галогена или дигалогена, где Rнезависимо выбран из R, COR, COR, СНО, COH и галогена;
6
9
2
2
3
R и R независимо выбран из Н, R, ОН, OR, SH, SR, NH, NHR, NRR', NO, MeSn и галогена;
7
2
2
3
R независимо выбран из Н, R, ОН, OR, SH, SR, NH, NHR, NRR', NO, MeSn и галогена;
Q независимо выбран из О, S и NH;
11
3
R представляет собой любой из Н или R, или где Q представляет собой О, SOM, где М является катионом металла;
1-8
3-8
5-20
каждый из R и R' независимо выбран из необязательно замещенных C-алкильных, С-гетероциклических и С-арильных групп, и необязательно по отношению к группе NRR', R и R' вместе с атомом азота, к которому они присоединены, формируют необязательно замещенное 4-, 5-, 6- или 7-членное гетероциклическое кольцо;
12
16
19
17
2
6
9
7
R, R, R и R являются такими, как определено соответственно для R, R, R и R;
3-12
Rʺ является С-алкиленовой группой, цепь которой может быть прервана одним или несколькими гетероатомами и/или ароматическими кольцами, которые необязательно являются замещенными; и
X и X' независимо выбран из О, S и N(H).
23. Способ по п. 18, где D имеет структуру
где n равно 0 или 1.
24. Способ по п. 18, где D имеет структуру, выбранную из
; и
E
E
D
D
2
2
где каждый из R и R независимо выбран из Н или R, где R независимо выбран из R, COR, COR, СНО, COH и галогена;
1
2
5-20
где каждый из Ar и Ar независимо представляет собой необязательно замещенный C-арил; и
где n равно 0 или 1.
25. Способ по п. 18, где D представляет собой пирролобензодиазепин с формулой В
где горизонтальная волнистая линия указывает на участок ковалентного присоединения к линкеру;
V1
V2
5-6
R и R независимо выбраны из Н, метила, этила, фенила, фтор-замещенного фенила и С-гетероциклила; и
n равно 0 или 1.
26. Способ по п. 18, где D является производным неморубицина.
27. Способ по п. 18, где D имеет структуру, выбранную из
и
28. Способ по п. 18, где линкер может расщепляться протеазой.
29. Способ по п. 28, где линкер содержит дипептид Val-Cit или дипептид Phe-Lys.
30. Способ по п. 18, где линкер является кислото-неустойчивым.
31. Способ по п. 30, где линкер содержит гидразон.
32. Способ по п. 18, включающий формулу:
где S представляет собой атом серы.
33. Способ по п. 18, включающий формулу
34. Способ по п. 18, включающий формулу, выбранную из
и
35. Способ по п. 18, где р варьирует от 2 до 5.
36. Способ по любому из пп. 1-9, 19-35, где ингибитор пути hedgehog является антагонистом для рецептора smoothened.
37. Способ по п. 36, где антагонист для рецептора smoothened представляет собой 2-хлор-N-[4-хлор-3-(пиридин-2-ил)фенил]-4-(метилсульфонил)бензамид или его соль.
38. Способ по п. 37, где антагонист для рецептора smoothened представляет собой 2-хлор-N-[4-хлор-3-(пиридин-2-ил)фенил]-4-(метилсульфонил)бензамид.
39. Способ по п. 36, где антагонист для рецептора smoothened представляет собой висмодегиб.
40. Способ по любому из пп. 1-9, 19-35, 37-39, где связанное с геном hedgehog заболевание представляет собой злокачественную опухоль.
41. Способ по п. 40, где злокачественная опухоль представляет собой базально-клеточную карциному.
42. Способ по п. 41, где базально-клеточная карцинома является местнораспространенной или метастатической базально-клеточной карциномой.
43. Способ по п. 40, где злокачественная опухоль является гранулобластомой.
44. Способ по п. 40, где связанное с геном hedgehog заболевание является LGR5-положительным.
45. Способ по любому из пп. 1-9, 19-35, 37-39, 41-44, где ингибитор пути hedgehog вводят одновременно с антителом к LGR5.
46. Способ по любому из пп. 1-9, 19-35, 37-39, 41-44, где ингибитор пути hedgehog вводят отдельно, последовательно или одновременно с антителом к LGR5.