УСТРОЙСТВО ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ИССЛЕДОВАНИЙ УРЕАЗЫ ИЗ КОМБИНИРОВАННОЙ БИОПСИИ АНТРУМА И ТЕЛА ЖЕЛУДКА ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА

56748
15
УСТРОЙСТВО ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯПСОМБИНИРОВАННЫХ 20 25 30LИССЛЕДОВАНИЙ УРЕАЗЫ ИЗ ИОПСИИ АНТРУМА И ТЕЛА ЖЕЛУДКА ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНОГО ТРАКТА Изобретение относится к устройству для проведения комбинированных исследований уреазы из биопсии антрума и тела желудка для диагностики заболеваний желудочно-кишечного тракта. Заболевания желудочно-кишечного тракта, как, например, дуоденальная и гастральная язвенная болезнь, но прежде всего хронически-активный гастрит, тесно связаны с частичным или же диффузным поражением желудка Heliobacter pylori (HP), бактериями, разлагаюшими мочевину, известными также как Campylobacter pylori. Принципиальные доказательства роли микроорганизмов в разложении мочевины, в частности роль HP, были описаны Stuart et al. (Jourп. Bacteriol., 1945, 49, 437) и Christensen (Journ. Bacteriol., 1946, 52, 461). Касательно вышеназванных заболеваний желудочно-кишечного тракта в заявка №  /// фирмы АСТРА КЕМИКАЛС ГмбХ, Германия , 5 10 15 20 25 30
1настоящее время считается доказанным, что HP являются очевидной причиной хронического гастрита типа В (см. Rauws et al., Gastroenterology, 1988, 94, 33). Что касается язвенной болезни, то HP представляют собой фактор риска, обусловливающий предрасположение к рецидиву язвы двенадцатиперстной кишки (см. Coghlan et al.. Lancet II, 1987, 1109). Поэтому в течение ряда лет велся поиск все более надежных и прежде всего применимых на практике методов доказательств роли HP. Нри этом анализ проб биопсии с проведением исследований уреазы в силу легкости его применения и незначительных затрат получал все более широкое распространение по сравнению с очень тонкой и специфической техникой выращивания культур. Так, например, у Christensen (Journ. Bacteriol., 1946, 52, 461) описывается питательная среда для дифференциации разлагающих мочевину микроорганизмов, базирующаяся на разложении мочевины, обусловненном микроорганизмами, содержащими уреазу. Разложение мочевины на двуокись углерода и аммиак вызывает щелочную реакцию среды, которую показывает изменение цвета используемого в качестве рН-индикатора фенолового красного от желтого до красного. Модифицированный метод быстрого исследования, обеспечивающий определенные преимущества при диагностике главным образом при незначительном заселении пробы бактериями Heliobacter pylori, описан Malfertheiner (Acta Therapeutica, 1988, 14, 205). Согласно Boersch et al. (Immun. Infekt., 1989, 17, 83-90) комбинированное исследование биопсии антрума и тела желудка по сравнению с раздельной биопсией в принципе превосходит эту последнюю по диагностической достоверности и специфичности при выявлении поражения желудка бактериями HP и вполне сравнимо с результатами требующей большой кропотливости техники выращивания культур. Комбинация двух антральных исследований уреазы заметно уступает комбинированному исследованию биопсии антрума и тела желудка. Согласно Boersch et al. комбинированные исследования уреазы из биопсии антрум/тело желудка представляют собой рациональный метод диагностики касательно соотнощения затрат материалов и средств, с одной стороны, и достигаемого результата, с другой. Исследование уреазы служит прежде всего 5 10 15 20 25 30
-Sметодом выбора в тех случаях, когда отсутствует возможность применять технику выращивания культур, требующую помимо тщательности, как правило, также больщих затрат средств и материалов. В европейской заявке EP-PS 204438 описывается способ выявления уреазы на материале желудка, в котором применяют смесь, состоящую из мочевины, бактерицида, препятствующего в значительной степени росту продуцирующих уреазу организмов, и рН-индикатора (например, фенолового красного) в питательной среде (преимущественно в бактериологическом агаре). Представленное на фигурах 1-3 упомянутой европейской заявки 204438 устройство, выполненное в виде прямоугольной пластины, в которой находится небольщая чащка с гибкой крыщкой, предназначенная для выщеназванного агара, имеется в торговле под названием CLO-Test. Описанные до настоящего времени и обычно используемые для исследований уреазы устройства представляют собой в основном простые, снабженные запорным приспособлением емкости, служащие для размещения только одной биопсии - либо тела желудка, либо антрума. Эти емкости во избежание путаницы необходимо соответствующим образом маркировать или наклеивать на них подробные этикетки. Но поскольку используемые емкости, например, пробирки Эппендорфа, очень малы, не представляется возможным произвести на них запись важнейпшх данных о пациенте, клиническую документацию, время проведения исследований и их результаты. При использовании соответствующих этикеток по соображениям экономии приходится, как правило, отказываться от подробных записей важнейщих данных о пациенте. Поэтому в обычных лабораторных условиях это могло бы привести к ощибкам в идентификации взятой биопсии или вызвать трудности с установлением пациентов, у которых была взята биопсия. Устройства, которые не обладают указанными выше недостатками и которые предназначены для одновременного размещения биопсии антрума и тела желудка в целях комбинированного исследования уреазы из биопсии антрум/тело желудка, из существующего на сегодняшний день уровня техники неизвестны. 5 10 15 20 25 30
-fИсходя из сказанного, в основу изобретения была положена задача создать устройство, которое позволяет проводить комбинированные исследования уреазы антрума и тела желудка для диагностики заболеваний желудочнокишечного тракта и которое дает специалисту возможность четко и безошибочно идентифицировать взятую биопсию касательно определения, является ли это антральная часть желудка или тело желудка. Задача изобретения состоит прежде всего в том, чтобы предоставить в распоряжение лечап1,его врача простое в эксплуатации, быстродействующее и надежное устройство и тем самым избежать ошибок в идентификации биопсии, взятой у нескольких пациентов. Согласно изобретению для решения названных задач служит устройство по пункту 1, имеющее а)пластину б)нанесенное на эту пластину схематическое изображение желудка, в)по крайней мере по одному отверстию в указанной пластине на схематическом изображении в местах, соответствуюш:их телу желудка и антра.льной части желудка, г)шкалу для оценки результатов исследования уреазы и д)поле для размеш;ения данных о пациенте и клинической документации. В одном из вариантов выполнения изобретения вышеупомянутые отверстия в устройстве предназначены для размещения и закрепления имеющихся в продаже, закрьтаемых пробирок, содержащих используемую в исследовании уреазы среду. В этом варианте выполнения схематическое изображение желудка наносят на пластину либо методом печати, либо методом гравировки. Особенно предпочтительно устройство, отличающееся тем, что названные отверстия являются одновременно отверстиями емкостей, прочно соединенных с пластиной, причем эти емкости содержат питательную среду для проводимого исследования уреазы и снабжены крышкой. В качестве запорного приспособления используют предпочтительно закрепленную на пластине крышку. Альтернативой этому может служить, например, адгезионная крышка в виде прозрачной пленки. При использовании такой адгезионной крышки на нее методом печати может наноситься схематическое изображение желудка. Благодаря этому схематическое изображение наносят на пластину не методом печати или 5 10 15 20 25 30 гравировки, a в виде пленки с уже нанесенным на эту последнюю изображением. Отверстия в пластине в этих случаях можно закрывать либо отдельными кусками пленки, либо с помощью единого куска. Предпочтительно для закрытия отверстий используют только одну пленку. В наиболее предпочтительных случаях схематическое изображение желудка наносят методом печати или гравировки непосредственно на пластину, а отверстия закрывают крышкой либо прозрачной, чистой, без нанесенного изображения, пленкой. Благодаря этому и при полном удалении адгезионной крышки также обеспечивается безошибочная идентификация биопсии антральной части, соответственно тела желудка. В другом варианте выполнения изобретения в пластине в местах, соответствуюп ;их телу желудка и антральной части желудка, предусмотрено более чем по одному отверстию, что позволяет получить преимущество, заключающееся в возможности одновременно проводить комбинированное исследование нескольких проб биопсии антральной части желудка и тела желудка. Благодаря дополнительным контрольным пробам, анализ которых может тем самым проводиться на одной и той же пластине, риск получить искаженную картину результатов исследования уреазы сведен до минимума. Устройство по изобретению может применяться при проведении общепринятых исследований уреазы. Предпочтительно при этом использовать гелеобразный субстрат, содержащий в 1000 г 0,1 г дрожжевого экстракта, 0,1 г дигидрофосфата калия, 0,6 г фенолового красного, 14,4 г агар-агара, 0,1 г декстрозы, 19,2 г мочевины, 2,9 мл витаминного раствора и ОД мл раствора микроэлементов. Упомянутый витаминный раствор получают растворением 0,198 rD( + ) биотина, 1,977 г никотиновой кислоты, 0,988 г витамина В1, 0,988 г р-аминобензойной кислоты, 0,494 г натриевой соли D-пантотеновой кислоты, 4,942 г пиридоксаминдигидрохлорида, 1,977 г витамина В12 в 988,435 г дистиллированной воды и последующей стерильной фильтрацией, а упомянутый раствор микроэлементов получают растворением 0,049 г хлорида бария  2 Н20, 0,198 г нейтрального иодида калия, 0,198 г бромида калия, 0,099 г борной кислоты, 0,049 г хлорида олова, 0,049 г хлорида лития, 0,198 г хлорида цинка  2 Н2О, 0,099 г сульфата меди (П)  5 П2О, 0,198 г хлорида кобальта  6 Н20, 0,99 г 5 10 15 20 25 30 хлорида марганца (П)  4 Н20, 7,919 г Titriplex III  2 Н2О, 0,01 г сульфата железа (II)  7 Н2О, 0,099 г молибдата натрия  Н20 в 989,844 г бидистиллированной воды и последующей стерильной фильтрацией. Предпочтительно используют чистые субстанции, соответственно субстанции для аналитики (р.а.). Не содержащую мочевину основную композицию автоклавируют и затем при температуре ниже 62° С смешивают с термолабильными компонентами, получая таким путем готовую для наполнения соответствующих емкостей смесь. Значение рН субстрата устанавливают на 6,01 ±0,1. Устройство по изобретению представляет собой простое в обслуживании вспомогательное средство для диагностирования заболеваний желудочно-кишечного тракта, позволяющее осуществлять тщательные и специфические комбинированные исследования уреазы из биопсии антрум/тело желудка. Нанесенное на пластину схематическое изображение желудка с емкостями, размещенными в зонах, соответствующих антруму и телу желудка, обеспечивает простую по исполнению идентификацию проб, снижающую риск в допущении случайных ошибок при определении касательно того, является ли взятая биопсия антрумом или телом желудка. При всех условиях предлагаемое согласно изобретению устройство отличается легкостью в обслуживании, и благодаря тому, что на одной и той же пластине наряду с пробами биопсии как антральной части, так и тела желудка представлены все необходимые данные о пациенте и/или соответствующая клиническая документация (например, время проведения исследований и их результаты), простым путем исключается возможность допущения ошибок или подмены. Наличие на пластине оценочной шкалы благодаря непосредственному сравнению наблюдаемых изменений цвета расположенных рядом друг с другом питательных сред, содержащих биопсии антрума и тела желудка, позволяет быстро и однозначно ставить диагноз. Обе биопсии находятся вместе на пластине, соответственно закреплены на ней и даже через 24 часа на них можно проводить сравнительные наблюдения за изменениями цвета уреазы. Конструктивные особенности устройства по изобретению обеспечивают возможность надежного хранения проб. 5 10 15 20 25 30
)
- Пример 1 На фиг.1 представлено устройство для проведения комбинированных исследований уреазы из биопсии антрум/тело желудка для диагностики заболеваний желудочно-кишечного тракта. На пластине 1 имеется схематическое изображение желудка 2. В местах, соответствующих антруму и телу желудка, предусмотрено соответственно по одному отверстию 3. Для оценки результатов анализа на пластине 1 предусмотрена шкала 4, имеюш;ая предпочтительно цветную градуировку. Имеюп ;ееся на пластине 1 поле 5 предназначено для размещения данных о пациенте и клинической документации, т.е. на этом поле может фиксироваться итоговая оценка комбинированного анализа уреазы из биопсии антрум/тело желудка. Поле 6 содержит другую информацию касательно этого комбинированного анализа уреазы, как, например, название изготовителя или какие-либо пояснения общего характера. Пример 2 На фиг.2 показан поперечный разрез устройства по фиг.1 для проведения комбинированных исследований уреазы из биопсии антрум/тело желудка для диагностики заболеваний желудочно-кишечного тракта, в котором пластина 1 устройства, представленного на фиг.1, снабжена заполненньпми субстратом 2 емкостями 4, которые могут покрываться пленкой 3. Емкости 2 на фиг.2 размещены таким образом, что их отверстия совпадают с отверстиями 3 по фиг.1. Пример 3 Представленное на фиг.1 устройство предназначено для размещения закрываемых емкостей, соответственно пробирок, содержащих используемый для исследований уреазы субстрат. На фиг.З показан поперечный разрез устройства для проведения комбинированных исследований уреазы из биопсии антрум/тело желудка для диагонстики заболеваний желудочно-кишечного тракта, в котором в отверстие 2 пластины 1 устанавливаются названные выше пробирки, причем эти пробирки крепятся с помощью резиновых уплотнителей или резиновых колец 3, вставленных в отверстия. Положение отверстий 2 на фиг.4 соответствует положению отверстий 5 10 15 20
.) 3 на фиг.1, что обеспечивает четкую идентификацию проб касательно определения антрума, соответственно тела желудка. Пример 4 На фиг.4 показан поперечный разрез устройства, которое сочетает в себе признаки вариантов выполнения изобретения, указанные в примерах 2 и 3. Емкости 4, размещенные в пластине 1 по фиг.2, снабжены краями, выступающими над поверхностью пластины 1, что при определенных условиях позволяет размещать в пластине пробирки 2 по фиг.4. Благодаря выступающим над поверхностью пластины 1 краям емкости 2 имеется возможность для насадки соответствующего запорного приспособления, например, крыщки в виде колпачка 4 (фиг.4), или же, что особенно предпочтительно, в виде навинчивающегося колпачка с цилиндрическим вкладышем, который обеспечивает принудительный контакт между биопсией и используемым для анализа уреазы субстратом и который предпочтительно вдавливает биопсию в субстрат. Эти емкости 2 можно заполнять субстратом 3, применяемым для исследований уреазы. Емкости 2 (фиг.4) размещены в местах расположения отверстий 3, показанных на фиг.1, благодаря чему обеспечивается возможность идентификации тела желудка и антрума. Пример 5 На фиг.5 представлен вид сверху на особенно предпочтительный вариант выполнения устройства по фиг.1, соответственно устройства, описанного в выщеприведенных примерах. Нумерация соответствует нумерации по фиг.1.  to