СПОСОБ ПРОИЗВОДСТВА КОМБИНИРОВАННОЙ АНТИГЕЛЬМИНТНОЙ ТАБЛЕТКИ С СИМБИОТИКОМ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ МЕЛКОГО РОГАТОГО СКОТА
METHOD OF PRODUCTION OF A COMBINED ANTIHELMINT TABLET WITH A SYMBIOTIC TREATMENT FOR TREATMENT OF A SMALL CATTLE

Область техники, к которой относится изобретение
Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности, к способу производства комбинированной антигельминтной таблетки с симбиотиком для лечения мелкого рогатого скота и может быть использовано для профилактики и лечения глистных инвазий, неспецифической коррекции иммунного ответа организма животных, нормализации гепатопротекторных и репаративных функций печени на воздействие химиотерапевтических средств и глистных инвазий на организм мелкого рогатого скота.
Уровень техники
Известен комплексный антипаразитарный препарат, не обладающий иммуносупрессией, включающий авермектиновый комплекс и вспомогательные вещества, при этом он дополнительно содержит иммуностимулятор риботан при следующем соотношении компонентов, масс. %: авермектиновый комплекс 05-2,0; риботан 5,0-15,0; вспомогательные вещества - остальное.
В комплексном антипаразитарном препарате в качестве авермектинового комплекса содержит или авертин N, или аверсектин С, или ивермектин, или абамектин или др.
Комплексный антипаразитарный препарат включает авермектиновый комплекс из мицелия Streptomyces avermitilis ВКПМ S - 1440 с повышенным содержанием группы В (см. пат. RU №2155052, МПК А61K 35/70, опубл. 27.08.2000 г.).
Недостатком данного препарата является узкое, противонематодозное действие, тогда как для борьбы с гельминтами родов цестоды и трематоды препарат группы макроциклических лактонов не эффективен, для чего необходимо применять дополнительно антигельминтики.
Известен препарат для профилактики и лечения гельминтозов лошадей, содержащий соединение из группы авермектинов и целевые добавки, при этом он дополнительно содержит празиквантел или фенасал при следующем соотношении компонентов, масс. %: соединение из группы авермектинов 0,05-10,0; празиквантел или фенасал 3,0-70,0; целевые добавки - остальное.
В препарате для профилактики и лечения гельминтозов лошадей в качестве соединения из группы авермектинов содержит ивермектин, или абамектин, или дорамектин, или моксидектин (см. пат. RU №2279874, МПК А61K 31/00, А61K 31/495, А61K 36/06, опубл. 20.07.2006 г.).
Недостатком данного препарата является то, что он обладает ограниченными возможностями, только для лечения лошадей.
Известен способ лечения гельминтозов жвачных животных, включающий пероральное введение мелкому и крупному рогатому скоту лекарственного средства, содержащего празиквантел и ивермектин, при этом в состав лекарственного средства дополнительно вводят селенит натрия, нипагин, нипазол, лактозу, твин-80, желатин и воду дистиллированную при следующем соотношении ингредиентов (мас. %): празиквантел - 5,0 ивермектин - 0,2, селенит натрия - 0,071, нипагин - 0,01, нипазол - 0,005, лактоза - 30,0, твин - 80-2,0, желатин - 2,0, вода дистиллированная - остальное, затем готовят лекарственное средство в форме суспензии, которую вводят животным однократно из расчета 1 мл на 10 кг массы животного.
В способе лечения гельминтозов жвачных животных лекарственное средство в форме суспензии вводят животным индивидуально принудительно на корень языка.
Лекарственное средство для лечения гельминтозов жвачных животных по способу по любому из пп. 1 и 2, содержащее празиквантел и ивермектин, дополнительно содержит селенит натрия, нипагин, нипазол, лактозу, твин-80, желатин и воду дистиллированную при следующем соотношении ингредиентов (мас. %): празиквантел - 5,0, ивермектин - 0,2, селенит натрия - 0,071, нипагин - 0,01, нипазол - 0,005, лактоза - 30,0, твин-80 - 2,0, желатин - 2,0, вода дистиллированная - остальное (см. пат. RU №2412697, МПК А63K 31/00, А61Р 33/10, опубл. 27.02.2011 г.).
Недостатком данного способа и лекарственного средства является то, что он обладает высокой антигельминтной эффективностью против основных гельминтозов, однако селенит натрия, входящий в состав средства не обеспечивает защиту организма животных от токсического действия на печень средства и продуктов распада гельминтов (см. Колосова О.В. Морфологические изменения печени здоровых норок под влиянием водного раствора селенита натрия с пролонгатором. О.В. Колосова Вестник Краснодарского ГАУ. 2011. №1 - с. 137-141).
Известен препарат для профилактики и лечения гельминтозов животных, содержащий соединение из группы авермектинов или его соль и целевую добавку, при этом он дополнительно содержит празиквантел при следующем соотношении ингредиентов, масс. ч.: соединение из группы авермектинов:пирантел или его соль:празиквантел:целевая добавка = 1,2:3,0:1,0:6,0.
Препарат в качестве соединения из группы авермектинов содержит ивермектин, или абамектин, или дорамектин, или моксидектин.
Препарат в качестве соли пирантела содержит пирантел памоат, или пирантел тартрат, или пирантел эмбонат, или пирантел гидрохлорид (см. пат. RU №2496329, МПК A23K 1/16, опубл. 27.10.2013 г.).
Недостатком данного препарата является то, что он не обладает выраженной антивирусной активностью, а также необходимость его длительного применения при лечении.
3
Наиболее близким по технической сущности и достигаемому положительному эффекту и принятый авторами за прототип является способ изготовления таблетки, содержащей первый и второй слой, включающий этапы, на которых: добавляют первую порошковую смесь на плиту пресс-формы, причем указанная первая порошковая смесь содержит фармацевтически активное вещество и связующее вещество, добавляют вторую порошковую смесь на указанную плиту пресс-формы, причем указанная вторая порошковая смесь содержит связующее вещество, а композиция указанной второй порошковой смеси отличается от композиции указанной первой порошковой смеси, прессуют первую порошковую смесь и вторую порошковую смесь на указанной плите пресс-формы для образования таблетированной формы и подвергают указанную таблетированную форму радиочастотному излучению в течение периода времени, достаточного для активации указанного связующего вещества внутри указанной таблетированной формы для сплавления указанной таблетированной формы в указанную таблетку, таким образом, чтобы плотность указанной таблетки составляла менее приблизительно 0,8 г/см, а указанная таблетка рассасывалась в полости рта при помещении на язык в течение менее приблизительно 30 с.
В способе, в котором указанное связующее вещество в указанной первой порошковой смеси и указанное связующее вещество в указанной второй порошковой смеси представляют собой плавкие материалы с температурой плавления от приблизительно 30°С до приблизительно 140°С и указанная таблетированная форма подвергается указанному воздействию излучения в течение периода времени, достатосчного для плавления или размягчения указанных связующих веществ.
В способе, в котором указанное связующее вещество в указанной первой порошковой смеси представляет собой связующее вещество, расплавляемое РЧ-излучением, и указанная таблетированная форма подвергается воздействию РЧ-излучения в течение времени, достаточного для расплавления или размягчения указанного связующего вещества, расплавляемого РЧ-излучением.
В способе, в котором указанная первая порошковая смесь содержит материал, нагреваемый РЧ-излучением, и указанная таблетированная форма подвергается воздействию РЧ-излучения в течение периода времени, достаточного для нагревания указанного материала, нагреваемого РЧ-излучением, таким образом, чтобы указанный материал, нагреваемый РЧ-излучением, расплавлял или размягчал указанное связующее вещество, входящее в состав указанной первой порошковой смеси.
В способе, в котором указанное связующее вещество в указанной первой порошковой смеси и указанное связующее вещество в указанной второй порошковой смеси представляет собой связующие материалы, активируемые водой, причем указанная первая порошковая смесь и указанная вторая порошковая смесь дополнительно содержат водосодержащие материалы, а указанная таблетированная форма подвергается указанному воздействию излучения в течение периода времени, достаточного для нагревания водосодержащих материалов выше их температуры дегидротации.
В способе, в котором указанная первая порошковая смесь содержит частицы, содержащие указанное первое фармацевтически активное вещество, причем указанные частицы покрыты указанным связующим веществом.
В способе, включающем этап, на котором прессуют указанную первую порошковую смесь перед добавлением указанной второй порошковой смеси на указанную плиту пресс-формы.
В способе, в котором поверхность указанной таблетки дополнительно подвергают воздействию инфракрасного излучения, причем большая часть длины волны указанного инфракрасного излучения составляет от приблизительно 0,5 до приблизительно 5 мкм.
Таблетка, полученная в соответствии со способом по вышеперечисленным пунктам, содержащая первый слой и второй слой, причем:
- указанный первый слой содержит фармацевтически активное вещество, и композиция указанного первого слоя отличается от композиции указанного второго слоя;
3
- плотность указанной таблетки составляет менее приблизительно 0,8 г/см;
- и рассасывание указанной таблетки в полости рта при помещении на язык занимает менее приблизительно 30 с.
Таблетка, в которой указанный первый слой не содержит то же фармацевтически активное вещество, что и указанный второй слой.
Таблетка, в которой указанный первый слой рассасывается по меньшей мере в два раза быстрее, чем указанный второй слой.
Таблетка, в которой цвет указанного первого слоя отличается от цвета указанного второго слоя.
Таблетка, в которой вкус указанного первого слоя отличается от вкуса указанного второго слоя.
Таблетка, содержащая третий слой, причем композиция указанного третьего слоя отличается от композиции указанного первого слоя и указанного второго слоя.
3
Таблетка, плотность которой составляет менее приблизительно 0,7 г/см.
Таблетка, в которой указанное связующее вещество содержит полиэтиленгликоль со средним размером частиц менее приблизительно 100 мкм.
Таблетка, содержащая менее приблизительно 1 вес. % суперразрыхлителя (см. пат. RU №2578950, МПК А61K 9/24, А61K 9/14, А61K 31/00, А61K 47/34, А61J 3/10, В29С 43/52, В30В 11/02, В30В 11/00, опубл. 27.03.2016 г.).
Недостатком данной многослойной таблетки является сложность производства, а также то, что она не обладает выраженной антивирусной активностью и необходимость длительного применения при лечении.
Раскрытие изобретения
Задачей предлагаемого изобретения является разработка способа производства комбинированной антигельминтной таблетки с симбиотиком для лечения мелкого рогатого скота, обладающей высокой антигельминтной активностью, неспецифическими гепатопротекторными, иммуностимулирующими и адаптогенными свойствами, которая способствует интенсификации лечения и профилактики целого ряда глистных инвазий, сопровождающихся снижением иммунобиологических свойств организма и снижением репаративных свойств печени с использованием рациональных приемов, которые обеспечивают приготовление эффективной таблетки за счет сочетанного применения в лекарственной таблетке комбинации эффективных противопаразитарных компонентов.
Технический результат, который может быть достигнут с помощью предлагаемого изобретения, сводится к высокой антигельминтной активности таблетки, интенсификации лечения и профилактики целого ряда глистных инвазий, неспецифической коррекции иммунного ответа организма животных, нормализации гепатопротекторных и репаративных функций печени.
3
8
10
Технический результат достигается с помощью способа производства комбинированной антигельминтной таблетки с симбиотиком для лечения мелкого рогатого скота, содержащей первый и второй слой, включающий этапы, на которых: добавляют первую порошковую смесь на плиту пресс-формы, причем указанная первая порошковая смесь содержит фармацевтически активное вещество и связующее вещество, добавляют вторую порошковую смесь на указанную плиту пресс-формы, причем указанная вторая порошковая смесь содержит связующее вещество, а композиция указанной второй порошковой смеси отличается от композиции указанной первой порошковой смеси, прессуют первую порошковую смесь и вторую порошковую смесь на указанной плите пресс-формы для образования таблетированной формы и подвергают указанную таблетированную форму радиочастотному излучению в течение периода времени, достаточного для активации указанного связующего вещества внутри указанной таблетированной формы для сплавления указанной таблетированной формы в указанную таблетку, таким образом, чтобы плотность указанной таблетки составляла менее приблизительно 0,8 г/см, при этом для получения первой порошковой смеси готовят бактериальный концентрат, включающий консорциум бифидо и лактобактерий Bifidobacterium adolescentis В-1 и Lactobacillus acidophilus ЛГ-1 с титром 10-10 КОЕ/г сорбированных на носителе в соотношении 1:1:12, которые концентрируют путем фильтрации или центрифугирования до получения суспензии, содержащей 5 млрд. бактерий в I мл, с последующим смешиванием их в равных объемах, причем в качестве носителя используют муку или отруби из расчета 12 частей носителя на I часть смеси концентрированных культур, проводят контактно-сорбционную сушку биомассы, а затем полученную сухую порошкообразную массу смешивают с лактулозой, а для получения второй порошковой смеси используют ивермектин, празиквантел и, по меньшей мере, один фармацевтически приемлемый наполнитель, в качестве которого используют микрокристаллическую целлюлозу МКЦ, затем смешивают субстанции ивермектина, празиквантела и наполнителя в сухом виде при следующем соотношении компонентов масс. %:
ивермектин
0,27-0,28
празиквантел
7,00-7,14
консорциум бифидо и лактобактерий
(Bifidobacterium adolescentis B-1 и
Lactobacillus acidophilus ЛГ-1)
с титром 10<sup>8</sup>-10<sup>10</sup> КОЕ/г сорбированных
на носителе в соотношении 1:1:12
35,00-35,71
лактулоза
21,00-21,43
микрокристаллическая целлюлоза МКЦ
35,00-35,44
Гельминтозы жвачных животных распространены повсеместно и представляют серьезную проблему в животноводстве, так как наносят огромный экономический ущерб хозяйствам (см. Колесников В.И. «Комплексная система технологических процессов профилактики основных гельминтозов овец», Колесников В.И. Вестник АПК Ставрополья. 2015. №1 (17) С. 103-106); (см. Лоптева М.С., Колесников В.И. Экономический ущерб при дикроцелиозе//Ветеринарная служба Ставрополья. 2010. №1. С. 36-39); (см. Сафиуллин Р.Т. Распространение и экономический ущерб от основных гельминтозов жвачных животных // Ветеринария. - 1997. - №6. - С. 28-32), в связи с этим профилактика и лечение гельминтозов жвачных животных весьма актуальны. В настоящее время для борьбы с гельминтозами имеется большое количество препаратов, в том числе из группы макроциклических лактонов (см. Архипов И.А. Антигельминтики: фармакология и применение. Изд. РАСХН. М. - 2009. - 409 с.); (см. Атаев A.M., «Сравнительная эффективность антигельминтиков при гельминтозах овец», Атаев A.M., Зубаирова М.М., Колесников В.И., Биттиров A.M., Эльдарова Л.Х. / Вестник ветеринарии. 2016. №1 (76). С. 50-54).
Ивермектины широко применяются в ветеринарной практике, в многочисленных исследованиях доказали свою эффективность в борьбе против экто и эндопаразитов сельскохозяйственных животных (см. Лоптева М.С., Колесников В.И. Экономический ущерб при дикроцелиозе//Ветеринарная служба Ставрополья. 2010. №1. С. 36-39); (см. Колесников В.И. «Эффективность нового препарата пролонгированного действия «ИВЕРЛОНГ 2» при стронгилятозах овец» / Колесников В.И., Енгашева Е.С., Суслов В.В., Кошкина Н.А., Киц Е.А., Лоптева М.С., Филимонов Д.Н. Вопросы нормативно-правового регулирования в ветеринарии. 2015. №4. С. 95-98).
Таким образом, технический результат достигается за счет сочетанного применения в лекарственной таблетке комбинации эффективных противопаразитарных компонентов, то есть лекарственная таблетка содержит антагонистически активные бактерии нормофлоры кишечника, и стимулятор размножения бактерий, чем достигается неспецифическая коррекция иммунного ответа организма животных, восстановление функциональной активности, ускорение регенерации гепатоцитов, метаболитических и репаративныхпроцессов в тканях печени при глистных инвазияхи при воздействии на печень антигельминтных веществ, при этом в качестве антигельминтного средства используют ивермектин (Ivermectin) и празиквантел (Praziquantel), в качестве бактерий вводится смесь консорциума бифидо и лактобактерий сорбированных на растительном носителе, в качестве стимулятора размножения бактерий таблетка содержит лактулозу, а в качестве формообразующего вещества таблетка содержит целлюлозу микрокристаллическую (МКЦ).
Компоненты сформированы в таблетки, при этом, одна таблетка содержит антигельминтные вещества ивермектин и празиквантел, бактерии нормофлоры кишечника, стимулятор размножения бактерий и формообразующее вещество.
Ивермектин (Ivermectin), код CAS 70288-86-7 белый или светло-желтый кристаллический порошок, обладает выраженным противопаразитарным действием на личиночные и половозрелые стадии нематод желудочно-кишечного тракта и легких, личинки подкожных, носоглоточных и желудочных оводов, вшей, кровососок и саркоптоидных клещей. Ивермектин стимулирует выделение гамма-аминомасляной кислоты (ГАМК) нервными окончаниями и усиливает связывание ее с синаптическими ГАМК-рецепторами, блокируя передачу нервных импульсов, что приводит к параличу и последующей гибели гельминтов. У клещей и насекомых блокируется передача нервных импульсов между нервными окончаниями и клетками мышечной ткани, что также приводит к параличу и гибели паразитов.
Празиквантел (Praziquantel), код CAS 55268-74-1, белый кристаллический порошок, горький на вкус. Гигроскопичен, легко растворим в хлороформе и диметилсульфоксиде, растворим в этаноле и очень незначительно растворим в воде. Антигельминтное средство широкого спектра действия эффективен против цестодозов и трематодозов. Повышает проницаемость мембран клеток гельминтов для ионов кальция, вызывая генерализованное сокращение мускулатуры паразита, переходящее в стойкий паралич, ведущий к гибели гельминта (см. www.rlsnet.ru\mnn_index_id_244.htm).
Целлюлоза микрокристаллическая (МКЦ) ТУ 9199-001-07508109, легкосыпучий белоснежный порошок со степенью кристалличности 70-85% и средней длиной кристаллов 7-10 нм, без запаха и вкуса. МКЦ получают в результате тонкого измельчения и тщательной очистки хлопковой целлюлозы.
МКЦ применяют в фармацевтической, пищевой промышленности, в медицине как в качестве пищевой добавки, так и в качестве инертного наполнителя для таблетирования лекарственных препаратов.
Таблетка с добавлением МКЦ отличаются легким высвобождением лекарственных веществ, допустимыми пределами вариации веса, механической прочностью. Химически и физически стабильна, обладает отличными показателями прессуемости (см. http://www.rlsnet.ru/mnn_index_id_2245.htm).
Биомасса, входящая в состав средства, содержит бифидобактерии, этом оба штамма паспортизированы и депонированы во Всероссийском государственном научно-исследовательском институте контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов (ВГНКИ), штамм Bifidobacterium adolescentis В-1, В-2944 или лактобактерии штамм Lactobacillus acidophilus ЛГ-1, В-5863, или их смесь, сорбированную на носителе. В качестве носителя могут быть использованы природные и искусственные вещества, пригодные в качестве сорбентов для бактерий, в частности, кремния диоксид коллоидный, уголь активированный, лигнин гидролизный и другие
Биомасса изготовлена из живых бактерий, представляет собой однородный, сыпучий отрубевидный либо мучной порошок (12 весовых частей носителя и одна часть по объему смесь концентрированных высушенных культур). Доля влаги не более 8%, сумма каротиноидов не менее 0,24 мг в 1 г, количество бета-каротина не менее 0,1 мг в 1 г.
В сорбированном на носителе состоянии бактерии обеспечивают высокую локальную колонизацию слизистых оболочек кишечника, усиливают в них восстановительные процессы.
Используемые штаммы нетоксичны, невирулентны, нетоксигенны для человека и животных, обладают высокой антагонистической активностью к условно патогенным микроорганизмам, препятствуют их адгезии к слизистой оболочке кишечника, способствуют нормализации микробиоценоза желудочно-кишечного тракта и повышению неспецифической резистентности организма, активизируют пристеночное пищеварение, синтезируют аминокислоты, витамины, обладают иммуномодулирующим действием.
Гепатопротективное действие бифидо- и лактобактерий обусловлено следующим:
- под действием указанных бактерий снижается рН в толстом отделе кишечника за счет ферментации полисахаридов с образованием жирных кислот. При низких значениях рН подавляется бактериальная деградация первичных желчных кислот (холевой и дезоксихолевой), что ведет к изменению их кишечно-печеночной циркуляции и подавлению синтеза желчных кислот в печени;
- микрофлора ЖКТ, в частности сапрофитная, препятствует абсорбции холестерина из пищеварительного тракта;
- бифидобактерии уменьшают выход холестерина из печеночных клеток за счет ингибирования активности HMG-CoA-редуктазы;
- лактобактерий за счет выделения большого количества молочной кислоты и снижения рН среды деконьюгируют желчные кислоты, которые при кислых значениях рН связывают холестерин;
- при кислой реакции среды в кишечнике увеличивается осмотическое давление, обусловленное метаболитами бифидо- и лактобактерий, повышается удержание ионов аммония в кишечнике, миграция аммиака из крови в кишку и его ионизация;
- бифидо- и лактобактерий трансформируют экзо- и эндотоксины образуя соединения, не абсорбирующиеся в кишечнике.
После приема бифидобактерий снижается рН в толстом отделе кишечника, подавляется бактериальная деградация первичных желчных кислот, что ведет к изменению их кишечно-печеночной циркуляции и, как следствие, подавлению синтеза желчных кислот в печени. Это, в свою очередь, ингибирует образование в печени холестерина и ведет к снижению уровня сывороточного холестерина. Снижение уровня липидов в крови уменьшает нагрузку на поврежденные гепатоциты, способствуя уменьшению холестаза.
Лактулоза (Lactulose) представляет собой синтетический дисахарид, не встречающийся в природе, в котором каждая молекула галактозы связана р-1,4-связью с молекулой фруктозы. Действие лактулозы определяется тем, что ее молекулы не расщепляются ферментами, вследствие чего она остается интактной, вплоть до попадания в толстый отдел кишечника, где под действием бактерий происходит ее разложение на органические кислоты, главным образом молочную, уксусную, масляную и пропионовую. В результате чего подкисляется содержимое кишечника и повышается осмотическое давление в толстой кишке. Гепатопротекторный эффект лактулозы опосредованный, и обусловлен снижением концентрации аммиака за счет подкисления содержимого толстой кишки, ингибирования разложения мочевины бактериями. Лактулоза способствует активизации роста бактерий нормальной микрофлоры кишечника и улучшает функцию печени, успешно используется как наполнитель для прямого прессования таблеток (см. http://www.rlsnet.ru/mnn_index_id_1041.htm).
Сущность способа производства комбинированной антигельминтной таблетки с симбиотиком для лечения мелкого рогатого скота заключается в следующем.
3
Для изготовления двухслойной таблетки добавляют на плиту пресс-формы сначала первую порошковую смесь (симбиотик), затем вторую порошковую смесь (антигельминтики). Первая порошковая смесь содержит фармацевтически активное вещество и связующее вещество. Вторая порошковая смесь содержит фармацевтически активное вещество и связующее вещество. Далее прессуют первую порошковую смесь и вторую порошковую смесь на плите пресс-формы с образованием таблетированной формы, которую подвергают радиочастотному излучению в течение периода времени, достаточного для активации связующего вещества и сплавления таблетированной формы в двухслойную таблетку. Плотность таблетки составляет не менее 0,8 г/см. Готовят таблетированную лекарственную форму, содержащую антигельминтные вещества ивермектин (Ivermectin) и празиквантел (Praziquantel), бактерии нормофлоры кишечника лактобактерий и бифидобактерии (сорбированные на растительном носителе), стимулятор размножения бактерий лактулоза (Lactulose) и формообразующее вещество микрокристаллическая целлюлоза (МКЦ), при следующем соотношении компонентов в сухом виде масс. %:
ивермектин
0,27-0,28
празиквантел
7,00-7,14
консорциум бифидо и лактобактерий
(Bifidobacterium adolescentis B-1 и
Lactobacillus acidophilus ЛГ-1)
с титром 10<sup>8</sup>-10<sup>10</sup> КОЕ/г сорбированных
на носителе в соотношении 1:1:12
35,00-35,71
лактулоза
21,00-21,43
микрокристаллическая целлюлоза МКЦ
35,00-35,44
Перед применением необходимое количество таблеток разводят в объеме воды для последующего растворения и образования суспензии, которую, в соответствии с дозировкой, с помощью шприца-дозатора принудительно вводят животным на корень языка.
Краткое описание чертежей и иных материалов
На чертеже дан способ производства комбинированной антигельминтной таблетки с симбиотиком для лечения мелкого рогатого скота, оценка иммуностимулирующей активности и действия на печень комбинированной двуслойной антигельминтной таблетки с симбиотиком на 10 день после введения препарата, таблица.
Раскрытие изобретения
Примеры конкретного выполнения способа производства комбинированной антигельминтной таблетки с симбиотиком для лечения мелкого рогатого скота
3
8
10
Пример 1. Способ производства комбинированной антигельминтной таблетки с симбиотиком для лечения мелкого рогатого скота осуществляют следующим образом: на плиту пресс-формы сначала наносят первую порошковую смесь (симбиотик), затем вторую порошковую смесь (антигельминтик), при этом первая порошковая смесь содержит фармацевтически активное вещество и связующее вещество. Вторая порошковая смесь содержит фармацевтически активное вещество и связующее вещество. Композиция второй порошковой смеси отличается от композиции первой порошковой смеси. Далее прессуют первую порошковую смесь и вторую порошковую смесь на плите пресс-формы с образованием таблетированной формы, которую подвергают радиочастотному излучению в течение периода времени, достаточного для активации связующего вещества и сплавления таблетированной формы в двухслойную таблетку. Плотность таблетки составляет не менее 0,8 г/см. Примеры связующих веществ включают в себя без ограничений плавкие связующие вещества и связующие материалы, активируемые водой. Носитель содержит один или более применимых эксципиентов для получения таблеток. Примеры применимых эксципиентов включают в себя без ограничений наполнители, адсорбенты, разрыхлители, смазывающие вещества, скользящие вещества, подсластители, суперразрыхлители, вкусоароматические добавки, антиоксиданты, консерванты, загустители, а также их смеси. В одной частице порошковой смеси могут присутствовать один или более из описанных выше ингредиентов. Способ получения комбинированной первой порошковой смеси (симбиотик) включает сухой комплексный препарат бифидо и лактобактерий однородный, сыпучий отрубевидный либо мучной порошок сорбированный на естественных растительных носителях. (12 весовых частей носителя и одна часть по объему смесь концентрированных высушенных культур), при этом для получения бактериального концентрата жидкие культуры консорциум бифидо и лактобактерий (Bifidobacterium adolescentis В-1 и Lactobacillus acidophilus ЛГ-1) с титром 10-10 КОЕ/г сорбированных на носителе в соотношении 1:1:12 концентрирует при помощи фильтрации или центрифугирования до получения суспензии, содержащей 5 млрд бактерий в I мл (по оптическому стандарту мутности ГИСК) и смешивают в равных объемах. В качестве носителя используют муку или отруби из расчета 12 частей носителя на I часть смеси концентрированных культур, затем проводят контактно-сорбционную сушку биомассы, далее полученную сухую порошкообразную массу смешивают с лактулозой в мешалке в течение 8-10 минут.
Способ получения комбинированной второй порошковой смеси, заключается в смешивании ивермектина и празиквантела, с наполнителем микрокристаллической целлюлозой в быстрой мешалке в течение 8-10 минут, при этом компоненты первой и второй порошковой смеси берут в следующем соотношении компонентов масс. %:
ивермектин
0,20
празиквантел
5,00
консорциум бифидо и лактобактерий
(Bifidobacterium adolescentis B-1 и
Lactobacillus acidophilus ЛГ-1)
с титром 10<sup>8</sup>-10<sup>10</sup> КОЕ/г сорбированных
на носителе в соотношении 1:1:12
34,00
лактулоза
20,00
микрокристаллическая целлюлоза МКЦ
34,00
Перед применением одну таблетку, рассчитанную на 10 кг живой массы животного, разводят в двух мл воды для последующего растворения и образования суспензии, которую с помощью шприца-дозатора принудительно вводят животным на корень языка.
Эффективность препарата определяют по результатам исследований проб фекалий от 10 ягнят и 10 овцематок через 10 дней после дегельминтизации.
Через 10 дней после введения препарата в пробах кала у 8 из 10 животных были обнаружены яйца гельминтов. Таким образом, лекарственное средство в дозе 1 таблетка/10 кг массы животного показало эффективность только 20%, а пример 1 показал слабую антигельминтную эффективность, за счет низкой дозы компонентов, отвечающих за антигельминтное действие препарата.
Пример 2. Способ производства комбинированной антигельминтной таблетки с симбиотиком для лечения мелкого рогатого скота осуществляют аналогично примера 1, но компоненты первой и второй порошковой смеси берут в следующем соотношении компонентов масс. %:
ивермектин
0,27
празиквантел
7,00
консорциум бифидо и лактобактерий
(Bifidobacterium adolescentis B-1 и
Lactobacillus acidophilus ЛГ-1)
с титром 10<sup>8</sup>-10<sup>10</sup> КОЕ/г сорбированных
на носителе в соотношении 1:1:12
35,00
лактулоза
21,00
микрокристаллическая целлюлоза МКЦ
35,00
Эффективность препарата определяют по результатам исследований проб фекалий от 20 ягнят спонтанно зараженных стронгилятами желудочно-кишечного тракта и легких, нематодирами, трихоцефалами, стронгилоидами, диктиокаулами, мониезиями. Установлено, что лекарственное средство в дозе 1 таблетка/10 кг массы животного через 10 дней после дегельминтизации показало 100% эффективность против основных гельминтозов желудочно-кишечного тракта животных (стронгилята, нематодиры, трихоцефалы, стронгилоиды, диктиокаулы и мониезии).
Пример 3. Способ производства комбинированной антигельминтной таблетки с симбиотиком для лечения мелкого рогатого скота осуществляют аналогично примера 1, но компоненты первой и второй порошковой смеси берут в следующем соотношении компонентов масс. %:
ивермектин
0,28
празиквантел
7,14
консорциум бифидо и лактобактерий
(Bifidobacterium adolescentis B-1 и
Lactobacillus acidophilus ЛГ-1)
с титром 10<sup>8</sup>-10<sup>10</sup> КОЕ/г сорбированных
на носителе в соотношении 1:1:12
35,71
лактулоза
21,43
микрокристаллическая целлюлоза МКЦ
35,44
Эффективность препарата также определяют по результатам исследований проб фекалий от 20 ягнят спонтанно зараженных стронгилятами желудочно-кишечного тракта и легких, нематодирами, трихоцефалами, стронгилоидами, диктиокаулами, мониезиями. Установлено, что лекарственное средство в дозе 1 таблетка/10 кг массы животного через 10 дней после дегельминтизации показало 100% эффективность против основных гельминтозов желудочно-кишечного тракта животных (стронгилята, нематодиры, трихоцефалы, стронгилоиды, диктиокаулы и мониезии).
Пример 4. Способ производства комбинированной антигельминтной таблетки с симбиотиком для лечения мелкого рогатого скота осуществляют аналогично примера 1, но компоненты первой и второй порошковой смеси берут в следующем соотношении компонентов, масс. %:
ивермектин
0,30
празиквантел
8,00
консорциум бифидо и лактобактерий
(Bifidobacterium adolescentis B-1 и
Lactobacillus acidophilus ЛГ-1)
с титром 10<sup>8</sup>-10<sup>10</sup> КОЕ/г сорбированных
на носителе в соотношении 1:1:12
35,9
лактулоза
23,00
микрокристаллическая целлюлоза МКЦ
37,30
Эффективность препарата определяют по результатам исследований проб фекалий от 10 ягнят и 10 овцематок через 10 дней после дегельминтизации.
Через 10 дней после введения препарата у животных во всех пробах не было обнаружено яиц гельминтов. Лекарственное средство у животных в дозе 1 таблетка/10 кг массы тела показало 100% эффективность в отношении гельминтов желудочно-кишечного тракта и легких. Таким образом, пример 4 по эффективности антигельминтного действия не отличается от примера 2 и 3, но в примере 4, наблюдается перерасход антигельминтных веществ, что ведет к удорожанию лекарственного средства.
Таким образом, наиболее оптимальными являются примеры 2 и 3 способа производства комбинированной антигельминтной таблетки с симбиотиком для лечения мелкого рогатого скота.
Примеры результатов испытания антигельминтной таблетки на животных.
Пример 5. Антигельминтное действие. Заявленное лекарственное средство в виде таблетки предназначено для лечения цестодозов, нематодозов и микстинвазий жвачных животных.
Готовый препарат в таблетированной форме дают животным индивидуально перорально однократно из расчета 1 таблетка на 10 кг массы тела. Специальной диеты и применения слабительных средств животным перед дегельминтизацией не требуется.
Оценку терапевтической эффективности лекарственного средства производят при микстинвазиях ягнят.
В опыт берут 30 ягнят в возрасте 4-5 месяцев северо-кавказской породы, спонтанно инвазированных мониезиозом, стронгилятозами желудочно-кишечного тракта. Животных разделили на три группы по 10 голов в каждой. Лекарственное средство, комбинированные двуслойные антигельминтные таблетки с симбиотиком (КДВАТСС) задают ягнятам первой опытной группы из расчета 1 таблетка на 10 кг массы животного. Животным второй опытной группы выпаивают препарат Монизен из расчета 1 мл суспензии на 10 кг массы тела. Контрольную группу лечению не подвергают. Обработанных животных выпускают в отару, где они содержатся в идентичных условиях, что и необработанные овцы.
Эффективность обработок определяют по результатам исследований проб фекалий от 30 ягнят до дачи препарата и через 10 дней после дегельминтизации.
Во всех пробах фекалий до дачи лекарственного средства (01.05.2016 г.) были обнаружены яйца стронгилят в количестве от 27 до 115 экз. в трех каплях, в 9 пробах единичные яйца нематодир, в 8 пробах - яйца мониезий.
Через 10 дней после введения препарата в первой опытной группе животных во всех пробах яиц гельминтов не обнаружено. Таким образом, лекарственное средство в дозе 1 таблетка/10 кг массы животного показало 100% эффективность в отношении мониезиоза, стронгилятозов желудочно-кишечного тракта и легких. Во второй группе ягнят, получавших препарат монизен, во всех пробах фекалий яиц и личинок гельминтов не обнаружено, что говорит о 100% эффективности. В контрольной группе сохранялась высокая степень инвазии животных.
Пример 6. Иммуностимулирующая активность и действие на печень комбинированной антигельминтной таблетки с симбиотиком.
Готовый препарат в форме суспензии дают животным индивидуально, перорально, однократно из расчета 1 таблетка на 10 кг массы тела. Специальной диеты и применения слабительных средств животным перед дегельминтизацией не требуется.
В опыт также берут 30 ягнят в возрасте 4-5 месяцев северо-кавказской породы, спонтанно инвазированных мониезиозом, стронгилятозами желудочно-кишечного тракта и легких. Животных делят на три группы по 10 голов в каждой. Лекарственное средство с симбиотиком (КДВАТСС) в форме суспензии дают орально ягнятам первой опытной группы из расчета 1 мл на 10 кг массы животного. Животным второй опытной группы выпаивают препарат Монизен из расчета 1 мл суспензии на 10 кг массы тела. Контрольная группа лечению не подвергалась.
Обработанных животных выпускают в отару, где они содержатся в идентичных условиях, что и необработанные овцы. Для изучения влияния антигельминтных препаратов на организм ягнят кровь для исследований берут из яремной вены на 10 день после введения препаратов в вакутейнеры VACUETTE ЭДТА.
Биохимические исследования крови проводят на базе лаборатории инфекционных, незаразных болезней и паразитарных болезней ФГНУ ВНИИОК на анализаторе SPEKOL 211 с использованием тест-реактивов фирмы Лахема и ООО «ОльвексДиагностикум».
В сыворотке крови определяют - уровень общего биллирубина, альбуминов, активность ферментоваспартатаминотрансферазы (AST), аланинаминотрасферазы (ALT), щелочной фосфотазы, а также показатели иммунологической реактивности организма ягнят (содержание Т- и В-лимфоцитов, лизоцимную, фагоцитарную и бактерицидную активность). Результаты представлены в таблице.
Анализируя иммунологические показатели, представленные в таблице, следует отметить, что в группе, где применяют комбинированные двухслойные антигельминтные таблетки с симбиотиком (КДВАТСС), на 10-й день наблюдается увеличение количества лимфоцитов на 14,73%, по сравнению с группой животных обработанных монизеном и в сравнении с контрольной группой на 32,43% соответственно.
К 10-му дню в контрольной группе животных количество розеткообразующих В-лимфоцитов составило 15,40±1,03%, что говорит о неблагоприятном воздействии стронгилят желудочно-кишечного тракта на обеспечение гуморального иммунитета (таблица). Отмечается повышение уровня В-лимфоцитов в первой опытной группе на 9,67% по сравнению, со второй группой и на 17,69% по сравнению с контролем. На 10-й день после применения препаратов в первой опытной группе получавшей комбинированные двухслойные антигельминтные таблетки с симбиотиком (КДВАТСС), по отношению ко второй опытной группе животных, наблюдается рост бактерицидной (БАСК) и лизоцимной (ЛАСК) активности сыворотки крови на 43,62% и 32,71%, соответственно. По отношению к контролю показатели бактерицидной (БАСК) и лизоцимной (ЛАСК) активности сыворотки крови первой опытной группы выросли на 67,17 и 64,01% соответственно. Фагоцитарная активность нейтрофилов (ФАСК) по отношению к группе животных получавших монизен выросла на 36,61, а к контрольной группе на 65,10% соответственно.
Снижение уровня общего билирубина наблюдалось на 10-й день у животных первой опытной группы. Его содержание в сыворотке крови понизилось, по сравнению с показателем второй опытной группы на 15,50% и на 63,18% с показателями контрольной группы соответственно.
На 10-й день после дегельминтизации содержание альбуминов в сыворотке крови овец, не подвергнутых лечебным манипуляциям, было низким и находилось на уровне 16,9±4,9 г/л., что свидетельствует о влиянии гельминтов на печень. Напротив, альбумины в сыворотке крови овец опытных групп находились на высоком уровне. Наиболее выражено этот процесс наблюдается в сыворотке крови животных получавших комбинированные двухслойные антигельминтные таблетки с симбиотиком (КДВАТСС) в сравнении с группой получавшей «Монизен» на 24,9% и в сравнении с контрольной группой на 49,32%
После обработки животных на 10-й день в контрольной группе не получавшей лечения, зарегистрирован в сыворотке крови высокий уровень содержания щелочной фосфатазы 192,35±0,7 ед/л. Однако, в опытных группах регистрируют восстановление содержания фермента щелочной фосфатазы до физиологического значения. В первой опытной группе животных данный показатель на 10-й день опыта понизился на 4,01% по сравнению с показателями второй опытной группы и на 23,9% в сравнении с показателем контрольной группы соответственно.
Активность ферментов АлАТ и АсАТ в первой опытной группе животных была ниже на 52,54% и 6,97% по сравнению со второй опытной группой и в сравнении с показателями контрольной группы на 45,15% и 32,01% соответственно.
Таким образом, исходя из полученных данных, можно сделать вывод, что применение комбинированных двухслойных антигельминтных таблеток с симбиотиком (КДВАТСС) благоприятно влияет на иммунный статус и общую резистентность животных. Отмечается положительное воздействие препаратов на активность печеночных ферментов, которые отражают благоприятное функциональное состояние гепатоцитов, что в свою очередь обеспечивает активный метаболитический статус животных, и нивелирует неблагоприятное действие от применения антигельминтных препаратов на организм животного.
Предлагаемое изобретение по сравнению с прототипом и другими известными техническими решениями имеет следующие преимущества:
- высокая антигельминтная активность;
- обладает неспецифическими гепатопротекторными, иммуностимулирующими и адаптогенными свойствами;
- способствует интенсификации лечения и профилактики целого ряда глистных инвазий, сопровождающихся снижением иммунобиологических свойств организма и снижением репаративных свойств печени.